## IJMS – Indonesian Journal On Medical Science – Volume 3 No 1 - Januari 2016
Cosmos caudatus -

## Cosmos caudatus
Agil Novianto 1) , Hartono 2) 1,2 Akademi Farmasi Nasional Surakarta
Email: agiel.novianto@gmail.com; tono_navsol@yahoo.co.id

## Abstract
has  good  antioxidant  activity.  Kenikir  on  ethanolic  extract  hasIC acetate fraction of this has IC
fraction, it give deep opportunity to develop hepatoprotector. This research to know the effective of etyl
treatments give for seven days.At 7th day, 30 minute after last dose, all rats give paracetamol. At the
Keywords: Hepatoprotector, Kenikir, paracetamol, ethyl acetate

## Abstrak
Penggunaan  parasetamol  dalam  dosis  toksik  dapat  memicu  terjadinya kerusakan  liver  yang  ditandai dengan  terjadinya  nekrosis  dan  kenaikan  kadar  enzim  seperti  SGPT  dan  SGOT  (aminotransferase). Penggunaan  ekstrak  etanol  kenikir  terbukti  mampu  mencegah  kerusakan  liver  yang  disebabkan oleh  paracetamol.Kenikir  terbukti  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  baik.Kenikir  dalam  bentuk ekstrak  etanol  memiliki  IC 50
peluang yang lebih dalam pengembangkan hepatoprotektor.Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efektivitas  fraksi  etil  asetat  kenikir  pada  tikus  yang  diinduksi  parasetamol.  Kerusakan  liver  diinduksi dengan menggunakan paracetamol (2,5 g/kg BB) dan parameter biokimia yang diteliti meliputi serum glutamate oxalate transaminase (SGOT) and serum glutamate pyruvate transaminase (SGPT) dengan menggunakan kurkuminoid 100 mg/kg BB) dan fraksi etil asetat kenikir  dosis 281,25; 562,5; 1125 mg/ kg  BB.  Semua  perlakuan    diberikanselama  tujuh  hari.  Pada  hari  ke-7,  30  menit  setelah  pemberian dosis  terakhir  dilanjutkan  dengan  pemberian  paracetamol.Pada  hari  ke-9,  dilakukan  pengukuran
IJMS – Indonesian Journal On Medical Science – Volume 3 No 1 - Januari 2016
parameter biokimia.Fraksi etil asetat kenikir mampu memberikan efek hepatoprotektor pada tikus yang
dan SGOT.
: Hepatoprotektor, Kenikir, paracetamol, etil asetat

## I.
Penyakit hati sampai saat ini masih menjadi problem  kesehatan  yang  serius. Kerusakan  hati dapat  terjadi  karena  infeksi,  virus,  penggunaan obat,  dan  lingkungan  (Singh,  2001).Parasetamol merupakan  obat  yang  memiliki  efek  analgesic dan  antipiretik,  namun  disisi  lain  penggunaan parasetamol  dalam  dosis  berlebih  (  15  /hari) mampu menyebabkan kerusakan liver (Clark et al ., 2012; Gestanovia 2007; Sabate et al ., 2011; Clark et  al .,  2012).  Hal  ini  dapat  terjadi  karena  proses metabolisme  parasetamol dalam liver membentuk metabolit reaktif yang dikenal dengan N-acetyl-p- benzoquinonemine (NAPQI).  NAPQI  berinteraksi secara  kovalen  dengan  makromolekul  hati  pada bagian  sistein  dan  mengakibatkan  terjadinya oksidasi  lipid  dan  menyebabkan  kerusakan  pada liver (Setty, 2007).
Pemanfaatan  bahan-bahan  alam  sebagai obat  tradisional  mulai  dikembangkan.Penggunan bahan  alam  atau  herbal  memainkan  peran  yang penting dalam menangani masalah kerusakan hati. Herbal  disebut  memiliki  efek  hepatoprotektif  bila penggunaanya mampu menjaga fungsi sel-sel hati dan  membantu  mempercepat  penyembuhannya (Hadi, 2000).Pada  tahun terakhir fokus penelitian menggunakan  herbal  sebagai  hepatoprotektif dievaluasi  melalui  mekanisme  antioksidan  (Said et al ., 2002).Penelitian yang dilakukan oleh Maity pada tahun 2007, t erdapat korelasi antara aktivitas hepatoprotektif  dengan  aktivitas antioksidan dari  sampel  yang  digunakannya  ( Ichnocarpus
frutescens ).  Mekanisme  hepatoprotektif  dapat dilihat  dari  kemampuan Ichnocarpus  frutescens menangkal  radikal  bebas  yang  terbentuk  dari proses  oksidasi  lipid  akibat  metabolit  reaktif parasetamol yaitu NAPQI.
Kenikir  ( Cosmos  caudatus K.)  telah  lama digunakan dalam konsep pengobatan tradisional .
Secara tradisional daun ini juga digunakan sebagai obat  penambah  nafsu  makan,  lemah  lambung, penguat  tulang,  dan  pengusir  serangga.Abas et al . (2003) menyebutkan bahwa ekstrak metanolik
kuersetin.  Ekstrak etanol kenikir dosis 2.250 mg/ kgBB  ,  memiliki  efektivitas  dalam  menurunkan kadar SGPT pada tikus yang diinduksi paracetamol (Setyawati, 2011).
Ekstrak etanol dan fraksi etil asetat terdapat
Uji aktivitas antioksidan dengan metode penangkapan  radikal  DPPH  (2,2’-difenil-1-pikril- hidrazil) menunjukkan ekstrak etanol memiliki IC 50
etil  asetat  herba  kenikir  memiliki  potensi  daya antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan bentuk ekstrak  etanol.Sejauh  ini  belum  ada  penelitian terkait  dengan  efek  hepatoprotektor  fraksi  etil asetat kenikir. Hal ini memberikan peluang  untuk dilakukan penelitian melihat efek hepatoprotektor dari    fraksi  etil  asetat  herba  kenikir  dengan parameter kadar SGPT dan SGOT

## II.
Alat dan bahan yang digunakan adalah daun kenikir, tablet parasetamol 500 mg (Kimia Farma), kurkuminoid,  CMC Na (Brataco), aquadest, etanol 70  %   dan  ethyl acetat  (Brataco).Hewan  uji tikus jantan  galur  wistar  berat  150-200g.Reagen  Folin ciocicalceteu. Spuit oral (Terumol) setrifuge sigma, kit SGPT, mesh (One med), water bath, pelat KLT silica G 60 F 254 (Merk),  Fotometer Clinicon.
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  70  %  Kenikir .
Daun  kenikir  yang  telah  dikeringkan  diambil sebanyak  2 kg  untuk dilakukan  ekstraksi  dengan menggunakan  metode  maserasi.  Herba  kenikir dimasukkan  dalam    bejana,  kemudian  ditambah dengan  15  literetanol0  %,  ditutup  dan  biarkan selama  5  hari, diserkai,  dan ampas  diperas.  Sari etanol  selanjutnya  dilakukan  pemekatan  sampai dihasilkan ekstrak etanolik kenikir
Pembuatan Fraksi etil asetat kenikir. Seratus gram ekstrak etanolik kenikir disuspensikan dalam air panas sebanyak 100 ml. Dilakukkan fraksinasi dengan menggunakan hexane 50 ml sebanyak dua kali. Fraksi air hasil proses fraksinasi selanjutnya difraksinasi ulang dengan menggunakan pelaruut etil asetat 50 ml sebanyak dua kali. Hasil fraksi etil asetat selanjutnya dilakukan pemekatan.
Uji aktivitas hepatoprotektor. Uji hepatoprotektor  dilakukan  mengikuti  rancangan yang  dilakukan pada  ( Hurkadale et  al .,  2012;
Paramaguru et al ., 2011). Hewan uji dibagi enam kelompok.  Kelompok  I  (normal  )  diberi  asupan aquades,  Kelompok  II    (kontrol  negatif)  diberi CMC  1  %,  Kelompok  III  (kontrol  positif)  diberi kurkuminoid  100mg/kg  BB  dalam  CMC  1  %, Kelompok  IV-VI    (kelompok  perlakukan)    diberi fraksi etil asetat kenikir dengan dosis  281,25 mg/ kg BB, 562,5 mg/kg BB, dan 1.125 mg/kg BB.
Perlakukan sediaan uji selama 7 hari, pada hari  ke-7,    30  menit  setelah  pemberian  sampel uji dilanjutkan dengan induksi parasetamol  dosis 2,5  g/kgBB  secara  peroral  ( Hurkadale et  al ., 2012; Paramaguru et  al .,  2011).  Setelah  48  jam pemberian parasetamol, sampel darah diambil dari vena  lateralis  (vena  ekor)  (Somchit et  al .,  2005; Devaraj et  al .,  2011)..    Sampel  darah  digunakan untuk analisis biokimia darah  (SGPT dan SGOT).

## III.
Pembuatan  fraksi  etil  asetat  kenikir dilakukan  dengan  teknik  fraksinasi  dimana fraksi  air    diekstraksi  dengan  etil  asetat  dengan perbandingan 2:1 dan dilakukan secara berkesinambungan.  Hasil  proses  fraksinasi  ini, diperoleh fraksi etil asetat sebanyak 27,28  gram atau  rendemen  sebanyak  1,36  %  (dihitung  dari bobot kering simplisia yang digunakan).
Pemberian  sediaan  uji  dilakukan  selama 7  hari  baik  itu  kurkuminoid  maupaun  sedian  uji berupa fraksi etil asetat kenikir dengan tiga variasi dosis yaitu 282,25 mg/kg BB (dosis I), 562,5 mg/ kg  BB  (dosis  II),  dan  1125  mg/kg  BB  (dosis  III). Hasil pengujian parameter biokimia darah berupa SGPT dan SGOT yang ditetapkan 48 jam setelah induksi  paracetamol  diperoleh  hasil  seperti  pada Tabel 1.

## Tabel  1.  Parameter  biokimia  darah  periode penelitian
Kelompok Berat hati Rasio Hati Parameter biokimia darah akhir Normal 110,53 130,63 5,25 4,02 73,75 286,25 Paracetamol 111,93 135,4 5,96 4,25 195,80 a 509,40 a Kurkuminoid 129,67 141,53 6,07 4,29 78,50 * 359,50 * Dosis I 110,95 142,50 5,85 4,13 190,50 * 405

## IJMS – Indonesian Journal On Medical Science – Volume 3 No 1 - Januari 2016
Dosis II 123,10 143,33 5,20 3,63 168,67 * 583,67 Dosis III 114,17 157,50 5,47 3,48 123,50 * 376,50 *
Gambar  1.  Histogram  pengaruh  pemberaian

## parameter SGPT dan SGOT
Berdasarkan  data  di  atas,  penggunaan paracetamol  mampu  menaikan  kadar  SGPT dan  SGOT  terlihat  dengan  kadar  yang  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  kelompok  yang mendapatkan perlakuan sediaan uji. Penggunaan kurkuminoid sebagai kontrol positif terlihat mampu menurunkan kadar SGPT dan SGOT. Penggunaan fraksi etil asetat kenikir mampu menurunkan SGPT dan SGOT.

## IV. PEMBAHASAN
Uji  hepatoprotektor  dilakukan  mengikuti rancangan  yang  dilakukan    pada  (Hurkadale
et  al ,  2012;  Paramaguru et  al .,  2011),  induksi paracetamol  pada  hari  ke-7  dan  dilakukan pemeriksaaan  parameter  biokimia  darah  48  jam setelah  induksi.  Hal  ini  dilakukan  dengan  tujuan untuk untuk melihat lebih jauh efek hepatoprotektor dalam waktu yang lebih lama, sehingga akumulasi pemberian  sediaan  uji  diharapkan  lebih  mampu mencegah terjadinya kerusakan liver.
Berdasarkan  data  di  atas  terlihat  bahwa kelompok  kontrol  negatif  yang  diberi  induksi paracetamol  memiliki  kadar  SGPT  dan  SGOT yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  dua kelompok  lainya.  Hasil  analisa  statistik  dengan menggunakan  metode  one  way  Anova  terlihat efek induksi Paracetamol dengan dosis toksik (2,5 g/kg BB) mampu memberikan kenaikan parameter
pada  kelompok  kontrol  negative  dibanding  dua kelompok  lainya  (normal  dan  kurkuminoid) (p<0,05).
Pemberian  fraksi etil asetat  kenikir dengan tiga  variasi  dosis  menunjukkan  adanya  efek hepatoprotektor.Hal  ini  dilihat  dari  parameter biokimia darah SGPT.Pemberian fraksi etil asetat kenikir  mampu  menekan  kenaikan  SGPT.Efek fraksi  etil  asetat  kenikir  sebagai  hepatoprotektor menunjukkan  hubungan  yang  sebanding  dengan dosis  yang  diberikan  ( dependent  dose ),  semakin tinggi  dosis  yang  diberikan  efek  hepatoprotektor meningkat.  Dosis  tertinggi  yaitu  1125  mg/kg  BB (dosis III) memberikan efek hepatoprotektor secara
parameter  biokimia  pendukung  yaitu  SGOT dimana  dosis  tertinggi  fraksi  etil  asetat  kenikir juga  memberikan  respon  nilai  SGOT  terendah dibandingkan dengan dua fraksi etil asetat kenikir (Gambar 1).

## IJMS – Indonesian Journal On Medical Science – Volume 3 No 1 - Januari 2016
Pemberian  induksi  paracetamol  dengan dosis toksis (2,5 g/kg BB) memberikan kerusakan liver  dengan  model  nekrosis  tipe  sentrizonal (Zimmerman, 1978). Pada kerusakan liver terjadi kerusakan  membran sel dan   organel  yang  akan menyebabkan  enzim  transaminase  (SGPT  dan SGOT)  dilepaskan  ke  dalam  darah  dari  sitosol dan organel subsel, seperti mitokondria, lisosom, dan  nucleus .  Hal  ini  menyebabkan  kadar  enzim p embuluh  darah  meningkat  dalam  darah  dapat (Bigoniya et  al .,  2009;  Thapa  and  Walia,  2007; Hall,    and  Cash,    2011).  Keberadaan  fraksi  etil asetat  kenikir  berperan  penting  untuk  mencegah kerusakan  liver  yang  diakibatkan  oleh  metabolit reaktif NAPQI, sehingga meminimalisir kerusakan membran  serta  naiknya  SGPT  dan  SGOT.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Devaraj, et  al (2011)terlihat korelasi antara induksi hepatotoksin yaitu  paracetamol  dan  CCl4  dengan  naiknya rasio berat liver dan berat badan hewan uji.Dalam penelitian ini pemberian induksi paracetamol tidak memberikan korelasi yang linear dengan naiknya rasio berat liver dan berat badan hewan uji (Tabel I).Kelompok kontrol negatif paracetamol dibanding dengan kurkuminoid memberikan hasil yang lebih tinggi pada kurkuminoid, namun hal ini berbading terbalik dengan nilai parameter biokimia SGPT dan SGOT.Hal  ini  menunjukkan  induksi  paracetamol belum tentu memberikan efek yang linear dari segi kenaikan  rasio  liver.Kenaikan  rasio  liver  belum tentu  memberikan  jaminan  adanya  kerusakan liver.
Aktivitas  hepatoprotektor  kenikir  dipicu
Quercetin  memiliki  efek  hepatoprotector  pada hewan  uji  yang  diinduksi  dengan  hepatotoksin seperti thioacetamid maupun paracetamol (Jashita
et  al .,  2011;  Ali et  al .  2013).Hasil  uji  aktiviitas antioksidan fraksi etil asetat kenikir secara in vitro dengan menggunakan DPPH diperoleh IC 50 14,229
melihat  parameter  biokimia  dan  keberadaan penelitian  lain  terkait  antioksidan  ( in  vitro ),  maka aktivitas  hepatoprotektor  fraksi  etil  asetat  kenikir melalui  mekanisme  antioksidan.  Hal  ini  didukung dengan  penelitian  lain  yang  mengkorelasikan efek hepatoprotektor dengan aktivitas antioksidan (Singh et  al .,  2011 ). Antioksidan  menjadi  salah satu target mekanisme hepatoprotektif didasarkan pada  penggunaan  paracetamol  dalam  dosis berlebih  memicu  terbentuknya  metabolit  reaktif NAPQI.

## V.
Fraksi etil asetat kenikir mampu memberikan efek  hepatoprotektor  pada  tikus  yang  diinduksi paracetamol.  Fraksi  etil  asetat  kenikir  dengan
ditunjukkan  dengan    penurunan  parameter biokimia SGPT dan SGOT.
Abas,  2003,  Antioxidative  Radical  Scavenging Properties  of  the  Constituent  Isolated  from Cosmos  caudatus K.), Natural  Product Science 9 (4); 245-248.
Ali, M., Qadir, M., Saleem, M., Janbaz, K.H., Gul,
H.,  and Hussain, L., 2013, Hepatoprotective potential  of  Convolvulus  arvensis  against paracetamol-induced
hepatotoxicity,
Bangladesh J Pharmacol ; 8 : 300-304
Bigoniya,  P.,  Singh,  C.S.,  and  Shukla, A.    2009,
A  Comprehensive    Review  of  Different

## IJMS – Indonesian Journal On Medical Science – Volume 3 No 1 - Januari 2016
Liver  Toxicants  used  in  Experimental
Pharmacology, International Journal
of  Pharmaceutical  Science  and  Drug Research , 1 (3): 124-135
Clark,  R.,  Fisher,  J.E.,    Sketris,  I.S.,    and Johnston, G.M. 2012, Population prevalence  of  high  dose  paracetamol  in dispensed  paracetamol/opioid  prescription combinations: an observational study, BMC Pharmacology and Toxicology , I :1-8.
Devaraj,  V.C.,    Krishna,  B.G.,    Viswanatha, G.L.,    Kamath,  J.V.,    and  Kumar,  S.  2011, Hepatoprotective activity of Hepax-A polyherbal formulation,
Journal of Tropical Biomedicine , 1 :142-146 Gestanovia,  2007, Hepatotoksis  Parasetamol , Undip, Semarang.
Hadi,  S,  2000, Hepatology ,  Mandar  Maju, Bandung.
Hall, P and Cash, J. 2011, What is the real function on  the  liver  function  test, Ulster  Medical
Journal , 81 (1):30-36.
Hurkadale, P.J., Shelar, P.A.,  Palled, S.G.,  Man- davkar,  Y.D.,  and    Khedkar,  A.S.  2012,
Hepatoprotective  activity  of Amorphophal- lus  paeoniifolius tubers  against  parase- tamol-induced  liver  damage  in  rats, Asian
1:S238-S242
Jashita,  M., Chakraborty,  M.,    and  Kamath, J.V.  2013,  Effect  Of  Quercetin  On
Hepatoprotective  Activity  Of  Silymarin Against  Thioacetamide  Intoxicated  Rats,
Int. Res. J. Pharm, 4 (7).
Maity,  T.K.,  Dash,  D.K.,  Yeligar,  V.C.,  Nayak, S.S.,  Ghosh,  T.,  Rajalingam,  D., et  al .
2007, Evaluation of hepatoprotective
and  antioxidant  activity  of Ichnocarpus frutescens (Linn.)  R.Br.  on  paracetamol- induced  hepatotoxicity  in  rats, Tropical Journal of Pharmaceutical Research ,  (3):
755-765.
Paramaguru,  R.,  Singh,  S.K.,  Rajasekar,  N., and  Raj,  A.V.  2011,Hepatoprotective  And Antioxidant  Effects  of Amorphophallus campanulatus Against Acetaminophen Induced Hepatotoxicity in Rats, International Journal Pharmacy Science, 3 (2):202-205.
Sabate, M.,  Ibanez, L., Perez, E., Vidal, X., Buti, M., and Xiol, X., et al. 2011, Paracetamol in therapeutic  dosages  and  acute  liver  injury: causality assessment in a prospective case series, BMC Gastroenterology , I :1-7.
Said,    O.,  Khalil,    K,  Fulder  S.  2002.
Ethnobotanical  survey  of  medicinal  herbs of  the  middle  eastern  region. Journal  of Ethnopharmacology , 83 : 251-265.
Setty,  S.  R.,  Quereshi, A.A.,    Swamy,   A.H.M.V., Patil,  T.,  Prakash,  T.,  Prabhu,  K.,  and Gouda,  A.V..    2007,    Hepatoprotective
parasetamol-induced  hepatic  injury  in  rats, Fitoterapia, 78
Singh, D. and Gupta, R.S.  2011,Hepatoprotective Activity  of  Metanol  Extract  of Tecomella undulate against  Alcohol  and  Parasetamol Induced  Hepatotoxicity  in  Rats,
Sciences and Medicine Research , :1-8. Soliman    and  Al-wabel,  2013,  Hepatoprotective Effects of Thymus and Salvia Essential oils on  Paracetamol-Induced  Toxicity  in  Rats, Journal  Physic  Pharmacy  Advetorial , 3 (2):
41-47.

## IJMS – Indonesian Journal On Medical Science – Volume 3 No 1 - Januari 2016
Somchit,  M.N.,  Zuraini,  A.,  Bustaman,  A.A.,
Somchit, N., Sulaiman, N,R., and
Norantulina,  R.  2005,  Protective Activity  of Turmeric  (Curcuma  longa)  in  Parasetamol Induced Hepatotoxicity in Rats, International
Journal of Pharmacology, 1 (3); 252-256.
Setyawati,  2011, Uji  Efek  Hepatoprotektor Ekstrak  Daun  Kenikir  ( Cosmos  caudatus
K.)  Pada  Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar Yang  Diinduksi  Parasetamol, KTI ,  AKFAR
Nasional.
Thapa  and  Walia,  2007,  Liver  Function  Tests and  Their  Interpretation, Indian  Journal  of
Pediatrics , 74 :663-671.
Atlas of Vascular Anatomy an Angiographic  Approach:  Second  Edition .
Philadelphia, Lippincott Williams & Wilkins.
Zimmerman,  H.J.  1978, Hepatotoxicity , Appleton
Century Crofts, New York.