DOI 10.33323/indigenous.v7i1.420
Volume 7(1) 2024 (7-11)

## Pengaruh Fermentasi Kulit Buah Kakao (Theobroma cacao) Terhadap Kadar Protein Larva Black Soldier Fly (BSF)
Lailatul Maftuhah 1*) , Novy Eurika 1) , Ariza Budi Tunjung Sari 2)
1 Program Studi Pendidikan Biologi, FKIP, Universitas Muhammadiyah Jember
2 Pusat Penelitian Kopi dan Kakao Indonesia Corresponding Author :  eurika@unmuhjember.ac.id

## Abstrak
Proporsi  terbesar  dari  berat  buah  kakao  adalah  kulitnya  dengan  persentase  75,65%.  Pemanfaatan kulit  buah  kakao  yang  telah  diterapkan  adalah  pengolahan  kulitnya  menjadi  sabun,  ditimbun,  atau didegradasi menggunakan larva BSF yang menghasilkan kasgot untuk dimanfaatkan sebagai pupuk. Larva BSF  merupakan  insekta  yang  dapat  mengubah  limbah  menjadi  protein  sebesar  40%.  Penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian pakan fermentasi limbah kulit buah kakao terhadap kadar protein  larva  BSF.  Metode  penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  menggunakan  3 perlakuan yang terdiri dari pemberian pakan limbah kulit buah kakao tanpa fermentasi (F0), fermentasi 7 hari (F7), dan fermentasi 14 hari (F14). Hasil penelitian dianalisis menggunakan uji ANOVA dan dilanjutkan dengan  uji  lanjut  Tukey  pada  taraf  kepercayaan  95%.  Hasil  penelitian  yang  diperoleh  kadar  protein  larva BSF sebesar 49,76% (Fo), 59,32% (F7), dan 49,79% (F14). Limbah kulit buah kakao dapat dimanfaatkan sebagai pakan larva BSF serta dapat mempengaruhi kadar protein dengan kadar tertinggi pada limbah F7 (p<0,05).

## Keywords: limbah kulit buah kakao, protein, larva BSF

## Abstract
The largest proportion of cocoa fruit weight is the skin with a percentage of 75.65%. The use of cocoa pod  husk  that  has  been  applied  is  the  processing  of  the  skin  into  soap,  landfilled,  or  degraded  using  BSF larvae that produce kasgot to be used as fertilizer. BSF larvae are insects that can convert waste into protein by  40%.  This  study  aims  to  determine  the  effect  of  fermentation-feeding  cocoa  pod  husk  on  BSF  larval protein  levels.  This  research  method  uses  Complete  Randomized  Design  (RAL)  using  3  treatments consisting  of  feeding  cocoa  pod  husk  without  fermentation  (F0),  7  days  fermentation  (F7),  and  14  days fermentation  (F14).  The  results  of  the  study  were  analyzed  using  the  ANOVA  test  and  continued  with Tukey's follow-up  test  at  a  95%  confidence  level. The  results  obtained  BSF  larval  protein  levels  of  49.76% (Fo), 59.32% (F7), and 49.79% (F14). Cocoa  pod husk waste can be used as feed for BSF larvae and can affect protein levels with the highest levels in F7 waste (p < 0.05).

## Keywords: cocoa pod husk, protein, BSF larvae

## PENDAHULUAN
Kakao  dengan  nama  latin Theobroma  cacao merupakan  buah  yang  memiliki  struktur 75,65%  kulit  buah,  21,74  biji,  dan  2,59%  plasenta.  Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Kamelia  &  Fathurohman  (2017)  dinyatakan  bahwa  kulit  buah  kakao  dapat  berpotensi  digunakan sebagai  pakan  karena  memiliki  komposisi  nutrien  yang  baik,  diantaranya  6,9%  protein  kasar, 67,09% serat deterjen netral, dan 47,16% serat deterjen asam. Pada penelitian Pappa et al (2019) kulit buah kakao dinyatakan memiliki kandungan senyawa kimia dan tanin. Tanin merupakan salah satu senyawa aktif yang memiliki bebebrapa khasiat yaitu sebagai astringen, antidiare, antibakteri, dan antioksidan. Namun, disisi lain kandungan tanin dalam kulit buah kakao dapat menyebabkan dalam penghambat kerja enzim dan penghilang substrat (protein) yang berikatan dengan lipid dan penghilang substrat (protein) yang mengikat enzim protase yang berperan untuk katalisasi protein menjadi  asam  amino.  Hal  ini  diperlukan  dalam  pertumbuhan  makhluk  hidup.  Kulit  buah  kakao memiliki  kandungan  6,44%  2,3-butanediol,  2,33%  benzeacetic  acid,  23,51%  kafein,  dan  65,99% teobromin  (Kayaputri et  al., 2014) . Kandungan  antinutrisi  dalam  kulit  buah  kakao  diantaranya lignin, tanin, dan teobromin yang dapat mempengaruhi kecernaan bahan kering.
Pada  penelitian  Yusup et al (2020)  limbah  kulit  buah  kakao  diolah menjadi pupuk melalui proses  degradasi  yang  dilakukan  oleh  larva  BSF  ( Black  Soldier  Fly )  sehingga  menghasilkan kasgot  yakni  residu  dari  larva  BSF.  Kasgot  yang  dihasilkan  memiliki  unsur  nitrogen,  fosfor,  dan kalium  yang  dapat  dimanfaatkan  menjadi  pupuk.  Larva  BSF  adalah  jenis  insekta  yang  banyak dipelajari  karakteristik  dan  kandungan  nutrisinya.  Berdasarkan  penelitian  Wardhana  (2016) diperoleh data kadar protein larva BSF sebesar 44,26% sedangkan kadar lemak sebesar 29,65%, hal tersebut tidak berbeda jauh dengan penelitian Cahyani et al (2020) kadar protein larva sebesar 49,67%, sedangkan kadar lemak sebesar 21,17%.  Besar kadar protein dan lemak pada larva BSF dipengaruhi  oleh    sumber  media  pakan  larva  BSF.  Larva  BSF  yang  memiliki  kandungan  protein yang  tinggi  dapat  menjadi  alternatif  pakan  hewan  ternak  seperti  lele,  ayam,  burung,  dan  lain sebagainya.  Dalam  larva  BSF  dapat  menjadi  suplemen  ayam  boiler,  ikan  mas  koki  dan  mencit, dalam  hal  ini  dinyatakan  dapat    meningkatkan  bobot,  sistem  pencernaan,  tekstur  daging  serta kandungan  nutrisi  ayam  boiler  (Suryani et  al .,  2017).  Sehingga  dengan  hal  ini  larva  BSF  dapat menjadi sumber protein terbarukan yang tinggi sehingga dapat membatasi ketergantungan pakan impor.
Kualitas  limbah  kulit  buah  kakao  dapat  dijadikan  sebagai  sumber  pakan  kaya  nutrisi, sehingga dapat dimanfaatkan sebagai pakan terhadap larva BSF yang dapat pula menjadi faktor untuk mendukung pertumbuhan dan perbanyakan larva serangga pada kondisi laboratorium. Pada penelitian  Cahyani et  al (2020) menyatakan  bahwa  jenis  pakan  yang  diberikan  pada  larva  dapat mempengaruhi  komposisi  kimia  dalam  tubuhnya.  Larva  BSF  sendiri  dapat  mengubah  limbah- limbah  tersebut  menjadi  biomassa  protein  dengan  jumlah  yang  cukup  signifikan  yakni  sebesar 40%  (Permana,  Susanto,  2022).  Nutrisi  yang  terkandung  dalam  makanan  yang  harus  dipenuhi untuk media  pakan  larva  yakni  protein  dan  karbohidrat, dalam  penelitian  Ardigurnita,  &  fransiska (2021) menyatakan bahwa makanan berupa limbah organik yang akan diberikan pada larva yang melalui proses penguraian menggunakan bakteri atau jamur akan memungkinkan dikonsumsi oleh larva.  Proses  fermentasi  pakan  dapat  mengurai  nutrisi  yang  terkandung  didalamnya,  sehingga mudah dicerna. Makanan yang memiliki kandungan nutrisi yang rendah akan menghasilkan larva BSF  dengan  kualitas  rendah,  dan  akan  memperpanjang  fase  larva  hingga  empat  bulan.  Dalam penelitian ini larva BSF diberi perlakuan pakan limbah kulit buah kakao dengan tiga kriteria berupa F0,  F7, dan  F14.  Penelitian  ini  difokuskan  dan  bertujuan  untuk mengetahui  pengaruh  pemberian pakan limbah kulit buah kakao terhadap kadar protein larva BSF.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Lingkup Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan  April  hingga  bulan  Mei  2023.  Tempat pelaksanaan kegiatan  pembuatan  pakan,  pemeliharaan  larva  BSF,  serta  pengujian  kadar  protein  larva dilaksanakan di laboratorium pasca panen Pusat Penelitian Kopi dan Kakao Indonesia.

## Desain Penelitian
Unit  percobaan  dalam  peneitian  ini  menggunakan  rancangan  acak  lengkap.  Perlakuan  yang dilakukan  dalam  penelitian:  pemberian  pakan  limbah  kulit  buah  kakao  tanpa  fermentasi  (F0), pemberian  pakan  limbah  kulit  buah  kakao  dengan  fermentasi  7  hari  (F7),  dan  pemberian  pakan limbah  kulit  buah  kakao  dengan  fermentasi  14  hari  (F14).  Desain  penelitian  menggunakan  3 perlakuan dengan 9 kali ulangan.

## Cara Kerja a.  Persiapan Bahan Pakan
Penelitian  dimulai  dengan  mempersiapkan    pakan  untuk  larva  BSF  yang  akan  diberi perlakuan.  Limbah  kulit  buah  kakao  yang akan  dijadikan  media  pakan diberi  perlakuan  F0,  F77, dan F14. Limbah kulit buah kakao dibersihkan dengan air, selanjutnya dikeringkan dengan cahaya matahari  selama  1  hari.  Kulit  buah  kakao  digiling  menjadi  bubuk  kasar.  Perlakuan  limbah  kulit buah kakao fermentasi dilakukan dengan cara menambahkan kultur EM4 1% v / v yang dicampur  2
Indigenous Biologi Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 7(1) 2024
gr  gula  merah  (0,2gr/ml)  (Adhiansyah,  2014a).  Setelah  EM4  1%  dibuat  selanjutnya  disiapkan bubuk  kulit  buah  kakao  dan  dicampur  dengan    kultur  EM4  1%  menggunakan  perbandingan  1 gr:1,5  ml  yakni  dengan  rincian  50  gr  limbah  kulit  buah  kakao  dicampur  dengan  larutan EM4  1% sebanyak  75  ml  dalam  keadaan  tertutup  kemudian  didiamkan  selama  7  (F7)  dan  14  hari  (F14) (Adhiansyah, 2014).
b. Pemberian pakan larva BSF
Larva  yang  digunakan  merupakan  larva  berumur  7  hari  (instar  2)  dari  fasilitas  budidaya BSFdi  Desa  Baratan  Kabupaten  Jember.  Larva  dipelihara  dalam  wadah  plastik  yang  ditutup dengan  jaring,  sehinga  memungkinkan  terjadinya  sirkulasi  udara.  Setiap  wadah  pemeliharaan berisi  1000  ekor  larva  dan  pemberian  pakan  pada  larva  disesuaikan  dengan  umur  larva  yaitu 1gr/larva setiap 3 hari sekali. Pakan larva diperoleh dari limbah kulit buah kakao dengan perlakuan limbah kulit buah kakao tanpa fermentasi dan fermentasi. Larva yang telah dipelihara sampai umur 14    hari  dipanen  sebelum  memasuki  fase  prepupa.  Larva  kemudian  ditimbang  dan  dimasukkan kedalam  wadah  plastik  tertutup  dan  disimpan  pada  suhu  -18°C  selama  24  jam  (Danieli et  al ., 2019).

## c.  Analisis kadar protein larva BSF
Prosedur  analisa  kadar  protein  menggunakan  metode  Lowry-Follin  (Kartika, et.al .  2015) sebagai  berikut;  larva  BSF  dikeringkan  dengan  cara  dioven  selama  24  jam  dengan  suhu  55°C. Sampel  ditimbang  sebanyak  0,1  gr  dan  dihaluskan  menggunakan  mortar.  Setelah  dihaluskan ditambah  akuades  sebanyak  4  ml.  Larutan  sampel  diambil  sebanyak  1  ml  menggunakan  mikro pipet  dan  ditambahkan  reagen  Lowry  C  (fosfotungstat-fosfomolibdad,  Na-carbonat,  NaOH,  kupri sulfat,  dan  Na-K-tartat)  8  ml.  kemudian  didiamkan  selama  10  menit  kemudian  ditambahkan  1  m pereaksi  Folin  selanjutnya  dikukur  menggunakan  spektofotometer  pada  panjang  gelombang  740 nm . Kadar  protein  dihitung  berdasarkan  kadar  N  dalam  bahan  dengan  dikalikan  faktor  konversi. Adapun  rumus  menghitung  kadar  protein  menurut  SNI  01-2891  (BSN,  1992)  adalah  sebagai berikut :
Kadar Protein (%) =
𝑋 × 𝑓𝑝
W× 100 % Keterangan : w   : Berat sampel X    : Konsentrasi protein Fp  : Faktor pengenceran

## Analisis Data
Data yang diperoleh pada penelitian ini dianalisis secara statistik menggunakan perangkat lunak SPSS 26 dengan metode One-Way ANOVA pada taraf kepercayaan 95 % untuk mengetahui pengaruh masing-masing perlakuan terhadap perubahan yang diukur, dan dilanjutkan dengan uji lanjut tukey pada taraf kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisis Kadar Protein Larva BSF dengan Media Pakan Limbah Kulit Kakao
Pemberian  pakan  limbah  kulit  buah  kakao  dengan  tiga  perlakuan  F0,  F7  dan  F14  yang digunakan  untuk  media  pakan  larva  BSF  menghasilkan  larva  dengan  kandungan  protein  yang berbeda dapat dilihat pada Gambar 1. Larva BSF yang diuji adalah larva berusia 7 hari yang diberi perlakuan  pakan  selama  7 hari,  kemudian  diuji  kadar  protein pada usia  14  hari.  Pengujian  pada usia  tersebut  dikarenakan  larva  muda  memiliki  kandungan  protein  yang  lebih  tinggi  dibandigkan dengan larva yang tua. Hal ini didukung dengan hasil penelitian oleh Wardhana et al (2016) yang menyatakan  bahwa  larva  usia  larva  15  hari  memiliki  kandungan  protein  sebesar  44,01  % sedangkan  larva  BSF  berusia  20  hari  memiliki  kandugan  protein  sebesar  42,07  %  hal  ini dikarenakan larva BSF yang masih muda memiliki sel struktural yang lebih cepat pertumbuhannya. Hasil pengukuran kadar protein larva BSF ditunjukkan pada Gambar 1.
Gambar 1 Hasil uji kadar protein pada larva BSF yang diberi pakan kulit buah kakao yang tidak difermentasi (F0), difermentasi 7 hari (F7), dan difermentasi 14 hari (F14), data merupakan rerata dari 9 ulangan
Berdasarkan  Gambar  1  dapat  diketahui  bahwa  hasil  uji  kandungan protein  pada  larva  BSF adalah  sebesar  49,76  ±  7,36%  (F0), 59,32  ±   4,41%  (F7),  49,79  ±  8,33%  (F14).  Pada penelitian Muhlison et  al .,  (2019)  memberi  perlakuan  yang  berbeda  dengan  menggunakan  limbah  buah, ampas  tahu,  kulit  singkong, dan  sisa makanan,  data  protein  larva  BSF  yang  diberi pakan  limbah buah  memiliki  kadar  protein  sebesar  46,70%,  ampas  tahu  48,61%,  kulit  singkong  44,32%,  dan limbah sisa makanan sebesar 42,80%. Faktanya kadar protein pada larva tertinggi terdapat pada perlakuan F7 (p<0,05) hal ini diperkirakan  pengaruh dari peningkatan  kadar  nitrogen  pada pakan F7 oleh Lactobacillus yang terkandung dalam EM4 (Suryani et al ., 2017).
Peningkatan nitrogen pada pakan disebabkan aktivitas mikroorganisme yang memanfaatkan protein  dalam  metabolismenya,  serta  proses  asimilasi  yakni  mikroorganisme  dalam  EM4  yang menguraikan  protein  mejadi  asam  amino.  Asam  amino  yang  diuraikan  akan    menjadi  ammonia (NH 3 ) dan ammonium (NH 4 ) melalui proses amonifikasi. Amonia (NH 3 ) yang terbentuk akan diubah menjadi  nitrit  (NO 2 -)  yang  berakhir  berubah  menjadi  nitrat  (NO 3 -),  nitrat  merupakan  bentuk sempurna  dari  N  (nitrogen)  yang  stabil.    Sedangkan  nitrogen  yang  menurun  diakibatkan  oleh adanya pengaruh metabolism sel yang mengasimilasikan nitrogen sehingga nitrogen akan hilang diudara  bebas  sebagai  amoniak,  jadi  semakin  lama  proses  fermentasi  maka  cenderung  terjadi penurunan  kadar  lemak,  kadar  nitrogen,  kadar  fosfor  dan  kadar  kalium  (Permata et  al. ,  2021). Nitrogen adalah komponen utama dalam sel protein.  Pakan F7 memiliki  kandungan protein yang cukup  sehingga  dapat  mempengaruhi  peningkatan  kandungan  protein  dalam  larva  BSF. Peningkatan  kadar  protein  tersebut  terjadi  dalam  aktivitas  enzim  protease  dari  usus  larva  BSF yang  menghidrolisisi  substrat  (Supriyatna  &  Ukit,  2016).  Sedangkan  pada  larva  perlakuan  F14 kadar nitrogen menurun diakibatkan oleh proses asimilasi nitrogen sehingga nitrogen akan hilang diudara bebas sebagai amoniak (Permata et al. , 2021). Menurunnya kadar nitrogen dalam pakan akan mempengaruhi kadar protein larva BSF, sehingga kadar protein pada larva BSF menurun.

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  limbah  kulit  buah  kakao  yang  difermentasi  dapat menjadi pakan  larva  BSF. Pemberian  pakan  limbah  kulit buah  kakao dengan  fermentasi  dapat mempengaruhi  kadar  protein  pada  larva  BSF.  Kadar  protein pada  larva BSF tertinggi terdapat pada perlakuan limbah kulit buah kakao yang difementasi selama 7 hari.

## DAFTAR PUSTAKA
Adhiansyah,  R.  (2014).  Studi  Pembuatan  Bahan  Pakan  Ternak  Terfermentasi  Kulit  Ari  Kedelai (Kajian jenis inokulum dan lama fermentasi).[Universitas Brawijaya]. http://repository.ub.ac.id/id/eprint/149731
BSN. (1992). Cara Uji Makanan dan Minuman SNI 01-2891-1992. In Sni 01-2891-1992 (p. 20).
0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 Non F F7 F14 Ka d a r Pro te in %
Indigenous Biologi Jurnal pendidikan dan Sains Biologi 7(1) 2024
Cahyani,  P., Engga  Maretha,  D.,  Pendidikan Biologi,  P., Ilmu  Tarbiyah  dan Keguruan,  F.,  Raden Fatah  Palembang,  U.,  &  H  Zainal,  J.  K.  (2020). Uji  Kandungan  Protein,  Karbohidrat  Dan Lemak Pada Larva Maggot (Hermetia illucens) Yang Di Produksi Di Kalidoni Kota Palembang Dan Sumbangsihnya Pada Materi Insecta Di Kelas X SMA/MA . 6 (2), 120.
Danieli,  P.  P.,  Lussiana,  C.,  Gasco,  L.,  Amici,  A.,  &  Ronchi,  B.  (2019). The  Effects  of  Diet Formulation  on  the  Yield  ,  Proximate  Composition  ,  and  Fatty  Acid  Profile  of  the  BSF. Animals , 9 (178).
Ardigurnita, & fransiska,  dan N. R. (2021). Efek Lama Proses Amofer terhadap Protein Kasar dan Lignin Kulit Buah Kakao . Baar , 3 (1), 17 –22.
Kamelia,  M.,  &  Fathurohman,  F.  (2017).  Pemanfaatan  Kulit  Buah  Kakao  Fermentasi  Sebagai Alternatif  Bahan  Pakan  Nabati  Serta  Pengaruhnya  Terhadap  Pertumbuhan  Ternak  Entok (Cairina muschata). Biosfer:
Jurnal Tadris Biologi , 8 (1), 66 –77.
https://doi.org/10.24042/biosf.v8i1.1264
Kartika,  C.,  J.,  Abdul  Majid,  J.,  Sulaiman,  M.,  Zailani.  (2015).  Uji  Kadar  Protein  Dan  Asam  Total Dadih Susu Kambing Etawa Dengan Variasi Penutup Dan Lama Fermentasi Yang Berbeda. 16 (1994), 1 –37. http://eprints.ums.ac.id/37501/6/
Kayaputri,  I.  L.,  Sumanti,  D.  M.,  Djali,  M.,  Indiarto,  R.,  &  Dewi,  D.  L.  (2014).  Kajian  Fitokimia Ekstrak  Kulit  Biji  Kakao (Theobroma  cacao  L.) . Chimica  et  Natura  Acta , 2 (1),  83 –90. https://doi.org/10.24198/cna.v2.n1.9140
Muhlison,  W.,  Jember,  U.,  Sucipto,  I.,  Jember,  U.,  Pratiwi,  N.,  Purnamasari,  L.,  &  Jember,  U. (2019). Komposisi Nutrien Larva Black Soldier Fly (Hermetia illucent) Dengan Media Tumbuh,
Suhu dan Waktu
Pengeringan yang Berbeda . March , 675 –680.
https://doi.org/10.14334/pros.semnas.tpv-2019-p.675-680
Pappa, S., Jamaluddin, A. W., & Ris, A. (2019). Kadar Tanin Pada Kulit Buah Kakao ( Theobroma cacao  L  .) Kabupaten  Poliwalimandar  dan  Toraja  Utara. Indonesian  E-Journal  of  Applied Chemistry , 7 (2), 92 –101.
Permana,  Susanto  (2022).  Kinerja  Pertumbuhan  Larva  Lalat  Tentara  Hitam Hermetia  illucens Linnaeus ( Diptera : Stratiomyidae ) pada Substrat . 33 (1), 13 –24.
Permata, D. A., Kasim, A., Asben, A., & Yusniwati, Y. (2021). Pengaruh Lama Fermentasi Spontan Terhadap  Karakteristik  Tandan  Kosong  Kelapa  Sawit  Fraksi  Serat  Campuran. Jurnal Teknologi Pertanian Andalas , 25 (1), 96. https://doi.org/10.25077/jtpa.25.1.96-103.2021
Supriyatna, A., & Ukit, U. (2016). Screening and Isolation of Cellulolytic Bacteria from Gut of Black Soldier  Flays  Larvae  (Hermetia  illucens)  Feeding  with  Rice  Straw.  Biosaintifika:  Journal  of Biology & Biology Education , 8 (3), 314. https://doi.org/10.15294/biosaintifika.v8i3.6762
Suryani, Y., Hernaman, I., & Hamidah, N. H. (2017). Pengaruh tingkat penggunaan EM4 (Effective Microorganisms-4)  pada  fermentasi  limbah  padat  dan  serat  kasar. Jurnal  Istek , 10 (1),  139 – 153.
Wardhana, A. H., Besar, B., Veteriner, P., & Re, J. (2016). Black Soldier Fly (Hermetia illucens) as an Alternative Protein Source for Animal Feed) . 26 (2), 73.
https://doi.org/10.14334/wartazoa.v26i2.1218
Yusup,  C.  A.,  Prakoso,  H.  T.,  Siswanto,  .,  &  Eris,  D.  D.  (2020). Bioconversion  performance  and development of black soldier fly (Hermetia illucens L.) on treated cocoa pod husk.  E-Journal Menara Perkebunan , 88 (1), 9. https://doi.org/10.22302/iribb.jur.mp.v88i1.365