## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK CACING DAN KAPSUL CACING
TANAH ( Lumbricusrubellus) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Salmonella Thyposa, Eschericia coli, dan Staphylococcus aureus DENGAN METODE DIFUSI AGAR
Linda Widyaningsih 1 , Rilijian Ayu Nugrahani 2
1,2) Akafarma Sunan Giri Ponorogo, Jl. Batoro Katong 32 Ponorogo e-mail: 1) linda.akafarma@gmail.com

## Abstrak
Latar  belakang: Salah  satu  jenis  cacing  tanah  yang  sering  digunakan  dalam  pengobatan  adalah Lumbricus  rubellus .Yang  mengandung  protein  cukup  tinggi  dan  menghasilkan  zat  pengendali  bakteri bernama  Lumbricin  I.  Lumbricin  I  mempunyai  aktifitas  antimikroba  berspektrum  luas,  yaitu  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram  positif  dan  gram  negatif. Tujuan: menguji  ada  atau  tidaknya kemampuan  zat  antibakteri  dari  ekstrak  cacing  dan  kapsul  cacing  tanah  ( Lumbricus  rubellus )  terhadap pertumbuhan bakteri Salmonella Thyposa, Escherichia coli , dan Staphylococcus aureus . Metode: dengan metode  difusi  agar  menggunakan  silinder  dari  berbagai  konsentrasi.  Adapun  hasil  penelitian  diameter zona  hambat  di  sekeliling  silinder  akan  diolah  menggunakan  statistik  ANOVA  satu  jalan  ( One  Way ANOVA )  dengan  penyelesaian  SPSS. Hasil: Dengan perlakuan  sampel  berbeda dengan  tanpa  perebusan dan  tanpa  disuspensikan  dengan  NaCl  0,97  %    ekstrak  cacing  dan  kapsul  cacing  tanah  (Lumbricus rubellus)  tidak  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Salmonella  thyposa,  Eschericia  coli dan Staphylococcus  aureus dengan  metode  difusi  agar. Simpulan  dan  saran: Dengan  perlakuan  sampel berbeda dengan tanpa perebusan dan tanpa disuspensikan dengan NaCl 0,97 % ekstrak cacing dan kapsul cacing  tanah  ( Lumbricus  rubellus )  tidak  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Salmonella  thyposa, Eschericia coli dan Staphylococcus aureus dengan metode difusi agar
Kata  Kunci  :  Ekstrak  cacing,  Kapsul  Cacing  tanah  (Lumbricus  rubellus),  Bakteri  Salmonella  Thyposa, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Difusi

## Abstract
Background: One type of earthworm that is often used in medicine is Lumbricus rubellus. Contains high enough protein and produce a bacterial controller called Lumbricin I. Lumbricin I has broad-spectrum antimicrobial  activity,  which  can  inhibit  the  growth  of  gram-positive  and  gram-negative  bacteria. Objectives:  to  test  whether  or  not  the  ability  of  antibacterial  substances  from  extracts  of  worms  and earthworm  capsules  (Lumbricus  rubellus)  against  Salmonella  Thyposa,  Escherichia  coli,  and Staphylococcus  aureus  bacteria.  Methods:using  diffusion  method  to  use  cylinders  Of  various concentrations. The results of the inhibit zone diameter residence around the cylinder will be processed using  one  way  ANOVA  statistic  (One  Way  ANOVA)  with  SPSS  completion.Results:  With  a  different sample  treatment  without  boiling  and  without  suspended  with  0.97%  NaCl  extract  of  worms  and earthworm  capsules  (Lumbricus  rubellus)  can  not  inhibit  the  growth  of  bacteria  Salmonella  thyposa, Eschericia  coli  and  Staphylococcus  aureus  with  the  diffusion  method.Conclusions  and  suggestions: Based  on  the  results  of  data  analysis  obtained  the  conclusion:  With  sample  treatment  different  from without  boiling  and  without  suspension  with  NaCl  0.97%  worm  extract  and  earthworm  capsule (Lumbricus rubellus) cannot inhibit the growth of Salmonella thyposa, Eschericia coli andStaphylococcus aureus bacteria by agar diffusion method.
Keywords : Extracts of worms, Capsules (Lumbricus rubellus), Salmonella Thyposa Bacteria, Escherichia coli,

## PENDAHULUAN
Di  beberapa  Kota  di  Indonesia  seperti  Ponorogo  dan  Madiun,  cacing  tanah  sudah  dimanfaatkan sebagai  bahan  obat  tradisional.  Salah  satu  jenis  cacing  tanah  yang  sering  digunakan  adalah  Lumbricus rubellus. Yang mengandung protein cukup tinggi yaitu 64-76% berat kering, selain itu juga mengandung 20  jenis  asam  amino.    Obat  tradisional  adalah  bahan  atau  ramuan  bahan  yang  berupa  bahan  tumbuhan, bahan  hewan,  bahan  mineral,  sediaan  sarian  (galenik),  atau  campuran  dari  bahan  tersebut  yang  secara turun  temurun  telah  digunakan  untuk  pengobatan,  dan  dapat  diterapkan  sesuai  dengan  norma  yang berlaku di masyarakat (Anonim, 2012).
Ciri-ciri  fisik  cacing  tanah Lumbricus  rubellus termasuk  hewan  tingkat  rendah  karena  tidak mempunyai tulang belakang. Di tubuhnya terdapat segmen luar dan dalam, berambut, tidak mempunyai kerangka  luar,  tubuhnya  dilindungi  oleh  kutikula  (kulit  bagian  luar),  tidak  memiliki  alat  gerak  seperti kebanyakan binatang, dan tidak memiliki mata. Untuk  dapat bergerak, cacing tanah harus menggunakan otot-otot tubuhnya yang panjang dan tebal yang melingkari tubuhnya. Kandungan gizi yang dimiliki oleh cacing  tanah Lumbricus  rubellus cukup  tinggi,  terutama  kandungan  proteinnya yang  mencapai  64-76%. Selain protein, kandungan gizi lainnya yang terdapat dalam tubuh cacing tanah antara lain lemak 7-10%, kalsium  1,55%,  fosfor  1%,  dan  serat  kasar  1,08%.  Selain  itu,  cacing  tanah  mengandung  auxin  yang merupakan zat perangsang tumbuh untuk tanaman.
Difusi agar Adalah cara yang mudah untuk menentukan kerentanan organisme terhadap antibiotik adalah dengan menginokulasikan pelat agar dengan biakan dan membiarkan antibiotik berdifusi ke media agar.  Cakram  atau  silinder  yang  telah  mengandung  antibiotik  diletakkan  dipermukaan  pelat  agar  yang mengandung organisme yang diuji. Efektivitas antibiotik ditunjukkan oleh zona hambat.

## METODE PENELITIAN
Pada  Penelitian  ini  digunakan  metode  Difusi  agar  dan purposive  sampling untuk  pengambilan sampelnya,  yaitu  cacing  tanah Lumbricus  rubellus besar,  gemuk,  berumur  12  minggu  yang  masih  segar dan  sehat.Peremajaan  bakteri  Salmonella  typhosa, Escherichia  coli, dan Staphylococcus  aureus .    Satu koloni  bakteri Salmonella  typhosa,  Escherichia  coli, dan Staphylococcus  aureus dari  biakan  murni diambil  dengan  menggunakan  jarum  ose  steril,  lalu  ditanam  pada  peptone  1  %  dengan  cara  diaduk. Kemudian diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37°C selama 24 jam (Lay, 1994).
Ekstrak  cacing  .    Ambil  cacing  tanah  ( Lumbricus  rubellus )  yang  masih  segar,  hilangkan  kotoran yang ada menempel di tubuh cacing kemudian dicuci dengan aquadest steril. Ambil 2 cacing, 3 cacing, 4 cacing,  dan  6  cacing  kemudian  ditimbang.    Cacing  tanah  ( Lumbricus  rubellus )  digerus  hingga  halus menggunakan mortir sampai halus  Larutkan masing-masing perlakuan dalam 20 ml aquadest steril.
Uji  Aktivitas  Antibakteri.  Gunakan  sarung  tangan  steril  sebelum  memulai  perlakuan.  Semua perlakuan  dilakukan  didalam  inkas.  Tuang  media  Nutrien  Agar  dalam  cawan  petri  steril,  biarkan memadat.  Tandai  satu  lempengan  agar  dengan  nama,  tanggal  dan  mikroorganisme  yang  akan  diuji. Celupkan  tangkai  kapas  ( cotton  swab )  dalam  biakan  mikroorganisme,  kemudian  putar  bagian  kapas  ke sisi  tabung  agar  cairan  tidak  menetes  dari  bagian  kapas  tersebut.  Sebar  mikroorganisme  pada  seluruh permukaan  lempengan  agar.  Untuk  mendapatkan  pertumbuhan  yang  merata,  gores  secara  mendatar, kemudian  putar  lempengan  90°  dan  buat  goresan  kedua,  putar  lempengan  45°  dan  buat  goresan  ketiga. Biarkan  lempengan  mengering  selama  5  menit.  Letakkan  silinder  di  atas  lempeng  agar.  Pipet  100  μl sampel  masukkan  silinder.  Tandai  macam-macam  silinder  sesuai  perlakuan  larutan  cacing  tanah.  Jarak antara  silinder  harus  cukup  luas,  sehingga  wilayah  jernih  tidak  berhimpitan.    Silinder  ditekan menggunakan pinset pada permukaan lempengan, sehingga terdapat kontak yang baik antara silinder dan lempengan agar. Inkubasi pada inkubator suhu 37°C selama 24 jam (Lay, 1994).
Kontrol positif menggunakan media NA, lalu inokulasi biakan murni, biarkan mengering selama 5 menit. Lalu letakkan silinder yang telah direndam pada 100 µl kloramfenikol. Lalu inkuabsi  suhu 37°C selama  24  jam.  Untuk  kontrol  negati,  Semua  perlakuan  dilakukan  di  dalam  inkas.  Media  NA  dituang kedalam  cawan  petri.  Letakkan  silinder  di  atas  media,  pipet  100  μl  aquadest  steril  masukkan  dalam silinder kemudian

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengamatan  pengujian  aktivitas  antibakteri  yang  dapat  diamati  dengan  adanya  zona  hambat pertumbuhan mikroorganisme dalam permukaan medium agar.
Tabel 1. Hasil Pengamatan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak cacing, Kapsul cacing tanah (Lumbricus rubellus), Kontrol positif kloramfenikol dan Kontrol negatif.
Ekstrak cacing dengan bakteri Staphylococcus aureus Berat cacing (g) Zona hambat (mm) pengulangan ke: 1 (SAC) 2 (SAC) 3 (SAC) 4 (SAC) ∑ X 2 Cacing 1,009 0 0 0 0 0 0 3 Cacing 1,560 0 0 0 0 0 0 4 Cacing 2,096 0 0 0 0 0 0 6 Cacing 3,066 0 0 0 0 0 0
SAC = Staphylococcus aureus ekstrak cacing
Ekstrak cacing dengan bakteri Berat cacing (g) Zona hambat (mm) pengulangan ke: 1 (STC) 2 (STC) 3 (STC)  4 (STC) ∑ X
Salmonella Thyposa
2 Cacing 1,009 0 0 0 0 0 0 3 Cacing 1,560 0 0 0 0 0 0 4 Cacing 2,096 0 0 0 0 0 0 6 Cacing 3,066 0 0 0 0 0 0 STC = Salmonella Thyposa ekstrak cacing Ekstrak cacing dengan bakteri Escherichia coli Berat cacing (g) Zona hambat (mm) pengulangan ke: 1 (ECC) 2 (ECC) 3 (ECC) 4 (ECC) ∑ X 2 Cacing 1,009 0 0 0 0 0 0 3 Cacing 1,560 0 0 0 0 0 0 4 Cacing 2,096 0 0 0 0 0 0 6 Cacing 3,066 0 0 0 0 0 0 ECC = Escherichia coli ekstrak cacing
1. Kapsul cacing tanah Lumbricus rubellus
Kapsul dengan bakteri Staphylococcus aureus Berat kapsul (g) Zona hambat (mm) pengulangan ke: 1 (SAK) 2 (SAK)  3 (SAK) 4 (SAK) ∑ X 1 Kapsul 0,501 0 0 0 0 0 0 2 Kapsul 1,005 0 0 0 0 0 0 3 Kapsul 1,501 0 0 0 0 0 0 4 Kapsul 2,001 0 0 0 0 0 0 SAK = Staphylococcus aureus kapsul Kapsul dengan bakteri Salmonella Thyposa Berat kapsul (g) Zona hambat (mm) pengulangan ke: 1 (STK) 2 (STK) 3 (STK)  4 (STK) ∑ X 1 Kapsul 0,501 0 0 0 0 0 0 2 Kapsul 1,005 0 0 0 0 0 0 3 Kapsul 1,501 0 0 0 0 0 0 4 Kapsul 2,001 0 0 0 0 0 0
STK = Salmonella Thyposa Kapsul
Kapsul dengan bakteri Escherichia Coli Berat Kapsul (g) Zona hambat (mm) pengulangan ke: 1 (ECK) 2 (ECK) 3 (ECK) 4 (ECK) ∑ X 1 Kapsul 0,501 0 0 0 0 0 0 2 Kapsul 1,005 0 0 0 0 0 0 3 Kapsul 1,501 0 0 0 0 0 0 4 Kapsul 2,001 0 0 0 0 0 0 ECK = Escherichia Coli Kapsul

## 2. Kontol Negatif dan Positif
Kontrol + Kloramfenikol Zona hambat (mm) pengulangan ke: 1 2 3 4 ∑
X
K + Staphylococcus aureus
30 37 30 30 127 31,75
K + Salmonella Thyposa 40 35 42 35 152 38,00
K+
Escherichia coli 50 52 53
40 195 48,75 Kontrol -

## Tidak ada zona hambat bakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  digunakan  untuk  mengetahui  ada  tidaknya  kemampuan  menghambat  dari suatu zat antimikroba terhadap bakteri uji. Dalam penelitian ini digunakan sampel berupa ekstrak cacing dalam perlakuan berbeda dan kapsul cacing tanah Lumbricus rubellus yang diambil dari salah satu merk dagang.Dari  hasil  penelitian  aktivitas  antibakteri  ekstrak  cacing  dan  kapsul    cacing  tanah  ( Lumbricus rubellus )  tidak dapat menghambat pertumbuhan bakteri. Hal ini dapat dilihat pada tabel 1 ekstrak cacing dan  kapsul  cacing  tanah (Lumbricus  rubellus )  tidak  menunjukkan  zona  hambat  yang  dihasilkan.    Ini menunjukkan  bahwa  cacing  tanah  tidak  bisa  berpotensi  sebagai  antibakteri  atau  antibiotik  dengan perlakuan berbeda.
Ukuran  zona  hambat  dapat  dipengaruhi  oleh  kepadatan  atau  viskositas  media  biakan,  kecepatan difusi  antibiotik,  konsentrasi  antibiotik  pada  cakram  filter,  dan  interaksi  antibiotik  dengan  media  (Radji dan Harmita, 2006).

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil analisis data diperoleh simpulan:
Dengan perlakuan sampel berbeda dengan tanpa perebusan dan tanpa disuspensikan dengan NaCl 0,97 % ekstrak cacing dan kapsul cacing tanah ( Lumbricus rubellus ) tidak dapat menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella thyposa, Eschericia coli dan Staphylococcus aureus dengan metode difusi agar

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim,  2012. Industri  Dan  Usaha  Obat  Tradisional. Peraturan  Menteri  Kesehatan  Republik Indonesia(online). binfar.depkes.go.id. diakses 1 April 2017.
Deni,  Fara.  2015.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Air  Cacing  Tanah  (Lumbricus  rubellus)  Terhadap Pertumbuhan Bakteri Salmonella thypi Secara In Vitro. Yogyakarta: Universitas Sanata Dharma Indrawati,  Ida,  et  al.  2013. Uji  Sensitivitas  Bakteri  Staphylococcus  Aureus,  Steptococcus  Pyogenes  Dan Pseudomonas  Aeruginosa  Terhadap  Air  Rebusan  Cacing  Tanah  Lumbricus  Rubellus  Dan Pheretima Asiatica Dan Antibiotik Secara In Vitro. Bandung: Universitas Padjajaran
Sofyan,  A.,  et  al.2010. Performa  dan  Histopatologi  Ayam  Broiler  yang  Diinfeksi  dengan  Salmonella pullorum  Setelah  Pemberian  Imbuhan  Pakan  Mengandung  Tepung  Cacing  Tanah  (Lumbricus rubellus). Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada.
Sujarweni, V. Wiratna. 2015. Statistik Untuk Kesehatan . Yogyakarta: Penerbit Gava Media Yana, Desy. 2014. Uji Daya Hambat Ekstrak  Cacing Tanah Lumbricus Rubellus Dalam Sediaan Kapsul Terhadap  Pertumbuhan  Salmonella  Thyposa  Dengan  Metode  Difusi  Agar. Ponorogo: AKAFARMA
Yd  Budiarti,  Ratna,  et  al.  2015. Kemampuan  Beberapa  Isolat  Bakteri  Endosimbion  Cacing  Tanah Lumbricus  Rubellus  Dalam  Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri  Salmonella  Thypi  Dan Staphylococcus Aureus. Makasar: Universitas Hasanuddin