## Pengaruh Kombinasi Inokulum dan Waktu Fermentasi terhadap Kandungan Nutrien Campuran Bungkil Inti Sawit dan Onggok
Effect of inoculum combination and fermentation time on nutrient content of palm kernel meal and cassava waste mixture
Didik Nur Edi 1) dan Osfar Sjofjan 2)
1) Seksi Pembibitan Ternak dan Hijauan Makanan Ternak, UPT Pembibitan Ternak dan Kesehatan Hewan di Madura, Dinas Peternakan Provinsi Jawa Timur
didiknuredi@yahoo.co.id
2) Bagian Nutrisi dan Makanan Ternak, Fakultas Peternakan, Universitas Brawijaya, Malang osfar@ub.ac.id Diterima : 14 Januari 2021 Disetujui : 01 April 2021 Diterbitkan : 31 Agustus 2021
Abstrak: Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengevaluasi  pengaruh  kombinasi  inokulum  dan  waktu  fermentasi terhadap kandungan nutrien campuran bungkil inti sawit dan onggok. Metode yang digunakan adalah penelitian dengan rancangan acak lengkap pola tersarang. Kombinasi inokulum terdiri dari Bacillus sp., Trichoderma sp., dan Cellulomonas  sp.  dengan  empat  rasio  berbeda  yaitu  1:1:1  (I1),  2:1:1  (I2),  1:2:1  (I3),  dan  1:1:2  (I4).  Waktu  fermentasi terdiri dari empat perlakuan yaitu 0 (W0), 36 (W1), 72 (W2), 108 (W3), dan 144 jam (W4). Variabel yang diamati adalah  kandungan  bahan  organik  (BO),  protein  kasar  (PK),  protein  terlarut  (PT),  gula  reduksi  (GR),  neutral detergent  fiber  (NDF),  dan  acid  detergent  fiber  (ADF).  Data  dianalisis  menggunakan  analisis  variansi  dan dilanjutkan  dengan  Uji  Jarak  Berganda  Duncan.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kombinasi  inokulum memberikan  pengaruh  tidak  nyata  (P>0,05)  terhadap  BO,  PK,  PT,  GR,  NDF,  dan  ADF.  Lama  fermentasi memberikan  pengaruh  yang  sangat  nyata  (P<0,01)  terhadap  BO,  PK,  PT,  GR,  NDF  dan  ADF.  Kesimpulan  dalam penelitian ini adalah kombinasi inokulum tidak berpengaruh terhadap kandungan nutrien campuran bungkil inti sawit  dan  onggok.  Lama  fermentasi  yang  menghasilkan  kandungan  nutrien  campuran  bungkil  inti  sawit  dan onggok paling optimal adalah 144 jam.
Kata Kunci: bungkil inti sawit, fermentasi, inokulum, kandungan nutrien, onggok
Abstract: This  study  aimed  to  evaluate  the  effect  of  inoculum  combination  and  fermentation  time  on  nutrient content of palm kernel meal and cassava waste mixture. Method used was experiment using nested of completely randomized design. Inoculum combination  consisted of Bacillus sp., Trichoderma sp., and Cellulomonas sp. with four different ratios namely 1:1:1 (I1), 2:1:1 (I2), 1:2:1 (I3), and 1:1:2 (I4). Fermentation time consisted of five treatments namely 0 (W0), 36 (W1), 72 (W2), 108 (W3), and 144 hours (W4). Variables observed were organic  matter (OM), crude  protein  (CP),  soluble  protein  (SP),  reducing  sugar  (RS),  neutral  detergent  fiber  (NDF),  and  acid  detergent fiber (ADF). Data were analyzed using analysis of variance followed by Duncan’s Multiple Range Test. The results showed  that  inoculum  combination  did  not  significantly  affect  (P>0.05)  OM,  CP,  SP,  RS,  NDF,  and  ADF. Fermentation time had a highly significant effect (P<0.01) on OM, CP, SP, RS, NDF, and ADF. It could be concluded that  inoculum  combination  had  no  effect  on  nutrient  content  of  palm  kernel  meal  and  cassava  waste  mixture. Fermentation time that provides optimum nutrient content of palm kernel meal and cassava waste mixture is 144 hours.
Keywords: palm kernel meal, fermentation, inoculum, nutrient content, cassava waste

## 1. Pendahuluan
Upaya  eksplorasi  bahan  pakan  alternatif  kini banyak  dilakukan  sebagai  akibat  dari  semakin meningkatnya  harga  dan  fluktuatifnya  ketersediaan bahan  pakan  konvensional.  Beberapa  bahan  pakan alternatif  yang  tersedia  melimpah  diantaranya  hasil samping industri pertanian seperti bungkil inti sawit
dan  onggok.  Bungkil  inti  sawit  mempunyai  potensi besar  untuk  dapat  digunakan  sebagai  bahan  pakan alternatif.  Proporsi  bungkil  inti  sawit  mencapai  45% dari  total  inti  sawit  sehingga  diperkirakan  produksi bungkil  inti  sawit  di  Indonesia  pada  tahun  2020 mencapai 4,42 juta ton [1]. Bungkil inti sawit memiliki kandungan  energi  metabolis  sebesar  1.133-2.260
kkal/kg  dengan  kandungan  protein  kasar  mencapai 13,60-17,60%  [2,3,4].  Bungkil  inti  sawit  juga mengandung  asam  amino  esensial  dan  memiliki kandungan  mineral  yang  relatif  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  jagung  [5].  Akan  tetapi, pemanfaatan bungkil inti sawit mempunyai beberapa kendala  diantaranya  adalah  mengandung non-starch polysaccharides ,  serat  kasar  tidak  tercerna  yang tinggi,  dan  memiliki  tekstur  kasar  yang  dapat memberikan  pengaruh  negatif  bila  digunakan  untuk bahan pakan unggas [6].
Onggok juga merupakan salah satu bahan pakan alternatif yang potensial. Onggok merupakan produk samping  dari  pengolahan  tepung  tapioka.  Setiap pengolahan  tepung  tapioka  dapat  dihasilkan  16% onggok  dengan  kandungan  energi  metabolis  2.783 kkal/kg,  protein  kasar 2,90%, pati 40,80-45,50%, dan serat  kasar  14,08-23,93%  [7,8].  Pemanfaatan  onggok untuk  pakan  terkendala  dengan  kandungan  serat kasar  yang  tinggi  sehingga  diperlukan  perlakuan sebelum diberikan untuk unggas [9].
Fermentasi  merupakan  salah  satu  bioteknologi untuk  meningkatkan  kualitas  nutrien  dari  produk samping  pertanian  dan  perkebunan  [10].  Beberapa faktor  yang  dapat  mempengaruhi  fermentasi  adalah substrat/media,  mikroba,  kondisi  fisik  pertumbuhan (suhu,  kelembapan,  oksigen),  dan  lama  waktu fermentasi  [11].  Berdasarkan  kandungan  nutrien bungkil  inti  sawit  dan  onggok  serta  untuk menurunkan  kendalanya,  maka  diperlukan  mikroba yang dapat menghasilkan enzim amilolitik, proteolitik  dan  selulolitik.  Mikroba Bacillus sp., Trichoderma sp.,  dan Cellulomonas sp.  masing- masing  dapat  menghasilkan  enzim  ekstraseluler berupa  amilase,  protease,  dan  selulase  [12,13,14]. Kombinasi  ketiga  mikroba  tersebut  memiliki  potensi untuk dapat digunakan sebagai inokulum fermentasi campuran bungkil inti sawit dan onggok.
Berdasarkan  uraian  tersebut,  penelitian  dilakukan untuk  mengevaluasi  pengaruh  kombinasi  inokulum dan  waktu  fermentasi  terhadap  kandungan  nutrien campuran bungkil inti sawit dan onggok.

## 2. Materi dan Metode

## 2.1. Materi penelitian
Materi  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  bungkil  inti  sawit  yang  diperoleh  dari  pabrik pengolahan  minyak  sawit  milik  PT.  Perkebunan Nusantara  VII  Provinsi  Lampung,  sedangkan  onggok diperoleh  dari  daerah  Malang.  Inokulum  yang digunakan  terdiri  dari  tiga  kultur  mikroba  yaitu Bacillus sp. (2,56 x 10 9 CFU/mL), Trichoderma sp. (1,25 x  10 7 CFU/mL),  dan Cellulomonas sp.  (2,80  x  10 6 CFU/mL).  Alat  yang  digunakan  adalah  timbangan analitik, grinder , seperangkat alat fermentasi, analisis proksimat, van  soest ,  gula  reduksi,  dan  protein terlarut.

## 2.2. Rancangan percobaan
Metode  yang  digunakan  adalah  percobaan tersarang  dalam  rancangan  acak  lengkap.  Perlakuan yang  digunakan  yaitu  lima  waktu  fermentasi  (W0:  0 jam,  W1:  36  jam,  W2:  72  jam,  W3:  108  jam,  dan  W4: 144  jam)  tersarang  pada  4  kombinasi  inokulum Bacillus sp., Trichoderma sp.,  dan Cellulomonas sp. (I1:  1:1:1,  I2:  2:1:1,  I3:  1:2:1,  dan  I4:  1:1:2).  Setiap perlakuan menggunakan 3 kali ulangan.

## 2.3. Prosedur fermentasi
Kultur  mikroba  terlebih  dahulu  diaktifkan dengan cara air sebanyak 25 liter didihkan, kemudian didinginkan  sampai  suhu  30 o C  selanjutnya  dibagi dalam  tiga  silo  yang  masing-masing  ditambah  100  g spora Bacillus sp., Trichoderma sp., Cellulomonas sp., dan 100 g molases. Selanjutnya diaerasi serta diperam selama 24 jam agar spora aktif (dikembangkan secara individual).  Selanjutnya  spora  aktif  ditambah  mikro nutrien  (mengandung  glukosa,  mikromineral,  dan vitamin) sebanyak 17,50 g/L air kemudian dihomogenkan.
Prosedur  fermentasi  yang  dilakukan  adalah bungkil  inti  sawit  sebanyak  55%  (165  g)  dicampur dengan  onggok  45%  (135  g)  kemudian  digunakan sebagai substrat.  Selanjutnya substrat dikukus dalam keadaaan  basah  dengan  rasio  air  dan  substrat  1:1. Selanjutnya  substrat  didinginkan  dan  difermentasi dengan  ditambah  kombinasi  inokulum  sesuai perlakuan  sebanyak  0,6%  (1,8  ml)  dan  difermentasi sesuai waktu perlakuan. Fermentasi substrat ditempatkan  pada  wadah  plastik  berpori  dengan ketebalan  2-3  cm.  Proses  fermentasi  berjalan  baik dengan  ditandai  perubahan  warna,  aroma  wangi (seperti  alkohol),  dan  tekstur  menjadi  lebih  kompak pada  permukaan.  Substrat  yang  telah  difermentasi kemudian  dipanen,  dikeringkan,  dan  digiling  untuk dilakukan analisis kandungan nutrien.

## 2.4. Analisis kandungan nutrien
Peubah yang diamati meliputi kandungan bahan organik  (BO)  [15],  protein  kasar  (PK)  [15],  protein terlarut  (PT)  [16],  gula  reduksi  (GR)  [17],  neutral detergent  fiber  (NDF)  [18],  dan  acid  detergent  fiber (ADF) [18].

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1. Kombinasi inokulum
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kombinasi inokulum  tidak  memberikan  pengaruh  yang  nyata (P>0,05)  terhadap  BO,  PK,  PT,  GR,  NDF,  dan  ADF ( Tabel 1 ). Hal ini mengindikasikan bahwa kombinasi inokulum  memberikan  perbedaan  yang  sangat  kecil dalam kemampuan mendegradasi substrat campuran bungkil  inti  sawit  dan  onggok  sehingga  secara
statistik  perbedaan  ini  tidak  terlihat.  Hal  ini  dapat terjadi  karena  perbandingan  kombinasi  antara Bacillus sp., Trichoderma sp.,  dan Cellulomonas sp., kurang  besar.  Hasil  ini  sejalan  dengan  penelitian sebelumnya  yang  melaporkan  bahwa  tidak  ada pengaruh penyusutan berat bahan kering bungkil inti sawit  yang  difermentasi  dengan Trichoderma  resei hingga  3  kali  dosis  yaitu  2,13  x  10 4 hingga  2,13  x  10 6 CFU/ml  [19].  Peningkatan  dosis  inokulan T.  resei
hingga  2  kali  lipat  dari  0,2  menjadi  0,4%  juga  secara statistik  belum  mampu  menunjukkan  perbedaan yang  signifikan  pada  fermentasi  limbah  solid  kelapa sawit  dengan  indikator  kandungan  PK  dan  SK  [20]. Pada  penelitian  lain,  pemberian  inokulum  ragi  tape hingga  3  kali  dosis  yaitu  1,5  hingga  4,5  g/kg  pada substrat  kulit  umbi  kayu  juga  mempunyai  pola  dan jumlah pertumbuhan mikroba yang sama [21].
Tabel 1 . Pengaruh kombinasi inokulum terhadap kandungan nutrien campuran bungkil inti sawit dan onggok
No Inokulum BO PK PT GR NDF ADF ------------------------------------------------------%-------------------------------------------------- 1 I1 95,40±0,45 9,92±1,68 7,12±2,02 6,64±4,18 55,90±2,98 29,72±4,99 2 I2 95,35±0,58 10,34±1,87 8,41±1,46 7,66±4,48 55,33±2,88 30,48±3,49 3 I3 95,63±0,55 9,57±1,52 7,92±1,73 8,86±4,60 54,71±3,74 29,65±4,28 4 I4 95,25±0,66 10,53±2,31 7,57±1,98 7,75±4,45 53,26±1,38 28,23±4,54 Keterangan: Kombinasi inokulum Bacillus sp., Trichoderma sp., dan Cellulomonas sp. dengan rasio I1: 1:1:1, I2: 2:1:1, I3: 1:2:1, dan I4: 1:1:2. BO: bahan organik, PK: protein kasar, PT: protein terlarut, GR: gula reduksi, NDF: neutral detergent fiber , dan ADF: acid detergent fiber .
Tidak  adanya  pengaruh  yang  nyata  dari kombinasi inokulum juga dapat terjadi karena adanya efek antagonis dari campuran enzim yang dihasilkan. Enzim  selulolitik  dan  amilolitik  sebenarnya  dapat bekerja secara sinergi karena mendegradasi karbohidrat  dan  turunannya.  Akan  tetapi  kedua enzim tersebut akan turun aktifitasnya bila dicampur secara langsung dengan enzim proteolitik.
Sebagaimana dilaporkan pada penelitian sebelumnya, aktifitas  enzi m  β -glukosidase  pada  kultur  murni Aspergillus  niger dan T. resei yang diinkubasi selama 7  hari  masing-masing  adalah  0,75  dan  0,39  IU/ml, akan  tetapi  aktivitas  enzim  tersebut  menjadi  turun disaat  keduanya  dicampur  dengan  perbandingan A. niger dan T.  resei sebesar  1:1  (0,52  IU/ml),  2:1  (0,38 IU/ml), dan 1:2 (0,29 IU/ml) [22].
Perbedaan  kecil  pengaruh  ini  terlihat  secara numerik  yang  mana  perbedaan  rasio  kombinasi antara Bacillus sp., Trichoderma sp., dan Cellulomonas sp.  akan  berdampak  pada  perbedaan komposisi  enzim  dominan  yang  dihasilkan.  Bakteri dari  genus Bacillus paling  banyak  menghasilkan enzim  hidrolase  seperti  amilase  dan  glukosa dehydrogenase  [12].  Hal  ini  mengakibatkan  I2 (inokulum Bacillus sp.  paling  dominan)  cenderung amilolitik  sehingga  menghasilkan  kandungan  GR yang cenderung lebih tinggi. Disisi lain, Trichoderma sp. merupakan jenis mikroba yang banyak menghasilkan enzim protease [23] sehingga menyebabkan  I3  cenderung  lebih  proteolitik  yang diindikasikan  dengan  kandungan  PT  tertinggi. Sedangkan  I4  yang  memiliki  komposisi  mikroba Cellulomonas sp.  paling  dominan  lebih  cenderung selulolitik  [24]  sehingga  mengakibatkan  kandungan NDF  dan  ADF  campuran  bungkil  inti  sawit  dan onggok cenderung lebih rendah.

## 3.2. Waktu fermentasi
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  waktu fermentasi  tersarang  pada  inokulum  memberikan pengaruh  yang  sangat  nyata  (P<0,01)  terhadap kandungan BO, PK, PT, GR, NDF, dan pengaruh yang nyata  (P<0,05)  terhadap  kandungan  ADF  campuran bungkil  inti  sawit  dan  onggok.  W4  secara  nyata (P<0,01)  menurunkan  kandungan  BO  pada  keempat kombinasi  inokulum  jika  dibandingkan  dengan  W0. Sebagaimana  dapat  dilihat  pada Gambar  1A ,  terjadi penurunan  persentase  BO  sekitar  1-2%  setelah difermentasi selama 144 jam, hal ini mengindikasikan bahwa  selama  proses  fermentasi  terjadi  perombakan BO.  Semakin  lama  waktu  fermentasi  memberikan kesempatan  mikroba  untuk  tumbuh,  berkembang, dan  menghasilkan  enzim  sehingga  dapat  lebih banyak  mendegradasi kandungan BO  dalam substrat [25].  Pada Gambar  1A juga  terlihat  bahwa  I4 cenderung lebih banyak menurunkan kandungan BO. Hal  ini  terjadi  karena  campuran  bungkil  inti  sawit dan  onggok  merupakan  substrat  fermentasi  yang kaya  akan  serat  kasar  [26],  sedangkan  I4  memiliki komposisi Cellulomonas sp.  yang  lebih  dominan sehingga  lebih  selulolitik  dan  dapat  mendegradasi substrat lebih optimal.
Tabel  2 menunjukkan  bahwa  kandungan  PK campuran bungkil inti sawit dan onggok  pada semua kombinasi  inokulum  meningkat  (P<0,01)  seiring dengan  waktu  fermentasi.  Peningkatan  PK  terjadi hingga waktu fermentasi 144 jam ( Gambar 1B ). Pada penelitian  lain  juga  dilaporkan  bahwa  lama  waktu fermentasi  bungkil  inti  sawit  dengan  inokulum A. niger galur  mutan  E27  sejalan  dengan  peningkatan kandungan  PK  [27].  Peningkatan  PK  dapat  terjadi karena adanya penurunan kandungan nutrien lainnya terutama  karbohidrat  yang  digunakan  untuk  sumber nutrien  bagi  mikroba  [28].  Adanya  pertumbuhan
inokulum  juga  dapat  berperan  dalam  meningkatkan PK  karena  biomassa  inokulum  tergolong  sebagai protein  sel  tunggal  [29].  Selain  itu,  enzim  yang diseksresikan  inokulum  juga  akan  berkontribusi terhadap  kandungan  PK  substrat  karena  enzim  juga tersusun atas protein [30].
Hasil  penelitian  secara  jelas  menunjukkan bahwa  W4  memberikan  hasil  kandungan  PT campuran  bungkil  inti  sawit  dan  onggok  yang  lebih tinggi  (P<0,01)  dibandingkan  perlakuan  waktu fermentasi lainnya ( Tabel 2 ). Gambar 1C memperlihatkan  pola  perubahan  PT  yang sama pada semua  jenis  inokulum  yaitu  meningkat  seiring dengan  lama  waktu  fermentasi.  Hal  tersebut  dapat terjadi  karena  lama waktu  fermentasi  akan memberikan  peluang  inokulum  untuk  mendagradasi substrat lebih lama. Peningkatan tertinggi dari empat
inokulum  terjadi  pada  I3,  hal  tersebut  dapat  terjadi karena  perbandingan Trichoderma sp.  pada  I3  lebih besar  dibandingkan  dengan  inokulum  lainnya sehingga lebih proteolitik. Tabel 2 juga memperlihatkan  bahwa  rataan  peningkatan  PT  lebih tinggi  dari  pada  PK  yaitu  masing-masing  60  dan 300%.  Hal  tersebut  dapat  dijelaskan  karena  PK merupakan  indikator  dari  kandungan  N  dalam substrat  sedangkan  PT  merupakan  indikator  dari degradasi protein menjadi monomernya. Peningkatan PT selama proses fermentasi dikarenakan peningkatan  biomassa  mikroba  seiring  dengan sekresi  beberapa  enzim  ekstraseluler  dan  protein  sel tunggal  sehingga  PT  meningkat  [31].  Pada  penelitian sebelumnya  juga  dilaporkan  bahwa  selama  proses fermentasi  peningkatan  kandungan  PK  lebih  rendah dari pada PT [32].
Tabel 2 . Pengaruh  waktu  fermentasi  tersarang  pada  kombinasi  inokulum  terhadap  kandungan  nutrien campuran bungkil inti sawit dan onggok
Inokulum Waktu fermentasi BO PK PT GR NDF ADF ------------------------------------------------------%-------------------------------------------------- I1 W0 96,17±0,04 A 8,14±0,07 A 2,13±0,27 A 3,99±0,27 A 52,62±0,43 A 24,35±0,56 a W1 95,44±0,12 AB 9,01±1,13 A 3,43±0,25 B 6,29±0,12 B 53,53±6,65 A 25,24±2,78 a W2 95,18±0,73 B 9,05±0,29 A 5,65±0,50 C 7,96±0,15 C 55,68±0,82 AB 29,55±0,96 b W3 95,14±0,04 B 11,37±0,51 B 10,39±0,29 D 8,49±0,18 D 57,94±0,43 AB 34,66±1,35 c W4 95,06±0,23 B 12,01±0,79 B 11,57±0,35 E 8,90±0,15 E 59,75±6,65 B 34,82±1,78 c I2 W0 96,11±0,10 A 8,13±0,19 A 2,21±0,45 A 6,07±0,08 A 51,51±0,44 A 25,85±0,08 a W1 95,52±0,10 AB 8,92±0,46 A 4,18±0,16 B 8,03±0,07 B 53,42±1,00 AB 25,85±1,36 ab W2 95,47±0,07 AB 10,27±0,06 B 7,94±0,16 C 8,74±0,19 C 55,62±2,45 AB 30,18±0,60 b W3 95,08±0,38 B 11,81±0,31 C 11,40±0,27 D 9,57±0,15 D 58,02±6,66 B 33,76±0,12 c W4 94,55±1,52 B 12,55±0,31 C 12,60±0,67 E 9,61±0,03 D 58,11±0,91 B 34,05±0,59 c I3 W0 96,22±0,07 A 8,26±0,09 A 3,67±0,34 A 5,13±0,17 A 50,57±4,06 A 24,81±2,21 a W1 96,10±0,09 A 8,33±0,38 A 4,54±0,14 B 7,48±0,17 B 53,06±0,80 A 26,21±1,15 a W2 95,53±0,12 AB 8,96±0,30 A 9,76±0,30 C 8,38±0,05 C 54,31±0,25 A 29,27±0,24 b W3 95,42±0,10 AB 10,56±0,58 B 12,41±0,46 D 9,29±0,11 D 54,91±0,69 A 33,51±0,35 c W4 94,87±0,22 B 11,74±0,21 C 13,93±0,20 E 9,29±0,18 D 60,70±5,81 B 34,44±1,64 c I4 W0 96,04±0,04 A 8,34±0,59 A 2,70±0,60 A 4,39±0,29 A 52,16±0,50 A 21,65±1,00 a W1 95,75±0,09 A 8,63±0,52 A 3,74±0,37 B 7,01±0,31 B 52,54±4,05 A 25,33±2,55 b W2 95,14±0,12 AB 9,78±0,73 B 8,50±0,43 C 8,19±0,08 C 52,59±5,30 A 30,82±0,99 c W3 94,95±0,21 AB 12,38±0,36 C 10,83±0,57 D 8,88±0,15 D 53,45±2,17 A 31,45±1,42 c W4 94,37±0,30 B 13,51±0,73 C 13,00±0,48 E 9,36±0,16 E 55,58±0,41 A 31,91±1,23 c
Keterangan: Kombinasi inokulum Bacillus sp., Trichoderma sp., dan Cellulomonas sp. dengan rasio I 1 : 1:1:1, I 2 : 2:1:1, I 3 : 1:2:1, dan I 4 : 1:1:2. Waktu fermentasi W 0 : 0 jam, W 1 : 36 jam, W2: 72 jam, W3: 108 jam, dan W4: 144 jam. BO: bahan organik, PK: protein kasar, PT: protein terlarut, GR: gula reduksi, NDF: neutral detergent fiber , dan ADF: acid detergent fiber . a-c nilai rataan pada baris yang sama dengan superskrip yang berbeda menunjukkan  perbedaan  yang  nyata  (P<0,05). A-E nilai  rataan  pada  baris  yang  sama  dengan  superskrip  yang  berbeda  menunjukkan perbedaan yang sangat nyata (P<0,01).
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan  GR  meningkat  (P<0,01)  seiring  dengan waktu  fermentasi  ( Tabel  2 ).  Pola  ini  terlihat  pada semua kombinasi inokulum. Pada Gambar  1D dapat dilihat  bahwa  pola  perubahan  GR  seiring  dengan waktu  fermentasi  yaitu  naik  sekitar  90%  dari konsentrasi  awal.  Peningkatan  ini  dapat  terjadi
karena  mikroba  yang  terdapat  dalam  inokulum berkembang  seiring  dengan  waktu  fermentasi.  GR merupakan hasil metabolit karbohidrat yang digunakan untuk aktifitas pertumbuhan dan merupakan  metabolit  sekunder  [33].  Semakin  lama waktu  fermentasi  memberikan  kesempatan  mikroba lebih lama untuk mendegradasi karbohidrat  menjadi
gula  yang  diindikasikan  dengan  meningkatnya  GR. Kenaikan  tertinggi  GR  terjadi  pada  I2.  Hal  tersebut dapat  terjadi  karena  pada  I2  lebih  amilolitik dibandingkan  dengan  inokulum  lainnya  karena perbandingan Bacillus sp.  yang  menghasilkan  enzim amilase lebih besar. Pada penelitian lain, peningkatan persentase  GR  juga  terjadi  pada  onggok  seiring dengan  peningkatan  konsentrasi  enzim  α -amilase,
selulase,  dan  glukomilase  [34].  Peningkatan  GR  juga ditunjang oleh aktifitas Bacillus sp. dan Cellulomonas sp.  yang  dapat  bekerja  secara  sinergi  untuk mendegradasi  karbohidrat  dan  turunannya.  GR adalah  golongan  karbohidrat  yang  dapat  mereduksi senyawa-senyawa  penerima  elektron  seperti  glukosa dan fruktosa [35].
Gambar 1 . Pola perubahan kandungan (A) BO, (B) PK, (C) PT, (D) GR, (E) NDF, dan (F) ADF campuran bungkil inti sawit dan onggok yang dipengaruhi oleh waktu fermentasi tersarang pada kombinasi inokulum. Kombinasi inokulum Bacillus sp., Trichoderma sp., dan Cellulomonas sp. dengan rasio I 1 : 1:1:1, I 2 : 2:1:1, I 3 : 1:2:1, dan I 4 : 1:1:2. Waktu fermentasi W 0 : 0 jam, W 1 : 36 jam, W2: 72 jam, W3: 108 jam, dan W4: 144 jam. BO: bahan organik, PK: protein kasar, PT: protein terlarut, GR: gula reduksi, NDF: neutral detergent fiber , dan ADF: acid detergent fiber .
Tabel  2 menunjukkan  bahwa  waktu  fermentasi W4  dapat  meningkatkan  (P<0,01)  kandungan  NDF campuran  bungkil  inti  sawit  dan  onggok  jika dibandingkan  W0.  Akan  tetapi,  peningkatan  ini
hanya terjadi pada kombinasi inokulum  I1, I2 dan I3. Sedangkan pada I4  waktu  fermentasi  tidak memberikan  perbedaan  yang  nyata.  Hasil  ini menerangkan  bahwa  W0  mempunyai  persentase
NDF  terendah  dan  meningkat  seiring  dengan  waktu fermentasi. Sebagaimana dapat dilihat pada Gambar 1E ,  peningkatan  kandungan  NDF  pada  I4  cenderung lebih rendah dibandingkan dengan inokulum lainnya. Lebih  rendahnya  kandungan  NDF  ini  dapat disebabkan karena pada
I4
perbandingan
Cellulomonas sp.  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan inoculum lainnya sehingga lebih selulolitik.
Meningkatnya  persentase  NDF  dapat  dipahami karena seiring dengan lama waktu fermentasi kapang Trichoderma sp.  akan  berkembang.  Kapang  dapat menyumbangkan  serat  kasar  melalui  dinding  selnya [36].  Peningkatan  NDF  juga  disebabkan  oleh penurunan persentase BO, yang berkebalikan dengan peningkatan  persentase  abu.  Adanya  peningkatan persentase  kandungan  abu  maka  akan  menyebabkan persentase  NDF  meningkat  karena  abu  merupakan salah  satu  komponen  dari  NDF  [37].  Pada  penelitian ini,  kandungan  NDF  bungkil  inti  sawit  dan  onggok terfermentasi  cukup  tinggi  (>50%).  Akan  tetapi, meskipun kandungan NDFnya  tinggi, kandungan  PK campuran bungkil inti sawit dan onggok terfermentasi  sebanding  dengan  jagung  sehingga diharapkan  dapat  menggantikan  sebagian  proporsi jagung  pada  pakan  unggas.  Lebih  lanjut,  NDF  juga merupakan  salah  satu  fraksi  dari  serat  kasar  yang diperlukan  untuk  unggas  pada  taraf  tertentu  untuk efek  prebiotik  dan  toksisitas  [38].  Oleh  karena  itu, penelitian lebih lanjut diperlukan untuk melihat level optimal penggunaan campuran bungkil inti sawit dan onggok pada unggas.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan  ADF  meningkat  seiring  dengan  waktu fermentasi yang semakin lama (Tabel 2). Sebagaimana  juga  dapat  dilihat  pada Gambar  1F , pola  peningkatan  ADF  terlihat  pada  semua  jenis kombinasi  inokulum.  Peningkatan  persentase  ADF sejalan dengan lamanya waktu fermentasi dimungkinkan  terjadi  karena  inokulum  tidak  dapat menghasilkan  enzim  lignase.  Sehingga  kandungan lignin  dan  abu  tetap  terhadap  kontrol,  tetapi  secara persentase meningkat berkebalikan dengan BO. Pada penelitian sebelumnya, terjadi peningkatan persentase  kandungan  abu,  kalsium  dan  fosfor  pada campuran  bungkil  inti  sawit  dan  onggok  setelah difermentasi  dengan A.  niger [30].  ADF  terdiri  atas lignin,  abu  dan  selulosa  [39]  sehingga  meningkatnya persentase  abu  dan  lignin  akan  berkorelasi  dengan peningkatan  persentase  ADF.  Pada  penelitian  lain juga  dilaporkan  bahwa  lamanya  waktu  fermentasi mengakibatkan  peningkatan  kandungan  NDF  dan ADF  pada  fermentasi  BIS  dengan Trichoderma sp. [19].

## 4. Kesimpulan
Kesimpulan dari penelitian ini adalah perbandingan  kombinasi  inokulum Bacillus sp., Trichoderma sp.,  dan Cellulomonas sp.  tidak
memberikan  pengaruh  yang  berarti  terhadap kandungan  nutrien  campuran  bungkil  inti  sawit  dan onggok. Waktu fermentasi optimal untuk menghasilkan  kandungan  nutrien  campuran  bungkil inti sawit dan onggok terbaik adalah 144 jam.

## Referensi
[1] Direktorat  Jenderal  Perkebunan, Statistik Perkebunan  Indonesia  2018-2020 .  Jakarta: Direktorat Jenderal Perkebunan, Kementerian Pertanian, 2019.
[2] B.  Sundu,  A.  Kumar,  and  J.  Dingle, “Comparison of feeding values of palm kernel meal  and  copra  meal  for  broilers ,” Recent Advances in Animal Nutrition in Australia , vol. 15, p. 28A, 2005.
[3] M.  R.  Abdollahi,  B.  Hosking,  and  V. Ravindran,  “Nutrient  analysis,  m etabolisable energy  and  ileal  amino  acid  digestibility  of palm  kernel  meal  for  broilers,” Animal  Feed Science  and  Technology ,  vol.  206,  pp.  119-125, 2015.
[4] H.E. Hanafiah, I. Zulkifli, A. F. Soleimani, and E.  A.  Awad,  “ Apparent  metabolisable  energy and ileal crude protein digestibility of various treated palm kernel cake based diets for heat- stressed  broiler  chickens,” European  Poultry Science , p. 81, 2017.
[5] L. Tsaniyah dan H. Hermawan, “ Pengendalian proses  produksi  bahan  pakan  bungkil  sawit dalam  perspektif  keamanan  pangan ,” Jurnal OE , vol. 7, no. 2, pp. 121-131, 2015.
[6] M.  I.  Alshelmani,  T.  C.  Loh,  H.  L.  Foo,  A.  Q. Sazili,  and  W.  H.  Lau, “ Effect  of  feeding different levels of palm kernel cake fermented by Paenibacillus  polymyxa ATCC  842  on nutrient  digestibility,  intestinal  morphology, and  gut  microflora  in  broiler chickens,”
Animal  Feed  Science  and  Technology ,  vol.  216, pp. 216 – 224, 2016.
[7] D.  N.  Edi, “ Analysis  of  regional  potency  and local feed resources to develop native chicken in East  Java  Province,” Jurnal  Ternak ,  vol.  11, no. 2, pp. 7-22, 2020.
[8] N.  Musita, “ Kajian  sifat  fisikokimia  tepung onggok  industri  besar  dan  industri  kecil ,” Majalah TEGI , vol. 10, no. 1, pp. 19-24, 2018.
[9] K.  Kiramang, “ Potensi  dan  pemanfaatan onggok  dalam  ransum  unggas ,” Jurnal Teknosains, vol. 5, no. 2, PP. 155-163, 2011.
[10] I. G. N. G. Bidura, I. B.  G.  Pratama,  dan  T. G. O.  Susilo, Limbah:  Pakan  Alternatif  dan
Aplikasi Teknologi . Denpasar: Udayana
University Press, 2008.
[11] T.  Pasaribu ,  “ Upaya  meningkatkan  kualitas
bungkil inti sawit melalui teknologi fermentasi  dan  penambahan  enzim  untuk
unggas,” WARTAZOA ,  vol.  28,  no.  3,  pp.  119-
128, 2018.
[12] S.  Madonna, “ Produksi  enzim  amilolitik  dari Bacillus  megaterium menggunakan  variasi kadar pati sagu ( Metroxylon sp.),” Al-Kauniyah Jurnal Biologi , vol. 7, no. 1, pp. 22-27, 2014.
[13] M.  Astriani, “ Skrining  bakteri  selulolitik  asal tanah  kebun  pisang  ( Musa  paradisiaca ),”
Jurnal Biota , vol. 3, no. 1, pp. 6-10, 2017.
[14] D. Indrawati, A. Susilowati, D. P. Atmojo, dan N.  Mulyana, “ Efektivitas  enzim  kasar  kitinase dari  jamur Trichoderma  viride yang  diiradiasi oleh  sinar gamma terhadap degradasi cangkang telur nematoda Haemonchus contortus pada  ternak  domba,” Jurnal  Ilmu- Ilmu Peternakan , vol. 29, no. 1, pp. 24 – 36, 2019.
[15] AOAC, Official Methods of Analysis , 15 edition. Arlington, VA: AOAC Inc, 1990.
[16] O. H. Lowry, N. J. Rosebrough, A. L. Farr, and R.  J.  Randall, “ Protein  measurement  with  the Folin  phenol  reagent,” Journal  of  Biological Chemistry , vol. 193, pp. 265-275, 1951.
[17] N.  Nelson, “ A  photometric  adaptation  of  the Somogyi  method  for  the  determination  of glucose, Journal  of  Biological  Chemistry ,  vol. 153, no. 2, pp. 375-380, 1944.
[18] P.  V.  Van  Soest,  J.  B.  Robertson,  and  B.  A. Lewis, “ Methods  for  dietary  fiber,  neutral
detergent fiber, and nonstarch
polysaccharides in relation to animal nutrition,” Journal of Dairy Science , vol. 74, no. 10, pp. 3583-3597, 1991.
[19] A.  Jaelani,  W.  G.  Piliang,  Suryahadi,  dan Rahayu, “ Hidrolisis  bungkil  inti  sawit  ( Elaeis guinensis Jacq)  oleh  kapang Trichoderma reesei sebagai  pendegradasi  polisakarida mannan ,” Animal Production , vol. 10, no. 1, pp. 42-49, 2005.
[20] M.  Lie,  M.  Najoan,  dan  F.  R.  Wolayan, “ Peningkatan  nilai  nutrien  (protein  kasar  dan serat  kasar)  limbah  solid  kelapa  sawit terfermentasi  dengan Trichoderma  reesei ,” Jurnal  LPPM  Bidang  Sains  dan  Teknologi ,  vol. 2, no. 1, p. 34043, 2015.
[21] N. H. Muhiddin, N. Juli, dan I. N. P. Aryantha, “Peningkatan  kandungan  protein  kulit  umbi ubi kayu melalui proses fermentasi,” JMS , vol. 6, no. 1, pp. 1-12, 2001.
[22] T.  Juhász,  K.  Kozma,  and  K.  Réczey, “Production of β -glucosidase in mixed culture of Aspergillus niger BKMF 1305 and Trichoderma reesei RUT C30,” Food
Technology  and  Biotechnology ,  vol.  41,  no.  1, pp. 49-53, 2003.
[23] J. J. Deng, W. Q. Huang, Z. W. Li, D. L. Lu, Y. Zhang,  and  X.  C.  Luo, “ Biocontrol  activity  of recombinant aspartic
protease
from Trichoderma  harzianum against  pathogenic
fungi,” Enzyme and Microbial Technology , vol.
112, pp. 35-42, 2018.
[24] H.  V.  Poulsen,  F.  W.  Willink,  and  K. Ingvorsen, “ Aerobic  and  anaerobic  cellulase production  by Cellulomonas  uda ,” Archives  of Microbiology , vol. 198, no. 8, pp. 725-735, 2016. [25] Mirnawati, G. Ciptaan, and Ferawati, “Improving  the  quality  and  nutrient  content of  palm  kernel  cake  through  fermentation with Bacillus  subtilis ,” Livestock  Research  for Rural Development , vol. 31, no. 7, p. 98, 2019.
[26] Y.  Sukaryana,  Nurhayati,  dan  C.  U.  Wirawati, “ Optimalisasi  pemanfaatan  bungkil  inti  sawit, gaplek dan onggok melalui teknologi fermentasi  dengan  kapang  berbeda  sebagai bahan pakan ayam pedaging ,” Jurnal
Penelitian Pertanian Terapan , vol. 13, no. 2, pp.
70-77, 2013.
[27] L.  Sari  dan  T.  Purwadaria, “ Pengkajian  nilai gizi  hasil  fermentasi  mutan Aspergillus  niger pada substrat bungkil kelapa dan bungkil inti sawit,” Biodiversitas ,  vol.  5,  no.  2,  pp.  48-51, 2004.
[28] T. Pasaribu, E. B. Laconi, and I. P. Kompiang, “ Evaluation  of  the  nutrient  contents  of  palm kernel  cake  fermented  by  microbial  cocktails as a potential feedstuff for poultry ,” Journal of the  Indonesian  Tropical  Animal  Agriculture , vol. 44, no. 3, pp. 295-302, 2019.
[29] Mirnawati,  A.  Djulardi,  and  Y.  Marlida, “Improving  the  quality  of  palm  kernel  cake through fermentation by Eupenicillium javanicum as  poultry  ration, Pakistan  Journal of Nutrition , vol. 12, no. 12, pp. 1085-1088, 2013.
[30] Nurhayati, O. Sjofjan, dan  Koentjoko,
“ Kualitas  nutrisi  campuran  bungkil  inti  sawit dan  onggok  yang  difermentasi  menggunakan Aspergillus  niger ,” Journal  of  the  Indonesian Tropical Animal Agriculture , vol. 31,  no. 3, pp. 172-178, 2006.
[31] Y.  Martono,  L.  V.  Danriani,  dan  S.  Hartini, “ Pengaruh  fermentasi  terhadap  kandungan protein  dan  asam  amino  pada  tepung  gaplek yang difortifikasi tepung kedelai  ( Glycine max (L)),” AGRITECH ,  vol.  36,  no.  2,  pp.  56-53, 2016.
[32] Sridanarti, “ Pengaruh waktu inkubasi campuran  ampas  tahu  dan  onggok  yang difermantasi  dengan Neurospora  sitophila
terhadap kandungan zat makanan,” Universitas Brawijaya, 2007.
[33] H.  S.  Nur, “ Suksesi  mikroba  dan  aspek biokimiawi  fermentasi  mandai  dengan  kadar garam rendah,” Makara Journal of Science , vol. 13, no. 1, pp. 13-16, 2009.
[34] Sutikno,  Marniza,  Selviana,  dan  N.  Musita, “ Pengaruh konsentrasi  enzim  selulase,  α– amilase dan glukoamilase terhadap kadar gula
e-ISSN 2655-2159
reduksi dari onggok ,” Jurnal Teknologi Industri
& Hasil Pertanian , vol. 21, no. 1, pp. 1-12, 2016.
[35] R.  Afriza  dan  Ismanilda, “Analisis  perbedaan kadar  gula  pereduksi  dengan  metode  Lane Eynon  dan  Luff  Schoorl  pada  buah  naga merah ( Hylocereus polyrhizus ),” Jurnal Temapela , vol. 2, no. 2, pp. 90-96, 2019.
[36] S.  P.  Ginting  dan  R.  Krisnan, “ Pengaruh fermentasi  menggunakan  beberapa  strain
Trichoderma dan  masa  inkubasi  berbeda terhadap  komposisi  kimiawi  bungkil  inti sawit ,” Prosiding  Seminar  Nasional  Teknologi Peternakan dan Veteriner , pp. 939-944, 2006.
[37] D. Novika, “ Degradasi fraksi serat (NDF, ADF, selulosa  dan  hemiselulosa)  ransum  yang menggunakan  daun  coklat  secara In-vitro . Universitas Andalas, 2013.
[38] D.  N.  Edi,  “Bahan  pakan  alternatif  sumber energi  untuk  substitusi  jagung  pada  unggas,” Jurnal Peternakan Indonesia , vol. 23, no. 1, pp. 43-61, 2021.
[39] N.  Usman,  E.  J.  Saleh,  dan  M.  Nusi, “ Kandungan acid  detergent  fiber dan neutral detergent  fiber jerami  jagung  fermentasi dengan  mengunakan  jamur Trichoderma viride dengan  lama  inkubasi  berbeda ,”
Jambura  Journal  of  Animal  Science ,  vol.  1,  no.
2, pp. 57-61, 2019.