## ANALISIS KINETIKA PELEPASAN TEOFILIN DARI GRANUL MATRIKS KITOSAN
Submitted : 1 Mei 2016
Edited : 17 Mei 2016
Accepted : 25 Mei 2016
Suprianto
Dosen Kopertis Wilayah I dpk Stikes Helvetia Medan Email : ekahasbi@gmail.com

## ABSTRACT
Moment the drug dosage form development, it is important to study the drug release or dissolution that is recognized as an element in drug development. Mathematical models could help optimize  the  design  of drugs  to  produce models  of drug  release information. Analysis  of quantitative values obtained when depicting dissolution drug release profiles more easily when the mathematical  concepts  used  to describe the drug  release kinetics  model. Model release of drugs known include zero order, first order, Higuchi models, models Hixon Crowell and Peppas Korsmeyer models. The  purpose  of this review apply mathematical  concepts to study  the phenomenon of drug release theophylline granules matrix made from chitosan.

## K eywords : release, kinetics, theophylline and chitosan

## PENDAHULUAN
Sustained  release, sustained    action, prolonged action, controlled release, extended release,    depot release adalah istilah untuk mengidentifikasi sistem penyampaian obat yang  dirancang  untuk mencapai efek terapi berkepanjangan oleh obat yang terus melepaskan selama  jangka waktu setelah pemberian dosis obat tunggal. Saat  ini,  kebanyakan waktu pelepasan obat diformulasi sehingga bahan  aktif di dalam matriks yang  tidak  larut sehingga obat melarut harus menemukan  jalan keluar melalui lubang-lubang dalam matriks (1,2) .
Produk pelepasan terkendali
menawarkan beberapa keuntungan,  antara lain:  mempertahankan  kadar  obat  dalam plasma, memperkecil toksisitas, menurunkan efek  samping  akibat  fluktuasi  kadar  obat,
frekuensi  pemberian  obat  sekali  sehari  dan menjamin terapi optimum (3,4) .
Teofilin
adalah salah satu bronkodilator dengan  indeks  terapi  sempit, yaitu  berkisar  antara  10-20  mcg/ml  darah, diberikan  pada  penderita  asma  kronis,  dosis lazim  200  mg  sekali  pemakaian  dan  waktu paruh 3-7 jam serta mempunyai pKa sebesar 8,6 (5,6) .
Kitosan  telah  dimanfaatkan  untuk membuat granul dengan bahan aktif indometasin  dan  dilaporkan  bahwa  granul kitosan  mempunyai  potensi  sebagai  sediaan oral pelepasan terkendali (7) .
Modifikasi sediaan pelepasan obat mencakup delayed dan extended release.
Delayed release didefinisikan sebagai pelepasan obat pada  waktu selain segera setelah  pemberian. Produk extended  release diformulasikan untuk  membuat obat yang
tersedia selama  jangka setelah  pemberian. Profil  pelepasan  obat  secara in  vivo dapat dilihat seperti Gambar 1 (8) . Sediaan konvensional dirancang untuk  melepaskan  zat aktif dengan  segera sehingga  diabsorbsi  ke  dalam  sirkulasi sistemik  dengan  cepat  dan  sempurna. Sebaliknya  sediaan  pelepasan  terkendali, baik sustained  release,  prolonged  release, time  release maupun delayed  released dirancang untuk melepaskan zat aktif secara lambat dibandingkan dengan sediaan konvensional (9) .
Kemajuan  teknis telah menyebabkan perkembangan modifikasi  pelepasan sistem pemberian  obat untuk  mengatasi kelemahan sistem pemberian obat konvensional (10,8,11) . Prolonged release menunjukkan bahwa obat  disiapkan untuk  penyerapan selama  periode yang  lebih lama dari bentuk sediaan konvensional (11) . Sistem pelepasan dikendalikan khas dirancang untuk memberikan tingkat  obat yang  konstan atau hampir konstan  dalam plasma  dengan mengurangi fluktuasi melalui lepas  lambat selama jangka waktu tertentu (8,12,13) .
Sustained  release  menunjukkan p elepasan terhambat , berkepanjangan atau pelepasan lambat  untuk  jangka  waktu lama. Sistem pelepasan berkelanjutan hanya memperpanjang terapi obat untuk  jangka waktu lama (14) .
Timed release digunakan untuk
mendapatkan pelepasan dengan jeda waktu sekitar  4-5 jam . Sediaan dilapisi selulosa asetat ftalat untuk memberikan perlindungan asam lambung . Lapisan menyebabkan keterlambatan  pelepasan  obat , menunda pelepasan  obat di usus halus. Waktu pelepasan  obat dikendalikan sehingga dapat terhambat hingga  5 jam menargetkan obat untuk usus besar (14) .
Kinetika pelepasan  obat  diperoleh dari uji disolusi (15,16) . Orde nol merupakan model yang  ideal pelepasan  obat dalam
rangka mencapai aksi farmakologi berkepanjangan . Obat di disolusi dari bentuk sediaan dan melepaskan obat secara perlahan diwakili oleh persamaan berikut:
Qt = Qo + Ko t Dimana Qt merupakan jumlah obat dalam  waktu  t, Qo sebagai jumlah  awal obat  dalam  larutan dan Ko  adalah konstanta pelepasan orde nol (14 ) .
Sediaan  memiliki  pelepasan  orde nol  akan  melepaskan  zat  aktif  dengan kecepatan konstan. Peningkatan konsentrasi obat berbanding lurus dengan  waktu (17) . Data  pelepasan  obat yang  diperoleh secara  in  vitro diplot sebagai jumlah  kumulatif obat ter lepas terhadap  waktu dan  dihasilkan  grafik linear jika pelepasan mememnuhi kinetika pelepasan orde nol (18 ) . Model orde nol dapat digunakan untuk  menggambarkan disolusi obat dari beberapa  jenis modifikasi bentuk pelepasan sediaan obat , seperti  beberapa sistem transdermal , matriks tablet dengan obat yang kelarutan rendah, sistem osmotik , dan lain-lain (19) .
Wagner mengasumsikan bahwa luas permukaan terpapar dari tablet menurun secara  eksponensial dengan  waktu selama proses disolusi yang menunjukkan  bahwa pelepasan  obat dari  sebagian  besar tablet lepas lambat dapat dijelaskan oleh kinetika orde Satu . Persamaan yang menggambarkan kinetika orde satu adalah (19) : log Q t = logQ 0 + K1/2.303
Dimana, Q adalah fraksi obat yang dilepaskan pada  waktu t dan K 1 adalah konstanta pelepasan obat  orde  pertama. P lot logaritma  fraksi obat terhadap waktu akan linear jika pelepasan mememnuhi kinetika pelepasan orde satu (20) .

## Gambar 1. Profil Kadar Obat dalam Darah dari Beberapa Bentuk Sediaan
Kinetika  pelepasan  obat  yang diselidiki oleh T. Higuchi sering disebut
orde
Higuchi, yang mendefinisikan ketergantungan  linear  dari  fraksi  aktif yang dilepaskan per  unit  (Q) dari akar  kuadrat waktu dengan  model  persamaan  sebagai berikut :
Q = K 2 t ½
Dimana,  K 2 adalah  konstanta  laju pelepasan. Plot  fraksi  obat yang  dilepaskan terhadap akar kuadrat waktu akan linear jika pelepasan mengikuti persamaan Higuchi (20) .
Hixson-Crowell (1931) memahami bahwa luas  permukaan partikel sebanding dengan  akar kubik volume yang dijelaskan dengan persamaan berikut :
Qo 1/3 - Qt 1/3 = Ks t
Dimana Qo adalah  jumlah  awal  obat dalam bentuk  sediaan  farmasi. Qt  adalah jumlah  sisa  obat  bentuk  sediaan  farmasi pada  waktu  t. Ks adalah  konstanta menggabungkan hubungan volume
permukaan.  Plot  akar pangkat  tiga fraksi obat yang tersisa terhadap waktu akan linear
jika pelepasan mengikuti persamaan Hixson- Crowell(20). Korsemeyer et al . (1983 ) menurunkan hubungan yang menggambarkan pelepasan  obat dari  sstem polimer dengan persamaan sebagai
berikut (21) :
Qt/Qo = Kt n
Dimana Qt/Qo adalah fraksi obat yang dilepaskan pada  waktu  t, K adalah  konstan kinetika yang dilengkapi karakteristik struktur dan geometris sistem
penyampaian. n adalah eksponen difusi yang menunjukkan mekanisme transportasi obat melalui polimer. Eksponen pelepasan n ≤ 0,5 untuk Fickian difusi dilepaskan dari slab (matriks non swellable); 0,5 < n < 1.0 untuk pelepasan non-Fickian (anomali), ini  berarti bahwa pelepasan  obat diikuti kedua difusi dan dikendalikan mekanisme erosi dan n = 1 untuk pelepasan orde nol (21, 19) .
Untuk mempelajari kinetika pelepasan, data yang diperoleh dari penelitian  in  vitro pelepasan  obat yang diplot  sebagai log persentase kumulatif pelepasan  obat terhadap log waktu akan

## Range Terapi
linear jika pelepasan memenuhi kinetika pelepasan Korsemeyer-Peppas (21) .

## BAHAN DAN ALAT
Bahan yang digunakan dalam
penelitian  ini  antara  lain teofilin p.a (Metcorp, Ltd), asam klorida p.a (E.Merck), natrium  hidroksida  p.a  (E.Merck),  kalium dihidrogen  fosfat  p.a  (E.Merck),  kalium klorida  p.a  (E.Merck),  asam  asetat  glasial p.a  (E.Merck) dan  kitosan  hasil  isolasi limbah  padat  udang  Swallo  Tambak  Sari Mabar  (Standar  Protan  Laboratories,  Inc), natrium hipoklorit p.a (E.Merck).
Alat  yang  digunakan  diantaranya Spektrofotometer  ultra  violet  (Milton  Roy 21D),  alat  disolusi  (Erweka),  pengaduk magnetik (Ikamag), timbangan listrik (Sartorius),  pH  meter  stick  (HBI),  alat-alat gelas dan lain-lain.

## METODE PENELITIAN
Metode penelitian pelepasan
terkendali  teofilin  sediaan  granul  kitosan meliputi :

## Pembuatan Granul Teofilin
Formula  F 1 sampai F 3 , granul kitosan dibuat  dengan  melarutkan  teofilin  dalam larutan natrium hidroksida 0,1 N sebanyak 5 ml dan diencerkan dengan 10 ml akuabidestilata,  diserap  dengan  kitosan. Pelarut diuapkan pada suhu 60 0 C dan residu ditambah 10 ml asam asetat 10% setiap 400 mg  kitosan  dan  ditambah  akuabidestilata secukupnya  sampai  terbentuk  gel  dan selanjutnya pelarut  diuapkan pada suhu 60 0 C  hingga  massa  dapat  digranulasi  dengan mesh  12. Kemudian  didiamkan  pada  suhu kamar  selama  6  jam  dan  dikeringkan  pada suhu  60 0 C  selama  8  jam.  Formula  dapat dilihat pada Tabel 1 (7) .
Tabel 1. Formula Sediaan Granul Teofilin No. Formula Teofilin (m) Kitosan (mg) 1 F 1 200 400 2 F 2 200 600 3 F 3 200 800 4 F 4 200 1000
Pembuatan  Kurva  Resapan  Teofilin dalam Medium pH = 6,8
Seratus koma empat miligram teofilin dilarutkan  dalam  labu  takar  250  ml  dengan medium pH = 6,8 hingga garis tanda (larutan induk).  Larutan  induk  dipipet  dua  koma enam  milliliter,  diencerkan  dengan  medium yang  sama  dalam  labu  ukur  100  ml  hingga batas  garis  tanda  dan  resapan  diukur  pada panjang  gelombang  240  sampai  290  nm (22) . Sebagai  larutan  pembanding  digunakan medium yang sama.

## Uji Disolusi
Pelepasan  obat  secara in  vitro
ditentukan  dengan  memodifikasi  metode  uji disolusi  USP  XXII  dengan  menggunakan keranjang
berputar.
Granul yang mengandung  kira-kira  200  mg  teofilin dimasukkan ke dalam keranjang dan di putar dengan  kecepatan  100  rpm  pada  ketinggian kira-kira  2  cm  dari  dasar  labu  yang  berisi 1000  ml  medium pH  =  6,8 pada  suhu  37  ± 0,5 0 C (7,23,24) . Alikuot dipipet dengan volume, selang  dan  lama  waktu  tertentu  dan  diukur serapan  pada  panjang  gelombang  270  nm dengan  spektrofotometer  ultra  violet (23) . Jumlah  teofilin  yang  dilepaskan  ditentukan dengan menggunakan kurva kalibrasi teofilin.  Volume  cairan  dalam  labu  tetap dijaga  1000  ml  dengan  menambahkan medium yang sama dan setiap formula diuji 6 kali (7, 22, 24) .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kinetika  pelepasan  obat  ditentukan berdasarkan  harga  koefisien regresi terbesar dari analisis regresi model kinetika pelepasan  obat. Hubungan  waktu  dengan kadar  teofilin formula  F 1 untuk  masing- masing  analisis  regresi  dapat  dilihat  pada Tabel 2. Plot konsentrasi obat dengan waktu, fraksi  obat yang  dilepaskan terhadap  akar kuadrat  waktu dan log persentase kumulatif pelepasan  obat dengan log waktu tidak linear.  Hal  ini  menggambarkan  bahwa kinetika  pelepasan  teofilin  tidak  mengikuti orde  nol,  Higuchi  dan Korsemeyer-Peppas. Plot logaritma  fraksi obat terhadap waktu dan akar pangkat  tiga fraksi  obat yang tersisa terhadap  waktu relative linear, namun koefisien  regresi  analisis  kinetika orde  satu  lebih  besar  (R 2 =0,994),  maka formula F1 cenderung melepaskan mengikuti kinetika orde satu (Gambar 2).
Hubungan waktu dengan kadar teofilin  formula  F 2 untuk  masing-masing analisis  regresi  dapat  dilihat  pada Tabel 3. Plot konsentrasi  obat  dengan  waktu dan fraksi  obat yang  dilepaskan terhadap  akar kuadrat  waktu tidak linear.  Hal  ini menggambarkan  bahwa  kinetika  pelepasan teofilin  tidak  mengikuti  orde  nol dan Higuchi. Plot logaritma fraksi obat terhadap waktu, akar pangkat  tiga fraksi  obat yang tersisa terhadap  waktu dan log persentase kumulatif pelepasan  obat dengan log waktu relative linear, namun koefisien  regresi analisis  kinetika  orde Hixson-Crowell lebih besar (R 2 =0,989), maka formula F 2 cenderung  melepaskan  mengikuti  kinetika orde Hixson-Crowell (Gambar 3).
Hubungan waktu dengan kadar teofilin  formula  F 3 untuk  masing-masing analisis  regresi  dapat  dilihat  pada  Tabel 4. Plot konsentrasi  obat  dengan  waktu, fraksi obat yang  dilepaskan terhadap  akar  kuadrat waktu dan log persentase kumulatif pelepasan  obat dengan log waktu tidak linear.  Hal  ini  menggambarkan  bahwa
kinetika  pelepasan  teofilin  tidak  mengikuti orde  nol,  Higuchi  dan Korsemeyer-Peppas. Plot logaritma  fraksi obat terhadap waktu dan akar pangkat  tiga fraksi  obat yang tersisa terhadap  waktu relative linear, namun koefisien  regresi  analisis  kinetika orde Hixson-Crowell lebih besar (R 2 =0,994), maka  formula  F 3 cenderung  melepaskan mengikuti  kinetika orde Hixson-Crowell (Gambar 4).
Hubungan waktu dengan kadar teofilin  formula  F 4 untuk  masing-masng analisis  regresi  dapat  dilihat  pada  Tabel  5. Plot konsentrasi  obat  dengan  waktu, fraksi obat yang  dilepaskan terhadap  akar  kuadrat waktu dan log persentase kumulatif pelepasan  obat dengan log waktu tidak linear.  Hal  ini  menggambarkan  bahwa kinetika  pelepasan  teofilin  tidak  mengikuti orde  nol,  Higuchi  dan Korsemeyer-Peppas. Plot logaritma  fraksi obat terhadap waktu dan akar pangkat  tiga fraksi  obat yang tersisa terhadap  waktu relative linear, namun koefisien  regresi  analisis  kinetika orde Hixson-Crowell lebih besar (R 2 =0,994), maka  formula  F 4 cenderung  melepaskan mengikuti  kinetika  orde Hixson-Crowell (Gambar 5).
Rani, et  al., 2010,  telah  melakukan penelitian  dengan  bahan  matriks  kitosan diperoleh  pelepasan  bahan  obat  mengikuti orde  Higuchi. Murtaza, et  al.,  2012, juga memperoleh hasil yang sama. Ini menunjukkan bahwa model pelepasan teofilin  dari  granul  kitosan  cenderung mengikuti  orde  Higuchi (16,25) . Namun,  hasil penelitian menunjukkan kecenderungan
bahwa  pelepasan teofilin  mengikuti  orde Hixson-Crowell,  kitosan  belum  dicampur dengan cross-linking agent, seperti glutaraldehida (16,25) .

## Tabel 2. Hubungan Waktu dengan Kadar Teofilin dari Teofilin Formula F 1
Gambar 2. Hasil Analisis Regresi Kinetika (A= Orde Nol, B= Orde Satu, C = Orde Higuchi, D = Hixson-Crowell dan E = Korsemeyer-Peppas) Pelepasan Teofilin Formula F 1

## Tabel 3. Hubungan Waktu dengan Kadar Teofilin dari Teofilin Formula F 2
Gambar 3. Hasil Analisis Regresi Kinetika (A= Orde Nol, B= Orde Satu, C = Orde Higuchi, D = Hixson-Crowell dan E = Korsemeyer-Peppas) Pelepasan Teofilin Formula F 2

## Tabel 4. Hubungan Waktu dengan Kadar Teofilin dari Teofilin Formula F 3
Gambar 4. Hasil Analisis Regresi Kinetika (A= Orde Nol, B= Orde Satu, C = Orde Higuchi, D = Hixson-Crowell dan E = Korsemeyer-Peppas) Pelepasan Teofilin Formula F 3

## Tabel 5. Hubungan Waktu dengan Kadar Teofilin dari Teofilin Formula F 4
Gambar 5. Hasil Analisis Regresi Kinetika (A= Orde Nol, B= Orde Satu, C = Orde Higuchi, D = Hixson-Crowell dan E = Korsemeyer-Peppas) Pelepasan Teofilin Formula F 4

## SIMPULAN
Kinetika  pelepasan  teofilin  sediaan granul  formula  F 1 mengikuti  orde  satu. Sedangkan formula F 2 , F 3 , dan F 4 mengikuti
orde Hixson-Crowell. Peningkatan konsentrasi kitosan  cenderung  pelepasan teofilin mengikuti orde Hixson-Crowell. DAFTAR PUSTAKA 1. Aiache, J.M. Farmasetika 2. Biofarmasi. Edisi Kedua. Surabaya: Airlangga University Press; 1993. p. 154-339. 2. Barnes, P.J. Theophylline. Pharmaceuticals. 2010; 3: 725-747. 3. Bhowmik, D., Gopinath and Kumar,K.P.S.,  Controlled  Release  Drug Delivery Systems. The Pharma Innovation Journal. 2012; 1(10): 24-32. 4. Dash,  S.,  Murthy,  P.N.,  Nath,  L.,  and Chowdhury,  P.  Kinetic  Modeling  on Drug  Release  from  Controlled  Drug Delivery Systems. Acta Poloniae Pharmaceutica - Drug  Research. 2010; 67(3): 217-223. 5. Dixit,  N.,  Maurya,  S.D  and  Sagar, B.P.S., Controlled Release Drug Delivery  Systems. Indian  Journal  of Research in Pharmacy and Biotechnology. 2013; 1(3): 305-310 6. Kakar,  S.,  Singh,  R  and  Semwal,  A.,
Drug  Release  Characteristics  of  Dosage Forms:  A  Review. Int.  J.  Recent  Adv Pharm Res. 2014); 4(1): 6-17.
7. Lokhandwala,  H.,  Deshpande,  A.,  and Deshpande,  S., Kinetic  Modeling  and
Dissolution  Profil  Comparison:  An Overview. Int.  J.  Pharm.  Bio.  Sci. . 2013; 4(1): 728 – 737.
8. Lordi,  N.G. Bentuk  Sediaan  Pelepasan Berkesinambungan. Dalam: Teori  dan Praktek  Farmasi  Industri. Edisi Ketiga.
Jilid  2.  Editor:  Leon  Lachman,  H.A.
Lieberman  dan J.L.  Kanig,  Jakarta:  UI- Press; 1994. Hal. 893-940.
9. Mandhar,  P  and  Joshi,  G.  Development of  Sustained  Release  Drug  Delivery
System: A Review. Asian Pac. J. Health Sci. 2015; 2(1): 179-185.
10. Miyazaki, S., Yamaguchi, H., Yokouchi, C.,  Takada,  M  dan  How,  W.M. Sustained Release of Indomethacin from Chitosan  Granules  in  Beagle Dogs.  J.
Pharm.  Pharmacol. 1988; 40:  642 – 643.
11. Nagendrakumar,  D.,  Keshavshetti,  G.  G and Shardor, A. G. An overview: Matrix tablets  as  sustained  release. Recent Research  in  Science  and  Technology.
2013; 5(4): 36-45
12. Ninama.U.,  Pal,  J.T.,  Chaudhary,  S., Bhimani,  B.,  and  Dalsaniya,  D.  Lipid Matrix Tablet as Sustaind Drug Delivery System: A Review. IJPRBS. 2015; 4(2): 98-114.
13. Patnaik,  N.A.,  Nagarjuna1,  T  and
Thulasiramaraju, T.V. Sustained Release Drug  Delivery  System:  A  Modern
Formulation Appoach. International
Journal  of  Research  in  Pharmaceutical and  Nano  Sciences. 2013; 2(5):    586-
601.
14. Ramakrishna,  S.,  Mihira,  V.,  Vyshnavi, K.R  and  Ranjith,  V. Design  and Evaluation  of  Drug  Release  Kinetics  of Meloxicam  Sustained  Release  Matrix Tablet. Int J Curr Pharm Res. 2012; (1): 90-99.
15. Ramteke K.H., Dighe P.A., Kharat A. R and  Patil,  S.V. Mathematical  Models  of Drug Dissolution: A Review. Sch. Acad. J. Pharm. 2014; 3(5): 388-396.
16. Rani,  M.,  Agarwal,  A.,  Maharana,  T., dan Negi, Y.S. A Comparative Study for Interpenetrating Polymeric Network (IPN)  of  Chitosan  Amino  Acid  Beads for Controlled  Drug  Release. African Journal of Pharmacy and Pharmacology. 2010; 4(2): 35-54.
17. Robinson,  J.R.,  Hon,  V.  dan  Lee,  L.
Methode  to  Achieve  Sustained  Drug Delivery. Dalam: Sustained and Controlled Release Drug Deliver
Systems. Editor:  J.R.  Robinson.  New York  dan  Basel:  Marcel  Dekker,  Inc. ;
1978. p. 146. 18. Shargel,  L.  dan  Andrew  B.C.Yu.
Biofarmasetika  dan  Farmakokinetika
Terapan. Edisi Kedua. Surabaya: Airlangga  University  Press; (1988).  p. 454-455.
19. Singhvi,  G  and Singh,  M. Review:  In- Vitro  Drug  Release Characterization Models. IJPSR. 2011; 2(1): 77-84.
20. Shaikh,  H.K.,  Kshirsagar,  R.  V.  and
Patil,  S.  G.  Mathematical  Model  for Drug    Release  Characterization:  A Review. World Journal of Pharmaceutical  Research. 2015); 4(4): 324-338. 21. Voigt,  R. Buku  Pelajaran  Teknologi
Farmasi. Edisi  V.  Revisi.  Yogyakarta: Gajah  Mada  University  Press;  1994.  p.
349- 670.
22. Vashi,  V.I.  and  Meyer,  M.C. Effect  pH on  the  in Vitro  Dissolution  and  in  Vivo
Absoption of Controlled Release Theophilline  in  Dogs. J.  Pharm.  Sci. 1988; 77(9): 760-764.
23. Clarke EGC. Isolation and Identification of  Drug. London:  The  Pharmaceutical
Press; 1969. p. 270-271. 24. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (1995). F'armakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Depkes RI. 25. Murtaza,  G.,  Ahmad,  M.,  Khan,  S.A., dan  Hussain,  I.  Evaluation  of  Cefixime Loaded Chitosan Microspheres: Analysis  of  Dissolution Data  Using DDSolver.  [internet].  2012.  [cited  2013 August 12]. Available from: http://www.dissolutiontech.com/DTreso ur/201205Articles/DT201205_A02.pdf