## PEMBERIAN TEMPE MENURUNKAN KADAR MALONDIALDEHYDE (MDA) DAN MENINGKATKAN AKTIVITAS ENZIM SUPEROXIDE DISMUTASE
(SOD) PADA TIKUS DENGAN AKTIVITAS FISIK TINGGI
( The tempe giving decrease malondialdehyde [ MDA ] level and increase the activities of superoxide dismutase enzyme [ SOD ] on rats with high physical activities )
Iriyanti Harun 1* , Hardhono Susanto 2 , Ali Rosidi 3 1 Magister Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang 50275 2 Bagian Patologi Anatomi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang 50275 3 Program Studi Ilmu Gizi, Universitas Muhammadiyah, Semarang 50273

## ABSTRACT
The aim of this research was to analyze the influence of tempe giving to the oxidative stress in rats with high physical activities. This research was true experimental post-test only with control group design on 35 rats. The rats were given high physical activities and tempe treatments for 30 days. Those rats were divided into 5 group, which were: control 1 without giving tempe and supplement, control 2 with the giving of the commercial supplement, treatment 1 with giving 0.75 g tempe/200 g of body weight/day, treatment 2 with giving 1.5 g tempe/200 g of body weight/day and treatment 3 with giving 3 g tempe/200 g of body weight/day. At the end of this research, it was done the examination of the plasma MDA level by using TBARS method and activities of SOD enzyme using spectrofometry. The statistical analysis used One-way ANOVA Tests and Post Hoc LSD. The result showed that the tempe giving at various doses was significantly influenced to the reduction of MDA level (p<0.05) and also significantly influenced to the increasing activities of SOD enzyme (p<0.05). The giving of 3 g tempe was the most effective dose to the reduction of MDA level and the increasing activities of SOD enzyme. The conclusion was tempe could decrease the MDA level and increase the activities of SOD enzyme significantly in oxidative stress rats with high physical activities.
Keywords : antioxidant, high activities , MDA, oxidative stress, SOD, tempe

## ABSTRAK
Tujuan penelitian ini adalah untuk menganalisis pengaruh pemberian tempe terhadap stres oksidatif pada  tikus  dengan  aktivitas  fisik  tinggi.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian true  experimental,  post test only with control grup design pada 35 ekor tikus yang diberi aktivitas fisik tinggi dan perlakuan pemberian tempe selama 30 hari. Tikus dibagi menjadi 5 perlakuan yaitu kontrol 1 (tanpa pemberian tempe dan suplemen), kontrol 2 (pemberian suplemen komersial), perlakuan 1 (pemberian tempe 0,75 g/200 g bb/hari), perlakuan 2 (pemberian tempe 1,5 g/200 g bb/hari) dan perlakuan 3 (pemberian tempe 3  g/200  g  bb/hari).  Pada  akhir  penelitian  dilakukan  pemeriksaan  menggunakan  kadar  MDA  plasma dengan TBARS dan kadar SOD. Analisis statistik dilakukan uji one way anova dan post hoc LSD . Hasil menunjukkan bahwa pemberian tempe berbagai dosis berpengaruh signifikan terhadap penurunan kadar MDA (p<0,05) dan juga berpengaruh signifikan terhadap peningkatan aktivitas enzim SOD ( p <0,05). Pemberian tempe 3 g /200g bb merupakan dosis efektif terhadap penurunan kadar MDA dan peningkatan aktivitas enzim SOD. Kesimpulannya tempe dapat menurunkan kadar MDA dan meningkatkan aktivitas enzim SOD secara signifikan pada tikus stres oksidatif dengan aktivitas fisik tinggi.
Kata kunci : aktivitas tinggi, antioksidan, MDA, SOD, stres oksidatif, tempe
* Korespondensi: Telp: +628114190183 , Surel: iriyanti.magi2015@gmail.com
J. Gizi Pangan, Volume 12, Nomor 3, November 2017 211
J. Gizi Pangan, November 2017, 12(3):211-216 ISSN 1978-1059  EISSN 2407-0920 DOI: 10.25182/jgp.2017.12.211-216 Terakreditasi SK Menristek Dikti 12/M/Kp/II/2015 Tersedia daring: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jgizipangan

## PENDAHULUAN
Stres oksidatif merupakan suatu kondisi ketidakseimbangan antara produksi radikal be- bas dengan antioksidan di dalam tubuh sehingga akan memicu kondisi patologis seperti penuaan, inflamasi,  penyakit  kardiovaskular,  neurode - generatif dan kanker. Keterkaitan antara latihan
fisik  dan  stres  oksidatif  sangat  tergantung  pada intensitas dan durasinya (Yavari et al . 2015). At - let profesional sering kali melakukan latihan fisik melebihi yang dianjurkan, apalagi saat mengha- dapi kompetisi, dalam jangka panjang intensitas latihan yang meningkat ini tentunya sangat meru- gikan dan dapat menimbulkan efek negatif salah satunya yaitu meningkatnya senyawa oksidan
Harun dkk.
dalam tubuh. Apabila sistem pertahanan antioksi - dan tidak mampu menetralisir senyawa oksidan, maka akan memicu kondisi stres oksidatif (Pingi- tore et al . 2015; Yavari et al . 2015). Berolahraga berat akan menghasilkan Re- active Oxygen Species (ROS) yang berlebih se- hingga menurunkan pertahanan antioksidan dalam tubuh dan hasilnya adalah stres oksidatif. Untuk meminimalisir efek tersebut suplemen multivita- min sintetik digunakan, karena dianggap dapat meningkatkan  kapasitas  fisik  serta  memberikan keunggulan yang kompetitif khususnya bagi atlit (Williams  2004).  Penelitian  yang  dilakukan  di Birmingham membuktikan bahwa berolahraga berlari sejauh 142 mil dapat menyebabkan stres oksidatif yang mampu bertahan hingga satu bulan (Turner et al 2011). Salah satu Biomarker yang paling umum digunakan untuk mengukur derajat stres oksida- tif adalah Malondialdehyde (MDA) yang meru- pakan hasil akhir dari peroksidasi lipid (Moselhy et al . 2013). Meningkatnya pembentukan radikal bebas dalam tubuh dimulai pada saat 12-24 jam setelah aktivitas fisik, selanjutnya akan mening - kat setelah 48-72 jam dan akan kembali normal setelah 72 jam sesuai intensitas dan lamanya akti- vitas fisik (Kiyatno 2009).
Secara alami tubuh mempunyai kemam- puan untuk menangkal radikal bebas dengan membentuk antioksidan endogen yang dihasilkan oleh tubuh yang kadarnya dapat diukur melalui GPx ( Glutation Peroxidase ), katalase dan aktivi- tas enzim Superoxide Dismutase (SOD). Aktivitas fisik yang terlalu tinggi akan mengakibatkan ka - dar radikal bebas dalam tubuh juga meningkat se- hingga antioksidan endogen tidak mampu untuk menetralisir radikal bebas, dibutuhkan antioksi- dan eksogen dalam jumlah yang lebih banyak un- tuk menetralisir efek radikal bebas (Astuti 2008). Enzim SOD merupakan pertahanan pertama ter- hadap proses peroksidasi lipid yang berlebihan di dalam tubuh dan aktivitasnya bergantung pada lo- gam mineral mangan (Mn), Zink (Zn) dan temba- ga (Cu) agar dapat bekerja dengan optimal (Pow- ers & Jackson 2010). Tempe memiliki kelebihan yaitu mempunyai ketersediaan mineral lebih baik dibandingkan kedelai (Astawan et al. 2016). Tempe merupakan salah satu produk ola- han dari kedelai hasil fermentasi ragi rhizopus spp yang tinggi antioksidan alami, tempe mem- punyai  komponen  senyawa  bioaktif  isoflavon yang berperan sebagai antioksidan eksogen di dalam tubuh sehingga dapat mencegah terjadinya kerusakan sel oleh radikal bebas (Utari & Riyadi 2010).  Beberapa  penelitian  terkait  dengan  anti- oksidan menunjukkan bahwa suplementasi kede- lai dapat meningkatkan antioksidan dan mence- gah terjadinya peroksidasi lipid (Yoon & Park
2014). Aktivitas enzim SOD pada proses fermen - tasi tempe terjadi bersamaan dengan pertumbu- han jamur, dimulai sejak 24 jam dan selanjutnya meningkat sampai 60 jam fermentasi dan kemu- dian mulai menurun karena pertumbuhan jamur dipengaruhi oleh kondisi lingkungan (Astuti et al. 2000). Pemilihan tempe sebagai sampel dalam penelitian ini karena tempe mengandung zat bio- aktif  isoflavon  tertinggi  dibandingkan  produk fermentasi kedelai lainnya yaitu sebanyak 60,61 mg dan pada tempe dengan proses pemasakan jumlah isoflavon sebesar 35,64 mg (Bhagwat et al. 2008). Beberapa penelitian telah membuktikan manfaat mengonsumsi tempe seperti pada pene- litian Desminarti & Anwar  (2012) menunjukkan bahwa pemberian bubuk instan tempe sebanyak 35% pada tikus hiperglikemia memberikan pe- ngaruh yang paling kuat dalam menurunkan ka- dar MDA serum sebanyak 18,75%. Utari (2011) dalam penelitiannya juga menunjukkan bahwa konsumsi tempe dapat meningkatkan aktivitas enzim SOD sebesar 56,9% dan menurunkan ka- dar MDA sebesar 10,4% pada wanita menopause . Hasil penelitian di korea juga membuktikan bah- wa  suplementasi  isoflavon  dapat  meningkatkan aktivitas enzim SOD, GSH-px dan menurunkan kadar MDA pada tikus (Yoon & Park 2014). Penelitian ini bertujuan untuk mengeta- hui pengaruh pemberian tempe terhadap kadar MDA dan aktivitas enzim SOD pada tikus wis- tar dengan aktivitas fisik tinggi. Penelitian ini di - harapkan dapat memberikan informasi yang ber- manfaat bagi ilmu pengetahuan dan juga dapat meningkatkan pengetahuan bagi masyarakat bahwa tempe dapat digunakan sebagai alternatif makanan fungsional sebagai sumber antioksidan alami yang aman bagi tubuh sehingga dapat me- minimalisir terjadinya stres oksidatif yang diaki- batkan oleh aktivitas tinggi.

## METODE
Desain, tempat, dan waktu Penelitian ini merupakan penelitian true experiment , post test only control group design . Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Pusat Studi Pangan dan Gizi (PAU) Universitas Gadjah Mada  Yogyakarta.  Penelitian  dilakukan  dalam rentang waktu bulan Januari - Februari 2017.
Jenis dan cara pengambilan sampel Sampel dalam penelitian ini menggunakan tikus putih jantan jenis wistar yang diperoleh dari Laboratorium Pusat Studi Pangan dan Gizi (PAU) Universitas Gadjah Mada Yogyakarta dengan usia 2-3 bulan dan berat badan ±200g. Besar sampel dalam penelitian ini sebanyak 35 ekor tikus yang
Intervensi tempe terhadap stres oksidatif pada aktivitas tinggi dibagi dalam 5 perlakuan yaitu 2 kontrol dan 3 perlakuan. Peralatan yang digunakan berupa kan - dang, wadah pakan, wadah minum, waterbath untuk latihan renang tikus dengan kedalaman 50 cm, timbangan digital, spuit sonde, dan alat pemeriksaan kadar MDA dan SOD. Bahan pakan tikus Comfeed AD II diperoleh dari Laboratorium Pusat Studi Pangan dan Gizi (PAU) dengan kom- posisi kadar air 12%, protein kasar 15%, lemak kasar 3-7%, serat kasar 6%, abu 7%, kalsium 0,9- 1,1%, dan fosfor 0,6-0,9%. Tempe diperoleh dari pasar lokal kota Yogyakarta, multivitamin yang diberikan merk komersial dengan komposisi an- tioksidan vitamin A 1000IU, vitamin C 150 mg, vitamin E 15 mg, zinc oxide 15 mg, vitamin B kompleks dan mineral serta reagen MDA dan SOD.
Tahapan penelitian Tikus sebanyak 35 ekor diadaptasi selama 3 hari dan diberikan pakan standar comfeed AD II dan aquadest ad libithum, selanjutnya dilakukan penimbangan berat badan tikus. Sebelum aktivi - tas fisik dan diberi perlakuan, dilakukan pengam - bilan darah di bagian mata (plexus retro orbitalis) untuk standarisasi kadar normal MDA plasma dan  SOD  tikus  yang  dianggap  sehat. Tahap  se - lanjutnya sebelum intervensi, dilakukan renang pendahuluan dengan tujuan untuk mengetahui waktu aktivitas fisik maksimal tikus yang dipakai sebagai dasar lama waktu pelatihan renang, se- hingga berdasarkan renang pendahuluan didapat- kan waktu renang sekitar ±40 menit.
Tikus diberi aktivitas fisik tinggi selama 30 hari sebagai induksi stres oksidatif yang dibagi dalam 5 perlakuan, yaitu K1 tanpa pemberian suplemen multivitamin dan perlakuan, K2 diberi- kan suplemen multivitamin merk komersial de- ngan dosis 15 mg dihomogenkan dengan aquades menjadi 4 ml dan diberikan dengan sonde lam- bung, P1 diberi tempe sudah melalui proses steam  blanching (pengukusan) selama 5 menit sebanyak  0,75 g/ 200g bb tikus, P2 diberi tempe dengan dosis 1,5 g/ 200g bb tikus dan P3 diberi tempe dengan dosis 3 g/ 200g bb tikus, masing- masingnya dihomogenkan (diblender) dengan aquades menjadi 4 ml dengan metode sonde lam-
bung dan diberikan sehari sekali pada pagi hari setelah aktivitas fisik tinggi.
Penimbangan berat badan dilakukan kem- bali pada akhir penelitian, selanjutnya dilakukan pengambilan darah melalui plexus retro orbitalis dimana hasil analisis dalam penelitian ini adalah kadar MDA TBARS dan aktivitas enzim SOD dengan metode spektrofotometri.
Pengolahan dan analisis data Data yang diperoleh disusun dalam ben- tuk master tabel, selanjutnya dilakukan analisis statistik dengan menguji normalitas menggu- nakan Shapiro Wilk karena jumlah sampel <50. Data yang berdistribusi normal dianalisis dengan uji One Way Anova dilanjutkan dengan Post Hoc LSD, apabila tidak berdistribusi normal maka di- gunakan uji Kruskal  Wallis dilanjutkan dengan Mann  Whitney .  Dilakukan  uji Spearman untuk mengetahui korelasi antara kadar MDA dan ak- tivitas enzim SOD.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Karakteristik hewan coba Berat badan (g). Rata-rata berat badan tikus selama penelitian dapat dilihat pada Ta- bel  1.  Penimbangan  berat  badan  bertujuan  un - tuk memantau perubahan berat badan tikus se- lama penelitian, ini terkait dengan aktivitas fisik tinggi, pemberian pakan standar dan pemberian dosis tempe. Rata-rata berat badan tikus sebelum intervensi berkisar antara 194,1 g - 200,6 g, ber- dasarkan uji Kruskal Wallis tidak ada perbedaan yang bermakna berat badan tikus antar perlakuan sebelum intervensi (p=0,149), sedangkan setelah intervensi rata-rata berat badan tikus meningkat berkisar  antara  214,3g-221,4g.  Berdasarkan  uji Kruskal Walis tidak terdapat perbedaan pening- katan berat badan yang bermakna antar kelom- pok setelah intervensi (p=0,608).
Kadar MDA dan SOD sebelum aktivitas fisik  dan  perlakuan. Pemeriksaan kadar MDA dan SOD dilakukan setelah aklimatisasi pada hari ke 4 untuk standarisasi kadar normal MDA dan SOD ketika tikus belum mengalami stres oksida- tif atau masih dalam kondisi sehat.
Berat badan (g) Kelompok p * K1 K2 P1 P2 P3 Awal penelitian 199,6±2,70 196,1±3,25 194,1±4,16 198,0±7,61 200,6±2,60 0,149 Akhir penelitian 220,2±1,92 217,3±4,32 214.3±4,67 218,5±7,94 221,4±2,70 0,218 Δ 20,6 21,1 20,1 20,0 20,8 0,608
* Uji Kruskal wallis .
Tabel 1. Rata-rata berat badan tikus (g)
Tabel 2 menunjukkan bahwa nilai rata-rata kadar MDA pada tikus sebelum dilakukan in- duksi aktivitas fisik tinggi dan perlakuan pembe - rian tempe berkisar antara 1,30 nmol/ml sampai 1,54 nmol/ml. Berdasarkan uji One Way Anova menunjukkan tidak terdapat perbedaan yang ber- makna kadar MDA antar perlakuan (p=0,342) sedangkan rata-rata kadar SOD berkisar antara 77,44 U/ml sampai 81,45 U/ml, berdasarkan uji One Way Anova menunjukkan tidak ada perbe- daan kadar SOD yang bermakna antar perlakuan (p=0,593).
Pengaruh pemberian tempe terhadap kadar MDA dan aktivitas enzim SOD Tabel 3 menunjukkan bahwa kadar MDA plasma tertinggi terdapat pada perlakuan K1 sebesar (7,16±0,60 nmol/ml), ini berarti bahwa tikus sudah berada pada kondisi stres oksidatif. Terjadi peningkatan kadar MDA plasma dikare- nakan tingginya aktivitas yang dilakukan setiap hari selama 30 hari, mengakibatkan terjadinya ketidakseimbangan antara jumlah antioksidan dan radikal bebas di dalam tubuh. Jumlah anti- oksidan akan sangat dipengaruhi oleh jumlah ra- dikal bebas yang terbentuk di dalam tubuh selama aktivitas fisik tinggi (Baghaiee et al. 2016). Hasil penelitian ini sejalan dengan penelitian sebelum- nya bahwa pada kelompok dengan aktivitas fisik yang berlebih memiliki rata-rata kadar MDA pa- ling tinggi (Arsana 2014). Penelitian Rosidi juga menyatakan bahwa terjadi peningkatan kadar MDA setelah aktivitas fisik (Rosidi 2013). Pemberian perlakuan berupa tempe pada penelitian ini bertujuan untuk menurunkan kadar MDA plasma akibat stres oksidatif. Berdasarkan uji one way anova , perlakuan pemberian tempe
Harun dkk.
dengan dosis 0,75g, 1,5g dan 3g mengakibatkan penurunan kadar MDA plasma secara signifikan (p<0,05).  Pemberian  tempe  dengan  dosis  1,5  g dan 3 g/200 g bb merupakan dosis optimal karena mempunyai efek yang sama dalam menurunkan kadar MDA plasma.
Tempe  mengandung  senyawa  isoflavon dalam bentuk deidzein dan genistein yang ber- peran sebagai antioksidan sehingga dapat menet- ralisir adanya radikal bebas yang dapat mence- gah peroksidasi lipid sehingga MDA sebagai hasil akhir dari peroksidasi lipid juga menurun (Suarsana et al .  2014). Hasil penelitian ini se- jalan dengan penelitian Yoon dan Park (2014) bahwa perlakuan dengan exercise yang dilaku- kan lima hari dalam seminggu selama lima bu- lan dengan pemberian isoflavon dengan dosis 2,5 mg/kg dapat menurunkan MDA TBARS. Sejalan dengan penelitian Feng dan Zang (2016), me- nyatakan bahwa terdapat penurunan yang signifi - kan terhadap kadar MDA yang diberikan isofla - von dosis tinggi dibandingkan kelompok kontrol setelah aktivitas fisik maksimal pada tikus. Aktivitas enzim SOD plasma setelah pem- berian intervensi tempe menunjukkan bahwa setelah aktivitas tinggi pada kelompok K1 mem- punyai kadar aktivitas enzim SOD paling rendah sebesar 18,57 U/ml, hal ini disebabkan karena tingginya kadar radikal bebas dalam tubuh tikus selama aktivitas fisik tinggi sehingga antioksidan endogen dalam tubuh tidak mampu menetralisir radikal bebas (Astuti 2008).
Kelompok perlakuan  P3 memiliki akti- vitas enzim SOD paling tinggi sebesar 70,35 U/ ml dan hampir mencapai keadaan normal, terjadi peningkatan aktivitas enzim SOD bersamaan dengan penurunan kadar TBARS karena bahan
Perlakuan Kadar MDA (nmol/ml) Rata-rata ±SD p * Kadar SOD (U/ml) Rata-rata ±SD p * K1 1,52 ±0,32 0,342 81,45 ±5,53 0,593 K2 1,30 ±0,14 77,94 ±6,47 P1 1,49 ±0,26 81,45 ±4,15 P2 1,52 ±0,24 77,44 ±5,76 P3 1,54 ±0,17 80,45 ±7,80 *One Way Anova Tabel 2. Kadar Malondialdehid (MDA) dan Superoxide Dismutase (SOD) tikus sebelum aktivitas dan perlakuan
Tabel 3. Rata-rata kadar malondialdehyde (MDA) dan Aktivitas Enzim SOD tikus setelah intervensi Perlakuan Kadar MDA (nmol/ml) Rata-rata ±SD p * Kadar SOD (U/ml) Rata-rata ±SD p * K1 7,16 ±0,60 a 0,000 18,57 ±4,82 a 0,000 K2 1,69 ±0,22 b 72,91 ±3,97 b P1 3,85 ±0,38 c 34,52 ±7,71 c P2 2,42 ±0,32 d 61,60 ±5,50 d P3 2,27 ±0,37 d 70,35 ±4,82 b *One Way Anova; a,b,c Post hoc LSD berbeda signifikan
Intervensi tempe terhadap stres oksidatif pada aktivitas tinggi makanan pada tempe merupakan hasil fermen- tasi dari kedelai yang mempunyai komponen zat bioaktif isoflavon (deidzein dan genistein) yang bertindak sebagai antioksidan eksogen (Haron et al. 2009; Yoon & Park 2014). Berdasarkan uji  one  way  anova terdapat perbedaan aktivitas enzim SOD secara bermakna (p<0,05). Pemberian tempe dengan dosis 3g/200g bb merupakan dosis efektif meningkatkan kadar aktivitas enzim SOD plasma dimana rata-rata pada kelompok P3 lebih tinggi dari semua ke- lompok  perlakuan.  Hasil  penelitian  ini  sejalan dengan penelitian Astuti (2008), bahwa pembe- rian tepung kedelai yang kaya isoflavon dengan dosis 1,5 mg/ekor/hari dapat menghambat pem- bentukan peroksidasi lipid dan mempertahankan kadar  SOD  tetap  tinggi. Penelitian Utari (2011) juga menyatakan bahwa konsumsi tempe dapat meningkatkan aktivitas enzim SOD dalam darah sebesar 56,9%.
Genistein merupakan antioksidan yang berperan sebagai pelindung dalam mengurangi pembentukan radikal bebas dan oksigen reaktif sehingga diperlukan untuk melindungi sel un- tuk melawan adanya lipid peroksidasi. Selain itu juga  isoflavon  genestein  mampu  meningkatkan ekspresi MnSOD melalui interaksi dengan resep- tor estrogen dalam sel (Jiang et al. 2008; Yoon & Park 2014).
SOD akan bekerja secara maksimal tergan- tung pada logam Cu/Zn, Fe dan Mn yang dapat melindungi sel-sel dan jaringan dari serangan radikal  bebas.  Tempe  mempunyai  mineral-min - eral yang lengkap diantaranya Cu, Fe dan Zn dimana mineral tersebut berperan sangat penting sebagai kofaktor enzim-enzim antioksidan se- hingga mampu menunjang aktivitas enzim SOD di dalam tubuh. Mineral yang terkandung dalam tempe mudah diserap oleh usus halus (Astuti 2008; Lobo et al. 2010; Yoon & Park 2014). Pada kelompok K2 yang diberi suplemen menunjukkan peningkatan kadar SOD paling tinggi diantara semua kelompok perlakuan, na- mun mengonsumsi suplemen multivitamin sinte- tik tentunya berbahaya dan dapat merugikan, se- perti ketergantungan, harga yang mahal dan daya larutnya yang sangat rendah (Sayuti & Yenrina 2015).

## KESIMPULAN
Terjadi penurunan kadar MDA dan pe- ningkatan aktivitas enzim SOD pada tikus stres oksidatif pada perlakuan pemberian tempe dosis 0,75 g/200 g bb, 1,5 g/200 g bb, dan 3 g/200 g bb secara signifikan. Pemberian tempe 3 g /200g bb merupakan dosis efektif terhadap penurunan ka- dar MDA dan peningkatan aktivitas enzim SOD. Penelitian selanjutnya perlu dilakukan pengujian  kandungan  senyawa  aktif  isoflavon
dan zat gizi secara keseluruhan pada tempe yang digunakan sebagai intervensi khususnya yang berkaitan dengan antioksidan.

## DAFTAR PUSTAKA
Arsana  NI.  2014.  Ekstrak  kulit  buah  manggis ( garnicia  mangostana L.)  dan  pelatihan fisik  menurunkan  stres  oksidatif  pada  ti - kus wistar selama aktivitas fisik maksimal [Disertasi]. Denpasar: Universitas Udaya - na. Astawan M, Wresdiyati T, Ichsan M. 2016. Kara - kteristik fisikokimia tepung tempe kecam - bah kedelai.J Gizi Pangan 11(1):35-42.
Astuti  M, Meliala A, Dalais FS, Wahlqvist A . 2000.  Tempe,  a  nutritious  and  healthy food  from  Indonesia.  Asia  Pac  J  Clin Nutr  9(4):322-325.  doi:  10.1046/j.1440- 6047.2000.00176.x.
Astuti  S. 2008. Isoflavon kedelai dan potensinya sebagai  penangkap  radikal  bebas.  Jurnal teknologi industri dan hasil pertanian Uni- versitas Lampung 13(2):126-136.
Baghaiee B, Aliparasti ML, Almasi S, Siah- kuihan M, Baradaran B . 2016.  Antioxi - dant expression response to free radicals in active men and women fallowing to a session  incremental  exercise;  Numeri - cal relationship between antioxidants and free radicals. Asian J Sport Med 7(2).doi: 10.5812/asjsm.29901.
Bhagwat S, Haytowitz DB, Holden JM . 2008. USDA  Database  for  the  isoflavone  con - tent of selected Foods, U.S. department of argiculture.doi:  http://www.ars.usda.gov/ SP2UserFiles/Place/12354500/Data/iso- flav/Isoflav_R2. pdf.
Desminarti S, Anwar F. 2012. Efek bubuk tem - pe instan terhadap kadar malonaldehida ( MDA ) Serum tikus hiperglikemik. Jurnal Kedokteran Hewan 6(2):72–74.
Feng J, Zhang T. 2016. Remission effect of soy isoflavone on sport fatigue and its. JFST 8(3):31-37.
Haron H, Ismail A, Azlan A, Shahar S, Peng LS
. 2009.  Daidzein and genestein contents in tempeh  and  selected soy products. J Food  Chemistry  115(4):1350-1356.  doi: 10.1016/j.foodchem.2009.01.053.
Jiang ZY, Jiang SQ, Lin YC, Ma XY, Xi PB, Cao T, Wang XQ . 2008 Effect of ge- nistein on antioxidative defence system and  membrane  fluidity  in  chick  skeletal muscle cells. Asian-Aust Animal Science 21(8):1220-1225.
Kiyatno.  2009.  Antioksidan  vitamin  dan  keru - sakan otot pada aktivitas fisik. M Med In - dones 43(6):277-281.
Harun dkk.
Lobo V, Patil A, Phatak A, Chandra N . 2010. Free radicals, antioxidants and functional foods: Impact on human health. Pharmacognosy reviews 4(8):1181-26. doi: 10.4103/0973- 7847.70902.
Moselhy HF, Reid RG, Yousef S, Boyle Sp . 2013. A specific, accurate, and sensitive measure of total plasma malondialdehyde by HPLC. Journal  of  lipid  research  54(3):852-858. doi: 10.1194/jlr.D032698.
Pingitore A, Lima GPP, Mastorci F, Qinones A,  Iervasi  G,  Vasalle  C.2015.  Exercise and oxidative stress: Potential effects of antioxidant  dietary  strategies  in  sports. J.  Nutr  31(7-8):916-922.  doi:  10.1016/j. nut.2015.02.005.
Powers SK, Jackson MJ. 2010. Exercise induced oxidative stress: cellular mechanisms and  impact  on  muscle  force  production. NIH Public Access 88(4):1243-1276. doi: 10.1152/physrev.00031.2007.Exercise- Induced.
Rosidi  A.  2013.  Pengaruh  pemberian  ekstrak temulawak ( curcuma  xanthorrhiza roxb) terhadap stres oksidatif dan kesegaran jas- mani  atlet.[Disertasi].Bogor:  Institut  Per - tanian Bogor.
Sayuti  K,  Yenrina  R.  2015.  Antioksidan  alami dan  sintetik.  Padang: Andalas  University Press. Suarsana IN Astawa IN, Kardena IM. 2014. Role of  isoflavones  on  lipid  peroxidation,  su - peroxide dismutase in lymphocytes under oxidative stress conditions Journal of Biol- ogy, Agriculture and Healthcare 4(12):1-8. Turner  JE,  Hodges  NJ,  Bosch  JA,  Aldred  S. 2011. Prolonged Depletion of Antioxidant Capacity  after  Ultra  endurance  Exercise. Med. Sei. Sports Exerc 43(9):1770-1776. doi: 10.1249/MSS.ObO.
Utari DM. (2011) Efek intervensi tempe terhadap profil  lipid,superoksida  dismutase,  LDL teroksidasi dan malondialdehyde pada wanita  menopause.[Thesis].  Bogor:  Insti - tut Pertanian Bogor.
Utari  DM,  Riyadi  H.  2010.  Effects  of  soybean processing becoming tempeh and the cooking  of  tempeh  on  isoflavones  level. PGM 33(2):148-153.
Williams  MH.  2004.  Dietary  supplements    and sports performance introduction and vita- mins. JISSN 1(2):1-6. doi: 10.1186/1550- 2783-1-2-1.
Yavari A, Javadi M, Mirmiran P, Bahadoran Z. 2015.  Exercise  induced  oxidative  stress and  dietary  antioxidants. AJSM  6(1):1-7. doi:10.5812/asjsm.24898.
Yoon  GA,  Park  S.  2014. Antioxidant  action  of soy  isoflavones  on  oxidative  stress  and antioxidant enzyme activities in exercised rats.  Nutr  Res  Pract  8(6):618-624.  doi:
10.4162/nrp.2014.8.6.618.