## PENGARUH HORMON HIPOFISA DAN OVAPRIM TERHADAP OVULASI KATAK SERTA PERBEDAAN PAKAN TERHADAP  PERTUMBUHAN BERUDU KATAK  Fejervarya cancrivora
Ardyah Ramdhina Irsanti Putri 1) ., Nia Kurniawan 1) ., Agung Pramana Warih Marhendra 1)
1) Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya, Malang ir.dhien@gmail.com, wawanunibraw@yahoo.com,

## ABSTRAK
Katak  Fejervarya  cancrivora  merupakan  kelompok  dari  kelas  amfibi  yang  habitatnya  sangat dipengaruhi  oleh  perubahan  kondisi  habitat  dan  aktivitas  manusia.  Salah  satu  upaya  untuk mempertahankan  keanekaragaman  hayati  yaitu  memanfaatkan  teknologi  reproduksi  buatan  dengan melakukan  induksi  pematangan  gonad  menggunakan  hormon  hipofisa  dan  ovaprim.  Tujuan  penelitian ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  hormon  hipofisa  dan  ovaprim  terhadap  pematangan gonad  dan  keberhasilan  fertilisasi  pada  katak  Fejervarya  cancrivora,  serta  mengetahui  pengaruh perbedaan  pemberian  pakan  pada  pertumbuhan  berudu  katak  Fejervarya cancrivora.  Injeksi  dilakukan pada  katak  betina  yang    hampir  matang  gonad  dengan  total  dosis  injeksi  250  µl  secara  intraperitonial. Setelah dipijahkan dan difertilisasi, telur dipelihara sampai menetas dan diberikan dua perlakuan pakan, yaitu  pakan  bayam    rebus  (P1)  serta    pakan  bayam  rebus  dan  kuning  telur  rebus  (P2). Hasil  penelitian menunjukkan  pada  perlakuan  injeksi  hipofisa  dihasilkan  telur  632  butir  sel  telur  dan  berhasil  menetas 65,67%    dan  perlakuan  injeksi  ovaprim  sebanyak  108  butir  sel  telur  dan  dapat  menetas  75,92%.  Hasil perlakuan  P1  dan  P2  pada  kedua  jenis  injeksi  tidak  terdapat  perbedaan  panjang  (p>0,05)  namun terdapat perbedaan berat (p<0,05) pada perlakuan selama masa metamorfosis. Persentase jumlah berudu yang  berhasil  bermetamorfosis  sempurna  pada  perlakuan  injeksi  hipofisa  sebanyak  41,12%,  sedangkan pada perlakuan injeksi ovaprim sebanyak 31,67%.
Kata kunci : Fejervarya cancrivora, hipofisa, ovaprim, pakan, pertumbuhan

## ABSTRACT
Fejervarya  cancrivora  is  an  amphibian  which  its  habitat  is  strongly  influenced  by  the  conditions  of  the habitat  and  human  activities.  One  of  the  efforts  to  maintain  the  biodiversity  is  using  artificial reproduction  technologies  by  pituitary  hormones  and  ovaprim  injection  to  induce  gonadal  maturation. The purpose of this study was to determine the effect of pituitary hormones (Hip) and ovaprim (Ova) on gonadal  maturation  and  fertilization  success  in  Fejervarya  cancrivora,  and  to  understand  the  effect  of different  feeding  on  the  growth  of  tadpoles.  Injections  were  performed  on  early  mature  gonads  female frogs  with  a  total  dose  of  250  µl,  using  intraperitonial  injection.  After  spawned  and  fertilized,  the  eggs reared  until  hatched  and  given  with  two  different  feed treatments  such  as,  feed  boiled  spinach  (P1)  and boiled spinach with boiled egg yolk (P2). Results showed the treatment pituitary can lying 632 eggs cells (100%) and only 65.67% hatched, treatment ovaprim lying 108 egg cells (100%) and only 75.92% of eggs can  hatched.  The  results  of  P1  and  P2  treatment  of  pituitary  and  ovaprim  injection  that  there  were  no length  difference  (p>0.05)  but  it  has  weight  difference  (p<0.05)  during  its  metamorphosis.  Percentage  of tadpoles  that  successfully  metamorphosed  by  pituitary  treatment  is  41.12%  and    ovaprim  treatment  is 31.67 %.
Key words: Fejervarya cancrivora, feed, growth, pituitary, ovaprim

## PENDAHULUAN
Fejervarya cancrivora Gravenhorst 1829,  merupakan  kelompok  dari  kelas  amfibi yang habitatnya sangat dipengaruhi oleh perubahan kondisi habitat dan aktivitas manusia. Aplikasi  teknologi  reproduksi  buatan  dalam penelitian  ini  untuk  menginduksi  pematangan gonad  dengan  injeksi  hormon  hipofisa  dan
hormon  dari  ovaprim  untuk  mempercepat  waktu ovulasi  sehingga  dapat  segera  dipijahkan.  Sel telur  yang  telah  difertilisasi  akan  menetas  dan mengalami  pertumbuhan  dan  perkembangan, keduanya  sangat  dipengaruhi  dari  jenis  pakan yang  diberikan.  Umumnya  berudu  adalah herbivora [6] ,  penelitian  ini  menggunakan  dua jenis variasi, yaitu antara pakan bayam rebus dan pakan  bayam  dengan  tambahan  kuning  telur.
Pertumbuhan  dan  perkembangannya  diamati sampai metamorfosis sempurna. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian  hormon  hipofisa  dan  ovaprim terhadap  pematangan  gonad  dan  keberhasilan fertilisasi  pada  katak  Fejervarya  cancrivora, serta mengetahui pengaruh perbedaan pemberian pakan pada pertumbuhan berudu katak Fejervarya  cancrivora.Harapan  kedepan  dalam penelitian  ini  adalah  memberikan  informasi mengenai  efek  pemberian  hormon  terhadap kematangan gonad katak serta pengaruh pemberian pakan terhadap selama masa pertumbuhan berudu katak Fejervarya cancrivora.

## METODE PENELITIAN

## Injeksi hormon hipofisa dan ovaprim.
Teknologi  reproduksi  buatan  dengan injeksi  hormon  menggunakan  lima  ekor  katak Fejervarya cancrivora betina yang diperoleh dari area  persawahan  di  Kecamatan  Blimbing,  Kota Malang  digunakan  dalam  penelitian.  Tiga  ekor untuk  diinjeksi  hormon  hipofsa  dan  dua  ekor untuk injeksi ovaprim. Kelenjar hipofisa diperoleh  dari  hipofisa  katak  Fejervarya  sp.  dan ovaprim  merk  Syndel  diperoleh  dari  unit penyedia komersil. Digunakan satu buah hipofisa per  ekor  katak  betina  dengan  penambahan Phospat  buffer  saline  (PBS)  sebagai  pelarut, sedangkan dosis injeksi ovaprim sebesar 1 ml/kg dengan  penambahan  NaCl  Fisiologis  0,9% sebagai pelarut. Injeksi dilakukan secara intraperitonial dengan total dosis masing-masing hormon sebesar 250µl per ekor.

## Fertilisasi in vitro
Fertilisasi dilakukan sesaat setelah katak betina dapat dipijahkan dan ditambahkan larutan sperma.  Pemijahan  dilakukan  14  sampai  16  jam setelah injeksi, dengan cara melakukan stripping di  bagian  dorsal  menuju  kloaka,  sedangkan sperma  diperoleh  dari  sepasang  testis  katak Fejervarya  candrivora  jantan  untuk  masing- masing  katak  betina  yang  dapat  dipijah.  Hasil koleksi  testis  diletakkan  dalam  cawan  petri  dan ditambahkan NaCl Fisiologis 0,9% dan dipotong-potong dengan gunting bedah, kemudian  dilakukan  konfirmasi  kualitas  sperma meliputi  motilitas,  konsentrasi  sperma,  dan viabitilas. Fertilisasi dilakukan dalam bak plastik steril, sepuluh menit setelah fertilisasi, bak dialiri dengan  dechlorinated  water  untuk  pemeliharaan embrio hingga menetas.

## Pemberian pakan dan pemeliharaan
Berudu  dipelihara  dalam  bak  plastik dengan  kedalaman  air  15  cm  dan  dikuras  tiap tiga  hari  sekali.  Air  yang  digunakan  merupakan air yang bebas kandungan kaporit (dechlorinated water)  dengan  cara  menambahkan  4  gram sodium  thiosulfat  ke  dalam  100  liter  air  tap. Berudu  pada  fase  feeding  tadpole  diberikan  dua jenis  perlakuan  pakan,  pertama  pakan  bayam rebus setiap hari (P1), kedua pakan bayam rebus setiap  hari  kecuali  dan  kuning  telur  rebus  tiap tiga  hari  sekali  (P2).  Setelah  kaki  depan  dan belakang  sudah tampak,  pemeliharaan  dilakukan dalam  bak  pada  kemiringan  10 o sehingga terdapat  daerah  yang  tergenang  air  dan  daerah yang  kering  serta  diberikan  tempat  pijakan [5] serta  diberi  Salvinea  sp.  atau  tanaman  yang tumbuh di perairan sawah. Pengamatan dilakukan  pada  setiap  fase  secara  bertahap sampai  perkembangan  katak  sempurna  dan didokumentasikan menggunakan kamera digital.

## Analisa data
Parameter  untuk  mengetahui  tingkat keberhasilan reproduksi katak mencakup persentase jumlah sel telur yang dapat dipijahkan,  persentase  sel  telur  yang  berhasil terfertilisasi,  persentase  jumlah  sel  telur  yang hatching  (menetas),  persentase  jumlah  tadpole yang bertahan hidup sampai terjadi metamorfosis menjadi  katak  sempurna  pada  masing-masing perlakuan pakan. Selain itu diamati pertumbuhan berdasarkan  panjang  dan  berat  berudu  pada masing-masing perlakuan. Data dianalisis dengan  menggunakan  software  Microsoft  Excel dan  software  SPSS  16.0  for  windows  dengan independent t-test.

## .HASIL DAN PEMBAHASAN

## Efek injeksi hormon hipofisa dan ovaprim
Peran  hormon  hipofisa  dalam  injeksi khususnya  terletak  pada  kandungan  LH  untuk induksi ovulasi, sebab kondisi fisiologis sel telur katak  telah  melalui  tahapan  pematangan  sel folikel  oleh  FSH  sehingga  upaya  pemberian injeksi hipofisa dalam penelitian ini meningkatkan  jumlah  LH  yang  menyebabkan sintesis progesteron yang berada di sel-sel folikel yang  mengelilingi  oosit,  sehingga  progesteron dapat  berikatan  pada  reseptor  oosit  untuk menginduksi  terjadinya  ovulasi [8] .  Kelebihan penggunaan  ovaprim  yaitu  terdapat  kandungan anti-dopamin yang berfungsi untuk menghambat sintesis  dopamin,  sehingga  sekresi  gonadotropin
tidak  terhambat.  Sekresi  gonadotropin  yang terhambat  akan  berimbas  pada  berkurangnya hormon  LH  dan  FSH  di  dalam  tubuh  sehingga proses pematangan gonad akan ikut menurun dan terhenti [1] .  Setelah  injeksi,  efek  pemberian hormon hipofisa diketahui secara morfologi pada bagian  abdomen  menjadi  lebih  gelap  dalam waktu dua jam. Hasil dari tiga ekor katak betina yang  telah  diinjeksi  hipofisa,  hanya  satu  ekor katak  betina  yang  dapat  dipijahkan,  sedangkan dua  ekor  yang  lain  tidak  bertelur.  Hasil  injeksi ovaprim,  dua  ekor  katak  betina,  satu  ekor  mati dan  satu  ekor  berhasil  dipijahkan.  Jumlah  sel telur  yang  dihasilkan  pada injeksi  ovaprim  lebih sedikit  bila  dibandingkan  dengan  hasil  injeksi hipofisa.  Hal  ini  dimungkinkan  dapat  terjadi sebab  lokasi  target  dari  injeksi  ovaprim  adalah untuk  menginduksi  kelenjar  pituitari,  sedangkan injeksi  hipofisa  untuk  menstimulasi  reseptor  di sel  telur,  sehingga  untuk  mencapai  sel  target pada  injeksi  ovaprim  membutuhkan  waktu  yang lebih lama dan kompleks.

## Hasil fertilisasi dan pertumbuhan embrio
Hasil pengamatan motilitas sperma katak berdasarkan  kriteria  penilaian  gerak  massa termasuk dalam kategori sangat baik (Susilawati, 2011),  yaitu  geraknya  sangat  cepat  dan menyeluruh  di  semua  bidang  pandang  bila dibandingkan  dengan  individu  yang  tidak bergerak  atau  mati.  Sedangkan  pada  motilitas individu,  beberapa  terlihat  bergerak  memutar, gerakan  maju  dan  beberapa  tidak  bergerak  atau mati. Gerakan maju yang kuat pada spermatozoa merupakan indeks daya hidup yang penting bagi spermatozoa.    Jumlah  konsentrasi  sperma  hasil pengamatan  sebanyak  2,3 х 10 6 .  Uji  viabilitas menunjukkan  tingkat  hidup  sperma  yang  lebih tinggi  dibandingkan  jumlah  yang  mati  sebab setelah penambahan eosin negrosin tidak ada zat pewarna yang menembus membran spermatozoa.
Fase pembelahan sel telur katak berlangsung  selama  tiga  setengah  jam  setelah terfertilisasi.  Tahapan  pembelahan  sel  telur dimulai  sesaat  setelah  sperma  membuahi  sel telur,  sel  telur  akan  terbungkus  oleh  dua  layer yang disebut zona pelusida dan membran vitelin. Pembelahan  pertama  disebut  cleavage,  64  sel hingga  128  sel  disebut  blastula,  kemudian dilanjutkan  dengan  tahap  gastrulasi  yang merupakan  pembentukan  tiga  lapisan  yaitu ektoderm, mesoderm, dan endoderm sebagai fase awal terjadinya diferensiasi sel.
Telur  akan  menetas  30-35  jam  setelah fertilisasi,  berdasarkan  jumlah  perhitungan  larva
yang  menetas,  perlakuan  injeksi  hipofisa sebanyak  414  ekor  dan  perlakuan  injeksi ovaprim sebanyak 82 ekor. Kurang lebih 60 jam setelah  fertilisasi,  selanjutnya  diikuti  oleh perkembangan  tutup  insang  yang  disebut operculum  akan  terbentuk  sempurna  setelah  96 jam (empat hari) setelah fertilisasi [10] . Pertumbuhan  telur  katak  menjadi  katak  muda terbagi  menjadi  tiga  fase  utama,  yaitu  fase perkembangan  sel  telur,  fase  larva,  dan  fase metamorfosis berudu katak.
Awal metamorfosis berudu katak nampak    oleh  munculnya  kaki  belakang  (hind limb) pada minggu kedua yaitu antara hari ke 14 sampai  hari  ke  16.  Hasil  Hip-P1  dan  Hip-P2 menunjukkan  perbandingan  persentase  sebesar 19,69%  dan  19,22%  dengan  jumlah  individu Hip-P1 sebanyak 171 ekor dan Hip-P2 sebanyak 162  ekor.  Perkembangan  selanjutnya  sampai tahap  munculnya  kaki  depan  (fore  limb) perbandingan persentase P1 sebesar 17,04% dan P2  sebesar  16%  dengan jumlah  individu  Hip-P1 sebanyak 120 dan individu Hip-P2 sebanyak 100 ekor. Fase berudu (feeding tadpole) menunjukkan  persentase  berudu  katak  sebanyak 37,96%  pada  masing-masing  perlakuan  Ova-P1 dan  Ova-P2.    Fase  pertumbuhan  kaki  belakang (hind  limb)  pada  perlakuan  Ova-P1  sebanyak 26,7% berudu katak dan Ova-P2 sebanyak 23,9% berudu  katak.  Memasuki  fase  pertumbuhan  kaki depan (fore limb) sebanyak 24,25% berudu katak pada  perlakuan  Ova-P1  dan  19,33%  berudu katak pada perlakuan Ova-P2 (Tabel 1).
Tabel  1.  Persentase  kemampuan  perkembangan berudu  Fejervarya  cancrivora  perlakuan hipofisa dan ovaprim
Perlakuan injeksi Parameter Telur (%) Meneta s (%) Berudu (%) Hind limb (%) Fore limb (%) Katak (%) Hipofisa 632 (100) 414 (65,67) 207 (32,835)* 171 (19,69) * 120 (17,04) * 105 (16,26)* 207 (32,835)* * 162 (19,2)* * 100 (16)** 89 (15,43)** Ovaprim 108 (100) 82 (75,92) 41 (37,96)* 35 (26,7)* 28 (24,25) * 23 (22,49)* 41 (37,96)** 27 (23,9)* * 14 (19,3)* * 12 (18,6)**
* = P1, ** = P2

## Pertumbuhan berudu
Berdasarkan hasil penelitian, Hip-P2 dan Ova-P2 selesai bermetamorfosis pada hari ke 44, sedangkan  perlakuan  Hip-P1  dan  Ova-P1  baru berakhir  pada  hari  ke  46.  Pengaruh  pakan  pada perlakuan  injeksi  hipofisa  P1  dan  P2  diketahui
terjadi  perbedaan  berat  harian pada  hari  ke  22,  26,  dan  hari  ke  28.  Rata setelah hari ke 14, terjadi peningkatan penambahan  berat  Hip-P2  bila  dibandingkan dengan  perlakuan  Hip-P1.  Sedangkan  pada pertumbuhan  panjang,  perlakuan  Hip cenderung lebih panjang pada hari ke 18, 26, 28, dan  puncak  panjang  maksimal  pada  hari  ke  32. Namun  setelah  hari  ke  32,  panjang  rata berudu Hip-P2 menurun lebih cepat dibandingkan  perlakuan  Hip-P1 Hasil uji statistik dari kedua perlakuan P1 dan P2 pada  injeksi  hipofisa  tidak  terdapat  perbedaan panjang yang signifikan selama masa metamorfosis  yaitu  sebesar  0,36  (p>0,05). Namun  berat  pada  perlakuan  P1  dan  P2  pada injeksi  hipofisa  sampai  metamorfosis  berakhir terdapat perbedaan yang signifikan yaitu sebesar 0,03 (p<0,05).
Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan  dan  perkembangan  pada  berudu antara lain kondisi air, jumlah asupan pakan, dan tingkat kerapatan individu dalam wadah
pemeliharan [4] .  Pemberian  pakan  konvensional dapat menyebabkan kondisi lingkungan air kotor dan  mudah  terkontaminasi,  hal  ini  dapat memengaruhi  tingkat  survival  rate pertumbuhan.  Bayam  rebus  menyebabkan  air menjadi  mudah  keruh  dan  nutrisi  yang dikandung  bayam  rebus  tidak  dapat  memenuhi kebutuhan  selama  fase  metamormosis,  selain  itu
Gambar 1. Perubahan (a) berat dan (b) panjang pada dua jenis injeksi dan perlakuan pakan
terjadi  perbedaan  berat  harian  yang  signifikan pada  hari  ke  22,  26,  dan  hari  ke  28.  Rata-rata setelah hari ke 14, terjadi peningkatan P2  bila  dibandingkan P1.  Sedangkan  pada pertumbuhan  panjang,  perlakuan  Hip-P2  dan hari ke 18, 26, 28,
dan  puncak  panjang  maksimal  pada  hari  ke  32. Namun  setelah  hari  ke  32,  panjang  rata-rata
P2 menurun lebih cepat P1  (Gambar  1). uji statistik dari kedua perlakuan P1 dan P2 a  tidak  terdapat  perbedaan panjang yang signifikan selama masa metamorfosis  yaitu  sebesar  0,36  (p>0,05). Namun  berat  pada  perlakuan  P1  dan  P2  pada injeksi  hipofisa  sampai  metamorfosis  berakhir terdapat perbedaan yang signifikan yaitu sebesar
faktor yang mempengaruhi pertumbuhan  dan  perkembangan  pada  berudu antara lain kondisi air, jumlah asupan pakan, dan tingkat kerapatan individu dalam wadah
emberian  pakan  konvensional dapat menyebabkan kondisi lingkungan air kotor ,  hal  ini  dapat survival  rate  selama  masa ayam  rebus  menyebabkan  air menjadi  mudah  keruh  dan  nutrisi  yang dikandung  bayam  rebus  tidak  dapat  memenuhi kebutuhan  selama  fase  metamormosis,  selain  itu
setelah menyelesaikan fase metamorfosis ditemukan  kandungan  kalsium  oksalat  yang cukup tinggi dalam ginjal katak tersebut Tabel  2.  Perbandingan  kandungan  gizi  pada  kedua jenis pakan
No. Kandungan gizi Bayam rebus Dalam 100 gram 1 Kalori 36 kal 2 Karbohidrat 6,5 gram 3 Lemak 0,5 gram 4 Protein; Nabati Hewani 3,5 gram - 5 Makromineral; Kalsium Fosfor Zat  besi 265 mg 67 mg 3,9 mg 6 Vitamin; A B C 60 mg 0,08 mg 80 mg Sumber: Depkes Direktorat Gizi Depkes RI
Protein, lemak, dan karbohidrat merupakan  sumber  yang  paling  penting  untuk
pembentukan  energi  atau  ATP  yang  digunakan dalam  aktivitas  metabolisme  di  dalam  tubuh berudu.  Khususnya  protein  yang  merupakan kunci untuk menstimulasi terjadinya metamorfosis [2] . Pemberian pakan tambahan bisa menjadi  salah  satu  solusi  untuk  memperkaya nutrisi  yang  dibutuhkan  be metamorfosis [3] .  Jumlah  berudu  yang  bertahan
(a)
(b)
dan (b) panjang berudu Fejervarya cancrivora selama masa pertumbuhan pada dua jenis injeksi dan perlakuan pakan
etelah menyelesaikan fase metamorfosis ditemukan  kandungan  kalsium  oksalat  yang cukup tinggi dalam ginjal katak tersebut [7] .
Perbandingan  kandungan  gizi  pada  kedua
Jenis Pakan Bayam rebus Dalam 100 gram Sebutir kuning telur rebus 55 kal 6,5 gram 0,61 gram 0,5 gram 4,49 gram 3,5 gram - 2,69 gram 265 mg 2% - 3% 0,08 mg - - - Depkes Direktorat Gizi Depkes RI
rotein, lemak, dan karbohidrat merupakan  sumber  yang  paling  penting  untuk
pembentukan  energi  atau  ATP  yang  digunakan dalam  aktivitas  metabolisme  di  dalam  tubuh berudu.  Khususnya  protein  yang  merupakan kunci untuk menstimulasi terjadinya mberian pakan tambahan bisa menjadi  salah  satu  solusi  untuk  memperkaya nutrisi  yang  dibutuhkan  berudu  selama  masa Jumlah  berudu  yang  bertahan

## selama masa pertumbuhan
hidup  pada  perlakuan  pakan  bayam  rebus  (P1) lebih  tinggi  bila  dibandingkan  dengan  perlakuan pakan  bayam  rebus  dengan  penambahan  kuning telur rebus (P2). Penambahan kuning telur sangat dibutuhkan  untuk  memberikan  variasi  sumber nutrisi  yang  tidak  hanya  berasal  dari  tumbuhan saja, sebab nutrisi yang kompleks yang diperoleh dari  pemberian  dua  jenis  pakan  mampu memberikan masa metamorfosis yang cenderung lebih cepat, sebab nutrisi yang dikandung bayam rebus  belum  memenuhi  kebutuhan  selama  fase metamorfosis [7] .
Penambahan berat pada berudu merupakan  akibat  dari  konsumsi  pakan  dengan kandungan  lipid  sehingga  terjadi  penimbunan lemak  di  dalam  tubuh.  Asam  lemak  esensial, menyediakan  prekursor  yang  diperlukan  untuk regulasi  metabolisme  lokal  di  banyak  jaringan pada  berudu,  untuk  mengatur  metabolisme  lipid seluler,  yaitu  kerja  enzim  lipase.  Jumlah  dan jenis  lipid  yang  dikonsumsi  dapat  menyebabkan efek  yang  berbeda  pada  tubuh  berudu  pada berudu,  misalnya  kegemukan [2] .  Pemberian pakan  dihentikan  saat  kaki  depan  tumbuh,  yaitu antara hari ke 34 sampai ekor memendek kurang lebih  seperempat  bagian,  sebab  pada  kondisi berudu  mengalami  pemendekan  ekor,  berudu tidak  mengkonsumsi  apapun.  Nutrisi  yang diperoleh  berudu  pada  kondisi  ini  berasal  dari protein  dan  lipid  pada  ekor  yang  memendek  di dalam  tubuh  berudu.  Setelah  ekor  memendek kira-kira  tigaperempat  bagian  katak  diberikan pakan lagi hingga menjadi katak sempurna untuk pertumbuhan dan perkembangan lebih lanjut.

## KESIMPULAN
Hormon hipofisa maupun
ovaprim
mempengaruhi kecepatan pematangan gonad, diketahui  dari  jumlah  sel  telur  yang  berhasil dipijahkan dan kualitas sel telur diketahui dari jumlah sel  telur  yang  berhasil  menetas.  Jumlah  telur  yang dapat  dipijahkan  serta  yang  berhasil  menetas  pada injeksi  hipofisa  lebih  banyak  daripada  hasil  injeksi ovaprim.    Selain  itu  Pemberian  pakan  bayam  rebus dan  kuning  telur  rebus  selama  pemeliharaan mempengaruhi berat secara signifikan dan mempercepat masa metamorfosis

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  kepada  Bapak  Mulyadi  dan  seluruh anggota  laboratorium  serta  teman-teman  yang mendukung penuh untuk keberhasilan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Browne, R.K. 2009(a). Amphibian Hormone Cycle. Amphibian  Ark  Research  Officer,  Royal Zoological Society of Antwerp, Belgium.
[2] Browne,  R.K.  2009(b).  Amphibian  Diet  and Nutrition.  Amphibian  Ark  Research  Officer, Royal Zoological Society of Antwerp, Belgium.
[3] Carmona  O.  C.,  Miguel  A.,  Olvera  N.,  Miguel  R., Alejandro F.N. 1995. Estimation of the protein requirement  for  bullfrog  (Rana  cutesbeiana) tadpoles, and its effect on metamorphosis ratio. Elsevier. Aquaculture. 141:223-23 1
[4] Hofer.  R.,  dan  Lackner  R.  2006.  Nutritional  Status of  Tadpole  Populations  of  Rana  temporaria  in the  Central  Alps  (Austria).  Verein  Innsbruck, 93:147-159
[5] Kurniawan, N., Daicus M.  M., H. S. Yong, dan M. Sumida.  2009.  Conservation  of  Fejervarya cancrivora by Artificial Reproduction. Prosiding Bioteknologi. 14:474-486
[6] Lynch,  J.D.  2006.  The  tadpoles  of  frogs  and  toads found  in  the  lowlands  of  northern  Colombia. Review  Academy  Colombia  Science.  30(116): 443-457,
[7] McDiarmid  R.W.  dan  R.  Altig.  1999.  Tadpole,  the Biology  Of  Anuran  Larvae.  The  University  of Chicago. USA. ISBN: 0-226-55762-6
[8] Norris,  D.O.  2007.  Vertebrate  Endocrinology,  4th Edition. Elsevier Incorporation. London.
[9] Susilawati,  T.  2011.  Spermatologi.  Universitas Brawijaya Press.
[10] Uchiyama,  M.,  Toshiki  M.,  dan  Hideki  Y.  1990. Notes  on  the  Development  of  the  Crab-Eating Frog,  Rana  cancrivora.  Zoological  Science. 7:73-78