## KANDUNGAN KLOROFIL BERBAGAI JENIS DAUN TANAMAN DAN Cu-TURUNAN KLOROFIL SERTA KARAKTERISTIK FISIKO-KIMIANYA
( Chlorophyll Level of  Various Geen Leaves and Copper-chlorophyll derivatives and its Charaterization )
Nurdin 1 , Clara M. Kusharto 2* , Ikeu Tanziha 2 , dan M. Januwati 3
1 Program Studi Kimia, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Tadulako, Palu.
2* Alamat Korespondensi: Departemen Gizi Masyarakat, Fakultas Ekologi Manusia, Institut Pertanian Bogor, Bogor 16680.  Telp: 0251-8621258; Fax: 0251-8622276; Email:  kcl@indo.net.id
2 Departemen Gizi Masyarakat, Fakultas Ekologi Manusia, Institut Pertanian Bogor, Bogor 16680 3 Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik, Departemen Pertanian, Cimanggu, Bogor

## ABSTRACT
The chlorophyll is well known as natural antioxidant which is commonly high  level in some geen leafy and has potential biological effect for a good  health and  has been proved has antioxidant and antimutagenic activity. In fact, a high content of chlorophyll is available in nature but in contrast its found commercially in Indonesia as imported product with a high price. The objectives of this study were to determine of chlorophyll level  of various leaves (Premna oblongifolia Merr., Saurpus androgynus  Merr. Centella asiatica, and Morus alba L),  to produce copper-chlorophyll derivative powder, and to observe its physico-chemical properties. The research showed that cincau leaf had higher level of chlorophyll than other leaves, meanwhile cincau leaf used as material of copper- chlorophyll derivative. Cincau leaves chlorophyll extract solution with Cu 2+ 100 mg/l level produce the cincau copper-chlorophyll derivative powder with highest  pH, solubility, and geenness compare to other copper levels. The cincau copper-derivate chlorophyll  powder contained chlorophyll 3986 mg/kg,  -carotene 33.8 mg/kg, and contained alkaloid, saponin, tanin, steroid, and glycoside.
Keywords: chlorophyll, Premna oblongifolia Merr., Saurpus androgynus  Merr., Centella asiatica, Morus alba L., copper-chlorophyll derivative

## PENDAHULUAN
Indonesia sebagai negara tropis memiliki kekayaan alam berbagai jenis tumbuhan yang mempunyai kandungan bahan aktif tertentu yang bermanfaat untuk kesehatan. Terdapat kurang lebih dari  7 000 spesies tumbuhan (90% dari spesies tumbuhan Asia) diketahui berkha- siat sebagai obat (BPOM, 2001). Sebagian besar tumbuhan ini (hampir 80%) sudah lama diper- gunakan oleh penduduk lokal sebagai obat- obatan tradisional, namun belum diusahakan secara optimal untuk pengembangan obat yang memberikan nilai ekonomis dan dapat mening- katkan pendapatan petani tanaman itu sendiri.
Daun tumbuhan mengandung berbagai zat gizi maupun non-gizi (metabolit sekunder), seperti vitamin, mineral, serat pangan, beta- karoten, dan klorofil. Konsumsi bahan pangan nabati (sayuran atau dedaunan) sering dikaitkan dengan menurunnya risiko menderita penyakit degeneratif, khususnya penyakit jantung koroner (PJK). Hal ini tidak terlepas
dari kandungan senyawa bioaktif dari pangan nabati tersebut. Senyawa antioksidan alami yang diduga banyak terdapat dalam sayuran atau dedaunan hijau adalah klorofil. Bebera- pa hasil penelitian menunjukkan bahwa kloro- fil dan turunannya memiliki kemampuan seba- gai antioksidan dan antimutagenik (Marquez et al., 2005, Ferruzzi et al., 2006).
Ketersediaan klorofil yang tinggi di alam serta khasiat biologis yang dimilikinya, menja- di peluang untuk dikembangkan sebagai bahan suplemen pangan atau pangan fungsional (Prangdimurti, 2007). Sementara itu suple- men pangan berbasis klorofil yang beredar di Indonesia hampir semuanya merupakan produk impor dan memiliki harga jual yang cukup tinggi.
Penelitian tentang absorpsi dan metabo- lisme klorofil masih terbatas. Hal ini berhu- bungan dengan sifat klorofil alami yang mu- dah terdegadasi oleh asam, panas, cahaya, dan oksigen (Goss, 1991; Kotani et al., 1999).
Klorofil dan turunannya yang mengikat logam mempunyai kapasitas antioksidan dan bioavai- labilitas yang berbeda. Cu-klorofilin sebagai salah turunan klorofil mempunyai aktivitas an- tioksidan yang lebih tinggi dibandingkan klo- rofil alami (Marquez et al., 2005).
Pengikatan logam oleh klorofil bertujuan untuk meningkatkan kestabilan ekstrak klorofil yang dihasilkan (von Elbe et al., 1986; Canjura et al., 1999). Salah satu turunan klorofil yang masih terbatas dipelajari efeknya bagi pence- gahan penyakit degeneratif adalah turunan klorofil yang mengikat logam tembaga (Cu). Tembaga  merupakan salah satu mikromineral essensial selain I, Zn, Se, Mo, dan Cr, mem- punyai tingkat stabilitas kompleks logam de- ngan porfirin yang lebih tinggi. Cheng et al. (1982), menyatakan tingkat stabilitas kompleks logam adalah berturut-turut sebagai berikut: Pt>Pd>Ni>Co>Cu>Fe>Zn>Mn>Mg>Cd>Sn>Hg>Pb> Ba.
Pada penelitian ini ditentukan kandung- an klorofil berbagai daun (cincau, katuk, mur- bei, dan pegagan). Daun yang mempunyai ka- dar klorofil tertinggi, dibuat menjadi bubuk Cu-turunan klorofil menggunakan bahan pengi- si dekstrin dan freeze dryer .
Penelitian ini bertujuan untuk (1) Meng- analisis kadar  klorofil dari berbagai jenis daun tanaman (daun cincau, daun pegagan, daun katuk, dan daun murbei), dan (2) Membuat sediaan bubuk ekstrak Cu-turunan klorofil dan mengamati karakteristiknya.

## METODE

## Desain, Tempat, dan Waktu Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eks- perimental yang dilaksanakan di Laboratorium Balittro Cimanggu Bogor. Penelitian dilaksana- kan pada bulai Mei hingga Agustus 2008 dan didanai oleh Sekretariat Badan Litbang Perta- nian Departemen Pertanian RI melalui Prog KKP3T dengan No. Kontrak: 723/LB.620/I.1/3/ 2008.
Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan adalah da- un cincau,daun pegagan, daun katuk, dan daun murbei. Alat yang digunakan antara lain kertas saring Whatman No. 1 dan 42, erlenmeyer vakum, pompa vakum, pH meter, rotavapor, spektrofotometer, dan freeze dryer .
1. Penentuan kadar klorofil empat jenis daun tanaman (daun cincau, daun  katuk, daun pegagan, dan daun murbei)
Metode penentuan konsentrasi klorofil dilakukan dengan metode International Rice Research Institute (IRRI) yang telah di- modifikasi oleh Balitbio Bogor (Alsuhendra, 2004). Sebanyak 0,1 g daun cincau hijau , daun pegagan, daun katuk, daun murbei, yang telah dirajang (ukuran sekitar 2 mm), dimasukkan ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan aseton sebanyak 20 ml. Campuran tersebut dikocok secukupnya, lalu didiamkan selama 2 × 24 jam. Ekstrak yang diperoleh dianalisis konsentrasi klorofil a maupun klorofil b -nya menggunakan spektrofotometer, masing- masing pada panjang gelombang 645 dan 663 nm.

## 2. Ekstraksi klorofil, penyiapan turunan klorofil, pembuatan kompleks Cu-turunan klorofil
Ada 3 langkah yang dilakukan pada tahap ini, yaitu persiapan bahan ekstrak klorofil dan penyiapan turunan  klorofil serta pembuatan kompleks Cu-turunan klorofil.
a. Persiapan bahan Daun yang terpilih pada Tahap I (daun pegagan) dibersihkan dari berbagai kotoran, lalu dilap dengan tissu, selanjutnya dikering- anginkan. Daun tersebut lalu dipotong kecil- kecil dengan gunting untuk memudahkan proses penghancuran.
b. Ekstraksi klorofil
Sebanyak ± 50 g potongan daun terpilih dihancurkan dengan blender menggunakan 125 ml etanol 95% selama 3 menit, secara terputus setiap 1 menit. Hancuran kemudian disaring dengan kain saring halus (60 mesh), lalu filtrat yang diperoleh disaring lagi dengan corong Buchner menggunakan kertas saring Whatman No.1 dan 42 secara berturut-turut. Penyaringan menggunakan pompa vakum. Residu dicuci dengan 75 ml etanol 95% kemudian disaring lagi dengan corong Buchner (Alsuhendra, 2004). Filtrat diambil sebagai ekstrak kasar klorofil. Semua proses dilakukan dalam kondisi terhindar dari cahaya.
c. Penyiapan turunan klorofil dan pembuatan kompleks Cu-klorofil Pembentukan turunan klorofil (feofitin) dilakukan dengan mengasamkan klorofil yang telah diekstrak dengan menambahkan HCl 1 M hingga pH larutan mencapai 5.0 (Alsuhendra, 2004). Kompleks Cu-turunan klorofil dibuat dengan cara menambahkan 180 ml filtrat
ekstrak yang mengandung 0, 50, 100, dan 150 mg/l  Cu 2+ .
Ekstrak turunan klorofil yang telah di- tambah Cu 2+ dinaikkan pH-nya hingga 8.5 de- ngan menambahkan NaOH 1 M. Reaksi dilaku- kan di dalam labu tertutup selama 30 menit menggunakan magnetic stirrer (Alsuhendra, 2004).
Setelah reaksi berlangsung sempurna, campuran tersebut ditambahkan dekstrin 3%. Reaksi dilakukan selama 30 menit mengguna- kan magnetic stirrer . Kecepatan magnetic stirrer diatur pada skala 7. Setelah reaksi selesai, campuran dimasukkan dalam freezer (-20 o C) dan didiamkan selama semalam sebe- lum dikeringkan dengan pengering beku (freeze dryer) . Setelah campuran kering, maka diperoleh bubuk Cu-turunan klorofil.

## 3. Karakterisasi fisiko-kimia bubuk ekstrak Cu-turunan klorofil
Bubuk Cu-turunan klorofil yang dipilih untuk dikarakterisasi lebih lanjut adalah yang mempunyai tingkat kelarutan tinggi, pH tinggi, dan tingkat warna hijau yang tinggi. Untuk mempelajari sifat fisik dari bubuk turunan Cu- klorofil yang dihasilkan dilakukan uji proksi- mat, uji fitokimia, dan  -karoten (metode HPLC).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Sebelum penentuan jenis daun tanaman yang akan digunakan dalam pembuatan bubuk Cu-turunan klorofil, maka terlebih dahulu dilakukan s creening konsentrasi klorofil dari berbagai daun tanaman, di antaranya cincau, katuk, murbei, dan pegagan. Hasil penentuan konsentrasi klorofil tersebut dapat dilihat pada Tabel 1.
Pada Tabel 1 tampak bahwa daun yang mempunyai kadar klorofil tertinggi adalah daun cincau dengan kadar 1708.8 mg/kg. Berdasarkan hasil ini, maka daun cincau akan digunakan untuk proses penelitian selanjutnya, yaitu untuk pembuatan bubuk Cu-turunan klorofil.
Tabel 1. Konsentrasi Klorofil dari Berbagai

## Daun Tanaman
Jenis Daun Berat (g) Konsentrasi Klorofil (mg/kg) a (645 nm) b (663 nm) Total Pegagan 0.2 612.5 219.0 831.5 Katuk 0.2 1136.6 372.5 1509.1 Murbei 0.2 651.7 192.5 844.2 Cincau hijau 0.2 1300.0 408.7 1708.8
Bubuk Cu-turunan klorofil Daun Cincau (Premna oblongifolia Merr. )
Pembuatan bubuk Cu-turunan klorofil diawali dengan melakukan ekstraksi daun cincau hijau menggunakan etanol 95%. Etanol digunakan karena relatif aman dibanding pe- larut lain (dietil eter, aseton, metanol, petro- leum, dan eter). Pengekstrak etanol juga da- pat memberikan nilai recovery yang tinggi, dan kemurnian klorofil (Bianca, 1993; Mahmud, 1994; Alsuhendra, 2004).
Pada pembuatan bubuk Cu-turunan klo- rofil menggunakan bahan pengisi dekstrin 3%. Tujuan penggunaan dekstrin ini adalah untuk mempersingkat waktu pengeringan dan meng- hasilkan performa produk yang relatif bagus. Hasil penelitian pendahuluan menunjukkan bahwa ekstrak Cu-turunan klorofil yang dike- ringkan tanpa menggunakan dekstrin, produk- nya lengket pada wadah (bubuk tidak terben- tuk) dan warnanya hijau kehitam-hitaman. Hal ini berarti bahwa semakin kecil konsentrasi dekstrin (di bawah 3%), performa produk re- latif kurang optimal.
Alasan penambahan Cu pada ekstrak klo- rofil (turunan klorofil) adalah untuk memper- tahankan kestabilan warna hijau klorofil dan meningkatkan kelarutan maupun pH dari pro- duk bubuk yang dihasilkan. BPOM (2004) men- syaratkan konsumsi Cu perhari sebesar 3 mg/ hari. Syarat ini relatif lebih rendah dibanding upper limit (UL) dari Cu yaitu 10 mg/hari.
Karakteristik Fisiko-Kimia Bubuk Ekstrak Cu- turunan klorofil dari Berbagai  Konsentrasi Cu
Bubuk ekstrak Cu-turunan klorofil me- ngandung tembaga yang kadarnya berbeda, yaitu masing-masing 0, 50, 100, dan 150 mg/l. Untuk menentukan bubuk ekstrak yang akan dipilih untuk bahan intervensi pada hewan coba (kelinci), maka dilakukan uji karakteristik fisiko-kimia utama antara lain: rendemen, pH, kelarutan, dan warna. Khusus untuk uji warna
digunakan parameter antara lain: tingkat ke- cerahan atau whiteness (W), kehijauan atau geeness (G), dan kekuningan atau yellowness (Y). Hasil uji pH dan kelarutan dapat dilihat pada Tabel 2 dan uji warna pada Tabel 3.

## Rendemen
Ada 2 jenis rendemen yang dihitung, yaitu bubuk Cu-turunan klorofil tanpa menggu- nakan dekstrin dan dengan dekstrin. Rende- men bubuk klorofil tanpa penambahan dekstrin adalah sebanyak 5.8%.
Rendemen dihitung berdasarkan jumlah massa (g) bubuk Cu-turunan klorofil (me- ngandung dekstrin) yang diperoleh dibanding- kan dengan berat daun cincau hijau yang digunakan untuk membuat ekstrak. Dari Tabel 2 tampak bahwa bubuk kontrol negatif (Cu 0 mg/l) memiliki rendemen yang paling rendah dibanding bubuk ekstrak lainnya. Produk yang ekstraknya mengandung Cu 150 mg/l memiliki rendemen yang tertinggi, wa- laupun tidak berbeda nyata (p  0.05) dengan produk bubuk yang ekstraknya mengandung Cu 100 ppm. Terjadinya perbedaan rendemen ini diduga karena adanya perbedaan kandungan Cu dari produk bubuk yang dihasilkan.
pH pH menunjukkan tingkat keasaman suatu produk. pH akhir dari produk ekstrak Cu- turunan klorofil yang dihasilkan adalah 8.5. Pengukuran pH produk bubuk ekstrak Cu- turunan klorofil dilakukan setelah pengeringan produk menggunakan freeze dryer. Pada Tabel 2 tampak bahwa produk dengan konsentrasi Cu 0 ppm memiliki pH paling rendah, dan berbeda nyata (p  0.05) dengan produk lainnya.
Produk yang memiliki pH paling tinggi yaitu 7.64 adalah produk ekstrak yang mengan- dung Cu 100 ppm, sedangkan produk ekstrak dengan kandungan Cu 150 ppm memiliki pH 7.28. Hal ini menunjukkan bahwa produk yang mengandung Cu 100 ppm relatif lebih mampu menahan penurunan pH selama proses pengolahan (pengeringan). Penurunan pH dapat disebabkan karena suatu produk berinteraksi dengan CO 2 yang ada di udara. Hasil yang diperoleh ini sesuai dengan pernya- taan LaBorde dan von Elbe (1994) dalam Alsuhendra (2004), bahwa penambahan bebe- rapa bahan yang bersifat alkali pada sayuran dapat mempertahankan warna hijau klorofil karena terjadinya kenaikan pH, dimana pada pH tinggi, stabilitas klorofil juga relatif tinggi.
Tabel 2. Rata-rata Rendemen, pH, dan Kelarutan Bubuk Ekstrak Cu-turunan Klorofil Bubuk dengan kadar Cu (mg/l) Rendemen (%) pH Kelarutan (%) 0 13.95 ± 0.07 a 4.53 ± 0.04 a 91.07 ± 0.11 a 50 14.10 ± 0.14 a 7.53 ± 0.09 bc 92.57 ± 0.08 b 100 14.20 ± 0.14 ab 7.64 ± 0.12 c 98.04 ± 0.36 c 150 14.45 ± 0.07 b 7.28  ± 0.15 b 98.26 ± 0.59 c
Angka dengan huruf yang sama (1 kolom) menunjukkan tidak berbeda nyata pada α = 0.05
Tabel 3. Rata-rata Nilai Uji Warna Bubuk Ekstrak Cu-turunan Klorofil, Sebelum dan Sesudah Dipanaskan
Cu 2+ (mg/l) Nilai Uji Warna Sebelum dipanaskan Sesudah dipanaskan W G  Y W G Y 0 36.82±0.03 d -4.31±0.43 c 12.47±0.27 d 37.09±0.02 d -5.93± 3.48 a 12.44 ± 0.07 d
50 28.42±0.06 a -5.99±0.04 b 8.18±0.03 a 29.67±0.05 a -5.86 ± 0.02 a 8.75 ± 0.02 a
100 32.88±0.01 c -8.83±0.04 a 11.20±0.03 c 33.05±0.04 c -7.74 ± 0.03 a 11.04 ± 0.00 c 150 32.12±0.01 b -8.44±0.04 a 10.61±0.04 b 32.39±0.01 b -7.55± 0.05 a 10.21 ± 0.06 b
Angka dengan huruf yang sama (1 kolom)  menunjukkan tidak berbeda nyata pada α =0,05 W = kecerahan (whiteness); G = tingkat kehijauan (geeness) dengan tanda  + berarti merah, dan  -  adalah hijau; Y = tingkat kekuningan (yellowness), dengan  tanda + berarti kuning, dan  -  adalah biru

## Kelarutan
Kelarutan menunjukkan banyaknya bagian dari suatu produk yang dapat larut dalam suatu pelarut dengan volume tertentu. Pada Tabel 2 tampak bahwa kelarutan dalam air cenderung meningkat dengan bertambahnya konsentrasi Cu yaitu berkisar antara 91.07% dan 98.26%. Hasil kelarutan produk ini relatif lebih tinggi dibanding hasil penelitian Alsuhendra (2004) yang menggunakan sistem pengering spray dryer untuk mengekstrak klorofil daun singkong dengan zat pengompleks Zn (100 ppm) yaitu antara 89.4% dan 90.7%.
Produk dengan penambahan Cu 0 ppm memiliki kelarutan paling rendah yaitu 91.07%. Rendahnya kelarutan ini diduga karena Mg 2+ yang terlepas dalam sistem larutan konsentrasinya relatif rendah, sehingga kemampuan pengikatan molekul klorofil dari produk ini dengan dekstrin dan air menjadi turun, sedangkan produk dengan penambahan Cu 150 mg/l memiliki kelarutan paling tinggi, namun tidak berbeda nyata  (p  0.05) dengan Cu 100 mg/l. Tingginya kelarutan ini diduga karena banyaknya Cu yang tidak terikat (terlepas) pada cincin tetrapirol, sehingga dalam larutan berubah menjadi Cu 2+ yang mempunyai kelarutan tinggi.

## Warna
Uji warna ini dilakukan untuk menen- tukan tingkat kecerahan (whiteness) , kehi- jauan (geeness) , dan tingkat kekuningan (yellowness) dari produk bubuk Cu-turunan klorofil menggunakan kromameter. Uji warna dilakukan sebelum dan sesudah pemanasan pada suhu 105 o C. Datanya disajikan pada Tabel 3.
(1). Tingkat Kecerahan (W) Pada Tabel 3 tampak produk bubuk de- ngan konsentrasi Cu 0 ppm mempunyai tingkat kecerahan yang tertinggi yaitu sebesar 36.82, namun tingkat kehijauannya paling rendah di antara semua produk bubuk. Tingginya tingkat kecerahan bubuk yang mengandung Cu 0 ppm karena memang awalnya produk tersebut berwarna coklat-terang. Tingkat kecerahan tertinggi berikutnya adalah produk bubuk dengan konsentrasi Cu 100 ppm. Pada Tabel tersebut juga tampak bahwa semua produk bubuk dengan berbagai konsentrasi Cu mengalami kenaikan tingkat kecerahan setelah
dipanaskan pada suhu 105 o C, dan berbeda nyata di antara semua perlakuan. Hal ini dapat disebabkan karena terjadinya penguapan pelarut.
(2). Tingkat Kehijauan (G) Pada Tabel 3 tampak bahwa sebelum pemanasan (105 o C), produk bubuk dengan konsentasi Cu 2+ 100 mg/l mempuyai tingkat kehijauan yang relatif tinggi dibanding kon- sentrasi Cu 2+ yang lain, namun tidak berbeda nyata dengan dengan Cu 2+ 150 mg/l, baik se- belum maupun sesudah dipanaskan. Nilai tingkat kehijauan produk bubuk sebelum pemanasan lebih tinggi dibandingkan dengan produk sesudah pemanasan. Produk kontrol (Cu 2+ 0 mg/l) mempunyai tingkat kehijauan yang paling rendah. Hal ini menunjukkan penambahan Cu 2+ relatif dapat mempertahankan tingkat kehijauan produk yang dihasilkan, karena adanya ikatan antara Cu 2+ dan turunan klorofil (feofitin) yang relatif kuat.
Perubahan tingkat kehijauan produk bubuk Cu-turunan klorofil (Cu 100 mg/l) se- telah pemanasan jauh lebih rendah diban- ding bubuk Zn-turunan klorofil daun singkong (Zn 2+ 100 mg/l) hasil penelitian Alsuhendra (2004). Hasil penelitiannya menunjukkan penurunan tingkat kehijauan bubuk Zn-turunan klorofil sebesar 5.60 poin, setelah dipanaskan pada temperatur 105 o C. Hal ini berarti bahwa kadar klorofil dalam bubuk juga menurun.
Terjadinya penurunan tingkat kehijau- an yang relatif besar, diduga terkait dengan rendahnya afinitas Zn terhadap porfirin di- banding Cu. Dalam hubungannya dengan klo- rofil alami, Faboya (2006) melaporkan bahwa pada suhu  sekitar 100 o C dan pH 6, total klorofil akan hilang paling sedikit 56%. Namun pada penelitian ini tidak dilaporkan adanya tam- bahan mineral logam tertentu, selain Mg yang secara alami memang terkandung pada klorofil tersebut.
Hasil penelitian ini menunjukkan penurunan tingkat kehijauan bubuk Cu-turunan klorofil relatif kecil, hanya sebesar 1.09 poin. Hal ini menunjukkan bahwa logam pengelat Cu relatif lebih stabil dalam mempertahankan tingkat kehijauan klorofil. Hal ini sesuai dengan pernyataan Cheng et al., (1982), serta Mahan dan Stump (2004), bahwa Cu mempunyai tingkat stabili-
tas atau afinitas yang lebih tinggi untuk berikatan dengan ligan yang kaya elektron dibanding Zn.
(2). Tingkat Kekuningan (Y) Pada Tabel 3 tampak produk bubuk de- ngan konsentrasi Cu 0 ppm mempunyai ting- kat kekuningan yang tertinggi yaitu sebesar 12.44. Kemudian disusul produk bubuk de- ngan konsentrasi Cu 100 ppm. Pada Tabel tersebut tampak bahwa tingkat kekuningan relatif berfluktuasi seiring dengan mening- katnya konsentrasi Cu dalam produk bubuk. Warna kuning-hijau menunjukkan klorofil b yang lebih polar, sedangkan bila berwarna biru-hijau menunjukkan klorofil a yang kurang polar (Goss, 1991).

## Hasil Uji Proksimat dari Bubuk Cu-turunan klorofil terpilih
Berdasarkan uji karakteristik fisiko-ki- mia di atas, tampak bahwa produk bubuk ekstrak klorofil daun cincau hijau yang mempunyai tingkat kehijauan, kelarutan, dan pH yang tinggi adalah produk ekstrak dengan konsentrasi Cu 100 ppm.
Kadar gizi (hasil uji proksimat) dan  - karoten dari bubuk tersebut tampak pada Tabel 4. Bubuk ekstrak Cu-turunan klorofil (konsentrasi Cu 100 ppm) mengandung protein 0.89%, lemak 7.11%, abu 2.63%, air 6.93%, serat kasar 3.31% dan  -karoten sebesar 3.38 mg/100 g (33.8 mg/kg).
Tabel 4. Kadar  Zat  Gizi dan Zat Non-gizi Bubuk Cu-turunan Klorofil (Cu 100 ppm) Parameter Kadar Protein 0.89%
Lemak 7.11% Abu 2.63% Air 6.93% Serat kasar 3.31%  -karoten 33.8 mg/kg Klorofil 3986 mg/kg
Hasil Uji Kualitatif Zat Fitokimia Bubuk Ekstrak Cu-turunan klorofil dan Klorofil Komersial
Uji fitokimia ini bertujuan untuk mengetahui jenis-jenis zat bioaktif lain dalam bubuk klorofil yang dibuat. Hasil uji fitokimia bubuk ekstrak Cu-turunan klorofil menunjukkan bahwa bubuk ekstrak Cu-turunan klorofil mengandung 5 zat fitokimia yang dominan antara lain: alkaloid, saponin, tanin, steroid, dan glikosida (Tabel 5).
Kandungan tanin dalam bubuk Cu- turunan klorofil cincau mempunyai nilai tam- bah tersendiri. Selain sebagai antioksidan, tanin bisa digunakan untuk membunuh bak- teri baik pada Streptococcus pyogenes mau- pun Pasteurella multocida ( in vitro ) (Siswantoro, 2008).
Tabel 5. Hasil  Analisis  Fitokimia  (Kualitatif) Bubuk  Cu-turunan  Klorofil (Cu 2+ 100
mg/l) dan Bubuk Klorofil Komersial
Komponen Keterangan Alkaloid ++++
Saponin ++++ Tanin ++++ Fenolik - Flavonoid - Triterpenoid - Steroid ++++ Glikosida ++++
Keterangan: Hasil negatif =     - Hasil positif  lemah =    + Hasil positif kuat =    ++ Hasil positif kuat sekali =    +++ Hasil positif sangat kuat =    ++++

## KESIMPULAN
Daun cincau ( Premna oblongifolia Merr.) mempunyai kadar klorofil tertinggi dibandingkan daun lainnya (pegagan, katuk, dan murbei), sehingga daun cincau diguna- kan sebagai bahan untuk membuat bubuk Cu- turunan klorofil.
Konsentrasi Cu (tembaga) yang terbaik dalam hal pembentukan bubuk Cu-turunan klorofil cincau ( Premna oblongifolia Merr.) adalah 100 ppm. Penilaian ini ditinjau ber- dasarkan hasil uji pH yang relatif tinggi, warna yang relatif lebih hijau, lebih terang, kelarutan tinggi. Bubuk Cu-turunan klorofil mengandung klorofil dan  -karoten masing- masing sebesar 33.8 mg/kg dan 3986 mg/kg.
Hasil uji fitokimia bubuk ekstrak Cu-tu- runan klorofil daun cincau ( Premna oblo- ngifolia Merr.) menunjukkan bahwa bubuk ekstrak Cu-turunan klorofil mengandung 5 zat fitokimia utama yang berguna untuk peningkatan kesehatan antara lain: alkaloid, saponin, tanin, steroid, dan glikosida.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Sekretariat Badan Litbang Pertanian Departemen Pertanian RI atas dana peneliti- an yang diberikan melalui Prog KKP3T dengan No. Kontrak: 723/LB.620/I.1/3/2008.

## DAFTAR PUSTAKA
Alsuhendra. 2004. Daya Anti-atherosclerosis Zn-Turunan Klorofil dari Daun Singkong (Manihot esculenta Crantz) pada Kelinci Percobaan. Disertasi Doktoral Sekolah Pascasarjana, IPB, Bogor.
Bianca K. 1993. Pengaruh Penambahan ZnCl 2 di Dalam Pembuatan Ekstrak Warna dari
Campuran Daun Suji (Pleomele angustifolia) dan Daun Pandan (Pandanus amarylifollus Roxb.) Skripsi Sarjana Fakultas Teknologi Pertanian, IPB, Bogor.
[BPOM] Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2001. Kebijakan Pengembangan Obat Alam/Herbal Medicine Indonesia. Badan POM, Jakarta.
[BPOM] Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2004.  Keputusan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan RI Nomor HK.00.05.23.3644 Tahun 2004 tentang Ketentuan Pokok Pengawasan Suplemen Makanan. Badan POM, Jakarta.
Canjura FL, Watkins RH, & Schwartz. 1999. Color improvement and metallo- chlorophyll complexes in continuous flow aseptically processed peas. J.l of Food Sci. 64 (6), 987-990.
Cheng KL, Ueno K, & Imamura T. 1982. Hand- book of Organic Analytical Reagents. CRC Press, Boca Raton, Florida.
Faboya OO. 2006. Chlorophyll changes in some geen leafy vegetables during cooking. J. of the Science of Food and Agiculture. 36(8), 740–744.
Ferruzzi MG, Bohm V, Courtney PD. & Schwartz SJ. 2006. Antioxidant and
Antimutagenic Activity of Dietary
Chlorophyll Derivatives Determined by Radical Scavenging and Bacterial Reverse
Mutagenesis Assays. J.Food Science 67: 2589-2595.
Goss J. 1991. Pigments in Vegetables: Chlo- phylls and Carotenoids. Van Nostrand Reinhold, New York.
Kotani  M,  Yamauchi  N,  Ueda  Y,  Imahori  Y,  & Chachin K. 1999. Chlorophyll Degada- tion in Boiled Broccoli Florets during Storage in the Light.  Food Science and Technology Research. 5(1), pp.35-38.
LaBorde LF & von Elbe JH. 1994. Chlorophyll degadation and zinc complex formation with chlorophyll derivatives in heated geen vegetables. J.Agic.Food Chem. 42(5), 1100-1103.
Mahmud M. 1994. Pemurnian Klorofil Daun Suji (Pleomele angustifolia N.E.Brown). Skripsi Sarjana Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, IPB, Bogor.
Mahan LK, Stump SE. 2004. Food, Nutrition, & Diet Therapy. Ed ke-2. Saunders, Philadelphia.
Marquez UML, Barros RMC, Sinnecker P. 2005. Antioxidant activity of chlorophylls and their derivates. Food Research International  38, 885-891.
Prangdimurti E. 2007. Kapasitas Antioksidan dan Daya Hipokolesterolemik Ekstrak Daun Suji (Pleomele angustifolia N.E. Brown). Disertasi Doktoral Sekolah Pas- casarjana,  IPB, Bogor.
Siswantoro D. 2008. Kajian Aktivitas Tanin dengan Penisilin terhadap Bakteri Streptococcus Pyogenes dan Pasteurella Multocida secara in vitro. Dalam http://adln. lib.unair.ac.id.
Von Elbe JH, Huang AS, Attoe EL, & Nank WK. 1986. Pigmen composition and color of conventional and Veri-Geen canned. J.Agic. Food Chem.  34(1), 52-54.