Analisa Cemaran Bakteri Jamu Beras Kencur Sediaan Cair dengan Metode Angka Lempeng Total
Mubarokah Nuriaini Dewi 1 , Wigayanti 2* , Putri Fatmawati 3 , Rinette Visca 4 , Junie Suriawati 5 , Siti Rahayu Rahmawati 6
1,2,3,4 Fakultas Teknologi Industri, Program Studi Teknik Kimia, Universitas Jayabaya
5,6 Program Studi D3 Analisa Farmasi dan Makanan, Poltekkes Kemenkes Jakarta II * Koresponden email : wigayanti98@gmail.com Diterima: 28 September 2022 Disetujui: 7 Oktober 2022

## Abstract
In  Indonesia,  traditional  medicines  like  saffron-colored  rice  are  still  in  high  demand.  Microbial contamination might occur if the production process is not carried out in line with the procedure for creating and  processing  herbal  medication.  Herbal  medicine  formulation  must  adhere  to  the  Total  Plate  Number criteria (ALT). The purpose of this study was to quantify the microbiological contamination levels in the liquid herbal rice kencur that the traveling herbal medicine vendor produces. Rice samples dyed saffron were employed in the study's experimental design (A, B, and C). The steps of microbial testing included homogenization, dilution, mixing with the medium, and incubation. By mixing 25 ml of material with 225 ml  of  0.1%  buffered  peptoned  water  using  a  stomacher  for  two  minutes,  homogenization  was  started. Suspension dilution was used to create colonies that grew apart so that they could be counted easily. The pour plate inoculation method is used for blending with the medium. Nutrient agar is the solid medium used for ALT. According to the study's findings, sample A had 2.2 x 104 colonies per milliliter, sample B had 2.6 x 104 colonies per milliliter, and sample C had 8.0 x 107 colonies per milliliter for ALT values. The outcomes do not meet the criteria outlined in the Head of Drug and Food Control Agency of the Republic of Indonesia Regulation No. 12 of 2014 on Quality Requirements for Traditional Medicines.
Keywords: s affron-colored rice, total plate quantity, herbal, agar blanks, microbes

## Abstrak
Obat  tradisional  seperti  jamu  beras  kencur  masih  digemari  di  Indonesia.  Jika  proses  produksinya  tidak dilakukan  sesuai  dengan  standar  cara  pembuatan  dan  pengolahan  jamu,  maka  dapat  menyebabkan kontaminasi mikroba. Sediaan jamu harus memenuhi persyaratan Angka Lempeng Total (ALT). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui besarnya cemaran mikroba pada cairan jamu beras kencur yang di produksi oleh penjual jamu gendong keliling. Penelitian ini menggunakan metode deskriptif dengan menggunakan sampel jamu gendong beras kencur (A, B, dan C). Pengujian mikroba dengan melalui beberapa tahapan, antara  lain  homogenisasi,  pengenceran,  pencampuran  dengan  medium,  inkubasi  dan  interpretasi  hasil. Homogenisasi  sampel  dimulai  dengan  mencampurkan  25  ml  sampel  dengan  225  ml Buffered  Peptoned Water 0,1%  dan  dikocok  dengan vortex selama  2  menit.  Pengenceran  suspensi  dilakukan  untuk memperoleh  koloni  yang  tumbuh  terpisah  sehingga  mudah  dihitung.  Pencampuran  dengan  medium dilakukan dengan metode inokulasi pour plat (dengan teknik tuang). Nutrient agar adalah media padat yang digunakan  untuk  ALT.  Berdasarkan  hasil  penelitian  diperoleh  hasil  ALT  yaitu,  sampel  A=2,2  x  10 4 koloni/ml, sampel B=2,6 x 10 4 koloni/ml, dan sampel C=8,0 x 10 7 koloni/ml. Hasil tersebut tidak sesuai dengan persyaratan yang tercantum dalam Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia Nomor 12 Tahun 2014 tentang Persyaratan Mutu Obat Tradisional.
Kata Kunci: beras kencur, angka lempeng total, obat tradisional, media agar, mikroba

## 1. Pendahuluan
Perkembangan  jamu  terus  meningkat,  hal  ini  dikarenakan  masyarakat  umum  yang  masih  terus mengkonsumsi obat herbal yang terbuat dari bahan alam. Ketersediaan bahan baku yang melimpah dengan harga murah, proses pembuatan jamu yang cukup mudah  dan efek samping jamu yang relatif lebih sedikit dibandingkan  dengan  obat  dokter  (obat-obatan  berbahan  kimia)  [1,2].  Dulu  orang  rutin  mengkonsumsi jamu karena alasan untuk kesehatan, namun sekarang  banyak orang yang  enggan melakukannya karena rasanya yang tidak enak. Saat ini jamu kemasan jamu memiliki rasa yang berbeda dengan minuman ringan lainnya. Untuk sekarang, jamu memiliki rasa yang enak misalnya jamu kemasan dengan rasa beras kencur. Dengan  membiasakan  minum  jamu  beras  kencur,  seseorang  dapat  mencegah  pegal  dan  linu  yang  dapat
terjadi jika seseorang melakukan aktivitas fisik yang berat  [3]. Selain itu, banyak juga yang berpendapat bahwa jamu beras kencur dapat menyebabkan nafsu makan meningkat, dan menyehatkan tubuh [4].
Menurut  Peraturan  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia  Nomor  6  Tahun  2012  tentang Perindustrian dan Usaha Obat Tradisional, bahwa usaha jamu gendong adalah praktik yang dilakukan oleh perorangan dengan menggunakan bahan obat tradisional berupa cairan yang dibuat segar dengan maksud untuk dijual langsung ke konsumen [5]. Usaha jamu gendong dan usaha jamu racikan tidak perlu mendapat izin edar dari kementerian. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 24 Tahun 2018 tentang Perizinan  dan  Penyelenggaraan  Praktik  Tenaga  Kesehatan  Jamu  Tradisional  dalam  rangka  melindungi masyarakat  penerima  pelayanan  kesehatan,  setiap  tenaga  kesehatan  yang  akan  melaksanakan  praktik profesinya wajib memiliki izin sesuai dengan ketentuan peraturan perundang-undangan. Penjual jamu wajib memiliki  Surat  Izin  Praktik  Jamu  Tradisional  (SIPTKT  Jamu).    SIPTKT  Jamu  adalah  bukti  tertulis pemberian wewenang untuk melaksanakan praktik profesi Tenaga Kesehatan Jamu Tradisional [6].
Pengolahan  jamu  sangat  sederhana,  yaitu  dengan  memanfaatkan  bahan  dan  peralatan  dapur  yang mudah  didapat.  Jangan  berasumsi  bahwa  setelah  mengkonsumsi  jamu,  dapat  mengganggu  kesehatan masyarakat  karena  disebabkan  oleh  adanya mikroba patogen. Perlu  mempertimbangkan beberapa  faktor seperti sanitasi dan higiene (baik bahan baku, peralatan, maupun produsen jamu) dalam pengolahan jamu untuk memperoleh jamu yang memenuhi syarat kesehatan. Sediaan jamu cair dibuat  dengan aman untuk konsumsi umum. Oleh karena itu, sediaan jamu tersebut harus dilindungi dari cemaran mikroba patogen.
Mikroba memiliki berbagai habitat yang berbeda-beda, tetapi yang paling menonjol adalah di dalam media  air.  Dalam  pembuatan  sediaan  jamu  beras  kencur,  air  yang  digunakan  sebagai  pelarut  perlu diwaspadai adanya mikroba patogen pada air. Selain adanya mikroba patogen, jamu juga harus memenuhi syarat Angka Lempeng Total (ALT).  ALT adalah jumlah mikroba mesofilik aerobik per ml sampel yang ditentukan  dengan  metode  standar.  ALT  mencantumkan  jumlah  mikroba  dalam  produk  tertentu.  Di beberapa  negara  dinyatakan  sebagai Aerobic  Plate  Count (APC)  atau Standard  Plate  Count (SPC)  atau Aerobic Microbial Count (AMC). ALT merupakan perhitungan untuk jumlah mikroba secara keseluruhan, bukan  berdasarkan  jenis  mikroba  tertentu  [7].  Menguji  jumlah  keberadaan  mikroba  biasanya  dilakukan dengan metode mikrobiologi dengan media yang sesuai untuk pertumbuhan mikrobanya. Jamu yang sudah terkontaminasi juga dapat dikenali dari perubahan rasa, warna dan tekstur.
Penelitian sebelumnya menyatakan bahwa berdasarkan hasil percobaan ALT kemungkinan diperoleh cemaran 10 6 cfu/ml untuk jamu tidak memenuhi persyaratan  Standar Nasional Indonesia (SNI)  [8, 9, 10, 11]. Faktor higiene yang yang dapat diterapkan pada semua aspek penjualan jamu, mulai dari pengadaan bahan baku hingga penyajian jamu yang menyebabkan adanya cemaran mikroba. Tujuan dari penelitian adalah    untuk  mengetahui  bagaimana  cemaran  mikroba  pada  jamu  beras  kencur  dalam  sedian  cair  yang dibuat oleh penjual jamu gendong keliling.

## 2. Metode Penelitian

## Peralatan dan Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  antara  lain Plate  Count  Agar (PCA)  (Himedia), Triphenyltetrazolium  Chloride (TTC), Buffered  Peptoned  Water 0,1%  (BPW), Lactose  Broth , Potato Dextrose Agar (PDA) (Scharlau), dan pereaksi pewarnaan Gram bakteri (termasuk kristal violet, yodium, dan  alkohol  96%),  minyak  imersi,  air  suling (yang disterilkan).  Termasuk  sampel  berupa  jamu  gendong beras  kencur  sediaan  cair  yang  didapat  dari  tiga  orang  penjual  jamu  gendong  di  Cempaka  Putih. Pengambilan sampel dilakukan pada pagi hari, diambil 500 ml dan disimpan dalam botol media tertutup dan langsung dibawa ke Laboratorium Mikrobiologi-Laboratorium Kesehatan Daerah Provinsi DKI Jakarta untuk  diuji.  Adapun  alat  yang  digunakan  adalah  penghitung  koloni  ( colony  counter ), autoclave  merk Hirayama Passed , incubator merk Memmer t, Bio Safety Cabinet (BSC) 1300 series A2 , oven, vortex mixer merk IKA, fine pipet dan Blue Tips , pembakar bunsen, korek gas, cawan petri, rak tabung reaksi, tabung reaksi, erlenmeyer .

## Metode Pengujian
Metode ALT melalui beberapa langkah penelitian [12]  sebagai berikut:
1) Langkah pertama dalam proses homogenisasi adalah mencampurkan masing-masing 25 ml sampel (A, B dan C)  dengan 225 ml BPW 0,1% dan dikocok sampai benar-benar homogen dengan vortex selama 2 menit. Ini adalah larutan dengan pengenceran 10 -1
2) Langkah kedua, pengenceran adalah menyiapkan 15 tabung reaksi (masing-masing sampel  A, B, dan C  menggunakan 5 tabung reaksi) dan diisi dengan 9 mL BPW. Tuangkan 1 ml suspensi pengenceran 10 -1 dengan pipet steril ke dalam larutan 9 mL BPW untuk memperoleh pengeceran 10 -2 . Suspensi dari masing-masing pengenceran dipipet 1 mL ke dalam cawan Petri dan dibuat duplo.
3) Langkah ketiga, pencampuran dengan media dilakukan dengan metode inokulasi pour plate (dengan cara tuang). Tambahkan 12-15 ml PCA yang telah dibuat pada suhu 45° ± 1° C dalam setiap cawan didiamkan  selama  15  menit  sejak  pengenceran  pertama.  Cawan  diputar  membentuk  angka  delapan hingga menjadi padat agar tercampur dengan baik. Semua cawan petri diinkubasi pada suhu 35 ± 1° C selama 24-48 jam dengan posisi tegak lurus terhadap inkubator.
4) Langkah keempat, setiap cawan dengan kapasitas 25-250 koloni dilakukan perhitungan setelah 48 jam menggunakan alat colony counter . Jika sebuah cawan adalah duplo dari pengenceran terendah, pada koloni  kurang  dari  25,  maka  jumlah  rata-rata  koloni  per  cawan  dan  dikalikan  dengan  faktor pengenceran untuk  menentukan nilai ALT.

## Pembuatan Blangko
Menggunakan cawan petri steril, dibuat blanko agar dan blanko pengencer. Untuk blanko agar, hanya berisi media PCA yang telah ditambahkan 0,5% TTC tanpa sampel. Media PCA yang  sebelumnya telah dicairkan  pada  suhu  45  ±  1°  C  dituang  ke  dalam  cawan  sebanyak  12-15  mL.  Lalu,  cawan  diputar membentuk angka delapan hingga menjadi padat. Sebaliknya, saat membuat blanko pengencer, tambahkan 1 mL larutan pengencer BPW ke dalan cawan Petri  yang sudah sterilkan. Blanko pengencer dan blanko agar  dibiarkan  membeku  dan  diletakkan  semua  cawan  Petri  posisi  terbalik  ke  dalam  inkubator  dan diinkubasi  pada  suhu  35  ± 1° C  selama  48  jam.  Setiap  cawan yang  berisi  25-250  koloni  setelah  48  jam dilakukan perhitungan koloni menggunakan alat colony counter . Jika jumlah cawan duplo dari pengenceran terendah  kurang  dari  25  koloni,  maka  jumlah  rata-rata  koloni  per  cawan  dan  dikalikan  dengan  faktor pengenceran untuk  menentukan nilai ALT. Rumus perhitungan koloni [12, 9] yaitu
Koloni per ml    = 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 𝑝𝑒𝑟 𝑐𝑎𝑤𝑎𝑛 𝑥 𝑓𝑎𝑘𝑡𝑜𝑟 𝑝𝑒𝑛𝑔𝑒𝑛𝑐𝑒𝑟𝑎𝑛 𝑥 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙

## 3. Hasil dan Pembahasan
Angka Lempeng Total (ALT) merupakan ukuran jumlah total mikroba, bukan berdasarkan pada jenis mikroba tertentu [13, 14]. Prinsip ALT adalah menanamkan mikroba aerobik mesofil dalam media yang sesuai  selama  24-48  jam  pada  suhu  35±1°  C,  sehingga  mikroba  dapat  diamati  tanpa  memerlukan mikroskop. Pada ALT hasil koloni yang dapat dihitung antara 25-250 [12]. Pengujian dilakukan terhadap 3  sampel  jamu  beras  kencur  sediaan  cair  yang  didapat  dari  pedagang  jamu  gendong  keliling.  Sterilisasi harus  dilakukan  terlebih  dahulu  sebelum  melakukan  pengujian.  Sterilisasi  mikrobiologi  adalah  proses menghilangkan semua jenis mikroba hidup yang ada dalam suatu benda [15].
Media  disterilkan  selama  15-20  menit,  dilanjutkan  ketika  termometer  di  dalam  autoklaf menunjukkan suhu 121° C. Peralatan gelas yang akan digunakan untuk pengujian harus disterilisasi tetapi tidak  di  dalam  autoklaf,  selain  media  dan  pengencer.  Alat  gelas  disterilisasi  menggunakan  oven  kering selama  2-3  jam  pada  temperatur  160-170°  C;  bergantung banyak  sedikitnya  alat  yang dimasukkan  [16]. Selain  mensterilkan  alat,  proses  pengambilan  sampel  dari  wadah  pengemasan  harus  dilakukan  secara aseptik  (hati-hati)  untuk  mencegah  kontaminasi  dari  luar  [17]. Tabel  1-2 merupakan  hasil  perhitungan jumlah koloni pada sampel.
Tabel 1. Hasil perhitungan jumlah koloni pada sampel Contoh Pengenceran Cawan 1 Cawan 2 Rata- rata ALT Contoh 10 -1 TBUD TBUD TBUD 10 -2 232 212 222 10-3 69 33 51 Sampel 1 10-4 5 2 3,5 2,2 x 10 4 10-5 0 0 0 10-6 0 0 0 10 -1 TBUD TBUD TBUD 10 -2 226 296 261 Sampel 2 10-3 100 96 98 2,6 x 10 4 ≤10 4 10-4 76 72 74 10-5 31 35 33 10-6 14 12 13 10 -1 TBUD TBUD TBUD 10 -2 TBUD TBUD TBUD
p-ISSN : 2528-3561 e-ISSN : 2541-1934 Contoh Pengenceran Cawan 1 Cawan 2 Rata- rata ALT Contoh Sampel 3 10-3 TBUD TBUD TBUD 8,0 x 10 7 10-4 TBUD TBUD TBUD 10-5 TBUD TBUD TBUD 10 -6 78 82 80 Sumber : Data penelitian (2022)
Tabel 2. Hasil jumlah koloni blangko agar dan blangko pengencer Keterangan Blangko Agar Blangko Pengencer Cawan 1 0 0 Cawan 2 0 0 X 0 0
Sumber : Data penelitian (2022)
Sebelum melakukan pengujian wadah sampel dibuka, sebaiknya dibersihkan terlebih dahulu dengan alkohol 70%  untuk  menghindari  adanya  cemaran  mikroba  dari  luar  sampel.  Sehingga  jika  ada  mikroba, murninya  berasal  dari  sampel.  Untuk  mengurangi  kontaminasi,  homogenisasi  dilakukan  dengan  teknik aseptik di dekat api bunsen[8], dengan menambahkan sampel sebanyak 10 mL yang telah diaduk  dengan tujuan  untuk  cairan  dan  endapan  dalam  sampel  dapat  tercampur.  Kemudian  campuran  tersebut, ditambahkan  ke  dalam  erlenmeyer  yang  telah  disterilkan,  ditambahkan  larutan  pengencer  yaitu  BPW sebanyak 90 mL dan dihomogenkan hingga diperoleh suspensi dengan pengenceran 1:10 atau 10 -1 . Bahan utama larutan pengencer BPW adalah 10,0 g pepton atau protein yang berguna sebagai nutrisi. Nitrogen  (N2)  merupakan  komponen  utama  protein  yang  dibutuhkan  mikroba  untuk  menyusun  protein. Komponen lainnya adalah 5,0 mL sodium klorida, 3,5 mL disodium fosfat dan 1,5 mL potasium dihidrogen fosfat yang berfungsi sebagai mineral yang dibutuhkan untuk mendukung kehidupan mikroba. Selain itu, BPW bekerja untuk menjaga pH optimum pH 7,2 ± 0,2 bagi  pertumbuhan mikroba [9].
Menentukan  jumlah  pengenceran  tergantung  pada  perkiraan  jumlah  mikroba  dalam  sampel. Menggunakan  perbandingan  1:9  untuk  sampel  dan  pengenceran  pertama  (BPW),  sehingga  pengenceran berikutnya mengandung 1/10 sel mikroba dari pengenceran sebelumnya. Agar diperoleh pengenceran 10 -2 yang  dihomogenkan  dengan  bantuan vortex  mixer .  Pengenceran  selanjutnya  10 -3 ,  10 -4 ,  10 -5 ,  hingga  10 -6 dibuat  dengan  metode  yang  sama  seperti  proses  sebelumnya.  Setiap  pengenceran  dibuat  duplo  dengan tujuan  untuk  meningkatkan  perhitungan  yang  akurat.  Tujuan  pengenceran  bertingkat  adalah  untuk mengurangi jumlah mikroba yang tersuspensi dalam cairan. Jika tidak dilakukan pengenceran maka koloni yang tumbuh akan sangat pekat dan saling tumpang tindih sehingga menghambat proses pengamatan dan perhitungan koloni.
Pengujian dilakukan di ruang yang aseptic,  yaitu Bio Safety Cabinet (BSC) atau bisa juga disebut juga Laminar  Air  Flow (LAF)  merupakan  alat  yang  berguna  untuk  bekerja  secara  aseptik  karena  BSC memiliki pengaturan dan aliran udara sehingga menjadi steril dan aplikasi sinar UV beberapa jam sebelum digunakan.  Setelah  sampel  diencerkan,  cawan  Petri  diisi  dengan  media  PCA  dengan  penambahan  TTC 0,5%.  Pemilihan  media  PCA  karena  media  ini  sering  disarankan  untuk  metode  Angka  Lempeng  Total. Dalam media ini terdapat 5,0 g tripton, 1,5 g ekstrak ragi, 1 g dekstrosa, 1000 mL akuades, dan 15 g agar- agar  yang  cocok  untuk  mikroba  mesofil  aerobik.  Selain  itu,  kasein  yang  mengalami  hidroksilasi menghasilkan  asam  amino  dan  zat  kompleks lainnya  yang  penting untuk  pertumbuhan  mikroba,  ekstrak ragi  sebagai  sumber  utama  vitamin  B-kompleks,  dan  dekstrosa  merupakan  sumber  energi  utama  untuk pertumbuhan  mikroba.  Selama  penuangan  media,  tutup  cawan  tidak  boleh  dibuka  terlalu  lebar  untuk mencegah kontaminasi dari luar.
Penambahan TTC 0,5% juga mempengaruhi pertumbuhan mikroba di media PCA. TTC merupakan pewarna  yang  sering  digunakan  untuk  perhitungan  koloni  mikroba  pada  media  kultur  padat.  TTC  tidak berwarna  jika  direduksi.  TTC direduksi  menjadi  formazan  yang  tidak  larut  dalam  sel  mikroba  sehingga menghasilkan  koloni  berwarna  merah.  Konsentrasi  TTC  ditambahkan  ke  media  kultur  sangat  penting karena pada tingkat tinggi dapat memiliki efek merusak. Konsentrasi  TTC yang digunakan dalam media kultur harus cukup rendah untuk menghambat pertumbuhan [11].
Setelah  semua  sampel  terisi  media,  cawan  Petri  harus  diputar  membentuk  angka  delapan,  agar campuran dalam media tercampur. Kemudian, media didiamkan hingga padat yang menunjukkan bahwa kadar air dalam media stabil. Lalu, inkubasi dilakukan selama 24-48 jam pada suhu 35 ± 1° C. Cawan Petri harus diletakkan dalam posisi terbalik saat dimasukkan ke dalam inkubator. Hal ini dilakukan agar tidak
ada tetesan air yang jatuh mengenai media. Jika ada air yang jatuh, akan merusak pembacaan ALT sampel yang diuji [1, 9].
Selain sampel juga dibuat blanko agar dan blanko pengencer yang bertujuan untuk melihat sterilitas pengencer dan media yang digunakan. Setelah selesai masa inkubasi 48 jam untuk blanko agar dan blanko pengencer  tidak  ada  koloni  yang  tumbuh  atau  jumlahnya  nol,  hal  ini  menunjukkan  bahwa  media  dan pengencer  yang  digunakan  bersih  dan  tidak  terkontaminasi  oleh  apapun.  Setelah  masa  inkubasi  selesai, koloni  yang  terbentuk  dihitung.  Setiap  koloni  dapat  dianggap  berasal  dari  satu  sel  yang  tersusun  dari beberapa  sel  lainnya,  namun  tidak  menutup  kemungkinan  juga  berasal  dari  satu  sel  yang  letaknya berdekatan. Hitung jumlah koloni yang tumbuh antara 25-250 masing-masing cawannya.
Berdasarkan temuan penelitian didapatkan hasil ALT yaitu sampel A=2,2 x 10 4 koloni/ml, sampel B =2,6 x 10 4 koloni/ml, dan sampel C=8,0 x 10 7 koloni/ml. Sebagaimana yang tercantum dalam Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia Nomor 12 Tahun 2014 tentang Persyaratan Mutu Obat Tradisional ketiga sampel tersebut tidak sesuai dengan persyaratan yang tercantum [18]. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian jamu beras kencur [11] dengan memperoleh ALT rata-rata 4,7 x 10 5 ± 6,15 x 10 5 lebih dari standar yang ditetapkan.
Tingginya tingkat cemaran mikrobiologi pada jamu terkait dengan sanitasi dan higiene bahan baku, proses pengolahan, dan proses penyajian [5]. Bahan baku yang digunakan dalam proses penyimpanan tidak sesuai,  serta  proses  pencucian  dan  pengupasan  bahan  baku  yang  tidak  benar  sehingga  menyebabkan mikroba  tetap  menempel  pada  rimpang  jamu.  Selain  itu,  pencucian  peralatan  yang  tidak  benar  akan mengakibatkan  kotoran  masih  tertinggal.  Penggunakan  peralatan  seadanya  dan  tanpa  pendingin  saat melakukan pendistribusian jamu menghasilkan aktivitas mikroba tumbuh yang lebih cepat [16].

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan hasil pengukuran Angka Lempeng Total (ALT) dari Jamu Beras Kencur Sediaan Cair diperoleh hasil yaitu sampel A=2,2 x 10 4 koloni/ml, sampel B=2,6 x 10 4 koloni/ml, dan sampel C=8,0 x 10 7 koloni/ml. Sebagaimana tercantum dalam Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia Nomor 12 Tahun 2014 tentang Persyaratan Mutu Obat Tradisional, ketiga sampel tersebut tidak sesuai dengan persyaratan yang tercantum. Sebagian besar jamu tersebut tercemar oleh mikroba. Menurut Peraturan  Kepala  Badan  Pengawasan  Obat  dan  Makanan  Republik  Indonesia  Nomor  12  Tahun  2014 tentang  Persyaratan  Mutu  Obat  Tradisional  jumlah  batas  maksimum  mutu  jamu  yang  diklasifikasikan cairan obat dalam pada cemaran mikroba. Uji Angka Lempeng Total untuk ketiga sampel tidak memenuhi syarat.

## 5. Ucapan Terima Kasih
Peneliti  mengucapkan  terimakasih  kepada  FakultasTeknologi  Industri  Universitas  Jayabaya  dan Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan Jakarta II yang mendukung proses dan penyusunan artikel penelitian  ini.  Peneliti  juga  mengucapkan  terima  kasih  kepada penjual  jamu gendong di  Cempaka  Putih yang bersedia membantu penelitian ini.

## 6. Singkatan
BSC Bio Safety Cabinet LAF Laminar Air Flow PCA Plate Count Agar TTC Triphenyltetrazolium Chloride BPW Buffered Peptoned Water 0,1% PDA Potato Dextrose Agar TBUD Tidak Bisa Untuk Dihitung

## 7. Referensi
[1] Hadijah, S. “Deteksi Cemaran Bakteri  pada Jamu Tradisional yang Dijajakan di Kelurahan Banta- Bantaeng,” Jurnal Biotek , 3 (1), 107-114. 2015.
[2]        C.  Afifi  dan  L.  Sugiarti, " Analisis  Mikrobiologis  Jamu  Tujuh Angin  dan  Sari  Asih  PT.  Jamu  Air Mancur Surakarta dengan Metode ALT dan AKK, " European Journal of Pharmaceutical Sciences , vol. 48, no. 1, pp. 628–635, 2013.
[3]    D. Kusuma, " Uji Angka Lempeng Total (ALT) dalam Jamu Gendong Beras Kencur yang Beredar di Tiga  Pasar  di  Kotamadya  Yogyakarta, " Skripsi,  Fakultas  Farmasi,  Universitas  Sanata  Dharma, Yogyakarta, 2008.
[4]    H. Sholehah, " Uji Total Plate Count dan Uji Total Plate Count dan Cemaran Escherichia Coli pada Jamu Gendong Temulawak di Pasar Tradisional, " Skripsi, Universitas Islam Negeri Sunan Ampel, Yogyakarta, pp. 1-92, 2019.
[5]    Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 6 Tahun 2012 tentang industri dan usaha obat tradisional
[6]    Peraturan  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia  Nomor  24  Tahun  2018  tentang  izin  dan penyelenggaraan praktik tenaga kesehatan tradisional jamu
[7]     Maghfiroh, A. T. Estoepangestie, T. Nurhajati, N. Harijani, M.H. Effendi dan D. Handijatno, "Total Plate  Count  of  Commercial  Pasteurized  Milk  Sold  by  Street  Vendors  in  Mulyorejo  Sub-District Surabaya , " Journal of Halal Product and Research (JHPR), vol. 4, no. 2, 2021 .
[8]      N.  A.  Purlianto, "Uji  Angka  Lempeng  Total  dan  Identifikasi Escherichia  coli pada  Jamu  Pahitan Brotowali  yang  Diproduksi  oleh  Penjual  Jamu  Gendong  Keliling  di  Wilayah  Tonggalan  Klaten Tengah , " Skripsi, pp. 1-94, 2015.
[9]        F.  Hamida,  Herdini  dan  R.  Oktaviani, " Cemaran  Mikrob  pada  Jamu  Gendong  Kunyit  Asam  di Pancoran Mas, Depok, Jawa Barat, " Sainstech Farma , vol. 15, no. 2, pp. 50–56, 2022.
[10]      S.  Hadijah, "Deteksi  Cemaran  Bakteri  pada  Jamu  Tradisional  yang  Dijajakan  di  Kelurahan  Bata- Bantaeng , " Jurnal Biotek , vol. 3, no. 1, pp. 107-114, 2015.
[11]  M. C. Nuria, Septaningsih, D. R. Dewi dan Sumantri, "Pemeriksaan angka Kuman dan Jamur serta Identifikasinya pada Jamu Gendong Beras Kencur dan Temu lawak di Kabupaten Semarang Bagian Selatan , " Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik ,  vol. 5, no. 2, pp. 32-36, 2008.
[12]  SNI No. 2897:2008,”Metode Pengujian Cemaran Mikroba dalam Daging, Telur dan Susu, serta Hasil Olahannya,” 2008.
[13]  A. D. Hardinanta, " Uji Angka Kapang dan Angka Lempeng Total (ALT) pada Jamu Gendong Beras Kencur di Pasar Tradisional yang Berada di Kabupaten Y, " Skripsi , Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma,  pp. 1-92, 2021.
[14]  A. Ameri, M. Ekhtelat and S. Shamsaei, " Microbial Indices of Industrial and Traditional Medicinal Herbs in Ahvaz, Iran, " Food and Raw Materials , vol. 8, no. 1, pp. 134–139, 2020.
[15]  M. Zainuri, H. Endrawati, S. Winarni, F. Arifan, A Setyawan and H. P. Hapsari, " Analysis Total Plate Count  (TPC)  and  Organoleptic  Test  on  Seaweed  Chips, " Journal  of  Physics:  Conference  Series ISNPINSA 2019 , pp. 1-5 2020.
[16]  F. Arifan, I. Pudjihastuti,  S. Winarni, R. T. D Broto and Wahyuningsih, " Total Plate Count (TPC) Analysis of Processed Ginger on Tlogowungu Tourism Village, " Advances in Engineering Research, vol. 167, pp. 377-379, 2018.
[17]    C.  F.  Saweng,  L.  M.  Sudimartini  dan  I.  N.  Suartha, " Uji  Cemaran  Mikroba  pada  Daun  Mimba (Azadiractha Indica A. Juss) Sebagai Standarisasi Bahan Obat Herbal, " Indonesia Medicus Veterinus , vol. 9, no. 2, pp. 270-280, 2020.
[18] Peraturan Kepala Badan Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia Nomor 12 Tahun 2014 tentang Persyaratan Mutu Obat Tradisional.