Pemanfaatan tepung testis sapi sebagai hormon alami pada penjantanan ikan cupang, Betta splendens Regan, 1910
[ Cow’s testicles flour as the natural hormone masculinization of Siamese fighting fish, Betta splendens Regan, 1910]
Andi Aliah Hidayani  , Yushinta Fujaya, Dody Dharmawan Trijuno, Siti Aslamyah
Jurusan Perikanan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Hasanuddin KampusTamalanrea, Jl. Perintis Kemerdekaan Km. 10, Makassar, 90245
Diterima: 27 Agustus 2015; Disetujui: 12 Januari 2016

## Abstrak
Ikan Cupang, Betta splendens jantan merupakan ikan hias yang memiliki keindahan warna tubuh serta keunikan bentuk sirip sehingga sangat diminati oleh pecinta ikan hias.  Penelitian ini bertujuan melakukan pembalikan kelamin dengan menjantankan ikan cupang yang diproduksi. Penelitian dilakukan dalam dua tahap yaitu: tahap pertama dengan meren- dam larva ikan cupang berumur empat hari ke dalam larutan tepung testis sapi dengan dosis berbeda, dan tahap ke dua dengan lama perendaman berbeda. Dosis testis yang diuji terdiri atas lima tingkatan yaitu 0 mg L -1 , 20 mg L -1 , 40 mgL -1 60 mg L -1 , dan 80 mg L -1 . Lama perendaman yang diuji adalah: 0 jam, 24 jam, 36 jam, 48 jam, dan 60 jam. Parameter yang diukur adalah persentase ikan jantan yang dihasilkan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa persentase ikan berke- lamin jantan tertinggi diperoleh pada dosis 60 mg L -1 dan lama waktu perendaman 24 jam dengan nilai persentasi ber- turut-turut  88,5%  dan 87,5%.  Hasil  penelitian  ini  memberikan  informasi  bahwa  teknologi  penjantanan  melalui  peren- daman  dalam  larutan  testis  sapi  dapat  dilakukan  pada  larva  ikan  cupang.  Teknologi  ini  mudah  dilakukan  sehingga pembudidaya dapat menggunakan tepung testis sapi untuk menjantankan ikan cupang produksinya.
Kata penting: ikan cupang, testis sapi, penjantanan, hormon

## Abstract
Siamese fighting fish, Betta splendens male is a lovely color ornamental fish with unique shape fins that make it highly demand  by  the  ornamental  fish  lovers.  This  study  aims  to  perform  sex  reversal  with  masculinization  fish  production. The study was carried out in two stages i.e.: stage 1 by soaking the 4 days old fish larvae into a solution of cow testicles flour with different doses, stage 2 with different soaking time. Testicular dose tested consists of five levels i.e.: 0 mg L - 1 , 20 mg L -1 , 40 mg L -1 , 60 mg L -1 , and 80 mg L -1 . Time immersions tested were: 0 hours, 24 hours, 36 hours, 48 hours and 60 hours. The measured parameter was the percentage of male fish produced. The results showed the highest  per- centtage of male fish obtained at a dose of 60 mg L -1 and a 24-hour soaking time with a percentage value respectively 88.5% and 87.5%. The study provided information that masculinization technology in a solution of cow testicles appli- cable for fish larvae. This technology is easy to do so that farmers can use cow's testicles flour for masculinization for their fish production.
Keywords: Siamese fighting fish, cow testis, masculinization, hormone

## Pendahuluan
Ikan  cupang  ( Betta  splendens )  jantan  me- rupakan  ikan  hias  yang  bernilai  ekonomis  tinggi karena  memiliki  keistimewaan seperti keindahan warna tubuh dan keunikan bentuk sirip sehingga sangat  diminati  oleh  pencinta  ikan  hias.  Ikan  ini dapat digunakan sebagai ikan laga ( fighting fish ) karena sangat agresif dan memiliki kebiasaan sa- ling menyerang jika ditempatkan dalam satu wa-
dah  (Dewantoro  2001).  Permintaan  terhadap  je- nis  ikan  cupang  jantan  semakin  meningkat  bela- kangan  ini  sehingga  perlu  dicari  suatu  metode yang dapat menghasilkan keturunan jantan secara massal (Purwati et al . 2004).
Salah  satu  teknik  yang  dapat  digunakan untuk  memproduksi  benih  ikan  kelamin  tunggal ( monosex ) jantan  adalah  melalui  pembalikan  ke- lamin ( sex reversal ) (Muslim 2011), yang mene- rapkan  rekayasa  hormonal  untuk  mengubah ka- rakter  seksual  betina  ke  jantan  (maskulinisasi/ penjantanan) atau dari jantan menjadi betina (fe-
 Penulis korespondensi
Surel: lhia_achsan@yahoo.com
minisasi)  (Mardiana  2009).  Hormon  jantan  ste- roid yang  umum digunakan adalah hormon 17α- metiltestosterone.  Namun,  hormon  ini  merupa- kan  salah  satu  steroid  sintetik  yang  dilarang penggunaannya  dalam  kegiatan  akuakultur  pada hewan  yang  diberi  perlakuan.  Hormon  sintetik seperti metiltestosteron yang dapat dimanfaatkan untuk  penjantanan,  mempunyai  kelemahan  yaitu sulit  terurai  di  dalam  tubuh,  bersifat  karsinoge- nik,  mencemari  lingkungan, dan  kadang  menim- bulkan efek samping yang tidak diinginkan (Ria- ni et al . 2010). Selain itu harga hormon ini relatif mahal dan sulit  untuk diperoleh. Melihat perma- salahan  tersebut,  diperlukan  penggunaan  bahan alternatif  lain  yang  aman  dan  ramah  lingkungan dalam proses pembalikan kelamin. Salah satu ca- ra  yang  dianggap  aman  adalah  penggunaan  ba- han alami seperti madu (Damayanti et al . 2013), teripang pasir (Riani et al . 2010), ekstrak purwo- ceng  (Arfah et  al .  2013)  atau  tepung  testis  sapi (Muslim et al . 2011).
Tepung testis sapi merupakan bahan alami yang sering digunakan dalam proses penjantanan ikan.  Berdasarkan  beberapa  hasil  penelitian  de- ngan  menggunakan  testis  sapi  menunjukkan  tes- tis  sapi  mengandung  hormon  testosteron  alami yang  sangat  tinggi.  Selain  itu  tepung  testis  sapi mudah  didapat,  harga  relatif  murah  dan  ukuran- nya  besar  (Muslim  2011).  Pemberian  hormon yang  berasal  dari  testis  sapi  pada  fase  awal  per- tumbuhan  gonad  ketika  diferensiasi  kelamin  be- lum  terarah.  Namun  demikian,  bila  diintervensi dengan bahan-bahan tertentu seperti tepung testis sapi  maka  perkembangan  gonad  dapat  berlang- sung  berlawanan  dengan  seharusnya  (Zairin  Jr 2002).
Faktor lain yang memengaruhi keberhasil- an  pengarahan  diferensiasi  kelamin  adalah  dosis hormon dan lama perlakuan.  Untuk  memperoleh perendaman  yang  efektif  maka  perlu  diperhati-
kan hubungan antara dosis hormon dan lama per- lakuan.  Perendaman  dengan  menggunakan  dosis tinggi membutuhkan waktu perendaman yang le- bih  singkat,  dan  sebaliknya  perendaman  dengan menggunakan  dosis  yang  rendah  membutuhkan waktu  perendaman  yang  lama. Oleh  karena  itu perlu  diketahui  lama  perendaman  yang  efektif agar  dapat  menjamin  keberhasilan  pengarahan diferensiasi  kelamin  ikan  cupang  (Purwati et  al . 2004). Penelitian ini bertujuan  untuk  menganali- sis dosis hormon dan lama perlakuan tepung tes- tis sapi terhadap proses penjantanan ikan cupang melalui perendaman embrio.

## Bahan dan metode

## Waktu dan tempat
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  F11  Betta Farm Makassar dan Hatchery Fakultas Ilmu Ke- lautan dan Perikanan Universitas Hasanuddin pa- da  bulan  Mei  sampai  Juli  2014.  Pembuatan tepung  testis  sapi  dilakukan  di  laboratorium  Ju- rusan  Teknik  Kimia,  Politeknik  Negeri  Ujung Pandang.

## Rancangan percobaan
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  satu  faktor.  Faktor  yang diuji adalah perbedaan dosis perendaman dan la- ma  waktu  perendaman  dengan  masing-masing lima  taraf  perlakuan  yaitu  untuk  dosis  peren- daman: 0 mg L -1 (kontrol); 20 mg L -1 ; 40 mg L -1 ;
60  mg  L -1 dan  80  mg  L -1 ;  sedangkan  untuk  lama perendaman: 0 jam (tanpa perendaman); 24 jam; 36 jam; 48 jam, dan 60 jam. Masing-masing per- lakuan  dengan  tiga  ulangan.  Ikan  uji  yang  digu- nakan  adalah  larva  ikan  cupang  berumur  empat hari  berasal  dari  tiga  pasang  induk  yang  dipilih secara  acak  yang  dipijahkan  secara  alami  dalam bak  terkontrol.  Jumlah  larva  per  unit  perlakuan
adalah  30  ekor  larva  sehingga  diperlukan  seba- nyak 450 ekor larva.
Pembuatan  tepung  testis  sapi  dan  proses  peren- daman larva
Tepung  testis  sapi  dibuat  dengan  cara menguliti testis segar, kemudian dibelah meman- jang, lalu dibuka  kulit dalam, dicacah atau dipo- tong-potong kecil, setelah itu dimasukkan ke da- lam  tabung,  dibekukan  dalam freezer (24  jam), tabung  dipasang  pada freeze  dry selama  24  jam pada  suhu  -75 o C  dan  tekanan  -0,1  Mpa.  Setelah kering  testis  diblender,  lalu  diayak  dengan  sa- ringan  halus  (0,42  mm).  Tepung  siap  digunakan untuk  proses  pembalikan  kelamin  pada  ikan  cu- pang.
Pembuatan  wadah  perendaman  dilakukan dengan cara melarutkan tepung testis sapi dengan larutan metil alkohol sebanyak 50% dari total vo- lume  ke  dalam  masih-masing  toples  yang  telah diisi  1  liter  air,  kemudian  diberi  aerator  agar  te- pung testis sapi larut dalam air. Media perendam- an yang digunakan sebanyak 15 buah. Perendam- an benih dalam larutan tepung testis sapi dilaku- kan  melalui  dua  tahap  yaitu  tahap  pertama  de- ngan  dosis  perendaman  0  mg  L -1 (kontrol),  20 mg  L -1 ,  40  mg  L -1 ,  60  mg  L -1 ,  80  mg  L -1 selama 24 jam; tahap kedua lama perendaman 0 jam, 24 jam, 36 jam, 48 jam dan 60 jam dengan dosis 60 mg L -1 .
Setelah melalui proses perendaman, benih ikan  cupang  dipelihara  masing-masing  dalam akuarium berukuran 50 cm x 30 cm x 25 cm se- banyak  12  buah.  Sebelum  digunakan,  akuarium untuk  pemeliharaan  dicuci  terlebih  dahulu  agar bebas  dari  kotoran,  kemudian  dibilas  dengan  air bersih,  kemudian  pada  masing-masing  akuarium diisi dengan air bersih yang telah diendapkan se- lama  24  jam  sebelumnya.  Selama  masa  pemeli- haraan, anak ikan cupang diberi pakan naupli ar-
temia  dan  kutu  air  dengan  frekuensi  2-3  kali  se- hari.  Untuk  menjaga  kualitas  air  di  dalam  akua- rium tetap stabil, dilakukan penyiponan kotoran- kotoran  ikan  selama  masa  pemeliharaan.  Penyi- ponan sisa-sisa pakan dilakukan setiap hari diser- tai penggantian air sekitar 20-30%. Pemeliharaan anak  ikan  cupang  dilakukan  hingga  berumur  45 hingga 60 hari.

## Identifikasi jenis kelamin ikan uji
Identifikasi  jenis  kelamin  anak  ikan  cu- pang  dapat  dilakukan  setelah  larva  berumur  45- 60 hari. Pengamatan dilakukan secara morfologis dengan  melihat ciri fisik anak ikan cupang. Ikan jantan  dapat  dikenali  dengan  memiliki  warna yang  lebih  cerah,  sirip  anal  yang  lebih  panjang, ukuran  tubuh  lebih  besar,  dan  jika  diamati  dari arah dorsal terlihat ramping. Ikan betina dicirikan dengan adanya bintik putih di sekitar anal, warna kurang  cerah,  dan  sirip  anal  yang  lebih  pendek. Selain  itu  ikan  jantan  akan  lebih  terlihat  agresif dibandingkan dengan ikan betina.

## Parameter penelitian
Parameter yang diamati adalah proporsi jenis kelamin anak ikan cupang setelah diberikan ekstrak tepung testis sapi. Pengamatan terhadap jenis kelamin anak ikan cupang dilakukan secara morfologis dengan melihat ciri fisik ikan. Persen- tase individu jantan dihitung dengan rumus:
%  Jantan  =  (jumlah  jantan/jumlah  total  ikan)  x 100
Kelangsungan hidup (SR) dihitung dengan menggunakan rumus:
SR  (%)  =  (jumlah  ikan  yang  hidup/jumlah  total ikan) x 100

## Analisis data
Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan menggunakan analisis ragam (ANOVA) dan jika
ditemukan adanya pengaruh yang signifikan dila- kukan uji lanjut Tuckey untuk menentukan dosis dan  lama  perendaman  terbaik.  Penentuan  dosis optimum  menggunakan  uji  analisis  regresi  kua- dratik (Steel & Torrie 1993).

## Hasil

## Nisbah kelamin jantan
Persentase  jenis  kelamin  ikan  jantan  yang menggunakan  dosis  berbeda  dapat  dilihat  pada Gambar  1.  Pada    gambar  tersebut  diperlihatkan
persentase  jenis  kelamin  ikan  jantan  dari  hasil perendaman  embrio  dengan  menggunakan  te- pung testis sapi, yaitu 40,72%; 68,86%; 83,40%; 88,50%,  dan  74,38%  untuk  dosis  perlakuan  ma- sing-masing 0 mg L -1 (kontrol), 20 mg L -1 , 40 mg L -1 , 60  mg  L -1 dan 80  mg  L -1 . Dibandingkan de- ngan  dosis  lain,  persentase  kelamin  jantan  de- ngan  menggunakan  dosis  60  mg  L -1 yang  diren- dam  selama 24 jam  menunjukkan hasil  yang pa- ling tinggi (88,50%).
Gambar 1.  Persentase ikan cupang jantan dengan dosis berbeda yang direndam selama 24 jam
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 P er sent a se Ik a n J a nta n (%) Dosis Hormon (mg L -1 ) 40,72 68,86 83,40 88,55 74,38
Gambar 2. Persentase ikan cupang jantan dengan menggunakan waktu perlakuan yang berbeda dengan menggunakan dosis 60 mg L -1 .
Persentase jenis  kelamin ikan jantan dengan menggunakan  waktu  perendaman  yang  berbeda dapat  dilihat  pada  Gambar  2.  Hasil  perendaman embrio  menggunakan  tepung  testis  sapi  dengan perlakuan  waktu  perendaman  pada  0  jam  (kon- trol), 24 jam, 36 jam, 48 jam dan 60 jam  meng- hasilkan  persentase  jenis  kelamin  ikan  jantan 40,54%;  87,55%;  84,89%;  64,79%  dan  39,81% berturut-turut.  Persentase  ikan  Cupang  berkela- min  jantan  tertinggi  dicapai  pada  perlakuan dengan  waktu  perendaman  24  jam  yaitu  87,55% (Gambar 2).
Hasil  perhitungan  analisis  regresi  kua- dratik  menunjukkan  bahwa  antara  dosis  peren- daman  dengan  tepung  testis  sapi  terhadap  per- sentase  jantan  ikan  cupang  membentuk  suatu kurva parabolik dengan persamaan y = -0,0168x 2 + 1,7771x + 40,357 (Gambar 3). Hasil perhitung- an  analisis  regresi  kuadratik  antara  lama  waktu perendaman dengan tepung testis sapi menunjuk- kan suatu kurva parabolik dengan persamaan y =
-0,052x 2 +  3,093x  +  41,26  (Gambar  4).  Kedua kurva  tersebut  menunjukkan  satu  titik  optimum yang  menghasilkan  persentase  ikan  cupang  jan- tan tertinggi.

## Tingkat kelangsungan hidup ikan cupang
Tingkat  kelangsungan  hidup  ikan  cupang selama pemeliharaan dengan menggunakan dosis yang  berbeda  didapatkan  data  berkisar  antara 91,11-96,67%  (Gambar  5),  sedangkan  dengan menggunakan  waktu  perendaman  yang  berbeda berkisar  antara  92,22-97,78%  (Gambar  6).  Hasil ini menunjukkan bahwa di antara perlakuan dosis dan lama perendaman yang berbeda tidak berpe- ngaruh  nyata  terhadap  kelangsungan  hidup  ikan cupang. Tidak berpengaruhnya tepung testis sapi terhadap kelangsungan hidup ikan cupang selama perendaman  membuktikan  bahwa  tepung  testis sapi  tidak  bersifat  toksik  (racun)  pada  ikan cupang.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 Kontrol 24 36 48 60 P e rsen tase ikan jan tan ( % ) Waktu Perendaman (Jam) 84,89 64,79 39,81 40,54 87,55
Gambar 3. Kurva parabolik dosis konsentrasi tepung testis sapi terhadap persentase ikan cupang jantan
Gambar 4. Kurva parabolik dosis lama perendaman tepung testis sapi terhadap persentase ikan cupang jantan
Gambar 5. Persentase ikan cupang yang hidup dengan pemberian tepung testis sapi pada dosis yang berbeda.
40.72
68,86 83,40
88,50 74,38 y = -0,0168x2 + 1,7771x + 40,357 R² = 0,9957 0 20 40 60 80 100 0 20 40 60 80 100 P er sent a se ik a n ja nt a n (%) Dosis hormon (mg L-1) 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 0 20 40 60 80 % T ing k a t k ela ng sun g a n hid up Dosis hormon (mg L -1 ) 92,22 94,44 96,67 91,11 95,56
Gambar 6. Persentase ikan cupang yang hidup dengan pemberian tepung testis sapi  dengan perlakuan waktu perendaman yang berbeda

## Pembahasan

## Nisbah kelamin jantan
Berdasarkan  hasil  penelitian,  ada  kecen- derungan bahwa semakin tinggi dosis yang dibe- rikan hingga 60 mg L -1 tepung testis sapi akan se- makin  tinggi  persentase  kelamin  jantan  yang  di- hasilkan. Namun, jika dosis telah melebihi 60 mg L -1 ,  pembentukan  kelamin  jantan  pada  ikan  cu- pang mulai menurun. Diduga perendaman tepung testis sapi 60 mg L -1 merupakan dosis yang opti- mal  dibandingkan  perlakuan  lainnya,  sehingga memberikan efek penjantanan yang maksimal di- bandingkan  perlakuan  yang  lain.  Hal  ini  terjadi karena  dosis  hormon  steroid  yang  tepat  pada  te- pung  testis  sapi  mampu  mempercepat  pemben- tukan gonad jantan yang kemudian akan berkem- bang  menjadi testis sehingga akan  menghasilkan ikan berfenotip jantan lebih banyak dibandingkan ikan berfenotip betina (Zairin Jr 2002). Penelitian yang  serupa  juga  dilakukan  oleh  Irmasari et  al .
(2012) pada ikan nila dengan dosis 3 mg L -1 de- ngan  waktu  perendaman  selama  8  jam  mengha- silkan  ikan  jantan  sebesar  69,07%.  Bahan  aktif lain yang umum digunakan dalam proses penjan- tanan  ikan  cupang  adalah  tepung  teripang  dan ekstrak  Purwoceng.  Tepung  teripang  dengan
dosis 30 mg L -1 , lama perendaman 6 jam dan pe- meliharaan  selama  55  hari  dapat  menghasilkan ikan jantan sebesar 66,66% (Yustina et al . 2012),
sedangkan pada ekstrak purwoceng dengan dosis 20  mg  L -1 menghasilkan  ikan  jantan  sebesar 62,22% , lama perendaman 8 jam dan pemeliha- raan selama 87 hari (Arfah et al . 2013).
Pemberian  dosis  tepung  testis  sapi  harus tepat  dalam  proses  pembalikan  kelamin  karena jika dosis yang digunakan terlalu rendah menye- babkan  proses  pembalikan  kelamin  berlangsung kurang  sempurna  dan  menyebabkan  terbentuk- nya  individu  interseks,  namun  dosis  yang  tinggi juga  menyebabkan  efek  kebalikan  dari  populasi yang diharapkan dan terbentuknya individu steril (Muslim  2011).  Penggunaan  dosis  hormon  tes- tosterone  yang  berlebihan  dapat  menyebabkan terjadinya efek paradoxial yaitu ikan yang diberi perlakuan  dengan  testosteron  tidak  dapat meningkatkan  jumlah  kelamin  jantan  melainkan peningkatan  jenis  kelamin  betina  (Piferrer  & Donaldson 1989).
Selain  faktor  dosis,  keberhasilan  pada pengarahan kelamin juga dipengaruhi oleh waktu pemberian  hormon.  Waktu  pemberian  hormon yang  tepat  sangat  menunjang  keberhasilan  pem-
89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 Kontrol 24 36 48 60 % T ing k a t K ela ng sun g a n H idu p Waktu Perendaman (Jam) 95,56 97,78 95,56 97,78 92,22
balikan  kelamin.  Ada  tiga  cara  pemberian  hor- mon yang dapat dilakukan untuk perubahan jenis kelamin,  yaitu:  melalui  penyuntikan,  perendam- an, dan pakan. Pandian & Sheela (1995) menya- takan  bahwa  perlakuan  melalui  oral  dan  peren- daman untuk maskulinisasi atau feminisasi meru- pakan  metode  yang  terbaik  dalam  pemanfaatan hormon  steroid . Pemberian  hormon  dengan  cara perendaman pada stadia larva dimulai ketika ku- ning  telur  sudah  habis.  Cara  ini  diyakini  sangat efektif  karena  mudah  menyiapkan  hormonnya dan tidak memerlukan waktu yang lama. Diduga bahwa  stadia  larva  masih  berada  pada  fase  labil sehingga mudah dipengaruhi oleh rangsangan da- ri luar, serta pada  fase  larva,  gonad belum  terdi- ferensiasi seks, apakah jantan atau betina (Suhen- dar  1997).  Selain  itu,  stadia  ini  juga  merupakan fase bintik mata yang diduga merupakan fase pa- ling efektif untuk  melakukan  kegiatan pengarah- an  kelamin.  Karena  pada  fase  ini  perkembangan otak  masih  labil  sehingga  mudah  untuk  diarah- kan  (Martati  2006).  Fase  bintik  mata  embrio  di- anggap  telah  kuat  untuk  menerima  perlakuan (Zairin  Jr  2002),  sehingga  dapat  mengurangi  re- siko gagal menetas. Menurut Kwon et al . (2000), masa diferensiasi ikan terjadi hingga 30 hari sete- lah menetas.
Perendaman  embrio  dengan  tepung  testis sapi dosis 60 mg L -1 selama 24 jam menunjukkan persentase jenis kelamin jantan yang sangat ting- gi. Kondisi ini berarti hormon bekerja dengan ba- ik  pada  perlakuan  24  jam,  dan  sudah  memenga- ruhi diferensiasi seks ke arah jantan.  Pada perla- kuan 60 jam terjadi penurunan yang sangat dras- tis,  diduga  akibat  lamanya  perendamanan  terjadi efek paradoxial feminization yaitu hasil yang di- peroleh  bukan  peningkatan  jumlah  kelamin  jan- tan  melainkan  peningkatan  jumlah  ikan  betina (Mantau  2005).  Beberapa  penelitian  menunjuk- kan bahwa lama waktu perendaman berpengaruh
terhadap keberhasilan penjantanan ikan. Menurut Iskandar  (1996),  perendaman  larva  ikan  nila  di dalam  ekstrak  tepung  testis  sapi  selama  8  jam berpengaruh  nyata  terhadap  persentase  ikan  nila jantan yang diperoleh sebesar 85,56%.
Untuk memperoleh hasil yang terbaik dari kajian  proses  pembalikan  kelamin  yang  dilaku- kan,  dosis  atau  konsentrasi,  waktu  dan  lama perendaman  merupakan  faktor  penting  yang menunjang keberhasilan pengubahan jenis kelamin  pada  ikan  (Zairin  Jr.  2002).  Terdapat hubungan  terbalik  antara  tingkat  dosis  dan  lama perendaman  sehingga  untuk  dosis  yang  lebih tinggi  perendamannya  lebih  singkat  dan  untuk dosis yang lebih rendah perendamannya lebih la- ma (Hunter  & Donaldson 1983).  Masuknya  hor- mon ke dalam tubuh larva diduga melalui proses osmosis. Dosis hormon dalam media pemelihara- an  lebih  tinggi  daripada  dosis  hormon  di  dalam tubuh  larva  itu  sendiri,  sehingga  hormon  di  da- lam  media  masuk  secara  difusi  ke  dalam  tubuh larva.  Semakin  lama  perendaman  maka  semakin banyak  hormon  yang  masuk  dan  memengaruhi gonad  (Irmasari et  al .  2012).  Hormon  dengan dosis  yang  tinggi  dengan  waktu  perendaman  le- bih lama dapat menyebabkan stres pada larva dan menimbulkan kematian (Purwati et al . 2004).

## Tingkat kelangsungan hidup
Selama masa pemeliharaan tingkat kelang- sungan hidup ikan cupang dalam parameter dosis dan waktu perendaman cukup baik. Hal ini dise- babkan oleh penanganan  selama penelitian yang baik, seperti pemberian  ukuran pakan yang  kecil yang  cocok  dengan  bukaan  mulut  larva  ikan  cu- pang,  mengurangi  goncangan  pada  saat  pemin- dahan  larva  ke  bak  pemeliharaan  sehingga  tidak menyebabkan  larva  mengalami  stres,  serta  men- jaga suhu air tetap optimal bagi ikan cupang yai- tu sekitar 23-25  C. Peningkatan suhu  yang dras-
tis  dapat  membuat  ikan  mengalami  stres  dan mati.
Namun  setiap  perlakuan  menunjukkan tingkat  kelangsungan  hidup  ikan  yang  berbeda- beda. Perlakuan kontrol pada dosis yang berbeda, tingkat  kelangsungan  hidup  ikan  cukup  tinggi (95,56%),  namun  terjadi  penurunan  pada  perla- kuan  dosis  20  mg  L -1 (92,22%),  40  mg  L -1
(94,44%),  dan  80  mg  L -1 (91,11%);  sedangkan pada  perlakuan  lama  perendaman  tidak  terjadi perbedaan  yang  terlalu  besar  antara  larva  yang direndam  tanpa  larutan  testis  sapi  dengan  larva yang  direndam  dalam  larutan  testis  sapi.  Perbe- daan  hasil  yang  diperoleh  ini  dipengaruhi  oleh perendaman  larva  dengan  larutan  yang  mengan- dung  alkohol  yang  digunakan  untuk  melarutkan tepung testis sapi dengan air pada perlakuan. Ha- sil ini tidak jauh berbeda dengan  penelitian yang dilakukan  oleh  Yustina et  al .  (2012)  yang  men- dapatkan hasil tingkat kelangsungan hidup antara 54-58% menggunakan larutan alkohol dalam me- larutkan  ekstrak  tepung  teripang  pada  proses penjantanan  ikan  cupang.  Menurut  Hakim (2008),  meskipun  dalam  jumlah  yang  sangat  se- dikit  alkohol  dapat  menyebabkan  kematian  apa- bila  perendaman  dilakukan  dalam  waktu  yang cukup lama.
Tingkat  kelangsungan  hidup  yang  tinggi pada  ikan  cupang  diperlihatkan  pada  perlakuan dosis 60 mg L -1 (96,67%) dan perlakuan lama pe- rendaman 24 jam (97,78%). Kelangsungan hidup yang  tinggi  ini  diduga  dipengaruhi  oleh  adanya kandungan bahan lain yang terdapat di dalam te- pung  testis  sapi.  Tepung  testis  sapi  mengandung berbagai  macam  asam  amino  esensial  dan  non esensial  serta  mengandung  asam  lemak  jenuh dan  tak  jenuh  (Odin et  al .  2011).  Asam  amino tersebut  antara  lain  arginin,  histidin,  isoleusin, leusin,  lisin,  metionin,  fenilalanin,  treonin  dan valin,  sedangkan  non  esensialnya  antara  lain  as-
partat,  alanin,  glutamat,  glisin,  prolin,  serin,  sis- tein  dan  tirosin.  Asam  amino  arginin,  histidin, leusin,  glutamat,  glisin,  prolin,  serin  dan  tirosin sangat  berguna  dalam  pembentukan  hormon  an- drogen yaitu testosteron yang berperan dalam pe- ningkatan  libido  maupun  pembentukan  sperma- tozoa.
Menurut  Hafez  (1987),  asam  amino  seba- gai  hormon  yang  merangsang pembentukan  hor- mon steroid diantaranya testosteron dan  merang- sang  spermatogenesis,  sedangkan  leusin  sangat berguna  dalam  sintesis  protein  pada  pembentuk- an otot. Fulierton (1980) menjelaskan bahwa, se- lain mempunyai sifat androgenik, testosteron ter- nyata mempunyai sifat anabolik, yaitu dapat me- macu  pertumbuhan  otot.  Tepung  testis  sapi mengandung  hormon  androgen  yang  sama  se- hingga memiliki sifat anabolik yang mampu me- rangsang  pertumbuhan,  bertanggung  jawab  ter- hadap  penampakan  karakter  dan  fungsi  kelamin jantan.
Hasil  kelangsungan  hidup  akhir  ikan  cu- pang dalam penelitian ini lebih tinggi dibanding- kan  hasil  penelitian  pada  ikan  nila  yang  dilaku- kan  Iskandar  (1996)  sebesar  45-68%  dan  Meyer et al. (2008) sebesar 40,2%, menggunakan  testis sapi  segar;  Murni  (2005)  sebesar  80%  rnenggu- nakan  testis  sapi  yang  dikeringkan  dengan  cara dioven, Bombata & Somatun (2008) sebesar 65% dengan  menggunakan  testis  kambing,  dan  pada ikan  cupang  dengan  menggunakan  tepung  teri- pang (54%) (Yustina et al . 2012).
Tingginya tingkat  kelangsungan hidup se- telah  diberikan  konsentrasi  tepung  testis  sapi  di- duga  karena  tingginya  kandungan  protein  dalam tepung testis sapi yaitu 76,56%.  Seperti dikemu- kakan Irmasari et al. (2012) dalam penelitiannya menemukan  bahwa  kandungan  protein  dalam tepung  testis  sapi  mencapai  76,26-77,08%. Kandungan protein dalam testis sapi lebih tinggi
dibandingkan  testis  kambing  sebesar  47,33%
(Bombata  &  Somatun  2008).  Hal  ini  dapat dicapai  apabila  pembuatan  tepung  testis  sapi menggunakan  testis  sapi  dalam  kondisi  yang segar  dan  langsung  disimpan  dalam freezer dan dibuat tepung dalam kondisi segar dengan meng- gunakan mesin freeze dry.
Dibandingkan  dengan  penggunaan  hor- mon 17α-metiltestosteron yang bersifat sintentik, hormon  testis  sapi  lebih  aman  digunakan  karena berasal dari bahan alami. Dari penelitian Yustina et  al .  (2012),  penggunaan  hormon 17α-metiltes- tosteron pada ikan cupang melalui metode peren- daman  menghasilkan  kelangsungan  hidup  yang sangat  rendah  sebesar  14,66%.  Hal  ini  karena hormon 17α-metiltestosteron yang  merupakan hormon  sintetik  memberi  efek  toksik  terhadap larva  ikan  cupang.  Efek  toksik  diakibatkan  oleh dosis  hormon  yang  terlalu  tinggi  maupun  akibat masuknya  hormon  sintetis  ke  dalam  tubuh  larva ikan.
Selain  itu,  bahan  sintetis  yang  masuk  ke dalam  tubuh  juga  dapat  memberi  efek  biphasik terhadap sistem antibodi, yaitu pada awalnya da- pat  merangsang  pembentukan  antibodi,  tetapi efek  selanjutnya  adalah  menghambat  reaksi imun.  Pemberian  bahan  sintetis  dalam  waktu  la- ma  walaupun  dalam  dosis  rendah,  dapat  meru- sak  kemampuan  sel  imun  untuk  memperbanyak diri (proliferasi) (Connell & Miller 2006).

## Simpulan
Tepung  testis  sapi  yang  diberikan  pada larva uji melalui metode perendaman, efektif un- tuk  penjantanan  ikan  cupang  ( Betta  splendens ).
Tepung  testis  sapi  dengan  dosis  80  mg  L -1 yang diberikan  selama  24  jam  mampu  meningkatkan ikan  jantan  dari  40%  menjadi  88%.  Pemberian tepung testis sapi tidak memengaruhi tingkat ke- langsungan hidup ikan uji.

## Persantunan
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Muh. Fariz Z. Ali untuk penyediaan embrio ikan cupang dan fasilitas pemeliharaan.

## Daftar pustaka
Arfah  H,  Soelistyowati  DT,  Bulkini  A.  2013. Maskulinisasi  ikan  cupang Betta  splen- dens melalui  perendaman  embrio  dalam ekstrak  purwoceng Pimpinella  alpina . Jurnal Akuakultur Indonesia , 12 (2): 145– 150.
Bombata HAF, Somatun AO. 2008. The effect of lyophilized  goat  testes  meal  as  first  feed on the growth of "wesafu": an ecotype ci- chlid of epe-lagoon, in Lagos State, Nige- ria. Pakistan  Journal  of  Nutrition ,  7(5):
686-588.
Connell DW, Miller GJ. 2006. Kimia Pencemar- an. Diterjemahkan oleh Y. Koestoer. Uni- versitas Indonesia. Jakarta. 444 hlm.
Damayanti AA, Sutresna W, Wildan. 2013. Apli- kasi madu untuk pengarahan jenis kelamin pada  ikan  nila  ( Oreochromis  niloticus) . Jurnal Depik , 2(2): 82- 86.
Dewantoro  GW.  2001.  Fekunditas  dan  produksi larva  pada  ikan  cupang  ( Betta  splendens Regan)  yang  berbeda  umur  dan  pakan alaminya. Jurnal Iktiologi Indonesia , 1(2):
49-52.
Fulierton  DS.  1980.  Steroid  dan  Senyawa Terapetik  Sejenis.  In  :  Buku  teks  Wilson dan Gisvold. Kimia Farmasi dan Medicinal  Organik.  Editor  :  Doerge  R.F.
Edisi  VIII,  Bagian  II.  J.B.  Lippincott
Company.  Philadelphia  –  Toronto.  USA. pp. 675-754.
Hafez  ESE. 1987. Reproductive  Behavior .  4 th edition.  Lea  and  Febiger.  Philadelphia.
537 p.
Hakim  RH.  2008.  Optimalisasi  pemberian  dosis hormon  metiltestosteron  terhadap  keber- hasilan  pembentukan  monoseks  jantan lobster  air  tawar  ( Cherax  quadricarina- tus ). Jurnal  Protein,  Jurnal  Ilmiah  Ilmu Peternakan-Perikanan  UMM, 15(1):  1- 17.
Hunter GA, Donaldson EM. 1983. Hormonal sex control  and  its  application  to  fish  culture. In : Hoar WS, Randall DJ, Donaldson  EM (Eds.). Fish  Physiology.  Vol.  9  Repro- duction,  Part  B  Behaviour  and  Fertility
Control .  Academic  Press,  New  York.  pp. 223-291.
Irmasari,  Iskandar,  Subhan  U.  2012.  Pengaruh ekstrak  tepung  testis  sapi  dengan  konsen- trasi  yang  berbeda  terhadap  keberhasilan maskulinisasi  ikan  nila  merah. Jurnal Perikanan dan Kelautan , 3(4): 115-121.
Iskandar.  1996.  Pemanfaatan  testis  sapi  dalam teknik  pengalihan  jenis  kelamin  (sex  re- versal)  ikan  nila  merah. Skripsi .  Univer- sitas Djuanda Bogor. 64 hlm.
Kwon YJ, Haghpanah V, Kongson-Hurtado ML, Mc  Andrew  JB,  Penman  JD.  2000.    Mas- culinization  of  genetic  female  Nile  tilapia by  dietary  administration  of  an  aromatase inhibitor  during  sexual  differentiation.
Journal  of  Experimental  Zoology ,  287(1): 46-53.
Mantau Z. 2005. Produksi  benih ikan nila jantan dengan  rangsangan  hormon  metil  testos- teron  dalam  tepung  pelet. Jurnal  Litbang Pertanian , 24(2): 80-84.
Mardiana.  2009.  Teknologi  pengarahan  kelamin ikan  menggunakan  madu. Jurnal  PENA Akuatika , 1(1): 37-43.
Martati  E.  2006.  Efektivitas  madu  terhadap  nis- bah kelamin ikan gapi ( Poecilia reticulata Peters). Skripsi .  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu  Kelautan.  Institut  Pertanian  Bogor.
26 hlm.
Meyer D, Guevara M, Chan W, Castillo C. 2008. Use of fresh bull and hog testis in the sex reversal of Nile tilapia  fry. Paper present- ed  at  the  World  Aquaculture  2008, The Annual  International  Conference  and  Ex- position of World Aquaculture Society and Korean  Aquaculture  Society.  Busan,  Ko- rea. 26p.
Murni AP. 2005. Efektivitas hormon methyl tes- tosteron  terhadap  sex  reversal  ikan. Risa- lah  Pertemuan  Ilmiah  Penelitian  dan  Pe- ngembangan  Aplikasi  Isotop  dan  Radiasi. BATAN .  Jakarta. 23: 164-170
Muslim.  2011.  Maskulinisasi  ikan  nila  ( Oreo- chromis  niloticus )  dengan  pemberian  te- pung  testis  sapi. Jurnal  Akuakultur  Indo- nesia, 10(1): 51-58.
Odin  RY,  Bolivar  RB,  Liping  L,  Fitzsimmons, K.  2011.  Masculinization  of  Nile  tilapia ( Oreochromis  niloticus L.)  using  lyophi- lized testes from carabao ( Bubalus bubalis carabanesis L.), bull ( Bos indicus L.) and boar  ( Sus  domesticus L.).  In Better science,  better  fish,  better  life.  Proceed- ings of the Ninth International Symposium on Tilapia in Aquaculture, Shanghai, Chi- na,  22-24  April  2011. AQUAFISH  Colla- borative  Research  Support  Program.  pp.
105-120.
Pandian  TJ,  Sheela  SG.  1995.  Hormonal  induc- tiore  of  sex  reversal  in  fish. Aquaculture 138(1-4): 1-22.
Piferrer  F,  Donaldson  EM.  1989.  Gonadal  diffe- rentiation  in  coho  salmon, Oncorhynchus kisutch ,  after  a  single  treatment  with  an- drogen  or  estrogen  at  different  stages  du- ring  ontogenesis. Aquaculture 77(2-3):
243-250
Purwati S, Carman O, Zairin Jr M. 2004. Femini- sasi  ikan  betta (Betta  splendens Regan) melalui perendaman embrio dalam larutan hormon  estradiol-17β  dengan  dosis  400 μg/L  selama  6,12,18  dan  24  Jam. Jurnal Akuakultur Indonesia , 3(3): 9-13.
Riani  E,  Sudrajat  AO,    Triajie  H.  2010.  Efek- tivitas  ekstrak  teripang  pasir  yang  telah diformulasikan  terhadap  maskulinisasi udang  galah. Bionatura-Jurnal  Ilmu-ilmu Hayati dan Fisik , 12(3): 142-152.
Steel RGD, Torrie JH. 1993. Prinsip dan Prose- dur Statistika (Pendekatan Biometrik). Di- terjemahkan  oleh  B.  Sumantri.  Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. 748 hlm.
Suhendar.  1997.  Pengaruh  metil  testosteron  ter- hadap perubahan jenis kelamin pada benih ikan  mas  berumur  25,  30,  dan  31  hari.
Karya Ilmiah . Fakultas Perikanan IPB Bo- gor.  55 hlm.
Yustina,  Arnetis  D,  Ariani.  2012.  Efektivitas  te- pung  teripang  pasir  ( Holothuria  scabra ) terhadap maskulinisasi ikan cupang ( Betta splendens ). Jurnal  Biogenesis, 9(1):  67- 73.
Zairin  Jr,  M.  2002. Sex  Reversal  Memproduksi Benih  Ikan  Jantan  atau  Betina .  Penebar Swadaya. Jakarta. 113 hlm.