## Pengaruh Suhu dan Waktu Pulsed Electric Field Terhadap Kualitas Probiotik Pakan Ternak dari Cacing Tanah

## The Effect of Temperature and Time of Pulsed Electric Field on Animal Feed Probiotics Quality from Earthworm
Mochamad Bagus Hermanto, Angky Wahyu Putranto, Wafa Nida Faida Azra* Departemen Keteknikan Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya, Jl. Veteran- Malang 65145
*Email korespondensi : wafanida9c@gmail.com

## ABSTRAK
Cacing tanah atau Lumbricus rubellus adalah salah satu cacing yang banyak dibudidayakan di Indonesia. Cacing ini memiliki karakteristik hidup yang mudah, cepat berkembangbiak dengan ciri - ciri panjang tubuh 8 cm–14 cm. Oleh karena itu, cacing ini banyak dibudidayakan karena dapat diolah menjadi berbagai macam produk seperti probiotik pakan ternak. Probiotik berbahan cacing memiliki kandungan protein yang sangat tinggi sebesar 64-76%, serat kasar 45% dan kandungan lainnya yang dapat bermanfaat untuk kesehatan ternak.  Pemanasan  secara  konvensional  sebelum  proses  fermentasi  secara  tidak  langsung  menurunkan kandungan protein pada cacing tanah. Oleh karena itu, penggunaan teknologi pulsed electric field (PEF) pada penelitian  ini  bertujuan  untuk  menjaga  stabilitas  protein  sekaligus  mengurangi  kontaminasi  produk fermentasi. Penelitian ini menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap dengan dua faktor, suhu dan waktu pemberian PEF yang diberikan sebelum bahan diproses. Sedangkan pemilihan perlakuan terbaik menggunakan  metode Multiple  Attribute  Zeleny .  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  suhu  dan  waktu pretreatment PEF, berpengaruh nyata terhadap pH, namun tidak berpengaruh nyata terhadap warna pada probiotik pakan ternak dari cacing tanah. Perlakuan terbaik terdapat pada pretreatment pada suhu 27 0 C dan waktu 30 detik dengan nilai pH sebesar 4.8 dan nilai warna untuk tingkat kecerahan (L*) sebesar 4.8, tingkat kemerahan (a) sebesar 40.90 dan tingkat kekuningan (b) sebesar 2.12.
Kata kunci: cacing tanah, pulsed electric field , probiotik, pH, warna

## ABSTRACT
Earthworm or Lumbricus rubellus is one of the worms that are widely cultivated in Indonesia. Lumbricus rubellus has the characteristics of an easy life, fast breeding with characteristics of a body length of 8 cm-14 cm. Therefore, Lumbricus rubellus is widely cultivated since it can be processed into various products such as animal feed probiotics. Probiotics made from worms have a very high protein content of 64-76%, crude fiber 45% and other ingredients that can be beneficial for livestock  health.  The  conventional  heating  before  the  fermentation  process  indirectly  reduces  the  protein  content  of earthworms. Therefore, the use of pulsed electric field (PEF) technology in this study aims to maintain protein stability and  reducing  product  contamination.  This  study  used  a  completely  randomized  design  method  with  two  factors, temperature and time of PEF exposure. While the selection of the best treatment using the Multiple Attribute Zeleny. The results showed that the PEF pretreatment had a significant effect on pH, but did not significantly affect the color of animal feed probiotics from earthworms. The best treatment was found at a temperature of 27oC and a PEF time of 30 seconds with a pH value of 4.8 and a color value for the brightness level (L*) of 4.8, the level of redness (a) of 40.90 and the level of yellowness (b) of 2.12.
Keywords: earthworms, pulse electric field, probiotic, pH, color

## PENDAHULUAN
Cacing  tanah  ( Lumbricus  rebellus )  adalah  salah satu  jenis  hewan  avertebrata  yang  dapat dibudidayakan di  Indonesia.  Hewan  lunak  ini memiliki karakteristik  cepat  berkembangbiak, tumbuh  subur  dan  memiliki  ketahanan  hidup yang tinggi. Cacing tanah dapat diolah menjadi berbagai  macam  produk  karena  memiliki
berbagai macam manfaat seperti tinggi protein, enzim lumbrokinase, enzim  peroksida, katalase dan  lainnya  (Maulida  &  Riawan,  2015).  Cacing dapat  digunakan   sebagai pupuk dan  pakan ternak  alternatif yang berkualitas tinggi dengan harga  terjangkau  (Rahim,  2018).  Pemanfaatan cacing tanah saat ini belum maksimal, padahal di negara  maju  cacing  banyak  dimanfaatkan dengan  cara  diolah  terlebih  dahulu  sebagai sumber  protein  tinggi  untuk  dijadikan  bahan
pakan alternatif. Pakan termasuk aspek terbesar dari biaya produksi yang nilainya mencapai 60%- 70%. Permintaan pakan mengalami peningkatan seiring  dengan  meningkatnya  budidaya.  Akan tetapi,  bahan  pakan  konvensional  berprotein tinggi memiliki harga fluktuatif dan masih impor untuk memenuhi kebutuhan industri peternakan dan    perikanan.    Oleh  karena  itu,  cacing  tanah jenis Lumbricus rubellus dapat menjadi alternatif pakan  yang  terjangkau  dengan  kandungan protein tinggi yaitu sebesar 76% untuk menjadi pakan probiotik bagi ternak (Sadiyah et al., 2018).
Probiotik  pakan  ternak  berfungsi  untuk meningkatkan  kualitas  pakan  melalui  cara penguraian  sehingga  meningkatkan  kecernaan pakan dan dapat meminimalisasi pertumbuhan bakteri  patogen  (Yulvizar,  2013).  Hal  ini dikarenakan  cacing  tanah  memiliki  lumbricin yaitu  antibiotik  yang  berasal  dari  protein  serta tergolong  pada  bakteriosin.  Kelebihan  dari bakteriosin yaitu mudah mengalami biodegradasi,  tidak  berbahaya  bagi  usus  dan dapat dicerna oleh enzim dengan mudah. Selain itu,  konsentrasi  asam  amino  esensial  dan  asam lemak  yang  lebih  unggul  jika  dibandingkan dengan pakan pada umumnya (Nalunga et al., 2021).  Produk  probiotik  pakan  ternak  dari fermentasi  jus  cacing  tanah  umumnya menggunakan bakteri asam laktat (BAL) seperti bakteri Lactobacillus  casei dengan  pemberian bahan  tambahan  seperti  gula,  dan  air  kelapa. Penggunaan  gula  bertujuan  sebagai  sumber karbon  yang  dibutuhkan  oleh Lactobacillus  casei selama proses fermentasi berlangsung. Selain itu, untuk  menambah  rasa  manis  pada  probiotik, karena apabila tidak ditambahkan sukrosa maka akan  menghasilkan  bau  yang  sangat  masam (Yanuar & Sutrisno, 2015). Proses fermentasi akan memecah  senyawa  organik  dari  senyawa komplek menjadi senyawa yang sederhana agar mudah  dicerna  dari  bahan  asalnya.  Selain  itu, manfaat fermentasi juga dapat menambah nilai nutrisi bagi produk dan sifat fisik lain karena sifat mikroba  yang  katabolik  dapat  mensistesis beberapa  vitamin  yang  tidak  sederhana (Pamungkas, 2011).
Proses  pembuatan  probiotik  pakan  ternak dari fermentasi cacing tanah selama ini dilakukan secara konvensional dengan pemanasanan pada suhu 55-60 ᵒ C pada jus cacing dilanjutkan dengan fermentasi selama 30-40 hari. Waktu fermentasi yang  cukup  lama  tersebut  seringkali  membuat produk mengalami kontaminasi seperti tumbuhnya jamur, bakteri patogen dan lain – lain.
Oleh karena itu, diperlukan suatu teknologi yang mampu  mempertahankan  kandungan  tersebut pada jus cacing tanah melalui pemanasan non- thermal yang  bertujuan  untuk  menjaga kandungan protein, asam amino dan enzim pada jus cacing. Selain itu, waktu fermentasi yang lebih singkat  juga  diperlukan  agar  dapat  memenuhi produksi pakan secara maksimal.
Perlakuan  dengan  menggunakan pulsed electric  field (PEF)  berbeda  dengan  perlakuan panas  karena  dengan  perlakuan  panas menghasilkan  kerusakan  yang  hebat  pada organel  sel  dan  pada  perlakuan  PEF  membuat kerusakan pecahnya dinding sel. Teknologi PEF merupakan teknologi non- thermal yang menerapkan medan listrik tegangan tinggi pada bahan  yang  ditempatkan  diantara  2  elektroda dalam  waktu  yang  singkat  untuk  memperkecil kerusakan yang dari proses pemanasan  (Hawa et al.,  2011;  Angky  Wahyu  Putranto,  2014). Penerapan teknologi PEF pada kuat medan listrik rendah  (<10  kV.cm -1 )  dilakukan  untuk  proses ekstraksi  senyawa  penting  dari  bahan  alam seperti ekstraksi senyawa fenolik, flavonoid, dan antosianin  dan  proses  pemecahan  ikatan lignoselulosa  pada  biomasa    (Dewi  et  al.,  2019; Izza et al., 2016; A W Putranto et al., 2018; Angky Wahyu  Putranto  et  al.,  2014,  2020).  Sedangkan penerapan  kuat  medan  listrik  yang  tinggi  (>10 kV.cm -1 )  digunakan  untuk  menginaktivasi mikroorganisme pada produk cair (Priyanto et al., 2021; Angky Wahyu Putranto et al., 2022; Sharma et al., 2014).
Pada penelitian ini, teknologi PEF digunakan untuk menjaga protein, asam amino dan enzim dari  kerusakan  akibat  suhu  pemanasan  yang tinggi.  Selain  itu,  perlakuan  pretreatment  PEF dilakukan  untuk  mensterilisasi  bahan  sehingga proses  fermentasi  dapat  berjalan  dengan  baik karena  tidak  ada  kontaminasi  mikroorganisme lain  selama  fermentasi  berlangsung.  Namun demikian,  efisiensi  sterilisasi  dan  suhu  aman untuk protein, asam amino dan enzim pada suatu produk  menggunakan  perlakuan  PEF  sangat tergantung  dari  lamanya  waktu  proses  yang digunakan  dan  suhu  awal  produk  (Hawa  & Putri, 2011; Priyanto et al., 2021). Oleh karena itu, faktor  lama  waktu  kejut  dan  suhu  menjadi parameter penting untuk diteliti sehingga dapat mengetahui nilai waktu dan suhu yang terbaik untuk  dapat  menghasilkan  produk  probiotik pakan ternak.
METODE PENELITIAN

## Pembuatan Jus Cacing
Cacing  tanah  diperoleh  dari  CV.  RAJ  Organik, Kota  Malang  dengan  umur  panen  cacing  yang diseragamkan  yaitu  4-5  bulan.  Cacing  tanah selanjutnya dibersihkan melalui proses pencucian dilakukan dengan waktu yang singkat agar dapat menjaga  kandungan  saponin  (busa)  yang dikeluarkan oleh cacing sebagai perlindungan diri. Menurut (Yanuartono et al., 2017) saponin dapat dimanfaatkan  sebagai  komposisi  pakan  ternak. Sebanyak 3 kg cacing dihancurkan dengan blender dan ditambahkan perasan nanas 2 liter, gula merah 2 kg, air kelapa 1 liter. Adapun tujuan pemberian gula dan air kelapa sebagai sumber karbon bagi bakteri  dan  sebagai  substrat  dalam  fermentasi, sedangkan  pemberian  nanas  adalah  sebagai sumber energi untuk bakteri dan menjaga kualitas produk agar tetap segar (Yanuar & Sutrisno, 2015).

## Pretreatment PEF Jus Cacing
Teknologi PEF yang digunakan pada penelitian ini terdiri dari dua bagian utama yaitu chamber utama yang  dilengkapi  pengaduk  otomatis  dan  bagian kontrol box. Konfigurasi elektroda dan pengaduk pada chamber PEF seperti pada penelitian (Angky Wahyu  Putranto  et  al.,  2020). Chamber PEF berbentuk  tabung  vertikal  kapasitas  maksimal sebesar  8  liter  bahan.  Kuat  medan  listrik  yang diguanakan yaitu 4.74 kV.cm -1 , frekuensi sebesar 8.2 KHz dan kecepatan pengaduk sebesar 225 rpm. Chamber PEF  didesain  dengan  sensor  suhu  dan sistem kontrol untuk parameter suhu dan waktu.
Proses  pretreatment  jus  cacing  dilakukan dengan  memindahkan  jus  cacing  ke  dalam chamber PEF  dan  diberikan  kuat  medan  listrik, frekuensi dan kecepatan pengaduk yaitu masing- masing 4.7 kV.cm -1 , 8 KHz dan 225 rpm. Selain itu, diberikan beberapa variasi perlakuan suhu yaitu 27 ᵒ C dan 30 ᵒ C, serta waktu PEF 30 dan 60 detik. Pemilihan faktor tersebut berdasarkan penelitian pendahuluan  yang  dilakukan  dengan  beberapa variasi  suhu  dan  waktu  PEF.  Pada  suhu pemanasan awal di atas 30 ᵒ C, nilai warna produk sangat keruh. Suhu pemanasan awal yang terlalu tinggi  pada  PEF  akan  mengakibatkan  degradasi asam amino dan reaksi buruk lainnya. Selain itu, pemberian  suhu  yang  tidak  tepat  akan mengakibatkan  penurunan  nilai  warna  dan penurunan aktivitas enzim lipoksigenase (Pranata, 2017).  Pada  jus  cacing  juga  memiliki  enzim protease serin yang berfungsi untuk memutuskan ikatan  peptide  pada  protein  sehingga  dapat meingkatkan  kecernaan  protein  sekaligus mendorong  penyerapan  protein  dalam  pakan
(Aslamyah  et  al.,  2020).  Jus  cacing  tanpa pretreatment  PEF  selanjutnya  disebut  sebagai sampel kontrol.

## Fermentasi Jus Cacing
Jus cacing baik yang diberikan dan tidak diberikan pretreatment
PEF (kontrol) selanjutnya dimasukkan  pada  botol  fermentasi  dan ditambahkan  bakteri Lactobacillus  casei sebanyak 10%. Botol ditutup rapat dan dipastikan tidak ada udara yang keluar masuk dari botol, karena proses fermentasi  yang  dilakukan  berlangsung  secara anaerob fakultatif. Setelah 7 hari, hasil fermentasi dapat dibuka dan pastikan produk tidak berbau serta  tidak  tumbuhnya  jamur  di  permukaan produk.  Setelah  itu  produk  hasil  fermentasi dilakukan pengujian pH dan warna.

## Metode Penelitian
Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  yang  disusun secara faktorial dengan dua faktor yaitu suhu dan lama  waktu  kejut  dan  pada  setiap  faktor menggunakan 2 taraf perlakuan. Apabila terdapat pengaruh  dari  hasil  analisis  statistik  maka  akan dilakukan  uji  lanjut  BNT  dengan  selang kepercayaan 5% agar dapat mengetahui seberapa signifikan pengaruh tersebut. Adapun pengujian yang dilakukan pada penelitian ini terdiri dari dua parameter yaitu pH menggunakan pH meter (pH- 009(I)A) dan uji warna menggunakan color reader (Fru  Tipe  WF  30).  Alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini diantaranya timbangan analitik (SF- 400),  mesin  juicer  (Lokal,  Indonesia)  dan termometer (Brannan).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengaruh  Variasi  Suhu  dan  Waktu  PEF Terhadap Nilai pH
Proses pretreatment PEF pada jus cacing bertujuan untuk  mensterilisasi  bahan  tambahan  pada pembuatan pakan dan menjaga kandungan asam amino cacing tanah. Asam amino ini digunakan sebagai  protein  yang  merupakan  konstituen utama  dari  jaringan  struktural  dan  pelindung, termasuk tulang, otot dan organ. Asam amino juga digunakan  sebagai  suplemen  dalam  perawatan kesehatan  ternak  (Istiqomah  et  al.,  2017).  Oleh karena itu, pemberian pulsa listrik tegangan tinggi pada pembuatan jus cacing untuk probiotik pakan ini  sangat  sesuai  karena  dapat  memecah makromolekul  menjadi  mikromolekul.  Hal tersebut  dapat  menjaga  kandungan  enzim  dan protein relatif terjaga.
Nilai  rerata  pH  probiotik  hasil  pretreatment PEF  dengan  4  perlakuan  berbeda  dan  kontrol dapat  dilihat  pada  Gambar  1.  Berdasarkan Gambar  1  dapat  dilihat  bahwa  parameter  pH sampel  tanpa  pretreatment  PEF  menghasilkan nilai pH yang tinggi  dibandingkan  dengan pH pada  sampel  yang  diberikan  pretreatment  PEF. Selanjutnya  dilakukan  analisis  statistik  yang menghasilkan nilai Fhitung lebih besar dari Ftabel. Hal  tersebut  menyatakan  adanya  pengaruh pemberian  pretreatment  PEF  terhadap  pH probiotik terfermentasi. Oleh karena itu, dilakukan uji lanjut yang dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Grafik rerata pH terhadap variasi suhu dan waktu PEF
Nilai  pH  terssebut  dihasilkan  setelah  proses fermentasi  hari  ke  5.  Hasil  grafik  tersebut menunjukkan  bahwa  produk  yang  diberikan pretreatment PEF memiliki pH yang lebih rendah dibandingkan  kontrol,  apabila  merujuk  pada penelitian (Sumarlan et al., 2014), nilai pH rendah akan mengurangi tumbuhnya mikroba berbahaya yang  dapat  merusak  probiotik  sehingga  dengan pretreatment  PEF  menghasilkan  perubahan  sifat kimia  salah  satunya  pH.  Hal  ini  didukung  oleh penelitian Hawa & Putri yang menyatakan bahwa perlakuan  non- thermal menggunakan  PEF memberikan pengaruh dan cenderung menurunkan pH dibandingkan dengan perlakuan thermal (Hawa & Putri, 2011). Hasil analisis ANOVA menunjukkan adanya pengaruh  suhu  dan  lama  waktu  kejut  terhadap pH  probiotik  terfermentasi  maka  dilakukan  uji lanjut  BNT  (Beda  Nyata  Terkecil)  yang menghasilkan bahwa suhu pemanasan awal PEF pada  suhu  27 ᵒ C      tidak  memberikan  perbedaan yang signifikan terhadap nilai pH probiotik pakan. Sedangkan suhu pemanasan awal 30 ᵒ C dan waktu PEF 30 dan 60 detik memberikan dampak yang sangat signifikan seperti notasi yang ditunjukkan pada Gambar 1.
Pengaruh  Variasi  Suhu  dan  Waktu  PEF Terhadap Nilai Warna
Atribut pengujian warna pakan probiotik cacing tanah pada penelitian ini terbagi menjadi 3 atribut yaitu L* ( Lightness ) yang menunjukkan kecerahan, atribut  a  yang  menunjukkan  nilai  merah  dan atribut b yang menunjukkan nilai kuning (Triasih et al., 2020). Hasil uji statistik menunjukkan bahwa variasi  suhu  dan  waktu  PEF  terhadap  probiotik pakan  ternak  dari  cacing  tanah  terhadap  ketga atribut  pengujian  warna  (L*,  a,  b)  yaitu  tidak berbeda nyata dengan nilai F hitung lebih rendah dari  pada  F  tabel,  sehingga  tidak  dilakukan  uji lanjut  BNT.  Namun  demikian,  rerata  pengujian warna terdapat beberapa perbedaan seperti yang ditunjukkan pada Gambar 2, 3 dan 4.
Gambar  2.  Grafik  Rerata  Nilai  Kecerahan  (L*) Terhadap Variasi Suhu dan Waktu PEF
Gambar 2 menunjukkan nilai uji tingkat kecerahan warna  (L*)  probiotik  pakan  kontrol  dan  pakan yang  diberikan  perlakuan  PEF.  Pada  perlakuan suhu  27 ᵒ C  dengan  waktu  kejut  30  detik menghasilkan  rerata  40.90±0.44,  perlakuan  suhu 27 ᵒ C  dengan waktu kejut 60 detik menghasilkan rerata  39.77±1.68,  perlakuan  suhu  30 ᵒ C  dengan waktu  kejut  30  detik  menghasilkan  rerata 39.09±2.31.  Sedangkan  perlakuan  suhu  30 ᵒ C dengan waktu kejut 60 detik menghasilkan rerata 38.06±1.18  serta  nilai  kecerahan  untuk  kontrol menghasilkan rerata 40.44±1.18.
Gambar  3.  Grafik  Rerata  Nilai  Kemerahan  (a) Terhadap Variasi Suhu dan Waktu PEF
Hasil  nilai  uji  tingkat  kemerahan  warna  (a) probiotik kontrol dan probiotik dengan perlakuan variasi  suhu  dan  waktu  PEF  (Gambar  3)
6.8 4.9 6.3 5.2 6.9 0 2 4 6 8 10 Kontrol 27 30 Nil ai pH Suhu ( ° C) 30 detik 60 detik b 40.44 40.9 39.77 39.09 38.06 0 20 40 60 Kontrol 27 30 N ila i K ecer aha n (L*) Suhu ( ° C) 30 detik 60 detik 1.63 2.12 1.74 2.09 1.64 0 1 2 3 Kontrol 27 30 N ila i K em er aha n (a ) Suhu ( ° C) 30 detik 60 detik a a c
menunjukkan  bahwa  suhu  27 ᵒ C  dengan  waktu kejut  30  detik  menghasilkan  rerata  2.12±0.33, perlakuan kedua yaitu suhu 27 ᵒ C dengan waktu kejut  60  detik  menghasilkan  rerata  1.802±0.24, perlakuan ketiga yaitu suhu 30 ᵒ C dengan waktu kejut  30  detik  menghasilkan  rerata  1.64±0.10, perlakuan keempat yaitu suhu 30 ᵒ C dengan waktu kejut 60 detik menghasilkan rerata 1.64±0.42 dan untuk kontrol menghasilkan rerata 1.63±0.19.
Gambar  4.  Grafik  Rerata  Nilai  Kekuningan  (b) Terhadap Variasi Suhu dan Waktu PEF
Hasil uji tingkat kekuningan warna (b) probiotik pakan  kontrol  dan  probiotik  dengan  perlakuan variasi  suhu  dan  waktu  PEF  (Gambar  4) menunjukkan  bahwa  suhu  27 ᵒ C  dengan  waktu kejut  30  detik  menghasilkan  rerata  13,87±0,53, perlakuan kedua yaitu suhu 27 ᵒ C dengan waktu kejut  60  detik  menghasilkan  rerata  15.04±1.89, perlakuan ketiga yaitu suhu 30 ᵒ C dengan waktu kejut  30  detik  menghasilkan  rerata  15.87±2.24, perlakuan keempat yaitu suhu 30 ᵒ C dengan waktu kejut 60 detik menghasilkan rerata 16.35±0.30 dan untuk kontrol menghasilkan rerata 14.36±1.98.
Secara  umum,  pengaruh  suhu  pemanasan awal  dan  waktu  PEF  terhadap  parameter  nilai kecerahan  (L*),  nilai  kemerahan  (a)  dan  nilai kekuningan  (b)  warna  pada  probiotik  pakan ternak  dari  cacing  tanah  tidak  menunjukkan perbedaan yang signifikan dengan probiotik tanpa pretreatment PEF atau kontrol. Menurut (Priyanto et  al.,  2021)  yang  menggunakan  kejut  listrik tegangan tinggi (PEF) pada suatu produk cair yaitu susu mengindikasikan pretreatment waktu kejut listrik pada bahan fermentasi tidak menyebabkan adanya perubahan warna yang berdampak pada penampakan  produk,  sehingga  warna  sampel kontrol  dan  sample  pretreatment  PEF  tidak memiliki  perbedaan  signifikan.  Adanya  variasi suhu  dan  lama  waktu  kejut  listrik  tidak mempengaruhi  warna,  hal  ini  sesuai  dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Hawa  &  Putri, bahwa perubahan tingkat kecerahan akan terjadi apabila  terdapat  variasi  tegangan  di  atas  20  kV
(Hawa & Putri, 2011).

## Pemilihan Perlakuan Terbaik
Berdasarkan perlakuan terbaik dengan menggunakan  metode  zeleny,  perlakuan pretreatment  PEF  pada  probiotik  pakan  ternak menghasilkan  nilai  yang  lebih  baik  daripada menggunakan  cara  konvensional.  Menurut Lawren,  nilai  pH  dipengaruhi  oleh  aktivitas Lactobacillus  casei ,  semakin  kecil  nilai  pH  maka peluang  tumbuhnya  mikroba  semakin  kecil (Winny, 2014). Pada pembuatan probiotik dengan cara  konvensional  menghasilkan  pH  sebesar  6.8 sedangkan dengan pretreatment PEF
menghasilkan  pH  4.8  dengan  tingkat  kecerahan (L*) sebesar 40.90, tingkat kemerahan (a) sebesar 2.12 dan tingkat kekuningan (b) sebesar 13.87 pada perlakuan  suhu  27 ᵒ C  selama  30  detik.  Pada penelitian ini variasi suhu dan waktu pretreatment PEF  tidak  memberikan  pengaruh  terhadap  nilai pH dan warna probiotik pakan ternak dari cacing tanah. Namun demikian, perlakuan terbaik pada suhu 27 ᵒ C dan waktu PEF 30 detik sudah sesuai dengan  penelitian  sebelumnya  dan  dapat digunakan sebagai alternatif pengganti pemanasan konvensional pada suhu tinggi untuk menghasilkan probiotik pakan ternak cacing tanah dengan  kandungan  protein  yang  relatif  terjaga. Penelitian  lebih  lanjut  disarankan  untuk  dapat melakukan  beberapa  optimasi  perlakuan  PEF dengan  beberapa  parameter  kualitas  probiotik pakan  ternak  untuk  mengetahui  besarnya kandungan  protein  dan  asam  amino  sesuai kebutuhan pakan ternak.

## DAFTAR PUSTAKA
Aslamyah, S., Zainuddin, Badraeni, Umam, M. K., Lestari, A. D., & Haslinda. (2020). The effect of  protein  levels  in  fermentation  feed supplemented lumbricus sp. extract as feed additive on growth performance and body chemical  composition  of  milkfish,  Chanos chanos forskal 1775. {IOP} Conference Series: Earth and Environmental Science , 575 (1), 12036. Dewi, S. R., Sumarni, N., Izza, N., Putranto, A. W.,
& Susilo, B. (2019). Study of Pulsed Electric Field  Strength  and  Drying  Method  on Antioxidant  of  Torbangun  (Coleus amboinicus  L.)  Extract. Jurnal  Keteknikan Pertanian , 07 (1), 91–98.
Hawa, L. C., & Putri, R. I. (2011). Penerapan Pulsed Electric  Field  Pada  Pasteurisasi. Agritech ,
31 (4), 352–358.
Hawa, L. C., Susilo, B., & Jayasari, N. E. (2011). Studi
14.36 13.87 15.87 15.04 16.35 0 5 10 15 20 25 Kontrol 27 30 N ila i K ek un in gan (b ) Suhu (°C) 30 detik 60 detik
Komparasi  Inaktivasi  Escherichia  coli  dan Perubahan Sifat Fisik pada Pasteurisasi Susu Sapi  Pemanasan  Dengan  Kejut  Medan Listrik. Teknologi Pertanian , 12 (1), 31–39. Istiqomah, L., Sakti, A. A., Suryani, A. E., Karimy, M. F., Anggraeni, A. S., & Herdian, H. (2017). Effect  of  feed  supplement  containing earthworm  meal  (Lumbricus  rubellus)  on production performance of quail (Coturnix coturnix  japonica). {IOP}  Conference  Series: Earth and Environmental Science , 101 , 12032. Izza, N., Dewi, S. R., Putranto, A. W., & Yuneri, D. (2016). Extraction of Phenolic Compounds from Cosmos  caudatus  Using  Pulse  Electric  Field (PEF). Jurnal Teknologi Pertanian , 17 (2), 91–96. Maulida, A. A. A., & Riawan, N. (2015). Budidaya Cacing Tanah Unggul . Agromedia Pustaka. Nalunga, A., Komakech, A. J., Jjagwe, J., Magala, H.,  &  Lederer,  J.  (2021).  Growth characteristics  and  meat  quality  of  broiler chickens fed earthworm meal from Eudrilus eugeniae as a protein source. Livestock Science , 245 , 104394.
Pamungkas,  W.  (2011).  Teknologi  Fermentasi, Alternatif Solusi Dalam Upaya Pemanfaatan Bahan Pakan Lokal. Media Akuakultur , 6 (1), 43. Pranata, A. A. (2017). Inaktivasi Enzim Lipoksigenase Pada  Sari  Edamame  (Glycine  max)  dengan Pulsed Electric Field (PEF). Universitas Jember. Priyanto, A. D., Wicaksono, L. A., & Putranto, A. W. (2021). Pengaruh Suhu dan Waktu Pre- Heating pada Kualitas Fisik, Total Mikroba dan Organoleptik Susu Kolagen Sapi yang Dipasteurisasi
Menggunakan Pulsed Electric  Field. Jurnal  Keteknikan  Pertanian Tropis Dan Biosistem , 9 (2), 141–153.
Putranto,  A  W,  Dewi,  S.  R.,  Puspitasari,  Y.,  & Nuriah,  F.  A.  (2018).  Optimization  of  free radical  scavenging  capacity  and  pH  of Hylocereus  polyrhizus  peel  by  Response Surface Methodology. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science , 131 , 12051. Putranto, Angky Wahyu. (2014). Rancang Bangun dan Optimasi Total Karoten Jus Wortel (Daucus Carrota L.) Menggunakan Pulsed Electric Field Sistem Batch . Universitas Brawijaya.
Putranto, Angky Wahyu, Abida, S. H., Adrebi, K.,
&  Harianti,  A.  (2020).  Lignocellulosic Analysis of Corncob Biomass by Using Non- Thermal  Pulsed  Electric  Field-NaOH Pretreatment. Reaktor , 20 (4), 183–191.
Putranto, Angky Wahyu, Argo, B. D., & Wijana, S. (2014). Green Pulsed Electric Field-Assisted Extraction  Method  of  Total  Carotenoid
Carrot  Pulp  Using  Olive  Oil  as  Solvent. Indonesian Green Technology Journal , 3 (1), 1–9. Putranto, Angky Wahyu, Priyanto, A. D., Estiasih, T.,  Widyasari,  W.,  &  Munarko,  H.  (2022). Optimasi  Waktu  Pre-Heating  dan  Waktu Pulsed Electric Field terhadap Total Mikroba dan  Sifat  Fisik  Susu. Jurnal  Ilmiah  Rekayasa Pertanian Dan Biosistem , 10 (1), 39–48. Rahim, A. R. (2018). Pemanfaatan Limbah Tambak Ikan  Untuk  Budidaya  Cacing  Tanah Lumbricus rubellus. Jurnal Perikanan Pantura (JPP) , 1 (2), 1.
Sadiyah,  H.,  Hidayat,  N.,  &  Rahmah,  L.  (2018). Optimasi  Kadar  N-Amino  Dan  Padatan Terlarut Total Pada Ekstrak Cacing Tanah ( Lumbricus  Rubellus  )  Dengan  Kajian Konsentrasi  Garam  Dan  Waktu  Inkubasi Optimization  of  N-Amino  and  Total Dissolved  Solids  in  Earthworm  Extract  ( Lumbricus rubellus ) with Study. Journal of Food and Life Sciences , 2 (1).
Sharma, P., Oey, I., & Everett, D. W. (2014). Effect of pulsed  electric  field  processing  on  the functional properties of bovine milk. Trends in Food Science & Technology , 35 (2), 87–101. Sumarlan, S. H., Dwi, R., Liani, A., Yulianingsih, R.,
&  Indriani,  D.  W.  (2014).  Voltage  and Frequecy  Effect  to  Characteristic  and Amount  of  Microorganism  of  Starfruit Extract  (Averrhoa  carambola  L.). Jurnal Teknologi Pertanian , 15 (1), 47–58.
Triasih,  D.,  Laksanawati,  A.  T.,  &  Nurlailatul,  S.
(2020).  Karakteristik  Penambahan  Angkak Terhadap  Sifat  Fisik  dan  Organoleptik Salami. Seminar Nasional Terapan Riset Inovatif (SENTRINOV) Ke-6 , 1233–1240. Winny, L. (2014). Kualitas Minuman Probiotik Ekstrak Mahkota dan Kelopak Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa  L.). Universitas  Atma  Jaya Yogyakarta.
Yanuar,  S.  E.,  &  Sutrisno,  A.  (2015).  Minuman Probiotik dari Air Kelapa Muda-Yanuar, dkk. Jurnal Pangan Dan Agroindustri , 3 (3), 909–917. Yanuartono, Purnamaningsih, H., Nururrozi, A., & Indarjulianto,  S.  (2017).  Saponin :  Dampak terhadap Ternak (Ulasan). Jurnal Peternakan Sriwijaya , 6 (2), 79–90. Yulvizar, C. (2013). Isolasi dan Identifikasi Bakteri Probiotik pada Rastrelliger sp. Isolation and Identification  of  Probiotic  Bacteria  in Rastrelliger sp. Biospecies , 6 (2), 1–7.