Uji Aktivitas Antidiabetes Infusa Daun Kemuning ( Murraya Paniculata L Jack.) Pada Mencit Putih Jantan Yang Diinduksi Glukosa
Antidiabetic activity of Kemuning (Murraya Paniculata L Jack.) Water Extract In Glucose- Induced Diabetic Mice
Sri Rejeki Handayani 1 , Pramesti Tiwi Mahanani 2
Universitas Setia Budi 1 2 handayanijeki@yahoo.co.id
Abstract :  Orange  Jessamine  or  Kemuning  (Murraya  Paniculata  L.  Jack)  is  known  to  be  useful  treat various  diseases,  one  of  which  is  diabetes  mellitus.  This  study  aimed  to  determine  the  antidiabetic activity of kemuning infusion on glucose-induced male white mice and find out the most effective dose. Kemuning  dry  leaves  were  extracted  using  a  water  solvent  by  the  infusion  method.  The  antidiabetic test  was  carried  out  using  the  glucose  tolerance  method.  Test  animals  were  divided  into  5  groups, each  group  consisting  of  5  mice.  Group  I  (diabetes  control)  CMC  0.5%,  group  II  (drug  control) glibenclamide,  group  III  (2,5%  of  infusion  of  kemuning  leaves),  group  IV  (5%  infusion  of  kemuning leaves), and V (10% of infusion leaves). Measurement of glucose levels was carried out 4 times every 30 minutes. The obtained data were then analyzed by ANOVA with a confidence level of 95% followed by a Post Hoc test. The results showed that infusion of yellow leaves had antidiabetic activity in male white  mice  given  a  glucose  load.  The  effective  dose  of  infusion  of  yellow  leaves  which  gives  an antidiabetic effect is a concentration of 5%.
Key words : kemuning leaves, infusion, antidiabetic .
Abstrak :  Tanaman  kemuning  ( Murraya  Paniculata L.  Jack)  merupakan  salah  satu  tanaman  yang dapat  digunakan  sebagai  obat  untuk  mengatasi  berbagai  macam  penyakit,  salah  satunya  diabetes melitus.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antidiabetes  infus  daun  kemuning terhadap mencit putih jantan yang diinduksi glukosa serta mengetahui dosis yang paling efektif. Kemuning  diekstrasi  menggunakan  pelarut  air  dengan  metode  infus.  Metode  uji  antidiabetes menggunakan  metode  toleransi  glukosa.  Hewan  uji  dibagi  5  kelompok,  tiap  kelompok  terdiri  dari  5 ekor  mencit.  Kelompok  I  (kontrol  diabetes)  CMC  0,5%,  kelompok  II  (kontrol  obat)  glibenklamid, kelompok  III  (infus  daun  kemuning  konsentrasi  dosis  2,5%),  kelompok  IV  (infus  daun  kemuning konsentrasi  dosis  5%),  dan  V  (infus  daun  kemuning  konsentrasi  dosis  10%).  Pengukuran  kadar glukosa  dilakukan  pada  menit  ke-30,  ke-60,  ke-90,  ke-120.  Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan statistik ANOVA dengan taraf kepercayaan 95% dilanjutkan dengan uji Post Hoc test. Hasil penelitian menunjukkan bahwa infus daun kemuning mempunyai aktivitas antidiabetes pada mencit putih jantan yang  diberi  beban  glukosa.  Dosis  efektif infus  daun  kemuning  yang  memberi  efek  antidiabetes  yaitu konsentrasi dosis 5%.
Kata kunci: Daun kemuning, infus, antidiabetes.

## I.  Pendahuluan
Kasus  penderita  diabetes  melitus  setiap tahunnya  terus  meningkat,  lebih  dari  425  juta orang  di  dunia  menderita  diabetes  melitus  pada tahun  2017  dan  diperkirakan  akan  meningkat diseluruh  dunia  pada  tahun  2045  menjadi  629 juta  penderita.  Indonesia  menempati  urutan ketiga  di  dunia  untuk  jumlah  penderita  diabetes melitus  (IDF  2017).  Penyakit  ini  menyebabkan perubahan  patofisiologis  multiorgan  yang  dapat menurunkan  kualitas  hidup  penderita  dan meningkatkan morbiditas dan mortalitas. Diabetes  melitus  yang  tidak  terkontrol  akan meningkatkan  progresivitas  terjadinya  berbagai komplikasi  kronik,  baik  mikroanglopati  maupun makroanglopati (Iyos & Astuti, 2017).
Peningkatan
kadar glukosa
darah
(hiperglikemia)  dapat  diturunkan  dengan  bahan obat  sintetis  (kimia)    seperti  penggunaan  obat golongan sulfonilurea dan biguanida. Hiperglikemia  juga  dapat  diturunkan  dengan obat-obat  yang  berasal  dari  bahan  alam. Penggunaan bahan obat yang berasal dari alam dilaporkan  lebih  aman  dibandingkan  dengan obat  sintetis  karena memiliki  efek  samping  yang minimal.
Salah  satu  tanaman  yang  memiliki  banyak khasiat yaitu daun kemuning ( Murraya Paniculata L.  Jack).  daun  kemuning  memiliki khasiat, antara lain sebagai obat untuk kolesterol, analgetik, memiliki aktivitas antimikroba,  antioksidan  (Gill.  N  et  al,  2014). Telah  lama  buah  mengkudu  secara  empiris  dan melalui  penelitian  bermanfaat  bagi  kesehatan manusia  (Wahyuni,  2008).  Dari  penelitian  Setya (2017), hasil fitokimia dalam biji mengkudu positif terdapat  alkaloid,  saponin,  tanin  dan  glikosida jantung.  Senyawa  fitokimia  tersebut  dapat dimanfaatkan sebagai insektisida nabati.
Penelitian  ini  dirancang  untuk  menguji kemampuan dari ekstrak biji mengkudu ( Morinda citrifolia )  sebagai  penolak  gigitan  nyamuk  dan larvasida.  Dalam  penelitian  ini  juga  mengevaluasi kemampuan  patologis  dari  ekstrak  terhadap  jaringan larva.  Perubahan  jaringan  kutikula  dan  usus  larva dibandingkan  dengan  kontrol  dan  dilaporkan  sebagai data histopatogenik.
Menurut  penelitian  Gautama  MK  et  al  (2012) daun  kemuning  sebagai  antidiabetes  dengan potensi antioksidan yang dimiliki. Selain antioksidan  sebagai  antidiabetes,  senyawa  lain yang berhubungan dengan antidiabetes menurut
penelitian  Iyos  dan  Astuti  (2017)  yaitu  senyawa flavonoid  dan  tanin.  Flavonoid  memiliki  efek hipoglikemik  dengan  beberapa  mekanisme  yaitu dengan menghambat absorpsi glukosa, meningkatkan  toleransi  glukosa,  merangsang pelepasan  insulin  atau  bertindak  seperti  insulin, meningkatkan  ambilan  glukosa  oleh  jaringan perifer  serta  mengatur  enzim-enzim  yang berperan  dalam  metabolisme  karbohidrat.  Tanin mampu  menurunkan  kadar  glukosa  darah dengan  cara  meningkatkan  ambilan  glukosa. Menurut  Cahyanto  dan  Supriyatna  (2013) saponin  juga  merupakan  senyawa  yang  dapat digunakan sebagai antidiabetes.

## II.  Metode Penelitian

## Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini, alat untuk  membuat  sediaan  infus  daun  kemuning adalah timbangan analitik, panci infus, termometer,  pemanas  (kompor),  beker  glass, batang  pengaduk,  kain  flanel,  corong  kaca.  Alat untuk  mengukur  kadar  gula  darah  antara  lain glukometer,  glucose  strip  test,  jarum  suntik  oral, neraca analitik, kandang mencit.

## Bahan
Bahan  sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  daun  kemuning.  Bahan untuk  infus  digunakan  dalam  proses  penyarian yaitu  aquadest,    baban  penginduksi  yaitu glukosa, obat pembanding glibenklamid, sebagai kontrol diabetes yaitu CMC Na.
Hewan  uji  yang  digunakan  dalam  penelitian ini adalah mencit putih jantan, berumur 2-3 bulan dengan berat badan 20-40 gram.

## Pengambilan Sampel
Daun  kemuning  yang  diambil  di  daerah Sukoharjo,  Jawa  Tengah,  pengambilan  secara acak  dengan  keadaan  daun  segar  yang berwarna  hijau,  bebas  dari  hama.  Selanjutnya dilakukan determinasi terhadap kebenaran sampel  dari  daun  kemuning  yang  digunakan. Determinasi  dilakukan  di  UPT  Laboratorium Biologi  Fakultas  MIPA  Universitas  Sebelas Maret, Surakarta.
Daun  kemuning  dilakukan  sortasi  dan dikeringkan  dengan  cara  dijemur  (tidak  dengan matahari  langsung)  sampai  didapatkan  daun kering.  Daun  yang  telah  kering  kemudian  dibuat
serbuk  dengan  cara  diserbukan  menggunakan alat dan diayak dengan ayakan no. 40.

## Pembuatan Infusa
Infusa  daun  kemuning  dibuat  dengan  cara menimbang  serbuk  simplisia  daun  kemuning sebanyak  10  g.  Kemudian  dimasukkan  dalam panci  infusa,  ditambahkan  air  sebanyak  100  ml (+2x  bobot  simplisia).  Panci  infus  dipanaskan selama  15  menit  terhitung  dari  suhu  mencapai 90ºC, kemudian disaring dengan kain flanel.

## Uji Antidiabetes
Mencit  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini sebanyak  25  ekor  yang  terbagi  dalam  5 kelompok  uji.  Masing –masing  kelompok  terdiri dari 5 ekor mencit.
Mencit putih jantan yang masing-masing telah ditimbang dan dikelompokkan, dipuasakan makan selama 16 jam. Pengambilan darah awal dilakukan  sebelum mencit  diberi  perlakuan  yang diambil  darah  melalui  vena  lateralis  ekor  mencit (T0).  Setelah  itu  mencit  diberikan  perlakuan  per oral.  Kelompok  (I)  merupakan  kontrol  negatif diberikan  CMC  Na  0,5%;  kelompok  (II)  kontrol positif  diberikan  glibenklamid  0,01%;  kelompok (III)  infus  daun  kemuning  konsentrasi  dosis 2,5%;  kelompok  (IV)  infus  daun  kemuning konsentrasi  dosis  5%  dan  kelompok  (V)  infus daun kemuning konsentrasi dosis 10%. 30 menit setelah  perlakuan  masing-masing  kelompok, kemudian diberikan induksi glukosa dosis 2 g/kg BB  mencit.  Pengamatan  dilakukan  setelah pemberian  glukosa,  pada  menit  ke-30,  60,  90, dan  120.  Sampel  darah  diambil  dari  ekor mencit dengan  menusukkan  jarum  pada  bagian  ekor hewan uji, kemudian darah diteteskan pada strip glukometer  dan  dimasukkan  dalam  glukometer untuk dibaca kadar gula darahnya.

## Analisis
Analisis data yang digunakan dalam penelitian ini menggunakan ANOVA. Uji ANOVA digunakan  untuk  mengetahui  ada  tidaknya perbedaan rerata kadar gula darah sebelum dan sesudah perlakuan. Jika terjadi beda nyata pada faktor  perlakuan  pada  selang  kepercayaan  95% dilanjutkan dengan uji Post Hoc Tests.
III. Hasil
Penelitian  ini bertujuan untuk  menguji aktivitas antidiabetes dan dosis efektif dari infusa
daun  kemuning.  Daun  kemuning  yang  telah diperoleh  dikeringkan  dan  diinfusa  dengan pelarut air pada suhu 90 0 C selama 15 menit. Pada  penelitian  ini  dilakukan  dengan metode toleransi  glukosa.  Sebelum  perlakuan  masing- masing  mencit  dipuasakan  selama  kurang  lebih 16  jam.  Puasa  dilakukan  untuk  memperoleh kadar glukosa awal.
Hewan  percobaan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  mencit  putih  jantan, berumur  2-3  bulan  dengan  berat  sekitar  20-40 gram.
Obat  pembanding  yang  digunakan  yaitu glibenklamid.  Glibenklamid  memilki  mekanisme kerja dengan cara berikatan dengan reseptornya dipankreas  yang  menyebabkan  kanal  kalium tertutup dan selanjutnya terjadi depolarisasi yang menyebabkan  kanal  kalium  terbuka,  ion  kalium yang  masuk  ke  dalam  granula  insulin  untuk melepaskan  insulin  sehingga  dapat menurunkan kadar glukosa darah (Hananti dkk, 2012)
Pada  penelitian  ini  pemberian  sediaan dilakukan  30  menit  sebelum  diberikan  beban induksi  glukosa.  Hal  ini  bertujuan  untuk  melihat mekanisme  kerja  dari  infusa  daun  kemuning dalam  memberikan  efek  penurunan  kadar glukosa darah. Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan  setelah  pemberian  beban  glukosa pada  menit  ke-30,60,90,  dan  120.  Pengukuran dilakukan  dengan  menggunakan  alat  ukur glukosa  darah  Glukometer  Easy  Touch  GCU. Perubahan  kadar  glukosa  darah  dapat  dilihat pada tabel 1.
Berdasarkan  tabel  1  menunjukkan  bahwa persentase  penurunan  kadar  glukosa  darah paling  besar  yaitu  pada  kelompok  II  sebagai kontrol  obat  (glibenklamid).  Pada  kelompok perlakuan,  menunjukkan  bahwa  makin  besar dosis,  makin  besar  persentase  penurunan  kadar glukosa darah.
Data  rata-rata  kadar  glukosa  darah  (tabel  2) pada menit ke-60 hingga menit ke-120 kelompok
II  (kontrol  obat)  dan  kelompok  V  (infusa  daun kemuning  konsentrasi  dosis  10%)  terdapat perbedaan  secara  bermakna  (p<0,05)  terhadap kelompok  I  (kontrol  diabetes).  Sedangkan Kelompok IV (infusa daun kemuning konsentrasi dosis  5%)  terdapat  perbedaan  secara  bermakna terhadap  kelompok  I,  pada  menit  ke-90  hingga ke-120. Untuk melihat kemampuan infus kemuning  dalam  menurunkan  kadar  glukosa darah  dilakukan  uji  statistik  dari  rata-rata  kadar glukosa  darah.  Dari  hasil  statistik  (tabel  2) menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan  bermakna (p<0,05)  pada  kelompok  II,  IV,  dan  V dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  negatif. Sedangkan  pada  kelompok  III  tidak  ada perbedaan  bermakan  terhadap  kelompok  I,  hal ini  menunjukkan  bahwa  infusa  daun  kemuning dengan  dosis  2,5%  belum  mampu  menurunkan kadar glukosa darah secara bermakna.
Kemampuan  infus  daun  kemuning  sebagai antidiabetes  ini  dikarenakan  adanya  kandungan senyawa  yang  terdapat  dalam  daun  kemuning antara  lain  minyak  atsiri,  alkaloid,  flavonoid, saponin,  tanin,  damar.  Kandungan  senyawa yang  diduga mampu menurunkan  kadar  glukosa darah  yaitu  flavonoid  dan  tanin  (Iyos  dan  Astuti, 2017)  serta  saponin  (Cahyanto  dan  Supriyatna,
2013).  Flavonoid  memiliki  efek  hipoglikemk dengan  beberapa  mekanisme  yaitu  dengan menghambat  absorpsi  glukosa,  meningkatkan toleransi glukosa, merangsang pelepasan insulin atau  bertindak  seperti  insulin,  meningkatkan ambilan  glukosa  oleh  jaringan  perifer  serta mengatur  enzim-enzim  yang  berperan  dalam metabolisme karbohidrat. Tanin mampu menurunkan  kadar  glukosa  darah  dengan  cara meningkatkan ambilan glukosa. Saponin sebagai inhibitor enzim α-glukosidase yang menghambat pemecahan karbohidrat menjadi glukosa.

## IV. SIMPULAN
1.  Infusa Daun kemuning ( Murraya
Paniculata  L  Jack.) dalam  penelitian  ini mempunyai  efek  menurunkan  kadar glukosa  darah  terhadap  mencit  putih jantan yang diinduksi glukosa. 2.  Infusa Daun Kemuning ( Murraya Paniculata  L  Jack.) dengan  konsentrasi dosis  5%  merupakan  dosis  efektif  yang dapat menurunkan kadar glukosa

## DAFTAR PUSTAKA
Indonesia.  2014. Situasi  dan  Analisis  Diabetes .
Jakarta: Kemenkes RI.
[ADA]  American  Diabetes  Association.2010. Diagnosis  and  Classification  of  Diabetes Mellitus. Diabetes Care ; 34:s62-9.
[IDF]  International  Diabetes  Federation.  IDF Diabetes  Atlas  8th  ed.  2018.  [Diakses  1 Mei, 2018].
Cahyanto  H.A,  Supriyatna  N.  2013.  Aktivitas
Antidiabetes  Ekstrak  Daun  Tabat  Barito (Ficus  deltoidea.  Jack)  pada  tikus  wistar.
Biopropal Industri 4:14-21
Da costa EMJ.  2016. Aktivitas Antihiperglikemia
Ekstrak  Etanol  Buah  Sirsak  ( Annona muricata  Linn .)  Terhadap  Tikus  Putih Jantan  Galur  Wistar  yang  Diinduksi Aloksan.  [ SKRIPSI ]  Surakarta:  Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi. Gautama  MK,  Gupta  A,  Vijaykumar  M.  Rao  CV, Goel RK. 2012. Studies on the hypoglycemic effects of Murraya paniculata Linn. extract on alloxan-induced oxidative  stress  in  diabetic  and  non- diabetic  models. Asian  Pasific  Journal  of Tropical Disease S186-S191.
Gill  N, Kaur  N,  Arora  R.  2014.  An Overview  On:
Murraya  paniculata  Linn.  Department  Of
Pharmaceutical  Chemistry.  Rayat  Institute Of Pharmacy.
Iyos  RN,  Astuti  PD.  2017.  Pengaruh  Ekstrak
Daun Sirsak (Annona muricata. L) terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah.  Lampung:  Fakultas  Kedokteran Universitas Lampung 6:144-148