Pengaruh Ekstrak Etanol Buah  Pinang Yaki ( Areca vestiaria ) terhadap Gambaran Makroskopis Organ Lambung pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar ( Rattus norvegicus L.)
Rein A. Gosal 1) , Widdhi Bodhi 1) , Herny Simbala 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Crownshaft  palm  (Areca  vestiaria)  is  one  of  the  plants  that  grow  in  North  Sulawesi  region which is widely used to cure diseases such as diabetes, diarrhea, and as a contraceptive drug. This study  aims  to  determine  the  effect  from  ethanolic  extract  of  crownshaft  palm  fruit  (Areca  vestiaria) against the description of gastric organ macroscopically. The method used was experimental methods and male white rats wistar strain as research subjects, totaling 12 rats, which are divided into three groups of dose were given ethanol extract of crownshaft palm nuts orally (7.2 mg / mL 14.4 mg / mL, 21.6 mg / mL) and a group as a negative control for comparison. The tests were carried out for 40 days, with observations made against the body weight of rats, gastric organ macroscopically and the weights  of  organ.The  results  were  of  stomach  macroscopic  picture  of  rats  with  treatment  shows  no difference  compared  to  negative  control.  In  the  analysis  using  one-way  ANOVA  test  showed  no significant difference in the results of the weighing of body weight and rat gastric organ weights (p> 0.05). The conclusion of this study was the crownshaft palm fruithas noinfluence, which can damage the stomach of wistar rats.
Keywords : Crownshaft palm (Areca vestiaria), gastric macroscopic, white rat ( Rattusnorvegicus ).

## ABSTRAK
Pinang  yaki (Areca  vestiaria) adalah  salah  satu  tumbuhan  yang  tumbuh  di  daerah  Sulawesi  Utara yang  banyak  digunakan  untuk  menyembuhkan  penyakit  seperti  diabetes,  diare,  dan  sebagai  obat kontrasepsi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak  etanol  buah  pinang  yaki ( Areca  vestiaria )  terhadap  gambaran  organ  lambung  secara  makroskopis.  Metode  penelitian  yang digunakan adalah metode eksperimental dan subjek penelitian menggunakan tikus putih jantan galur Wistar  berjumlah  12  ekor,  yang  dibagi  dalam  tiga  kelompok  dosis  yang  diberi  ekstrak  etanol  buah pinang  yaki  secara  oral  (7.2  mg/mL,  14.4  mg/mL,  21.6  mg/mL)  dan  satu  kelompok  kontrol  negatif sebagai  pembanding.  Masa  pengujian  dilakukan  selama  40  hari,  pengamatan  yang  dilakukan  yaitu berat  badan  tikus,  pengamatan  makroskopis  organ  lambung  dan  pengamatan  berat  organ.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  gambaran  makroskopis  lambung  tikus  yang  diberi  perlakuan  tidak memiliki perbedaan dibanding lambung tikus kontrol negatif. Pada analisis menggunakan uji one way ANOVA menunjukkan tidak ada perbedaan yang bermakna pada hasil penimbangan berat badan dan berat  organ  lambung  tikus  (p  >  0.05).  Kesimpulan  dari  penelitian  ini  adalah  pinang  yaki  tidak memiliki pengaruh yang dapat merusak lambung tikus Wistar.
Kata kunci : Pinang yaki ( Areca vestiaria ), makroskopis lambung, tikus putih ( Rattus norvegicus ).

## PENDAHULUAN
Saat ini, penelitian dan pengembangan tumbuhan  obat,  baik  di  dalam  maupun  di luar  negeri  berkembang  pesat.  Penelitian yang  berkembang  terutama  pada  segi farmakologi maupun fitokimianya berdasarkan  indikasi  tumbuhan  obat  yang telah  digunakan  oleh  sebagian  masyarakat dengan  khasiat  yang  teruji  secara  empiris. Terlebih  lagi,  uji  toksikologi  juga  telah banyak  dilakukan  oleh  para  peneliti  untuk mengetahui  keamanan  tumbuhan  obat yang  sering  digunakan  untuk  pemakaian jangka panjang, maupun pemakaian insidentil (Dalimartha, 2005).
Salah  satu  tumbuhan  yang  bisa digunakan  sebagai  obat  tradisional  adalah pinang yaki. Pinang yaki (Areca vestiaria) adalah  salah  satu  tumbuhan  yang  tumbuh di  daerah  Sulawesi  Utara  tepatnya  di lereng  gunung  Soputan  dan  gunung Mahawu kabupaten Minahasa.  Biji pinang yaki mengandung senyawa tanin, triterpenoida,  flavonoid  dan  saponin  yang kemungkinan  besar  mengandung  senyawa potensi  bioaktif  (Simbala,  2007).  Menurut Midian  (2007),  flavonoid  merupakan senyawa aktif sebagai antitumor, antialergi, antihepatotoksik, kardiovaskular dan antioksidan, antidiabetes, stimultant pada jantung.
Menurut  Simbala  (2006),  pinang  yaki yang  merupakan  sejenis  palem  liar, ternyata  merupakan  tanaman  multi  fungsi. Masyarakat  Sulawesi  Utara  biasanya menggunakan  secara  empiris  tanaman  ini untuk  menyembuhkan  berbagai  macam penyakit  seperti  diabetes  dan  diare  juga suatu obat kontrasepsi. Namun sampai saat ini  belum  terdapat  data  klinis  mengenai efektifitas  pinang  yaki  pada  manusia menurut  sediaan  galeniknya.  Pengaruh penggunaan  per  oral  pertama  kali  akan
berefek  pada  organ  pencernaan  seperti lambung  apalagi  bila  penggunaannya dalam waktu lama.
Lambung  merupakan  bagian  dari saluran pencernaan yang banyak mendapatkan paparan dengan bahan-bahan yang  merusak  mukosanya.  Kerusakan mukosa lambung paling banyak disebabkan penggunaan obat anti inflamasi non  steroid  (NSAID)  (Snell,  2006). Menurut  Loho  (2002),  obat  golongan NSAID  seperti  asam  mefenamat  dapat menyebabkan pengelupasan pada sel epitel permukaan dan mengurangi sekresi mukus yang merupakan barrier  protektif terhadap asam
Otot lambung berfungsi untuk mengaduk dan menggerus bahan makanan di  dalamnya  serta  mencampur  secara sempurna  dengan  getah  pencernaan  yang dikeluarkan  lambung.  Getah  lambung mengandung  asam  hidroklorida,  enzim- enzim, dan mukus. Sekresi mukus membentuk  selubung  yang  melindungi lambung  serta  berfungsi  sebagai  pelumas sehingga  makanan  lebih  mudah  terbawa (Agustina et al , 2005).
Mengingat  pentingnya  organ  tersebut, maka perlu dilakukan penelitian mengenai pengaruh  yang  ditimbulkan  dari  konsumsi pinang yaki (Areca vestiaria) s ebagai obat terhadap  gambaran  organ  lambung  secara makroskopis, yaitu meliputi warna, konsistensi  dan  permukaan,  serta  berat (ditimbang).

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Agustus  2016  –  Mei  2017.  Tempat penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Patologi  Anatomi  Fakultas  Kedokteran  , Universitas  Sam  Ratulangi  Manado dan Laboratorium  Penelitian  Program  Studi Farmasi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu
Pengetahuan  Alam  (MIPA),  Universitas Sam Ratulangi Manado.
Alat  –  alat  yang  digunakan  yaitu  : gelas  beaker,  batang  pengaduk,  blender, vorteks,  kertas  saring,  ayakan  200 mesh , aluminium foil, rotary evaporator, timbangan  analitik,  alat  penggiling,  oven, corong  pisah.  gelas  ukur,  botol  kecil,  hot plate,  sonikator,  kulkas  pendingin  dan cawan  petri,  wadah  makanan  tikus,  botol minuman  tikus,  kawat  kasa  dan  dadak padi, sonde  lambung  metal,  gunting,  sarung tangan  dan  dispo,  tempat  otopsi,  jarum, gunting, pinset, pisau bedah dan toples.
Bahan – bahan  yang digunakan  yaitu : buah  pinang  yaki  ( Areca  vestiaria) segar yang  berwarna  merah,  etanol  96  %, akuades, Latutan CMC, eter, dan makanan hewan (pellet).

## Pembuatan Simplisia
Tahap awal dilakukan pengumpulan bahan baku buah pinang yaki. Buah  pinang yaki di sortasi basah untuk memisahkan kotoran dan bahan-bahan asing dari biji. Selanjutnya  buah  pinang  yaki  disikat dibawah  air  yang  mengalir,  ditiriskan kemudian  dirajang  kecil-kecil  dengan mengunakan pisau, selanjutnya dikeringkan dengan cara diangin-anginkan selama  7  hari.  Sampel  kering  kemudian dihaluskan  mengunakan  blender  dan diayak mengunakan ayakan  200 mesh dan didapatkan serbuk simplisia halus.

## Pembuatan Ekstrak
Serbuk  dari  buah  pinang  yaki  ( Areca vestiaria) ditimbang  sebanyak  400  gr Kemudian dimasukkan didalam wadah dan dimaserasi  dengan  pelarut  etanol  96% sebanyak 1000 ml selama 48 jam. Setelah dimaserasi  selama  48  jam,  Larutan
tersebut  disaring  menggunakan  kain  sifon dan  setelah  itu  disaring  kembali  lagi dengan  kertas  whatman  No  42  yang kemudian  dimasukkan  kedalam  gelas erlenmeyer  untuk  dipisahkan  residu  dari filtrat  (Frengki et  al. ,  2014),  filtrat kemudian diuapkan menggunakan vacuum rotary evaporator pada suhu 40 o C sampai diperoleh  ekstrak  etanol  yang  pekat. Ekstrak  etanol  pekat  kemudian  diuapkan didalam  oven  dengan  suhu  40 o C  sampai kering  selama  24  jam.  Ektrak  kering  dari buah Areca  vestiaria di  timbang,  dan disimpan.

## Pembuatan larutan CMC 1%
Larutan  CMC  dibuat  dengan  melarutkan 1g  CMC  ke  dalam  30  ml  Aquadest dipanaskan sambil diaduk sampai homogen.  Kemudian  ditambahkan  dengan aquadest  sampai  volume  100ml.  Lalu didinginkan.

## Pembuatan  Larutan  Ekstrak  Buah Pinang Yaki
Dosis pemakaian buah pinang yaki ( Areca vestiaria) dengan  faktor  konversi  dosis dari manusia (70 kg) ke hewan uji (200 g) dengan  dikalikan  0,018  yaitu  7,2  mg/mL, 14,4  mg/mL,  dan  21,6  mg/mL.  Ekstrak buah    Pinang  yaki (Areca  vestiaria) ditimbang  sesuai  dengan  dosis  untuk larutan  100  ml  kemudian  disuspensikan dengan  larutan  CMC  dalam  labu  ukur 100ml.  kemudian  disonifikasi  hingga homogen.

## Perlakuan
Pada  penelitian  ini  dilakukan  Perlakuan selama 40 hari, masing- masing konsentrasi  menggunakan  3  hewan  uji. Ekstrak  pinang  yaki  diberikan  sesuai dengan dosis,    yang  diberikan secara oral dengan  menggunakan  sonde  dan  dispo  10
ml dengan dosis perhari 1 ml (1 cc), sonde dimasukkan melalui mulut sampai esofagus,  dimasukkan  perlahan-  lahan untuk menghindari refluks.

## Pembedahan
Pertama-tama  tikus  yang  akan  dibedah diterminasi dengan cara memasukkan tikus tersebut ke dalam toples yang disirami eter di bagian dalamnya. Setelah beberapa saat tikus  dikeluarkan  dan  ditaruh  di  baki parafin  untuk  dibedah,  keempat  kaki  dan ekor tikus di tusuk dengan jarum agar tikus tidak meronta. Pembedahan diawali dengan  membelah  bagian  perut  bawah tikus hingga bagian dada, kemudian organ diambil  keluar  dari  dalam  tubuh  tikus. Untuk  organ  lambung  harus  dipisahkan dengan  bagian  usus,  hati,  dan  empedu yang melekat.

## Pengamatan Makroskopis
Penilaian  secara  makroskopik  dilakukan dimulai  dari  saat  pembedahan  hingga selesai melalui pengamatan warna,
perabaan konsistensi dan permukaan, serta penimbangan berat lambung tikus.

## Analisis Data
Semua  data  yang  diperoleh  dianalisis dengan  uji one  way ANOVA  dengan menggunakan SPSS.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gambaran Makroskopis Organ Lambung Tikus Wistar Pengamatan secara makroskopis
dimulai  pada  saat  otopsi  dilakukan  dan diperoleh data mengenai warna, konsistensi, berat badan dan berat organ.
Tikus Wistar Kelompok Tanpa Perlakuan (Kontrol Negatif) Gambaran  makroskopis  tikus  wistar kelompok
kontrol negatif tidak menunjukkan perubahan ataupun kelainan, lambung  tidak  mengalami  pengerasan, permukaan halus dan berwarna kemerahan (Gambar 1).
Gambar 1 . Gambaran makroskopis lambung kelompok tanpa perlakuan (kontrol negatif)
Tikus  Wistar  Kelompok  Perlakuan Dosis 400 Mg, Dosis 800 Mg, Dan Dosis 1200 Mg
Pada  kelompok  perlakuan  dosis  400 mg,  dosis  800  mg,  dan  dosis  1200  mg, gambaran  makroskopis  lambung  tikus
wistar tidak menunjukkan adanya kelainan ataupun  perbedaan  yang  bermakna  bila dibadingkan dengan gambaran
makroskopis  lambung  kelompok  kontrol negatif. lambung tidak mengalami pengerasan,  permukaannya  halus  dan warnanya terlihat kemerahan (Gambar 2).

## A                                                                         B

## C
Gambar 2 . Gambaran makroskopis lambung kelompok perlakuan A (kelompok perlakuan Dosis 400 mg) , B (kelompok perlakuan Dosis 800 mg), dan C (kelompok perlakuan Dosis 1200 mg).
Dari hasil yang diamati dapat dilihat dari  pemberian  perlakuan  selama  40 hari, secara  makroskopik lambung tikus wistar  yang  diberikan  ekstrak  buah pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )  tampak normal dan tidak berbeda bila dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol negatif (tanpa diberi perlakuan). Hal  ini menunjukan  bahwa  buah  pinang  yaki tidak memberi efek yang dapat merusak lambung..
Didukung oleh hasil penelitian Hehi (2013), yang menyatakan bahwa lambung  yang berwarna kemerahan dan konsistensi  yang  kenyal  menunjukan gambaran  makroskopis  yang  normal. Dari  hasil  yang  diamati  tampak  warna lambung  dan  konsistensi  lambung
antara  kelompok  kontrol  negatif  dan kelompok perlakuan hampir sama.
Buah  pinang  yaki  memiliki  banyak kandungan  senyawa  ,  diantaranya  yaitu senyawa flavonoid dan saponin.
Flavonoid dapat
meningkatkan prostaglandin  pada  mukosa  lambung, dan  juga  dapat  mencegah  pembentukan radikal  bebas  yang  membuat  lambung menjadi  ulseratif  dan  erosif.  Saponin dapat  mengaktivasi  membran  pelindung mukosa lambung (Pasaribu et al, 2013).

## Hasil  Penimbangan  Berat  Badan  Tikus Wistar
Data  hasil  penimbangan  berat  badan tikus  setelah  perlakuan  dapat  dilihat  pada grafik 1.
Grafik 1. Data hasil penimbangan berat badan tikus wistar.
Dari  grafik  hasil  penimbangan  berat badan tikus di atas dapat di lihat bahwa dari keempat kelompok yang menunjukkan  data  berat  badan  tikus wistar  yang  paling  kecil  terdapat  pada kelompok dosis 400 mg (A4), sedangkan  yang  paling  besar  terdapat pada kelompok kontrol negatif (K).
Pengukuran berat badan tikus adalah salah satu data pendukung guna melihat pengaruh  toksisitas.  Berat  badan  dapat memberikan gambaran kesehatan hewan coba dan merupakan salah satu parameter  untuk menentukan  efek toksik  suatu  senyawa  (Siburian  dan Marlinza, 2009).
Di  lihat  pada  hasil  rata  -  rata penimbangan  berat  badan  tikus  tiap kelompok perlakuan diatas terdapat perbedaan  berat  badan  antara  kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol negatif,  terjadinya  perubahan  berat  badan tikus  dapat  dikarenakan  adanya  proses pertumbuhan  yang dialami oleh tikus, dan juga  adanya  pengaruh  pemberian  ekstrak etanol buah pinang yaki.
Hasil Penimbangan Berat Organ Lambung Tikus Wistar
Data  hasil  penimbangan  berat  organ lambung  tikus  setelah  perlakuan  dapat dilihat pada grafik 2.
Grafik 2. Data hasil penimbangan organ lambung tikus wistar
Dari hasil penimbangan di atas dapat
di  lihat  bahwa  diantara  keempat
176 127 193 121 144  130  146  134  133  125  125  150 0 50 100 150 200 250 K (1)  K (2)  K (3)  A4 (1) A4 (2) A4 (3) A8 (1) A8 (2) A8 (3)  A12 (1) A12 (2) A12 (3) BE R A T BA DA N T IKUS ( G R A M) KELOMPOK PERLAKUAN Hasil Penimbangan Berat Badan

## Tikus
1,726 2,518 2,128 3,883 2,401 2,183 6,168 1,830 1,736 2,096 1,314 1,848 0,000 2,000 4,000 6,000 8,000 K (1)  K (3)  K (3)  A4 (1) A4 (2) A4 (3) A8 (1) A8 (2) A8 (3) A12 (1) A12 (2) A12 (3) BE R A T LA MBUN G T IKUS ( G R A M) KELOMPOK PERLAKUAN Hasil Penimbangan Organ Lambung Tikus
kelompok.yang menunjukkan organ lambung  tikus  terkecil  terdapat  pada kelompok  dosis  1200  ml  (A12), sedangkan  data  organ  lambung  tikus terbesar  terdapat  pada  kelompok  dosis 800 mg (A8).
Bila  dibandingkan  dengan  data  berat badan tikus sebelumnya, terlihat hasil yang tidak  wajar,  dimana  tikus  A8  (1)  dengan berat  badan  146  gram  memiliki  berat lambung  terbesar  6.168  gram  sedangkan tikus  yaitu  K  (3)  dengan  berat  badan  193 gram hanya memiliki berat lambung 2.128 gram.
Perbedaan  data  yang  didapatkan  bisa disebabkan oleh beberapa faktor, diantaranya toksisitas ekstrak yang digunakan, atau memang terdapat kelainan pada  organ  lambung  tikus  yang  diambil. Karena data berat yang didapat belum bisa memberikan  hasil  yang  pasti,  maka dilakukan pengujian secara statistik.
Didukung  oleh  Walangitan  et  al. (2014),  pada  tikus  yang  diberikan  ekstrak kayu  manis  ( Cinnamomum  burmanii ) ukuran dan berat  lambung tikus  bervariasi antara  satu  kelompok  dengan  kelompok lain,  tapi  tidak  memberikann  pengaruh yang berarti.

## Hasil Pengujian Statistik
Kriteria pengujian:
Hipotesis :
Ho  :  tidak  ada  perbedaan  yang bermakna antara setiap kelompok. H1  :  terdapat  perbedaan  yang bermakna antara setiap kelompok.
Pengambilan keputusan :
Jika nilai signifikansi ≥ 0,05, maka Ho diterima. Jika nilai signifikansi ≤ 0,05, maka
Ho di tolak.
Hasil perolehan data statistik One way
ANOVA  terhadap  berat  badan  tikus mendapatkan  nilai  signifikansi  0.208,  dan berat  organ  lambung  tikus  mendapatkan nilai signifikansi 0.570. Keduannya menunjukkan  nilai  signifikansi  yang  lebih besar  dibanding  0.05,  sehingga  dapat dikatakan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan yang  berarti  antara  setiap  kelompok perlakuan.
Walaupun jika dilihat data berat badan dan  berat  organ  lambung  tikus  yang sebelumnya  dibahas  terdapat  perbedaan, tetapi  hasil  uji  statistik  menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang bermakna.  Artinya  bahwa  secara  kasat mata  terdapat  perbedaan  pada  masing- masing kelompok perlakuan, namun karena  perbedaan  tersebut  tidak  begitu signifikan  sehingga  dapat  dikatakan  tidak ada perubahan yang terjadi.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  buah pinang  yaki (Areca  vestiaria) tidak berpengaruh terhadap gambaran makroskopis  organ  lambung  pada  tikus putih jantan galur wistar (Rattus norvegicus).

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina, D., Febriyanti, V., Widyarini, S. Efek  pemberian  ekstrak  etanol daun  Gynura  Procumbens  (Lour)
Merr  pada  hati  dan  ginjal  tikus Sprague Dawley Jantan.
Indonesian  journal  of  Dentistry.
2005; 12(1) : 10-14
Dalimartha,  S.  2005. Tanaman  Obat  di
Lingkungan  Sekitar. Jakarta  : Puspa Sehat.
Hehi,  F.K.,  Loho,  L.  Durry,  M.F.  2013. Gambaran  Histopatologi  Lambung Tikus  Wistar  Pasca  Pemberian Metanol. Jurnal e-Biomedik (eBM), 1(2): 890-895.
Loho L. 2002. Patologi Saluran Pencernaan . Manado: Bagian Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Sam Ratulangi
Midian  ,S.  2007. Penuntun  Fitokimia Farmasi . Bandung. ITB Press
Pasaribu,  J.,  Loho,  L.,  Lintong,  P.  2013.
Gambaran  Histopatologi  Lambung Tikus  Wistar  (Rattus  norvegicus) Yang Diberikan Lengkuas (Alpinia galanga  Willd)  Setelah  Diinduksi Oleh  Asam  Mefenamat. Jurnal  e- Biomedik (eBM), 1(1):402-407
Siburian, J. dan R. Marlinza. (2009). Efek Pemberian  Ekstrak  Akar  Pasak Bumi  ( Eurycoma  Longifolia Jack) Pada  Tahap  Prakopulasi  Terhadap Fertilitas  Mencit  ( Mus  Musculus L.) Betina. Biospecies. 2 (2): 24-30
Simbala, 2006. Kajian Etnobotani,
Proksimat  dan  Fitokimia  Pinang yaki  (Areca  vestiaria  Giseke) . 12:173-183.
Simbala,  H.E.I.  2007. Keanekaragaman Floristik dan pemanfaatan Sebagai
Tumbuhan Obat di Kawasan Konservasi  II  Taman  Nasional Bogani Nani Wartabone
(Kabupaten  Bolaang  Mongondow,
Sulawesi Utara). [Disertasi].
Institut Pertanian Bogor : Bogor.
Snell  RS.  2006. Abdomen:  Bagian  II
Cavitas Abdomilanis. Dalam: Anatomi  Klinik  untuk  Mahasiswa Kedokteran (Edisi Keenam). Jakarta: EGC.