UJI EFEK ANALGETIK EKSTRAK ETANOL DAUN PEPAYA ( Carica papaya L) PADA MENCIT PUTIH JANTAN ( Mus mucculus )
Stella Octavianus 1) , Fatimawali 1) dan Widya A. Lolo 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
The objectives of this research were to find out analgesic effect of pepaya leaf etanol extract with  concentration  0,6  g/kgBB,  1,2  g/kgBB  and  2,4  g/kgBB  on  white  male  mouse  ( Mus musculus ).  The  subject  in  this  research  were  15  white  male  mouse  which  divided  into  5 groups, each group consist of 3 white male mouse. Negative control group were administered with  CMC,  positive  control  group  were  administered  with  mefenamid  acid  and  experiment groups were administered with  pepaya leaf etanol  extract.  Analgesic test were examined by giving pain stimulation to treated animals, such a 55°C heat stimulation. The response which observed  were  mouse  licking  feet  or  jumping  response.  The  observation,  then  at  30,  60,  90 and  120  minutes  after  administered.  The  results  shows  that  pepaya  leaf  etanol  extract  with concentration  0,6  g/kgBB,  1,2  g/kgBB  and  2,4  g/kgBB  prossess  analgesic  effect  on  white male  mouse,  expecially  concentration  2,4  g/kgBB.  It  can  be  conclusion  that  pepaya  leaf etanol extract own the analgesic effect on white male mouse thermal induction.
Key words : analgesic, pepaya leaf extract, pain

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  ada  tidaknya  efek  analgetik  dari  ekstrak  etanol daun pepaya dengan dosis 0,6 g/kgBB, 1,2 g/kgBB dan 2,4 g/kgBB pada mencit putih jantan ( Mus  musculus )  .  Subjek    penelitian  ini  ialah  15  ekor  mencit  putih  yang  dibagi  menjadi  5 kelompok  yaitu  kontrol  negatif  (CMC),  kelompok  kontrol  positif  (Asam  mefenamat)  dan kelompok  perlakuan  (ekstrak  etanol  daun  pepaya).  Pengujian  efek  analgetik  dilakukan dengan cara memberikan rangsangan nyeri pada hewan uji, berupa rangsangan panas dengan suhu  55°C.  Respon  mencit  yang  diamati  yaitu  gerakan  menjilat  kaki  dan  atau  melompat. Pengamatan  dilakukan  selama  1  menit.  Pengamatan  dilakukan  sebelum  pemberian  zat  uji, kemudian  berturut-turut  pada  menit  ke-30,  60,  90  dan  120  setelah  pemberian  zat  uji.  Hasil penelitian  menunjukkan  ekstrak  etanol  daun  pepaya  dengan  dosis  0,6  g/kgBB,  1,2  g/kgBB dan 2,4 g/kgBB memiliki efek analgetik pada mencit putih terutama pada dosis 2,4 g/kgBB. Dengan  demikian  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  pepaya  memiliki  efek analgetik pada mencit putih jantan yang diinduksi secara termik
Kata kunci : nyeri, analgetik, daun pepaya

## PENDAHULUAN
Analgetika  atau  obat  penghalang
nyeri adalah zat-zat  yang mengurangi atau menghalau rasa nyeri tanpa menghilangkan kesadaran (perbedaan dengan  anestetika  umum)  (Tjay  dan Rahardja, 2002). Nyeri  menjadi  salah satu alasan  utama  seseorang  datang  untuk mencari pertolongan medis karena sebagian  besar  penyakit  pada  tubuh menimbulkan  rasa  nyeri  (Price,  2006). Pada  dasarnya  nyeri  merupakan  keadaan yang  mengganggu  dan  tidak  nyaman  bagi penderitanya, namun nyeri dapat digunakan sebagai tanda adanya kerusakan jaringan,  diantaranya  nyeri  kutan  yang bersifat  membakar  dan  lambat  hilang dengan  pembebasan  prostaglandin  sebagai mediator  spesifik  untuk  nyeri  yang belangsung  lama  (Satyanegara,  1978). Nyeri  yang  disebabkan  oleh  rangsangan mekanis,  kimiawi  atau  fisis  (kalor,  listrik) dapat menimbulkan kerusakan pada jaringan.  Rangsangan  tersebut  memicu pelepasan  zat-zat  tertentu  yang  disebut mediator  nyeri,  antara  lain:  histamin, bradikidin,  leukotrien  dan  prostaglandin (Tjay dan Rahardja, 2002).
Pengobatan  menggunakan  tanaman obat telah ada dan dikenal oleh masyarakat Indonesia  sejak  zaman  dahulu.  Banyak tanaman  obat  yang  sudah  dilaporkan mempunyai  efek  terapi  untuk  beberapa penyakit,  namun  pengetahuan  tentang khasiat  dan  keamanan  obat  alami  ini kebanyakan  hanya  bersifat  empiris  dan belum  diuji  secara  ilmiah,  salah  satunya adalah  tanaman  pepaya  ( Carica  papaya L.).  Daun  pepaya  adalah  tanaman  obat yang diketahui mempunyai khasiat empiris sebagai analgetik.
Daun  pepaya  diketahui  mengandung flavonoid.  Flavonoid  berperan  sebagai analgetik yang mekanisme kerjanya menghambat  kerja  enzim  siklooksigenase (Suryanto,  2012).  Dengan  demikian  akan mengurangi  produksi  prostaglandin  oleh asam arakidonat sehingga mengurangi rasa nyeri (Gunawan, 2008).

## METODOLOGI PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  alat-alat  gelas  ( pyrex ), ayakan  no.  200  mesh,  blender  (Miyako), disposable  syringe 1  ml  (One  Med), lumpang  dan  alu,  kandang  dan  tempat minum  hewan  uji,  NGT  ( Nasogastric Tube )  pediatrik  no.  3,5  (Terumo),  oven, pisau, rotary evaporator, stopwatch, sarung  tangan,  timbangan  analitik  dan waterbath
Dalam penelitian bahan yang digunakan  antara  lain  aquadest,  asam mefenamat  500  mg,  CMC  ( Carboxy methyl  celluolsse )  0,5%,  makanan  hewan uji, sampel segar daun pepaya 1000 gram, etanol 95% dan kertas saring.

## Ekstraksi tanaman dengan cara maserasi
Sampel berupa daun pepaya ( Carica  papaya L.)  dibersihkan  lalu dirajang  dan  menghasilkan  1  kg  sampel daun pepaya basah, kemudian dikeringkan dengan  menggunakan  oven  pada  suhu 40°C,  lalu  ditimbang.  Sampel  yang  telah kering  di  blender  lalu  diayak  dengan ayakan no 200 mesh. Serbuk daun pepaya sebanyak  150  g  dimasukkan  ke  dalam beaker  glass ,  kemudian  ditambahkan pelarut  etanol  80%  sebanyak  750  mL, ditutup  dan  dibiarkan  selama  3  hari terlindung dari cahaya (setiap hari digojok). Setelah 3 hari, rendaman tersebut disaring  dengan  menggunakan  kertas saring  (filtrat  1)  dan  sisanya  diekstrak kembali  dengan etanol 80%  sebanyak 450 mL  selama  2  hari.  Filtrat  1  dan  filtrat  2 digabung  kemudian  diuapkan  dengan menggunakan evaporator pada  suhu  40°C yang bertujuan untuk menguapkan pelarutnya  hingga  berupa  endapan  tidak terlalu kental. Kemudian proses dilanjutkan  dengan  pemekatan  ekstrak sampai  menjadi  ekstrak  kental  dengan menggunakan water bath pada suhu 50°C.
Dari  hasil  ekstrak  kental  yang  dibuat, didapat sebanyak 24,94 g.
Pembuatan suspensi CMC 0,5%
Sebanyak  0,5  g  CMC  ditaburkan dalam  lumpang  yang  berisi  10  mL aquadest yang telah dipanaskan, kemudian digerus  sampai  homogen.  Selanjutnya dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  dan tambahkan  aquadest  sampai  volume  100 mL.

## Dosis Ekstrak daun pepaya.
Takaran  konversi  dosis  untuk manusia  dengan  BB  70  kg  pada  mencit dengan BB 20 g adalah 0,0026 g. Rata-rata orang  Indonesia  beratnya  50  kg.  Dosis ekstrak  pepaya  ( Carica  papaya )  yang biasa  digunakan  masyarakat  adalah  2,494 g (dapat dilihat pada lampiran ) maka dosis untuk mencit adalah : = (70/50 x  2,494 g) x 0,0026 = 0,009 g / 30 g mencit =  0,3 g /kgBB
Dalam  percobaan  digunakan  dosis ekstrak daun pepaya yang bertingkat : Kelompok p1 =  2  x   0,3   g/kgBB =   0,6 g/kgBB Kelompok p2 =  4  x   0,3   g/kgBB =   1,2 g/kgBB Kelompok p3 =  8  x   0,3   g/kgBB =   2,4 g/kgBB
Dosis Asam Mefenamat Tiap tablet asam mefenamat mengandung  500  mg  asam  mefenamat. Takaran  konversi  dosis  asam  mefenamat untuk  manusia  dengan  BB  70  kg  pada mencit  dengan  BB  20  g  adalah  0,0026. Rata-rata  orang  Indonesia  beratnya  50  kg, maka dosis untuk mencit adalah: = (70/50 x 500 mg) x 0,0026 = 1,82 mg /30 g mencit = 60 mg/kgBB

## Pengujian Efek Analgesik
Langkah-langkah  pengujian  efek analgesik  pada  hewan  uji  yaitu  sebagai berikut:
a. Beaker  glass dimasukkan  ke  dalam waterbath yang  berisi  air,  kemudian waterbath dipanaskan  hingga  suhu 55°C.  Setelah  suhu  mencapai  55°C,
mencit  dimasukkan  ke  dalam beaker glass tersebut.
b. Setelah  mencit  ada  di  dalam beaker glass maka  responnya  diamati,  yaitu berupa  gerakan  menjilat  kaki  dan  atau melompat. Pengamatan dilakukan selama 1 menit.
c. Kelompok  kontrol  negatif  diberikan suspensi CMC 0,5%, kelompok kontrol positif diberikan suspensi asam mefenamat  dan  kelompok  perlakuan diberikan  suspensi  ekstrak  etanol  daun pepaya. Mencit lalu diistirahatkan untuk diamati kembali pada menit ke-30.
d. Pengamatan dilakukan hingga menit ke- 120,  dengan  interval  waktu  30  menit untuk setiap pengamatan.
e. Pengamatan dilakukan sebanyak 5 kali, yaitu :
i. Sebelum pemberian bahan uji
ii. Menit  ke-30  setelah  pemberian bahan uji iii. Menit  ke-60  setelah  pemberian bahan uji iv. Menit  ke-90  setelah  pemberian bahan uji
v. Menit  ke-120  setelah  pemberian bahan uji

## Analisis Data
Data  hasil  pengamatan  dikumpulkan dan  disajikan  dalam  bentuk  tabel,  grafik dan analisis statistik uji One-Way ANOVA ( Analysis Of Variance ). Jika terdapat beda nyata  dilanjutkan  dengan  pengujian  LSD ( Least Significant Difference ) (p < 0,05).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  analisis  statistik  uji  ANOVA (lampiran  7)  rata-rata  total  respon  mencit kelompok  kontrol  negatif,  kontrol  positif dan  kelompok  perlakuan  menunjukkan hasil yang tidak bermakna dengan nilai p = 0,085  (  p  >  α.),  tetapi  pada  hasil  uji  LSD menunjukkan  hasil  yang  bermakna  antara kelompok  kontrol  negatif  dibandingkan dengan  kelompok  kontrol  positif  dan kelompok perlakuan.
Penelitian  ini  menggunakan  mencit putih  jantan  karena  kondisi  biolgisnya
lebih  stabil  dibandingkan  dengan  mencit betina.  Sebelum  dilakukan  perlakuan, hewan  uji  dipuasakan  terlebih  dahulu selama 8 jam, dengan hanya diberi minum dengan tujuan agar kondisi hewan uji sama dan  mengurangi  pengaruh  makanan  yang dikonsumsi.
Penelitian  ini  dilakukan  untuk mengetahui  ada  tidaknya  efek  analgetik dari ekstrak daun pepaya dengan menggunakan  metode  rangsangan  panas ( hot plate method ) yang diuji pada mencit. Rangsangan  yang  diberikan  pada  hewan uji  yaitu  berupa  rangsangan  panas  dengan suhu  55°C.  Pada  suhu  45°C  seseorang mulai  merasakan  sakit  dan  reseptor  panas mempunyai  respon  terhadap  suhu  30- 45°C,  suhu  diatas  45°C  mulai  terjadi kerusakan  jaringan  akibat  panas  dan sensasinya  berubah  menjadi  nyeri.  Jadi, rasa  nyeri  yang  disebabkan  oleh  panas sangat erat hubungannya dengan kemampuan panas untuk merusak jaringan (Guyton, 1994). Pada penelitian ini respon mencit  yang  dinilai  berupa  gerakan menjilat  kaki  dan  atau  melompat.  Sebagai patokan,  bahwa  mencit  mulai  merasakan nyeri  pada  waktu  menjilat  kaki  belakang dan  atau  melompat,  karena  menjilat  kaki depan  adalah  hal  normal  bagi  mencit (Turner, 1965).
Pada  kelompok  kontrol  negatif yang  diberikan  CMC  menunjukkan  rata- rata  jumlah  respon  hewan  uji  antara sebelum  dan  setelah  pemberian  CMC, tidak  terjadi  penurunan.  Walaupun  setelah perlakuan  pada  menit  ke-90  dan  120 terjadi  penurunan  rata-rata  respon  nyeri pada  mencit.  Tetapi  jika  dibandingkan dengan rata-rata respon sebelum perlakuan, rata-rata respon pada menit ke - 90  dan  120  jauh  lebih  besar.  Hal  ini disebabkan  karena  pada  kontrol  negatif tidak  terkandung  zat  aktif  yang  dapat mengurangi nyeri.
Pada kelompok kontrol positif yang diberikan  asam  mefenamat,  menunjukkan terjadi  penurunan  respon  rata-rata  hewan uji  terhadap  rangsangan  nyeri.  Efek analgetik  dari  kelompok  kontrol  positif
tetap  terlihat  sampai  akhir  pengujian  pada menit  ke-120.  Efek  analgetik  asam mefenamat  pada  penelitian  ini  mencapai puncaknya  pada  menit  ke-120.  Asam mefenamat  diketahui  memiliki  waktu paruh  2-4  jam.  Pada  manusia,  efek analgetik  asam  mefenamat  mencapai puncak  pada  waktu  2-4  jam.  Berdasarkan penelitian  pada  kontrol  positif,  efek analgesik  asam  mefenamat  pada  mencit timbul pada menit ke-30 setelah pemberian oral  dan  puncaknya  pada  menit  ke-120. Hal ini disebabkan karena faktor perbedaan  spesies  antara  manusia  dengan mencit  yakni  perbedaan  metabolisme mencit  dan  manusia,  namun  untuk  efek analgetik  asam  mefenamat  sesuai  dengan teori  yang  mengatakan  bahwa  efek analgesik  asam  mefenamat  mencapai puncak  dalam  waktu  2-4  jam  (Gunawan, 2008).
Dari keseluruhan data yang didapatkan  dari  kelompok perlakuan (ekstrak  etanol  daun  pepaya)  terlihat bahwa  efek  yang  ditimbulkan  oleh  Kp 1 (dosis  0,7  g/kgBB)  dan  asam  mefenamat 0,0759  g  hampir  sama.  Hal  ini  berarti potensi  analgetik    Kp 1 sama  dengan  asam mefenamat  0,0759  g  dalam  mengurangi rasa  nyeri  pada  mencit  yang  diinduksi secara  termik  menggunakan waterbath . Kp 2 (dosis 1,2 g/kgBB) dan Kp 3 (dosis 2,4 g/kgBB)  mempunyai  efek  analgetik  yang lebih  baik  dari  asam  mefenamat  terutama Kp 3 yang  merupakan  dosis  maksimum pada  penelitian  ini.  Hal  ini  disebabkan oleh  perbedaan  dosis  yang  diberikan dimana  dosis  Kp 2 dan  Kp 3 lebih  besar daripada dosis asam mefenamat.
Pemberian  dosis  yang  lebih  tinggi  dari ekstrak etanol daun pepaya ini dimaksudkan  untuk  mendapatkan  efek analgetik yang lebih pasti.
Hasil  pengujian  pada  kelompok perlakuan  yang  diberi  dosis  berbeda, menunjukkan adanya efek analgetik ekstrak  etanol  daun  pepaya  pada  hewan uji. Hal ini terlihat dari penurunan rata-rata respon nyeri dari mencit sebelum perlakuan dibandingkan setelah perlakuan.
Kp 1 ( dosis 0,6 g/kgBB) terlihat efek analgetiknya  pada  menit  ke-30  setelah perlakuan  dan  tetap  memperlihatkan  efek analgetiknya  sampai  menit  ke-90.  Efek analgetik  Kp 1 mencapai  puncaknya  pada menit  ke-90.  Pada  menit  ke-120,  efek analgetiknya  sudah  hilang  hal  ini  terlihat dari  rata-rata  respon  nyeri  mencit  pada menit  ke-120  lebih  tinggi  dari  rata-rata respon nyeri mencit sebelum perlakuan.
Kp 2 (dosis 1,2 g/kgBB) terlihat efek analgetiknya  pada  menit  ke-30  setelah perlakuan  dan  tetap  memperlihatkan  efek analgetiknya  sampai  menit  ke-90.  Efek analgetik  Kp 2 mencapai  puncaknya  pada menit  ke-90.  Pada  menit  ke-120,  efek analgetiknya  sudah  hilang  hal  ini  terlihat dari  rata-rata  respon  nyeri  mencit  pada menit ke-120 sama dengan rata-rata respon nyeri mencit sebelum perlakuan.
Kp 3 ( dosis 2,4 g/kgBB) terlihat efek analgetiknya  pada  menit  ke-30  setelah perlakuan  dan  tetap  memperlihatkan  efek analgetiknya  sampai  menit  ke-90.  Efek analgetik  Kp 3 mencapai  puncaknya  pada menit  ke-90.  Pada  menit  ke-120,  efek analgetiknya  sudah  hilang  hal  ini  terlihat dari  rata-rata  respon  nyeri  mencit  pada menit  ke-120  lebih  tinggi  dari  rata-rata respon  nyeri  mencit  sebelum  perlakuan. Kp 3 mempunyai  efek  analgetik  yang  lebih baik  dari  kontrol  positif  yaitu  asam mefenamat dan mempunyai efek analgetik yang paling baik dalam kelompok perlakuan.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa semakin  tinggi  dosis  ekstrak  etanol  daun pepaya maka semakin besar efek pengurangan rasa nyeri. Hal ini disebabkan karena  semakin  tinggi  dosis  ekstrak  yang diberikan  semakin  banyak  zat  aktif  yang terkandung di dalamnya.
Ketiga kelompok perlakuan memiliki  efek  analgetik  hanya  sampai pada  menit  ke-90.  Pada  menit  ke-120 sudah  tidak  memiliki  efek  analgetik. Penurunan  efek  ekstrak  etanol  daun pepaya  disebabkan  karena  waktu  paruh ekstrak  yang  cepat  dan  berbeda  dengan waktu  paruh  senyawa  sintetik  yang  lebih lama.
Tanpa  melihat  perbedaan  dosis ekstrak etanol daun pepaya yang diberikan, penelitian  ini  membuktikan  bahwa  secara farmakologis  tumbuhan  ini  memiliki  efek analgetik.  Ekstrak  etanol  daun  pepaya memiliki efek analgetik karena kandungan flavonoid.  Flavonoid  berperan  sebagai analgetik yang mekanisme kerjanya menghambat  kerja  enzim  siklogenase (Suryanto,  2012).  Dengan  demikian  akan mengurangi  produksi  prostaglandin  oleh asam arakidonat sehingga mengurangi rasa nyeri (Gunawan, 2008).
Dari hasil pengamatan yang dilakukan pada pada mencit yang diinduksi  secara  termik  menggunakan waterbath ,  terlihat  bahwa  tidak  semua mencit  menunjukkan  respon  yang  sama. Ketidaksamaan  tersebut  antara  lain,  ada yang  memberikan  respon  lompatan  atau hanya  berupa  jilatan  atau  keduanya  dan jumlah  respon  mencit  yang  berbeda-beda sebelum  perlakuan.  Hal  ini  disebabkan oleh faktor yang mempengaruhi metabolisme  obat  atau  ekstrak  yang diberikan  pada  mencit,  antara  lain  yaitu genetik  atau  keturunan,  perbedaan  umur, makanan dan penyakit (Coleman, 2010).
Melihat banyaknya faktor yang dapat mempengaruhi,  dapat  disimpulkan  bahwa adanya  spesifitas  individual  terhadap induksi  nyeri  yang  diberikan  dan  respon mencit  terhadap  pemberian  obat  dan ekstrak  pun  berbeda-beda,  sehingga  hasil data  pengamatan  berbeda-beda  setiap mencit walaupun dalam kelompok perlakuan  yang  sama,  namun  pada keseluruhan  rata-rata  hasil  pengamatan  ini menunjukkan  respon  sesuai  dengan  yang diharapkan dari masing-masing kelompok

## PENUTUP Kesimpulan
Dari hasil penelitian yang dilakukan, didapatkan  kesimpulan  bahwa  ektrak etanol  daun  pepaya  ( Carica  papaya ) memberikan  efek  analgetik  pada  mencit putih jantan ( Mus musculus ) yang diinduksi secara termik.

## DAFTAR PUSTAKA
Coleman  M,  D.  2010. Factor  affecting drug  metabolism .  UK:  Wiley- Blackwell.
Gunawan,  S.G.,  Setiabudy,  R.,  Nafrialdi,
Elsyabeth, editor. 2008.
Farmakologi  dan  Terapi Edisi  5 . FKUI, Jakarta.
Pandey,  P,  V.,  Bodhi,  W.,  dan  Yudistira,
A.  2013. Uji  Efek  Analgetik
Ekstrak  Rumput  Teki  (Cyperus rotundus  L.)    pada  Tikus  Putih Jantan Galur Wistar (Rattus
novergicus) . Pharmacon, Manado. Price,  S.  A.,  Wilson  I.  M.  2006. Patofisiologi Konsep Klinis Proses-
proses  Penyakit  Edisi  6 .  EGC,
Jakarta.
Puspitasari,  H.,  Listyawati,  S.,  dan
Widiyani, T. 2003. Aktivitas Analgetik Ekstrak Umbi Teki (Cyperus rotundus L.) pada Mencit
Putih  (Mus  musculus  L.)  Jantan . Jurusan  Biologi  FMIPA  UNS,
Surakarta.
Turner.  1965.  Didalam  Puspitasari,  H. 2003. Aktivitas  Analgetik  Ekstrak Umbi  Teki  (Cyperus  rotundus  L.) pada  Mencit  Putih  (Mus  musculus L.) Jantan . Biofarmasi 1 (2): 50-57.