## BIODEGRADASI POPOK BAYI BEKAS MENGGUNAKAN JAMUR DAN BAKTERI SELULOLITIK DENGAN FERMENTASI PADAT

## BIODEGRADATION OF USED BABY DIAPERS USING CELLULOLITIC FUNGUS AND BACTERIA WITH SOLID FERMENTATION
Riryn Novianty 1* , Andi Dahliaty 2 , Nurul Iflah Nasution 3 , Haryati 4
1234 Program Studi Kimia , Fakultas MIPA Universitas Riau, Indonesia *Email: rirynnovianty@lecturer.unri.ac.id
Diterima: 21 Februari 2020. Disetujui: 10 Maret 2020. Dipublikasikan: 30 April 2020
Abstrak: Popok  bayi  terbuat  dari  kapas  dan pulp mengandung  selulosa  yang  dapat  digunakan  sebagai  substrat dalam  produksi  enzim  selulase.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kemampuan  jamur Trichoderma asperellum LBKURCC1 dan bakteri selulolitik S-22 dalam mendegradasi popok bayi bekas yang mengandung urin dengan  cara  fermentasi  padat  selama  10,  20,  dan  30  hari.  Penentuan  aktivitas  enzim  selulase  dilakukan  dengan substrat CMC 2%  pada pH 5,5 ( Trichoderma asperellum LBKURCC1) dan  pH  7 (isolat bakteri  S-22) pada suhu inkubasi 40ºC selama 30 menit dan diamati menggunakan metode Nelson-Somogyi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa popok bayi bekas dapat digunakan sebagai substrat oleh jamur Trichoderma asperellum LBKURCC1 untuk produksi enzim selulase dengan aktivitas ekstrak kasar enzim selulase tertinggi diperoleh pada fermentasi padat hari ke 10  sebesar (1,891  ±  1,453) ×  10 -3 U/mL sedangkan  oleh isolat bakteri  S-22 pada  hari  ke  20  sebesar  (2,854 ± 0,019) × 10 -3 U/mL. Bakteri selulolitik S-22 mampu mendegradasi popok bayi bekas lebih baik jika dibandingkan jamur Trichoderma asperellum LBKURCC1 dan jika dibandingkan dengan standar kualitas kompos SNI : 19-7030- 200, popok bayi tersebut belum memenuhi standar untuk dapat dijadikan kompos.
Kata Kunci : Bakteri, fermentasi padat, popok bayi bekas, selulase , Trichoderma asperellum
Abstract: Diapers  are  made  by  cotton  and  pulp  containing  cellulose  that  can  be  used  as  a  substrate  in  the production  of  cellulose  enzymes.  The  purpose  of  this  research  is  to  determine  the  ability  of  cellulolytic  fungi Trichoderma asperellum LBKURCC1 and cellulolytic bacteria S-22 to degrade the used diapers containing urine by solid  fermentation  for  10,  20,  and  30  days.  The  activity  of  crude  extract  of  cellulose  enzyme  was  observed  with CMC 2% as substrate at pH 5,5 (Trichoderma asperellum LBKURCC1) and pH 7 (bacteria S-22 isolate), incubation temperature 40ºC during 30 minutes by using Nelson Somogyi’s method. The result showed that used diapers can be  used  as  substrate  for  cellulose  enzyme  production  by  fungi  Trichoderma  asperellum  LBKURCC1  with  the highest activity of cruide extract cellulose enzyme obtained at 10 th days solid fermentation of (1,891 ± 1,453) × 10 -3 U  /  mL  and  by  bacteria  S-22  isolate  at  20 th days  solid  fermentation  of  (2,854  ±  0,019)  ×  10 -3 U/mL.  It  can  be concluded  that  bacteria    S-22  isolate  would  degrade  the  used  diapers  better  than  fungi  Trichoderma  asperellum LBKURCC1.  The  result  of  this  research  compared  to  quality  standards  compost  of  SNI:  19-7030-2004  have  not fulfilled, so it can not be used as compost
Keywords : Bacteria, cellulase, solid fermentation, Trichoderma asperellum, used diaper

## PENDAHULUAN
Angka  kelahiran  bayi  di  Provinsi  Riau    menurut Badan  Pusat  Statistik  dalam  proyeksi  angka kelahiran  total  atau Total  Fertility  Rate (TFR) mencapai 2.726 selama tahun 2015-2020, jumlah ini akan  terus  meningkat  setiap  tahunnya  [1].  Popok bayi merupakan salah satu kebutuhan sekunder yang akan meningkat seiring dengan meningkatnya jumlah kelahiran bayi. Semakin tingginya pemakaian popok bayi maka limbah yang dihasilkan juga akan semakin banyak.  Sehingga  pemakaian  popok  bayi  tanpa diimbangi dengan sistem pengelolaan atau pemanfaatan  limbah  tersebut  lama  kelamaan  akan menjadi salah satu penyebab permasalahan di bidang lingkungan,  karena  limbah  ini  akan  mengganggu estetika lingkungan.
Salah  satu  proses  pengolahan  limbah  secara  biologi yang  sering  dipilih  adalah  biodegradasi,  karena efektif untuk pengolahan limbah organik terlarut dan biaya  yang  dibutuhkan  relatif  sedikit. Pulp merupakan bahan baku utama pembuatan popok bayi yang  sebagian  besar  terbuat  dari  senyawa  polimer yang berupa selulosa. Adanya selulosa  dalam popok bayi  tersebut  akan  dapat  menginduksi  terbentuknya enzim  selulase  oleh  mikroorganisme  selulolitik, dengan terbentuknya enzim selulase maka pulp pada popok  bayi  bekas  akan  dapat  diurai  oleh mikroorganisme [2].
Fungi  selulolitik  yang  cukup  baik  memproduksi enzim  selulolitik  adalah Trichoderma  viride dan Trichoderma  reesei .  Fungi  tersebut  merupakan kelompok  fungi  tanah  sebagai  penghasil  selulase yang  paling  efisien  [3]. Trichoderma  asperellum
merupakan salah satu spesies dari genus Trichoderma .  Spesies T.  asperellum merupakan jamur  selulolitik  dan  berfilamen  yang  memiliki kapasitas  besar  sebagai  penghasil  enzim  selulase. Jamur  ini  memungkinkan  untuk  menghidrolisis selulosa  yang  terdapat  pada  pulp  dari  limbah  popok bayi bekas.
Biodegradasi suatu senyawa ditentukan oleh sifat dan susunan bahan, dimana pada umumnya senyawa organik  mempunyai  sifat  cepat  terdegradasi  dan senyawa  anorganik  mempunyai  sifat  lebih  lambat terdegradasi.  Misalnya,  penguraian  polisakarida selulosa menjadi monosakarida (glukosa). Biodegradasi  akan  lebih  efektif  jika  adanya  sistem simbiosis  antara  dua  atau  lebih  mikroba  yang diterapkan ternyata dapat menguntungkan dilihat dari segi  waktu,  hasil,  efisiensi.  Selain  adanya  simbiosis penggunaan  beberapa  spesies  mikroba  sekaligus lebih  efektif  selama  proses  dibandingkan  dengan penggunaan satu  mikroba [4].
Fermentasi  Media  Padat  (Solid  State  Fermantation) atau  biasa  dikenal  dengan  fermentasi  adalah fermentasi  dengan  substrat  tidak  larut  yang mengandung  kadar  air  40-75%.  Fermentasi  dapat menghasilkan  berbagai  produk  yang  berbeda termasuk  enzim,  asam  organik,  konidia,  dan biomassa  jamur.  Media  fermentasi  pada  metode  ini berfungsi  sebagai  sumber  karbon,  nitrogen  maupun sumber  energi  [5].  Fermentasi  Media  Padat umumnya  digunakan  untuk  produksi  enzim,  proses produksi  ini  membutuhkan  waktu  yang  lebih  lama jika  dibandingakn  dengan  Fermentasi  Media  Cair. Jenis  enzim  dan  mikrob  menentukan  waktu  optimal proses fermentasi [6].
Enzim  selulase  adalah  salah  satu  enzim  yang dihasilkan  oleh  sejumlah  mikroorganisme  dan  pada umumnya  merupakan  enzim  ekstraseluler  yang dihasilkan  di  dalam  sel  kemudian  dikeluarkan  ke medium  pertumbuhannya,  untuk  mengkatalisis pemecahan  selulosa  menjadi  glukosa  dengan pemutusan ikatan      β-1,4-glukosidik yang terdapat pada selulosa. Enzim ini sangat penting dalam proses biokonversi  atau  perubahan  secara  biologi  limbah- limbah  organik  mengandung  selulosa  menjadi glukosa [7].
Penelitian  ini  merupakan  lanjutan  dari  penelitian sebelumnya  yang  telah  dilakukan  oleh  Damayanti (2015)  dengan  menggunakan  sampel  popok  bayi yang  belum  terpakai  menggunakan  isolat  jamur Trichoderma  asperellum LBKURCC1  dan  isolat bakeri  selulolitik  S-22  oleh  Mahdalena  (2014)  [8]. Biodegradasi  popok  bayi  bekas  mengandung  urin masih  jarang  dilakukan.    Penelitian  ini  bertujuan untuk  menentukan  kemampuan  jamur Trichoderma asperellum LBKURCC1 dan isolat bakteri selulolitik S-22  dalam  mendegradasi pulp dari  limbah  popok bayi  bekas  dengan  melihat  aktivitas  ekstrak  kasar enzim  yang  dihasilkan.  Kadar  C-total,  N-total,  dan rasio  C/N  yang  diperoleh  dari  residu  popok  bayi bekas hasil fermentasi menggunakan jamur selulolitik
LBKURCC1  dan  bakteri  S-22  dibandingkan  dengan standar kualitas kompos SNI          19-7030-2004.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah Oven ( Fisher  Scientific Model  655F),  pH  meter  (Hanna Instrument  H18014),  Autoklaf All  American  Mode 25X-2  (Winconsin  Aluminium  Foundry  Co.  Inc., Monitowoc),  Vortex  (H-VM-300),  Spektrofotometer UV-VIS  ( Thermoscientific  genesys 10S  UV-Vis), Waterbath ( Grant  Instrument  Type SUB  28),  dan peralatan laboratorium standar lainnya sesuai dengan prosedur kerja.
Bahan  yang  digunakan  isolat  jamur Trichoderma asperellum LBKURCC1  yang  diisolasi  dari  tanah perkebunan  jeruk  dan  coklat  di  Riau  [9]  dan  isolat bakteri  selulolitik    S-22  yang  diisolasi  dari  Sungai Siak  di  daerah  Tandun  yang  merupakan  koleksi Laboratorium  Riset  Enzim,  Fermentasi,  dan Biomolekuler  Jurusan  Kimia  FMIPA  UR,  reagen arsenomolibdat,  H 2 SO 4p ,  Na 2 HasO 4 .7H 2 O  (Sigma, No.  kat.  A6156),  reagen  Nelson  Somogyi  C-
4 H 4 KNaO 6 (Merck,  No.  kat.  1.  08087), Carboxy Methil Cellulose (CMC), agar batang, kentang, kertas saring Whatman G/FC dan bahan-bahan lainnya yang sesuai dengan prosedur kerja.

## Persiapan popok bayi bekas
Sampel  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah popok  bayi  bekas  yang  mengandung  urin.  Popok bayi  bekas ini dipotong  dan  ditimbang dengan  berat ±  10,3  gram  yang  akan  digunakan  sebagai  substrat pada media fermentasi selama 10, 20, dan 30 hari.

## Persiapan Inokulum Jamur
Isolat jamur T. asperellum LBKURCC1 diremajakan pada  media  padat  PDA  (agar  miring).  Selanjutnya diinkubasi  pada  temperatur  kamar  selama  7  hari. Spora jamur dilepaskan menggunakan ose dari media PDA  yang  telah  disuspensikan  dalam  larutan  salin (NaCl  0,8%).  Suspensi  dihomogenkan  dengan  cara divorteks.  Suspensi  disaring  menggunakan glass wool steril untuk memisahkan spora dari miselia dan menyaring  media  PDA  yang  ikut  terlepas.  Spora diencerkan  hingga  pembacaan  OD  antara  0,677- 0,687 pada panjang gelombang 660 nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis.

## Persiapan Inokulum Bakteri
Media yang digunakan sebagai inokulum adalah NB yang  dilarutkan  dalam  larutan bufer  posfat  pH  7. Untuk  setiap    isolat  dibuat  inokulum  sebanyak  100 mL  kemudian  autoklaf.  Media  didiamkan  selama kurang  lebih  24  jam  untuk  melihat  kontaminasi sebelum ditanami bakteri.
Inokulasi  dilakukan  dengan  cara  mengambil  bakteri dari  media Nutrient  Agar (NA)  menggunakan  ose dan  dipindahkan  dalan  media  NB.  Kemudian diinkubasi  menggunakan shaking  incubator dengan kecepatan  agitasi  120  rpm  pada  suhu  37 o C  selama ±16  jam.  Inokulum  tersebut  diukur  kekeruhan  sel
bakterinya  atau optical  density (OD)  pada  panjang gelombang 660 nm.

## Fermentasi padat
Media  fermentasi  terdiri  dari  0,8g/L  NH4H2PO4, 0,7g/L  Na2PO4,  0,4g/L  KH2PO4,  0,1g/L  CaCl2, 0,1g/L  MgSO4,  0,01g/L  Pepton,  100  mL  Bufer Asetat pH 5,5, 2mL/L Logam Runut. Sebanyak  100  mL  inokulum  media  cair  dalam larutan  buffer  asetat  pH  5,5  (jamur T.  asperellum LBKURCC1)  dan  pH  7  (isolat  bakteri  S-22) dimasukkan ke dalam erlenmeyer yang telah berisi ± 10 gram potongan popok bayi bekas yang telah steril, kemudian diinkubasi pada suhu kamar dan dilakukan pengadukan secara manual pada rentang waktu 10-14 jam selama 10, 20 dan 30 hari agar terjadinya proses aerasi.

## Isolasi ekstrak kasar enzim
Setelah proses biodegradasi popok bayi bekas secara fermentasi selesai, hasil fermentasi didinginkan pada suhu  4 o C  selama  1  jam.  Selanjutnya  media fermentasi  disaring  menggunakan  kertas  saring whatman G/FC . Ekstrak kasar enzim yang dihasilkan oleh  mikroorganisme  pada  proses  fermentasi dijernihkan dengan cara sentrifugasi dingin selama ± 10 menit dengan kecepatan 9500 rpm. Ekstrak kasar enzim yang diperoleh ditambahkan NaN 3 0,02% dan disimpan  pada  suhu  4 o C  apabila  tidak  langsung dilakukan uji aktivitas enzim.

## Uji aktivitas ekstrak kasar enzim selulase
CMC  0,2  gr  dilarutkan  dalam  10  mL  buffer  asetat 0,05  M  pH  5,5  (sebagai  substrat).  Substrat  diambil 0,5  mL  dan  dimasukkan  dalam  tabung  uji, selanjutnya  tabung  uji  diprainkubasi  dalam waterbath  thermostat dengan  suhu  40 o C  selama  5 menit.  Tanpa  mengeluarkan  tabung  dari waterbath , tambahkan 0,5 mL enzin dari masing– masing variasi waktu  fermentasi.  Inkubasi  dilanjutkan  selama  30 menit.  Setelah  30  menit,  tabung  dikeluarkan  dari waterbath dan  ditambahkan  0,5  mL  reagen  Nelson- Somogyi , lalu divorteks.
Tabung  kontrol  dalam  keadaan  kosong  dimasukkan ke  dalam  waterbath  bersamaan  dengan  tabung  uji. Prainkubasi  dilakukan  selama  5  menit.  Tanpa mengeluarkan  tabung  dari waterbath ,  ditambahkan 0,5  mL.enzim  kedalam  tabung.  Inkubasi  dilanjutkan sampai  30  menit.  Setelah  30  menit,  tabung dikeluarkan dari waterbath dan ditambahkan 0,5 mL reagen Nelson-Somogyi, lalu  divorteks.  Selanjutnya ditambahkan 0,5 mL substrat CMC.
Setelah tabung uji, kontrol, dan blanko ditambahkan reagen  Nelson-Somogyi,  semua  tabung  dimasukkan ke dalam penangas air mendidih selama 20 menit dan ditutup  menggunakan  kelereng.  Tabung  dikeluarkan dan  didinginkan hingga  mencapai suhu  kamar. Pada setiap  tabung  ditambahkan  0,5  mL  reagen arsenomolibdat, lalu divorteks dan didiamkan selama 5 menit. Kemudian ditambahkan akuades sebanyak 3 mL ke dalam setiap tabung reaksi tersebut, divorteks dan  diinkubasi  selama  30  menit.  Absorban  larutan
diukur  menggunakan  spektrofotometer  sinar  tampak pada panjang gelombang    540 nm.

## Penentuan  kadar karbon organik
Residu  popok  bayi  bekas  bekas  hasil  fermentasi ditimbang  sebanyak  0,5  g,  dimasukan  ke  dalam krusibel dan masukkan ke dalam furnace. Mula-mula residu  diabukan  pada  suhu  300 o C  selama  1,5  jam dan  selanjutnya  pada  suhu  550-600 o C  selama  2,5 jam. Furnace dimatikan  dan  biarkan  selama  satu malam.  Kemudian  dinginkan  dalam  desikator  dan ditimbang [11].

## Penentuan N-total dengan metode Kjeldahl
Sebanyak  2,0  g  residu  popok  bayi  bekas  hasil fermentasi  ditimbang,  dimasukan  ke  dalam  labu Kjeldahl  500  mL,  lalu  ditambahkan  20  mL  H 2 SO 4 pekat, kemudian ditempatkan diatas alat pembakar di dalam ruangan asam selama 4-6 jam. Api dinyalakan kecil  agar  perubahan  yang  terjadi  sempurna, pemanasan  dihentikan  bila  telah  terbentuk  cairan berwarna  bening  kehijauan.  Setelah  itu  dibiarkan hingga  dingin,  kemudian  larutan  sampel  dalam  labu Kjaldahl  dimasukan  ke  dalam  alat  destilasi  yang dimodifikasi,  dan  ditambah  NaOH  45  %  pada volume sama.
Destilasi  dilakukan  selama  15  menit,  setelah  larutan penampung berubah warna dari merah muda menjadi warna hijau. Destilat ditampung dalam 20 mL larutan asam borat 4% yang telah ditambah 1 tetes indikator campuran (0,5 % Bromkeresol hijau dan 0,1 % metil merah  dalam  etanol  95  %).  Warna  larutan  yang semula biru kehijauan berubah menjadi hijau. Distilat dititrasi  dengan  H 2 SO 4 0,05  N  hingga  larutan berubah’warna  menjadi  abu-abu.  Satu  blanko  tanpa sampel  dan  satu  larutan  standar  amonium  klorida juga dititrasi dengan H 2 SO 4 0,05 N [11].

## Pengukuran rasio C/N
Rasio C/N diukur dengan cara membandingkan kadar C-organik  dengan  kadar  N-total  residu  popok  bayi bekas  hasil  fermentasi  menggunakan  isolat  jamur T. asperellum LBKURCC1 dan isolat bakteri    S-22 selama  10,  20,  dan  30  hari.  Berdasarkan  Balai Penelitian  Tanah  tahun  2005  menyatakan  bahwa syarat  mutu  kompos  dari  sampah  organik  domestik (SNI  19-7030-2004)  rasio  C/N  berada  pada  kisaran 10-20.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Fermentasi  padat  dipilih  dalam  proses  biodegradasi popok  bayi  bekas  ini  karena  dapat  mengubah  suatu senyawa  menjadi  senyawa  lain  menggunakan mikroorganisme  dalam  kondisi  aerob  dan  anaerob. Fermentasi  padat  merupakan  fermentasi  dengan substrat  tidak  larut  yang  mengandung  kadar  air 40-75%.  Isolat  jamur  LBKURCC1 dan  bakteri  S-22 yang  akan  diinokulasikan  ke  dalam  media  produksi cair  terlebih  dahulu  dilakukan  penghitungan  jumlah spora dengan mengukur Optical Density (OD).  Pada jamur  nilai  OD  menunjukkan  kekeruhan  suspensi spora  dalam  larutan  salin  (NaCl  0,8%).  Semakin
keruh  suspensi  spora  maka  nilai  OD  akan  semakin tinggi,  hal  ini  menandakan  banyaknya  jumlah  spora di  dalam  larutan,  dengan  demikian  nilai  OD  yang dihasilkan dari setiap isolat akan berbeda-beda.Spora jamur  yang diinokulasikan ke dalam media produksi cair  diusahakan  relatif  sama  agar  jumlah  sel  awal sebelum  fermentasi  dianggap  sama.  Demikian  juga halnya  dengan  bakteri,  nilai  OD  menunjukkan kekeruhan  atau  suspensi  sel  dalam  media  cair  NB. Perbedaan  nilai  OD  masing-masing  bakteri disebabkan  oleh perbedaan  jumlah sel. Bakteri  yang diinokulasikan  ke  dalam  media  produksi  enzim diusahakan  relatif  sama  yaitu  0,5  dan  dianggap jumlah  sel  awal  sebelum  fermentasi  relatif  sama. Menurut  Maniatis  dkk.,  (1989),  nilai  OD  660  nm dikorelasikan dengan OD 660 nm 2 setara dengan 1,6 x  10  9  sel/mL  kurva  standar  yang  menyatakan hubungan OD dengan jumlah sel per mL. Sedangkan untuk  jamur,  nilai  OD 660nm sebesar  0,34  setara dengan  ̴7×10 12 spora/mL [12].
Fermentasi  dilakukan  dengan  menggunakan  isolat jamur  LBKURCC1  pada  media  produksi  cair  yang mengandung  buffer  asetat  pH  5,5  dan  bakteri  S-22 pada  pH  7.  Adanya  buffer  ini  diharapkan  dapat mencegah  terjadinya  perubahan  kondisi  keasaman lingkungan media produksi selama proses fermentasi berlangsung.  Perubahan  pH  secara  ekstrim  dapat menjadikan  enzim  mengalami  denaturasi,  sebab  pH ekstrim dapat merusak konformasi enzim (sekunder, tersier,  dan  kuartener).  Rusaknya  enzim  akan menghilangkan sisi katalitik dan sisi pengikat antara enzim dan substrat sehingga mengakibatkan substrat tidak dapat diikat [13]. Ekstrak kasar enzim selulase yang  diperoleh  setelah  fermentasi  selesai  dapat disimpan dengan menambahkan larutan NaN 3 0,02%, larutan  ini  berfungsi  sebagai  bahan  pengawet  untuk mencegah  rusaknya  enzim  yang  disebabkan terjadinya  kontaminan  oleh  mikroorganisme  lain selama penyimpanan.
Pengukuran  aktivitas  ekstrak  kasar  enzim  hasil fermentasi padat dengan variasi waktu 10, 20, dan 30 hari  dilakukan  untuk    menunjukkan  bahwa  selulosa pada pulp popok  bayi  bekas  yang  mengandung  urin dapat didegradasi oleh jamur selulolitik T.asperellum LBKURCC1  dan  isolat  bakteri  S-22.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  selulosa  popok  bayi  bekas mengandung  urin  dapat  digunakan  sebagai  sumber karbon yang bisa dilihat dari adanya aktivitas ekstrak kasar  enzim  selulase  yang  dianalisis  menggunakan metode  Nelson-Somogyi.  Hasil  fermentasi  popok bayi  bekas  menggunakan  isolat  jamur  LBKURCC1 dan bakteri S-22 dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Aktivitas enzim selulase hasil fermentasi dari isolat jamur LBKURCC1 dan bakteri S-22 pada
popok bayi bekas Waktu Fermentasi Rata-rata aktivitas enzim    (x 10 -3 U/mL) LBKURCC1 S-22 10 hari 1,891 ± 1,453 a 0,822 ± 0,571 b 20 hari 0,753 ± 0,630 a 2,854 ± 0,019 a 30 hari 0,291 ± 0,224 a 0,292 ± 0,169 b
Catatan:   Nilai yang diikuti pangkat huruf yang sama pada  satu  kolom  menyatakan  tidak  berbeda  secara signifikan  pada tingkat  5%  (p≤0,05) berdasarkan  uji Duncan jarak berganda
Dari  data  yang  terdapat  pada  tabel  dapat  dilihat bahwa  aktivitas  tertinggi  dari  ekstrak  kasar  enzim selulase pada isolat  jamur  LBKURCC1 berada pada fermentasi hari ke 10 sebesar (1,891 ± 1,453 a ) × 10 -3 U/mL.  Aktivitas  enzim  kemudian  mengalami penurunan  sampai  pada  30  hari  fermentasi. Berdasarkan uji Duncan jarak berganda untuk jamur LBKURCC1,  aktivitas  enzim  tidak  berbeda  secara signifikan untuk semua waktu fermentasi. Sedangkan pada  isolat  bakteri  S-22,  aktivitas  enzim  selulase tertinggi  berada  pada  fermentasi  hari  ke  20  dan aktivitas terendah berada pada fermentasi hari ke 30. Berdasarkan  uji  Duncan  jarak  berganda  untuk  isolat bakteri  S-22,  aktivitas  enzim  tidak  berbeda  secara signifikan untuk waktu fermentasi hari  ke 10 dan 30. Penurunan  aktivitas  enzim  ini  dipengaruhi  oleh jumlah  nutrien  dalam  media  produksi  yang digunakan  oleh  mikroorganisme  dalam  proses metabolisme.  Apabila  nutrien  semakin  berkurang maka  tidak  dapat  mencakupi  kebutuhan  dari mikroorganisme yang mengakibatkan mikroorganisme  tersebut  perlahan-lahan  akan  mati. Menurut  Putri  (2012)  aktivitas  ekstrak  kasar  enzim selulase mengalami peningkatan dan penurunan yang tidak  stabil  dapat  dikarenakan  selulase  terdiri  dari campuran beberapa enzim (endoglukonase, eksoglukonase,  dan β -glukosidase)  yang  diduga memiliki  jumlah  yang  sama  sehingga  tidak  ada aktivitas  yang  menonjol  dan  menyebabkan  aktivitas tidak jauh berbeda terhadap variasi waktu fermentasi [14].  Penurunan  aktivitas  ekstrak  kasar  enzim  juga bisa terjadi karena dalam penyimpangan, konsentrasi enzim di setiap tabung mikro berbeda-beda dan bisa terjadi  karena  adanya  kesalahan  analisis  ( human error ).
Aktivitas  enzim  selulase  bakteri  S-22  lebih  tinggi jika  dibandingkan  dengan  isolat  jamur  LBKURCC1 dikarenakan  setiap mikroorganisme  penghasil enzim memiliki  gen  yang  berbeda  dan  menghasilkan kompleks  enzim  yang  berbeda.  Gen  merupakan fragmen  DNA  yang  memiliki  urutan  basa  tertentu yang  akan  mempengaruhi  urutan  asam  amino  pada saat  sintesis  protein.  Protein  enzim  selulase  yang dihasilkan  dari  genus  yang  sama  bisa  saja  memiliki aktivitas  enzim  selulase  yang  berbeda  apalagi  dua jenis mikroorganisme yang berbeda [15].
Penentuan  kandungan  karbon  organik  dalam  sampel popok  bayi  yang  telah  difermentasi  dengan  jamur LBKURCC1 dan S-22 dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil penentuan kadar karbon organik pada popok bayi bekas yang difermentasi dengan isolat jamur LBKURCC1 dan bakteri S-22
Dekomposisi  senyawa  organik  dilakukan  dengan menggunakan  mikroorganisme.  Mikroorganisme dapat  menguraikan  bahan-bahan  organik  sebagai sumber  makanan  yang  selanjutnya  akan  diuraikan menjadi  senyawa  yang  lebih  sederhana.  Kadar C-organik  merupakan  indikator  telah  terjadinya proses  dekomposisi  dalam  pengomposan  dan kematangan kompos. Proses dekomposisi mengubah karbon  menjadi  sumber  energi  untuk  menyusun bahan  seluler  sel-sel  mikroba  dengan  membebaskan CO 2 dan  bahan-bahan  lain  yang  mudah  menguap. Jamur  dan  Bakteri  selulolitik  memiliki  peranan penting  dalam  dekomposisi  selulosa  dengan melibatkan enzim selulase.
Kadar  C-organik  residu  popok  bayi  bekas  setelah fermentasi oleh isolat jamur LBKURCC1 mengalami penurunan dari  fermentasi 10 ke 20 hari. Penurunan kadar     C-organik ini berhubungan dengan aktivitas ekstrak  kasar  enzim  karena  semakin  lama  waktu fermentasi  maka  aktivitas  enzim  akan  meningkat sampai  batas  optimumnya.  Setelah  batas  opitimum maka  aktivitas  enzim  akan  menurun  akibat kurangnya  nutrien  dalam  media  produksi  sehingga menyebabkan  kadar  C-organik  pun  mulai  menurun saat aktivitas enzimnya menurun. Hal ini disebabkan karena  jamur  selulolitik  bekerja  merombak  selulosa yang terdapat pada bahan penyusun kompos menjadi monomer  glukosa.  Jamur  selulolitik  mampu memecah  selulosa  menjadi  molekul  yang  lebih sederhana  sehingga  ketersediaan  energi  untuk mikroorganisme  meningkat.  Polimer  glukosa  yang telah  dirombak  dimanfaatkan  oleh  jamur  sebagai sumber  energi  dalam  proses  metabolisme  dan perbanyakan  sel,  sehingga  senyawa  organik  diubah menjadi  asam  organik  dan  alkohol  terlebih  dahulu kemudian  diubah  menjadi  CO 2 ,  NH 4 ,  NH 3 dan  H 2 O [16].
Kadar  C-organik  residu  popok  bayi  bekas  setelah fermentasi  oleh  isolat  bakteri        S-22  mengalami peningkatan  dari  fermentasi  10  hari  hingga  30  hari. Hal  ini  disebabkan  karena  adanya  aktivitas  bakteri yang  diinokulasi  pada  popok  bayi  bekas.  Semakin lama  waktu  fermentasi  maka  aktivitas  enzim  akan meningkat  sampai  batas  optimumnya,  setelah  batas optimum  aktivitas  enzim  akan  menurun  akibat kurangnya  nutrien  dalam  media  produksi  sehingga menyebabkan kadar           C-total juga akan menurun
seiring  dengan  aktivitas  enzim  yang  menurun. Peningkatan  aktivitas  enzim  yang  diperoleh  selama fermentasi menunjukkan  bahwa isolat T. asperellum LBKURCC1  mampu  mengurai  selulosa  popok  bayi bekas  menjadi  senyawa  sederhana  seperti  glukosa untuk memperoleh energi.
Kadar karbon yang diperoleh pada residu popok bayi bekas  hasil  fermentasi  selama  30  hari  ini  apabila dibandingkan dengan standar kualitas kompos  untuk kadar  karbon  dalam  SNI  19-7030-2004  (9,8-32%) tidak  memenuhi  kriteria  standar  kualitas  kompos dikarenakan nilainya yang masih sangat tinggi, yakni sebesar  55,897%  dan  57,866%. Chalimatus  dkk (2013)  menyatakan  bahwa  hal  ini  dapat  disebabkan oleh  proses  dekomposisi  yang  kurang  sempurna dikarenakan  kondisi  tumpukan  kompos  berada  pada skala  laboratorium  sehingga  membuat  tumpukan tidak dapat menahan panas dengan baik [17].
Dekomposisi  dipengaruhi  oleh  aktifitas  enzim  juga dipengaruhi oleh jenis dan jumlah sel mikroorganisme  yang  melakukan  proses  fermentasi. Yuliprianto  (2010)  juga  mengatakan  bahwa  ukuran partikel  juga  mempengaruhi  dekomposisi  bahan organik.  Semakin  kecil  ukuran  partikel  bahan organik,  maka  semakin  luas  permukaan  yang  dapat diserang  mikroorganisme  pengurai.  Penelitian  ini tidak melalui proses penghancuran popok bayi bekas sebagai  sumber  karbon,  sehingga  ukuran pulp yang digunakan  relatif  besar  yang  mengakibatkan  proses dekomposisi  kurang  sempurna  dan  menghasilkan kadar C-total yang masih tinggi [18]
Penentuan  kadar  N-total  dalam  sampel  popok  bayi hasil fermentasi  dilakukan dengan metode Kjeldahl. Hasilnya dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil penentuan kadar nitrogen total pada popok bayi yang difermentasi dengan isolat jamur LBKURCC1 dan bakteri S-22
Nitrogen  digunakan  oleh    mikroorganisme  sebagai sumber  makanan  untuk  membentuk  sel-sel  baru. Mikroorganisme  menguraikan  protein  dan  bahan organik  yang  mengandung  nitrogen  lainnya  dan terjadi  pelepasan  gas  amoniak.  Nitrogen  sangat dibutuhkan  oleh  tanaman  sebagai  penyusun  asam amino, protein dan komponen lainnya. Nitrogen juga penting  dalam  respirasi,  meningkatkan  reaksi enzimatik,  dan  meningkatkan  metabolisme  sel. Menurut  Yuliprianto  (2010),  amonium  merupakan sumber  utama  nitrogen  untuk  mikroorganisme, karena secara langsung diasimilasi oleh mikroorganisme melalui proses nitrifikasi.
Mikroorganisme  tersebut  melakukan  metabolisme
Waktu fermentasi Kadar C-organik (%) (hari) LBKURCC1 S-22 10 56,155 ± 0,823 57,937±0,016 20 56,007 ± 0,446 57,942± 0,009 30 56,529 ± 0,358 57,719± 0,221
Waktu fermentasi Kadar N-total (%) (hari) LBKURCC1 S-22 10 4,965 ± 0.118 0,113 ± 0,004 20 9,094 ± 0,240 0,092 ± 0,013 30 2,793 ± 0,056 0,090 ± 0,010
yang  menghasilkan  senyawa  protein.  Protein merupakan  suatu  polimer  yang  monomernya  asam amino,  sedangkan  asam  amino  itu  sendiri  adalah senyawa  karboksilat  yang  mengandung  gugus  amin yang terdiri dari atom nitrogen. Selanjutnya nitrogen yang dihasilkan akan disumbangkan ke kompos. Kadar  N-total  untuk  isolat  jamur  LBKURCC1 meningkat  dari  hari  ke  10  yakni  sebesar  4,965% menjadi  sebesar  9,094%  pada  20  hari  fermentasi, kemudian  mengalami  penurunan  sampai  hari  ke  30 menjadi  2,793%.  Sedangkan  kadar  N-total  pada isolat  bakteri  S-22  mengalami  penurunan  selama waktu  fermentasi  30  hari.Terjadinya  penurunan kadar  nitrogen  diduga  disebabkan  karena  semakin lama  waktu  fermentasi  maka  kompos  akan kehilangan  nitrogen  yang  terbuang  dalam  bentuk amoniak.  Hal  ini  juga  diutarakan  oleh  Wijaksono (2016), bahwa penurunan kadar nitrogen disebabkan oleh  metabolisme  sel  yang  mengakibatkan  nitrogen hilang diudara bebas sebagai amoniak [19]. Selain itu nitrogen merupakan komponen penyusun protein dan 40-50% sel mikroorganisme terdiri dari protein [20]. Kandungan  nitrogen  pada  isolat  jamur  LBKURCC1 pada  penelitian  ini  apabila  dibandingkan  dengan standar  kualitas  kompos SNI  19-7030-2004   dengan batas  minimum  0,4%  telah  memenuhi  batas  kriteria kompos.  Damayanti  (2015)  menyatakan  bahwa penurunan  jumlah  nitrogen  dapat  dikarenakan  pada saat  proses  aerasi  sebagai  nitrogen  organik  sudah mulai  dimanfaatkan  oleh  mikroorganisme  dan mengubahnya  menjadi  amonia  (NH 3 )  yang  sifatnya mudah menguap ke udara. Kandungan nitrogen pada popok  bayi  setelah  fermentasi  30  hari  untuk  isolat pun  S-22  tidak  memenuhi  syarat  SNI  19-7030-2004 karena kurang dari 0,4%.
Hasil  analisis  karbon  dan  nitrogen  dari  masing- masing  popok  bayi  yang  telah  difermentasi  dapat dilihat dari Tabel 4.
Tabel 4. Hasil penentuan rasio C/N pada popok bayi yang difermentasi dengan isolat jamur LBKURCC1 dan  isolat bakteri S-22
Rasio  C/N  merupakan  hasil  perbandingan  antara karbohidrat  dan  nitrogen.  Rasio  C/N  tanah  sekitar 10-12. Apabila bahan organik mempunyai kandungan  C/N  mendekati  atau  sama  dengan  C/N tanah,  bahan  tersebut  dapat  digunakan  atau  diserap tanaman.  Prinsip  pengomposan  adalah  menurunkan rasio  C/N  bahan  organik  hingga  sama  dengan  C/N (<20).  Semakin  tinggi    C/N  bahan,  proses pengomposan  akan  semakin  lama  karena  C/N  harus diturunkan.  Waktu  yang  di  perlukan  untuk menurunkan  C/N  tersebut  bermacam-macam,  dari tiga bulan hingga mencapai  tahunan. Hal ini terlihat
dari  proses  pembuatan  humus  di  alam  dalam  proses pengomposan,  terjadi  perubahan  untuk  mengurangi atau menghilangkan kadar karbohidrat dan meningkatkan senyawa N yang larut (amonia) [21] . Kadar C-total  dan N-total  yang diperoleh digunakan untuk  menganalisis  rasio  C/N  untuk  melihat  tingkat kematangan  pengomposan  dari  residu  popok  bayi bekas  hasil fermentasi selama  30  hari  menggunakan isolat  jamur  LBKURCC1  dan  bakteri  S-22.  Rasio C/N  residu  popok  bayi  bekas  pada  selama  30  hari fermentasi  untuk  isolat  jamur  LBKURCC1  dan bakteri  S-22  jika  dibandingkan  dengan  parameter rasio  C/N  standar  kualitas  kompos  dalam  SNI  19- 7030-2004  tidak  memenuhi  syarat.  Spesifikasi kompos  dari  sampah  organik  domestik  dalam strandar  kualitas  kompos  SNI  19-7030-2004 memperlihatkan bahwa standar rasio C/N adalah 10- 20.  Tingginya  kadar  rasio  C/N  disebabkan  karena kandungan  karbonnya  yang  tinggi  sedangkan kandungan nitrogennya sangat rendah.
Menurut  Chalimatus.,  dkk  (2013)  tingginya  kadar rasio  C/N  yang  diperoleh  diduga  karena  proses perombakan  bahan  organik  belum  selesai  secara keseluruhan,  sehingga  nitrogen  yang  dihasilkan hanya sedikit yang menyebabkan proses dekomposisi akan  menjadi  lambat.  Haryati  (2016)  menambahkan semakin tinggi kandungan selulosa dan lignin bahan dasar  kompos,  maka  semakin  besar  nilai  rasio  C/N sehingga akan semakin sulit didekomposisi. Sebaliknya  semakin  rendah  kandungan  selulosa  dan lignin  maka  semakin  mudah  didekomposisi,  dan proses dekomposisi dapat berlangsung semakin cepat (Supadma,  2008)  [22].  Menurut  Djuarnani  (2005), apabila  rasio  C/N  kompos  yang  dihasilkan  tinggi, maka  dalam  tanah  akan  terjadi  imobilisasi  nitrogen dari  tanah  oleh  mikroorganisme,  sehingga  nitrogen menjadi  tidak  tersedia  dan  pertumbuhan  tanaman menjadi kurang bagus [23].

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan dapat  disimpulkan  bahwa pulp pada  popok  bayi bekas  dapat  didegradasi  oleh  jamur  selulolitik Trichoderma  asperellum LBKURCC1  dan  isolat bakteri  S-22  yang  dibuktikan  dari  adanya  aktivitas enzim  selulase  yang  dihasilkan.  Isolat  bakteri memiliki kemampuan mendegradasi pulp popok bayi bekas  lebih  baik  jika  dibandingkan  dengan  jamur karena  memiliki  aktivitas  selulolitik  yang  lebih tinggi.
Kadar  C-total,  N-total,  dan  rasio  C/N  residu  popok bayi  bekas  hasil  fermentasi  padat  selama  30  hari menggunakan jamur selulolitik LBKURCC1 berturut-turut sebesar 56,529%, 2,793%, dan  20,243 untuk  bakteri  selulolitik  S-22  berturut-turut  sebesar 57,719%,  0,090%  dan  642,046  belum  memenuhi parameter  standar  kualitas  kompos  dari  sampah organik  domestik  SNI  19-7030-2004  yakni  kadar  C sebesar  9,8-32%,  kadar  N  sebesar  0,4%,  dan  rasio C/N sebesar 10-20.
Waktu fermentasi Rasio C/N (hari) LBKURCC1 S-22 10 11,312±0,104  512,764  ± 6,560 20 6,162 ± 0,211  633,071 ± 91.842 30 20,243±0,531  642,046 ± 72,795

## DAFTAR PUSTAKA
1. Badan Pusat  Statistik.  2013.  Proyeksi penduduk  indonesia  2010-2035.  katalog  BPS: 2101018.  Badan  Pusat  Statistik,  Jakarta. Tersedia di:
http://www.bps.go.id/index.php/publikasi/16
2. Doraja,  P.H.  Shovitri,  M.,  Kuswytasari,  N.D. 2012.  Biodegradasi  limbah  domestik  dengan menggunakan  inokulum  alami  dari  tangki septik. Jurnal Sains Dan Seni ITS. 1(1) : 44-47.
3. Koto,  R.G.  2013.  Kecernaan  in  vitro  bahan kering  dan  bahan  organik  jerami  jagung  ( Zea Mays )  yang  di  inokulasi  dengan Trichoderma sp. pada  inkubasi  yang  berbeda. Skripsi . Fakultas  Pertanian  Universitas  Hasanuddin, Makassar
4. Lestari,  P.B.,  Hartati,  T.W.  2017. Mikologi Berbasis  Inkuiri .  Penerbit  Gunung  Samudera, Malang
5. Satyawiharja,  B.  1984. Fermentasi  Media Padat dan Manfaatnya . Dirjen Dikti, Jakarta.
6. Suhartono, M.  T. 1989. Enzim dan Bioteknologi. IUC-Bank Dunia XVII, Bogor.
7. Acharya,  P.B.,  Acharya  &  Modi,  H.  A.  2008. Optimazation  for  cellulose  production  by Aspergillus  niger  using  saw  dust  as  substrate. African journal of biotechnology. 22: 4147-52.
8. Damayanti,  N.  2015.  Biodegradasi  popok  bayi menggunakan  jamur  selulolitik Trichoderma asperellum LBKURCC1  dan  LBKURCC2 dengan fermentasi. Skripsi . FMIPA Universitas Riau, Pekanbaru.
9. Nugroho,  T.T.,  Ali,  M.,  Ginting,  C., Wahyuningsih,  Dahliaty,  A.,  Devi,  S., Sukmarisa,  Y.  2003.  Isolasi  dan  karakterisasi sebagian  kitinase Trichoderma  viride TNJ63. Jurnal Natur Indonesia 5 (2): 101-106. 10. Aminah,  S.,  Soedarso,  G.B.,  Sastro,  Y.  2003. Teknologi  Pengomposan .  Balai  Pengkajian Teknologi Pertanian, Jakarta. 11. Sawitri,  N.  2010.  Penentuan  beberapa parameter  produksi  kitenase Trichoderma asperellum LBKURCC1 dan LBKURCC2 pada berbagai  substrat  kitin. Skripsi. FMIPA
Universitas Riau, Pekanbaru. 12. Maniatis,  T.,  F.Frictch,  Sambrook.  1989. Molecular
Cloning.Cold spring harbor laboratory press, New York.
13. Poedjiadi,  A.  1994. Dasar  Biokimia .  UI  Press, Jakarta.
14. Putri, N.R. 2012. Penentuan temperatur dan pH optimum  selulase Trichoderma  asperellum LBKURCC1 dan LBKURCC2. Skripsi . FMIPA Universitas Riau, Pekanbaru. 15. Tobing,  E.L.  2009.  Studi  tentang  kandungan nitrogen,  karbon organik dan C/N dari kompos tumbuhan kembang
bulan ( Tithonia diversifolia ). Skripsi . FIMIPA USU.
16. Yuwono, T. 2005. Biologi Molekuler. Erlangga, Jakarta.9
17. Chalimatus,  H.,  Latifah,  Mahatmanti,  F.W. 2013. Efektifitas Jamur Trichoderma harzianum dalam  Pengomposan  Limbah  Sludge  Pabrik Kertas. Indonesian Journal of Chemical Science 2 (3): 224-229. 18. Yuliprianto,  H.  2010.  Biologi  Tanah  dan
Strategi Pengolahannya. Graha Ilmu,
Yogyakarta.
19. Wijaksono R.A., Subiantoro R., Utoyo B. 2016. Pengaruh  lama  fermentasi  pada  kualitas  pupuk kandang  kambing. Jurnal  Agro  Industri Perkebunan .  Politeknik  Negeri  Lampung, Bandar Lampung.
20. Siregar  S.A.  2005. Instalasi  Pengolahan Limbah . Penerbit Kanikus, Yogyakarta.
21. Indriani,  H.Y.  2011. Membuat  Kompos  Secara Kilat . Penebar Swadaya, Jakarta.
22. Supadma,  A.A.N    Arthagama  ,  &    D.E.  2008. Uji  formulasi  kualitas  pupuk  kompos  yang bersumber  dari  sampah  organik  dengan penambahan limbah ternak ayam, sapi, babi dan tanaman  pahitan. Jurnal  Bumi  Lestari,  8 (2):
113-121.
23. Djunarnani,N.  Kristian,  Setiawan,  B.S.  2012. Cara  cepat  membuar  kompos .  Agromedia pustaka. Jakarta.