Penggunaan ekstrak semanggi air ( Marsilea crenata ) sebagai sumber fitoestrogen terhadap gambaran darah tikus ( Rattus norvegicus)
Nurina Titisari 1, *, Ahmad Fauzi 1 , Pratiwi Trisunuwati 2
1 Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Brawijaya, Malang, Indonesia
2 Fakultas Peternakan, Universitas Brawijaya, Malang, Indonesia
ABSTRAK: Tanaman semanggi air mengandung fitoestrogen yang mungkin dapat berpengaruh terhadap profil darah. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk melihat gambaran darah pada tikus betina setelah pemberian semanggi air. Tikus betina ( Rat- tus norwegicus ) sebanyak 30 ekor dalam penelitian ini dibagi menjadi 6 kelompok yaitu: I (K-) kontrol negatif, II (K+) kontrol positif, III (P1) diberi ekstrak semanggi air 6.25%, IV (P2) diberi ekstrak semanggi air 12.5%, V (P3) diberi ekstrak semanggi air 25% dan VI (P4) diberi ekstrak semanggi air 50%. Ekstrak etanol semanggi air diberikan peroral selama 21 hari pascape- nyerentakkan  berahi  menggunakan  prostaglandin  2  alfa  dua  hari  sebelumnya.  Profil  darah  lengkap  diperiksa  sesudah  perla- kuanpada parameter white blood cell (WBC), red blood cell (RBC), hemoglobin (Hb) dan packed cell volume (PCV). Hasil analisa menunjukkan bahwa WBC, RBC, Hb dan PCV pada darah tikus menunjukkan perbedaan yang tidak signifikan dianta- ra kelompok perlakuan. Kesimpulan dari penelitian ini yaitu pemberian ekstrak semanggi tidak mempengaruhi profil hemato- logi tikus.
Kata kunci: semanggi air, WBC, RBC, Hb, PCV

## ■ PENDAHULUAN
Fitoestrogen  adalah substrat  tumbuhan  yang  memiliki  akti- vitas menyerupai estrogen, meskipun struktur kimia kedua- nya berbeda (Glover & Assinder 2006). Salah satu senyawa kimia yang termasuk fitoestrogen adalah isoflavone . Isofla- vone merupakan compound-like  hormone yang  terdapat pada berbagai  tanaman seperti  pada  tanaman semanggi air. Isoflavone yang  dimiliki  semanggi  air  dapat  meniru  peran hormon  estrogen  pada  tubuh  wanita.  Mengkonsumsi  se- manggi air dilaporkan mampu meningkatkan kadar estrogen dalam darah ( Anisah 2008 ), namun pengaruh mengkonsumsi semanggi  air  terhadap  gambaran  darah  belum  dilaporkan. Menurut  Prossnitz et  al. (2007),  estrogen  berperan  sebagai anti-inflammatory    dan  membantu  mobilisasi  sel  darah  pu- tih.  Dengan  demikian,  pengukuran  konsentrasi  ekstrak  da- lam  pemberian semanggi  air sangat  diperlukan  untuk  men- getahui pengaruhnya terhadap profil hematologi. Penelitian ini  bertujuan  untuk  melihat  profil  darah  tikus  setelah  pem- berian  ekstrak  etanol  daun  semanggi  air  untuk  mengetahui keamanan mengkonsumsi semanggi air terus menerus.

## ■ BAHAN DAN METODE
Pembuatan  ekstrak etanol  daun  semanggi air: Pembuatan  ektrak  daun  semanggi  air  dilakukan  di  Materia Medica kota Batu Malang menggunakan etanol 96%.
Hewan coba: Tikus ( Rattus norvegicus ) betina, strain Wis- tar,  usia  8 minggu,  berat  badan  rata-rata  200  gram.  Hewan
coba diaklimatisasi selama 7 hari, diberi pakan dan minum tersedia  secara ad  libitum .  Tikusdiperoleh  dari  Laborato- rium Biomol, FMIPA Universitas Brawijaya. Pemeliharaan di  Laboratorium  Faal,  Fakultas  Kedokteran,  Universitas Brawijaya.  Penelitian  ini  mendapatkan  laik  etik  penelitian dari  Universitas  Brawijaya  No.  347/EC/KEPK/  05/2015. Hewan  coba  dibagi  dalam  6  kelompok:  4  kelompok perlakuan  dengan  dosis  ekstrak  etanol  daun  semanggi  air (6.25%,  12.5%,  25%,  dan  50%)  dan  2  kelompok  kontrol (kontrol  negatif  diberikan  larutan  fisiologis  dan  kontrol positif diberikan Mycrogynon).
Pemberian estrak etanol daun semanggi air: Semua tikus diberikan Prostaglandin F2α (PGF2α)  untuk penyerentakan birahi 2 hari sebelum perlakuan. Tikus diberi ekstrak etanol semanggi  air  sebanyak  2  cc  setiap  pagi  selama  21  hari menggunakan sonde lambung.
Pemeriksaan  darah: Darah  dikoleksi  melalui  kapiler orbital  kemudian  dimasukkan  ke  tabung  yang  mengandung EDTA.  Profil  darah  yang  diamati  meliputi  jumlah white blood cell (WBC), red blood cell (RBC), hemoglobin (Hb), dan packed cell volume (PCV).
Analisis  data: Hasil  pemeriksaan  darah  dianalisa menggunakan analisis of varian (ANOVA). Uji dilanjutkan dengan  perbandingan  berganda  uji  Tukey  atau  Beda  Nyata Jujur (BNJ) dengan α= 0.05.
ISSN 2581-2416 DOI: http://dx.doi.org/10.29244/avl.3.1.11-12 http://journal.ipb.ac.id/index.php/arshivetlett
Diterima: 29-01-2019 | Direvisi: 21-02-2019 | Disetujui: 26-02-2019 ©  2019  CC-BY-SA.  Ini  adalah  artikel Open  Access yan g  didistribusikan berdasarkan  ketentuan  dari Creati ve  Commons  Attribution  ShareAlike  4.0 International License ( https://creativeco mmons.org/licenses/by-sa/4.0/ ).
Tabel 1 Hasil pemeriksaan white blood cells (WBC), red blood cells (RBC), hemoglobin (Hb), dan packed cell volume (PCV) dalam darah tikus setelah 21 hari pemberian ekstrak etanol semanggi air secara berturut-turut.

## ■ HASIL DAN PEMBAHASAN

## Nilai WBC
Pemeriksaan white  blood  cells (WBC)  pada  penelitian  ini dilakukan untuk melihat respon sistemik terhadap peningka- tan  leukosit  atau  sebaliknya.  Nilai  WBC  pada  kelompok perlakuan  ekstrak  semanggi  air  mengalami  peningkatan dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol  negatif,  terutama nilai WBC pada kelompok perlakuan P3 dan P4 yakni 6.77 x  10 3 /µl    dan  6,33  x  10 3 /µl  ( Tabel  1 ).  Peningkatan  nilai WBC  pada  kelompok  perlakuan  P3  dan  P4  dapat  dipenga- ruhi oleh pemberian ekstrak etanol semanggi air. Fitoestro- gen dalam ekstrak etanol semanggi air mampu memobilisasi sel  darah  putih  sehingga  meningkatkan  nilai  WBC  dalam darah.  Menurut  Anisah  (2008),  pemberian  semanggi  air dosis  30  mg/kg  berat  badan  dapat  meningkatkan  kadar  es- trogen darah pada tikus betina. Namun demikian nilai rata- rata  WBC  pada  setiap  kelompok  perlakuan  masih  dalam batas normal. Menurut Schalm (2010) nilai normal sel darah putih pada tikus Wistar yakni 1.96- 8.25 (10 3 /mm 3 ).

## Nilai RBC, Hb dan PCV
Analisa red  blood  cells ,  hemoglobin,  dan packed  cell  vo- lume adalah  salah  satu  metode  untuk  mengetahui  status fisiologi  hewan  terutama  yang  berkaitan  dengan  kondisi anemia. Kondisi anemia dapat terjadi pada beberapa penya- kit  seperti  talasemia,  anemia  aplastic,  malnutrisi,  trauma dan perdarahan akut atau kronis (Salasia & Hariono 2014). Nilai rata-rata RBC tikus pada kelompok kontrol dan perla- kuan masih berada pada rata-rata normal 7.3-9.6 (10 6 /mm 3 ) (Schalm  2010).  Total  RBC  secara  statistik  menunjukkan tidak  adanya  perbedaan  diantara  kelompok  perlakuan (p>0.05) ( Tabel 1 ). Hal ini menunjukkan bahwa pemberian ekstrak  etanol  semanggi  air  pada  tikus  dengan  konsentrasi (6.25%,  12.5  %,  25%,  dan  50%)  sebagai  fitoestrogen  tidak berpengaruh terhadap jumlah eritrosit dalam darah.
Nilai  rata-rata  Hb  pada  kelompok  kontrol  dan  perlakuan menunjukkan  kadar  masih  dalam  batas  normal.  Menurut Schalm  (2010),  kadar  Hb  darah  tikus  normal  adalah  13.7- 17.6  (g/dL).  Hemoglobin  mempunyai  peranan  membawa oksigen dari paru-paru keseluruh tubuh melalui sel eritrosit. Hasil  uji  statistik  menunjukkan  tidak  ada  perbedaan  antar perlakuan.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  se- manggi air  juga  tidak  memberikan  efek  yang  berarti  terha- dap kadar Hb dalam darah.
Packed  cell  volume (PCV) atau  nilai  hematokrit  merupa- kan persentase volume eritrosit di dalam darah. Tujuan pe- meriksaan  PCV  adalah  untuk  mengetahui  konsentrasi  sel darah  dalam  cairan  darah.  Hasil  pemeriksaan  PCV  pada kelompok perlakuan pemberian ekstrak etanol semanggi air menunjukkan hasil yang tidak berbeda jauh dengan kelom- pok  kontrol  negatif.  Nilai  PCV  pada  kelompok  pemberian ekstrak semanggi air berada pada kisaran nilai normal PCV tikus  yakni  39.6-52.5  %  (Schalm  2010).  Hasil  uji  statistik menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  jumlah  PCV diantara  kelompok  perlakuan.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa pemberian  ekstrak  semanggi  air  pada  hewan  coba  tidak berpengaruh  terhadap  kadar  PCV  dalam  darah.  Penurunan PCV dapat terjadi pada kasus perdarahan akut, akibat kera- cunan  atau  trauma,  anemia,  leukemia,  gagal  ginjal  kronis, sirosis hepatitis, defesisensi vitamin B dan C dan malnutrisi (Salasia & Hariono 2014).

## ■ SIMPULAN
Ekstrak  semanggi  tidak  berpengaruh  terhadap  gambaran profil darah tikus pada parameter WBC, RBC, Hb dan PCV.

## ■ INFORMASI PENULIS

## Penulis untuk Korespondensi
*NT: nurinatitisari@gmail.com Fakultas Kedokteran Hewan Kampus II, Universitas Brawijaya, Perum Puncak Dieng Ekslusive, Malang.

## ■ PUSTAKA ACUAN
Anisah  K.  2008.  Pengaruh  pemberian  ekstrak  daun  semanggi  air ( Marsilea  crenata )  terhadap  kadar  estrogen  dalam  darah  tikus putih  betina  ( Rattus  norvegicus ).  Repositori  thesis  Universitas Airlangga, Surabaya.
Glover  A,  Assinder SJ. 2006. Acute exposure of adult male rats to dietary  phytoestrogen  reduces  fecundity  and  alters  epididymal steroid hormon receptor expression. Jour. Endoc. 189: 565-573
Prossnitz ER, Arterburn JB, Sklar LA. 2007. GPR30: A G protein- coupled  receptor  for  estrogen. Mol.  Cell.  Endocrinol.  265:138- 142.
Salasia  SIO,  Hariono  B.  2014.  Patologi  Klinik  Veteriner:  Kasus Patologi Klinis. Penerbit Samudra Biru, Yogyakarta. Halaman 1- 4, 9, 33-41.
Schalm  OW.  2010.  Veterinary  Hematology.  Edisi  ke-6.  Lea  & Febiger, Philadelphia.
Perlakuan WBC (10 3 /µl) RBC (10 6 /µl) Hb (g/dl) PCV (%) K- (Kontrol Negatif) 2.50±0.36 7.42±0.15 17.02±0.44 43.47±1.95 K+ (Kontrol Positif) 3.43±1.59 6.88±0.07 15.93±1.31 39.53±3.09 P1 (Extrak semanggi 6.25%) 4.60±0.30 7.28±0.49 16.97±1.00 43.17±2.80 P2 (Extrak semanggi 12.5%) 3.13±0.59 7.00±0.15 16.07±0.21 42.10±1.18 P3 (Extrak semanggi 25%) 6.77±2.61 7.15±0.26 16.57±1.00 41.17±3.41 P4 (Extrak semanggi 50%) 6.33±2.96 7.04±0.25 16.53±0.60 41.87±3.46 Nilai P 0.060 0.200 0.450 0.570