Barrianti,  Cep  Wahyu,  Bunga  Salma  Fitriani  (2023) Identifikasi  Bakteri  Asam  Laktat  pada  Fermentasi Symbiotic  Culture  of  Bacteria  and  Yeast  (Scoby)  dengan  Teh  Putih  dan  Gula  Merah, (8)  10, https://doi.org/10.36418/syntax-literate.v8i10
E-ISSN: 2548-1398 Published by: Ridwan Institute
Syntax  Literate:  Jurnal  Ilmiah  Indonesia  p–ISSN:  2541-0849  e- ISSN: 2548-1398 Vol. 8, No. 11, November 2023

## IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT PADA FERMENTASI SYMBIOTIC CULTURE OF BACTERIA AND YEAST (SCOBY) DENGAN TEH PUTIH DAN GULA MERAH
Barrianti 1* , Cep Wahyu 2 , Bunga Salma Fitriani 3
1 RS Mata Cicendo Bandung 1,2,3 Institut Kesehatan Rajawali Bandung Email: barriantirian@gmail.com, cepwahyu85@gmail.com, bungaspaces@gmail.com

## Abstrak
Menurunnya  sistem  kekebalan  tubuh  dapat  menimbulkan  penyakit  pada  saluran pencernaan  seperti  diare.  Pengobatan  diare  dengan  antibiotik  yang  menimbulkan banyak  dampak  negatif  dari  resistensi  antibiotik  membuat  masyarakat  beralih kepada  penggunaan  probiotik  sebagai  pengobatan  alternatif.  Beberapa  penelitian menyatakan  bakteri  probiotik  yang  terdapat  pada  minuman  probiotik  kombucha seperti  bakteri  asam  laktat  dapat  bermanfaat  untuk  menjaga  keseimbangan mikroflora  saluran  pencernaan  dengan  membantu  menghambat  pertumbuhan bakteri patogen penyebab diare. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi spesies  bakteri  asam  laktat  yang  berperan  dalam  minuman  probiotik  kombucha. Penelitian  ini  menggunakan  rancangan  deskriptif  eksperimental,  yaitu mendeskripsikan  hasil  data  penelitian  berupa  gambar  dan  tabel  kemudian  ditarik kesimpulan.  Hasil  yang  diperoleh  dari  penelitian  yang  telah  dilakukan  adalah didapatkan  mikroorganisme  yeast  dengan  spesies  Saccharomyces  cerevisiae, Candida  spherica,  Candida  lambica,  Candida  inconspicua,  dan  Candida  krusei. Sementara itu, bakteri yang diduga bakteri asam laktat dengan genus Lactobacillus tidak  dapat  teridentifikasi  oleh  alat  vitek.  Pada  penelitian  ini  dapat  disimpulkan bahwa tidak dapat ditemukan spesies bakteri asam laktat pada seluruh isolat yang diperoleh dari sampel minuman probiotik kombucha yang dibuat dari teh putih dan gula merah.
Kata kunci: Bakteri Asam Laktat; Mikrobiologi; Minuman Probiotik; SCOBY; Yeast

## Abstract
A  decreased  immune  system  can  cause  diseases  of  the  digestive  tract  such  as diarrhea.  Treatment  of  diarrhea  with  antibiotics  which  causes  many  negative impacts from antibiotic resistance has made people turn to the use of probiotics as an alternative treatment. Several studies have stated that the probiotic bacteria found in  probiotic  kombucha  drinks,  such  as  lactic  acid  bacteria,  can  be  useful  for maintaining  the  balance  of  the  digestive  tract  microflora  by  helping  inhibit  the growth of pathogenic bacteria that cause diarrhea. The aim of this study is to identify the species of lactic acid bacteria that play a role in probiotic kombucha drinks. This
study uses a descriptive experimental design, namely describing the results of study data in the form of pictures and tables and then drawing conclusions. The results obtained from the study that has been carried out are yeast microorganisms with the species  Saccharomyces  cerevisiae,  Candida  spherica,  Candida  lambica,  Candida inconspicua, and Candida krusei. Meanwhile, bacteria suspected to be lactic acid bacteria of the genus Lactobacillus could not be identified by the vitek tool. In this study it can be concluded that no species of lactic acid bacteria could be found in all isolates obtained from samples of probiotic kombucha drinks made from white tea and brown sugar.
Keywords: Lactic Acid Bacteria; Microbiology; Probiotic Drink; SCOBY; Yeast.

## Pendahuluan
Saluran  pencernaan  merupakan  salah satu  organ  yang  berperan  dalam  sistem kekebalan  tubuh.  Menurunnya  sistem  kekebalan  tubuh  dapat  menimbulkan  berbagai penyakit, terutama pada saluran pencernaan seperti diare (Dewi, Atifah, Farma, Yuniarti, dan  Fadhilla,  2021).  Diare  disebabkan  oleh  beberapa  bakteri  patogen.  Bakteri  patogen penyebab  penyakit  diare  pada  saluran  pencernaan  manusia  dapat  diobati  dengan antibiotik.
Namun, banyaknya dampak negatif dari resistensi antibiotik membuat masyarakat beralih kepada penggunaan probiotik sebagai pengobatan alternatif. Probiotik merupakan bakteri baik yang memiliki kemampuan tumbuh lebih cepat dibandingkan dengan bakteri patogen,  sehingga  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  patogen  dalam  saluran pencernaan  manusia  (Dewi,  Atifah,  Farma,  Yuniarti,  dan  Fadhilla,  2021).  Salah  satu produk probiotik yang banyak dikembangkan akhir-akhir ini adalah kombucha.
Kombucha  merupakan  minuman  probiotik  yang  menyegarkan  dan  baik  untuk kesehatan  (Riswanto  dan  Setiawan,  2022).  Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Dewi (2022)  kombucha  teh  rosella  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri  penyebab diare, Escherichia coli. Selain itu, pada penelitian yang dilakukan oleh Riadi, Setiyawati, dan Situmeang (2020) kombucha kimchi memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri lain penyebab diare, yaitu Shigella dysentriae dan pada penelitian yang dilakukan oleh Afifah  (2010)  kombucha  teh,  kopi,  dan  rosella  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap bakteri lain penyebab diare, yaitu Vibrio cholerae. Aktivitas anti bakteri pada kombucha berasal dari bakteri probiotik yang terkandung didalamnya.
Bakteri yang terdapat pada setiap fermentasi minuman kombucha akan berbeda tergantung  pada  substrat  yang  digunakan  dalam  pembuatan  minuman  kombucha (Karyantina  dan  Sumarmi,  2021).  Teh  dapat  digunakan  sebagai  substrat  dalam  proses pembuatan  minuman  kombucha  karena  memiliki  aktivitas  antioksidan  alami  yang berasal dari senyawa fenol (Khaerah dan Akbar, 2019).
Teh  diberi  tambahan  pemanis  berupa  gula.  Namun,  gula  yang  digunakan  pada pembuatan  minuman  kombucha  tidak  berfungsi  sebagai  pemanis  melainkan  sebagai sumber karbon bagi mikroorganisme kombucha untuk tetap bertahan hidup saat melalui proses  fermentasi  (Hoffman,  1995  dalam  Verawati,  2019).  Pada  penelitian  yang dilakukan Verawati (2019) gula merah memiliki kadar gula yang tepat untuk membantu
proses fermentasi kombucha sehingga kadar alkohol dan total asam yang dihasilkan pun tepat untuk menghasilkan fermentasi yang lebih baik.
Hasil fermentasi dari teh dan gula pada minuman kombucha menghasilkan lapisan gelatin yang disebut SCOBY (Symbiotic Culture of Bacteria and Yeast). SCOBY adalah kultur simbiosis yang terdiri atas gabungan mikroorganisme bakteri dan yeast yang hidup dalam  koloni  yang  sama  (Azizah,  Darma,  Darusman,  2020).  Salah  satu  bakteri  yang terdapat pada teh kombucha adalah bakteri asam laktat. Bakteri tersebut bermanfaat bagi saluran  pencernaan  manusia  karena  dapat  menjaga  keseimbangan  mikroflora  saluran pencernaan dengan membantu menghambat pertumbuhan bakteri patogen (Dewi, Atifah, Farma,  Yuniarti,  dan  Fadhilla,  2021).  Bakteri  asam  laktat  yang  berperan  dalam  proses pembuatan teh kombucha belum banyak teridentifikasi.
Berdasarkan uraian mengenai bakteri asam laktat yang memiliki potensi sebagai zat  antibakteri  terhadap  pertumbuhan  bakteri  patogen  penyebab  diare.  Maka  peneliti tertarik untuk melakukan pengembangan mengenai mikroorganisme bakteri asam laktat yang  berperan  dalam  minuman  probiotik  kombucha  dengan  teh  putih  dan  gula  merah sebagai substrat fermentasi kombucha sehingga penelitian ini diberi judul “Identifikasi Bakteri Asam Laktat pada Fermentasi Symbiotic Culture of Bacteria and Yeast (SCOBY) dengan Teh Putih dan Gula Merah”.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Rumah  Sakit  Mata Cicendo  Bandung  dan  Laboratorium  Kesehatan  Provinsi  Jawa  Barat.  Jenis  penelitian yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  deskriptif  eksperimental.  Sampel  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  fermentasi  Symbiotic  Culture  of  Bacteria  and Yeast (SCOBY) dengan teh putih dan gula merah dengan teknik pengambilan sampel, yaitu teknik purposive sampling. Pada penelitian ini juga menggunakan tambahan sampel kontrol dari fermentasi Symbiotic Culture of Bacteria and  Yeast (SCOBY) dengan teh hitam dan gula pasir.
Data yang digunakan dalam penelitian ini adalah data primer. Data primer pada penelitian  ini,  yaitu  pengumpulan  data  yang  dilakukan  dengan  cara  melakukan identifikasi spesies bakteri asam laktat dalam minuman probiotik kombucha dengan teh putih dan gula merah melalui pengamatan makroskopis yang dilakukan dengan melihat morfologi koloni secara langsung pada isolat media MRSA (deMan Rogosa Sharpe Agar) dan media BA (Blood Agar). Pengamatan mikroskopis yang dilakukan dengan melihat morfologi sel melalui pewarnaan Gram menggunakan alat mikroskop. Identifikasi spesies bakteri yang dilakukan secara otomatis menggunakan alat vitek MS dan vitek 2.

## Uji Makroskopis
Isolasi  dilakukan  dengan  cara  menanam  sampel  pada  media  MRSA  dan  BA dengan metode streak plate lalu diinkubasi pada inkubator suhu 37°C selama 2x24 jam. Selanjutnya,  dilakukan  pemurnian  dengan  cara  mengambil  bakteri  hasil  isolasi  yang membentuk zona bening (koloni bakteri tunggal) secara aseptis menggunakan jarum ose
lalu ditanam pada media MRSA dan BA dengan metode streak plate kemudian diinkubasi pada  inkubator  suhu  37°C  selama  2x24  jam,  disimpan  pada  suhu  -20°C  (Rambitan, Pelealu, dan Tallei, 2018).

## Uji Mikroskopis
Pewarnaan Gram dilakukan secara otomatis menggunakan alat previ color gram stainer  dengan  cara  membuat  sediaan  koloni  dari  isolat  hasil  pemurnian  media  MRSA dan  BA  pada  object  glass  menggunakan  ose  kemudian  keringkan  sediaan  di  atas  rak pewarnaan lalu fiksasi di atas spirtus. Sediaan terfiksasi tersebut dimasukkan ke dalam rak  previ  color  gram  dengan  mempertimbangkan  keseimbangan  sediaan  pada  object glass, tutup alat.
Setelah itu, pilih dan klik jumlah sediaan yang akan diwarnai serta klik tombol mulai  pada  alat.  Proses  pewarnaan  berlangsung  sampai  mesin  berhenti  beroperasi. Selanjutnya, sediaan diamati dibawah mikroskop dengan pembesaran lensa objektif 100x (Harindana, Iswari, Setyojatmiko, dan Fatmawati, 2021).

## Identifikasi Spesies Vitek Ms
Identifikasi  bakteri  dilakukan  dengan  cara  mengambil  koloni  pada  isolat  hasil pemurnian media MRSA dan BA kemudian menempatkan koloni pada kartu vitek MS lalu  ratakan.  Selanjutnya,  tambahkan  matrix  VITEK  MS-CHCH  1  µl  di  tengah  posisi kartu menggunakan mikropipet. Biarkan koloni dan matrix pada kartu mengering secara menyeluruh. Setelah itu, masukkan kartu pada alat vitek MS (Huyyirnah dan Rosmaniar, 2021).

## Identifikasi Spesies Vitek 2
Identifikasi  bakteri  dilakukan  dengan  membuat  suspensi  bakteri  dengan  cara mengambil  koloni  pada  isolat  hasil  pemurnian  media  MRSA  dan  BA  kemudian  setiap koloni dimasukkan kedalam tabung polystyrene bening berisi 3 mL larutan NaCl 0,45%- 0,50% dengan pH 4,5-7,0 lalu homogenkan. Suspensi bakteri pada tabung polystyrene bening  diukur  kekeruhannya  dalam  rentang  0.50-0.63  Mc  Farland  untuk  bakteri Gram positif  sedangkan  untuk  yeast  dalam  rentang  1.80-2.20  Mc  Farland  menggunakan  alat DensiCHEK  dengan  cara  memasukkan  tabung  inokulum  ke  lubang  pengukuran,  putar 360° secara perlahan.
Setelah  kekeruhan  berada  dalam  rentang  yang  benar,  masukkan  hasil  suspensi bakteri pada bagian depan kaset, lalu masukkan kartu GP jika bakteri Gram positif dan kartu  YST  jika  yeast  pada  bagian  belakang  kaset  dengan  tabung  transfer  pada  kartu dimasukkan ke dalam suspensi bakteri. Setelah itu, kaset ditempatkan kedalam ruang alat vitek 2. Secara otomatis alat akan mengidentifikasi spesies bakteri selama 5-8 jam (Amal, 2020).

## Hasil dan Pembahasan Identifikasi Makroskopis
Identifikasi makroskopis dilakukan dengan melihat langsung isolat yang tumbuh pada media agar meliputi bentuk koloni, warna, tepian, dan elevasi yang terbentuk pada isolat (Kurnia, Amir, dan Handayani, 2020). Pengamatan makroskopik dilakukan melalui hasil  isolat  media  MRSA  dan  BA.  Hasil  identifikasi  makroskopis  dapat  dilihat  pada Gambar 1 dan Tabel 1.

## Gambar 1 Isolasi SCOBY Kombucha

## Tabel 1 Identifikasi Makroskopis SCOBY dengan Teh Putih dan Gula Merah
Identifikasi Makroskopis (Morfologi Koloni) Bentuk Warna Tepian Elevasi Bulat Putih Susu Rata Berwarna Bening Cembung Bulat Putih Krem Rata Cembung Menonjol
Berdasarkan hasil penelitian didapatkan 2 koloni berbeda. Secara makroskopis koloni  pada  media  MRSA  baik  sampel  kontrol  maupun  sampel  uji  memiliki  bentuk koloni bulat dengan membentuk zona bening disekitar koloni, warna putih susu, tepian rata  berwarna  bening,  dan  elevasi  cembung  sedangkan  pada  media  BA  baik  sampel kontrol  maupun  sampel  uji  memiliki  bentuk  koloni bulat  dengan  membentuk  zona bening disekitar koloni, warna putih krem, tepian rata, dan elevasi cembung menonjol.

## Identifikasi Mikroskopis
Identifikasi  mikroskopis  dilakukan  dengan  teknik  pewarnaan  Gram  untuk mengetahui  apakah  bakteri  tersebut  termasuk  bakteri  Gram  positif  atau  bakteri  Gram negatif,  memiliki  bentuk  batang ( bacillus )  atau  bulat  ( coccus )  (Ulinnuha,  2018). Pengamatan  mikroskopik  dilakukan melalui  hasil  koloni  media  MRSA  dan  BA. Hasil identifikasi makroskopis  dapat dilihat pada Gambar 2 dan Tabel 2.

## Gambar 2 Pewarnaan Gram SCOBY Kombucha
A. Batang ( Bacillus ) B. Oval
Tabel 2 Identifikasi  Mikroskopis  SCOBY dengan Teh Putih dan Gula Merah
Identifikasi Mikroskopis (Morfologi Sel) Bentuk Gram Bacillus Positif Oval Positif
Berdasarkan hasil penelitian didapatkan 2 sel berbeda. Secara mikroskopis koloni pada media MRSA baik sampel kontrol maupun sampel uji memiliki bentuk sel batang (bacillus) dan bersifat   Gram   positif   sedangkan   pada media BA baik sampel kontrol maupun sampel uji memiliki bentuk sel oval dan bersifat Gram positif.

## Identifikasi Spesies
Identifikasi spesies bakteri secara langsung bisa menggunakan alat otomatis vitek 2 dan vitek MS. Vitek 2 merupakan alat analisis mikrobiologi dengan prinsip advance colorymetry  dan turbidimetry  (Paramitha,  2020).  Sementara itu,  Vitek  MS  merupakan salah  satu  jenis  spektrofotometri  massa  dengan  prinsip  soft  ionization  (Kemalaputri, Jannah, dan Budiharjo, 2017). Identifikasi spesies dilakukan melalui hasil isolat media MRSA dan BA. Hasil identifikasi spesies dapat dilihat pada Tabel 3.

## Tabel 3 Identifikasi Spesies SCOBY dengan Teh Putih dan Gula Merah
Identifikasi Spesies Spesies Akurasi Candida lambica 33,3% Candida inconspicua 33,3% Candida krusei 33,3% S. cerevisiae 50% Candida spherica 50%
Berdasarkan  hasil  penelitian  didapatkan  5  spesies  berbeda.  Identifikasi  spesies pada  media  MRSA  baik  sampel  kontrol maupun  sampel  uji  tidak  dapat  teridentifikasi oleh alat vitek MS. Sementara itu, pada media BA sampel uji didapatkan hasil 5 jenis spesies  yeast  dalam  satu  famili  yang  sama,  yaitu  Saccharomycetaceae  dengan  spesies Saccharomyces  cerevisiae,  Candida  spherica,  Candida  lambica,  Candida  inconspicua,
dan Candida krusei sedangkan pada media BA sampel kontrol tidak dapat teridentifikasi oleh alat vitek 2.

## Pembahasan Identifikasi Makroskopis
Pengamatan  makroskopis  bakteri  asam  laktat  dilakukan  dengan  mengamati secara  langsung  morfologi  setiap  koloni bakteri  asam  laktat  yang  tumbuh  pada  media agar (Santosa dan Retnaningrum, 2020). Koloni bakteri asam laktat yang ditemukan pada penelitian ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Djasmasari dan Rahmatia (2020), yaitu ciri makroskopis koloni bakteri asam laktat dari SCOBY kombucha adalah berbentuk  bundar,  elevasi  cembung,  tepian  rata,  dan  warna  putih  susu.  Hal  ini  sesuai dengan pernyataan Kurnia, Amir, dan Handayani (2020) yang menyatakan bahwa koloni yang  diduga  bakteri  asam  laktat  memiliki  warna  putih  susu  hingga  putih  kekuningan, bentuk bulat, dan tepian berwarna bening.
Koloni  yeast  yang  dapat  berpotensi  sebagai  probiotik  yang  ditemukan  pada penelitian ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Linawati, Rusmiyanto, dan Kurniatuhadi (2021), yaitu solate yeast probiotik yang ditemukan memiliki bentuk koloni bulat,  tekstur  koloni  yeast  krim  dan  kental  berwarna  putih  krem,  elevasi  koloni  yeast cembung dan sedikit menonjol, tepian rata dan memiliki diameter koloni yang bervariasi pada  setiap  solate.  Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan  Sari,  Saputro,  dan  Muhibuddin (2016)  yang  menyatakan  bahwa  koloni  yeast  probiotik  memiliki  morfologi  koloni berbentuk  bulat,  berwarna  putih  dan  krem,  tekstur  krim,  permukaan  halus  berkilau (smooth shiny), dengan elevasi cembung dan sedikit menonjol.

## Identifikasi Mikroskopis
Pengamatan mikroskopis bakteri asam laktat dilakukan dengan teknik pewarnaan Gram untuk diamati sifat Gram dan bentuk selnya dibawah mikroskop dengan perbesaran 100x  (Amaliah,  Bahri,  dan  Amelia,  2018).  Hasil  pewarnaan  Gram  bakteri  asam  laktat yang  ditemukan  pada  penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Karyantina  dan  Sumarmi  (2021),  yaitu  ditemukan  sel  berbentuk  batang  (bacillus)  dan bersifat  Gram  positif  yang  diduga  sebagai  bakteri  asam  laktat  dari  fermentasi  teh kombucha.
Hal  ini  sesuai  dengan  pernyataan  Santosa  dan  Retnaningrum  (2020)  yang menyatakan  bahwa  kelompok  bakteri  asam  laktat  memiliki  sel  berbentuk  batang (bacillus)  dan  bersifat  Gram  positif,  ciri  tersebut  merupakan  bakteri  asam  laktat  yang termasuk dalam genus Lactobacillus. Hasil pewarnaan Gram yeast yang dapat berpotensi sebagai  probiotik  yang  ditemukan  pada  penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Linawati,  Rusmiyanto,  dan  Kurniatuhadi  (2021),  yaitu  isolat  yeast probiotik yang ditemukan memiliki bentuk sel oval, terwarnai ungu, dan bersifat Gram positif. Hal ini sesuai dengan pernyataan Puspita, Nadia, Immanuela, dan Titania (2020) yang menyatakan bahwa koloni yeast probiotik memiliki morfologi sel berbentuk bulat
atau oval, memiliki ukuran berbeda- beda yang dipengaruhi oleh strain dengan panjang 5-20 µm dan lebar 1-10 µm.

## Identifikasi Spesies
Identifikasi spesies bakteri asam laktat pada  penelitian ini dilakukan menggunakan alat otomatis vitek 2 dan vitek MS. Koloni yang diduga bakteri asam laktat ditemukan  dengan  bentuk  sel  batang  (bacillus)  Gram  positif  pada  sampel  uji  maupun sampel  control  divitek  menggunakan  alat  otomatis  vitek  MS  didapatkan  hasil  no identification (tidak teridentifikasi).
Hal tersebut dapat terjadi karena spesies bakteri yang terdapat pada koloni tidak terdapat  pada  data  sistem  alat  vitek  MS.  Alat  vitek  MS  yang  belum  dilakukan  update software hanya menampilkan sedikit spesies Lactobacillus. Hasil penelitian Jayabalan, Malbaša, Lončar, Vitas, dan Sathishkumar (2014) mengidentifikasi Lactobacillus pada teh  kombucha  mendominasi  30%  dari  mikroorganisme.  Hasil  penelitian  Marsh, O’Sullivan, Hill, Ross, dan Cotter (2014) menunjukkan bahwa ekstraksi DNA selulosa kombucha  dari  5  lokasi  geografis,  terdeteksi  beberapa  bakteri  yang  berbeda.  Genus bakteri utama adalah Gluconacetobacter (>85%) dan Lactobacillus (hingga 30%) dengan jumlah genus sub-dominan yang belum terdeteksi sebelumnya pada kombucha.
Koloni yang diduga yeast ditemukan dengan bentuk sel oval berwarna ungu pada sampel  uji  maupun  sampel  kontrol  di  vitek  menggunakan  alat  otomatis  vitek  2.  Pada sampel  uji  dengan  media  MRSA  didapatkan  hasil  low  discrimination  dikarenakan terdeteksi 3 jenis spesies dalam 1 koloni, yaitu Candida lambica, Candida inconspicua, dan  Candida  krusei  dengan  masing-masing  akurasi  spesiesnya  adalah  33,3%.  Pada sampel uji dengan media BA didapatkan hasil low discrimination dikarenakan terdeteksi 2 spesies dalam 1 koloni, yaitu Saccharomyces cerevisiae dan Candida spherica dengan masing-masing akurasi spesiesnya adalah 50%.
Pada  informasi  yang  terdapat  dalam  FAQ  Vitek  ada  kalanya  hasil  identifikasi tidak merujuk ke satu spesies seperti hasil yang probabilitasnya diatas 85%, hal ini terjadi karena  reaksi  biokimia  dari  mikroorganisme  tersebut  mempunyai  kemiripan.  Jika  itu terjadi  maka  hasil  identifikasi  menjadi  low  discrimination  yang  artinya  hasil  reaksi biokimia yang ada kemungkinan mengarah ke mikroorganisme A atau B.
Sementara  itu,  pada  sampel  kontrol  dengan  media  BA  didapatkan  hasil unidentified (tidak teridentifikasi). Pada informasi yang terdapat dalam FAQ Vitek jika ditemukan  lebih  dari  3  taksa  mikroorganisme  dan  menunjukkan  reaksi  biokimia  yang mirip sehingga alat tidak bisa memilih salah satu dari taksa tersebut atau viabilitas dari mikroorganisme  tersebut  tidak  terdeteksi  sehingga  hasil  reaksi  biokimia  menunjukkan minus semua atau reaksi biokimia < 30%.
Hasil penelitian Marsh, O’Sullivan, Hill, Ross, dan Cotter (2014) dan Vīna, Linde, Patetko,  dan  Semjonovs  (2013)  mengidentifikasi  yeast  pada  kombucha  dari  daun  the didapatkan yeast dengan genus Saccharomyces, Zygosaccharomyces, Schizosaccharomyces,  Torulaspora,  Pichia,  Brettanomyces,  Candida,  Kloeckera,  dan Torulopsis.  Greenwalt,  Steinkraus,  dan  Ledford  (2000)  menyatakan  bahwa  kultur kombucha  terdiri  dari  beberapa  mikroorganisme  yeast  pada  genus  Brettanomyces,
Candida,  Mycoderma,  Mycoturula,  Phichia,  Saccharomyces,  Schizoccharomyces, Torulaspora, Toruoplasis, dan Zygosaccharomyces.

## Kesimpulan
Seluruh  isolat  yang  diperoleh  pada  fermentasi  minuman  probiotik  kombucha dengan teh putih dan gula merah didapatkan 2 koloni berbeda pada uji makroskopik, yaitu koloni  dengan  bentuk  bulat,  warna  putih  susu,  tepian  rata  berwarna  bening,  elevasi cembung,  dan  koloni  dengan  bentuk  bulat,  warna  putih  krem,  tepian  rata,  elevasi cembung menonjol. Pada uji mikroskopik didapatkan 2 bentuk sel berbeda, yaitu bakteri dengan  bentuk  sel  batang  (bacillus)  bersifat  Gram  positif  dan  bentuk  sel  oval  bersifat Gram positif. Spesies mikroorganisme yang dapat teridentifikasi adalah yeast dalam satu famili yang sama, yaitu Saccharomycetaceae dengan spesies Saccharomyces cerevisiae, Candida spherica, Candida lambica, Candida inconspicua, dan Candida krusei. Sementara itu,  spesies  bakteri  asam  laktat  yang  diduga  termasuk  genus  Lactobacillus  tidak  dapat teridentifikasi oleh alat vitek.

## BIBLIOGRAFI
Afifah, Nurul. (2010). Analisis kondisi dan potensi lama fermentasi medium kombucha (teh, kopi, rosela) dalam menghambat pertumbuhan bakteri patogen (Vibrio cholerae dan Bacillus cereus) . Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.
Amaliah  ZZ,  Bahri  S,  Amelia  P.  Isolasi  dan  Karakterisasi  Bakteri  Asam  Laktat  dari Limbah Cair Rendaman Kacang Kedelai. Jurnal Fitofarmaka Indonesia [serial online] 2018 [cited 2018]; 5(1):253-257. Available from: URL: https://jurnal.farmasi.umi.ac.id/index .php/fitofarmakaindo/article/view/32 0
Azizah AN, Darma GC, Darusman F. Formulasi SCOBY (Symbiotic Culture of Bacteria and  Yeast)  dari  Raw  Kombucha  Berdasarkan  Perbandingan  Media  Pertumbuhan Larutan  Gula  dan  Larutan  Teh  Gula.  Prosiding  Farmasi  [serial  online]  2020  Aug [cited 2020 Aug 25]; 6(2):325-31. Available from: URL:
https://karyailmiah.unisba.ac.id/inde x.php/farmasi/article/view/23023
Dewi AS, Atifah Y, Farma SA, Yuniarti E, Fadhilla R. Pentingnya Konsumsi Probiotik untuk Saluran Pencernaan dan Kaitannya dengan Sistem Kekebalan Tubuh Manusia. InProsiding Seminar Nasional Biologi [serial online] 2021 Sep [cited 2021 Sep 1]; 1(1):149-156. Available  from:  URL: https://semnas.biologi.fmipa.unp.ac.i d/index.php/prosiding/article/view/2 3.
Dewi  PD.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Kombucha  Teh  Rosella  Terhadap  Bakteri Escherichia coli (Politeknik Kesehatan Kemenkes Denpasar). Skripsi [serial online] 2022  [cited  2022];  pp:1-58.  Available  from:  URL:  http://repository.poltekkes- denpasar.ac.id/id/eprint/9506.
Djasmasari W, Rahmatia L. Isolasi Bakteri Asam Asetat pada SCOBY Kombucha Teh Hijau. Warta Akab [serial online] 2020 Dec [cited 2020
Dec];  44(2):120-125. Available from: URL:https://aka.ac.id/jurnal/index.ph
p/warta_akab/article/view/20
Greenwalt  CJ,  Steinkraus  KH,  Ledford  RA.  Kombucha,  The  Fermented  Tea: Microbiology, Composition, and Claimed Health Effects. Journal of Food Protection [serial online] 2000 Feb [cited 2000 Feb 1]; 63(7):976- 981. Available  from:  URL: https://www.sciencedirect.com/scien ce/article/pii/S0362028X22001600.
Harindana PY, Iswari IS, Setyojatmiko I, Fatmawati NN. Kesesuaian Pewarnaan Gram dengan  Kultur  Darah  Sebagai  Prediktor  Nilai  Kritis  Kasus  Bakteremia  di  Rumah Sakit Umum Pusat Sanglah, Denpasar. Intisari Sains Medis [serial online] 2021 Jul [cited 2021 Jul 16]; 12(2):494-499. Available from: URL:
https://www.isainsmedis.id/index.ph p/ism/article/view/1038
Huyyirnah,  Rosmaniar  R.  Modifikasi  Medium  Menggunakan  Saline-Water  Soluble Fraction  (SSF)  atau  Fraksi  Minyak  Terlarut  untuk  Menumbuhkan  Bakteri Pendegradasi  Hidrokarbon.  Indonesian  Journal  of  Laboratory  [serialonline]  2021 [cited 2021]; 4(2):72-81. Available from: URL:https://journal.ugm.ac.id/ijl/article/vi ew/69282.
Jayabalan  R,  Malbaša  RV,  Lončar  ES,  Vitas  JS,  Sathishkumar  M.  A  Review  on Kombucha  Tea-Microbiology,  Composition,  Fermentation,  Beneficial  Effects, Toxicity, and Tea Fungus. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety [serial  online]  2014  [cited  2014];  13(4):538-  550.  Available  from:  URL: https://ift.onlinelibrary.wiley.com/do i/abs/10.1111/1541-4337.12073
Karyantina  M,  Sumarmi.  Identifikasi  Bakteri  Asam  Laktat  dari  Kombucha  Rosella.
Agrointek: Jurnal Teknologi Industri Pertanian [serial online] 2021 Mar [cited 2021 Mar30]; 15(1):244-252. Available from: URL: https://journal.trunojoyo.ac.id/agroint ek/article/view/7340
Kemalaputri  DW,  Jannah  SN,  Budiharjo  A.  Deteksi  MRSA  (Methicillin  Resistant Staphylococcus aureus) pada Pasien Rumah Sakit dengan Metode MALDI-TOF MS dan Multiplex PCR. Jurnal Akademika Biologi [serial online] 2017 Oct [cited 2017 Oct]; 6(4):51-61.
Khaerah A, Akbar F. Aktivitas Antioksidan Teh Kombucha dari Beberapa Varian Teh yang Berbeda. InProsiding Seminar Nasional LP2M UNM [serial online] 2019 [cited 2019]pp:472- 476.Availablefrom:URL:https://spada.uns.ac.id/pluginfile.php/260581/mod_resourc e/content/1/Jurnal%20kombucha.pdf
Kurnia  M,  Amir  H,  Handayani  D.  Isolasi  dan  Identifikasi  Bakteri  Asam  Laktat  dari Makanan  Tradisional  Suku  Rejang  di  Provinsi  Bengkulu:  “Lemea”.  ALOTROP, Jurnal  Pendidikan  dan  Ilmu  Kimia  [serial  online]  2020  [cited  2020];  4(1):25-32. Available from: URL: https://ejournal.unib.ac.id/alotropjurn al/article/view/13705
Linawati, Rusmiyanto E, Kurniatuhadi R. Khamir Potensial Probiotik Hasil Isolasi dari Fermentasi  Jus  Jeruk  Siam  (Citrus  nobilis  var.  microcarpa).  Biologica  Samudra: Jurnal Biologica Samudra [serial online] 2021Dec [cited 2021 Dec31]; 3(2):115-132. Available from: URL: https://www.ejurnalunsam.id/index.p hp/jbs/article/view/4101
Marsh AJ, O'Sullivan O, Hill C, Ross RP, Cotter PD. Sequence-based Analysis of The Bacterial and Fungal Compositions of Multiple Kombucha (Tea Fungus) Samples. Food Microbiology [serial online] 2014 [cited 2014]; 38:171-178. Available from: URL: https://www.sciencedirect.com/scien ce/article/abs/pii/S074000201300184 6
Paramitha  NW.  Identifikasi  dan  Uji  Sensitivitas  Escherichia  Coli  Terhadap  Antibiotik Siprofloksasin  pada  Penderita  Infeksi  Saluran  Kemih  di  Rumah  Sakit  Daerah Mangusada  (Politeknik  Kesehatan  Denpasar).  Skripsi  [serial  online]  2020 [cited2020]; pp:1-62. Available from: URL:http://repository.poltekkes- denpasar.ac.id/5485/
Puspita  D,  Nadia  E,  Immanuela  E,  Titania  MC.  Isolasi,  Identifikasi  dan  Uji  Produksi Yeast  yang  Diisolasi  dari  Nira  Kelapa.  Biosfer:  Jurnal  Biologi  dan  Pendidikan Biologi [serial online] 2020 Jun [cited 2020 Jun 1]; 5(1):1-5. Available from:  URL: https://www.journal.unpas.ac.id/inde x.php/biosfer/article/view/2395
Rambitan G, Pelealu JJ, Tallei TE. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Asam Laktat Hasil Fermentasi Kol Merah (Brassica oleracea L.) Sebagai Probiotik Potensial (Isolation and  Identification  Lactic  Acid  Bacteria  from  Red  Cabbage  (Brassica  oleracea  L.) Fermentation as Potential Probiotic).  Jurnal  Bioslogos  [serial  online]  2018  Aug [cited 2018 Aug]; 8(2):33-37. Available  from: URL:https://ejournal.unsrat.ac.id/ind ex.php/bioslogos/article/view/21447
Riadi S, Setiyawati D, Situmeang S. Isolasi dan Uji Potensi Bakteri Asam Laktat Asal Kimchii  dan  Teh  Kombucha  dalam  Menghambat  Bakteri  Patogen.  Jurnal  Kesmas Prima Indonesia [serial online] 2020 [cited 2020]; 2(1):25-29. Available from: URL: http://jurnal.unprimdn.ac.id/index.ph p/JKPI/article/view/891
Riswanto  D,  Setiawan  U.  Minuman  Probiotik  Kombucha  dengan  Ekstrak  Daun  Teh Hijau Sebagai Herbal Alternatif untuk Meningkatkan Sistem Kekebalan Imun Tubuh.
Jurnal Lentera: Kajian Keagamaan, Keilmuan dan Teknologi [serial online]2022 Sep [cited 2022 Sep 4]; 21(2):200-8. Available from:URL:
http://www.ejournal.staimnglawak.ac .id/index.php/lentera/article/view/800
Santosa  EA,  Retnaningrum  E.  Karakterisasi  Fenotipik  dan  Aktivitas  Antimikrobia Bakteri Asam Laktat dari Limbah Produksi Tempe. Jurnal Sains Dasar [serial online] 2020 [cited 2020]; 9(1):1-10.
Sari DY, Saputro TB, Muhibuddin A. Uji Potensi Fermentasi Etanol Yeast Tanah yang Diisolasi dari Metode Budidaya SDN di Daerah Batu, Jawa Timur. Jurnal Sains dan Seni  ITS  [serial  online]  2016  Feb  [cited 2016];  5(2):39-43.  Available  from:  URL: http://ejurnal.its.ac.id/index.php/sains _seni/article/view/20601
Ulinnuha  A.  Isolasi  dan  Karakterisasi  Bakteri  Asam  Laktat  (BAL)  dari  Kulit  Pisang Kepok (Musa balbisiana)  Sebagai Antibakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus (Universitas Islam Negeri  Maulana  Malik  Ibrahim).  Skripsi  [serial  online] 2018 [cited 2018]; pp:1-88. Available from: URL:http://etheses.uin- malang.ac.id/id/eprint/14098
Verawati  CS.  Pengaruh  Variasi  Jenis  Gula  Terhadap  Kadar  Alkohol,  Total  Asam Tertitrasi (TAT), dan Uji Organoleptik Hasil Fermentasi Kombucha Teh Daun Sukun (Artocarpus altilis) (Universitas Sanata Dharma). Skripsi [serial online] 2019 [cited 2019]; pp:1-70.
Vīna I, Linde R, Patetko A, Semjonovs P. Glucuronic Acid From Fermented Beverages:
Biochemical Functions in Humans and Its Role in Health

## Copyright holder:
Barrianti, Cep Wahyu, Bunga Salma Fitriani (2023)
First publication right: Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia
This article is licensed under: