## EFFECT OF VINEGAR TO HISTAMINE CONTENT
IN BULLET TUNA ( Auxis rochei )
Pengaruh Asam Cuka Terhadap Kandungan Histamin Dalam Daging Ikan Komu ( Auxis rochei )
Nikmans Hattu 1, *, Eirene G. Fransina 1 , Cecilia A. Seumahu 2 , Josina M. Sopacua 1
1 Chemistry Department, Faculty of Mathematics and Natural Sciences
2 Biology Department, Faculty of Mathematics and Natural Sciences Pattimura University, Kampus Poka, Jl. Ir. M. Putuhena, Ambon 97134
*Corresponding authir, e-mail: nickhattu@fmipa.unpatti.ac.id
Received:  October 2015 Published: January 2016

## ABSTRACT
The  research  on  the  effect  of  vinegar  to  histamine  content  in  bullet  tuna  ( Auxis  rochei )  has  been  done. Histamine content of quant itatively determined using a standard curve regression equation (y = 0.005 x - 0.046) with a  price  coefficient  of determination   (R 2 =   0.926)   is    close   to   unit y.   The    results    showed    levels    of histamine  in  bullet tuna  marinated  in  vinegar with  variation concentrations of 5%, 10%,  15%,  20%,  and  25% within  10  minutes,  are  25.9099;  20.0408;  18.9671; 18.7108  and  18.6336  mg/100g  respectively.  While  the levels  of  histamine  in bullet  tuna  marinated  in 25% of vinegar with  variation of 10  minutes, 20  minutes, and 30 minutes, are 18.6336; 16.0550; and 15.5246 mg/100g respectively.
Keywords : Bullet tuna, histamine, spectrophotometry, vinegar

## PENDAHULUAN
Potensi  lestari  perikanan  laut  Indonesia diperkirakan 6,4 juta ton per tahun yang tersebar di  seluruh  wilayah  perairan  Indonesia  dan  ZEE (Zona  Ekonomi  Eksklusif)  dengan  jumlah tangkapan  yang  diperbolehkan  sebesar  5,12  juta ton  per tahun  atau  sekitar  80  persen dari potensi lestari. Produksi perikanan tangkap dari penangkapan  ikan  di  laut  dan  di perairan  umum pada tahun 2006 masing-masing sekitar 4.468.010  ton  dan  301.150  ton  (Ditjen Perikanan  Tangkap  2007).  Salah  satu  produk perikanan  tangkap  unggulan  Indonesia  adalah ikan  komu.  Ikan  komu  merupakan    salah  satu komoditas  perikanan  Indonesia  yang  potensial, terbesar kedua setelah udang (DKP, 2005).
Ikan    komu    tersebar    di    perairan Kalimantan,    Sumatera,    pantai    India,  Filipina dan  sebelah  selatan  Australia,  sebelah  barat Afrika  Barat,  Jepang,  sebelah  barat  Hawai  dan perairan  pantai  Pasifik-Amerika.  Ikan  komu berkelompok  besar  bersifat  karnivora,  jenis makanannya adalah stomapoda, decapoda, cepapoda,  ikan  kecil,  selain  itu  ikan  komu
merupakan  ikan  perenang  cepat  serta  akan ditangkap  pada  saat  gelombang  dan  angin sedang.  Ikan  komu  ini  hidup  di  daerah  pantai, lepas  pantai  perairan  Indonesia  yang  daerah penyebarannya  hampir  sama  dengan  ikan  cakalang yaitu  perairan  barat  Sumatera,  selatan  Jawa, utara  Sulawesi,  laut  Banda  dan  utara  Irian  Jaya (Wudianto, dkk., 2007).
Ikan  merupakan  bahan pangan  yang  mudah mengalami  kerusakan  biologis  oleh  enzim  atau mikroorganisme pembusuk, sehingga memerlukan  penanganan  yang  khusus  untuk mempertahankan  mutunya.  Proses  kerusakan ikan  berlangsung  lebih    cepat    di  daerah  tropis karena  suhu    dan  kelembaban  harian    yang tinggi.  Proses  kemunduran  mutu  tersebut  makin dipercepat  dengan  cara  penanganan  atau penangkapan  yang  kurang  baik,  fasilitas  sanitasi yang  tidak  memadai  serta  terbatasnya  sarana distribusi dan pemasaran.
Pada  ikan  yang  sudah  tidak  segar  lagi  dan menuju  proses  pembusukan,  biasanya  akan terbentuk  histamin.  Histamin  merupakan  salah satu  bahan  kimia  yang  bersifat  toksik  jika ditemukan  banyak  dalam  tubuh.  Senyawa  ini
juga  merupakan  suatu  amina  biogenik  yang diproduksi melalui proses dekarboksilase bakterial  dari  asam  amino    histidin,    dan kebanyakan  ditemukan  dalam  jumlah  besar pada ikan-ikan dari famili scombridae . Keracunan  histamin  biasanya  terjadi  setelah mengkonsumsi  ikan  yang  mengandung  histamin tinggi.  Gejala  keracunan  sangat    bervariasi    dan merupakan  gejala  alergis,  meliputi  gatal-gatal, diare, demam,  sakit  kepala,  dan  tekanan  darah turun  (Borade,  dkk.,  2007  ;  Shalaby,  1996; Suryanti, 2006 ; & Taylor, 1986).
Histamin  merupakan  salah  satu  anima biogenik  yang  diproduksi  pada  jaringan    ikan oleh  bakteri  dari  famili Enterobacteriaceae , seperti Morganella, Klebsiella, dan Hafnia yang menghasilkan  enzim  histidin decarboxylase . Bakteri  yang  secara  alami  terdapat  pada  insang dan  usus  ikan  akan  menyebar  ke  seluruh bagian tubuh  selama  proses  penanganan  (Sumner  dkk., 2004).
Kandungan    histamin    dapat    dijadikan indikasi    mutu    ikan    komu    dan  histamin  juga merupakan  indikator  standar  keamanan  pangan produk  ikan.  Hal  ini  disebabkan  kandungan histamin  dapat  menyebabkan  efek  keracunan. Keracunan  histamin  terjadi  di  seluruh  dunia dan  kemungkinan  pada  umumnya  disebabkan oleh    racun    yang    dihasilkan    pada    ikan. Jepang,    Amerika    Serikat    (USA),    dan  Inggris Raya  ( United  Kingdom, UK)  merupakan  negara dengan jumlah penduduk tertinggi yang menderita  keracunan  histamin  (Sumner  dkk., 2004).
Sebagai  akibat  dari  banyaknya  prevalensi keracunan  histamin  dan  tingkat  komsumsi produk  hewani  khususnya  ikan  yang  tinggi, maka pengawasan kualitas  pada pangan diantaranya kandungan histamin perlu mendapat    perhatian  serius  bahwa  perlunya upaya  untuk  menghambat  dan  menurunkan kandungan  senyawa  ini  dalam  produk  bahan pangan.  Beberapa  upaya  telah  dilakukan  di antaranya  ikan  direbus  terlebih  dahulu,  ikan diasapi,  ikan  direbus  dengan  penambahan garam.
Kandungan  histamin  dalam  ikan  juga  bisa ditentukan  berdasarkan  pemberian  asam  cuka. Pada konsentrasi asam asetat  yang rendah dalam waktu  penyimpanan  5  jam  kandungan  histamin dalam  ikan cenderung  lebih tinggi dibandingkan pada  konsentrasi  asam  cuka    yang    tinggi (Seumahu    dkk.,    2010).  Dalam  penelitian  ini
dilakukan  penentuan  kandungan  histamin  dalam daging  ikan  komu  yang  telah  direndam  dengan asam  cuka  dalam  variasi  konsentrasi  dan  waktu perendaman.  Penelitian  ini  bermanfaat  karena dapat dijadikan data ilmiah mengenai kandungan histamin  pada  ikan  komu  akibat  pengaruh  asam cuka  dan  sebagai  rujukan  data  serta  informasi dalam  pengembangan  produk  pangan  berbahan baku ikan.

## METODOLOGI

## Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  sampel  ikan  komu,  asam sulfanilat  (p.a.  Merck),  asam  klorida  (p.a. Merck),  natrium  nitrit  (p.a.  Merck),  natrium klorida  (p.a.  Merck),  natrium  sulfat  anhidrous (p.a.  Merck),  natrium  fosfat  monohidrat  (p.a. Merck),  natrium  karbonat  (p.a.  Merck),  n- butanol  (p.a.  Merck),  histamin  dihidroklorida (p.a. Merck), akuades, kertas saring whatman no. 42, asam cuka komersial merek Dixi.
Alat Peralatan dan instrumen yang akan digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  : seperangkat  alat  gelas  (Pyrex),  neraca  analitik, blender, pemanas listrik (Cimarec 2), refrigerator (LG), sentrifuge (Labofuge 200-Heraeus), spektrofotometer UV-Vis (UV-1700 Pharmaspec - Shimadzu).

## Prosedur Kerja Persiapan sampel
Ikan  komu  yang  telah  diambil  dari  tempat penjualan ikan dicuci bersih. Daging ikan bagian dorsal  (tanpa  kulit)  diambil  dari  bagian  tubuh ikan  komu  selanjutnya  diiris  dan  ditimbang sebanyak  5  g  setelah  itu  daging  ikan  komu tersebut  direndam  pada  larutan  asam  cuka  5%, 10%,  15%,  20%,  dan  25%  dengan  volume  30 mL  selama  10  menit  kemudian  dicuci  kembali dengan  akuades  sebanyak  30    mL.  Setelah diperoleh konsentrasi histamin terendah, konsentrasi
tersebut dipakai untuk menvariasikan  waktu  perendaman  selama  20 menit dan 30 menit.
Pembuatan pereaksi p-fenildiazonium sulfonat
Campuran  1,5  mL  asam  sulfanilat  0,9% (b/v)  dalam  HCl  pekat  dan  1,5  mL  NaNO2  5%
(b/v)  didinginkan dengan direndam dalam air  es selama  5  menit.  6  mL dari  larutan  NaNO2  5  % ditambahkan  dan  didiamkan  selama  5  menit. Kemudian,  pereaksi  disimpan  dalam  rendaman es  selama  15  menit.  Selanjutnya  didiamkan selama 12 jam dan siap digunakan.

## Pembuatan larutan standar histamin
Histamin  dihidroklorida  (165,5  mg,  BM  = 184  g/mol)  dilarutkan  dalam100  mL  akuades sampai mencapai konsentrasi 1000 ppm histamin  bebas.  Larutan  histamin  standar  1000 ppm  kemudian  diencerkan  dengan  akuades untuk memperoleh konsentrasi 5, 10,  20, 40, 60, 80, dan 100 ppm.

## Ekstraksi histamin
Irisan  tipis  daging   ikan  komu  ditimbang sebanyak    kurang    lebih    5    g.  Sampel dihomogenkan  dengan  20  mL  larutan  NaCl 0,85%  (b/v)  selama  2  menit  menggunakan blender.    Selanjutnya    dimasukkan    ke    dalam tabung    sentrifuge75  mL  dan  disentrifuge  pada 5300  rpm  selama  1  jam  pada  4°C.  Supernatan yang  terbentuk  dibuat  menjadi  25  mL  dengan larutan  NaCl  0,85%.  Ekstrak  digunakan  untuk analisis selanjutnya.
Dalam tabung  reaksi,  1  mL ekstrak diencerkan  menjadi  2 mL  dengan larutan  NaCl 0,85  %  dan  0,5  g  campuran  garam  (berisi  6,25 g  Na2SO4    anhidrat  yang    ditambahkan  1  g Na3PO4.H2O).  Tabung dikocok agar  tercampur secara  merata.  Kemudian  ditambahkan  2    mL n-butanol  dan  dikocok  sekuat  mungkin selama 1  menit  dan  didiamkan  selama  2  menit. Selanjutnya dikocok sedikit agar terjadi kerusakan  pada  gel  protein.  Tabung  kemudian dikocok  lagi  beberapa  menit  dan  disentrifuge pada  3100  rpm  untuk  10  menit.  Butanol  yang terletak  di  bagian  atas  (sekitar  1 mL) dipindahkan  ke  dalam  tabung  bersih  dan kering.  Selanjutnya  diuapkan  menjadi  benar- benar  kering.  Residu  dilarutkan  di  dalam  1  mL akuades  dan  kemudian  direaksikan  dengan pereaksi p-fenildiazonium sulfonat.

## Analisis secara spektrofotometri
Di  dalam  tabung  reaksi  yang  bersih  berisi 5  mL  larutan  Na2CO3    1,1%  ditambahkan perlahan-lahan  2  mL  pereaksi  p-fenildiazonium sulfonat  dan  dicampur.  Kemudian  ditambahkan 1  mL  larutan  residu  yang  diperoleh  dari  proses ekstraksi  ke  dalam  tabung.  Absorbansi  dari
warna  yang  dihasilkan  diukur  secepatnya setelah  5    menit    pada  panjang    gelombang 497,8    nm  menggunakan  akuades  sebagai blanko.  Konsentrasi  histamin  dalam  sampel diperoleh  dari  kurva  standar  untuk  pengukuran absorbansi  pada  497,8  nm  dengan  analisis regresi.

## Pembuatan kurva standar
Sebanyak 1  mL  larutan standar histamin (5, 10,  20,  40,  60,  80,  dan  100  ppm)  direaksikan dengan  pereaksi  p-fenildiazonium  sulfonat  dan diukur  absorbansinya  dengan  spektrofotometer UV-Vis  pada  panjang  gelombang  497,8  nm. Selanjutnya  dibuat  kurva  absorbansi  versus konsentrasi histamin.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisis Kualitatif Histamin
Analisis  kualitatif  kandungan  histamin ditentukan menggunakan pereaksi p-fenildiazonium  sulfonat  pada  metode  ini. Warna  yang  ditimbulkan  yang  mengindikasikan adanya  histamin,  yakni  timbulnya  warna  kuning muda  hingga  orange  yang  merata  dalam larutan.    Konsentrasi  histamin  yang  semakin tinggi  pada  sampel  akan  memperlihatkan intensitas warna yang lebih nyata (Gambar 1).
Intensitas  warna  yang  dihasilkan  reaksi antara  larutan  standar  histamin dengn  pereaksi p-fenildiazonium    sulfonat    dicatat    pada    6 konsentrasi  berbeda. Skala  warna  referensi  dari larutan  standar  ini  dengan  konsentrasi  berkisar antara  5-80  mg/L  dapat  digunakan  untuk pemeriksaan  secara  visual  terhadap  sampel.  Hal ini  memungkinkan  analisis  lebih  cepat  dan dapat  diterima,  serta  memungkinkan  ada  atau tidaknya penggunaan spektrofotometer. Intensitas  warna  yang  dihasilkan  pada  tiap konsentrasi  histamin  dalam  sampel  berbanding lurus  dengan  skala  warna  referensi  dan absorbansi  dari  histamin  standar  yang  diukur pada  panjang  gelombang  497,8  nm  pada konsentrasi yang sama.

## Analisis Kuantitatif Histamin
Analisis  kuantitatif  kandungan  histamin dalam  ikan  komu  ( Auxis  rochei )  dilakukan dengan  menggunakan  metode  kurva  kalibrasi. Kurva  kalibrasi  pada penentuan histamin dalam percobaan  ini  dibuat  dengan  cara  mengukur absorbans sederetan  larutan  standar  yang  yang
diketahui  konsentrasinya.  Dari  kurva  kalibrasi diperoleh  persamaan  regresi  kurva  standar yakni,  y  =  0,005x-0,046  dengan  koefisien determinasi R 2 =0,926.
Gambar 1 . Sederetan larutan standar komplex histamin dengan konsentrasi dari kiri ke kanan 80, 60, 40, 20, 10 dan 5 ppm
Hasil  analisis  kandungan  histamin  rata- rata  dalam  daging    ikan  komu  ( Auxis  rochei ) berdasarkan  variasi  konsentrasi  asam  cuka dengan metode spektrofotometri UV-Vis dirangkum pada Tabel 1.
Berdasarkan hasil penelitian dengan perlakuan  lamanya  waktu  sampel  10  menit  dan variasi  konsentrasi  asam  cuka  (pH  5),  maka konsentrasi  histamin  dalam  ikan  komu  yang ditemukan  berkisar  antara  18,6336-25,9099
mg/100g sampel. Konsentrasi tertinggi ditemukan  pada  sampel  ikan  komu  dengan konsentrasi  asam  cuka  5%.  Sementara  itu, konsentrasi  terendah  ditemukan  pada  sampel ikan komu konsentrasi asam cuka 25%.
Tabel 1.   Analisis   kandungan   histamin  ikan komu dalam waktu 10 menit Konsentrasi asam cuka (%) Konsentrasi Histamin (mg/100g) 0 28,0344 5 25,9099 10 20,0408 15 18,9671 20 18,7108 25 18,6336
Hasil  analisis  data  pengukuran  histamin secara  statistika  (Tabel  2)  menunjukkan  bahwa kandungan  histamin  dalam  daging  ikan  komu yang  telah  direndam  selama  10  menit  dalam larutan  asam  cuka  5%,  10%,  15%,  20%,  dan 25%  tidak  berpengaruh  nyata  (p>0,05)  dalam penghambatan  histamin  terhadap  daging  ikan komu mentah (kontrol).
Setelah didapat konsentrasi histamin terendah  pada  asam  cuka  25%,  selanjutnya dilakukan  penelitian  dengan  konsentrasi tersebut tetapi  menggunakan  variasi    waktu    10    menit,
Tabel 2. Hasil analisis statistika kandungan histamin ikan komu dalam waktu 10 menit
Perbandingan Tingkat signifikan ( p) Komu Kontrol Vs Komu, Asam Cuka 5% 0,981 Komu, Asam Cuka 10% 0,181 Komu, Asam Cuka 15% 0,105 Komu, Asam Cuka 20% 0,092 Komu, Asam Cuka 25% 0,088 Komu, Asam Cuka 5% Vs Komu, Asam Cuka 10% 0,454 Komu, Asam Cuka 15% 0,292 Komu, Asam Cuka 20% 0,260 Komu, Asam Cuka 25% 0,251 Komu, Asam Cuka 10% Vs Komu, Asam Cuka 15% 0,999 Komu, Asam Cuka 20% 0,998 Komu, Asam Cuka 25% 0,997 Komu, Asam Cuka 15% Vs Komu, Asam Cuka 20% 1,00 Komu, Asam Cuka 25% 1,00 Komu, Asam Cuka 20% Vs Komu, Asam Cuka 25% 1,00
20    menit,    dan    30    menit.    Hasil    analisis kandungan histamin  rata-rata  dalam daging  ikan komu  ( Auxis  rochei )  berdasarkan  variasi  waktu dengan metode spektrofotometri UV-Vis dirangkum pada Tabel 3.
Berdasarkan hasil penelitian dengan konsentrasi  asam  cuka  25%  dengan  variasi
waktu,  maka  konsentrasi  histamin  ikan  komu ditemukan  berkisar  antara  15,5246-18,6336 mg/100g sampel. Konsentrasi tertinggi ditemukan  pada  sampel  ikan  komu  dengan waktu rendaman 10 menit, sedangkan konsentrasi  terendah  ditemukan  pada  sampel ikan komu dengan waktu rendaman 30 menit.
Tabel 3. A nalisis kandungan histamin ikan komu dalam larutan asam cuka 25%
Waktu (Menit) Konsentrasi Histamin (mg/100g) 10 18,6336 20 16,0550 30 15,5246
Hasil  analisis  data  pengukuran  histamin secara  statistika  (Tabel  4)  menunjukkan  bahwa kandungan  histamin  dalam  daging  ikan  komu 25%  dengan  variasi    waktu    perendaman    20 menit   dan  30  menit   tidak   berpengaruh  nyata (p>0,05) dalam penghambatan histamin terhadap daging  ikan komu dengan waktu perendaman 10 menit.
Tabel 4. Hasil analisis statistika kandungan histamin ikan komu dalam larutan
asam cuka 25% Perbandingan Tingkat Signifikansi ( p) Perendaman 10 menit vs Perendaman 20 menit 0,220 Perendaman 30 menit 0,134 Perendaman 20 menit vs Perendaman 30 menit 0,921
Proses  pembentukan  histamin  pada  ikan sangat  ditentukan  oleh  aktivitas  enzim  histidin dekarboksilase  yang  dihasilkan  oleh  bakteri pembentuk  histamin.  Suhu optimum bagi perkembangan bakteri tersebut adalah 20-30  °C.  Penyebab  utama  pembusukan  oleh bakteri  bersumber  dari  insang.  Sejalan  dengan hal  tersebut,  Seumahu  dkk  (2009)  juga melaporkan  kandungan  histamin  dalam  daging ikan  berdasarkan  pemberian  asam asetat  dengan konsentrasi  5%,  10%,  15%,  20%,  dan  25% menurun  dari  51,10  mg/100g  menjadi  42,29 mg/100g  sampel  selama  5 jam.
Semakin  tinggi  konsentrasi  asam  cuka  dan semakin  lama  perendaman, maka kadar  histamin
ikan  komu  semakin  rendah.  Hal  ini  disebabkan karena  kandungan  histamin  dalam  daging  ikan komu  ditentukan  berdasarkan  pemberian  asam cuka. Pemberian asam cuka dilakukan berdasarkan  pertimbangan  bahwa  asam  cuka yang  meresap  ke  dalam  daging  ikan  komu diduga  dapat  menghambat  reaksi  pembentukan histamin oleh enzim melalui proses dekarboksilase.  Selain  itu,  penambahan  asam cuka pada ikan juga akan menurunkan pH.
Semakin    lama    proses    perendaman, semakin    meningkat    pula    penetrasi  asam  cuka ke dalam daging ikan  yang direndam.  Akibatnya rasa  daging  ikan  yang  dihasilkan  terasa  getir asam  cukanya  dengan  bau  yang  sangat  tajam. Daya  hambat  larutan    asam    cuka    terhadap bakteri    dan    enzim    semakin    meningkat dengan  semakin  tingginya  konsentrasi  larutan tersebut,  namun  rasanya  semakin  tidak  disukai. Fungsi      asam      cuka      memberikan      pengawet dengan      menurunkan      pH  sehingga    semua bakteri    pembusuk    terhambat    atau    terhenti. Namun    semakin  rendah  pH,  maka  semakin asam pula  bau  dan  rasa  daging  ikan  komu  yang dihasilkan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh, maka  dapat  disimpulkan  bahwa  kandungan histamin  yang  terdapat  dalam daging  ikan  komu ( Auxis  rochei )  dengan  variasi  konsentrasi  asam cuka  5%,  10%,  15%,  20%,  dan  25%  dengan waktu  perendaman  10   menit   adalah  25,9099; 20,0408;  18,9671;    18,7108    dan  18,6336 mg/100g  sampel  ikan  komu. Kandungan histamin yang terdapat  dalam daging  ikan  komu dengan  variasi waktu  10,  20, dan  30  menit  pada konsentrasi asam cuka 25% berturut-turut adalah 18,6336; 16,0550; dan 15,5246  mg/100g sampel ikan  komu.   Semakin  tinggi  konsentrasi  asam cuka dan semakin    lama  perendaman, menghasilkan  kadar  histamin  ikan  komu  yang semakin  rendah,  walaupun  secara  statistik  tidak terdapat perbedaan yang signifikan.

## DAFTAR PUSTAKA
Alfred,  A.  1998. The  Effect  of  Delayed  Icing and  Gutting  on  The  Quality  of Freshwater Arctic  Charr ( Salvelinus  alpinus L.). Iceland:  United  Nation  University-Fisheries Training Programe.
Aninomous,  2007. Kecil,  Persentase  Ekspor Perikanan Lokal ke Cina . http://www.bisnisbali.com/2007/08/10/news/ agrohobi/bi.html. Diakses tanggal 14
Oktober 2010.
Aninomous,  2008, Ikan,  Gizi  Super  Komplit , http://id.shvoong.com/medicine-and- health/1826681-ikan-gizi-super-komplit/. Diakses   tanggal   12   Oktober 2010. Aninomous,    2011.    Auxis    rochei    rochei (Risso,1810), http://fishbase.org.cn. Diakses tanggal 8 Oktober 2011.
Bateman,  R.  C.,  Eldrige,  D.  B.,  Wade,  S., McCoy-Messer,  J.,  Jester,  E.  L.  E.,  dan Mowdy,  D.  E.  1994.  Copper  Chelation Assay  for  Histamine  in  tuna. J.  Food  Sci., 59(3):517-543.
Borade,  P.  S.,  Ballary,  C.  C.,  dan Lee,  D.  K.  C. 2007.  A  Fishy  Cause  Of  SuddenNear  Fatal Hypotension; Resuscitation, 72:158-160. Day,  R.  A.,  Jr,  dan  Underwood,  A.  L.,  1980, Analisis  Kimia  Kuantitatif  Edisi Keempat , penerjemah  Pudjaatmaka,  A.  H.,  Penerbit Erlangga : Jakarta.
Departemen  Kelautan  dan  Perikanan.  2005. Revitalisasi  Perikanan .  Jakarta:  Departemen Kelautan dan Perikanan Republik Indonesia.
Ditjen  Perikanan  Tangkap.  2007. Statistik Perikanan  Tangkap  Indonesia  2006 .Jakarta: Direktorat  Jenderal  Perikanan  Tangkap. Departemen Kelautan dan Perikanan.
Doerge,  R.  F.,  Wilson,  C.  O.,  dan  Gisvold,  O.
1977. Textbook  of  Organic  Medicinal  and Pharmaceutical  Chemistry .  7th  edition. Philadelphia : Lippincott.
Harborne,  J.  B.  1987. Metode  Fitokimia .
Terbitan  kedua.  Diterjemahkan  oleh  K.
Padmawinata & I. Soediro, ITB. Bandung.
Haryanti,  M.  2010.  Pengaruh  Konsentrasi
Larutan Tawas (Al2(SO4)3.14H2O)
Terhadap    Kandungan    Protein,    Nitrogen Terlarut dan Nitrogen Non Protein pada Ikan Tongkol. Dalam    http://digilib.unimus.ac.id. (1 November 2011)
Henrik  HH,  Dilson  M,  dan  Derrick  S.  2004. A
Guide Seafood Hygiene Management .
Eurofish:  the  Norwegian Ministry  of Fishers and  Coastae  Affair  and  the  Swiss  Import Promotion Programme.
Huss,  H.  H.  1994. Assurance  of  Sea  Food Quality . FAO  Fisheries  Technical Paper.
334 .Rome.  M-40  ISBN  92-5-103446-X,  169 pp.
Huss,  H.  H.  1995. Quality  and  Changes  in Fresh  Fish . FAO  Fisheries  Technical Paper. 348 .Rome. M-47 ISBN 92-5-103507-
5.
Junianto. 2003. Teknik Penanganan Ikan . Jakarta : Penebar Swadaya.
Keer, M., Paul, L. dan Sylvia, A. 2002. Effect of
Storage  Condition  on  Histamine  Formation in  Fresh  and  Canned  Tuna.  Commision  by Food Safety Unit . Dalam www.foodsafety.vic.gov.au.  (  5  Oktober 2011 )
Kose,   S.   dan   Hall,   G.   2000.   Modification of   A   Colorimetric   Method   For Histamine Analysis  in  Fish  Meal, Food  Res.  Int. ,  33, 839-845.
Krızek, M., Vacha, F.,    Vorlova, L.,
Lukasova,  J.  dan  Cupakova,  S.  B.  2004. Biogenic  Amines  In  Vacuum-Packed  and Non-Vacuum-Packed Flesh of Carp
(Cyprinus  carpio) Stored  At  Different Temperatures; Food  Chem., 88, 185-191.
Lakshmanan,  R., Shakila, R.  J. dan Jeyasekaran,
G.  2002.  Survival  of  Amine-  Forming Bacteria During The Ice Storage of Fish and Shrimp, Food Microbiology , 19, 617-625.
Martin RE, Flick GJ, Hebard CE dan  Ward  DR.
1982. Chemistry and Biochemistry of Marine Food Products. United States: AVI publishing company, Inc.
Mulja,  H.  M.  dan  Suharman.  1995. Analisis Instrumental .  Airlangga  University  Press  : Surabaya.
Nelson,  J.  S.  2006. The  Fishes  of  The  World . Jhon  Wiley  and  Sons  Inc  :  New York.
Patange,  S.B.,  Mukundan,  M.K.  dan  Kumar,  K. Ashok.  2005.  A  Simple  and  Rapid  Method for Colorimetric Determination of Histamine in Fish Flesh, Food Control , 16(5), 465-472. Peristiwady, T. 2006. Ikan-Ikan Laut Ekonomis  Penting  di  Indonesia.  Petunjuk Identifikasi . Penerbit LIPI Press. Jakarta. Setiyono, I.K. 2006. Factors Affecting Histamine  Level  in  Indonesian  Canned Albacore  Tuna  ( Thunnus  alalunga ). Tesis .
Departemen of  Marine  Biotechnology. University of Tromse. Norway.
Seumahu, C.A., Hattu, N. dan Fransina, E.G.
2009.  Analisis  Kandungan  Histamin sebagai Bioindikator Kualitas dan
Keamanan  Pangan  Produk  Perikanan pada Ikan        Jenis        Scombridae Berdasarkan        Modifikasi        Metode Spektrofotometri, Laporan  Penelitian Hibah Bersaing 2010 , Universitas Pattimura.
Shalaby,  A.  R.  1996.  Significance  of Biogenic  Amines  to  Food  Safety  and Human Health .  Food  Res.Int., 29(7): 675-690.
Suharna,    C.    2006.    Kajian    Sistem Manajemen    Mutu    pada    Pengolahan “Ikan  Jambal  Roti”  di  Pangandaran  – Kabupaten Ciamis. Tesis ,  Program Studi Manajemen Sumberdaya Pantai, Program Pascasarjana Universitas Diponegoro. Semarang.
Sumner  J,  Ross  T,  Ababouch  L.  2004.
Application  of  Risk  Assessment  in  the Fish Industry . Roma: FAO.
Suryanti,  Wikanta,  T.  dan  Indriati,  N.  2006.
Kandungan  Histamin  pada  Beberapa Produk  Hasil  Perikanan ,  Pusat  Riset Pengolahan  Produk  dan  Sosial  Ekonomi Departemen Kelautan dan Perikanan.
Taylor,  S.  L.  1986.  Histamine  Food Poisoning  :  Toxicology  and  Clinical Aspects. Critical  Review  in  Toxicology . 17: 91-128.
Tsai,  Y.H.,  Kung,  H.F.,  Lee,  T.M.,  Chen, H.C.,  Chou,  S.S.,  Wei,  C.I.  dan  Hwang, D.F.  2005.  Determination  of  Histamine in  Canned  Mackerel  Implicated  in  a Food  Borne  Poisoning, Food  Control , 16(7): 579-585.
Wicaksono,  Dhias.  2009.  Asesmen  Risiko Histamin  Selama  Proses  Pengolahan pada  Industri  Tuna  Loin. Skripsi. Program Studi Teknologi Hasil Perikanan,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor.
Winarno,  F.  G.  1983. Enzim  Pangan . Penerbit Gramedia. Jakarta.
Wudianto,  M.,  Agustinus.,  dan  P.  Anung. 2007. Memancing  di  Perairan  Tawar dan  di  Laut .  Penebar  Swadaya.  Jakarta. 125 hlm.
Yeh,  C.Y.,  Lin,  S.J.  dan  Hwang,  D.F. 2006.  Biogenic  Amines,  Histamine  and Label  of  Dressed  Fried  Fish  Meat Products  in  Taiwan, Food  Control, 17: 423–428.