Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Vol. 10 No. 1 Mei 2024 ISSN: 2443-1095

## OPTIMASI PROSES EKSTRAKSI PROPOLIS DARI LIMBAH PERASAN MADU TRIGONA DENGAN PENGGUNAAN PELARUT AIR

## [Optimization of Propolis Extraction from Juice-Squeezed of Trigona Honey Waste using Water Solvent]
Tri Isti Rahayu 1* , Yesica Marcelina Romauli Sinaga 1 , Firman Fajar Perdhana 1 , Lulu Diani Zuhdia 1
1) Program Studi Ilmu dan Teknologi Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan Agroindustri Universitas Mataram *email: triistirahayu@unram.ac.id

## ABSTRACT
Propolis is a natural resin produced by bees and has various health benefits that have been extensively studied. The extraction of propolis from Trigona honey pass residues generally uses organic solvent. Propolis can be extracted using water as a solvent with certain treatments. The study aims to obtain an optimal propolis extraction using a water solvent which is known to be safe and cheap. The optimization process of water extraction was combined with various extraction methods such as cold maceration, hot maceration (temperature 60°C), Ultrasound-Assisted Extraction (UAE), and  Microwave-Assisted  Extraction  (MAE),  compared  to  organic  solvent  controls  and  commercial  propolis.  The parameters  observed  from  the  obtained  extracts  are  pH,  phytochemical  screening  (alkaloids,  phenolics,  saponins, steroids, and flavonoids), color, antioxidant activity, and antibacterial activity. The data was analyzed using analysis of variance with the level of significance set at 5%. The results showed that the water extraction with MAE produced propolis extract with the highest antioxidant content and performed bacterial growth inhibition against Escherichia coli and Staphylococcus aureus.
Keywords: extraction method, propolis, Trigona

## ABSTRAK
Propolis merupakan zat resin alami yang dihasilkan oleh lebah dan memiliki berbagai manfaat kesehatan yang telah  banyak  diteliti.  Ekstraksi  propolis  dari  limbah  perasan  madu  Trigona  umumnya  masih  menggunakan  pelarut organik.  Propolis  dapat  diekstraksi  menggunakan  pelarut  air  dengan  beberapa  perlakuan  tertentu  Penelitian  ini bertujuan untuk mendapatkan ekstraksi propolis yang optimal dengan menggunakan pelarut air yang diketahui aman dan  murah.  Optimasi  proses  ekstraksi  air  dipadukan  dengan  berbagai  metode  ekstraksi  seperti  maserasi  dingin, maserasi  panas  (suhu  60°C), Ultrasound-Assisted  Extraction  (UAE),  dan  Microwave-Assisted  Extraction  (MAE), dibandingkan  dengan  kontrol  pelarut  organik  dan  propolis  komersial.  Parameter  yang  diamati  dari  ekstrak  yang diperoleh adalah pH, skrining fitokimia (alkaloid, fenolik, saponin, steroid, dan flavonoid), warna, aktivitas antioksidan, dan aktivitas antibakteri. Data dianalisis menggunakan analisis varians dengan taraf signifikansi 5%. Hasil pengujian menunjukkan bahwa ekstraksi air dengan MAE menghasilkan ekstrak propolis dengan kandungan antioksidan tertinggi dan mampu menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.
Kata kunci: metode ekstraksi, propolis, trigona
Copyright © 2024 by Authors, published by Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan). This is an open access article distributed under the CC BY-SA 4.0 License https:// creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446

## PENDAHULUAN
Lebah trigona merupakan lebah tanpa sengat yang mampu menghasilkan madu. Sifatnya yang tak bersengat membuat lebah jenis ini lebih mudah dibudidayakan karena resikonya yang lebih kecil. Selain madu, lebah trigona mampu menghasilkan bahan lain seperti polen dan propolis yang mempunyai banyak manfaat.  Meningkatnya  usaha  budidaya  lebah  trigona  disebabkan  juga  karena harga  jual  madu  trigona yang lebih tinggi. Nilai jual tinggi ini didukung dengan berbagai studi literatur akan manfaat dan komponen bioaktif yang dikandungnya. Hasil samping perasan madu trigona yang terdiri dari wax yang bercampur dengan propolis juga diketahui memiliki banyak manfaat. Propolis memiliki nilai ekonomis tinggi. Propolis atau lem lebah, yaitu zat yang dihasilkan oleh lebah yang berfungsi untuk menambal dan mensterilkan sarang lebah (Anjum et al. 2019).
Propolis  mengandung  berbagai  komponen  bioaktif.  Bioaktif  yang  terkandung  dalam  propolis didominasi oleh flavonoid, dengan kadar hampir 50%. Hasil uji fitokimia (Afata et al. 2022) menunjukkan bahwa ekstrak propolis mengandung senyawa flavonoid, alkaloid, tanin, saponin, triterpenoid, steroid dan minyak atsiri. Penggunaan propolis dari sisa perasan madu trigona masih sangat jarang dilakukan. Peternak lebah trigona biasanya akan membuang sisa hasil perasan madu atau dibiarkan menumpuk begitu saja. Hal  ini  disebabkan  kondisi  asal  propolis  bercampur  dengan  lilin  lebah  yang  membentuk  sarang  dan menyelimuti  madu  lebah  trigona.  Konsumsi  propolis  yang  masih  bercampur  lilin  dapat  menimbulkan masalah pencernaan, sehingga jarang dikonsumsi langsung.
Propolis yang banyak dikonsumsi dan mempunyai nilai jual tinggi adalah propolis hasil ekstraksi yang telah dipisahkan dari komponen lain yang mengganggu seperti lilin. Proses ekstraksi sederhana yang dapat  dilakukan  adalah  dengan  proses  perebusan.  Panas  akan  menyebabkan  lilin  mencair  dan  propolis yang ada pada lilin terlarut di dalam air. Saat proses pendinginan, lilin akan memadat kembali sehingga bisa dipisahkan dari air yang tercampur dengan propolis. Hanya saja, penggunaan panas berlebih pada metode ini dikhawatirkan akan merusak sebagian senyawa bioaktif penting pada propolis. Metode lainnya yang dapat dilakukan untuk ektraksi propolis adalah dengan ekstraksi menggunakan pelarut organik. Hanya saja,  proses  ekstraksi  ini  membutuhkan  biaya  yang  mahal  dan  peralatan  yang  sulit  untuk  memastikan propolis  yang  dihasilkan  benar  benar  aman  dikonsumsi  dan  tidak  mengandung  residu  pelarut  yang digunakan. Alternatif yang dapat dilakukan adalah dengan menggunakan pelarut air yang aman dan murah. Optimasi proses ekstraksi dengan air ini dapat dikombinasikan dengan berbagai metode ekstraksi seperti maserasi  dingin,  infundasi  dengan  kontrol  suhu,  menggunakan  gelombang  suara, Ultrasound  Assisted Extraction (UAE), hingga penggunaan gelombang Microwave Assisted Extraction (MAE) untuk membantu megeluarkan propolis dari matriks campurannya dengan lilin. Beberapa penelitian sebelumnya menunjukan proses ekstraksi menggunakan UAE 90 menit dan MAE 3 menit dengan pelarut air mampu menghasilkan ekstrak dengan komponen bioaktif yang diinginkan.
Penelitian mengenai metode optimasi proses ekstraksi propolis lebah trigona menggunakan pelarut air  perlu  dilakukan.  Hasil  ekstraksi  ini  nantinya  dapat  dikonsumsi  langsung  atau  dapat  lebih  mudah diaplikasikan untuk menghasilkan berbagai produk makanan atau minuman fungsional seperti jamu dan lainnya  yang  dapat  meningkatkan  keamanan  maupun  masa  simpan  produk  karna  kandungan  senyawa bioaktifnya juga dapat berperan sebagai antimikroba. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan ekstraksi propolis  yang  optimal  dengan  menggunakan  pelarut  air  dipadukan  dengan  metode  ekstraksi  maserasi dingin,  maserasi  panas  (suhu  60°C), Ultrasound-Assisted  Extraction  (UAE),  dan  Microwave-Assisted Extraction (MAE).
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Vol. 10 No. 1 Mei 2024 ISSN: 2443-1095

## BAHAN DAN METODE Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain limbah perasan madu trigona yang diperoleh dari peternakan lebah madu trigona yang ada di wilayah Suranadi, propolis komersil merek Melia, medium Nutrient Agar (NA), mediun Nutrient Broth (NB) FeCl 3, serbuk Mg, HCl, Gelatin, n-Heksan, Asam Asetat Anhidrat, H 2 SO 4 pekat, Reagen Dagendrof, Reagen Mayer, Reagen Wegner, DPPH, Metanol, kultur bakteri uji, larutan buffer phosphate, aquades, alkohol 96%, dan methylene blue.
Adapun  alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah Spektrofotometer  UV-Vis  merk Thermoscientific/Evolution 201 local control, laminar flow, autoklaf, pisau dan sendok stainless steel, piring, nampan, erlenmeyer, hot  plate,  gelas  ukur,  pipet  volume, pipet  mikro,  pipet  tetes,  inkubator ,  blue  tip, yellow tip, vortex, cawan petri, tabung reaksi, rak tabung reaksi, timbangan analitik, lampu bunsen, korek api, waterbath,  pH  meter,  pengaduk,  stopwatch,  termometer,  drigalski,  gelas  piala,  lap,  tisu,  masker, sarung tangan, oven, kompor gas, dan kertas label.

## Metode
Metode  eksperimental  pada  penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium.  Rancangan  yang digunakan  adalah  Rancangan  Acak  Kelompok  (RAK)  dengan  percobaan  faktor  tunggal  yaitu  metode ekstraksi dengan 5 perlakuan yang nantinya beberapa parameter juga akan dibandingkan dengan kontrol (maserasi 24 jam dengan pelarut organik etanol 70%) dan propolis komersial. Perlakuan yang dilakukan seperti yang disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Perlakuan penelitian Perlakuan Metode Ekstraksi T0 (Kontrol Pelarut Organik) Maserasi T1 Maserasi (suhu ruang, T 24 Jam) T2 Maserasi (suhu 60 o C, T 24 Jam) T3 UAE (amplitudo 50%, T 25 menit) T4 MAE (180 watt, 3x1 menit) T5 Perebusan (5 menit) T6 (Kontrol propolis komersial sesuai aturan pakai di kemasan) 2 tetes dilarutkan dalam 240 ml air

## Tahap Persiapan Ekstrak
Sebanyak  100  gram  limbah  perasan  madu  trigona  dicampurkan  dengan  pelarut  akuades  steril dengan perbandingan 1:5. Selanjutnya dilakukan proses ekstraksi berdasarkan jenis metode ekstraksi yang digunakan dan dilanjutkan dengan penyaringan. Selanjutnya dilakukan analisa.

## Parameter Pengamatan
Parameter  yang  diamati  dalam  penelitian  ini  yaitu  pH  (Modifikasi  SNI  6989.11:2019).  Skrining fitokimia  pada  ekstrak  propolis  dilakukan  berdasarkan  Khairunnisa et  al.  (2020).  Pengujian  aktivitas antioksidan pada ekstrak dilakukan dengan metode DPPH berdasarkan Prasetyo et al. (2021). Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan melihat zona hambat bakteri uji menggunakan metode sumuran (Jagessar, 2008). Uji warna secara fisik dilakukan dengan menggunakan alat colorimeter (MSEZ User Manual).
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Vol. 10 No. 1 Mei 2024 ISSN: 2443-1095

## HASIL DAN PEMBAHASAN Nilai pH
Nilai  pH  propolis  hasil  berbagai  metode  ekstraksi  dapat  dilihat  pada  Gambar  1.  Propolis  hasil metode  ekstraksi  maserasi  suhu  ruang  memiliki  pH  yang  paling  rendah.  Meskipun  demikian,  secara keseluruhan  nilai  pH  propolis  yang  diperoleh  dari  berbagai  metode  ekstraksi  tidak  berbeda  jauh,  yakni berkisar 3,68 sampai 4,12. pH propolis yang diperoleh seluruhnya termasuk dalam kisaran pH asam. Hasil penelitian Usman et al. (2016) juga menunjukan hal serupa. pH propolis trigona yang diekstrak dengan pelarut air dengan metode perebusan senilai 4. Hal berbeda ditunjukan pada ekstrak pelarut organik dan propolis komersial yang memiliki pH di atas 6. Kesamaan nilai pH antara ekstrak pelarut organik dengan propolis  komersil  disebabkan  propolis  komersil  pada  umumnya  juga  diperoleh  dari  hasil  ekstraksi menggunakan  pelarut  organik.  Proses  ekstraksi  menggunakan  pelarut  organik  akan  mengekstrak komponen  bioaktif  yang  lebih  beragam.  Hasil  analisis  komponen  propolis  trigona  menggunakan  gas kromatografi  spektroskopi  masa  menunjukan  pelarut  organik  mampu  menghasilkan  25  jenis  komponen bioaktif sedangkan pelarut air hanya 12. Disebutkan juga komponen volatil lebih banyak terekstrak dengan pelarut etanol (Usman et al.,2016). Variasi komponen yang makin beragam juga dapat mempengaruhi pH ekstrak yang dihasilkan.
Gambar 1. Nilai pH ekstrak propolis dengan berbagai metode ekstraksi

## Skrining Tes Fitokimia
Proses  ekstraksi  akan  mempengaruhi  senyawa  fitokimia  yang  terekstrak.  Skrining  keberadaan senyawa fitokimia ini dilakukan untuk mengetahui senyawa apa saja yang terkandung pada ekstrak. Hasil penelitian menunjukan propolis yang diekstrak dengan metode maserasi dengan suhu 60 o C, UAE, MAE serta perebusan menunjukan ekstrak positif mengandung alkaloid, flavonoid, terpenoid serta steroid dan fenolik (Tabel 2). Hasil ini sesuai dengan penelitian Khairunnisa et al. (2020) didapatkan hasil uji kualitatif propolis  trigona  yang  diekstrak  dengan  pelarut  air,  etanol,  dan  metanol  positif  mengandung  senyawa alkaloid, flavonoid, fenolik, dan tanin. Hasil uji kuantitatif menunjukkan kandungan flavonoid total ekstrak dengan pelarut metanol, etanol, dan air secara berurutan adalah 0,15%; 0,04%; dan 0,17%. Kandungan fenol total ekstrak dengan pelarut metanol, etanol, dan air secara berurutan adalah 0,54%; 0,38%; dan 0,39%.
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Vol. 10 No. 1 Mei 2024 ISSN: 2443-1095
Tabel 2. Skrining tes Fitokimia ekstrak propolis dengan berbagai metode ekstraksi No Senyawa Fitokimia T1 T2 T3 T4 T5 1  Alkaloid + + + + + 2  Flavonoid + + + + + 3  Triterpenoid dan steroid + + + + + 4  Fenolik - + + + +
Hasil skrining proses maserasi air pada suhu ruang menunjukkan bahwa tidak terdapat senyawa fenolik pada ekstraknya. Hal ini disebabkan karena air belum mampu secara sempurna memecah matriks selaput  pembungkus  madu  yang  terdiri  dari  wax  atau  senyawa  lilin.  Wax  diketahui  bersifat  hidrofobik, sehingga menyulitkan komponen air bercampur memasuki matriks.

## Aktivitas Antimikroba
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  propolis  dengan  berbagai  metode  ekstraksi  menggunakan pelarut  air  disajikan  pada  Tabel  3.  Bakteri  yang  digunakan  adalah E.  coli  dan  S.  aureus.  Dari  hasil  uji aktivitas antibakteri terlihat bahwa setiap ekstrak memiliki zona hambat yang berbeda-beda untuk bakteri uji E. coli dan S. aureus, kecuali pada ektrak propolis maserasi suhu 60 o C dan propolis komersial yang sama sekali  tidak  menunjukkan  zona  hambat  terhadap  kedua  bakteri  uji.  Tidak  adanya  zona  hambat  yang diberikan oleh propolis komersial kemungkinan disebabkan oleh rendahnya konsentrasi propolis komersial yang digunakan saat pengujian. Sampel propolis komersial sebanyak 2 tetes dicampur dengan air 240 mL, baru selanjutnya diteteskan ke dalam media sumuran yang sudah diinokulasi dengan bakteri uji.
Tabel 3. Zona Hambat Ekstrak Propolis terhadap bakteri E. coli dan S.aureus Perlakuan Zona Hambat (mm) E. coli S. aureus T0 1,5 3 T1 0 2,5 T2 0 0 T3 1 2 T4 1 0 T5 0,75 0 T6 0 0
Beberapa ekstrak menunjukkan zona hambat untuk 1 jenis bakteri tetapi tidak untuk jenis lainnya. Hasil  penelitian  ini  memperlihatkan  zona  penghambatan  yang  lebih  besar  dimiliki  oleh  ekstrak  pelarut organik dibandingkan semua sampel esktrak air yang digunakan terhadap kedua jenis bakteri uji. Hal ini dapat disebabkan komposisi kimia yang diperoleh dari ekstrak alkohol dan ektrak air juga berbeda karena proses ekstraksinya berbeda sehingga efektivtias antibakterinya pun berbeda. Flavonoid yang merupakan komponen utama penyusun propolis adalah sejumlah besar senyawa fenolik yang lebih mudah diekstrak dengan  pelarut  alkohol  (Mello et  al.,  2010).  Hal  ini  juga  didukung  oleh  penelitian  Usman  (2016)  yang menunjukan total fenolik yang diperoleh penggunaan pelarut organik etanol lebih dari 5 kali lebih besar dibandingkan dengan pelarut air, sedangkan total flavonoidnya 2 kali lebih besar dibandingkan penggunaan pelarut air.

## Warna
Warna diperoleh dari pemantulan spectrum cahaya oleh benda yang selanjutnya ditangkap oleh mata sebagai indra pengelihatan, dan kemudian akan diterjemahkan sebagai sebuah warna tertentu oleh otak.  Warna  merupakan  salah  satu  komponen  penting  yang  menentukan  mutu  produk  pangan.  Peran
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Vol. 10 No. 1 Mei 2024 ISSN: 2443-1095
penting warna tersebut sangat erat kaitannya dengan daya tarik konsumen terhadap produk. Salah satu metode pengukuran warna adalah dengan mengukur nilai L, a, b seperti disajikan pada Tabel 4.
Tabel 4. Nilai L, a, b ekstrak propolis hasil berbagai metode ekstraksi Perlakuan Nilai L Nilai a Nilai b T0 22,06 5,04 12,73 T1 72,6 -0,32 15,77 T2 40,31 16,13 32,67 T3 41,94 9 16,9 T4 47,8 12,78 30,41 T5 63,21 6,08 38,22 T6 30,39 3,54 18,12
Nilai  L  menggambarkan  kecerahan  warna  produk.  Dari  Tabel  4  terlihat  propolis  hasil  ekstraksi dengan metode maserasi pada suhu ruang memiliki nilai kecerahan yang paling tinggi dibandingkan dengan propolis dari metode esktraksi lainnya. Hal ini terlihat dari nilai L yang paling tinggi yakni 72,6. Propolis dengan kecerahan warna paling rendah dimiliki oleh propolis hasil ekstraksi dengan metode maserasi suhu 60 o C.  Nilai  a  menggambarkan  warna  kromatik  campuran  merah  dan  hijau.  Nilai  a  positif  menunjukkan koordinat derajat kemerahan yang lebih dominan, sedangkan nilai a negatif menunjukkan koordinat derajat kehijauan yang lebih dominan. Nilai a semua propolis bertanda positif kecuali pada propolis hasil ektraksi dengan maserasi pada suhu ruang. Nilai b positif menunjukkan koordinat derajat kekuningan yang lebih dominan, sedangkan nilai b negatif menunjukkan koordinat derajat kebiruan yang lebih dominan. Propolis yang memiliki warna paling kuning adalah hasil ekstraksi metode perebusan, dan diikuti dengan propolis hasil ektraksi metode maserasi pada suhu 60 o C. Warna merah yang paling kuat diperoleh pada propolis hasil ektraksi metode maserasi suhu 60 o C, dan diikuti propolis metode MAE. Warna merah cenderung ke arah  coklat  gelap  diperlihatkan  oleh  hasil  ekstrak  dengan  menggunakan  metode  MAE.  Warna  propolis sangat  berhubungan  dengan  kadar  flavonoid  yang  terkandung  dalam  propolis  sehingga  semakin  gelap propolis maka akan semakin tinggi juga kandungan flavonoid di propolis tersebut (Woo, 2004).

## Antioksidan
Aktivitas  antioksidan  propolis  diuji  dengan  metode  DPPH  (Molyneux,  2004).  Prinsip  pengujian aktivitas antioksidan tersebut adalah reaksi yang terjadi pada senyawa antioksidan yang terkandung pada sampel untuk mendonorkan atom hidrogen pada senyawa radikal bebas stabil DPPH (2,2-difenil-1-pikril- hidrazil). Aktivitas antioksidan pada sampel akan ditunjukan dengan tereduksinya senyawa DPPH menjadi DPPH-H. Reduksi senyawa ini akan terlihat dari terjadinya perubahan warna reagen ungu menjadi kuning. Aktivitas antioksidan ditunjukkan dengan parameter IC50, yaitu konsentrasi larutan sampel yang diperlukan untuk menghambat 50% senyawa DPPH. Nilai IC50 yang semakin kecil menandakan semakin kuat aktivitas senyawa  antioksidannya  dalam  menangkal  radikal  bebas  (Rumayati et  al.,  2014).  Hasil  uji  aktivitas antioksidan sampel propolis dengan berbagai metode ekstraksi disajikan pada Tabel 5.
Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  pada  Tabel  5  menunjukkan  berbagai  metode  ekstraksi  tidak berpengaruh nyata terhadap kandungan antioksidan yang diperoleh. Hasil antioksidan tertinggi ditunjukan dengan nilai IC 50 terendah. Nilai antioksidan tertinggi ditunjukan pada perlakuan maserasi 24 jam dengan suhu 60ºC dan diikuti perlakuan MAE.
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Tabel 5. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Propolis Metode Ekstraksi IC 50 T0 8,50 a T1 7,73 a T2 5,88 a T3 6,65 a T4 6,32 a T5 7,27 a T6 7,30 a
Metode ekstraksi propolis dengan menggunakan perlakuan di atas suhu ruang menunjukkan hasil aktivitas  antioksidan  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  metode  ekstraksi  pada  suhu ruang.  Hal  ini dikarenakan panas yang digunakan mampu  memecah membran dan menarik komponen  bioaktif keluar dari bahan yang diekstrak. Meskipun demikian, suhu ekstraksi propolis yang terlalu tinggi diketahui justru dapat menurunkan aktivitas antioksidan karena terjadi kerusakan pada senyawa-senyawa antioksidan yang dikandung.  Proses  ekstraksi  menggunakan  gelombang  mikro  dengan  waktu  yang  singkat  juga  akan menghasilkan panas yang tidak terlampau tinggi. Suhu pemanasan optimum untuk menghasilkan aktivitas antioksidan tertinggi diketahui adalah 60ºC (Kurniati et al., 2019).
Senyawa fenolik merupakan senyawa antioksidan yang banyak ditemukan pada sampel propolis. Senyawa  fenolik  umumnya  memiliki  rentang  suhu  0-90ºC  (Putri et  al.,  2014).  Hampir  sebagian  besar senyawa fenolik akan mengalami kerusakan ketika dipanaskan di atas suhu 85ºC dengan waktu pemanasan lebih dari 5 menit. Dengan demikian, pengaturan suhu dan waktu ekstraksi merupakan hal yang esensial untuk memperoleh propolis dengan aktivitas antioksidan yang tinggi (Dewata et al., 2017). Hal ini sejalan dengan  hasil  uji  aktivitas  antioksidan  sampel  propolis  pada  penelitian  ini.  Penggunaan  microwave memberikan  keuntungan  karena  penggunaan  waktunya  yang  relatif  singkat.  Hal  tersebut  memberikan dampak terhadap kondisi kandungan senyawa antioksidan, terutama kemungkinan kerusakan senyawa- senyawa fenolik selama ekstraksi menggunakan suhu yang tinggi (Rismawati & Ismiyati, 2017; Khairunnisa et al., 2020; Rosana et al., 2021).

## KESIMPULAN
Hasil penelitian menunjukan ekstraksi propolis dari limbah perasan madu trigona menggunakan pelarut air terbaik dilakukan dengan proses ekstraksi menggunakan MAE. Proses ekstraksi menggunakan microwave menggunakan waktu yang sangat singkat dan tidak membutuhkan panas yang tinggi. Hal ini dapat menjaga kandungan antioksidan yang terdapat pada ekstrak. Selain itu, juga dapat diketahui ekstrak dengan  metode  ini  mampu  menangkap  komponen  bioaktif  seperti  alkaloid,  flavonoid,  terpenoid  serta steroid  dan  fenolik.  Senyawa  ini  juga  nantinya  berperan  sebagai  agen  antimikroba  yang  mampu menghambat pertumbuhan mikroba E. Coli.

## DAFTAR PUSTAKA
Afata,  T.K.,  Nemo,  R.,  Ishete,  N.,  Tucho,  G.T.,  &  Dekebo,  A.  2022.  Phytochemical  investigation, physicochemical characterization, and antimicrobial activities of Ethiopian propolis. Arabian Journal of Chemistry 15(7):1-9.
Anjum, S.I., Ullah, A., Khan, K.A., Attaulla, M., Khan, H., Ali, H. et al. 2019. Composition and functional properties of propolis (bee glue): A review. Saudi Journal of Biological Sciences 26:1695-1703.
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Vol. 10 No. 1 Mei 2024 ISSN: 2443-1095
Dewata, I. P., Wipradnyadewi, P. A. S., & Widarta, I. W. R. 2017. Pengaruh Suhu dan Lama Penyeduhan terhadap Aktivitas Antioksidan dan Sifat Sensoris Teh Herbal Daun Alpukat ( Persea americana Mill.). Jurnal ITEPA 6(2): 30-39.
Jagessar,  R.  2008.  Selective  Antimicrobial  Properties  of Phyllanthusacidus  Leaf  Extract  Against  Candida albicans, Escherichia coli, and Staphylococcus aureus Using Strokes Disc Diffusion, Well Diffusion, Streak Plate and a Dilution Method. Nature and Science 2(6): 24-38.
Khairunnisa, K., Mardawati, E., & Putri, S. H. 2020. Karakteristik Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Propolis Lebah Trigona Sp. Jurnal Industri Pertanian 2(1): 124-129.
Kurniati,  D.,  Arifin,  H.  R.,  Ciptaningtyas,  D.,  &  Windarningsih,  F.  2019.  Kajian  Pengaruh  Pemanasan terhadap Aktivitas Antioksidan Buah Mengkudu ( Morinda citrifolia) sebagai Alternatif Sumber Pangan Fungsional. Jurnal Teknologi Pangan 3 (1): 20-25.
Mello,  B.  C.  B.  S.,  Petrus,  J.  C.  C.,  &  Hubinger,  M.  D.  2010.  Concentration  of  Flavonoids  and  Phenolic Compounds  in  Aqueous  and  Ethanolic  Propolis  Extracts  Through  Nanofiltration. Journal  of  Food Engineering 96(4): 533-539.
Molyneux,  P.  2004.  The  Use  of  The  Stable  Free  Radical  Diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH)  for  Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J. Sci. Technol. 26(2): 211-219.
Prasetyo, E., Kharomah, N.Z.W., Rahayu, T.P. 2021. Uji Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil)  Terhadap  Ekstrak  Etanol  Kulit  Buah  Durian  (Durio  zibethinnus  L.)  dari Desa Alasmalang Kabupaten Banyumas. Jurnal Pharmascience 8(1):75-82.
Putri, D. D., Nurmagustina, D. E., & Chandra, A. A. 2014. Kandungan Total Fenol dan Aktivitas Antibakteri Kelopak Buah Rosela Merah dan Ungu sebagai Kandidat Feed Additive Alami pada Broiler. Jurnal Penelitian Pertanian Terapan, 14(3): 174-180.
Rismawati, S. N., & Ismiyati. 2017. Pengaruh Variasi pH terhadap Kadar Flavonoid pada Ekstraksi Propolis dan Karakterisasinya sebagai Antimikroba. Jurnal Konversi 6(2): 89-94.
Rosana,  M.,  Ahwan,  &  Qonitah,  F.  2021.  Uji  Kualitatif  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Propolis. LUMBUNG FARMASI: Jurnal Ilmu Kefarmasian 2(2): 154-157.
Rumayati,  Idiawati,  N.,  &  Destiarti,  L.  2014.  Uji  Aktivitas  Antioksidan,  Total  Fenol,  dan  Toksisitas  dari Ekstrak Daun dan Batang Lakum ( Cayratia trifolia (L) Domin). Jurnal Kimia Katulistiwa 3(3): 30-35.
Usman, UZ., Bakar, ABA., Mohamed & M. 2016. Phytochemical Screening and Comparison of Antioxidant Activity of Water and Ethanol Extract Propolis From Malaysia. Int J Pharm Sci 8(5): 413 415.
Woo, K. S. 2004. Use of Bee Venom and Propolis for Apitherapy in Korea. On: Camaya EN, Cervancia C.
(eds.).  Proceeding  of  the  7 th Asian  Apicultural  Association  Conference  and  10 th BEENET Symposium  and  Technofora;  Los  Banos,  Univ.  of  the  Philippines.  Laguna:  UPLB-BP,  College, Laguna (Philippines).