J. Kartika Kimia , November 2021, 4, (2), 89-95 Journal homepage : http://jkk.unjani.ac.id/index.php/jkk P-ISSN: 2655-1322     E-ISSN: 2655-0938

## Analisis Bakteri Coliform dalam Sampel Air Minum Pamsimas di Kabupaten Kuningan

## Analysis of Coliform Bacteria in PAMSIMAS Drinking Water Samples in Kuningan Regency
Nur Khopipah Hadiansyah 1,* , Assyifa Junitasari 1 , dan Eka Gustiana 2*
1 Universitas Islam Negeri Sunan Gunung Djati Bandung, Jl. A.H. Nasution No. 105 Cipadung
2 Laboratorium Kesehatan Daerah Kabupaten Kuningan, Jl. Aruji Kartawinata No. 21 Kuningan *E-mail: nurkhopipahha@gmail.com
DOI: https://doi.org/10.26874/jkk.v4i2.89
Received : 5 Nov 2021, Revised : 30 Nov 2021, Accepted : 30 Nov 2021, O nline : 30 Nov 2021

## Abstrak
Meningkatnya  aktivitas  masyarakat  Kabupaten  Kuningan  tanpa  memperhatikan  lingkungan menyebabkan  terjadinya  pencemaran,  salah  satunya  pencemaran  sumber  air  minum  sehingga menurunkan kualitasnya. Bakteri coliform merupakan mikroorganisme yang lazim digunakan sebagai indikator  air  yang terkontaminasi  oleh  patogen.  Pada penelitian  ini  bertujuan  menentukan  kelayakan serta jumlah bakteri coliform dalam sampel air minum PAMSIMAS yang berasal dari tujuh sumber mata air  di  Kabupaten  Kuningan.  Metode  analisis  yang  digunakan  berdasarkan  metode Most  Probable Number (MPN) dengan melibatkan dua tahapan uji, yakni uji penduga pada media Lactose Broth (LB) single  strength dan triple  strength serta  media Escherchia  coli Broth (ECB).  Kemudian,  dilanjutkan tahap uji penegas pada media Brilian Green Lactose Broth (BGLB) dan Eosin Methylen Blue (EMB). Hasil  penelitian menunjukkan  pada  uji  penduga  semua  sampel  dalam media  LB  positif  mengandung bakteri coliform sedangkan  dalam  media  ECB  terdapat  tiga  sampel  positif  mengandung  bakteri Escherichia  coli .  Tahapan  uji  penegas  pada  media  BGLB  menunjukkan  enam  sampel  mengandung bakteri coliform dengan  jumlah  berbeda-beda.  Sedangkan  uji  penegas  pada  media  EMB  hanya  satu sampel  yang  menunjukkan  hasil  positif  mengandung  bakteri  jenis E.  coli .  Sehingga  berdasarkan PERMENKES nomor 492 tahun 2010 bahwa sampel air minum PAMSIMAS yang berasal dari tujuh sumber mata air di kabupaten Kuningan tidak memenuhi baku mutu dan tidak layak konsumsi.
Kata kunci: coliform, most probable number, PAMSIMAS, uji penduga, uji penegas

## Abstract
The increasing activity of the people of Kuningan Regency without paying attention to the environment causes pollution, one of which is pollution of drinking water sources, until reducing its quality. Coliform bacteria  are  microorganisms  that  are  commonly  used  as  an  indicator  of  water  contaminated  by pathogens.  This  study  aims  to  determine  the  feasibility  and  the  number  of  Coliform  bacteria  in PAMSIMAS drinking water samples from seven springs in Kuningan Regency. The analytical method used  is  based  on  the  Most  Probable  Number  (MPN)  method  involving  two  test  stages,  namely  the presumptive test on Single Strength and Triple Strength Lactose Broth (LB) media and Escherichia coli Broth (ECB) media. Then, the confirmation test was continued on Brilliant Green Lactose Broth (BGLB) and Eosin Methylene Blue (EMB) media. The results showed that in the presumptive test all samples in LB media were positive for Coliform bacteria, while in ECB media there were three positive samples containing  Escherichia  coli  bacteria.  The  confirmation  test  stage  on  BGLB  media  showed  that  six samples contained different amounts of Coliform bacteria. While the confirmation test on EMB media
only one sample which showed a positive result containing E. coli bacteria. Based on the PERMENKES number  492  of  2010  that  the  PAMSIMAS  drinking  water  samples  from  seven  springs  in  Kuningan regencyt didn’t meet the quality standards and were not suitable for consumption.
Keywords: Coliform, Most Probable Number, PAMSIMAS, Presumptive test, Confirmed test
1 Pendahuluan
Seiring dengan meningkatnya jumlah kebutuhan  masyarakat  Kabupaten  Kuningan berkorelasi dengan meningkatnya jumlah aktivitas masyarakat  yang  berkaitan  langsung  dengan lingkungan dan tentunya menyebabkan terjadinya peningkatan  kebutuhan  air  sebagai  sumber  daya esensial  bagi  berbagai  aspek  kehidupan  salah satunya sumber air minum. Berdasarkan Peraturan Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia  nomor 492/Menkes/Per/IV/2010,  air  minum  merupakan air  dengan  melalui  proses  pengolahan  maupun tanpa  pengolahan  yang  memiliki  kualitas memenuhi persyaratan baik secara kesehatan dan dapat diminum secara langsung.
Akan tetapi, rendahnya kesadaran masyarakat Kabupaten Kuningan terhadap kelestarian lingkungan  menyebabkan  berbagai  dampak negatif,  contohnya  pencemaran  terhadap  sumber air  minum.  Dengan  demikian,  Pemerintahan Daerah  Kabupaten  Kuningan  menyelenggarakan Program  Penyediaan  Air  Minum  dan  Sanitasi Berbasis  Masyarakat  (PAMSIMAS)  melalui pemanfaatan  sumber  mata  air  yang    ada  dengan tujuan  guna  meningkatkan  ketersediaan  air minum,  sanitasi,  dan  meningkatkan  derajat kesehatan  masyarakat  terutama  dalam  rangka menurunkan  angka  penyakit  diare  serta  penyakit lainnya  yang  bisa  ditularkan  melalui  air  maupun lingkungan [1].
Cemaran sumber air minum yang berasal dari sumber  kimiawi  maupun  mikrobiologis  dapat menyebabkan  tidak  layaknya  air  tersebut  untuk dikonsumsi  sebagai  air  minum.  Bakteri coliform sebagai salah satu sumber cemaran mikrobiologis dan  mikroorganisme  yang  lazim  dijadikan indikator  air  terkontaminasi  oleh  patogen  [2]. Bakteri coliform dengan  karakteristik  bakteri berbentuk  batang,  bakteri  gram  negatif,  tidak membentuk  spora,  dan  bersifat  aerobik  serta anaerobik fakultatif yang dapat memfermentasikan  laktosa  dengan menghasilkan asam  dan  gas  dalam  waktu  48  jam.  D  imana, subkelompok bakteri coliform ini terdiri dari fecal coliform dan non  fecal  coliform yang  termasuk bakteri intestinal, yakni bakteri yang hidup dalam saluran pencernaan manusia dan menghasilkan zat etionin  penyebab  kanker  [3].  Selain  itu,  bakteri
pembusuk  ini  pun  menghasilkan  bermacam- macam  racun,  seperti  indol  dan  skatol  yang  bisa menimbulkan  berbagai  penyakit  jika  jumlahnya berlebihan.  Keberadaan  bakeri coliform dalam sumber air menunjukkan bahwa adanya kontaminasi  kotoran  manusia  atau  hewan  yang masuk  ke  dalam  sumber  air  tersebut.  Selain  itu, adanya kontaminasi bakteri coliform menunjukkan  potensi  adanya  bakteri  penyebab penyakit  lain  di  dalam  air  serta  menunjukkan adanya kemungkinan terdapat mikroba enteropatogenik  dan  toksigenik  yang  berbahaya bagi  kesehatan  [4].    Penggunaannya  sebagai indikator  berbanding  lurus  dengan  pencemaran air,  di  mana  semakin  tinggi  kandungan  bakteri coliform maka semakin buruk kualitas air tersebut [5].
Metode Most  Probable  Number (MPN) merupakan metode penentuan keberadaan jumlah mikroorganisme yang dihitung dengan cara tidak langsung dan menggunakan medium cair di dalam tabung  reaksi  serta  perhitungan  dilakukan berdasarkan  jumlah  tabung  yang  positif.  Prinsip utama metode MPN yakni mengencerkan sampel sampai  tingkat  tertentu  sehingga  diperoleh konsentrasi  mikroorganisme  yang  sesuai.  Di mana, jumlah sampel atau pengenceran yang baik adalah yang menghasilkan tabung positif. Tabung positif  yaitu  tabung  yang  ditumbuhi  oleh  jasad renik  setelah  inkubasi  selama  pada  suhu  dan waktu  tertentu  serta  dapat  diamati  dengan timbulnya  kekeruhan  dan  terbentuknya  gas  di dalam  tabung  kecil  (tabung  durham)  terbalik. Penentuan  keberadaan  bakteri Coliform dapat ditentukan  dengan  menggunakan  metode  MPN melalui  dua  tahap,  di  antaranya  uji  pendugaan ( presumptive  test )  dan  uji  penegasan  ( confirmed test ) [6].
Berdasarkan  Peraturan  Menteri  Kesehatan
Republik Indonesia Nomor 492/MENKES/PER/IV/2010  tentang  persyaratan kualitas air minum, kadar maksimum total bakteri coliform maupun bakteri E. coli yang diperbolehkan  ialah  0  sel/100  mL  sampel.  Hal tersebut  disebabkan  karena  keberadaan  bakteri coliform dalam  air  minum  memberikan  dampak negatif  bagi  kesehatan,  seperti  menimbulkan gangguan  penyakit  diare,  infeksi  usus,  dan
demam, serta pada tingkatan paling parah mampu menyebabkan kanker [2]. Maka dari itu, informasi mengenai kelayakan sumber air minum sangatlah penting.  Sehingga  pada  penelitian  ini  dilakukan analisis  jumlah  bakteri coliform yang  terdapat pada  sumber  air  minum  PAMSIMAS  di Kabupaten Kuningan untuk menentukan kelayakan sumber air minum tersebut.
2 Metode Penelitian

## 2.1 Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan untuk analisis bakteri coliform di  antaranya  media Lactose  Broth (Merck),  media E.  coli (Merck),  media Brilian Green  Lactose  Broth (Merck),  pembuatan media Eosin Methylen Blue (Merck), dan aquades. Alat-alat  yang  digunakan  untuk  analisis bakteri coliform , di antaranya  tabung Erlenmeyer, botol sampel, cawan petri, batang pengaduk, pipet volume, ball  filler ,  oven,  autoklaf, beaker  glass , timbangan analitis, tabung reaksi, tabung durham, dan tutup prof karet.
2.2 Cara Kerja

## 2.2.1 Sterilisasi alat
Semua  alat  dan  bahan  yang  digunakan dibungkus  menggunakan  kertas,  alat  gelas/  kaca seperti  tabung  Erlenmeyer,  botol  sampel,  cawan petri, batang pengaduk, pipet volume dimasukkan ke  dalam  oven  dan  disterilisasi  pada  suhu  160- 180 ℃ selama  2  jam.  Sedangkan  media dimasukkan  ke  dalam  autoklaf  dan  disterilisasi hingga suhu autoklaf mencapai 121 ℃ dan tekanan 1 atm.

## 2.2.2 Pembuatan media Lactosa Broth (LB) triple strength
Media LB ditimbang sebanyak 19,5 gram dan dilarutkan  dengan  500  mL  aquades  di  dalam beaker  glass .  Kemudian  larutan  diaduk  hingga larut.  Larutan  media  LB  sebanyak  5  mL dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  telah diisi  tabung  durham  terbalik.  Tabung  reaksi ditutup  dengan  prof  karet  dan  disterilkan  dalam autoklaf pada suhu 121 ℃ selama 15 menit.
2.2.3 Pembuatan media Lactosa Broth (LB) single strength
Media LB ditimbang sebanyak 13 gram dan dilarutkan dengan 1 liter aquades di dalam beaker glass kemudian,  larutan  diaduk  hingga  larut. Larutan media LB sebanyak 5 mL dimasukkan ke dalam  tabung  reaksi  yang  telah  diisi  tabung durham  terbalik.  Tabung  reaksi  ditutup  dengan prof  karet  dan  disterilkan  dalam  autoklaf  pada suhu 121 ℃ selama 15 menit.

## 2.2.4 Pembuatan media Escherichia coli Broth (ECB)
Media  ECB  sebanyak  18,5  gram  ditimbang dan  dilarutkan  dengan  500  mL  aquades  dalam beaker  glass ,  kemudian  larutan  diaduk  hingga larut.  Larutan  media  ECB  sebanyak  10  mL dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  telah diisi  tabung  durham  terbalik.  Tabung  reaksi ditutup  dengan  prof  karet  dan  disterilkan  dalam autoklaf pada suhu 121 ℃ selama 15 menit.

## 2.2.5 Pembuatan media Brilian Green Lactose Broth (BGLB)
Media  BGLB  ditimbang  sebanyak  40  gram dan  dilarutkan  dengan  1  liter  aquades  di  dalam beaker  glass ,  kemudian  larutan  diaduk  hingga larut. Larutan BGLB sebanyak 10 mL dimasukkan ke  dalam  tabung  reaksi  yang  telah  diisi  durham terbalik. Tabung reaksi ditutup dengan prof karet dan  disterilkan  dalam  autoklaf  pada suhu    121 ℃ selama 15 menit.

## 2.2.6 Pembuatan media Eosin Methylen Blue (EMB)
Media EMB ditimbang sebanyak 18,75 gram dan dilarutkan dengan 500 mL aquades di dalam beaker  glass ,  kemudian  larutan  diaduk  hingga larut.  Larutan  dituangkan  ke  dalam  cawan  petri dan  disterilkan  dalam  autoklaf  pada suhu    121 ℃ selama 15 menit.

## 2.2.7 Pemeriksaan uji Most Probable Number (MPN)
Pada  uji  penduga  disiapkan  media  LB  dan media  ECB  dengan  jenis  ragam  3×10  mL,  3×1 mL,  3×0,1  mL  sebanyak  10  mL.  Sampel  yang akan  diperiksa  dimasukkan  ke  dalam  tabung reaksi  (media  LB  dan  media  ECB)  yang  telah berisi tabung durham terbalik dengan menggunakan  pipet  steril.  Kemudian,  diinkubasi pada suhu 35 ℃ - 37 ℃ selama 2 × 24 jam. Setelah 2  ×  24  jam  diperiksa  adanya  pembentukan  gas pada  tabung  durham  dan  dinyatakan  positif pendugaan.  Semua  hasil  yang  menunjukkan positif  (membentuk  gas)  pada  LB  dan  ECB dicatat.  Bila  hasil  pemeriksaan tidak membentuk gas  menunjukkan coliform negatif.  Untuk  hasil yang positif dilanjutkan dengan uji penegasan.
Pada uji penegasan  disiapkan media BGLB 2%  dalam  tabung  reaksi  dan  media  EMB  agar dalam  cawan  petri.  Uji  ini  dilakukan  untuk menegaskan hasil yang positif dari tes pendugaan. Dari  tiap-tiap  tabung  perkiraan  LB  yang  positif dipindahkan 1-2 ose ke dalam tabung yang berisi 10 mL BGLB 2%. Tabung pendugaan ECB yang positif  ditanam  1-2  ose  ke  dalam  EMB  agar. Kemudian,  diinkubasi  pada  suhu  5 ℃ -  37 ℃
selama 2 × 24 jam. Pembacaan dilakukan  2 × 24 jam  dengan  melihat  jumlah  tabung  BGLB  2% yang menunjukkan positif gas.

## 3 Hasil dan Diskusi
Coliform sebagai  flora  normal  yang  hidup pada  usus  manusia/  hewan,  sehingga  adanya bakteri  tersebut  dalam  air  minum  menandakan bahwa dalam satu atau lebih tahap pengolahan air minum  pernah  mengalami  kontak  dengan  feses. Dengan  demikian,  adanya coliform tersebut memungkinkan  pula  adanya  bakteri  patogen lainnya  yang  lebih  berbahaya.  Oleh  sebab  itu, bakteri coliform dijadikan  sebagai  indikator kontaminasi sumber air minum [7].

## 3.1 Penentuan jumlah Coliform dari sampel uji penduga
Analisis  sampel  pada  tahap  uji penduga/  uji pendahuluan  dilakukan  dengan  menginokulasi pada  media  LB  selama  48  jam  pada  suhu  35ºC- 37ºC  yang  kemudian  akan  diamati  keberadaan gelembung  gas  dalam  tabung  durham  terbalik. Dari  uji  penduga  ini  akan  menunjukkan  hasil positif  ketika  adanya  keberadaan  gelembung  gas pada tabung durham terbalik, hal ini menunjukkan bahwa terjadinya fermentasi laktosa oleh coliform . Kemudian, semua sampel air minum ditanam pada media LB untuk menentukan keberadaan coliform dan medium ECB untuk menentukan keberadaan bakteri E. coli.
Tabel 1 . Hasil Uji Penduga Pada Media LB Asal Sampel Mata Air Angka Tabung Positif Indeks per 100 ml sampel 10 mL 1 mL 0,1 mL Salakadomas 3 1 0 43 Citundun 3 2 1 150 Cisamaya 3 1 1 75 Cikadacang 3 3 3 2400 Wanahegar 3 3 3 2400 Linggajati 3 3 1 460 Citimbang 3 1 0 43
Berdasarkan  tabel  1  diketahui  bahwa  pada tabung  media  LB  semua  sampel  air  minum mengandung  bakteri coliform >0/100  mL. Sehingga  berdasarkan  PERMENKES  nomor 492/Menkes/Per/IV/2010 air minum tersebut tidak memenuhi  syarat  untuk  bisa  dikonsumsi.  Hal  ini dikarenakan  air  minum  yang  diuji  melampaui batas maksimum kandungan bakteri coliform pada air  minum,  yakni  0  sel/00  mL.  Terjadinya perbedaan  jumlah  keberadaan  bakteri coliform dari  setiap  sumber  air  minum  PAMSIMAS
disebabkan  karena  adanya  perbedaan  letak wilayah  mata  air  sehingga  memungkinkan terjadinya  perbedaan  sumber  pencemar,  adanya perbedaan  kualitas  sumber  mata  air,  serta perbedaan  penanganan  ketika  dilaksanakannya penyaluran air minum dari PAMSIMAS. Sampel air  minum  yang  mengandung  bakteri coliform menunjukkan  adanya  mikroba  yang  bersifat toksigenik  dan  berbahaya  bagi  kesehatan. Semakin  tinggi  tingkat  kontaminasi  bakteri coliform maka  semakin  tinggi  pula  risiko kehadiran  bakteri  patogen  lain  yang  dapat menyebabkan penyakit pada manusia [8].
Sampel pada tabung media ECB terdapat tiga sampel  positif  tercemar  bakteri E.  coli yang ditandai dengan adanya perubahan media menjadi keruh, yakni sampel air minum PAMSIMAS yang berasal dari mata air Cikadacang, Wanahegar, dan Linggajati.  Dengan  demikian,  sampel  air  minum tersebut  tidak  layak  dikonsumsi  sebagaimana PERMENKES  nomor  492/Menkes/Per/IV/2010 bahwa kadar maksimum bakteri E. coli adalah 0. Sedangkan empat sampel air minum PAMSIMAS yang berasal dari mata air Salakadomas, Citundun, Cisamaya,  dan  Citimbang  memenuhi  standar kualitas air minum.
Tabel 2. Hasil Uji Penduga Pada Media ECB
Asal Sampel Mata Air EC Broth Salakadomas Negatif Citundun Negatif Cisamaya Negatif Cikadacang Positif Wanahegar Positif Linggajati Positif Citimbang Negatif
Adanya  bakteri E.  coli dalam  sampel  air minum  PAMSIMAS  disebabkan  oleh  adanya aktivitas  manusia  di  sekitar  sumber  mata  air sehingga  menghadirkan  bakteri  tersebut.  Bakteri E.  coli merupakan  bakteri  yang  terdapat  dalam kotoran  hewan  maupun  manusia  yang  bisa menyebabkan  penyakit  infeksi  saluran  kemih, diare, sepsis, meningitis.

## 3.2 Penentuan Jumlah Coliform Dari Sampel Uji Penegas
Hasil dari uji pendugaan pada media LB yang menunjukkan adanya kandungan bakteri coliform pada  sampel  air  minum,  dilanjutkan  dengan tahapan  berikutnya  yakni  uji  penegasan  yang dilakukan  pada  media  BGLB.  Tahap  tersebut bertujuan untuk memastikan/ menegaskan keberadaan  bakteri coliform pada  sampel  air minum  tersebut.  Kemudian,  hasil  positif  dari  uji penduga pada media ECB, dilanjutkan dengan uji
penegasan  pada  media  EMB  untuk  mendeteksi pertumbuhan  bakteri Fecal  Coliform pada  tahap penduga.
Penggunaan media BGLB pada uji penegasan berfungsi sebagai penghambat pertumbuhan flora mikroba yang tidak diharapkan. Media BGLB merupakan media yang akan  berwarna  hijau  metalik  jika  terdapat  reaksi fermentasi  dengan  bakteri coliform .  Warna  ini berasal dari adanya koloni coliform yang bereaksi dengan  BGLB.  Bakteri coliform merupakan bakteri fermentasi, seringkali menghasilkan warna hijau metalik mengkilap. Bakteri yang menfermentasi dengan lambat akan menghasilkan koloni berwarna merah muda [9].
Tabel 3 . Hasil Uji Penegas Pada Media BGLB Asal Sampel Mata Air Angka Tabung Positif Indeks per 100 ml sampel 10 mL 1 mL 0,1 mL Salakadomas 0 0 0 0 Citundun 3 2 0 93 Cisamaya 3 0 0 23 Cikadacang 3 1 0 43 Wanahegar 3 3 3 2400 Linggajati 3 2 0 93 Citimbang 3 1 0 43 Media BGLB mampu menghambat pertumbuhan bakteri gram positif dan meningkatkan pertumbuhan bakteri coliform . Ada atau tidaknya bakteri coliform ini ditandai dengan terbentuknya asam dan gas CO 2 yang disebabkan karena  fermentasi  laktosa  oleh  bakteri  golongan coliform [9].  Berdasarkan  hasil  uji  penegasan setelah  diinkubasi  tabung  durham  menunjukkan adanya gas yang artinya terdapat bakteri coliform pada sampel. Sebaliknya jika tabung durham tidak menunjukkan  gas  berarti  tidak  adanya  bakteri coliform .  Berdasarkan  tabel  3  dapat  diketahui bahwa  pada  tabung  media  BGLB  terdapat  enam sampel  air  minum  PAMSIMAS  yang  tercemar bakteri coliform ,  yakni  air  minum  PAMSIMAS berasal dari mata air Citundun sebesar 93 sel/100 mL,  mata  air  Cisamaya  sebesar  23  sel/100  mL, mata air Cikadacang sebesar 43 sel/100 mL, mata air Wanahegar sebesar 2400 sel/100 mL, mata air Linggajati  sebesar  93  sel/100  mL,  dan  mata  air Citimbang  sebesar  23  sel/  100  mL.  Hal  tersebut menunjukkan  bahwa  kelima  sampel  air  minum tersebut tidak memenuhi standar syarat sebagaimana terdapat pada PERMENKES nomor 492/Menkes/Per/IV/2010 dengan kadar maksimum bakteri coliform adalah 0 sel/ 100 mL.
Sedangkan  satu  sampel  air  minum  PAMSIMAS yang  berasal  dari  mata  air  Salakadomas  layak dikonsumsi sebagai air minum.
Keberadaan  bakteri coliform menunjukkan adanya indikasi dari kondisi pengelolaan PAMSIMAS  yang  tidak  memadai.  Bakteri coliform dalam  air  minum  dengan  jumlah  yang tinggi menunjukkan adanya pertumbuhan bakteri Salmonella,  Shigella, dan Streptococcus .  Selain itu,  bakteri coliform juga  mampu  menyebabkan penyakit saluran pencernaan dan saluran pernafasan.  Semakin  rendah  kandungan  bakteri coliform , maka semakin baik kualitas bakteriologis air minum tersebut [7].
Tabel 4 . Hasil uji penegas pada media EMB agar Asal Sampel Mata Air EMB Agar Hasil Salakadomas 0 - Citundun 0 - Cisamaya 0 - Cikadacang 0 - Wanahegar 0 - Linggajati 4 + Citimbang 0 -
Media  EMB  agar  merupakan  media  selektif dan diferensial yang berfungsi untuk menumbuhkan  bakteri  gram  negatif  dan  pada umumnya digunakan untuk isolasi dan diferensiasi  bakteri non  fecal  coliform dan fecal coliform .  Media  EMB  agar  yang  digunakan menandakan kemungkinan kontaminasi mikroorganisme  patogen  dalam  sampel  air minum,  yakni  kontaminasi  bakteri E.  coli atau bakteri  patogen  usus  lainnya.  Hasil  positif  yang ditunjukkan  memberikan  ciri  warna  yang  khas, yakni bakteri gram negatif yang memfermentasikan laktosa mampu menghasilkan asam,  dalam  kondisi  asam  tersebut  akan menghasilkan  warna  kompleks  berupa  warna ungu  gelap  atau  hijau  metalik.  Warna  hijau metalik tersebut merupakan indikator dari bakteri yang mampu memfermentasi laktosa dengan kuat dan/atau  bakteri  yang  dapat  memfermentasi sukrosa  (khas  pada  bakteri fecal  coliform ). Sedangkan bakteri yang tidak dapat memfermentasi  laktosa,  koloni  akan  berwarna merah muda atau transparan [10].
Berdasarkan  tabel  4  dapat  diketahui  bahwa terindikasi  satu  sampel  air  minum  PAMSIMAS yang berasal dari mata air Linggajati mengandung sejumlah bakteri E. coli sehingga dinyatakan tidak layak dikonsumsi sebagai air minum. Sedangkan enam  sampel  air  minum  PAMSIMAS  lainnya yang berasal dari mata air Salakadomas, Citundun,
Cisamaya, Cikadacang, Wanahegar, dan mata air citimbang tidak menunjukkan adanya kandungan bakteri E.  coli .  Keberadaan  bakteri coliform termasuk bakteri E. coli dalam air minum sangat mempengaruhi kualitas baik atau buruknya suatu air minum.
4 Kesimpulan
Menurut acuan PERMENKES nomor 492/Menkes/Per/IV/2010, hasil pemeriksaan keberadaan  cemaran  bakteri coliform pada  tujuh sampel  air  minum  PAMSIMAS  di  Kabupaten Kuningan yang berasal dari mata air Salakadomas, Citundun,  Cisamaya,  Cikadacang,  Wana  Hegar, Linggajati,  dan  mata  air  Citimbang  ditunjukkan bahwa  ketujuh  sampel  tersebut  tidak  memenuhi standar baku mutu persyaratan secara bakteriologis sehingga ketujuh sampel air minum PAMSIMAS  tidak  layak  dikonsumsi  sebagai  air minum.  Hasil  ini  dikarenakan  pada  uji  penduga semua sampel dalam media LB positif mengandung  bakteri coliform sedangkan  dalam media  ECB  terdapat  tiga  sampel  positif mengandung bakteri E. coli . Tahapan uji penegas pada  media  BGLB  menunjukkan  enam  sampel mengandung  bakteri coliform dengan  jumlah berbeda-beda, yakni air minum PAMSIMAS dari mata  air  Citundun  sebesar  93  sel/100  mL, Cisamaya 23 sel/100 mL, Cikadacang 43 sel/100 mL,  Wanahegar  2400  sel/100  mL,  Linggajati  93 sel/100  mL,  dan  air  minum  dari  mata  air Citimbang sebesar 43 sel/100 mL. Sedangkan uji lanjutan  pada  media  EMB  terdapat  satu  sampel yang  menunjukkan  hasil  positif  mengandung bakteri jenis E. coli pada sampel air minum dari mata air Linggajati, yakni sebanyak 4 sel/100 mL.

## Ucapan Terima Kasih
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada seluruh  pihak  terkait  dalam  proses  penelitian khususnya  kepada  Ibu  Assyifa  Junitasari,  S.Pd., M.Si.  dan  Ibu  Eka  Gustiana,  SKM  selaku pembimbing penelitian serta pihak Laboratorium Kesehatan  Daerah  Kabupaten  Kuningan  yang telah  menyediakan  tempat  untuk  melakukan penelitian ini.

## Daftar Pustaka
[1] PAMSIMAS  [Internet].  Petunjuk  Teknis Pemantauan  Evaluasi  dan  Pelaporan  (PT- 12/2021);2021  [Cited  2021  Oct  2]. http://pamsimas.org/juknis-pemantauan-
evaluasi-dan-pelaporan/
[2] Cappuccino  JG,  Sherman  N.  Manual laboratorium mikrobiologi. 8th ed. Jakarta:
EGC; 2013.
[3] Ristiati  NP.  Pengantar  Mikrobiologi Umum Edisi 1. Bandung: Angkasa; 2015. [4] Hasruddin, Husna R. Mini Riset Mikrobiologi  Terapan.  Medan:  Graha Ilmu; 2014. [5] Li  D,  Liu  S.  2019,  Water  Quality Monitoring  in  Aquaculture, Water  Qual Monit Manag , 303–28. https://doi.org/10.1016/b978-0-12- 811330-1.00012-0. [6] Friedheim E, Michaelis L. 2007, Bacteriological  Analytical Manual. J  Biol
Chem , 91:55–368.
[7] Sulistyorini IS, Edwin M, Arung AS.2016, Analisis  Kualitas  Air  Pada  Sumber  Mata Air Di Kecamatan Karangan dan Kaliorang  Kabupaten  Kutai  Timur. J Hutan Tro, 1(4):64–76 .
[8] Bambang A, Fatimawali, Kojong N. 2014,
Analisis  Cemaran  Bakteri  Coliform  Dan Identifikasi  Escherichia  Coli  Pada  Air  Isi Ulang  Dari  Depot  Di  Kota  Manado. Pharmacon, 3(3):325–34. https://doi.org/10.35799/pha.3.2014.5406.
[9] Kesehatan  D.  Pedoman  Teknis  Sanitasi (Penyehatan)  Pengelolaan  Makanan  di
Rumah  Sakit.  Jakarta:  Direktorat  Jendral PPM & PLP; 1996. [10] Dwijoseputro D. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Perpustakaan
Nasional; 2010.
[11] Some  S,  Mondal  R,  Mitra  D,  Jain  D, Verma D, Das S. 2021, Microbial pollution of water with special reference to coliform bacteria and their nexus with environment. Energy Nexus , 1. https://doi.org/10.1016/j.nexus.2021.1000
08.
[12] Reed  BC,  Rasnake  MS.  2016,  An assessment  of  coliform  bacteria  in  water sources  near  Appalachian  Trail  shelters within  the  Great  Smoky  Mountains National  Park. Wilderness  Environ  Med,
27(1):107–110.
https://doi.org/10.1016/j.wem.2015.09.01 9.
[13] Meride  Y,  Ayenew  B.  2016,  Drinking water quality assessment and its effects on residents  health  in  Wondo  genet  campus, Ethiopia. Environ  Syst  Res ,  5(1):1–7. https://doi.org/10.1186/s40068-016-0053-
6.
[14] Prest  EI,  Hammes  F,  van  Loosdrecht MCM, Vrouwenvelder JS. 2016, Biological  stability  of  drinking  water: Controlling factors, methods, and challenges. Front  Microbiol ,  7:1–24. https://doi.org/10.3389/fmicb.2016.00045.
[15] Anwarudin  W,  Suhendi  D,  Azizah  N. 2019,  Analisis  kualitatif  bakteri  coliform pada  air  bak  penampungan  umum  desa taraju  kabupaten  kuningan.  Farmasi, 4(1):1–7.
[16] Sudiana  IM,  Sudirgayasa  IG.  2020, Analisis  Cemaran  Bakteri  Coliform  dan Eschericia Coli pada Depot Air Minum Isi Ulang  (DAMIU). J  Kesehat  Bakti  Tunas Husada    J  Ilmu  Keperawatan , Anal Kesehat Dan Farm , 20(1):52–61.
[17] Anisafitri  J,  Khairuddin  K,  Rasmi  DAC. 2020,  Analisis  Total  Bakteri  Coliform Sebagai  Indikator  Pencemaran  Air  Pada Sungai  Unus  Lombok. J  Pijar  Mipa ,  15
(3):266-272.
https://doi.org/10.29303/jpm.v15i3.1622.
[18] Amelia  F.  2019,  Identifikasi  Bakteri
Coliform  Pada  Air  Minum  Dalam Kemasan  (AMDK)  Yang  Diproduksi  Di
Kota Batam. Simbiosa , 8(1):85–92.
https://doi.org/10.33373/sim- bio.v8i1.1907.
[19] Dharmadewi  A,  Apriana  IM.  2019, Analisis  Kualitas  Air  pada  Sumber  Mata Air Di Dusun Paangtebel Desa
Peguyangan  Kaja  Denpasar  Ditinjau  dari Aspek Kimia dan Biologi. J Media Sains,
3(2):78–83.
[20] Kumalasari  D,  Firdhausi  NF,  Jariyah  IA. 2021, Analysis of Water Quality Based on Coliform Bacteria Parameters in Springs of Sumberbening  Village,  Malang  District. Indones J  Biotechnol  Biodivers ,  5(1):17– 23. https://doi.org/10.47007/ijobb.v5i1.75.
[21] Haderiah  H,  Wahdaniyah  F.  2018, Kualitas  Bakteriologis  (MPN  Coliform) Pada  Sumber  Mata  Air  Di  Desa  Buntu Ampang  Kec.  Baroko  Kab.  Enrekang. Sulolipu  Media  Komun  Sivitas  Akad  Dan
Masy, 18(1):36–41. https://doi.org/10.32382/sulolipu.v18i1.73 4.
[11][12][13][14][15][16][17][18][19][20][21]