Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Krim Kombinasi Ekstrak Biji Kopi Hijau ( Coffea canephora var Robusta) dan Ekstrak Daun Teh Hijau ( Camellia sinensis (L.))
Jurnal Farmasi Sains dan Terapan (Journal of Pharmacy Science and Practice) pISSN 2338-8404 and eISSN 2657-2311 Journal Homepage: http://journal.wima.ac.id/index.php/JFST/ DOI: 10.33508/jfst.v10i2.5081
Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Krim Kombinasi Ekstrak Biji Kopi  Hijau  ( Coffea  canephora var  Robusta)  dan  Ekstrak  Daun  Teh Hijau ( Camellia sinensis (L.)
Formulation and Antioxidant Activity Test of Combination Cream of Green Coffee Bean  Extract  ( Coffea  canephora var  Robusta)  and  Green  Tea  Leaves  Extract ( Camellia sinensis (L.)
Lamsari 1 , Shelly Taurhesia* 1 , Ratna Djamil 1
1 Magister Kosmetik Bahan Alam, Fakultas Farmasi, Universitas Pancasila, Jakarta
Article info:
Received Date : 24/10/2023 Revised Date   : 14/12/2023 Accepted Date : 04/01/2024 Abstrak Kopi robusta mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, kafein dan fenol, serta daun teh hijau mengandung senyawa katekin. Senyawa  fenol  pada  kopi  dan  katekin  pada  daun  teh  hijau  memiliki aktivitas  sebagai  antioksidan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengembangkan formulasi krim dari kombinasi ekstrak biji kopi hijau dan daun teh hijau, yang memiliki aktivitas antioksidan. Biji kopi hijau diekstraksi  secara  maserasi  kinetik  menggunakan  pelarut  kombinasi isopropanol : air (60:40), sedangkan daun teh hijau diekstraksi dengan pelarut etanol 70%. Mutu ekstrak kental diuji dan aktivitas antioksidan diukur  menggunakan  metode  DPPH.  Nilai  IC 50 ekstrak  biji  kopi  hijau (EBKH) adalah 22,37 ppm, ekstrak daun teh hijau (EDTH) adalah 7,02 ppm,  dan  kombinasi EBKH : EDTH (1:1)  adalah 11,59 ppm.  Formula krim  mengandung  kombinasi  kedua  ekstrak  dengan  variasi perbandingan EBKH : EDTH = 1:2 (F1) ; 1:1 (F2) dan 2:1 (F3). Diperoleh Krim  tipe  M/A,  berwarna  putih  kekuningan,  berbau  khas,  tekstur lembut, homogen, rentang pH 7,3 – 7,5, viskositas 190.000 – 205.000 cPs, diameter daya sebar 5,9 – 6,3 cm, dan nilai aktivitas antioksidan tertinggi  diperoleh  dari  F1  sebesar  25,62  ppm.  Ketiga  formula  stabil selama  4 minggu penyimpanan  pada  suhu  40°C, dan hasil uji iritasi menunjukkan iritasi amat ringan pada F2.

## Abstract
Robusta  coffee  contains  alkaloids,  flavonoids,  saponins,  tannins, caffeine  and  phenols,  while  green  tea  leaves  contain  catechin compounds. Phenolic compounds in coffee and catechins in green tea leaves have antioxidant activity. This research aims to develop a cream formulation from a combination of green coffee bean extract and green tea  leaves,  which  has  antioxidant  activity.  Green  coffee  beans  were extracted  by  kinetic  maceration  using  a  combination  solvent  of isopropanol : water (60:40) while green tea leaves were extracted with 70% ethanol solvent. The quality of the thick extract was tested, and the antioxidant  activity  was  measured  using  the  DPPH  method.  The  IC 50 value  of  green  coffee  bean  extract  (EBKH)  is  22.37  ppm,  green  tea leaves extract (EDTH) is 7.02 ppm, and the combination of EBKH : EDTH (1:1) is 11.59 ppm. The cream formula contains a combination of both extracts with varying ratios of EBKH: EDTH = 1:2 (F1); 1:1 (F2) and 2:1 (F3). O/W type cream was obtained, yellowish white, characteristic odor, soft, homogeneous texture,  pH  range 7.3 – 7.5, viscosity 190,000 –
Keywords: Green Coffee Green Tea Antioxidants Cream Corresponding Authors*: Shely Taurhesia Fakultas Farmasi Universitas Pancasila,
Jl. Srengseng sawah, Jakarta e-mail: shellytaurhesia@univpancasila.ac.id
205,000  cPs,  spreadability  diameter  5.9 – 6.3  cm,  and  the  highest antioxidant activity value was obtained from F1 of 25.62 ppm. All three formulas were stable at 40°C for 4 weeks of storage, and the irritation test results showed very mild irritation (negligible) on F2.

## PENDAHULUAN
Antioksidan  merupakan  senyawa  yang mampu  menghambat  proses  oksidasi  dengan mengikat  radikal  bebas.  Tubuh  manusia  dapat memproduksi antioksidan alami namun dewasa ini paparan radikal bebas tidak bisa dihindari sehingga antioksidan  yang  terdapat  secara  alami  di  dalam tubuh tidak cukup. Paparan sinar ultraviolet, polusi udara, dan asap rokok dapat memicu pembentukan radikal  bebas  atau  disebut  juga  dengan reactive oxygen  species (ROS).  Paparan  tersebut  pertama- tama  akan  mengenai  kulit  manusia  sebagai  organ paling luar dari tubuh sehingga dapat mengakibatkan kerusakan struktur maupun lapisan kulit  pada  lapisan  dermis  yaitu fibroblast dan matriks  ekstraseluler  seperti  kolagen,  elastin  dan substansi  dasar  yang  mengalami  penurunan  fungsi sehingga  mengakibatkan  kulit  menjadi  kehilangan elastisitas dan akhirnya menjadi keriput (Barel, Paye &  Maibach,  2009).  Antioksidan  diperlukan  untuk mengikat  radikal  bebas  dan  beberapa  penelitian telah dilakukan dalam menggali sumber antioksidan dari berbagai tanaman (Jayanti, Farida & Taurhesia, 2022;  Mahroji,  Taurhesia  &  Laksmitawati,  2022) bahkan dari limbah kulit buah (Purwanti, Farida & Taurhesia,  2022;  Krismayadi,  Taurhesia  &  Noor, 2022).
Penelitian  sebelumnya  menunjukkan  bahwa hasil skrining fitokimia biji kopi hijau mengandung caffeine,  caffeic  acid,  chlorogenic  acid dan trigonelline , di mana komponen tersebut menunjukkan  bahwa  biji  kopi  hijau  merupakan sumber antioksidan yang baik (Kanokwan, Thanaya and  Pimporn,  2016).  Biji  kopi  hijau  jenis  robusta yang  diekstraksi  dengan  isopropanol  :  air  (60:40) mengandung jumlah total fenolik paling tinggi, yaitu 31,71±0,25 % dan menunjukkan potensi antioksidan sebesar 88 % (Naidu et al ., 2008).
Daun  teh  hijau  mengandung  senyawa  aktif utama  katekin  terutama  Epigallocatechin-3-Gallate (EGCG). Katekin berfungsi sebagai antioksidan yang dapat  menurunkan  radikal  bebas  (Chacko et  al., 2010).  Hasil  penelitian  pengujian  aktivitas antioksidan  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol daun teh hijau memiliki nilai IC 50 sebesar 8,22±0,83 ppm  (Chasanah,  2017).  Teh  ( Camellia  sinensis Kuntze) memiliki aktivitas terhadap penghambatan elastase dan kolagenase yaitu sebesar 89% (Thring, Hili & Naughton, 2009).
Krim  didefinisikan  sebagai  sediaan  setengah padat, berupa emulsi mengandung air tidak kurang dari 60% dan dimaksudkan untuk pemakaian luar.
Keuntungan  sediaan  krim  adalah  kemampuan penyebarannya  yang  baik  pada  kulit,  memberikan efek  dingin  karena  lambatnya  penguapan  air  pada kulit, mudah dicuci dengan air, serta pelepasan zat aktif yang baik.
Berdasarkan  uraian  tersebut,  belum  ada penelitian  mengenai  kombinasi  antioksidan  dari ekstrak  biji  kopi  dan  ekstrak  daun  teh  hijau,  maka dilakukan  pengembangan  formula  sediaan  krim yang mengandung kombinasi ekstrak biji kopi hijau (EBKH) dan ekstrak daun teh hijau (EDTH) dengan perbandingan 1:2; 1:1 dan 2:1. Kemudian dilakukan evaluasi  terhadap  sediaan  krim  meliputi  uji organoleptis,  uji  tipe  krim,  uji  homogenitas,  uji viskositas dan sifat alir, uji pH, daya sebar,  dan uji aktivitas  antioksidan.  Dilakukan  juga  uji  stabilitas dipercepat  pada suhu  penyimpanan 40 o C selama 4 minggu dan uji iritasi.

## METODE Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  seperti  maserator, vacuum  rotary  evaporator Buchi, water  bath , timbangan analitik Sartorius, viscometer Brookfield, alat  sentrifugasi  DLAB,  spektrofotometer  UV-Vis Shimadzu,  oven  Memmert,  inkubator,  desikator Duran, mikropipet, cawan petri, jangka sorong, pH meter  dan  peralatan  gelas  Pyrex  di  laboratorium. Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  antara lain  daun  teh  hijau,  biji  kopi  hijau  robusta,  etanol 70%, isopropanol, reagen skrining fitokimia, bahan dengan  derajat  pro  analisis  yang  diperoleh  dari supplier untuk uji antioksidan seperti 1,2-diphenyl- 2-picrylhydrazyl (DPPH) dan metanol p.a.

## Persiapan bahan
Serbuk  biji  kopi  hijau  sebanyak  600  g ditimbang kemudian disimpan dalam wadah bersih, tertutup  rapat,  kedap  udara  dan  diberi silica  gel . Simplisia  daun  teh  hijau  dilakukan  uji  Bahan Organik  Asing  (BOA).  Ditimbang  dan  dihitung presentasi  bahan  organik  asing  terhadap  simplisia yang digunakan.

## Pembuatan ekstrak a. Biji Kopi Hijau
Serbuk  biji  kopi  hijau  diekstraksi  dengan pelarut  isopropanol  :  air  (60:40)  dengan  rasio pelarut  1:10.  Sebanyak  600  gram  serbuk  biji  kopi hijau,  dimaserasi  dengan  pelarut  isopropanol  :  air (60:40) sebanyak 6 liter. Dilakukan maserasi dengan cara penambahan pelarut sebanyak 600 ml, dengan
Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Krim Kombinasi Ekstrak Biji Kopi Hijau ( Coffea canephora var Robusta) dan Ekstrak Daun Teh Hijau ( Camellia sinensis (L.))
waktu  kontak  tiap  penambahan  yaitu  30  menit, dilakukan  selama  5  jam.  Setelah  proses  maserasi, kemudian  disaring  menggunakan  kertas  saring Whatman no.1.

## b. Daun Teh Hijau
Simplisia  daun  teh  hijau  diekstraksi  dengan pelarut  etanol  70%  dengan  rasio  pelarut  1:10. Sebanyak  500  gram  serbuk  teh  hijau  dimaserasi dengan  pelarut  etanol  70%  sebanyak  5  liter. Kemudian  diendapkan  selama  24  jam  dan  filtrat disaring menggunakan kertas saring Whatman no.1, kemudian ditampung. Dilakukan remaserasi dengan pelarut  sampai  senyawa-senyawa  aktif  tersari. Filtrat  ekstrak  cair  dievaporasi  dengan  alat rotavapor  pada  suhu  50°C  di  bawah  tekanan  40 milibar.  Kemudian  ekstrak  kental  disimpan  pada suhu 4°C.

## Penetapan Parameter Mutu Ekstrak
Penetapan  parameter  mutu  ekstrak  meliputi parameter  non  spesifik  seperti  susut  pengeringan; kadar air; kadar abu total; penetapan kadar abu tak larut asam; penetapan sisa pelarut; cemaran logam berat,  cemaran  mikroba  yang  terdiri  dari  Angka Lempeng  Total  dan  Angka  Kamir  Kapang. Sedangkan  untuk  parameter  spesifik  meliputi pengamatan organoleptik; dan skrining fitokimia.

## Uji  Antioksidan  Ekstrak  dengan  Metode DPPH
1. Pembuatan larutan
- Larutan  DPPH: Larutan  DPPH  50  ppm dibuat  dengan  cara  menimbang  DPPH sebanyak  5  mg  dilarutkan  dengan  100  ml metanol absolut dalam labu tentukur.
- Larutan Sampel: Dibuat larutan stok 500 ppm  dengan  cara  menimbang  ekstrak  biji kopi  hijau  dan  ekstrak  daun  teh  hijau masing-masing  sebanyak  5  mg  dan dilarutkan  dengan  metanol  absolut  sambil diaduk dan dihomogenkan lalu dicukupkan volumenya hingga 10 ml. Selanjutnya dibuat variasi konsentrasi 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm, 40 ppm, dan 80 ppm.
- Larutan  Pembanding :  Dibuat  larutan stok  100  ppm  dengan  cara  menimbang sebanyak  1  mg  Vitamin  C,  kemudian dilarutkan  dengan  metanol  absolut  sambil diaduk dan dihomogenkan lalu dicukupkan volumenya hingga 10 ml. Selanjutnya dibuat variasi konsentrasi 0,5 ppm, 1 ppm, 2 ppm, 3 ppm dan 4 ppm.
2. Pengukuran Antioksidan
- Pengukuran Antioksidan Blangko : Pengujian  dilakukan  dengan  memipet  4  ml DPPH,  dihomogenkan  dengan vortex ,  dan
diinkubasi  pada  suhu  37°C  di  ruang  gelap. Diukur absorbansinya pada panjang gelombang 517 nm. - Pengukuran Antioksidan Ekstrak:
Pengujian dilakukan dengan memipet 0,5 ml larutan  sampel  dari  berbagai  konsentrasi. Kemudian  masing-masing    ditambahkan  3,5 ml DPPH, dihomogenkan dengan vortex dan diinkubasi  pada  suhu  37°C  di  ruang  gelap. Diukur absorbansinya pada panjang gelombang 517 nm. Prosedur yang sama juga dilakukan untuk mengukur aktivitas antioksidan atas kombinasi ekstrak 1:1.
- Pengukuran Antioksidan Pembanding: Pengujian dilakukan dengan memipet 0,5 ml larutan  Vitamin  C  dari  berbagai  konsentrasi (Jayantie, Farida & Taurhesia, 2022; Mahroji, Taurhesia & Laksmitawati, 2022). Kemudian masing-masing  ditambahkan  3,5  ml  DPPH, dihomogenkan  dengan vortex ,  diinkubasi pada  suhu  37°C  di  ruang  gelap.  Diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang  517 nm.

## Formulasi Sediaan Krim
Dikembangkan  tiga  formula  sediaan  krim mengandung  kombinasi  kedua  ekstrak  dengan variasi perbandingan EBKH dan EDTH sebesar 1:2; 1:1 dan 2:1 seperti dapat dilihat pada Tabel 1.

## Prosedur Pembuatan Krim
Campurkan  fase  minyak  (asam  stearat,  adeps lanae,  BHT  dan  paraffin  cair)  dipanaskan  hingga temperatur  70°C  (campuran  pertama).  Pada Erlenmeyer yang berbeda, campurkan  fase air (TEA, gliserin, metil paraben, propil paraben) dipanaskan hingga temperatur 70°C (campuran kedua). Ekstrak yang sudah ditambahkan dengan sodium metabisulfit  dilarutkan  dengan  sedikit aquadest . Campurkan  fase  minyak  (campuran  pertama)  dan fase air (campuran kedua), diaduk hingga homogen, kemudian  dimasukkan  ekstrak  yang  sudah dilarutkan, diaduk hingga homogen.

## Evaluasi Sediaan Krim
Evaluasi  krim  meliputi  parameter  uji  yang umum  seperti  organoleptik;  homogenitas;  tipe emulsi  menggunakan pewarna methylene blue ; uji pH, viskositas menggunakan viskometer Brookfield dengan spindel no. 6; dan daya sebar. Di samping itu juga  dilakukan  uji  antioksidan  dari  sediaan  Krim Formula  I,  Formula  II  dan  Formula  III  mengikuti prosedur uji antioksidan pada ekstrak.
- Uji Stabilitas Dipercepat:
Krim disimpan  pada  suhu  tinggi  40  ±  2  °C  selama  4 minggu k emudian dilakukan pengamatan organoleptis  (warna,  bau,  kelembutan  dan homogenitas), pengukuran pH, viskositas dan daya sebar krim.
- Uji Freeze  Thaw : Pengujian freeze-thaw dilakukan  dengan  memaparkan  produk  ke  suhu beku  (sekitar  -4°C)  selama  24  jam,  lalu  dibiarkan mencair  pada  suhu  kamar  selama  24  jam.  Sampel kemudian ditempatkan pada suhu yang lebih tinggi (+  45°C)  selama  24  jam,  kemudian  ditempatkan
kembali  pada  suhu  kamar  selama  24  jam.  Sampel dianalisis  apakah  ada  perubahan  yang  nyata.  Jika, setelah tiga siklus pengujian freeze-thaw , tidak ada perubahan  maka  dapat  dikatakan  bahwa  produk cukup stabil.
Tabel 1 . Formulasi Sediaan Krim Nama Bahan Fungsi Formula % b/b F0 F1 F2 F3 Ekstrak biji kopi hijau   Bahan Aktif - 0,011 0,011 0,022 Ekstrak daun teh hijau  Bahan Aktif - 0,022 0,011 0,011 Sodium Metabisulfit Antioksidan - 0,1 0,1 0,1 Stearic acid Emulgator 10,0 10,0 10,0 10,0 Trietanolamin 2,0 2,0 2,0 2,0 Adeps lanae Emolien, basis 3,0 3,0 3,0 3,0 Paraffin liquid Emolien 15,0 15,0 15,0 15,0 Gliserin Humektan 15,0 15,0 15,0 15,0 Methyl paraben Pengawet 0,05 0,05 0,05 0,05 Propyl paraben Pengawet 0,1 0,1 0,1 0,1 Butyl hydroxy toluene Antioksidan 0,05 0,05 0,05 0,05 Air murni Pelarut ad 100 ad 100 ad 100 ad 100
- Uji  Mekanik  (Sentrifugasi): Sampel krim  dimasukkan  ke  dalam  tabung  sentrifugasi, kemudian dimasukkan ke  dalam alat sentrifugator. Sampel  disentrifugasi  pada  kecepatan  3750  rpm selama 5 jam. Setelah disentrifugasi, diamati apakah terjadi pemisahan atau tidak.

## Uji Iritasi
Uji  iritasi  dilakukan  berdasarkan  Peraturan Kepala  BPOM  No.7  tahun  2014  yaitu  tentang  “Uji Iritasi  Akut  Dermal”.  Pengujian  dilakukan  pada hewan  uji  (kelinci).  Kelinci  yang  digunakan  adalah kelinci  albino  jantan  yang  sehat  dan  dewasa,  berat sekitar 2 kg. Kelinci dicukur pada daerah punggung seluas  lebih  kurang  10  x  15  cm  untuk  tempat pemaparan  sediaan  uji.  Semua  hewan  uji  harus diamati ada atau tidaknya eritema dan udema (Tabel 2). Penilaian respon dilakukan pada jam ke-1, 24, 48 dan 72 setelah pembukaan tempelan. Pengujian ini telah mendapat persetujuan kaji etik hewan ( Ethical Clearance )  dari  Komisi  Etik  Penelitian  Kesehatan Universitas Muhammadiyah Prof. DR. HAMKA No. 02/20.10/0700 tertanggal 16 Oktober 2020.
Tabel 2 . Kriteria Iritasi

## HASIL DAN PEMBAHASAN
a. Hasil penetapan parameter mutu ekstrak
Hasil  penetapan  parameter  mutu  ekstrak yang  non-spesifik  menunjukkan  kedua  ekstrak memenuhi  seluruh  parameter  non  spesifik,  kecuali untuk kadar air pada ekstrak daun teh hijau 19,13% melebihi kadar yang diperbolehkan (10%). Kadar air di  atas  10%  memiliki  risiko  untuk  terkontaminasi khamir  dan  kapang.  Namun  hasil  uji  cemaran mikroba,  khususnya  untuk  Angka  Khamir  dan Kapang (AKK) menunjukkan tidak adanya cemaran. Kadar  abu  tak  larut  asam  untuk  ekstrak  biji  kopi hijau dan ekstrak daun teh hijau adalah o,22% dan 0,23% berturut-turut. Hasil ini sesuai dengan tidak ditemukannya  cemaran  logam  Pb  dan  Cd  pada kedua ekstrak (Tabel 3).
Skrining  fitokimia  bertujuan  untuk  melihat kandungan  alkaloid,  flavonoid,  tannin,  saponin, kuinon,  steroid  dan  triterpenoid  secara  kualitatif. Hasil  skrining  fitokimia  EBKH  dan  EDTH  seperti tampak  dalam  Tabel  4  menunjukkan  bahwa  kedua ekstrak mengandung alkaloid, flavonoid, tanin dan saponin,  tetapi  tidak  ditemukan  kuinon  dan triterpenoid,  sedangkan  steroid  hanya  ditemukan pada EDTH. Nilai Rata - rata Kategori Respon 0,0 - 0,4 Sangat ringan ( negligible ) 0,5 - 19 Iritan ringan ( slight ) 2,0 - 4,9 Iritan sedang ( moderate ) 5,0 - 8,0 Iritan kuat ( severe )
Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Krim Kombinasi Ekstrak Biji Kopi Hijau ( Coffea canephora var Robusta) dan Ekstrak Daun Teh Hijau ( Camellia sinensis (L.))
b.  Hasil  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak dengan Metode DPPH
Nilai IC 50 adalah konsentrasi yang dibutuhkan suatu  senyawa  untuk  dapat  menghambat  50% proses  oksidatif  dari  radikal  bebas.  Hasil pengukuran  diperoleh  nilai  IC 50 untuk  vitamin  C adalah  1,35  ppm,  seperti  tampak  pada  Gambar  1 dengan  R 2 =  0,98  (mendekati  1).  Pengukuran dilanjutkan  pada  ekstrak  biji  kopi  hijau,  diperoleh nilai  IC 50 yaitu  22,37  ppm,  dan  ekstrak  daun  teh hijau  7,02  ppm  seperti  tampak  dalam  Grafik  2. Berdasarkan  nilai  IC 50 yang  diperoleh,  aktivitas antioksidan  dapat  dikelompokkan  menjadi  5 kategori yaitu sangat kuat, kuat, sedang, lemah dan tidak aktif (seperti dalam Tabel 5). Untuk itu dapat
dikatakan  bahwa  kedua  ekstrak  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  sangat  kuat,  karena  nilai  IC 50 kedua ekstrak di bawah 50 ppm.
Untuk  menentukan  efek  kombinasi  apakah sinergis,  antagonis  ataupun  aditif,  ada  beberapa software yang  dapat  digunakan.  Namun  efek sinergis dapat diindikasi dengan kurva isobologram, apabila  nilai  IC 50 kombinasi  berada  di  bawah  dari nilai IC 50 masing-masing ekstrak. Dalam hal ini nilai IC 50 kombinasi  dari  EBKH  dan  EDTH  (1:1)  adalah 11,59  ppm  yang  berada  di  antara  nilai  IC 50 EBKH sebesar  22,37  ppm  dan  EDTH  sebesar  7,02  ppm. Maka  penelitian  dilanjutkan  untuk  membuat sediaan  krim  yang  mengandung  kombinasi  EBKH dan EDTH dengan berbagai perbandingan.
Tabel 3. Hasil Pemeriksaan Mutu Ekstrak Pengujian Persyaratan (FHI, 2008) Hasil (%) Ekstrak biji kopi hijau Ekstrak daun teh hijau Organoleptik (Warna, bau) Kuning kecoklatan, bau khas Coklat tua, bau khas Kadar air ≤ 10,00 %; 12,5% 3,47 19,13 Susut pengeringan < 11,00 % 0,13 0,17 Abu total ≤ 16,6 % 10,69 4,08 Abu tak larut asam ≤ 0,7% 0,23 0,22 Cemaran mikroba (ALT, AKK) ≤ 1x10 3 tidak terdeteksi tidak terdeteksi Cemaran logam berat (Pb, Cd) Pb 10 ppm, Cd 0,3 ppm tidak terdeteksi tidak terdeteksi Sisa pelarut < 1% tidak terdeteksi tidak terdeteksi Tabel 4 .  Hasil Penapisan Fitokimia Ekstrak Penapisan Fitokimia Ekstrak Biji Kopi Hijau Ekstrak Daun Teh Hijau Alkaloid + + Flavonoid + + Tanin + + Saponin + + Kuinon - - Steroid - + Triterpenoid - - (+) = memberikan hasil positif (-) = memberikan hasil negatif

## c. Hasil evaluasi krim mengandung EBKH dan EDTH dengan variasi perbandingan
Dalam  Gambar  4  dapat  dilihat  hasil  pembuatan krim yang  mengandung  kombinasi  EBKH : EDTH dengan perbandingan 1:2 (F1); 1:1 (F2) dan 2:1 (F3). Secara  organoleptik  terdapat  perbedaan  antara ketiga  formula,  krim  F2  yang  mengandung perbandingan  1:1  (ditengah)  berwarna  putih, tekstur lembut dan berbau khas sedangkan F1 dan F3  memiliki  warna  putih  kekuningan,  tekstur lembut  dan  berbau  khas.  Dapat  dikatakan  bahwa
warna  krim  amat  dipengaruhi  oleh  banyaknya kandungan ekstrak.
Tabel  5: Klasifikasi  antioksidan  berdasarkan  nilai IC 50 Nilai IC 50 ( ppm ) Aktivitas Antioksidan < 50 Sangat kuat 50-100 Kuat 101-250 Sedang 250-500 Lemah > 500 Tidak aktif
Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Krim Kombinasi Ekstrak Biji Kopi Hijau ( Coffea canephora var Robusta) dan Ekstrak Daun Teh Hijau ( Camellia sinensis (L.))
Krim  F2  yang  mengandung  EBKH  dan  EDTH dalam  jumlah  yang  sama  (1:1)  maka  krim berwarna putih, namun pada F1 (1:2) dan F3 (2:1) krim  berwarna  putih  kekungingan  karena dipengaruhi  warna  ekstrak  yang  dominan, EBKH  yang  berwarna  kuning  kecoklatan ataupun  EDTH  berwarna  coklat  tua.  Bau  khas pada  basis  krim  maupun  krim  F1,  F2,  dan  F3 seperti  bau  lilin  yang  menyengat  berasal  dari adaps  lanae ,  bau  ini  dapat  ditutupi  dengan penambahan fragrans.
Hasil  evaluasi  tipe  krim  menggunakan pewarna metilen biru menghasilkan warna biru pada fase luar dan globul (fasa dalam) tidak berwarna. Hal ini  menunjukkan  bahwa  tipe  emulsi  adalah  M/A (minyak  dalam  air).  Hasil  evaluasi  homogenitas sediaan krim kombinasi ekstrak biji kopi hijau dan daun  teh  hijau,  semua  formula  menunjukkan  hasil yang  homogen.  Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa bahan tambahan dan ekstrak dalam formulasi krim sudah tercampur merata.
Gambar 2 . Inhibisi (%) terhadap kadar EBKH (kiri) dan EDTH (kanan)
Gambar 3 . Inhibisi (%) terhadap kadar kombinasi EBKH : EDTH (1:1)
Kombinasi KH : TH EBKH EDTH
Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Krim Kombinasi Ekstrak Biji Kopi Hijau ( Coffea canephora var Robusta) dan Ekstrak Daun Teh Hijau ( Camellia sinensis (L.))
Hasil pengujian pH didapatkan krim memiliki pH  lebih  besar  dari  6,5.  Meskipun  tidak  sama dengan pH kulit namun sediaan krim masih masuk dalam  rentang  pH  yang  diperbolehkan.  Basis  krim memiliki  pH  7,76  dan  penambahan  kombinasi ekstrak  akan  menurunkan  pH  menjadi  7,43;  7,53 dan  7,40  untuk  F1,  F2  dan  F3.  Nilai  pH  terendah diperoleh dari F3 yang memiliki kadar EBKH yang lebih besar, kandungan polifenol yang bersifat asam lemah  dapat  menurunkan  pH.  Hasil  evaluasi viskositas  menunjukkan  bahwa  penambahan kombinasi  ekstrak  menurunkan  viskositas,  dari 201.245 cps pada basis menjadi 194.368 cps; 186.661 cps  dan  177.075  cps  untuk  F1,  F2,  dan  F3  secara berurutan. Hasil pengukuran daya sebar menunjuk- kan  bahwa  penambahan  kombinasi  ekstrak meningkatkan  daya  sebar  dari  5,93  cm  pada  basis menjadi 6,3 cm; 6,4 cm dan 7,0 berturut-turut untuk F1,  F2  dan  F3.  Nilai  viskositas  berbanding  terbalik dengan  nilai  daya  sebar,  artinya  semakin  rendah nilai  viskositas  akan  meningkatkan  daya  sebarnya. Kemampuan  menyebar  krim  yang  baik  akan memberikan  kemudahan  pengaplikasian  pada permukaan  kulit.  Selain  itu  penyebaran  zat  aktif pada  kulit  akan  lebih  merata  sehingga  efek  yang
ditimbulkan  zat  aktif  menjadi  lebih  optimal. Semakin besar daya sebar krim semakin baik karena semakin  luas  juga  kontak  antara  kulit  dan  krim sehingga zat aktif yang terkandung dapat menyebar dengan baik dan merata.

## d. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan pada Sediaan Krim
Hasil  pengukuran  aktivitas  antioksidan menggunakan  DPPH  dapat  yang  dilakukan  secara triplo, dapat dilihat pada Tabel 6 bahwa F1 (EBKH : EDTH = 1:2) memiliki nilai IC 50 yang tertinggi yaitu 25,62  ppm.  Apabila  nilai  IC 50 dari  krim  F1 dicocokkan  ke  dalam  tabel  5  terkait  penggolongan antioksidan, maka F1 memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat.
e. Uji stabilitas
1. Hasil uji stabilitas dipercepat
Seperti  dapat  dilihat  dalam  grafik  5-6  bahwa pengukuran  pH,  viskositas  dan  daya  sebar ketiga  formula  krim  (F1,  F2  dan  F3)  yang disimpan pada suhu 40 ± 2 °C selama 4 minggu tidak menunjukkan perubahan, sehingga dapat dikatakan  bahwa  Krim  F1,  F2  dan  F3  stabil selama 4 minggu pada suhu 40 ± 2 °C.
Gambar 5 . Hasil uji stabilitas dipercepat (pada suhu 40 o C selama 4 minggu) untuk pH dan daya sebar
2. Hasil pengujian freeze-thaw Uji freeze-thaw dapat  untuk  mendeteksi ketidakstabilan  emulsi  dan  krim.  Pengamatan organoleptis terhadap hasil uji Freeze thaw selama 6  siklus  untuk  F0  (basis),  F1,  F2  dan  F3 menunjukkan  bahwa  semua  krim  tetap  homogen dan  tidak  terjadi  pemisahan.  Hal  ini  dapat mengindikasikan  bahwa  semua  formula  krim stabil.
3. Uji Mekanik (Sentrifugasi)
Seperti  tampak  dalam  Gambar  7  bahwa  uji mekanik (sentrifugasi) atas ketiga formula krim F1, F2  dan  F3  pada  saat  awal  tidak  menunjukkan pemisahan,  begitu  juga  setelah  penyimpanan selama  4  minggu  di  suhu  40  °C  tidak  terjadi pemisahan.  Hal  ini  sejalan  dengan  hasil  uji stabilitas  dipercepat  yang  menunjukkan  bahwa baik  basis  maupun  formula  krim  stabil,  seperti tampak pada Gambar 7.
0 2 4 6 8 0 1 2 3 4 Da ya s eb ar ( cm) Penyimpanan (minggu) Basis F1 F2 F3 4,5 5 5,5 6 6,5 7 7,5 8 0 1 2 3 4 pH Lama penyimpanan (Minggu) Basis F1 F2
F3
Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Krim Kombinasi Ekstrak Biji Kopi Hijau ( Coffea canephora var Robusta) dan Ekstrak Daun Teh Hijau ( Camellia sinensis (L.))

## Tabel 6 . Hasil uji aktivitas antioksidan krim F1, F2 dan F3
Sediaan Kadar (ppm) Abs. Blanko Absorban sampel % Inhibisi Rata - rata % Inhibisi Nilai a b r Persamaan garis IC 50 (ppm) I II III I II III y = bx + a F1 10 0,6032 0,2985 0,2990 0,3000 50,51 50,43 50,27 50,40 a = 49,157 y = 0,0329x + 49,157 25,62 50 0,2950 0,2952 0,2958 51,09 51,06 50,96 51,04 100 0,2936 0,2941 0,2937 51,33 51,24 51,31 51,29 b = 0,0329 150 0,2815 0,2820 0,2816 53,33 53,25 53,32 53,30 200 0,2691 0,2690 0,2689 55,39 55,40 55,42 55,40 r = 0,9144 250 0,2504 0,2505 0,2505 58,49 58,47 58,47 58,48 F2 10 0,6034 0,3377 0,3377 0,3379 44,03 44,03 44,00 44,02 a = 43,183 y = 0,0593x + 43,183 114,95 50 0,3310 0,3312 0,3311 45,14 45,11 45,13 45,13 100 0,2999 0,3000 0,2998 50,30 50,28 50,31 50,30 b = 0,0593 150 0,2899 0,2897 0,2970 51,96 51,99 50,78 51,57 200 0,2693 0,2694 0,2695 55,37 55,35 55,34 55,35 r = 0,9803 250 0,2549 0,2549 0,2548 57,76 57,76 57,77 57,76 F3 10 0,6032 0,3100 0,3102 0,3103 48,61 48,57 48,56 48,58 a = 47,496 y = 0,0412x + 47,496 60,78 50 0,3034 0,3037 0,3036 49,70 49,65 49,67 49,67 100 0,2962 0,2958 0,2959 50,90 50,96 50,94 50,93 b = 0,0412 150 0,2855 0,2857 0,2857 52,67 52,64 52,64 52,65 200 0,2640 0,2641 0,2643 56,23 56,22 56,18 56,21 r = 0,9664 250 0,2515 0,2516 0,2518 58,31 58,29 58,26 58,28 Basis 10 0,739 0,904 0,905 0,905 -22,33 -22,46 -22,46 -22,42 a = 2,611 y = 0,1437x + 2,611 329,78 50 0,654 0,654 0,654 11,50 11,50 11,50 11,50 100 0,636 0,635 0,636 13,94 14,07 13,94 13,98 b = 0,1437 150 0,569 0,567 0,568 23,00 23,27 23,14 23,14 200 0,473 0,473 0,474 35,99 35,99 35,86 35,95 r = 0,9288 250 0,470 0,470 0,470 36,40 36,40 36,40 36,40
Gambar 6 . Hasil uji stabilitas dipercepat (pada suhu 40 o C selama 4 minggu) terhadap daya sebar

## f. Hasil uji iritasi
Hasil  uji  iritasi  dapat  dilihat  pada  Tabel  6, pada  pengamatan  72  jam  kelinci  nomor  2 menunjukkan  bahwa  F2  memberikan  sedikit respons eritema, tetapi tidak menimbulkan udema. Hasil  perhitungan  Nilai  indeks  iritasi  primer adalah 0,05 yang berarti termasuk dalam kategori sangat ringan ( negligible ).
Tabel 7. Hasil Uji iritasi pada kelinci Waktu (jam) Kelinci 1 Kelinci 2 Kelinci 3 E U E U E U 24 0 0 0 0 0 0 48 0 0 0 0 0 0 72 0 0 1 0 0 0 Jumlah 0 0 1 0 0 0 0 50.000 100.000 150.000 200.000 250.000 0 1 2 3 4 vis kosita s (c ps) Lama penyimpanan (minggu) Basis F1 F2
F3
Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Krim Kombinasi Ekstrak Biji Kopi Hijau ( Coffea canephora var Robusta) dan Ekstrak Daun Teh Hijau ( Camellia sinensis (L.))

## KESIMPULAN
Ekstrak  biji  kopi  hijau  dan  ekstrak  daun  teh hijau  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  sangat kuat, dengan nilai IC 50 sebesar 22,37 ppm dan 7,02 ppm. Kombinasi ekstrak biji kopi hijau dan ekstrak daun teh hijau (1:1) memiliki kinerja sinergis dengan nilai IC 50 11,59 ppm. Dari ketiga formula krim yang dikembangkan,  krim  F1  yang  mengandung kombinasi ekstrak biji kopi hijau dan daun teh hijau (1:2) menunjukkan aktivitas antioksidan yang paling
tinggi  (25,2  ppm),  memenuhi  parameter  fisik  dan kimia,  stabil  pada  suhu  tinggi  (40°C)  selama  4 minggu penyimpanan, serta memiliki indeks iritasi 0,05 yang artinya iritasi sangat ringan ( negligible).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kami  ucapkan  atas  dukungan Dekan  Fakultas  Farmasi  Universitas  Pancasila beserta  jajarannya  sehingga  penelitian  ini  dapat terlaksana dengan lancar dan baik.
Gambar 7 . Hasil uji mekanik/sentrifugasi krim F1, F2 dan F3 saat awal (kiri), dan hasil sentrifugasi krim yang disimpan pada 40°C selama 4 minggu (kanan)

## DAFTAR PUSTAKA
Barel,  A.O.,  Paye,  M.  and  Maibach,  H.,  2009, Handbook  of Cosmetic  Science  and  Technology ,  Third  Edition,  Informa Healthcare USA Inc., New York.
Chacko,  S.M.,  Thambi,  P.T.,  Kuttan,  R.,  Nishigaki,  I.,  2010, Beneficial  Eeffects  of  Green  Tea:  a  Literature  Review, Chinese Medicine , 5:13, doi: 10.1186/1749-8546-5-13.
Chasanah, U., 2017, Uji Aktivitas Antioksidan Krim Ekstrak Green Tea dengan Fase Minyak VCO dan Minyak Zaitun dengan Metode DPPH, Seminar  Nasional  dan  Gelar  Produk ,  Universitas Muhammadiyah, Malang.
Jayantie,  D.D.,  Farida,  Y.,  Taurhesia,  S.,  2022,  Aktivitas Antioksidan dan Inhibisi Enzim Tirosinase Ekstrak Etanol Buah Gandaria  ( Bouea  macrophylla Griff.)  secara  In  Vitro, Pharmacoscript , 5(1): 63-70.
Kanokwan,  K.,  Thanaya,  N.,  Pimporn,  L.,  2016,  Evaluation  of Antioxidant and Anti Tyrosinase Activities as well as Stability of Green  and  Roasted  Coffee  Bean  Exctracts  from Coffea  arabica and Coffea  canephora Grown  in  Thailand, Journal  of Pharmacognosy and Phytotherapy , 8(10): 182-192.
Krismayadi, Taurhesia, S., Noor, S.U., 2022, Kombinasi Ekstrak Kulit  Buah  Nanas  dan  Mangga  yang  Memiliki  Aktivitas
Antioksidan dan Inhibisi Tirosinase, Jurnal Farmasi Indonesia , 14(1): 1-9.
Mahroji, M., Taurhesia, S., Laksmitawati, D.R., 2022, Antioxidant Activity  Test  Combination  of  Cantigi  Leaf  Extract  ( Vaccinium varingiaefoium ) and Nail Henna Leaf Extract ( Lawsonia inermis Linn), International Journal of Health and Pharmaceutical , 2(1): 182-187.
Naidu, M.M., Sulochanamma, G., Sampathu, S.R., and Srinivas, P.,  2008,  Studies  on  Extraction  and  Antioxidant  Potential  of Green Coffee, Food Chemistry , 107(1): 377-384.
Purwanti, R.A., Farida, Y., Taurhesia, S., 2022, Formulasi Sediaan Serum  Anti  Aging  Kombinasi  dari  Ekstrak  Buah  Tomat ( Lycopersicum esculentum L.) dan Ekstrak Kulit Buah Semangka ( Citrullus lanatus Thunb.), Jurnal Fitofarmaka Indonesia , 9(2): 19-24.
Thring,  T.S.A.,  Hili,  P.  and  Naughton,  D.P.,  2009, Anti- collagenase, Anti-elastase and Anti-oxidant Activities of Extracts from 21 Plants., BMC Complementary and Alternative Medicine, 9:27, doi: 10.1186/1472-6882-9-27.