## ISOLASI DAN KARAKTERISTIK BAKTERI PELARUT FOSFAT (BPF) DARI RHIZOSFER TANAMAN JAGUNG FASE VEGETATIF DAN FASE GENERATIF
Fany Juliarti Panjaitan 1 , Taufiq Bachtiar ,2 , Irsyana Arsyad 3, Onesimus Ke Lele 4 1,4 Universitas Katolik Indonesia Santu Paulus Ruteng, Nusa Tenggara Timur
2 Pusat Aplikasi Isotop dan Radiasi – Badan Tenaga Nuklir Nasional, Jl. Lebak Bulus Raya No. 49, Jakarta Selatan, 12440 3 Departemen Ilmu Tanah dan Sumber Daya Lahan - Institut Pertanian Bogor, Jl. Raya Dramaga Babakan, Bogor, 16680 Email : fanyjait@gmail.com

## ABSTRACT
The plants acquire phosporus from soil solution as phosphate anion. The availability of nutrients is very low in  soil  and crops compared to  the other macronutriens.  It  precipitates in soil  as orthophosphate or absorbed  by  Al  and  Fe  so  that  inhibiting  the  plant  growth.  Phosphate  solubilizing  bacteria  are  able  to release  the  P  bond  of  clay  minerals  and  provide  it  for  crops.  The  research  aimed  to  get  phosphate solubilzing  microbes  from  maize  ( Zea  mays L.)  rhizosphere.  The  soil  samples  were  taken  from  the maize  rhizosphere  in  both  the  vegetative  and  generative  phases  in  the  Cikabayan  Bogor  experimental farm. The phosphate solubilzing bacteria were determined for its ability to dissolve phosphate in liquid Pikovskaya media. The results of research were obtained 16 phosphate solubilizing bacteria, each of the 12  isolates  derived  from  maize  rhizosphere  in  vegetative  phase  (JM  FIO)  and  4  isolates  in  generative phase  (JT  FIO).  The  phosphate  solubiliton  index  of  each  phosphate  solubilizing  bacteria  was  varied, namely  2,2-4,  the  largest  dissolution  index  obtained  at  JM  FIO  1.  The  largest  phosphate  dissolving ability in liquid Pikovskaya media was showed by JM FIO 3 isolate, P value was 0,60 ppm or increased 300% of control then followed by JM FIO 9 with 0,43 ppm P. The research also showed that JM FIO 3 and JM FIO 9 were not pathogenic and potentially could be used as biological fertilizer with number of cells at each 4.2 x 10 9 and 1.2 x 10 9 CFU/g of carrier.

## Key Words : Phosphate Solubilizing Microbe, Maize, Rhizosphere

## PENDAHULUAN
Kesuburan  tanah  merupakan  faktor penting  yang  mempengaruhi  pertumbuhan tanaman,  apabila  tanah  tersebut  tidak  subur, maka  akan  mengakibatkan  produksi  tanaman budidaya  menurun.  Ketidaktersediaan  unsur hara  esensial  seperti  fosfat  merupakan  salah satu  faktor  pembatas  pertumbuhan  tanaman karena  cenderung  terikat  pada  mineral  yang mengandung  Al,  Fe  dan  Ca  sehingga  jumlah  P rendah  di  dalam  tanah.  Unsur  P  umumnya ditambahkan ke dalam tanah melalui pemupukan,  namun    fosfat  yang  dapat dimanfaatkan  oleh  tanaman  hanya  sebesar  10-
30%  dari  pupuk  fosfat  yang  diberikan,  berarti 70-90%  pupuk  fosfat  tetap  berada  di  dalam tanah (Larasati et al. 2018). Salah satu alternatif untuk meningkatkan efisiensi pemupukan fosfat, dalam  mengatasi  rendahnya  fosfat  tersedia dalam  tanah  adalah  dengan  memanfaatkan bakteri pelarut fosfat (BPF).
Bakteri  pelarut  fosfat  (BPF)  merupakan jasad renik tanah yang mempunyai kemampuan dalam  melarutkan  unsur  P  anorganik  dan memineralisasi  unsur  hara  P  organik  sehingga unsur  P  tersedia  bagi  tanaman  (Sharma et  al., 2013).  BPF  juga  berperan  dalam  menstimulasi fiksasi  nitrogen,  sintesis  fitohormon  dan
meningkatkan ketersediaan Zn dan Fe (Wani et al., 2007). Berdasarkan keunggulan-keunggulan BPF  terhadap  pertumbuhan  dan  produksi tanaman,  perlu  mengeksplorasi  jenis  mikroba tersebut pada daerah rhizosfer untuk mendapatkan  BPF  yang  efektif  dan  potensial. Daerah  rhizosfer  merupakan  bagian  dari  tanah yang memiliki aktivitas metabolisme mikroorganisme  dan  tanaman  tertinggi  karena dipengaruhi oleh adanya eksudat akar ( Schröder  dan  Hartmann,  2003 ). Populasi  BPF di  daerah  rhizosfer  mencapai  10-100  kali  lebih banyak  dibandingkan  daerah  non-rhizosfer karena  akar  mengekskresikan  bahan  organik yang  dapat  mencukupi  dan  merangsang pertumbuhan  mikroba  (Widawati  dan  Suliasih 2005).  Menurut  Islami  dan  Utomo  (1995), tanaman monokotil lebih banyak mengeluarkan eksudat  dari  pada  tanaman  dikotil.  Contohnya adalah  rhizoser  tanaman  jagung  yang  mampu tumbuh  sampai  pada  kedalaman  2  m  dan menyebar  secara  horizontal  lebih  dari  1  m. Menurut Guckert et al . (1991), tanaman jagung memproduksi  eksudat  akar  kaya  akan  asam organik dan protein paling tinggi pada saat akar tanaman  masih  muda  atau  pada  fase  vegetatif. Oleh  karena  itu,  perlu  dilakukan  penelitian  ini untuk  mendapatkan  BPF  yang  efektif  dan potensial  sebagai  pendegradasai  unsur  hara fosfor dari rhizosfer tanaman jagung baik pada fase vegetatif maupun generatif.

## METODE PENELITIAN

## Pengambilan Sampel Tanah
Pengambilan  sampel  tanah  dilakukan dengan metode random sampling dari beberapa rizosfer  tanaman  jagung  baik  pada  fase vegetatif  maupun  fase  generatif  di  kebun percobaan Cikabayan IPB menggunakan sekop,
kemudian  sampel  tanah  dikompositkan  dan dimasukkan ke dalam plastik serta dilabel.

## Isolasi  Karakterisasi  Bakteri  Pelarut  Fosfat
(BPF)
Teknik  isolasi  BPF  dilakukan  dengan metode  pengenceran,  yaitu  dengan  menimbang 10  g  sampel  tanah  kemudian  dimasukkan  ke dalam  90  ml  larutan  fisiologis  (NaCl  0.85%) yang  telah  diautoklaf  dan  dikocok  hingga homogen, sehingga diperoleh faktor pengenceran 10 -1 . Dari faktor pengenceran 10 -1 dipipet  1  ml  suspensi  tanah  kemudian diinokulasikan ke dalam 9 ml larutan fisiologis dan  dihomogenkan,  sampel  ini  merupakan faktor  pengenceran  10 -2 .  Pengenceran  diulangi hingga  faktor  pengenceran  10 -5 .  Penanaman sampel  dilakukan  dengan  metode  cawan  sebar. Suspensi tanah dari faktor pengenceran 10 -2 , 10 - 3 ,  10 -4 ,  10 -5 diinokulasikan  sebanyak  1  ml secara  aseptik  pada  media  selektif Pikovskaya dan  disebar  menggunakan  batang  L  dan diinkubasi  pada  inkubator  dengan  suhu  28 o C selama  7  hari.  Koloni  BPF  yang  tumbuh diamati  dengan  melihat  zona  bening  atau transparan  di  sekeliling  koloni  dan  dihitung jumlahnya.  Isolat  yang  diperoleh  dimurnikan sampai  mendapatkan  isolat  murni  (koloni tunggal).  Pemurnian  dilakukan  dengan  cara koloni  diambil  menggunakan  jarum  ose  secara aspetik  dan  di streak pada  media  agar Pikovskaya .  Media  tersebut  diinkubasi  selama 72 jam pada suhu 28-30 o C sehingga didapatkan isolat  murni  (koloni  tunggal).  Biakan  murni mikroba  pelarut  fosfat  digoreskan  pada  agar miring Pikovskaya (Pelczar dan Chan, 2006).
Karakterisasi Bakteri Pelarut Fosfat (BPF)
Pengamatan makroskopis dilakukan dengan  mengamati  bentuk  koloni,  bentuk
permukaan  koloni,  bentuk  tepi  koloni  serta warna  koloni.  Pengamatan  disesuaikan  dengan struktur  makroskopis  koloni  bakteri  oleh Cowan and Talaro (2006).

## Uji Patogenesitas Bakteri Pelarut Fosfat
Bakteri  Pelarut  Fosfat  diinokulasikan pada  media  cair Pikovskaya dan  diinkubasi selama 5 hari menggunakan mesin penggoyang dengan  kecepatan  100  rpm.  Masing-masing isolat BPF diambil sebanyak 1 ml menggunakan syringe dan  diinjeksikan  pada stomata daun tembakau. Selanjutnya, perubahan  pada  daun  tembakau  diamati  pada hari  ketiga  setelah  penyuntikan.  Jika  bagian daun  yang  disuntikan  menguning  dan  kering, maka isolat tersebut bersifat patogen.
Sebaliknya,  jika  daun  tembakau  tetap  hijau maka  isolat  mikroba  pelarut  fosfat  tersebut tidak patogen.
Indeks  Pelarutan  Fosfor  oleh  Bakteri Pelarut Fosfat
Isolat  murni  yang  telah  diperoleh  diuji pelarutan  P  secara  kualitatif.  Isolat  diujikan pada  media  pikovskaya  padat  kemudian pengamatan  dilakukan  sampai  terbentuknya zona  bening  di  sekitar  bakteri.  Koloni  yang dikelilingi  zona  bening  menunjukkan  adanya pelarutan  fosfat.  Pengujian  secara  kualitatif dilakukan  dengan  cara  menghitung  besarnya diameter  koloni  dan  zona  bening  berbanding besarnya diameter koloni. Perhitungan pelarutan  fosfat  pada  media  menggunakan Indeks pelarutan (IP).

## Gambar 1. Penghitungan Indeks Pelarutan
Uji  Kelarutan  P  pada  Media Pikovskaya

## Cair
Uji  kadar  fosfat  pada  BPF  bertujuan untuk mengetahui kadar fosfat  yang dikandung mikroba  tersebut  dan  menjadi  tolak  ukur kemampuan  mikroba  dalam  melarutkan  unsur fosfor.  Isolat BPF dikulturkan pada  erlenmeyer berisi  30  ml  media  cair Pikovskaya dan diinkubasi  menggunakan  shaker  pada  suhu ruang  selama  tiga  hari.  Media  cair Pikovskaya tanpa inokulasi biakan merupakan kontrol.
Media  cair  yang  telah  diinkubasi, disaring menggunakan kertas saring Whatmann
no.40  sampai  media  cair  tersebut  bening. Supernatan  yang  diperoleh  diencerkan  hingga 50  kali  kemudian  dianalisis  P  terlarut menggunakan metode Bray-1. Analisis menggunakan  larutan  standar  50  ppm  dengan seri  pengenceran  0-10  ppm  P.  Larutan  ini dibuat  dari  larutan  baku  yang  mempunyai konsentrasi  lebih  tinggi  kemudian  diencerkan dengan  larutan  Bray-1.  Sebanyak  5  ml  larutan PB  dan  5  tetes  larutan  PC  ditambahkan  ke dalam  5  ml  supernatan.  Jumlah  P  larut diidentifikasi melalui intensitas warna biru dari larutan dengan metode kolorimetri
IP = A / B
Keterangan : IP = Indeks Pelarutan
A = diameter koloni + zona bening
B = diameter koloni
(fosfomolibdat).  Intensitas  warna  biru  dari larutan dibaca pada gelombang 660 nm dengan spektrofotometer (Sulaeman, 2005).

## Penapisan  Bahan  Pembawa  Gambut  untuk formulasi Bakteri Pelarut Fosfat (BPF)
Bahan  pembawa  yang  digunakan  untuk memformulasi  BPF  adalah  gambut  yang  telah lolos saring 2 mm, pH 5.31 dan kadar air 9.3%. Menurut  Permentan/SR.140/10/2011  mengenai Persyaratan  Teknis  Minimal  Pupuk  Hayati Tunggal,  standar  mutu  kadar  air  menurut  jenis bahan  pembawa  tepung/serbuk  yaitu  ≤  35,  dan bahan  pembawa  gambut  sudah  sesuai  standar yang  ditetapkan.  Gambut  ditimbang  sebanyak 10  g  dan  dimasukkan  ke  dalam  plastik  tahan panas  kemudian  disterilkan  menggunakan autoklaf.  BPF  ditumbuhkan  pada  media  cair Pikovskaya selama 5 hari kemudian diinokulasikan  sebanyak  1  ml  ke  dalam  bahan
pembawa  gambut  dan  diinkubasi  selama  2 minggu.  Setelah  masa  inkubasi  2  minggu inokulum kemudian dilakukan uji mutu dengan menghitung jumlah mikroba  yang hidup  dalam bahan pembawa.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolasi  dan  Karakteristik  Bakteri  Pelarut Fosfat (BPF)
Berdasarkan hasil isolasi Bakteri Pelarut Fosfat  diperoleh  16  isolat,  yaitu  12  isolat  dari sampel  tanah  rhizosfer  tanaman  jagung  pada fase  vegetatif  dan  4  isolat  pada  fase  generatif. Sebanyak 16 isolat bakteri pelarut fosfat (BPF) yang  telah  diperoleh  selanjutnya  dilakukan pengamatan  karakteristik  morfologi  koloni meliputi  bentuk,  tepian,  elevasi,  dan  warna koloni  bakteri  sesuai  prosedur  Cowan  dan Talaro (2006) seperti yang disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1.  Karakteristik  morfologi  koloni  Bakteri  Pelarut  Fosfat  pada  rhizosfer  tanaman  jagung  fase vegetatif dan fase generatif
Keterangan :  JM  :  rhizosfer  tanaman  jagung  fase  vegetatif,  JT  :  rhizosfer  tanaman  jagung  fase generatif
Hasil  pengamatan  isolasi  BPF  dari sampel  tanah  rhizosfer  tanaman  jagung  pada
fase  vegetatif  dan  generatif  pada  media  agar Pikovskaya  menunjukkan  bahwa  karakteristik
Kode Isolat Bentuk Warna Elevasi Tepi Permukaan JM FIO 1 Circuler Kuning Flat Entire Kering JM FIO 3 Irreguler Putih Raised Entire Halus mengkilap JM FIO 7 Circuler Putih Raised Entire Halus mengkilap JM FIO 9 Circuler Putih Raised Entire Halus mengkilap JM FIO 10 Irreguler Krem Raised Lobate Berkerut JM FIO 11 Irreguler Kuning Umbonat Undulate Berkerut JM FIO 12 Irreguler Putih Raised Undulate Berkerut JM FIO 14 Circuler Krem Raised Entire Berkerut JM FIO 15 Irreguler Krem Raised Entire Halus mengkilap JM FIO 16 Irreguler Krem Raised Entire Halus mengkilap JM FIO 20 Irreguler Putih umbonate Entire Halus mengkilap JM FIO 23 Circuler Krem Raised Entire Kasar JT FIO 3 Circuler Putih Raised Entire Halus mengkilap JT FIO 7 Ciculer Putih Raised Entire Halus mengkilap JT FIO 9 Irreguler Krem Flat Entire Berkerut JT FIO 11 Irreguler Krem Raised Entire Halus mengkilap
16  isolat  bakteri  berbeda,  yaitu  bentuk,  warna, elevasi,  tepi,  bentuk  permukaan,  dan  indeks pelarutan  P  (Tabel  1).  Karakteristik  morfologi 16  bakteri  pelarut  fosfat  yang  diisolasi  pada rhizosfer  tanaman  jagung  beragam,  mulai  dari bentuk  koloni  circuler  dan  irreguler,  warna koloni  berwarna  putih,  krem,  dan  kuning, elevasi  flat,  raised,  dan  umbonat,  tepi  entire, lobate, dan undulate, bentuk permukaan kering, halus mengkilap, berkerut, dan kasar.

## Uji Patogenitas Bakteri Pelarut Fosfat
Isolat  BPF  yang  tumbuh  diuji  sifat patogenitasnya  pada  daun  tanaman  tembakau.
Apabila  terdapat  gejala  nekrosis  pada  daun tembakau,  maka  isolat  BPF  tersebut  bersifat patogen  dan  apabila  tidak  menimbulkan  gejala nekrosis  pada  daun  tembakau,  maka  isolat bakteri tersebut dapat diuji lanjut untuk melihat kemampuan  lainnya.  Hal  ini  dilakukan  apabila bakteri  tersebut  diaplikasikan  sebagai  pupuk hayati,  BPF  tersebut  tidak  menyebabkan kematian  pada  tanaman.  Pengamatan  sifat patogenitas  BPF  pada  daun  tanaman  tembakau disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2. Uji Patogenitas Bakteri Pelarut Fosfat pada Daun Tanaman Tembakau Kode Isolat Nekrosis pada Daun Tembakau Keterangan Sifat Patogenitas JM FIO 3 Negatif Daun tetap berwarna hijau tanpa adanya bercak coklat dan kering yang  merupakan  gejala  nekrosis daun. Negatif JM FIO 9 Negatif Negatif
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  sebanyak 16  isolat  yang  diuji  pada  daun  tanaman tembakau  diperoleh  2  isolat  yag  tidak  bersifat patogen, yaitu JM FIO 3 dan JM FIO 9. Hal ini ditunjukkan  dengan  tidak  adanya  gejala nekrosis  pada  daun  tembakau,  sehingga  isolat JM  FIO  3  dan  JM  FIO  9  memiliki  potensi sebagai pupuk hayati.
Uji  Kelarutan  P  dalam  Media Pikovskaya Cair
Hasil  pengujian  kelarutan  P  oleh  JM FIO  3  dan  JM  FIO  9  dalam  media Pikovskaya cair dan padat menunjukkan bahwa kedua BPF memiliki  kemampuan  yang  berbeda  dalam melarutkan  fosfat  terikat  dalam  bentuk tri calcium  fosfat menjadi  P  yang  tersedia.  Hasil pengukuran  kemampuan  setiap  bakteri  dalam melarutkan fosfat dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Uji Kelarutan P oleh Bakteri Pelarut Fosfat dalam Media Pikovskaya Padat dan Cair .
Kode Isolat Indeks Pelarutan Fosfat (IP) pada media Pikovskaya padat Kelarutan P pada media Pikovskaya cair (mg P/kg) Kontrol - 0.15 JM FIO 3 3.5 0.60 JM FIO 9 2.4 0.45
Dari  data  pada  Tabel  3  menunjukkan bahwa  JM  FIO  3  memiliki  kemampuan melarutkan P terikat tertinggi dibandingkan JM FIO  9  dan  kontrol,  Hal  ini  dibuktikkan  dari nilai  indeks  pelarutan  fosfat  pada  media Pikovskaya padat  sebesar  3,5  dan  uji  kelarutan P pada media Pikovskaya cair sebesar 0,60 mg P//kg. Kemampuan kedua isolat dalam melarutkan  P  berbeda  tergantung  dari  proses metabolisme  isolat  bakteri  pelarut  fosfat  dalam mengeskresikan  asam-asam  organik  ke  dalam lingkungan  tumbuhnya.  Hal  ini  sesuai  dengan Widyati  (2007)  bahwa  kemampuan  isolat
bakteri dalam melarutkan fosfat dan menghasilkan  asam-asam  organik  tergantung pada proses metabolisme isolat bakteri tersebut yang dipengaruhi oleh aktivitas enzim. Semakin Dari  hasil  pengujian  ini  didapatkan  bahwa  JM FIO  3  merupakan  isolat  potensial  untuk pengembangan biofertilizer.
Penapisan  Bahan  Pembawa  Gambut  untuk Formulasi Bakteri Pelarut Fosfat (BPF)
Hasil  pengamatan  jumlah  koloni  BPF dalam bahan pembawa gambut yang diinkubasi selama 2 minggu disajikan pada Tabel 4.
Tabel 4.  Hasil Total  Plate  Count jumlah  koloni  (CFU/g  gambut)  dalam  bahan  pembawa  gambut dengan masa inkubasi 2 minggu Kode Isolat Jumlah CFU/gram JM FIO 3 4,2 x 10 9 JM FIO 9 1,2 x 10 9
Tabel  4  menunjukkan  bahwa  jumlah koloni  JM  FIO  3  dan  JM  FIO  9  mampu mempertahankan  populasi    4,2  x  10 9 CFU/g.
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  bahan  pembawa gambut  yang  digunakan  untuk  formulasi  BPF mampu mempertahankan populasi selama masa penyimpanan 2 minggu. Haryanti et al. (2014), bahan pembawa yang baik untuk memproduksi pupuk  hayati  yang  mengandung  agen  BPF adalah gambut dan kualitas pupuk hayati masih baik  selama  masa  penyimpanan  90  hari. Yuniarti et  al. (2009)  memperoleh  total populasi  BPF  ( Pseudomonas sp.)  berkisar  1,88 x  10 7 -8,50  x  10 8 CFU/g  pada  masa penyimpanan  0  hari  dan  bahan  pembawa gambut.  Pupuk  hayati  yang  diproduksi  hingga minggu ke-2 mampu mempertahankan viabilitas sel bakteri sesuai Permentan/SR.140/10/2011 mengenai
Persyaratan  Teknis  Minimal  Pupuk  Hayati Tunggal,  standar  mutu  TPC  menurut  jenis bahan pembawa tepung/serbuk yaitu 10 7 CFU/g kering bahan pembawa. Dari hasil ini diperoleh bahwa  JM  FIO  3  dan  JM  FIO  9  memiliki potensi  untuk  dikembangkan  sebagai  bahan pupuk hayati tunggal.

## KESIMPULAN
Hasil  isolasi  bakteri  pelarut  fosfat diperoleh  16  isolat  dari  sampel  tanah  rhizosfer tanaman  jagung  fase  vegetatif  dan  fase generatif dengan karakteristik morfologi bentuk koloni,  warna,  elevasi,  tepi,  serta  bentuk permukaan  yang bervariasi. Dari 16 isolat BPF diperoleh  2  isolat  yang  tidak  memiliki  sifat patogenitas  pada  daun  tembakau,  yaitu  isolat
JM FIO 3 dan JM FIO 9. JM FIO 3 merupakan isolat  yang  memiliki  kemampuan  tinggi  dalam melarutkan  fosfat dan berpotensi untuk dijadikan  sebagai  pupuk  hayati  tunggal.  Bahan pembawa  gambut  yang  digunakan  untuk formulasi BPF mampu mempertahankan populasi  koloni  selama  masa  inkubasi  2 minggu,  yaitu  4.2  ×  10 9 sel/g  dan  1,2  g  x  10 9 sel/g bahan pembawa.

## DAFTAR PUSTAKA
Cowan, M.K., K.P. Talaro. 2006. Microbiology A Systems Approach . McGraw-Hill Companies. New York.
Guckert, F. M., Chavanon, M., J.L. Morel, dan
G. Villemin. 1991. Root exudation in Beta  vulgaris :  A  comparizon
with Zea  mays. In plant  roots  and their  environment ,  Proceeding  of an  ISRRSymposium,  McMichael and  H.  Persson  (Eds).  Elsevier Scintific  Publishong,  New  York. 449-455.
Haryanti,  D.,  Zul,  D.,  Fibriarti,  B.L.  2014.
Formulasi  Pupuk  hayati  Serbuk Menggunakan Bakteri Pelarut Fosfat Indigenus Asal Tanah Gambut  Riau  dalam  Berbagai Bahan  Pembawa.  JOM  FMIPA 1(2) : 562-570.
Islami,  T.,  H.U.  Utomo.  1995 .  Hubungan
Tanah,  Air  dan  Tanaman .  IKIP press. Semarang. 297 hlm.
Larasati, E.D., Rukmi,M.G.I., Kusdiyantini, E., Ginting,  R.C.B.  2018.  Isolasi  dan Identifikasi  Bakteri  Pelarut  Fosfat dari Tanah Gambut. Bioma, 20 (1) : 1-8. Pelczar., Chan. 2006. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Universitas Indonesia. Jakarta
Schröder,  P.,  A.  Hartmann.  2003.  New Developments in Rhizosphere
Research.  J  Soils  &  Sediments  3
(4): 227.
Sharma,  S.  B.,  Sayyed,  R.  Z.,  Trivedi,  M.  H.,
Gobi,  T.  A.  2013.  Phosphate solubilizing  microbes:  sustainable approach for managing phosphorus deficiency in agricultural  soils. Springerplus 2, 587–600. doi: 10.1186/2193- 1801-2-587.
Wani,  P.  A.,  Khan,  M. S.,  Zaidi,  A.  2007.  Co-
inoculation  of  nitrogen  fixing  and phosphate  solubilizing  bacteria  to promote growth, yield and nutrient  uptake  in  chickpea. Acta Agron.  Hung. 55,  315–323.  doi:
10.1556/AAgr.55.2007.3.7.
Widiawati,  S.,  Suliasih.  2005.  Augmentasi Bakteri  Pelarut  Fosfat  (BPF) Potensial sebagai Pemacu Pertumbuhan Caysin (Brasica caventis Oed.) di Tanah Marginal.
Biodiversitas 7(1):10-14.
Widyati E. 2007. Formulasi inokulum Mikroba: MA,  BPF  dan  Rhizobium  Asal Lahan    Bekas  Tambang  Batubara untuk  Bibit Acacia  crassicarpa Cunn. Ex-Benth. Jurnal Biodiversitas 8 (3) : 238 - 241.
Yuniarti  E,  Husen  E,  Nurhamida.  2009. Optimasi  produksi  dan  ketahanan dalam  bahan  pembawa  gambut inokulan Pseudomonas sp. Bogor: Balai Penelitian Tanah.