DAYA HAMBAT EKSTRAK ETANOL Schismatoglottis sp. TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
Fahri Bian 1) , Febby E.F. Kandou 1) ,Marhaenus J. Rumondor 1)
1) PS Biologi FMIPA Universitas Sam Ratulangi Manado e-mail : Brown_minhoz@yahoo.com ; febbyefkandou@yahoo.com; marhaenusrumondor66@yahoo.com

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  daya  hambat  ekstrak  etanol  daun Schismatoglottis sp. terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli .  Daya  hambat  ekstrak  etanol Schismatoglottis sp.  terhadap  bakteri  menggunakan  metode  Kirby-Bauer,  yaitu  metode  difusi dengan  cakram  kertas.  Ekstrak  etanol Schismatoglottis sp.  menghambat  pertumbuhan S.  aureus pada  konsentrasi  60%  dan  90%  dengan  diameter  zona  hambat  16,10  mm  dan  31,33  mm  serta terhadap E.  coli pada  konsentrasi  30%,  60%,  dan  90%  dengan  diameter  zona  hambat  berturut- turut  11,72  mm,  16,38  mm,  dan    29,27  mm.  Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat  disimpulkan bahwa  ekstrak  etanol Schismatoglottis sp.  terhadap S.  aureus pada  konsentrasi  60%  dan  90% masing-masing memiliki kekautan antibakteri termasuk kategori kuat dan sangat kuat, sedangkan terhadap E.  coli pada  konsentrasi  30%  dan  60%,  memiliki  kekuatan  antibakteri  kategoti  kuat sedangkan pada konsentrasi 90% memiliki kekuatan antibakteri kategori sangat kuat.
Kata kunci : Schismatoglottis sp, Antibakteri, Staphylococcus aureus , Escherichia coli
THE INHIBITION OF ETHANOL EXTRACT OF Schismatoglottis sp . AGAINST BACTERIA Staphylococcus aureus AND
Escherichia coli.

## ABSTRACT
This  study  aimed  to  determine  the  inhibition  of  ethanol  extract  of  leaves Schismatoglottis sp. against S.  aureus and E. coli. Inhibition  of  the  ethanol  extract  of Schismatoglottis sp. against  to bacterial using the Kirby-Bauer method, is the paper disk diffusion method. Schismatoglottis sp. ethanol extract inhibit the growth of S. aureus at a concentration of 60% and 90% inhibition zone with a diameter of 16.10 mm and 31.33 mm and against E. coli at a concentration of 30%, 60%, and 90% with inhibition zone diameter respectively 11, 72 mm, 16.38 mm and 29.27 mm. Based on the results, it can be concluded that the ethanol extract Schismatoglottis sp. against S. aureus at concentrations  of  60%  and  90%  respectively  have  antibacterial  kekautan  categorized  as  strong and very strong, while against E. coli at a concentration of 30% and 60%, have a strong kategoti antibacterial  strength  while  at  a  concentration  of  90%  has  antibacterial  strength  very  strong category.
Keywords: Schismatoglottis sp, antibacterials, Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

## PENDAHULUAN
Suku  Araceae  atau  keluarga  talas- talasan  merupakan  salah  satu  golongan tumbuhan yang memiliki tingkat keanekaragaman  yang  cukup  tinggi  dan mempunyai  daerah  persebaran  yang  luas  di wilayah Indonesia.
Salah  satu  tumbuhan  yang  memiliki khasiat  sebagai  obat  tradisional,  ialah tumbuhan  talas-talasan.  Di  beberapa  negara
tumbuhan  talas-talasan dimanfaatkan  sebagai obat  antiinflamasi,  antikanker,  antidiabetes, dan  antibakteri,    (Prajapati et  al .,  2011). Senyawa-senyawa yang telah berhasil diisolasi  dari  daun Colocasia  esculanta mengandung senyawa kimia flavonoid, tanin, alkaloid,  dan  saponin  (Wijaya,  2014).  Di antara suku Araceae terdapat jenis Schismatoglottis sp.  yang  banyak  terdapat  di Sulawesi  Utara,  tetapi  belum  ada  penelitian
yang  membuktikan  pengaruhnya  terhadap bakteri E. coli dan S. aureus. Untuk menguji kemampuan  suatu  senyawa  yang  bersifat antibakteri  biasanya  menggunakan  bakteri S. aureus dan E. coli. Kedua bakteri ini dipilih, untuk  mewakili  bakteri  kelompok  Gram positif  ( S.  aureus )  dan  kelompok  Gram negatif( E.coli ).

## METODE PENELITIAN
Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi (pembuatan ekstrak),  Laboratorium  Bioteknologi  (uji aktivitas  antibakteri),  serta  Laboratorium Farmakologi  dan  Biofarmasi  (evaporasi ekstrak)  di  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan
Alam Universitas Sam Ratulangi  Manado    pada  bulan  Maret-Juli 2015. Alat dan Bahan Alat-alat yang digunakan, yaitu Erlenmeyer  500  ml,  gelas  ukur  500  ml, aluminium  foil ,  timbangan  digital,  10  tabung reaksi, 20 cawan petri, hot plate, laminar air flow ,  lampu  bunsen,  jarum  inokulasi  lurus, autoklaf, lemari pendingin, mortar dan pestle, rak  tabung,  korek  api,  pinset,  evaporator, oven,  cakram  kertas  jenis  Whatman  No.42 dengan  diameter  6  mm,  mistar,  kamera, sarung tangan, mikropipet (10-100µL).
Bahan-bahan  yang  digunakan  yaitu daun Schismatoglottis sp.  biakan  murni bakteri S.  aureus dan E.  coli yang  diperoleh dari  Laboratorium  Bioteknologi  FMIPA Unsrat, medium Nutrient Agar (NA), medium Nutrient  Broth (NB),  akuades,  etanol  96%, dan zat antibiotik (ampicillin).
Penyiapan Sampel dan Pembuatan Ekstrak Daun Schismatoglottis sp.  diambil dicuci bersih, diiris
daunnya, dikeringanginkan di dalam ruangan selama ± 15  hari  sampai  mencapai  berat  konstan, kemudian  diblender  daunnya  serta  ditapis hingga  menjadi  serbuk  (Dewi,  2010).  serbuk ditimbang sebanyak 50 g kemudian dimasukan  ke  dalam  wadah  dan  dimaserasi dengan pelarut etanol 96%, sebanyak 500 ml selama    3  x  24  jam.  Larutan  disaring mengunakan  kain  sifon  dan  kertas  Whatman kemudian  dimasukkan  ke  dalam  gelas
erlenmeyer  untuk  dipisahkan  residu  dari filtrat (Frengki et al ., 2014), filtrat kemudian diuapkan  dengan  mengunakan vacum  rotary evaporator pada suhu 40°C sampai diperoleh ekstrak  etanol  yang  pekat.  Ekstrak  etanol pekat  lalu  diuapkan  di  dalam  oven  dengan suhu  40°C  sampai  kering  atau  1  x  24  jam. Ekstrak kemudian diencerkan masing-masing menjadi  30%,  60%,  dan  90%.  Antibiotik pembanding  yaitu  ampicillin  dibuat  dengan takaran  10  mg  yang  dilarutkan  dalam  10  ml akuades (Tangapo, 2005).

## Pembuatan Medium Tumbuh Bakteri dan Pembiakan Bakteri
Dilarutkan  150  ml  akuades  dengan 1,95  g  medium  NB  dan  7  g  medium  NA dilarutkan  dengan  350  ml  akuades.  Semua campuran medium dipanaskan hingga semuanya  larut.  Medium  NB  dimasukan  ke dalam  10  tabung  reaksi  masing-masing sebanyak  10  ml  dan  medium  NA  untuk disterilisasi dengan autoklaf selama 15 menit pada  suhu  121°C  di  bawah  tekanan  15  lbs (Dewi, 2010). Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli yang  dijadikan  biakan murni,  diinokulasikan  secara  aseptik  ke medium NB steril yang berisi 10 ml, masing- masing  sebanyak  5  tabung  reaksi  dari  10 tabung  NB  steril  yang  sudah  disiapkan. Biakan tersebut sebagai stocklalu diinkubasikan  selama  1x  24  jam  pada  suhu 37°C (Ramadanti, 2008).

## Daya Hambat Ekstrak terhadap Bakteri
Bakteri S.  aureus dan E.  coli sebagai biakan  uji,  dipindahkan  dari  medium  NB  ke 10 cawan petri steril masing-masing sebanyak  0,1  ml  (Tangapo,  2005).  Medium NA  dituang  kecawan  petri  berisi  biakan  uji, masing-masing  sebanyak  15  ml.  Masing- masing dari cakram  kertas steril dipindahkan secara  aseptik  menggunakan  pinset  steril  ke konsentrasi  yakni,  30%,  60%,  dan  90% serta larutan antibiotik (kontrol positif) dan larutan akuades (kontrol negatif) direndam ± 1 menit (Tangapo,  2005).  Cakram  kertas  kemudian dipindahkan  dengan  pinset  steril  ke  medium NA  berisi S.  aureus dan E.  coli secara aseptik,  kemudian  diinkubasi  selama  1  x  24 jam  dengan  suhu  37°C.  Setelah  diinkubasi, diamati  zona  bening  yang  terdapat  di  sekitar kertas  cakram  dan  diukur  diameternya. Pengujian  daya  hambat  antibakteri  ekstrak etanol  daun Schismatoglottis sp.  terhadap S.
aureus dan E.  coli dilakukan  sebanyak  tiga kali  pengulangan  untuk  setiap  konsentrasi yang diuji (Tangapo, 2005).

## Analisis Data
Diameter  zona  daya  hambat  ekstrak etanol  daun Schismatoglottis sp  terhadap S.
aureus dan E.  coli disajikan  dalam  bentuk tabel  dan  gambar.  Efektivitas  antibakteri konsentrasi ekstrak etanol
daun Schismatoglottis sp.  terhadap  antibiotik dihitung  berdasarkan  persamaan  (Tangapo, 2005), yaitu:
E = (D/Da) x 100% Keterangan : E  : efektivitas antibakteri (%) D:diameter zona hambat ekstrak (mm) Da:diameter zona hambat antibiotik (mm)

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Daya Hambat Ekstrak
Pengukuran  diameter  zona  hambat  dilakukan untuk  menggolongkan  kekuatan  antibakteri. Zona  bening  yang  terdapat  disekitar  cakram kertas  yang  diuji  menandakan  bahwa  terjadi aktivitas  daya  hambat.  Adanya  zona  bening disekitar  cakram  kertas  merupakan  daerah difusi  dalam  mempengaruhi  pertumbuhan bakteri.  Kekuatan  antibakteri  dapat  diketahui dengan  mengukur    besarnya  diameter  dari zona  hambat  yang  terbentuk  oleh  ekstrak yang  diuji.  Davis  dan  Stout,  (1971) mengelompokkan kekuatan antibakteri dalam menggolongkan  diameter  dari  zona  hambat yang diperoleh.
Ekstrak Daun Schismatoglottis sp.
Hasil  pengujian  dari  ekstrak  etanol Schismatoglottis sp.  terhadap  bakteri E  coli, terlihat  memiliki  zona  bening  di  konsentrasi 30%,  60%,  dan  90%  (Gambar  1).  Diameter daya  hambat  ekstrak  etanol Schismatoglottis sp.  terhadap E.  coli semakin  meningkat bersamaan  dengan  meningkatnya  konsentrasi ekstrak  (Tabel  1).  Hal  ini  menunjukkan bahwa  senyawa  aktif  yang  terdapat  didalam ekstrak  etanol Schismatoglottis sp.  memiliki aktivitas antibakteri dan mampu menghambat pertumbuhan  bakteri E.  coli dari  golongan Gram  negatif.  Daya  hambat  ekstrak  etanol Schismatoglottis sp.  terhadap  bakteri E.  coli pada  konsentrasi  30%  dan  60%  memiliki kekuatan  antibakteri  yang  termasuk  kategori kuat,  sedangkan  pada  konsentrasi  90%
memiliki kekuatan antibakteri kategori sangat kuat  karena  mempunyai  diameter  diatas  20 mm.
Tabel  1.  Diameter  Zona  Hambat  Ekstrak Schismatoglottis sp terhadap S. aureus dan E.
coli .
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  senyawa aktif  yang  terdapat  didalam  ekstrak  etanol Schismatoglottis sp. memiliki aktivitas antibakteri dan mampu menghambat pertumbuhan  bakteri E.coli dari  golongan Gram  negatif.  Daya  hambat  ekstrak  etanol Schismatoglottis sp.  terhadap  Bakteri E.  coli pada  konsentrasi  30%  dan  60%  memiliki kekuatan  antibakteri  yang  termasuk  kategori kuat,  sedangkan  pada  konsentrasi  90% memiliki kekuatan antibakteri kategori sangat kuat  karena  mempunyai  diameter  diatas  20 mm.  Hasil  yang  sama  juga  ditunjukkan  dari ekstrak  etanol Schismatoglottis sp  terhadap bakteri S.aureus dari golongan Gram positif . Diameter daya
hambatdari ekstraketanol
Schismatoglottis sphanya terlihat  pada  konsentrasi  60%  dan  90%,
sedangkan  pada  konsentrasi  30%  tidak terlihat  zona  bening  (Gambar  2).  Hal  ini menujukkan bahwa ekstrak etanol Schismatoglottis sp.  pada  konsentrasi  sedang dan  tinggi,  sudah  mampu  menghambat metabolisme  bakteri S.  aureus, sedangkan pada  konsentrasi  rendah  belum  mampu mempengaruhi  metabolisme  bakteri.  Hal  ini terlihat  dengan  adanya  pertumbuhan  bakteri di  sekitar  cakram  kertas  pada  konsentrasi 30%. Nilai diameter dari zona hambat ekstrak etanol Schismatoglottis sp. terhadap S. aureus pada konsentrasi 60% dan 90% adalah 16,10 mm  dan  31,33  mm  (Tabel  1).  Daya  hamba tekstrak  etanol Schismatoglottis sp.  terhadap bakteri S.  aureus pada  konsensentrasi  60% termasuk  dalam  kategori  kuat,  sedangkan pada  konsentrasi  90%  termasuk  dalam kategori  sangat  kuat  karena  mempunyai
Konsentrasi (%)
Di  Diameter Zona Hambat Ekstrak Schismatoglottis sp(mm) S.  aureus        E. coli 30% 0,00±0,00      11,72±0,69 60% 16,10±0,77   16,38±0,76 90% 31,33±2,72   29,27±0,63
diameter  diatas  20  mm.  Adanya  peningkatan zona  bening  pada  bakteri E.coli dan S. aureus, disebabkan  oleh  senyawa  aktif  yang terkandung  dalam  ekstrak  etanol  daun Schismatoglottis sp. yang mampu membunuh biakan  uji.  Menurut  Lense  (2011),  daun  dari Schismatoglottis sp.  mengandung  senyawa alkaloid.  Senyawa  alkaloid  memiliki  potensi sebagai antibakteri (Nakade et al., 2013).  Hal inilah  yang  menjadi  dasar  adanya  zona bening  yang  ditunjukan  oleh  ekstrak  etanol Schismatoglottis sp.  terhadap  bakteri S. aureus dan E. coli .
Gambar  1.  Zona  Hambat  Ekstrak  Daun Schismatoglottis sp  pada E.  coli pada Konsentrasi 30%, 60%, dan 90%.
Gambar  2.  Zona  Hambat  Ekstrak  Daun Schismatoglottis sp.  pada S.  aureus pada Konsentrasi 30%, 60%, dan 90%.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  maka dapat  disimpulkan  bahwa  pengujian  ekstrak etanol  daun Schismatoglottis sp.  terhadap E. coli dan S.  aureus menunjukkan  adanya aktivitas  antibakteri.  Zona  hambat  ekstrak etanol daun Schimatoglottis sp. pada konsentrasi  30%  dan  60%  memiliki  daya hambat  yang  tergolong  kuat , serta  pada konsentrasi 90% memiliki daya hambat yang
tergolong  sangat  kuat  terhadap  bakteri E. coli, sedangkan  pada  konsentrasi  60% memiliki kekuatan antibakteri tergolong kuat serta pada konsentrasi 90% memiliki kekuatan  antibakteri  kategori  sangat  kuat terhadap bakteri S. aureus.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan untuk  mengetahui  senyawa  bioaktif  yang terkandung di dalam Schismatoglottis sp yang lebih  khusus,  karena    memiliki  senyawa antibakteri  dan  uji  daya  hambat  terhadap bakteri lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Adam,  A.  A.  2014.  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Kasar  Tunikata Polycarpa aurata terhadap Streptococcus  mutans . [Skripsi].  Universitas  Sam  Ratulangi Manado. Manado. Davis,  W.  W  dan  T.  R.  Stout.  1971.  Disc Plate Method of Microbiological Antibiotic Essay. Journal of Microbiology 22(4): 659-665.
Dewi,    F.  K.  2010.  Aktivitas  Antibakteri
Ekstrak Etanol Buah Mengkudu ( Morinda  citrifolia )  terhadap  Bakteri Pembusuk  Daging  Segar.  [Skripsi].
Universitas Sebelas Maret. Surakarta.
Frengki,  Roslizawaty  dan  D.  Pertiwi.  2014.
Uji  Toksisitas  Ekstrak  Etanol  Sarang Semut  Lokal  Aceh  ( Mymercodia sp.) dengan  Metode  BSLT  terhadap  Larva Udang Artemia  salina Leach. Jurnal
Medika Viterinaria 8(1): 0853-194.
Lense,  O.  2011.  Biological  Screening  of
Selected  Traditional  Medicinal  Plants
Species  Utilized  by  Local  People  of Manokwari,  West  papua  Province. Nusantara Bioscience 3(3): 145-150. Pattaratanawadee,  E.,  C.  Rachtanapun.,  P. Wanchaitanawong dan W. Mahakarnchanakul.2006.Antimicrobial Activity  of  Spice  Extracts  against Pathogenic and Spoilage Microorganisms. Kasetsart  journal: Natural Science 40(5): 159-165.
Ramadanti,  I.  A.  2008.  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Bawang  Putih ( Allium  sativum L)terhadap  bakteri Escherichia  coli in  vitro. [Artikel Karya Tulis Ilmiah].Universitas Diponegoro. Semarang.
Rezvanpanah, S., K. Rezaei.,M.T. Golmakani dan  S.  H.  Razavi.  2011.  Antibacterial Properties and Chemical Characterization  of  the  Essential  Oils from  Summer  Savory  Extracted  by Microwave-Assisted  Hydrodistillation. Braz J Microbiol 4(42): 1453–1462.
Rostinawati, T. 2009. Uji Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Bunga Rossela ( Hibiscus sabdarifa L.) terhadap Escherichia  coli, Salmonella typhi dan Staphylococcus aureus
dengan Metode Difusi Agar.[Penelitian Mandiri]. Universitas Padjadjaran.
Jatinangor. Tangapo. A. M. 2005. Efektivitas Antibakteri Ekstrak  Tumbuhan  Daun  Sendok ( Plantago major) terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa [Skripsi].
Universitas Sam Ratulangi. Manado