## DOI: 10.32663/ja.v%vi%i. 2303
PROFIL DARAH IKAN NILA ( Oreochromis niloticus ) STRAIN

## SULTANA, NIRWANA DAN LARASATI TERHADAP INFEKSI
Aeromonas hydrophyla
(Blood Profile of Tilapia (Oreochromis niloticus) Strains Sultana, Nirwana and Larasati against Aeromonas hydrophyla infection)
Rima Oktavia Kusuma* , Muh. Sulaiman Dadiono, Kasprijo, Muh. Nurhafid *Program Studi Akuakultur Fakultas Perikanan  dan  Kelautan, Universitas Jenderal Soedirman Jl. Dr. Suparno. Komplek GOR Susilo Sudarman Karangwangkal-Purwokerto 53122 Indonesia * Corresponding Author, Email: rimaoktavia@unsoed.ac.id

## ABSTRACT
Aeromonas  hydrophyla is  a  gram  negative  bacteria,  which  often  infects  tilapia  and  causes internal  damage  to  the  liver,  spleen  and  kidneys.  Tilapia  Sultana,  Nirwana  and  Larasati  are superior strains that have fast growth and are resistant to disease. This study was conducted to observe  and  compare  the  physiological  response  of  the  three  strains  to Aeromonas hydrophyla infection through blood profiles. The blood profile can describe the health status of  the  fish.  The  parameters  of  the  blood  profile  observed  were  the  number  of  erythrocytes, hemoglobin, hematocrit, blood glucose, lymphocytes and monocytes. The results showed that the  erythrocytes,  monocytes  and  polymorphonuclear  counts  of  the  three  strains  were significantly different, while for hemoglobin, hematocrit, glucose, and lymphocytes were not significantly different.
Keywords : Aeromonas hydrophyla, blood profile, Oreochromis niloticus

## PENDAHULUAN
Ikan nila merupakan komoditi budidaya  yang  menjanjikan  di  Indonesia. Berbagai  strain  nila  dikembangkan  untuk memberikan  sifat-  sifat  unggul  seperti pertumbuhan  cepat  dan  ketahanan  penyakit. Ikan  nila  strain  Sultana  merupakan  hasil seleksi  famili  dan  perkawinan  silang  43 strain  nila  (Ramadhan  2015),  nila  Nirwana merupakan  nila  hasil  pengembangan  dari Balai  Pengembangan  Benih  Ikan  Wanayasa yang terletak di Purwakarta, Jawa Barat, dan ikan  nila  Larasati  merupakan  nila  hasil perekayasaan oleh PBIAT Janti, Klaten. Ikan ini  merupakan  persilangan  antara  nila  hitam dengan nila merah (Dinas Perikanan, 2021)
Aeromonas hydrophila termasuk kedalam bakteri  gram negative  yang bersifat pathogen  yang  sering  menyerang  ikan  nila. Ikan  yang  terinfeksi Aeromonas  hydrophyla
menunjukkan gejala kehilangan nafsu makan, luka pada permukaan tubuh, pendarahan  pada  insang,  perut  membesar berisi  cairan,  pembengkaan  dan  kerusakan pada  jaringan  hati,  ginjal  dan  limfa (Qolbiyah, 2021). Tubuh ikan akan memberikan  respon  fisiologis  apabila  terjadi infeksi.  Profil  darah  memiliki  peran  yang sangat  penting  dalam  fisiologi  dan  aktifitas tubuh  hewan  (Azhari,  2020).  Perubahan hematologi pada darah perifer dapat digunakan  sebagai  indikator  adanya  infeksi dan  kondisi  stress  pada  ikan  air  tawar (lusiastuti, 2018)
Penelitian  ini  dilakukan  dengan tujuan melihat respon fisiologis  ketiga strain ikan  Nila  terhadap  infeksi Aeromonas hydrophyla ,  sebagai  landasan  pertimbangan dalam kegiatan pembenihan.

## DOI: 10.32663/ja.v%vi%i. 2303

## BAHAN DAN METODE
Ikan  Nila  Sultana  didapatkan  dari BBI Pandak, Ikan nila Nirwana dan  Larasati didapatkan dari  BBI Sidabowa. Ukuran ikan nila  yang  digunakan  adalah  10-  15  cm dengan  berat  rata-  rata  17-  20  gr.  Penelitian dirancang  dengan  rancangan  acak  lengkap (RAL)  dengan  tiga  kali  ulangan.  Data dianalisis statistik dengan selang kepercayaan  95%  menggunakan  software IBM  SPPS  26.0,  uji  Tukey  dilakukan  jika hasil ANOVA berbeda nyata.

## Penyiapan bakteri Aeromonas hydrophyla
Bakteri Aeromonas hydrophila berasal  dari    stok    yang    terdapat    pada Laboratorium    Fakultas    Perikanan    dan Kelautan  Universitas    Jenderal    Soedirman. Bakteri    tersebut    dikultur    kembali    pada media  spesifik  media  GSP  ( Glutamate Starch  Phenol ).  Setelah  bakteri  tumbuh, kemudian    diinokulasi    pada    media    TSA, dan  inkubasi  selama  18-24  jam  pada  suhu 28°C. Media  TSB ( Tryptic Soy Broth ) yang sudah    steril    dituang    ke    dalam    tabung reaksi    sebanyak    5  mL  secara  aseptis. Bakteri Aeromonas  hydrophila yang  telah tumbuh  pada  media  TSA  diambil  dengan jarum  ose  dan  dikultur  pada  media  TSB. Kemudian  media  TSB    diinkubasi    pada shaker    selama    18-24    jam    dengan    suhu 28°C.

## Infeksi Bakteri
Proses  infeksi  dilakukan  dengan metode  perendaman,  jumlah  kultivar  bakteri yang  dibutuhkan  untuk  10  L  air  adalah  150 mL  bakteri  dalam  media  TSB.  Perendaman dilakukan  selama  24  jam,  setelah  24  jam ikan dipindahkan dalam akuarium pemeliharaan.
Profil darah
Pengambilan darah dilakukan dengan menggunakan spuit pada  bagian  vena caudalis yang terletak tepat di bagian ventral tulang  vertebrate.  Darah  yang  telah  terambil kemudian  dimasukkan  dalam tube dan tercampur  rata  dengan  antikoagulat  yang berupa EDTA. Pengambilan sampel dilakukan saat hari ke 7 pasca infeksi.

## Pengukuran eritrosit
jumlah  eritrosit  menurut  Baxhall  dan Daisley  (1973),  Perhitungan,  jumlah  sel darah  merah  dengan  bantuan  mikroskop dengan  pembesaran  400x.  jumlah  eritrosis total  dihitung  sebanyak  5  kotak  kecil  dan jumlah dihitung menurut rumus:
jumlah eritrosit per mm 3 =E/N x 1/V x 100
Dimana:  E  =  Jumlah  eritrosit;    N    =  Jumlah bujur  sangkar;      V  =  Volume  bujur  sangkar kecil; 100  = Pengenceran 100 kali

## Pengukuran  Hemoglobin,  Hematokrit  dan Glukosa
Metode  pengukuran  hemoglobin  dan hematokrit  darah  menggunakan  alat  tes hemoglobin darah digital. Masukkan strip ke dalam  alat  digital  tersebut  lalu  ditunggu dampai  alat  memunculkan  gambar  darah  di layer  dan  warna  biru  pada  kotak  kecil  yang ada di strip. Pengecekan glukosa darah dapat dilakukan  dengan  menggunakan  alat  uji glukosa  untuk  manusia  (Philipson  et  al 2010).  Alat  uji  glukosa  yang  digunakan adalah merk GlucoDr dengan kisaran 20-600 mg/dL.

## Diferensiasi Leukosit
Perhitungan  dilakukan  dengan  cara mengambil  darah  ikan  kemudian  dibuat preparat  ulas  darah  pada  kaca  objek  lalu dikeringkan  anginkan.  Genangi  sampel dengan  methanol  atau  ethanol  95%  biarkan
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i. 2303
selama  3-  5  menit.  Setelah  kering  genangi degan  pewarna  giemsa  10%  selama  15  –  30 menit,  bilas  dengan  air  mengalir,  biarkan sampel mongering suhu ruang. Amati sampel dengan  mikroskop perbesaran 1000x

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Jumlah  rata-  rata  eritrosit  dari  ikan nila  strain  Larasati  0.78  ±  0.34 a .    Sultana 0.85 ± 0.09 ab , Nirwana 1.47 ± 0.56 b (gambar 1a), rata-rata tertinggi adalah strain Nirwana, sedangkan  untuk  jumlah  eritrosit  terendah pada  strain  Larasati.  Hasil  perhitungan statistik  ANOVA  (P>0,05)  menunjukkan bahwa  jumlah  eritrosit  Nirwana  memiliki perbedaan  signifikan  dengan  Larasati  dan Sultana  tidak  berbeda  significan  dengan Nirwana  maupun  Larasati.    Jumlah  eritrosit normal pada ikan teleostoi adalah 1,05-3,0 x 10 6 (Irianto, 2005). Jumlah eritrosit  Nirwana masih  berada  di  dalam  kisaran  normal sedangkan  untuk  Larsati  dan  Sultana  berada di  bawah  kisaran  normal.    Jumlah  eritrosit dipengaruhi  oleh  jenis  kelamin,  umur, kondisi  tubuh,  variasi  harian,  dan  keadaan stress (Schmidt dan Nelson, 1990).
Infeksi Aeromonas hydrophila secara internal  dapat  menyebabkan  adanya  cairan ascites, anemia dan kerusakan organ terutama ginjal dan hati, terjadi erythema dan hemorrhagi  petechiae  pada  peritonium  dan sebagian  besar  organ  viseral.  Pemeriksaan histologi  menunjukkan  adanya  nekrosis  di ginjal  dan  hati.  Kerusakan  ginjal  ini  dapat menyebabkan produksi sel darah merah ikan menurun.    Bakteri Aeromonas  hydropyla memiliki Aerolysin  Cytotoxic  Enterotoxin (Act) ,  merupakan  polipeptida  rantai  tunggal yang  menyebabkan  spesies  ini  patogenik. Kemampuan Act yaitu mampu melisiskan sel darah merah dan juga merusak jaringan.  Hal
tersebut  diduga  menjadi  penyebab  nilai eritosit Larasati dan Sultana rendah.
Hemoglobin  merupakan  bagian  dari eritrosit  dimana  memiliki  fungsi  sebagai pengangkut  oksigen  dan  karbondioksida (Novita,  2020).  Haemoglobin  merupakan protein  dalam  eritrosit  yang  tersusun  atas protein  globin  tidak  memiliki  warna  dan pigmen  heme  yang  dihasilkan  di  dalam eritrosit  (Addini,  2020).  Jumlah  rata-  rata hemoglobin  Sultana 7.14    ±  1,80 a ,  Nirwana 9.08  ±  2.14 a ,  dan Larasati 7.82  ±  1.04 a , Rata- rata  hemoglobin  tertinggi  adalah  Nirwana, dan  yang  terendah  adalah  Sultana  (Gambar 1b).  Kadar  hemoglobin  ketiga  strain  masih dalam  kisaran  normal,    menurut  (Lusiastuti, 2018) kadar hemoglobin ikan nila adalah 6 - 11,01  %.  Kadar  hemoglobin  berbanding lurus dengan jumlah eritrosit, semakin tinggi kadar hemoglobin maka semakin tinggi pula jumlah eritrosit  (Azhari, 2020).  Perhitungan ANOVA  (P>0,05)  menunjukkan  kadar hemoglobin  di  ketiga  strain  ikan  Nila  yang telah  diinfeksi Aeromonas  Hydrophyla tidak berbeda nyata.
Hematokrit  merupakan  parameter yang  berpengaruh  terhadap  pengukuran volume  sel  darah  merah  (Hesser,  1960). Hematrokrit  adalah  persen  volume  sel  darah merah yang ada di dalam darah (Sastradipradja et  al, 1989). Jumlah rata-rata hematrokrit  Sultana  21.8  ±  5.62 a ,  Nirwana 26.4±4.18 a ,  Larasati  23.46  ±  3.14 a .  Nilai hematokrit  tertinggi  pada  Nirwana  dan  yang terendah  pada  Sultana.  Kadar  hematokrit ketiga  strain  tersebut  masih  dalam  batas normal.  Nilai  hematokrit  pada  ikan  teleostei berkisar  antara  20-30  %,  dan  pada  beberapa spesies  ikan  laut  sekitar  42  %  (Bond  1979). Sedangkan  hematokrit  pada  ikan  nila  adalah 23,6-  37,4  %  (Lusiastuti,  2018).  Hasil Perhitungan ANOVA (P>0,05) menunjukkan

## DOI: 10.32663/ja.v%vi%i. 2303
[VALUE] ±0.09 ab [VALUE]
±0.56 a [VALUE] ±0,34 b 0 0,5 1 1,5 2 2,5 Sultana Nirwana Larasati ju m lah E ritro sit x 10 6 (s el/m m 3 ) Strain Nila [VALUE] ± 5,62 a [VALUE] ±
4,18 a [VALUE] ± 3,14 a 0 10 20 30 40 Sultana Nirwana Larasati H em at o kr it (% ) Strain Nila
bahwa hematokrit ketiga strain tidak berbeda nyata. (a) (b)
Gambar 1. (a) Grafik total Eritrosit ketiga strain ikan nila (sel/mm 3 ); (b) Grafik Hemoglobin ketiga strain ikan Nila (g/dL)
(a) (b)
Gambar 2. (a) Grafik prosentase hematorkit (%); (b) Grafik jumlah glukosa (mg/dL)
Kadar  glukosa  ikan  Sultana  155,2 ±47,48,  Nirwana  145,8  ±  106,01,  dan Larasati  104,4  ±44,45.    strain  Sultana  dan Nirwana memiliki kadar glukosa yang tinggi, sedangkan  Larasati  masih  dalam  kisaran normal. Menurut (Suwandi, 2021)
menyatakan  kadar  glukosa  darah  ikan  nila sebesar 70 – 106
mg/dL (milligram/deciliter).  Peningkatan  Glukosa disebabkan  oleh  stress  akibat  kualitas  air, kepadatan  tinggi,  dan  infeksi  bakteri. Hormon    stres    berhubungan    dengan kortisol,  kortisol  ini  akan  memobilisas  dan meningkatkan  produksi  glukosa  pada  ikan
melalui proses glukogenesis dan glikogenolisis  untuk  memenuhi  kebutuhan energi  yang  diakibatkan  oleh  stressor (Martinez  et  al,  2009).  Peningkatan  kadar glukosa  darah  untuk  mengatasi  kebutuhan energi  yang tinggi  pada  saat  stress  (Yustiati, 2017). Infeksi Aeromonas Hydrophyla diduga menjadi stressor yang mengakibatkan meningkatnya  kadar  glukosa  dalam  darah Nirwana  dan  Sultana.  Hasil  perhitungan ANOVA  (P>0,05)  menunjukkan  bahwa kadar  glukosa  di  antara  ketiga  strain  tidak berbeda nyata
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i. 2303
[VALUE]± 3,32 a [VALUE]± 0,84 a [VALUE]± 2,73 a 77 78 79 80 81 82 Sultana Nirwana Larasati Lim fo sit (% ) Strain Nila [VALUE]± 2,71 ab [VALUE]± 0,82 b [VALUE]± 1,71 a 0 5 10 15 20 Sultana Nirwana Larasati Mo n o sit (% ) Strain Nila (a) (b)
Gambar 3. (a) Jumlah limfosit (%) ketiga strain ; (b) jumlah monosit (%)
Jumlah  rata-  rata  limfosit  Sultana 79,52  ±  3,32 a ,  Nirwana  79,42  ±  0,84 a ,  dan Larasati  80,69  ±  2,73 a .  Bedasarkan  hasil perhitungan  ANOVA  (P>0,05),  jumlah limfosit  ketiga  strain  tidak  berbeda  nyata. Kisaran jumlah leukosit ikan nila adalah 68- 76 % (Lusiastuti, 2018). Peningkatan jumlah limfosit  dipicu  oleh  beberapa  faktor,  salah satunya  adalah  serangan  penyakit.  Saat  ada infeksi  limfosit  akan  berproliferasi  dan membentuk  antibody,  jumlah  limfosit  yang rendah akan mempengaruhi penurunan kadar antibody,  sehingga  kekebalan  ikan  terhadap serangan penyakit menurun (Prakoeswa,
2020).  Peningkatan  limfosit  terjadi pada  ikan  mas  setelah  diinfeksi Aeromonas salmonica (Andayani,  2020).  Limfosit  tidak dapat  mengenali  antigen  secara  langsung, proses  pengenalan  antigen  dibantu  oleh reseptor  spesifik  pada  membrane  sel.  Saat limfosit  T  dengan  bantuan  sel  reseptor  telah mampu  mengenali  antigen,  maka  akan memberikan reaksi kekebalan secara langsung  dan  menstimulasi  sel  B  untuk berdiferensiasi  dan  membentuk  antibody spesifik (Murdriyanto et al, 2002).
Gambar 4. Profil darah ikan Nila Nirwana dengan pewarnaan giemsa 10% dengan perbesaran 1000x (M) Monosit; (P) polymorfonuklear; (L) limfosit
DOI: 10.32663/ja.v%vi%i. 2303
[VALUE]± 0,51 a
[VALUE]± 0,45 ab [VALUE]± 0,36 b 0 1 2 3 4 5 6 7 Sultana Nirwana Larasati Po lim o rf o n u klear (% ) Strain Nila
Rata-  rata  jumlah  monosit  Sultana 16,24  ±  2,71 ab ,  Nirwana  17,68  ±  0,82 b , Larasati  14,91  ±  1,71 a .  Hasil  perhitungan ANOVA  (P>0,05)  menunjukkan  ketiganya berbeda  nyata,  dengan  uji  lanjutan  Turkey menyatakan  Nirwana  dan  Larasati  memiliki perbedaan yang signifikan. Ikan Nila normal memiliki  kisaran  prosentase  monosit  3,9- 5,9%  (Hardi,  2011),  oleh  karena  itu  jumlah monosit  pada  ketiga  strain  yang  telah diinfeksi  bakteri  Aeromonas  berada  di  atas kisaran  normal.  Tingginya  jumlah  monosit diduga  diakibatkan  adanya  infeksi  oleh Aeromonas  hydrophyla .  Monosit  merupakan bagian  dari  system  kekebalan  non  spesifik dan merupakan agen makrofag yang memfagosit  benda  asing  dalam  tubuh. Aktifitas  fagositosis  pada  ikan  memiliki peran penting untuk menghilangkan penyebab  pathogen  (Palanikani  et  al,  2019). Monosit  berperan  penting  untuk  memakan
zat-zat  asing  yang  masuk  ke  dalam tubuh dan  memberikan  informasi  tentang  serangan penyakit  kepada  leukosit  (Utami,  2014). Jumlah  monosit  dapat  meningkat  hingga mencapai 10% dari total jumlah limfosit saat terjadi  infeksi  suatu  bakteri  atau  virus tertentu  (Putri,  2019).  Pada  saat  terjadi infeksi, monosit akan meninggalkan pembuluh  darah  menuju  daerah  yang terinfeksi  untuk  memfagosit.  Pada  ikan monosit  berperan  sebagai  makrofag  yang mampu mensekresi sitokin IL12, TNF ά, IL- 8  membantu  memanggil  neutrophil  menuju ke tempat  yang terinfeksi, sedangkan TNF ά membantu mengaktifasi sel T,  IL-12 memiliki  peran  mengaktivasi  sel  NK  sera diferensisasi  CD4+  menjadi  Th1.  Dalam peranannya menghancurkan bakteri, monosit yang  berdiferensiasi  menjadi  makrofage mampu  mengeluarkan Reactive  oxygen species (ROS). (Khazanah, 2020)
Gambar 5. Grafik jumlah polimorfonuklear ketiga strain
Sel  polimorfonuklear  (PMN)  atau granulosit  juga  diketahui  merupakan  sel inflamasi  pertama  yang  bermigrasi  menuju area  luka,  kemudian  digantikan  oleh  sel mononuclear atau makrofag yang inflitrasinya dipacu oleh limfosit (Faris,2020).  Sel  polymorfonuklear  dapat berada  di  tempat  infeksi  2-4  jam  sedangkan
monosit bergerak lebih lambat yaitu 7-8 jam untuk sampai ke temat infeksi (Baratawidjaya,2009). Pada jenis ikan telestoi,  granulosit  darah  diketahui  memiliki butiran-  butiran  yang  besar  dan  bulat  serta dapat  ditemui  setiap  bentuknya  (basophil, eosinophil  dan  neutrophil)  (Hine,  1994). Rata-  rata  jumlah  polimorfonuklear  Sultana

## DOI: 10.32663/ja.v%vi%i. 2303
adalah  4,2  ±  0,51 ab ,  Nirwana  2,8  ±0,45 a , Larasati 4,3 ±0,36 b . Berdasarkan perhitungan statistic  ANOVA  jumlah  polimorfonuklear ketiga  strain  berbeda  nyata,  dengan  uji turkey menyatakan polimorfonuklear Larasati berbeda signifikan dengan Nirwana, untuk  Sultana  tidak  memiliki  perbedaaan terlalu  signifikan.  Jumlah  polimorfonuklear yang  rendah  linier  dengan  rendahnya  daya tahan  tubuh  ikan.  Jumlah  polymorfonuklear lebih  sedikit  dibandingkan  dengan  sel leukosit yang lainnya (Kuby, 2019)
Glukosa  darah,  presentase  neutrophil dan  monosit  meningkat,sedangkan  eritrosit, Hb,  total  leukosit  dan  presentase  limfosit menurun    pada  ikan  Wader  Pari  ( Rasbora argyrotaenia ) setelah diinfeksi Motile Aeromonas  Septicemia (MAS)  (Apriliani,
2020). Hal serupa juga terjadi pada ikan Nila yang  diinfeksi Streptococcus  agalactiae mengalami penurunan jumah eritrosit, hemoglobin,  sedangkan  untuk  monosit, neutrophil  dan  leukosit  mengalami  kenaikan (Suliestyana, 2020).

## KESIMPULAN
Penelitian  ini  menyimpulkan  bahwa jumlah eritrosit,
monosit dan
polymorfonuklear  ketiga  strain  berbeda nyata, sedangkan untuk hemoglobin, hematokrit,  glukosa,  limfosit  tidak  berbeda nyata.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  bagian  dari  hibah  riset BLU  LPPM  Universitas  Jenderal  Soedirman skema  Riset  Peningkatan  Kopetensi  tahun pendanaan 2021

## DAFTAR PUSTAKA
Addini  N.,  Tang,  U,  M.,  Syawal,  H.  (2020).
Fisiologis  pertumbuhan  ikan  selais (Ompok hypophthalmus) pada sistem
resirkulasi
akuakultur (SRA).
Berkala  Perikanan  Terubuk, 48(20), xx-xx http://dx.doi.org/10.31258/terubuk.48 .2.450-463
Apriliani,  D,  P.  (2020).  Profil  hematologi
ikan Wader Pari (Rasbora Argyrotaenia)  yang  diinfeksi  motile Aeromonas Septicemia (Mas). [Skripsi]. UNIVERSITAS AIRLANGGA.
Andayani,  S.,    Dadiono,  S,  M.,    Elwira,  W,
T.,   Setyawan, F,  H. (2020).  Potency of  aloe  extract  as  immunostimulant for  carp  ( Cyprinus  carpio )  against Aeromonas
salmonicida . Biodiversitas . 21(3). DOI: 10.13057/biodiv/d210302
Azhari,  N.,  &  Hidayaturrahmah.  (2020).
Profil darah ikan Gelodok
(Periophthalmodon  Schlosseri)  dan (Boleophthalamus  Boddarti)  di  desa Kuala Tambangan Pelaihari, Kalimantan Selatan. Jurnal Pharmascience , 7(2),176-186 http://dx.doi.org/10.20527/jps.v7i2.8
465
Baratawidjaya,  K,  G.,  &  Rengganis,  I.
(2009). Imunologi  Dasar .  Balai Penerbit. Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia
Faris,  M.  (2020).  Potensi  immunodulator ekstrak  cengkeh  pada  kadar  limfosit dan  makrofag  sebagai  mekanisme pertahanan  tubuh. Khazanah  Jurnal . 12 Universitas Islam Indonesia http://dx.doi.org/10.20885/khazanah.i
ss1.art8

## DOI: 10.32663/ja.v%vi%i. 2303
Hardi,  E,  H.  (2011).  Kandidat  Vaksin
Potensial Streptococcus  agalactiae untuk Pencegahan Penyakit Streptococcosis pada Ikan Nila ( Oreochromis  niloticus .  [Disertasi]. Sekolah Pascasarjana. Institut
Pertanian Bogor. Bogor
Hesser,  E,  F.  (1960).  Methods  for  Routine
Fish Hematology. Taylor and
Francis. https://doi.org/10.1577/1548-
8659(1960)22[172:GOSCC]2.0.CO;2
Hine, P, M., & Jones, J, B. (2010) . Bonamia
and  other  aquatic  parasites  of importance to New Zealand. https://doi.org/10.1080/03014223.199 4.9517975
Lusiastuti,  A,  M.,  &  Hardi,  E,  H.  (2018).
Gambaran  darah  sebagai  indikator kesehatan  pada  ikan  air  tawar. Prosiding  Seminar  Nasional  Ikan  VI: 65-69
Martínez,  M,  P.,  Cordova,  L,  R,  M.,
Enriquez,  R,  R.  (2009).  Cortisol  and glucose:  Reliable  indicators  of  fish stress?.  Pan-American Journal  of
Aquatic  Sciences ,  4(2),  158-178 https://www.scopus.com/inward/reco rd.uri?partnerID=HzOxMe3b&scp=6 8349148307&origin=inward
Novita.,  Setyowati,  D,  N.,  Astriana,  B,  H.,
(2020). Profil darah ikan Kakap Putih yang  diinfeksi  bakteri  Vibrio  sp. dengan pemberian Lidah Buaya ( Aloe vera ). Jurnal Perikanan 10(1), 55-69. DOI
: https://doi.org/10.29303/jp.v10i1.175
Palanikani,  R.,  Chanthini,  K,  M,  P., Soranam,  R.  (2020).  Efficacy  of Andrographis paniculata supplements
induce a non-specific immune system against the pathogenicity of Aeromonas  hydrophila  infection  in Indian  major  carp  (Labeo  rohita).
Environ Sci Pollut Res 27. https://doi.org/10.1007/s11356-019-
05957-7
Putri,  S,  D.  (2019).  Gambaran  Hasil Pemeriksaan  Hitung  Jenis  Leukosit Pada  Penderita  Pasien  Malaria  di RSUD  M.  Zein  Painana.  [Skripsi]. STIKES Perintis Padang
Punt, J., Steanford, S, A., College, P., Jones,
P,  P.,  Owen,  J,  A.  (2019). Kuby
Immunology . North American Edition W. H. Freeman and Company. One New York Plaza
Prakoeswa, F, R. (2020). Peranan sel limfosit dalam  imunulogi:  Artikel  Review. Jurnal Sains Kesehatan, 2(4). https://doi.org/10.25026/jsk.v2i4.212
Qolbiyah, R, Q. (2021). Pengaruh Pemberian Pakan  Dengan  Probiotik  Bacillus subtilis dan Lactobacillus acidophilus Pada  Kelangsungan  Hidup  Ikan  Nila (Oreochromis niloticus) yang Diinfeksi dengan Aeromonas hydrophyla. Universitas Islam Negeri Sunan Ampel Surabaya.
http://digilib.uinsby.ac.id/id/eprint/49 555
Rhamadhan,  I,  Rosidah,  F,  N.,  Andriani,  Y.
(2015). Efektivitas penambahan ekstrak daun kecubung ( Datura metel L )  pada  pakan  untuk  pencegahan streptocococcis  pada  benih  ikan  nila Sultana, Oreochromis niloticus (Linnaeus,  1758). Jurnal  Ikhtiology
Indonesia ,
15(3). https://doi.org/10.32491/jii.v15i3.60
Sastradipraja,    D.,  Sikar,  S,  H,  S., Wijayakusuma,  R.,  Ungerer,  T.  , Maad,  A.,  Nasution,  H.,  Suriawinata , R.,   Hamzah , R. (1989). Penuntun Praktikum            Fisiologi  Veteriner . Bogor (ID): IPB Press
Schmidt,  W.,  &  Nelson,  B.  (1990). Animal Physiology . Harper Collins Publisher, New York.
Suwandi,  R.,  Karima,  F,  R.,  Jacoeb,  A,  M.,
Nugraha, R. (2021). Pengaruh ekstrak Kayu  Manis  ( Cinnamomum  sp )  dan pembekuan  terhadap  fisiologi  Ikan Mas ( Cyprinus carpio ). Jurnal Perikanan  Hasil  Perikanan, (24)2.
https://doi.org/10.17844/jphpi.v24i2.
36803
Utami  D,  T.,  Prayitno,  S,  B.,  Hastuti,  S., Santika, A., (2014). Gambaran parameter hematologis pada ikan Nila ( Oreochromis  niloticus )  yang  diberi vaksin  DNA  Streptococcus  iniae dengan  dosis  yang  berbeda. Journal of  Aquaculture  Management  and Technology . 0, 7-20
Yustiati, A., Pribadi, S, S., Rizal, A., Lili, W.
(2017).  Pengaruh  Kepadatan  pada Pengangkutan  dengan  Suhu  Rendah
Terhadap  Kadar  Glukosa  dan  Darah Kelulusan Hidup Ikan Nila ( Oreochromis niloticus ). Jurnal Akuatika, 2(2). https://doi.org/10.24198/jaki.v2i2.23 424