Jurnal Pharmascience, Vol .03, No.02, Oktober 2016, hal: 80 - 88 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/
Research Article

## Perbandingan Efek Ekstrak Etanol, Fraksi N-
Butanol, dan Fraksi Petroleum Eter Daun Kembang Bulan ( Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray)

## Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Mencit Jantan Yang Diinduksi Aloksan
*Khoerul Anwar 1 , Ade Putri Leluni Ngindra 1 , Ria Eka Putri Hariadi 1 , Nadia Kamalia 1 , Heri Budi Santoso 2
1 Program Studi Farmasi, FMPA, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru 2 Program Studi Biologi, FMIPA, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru *Email : khoerul.anwar@unlam.ac.id

## ABSTRAK
Secara  empiris  daun  kembang  bulan  digunakan  oleh  masyarakat  daerah Loksado,  Kalimantan  Selatan  untuk  pengobatan  diabetes.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  perbandingan  aktivitas  ekstrak  etanol, fraksi n -butanol,  dan  fraksi petroleum eter daun kembang bulan ( Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray)  terhadap penurunan  kadar  glukosa  darah  pada  mencit  jantan  diabetes  dengan  penginduksi aloksan. Serbuk kering  daun  kembang  bulan diekstraksi  menggunakan  etanol  dengan metode  maserasi,  kemudian  ekstrak  etanol  difraksinasi  menggunakan n -butanol  dan petroleum eter. Ekstrak etanol, fraksi n -butanol dan fraksi petroleum eter yang didapat diuapkan sampai menjadi ekstrak kering dan akan digunakan sebagai sampel uji. Dua puluh  lima  ekor  mencit  diinduksi  dengan  aloksan  dosis  150  mg/kgBB  secara intraperitonial  pada  hari  ke-2  dan  ke-4.  Mencit  hiperglikemik  dibagi  menjadi  5 kelompok, yaitu K1, K2, K3, K4, dan K5. Sampel uji diberikan selama 7 hari berturut- turut  setelah  induksi  aloksan  pada  hari  ke-4.  Kelompok  K1  sebagai  kontrol  negatif diberi  Na-CMC  0,5%.  Kelompok  K2  kontrol  positif  diberi    glibenklamid  0,6525 mg/kgBB. Kelompok K3, K4, dan K5 berturut-turut diberikan ekstrak etanol, fraksi n - butanol  dan  fraksi  petroleum  eter  daun  kembang  bulan  dengan  dosis  100  mg/kgBB. Kadar  glukosa  darah  puasa  diukur  dengan  menggunakan  GlucoDr ® sebelum  hewan uji  diinduksi  aloksan  (hari  ke-0),  hari  ke-2,  4,  8,  dan  11.  Hasil  penelitian  menunjukan bahwa ekstrak etanol, fraksi n -butanol dan fraksi petroleum eter daun kembang bulan mampu  menurunkan  kadar  glukosa  darah  yang  berbeda  bermakna  dibandingkan kontrol  negatif  (p<0,05).  Kelompok  yang  diberi  perlakuan  fraksi  petroleum  eter memberikan penurunan  kadar glukosa darah terbesar (41,19%).
Kata kunci: Tithonia diversifolia , ekstrak etanol, fraksi n -butanol, fraksi petroleum eter, glukosa darah, aloksan

## ABSTRACT
Leaf of kembang bulan (Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray) empirically used by  local  communities  of  Loksado,  South  Kalimantan  for  the  treatment  of  diabetes.  This study  aimed  to  compare  the  activity  of  the  ethanolic  extract,  n-butanol  fraction  and petroleum  ether  fraction  of  kembang  bulan  leaves  to  decrease  blood  glucose  levels  in alloxan-induced  diabetic  male  mice.  Dry  powder  of  kembang  bulan  leaves  extracted  by maceration  method  using  ethanol,  then  ethanol  extract  was  fractionated  using  n-butanol and petroleum ether. Obtained extract was evaporated to become dry and will be used as a test sample. Twenty-five mice induced by alloxan dose of 150 mg / kg intraperitoneally on 2 nd and 4 th day. Hyperglycemic mice were divided into 5 groups, ie K1, K2, K3, K4, and K5. The  test  sample  is  given  for  7  days  in  a  row  after  alloxan  induction  on  4 th day.  K1  as  a negative  control  group  was  given  0.5%  Na-CMC.  K2  (positive  control  group)  was  given 0.6525  mg/kgBW  of  glibenclamide.  Group  K3,  K4,  and  K5  successively  administered  the ethanolic extract, n-butanol fraction and petroleum ether fraction of kembang bulan leaves in a dose of 100 mg/kgBW. Fasting blood glucose levels were measured using GlucoDr® before alloxan induction (day 0) and the day after the treatment,  namely on days 2, 4, 8, and  11.  The  results  showed  that  the  ethanolic  extract,  n-butanol  fraction  and  petroleum ether fraction of kembang bulan leaf can lower blood glucose levels significantly different compared to the negative control (p <0.05). The group treated fractions of petroleum ether gives the greatest reduction in blood glucose levels (41.19%).
Keywords: Tithonia diversifolia, ethanolic extract, n-butanol fractions, of petroleum ether fractions, blood glucose, alloxan

## I. PENDAHULUAN
Diabetes mellitus (DM) merupakan salah  satu  masalah  kesehatan  yang berdampak  pada  produktivitas  dan  dapat menurunkan sumber daya manusia.
Penyakit  ini  tidak  hanya  berpengaruh secara  individu,  tetapi  sistem  kesehatan suatu  negara  (Depkes,  2003).  Alternatif pengobatan  diabetes  menggunakan  obat sintetis  memang  telah  banyak  dilakukan seperti terapi insulin, sulfonilurea, meglitinid dan golongan lainnya.
Banyaknya  efek  samping  dan  resiko terjadinya  interaksi  obat  serta  harga  obat- obat sintetis yang relatif mahal menyebabkan naiknya kecenderungan
penggunaan    bahan    alam  sebagai  terapi pengobatan DM.
Daun  kembang  bulan  ( Tithonia diversifolia (Hemsley)  A.  Gray)  secara empiris  telah  digunakan  oleh  masyarakat sebagai  obat  DM.  Masyarakat  Loksado, Kandangan biasanya menggunakan tumbuhan  ini  dengan  cara  merebus  daun kembang bulan dan meminum air rebusannya.  Penelitian  terdahulu  oleh Lingga et  al. (2010),  dengan  metode toleransi  glukosa,  membuktikan  bahwa infusa  daun  kembang  bulan  mempunyai efek  hipoglikemia  terhadap  tikus  putih. Keadaan  hiperglikemia  pada  uji  toleransi glukosa  hanya  berlangsung  beberapa  jam
setelah  pemberian  glukosa  sedangkan dengan  menggunakan  aloksan  akan  cepat menimbulkan  hiperglikemia  permanen dalam  waktu  dua  sampai  tiga  hari. Aloksan  akan  merusakan  sel  β  pankreas mencit  sehingga  menghambat  sekresi insulin  dan  mengakibatkan  kadar  glukosa darah meningkat.
Daun  kembang  bulan  mengandung saponin,  flavonoid  dan  polifenol  yang menyebabkan  adanya  efek  antidiabetes. Berdasarkan  penelitian  Sulistijowati  & Gunawan  (2001),  diketahui  bahwa  daun kembang bulan memiliki kandungan kimia sedikitnya  12  senyawa  terpenoid,  dan  14 senyawa  flavonoid.  Studiawan  &  Santosa (2005),  membuktikan  bahwa  senyawa flavonoid  memiliki  aktivitas  menurunkan kadar  glukosa  dalam  darah.  Etanol merupakan  pelarut  organik  yang  bersifat polar  sehingga  dapat melarutkan  seluruh golongan    metabolit    sekunder.    Semua senyawa    dapat    terlarut  dalam    ekstrak etanol    tersebut,    sehingga    senyawa- senyawa  tersebut  masih  dapat dipisahkan lagi    menjadi    beberapa    fraksi. n -Butanol digunakan  untuk  memisakan  senyawa- senyawa  yang  cenderung  polar  seperti flavonoid,    polifenol    dan    saponin. Petroleum  eter  merupakan  pelarut  organik yang  bersifat  nonpolar  di  mana  dapat melarutkan    senyawa-senyawa,  seperti flavonoid, steroid dan terpenoid (Harborne, 1987).
Penelitian  ini  dilakukan  pada  ekstrak etanol, fraksi n -butanol dan fraksi petroleum  eter  daun  kembang  bulan. Tujuan  penelitian  ini adalah untuk mengetahui perbandingan aktivitas ekstrak etanol, fraksi n -butanol,  dan  fraksi petroleum  eter  daun  kembang  bulan ( Tithonia  diversifolia (Hemsley)  A.  Gray) terhadap  penurunan  kadar  glukosa  darah pada  mencit  jantan  diabetes  dengan penginduksi  aloksan.  Manfaat  penelitian ini diharapkan dapat mendukung pengembangan  daun  kembang  bulan sebagai antidiabetes.

## II. METODE

## A. Alat dan Bahan penelitian
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  alat-alat  gelas laboratorium  (Pyrex  Iwaki  Glass®),  alat maserasi,  blender  (National®), blood glucose  test  meter (GlucoDr®), hotplate , jarum  intraperitoneal  (Terumo®),  neraca analitik  (Ohaus®),  timbangan  mencit (Adam®), vacuum  rotary  evaporator (Heidolph®),    sonde  oral  (Terumo®),  dan waterbath (Memment®)..
Bahan  yang  digunakan,  yaitu  daun kembang  bulan,  etanol  96%  (Brataco), aloksan Sigma Aldrich), n-butanol (teknis),  petroleum  eter  (teknis),  asam klorida  (HCl),  asam  asetat  anhidridat  1%, aquadest, , etanol 70% (Brataco), glibenklamid  (Kimia  Farma),  larutan  besi
(III)  klorida  (FeCl3),  NaCl  0,9%,  Na- CMC,  reagen Mayer ,  dan  serbuk  logam magnesium.

## B. Hewan uji
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah mencit  jantan  galur Balb/c ,  umur  2-3 bulan,  dalam  keadaan  sehat  dan  bobot berkisar antara 20-30 g.

## C. Cara Kerja

## 1. Pengolahan Sampel
Daun  kembang  bulan  diambil  dari daerah  Loksado,  Kalimantan  Selatan. Setelah  dicuci,  daun  kembang  bulan dikeringanginkan  tanpa  terkena  sinar matahari  langsung,  lalu  diblender  hingga menjadi serbuk halus.

## 2. Pembuatan Ekstrak Etanol
Serbuk  kasar  daun  kembang  bulan sebanyak  978,98  g  dimasukkan  ke  dalam maserator  dan  ditambahkan  etanol  70% kemudian  dimaserasi  selama  24  jam. Maserat  ditampung  dan  proses  maserasi diulang sebanyak 2 kali. Ekstrak cair yang diperoleh diuapkan dengan rotary evaporator dan dikeringkan hingga diperoleh  ekstrak  kental  dan  ditimbang (Studiawan & Santoso, 2005).

## 3. Pembuatan fraksi
Ekstrak    kental    disuspensikan dengan    air    (1:2)    kemudian  dimasukkan ke  dalam  corong  pisah,  ditambahkan  50 mL    pelarut    petroleum    eter,  digojok  dan
didiamkan  selama  30  menit  hingga terbentuk  2  lapisan.  Lapisan  bagian    atas diambil  sebagai    fraksi    petroleum    eter. Selanjutnya  lapisan  bawah  ditambahkan dengan    50  mL  pelarut n -butanol  yang telah  dijenuhkan  dengan  5  bagian  air, digojok  dan  didiamkan  selama  30  menit hingga terbentuk 2 lapisan. Lapisan bagian atas  tersebut  diambil  sebagai  fraksi n - butanol.  Setiap  penambahan  dilakukan replikasi  sebanyak  2  kali.  Masing-masing fraksi  diuapkan  hingga  diperoleh  bobot tetap.
4. Identifikasi  kimia  ekstrak  dan fraksi  daun kembang bulan
a. Reaksi identifikasi terhadap alkaloid
Ekstrak  atau  fraksi  daun  kembang  bulan sebanyak  0,5  g  ditambahkan  dengan  1  ml asam klorida 2 N dan 9 ml air, dipanaskan di  atas  penangas  air  selama  2  menit, dinginkan  dan  saring.  Tiga  tetes  filtrat dipindahkan pada kaca arloji dan ditambahkan  pereaksi Mayer (Depkes  RI, 1989).
b. Reaksi identifikasi terhadap saponin
Sebanyak  0,5  g  ekstrak  atau  fraksi  daun kembang  bulan  dalam  tabung  reaksi, ditambahkan  10  ml  akuades,  didinginkan dan  dikocok  selama  10    detik.  Adanya busa stabil selama 10 menit setinggi 1 – 10 cm  menandakan  adanya  saponin  (Depkes RI, 1989).
c. Reaksi identifikasi terhadap flavonoid Ekstrak  atau  fraksi  daun  kembang  bulan dilarutkan  dalam  air,  disaring  kemudian diteteskan  pada  kertas  saring  sebanyak  2 tetes. Selanjutnya diuapkan di atas amonia. Bila terbentuk warna kuning hingga jingga menunjukkan adanya flavonoid (Harborne, 1987).
d. Reaksi identifikasi terhadap tanin Ekstrak  atau  fraksi  daun  kembang  bulan ditambahkan  dengan  larutan  besi  (III) amonium sulfat P yang telah diencerkan 5 kali.  Bila  terbentuk  warna  hijau  atau  biru hingga  hitam  menunjukkan  adanya  tanin (Depkes RI, 1979).
e. Reaksi identifikasi terhadap steroid Beberapa  mg  ekstrak  atau  fraksi  daun kembang  bulan  dilarutkan  dalam  2-3  ml kloroform, lalu ditambahkan 10 tetes asam asetat  anhidrida  dan  2-3  tetes  asam  sulfat pekat.  Terbentuknya  warna  biru-hijau menandakan  adanya  steroid  (Auterhoff  & Kovar, 2002).

## 5. Pengujian aktivitas antidiabetes
Dua  puluh  lima  ekor  mencit dipuasakan  (tidak  makan  tetapi  tetap minum)  selama  12  jam.  Berat  badan  dan diukur  kadar  glukosa  darah  puasa  awal mencit diukur. Aloksan dosis 150
mg/kgBB  diberikan  secara  intraperitonial pada hari ke-0 dan 2. Pada hari ke-2 dan 4 kadar  glukosa  darah  puasa  mencit  juga diukur.  Mencit  yang  telah  diabetes  (kadar glukosa darah >150 mg/dL)
dikelompokkan menjadi 5 kelompok, yaitu (1) KN  (kontrol negatif) diberikan suspensi Na-CMC 0,5% secara peroral, (2) KP  (kontrol  positif)  diberikan  suspensi glibenklamid dengan dosis 0,6525 mg/kgBB secara peroral, (3) D1 diberikan suspensi  ekstrak  etanol  daun  kembang bulan  dosis  100  mg/kgBB  secara  peroral, (4) D2 diberikan suspensi fraksi n -butanol daun  kembang  bulan  dosis  100  mg/kgBB secara  peroral,  dan  (5)  D3  diberikan suspensi  fraksi  petroleum  eter  daun kembang bulan dosis 100 mg/kgBB secara peroral. Perlakuan diberikan selama 7 hari berturut-turut.  Kadar  glukosa  darah  puasa mencit  diukur  pada  hari  ke-8  dan  11 dengan menggunakan glukometer (Studiawan & Santoso, 2005).

## D. Analisis Data
Data diproses menggunakan program SPSS. Data dianalisis menggunakan  uji  beda  parametrik  One Way  Anova  satu  arah  dengan  taraf kepercayaan 95%. Analisis data dilanjutkan dengan uji LSD untuk mengetahui  kelompok  mana  saja  yang mempunyai perbedaan bermakna.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Identifikasi  Kimia  Daun  Kembang

## Bulan
Hasil determinasi yang telah dilakukan di  Laboratorium Dasar  Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam
Universitas Lambung
Mangkurat Banjarbaru  menyatakan  bahwa  tanaman yang  digunakan  pada  penelitian  adalah Tithonia  diversifolia (Hemsley)  A.  Gray, suku Asteraceae. Uji identifikasi kandungan  kimia  dilakukan  terhadap ekstrak dan fraksi yang didapat (Tabel 1).
Tabel 1. Hasil Uji Identifikasi Kimia Daun Kembang Bulan
Uji  identifikasi  kandungan  kimia menunjukkan  perbedaan  kandungan  di antara  fraksi  PE  dengan  ekstrak  etanol maupun  fraksi n -butanol.  Petroleum  eter dengan  sifatnya  yang  relatif  non  polar mampu  menarik  steroid.  Ekstrak  etanol maupun  fraksi n -butanol  daun  kembang bulan tidak mengandung steroid. Di dalam fraksi PE tidak terdeteksi tanin sebagaimana  terdapat  di  ekstrak  etanol maupun  fraksi n -butanol  daun  kembang bulan.

## B. Induksi Aloksan
Mencit  diinduksi  dengan  aloksan secara  intraperitonial  untuk  menaikkan kadar  glukosa  darah.  Kadar  glukosa  darah mencit  diukur  pada  hari  ke-2,  ternyata
pada hari ke-2 tidak terjadi kenaikan kadar glukosa  darah  pada  mencit  sehingga mencit  disuntik  lagi  dengan  aloksan. Setelah  2  hari  kemudian  atau  hari  ke-4 dilakukan  kembali  pengukuran  kadar glukosa  darah  mencit  ternyata  terjadi kenaikkan  kadar  gula  darah  mencit (Gambar  1).  Mencit  dikatakan  mengalami diabetes  jika  kadar  glukosa  darahnya  > 150  mg/dl.  Aloksan  memiliki  bentuk molekul  yang  mirip  dengan  molekul glukosa,  sehingga  transporter  glukosa GLUT-2  dalam  membran  plasma  sel  β pankreas  menerimanya  sebagai  analog glukosa  dan  membawanya  ke  dalam sitosol.  Aloksan  yang  masuk  secara selektif  diakumulasi  dan  menimbulkan efek  toksik  pada  sel  β  pankreas  (Lenzen, 2008). Rusaknya    sel    β-pankreas mengakibatkan    berkurangnya    produksi insulin  sehingga    terjadi    peningkatan kadar  glukosa  darah.
Gambar  1 .  Kadar  glukosa  darah  mencit (mg/dL)  sebelum  dan  setelah diinduksi  dengan  aloksan.
0 50 100 150 200 250 Sebelum Induksi Setelah Induksi K ad ar G lu ko sa Dar ah ( m g/ d l)
Tanda * menunjukkan adanya  perbedaan  bermakna dibandingkan sebelum induksi (p<0,05)
Pada  penelitian  ini  kadar  glukosa darah  diukur  menggunakan  GlucoDr. Keuntungan dari penggunaan alat ini yaitu sampel  darah  yang  digunakan  sangat sedikit,  mudah,  dan  hasil  dapat  diperoleh dengan  cepat  dalam  waktu  11  detik.  Alat pengukur  glukosa  darah  ini  juga  memiliki keterbatasan  tidak  dapat  mengukur  kadar glukosa  darah  di  atas  600  mg/dL.  Metode enzimatis  lainnya  seperti  GOD  PAP memerlukan  jumlah  sampel  darah  yang banyak.  Pengambilan  darah  yang  terlalu banyak  dapat  mengakibatkan  hewan  uji mengalami stres sehingga dapat mempengaruhi hasil penelitian (Soemardji, 2004).

## C. Penurunan Kadar Glukosa Darah
Pemberian  bahan  uji  dilakukan pada  hari  ke-5  yaitu  sehari  setelah terjadinya  kenaikkan  kadar  glukosa  darah mencit dan dilakukan selama 7 hari.  Hasil pengukuran  kadar  glukosa  darah  mencit menunjukkan bahwa pemberian glibenklamid  (kontrol  positif),  ekstrak etanol, fraksi n-butanol dan fraksi petroleum  eter  daun  kembang  bulan mampu  menurunkan  kadar  glukosa  darah
dengan persentase penurunan yang berbeda-beda (Gambar 2).
Keterangan : KN = Kontrol negatif Na-CMC 0,5% KP  = Kontrol positif glibenklamid 0,6525 mg/kgBB D1 = Ekstrak etanol daun kembang bulan 100 mg/kgBB D2 = Fraksi n -butanol daun kembang bulan 100 mg/kgBB D3 = Fraksi petroleum eter daun kembang bulan 100 mg/kgBB
Gambar  2 .  Persen  penurunan  kadar glukosa darah setelah pemberian
perlakuan selama  7  hari. Tanda  * menunjukkan adanya perbedaan bermakna dibandingkan kontrol negatif (p<0,05)
Hasil    uji    LSD  menunjukkan semua  kelompok  perlakuan  memberikan penurunan  glukosa  darah  yang  berbeda bermakna  dibandingkan  kontrol  negatif (p<0,05).  Pemberian  fraksi  petroleum  eter daun  kembang  bulan  100  mg/kgBB memberikan  penurunan  glukosa  darah yang paling besar dibandingkan kelompok yang  lain  dan  sebanding  dengan  ekstrak etanol  daun  kembang  bulan  dosis  100 mg/kgBB  walaupun  lebih  kecil  dari kontrol positif glibenklamid 0,6525
-80 -60 -40 -20 0 20 40 60 80 KN KP D1 D2 D3
P e nur unan K adar G lukosa D arah (%)
mg/kgBB.    Perbedaan  aktivitas  penurunan glukosa  darah  ini  disebabkan  karena perbedaan kadar kandungan senyawa aktif pada  ekstrak  etanol,  fraksi n -butanol, maupun  fraksi  petroleum  eter  daun kembang bulan.
Dari  hasil  penelitian  diketahui bahwa  ekstrak  etanol  dan  fraksi n -butanol daun kembang bulan mempunyai kandungan kimia berupa alkaloid, saponin, flavonoid, dan tanin. Fraksi petroleum eter daun kembang bulan mengandung alkaloid,  flavonoid,  steroid    dan    saponin. Aktivitas  antidiabetes  ekstrak  etanol  daun kembang  bulan  terjadi  karena  aktivitas senyawa  kimia  yang  terkandung  di dalamnya  yang  bekerja  secara  sinergis dalam  menurunkan  kadar  gula  darah. Mekanisme  penurunan  gula  darahnya tergantung kepada mekanisme dari masing-masing senyawa.
Alkaloid memiliki kecenderungan melepaskan insulin dari sel β pankreas dan memiliki  kemampuan  untuk  melindungi sel  β  pankreas  dari  kerusakan  pankreas akibat  induksi  aloksan  pada  hewan  uji (Jeyanthi,  2012).  Saponin  memiliki  efek sebagai antioksidan yang akan melindungi sel  β  dan  membuat  besarnya  degranulasi dari  insulin  berkurang  sedikit  dari  yang sebelumnya  (Yin et  al .,  2004).  Saponin secara  signifikan  memperbaiki  gejala klinik  dari  diabetes  termasuk  kadar glukosa darah yang tinggi dan  menyerupai
mekanisme  kerja  penghambat  enzim  α- glukosidase (Deng et al., 2012). Flavonoid membantu  proses  regenerasi  dari  sel  β pankreas  dengan  cara  menangkal  radikal bebas,  meningkatkan  pelepasan  insulin, dan  menstimulasi  penyerapan  Ca 2+ dari jaringan  sel  yang  sangat  efektif  pada keadaan tidak memiliki insulin yang cukup (Sandhar et  al .,  2011).  Tanin  diketahui mampu  menghambat  kehilangan  transport glukosa  yang  menghasilkan  insulin.  Tanin juga  diduga  menginduksi  fosforilasi  dari reseptor insulin dengan membentuk transporter  glukosa  4  (GLUT-4)  (Liu et al .,  2005).    Steroid    menurunkan    glukosa darah    melalui    pengaruhnya    terhadap kerja insulin  pada  tingkat  selular,  distal reseptor    insulin    dan    menurunkan produksi  glukosa  di  hati  (Raman et  al ., 2012).

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat disimpulkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol, fraksi n- butanol dan fraksi petroleum  eter  daun  kembang  bulan mampu  menurunkan  kadar  glukosa  darah. Pemberian  fraksi  petroleum  eter  daun kembang  bulan  dosis  100  mg/  kgBB memberikan  persentase  penurunan  kadar glukosa  darah  yang  paling  besar  yaitu 41,19%.

## DAFTAR PUSTAKA
Auterhoff,  H  &  K.  A.  Kovar.  2002. Identifikasi  Obat. Terjemahan  N.
C. Sugiarso. Penerbit ITB, Bandung.
Deng,  Y.,  He  K.,  Ye  X.,  Chen  X.,  Huang
J., Li X., Yuan L., Jin Y., Jin Q., & Li  P.  2012.    Saponin    Rich Fraction    from    Polygonatum odoratum  (Mill.)  Druce with more Potential  Hypoglycemic  Effects. Journal  of  Ethnopharmacology . 141(1): 228-33 Depkes  RI.  1989. Materia Medika Indonesia . Jilid VI. Cetakan
Kelima.  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. --------------.  2003. Peran  Diit  dalam
Penanggulangan Diabetes .
Makalah  Pekan  DM  disampaikan dalam  Rangka  Seminar  Pekan
Diabetes, Jakarta.
Harborne,  J.  B.  1987. Metode  Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis  Tumbuhan .  Edisi  ke-
2. Terjemahan  K.  Padmawinata dan I. Soediro . ITB, Bandung. Jeyanthi,  K.A.  2012.  Beneficial  Effect  of Cassia  fistula (L)  Flower  Extract on Antioxidant Defense in
Sterptozotocin  Induced  Diabetic Rats. International  Journal  of
Pharmacy  and  Pharmaceutical Science . Vol. 4, issue 2: 274-276.
Lenzen,  S.  2008.  The  Mechanisms  of alloxan- and streptozotocin- induced diabetes. Diabetologia 51(2): 216–226.
Lingga,  H.  N.,    M.  Faturrakhman.,  S.  W.
Rahmatullah., & R. Heryani. 2010. Kajian  Aktivitas  Infusa  Daun Kembang Bulan (Tithonia diversifolia) sebagai Alternatif Antidiabetes. Laporan PKM Bidang  Penelitian. Fakultas  MIPA
Universitas  Lambung  Mangkurat,
Banjarbaru.
Liu,  X., Kim  J. K., Li  Y.,  Li  J., Liu  F., & Chen  X.  2005.  Tannin  Acid
Stimulation Glucose Transport and Inhibits  Adipocyte  Differentiation in  3T3-L1  Cells. NCBI .  135:  71-
165.
Raman,  B.  V.,  A.  N.  V.  Krishna,  B.  N.
Rao,  M.  P.  Saradhi  &  M.  V.  B. Rao. 2012. Plants with
Antidiabetic  Activities  and  Their Medicinal    Values. International Research Journal of Pharmacy No. 3(3).
Sandhar, H. K., E. Kumar., S. Prasher., P.
Tiwari.,  M.  Salhan.,  &  P.  Sharma.
2011. A Review of Phytochemistry and  Pharmacology  of  Flavonoid. International Pharmaceutica Sciencia . Vol. 1, issue 1, 37.
Soemardji,  A.A.  2004.  Penentuan  Kadar Gula  Darah  Mencit  Secara  Cepat  : Untuk Diterapkan dalam Penapisan Aktivitas  Antidiabetes  In  vivo . Acta  Pharmaceutica. Vol.XXIX,
No. 3 : 115.
Sulistijowati,  A.  &  D.  Gunawan.  2001. Efek  Ekstrak  Daun  Kembang Bulan  ( Tithonia  diversifolia A. Gray)  Terhadap Candida  albicans serta Profil Kromatografinya. Cermin  Dunia  Kedokteran .  130:
32-36.
Studiawan, H & M. H. Santoso. 2005. Uji
Aktivitas Penurunan Kadar
Glukosa  Darah  Ekstrak  Daun Eugenia  polyantha pada  Mencit yang  Diinduksi  Aloksan. Media Kedokteran  Hewan .  2005.  Vol.21, No. 2.
Yin,  X.,  Y.  Zhang.,  H.  Wu.,  X.  Zhu.,  X. Zheng.,  S.  Jiang.,  H.  Zhuo.,  J. Shen.,  L.  Li.,  &  J.  Qiu.  2004. Protective  Effects  of  Astragalus Saponin  I  on  Early  Stage  of Diabetic  Nephropathy  in  Rats.
Journal of Pharmacological
Sciences. 95: 256-266.