## Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan
HEPATOPROTEKTIF EKSTRAK KULIT DELIMA ( Punica Granatum L )

## PADA TIKUS YANG DIINDUKSI CCL 4
(HEPATOPROTECTIVE POMEGRANATE PEEL EXTRACT ( Punica Granatum L ) IN RATS WHICH INDUCED BY CCL 4 )
Fransiska Ambarukmi 1
1 Laboratorium Anatomi, Fakultas Kedokteran, Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi,
Jawa Barat, Indonesia
Email Korespondensi : ambarukmifransiska@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian  dilakukan  untuk  mengetahui  dosis  efektif  ekstrak  kulit  delima  terhadap  kerusakan  hati dengan indikator kadar Serum Glutamik Piruvat Transaminase (SGPT) dan malondialdehid (MDA) plasma  pada  tikus  jantan  yang  diinduksi  karbon  tetraklorida  (CCl 4 ).  Target  penelitian  ini  adalah dapat dibuktikannya efek penghambatan ekstrak kulit delima terhadap kerusakan hati tikus akibat induksi  CCl 4 serta  mendapatkan  dosis  optimal.  Penelitian  bersifat  laboratorik  dengan  rancangan acak lengkap, menggunakan sampel 36 ekor tikus dengan jumlah replikasi setiap kelompok adalah 4  ekor.  Objek  dikelompokkan  dalam  9  kelompok  yang  akan  membandingkan  efek  ekstrak  kulit delima mulai dari 100mg/KgBB hingga 600mg/KgBB dosis tunggal yang diberikan 3 jam sebelum tikus diinduksi CCL 4 peroral . Indikator penghambatan kerusakan hati ditinjau dari kadar SGPT dan MDA plasma. Analisis data menggunakan uji Kruskal Wallis dilanjutkan uji Mann-Whitney . Hasil penelitian  menunjukkan  kelompok  perlakuan  dengan  ekstrak  kulit  dlima  dosis  300  mg/kgBB hingga  600  mg/kgBB  memiliki  kadar  SGPT  dan  MDA  plasma  lebih  rendah  secara  bermakna (P<0,05)  dibandingkan  dengan  kontrol  positif  yang  diberi  CCl 4. Ekstrak  kulit  delima  dosis  500 mg/kgBB paling efektif menghambat peningkatan kadar SGPT, sedangkan dosis 400 mg/kgBB dan 500 mg/kgBB mampu menghambat peningkatan kadar MDA plasma dengan efektivitas yang sama (p>0,05).  Ekstrak  etanol  kulit  delima  menghambat  peningkatan  kadar  SGPT  dengan  dosis  paling efektif  500  mg/kgBB  dan  menghambat  kadar  MDA  plasma  dengan  dosis  paling  efektif  400 mg/kgBB.
Kata Kunci: karbon tetraklorida, kulit delima, malondialdehid, Serum Glutamik Piruvat Transaminase

## ABSTRACT
The study was conducted to determine the effective dose of pomegranate peel extract against liver damage by measuring SGPT and MDA plasma levels in male rats induced by CCl 4 . The target of this study is to prove the inhibitory effect of pomegranate peel extract on rat liver damage due to CCl4  induction  and  to  obtain  the  optimal  dose.  This  was  a  laboratory  study  with  a  completely randomized design, using a sample of 36 rats with the number of replications per group was 4 rats. The objects are grouped into 9 groups which will compare the effects of pomegranate peel extract
DOI DOI

## ARTIKEL PENELITIAN
from 100 mg/KgBW to 600 mg/KgBB single dose which given 3 hours before rats induced by CCl 4 orally.  Indicators  of  inhibition  of  liver  damage  in  terms  of  plasma  SGPT  and  MDA  levels.  Data analysis used the Kruskal Wallis test followed by the Mann-Whitney test. The results showed that the treatment group with a dose of 300 mg/KgBW to 600 mg/KgBW had significantly lower plasma levels  of  SGPT  and  MDA  (P  <0.05)  compared  to  the  positive  control  who  was  given  CCl 4 . Pomegranate  peel  extract  at  a  dose  of  500  mg/KbBW  was  the  most  effective  at  inhibiting  the increase in SGPT levels, while the doses of 400 mg/KgBW and 500 mg/KgBW were able to inhibit the  increase  in  plasma  MDA  levels  with  the  same  effectiveness  (p>0.05).  The  ethanol  extract  of pomegranate peel was able to inhibit the increase in SGPT levels with the most effective dose of 500 mg/KbBW and inhibit plasma MDA levels with the most effective dose of 400 mg/KgBW.
Keywords: carbon tetrachloride , malondialdehyde, pomegranate peel, Serum Glutamic Pyruvate Transaminase

## PENDAHULUAN
Delima ( Punica  granatum  L ) adalah tanaman  tua  yang  terdiri  dari  bunga,  akar, buah,  dan  daun,  asli  Asia  Tengah  dan terutama  dibudidayakan  di  Mediterania dan  California,  namun  sekarang  tersebar luas  hampir  di  seluruh  dunia.  Komposisi fitokimia  buah  delima  berlimpah  dengan senyawa flavonoid, ellagitannins, proanthocyanidins,  mineral,  vitamin,  lipid, dan  asam  organik  yang  menyajikan  nilai biologis  dan  kesehatan  yang  signifikan. Delima banyak dimanfaatkan dalam pengobatan karena dalam setiap komponen buahnya mengandung zat-zat yang diyakini  berkhasiat  bagi  kesehatan.  Kulit dan  bunganya  merupakan  astringen  kuat, dan  berkhasiat  menghentikan  perdarahan. Daging  buah  berkhasiat  sebagai  penyejuk, pereda demam, dan antitoksik. 1-4 Penelitian
Tjakradidjadja tahun 2011 menggambarkan  efek  buah  delima  dalam menghambat peningkatan
kadar malondialdehid  akibat  asap  rokok.  Ashous
et al tahun 2012 dan Agha et al tahun 2013 melaporkan  efek  hepatoprotektor  delima terhadap  kerusakan  hati  tikus.  Wei  et  al 2020  menunjukkan  efek  protektif  ekstrak kulit  delima  dalam  mencegah  fibrosis  hati akibat  induksi karbon  tetraklorida ( CCl 4) dengan  menghambat  jalur  p38MAPK- Nrf2. 4-8 Buah delima berkhasiat menghambat radikal bebas karena memiliki  kandungan  antioksidan  dalam konsentrasi  yang  cukup  tinggi  (11,33 mmol/100g).  Antioksidan  utama  yang terkandung  dalam  buah  delima  adalah golongan polifenol seperti alkaloid, flavonoid,  saponin,  dan  asam  organik. Kandylis et al pada tahun 2020 melaporkan delima memiliki kadar antioksidan  tertinggi  dibandingkan  buah- buahan lainnya. Gozlekci el al tahun 2011 menunjukkan  kadar  polifenol  tertinggi pada  buah  delima,  terkandung  dalam kulitnya. Genena et  al tahun  2017 membuktikan konsumsi jus  dan kulit  buah delima  secara  signifikan  meningkatkan
parameter  lipid  dan  aktivitas  enzim antioksidan  pada  tingkat  hiperlipidemia yang  menunjukkan  potensi  terapeutik penggunaan  buah  delima  untuk  mengatasi hiperlipidemia  dan  memodifikasi  risiko CVD. 1,4,9-10
Kandungan antioksidan delima mampu  menghambat  kerusakan  sel  akibat radikal  bebas.  Salah  satu  zat  kimia  yang dapat  bersifat  radikal  bebas  antara  lain karbon tetraklorida (CCl 4 ) yang menyebabkan  kerusakan  hati.  Kerusakan pada hati akibat CCl 4 terjadi melalui proses oksidasi  dan  dampak  yang  terjadi  tidak secara  langsung  disebabkan  oleh  molekul CCl 4 , melainkan oleh CCl 3 R (triklorkarbon radikal),  suatu  metabolit  toksik  reaktif ( reactive toxic metabolites ), yang merupakan hasil biotransfomasi CCl 4 yang dikatalisis  oleh  enzim  sitokrom  P-450. Sitokrom P-450 berperan pada metabolisme  obat-obatan  dalam  hati  yang dapat  menghasilkan  metabolit  reaktif oksigen  ( reactive  oxygen  metabolites) maupun  metabolit  reaktif  toksik  ( reactive toxic  metabolites )  yang  berlebihan.  CCL 3 R dapat  secara  langsung  berikatan  kovalen dengan  makromolekul  sel,  merusak  ikatan rangkap  asam  lemak  tak  jenuh  dengan mengikat  atom  hidrogen  pada  molekul fosfolipid membran sel yang menyebabkan dekomposisi  oksidatif  lemak,  kemudian bereaksi  dengan  oksigen  menghasilkan
radikal  peroksil.    Radikal  peroksil  ini bereaksi dengan rantai asam lemak lainnya membentuk  radikal  bebas  baru  dan  lipid peroksida  secara  berantai. 9,11-13 Selain kerusakan  struktur  membran,  terjadi  pula gangguan  fungsi  retikulum  endoplasma yang menyebabkan sintesis protein, aktivitas  enzim  di  dalamnya  seperti glukosa-6-fosfat  dan  sistem  P-450  dan kemampuan retikulum mengikat ion kalsium  menurun  tajam.  Kerusakan  pada retikulum endoplasma menyebabkan terjadi  timbunan  lemak  dalam  sel  hati  dan tahap  lanjut  terjadi  jejas  mitokondria  dan diikuti pembengkakan progresif sel  karena peningkatan  permeabilitas  membran  sel dan  sertai  influks  masif  kalsium  yang menyebabkan denaturasi protein dan kematian sel. 12,13 Sel hati (hepatosit) akan melepaskan  zat-zat  yang  terkandung  di dalamnya ke dalam darah apabila mengalami kerusakan.  Enzim  sitosol hepatosit  seperti Serum  Glutamic  Pyruvic Acid  Transaminase (SGPT)  akan  keluar, sehingga  terjadi  peningkatan  aktivitasnya dalam  darah.  Kadar  SGPT  tertinggi ditemukan  dalam    hubungannya  keadaan yang    menyebabkan    nekrosis  hati  yang luas. Selain itu, asam lemak tak jenuh pada membran  hepatosit  yang  terpapar  oleh radikal  bebas,  akan  mengalami  reaksi berantai    dan    pemecahan    (dekomposisi) sampai menjadi
malondialdehyde (MDA). 14-15 Dalam
keadaan normal, mitokondria secara efektif dapat  mengatasi  aktivitas  radikal  bebas
diantaranya melalui mekanisme antioksidan  endogen  yang  meliputi  GSH ( glutathione ) dan SOD ( superoxide dismutase ).  Namun  apabila  pertahanan antioksidan  ini  tidak  mampu  mencegah kerusakan akibat peningkatan pembentukan radikal bebas, maka diperlukan suplemen antioksidan.
Suplemen  antioksidan  dapat  menghambat kerusakan  hepatosit  akibat  efek  negatif radikal bebas. 12,
Delima  yang  merupakan  salah  satu tumbuhan  yang  mengandung  senyawa antioksidan dalam kadar yang cukup tinggi terbukti  mampu  menghambat  kerusakan hati akibat radikal bebas. Agha et al tahun 2013 menggambarkan kemampuan ekstrak kulit  delima  dalam  menghambat  kadar MDA  plasma  pada  tikus  yang  diinduksi oleh  pentaklorofenol  dengan  dosis  400 mg/kgBB  yang  dianggap  lebih  efektif dibandingkan dengan dosis 200 mg/kgBB. 8
Penelitian  dengan  dosis  yang  lebih  rendah dari  200  mg/kgBB  dan  lebih  tinggi  dari 400  mg/kgBB  belum  pernah  dilakukan, sehingga  perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  dengan  berbagai  variasi  dosis  untuk mendapatkan  dosis  paling  optimal  ekstrak kulit delima dalam menghambat kerusakan
hati,  dengan  menilai  kadar  SGPT  dan MDA plasma tikus yang diinduksi CCL 4 .

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  bersifat  eksperimental laboratorik  dengan  metode  komparatif, menggunakan  36  ekor  tikus  jantan  galur Wistar  usia  8-12  minggu  dengan  rerata berat  badan  150  –  200  gram,  yang  dibagi menjadi  9  kelompok,  masing-masing terdiri  dari  4  ekor  tikus.  Kelompok  1 merupakan  kelompok  kontrol  negatif, Kelompok 2 merupakan  kelompok kontrol positif yang hanya mendapatkan 2 ml/kgBB  CCl 4 per  oral  dan  Kelompok  3 merupakan  kelompok  kontrol  positif  yang hanya diberikan ekstrak etanol kulit delima dosis  600  mg/KgBB  untuk  menilai  ada atau  tidaknya  efek  hepatotoksik  ekstrak etanol  kulit  delima  dengan  dosis  tertinggi dalam  penelitian  ini.  Kelompok  4  sampai Kelompok 6 merupakan kelompok perlakuan yang mendapat CCl4 2 ml/KgBB  per  oral  yang  diberikan  3  jam setelah  pemberian  ekstrak  etanol  kulit delima mulai dari dosis 100, 200, 300, 400, 500  dan  600  mg/KgBB.  Setelah  24  jam dilakukan pemeriksaan SGPT menggunakan metode fotometer dan MDA Plasma dengan metode TBARs. Data yang diperoleh  dari  hasil  pengukuran  kadar SGPT  dan  kadar malondialdehyde (MDA) plasma  diolah  menggunakan  uji Kruskal- Wallis dan dilanjutkan dengan post hoc uji
Mann-Whitney .  Protokol  penelitian  ini telah  mendapatkan  persetujuan  etik  dari Komisi Etik Universitas Padjadjaran Bandung.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Efek  ekstrak  etanol  kulit  delima terhadap kadar SGPT dan MDA tikus yang diinduksi CCl 4 tampak pada Tabel 1, yang menunjukkan  adanya  perbedaan  kadar SGPT  maupun  MDA  plasma  dari  masing- masing kelompok percobaan. Kadar SGPT maupun MDA plasma tertinggi ditunjukkan  pada  kelompok  2  yang  hanya diinduksi  CCl 4 .  Pemberian  ekstrak  etanol kulit  delima  dengan  dosis  tertinggi,  yaitu 600 mg/kgBB pada kelompok 3 menunjukkan hasil kadar SGPT dan MDA plasma  yang  tidak  jauh  berbeda  dengan Kelompok kontrol negatif. Hasil pengukuran SGPT  dan  MDA plasma tikus
pada  kelompok  yang  diberi  ekstrak  kulit delima  dosis  100  hingga  600  mg/kgBB menunjukkan  hasil  yang  lebih  rendah dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol positif yang mengindikasikan bahwa ekstrak  etanol  kulit  delima  memiliki kemampuan hepatoprotektor dari kerusakan  yang  diinduksi  CCl 4 sebagai radikal  bebas  yang  diidentifikasi  melalui penurunan kadar SGPT plasma.
Hasil uji Kruskal-Wallis yang tertera pada  Tabel  2,  menunjukkan  hasil  p<0,05 yang  berarti  sedikitnya  terdapat  dua kelompok  yang  memiliki  perbedaan  kadar SGPT dan MDA yang bermakna, sehingga analisis statistik dapat  dilanjutkan pada uji Mann-Whitney untuk  melihat  kemaknaan perbedaan hasil dari masing-masing kelompok  percobaan.  Hasil  uji Mann Whitney dinyatakan  memiliki  perbedaan yang signifikan jika nilai p≤0,05.
Tabel 1 Hasil rerata kadar SGPT dan MDA plasma tikus
Kelompok Rerata Kadar SGPT (IU/L) Rerata Kadar MDA (mg/L) Kelompok 1 71,00 ± 3,60 0,037± 0,006 Kelompok 2 294,00 ± 70,37 0,054±  0,009 Kelompok 3 68,00 ± 2,64 0,038± 0,001 Kelompok 4 265,67 ± 18,77 0,039± 0,006 Kelompok 5 245,67 ± 67,57 0,048± 0,006 Kelompok 6 164,00 ± 17,61 0,047± 0,009 Kelompok 7 126,33 ± 14,15 0,023± 0,003 Kelompok 8 101,00 ± 30,04 0,022± 0,002 Kelompok 9 202,00 ± 10,14 0,028± 0,004 Keterangan:
Kelompok 1: Makan dan minum ad libitum Kelompok 2: Kontrol Positif (CCl 4 ) 2 ml/kg B Kelompok 3: Ekstrak kulit delima 600 mg/kgBB Kelompok 4: Ekstrak kulit delima 100 mg/kgBB+CCl 4 2 ml/kg BB Kelompok 5: Ekstrak kulit delima 200 mg/kgBB+CCl 4 2 ml/kg BB Kelompok 6: Ekstrak kulit delima 300 mg/kgBB+CCl 4 2 ml/kg BB
Kelompok 7: Ekstrak kulit delima 400 mg/kgBB+CCl 4 2 ml/kg BB Kelompok 8: Ekstrak kulit delima 500 mg/kgBB+CCl 4 2 ml/kg BB Kelompok 9: Ekstrak kulit delima 600 mg/kgBB+CCl 4 2 ml/kg BB SGPT: Serum Glutamic Pyruvic Acid Transaminase
MDA: Malondialdehyde
Tabel 2 Hasil uji Kruskal-Wallis kadar SGPT plasma tikus Variable Rerata Nilai P SGPT 170,85 ± 26,10 0,002 MDA 0,04 ± 0,01 0.006 Keterangan: SGPT: Serum Glutamic Pyruvic Acid Transaminase
MDA: Malondialdehyde P value : nilai signifikansi uji Kruskal-Wallis
Berdasarkan  Tabel  3  hasil  uji Mann- Whitney menunjukkan  bahwa  rerata  kadar
SGPT pada kelompok 1 sebagai kontrol negatif (71,00±3,60) tidak berbeda bermakna  dengan  kelompok  3  (68,00  ± 2,64) dan kelompok 8 (101,00 ± 30,04). Ini berarti  pemberian  dosis  maksimal  ekstrak etanol  kulit  delima  sebesar  600  mg/KgBB tidak  menghasilkan  kadar  SGPT  yang berbeda  dengan  kelompok  kontrol  negatif. Pada  kelompok  perlakuan  yang  mendapat CCL4  peroral  dan  diberi  ekstrak  kulit delima  500  mg/KgBB  juga  memberikan hasil  kadar  SGPT  yang  tidak  berbeda dengan  kelompok  kontrol  negatif.  Hal  ini mengindikasikan bahwa dosis 500 mg/KgBB  mampu  mencegah  peningkatan kadar  SGPT  pada  tikus  yang  diinduksi CCl4,  ditunjukkan  dengan  kadar  SGPT yang  tidak  berbeda  dengan  kelompok kontrol negatif.
Kadar  SGPT  pada  kelompok  2  yang diinduksi  CCl 4 saja,  lebih  tinggi  secara
bermakna  (p≤0,05)  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  negatif  (71,00±3,60). Pajanan  CCl 4 menyebabkan  terjadinya proses  peroksidasi  lipid  melalui  metabolit reaktifnya yaitu CCl 3 − yang akan berikatan dengan  molekul  oksigen  membentuk CCl 3 OH − yang  kemudian  secara  cepat membentuk ikatan dengan asam lemak tak jenuh pada membran hepatosit membentuk peroksidasi  lipid  yang  berdampak  akhir pada lisis hepatosit, sehingga enzim SGPT yang  terdapat  dalam  sitoplasma  secara masif akan dilepaskan ke dalam plasma. 4,12
Agha et  al menunjukkan  bahwa  polifenol yang  terkandung  di  dalam  ekstrak  etanol kulit  delima  dapat  menghambat  proses peroksidasi  lipid  pada  membran  hepatosit tikus  yang  diinduksi  bahan  hepatotoksik sehingga  mencegah  lisis. 7 Kemampuan  ini dapat  terlihat  dengan  membandingkan kadar  SGPT  Kelompok  2  (294,00±70,37) dengan  kelompok  6,7,8  dan  9.  Jumlah kadar  SGPT  plasma  pada  Kelompok  6
(164,00±17,61), Kelompok 7 (126,33±14,15), Kelompok 8 (101,00±30,04) dan Kelompok 9
(202,00±10,14)  menunjukkan  kadar  SGPT plasma yang lebih rendah secara bermakna (p≤0,05)  dibandingkan  dengan  kelompok 2.  Polifenol  yang  terdapat  pada  ekstrak etanol  kulit  delima  dapat  membentuk ikatan  dengan  radikal  bebas  menghasilkan bentuk yang non radikal sehingga mencegah proses peroksidasi lipid. 4
Kadar SGPT pada Kelompok 4 dan 5 menunjukkan  kadar  SGPT  plasma  sebesar 265,67±18,77  dan  245,67±67,57  yang lebih rendah dibandingkan dengan kelompok kontrol positif, namun secara uji statistik  tidak  menunjukkan  perbedaan yang  bermakna  (p>0,05).  Hal  ini  diduga terjadi karena jumlah antioksidan polifenol dalam  dosis  tersebut  belum  mencapai kadar  yang  optimal  dalam  membentuk ikatan  dengan  CCl 3 − yang  mengakibatkan lisis  hepatosit.  Kadar  SGPT  Kelompok  6 berbeda  signifikan  dengan  Kelompok  7,  8 dan  9.  Kadar  SGPT  pada  pemberian ekstrak etanol kulit delima pada Kelompok 7 dan 8 menunjukkan perbedaan bermakna (p≤0,05)  dan  menunjukkan  hasil  yang lebih  rendah  dengan  Kelompok  6  yang artinya  pemberian  ekstrak  etanol  kulit delima  pada  dosis  400  dan  500  mg/kgBB memiliki  efek  mencegah  kenaikan  SGPT plasma yang lebih baik dibandingkan dosis
300  mg/kg  BB.  Kadar  SGPT  antara Kelompok  7  dan  8  ternyata  tidak menunjukkan perbedaan bermakna (p>0,05),  yang  berarti  dosis  400  dan  500 mg/kgBB  menunjukkan  kemampuan  yang hampir  sama  dalam  melindungi  hepatosit , namun  kadar  SGPT  pada  kelompok  dosis 500  mg/kgBB  tidak  memiliki  perbedaan bermakna dengan kelompok kontrol negatif  (p>0,05),  artinya  dosis  ini  mampu melindungi  hepar  mendekati  keadaan normal.  Kadar  SGPT  pada  Kelompok  9 lebih  tinggi  secara  bermakna  (p≤0,05) dengan Kelompok 6, 7 dan 8. Kadar SGPT pada  Kelompok  9  tidak  menunjukkan perbedaan  bermakna  dengan  Kelompok  5 (p>0,05).  Pemberian  ekstrak  etanol  kulit delima  pada  dosis  yang  ditingkatkan hingga  600  mg/kgBB  tidak  mencegah peningkatan  SGPT  lebih  baik  daripada pemberian ekstrak etanol kulit delima pada dosis yang lebih rendah.
Ekstrak etanol kulit delima mengandung  antioksidan  polifenol  yang dapat  berfungsi  sebagai scavenger yang dapat  membentuk  ikatan  dengan  ion-ion radikal  menghasilkan  bentuk  yang  radikal. Polifenol  yang  terkandung  dalam  ekstrak etanol  kulit  delima  akan  berikatan  dengan CCl 3 - penyebab  timbulnya  peroksidasi lipid membran hepatosit, sehingga menghambat  proses  peroksidasi  lipid. 16-18
Efek ekstrak kulit delima sebagai
hepatoprotektor  tampak  pada  Kelompok  8 yang  mendapatkan  dosis  500  mg/kgBB. Hal  ini  mendukung  pernyataan  Agha  dkk. bahwa polifenol yang terkandung di dalam ekstrak etanol kulit delima dapat menghambat  proses  peroksidasi  lipid  pada membran  hepatosit  yang  diinduksi  zat hepatotoksik  sehingga  mencegah  lisis hepatosit. 8, 10, 18,19

## Kadar MDA Plasma Tikus
Pada  Tabel  3,  Kelompok  3,  6  dan  7 menghasilkan  kadar  MDA  plasma  yang tidak berbeda signifikan  dengan kelompok kontrol negatif. Ini menunjukkan pemberian  ekstrak  kulit  delima  dosis tertinggi  600  mg/KgBB  menghasilkan kadar  MDA  plasma  yang  sama  dengan kontrol negatif. Kadar MDA pada kelompok  yang  diinduksi  CCl4  dan  diberi kulit  delima  dosis  300  mg/KgBB  dan  400 mg/KgBB tidak berbeda dengan kelompok 1.  Kelompok  1  yang  merupakan  kontrol negatif yang tidak diberikan ekstrak etanol kulit  delima  dan  CCl 4 .  Meskipun  tidak diberikan  zat  yang  dapat  menghasilkan radikal  bebas  tetapi  hasil  dari  proses metabolisme tubuh normal dapat menghasilkan  radikal  bebas,  sehingga kadar MDA plasma pada kelompok 1 lebih tinggi  secara  bermakna  jika  dibandingkan dengan kelompok 7-9. 5,22
Kadar  MDA pada Kelompok  2 (0,054±0,009)  yang  hanya  diberi  CCl 4
memiliki  perbedaan  bermakna  (p≤0,05) dibandingkan  dengan  semua  kelompok, kecuali dengan Kelompok 5 (0,048±0,006) dan  6  ( 0,047±  0,009) .  Kadar  MDA  plasma Kelompok  2  lebih  tinggi  secara  bermakna dengan Kelompok 1 (0,037±0,006), Kelompok  3  (0,038±0,001),  Kelompok  4 (0,039±0,006), Kelompok 7 (0,023±0,003), Kelompok  8  (0,022±0,002)  dan  kelompok 9  (0,028±0,004).  Hal  tersebut  dikarenakan CCl 4 bersifat  sebagai  radikal  bebas. 5 Saat CCl 4 masuk  ke  dalam  tubuh  maka  CCl 4 akan  dimetabolisme  oleh  enzim  sitokrom P450 menjadi triklorometil (CCl 3 ᴿ) kemudian  akan  berikatan  dengan  oksigen sehingga membentuk trichloromethyl peroxyl  radicals (CCl 3 O 2 ᴿ).  CCl 3 ᴿ  dan CCl 3 O 2 ᴿ  merupakan  suatu  radikal  bebas yang  dapat  merusak  sel  tubuh  melalui proses  peroksidasi  lipid. Hasil  dari peroksidasi  lipid  membentuk  senyawa malondialdehyde (MDA) yang  dapat dideteksi  pada  plasma,  sehingga  dapat menjadi  indikator  tingginya  radikal  bebas di dalam tubuh. Ekstrak etanol kulit delima pada kelompok perlakuan dapat menghambat radikal bebas karena memiliki kandungan polifenol  yang tinggi. Polifenol menghambat radikal bebas dengan  cara  mendonorkan  atom  hidrogen, membentuk  kelat  logam  dan  menghambat terbentuknya  singlet  oksigen,  sehingga terjadi penurunan kadar radikal bebas yang
ditandai  dengan  penurunan  kadar  MDA plasma pada kelompok perlakuan (4-9). 19,22
Delima  memiliki  kadar  antioksidan tertinggi  dibandingkan  dengan  buah- buahan  lain.  Penelitian  Tjakradidjaja et  al menunjukkan  bahwa  pemberian  bubuk delima  5%  dan  10%  dapat  menghambat terjadinya peroksidasi lipid yang ditunjukkan  dengan  penurunan  kadar MDA  plasma  tikus  yang  diinduksi  radikal bebas dari asap rokok. 5,9
Perbandingan  Kelompok  2  dengan Kelompok  4  memberikan  hasil  yang berbeda signifikan, namun dengan Kelompok  5  dan  6  tidak  memiliki perbedaan  yang  bermakna.  Artinya  dosis 200 dan 300 mg/kgBB ekstrak kulit delima tidak  dapat  meredam  kadar  radikal  bebas yang terdapat di dalam tubuh. Selain dosis, faktor  lain  yang  juga  mempengaruhi  yaitu kondisi  dan  sistem  organ  dari  obyek penelitian  karena  radikal  bebas  dapat dihasilkan  dari  hasil  metabolisme  tubuh normal. 19,22
Perbandingan kadar MDA Kelompok 3 dan 1 menunjukkan nilai p>0,05. Artinya ekstrak etanol kulit delima 600 mg/kgBB/hari  tidak  memberikan  efek sebagai  prooksidan. Kadar  MDA  pada Kelompok  4  lebih  tinggi  secara  bermakna dengan  Kelompok  7  dan  8,  karena  dosis pada kedua kelompok tersebut cukup untuk menekan kadar radikal bebas dan
menghambat  peningkatan  kadar  MDA plasma.  Rerata  kadar  MDA  plasma Kelompok  5  lebih  tinggi  secara  bermakna (p≤0,05)  jika  dibandingkan  dengan  rerata kadar  MDA  plasma  Kelompok  1,  3,  7,  8 dan  9,  artinya  dosis  ekstrak  etanol  kulit delima  200  mg/kgBB/hari  tidak  mampu menghambat  peningkatan  kadar  MDA plasma,  sedangkan  kadar  MDA  pada Kelompok  6  lebih  tinggi  secara  bermakna dengan Kelompok 7, 8 dan 9. Hal tersebut menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan kadar  MDA  yang  bermakna  antara pemberian dosis ekstrak etanol kulit delima 300  mg/kgBB/hari  dengan  pemberian ekstrak  etanol  kulit  delima  dosis  400,  500 dan 600 mg/kgBB/hari.
Kelompok 7 menunjukkan perbedaan bermakna  (p≤0,05)  jika  dibandingkan dengan  semua  kelompok,  kecuali  dengan Kelompok  1,  8  dan  9.  Dosis  400 mg/kgBB/hari  ekstrak  etanol  kulit  delima memberikan  efek  yang  sama  dengan  dosis 500 mg/kgBB/hari dan 600 mg/kgBB/hari. Hasil  kadar  MDA  plasma  Kelompok  7 memiliki  perbedaan  bermakna  dengan Kelompok  5,  hal  ini  sesuai  dengan penelitian  Agha et  al yang  menunjukkan bahwa  dosis  400  mg/kgBB/hari  ekstrak etanol  kulit  delima  secara  bermakna memiliki efek lebih baik sebagai hepatoprotektor  jika  dibandingkan  dengan dosis 200 mg/kgBB/hari. 8
Kelompok  8  memiliki  perbedaan bermakna  (p≤0,05)  jika  dibandingkan dengan  semua  kelompok,  kecuali  dengan Kelompok  7  dan  9.  Rerata  kadar  MDA plasma  kelompok  8  lebih  rendah  jika dibandingkan  dengan  kelompok  7  dan kelompok  9  namun  tidak  bermakna, sehingga  pemberian  ekstrak  etanol  dosis 500  mg/kgBB/hari  memiliki  efek  yang sama dengan pemberian dosis 400
mg/kgBB/hari dan dosis 600
mg/kgBB/hari.
Kulit delima memiliki efek antioksidan  terbaik  dalam  bentuk  ekstrak etanol,  dan  mempengaruhi  reaksi  oksidasi yang berlangsung dalam tubuh. Stacy et al menunjukkan  pemberian  ekstrak  polifenol buah  delima  dosis  500  mg/kgBB/hari berfungsi  sebagai  hepatoprotektor  paling baik  dalam  menghambat  kerusakan  hati akibat  induksi  parasetamol. 15,22 Kelompok 9  memiliki  perbedaan  bermakna  (p≤0,05) jika dibandingkan dengan semua kelompok,  kecuali  dengan  Kelompok  4,  7 dan  8.  Hal  ini  menunjukkan  dosis  ekstrak etanol  kulit  delima  600  mg/kgBB/hari memiliki efektivitas sama dengan
pemberian  dosis  400  mg/kgBB/hari.  Efek
dari  suatu  antioksidan  dipengaruhi  oleh dosis. Pemberian dosis kecil
mengakibatkan  antioksidan  tidak  cukup untuk  meredam  kadar  radikal  bebas, sedangkan  pemberian  dengan  dosis  yang
lebih  tinggi  mengakibatkan  antioksidan tersebut dapat berefek sebagai prooksidan. 21,23

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  kulit  delima  dapat menghambat  kenaikan  kadar  SGPT  tikus yang  diinduksi  CCl 4 dengan  dosis  paling efektif  500  mg/kgBB.  Dan  ekstrak  etanol kulit  delima  juga  memiliki  efek  sebagai antioksidan yang dapat menghambat peningkatan  kadar  MDA  plasma  tikus jantan  galur  wistar  yang  diinduksi  CCl 4 dengan dosis efektif 100 mg/kgBB.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Penulisan  artikel  ini  tidak  terdapat konflik kepentingan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada  pihak  yang  telah  membantu penulisan karya ilmiah ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Anna  Caruso,  et  al.  Pomegranate: Nutraceutical  with  Promising  Beneﬁts on Human Health. Appl. Sci. 2020;10, 6915
2. Xianglan  Weiab,  et  al.  Pomegranate
Peel Extract Ameliorates Liver ﬁbrosis Induced  By  Carbon  Tetrachloride  In Rats Through Suppressing
P38mapk/Nrf2  Pathway.  Journal  of Functional Foods. 2020;65:1-10.
3. Panagiotis  Kandylis  and  Evangelos Kokkinomagoulos.  Food  Applications and  Potential  Health    Benefits  of Pomegranate  and  its  Derivatives. Foods. 2020; 9:1-22
4. Gozleckci  S,  Saracoglu  O,  Onursal  E,
OzgenM.  Total  Phenolic  Distribution of  Juice,  Peel,  and  Seed  Extracts  of Four Pomegranate Cultivars.
Pharmacogn  Mag.  2011;  7(26):  161-
64.
5. Tjakradidjaja  FA,  Tjakradidjaja  AS. Pomegranate  ( Punica  Granatum  L .) powder reduced malondialdehyde
(MDA)  level  in  cigarette  smoke exposed  rats.  Med  J  Indones.  2011; 10(1): 34-9.
6. Haber  SL,  et  al.  Antioxidant  and
Antiatherogenic Effects of
Pomegranate.  Am  J  Health  Syst
Pharm. 2011; 68(14): 1302-5. 7. Ashoush IS, et al. Antioxidant Activity and Hepatoprotective Effect of
Pomegranate  Peel  and  Whey  Powders in  Rats.  Annals  of  Agricultural Science. 2013; 58(1): 27-32.
8. Agha  FE,  et  al.  Protective  Effect  of
Punica  Granatum  Peel  Extract  Againts Petachlorophenol_Induced Oxidative Stress, Cytogenetic and Hepatic Damage
In Rats. Australian Journal of Basic And Applied Science. 2013; 7 (2): 853-64.
9. Kandylis  P  and  Kokkinomagoulos. Food Applications and Potential Health  Benefits  of  Pomegranate  and Its Derivates. Foods. 2020; 9 (122): 1- 21
10. Genena DM and Agamy NF. Effect Of Pomegranate  Juice  And  Peel  On Antioxidant  Enzymes  And  Lipid Profile  In  Carbon  Tetrachloride- Induced  Hyperlipidemic  Rats.  Int.  J. Adv. Res. 2017. 5(1);1708-1714
11. Shah  GH,  Patel  BG,  Shah  GB. Development  Of  Carbon  Tetrachloride- Induced  Chronic  Hepatotoxicity  Model In  Rats  And Its  Application  In Evaluation  Of  Hepatoprotective  Activity
Of Silymarin. Asian Journal of Pharmaceutical  and  Clinical  Research.
2017. 10(8); 274-278
12. Wu  T,  Li  J,  Li  Y,  Song  H.  Antioxidant and Hepatoprotective Effect Of Swertiamarin  On  Carbontetrachloride- Induced Hepatotoxicity via The Nrf2/HO-1 Pathway. Cell Physiol Biochem.2017. 41; 2242-2254
13. Halliwell,  Barry  &  Gutteridge,  Jhon M.C.  Free  Radicals  in  Biology  and Medicine.  5 th ed.  2015.  New  York: Oxford University Press.
14. Sodeman,  Wiliam  A  &  Sodeman, Thomas  M. Sodeman  Patofisiologi
(Pathologis  Physiology  Mechanism  of
Disease) .  11 th ed.  2015.  Alih  Bahasa Andry Hartono, dkk. Jakarta: Hipokrates.
15. Podolsky, Daniel K & Isselbacher, J. Tes Diagnostik  Pada  Penyakit  Hati.  Dalam Isselbacher,  dkk. Harrison  Prinsip-
Prinsip Ilmu Penyakit Dalam, hlm 1623- 26.  Editor  Edisi  Bahasa  Indonesia Ahmad,  H,  Asdie.  Volume  4.  Edisi  20.
2018.Jakarta:  Penerbit  Buku  Kedokteran
EGC.
16. Dienstag,  Jules  L  &  Isselbacher,  Kurt  J. Hepatitis  Akut.  Dalam  Isselbacher,  dkk.
Harrison  Prinsip-Prinsip  Ilmu  Penyakit
Dalam, hlm  1638-58.  Editor  Edisi
Bahasa  Indonesia  Ahmad,  H,  Asdie. Volume  6.  Edisi  20.  2018.  Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.
17. Tina  Jafaria,  et  al.  E ﬀ ects  of pomegranate  peel  extract  and  vitamin E on oxidative stress and antioxidative capacity  of  hemodialysis  patients:  A randomized  controlled  clinical  trial.
Journal of Functional Foods. 2020;72;1-7
18. Papas  AM.  Antioxydant  status,  diet, nutritional  health.  United  States  of
America: CRC press LLC; 2016.
19. Bhandari  PR.  Pomegranate  (Punica
Granatum  L).  Ancient  seeds  for modern  cure?  Review  Of  Potential Therapeutic  Application.  International Journal  Of  Nutrition,  Pharmacology,
Neurological Disease. 2012; 3(2): 171- 184
20. Wang R, Ding Y, Liu R, Xiang L, Du
L. Pomegranate: Constituents,
Bioactivities  and  Pharmacokinetics. Fruit,  vegetable  and  Cereal  Science and  Biotechnology.Global  Science Book.  2010. P 77-87.
21. Rajan  S,  et  al.  Antioxidant  Potentials of  Punica  Granatum  Fruit  Rind Extracts.  International  Journal  of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 2011; 3(3): 82-8.
22. Hong    MY,  Mansour  L,  Klarich  DS., Copp L and Bloem K. Comparison Of Antioxidant  Capacity  Of  Commonly Consumed Youth Beverages in United States.  International  Journal  Of  Food Science  And  Technology.  2016;  51: 1409-1416
23. Stacy  L,  et  al.  Antioxydant  and antiatherogenic effect of pomegranate. Am J Health Syst.2011: 68(14): 1302- 5