Ritna et al./Galenika Journal of Pharmacy

## IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOID PADA FRAKSI ETIL ASETAT BENALU BATU( Begonia sp.) ASAL KABUPATEN MOROWALI UTARA
IDENTIFICATION OF FLAVONOID COMPOUNDS IN ETHYL ACETATE FRACTION OF BENALU BATU (Begonia sp.) ORIGINATED FROM NORTH MOROWALI REGENCY
Agus Ritna 1* , Syariful Anam 1 , Akhmad Khumaidi 1
1 Jurusan Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu, Indonesia

## ABSTRAK
Tumbuhan  Benalu  Batu  ( Begonia sp.)  dari  familia  Begoniaceae  merupakan  tanaman  yang  digunakan oleh  masyarakat  Morowali  Utara  untuk  mengobati  tumor  dan  kanker.Secara  umum  tumbuhan  Benalu  Batu ( Begonia sp.)  memiliki  senyawa  saponin,  tanin,  flavonoid  dan  polifenol.Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengidentifikasi  senyawa  flavonoid  fraksi  etil  asetat  benalu  batu  ( Begonia sp.).Simplisia  diekstraksi  dengan metode maserasi dan dipartisi dengan meggunakan n -heksana, etil asetat dan air.Ekstrak etil asetat difraksinasi dengan  sembilan  perbandingan  eluen,  metode  pemisahan  yang  digunakan  adalah  kromatografi  cair  vakum (KCV)  dan  kromatografi  lapis  tipis  preparatif  (KLTP).Didapatkan  satu  fraksi  yang  diduga  memiliki  senyawa flavonoid  setelah  dilakukan  uji  pereaksi  warna  dengan  metode  Shinode  dan  Pew.Hasil    Spektroskopi Ultraviolet-Visible dengan menggunakan pelarut metanol pada rentang panjang gelombang 200-550 nm,  isolat menunjukkan puncak serapan pada 275 nm (puncak 1) dan 225 nm (puncak 2). Berdasarkan panjang gelombang senyawa  flavonoid  yang  dikandung  fraksi  benalu  batu  ( Begonia sp.)  menunjukkan    kemiripan  dengan  puncak serapan  jenis  flavan-3-ol atau flavanol.
Kata kunci : Begonia sp., Flavonoid, Fraksi etil asetat, flavanol.

## ABSTRACT
Benalu  Batu Plant (Begonia sp.)  in  family  Begoniaceae  is  a  plant  used  by  the  people  of  North Morowali to treat tumors and cancers. It generally contains saponins, tannins, flavonoids and polyphenols. This research aimed to identify flavonoid compounds contained in ethyl acetate fraction of Begonia sp. The simplicia was  extracted  using  maceration  method  and  partitioned  using  n-hexane,  ethyl  acetate  and  water.  The  Ethyl acetate  extract  was  then  fractionated  by  nine  eluent  combinations  using  separation  method  ofVacuum  Liquid Chromatography  (VLC)  and  Preparative  Thin  Layer  Chromatography  (Prep  TLC).  One  fraction  was  obtained and  was  suspected  to  contain  flavonoid  compounds  after  Shinode  and  Pew  color  reagent  test. In  the  result  of Ultraviolet-Visible  Spectroscopy  with  methanol  at  wavelength  range  of  200-550  nm,  the  isolates  showed absorption peaks  at 275 nm (peak 1) and 225 nm  (peak 2). Based on the wavelength of  flavonoid compounds contained in the fraction, Begonia sp.showed similarities to the absorption peak of flavan-3-ol or flavanols.
Keywords : Begonia sp., Flavonoids, ethyl acetate fraction, flavanols.
October 2016

## PENDAHULUAN
Tumbuhan  Benalu  Batu  ( Begonia sp . ) asal  Kab.  Morowali  Utara,  Sulawesi  Tengah, merupakan salah satu tumbuhan yang digunakan  secara  empiris  oleh  masyarakat untuk mengobati berbagai penyakit. Masyarakat  menggunakan  tanaman  ini  untuk pengobatan tumor, kanker (Novriawan,  2009).
Penelitian yang telah dilakukan menyatakan  bahwa  ekstrak  metanol  Benalu Batu ( Begonia sp.) aktif menghambat pertumbuhan  sel  kanker  dengan  memberikan efek  hambatan  pertumbuhan  sel  kanker payudara  (T47D)  dengan  nilai  IC 50 =  122,21 µg/ml.  Selain  itu  uji  antikanker  mulut  rahim dengan menggunakan sel kanker HeLa ekstrak metanol  dapat  menghambat  pertumbuhan  sel kanker  HeLa  dengan  nilai  IC 50 =  70,97  µg/ml (Anam dkk, 2014)
Hasil  uji  skrining  fitokimia  terhadap ekstrak  metanol    benalu  batu  ( Begonia sp.) diketahui positif mengandung senyawa golongan flavonoid (Anam,
dkk, 2014).Senyawa  flavonoid  diduga  memiliki peran  dalam  menghambat  sel  kanker  T47D dan  sel  HeLa.  Oleh  karena  itu  penelitian identifikasi terhadap golongan senyawa flavonoid dari fraksi etil asetat  ekstrak Benalu Batu ini perlu untuk dilakukan.

## BAHAN DAN METODE Bahan
Sampel  yang  digunakan  merupakan  tumbuhan Benalu  Batu  ( Begonia sp.)  yang  diambil  di desa  Wawopada  kabupaten  Morowali  Utara. Bahan  yang  digunakan  adalah  pelarut  etanol 96%,  metanol, n -heksana,  etil  asetat,  air suling,  lempeng  KLT  F 254 (MERCK),  serbuk silika  gel  60  PF 254 (MERCK),    serbuk  silika GF 254 (MERCK),  Aluminium  klorida,  serbuk magnesium dan serbuk zink.

## Alat
Gelas  ukur,  gelas  kimia,  bejana  maserasi, chamber  KLT,  neraca  analitik  ( CITIZEN ® ), timbangan gram ( OHAUS ® ), hot plate, vacuum rotary  evaporator  (EYELA ® ), cawan  porselen, oven,  sentrifuge  (C2  SERIES),  lampu  UV 245nm dan 366 nm (CAMAG),dan spektrofotometer UV-Vis (UNICO).
Identifikasi Tumbuhan Sampel tumbuhan yang digunakan diidentifikasi  di  Unit  Pelaksana  Teknis  (UPT)
Sumber  Daya  Hayati  Sulawesi  Tengah Universitas Tadulako Palu.

## Penyiapan Ekstrak Uji
Tumbuhan Begonia sp  dicuci  dengan  air mengalir hingga bersih, dirajang lalu dikeringkan. Simplisia 228,98 gram
diserbukkan lalu dimaserasi dengan menggunakan  pelarut  etanol  96%  sebanyak 2400  ml  selama  3x  24  jam  lalu  diuapkan menggunakan vacuum  rotary  evaporator pada suhu  pemanasan  65 o C  sehingga  didapatkan ekstrak kental.

## Partisi
Ekstrak  etanol  10  gram  dilarutkan  dengan etanol  10  ml  dan  air  suling  sebanyak  20  ml. Kemudian  dipartisi  dengan  30  ml  pelarut n - heksana  dalam  corong  pisah  sebanyak  6  kali, dan  ekstrak n -heksana  diuapkan  dengan vacuum  rotary  evaporator sehingga  diperoleh ekstrak kental n -heksana. Dengan menggunakan  jumlah  pelarut  yang  sama selanjutnya  residu  dipartisi  dengan  pelarut  etil asetat.    Setelah  itu  ekstrak  etil  asetat  dan ekstrak  air  diuapkan  pelarutnya  hingga diperoleh ekstrak kental etil asetat dan air.

## Uji Pereaksi Warna
 Metode shinode, 1 ml  dari ekstrak etil asetat  dan  n-heksana  yang  dilarutkan dengan  etanol  96%  ditambahkan  100 mg serbuk magnesium, dan diteteskan 0,5 ml asam klorida pekat.
 Metode  Pew,  1  ml  dari    ekstrak  etil asetat  dan  n-heksana  yang  dilarutkan dengan etanol 96 %, ditambahkan 400 mg  lempeng  zinkdan  diteteskan    2 tetes  asam  klorida  2  N  dan  asam klorida  pekat  sebanyak  0,5  ml.  Uji shinode dan pew tidak dilakukan pada ekstrak air.

## Fraksinasi  dengan  Kromatografi  Cair Vakum (KCV)
Sampel  1  gram  dilarutkan  dengan  eter  dan dipreabsorbsi  dengan  silika  gel  GF 254 hingga homogen  dan  kering.  Dimasukkan  ke  dalam kolom  yang  terisi  dengan  silika  lalu  dielusi menggunakan pelarut yang kepolaran semakin meningkat  yaitu  dengan n -heksana, n -heksana :  etil  asetat  (3:2), n -heksana  :  etil  asetat  (1:4), etil asetat, etil asetat : metanol (4:1), etil asetat : metanol  (3:2), etil  asetat : metanol  (2:3), etil asetat : metanol (1:4) dan metanol.

## Identifikasi  dengan  Pereaksi  Semprot  pada Lempeng KLT
Hasil fraksinasi ditotolkan pada lempeng KLT dan  disemprot  dengan  pereaksi  AlCl 3 .  Elusi dilakukan  menggunakan  perbandingan  eluen etil  asetat  :  metanol  (3:2)  yang  memberikan profil KLT yang terbaik.

## Isolasi dengan KLTP
hasil  fraksinasi  dilarutkan  dan  ditotolkan  pada lempeng  KLTP  kemudian  lempeng  kaca  hasil penotolan  dikeringkan  dan  selanjutnya  dielusi dengan  etil  asetat  :  metanol  (3:2).  Setelah dilakukan  pengembangan,  pita  yang  terbentuk dikerok  dan  dipisahkan  dari  silika  gel  yang masih terikat.

## Uji kemurnian isolat
Isolat flavonoid yang diperoleh diuji kemurniaannya  dengan  metode  elusi  sistem multi  eluen.  Isolat  flavonoid  ditotolkan  pada lempeng
KLT, selanjutnya dielusi menggunakan n -heksana  :  kloroform  :  etil asetat (6 : 1,5 : 1), n -heksana: kloroform (3:1), dan n -heksana : etil asetat (4:1).

## Spektroskopi senyawa isolat
Isolat  murni  yang  merupakan  senyawa flavonoid  dilarutkan  dalam  metanol  kemudian diamati
pola
spektrumnyamenggunakanspektrofotometer
UV-Vis pada rentang panjang gelombang 200- 550 nm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Identifikasi Tanaman
Identifikasi  yang  dilakukan  di  Unit  Pelaksana Teknis  (UPT)  Sumber  Daya  Hayati  Sulawesi
Tengah Universitas Tadulako Palu, menyatakan  bahwa  sampel  yang  digunakan untuk penelitian merupakan tumbuhan Begonia sp.

## Pembuatan ekstrak uji
Serbuk simplisia Begonia sp. sebanyak 228,98 gram dimaserasi dengan menggunakan pelarut etanol 96%. Hasil ekstraksi maserasi didapatkan ekstrak etanol 14,5 gram.
Partisi Ekstrak etanol Begonia sp. dipartisi menggunakan  dua  pelarut  yang  mempunyai tingkat kepolaran berbeda yaitu n -heksana, etil asetat  dan  air.Diperoleh  ekstrak  kental n - heksana  sebanyak  3,40  gram  dengan  persen rendemen  34%,  ekstrak  kental  etil  asetat  1,05 gram    dengan  persen  rendemen  10,5%    dan ekstrak  air  yang  tersisa  adalah  3,16  gram dengan persen rendemen  31,6%.

## Uji pereaksi warna ekstrak hasil partisi
Ekstrak  larut n -heksana  dan  ekstrak  larut  etil asetat dikumpulkan, lalu diuji dengan menggunakan  reaksi  Shinoda  dan  reaksi  Pew. Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  dapat  dilihat padaTabel 1
Tabel 1 Hasil uji fitokimia dengan pereaksi warna ekstrak n-heksana dan etil asetat
partisi Reaksi shinode Ket. Reaksi pew Ket. n-heksana Hijau kehitaman - Hitam - Etil asetat merah + Merah, keunguan + air ND ND ND ND Ket :
ND : tidak dilakuakn
Fraksinasi dengan kromatografi cair vakum (KCV)
Setelah  proses  elusi  selesai  diperoleh  delapan fraksi  yaitu F2-F9 dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel  2  hasil  pemisahan  ekstrak  etil  setat Begonia sp.
Fraksi Fraksi etil asetat Bobot fraksi (gram) Persen rendam en F1 Heksan 0 0 % F2 Heksan : etil asetat (30:20) 0,12 12% F3 Heksan : etil asetat (10:40) 0,08 8% F4 Etil asetat  (50) 0,13 13% F5 Etil asetat : metanol (40:10) 0,15 15% F6 Etil asetat : metanol (30:20) 0,16 16% F7 Etil asetat : metanol (20:30) 0,09 9% F8 Etil asetat : metanol (10:40) 0,12 12% F9 Metanol (50) 0,13 13% Persen recovery 0,98 98%

## Identifikasi Dengan Pereaksi Semprot Pada Lempeng KLT
a b c d
Gambar 1  KLT Hasil kromatografi cair vakum dan penyemprotan dengan AlCl 3 5 % ;fase diam silica gel F 254 dan  eluen yang digunakan adalah n-heksan:etil asetat (4:1), pada jarak elusi 8 cm.
a. Visualisasi KLT pada lampu UV 254 nm
b. Visualisasi KLT pada lampu UV 366 nm
c. Visualisasi KLT setelah penyemprotan AlCl 3 pada lampu UV 254 nm
d. Visualisasi KLT setelah penyemprotan AlCl 3 pada lampu UV 366nm
Tabel 3 Hasil uji pereaksi warna hasil fraksi etil asetat Benalu Batu ( Begonia sp.) Fraksi Fraksi etil asetat Reaksi Shinode Reaksi Pew Ket. F2 Heksan : etil asetat (30:20) Hijau, kecoklatan Hijau _ F3 Heksan : etil asetat (10:40) Hijau, hitam Hijau _ F4 Etil asetat  (50) Hijau Hijau _ F5 Etil asetat : metanol (40:10) Coklat Hijau, kecoklatan _ F6 Etil asetat : metanol (30:20) Merah bata Merah bata, keunguan + F7 Etil asetat : metanol (20:30) Cokelat muda Hijau muda _ F8 Etil asetat : metanol (10:40) Cokelat Hijau bening _ F9 Metanol (50) Cokelat keruh Hijau bening _

## Uji Kemurnian Isolat
Dari pengamatan  pada lempeng KLT  setelah  dielusi dengan tiga perbandingan  eluen dengan kepolaran yang berbeda, noda terlihat tunggal Seperti pada gambar 3.
a b c d e f
Gambar2  Hasil identifikasi senyawa tunggal dengan menggunakan kromatografi lapis tipis multieluen.Fase diam silica gel F 254 ,  Pada jarak elusi 8 cm.
a. Penampakan KLT multi eluen n -heksan : kloroform : etil asetat (6 : 1,5 : 1) pada lampu UV 254 b. Penampakan KLT multi eluen n -heksan : kloroform : etil asetat (6 : 1,5 : 1) pada lampu UV 366
c. Penampakan KLT multi eluen n -heksan:kloroform (3:1) pada lampu UV 254 nm
d. Penampakan KLT multi eluen n -heksan:kloroform (3:1) pada lampu UV 366 nm
e. Penampakan KLT multi eluen n -heksan:etil asetat (4:1) pada lampu UV 254 nm
f. Penampakan KLT multi eluen n -heksan:etil asetat (4:1) pada lampu UV 366 nm

## Analisis Spektrofotometri UV-Vis Isolat

## Pembahasan
Serbuk  simplisia Begonia sp.  sebanyak 228,98 gram dimaserasi dengan menggunakan pelarut  etanol  96%.  Pemilihan  etanol  sebagai pelarut  didasarkan  pada  etanol  bersifat  lebih selektif  pada  senyawa  metabolit  sekunder, tidak mudah ditumbuhi jamur dan bakteri pada etanol,  tidak  beracun,  tidak  bereaksi  dengan komponen  yang  diekstraksi,  absorbsinya  baik, tidak  membutuhkan  waktu  yang  lama  dalam pemekatan  ekstrak.  Selain  itu,  pelarut  etanol dapat  mengektraksi  senyawa  flavonoid  yang tergolong  dalam  senyawa  polar  sehingga  akan lebih  mudah  larut  dalam  pelarut  polar (Markham,1988).  Senyawa  flavonoid  tidak tahan terhadap pemanasan dan mudah teroksidasi  pada  suhu  yang  tinggi  (Lenny, 2006),    sehingga  digunakan  metode  ekstraksi maserasi.  Hasil  ekstraksi  maserasi  didapatkan ekstrak etanol 14,5 gram.
Ekstrak  etanol Begonia sp.  dipartisi menggunakan  dua  pelarut  yang  mempunyai tingkat kepolaran berbeda yaitu n -heksana, etil asetat  dan  air.Hal  ini  bertujuan  untuk memisahkan kelompok senyawa yang kepolarannya  rendah  ke  pelarut n -heksana, kelompok  senyawa  yang  kepolarannya  sedang ke  pelarut  etil  asetat  dan  yang  kepolaranya tinggi  ke  air.  Sepuluh    gram  ekstrak  kental etanol  benalu  batu  terlebih  dahulu  dilarutkan ke  dalam  10  ml  etanol  dan  air  20  ml.  Partisi dilakukan  sebanyak  6  kali  dengan  jumlah pelarut  30  ml  untuk  masing-masing  pelarut n - heksana dan etil asetat. Pelarut n -heksana akan memisahkan senyawa-senyawa nonpolar seperti  klorofil,  triterpen,  lemak,  dan  senyawa non  polar  lainnya  sehingga  memudahkan untuk mendapatkan senyawa flavonoid.Diperoleh  ekstrak  kental n -heksana sebanyak  3,40  gram  dengan  persen  rendemen 34%,  ekstrak  kental  etil  asetat  1,05  gram dengan  persen  rendemen  10,5%    dan  ekstrak air  yang  tersisa  adalah  3,16  gram  dengan persen rendemen  31,6%.
Ekstrak larut n -heksana dan ekstrak larut etil  asetat  dikumpulkan,  lalu  diuji  dengan menggunakan  reaksi  Shinoda  dan  reaksi  Pew untuk  memastikan  ada  maupun  tidaknya senyawa  flavonoid.  Setelah  diuji  dengan menggunakan pereaksi shinode,  ekstrak   larut n -heksana  berubah  warna  menjadi  hijau
kehitaman,  dan  dengan  reaksi    pew    ekstrak n -heksana  menghasilkan  perubahan  warna hijau.  Hal  ini  menandakan  tidak  adanya senyawa  flavonoid.Ekstrak  larut  etil  asetat diuji  dengan  reaksi  pew  setelah  penambahan serbuk  magnesium  dan  diteteskan  dengan asam  klorida  pekat  memberikan  perubahan warna merah keunguan. Dengan menggunakan metode  shinode    ekstrak  etil  asetat  yang awalnya  berwarna  cokelat  akan  berwarna merah  intensif  selama  5  menit  setelah penambahan    serbuk    zink  dan  diteteskan dengan asam klorida pekat. Hal ini menyatakan  ekstrak  yang  larut  di  dalam pelarut  etil  asetat  memiliki  senyawa  flavonoid (Djamil, 2014)
Proses  pemisahan  selanjutnya  dilakukan dengan  menggunakan  metode  kromatografi cair  vakum,  metode  ini  dilakukanpada  estrak etil  asetat.  Metode  ini  didasarkan  pada kecenderungan senyawa terfraksinasi berdasarkan  perbedaan  kepolaran  pada  dua fase,  fase  diam  (silika)  dan  fase  gerak  (eluen) dengan  menggunakan  bantuan  alat  vakum. Metode  ini  dipilih  karena  kecepatan  proses (efisiensi  waktu)  dengan  cara  kolom  dihisap menggunakan  vakum.  Selain  itu  KCV  juga dapat  memisahkan  komponen  senyawa  dalam jumlah yang banyak. Untuk proses pengelusian  dilakukan  dari  pelarut  yang nonpolar  sampai  dengan  pelarut  yang  polar. Proses  KCV  dilakukan  dengan  menggunakan eluen n -heksana, n -heksana  :  etil  asetat  (3:2), n -heksana  :  etil  asetat  (1:4),  etil  asetat,  etil asetat  :  metanol  (4:1),  etil  asetat  :  metanol (3:2),  etil  asetat  :  metanol  (2:3),  etil  asetat  : metanol  (1:4)  dan  metanol  dengan  masing- masing  volume  eluen  50  ml.  Pada  saat  proses pengelusian  awal  dengan  eluen n -heksana 100%  ekstrak  tidak  terelusi,  karena  pada  saat proses  partisi  dengan  pelarut n -heksana, komponen yang larut sudah terpartisi sempurna  sehingga  komponen  senyawa  pada ekstrak etil asetat tidak terelusi. Setelah proses elusi selesai diperoleh delapan fraksi  yaitu F2- F9 dapat dilihat pada tabel 2.
Fraksi yang diperoleh kemudian ditotolkan  di  lempeng  KLT  yang  sebelumnya sudah  diaktifkan  untuk  meningkatkan  proses perembesan  (elusi)  oleh  eluen  pada  silika (Sastrohamidjojo,  2007).  Lempeng  KLT  yang
telah  ditotolkan  dengan  delapan  fraksi, kemudian  dielusi  di  dalam  chamber  dengan menggunakan eluen n -heksana:etil asetat (4:1) sebanyak 20 ml dengan panjang trayek elusi 8 cm. Setelah dielusi, lempeng KLT dikeringkan dan  disemprot  dengan  pereaksi  AlCl 3 .  Hasil positif  yang  memberikan  penampakan  noda biru pada hasil partisi yaitu  fraksi etil asetat : metanol  (4:1),  etil  asetat  :  metanol  (3:2),  etil asetat:  metanol  (2:3),  etil  asetat    :  metanol (1:4) dan methanol
Uji  warna  yang  digunakan  adalah  metode shinoda dan pew. Fraksi dari tiap perbandingan eluen
diuji dengan
menggunakan  serbuk  magnesium  dan  serbuk zink dan diteteskan dengan HCl pekat dan tiap fraksi  memberikan  perubahan  warna  yang berbeda-beda. Hal  ini  dilakukan  untuk menguatkan dugaan pada metode kromatografi lapis  tipis.Pada  fraksi  6  terjadi  perubahan warna  menjadi  merah  tua,  diduga  yang  terjadi karena  atom  Mg 2+ atau    Zn 2+ membentuk kompleks dengan senyawa flavonoid (Andersen  dan  Markham,  2006).  Perkiraan Komplek yang terjadi pada magnesium:
Reaksi  yang  dapat  terjadi    antara  logam  Mg dan  HCl  pekat  pada  pengujian  flavonoid adalah  reduksi  inti  bensopiron  yang  terdapat pada  struktur  flavonoid  sehingga  terjadi perubahan  warna menjadi berwarna merah tua karena  adanya  endapan  garam  favillium karena  terjadi  reduksi  dengan  magnesium  dan asamklorida  dengan  gugus  OH.  Perkiraan reaksi yang terjadi (Achmad, 1986):
Fraksi  yang  diduga  memiliki  senyawa flavonoid tersebut dipisahkan dengan menggunakan  KLTP  yang  ditotolkan  pada lempeng  kaca  berukuran  20  x  20  cm  dan
dielusi menggunakan  eluen  yang bersifat agak polar  karena  flavonoid  tergolong  senyawa polar  sehingga  lebih  mudah  dielusi  oleh senyawa  yang  bersifat  agak  polar.  Setelah dielusi  didapatkan  pita    berwarna  biru,  bagian tersebut dikeruk dengan menggunakan spatula, kemudian  dilarutkan  menggunakan  kloroform sebagai  pelarut  setelah  itu  disentrifuge  selama 15  menit  dengan  kecepatan  sentrifugasi  5000 rpm. Hal ini dilakukan agar dapat memisahkan antara komponen senyawadengan bagian silika yang  ada  sehingga  isolat  yang  diperoleh  tidak bercampur  dengan  silika.Setelah    itu  isolat ditampung dalam vial.
Untuk  mengetahui  apakah  isolat  benar- benar  tunggal  dilakukan  dengan  melakukan KLT  multi  eluen.  Eluen  yang  digunakan dipilih berdasarkan perbedaan tingkat kepolaran  yaitu n -heksana  :  kloroform  :  etil asetat (6 : 1,5 : 1), n -heksana: kloroform (3:1), dan n -heksana  :  etil  asetat  (4:1).  Dari pengamatan pada lempeng KLT setelah dielusi dengan  tiga  perbandingan  eluen  dengan kepolaran  yang  berbeda,  noda  terlihat  tunggal Seperti pada gambar 3.
Hasil  spektroskopi  Ultaviolet-Visible dengan menggunakan pelarut metanol didapatkan  bahwa  isolat  tersebut  memberikan spektrum yang menyerupai senyawa flavonoid.Isolat    memperlihatkan  puncak spektrum pada rentang 210 - 280 nm. Senyawa flavonoid yang terdapat pada ekstrak tumbuhan benalu batu ( Begonia sp.) memperlihatkan  puncak    pada  275  nm  untuk puncak  1  dan  225  nm  untuk  puncak  2. Menurut  Long  Ze  Lin  dan  Harnly  James (2012)  senyawa  flavanol  memiliki    λ maks 278 nm pada spektrofotometer UltraViolet-Visible. Hasil  penelitian    Achmad  S.A  (1998)  λ maks untuk  senyawa  flavan-3-ol    jenis  afzelechin adalah  210,  242  (bahu),  286  nm.  Senyawa flavanol  pada  penelitian  Wei  -  Dong  Zhang (2008)  dan  Salim et  al (2013)  menyatakan
λ maks flavonoid berada pada panjang gelombang  200  -  240,    dan  260  -  280  nm. Selain  itu,  penelitian  Satolom  (2015)  , mendapatkan  bahwa  senyawa  dengan    λ maks 231,6  dan    275,8  nm  merupakan  senyawa flavanol.  Berdasarkan  hasil  analisis  data  yang dilakukan,  menggambarkan  bahwa  senyawa flavonoid  yang  terdapat  pada  ektrak Begonia sp. diduga adalah senyawa golongan flavan-3- ol.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmad,  S.A.  (1986). Kimia  Organik  Bahan Alam . Jakarta: Karnunika.
Anam,  S.,  Yuliet.,  Ritna  A.,  Firmanita,
Rismayanti  D.,  &  Zubair  M.S.  (2014). Aktivitas  Sitotoksik  Ekstrak  Metanol Benalu Batu ( Begonia sp.): Ethnomedicine  Suku  Wana  Sulawesi Tengah . Jurnal Ilmu Kefarmasian
Indonesia , 12(1), 10-16.
Cindy  C.  S.  (2015), Isolasi  Senyawa Flavonoid  Pada  Biji  Pinang  Yaki  (Areca vestiaria Giseke), Jurusan Kimia, FMIPA,
Unsrat, Manado.
Djamil,  R.  (2014).  Isolasi  dan  Identifikasi Senyawa  Flavonoid  dalam  Fraksi  n- butanol Daun Dewa (Gynura pseudochina (L.)  DC)  Secara  Sepktrofotometer  UV-
Cahaya Tampak, Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia , 12(1), 93-98.
Lenny,  S.  (2006). Isolasi  dan  Uji  Bioaktifitas Kandungan  Kimia  Utama  Puding  Merah dengan Metoda Uji Brine Shrimp. FMIPA Universitas Sumatera Utara : Medan.
Lin, L.Z., & James M. H. (2012). Quantitation
of Flavanols, Proanthocyanidins, Isoflavones, Flavanones, Dihydrochalcones,  Stilbenes,  Benzoic Acid Derivatives Using Ultraviolet
Absorbance after  Identification by Liquid
Chromatography–Mass  Spectrometry. J
Agric Food Chem ., 60(23): 5832–5840. Markham, K.R. (1988). Cara Mengidentifikasi  Flavonoid .  Penerjemah: Padmawinata, K. Penerbit ITB, Bandung.
Novriawan,  H.  (2009). Sistem  Pengetahuan dan  Pemanfaatan  Benalu  Batu  (Polohi Wasu) pada Masyarakat Desa Wawopada Kec.  Lembo  Kab.  Morowali, Skripsi, Fakultas  Ilmu  Sosial  Dan  Ilmu  Politik, Universitas Tadulako, Palu.
Salim,  fatimah,    Mazatulikhma  Mat  Zain, Mohd Syafiq Mohammad Ridzuan, Moses  Langat,  Dulcie  Mulholland,  and Rohaya  Ahmad.  (2013).  Flavan-3-ols from  the  Leaves  of  Malaysian  Uncaria longiflora  var.  pteropoda  (Miq.)  Ridsd.
Phytochemistry Letters
Sastrohamidjojo,  H.  (2007). Dasar-  Dasar Spektrofotoskopi ,  Edisi  Kedua,  Cetakan Kedua, Penerbit Liberty, Jogjakarta.
Sjamsul  A.,  Achmad,  Silvester,  M.,  Udjiana, S.,  Aimi, N., Hakim, E.H., dan Makmur, L., (1998). Tiga senyawa flavan-3-ol dari tumbuhan Artocarpus reticulafus. Jurutan Kimia  Fakultas  Matematika  dan  llmu Pengetahua  Alam,  lnstitut  Teknologi Bandung PROC. ITB, VOL. 30, NO. 2.
Zhanga,  D.,  Sua,  J.,  Wub,  Z.J.,  Shena,  Y.H.,
Zhanga,  C.,  Lia  H.L.,  and  Liua,  R.H.
(2008). Three new flavanols from Daphne giraldii, Journal  of  Asian  Natural Products Research. 10(6), 547–550.
Øyvind  M.  A.,  &  Kenneth  R.M.  (2006). Flavonoids  Chemistry,Biochemistry  and Applications,  e dited  by CRC  Press  - Taylor  &  Francis  Group,  London  New York