Pemberian Krim Ekstrak Moringa oleifera L.
pada Tikus dengan Luka Insisi:
Studi terhadap Kadar IL-1, IL-10 dan rasio IL-1:IL-10
1 2 3
Frederick Surya Utoyo , Udin Bahrudin , Yan Wisnu Prajoko , 4
4 Endang Mahati , Nani Maharani
Latar belakang : Saat ini, berbagai tanaman asli Indonesia dikembangkan sebagai bahan perawatan luka untuk hasil penyembuhan yang lebih baik. Salah satunya, yaitu Moringa oleifera L., yang  merupakan tanaman asli Indonesia serta berpotensi dapat membantu penyembuhan luka   melalui regulasi jalur sitokin inflamasi, interleukin (IL)-1 dan IL-10. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian  ekstrak Moringa oleifera L. terhadap IL-1, IL-10, dan rasio IL-1: IL-10 di jaringan kulit, pada tikus dengan luka insisi.
Metode  : Penelitian  ini  menggunakan  desain post  test  only  controlled  group dengan sampel  berupa  15  tikus  Wistar  yang  dilakukan  luka  insisi.  Sampel  dibagi  menjadi  3 kelompok  perlakuan:  perawatan  luka  dengan framycetin  sulphate (KP),  krim  ekstrak Moringa oleifera L. 15% (M), dan krim plasebo (KN). Pengukuran kadar IL-1, IL-10, dan rasio IL-1:  IL-10 dilakukan pada hari ke-10 perlakuan melalui pengambilan jaringan. Hasil : Kadar IL-1 pada kelompok perlakuan (M) tidak berbeda bermakna dibanding KN dan  KP  (33,56±4,68  vs  40,92±27,32  vs  30,23±3,92  pg/mL, p =0,543).  Kelompok  KP memiliki IL-10 lebih tinggi dibandingkan kelompok M dan KN (113,95±9,38; 91,75±5,65 dan 94,93±2,39 pg/mL, p<0,001), dan tidak didapatkan perbedaan antara kelompok M dan KN ( p =0,296). Rasio IL-1: IL-10 kelompok KP, M, dan KN tidak menunjukan perbedaan bermakna (0,27±0,05, 0,37±0,06 dan 0,44±0,30, p =0,249). Simpulan : Pemberian ekstrak Moringa oleifera L. secara topikal tidak mempengaruhi kadar IL-1 dan rasio IL-1 : IL-10 di jaringan kulit tikus dengan luka insisi. Kadar IL-10 di jaringan  kulit  tidak  berbeda  dibanding  kelompok  kontrol  negatif,  serta  lebih  rendah dibanding kelompok framycetin sulphate .
Kata kunci : Luka insisi, Moringa oleifera L. , perawatan luka
1 Magister Ilmu Biomedik, Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang, Indonesia
2 Bagian Jantung dan Pembuluh Darah, Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang, Indonesia
3 Bagian Ilmu Bedah Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang, Indonesia
4 Bagian Farmakologi dan Terapi, Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang, Indonesia

## Abstrak
Original Article
Med Hosp 2022; vol 9 (3) : 299–305
pISSN: 2301-4369 eISSN: 2685-7898 https://doi.org/10.36408/mhjcm.v9i3.778
Diajukan : 13 Juli 2022 Diterima : 20 Oktober 2022
Afiliasi Penulis: Bagian Farmakologi dan Terapi, Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang, Indonesia
Korespondensi Penulis: Nani Maharani Jalan Prof. H. Soedarto, S.H Tembalang, Semarang 50275, Jawa Tengah Indonesia
E-mail: maharani.nani@fk.undip.ac.id
Background : Nowadays, some natural herbs from Indonesia have been explored to develop wound treatment materials that results in a better wound healing outcome. Moringa oleifera L. is a herb from Indonesia which may improve the outcome of wound treatment through regulation of inflammatory cytokine including interleukin (IL)-1 and IL-10. This study was aimed to evaluate the effect of Moringa oleifera L. extract on the level of IL-1, IL-10 and IL-1: IL-10 ratio in rats' incision wound tissue.
Methods : This study used a post-test only controlled group design with 15 Wistar rats which undergo incision wound on skin. Rats were divided into 3 groups, i.e. the wound dressing with framycetin sulphate (KP) group, Moringa oleifera L 15% cream (M) group, and placebo cream (KN) group. The level of IL-1, IL-10, and IL-1: IL-10 ratio from wound tissue were measured on the day-10 after incision. Results : The IL-1 level in treatment group (M) was not significantly different compared to KN and KP group (33.56±4.68; 40.92±27.32; 30.23±3.92 pg/mL, respectively, p =0.543). The level of IL-10 in the KP group was significantly higher than other groups (113.95±9.38; 91.75±5.65; and 94.93±2.39 pg/mL, respectively, p <0.001), and there was no significant difference between M and KN group ( p =0.296). The IL-1: IL-10 ratio of KP, M, and KN groups were not significantly different (0.27±0.05; 0.37±0.06; and 0.44±0.30, respectively, p =0.249). Conclusion : Topical application of Moringa oleifera L. extract cream did not significantly affect the IL-1 level and the IL-1:IL-10 ratio in skin tissue of rats with incision wound. Moreover, the IL-10 level was not significantly different compared to negative control group, but lesser than framycetin sulphate's.
Keywords : Moringa oleifera L., incision wound, wound dressing

## Abstract
The Application of Moringa oleifera L. Cream on Rats with Incision Wound: Study on the IL-1 Level, IL-10 Level and IL-1:IL-10 ratio

## PENDAHULUAN
Pengembangan  produksi  tanaman  obat  saat  ini berkembang  pesat  dan  dipengaruhi  oleh  anggapan masyarakat tentang efek samping yang relatif lebih kecil
1 dalam penggunaan obat herbal. Moringa oleifera L , atau dikenal  dengan  nama  tanaman  kelor,  merupakan tanaman yang dapat tumbuh dan berkembang di daerah
2 tropis  termasuk  di  Indonesia.   Penggunaan  daun  kelor sangat  beragam,  yaitu  sebagai  obat-obatan  tradisional yang  memiliki  sifat  antioksidan,  antibakteri,  dan antijamur, biopestisida, meningkatkan nutrisi makanan,
3 dan pupuk.
Moringa  oleifera  L. telah  diuji  dan  memiliki  efek positif  dalam  penyembuhan  luka  pada  tikus  dengan berbagai  kondisi,  termasuk  kondisi  yang  menghambat penyembuhan  luka  seperti  komorbid  diabetes  dan 4,5 penggunaan dexamethason.  Biji, akar, kulit, dan daun tanaman  kelor  juga  menunjukkan  aktivitas  dalam penghambatan  berbagai  bakteri,  seperti S.  aureus, 1,6 Pseudomonas sp. , dan E. coli .  Daun kelor memiliki fungsi dalam  menurunkan  kadar  interleukin-1  (IL-1)  dan 7,8 meningkatkan kadar interleukin-10 (IL-10). Berbagai  senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam Moringa  oleifera  L. berperan  dalam  penyembuhan  luka. Senyawa kuersetin, tannin, dan saponin berperan dalam proses  inflamasi  maupun  pembentukan  matriks 9 ekstraseluler.   Penggunaan  ektrak  daun  kelor  juga memberikan pengaruh pada kadar IL-1 dan IL-10 pada kondisi  penyakit  kronis,  seperti  steatohepatitis  non-
10 alkoholik.  Lebih lanjut, IL-1 dan IL-10 mungkin dapat mempengaruhi penyembuhan luka.
Luka  insisi  merupakan  luka  yang  dihasilkan akibat pemisahan jaringan kulit oleh benda tajam yang memiliki  panjang  yang  lebih  besar  dibandingkan  lebar dari  luka.  Penggunaan  model  luka  insisi  memberikan gambaran penyembuhan luka secara primer dan dapat digunakan untuk mengevaluasi terapi topikal, terutama 11 dalam parameter histologi maupun biokimia.  Beberapa rekomendasi perawatan luka paska bedah yang telah ada berbeda-beda dalam hal teknik dan level rekomendasi, misalnya  dalam  penggunaan  profilaksis  antibiotik, pembersihan  luka  paska  bedah,  penggunaan dressing , 12–15 debridement,  hingga  penggunaan  analgetik. Beberapa  macam  produk  perawatan  luka,  seperti penggunaan  salep  berbasis  perak  pada  luka  akut, aplikasi  tekanan  negatif  pada  luka  luas,  maupun penggunaan  terapi  hiperbarik,  belum  disertai  bukti 16,17 rekomendasi  yang  kuat. Penggunaan  berbagai metode  yang  tidak  tepat  dapat  menyebabkan  proses 17 perawatan  menjadi  tidak  efektif  serta  tidak  optimal. Pada  studi  ini  diteliti  apakah  pemberian  ekstrak  daun kelor topikal dapat mempengaruhi kadar IL-1 dan IL-10 pada jaringan yang luka.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  telah  mendapatkan  persetujuan  etik  dari Komisi Etik Penelitian Kesehatan, Fakultas Kedokteran Universitas  Diponegoro,  dengan Ethical  Clearance No. 141/EC/H/FK-UNDIP/XII/2021.
Desain  yang  digunakan  adalah post  test-only controlled  group dengan  menggunakan  15  ekor  tikus Wistar sebagai sampel. Tikus dibagi menjadi 3 kelompok
perlakuan: kelompok perawatan luka dengan framycetin sulphate (KP),  krim  ekstrak Moringa  oleifera  L. 15%  (M), dan plasebo (KN).
Krim  ekstrak Moringa  oleifera  L .  dibuat  dengan melakukan  ekstraksi  dari  daun Moringa  oleifera  L .  yang dibudidayakan  di  area  Kota  Pekalongan  dengan ketinggian 1 meter diatas permukaan laut menggunakan etanol  96%.  Sebanyak  7,5  gram  ekstrak  tersebut digunakan  untuk  membuat  krim  dengan  konsentrasi 15% sebanyak 50 gram dengan bahan campuran berupa: carboxymethyl cellulose sodium (CMC-NA) 0,5 gram, asam stearat  5  gram,  parafin  4  gram,  vaselin  album  3  gram, trietanolamin  0,5  gram,  sorbitan  monostearat  1  gram, niqapin secukupnya, dan aquades hingga total campuran 50  gram.  Bahan  campuran  digunakan  dengan  jumlah yang sama untuk membentuk krim plasebo.
Luka  insisi  dilakukan  pada  punggung  tikus dengan menggunakan skalpel dan kemudian dilakukan penjahitan  luka  secara simple  interrupted menggunakan benang silk no.  3/0  dan  jarum curved no.  9.  Perawatan luka dilakukan sebanyak 3 kali per hari selama 10 hari menggunakan cotton  buds .  Setelah  hari  ke-10,  jaringan kulit  diambil  sebanyak  1  gram  untuk  dilakukan pengukuran  kadar  IL-1,  IL-10  dan  rasio  IL-1:  IL-10 menggunakan metode ELISA.
Data  dikumpulkan  dan  diolah  menggunakan program  statistik  SPSS  versi  23.0.  Uji  homogenitas dilakukan  dengan  uji Saphiro–Wilk dengan  uji  beda menggunakan ANOVA apabila berdistribusi normal dan uji Kruskal  Wallis bila  tidak  berdistribusi  normal.  Nilai signifikansi dianggap bermakna bila nilai p <0,05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Selama  perlakuan,  seluruh  hewan  coba  dalam  kondisi baik,  dan  tidak  ada  yang  mati/dieksklusi.  Hasil pemeriksaan  kadar  IL-1  dan  IL-10  jaringan  dengan ELISA,  dan  hasil  perhitungan  rasio  IL-1  dan  IL-10 disajikan dalam sub bagian sebagai berikut:

## Kadar IL-1
Hasil  pengukuran  kadar  IL-1  pada  kelompok  kontrol positif,  perlakuan,  dan  kontrol  negatif  secara  berturut- turut adalah 30,23±3,92 pg/mL, 33,56±4,68 pg/mL, dan 40,92±27,32  pg/mL.  Hasil  uji  perbedaan  dengan  uji Kruskal-Wallis antara  ketiga  kelompok  menunjukkan hasil  yang  tidak  signifikan.  Kadar  IL-1  kelompok perlakuan  lebih  rendah  dibanding  kelompok  kontrol negatif  (tanpa  perlakuan),  namun  perbedaan  ini  tidak bermakna secara statistik ( p =0,566 dan p =0,543). Antara kelompok  perlakuan  dan  kontrol  positif,  juga  tidak didapatkan perbedaan bermakna ( p =0,310).
Pada penelitian ini, pemberian ekstrak kelor tidak memberikan perbedaan yang bermakna dengan kontrol negatif maupun kelompok kontrol positif. Penelitian oleh Azevedo  pada  tahun  2019  mengamati  peran  ekstrak Moringa oleifera L . dengan kadar 10% terhadap IL-1 serum pada  penyembuhan  luka.  Pemberian  ekstrak Moringa oleifera  L .  secara  topikal  pada  tikus  tanpa  diabetes menunjukan kadar IL-1 yang lebih rendah dibandingkan kelompok  yang  hanya  diberikan  salin,  demikian  pula pada model diabetes. Hal tersebut sejalan dengan temuan pada studi kali ini, yaitu terdapat kadar IL-1 yang lebih
Kontrol positif Kelompok Perlakuan Moringa oleifera L. Kontrol Negatif 0 K ad ar IL -1 p=0,543 p=0,566 p=0,548 p=0,310 10 20 30 40 50 60
Gambar 1. Grafik Kadar IL-1 pada Kelompok Kontrol Positif (framycetin sulphate) , Perlakuan (Moringa oleifera L.) , dan Kontrol Negatif (tanpa perlakuan).
rendah  pada  pemberian Moringa  oleifera  L ,  meskipun 4,18 tidak  berbeda  signifikan. Perbedaan  ini  mungkin disebabkan oleh perbedaan lama pemberian dan lokasi pengamatan.
Penurunan kadar IL-1 oleh ekstrak Moringa oleifera L .  dapat  diperantarai  oleh  kandungan  kuersetin.  Studi analisis  penggunaan  kuersetin  pada  kultur  sel  HaCaT dari jaringan luka menunjukan penurunan produksi IL-1 setelah  pemberian  kuersetin  dengan  dosis  1μM. Penurunan  tersebut  tampak  signifikan  pada  hari  ke-3 dan  hari  ke-7  serta  kembali  ke  nilai  dasar  sebelum
19 perlukaan  pada  hari  ke-14.   Penggunaan  kuersetin dengan  konsentrasi  20μg/mL  dapat  menghambat produksi IL-1 pada sel keratinosit manusia yang terpapar 20 sinar  ultraviolet  B.   Ekstrak  etanol Moringa  oleifera  L . memiliki  kandungan  kuersetin  sebanyak  0,45–8,33 21,22 mg/100  g  daun. Namun,  pada  studi  ini  belum dilakukan pengukuran kadar kuersetin pada produk jadi yang digunakan.
Ketika  terjadi  perlukaan,  jaringan  yang mengalami  kerusakan  akan  mengekspresikan damaged- associated  molecular  pattern (DAMP).  Partikel  tersebut akan dikenali oleh reseptor pada sel imun innate, seperti sel  NK  dan  sel  dendritik  pada  jaringan  sekitar  untuk mengaktifkan  jalur  inflamasi.  Jalur  respon  yang menangani proses aktivasi tersebut adalah NF-kB, yang dapat  berfungsi  dalam  regulasi  dan  produksi  gen  oleh nukleus,  termasuk  interleukin.  Pengenalan  kerusakan jaringan  akan  menstimulasi  jalur  NF-kB  untuk terfosforilasi  menjadi  subunit  IkB  yang  lebih  lanjut terpecah menjadi protein p50. Protein tersebut kemudian akan berpengaruh pada proses transkripsi pro-IL-1 oleh nukleus. Keberadaan kerusakan mitokondria maupaun
spesies oksigen reaktif (ROS) akan memicu terbentuknya inflamasome yang berperan untuk mematurasi pro-IL-1 menjadi  IL-1  dan  menimbulkan  proses  inflamasi,  yang selanjutnya  akan  berperan  dalam  gangguan
23 penyembuhan luka.  Selain itu, keberadaan ROS dapat secara langsung memfosforilasi IkB untuk memproduksi 24 IL-1.   Hambatan  ROS  oleh  senyawa  flavonoid,  tannin, dan  kuersetin  pada  ekstrak Moringa  oleifera  L . menyebabkan berkurangnya produksi dan aktivasi dari IL-1.
Framycetin sulphate merupakan metode perawatan luka yang dapat digunakan untuk luka superfisial yang bersih.  Metode  tersebut  dapat  merangsang  penutupan luka  dengan  memberikan  lingkungan  yang  lembab. Lingkungan luka yang lembab mendukung reepitelisasi,
25 baik migrasi maupun proliferasi dari sel epitel.  Kondisi lembab menyebabkan peningkatan migrasi dari neutrofil dan  membantu  eliminasi  debris.  Pengamatan  pada jaringan  luka  yang  dirawat  dengan  kondisi  basah  dan lembab  menemukan  peningkatan  jumlah  sel  neutrofil dan  keratinosit  pada  luka  yang  dirawat  pada  kondisi lembab.  Selain  itu,  kondisi  lembab  pada  luka  dapat membuat  retensi  dari  faktor  pertumbuhan.  Kedua  hal tersebut  diduga  berperan  dalam  penurunan  inflamasi dan durasi dari fase inflamasi serta proliferasi pada luka 26–28 yang dirawat pada kondisi lembab. Belum ada studi yang  mengamati  hubungan framycetin  sulphate dengan kadar interleukin secara langsung. Studi ini memberikan gambaran  baru  bahwa  terdapat  potensi  IL-1  dalam proses  penyembuhan  luka  yang  dihasilkan  oleh framycetin sulphate .
Studi  tentang  perbaikan  luka  yang  dirawat dengan framycetin  sulphate menunjukkan  adanya
Medica Hospitalia | Vol. 9, No. 3, November 2022
Kontrol positif Kelompok Perlakuan Moringa oleifera L. Kontrol Negatif 0 K ad ar IL -1 0 p<0,001 p=0,296 p=0,02 p=0,003 20 40 60 80 100 120 140 160
Gambar 2. Grafik Kadar IL-10 pada Kelompok Kontrol Positif, Perlakuan (Moringa oleifera L.) , dan Kontrol Negatif
29 perbaikan luka pada hari ke-10.  Studi lain menunjukkan perubahan  kelembaban  pada  hari  ke-0  perawatan. Namun,  studi  tersebut  melakukan follow-up dengan 30 interval  30  hari.   Belum  ada  studi  yang  mengamati perubahan  kelembaban  pada  luka  akut  yang  dirawat dengan framycetin  sulphate dengan  interval  yang  lebih singkat.  Penggunaan  krim  ekstrak Moringa  oleifera  L . dapat  menurunkan  kehilangan  air  transepidermal  dan meningkatkan  hidrasi  kulit,  namun,  efek  tersebut  baru
31 tampak  pada  penggunaan  lebih  dari  2  minggu.   Hasil yang diperoleh pada penelitian ini telah mengarah pada kondisi  yang  diharapkan,  namun  pengamatan  dengan jangka waktu lebih panjang mungkin diperlukan untuk mendapatkan  efek  ekstrak Moringa  oleifra  L yang  lebih baik.

## Kadar IL-10
Kelompok kontrol positif, perlakuan, dan kontrol negatif memiliki  kadar  IL-10  secara  berturut-turut  adalah 113,95±9,38  pg/mL,  91,75±5,65  pg/mL,  dan  94,93±2,39 pg/mL.  Uji  statistik  menunjukkan  adanya  perbedaan bermakna antara ketiga kelompok ( p <0,001). Kadar IL-10 pada  kelompok  perlakuan  tidak  menunjukkan perbedaan  bermakna  dibandingkan  dengan  kelompok kontrol  negatif  ( p =0,296).  Dalam  hal  ini,  pemberian ekstrak Moringa  oleifera  L .  tidak  berpengaruh  terhadap kadar  IL-10  yang  merupakan  sitokin  anti  inflamasi. Kadar IL-10 pada kelompok kontrol positif lebih rendah secara  bermakna  dibandingkan  kelompok  perlakuan ( p =0,003), maupun kelompok kontrol negatif ( p =0,02).
Kadar  IL-10  pada  kelompok  perlakuan  yang diberikan  ekstrak Moringa  oleifera  L .  tidak  lebih  tinggi dibandingkan  kelompok  kontrol  negatif  sebagaimana diharapkan.  Hasil  tersebut  berbeda  dengan  studi pengamatan profil anti-inflamatori dari Moringa oleifera L . pada  sel  makrofag  murine.  Ekstrak Moringa  oleifera  L . tampak  dapat  meningkatkan  kadar  IL-10  pada  sel makrofag  yang  diinduksi  dengan  lipopolisakarida. Peningkatan  IL-10  bersifat dose-dependent ,  dimana semakin  tinggi  kadar  ekstrak,  peningkatan  kadar  IL-10 32 juga makin tinggi.  Studi lainnya oleh Gondo pada tahun 2021  menemukan  bahwa  ekstrak Moringa  oleifera  L . sebesar  800  mg/kgBB/hari  selama  14  hari  pada  tikus yang  hamil  dengan  diabetes  melitus,  dapat
33 meningkatkan  kadar  IL-10  sebesar  7,211  mIU/mL. Studi ini menggunakan sediaan Moringa oleifera L . topikal dan mengamati pengaruhnya terhadap IL-10. Belum ada studi lain yang mengamati penggunaan sediaan topikal dengan kadar IL-10.
K a n d u n g a n   k u e r s e t i n   d i k e t a h u i   d a p a t mempengaruhi  IL-10  pada  proses  penyembuhan  luka. Pengamatan  pada  tikus  yang  dilakukan  penyayatan menunjukan pemberian kuersetin 0,3% satu kali tiap hari selama  20  hari  memberikan  perbaikan  luka  yang  lebih cepat  disertai  peningkatan  kadar  IL-10.  Peningkatan kadar  IL-10  pada  penggunaan  kuersetin  topikal  terjadi
34 pada  hari  ke-7  paska  inisiasi.   Studi  pada  kultur  sel HaCaT  juga  menunjukan  penurunan  IL-10  paska
35 pemberian  kuersetin  dengan  dosis  1,5μM.   Ekstrak Moringa  oleifera  L .  juga  memiliki  kandungan  katekin, yang  termasuk  dalam  keluarga  tannin,  sebagai
Kontrol positif Kelompok Perlakuan Moringa oleifera L. Kontrol Negatif 0 R as io IL -1 : IL -1 0 p=0,249 p=0,639 p=0,241 p=0,095 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6
Gambar 3. Grafik Rasio IL-1: IL-10 pada Kelompok Kontrol Positif, Perlakuan (Moringa oleifra L.) , dan Kontrol Negatif.
antiinflamasi.  Penggunaan  katekin  dalam  bentuk epigallo-3-cathechin gallate (EGCG) 10μg/mL topikal pada luka  tikus  dengan  diabetes  menunjukan  peningkatan pada  kadar  IL-10  setelah  14  hari.  Aplikasi  pada konsentrasi tersebut setelah fase inflamasi dari perlukaan berlangsung  atau  hari  ke-4  setelah  perlukaan  tetap
36 menunjukkan peningkatan kadar IL-10  pada hari ke-8. Kandungan  EGCG  pada    ekstrak  etanol  daun Moringa oleifera L . berkisar antara 141,86–213,08 mg/100 g berat 37 kering.   Kadar  kuersetin  dan  EGCG  pada  produk  jadi yang  digunakan  pada  studi  ini  belum  dilakukan pengukuran.
Pada keadaan luka, DAMP dikenali oleh toll-like receptor (TLR), yang kemudian akan mengaktivasi jalur TIR-domain-containing adaptor protein (TIRAP) atau yang disebut juga sebagai MyD88 adaptor-like . Protein tersebut a k a n   m e l a k u k a n   f o s f o r i l a s i   p a d a   j a l u r TPL2/MEK/ERK/RSK  dan  berakhir  pada  aktivasi protien  CREB.  Protein  CREB  pada  nukleus  berperan
38 dalam transkripsi dari IL-10.  Aktivasi dari jalur CREB dapat  secara  langsung  dihambat  oleh  ROS,  yang
39 menyebabkan  penurunan  IL-10.   Lebih  lanjut, keberadaan  dari  IL-10  dapat  mensupresi  jalur  NF-kB. Selain itu, jalur NF-kB pada kondisi didapatkan adanya IL-17  dapat  berperan  dalam  perubahan  sel  makrofag menjadi tipe 2 (M2) yang merupakan sel memproduksi 40 IL-10.   Hambatan  pada  ROS  seharusnya  dapat meningkatkan  produksi  dari  IL-10.  Namun,  ekstrak Moringa  oleifera  L .  dapat  menghambat  jalur MEK/ERK/RSK yang berperan dalam penurunan signal 41 produksi dari IL-10.  Sementara itu, produksi IL-10 oleh NF-kB dimungkinkan dipengaruhi oleh keberadaan IL- 17,  yang  pada  studi  ini  belum  dikaji.  Mekanisme pengaruh Moringa oleifera L . terhadap kadar IL-10 perlu diteliti lebih lanjut.
Rasio IL-1: IL-10 Kelompok kontrol positif, perlakuan, dan kontrol negatif memiliki  kadar  IL-10  secara  berturut-turut  adalah 0,27±0,05  pg/mL;  0,37±0,06  pg/mL;  dan  0,44±0,30 pg/mL. Rasio IL-1 : IL-10 pada kelompok perlakuan lebih kecil dibandingkan kontrol negatif, namun tidak berbeda bermakna ( p =0,639). Sementara itu, rasio IL-1: IL-10 pada kelompok  kontrol  positif  lebih  rendah  secara  tidak bermakna  dibandingkan  kontrol  negatif  ( p =0,241) maupun  perlakuan  ( p =0,095).  Analisis  statistik  dengan uji Kruskall-Wallis menunjukan tidak terdapat perbedaan signifikan antara ketiga grup ( p =0,249).
Rasio  IL-1:IL-10  pada  kelompok  perlakuan  yang diberikan  ekstrak Moringa  oleifera  L .  menunjukan  nilai yang  lebih  rendah  dibandingkan  kelompok  kontrol negatif dan lebih tinggi dibandingkan kelompok kontrol positif. Faktor-faktor yang mempengaruhi komponen IL- 1  dan  IL-10  akan  berkaitan  dengan  hasil  temuan  pada parameter rasio. Studi oleh Al-ghurabi mengungkapkan rasio  IL-1:IL-10  yang  semakin  tinggi  menunjukan 42 terjadinya suatu proses patologis yang bersifat kronis.
Penurunan  rasio  pada  kelompok  pemberian  ekstrak Moringa  oleifera  L .  menunjukan  terdapatnya kemungkinan  luka  tidak  berprogress  pada  kondisi kronis.  Hal  tersebut  sejalan  dengan  temuan  pada kelompok kontrol positif.

## SIMPULAN
Pemberian ekstrak Moringa oleifera L . secara topikal tidak mempengaruhi  kadar  IL-1  dan  rasio  IL-1  :  IL-10  di jaringan  kulit  tikus  dengan  luka  insisi.  Kadar  IL-10  di jaringan kulit tidak berbeda dibanding kelompok kontrol negatif,  serta  lebih  rendah  dibanding  kelompok framycetin sulphate .

## DAFTAR PUSTAKA
1. Wigunarti  AH,  Pujiyanto  S,  Suprihadi  A,  Dima  LLRH,  Lolo WA.  Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  kelor  (moringa oleifera l.) terhadap bakteri escherichia coli dan staphylococcus aureus. [Antibacterial activity test of moringa oleifera l. extracts on  eschericia  coli  and  staphylococcus  aureus].  Pharmacon. 2016;5(2):282–9. Indonesian
2. Isnan  W,  Muin  N.  Ragam  manfaat  tanaman  kelor  (moringa oleifera lamk) bagi masyarakat. [Benefits of moringa oleifera l.] Info Tek Eboni. 2017;14(1):63–75. Indonesian
3. Riastiwi  I,  Damayanto  IPGP,  Ridwan,  Handayani  T, Leksonowati A. Moringa oleifera distribution in java and lesser sunda  islands  attributed  with  annual  rainfall.  Biosaintifika  J Biol Biol Educ. 2018;10(3):613–21.
4. Azevedo ÍM, Araújo-Filho I, Teixeira MMA, Moreira MDF de C, Medeiros AC. Wound healing of diabetic rats treated with moringa oleifera extract. Acta Cir Bras. 2018;33(9):799–805.
5. Lambole V, Kumar U. Effect of moringa oleifera lam. on normal and  dexamethasone  suppressed  wound  healing.  Asian  Pac  J Trop Biomed. 2012;2(1 SUPPL.):S219–23.
6. Abdalla AM, Alwasilah HY, Mahjoub RAH, Mohammed HI, Yagoub  M.  Evaluation  of  antimicrobial  activity  of  moringa oleifera leaf extracts against pathogenic bacteria isolated from urinary  tract  infected  patients.  J  Adv  Lab  Res  Biol. 2016;7(2):47–51.
7. Karthivashan G, Kura AU, Arulselvan P, Isa NM, Fakurazi S. The  modulatory  effect  of  moringa  oleifera  leaf  extract  on endogenous antioxidant systems and inflammatory markers in an  acetaminophen-induced  nephrotoxic  mice  model.  PeerJ. 2016;2016(7):1–18.
8. Nilamsari  RV,  Adharini  WI,  Lestari  ND,  Tsuboi  H,  Rifa'i  M. Combination moringa oleifera extract and ifalmin as potential formulation  of  preventing  inflammation  in  diabetic  mice model. J Exp Life Sci. 2020;10(1):37–42.
9. Erwiyani  AR,  Haswan  D,  Agasi  A,  Karminingtyas  SR. Pengaruh  sediaan  gel  dan  krim  ekstrak  etanol  daun  kelor (moringa oleifera lamk) terhadap penurunan luas luka bakar pada tikus. [The effect of moringa oleifera l. ethanol extract gel and cream on rat's burn wound area] Indones J Pharm Naturual Prod. 2020;03(June):41–52. Indonesian
10.  Xiao  X,  Wang  J,  Meng  C,  Liang  W,  Wang  T,  Zhou  B, et  al . Moringa  oleifera  lam  and  its  therapeutic  effects  in  immune disorders. Front Pharmacol. 2020;11(December):1–9.
11.  Dorsett-Martin  WA.  Rat  models  of  skin  wound  healing:  A review. Wound Repair Regen. 2004;12(6):591–9.
12.  National Insitute of Health and care Excellence. Surgical site infections:  prevention  and  treatment  CG74.  Clin  Guidel.

## Medica Hospitalia
| Vol. 9, No. 3, November 2022
2020;(August). 1-75
13.  Bonnar P, Dhar P, Rotstein O, Morris A, Downing M, Pearsall E, et  al .  Surgical  Site  infection  prevention:  a  clinical  practice guideline. Best Practice in Surgery. 2017.1–50
14.  Leaper  DJ,  Edmiston  CE.  World  Health  Organization:  global guidelines for the prevention of surgical site infection. J Hosp Infect. 2017;95(2):135–6.
15.  Gillespie BM, Bull C, Walker R, Lin F, Roberts S, Chaboyer W. Quality  appraisal  of  clinical  guidelines  for  surgical  site infection  prevention:  A  systematic  review.  PLoS  One. 2018;13(9):1–17.
16.  Harvey  G,  Mcinnes  E.  Disinvesting  in  ineffective  and inappropriate  practice:  the  neglected  side  of  evidence-based h e a l t h   c a r e ?   W o r l d v i e w s   E v i d e n c e - B a s e d   N u r s . 2015;12(6):309–12.
17.  Gillespie  BM,  Walker  RM,  McInnes  E,  Moore  Z,  Eskes  AM, O'Connor  T, et  al .  Preoperative  and  postoperative recommendations  to  surgical  wound  care  interventions:  A systematic meta-review of cochrane reviews. Int J Nurs Stud. 2020;102.
18.  Tofiq SA, Azeez HA, Othman HH. Wound healing activities of moringa oleifera leaves extract cultivated in kurdistan region- iraq. Jordan J Biol Sci. 2021;14(4):637–45.
19.  Yin  G,  Wang  Z,  Wang  Z,  Wang  X.  Topical  application  of quercetin improves wound healing in pressure ulcer lesions. Exp Dermatol. 2018;27(7):779–86.
20.  Hatahet T. Comparison of topical quercetin nanoformulations for  skin  protection:  Human  health  and  pathology [dissertation]. [France]. Universtiy Montpellier; 2018. 104 p.
21.  Fatmawati  A  dan  NPA.  Penetapan  kadar  flavonoid  total ekstrak  etanol  daun  kelor  (moringa  oleifera  lam)  dengan metode kromatografi lapis tipis densitometri. [Total flavonoid from ethanol extract of moringa oleifera l. using thin layered chromatography  densitometry].  Proc  Conf  Matern  Healthc Pharm. 2019;1(1):1–7. Indonesian
22.  Djahilape SR, Suprijono A, Wulan AAH. Perbedaan aktivitas antioksidan  ekstrak  etanol  dan  fraksi  etil  asetat  daun  kelor (moringa oleifera lam) serta penetapan kadar flavonoid total. [Difference  antioxidant  activity  of  ethanol  extract  and  ethyl acetate  fraction  extract  of  moringa  oleifera  and  its  flavonoid level]. Media Farm Indones. 2018;11(1):1014–23. Indonesian
23.  Liu  T,  Zhang  L,  Joo  D,  Sun  SC.  NF-κB  signaling  in i n f l a m m a t i o n .   S i g n a l   T r a n s d u c t   T a r g e t   T h e r . 2017;2(March):1–9.
24.  Morgan MJ, Liu ZG. Crosstalk of reactive oxygen species and NF-κB signaling. Cell Res. 2011;21(1):103–15.
25.  Kavitha  KV.  Choice  of  wound  care  in  diabetic  foot  ulcer:  A practical approach. World J Diabetes. 2014;5(4):546.
26.  Junker JPE, Kamel RA, Caterson EJ, Eriksson E. Clinical impact upon wound healing and inflammation in moist, wet, and dry environments. Adv Wound Care. 2013;2(7):348–56.
27.  Ousey K, Cutting KF, Rogers AA, Rippon MG. The importance of  hydration  in  wound  healing:  Reinvigorating  the  clinical perspective. J Wound Care. 2016;25(3):122–30.
28.  Marlene V. Moist Wound Healing : Past and present. Wound care canada. 2010;10(2):12–9.
29.  Mohan M, Jailani M, Amirsyah M. Comparison of effectiveness of  silver  sulfadiazine  and  gentamicin  on  abrasion  wound healing. J Rekonstruksi dan Estet. 2021;4(1):20.
30.  Hasatsri S, Angspatt A, Aramwit P. Randomized clinical trial of the  innovative  bilayered  wound  dressing  made  of  silk  and gelatin:  safety  and  efficacy  tests  using  a  split-thickness  skin graft  model.  Evidence-based  Complement  Altern  Med. 2015;2015:1–8.
31.  Ali A, Akhtar N, Khan MS, Rasool F, Iqbal FM, Khan MT, et al . Moisturizing  effect  of  cream  containing  moringa  oleifera (sohajana)  leaf  extract  by  biophysical  techniques:  In  vivo evaluation. J Med Plants Res. 2013;7(8):386–91.
32.  Fard  M,  Arulselvan  P,  Karthivashan  G,  Adam  S,  Fakurazi  S. Bioactive  extract  from  moringa  oleifera  inhibits  the  pro- inflammatory  mediators  in  lipopolysaccharide  stimulated macrophages. Pharmacogn Mag. 2015;11(44):556.
33.  Gondo HK. Moringa leaf powder (moringa oleifera) decrease of inflammation plasma cytokine of pregnant rats with diabetes mellitus. Open Access Maced J Med Sci. 2021;9:1043–6.
34.  Kant V, Jangir BL, Kumar V, Nigam A, Sharma V. Quercetin accelerated cutaneous wound healing in rats by modulation of different  cytokines  and  growth  factors.  Growth  Factors. 2020;38(2):105–19.
35.  Beken  B,  Serttas  R,  Yazicioglu  M,  Turkekul  K,  Erdogan  S. Quercetin  improves  inflammation,  oxidative  stress,  and impaired wound healing in atopic dermatitis model of human keratinocytes.  Pediatr  Allergy,  Immunol  Pulmonol. 2020;33(2):69–79.
36.  Huang YW, Zhu QQ, Yang XY, Xu HH, Sun B, Wang XJ, et al. Wound healing can be improved by (2)-epigallocatechin gallate through  targeting  Notch  in  streptozotocin-induced  diabetic mice. FASEB J. 2019;33(1):953–64.
37.  Ahmed KS, Jahan IA, Jahan F, Hossain H. Antioxidant activities and  simultaneous  HPLC-DAD  profiling  of  polyphenolic compounds  from  moringa  oleifera  lam.  Leaves  grown  in Bangladesh. Food Res. 2021;5(1):401–8.
38.  Sanin DE, Prendergast CT, Mountford AP. IL-10 production in macrophages  is  regulated  by  a  tlr-driven  creb-mediated mechanism that is linked to genes involved in cell metabolism. J Immunol. 2015;195(3):1218–32.
39.  Özgen N, Guo J, Gertsberg Z, Danilo P, Rosen MR, Steinberg SF. Reactive  oxygen  species  decrease  cAMP  response  element binding  protein  expression  in  cardiomyocytes  via  a  protein kinase D1-dependent mechanism that does not require Ser133 phosphorylation. Mol Pharmacol. 2009;76(4):896–902.
40.  Shen J, Sun X, Pan B, Cao S, Cao J, Che D, et al . IL-17 induces macrophages to M2-like phenotype via NF-κB. Cancer Manag Res. 2018;10:4217–28.
41.  Sodvadiya M, Patel H, Mishra A, Nair S. Emerging insights into anticancer chemopreventive activities of nutraceutical moringa oleifera:  molecular  mechanisms,  signal  transduction  and  in vivo efficacy. Curr Pharmacol Reports. 2020;6(2):38–51.
42.  Al-ghurabi BH. Clinical relevance of il1b/ il-10 and tnf-alpha /il-10 ratio in chronic periodontitis patients of recent scientific. International  Journal  of  Recent  Scientific  Research. 2018;8(September):1–4.