Aeni et al.: Pengaruh Ekstrak Gulma Siam, Saliara, dan Kemuning 193
J.  Agrotek    Tropika.    ISSN  2337-4993 Vol. 4,  No. 3: 193 – 197,  September 2016

## PENGARUH EKSTRAK GULMA SIAM, SALIARA, DAN KEMUNING TERHADAP BUSUK LUNAK NANAS (Erwinia chrysanthemi) SECARA IN VITRO
Nur Aeni, Titik Nur Aeny, Efri & Cipta Ginting
Jurusan Agroteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Lampung Jl. Prof. Soemantri Brodjonegoro, No. 1 Bandar Lampung 35145 E-mail: aeni4982@gmail.com

## ABSTRAK
Salah satu penyakit penting tanaman nanas adalah penyakit busuk lunak nanas yang disebabkan oleh Erwinia chrysanthemi. Pemanfaatan pestisida nabati menjadi alternatif pengendalian penyakit busuk lunak nanas yang ramah lingkungan.  Tujuan penelitian ini untuk mengetahui pengaruh ekstrak gulma siam, saliara dan kemuning terhadap pertumbuhan E. chrysanthemi secara in vitro dan mengetahui pengaruh taraf konsentrasi ekstrak gulma siam, saliara dan kemuning  terhadap pertumbuhan E. chrysanthemi secara in vitro. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Bioteknologi Fakultas Pertanian Universitas Lampung pada  bulan  Maret  sampai bulan  Juli  2016.    Pelaksanaan  penelitian meliputi  penyiapan  isolat E.chrysanthemi,  penyiapan ekstrak gulma siam, saliara dan kemuning, penyiapan media nutrient agar (NA), penyiapan medium berisi E.chrysanthemi, pengujian penghambatan ekstrak gulma siam, saliara dan kemuning terhadap pertumbuhan E.chrysanthemi secara in vitro, pengamatan dan pengumpulan data.  Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan 5 taraf konsentrasi.   Taraf konsentrasi yang digunakan adalah 0%, 20%, 40%, 60% dan 80% dan diulang sebanyak 3 kali.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak gulma siam dan saliara dengan taraf yang diuji terlihat adanya zona penghambatan.  Pada perlakuan ekstrak kemuning dengan taraf konsentrasi 0%-80% tidak tampak adanya zona penghambatan di sekitar cakram.  Semakin tinggi taraf konsentrasi ekstrak gulma siam dan saliara semakin menghambat pertumbuhan E.chrysanthemi secara in vitro.
Kata kunci: Ekstrak, Erwinia chrysanthemi, gulma siam, kemuning, penghambatan, saliara

## PENDAHULUAN
Nanas  (Ananas  comosus  L.  Merr.)  merupakan buah  olahan  ekspor  Indonesia.    Bahkan  indonesia merupakan eksportir nanas kaleng ketiga di dunia setelah Thailand dan Filipina.  Jumlah ekspor nanas Indonesia mencapai 450.000 ton/tahun yang disuplai dari PT Great Giant Peneaplle, Lampung Tengah (Nixon, 2009).
Berdasarkan data Badan Pusat Statistik (2016), produksi  buah  nanas  di  Indonesia  pada  tahun 2013 sebesar 1.837.159 ton atau naik dari tahun sebelumnya (2012) 1.781.899 ton.  Produksi tersebut berasal dari beberapa daerah di Indonesia, salah satunya Provinsi Lampung yang memiliki produksi buah nanas terbesar di Indonesia pada tahun 2013, yaitu  sebesar 722.620 ton.
Dalam upaya meningkatkan produksi nanas untuk proses  memenuhi  kebutuhan  ekspor,  Indonesia  telah melakukan  budidaya  yang  baik  yang  selanjutnya diharapkan akan  menghasilkan produksi yang tinggi. Namun demikian, di dalam usaha peningkatan produksi nanas, masih ditemukan berbagai kendala, salah satunya
adalah serangan organisme pengganggu tanaman (OPT) khususnya patogen atau organisme penyebab penyakit. Salah satu penyakit tanaman nanas yang dilaporkan oleh Prasetyo dan Aeny (2014) adalah penyakit busuk buah (fruit  collapse)  yang  disebabkan  oleh Erwinia chrysanthemi. Penyakit ini sudah banyak dilaporkan di  berbagai  negara  penghasil  nanas  sebagai  penyakit yang berbahaya dan menimbulkan kerugian yang besar (Kaneshiro, dkk., 2008 dan Sahilah, dkk., 2008).
Pada umumnya pengendalian penyakit tanaman yang disebabkan oleh bakteri dilakukan secara kimiawi dengan menggunakan bakterisida, yaitu bahan kimia yang dapat membunuh bakteri.  Namun, penggunaan bahan kimia banyak dikhawatirkan dapat menimbulkan dampak negatif bagi pengguna maupun lingkungan.  Selain itu, harga  pestisida  yang  semakin  mahal  juga  menjadi permasalahan bagi petani. Saat ini, pengendalian yang murah, aman dan ramah lingkungan menjadi prioritas utama.  Salah satunya adalah dengan cara pemanfaatan tumbuhan yang berperan sebagai pestisida nabati yang bersifat ramah lingkungan.  Selain ramah lingkungan karena mudah terurai dan tidak meninggalkan residu,
bahan-bahan  pestisida  nabati  pada  umumnya  mudah ditemukan,  mudah  dibuat,  dan  mudah  diaplikasikan (Suharjo dan Aeny, 2011).
Banyak jenis  tumbuhan yang  dilaporkan  dapat dijadikan sebagai bahan pestisida nabati, atau khususnya bakterisida  nabati.  Beberapa  diantaranya  adalah Chromolaena odorata atau guilma siam (Suharjo dan Aeny, 2011), Lantana camara atau saliara (Dini, dkk., 2011) dan Murraya paniculata atau kemuning (Kartika, 2007).  Ketiga  jenis  tumbuhan  tersebut  dilaporkan mengandung  senyawa  antibakteri.  Gulma  siam mengandung senyawa alkaloid dan flavonoid (Adegbite dan Adesiyan,  2011). Novianti  (2013)  melaporkan senyawa  yang  terkandung dalam  daun  saliara  adalah flavonoid, tanin dan terpenoid. Dosoky, dkk. (2016) melaporkan  bahwa  daun  kemuning  mengandung senyawa  kimia  yang  merupakan  metabolit  sekunder seperti minyak atsiri dan flavonoid.  Senyawa antibakteri tersebut diduga dapat mengendalikan patogen tanaman. Namun, saat ini belum ada laporan penggunaan gulma siam,  saliara  dan  kemuning sebagai  pestisida  nabati dalam mengendalikan penyakit busuk lunak tanaman nanas.    Oleh  karena  itu,    perlu  dilakukan  pengujian ekstrak  gulma  siam,  saliara  dan  kemuning  dalam menghambat pertumbuhan E. chrysanthemi.

## BAHAN  DAN  METODE
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium Bioteknologi Fakultas Pertanian Universitas Lampung. Pelaksanaan penelitian dimulai dari bulan Maret 2016 hingga bulan Juli 2016.
Pada  penelitian  ini  dilakukan  penyiapan  isolat E.chrysanthemi, penyiapan ekstrak gulma siam, saliara dan kemuning, penyiapan media nutrient agar (NA), penyiapan  medium  berisi E.chrysanthemi,  pengujian penghambatan ekstrak gulma siam, saliara dan kemuning terhadap pertumbuhan E.chrysanthemi secara in vitro, pengamatan dan pengumpulan data.
Isolat  bakteri E.  chrysanthemi didapatkan  dari koleksi Laboratorium Bioteknologi Fakultas Pertanian Universitas  Lampung.    Sebelum  digunakan  dalam penelitian ini, isolat bakteri terlebih dahulu diremajakan.
Ekstrak gulma siam diambil dari bagian bunga, saliara dan kemuning diambil dari bagian daun masing- masing  sebanyak  100  gram.    Masing-masing  bagian tanaman dirajang lalu ditambahkan air steril sebanyak 100  ml.    Selanjutnya,  bagian  tanaman  yang  telah direndam, dihaluskan dengan mortar dan disaring dengan kain  sifon  dan  hasil  air  saringan  tersebut  dijadikan sebagai ekstrak murni 100%.  Tingkat konsentrasi yang digunakan yaitu 0%, 20%, 40%, 60% dan 80%.
Media NA disiapkan dengan cara mencampurkan bubuk NA sebanyak 28 g ke dalam 1.000 ml aquades lalu diaduk rata dan kemudian direbus sampai mendidih untuk  melarutkan  bubuk  NA.    Setelah  itu,  tabung erlenmeyer  yang  berisi  media  dimasukkan  ke  dalam plastik tahan panas dan disterilkan pada suhu 121°C dan tekanan 1 atm selama 15 menit.
Penyiapan  media  berisi E.  chrysanthemi dilakukan dengan cara menambahkan dua ose bakteri ke dalam 5 ml air steril.  Selanjutnya campuran tersebut dihomogenkan  dengan  menggunakan  rotamixer. Suspensi tersebut dimasukkan ke dalam 100 ml media NA steril yang masih cair dan digoyang-goyang supaya tercampur rata dengan media.  Selanjutnya campuran media dan suspensi bakteri  tersebut dituang ke cawan dan digunakan sebagai media pengujian secara in vitro Pengujian  penghambatan  ekstrak  gulma  siam, saliara  dan  kemuning  terhadap  pertumbuhan E.chrysanthemi    secara in  vitro  dilakukan  dengan menggunakan  metode  difusi  agar.    Potongan  cakram kertas  saring  berdiameter  0,5  cm  direndam  dalam ekstrak gulma siam, saliara dan kemuning sesuai dengan konsentrasi  perlakuan  selama  2  menit  agar  meresap sampai  jenuh.    Kemudian,  cakram  kertas  yang  telah direndam  tersebut  ditiriskan  lalu  diletakkan  pada permukaan  media NA yang sebelumnya telah dicampur dengan biakan E. chrysanthemi. Selanjutnya, cawan petri diinkubasi selama 24 jam dalam suhu kamar Pengamatan pada ketiga subpercobaan dilakukan terhadap diameter zona penghambatan yang terbentuk di sekeliling cakram kertas saring yang telah direndam pada masing-masing ekstrak  sesuai  perlakuan.  Zona penghambatan ditandai dengan adanya daerah bening di  sekitar  potongan  kertas  saring.  Diameter  zona penghambatan diukur berdasarkan nilai rata dari ukuran diameter  yang  terpendek  dan  terpanjang.  Data  yang didapatkan kemudian diuji secara statistik
Penelitian terdiri dari tiga subpercobaan.  Masing- masing  percobaan  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL),  dengan  5  perlakuan  yang  diulang sebanyak 3 kali.  Kelima perlakuan tersebut adalah taraf konsentrasi 0% (air steril), 20%, 40%, 60%, dan 80%. Data hasil pengamatan dianalisis dengan sidik ragam (Anova) dan dilanjutkan dengan perbandingan polinomial ortogonal

## HASIL  DAN  PEMBAHASAN

## Hasil Penelitian
Dari  hasil  pengamatan  terhadap  pertumbuhan bakteri E.chrysanthemi pada perlakuann ekstrak gulma
siam dan saliara dengan taraf konsentrasi yang diuji 40%, 60% dan 80% terlihat adanya zona bening di sekitar cakram kertas yang berisi ekstrak.  Zona bening tersebut menunjukkan  bahwa  tidak  ada  pertumbuhan  bakteri E.chrysanthemi.    Pada  perlakuan  ekstrak  kemuning tidak  terbentuk  zona  bening  atau  tidak  terjadi penghambatan pertumbuhan bakteri E.chrysanthemi.
Pengaruh ekstrak gulma siam terhadap diameter zona penghambatan  bakteri E.chrysanthemi secara in vitro ditunjukkan  pada  Gambar  1.  Gambar  1 menunjukkan bahwa semakin tinggi taraf konsentrasi yang  digunakan  pada  ekstrak  gulma  siam  semakin menghambat pertumbuhan E.chrysanthemi secara linier dengan  persamaan  Y=0,0622x  -  0,02.    Setiap penambahan  konsentrasi    akan  menambah  efek penghambatan yang besar.
Pengaruh ekstrak saliara terhadap diameter zona penghamabatan  E.  chrysanthemi secara  in  vitro ditunjukkan pada Gambar 2. Gambar 2 menunjukkan bahwa semakin tinggi taraf konsentrasi yang digunakan pada  ekstrak  gulma  saliara  semakin  menghambat pertumbuhan E.chrysanthemi secara  linier  dengan persamaan  Y=0,04x+0,06.    Setiap  penambahan konsentrasi  akan menambah efek penghambatan yang besar. Pada perlakuan ekstrak kemuning dengan taraf konsentrasi  0%-80%  tidak  tampak  adanya  zona penghambatan E.  chrysanthemi secara  in  vitro di sekitar cakram kertas.

## Pembahasan
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak gulma siam mampu menghambat pertumbuhan bakteri
E.  chrysanthemi secara in  vitro. Perlakuan  ekstrak gulma  siam dalam  menghambat  pertumbuhan E.chrysanthemi  diduga  karena  adanya  senyawa antibakteri yang terkandung dalam bunga gulma siam. Lamb  (2005)  melaporkan  bahwa  bunga  gulma  siam mengandung senyawa  flavonoid.   Senyawa flavonoid dilaporkan  dapat  menghambat  sintesis  asam  nukleat, sehingga  menyebabkan  pertumbuhan  sel  bakteri terhambat.    Flavonoid  juga  bekerja  langsung  pada membran sel bakteri yang menyebabkan kebocoran sel.
Hasil uji lanjut polinomial ortogonal pada taraf konsentrasi ekstrak gulma siam  terhadap diameter zona penghambatan  bakteri E.  chrysanthemi  membentuk pola linier.  Pola linier menunjukkan bahwa semakin tinggi tingkat konsentrasi ekstrak gulma siam maka diameter zona penghambatan semakin besar.  Penambahan zona penghambatan pertumbuhan E. chrysanthemi  diduga karena konsentrasi yang tinggi mengandung senyawa antibakteri yang lebih banyak sehingga diameter zona penghambatannya menjadi lebih luas.  Hal ini selaras dengan hasil penelitian Ulpa (2008) yang menunjukkan tingkat konsentrasi ekstrak gulma siam yang tinggi zona penghambatannya semakin luas.
Selain gulma siam dalam penelitian ini ekstrak saliara juga menunjukkan penghambatan pertumbuhan E. chrysanthemi secara in vitro.  Hal ini juga sejalan dengan  penelitian  Novianti  (2013)  yang  menyatakan bahwa  eksrak L.camara dapat  menghambat E.coli secara in vitro. Daun saliara dilaporkan mengandung senyawa aktif seperti  tanin, flavenoid dan terpenoid. Senyawa kimia yang dapat larut dalam air dari ketiga senyawa tersebut adalah tanin (Irianty dan Yenti, 2014)
Gambar 1. Grafik pengaruh taraf konsentrasi ekstrak gulma  siam  terhadap  diameter  zona penghambatan E.  chrysanthemi secara in vitro
Gambar 2.  Grafik pengaruh taraf konsentrasi ekstrak saliara terhadap diameter zona penghambatan E.  chrysanthemi secara in vitro
dan  flavonoid  (Arteel  dan  Sies,1999).  Tanin  dapat berperan sebagai antibakteri karena sifatnya yang dapat mengganggu kerja enzim, bereaksi dengan membran sel, dan  dapat  mengganggu  fungsi  materi  genetik  yang berada  pada  sel  bakteri  (Sulastrianah,  dkk.,  2014). Flavonoid  dapat  menyebabkan  terjadinya  kerusakan permeabilitas dinding sel bakteri (Bulan, dkk., 2004).
Hasil uji lanjut polinomial ortogonal pada taraf konsentrasi  ekstrak  saliara  terhadap  diameter  zona penghambatan  bakteri E.  chrysanthemi  membentuk pola linier.  Pola linier menunjukkan bahwa semakin tinggi tingkat konsentrasi ekstrak saliara maka diameter zona penghambatan  semakin  besar.    Penambahan  zona penghambatan  pertumbuhan E.  chrysanthemi  diduga karena konsentrasi yang tinggi mengandung senyawa antibakteri yang lebih banyak sehingga diameter zona penghambatannya menjadi lebih luas.  Hal ini selaras dengan  hasil  penelitian  Lestari,  dkk. (2013)  yang menunjukkan bahwa semakin tinggi tingkat konsentrasi ekstrak gulma saliara, semakin besar penghambatnnya terhadap pertumbuhan bakteri E. coli. Semakin tinggi konsentrasi  fraksi  ekstrak  saliara,  semakin  besar penghambatan terhadap pertumbuhan Colletotrichum capsici (Sugiyem, 2015).
Senyawa aktif yang terdapat pada daun kemuning yaitu  flavonoid  dan  terpenoid  (Dosoky,  dkk.,  2016). Senyawa  flavonoid  dilaporkan  dapat  larut  dalam  air (Arteel dan Sies, 1999) sedangkan terpenoid umumnya larut dalam pelarut organik dan tidak larut dalam air (Ketaren 1987 dalam Ikawaty, 2015).  Dengan demikian, diantara kedua senyawa aktif tersebut  hanya salah satu senyawa yang  bekerja dalam  menghambat  bakteri E. chrysanthemi secara in vitro yaitu flavonoid.
Perbedaan  kondisi  lingkungan  tempat  tumbuh dapat  menyebabkan perbedaan  jenis  dan jumlah dari metabolit  sekunder yang terkandung dalam tanaman. Dilaporkan bahwa tanaman Beladona stratomium dan Chinchona  ledgeriana yang  tumbuh  pada  intensitas cahaya yang penuh menghasilkan senyawa alkaloid yang lebih tinggi dibandingkan dengan yang tumbuh dibawah naungan (Sulandjari).  Pada penelitian ini daun kemuning di ambil dari tempat yang tumbuh di bawah naungan. Dengan  demikian  diduga  jumlah  senyawa  flavonoid yang  tedapat  pada  tanaman  kemuning  lebih  sedikit dibandingkan dengan gulma siam dan saliara, sehingga tanaman kemuning tidak dapat menekan pertumbuhan bakteri E.  chrysanthemi secara in  vitro

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa ekstrak gulma siam dan saliara dapat
menghambat  pertumbuhan E.chrysanthemi  secara in vitro,  sedangkan  ekstrak  kemuning tidak  dapat menghambat. Semakin tinggi tingkat konsentrasi ekstrak gulma  siam  dan  saliara  semakin  menghambat pertumbuhan E.chrysanthemi secara in  vitro.

## DAFTAR  PUSTAKA
Adegbite, A.A dan S.O. Adesiyan. 2011. Root extracts of  plants  to  control  root-knot  nematode  on edible soybean.  Obafemi Awolowo  University. Nigeria. World Journal of Agricultural Sciences 1(1): 18-21.
Arteel,  G.E.  dan  H.  Sies.  1999. Protection  against peroxynitrite  by  cocoa  polyphenol  oligomers. FEBS Letters. 462: 167-170.
BPS (Badan Pusat Statistika). 2016. Produksi tanaman buah-buahan.  Available  online  at http:// www.bps.go.id/site/pilihdata, [12 April 2016].
Bulan, R., S. Soedigdo., S. Achmad, dan Buchari. 2004.
Lantaden  X R glikosida  dari  daun  Lantana camara  L. Jurnal  Matematika  dan  Sains  9(1): 209-213.
Dini, I., Muharram dan S. Faika. 2011. Potensi ekstrak tumbuhan tembelekan (Lantana camara Linn.) dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus  dan Escherichia  coli. Bionature . 12(1): 21–25.
Dosoky, N.S., P. Satyal., T.P. Gautam., dan W.N. Setzer. 2016. Composition and  biological activities  of Murraya paniculata (L.) jack essential oil from Nepal. Articles Medicines. 3(7): 1-10.
Ikawaty, A.L.  2015. Ekstraksi  minyak  atsiri  bunga krisan  (Chrysanthemum  cinerariaefolium) dengan  pelarut  etanol  dan  n-heksana. Tugas Akhir. Universitas Negeri Semarang. Semarang. 1-23.
Irianty,  S.I,  dan  S.R.  Yenti.  2014.  Pengaruh perbandingan  pelarut  etanol-air  terhadap kadar  tanin  pada  sokletasi  daun  gambir (Uncaria gambir Roxb). SAGU. 13(1): 1-7.
Kaneshiro, W.S., M. Burger., B.G. Vine., A.S. De Silva., dan A.M. Alvarez.  2008. Characterization  of Erwinia  chrysanthemi  from  a  bacterial  heart rot  of  pineapple  outbreak  in  Hawaii.  Plant Disease 92(10): 1444-1450.
Kartika,  D.  2007.  Profil  kromatogram  dan  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  daun  kemuning (Murraya  paniculata  (L.)  Jack.) terhadap bakteri Escherichia coli in vitro. Artikel Karya Tulis Ilmiah.  Fakultas Kedokteran. Universitas Diponegoro.
Lamb, A.J. 2005. Antimicrobial activity of flavonoids.
International  Journal  of  Antimicrobial  Agents
26: 343-356.
Lestari, A., M. Jamhari., dan I.N. Kundera. 2013. Daya hambat  ekstrak  daun  tembelek  (Lantana camara  l.) terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli. e-Jipbiol.  1:  42-49.

## Nixon,  M.T.  2009. Buku  Pintar  Budidaya  Tanaman
Buah  Unggul  Indonesia.  PT  Agromedia Pustaka.  Jakarta.
Novianti.  2013. Aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol daun  tembelekan (Lantana  camara  L.) terhadap Saphylococcus aureus dan Escherichia  coli  dengan  metode  mikrodilusi clsim07-A9. Jurnal  Ilmiah  Farmako  Bahari 4(2): 1-11.
Prasetyo,  J.,  dan  T.N. Aeny.  2014. Pineapple  fruit collapse  newly  emerging  disease  of  pineapple in  Lampung,  Indonesia.  Jurnal  Hama  dan Penyakit  Tumbuhan  Tropika. 14(1):  96-99.
Sahilah, A.M., L. Rozeita., M.S.U. Kalsum., dan R. Son. 2008. Typing of Erwinia chrysanthemi isolated from  josapine  pineapple  in  malaysia  using
antimicrobial  susceptibility,  plasmid  profiles, ERIC-PCR  and  RFLP  analysis. International Food  Research  Journal  15(3):  273-280.
Sugiyem,W.  2015. Pengaruh  tingkat  konsentrasi ekstrak Tagetes erecta L. dan Lantana camara L. terhadap  pertumbuhan  dan  sporulasi Colletotrichum capsici  secara in  vitro. Skripsi.Universitas  Lampung.
Suharjo, R., dan T.N. Aeny.  2011. Eksplorasi potensi gulma  siam  (Chromolaena  odorata) sebagai biofungisida  pengendali Phytophthora palmivora yang  diisolasi  dari  buah  kakao. Jurnal Hama dan Penyakit Tumbuhan Tropika 11(2): 201-209.
Sulandjari. Tanaman obat rauvolfia serpentina. Available online  at  http://lpp.uns.ac.id/bukuteks/images/ flippingbook/Tanaman%2520Obat%2520 Rauvolfia%2520Serpentina, [7 September 2016].
Sulastrianah,  Imran  dan  E.S.  Fitria.  2014. Uji  daya hambat ekstrak daun sirsak (Annona muricata L.) dan  daun  sirih (Piper  betle L.) terhadap pertumbuhan  bakteri  Escherichia  coli.  Bagian Farmakologi FK UHO.
Ulpa,  M.  2008. Studi  habitat  dan  pengujian  ekstrak gulma  siam  (Chromolaena  odorata) dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  penyebab penyakit  layu  pisang  (Ralstonia  sp.)  secara in vitro. Skripsi.  Fakultas  Pertanian.  Universitas Lampung.