## PRETREATMENT LIMBAH PENGOLAHAN KOPI UNTUK MENGHASILKAN BIOGAS PADA PROSES ANAEROBIK
Satriananda 1 *, Khairul Nasrizal 1 , Suryani Salim 1
1 Teknik Kimia, Politeknik Negeri Lhokseumawe, Jl. Banda Aceh-Medan Km. 280,3, Buketrata, Mesjid Punteut, Blang Mangat, Kota Lhokseumawe, Aceh 24301, Indonesia * Email: satria_pnl@gmail.com

## ABSTRAK
Pada  penelitian  ini  mempelajari  proses pretreatment limbah  pengolahan  kopi  untuk  menghasilkan biogas  pada  proses  anaerobik.  Limbah  cair  pengolahan  kopi  merupakan  limbah  cair  yang  berasal dari  air  buangan  pada  proses  pencucian  ( washing )  dan  pengupasan  ( pulping )  kopi.  Limbah  cair pengolahan kopi sendiri memiliki kandungan senyawa organik  yang tinggi sehingga cocok untuk dikonversi  menjadi  biogas.  Konversi  limbah  cair  kopi  menjadi  biogas  dilakukan  dengan menambahkan  kotoran  sapi  dan  kulit  kopi  sebagai  substrat  dengan  variasi  berat  bioarang  kulit tanduk terdiri dari: 0; 5; 10; 15; 20 gram. Lama fermentasi untuk setiap perlakuan adalah 30 hari. Sebelum  dilakukan  fermentasi,  kulit  kopi  terlebih  dahulu  dilakukan pretreatment menggunakan NaOH  8%  dan  aquades  untuk  menghilangkan  lignin  pada  kulit  kopi  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  pada  proses  anaerobik.  Variabel  yang  diukur  meliputi Chemical  Oxygen Demand (COD), Total Solids (TS), Volume Biogas, dan pH.  Dari hasil penelitian diperoleh nilai terbaik  pada digester dengan pretreatment NaOH  8%  menggunakan  bioarang  kulit  tanduk  kopi sebanyak  15  gram.  Nilai  COD  awal  dan  akhir  yaitu  sebesar  7.200  mg/L  O 2 dan  1.800  mg/L  O 2 dengan  persentase  penyisihan  senyawa  organik  sebesar  75%, Total  Solid awal  dan  akhir  sebesar 10.940 mg/L dan 14.540 mg/L, Volume biogas 5.200 mL, derajat keasaman (pH) awal dan akhir sebesar  7,4  dan  5,7.    Perlakuan  awal  dengan pretreatment dan  penambahan  bioarang mempengaruhi volume biogas yang dihasilkan.
Kata kunci : Aquades, Bioarang, Biogas, NaOH, Pretreatment

## ABSTRACT
In this research, we study the pretreatment process of coffee processing waste to produce biogas in an anaerobic process. Coffee processing liquid waste is liquid waste that comes from waste water in  the  washing  and  pulping  process  of  coffee.  Coffee  processing  liquid  waste  itself  has  a  high content  of  organic  compounds,  making  it  suitable  for  conversion  into  biogas.  The  conversion  of coffee liquid  waste  into  biogas  is  carried  out  by  adding  cow  dung  and  coffee  skin  as  a  substrate with  variations  in  the  weight  of  horn  husk  biochar  consisting  of:  0;  5;  10;  15;  20  grams.  The fermentation  time  for  each  treatment  was  30  days.  Prior  to  fermentation,  coffee  husks  were pretreated  using  8%  NaOH  and  aquades  to  remove  lignin  from  coffee  husks  that  could  inhibit bacterial  growth  in  the  anaerobic  process.  The  variables  measured  included  Chemical  Oxygen Demand (COD), Total Solids (TS), Biogas Volume, and pH. From the results of the study, the best value was obtained in the digester with 8% NaOH pretreatment using coffee horn skin biochar as much as 15 grams. The initial and final COD values are 7,200 mg/L O2 and 1,800 mg/L O2 with a percentage  of  organic  compound  removal  of  75%,  the  initial  and  final  Total  Solids  are  10,940 mg/L  and  14,540  mg/L,  biogas  volume  5,200  mL,  acidity  degree  (pH)  initial  and final  were  7.4 and 5.7, respectively. Pretreatment with pretreatment and addition of charcoal affects the  volume of biogas produced.
Keywords : Aquades, Biochar, Biogas, NaOH, Pretreatment

## PENDAHULUAN
Ketahanan  energi  merupakan  persoalan krusial  yang  sedang  dihadapi  dunia  saat  ini, termasuk di Indonesia yang sekarang dihadapkan dengan tantangan semakin menurunnya  cadangan  energi  fosil  namun belum  dapat  diimbangi  dengan  penemuan cadangan  energi  baru,  sementara  kebutuhan energi  fosil  seperti  minyak  dan  gas  dari  tahun ke tahun semakin meningkat. Padahal, peningkatan  ketergantungan  terhadap  sumber energi  fosil  dapat  menjadi  masalah  besar karena  ketersediannya  terus  berkurang  dan sifatnya tidak dapat diperbaharui (Elsayed dkk, 2020).
Indonesia  memiliki  potensi  sumber  energi alternatif  yang  melimpah,  terutama  untuk bahan  baku  biogas  seperti  kotoran  dari peternakan,  sampah  organik  dari  pasar  dan industri makanan serta dari limbah perkebunan (Sepehri dkk, 2019).
Salah  satu  limbah  pertanian  yang  berpotensi menghasilkan  energi  adalah  limbah  kulit  kopi. Limbah  kulit  kopi  banyak  terdapat  di Kabupaten  Aceh  Tengah.  Pada  tahun  2019, produksi  kopi  di  Aceh  Tengah  mencapai 34.608  ton  (BPS  Aceh  Tengah,  2020). Tingginya  produksi  kopi  berdampak  pada banyaknya  limbah  kulit  kopi  yang  dihasilkan. Secara  umum  limbah  kulit  kopi  hanya dibenamkan  dalam  tanah  untuk  menjadi kompos  dan  di  sebagian  daerah  limbah  kulit kopi dibiarkan sehingga dapat menjadi sumber penyebaran hama dan penyakit tanaman (Lima dkk, 2018).
Limbah kulit kopi termasuk limbah biomassa yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  sumber energi terbarukan. Limbah kulit kopi mengandung selulosa 63%, hemiselulosa 2,3%, lignin  17%,  protein  11,5%,  tanin  1,8  -  8,56% dan  pektin  6,5%  (Saini  dkk,  2015).  Namun, keberadaan  kandungan  zat  kimia  beracun seperti  tanin,  kafein,  dan  polifenol  menjadikan permasalahan yang dapat menghambat produksi  biogas  yang  diinginkan  (Karimi  dan Taherzadeh, 2016).
Untuk  menghilangkan  zat  kimia  beracun tersebut,  dapat  dilakukan  dengan  beberapa
pretreatment,  baik  secara  fisika,  kimia, kombinasi  fisika-kimia  dan  secara  biologi (Abraham  dkk,  2020).  Yanwen  Xue  dkk (2019),  telah  melakukan  penelitian  pembuatan biogas  dari  miskantus  dengan  melakukan pretreatment secara kimia menggunakan NaOH untuk  menghilangkan  kadar  lignin.  Selain  itu, Dahunsi  dkk  (2019),  melakukan  pretreatment secara  mekanik  (size  reduction)  terhadap rumput  gajah,  bunga  matahari  meksiko  dan rumput  siam  untuk  meningkatkan  produksi metana. Zhang dkk (2020), melakukan pretreatment  dengan  penambahan  bioarang untuk meningkatkan stabilitas proses anaerobik dan produksi gas metana.
Kulit kopi mengandung beberapa komponen, antara  lain  selulosa  (63%),  lignin  (17%), protein  (11.5%),  hemiselulosa  (2.3%),  tannin (1.8-8.56%),  kafein  (1.6%)  dan  komponen organik  lainnya.  Jika  dilihat  komposisi  kulit kopi,  maka  sangat  memungkinkan  untuk dimanfaatkan  sebagai  bahan  baku  pembuatan biogas. Tetapi, ada beberapa zat inhibitor yang dapat  menghambat  produksi  biogas,  seperti kafein,  tannin  dan  polifenol  (Mustafa  dkk, 2016).  Sehingga,  perlu  dilakukan  pretreatment pada  kulit  kopi  agar  tidak  mengganggu  saat produksi biogas.
Pada  penelitian  ini  dilakukan  pengolahan limbah  kulit  kopi  yang  dicampur  dengan limbah  cair  pengolahan  kopi  sebagai  substrat dengan  menambahkan  kotoran  sapi  sebagai inokulan  serta  penambahan  bioarang  berbahan dasar bioarang kulit tanduk kopi yang berguna untuk  meningkatkan  produksi  biometana. Proses  pretreatment  dilakukan  menggunakan NaOH  8%  dan  aquades  untuk  mengurangi kandungan zat-zat kimia yang dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri  di  dalam reaktor.

## METODE PENELITIAN

## A.  Alat yang digunakan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini yaitu  digester  anaerobik,  pipet  volume,  pipet ukur,  cawan  porselin,  ball  pipet,  labu  ukur, oven,  neraca  analitik,  desikator,  furnace,  pH meter, buret, tabung COD, dan COD reaktor.

## B.  Bahan yang digunakan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini yaitu kulit kopi, kulit tanduk, limbah cair kopi, kotoran  sapi,  larutan  H2SO4,  larutan  FAS, NaOH  8%,  aquades,  kristal  Ag2SO4,  kristal Hg2SO4, indikator feroin, dan kristal K2Cr2O7.

## METODE PENELITIAN PROSEDUR PERCOBAAN

## A.  Persiapan bahan baku
Pada  penelitian  ini  menggunakan  bahan  baku dari  kulit  kopi,  kulit  tanduk,  dan  limbah  cair kopi  yang  diambil  dari  limbah  industri  CV. Nutrisi  Aceh,  Kabupaten  Aceh  Tengah  dan untuk  inokulan  kotoran  sapi  didapatkan  dari peternakan sekitar Kota Lhokseumawe.

## B.  Pembuatan Biogas Persiapan substrat
Persiapan  substrat  dimulai  dari  proses pengecilan  dan  penyeragaman  ukuran  kulit kopi. Sedangkan untuk pretreatment pada kulit kopi  dilakukan  menggunakan  NaOH  8%  dan aquades.

## Pengecilan ukuran
Pengecilan  ukuran  kulit  kopi  yang  sudah  di treatment  mengunakan  crusher  dan  disaring menggunakan ayakan ukuran 35 mesh.
Pretreatment  limbah  kulit  kopi  dilakukan dengan dua variasi:
•  Pretreatment kulit kopi menggunakan proses kimia dengan bantuan NaOH 8%.
Pretreatmentnya dilakukan dengan cara perendaman  kulit  kopi  dengan  larutan  NaOH 8% dalam wadah tertutup.
•  Pretreatment kulit kopi menggunakan proses fisika dengan bantuan aquades. Pretreatmentnya dilakukan dengan cara perendaman  kulit  kopi  dengan  aquades  panas dalam wadah.

## Persiapan bioarang
Bioarang  yang  digunakan  yaitu  kulit  tanduk dari buah kopi yang diarangkan dengan furnace selama 1 jam pada suhu 350 °C

## Pencampuran bahan didalam digester
Kulit  kopi  (KK),  limbah  cair  kopi  (LC), Kotoran  Sapi  (KS),  dan  juga  bioarang  kulit tanduk  (BKT)  dicampurkan  dalam  digester sesuai variabel yang ditentukan.
Melakukan  proses  fermentasi  selama  30 hari.
Melakukan  pengecekan  TS,  COD,  dan  pH awal dan akhir.

## PROSEDUR PENGUJIAN Total Solid  (Standar Methods 2540 B)
Persiapan  cawan  evaporasi  –  diamkan pada  suhu  103⁰C  hingga  105⁰C  selama  1  jam dalam  oven.  Dinginkan  dan  simpan  peralatan yang  sudah  kering  dalam  desikator.  Timbang setiap piring dan kaca arloji sebelum digunakan (catat  berat  gabungan  sebagai  "  berat W_cawan").
Persiapan sampel Jika sampel mengandung cukup  uap  air  untuk  mengalir  dengan  mudah, aduk  untuk  menghomogenkan,  tempatkan  25 sampai  50  g  sampel  alikuot  pada  piring penguapan.  Jika  sampel  akan  dianalisis  dalam rangkap  dua,  massa  kedua  alikuot  tidak  boleh berbeda  lebih  dari  10%.  Tutupi  setiap  sampel dengan kaca arloji, dan timbang hingga 0,01 g terdekat  (catat  berat  sebagai  "  W_sampel"). Sebarkan setiap sampel sehingga merata di atas piring  penguapan.  Uapkan  sampel  hingga kering pada penangas uap.
Keringkan  sampel  pada  103⁰C  hingga 105⁰C  selama  12  jam,  minimum,  dinginkan untuk  menyeimbangkan  suhu  dalam  desikator individu  yang  berisi  desikator  segar,  dan timbang.
Panaskan  residu  selama  1  jam,  dinginkan hingga  suhu  seimbang  dalam  desikator,  dan timbang. Ulangi prosedur pemanasan, pendinginan,  pengeringan,  dan  penimbangan ini  hingga  beratnya  berubah  kurang  dari  4% atau 50 mg, mana yang lebih kecil. Catat berat akhir sebagai "W total ".
Melakukan  perhitungan  Total  Solids  (TS) dengan rumus :
TS  =
x 1000
Di mana:
= Berat cawan (mg) = Volume sampel (ml)
= Berat residu kering dan

## cawan (mg)
Chemical  Oxygen  Demand  (COD)  (Standar Methods 5220 C)
 Siapkan  sampel  dan  diencerkan  jika sampel pekat.
 Pipet  sampel  sebanyak  2,5  ml  kedalam tabung Chemical Oxygen Demand (COD)
 Tambahkan larutan dikromat sebanyak 1,5 ml kedalam sampel tabung COD
 Tambahkan  larutan  digesti  sebanyak  3,5 ml  kedalam  tabung  COD,  tutup  kemudian homogenkan.
 Setelah  homogen,  Panaskan  tabung  COD berisi  sampel  dengan  menggunakan  alat COD  reaktor  dengan  suhu  150⁰C  selam  2 jam
 Dinginkan, kemudian titrasi dengan larutan FAS  (Fero  Amonium  Sulfat)  0,05  M ditambah  indikator  Feroin  sebanyak  2 tetes,  sampai  terjadi  perubahan  warna  dari hijau – biru menjadi coklat – kemerahan
 Catat volume FAS yang terpakai.
Derajat  keasaman  (pH)  (SNI  06-6989.11- 2019)
 Lakukan  Kalibrasi  alat  pH  sebelum menganalisa  sampel  dengan  menggunakan larutan standar penyangga pH
 Untuk  sampel  yang  bersuhu  tinggi, sesuaikan hingga sampai suhu kamar
 Keringkan  dan  bilas  elektroda  alat  pH meter dengan air suling
 Bilas  elektroda  dengan  sampel  yang  ingin di analisa
 Celupkan  elektroda  kedalam  sampel, sampai pH meter menunjukkan pembacaan yang tetap (konstan).

## Pengukuran Biogas
Pengukuran dilakukan dengan cara volume gas  yang  terbentuk  tiap  harinya  akan  diukur dengan menghitung volume gas yang ditampung  pada  gelas  tersebut  dimasukkan  ke dalam  bak  penuh  air  dengan  posisi  terbalik.
Jumlah air yang keluar dari gelas ukur tersebut diukur  volumenya  dengan  asumsi  bahwa volume  air  yang  keluar  sama  dengan  volume gas yang ada pada gelas ukur tersebut.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini dilaksanakan selama 4 bulan di Laboratorium  Pengolahan  Minyak  dan  Gas serta  Laboratorium  Pengolahan  Air  dan Limbah  Jurusan  Teknik  Kimia  Politeknik Negeri Lhokseumawe.
Proses  produksi  biogas  dilakukan  secara anaerobik  menggunakan  substrat  kulit  kopi (KK),  Limbah  cair  kopi  (LK),  bioarang  kulit tanduk  kopi  (BKT)  dengan  mikroorganisme berasal dari kotoran sapi.
Pada  penelitian  ini  dilakukan  dua  perlakuan awal  terhadap  kulit  kopi  yaitu  pretreatment NaOH  8%  dan  pretreatment  aquades.  Proses pembuatan  bioarang  kulit  tanduk  kopi  melalui furnace  pada  suhu  350°C  selama  1  jam pembakaran  dengan  ukuran  bioarang  ±  0,01 cm.  Perlakuan  awal  pada  kulit  kopi  adalah pengecilan  ukuran  substrat  dengan  tujuan bakteri  metagenosis  dapat  lebih  mudah  dalam mendegradasi  kulit  kopi  yang  menjadi  sumber nutrisi makanan.
Penelitian  ini  dilakukan  selama  30  hari dengan  perlakuan  digester  sistem  batch  pada temperatur  mesofilik  yang  masing-masing berisi substrat kulit kopi  yang telah di lakukan pretreatment  dengan  NaOH  8%  dan  campuran limbah cair  kopi,  variasi  bioarang  kulit  tanduk kopi  serta  kotoran  sapi  (V1)  yang  kemudian akan  dibandingkan  dengan  kulit  kopi  yang telah di pretreatment aquades dengan campuran limbah cair  kopi,  variasi  bioarang  kulit  tanduk kopi dan kotoran sapi (V2). Adapun parameter yang diukur dalam penelitian ini adalah derajat keasaman  (pH),  Total  Solid  (TS),  Chemical Oxygen  Demand  (COD),  dan  pengukuran volume biogas.

## Data Hasil Penelitian
Dari  penelitian  ini  diperoleh  hasil  berupa data pengamatan, analisa dan pengolahan data. Data-data  hasil  penelitian  dan  perhitungan ditampilkan  pada  Tabel  4.1  dan  Tabel  4.2, sedangkan  data  hasil  pengukuran  langsung  di laboratorium ditampilkan pada Lampiran II.
Tabel  1  Data  hasil  penelitian  pada Digester (limbah  cair  perendaman  kopi  +  bioarang kulit  tanduk  kopi  +  kotoran  sapi  +  kulit kopi)  dengan  perlakuan  awal  ( Pretreatment Aquades )
Tabel  1  Data  hasil  penelitian  pada Digester
(limbah  cair  perendaman  kopi  +  bioarang kulit  tanduk  kopi  +  kotoran  sapi  +  kulit kopi)  dengan  perlakuan  awal  ( Pretreatment

## NaOH 8%)

## PEMBAHASAN
Limbah  cair  pengolahan  kopi  bersifat  asam dan  memiliki  kandungan  bahan  organik  yang tinggi,  sehingga  dapat  mengganggu  kehidupan organisme  air  jika  dibuang  langsung  ke  badan air.  Limbah  cair  pengolahan  kopi  memiliki nilai  kandungan  bahan  organik  COD  sebesar 5.000-35.000  mg/L.  Tingginya  kandungan bahan  organik  pada  limbah  cair  pengolahan kopi  dapat  dimanfaatkan  untuk  menghasilkan biogas  melalui  proses  anaerobik.  Proses anaerobik  akan  memecah  bahan  organik menjadi  senyawa  yang  relatif  lebih  aman  bagi lingkungan  dengan  penurunan  nilai  COD, BOD,  TSS  dan  TDS  serta  menghasilkan  gas metan  yang  dapat  digunakan  sebagai  sumber energi (Novita, 2018).
Pengaruh Variasi Berat Bioarang Terhadap Penyisihan  Senyawa  Organik  pada  Proses Anaerobik  dengan  Pretreatment  Aquades dan NaOH 8%
Tingginya  kandungan  senyawa  organik didalam  limbah  dapat  diukur  menggunakan parameter  Chemical  Oxygen  Demand  (COD), dimana  parameter  ini    menunjukkan  jumlah oksigen yang diperlukan agar kandungan bahan organik  dalam  limbah  cair  dapat  teroksidasi secara  kimia.  Penurunan  COD  terjadi  karena dekomposisi  senyawa  organik  terjadi  secara alamiah  dalam  limbah,  sehingga  nilai  COD mengalami  penurunan  selama  berlangsungnya proses pengolahan.
Proses dekomposisi bahan organik merupakan proses perombakan material organik  dari  senyawa  kompleks  menjadi senyawa  yang  lebih  sederhana  yang  dilakukan oleh sejumlah mikroorganisme. Proses perombakan  bahan  organik  juga  menyebabkan penyusutan volume bahan organik.
Perombakan  senyawa  organik  melalui  tahapan hidrolisis, asidifikasi (pengasaman), dan pembentukan metana.
Pada  tahapan  hidrolisis,  kelompok  bakteri hidrolitik  mendegrasikan  senyawa  organik kompleks  yang  berupa  polimer  menjadi monomernya  yang  berupa  senyawa  yang  tidak larut  dengan  berat  molekul  yang  lebih  ringan. Pada  tahap  asidifikasi,  bakteri  penghasil  asam mengubah  senyawa  rantai  pendek  hasil  proses pada  tahap  hidrolisis  menjadi  asam  asetat, hidrogen  (H2)  dan  karbondioksida.  Bakteri tersebut  merupakan  bakteri  anaerobik  yang dapat  tumbuh  dan  berkembang  pada  keadaan asam.
Menurut  (Deng  dkk,  2020),  pada  tahap  ini bakteri metanogenik mendekomposisikan senyawa  organik  dengan  berat  molekul  tinggi menjadi senyawa dengan berat molekul rendah. Bakteri  ini  menggunakan  hidrogen,  CO2  dan asam  asetat  membentuk  metana  dan  CO2. Namun, implementasinya relatif tidak memuaskan  karena  tingkat  hidrolisis  bahan organik  yang  rendah,  penghambatan  oleh  zat beracun  (misalnya  NH3  dan  H2S)  untuk metanogenesis,  bersama  dengan  akumulasi produk  antara  (misalnya  asam  lemak  volatil) (Zhou dkk., 2019).
Pada  penelitian  ini,  dilakukan  variasi  berat bioarang  dan  perbedaan  proses  melalui perlakuan  awal  pretreatment  aquades  dan pretreatment  NaOH  8%  terhadap  kulit  kopi. Pengaruh  variasi  berat  bioarang  terhadap penyisihan  senyawa  organik  pada  proses anaerobik dengan pretreatment aquades ditampilkan  pada  Gambar  4.1,  Sedangkan perlakuan  dengan  pretreatment  NaOH  8% ditampilkan pada Gambar 4.2
Gambar  1  Penyisihan  senyawa  organik  (COD) pada digester dengan pretreatment aquades
Pretreatment  awal  bahan  baku  digunakan untuk  meningkatkan  degradabilitas  berbagai substrat  menggunakan  aditif  anorganik  dan biologis untuk mendukung imobilisasi biomassa,  nutrisi,  pengurangan  inhibitor,  dan peningkatan  stabilitas  proses  (Indren  dkk., 2020).  Oleh  karena  itu,  berbagai  metode  pra- perlakuan  anaerobic  digestion,  seperti  aditif, biologis,  termal,  kimia  dan  kombinasi  dari metode-metode  ini,  telah  dikhususkan  untuk meningkatkan  efisiensi  dan  stabilitas  proses anaerobik (Xiao dkk., 2020).
Gambar  2  Penyisihan  senyawa  organik  (COD) pada digester dengan pretreatment NaOH 8%
Pada  gambar  1  dan  gambar  2  dapat  dilihat bahwa  pada  berbagai  variasi  bioarang  dengan pretreatment  aquades  dan  NaOH  8%,  terjadi penurunan  nilai  COD.  Penurunan  nilai  COD tertinggi  pada  perlakuan  pretreatment  aquades diperoleh  pada  variasi  berat  bioarang  15  gram yaitu dari 7.400 mg/L  O2 menjadi 4.200 mg/L O2 dengan penurunan nilai COD sebesar 3.200 mg/L O2. Sedangkan pada perlakuan pretreatment  NaOH  8%  diperoleh  pada  variasi berat  bioarang  15  gram  yaitu  dari  7.200  mg/L O2  menjadi  1.800  mg/L  O2  dengan  kadar penurunan COD sebesar 5.400 mg/L O2.
Pada  kedua  grafik  dapat  dilihat  bahwa  pada perlakuan  pretreatment  NaOH  8%  lebih  baik dari pada perlakuan pretreatment menggunakan aquades.  Hal  ini  disebabkan  oleh  terjadinya proses  delignifikasi  pada  kulit  kopi  yang menjadi substrat bagi mikroba.
Proses  delignifikasi  merupakan  tahap  awal yang  bertujuan  untuk  mengurangi  kadar  lignin di  dalam  bahan  berlignoselulosa.  Proses delignifikasi akan melarutkan kandungan lignin di dalam bahan sehingga mempermudah proses pemisahan  lignin  dengan  serat  selulosa. Delignifikasi akan membuka struktur lignoselulosa  agar  selulosa  menjadi  lebih mudah diakses oleh mikroba. Sehingga,  proses pendegradasian  senyawa  organik  lebih  mudah dilakukan  oleh  mikroorganisme  (Yanwen  Xue dkk.,  2019).  Selain  itu,  disebabkan  juga  oleh variasi  berat  bioarang.  Semakin  berat  variasi bioarang  yang  digunakan  maka  penurunan COD  lebih  baik.  Hal  ini  dikarenakan  bioarang menjadi agen penstabil dalam proses penguraian  senyawa  organik  secara  anaerobik yang  dapat  meningkatkan  kapasitas  buffering, menyerap  inhibitor  yang  dikandung  oleh substrat,  dan  meningkatkan  kinerja  operasi proses anaerobik (Fagbohungbe dkk., 2017). Pada  konsentrasi  bioarang  20  gram  terjadi peningkatan  nilai  COD  kembali  untuk  kedua perlakuan  pretreatment  baik  itu  NaOH  8% maupun aquades. kemungkinan hal ini disebabkan  oleh  bakteri  yang  mati  mengalami peristiwa lisis yaitu peristiwa dimana pecahnya sel  dan  keluarnya  cairan  sel  yang  akan mempengaruhi  kandungan  senyawa  organik dalam  substrat  dan  kemudian  terukur  sebagai COD  sehingga  nilai  COD  dalam  substrat menjadi naik (Qunpeng Cheng dkk., 2020).
Gambar  3  Pengaruh  variasi  bioarang  terhadap penyisihan  senyawa  organik  (COD)  pada digester  dengan  pretreatment  NaOH  8%  dan pretreatment aquades.
Dari  gambar  3  dapat  dilihat  bahwa  semakin besar  variasi  berat  bioarang,  maka    semakin menurun  nilai  COD.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  dengan  peningkatan  berat  bioarang dapat  membantu  lebih  banyak  penyerapan  zat- zat  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri,  sehingga  senyawa  organik  yang disisihkan  menjadi  semakin  banyak  pula. Peningkatan  penguraian  senyawa  organik ditunjukkan  dengan  semakin  besar  efisiensi penyisihan COD di dalam reaktor.
Efisiensi  penyisihan  COD  optimum  dicapai pada  variasi  berat  bioarang  15  gram,  dimana pada perlakuan pretreatment dengan NaOH 8% efisiensi  penyisihannya  75%,  sedangkan  pada pretreatment dengan aquades efisiensi penyisihan  COD  hanya  mencapai  43,24%. Penambahan  berat  bioarang  menjadi  20  gram terlihat  tidak  lagi  memberikan  pengaruh  yang signifikan  terhadap  peningkatan  efisiensi penyisihan COD.
Nilai  efisiensi  penyisihan  COD  merupakan kemampuan  bioreaktor  dalam  menurunkan nilai  COD  pada  setiap  waktu  proses.  Dimana terjadinya  proses  pendegradasian  substrat  oleh mikroba  dan  sumber  protein  dihidrolisis menjadi asam-asam amino, karbohidrat dihidrolisis  menjadi  gula-gula  sederhana,  dan lemak dihidrolisis menjadi asam-asam berantai pendek.  Pada  perlakuan  pretreatment  dengan NaOH  8%,  persentase  penyisihan  COD  lebih tinggi dibandingkan dengan persentase penyisihan COD pretreatment aquades. Hal ini disebabkan karena pada perlakuan pretreatment NaOH  terjadinya  proses  delignifikasi  bahan
berlignoselulosa  yang  tinggi  terhadap  kulit kopi  yang  berguna  sebagai  substrat  (nutrisi) bagi  mikroba  dalam  memproduksi  biogas (Amith Abrahama, 2020).
Pengaruh Variasi Berat Bioarang Terhadap Total  Solid  (TS)  pada  Proses  Anaerobik dengan  Pretreatment  Aquades  dan  NaOH 8%
Total solid merupakan jumlah materi padatan yang  terdapat  dalam  limbah.  Total  solid  dapat digunakan  sebagai  salah  satu  parameter  yang menunjukkan  telah  terjadi  proses  dekomposisi senyawa  organik  pada  proses  anaerobik  untuk membentuk  bakteri-bakteri  baru  dalam  bentuk lumpur  bakteri.    Pengaruh  variasi  berat bioarang terhadap Total Solid (TS) pada proses anaerobik  dengan  perlakuan  pretreatment aquades ditampilkan pada Gambar 4.
Gambar  4  Pengaruh  variasi  berat  bioarang terhadap  Total  Solid  (TS)  pada  proses anaerobik  dengan  perlakuan  pretreatment aquades
Gambar  4  memperlihatkan  bahwa  terjadi peningkatan  Total  Solid  di  dalam  reaktor. Peningkatan  Total  Solid  ini  disebabkan perombakan senyawa organik oleh mikroorganisme,  dimana  kandungan  senyawa organik  pada  lumpur  kotoran  sapi  dan  substrat kulit kopi sangat tinggi dan mengandung unsur protein, lemak, dan karbohidrat rantai panjang, karakteristik yang demikian membuat senyawa tersebut  mudah  dicerna  oleh  mikroorganisme untuk  membentuk  sel-sel  bakteri  baru  dalam bentuk lumpur, sehingga mengakibatkan kenaikan nilai Total Solids di dalam reaktor.
Gambar  5  Pengaruh  variasi  berat  bioarang terhadap  Total  Solid  (TS)  pada  proses anaerobik  dengan  perlakuan  pretreatment NaOH 8%
Pengaruh  variasi  berat  bioarang  terhadap Total Solid (TS) pada proses anaerobik dengan perlakuan  pretreatment  NaOH  8%  ditampilkan pada Gambar  5. Secara umum, pada perlakuan dengan  pretreatment  NaOH  8%,  juga  terjadi peningkatan  jumlah  Total  Solid  seperti  halnya pada  perlakuan  dengan  aquades.  Namun,  jika dibandingkan  nilai  Total  Solids  pada  kedua perlakuan  tersebut,  dapat  dilihat  bahwa peningkatan  nilai  Total  Solids  Pretreatment dengan  NaOH  8%  mengalami  peningkatan nilai Total Solids yang lebih besar.
Nilai  Total  Solids  tertinggi  pada  perlakuan pretreatment  aquades  mencapai  11.480  mg/L, sedangkan  pada  perlakuan  pretreatment NaOH 8%  nilai  Total  Solids  mencapai  15.160  mg/L. Pengaruh variasi berat bioarang terhadap Total Solid (TS) pada proses   anaerobik dengan perlakuan pretreatment NaOH 8% dan pretreatment  aquades  dapat  dilihat  pada Gambar 6.
Gambar  6  Pengaruh  variasi  berat  bioarang terhadap  Total  Solid  (TS)  pada  proses anaerobik  dengan  perlakuan  pretreatment NaOH 8% dan pretreatment    aquades
Dari  gambar  6  dimana  dapat  dilihat  bahwa pada  digester  dengan  pretreatment  NaOH  8% menunjukkan nilai total solid yang lebih tinggi dibandingkan  digester  dengan  pretreatment aquades.  Tingginya  kadar  total  solids  pada digester dengan pretreatment NaOH 8% terjadi karena  selama  proses  perendaman  dengan NaOH  membantu  menghilangkan  lignin  pada kulit kopi yang dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  pada  proses  produksi biogas.  Tingginya  nilai  total  solid  disebabkan oleh  terjadinya  degradasi  selama  waktu fermentasi  yang  meyebabkan  terbentuknya bakteri  baru  sehingga  kadar  total  solid  pada digester semakin meningkat.
Pengaruh Variasi Berat Bioarang Terhadap Pembentukan Biogas
pada Proses Anaerobik  dengan  Perlakuan  Pretreatment Aquades dan NaOH 8%
Hasil  analisis  produksi  biogas  dilakukan dalam bentuk pengukuran volume biogas  yang diamati  selama  30  hari  ditunjukkan  dalam Gambar 7.
Gambar  7  Pengaruh  variasi  berat  bioarang terhadap  pembentukan  biogas  selama  30  hari pada  proses    anaerobik  dengan  pretreatment aquades dan NaOH 8%
Berdasarkan Gambar 4.7 dapat dilihat bahwa semakin  besar  penambahan  berat  bioarang, maka semakin tinggi pula produksi biogas yang dihasilkan. Hal ini dikarenakan, bioarang dapat memfasilitasi  kelimpahan  komunitas  mikroba dan  mendegradasi  biomassa  lignoselulosa dalam proses anaerobik (Zhang dkk., 2020). Waktu  terbentuk  biogas  untuk  variasi  berat bioarang  dengan  pretreatment  NaOH  8%  lebih cepat dibandingkan dengan perlakuan pretreatment  aquades.  Untuk  variasi  berat
bioarang  dengan  konsentrasi  pretreatment NaOH  8%  biogas  pertama  kali  terbentuk  pada hari ke-3, sedangkan untuk perlakuan pretreatment  aquades  biogas  terbentuk  pada hari  ke-6.  Hal  tersebut  membuktikan  bahwa lignoselulosa  dalam  kulit  kopi  yang  sudah diberi  perlakuan  awal  (pretreatment)  oleh NaOH 8%, terpecah menjadi selulosa, hemiselulosa, dan lignin sehingga lebih mudah dikonversi  menjadi  biogas  oleh  mikroba sehingga  waktu  pembentukannya  lebih  cepat (Yanwen Xue dkk., 2019). Pemecahan  lignoselulosa  memiliki  potensi untuk meningkatkan
pertumbuhan
mikroorganisme  sehingga  dapat  menghasilkan biogas  lebih  baik,  namun  bahan  baku  dan kondisi operasi pretreatment memiliki kombinasi  tersendiri  terhadap  jumlah  bahan pretreatment  yang  digunakan.  Selulosa  yang dipisahkan  dari  lignoselulosa  dapat  dihasilkan lebih  banyak,  namun  produk  samping  garam natrium dari pretreatment lignoselulosa dengan bahan  NaOH  yang  berlebih  akan  menjadi inhibitor  pada  proses  anaerobik  sehingga produksi  gas  menjadi  rendah  (Liu  S  dkk, 2018).
Pengaruh Variasi Berat Bioarang Terhadap Derajat  Keasaman  (pH)  pada  Proses Anaerobik  dengan  Perlakuan  Pretreatment Aquades dan NaOH 8%
Dalam  penelitian  ini,  derajat  keasaman  (pH) menjadi  variabel  kontrol  terjadinya  proses fermentasi  bahan  organik  yang  dikonversi menjadi biogas dalam sistem proses  anaerobik. Derajat keasaman ini menjadi salah satu faktor penentu  keberhasilan  pembentukan  biogas. Derajat keasaman ini dimonitor setiap pengambilan sampel untuk mengetahui kondisi substrat dalam digester.
Faktor pH sangat berperan pada dekomposisi anaerob  karena  pada  rentang  pH  yang  tidak sesuai,  mikroba  tidak  dapat  tumbuh  dengan maksimum  dan  bahkan  dapat  menyebabkan kematian. Oleh karena itu, pengaturan pH perlu dilakukan  selama  proses  pembentukan  biogas agar  kesetimbangan  reaksi  antara  tahap asidogenik  dan  metanogenik  terjaga  dengan baik.
Derajat  keasaman  (pH)  harus  dijaga  pada kondisi  optimum  yaitu  antara  6,8-7,2.  Apabila pH  substrat  turun  maka  akan  menyebabkan proses  pengubah  substrat  menjadi  biogas terhambat  sehingga  mengakibatkan  penurunan kuantitas  biogas.  Nilai  pH  yang  terlalu  tinggi juga harus dihindari, karena akan menyebabkan produk  akhir  yang  dihasilkan  adalah  CO2 sebagai produk utama (Rusdiyono dkk, 2017).
Gambar  8  Pengaruh  variasi  berat  bioarang terhadap derajat keasaman (pH) pada proses anaerobik dengan perlakuan
pretreatment aquades
Pada  gambar  8  dapat  dilihat  bahwa  pH  awal digester dengan perlakuan pretreatment aquades  dengan  konsentrasi  bioarang  0,  5,  10, 15,  dan  20  berada  pada  rentang  7,0  –  7,1, namun setelah berjalannya proses dekomposisi anaerobik, maka penurunan pH menjadi sekitar 5,5.
Gambar  9  Pengaruh  variasi  berat  bioarang terhadap derajat keasaman (pH) pada proses  anaerobik  dengan  pretreatment  NaOH 8%
Pada  Gambar  9  dapat  dilihat  bahwa  pada perlakuan  dengan  pretreatment  NaOH  8%,  pH awal  digester  berada  pada  rentang  7,2  –  7,4. Nilai  ini  lebih  tinggi  dibandingkan  pada perlakuan dengan aquades. Hal ini memperlihatkan pengaruh NaOH  yang bersifat basa  mampu  untuk  menaikkan  pH  sistem. Meskipun demikian, seiring dengan meningkatnya  waktu,  maka  terjadi  juga penurunan  pH  di  dalam  sistem.  Kondisi  ini mengindikasikan bahwa dalam digester tersebut juga terjadi proses asidifikasi. Menurut Ni’mah,  dkk  (2014),  pH  substrat  awal  dengan rentang  netral  yaitu  antara  6,6-7,6  akan memberikan  peningkatan  laju  produksi  biogas lebih  baik  dibandingkan  dengan  perlakuan  pH lain.
Penurunan  derajat  keasaman  pada  penelitian ini,  kemungkinan  disebabkan  karena  tidak adanya  pengadukan  yang  memadai  di  dalam reaktor,  sehingga  bakteri-bakteri  cenderung menumpuk  di  bagian  bawah  reaktor.  Bakteri- bakteri  yang  ada  di  bagian  bawah  reaktor bukan  hanya  dari  kelompok  metanogenik  saja, tetapi  juga  kelompok  bakteri  hidrolisis, asidogenesis  dan  asetogenesis.  Kelompok- kelompok  bakteri  tersebut  mengkonsumsi senyawa  organik  dan  menghasilkan  produk- produk  berupa  asam-asam  organik  yang  dapat menurunkan pH sistem.
Menurut  Ramdiana  (2017)  pada  rentang  pH 6-6,7 bakteri metanogen yang mampu bertahan untuk  menghasilkan  gas  sangat  sedikit  karena kondisi  keasaman  substrat  dapat  membunuh bakteri,  sehingga  gas  metana  yang  dihasilkan dalam  jumlah  sedikit.  Mikroorganisme  yang bekerja pada tahap awal adalah mikroorganisme pada proses hidrolisis- asidogenesis  yang  menghasilkan  asam  volatil sehingga nilai pH menjadi turun (Ni’mah dkk, 2014).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  dapat  diambil  kesimpulan  sebagai berikut:
Perlakuan  awal  limbah  kulit  kopi  dengan pretreatment  NaOH  8%  memberikan  hasil yang lebih baik dibandingkan dengan pretreatment  menggunakan  aquades.  Hal  ini dapat  dilihat  dengan  penyisihan  senyawa organik yang lebih baik, pH relatif lebih tinggi,
Total Solids yang lebih besar dan produksi gas yang lebih banyak.
Semakin  banyak  jumlah  biorang  maka semakin  banyak  senyawa  organik  yang disisihkan,  Total  Solids  yang  lebih  besar,  pH yang  relatif  tinggi  dan  produksi  biogas  yang lebih banyak.

## DAFTAR PUSTAKA
[BSN]  Badan  Standarisasi  Nasional.  (2014).
Standar  Mutu  Biogas  Bertekanan  Tinggi (Patent No. SNI 8019-2014).
Abraham,  A.,  Mathew,  A.  K.,  Park,  H.,  Choi, O.,  Sindhu,  R.,  Parameswaran,  B.,  ...  & Sang,  B.  I.  (2020). Pretreatment strategies for enhanced biogas production  from lignocellulosic biomass. Bioresource Technology, 301, 122725.
Amin,  F.R.,  Khalid,  H.,  Zhang,  H.,  Rahman,
S.U.,  Zhang,  R.H.,  Liu,  G.Q.,  Chen,  C., 2017.
Pretreatment methods of lignocellulosic biomass for anaerobic digestion. Amb. Express 7, 72.
Badan Pusat Statistik Kabupaten Aceh Tengah. (2016-2020). Aceh Tengah Dalam  Angka 2016-2020 , Aceh
Baird,  R.  B.,  Eaton,  A.  D.,  &  Clesceri,  L.  S. (2012). Standard methods for the examination  of  water  and  wastewater (Vol.
10). E. W. Rice (Ed.). Washington,   DC: American public health association.
Beggio,  G.,  Schievano,  A.,  Bonato,  T., Hennebert,  P.,  Pivato,  A.,  2019.  Statistical analysis  for  the  quality  assessment  of digestates from separately collected   organic fraction of municipal solid waste (OFMSW) and agro-industrial   feedstock.
Should input  feedstock  to  anaerobic  digestion determine the legal   status  of  digestate?
Waste Manag. 87, 546 – 558.
Cao,  L.,  Zhang,  C.,  Chen,  H.,  Tsang,  D.C.W., Luo,  G.,  Zhang,  S.,  Chen,  J.,  2017. Hydrothermal  liquefaction  of  agricultural and forestry wastes: state-of-the-art   review and  future  prospects.  Bioresour.  Technol.

## 245,1184e1193.
https://doi.org/10.1016/j.biortech.2017.08.1
96 .
Çelebi,  E.  B.,  Aksoy,  A.,  &  Sanin,  F.  D. (2020).  Effects  of  anaerobic  digestion enhanced by ultrasound Pretreatment on the fuel properties of municipal   sludge. Environmental Science and Pollution Research, 27(14), 17350-17358.
Cheng, Q., Xu, C., Huang, W., Jiang, M., Yan, J., Fan, G., ... & Song, G. (2020). Improving anaerobic  digestion  of  piggery  wastewater by alleviating stress of  ammonia using biochar derived from rice straw. Environmental Technology  & Innovation, 19, 100948.
Chiappero, M.,  Norouzi,  O.,  Hu,  M.,
Demichelis,  F.,  Berruti,  F.,  Di  Maria,  F., Mašek,  O.,  &  Fiore,  S.  (2020).  Review  of biochar  role  as  additive  in  anaerobik digestion processes. Renewable and Sustainable  Energy  Reviews , 131 (June). https://doi.org/10.1016/j.rser.2020.110037
Cimon,  C.,  Kadota,  P.,  Eskicioglu,  C.,  2019. Effect of biochar and wood ash   amendment on  biochemical  methane  production  of wastewater sludge from a   temperature phase anaerobic digestion process.
Bioresour. Technol., 122440 https://doi.org/10.1016/j.biortech.2019.1224 40 .
Corro,  G.,  Paniagua,  L.,  Pal,  U.,  Bañuelos,  F., &  Rosas,  M.  (2013).  Generation  of  biogas from coffee-pulp and cow-dung co- digestion: Infrared studies of postcombustion  emissions. Energy Conversion and Management, 74, 471-481. Dahadha,  S.,  Amin,  Z.,  Lakeh,  A.A.B.,
Elbeshbishy,  E.,  2017.  Evaluation  of different Pretreatment processes of lignocellulosic biomass for enhanced biomethane  production.  Energy  Fuels  31, 10335–10347.
Dahunsi, S.O., 2019. Mechanical Pretreatment of  lignocelluloses  for  enhanced  biogas production:  methane  yield  prediction  from biomass structural components.  Bioresour. Technol. 280, 18–26.
Deng, L., Liu, Y., & Wang, W. (2020). Biogas technology. In Biogas Technology . Registered company Springer Nature Singapore Pte Ltd. https://doi.org/10.1007/978-981-15-4940-3 Elsayed,  M.,  Ran,  Y.,  Ai,  P.,  Azab,  M., Mansour, A., Jin, K., Zhang, Y., Abomohra, A.E.-F.,2020.
Innovative integrated approach  of  biofuel  production  from agricultural  wastes  by  anaerobic  digestion and black soldier fly larvae.   J.Clean. Prod. 263,121495 https://doi.org/10.1016/j.jclepro.2020.12149 5 .
Fagbohungbe, M., Herbert, B., Hurst, L., Ibeto,
C., Li, H., Usmani, S., Semple, K.,   2017. The  challenges  of  anaerobic  digestion  and the role of biochar in  optimizing  anaerobic digestion. Waste. Manage. 61, 236–249.
Federation, W. E., & Aph Association. (2005).
Standard  methods  for  the  examination  of water  and  wastewater.  American  Pubic Health Association (APHA):   Washington, DC, USA, 2005, 21.
Feng, R., Zaidi, A.A., Zhang, K., Shi, Y., 2018. Optimization of microwave Pretreatment for  biogas  enhancement  through  anaerobic digestion of  microalgal  biomass.  Period. Polytech. Chem. Eng. 63, 65–72.
Greses,  S.,  Gaby,  J.C.,  Aguado,  D.,  Ferrer,  J.,
Seco,  A.,  Horn,  S.J.,  2017.  Microbial community characterization during
anaerobic  digestion  of Scenedesmus  spp.
under mesophilic and thermophilic conditions.  Algal  Res.  27,  121–130. https://doi.org/10.1016/j.algal.2017.09.002 .
Indren,  M.,  Birzer,  C.H.,  Kidd,  S.P.,  Hall,  T.,
Medwell, P.R., 2020. Effects of  biochar parent material and microbial pre-loading in
biochar-amended high- solids anaerobic digestion.  Bioresour.  Technol.  298,  122457 https://doi.org/10.1016/j.biortech.2019.1224 57 .
Iweka, S. C., Owuama, K. C., Chukwuneke, J. L., & Falowo, O. A. (2021).   Optimization of  biogas  yield  from  anaerobic  co-digestion of corn-chaff and   cow dung digestate: RSM  and  python  approach.  Heliyon,  7(11), e08255.
Kapoor, R.,  Ghosh, P., Tyagi,  B., Vijay,  V.K., Vijay,  V.,  Thakur,  I.S.,  Kamyab,  H., Nguyen,  D.D.,  Kumar,  A.,  2020.  Advances in biogas valorization and   utilization systems:  a  comprehensive  review.  J.  Clean.
Prod. 273, 123052 https://doi.org/10.1016/j.jclepro.2020.12305 2 . Karimi, K., Taherzadeh, M.J., 2016b. A critical review of analytical
methods in
Pretreatment of
lignocelluloses: composition,  imaging,  and  crystallinity. Bioresour. Technol. 200, 1008–1018.
Koupaie,  E.H.,  Dahadha,  S.,  BazyarLakeh, A.A.,  Azizi,  A.,  Elbeshbishy,  E.,  2019. Enzymatic Pretreatment of  lignocellulosic
biomass for enhanced biomethane production–  a  review.  J  Environ.  Manage. 233, 774–784.
Kumar,  A.K.,  Sharma,  S.,  2017.  Recent updates on different methods of Pretreatment of lignocellulosic feedstocks: a review. Bioresour. Bioprocess. 4, 7.
Lima,  D.R.S.,  Adarme,  O.F.H.,  Baêta,  B.E.L., Gurgel,  L.V.A.,  de  Aquino,  S.F.,2018. Influence of different thermal Pretreatment s and inoculum selection
on the biomethanation  of  sugarcane  bagasse  by solid-state anaerobic digestion: a   kinetic analysis. Ind. Crop. Prod. 111, 684–693.
Lin,  R.,  Cheng,  J.,  Ding,  L.,  Murphy,  J.D., 2018.  Improved  efficiency  of  anaerobic digestion through direct interspecies electron transfer at mesophilic and thermophilic  temperature  ranges.  Chem.
Eng. J. 350, 681–691. https://doi.org/10.1016/j.cej.2018.05.173 .
Luo,  T.,  Huang,  H.,  Mei,  Z.,  Shen,  F.,  Ge,  Y.,
Hu,  G.,  Meng,  X.,  2019.  Hydrothermal Pretreatment of  rice  straw  at  relatively lower  temperature  to  improve  biogas production  via  anaerobic  digestion.  Chin. Chem. Lett. 30, 1219–1223.
Millati,  R.,  Wikandari,  R.,  Ariyanto,  T.,  Putri, R.U., Taherzadeh, M.J., 2020. Pretreatment technologies  for  anaerobic  digestion  of lignocelluloses and toxic  feedstocks. Bioresour. Technol. 304, 122998.
Mustafa, A.M., Poulsen, T.G., Sheng, K., 2016. Fungal Pretreatment of rice straw  with Pleurotus  ostreatus  and  Trichoderma  reesei to enhance methane   production   under solidstate anaerobic digestion. Appl. Energy 180, 661–671.
Neshat,  S.A.,  Mohammadi,  M.,  Najafpour, G.D.,  Lahijani,  P.,  2017.  Anaerobic  co- digestion of animal manures and lignocellulosic residues as a potent approach for  sustainable  biogas  production.  Renew. Sustain. Energy Rev. 79, 308–322.
Ni’mah,  L.  2014.  Biogas  from  Solid  Waste  of Tofu Production and Cow Manure  Mixture: Composition  Effect. Chemica Volume  1, Nomor 1 ISSN :2355-  8776.
Pan,  J.,  Ma,  J.,  Liu,  X.,  Zhai,  L.,  Ouyang,  X., Liu, H., 2019a. Effects of different   types of  biochar  on  the  anaerobic  digestion  of chicken manure. Bioresour.  Technol. 275,
258–265. https://doi.org/10.1016/j.biortech.2018.12.0
68 .
Patinvoh, R.J., Osadolor, O.A., Chandolias, K., Horváth, I.S., Taherzadeh, M.J.,  2017.
Innovative Pretreatment strategies  for biogas production. Bioresour.  Technol.  224, 13–24.
Paudel,  S.R.,  Banjara,  S.P.,  Choi,  O.K.,  Park, K.Y.,  Kim,  Y.M.,  Lee,  J.W.,  2017. Pretreatment of  agricultural  biomass  for
anaerobic  digestion:  current  state  and challenges.  Bioresour.  Technol.  245,  1194– 1205.
Phuttaro,  C.,  Sawatdeenarunat,  C.,  Surendra, K.C.,  Boonsawang,  P.,  Chaiprapat,  S., Khanal,  S.K.,  2019.  Anaerobic  digestion  of hydrothermally-pretreated   lignocellulosic biomass: Influence of Pretreatment temperatures, inhibitors   and soluble organics  on  methane  yield.  Bioresour. Technol. 284, 128–138.
Ramdiana.  2017.  Pengaruh  Variasi  Komposisi pada Campuran Limbah Cair Aren   dan Kotoran  Sapi  Terhadap  Produksi  Biogas . Eksergi, 14(2) ISSN: 1410-394X.
Rodriguez,  C.,  Alaswad,  A.,  Benyounis,  K.Y., Olabi,  A.G.,  2017. Pretreatment techniques used  in  biogas  production  from  grass. Renew. Sustain. Energy   Rev.   68,  1193– 1204.
Romero-Güiza,  M.S.,  Vila,  J.,  Mata-Alvarez, J., Chimenos, J.M., Astals, S., 2016.  The role  of  additives  on  anaerobic  digestion:  a review. Renew. Sustain.   Energy  Rev.  58, 1486–1499.
Rusdiyono, A. P., Kirom, M. R., dan Qurthobi,
A. 2017. Perancangan Alat Ukur
Konsentrasi  Gas  Metana  dari  Anaerobic Baffled Reactor (Abr) Semi-  Kontinyu dengan Substrat Susu Basi . E-proceeding Of Engineering. Vol.4   No.1 ISSN  :  2355-
9365
Saif,  I.,  Salama, E.  S.,  Usman,  M.,  Lee,  D.  S., Malik,  K.,  Liu,  P.,  &  Li,  X.  (2021).
Improved digestibility and biogas production  from  lignocellulosic  biomass: Biochar  addition  and  microbial  response. Industrial Crops and Products, 171, 113851.
Saini,  J.K.,  Saini,  R.,  Tewari,  L.,  2015. Lignocellulosic agriculture wastes as biomass  feedstocks  for  second-generation biogas  production:  concepts  and  recent developments. 3 Biotech 5, 337–353.
Sepehri,  A.,  Sarrafzadeh,  M.H.,  Avateffazeli,
M., 2019. Interaction between   Chlorella vulgaris  and  nitrifying-enriched  activated sludge in the treatment of   wastewater with low C/N ratio. J. Clean. Prod. https://doi.org/10.1016/j.jclepro.2019.11916 4
Shrestha,  S.,  Fonoll,  X.,  Khanal,  S.K.,  Raskin, L., 2017. Biological strategies for  enhanced hydrolysis of lignocellulosic biomass during anaerobic digestion:  current status and future  perspectives.  Bioresour.  Technol. 245, 1245–1257.
Tabatabaei,  M.,  Karimi,  K.,  Kumar,  R., Horváth,  I.S.,  2015.  Renewable  Energy  and alternative  fuel  technologies.  Biomed.  Res. Int 245935 .
Taherdanak, M., Zilouei, H., Karimi, K., 2016. The  influence  of  dilute  sulfuric  acid Pretreatment on  biogas  production  form wheat plant. Int. J. Green Energy 13, 1129– 1134.
Travaini,  R.,  Martín-Juárez,  J.,  Lorenzo- Hernando,  A.,  Bolado-Rodríguez,  S.,  2016. Ozonolysis:  an  advantageous Pretreatment for lignocellulosic biomass  revisited.
Bioresour. Technol. 199, 2–12.
Tun,  M.M.,  Juchelková,  D.,  Raclavská,  H., Sassmanová,  V.,  2018.  Utilization  of biodegradable  wastes  as  a  clean  energy source in the developing countries: a  case study in Myanmar. Energies 11, 3183.
Wagner,  A.O.,  Lackner,  N.,  Mutschlechner, M., Prem, E.M., Markt, R.,  Illmer, P., 2018. Biological Pretreatment strategies for second-generation lignocellulosic  resources to  enhance  biogas  production.  Energies  11, 1797.
Wang,  S.,  Yuan,  R.,  Liu,  C.,  Zhou,  B.,  2020a. Effect of Fe2+ adding period on the   biogas production and microbial community distribution during the dry   anaerobic digestion  process.  Process.  Saf.  Environ. 136, 234–241.
Xiao, B., Tang, X., Yi,  H., Dong,  L.,  Han, Y.,
Liu, J., 2020. Comparison of two   advanced anaerobic  digestions  of  sewage  sludge  with high-temperature   thermal Pretreatment and low-temperature thermal-alkaline
Pretreatment .  Bioresour. Technol. 304,
122979.
Xue,  Y.,  Li,  Q.,  Gu,  Y.,  Yu,  H.,  Zhang,  Y.,  &
Zhou, X. (2020). Improving biodegradability  and  biogas  production  of miscanthus using a combination of hydrothermal  and  alkaline Pretreatment .
Industrial crops and products, 144, 111985.
Zhang,  J.,  Zhou,  H.,  Gu,  J.,  Huang,  F.,  Yang, W., Wang, S., Yuan, T., Liao, B.,   2020a. Effects of nano-Fe3O4-modified biochar on iron plaque formation and   Cd accumulation  in  rice  (Oryza  sativa  L.). Environ. Pollut. 260, 113970.
Zhang, M., & Wang, Y. (2020). Effects of  Fe- Mn-modified biochar addition on   anaerobic digestion  of  sewage  sludge:  biomethane production, heavy metal   speciation and performance stability.
Bioresource Technology, 313, 123695.
Zieliński, M., Kisielewska, M., Dębowski, M.,
Elbruda,  K.,  2019.  Effects  of  nutrients supplementation on enhanced biogas production  from  maize  silage  and  cattle slurry  mixture.  Water  Air  Soil  Pollut.  230, 117.