## TOXICITY TEST OF THE EXTRACT OF PEPPER ELDER (Peperomia pellucida) USING BRINE SHRIMP LETHALITY TEST

## UJI TOKSISITAS EKSTRAK SIRIH CINA (Peperomia pellucida) DENGAN MENGGUNAKAN METODE BRINE SHRIMP LETHALITY TEST
Angelica V. Togelang 1) , Herni E.I Simbala 1) , Surya Sumantri Abdullah 1)
1) Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi *angelicakarim075@gmail.com

## ABSTRACT
Pepper Elder (Peperomia pellucida L. Kunth ) is one of the herbal plants that has the potential as an anticancer. Pepper Elder is a weed plant that grows wild in wet and humid environments but is rarely cultivated.  Research  on  the  Pepper  Elder  plant  aims  to  determine  the  metabolite  compounds contained in the plant, its potential as an anticancer, and the LC 50 value. The research was conducted using an experimental method with the Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) method. Extraction was carried  out  by  maceration  method  to  extract  secondary  metabolites.  Through  screening  tests  it  is known that Pepper Elder contains alkaloids, flavonoids, tannins, saponins, and steroids. Tests were carried out with Artemia saline L. larvae at concentrations of 1000 µg/mL , 100 µg/mL , 10 µg/mL , 1 µg/mL with the potency obtained at the toxic level and LC 50 value is 40.947 µg/mL.
Keywords: Peperomia pellucida , Toxicity, BSLT, Artemia salina

## ABSTRAK
Sirih  Cina  ( Peperomia  pellucida L.  Kunth)  adalah  salah  satu  tumbuhan  herbal  yang  berpotensi sebagai antikanker. Sirih cina adalah salah satu tumbuhan gulma yang tumbuh liar di lingkungan yang basah dan lembab namun jarang dibudidayakan. Penelitian pada tumbuhan sirih cina bertujuan untuk mengetahui senyawa metabolit yang terkandung di dalam tumbuhan, potensinya sebagai antikanker, dan  nilai  LC 50 .  Penelitian  dilakukan  menggunakan  metode  eksperimental  dengan  Metode Brine Shrimp  Lethality  Test (BSLT).  Ekstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi  untuk  mengambil senyawa metabolit sekunder. Melalui uji skrining diketahui bahwa sirih cina mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, tannin, saponin, dan steroid. Pengujian dilakukan dengan larva Artemia saline L . pada konsentrasi 1000 μg/mL, 100 μg/mL, 10 μg/mL, 1 μg/mL dengan potensi yang didapatkan pada tingkat toksik dan nilai LC 50 , yaitu 40,947 µg/mL.
Kata kunci : Peperomia pellucida , Toksisitas, BSLT, Artemia salina .

## PENDAHULUAN
Sekitar  80%  dari  total  jenis  tumbuhan  yang berkhasiat  obat  ada  di  Indonesia.  Di  Sulawesi Utara, masyarakat tradisional yang biasa tinggal di sekitar  kawan  hutan  memanfaatkan  tumbuhan untuk keperluan pangan, bahan konstruksi, ataupun dijadikan obat-obatan. Perkembangan dan modernisasi  budaya  menyebabkan  hilangnya pengetahuan  mengenai  obat-obatan  tradisional. Dimana  pengetahuan  mengenai  obat-obatan  ini cenderung  hanya  diketahui  oleh  kelompok masyarakat tertentu (Kinho et al , 2011).
Kandungan  atau  senyawa  yang  dapat dimanfaatkan untuk membunuh atau menghambat poliferasi  disebut  antikanker.  Antikanker  pada umumnya  memiliki  sifat  toksik  baik  bagi  sel kanker  ataupun  sel  normal  yang  poliferasinya cepat. Senyawa yang memiliki sifat antikanker ini sendiri diharapkan memiliki sifat toksisitas selektif yang  artinya  hanya  menghancurkan  sel  kanker tanpa harus merusak jaringan normal disekitarnya (Pratama dan Nuwarda, 2013).
Salah  satu  tumbuhan  herbal  yang  berpotensi sebagai  antikanker  adalah  Sirih  Cina  ( Peperomia pellucida L.  Kunth).  Sirih  cina  adalah  salah  satu tumbuhan  gulma  yang  tumbuh  liar  di  lingkungan yang basah dan lembab namun jarang dibudidayakan.  Menurut  Bialangi et  al (2021), kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  ada dalam  sirih  cina (Peperomia  pellucida L.  Kunth ) adalah alkaloid. Sirih cina (Peperomia pellucida L. Kunth)  juga  mengandung  beberapa  minyak esensial,  berupa  dillapiole,  β-caryophyllene  dan carotol  yang  memiliki  aktivitas  larvasida  tinggi. Senyawa lainnya adalah flavonoid seperti acacetin, apigenin,  isovitexin  dan  pellucidatin,  fitosterol, yaitu, campesterol, stigmasterol, dan arylproppanoids.  Dimana  senyawa  spesifik  yang terkandung dalam flavonoid seperti apigenin, serta turunan fitosterol, yaitu campesterol dan stigmasterol yang memiliki efek antikanker.
Untuk  mengetahui  potensi  dari  sirih  cina sebagai  antikanker  digunakan  uji  dengan  metode Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT).  Metode BSLT adalah uji yang dilakukan untuk memantau aktivitas  biologis  berbagai  spesies  tumbuhan. Meskipun metode ini tidak memberikan informasi yang rinci mengenai pembentukan mekanisme aksi toksik,  tetapi  metode  ini  sangat  berguna  untuk penilaian  potensi  toksik  dari  berbagai  ekstrak tumbuhan juga sudah teruji tingkat kepercayaannya  sebanyak  95%  untuk  mengamati
aktivitas toksik dalam suatu senyawa (Hamidi et al , 2014).
Berdasarkan  uraian  di  atas,  maka  penelitian ini  dilakukan  untuk memperluas  kajian  penelitian terhadap tumbuhan sirih cina ( Peperomia pellucida L.  Kunth) yang  berpotensi  sebagai  antikanker dengan metode BSLT.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan  Februari 2023 –  Mei  2023 di  Laboratorium  Farmasi  lanjut Program  studi  Farmasi,  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sam Ratulangi Manado.

## Alat dan Bahan Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah pot salep, erlenmeyer, bejana kaca maserasi, neraca  analitik, Water  Bath, gelas  beker, mikropipet, corong kaca, kertas saring, pipet tetes, cawan  penguap,  batang  pengaduk,  kain  hitam, blender,  spatula, hot  plate,  stirrer, kertas  pH,  alat penetasan  udang  (wadah  plastik,  lakban  hitam, sterofoam, aluminium foil, lampu neon akuarium, thermometer, aerator (Amara)).

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  adalah  air  laut, akuades,  etanol  96%,  kloroform,  ammonia,  asam sulfat, reagen mayer, wagner, dragendorff, serbuk magnesium,  asam  klorida pekat,  besi  (III)  klorida sebagai  bahan  untuk  mengidentifikasi  metabolit sekunder, aluminium foil , sampel yang digunakan berupa sirih cina ( Peperomia pellucida L. Kunth), dan hewan uji, yaitu telur Artemia salina Leach.

## Prosedur Penelitian Preparasi Sampel
Sirih  Cina  ( Peperomia  pellucida L.  Kunth) yang  digunakan  pada  penelitian  ini  diambil  dari Kelurahan  Tumumpa  II,  Kecamatan  Tuminting, Kota Manado, Provinsi Sulawesi Utara. Sirih Cina ( Peperomia  pellucida L.  Kunth)  yang  didapatkan sebanyak  2  kg  kemudian  dilakukan  sortasi  basah dan pencucian menggunakan air mengalir. Sampel yang  telah  dicuci,  kemudian  dijemur  dibawah matahari,  kemudian  setelah  kering  sampel  di blender  hingga  halus,  setelah  diblender  hingga halus maka sampel sudah siap untuk dimaserasi.

## Pembuatan Ekstrak
Sirih  cina  yang  sudah  dikeringkan, kemudian  dihaluskan  hingga  berbentuk  serbuk, kemudian dimaserasi menggunakan pelarut etanol
(teknis)  95%  sebanyak  2-3  cm  diatas  permukaan simplisia,  lalu  didiamkan  selama  3x24  jam  dan diaduk sekali sehari. Kemudian, disaring menggunakan  kertas  saring  dipisahkan  antara ampas  dan  filtrat.  Ampas  diekstraksi  kembali dengan etanol 95%,  dilakukan remaserasi sebanyak  2  kali.  Hasil  berupa  filtrat  di  uapkan menggunakan Water Bath dengan suhu 75˚C, yang bertujuan  sebagai  penguap  pelarut  etanol  pada filtrat  hingga  diperoleh  ekstrak  yang  kental (Rachmawati dan Rantelino, 2018).

## Skrining Fitokimia
Ekstrak  kental  Sirih  Cina  ( Peperomia pellucida L.  Kunth)  dilakukan  uji  fitokimia meliputi  uji  pemeriksaan  golongan  alkaloid, flavonoid, tannin, saponin, steroid dan triterpenoid (Arianta, 2021).

## Uji Alkaloid
Ekstrak  Sirih  Cina  ( Peperomia  pellucida L. Kunth) sebanyak 1 gr dimasukkan ke dalam tabung  reaksi,  lalu  ditambahkan  kloroform sebanyak  10  mL,  kemudian  ditambahkan  10 mL  amoniak.  Saring  larutan  kedalam  tabung reaksi dan diteteskan H 2 SO 4 sebanyak 10 tetes, kemudian  dikocok  dan  diamkan  selama beberapa  menit  sampai  terbentuk  2  lapisan. Lapisan  atas  yang  didapat  dipindahkan masing-masing  sebanyak  1  mL  ke  dalam  3 tabung reaksi, kemudian ditambahkan beberapa  tetes  pereaksi  Mayer,  Wagner,  dan Dragendorff.
Uji Flavonoid Ekstrak  Sirih  Cina  ( Peperomia  pellucida L. Kunth) sebanyak 1 gr dimasukkan ke dalam tabung reaksi,  lalu  ditambahkan  5  mL  etanol,  kemudian dipanaskan selama beberapa menit, lalu ditambahkan beberapa tetes HCL pekat. Setelah itu ditambahkan 0,2 gr logam Mg.
Uji Tanin
Ekstrak  Sirih  Cina  ( Peperomia  pellucida L. Kunth) sebanyak 1 gr dimasukkan ke dalam tabung reaksi,  lalu  ditambahkan  etanol  sampai  sampel terendam,  lalu  diteteskan  2-3  tetes  larutan  FeCl3 1%.
Uji Saponin
Ekstrak  Sirih  Cina  ( Peperomia  pellucida L. Kunth) sebanyak 1 gr dimasukkan ke dalam tabung reaksi,  lalu  ditambahkan  aquades  sampai  sampel terendam,  kemudian  dididihkan  selama  beberapa menit, setelah itu didinginkan kemudian dikocok.

## Uji Steroid dan Triterpenoid
Ekstrak  Sirih  Cina  ( Peperomia  pellucida L. Kunth) sebanyak 1 gr dimasukkan ke dalam tabung reaksi,  lalu  ditambahkan  asam  asetat  glasial,  lalu dibiarkan selama 15 menit, kemudian dipindahkan ke tabung reaksi sebanyak 6 tetes dan ditambahkan 2-3 tetes asam sulfat pekat.

## Penetasan Larva Artemia Salina Leach
Penetasan  larva Artemia  salina Leach dilakukan  di  dalam  wadah  plastik  yang  sudah dibagi  menjadi  2  bagian,  yaitu  bagian  terang  dan bagian gelap, kemudian di beri batas menggunakan sterofoam  yang  tepi  bawahnya  sudah  dilubangi agar  larva  dapat  menuju  sisi  satunya  setelah menetas.  Wadah  kemudian  diisi  dengan  air  laut. Kemudian,  pada  salah  satu  ruang  diisi  1  sendok telur lalu ditutup menggunakan aluminium foil dan lakban hitam, ruang yang diutup ini disebut dengan ruang gelap. Pada ruangan yang satunya lagi, diberi penerangan  menggunakan  cahaya  lampu  neon untuk merangsang penetasan. Kemudian, dipasangi  aerator  guna  memberikan  oksigen pada telur  yang  menetas  menjadi  larva  dan  berpindah pada  ruang  terang  dengan  suhu  penetasan  adalah ±25-30  ºC  dan  pH  ±  7-8.  Telur  akan  menetas setelah  18-24  jam  dan  larvanya  disebut nauplii . Nauplii yang sudah berumur 24 jam, dipindahkan ke wadah lain hingga berumur 48 jam, kerika sudah berumur  48  jam  maka  dapat  dijadikan  hewan percobaan untuk uji BLST (Fatimatuzzahra, 2013).

## Pembuatan Konsentrasi Larutan Uji
Konsentrasi  larutan  uji  untuk  BSLT  adalah 1000 μg/mL, 100 μg/mL, 10 μg/mL, 1 μg/mL, dan 0 μg/mL (sebagai control negatif). (Surya, 2018). a. Ekstrak  Sirih  Cina  ( Peperomia  pellucida L. Kunth) ditimbang sebanyak 50 mg, kemudian dilarutkan  dengan  air  laut  50  mL  untuk memperoleh 1000 μg/mL
b. Dari  larutan  dengan  konsentrasi  1000  μg/mL diambil  5  mL  dan  dilarutkan  dengan  air  laut hingga  50  mL  untuk  mendapatkan  konsetrasi 100 μg/mL.
c. Dari  larutan  dengan  konsentrasi  100  μg/mL diambil  5  mL  dan  dilarutkan  dengan  air  laut hingga  50  mL  untuk  mendapatkan  konsetrasi 10 μg/mL.
d. larutan  dengan  konsentrasi  10 μg/mL diambil 5 mL dan dilarutkan dengan air laut hingga 50 mL untuk mendapatkan konsetrasi 1 μg/mL.
e. Untuk  memperoleh  larutan  konsentrasi  0 μg/mL  dibuat  dengan  mengambil  10  mL  air laut.

## Uji Toksisitas
Setelah  pembuatan  konsentrasi,  disiapkan  5 wadah  kaca  untuk  masing-masing  konsentrasi ditambahkan,  kemudian  dimasukkan  10  Larva Artemia salina Leach dan dilakukan triplo (3 kali pengulangan).  Pengukuran  dilakukan  dengan menghitung jumlah kematian Larva Artemia salina Leach sebanyak  50%  dari  total  larva  uji  dengan pengamatan  setelah  periode  inkubasi  selama  24 jam setelah pemberian larutan uji (Fatimatuzzahra, 2013).

## Analisis Data
presentase kematian larva dilanjutkan dengan analisis  data  menggunakan  metode  probit  untuk mencari nilai LC 50 (Mutiyani, 2013).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia bertujuan untuk mengetahui  golongan  senyawa  yang  terkandung pada suatu tumbuhan sebagai informasi awal untuk mengetahui  aktivitas  biologi  dari  suatu  tanaman. Skrining fitokimia yang dilakukan pada penelitian
Setelah  didapatkan  hasil  pengamatan  dari kematian  Larva Artemia  salina Leach,  dilakukan untuk  mengetahui  aktivitas  biologi  dari  suatu tanaman.  Skrining  fitokimia  yang  dilakukan pada penelitian  menguji  ada  atau  tidaknya  kandungan dari  enam  golongan  senyawa  yang  berpotensi toksik.  Hasil  pengujian  skrining  fitokimia  dapat dilakukan pada Tabel 1
Berdasarkan  hasil  dari  uji  skrining,  dapat dilihat  pada  uji  alkaloid  digunakan  tiga  pereaksi, yaitu  pereaksi  dragendorff,  wagner,  dan  mayer. Pereaksi  dragendorff  memunculkan  endapan berwarna jingga yang terjadi karena adanya reaksi pengganti  ligan,  pada  pereaksi  wagner  terdapat endapan berwarna coklat, sedangkan pada pereaksi mayer  tidak  menimbulkan  perubahan  warna ataupun  terbentuknya  endapan.  Jadi,  dari  tiga pereaksi yang digunakan hanya dua pereaksi yang menyebabkan perubahan warna dan pembentukan endapan. Hal ini menunjukkan bahwa sirih cina
mengandung senyawa alkaloid tetapi tidak terlalu kuat.
Menurut  Rukmini et  al (2020),  hasil  dari skrining  fitokimia  pada  sirih  cina  untuk  uji flavonoid,  menghasilkan  warna  merah  bata  tetapi pada  penelitian  ini  hasil  percobaan  terbentuk larutan berwarna jingga, akan tetapi hal ini berarti bahwa  sirih  cina  mengandung  flavonoid,  karena flavonoid  sendiri  memiliki  ikatan  dengan  gugus gula  dan  flavonoid  ini  merupakan  bagian kelompok senyawa fenol yang bertanggung jawab terhadap zat warna merah, ungu, biru, dan sebagai zat warna kuning pada tumbuhan. Kemudian, pada uji  tannin  terjadi  perubahan warna  hijau  kebiruan sedangkan  pada  penelitian  ini  terjadi  perubahan warna berupa hitam kehijauan yang berarti bahwa sirih  cina  mengandung  tannin  kondensasi  karena perubahan warnanya.
Uji saponin menunjukkan adanya busa stabil selama  beberapa  menit,  saponin  pada  umumnya
Tabel 1. Hasil Uji Skrining Fitokimia Sirih Cina ( Peperomia pellucida L. Kunth) Senyawa Metabolit Perubahan Positif Hasil Keterangan Alkaloid Dragendorff Terbentuk endapan berwarna jingga Endapan berwarna jingga (+) Wagner Terbentuk endapan warna coklat Endapan berwarna coklat (+) Mayer Terbentuk endapan warna putih Tidak ada endapan (-) Flavonoid Terbentuk larutan berwarna merah tua, kuning, atau jingga Larutan berwarna jingga (+) Tanin Terbentuk larutan berwarna hitam kebiruan atau hijau Larutan berwarna hitam kehijauan (+) Saponin Terbentuk busa yang dapa bertahan selama beberapa menit Ada busa stabil selama beberapa menit (+) Steroid/Triterpenoid Terbentuk larutan berwarna merah, jingga, atau ungu Larutan berwarna hitam (+)(-)
Keterangan : (-) Tidak mengandung senyawa; (+) Mengandung senyawa
dalam  bentuk  glikosida  sehingga  cenderung bersifat  polar.  Saponin  merupakan  senyawa  aktif permukaan  yang  dapat  menimbulkan  busa  jika dikocok  dalam  air.  Busa  ini  disebut  misel  yang terbentuk karena gugus polar yang menghadap ke luar dan gugus nonpolar yang menghadap ke dalam sehingga tampak seperti busa.
Pada penelitian Sandy et al (2020), untuk uji steroid menunjukkan hasil positif dengan perubahan warna hijau kebiruan sedangkan untuk uji  steroid  pada  penelitian  ini  juga  menunjukkan hasil  positif  pada  uji  steroid  karena  terjadi perubahan larutan berwarna hijau kehitaman.
Sedangkan  pada  senyawa  terpenoid,  larutan tidak  berubah  warna  hal  ini  menunjukkan  bahwa sirih cina tidak mengandung terpenoid.
Pengujian Toksisitas dengan Metode BSLT Pengujian toksisitas dilakukan dengan metode Brine  Shrimp  Lethality  Test (BSLT) menggunakan  larva Artemia  Saline Leach. Kemampuan  toksisitas  dari  ekstrak  sirih  cina ( Peperomia pellucida L. Kunth) dalam mematikan larva  diberikan  perlakuan  dengan  konsentrasi 1000, 100, 10, dan 1 µg/mL beserta larutan control yang  hanya  berisikan  air  laut  yang  dapat  dilihat pada  tabel  3.  Penambahan  larutan  control dilakukan  sebagai  pembanding  yang  mana  untuk mengetahui  pengaruh  air  laut  ataupun  factor  lain terhadap kematian larva.
Tabel 2. Persentase Jumlah Kematian Larva Udang Pengujian Kontrol (-) 0 µg/mL Jumlah Kematian Setiap Konsentrasi 1 µg/mL 10 µg/mL 100 µg/mL 1000 µg/mL 1 0 2 4 6 8 2 0 3 5 5 7 3 0 2 4 5 7 Total Kematian 0 7 13 16 22 Rata-rata 0 2,33 4,33 5,33 7,33 Persentase Kematian (%) 0% 23,33% 43,33% 53,33% 73,33%
Tabel 3. Nilai LC 50 Kosentrasi µg/mL Log Konsentrasi Jumlah Larva Uji Jumlah Larva Mati Persentase Kematian (%) Nilai Probit 1 2 3 Rata-rata 0 10 0 0 0 0 - 1 0 10 2 3 2 3 23 4.2710 10 1 10 4 5 4 4 43 4.8313 100 2 10 6 5 5 5 53 5.0828 1000 3 10 8 7 7 7 73 5.6219
LC 50 = 40,947 µg/mL
Gambar 1. Grafik Analisis Regresi
Hasil  analisis  regresi  diperoleh  persamaan linear  Y  =  0,4304x  +  4,3061  dengan  nilai  R2  = 0,981.  Koefisien  determinasi  (R2)  adalah  nilai yang  menunjukkan  bagian  dari  keragaman  total variable  tak  bebas  Y  yang  dapat  diperhitungkan oleh  keragaman  variable  bebas  X.  Nilai  R2  yang terletak  antara  0-1  memiliki  korelasi  yang menyatakan  semakin  baik  apabila  R2  semakin mendekati nilai 1. Pada uji toksisitas ini, nilai R2 mendekati  angka  1,  hal  ini  menunjukkan  bahwa factor yang mempengaruhi kematian dari larva uji adalah  akibat  dari  efek  yang  ditimbulkan  oleh ektrak sirih cina ( Peperomia pellucida L. Kunth), apabila  nilai  R2  semakin  menjauhi  nilai  1  maka terdapat  factor  lain  yang  menyebabkan  kematian pada  larva  uji.  Dari  perhitungan  yang  didapatkan berdasarkan  nilai  LC 50 diambil  dari  antilog  x dengan nilai 40,947 µg/mL, maka dapat dinyatakan bahwa  ektrak  sirih  cina  ( Peperomia  pellucida L. Kunth)  dapat berpotensi sebagai kandidat antikanker  dengan  potensi  toksisitas  kategori toksik.
Tabel 4. Tingkat Nilai Toksisitas LC 50
(Reskianingsih., 2014)
No.
Nilai LC 50 (µg/mL) Tingkat Toksisitas 1. > 1000 µg/mL Tidak Toksik 2. 30 – 1000 µg/mL Toksik 3. < 30 µg/mL Sangat Toksik
Pada penelitian yang telah dilakukan oleh Sri dan  Sari  pada  tahun  2019  tentang  uji  toksisitas pada daun sirih cina didapatkan nilai LC 50 sebesar
31,62  ppm  sedangkan  pada  penelitian  ini didapatkan  nilai  LC 50 sebesar  40,947  µg/mL,  hal ini  menunjukkan  bahwa  sirih  cina  berada  pada tingkat toksik yang mana membedakan juga factor lingkungan tempat tumbuhnya sirih cina yang juga dapat menjadi factor utama seperti kualitas tanah, cuaca, temperature, kadar air, beda usia tumbuhan juga  cahaya,  yang  dapat  menjadi  tolak  ukur  kuat atau tidaknya kandungan golongan senyawa yang berpotensi sebagai antikanker.
Penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  sirih  cina memiliki potensi sitotoksik, yang mana hal tersebut berkaitan dengan senyawa yang terkandung dalam sirih cina, yaitu flavonoid. Flavonoid dalam kadar tertentu  memiliki  potensi  sitotoksik  serta  dapat menyebabkan kematian pada larva uji. (Bialangi et al , 2021).
Selain flavonoid, senyawa lain yang terkandung  pada  sampel  seperti  alkaloid,  tannin, dan  saponin  juga  dapat  berfungsi  sebagai antikanker.  Senyawa  alkaloid  sendiri  dapat menghambat mekanisme pembelahan serta pengaktifan jalur apoptosis sel kanker. Sedangkan senyawa tannin dapat menghambat kerja enzim sel, mencegah terjadinya  proses  mutagenesis  sel  yang dapat  menimbulkan  kanker  dan  pengaktifan  sel makrofag  kanker.  Untuk  senyawa  saponin  sendiri memiliki  efek  antioksidan  dengan  membentuk spesies reaktif seperti hidroperoksida dan superoksida sehingga dapat menghambat pembentukan lipid. (Gusung et al , 2020).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  Sirih  Cina (Peperomia  pellucida L.  Kunth)  mengandung senyawa  metabolit  sekunder  yaitu  alkaloid, flavonoid, tannin, saponin, dan steroid yang dapat
y = 0.4304x + 4.3061 R² = 0.981 0 1 2 3 4 5 6 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 N ilai P ro b it Log Konsentrasi
dilihat  dari  perubahan  warna  dan  pembentukan endapan.  Potensi  yang  dapat  dilihat  pada  Ekstrak Sirih Cina (Peperomia pellucida L. Kunth) sebagai antikanker  menunjukkan  adanya  sifat  toksik dengan  termasuk  kedalam  tingkat  toksik,  hal  ini menunjukkan bahwa ekstrak Sirih Cina (Peperomia pellucida L. Kunth) memiliki potensi untuk  menjadi  antikanker  dengan  nilai Lethal Concentration 50%  (LC 50 )  dari  Sirih  Cina (Peperomia  pellucida L.  Kunth)  yang  didapatkan yaitu 40,947 µg/mL.

## SARAN
Penelitian  lebih  lanjut  uji  toksisitas  Ekstrak Sirih  Cina (Peperomia  pellucida L.  Kunth) menggunakan metode uji toksisitasis khusus.

## DAFTAR PUSTAKA
Alqamari, M., Tarigan, D.M., Alridiwirsah. 2017.
Budidaya  Tumbuhan  Obat  dan  Rempah. Medan: UMSU Press Arianta, I.P.A. 2021 . Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Bunga  Kamboja  Kuning  ( Plumeria  alba ) dengan  Menggunakan  Metode  Brine Shrimp  Lethality  Test  (BSLT) [Skripsi].
Manado: Universitas Sam Ratulangi.
Bialangi,  N.,  Salimi,  Y.K.,  Situmeang,  B.  2021.
Manfaat  Ekstrak  Tumbuhan  Suruhan sebagai  Antioksidan  dan  Antimalaria. Banten: YPSIM.
Fatimatuzzahra,  F.  2013.  Uji  Toksisitas  Akut Ekstrak  Etanol  Daun  Kemangi  ( Ocimum canum  Sims )  terhadap  Larva  Artemia salina Leach dengan Metode Brine Shrimp Lethality  Test  (BSLT) [skripsi] .  Jakarta:
Universitas Islam Negeri Hidayatullah. Gusung,  D.E.,  Maarsit,  W.,  Hariyani.,  Potalangi,
O.P.  2020. Studi  Aktivitas  Antioksidan dan Antikanker Payudara (MCF-7) Ekstrak  Etanol  Daun  Benalu  Langsat Dendrophthoe pentandra .
Jurnal Biofarmasetikal Tropis . 3(1): 166-174
Hamidi, R.M., Jovanova, B., Panovska, T.K. 2014.
Toxilogical  evaluation  of  the  plant products  using  Brine  Shrimp  ( Artemia saline L.) model. Macedonian
Pharmaceutical Bulletin . 60(1): 9-18
Karomah,  S.  2019.  Uji  Ekstrak  Tumbuhan  Sirih
Cina  (Peperomia  pellucida  L.)  sebagai antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis [skripsi].
Medan: Universitas Medan Area.
Kinho,  J., Diah,  A.,  Supratman, T., Harwiyaddin, K.,  Yermias,  K.,  Syamsir,  S.,  Moody,  K. 2011. Tumbuhan  Obat  Tradisional  di Sulawesi  Utara  Jilid  I. Manado:  Balai Penelitian Kehutanan Manado.
Mukhriani.  2014. Ekstraksi,  Pemisahan  Senyawa, dan  Identifikasi  Senyawa  Aktif. Jurnal Kesehatan . 7(2): 361-367.
Mutiyani,  N.  2013.  Uji  Toksisistas  Akut  Ekstrak Etil  Asetat  Garcinia  bethami  Pierre dengan  Metode  Brine  Shrimp  Lethality Test  (BSLT)  [skripsi].  Jakarta:  Fakultas Kedokteran UIN.
Pratama, E.F., dan Nuwarda, R.F. 2018. Senyawa Aktif  Antikanker  dari  Bahan  Alam  dan Aktivitasnya. Farmaka. 16(1): 149-158.
Rachmawati,  F.,  dan  Rantelino,  V.  2018.  Bunga Rampai  Saintifika.  Jakarta: FK  UKI.  (1): 51-56.
Reskianingsih, A. 2014. Uji Toksisitas Akut Ekstrak Metanol  Buah  Phaleria  macrocarpa (Scheff)  Boerl  Terhadap  Larva  Artemia salina Leach dengan Metode Brine Shrimp Lethality  Test  (BSLT)  [skripsi].  Jakarta: Fakultas Kedokteran UIN.
Riza,  F.F.F.  2012.  Uji  Toksisitas  Ekstrak  Kasar Sargassum cristaefolium terhadap Metode Artemia  Salina dengan  Metode  BSLT (Brine  Shrimp  Lethality  Test) [skripsi].
Depok: FMIPA UI.
Rukmini,  A.,  Utomo,  D.H.,  Laily,  A.N.  2020.
Skrining  Fitokimia  Familia  Piperceae. Jurnal  Biologi  dan  Pembelajarannya. 7(1): 28-32.
Sandy,  F.F.,  Susilawati,  Y.,  Ramadhania,  Z.M. 2020.  Review:  Analisis  Kualitatif  dan Kuantitatif  Kandungan  Senyawa  Kimia Herba  Sasaladaan  ( Peperomia  pellucida (L)  H.B.K). Jurnal  Sains  dan  Kesehatan . 2(4): 505-516.
Surya,  A.  2018.  Toksisitas  Ekstrak  Daun  Matoa ( Pometia pinnata ) terhadap larva ( Artemia salina L.)  dengan  Metode  Brine  Shrimp Lethality  Test . Jurnal  Analis  Kesehatan Kliknikal Sains. 6(1): 13-17.
Vifta,  R.L.,  Advistasari,  Y.D.,  2018.  Skrining Fitokimia,  Karakterisasi,  dan  Penentuan Kadar Flavonoid Total Ekstrak dan Fraksi- Fraksi  Buah  Parijoto (Medinilla  speciosa B. ). Prosiding Semarang: Seminar Nasional Unimus. 1(1): 2654-3257
Wibowo,  S.,  Utomo,  B.S.B.,  Suryaningrum,  D., Syamdidi.  2013. Artemia  Untuk  Pakan
Ikan  dan  Udang. Jakarta:  Penebar Swadaya.
Sri,  W.,  dan  Sari,  A.  2019.  Uji  Toksisitas  Akut Daun  Suruhan  ( Peperomia  pellucida  (L.) Kunth)  Terhadap  Larva  Udang  (Artemia Salina  Leach).  Jurnal  Herbal  Indonesia. 1(1): 2685-9343.