Ionic Silver Nanoparticles (Ag + ) Sebagai Bahan

## Antibiotik Alternatif Untuk Salmonella Typhymurium

## Saraswati Kendis Intan Palupi*, and Suparno
Prodi Fisika, Universitas Negeri Yogyakarta
* Saraswati.kendis2015@gmail.com

## ABSTRACT
This study aims to determine the ability of ionic silver nanoparticles (ISN) Ag + as an antibiotic material to inhibit the growth of Salmonella typhimurium . ISN are produced by electrolysis using two AgBr bars as  electrodes  with  distilled  water  as  electrolyte  solvents.  The  effect  of  electrolysis  time  on  ISN concentration and electrical conductivity was observed with a TDS and EC meter. All ISN samples have been characterized by UV-Vis spectrophotometer, AAS, and PSA . The results showed the concentration of ISN and the electrical conductivity of the solution increased with the length of time of electrolysis. UV-Vis spectrophotometer test results have shown the peak of absorbance at a wavelength of 416.5- 417 nm. The concentration test using AAS has shown that the concentration of  ISN for TDS 11 ppm, 20  ppm  and  29  ppm  is  9.8  ppm,  17.6  ppm,  and  23.9  ppm  respectively.  While  the  size  of  silver nanoparticles PSA test results have shown (76.8 ± 0.667) nm.  The results of the test of the ability of ISN as an antibiotic Salmonella typhimurium showed the formation of a clear zone until the 72th hour with the largest average diameter in the stationary phase area (hours 24-72) was 7.39 ± 0.04 mm for a concentration of 20 ppm.
Keywords: electrolysis, ionic silver nanoparticles, antibacterial, Salmonella typhimurium

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kemampuan ionic  silver  nanoparticles (ISN)  Ag + sebagai bahan  antibiotik  untuk  menghambat  pertumbuhan Salmonella  typhimurium .  ISN  diproduksi  dengan proses elektrolisis  menggunakan dua batang AgBr sebagai  elektroda dengan aquades sebagai pelarut elektrolit.  Pengaruh  waktu  elektrolisis  terhadap  konsentrasi  ISN  dan  konduktivitas  listrik  diamati dengan  TDS  dan  EC  meter.  Semua  sampel  ISN  dikarakterisasi  dengan  menggunakan  UV-Vis spectrophotometer ,  AAS,  and  PSA.  Hasil  penelitian  menunjukan  konsentrasi  ISN  dan  konduktivitas listrik  larutan  meningkat  seiring  dengan  lama  waktu  elektrolisis.  Hasil  uji  spektrofotometer  UV-Vis menunjukan adanya puncak absorbansi pada panjang gelombang 416,5-417 nm. Uji konsentrasi dengan menggunakan AAS menunjukan bahwa konsentrasi ISN untuk TDS 11 ppm, 20 ppm dan 29 ppm adalah 9,8 ppm, 17,6 ppm, dan 23,9 ppm secara berurutan. Sedangkan ukuran nanopartikel perak hasil uji PSA menunjukan  (76,8  ±  0,667)  nm.  Hasil  uji  kemampuan  ISN  sebagai  bahan  antibiotik Salmonella typhimurium menunjukan terbentuknya zona bening sampai jam ke 72 dengan diameter rata-rata paling besar di daerah fase  stasioner (jam ke 24-72) adalah 7,39 ± 0,04 mm untuk konsentrasi 20 ppm.
Kata kunci: elektrolisis, nanopartikel perak ionik, antibakteri, Salmonella typhimurium

## PENDAHULUAN
Nanoteknologi  saat  ini  sedang  banyak  dikembangkan. Objeknya  merupakan nanopartikel, yaitu partikel koloid yang berukuran antara 1 hingga 100 nm [1] . Nanoteknologi banyak mendapat perhatian dikarenakan partikel yang dihasilkan yang disebut nanopartikel memiliki  keunikan  sifat  fisik,  reaktivitas  kimia,  dan  potensi  aplikasi [2] .  Nanoteknologi banyak diterapkan juga pada logam. Salah satu metode untuk membuat nanopartikel logam
adalah  elektrokimia [3] .  Salah  satu  metode  elektrokimia  yang  biasa  dipergunakan  untuk memproduksi  nanopartikel  perak  adalah  metode  elektrolisis.  Metode  ini  menghasilkan nanopartikel  perak  yang  bermuatan  positif  (Ag + ),  bukan  nanopartikel  perak  yang  netral (Ag 0 ) [4] .  Kelebihan ionic  silver  nanoparticles ada  pada  muatan  positifnya  yang  akan membuat  nanopartikel  perak lebih mudah  menembus  dinding  sel  bakteri  yang  bermuatan negatif, merobek dan merusaknya sehingga menyebabkan kematian sel [5] .
Nanopartikel perak saat ini menjadi perhatian banyak peneliti karena perak menjadi agen antimikroba yang kuat dalam bentuk ion. Sampai saat ini belum diketahui ada bakteri yang resistan  terhadap  nanopartikel  perak  termasuk  bakteri  patogen [2] .  Semakin  kecil  ukuran partikel perak maka semakin kuat sifat antimikrobanya [6] . Nanopartikel perak tersebut dapat dimanfaatkan sebagai antibiotik untuk mengatasi infeksi bakteri Salmonella typhimurium , dimana  bakteri Salmonella  typhimurium semakin  tahan  terhadap  antibiotik  seperti ampicillin,  chloramphenicol,  streptomycin,  sulfamethoxazole, dan tetracycline [7] .  Infeksi dari Salmonella di negara berkembang pada umumnya menyebabkan gastroenteritis yang parah, dimana 40%  kasus menyebabkan septicemia , dan 30%  kasus menyebabkan kematian [8] .
Paper  ini  melaporkan  hasil  penelitian ionic  silver  nanoparticles sebagai  bahan  antibiotik terhadap bakteri Salmonella typhimurium . Sebelumnya telah dilakukan proses karakterisasi ionic  silver  nanoparticles dengan  menggunakan  UV-Vis spectrophotometer untuk mengetahui  keberadaan  nanopartikel  perak  dalam  larutan,  AAS  ( Atomic  Absorption Spectrophotometer )  untuk  mengetahui  konsentrasi  nanopartikel  perak,  dan  PSA  ( Particle Size  Analyzer )  untuk  mengetahui  diameter/ukuran  nanopartiukel  perak.  Sedangkan  Uji kemampuan antibakteri ionic silver nanoparticles dilakukan dengan metode disk diffusion ( Kirby Bauer test ). Dalam hal ini, dilihat hubungan antara konsentrasi nanopartikel perak terhadap zona bening yang terbentuk dan dibandingkan dengan zona bening yang terbentuk oleh kloramfenikol sebagai kontrol positif. Pengukuran zona bening dimulai dari jam ke 3 sampai jam ke 72 dengan interval waktu 3 jam.
Berdasarkan uraian tersebut, maka telah dilakukan penelitian mengenai aplikasi ionic silver nanoparticles terhadap daya hambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhimurium dengan menggunakan  metode disk  diffusion/Kirby  Bauer  test ,  dimana ionic  silver  nanoparticles diproduksi  dengan  metode  elektrolisis  serta  dikarakterisasi  dengan  menggunakan spektroskopi  UV-Vis,  AAS,  dan  PSA.  Melalui  metode disk  diffusion/Kirby  Bauer  test dilakukan pengukuran diameter zona bening/zona hambat yang terbentuk.

## METODE

## a. Proses Produksi Ionic Silver Nanoparticles
Proses  produksi ionic  silver  nanoparticles dilakukan  dengan  metode  elektrolisis  dengan menggunakan dua batang AgBr 99,95% sebagai elektroda dengan jarak sejauh 1 cm dalam aquades 400 mL. Elektrolisis dilakukan dengan mengalirkan arus listrik sebesar 15 volt dan mengalirkan  udara  dalam  aquades  menggunakan  pompa.  Setiap  10  menit  dilakukan pembersihan  dan  pengamplasan  elektroda,  pengukuran  konsentrasi  dan  konduktivitas larutan,  serta  dilakukan  pergantian  polarisasi.  Hal  tersebut  dilakukan  hingga  100  menit. Setelah itu, larutan yang sudah jadi dimasukan ke dalam botol kaca gelap. Kemudian hasil larutan dibuat menjadi tiga sampel dengan konsentrasi 11 ppm, 20 ppm, dan 29 ppm.

## b. Proses Karakterisasi Ionic Silver Nanoparticles
Proses pengujian Karakterisasi ionic silver nanoparticles dilakukan menggunakan UV-Vis spectrophotometer , AAS, dan PSA. Uji menggunakan UV-Vis spectrophotometer dilakukan pada rentang panjang gelombang 200-800 nm untuk menemukan puncak absorbansi larutan nanopartikel  perak.  pengujian  menggunakan  AAS  dilakukan  dengan  konsentrasi  partikel padat terlarut dengan menggunakan TDS meter yakni, 11 ppm, 20 ppm, dan 29 ppm untuk mengetahui konsentrasi nanopartikel perak pada masing-masing larutan tersebut. Sedangkan pengujian  menggunakan  PSA  dilakukan  menggunakan  sampel  dengan  konsentrasi  23,9 ppm.

## c. Proses Pengujian Sifat Antibakteri Ionic Silver Nanoparticles
Sebelum dilakukan pengujian dengan metode disk diffusion , dilakukan kultur bakteri terlebih dahulu.  Kultur  bakteri  dilakukan  dalam  media  NB  ( Nutrient  Broth ).  Media  NB  dibuat dengan  cara  menimbang  serbuk  NB  sebanyak  1,95  gram  lalu  dilarutkan  dalam  150  mL aquades kemudian dipanaskan dengan magnetic stirer . Larutan NB kemudian dimasukan ke dalam botol dan ditutup dengan kapas serta kertas payung. Selanjutnya disterilkan selama 30 menit dengan autoclave . Kemudian, bakteri yang ada pada media agar miring diambil dengan ose bulat, lalu ose bulat tersebut dicelupkan ke dalam larutan NB yang telah dibuat. Setelah  itu,  mulut  botol  ditutup  dengan  kapas  dan  botol  tersebut  diletakan  pada shaker selama 1 hari.
Setelah  mengkultur  bakteri,  barulah  dilakukan  pengujian  dengan  metode disk  diffusion . Membuat media NA ( Nutrient Agar ) dengan menimbang sebanyak 4,2 gram serbuk NA dan dilarutkan dalam aquades  150 mL. Larutan tersebut dihomogenkan dengan menggunakan magnetic stirrer dan larutan NA dimasukan ke dalam erlenmeyer lalu ditutup dengan kapas dan kertas payung. Setelah itu disterilkan dengan autoclave selama 30 menit. Setelah selesai disterilkan, larutan dituangkan ke dalam cawan petri dan ditunggu hingga media NA padat.
Selanjutnya  bakteri Salmonella  typhimurium diambil  dengan  menggunakan  mikropipet sebanyak 0,1 mL lalu diratakan dengan drigalsky di atas media agar yang telah padat dalam cawan petri. Selanjutnya dilakukan inokulasi dengan cara meletakan 5 buah  kertas saring berbentuk  bulat  ( disk )  dengan  diameter  berukuran  5 mm.  3  kertas  saring  tersebut dicelup masing-masing pada ionic silver nanoparticles dengan konsentrasi 9,8 ppm, 17,6 ppm, dan 23,9 ppm. Satu dicelup pada kloramfenokol sebagai kontrol positif dan satu dicelup pada aquades sebagai kontrol negatif. Cawan petri yang telah berisi 5 disk diatas kemudian ditutup dengan plastic wrap dan diletakan pada ruangan steril dengan suhu 37 o C. pengamatan dan pencatatan diameter zona bening dilakukan setiap 3 jam sekali selama 72 jam.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## a. Produksi Ionic Silver Nanoparticles
Bahan pelarut yang digunakan adalah aquades yang telah diukur dengan TDS dan EC meter bahwa  partikel  padat  terlarutnya  adalah  0  ppm,  maka  dari  itu  setelah  dilakukan  proses elektrolisis dimonitor keberadaan partikel padat terlarut pada larutan dengan menggunakan alat yang sama. Dalam hal ini, diamati pengaruh waktu terhadap konsentrasi partikel padat terlarut.  Disamping  itu,  untuk  meyakinkan  bahwa  partikel  bersifat  ionik  dilakukan pengukuran konduktivitas listrik larutan. Gambar 1 menunjukan hubungan pengaruh waktu terhadap konsentrasi larutan dan konduktivitas listrik larutan.
0 20 40 60 80 100 0 5 10 15 20 25 30 35 EC Data1C Waktu elektrolisis (menit) K o n se n tr a si i o n l a ru ta n ( p p m ) 0 5 10 15 20 ppm Polynomial Fit of Data1_B K o n d u k ti v it a s la ru ta n ( µ S /c m )
Gambar 1. Grafik hubungan waktu elektrolisis dengan konsentrasi ion larutan dan konduktivitas larutan
Gambar  1  menunjukan  bahwa  konsentrasi  larutan  semakin  tinggi  apabila  waktu  yang diperlukan  untuk  proses  elektrolisis  semakin  lama,  dimana  hasil  tertinggi  diperoleh konsentrasi sebesar 18 ppm dalam waktu 100 menit, sementara hasil terendah diperoleh pada 10 menit pertama dengan konsentrasi sebesar 1 ppm. Kenaikan konsentrasi pada waktu 10 menit  hingga  50  menit  terjadi  perlahan,  sedangkan  kenaikan  konsentrasi  pada  waktu  60 menit  hingga  100  menit  terjadi  kenaikan  yang  cukup  signifikan.  Hal  ini  terbukti  dengan grafik yang tidak linier. Grafik pada Gambar 1 merupakan grafik dengan fungsi polinomial orde dua. Terbukti dengan hasil analisis menggunakan software origin mendapatkan hasil R 2 sebesar  0,99256  dengan  standar  deviasi  sebesar  0,55576.  Nilai R 2 yang  didapatkan mendekati  nilai  satu  yang  membuktikan bahwa  grafik  tersebut  sesuai  dengan fitting yang digunakan dimana fungsi yang didapat dari grafik tersebut adalah Persamaan 1.
𝐶 = 𝑎𝑡 2 + 𝑏𝑡 + c (1)
Dimana, C = Konsentrasi ion larutan (ppm)
t = Waktu elektrolisis (menit)
a = 0,00231 (ppm/menit)
b = -0,07659 (ppm/menit)
c = 1,81667 (ppm)
Kenaikan konsentrasi yang signifikan dapat terjadi akibat aquades yang semula tidak ada ion (elektrolit lemah), setelah beberapa waktu akan menjadi larutan elektrolit karena adanya ion- ion  yang  dihasilkan  dari  reaksi  elektrolisis.  Ion-ion  yang  ada  membantu  elektron  cepat mengalir dan berdampak pada semakin cepatnya ion  Ag + dihasilkan, sehingga konsentrasi larutan pun meningkat. Bertambahnya konsentrasi larutan dapat dipastikan merupakan ion dan bukan merupakan hasil dari reaksi reduksi yang berupa pengotor dengan cara mengukur konduktivitas larutan dengan alat TDS dan EC meter.
Gambar  1  juga  menunjukan  semakin  lama  waktu  elektrolisis  semakin  besar  pula konduktivitas listrik larutan. Kenaikan besar konduktivitas listrik juga terjadi mulai menit ke 60 hingga menit ke 100. Konduktivitas listrik terkecil terjadi pada menit ke 10 sebesar 2 µScm -1 , sedangkan konduktivitas listrik terbesar terjadi pada menit ke 100 sebesar 34 µScm - 1 .  Hasil  analisis  dengan software  origin menunjukan  bahwa  grafik  tersebut  pun  sesuai dengan fitting polinomial  orde  dua  dengan  R 2 sebesar  0,99078  dengan  standar  deviasi sebesar 1,1562. Hasil analisis pun menunjukan fungsi grafik seperti pada Persamaan 2.
𝐾 = 𝑑𝑡 2 + 𝑒𝑡 + f (2)
Dimana, K = Konduktivitas larutan (µS/cm)
t = Waktu elektrolisis (menit)
d = 0,00424 (µS/cm.menit 2 ) e = -0,13455 (µS/cm.menit)
f = 3,46667 (µS/cm)
Data  konduktivitas  listrik  di  atas  menunjukan  bahwa  pertikel  terlarut  bersifat  ionik  dan diketahui  bahwa  waktu  elektrolisis  berpengaruh  terhadap  konsentrasi  dan  konduktivitas listrik larutan.

## b. Karakterisasi Ionic Silver Nanoparticles
Untuk  mengetahui  bahwa  di  larutan  benar-benar  terdapat  nanopartikel  perak,  maka dilakukan  pengujian  keberadaan  nanopartikel  perak  dengan  UV-Vis spectrophotometer . Dalam  hal  ini,  dilakukan  pengujian  terhadap  pengaruh  panjang  gelombang  terhadap absorbansi. Pengaruh panjang gelombang dari 200-800 nm. Hasil uji menggunakan UV-Vis spectrophotometer disajikan pada Gambar 2, Gambar 3, dan Gambar 4.
Gambar  2. Grafik  panjang  gelombang  dengan  absorbansi  untuk  sampel  ionic  silver  nanoparticles  dengan konsentrasi 11 ppm
Gambar  3. Grafik  panjang  gelombang  dengan  absorbansi  untuk  sampel  ionic  silver  nanoparticles  dengan konsentrasi 20 ppm
Gambar  4. Grafik  panjang  gelombang  dengan  absorbansi  untuk  sampel  ionic  silver  nanoparticles  dengan konsentrasi 29 ppm
Berdasarkan grafik pada Gambar 1, Gambar 2, dan Gambar 3 dari hasil uji menggunakan UV-Vis spectrophotometer didapatkan  2  puncak  untuk  masing-masing  sampel    larutan kecuali  sampel  dengan  konsentrasi  20  ppm.  Pada  sampel  pertama  yaitu  sampel  dengan konsentrasi  11  ppm,  puncak  yang  ditunjukan  adalah  pada  panjang  gelombang  208  nm dengan absorbansi sebesar 0,184 dan pada panjang gelombang 416,50 nm dengan absorbansi 0,032.  Sampel  kedua  (larutan  dengan  konsentrasi  20  ppm)  diperoleh  tiga  puncak  pada panjang gelombang 209 nm, 417 nm, dan 778 nm dengan absorbansi masing-masing adalah 0,377; 0,063; 0,007. Sampel ketiga (larutan dengan konsentrasi 29 ppm) diperoleh puncak pada  panjang  gelombang  208,50  nm  dengan  absorbansi  0,570,  serta  pada  panjang gelombang 416,50 nm dengan absorbansi 0,094.
Hasil uji dari ketiga sampel membuktikan bahwa sampel tersebut memiliki kandungan Ag + dan Br - . Kandungan Ag + ditunjukan oleh puncak dengan panjang gelombang yang berada pada rentang 411-437 nm [9] , sedangkan kandungan Br - ditunjukan dengan adanya puncak pada panjang gelombang 208-209 nm, yang mana ion Br - muncul pada panjang gelombang kisaran 195-215 nm [10] . Sementara, puncak pada panjang gelombang 778 nm merupakan polianilin dalam bentuk garam emeraldine dimana absorbansi berada pada rentang 750-800 nm [11] .  Setelah  membuktikan  bahwa  sampel  yang  telah  dibuat memiliki  kandungan  Ag + , maka  dilakukan  uji  untuk mengetahui  konsentrasi  Ag + yang  terlarut  dalam  ketiga  sampel dengan  menggunakan  AAS.  Ketiga  sampel  sebelumnya  diencerkan  sepuluh  kali  sebelum dilakukan uji agar tidak terlalu pekat. Setelah diuji dengan AAS, didapatkan konsentrasi ion ion Ag + dari masing-masing sampel (11 ppm, 20 ppm, dan 29 ppm) adalah  9,8 ppm, 17,6 ppm, dan 23,9 ppm secara berturutan.
Kemudian,  untuk  mengetahui  ukuran  partikel  maka  dilakukan  penentuan  ukuran  partikel dengan  menggunakan  PSA,  dimana  PSA  tersebut  menggunakan  metode dynamic  light scattering (DLS) yang terbukti mampu menentukan partikel di bawah 10 nm [12] . Data dari uji  menggunakan  metode  DLS  kemudian  dianalisis  dengan  metode cumulant .  Metode cumulant dipakai  karena  lebih  stabil  dan  tidak  terpengaruh  oleh noise .  Berdasarkan  hasil analisis  yang  didapat,  maka  ukuran  partikel/diameter  partikel  sebesar  (76,8  ±  0,7)  nm. Dilihaat  dari  ukuran  partikel,  dapat  disimpulkan  bahwa  larutan  tersebut  mengandung nanopartikel, hal ini karena ukuran partikel tidak lebih dari 100 nm [13] .
c. Hasil Pengukuran Zona Bening
Efektivitas ionic silver nanoparticles dalam menghambat pertumbuhan bakteri Salmonella typhimurium dilakukan dengan  pengujian menggunakan metode disk diffusion ( Kirby bauer test ). Pada pengujian dengan metode disk diffusion akan terbentuk zona bening di  sekitar disk yang  merupakan  bukti  adanya  zona  hambat  dari  pertumbuhan  bakteri.  Pengujian dilakukan  dengan  tiga  variasi  konsentrasi  nanopartikel  perak  ionik  yang  masing-masing mengandung  ion  Ag + sebesar  9,8  ppm,  17,6  ppm,  dan  23,9  ppm.  Selain ionic  silver nanoparticles , dalam pengujian disertakan juga kloramfenikol sebagai kontrol positif, dan aquades  debagai  kontrol  negatif.  Pengujian  dilakukan  selama  72  jam,  dan  dilakukan pengukuran zona bening yang terbentuk setiap 3 jam sekali.
20 30 40 50 60 70 80 6 7 8 9 10 d ia m et er z o n a b en in g ( m m ) waktu paparan (jam) k1 k2 k3
Gambar 5. Perbandingan hasil pengukuran zona bening dalam grafik hubungan antara waktu paparan dengan diameter zona bening untuk tiga sampel ionic silver nanoparticles
Pengamatan  zona  bening  terhadap paper  disk yang  dicelup  aquades  tidak  menunjukkan adanya  zona  bening,  sedangkan  untuk  kontrol  positif  kloramfenikol,  zona  bening  hanya teramati dari jam ke 3 hingga jam ke 18, sementara jam ke 21 hingga ke 72 zona  bening tidak teramati. Selain itu, pada ketiga paper disk yang dicelup pada ionic silver nanoparticles dengan konsentrasi 9,8 ppm, 17,6 ppm, dan 23,9 ppm menunjukan zona bening sejak jam ke 3 hingga jam ke 72. Gambar 6 menunjukan zona bening di sekitar paper disk yang dicelup larutan ionic silver nanoparticles dengan konsentrasi sebesar 9,8 ppm, 17,6 ppm, dan 23,9 ppm.
Dalam rangka mengetahui perbandingan ukuran besarnya zona bening yang terbentuk, maka hasil pengukuran zona bening yang ada pada fase stasioner bakteri Salmonella typhimurium yaitu mulai jam ke 24 hingga ke 72 [14] dirata-rata. Berdasarkan rata-rata tersebut dihasilkan nilai untuk ionic silver nanoparticles dengan konsentrasi 9,8 ppm, 17,6 ppm, dan 23,9 ppm masing-masing adalah (5,75 ±  0,06) mm, (7,39 ±  0,04) mm, dan (6,18 ±  0,06) mm, yang artinya ionic silver nanoparticles yang diuji lebih unggu dari kloramfenikol.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  penelitian  ini  diketahui  bahwa  waktu  elektrolisis  mempengaruhi  besarnya konsentrasi  pada  larutan ionic  silver  nanoparticles yang  terbentuk.  Besarnya  konsentrasi larutan  seiring  bertambahnya  waktu  menghasilkan  persamaan Y = 0,00231t 2 − 0,07659t + 1,81667 .  Berdasarkan  uji  dari  UV-Vis spectrophotometer diketahui  adanya
puncak serapan pada panjang gelombang 416,5-417 nm yang merupakan Ag + , dan 208-209 yang merupakan Br - . Pada tiga sampel yang dibuat, berdasarkan hasil uji AAS ditemukan ion Ag + masing-masing  sebesar 9,8 ppm, 17,6 ppm, dan 23,9 ppm.  Diameter/ukuran dari ionic  silver  nanoparticles berdasarkan  hasil  PSA  adalah  (76,8  ±  0,7)  nm.  Konsentrasi nanopartikel perak ionik dengan konsentrasi 17,6 ppm memiliki sifat antibakteri yang paling kuat ditunjukan oleh rata-rata diameter zona bening pada fase stasioner sebesar (7,39 ± 0,04) mm.

## DAFTAR PUSTAKA
1 Jeevanandam,  J.,  Barhoum,  A.,  Chan,  Y.  S.,  Dufresne,  A.,  &  Danquah,  M.  K.  2018. Review On Nanoparticles And Nanostructured Materials : History , Sources , Toxicity And Regulations. Beilstein Journal of Nanotechnology , Vol. 9, Hal. 1050–1074.
2 Haryono,  A.,  Sondari,  D.,  Harmami,  S. B.,  &  Randy,  M.  2008.  Sintesa  Nanopartikel Perak dan Potensi Aplikasinya. Jurnal Riset Industri , Vol. 2, No. 3, Hal. 156-163.
3 Ulum,  B.,  Kurniawan,  F.,  Ulfin,  I.,  &  Bahan,  A.  P.  2018.  Sintesis  Senyawaan  Seng Secara Elektrolisis, Jurnal Sains dan Seni ITS , Vol. 7 , No. 2, Hal. 1–2.
4 Starowicz,  M.,  Stypula,  B.,  &  Banas,  J.  2005.  Electrochemical  Synthesis  of  Silver Nanoparticles. Electrochemistry Communications , Vol. 8, Hal. 227-230.
5 Chuchita, C., Santoso, S. J., & Suyanta, S. 2018. Sintesis Nanopartikel Dari Perak Nitrat Dengan  Tirosin  Sebagai  Reduktor  Dan  Agen  Pengkaping  Untuk  Membentuk Nanokomposit  Film  AgNPs  -Poli  Asam  Laktat  Sebagai  Antibakteri. Berkala  MIPA, Vol. 25, No. 2, Hal. 140–153.
6 Ariyanta,  H.  A.  2014.  Preparasi  Nanopartikel  Perak  Dengan  Metode  Reduksi  dan Aplikasinya Sebagai Antibakteri Penyebab Luka Infeksi. Jurnal MKMI . Hal. 36-42.
7 Wang, J., Li, Y., Xu, X., Liang, B., Wu, F., & Yang, X. 2017. Antimicrobial Resistance of  Salmonella  enterica  Serovar  Typhimurium  in  Shanghai,  China. Frontiers  in Microbiology , Vol. 8, Hal. 1–10.
8 Bell, C., & Kyriakides, A. 2009. Foodborne Pathogens (Second Edition) . Cambridge: Woodhead Publishing Series in Food Science, Technology and Nutrition, Hal. 627-674.
9 Hu, M. Z., & Easterly, C. E. 2009. A novel thermal electrochemical synthesis method for production of stable colloids of “naked” metal ( Ag ) nanocrystals. Materials Science and Engineering C , Vol. 29, Hal. 726-736.
10 Tirumalesh,  K.  2008.  Simultaneous  determination  of  bromide  and  nitrate  in contaminated  waters  by  ion  chromatography  using  amperometry  and  absorbance detectors. Talanta , Vol. 74, Hal. 1428–1434.
11 Wallace,  G.  G.,  Teasdale,  P.  R.,  Spinks,  G.  M.,  &  Kane-Maguire,  L.  A.  P.  2008. Conductive  Electroactive  Polymers:  Intelligent  Polymer  Systems ,  Third  Edition. Florida: CRC Press
12 Suparno,  S.  2013.  Electrophoretic  Mobility  and  Size  Determination  of  Aerosol  OT Inverse Micelle in Decane Using Phase Analysis Light Scattering (PALS) and Dynamic Light  Scattering  (DLS)  Respectively. International  Journal  of  Applied  Physics  and Mathematics , Vol. 3, No. 2, Hal. 92-94.
13 Manurung, P. G. 2018. Nanomaterial-Tinjauan Masa Kini . Yogyakarta: Penerbit ANDI 14 Hawkins, J.  L., Uknalis, J., Oscar, T. P., Schwarz, J. G., & Vimini, B. 2019. The Effect of  Previous  Life  Cycle  Phase  on  the  Growth  Kinetics  ,  Morphology  ,  and  Antibiotic Resistance  of  Salmonella  Typhimurium  DT104  in  Brain  Heart  Infusion  and  Ground Chicken Extract Preparation of Bacterial Inoculum. Frontiers in Microbiology , Vol. 10.