## Penentuan Proses Pretreatment untuk Pemanfaatan Limbah Kulit Singkong sebagai Bahan Baku Bioetanol melalui Hidrolisa Enzimatis menggunakan Aspergillus spp.
Dessy Ariyanti 1 *, Aprilina Purbasari 1 , Heny Kusumayanti 2 , Noer Abyor Handayani 1
1 Departemen Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Diponegoro 2 Program Studi Teknik Kimia, Departemen Teknologi Industri, Sekolah Vokasi, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, Tembalang, Kota Semarang, Jawa Tengah 50275, Indonesia
Email: dessy.ariyanti@che.undip.ac.id

## Abstrak
Ketergantungan terhadap bahan bakar fosil ini menjadi masalah besar yang sangat mendesak untuk segera diselesaikan. Salah satu langkah solusi yang bisa dilakukan adalah memanfatkan bioetanol lignoselulosa dari limbah  kulit  singkong  sebagai  alternatif  pengganti.  Permasalahan  utama  yang  menghambat  penggunaan kulit singkong sebagai bahan baku utama pembuatan bioetanol adalah belum adanya proses pretreatment dan hidrolisa yang terbukti efektif secara teknis maupun ekonomis untuk mengkonversi lignoselulosa yang terkandung  dalam  kulit  singkong  menjadi  bentuk  gula  sederhana.  Penelitian  ini  dilaksanakan  untuk mengetahui efektifitas proses pretreatment dan hidrolisa untuk mengkonversi lignoselulosa yang terkandung dalam kulit  singkong menjadi  bentuk  gula sederhana. Metode  pretreatment asam (H 2 SO 4 ) dan organosolv (Etanol + CH 3 COONa) terbukti dapat meningkatkan yield gula tereduksi hingga 50% dibandingkan dengan proses hidrolisa tanpa pretreatment. Yield hingga 78% dapat diperoleh pada proses pretreatment asam suhu 30 o C, waktu 30 menit yang dilanjutkan dengan hidrolisa enzimatik dengan Aspergillus niger selama 48 jam. Peningkatan  yield  pada  proses  pretreatment  organosolv  (optimum  74%  pada  suhu  30 o C,  waktu  90  menit) masih  dapat  dilakukan  dengan  meningkatkan  waktu  operasi  dan  meningkatkan  suhu  operasi.  Namun peningkatan suhu maupun penambahan waktu operasi berpengaruh terhadap analisa teknis dan ekonomis dari  proses.  Secara  teknis,  pretreatment  organosolv  lebih  mudah  dilakukan  terutama  pada  proses  dengan kondisi  operasi  atmosferik  dibandingkan  dengan  pretreatment  asam  karena  sifat  bahan  kimia  yang digunakan  dan  penanganannya.  Secara  ekonomis,  pretreatment  asam  lebih  baik  untuk  diaplikasikan dibandingkan pretreatment organosolv, hal ini dikarenakan yield yang  dihasilkan lebih tinggi  pada kondisi proses atmosferik.
Kata kunci : H 2 SO 4 , hidrolisa enzimatis, kulit singkong, organosolv, pre-treatment asam

## Abstract

## Determination of Pretreatment Process for Utilizing Cassava Skin Waste as Bioethanol Raw Material through Enzymatic Hydrolysis using Aspergillus spp.
Lignocellulose material derived from cassava peel can be utilized as raw material for bioethanol production. The utilization of this material can be part of solution in order to maintain Indonesia’s energy security which still majority  covered  by  the  fossil  fuel.  The  main  problem  of  lignocellulose  conversion  into  bioethanol  is  their crystalline structures those make them really difficult to be converted into monomeric sugar prior fermentation to produce ethanol. The objective of this research is to find out the effectiveness of pre-treatment process prior enzymatic hydrolysis of lignocellulose contained on cassava peel. The result shows pre-treatment methods both acid (H 2 SO 4 ) and organosolv (Etanol + CH 3 COONa) proved to be effective in order to increase the yield of total reducing  sugar  (TRS)  until  50%  after  enzymatic  hydrolysis  compared  to  the  sample  without  pre-treatment.
Highest yield 78% can be achieved by applying acid pre-treatment under temperature 30 o C and 30 minutes of process  prior  enzymatic  hydrolysis  by  Aspergillus  niger  under  temperature  35 o C  for  48  hours.  Further optimization  in  organosolv  pre-treatment  can  be  conducted  by  increasing  the  temperature  and  prolong  the process  into  certain  extent.  It  should  be  noted  that  the  above  action  could  influence  the  feasibility  of  the organosolv pre-treatment technically and economically. From technical point of view, organosolv pre-treatment can be more feasible compared to acid pre-treatment (under atmospheric condition) as the reagents are easy to handle in terms of safety consideration. However, from economic side acid pre-treatment is more preferable as higher yield of the process and lower volume of chemical can be used in order to achieve the same amount of product.
Keywords: H 2 SO 4 , enzymatic hydrolysis, cassava peel, organosolv, acid pre-treatment

## PENDAHULUAN
Kebutuhan energi Indonesia saat ini sebagian besar  masih  bertumpu  pada  bahan  bakar  fosil. Kebutuhan  total  energi  nasional  tahun  2016 berada  pada kisaran  795  juta SBM  (setara  barrel minyak)  (BPPT,  2018).  Ketergantungan  terhadap bahan bakar fosil ini menjadi masalah besar yang sangat mendesak untuk segera diselesaikan. Salah satu  langkah  solusi  yang  bisa  dilakukan  adalah memanfatkan  bioetanol  lignoselulosa  sebagai alternatif  pengganti.  Salah  satu  sumber  biomasa lignoselulosa  non  pangan  di  Indonesia  yang tersedia  melimpah  adalah  limbah  kulit  singkong. Produksi  singkong  di  Jawa  Tengah  sekitar  3,18 juta  ton  dengan  luas  lahan  120,895  hektar  dan produktivitas  lahan  259,64  ku/ha  (BPS,  2018). Jumlah  kulit  singkong  dari  total  berat  singkong berkisar 20-35% (Olanbiwoninu & Odunfa, 2012), sehingga  berdasarkan  data  tahun  2017  dapat diasumsikan  bahwa  Jawa  Tengah  menghasilkan 636  –  1,11  juta  kulit  singkong.  Permasalahan utama  yang  menghambat  penggunaan  kulit singkong  sebagai  bahan  baku  utama  pembuatan bioetanol  adalah  jenis  polisakarida  yang terkandung  dalam  kulit  singkong  tersebut  yaitu selulosa  dan  hemiselulosa.  Dalam  proses pembuatan  bioetanol,  selulosa  dan  hemiselulosa harus  dikonversi  dalam  bentuk  gula  sederhana yang  nantinya  difermentasi  oleh  mikroba  untuk menghasilkan  bioetanol.  Polisakarida jenis selulosa  dan  hemiselulosa  sangat  sulit  untuk dikonversi  menjadi  bentuk  gula  sederhana (glukosa) karena struktur polimernya yang sangat kuat. Penelitian-penelitian yang telah dilaksanakan ( Murtianto  &  Chandra,  2008;  Sathya  Geetha  & Krishnan, 2009; Hikmiyati & Yanie, 2010; Juwita &
Susilowati,  2011;  Artiyani,  2011;  Kongkiattikajorn &  Sornvoraweat,  2011;  Kongkiattikajorn,  2012 ) kurang  berfokus  pada  proses  konversi  selulosa dan hemiselulosa menjadi bentuk gula sederhana. Berdasarkan  hal  tersebut,  maka  penelitian  ini diarahkan untuk mendapatkan metode pretreatment  yang  efektif,  efesien  dan  aplikatif serta ekonomis untuk menunjang proses hidrolisa dan dalam mengkonversi selulosa dan hemiselulosa  serta  polisakarida  lain  yang terkandung limbah kulit singkong menjadi bentuk gula  sederhana  yang  nantinya  dapat  digunakan sebagai bahan baku bioetanol.

## METODOLOGI
Bahan baku utama dari penelitian ini adalah limbah  kulit  singkong  dari  PT.  Indofood  Fritolay Semarang.  Kulit  singkong  ini  dicuci,  dikeringkan dengan  sinar  matahari  kemudian  ditepungkan, dikeringkan kembali dalam oven temperatur 55 o C selama  12  jam  untuk  kemudian  disimpan.  Bahan baku lainnya adalah H 2 SO 4 , Etanol, Sodium asetat (Merck)  untuk  proses  pretreatment  serta CaCl 2 .7H 2 O,  MgSO 4 ,  dan  (NH 4 ) 3 PO 4 (EM)  untuk proses hidrolisa enzimatik.
Strain Aspergillus  spp  (A.  niger  dan  A. oryzae) didapatkan dari koleksi Center of Biomass and  Renewable  Energy  (C-BIORE),  Jurusan  Teknik Kimia,  Fakultas  Teknik,  Universitas  Diponegoro. Strain ini disuplai dari Jurusan Pangan dan Nutrisi Universitas  Gajah  Mada,  yang  dipindahkan  pada slant  potato  dextrose  agar  (PDA)  dan  disimpan pada suhu 4 o C.
Proses  diawali  dengan  pretreatment  asam yaitu  dengan  mensuspensikan  5  gr  tepung  kulit singkong  dalam  45  ml  H 2 SO 4 ,  kemudian
dipanaskan  hingga  temperatur  sesuai  variabel selama  30  menit  (variabel  waktu).  Setelah  itu, suspensi  disaring,  residunya  dicuci  dengan menggunakan  NaOH  untuk  menetralkan  pHnya. Pretreatment  organosolv  dilakukan  dengan  cara yang  hampir  sama  yaitu  mensuspensikan  5  gr tepung  kulit  singkong  dalam  45  ml  etanol  yang sebelumnya  telah  ditambah  CH 3 COONa  0,05M. Suspensi kemudian dipanaskan hingga temperatur sesuai  variabel  selama  30  menit.  Setelah  itu, suspensi  disaring,  residunya  dicuci  dengan menggunakan  aquades.  Hidrolisa  enzimatik dilakukan  dengan  menambahkan  1.5%w/v  kulit singkong  hasil  pretreatment  ke  dalam  100  ml medium  yang  terdiri  dari  1g/l  CaCl 2 .7H 2 O,  1g/l MgSO 4 ,  2g/l  (NH 4 ) 2 SO 4 ,  and  0.5g/l  KH 2 PO 4 . Kemudian  medium  disterilisasi  dan  diinokulasi dengan Aspergillus  spp .  Campuran  kemudian diinkubasi  selama  48  jam  pada  temperatur  35 o C. Hasil  fermentasi  kemudian  disentrifugasi  untuk diambil supernatannya dan dianalisa.
Hasil  penelitian  dianalisis  supernatannya untuk  mengetahui  gula  tereduksi.  Konsentrasi gula  tereduksi  diestimasi  dengan  menggunakan metode penentuan gula tereduksi DNS (Andersen, 2007).  Analisa  teknis  dilakukan  dengan  mencatat fenomena  yang  terjadi  selama  proses  penelitian berlangsung, terutama mengenai kendala-kendala yang di temui serta membandingkan keuntungan dan  kelemahan  proses  pretreatment  asam  dan organosolv.  Analisa  ekonomi  dilakukan  dengan mengestimasi  dari  data  hasil  penelitian  yaitu kondisi operasi proses pretreatment dan hidrolisa
enzimatik,  bahan  kimia  yang  digunakan  serta harga dan berapa kuantitas penggunaannya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh  proses  pretreatment  terhadap  yield gula tereduksi
Penelitian  ini  membandingkan  dua  jenis metode  pretreatment  yaitu  pretreatment  asam (H 2 SO 4 ) dan pretreatment organosolv (etanol+CH 3 COONa)  yang  dilakukan  sebelum proses  hidrolisa  enzimatik.  Setelah  proses hidrolisa  enzimatik  menggunakan  dua  jenis mikroorganisme  yaitu Aspergillus  niger dan Aspergillus  oryzae ,  efektifitas  dari  kedua  proses pretreatment  dalam  mengkonversi  komponen lignoselulosa  menjadi  gula  sederhana  dapat dibandingkan..  Gambar  1a    menunjukkan pretreatment  asam  dengan  H 2 SO 4 0,1  M  selama 30 menit pada suhu 30 o C yang dilanjutkan dengan hidrolisa  enzimatik  dengan Aspergillus  niger selama  48  jam,  dapat  menghasilkan  yield  yang lebih  tinggi  (76%)  dibandingkan  dengan pretreatment  organosolv  (Etanol+CH 3 COONa 0,05M) pada kondisi yang sama (60%).
Proses  pretreatment  baik  asam  maupun organosolv  dapat  meningkatkan  yield  gula tereduksi yang dihasilkan (min 40%) dibandingkan dengan  proses  hidrolisa  enzimatik  tepung  kulit singkong  tanpa  pretreatment.  Kecenderungan yang sama dapat dilihat pada gambar 1b dimana hidrolisa  enzimatik  memanfaatkan  enzim  dari mikroorganisme Aspergillus  oryzae. Namun (a)
(b)
Gambar 1 Perbandingan hasil gula tereduksi dari berbagai proses pretreatment setelah proses hidrolisa enzimatik dengan Aspergillus niger (a) dan Aspergillus oryzae (b) selama 48 jam
apabila  dibandingkan  dengan  yield  yang dihasilkan  dari  proses  hidrolisa  enzimatik  tepung kulit  singkong  tanpa  pretreatment,  penambahan proses  pretreatment  baik  asam  maupun organosolv hanya  dapat meningkatkan yield  gula tereduksi  10-30%  saja.  Parameter  utama  dari hidrolisa  enzimatik  adalah  terjadinya  kontak  fisik antara  enzim  dan  ikatan  molekul  yang  akan dihidrolisa.  Kontak  fisik  lebih  diterjemahkan  pada luas  permukaan  kontak,  kristalinitas  substrat, ukuran partikel dan  porositas substrat (Andersen, 2007).  Pretreatment  kimia  seperti  metode pretreatment  asam  (H 2 SO 4 )  berfungsi  untuk memutuskan  ikatan  kristalin  dari  struktur lignoselulosa.  Berkurangnya  struktur  kristalin memberikan  kesempatan  kepada  enzim  yang dihasilkan oleh Aspergillus niger dan oryzae untuk masuk  kedalam  substrat  dan  menjadi  mediator reaksi  hidrolisa.  Hal  ini  terlihat  dari  adanya perbedaan yang cukup tinggi antara hasil hidrolisa sampel  tanpa  dan  dengan  pretreatment.  Tren yang sama dikemukakan oleh Zhang et al. (2006)
yang
menginvestigasi pengaruh metode pretreatment  asam  (H 3 PO 4 )  terhadap  proses hidrolisa. Terdapat perbedaan hasil hidrolisa yang cukup  signifikan  antara  sampel  selulosa  tanpa pretreatment  dibandingkan  dengan  sampel selulosa  dengan  pretreatment  asam  (H 3 PO 4 ).  Hal ini  terjadi  karena  pretreatment  asam  dapat merusak  struktur  kristalin  pada  substrat  dan menyediakan  luas  permukaan  yang  lebih  luas untuk  enzim  dalam  mengkatalisasi  proses hidrolisa  (Zhang,  et.al  2006).  Sementara  itu, pretreatment  organosolv  (Etanol  +  CH 3 COONa) berfungsi  untuk  melarutkan  lignin yang merupakan bagian dari material lignoselulosa (15- 28%)  dan  berikatan  silang  dengan  hemiselulosa. Seperti  halnya  dengan  pretreatment  asam, terlarutnya  lignin  dapat  menyediakan  luas permukaan  yang  cukup  besar  kepada  enzim dalam  mengkatalisasi  proses  hidrolisa.  Selain  itu substrat  utama  yaitu  selulosa  dan  hemiselulosa lebih mudah diakses saat komponen lignin terlarut dalam solven  organik dalam hal ini etanol (Zhao, et al., 2009; Zhang et al ., 2016).
Data pada gambar 1 juga memperlihatkan pretreatment  asam  menghasilkan  yield  gula tereduksi yang lebih tinggi dibandingkan  dengan pretreatment  organosolv.  Hal  yang  sama didapatkan oleh Olanbiwoninu dan Odunfa (2012)
yang  menggunakan  asam  sulfat  sebagai  bagian dari  pretreatment  asam  sebelum  proses  hidrolisa enzimatik  dengan Pseudomonas  fluorescens dan Aspergillus terreus . Asam sulfat dan beberapa jenis asam  lainnya  menyediakan  ion  hidrogen tambahan  untuk  membentuk  asam  konjugasi, yang membentuk celah pada ikatan glikosidik. Hal ini  dapat  mendesktruksi  ikatan  kristalin  pada substrat.  Molekul  air  pada  sistem  juga  dapat membantu  proses  desktruksi  ini.  Sehingga  luas permukaan  dan  akses  yang  dibentuk  dalam substrat  semakin  banyak  dibandingkan  dengan pretreatment  organosolv  yang  hanya  mampu melarutkan lignin (Wyman, 2006; Sun, et al ., 2016).
Optimasi proses pretreatment
Dua proses pretreatment yaitu pretreatment  asam  dan  organosolv  yang dilakukan  sebelum  proses  hidrolisa  enzimatik terbukti  dapat  meningkatkan  yield  gula  tereduksi (10-50%)  untuk  nantinya  dapat  diproses  lebih lanjut  hingga menghasilkan etanol. Secara umum terdapat dua parameter utama yang mempengaruhi  gula  tereduksi  yang  dihasilkan setelah proses pretreatment yaitu suhu dan lama proses tersebut berlangsung (Gambar 2).
Gambar 2a menunjukkan pengaruh waktu pretreatment  terhadap  gula  tereduksi  yang dihasilkan  sebelum  dan  setelah  proses  hidrolisa enzimatik dengan Aspergillus niger selama 48 jam. Kecenderungan  antara  pretreatment  asam  dan organosolv  berbeda  pada  variasi  waktu  proses. Yield dari bahan baku tepung kulit singkong yang dipretreatment  dengan  organosolv  cenderung meningkat  seiring  dengan  penambahan  waktu operasi,  sebaliknya  yield  dari  bahan  baku  tepung kulit singkong yang dipretreatment dengan asam cenderung  menurun.  Tren  yang  sama  ditemukan pada  proses  hidrolisa  enzimatik  dengan Aspergillus oryzae (Gambar 2c) .
Parameter  lain  yang  mempengaruhi  yield gula  tereduksi  adalah  suhu  proses  pretreatment. Proses  pretreatment  asam  menggunakan  variasi suhu  proses  30-90 o C,  sementara  proses pretreatment  organosolv  menggunakan  variasi suhu  30-60 o C,  dikarenakan  proses  pretreatment organosolv  melibatkan  etanol  yang  memiliki  titik didih  60 o C.  Gambar  2b  dan  d  memperlihatkan pengaruh  suhu  terhadap  gula  tereduksi  yang dihasilkan  sebelum  dan  setelah  proses  hidrolisa
enzimatik dengan Aspergillus niger dan Aspergillus oryzae selama  48  jam.  Tren  yang  sama  diperoleh dari  hasil  penelitian  dengan  kedua  jenis mikroorganisme  tersebut.  Peningkatan  suhu proses  berpengaruh  terhadap  peningkatan  yield gula tereduksi pada bahan baku yang ditreatment menggunakan  organosolv,  sedangkan  yield  gula tereduksi  pada  bahan  baku  yang  ditreatment menggunakan  asam  cenderung  menurun  seiring dengan peningkatan suhu.
Mekanisme  pretreatment  organosolv dengan  etanol  dan  CH 3 COONa  lebih  dititik beratkan  pada  proses  pelarutan  lignin  pada etanol. Proses pelarutan lignin sangat dipengaruhi oleh  suhu  dan  waktu  operasi,  sehingga  semakin tinggi  suhu  dan  waktu  operasi,  yield  gula tereduksi  yang  dihasilkan  juga  semakin  tinggi (Quesada et  al., 2010).  Sedangkan,  mekanisme yang  ditekankan  pada  proses  pretreatment  asam menggunakan H 2 SO 4 adalah mekanisme destruksi struktur  kristalin  dari  komponen  lignoselulosa. Waktu  dan  suhu  proses  secara  umum  dapat
meningkatkan  proses  dekstruksi  kristalin  material lignoselulosa  (Wyman,  2006;  Xu et  al., 2015). Namun  pada  penelitian  ini  tren  yang  diamati terbalik,  hal  ini  dimungkinkan  akibat  proses dekstruksi ini menghasilkan komponen lain selain monomer  gula  yang  mempengaruhi  proses hidrolisa  enzimatik.  Penelitian  lebih  lanjut mengenai  komponen-komponen  yang  dihasilkan setelah  proses  pretreatment  diperlukan  untuk menjelaskan fenomena ini.
Analisis teknis dan ekonomis proses pretreatment
Dua  metode  pretreatment  yang  telah diteliti  masing-masing  memiliki  kelebihan  dan kekurangan  yang  dianalisa  selama  proses penelitian.  Proses  pretreatment  asam,  melibatkan bahan  kimia  asam  sulfat  yang  sangat  berbahaya sedangkan  proses  pretreatment  organosolv melibatkan  bahan  kimia  yaitu  etanol  yang  cukup mahal.  Tinjauan  teknis  dan  ekonomis  dari  kedua proses dapat dilihat pada Table 1 dan 2.
(a) (b)
(c)
(d)
Gambar  2. Pengaruh  waktu  (a,c)  dan  suhu  (b,d)  pretreatment  terhadap  gula  tereduksi  yang  dihasilkan sebelum dan setelah proses hidrolisa enzimatik dengan Aspergillus niger (a,b) dan oryzae (c,d) selama 48 jam

## Tabel 1. Kajian teknis berbagai metode pretreatment
Pretreatment Kajian Teknis Penanganan bahan kimia Penanganan  saat Pretreatment Pencucian Organosolv (Etanol + H 3 COONa) Cukup  mudah  dalam  penyimpanan, etanol  tetap  dalam  keadaan  layak dipakai  walaupun  disimpan  dalam waktu  yang  lama,  dan  disarankan untuk  menyimpan  ditempat  yang rapat  dan  dijauhkan  dari  benda yang mudah terbakar  karena etanol mudah untuk  menguap. Sedangkan CH 3 COONa, yang berbentuk padatan, cukup dengan dihindarkan kontak dengan air dan udara Perlu pengawasan yang teliti karena  titik  didih  metanol berada pada suhu 60⁰C Lebih  mudah  untuk dinetralkan, tidak memerlukan air dalam  jumlah  banyak dalam proses pencucian untuk menetralkan pH. H 2 SO 4 Memerlukan  teknik  khusus  dalam penyimpanan, tidak dianjurkan untuk  menyimpannya  dalam  waktu lama  karena  berpengaruh  terhadap kualitasnya. Titik  didih  tinggi,  yaitu 290⁰C,  namun  larutan  asam dapat mengalami penguraian  apabila  terkena panas  dan  mengeluarkan gas SO 2 . Memerlukan  volume air yang cukup banyak untuk menetralkan pH setelah proses. Tabel 2. Kajian ekonomi berbagai metode pretreatment
Parameter Pretreatment asam (H 2 SO 4 ) Pretreatment organosolv (Etanol + CH 3 COONa) Yield yang dihasilkan (optimum) 78% 74% Waktu proses 30 menit 90 menit Kebutuhan air (proses pencucian) 180 mL/gr bahan baku 60 mL/gr bahan baku Kebutuhan reagen 0.05mL/gr bahan baku 9mL/gr bahan baku

## KESIMPULAN
Penelitian  untuk  mengetahui  efektifitas proses  pretreatment  dan  hidrolisa  untuk mengkonversi  lignoselulosa  yang  terkandung dalam  kulit  singkong  menjadi  bentuk  gula sederhana  yang  nantinya  dapat  digunakan sebagai bahan baku bioetanol telah dilaksanakan. Metode  pretreatment  asam  (H 2 SO 4 )  dan organosolv  (Etanol  +  CH 3 COONa)  terbukti  dapat meningkatkan  yield  gula  tereduksi  hingga  50% dibandingkan  dengan  proses  hidrolisa  tanpa pretreatment.  Yield  hingga  78%  dapat  diperoleh
pada  proses  pretreatment  asam  (H 2 SO 4 )  suhu 30 o C,  waktu  30  menit  yang  dilanjutkan  dengan hidrolisa  enzimatik  dengan Aspergillus  niger selama  48  jam.  Peningkatan  yield  pada  proses pretreatment  organosolv  (optimum  74%  pada suhu 30 o C, waktu 90 menit) masih dapat dilakukan dengan  meningkatkan  waktu  operasi  dan meningkatkan  suhu  operasi.  Namun  peningkatan suhu  maupun  penambahan  waktu  operasi berpengaruh  terhadap  analisa  teknis  dan ekonomis dari proses. Secara teknis, pretreatment organosolv lebih mudah dilakukan terutama pada proses  dengan  kondisi  operasi  atmosferik
dibandingkan  dengan  pretreatment  asam  karena sifat  bahan  kimia  yang  digunakan  dan penanganannya.  Secara  ekonomis,  pretreatment asam lebih baik untuk diaplikasikan dibandingkan pretreatment  organosolv,  hal  ini  dikarenakan bahan  kimia  yang  digunakan  lebih  sedikit  secara kuantitas dan lebih murah. Selain itu, yield proses pretreatment asam lebih tinggi apabila dibandingkan pada waktu proses yang sama.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih yang sebesar-besarnya disampaikan kepada Dinas Pendidikan,
Pemerintah Provinsi Jawa Tengah atas pendanaan riset  ini  melalui  Program  Penelitian  Dosen  Muda (PPDM).

## DAFTAR PUSTAKA
Andersen,  N.  2007.  Enzymatic  Hydrolysis  of Cellulose  Experimental  and  Modeling  Studies., Ph.D.  Thesis  BioCentrum-DTU,  Technical University of Denmark.
Artiyani,  A.  2011.  Bioetanol  dari  limbah  kulit singkong  melalui  proses  hidrolisis  dan fermentasi  dengan saccharomyces  cerevisiae. Tesis.  Program  Magister  Jurusan  Teknik Lingkungan,  Fakultas  Teknik  Sipil  dan Perencanaan,  Institut  Teknologi  Sepuluh Nopember.
Badan  Pengkajian  dan  Penerapan  Teknologi [BPPT].  2018.  Outlook  Energi  Indonesia  2018. Pusat  Pengkajian  Industri  Proses  dan  Energi (PPIPE).  Badan  Pengkajian  dan  Penerapan Teknologi (BPPT). ISBN 978-602-1328-05-7 Badan  Pusat  Statistik  [BPS].  2018.  Provinsi  Jawa Tengah dalam Angka 2018. www.bps.go.id .
Hikmiyati,  N.,  &  Yanie,  N.S.  2010.  Pembuatan bioetanol  dari  limbah  kulit  singkong  melalui proses  hidrolisa  asam  dan  enzimatis.  Skripsi. Jurusan  Teknik  Kimia,  Fak.  Teknik,  Universitas Diponegoro.
Juwita,  A.A.,  &  Susilowati,  C.  2011.  Bioetanol  dari ampas  dan  kulit  singkong.  Skripsi.  Jurusan Teknik  Kimia,  Fak.  Teknik,  Universitas Diponegoro.
Kongkiattikajorn,  J.,  2012.,  Ethanol  Production from  Dilute-Acid  Pretreated  Cassava  Peel  by Fed-Batch  Simultaneous  Saccharification  and
Fermentation., International  Journal  of  the Computer,  the  Internet  and  Management ,  20 (2): 22-27
Kongkiattikajorn,  J.  &  Sornvoraweat,  B.,  2011.,
Comparative  Study  of  Bioethanol  Production from  Cassava  Peels  by  Monoculture  and  Co- Culture  of  Yeast. Kasetsart Journal  (Nat.  Sci .), 45:268-274
Murtianto,  B.W.  &  Aria  Chandra,  B.  2008.
Production  of  bioethanol  from  cassava  peel waste  (cpw)  by  using  sweet  corn  enzyme powder. Semesta Bilingual Boarding School.
Olanbiwoninu,  A.A,  &  Odunfa,  S.A.,  2012, Enhancing  the  Production  of  Reducing  Sugars from Cassava Peels by Pretreatment Methods., International Journal of Science and Technology , 2(9):650-657. Quesada-Medina,  J.,  López-Cremades,  F.J.  & Olivares-Carrillo, P., 2010. Organosolv extraction  of  lignin  from  hydrolyzed  almond shells  and  application  of  the  δ-value  theory. Bioresource technology , 101 (21), pp.8252-8260. Geetha, G.S., & Krishnan, A.N.G. 2009. Diluted acid hydrolysis  and  steam  explosion  of  Manihot esculenta  peeling  waste  for  bio  ethanol production.  Centre  for  Environmental  Studies, Anna University.
Sun,  F.F.,  Tang,  S.,  Liu,  R.,  Tang,  Y.,  Wang,  R., Zhang, Z., Gao, Z., Li, H., Li, C  & Xiao, Z. 2016. Biorefining  fractionation  of  the Camellia oleifera Abel. hull into diverse bioproducts with a  two-stage  organosolv  extraction. Industrial Crops and Products. 94:790-799. Wyman,  C.E.,  Decker,  S.R.,  Himmel,  M.E.,  Brady, J.W., Skopec, C.E., & Viikari, L., 2006., Hydrolysis of Cellulose and Hemicellulose. Chapter book.
Xu,  G.,  Wang,  A.,  Pang,  J.,  Zheng,  M.,  Yin,  J.,  &
Zhang, T. 2015. Remarkable effect of extremely dilute  H 2 SO 4 on  the  cellulose  conversion  to ethylene  glycol. Applied  Catalyst  A:  General . 502: 65-70.
Zhao,  X.,  Cheng,  K.  &  Liu,  D.  2009.  Organosolv pretreatment  of  lignocellulosic  biomass  for enzymatic hydrolysis., Applied Microbiology and Biotechnology. 82:815–827
Zhang, Y.H.P., Cui J., Lynd, L.R. & Kuang, L.R. 2006. A transition from cellulose swelling to cellulose dissolution  by  o-phosphoric  acid:  evidence from enzymatic hydrolysis and supramolecular structure. Biomacromolecules . 7: 644-648.
Zhang,  Z.,    Harrison,  M.D.,    Rackemann,  D.W., Dohertya,  W.O.S    &    O'Haraa,  I.A.  2016. Organosolv pretreatment  of plant  biomass for
enhanced  enzymatic  saccharification. Green
Chemistry. 18(2):360-381