## UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK MENIRAN TERHADAP PERTUMBUHAN Candida albicans YANG DIISOLASI DARI  PLAT GIGI TIRUAN LEPASAN AKRILIK
Ari Krisanda Sianturi 1) , Vonny N.S Wowor 1) , P. L. Suling 1 )
1) Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran Universitas Sam Ratulangi E-mail : krisandaari@gmail.com

## ABSTRACT
Herbal  plants  in  Indonesia  is common  used as  medicine.  One  of  the  natural  ingredient  that can be used is Meniran (Phylantus Nirruri L). Meniran has chemical compounds that inhabiting fungi such as flavonoid, tannin, and saponin. Candida albicans is normal flora in oral cavity but in acrylic users  denture,  Candida  albicans  can  rapidly  grows  if  acrylic  user  denture  don’t  keep  their  mouth cleanliness. Excessive growth of Candida albicans can causing infection in oral cavity of acrylic user denture.    Alterntive  way  to  prevent  Candida  albicans  is  by  using  Meniran.  The  purpose  of  this research is to find out if the antifungi extract of Meniran effective to inhabiting the growth of Candida albicans and to rate the amount effect of Meniran extract against Candida albicans observed from it’s inhabiting zone. This research is experimental research using post-test only control group design with modification  of  Kirby  bauer  methods  using  filter  paper.  Meniran  extract  obtained  from  maceration method  using  96%  ethanol  solvent.  Candida  albicans  bred  from  the  smear  of  acrylic  plate  denture. This  research  result  obtained  from  total  diameter  of  inhibition  zone  of  Meniran  extract  against Candida albicans in the amount of 92,8 mm with a mean value of 18,5 mm. From this research can be concluded that Meniran extract has antifungi effect to inhabiting Candida albicans. Inhabiting zone of Meniran extract against Candida albicans is 18,5 mm.
Keywords : Meniran (phyllanthus niruri L), Candida albicans.

## ABSTRAK
Di  Indonesia  tanaman  herbal  telah  banyak  digunakan  sebagai  bahan  obat.  Salah  satu  bahan alami  adalah  tanaman  Meniran  ( Phyllanthus  niruri L . ). Tanaman  Meniran  memiliki  kandungan senyawa yang bersifat antijamur seperti flavonoid, tanin, dan saponin. Candida albicans merupakan flora  normal  didalam  mulut,  namun  pada  pengguna  gigi  tiruan  akrilik  Candida  albicans  dapat tumbuh  dengan  pesat  jika  tidak  dijaga  kebersihan  pada  gigi  tiruan  akrilik.  Pertumbuhan  jamur Candida  albicans  yang  berlebihan  dapat  menyebabkan  infeksi  pada  rongga  mulut  pengguna  gigi tiruan  akrilik.  Cara  alternatif  untuk  menanggulangi  jamur  Candida  albicans  yaitu  dengan menggunakan  tanaman  Meniran. Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  apakah  ekstrak  Meniran dapat menghambat pertumbuhan jamur Candida albicans yang diisolasi dari plat pengguna gigi tiruan lepasan akrilik. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental menggunakan desain post-test only control  group  design dengan  menggunakan  metode  difusi  lempeng  agar  Kirby-bauer  dengan menggunakan kertas saring. Ekstrak Meniran didapat dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Jamur Candida albicans dibiakkan dari hasil apusan pada plat gigi tiruan lepasan akrilik. Hasil  penelitian  didapatkan  rerata  diameter  zona  hambat  ekstrak  Meniran  sebesar  18,5  mm;  rerata diameter Ketonazol (kontrol positip) sebesar 47,8mm; dan pada Etanol 96% (kontrol  negatip) tidak terbentuk  zona  hambat.  Kesimpulan  bahwa  ekstrak  Meniran  memiliki  kemampuan  dalam menghambat  pertumbuhan  jamur Candida  albicans yang  diisolasi  dari  plat  pengguna  gigi  tiruan lepasan akrilik.
Kata kunci : tanaman Meniran ( Phyllanthus niruri L.), Candida albicans

## PENDAHULUAN
Gigi  merupakan  salah  satu  organ  tubuh manusia  yang  terletak  dalam  mulut  dan memiliki  beberapa  fungsi  yang  penting. Bentuk  gigi  dalam  mulut  berbeda-beda sesuai fungsinya dalam mengunyah makanan.  Fungsi  gigi lainnya  yakni berupa fungsi fonetik dan fungsi estetik.
Kehilangan  gigi  dan  tidak  segera  diganti dapat  menyebabkan  masalah  atau  gangguan pada  fungsi-fungsi  yang  dimaksud  (Jubhari, 2008).
Riset  Kesehatan  Dasar  Departemen
Kesehatan
Republik Indonesia (RISKESDAS)  Tahun  2007  melaporkan bahwa kehilangan gigi terbanyak ditemukan pada  kelompok  usia  65  tahun  ke  atas,  yaitu sebesar  17,6%  (Depkes,  2007). Penelitian yang dilakukan GlaxoSmithKline, menyatakan  bahwa  54%    masyarakat Indonesia  pengguna  gigi  tiruan  berusia  65 tahun ke atas (GlaxoSmithKline, 2013). Data ini memperlihatkan bahwa seiring bertambahnya  usia,  persentase  kehilangan gigi  semakin  besar,  dengan  demikian kebutuhan  akan  pemakaian  gigi  tiruan  juga semakin  meningkat.  Pemakaian  gigi  tiruan diperlukan apabila seseorang telah kehilangan  giginya.  Data  survei  Badan Penelitian  dan  Pengembangan  kesehatan tahun  2010  menunjukkan  bahwa  79,6% masyarakat Indonesia mendapatkan pelayanan  pencabutan  gigi  (Agtini,  2010). Hal ini menggambarkan besarnya kebutuhan akan pembuatan gigi tiruan.
Gigi  tiruan  merupakan  protesa  atau  alat tiruan  yang  menggantikan  sebagian  ataupun seluruh  gigi  asli  yang  hilang  serta  jaringan sekitarnya  agar  fungsi  yang  hilang  dapat dikembalikan. Namun seiring dengan lamanya  pemakaian  gigi  tiruan,  sering timbul  masalah  pada  kesehatan  pengguna
gigi  tiruan.  Salah  satu  masalah  yang  umum terjadi  pada  pengguna  yang  cenderung mengabaikan  kebersihan  mulut  dan  gigi tiruannya,yaitu denture  stomatitis atau stomatitis karena gigi tiruan. Penelitian yang dilakukan  Damayanti,  menyatakan  bahwa penyebab  utama denture  stomatitis yaitu keberadaan jamur Candida albicans
(Damayanti, 2009). Candida
albicans merupakan mikroorganisme normal dalam rongga mulut yang  bersifat  oportunistik  patogen.  Pada kondisi dimana keseimbangan jumlah mikroorganisme  dalam  mulut  terganggu, maka Candida  albicans dapat  berubah menjadi  patogen.  Pada  pemakai  gigi  tiruan yang  kurang  terjaga  kebersihan  mulutnya, terlebih  khusus  pemakai  gigi  tiruan  lepasan akrilik  dapat  membuat  jumlah  koloni Candida  albicans meningkat . Keadaan  ini dipicu  oleh  karena  karakteristik  permukaan plat  resin  akrilik  yang  banyak  mengandung porositas, terlebih permukaan plat gigi tiruan yang  berhadapan  dengan  mukosa  mulut tidak dipoles (Sugianiti, 2011).
Pemeliharaan  kebersihan  gigi  tiruan akrilik  dan  kebersihan  rongga  mulut umumnya  dilakukan  dengan  cara  menyikat menggunakan sikat gigi.  Khusus untuk gigi tiruan  selain  disikat  juga  dianjurkan  untuk direndam  dalam  larutan  pembersih  gigi tiruan. Larutan yang umum digunakan yakni larutan  sodium  hypochlorite.  Larutan  ini banyak  dijual  di  pasaran  namun  harganya relatif mahal, oleh sebab itu perlu dipikirkan bahan  alternatif  sebagai  pengganti  bahan pembersih  gigi  tiruan  yang  lebih  murah. Salah  satu  alternatif  pilihan  yakni  dengan meningkatkan penggunaan tumbuhan berkhasiat  sebagai  bahan  obat  herbal (Brooks dkk, 1996).
Pengobatan dengan menggunakan bahan herbal  memiliki  keunggulan  antara  lain relatif lebih aman karena  berasal  dari bahan alami, mudah diperoleh dan dikembangbiakan. Indonesia merupakan salah  satu  daerah  yang  kaya  akan  berbagai tumbuhan  berkhasiat.  Salah  satu  tumbuhan berkhasiat  yang  memenuhi  kriteria  sebagai bahan  obat  herbal,  yaitu  tanaman  Meniran. Tanaman  Meniran  merupakan  salah  satu tanaman  yang  antara  lain  mengandung senyawa  golongan  flavonoid.  Flavonoid merupakan  golongan  terbesar  senyawa fenol,  dimana  senyawa  fenol  dapat  bersifat antijamur (Damle, 2008).
Berdasarkan  beberapa  hal  yang  di kemukakan diatas, serta mengingat sebagian besar  pengguna  gigi  tiruan  lepasan  berada pada  usia  65  tahun  ke  atas  sehingga  turut berpengaruh  pada  berkurangnya  kesadaran untuk  membersihkan  gigi  tiruan,  maka penulis  tertarik  untuk  meneliti  lebih  lanjut tentang    daya  hambat  ekstrak  Meniran ( Phyllanthus niruri L.) terhadap pertumbuhan Candida albicans yang diisolasi dari gigi tiruan lepasan akrilik.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  Untuk  mengetahui  apakah ekstrak  Meniran  memiliki  daya  hambat terhadap  pertumbuhan Candida  albicans yang diisolasi dari plat pengguna gigi tiruan lepasan akrilik.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  laboratories dengan  desain post test only control group, yaitu observasi dilakukan  setelah  perlakuan.  Subjek  dari penelitian  ini  adalah  ekstrak  Meniran ( Phyllanthus  niruri L.)  dan  jamur Candida albicans yang  diisolasi  dari  plat  pengguna gigi  tiruan  akrilik  yang  pada  mukosa  mulut
di bawah plat gigi tiruan sudah menunjukkan tanda-tanda denture stomatitis .  Pembuatan  ekstrak  Meniran dilakukan  di  Laboratorium  Farmasi  MIPA Universitas Sam Ratulangi Manado. Pembuatan  ekstrak  Meniran  dilakukan dengan  terlebih  dahulu  mencuci  tanaman Meniran  yang  akan  digunakan,  kemudian memotongnya  kecil-kecil,  dan  dikeringkan di tempat yang tidak terkena sinar matahari. Setelah  itu,  Meniran  diblender  dan  hasilnya dimaserasi  dengan  pelarut  etanol  96%. Setelah  dimaserasi  kemudian                hasilnya difiltrasi  sebanyak  tiga  kali  agar  ekstrak yang  diperoleh  nanti  benar-benar  murni. Hasil  dari  filtrasi  selanjutnya  dievaporasi menggunakan evaporator. Selanjutnya, hasil dari evaporasi diletakkan dalam oven selama 1x24  jam.  Setelah  dioven,  hasil  dari ekstraksi dimasukkan ke dalam wadah untuk siap digunakan.
Isolasi  dan  penanaman  jamur  pada media  agar  S abouraud    Dextrose dimulai dengan membawa relawan yang menggunakan  gigi  tiruan  lepasan  akrilik  ke laboratorium. Plat gigi tiruannya dilepas dari mulut, kemudian diambil apusannya dengan menggunakan  kapas  lidi  steril.  Sebelum jamur  ditanam  pada  media  agar  S abouraud Dextrose ,  bagian  belakang  cawan  petri dibagi menjadi 3 bagian dengan menggunakan  spidol.  Jamur  yang  sudah diambil  apusannya  kemudian  dioleskan merata pada media agar S abouraud Dextrose , kemudian diinkubasi dengan suhu 37 0 C  selama  24  jam.  Koloni    yang  tumbuh sebagian  diambil  dan  diberi  pewarnaan Gram  untuk  diidentifikasi  sebagai Candida sp . dengan menggunakan mikroskop.
Sediaan yang sudah direkat, diwarnai dengan  menggunakan  karbol  kristal  ungu selama  5  menit,  kemudian  zat  warna
dibuang  dan  diganti  dengan  larutan  lugol dan  dibiarkan  selama  45-60  detik.  Setelah itu larutan lugol  dibuang dan sediaan dicuci dengan menggunakan etanol 96% selama 30 detik atau digoyang-goyangkan sampai tidak ada  zat  warna  yang  mengalir  lagi.  Sediaan dicuci  dengan  air  dan  diwarnai  dengan  air fukhsin  selama  1-2  menit.  Setelah  itu sediaan  dicuci  dan  dikeringkan    kemudian diperiksa di bawah mikroskop.
Untuk  mengidentifikasi  jamur Candida albicans dilakukan  pengambilan  darah sebanyak 3 cc. Selanjutnya darah dimasukan ke  dalam  flakon  dan  dilakukan sentrifuge dengan  kecepatan  3000  rpm  selama  15 menit. Darah yang telah di sentrifuge diambil dan  disimpan.  Selanjutnya  serum  diambil 0,5  ml  dan  dimasukan  ke  dalam eppendorf , lalu ditambahkan 5-10 koloni jamur. Setelah itu  dievaluasi  selama  4  jam  dan  dilihat  di bawah mikroskop
pembentukan pseudohifanya.  Bila  terbentuk  pseudohifa maka  koloni  tersebut  merupakan  koloni Candida albicans .
Metode  pengujian  yang  digunakan adalah  metode  difusi  lempeng  agar  ( Kirby Bauer ) yang merupakan metode uji kepekaan langsung. Agar Sabouraud Dextrose disediakan  sebanyak  lima  cawan petri. Candida  albicans dioleskan  secara merata  dengan  menggunakan  kapas  lidi steril  pada  permukaan  agar Sabouraud Dextrose dan  dibiarkan  3-5    menit  dalam suhu  kamar.  Kertas  saring  dibentuk  seperti cakram  dengan  menggunakan perforator sebanyak  lima  belas  buah,  lima  cakram  di antaranya diberi ekstrak Meniran sedangkan lima  cakram  diberi  Ketokonazol  sebagai kontrol  positif,  dan  lima  cakram  diberi etanol 96% sebagai kontrol negatif. Cakram tersebut  lalu  diletakkan  di  media  agar Sabouraud  Dextrose yang  sudah  dioleskan
jamur Candida albicans di atasnya. Selanjutnya  dimasukan  ke  dalam  inkubator dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 0 C.  Setiap  cawan  petri  terdiri  dari  satu cakram  kelompok  intervensi  dan  satu cakram  kelompok  kontrol  positif  dan  satu cakram  kelompok  kontrol  negatif.  Diameter zona hambat yang terbentuk diukur menggunakan  jangka  sorong  menggunakan rumus :
D v + D h
2 Keterangan: D V : Diameter Vertikal
D H : Diameter Horizontal

## Gambar 1. Pengukuran diameter zona hambat

## HASIL PENELITIAN
Pengujian daya hambat dilakukan dengan  mengukur  zona  hambat,  yang terdapat  dalam  media  berisi  jamur Candida albicans setelah  inkubasi  selama  24  jam dengan suhu 37˚C. Pengukuran zona hambat dilakukan  menggunakan  jangka  sorong dengan  satuan  millimeter  dan  tingkat ketelitian  0,05  mm.  Diameter  yang  diukur yakni  diameter  vertikal    dan  diameter horizontal.  Titik  pengukuran  diambil  untuk jarak  vertikal  terbesar    dan  jarak  horizontal terbesar  untuk  masing-masing  zona  hambat yang  terbentuk  pada  media  agar Sabouraud Dextrose (Gambar 2).
D h D v
Gambar  2.  (A)  Ekstrak  Meniran;  (B)  Antijamur ketokonazol; (C) Etanol 96 %;            (D) Zona hambat  ekstrak  Meniran;  (E)  Zona  hambat antijamur ketokonazol
Tabel 1. Diameter zona hambat ekstrak Meniran terhadap  pertumbuhan jamur Candida  albicans dalam satuan milimeter (mm)
Diameter zona hambat (mm) Pengul angan Ekstrak meniran Kontrol positif (ketakon azol) Kontrol negatif (etanol 96%) 1 15, 5 47,9 0 2 22,7 50,1 0 3 18 49,4 0 4 19,3 45,3 0 5 17,3 46,7 0 Rerata 18,5 47,8 0
Tabel 1 menunjukkan bahwa pada media agar pertama, diameter zona hambat ekstrak Meniran  sebesar  15,5  mm,  kemudian  pada media  kedua  sebesar  22,7  mm,  diameter zona  hambat  pada  media  ketiga  sebesar  18 mm,  pada media ke empat didapat diameter sebesar  19,3  mm,  dan  pada  media  terakhir diperoleh  hasil  diameter  zona  hambat sebesar  17,3  mm.  Rerata  diameter  zona
hambat ekstrak Meniran pada ke lima media agar Sabouraud Dextrose sebesar 18,5 mm.
Tabel  1  juga  menunjukkan  Ketokenazol sebagai  kontrol  positif  memiliki  daya hambat    sebesar  47,9  mm  pada  media pertama,  sebesar  50,1  mm  pada  media kedua,    dan  pada  media  agar  ketiga  didapat diameter zona hambat 49,4 mm, selanjutnya pada  media  keempat  sebesar  45,3  mm,  dan pada  media  terakhir  didapat  diameter  zona hambat  sebesar  46,7  mm.  Rerata  zona hambat  Ketokonazol  sebagai  kontrol  positif pada  kelima  media Sabouraud  Dextrose sebesar 47,8 mm.
Hasil  penelitian  pada  Tabel  1  juga menunjukkan  bahwa  Etanol  96%  sebagai kontrol  negatif  tidak  menunjukkan  adanya pembentukan zona hambat. Berikut ini pada Gambar 3 disajikan diagram hasil pengukuran  diameter  zona  hambat  terhadap pertumbuhan jamur Candida albicans.
Gambar  3.    Diagram  diameter  zona  hambat terhadap pertumbuhan    jamur Candida albicans

## PEMBAHASAN
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  dengan pengulangan sebanyak 5 (lima) kali memperlihatkan  terbentuknya  zona  hambat di  sekitar  kertas  saring  yang  mengandung
0 20 40 60 media 1 media 2 media 3 media 4 media 5

## Diagram Diameter Zona Hambat
Ekstrak meniran (Phyllanthus Niruri Linn) Kontrol positif (ketokonazol) Kontrol negatif (etanol96%) D B A C E
ekstrak Meniran, demikian halnya di sekitar kertas saring Ketokonazol. Hasil ini membuktikan bahwa ekstrak Meniran memiliki  efek  antijamur,  sama  halnya dengan  kontrol  positip  yakni  Ketokonazol. Terbentuknya  zona  hambat  di  sekitar  kertas saring  yang  mengandung  ekstrak  Meniran membuktikan  bahwa  tanaman  Meniran memiliki  kemampuan  untuk  menghambat pertumbuhan  jamur Candida  albicans .  Efek antijamur  dimiliki  oleh  tumbuhan  Meniran karena  tumbuhan  ini  mengandung  senyawa alkaloid,  flavonoid  serta  tanin  yang  mampu menghambat pertumbuhan Candida albicans (Damle,  2008). Sebaliknya  pada kertas saring yang mengandung Etanol 96% tidak  terbentuk  zona  hambat,  karena  Etanol 96%  sebagai  kontrol  negatip  memang  tidak memiliki efek antijamur.
Hasil pengukuran diameter zona hambat menunjukkan hasil yang berbeda-beda untuk masing-masing  kertas  saring,  baik  kertas saring  yang  mengandung  Ekstrak  Meniran maupun  kertas  saring  Ketokonazol  (Tabel 1). Keadaan ini menunjukkan bahwa ekstrak Meniran  serta  Ketokonazol  tidak  memiliki diameter  zona  hambat  yang  sama  di  setiap media.  Hal  ini  terjadi  karena  metode  kertas saring yang digunakan memiliki kekurangan yaitu  tidak  bisa  mengontrol  banyaknya senyawa  aktif  yang  terserap  pada  masing- masing  kertas  saring,  sehingga  membuat diameter zona hambat berbeda-beda walaupun diambil dari suspensi yang sama.
Ada  beberapa  cara  atau  metode  untuk melakukan uji daya hambat selain menggunakan  metode  kertas  saring.  Cara yang  sering  digunakan  juga  yaitu  metode sumur.  Metode  ini  bisa  saja  memberikan hasil  yang  sedikit  berbeda  dari  metode kertas  saring,  karena  metode  ini  tidak menggunakan  media  perantara  seperti  pada
kertas  saring  tetapi  menggunakan  ekstrak secara  langsung  yang  dimasukkan  dalam sumur pada media agar.
Di  sekitar  kertas  saring  Ketokonazol terlihat  pertumbuhan  jamur  cukup  jauh menjauhi  kertas  saring  daripada  ekstrak Meniran.  Rerata  hasil  pengukuran  diameter zona  hambat  pada  ekstrak  Meniran  sebesar 18,5 mm dan pada Ketokonazol sebesar 47,8 mm. Hasil ini menunjukkan bahwa Ketokonazol  memiliki  efek  antijamur  yang lebih  besar  dibandingkan  ekstrak  Meniran. Hal ini terlihat demikian karena Ketokonazol  memang  sudah  merupakan sediaan  obat  antijamur  yang  sudah  teruji kemampuannya dan sudah umum digunakan dalam  dunia  kedokteran  sebagai  obat antijamur.  Ketokonazol  bekerja  dengan menghambat enzim sitokrom jamur sehingga  mengganggu  sintesis  ergosterol yang  merupakan  komponen  penting  dari membran sel jamur (Habib, 2004).
Efek  antijamur  ekstrak  Meniran  ada karena  peran  alkaloid,  tanin,  saponin  yang terkandung dalam tanaman Meniran. Alkaloid berikatan dengan ergosterol sehingga membentuk lubang yang menyebabkan kebocoran pada membran sel. Hal  ini  menyebabkan  kerusakan  pada membran  sel  jamur. Flavonoid  merupakan golongan  senyawa  fenol  (Setiabudy  & Bahry, 2007). Fenol bersifat antijamur, yang mempunyai kemampuan menambah permeabilitas  sel  dan  dapat  mengkoagulasi protein  pada  jamur  (Harliana,  2006). Tanin mempunyai efektifitas menghambat pertumbuhan Candida  albicans dengan cara menciutkan dan mengendapkan protein pada membran sel jamur larutan dengan membentuk senyawa yang tidak larut.
Rerata  diameter  zona  hambat  yang terbentuk  pada  ekstrak  Meniran  lebih  kecil
dibandingkan dengan antijamur ketokonazol , hal
ini mungkin dikarenakan  alkaloid,  flavonoid  dan  tannin dalam  tanaman  Meniran  memiliki  efek antijamur yang kurang dibandingkan Ketokonazol. Di samping itu belum diketahuinya Minimal Inhibitory Concentration ekstrak  Meniran  terhadap jamur Candida albicans juga turut memengaruhi hasil yang ada. Pada penelitian ini baru dibuktikan efek antijamur
dari Ekstrak Meniran.
Agar bisa ditingkatkan kemampuannya sehingga
memiliki efek sebagai  obat  antijamur, maka perlu dilakukan penelitian dengan konsentrasi yang ditingkatkan.

## KESIMPULAN
Ekstrak  meniran  memiliki  kemampuan dalam  menghambat  pertumbuhan  jamur Candida  albicans yang  diisolasi  dari  plat pengguna gigi tiruan akrilik.

## DAFTAR PUSTAKA
Agtini  DM.  2010.  Presentase  pengguna protesa di Indonesia. [serial online].
Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan  Departemen  Kesehatan  RI. 2007. Laporan  hasil  riset  kesehatan dasar (Riskesdas) nasional . Jakarta.
Brooks,  G.  Jawetz,  Melnick  dan  Adelberg.
1996. Mikrobiologi  kedokteran Edisi 20. EGC. Jakarta. h. 627-9
Damayanti,  L.  2009. Respon  jaringan terhadap  gigi  tiruan  lengkap  pada
pasien usia lanjut. Makalah. Bandung: Bagian Prostodonsia Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Padjadjaran. 2009. Damle  MC. Phyllantus  Niruri .  2008. Available from: http://www.pharmainfo.net/  reviews/
phyllanthus-niruri.  Diunduh  Maret
2016.
GlaxoSmithKline.  2013. Pengguna  gigi tiruan online. [serial online].
Habif  TP.  2004.  Clinical  dermatology. Mosby: Edinburgh.
Harliana.  2006. Aktivitas  antijamur  ekstrak rimpang temu glenyeh . Skripsi. Fakultas MIPA UNS. Surakarta. h. 16.
Jubhari EH. 2007. Upaya untuk mengurangi preparasi  gigi  :  Fung  shell  bridge.
Jurnal  Kedokteran  Gigi  Dentofasial . h. 6(1):27-9.
Setiabudy,  R.    Bahry,  B.2007. Farmakologi dan  terapi:  Obat  Jamur. Edisi  5. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.. h. 571-84. Sugianitri  NI.  2011. Ekstrak  biji  buah pinang(areca catechu L.) dapat menghambat pertumbuhan koloni candida  albicans secara in  vitro pada resin aklirik head cured. [thesis]. Bali.
Universitas Udayana.