## UJI TOKSISITAS DENGAN METODE BSLT PADA NANOPARTIKEL KOMBINASI OBAT CISPLATIN, BOVINE SERUM ALBUMIN DAN ASAM FOLAT
Ersalina Nidianti*, Ary Andini
Prodi Analis Kesehatan, Fakultas Kesehatan, Universitas Nahdlatul Ulama Surabaya
Email * : ersalinanidianti@unusa.ac.id
Artikel diterima: 30 September2020; Disetujui: 22 Maret 2021 DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v6i1.609

## ABSTRAK
Kanker  adalah  penyakit  tidak  menular  yang  menyebabkan  mordibitas  dan mortalitas di seluruh wilayah dunia. Pengobatan kanker menjadi hal penting dalam mengurangi  tingginya  jumlah  angka  kematian  (mortalitas)  karena  penderita penyakit kanker. Salah satu pengobatan kanker adalah dengan menggunakan obat kemoterapi  cisplatin.  Akan  tetapi  obat  cisplatin  memiliki  efek  samping  yaitu nefrotoksisitas,ototoksisitas,neurotoksisitas,hemotologistoksisitas,kardiotoksisitas, dan  hepatotoksisitas.  Oleh  karena  itu  kombinasi  cisplatin  dalam  nanopartikel albumin  dan  modifikasi  ikatan  menggunakan  asam  folat  sebagai  solusi  alternatif meminimalisir  efek  toksik  yang  dihasilkan.  Tujuan  penelitian  untuk  mengetahui efek  toksisitas  formulasi  obat  cisplatin  dengan  kombinasi  nanopartikel  bovine serum albumin (BSA) dan asam folat melalui metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT).  Metode penelitian yang dilakukan yaitu sintesis nanopartikel BSA (NP- BSA), Sintesis NP-BSA dengan Obat Cisplatin (CP-NP-BSA), Sintesis Asam Folat dengan  Kombinasi  CP-NP-BSA  (As-CP-NP-BSA).  Kemudian  dilakukan  uji toksisitas  dengan  metode  BSLT  untuk  mengetahui  kadar  toksisitas  nanopartikel BSA  serta  pengaruh  penambahan  asam  folat  dalam  obat  cisplatin  dalam nanopartikel.  Hasil  diperoleh  bahwa  absorbansi  dari  Spektrofotometer  UV-Vis panjang  gelombang  358  nm  As-CP-NP-BSA  sebesar  0,86.  Kadar  toksisitas  pada NP-BSA dengan nilai LC 50 69,23 ppm sedangkan kadar toksisitas As-CP-NP-BSA LC 50 56,56 ppm. Nanopartikel yang terdiri dari kombinasi bovine serum albumin, cisplatin dan asam folat dapat dijadikan sebagai kandidat obat antikanker.
Kata kunci: Cisplatin, Antikanker, Nanopartikel, Toksisitas

## ABSTRACT
Cancer is a non-communicable disease that causes morbidity and mortality in all regions of the world. Cancer treatment is important in reducing the high number of deaths (mortality) due to cancer sufferers. One of the cancer treatments is using chemotherapy  drug  cisplatin.  However,  cisplatin  drug  has  side  effects,  namely nephrotoxicity,  ototoxicity,  neurotoxicity,  hemotoxicity,  cardiotoxicity,  and hepatotoxicity.  Therefore,  the  combination  of  cisplatin  in  albumin  nanoparticles and modification of the bond using folic acid as an alternative solution minimizes
the resulting toxic effects. This study aimed to determine the toxicity effect of the cisplatin  drug  formulation  with  a  combination  of  bovine  serum  albumin  (BSA) nanoparticles  and  folic  acid  through  the  Brine  Shrimp  Lethality  Test  (BSLT) method.  The research methods used were BSA nanoparticle synthesis  (NP-BSA), NP-BSA  Synthesis  with  Cisplatin  Drug  (CP-NP-BSA),  Folic  Acid  Synthesis  with CP-NP-BSA Combination (As-CP-NP-BSA). Then, a toxicity test was carried out using the BSLT method to determine the toxicity level of BSA nanoparticles and the effect  of  adding  folic  acid  in  the  cisplatin  drug  in  the  nanoparticles.  The  results showed  that  the  absorbance  of  the  358  nm  As-CP-NP-BSA  UV-Vis spectrophotometer was 0.86. The toxicity level of the NP-BSA with the LC50 value was  69.23  ppm  while  the  As-CP-NP-BSA  LC50  toxicity  level  was  56.56  ppm. Nanoparticles consisting of a combination of bovine serum albumin, cisplatin and folic acid can be used as candidates for anticancer drugs.

## Keywords: Cisplatin, Anticancer, Nanoparticles, Toxicity

## PENDAHULUAN
Kanker  merupakan  penyakit tidak  menular  yang  menyebabkan morbidibitas dan mortalitas di seluruh wilayah  dunia.  Data  dari  laporan Global  Burder  Cancer  (Globocan) pada tahun 2018 menunjukkan bahwa ada  18,1  juta  kasus  baru  kanker dengan  9,6  juta  kasus  kematian disebabkan kanker (Bray et al. 2018). Berdasarkan  data  Riskesdas  pada tahun  2018  prevalensi  kanker  di Indonesia menunjukkan adanya peningkatan  dari  1,4  per  1.000 penduduk  ditahun  2013  menjadi  1,79 per 1.000 penduduk ditahun 2018.
Penyebab terjadinya kanker karena adanya perubahan struktur dan fungsi secara genetik. Penyakit kanker dikarenakan  kondisi  sel  mengalami
pertumbuhan  yang  tidak  normal  dan tidak terkendali. Penyakit ini ditandai sel-sel  dalam  tubuh  manusia  terus berkembang  biak  dan  tidak  mampu dikendalikan atau dihentikan sehingga terbentuk  tumor  atau  sel-sel  ganas yang  berpotensial  menjadi  metastasis (Rahmani  et  al.  2014).  Pengobatan kanker  dilakukan  secara  intensif seperti: pembedahan, kemoterapi, radioterapi. Pengobatan kanker secara kemoterapi  merupakan  salah  satu pengobatan  yang  digunakan  untuk menghancurkan sel-sel kanker dengan menghambat pertumbuhan dan perkembangan sel kanker. Kemoterapi melibatkan  penggunaan  obat  dengan berat  molekul  yang  rendah  untuk menghancurkan  sel  tumor  secara selektif  (Mutiah,  Suryadinata,  and
Nurani 2018).
Salah satu obat kemoterapi yang digunakan  untuk  pengobatan  kanker adalah  cisplatin.  Cisplatin  dapat digunakan untuk pengobatan berbagai jenis  kanker  pada  manusia  seperti kanker  ovarium,  paru-paru,  testis, kandung  kemih,  payudara,  otak  dll. Cisplatin  diberikan  melalui  intervena sebagai  infus  jangka  pendek  dalam larutan  saline  untuk  pengobatan kanker  ganas.  Pemberian  cisplatin pada pengobatan kanker dapat memicu  proses  pembelahan  sel  yang tidak normal & berpotensi menyerang sel yang berdekatan (Aldossary 2019). Penggunaan  secara  klinis  cisplatin dibatasi  karena  adanya  efek  samping yang  bersifat  toksik  yang  bergantung pada  dosis.  Toksisitas  cisplatin  yaitu nefrotoksisitas,ototoksisitas,neurotoks isitas, hemotologis toksisitas, kardiotoksisitas,  dan  hepatotoksisitas. Karena efek samping yang dihasilkan tersebut  dibuatlah  obat  berbasis nanopartikel ( Qi et al. 2019) .
Obat  dengan  sistem  penghantar obat  ( drug  delivery )  berbasis  nano telah dikaji dan diteliti untuk meminimalkan efek samping dari obat cisplatin,  mengurangi  toksisitas  obat
serta  mampu  meningkatkan  efisiensi antineoplastik dan meningkatkan kemanjuran  obat.  ( Alam  et  al.  2015 ).
Penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh (Kettering  et  al.  2009)  penggunaan cisplatin dengan kombinasi nanopartikel  magnetik  menunjukkan aktivitas  kemoterapi  akan  tetapi menghasilkan  efek  samping  tubuh terasa  panas.  Oleh  karena  itu,  dalam penelitian  ini  digunakan  nanopartikel dari  bahan  polimer  organik  seperti albumin,  yang  diperoleh  dari bovine serum  albumin (BSA)  dikombinasi dengan  obat  cisplatin  dan  modifikasi ikatan menggunakan asam folat untuk meminimalisir toksisitas obat.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  efek  toksisitas  formulasi obat  cisplatin  dengan  kombinasi nanopartikel  bovine  serum  albumin (BSA) dan asam folat melalui metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT).

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  yaitu:  erlenmeyer  600  ml, neraca  analitik, magnetik stirer, gelas ukur 100 ml, pipet tetes, pipet volume, hot plate, sentrifuse, Spektrofotometer
UV-Vis.
Bahan-bahan  yang  digunakan dalam  penelitian:  Etanol  95  %, Cisplatin,  larutan  Bovine  Serum Albumin  (BSA),  NaOH,  larutan
Phosphat Buffer Saline (PBS),
Gluteraldehid,  Asam  folat,  aquades, aquabidest, dan pelarut kimia lainnya. Sintesis Nanopartikel Bovine Serum Albumin (NP-BSA)
Sintesis  nanopartikel  bovine serum  albumin  (BSA)  dilakukan dengan menggunakan teknik desolvasi.  Larutan  BSA  (4%  w/v) dengan pH 7 ditambahkan etanol (0,5 ml/menit  dengan  interval  2  menit) dilakukan  pengadukan  menggunakan magnetik  stirrer  600  rpm.  Kemudian ditambahkan  8%  gluteraldehid  (1,7 μl/mg BSA) didiamkan selama 6 jam pada temperatur ruang dengan pengadukan magnetik stirer (600 rpm) hingga terbentuk larutan keruh.
Nanopartikel yang dihasilkan dimurnikan  dengan  menggunakan sentrifugasi,  kemudian  dicuci  dengan menggunakan Phosphat Buffer Saline (PBS)  steril.  Kemudian  nanopartikel yang terbentuk disimpan dalam desikator (Alam et al. 2015).
Sintesis Nanopartikel Bovine Serum Albumin  dengan  Obat  Cisplatin (CP-NP-BSA)
Obat cisplatin diinkubasi selama 24 jam kemudian ditambahkan larutan BSA  (4%  w/v)  pada  suhu  37  °C  dan dilakukan pengadukan stirer kemudian ditambahkan NaOH 0,1 N (Alam et al. 2015).
Sintesis Asam Folat dengan Kombinasi  Nanopartikel  Bovine Serum  Albumin  dengan  Obat Cisplatin (As-CP-NP-BSA)
Nanopartikel  BSA  (NP-BSA) dan  cisplatin  nanopartikel  BSA  (CP- NP-BSA)  dimodifikasi  dengan  asam folat. Asam folat ditambahkan dengan PBS & Sorbitol dengan perbandingan (1:2:2)  kemudian  distirer  15  menit pada  temperatur  ruang.  Jumlah  NP- BSA dan CP-NP-BSA yang ditambahkan  sebanyak  20  mg/ml  dan distirer dengan magnetik stirer selama 4-5 jam. Hasil disentrifugasi dan siap untuk analisis (Alam et al. 2015).
Uji Toksisitas Metode BSLT
Telur Artemia  Salina ( A.salina )
0.5  g  ditetaskan  dalam  media  air  laut (35% kadar garam), bersirkulasi udara yang  baik  dan  pencahayaan  yang terang dan suhu 24-26 o C. Setelah 12-
48  jam  telur  menetas,  salinitas dikurangi hingga 5% untuk uji BSLT, tidak  boleh  umur  7  hari  dan  tidak boleh  kurang  dari  3  hari.  Untuk senyawa  murni  dibuat  konsentrasi  1, 10 dan 100 ppm.
Disiapkan beberapa vial (tabung reaksi)  yang  masing-masing  diisi dengan 5 ml air laut dan 5 ml larutan sampel dengan konsentrasi (1, 10, 20, 30,  40,  50,  60,  70,  80  ppm)  serta  10 ekor A. salina . Lakukan hal yang sama untuk  kontrol  dengan  pelarut  (etanol atau  DMSO).  Waktu  kontak  dilihat  1 jam hingga 6 jam. Replikasi dilakukan sebanyak  3X,  hitung  nilai  LC 50
dengan SPSS. Karena A.salina langsung kontak dengan sampel, maka dapat  diketahui  jumlah A.salina yang hidup dan jumlah yang mati, berdasarkan rumus
Evaluasi:
%Kematian= Total kematian A.salina - Kontrol
Total larva hewan coba x100
(Meyer et al. 1982).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Sintesis Nanopartikel Bovine Serum Albumin (NP-BSA)
Preparasi  nanopartikel  bovine serum  albumin  (BSA)  dilakukan dengan metode desolvasi (yaitu teknik
pembuatan  nanopartikel  berdasarkan perbedaan kelarutan antara desolvating  agent dengan  pelarut  air yang  bercampur  BSA).  Kelarutan BSA dalam air tinggi bila ditambahkan desolvating agent / pelarut  pendesolvasi  seperti  (etanol, aseton, dan DMSO) sehingga membentuk  agregrat  dari  BSA  dan ditambahkan crosslinker yang didasarkan  pada  karakteristik  fisiko kimia  (Ambarwati  2019).  Sintesis dilakukan dengan mencampur larutan BSA, etanol 96% (sebagai desolvating agent ) dan gluteraldehid  8%  (sebagai crosslinker ) distirerr 600 rpm selama 6 jam.  Kemudian  nanopartikel  dicuci dengan  PBS  pH  7.4  steril  dan disentrifugasi  2000  rpm  selama  5 menit.  Terbentuk  dua  lapisan  yaitu filtrat dan endapan kemudian dipisahkan  dan  disimpan  dalam desikator (Usreg, Husein,  and Fahmi, Ph.D  2019),  (Alam  et  al.  2015). Parameter optimasi pada penelitian ini bergantung  pada  jenis desolvating age nt,  jumlah  pelarut  pendesolvasi, jumlah  larutan  BSA  yang  digunakan, jumlah desolvating agent , lama pengadukkan dan pH pelarut (Ambarwati 2019).
Sintesis Nanopartikel Bovine Serum Albumin  dengan  Obat  Cisplatin
(CP-NP-BSA) Cisplatin sebagai
agen kemoterapi  yang  dianggap  penting dalam pengobatan kanker. Pemberian cisplatin  dalam  waktu  lama  dapat mempengaruhi  efektivitas  organ  dan menghasilkan  efek  samping  sehingga perlu  dilakukan  kombinasi  cisplatin untuk  mengurangi  toksisitas  obat tersebut  salah  satunya  dalam  bentuk nanopartikel  (Syame  et  al.  2018). Sintesis  nanopartikel  BSA    dengan obat  cisplatin  dilakukan  dengan penambahan NP-BSA yang terbentuk kemudian  ditambahkan  NaOH  0,1  N dan  dilakukan  pengadukan  stirer  600 rpm (Alam et al. 2015).
Sintesis Asam Folat dengan Kombinasi  Nanopartikel  Bovine Serum  Albumin  dengan  Obat Cisplatin (As-CP-NP-BSA)
Albumin  banyak  ditemukan dalam bentuk Bovine Serum Albumin (BSA)  atau  Human  Serum  Albumin (HSA).  Albumin  merupakan  polimer alami dengan sifat fisik dan kimianya yang  unik,  serta  banyak  digunakan didalam preparasi nanopartikel karena mampu  membawa  protein  serbaguna
untuk penargetan obat dan memperbaiki  profil  farmakokinetik berbasis  peptida  atau  obat  berbasis protein  (Das  et  al.  2011).  Bovine Serum  Albumin  (BSA)  merupakan polimer yang terdiri dari asam  amino yang  terhubung  oleh  adanya  ikatan peptida.  BSA  mampu  meningkatkan biodegradabilitas dan stabilitas.
Nanopartikel yang menggunakan BSA memiliki karakteristik
untuk meningkatkan efek terapeutik antitumor dan drug delivery (Yang et al. 2014). Asam folat yang mengandung  protein  disebut  sebagai reseptor  folat.  Reseptor  folat  sangat menjanjikan sebagai ligan taget untuk pengobatan  kanker  karena  mampu memelihara  fungsi  sel,  meningkatkan sistem  kekebalan,  serta  memiliki penyerapan  nanopartikel  yang  baik (Yang  et  al.  2014).    Asam  folat  yang dikombinasi dengan nanopartikel cisplatin dan BSA kemudian disentrifugasi dan supernatannya disimpan  untuk  analisis  lebih  lanjut. Sampel dicuci dengan PBS,
diliofilisasi dan disimpan.
Sampel  NP-BSA,  CP-NP-BSA dan As-CP-NP-BSA dilakukan pengukuran absorbansi dengan
menggunakan  Spektrofotometer  UV- Vis pada panjang gelombang 358 nm. Dari  hasil  pengukuran  bahwa  Asam folat, Cisplatin dan Nanopartikel BSA memiliki absorbansi yang lebih tinggi dibandingkan  dengan  Nanopartikel BSA dan Cisplatin nanopartikel BSA. Data  dapat  dilihat  padad  tabel  1, gambar 2.
Gambar 1. Hasil Filtrat Setelah
Sentrifugasi Pada Sintesis A.) NP- BSA, B.) CP-NP-BSA C.) AS-CP-

## NP-BSA
Tabel 1. Hasil pengukuran Spektrofotometer UV-Vis Sampel Absorbansi NP-BSA 0,045 CP-NP-BSA 0,844 As-CP-NP-BSA 0,86
Gambar 2. Spektrofotometer UV-Vis panjang gelombang 358 nm

## Uji Toksisitas Metode BSLT
Toksisitas dapat diartikan sebagai  kemampuan  suatu  zat  untuk menimbulkan kerusakan pada organisme  hidup  (Millati  2016).  Uji toksisitas  metode  BSLT  dilakukan dengan  menggunakan  larva  udang Artemia  salina. Kategori  toksisitas dari suatu bahan yaitu sebagai berikut (Millati 2016):
Tabel 2. Kategori toksisitas Kategori LC 50 (ppm) Sangat Toksik < 30 Toksik 30-1000 Tidak Toksik  > 1000 Tabel 3 . Pengaruh konsentrasi terhadap kematian larva (NP-BSA) Konsentrasi Rata- Rata Larva Mati Total Larva % Mortalitas 0 0 10 0 1 1,3 10 13 10 2 10 20 20 2,3 10 23 30 3,3 10 33 40 3,7 10 37 50 4,3 10 43 60 5,3 10 53 70 7,7 10 77 80 10 10 100 Hasil uji toksisitas menunjukkan konsentrasi  yang  dapat  membunuh larva A.Salina dengan variasi konsentrasi 1,10,20,30,40,50,60,70,80 ppm.  Jumlah  larva  yang  diuji  adalah
0,045 0,844 0,86 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 NP-BSA CP-NP-BSA As-CP-NP-BSA A b sorba n si Sampel A B C
10  ekor  tiap  konsentrasi  dilakukan pengulangan/replikasi  sebanyak  3X. Hasil  pengujian  dapat  dilihat  pada tabel 3.
Tabel 4 . Pengaruh konsentrasi terhadap kematian larva (As-CP-NP- BSA)
Konsentrasi Rata- Rata Larva Mati Total Larva % Mortalitas 0 0 10 0 1 1 10 10 10 2 10 20 20 3 10 30 30 4 10 40 40 5 10 50 50 6 10 60 60 7 10 70 70 8 10 80 80 10 10 100 Berdasarkan  tabel  3  dan  4 terlihat bahwa semakin tinggi konsentrasi  maka  semakin  besar tingkat kematin larva A.Salina.
Tingkat  kematian  dapat  ditentukan
secara langsung dengan
membandingkan  konsentrasi  terendah hingga  konsentrasi  tertinggi.  Hal  ini dapat  diartikan bahwa kematian larva A.Salina meningkat  seiring  dengan pengingkatan konsentrasi dalam sampel.  Gambar  larva  A.Salina  yang digunakan dalam uji toksisitas metode BSLT  dapat  dilihat  dalam  gambar  3. (Runtuwene and Wewengkang 2016)

## Gambar 3. Larva Artemia Salina
Berdasarkan  tabel  3  dilakukan analisis  probit  menggunakan  SPSS menunjukkan nilai LC 50 dari NP-BSA adalah 69,23 ppm. Sedangkan berdasarkan  tabel  4  hasil  analisis probit menggunakan SPSS
menunjukkan  nilai  LC 50 dari  As-CP- NP-BSA 56,56 ppm. Menurut (Meyer et  al.  1982)  bahwa  suatu  larutan menunjukkan  aktivitas  toksik  dalam uji toksisitas jika larutan tersebut dapat menyebabkan  kematian  50%  hewan uji  pada  konsentrasi  <1000  ppm. Berdasarkan  tabel  2  bahwa  NP-BSA dan  As-  CP-NP-BSA  bersifat  toksik. NP-BSA  memiliki  nilai  LC 50 pada konsentrasi  yang  lebih  tinggi  (69,23 ppm)  dibandingkan  dengan  As-CP- NP-BSA  (56,56  ppm)  hal  ini  berarti kombinasi asam folat & obat cisplatin dapat menurunkan toksisitas (Maukar, Runtuwene, and Pontoh 2013).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian
yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa nanopartikel yang terdiri  dari  kombinasi  bovine  serum albumin,  cisplatin  dan  asam  folat dapat dijadikan sebagai kandidat obat antikanker. Kadar toksisitas pada NP- BSA  dengan  nilai  LC 50 69,23  ppm sedangkan  kadar  toksisitas  As-CP- NP-BSA  LC 50 56,56  ppm.  Semakin
tinggi kadar konsentrasi maka semakin tinggi toksisitas yang dihasilkan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  diberikan kepada RISTEK-BRIN
Program Kompetitif  Nasional,  Skema  PDP yang  telah  memberikan  dana  hibah penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Alam,  Noor  et  al.  2015.  “Reduced Toxicological Manifestations of Cisplatin Following Encapsulation in Folate Grafted Albumin  Nanoparticles.” Life
Sciences 142: 76–85.
Aldossary, Sara A. 2019. “Review on
Pharmacology of Cisplatin: Clinical  Use,  Toxicity  and Mechanism  of  Resistance  of Cisplatin.” Biomedical and Pharmacology  Journal 11(1): 07–15. Ambarwati,  Rini.  2019.  “Pembuatan Nanopartikel Albumin Menggunakan Metode Desolvasi  Sebagai  Alternatif Sistem Pembawa.” FITOFARMAKA: Jurnal Ilmiah Farmasi 9(1): 35–39. Bray,  Freddie  et  al.  2018.  “Global Cancer Statistics 2018: GLOBOCAN Estimates of Incidence and Mortality Worldwide  for  36  Cancers  in 185  Countries.” CA:  A  Cancer Journal  for  Clinicians 68(6):
394–424.
Das, Saikat et al. 2011. “Nanotechnology  in  Oncology: Characterization  and  in  Vitro
Release  Kinetics  of  Cisplatin- Loaded Albumin Nanoparticles: Implications in Anticancer Drug Delivery.” Indian  Journal  of Pharmacology 43(4): 409–13.
Kettering,  Melanie  et  al.  2009.
“Characterization of Iron Oxide Nanoparticles  Adsorbed  with Cisplatin for Biomedical Applications.” Physics in Medicine  and  Biology 54(17):
5109–21.
Maukar, Morein A, Max R.J.
Runtuwene,  and  Julius  Pontoh. 2013. “Analisis  Kandungan Fitokimia  Dari  Uji  Toksisitas Ekstrak  Metanol  Daun  Soyogik (Sauraula Bracteosa DC) Dengan  Menggunakan  Metode Maserasi.” Jurnal  Ilmiah  Sains
13(2): 98.
Meyer,  B.  N.  et  al.  1982.  “Brine Shrimp:  A  Convenient  General Bioassay for Active Plant Constituents.” Planta  Medica
45(1): 31–34.
Millati,  Nuria.  2016.  “Uji  Toksisitas Dengan Metode BSLT Senyawa Steroid  Fraksi  Petroleum  Eter Mikroalga Chlorella Sp.” Skripsi : 1–10. Mutiah,  Roihatul,  Arief  Suryadinata,
and  Prasasti  Swara  Nurani. 2018. “Uji Sitotoksik Kombinasi Cisplatin Dengan Ekstrak Etanol Benalu Aalpukat (Dendrophthoe
Pentandra  (L)  Miq.)  Pada  Sel
Hela.” Majalah Kesehatan 5(3): 133–43.
Qi,  Luyu  et  al.  2019.  “Advances  in Toxicological  Research  of  the Anticancer  Drug  Cisplatin.” Chemical Research in Toxicology : acs.chemrestox.9b00204.
Rahmani,  Arshad  H.,  Mohammad  A.
Al  Zohairy,  Salah  M.  Aly,  and Masood A. Khan. 2014. “Curcumin: A Potential Candidate  in  Prevention  of Cancer  via  Modulation  of Molecular  Pathways.” BioMed Research International 2014(Figure 1). Runtuwene,  Max  Revolta,  and  Defny Wewengkang. 2016. “Uji Aktivitas Antioksidan Dan Toksisitas  Ekstrak  Etanol  Daun Foki Sabarati (Solanum Torvum).” Pharmacon 5(3): 94– 101.
Syame,  Sohier  M  et  al.  2018. “Synthesis and Characterization of  Cisplatin-Loaded  BSA  (
Bovine Serum Albumin ) Nanoparticles  as  Drug  Delivery System against Pancreatic
Cancer Cells.” 8(9): 39–48.
Usreg,  Handjani  Sri  Usreg,  Albari Husein,  and  Mochamad  Zakki
Fahmi,  Ph.D.  2019.  “Uji Sitotoksik  Terhadap  Sintesis Dan  Karakterisasi  Magnetik Nanopartikel  CuFe2O4  Yang Dilingkupi Bovine Serum Albumin (BSA).” Jurnal  Kimia Riset 4(1): 7.
Yang, Rui et al. 2014. “Preparation of Folic Acid-Conjugated, Doxorubicin-Loaded,  Magnetic Bovine Serum Albumin Nanospheres and Their Antitumor  Effects  in  Vitro  and in  Vivo.” International  journal of nanomedicine 9: 4231–43.