## Indonesian Dental Association
Journal of Indonesian Dental Association
http://jurnal.pdgi.or.id/index.php/jida ISSN: 2621-6183 (Print);  ISSN: 2621-6175 (Online)

## The Effect of Presto Cooker as an Alternative Sterilizer Device for Dental Equipment
Ariadna Adisattya Djais 1§ , Citra Fragrantia Theodorea 1
1 Department of Oral Biology, Faculty of Dentistry, University of Indonesia, Indonesia
Received date:  February 3, 2019. Accepted date:  March 21, 2019. Published date:  April 30, 2019

## KEYWORDS
Candida albicans ; Porphyromonas gingivalis ; presto; Staphylococcus aureus ; sterilizer;
Streptococcus mutans

## ABSTRACT
Introduction: In the suburb area of  Indonesia, autoclaves as a sterilizer  could not been used optimally  due  to  inadequate  electrical  capacity.  An  alternative  sterilizer  such  as  a  pressure cooker ( presto ) have been choosen because it has same principle as an autoclave, but it doesn’t required the electrical supply. Nevertheless, the procedure of presto in dentistry remain unclear. Objective: To  obtain  a  standard  procedure  by  using  presto  cooker  for  dental  instrument sterilization. Methods: The  effect  of  presto was  observed  on  aerobic  ( S.  aureus ATCC 25923 T ),  facultative  anaerobes  ( S.  mutans ATCC  25175 T ),  anaerobes  ( P.  gingivalis ATCC 33277 T ) and yeasts ( C. albicans ATCC 10231 T ) which are exposed to the dental mirror. Each dental  mirror  (triplo)  was  dipped  for  3  minutes  on  media  containing  bacteria  (10 6 bacteria/ mL). Furthermore, the dental  mirrors  were cooked at presto (MAXIM, 7 L,  Indonesia)  which contained  500  mL  of  water,  for  15,  30  and  45  minutes.  Bacterial  growth  analysis  were observed  visually  and  microscopically  after  Gram  staining. Results: In  the S.  aureus ATCC 25923 T and C. albicans ATCC 10231 T groups, up to 30 minutes the color of the media showed cloudy  but  remained  clear  when  sterilized  for  45  minutes.  Likewise,  these  groups  showed appereance  of  bacterial  growth  for  15-30  minutes  but  didn’t  appear  to  grow  in  45  minutes. While  in  the S.  mutans ATCC  25175 T and P.  gingivalis ATCC  33277 T groups,  up  to  15 minutes the color of the media showed cloudy but remained clear after being sterilized for 30 minutes.  In addition, these  groups showed appereance  of bacterial  growth for 15  minutes but absence in 30-45 minutes. Conclusion: Presto can be used as one of alternative equipment to sterilize  dental  instrument,  effectively.  The  optimal  killing  time  of  bacteria  and  yeast  was  45 minutes.
§ Corresponding Author E-mail address: ariedjais26@gmail.com (Djais AA)
DOI: https://doi.org/10.32793/jida.v2i1.356
Copyright: ©2019 Djais AA, Theodorea CF. This is an open access article distributed under the terms of the Creative Commons  Attribution  License,  which  permits  unrestricted  use,  distribution,  and  reproduction  in  any  medium provided the original author and sources are credited.

## KATA KUNCI
Candida albicans ; Porphyromonas gingivalis ; presto cooker ; Staphylococcus aureus ; sterilisasi; Streptococcus mutans

## ABSTRAK
Pendahuluan: Di  pedalaman  Indonesia,  autoklaf  sebagai  alat  sterilisator  belum  dapat digunakan  secara  optimal  karena  faktor  kapasitas  listrik  yang  belum  memadai.  Dipilihnya pressure  cooker  (panci  presto)  sebagai  alat  sterilisator  alternatif  oleh  karena  memiliki  prinsip kerja  yang  sama  dengan  autoklaf,  namun  tidak  membutuhkan  energi  listrik.  Tetapi,  prosedur pemakaian panci presto sebagai sterilisator alat kedokteran gigi masih belum diketahui secara mendetil. Tujuan: Untuk mendapatkan standar prosedur penggunaan panci presto secara rinci sebagai  sterilisator  alat  kedokteran  gigi. Metode: Efek  sterilisasi  panci  presto  diuji  terhadap bakteri aerob ( S. aureus ATCC 25923 T ), fakultatif anaerob ( S. mutans ATCC 25175 T ), anaerob ( P.  gingivalis ATCC  33277 T )  dan yeast ( C.  albicans ATCC  25923 T )  yang  dipaparkan  pada kaca mulut, sebanyak (10 6 bakteri/mL), selama 3 menit.  Selanjutnya, kaca mulut dimasak pada panci  presto  (MAXIM,  7  L,  Indonesia)  yang  berisi  500  mL  air  selama  15,  30  dan  45  menit. Analisis  adanya      pertumbuhan  bakteri  diamati  secara  visual  dan  secara  mikroskopik  setelah dilakukan  pewarnaan  Gram. Hasil: Pada  kelompok S.  aureus ATCC  25923 T dan C.albicans ATCC  25923 T sampai  30  menit  warna  media  masih  keruh  dan  menjadi  bening  setelah disterilkan selama 45 menit. Pada kelompok S. aureus ATCC 25923 T dan C. albicans ATCC 25923 T mikrorganisme  tersebut  masih  bertahan  hidup  walau  disterilkan  selama  30  menit namun  tidak  tampak  pertumbuhannya  pada  45  menit.  Sedangkan  pada  kelompok S.  mutans ATCC 25175 T dan P. gingivalis ATCC 33277 T sampai 15 menit warna media masih keruh dan menjadi bening setelah disterilkan selama 30 menit. Pada kelompok S. mutans ATCC 25175 T dan P. gingivalis ATCC 33277 T bakteri tersebut masih bertahan hidup walau disterilkan selama 15  menit  namun  tidak  tampak  pertumbuhannya  pada  30  menit. Kesimpulan: Panci  presto dapat digunakan sebagai alternatif sterilisator alat standar kedokteran gigi yang efektif, dengan waktu bunuh optimal selama 45 menit.

## PENDAHULUAN
Metode  alat  sterilisasi  yang  umumnya  digunakan dalam  bidang  kedokteran  adalah  panas  lembab  (tekanan uap  dalam  autoklaf),  panas  kering  (oven  udara  panas), dan  bahan  kimia  gas  ( chemiclave ).  Metode  sterilisasi lainnya  yang  tidak  digunakan  dalam  kedokteran  gigi adalah  gas  etilen  oksida, iradiasi  gamma  dan penyaringan. 1,2 Tekanan  uap  merupakan  tindakan sterilisasi yang sangat efektif karena dapat membebaskan atau  merubah  panas  uap  sehingga  membentuk  air. Kondisi  ini  berpotensi  membunuh  mikroorganisme, sedangkan  volume  uap  yang  berkontraksi  dapat memperkuat  penetrasi. 2 Fenomena  yang  digunakan  pada sterilisasi  uap  oleh  autoklaf,  yaitu  ketika  air  dipanaskan pada  lingkungan  yang  tertutup,  naiknya  titik  didih berhubungan  dengan  suhu  uap  yang  dihasilkan.  Misal; pada  104  kPa  (15  psi)  suhu  uap  yang  dihasilkan  adalah 121 o C 2,3 (Tabel 1).
Alat  sterilisasi  yang  menjadi  standar  pada  bidang kedokteran  gigi  adalah  autoklaf.  Alat  sterilisasi  ini merupakan  alat  pemanas  tertutup  yang  digunakan  untuk mensterilkan suatu benda dengan menggunakan uap pada suhu  dan  tekanan  tinggi  (121 o C,  15  lbs)  selama  kurang lebih  15  menit. 4,5 Autoklaf  ditujukan  untuk  membunuh endospora, karena sel ini dapat dibunuh pada suhu 100 o C yang  merupakan  titik  didih  air  pada  tekanan  atmosfer normal.  Pada  suhu  121 o C,  endospora  dapat  dibunuh dalam  waktu  4-5  menit,  sedangkan vegetative bakteri dapat  dibunuh  hanya  dalam  waktu  6-30  detik  pada  suhu 65 o C 4 .  Adapun  komponen-komponen  yang  terdapat pada autoklaf, adalah: bejana tekan, ruang air, ruang uap, elemen  panas  (yang  dapat  mendidihkan  air  sehingga menjadi  uap),  katup  uap  (untuk  membuang  udara terjebak),  katup  pengaman  (untuk  membuang  uap berlebih),  sensor  suhu  (termometer)  dan pressure Gauge (untuk mengetahui tekanan dalam autoklaf). 4
Temperatur ( o C) Tekanan Waktu tunggu (menit) Waktu siklus keseluruhan (menit) psi kPa 134 - 138 30 207 3 20 126 - 129 20 138 10 30 121 - 124 15 104 15 40 115 - 118 10 69 30 50
Tabel 1. Daftar tekanan, temperatur dan waktu untuk sterilisasi
Pressure cooker (presto) merupakan alat masak yang umumnya digunakan untuk melunakkan tulang, melunakkan  ikan,  daging  dan  sebagainya.  Prinsip  kerja dari  alat  masak  ini  sama  dengan  prinsip  kerja  autoklaf. Komponen yang terdapat pada autoklaf, dapat ditemukan juga  pada  presto,  seperti:  bejana  tekan,  ruang  air,  ruang uap,  elemen  panas  dan  katup  pengaman. 6 Pada  alat masak  ini tidak  terdapat katup uap  yang  berfungsi  untuk membuang  udara  yang  terjebak,  selain  itu  pada  alat  ini tidak  ada  komponen  termometer  dan pressure Gauge, sehingga  informasi  tentang  suhu  121 o C  dan  tekanan  15 lbs,  hanya  diestimasikan  dengan  naiknya  bandul pengaman  dan  keluarnya  asap  melalui  katup  tersebut, sehingga  mengisyaratkan  bahwa  suhu  telah  mencapai lebih  dari  100 o C,  dan  tekanan  yang  dicapai  adalah  lebih tinggi  dari  1  atmosfer. 7 Berikut  spesifikasi  presto (MAXIM)  yang  digunakan  sebagai  alat  uji,  antara  lain: volume air 500 mL, waktu 30 menit sejak katup pertama kali  mengeluarkan  uap,  dan  tekanan  dalam  presto  80 KPA.  Upaya  untuk  mendapatkan  hasil  akhir  yang  sama dengan  metode  kerja  autoklaf  yaitu  kondisi  alat  yang steril,  walau  tanpa  indikator  termometer  dan pressure Gauge  adalah  dengan  melakukan  perpanjangan  waktu setelah  melebihi  titik  didih  air,  dimana  indikator  katup atau  bandul  pengaman  terangkat  yang  ditandai  ketika presto mengeluarkan  bunyi.
Walaupun alat standar autoklaf umumnya tersedia di Puskesmas  atau  tempat  pelayanan  kesehatan  masyarakat lainnya,  namun  alat  tersebut  belum  dapat  digunakan secara  optimal.  Hal  ini  terutama  disebabkan  oleh  karena faktor  penunjang  seperti  kapasitas  listrik  ditempat tersebut  yang  kurang  memadai.  Sehingga  diupayakan suatu  alat  yang  berhasil  guna  dengan  indikator  harga relatif  murah  serta  tidak  membutuhkan  faktor  penunjang seperti  beban  kapasitas  listrik  yang  cukup  tinggi. Berkaitan  dengan  hal  tersebut  maka  dipilih  alat  masak presto  yang  mempunyai  komponen-komponen  mirip dengan  autoklaf  dan  sebagai  sumber  energi  panas  yang dapat digunakan kompor tanpa listrik. Kekurangan presto dibandingkan  autoklaf  berkaitan  dengan  hal  di  atas adalah  alat  ini  tidak  memiliki  ukuran  temperatur  dan ukuran  tekanansehingga  besarnya  tekanan  pada  alat presto  bersifat  pasif  tergantung  dari  beratnya  bandul. Adapun  indikator  yang  digunakan  untuk  melihat keberhasilan  sterilisasi  pada  penelitian  ini  dilakukan  uji laboratorium  dari  alat  yang  disterilkan  yaitu  dengan variabel  waktu.  Berdasarkan  data  tersebut,  maka dibuatkan panduan untuk aplikasi  klinik.
Pada penelitian ini, alat standar kedokteran gigi yang diuji  adalah  kaca  mulut.  Pemilihan  kaca  mulut  sebagai alat uji disebabkan alat ini diasumsikan paling sulit untuk disterilkan dibandingkan dengan alat-alat kedokteran gigi lainnya  seperti  pinset,  gunting,  dan  sebagainya.  Kaca mulut  terdiri  dari  dua  bagian  yaitu  cermin  bulat  dan kerangka  logam  yang  berfungsi  untuk  mengikat  kaca
tersebut.  Walau  oleh  pabrik  telah  diupayakan  tidak berjarak  antara  kerangka  dan  cermin,  namun  diantara kedua  komponen  tersebut  tetap  terdapat  celah  dalam ukuran mikrometer. Celah tersebut sangat sulit dijangkau/dibersihkan bila terpapar oleh mikro- organisme.
Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri  yang sering  ditemukan  pada  kavitas  oral. S.  aureus memiliki proporsi  isolasi  yang  tinggi  pada  saliva  dari  orang  tua sehat  yang  berumur  lebih  dari  70  tahun.  Habitat  dari S. aureus adalah  kulit,  yang  umumnya  dapat  bertransmisi melalui  tangan.  Selain  itu,  bakteri  ini  dapat  tercemar melalui  udara  dan  debu,  serta  sering  kali  ditemukan  di lingkungan  rumah  sakit.  Karakteristik S.  aureus adalah kokus  berkelompok  positif  Gram,  tidak  berspora, non- motile ,  berkapsul  pada  beberapa  strain,  tumbuh  secara aerob  dengan  koloni  berwarna  kuning  atau  emas  pada media agar darah, positif-katalase. 8,9
Streptococcus  mutans adalah  bakteri  fakultatif anaerob.  Bakteri  ini  merupakan bagian dari  streptokokus oral  yang  memiliki  proporsi  terbesar  diseluruh  bakteri oral. Pada kultur, bakteri ini kokus berantai positif Gram, α-hemolisis, katalase negatif. Berbeda dengan pneumokokus,  streptokokus  oral  pada  pertumbuhannya tidak  terhambat  oleh bile atau optochin ( ethyl- hydrocupreine  hydrochloride ).  Kelompok S.  mutans merupakan  agen  utama  pada  karies  gigi.  Karakteristik mereka adalah kemampuannya menghasilkan polisakarida  ekstraseluler  yang  lengket  dalam  jumlah yang besar. Apabila terdapat karbohidrat di lingkungannya,  maka  kondisi  ini  berpotensi  membantu bakteri menempel ke enamel atau berikatan antar mereka. Pada  manusia  hanya  dikenal  tiga serotype S.  mutans yakni serotype c, e dan f. 10,11
Porphyromonas  gingivalis adalah  bakteri  anaerob obligat yang memiliki karakter, bakteri batang pleomorfik  negatif  Gram,  non-motil,  asaharolitik. P. gingivalis, dapat tumbuh dalam suasana strik anaerob dan membutuhkan  hemin  dan  vitamin  K.  Pada  lokasi  intra oral,  bakteri  ini  ditemukan  dalam  jumlah  kecil  di  sulkus gingiva  dan  biofilm  subgingival.  Bakteri  ini  berkaitan dengan  periodontitis  kronis  dan  abses  dentoalveolar. P. gingivalis memproduksi  enzim  protease,  a  haemolisin, kolagenase,  yakni  enzim  yang  mendegradasi  kolagen, dan hasil  metabolit yang bersifat sitotoksik. 12
Candida  albicans adalah yeast dari  golongan Deuteromycota, spesies  ini  merupakan  penyebab  infeksi oportunistik  yang  disebut  kandidiasis  pada  kulit  mukosa dan  organ  dalam  manusia.  Karakteristik  spesies  ini adalah berbentuk seperti telur atau sferis dengan diameter 3-5  µm  dan  dapat  memproduksi  pseudohifa.  Spesies  ini merupakan  penyebab  infeksi  oportunistik  yang  disebut kandidiasis  pada kulit mukosa dan organ dalam  manusia.
Karakteristik  spesies  ini  adalah  berbentuk  seperti  telur atau  sferis  dengan  diameter  3-5  µm  dan  dapat memproduksi  pseudohifa.  Spesies  ini  mempunyai  dua jenis  morfologis,  yaitu  bentuk  seperti  khamir  dan bentuk hifa. 13,14
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mendapatkan  suatu standar  prosedur  penggunaan  presto  secara  rinci  untuk mendapatkan  hasil  steril  pada  alat  standar  kedokteran gigi.  Manfaat penelitian ini adalah (i) mengetahui waktu optimal  yang  dibutuhkan  oleh  presto  untuk  membunuh bakteri  dan  jamur,  (ii)  menginformasikan  kepada  tenaga kesehatan  yang  bertugas  di  lokasi  pelayanan  kesehatan yang  mempunyai  kendala  keterbatasan  kapasitas  energi listrik,  maka  metode  ini  dapat  digunakan  sebagai tindakan alternatif  pengganti autoklaf.

## BAHAN DAN METODE
Jenis penelitian  ini adalah  eksperimen  laboratorik in vitro yang dirancang untuk membuktikan efek panas dan tekanan  uap  dari  presto  yang  dapat  membunuh  bakteri aerob,  fakultatif  anaerob,  anaerob  dan yeast ketika dipaparkan  pada  alat  kesehatan,  khususnya  alat  standar kedokteran gigi.
Pada  penelitian  ini  yang  digunakan  sebagai  alat standard kedokteran gigi adalah kaca mulut steril yang di uji  secara  triplo,  masing-masing  dicelupkan  selama  3 menit  pada  media  yang  berisi  kelompok  bakteri  yang telah  diukur  jumlahnya  (10 6 bakteri/mL). Kelompok  1 menggunakan  bakteri  uji: Staphylococcus  aureus ATCC 25923 T ,  Kelompok  2:  menggunakan  bakteri  uji Streptococcus  mutans ATCC  25175 T ,  Kelompok  3: menggunakan  bakteri  uji Porphyromonas  gingivalis ATCC 33277 T , dan  Kelompok 4:  menggunakan yeast uji Candida  albicans ATCC  25923 T. Kontrol  negatif  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  kaca  mulut  steril tanpa  kontaminasi  bakteri.  Sedangkan  kontrol  positif yang  digunakan  berupa  media  yang  berisi  bakteri  yang tidak diberi perlakuan.
Kaca  mulut  yang  telah  dikontaminasi  oleh  masing- masing  bakteri  tersebut  dimasukan  ke sterile  pouch ( medic  pack )  dan  kemudian  dimasukan  ke  dalam  presto (MAXIM,  7  L,  Indonesia)  yang  telah  diisi  dengan  air sebanyak  500  mL.  Presto  dipanaskan  di  atas  kompor, setelah  bandul  pengaman  terangkat  dan  presto  berbunyi, ditunggu  selama  15  menit,  baru  kompor  dimatikan  dan diamkan  presto  hingga  mencapai  suhu  ruang.  Prosedur tersebut dilakukan  untuk uji 30 menit dan 45 menit.
Setelah  suhu  presto  mencapai  suhu  ruang,  kaca mulut  yang  sebelumnya  telah  dipapar  oleh  bakteri S. mutans dan P.  gingivalis diambil  dan  dimasukan  dalam media Brain  Heart  Infusion (BHI) Broth ,  kemudian diinkubasi  37 o C  selama  48  jam  dalam  suasana  anaerob
dengan  menggunakan  sistim gaspack .  Sedangkan  untuk bakteri S.  aureus diinkubasi  37 o C  selama  48  jam  dalam suasana  aerob.  Pada  kaca  mulut  yang  sebelumnya dipapar  dengan C.  albicans diambil  dan  dimasukan  ke dalam  media  cair  Sabouroud kemudian  di  inkubasi  37 o C selama  48 jam dalam suasana aerob.
Analisis  terhadap  pertumbuhan  bakteri  diamati dengan  menggunakan  dua  cara,  yaitu:  (i)  secara  visual, ada/tidaknya  pertumbuhan  bakteri  diamati  dengan melihat  perubahan  warna  pada  media  kultur  cair  ketika dimasukkan  kaca  mulut  yang  telah  disterilisasi  dengan menggunakan  presto  selama  15,  30  dan  45  menit.  (ii) Secara  mikroskopik,  ada  atau  tidaknya  pertumbuhan bakteri  diamati  dibawah  mikroskop  setelah  dilakukan pewarnaan Gram.

## Alur Penelitian
S. aureus, S. mutans, P gingivalis dan C. albicans , re- culture (1x24) jam
Standarisasi : 10 6 sel/mL
Instrumen steril dicelupkan  di media yang berisi bakteri selama 1 menit Instrumen dikemas dalam Sterile pouch
Sterile pouch dimasukkan  ke dalam Presto yang telah
disiapkan
Presto dipanaskan di atas kompor sampai  bandul terangkat / berbunyi
Waktu uji (15, 30, 45) menit Observasi visual dan mikroskopik Analisa hasil Kesimpulan

## HASIL
Hasil  inkubasi  kaca  mulut  ke  dalam  masing  media kultur  cair  menunjukkan  ada  atau  tidaknya  aktivitas pertumbuhan bakteri  pada  kaca mulut  tersebut. Pengamatan  pertumbuhan  bakteri  diamati  secara  visual terhadap  perubahan  warna  media  kultur  cair  (Tabel  2). Pada  kelompok  1  dan  4,  perubahan  warna  media  kultur cair  tampak  keruh  ketika  dimasukkan  kaca  mulut  yang telah disterilisasi dengan menggunakan presto selama 15- 30  menit.  Kondisi  media  kultur  cair  tetap  bening  ketika kaca  mulut disterilkan selama 45 menit. Sedangkan pada kelompok  2  dan  3,  perubahan  warna  media  kultur  cair setelah  kaca  mulut  disterilkan  selama  15  menit  menjadi keruh.  Selain  itu,  tidak  terjadi  perubahan  warna  pada media kultur  cair  kelompok  2 dan  3 tersebut, selama 30- 45 menit.
Selain  diamati  secara  visual,  ada  atau  tidaknya aktivitas  pertumbuhan  bakteri  pada  kaca  mulut  dapat diamati secara mikroskopik setelah dilakukan pewarnaan Gram  (Tabel  3).  Pada  kelompok  1  dan  4  menunjukkan adanya  pertumbuhan  bakteri  yang  dapat  diamati  secara mikroskopik  pada  kaca  mulut  yang  telah  disterilkan dengan  menggunakan  presto  selama  15-30  menit. Pengamatan  pertumbuhan  bakteri  dari  kedua  kelompok
tersebut  tidak  ditemukan  pada  kaca  mulut  yang  telah disterilkan selama 45 menit. Sedangkan pada kelompok 2 dan 3,  pengamatan pertumbuhan  bakteri ditemukan  pada kaca  mulut  yang  telah  disterilkan  dengan  menggunakan presto  selama  15  menit.  Sedangkan  pengamatan pertumbuhan bakteri secara mikroskopik tidak ditemukan pada  kaca  mulut  yang  telah  disterilkan  selama  30-45 menit.

## PEMBAHASAN
Pada  pemanasan  selama  15  menit  seluruh  mikro- organisme  uji  tetap  tumbuh,  menunjukan  pada  saat  itu kondisi panci presto menunjukan suhu kurang dari 121 o C dengan tekanan 15 psi. Hal  ini ditunjukan dengan media bakteri  menjadi  keruh  yang  memperlihatkan  adanya pertumbuhan  bakteri  yang  juga  dikonfirmasi  dengan pengamatan  sel  bakteri  setelah  dilakukan  pewarnaan Gram.  Pada  menit  ke-30,  kedua  mikroorganisme  yang hidup dalam suasana aerob ( S. aureus, C. albicans ) masih dapat  bertahan  hidup,  sedangkan  bakteri  fakultatif anaerob  dan  anaerob  dapat  dibunuh.  Pada  menit  ke-45, seluruh  mikroorganisme  yang  diuji  sudah  terbunuh dengan  indikator  media  bakteri  tetap  jernih  dan  hasil pengamatan  dibawah  mikroskop  setelah  dilakukan pewarnaan    Gram    tidak    tampak     adanya     bakteri.
Tabel  2. Hasil  pengamatan  pada  perubahan  warna  kultur  setelah  kaca  mulut  disterilkan  dengan menggunakan  presto selama  15, 30 dan 45 menit
Bakteri 15 menit Visual 30 menit Visual 45 menit Visual S. aureus ATCC 25923 T K K K K K K B B B S. mutans ATCC 25175 T K K K B B B B B B P. gingivalis ATCC 33277 T K K K B B B B B B C. albicans ATCC 25923 T K K K K K K B B B
B = Bening;  K = Keruh
Tabel  3. Hasil  pengamatan  ada  atau  tidaknya  pertumbuhan  bakteri  secara  mikrokopik  setelah  kaca mulut disterilkan  dengan menggunakan  presto selama  15, 30 dan 45 menit
Bakteri 15 menit Visual 30 menit Visual 45 menit Visual S. aureus ATCC 25923 T + + + + + + - - - S. mutans ATCC 25175 T + + + - - - - - - P. gingivalis ATCC 33277 T + + + - - - - - - C. albicans ATCC 25923 T + + + + + + - - -
(+) = tampak bakteri dibawah  mikroskop, (-) = Tidak tampak bakteri dibawah  mikroskop
Pemilihan  bakteri S.  aureus oleh  karena  bakteri  ini berkaitan  dengan  pembentukan  pus  pada  kasus  infeksi, serta  merupakan  bakteri  uji  untuk mendeteksi  Methicilin Resistant S.  aureus (MRSA). 15 S.  mutans merupakan etiologi  utama  bakteri  penyebab  karies  gigi, 10 oleh karenanya  dipilih  sebagai  salah  satu  bakteri  uji  pada penelitian  ini.  Adapun  pemilihan  bakteri P.  gingivalis, dipilih  oleh  karena  bakteri  ini  merupakan  bakteri  yang berperan  besar  pada  infeksi  jaringan  periodontal. 16 C. albicans adalah  satu-satunya  jamur  yang  berperan  besar pada  penyakit  mulut  seperti  karies  gigi  serta  penyakit jaringan  periodontal. 17

## KESIMPULAN
Presto  dapat  digunakan  sebagai  alat  alternatif  untuk mensterilkan  alat  standar  kedokteran  gigi  secara  efektif dan efisien.  Waktu optimal untuk membunuh bakteri dan yeast menggunakan  presto  adalah  45  menit  yang didiamkan  setelah  katup  pengaman  mengeluarkan  uap atau  berbunyi. Setelah  45  menit,  kompor  baru  dimatikan sumber  panasnya.  Prosedur  yang  dianjurkan  pada  alat- alat  kedokteran  gigi  sebelum  disterilkan  menggunakan presto  adalah  alat  standar  tersebut  harus  dicuci  dahulu dengan sikat gigi  dan air sabun untuk mereduksi kotoran dan  jumlah  bakteri  yang  terdapat  pada  alat  tersebut selanjutnya  dibilas  dengan  air  bersih  kemudian dimasukan  ke  dalam sterile  pouch .    Panci  presto  diisi dengan  air  sebanyak  500  mL,  setelah  itu sterile  pouch yang berisi alat standar kedokteran gigi dimasukan dalam presto  kemudian  ditutup  dengan  rapat.  Sumber  panas diaktifkan,  setelah  bandul  terangkat  dan  presto  akan mengeluarkan  bunyi,  ditunggu  hingga  45  menit, kemudian sumber panas dimatikan. Presto dibuka setelah suhu mencapai  sekitar 30 o C.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Pak Djaja Suhardja atas kontribusinya di laboratorium Biologi Oral, FKG  UI.  Penelitian  ini  didukung  oleh  Hibah  P2M  UI tahun 2018.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Penulis menyatakan tidak terdapat konflik kepentingan  yang berkaitan dengan manuskrip  ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Bargale  S,  Patel  N,  Dave  B,  Poonacha  KS, Ardeshana  A,  Mehta  D.  Assessment  of  sterilization technique  practices  at  dental  clinics  of  Vadodara, Gujarat India. Sch J Dent Sci. 2016;3(9):240-246.
2. Alder  VG,  Brown  AM,  Gillespie  WA.  Disinfection
of  heat-sensitive  material  by  low-temperature  steam and formaldehyde.  J Clin  Pathol. 1966;19(1):83-89.
3. N  Vishal  Gupta,  Shukshith  KS.  Qualification  of autoclave.  Int  J  Pharm  Tech  Res.  2016;  9(4):220- 226.
4. Madigan  MT,  Martinko  JM,  Brock  TD.  Brock Biology  of  Microorganisms.  New  Jersey:  Pearson Prentice Hall;  2006.
5. Baird RM, Hodges NA, Denyer SP. 2000. Handbook of  microbiological  quality  control:  pharmaceutical science.  USA: CRC Press; 2000.
6. DD  Date,  Tated  RG.  Pressure  cooker  lid-literature review.  International  Journal  of  Advance  Research Ideas  and  Innovations  in  Technology  (IJARIIT). 2018;4(3):2388-96.
7. Everall  PH,  Morris  CA,  Yarnell  R.  Sterilization  in the laboratory autoclave using direct air displacement by steam. J Clin Pathol. 1978;31(2):144-147.
8. Marin  LFC,  Arciniegas  GE,  and  Vivas  MC. Characterization  of Staphylococcus  aureus isolates that  colonize  medical  students  in  a  hospital  on  the city of Cali, Columbia. Int J Microbiol. 2015;2015:10358489.
9. Abulkasim HM, GS Shukla, HK Bajaj and Masih H. Antimicrobial  resistance  of Staphylococcus  aureus among  healthy  and  adult  students.  Int  J  Pharm  Sci Res. 2017; 8(12):5247-5251.
10. Cheon  K,  Moser  SA,  Wienner  HW,  Whiddon  J, Momeni  SS,  Ruby  JD,  et  al.  Characteristics  of Streptococcus mutans genotypes and dental caries in children.  Eur J Oral Sci. 2013; 121(301):148-155. 11. Mounika  S,  Jagannathan  N,  Murali.  Association  of Streptococcus  mutans and Streptococcus  sanguis in act of dental caries. J Pharm Sci Res. 2015;7(9):764- 766.
12. How  KY,  Song  KP,  Chan  KG. Phorphyromonas gingivalis : an overview of periodontopathic pathogen  below  the  gum  line.  Front  Microbiol. 2016;7:53.
13. Lof  M,  Janus  MM,  Krom  BP.  Metabolic  interaction between  bacteria  and  fungi  in  comensal  oral biofilms. J Fungi. 2017;3(3):40.
14. Ghasempour  M,  Sefidgar  SA,  Eyzadian  H, Gharakhani  S.  Prevalence  of Candida  albicans in dental  plague  and  caries  lesion  of  early  childhood caries  (ECC)  according  to  sampling  site.  Caspian  J Intern Med. 2011;2(4):304-308.
15. Adhikari  R,  Pant  ND,  Neupane  S,  Neupane  N, Bhattarai  R,  Bhattas,  et  al.  Detection  of  methicilin resistant Staphylococcus aureus and determination of minimum  inhibitory  concentration  of  vancomycin for Staphylococcus aureus isolated  from pus /wound swab  samples  of  patients  attending  a  tertiary  care hospital  in  Kathmandu  Nepal. Can  J Infect  Dis  Med Microbiol. 2017;2017(2191532):1-6.
X
16. Rafiei M, Kiani F, Sayehmiri F, Sayehmiri K, Sheiki A,  Azodi  MZ.  Study  of Phorphyromonas  gingivalis in periodontal disease: a systematic review and meta- analysis.  Med J Islam Repub Iran. 2017;31: 62.
17. How  KY,  Song  KP,  and  Chan  KG.  Porphyromonas gingivalis: An overview of periodontopathic pathogen below the gum line. Front Microbiol. 2016; 7: 53.