## ISOLASI DAN SELEKSI JAMUR DAN BAKTERI ENDOFIT DARI TANAMAN MIMBA, BELUNTAS DAN GANDARUSA SEBAGAI PENGHASIL FUNGISTATIK DAN BAKTERIOSTATIK SCABIES
1) Rikka W. Sir, 2) Arnold Ch. Tabun dan 3) Devi Y. J. Moenek 1) Program Studi Teknologi Pangan, 2) Program Studi Produksi Ternak dan
3) Program Studi Kesehatan Hewan Politeknik Pertanian Negeri Kupang, Jl. Adisucipto Penfui, P. O. Box. 1152, Kupang 85011

## ABSTRACT
Isolation  and  Selection  of  Endophytic  Fungi  and  Bacteria  from  Mimba, Beluntas and Gandarusa used for Fungi Static and Bacteria Static Scabies. This research aim to get endophytic microbes from mimba, beluntas and gandarusa to  produced  bacteria  static  and  fungi  static  to  heal  sufferer  animal  scabies. Microbes  isolated  from  three  kinds  of  plants  was  classified  based  on  colony  and cells shape. This research placed in Biotechnology Laboratory from June-November 2008  using  Completely Randomized Design.  There  were  three  treatments  of  plant types  and  3  repeats  for  each  isolate.  The  result  that  there  were  two  kinds of endophytic  bacteria from  mimba,  one  kind  of  endophytic fungi from  beluntas  and one kind of endophytic bacteria from gandarusa. Endophytic bacteria isolated from mimba leaf (MDB2) had a best potential to be fungi static for scabies.
Keywords: isolation, selection,  fungi  static,  bacteria  static,  scabies,  mimba, gandarusa, beluntas.

## PENDAHULUAN
Scabies atau kudis merupakan jenis penyakit kulit yang disebabkan oleh tungau Sarcoptes  sp .  yang  menular  dari  hewan  ke  manusia  dan  banyak menyerang ternak kambing, babi, sapi serta ternak lainnya. Penyakit ini sangat mengganggu kesehatan ternak karena menimbulkan rasa gatal yang sangat dan merusak  penampilan  luar  ternak  sehingga  terlihat  sangat  menjijikan. Pengobatan  penyakit  ini  relatif  mahal  sehingga  dapat  menyebabkan  kerugian yang  sangat  besar  jika  penyakit  ini  menyerang  hewan  ternak  terutama  pada ternak  yang  memiliki nilai jual  tinggi  seperti  sapi,  babi dan  kambing.  Menurut Badan  Pusat  Statistik  (2005),  jumlah  ternak  kambing  di  Kabupaten  Kupang cukup  banyak,  yang  dapat  dilihat  dari  data  populasi  ternak  kambing  yang cukup  tinggi  yaitu  ±  79-126  ekor.  Walaupun  penyebab  utama  dari  scabies adalah  tungau,  pengelupasan  kulit  pada  ternak  dan  adanya  nanah  diduga menyebabkan  tumbuhnya  mikroba  ikutan  seperti  jamur  dan  bakteri  kulit. Untuk  itu  perlu  dicari  obat  alternatif  yang  bersumber  dari  tanaman  obat tradisional  yang  dapat  digunakan  sebagai  fungi  dan  bakteri  statik  penyakit tersebut.
Mikrobia  endofit  merupakan  mikrobia  yang  dapat  diisolasi  dari  jaringan tanaman  dan  memiliki  kemampuan  memproduksi  senyawa  metabolit  sekunder sesuai  dengan  tanaman  inangnya  sehingga  merupakan  peluang  yang  sangat besar  dan  dapat  diandalkan  untuk  memproduksi  metabolit  sekunder  yang
berfungsi sebagai bahan aktif pengobatan alternatif terhadap penyakit skabies. Sehingga  apabila  endofit  yang  diisolasi  dari  suatu  tanaman  obat  dapat menghasilkan  alkaloid  atau  metabolit  sekunder  sama  dengan  tanaman  aslinya tanaman  aslinya  untuk  diambil  sebagai  simplisia,  yang  kemungkinan  besar memerlukan puluhan tahun untuk dapat dipanen (Strobel GA.,et.al. 2003). Menurut  Stierle  et  al. (1995),  pemanfaatan  mikroba  endofitik  dalam memproduksi  senyawa  aktif  memiliki  beberapa  kelebihan,  antara  lain  (1)  lebih cepat  menghasilkan  dengan  mutu  yang  seragam,  (2)  dapat  diproduksi dalam skala  besar,  dan  (3)  kemungkinan  diperoleh  komponen  bioaktif  baru  dengan memberikan kondisi yang berbeda.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  dilakukan  di  kandang  ternak  Politani, dan  Laboratorium Bioteknologi Pertanian Politani Negeri Kupang dari Juni – November. Rancangan percobaan  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  yang  terdiri  dari  3  macam perlakuan  jenis  tanaman  yaitu  mimba,  beluntas  dan  gandarusa  (daun,  batang dan akar). Ulangan dilakukan sebanyak 3 kali per isolat jamur dan bakteri yang didapatkan.  Data  hasil  pengukuran  zona  hambatan  dari  tiap  isolat dibandingkan dengan nilai rata-ratanya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolasi  Jamur  dan  Bakteri  Endofit  dari  tanaman  mimba,  beluntas  dan gandarusa Isolasi  dilakukan  pada  ketiga  tanaman  yang  diduga  berpotensi  sebagai penghasil  jamur  dan  bakteri  endofitik. Isolat  yang  diperoleh  dari  proses  isolasi jamur  dan  bakteri  endofit  dari  batang  dan  daun  ketiga  tanaman  yaitu  mimba, beluntas dan gandarusa dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Isolasi Jamur dan bakteri endofit pada tanaman mimba, beluntas dan gandarusa Jenis Tanaman Isolat Dugaan Jamur Bakteri Mindi - MBB1, MDB2 Beluntas BDJ1 - Gandarusa - GDB1 Keterangan:  MBB1  (Mimba  Batang  Bakteri1),  MDB2(Mimba  Daun  Bakteri2),,  BDJ1  (Beluntas

## Daun Jamur 1) dan GDB1 (Gandarusa Daun Bakteri1)
Pengelompokan isolat-isolat yang didapatkan dari proses isolasi ke dalam kelompok  jamur  dan  bakteri  berdasarkan  pada  ciri  morfologi  koloni  dan morfologi  sel.  Berdasarkan  uji  morfologi  koloni,  bakteri  MBB1    memiliki warna koloni  putih,  permukaan kasar dan  tepi  koloni  rata,  sedangkan  bakteri  MDB1 memiliki  warna  koloni  coklat  muda,  permukaan kasar dan  tepi  koloni  rata. Morfologi  sel  dari  MBB1  dan  MDB2  menunjukan  bentuk  yang  sama  yaitu berbentuk oval. Isolat jamur BDJ1 dari daun beluntas memiliki warna miselium putih, tidak bersekat dan memiliki spora berwarna coklat kehitaman, sedangkan isolat  bakteri  GDB1  yang  berasal  dari  daun  gandarusa  memiliki  ciri  morfologi
koloni,  berwarna  putih  susu,  tepi  koloni  rata  dan  permukaan kasar dan berdasarkan ciri morfologi sel memiliki bentuk sel oval. Isolat yang telah dikelompokan kemudian dimurnikan dan dijadikan stok kultur  untuk  selanjutnya  digunakan  untuk  pengujian  daya  hambat  terhadap jamur ikutan scabies.

## Isolasi Jamur dan Bakteri Ikutan Scabies
Hasil  isolasi  jamur  dan  bakteri  ikutan  dari permukaan  kulit hewan (ternak  kambing)  yang  terkena  scabies,  didapatkan  satu    jenis  jamur  yang diduga sebagai jamur ikutan scabies (SJ1), sedangkan bakteri tidak didapatkan pada  proses  ini.  Isolat  tersebut  kemudian  dimurnikan  untuk  pengujian selanjutnya.

## Pengujian Isolat Jamur dan Bakteri Endofit Terhadap Jamur Ikutan Scabies
Menurut  Petrini  et  al.,  (1992),  banyak  kelompok  fungi  endofit  yang mampu memproduksi senyawa antibiotika yang aktif melawan bakteri maupun fungi  patogenik  terhadap  manusia,  hewan  dan  tumbuhan.  Fungi  ini  dapat menginfeksi tumbuhan sehat pada jaringan tertentu dan mampu menghasilkan mikotoksin, enzim serta antibiotika (Carrol,1988 ; Clay, 1988). Asosiasi beberapa fungi endofit dengan tumbuhan inang mampu melindungi tumbuhan inangnya dari beberapa patogen virulen, baik bakteri maupun jamur (Bills dan Polyshook, 1992).
Pengujian  daya  hambat  dari  keempat  isolat  dilakukan  terhadap  jamur ikutan  scabies. Pengujian  dilakukan dengan  cara  sebagai  berikut:  kapang  SJ1 ditumbuhkan  dalam  media  kemudian  dilarutkan menggunakan  aquades  steril, suspensi mikrobia ditransfer ke dalam cawan Petri sebanyak kurang lebih 1 mL kemudian dituangkan media Potato Dextrose Agar cair yang bersuhu 35-40°C ke dalam  cawan  Petri  tersebut,  media digoyang  agar  homogen  dan  didiamkan beberapa  saat sampai  dingin.  Setelah  dingin,  ditempelkan  potongan  kertas saring  steril  yang  berdiameter  1  cm pada tengah media  tersebut, selanjutnya diteteskan  suspensi  mikrobia  endofit  sebanyak 1  ml di  atas  potongan kertas tersebut.  Cawan  Petri diinkubasi  pada  suhu  30°C  selama  1-3  hari  sampai terlihat pertumbuhan  atau  adanya  lingkaran  jernih  disekitar potongan  kertas tersebut. Lingkaran  jernih  tersebut merupakan  tanda  adanya  senyawa  bioaktif yang  dihasilkan oleh  mikrobia  endofit  untuk  memproteksi  diri  terhadap serangan/ pertumbuhan mikrobia ikutan scabies.
Isolat bakteri dan jamur endofit diinokulasikan pada media cair Nutrient Broth  dalam  Erlenmeyer  500  mL  yang  diisi  150  mL media  (dua  ulangan). Erlenmeyer diinkubasikan dalam “shaker” dengan kecepatan 150 rpm selama 6 hari pada suhu 28-30ºC.
Berdasarkan  pengujian  keempat  isolat  endofit    terhadap  jamur  ikutan scabies,  didapatkan  bahwa  bakteri  MBB1,  GDB1  dan  jamur  BDJ1    tidak memiliki daya hambat yang kuat ini dapat dilihat dari hasil pertumbuhan secara bersama pada cawan petri yang tidak terdapat zona penghambatan( zona jernih). Pada  hari  ketiga  pertumbuhan  dari  ketiga  isolate  ini  terdapat  luas  zona penghambatan yang sangat kecil (<0,5 cm), tetapi memasuki hari keempat zona tersebut telah tertutupi oleh jamur penginfeksi, sehingga dapat dikatakan bahwa ketiga  isolat endofit  tersebut  memiliki  daya  hambat  yang  lemah  sedangkan bakteri  MDB2    yang  diisolasi  dari  daun  beluntas  menunjukkan  daya  hambat
yang cukup  besar  yaitu  diameter  hambatan  3  cm  pada  hari  ketiga. Hal  ini diduga  disebabkan  isolat  ini  mampu  menghasilkan  senyawa  alkaloid  atau senyawa  antibiotik  atau  enzim  yang  mampu  melawan  serangan  jamur  ikutan scabies. Ini  menunjukkan  bahwa  isolat  ini  memiliki  potensi  untuk dikembangkan sebagai fungistatik untuk penyakit scabies pada ternak.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
1. MDB2)  dan  gandarusa  (GDB1)  sedangkan  isolat  jamur  endofit  dugaan didapatkan dari tanaman beluntas (BLJ1).
2. Isolat  yang  memiliki  zona  penghambatan  terbesar  terhadap  jamur    ikutan scabies adalah isolat MDB2 yang berasal dari tanaman mindi.
Saran
Perlu adanya penelitian dan pengujian lebih lanjut tentang daya hambat isolat bakteri endofit dugaan yang berasal dari tanaman mindi tersebut sehingga dapat dikembangkan lebih lanjut sebagai obat alternatif scabies pada ternak.

## DAFTAR PUSTAKA
Bills,  G.F.  and  Polyshook,  J.D. 1992.  Recovery  of Endophytic Fungi  from Chamaechyparisthyoides. Sydowia 44:1-12.
Carrol,  G.C.  1988.Fungal  Endophytes  in  Stems  and  Leaves.  From  Latent Pathogens to Mutualistic Symbiont. Ecology. 69:2-9.
Clay, K. 1988. Fungal Endophytes of Grasses : A Devensive Mutualism Between Plants and Fungi. Ecology 69 (1) : 10-16.
James,  E.K.  and  F.L.  Olivares.  1997.  Infection  and  colonization  of  sugar  cane and  other  graminaceous  plants  by  endophytic  diazotrophs.  Critical Reviews in Plant Science 17:77-119.
Olivares, F.L., V.L.D. Baldani, V.M. Reis, J.I. Baldani, and J. Dobereiner. 1996. Occurrence of the endophytic diazotrophs Herbaspirillum spp. In Roots, Stems and Leaves Predominantly of Gramineae. Biol. Fertil. Soils 21:197- 200.
Petrini,  O.,  T.N.  Sieber,  L.  Toti  dan  O.  Viret.,  1992. Ecology  Metabolite Production  and  Substrate  Utilization  in  Endophytic  Fungi.  Natural Toxins 1:185-196.
Stierle,  A.,  D.  Stierle,  G.  Strobel,  G.  Bigman,  and  P.  Grothes.  1995.  Bioactive metabolites  of  the  endophytic  fungi  dan  bakteri    of  pasific  yew  Taxus brevifolia. Elsevier Scientific Publ., Ireland.
Strobel,  G.A.,  W.M.  Hess,  E.  Ford,  R.S.  Sidhu,  and  X.  Yang.,  1996.  Taxol  from Fungal  Endophytes  and  The  Issue  of  Biodiversity. Journal  of  Industrial Microbiology. 17:417-425.