Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Obat Kumur Infusa Daun Salam
( Syzygium polyanthum W.) terhadap Streptococcus mutans
Antibacterial Activity Test of Medicines Invention of Salam Leaf Infusion (Syzygium polyanthum W.) against Streptococcus mutans
Adelia Setyaningrum Permatasari 1 , Dyah Susilowati 2 , Susi Endrawati 3 1,2,3 Politeknik Kesehatan Bhakti Mulia, Sukoharjo permatasariaa@gmail.com , susilowatidyah75@gmail.com , susiendrawati.5@gmail.com https://doi.org/10.55181/ijms.v9i1.356
Abstract : Bay leaves (Syzygium polyanthan W.) contains substances of color, tanning substances and essential oils which are antibacterial. The objectives of the study were 1) to find out that the bay leaf infusion  mouthwash  had  activity  against  Streptococcus  mutans  bacteria,  This  study  used  the  well diffusion method with a diameter of 9mm. The concentrations used were 10%, 20% and 30%, positive control  (Amoxicillin)  and  negative  control  (mouthwash without  bay  leaf  infusion). The  results showed that the positive control got large results with an average diameter of 19.16 mm, there was no inhibition zone in the negative control. Bay leaf infusion has activity against Streptococcus mutans bacteria at a concentration of 10% with a diameter of 10.66 mm, a concentration of 20% with a diameter of 12.33 mm, a concentration of 40% with a diameter of 15 mm. Bay leaf infusion mouthwash has activity against Streptococcus mutas with the diameter of the zone of inhibition of the bay leaf infusion mouthwash at a concentration of 10% is 10.66 mm, a concentration of 20% with diameter 12.33 mm, concentration 40% with diameter 15 mm.
Key words : bay leaf, mouthwash, antibacterial test
Abstrak : Daun salam ( Syzygium polyanthum W. ) mengandung zat-zat bahan warna, zat samak dan minyak atsiri yang bersifat antibakteri. Tujuan penelitian untuk mengetahui sediaan obat kumur infusa daun  salam  memiliki  aktivitas  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans, Penelitian  ini  menggunakan metode difusi sumuran dengan diameter 9mm. Konsentrasi yang digunakan 10%, 20% dan 30%, kontrol positif (Amoxicillin) dan kontrol negatif (obat kumur sediaan tanpa infusa daun salam). Hasil penelitian didapat  kontrol  positif  mendapatkan  hasil  yang  besar  dengan  diameter  rata-rata  19,16  mm,  tidak terdapat  zona  hambat  pada  kontrol  negatif.  Sediaan  infusa  daun  salam  memiliki  aktivitas  terhadap bakteri Streptococcus  mutans pada  konsentrasi  10%  dengan  diameter  10,66  mm,  konsentrasi  20% dengan  diameter  12,33  mm,  konsentrasi  40%  dengan  diameter  15  mm.  Sediaan  obat  kumur  infusa daun salam memiliki aktivitas terhadap Streptococcus mutans dengan diameter zona hambat sediaan obat  kumur  infusa  daun  salam    pada  konsentrasi  10%  adalah  10,66  mm,  konsentrasi  20%  dengan diameter 12,33 mm, konsentrasi 40% dengan diameter 15 mm.
Kata kunci : daun salam, obat kumur, uji antibakteri

## I. PENDAHULUAN
Sejak  ribuan  tahun  yang  lalu  obat  dan pengobatan tradisional sudah ada di Indonesia, jauh  sebelum  pelayanan  kesehatan  modern dikenal  di  masyarakat.  Pengobatan  tradisional dengan  memanfaatkan  tumbuhan  berkhasiat obat merupakan pengobatan yang dimanfaatkan dan  diakui  masyarakat  dunia,  yang  menandai kesadaran  untuk  kembali  ke  alam  ( back  to nature) untuk mencapai kesehatan yang optimal dan  untuk  mengatasi  berbagai  penyakit  secara alami (Kusuma, 2002).
Kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi  yang  semakin  pesat  dan  canggih  di zaman  sekarang  ini,  ternyata  tidak  mampu menggeser  atau  mengesampingkan  peranan obat-obat  tradisional  begitu  saja,  tetapi  hidup berdampingan  dan  saling  melengkapi.  Hal  ini terbukti dengan banyaknya peminat pengobatan tradisional.  Pengobatan  tradisional  adalah
pengobatan  menggunakan  obat-obatan  atau ramuan tradisional (Thomas, 1992).
Bau  mulut  sering  kali  juga  disebabkan oleh  bakteri Streptococcus  mutans ,  karena menghasilkan senyawa belerang berbau menyengat  yang  melekat  di  rongga  mulut  dan permukaan  lidah  yang  merupakan  80-90% penyebab masalah pada mulut (Haraszthy dkk , 2007). Streptococcus  mutans dapat  berubah menjadi  patogen  bila  lingkungan  hidup  bakteri tersebut menguntungkan dan terjadi peningkatan  populasi. Streptococcus  mutans adalah penghuni normal rongga mulut (Roeslan, 1996).
Streptococcus  mutans merupakan  salah satu  bakteri  patogen  yaitu  bakteri  pembentuk senyawa  yang  tidak  terlarut  pada  mulut  yang merupakan  unsur  utama  penyebab  timbulnya caries  pada  gigi  dan  plak  pada  gigi.  Penyebab halitosis  sebanyak  80%  dari  rongga  mulut  dan
20%  karena  permasalahan  pada  pencernaan (Nugraha, 2008).
Masalah  bau  mulut  dapat  diatasi  dengan obat  kumur  yang  mengandung  zat  aktif  untuk mencegah  atau  membunuh  kuman  penyebab halistosis. Salah satunya adalah yang bersumber  dari  tanaman,  seperti  tanaman salam.
Daun  salam  merupakan  tumbuhan  yang mudah  hidup  di  dataran rendah maupun  tinggi. Tanaman  ini  dapat  hidup  tanpa  perlakuan khusus.  Daun  salam  biasanya  digunakan sebagai  penyedap  rasa  pada  makanan. Harmanto  (2007)  menyatakan  bahwa  daun salam tingginya mencapai 25 m. Daunnya yang rimbun,  berbentuk  lonjong/bulat  telur,  berujung runcing bila diremas mengeluarkan bau harum. Daun salam mengandung zat-zat bahan warna, zat  samak  dan  minyak  atsiri  yang  bersifat antibakteri. Zat tannin yang terkandung bersifat menciutkan  (astringent).  Daun  salam  juga bermanfaat  untuk  mengatasi  diare,  diabetes, kudis atau gatal dan lambung lemah. Efektifitas antimikroba  yang  ditunjukkan  ekstrak  daun salam  memiliki  zat  aktif  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri  berupa  tannin,  flavonoid dan minyak atsiri, yang mana ketiga zat tersebut merupakan  komposisi  kimia  yang  terkandung dalam ekstrak daun salam (Sudirman, 2014).
Penelitian  sebelumnya  yang  dilakukan oleh Handayani dkk . (2016) telah membuktikan bahwa ekstrak etanol daun salam memiliki efek antibakteri  terhadap  bakteri Streptococcus mutans pada  konsentrasi  1%,  1,5%,  dan  2%. Konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  salam  yang paling  efektif  dalam  membentuk  aktivitas antibakteri  terbaik  merupakan  konsentrasi  2% yang  mempunyai  daya  hambat  sebesar  3,68 mm. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis mengenai  aktivitas  sediaan  obat  kumur  infusa daun salam ( Syzygium polyanthum W. ) terhadap Bakteri Streptococcus mutans .

## II. METODOLOGI PENELITIAN
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah eksperimental  dengan  membuat  sediaan  obat kumur  ( mouthwash )  dan  mengetahui  uji aktivitasnya  terhadap  bakteri Streptococcus mutans . Pembuatan simplisia daun salam
dilakukan  dengan  cara  menimbang  sebanyak 500  g  yang  baru  dipetik  kemudian  dibersihkan dari kotoran yang menempel, dicuci dengan air mengalir, ditiriskan dan ditimbang berat basahnya.  Daun  salam  dianginkan  di  dalam ruangan  terhindar  dari  sinar  matahari  hingga kering  lalu  ditimbang  sebagai  berat  kering selanjutnya dibuat serbuk.
Infusa  daun  dalam  dilakukan  secara infundasi. Serbuk simplisia daun salam
ditimbang kurang  lebih  100  gram. Konsentrasi daun salam yang digunakan pada penelitian ini adalah perbandingan 10% (b/v), 20% (b/v), 40% (b/v), yaitu 10g, 20g dan 40g sebuk daun salam yang  masing-masing  ditambahkan  100  ml  air dan dipanaskan di atas penangas air selama 15 menit terhitung  setelah  suhu  mencapai  90˚C dengan  sesekali  diaduk.  Setelah  itu,  campuran yang  masih  panas  disaring  dan  didinginkan untuk  menghilangkan  ampas  daun  salam (Varma, 2016).
Proses  pembuatan  obat  kumur  infusa daun salam dilakukan dengan cara menimbang semua bahan yang diperlukan. Kemudian infusa daun  salam  dimasukkan  ke  dalam  mortir ditambahkan  gliserin  dan  digerus  hingga homogen, dimasukkan sorbitol dan Na benzoat lalu  digerus  hingga  homogen,  ditambahkan aquadest  add  100  ml,  dilakukan  penyaringan dan  dimasukan  ke  dalam  botol,  diberikan peppermint oil 3-4 tetes (Handayani dkk ., 2016). Uji  evaluasi  meliputi  uji  organoleptis,  uji pH,  uji  viskositas.  Kemudian  dilakukan  uji aktivitas  antibakteri  metode  difusi  dengan  cara sumuran.  Media  nutrien  agar  (NA)  yang sebelumnya  sudah  dibuat,  kemudian  pada permukaan media NA digoresi dengan suspensi Streptococcus  mutans dengan  menggunakan kapas  lidi  steril  kemudian  ditekan-tekan  pada ujung tabung digoreskan secara merata setelah itu  didiamkan  selama  5-10  menit,  setelah  itu media  dibuat  sumuran  dengan  menggunakan boor  prop ,  kemudiaan  pada  sumuran  diisi dengan  sediaan obat kumur infusa daun salam dengan  menggunakan  mikropipet  0,5 μl  kadar konsentrasi  yang  digunakan  adalah  10%,20%, 40%  yang  telah  dibuat  dan  cawan  petri dibungkus dengan menggunakan kertas setelah itu  inkubasi  selama  24  jam  pada  suhu  37 0 C. Data diameter zona hambat dianalisis menggunakan  ANOVA  dengan software  versi 22.

## III.  HASIL PENELITIAN
Hasil  pengamatan  dan  pengolahan  data dari penelitian tentang pembuatan sediaan obat kumur  infusa  daun  salam,  didapatkan  hasil sebagai berikut:
1.  Susut Pengeringan
= 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑏𝑎𝑠𝑎ℎ−𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑘𝑒𝑟𝑖𝑛𝑔 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑏𝑎𝑠𝑎ℎ x 100% = 500 𝑔−300 𝑔 500 𝑔 𝑥 100%
= 40 %
2.  Hasil Uji Fisik Sediaan Hasil  uji  evaluasi  fisik  sediaan  obat kumur infusa daun salam sebagai berikut: a.  Organoleptis
Tabel  1. Organoleptis Sediaan Obat Kumur Infusa Daun Salam
Organoleptis  Sediaan 1 Sediaan 2 Sediaan 3 Bentuk Larutan Larutan Larutan Warna Coklat Tua Coklat Tua Coklat Muda Bau Harum Pepper- mint Harum Pepper- mint Harum Pepper- mint Tabel 1 menunjukkan bahwa
organoleptis  dari  sediaan  1  (10%)  dan sediaan  2  (20%)  obat kumur infusa  daun salam  memiliki  hasil    yang  sama  yaitu berbentuk  larutan,  berwarna  coklat  tua, dan memiliki bau khas harum peppermint. Sedangkan  sediaan  3  (40%)  obat  kumur infusa  daun  salam  berbentuk  larutan, berwarna  coklat  muda,  dan  memiliki  bau khas harum peppermint.
b.  Uji pH Tabel  2. Uji  pH  Sediaan  Obat  Kumur
Infusa Daun Salam Sediaan pH Sediaan 1 5 Sediaan 2 5 Sediaan 3 5
Pengukuran  nilai  pH  menggunakan pH  universal.  Hasil  pengukuran  pH  pada tabel  2  menunjukkan  hasil  sediaan  1;  2; dan  3  memiliki  pH  yang  sama  yaitu  5. Hasil uji pH yang telah dilakukan sediaan obat  kumur  infusa  daun  salam  sudah memenuhi  standart  obat  kumur  yaitu  pH 5,0-7,0.
c.  Uji Viskositas Tabel  3. Uji  Viskositas  Sediaan  Obat
Kumur Infusa Daun Salam Replikasi Sediaan 1 Sediaan 2 Sediaan 3 (cP) I 0,690 0603 0,637 II 0,757 0,728 0,727 III Rata-rata 0,732 0,726 0,694 0,675 0,757 0,707 Pengujian  viskositas  sediaan  obat kumur berpengaruh  terhadap  tingkat kekentalan produk tersebut saat
digunakan  untuk  berkumur.  Pengukuran tingkat  viskositas  sediaan  menggunakan viskometer Oswald. Hasil  penelitian  ini menunjukkan  nilai  viskositas  obat  kumur infusa  daun  salam  mendekati  viskositas air  yang  berarti  obat  kumur  infusa  daun salam lebih mudah dan nyaman digunakan  untuk  berkumur  (Pradewa, 2008).  Nilai  viskositas  dipengaruhi  oleh bobot jenis suatu
cairan yang mempengaruhi kecepatan mengalir cairan tersebut. d.  Identifikasi Bakteri (Uji Biokimia Fermentasi Karbohidrat)
Gambar 1. Hasil uji identifikasi bakteri
Identifikasi  bakteri  uji  ini  penting dilakukan  untuk  memastikan  bahwa bakteri  uji  ini  benar Streptococcus mutans. Gambar  1  menunjukkan  uji secara  mikroskopis,  didapatkan  koloni bakteri berwarna ungu, berbentuk coccus yang  membentuk  rantai,  dan  berukuran diameter rata-rata 1-2 µm, sesuai dengan karakteristik bakteri Streptococcus mutans. Uji fermentasi karbohidrat dilakukan  dengan  isolat  murni  bakteri diinokulasikan dalam tabung berisi media TSIA secara tusukan menggunakan jarum inokulasi dan streak menggunakan jarum ose.  Perubahan  warna  media  TSIA  dari merah-orange menjadi
kuning menunjukkan adanya fermentasi laktosa, sukrosa,  dan  dekstrosa  dibandingkan dengan  ontrol. Streptococcus  mutans membentuk asam dari proses fermentasi laktosa,  sukrosa  dan  dekstrosa  (uji  TSIA positif) berdasarkan panduan determinasi bakteri (Holt dkk ., 1994). Tabel 4. Identifikasi Bakteri
Hasil  uji  identifikasi  bakteri  dapat disimpulkan  bahwa  bakteri  uji  yang digunakan benar merupakan
Streptococcus mutans. Hasil Fermentasi Karbohidrat Bakteri Uji Warna Orange-Merah Menjadi Kuning Glukosa √ Laktosa √ Maltosa √ Sukrosa √ Manitol √
e.  Uji Antibakteri
Gambar 2 . Zona hambat bakteri
Tabel 5. Uji Antibakteri
Sediaan Diameter Zona Hambat (mm)
Rata – Rata Replikasi ke -
I II III Kontrol (+) 19,5 19 19 19,16 Kontrol (-) 0 0 0 0 Sediaan I 10,5 11 10,5 10,66 Sediaan II 12,5 12,5 12 12,33 Sediaan III 15,5 14,5 15 15
Hasil  uji  antibakteri  seperti  yang terlihat  pada  gambar  2,  sediaan  obat kumur  infusa  daun  salam  ( Syzygium polyanthum  W. )  dengan  perbedaan konsentrasi 10%, 20%, dan 40% setelah diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  24 jam  menunjukkan  bahwa  terdapat  zona hambat  di  sekitar  sumuran  dengan ditandai  adanya  zona  yang  berwarna bening.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa sediaan  obat  kumur  infusa  daun  salam memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans.
Hasil  pengukuran  zona  hambat yang diperoleh diameter zona bening tiap formula mengalami
peningkatan, semakin  besar  konsentrasi  ekstrak semakin  besar  pula  diameter  zona bening  yang  diperoleh. Kontrol  positif yang  digunakan  adalah  Amoxicillin  500 mg yang menunjukkan diameter rata-rata 19,16 mm termasuk dalam kategori kuat
10-20 mm. Kontrol negatif yang digunakan yaitu obat kumur tanpa infusa daun  salam  tidak  memiliki  daya  hambat terhadap  bakteri,  hal  ini  dibuktikan dengan  tidak  adanya  zona  hambat terhadap  bakteri Streptococcus  mutans yang  terbentuk  disekitar  sumuran.  Pada sediaan  1  konsentrasi  10%  rata-rata diameter  zona  bening  yang  diperoleh sebesar 10,66 mm kategori daya hambat
kuat, sediaan 2 konsentrasi 20% sebesar 12,33  mm  kategori  daya  hambat  kuat, sediaan  3  konsentrasi  40%  sebesar  15 mm  kategori  daya  hambat  kuat,  kontrol negatif sebesar 0 mm dan kontrol positif sebesar 19,16 mm kategori daya hambat kuat.
Gambar 3 . Daya hambat sediaan uji Gambar  3  menunjukkan  grafik  daya hambat sediaan  obat  kumur  infusa  daun salam  terhadap  bakteri Streptococcus mutans memiliki  rata-rata  daya  hambat yang  tinggi  pada  sediaan  3  dengan konsentrasi  sebesar  40%  sedangkan daya  hambat  terendah  pada  sediaan  1 dengan konsentrasi sebesar 10%. Kontrol negatif tidak memberikan pengaruh terhadap bakteri Streptococcus mutans.

## 3.  Analisis Data
Analisis  data  menggunakan OneWay Anova dapat  dilakukan jika  sudah  dilakukan uji  normalitas  dan  homogenitas  data.    Uji normalitas  data  menggunakan Kolmogorov- Smirnov yang  berfungsi  untuk  mengetahui kenormalan  distribusi  data  yang  akan digunakan. Hasil interpretasi uji Kolmogorov- Smirnov yaitu  jika  nilai  p>0.05  artinya  data penelitian  berdistribusi  normal  sedangkan nilai p<0.05 maka data penelitian berdistribusi tidak normal. Table 6 menunjukkan  hasil  uji  normalitas  data menggunakan Kolmogorov-Smirnov . Tabel  6. Hasil  Uji  Normalitas Kolmogorov- Smirnov Obat  Kumur  Infusa  Daun
Salam One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test DIAMETER N 5 Normal Parameters a,b Mean 11.4300 Std. Deviation 7.15097 Most Extreme Differences Absolute ,257 Positive ,145 Negative -,257 Test Statistic ,257 Asymp. Sig. (2-tailed) ,200 c,d
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Di am eter z o na ha m ba t (m m ) Replikasi 1 Replikasi 2
Replikasi 3
Tabel 6 menunjukkan bahwa
konsentrasi  dan  diameter  zona  hambat memiliki  sebaran  data  yang  terdistribusi normal. Hal ini terlihat dari hasil ujii normalitas data  variabel  Diameter,  diketahui  nilai p(.200)>0.05. Nilai p>0.05 maka  H 0 diterima sehingga  data  Diameter  Zona  Hambat berdistribusi normal.
Uji  statistik  setelah  dilakukan  uji normalitas  data  adalah  uji  homogenitas.  Uji ini berfungsi untuk mengetahui homogenitas atau keseragaman data penelitian yang akan diuji. Hasil interpretasi uji homogenitas  yaitu jika  p>0.05  artinya  varian  kelompok  data adalah sama (homogen) sedangkan  p<0.05 maka  varian  kelompok  data  adalah    tidak sama (tidak homogen).
Hasil  uji  homogenitas  data  Diameter Zona  Hambat  diketahui  nilai  p  (.171)>0.05, maka H0 diterima sehingga nilai p>0.05 yang berarti bahwa hasil uji homogenitas menunjukkan  data  yang  dianalisis  bersifat homogen  atau  seragam  sehingga  pengujian data dapat diteruskan menggunakan analisis One Way Anova .
Uji  statistik  setelah  dilakukan  uji normalitas  data  adalah  uji  homogenitas.  Uji ini berfungsi untuk mengetahui homogenitas atau keseragaman data penelitian yang akan diuji. Hasil interpretasi uji homogenitas  yaitu jika  p>0.05  artinya  varian  kelompok  data adalah sama (homogen) sedangkan  p<0.05 maka  varian  kelompok  data  adalah    tidak sama (tidak homogen).
Hasil  uji  homogenitas  data  Diameter Zona  Hambat  diketahui  nilai  p(.171)>0.05, maka H0 diterima sehingga nilai p>0.05 yang berarti bahwa hasil uji homogenitas menunjukkan  data  yang  dianalisis  bersifat homogen atau seragam sehingga pengujian data dapat diteruskan menggunakan analisis One Way Anova .
Uji One  Way  Anova bertujuan  unuk mengetahui  apakah  terdapat  perbedaan rata-rata  antara    lebih  dari  dua  kelompok sampel.  Syarat  untuk  dapat  dilakukan  uji One Way Anova adalah  hasil uji normalitas data  harus  menunjukkan  hasil  bahwa  data memiliki  distribusi  normal  dan  hasil  uji homogenitas  harus  menunjukkan  bahwa data  penelitian  bersifat  homogen.  Hasil  uji normalitas  dan  homogenitas  yang  telah dilakukan, data pada penelitian ini memenuhi  persyaratan  untuk  dilakukan  uji One Way Anova dan dilanjutkan uji Post Hoc Test .  Interpretasi  hasil  uji One  Way  Anova adalah  hipotesis H 0 = tidak ada perbedaan antara perlakuan, H 1 = ada perbedaan yang nyata  antar  perlakuan.  Jika  nilai  p
(Sig)<0.05,  maka  H 1 diterima,  H 0 ditolak, begitu pula sebaliknya.
Tabel 7. Hasil Uji One Way Anova ANOVA
Diameter Zona Hambat Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 619.393 4  153.483 1534. 483 ,000 Within Groups 1.000 10 .100 Total 614.933 14
Tabel  7  menunjukkan  hasil  uji One Way Anova Diameter Zona Hambat diketahui nilai  p  (<0,001)  <  0.05  maka  H 0 ditolak sehingga  ada  perbedaan  diameter  zona hambat  antar  konsentrasi  uji.  Hasil  analisis bahwa  ada  perbedaaan  diameter  zona hambat yang bermakna.

## IV.  PEMBAHASAN
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan daya hambat antibakteri Streptococcus  mutans terhadap  obat  kumur infusa  daun  salam.  Daun  salam  memiliki efektifitas antimikroba yang ditunjukkan ekstrak daun salam memiliki zat aktif dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  berupa tannin,  flavonoid  dan  minyak  atsiri,  ketiga  zat tersebut  merupakan  komposisi  kimia  yang terkandung dalam ekstrak daun salam (Sudirman, 2014).
Penelitian  ini  menggunakan  metode infusa.  Infusa  merupakan  esktrak  simplisia dengan  pelarut  air.  Air  merupakan  salah  satu pelarut yang mudah, murah dan dipakai secara luas  oleh  masyarakat.  Bahan  yang  digunakan sebagai  obat  kumur  adalah  gliserin,  sorbitol, natrium  benzoat,  peppermint  oil  dan  aqua  dest sebagai  pelarut.  Gliserin  sebagai  humektan, sorbitol  sebagai  pemanis,  natrium  benzoate sebagai  pengawet,  peppermint  oil  sebagai corrigen odoris (memperbaiki bau), dan aquadest sebagai pelarut.
Uji  organoleptis  dilakukan  dengan  cara mengamati sifat fisik sediaan dari ketiga sediaan mempunyai  bentuk,  bau  dan  rasa  yang  sama yaitu berbentuk cairan, berwarna coklat, berbau harum  peppermint,  rasa  tidak  dirasakan. Sediaan 1 dan 2 memiliki warna yang sama yaitu coklat  muda,  sedangkan  sediaan  3  berwarna coklat tua.
Uji pH obat kumur harus memenuhi syarat yaitu  5,0-7,0,  jika  pH  <5  sediaan  terlalu  asam dan  akan  menyebabkan  semakin  banyaknya pertumbuhan  bakteri  dan  jika  pH  >7  maka sediaan  terlalu  basa  dan  akan  menyebabkan pertumbuhan  jamur  sehingga  menimbulkan sariawan.  Uji  pH  telah  dilakukan  sediaan  obat kumur  yaitu  5,  sudah  memenuhi  syarat  tidak
kurang dan tidak lebih dari pH standart nya 5,0 – 7,0.
Uji evaluasi selanjutnya yaitu uji viskositas, uji ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui sifat alir sediaan. Semakin kecil nilai viskositas maka semakin baik sifat alir sediaan, sedangkan  semakin  tinggi  nilai  viskositas semakin  susah  sediaan  untuk  mengalir  atau tingkat kekentalan tinggi. Uji viskositas menggunakan  viskosimeter  oswald/kapiler.  Uji viskositas  didapat  hasil  nilai  viskositas  obat kumur  infusa  daun  salam  mendekati  viskositas air  yang  berarti  obat  kumur  infusa  daun  salam lebih  mudah  dan  nyaman  digunakan  untuk berkumur (Pradewa, 2008).
Uji  identifikasi  bakteri  dilakukan  untuk mendapatkan  kultur  biakan  murni  bakteri,  dan memastikan  bahwa  bakteri  uji  yang  digunakan benar-benar Streptococcus  mutans. Uji  secara mikroskopis, didapatkan koloni bakteri berwarna ungu,  berbentuk coccus yang  membentuk rantai, dan berukuran diameter rata-rata 1-2 µm, sesuai dengan karakteristik bakteri Streptococcus  mutans. Uji  kemurnian  ini dilakukan dengan metode fermentasi karbohidrat.  Uji  fermentasi  karbohidrat  dalam media Triple  Sugar  Iron  Agar (TSIA)  dengan hasil positif yang menunjukkan bahwa bakteri uji memproduksi  asam  sebagai  hasil  fermentasi laktosa,  sukrosa,  dan  dekstrosa  (ditunjukkan oleh warna kuning pada media TSIA yang telah mengandung  bakteri  uji  setelah  masa  inkubasi pada suhu 37˚C selama 24 jam). Uji fermentasi karbohidrat,  didapatkan  hasil  media  TSIA berwarna  kuning  yang  berarti  mengandung laktosa,  sukrosa,  dan  dekstrosa  menandakan bahwa  bakteri  tersebut  benar Streptococcus mutans.
Uji  aktivitas  antibakteri  menggunakan metode  difusi  dengan  cara  sumuran  karena metode ini memiliki kelebihan yaitu lebih mudah mengukur  luas  zona  hambat  yang  terbentuk karena  beraktivitas  tidak  hanya  dipermukaan atas  nutrien  agar  tetapi  juga  sampai  ke  bawah Media  nutrien  agar  (NA)  yang  sebelumnya sudah dibuat, kemudian pada permukaan media NA  digoresi  dengan  suspensi Streptococcus mutans dengan  menggunakan  lidi  kapas  steril kemudian  ditekan-tekan  pada  ujung  tabung digoreskan secara merata setelah itu didiamkan selama  5-10  menit,  setelah  itu  media  dibuat sumuran  dengan  menggunakan boor  prop , kemudiaan pada sumuran diisi dengan sediaan obat  kumur  infusa  daun  salam  dengan menggunakan  mikropipet 0,5 μl kadar konsentrasi yang digunakan adalah 10%, 20%, 40%  yang  telah  dibuat  dan  cawan  petri dibungkus dengan menggunakan kertas setelah itu inkubasi selama 24 jam pada suhu 37 0 C.
Pengujian daya hambat bakteri menggunakan  kontrol  positif  yaitu  Amoxicillin dan  kontrol  negatif  sediaan  obat  kumur  tanpa ekstrak.  Daya  hambat  diketahui  berdasarkan pengukuran  diameter  zona  inhibisi  (zona bening)  yang  terbentuk  di  sekitar  sumuran. Pengukuran dilakukan menggunakan penggaris. Daya hambat diketahui dengan cara melakukan  pengujian  replikasi  3  kali  pada masing-masing  konsenrasi  untuk  mendapatkan hasil rata-rata.
Daerah  hambatan  pertumbuhan  bakteri adalah daerah jernih di sekitar cakram. semakin kuat daya aktivitas antibakterinya maka semakin luas  daerah  hambatnya  (Jawetz  dkk,  1996). Menurut  penelitian  Handayani  dkk ( 2016) tentang  Formulasi  dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri Streptococcus mutans dari Sediaan Mouthwash Ekstrak  Daun  Salam  ( Syzygium  polyanthum (Wight)  Walp.)    menunjukkan  hasil  formula  1 konsentrasi  1%  diameter  zona  bening  yang diperoleh  sebesar  2,325  mm,  formula  2 konsentrasi  1,5%  sebesar  2,350  mm,  dan formula  3  konsentrasi  2%  sebesar  3,68  mm. Sedangkan  penelitian  ini  menggunakan  infusa daun salam dengan hasil formula 1 konsentrasi 10% diameter zona hambat 10,66 mm, formula 2 konsentrasi 20% diameter zona hambat 12,33 mm, dan formula 3 konsentrasi 40% sebesar 15 mm.  Perbedaan  keduanya  dipengaruhi  oleh pelarut  berupa  etanol  dan  air.  Penggunaan  air sebagai  pelarut  dengan  ekstrak  daun  salam konsentrasi  tinggi  lebih  baik  daya  antibakteri terhadap bakteri Streptococcus mutans. Uji statistik normalitas data  diketahui nilai p  (.200)>0,05,  maka  H O diterima,  sehingga kesimpulannya variabel Diameter Zona Hambat (mm)  berdistribusi  normal  dan  uji  statistik homogenitas  data  Diameter  Zona  Hambat diketahui  nilai  p  (.200)>0.05,  maka  H 0 diterima berarti  data  yang  dianalisis  bersifat  homogen atau  seragam  sehingga  pengujian  data  dapat diteruskan  menggunakan  analisis One  Way Anova . Hasil uji One Way Anova Diameter Zona Hambat  diketahui  nilai  p  (<0,001) <  0.05 maka H 0 ditolak  sehingga  ada  perbedaan  Diameter Zona Hambat antar konsentrasi uji.

## V.  SIMPULAN
Sediaan  obat  kumur  infusa  daun  salam (Syzygium  polyanthum  W.) memiliki  aktivitas terhadap Streptococcus mutans. Diameter zona hambat sediaan obat kumur infusa daun salam (Syzygium  polyanthum  W.) pada  konsentrasi 10%  adalah  10,66  mm;  konsentrasi  20% diameter  12,33  mm;  konsentrasi  40%  dengan diameter 15 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
Handayani,  F.,  Warnida,  H.,  Nur,  S.J.,  2016. Formulasi  dan  Uji  Aktivitas Antibakteri Streptococcus  mutans  dari  Sediaan Mouthwash Ekstrak Daun Salam (Syzygium  polyanthum  (Wight)  Walp.). Media  Sains ,  Volume  9  Nomor  1. Akademi Farmasi Samarinda.
Handayani,  F.,  Warnida,  H.,  Nur.  S.J.  2016. Formulasi  dan  uji  aktivitas  antibakteri streptococcus  mutans  dari  sediaan mouthwash ekstrak daun salam (Syzygium  polyanthum  (Wight)  Walp.). Media Sains , 9 (1), April 2016.
Haraszthy.  IV.  2007.  Identification  of  Oral Bacteria Species Assosiated with Halitosis. J. American Dental Association. 138 (8): 1113-1120.
Harmanto,  N.  2007. Jus  Herbal  Segar  dan Menyehatkan .  Jakarta:  PT  Alex  Media Komputindo.
Holt, JG., Kreig, NR, Sneath, PHA, Staley, JT, & William,  St.  1994. Bergey’s  manual  of determinative  bacteriology  9  edition . USA. Williams and Wilkins Baltimore.
Jawetz,  E.,  J.L.  Melnick,  and  E.A.  Adelberg. 1996. Mikrobiologi Kedokteran . Edisi 20.
Jakarta.  Penerbit  Buku  Kedokteran EGC; 228-231.
Kusuma.  H.W.  2002. Tumbuhan  Berkhasiat Obat Indonesia. Seri Rempah,
Rimpang,  dan  Umbi.  Cetakan  Pertama Penerbit PT. Dytama Milenia. Jakarta
Nugraha.  A.  W.  2008, Si  Plak  Dimana-mana “Streptococcus  mutans” ,  Yogyakarta, Fakultas Farmasi USD.
Pradewa Resalto. 2008. Formulasi sediaan obat kumur  berbahan  dasar  gambir .  IPB (Institut Pertanian Bogor). Roeslan. B.O. 1996. Karakteristik Streptococcus mutans  Penyebab  Karies  Gigi. Majalah Kedokteran Gigi. (3),29-50.
Sudirman.  T.  A.  2014. Uji  Efektivitas  Ekstrak Daun Salam (Eugenia polyantha)
terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus  secara  In  Vitro .  Makassar: Fakultas  Kedokteran  Gigi  Universitas Makassar.
Thomas. A. N. 1992. Tanaman Obat Tradisional. Kamisius. Yogyakarta.
Varma  N.  2016 .  Phytoconstituents  and  their mode of extractions : An overview. Res.
J. Chem. Environ. Sci. 4(2): 8-15.
.