## AKTIVITAS ANTIKOLESTEROL EKSTRAK ETANOL BUAH KIWI HIJAU ( Actinidia deliciosa )
Submitted : 05 Mei 2020 Edited : 22 Desember 2020 Accepted : 29 Desember 2020
Novena Yety Lindawati, Desi Widya Ningsih
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional Jl. Solo-Baki, Kwarasan, Sukoharjo, Jawa Tengah Email : novena_yl@yahoo.com, desiwidya16@gmail.com

## ABSTRACT
Disease  in  the  liver  caused  by  hypercholesterolemia  is  fatty  liver.  Fatty  liver  is  one  of the  damages  to  the  liver,  a  condition  in  which  the  liver  experiences  fat  accumulation.  Green kiwifruit (Actinidia deliciosa) is a plant that contains a lot of flavonoid compounds can be used as cholesterol-lowering. Flavonoids are able to release cholesterol found in the walls of blood vessels  and  organs  in  the  body.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  presence  or absence  of  anticholesterol  activity  and  EC 50 values  in  ethanol  extracts  of  green  kiwifruit (Actinidia  deliciosa)  with  a  concentration  series  of  2.5;  5.0;  7.5;  10.0;  12.5  ppm.  Ethanol extract of green kiwifruit was tested for active substance content and quantitative analysis using UV-Vis spectrophotometry method at a wavelength of 668 nm and operating time of 15 minutes. The  results  showed  ethanol  extract  of  green  kiwifruit  contains  phenols,  flavonoids,  saponins, vitamin  C  which  can  reduce  cholesterol  levels  with  an  average  EC 50 value  of  7.3  ppm  with  a coefficient of variation value of 1.12%.
Keywords : Cholesterol, Extract, Green kiwifruit (Actinidia deliciosa), EC 50 .

## PENDAHULUAN
Kolesterol adalah salah satu komponen lemak  yang  dibutuhkan  tubuh  dan  berperan dalam  pembentukan  hormon,  anak  ginjal, testis, dan ovarium. Secara normal, kolesterol diproduksi  tubuh  dalam  jumlah  yang  tepat, tetapi  dapat  meningkat  jumlahnya  karena penambahan  makanan  yang  berasal  dari lemak  hewani.  Kolesterol  dalam  tubuh terutama diperoleh dari hasil sintesis di hati (1) . Hiperkolesterol adalah keadaan dimana kadar kolesterol  dalam  tubuh  melebihi  keadaan normal.
Keadaan ini dapat meningkatkan risiko terkena  beberapa  penyakit  salah  satunya penyakit hepar. Faktor penyebab hiperkolesterol diantaranya faktor keturunan,
konsumsi  makanan  tinggi  lemak,  kurang olahraga, kebiasaan merokok.
Penyakit  di  hepar  yang  disebabkan oleh hiperkolesterol adalah pelemakan
hati/ fatty  liver .  Perlemakan  hati  merupakan salah satu kerusakan pada hati, suatu keadaan yang  mana  hati  mengalami  penimbunan lemak. Perlemakan hati ini sering berpotensi menjadi  penyebab kerusakan hati dan sirosis hati (2) . Buah  kiwi  hijau  ( Actinidia  deliciosa ) adalah  tanaman  yang  banyak  mengandung senyawa  fitokimia  seperti  flavonoid,  dan quinone, vitamin dan juga  mineral (3) . Senyawa  flavonoid  dapat  digunakan  sebagai penurun kolesterol. Flavonoid mampu melunturkan  kolesterol  yang  terdapat  pada dinding  pembuluh  darah  dan  organ  didalam tubuh (4) . Senyawa fenolik, flavonoid, dan steroid dapat mempengaruhi aktivitas penurunan  kadar  kolesterol  didalam  tubuh (5) .  Buah  kiwi  hijau  ( Actinidia  deliciosa ) memiliki  aktivitas  antioksidan  sebesar  7,2
ppm,  senyawa  flavonoid,  senyawa  fenolik, klorofil, dan vitamin C yang tinggi (6) .
Tujuan penelitian ini untuk
mengetahui  aktivitas  antikolesterol  pada ekstrak  etanol  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa )  dalam  nilai  EC 50 dengan  metode Liebermann-Burchard .

## METODE PENELITIAN Teknik Pengumpulan Data
Bahan  yang  digunakan  adalah  serbuk buah  kiwi  hijau  ( Actinidia  deliciosa ),  etanol 70%, kloroform, FeCl 3 1%, serbuk logam Mg, HCl Pekat, amil alkohol, NaOH 10%, FeSO 4 , HCl 2N, NaCl 2%, asam asetat anhidrat, asam sulat pekat, baku kolesterol merck.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini adalah alat–alat gelas seperti gelas beker, pipet  volume,  tabung  reaksi  dan  labu  ukur (pyrex),  nampan,  blender  (Philips),  bejana, sotel, corong plastik, ayakan, cawan porselen, waterbath, rotary  evaporator ,  timbangan elektrik  (Ohaus  pioneer),  spektrofotometer UV-VIS  (Shimadzu  UV  mini-1240),  kuvet Hellma Analytic  type No  100.600 QG  Light path  lotum oven,  kertas  saring,  kain  flanel, alumunium foil.

## Prosedur Penelitian Pembuatan Simplisia
Populasi  pada  penelitian  ini  adalah buah  kiwi  hijau  ( Actinidia  deliciosa )  yang digunakan  didapatkan  dari  Pasar  Gede Surakarta. Pengambilan sampel pada
penelitian ini dilakukan dengan teknik simple random sampling diambil dari lima pedagang di  Pasar  Gede.  Identifikasi  dan  determinasi buah  kiwi  hijau  ( Actinidia  deliciosa ) dilakukan  di  Balai  Besar  Penelitian  dan Pengembangan  Tanaman  Obat  dan  Obat Tradisional (B2P2TOOT).
Simplisia  dibuat  dengan  dengan cara  mengumpulan  buah  kiwi  hijau ( Actinidia  deliciosa )  yang  diperoleh  dari lima  pedagang  di  Pasar  Gede  Surakarta. Pembuatan  simplisia  dengan  cara  disortasi untuk  memisahkan  dari  buah  yang  busuk kemudian buah kiwi  hijau ( Actinidia
deliciosa )  dipotong  tipis  untuk  memperluas permukaan  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa )  pada  saat  dikeringkan.  Buah  kiwi hijau  ( Actinidia  deliciosa )  yang  telah dipotong dikeringkan pada suhu 40˚C sampai kering.  Buah  kiwi  hijau  yang  sudah  kering diblender sampai halus kemudian diayak  dan diperoleh  simplisia  buah  kiwi hijau.

## Pembuatan Ekstrak Kental
Serbuk yang didapat ditimbang sebanyak  100,0  gram  kemudian  dimasukkan dalam bejana tertutup
dimaserasi menggunakan  etanol  70  %  sebanyak  7,5 bagian  cairan penyari  yaitu 750,0 ml etanol 70  %.  Perendaman  dilakukan  selama  5  hari dan  dilakukan  pengadukan  secara  konstan, setelah  5  hari  di  saring  menggunakan  kain flannel  dan  kertas  saring.  Ampas  di  sari kembali  dengan  etanol  70  %  sebanyak  2,5 bagian penyari yaitu 250,0 ml etanol 70 %.
Perendaman  dilakukan  selama  2  hari disertai  dengan  pengadukan  secara  konstan dan  disaring  dengan  kain  flannel  dan  kertas saring.  Filtrat  dienapkan  selama 1 hari untuk memisahkan  endapan (7) .  Filtrat  yang  didapat diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator , pada suhu 50˚C hingga diperoleh ekstrak  cair  dan  diuapkan  dengan  waterbath sampai  diperoleh  ekstak  kental.  Pembuatan ekstrak direplikasi sebanyak tiga kali (8) .
Uji  Kandungan  Zat  Aktif  Ekstrak Buah Kiwi Hijau ( Actinidia deliciosa ) Identifikasi Fenol
Ekstrak kentak ditambah 1,0 ml larutan FeCl3 1 %.  Hasil  positif
mengandung senyawa fenol  akan  menimbulkan  warna hijau,  merah,  ungu,  biru,  atau  hitam  yang kuat (9) .

## Identifikasi Flavonoid
Ekstrak  kental  2,0  ml  ditambahkan etanol  95%,  kemudian  ditambahkan  10,0  ml HCl  pekat  dan  ditambahkan  0,1  g  serbuk Mg positif flavonoid ditandai dengan larutan berwarna kuning (10) .

## Identifikasi steroid dan triterpenoid
Pemeriksaan  steroid  dan  triterpenoid dilakukan dengan reaksi Lieberman- Burchard. Sebanyak 1,0 ml sampel ditambahkan kloroform,
kemudian ditambahkan  asam  asetat  anhidrida  dan beberapa  tetes  asam  sulfat  pekat.  Hasil  uji positif untuk triterpenoid bila terbentuk warna hijau gelap. Hasil uji positif untuk steroid bila terbentuk warna merah muda atau merah (11) .

## Identifikasi vitamin C
Ektrak  kental  ditambah  2  tetes  NaOH 10%  dan  2,0  ml  FeSO 4 ,  campuran  akan menghasilkan  larutan kuning  hingga orange jika mengandung vitamin C (10) .

## Identifikasi saponin
Sebanyak 0,5 gram ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi lalu ditambahkan 10,0 ml  air  panas,  dinginkan  kemudian  dikocok kuat-kuat selama 10 detik, jika terbentuk buih yang stabil selama tidak kurang dari 10 menit setinggi  1-10  cm.  Penambahan  1  tetes  asam klorida 2N buih tidak hilang (12) .
Analisis  Kuantitatif  Ekstrak  Buah  Kiwi Hijau Pembuatan Larutan Baku Kolesterol Larutan induk kolesterol dibuat dengan konsentrasi  1000  ppm  yaitu  dengan  cara melarutkan 100,0 mg serbuk kolesterol dalam 100,0  ml kloroform  diaduk  hingga larut.
Penentuan Operating Time Penentuan operating time
menggunakan  konsentrasi  100  ppm  dapat ditentukan dengan cara diambil 0,5 ml larutan induk  kolesterol  1000  ppm  lalu  ditambah dengan  kloroform  dalam  labu  ukur  5,0  ml sampai tanda batas.
Larutan direaksikan dengan asam asetat anhidrat  2,0  ml  dan  0,1 ml  H 2 SO 4 dalam tabung reaksi. Absorbansi diukur tiap 1 menit mulai  dari  menit  ke-0  hingga  menit  ke-30 menggunakan  panjang  gelombang  maksimal secara  teoritis  668  nm  untuk  deteksi (10) . Waktu pengukuran yang stabil diperoleh dari hubungan  antara  waktu  pengukuran  dengan absorbansi larutan (13) .
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Penentuan panjang gelombang maksimum dapat ditentukan dengan
spektrofotometri UV-Vis dari larutan standar kolesterol  dengan  konsentrasi  100  ppm. Larutan  baku  kolesterol  1000  ppm  diambil sebanyak  0,5  ml  dalam  labu  ukur  5,0  ml ditambah  dengan  kloroform  sampai  tanda batas.
Larutan  direaksikan  dengan  asam asetat  anhidrat  2,0  ml  dan  0,1 ml  H 2 SO 4 pekat  dalam  tabung  reaksi  yang  lapisan  luar tabung ditutup dengan alumunium foil untuk melindungi dari cahaya, kemudian didiamkan selama  waktu operating  time .  Pengukuran menggunakan spektrofotometer UV-Vis dengan panjang gelombang 600-
750 nm (13) .

## Pembuatan Kurva Baku
Larutan  baku  kolesterol  konsentrasi 1000  ppm  dibuat 5  seri  konsentrasi  yaitu diambil dari larutan induk tersebut sebanyak 0,3;  0,35;  0,4;  0,45;  dan  0,5  ml  kemudian ditambah  dengan  kloroform  masing-masing hingga  volume  5,0  ml  dalam  labu  ukur sehingga  dihasilkan  masing-masing  larutan dengan  konsentrasi  60,  70,  80,  90,  dan  100 ppm.
Masing-masing larutan tersebut dihomogenkan dalam tabung reaksi, kemudian  ditambahkan  asam  asetat  anhidrat 2,0 ml dan 0,1  ml  H 2 SO 4 pekat, lapisan luar tabung ditutup menggunakan alumunium foil untuk melindungi dari cahaya dan didiamkan selama  waktu operating  time dan  diukur absorbansinya dengan menggunakan panjang gelombang  maksimumnya.  Kemudian  dibuat kurva  hubungan  antara  konsentrasi  dengan absorbansi (13) .
Penentuan  Penurunan  Kolesterol  dari Ekstrak  Buah  Kiwi  Hijau  ( Actinidia deliciosa )
Seri  konsentrasi  2,5  ;  5,0  ;  7,5  ;  10,0 dan  12,5  ppm  dari  konsentrasi  1000 ppm ekstrak  etanol  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa )  dalam  kloroform.  Masing-masing konsentrasi diambil 5,0 ml dimasukkan dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan dengan
5,0  ml  baku  kolesterol  dengan  konsentrasi
200  ppm  dalam  kloroform.  Campuran tersebut  diambil  5,0  ml,  kemudian  ditambah 2,0 ml asam asetat anhidrat dan 0,1 ml H 2 SO 4 pekat.  Larutan  didiamkan  di  tempat  gelap selama waktu operating time hingga terbentuk  perubahan  warna  menjadi  hijau. Penelitian  dilakukan  untuk  masing-masing ekstrak buah  kiwi hijau ( Actinidia deliciosa ) yang  diperoleh,  hasil  warna  yang  diperoleh dibaca dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang maksimumnya (13) .
Larutan  blangko  yang  digunakan adalah  5,0  ml  kloroform  ditambah  2,0  ml asam asetat anhidrat dan 0,1 ml H 2 SO 4 pekat.
Kontrol negatif yang digunakan berupa 5,0 ml larutan  kolesterol  200  ppm  dalam  kloroform ditambah 2,0 ml asam asetat anhidrat dan 0,1 ml H 2 SO 4 pekat (13) .
Presentase  kadar  penurunan  kolesterol menggunakan rumus berikut :
Keterangan : A = % penurunan kolesterol B = Absorbansi baku + sampel
C = Absorbansi kontrol (baku)
Nilai  EC 50 dihitung  dari  kurva  regresi linier  antara  konsentrasi  larutan  uji  dari ekstrak  etanol  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa ) dengan presentase kadar penurunan kolesterol, yaitu :
Keterangan : y = % penurunan kolesterol
x = konsentrasi sampel
a = intercept b = slope/harga kemiringan kurva

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyiapan  Sampel  Buah  Kiwi  Hijau ( Actinidia deliciosa ) Sampel yang digunakan pada
penelitian ini yaitu buah kiwi hijau ( Actinidia deliciosa ). Hasil determinasi dapat diketahui
bahwa buah kiwi hijau segar yang digunakan memiliki spesies Actinidia deliciosa (A.Chev.) C.F.Liang & A.R.Ferguson dengan  sinonim Actinidia  latifolia var. deliciosa A.Chev. dalam familia Actinidiaceae.
Sampel  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa ) didapat dari Pasar Gede Surakarta untuk  mewakili  populasi  yang  sama. Pengambilan  sampel  dilakukan  di  lima pedagang  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa ) yang ada di Pasar Gede, Surakarta.
Sampel buah kiwi hijau ( Actinidia deliciosa ) yang  didapat  kemudian  disortasi  dan dibersihkan  bulunya  yang  bertujuan  untuk memisahkan cemaran dan kotoran dari buah tersebut.
Sampel  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa ) kemudian dicuci untuk
membersihkan  kotoran  yang  melekat  pada buah  dan  dipotong-potong  lalu  dikeringkan dengan  oven  pada suhu 40 o C selama  4 hari.
Tujuan  dari  pengeringan  untuk  mengurangi kadar air sehingga proses pembusukan dapat terhambat,  tidak  mudah  rusak  dan  dapat disimpan dalam waktu yang lama.
Sampel  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa )  dibuat  serbuk  dengan  cara diblender  yang  bertujuan  untuk  memperluas permukaan  sel  sampel.  Hal  ini  akan memperbesar terjadinya kontak  antara partikel simplisia dengan cairan penyari yang selanjutnya dapat memperbesar efek
ekstraksi  sehingga  dengan  ukuran  serbuk yang  halus,  diharapkan  luas  permukaan kontak  dengan  cairan  penyari  akan  semakin besar  sehingga  senyawa  yang  terkandung dalam  sampel  mudah  ditarik  oleh  pelarut pada  saat  proses  ekstraksi.  Pada  dasarnya, semakin  halus  serbuk  maka  akan  semakin banyak permukaan serbuk yang bersentuhan dengan  cairan  penyari  sehingga  proses penyarian akan lebih maksimal.
Serbuk  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa )  yang  didapat  kemudian  diayak dengan ayakan 40 mesh yang bertujuan untuk mendapatkan  serbuk  simplisia  yang  paling halus.  Serbuk  simplisia  buah  kiwi  hijau ( Actinidia  deliciosa )  dari  masing-  masing pengeringan  diambil  sebesar  20,0  gram sebanyak  lima,  kemudian  dihomogenkan menjadi  100,0  gram  serbuk  simplisia  buah kiwi hijau ( Actinidia deliciosa ) dan
diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi.
Hal ini dilakukan untuk menghindari variasi kandungan metabolit sekunder dalam tanaman  supaya  didapatkan  hasil  yang homogen.
Pembuatan  Ekstrak  Buah  Kiwi  Hijau ( Actinidia deliciosa )
Proses  penyarian  pada  sampel  buah kiwi hijau ( Actinidia deliciosa ) menggunakan metode  maserasi.  Metode  ini  digunakan karena mudah dilakukan, alat yang sederhana dan tidak mengakibatkan kerusakan senyawa tertentu karena tidak menggunakan pemanasan,  kemudian  sebanyak  100,0  gram serbuk  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia  deliciosa )
diekstraksi. Pengekstraksian dilakukan sebanyak tiga kali.
Ekstraksi  bertujuan  untuk  mengambil zat  aktif  dalam  bahan  alam  dengan  bantuan pelarut  yang  sesuai.  Pada  metode  maserasi digunakan  etanol  70%  sebagai  pelarutnya. Pelarut  yang  tidak  berwarna  (bening)  akan menembus  dinding  sel  dan  masuk  ke  dalam rongga  sel  yang  mengandung  zat  aktif.  Zat aktif  akan  larut  karena  adanya  perbedaan konsentrasi antara larutan  zat  aktif  di  dalam sel  dengan  diluar sel, maka zat  larutan akan
didesak  keluar.  Penggunaan  etanol  70% bersifat  universal  yaitu  dapat  melarutkan berbagai macam kandungan zat aktif. Etanol 70%  masih  mengandung  air  sehingga flavonoid dapat tertarik pada cairan
penyari (10) .
Prinsip rotary  evaporator untuk memisahkan cairan penyari dengan penguapan  dan  vakum  destilasi  sehingga penurunan tekanan atmosfer akan mengakibatkan  cairan  penyari  lebih  cepat menguap,  keuntungan rotary  evaporator yaitu tidak mengakibatkan kerusakan senyawa karena suhu yang tinggi. Hasil  organoleptis  dari  ekstrak  buah kiwi hijau ( Actinidia deliciosa ) yaitu berupa ekstrak  kental,  berwarna  merah  kecoklatan, dan  berbau  khas.  Hasil  rendemen  ekstrak etanol  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia  deliciosa ) pada  penelitian  ini  sebesar  68,98  %,  59,20 %, dan 65,80 % dari masing-masing ekstrak.
Uji  Kandungan  Zat  Aktif  Ekstrak Buah Kiwi Hijau ( Actinidia deliciosa ) Uji  kandungan  zat  aktif  dilakukan untuk  mengetahui  senyawa  aktif  yang terkandung  dalam  ekstrak  buah  kiwi  hijau ( Actinidia deliciosa ). Uji kandungan zat aktif yang  diuji  pada  ekstrak  etanol  buah  kiwi hijau ( Actinidia deliciosa ) pada penelitian ini adalah fenol, flavonoid, saponin, steroid, triterpenoid, dan vitamin C.
Hasil  uji  kandungan  zat  aktif  ekstrak buah  kiwi  hijau  pada  tabel  1  menunjukkan bahwa ekstrak buah kiwi hijau mengandung senyawa  fenol,  flavonoid,  vitamin  C,  dan saponin.
Tabel 1. hasil kandungan zat aktif ekstrak buah kiwi hijau ( Actinidia deliciosa )
Prinsip  analisis  kuantitatif  ekstrak  buah kiwi  hijau  dengan  metode Liebermann- Burchard Pengukuran aktivitas penurunan kolesterol  dilakukan  dengan  menggunakan spektrofotometer  UV-Visibel.  Pengukuran penurunan kolesterol bertujuan untuk mengetahui  kemampuan  suatu  senyawa sebagai penurun kolesterol. Metode
Lieberman  Burchard adalah  pembentukan kompleks  warna  tertentu  dengan  beberapa reagen  yang  menyerap  cahaya  pada  panjang gelombang Visibel, sehingga dengan mengetahui nilai absorbansi dari suatu sampel pada suatu panjang gelombang tertentu, maka akan  dapat  di  tentukan  kadar  kolesterolnya.
Metode ini dipilih karena prosedur pengerjaannya  sederhana,  cepat,  sensitif, mudah dan hanya membutuhkan sampel yang sedikit.
Metode Lieberman Burchard
merupakan metode yang sangat spesifik untuk menganalisis  secara  kuantitatif  kolesterol yang  merupakan  senyawa  golongan  steroid. Kloroform digunakan untuk melarutkan baku kolesterol karena kolesterol mempunyai sifat larut dalam pelarut non polar yaitu 4,5 bagian kloroform (14) .  Reaksi  yang  terjadi  dalam proses  ini  harus  bebas  dari  air  karena keberadaan  air  mempengaruhi  proses  dan membuat  senyawa  yang  terbentuk  menjadi tidak  stabil.
Metode Lieberman Burchard menggunakan  pereaksi  asam  asetat  anhidrat dan  asam  sulfat  pekat.  Penambahan  asam asetat anhidrat bertujuan untuk menghilangkan kandungan air dan memastikan  sistem  terbebas  dari  air  dan membentuk produk turunan asetil dari steroid.
Larutan  ditutup  dengan  alumunium foil  agar  tidak  ada  penyerapan  cahaya  oleh kolesterol  sebelum  kolesterol  diukur  dengan spektrofotometri  Visibel  karena  hal  ini tentunya dapat mempengaruhi serapan cahaya pada saat pengukuran sehingga turut mempengaruhi hasil pengukuran (15) .
Larutan  tersebut  kemudian  didiamkan ditempat  yang  gelap  terlindung  dari  cahaya matahari  karena  larutan  kolesterol  bersifat
fotodegradasi  tidak  stabil  terhadap  cahaya. Larutan  yang  telah  didiamkan  hingga terbentuk  kompleks  larutan  berwarna  hijau kemudian dibaca serapannya dengan spektrofotometri  Visibel  dengan  panjang gelombang 668 nm. Spektrofotometri UV-Visibel
digunakan  karena  hasil  dari  reaksi  antara larutan  uji  dengan  asam  asetat  anhidrat  dan asam sulfat pekat akan terbentuk warna yang berwarna hijau yang dapat diukur serapannya dengan menggunakan spektrofotometer visibel. Reaksi kolesterol dengan asam sulfat dan asetat anhidrat anhidrat ditunjukkan pada gambar dibawah.
Reaksi kolesterol dengan asam sulfat dan asam asetat asetat anhidrat (16)
Langkah–langkah analisis
dilakukan dengan cara menentukan :
Penentuan operating time Penentuan operating  time dengan konsentrasi  100  ppm  dilakukan  pertama kali  pada  analisis  kuantitatif  penurunan kolesterol. Penentuan operating time dilakukan  untuk  mengetahui  waktu  yang dibutuhkan suatu senyawa untuk mencapai reaksi  yang  stabil  yang  ditandai  dengan absorbansi yang stabil. Operating time yang digunakan pada  penelitian  ini  pada  menit ke-15. Kolesterol bereaksi secara stabil dan sempurna  dengan  asam  asetat  dan  asam sulfat  pekat  membentuk  asam  3-aseto-5- kolesterol sulfunat (17.10) Penentuan panjang gelombang maksimum Panjang gelombang maksimal yang
diperoleh  668  nm.  Hal  ini  sesuai  dengan literatur  yang  menyebutkan  bahwa  panjang gelombang maksimum dari larutan kolesterol  yang  direaksikan  dengan  dengan asam  asetat  anhidrat  dan  asam  sulfat  pekat adalah 668 nm (10) .

## Pembuatan kurva baku
Koefisien  korelasi  (r)  dari  kurva kalibrasi  larutan  baku  kolesterol  sebesar  r  = 0,999  dengan  nilai  a  =  0,0304  dan  nilai  b  = 0,0053 sehingga diperoleh persamaan linier y = 0,0053x – 0,0304. Koefisien korelasi inilah yang  digunakan  untuk  mengetahui  linearitas suatu  metode  analisis,  dimana  a  merupakan intersep kurva, yaitu titik potong kurva pada sumbu  y  dan  b  adalah  slope/kemiringan kurva.
Hasil  linearitas  yang  baik  diperoleh jika nilai koefisien regresi mendekati 1. Harga koefisien  korelasi  (r)  yang  ideal  apabila mendekati  -1  atau  +1  menyatakan  hubungan yang linear antara konsentrasi dengan serapan yang dihasilkan dengan arti peningkatan nilai absorbansi  analit  berbanding  lurus  dengan peningkatan  konsentrasinya.  Semakin  besar nilai koefisien korelasi yang didapat semakin besar  kelinearan  yang  didapat.  Kisaran  kerja yang  dihasilkan  menunjukkan  kondisi  kerja yang  linear  yang  sesuai  dengan  hukum Lambert Beer.

## Hasil  pengukuran  penurunan  kolesterol dari ekstrak buah kiwi hijau
Pada tabel 2 hasil penurunan kolesterol ekstrak  buah  kiwi  menunjukkan  persen penurunan  kolesterol  pada  ekstrak  etanol buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa ) dengan tiga  replikasi  disertai  nilai  EC 50 dalam  lima seri  konsentrasi yaitu 2,5  ;  5,0  ; 7,5  ;  10,0
dan  12,5  ppm yang  menunjukkan  semakin besar konsentrasi sampel ekstrak etanol buah kiwi  hijau  ( Actinidia  deliciosa )  maka  persen penurunan kolesterol yang dihasilkan semakin tinggi.
Nilai  EC 50 ( Effective  Concentration ) merupakan  nilai  untuk  menggambarkan besarnya  konsentrasi  suatu  metabolit  yang diperlukan untuk menurunkan kadar kolesterol  sebanyak  50%  dari  kadar  total kolesterol awal. Nilai EC 50 didapatkan dengan persamaan  regresi  linier  yang  menyatakan hubungan  antara  konsentrasi  ekstrak  etanol buah  kiwi  hijau  ( Actinidia  deliciosa )  (x) dengan  persen  penurunan  kadar  kolesterol rata-rata (y) dari seri pengukuran sampel.
Nilai  EC 50 yang  diperoleh  dari penelitian  uji  potensi  antikolesterol  pada ekstrak  etanol  buah  kiwi  hijau  ( Actinidia deliciosa )  yaitu  7,4  ppm,  7,3  ppm,  dan  7,2 ppm. Rata–rata nilai EC 50 ekstrak etanol buah kiwi hijau sebesar 7,3 ppm.
Koefisien  variasi  merupakan  suatu koefisien  yang  digunakan  untuk  mengetahui kesesuaian  hasil  analisis  satu  dengan  hasil analisis  lain  dari  suatu  seri  pengukuran. Kriteria  nilai  KV  yang  baik  yaitu  2  %  atau kurang (18) . Nilai KV dari penelitian ini sebesar 1,12  %,  yang  menunjukkan  bahwa  nilai  KV kurang  dari  2  %.  Hal  tersebut  menunjukkan bahwa  data  diperoleh dengan  tingkat ketelitian kerja yang baik.
Tabel 2. Hasil penurunan kolesterol ekstrak buah kiwi
Ekstrak  buah  kiwi  hijau  menurunkan kadar  kolesterol  disebabkan  oleh  adanya kandungan  senyawa  metabolit  sekunder seperti fenol, flavonoid, saponin dan vitamin C. Flavonoid yang terkandung dalam ekstrak buah kiwi hijau menurunkan kadar kolesterol dengan  menghambat  kerja  enzim  3-hidroksi 3-metilglutaril  koenzim  A  reduktase  (HMG Co-A reduktase).
Enzim ini berfungsi sebagai pengkatalis  dalam  pembentukan  kolesterol dan meningkatkan aktivitas Lechitin
Cholesterol  Acyl (LCAT)  yang  merupakan enzim  yang  dapat  mengkonversi  kolesterol bebas  menjadi  ester  kolesterol  yang  lebih hidrofobik,  sehingga  ester  kolesterol  dapat berikatan  dengan  partikel  inti  lipoprotein untuk  membentuk  HDL  baru  yang  dapat meningkatkan  kadar  HDL  serum (19) .  Reaksi kimia antara kolesterol dengan flavonoid akan terjadi  ikatan  yang  paling  kuat  pada  gugus hidroksil  posisi  3-4.  Gugus  hidroksil  yang terdapat  pada  struktur  kolesterol  bereaksi dengan  gugus  keton  pada  struktur  flavonoid
(16) .
Kemampuan penurunan kolesterol dari ekstrak  etanol  buah  kiwi  hijau  selain dari kandungan  flavonoid  juga  dari  senyawa fenolik,  saponin,  dan  vitamin  C.  Saponin dapat  menurunkan  level  serum  kolesterol dengan  daya  pengikatan  antara  saponin dengan kolesterol (20) . Saponin bekerja dengan mengendapkan  kolesterol  dan  bercampur dalam  sirkulasi  entero  hepatik  asam  empedu yang  dapat  membuat  penyerapan  kolesterol pada usus terganggu (20) . Aktivitas
antikolesterol dari saponin juga dapat melalui penghambatan  reaksi  oksidasi  kolesterol LDL. Adanya hambatan reaksi oksidari rekasi LDL akan dapat menurunkan kadar kolesterol dalam darah (21) .

## SIMPULAN
Hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan menunjukkan  ekstrak  etanol  buah  kiwi  hijau ( Actinidia deliciosa ) memiliki potensi sebagai  antikolesterol  dengan  nilai  EC 50 sebesar 7,3 ppm dengan nilai KV 1,12 %.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Murray, R.  K.,  Granner  D.,and Rodwell V.W.,  2013,  Biokimia Harper,  Buku  Kedokteran  EGC, Jakarta 2. Ardjoni., 2007,  Berikan  Perhatian Pada  Hati  Anda ,  Diakses  tanggal  13 Agustus 2010 3. Shastri, K. V., Bhatia, V., Parikh, P. R., dan  Chaphekar,  V.  N.,  2012, Actinidia Deliciosa :  A  Review, International Journal of Pharmaceutical Sciences and
Research 3 (10): 3543-3549 .
4. Nalole, Martianty., 2009, Pembelajaran Melalui  Pendekatan  Realistik ,  Diakses pada tanggal 12 Maret 2012 5. Nadhilah  dan  Bachmid.,  2015,  Uji Aktivitas  Antikolesterol  Ekstrak  Etanol Daun Patikan Emas ( Euphorbia prunifolia Jacq.) pada Tikus Wistar yang Hiperkolesterolemia, Jurnal MIPA UNSRAT Online, 4,  1, pp.  29- 35Sutjiatmo,  A.  B.,  Sukandar,  E.  Y., Sinaga, R., Hernawati, R., dan Vikasari,
S. N., 2013, Efek Antikolesterol Ekstrak Etanol Daun Cerme ( Phyllanthus acidus (L.)  Skeels)  Pada  Tikus  Wistar  Betina,
Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi 4 (1).
6. Inggrid,H.M.,  dan  Santoso.  H.,  2014, Ekstraksi  Antioksidan  Dan  Senyawa Aktif  Dari  Buah  Kiwi  ( Actinidia deliciosa ), skripsi ,  Lembaga  Penelitian dan  Pengabdian  kepada  Masyarakat, Universitas Katolik Parahyangan, Bandung. 7. Depkes., 1986, Sediaan Galenik , Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta
8. Meila, O., Noraini., 2017, Uji Aktivitas Antidiabetes dari Ekstrak Metanol Buah Kiwi  ( Actinidia  deliciosa )  melalui Penghambatan Aktivitas α- Glukosidase , Jurnal  Farmasi  Galenika (Galenika Journal  of  Pharmacy)  3  (2):
132 – 137.
9. Harborne, JB., 1987, Metode Fitokimia , ITB, Bandung.
10. Ingrid,  Mufti  Ali.,  2017,  Uji  Aktivitas Antikolesterol  Ekstrak  Etanol  Daun Binahong  (Anredera  Cordifolia  (Ten) Steenis)  Secara  In  Vitro, Jurnal  Ilmiah Kesehatan 9 (1).
11. Ciulei,  J.,  1984, Methodology  for Analysis  of  Vegetables  and  Drugs ,
Faculty of Pharmacy. Pp, Bucharest
12. Mayasari,  U.  &  Laoli,  M.T.,  2018,
Karakterisasi  Simplisia  Dan  Skrining Fitokimia  Daun  Jeruk  Lemon  (Citrus limon (L.) Burm.F.), Klorofil 13. Amin, M. S., 2015, Studi In-vitro ; Efek Antikolesterol  dari  Ekstrak  Metanol
Buah  Parijoto  ( Medinilla  speciosa Blume )  Terhadap  Kolesterol  Total,
Skripsi ,  UIN  Syarif Hidayatullah,
Jakarta.
14. Rowe,  Raymond  C,  dkk.,  2009, Handbook of Pharmaceutical Excipients ,  6th  Ed.  Pharmaceutical Press, USA
15. Murray,Robert K., et al. , 2003, Biokimia Harper ed. 25 , EGC, Jakarta
16. Ingrid, Lily Fathrah., 2018, Activity Test of Suji Leaf Extract (Dracaena angustifolia Roxb.) on in vitro cholesterol  lowering, Jurnal  Kimia
Sains dan Aplikasi 21 (2).
17. Situmorang,  Manihar.,  2012, Kimia Lingkungan , FMIPA UNIMED, Medan.
18. Harmita.,  2004,  Petunjuk  Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara
Perhitungannya, Review Artikel Majalah Ilmu Kefarmasian 19. Aprilia  Fajrin.,  2010,  Aktivitas  Ekstrak Etanol Ketan Hitam untuk Menurunkan
Kadar  Kolesterol, Jurnal  Farmasi Indonesia 5 (2).
20. Smith and Adanlawo., 2013, Tissue lipid profile  of  rats  administered  saponin  ex tract  from  the  root  of  bitter  kola ,  ad vances in biochemistry 21. Kamesh, Venkatakrishnan and Thangarajan  Sumathi.,  2012,  Anti hypercholestrolemic  effect  of  Bacopa monniera  Linn.  On  highcholestrol  diet induced  hypercholestrolemia  in  rats, Asian  Pasific  Journal  of  Tropical medicine 5 (12): 949-955.
22. Adeneye  AA,  Olagunju  JA.,  2009, Preliminary hypoglycemic and hypolipidemic activities of the aqueousseed  extract  of  Carica  papaya Linn ,  in  wistar  rats,  Biology  and Medicine 1 (1): 1-10 .