## DOI: 10.30644/rik.v8i2.242
Tanin pada ekstrak daun rambutan ( Nephelium lappaceum l.) tidak berpotensi sebagai chelating agent dalam sintesis hidroksiapatit
Lia Anggresani 1* , Armini Hadriyati 1 , Ida Risnawati 1 , Santi Perawati 1 , Lili Andriani 1
1 Program Studi Farmasi, STIKES Harapan Ibu Jambi, Indonesia *Email korespondensi : anggresani@yahoo.com
Accepted: 06 September 2019; revision: 30 September 2019; published: 31 Desember 2019

## Abstrak
Latar  Belakang :  Hidroksiapatit  merupakan  biomaterial  yang  memiliki  komposisi  kimia  kalsium  dan fosfat  yang  sama  pada  jaringan  keras  manusia  seperti  pada  tulang  dan  gigi,  sehingga  banyak digunakan  dalam  bidang  kesehatan  sebagai  bahan  pengganti  tulang.  Sintesis  hidroksiapatit memerlukan  bahan  tambahan  berupa  polimer  untuk  memperbaiki  sifat  mekaniknya.  Salah  satu polimer yang berasal dari tumbuhan adalah senyawa polifenol yaitu tanin. Salah satu tumbuhan yang mengandung senyawa tanin yaitu daun rambutan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi senyawa  tanin  yang  terdapat  pada  ekstrak  daun  rambutan  sebagai chelating  agent dalam  proses sintesis hidroksiapatit.
Metode  : Penelitian  ini  menggunakan  Ca(OH) 2 sebagai  sumber  kalsium,  H 3 PO 4 sebagai  sumber fosfat dan senyawa tanin dari ekstrak rambutan sebagai chelating agent. Karakterisasi hidroksiapatit dilakukan dengan analisa FTIR, XRD, SEM dan PSA.
Hasil  : Hasil  analisa  FTIR  pada  suhu  140 o C  dan  160 o C  diperoleh  gugus  fungsi  OH  dan  PO 4 3- yang merupakan  gugus  fungsi  senyawa  hidroksiapatit.  Pada  hasil  analisa  XRD  diperoleh  dua  senyawa yaitu Hidroksiapatit dan Trikalsium Fosfat pada variasi suhu 140 o C dan 160 o C sesuai dengan standar ICSD  01-074-9780  dan  ICSD  01-073-4869,  sedangkan  pada  suhu  180 o C  dan  200 o C  diperoleh senyawa  Trikalsium  Fosfat  sesuai  dengan  standar  ICSD  01-073-4869.  Hasil  analisa  SEM  diperoleh morfologi permukaan sampel berbentuk aglomerat atau penggumpalan. Hasil analisa  PSA diperoleh ukuran partikel hidroksiapatit adalah 1,289 μm.
Kesimpulan : Ekstrak daun rambutan tidak berperan sebagai chelating agent dalam proses sintesis hidroksiapatit dengan metode hidrotermal.
Kata kunci: Hidroksiapatit, Daun rambutan, Chelating agent, Hidrotermal
Abstract Background : : Hydroxyapatite is  a  biomaterial  that  has  the  same  chemical  composition  of calcium and phosphate in human hard tissues as in bones and teeth, so it is widely used in the health field  as a  bone  replacement  material.  Hydroxyapatite  synthesis  requires  additional  materials  to  improve  its mechanical  properties.  One  of  the  polymers  derived  from  plants  is  the  composition  of  polyphenols, namely  tannins.  One  of  the  plants  that  contain  tannin  compounds  is  rambutan  leaves.  This  study discusses  the  potential  of  compounds  contained  in  rambutan  leaf  extract  as  chelating  agents  in  the process of hydroxyapatite synthesis.
Method  : This  study  used  Ca(OH) 2 as  a  source  of  calcium,  H 3 PO 4 as  a  source  of  phosphate  and tannin compounds from rambutan extract as a chelating agent. The characterization of hydroxyapatite was carried out by FTIR, XRD, SEM and PSA analysis.
Results : The results of FTIR analysis at temperatures of 140 o C  and  160 o C obtained OH and  PO 4 3- functional  groups  which  are  functional  groups  of  hydroxyapatite  compounds.  In  the  XRD  analysis results obtained two compounds namely Hydroxyapatite and Tricalcium Phosphate at 140 o C and 160 o C  temperature  variations  in  accordance  with  ICSD  01-074-9780  and  ICSD  01-073-4869,  while  at 180 o C  and  200 o C  obtained  Tricalcium  Phosphate  compounds  according  to  ICSD  01  01  -073-4869. SEM analysis results obtained surface morphology in the form of agglomerate or clumping samples. PSA analysis result s obtained hydroxyapatite particle size is 1,289 μm.
Conclusion : Rambutan leaf extract did not act as chelating agents in the process of hydroxyapatite synthesis by the hydrothermal method.
Key words: Hydroxyapatite, Rambutan leaves, Chelating agent, Hydrothermal
ISSN 2548-6462 (online), ISSN 2088-8740 (print)

## PENDAHULUAN
Hidroksiapatit  merupakan  biomaterial yang  memiliki  komposisi  kimia  kalsium  dan fosfat  yang  sama  dengan  jaringan  keras manusia  seperti  pada  tulang  dan  gigi. Hidroksiapatit memiliki sifat biokompa- tibilitas  dan  osteokonduktivitas  yang  baik  di dalam  tubuh  sehingga  banyak  digunakan dalam  bidang  kesehatan  sebagai  bahan pengganti  tulang  manusia  yang  rusak. Hidroksiapatit  sintetis  memiliki  kelemahan utama  yaitu  memiliki  sifat  mekanik  yang rendah  sehingga  diperlukan  penambahan polimer dalam proses pembuatannya (1).
Berbagai
penelitian tentang hidroksiapatite  telah  dilakukan.  Beberapa diantaranya  memanfaatkan  limbah  dari tulang  ikan  tuna  (2),  tulang  ikan tenggiri  (3), tulang  sapi  aceh  (4),  dan  cangkang  kerang darah  (5).  Penelitian  tentang  hidroksiapatite dari mineral alam telah dilakukan salah satu- nya bersumber dari batu kapur bukit tui (6).
Saat  ini,  pendekatan  biogenik  telah digunakan  untuk  sintesis  bahan  anorganik menggunakan  prekursor  seperti ionic  liquid , mikroorganisme  dan  ekstrak  tumbuhan  (7). Salah satu polimer yang berasal dari ekstrak tumbuhan  adalah  senyawa  polifenol  yaitu tanin.  Senyawa  tanin  memiliki  kemampuan sebagai  agen  pengkhelat  ( chelating  agent ) pada  unsur  logam  yang  akan  membuat logam menjadi lebih stabil dan aman didalam tubuh  disebabkan  karena  adanya  gugus fenolik  (8).  Salah  satu  tumbuhan  yang banyak  mengandung  tanin  adalah  daun rambutan yaitu sekitar 6,62% (9).
Daun  rambutan  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  daun  rambutan  yang berwarna  hijau  tua.  Hal  ini  dikarenakan kandungan  tanin  yang  terdapat  pada  daun tua  lebih  banyak  daripada  daun  rambutan muda  (1).  Metode  pada  penelitian  ini  yaitu metode hidrotermal karena proses pengerjaan yang sederhana, dapat dilakukan pada  suhu  rendah  dan  menghasilkan kemurnian yang tinggi (10). Tujuan Penelitian ini untuk  mengetahui  potensi senyawa  tanin  yang  terdapat  pada  ekstrak daun  rambutan  sebagai chelating  agent dalam  proses  sintesis  hidroksiapatit  dengan metode hidrotermal.

## METODE Proses ekstraksi
Daun rambutan dicuci dan dibersihkan dari kotoran, dipotong kecil-kecil kemudian  dikeringkan  dalam  suhu  ruang. Daun  rambutan  yang  kering  ditimbang sebanyak  25  gram,  masukkan  dalam kantong  sampel  yang  terbuat  dari  kertas saring. Kantong yang berisi sampel dimasukkan  dalam  alat  soklet.  Tambahkan etanol 70% ke labu alas bulat sebanyak 250 ml.  Hidupkan  alat,  atur  suhu  100 0 C  dan waktu ekstraksi selama 1 jam (7).

## Proses Sintesis Hidroksiapatit
Sebanyak  250  ml  Ca(OH) 2 1  M diaduk  selama  10  menit  menggunakan magnetic  stirrer .  Lalu  250  ml  H 3 PO 4 0,6  M diaduk  selama  10  menit  menggunakan magnetic  stirrer ,  dan  ditambahkan  ke  dalam larutan Ca(OH) 2 . Kemudian 25 ml NaOH 0,8 M ditambahkan sedikit demi sedikit ke dalam campuran  Ca(OH) 2 dan  H 3 PO 4 sampai  pH larutannya  12.  Ekstrak  cair  daun  rambutan 50 ml dimasukkan ke dalam larutan tersebut dan lanjutkan pengadukan dengan magnetic stirrer selama  1  jam  (11).  Kemudian  sampel dimasukkan dalam vessel hidrotermal kemudian  panaskan  dalam  oven  selama  16 jam  dengan  memvariasikan  suhu  operasi pada  140,  160,  180  dan  200 0 C.  Setelah  itu hidroksiapatit  dipisahkan  dari  sisa  reaktan menggunakan kertas saring whatman No.42. Endapan  yang  diperoleh,  dikeringkan  dalam oven  pada  suhu  110 0 C  dan  di  timbang hingga  beratnya  konstan  (10).  Kemudian sampel dikarakterisasi dengan menggunakan  alat    FTIR,  XRD,  SEM,  dan PSA.

## HASIL Analisa FTIR
Untuk  menentukan  gugus  fungsi  OH - , PO 4 3- , dan CO 3 -2 yang terdapat pada sampel dilakukan  analisa  menggunakan Fourier Transform  Infrared  Spectroscopy  (FTIR) yang dilakukan pada range 4000 hingga 600 cm -1 .  Hasil  analisa  FTIR  pada  suhu  140 o C didapatkan  adanya  bilangan  gelombang pada  3355,53  cm -1 menunjukkan  adanya gugus fungsi OH - ; pada bilangan gelombang
2159,77  cm -1 menunjukkan  terdapatnya gugus  fungsi  P-OH  ;  pada  bilangan gelombang 1652,00  cm -1 menunjukkan terdapatnya  gugus  fungsi  C-O  ;  pada bilangan gelombang 1022,19 cm -1 menunjukkan  gugus  fungsi  PO 4 3- yang ditunjukkan  dengan  adanya  ikatan  P-O (Gambar  1).  Hasil  analisa  FTIR  pada  suhu 160 o C didapatkan adanya bilangan gelombang pada 3320,31 cm -1 yang menunjukkan  gugus  fungsi  O-H  ;  pada bilangan gelombang 2162,31 cm -1
menunjukkan  gugus  fungsi  P-OH  ;  pada bilangan
gelombang
1656,00
cm -1 menunjukkan  gugus  fungsi  C-O  ;  dan  pada
bilangan  gelombang  1020,57  cm -1 diperoleh gugus  fungsi  PO 4 -3 ditunjukkan  dengan adanya ikatan P-O (Gambar 1). Hasil analisa FTIR  pada  suhu  180 o C  didapatkan  adanya bilangan  gelombang  2211,22  cm -1 yang menunjukkan  gugus  fungsi  P-OH;  pada bilangan gelombang 1417,85 cm -1
menunjukkan  gugus  fungsi  C-O  dan  pada bilangan gelombang 1025,46 cm -1 menunjukkan  gugus  fungsi  PO 4 3- (Gambar 1).  Pada  suhu  200 o C  hasil  analisa  FTIR hanya  diperoleh  gugus  fungsi  PO 4 3- pada bilangan  gelombang  1022,90  cm -1 (Gambar 1).
Gambar 1. Hasil analisa FTIR pada suhu 140 o C,160 o C, 180 o C dan 200 o C
Hasil analisa XRD
Hasil
difraktogram yang diperoleh dibandingan deng8an standar ICSD ( Inorganic  Crystal  Structure  Database )  No. 01-073-4869  yang  menunjukkan  adanya senyawa  Trikalsium  Fosfat  [Ca 3 (PO 4 ) 2 ]  dan
ICSD  No.  01-074-9780  yang  menunjukkan adanya  senyawa  hidroksiapatit  yang  dapat dilihat dari intensitas yang tinggi pada posisi 2θ.  Pada  suhu  140 0 C  intensitas  yang  tinggi terdapat  pada  posisi  2θ:    17,09 o ;  29,37 o ; 31,15 o dan  34,66 o menunjukkan  adanya
senyawa  Trikalsium  Fosfat.  Dan  terdapat pula  intensitas  yang  tinggi  pada  posisi  2θ: 21,68 o ;  25,90 o ;  28,00 o dan  32,92 o yang mengindikasikan adanya senyawa Hidroksiapatit  dalam  sampel  (Gambar  2  a).
Pada suhu 160 o C intensitas tinggi menunjukkan  senyawa  Trikalsium  Fosfat yang terdapat pada posisi 2θ: 17,06 o ; 29,37 o ; 31,17 o dan  34,67 o .  Dan  terdapat  intensitas yang  tinggi  terdapat  pada  posisi  2θ:  23,08 o ; 25,86 o ; 28,00 o dan 32,82 o yang menunjukkan
senyawa  Hidroksiapatit  (Gambar  2  b).  Pada suhu  180 0 C  intensitas  tinggi  terdapat  pada posisi 2θ: 17,04 o ; 25,89 o ; 27,94 o ; 28,44 o dan 31,25 o yang mengindikasikan telah terbentuk senyawa Trikalsium Fosfat dan tidak ditemukan  adanya  senyawa  Hidroksiapatit dalam  sampel  (Gambar  2  c).  Pada  suhu 200 0 C  intensitas  tinggi  terdapat  pada  posisi 2θ:  17,06 o ;  21,86 o ;  25,85 o ;  27,87 o ;  31,22 o ; 32,83 o yang  menunjukkan  telah  terbentuk senyawa Trikalsium Fosfat (Gambar 2 d).
(b)
(a)
Gambar 2. Hasil analisa XRD pada suhu (a) (b) 160 o C (c) 180 o C (d) 200 o C

## Hasil analisa SEM
Analisa  SEM  hanya  dilakukan  pada  suhu 160 o C  karena  pada  suhu  tersebut  yang paling  banyak  puncak  hidroksiapatit.  Hasil analisa SEM yang dilakukan pada perbesaran  10.000x  dan  15.000x  dapat dilihat pada Gambar  3 menunjukkan partikel yang berbentuk aglomerat atau gumpalan

## Hasil analisa PSA
Hasil  analisa  PSA  diperoleh  kurva  dengan dua  puncak  yang  menandakan  distribusi ukuran  partikelnya  bersifat  tidak  normal. Ukuran  partikel  terkecil  yang  diperoleh berturut- turut  yaitu  0,541μm,  0,685μm, 1,203μm  dan  2,166μm  sehingga  diperoleh rata-rata  ukuran  partikelnya  sebesar  1,289 μm (Gambar 4)
(d)
(c)
Gambar 3. Hasil analisa SEM suhu 160 o C (a) perbesaran 10.000x (b) perbesaran 15.000x
Gambar 4. Hasil analisa PSA suhu 160 o C

## PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui  peran  tanin  dari  ekstrak  daun rambutan  sebagai  chelating  agent  dalam sintesis hidroksiapatite. Bahan yang digunakan sebagai prekursor kalsium yaitu
Ca(OH) 2 ,  sedangkan  sebagai  prekursor fosfat  menggunakan  H 3 PO 4 dan  tanin  dari ekstrak  daun  rambutan  digunakan  sebagai cheating  agent. Proses  ekstraksi  dilakukan dengan  metode  soklet  dengan  suhu  100 o C
(a)
(b)
selama  1  jam.  Tahap  sintesis  hidroksiapatit dilakukan  dengan  perbandingan  mol  Ca/P 1,67  menggunakan  prekursor  Ca(OH) 2 dan H 3 PO 4 pada  kondisi  pH  12  yang  diatur menggunakan  NaOH  0,8  M  kemudian ditambahkan ekstrak daun rambutan. Proses sintesis  dilakukan  menggunakan vessel hidrotermal  yang  ditempatkan  didalam  oven selama  16  jam  dengan  variasi  suhu  operasi pada  140,  160,  180,  dan  200 o C.  Prinsip hidrotermal  yaitu  pembentukan  material dengan  pemanasan  reaktan  dalam  wadah tertutup,  dimana  dengan  sistem  tertutup  ini memungkinkan tekanan dan suhu meningkat dengan  cepat  (12).  Tahap  pemurnian dilakukan dengan menyaring endapan hidroksiapatit dari sisa reaktan
menggunakan  kertas  saring  dan  dicuci dengan aquadest. Proses pemurnian dilakukan  untuk  memisahkan  hidroksiapatit dari  sisa  reaktan  sehingga  hasil  yang diperoleh lebih murni (10).
Analisa FTIR berfungsi untuk mengidentifikasi  gugus  fungsi  yang  terdapat pada sampel antara lain gugus fungsi PO 4 3- , OH - ,  dan  CO 3 2- dalam range 4000  hingga 600  cm -1 dan  4000-400  cm -1 .  Berdasarkan hasil  analisa  FTIR  semakin  meningkat  suhu sintesis  maka  bilangan  gelombang  pada gugus  fungsi  OH  yang  teramati  semakin tumpul,  sehingga  pada  suhu  180 o C  dan 200 o C tidak terdeteksi gugus fungsi OH. Hal ini  disebabkan  karena  hilangnya  OH  pada perlakuan  suhu  tinggi.  Rentang  bilangan gelombang  gugus  fungsi  OH  yaitu  3570- 3200  cm -1 yang  bersifat  melebar  merupakan gugus  hidroksi  yang  mengalami  ikatan hidrogen  dan  adanya  gugus  fungsi  PO 4 3- ditunjukkan  dengan  adanya  ikatan  P-O dengan  rentang  bilangan  gelombang  gugus P-O  yaitu  1050-870  cm -1 (13).  Rentang bilangan  gelombang  gugus  fungsi  P-OH yaitu  2700-2100  cm -1 (13).  Adanya  gugus fungsi  PO 4 3- dan  OH - pada  variasi  suhu 140 o C  dan  160 o C  yang  merupakan  gugus fungsional dari senyawa hidroksiapatit mengindikasikan adanya kandungan hidroksiapatit  pada  hasil  sintesis  (10). Senyawa  tanin  memiliki  rumus  molekul  C 76- H 52 O 46 yang  merupakan  senyawa  polifenol yang  memiliki  gugus  fungsi  C=O  ester,  C-H
alifatik,  C=C  aromatik,  O-H,  C-O-C  eter  dan C-O-H 11 .  Gugus  fungsi  tersebut  tidak terdeteksi  pada  hasil  analisa  FTIR,  yang menandakan tidak ada senyawa tanin dalam sampel hidroksiapatit. Proses ekstraksi yang tidak  tepat  menyebabkan  hilangnya  suatu senyawa  yang  terdapat  dalam  sampel, dimana  pada  penelitian  ini  digunakan  suhu ekstraksi  100 o C  selama  1  jam  dengan pelarut  etanol,  sedangkan  titik  didih  etanol yaitu 78 o C. Suhu optimum ekstraksi yaitu 60- 70 o C  atau  sedikit  dibawah  titik  didih  pelarut (14). Jika ekstraksi dilakukan diatas titik didih pelarut maka pelarut tersebut telah menguap sehingga  tidak  ada  senyawa  tanin  yang dapat diekstrak (15).
Hasil  analisa  XRD  pada  variasi  suhu 140 o C dan 160 o C menunjukkan bahwa telah terbentuk  dua  senyawa  kalsium  fosfat  yaitu Trikalsium  Fosfat  dan  Hidroksiapatit.  Hasil tersebut dilihat berdasarkan kemiripan posisi 2θ  difraktogram  sampel  dengan  standar Hidroksiapatit ICSD 01-074-9780 dan
Trikalsium Fosfat ICSD 01-073-4869. Puncak  difraktogram  yang  menunjukkan senyawa  Trikalsium  Fosfat  lebih  banyak dibandingkan  puncak  hidroksiapatit  yang terdapat  pada  sampel,  hal  ini  karena  pita gelombang FTIR yang menunjukkan adanya gugus  OH  pada  sampel  bersifat  melebar yakni pada rentang 3570-3200 cm -1 , sehingga  ketika  dianalisa  menggunakan XRD  hanya  ditemukan  sedikit  puncak Hidroksiapatit. Terbentuknya senyawa Trikalsium  Fosfat  pada sampel bukanlah hal yang fatal. Hal tersebut dikarenakan Trikalsium  Fosfat  juga  dapat  digunakan sebagai  implan  tulang.  Senyawa  Trikalsium Fosfat  memiliki  sifat  biodegradabel,  bioaktif dan memiliki kelarutan yang tinggi (16)
Analisa SEM dilakukan untuk melihat morfologi  permukaan  partikel  dari  senyawa kalsium  fosfat  yang  terbentuk.  Berdasarkan hasil pengujian, morfologi permukaan sampel berbentuk aglomerat atau penggumpalan  (17).  Hal  ini  terjadi  karena adanya  senyawa  kalsium  fosfat  lain  berupa Trikalsium Fosfat (18).
Analisa PSA dilakukan untuk mengetahui  distribusi  ukuran  partikel  dari senyawa  hidroksiapatit  yang  dihasilkan.
Berdasarkan hasil pengujian, diperoleh kurva distribusi  tidak  normal  dengan  terbentuknya dua  puncak.  Ukuran  partikel  yang  diperoleh yaitu  berturut- turut  0,541  μm,  0,685  μm, 1,203μm,  1,856μm  dan  2,166  μm  dengan rata-rata  ukur an  partikel  1,289  μm.  Ukuran partikel  yang  diperoleh  termasuk  kategori mikropartikel dengan rentang ukuran mikropartikel  yaitu  1- 1000  μm  (20).  Hal  ini disebabkan  karena  partikel  hidroksiapatit yang  terbentuk  berupa  aglomerat  atau gumpalan,  sehingga  ukuran  partikelnya menjadi besar. Selain itu, proses pengadukan
juga mempengaruhi homogenitas distribusi ukuran partikel dimana semakin tinggi kecepatan pengadukan  dan  semakin  lama  waktu pengadukan  maka  ukuran  partikel  yang diperoleh  semakin  kecil,  hal  ini  dikarenakan semakin  banyak  partikel  yang  terpecah menjadi ukuran nano (19).

## KESIMPULAN
Tanin  pada  ekstrak  daun  rambutan tidak  berpotensi  sebagai  chelating  agent dalam sintesis Hidroksiapatit.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Andronescu  E,  Grumezescu  AM,  Gusa
M-I, Holban AM, Ilie F-C, Irimia A, et al. Nano-hydroxyapatite:  novel  approaches in biomedical applications. In:
Nanobiomaterials in Hard Tissue Engineering. 2016. p. 189 –213.
2.   Mutmainnah  M,  Chadijah  S,  Rustiah WO.  Hidroksiapatit  dari  Tulang  Ikan Tuna  Sirip  Kuning  (Tunnus  albacores) dengan  Metode  Presipitasi.  Al-Kimia. 2017;5(2):119 –26.
3.   Anggresani  Lia,  Santi  Perawati  IJR.
Limbah Tulang Ikan Tenggiri (Scomberomorus guttatus) Sebagai Sumber  Kalsium  Pada  Pembuatan Hidroksiapatit. 2019;4(2):133 –40. 4.   Fadhilah N, Jalil Z. Sintesis Hidroksiapatit  yang  Berasal  dari  Tulang Sapi Aceh Synthesis of Natural
Hydroxyapatite  f  rom  Aceh  ’  s  Bovine Bone. • J Aceh Phys Soc. 2016;5(2):19– 21.
5.   Al-busaidi  KA.  No  Title فيظوت بتكملا تا
يميداكلأا.  2010;(45):39.  Available  from: https://www.nber.org/papers/w15827.pdf 6.   Anggresani  L.  Dip-Costing  Senyawa Kalsium  Fosfat  dari  Batu  Kapur  Bukit Tui  dengan  Variasi  Rasio  Mol  Ca/P Melalui  Metode  Sol-Gel.  Sainstek    J Sains dan Teknol. 2016;7(1):33.
7.   Sundrarajan  M,  Jegatheeswaran  S, Selvam  S,  Sanjeevi  N,  Balaji  M.  The Ionic  Liquid  Assisted  Green  Synthesis Of Hydroxyapatite Nanoplates by Moringa  oleifera  Flower  Extract:  A Biomimetic Approach. JMADE. 2015;
8.   Noriko  N.  Potensi  Daun  Teh  (  Camellia sinensis  )  dan  Daun  Anting  -  anting Acalypha  indica  L.  dalam  Menghambat Pertumbuhan  Salmonella  typhi.  Al- Azhar  Indones  Seri  Sains  Dan  Teknol.
2013;Vol. 2 No.(2):104 –10.
9.   Andriyani  D,  Utami  PI,  Dhiani  BA.
Penetapan Kadar Tanin Daun Rambutan  (Nephelium  Lappaceum  L.) Secara Spektrofotometri Ultraviolet Visibel. Pharmacy. 2010;07(02).
10.   Yahya  M,  Aziz  Y,  Zultiniar.  Sintesis Hidroksiapatit  dari  Precipitated  Calcium Carbonate  (PCC)  Kulit  Telur  Ayam Melalui Proses Hidrotermal. Jom FTEKNIK. 2016;10(1):1 –8. 11.   Kalaiselvi V, Mathammal R, Vijayakumar S, Vaseeharan B.
Microwave  assisted  green  synthesis  of Hydroxyapatite  nanorods  using  Moringa oleifera flower extract and its antimicrobial  applications.  Int  J  Vet  Sci Med. 2018;6(2):286 –95.
12.   Ningsih SKW. Sintesis Anorganik. 2016. 245 p.
13.      A.  Rohman. Spektroskopi  Inframerah dan Kemometrika untuk Analisis
Farmasi. Yogyakarta  :  Pustaka  Pelajar, 2014
14.   Thoha  MY,  Sitanggang  AF,  Hutahayan DR.  Pengaruh  Pelarut  Isopropil  Alkohol 75% dan Etanol 75% Terhadap Ekstraksi  Saponin  dari  Biji  Teh  dengan Variabel  Waktu  dan  Temperatur.  J  Tek Kim. 2009;16(3):1 –10.
15.   Fachry AR, Sastrawan RA, Svingkoe G. Kondisi  Optimal  Proses  Ekstraksi  Tanin Dari  Daun  Jambu  Biji  Menggunakan
Pelarut Etanol. Pros SNTK TOPI. 2012; 16.   Amin A, Ulfah M. Sintesis dan Karakterisasi  Komposit  Hidroksiapatit dari  Tulang  Ikan  Lamuru  (Sardinella longiceps)-Kitosan  sebagai  Bone  Filler. JF FIK. 2017;5(1):9 –15.
17.   Harahap  AW,  Helwani  Z,  Zultiniar, Yelmida.  Sintesis  Hidroksiapatit  melalui Precipitated Calcium Carbonate ( PCC) Cangkang Kerang Darah dengan Metode  Hidrotermal  pada  Variasi  pH dan  Waktu  Reaksi.  Jom  FTEKNIK. 2015;2(2).
18.   Muhara  I,  Fadli  A,  Akbar  F.  Sintesis Hidroksiapatit dari Kulit Kerang Darah
dengan Metode Hidrotermal Suhu Rendah. Jom FTEKNIK. 2015;2(1):1 –5.
19.   Taurina  W,  Sari  R,  Hafinur  UC,
Wahdaningsih  S,  Isnindar.  Optimasi kecepatan dan lama pengadukan terhadap  ukuran  nanopartikel  kitosan- ekstrak  etanol  70%  kulit  jeruk  siam (Citrus  nobilis  L.var  Microcarpa).  Tradit Med J. 2017;22(1):16 –20. 20.   Parida K, Panda S, Ravanan P, Roy H, Manickam  M,  Talwar  P.  Microparticles based drug delivery systems: preparation  and  application  in  cancer therapeutics. Cellulose. 2013; 17(September):18.