## Pendahuluan
Diabetes   mellitus   adalah   penyakit multifaktorial,   yang   ditandai   dengan sindroma   hiperglikemia   kronis   dan gangguan   metabolisme   karbohidrat,   lemak serta   protein   yang   disebabkan   insufisiensi sekresi   insulin   ataupun   aktivitas   endogen insulin   atau   keduanya   (1).   Data World Health   Organisation (WHO)   pada   tahun 2003 tercatat hampir 200 juta orang di dunia menderita   diabetes   dan   diperkirakan   pada tahun 2025 jumlah penderita bisa mencapai sekitar   330   juta   jiwa   (2).   Secara epidemiologi,   diperkirakan   bahwa   pada tahun   2030   prevalensi   Diabetes   Melitus (DM) di Indonesia mencapai 21,3 juta orang (3). Sedangkan hasil Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas)   tahun   2007,   diperoleh   bahwa proporsi   penyebab   kematian   akibat   DM pada kelompok usia 45-54 tahun di daerah perkotaan   menduduki   ranking   ke-2   yaitu 14,7%.   Dan   daerah   pedesaan   DM menduduki ranking ke-6 yaitu 5,8% (4).
Diabetes Melitus (DM) tipe 1 ditandai oleh   kerusakan   selektif   dari   sel-sel   beta pankreas   penghasil   insulin   melalui mekanisme cellular   mediated   autoimmune . Suatu   penyusupan   sel-sel   inflamatori   ke dalam pulau langerhans, yaitu insulitis, yang diikuti oleh kematian sel beta karena proses fagositosis oleh makrofag, ciri khas kondisi patologi DM tipe 1 didominasi respon limfosit T   CD4+   penghasil   IFN-γ.   IFN-γ   memicu makrofag   mensekresi   sitokin-sitokin proinflamasi seperti IL-1β, TNF-α oleh sel T (5).
Mahoni   merupakan   salah   satu tumbuhan   yang   digunakan   masyarakat untuk pengobatan diabetes mellitus. Bagian yang   digunakan   dari   mahoni   adalah   biji. Kandungan   bahan   kimia   dari   biji   mahoni adalah   flavonoid,   alkaloid,   terpenoid, antraquinon,   cardiac   glycosides,   saponin dan   volatile   oils   (6,   7).   Ghosh   et   al.,   (8) melaporkan   ekstrak   methanol   biji   mahoni dosis 50 dan 100mg/kgBB mempunyai efek
Pengaruh Ekstrak Metanol Biji Mahoni ( Swetenia mahagoni Jacq) terhadap Penurunan Glukosa Darah dan Perbaikan Jaringan Pankreas Tikus Hasil Induksi MLD-STZ
Effect of Methanolic Swetenia mahagoni Seed Extracts to Decreasing Blood Glucose Contant and Repair Pancreatic Tissue Damage of Rat Multiple Low Dose-Streptozotocin (MLD-STZ)
Induced
Nany Suryani*
STIKES Husada Borneo, Jl. A. Yani Km 30,5 No.4 Banjarbaru, Kalimantan Selatan *korespondensi : nan_cdy@yahoo.co.id

## Abstract
Cancer is a disease that causes most deaths in this century. In general, cancer can affect Diabetes Mellitus (DM) is a disease with metabolism disorder signed by increasing of glucose blood   (hyperglicemia),   caused   by   disorder   of   insulin   secretion   and   or   increasing   of   insulin resistance. Therapy of Methanolic Swetenia mahagoni Seed Extracts is an alternative treatment for DM. The objective of this research is to prove the effect of extract of Swetenia mahagoni Jacq to decreasing blood glucose content and repair pancreatic tissue damage of rat result Multiple   Low   Dose-Streptozotocin  (MLD-STZ   )induced   dose  of   20  mg/kg  weight   for  5  days successively. Blood glucose of rat was measured using digital glucometer and categorized as DM if it is  >300 mg/dL. This research used 25 wistar strained white rat (Rattus norvegicus). Which were classified  into 5  groups,  they  are one group of negative  control,  one group of positive control, and three groups of MLD-STZ induced given treatment of Methanolic Swetenia mahagoni Seed Extracts with dose of 100, 250 and 400 mg/kg weight for 7 days. The result showed that treatment of Methanolic Swetenia mahagoni Seed Extracts with dose of 100, 250 and 400 mg/kgBW decreased blood glucose 55,47%; 81,01% and 73,63% successively, and improved damage of pancreas tissue from decreasing in the degree of insulitis (p<0.05). There was a protective effect of methanolic Swetenia mahagoni seed extract to blood glucose and damage of rat pancreas tissue MLD-STZ induced. The terapeutic effect was optimal at dose of 250 mg/kgBW.
Keywords : Methanolic Swetenia mahagoni seed extract, insulin, TNF-α expression, damage of pancreas tissue, and MLD-STZ
farmakologi sebagai anti inflamasi, analgesik dan   antipiretik   pada   hewan   coba   yang dilukai   bagian   telinganya.   Selain   itu pemberian   ekstrak   methanol   :   air   (3:1)   biji mahoni dosis 250 mg/kgBB selama 21 hari dapat   menurunkan   kadar   glukosa   darah tikus   Rattus   norvegicus   strain   wistar   yang diinduksi streptozotocin (STZ) dosis tunggal 4 mg/grBB (9). Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan   pengaruh   pemberian   terapi ekstrak   metanol   biji   mahoni   ( Swetenia mahagoni Jacq) dapat mempengaruhi kadar glukosa   darah   dan   memperbaiki   jaringan pankreas   pada   tikus   hasil   induksi   Multiple Low Dose Streptozotocin (MLD-STZ).

## Metode Penelitian
Penelitian   ini   dilakukan   secara ekperimantal   laboratorium   dengan   desain post   test   only   controlled   group . Menggunakan tikus putih jantan jenis Rattus norvegicus strain wistar (penelitian ini telah mendapat   persetujuan   komisi   etik   Fakultas Kedokteran   Unuversitas   Brawijaya. Penelitian   dilakukan   di   Laboratorium Farmakologi, Laboratorium Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran, Laboratorium Fisiologi Hewan dan Laboratorium Biokimia Fakultas Matematika   dan   Ilmu   Pengetahuan   Alam Universitas   Brawijaya   Malang   dari   bulan Juni sampai Agustus 2012.
Penyiapan Hewan Coba Berdasarkan   perhitungan   dengan menggunakan   rumus   Federer   dihasilkan jumlah sampel sebanyak 25 ekor tikus putih jantan jenis Rattus norvegicus strain wistar jantan dengan berat 100-130 gram, umur 2 bulan   digunakan   dalam   penelitian   ini. Masing-masing   5   ekor   kelompok   kontrol negatif, 5 ekor kelompok DM (kontrol positif), 15   ekor   kelompok   tikus   DM   yang   diberi terapi  ekstrak etanol  biji  mahoni dosis  100 mg/kgBB, 250 mg/kgBB dan 400 mg/kg BB (masing-masing 5 ekor tikus).
Ekstraksi   Biji   Mahoni   ( Swetenia   mahagoni Jacq)
Pembuatan ekstrak dilakukan dengan cara   maserasi   menggunakan   pelarut metanol (7). Serbuk biji mahoni dimasukkan ke   dalam   botol   berwarna   gelap,   kemudian ditambahkan   pelarut   metanol,   ditutup   dan dibiarkan   selama   dua   hari   terlindung   dari cahaya   sambil   diaduk,   disaring   sehingga
didapat maserat. Ampas dimaserasi dengan metanol menggunakan prosedur yang sama, maserasi   dilakukan   sampai   diperoleh maserat   yang   jernih.   Semua   maserat metanol digabungkan dan diuapkan dengan menggunakan evaporator pada temperature ±   40 o C   sampai   diperoleh   ekstrak   metanol kental.
Pengukuran Kadar Glukosa Darah Tikus   diukur   kadar   glukosa   darahnya yang diperoleh dari darah ujung ekor (vena lateralis).   Caranya   tikus   yang   diambil darahnya   ditempatkan   pada   tempat   yang hanya memuat 1 ekor tikus, dengan posisi ekor   berada   diluar.   Kemuadian   ekor   tikus dibasahi   dengan   air   hangat   dengan   tujuan untuk vasodilatasi pembuluh darah, setelah itu baru diambil darah dengan menggunakan blood   lancet.   Pengukuran   glukosa   darah menggunakan   alat   glucometer.   Darah   dari ekor   tikus   diteteskan   pada   strip   yang terhubung   dengan   glucometer   kemudian dibiarkan   selama  6  detik  dan  dibaca  skala yang   terlihat   pada   layar,   dimana   satuan skala pengukuran yang terbaca mg/dL.
Pembuatan Preparat Pankreas Organ pankreas yang telah memadat dalam   blok   paraffin   dipotong   dengan menggunakan   microtom.   Pankreas   diiris dengan   ukuran   5   µm.   Potongan   preparat dikeringkan dan diletakkan diatas hot plate 38-40 o C sampai kering selanjutnya preparat disimpan   dalam   inkubator   suhu   38-40 o C selama 24 jam.
Pewarnaan Hematoxylen-Eosin Pewarnaan hematoxylen-Eosin diawali dari   tahap   deparafinisasi   yakni   preparat dimasukkan   dalam   xylol   bertingkat   1-3 masing-masing selama 5 menit. Selanjutnya pada   tahap   rehidrasi   preparat   dimasukkan dalam etanol bertingkat 95, 90, 80 dan 70% masing-masing   selama   5   menit,   direndam dalam   aquades   selama   5   menit,   preparat dimasukkan   dalam   pewarna   hematoxylen sampai didapatkan hasil warna yang terbaik 10 menit. Cuci dengan air mengalir selama 30 menit, kemudian dibilas dengan aquades sebelum   diwarnai   dengan   eosin.   selama   5 menit. Selanjutknya tahap dehidrasi dengan memasukkan   perparat   pada   seri   etanol bertingkat   dari   80.   90   dan   95%   hingga etanol absolut 1-3. Lakukan clearing dengan
memasukkan   preparat   pada   xylol   1,2   dan dikeringanginkan.   Selanjutnya   dilakukan mounting dengan entellan.
Analisa Data Data   yang   didapat   berupa   data diskriptif   dan  disajikan  dalam   bentuk tabel. Analisa   data   dilakukan   dengan   menguji homogenitas, normagenitas, untuk mengetahui   adanya   perbedaan   antara kelompok   kontrol   dengan   kelompok perlakuan dilakukan uji ANOVA serta untuk mengetahui   adanya   hubungan   dan pengaruh dari pemberian ekstrak biji mahoni dilakukan   uji   regresi   kuadratik   dengan menggunakan perangkat lunak SPSS 14.

## Hasil Penelitian
A. Ekstrak   Metanol   Biji   Mahoni   ( Swetenia mahogoni Jaqc )
Penelitian   ini   menggunakan   biji mahoni   159   gram   biji   mahoni   basah kemudian   dikeringkan,   diperoleh   105   gram serbuk   biji   mahoni,   selanjutnya   diekstraksi dengan   methanol   menghasilkan   ekstrak kental sebanyak 13243,2 mg.
Kadar   Glukosa   Darah   Tikus   Hasil Induksi   MLD-STZ   dan   Terapi   Ekstrak Metanol Biji Mahoni
Pengukuran   kadar   glukosa   darah dilakukan   sebanyak   3   kali   yaitu   sebelum induksi   MLD-STZ,  setelah   inkubasi   14  hari pasca   induksi   MLD-STZ   dan   setelah pemberian   terapi   ekstrak   biji   mahoni   dosis 100; 250 dan 400 mg/dl terlihat pada Tabel 1, dari hasil tersebut menunjukkan terjadinya peningkatan   seteal   induksi   dengan streptozotocin   dan   penuruanan   kadar glukosa   darah   setelah   mendapatkan   terapi ekstrak biji mahoni. Kadar glukosa darah ini diukur   dengan   menggunakan   glucometer digital.
Tabel 1. Kadar   Glukosa   Darah  Tikus   Kontrol, DM   dan   Terapi   Ekstrak   Metanol   Biji Mahoni ( Swetenia mahagoni Jacq) Kelompok Rata-rata kadar p-value
Perlakuan glukosa darah (mg/dL) terhadap DM Kontrol 97,4 ± 8,02 0,000 DM 579,4 ± 31,09 - Terapi 100mg/kgBB 258,0 ± 16,32 0,000 Terapi 250mg/kgBB 110,0 ± 5,43 0,000 Terapi 400mg/kgBB 152,8 ± 6,09 0,000
Gambar 1. Kadar   Glukosa   Darah   Tikus Kontrol, DM dan Terapi Ekstrak Metanol Biji Mahoni ( Swetenia mahagoni Jacq).
Berdasarkan   hasil   penelitian,   terlihat bahwa kadar glukosa darah kelompok tikus kontrol   yaitu   (97,4   ±   8,02)   mg/dl   termasuk dalam   rentang   kadar   glukosa   darah   tikus normal yaitu 50-135 mg/dl (10). Sedangkan kadar   glukosa   darah   pada   kelompok   tikus yang diinduksi MLD-STZ dosis 20 mg/kgBB mengalami   kenaikan   kadar   glukosa   darah yaitu (579,4 ± 31,09) mg/dl, juga termasuk dalam   rentang   kadar   glukosa   darah   tikus DM yaitu ≥ 300 mg/dl (Nurdiana dkk, 1998). Kadar   glukosa   darah   tikus   mengalami penurunan   yang   signifikan   pasca   terapi ekstrak methanol biji mahoni dosis 100; 250 dan   400   mg/kgBB   yaitu   (258,0   ±   16,32); (110 ± 5,43) dan (152,8 ± 6,09) mg/dl. Dari hasil analisa statistic menunjukkan terdapat perbedaan   yang   sangat   nyata   (p<0,05) antara   kadar   glukosa   darah   pada   tikus dengan tikus yang diinduksi MLD-STZ.
B. Hubungan   Dosis   Esktrak   Metanol   Biji Mahoni dengan Kadar Glukosa Darah Tikus Hasil Induksi MLD-STZ Berdasarkan analisis regresi kuadratik yang   dilakukan   dengan   koefisien
determinasi R2=0,978 dan koefisien korelasi R=0,989.   Artinya   model   regresi   kuadratik mampu   menjelaskan   keragaman   kadar glukosa   darah   sebesar   97,8%   dan mempunyai   hubungan   yang   sangat   kuat antara   dosis   perlakuan   terhadap   kadar glukosa   darah.   Pendugaan   model   tersebut dilakukan   dengan   bantuan   program   SPSS versi 14, sehingga menghasilkan persamaan sebagai   berikut:   y   =   462,667   –   2,471x   + 0,004x2   (1).   Persamaan   (1)   dapat digunakan   untuk   keperluan   peramalan respon   kadar   glukosa   darah   berdasarkan dosis   perlakuan   yang   diberikan   dan sekaligus   menentukan   kondisi   optimum dengan   konsep   deferensial.   Hasil diferensiasi   model   regresi   ordo   kedua merupakan   suatu   persamaan   linear,   yaitu: -2,471 + 0,008x = 0 (2). Penyelesaian dari persamaan (2) menghasilkan titik optimum x =   308,875   yang   berarti   dosis   perlakuan ekstrak metanol biji mahoni sebesar 308,875 mg/kgBB.   Kadar   glukosa   darah   dapat diketahui   dengan   cara   mensubstitusikan nilai x = 308,875 ke dalam persamaan (1), sehingga diperoleh nilai y = 81,052. Dengan demikian,   penurunan   kadar   glukosa   darah maksimum   sebesar   81,052   mg/dL   dicapai pada   dosis   perlakuan   sebesar   308,875
mg/kgBB.
Gambar 2. Hubungan   Dosis   Ekstrak Metanol Biji Mahoni ( Swetenia mahagoni
Jacq)   terhadap Perubahan   Kadar   Glukosa Darah Tikus Hasil Induksi MLD- STZ Gambar   2   menunjukkan   bentuk hubungan   antara   dosis   perlakuan   dengan kadar   glukosa   darah   tikus   yang   diberikan ekstrak   metanol   biji   mahoni.   Hubungan tersebut menerangkan bahwa kadar glukosa darah terus menurun seiring dengan adanya
pertambahan   dosis   ekstrak   metanol   biji mahoni  sampai  mencapai  titik tertentu  dan setelah   melewati   titik   optimum   akan mengalami   peningkatan.   Hasil   perhitungan secara   matematis   dari   model   regresi kuadratik   (persamaan   1),   telah   diperoleh penurunan   kadar   glukosa   maksimum sebesar   81,052   mg/dL   yang   dicapai   pada dosis perlakuan 308,857 mg/kgBB.
Perbaikan   Jaringan   Pankreas   (Derajat Insulitis) Tikus Kontrol, Tikus DM dan Tikus Terapi Ekstrak Metanol Biji Mahoni Hasil   penelitian   (Gambar   4) menunjukkan bahwa pulau langerhans tikus kontrol masih terlihat sedikitnya rongga atau ruang   interseluler   dan   banyak   sel   beta pankreas   penghasil   hormon   insulin. Sedangkan   pada   tikus   diabetes   mellitus terdapat   banyak   rongga   atau   ruang interseluler   pada   pulau   langerhans   yang menyebabkan berkurangnya jumlah sel beta pankreas penghasil  insulin.   Data penelitian menunjukkan   adanya   perbaikan   jaringan pankreas yang paling baik pada pemberian terapi ekstrak metanol biji mahoni dosis 250 mg/kgBB.   Hal   ini   sejalan   dengan   hasil analisa   statistic   bahwa   terapi   dosis   250 mg/kgBB berbeda secara signifikan (p<0,05) dengan terapi dosis 100 dan 400 mg/kgBB. Terapi   dosis   250   mg/kgBB   yang   diberikan pada   tikus   DM   menunjukkan   perbaikan jaringan  pankreas yang paling  baik,  hal ini sesuai   dengan   data   penurunan   kadar glukosa   darah,   peningkatan   kadar   insulin dan penurunan ekspresi TNF-α yang paling baik dibandingkan dengan pemberian terapi dosis   100   dan   400   mg/kgBB.   Rata-rata derajat   insulitis   dapat   dilihat   pada   Tabel   2 dan Gambar 3.
Tabel 2. Kerusakan   Jaringan   Pankreas (Derajat   Insulitis)   pada   Tikus Kontrol,   Tikus   DM   dan   Tikus Terapi   Ekstrak   Metanol   Biji Mahoni Kelompok Perlakuan Rata-rata Derajat Insulitis (%) p-value terhadap DM
Kontrol 10,00 ± 1,58 0,000 DM 77,20 ± 6,22 - Terapi 100mg/kgBB 38,20 ± 4,27 0,000 Terapi 250mg/kgBB 18,40 ± 3,58 0,000 Terapi 400mg/kgBB 28,00 ± 4,18 0,000
Gambar 3. Kerusakan   Jaringan   Pankreas (Derajat   Insulitis)   pada   Tikus Kontrol,   Tikus   DM   dan   Tikus Terapi   Ekstrak   Metanol   Biji Mahoni
Gambar 4. Hasil   Pewarnaan   HE   pada pulau langerhans pankreas
Keterangan:   A:   Pulau   langerhans   tikus kontrol   (skor  1);   B:  Pulau   langerhans   tikus DM   (skor   3-4);   C:   Pulau   langerhans   tikus terapi   ekstrak   biji   mahoni   dosis   100 mg/kgBB (skor 2); D: Pulau langerhans tikus terapi   ekstrak   biji   mahoni   dosis   250
mg/kgBB   (skor   1-2);   E:   Pulau   langerhans tikus   terapi   ekstrak   biji   mahoni   dosis   400 mg/kgBB   (skor   1-2).   Pembesaran   400x; Panah   hitam:   rongga   interseluler;   panah merah: sel beta pankreas.
Hubungan   Dosis   Ekstrak   Metanol   Biji Mahoni   dengan   Perbaikan   Jaringan Pankreas   yang   Rusak   (Derajat   Insulitis) Tikus Hasil Induksi MLD-STZ Berdasarkan analisa regresi kuadratik dengan koefisien determinasi R2=0,731 dan koefisien   korelasi   R=0,855.   Artinya   model regresi   kuadratik   mampu   menjelaskan keragaman   kadar   glukosa   darah   sebesar 73,1%   dan   mempunyai   hubungan   yang sangat kuat antara dosis perlakuan terhadap kadar glukosa darah.
Pendugaan   model   tersebut   dilakukan dengan   bantuan   program   SPSS   versi   14, sehingga menghasilkan persamaan sebagai berikut:   y   =   71,155   –   0,352x   +   0,00059x2 (1).  Persamaan  (1) dapat  digunakan  untuk keperluan   peramalan   respon   perbaikan jaringan   pankreas   yang   rusak  berdasarkan dosis   perlakuan   yang   diberikan   dan sekaligus   menentukan   kondisi   optimum dengan   konsep   deferensial.   Hasil diferensiasi   model   regresi   ordo   kedua merupakan   suatu  persamaan   linear,   yaitu:- 0,352 + 0,00118x = 0 (2). Penyelesaian dari persamaan (2) menghasilkan titik optimum x =   298,31   yang   berarti   dosis   perlakuan ekstrak metanol biji mahoni sebesar 298,31 mg/kgBB. Perbaikan jaringan pankreas yang rusak   dapat   diketahui   dengan   cara mensubstitusikan nilai x = 298,31 ke dalam persamaan (1), sehingga diperoleh nilai y = 18,65.   Dengan   demikian,   penurunan kerusakan   jaringan   pankreas   (derajat insulitis)   maksimum   sebesar   18,65   dicapai pada   dosis   perlakuan   sebesar   298,31 mg/kgBB.
Gambar 5. Hubungan   Dosis   Ekstrak Metanol Biji Mahoni ( Swetenia mahagoni
Jacq)   terhadap Kerusakan   Jaringan   Pankreas (derajat   insulitis)   Tikus   Hasil Induksi MLD-STZ
Gambar   5   menunjukkan   bentuk hubungan   antara   dosis   perlakuan   dengan perbaikan   jaringan   pankreas   tikus   yang diberikan   ekstrak   metanol   biji   mahoni. Hubungan   tersebut   menerangkan   bahwa kerusakan   jaringan   pankreas   (derajat insulitis)   terus   menurun   seiring   dengan adanya pertambahan dosis ekstrak metanol biji   mahoni   sampai   mencapai   titik   tertentu dan   setelah   melewati   titik   optimum   akan mengalami   peningkatan.   Hasil   perhitungan secara   matematis   dari   model   regresi kuadratik   (persamaan   1),   telah   diperoleh penurunan   kerusakan   jaringan   pankreas (derajat   insulitis)  maksimum  sebesar 18,65 yang   dicapai   pada   dosis   perlakuan   298,31 mg/kgBB.

## Pembahasan
A. Ekstrak   Metanol   Biji   Mahoni   ( Swetenia mahogoni Jaqc) Biji   mahoni   didapatkan   dari pekarangan   Universitas   Brawijaya.   Seratus gram   bubuk   biji   mahoni   kering   diekstraksi dengan   menggunakan   metode   maserasi dengan   pelarut   metanol     yang   diendapkan selama   24   jam   sampai   terbentuk   filtrate jernih pada bagian atas. Selanjutnya filtrate yang   didapat   dipisahkan   antara   pelarut methanol dengan bahan aktif yang terdapat dalam biji mahoni melalui proses evaporasi sehingga   diperoleh   ekstrak   kental   bila diperhitungkan   terhadap   kadar   keringnya sebesar 13,243 gram (12,61%). Kandungan bahan aktif dalam ekstrak biji mahoni antara
lain   flavonoid,   alkaloid,   terpenoid, antraquinon,   cardiac   glycosides,   saponin dan volatile oils (6, 7). Menurut Sahgal et al. (2009)   pada   1   gram   ekstrak   biji   mahoni mengandung phenolic sebesar 26,9 ± 0,26 mg setara dengan asam galat dan flavonoid sebesar   2,5   ±   0,15   mg   setara   dengan katekin.   Bila   dikonversikan   dengan penelitian   Sahgal   et   al.(2009)   dari   13,243 gram ekstrak biji mahoni pada penelitian ini kandungan  phenolic   dan  flavonoid  sebesar 356,24     ±   3,44   mg   setara   dengan   asam galat dan 33,11 ± 88,29 mg setara dengan katekin.
Kadar Glukosa Darah Tikus Setelah Induksi MLD-STZ   dan   Terapi   Ekstrak   Metanol   Biji Mahoni
Penyiapan   tikus   diabetes   dilakukan dengan   injeksi   streptozotocin   dosis   rendah berulang   (MLD-STZ)   secara   intraperitonial (i.p).   Dosis   streptozotocin   yang   digunakan dalam penelitian ini adalah 20 mg/kgBB/hari selama   5   hari   berturut-turut   (11)   dan diinkubasi selama 14 hari. Injeksi MLD-STZ tersebut   dapat   menyebabkan   tikus menderita  diabetes   (DM)   tipe   1.   Dikatakan menderita   DM   bila   kadar   glukosa   darah   > 300 mg/dL (12).
Diabetes   tipe   1   ditandai   dengan kerusakan   sel   β   pankreas   melalui   reaksi autoimun yang melibatkan sel T CD4+ (Th) dan   peningkatan   kadar   glukosa   darah. Pengaruh   dari   induksi   STZ   akan meningkatkan   ekspresi   sel-sel   inflamatori (TNF-α,   IFN-γ,   IL-1β)   dan   menimbulkan manifestasi   meningkatnya   kadar   glukosa darah. Streptozotocin merupakan nitrosurea yang   bersifat   sitotoksik   spesifik   pada   sel beta pankreas.
Induksi   STZ   akan   menyebabkan terjadinya   alkilasi   DNA.   Kerusakan   DNA akan   memicu   produksi   enzim   poli   (ADP- ribosa) sintase, yaitu enzim yang diperlukan untuk memperbaiki kerusakan DNA.  Enzim ini memerlukan NAD (nikotinamida adenine dinukleotida) sebagai substratnya, sehingga kandungan   NAD+   dalam   sel   menurun. Menurunnya   kadar   NAD+   selular   juga menyebabkan   penurunan   jumlah   ATP sehingga sintesis dan sekresi insulin dapat terhambat yang menyebabkan hiperglikemia. Streptozotocin sebagai donor NO   yang   mampu   meningkatkan   spesies oksigen   reaktif   (ROS)   diantaranya   radikal
superoksida   (O2-),   radikal   hidroksil   (OH-) dan   hydrogen   peroksida   (H2O2).   Radikal NO   dalam   bentuk   bebas   ataupun   dalam bentuk   senyawa   peroksinitrit   (ONOO-), reaksi   yang   dihasilkan   dari   reaksi   NO dengan O2- bersifat sangat toksik terhadap sel   beta   pankreas   karena   dapat menyebabkan   kerusakan   DNA   pankreas. Dalam   mitokondria,   STZ   menyebabkan siklus   krebs   terhambat   serta   pemakaian oksigen   dalam   mitokondria   pun   menurun sehingga   produksi   ATP   mitokokndria menjadi terbatas. Meningkatnya  penurunan produksi   ATP   dalam   mitokondria   dapat meningkatkan pasokan substrat untuk enzim xantin oksidase   akan mengkatalisis reaksi pembentukan anion superoksida (O2-) aktif (13).   Peningkatan   radikal   superoksida menyebabkan   meningkatnya   hydrogen peroksida   dan   radikal   hidroksil   yang mengakibatkan   terjadinya   kerusakan pankreas   dan   terhambatnya   sentesis   dan sekresi   insulin   sehingga   terjadi hiperglikemia.
Berdasarkan   hasil   pengukuran menunjukkan   bahwa   kadar   glukosa   darah tikus mengalami penurunan yang signifikan pasca   terapi   ekstrak   metanol   biji   mahoni dengan dosis  100; 250;  dan 400 mg/kgBB (p<0,05).   Hal   tersebut   sesuai   dengan penelitian   yang   telah   dilakukan   oleh (Linghuat,   2008   dan   Debasis   et   al.,   2010) bahwa   terapi   ekstrak   biji   mahoni   dapat menurunkan   kadar   glukosa   darah   tikus diabetes mellitus. Penurunan kadar glukosa darah terjadi dikarenakan adanya perbaikan jaringan   pankreas,   sehingga   dapat meningkatkan   sekresi   insulin   akibatnya glukosa dalam darah dapat diserap kedalam sel   dan   dapat   diubah   menjadi   energi   atau disimpan dalam bentuk glikogen dalam hati dan otot. Hal ini juga sesuai dengan analisa korelasi antara kadar glukosa darah dengan insulin yang mempunyai hubungan (korelasi) negatif   yang   bermakna   (p<0,05),   dimana peningkatan   kadar   insulin   plasma   dapat menurunkan kadar glukosa darah.
Menurut   Maiti   et   al   (2009)   senyawa swietenine   yang   diisolasi   dari   jenis Swietenia   macrophylla   memiliki   efek hipoglikemik yang dapat menurunkan kadar glukosa   darah   (15).   Ekstrak   biji   mahoni mengandung senyawa-senyawa yang terdiri dari   flavonoid,   alkaloid,   terpenoid, antraquinon,   cardiac   glycosides,   saponin
dan volatile oils (6, 7) yang terbukti memiliki aktivitas antioksidan. Aktivitas antioksidan ini mampu   menangkap   radikal   bebas   yang menyebabkan   perbaikan   pada   kerusakan sel   beta   pankreas   penyebab   DM   tipe   1. Dengan   adanya   perbaikan   pada   jaringan pankreas, maka terjadi  peningkatan  jumlah insulin   didalam   tubuh   sehingga   glukosa darah   akan   masuk   kedalam   sel   sehingga terjadi   penurunan   glukosa   darah   dalam tubuh.
Pengaruh   hipoglikemik   ekstrak metanol   biji   mahoni   tidak   sesuai   dengan dosis   yang   diberikan,   artinya   pada peningkatan   dosis   dari   250   mg/kgBB menjadi   400   mg/kgBB   cenderung meningkatkan   kadar   glukosa   darah. Keadaan   ini   kemungkinan   disebabkan karena   kandungan   ekstrak   metanol   biji mahoni yang kompleks yang masing-masing dapat   bekerja   secara   non   spesifik   pada kadar   glukosa   darah   tikus   yang   diinduksi MLD-STZ. Peningkatan kadar glukosa darah tikus yang diterapi dengan ekstrak metanol biji   mahoni   dosis   400   mg/kgBB kemungkinan juga menyebabkan kandungan   antioksidan   yang   banyak terdapat dalam ekstrak metanol biji mahoni yang berubah menjadi prooksidan.
Perbaikan   Jaringan   Pankreas   (Derajat Insulitis) Tikus Kontrol, Tikus DM dan Tikus DM   yang   Mendapat   Terapi   Ekstrak   Biji Mahoni
Induksi   agen   diabetonik   STZ menyebabkan   peradangan   sel   beta pankreas   (insulitis).   Insulitis   merupakan suatu   penyusupan   atau   infiltrasi   sel-sel mononuclear   ke   dalam   pulau   langerhans dari   jaringan   pankreas.   Pada   insulitis   sel yang mendominasi adalah sel mononuclear (makrofag,   limfosit   dan   monosit)   (21). Tingkatan   infiltrasi   sel-sel   mononuclear   ke dalam   pulau   langerhans   pada   jaringan pankreas   dapat   diketahui   dengan menghitung   derajat   insulitis.   Skor   derajat insulitis   berkisar   antara   0-4.   Skor   0,   tidak ditemukan   lesi;   skor   1,   terdapat   insulitis <25%;   skor   2,   <50%   pulau   langerhans diinfiltrasi;   skor   3,   <75%   pulau   langerhans diinfiltrasi; skor 4, >75% mengalami infiltrasi atau degenerasi.
Berdasarkan analisa statistik menunjukkan   perbaikan   jaringan   pankreas tikus   terapi   bahwa   berbeda   sangat   nyata
(p<0,05)   dengan   tikus   DM.   Hal   ini menunjukkan bahwa secara signifikan terapi ekstrak metanol biji mahoni pada tikus DM dapat   menurunkan   skor   derajat   insulitis jaringan pankreas. Pemberian terapi ekstrak biji   mahoni   dosis   100;   250;   400   mg/kgBB menunjukkan   penurunan   skor   derajat insulitis   yang   berakibat   pada   perbaikan kerusakan   jaringan   pankreas.   Ekstrak   biji mahoni mengandung senyawa-senyawa dan bahan   aktif   yang   memiliki   aktivitas antioksidan.   Selain   itu   menurut   (8)   ekstrak biji   mahoni   mempunyai   efek   farmakologi sebagai   antiinflamasi.  Aktivitas   antioksidan pada   ekstrak   biji   mahoni   mampu menangkap   radikal   bebas,   sehingga   dapat terjadi   perbaikan   pada   kerusakan   jaringan pankreas.   Dengan   demikian   proses terjadinya   radang   akan   berkurang   dan aktivitas   makrofag   pun   juga   terhambat sehingga   terjadi   penurunan   fagositosis   sel beta pankreas.
Pengaruh Ketiga Dosis Ekstrak Metanol Biji Mahoni   Terhadap   Kadar   Glukosa   Darah, Kadar Insulin,   Ekspresi TNF-α  dan Derajat Insulitis
Ekstrak   metanol   biji   mahoni   secara bermakna   (p<0,05)   dapat   menurunkan kadar   glukosa   darah,   meningkatkan   kadar insulin plasma, menurunkan ekspresi TNF-α dan   menurunkan   derajat   insulitis   pada kerusakan   jaringan   pankreas   tikus   yang diinduksi   MLD-STZ.   Terlihat   pada   Table   5 dari ketiga dosis terapi ekstrak metanol biji mahoni,   dosis   250   mg/kgBB   merupakan dosis   yang   menunjukkan   hasil   yang   paling mendekati   tikus   kontrol   baik   itu  dilihat   dari penurunan   kadar   glukosa   darah, pengingkatan   kadar   insulin,     penurunan ekspresi TNF-α maupun penurunan derajat insulitis pada perbaikan jaringan pankreas.
Pada   dosis   400   mg/kgBB   efeknya justru lebih kecil dibandingkan dengan dosis 250   mg/kgBB.   Hal   tersebut   kemungkinan terkait   dengan   banyaknya   kandungan senyawa   dan   bahan   aktif   yang   ada   pada ekstrak   biji   mahoni   yang   kompleks   yang masing-masing   dapat   bekerja   secara   tidak spesifik  pada  tikus  hasil   induksi   MLD-STZ. Hal ini sering dijumpai pada aktivitas ekstrak bahan   alam   yang   merupakan   campuran multikomponen.   Dimana   komponen- komponen   tersebut   dapat   saling   sinergis, aditif maupun antagonis. Kemungkinan pada
dosis yang lebih besar ekstrak metanol biji mahoni   dapat   memperparah   atau   tidak berpengaruh   pada   perbaikan   kerusakan jaringan   pankreas   juga   tidak   dapat diabaikan.   Atau   juga   kemungkinan   diduga peningkatan   dosis   ekstrak   metanol   biji mahoni   dari   250   menjadi   400   mg/kgBB menyebabkan   kandungan   senyawa- senyawa dalam biji mahoni yang  bertindak sebagai   antioksidan   mengalami   perubahan menjadi prooksidan. Keadaan ini juga sesuai dengan   pendapat   Gordon   (1993)   yang menyatakan   bahwa   besar   konsentrasi antioksidan   yang   ditambahkan   dapat berpengaruh pada laju  oksidasi (22). Pada konsentrasi tinggi, aktivitas antioksidan grup fenolik   sering   lenyap   bahkan   antioksidan tersebut berubah menjadi prooksidan. Oleh karena   itu   peningkatan   dosis   ekstrak   biji mahoni   sebagai   antioksidan   dapat mengubah   fungsi   antioksidan   sehingga beralih   fungsi   menjadi   prooksidan   yang dapat   merusak   sel   sebagaimana   radikal bebas. Untuk itu perlu dikaji lebih lanjut efek toksik   dari   ekstrak   metanol   biji   mahoni dalam   kaitannya   dengan   penggunaannya sebagai   terapi   protektif   pada   perbaikan kerusakan jaringan pankreas.
Gambar 6. Antioksidan bertindak sebagai prooksidan   pada   konsetrasi tinggi (Gordon, 1993)
Berdasarkan   hasil   analisa   regresi kuadratik,   pertama  pada   analisa   hubungan dosis   perlakuan   dengan   kadar   glukosa darah   terlihat   adanya   penurunan   kadar glukosa darah sampai titik maksimum yaitu pada   pemberian   dosis   maksimum   308,857 mg/kgBB   dengan   kadar   glukosa   darah sebesar   81,052   mg/dL.   Namun   pada pemberian dosis melebihi 308,857 mg/kgBB kadar   glukosa   darah   mengalami peningkatan   kembali.   Kedua   pada   analisa hubungan   dosis   perlakuan   dengan   kadar insulin   terjadi   peningkatan   kadar   insulin sampai   pada   titik   maksimum   yaitu   pada dosis   290   mg/kgBB   dengan   kadar   insulin sebesar   2,865   ng/dL.   Namun   pada pemberian   dosis   melebihi   290   mg/kgBB kadar insulin mengalami penurunan kembali.
Ketiga pada analisa hubungan dosis dengan ekspresi  TNF-α   terjadi   penurunan   ekspresi TNF-α   sampai   pada   titik   maksimum   yaitu pada   dosis   290   mg/kgBB   dengan   nilai ekspresi TNF-α sebesar 5,152. Namun pada pemberian   dosis   melebihi   290   mg/kgBB ekspresi   TNF-α   mengalami   peningkatan kembali.   Keempat   pada   analisa   hubungan dosis perlakuan dengan kerusakan jaringan pankreas   (derajat   insultis),   dimana   terjadi penurunan   kerusakan   jaringan   pankreas sampai   pada   titik   maksimum   yaitu   pada dosis 298,31 mg/kgBB dengan nilai derajat insulitis   sebesar   18,65.   Namun   pada memberian   dosis   melebihi   dosis   298,31 mg/kgBB   kerusakan   jaringan   pankreas (derajat   insulitis)   mengalami   peningkatan kembali.
Berdasarkan   hasil   analisa   tersebut dapat memberikan informasi rata-rata dosis maksimum yang  diberikan  pada  tikus  hasil induksi   MLD-STZ.   Rata-rata   dosis   ekstrak biji   mahoni   maksimum   sebesar   296,792 mg/kgBB yang memberikan pengaruh yang maksimum   pula   pada   penurunan   kadar glukosa darah, kadar insulin, ekspresi TNF-α dan dalam memperbaiki kerusakan jaringan pankreas. Penggunaan dosis yang melebihi dosis   296,792   mg/kgBB   akan   memberikan dampak   negatif,   sehingga   dalam pengunaannya harus dengan kehati-hatian.

## Kesimpulan
Berdasarkan   hasil   penelitian   yang telah   dilakukan,   dapat   ditarik   kesimpulan bahwa:
Pemberian terapi ekstrak methanol biji mahoni   dosis   100;   250   dan   400   mg/kgBB pada   tikus   yang   diinduksi   MLD-STZ menunjukkan   penurunan   kadar   glukosa darah   berturut-turut   sebesar   55,47%; 81,01% dan 73,63%
Pemberian terapi ekstrak methanol biji mahoni   dosis   100;   250   dan   400   mg/kgBB pada   tikus   yang   diinduksi   MLD-STZ menunjukkan   adanya   perbaikan   gambaran histologis jaringan pankreas dan dosis yang memberikan efek mendekati kontrol adalah dosis 250 mg/kgBB yang menunjukkan efek optimal dari penurunan kadar glukosa darah sebesar   70%   dan   perbaikan   jaringan pankreas yang rusak sebesar 76,17%.
Daftar Pustaka
1. Sivakumar   S.,   Subramanian   SP.   2009. Pancreatic tissue protective nature of D- Pinitol   studied   in   streptozotocin- mediated   oxidative   in   experimental diabetic   rats.   Eur.J   of   Pharmacol, 622:56-70.
2. WHO. 2006. Diabetes. http://www.who.int/mediacentre/factshee ts/fs312/en/
3. [ADA]   American   Diabetes   Association. 2011.   Standards   of   Medical   Care   in Diabetes-2011.   Diabetes   Care,   Vol.34, DOI:10.2337/dc11-S011.
4. [Depkes   RI]   Departemen   Kesehatan
Republik   Indonesia.   2011.     Jumlah Penderita   Diabetes   Indonesia   Ranking ke-4 Di Dunia http://www.depkes.go.id/index.php? option=news&task=viewarticle&sid=118
3&Itemid=2.   direkam   pada   12   Maret 2011.
5. Karen   G.B.,   Iris   R.   2010.   Imunologi Dasar. Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta
6. Hajli   Z.   2011.   Isolasi   Senyawa Golongan   Flavonoid   Biji   Mahoni ( Swetenia   mahagoni Jacq)   yang Berpotensi   sebagai   Antioksidan. Fakultas   Matematika   dan   Ilmu Pengetahuan   Alam.   Institut   Pertanian Bogor.
7. Sahgal   G,   S.   Ramanathan,   S. Sasidharan,   MN.   Mordi,   S.   Ismail   and SM. Mansor.  2009. Phytochemical  and antimicrobial   activity   of   Swietenia mahagoni   crude   methanolic   seed extract. Tropical Biol 26:274-279.
8. Ghosh S., SE. Besra, K. Roy, JK. Gupta and   JR.   Vedasiromoni.   2009. Pharmacological   effects   of   methanolic extract   of Swetenia   Mahagoni Jacq (meliaceae) seeds. Int J Green Pharm; 3:206-10
9. Debasis De., C. Kausik, M.A. Kazi, and K.B.   Tushar.   2010.   Antidiabetic Potentiality   of   the  Aqueous-Methanolic Extract of Seed of Swetenia  mahagoni (L.) Jacq . In   Streptozotocin-Induced DiabeticMale  Albino   Rat:  A  Correlative and   Evidence-Based   Approach   with Antioxidative   and   Antihyperlipidemic Activities Hindawi Publishing Corporation Evidence-Based Complementary   and   Alternative Medicine   Volume   2011,   Article   ID
892807, 11 pages doi:10.1155/2011/892807. 10. Benjamin E.M. 2002. Self Monitoring of Blood   Glucose:   The   basics.   Clinical Diabetes, 20(1):454-457
11. Aulanni’am.
2011. Superoxide Dismutase   (SOD)   Activity   and Histological   Pancreas   of   Type   1 Diabetes   Mellitus   Rats   Which   Get   the Temu   Giring   ( Curcuma   heyneana ) Extract   Treatment.   Media   Kedokteran Hewan Vol.27-No1.
12. Nurdiana.N, Permatasari, Setyawati dan M.   Ali.   1998.   Efek   Streptozotocin sebagai Bahan Diabetogenik pada Tikus Wistar dengan Cara Intraperitonial dan Intravena. Majalah Kedokteran Unibraw.
Vol. XIV no.2: hal 66-77.
13. Nugroho BA, dan E. Puwaningsih. 2004. Pengaruh   diet   ekstrak   rumput   laut
( Eucheuma sp. ) terhadap kadar glukosa darah   tikus   putih   ( Rattus   norvegicus ) hiperglikemik.   Media   Medika   Indonesia Vol.39 No. 3, 2004 : 154 – 60.
14. Linghuat   R.,   2008.   Uji   Efek   Ekstrak Etanol Biji Mahoni ( Swetenia mahagoni Jacq) Terhadap Penururnan Kadar Gula Darah   Tikus   Putih,   Fakultas   Farmasi
Universitas Sumatra Utara, Medan.
15. Maiti   A.,   S.   Dewanjee   dan   R.   Sahu. 2009.   Isolation   of   Hypoglycemic Phytoconstituent   from Swetenia macrophylla Seeds.   Phytother   Res. 23:1731-33
16. Wahyu   W,   2008.   Potensi   Antioksidan sebagai   Antidiabetes,   JKM,   Vol.   7 No.2:193-202.
17. Lugasi  A,   J.   Hovari,   KV.   Sagi,   and   L. Biro.   2003.   The   role   of   antioxidant phytonutients   in   the   prevention   of diseases. Acta Biol Szeged 47:119-125.
18. Botutihe.   2010.   Efek   Ekstrak   Rumput Laut   Coklat   ( Sargasum   duplicatum Bory ) terhadap Profil Radikal Bebas dan
Protein   Kinase   C   Paru   Tikus   ( Rattus novegicus ) yang dipapar Benzo[A]piren. Tesis Program Pascasarjana Universitas Brawijaya Malang. 19. Geethaa,   Sahgal,   S.   Ramanathan,
S.Sasirdharan,   M.   Nizam,   Mordi,   S. Ismail   and   S.M.   Mansor.   2010.   Brine shrimp   lethality   and   acute   oral   toxicity studies   on Swetenia   mahagoni   (Linn) Jacq . Seed   methanolic   extract,
Pharmacogn Res. 2(4):215-220.
20. Li DD, J.H. Chen, Q. Chen, G.W. Li, J. Chen, J.M. Yue, M.L. Chen, X.P. Wang, J.H.   Shen   and   H.L.Jiang.   2005. Swetenia   mahagony extract   shows agonistic   avtivity   to   PPARγ   and   gives ameliorative   effects   on   diabetic   db/db mice. Acta Pharmacol Sinica. 26(2):220- 22.
21. Robinovitch   A.,   W.   Suarez-Pinzon,   L. Sorensen,   R.   Bleackley,   and   C.Power R.F.   1995.IFNγ   Gene   Expression   in Pancreatic Islet Infiltrating Mononuklear Cells   Correlates   With   Autoimmune Diabetes in  Non Obese Diabetic  Mice. Journal Immunology, 154:4874-4882