## UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN ANTIBAKTERI PEWARNA ALAMI TENUN IKAT DARI DESA HUNDIHOPO, KECAMATAN ROTE TIMUR, KABUPATEN ROTE NDAO
( TESTING THE ANTIOXIDANT AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF NATURAL DYE WEAVING FROM HUNDIHOPO VILLAGE, ROTE TIMUR DISTRICT, ROTE
NDAO REGENCY )
Alan Ch Sabuna 1 Arnold Ch. Hendrik 1 , dan Novi I. Bullu 1
1 Program Studi Pendidikan Biologi, FKIP, Universitas Kristen Artha Wacana Corresponding author : alan.sabuna@gmail.com

## Abstrak
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui potensi antioksidan dan antibakteri dari ekstrak pewarna alami tenun ikat dari Desa Hundihopo, Rote Timur, Kabupaten Rote Ndao. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Oktober –  November  2018  di  Laboratorium  Biosains  Universitas  Nusa  Cendana  Kupang  untuk  uji  antioksidan,  dan Laboratorium  Biologi  Universitas  Kristen  Artha  Wacana  untuk  uji  antibakteri.  Penelitian  ini  menggunakan metode  eksperimental  di  laboratorium  yang  terbagi  menjadi  dua  tahap.  Tahap  pertama  ekstraksi  dengan memanaskan bahan pewarna dengan air, dilanjutkan tahap kedua uji antioksidan menggunakan metode DPPH dan  uji  antibakteri  menggunakan  metode  difusi  agar.  Kesimpulan  dari  penelitian  ini  bahwa  ekstrak  pewarna alami mengkudu, mengkudu + loba, dan tarum memiliki nilai IC 50 6367,5 ppm, 3707,77 ppm, dan 3037,5 ppm sehingga berpotensi sebagai sumber antioksidan alami kategori sangat lemah. Diameter zona hambat ekstrak pewarna alami mengkudu + loba memiliki diameter zona hambat 10,1 ± 0,22 mm pada konsentrasi 5000 ppm sehingga termasuk antibakteri alami kategori lemah.
Kata kunci: Antioksidan, Antibakteri, Pewarna alami, Rote Ndao

## Abstract
This research was conducted to determine the antioxidant and antibacterial potential of the natural dye extract of  ikat  weaving  from  Hundihopo  Village,  East  Rote,  Rote  Ndao  Regency.  This  research  was  conducted  in October – November 2018 at the Bioscience Laboratory of Nusa Cendana University, Kupang for antioxidant testing, and the Biology Laboratory of Artha Wacana Christian University for antibacterial testing. This research uses an experimental method in a laboratory which is divided into two stages. The first stage is extraction by heating the dye with water, followed by the second stage of antioxidant testing using the DPPH method and antibacterial  testing  using  the  agar  diffusion  method.  The  conclusion  of this  research  is  that  the  extracts  of natural noni, noni + loba, and tarum have IC50 values of 6367.5 ppm, 3707.77 ppm, and 3037.5 ppm so that they are potential sources of natural antioxidants in the very weak category. The diameter of the inhibition zone of the natural dye extract of noni + loba has an inhibition zone diameter of 10.1 ± 0.22 mm at a concentration of 5000 ppm so that it is included in the weak category of natural antibacterial.
Keywords: Antioxidant, Antibacterial, Natural Dyes, Rote Ndao

## Indigenous Biologi
Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 4(3) 2021

## PENDAHULUAN
Dalam hal memilih pakaian untuk membungkus badan, biasanya setiap orang akan memilih bahan  yang  nyaman  dikenakan  dan  menarik  ketika  dipandang,  tetapi  selain  itu  pakaian  tersebut juga  aman  dipergunakan.  Pakaian  amat  rentan  terhadap  serangan  mikroba,  karena  luas permukaannya  yang  besar  dan  mudah  lembab.  Apalagi  serat  alami  tersusun  oleh  protein  dan selulosa  yang  merupakan  kebutuhan  dasar  bagi  mikroba  untuk  bertumbuh  ditambah  lagi  jika tersedia  oksigen,  nutrisi  dan  suhu  yang  sesuai.  Hal  ini  sering  mengarah  kepada  bau  yang  tidak menyenangkan, infeksi kulit, respon alergi, dan penyakit terkait lainnya (Singh et al ., 2004).
Orang  Nusa  Tenggara  Timur  sering  mengunakan  pakaian  bermotif  daerah  dalam  kegiatan sehari-hari, baik itu dalam aktivitas kerja di kantor, maupun dalam acara formal tertentu. Pakaian adat  yang  digunakan  berasal  dari  kain  tenun  ikat  yang  dibuat  oleh  kelompok  pengrajin  pada umumnya  terdiri  dari  ibu-ibu  rumah  tangga.  Kain  tenun  ikat  NTT  memiliki  corak  dan  motif  yang berbeda-beda tergantung dari suku-suku yang ada di Nusa Tenggara Timur. Bahkan setiap daerah memiliki warna yang dominan dan menjadi ciri khas daerah tersebut, di Rote memiliki warna dasar hitam, di pulau Timor terlihat dari warna-warnanya yang terang, sedangkan di pulau Sumba memiliki motif etnik dan bernilai religius (Noviyanti, 2004).
Warna-warna  yang  menghiasi  tenun  ikat  NTT  berasal  dari  warna  benang  toko  yang  berarti warna  tersebut  hasil  dari  proses  pewarnaan  menggunakan  pewarna  sintetik.  Saat  ini,  pengrajin beralih  menggunakan  pewarna  tekstil  daripada  pewarna  alami  karena  proses  pengolahan  lama, warna  kurang  menarik,  bahan  baku  bergantung  musim  dan  jumlah  yang  dibutuhkan  banyak (Murniati dan Takandjandji, 2015).
Namun penggunaan pewarna tekstil tidak selamanya aman, dilaporkan bahwa pewarna tekstil sintetis menunjukkan sekelompok besar senyawa organik yang dapat memiliki dampak merugikan terhadap  lingkungan,  serta  beberapa  di  antaranya  dapat  menyebabkan  bahaya  bagi  manusia (Hassaan  and  Ahmed,  2017).  Penelitian  oleh  Ufi  (2018)  telah  berhasil  mendaftar  tumbuhan- tumbuhan  pewarna  alami  di  daratan  Timor,  Rote,  dan  Sabu  yang  secara  turun-temurun dimanfaatkan oleh pengrajin tenun ikat, diantaranya tarum, mengkudu, kunyit dan jati.
Untuk menggalakkan penggunaan zat  warna alami pada kain tenun ikat, maka kelemahan- kelemahan  pewarna  alami  harus  secara  perlahan-lahan  diminimalisir.  Salah  satu  caranya  adalah menambahkan bahan tertentu yang bisa memberikan efek antimikroba. Berbagai bahan alam telah dilaporkan, seperti ekstrak delima, daun pacar, dan kenari memiliki aktivitas antimikroba (Bhuyan et al ., 2016).
Tumbuhan-tumbuhan  yang  dimanfaatkan  dalam  proses  pewarnaan  antara  lain  tarum, mengkudu, kunyit, dan jati. Tarum mengandung senyawa tannin sebesar 0,08% dan 0,41% saponin (Herdiawan  dan  Krisman,  2014),  dan  akar  mengkudu  mengandung  senyawa  antrakuinon, klororubin,  sterol,  resin  (Sitepu,  2012  dalam  Rahmawati  dan  Hidajati,  2017),  kemudian  proses meramunya  dapat  direbus,  ditumbuk,  dan  sedikit  ditambah  air  sehingga  memungkinkan  pigmen dapat terlarut dalam air semaksimal mungkin agar benang yang direndam dapat terwarnai dengan baik. Hasil olahan tersebut diduga menyimpan kadar antioksidan tinggi yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri atau jamur pada pakaian.
Bakteri Escherichia coli merupakan salah satu bakteri patogen (Woodz-Panzaru et al ., 2009) yang dapat bertumbuh pada pakaian manusia jikalau dalam kondisi lembab, sehingga mengontrol bakteri  ini  amat  penting  dilakukan  bahkan  memungkinkan  menjangkiti  manusia  jika  mengalami kontak  fisik  (Bloomfield et  al .,  2011).Berdasarkan  latar  belakang  di  atas,  maka  perlu  dilakukan penelitian  untuk menguji aktivitas antioksidan dan antibakteri pewarna alami tenun ikat dari Desa Hundihopo, Kecamatan Rote Timur, Kabupaten Rote Ndao. ”

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Lokasi Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  desa  Hundihopo  untuk  pembuatan  pewarna  alami, Laboratorium Biosains Universitas Nusa Cendana Kupang untuk uji antioksidan, dan Laboratorium Biologi Universitas Kristen Artha Wacana untuk uji antibakteri dari bulan Oktober – November 2018.

## Bahan dan Alat Penelitian
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah  daun  tarum  ( Indigofera  tinctoria ), akar mengkudu  ( Morinda citrifolia ), rimpang kunyit ( Curcuma longa ), kulit loba ( Symplocos sp.), pelarut air, akuades. Alat-alat yang digunakan adalah alat-alat gelas laboratorium, pengaduk magnetik, oven, vorteks, water bath , timbangan analitik, sentrifuge dan spektrofotometer UV-Vis.

## Prosedur Penelitian a. Pengambilan sampel dan sortasi
Daun  tarum,  akar  mengkudu,  dan  rimpang  kunyit  diambil  dari  sekitar  desa  Hundihopo bersama pengrajin tenun ikat Rote. Herba yang telah diambil dilakukan sortasi untuk memilah herba yang masih segar dari tanah, kerikil, rumput-rumputan, bagian tanaman yang rusak, maupun bagian tanaman  lain  yang  tidak  dibutuhkan  dalam  pewarnaan.  Herba  segar  kemudian  dicuci  dengan  air untuk siap digunakan dalam prosedur selanjutnya.

## b. Pembuatan Larutan Pewarna
Pada  proses  pewarnaan  digunakan  tiga  jenis  pewarna  alami  yang  dibuat  sesuai  dengan jumlah,  takaran,  serta  prosedur  yang  dibuat  oleh  pengrajin.  Proses  pembuatan  pewarna  alami sebagai berikut: 1. Larutan tarum
Sebanyak  50  gram  daun  tarum  dilarutkan  dalam  1000  ml  air  kemudian  dipanaskan sampai  mendidih  selama  5  menit  sambil  diaduk-aduk  agar  dapat  meningkatkan kelarutan  zat warna tarum dalam air. Kemudian larutan tarum disaring dan diambil filtratnya.
2. Larutan Mengkudu
Larutan  mengkudu  dibuat  dengan  kulit  akar  mengkudu  yang  telah  dipotong  kecil-kecil ditimbang sebanyak 430 gram, kemudian ditumbuk hingga halus dan ditambahkan 1000 ml air, lalu  dipanaskan  sampai  mendidih  selama  4  menit  sambil  diaduk-aduk.  Larutan  mengkudu disaring dan dipisahkan ampas dan filtrat yang dihasilkan.
3. Larutan Mengkudu + Loba
Sebanyak  430  gram  mengkudu  yang  telah  dipotong  kecil-kecil  ditumbuk  hingga  halus dan  ditambahkan  1000  ml  air.  Kemudian  15  gram  loba  yang  telah  dikunyah  ditambahkan  ke dalam larutan mengkudu. Pemanasan larutan sampai mendidih selama 6 menit sambil diaduk- aduk. Kemudian larutan mengkudu + loba disaring dan diambil filtratnya.
Gambar 1 Daun Tarum Gambar 2 Akar Mengkudu Gambar 3 Kulit loba Gambar 4 Larutan Tarum Gambar 5 Larutan Mengkudu Gambar 6Larutan Mengkudu + Loba

## Indigenous Biologi
Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 4(3) 2021

## c. Uji Antioksidan

## 1. Pembuatan Larutan DPPH
Larutan  DPPH  (1,  1-difenil-2-pikrihidrazil)  merupakan  larutan  yang  digunakan untuk  menguji  besar  perendeman  radikal  bebas  dan  merupakan  larutan  blanko  (Harrizul dkk., 2013). Larutan ini diperoleh dengan cara menimbang serbuk DPPH sebanyak 10 mg lalu  dimasukkan  kedalam  gelas  kimia,  kemudian  ditambahkan  sedikit  etanol  untuk melarutkan serbuk DPPH tersebut. Selanjutnya larutan DPPH dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml kemudian ditambahkan Metanol hingga tanda batas. Larutan yang diperoleh adalah  larutan  induk  DPPH  dengan  konsentrasi  100  ppm.  Dari  larutan  induk  100  ppm kemudian diambil sebanyak 25 ml dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml lalu ditambahkan metanol  hingga  tanda  batas  dan  diperoleh  larutan  DPPH  25  ppm.  Larutan  ini  yang  akan direaksikan dengan larutan uji (Anonim, 2018).
2. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Larutan DPPH Untuk menentukan Panjang gelombang maksimum larutan DPPH yang disiapkan, ke  dalam  kuvet  dimasukkan  2  ml  pelarut  Metanol  kemudian  ditambahkan  2  ml  Larutan DPPH dan di homogenkan menggunakan vortex. Setelah itu dibuat spektra  sinar tampak pada  alat  Spektrofotometer  UV-Vis  untuk  panjang gelombang  400 – 700 nm. Setelah itu diperoleh  Panjang  Gelombang  maksimum  yakni  pada  panjang  gelombang  dengan absorbansi terbesar (Anonim, 2018).
3. Pengukuran Absorbansi untuk Menentukan Besar Peredaman Radikal Bebas Pengukuran  absorbansi  dilakukan  untuk  menentukan  besar  peredaman  radikal bebas terhadap Sampel yang telah dievaporasi terlebih dahulu. Ketiga jenis sampel ini diberi perlakuan yang sama yakni masing- masing konsentrasi dimasukkan sebanyak 2 ml sampel ke  dalam  tabung  reaksi  kemudian  ditambahkan  2  ml  DPPH  25  ppm  dan  dihomogenkan menggunakan  vorteks,  kemudian  di  inkubasi  selama  30  menit.  Setelah  30  menit  diukur absorbansi  pada  panjang gelombang  hasil  scan  lamda maksimum  (Anonim,  2018).  Hasil pengukurannya berupa Data absorbansi.
% inhibisi = (A kontrol – A sampel ) / A kontrol X100%

## d. Uji Antibakteri
Diambil beberapa koloni isolat E. coli segar lalu dikulturkan masing-masing ke dalam 50 ml Nutrient  Broth  (NB),  kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37ºC  selama  24  jam  hingga  didapatkan kekeruhan. Kultur bakteri E. coli diambil sebanyak 1 ml kemudian dituang pada media Nutrient Agar (NA)  dan  diratakan  dengan  menggunakan  batang  L.  Media  yang  telah  berisi  bakteri  didiamkan selama  15-20  menit  agar  bakteri  terserap  seluruhnya  ke  dalam  media.  Ambil  kertas  cakram  dan dicelupkan ke larutan pewarna alami mengkudu, larutan mengkudu + loba, dan larutan tarum, dan diletakkan di atas media yang telah berisi bakteri E. coli . Selanjutnya diinkubasi selama 24 jam pada suhu  37ºC,  dan  diamati  pertumbuhannya  serta  zona  bening  yang  terbentuk,  kemudian  dilakukan pengukuran dengan menggunakan jangka sorong. Untuk rumus perhitungan diameter zona hambat menggunakan rumus berikut ini:
Diameter Zona Hambat = (Dv − Dc) + (Dh − Dc)
2
Keterangan : Dv = Diameter vertikal Dh = Diameter horizontal Dc = Diameter cakram

## Teknik Analisis Data
Data  dianalisis  secara  statistik  menggunakan  analisis  variansi  ANOVA  satu  jalur  dengan taraf signifikansi 5%. Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan program SPSS versi 22.0.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Aktivitas Antioksidan Ekstrak Pewarna Alami Induk
Hasil  penentuan  panjang  gelombang  maksimum  dengan  menggunakan  spektrofotometer UV-VIS, dapat dinyatakan bahwa serapan maksimum DPPH berada pada panjang gelombang 517 nm.  Berdasarkan  hasil  penelitian,  persen  inhibisi  untuk  sampel  pewarna  alami  berbahan  dasar tarum, mengkudu, dan loba dapat dilihat pada tabel 1 di bawah ini.
Tabel 1. Persentase inhibisi sampel pewarna alami
No. Sampel Konsentrasi Pewarna (ppm) % Inhibisi 1 Mengkudu (Warna Kuning) 1000 29,54 2000 33,51 3000 40,08 4000 41,17 5000 49,38 2 Mengkudu + Loba (Warna Merah) 1000 24,35 2000 36,38 3000 45,41 4000 53,35 5000 61,96 3 Tarum (Warna Hitam) 1000 35,97 2000 41,31 3000 47,46 4000 64,02 5000 67,03 Tabel 2. Nilai IC 50 ekstrak pewarna alami No. Nama Sampel Persamaan Linier IC 50 (ppm) 1 Mengkudu (Warna Kuning) y  =  0.004x  +  24.53 R² = 0.962 6367,5 2 Mengkudu + Loba (Warna Merah) y  =  0.009x  +  16.63 R² = 0.993 3707,77 3 Tarum (Warna Hitam) y  =  0.008x  +  25.70 R² = 0.948 3037,5
Metode  DPPH  digunakan  untuk menguji  aktivitas  antioksidan  dari ketiga  ekstrak  pewarna alami induk. DPPH menghasilkan radikal bebas aktif ketika dilarutkan dalam alkohol. Ketika radikal bebas DPPH diblokir oleh antioksidan melalui donor hidrogen untuk membentuk DPPH yang stabil, absorbansinya menurun. Reaksi ini mengubah warna dari ungu menjadi kuning (Molyneux, 2004).
Aktivitas antioksidan dihitung dari aktivitas inhibisi ekstrak pada pereaksi DPPH yang juga berperan sebagai suatu radikal bebas. Dari hasil pengukuran diperoleh persamaan regresi linier, y adalah  %  inhibisi  dan  x adalah  IC 50 yaitu konsentrasi  dari  antioksidan  yang  dapat  meredam  atau menghambat 50% radikal bebas. Dengan menggunakan rumus regresi pada tabel 2 diperoleh IC 50 untuk ekstrak pewarna alami kuning adalah 6367,5 ppm; ekstrak pewarna alami merah mempunyai nilai IC 50 = 3707,77 ppm, dan ekstrak pewarna alami hitam mempunyai nilai IC 50 = 3037,5 ppm. Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan  pada  Tabel  2,  menunjukkan  bahwa  nilai  IC 50 ekstrak tarum lebih kecil dari ekstrak mengkudu + loba, dan ekstrak mengkudu + loba lebih kecil dari ekstrak mengkudu, bila semakin kecil nilai IC 50 maka aktivitas antioksidan semakin tinggi (Molyneux, 2004), yang berarti aktivitas antioksidan ekstrak tarum > ekstrak mengkudu + loba > ekstrak mengkudu.
Senyawa  antioksidan  yang  terkandung  di  dalam  ketiga  bahan  pewarna  alami  induk  ini menurut Pratt dan Hudson (1992), antioksidan alami paling banyak terdapat pada kayu, kulit kayu, batang,  daun,  buah,  akar,  bunga  dan  biji.  Sebagian  besar  senyawa  ini  biasanya  merupakan senyawa fenolik atau polifenol di alam, misalnya tokoferol, flavonoid dan turunan dari asam sinamat, fosfatidat dan asam organik lainnya.

## Indigenous Biologi Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 4(3) 2021
Kategori  aktivitas  antioksidan  suatu  senyawa  menurut  Pangestu  dkk  (2017)  jika  nilai  IC 50 berada di atas 200 ppm, digolongkan ke dalam kategori sangat lemah (>200 ppm).  Ekstrak daun tarum,  akar  mengkudu  dan  kulit  loba  dikategorikan  sebagai  antioksidan  yang  sangat  lemah. Lemahnya  aktivitas  antioksidan  diduga  dipengaruhi  oleh  pelarut  yang  digunakan,  yaitu  air. Berdasarkan penelitian Verdiana dkk. (2018), hasil sidik ragam menunjukkan bahwa perlakuan jenis pelarut berpengaruh sangat nyata (P<0,01) terhadap aktivitas antioksidan ekstrak kulit buah lemon. Aktivitas antioksidan terendah diperoleh pada pelarut aquades. Didukung pula oleh hasil penelitian Do et  al .  (2014),  kadar  total  flavonoid,  kadar  total  fenol,  dan  aktivitas  antioksidan Limnophila aromatica dengan  menggunakan  pelarut  ekstraksi  air  menunjukkan  hasil  terendah  dibandingkan dengan pelarut lainnya, seperti metanol, etanol dan aseton.

## Aktivitas Antibakteri Ekstrak Pewarna Alami Induk
Kemampuan  ekstrak  pewarna  alami  induk  untuk  menghambat  pertumbuhan E.  coli dapat dilihat  dari  semakin  besarnya  zona  hambat  yang  terbentuk.  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri menggunakan metode difusi cakram dan hasil pengukuran rata-rata diameter zona hambat ekstrak warna merah, kuning dan hitam terhadap bakteri E. coli dapat dilihat Gambar 7 dan Tabel 3.
(A) (B)
(C)
Gambar 7. Uji aktivitas antibakteri ekstrak pewarna alami induk terhadap bakteri Escherichia coli . (A). Merah, (B). Kuning, (C) Hitam.
Tabel  3.  Hasil  Pengukuran  Rata-rata  Diameter  Zona  Hambat  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia  coli Yang Dihambat Dengan Ekstrak Pewarna Alami Induk.
Jenis Warna Konsentrasi pewarna induk Rata-rata diameter zona hambat pertumbuhan (mm) Merah (Mengkudu + Loba) 1000 ppm 3,3 ± 0,27 a 3000 ppm 6,4 ± 0,41 c 5000 ppm 10,1 ± 0,22 f Kuning (Mengkudu) 1000 ppm 3 ± 0,70 a 3000 ppm 5,4 ± 0,54 b 5000 ppm 9,3 ± 0,44 e Hitam (Tarum) 1000 ppm 2,9 ± 0,41 a 3000 ppm 5,3 ± 0,44 b
5000 ppm 8,5 ± 0,5 d
Keterangan: *Huruf yang berbeda menunjukkan zona hambat yang berbeda secara nyata (P<0,05).
Data ANOVA diameter zona hambat pertumbuhan sel Escherichia coli , menunjukkan nilai signifikan  0,000  (p<0,05)  yang  berarti  terdapat  perbedaan  signifikan  pengaruh  perlakuan  yang diberikan pada mikroba uji. Hal ini menunjukkan bahwa ke-sembilan perlakuan telah memberikan aktivitas yang menghambat sifat toksik formalin dalam menekan pertumbuhan khamir Escherichia coli .
Uji lanjut yang digunakan adalah uji Duncan. Uji ini digunakan untuk melihat perlakuan mana yang memiliki efek yang sama atau berbeda dan efek yang terkecil sampai efek yang terbesar antara satu dengan lainnya. Uji Duncan terhadap diameter zona hambat bakteri E. coli untuk konsentrasi ekstrak  1000  ppm  (3,3  ±0,27  mm);  dan  3000  ppm  (6,4  ±  0,41  mm)  untuk  jenis  warna  merah menunjukkan perbedaan yang nyata. Hal ini berarti konsentrasi ekstrak tersebut telah menunjukkan efek yang berbeda dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli . Sedangkan konsentrasi ekstrak 3000 ppm (5,4 ± 0,54 mm) untuk warna kuning menunjukkan tidak ada perbedaan nyata dengan konsentrasi  3000  ppm  untuk  warna  hitam  (5,3  ±  0,44 mm).  Kemudian,  untuk konsentrasi  ekstrak 5000  ppm  untuk  warna  kuning  (9,3  ±  0,44  mm)  menunjukkan  perbedaan  yang  nyata  dengan konsentrasi  ekstrak  5000  ppm  (8,5  ±  0,5  mm).  Hal  ini  berarti  konsentrasi  ekstrak  tersebut menunjukkan efek yang berbeda dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli .
Efek  penghambatan  yang  paling  baik  terlihat  pada  konsentrasi  ekstrak  5000  ppm  untuk warna merah yaitu 10,1 ± 0,22 mm.  Konsentrasi yang menunjukkan penghambatan terkecil yaitu 1000 ppm untuk warna merah, kuning dan hitam terhadap sel E. coli .
Namun menurut Greenwood (1995), jika diameter rata-rata zona hambat kurang dari 10 mm (<10 mm), tidak menunjukkan respon hambat pertumbuhan. Dengan demikian, konsentrasi ekstrak zat warna alami penghambat pertumbuhan hanya ditemukan pada 5000 ppm untuk warna merah yang  dibuat  dari  bahan  dasar  mengkudu  dan  loba  sebagai  bahan  dasarnya.  Diduga  bahwa  jika konsentrasi ekstrak pewarna ditingkatkan, respons penghambatan pertumbuhan yang lebih nyata dapat diharapkan.
Kemampuan pewarna alami induk dengan konsentrasi 5000 ppm (warna merah) disebabkan karena  di  dalam  ekstrak  mengkudu  dan  loba  dapat  melarutkan  senyawa  antioksidan  seperti senyawa terpenoid dan fenolik, sehingga mampu menangkal radikal bebas hidroksil (Yuliarti, 2008). Senyawa  tersebut  mampu  berinteraksi  dengan  peptidoglikan  dinding  sel  bakteri Escherichia  coli . Senyawa flavonoid dapat menembus peptidoglikan yang bersifat polar karena flavonoid juga bersifat polar,  sedangkan  disisi  lain  senyawa  fenol  merusak  dinding  bakteri  dengan  memutuskan  ikatan peptidoglikan  (Pelczar  dan  Chan,  1988).  Penelitian  yang  serupa  oleh  Rahman  dkk.  (2018), menyatakan bahwa ekstrak kayu akar mengkudu memiliki antibakteri yang efektif terhadap bakteri gram positif yaitu Staphylococcus aureus .
Berdasarkan uji Duncan, menunjukkan diameter zona hambat pertumbuhan sel E. coli yang terbentuk pada konsentrasi ekstrak 1000 ppm lebih kecil dibandingkan dengan konsentrasi ekstrak 3000 ppm dan 5000 ppm baik pada jenis pewarna merah, kuning dan hitam. Ini membuktikan bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  kulit  batang  kesambi  yang  diberikan,  maka  semakin  besar diameter zona hambat yang terbentuk di sekeliling kertas cakram

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil dan pembahasan, maka dapat disimpulkan bahwa aktivitas antioksidan ekstrak pewarna  alami  mengkudu,  mengkudu  +  loba,  dan  tarum  memiliki  nilai  IC 50 6367,5  ppm,  3707,77 ppm,  dan  3037,5  ppm  sehingga  berpotensi  sebagai  sumber  antioksidan  alami  kategori  sangat lemah. Aktivitas antibakteri pada ekstrak pewarna alami mengkudu + loba memiliki diameter zona hambat  10,1  ±  0,22  mm  pada  konsentrasi  5000  ppm  sehingga  berpotensi  sebagai  sumber antibakteri alami kategori lemah.
Indigenous Biologi Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 4(3) 2021

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  dengan  meningkatkan  konsentrasi  tiap  pewarna  alami induk tenun ikat dari desa Hundihopo, Kecamatan Rote Timur, Kabupaten Rote Ndao.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim. 2018. Prosedur Uji Antioksidan. Laboratorium Riset Terpadu, Universitas Nusa Cendana.
Kupang.
Bhuyan,  S.,  Gogoi,  N.,  and  Kalita  B,  B.  Natural  Dyes  and  Its  Antimicrobial  Effect.  International Journal of Engineering Trends and Technology (IJETT) – Volume-42 Number-3 - December 2016.
Bloomfield,  S.  F.,  Exner,  M.,  Signorelli,  C.,  Nath,  K. J.,  and  Scott,  E.  A. 2011. The  infection risks associated with clothing and household linens in home and everyday life settings, and the role  of  laundry.  International  Scientific  Forum  on  Home  Hygiene.  Website:  http://www.ifh- homehygiene.org/IntegratedCRD.nsf/eb85eb9d8ecd365280257545005e8966/d0e3b0f3610 79f1780257865003d43b1?OpenDocument
Do, Quy-Diem, Angkawijaya, A., Tran-Nguyen, P. L., Huynh, L. H, Soetaredjo, E. F., Suryadi, I and Ju, Yi-Hsu. 2013. Effect of extraction solvent on total phenol content, total flavonoid content, and  antioxidant  activity  of  Limnophila  aromatica.  Journal  of  Food  and  Drug  Analysis.  22. 10.1016/j.jfda.2013.11.001.
Greenwood D. 1995. Antibiotics Susceptibility (Sensitivity) Test, Antimicrobial and Chemotheraphy.
United State of America: Mc Graw Hill Company.
Hassaan,  M.  and  E.  N.  Ahmed.  2017.  Health  and  Environmental  Impacts  of  Dyes:  Mini  Review.
American Journal of Environmental
Science and Engineering. 1. 64-67. 10.11648/j.ajese.20170103.11.
Harrizul  R.,  Ernita  W.  S.  dan  Rusdi.  2013.  Pengaruh  Perbandingan  Pelarut  Etanol-Air  Terhadap Kadar  Senyawa  Fenolat  dan  Daya  Antioksidan  Dari  38  Ekstrak  Daun  Sirsak  ( Annona muricate L). Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi.Vol. 18(01).
Herdiawan,  I  dan  Krisnan,  R.  Produktivitas  dan  Pemanfaatan  Tanaman  Leguminosa  Pohon Indigofera zollingeriana pada Lahan Kering. WARTAZOA Vol. 24 No. 2 Th. 2014 Hlm. 75-82. DOI: http://dx.doi.org/10.14334/wartazoa.v24i2.1051.
Molyneux,  P.  2004.  The  Use  of  The  Stable  Free  Radikal  Diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH)  For Estimating Antioxidant Activity. Journal Science of Technology 26 (2): 211-219.
Murniati  dan  Takandjandji,  M.  Tingkat  Pemanfaatan  Tumbuhan  Penghasil  Warna  Pada  Usaha Tenun  Ikat  Di  Kabupaten  Sumba  Timur.  Jurnal  Penelitian  Hutan  Tanaman  Vol.  12  No.  3, Desember 2015, 223-237.
Noviyanti, S. 2004. Mengenal Rupa-rupa Tenun Ikat. https://travel.kompas.com/read/2014/05/22/1357500/Mengenal.Rupa-rupa.Tenun.Ikat.NTT Pangestu, N. S., Nurhamidah, dan Elvinawati. 2017. Aktivitas Antioksidan Dan Antibakteri Ekstrak Daun Jatropha gossypifolia L. Jurnal Pendidikan dan Ilmu Kimia. 1(1):15-19.
Pelczar, M.J., E.C.S. Chan. 1988. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Universitas Indonesia Press. Jakarta. Pratt, D. E., and Hudson, B. J. F. 1992. Natural antioxidants not exploited commercially. In B. J. F.
Hudson (Ed.), Food antioxidants (pp. 171 –192). London: Elsevier Applied Science Rahman, A., Muktiningsih, M., Andika, F., Kartini, I., and Slamet, R. 2018. Extraction of natural dye powder from morinda citrifolia and its application as antibacterial dyes for cotton fabrics. IOP Conference  Series:  Materials  Science  and  Engineering.  434.  012096.  10.1088/1757- 899X/434/1/012096.
Rachmawati,  M.  dan  Hidajati,  N.  2017.  Isolasi  dan  identifikasi  senyawa  metabolit  sekunder  dari ekstrak  metanol  kulit  batang  tumbuhan  mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.).  Journal  of Chemistry, 6(2): 113-118.
Singh, R., Jain, A., Panwar, S. Gupta, D., and Khare, S. K. Antimicrobial Activity of Some Natural Dyes. Dyes and Pigments Volume 66, Issue 2, August 2005, Pages 99 – 102. Ufi O., 2018. Identifikasi Tumbuhan Pewarna Alami Desa Kie Kecamatan Niki-niki Kabupaten Timor Tengah Selatan. Skripsi Program Studi Pendidikan Biologi. UKAW.

## Indigenous Biologi
Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 4(3) 2021
Verdiana,  M.,  Widarta,  R.  dan  Permana,  I.  2018.  Pengaruh  jenis  pelarut  pada  ekstraksi menggunakan gelombang ultrasonik terhadap aktivitas antioksidan ekstrak kulit buah lemon ( Citrus  limon (Linn.)  Burm  F.).  Jurnal  Ilmu  dan  Teknologi  Pangan  (ITEPA).  7.  213. 10.24843/itepa.2018.v07.i04.p08.
Woods-Panzaru, S., Nelson, D., McCollum, G., Ballard, L. M., Millar, B. E., Maeda, Y., Goldsmith, C.  E.,  Rooney,  P.  J.,  Loughrey,  A.,  Rao,  J.  R.  and  Moore,  J.  E.  An  Examination  of Antibacterial and Antifungal Properties of Constituents Described in Traditional Ulster Cures and Remedies. Ulster Med J. 2009 Jam; 78(1): 13 – 15.
Yuliarti, Nurheti, 2008. Racun di Sekitar Kita. Penerbit ANDI. Yogyakarta.