## EFEKTIFITAS ANTI INFLAMASI FORMULASI KUNYIT ( CURCUMA LONGA ),  DAUN BINAHONG (ANREDERA CORDIFOLIA) DAN DAUN SAMBILOTO (ANDROGRAPHIS PANICULATA) TERHADAP LUKA SAYAT PADA KELINCI
Kh Endah Widhi Astuti 1 , Sih Rini Handajani 2
1,2 Kementerian Kesehatan Politeknik Kesehatan Surakarta Jurusan Kebidanan Diterima : 2 Oktober 2018, Disetujui : 16 Oktober 2018 e-mail : widhiastutie@gmail.com

## Abstract
Background: Perineal lacerations are tears that occur in the perineum because of the second  stage  of  labor.  The  Javanese  people  do  the  purpose  of  this  study  is  the effectiveness  of  anti-inflammatory  formulation  of  turmeric  (curcuma  longa),  leaves  of Binahong  (Anredera  cordifolia)  and  leaves  of  Sambiloto  (Andrographis  paniculata) against incisions in rabbits. Method: The method used in this study is the method in this study. This research uses a quantitative method with a type of pure treatment research in the form of pre-post test design. The sample in this study was 10 rabbits per group in 5  groups. Results :  There was  an  anti-inflammatory  effect  of  the turmeric  formulation, binahong  leaves  of  bitter  leaf  (F1,  F2  and  F3)  in  the  incision  wound  in  rabbits  (ρ <0.001). There is an anti-inflammatory effect of turmeric formulation, binahong leaves of bitter leaf on leukocyte levels in rabbit incisions in F1, F2 and F3 compared to the control  group  (ρ  <0.001). Conclusion :  Turmeric  formula,  binahong  leaf,  bitter  leaf (F1, F2 and F3) in the incision in rabbits can improve the wound healing process.
Keywords: Binahong Leaves, Sambiloto Leaves, Wounds, Turmeric

## PENDAHULUAN
Luka  adalah  peristiwa  yang  tidak dapat  dihindari  dari  kehidupan  yang diwujudkan sebagai hilangnya atau terputusnya  seluler,  anatomi,  integritas, fungsional dan jaringan hidup (Bhat et al., 2007).  Faktor  yang  menyebabkan  luka seperti  trauma,  tergores  benda  tajam, sengatan hewan sampai terjadinya ledakan.  Proses  penyembuhan  luka  yang terorganisir dengan
baik secara biokimiawi  yaitu  yang  mengarah  ke pertumbuhan  dan  regenerasi  dari  jaringan yang terluka secara khusus. Penyembuhan luka  melibatkan  aktivitas  jaringan  yang rumit  dari  sel  darah,  sitokin  dan  faktor pertumbuhan lainnya yang akhirnya mengarah ke pemulihan ke kondisi normal
(Clark,  1993).  Dalamnya  luka  akan mempengaruhi  kerusakan  atau  gangguan integritas kulit dan kematian sel-sel (Judd, 2007 : 13)
Keadaan  luka  dapat  terjadi  pada semua  mahluk  hidup.  Begitu  juga  pada saat  wanita  melahirkan  kemungkinan mengalami masalah ketika proses persalinan berlangsung diantaranya adalah terjadinya  robekan  (rupture)  pada  jalan lahir  atau  rupture  pada  perimeun  (Miles, 2009).Trauma perineum didefinisikan sebagai perlukaan yang terjadi pada labia, vagina, uretra, klitoris, otot perineum atau sfingter  ani.  Robekan  ini  dapat  terjadi secara  spontan  pada  saat  persalinan pervaginam,  atau  karena  tindakan  bedah yang  berlangsung  pada  saat  proses
persalinan  Laserasi  perineum  merupakan robekan  yang  terjadi  pada  perineum karena kala II  persalinan. Lebih  dari  85% persalinan  pervaginam  akan  mengalami trauma  perineum,  dan  hampir  69% memerlukan  penjahitan  (Miles,  2009). Angka kejadiannya berbeda-beda, tergantung  pada  praktik  individu  dan episiotomi  yang  bertujuan  memperbesar vaginal  outlet  dan  membantu  fasilitas kesehatan  yang  ada.Empat  puluh  empat persen  laserasi  perineum  terjadi  karena persalinan  spontan  maupun  buatan.Saat ini  obat  obat  secara  medis  banyak  di berikan  untuk.  mengembalikan  keadaan luka  perenium  agar  kembali  normal. Budaya dari suku jawa dalam pemanfaatan  tanaman  di  sekitar  rumah sudah  terjadi  sejak  jaman  nenek  moyang namun  baru  sedikit  di  buktikan  secara ilmiah didiantaranya
kunyit, daun binahong  serta  daun  sambiloto  yang sebenarnya mempunyai kandungan
antiinflamasi  dan  sebagai  antiseptik. Untuk  itu  perlu  dibuktikan  secara  ilmiah agar  pemanfaatan  tanaman  ini  semakin nyata pemanfaatanya maka perlu pengaplikasiakn  pada  hewan  kelinci sebelum  di  terapkan  pada  luka  perenium ibu postpartum.
Budaya  dari  suku  jawa  dalam pemanfaatan  tanaman  di  sekitar  rumah sudah  terjadi  sejak  jaman  nenek  moyang namun  baru  sedikit  di  buktikan  secara ilmiah didiantaranya kunyit, daun binahong  serta  daun  sambiloto  yang sebenarnya mempunyai
kandungan antiinflamasi dan sebagai antiseptik. penelitian  yang  dilakukan  oleh Hidayati,  E  (2002)  secara  in  vitro, membuktikan bahwa senyawa aktif dalam rimpang  kunyit  mampu  menghambat pertumbuhan    jamur,  virus,  dan  bakteri baik  Gram  positif  maupun  Gram    negatif,
seperti  E.coli  dan  Staphylococcus  aureus, karena  kunyit  mengandung  berbagai senyawa  diantaranya    adalah  kurkumin dan  minyak  atsiri.  Pada  ekstrak  dengan pelarut  etil  asetat  pada  konsentrasi  2  % dapat  membunuh  bakteri  Staphylococcus aureus.  Selain  itu  juga  dijelaskan  Uchida (2003)  bahwa  di  dalam  daun  binahong terdapat aktifitas antioksidan, asam askorbat  dan  total  fenol  yang  cukup tinggi.  Tanaman  yang  berkhasiat  sebagai antiradang,  antiinflamasi,  dan  antipiretik adalah daun sambiloto.
Tujuan penelitian adalah Mengetahui efek anti  inflamasi  formulasi  kunyit,  daun  binahong daun  sambiloto  (  KUBISA)  pada  luka  sayat  pada kelinci.
Jenis  penelitian  yang  digunakan adalah  uji  pra  klinis  (  pra  clinical  trial) pada  kelinci.  Pada  uji  klinis  peneliti memberikan  perlakuan  atau  intervensi kepada  kelinci  dengan  umur  dan  jenis yang  sama  dengan  memberika  salep  dari ekstrak  KUBISA  2  x  sehari  setiap  pagi dan sore selama 10 hari berturut turut dan diamati  setiap  harinya  mulai  hari  ke  0 sampai  hari  ke  10  dan  akan  di  lihat perubahan  tentang    keadaan  luka  pada kelinci  tersebut.  Penelitian  ini  dilakukan di  laboratorium  Farmasi  Universitas Gadjah Mada Jogjakarta
Sebagai  sampel  dalam  penelitian ini  adalah  10  kelinci  betina  setiap kelompok  dengan  total  5  kelompok dengan teknik samplingnya adalah purposive sampling dengan kriteria: dimana  untuk  penyiapan  hewan  coba Kelinci  diadaptasikan  selama  2  minggu dalam  kondisi  ruangan  laboratorium dengan tetap diberi makanan dan minuman.  Kelinci  yang  digunakan  adalah kelinci  betina  (Oryctolagus  cuniculus) sehat dan memiliki berat badan antara 1,5 sampai 2 kg
Table 1. Pembuatan formula Basis HPMC
Bahan F1( %) F2( %)
F3(%)
ekstrak binahong 40 45 50 ekstrak kunyit 3 4 5 ekstrak sambiloto 10 12 14 Basis gel 46 38 30 asam benzoate 1 1 1 oleum essensial Qs Qs Qs Jumlah 100 100 100
Pembuatan  formula  Basis  HPMC dikembangkan  dengan  air  suling  dingin dalam  beker  gelas.  Ditambahkan  metil paraben yang sebelumnya telah dilarutkan dalam  air  suling  panas  suhu  75 0 C dihomogenkan.  Kemudian  kunyit,  daun binahong  dan  daaun  sambiloto  digerus bersama  gliserin  dan  ditambahkan  ke dalam  basis,  setelah  itu  dihomogenkan hingga terbentuk gel

## METODE PENELITIAN
Untuk membuktikan pengaruh anti inflamasi Efektifitas Anti Inflamasi Formulasi  Kunyit  ( curcuma  longa ), Daun  Binahong (Anredera cordifolia)  dan Daun Sambiloto (Andrographis
paniculata)  Terhadap  Luka  luka  derajat  2 pada  kelinci  maka  jenis  penelitian  yang digunakan  adalah  uji  pra  klinis  (  pra clinical  trial)  pada  kelinci.  Pada  uji  klinis peneliti memberikan perlakuan atau intervensi  kepada  kelinci  dengan  umur dan  jenis  yang  sama  dengan  memberika salep  dari  ekstrak  KUBISA  2  x  sehari setiap  pagi  dan  sore  selama  10  hari berturut  turut  dan  diamati  setiap  harinya mulai hari ke 0 sampai hari ke 10dan akan di  lihat  perubahan  tentang    keadaan  luka pada kelinci tersebut.
Tabel 2. Bentuk Rancangan Penelitian
Pre Perlakuan Post Kelompok Perlakuan I P1 F1 P2 Kelompok Perlakuan II P1 F2 P2 Kelompok Perlakuan III P1 F3 P2 Kelompok kontrol 1 P1 Povidone P2 Kelompok Kontrol II Q1 - Q2

## Bentuk  Rancangan  Penelitian  menurut
Notoatmodjo (2012)

## HASIL PENELITIAN
Rata-Rata Skor REEDA dan Kadar Leukosit Pada Setiap Kelompok
Tabel  3. Rata-Rata  Skor  REEDA  dan  Kadar Leukosit Pada Setiap Kelompok
Keterangan Mean Standar Error 95 CI% Formula 1 Lower Upper Hari 1 5,8 0,359 4,988 6,612 Hari 3 3,8 0,200 3,348 4,252 Hari 5 2,0 0,211 1,523 2,477 Hari 7 1,3 0,153 0,954 1,646 Hari 10 0,0 0,000 0,000 0,000 Formula 2 Hari 1 6,2 0,359 5,388 7,012 Hari 3 3,6 0,371 2,760 4,440 Hari 5 2,5 0,373 1,657 3,343 Hari 7 1,3 0,213 0,817 1,783 Hari 10 0,0 0,000 0,000 0,000 Formula 3 Hari 1 5,1 0,348 4,313 5,887 Hari 3 3,2 0,249 2,636 3,764 Hari 5 0,6 0,267 -0,003 1,203 Hari 7 4,9 0,314 4,189 5,611 Hari 10 0,0 0,000 0,000 0,000 Kontrol 1 Hari 1 6,2 0,133 5,898 6,502 Hari 3 4,3 0,260 3,711 4,889 Hari 5 4,3 0,260 3,711 4,889 Hari 7 2,5 0,269 1,892 3,108 Hari 10 0,9 0,277 0,274 1,526 Kontrol 2 Hari 1 7,0 0,365 6,174 7,82 Hari 3 5,8 0,291 5,143 6,45 Hari 5 5,8 0,533 4,594 7,006 Hari 7 5,1 0,567 3,818 6,382 Hari 10 2,8 0,512 1,642 3,958
Berdasarkan Tabel 3 dijelaskan nilai rata- rata  skor  REEDA  pada  formula  1,  formula  2 formula 3, Kontrol 1 dan kontrol 2. Pada formula 1 didapatkan  skor  REEDA  hari  pertama  5,8 kemudian  menurun  menjadi  0,0  pada  hari  ke sepuluh.  Pada  formula  2  didapatkan  skor  REEDA hari  pertama  6,2  kemudian  menurun  menjadi  0,0 pada  hari  ke  sepuluh.  Pada  formula  3  didapatkan skor  hari  pertama  5,1  kemudian  menurun  menjadi 0,0  pada  hari  ke  sepuluh.  Pada  kontrol  1  (iodine) didapatkan  skor  hari  pertama  6,2  kemudian menurun  menjadi  0,9  pada  hari  ke  sepuluh.  Pada kontrol  2  didapatkan  skor  hari  pertama  7,0 kemudian  menurun  menjadi  2,8  pada  hari  ke sepuluh.
1. Pengaruh  Efek  anti  inflamasi  formulasi kunyit,  daun  binahong  daun  sambiloto (F1) pada luka sayat pada kelinci
Tabel  4 .  Efek  anti  inflamasi  formulasi  kunyit, daun  binahong  daun  sambiloto  (F1)  pada  luka sayat pada kelinci
Ket
MD SE P value* CI 95% P Value** Hari Hari Lower Upper 1 3 2,0 0,365 0,004 0,653 3,347 <0,001 5 3,8 0,359 <0,001 2,475 5,125 7 4,5 0,342 <0,001 3,240 5,760 10 5,8 0,359 <0,001 4,475 7,125 3 1 -2,0 0,365 0,004 -3,347 -0,653 5 1,8 0,200 <0,001 1,062 2,538 7 2,5 0,224 <0,001 1,675 3,325 10 3,8 0,200 <0,001 3,062 4,538 5 1 -3,8 0,359 <0,001 -5,125 -2,475 3 -1,8 0,200 <0,001 -2,538 -1,062 7 0,7 0,213 0,095 -0,088 1,488 10 2,0 0,211 <0,001 1,222 2,778 7 1 -4,5 0,342 <0,001 -5,760 -3,420 3 -2,5 0,224 <0,001 -3,325 -1,675 5 -0,7 0,213 0,095 -1,488 0,088 10 1,3 0,153 <0,001 0,736 1,864 10 1 -5,8 0,359 <0,001 -7,125 -4,475 3 -3,8 0,200 <0,001 -4,538 -3,062 5 -2,0 0,211 <0,001 -2,778 -1,222 7 -1,3 0,153 <0,001 -1,864 -0,736
Keterangan uji : *) Bonferonni Test , **) Repeated Anova dengan koreksi Greendhouse-Geisser Pada  Tabel  4  dijelakan  tentang  efek  formula 1  terhadap  penyembuhan  luka.  Hasil  uji  statistik menggunakan repeated  Anova didapatkan p value <0,001 yang berarti bahwa terdapat pengaruh Efek anti  inflamasi  formulasi  kunyit,  daun  binahong daun  sambiloto(  F1)  pada  luka  sayat  pada  kelinci. Hasil  uji  ini  kemudian  dilanjutkan  dengan  uji bonferoni test untuk melihat kelompok manasajakah  yang  terdapat  perbedaan.  Hasil  yang didapat  adalah  terdapat  penurunan  signifikan dalam setiap hari pemeriksaan mulai dari hari ke 1 sampai hari ke 10 ( p value <0,05).
2. Pengaruh  Efek  anti  inflamasi  formulasi kunyit,  daun  binahong  daun  sambiloto (F2) pada luka sayat pada kelinci
Tabel  5. Efek  anti  inflamasi  formulasi  kunyit, daun  binahong  daun  sambiloto  (  F2  )  pada  luka sayat pada kelinci
Ket MD SE P value* CI 95% P Value** Hari Hari Lower Upper 1 3 2,6 0,562 0,012 0,527 4,673 <0,001
5 3,7 0,517 0,001 1,791 5,609
7 4,9 0,433 <0,001 3,301 6,499
10 6,2 0,359 <0,001 4,875 7,525 3 1 -2,6 0,562 0,012 -4,673 -5,27 5 1,2 0,379 0,174 -0,297 2,497
7 2,3 0,473 0,009 0,556 4,044
10 3,6 0,371 <0,001 2,230 4,970 5 1 -3,7 0,517 0,001 -5609 -1,791 3 -1,1 0,379 0,174 -2,497 0,297 7 1,2 0,389 0,130 -0,234 2,634 10 2,5 0,373 0,001 1,125 3,875 7 1 -4,9 0,433 <0,001 -6,499 -3,301 3 -2,3 0,473 0,009 -4,044 -0,556 5 -1,2 0,389 0,130 -2,634 0,234 10 1,3 0,213 0,002 0,512 2,088 10 1 -6,2 0,359 <0,001 -7,525 -4,875 3 -3,6 0,371 <0,001 -4,970 -2,230 5 -2,5 0,373 0,001 -3,875 -1,125 7 -1,3 0,213 0,002 -2,088 -0,512 Keterangan uji : *) Bonferonni Test , **) Repeated Anova dengan koreksi Greendhouse-Geisser
Pada  Tabel  5  dijelakan  tentang  efek  formula 2  terhadap  penyembuhan  luka.  Hasil  uji  statistik menggunakan repeated  Anova didapatkan p value <0,001 yang berarti bahwa terdapat pengaruh Efek anti  inflamasi  formulasi  kunyit,  daun  binahong daun  sambiloto(  F2)  pada  luka  sayat  pada  kelinci. Hasil  uji  ini  kemudian  dilanjutkan  dengan  uji bonferoni test untuk melihat kelompok manasajakah  yang  terdapat  perbedaan.  Hasil  yang didapat  adalah  terdapat  penurunan  signifikan dalam setiap hari pemeriksaan mulai dari hari ke 1 sampai hari ke fbgfbgfbgf10 ( p value <0,05).
3. Pengaruh  efek  anti  inflamasi  formulasi kunyit, daun binahong  Daun samiloto (F3) pada luka sayat pada kelinci
Tabel  6. Efek  anti  inflamasi  formulasi  kunyit, daun  binahong  daun  sambiloto  (F2)  pada  luka sayat pada kelinci.
Ket MD SE P value* CI 95% P Value** Hari Hari Lower Upper 1 3 1,9 0,458 0,025 0,209 0,3591 <0,001 5 4,5 0,543 <0,001 2,498 6,502 7 0,2 0,133 1,000 -2,92 0,692 10 5,1 0,348 <0,001 3,816 6,384 3 1 -1,9 0,458 0,025 -3,591 -0,209 5 -2,6 0,221 <0,001 1,784 3,416 7 -1,7 0,423 0,030 -3,261 -0,139 10 3,2 0,249 <0,001 2,280 4,120 5 1 -4,5 0,543 <0,001 -6,502 -2,498 3 -2,6 0,221 <0,001 -3,416 -1,784 7 -4,3 0,496 <0,001 -6,128 -2,472 10 0,6 0,267 0,510 -0,384 -1,584 7 1 -0,2 0,133 1,000 -0,692 0,292 3 1,7 0,423 0,030 0,0139 3,261 5 4,3 0,496 <0,001 2,472 6,128 10 4,9 0,314 <0,001 3,740 6,060 10 1 - 5,100 0,348 <0,001 -6,384 -3,816 3 - 3,200 0,249 <0,001 -4,120 -2,280 5 0,600 0,267 0,510 -1,564 0,384 7 - 4,900 0,314 <0,001 -6,060 -3,740
Keterangan uji : *) Bonferonni Test , **) Repeated Anova dengan koreksi Greendhouse-Geisser
Pada  Tabel  6  dijelakan  tentang  efek formula  3  terhadap  penyembuhan  luka.  Hasil  uji statistik  menggunakan  repeated  Anova  didapatkan p  value <0,001  yang  berarti  bahwa  terdapat pengaruh  Efek  anti  inflamasi  formulasi  kunyit, daun  binahong  daun  sambiloto(  F3)  pada  luka sayat  pada  kelinci.  Hasil  uji  ini  kemudian dilanjutkan dengan uji bonferoni test untuk melihat kelompok  manasajakah  yang  terdapat  perbedaan. Hasil  yang  didapat  adalah  terdapat  penurunan signifikan  dalam  setiap  hari  pemeriksaan  mulai dari hari ke 1 sampai hari ke 10 ( p value <0,05).
4. Perbedaan  efek  anti  inflamasi  formulasi kunyit, daun binahong daun sambiloto F1, F2, F3, K1 dan K2 luka sayat pada kelinci
Tabel  7. Efek  Anti  Inflamasi  Formulasi  Kunyit, Daun  Binahong  Daun  Sambiloto  F1,  F2,  F3  Pada Luka Sayat Pada Kelinci
Skor reeda Kelompok Bonferroni Test Mean Square F P value* Reeda 1 F1 F2 1,000 4,780 4,509 0,004
F3 1,000 K1 1,000 K2 0,124 F2 F1 1,000 F3 0,211 K1 1,000 K2 0,891 F3 F1 1,000 F2 0,211 K1 0,211 K2 0,002 K1 F1 1,000 F2 1,000 F3 0,211 K2 0,891 K2 F1 0,124 F2 0,891
F3 0,002
K1 0,891 Reeda3 F1 F2 1,000
10,180 12,97 7
<0,001
F3 1,000 K1 0,840 K2 0,001 F2 F1 1,000
F3 1,000 K1 0,840 K2 <0,001 F3 F1 1,000 F2 1,000
K1 0,080 K2 <0,0001 K1 F1
1,000 F2 0,840 F3 0,080
K2 0,004 K2 F1 <0,001 F2 <0,001
F3 <0,001 K1
0,004 Reeda 5 F1 F2 1,000 41,330 34,06 3 <0,001 F3 0,067 K1 <0,001 K2 <0,001
F2 F1 1,000 F3 0,004
K1 0,007 K2 <0,001 F3 F1 0,067
F2 0,004
K1 <0,001 K2 <0,001 K1 F1 <0,001
F2 0,007 F3 <0,001 K2 0,039 K2 F1 <0,001 F2 <0,001 F3 <0,001 K1 0,039 Reeda7 F1 F2 1,000 35,120 31,29 5 <0,001
F3 <0,001 K1 0,149 K2 0,000 F2 F1 1,000 F3 <0,001 K1 0,149 K2 <0,001 F3 F1 <0,001 F2 <0,001 K1 <0,001 K2 1,000 K1 F1 0,149 F2 0,149 F3 <0,001 K2 <0,001 K2 F1 <0,001 F2 <0,001 F3 1,000 K1
<0,001 Reeda 10 F1 F2 1,000 14,780 21,80 7 <0,001 F3 1,000 K1 0,185 K2 0,000 F2 F1 1,000 F3 1,000 K1 0,185 K2 <0,001 F3 F1 1,000 F2 1,000 K1 0,185 K2 <0,001 K1 F1 0,185 F2 0,185 F3 0,185 K2 <0,001 K2 F1 <0,001 F2 <0,001 F3 <0,001 K1
<0,001
Keterangan uji : *) one way anova Berdasarkan  Tabel  7  didapatkan  nilai REEDA  pada  hari  pertama,  hasil  uji  Anova menunjukkan  perbedaan  bermakna  ρ=0,004, namun  demikian  saat  dilakukan  uji bonferroni tidak ada perbedaan bermakna pada setiap formula (ρ>0,05).  Pada  nilai  REEDA  pada  hari  ketiga, hasil uji Anova menunjukkan perbedaan bermakna ρ=<0,001,  saat  dilakukan  uji bonferroni tidak  ada perbedaan  bermakna  pada  formula  1,2,3  dan Kontrol  1  (ρ>0,05),  namun  terdapat  perbedaan bermakna  pada  kontrol  2  (ρ<0,05).  Pada  nilai REEDA  pada  hari  kelima,  hasil  uji  Anova menunjukkan perbedaan bermakna ρ=<0,001, saat dilakukan  uji bonferroni terdapat  hampir  seluruh formula terdapat perbedaan bermakna pada kontrol 2  (ρ<0,05).  Pada  nilai  REEDA  pada  hari  ketujuh, hasil uji Anova menunjukkan perbedaan bermakna ρ=<0,001,  saat  dilakukan  uji bonferroni terdapat perbedaan yang bervariasi pada setiap kelompoknya.  Pada  nilai  REEDA  pada  hari kesepuluh, hasil uji Anova menunjukkan perbedaan bermakna ρ=<0,001, saat  dilakukan uji
bonferroni tidak  ada  perbedaan  bermakna  pada formula  1,2,3  dan  Kontrol  1  (ρ>0,05),  namun terdapat  perbedaan  bermakna  pada  kontrol  2 (ρ<0,05).  Berdasarkan  hal  tersebut  menunjukkan bahwa  baik  formula  1  ,  2  dan  3  paling  efektif dalam  menyembuhkan  luka  dan  menunjukkan efektivitas  yang  sama,  sedangkan  pada  kelompok K1  yang  diberikan iodine lebih  baik  bila dibandingkan  dengan  K2  yang  tidak  diberikan intervensi apapun.
5. Pengaruh  anti  inflamasi  formulasi  kunyit, daun  binahong  daun  sambiloto  terhadap luka sayat  pada kelinci
Tabel 8. Pengaruh anti inflamasi formulasi kunyit, daun  binahong  daun  sambiloto  terhadap  kadar leukosit pada luka sayat  kelinci
Skor reeda Kelompok Bonfer roni Test Mean Mean Square F P value* Leukosit hari ke 1 10 x10 6 1,067 0,384
F1 72x10 2 F2 73 x10 2 F3 75 x10 2 K1
74 x10 2 K2 14 x10 2 Leukosit hari ke 10 F1 F1 53 x10 2 16x10 6 12,679 <0,001
F2 1,000 49 x10 2
F3 1,000 54 x10 2 K1 1,000 57 x10 2 K2 <0,001 81 x10 2 F2 F1 1,000 F3 1,000 K1 1,000 K2 <0,001 F3 F1 1,000 F2 1,000 K1 1,000 K2 <0,001 K1 F1 1,000 F2 1,000 F3 1,000 K2 <0,001 K2 F1 <0,001 F2 <0,001 F3 <0,001 K1 <0,001 Delta Leukosit 42X10 6 0,418 0,795
Keterangan uji : *) one way anova Berdasarkan  Tabel  8  didapatkan jumlah  leukosit  pada  hari  pertama,  hasil uji  Anova  menunjukkan  tidak  ada perbedaan  bermakna  ρ=0,384,  sehingga tidak dilakukan analisis lagi formula yang berbeda melalui uji Bonferroni Test . Pada jumlah leukosit pada hari kesepuluh, hasil uji  Anova  menunjukkan  ada  perbedaan bermakna
ρ=<0,001,
selanjutnya
dilakukan uji Bonferroni Test dan menunjukkan  perbedaan  yang  bermakna pada  kadar  leukosit  kelompok  kontrol  2 yang  lebih  tinggi  bila  dibandingkan
dengan F1,F2,F3 dan K1. Berdasarkan hal tersebut  menunjukkan  bahwa  luka  yang mendapatkan  intervensi  pengobatan  akan lebih  normal  kadar  leukositnya  bila dibandingkan  dengan  luka  yang  tidak mendapat pengobatan.

## PEMBAHASAN
Efektifitas  Anti  Inflamasi  Formulasi Kunyit  ( curcuma  longa ),    Daun Binahong  (Anredera  cordifolia)  dan Daun Sambiloto (Andrographis paniculata)  Terhadap  Luka  sayat  pada kelinci
Laserasi  perineum  merupakan  robekan yang  terjadi  pada  perineum  karena  kala  II persalinan. Lebih dari 85% persalinan pervaginam akan  mengalami  trauma  perineum,  dan  hampir 69% memerlukan penjahitan (Miles, 2009). Angka kejadiannya berbeda-beda, tergantung pada praktik individu dan episiotomi yang bertujuan memperbesar  vaginal  outlet  dan  membantu fasilitas  kesehatan  yang  ada.Empat  puluh  empat persen  laserasi  perineum  terjadi  karena  persalinan spontan  maupun  buatan.Saat  ini  obat  obat  secara medis  banyak  di  berikan  untuk.  mengembalikan keadaan  luka  perenium  agar  kembali  normal. Budaya  dari  suku  jawa  dalam  pemanfaatan tanaman di sekitar rumah sudah terjadi sejak jaman nenek  moyang  namun  baru  sedikit  di  buktikan secara ilmiah didiantaranya kunyit, daun binahong serta daun sambiloto  yang sebenarnya mempunyai kandungan antiinflamasi dan sebagai antiseptik.
Proses penyembuhan luka yang terorganisir  dengan  baik  secara  biokimiawi  yaitu yang  mengarah  ke  pertumbuhan  dan  regenerasi dari  jaringan  yang  terluka  secara  khusus. Penyembuhan  luka  melibatkan  aktivitas  jaringan yang  rumit  dari  sel  darah,  sitokin  dan  faktor pertumbuhan  lainnya  yang  akhirnya  mengarah  ke pemulihan ke kondisi normal (Clark, 1993).
Penelitian ini memformulakan kandungan Kunyit  ( curcuma  longa ),    Daun  Binahong (Anredera  cordifolia)  dan  Daun  Sambiloto (Andrographis  paniculata).  Formula  yang  diracik sesuai  dengan  kajian  penelitian  dan  bekerja  sama dengan  program  studi  jamu  untuk  meraciknya. Hasil yang didapatkan adalah 3 jenis formula yang telah diujicobakan pada kelinci untuk melihat efek formula Kunyit ( curcuma longa ),  Daun Binahong
( Anredera  cordifolia )  dan  Daun  Sambiloto ( Andrographis  paniculata )  dalam  menyembuhkan luka.
Sebelumnya penelitian terkait jamu hanya menggunakan  satu  formula  saja.  Hal  ini  yang menginspirasi  peneliti  untuk  membuat  campuran formula  dari  ketiga  bahan  Kunyit  ( curcuma  longa ),  Daun Binahong ( Anredera cordifolia ) dan Daun Sambiloto ( Andrographis paniculata ) dalam menyembuhkan  luka.  Formula  yang  digunakan dalam  pengobatan  luka  ini  adalah  dalam  bentuk sediaan  salep  yang  mudah  untuk  dioles  dan diberikan  pada  luka  yang  dikemas  dalam  nama “Ramuan  KUBISA”.  Hasil  yang  didapat diantaranya sebagai berikut:
Pada  penelitian  ini  di  Tabel  3  dijelaskan nilai  rata-rata  skor  REEDA  pada  formula  1, formula  2  formula  3,  Kontrol  1  dan  kontrol  2. Hasil  yang  didapat  skor  REEDA  pada  akhir penelitian  formula  1,  formula  2  formula  3 menunjukkan kesembuhan total sedangkan kontrol 1  masih  ada  yang  belum  sembuh  (0,9)  dan  juga pada  kelompok  kontrol  2  yang  masih  banyak menunjukkan  skor  REEDA  2,8  pada  hari  ke sepuluh.
Berdasarkan  kedalaman  luka  maka  luka dapat  diklasifikasikan  menjadi  superficial  yakni hanya  mengenai  epidermis  saja,  partial  thickness yakni  mengenai  epidermis  dan  sebagian  dermis, atau  full  thickness  yakni  luka  menembus  kulit melampaui  dermis  dapat  mencapai  jaringan subkutan, otot bahkan tulang (Judd, 2003: 34)
Secara singkat, proses penyembuhan luka dibagi  dalam  3  fase.Fase  pertama  yaitu  fase inflamasi  atau  fase  inisial  (lag  phase)  yang berlangsung  pada  saat  terjadinya  luka  sampai  hari ke-5.Pada  fase  ini  terjadi  perdarahan,  kemudian pembekuan /penghentian perdarahan akibat kontraksi otot polos dinding pembuluh darah yang terluka dan penggumpalan darah oleh trombin dan fibrin.Ikut  keluar  bahan  pertahanan  tubuh  berupa sel-sel  leukosit  dan  antibodi.  Disini  terjadi vasodilatasi pembuluh darah, oedema.(Dr. Bisono. 2002: 15)
Pada  penelitian  ini  fase  penyembuhan luka  dilakukan  sampai  hari  ke  sepuluh  yang merupakan  fase  kedua  dalam  penyembuhan  luka. Fase  kedua  yaitu  fase  fibroplasi  atau  fase proliferasi, berlangsung dari hari ke-6 sampai akhir minggu  ke-3.Terjadi  proliferasi  sel-sel  fibroblast yang  berasal  dari  sel-sel  mesensim  yang  belum berdiferensiasi.  Terjadi  pembentukan  jaringan granulasi  yang  terdiri  dari  sel-sel  fibroblast,  serat
kolagen yang dihasilkan oleh sel fibroblast, deposit sel-sel  radang,  kapiler  baru,  hasil  angiogenesis. Terjadi  penciutan  luka  akibat  kontraksi  serat-serat kolagen  yang  mempertautkan  tepi  luka.  Terjadi epitelisasi akibat proses migrasi dan proses mitosis sel-sel  stratum  basal  dan  keratinosit  lain  yang terpapar  luka  (sel-sel  kelenjar  sebaseus,  kelenjar keringat, dan  akar rambut) ke tengah luka. Semua proses  ini  akan  berhenti  bila  seluruh  permukaan luka sudah tertutup epitel. Orang awam mengatakan  luka  sudah  sembuh/sudah  kering. Sebaliknya,  proses  akan  berjalan  terus  bila permukaan luka belum tertutup epitel.
Gel  Kubisa  Di  buat  menjadi  3  formula dengan  kombinasi  zat  aktifnya:  Pada  Formula  1 kandungan  ekstrak  binahong  40%,  ekstrak  kunyit 3%,  ekstrak  sambiloto  10%  dan  Basis  Gel  46%.  : Pada Formula 1 kandungan ekstrak binahong 45%, ekstrak  kunyit  4%,  ekstrak  sambiloto  12%  dan Basis  Gel  38%.  :  Pada  Formula  3  kandungan ekstrak binahong 50%, ekstrak kunyit 5%, ekstrak sambiloto 14% dan Basis Gel 30%.
Pada  penelitian  ini  di  Tabel  4  dijelakan tentang  efek  formula  1  terhadap  penyembuhan luka Hasil yang didapat adalah terdapat penurunan signifikan  dalam  setiap  hari  pemeriksaan  mulai dari  hari  ke  1  sampai  hari  ke  10  ( p  value <0,05). Hal  yang  sama  juga  di  tabel  di  Tabel  5  dijelakan tentang  efek  formula  2,  dan  di  Tabel  6  dijelakan tentang efek formula 3. Hal ini menunjukkan pada ketiga  formula  memberikan  efek  penyembuhan yang sama.
Pada  penelitian  ini  Tabel  7  menunjukkan efek  formula  1,  formula,  2,  formula  3,  kontrol  1 dan  kontrol  2  pada  setiap  hari  pemeriksaan. Berdasarkan  hal  diatas  menunjukkan  pada  setiap hari  pemeriksaan  (1,3,5,7,10)  menunjukkan  efek yang sama pada formula 1, formula, 2, formula 3. Sedangkan pada kelompok kontrol 1 penyembuhan lebih baik dibandingkan kontrol 2.
Pada  Tabel  8  menunjukkan  gejala perubahan  leukosit.  Pada  hari  pertama  tidak  ada perbedaan  leukosit,  namun  pada  hari  ke  sepuluh kelinci yang mendapatkan terapi formula 1,2 dan 3 menunjukkan  jumlah  leukosit  yang  lebih  normal bila dibandingkan kelompok kontrol.
Senyawa  sesquiterpen  dalam  minyak atsiri  Senyawa  sesquiterpen  dalam  minyak  atsiri kunyit  merupakan    turunan  dari  senyawa  terpen seperti  alkohol  yang  bersifat  bakterisida  dengan merusak  struktur  tersier  protein  bakteri  atau denaturasi  protein  (Tarwiyah,  2001).  Sedangkan kurkumin  adalah  suatu  senyawa  fenolik.  Turunan
fenol  ini  akan  berinteraksi  dengan  dinding  sel bakteri,  selanjutnya  terabsorbsi  dan  penetrasi  ke dalam sel bakteri, sehingga menyebabkan presipitasi  dan  denaturasi  protein,  akibatnya  akan melisiskan  membran  sel  bakteri.  Sedangkan aktivitas  antibakteri curcumin  dengan  cara menghambat proliferasi sel bakteri.
Kunyit (Curcuma domestica Val.)
meningkatkan  kapasitas  antioksidan  tubuh  secara drastis. Kerusakan oksidatif diyakini menjadi salah satu  mekanisme  dibalik  penuaan  dan  sejumlah penyakit.  Kerusakan  oksidatif  melibatkan  radikal bebas, molekul yang sangat reaktif disertai dengan electron  yang  tidak  memiliki  pasangan.  Radikal bebas cenderung bereaksi dengan zat organik yang penting,  seperti  protein  asam  lemak  atau  DNA. Alasan utama mengapa antioksidan sangat penting adalah  karena  mereka  melindungi  tubuh  kita  dari radikal  bebas.  Kurkumin  ternyata  memiliki kandungan  antioksidan  yang  diperoleh  dari struktur  kimiawi  yang  dapat  menetralisir  radikal bebas.  Namun  kurkumin  juga  meningkatkan aktivitas  enzim  antioksidan  tubuh.  Dengan  cara tersebut, kurkumin mampu melawan radikal bebas. Kurkumin  memblokir  radikal  bebas  secara langsung,  kemudian  menstimulasi  mekanisme antioksidan tubuh.
Percobaan  pada  tikus  yang  disuntik dengan  bahan  ekstrak  dari  binahong  dapat meningkatkan  daya  tahan  tubuh    peningkatan agresivitas  tikus  dan  tidak  mudah  sakit.  Beberapa Beberapa  penyakit    yang  dapat  disembuhkan dengan menggunakan tanaman ini adalah: kerusakan ginjal, diabetes, pembengkakan jantung, muntah  darah,  tifus,  stroke  wasir,  rhematik, pemulihan  pasca  operasi,  pemulihan  pasca melahirkan, menyembuhkan segala luka dalam dan khitanan, radang usus, melancarkan dan menormalkan  peredaran  dan  tekanan  darah, sembelit,    sesak  napas,  sariawan  berat,  pusing- pusing,  sakit  perut,  menurunkan  panas  tinggi, menyuburkan  kandungan,  maag,  asam  urat, keputihan,  pembengkakan  hati,  meningkatkan vitalitas dan daya tahan tubuh (Manoi, 2009).
Ekstrak  metanol  daun  binahong  dapat menurunkan  kadar  glukosa  darah  (Sukandar, 2011.,  Makalalag,  2013).  Salep  ekstrak  daun binahong  memiliki  efektivitas  pada  penyembuhan luka yang terinfeksi bakteri Staphilococcus  aureus (Paju,  2013).Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  daun binahong  ditemukan  senyawa  polifenol,alkaloid dan  flavonoid.  Pada  konsentrasi  25  %  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  Staphylococcus
aureus,  pada  konsentrasi  50  %  dapat  menghambat pertumbuhanbakteri Pseudomonas aeruginosa
(Khunaifi, 2010), juga dapat menghambat pertumbuhanbakteri Shigella flexneri (Ainurrochmah  dkk,  2013).  Daun  binahong mengandungflavonoid yang menunjukkan aktivitas antioksidan. Ekstrak etil asetat daun binahongmempunyai  aktivitas  rendah  sebagai antioksidan  dengan  nilai  IC50  sebesar  1458,8 ppm(Rahmawati dkk, 2012). Binahong mempunyai aktivitas biologis karena adanyasenyawa  bioaktif  asam  fenolat  yang memiliki aktivitas antioksidan (Ekaviantiwi dkk,2013) Kumala (2010), dalam identifikasi polifenol pada ekstrak daun binahong,terdapat satu golongan  polimer  fenol  alam  melanin  tumbuhan yaitu  senyawapirogalol  dan  sumber  glikosida polifenol  dari  spesies  Protea  eximia.f.  Murdiyanto dkk  (2012)  dalam  identifikasi  senyawa  golongan triterpenoid  ekstrakdaun  binahong,  menemukan senyawa
2,3,19,23-tetrahidroksi-12-ene-
24,28dimetil  ester  yang  berfungsi  sebagai  anti bakteri
Penelitian terkait dengan Titis dkk (2013), berhasil mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa alkaloidpada  ekstrak  daun  binahong.  Isolat (ekstrak etanol) alkaloid adalah senyawa betanidin (C18H16N2O8)  yang  bersifat  tidak  sitotoksik dengan LC50sebesar 85,583ppm.
Selain  itu  Daun  sambiloto  memiliki kandungan kimia diantaranya deoksi
andrografolid, andrografolid, noeandrografolid,  12 di  dehidroandrografolid,  dan  homoandrografolid (Hariana,  2006).  Pada  percobaan  farmakologis senyawa kimia yang berkhasiat sebagai antiradang adalah  andrographolid  deoksi-andrografolid,  dan neoandrografolid (Achmad et al., 2007)
Di dalam daun, kadar senyawa andrografolid  memiliki  jumlah  tertinggi  yaitu sebesar  2,5-4,8%  dari  berat  keringnya  (Prapanza dan  Marito,  2003).    Andrografolid    telah dilaporkan  memiliki  beragam  efek  farmakologi seperti  antidiabetes  (Reyes-Balaguer  et  al.,  2005; Yu et al., 2008), anti-agregasi platelet  ((Amroyan et  al.,  1999),  antimalaria  (Dua  et  al.,  2000), antihiperglikemi (Kumar et al., 2012), imunostimulan  (Xu  et  al.,  2007),  hepatoprotektif (Singha et al., 2007), antihiperlipidemia (Sivananthan  and  Elamaran,  2013).  Didalam senyawa  inilah  yang  merupakan  anti  bakteri  dan dapat meningkatan proses penyembuhan luka.
Menurut  penelitian  Fajriansyah  tahun 2016  menyatakan  bahwa  salep  ekstrak  binahong 40% dapat menghasilkan kepadatan kolagen paling tinggi  dibanding  pemberian  secara  suspense  oral ekstrak  binahong  dosis  100mg/kg  BB/hari, pemberian  kombinasi  topical    ekstrak  binahong 40%  da  nsuspensi  oral  100mg/kg  BB/hari, pemberian silver sulfadiazine, dan pemberian basis salep  saja.Pemberian  salep  dilakukan  2x  sehari, dan pengamatan dilakukan selama 5 hari, dan hari keenam pengamatan hasil dengan preparat
Menurut  Muttaqin  N  Z  menyatakan sebelumnya  sudah  dilakukan  penelitian  oleh  Al Bayaty    dkk.,    pada    tahun    2012    yang    berjudul Effect    of    Andrographis    paniculataLeaf    Extract on  Wound  Healing  in  Rats.  Penelitian  tersebut dilakukan    dengan  menggukan    gel    ekstrak sambiloto    dengan    hasil    bahwa    Andrographis paniculata  Nees    dalam    topikal    aplikasi konsentrasi    10%    menyebabkan    penyembuhan luka  kulit    pada    leher    tikus    wistar    yang    lebih cepat    dibandingkan    dengan    kelompok  kontrol. Sedangkan  untuk  penelitian  Muttaqin  NZ  di aplikasikan pada terhadap angiogenesi pada proses penyembuhan  luka  GINGIVA  Rattus  norvegicus dengan  penggunaan  Gel  Ekstrak  Binahong  2x sehari  selama 1 menit  dengan pengamatan hari  ke 3, 7 dan 10.
Berdasarkan  dari  hasil  temuan  diatas menunjukkan  bahwa  Anti  inflamasi  formulasi 1,2,dan  3  dari    kunyit  daun  sambiloto  dan  daun binahong  berpengaruh  terhadap  luka  sayat  pada kelinci. Pada Hipotesis 2 Ada perbedaan pengaruh efek  formulasi  anti  inflamasi  dari  kunyit,  daun binahong,  dan  sambiloto  terhadap  luka  sayat  pada kelinci dibandingkan pada kelompok kontrol.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Dapat disimpulkan bahwa: Terdapat efek anti inflamasi
formulasikunyit,  daun  binahong  daun sambiloto(  F1)  pada  luka  sayat  pada kelinci  (ρ<0,001).  Terdapat  efek  anti inflamasi  formulasikunyit,  daun  binahong daun sambiloto( F2) pada luka sayat pada kelinci  (ρ<0,001).  Terdapat  efek  anti inflamasi  formulasikunyit,  daun  binahong daun sambiloto( F3) pada luka sayat pada kelinci  (ρ<0,001).  Perbedaan  efek  anti inflamasi formulasi kunyit, daun binahong
daun sambiloto F1, F2, F3 pada luka sayat pada  kelinci  (ρ<0,05).  Terdapat  pengaruh anti  inflamasi  formulasi  kunyit,  daun binahong  daun  sambiloto  terhadap  kadar leukosit  pada  luka  sayat    kelinci  pada F1,F2,F3  dibandingkan  dengan  kelompok kontrol (ρ<0,001).
Disarankan untuk mengembangkan hasil  penelitian  dalam  lingkup  yang  lebih luas  serta  dapat  meningkatkan  ranah penelitian  dengan  uji  coba  keamaan formula  pada  manusia Disarankan  hasil penelitian  ini  dapat  dilanjutkan  untuk melakukan kerjasama formula pada pabrikan  yang  lebih  besar  untuk  dapat dikembangkan sampai pada lingkup produk formula yang berlisensi.

## DAFTAR RUJUKAN
Achmad,  S.  A.  2007. Ilmu  Kimia  dan Kegunaan Tumbuh-tumbuhan Obat Indonesia .ITB Press. Bandung. Ainurrochmah,  A.,  Ratnasari,  E.  dan Lisdiana,  L.  2013. Efektivitas Ekstrak Daun Binahong  (Anredera  cordifolia) Terhadap Penghambatan Pertumbuhan Bakteri  Shigella flexneri dengan Metode  Sumuran:  Vol  2  No  3, 2013.
Surabaya. Amroyan,  E.,  Gabrielian,  E.,  Panossian,
A.,  Wikman,  G.  and  Wagner,  H. 1999. Inhibitory effect of andrographolide from Andrographis paniculata on PAF-induced platelet aggregation .Phytomedicine.6:27- 31.
Bhat,  S.  V.,  B.  A. Nagasampagi  and  S. Meenakshi . 2007. Natural
Products :Chemistry and Application .  Narosa  Publishing
House, New Delhi.India. Bisono.  2002. Petunjuk  Praktis  Operasi Kecil. EGC. Jakarta. Brown  DL.  2004. Wound .  In: Brown  DL,
Borschel  GH,  editors.  Michigan Manual  ofPlastic  Surgery.  1st  ed. Philadelphia, USA: Lippincott Williams & Wilkins. Clark,  C.  1993. My  First  Book  of  Words and  Pictures .London  :  Brown Watson. Depkes RI. 2010. ProfilKesehatan Indonesia. Jakarta: Depkes RI.
Depkes,  RI.  1995. Farmakope  Indonesia . Ed.4. depkes RI. Jakarta 4. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1979. Farmakope Indonesia . Edisi ketiga. Ekaviantiwi, TyasAyu., Fachriyah, Enny.,Kusrini, Dewi.2013. IdentifikasiAsamFenol atdariEkstrakEtanoldaunBinahong (Anrederacordifolia (Ten.)Stennis)danUjiAktivitasAntio ksidan .Chem Info,  Vol1, No1, Hal 283-293.
Hariana,  2006. Tumbuhan  Obat  dan Khasiatnya . Jakarta: Penebar SwadayaWisma Hijau. Hidayati,  E.,  N.  Juli,  E.  Marwani.  2002. Isolasi Enterobacteriaceae Patogen dari Makanan  Berbumbu  dan  Tidak Berbumbu Kunyit  (Curcuma longa L.) Serta Uji Pengaruh Ekstrak Kunyit (Curcuma  longa  L.)  Terhadap Pertumbuhan Bakteri Yang Diisolasi . FMIPA Universitas Nahdlatul Wathan-Mataram. Bandung. Judd,  H.  2003. Wound  care  made incredibly easy . 1st ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins. Hal : 30-34. Khunaifi, M. 2010. Uji aktivitas antibakteri  ekstrak  daun  binahong (Anredera
cordifolia  (ten.)  Steenis)  terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa . Skripsi. Malang: UIN Malang.
Kumala, K.R. 2010. Identifikasi Polivenol pada  Ekstrak  Daun  Binahong (Anredera cordifolia (tenore) stanis). (tesis). UNIMUS. Makalalag,  I.W.,  A.  Wullur,  dan  W. Wiyana.2013. Uji  ekstrak  daun binahong (anrederacordifolia (ten.)  steenis)  terhadap  kadargula darah  pada  tikus  putih  jantan galurwilstar(Rattus norvegius) yang diinduksisukrosa. Jurnal Ilmiah  Farmasi-Unsrat  2(1)  :  28—
34.
Manoi,  F.  2009. Binahong  (Anredera cordifolia)(Ten)  Steenis  Sebagai Obat.  Jurnal  Warta  Penelitian Dan Pengembangan Tanaman Industri . Volume 15 Nomor 1:3. Miles,  Matthew  B  &  a.  Michael
Huberman.  2009. Analisis  Data Kualitatif .Jakarta: UI-Press. Paju,  N.  20 13.  Uji  Efektifitas  Salep Ekstrak Daun Binahong (Anredera cordifolia) pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus) yang terinfeksi Staphylococcus aureus. Jurnal Ilmiah Farmasi , Hal
23-24.
Prapanza, I. & Marianto, L.A. 2003. Khasiat & Manfaat Sambiloto:  Raja  PahitPenakluk
Aneka  Penyakit .  3-9.  AgroMedia Pustaka. Jakarta.
Rahmawati.  (2009). Pengaruh  stimulasi elektrikterhadap pengurangan luas luka padapenyembuhan luka
(debth  wound) .Jurnal  Pendidikan
Mutiara Ilmu. 2009; 4(2): 102-107.
Retno  Iswari  Tranggono.  2007. Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik .  Jakarta  :  PT.  Gramedia Pustaka Utama. Anggota IKAPI.
Reyes-Balaguer, J., Solas-Moreno,E.,
Morata-Aldea,  C.  and  Elorza- Montesinos,  P.2005,  Spontaneous diabetic  myonecrosis,  Diabetes
Care, 28:980-981.
Rustaman,  N.Y.,  dkk.  2007. Strategi Belajar Mengajar Biologi . Bandung: Jurusan Pendidikan Biologi FPMIPA UPI. Sivananthan,  M.  and  M.  Elamaran.  2013. Medicinal  and  Pharmacological Properties of Andrographispaniculata . International jornal of Biomolecules  and  Biomedicine.  3 (2):1-12. Sukandar, E.Y., Elfahmi, Nurdewi.
(2009). Pengaruh Pemberian Ekstrak  Air  Daun  JatiBelanda (Guazuma Ulmifolia Laml.) terhadap  Kadar  LipidDarah  pada TikusJantan . Jurnal  Kesehatan Masyarakat , 8 (2):102-112. Suseno.  2013. Kandungan  binahong . http:www.jurnal.stkipgarut.ac.id. Diakses tanggal 30 April 2018. Titis, M., Enny, F., Dewi, K. 2013. Isolasi, IdentifikasidanUjiAktifitasSenyawa Alkaloid DaunBinahong (Anrederacordifolia (Tenore) Steenis). UniversitasDiponegoro.
Semarang.
Xu,  L.,  et  al.  2005. Visual  Acuity  in Northern  China  in  an  Urban  and Rural Population: the Beizing Eye Study . Br J Ophthalmol 89: 1089-1093