http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
Vol 6 No. 1 Mei 2020 e-ISSN: 2443-3446

## POTENSI PIGMEN ALAMI DARI BAKTERI SIMBION KARANG Mantipora sp SEBAGAI PEWARNA MAKANAN
[Potential of Pigment from Simbion Coral Bacteria Mantipora sp As a Food Color]
Dhanang Puspita 1*) , Jacob L.A Uktolseja 2)
1) Tekpang FKIK Universitas Kristen Satya Wacana, Salatiga *) Biologi, FB Universitas Kristen Satya Wacana, Salatiga *Email: dhanang.puspita@uksw.edu
Diterima 9 September 2019 / Disetujui 06 Juli 2020

## ABSTRACT
Color is very important in the food industry. The need for food coloring requires manufacturers to use synthetic dyes that have the potential to cause poisoning and cancer. One source of natural dyes comes from bacteria that are symbiotic with coral reefs. The purpose of this study is to isolate and characterize the bacterial pigment that has symbiosis with Montipora sp. The research method consisted of bacterial isolation and identification, pigment identification with UV-Vis spectrofotometer (200 – 800 nm) and TLC. The results of isilation and identification showed that Rhodococcus sp is dominant bacterial which is produces of carotenoiids for self defense from UV rays. The pigment found in Rhodococcus sp has the potential as a natural pigment for food coloring.
Keywords: carotenoids, Montipora, pigment, Rhodococcus sp.

## ABSTRAK
Warna  sangat  penting  dalam  industri  pangan.  Kebutuhan  pewarna  makanan  menuntut  produsen memakai bahan  pewarna sintetik  yang berpotensi menyebabkan  keracunan  dan  kanker.  Salah  satu  sumber pewarna  alami  berasal  dari  bakteri  yang  bersimbiosis  dengan  terumbu  karang.  Tujuan  dari  penelitian  ini adalah mengisolasi dan mengkarakterisasi pigmen bakteri yang bersimbion Montipora sp. Metode penelitian terdiri dari isolasi dan identifkasi bakteri, identifikasi pigmen dengan spektrofotometer UV-Vis (200 – 800 nm) dan  KLT.  Hasil  isolasi  dan  identifikasi bakteri  berjenis Rhodococcus  sp  dan  piigmen  yang  dihasilkan  adalah karotenoid yang digunakan sebagai pertahanan diri dari sinar UV. Pigmen yang terdapat pada Rhodococcus sp berpotensi sebagai pigmen alami untuk pewarna pangan.
Kata kunci: karotenoid, Montipora, pigmen, Rhodococcus sp.

## PENDAHULUAN
Warna  adalah  kesan  yang  diperoleh mata  dari  pantulan  cahaya-cahaya  yang mengenai benda-benda. Benda-benda tersebut  memiliki  zat  warna  yang  akan menyerap  atau  memantulkan  panjang gelombang  tertentu.  Warna-warna  yang dipantulkan  inilah  yang  akan  memberikan kesan  sehingga,  warna  teramatlah  penting dalam  kehidupan.  Dalam  industri  makanan dan minuman, warna adalah elemen penting dalam  sebuah  produk.  Warna  akan memberikan  informasi  dasar  sebuah  produk dan  menentukan  konsumen  dalam  memilih produk  (Winarno,  2004).  Begitu  pentingnya warna  sebagai  BTP  (Bahan  Tambahan Pangan)  acapkali  tidak  mengindahkan
keamanan pangan. Pewarna-pewarna sintetis yang  tidak layak  untuk  dikonsumsi  dijadikan BTP.  Efek  samping  pewarna  sintetis  yang tidak langsung terasa menjadikan pemanfaatan  pewarna  sintetis  ini  dianggap hal yang lumrah.
Pewarna  sintetik  memberikan  efek samping yang buruk bagi kesehatan. Potensi keracunan  hingga  ancaman  kanker  bisa terjadi  jika  tubuh  terus  menerus  terpapar pewarna  ini.  Alasan  pemanfaatan  pewarna sintetik  dibanding  pewarna  alami  adalah tingkat  kepraktisan,  nilai  ekonomis,  dan kekuatan  warna.  Pewarna  sintentik  lebih mudah  di  peroleh  dan  murah,  mudah pemakaian, dan praktis, serta memiliki warna yang  kuat  dibanding  pewarna  alami. Munculnya  kesadaran  masyarakat  akan
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
Vol 6 No. 1 Mei 2020
e-ISSN: 2443-3446
pentingnya  kesehatan  berkaitan  potensi gangguan  kesehatan  karena  pewarna makanan, maka
digalakan kembali penggunaan  pewarna  alami.  Pewarna  alami merupakan  sumber  pewarna  yang  berasal dari  tumbuhan,  hewan,  alga,  jamur,  dan mikroorganisme.  Pewarna  alami  terbukti lebih  aman  dibanding  dengan  pewarna sintetis (Puspita et al., 2018).
Salah  satu  sumber  pewarna  alami adalah dari bakteri yang berasal dari terumbu karang.    Asosiasi  antara  bakteri  dan  karang merupakan faktor penting bagi koloni karang sebagai  penyedia  nutrient  untuk  proses konversi  cahaya  menjadi  energi  kimia  oleh zooxanthellae.  Arini  (2013)  mengatakan bahwa  material  organik  yang  ada  dalam koloni  karang  tersedia  dalam  jumlah  yang melimpah sehingga memerlukan dekomposer yaitu bakteri pengurai.
Montipora sp adalah salah satu karang keras  bertipe  hermatipik  yang  menghasikan senyawa  bioaktif  (Speed  dan  Thamattoor, 2002),  yakni  menghasilkan  warna  seperti ungu,  merah  muda,  kuning,  dan  cokelat. Keberadaan warna pada Mantiopora menjadi indikator  keberadaan  pigmen.  Warna-warna yang  ada  di Mantiopora  adalah  senyawa biokatif yang disintesis oleh karang itu sendiri atau  simbionnya.  Keberadaan  bakteri  pada karang  sangatlah  penting  karena  berperan dalam  proses  degradasi  dan  penyedia material organik bagi inangnya. Radjasa et al
(2007) menyatakan, simbion karang memiliki kemampuan  yangsama  dengan  inangnya dalam  menghasilkan  senyawa  biokatif  dan salah  satunya  adalah  pigmen.  Pigmen  yang ada di Mantiopora sp diduga terdapat bakteri yang  mampu  mensintesis  warna  yang  sama dengan inangnya.
Dalam  penelitian  yang  dilakukan  oleh Wusqy et  al  (2014)  dikatakan  bakteri  yang bersimbiosis  dengan  karang Acropora  sp mampu menghasilkan warna yakni pigmen β- carotene.  Warna-warni  terumbu  karang adalah  ekspresi  dari  pigmen-pigmen  yang disintesis.  Pigmen-pigmen  yang  terdapat pada  terumbu  karang  seperti  karotenoid akan  diekspresikan  ke  dalam  warna  merah, merah  muda,  dan  kuning.  T ujuan  penelitian
ini  untuk  mengisolasi  dan  mengkarakterisasi pigmen  bakteri  yang  bersimbion Montipora sp.

## BAHAN DAN METODE
Sampel terumbu karang diperoleh dari
Pulau Menjangan
Kecil-Karimunjawa (koordinat;-5.8833,  110.4000)  yang  diambil di  kedalaman  8  –  23  m  pada  30  Agustus 2015  pukul  08.45.  Kemudian  sampel karang dihomogenisasai  untuk  proses  pencuplikan bakteri.  Bakteri  yang  sudah  dicuplik kemudian  diisolasi  dan  diidentifikasi  DNA  di PT.  Genetika  Science  Indonesia.  Pigmen pada bakteri dianalisis dengan
spektrofotometer.
Isolasi Bakteri (Radjasa et al., 2007) Terumbu karang diambil dari kedalaman  8  –  23  m  dengan  penyelaman scuba.  Sampel  terumbu  karang  gerus  dalam cawan  porselin  lalu  diisolasi  dalam  medium zobell  cair:  ekstrak  khamir  (Oxoid)  (0,5%)  , pepton  (Oxoid)    (0,5%),  glukosa  (Merck) (1%)  dan  air  laut  steril  (1.000  ml).  Selama dalam perjalanan sampel karang dikondisikan dalam  suhu  dingin  ±4Cº.  Isolasi  bakteri dilakukan  dengan  menggunakan  medium zobell padat; 5 g pepton (Oxoid), 1 g ekstrak khamir  (Oxoid),  dan  15  g  agar  nutrien (Oxoid)    dalam  1  liter  air  laut  steril. Pencuplikan  dilakukan  alam  inkass  dengan menggunakan  jarum  ose  yang  ditempelkan pada sampel lalu digoreskan pada permukaan  agar.  Inkubasi  isolat  dilakukan dengan  pemaparan  dengan  cahaya  lampu putih dalam suhu ruang ±25ºC selama  3 – 7 hari.  Bakteri  pembentuk  pigmen  ditandai dengan  koloni  yang  berwarna.  Koloni  yang berwarna  kemudian  dicuplik  dan  dilakukan penapisan  dalam  medium  isolasi  hingga didapatkan  koloni  tunggal.  Isolat  murni dipindahkan  dalam  medium  zobell  dalam agar miring.

## Identifikasi Bakteri (Geneaid, 2017)
Bakteri  simbion  didentifikasi  dengan cara sebagai berikut:
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
Vol 6 No. 1 Mei 2020 e-ISSN: 2443-3446
1.  Ekstraksi  DNA  mengggunakan  Presto™ Mini gDNA Bacteria Kit (Geneaid);
2.  Aplifikasi PCR mengggunakan MyTaq Red Mix (Bioline);
3.  Pemurnian  sampel  PCR  menggunakan Zymoclean™ Gel DNA Recovery Kit (Zymo Research);
4.  Sekuensing dengan cara Bi-directional.
Identifikasi  Morfologi  Bakteri  (Fardiaz, 1989)
Pengamatan morfologi bakteri dilakukan dengan pengecatan gram.
Pengetan  gram  dengan  menggunakan  Gram A  ( crystal  violet),  gram  B  (Methyl  Blue), Gram  C  (alkohol  70%),  dan  gram  D ( Safranin).  Setelah  dilakukan  pengecatan, kemudian  diamati  dengan  menggunakan mikroskop dengan perbesaran 1.600 ×.

## Ekstraksi Pigmen (Amaya, 2005)
Sebanyak 250 ml sampel bakteri yang ditumbuhkan  pada  media  cair  Zobell  2216E disentrifus  dengan  kecepatan  4000  rpm selama 15 menit pada suhu 4 ° C. Pellet yang mengendap  dipindahkan  ke  tabung  reaksi, kemudian  ditambahkan  larutan  Acetone (Merck)  :  Methanol  (Merck)  dengan perbandingan  7  :  3  v/v.  Sampel  divorteks selama  1  menit.  Cairan  berwarna  diambil kemudian  dipindahkan  ke  tabung  reaksi lainnya.  Cairan  berwarna  disaring  dengan menggunakan  kertas  whatman  (Sartorius) dengan  pori-pori  0,2  μm.  Hasil  saringan dikeringkan  dengan  menggunakan  gas nitrogen.  Sampel  pigmen  karotenoid  yang sudah dikeringkan disimpan pada suhu -20 º C hingga dilakukan analisis lanjutan.

## Analisis Pigmen (Amaya, 2005)
Sampel  pigmen  karotenoid  dideteksi dengan spektrofotometer UV-Vis Varian Cary pada  panjang  gelombang  200–800  nm dengan menggunakan pelarut aseton (Merck).

## KLT Pigmen (Amaya, 2005)
Sampel  8B  digunakan  perbandingan  eluen (Metanol (Merck) : Aseton (Merck) : Hexane
(Merck),  1  : 1  :  1 v/v/v).  Sampel  ditotolkan pada plat KLT silika gel 60 ukuran 2 x10 cm yang  sudah  di  plot  dengan  pensil  (dan tangan  tidak  menyentuh  permukaan  plat yang  mengandung  silica  gel).  Sampel  yang sudah  ditotolkan  dikering  anginkan.  Lalu,  di masukkan  ke  dalam  wadah  pengembang (gelas  chamber)  yang  berisi  eluen  dengan komposisi  yang  telah  ditentukan.  Dibiarkan noda  mengembang  sampai  eluen  berada pada  batas  yang  sudah  di  garisi  dengan pensil.  Kemudian  diambil  dan  dikering anginkan dan di lihat spotnya dibawah sinar UV dan dihitung Rf-nya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Karang melakukan hubungan simbiotik dengan berbagai bakteri, sehingga permukaan  karang  dikolonisasi  oleh  bakteri (DiSalvo,  1971).  Dari  jenis  bakteri  itu,  ada bakteri  yang  dapat  menghasilkan  pigmen karotenoid  ( Johnson  dan  Schroeder,  1996). Manfaat  pigmen  dari  bakteri  adalah  lebih aman digunakan untuk manusia dibandingkan  pigmen  buatan  yang  bisa mengandung  bahan  racun  (Nelis  dan Leenheer,  1991)  Karang Montipora  sp.  juga bersimbiosis dengan bakteri berkarotenoid.
Berdasarkan hasil ampilfikasi 16S rDNA menunjukan  bahwa  isolat  bakteri  8B menghasilkan  pita  basa  1400  bp  sesuai dengan  perbandingan  menggunakan  marker DNA.  Hasil  visualisasi  DNA  menggunakan elektroforesis  disajikan  pada  Gambar  1a. Hasil analisis menggunakan BLAST
menunjukkan  bahwa  isolat  bakteri  8B memiliki kemiripan dengan spesies
Rhodococcus    sp.  dengan  homologi  sekuen sebesar 99%. Analisis filogenetik menunjukkan  bahwa Rhodococcus  sp menggunakan Bi-directional  Sequencing disajikan  pada  Gambar  1b  dan  hasil  analisis menunjukan  bahwa  isolat  8b  memiliki hubungan kekerabatan dengan Rhodococcus sp.
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
Vol 6 No. 1 Mei 2020
e-ISSN: 2443-3446
1a 1b 1c
Gambar 1.   1a) Visualisasi DNA menggunakan elektroforesis (kiri); 1b) Filogenetik Rhodococcus sp (sampel  8B)  menggunakan Bi-directional  Sequencing  (kanan)  1c)  gambar  morfologi dan koloni (8b).
Hasil  dari  analisis  pigmen  dengan  menggunakan  spektrofotometer  ditunjukan  pada Gambar 2 dengan panjang gelombang dari 200–800 nm, terlihat beberapa puncak gelombang.
Gambar 2. Pola spektra dari pigmen yang dihasilkan oleh bakteri Rhodococcus sp simbion Motinpora sp.
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
Vol 6 No. 1 Mei 2020
e-ISSN: 2443-3446
Dari  hasil  KLT  Tabel  1,  diperoleh  4 fraksi  warna  dan  RF  yang  berbeda,  yakni; kuning  tua  (0,41),  kunimg  (0,54),  merah muda (0,56), dan merah kecoklatan (0,60).
Tabel 1. Hasil KLT pigmen bakteri
Gambar Warna RF kuning tua 0,41 kuning 0,54 merah muda 0,56 Merah kecoklatan 0,60 Mantipora memiliki kandungan senyawa  bioaktif diacetylenic.  Senyawa diacetylenic  terbukti  memiliki  sitotokisitas terhadap  sejumlah  sel  tumor  pada  manusia (Speed  dan  Thamattoor,  2002).  Ada kemungkinan,  senyawa  bioktif  tersebut  ikut dimiliki  oleh  salah  satu  simbionnya  yakni Rhodococcus. Genus Rhodococcus terdiri dari actinomycetes  gram  positif  dengan  koloni yang  berpigmen  merah  atau  merah  muda (Hill et  al,  1989).  Rhodococcus  sp  yang ditemukan  pada  habitat  laut,  mayoritas adalah  organisme  halofilik,  psikrotrofik,  dan memiliki  warna.  Warna  yang  muncul  dari genus Rhodococcus  yang  diisolasi  dari lingkungan  laut  biasnya  merah  atau  merah muda  (Helmke  dan  Weyland,  1984).  Osawa et  al  (2011)  melaporkan,  telah  mengisolasi carotenoid ( OH-chlorobactene  glucoside hexadecanoate)  dan  karotenoid  langka  OH- chlorobactene glucoside, OH--carotene glucoside  dan OH-4-keto-carotene glucoside hexadecanoate  dari Rhodococcus sp.
Genus Rhodococcus  adalah  kelompok bakteri  yang  sangat  beragam  dan  memiliki kemampuan  untuk  mereduksi  sejumlah senyawa  organik, termasuk beberapa senyawa  yang  paling  sulit  seperti resalcital.
Beberapa  strain  milik  genus Rhodococcus
telah diisolasi dari berbagai lingkungan yang terkontaminasi  (Curragh,  1994;  Haroune, 2004;  Morii,  1998;  Prince  and  Grossman, 2003),  yang  telah  terbukti  menjadi  kandidat ideal  untuk  meningkatkan  bioremediasi  situs yang terkontaminasi dan berbagai biotransformasi,  seperti  modifikasi  steroid, sintesis  enantioselektif,  dan  produksi  amida dari  nitril  (Kim  dan  Hyun,  2002).  Sebagai contoh, Rhodococcus  sp  strain  R04  diisolasi dari  tanah  yang  terkontaminasi  minyak  di Cina  utara  mampu  melakukan biodegraining polychlorinated biphenyls (PCBs) tidak hanya melalui  ring cleavage  tetapi  juga  melalui deklorinasi (Yang, 2007).
Genus Rhodococcus  terdiri  dari actinomycetes  gram  positif  dengan  koloni yang  berpigmen  merah  atau  merah  muda (Hill et al, 1989). Pada gambar (Gambar 1c), ditunjukan  warna  koloni  berwarna  kuning. Warna  kuning  adalah  pigmen  yang  dibentuk oleh  bakteri  tersebut  dapat  diindikasikan sebagai warna astaksantin, kantaksantin, dan Zeasantin  (Amaya,  2005).  Ketiga  pigmen tersebut adalah turunan dari karotenoid.
Dengan ditemukaanya Rhodococcus sp yang  mampu  memroduksi  pigmen  warna kuning  dapat  dijadikan  sebagai  sumber pigmen yang potensial. Penelitian selanjutnya  diharapkan  bisa  mengetahui secara  spesifik  jenis  pigmen  dan  besaran produktifitas  dalam  menghasilkan  pigmen. Kedepannya Rhodococcus  sp  bisa  dijadikan sebagai  sumber  agen  hayati  yang  mampu memroduksi pigmen alami.

## Pigmen Rhodococcus sp
Puncak-puncak  pola  spektra  (Gambar  2) pada beberapa panjang gelombang mengindikasikan  adanya  puncak  serapan oleh  pigmen-pigmen  yang  dihasilkan  oleh Rhodococcus sp. Terlihat, ada 3 puncak pada panjang  gelombang  200−300  nm  yang merupakan rentangan cahaya UV-B.
Cahaya  UV-B  dapat  merusak  DNA  dan protein jika terpapar terus-menerus.
Beberapa  mikroba  seperti  bakteri  dan  ragi memiliki  karotenoid  yang  mampu  menyerap UV-B ( Hirabayashi et al., 2004; Kilian et al. , 2007; Moline et  al.,  2009;  Libkind  et  al,
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
Vol 6 No. 1 Mei 2020
e-ISSN: 2443-3446
2009) sebagai  mekanisme  perlindungan terhadap fotooksidasi dan stabilisasi membran  sel  pada  suhu  tinggi  ( Yamano et al., 2002; Lutnaes et al., 2004).
Chen et al. (2017) menemukan sekitar 14  senyawa karotenoid  dan  isoprenoid kuinon  ( isoprenoid  quinones)  yang  diisolasi dari pigmen Rhodococcus sp. B7740, dengan puncak  serapan  antara  200  −  300  nm. (Ichiyama et  al.,  1989)  menemukan  warna kuning  oranye,  merah  muda  salmon,  dan merah  tua  dengan  puncak  serapan  antara 400 − 500 nm.
Karotenoid  yang  diisolasi  pada  bakteri simbion  karang  pada  penelitian  ini, didominansi  oleh  pigmen  warna  kuning dengan serapan maksimum lebih rendah dari kebanyakan  pigmen  warna  kuning  cahaya tampak.  Pigmen  kuning  cahaya  tampak dengan  panjang  gelombang  sekitar  400  − 500  nm  tidak  banyak  terisolasi  untuk  dapat dideteksi  oleh  spektrofotometer.  Amaya (2001) mengatakan, serapan maksimal pada panjang  gelombang  400  –  500  nm  dengan pelarut  aseton  akan  menyerap  beberapa spektrum  warna/pigmen.  Pada  panjang gelombang  448  nm  ( α-carotenoid,  panjang gelombang  480  ( astaxanthin),  dan  panjang gelombang  452  nm  ( β-carotenoid  dan zeaxanthin).
Dari  hasil  analisis  menggunakan  KLT seperti ditunjukan pada Tabel 1, menunjukan ada empat fraksi warna yang terpisah. Empat fraksi  warna  tersebut  terpisah  berdasarkan berat  molekulnya  masing-masing  dan  sifat kelarutannya.    Warna  kuning  tua,  kuning muda, merah mudah, dan merah kecoklatan adalah indikasi warna dari karotenoid.

## Pemanfaatan Pigmen Alami
Karotenoid
tidak semata-mata bertanggung jawab atas pembentukan warna merah,  merah  muda,  dan  kuning  tetapi  ada manfaat  lain.  Di  dalam  dunia  medis  dan industri  farmasi,  dan  industri  pangan, karotenoid  berfungsi  sebagai;  sumber vitamin  A,  anti  kanker,  sumber  antioksidan, dan  pewarna  alami  untuk  makanan  dan minuman.
Di  dalam  industri  makanan  dan minuman pemanfaatan pewarna sebagai BTP (bahan  tambahan  pangan)  dapat  digunakan untuk  memberi  nilai  tambah  pada  produk. Penambahan BTP yang tidak baik dan benar akan memberikan potensi gangguan kesehatan.  Dari  permasalahan  inilah  yang memunculkan gagasan pemanfaatan pewarna  alami  sebagai  BTP  yang  jauh  lebih aman.  Karotenoid  dari  bakteri  (biopigmen) yang  bersimbiosis  dengan  terumbu  karang bisa  menjadi  alternatif  sebagai  BTP  yang aman.
Kelebihan  pemanfaatan  pigmen  alami dari bakteri adalah tidak diperlukannya lahan yang  luas  dan  waktu  yang  lama  saat memanen  pigmen,  jika  dibandingan  dengan pigmen  dari  hewan  atau  tumbuhan.  Dalam waktu  singkat  dapat  dihasilkan  pigmen  dari bakteri  yang  ditumbuh  kembangkan  dalam bioreaktor.  Untuk  kedepannya,  pigmen  dari bakteri bisa menjadi penyuplai pigmen alami untuk  pemenuhan  kebutuhan  pigmen  dalam berbagai bidang industri. Dengan terpenuhinya kebutuhan pigmen alami maka akan  menekan  penggunaan  pigmen  sintetik, sehingga  permasalahan  berkaitan  dengan efek samping pigmen sintetik bisa ditekan.

## KESIMPULAN
Bakteri  simbion  yang  diisolasi  dari Motipora  sp  adalah  Rhodococcus  yang menghasilkan pigmen warna kuning (karotenoid)  Tiga  puncak  pd  pnjng  gel  200- 300nm  adalah  rentangan  cahaya  uv-B  dan dengan  KLT  terdpt  4  fraksi  warna  yakni; kuning tua, kuning muda, merah mudah, dan merah  kecoklatan.  Pigmen  tersebut  dapat berpotensi  digunakan  sbg  pewarna  alami pangan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kami mengucapkan terimakasih pada lab  CARC  (Carotenoid  and  Antioxidant Research  Center)  UKSW  yang  telah menyediakan  peralatan  dan  bahan-bahan kimia untuk penelitian dan analisis.
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
Vol 6 No. 1 Mei 2020 e-ISSN: 2443-3446

## DAFTAR PUSTAKA
Amaya, D.B.R. 2005. A Guide To Carotenoid Analysis  in Food.  ILSI Press. Washington. Arini,  D.I.D.  2013.  Potensi  Terumbu  Karang Indonesia“Tantangan dan Upaya Konservasinya” The  Challengeand Conservation  Efforts  of  Indonesian Coral  Reefs.  INFO  BPK  Manado  Vol.3 No.2.
Chen, Y., Xie, B., Yang, J., Chen, J., Sun, Z.. 2017.  Identification  of  microbial carotenoids  and  isoprenoid  quinones from Rhodococcus  sp.  B7740  and  its
stability  in  the  presence  of  iron  in model gastric conditions. Food Chemistry doi: http://dx.doi.org/10.1016/j.foodchem. 2017.06.067 Curragh,  H.  1994.  Haloalkane  degradation and  assimilation  by  Rhodococcus rhodochrous NCIMB 13064. Microbiology 140:1433–1442
DiSalvo,  L,H.  1971.  Regenerative  function and  microbial  ecology  of  coral  reefs: labeled  bacteria  in  a  coral  reef microcosm. J  Exp  Mar  Biol  Ecol 7:123−136.
Fardiaz,  S.  1989.  Penuntun  Praktikum Mikrobiologi Pangan. IPB. Bogor.
Geneaid.  2017.  Instruction  Manual  Presto™ Mini  RNA  Bacteria  Kit.Geneaid  Biotech Ltd. https://www.geneaid.com/sites/default /files/RBB21.pdf
Haroune,  N.  2004.  Metabolism  of  2- mercaptobenzothiazole by Rhodococcus rhodochrous. Appl. Environ. Microbiol. 70:6315–6319
Helmke, R., Weyland, H. 1984. Rhodococcus marinonascecs sp. Nob., an Actinomycete frem the Sea. International  Journal  of  Systematic Bacteriology. 34)2):127-128.
Hill,  R.,  Hart  S.,  Illing,  N.,  Kirby,  R.,  Wood,
D.R.  1989.  Cloning  and  Expression  of Rhodococcus Genes Encoding Pigment Production  in  Escherichia  coli.  Journal of  General  Microbiology  13:  1507- 1513.
Hirabayashi, H., Ishii, T., Takaichi, S., Inoue, K.,  Uehara,  K.  2004.  The  role  of carotenoids  in  the  photoadaptation  of the  brown-colored  sulfur  bacterium Chlorobium phaeobacteroides. Photochem Photobiol 79:280–285.
http://www.mdpi.com/20726643/6/2/546/ht m (diakses 30 September 2019)
Ichiyama,  S.,  Shimakata,  K.,  S., Tsukamura,
M.,  1989.  Carotenoid  pigments  of genus Rhodococcus. Micobial Immunol 33:503-508.
Johnson,  E.A.  and  Schroeder,W.A.  1996. Microbial  carotenoids.  Advances  in biochemical  engineering/biotechnology 53:119–178.
Kilian  O.,  Steunou  A.S.,  Fazeli  F.,  Bailey  S., Bhaya  D.,  Grossman,  A.R.  2007. Responses of a thermophilic Synechococcus  isolate  from  the microbial  mat  of  Octopus  Spring  to light.  Appl Environ  Microbiol  73:4268– 4278
Kim, B. Y., and H. H. Hyun. 2002. Production of acrylamide using immobi- lized cells of  Rhodococcus  rhodochrous  M33. Biotechnol. Bioproc. Eng. 7:194–200
Libkind,  D.,  Moline,  M.,  Sampaio,  J.P.,  van Broock,  M.  2009.  Yeasts  from  high- altitude  lakes:  influence  of  UV radiation. FEMS Microbiol Ecol 69:353– 362.
Lutnaes,  B.F.,  Strand,  A.,  Petursdottir,  S.K., Liaaen-Jensen, S. 2004. Carotenoids of thermophilic  bacteria  – Rhodothermus marinus  from  submarine  Icelandic  hot springs. Biochem Syst Ecol 32:455–468
Moline, M., Libkind, D., Dieguez Mdel C., van Broock,  M.  2009.  Photoprotective  role of  carotenoids  in  yeasts:  Response  to UV-B  of  pigmented  and  naturally- occurring  albino  strains.  J  Photochem Photobiol B 95:156–161.
Morii, S. 1998. 3-Ketosteroid-delta1-
dehydrogenase of Rhodococcus rhodochrous:  sequencing  of  the genomic  DNA  and  hyperexpression, purifi-  cation,  and  characterization  of the  recombinant  enzyme.  J.  Biochem. 124: 1026–1032.
Nelis, H.J., de Leenheer, A.P. 1991. Microbial sources of carotenoid pigments used in
http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood
Vol 6 No. 1 Mei 2020
e-ISSN: 2443-3446
foods  and  feeds.  Journal  of  Applied Bacteriology 70:181–191.
Osawa,  A.,  Kasahara,  S.,  Mastuoka,  S., Gassel,  S.,  Sandmann,  G.,  Shindo,  K. 2011. Isolation of a Novel Carotenoid, OH-chlorobactene Glucoside
Hexadecanoate,  and  Related  Rare Carotenoids from Rhodococcus sp. CIP and  Their  Antioxidative  Activities. Biosci.  Biotechnol.  Biochem.,  75  (11), 2142–2147.
Prince,  R.  C.,  and  M.  J.  Grossman.  2003.
Substrate preferences in biodesulfurization of diesel range fuels by  Rhodococcus  sp.  strain  ECRD-1. Appl.  Environ.  Microbiol.  69:5833– 5838.
Puspita, D., Tjahyono, Y.D., Samalukang, Y., Toy,  B.A.I.,  Totoda,  N.W.  2018. PRODUKSI  ANTOSIANIN  DARI  DAUN MIANA  (Plectranthus  scutellarioides) SEBAGAI  PEWARNA  ALAMI.  Pro  Food (Jurnal  Ilmu  dan  Teknologi  Pangan). 4(1):298-303.
Radjasa, O.K., S.I.O. Salasia, A. Sabdono, J. Weise,  J.F.  Imhoff,  C.  Lammler,  and M.J.  Risk.  2007.  Antibacterial  activity of  marine  bacterium  Pseudomonas  sp associated  with  soft  coral  Sinularia polydactyla  and  against  Streptococcus equi  Subsp.  zooepidemicus.  Int.  J.  of pharmacology, 3(2):170-174
Speed T.J, Thamattoor D.M. 2002. Synthesis of montiporynes A and B. Tetrahedron Letters 43. 367–369.2002
Winarno  F.G.  2004.  Kimia  Pangan  dan  Gizi. Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.
Wusqy, N.K. Limantara L, Karwur F.K.  2014.
Exploration, Isolation and Quantification  of  β-carotene  from Bacterial  Symbion  of  Acropora  sp.
Micriobiology  Indonesia.  Vol.8,  No.2, June 2014 (58-64)
Yang,  X.  Q.,  .  2007.  Characterization  and functional  analysis  of  a  new  gene cluster  involved  in  biphenyl/PCB degradation in  Rhodococcus  sp.  strain R04.  J.  Appl.  Microbiol.  103:2214– 2224.
Yamano,  Y.,  Sakai,  Y.,  Hara,  M.,  Ito,  M. 2002. Carotenoids and related polyenes.  Part  9.  Total  synthesis  of thermozeaxanthin and
thermocryptoxanthin and the
stabilizing  effect  of  thermozeaxanthin on  liposomes.  J  Chem  Soc  Perk  T 1:2006–2013.