## MEMBRAN PLASMA UTUH SPRMATOZOA EPIDIDIMIS KAMBING PERRANAKAN ETTAWA DALAM NATRIUM KLORIDA DENGAN KONSENTRASI BERBEDA
Arsiwan 1 , Takdir Saili 2 , La Ode Baa 2 , Syam Rahadi 2
1) Alumnus Fakultas Peternakan UHO
2) Fakultas Peternakan UHO Kendari

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  daya  tahan  membran  plasma  spermatozoa kambing  Peranakan  Etawa  (PE)  dalam  larutan  NaCl  dengan  konsentrasi  berbeda.  Penelitian  ini dilaksanakan di Laboratorium Unit Reproduksi Ternak Fakultas Peternakan Universitas Halu Oleo, pada  bulan  Juni  2013  sampai  November  2013.  Epididimis  dikoleksi  dari  rumah  pemotongan  dan spermatozoa  dikoleksi  dari  epididimis  menggunakan  metode  penyayatan.  Penelitian  ini menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  lima  perlakuan.  Perlakuan  tersebut  terdiri dari NaCl 0.7% (T1), NaCl 0.8% (T2), NaCl 0.9% (T3), NaCl 1.0% (T4) dan NaCl 1.1%. Evaluasi membran  plasma  utuh  spermatozoa  menggunakan  Hypo-osmotic  Swelling  Test  (HOS-test).  Data hasil  penelitian  ditransformasi  kedalam  arcsin  sebelum  dianalisis  menggunakan  analisis  varian, perbedaan  antara  perlakuan  dianalisis  dengan  Uji  Jarak  Berganda  Duncan.  Hasil  penelitian  ini menunjukan rata-rata membran plasma utuh berbeda sangat nyata (P>0,01), yaitu T3 (87.92%), T4 (87.60%), T2 (85.17%), T1 (78.53%), dan T5 (75.79%). konsentrasi larutan NaCl 0.9% merupakan medium  terbaik  untuk  mempertahankan  keutuhan  membrane  plasma  spermatozoa  epididimis kambing PE.
Kata Kunci : Kambing PE, Spermatozoa Epididimis, Membran Plasma Utuh.

## ABSTRACT
The objective of this study was to evaluate the integrity of plasma membrane of epididymal spermatozoa  of  Peranakan  Etawa  (PE)  goat  in  different  concentrations  of  sodium  chloride  (NaCl) solution.  The  research  was  conducted  in  laboratory  of  Animal  Reproduction  of  Animal  Science Faculty,  Halu  Oleo  University  from  June  to  November  2013.    Testical  epididymis  was  collected from  slaughter  house  and  spermarozoa  was  taken  from  epididymis  using  slicing  method.  The experimental design used in this study was completely randomized design with five treatments. The treatments  were  0.7%  NaCl  (T1),  0.8%  NaCl  (T2),  0.9%  NaCl  (T3),  1.0%  NaCl  and  1.1%  NaCl. Membrane  integrity  of spermatozoa was assed using Hypo-osmotic Swelling Test (HOS-test). The data  collected  was  transformed  using  arcsin  before  analized  using  variance  analysis,  while differences between treatments was analyzed using Duncan Multiple Range Test. The results of this study  showed  that  the  highest  averages  of  membrane  integrity  of  epididymal  spermatozoa  of    PE goat  was occurred in T3 (87.92%), followed by T4 (87.60%), T2 (85.17%), T1 (78.53%), and T5 (75.79%).  Based on those results, it was concluded that 0.9% NaCl solution was the best medium for maintaining the integrity of plasma membrane of epididymal spermatozoa of PE goat.
Keywords: PE Goat, Epididymal Spermatozoa, Membrane Integrity.

## PENDAHULUAN
Kambing  peranakan  etawa  (PE)
merupakan ternak ruminansia kecil dengan tingkat prolifikasi yang tinggi dan potensi  genetik  yang  baik,  menduduki posisi yang sangat penting untuk dikembangkan  (Rusdin,  2006).  Kambing PE merupaka kambing tipe dwiguna yaitu sebagai penghasil susu dan daging.
Rata-rata  bobot  badan  kambing  PE jantan apabila dipelihara dengan manajemen  yang baik dapat mencapai 40 kg/ekor,  sedangkan  kambing  PE  betina dapat mencapai 35 kg/ekor, serta umumnya  melahirkan  2  ekor  anak  sekali melahirkan  (Mulyono,  2003).  Melihat potensi  genetik  yang  dimiliki,  kambing PE  sangat  baik  apabila  digunakan  untuk meningkatkan  produktivitas  kambing- kambing lokal lainnya.
Peningkatkan potensi genetik ternak
dapat dengan cara persilangan. Persilangan ternak dapat dilakukan dengan  cara  kawin  alam  maupun  kawin suntik  atau  inseminasi  buatan  (IB). Keterbatasan populasi ternak kambing PE menjadi  salah  satu  faktor  penghambat terjadinya  peningkatan  mutu  genetik ternak.  Saat  ini,  faktor  keterbatasan populasi  bukanlah  satu-satunya  faktor penghambat  peningkatan  mutu  genetik ternak.  Faktor  penghambat  lain  adalah tidak  tersedianya  semen  beku  kambing PE  ataupun  kambing-kambing  unggul lainnya  yang  dapat  dijadikan  sebagai salah salah satu alternatif dalam meningkatkan mutu genetik ternak melalui  IB.  Salah  satu  tindakan  alternatif yang dapat dilakukan untuk
menyelamatkan  potensi  genetik  ternak yang  telah  dipotong yaitu  dengan
melakukan pemanfaatan spermatozoa epididimis.  Pemanfaatan  spermatozoa dari bagian epididimis memberikan
harapan baru  untuk mengumpulkan material genetik hewan jantan.
Spermatozoa  yang  dikoleksi  dari epididimis  ternak  atau  hewan  yang  telah dipotong  belum  dimanfaatkan  secara optimal  sebagai  salah  satu  alternatif sumber  spermatozoa  untuk  memenuhi kebutuhan  dalam  penerapan  berbagai teknologi  reproduksi  (Rizal  dan  Herdis, 2005).  Epididimis  mempunyai  fungsi utama  sebagai  tempat  penyimpanan spermatozoa sebelum diejakulasikan, transportasi, konsentrasi, dan
pendewasaan  spermatozoa  (Ismudiono dkk.,  2010;  Feradis,  2010).  Konsentrasi spermatozoa  pada  bagian  epididimis kurang lebih 4.000.000 per mm 3 (Ismudiono dkk., 2010). Untuk menggunakan  spermatozoa  epididimis sebagai  alternatif  penyelamatan  genetik unggul  dari  ternak-ternak  yang  dipotong, perlu dilakukan evaluasi terhadap kualitas spermatozoa yang terdapat dalam epididimis  tersebut  untuk  memprediksi kemampuan membuahi sel telur.
Evaluasi  kualitas  semen  sangat penting  dalam  memprediksi  fertilitas spermatozoa  hewan  ternak  (Dhurvey dkk . ,  2012).  Secara  umum  analisa kualitas  semen  dilakukan  dengan  melihat konsentrasi  sel  spermatozoa,  motilitas, morfologi, dan vitalitas, masih digunakan untuk memprediksi  fertilitas  spermatozoa di banyak laboratorium inseminasi ternak dan  manusia  (Mansour,  2009).  Karena kompleksnya  proses  fertilisasi,  pengujian salah satu parameter evaluasi semen tidak dapat  memprediksi  fertilitas    (Dhurvey dkk . , 2012).
Beberapa tahun ini, banyak perhatian  yang  diberikan  pada  evaluasi membran plasma utuh (MPU), karena  hal ini  sangat  penting  dan  mendasar  dalam proses  fertilisasi  (Lodhi  dkk ., 2008).
Beberapa proses fisiologi selama
fertilisasi  (kapasitasi,  reaksi  akrosom, penyatuan  spermatozoa,  dan  sel  telur) membutuhkan  membran  yang  aktif  dan tidak  mungkin  dapat  fertilisasi  dengan kondisi  membran  yang  tidak  aktif (Jeyendra  dkk . ,  1984).  Fungsi  keutuhan membran  plasma  spermatozoa  adalah sebuah faktor penting dalam metabolisme spermatozoa,  kapasitasi,  reaksi  akrosom, dan pengikatan spermatozoa pada permukaan sel telur (Baqir dkk . , 2009).
Sebagian  besar  proses  metabolisme sel  memerlukan  dan  dipengaruhi  oleh elektrolit.  Konsentrasi  elektrolit  tubuh menentukan  tekanan  intra  sel  dan  ekstra sel. Menurut Yaswir dan Ferawati (2012), menjaga  tekanan  osmotik  dan  distribusi beberapa  kompartemen  cairan  tubuh adalah  fungsi  utama  empat  elektrolit mayor,  yaitu  natrium  (Na + ),  kalium  (K + ), klorida  (Cl - ),  dan  bikarbonat  (HCO3 - ). Lebih dari 90% tekanan osmotik di cairan ekstrasel  ditentukan  oleh  garam  yang mengandung  natrium,  khususnya  dalam bentuk  natrium  klorida  (NaCl),  sehingga perubahan tekanan osmosis cairan ekstrasel menggambarkan perubahan konsentrasi natrium (Yaswir dan Ferawati, 2012). Berdasarkan sejumlah hasil penelitian tersebut, maka perlu dilakukan suatu kajian mengenai MPU spermatozoa epididimis  kambing  PE  dalam  NaCl dengan konsentrasi berbeda, untuk menjadikan spermatozoa epididimis sebagai  alternatif  yang  dapat  digunakan untuk  menjaga  potensi  genetik  ternak yang  dipotong  atau  ternak  yang  tidak dapat  merespon  vagina  buatan,  massage, dan  elektroejakulator  untuk  ditampung semennya.
METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Unit  Reproduksi  Ternak Fakultas  Peternakan  Universitas  Halu Oleo,  dimulai  pada  bulan  Juni  2013 sampai  November  2013.    Bahan  yang digunakan dalam penelitian yaitu epididimis  kambing  PE  yang  diperoleh dari tempat pemotongan kambing
Pesantren Hidayatullah Kecamatan Kambu  Kota  Kendari,  spritus,  eosin negrosin, dan NaCl. Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  mikroskop,  objek glass,  cover  glass,  bunsen,  oven,  pipet tetes, dan pisau pemotong.

## A. Prosedur Penelitian
1. Pembuatan Medium Osmolalitas Medium osmolalitas dibuat dengan  cara  melarutkan  NaCl  kedalam aquadest  yang  telah  diukur  volumenya. NaCl  yang  digunakan  pada  tiap-tiap perlakuan  di  timbang  terlebih  dahulu dengan  menggunakan  timbangan  analitik sebelum dilarutkan dalam aquadest sesuai dengan konsentrasinya.  Perbandingan antara  aquadest  dan  NaCl  menggunakan perbandingan  volume/gram.  Sehingga untuk  perlakuan  NaCl  7%,  jumlah  NaCl yang  dilarutkan  dalam  100  ml  aquadest yaitu  0,7  g  NaCl.  Begitu  pula  dengan medium osmolalitas 0,8% NaCl/ml (0,8 g NaCl dilarutkan dalam 100 ml aquadest), 0,9%  NaCl/ml  (0,9  g  NaCl  dilarutkan dalam  100  ml  aquadest),  1%  NaCl/ml  (1 g  NaCl  dilarutkan  dalam  100  ml aquadest), dan 1,1% NaCl/ml (1,1 g NaCl dilarutkan dalam 100 ml aquadest).
2. Persiapan Spermatozoa
Sampel  testis  yang  diambil  dari tempat  pemotongan  kambing,  dibawa  ke laboratorium  dan  dibersihkan  terlebih dahulu  dengan  air  bersih  sebelum dipisahkan antara testis dan epididimisnya.  Testis  dipisahkan  dari
skrotumnya  dan  dipotong  pada  batas vas deferens . Pemisahan epididimis dari testis dilakukan  dengan  memotong  bagian epididimis  sampai  terpisah  dengan  testis. Kemudian  dilakukan  evaluasi  kualitas spermatozoa  sesuai  dengan  paramater yang telah ditentukan
(analisis spermatozoa  yang  diamati  yaitu  warna, konsentrasi, bau, abnormalitas, dan
motilitas massa. 3. Perlakuan Spermatozoa Konsentrasi yang digunakan sebagai perlakuan untuk mengukur keutuhan  membrane  plasma  spermatozoa yaitu  NaCl  dengan  konsentrasi  0,7%/ml aquadest  (P1),  NaCl  0,8%/ml  aquadest (P2),  NaCl  0,9%/ml  aquades  (P3),  NaCl 1%/ml  aquadest  (P4), dan  NaCl  1,1%/ml aquadest (P5). Setiap perlakuan
dicampurkan  dengan  spermatozoa  yang berasal  dari  epididimis  dengan  volume spermatozoa  0,1-0,2  ml/ml  perlakuan. Kemudian  campuran  sperma  tersebut disimpan  dalam  oven  dengan  suhu  37 0 C
selama 1 jam.
4. Analisis MPU Spermatozoa Penilaian kemampuan hidup spermatozoa (viabilitas spermatozoa) diukur  melalui  membran  plasma  utuh (MPU).  Evaluasi  terhadap  keutuhan membran plasma spermatozoa (persentase MPU)  dilakukan  dengan  menggunakan metode HOS test.
Pengamatan membran plasma utuh spermatozoa,  dilakukan  dengan  cara meneteskan  setetes  campuran  sperma (campuran sperma dan larutan osmolalitas  yang telah diinkubasi) di atas kaca  objek  dan  ditutup  dengan  kaca penutup, lalu diamati di bawah mikroskop dengan  perbesaran  400  kali.  Kemudian dilakukan  perhitungan  spermatozoa  yang masih  memiliki  MPU  dan  spermatozoa yang  membrannya  sudah  mengalami kerusakan.
Spermatozoa  dengan  membran  yang masih utuh akan menahan cairan hipoosmotik  di  dalam  sel,  sehingga ekornya  terlihat  melingkar  atau  bengkok, sedangkan spermatozoa dengan ekor yang lurus  menunjukkan  membran  plasma telah  mengalami  kerusakan,  karena  tidak mampu menahan air yang masuk .

## B. Variabel Penelitian
Evaluasi kualitas spermatozoa dilakukan dengan dua tahapan yaitu tahap pemeriksaan  secara  makroskopis  dan pemeriksaan secara mikroskopis.
1. Evaluasi Makroskopis a. Warna Spermatozoa Warna spermatozoa dilihat langsung  dari  gelas  ukur  penampungan spermatozoa, pada umumnya
spermatozoa  segar  berwarna  putih  susu, crem atau kekuningan.
b. Bau Spermatozoa
Bau  spermatozoa  dapat  dengan mencium spermatozoa secara langsung. c. Konsistensi Spermatozoa Pengamatan  konsistensi  dengan pengamatan secara langsung sesaat setelah dilakukan penampungan spermatozoa.
2. Evaluasi Mikroskopis
a. Persentase Motilitas Spermatozoa Pergerakan  massa  diamati  dengan meneteskan  sperma  diatas  gelas  objek hangat  kemudian  diamati  di  bawah mikroskop  dengan  perbesaran  10  x  10 dan diberikan skor.
b. Persentase Abnormalitas Spermatozoa Persentase  abnormalitas    diamati dengan  mikroskop  perbesaran  400x. Perhitungan  abnormalitas  spermatozoa adalah jumlah spermatozoa yang abnormal dibagi dengan 200 spermatozoa yang  terlihat  dikali  seratus  persen.
c. Persentase Membran Plasma Utuh (MPU) Spermatozoa Persentase MPU adalah keutuhan membran  plasma  spermatozoa  diamati dengan  metode  HOS  test.  Spermatozoa dengan membran plasma yang masih utuh akan  menahan  cairan  osmolalitas  dalam sel, sehingga ekor terlihat melingkar atau membengkok  sedangkan  spermatozoa dengan  ekor  yang  lurus  menunjukkan membran plasma telah mengalami karusakan  karena  tidak  mampu  menahan cairan yang masuk ke dalam sel.
C. Analisis Data
Data  semen  segar  yang  diperoleh dari  penelitian  ini  dianalisis  deskriptif yaitu  warna,  bau,  konsistensi,  motilitas massa  dan  abnormalitas  spermatozoa. Data MPU dianalisis ragam dalam bentuk RAL  setelah  data  persentasi  MPU ditransformasi  dalam  arcsin.  Perbedaan antara  perlakuan  diuji  dengan  Uji  Jarak Berganda Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Pengamatan Kualitas Makroskopik Spermatozoa Epididimis
Hasil evaluasi kualitas segar spermatozoa epididimis  ini  memberikan  gambaran karakteristik spermatozoa epididimis kambing  PE    yang  normal.  Hasil pengamatan kualitas makroskopik spermatozoa  epididimis  dalam  penelitian ini disajikan pada Tabel 3.
Rata-rata  hasil  pengamatan  warna spermatozoa epididimis kambing PE yang diperoleh dari kedelapan buah testis  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu berwarna putih, yang berarti spermatozoa tersebut  tidak  terkontaminasi  oleh  darah ataupun yang lainnya. Warna spermatozoa  epididimis  berbeda  dengan warna  semen  hasil  ejakulasi.  Perbedaan tersebut  disebabkan  oleh  kandungan semeninal  plasma  dan  riboflavin  yang terdapat  dalam  seminal  plasma  pada semen  hasil  ejakulasi  Warna  yang  jelek adalah  hijau  kekuning-kuningan  karena diduga mengandung kuman Pseudomonas auroginosa dan  bila  kemerah-merahan mengindikasikan  spermatozoa  bercampur darah (Rusdin, 2006).
Rata-rata hasil pengamatan
konsistensi spermatozoa epididimis
kambing PE yang diperoleh dari kedelapan  buah  testis  yang  digunakan dalam penelitian yaitu kental. Konsistensi berhubungan dengan konsentrasi spermatozoa,  semakin  kental  semen, maka  akan  semakin  tinggi  konsentrasi spermatozoa yang terkandung didalamnya.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat Ningsih (2007) bahwa kekentalan  semen  akan  naik  selaras dengan kenaikan konsentrasi spermatozoa. Derajat kekeruhannya tergantung pada konsentrasi
Tabel 3. Data hasil pengamatan kualitas makroskopik semen epididymis
Testis Variabel Pengamatan Warna Bau Konsistensi I Putih Khas Kental II Putih Khas Kental III Putih Khas Kental IV Putih Khas Kental
Warna,  konsistensi,  dan  konsentrasi spermatozoa  merupakan  parameter  yang saling  berkaitan,  karena  warna  ditentukan oleh  kepadatan  (konsentrasi)  spermatozoa dan  juga  akan  termanifestasikan  pada konsistensi  spermatozoa  (Kostaman  dan Sutama,
2007). Berdasarkan nilai makroskopik spermatozoa dapat ditentukan  lebih  awal  bahwa  bahwa spermatozoa yang diperoleh dari epididimis, merupakan gambaran
sesungguhnya  kualitas  spermatozoa  yang terdapat dalam epididimis. Menurut Rusdin  (2006),  warna,  konsistensi,  dan volume  sangat  menentukan  penentuan pengenceran  dengan  dosis  IB,  demikian pula dengan konsentrasi juga ikut menentukan perlakuan selanjutnya terhadap spermatozoa epididimis. B. Kualitas Mikroskopik Spermatozoa Epididimis Data kualitas mikroskopik spermatozoa  epididimis  hasil  pengamatan dalam  penelitian  ini  disajikan  pada  Tabel 4. Tabel  4.  Data  hasil  pengamatan  kualitas mikroskopik spermatozoa epididymis Variabel Pengamatan Testis Rata- rata I II III IV Persentase Motilitas +++ +++  +++  +++  +++ Abnormal (%) 3,82  3,67  3,77  3,63  3,73%
Spermatozoa  mempunyai  kecenderungan untuk  bergerak  bersama-sama  dalam kelompok,  sehingga  akan  membentuk gelombang  gelombang  tebal  dan  tipis. Berdasarkan  pada  Tabel  4.2  rata-rata persentase motilitas spermatozoa epididimis yang digunakan dalam
penelitian  ini  dikategorikan  sangat  baik. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian yang dilaporkan  oleh  Rusdin  (2006),  bahwa nilai  mikroskopik  semen  kambing  normal yaitu  rata-rata  nilai  persentase  motilitas spermatozoa positif tiga (+++).
Persentase  motilitas  spermatozoa  atau daya gerak spermatozoa umumnya digunakan  sebagai  ukuran  kesanggupan dari  spermatozoa  untuk  membuahi  sel telur  dari  suatu  contoh  spermatozoa dengan  menilai  gerakan  massa  dan gerakan  individual  dari  spermatozoa (Dethan dkk ,. 2010) dan cara  yang paling sederhana  dalam  penilaian  spermatozoa untuk inseminasi
buatan.
Kecepatan/gerakan  spermatozoa  bukan merupakan  satu-satunya  faktor  penentu spermatozoa  untuk  menelusuri  saluran kelamin  betina  sampai  mencapai  tempat pembuahan  di  tuba  fallopi,  namun motilitas  atau  pergerakan  spermatozoa sendiri memegang peranan penting sewaktu pertemuannya dengan ovum. Berdasarkan pada Tabel 4. abnormalitas  spermatozoa  yang  diperoleh dari  pengamatan  ini  menunjukkan  hasil tingkat  abnormalitas  yang  berbeda-beda.
Rata-rata abnormalitas yang diperoleh dari hasil  pengamatan ini yaitu  3,73%. Persentase  abnormalitas  yang  diperoleh dari  hasil  penelitian  ini  lebih  rendah dibandingkan persentase abnormalitas spermatozoa dibeberapa kambing PE yang dilaporkan  dari  beberapa  hasil  penelitian sebelumnya. Rata-rata persentase
spermatozoa  abnormal  asal  epididimis kambing  lokal  Aceh  berkisar  antara 7,23%-10,75%  (Hamdan  dkk . ,  2010), rata-rata 3,4%-6,26% pada semen kambing lokal (Ridwan, 2009) dan semen segar  kambing  PE  rata-rata  15,78% (Winarto dan Isnaini, 2008).
Sedangkan  rata-rata  abnormalitas  semen segar  kambing  PE  yang  dilaporkan  oleh Rusdin  (2007),  berkisar  antara  2,0-2,4%, lebih  rendah  dari  abnormalitas  spermatozoa yang diperoleh dari hasil penelitian  ini, hasil ejakulasi  kambing  ataupun  ternak  lainnya, bila  mempunyai  15%  spermatozoa  abnormal didalam  semennya  akan  menunjukan  gejala infertilitas,  sehingga  ternak  tersebut  tidak layak dijadikan sebagai pejantan.
Abnormalitas  spermatozoa  merupakan kelainan  fisik  dari  spermatozoa  yang  terjadi karena  pada  saat  proses  pembentukan spermatozoa dalam tubuli seminiferi maupun karena proses perjalanan spermatozoa melalui saluran-saluran organ kelamin jantan.  Abnormalitas  spermatozoa  terjadi selain karena faktor heriditer tetapi dipengaruh  juga  oleh  faktor  lain  seperti penyakit  yang  apabila  menyerang  organ reproduksi  akan  menyebabkan  gangguan pada  pertumbuhan  dan  perkembangan  organ reproduksi terutama testis yang akan menyebabkan  produksi  spermatozoa  di dalam  tubuli  seminiferi  tidak  berlangsung secara sempurna (Dethan dkk ,. 2010).
2. Analisis data ditransformasi kedalam arcsin
Hasil  analisis  ragam  penggunaan NaCl  dengan  konsentrasi  berbeda menunjukkan  adanya  perbedaan  yang sangat  nyata  pada  setiap  perlakuan (P>0,01).  Persentase  membran  plasma utuh  yang  tertinggi  diperoleh  dari perlakuan  P3,  tetapi  tidak  berbeda nyata  dengan  perlakuan  P4.  Hal  ini disebabkan  karena  P3  sesuai  dengan kondisi  tubuh  (fisiologis).  Untuk  lebih jelasnya dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar  2.  Kurva  hasil  pengamatan membran  plasma  utuh spermatozoa

## C. Membran Plasma Utuh Spermatozoa dalam NaCl
Data  hasil  pengamatan  membran  plasma  utuh  spermatozoa  epididimis  kambing  PE dalam NaCl dengan konsentrasi berbeda dasajikan dalam Tabel 5.
Tabel 5. Data hasil pengamatan membran plasma utuh spermatozoa
Ulangan Perlakuan P1 P2 P3 P4 P5 1 78.94 85.02 87.83 87.43 74.44 2 78.14 85.22 87.63 87.85 76.53 3 78.53 84.76 88.27 87.71 75.98 4 78.50 85.67 87.94 87.4 76.21 Jumlah 314.11 340.67 351.67 350.39 303.16 Rerata 78.53±0.03 b 85.17±0.05 c 87.92±0.03 de 87.60±0.02 d 75.79±0.19 a
Keterangan: 1.  Superskrip  yang  berbeda  dalam  baris  yang  sama menunjukan  perbedaan  yang  sangat nyata (P>0.01)
78.53 85.17 87,9 87.6 75.79 75 80 85 90 0 2 4 6 % 0,7          0,8           0,9 1,0           1,1 [NaCl]
Perbedaan persentase membran plasma utuh dalam penelitian ini disebabkan  oleh  perbedaan  konsentrasi NaCl pada setiap perlakuan. Hal ini sesuai dengan  pendapat  yang  dikemukakan  oleh Irawan  (2007),  bahwa  pada  keadaan normal,  natrium  (Na)  bersama  dengan pasangan  (terutama  klorida,  Cl)  akan memberikan  kontribusi  lebih  dari  90% terhadap  efektif  osmolalitas  di  dalam cairan ekstraselular.
Keutuhan  membran  plasma  sangat diperlukan  oleh  spermatozoa,  karena kerusakan membran plasma akan berpengaruh  terhadap  proses  metabolisme dan  berhubungan  dengan  motilitas  serta daya hidup spermatozoa yang dihasilkan.
Metabolisme  sel  akan  berlangsung baik  jika  membran  plasma  sel  berada dalam  keadaan  yang  utuh,  sehingga mampu  dengan  baik  mengatur  lalu  lintas masuk  dan  keluar  dari  sel  semua  substrat dan  elektrolit  yang  dibutuhkan  dalam proses  metabolisme  (Surachman  dkk ., 2009).
Menurut  Rizal  dan  Nasrullah  (2004), selama proses  pematangan spermatozoa di dalam  epididimis,  juga  terjadi  perubahan susunan komponen senyawa-senyawa penyusun membran plasma sel spermatozoa. Membran plasma sel spermatozoa  akan  kehilangan  sebagian kolesterol,  sehingga  terjadi  peningkatan nisbah  antara  asam  lemak  tak  jenuh  dan kolesterol  (Rizal  dan  Nasrullah,  2004)  . Hal  ini  menyebabkan  membran  plasma menjadi  lebih  "rapuh"  (fragile).  Kondisi membran plasma yang demikian ini secara fisiologis  memang  dibutuhkan  untuk memudahkan spermatozoa menjalani proses kapasitasi di dalam uterus dan pada waktu  fusi  dengan  membran  plasma  oosit saat terjadi fertilisasi.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini dapat  disimpulkan  bahwa  konsentrasi NaCl  0.9%  mempertahankan  membran plasma  dengan  persentase  tertinggi,  tetapi tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan NaCl 1 %.

## DAFTAR PUSTAKA
Baqir,  M.,  M.R.  Fakhrildin,  dan  B.K. Kouty.  2009.  Outcomes  of  Sperm Parameters,  Hypo-Osmotic  Swelling Test  and  Intra-Uterine  Insemination For Varicocelic and Non-Varicocelic Infertile  Patients.  Journal  Dohuk University, Vol. 12. No. 1 Bearden,  H.J.,  J.W.  Fuquay,  dan  S.T.
Willard.  2004.  Applied  Animal Reproduction.  6 th Edition.  Pearson Prentice Hall. New Jersey.
Devendra,  C.  dan  M.  Burn.1994.  Goat
Production In The Tropics.
Terjemahan  IDK  Harya  Putra.  ITB Bandung.
Dethan,  A.A.,  Kustono,  dan  H.  Hartadi. 2010. Kualitas  dan  Kuantitas  Sperma
Kambing  Bligon  Jantan  Yang  Diberi Pakan Rumput Gajah Dengan Suplementasi  Tepung  Darah. Buletin Peternakan: Vol. 34. No. 3 Dhurvey, M., V.K. Gupta, S.P. Nema,  A. Patidar,  M.  Shivhare,  N.  Singh,  dan V.  Shakya.  2012.  Modern  Semen Evaluation  Techniques  in  Domestic Animals:  A  review.  Double  Helix Research  Internasional  Journal  Of Biomedical  and  Life  Sciences,  Vol. 3. No. 1
Hamdan,  Budianto,  A.  Sutriana,  D.  Aliza,
E.  Rahmi,  dan  A.R.  Dalimunthe. 2010.  Pengaruh  Lama  Penyimpanan Epididimis Pada Suhu 5 o C Terhadap
Kualitas Spermatozoa Kambing Lokal  Aceh.  Jurnal  Kedokteran Hewan: Vol. 4. No. 2 Herdis,  M.,  Surachman,  Yulnawati,  M.
Rizal,  dan  H.  Maheswari.  2008.
Viabilitas  dan  Keutuhan  Membran Plasma Spermatozoa Epididimis Kerbau  Belang  Pada  Penambahan Maltosa Dalam Pengencer Andromeid.  Jurnal  Indonesia  Tropis Animal Agriculture, Vol. 33. No. 2. Husin,  N.,  Stukey,  dan  Kususiyah.  2007. Uji Kualitas Semen Kambing Nubian dan Peranakannya (Kambing Nubian  X  PE)  Serta  Kambing  Boer
Berdasarkan  Lama  Penyimpanan. Jurnal  Sains  Peternakan  Indonesia: Vol. 2. No. 2.
Irawan,  M.A.  2007.  Cairan  Tubuh, Elektolit dan Mineral. Sport Science Brief. Vol. 1. No. 1.
Ismudiono,  P.  Srianto,  H.  Anwar,  A.P. Madyawati, A. Samik, dan E. Safitri. 2010.  Fisiologi  Reproduksi  Pada Ternak.  Airlangga  University  Press. Surabaya.
Kostama,  T.  dan  I.K.  Sutama.  2007. Morfometrik  Organ  Reproduksi  dan Kualitas  Semen  Kambing  Pejantan Muda  Yang  Diberi  Pakan  Jerami Padi  Dan  Jerami  Kedelai.  Seminar Nasional  Teknologi  Peternakan  dan
Veteriner 2007.
Lodhi,  L.,  A.,  M.  Zubair,  Z.I.  Qereshi,  I.
Ahmad dan H. Jamil. 2008. Correlation  Between  Hypo-Osmotic Swelling Test and Various Conventional Semen Evaluation Parameters In Fresh Nili-Ravi Buffalo  and  Sahiwal  Cow  Bull Semen.  Pakistan  Veteriner  Journal, Vol. 28. No. 4
Mansour,  M.,  M.  2009.  Modification  of Hypo-Osmotic  Swelling  Test  to
Evaluate  the  Integrity  of  Stallion Sperm  Plasma  Membrane.  Global Veterinaria, Vol. 3. No. 4 Ridwan. 2009. Pengaruh Pengencer Semen Terhadap  Abnormalitas  dan  Daya Tahan  Hidup Spermatozoa Kambing Lokal  Pada  Penyimpanan  Suhu  5ºC. J. Agroland, Vol. 16. No. 2 Rizal,  M.  dan  Herdis.  2005.  Daya  Hidup
Spermatozoa Epididimis Domba Garut yang Dikriopreservasi Menggunakan  Modifikasi  Pengencer Tris. Jurnal Hayati, Vol. 12. No. 2 Rizal, M. dan Nasrullah. 2004. Pemanfaatan Spermatozoa Epididimis Dalam Teknologi Reproduksi.  Wartazoa:  Vol.  14  No. 1. Rudi,  P.M.M.  2006.  Pengaruh  Pemberian
Cairan  Ringer  Laktat  Dibandingkan Nacl  0,9%  Terhadap  Keseimbangan Asam-Basa  Pada  Pasien  Sectio Caesaria  Dengan  Anestesi  Regional.
Tesis: Program Pasca Sarjana Magister Ilmu Biomedik Dan Program Pendidikan Dokter Spesialis  Anestesiologi  Universitas Diponegoro. Semarang. Rusdin.  2006.  Karakteristik  Semen  Segar Pejantan  Kambing  Peranakan  Etawa (PE)  Di  Balai  Pembibitan  Ternak dan Hijauan Makanan Ternak Garahan, Silo-Jember. Jurnal Agrisains, Vol. 7. No. 2 Surachman,  M.,  Herdis,  Yulnawati,  M. Rizal,  dan  H.  Maheshwari.  2009. Kualitas Semen Cair Asal Epididimis  Kerbau  Belang  dalam Bahan  Pengencer  Andromed  yang Mendapat Penambahan Sukrosa. Media  Peternakan:  Vol.  32  No.  2.