Analisa Indeks Glikemik Sari Tebu Alami, Nira Serbuk, dan Gula Kristal Putih dengan Metode In Vivo dan Metode In Vitro
In vivo and in Vitro Method for Analysis of Glicemic Index of Natural Sugarcane Juice, Sugarcane Juice Powder, and Plantation White Sugar
Simping Yuliatun 1) , Pius Pandu Bintang Wicaksono 2) dan Achmad Ridwan Ariyantoro 2)
1) Pusat Penelitian Perkebunan Gula Indonesia (P3GI), Pasuruan
2) Universitas Sebelas Maret Email: simping7@gmail.com

## ABSTRAK
Informasi indeks glikemik (IG) dapat digunakan untuk membantu konsumen dalam memilih makanan  dan  mengurangi  resiko  terhadap  penyakit  diabetes. Tujuan  penelitian  ini  untuk mengetahui  IG  dan  korelasi  metode in-vitro dan in-vivo dalam  penentuan  IG  pada  sari  tebu alami (STA), nira serbuk (NS) dan gula kristal putih (GKP). Analisa IG dengan metode in vivo dilakukan menggunakan partisipan (manusia). Respon gula darah selama 2 jam diukur setelah diberi  asupan  makanan  contoh.  Metode in  vitro prediksi  indeks  glikemik  dilakukan  dengan membuat simulasi sistem pencernaan di luar tubuh. Glukosa yang dibebaskan dari contoh yang dicerna secara in vitro selama 2 jam di bandingkan acuan (glukosa). Analisis statistik dilakukan untuk uji t berpasangan dan korelasi indeks glikemik pada metode in vivo dan in vitro . Hasil penelitian menunjukkan nilai indeks glikemik secara in vivo dari contoh STA, NS dan GKP berturut-turut 57,96 (IG sedang); 77,37 (IG tinggi); dan 85,78 (IG tinggi). Pengujian in vitro dari  contoh  STA,  NS  dan  GKP  menunjukkan  nilai  indeks  glikemik  berturut-turut  62,6  (IG sedang), 76,7 (IG tinggi) dan 86,3 (IG tinggi).  Hasil uji t menunjukkan metode in vitro dapat diterima untuk menggantikan metode in vivo . Pengujian IG metode in vitro dan in vivo memiliki korelasi kuat (r = 0,9188) dan positif.
Kata kunci: tebu, respon glikemik, indeks glikemik, in vivo, in vitro

## ABSTRACT
The  information  of glycemic  index may  assist  consumers  to  regulate  nutrition  content  and manage blood glucose levels. The objective of this research to determine glycemic index (GI) and the relationship between the in vivo glycemic index (GI) and in vitro digestibility of natural sugarcane juice (STA), sugarcane juice powder (NS) and plantation white sugar (GKP). The in vivo  glycemic  index  determination  method,  samples  were  tested  for  GI  in  healthy  human (participants).  The  blood  glucose  responses  measured  for  2  hours.  An  in  vitro  method  that predicts glycemic response proposed a simulated gastrointestinal digestion. Glucose liberated from  samples  digested  in  vitro  were  analysis  and  compared  with  glucose  as  reference. Statistical analysis using paired t-tests were conducted on glycemic index and correlation of in vivo and in vitro method. The result showed that GI values for in vivo method were STA 57.96 (medium  GI);  NS  77.37  (high  GI);  and  GKP  85.78  (high  GI).  An  in  vitro  method  showed glycemic index for STA, NS and GKP respectively 62,6 (medium GI); 76,7 (high GI); and 86,3 (high GI). The t test results showed that the in vitro method was acceptable to replace the in vivo method. The GI values were strongly (r= 0,9188) and positively correlated with an in vivo and in vitro methods for determining glycemic index.
Key words: sugarcane, glycemic response, glycemic index, in vivo, in vitro
Indonesian Sugar Research Journal Volume 3 No 2 page: 8 6 -9 5 p-ISSN: 2775-2100 e-ISSN: 2798-5415

## PENDAHULUAN
Angka  penderita  diabetes  melitus seluruh  dunia  masih  sangat  tinggi  dan cenderung  meningkat  setiap  tahunnya. Tahun  2021  jumlah  penderita  diabetes mencapai  10,25%  dari  jumlah  manusia dewasa  (20-70  tahun)  atau  sebanyak  537 juta jiwa (International
Diabetes Federation, 2021), dan diperkirakan jumlah ini meningkat menjadi 643 juta pada tahun 2030.    Penyakit  diabetes  dan  kegemukan (obesitas)  terkait  erat  dengan  kelebihan asupan  makanan  dengan  indeks  glikemik tinggi,  peningkatan  muatan  glikemik ( glycemic load ) dan gaya hidup yang tidak aktif (Sagili et al . 2022).
Makanan karbohidrat akan memicu peningkatan kadar gula darah (Bellmann et al .,  2017,  Shkembi  and  Huppert,  2023)). Indeks glikemik mengindikasikan pengaruh spesifik  dari  makanan  tertentu  terhadap peningkatan gula darah, sementara muatan glikemik  merujuk  pada  kualitas  dan kuantitas  karbohidrat  secara  keseluruhan dalam makanan dan interaksinya. Konsumsi  makanan  yang  mengandung indeks  glikemik  rendah  berguna  untuk mengatur level gula  darah  seseorang  yang dalam kondisi menderita diabetes (Barclay et al ., 2021).
Indeks  glikemik  merupakan  salah satu parameter kualitas karbohidrat (Gourineni et  al .,  2019),  yang  dapat digunakan  untuk  memperingkat  dampak dari karbohidrat tersedia terhadap peningkatan  kadar  gula  darah  (Barclay et al ., 2021). Secara fisiologi indeks glikemik menerangkan bagaimana dampak makanan karbohidrat  terhadap  peningkatan  glukosa darah  (Sun et  al .,  2022;  Koseoglu  dan Celikel,  2022).  Indeks  glikemik  dari  suatu makanan digunakan untuk memonitor level gula darah dari sekelompok orang tertentu. Indeks  glikemik  menyatakan  presentase area di bawah kurva respon gula darah bila mengkonsumsi sejumlah tertentu karbohidrat  glukosa.  Hal  ini  untuk
menjelaskan  bagaimana  dampak  terhadap asupan  makanan  yang  mengandung karbohidrat terhadap gula darah.
Nilai  glikemik  indeks  berkisar antara 1 hingga 100 (Sun et al ., 2022). Nilai indeks glikemik ≤55 tergolong rendah, nilai indeks  glikemik  56-69  dalam  kelompok indeks  glikemik  sedang.  Nilai  indeks glikemik  ≥70  dikelompokkan  ke  dalam indeks  glikemik  tinggi  (Atkinson et  al ., 2021; Barclay et al ., 2021). Makanan yang tergolong  memiliki  indeks  glikemik  tinggi memiliki  respon  meningkatkan  nilai  kadar gula  darah  lebih  tinggi  daripada  makanan dengan indeks glikemik rendah.
Informasi  nilai  indeks  glikemik dalam  suatu  makanan  dapat  membantu konsumen  dalam  memilih  makanan  bagi penderita  diabetes  maupun  bagi  mereka yang ingin mencegah diabetes dan menjaga kesehatannya (Whelan et al ., 2010). Indeks glikemik idealnya ditentukan secara in vivo dengan mengamati tingkat kadar gula darah pada  manusia  yang  mengasup  makanan tersebut.  Respon  gula  darah  dari  makanan yang  dikonsumsi  dibandingkan  dengan makanan  acuan  dalam  periode  waktu tertentu  dan  indeks  glikemik  dapat ditentukan.
Hasil  pengujian  indeks  glikemik secara in vivo lebih realistik (Miller, 2004; Sun et al. , 2022). Namun demikian, analisa indeks  glikemik  secara in  vivo sangat komplek  dan  menimbulkan  masalah  etika karena  menggunakan  subyek  manusia, membutuhkan biaya besar, dan waktu yang lama  (Bohn et  al .,  2018;  Koseoglu  dan Celikel, 2022). Engelyst et al . (1999) telah mengembangkan protokol pengujian secara in vitro untuk memprediksi indeks glikemik dengan  melibatkan  pengukuran  glukosa yang  dibebaskan  oleh  makanan  selama inkubasi  pada  37 o C  dengan  melibatkan enzim-enzim pencernaan.
Metode in  vitro digunakan  dengan mensimulasikan pencernaan makanan (Brodkorb et  al .,  2019).  Secara  umum, model pencernaan in vitro meniru kondisi in
vivo seperti  bahan  kimia  yang  terlibat, kondisi  lingkungan  reaksi,  bahan  dan pergerakan makanan.  Menurut Nurhayati et al. (2019),  penentuan  indeks  glikemik dengan  metode in  vitro oleh  Argyri et  al. (2016) mendekati nilai yang diperoleh dari indeks glikemik secara in vivo .
Penelitian  indeks  glikemik  pada produk  sari  tebu  alami  dan  nira  serbuk belum pernah dilaporkan. Tujuan penelitian ini  untuk  mengetahui  indeks  glikemik  sari tebu  alami,  nira  serbuk  dan  gula  kristal putih dengan pangan acuan berupa glukosa, serta  korelasi  metode  pengujiannya  secara in vitro terhadap metode in vivo .

## METODE
Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Pasca Panen, Pusat Penelitian Perkebunan Gula Indonesia (P3GI)
Pasuruan.  Waktu  penelitian  yaitu  pada bulan September – Desember 2021.

## Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah sari tebu alami (STA) diperoleh  dari  Laboratorium  Pasca  Panen, Pusat Penelitian perkebunan Gula Indonesia (P3GI). Nira serbuk dari hasil spray drying nira  tebu  yang  dilakukan  di  laboratorium Pasca  Panen,  P3GI.  Gula  kristal  putih diperoleh  dari  pasaran  dengan  merk  Rose Brand. Glukosa teknis, dinitro salisilic acid, kalium natrium tartarat, natrium hidroksida, enzim alfa-amilase, enzim alfa-glukosidase, HCl, buffer phospat, etanol.
Alat  yang  digunakan  adalah  pipet volume, tabung reaksi, oven, waterbath , pH meter,  termometer, stopwatch, neraca analitik, vortex, rak  dan  tabung  reaksi, pengaduk magnetik , panci dan spektrofotometer, glucometer dengan merk On Call Plus, stripe, lancet.

## Metode
Analisis  Nilai  Indeks  Glikemik  secara In Vivo (Metode Brouns et al ., 2005)
Pengujian  indeks  glikemik in  vivo dilakukan  dengan  metode  Brouns et  al .
(2005).  Penentuan  subyek  atau  partisipan. Partisipan dalam hal ini adalah orang yang menjalani  uji  penentuan  glikemik  indeks untuk produk makanan.  Partisipan dengan jenis kelamin perempuan berusia antara 18- 23  tahun.  Kondisi  partisipan  harus  sehat dengan  berat  badan  normal  dengan  indeks massa tubuh ( body mass index /BMI) sekitar 19-21,  tidak  memiliki  alergi  terhadap makanan, tidak memiliki penyakit diabetes atau  penyakit  kronis  lainnya,  dan  tidak dalam  masa  pengobatan  atau  tidak mengkonsumsi  obat-obatan  yang  bisa mempengaruhi kadar glukosa darah.
Penentuan  nilai  indeks  glikemik pada  produk  STA,  nira  serbuk  dan  gula kristal  putih  (GKP)  dilakukan  dengan memberikan  sampel  uji  kepada  partisipan untuk  dikonsumsi.  Partisipan  diwajibkan berpuasa  sekurang-kurangnya  8  jam sebelum  mengkonsumsi  contoh  yang diberikan. Jumlah contoh yang dikonsumsi sebanyak  50  gram  pada  setiap  partisipan. Pengambilan  sampel  darah  dari  partisipan pada  menit  ke-0  untuk  mengetahui  kadar glukosa darah puasa dilakukan menggunakan  alat finger  prick  capillary blood. Pengambilan sampel darah berikutnya  dilakukan  pada  interval  waktu 40  menit  selama  120  menit  setelah mengkonsumsi  makanan  yang  diujikan. Nilai kadar glukosa darah ditunjukkan dari alat glucometer On Call Plus . Luasan area bawah  kurva  ( area  under  curve /AUC) diperoleh dari kurva yang terbentuk antara waktu  pengambilan  contoh  darah versus kadar  glukosa  darah.  Perhitungan  nilai indeks glikemik diperoleh dari perbandingan  antara  luasan  area  bawah kurva  dari  contoh  pangan  yang  diujikan dibanding  luasan  area  bawah  kurva  dari pangan  acuan.  Pangan  acuan  yang digunakan  adalah  glukosa  (Brouns et  al ., 2005).  Persamaan  penentuan  nilai  indeks glikemik pangan yang diuji sebagai berikut:
𝐼𝑛𝑑𝑒𝑘𝑠 𝐺𝑙𝑖𝑘𝑒𝑚𝑖𝑘𝑠 !"#$ #&'# (#)#* +"&,# -#&. /#01#0 2#01 -."3. !"#$ #&'# (#)#* +"&,# -#&. /#01#0 #4"#0 x 100

## Prosedur Pengujian Indeks Glikemik secara
In-Vitro
Prosedur pengujian indeks glikemik secara in-vitro menggunakan  Metode Nurhayati (2019) dan Argyri et al . (2016).
Sebanyak  250  mg  bahan  ditambahkan akuades 10 ml dan diaduk hingga homogen. Selanjutnya  campuran  ditambahkan  enzim α-amilase 185 unit/g. Campuran didiamkan selama 2 menit pada suhu 37 o C. Kemudian campuran ditambahkan asam klorida 0,5M hingga pH 2,5 dan tambahkan 2 ml larutan buffer  fosfat  0,1M  pH  6,5.  Selanjutnya campuran di-inkubasi pada 37 o C selama 30 menit,  dan  ditambahkan  0,5  ml  larutan enzim  amiloglukosidase  3260  unit/ml. Inkubasi  dilanjutkan  kembali  pada  37 o C selama  2  jam.  Penentuan  kadar  glukosa menggunakan  metode  DNS  dilakukan setiap 40 menit yaitu menit ke 0, 40, 80, 120 setelah  inkubasi.  Pengujian in  vitro pada sampel  dilakukan  dalam  3  kali  ulangan. Luasan  area  bawah  kurva  ( area  under curve /AUC)  diperoleh  dari  kurva  yang terbentuk  antara  waktu  penggambilan contoh versus kadar  glukosa  contoh. Perhitungan nilai indeks glikemik diperoleh dari perbandingan antara luasan area bawah kurva  dari  contoh  pangan  yang  diujikan dibanding  luasan  area  bawah  kurva  dari pangan acuan.
Analisa  kuantitatif  gula  reduksi dengan  metode  Dinitro  Salicylic  Acid (DNS) (Milner, 1959)
Larutan  contoh  sebanyak  1  ml diencerkan  sampai  10  ml.  Ambil  1  ml larutan contoh dimasukkan ke dalam tabung reaksi  dan  tambahkan  1  ml  pereaksi  DNS 1M dikocok homogen. Tutup bagian mulut tabung  reaksi  dengan  aluminium  foil  dan panaskan hingga mendidih selama 15 menit hingga larutan berwarna merah kecoklatan. Selanjutnya tambahkan 1 ml larutan kalium natrium  tartarat  40%.  Tabung  reaksi didinginkan  dan  ditambahkan  akuades
hingga volume 8 ml dan kocok sampai rata. Larutan diukur absorbansinya pada panjang gelombang  575  nm.  Pembuatan  kurva standar  kalibrasi  menggunakan  larutan glukosa  dengan  konsentrasi  0,  200,  400, 800 dan 1000 ppm.
Analisa statistik Analisa  statitistik  dilakukan  pada data  hasil  pengujian  indeks  glikemik dengan  metoe  in  vivo  dan  in  vitro.  Data diolah  dengan software Statistic  8  untuk mendapatkan uji beda nyata dua perlakuan berpasangan,  serta  untuk  memperoleh koefisien korelasi Pearson’s.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Respon glikemik pada pengujian secara
in vivo
Respon  glikemik  mengindikasikan seberapa  cepat  suatu  karbohidrat  dicerna dan  terjadi  peningkatan  kadar  glukosa darah.  Kecepatan  dan  puncak  peningkatan gula darah ini dibandingkan dengan respon glikemik dari pangan acuan yang biasanya glukosa. Respon glikemik setelah mengkonsumsi sari tebu alami, nira serbuk, gula  kristal  putih  dan  glukosa  (sebagai makanan acuan) disajikan pada Gambar 1.
Gambar 1. menunjukkan peningkatan kadar gula darah paling tinggi terjadi  setelah  mengkonsumsi  glukosa, selanjutnya  gula  kristal  putih  (GKP),  nira serbuk dan terakhir sari tebu alami (STA). Kurva  perubahan  kadar  glukosa  pada Gambar  1  menunjukkan  respon  glikemik dari makanan yang diuji terhadap makanan acuan. Respon peningkatan gula darah yang bervariasi  ini  dapat  disebabkan  oleh banyaknya  karbohidrat  yang  terkandung dalam makanan yang dikonsumsi, juga oleh jenis monosakarida di dalamnya (Donaldson,  2001,  Hamli,  2013).  Respon enzim  terhadap  pencernaan  bahan  pada usus  halus  dan  absorpsi  glukosa  hasil pencernaan  melewati  dinding  usus  akan mempengaruhi  peningkatan  kadar  gula darah (Sadakiyo et al ., 2017)
Metode In Vitro
Gambar 1. Respon glikemik secara in vivo dari sari tebu alami, nira serbuk, gula kristal putih dan glukosa (makanan acuan)
Figure 1. Glycemic response by in vivo of natural sugarcane juice, sugarcane juice powder, white sugar plantation and glucose as reference food
Penentuan respon glikemik secara in vitro Respon glikemik dipelajari secara in vitro dengan  membuat  simulasi  sistem pencernaan  di  luar  makhluk  hidup.
Peningkatan
glukosa setelah mengkonsumsi  makanan  dapat  terjadi karena pemecahan dan absorpsi karbohidrat di usus. Penentuan indeks glikemik secara in  vitro untuk  sari  tebu  alami,  nira  serbuk dan  gula  kristal  putih  disajikan  pada Gambar 2.
Gambar  2  menunjukkan  jumlah glukosa  yang  dibebaskan  selama  proses inkubasi  diamati  dalam  kurun  waktu  0 hingga  120  menit  dari  sampel  sari  tebu alami,  nira  serbuk  dan  gula  kristal  putih, dibandingkan  dengan  dektrosa  (glukosa) sebagai  acuan.    Jumlah  glukosa  yang dibebaskan dari sampel tersebut bervariasi pada  titik  pengamatan  waktu  yang  sama. Respon  glikemik  digambarkan  sebagai banyaknya  glukosa  yang  dibebaskan  dari sampel  dibandingkan  dengan  yang  dilepas dari  glukosa  sebagai  standar  (Goni et  al ., 1997). Respon glikemik dari penelitian ini
diurutkan  dari  yang  paling  kecil  ke  paling besar adalah sari tebu alami < nira serbuk < gula kristal putih < glukosa.
Gambar  2.  Respon  glikemik in  vitro terhadap  sari  tebu  alami,  nira serbuk,  gula  kristal  putih  dan makanan acuan (glukosa)
Figure 2. Glycemic response by in vitro vivo of  natural  sugarcane  juice, sugarcane  juice  powder,  white sugar  plantation  and  glucose  as reference food
Perbandingan indeks glikemik metode in vivo terhadap metode in vitro
Respon  glikemik  dan  indeks glikemik  memiliki  hubungan  yang  erat. Indeks  glikemik  merupakan  perbandingan luasan  area  bawah  kurva  dari  sampel makanan dibandingkan dengan luasan area bawah  kurva  dari  makanan  acuan yangmana  kurva  tersebut  terbentuk  dari respon  glikemik  selama  2  jam  setelah mengkonsumsi makanan sebanyak 50 gram (Sadler, 2011).
Hasil  penentuan  nilai  indeks glikemik untuk sari tebu alami, nira serbuk dan gula kristal putih disajikan pada Tabel 1. Nilai indeks glikemik sari tebu secara in vivo adalah 57,95 ± 4,11 dan secara in vitro sebesar  62,67  ±  2,08.  Nilai  ini  tergolong dalam  kategori  IG  sedang.  Kedua  metode pengujian menempatkan pada kategori yang
0 50 100 150 200 250 -30 20 70 120 Ka da r g luk os a da ra h (m g/ dL ) Bl oo d gl uc os e co nt ent (m g/ dL ) Waktu (menit) Time (minutes)
STA Nira serbuk
GKP Glukosa 0 100 200 300 400 500 600 700 800 -30 20 70 120 Ka da r g lu ko sa (m g/ L) Gl uc os e re le as ed (m g/ L) Waktu (menit) Time (minutes) Glukosa GKP
Nira Serbuk STA
sama  meskipun  nilai  nominal  indeks glikemik sari tebu alami secara in vitro lebih tinggi dibandingkan metode in vivo .
Tabel  1  Nilai  glikemik  indeks  dengan metode in  vivo dan  metode in vitro
Table  1.  Value  of  glycemic  index  using  in vivo and in vitro methods Na m a pr od uk Na me o f p ro du ct Nilai indeks glikemik Value of glycemic index Ka te go ri Cl as si fi cat ion Me to de in v iv o In v iv o me th od
Me to de in v itro In v itro m eth od Sari Tebu
Alami Natural Sugarcane Juice 57,95 ± 4,11 62,67 ± 2,08 Sedang Medium Nira Serbuk Sugarcane Juice Powder 77,90 ± 1,30 76,67 ± 1,52 Tinggi High Gula  Kristal Putih Plantation White Sugar 85,4 ± 4,22 84,00 ± 1,00 Tinggi High
Tabel  1  juga  menunjukkan  nilai indeks glikemik nira serbuk sebesar 77,90 ± 1,30  untuk  hasil  pengujian  secara in  vivo dan  76,67  ±  1,52  untuk  hasil  pengujian in vitro . Nilai tersebut berada dalam kategori tinggi  karena  lebih  dari  70  dan  kedua metode  baik in  vivo maupun in  vivo menunjukkan  ke  dalam  kelompok  yang sama.
Nilai  indeks  glikemik  untuk  gula kristal  putih  sebesar  85,4  ±  4,22 menggunakan  metode in  vivo dan  84,00  ± 1,00 menggunakan metode in vivo . Indeks glikemik  contoh  gula  kristal  putih  dengan menggunakan  metode in  vivo dan in  vitro masuk dalam kategori tinggi atau lebih dari
70.  Nilai  indeks  glikemik  sukrosa  (gula kristal  putih)  beragam  dalam  kisaran  62 sampai  dengan  87,4.  Hal  tersebut dilaporkan  GI  sukrosa  berikut:  87,4  ±  6,3 (Lee dan Wolever, 1998); 77,6 ± 3,1 (Lee et al. , 2013); 65,43 (Livesey, 2003); 62(Rytz et al ., 2019).
Indeks  glikemik  suatu  bahan dipengaruhi oleh beberapa faktor. Menurut Barclay et al . (2021), faktor-faktor tersebut antara lain: persentase karbohidrat tersedia ( available  carbohydrate )  seperti  gula  atau pati, jenis gula (misalnya fruktosa, glukosa, sukrosa, maltose), tanaman sumber dari pati dan karakteristik fisiko-kimianya (misalnya derajat  gelatinisasi,  kadar  amilosa,  kadar amilopektin), ukuran partikel dari makanan, adanya  interaksi  antara  protein-pati  dan lemak-pati,  adanya  serat  yang viscous , adanya  enkapsulasi  oleh  dinding  sel  ( fibre matrix ),    komposisi  dan  struktur  makanan secara individu dan proses pengolahan pada makanan.

## Uji t dua perlakuan dan Korelasi
Pengujian indeks glikemik secara in vivo dan in vitro pada sari tebu alamai, nira serbuk, gula kristal putih dan glukosa diuji untuk mengetahui hubungan kedua metode tersebut.  Secara  statistik  pada  pengujian  2 perlakuan  yang  berpasangan  diperoleh seperti  pada  Tabel  2. Hipotesis  nol  (H 0 ) menyatakan  bahwa  kedua  perlakuan  yaitu metode in vivo dan in vitro adalah sama atau tidak berbeda nyata. Tabel 2 menunjukkan nilai  P  >  0,05  dan  t  hitung  <  dari  t  tabel. Tabel  2  menunjukkan  nilai  p  =  0,3061,  t hitung = -1,09 dan t tabel =1,86. Kriteria ini menunjukkan  bahwa  hipotesis  awal  (H 0 ) diterima, sementara hipotesis alternatif (Ha) ditolak. Hipotesis awal (H 0 ) diterima artinya kedua  perlakuan  tersebut,  metode in  vivo dan metode in vitro dalam penentuan nilai glikemik  indeks  tidak  berbeda  nyata. Korelasi  Pearson  menunjukkan  nilai 0,9188.  Hal  ini  berarti  korelasi  yang  kuat dan positif pada kedua metode tersebut.
Metode In Vitro
Tabel  2.  Statistik  untuk  uji  t  berpasangan pada pengujian in vitro dan in vivo untuk sari tebu alami, nira serbuk dan gula kristal putih
Table 2. Statistic for t test paired on in vitro and in vivo test of sugarcane juice, sugarcane  juice  powder  and plantation white sugar
Kriteria Criteria Nilai Value T -1.09 P 0.3061 t Table 1.860 Korelasi Pearson 0,9188 Pearson’s Correlation 0.9188 Penentuan indeks glikemik secar in vitro tanpa  menyertakan  aspek  dinamik pencernaan di tubuh disebut model statis in vitro . Bohn et al . (2018) menyatakan bahwa model  statis in  vitro ini  bisa  saja  terjadi relevan  secara  fisiologis.  Pada  pencernaan karbohidrat  memiliki  korelasi  yang  sangat baik  untuk  pengujian in  vitro dan in  vivo . Nilai  indeks  glikemik  secara in  vitro berkorelasi  kuat  dengan  nilai  indeks glikemik  secara in  vivo (Cairano et  al ., 2022),  meskipun  demikian  korelasi signifikan ini juga tergantung dari formulasi produk makanan.
Analisis korelasi merupakan analisis yang digunakan untuk mengetahui keeratan  hubungan  antara  beberapa variabel. Biasanya uji korelasi berhubungan dengan  uji  regresi  yang  menunjukkan apakah  masing-masing  variabel  saling mempengaruhi.  Korelasi  yang  menghu- bungkan kedua metode in vivo dan in vitro dalam  analisa  indeks  glikemik  juga  dapat dijelaskan dalam Gambar 3. Hasil rata-rata yang  diperoleh  dalam  pengujian in  vivo maupun in  vitro memiliki  nilai  R 2 sebesar 0,9839  dalam  persamaan  y  =  0,8799x  + 10,171 merupakan korelasi yang baik antara keduanya.
Gambar  3.  Hubungan  analisa  indeks glikemik menggunakan metode in vivo dan in vitro Figure  3.  Correlation  of  analysis  of glycemic index using in vivo and in vitro methods
Menurut Monro dan Mishra (2022), nilai indeks glikemik secara in vitro akurat untuk memprediksikan nilai indeks glikemik in  vivo untuk  bubur  nasi  dengan nilai R 2 = 0,97 dengan persamaan; y = 1,11x +  2,83.  Namun  demikian  korelasi  antara nilai IG in vitro dan IG in vivo untuk semua pengujian makanan berkabohidrat dari nasi dan  gandum  memiliki  nilai  R 2 =0,88, dengan  persamaan  y  =  1,11x  +  2,31. Analisis in  vitro dapat  menjadi  alat  yang akurat dan ekonomis dalam pengembangan pra klinis produk gandum utuh.
Garsetti et  al (2005)  juga  telah melaporkan  hubungan  antara  indeks glikemik  secara in  vivo dan  daya  cerna (d igestibility )  secara  in  vitro  berkorelasi signifikan  pada  biskuit  manis plain . Penentuan  daya  cerna  secara in  vitro menggunakan metode Engelyst et al ., 1999. Karakteristik  indeks  glikemik  berkorelasi dengan kecernaan pati dan bergantung pada jenis pengolahannya.
Goni et  al. (1997)  melaporkan prediksi indeks glikemik dilakukan dengan metode in vitro memiliki koefisien korelasi (r)  sebesar  0,909  terhadap  nilai  indeks glikemik  metode in  vivo .  Prediksi  nilai indeks glikemik dari pangan berkarbohidrat
y = 0,8799x + 10,171 R² = 0,9839 50 60 70 80 90 100 110 0 50 100 150 Me to de in v iv o In v iv o m et ho d Metode in vitro In vitro method
diperoleh  dengan  persamaan  indeks glikemik (IG) = 39,21 + 0,803H (90) . Simbol H  menyatakan  derajat  hidrolisis  atau hydrolysis  index yaitu  persentase  glukosa yang dibebaskan dari contoh dibandingkan dengan  yang  dilepaskan  dari  glukosa standar.  Angka  90  menunjukkan  waktu hidrolisis hingga 90 menit.
Secara statistik nilai indeks glikemik  secara in  vitro memungkinkan untuk pendekatan dalam penentuan indeks glikemik  (Hamli,  2013).  Penggunaan indeks  glikemik  secara in  vitro ini bermanfaat untuk menghilangkan kebutuhan  akan  subyek  manusia  atau analisis  darah  untuk  mengukur  indeks glikemik dalam makanan multi komponen.

## KESIMPULAN
Hasil  analisis  indeks  glikemik secara in  vivo didapatkan  nilai  rerata sebagai berikut: sari tebu alami 57,96; nira serbuk 77,37; gula kristal putih 85,78. Hasil analisis  indeks  glikemik  secara in  vitro didapatkan hasil rerata sebagai berikut: sari tebu alami 62,69 ; nira serbuk 76,68 ; dan gula  kristal  putih  86,72.  Uji  t  dari  dua perlakuan metode in vivo dan in vitro untuk pengujian  indeks  glikemik  menunjukkan kedua metode tersebut tidak berbeda nyata dan  nilai  korelasi  sebesar  0,9188.    Hasil pengujian in vitro dibandingkan dengan in vivo menunjukkan  bahwa  metode in  vitro dapat  digunakan  substitusi  dari  metode in vivo .

## DAFTAR PUSTAKA
Argyri, K., Anthnasatou, A., Binga, M., and Kapsokefalou,  M.  (2016)  ‘The potential  of  an  in  vitro  digestion method  for  predicting  glycemic response  of  foods  and  meal’, Nutrients, 8 (4): p209-20.
Atkinson,  F.S.,  Miller,  JCB.,  Powell,  KF., Buyken,  AE.  and  Goletzke,  J. (2021)  ‘International  tables  of glycemic index and glycemic load values 2021: a systematic review’,
American  Journal  of  Clinical Nutrition, 00: p1-8.
Barclay, A.W., Augustin, LSA., Brighenti, F.,  Delport,  E.,  Henry,  C.J., Sievenpiper,  J.L.,  Usic,  K., Yuexin, Y., Zurbau, A., Wolever, TMS., Astrup, A., Bulló, M., et al (15  authors)  (2021)  ‘Review: Dietary glycaemic index labelling: A  global  perspective, Nutrients , 13(3244):1-22.
Bellmann,  S.,  Minekus,  M.,  Sanders,  P., Bosgra,  S.  and  Havenaar,  R. (2017) ‘Human glycemic response curves after intake of carbohydrate foods  are  accurately  predicted  by combining in vitro gastrointestinal digestion  with  in  silico  kinetic modeling’,  Clinical  Nutrition Experimental, 30: p1-15.
Bohn, T., Carriere, F., Day, L., Deglaire, A., Egger,  D.,  Golding,  M.,  Le- Feunteum,  A.,  Menard,  O., Miralles,  B.,  Moscovici,  A., Portman,  R.,  Recio,  I.,  Remond, D.,  Choutelier,  VS.,  Wooster,  T, Lesmes,  U,  Machie,  A.,  Dupont. (2018)  ‘Correlation  between  in vitro  and  in  vivo  data  on  food digestion.  What  can  we  predict with  static  in  vitro  digestion models?’ Critical Reviews in Food Science  and  Nutrition ,  58  (13).
p2239-2261. ISSN 1040-8398.
Brodkorb,  A,  Egger,  L,  Alminger,  M.,
Alvito, P., Assuncao, R., Ballance, S.,  Bohn,  T.,  Lacanal,  C.B., Boutrou, R., Carrière, F. et al . (25 more authors) (2019) ‘INFOGEST static  in  vitro  simulation  of gastrointestinal  food  digestion’, Nature  Protocols ,  14  (4):  p991-
1014. ISSN 1754-2189 https://doi.org/10.1038/s41596- 018-0119-1 Brouns, F., Bjorck, I., Frayn, K.N., Gibbs, A.L.,  Lang,  V.,  Slama,  G.  and Wolever, T.M.S. (2005) ‘Glycaemic  index  methodology,
Nutrition  Research  Reviews ,  18: 145–171.
Cairano,  M.D.,  Magaia,  F.L.T.,  Condelli, N., Cela, N., Ojo, C.C., Radecka, I., Dunmore, S. and Galgano, F. (2022) ‘Glycemic  index  of  gluten-free biscuits  with  resistant  starch  and sucrose replacers: An in vivo and in vitro comparative study’, Foods, 11, 3253. https://doi.org/10.3390/foods11203 253 .
Donaldson, M., (2001) ‘The effect of carrot juice  on  blood  glucose  level’
Hallelujah Acres Foundation. p1-9 .
Englyst, K., Englyst, H., Hudson, G., Cole, T.,  and  Cummings,  J:  (1999)
‘Rapidly available glucose in foods: an in vitro measurement that reflects the  glycemic  response. Am  J  Clin Nutr, 69: p448–454.
Garsetti, M., Vinoy, S., Lang, V., Holt, S., Loyer, S., Miller, J.C.B. (2005) ‘The glycemic  and  insulinemic  index  of plain sweet biscuits: relationships to in vitro starch digestibility’, Journal of  the  American  College  of Nutrition , 24(6): p441–447.
Goni,  I.,  Alonso,  A.G.  and  Calixto,  F.S. (1997) ‘ A starch hydrolysis procedure  to  estimate  glycemic index’, Nutrition  Research, 17(3): p427-437.
Gourineni,  V.,  Stewart,  M.L.,  Skorge,  R. and  Wolever,  T.  (2019)  ‘Glycemic
Index of Slowly Digestible Carbohydrate Alone and in Powdered  Drink-Mix’, Nutrients, 11(1228): 1-9. doi:10.3390/nu11061228 Hamli,  S  (2013)  ‘Prediction  of  the glycaemic  index  of  simple  and composite  dishes’, Disertation  of PhD , University of Leeds.
International  Diabetes  Federation  (2021) IDF  Diabetes  Atlas ,  10th  ed. International  Diabetes  Federation: Brussels, Belgium.
Jones,  J.M.  (2007).  Glycemic  response definitions. AACC International . 27 (2): 54-55.
Koseoglu, S.Z.A. and Celikel, S. (2022) ‘In vitro  digestibility  and  predicted glycemic  index  of  commonly consumed  some  Turkish  traditional foods’,
Food Science and Technology , 42: 1-8.
Lee,  K.,  Moon,  S.,  Jung,  S.,  Je  Park,  Y., Yoon,  S.,  Choe,  K.,  and  Yang,  C. (2013)  ‘Glycemic  index  of  sucrose with  d-xylose  (XF)  in  human’, Current  Topics  in  Nutraceutical Research, 11(1/2): p35-40. Lee,  BM.  and  Wolever,  TMS.  (1998) ‘Effect  of  glucose,  sucrose  and fructose  on  plasma  glucose  and insulin responses in normal humans: comparison  with  white  bread’, European  Journal  of  Clinical Nutrition, 52: p924-928.
Leoro,  M.G.V.,  Clerici,  M.T.P.S.,  Chang, Y.K.  and  Steel,  C.J.  (2010) ‘Evaluation of the in vitro glycemic index  of  a  fiber-rich  extruded breakfast  cereal  produced  with organic passion fruit fiber and corn flour, Ciência  e  Tecnologia  de Alimentos, 30(4): p964–68.
Livesey,  G.  (2003)  ‘Health  potential  of polyols  as  sugar  replacers,  with emphasis on low glycaemic properties’, Nutrition  Research Reviews, 16: p163–191. Miller, G.L. (1959) ‘Use of dinitrosalicylic acid  reagent  for  determination  of reducing sugar’, Journal of Analytical Chemistry , 31, 426-428.
Miller,  J.C.B.  (2004)  ‘Testing  the glycaemic  index  of  foods:  in  vivo, not  in  vitro’, European  Journal  of Clinical  Nutrition ,  58:  p700–701. doi:10.1038/sj.ejcn.1601856.
Monro,  J.  and  Mishra,  S.  (2022)  ‘In  vitro digestive  analysis  of  digestible  and resistant  starch  fractions,  with concurrent glycemic index determination, in whole grain wheat
products  minimally  processed  for reduced  glycaemic  impact’, Foods, 11(1904): 1-12, https://doi.org/10.3390/foods11131 904 .
Nurhayati, A.D., Rimbawan, R., Anwar, F. dan  Winarto,  A.  (2019)  ‘Potensi penggunaan  metode  in  vitro  dalam memperkirakan pemeringkatan indeks  glikemik  in  vivo  pada beberapa  varietas  beras  yang dimasak’, Indonesian  Journal  of Human  Nutrition ,  6(2):  hlm.  119  – 138.
Rytz,  A.,  Adeline,  D.,  Lê,  K.A.,  Tan,  D., Lamothe,  L.,  Roger,  O.  and  Macé, K.  (2019)  ‘Predicting  glycemic index  and  glycemic  load  from macronutrients to accelerate development of foods and beverages with  lower  glucose  responses, Nutrients, 11(1172): p1-11.
doi:10.3390/nu11051172.
Sadakiyo,  T.,  Ishida,  Y.,  Inoue,  S., Taniguchi, Y., Sakurai, T., Takagaki, R., Kurose, M., Mori, T., Yamashita, A.Y.,  Mitsuzumi,  H.,  Kubota,  M., Watanabe, H. and Fukuda, S. (2017) ‘Attenuation  of  postprandial  blood glucose  in  humans  consuming isomaltodextrin:
carbohydrate
loading  studies’ ,  Food  &  Nutrition
Research , 61: p1-10.
Sadler,  M  (2011)  ‘Food,  Glycaemic Response  and  Health’, ILSI  Europe Consice Monograph series ,
International  Life  Science  Institute,
Brussels, Belgium, pp 1-28.
Sagili,  V.S.,  Chakrabarti,  P.,  Jayanty,  S., Kardile, H. and Sathuvalli, V.  (2022) ‘Review:  The  glycemic  index  and human  health  with  an  emphasis  on potatoes, Foods, 11,  2302.  https:// doi.org/10.3390/foods11152302 Shkembi,  B.  and  Huppertz,  T.  (2023) ‘Glycemic  responses  of  milk  and plant-based  drinks:  food  matrix effects’ , Foods , 12(453): p1-18. Sun,  Y.,  Zhong,  C.,  Zhou,  Z.,  Lei,  Z.  and Langris, T.A.G. (2022) ‘Review. A review  of  in  vitro  methods  for measuring  the  glycemic  index  of single  foods:  Understanding  the interaction  of  mass  transfer  and reaction engineering by dimensional analysis’ , Processes , 10(759):  p1- 17.
Whelan,  W.J.,  Hollar,  D.,  Agatston,  A., Dodson, H.J. and Tahal, D.S. (2010) ‘The  glycemic  response  is  a personal  attribute’ Life ,  62(8): p637–641.
World Health Organization, (1998)
‘Carbohydrate  in  human  nutrition: the  role  of  the  glycemic  index  in food choice