Volume 4, Nomor 1, Juni 2021 e-ISSN : 2598-7453 DOI: https://doi.org/10.31539/bioedusains.v4i1.2117
PEMANFAATAN HIDROLISAT TALAS ( Colocasia esculenta L.) PADA KULTUR MIKSOTROFIK MIKROALGA Tetraselmis chui : PENGAMATAN

## PERTUMBUHAN DAN KADAR LIPIDA
Mohamad Agus Salim UIN Sunan Gunung Djati Bandung agus.salim@uinsgd.ac.id

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengamati  potensi  penggunaan  hidrolisat  talas ( Colocasia  esculenta  L. )  sebagai  sumber  karbon  organik  kompleks  untuk menghasilkan kerapatan sel, biomasa, kadar lipida dan klorofil yang optimum dari mikroalga Tetraselmis  chui pada    kondisi  miksotrofik.  Kultur  dilaksanakan  pada botol  yang  berisi  400  mL  medium  basal  bold.  Hidrolisat  talas  diberikan  dalam lima  konsentrasi  yaitu  :  0,  5,  10,  15  dan  20  g/L.  Hasilnya  penelitian memperlihatkan mikroalga T. chui dapat tumbuh pada kondisi miksotrofik dengan penambahan hidrolisat talas pada kisaran konsentrasi 5 sampai 20 g/L. Kerapatan sel  dan  berat  kering  maksimum    pada  penambahan  hidrolisat  talas  10  g/L  yaitu masing  masing 4,23 x 10 5 sel/ml dan 0,57 g/L. Sedangkan berat segar dan kadar lipida maksimum dicapai pada penambahan hidrolisat talas 15 g/L yaitu 4,85 g/L dan  67,4%.  Kadar  klorofil  menurun  sejalan  dengan  meningkatnya  penambahan konsentrasi hidrolisat  talas .  Simpulan,  penggunaan  hidrolisat  talas  dapat meningkatkan  kerapatan  sel, berat  segar  dan  berat  kering,  kadar  lipida  dan menurunkan kadar klorofil mikroalga T.chui pada kultur miksotrofik.
Kata Kunci :  Hidrolisat Talas, Lipida, Miksotrofik, Pertumbuhan, Tetraselmis chui

## ABSTRACT
This  study  aims  to  observe  the  potential  use  of  taro  hydrolysate  (Colocasia esculenta  L.)  as  a  source  of  complex  organic  carbon  to  produce  optimum  cell density,  biomass,  lipid  and  chlorophyll  content  from  T.  chui  microalgae  under myxotrophic conditions. The culture was carried out in a vial containing 400 mL of bold basal medium. Taro hydrolysate is given in five concentrations, namely: 0, 5,  10,  15  and  20  g/L.  The  results  showed  that  T. chui  microalgae  could  grow  in myxotrophic conditions with the addition of taro hydrolysate in the concentration range of 5 to 20 g/L. The maximum cell density and dry weight in the addition of 10  g/L  taro  hydrolysate  were  4.23  x  105  cells/ml  and  0.57  g/L,  respectively. Meanwhile,  the  maximum  fresh  weight  and  lipid  content  were  achieved  at  the addition  of  15  g/L  taro  hydrolysate,  namely  4.85  g/L  and  67.4%.  Chlorophyll content  decreased  with  increasing  concentration  of  taro  hydrolysate.  In conclusion, the use of taro hydrolysate can increase cell density, fresh weight and dry  weight,  lipid  content  and  decrease  the  chlorophyll  content  of  T.chui microalgae in myxotrophic culture.
Keywords : Taro Hydrolysate, Lipid, Mixotrophic, Growth, Tetraselmis chui

## PENDAHULUAN
Saat  ini,  budidaya  mikroalga  mendapat  banyak  perhatian  dari  masyarakat ilmiah  di  seluruh  dunia  karena  terdapat  beberapa  alasan  seperti  laju pertumbuhannya yang cepat, memiliki senyawa  bioaktif yang berharga, termasuk pigmen  alami  dan  lipida  yang  berguna  untuk  produksi  bahan  bakar  hayati ( Oliveira  et  al.,  2021) .  Dengan  demikian  sangat  penting  untuk  meningkatkan produksi biomassa dan produktivitas lipida serta senyawa organik lainnya dengan cepat dan untuk menurunkan biaya produksi mikroalga itu sendiri (Ananthi et al., 2021). Penelitian terbaru mengungkapkan bahwa biomassa dan kandungan  lipida mikroalga  dapat  ditingkatkan  dengan  mengubah  kondisi  kultur  seperti penambahan nutriennya (Aziz et al., 2020). Kelayakan penggunaan metode kultur miksotrofik  telah  diketahui  sebagai  alternatif  dari  kultur  mikroalga  fototrofik (Huang  et  al.,  2021).  Dalam  kultur  miksotrofik,  mikroalga  akan  memperoleh energi  dari  karbon  organik  dan  cahaya.  Kondisi  seperti  ini  cocok  untuk  spesies mikroalga  yang  tidak  dapat  tumbuh  dalam  kegelapan  total  tetapi  membutuhkan sedikit  cahaya    ( Roostaei  et  al.,  2018). Selain  itu,  sintesis  produk  metabolisme seperti lipida dan pigmen dipengaruhi oleh keberadaan karbon organik (Daliry et al.,  2017).  Dalam  hal  ini,  hidrolisat  talas  sangat  menjanjikan  sebagai  sumber bahan organik yang murah untuk kultur mikroalga pada kondisi miksotrofik.
Menurut para ahli, metabolisme miksotrofik dapat ditemukan pada beberapa mikroalga. Organisme miksotrofik dapat memanfaatkan sumber karbon anorganik seperti  gas  CO 2 dan  bahan  organik  secara  bersamaan  pada  saat  ada  cahaya. Ternyata  banyak  spesies  mikroalga  yang  mampu  melaksanakan  proses metabolisme  baik  autotrofik  maupun  heterotrofik  untuk  pertumbuhannya,  yang artinya  mampu  berfotosintesis  sekaligus  memanfaatkan  bahan  organik  secara bersamaan  ( Kallarakkal et  al.,  2021).  Mengingat  keterbatasan  pengetahuan tentang potensi pertumbuhan miksotrofik dari mikroalga T. chui, maka penelitian ini  bertujuan  untuk  mengamati  sumber  karbon  organik  yaitu  hidrolisat  talas  ( C. esculenta L.)  dan  menganalisis  pengaruh  variasi  konsentrasinya  terhadap kepadatan sel, berat basah dan kering serta kandungan klorofil. Mikroalga T. chui dikultur  pada  kondisi  miksotrofik  agar  mampu  mengakumulasi  lipida  yang  akan digunakan  dalam  produksi  biodiesel.  Berdasarkan  pemaparan  latar  belakang tersebut  maka  tujuan  penelitiannya  yaitu  untuk  mempelajari  pertumbuhan miksotrofik  mikroalga T.  chui ,  menggunakan  hidrolisat  talas  sebagai  pendekatan alternatif dari kultur fotoautotrofik.

## METODE PENELITIAN
Kultur Mikroalga T. chui Biakan  mikroalga T.  chui merupakan  koleksi  milik  Laboratorium  Fisiologi Tumbuhan,  Jurusan  Biologi,  UIN  Bandung,  Indonesia.  Kultur  dilakukan  pada tabung erlenmeyer  yang berisi 400 mL media basal bold (MBB) yang dilengkapi dengan  hidrolisat talas sebagai sumber karbon organik.  Hidrolisat talas  disiapkan dalam  empat  konsentrasi:  5,  10,  15  dan  20  g/L  dan  0  g/L  sebagai  kontrol (fotoautotropik).  Setiap  perlakuan  dilakukan  pengulangan  sebanyak  lima  kali. Kultur  dilakukan  di  ruang  dengan  suhu  25  ±  2°C  di  bawah  penerangan  terus menerus  dengan  lampu  fluoresen  (10,8  μmoles/m 2 /s).  Kepadatan  sel  dihitung setiap hari pada ruang hitung menggunakan haemacytometer di bawah mikroskop majemuk  (Olympus  Normaski).  Setelah  tujuh  hari  kultur,  sel  dipanen  dengan
sentrifugasi dan  pengeringan selama 24  jam pada oven dengan suhu  60°C. Berat segar dan kering sel T. chui diukur pada akhir percobaan.

## Pembuatan Hidrolisat Talas
Tepung  talas  diencerkan  dengan  aquades  dalam  perbandingan  1  :  3  (b/v). Pada  larutan  tepung  talas  tersebut  ditambahkan  0,1%  α-amilase  dan  diinkubasi selama 25 menit pada suhu 82°C. Selanjutnya campuran tersebut dipanaskan pada suhu 100°C selama 60  menit dan  suhu dibiarkan  turun hingga 55°C.  Selanjutnya ke dalam campuran ditambahkan 0,06% glucoamylase  dan didiamkan selama 60 menit pada suhu 60°C.

## Pengukuran Biomassa dan Ekstraksi Lipida T. chui
Pengukuran  biomasa  mikroalga  dilaksanakan  pada  akhir  percobaan. Sebanyak 20 mL kultur T.chui disaring dengan kertas saring (Whatman no.1) dan dikeringkan  pada  oven  60°C  sampai  beratnya  konstan.  Biomasa  yang  diperoleh dinyatakan  dalam  gram  per  liter  (g/L).  Kandungan  lipida  mikroalga  dianalisis menggunakan prosedur Screening and Comparative Metabolic Profiling . Biomasa kering dari T. chui sebanyak 0,1 g direndam di dalam  kloroform :  methanol (2:1 v/v)  pada  suhu  ruang  seharian.  Selanjutnya  larutan  tersebut  disentrifugasi  pada kecepatan  6000  rpm  selama  10  menit  dan  sel  yang  mati  dibuang.  Pada  larutan tersebut ditambahkan 5 mL larutan NaCl 0,9% dan dibiarkan beberapa menit dan fase  organiknya  didapatkan.  Pelarut  organik  yang  tersisa  diuapkan,  maka  yang tertinggal  adalah  lipida  kasar  yang  dikeringkan  pada  suhu  50°C  dan  ditimbang lipida yang diperoleh dinyatakan dalam persen biomasa kering.

## Ekstraksi dan Pengukuran Kadar Klorofil
Medium  kultur  mikroalga  sebanyak  10  ml  disentrifugasi  pada  kecepatan 5000 rpm selama 8 menit dan dibilas dua kali pada air suling untuk mendapatkan biomasanya. Selanjutnya biomasa diekstraksi dengan  menambahkan 10 ml etanol 90%  (v/v)  hingga  warna  dari  biomasanya  memudar.  Kemudian  larutan  tersebut disentrifugasi  pada  kecepatan  5000  rpm  selama  8  menit  dan  supernatan dipisahkan untuk digunakan dalam pengukuran kadar klorofil. Kandungan klorofil a dan b dalam sel mikroalga diukur menggunakan spektrofotometer UV-VIS.

## Analisis Statistik
Data  dinyatakan  dalam  bentuk  rata-rata  ±  standar  error  dari  lima pengulangan.  Perbandingan  statistik  antara  kelompok  perlakuan  dikerjakan dengan  analisis  varian  (ANAVA)  satu  arah  dan  perbedaan  yang  signifikan  di antara  perlakuan  dianalisis  lanjut  dengan  uji  Duncan.  Pengolahan  data menggunakan  SPSS  untuk  Windows  versi  20.0.  Nilai  p  yang  kurang  dari  0,05 berarti berbeda nyata.

## HASIL PENELITIAN Kerapatan Sel T. chui
Data  yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa  kerapatan  sel T.  chui berbeda nyata  ( 𝑃 <0,05)  di  antara  variasi  perlakuan  hidrolisat  talas  di  akhir  percobaan (Gambar 1). Kerapatan sel T. chui secara signifikan lebih tinggi pada penambahan hidrolisat  talas  (kultur  miksotrofik)  dibandingkan  dengan  kontrol  (kultur fotoautotrofik). Kerapatan sel maksimum (4,23 x 10 5 sel / mL) terjadi pada kultur miksotrofik  dengan  penambahan  10  g/L  hidrolisat  talas,  sedangkan  penambahan 15 g/L hidrolisat talas pada media kultur T. chui mulai menghambat pertumbuhan hal ini ditunjukkan oleh kerapatan sel yang menurun.
Gambar 1.  Kerapatan  sel  mikroalga T.  chui pada  perlakuan  beberapa konsentrasi hidrolisat talas selama 7 hari pengamatan
Berat Segar dan Berat Kering T. chui Berat  basah  dan  berat  kering  biomasa T.  chui pada  kondisi  kultur fotoautotrofik  berbeda  nyata  (P  <0,05)  dengan  kondisi  kultur  miksotrofik  pada penambahan  hidrolisat  talas  sebagai  sumber  karbon  organik  (Gambar  2). Penambahan  hidrolisat  talas  terlihat  jelas  mampu  meningkatkan  biomasanya. Berat  segar tertinggi  terlihat  pada  pemberian  15  g/L  hidrolisat  talas,  diikuti  oleh 10  g/L,  20  g/L,  5  g/L  dan  0  g/L  (fotoautotrofik  /  kontrol).  Berat  segar  tertinggi 4,85 g/L terjadi pada penambahan hidrolisat talas 15 g/L dan lebih dari 6 kali lipat lebih  banyak  dari  pada  kontrol.  Sedangkan  berat  kering  tertinggi  terjadi  pada penambahan  10  g/L  hidrolisat  talas,  disusul  dengan  15  g/L,  20  g/L,  5  g/L  dan kontrol. Berat kering tertinggi 0,57 g/L terjadi pada pemberian hidrolisat talas 10 g/L  dan  lebih  dari  3  kali  lipat  lebih  banyak  dari  kontrol.  Hasil  ini  menunjukkan bahwa T. chui dapat dikultur dengan  penambahan  hidrolisat talas  hingga 15  g/L. Selain  itu,  perlu  dicatat  bahwa  pemberian  hidrolisat  talas  yang  tinggi  dapat menghambat pertumbuhan T. chui dalam hal penambahan biomasanya. Begitupun T. chui yang dikultur tanpa penambahan hidrolisat talas menghasilkan berat segar dan berat kering terendah.
c c a b c 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 0 5 10 15 20 K er a pa ta n S el (x10 5 se l/ m L )
Konsentrasi Hidrolisat Talas (g/L)
Gambar 2.  Berat  segar  dan  berat  kering T.  chui pada  perlakuan  beberapa konsentrasi hidrolisat talas di akhir pengamatan (hari ke-7)

## Kadar Lipida T. chui
Data  pengukuran  kadar  lipida  menunjukkan  bahwa  hidrolisat  talas  dapat memicu produksi lipida oleh mikroalga T. chui pada kondisi miksotrofik (Gambar 3).  Kandungan  lipida  pada  kisaran  40,2%  hingga  67,4%  (dari  berat  kering), terlihat  berbeda  nyata  (P<0,05)  antara  perlakuan  hidrolisat  talas  dengan  kontrol. Produktivitas  lipida  tertinggi  67,4%  dicapai  pada  kultur  dengan  perlakuan  15  g/l hidrolisat talas dan paling rendah pada kontrol sebesar 40,2%.
Gambar 3.  Kadar  lipida T.  chui pada  perlakuan  beberapa  konsentrasi hidrolisat talas di akhir pengamatan (hari ke-7)
c b a a b z z x x y 0 1 2 3 4 5 6 0 5 10 15 20 B er a t (g/ L ) Konsentrasi Hidrolisat Talas (g/L0) Berat Segar Berat kering c b b a b 0 10 20 30 40 50 60 70 80 0 5 10 15 20 K a da r L ipi da (%)
Konsentrasi Hidrolisat Talas (g/L)
Kadar Klorofil T. chui
Data  yang  diperoleh  memperlihatkan  bahwa  pada  kondisi  miksotrofik, kandungan  klorofil T.  chui menurun  seiring  dengan  peningkatan  konsentrasi hidrolisat  talas  (Gambar  4).  Selanjutnya,  pada  penelitian  ini  ditunjukkan  bahwa pengaruh  perlakuan  yang  signifikan  (p<0,05)  terhadap  kandungan  klorofil  pada kultur  dengan  kondisi  miksotrofik.  Kandungan  klorofil T.  chui yang  diberi perlakuan  hidrolisat  talas  menunjukkan  nilai  yang  lebih  rendah  dibandingkan dengan kontrol (kondisi fotoautotrofik).
Gambar 4.  Kadar  klorofil T.  chui pada  perlakuan  beberapa  konsentrasi hidrolisat talas di akhir pengamatan (hari ke-7)

## PEMBAHASAN
Kerapatan Sel T. chui
Karakteristik  pertumbuhan T.  chui menunjukkan  bahwa  kerapatan  sel  pada kondisi  miksotrofik  lebih  baik  daripada  kondisi  fotoautotrofik.  Dibandingkan dengan kontrol/fotoautotrofik, kerapatan sel pada kultur miksotrofik menunjukkan berbeda secara nyata. Begitupun, pengaruh karbon organik terhadap kerapatan sel T.  chui lebih  tinggi  daripada  sumber  karbon  anorganik.  Hal  tersebut dimungkinkan  karena  cahaya  dan  karbon  organik  (hidrolisat  talas)  yang  disuplai secara bersamaan ke kultur miksotrofik. Sebenarnya, sumber karbon organik pada konsentrasi  yang  bervariasi  dapat  menyebabkan  meningkat  atau  menurunnya pertumbuhan  sel  mikroalga.  Bahkan  pada  konsentrasi  yang  lebih  tinggi  dari sumber karbon tersebut dapat menjadi racun bagi sel mikroalga (Ma et al., 2021). Alasan  lain  mungkin  terjadi  seperti  dilaporan  oleh  Cai  et  al.,  (2021)  yang menyatakan  bahwa  pada  kerapatan  sel  yang  tinggi,  cahaya  menjadi  terbatas  dan pertumbuhan  fotoautotrofik  sangat  rendah  dibandingkan  dengan  pertumbuhan miksotrofik.  Hasilnya,  kerapatan  sel  diharapkan  jauh  lebih  tinggi  jika  hidrolisat talas dan intensitas cahaya ditingkatkan.
Pertumbuhan  mikroalga  pada  kondisi  miksotrofik  ada  dua  proses  berbeda yang  terjadi  di  dalam  sel;  fotosintesis  dan  respirasi  aerobik.  Fotosintesis dipengaruhi  oleh  intensitas  cahaya  dan  respirasi  aerob  terkait  dengan  sumber karbon  organik  (hidrolisat  talas).  ATP  yang  terbentuk  dari  reaksi  fotokimia seharusnya  mempercepat  anabolisme  dari  sumber  karbon  organik  pada  kultur
a b b b c x x x x y 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 0 5 10 15 20 K a da r K lo ro fi l (m g/ g) Konsentrasi Hidrolisat Talas (g/L) Klorofil a Klorofil b
miksotrofik T.  chui dan  ini  menjadi  alasan  untuk  terjadinya  peningkatan pertumbuhan pada kultur tersebut. Choix et al., (2021) menunjukkan bahwa kultur pada  kondisi  heterotrofik  dan  fotoautotrofik  memiliki  laju  pertumbuhan  sel  yang lebih rendah dibandingkan pada kondisi miksotrofik. Pada kajian  ini terlihat jelas bahwa T. chui berasimilasi dan tumbuh dengan adanya sumber karbon anorganik (CO 2 )  dan  organik  (hidrolisat  talas)  dengan  hadirnya  cahaya  (kondisi miksotrofik).
Berat Basah dan Berat Kering T. chui
Hasil ini serupa dengan data pengamatan sebelumnya, yang mengungkapkan  bahwa  pertumbuhan  miksotrofik T.  chui pada  sumber  karbon organik  menghasilkan  kandungan  biomassa  yang  lebih  tinggi  daripada  sel  yang tumbuh dalam kondisi fotoautotrofik ( Nguyen et al., 2021). Kultur sel miksotrofik yang  memanfaatkan  cahaya  dan  sumber  karbon  organik  telah  dianggap  sebagai proses  yang  paling  efisien  untuk  produksi  biomassa  mikroalga  (Smith  et  al., 2021). Meskipun energi cahaya yang digunakan untuk fiksasi CO 2 menurun dalam kultur  miksotrofik,  jumlah  energi  yang  hilang  minimal,  sehingga  miksotrofik memberikan  efisiensi  energi  yang  lebih  tinggi  daripada  model  kultur  lainnya ( Baldisserotto al.,  2021).  Selain  itu,  sumber  karbon  organik  berperan  penting dalam  meningkatkan  akumulasi  biomassa T.  chui selama  kultur  mikroalga. Penambahan  ke  dalam  media  kultur  dengan  hidrolisat  talas  menyebabkan konsentrasi biomassa lebih tinggi daripada kontrol. Efek stimulasi hidrolisat talas pada  produksi  biomassa  mungkin  terkait  dengan  adanya  beberapa  nutrisi  dalam komposisi dari hidrolisat talas itu sendiri.
Kemampuan  hidup pada kondisi  fotoautotrofik obligat untuk  dapat tumbuh secara  miksotrofik  merupakan  fenomena  yang  terjadi  pada  sejumlah  marga  dan spesies  dari  mikroalga  (Zhang  et  al.,  2021).  Untuk  alasan  ini, T.  chui dapat memanfaatkan hidrolisat talas sebagai sumber karbon dalam  kondisi miksotrofik. Lie  et  al.,  (2017)  mengungkapkan  bahwa  pertumbuhan  akan  jauh  lebih  jelas terjadi  pada  kehadiran  cahaya  daripada  dalam  kondisi  gelap  dan  dengan  adanya penambahan  sumber  karbon.  Selain  itu,  terbukti  bahwa  adanya  kemampuan T. chui untuk  memanfaatkan  sumber  karbon  yang  beragam.  Pada  konsentrasi  yang berbeda,  penambahan  hidrolisat  talas  sebagai  sumber  karbon  organik  dalam kondisi  miksotrofik  meningkatkan  berat  segar  dan  berat  kering  serta meningkatkan kandungan biomassa saat pemanenan secara luar biasa. Sedangkan sumber karbon anorganik dapat merangsang sintesis pigmen melalui peningkatan fotosintesis  yang  terlihat  dengan  meningkatnya  kandungan  klorofil.  Hasil  di  atas menunjukkan  bahwa  pada  kultur  miksotrofik T.  chui dengan  pemberian  sumber karbon  organik  dan  pencahayaan  adalah  pendekatan  yang  diinginkan  untuk produktivitas biomassa yang lebih tinggi.

## Kadar Lipida T. chui
Respons  bervariasinya  kadar  lipida  sesuai  dengan  konsentrasi  hidrolisat talas  yang  diberikan.  Pada  kondisi  miksotrofik,  hidrolisat  talas  yang  diberikan dapat  menginduksi  peningkatan  yang  signifikan  terhadap  kandungan  lipida T. chui. Dalam  hal  ini, Piasecka et  al.,  (2020)  mendeteksi  bahwa  kandungan  lipida dari sel mikroalga yang tumbuh secara miksotrofik dapat meningkat atau menurun tergantung  pada  spesies  mikroalga  yang  digunakan.  Lebih  lanjut,  hasil  ini
menunjukkan  bahwa  hidrolisat  talas  dapat  secara  efektif  meningkatkan  produksi lipida mikroalga, dan aplikasinya dapat mengurangi biaya produksi biodiesel dari mikroalga.  Selain  itu,  hasil  ini  menunjukkan  bahwa  produksi  lipida  bergantung dari spesies mikroalganya, kondisi kultur, dan sumber karbon dari bahan organik.
Perlakuan hidrolisat talas dapat meningkatkan kadar lipida secara signifikan.
Kultur  mikroalga  pada  kondisi  miksotrofik  tidak  hanya  mampu  meningkatkan produksi  biomassa,  tetapi  juga  kandungan  lipida  yang  sangat  penting  untuk produksi  biodiesel  berbasis  mikroalga  ( Fuentes-Grünewald et  al.,  2021). Mayoritas  penelitian  mengenai  kultur  mikroalga  pada  kondisi  miksotrofik  yang menggunakan  sumber  karbon  dalam  jumlah  terbatas  telah  membuktikan  bahwa metode  ini  efektif  untuk  mendapatkan  kandungan  lipida  mikroalga  yang  tinggi (Jeong et al., 2021). Genus Tetraselmis  ini telah menjadi organisme model untuk mengembangkan produksi lipida mikroalga yang hemat biaya pada kondisi kultur miksotrofik.  Banyak  mikroalga  dapat  mengakumulasi  lipida  karena  fotosintesis berlebih dan sumber karbon yang disuplainya (Lee et al., 2021).

## Kadar Klorofil
Kandungan  klorofil  a  dan  b  dari  sel T.  chui bervariasi  sesuai  dengan konsentrasi  hidrolisat  talas  yang  berbeda.  Pengaruh  dari  hidrolisat  talas  pada produksi  klorofil  sel T.  chui lebih  lemah  daripada  karbon  anorganik  (CO 2 ). Walaupun  demikian,  biosintesis  klorofil  sebenarnya  dipicu  juga  oleh  kehadiran sumber  karbon  anorganik  dan  organik.  Dalam  hal  ini,  kehadiran  hidrolisat  talas dalam  medium  kultur  akan  mempengaruhi  fotosintesis  dan  biosintesis  pigmen. Namun,  pengaruh sumber karbon  organik  pada  biosintesis klorofil T. chui cukup menarik. Sumber karbon yang lebih tinggi (> 5  g/L) dapat menghambat produksi klorofil.
Kandungan  klorofil T.  chui menurun  seiring  dengan  peningkatan konsentrasi  hidrolisat  talas.  Penurunan  kandungan  pigmen  pada  kondisi miksotrofik  dapat  dikaitkan  dengan  penurunan  jumlah  kloroplas  (Ayed  et  al., 2017). Hilangnya kandungan pigmen mikroalga selama pertumbuhan  miksotrofik disebabkan oleh perubahan protein membran fotosintetik (Mohan & Devi, 2015). Selanjutnya, biosintesis klorofil a diselesaikan  melalui reaksi  bergantung cahaya. Melalui reaksi ini, protochlorophyll dapat direduksi menjadi klorofil a (Rupaedah &  Takahashi  (2017).  Beberapa  laporan  mengungkapkan  bahwa  sumber  karbon dapat mengurangi efisiensi fotokimia dari fotosistem II (PS II) dan tingkat protein pusat reaksi PS II (Marudhupadi et al., 2016).
Pelaksanaan  di  awal  kultur,  sel-sel  mikroalga  menjalani  kondisi  kultur secara  fotoautotrofik  dan  mensintesis  pigmen  fotosintesis,  namun  kemudian beralih  ke  kondisi  kultur  miksotrofik  dengan  mengonsumsi  hidrolisat  talas  yang ada  di  dalam  medium.    Pembentukan  organel  fotosintesis  pada  mikroalga  akan terganggu  dengan  kehadiran  sumber  karbon  organik  ( Subhash et  al.,  2014). Kondisi  kultur  miksotrofik  akan  mengakibatkan  penurunan  produksi  pigmen fotosintesis jika dibandingkan dengan yang diperoleh pada kondisi fotoautotrofik. Kandungan  klorofil  yang  lebih  tinggi  yang  diperoleh  pada  kultur  fotoautotrofik bila dibandingkan dengan kultur miksotrofik menegaskan pengamatan tersebut. Di sisi  lain,  Chandra  et  al.,  (2014)  melaporkan  bahwa  kandungan  klorofil  yang rendah  pada  sel  miksotrofik  menurunkan  ketergantungan  pada  cahaya  sehingga pengurangan jumlah klorofil di dalam sel mikroalga dapat meredakan fotoinhibisi.
Hasil  ini  konsisten  dengan  Show  et  al., (2017)  yang  menemukan  jumlah  klorofil yang  lebih  rendah  pada  kondisi  miksotrofik  jika  dibandingkan  dengan  sel  yang tumbuh pada kondisi fotoautotrofik.

## SIMPULAN
Kultur  mikroalga T.  chui dengan  penambahan  hidrolisat  talas  pada mediumnya sebagai sumber karbon organik dapat meningkatkan pertumbuhan dan kandungan  lipida  mikroalga tersebut. Disamping itu, pemanfaatan hidrolisat talas dapat memicu peningkatan kepadatan sel, berat segar, berat kering dan kandungan lipida.  Begitu  juga  mampu  menurunkan  produksi  pigmen  fotosintesis  yaitu klorofil.  Dengan  demikian  kultur  ini  menawarkan  cara  yang  layak  untuk menurunkan  biaya  produksi  biomassa  mikroalga T.  chui dengan  pemanfaatan hidrolisat talas pada kondisi miksotrofik.

## DAFTAR PUSTAKA
Ananthi, V., Raja, R., Carvalho, I. S., Brindhadevi, K., Pugazhendhi, A., & Arun, A. (2021). A Realistic Scenario on Microalgae Based Biodiesel Production: Third Generation Biofuel. Fuel , 284, 1-10. https://doi.org/10.1016/j.fuel.2020.118965 Ayed, H. B. A. B., Taidi, B., Ayadi, H., Pareau, D., & Stambouli, M. (2017). The Use  of Chlorella  vulgaris to  Accumulate  Magnesium  Under  Different Culture Conditions. Journal of Applied Biotechnology & Bioengineering , 2 (5), 180-185. https://doi.org/ 10.15406/jabb.2017.02.00043 Aziz, M. M. A., Kassim, K. A., Shokravi, Z., Jakarni, F. M., Liu, H. Y., Zaini, N., &  Shokravi,  H.  (2020).  Two-Stage  Cultivation  Strategy  for  Simultaneous Increases  in  Growth  Rate  and  Lipid  Content  of  Microalgae:  A
Review. Renewable and Sustainable Energy Reviews , 119, 1-15.
https://doi.org/10.1016/j.rser.2019.109621
Baldisserotto, C., Sabia, A., Guerrini, A., Demaria, S., Maglie, M., Ferroni, L., &
Pancaldi,  S.  (2021).  Mixotrophic  Cultivation  of Thalassiosira  pseudonana with  Pure  and  Crude  Glycerol:  Impact  on  Lipid  Profile. Algal Research , 54 (9). https://doi.org/10.1016/j.algal.2021.102194
Cai,  Y.,  Liu,  Y.,  Liu,  T.,  Gao,  K.,  Zhang,  Q.,  Cao,  L  &  Ruan,  R.  (2021). Heterotrophic  Cultivation  of Chlorella  vulgaris Using  Broken  Rice Hydrolysate as Carbon Source for Biomass and Pigment Production. Bioresource Technology , 323 .
https://doi.org/10.1016/j.biortech.2020.124607
Chandra,  R.,  Rohit,  M.  V.,  Swamy,  Y.  V.,  &  Mohan,  S.  V.  (2014).  Regulatory Function  of  Organic  Carbon  Supplementation  on  Biodiesel  Production during  Growth  and  Nutrient  Stress  Phases  of  Mixotrophic  Microalgae Cultivation. Bioresource Technology , 165 , 279-287.
https://doi.org/10.1016/j.biortech.2014.02.102
Choix,  F.  J.,  Ramos-Ibarra,  J.  R.,  Mondragón-Cortez,  P.,  Lara-González,  M.  A., Juárez-Carrillo,  E.,  Becerril-Espinosa,  A.,  &  Torres,  J.  R.  (2021). Mixotrophic  Growth  Regime  as  a  Strategy  to  Develop  Microalgal Bioprocess  from  Nutrimental  Composition  of  Tequila  vinasses. Bioprocess and  Biosystems  Engineering ,  1-12. https://doi.org/10.1007/s00449-021- 02512
Daliry  S.,  Hallajisani,  A.,  Roshandeh  J.  M.,  Nouri,  H.,  &  Golzary,  A.  (2017). Investigation  of  Optimal  Condition  for Tetraselmis  chui Microalgae
Growth. Global J. Environ. Sci. Manage.,
3 (2), 217-230.
https://doi.org/10.22034/gjesm.2017.03.02.010
Fuentes-Grünewald,  C.,  Gayo-Peláez,  J.  I.,  Ndovela,  V.,  Wood,  E.,  Kapoore,  R. V.,  &  Llewellyn,  C.  A.  (2021).  Towards  a  Circular  Economy:  A  Novel Microalgal  Two-Step  Growth  Approach  to  Treat  Excess  Nutrients  from Digestate  and  to  Produce  Biomass  for  Animal  Feed. Bioresource Technology , 320 . https://doi.org/10.1016/j.biortech.2020.124349
Huang,  Y.,  Lou,  C.,  Luo,  L.,  &  Wang,  X.  C.  (2021).  Insight  into  Nitrogen  and Phosphorus  Coupling  Effects  on  Mixotrophic Chlorella  vulgaris Growth Under  Stably  Controlled  Nutrient  Conditions. Science  of  the  Total Environment , 752 , 1-10. https://doi.org/10.1016/j.scitotenv.2020.141747 Jeong, H. J., Kang, H. C., Lim, A. S., Jang, S. H., Lee, K., Lee, S. Y., & Kim, K. Y.  (2021).  Feeding  Diverse  Prey  as  an  Excellent  Strategy  of  Mixotrophic Dinoflagellates for Global Dominance. Science Advances , 7 (2). https://doi.org/10.1126/sciadv.abe4214
Kallarakkal,  K.  P.,  Muthukumar,  K.,  Alagarsamy,  A.,  Pugazhendhi,  A.,  & Mohamed,  S.  N.  (2021).  Enhancement  of  Biobutanol  Production  Using Mixotrophic  Culture  of Oscillatoria sp.  in  Cheese  Whey  Water. Fuel , 284 ,
1-9. https://doi.org/10.1016/j.fuel.2020.119008 Lee,  S.  A.,  Lee,  N.,  Oh,  H.  M.,  &  Ahn,  C.  Y.  (2021).  Stepwise  Treatment  of Undiluted  Raw  Piggery  Wastewater,  Using  Three  Microalgal  Species Adapted to High Ammonia. Chemosphere , 263 , 1-11. https://doi.org/10.1016/j.chemosphere.2020.127934 Lie, A. A., Liu, Z., Terrado, R., Tatters, A. O., Heidelberg, K. B., & Caron, D. A.
(2017).  Effect  of  Light  and  Prey  Availability  on  Gene  Expression  of  the Mixotrophic  Chrysophyte, Ochromonas sp. BMC  Genomics , 18 (1),  1-16. https://doi.org/10.1186/s12864-017-3549-1
Ma,  X.,  Zhang,  M.,  Gao,  Z.,  Gao,  M.,  Wu,  C.,  &  Wang,  Q.  (2021).  Microbial Lipid  Production  from  Banana  Straw  Hydrolysate  and  Ethanol
Stillage. Environmental Science and Pollution Research , 1-12. https://doi.org/10.1007/s11356-021-12644-z
Marudhupandi,  T.,  Sathishkumar,  R.,  &  Kumar,  T.  T.  A.  (2016).  Heterotrophic cultivation  of Nannochloropsis  salina for  Enhancing  Biomass  and  Lipid Production. Biotechnology
Reports , 10 , 8-16.
https://doi.org/10.1016/j.btre.2016.02.001
Mohan,  S.  V.,  &  Devi,  M.  P.  (2014). Salinity  Stress  Induced  Lipid  Synthesis  to Harness  Biodiesel  During  Dual  Mode  Cultivation  of  Mixotrophic Microalgae. Bioresource Technology , 165 , 288-294.
https://doi.org/10.1016/j.biortech.2014.02.103
Nguyen,  M.  K.,  Kim,  M.  K.,  Moon,  J.  Y.,  Van  Tran,  V.,  &  Lee,  Y.  C.  (2021).
Influence  of  Chitosan-Based  Carbon  Dots  Added  in  Mgac-Containing Culture  Medium  on  Green  Alga Tetraselmis sp . Journal  of  Applied Phycology , 1-11. https://doi.org/10.1007/s10811-021-02368-5
Oliveira, C. Y. B., D'Alessandro, E. B., Antoniosi  Filho, N. R., Lopes, R. G., & Derner, R. B. (2021). Synergistic  Effect of Growth Conditions and Organic Carbon  Sources  for  Improving  Biomass  Production  and  Biodiesel  Quality
by  The  Microalga Choricystis  minor var.  minor. Science  of  the  Total Environment , 759 . https://doi.org/10.1016/j.scitotenv.2020.143476
Piasecka,  A.,  Nawrocka,  A.,  Wiącek,  D.,  &  Krzemińska,  I.  (2020).  Agro- Industrial  by-Product  in  Photoheterotrophic  and  Mixotrophic  Culture  of
Tetradesmus obliquus: Production of ω3 and ω6 Essential Fatty Acids with Biotechnological Importance. Scientific Reports , 10 (1), 1-11. https://doi.org/10.1038/s41598-020-63184-4
Roostaei,  J.,  Zhang,  Y.,  Gopalakrishnan,  K.,  &  Ochocki,  A.  J.  (2018). Mixotrophic  Microalgae  Biofilm:  A  Novel  Algae  Cultivation  Strategy  for Improved  Productivity  and  Cost-Efficiency  of  Biofuel  Feedstock Production. Scientific  Reports , 8 (1),  1-10.  https://doi.org/10.1038/s41598- 018-31016-1
Rupaedah,  B.,  &  Takahashi,  Y.  (2017).  Effect  of  Nitrogen  Supply  in  Culture Media  and  Light  Intensity  on  Photosynthesis  of Chlamydomonas reinhardtii . Jurnal  Bioteknologi  &  Biosains  Indonesia  (JBBI) , 4 (2),  64-69. https://doi.org/10.29122/jbbi.v4i2.15
Show, P. L., Tang, M. S., Nagarajan, D., Ling, T. C., Ooi, C. W., & Chang, J. S. (2017).  A  Holistic  Approach  to  Managing  Microalgae  for  Biofuel Applications. International  Journal  of  Molecular  Sciences , 18 (1),  215. https://doi.org/10.3390/ijms18010215
Smith, J. P., Hughes, A. D., McEvoy, L., Thornton, B., & Day, J. G. (2021). The Carbon Partitioning of Glucose and DIC in Mixotrophic, Heterotrophic and Photoautotrophic Cultures of Tetraselmis suecica . Biotechnology Letters , 43 (3), 729-743. https://doi.org/10.1007/s10529-020-03073-y
Subhash, G. V., Rohit, M. V., Devi, M. P., Swamy, Y. V., & Mohan, S. V. (2014). Temperature  Induced  Stress  Influence  on  Biodiesel  Productivity  During Mixotrophic Microalgae Cultivation with Wastewater. Bioresource Technology , 169 , 789-793. https://doi.org/10.1016/j.biortech.2014.07.019 Zhang, Z., Sun, D., Cheng, K. W., & Chen, F. (2021). Investigation of Carbon and Energy  Metabolic  Mechanism  of  Mixotrophy  in Chromochloris zofingiensis . Biotechnology for Biofuels , 14 (1), 1-16. https://doi.org/10.1186/s13068-021-01890-5