UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA EKSTRAK DAN FRAKSI ALGA Turbinaria ornata (Turner) J.Argadh DARI PERAIRAN DESA TUMBAK, MINAHASA TENGGARA TERHADAP Staphylococcus aureus, Escherichia coli
dan Candida albicans
Vaneza Christine Lawani 1) , Herny E.I Simbala 1) , Henki Rotinsulu 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Algae are chromista that live in the ocean, some are stranded on the beach, attached to rocks with  a  kind  of  root  adhesives.  Algae  produce  many  compounds,  which  can  be  used  as antimicrobial  and  anticancer.  This  study  aims  to  determine  the  antimicrobial  activity  of  the extracts and fractions of Turbinaria ornata algae collected from the of Ponteng Island waters, Tumbak, Southeast  Minahasa  against  Staphylococcus aureus,  Escherichia coli and Candida albicans.  Turbinaria  ornata  algae  were  extracted  using  maceration  method  with  96%  of ethanol  solvent  and  fractionation  using  a  partition  method  with  n-hexane,  chloroform  and methanol as well as antimicrobial testing using the Kirby Bauer diffusion method. The results of this study indicate that ethanol extract of algae Turbinaria ornata has moderate category of  antimicrobial  activity  in  methanol,  n-hexane  and  chloroform  fractions  with  an  average inhibition of 7.33 mm against Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Candida albicans.
Keywords : Antimicrobials, Extraction, Fractionation, Turbinaria ornata

## ABSTRAK
Alga merupakan chromista yang hidup lautan ada yang terdampar di pinggir pantai, melekat pada  batu-batuan  dengan  alat  pelekat  semacam  akar.  Alga  banyak  menghasilkan  senyawa yang  dapat  digunakan  sebagai  antimikroba  dan  antikanker,  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  aktivitas  antimikroba  ekstrak  dan  fraksi  alga Turbinaria  ornata yang  dikoleksi dari  perairan  pulau  Ponteng,  desa  Tumbak,  Minahasa  Tenggara  terhadap Staphylococcus aureus,  Escherichia  coli dan Candida  albicans .  Alga Turbinaria  ornata diekstraksi menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%  dan  fraksinasi  menggunakan metode  partisi  dengan  pelarut  n-heksan,  kloroform  dan  metanol  serta  pengujian  antimikroba menggunakan metode difusi agar Kirby Bauer . Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol Alga Turbinaria ornata memiliki aktivitas antimikroba   kategori sedang pada fraksi  metanol,  n-heksan  dan  kloroform  dengan  daya  hambat  rata-rata  7,33  mm  terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli dan Candida albicans .
Kata kunci : Antimikroba, Ekstraksi, Fraksinasi, Turbinaria ornata

## PENDAHULUAN
Alga  yang  hidup  di  perairan Indonesia sangat  beragam,  terdapat  sekitar 782  jenis  yang  terdiri  dari  196  jenis  hijau, 134  jenis  coklat,  dan  452  jenis  merah. Kelimpahan  alga  dapat  dijadikan  peluang yang baik jika diketahui cara memanfaatkannya ke bidang seperti industri  pangan  dan  industri non -pangan (Anggadiredja et  al .,  2006).  Alga  coklat menghasilkan  alginat  (alginofit)  dengan penyebaran  yang  terbanyak  di  perairan Indonesia  adalah  spesies  dari  genus Sargassum dan Turbinaria (Yunizal, 2004). Turbinaria ornata adalah salah satu jenis  alga  coklat  yang  menghasilkan alginat (Rasyid, 2000).
Infeksi  oleh  mikroba  patogen  terus
mengalami peningkatan seiring munculnya kasus  mikroba  patogen  yang  resisten terhadap antibiotik, misalnya Staphylococcus  aureus , Escherichia  coli , Klebsiella sp ., dan Morganella sp., banyak ditemukan  resisten  terhadap  antibiotik golongan  β-laktam  seperti    penisilin (Mardiastuti et al ., 2007). Kondisi tersebut
memacu pencarian sumber bahan antimikroba  baru  yang  dapat  menghambat dan  membunuh  bakteri-bakteri  patogen (Tinambunan et al ., 2012).
Aktivitas antimikroba senyawa protein  dari  alga  coklat  juga  telah  diteliti. Arifuddin et al. (2001), melaporkan bahwa fraksi  protein  40-60%  dari  alga  coklat Sargassum  echinocarpum J.G  Agardh  dan Turbinaria decurrens bory efektif menghambat
pertumbuhan bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus dengan diameter hambat > 14 mm.
Akhir-akhir  ini  para  peneliti  bahan alam  cenderung  untuk  menemukan  bahan
obat  dari  laut  yang  dapat  digunakan  pada berbagai penyakit seperti kanker, peradangan,  malaria  dan  infeksi  oleh bakteri  dan  jamur.  Hal  ini  terjadi  karena adanya masalah kesehatan dengan mortalitas  yang  tinggi  di  negara-negara berkembang  dan  perkembangan  resistensi mikroorganisme patogen terhadap beberapa obat (Rajasekar et al ., 2012)..

## METODOLOGI PENELITIAN Bentuk Penelitian
Penelitian  yang  dilakukan  bersifat eksperimental  laboratorium  yang    menguji aktivitas  antimikroba  ekstrak  dan  fraksi alga Turbinaria ornata

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  Maret  2019  –  September  2019  di Laboratorium  Penelitian  Farmasi  Lanjut Program Studi Farmasi Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Sam Ratulangi Manado.

## Alat dan Bahan

## a. Alat
Alat yang digunakan pada penelitian ini ialah scuba diving (Peralatan Selam),  ziplok,  gunting,  sarung  tangan, botol  air  kemasan  600  mL,  pisau,  telenan, corong  pisah,  corong  gelas,  wadah  kaca, erlenmeyer,  gelas  ukur  (Pyrex),  gelas kimia  (Pyrex),  tabung  reaksi,  rak  tabung reaksi, micro tubes , cawan petri, timbangan  analitik, vortex (Benchmark), spatula,  oven,  pinset,  batang  pengaduk, pembakar  spritus,  pipet  tetes,  jarum  ose, vial,  lemari  pendingin, incubator incucell (N-Biotek), laminary  air  flow (Clean Bench), autoklaf (autoklaf KT-30 S ),
mikropipet,  jangka  sorong, digital  caliper , jas laboratorium dan kamera

## b. Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  ialah  Alga Turbinaria ornata , Staphylococcus
aureus,
Escherichia coli , Candida albicans, aquades,  etanol,  n-heksan,  kloroform, metanol,  pepton,  ekstrak  daging  ( meat extract ),  natrium  klorida, nutrient  agar , kloramfenikol  ( paper  disc ),  kertas  label, spidol  permanen,  kertas  saring,  kapas, aluminium foil dan tissue .

## Prosedur Penelitian

## Ekstraksi
Pembuatan  ekstrak  dilakukan dengan  metode  maserasi  yaitu  sebanyak 199  gram  sampel  dimasukkan  ke  dalam gelas  beker  lalu  direndam  dalam  pelarut etanol  96%,  sampai  sampel  terendam semuanya,  dikocok-kocok    lalu  dibiarkan selama  1x24  jam,  sampel  yang  sudah direndam kemudian disaring menggunakan corong  dan  kertas  saring.  Menghasilkan filtrat  1  dan  debris  1.  Debris  1  direndam kembali  dengan  etanol  96%  sampai terendam semuanya, debris dikocok-kocok dan dimaserasi  selama 1x24 jam. Diulangi cara  yang  sama  sampai  diperoleh  3  filtrat dan 3
debris.
Filtrat
dievaporasi menggunakan  oven  dengan  suhu  40 hingga  diperoleh  ekstrak  kasar  alga Turbinaria  ornata dan  ditimbang  dengan timbangan  analitik.  Ekstrak  kasar  alga Turbinaria  ornata yang  dihasilkan  dari proses ekstraksi sebanyak 7,9 gram.

## Fraksinasi
Ekstrak  kasar  alga Turbinaria ornata sebanyak  4,00  gram  dimasukkan dalam  Erlenmeyer,  dilarutkan  dengan campuran  metanol  :  air  (MeOH  :  H 2 O)
(80:20)  sebanyak  100  mL.  Setelah  sampel larut, dimasukkan dalam corong pisah lalu ditambahkan  pelarut  n-heksan  dengan jumlah  yang  sama,  setelah  itu  dikocok berulangkali  sampai  homogen.  Dibiarkan sampai terbentuk dua lapisan metanol : air (MeOH  :  H 2 O)  dan  n-heksan.  Masing- masing  lapisan  ditampung  dalam  wadah yang berbeda. Lapisan n-heksan dievaporasi  menggunakan  oven hingga kering,  lalu  ditimbang  dengan  timbangan analitik  dan  diperoleh  fraksi  n-heksan 0,0072  gram.  Lapisan  MeOH  :  H 2 O ditambahkan  akuades  sebanyak  100  mL dipartisi  dengan  pelarut  kloroform  dengan perbandingan  1:1  v/v  dalam  corong  pisah, lalu dikocok berulangkali sampai homogen. Dibiarkan sampai terbentuk  dua lapisan yaitu lapisan MeOH dan kloroform.  Masing  –  masing  lapisan ditampung  dalam  wadah  yang  berbeda. Lapisan kloroform dievaporasi menggunakan  oven  hingga  kering  lalu ditimbang  dan  diperoleh  fraksi  kloroform 0,0303  g.  Lapisan  MeOH  yang  ditampung pada wadah yang lain dievaporasi menggunakan  oven  hingga  kering  lalu ditimbang  berat  sampel,  dan  diperoleh fraksi MeOH 0,1869 g.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  uji  daya  hambat  ini  disterilkan terlebih  dahulu.  Alat  –  alat  gelas disterilkan  menggunakan  autoklaf  pada suhu 121 selama 15 menit.

## Pembuatan Media Cair B1
Ditimbang  Pepton  0,5  g,  ekstrak daging  0,3  g  ( meat  extract ),  Natrium klorida  0,3  g  dilarutkan  dalam  akuades sebanyak 100
mL menggunakan Erlenmeyer,  dikocok  sampai  homogen. Media  yang  telah  homogen  kemudian disterilkan  dengan  menggunakan  autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit. Dipipet 1  mL  media  cair  B1,  kemudian  masukkan dalam  tabung  reaksi  dan  tutup  dengan aluminium  foil .    Media  cair  B1  siap digunakan  sebagai  media  kultur  mikroba (Ortez, 2005).

## Kultur Mikroba
Masing  –  masing  mikroba  yang
sudah dikultur ( Escherichia
coli , Staphylococcus aureus dan Candida albicans ) ditambahkan media cair B1 yang disiapkan  sebelumnya  sebanyak  100  µL kedalam  tabung  reaksi  yang  berbeda  – beda.  Masing  –  masing  tabung  reaksi ditutup  dengan  aluminium  foil  dan dimasukkan  ke  dalam  inkubator  selama 1x24 jam dengan suhu 37 o C (Ortez, 2005).

## Pembuatan Kontrol (Positif dan Negatif)
Kontrol  postif  yang  digunakan yaitu  Kloramfenikol Paper  Disc dan Kontrol  negatif  yang  digunakan  dalam penelitian ini yaitu menggunakan  metanol, dengan cara membuat larutan stok metanol dengan  mengambil  sebanyak  200  μl metanol  kemudian  ditotolkan  pada paper disc.

## Pembuatan Larutan Uji
Sebanyak  1  mg  ekstrak  kasar  alga Turbinaria  ornata dilarutkan  dalam  200 μL  metanol  sehingga  menghasilkan konsentrasi  larutan  uji  sebesar  250  μg/50
μL  (Ortez,  2005).  Perlakuan  yang  sama dilakuakan  untuk  fraksi  metanol,  fraksi kloroform dan fraksi n-heksan.

## Pembuatan Media Agar B1
Pepton  0,5  g,  ekstrak  daging  ( meat extract )  0,3  g,  natrium  klorida  0,3  g, nutrient  agar 1,5  g  dan  dilarutkan  dalam akuades  sebanyak  100  mL  menggunakan Erlenmeyer,  dikocok  sampai  homogen. Media  yang  telah  homogen  kemudian disterilkan  dengan  menggunakan  autoklaf pada  suhu  121 o C  selama  15  menit.  Media agar B1 siap digunakan  untuk  uji aktivitas antimikroba (Ortez, 2005).

## Pengujian Aktivitas Antimikroba
Metode  yang  digunakan  yaitu Metode  Difusi  ( Disc  Diffusion  Kirby  and Bauer ).    Pengujian  aktivitas  antimikroba ini  cakram  ( paper  disc )  yang  digunakan berukuran 6 mm dengan daya serap 50 µL tiap cakram. Diinokulasi suspensi mikroba dalam  media  dan  dihomogenkan.  Media yang sudah diinokulasi mikroba dituangkan  dalam  cawan  petri  sampai media  memadat,  kemudian  cawan  petri diberi  label  Sampel  yang  telah  ditentukan kosentrasinya  (250  µg/50  µL)  ditotolkan pada masing-masing cakram dengan menggunakan mikropipet, kemudian diletakkan  kertas  cakram  yang  sudah ditotol  ke  dalam  cawan  petri  dan diinkubasi 1 x 24 jam (Ortez, 2005).

## Pengamatan  dan  Pengukuran  Zona Hambat
Pengamatan dilakukan setelah 1x24 jam  masa  inkubasi.  Daerah  pada  sekitaran cakram  menunjukkan  kepekaan  mikroba terhadap antibiotik atau bahan antimikroba yang  digunakan  sebagai  bahan  uji  yang
dinyatakan  dengan  diameter  zona  hambat atau  zona  bening.  Diameter  zona  hambat diukur  dalam  satuan  millimeter  (mm) menggunakan Digital  Caliper dengan  cara diukur diameter total  zona bening cakram. Kemudian  diameter  zona  hambat  tersebut dikategorikan kekuatan daya anti bakterinya berdasarkan penggolongan Davis  dan  Stout  (1971). Klasifikasi  zona Hambat  menurut  Davis  dan  Stout  (1971) dapat lihat pada Tabel 1.
Tabel  1.  Klasifikasi  Zona  Hambat
menurut Davis dan Stout (1971).

## Teknik Pengolahan dan Analisis Data
Teknik  pengolahan  data  dilakukan dengan  model  penyajian  dalam  bentuk tabel  dan  gambar,  grafik  dan  dianalisis secara  deskriptif.  Aktivitas  antibakteri diukur  menggunakan  penggaris  skala millimeter  berdasarkan  zona  hambat  yang terbentuk  dan  dikurangi  dengan  diameter kertas  cakram,  kemudian  di  rata-ratakan dari tiga kali pengujian.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
a. Hasil
Keterangan : EKE : Ekstrak Kasar Etanol FK : Fraksi Kloroform FM : Fraksi Metanol FN
: Fraksi n-Heksan
Tabel 2.  Hasil pengukuran diameter zona hambat ekstrak dan fraksi Alga ( Turbinaria ornata ) terhadap S. aureus, E. coli dan C. albicans

## b. Pembahasan
Ekstraksi merupakan proses
penarikan  komponen  –  komponen  yang diinginkan  dari  sampel  (Khopkar,  2003).
Sampel  alga Turbinaria  ornata dipotong kecil – kecil bertujuan untuk memudahkan senyawa aktif yang terkandung dalam alga Turbinaria  ornata untuk  tertarik  kedalam pelarut  dan  untuk  memperluas  ukuran permukaan  sampel,  karena  semakin  kecil ukuran  sampel  maka  luas  permukaan sampel  akan  meningkatkan  laju  ektraksi, yang  berarti  semakin  banyak  senyawa yang  tertarik  ke  dalam  pelarut  (Ghozali, 1996).  Sampel  alga Turbinaria  ornata selanjutnya  diekstraksi  dengan  metode maserasi. Proses maserasi dilakukan dengan  cara  merendam  sampel  alga Turbinaria  ornata selama  1x24  jam sebanyak  3  kali  dengan  menggunakan pelarut etanol 96%. Menurut Dean (2009), pemilihan metode maserasi  karena metode maserasi  dapat  mengekstraksi  senyawa aktif  dengan  baik  melalui  perendaman. Cairan penyari akan menembus dinding sel dan  masuk  ke  dalam  rongga  sel  yang Diameter Zona Hambat Respon Hambat Pertumbuhan > 20 mm Sangat kuat 11-20 mm Kuat 5-10 mm Sedang <5 mm Kurang
mengandung  zat  aktif yang  akan  larut,
karena adanya perbedaan kosentrasi larutan zat aktif di dalam sel dan di luar sel maka  larutan  terpekat  didesak  keluar. Proses  ini berulang  sehingga  terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan di dalam  dan  diluar  sel  (Dea, et  al., 2014). Etanol  adalah pelarut  terbaik  yang bersifat polar untuk ekstraksi senyawa fenolik pada hampir  semua  spesies  rumput  laut  jika dibandingkan  dengan  dengan  pelarut lainnya  (Hidayah et  al, 2016).  Hasil ekstrak  Alga Turbinaria  ornata diuapkan menggunakan  oven  dengan  suhu  37 o C, Menurut Vogel (1978),  penguapan ekstrak ini bertujuan untuk  menghilangkan pelarut dan air yang tersisa dalam ekstrak.
Hasil ekstrak kasar Alga Turbinaria  ornata yang  diperoleh  di lanjutkan  ke  tahap  fraksinasi.  Fraksinasi merupakan  proses  pemisahan  antara  zat cair  dengan  zat  cair  yang  dilakukan berdasarkan tingkat kepolarannya.
Senyawa  yang  memiliki  sifat  non  polar akan  larut  dalam  pelarut  non  polar, senyawa  yang  memiliki  sifat  semi  polar akan  larut  dalam  pelarut  semi  polar,  dan senyawa  yang  memiliki  sifat  polar  akan larut dalam palrut polar  (Harborne, 1987). Tujuan  penggunaan  pelarut  n-heksan, kloroform  dan  metanol  adalah  untuk memisahkan  senyawa  –  senyawa  yang terdapat  pada  ekstrak Turbinaria  ornata sesuai dengan sifat kepolarannya, sehingga komponennya  lebih  sederhana.  Dimana pelarut n-heksan digunakan untuk menarik senyawa  yang  bersifat  non  polar,  pelarut kloroform digunakan untuk menarik senyawa yang bersifat semi polar sedangkan  pelarut  metanol  digunakan untuk menarik senyawa yang bersifat polar (Defran, et  al., 2015). Berdasarkan tingkat
kepolaran  akan  terbentuk  dua  lapisan, pelarut  dengan  massa  jenis  lebih  tinggi berada di lapisan bawah sedangkan pelarut dengan  massa  jenis  lebih  kecil  berada  di lapisan  atas.  Fraksi  yang  diperoleh diuapkan menggunakan oven dan digunakan  untuk  uji  aktivitas  antimikroba. Sampel  ekstrak  etanol  yang  dihasilkan berwarna  coklat  dengan  massa  jenis  yang diperoleh  yaitu  7,9  gr  dari  hasil  maserasi sebanyak  199  gr  dengan  nilai  rendemen yaitu  0,039%.  Kemudian  ekstrak  etanol sebanyak 4,00 g difraksinasi menggunakan pelarut  n-heksan,  kloroform  dan  metanol. Ekstrak  kasar  etanol  alga Turbinaria ornata di  fraksinasi  dengan  metanol  air kemudian  dipartisi  dengan  pelarut  n  – heksan  menghasilkan  dua  lapisan,  yaitu lapisan  n  –  heksan  dan  lapisan  metanol. Warna  yang  dihasilkan  dari  filtrat  fraksi  n – heksan yaitu coklat terang dengan massa ekstrak  yang  diperoleh  0,00272  g  dari massa  awal  sampel  4,00  g  dengan  nilai rendemen yang diperoleh 1,088%. Lapisan metanol  dipartisi  kembali  dengan  pelarut kloroform hingga menghasilkan dua lapisan yaitu lapisan kloroform dan lapisan metanol. Warna dari filtrat kloroform yaitu hitam  dengan  massa  ekstrak  0,0303  g  dari massa  awal  sampel  4,00  g  dengan  nilai rendemen  12,12%.  Dan  untuk  lapisan metanol,  filtrat  yang  dihasilkan  berwarna kuning  kecoklatan  dengan  massa  ekstrak yang  diperoleh  yaitu  0,1869  g  dari  massa awal sampel 4,00 g dengan nilai rendemen 74,76%  Nilai  rendemen  yang  dihasilkan berbeda  hal  ini  karena  besarnya  rendemen ekstrak  dipengaruhi  oleh  sifat  kepolaran dari  pelarut,  suhu,  waktu  ekstraksi  serta tingkat  kepolaran  dari  jumlah  bahan  yang diekstrak  yang  memiliki  polaritas  yang sama  (Yim et  al, 2009  ;  Gazali, et  al,
2018). Hasil menunjukkan bahwa rendemen  yang  dihasilkan  fraksi  etanol lebih  tinggi  yaitu  1660%  yang  berarti pelarut  etanol  mampu  mengekstrak  lebih banyak  senyawa  –  senyawa  aktif  dari sampel.  Hal  ini  menunjukan  adanya aktivitas antimikroba yang terbentuk,  yang berarti ada kandungan senyawa antimikroba  yang  bersifat  polar  dan  non polar  pada  sampel  uji  Alga Turbinaria ornata dan menunjukkan bahwa komponen senyawa  polar Turbinaria  ornata lebih banyak.  Etanol  merupakan  pelarut  yang memiliki sifat polar (Harborne,1987). Uji aktivitas antimikroba dari alga Turbinaria ornata terhadap bakteri Escherichia  coli mewakili  bakteri  Gram negatif,  bakteri Staphylococcus  aureus mewakili bakteri Gram positif dan Candida  albicans yang  mewakili  Jamur menggunakan  Metode  difusi  agar  (difusi Kirby-Bauer  yang  telah  dimodifikasi). Pertumbuhan  bakteri  setelah  inkubasi selama 1x24 jam terlihat menjauhi cakram, hal  ini  berarti  terjadi  pembentukan  zona hambat  di  sekitar  cakram  yang  telah ditotolkan  sampel  uji  Alga Turbinaria ornata dan pada cakram antibiotik Kloramfenikol. Pada cakram kontrol negatif  tidak  terlihat  adanya  zona  hambat. Zona  hambat  yang  terbentuk  diukur diameternya  dengan  menggunakan  jangka sorong  dengan  satuan  milimeter  (mm). Pengukuran dilakukan dengan cara mengukur diameter dari ujung yang satu ke ujung  yang  lain  melalui  tengah-tengah cakram.  Aktivitas  yang  terbentuk  terlihat dari  adanya  zona  hambat  di  sekitaran cakram  dengan  ukuran  cakram  ( paper disc ) 6  mm,  membuktikan  bahwa  ekstrak dan  fraksi  alga Turbinaria  ornata yang diujikan  menunjukkan  kepekaan  terhadap
masing  –  masing  mikroba  dan  antibiotik yang  digunakan  sebagai  kontrol  positif. Berdasarkan hasil pengamatan yang dilakukan terhadap mikroba
Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli dan Candida  albicans masing-masing sebanyak tiga kali pengulangan memperlihatkan adanya zona hambat yang terbentuk  disekitar  disk/cakram.  Diameter zona  hambat  ekstrak  dan  fraksi  alga Turbinaria  ornata terhadap Escherichia coli yang  paling  besar  dihasilkan  oleh fraksi  metanol  yaitu  sebesar  22,00  mm dengan  nilai  rata-rata  7,33  mm.  Diameter zona  hambat  ekstrak  dan  fraksi  alga Turbinaria ornata terhadap Staphylococcus  aureus yang  paling  besar dihasilkan  oleh  fraksi  metanol  yaitu sebesar  22,00  mm  dengan  nilai  rata-rata 7,33  mm.  Diameter  zona  hambat  ekstrak dan fraksi alga Turbinaria ornata terhadap jamur Candida  albicans yang paling besar dihasilkan  oleh  fraksi  Metanol  22,00  mm dengan  nilai  rata-rata  7,33  mm.  Hasil pengukuran  diameter  zona  hambat  dapat dilihat pada Tabel 3.
Berdasarkan hasil yang diperoleh menyatakan  bahwa  ekstrak  dan  fraksi Turbinaria ornata memiliki  diameter zona hambat  sedang  sebagai  antimikroba,  hasil
Tabel  3.  Rendemen  ekstrak  dan  fraksi  Alga

## Turbinaria ornate
No.  Sampel Randemen (%) Warna Sampel 1. EKE 1600 Coklat 2. FN 1,088 Coklat Terang 3. FK 12,12 Hitam 4. FM 74,76 Kuning kecoklatan
pengukuran diameter zona hambat digolongkan  berdasarkan  klasifikasi  zona hambat  menurut  Davis  dan  Stout  yang dapat dilihat pada Tabel 1, yang membuktikan  bahwa  ekstrak  dan  fraksi alga Turbinaria  ornata yang  diujikan menunjukkan kepekaan terhadap masing  – masing  mikroba  dan  antibiotik  yang digunakan  sebagai  kontrol  positif.  Kontrol positif memperlihatkan aktivitas antimikroba  yang  paling  besar  terhadap Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli dan Candida albicans . Kontrol positif yang memiliki diameter daya hambat lebih besar yaitu  24,00  mm  pada Escherichia  coli, sedangkan  pada Staphylococcus  aureus
23,00  mm  dan  pada Candida  albicans 20,00  mm  .  Sedangkan  pada  kontrol negatif  tidak  menunjukan  terbentuknya zona  hambat.  Hal  tersebut  menandakan bahwa  tidak  ada  pengaruh  kontrol  negatif terhadap  antimikroba  yang  diuji.  Kontrol negatif  yang  digunakan  yaitu  metanol. Aktivitas  antimikroba  terbentuk  disekitar disk/cakram  dipengaruhi  oleh  aktivitas senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak dan fraksi alga Turbinaria ornata .
Semakin besar zona hambat yang terbentuk  maka  semakin  besar  daya hambat  sampel  alga Turbinaria  ornata terhadap pertumbuhan mikroba.

## KESIMPULAN
Hasil penelitian menunjukkan
bahwa adanya aktivitas antimikroba ekstrak  kasar  dan  fraksi  alga  coklat Turbinaria
ornata yang mampu
menghambat pertumbuhan mikroba
Staphylococcus aureus dengan daya hambat  fraksi  metanol  sebesar  7,33  mm , Escherichia  coli dengan  daya  hambat terbesar  fraksi  metanol  7,33  mm dan
Candida  albicans dengan  daya  hambat terbesar  fraksi  metanol  7,33  mm.  Dimana perolehan  nilai  rata-rata  dari  masing- masing  ekstrak  dan  fraksi  uji  aktivitas antimkroba termasuk pada kategori sedang.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut terhadap sampel alga coklat Turbinaria ornata dari lokasi pengambilan sampel yang berbeda agar dapat mengetahui  adanya  pengaruh  kondisi lingkungan  tempat  alga Turbinaria  ornata tumbuh  terhadap  aktivitas  antimikroba. Selain  itu  perlu  dikembangkan  dengan dilakukannya  uji  aktivitas  antioksidan untuk  mengetahui  fungsi  dari  senyawa yang terkandung dalam sampel alga coklat Turbinaria ornata sebagai antioksidan.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggadiredja,  J.  T.,  A.  Zatnika,  H. Purwoto, dan S. Istini, 2006. Rumput Laut  Pembudidayaan,  Pengolahan dan Pemasaran Komoditas Perikanan Potensial, Jakarta.
Arifuddin,  Patong,  R.,  dan  Ahmad,  A., 2001,  Penelusuran  Protein  Bioaktif dalam  Makro  Alga  sebagai  Bahan Antibakteri  dan  Antijamur,  Marina Chimica Acta. 2 (2):11-18.
Davis,  W.W.,  and  Stout,  T.R.  1971.  Disc Plate  Methods  of  Microbiological Antibiotic Assay. Journal Microbiology . 22 (4): 659-665.
Dea, A.P, Sura M. Ginting  dan Sumpono,
2014. Pengaruh metode ekstraksi dan konsentrasi  terhadap  aktivitas  Jahe merah
( zingiber officinale
var.rubrum) sebagai antibakteri escherichia coli . Jurnal Kimia .
1 (1):14
Dean,  J,  2009. Extraction  Techniques  In Analytical  Science .    John  Wiley
And  Sons  LTD,  pp.  London.  43-
46.
Defran  M.P  ,  Kiki  M.  Y,  dan  Reza  A.K. 2015. Identifikasi senyawa Antioksidan  dalam  Rumput  Laut Sargassum  duplicatum  J.G  Argadh dari  pantai  ujung  genteng.  Jurnal Kesehatan  dan  farmasi.  FMIPA UNSIBA, Bandung.
Gazali,  M.  Nurjanah,  Neviaty  P.Z.  2018.
Eksplorasi  senyawa  bioaktif  alga cokelat
Sargassum sp. Agardh sebagai antioksidan dari pesisir barat
Aceh.. Journal IPB : 21 (1).
Harborne,  J.B.  1987. Metode  Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis  Tumbuhan. Penerbit ITB, Bandung..
Hidayah  N, Hisan AK,  Solikin  A,  Irawati,
Mustikaningtyas D. 2016. Uji efektivitas ekstrak Sargassum muticum sebagai  alternative  obat bisul  akibat  aktivitas Staphylococcus
aureus . Journal of Creativity Students . 1 (1): 1-9
Mardiastuti,  H.  W.,  Karuniawati,  A., Kiranasari, A., Ikaningsih, dan
Kadarsih, R. 2007. Emerging Resistance  Pathogen:  Situasi  Terkini di  Asia,  Eropa,  Amerika  Serikat, Timur Tengah dan Indonesia,
Departemen  Mikrobiologi.  Fakultas
Kedokteran,  Universitas  Indonesia.
57 (3):75-79. Ortez, J.H. 2005. Disk Diffusion Testing in Manual of Antimicrobial Susceptibility  Testing.  Marie  B. Coyle (Coord.Ed). American Society for Microbiology. Rajasekar,  T.,  Balaji,  S.,  Kumaran,  S., Deivasigamani, B., Pugzhavendhan, S.R. 2012. Isolation  and  Characterization  of
Marine  Fungal  Metabolites  against Clinical  Pathogens. Asian  Pacific
Journal of Tropical Disease .
Elsevier . 387-S392.
Rasyid, A. 2000. Ekstraksi Natrium alginat dari  Turbinaria  decurrens  asal perairan  Pulau  Otangala  (Sulawesi Utara).  Prosiding  Seminar  Riptek
Kelautan Nasional 2 : 1–3.
Tinambunan, H., Melki, dan Isnaini, 2012,
Efektifitas  Ekstrak  Bakteri  yang Berasosiasi  dengan  Spons  dan Karang  Lunak  sebagai  Antibakteri dari Perairan Pulau Tegal Lampung, Maspari  Journal , 4 (2), 225-230.
Vogel, A.I. 1978. Kimia AnalisaKuantitatif
Anorganik. Diterjemahkan Pudjaatmaka. EGC, Jakarta. Yim H.S, Chye FY, Ho SK, Ho CW. 2009. Phenolic profiles of selected edible wild  mushrooms  as  affected  by extraction solvent, time and temperature. Assian  journal  of Food  and  Agro  Industry. 2 (3):392-
401.
Yunizal.  2004.  Teknologi  Pengolahan
Alginat.  Pusat  Riset  Pengolahan Produk danSosial Ekonomi Kelautan  dan  Perikanan,  Badan Riset Kelautan danPerikanan, Departemen Kelautan dan Perikanan, Jakarta.