Volume 4, Nomor 2, Desember 2021 e-ISSN: 2598-7453 DOI: https://doi.org/10.31539/bioedusains.v4i2.2636
EFEK EKSTRAK JINTAN HITAM ( Nigella sativa L.) TERHADAP GAMBARAN HISTOPATOLOGI HEPAR TIKUS PUTIH ( Rattus norvegicus ) YANG DIINDUKSI ISONIAZID
Kartika Sari 1 , Rizki Muharani 2 , Syalfinaf Manaf 3 , Hilda Taurina 4 , Liya Agustin Umar 5 , Novriantika Lestari 6
Universitas Bengkulu 1,2,3,4,5,6 novriantika.lestari@gmail.com 6

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  melihat  pengaruh  pemberian  ekstrak  jintan  hitam terhadap  perubahan  gambaran  histopatologis  hepar  tikus  putih  yang  diinduksi isoniazid. Metode yang digunakan adalah eksperimental dengan pola posttest only control group design . Subjek penelitian menggunakan 25 ekor Rattus norvegicus yang dibagi menjadi kelompok kontrol negatif (P1), kontrol positif (P2) isoniazid per  oral  dengan  dosis  5,4  -  6,75  mg/hari  selama  6  minggu,  perlakuan  1  (P3) , perlakuan  2  (P4)  dan  perlakuan  3  (P5)  yang  diberikan  isoniazid  dengan  dosis sebesar  5,4  -  6,75  mg/hari  secara  oral  serta  dilanjutkan  dengan  pemberian  jintan hitam  per  oral  dengan  dosis  bertingkat  sebesar  2000,  2500  dan  3000  mg/kgBB. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  terjadi  peningkatan  kerusakan  sel  hepar yang signifikan setelah pemberian isoniazid  ( p < 0,05) dan terjadi  pemulihan sel hepar setelah pemberian ekstrak jintan hitam selama 42 hari ( p < 0,05). Simpulan, pemberian  ekstrak  Jintan  Hitam  dapat  memulihkan  kerusakan  sel  hepar  yang diinduksi isoniazid.
Kata Kunci: Histopatologi Hepar, Isoniazid, Jintan Hitam

## ABSTRACT
This study aimed to examine the effect of giving black cumin extract to changes in the histopathological picture of  the liver of  white rats induced by isoniazid.  The method used is experimental with posttest only control group design pattern. The research  subjects  used  25  Rattus  norvegicus,  which  were  divided  into  negative control group (P1), positive control (P2) isoniazid orally with a dose of 5.4 - 6.75 mg/day for  six weeks,  treatment  1  (P3), treatment  2 (P4  ), and treatment  3 (P5) which was given isoniazid at a dose of 5.4 - 6.75 mg/day orally and followed by oral black cumin with stratified amounts of 2000, 2500 and 3000 mg/kgBW. The results  showed  that  there  was  a  significant  increase  in  liver  cell  damage  after administration of isoniazid (p < 0.05) and liver cell recovery after administration of black cumin extract for 42 days (p < 0.05). In conclusion, the administration of black cumin extract can restore isoniazid-induced liver cell damage.
Keywords : Liver Histopathology, Isoniazid, Black Cumin

## PENDAHULUAN
Tuberkulosis  (TB)  adalah  penyakit  infeksi  oleh  bakteri Mycobacterium tuberculosis yang  biasanya  menginfeksi  paru-paru  (Adam,  2020).  Penyakit  TB menyebar  dari  manusia  ke  manusia  yang  lain  melalui  udara.  Penyakit  TB  paru menyebar  ketika  seseorang  menghirup  udara  ketika  orang  dengan  penyakit  TB paru  batuk,  bersin,  atau  meludah.  Sejak  tahun  1993, World  Health  Organization (WHO)  menyatakan  bahwa  tuberkulosis  merupakan  kedaruratan  global  bagi kemanusiaan.  TB  merupakan  salah  satu  dari  10  penyebab  kematian  di  seluruh dunia.  Sekitar  sepertiga  dari  populasi  dunia  mengidap  TB  laten,  yang  artinya seseorang telah terinfeksi oleh bakteri tuberkulosis tetapi tidak (belum) merasakan gejala dari penyakit ini dan tidak dapat menularkan penyakit.
Jumlah penderita penyakit tuberkulosis pada 2015 berjumlah 10,4 juta orang dan  1,8  juta  meninggal  akibat  penyakit  ini.  Lebih  dari  95%  kematian  akibat tuberkulosis  terjadi  pada  negara  berpenghasilan  rendah  dan  menengah.  Enam negara  yang  menyumbang  60%  dari  kasus  tuberkulosis  baru  adalah  India, Indonesia,  Cina,  Nigeria,  Pakistan  dan  Afrika  Selatan.  Berdasarkan  data  dari Global  Tuberculosis  Report  2017 , Indonesia  menduduki  peringkat  kedua  angka kejadian tuberkulosis tertinggi di dunia. Total kasus yang dilaporkan di Indonesia pada tahun 2017 diperkirakan mencapai angka 330 ribu kasus dengan insidensi 40 kasus per 100 ribu penduduk (WHO, 2017).
Regimen  pengobatan  tuberkulosis  lini  pertama  yang  direkomendasikan adalah  isoniazid  (INH),  rifampisin,  etambutol,  pirazinamid  dan  streptomisin (Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia,  2018) . Pengobatan  tuberkulosis memerlukan  waktu  panjang  sekitar  6  sampai  8  bulan  untuk  mencapai penyembuhan  dengan  kombinasi  berbagai  macam  obat  (Kastien-Hilka  et  al., 2017).  Efek  samping  obat  anti  tuberkulosis  yang  mungkin  timbul  adalah hepatotoksik.  Salah  satu  obat  anti  tuberkulosis  lini  pertama  yang  menimbulkan efek  samping  hepatotoksik  adalah  isoniazid  (INH).  Mekanisme  hepatotoksisitas INH  dilaporkan  berasal  dari  INH  yang  diasetilasi  menjadi  asetilisoniazid, kemudian mengalami hidrolisis menjadi bentuk asetilhidrazin. Untuk mengurangi efek  negatif  hepatotoksisitas  dari  pengobatan  dengan  INH  maka  digunakan tanaman herbal seperti jintan hitam yang memiliki fungsi sebagai hepatoprotektor.
Jintan hitam ( Nigella sativa ) adalah tumbuhan anggota keluarga ranunculus yang  memiliki  bunga  putih  atau  biru  muda  yang  menjadi  hitam  saat  terpapar udara. Nigella  sativa atau  yang  memiliki  nama  lain black  seed (Inggris)  atau Habbatussauda  (Arab)  merupakan  tumbuhan  berbunga  yang  berasal  dari  Asia Barat  Daya  (Mukhtar  et  al.,  2019).  Beberapa  kandungan Nigella  sativa yang diketahui  antara  lain  minyak  lemak  (36-38%),  protein,  alkaloid,  saponin  dan minyak  esensial  (0,4%-2,5%).  Kandungan  utama  di  dalam  minyak  lemak dilaporkan adalah asam lemak tak jenuh, asam arachidic dan asam eicosadieonic. Sedangkan minyak esensial banyak mengandung thymoquinone (27,8%-57%), ρ- cymene  (7.1%–15.5%) ,  carvacrol (5.8%–11.6%), t-anethole (0.25%–2.3%), 4- terpineol (2.0%–6.6%) dan longifoline (1.0%–8.0%) (Tavakkoli et al., 2017). Beberapa  penelitian  melaporkan  bahwa Nigella  sativa dapat  digunakan sebagai  anti-oksidan,  anti-diabetes,  anti-kolesterol,  anti-kanker,  anti-peradangan, anti-histamin, anti-asma bronkial, anti-infeksi bakteri, virus dan parasit dan dapat digunakan  sebagai  imunomodulator  (Niu  et  al.,  2020).  Konstituen  utama  yang terkandung  di  dalam Nigella  sativa antara  lain  thymoquinone,  flavonoid,
alkaloid dan saponin, dimana thymoquinone yang merupakan komponen penting di  dalam  minyak  esensial  jintan  hitam  memiliki  efek  sebagai  anti-oksidan  dan anti-inflamasi  (Tavakkoli  et  al.,  2017).  Ahmad  et  al.,  (2020)  melaporkan  bahwa thymoquinone  dari Nigella  sativa berperan  sebagai  hepatoprotektor  terhadap hepatotoksisitas  dari tert-butylhydroperoxide (TBHP)  secara  in  vitro,  dengan menggunakan hepatosit tikus terisolasi.
Isoniazid  adalah  obat  yang  sangat  efektif  untuk  pengobatan  TB dibandingkan  dengan  obat  anti-tuberkulosis  yang  lain.  Akan  tetapi,  isoniazid menimbulkan  cukup  banyak  efek  samping  salah  satunya  hepatotoksisitas  yang ditandai  dengan  abnormalitas  fungsi  hati,  peningkatan  kadar  bilirubin  dan nekrosis  multilobular  yang  terjadi  karena  sitotoksisitas  oleh  bioaktivasi asetilhidrazin, suatu metabolit INH (Vilchèze & Jacobs, 2019).
Indonesia  merupakan  negara  dengan  insidensi  penyakit  TB  tertinggi  kedua di  dunia.  Salah  satu  regimen  obat  antituberkulosis  lini  pertama  yang direkomendasikan  adalah  INH.  Oleh  karena  itu,  peneliti  melakukan  kajian  pada studi  ini  untuk  menguji  efektivitas  ekstrak  jintan  hitam  dalam  memperbaiki gambaran  histopatologi  hepar  tikus  putih  yang  sebelumnya  terpapar  isoniazid. Penelitian  ini  penting  untuk  dilakukan  guna  menganalisis  hepatotoksisitas  dari INH terkait efek sampingnya dalam mengobati tuberkulosis.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  laboratorik  yang menggunakan  metode  rancangan  alur  lengkap  dengan  pola posttest-only  control group design dengan menggunakan 25 ekor tikus putih ( Rattus norvegicus ) galur Sprague Dawley yang berusia 10-12 minggu dengan berat badan 200-250. Rattus norvegicus dibagi  kedalam  5  kelompok,  yaitu  kelompok  kontrol  negatif  (P1), kelompok kontrol positif (P2) dan 3 kelompok perlakuan (P3, P4 & P5). Sampel diadaptasi  selama  7  hari  sebelum  menerima  perlakuan  selama  42  hari.  Bahan penelitian  yang  digunakan  adalah  isoniazid  dengan  dosis  5,4-6,75  mg,  ekstrak jintan hitam dosis bertingkat yaitu 2000, 2500, 3000 mg/kgBB.
Kelompok  P1  sebagai  kontrol  negatif  hanya  diberikan  aquades.  Kelompok P2 diberi isoniazid dosis 5,4-6,75 mg diharapkan akan mengalami kerusakan pada hepar sebagai kontrol positif. Kelompok P3 diberi isoniazid 5,4-6,75 mg selang 2 jam  diberi  ekstrak  jintan  hitam  dosis  2000  mg/kgBB.  Kelompok  P4  diberi isoniazid 5,4-6,75 selang 2 jam diberi ekstrak jintan hitam dosis 2500 mg/kgBB. Kelompok P5 diberi isoniazid  5,4-6,75  selang  2  jam  diberi  ekstrak  jintan  hitam dosis  3000  mg/kgBB.  Pemberian  ekstrak  jintan  hitam  sebagai  hepatoprotektor pada kelompok P3, P4 dan P5 diharapkan mampu mencegah terjadinya kerusakan hepar.
Proses adaptasi dilakukan 7 hari dan pemberian perlakuan dilakukan selama 42  hari.  Isoniazid  dan  ekstrak  jintan  hitam  diberikan  peroral  dengan  metode gavage .  Pada  hari  ke-43  tikus  dieuthanasia  dengan  metode  dislokasi  servikalis dengan sebelumnya diberikan kombinasi xylazine-ketamine sebagai anastesia dan analgesia lalu dilaparatomi untuk mengambil organ hepar.
Organ hepar kemudian dibuat preparat histopatologinya dan dinilai dengan sistem skoring kerusakan sel hepar Manja Roenigk. Hepatosit yang dinilai adalah 20  hepatosit  yang  berada  di  sekitar  vena  sentral.  Hepatosit  dinilai  apakah  dalam bentuk  normal,  atau  mengalami  degenerasi  parenkimatosa,  degenerasi  hidropik,
atau  nekrosis.  Pengamatan  dilakukan  dengan  menggunakan  mikroskop  pada perbesaran  40x,  kemudian  dengan  perbesaran  100x  dan  400x  untuk  menilai dengan  lebih  jelas.  Pengamatan  dilakukan  pada  lima  lapangan  pandang  berbeda, yaitu kanan atas, kanan bawah, tengah, kiri atas dan kiri bawah, lalu dihitung skor rata-ratanya.  Data  yang  diperoleh  akan  dianalisis  secara  statistik  dengan  uji Kruskal-Wallis dan dilanjutkan dengan uji Post-Hoc Mann-Whitney.

## HASIL PENELITIAN
Hasil  pengamatan  di  bawah  mikroskop  melihat  kerusakan  hepatosit  yang ada  pada  masing-masing  kelompok.  Gambaran  histopatologi  diamati  dengan perbesaran 400x. Pengamatan dilakukan pada 20 hepatosit yang berada di sekitar vena sentral.
Gambar  1.  Gambaran  Histologi  Hepar  Tikus  Kelompok  Kontrol  Negatif  (P1) dengan pewarnaan HE. Terdapat 20 sel hepatosit normal.
Gambar 2.  Gambaran  Histopatologi  Hepar  Tikus  Kelompok  Kontrol  Positif (P2=  INH)  dengan  pewarnaan  HE.  Terdapat  16  sel  normal,  2  sel karioereksis (A) dan 2 sel kariolisis (B).
A B
Gambar 3. Gambaran Histopatologi Hepar Tikus Putih Kelompok Perlakuan 1 (P3=  INH  dan  ekstrak Nigella  sativa dosis  2000  mg/kgBB)  dengan pewarnaan HE. terdapat 17 sel normal, 2 sel karioreksis (A) dan 1 sel kariolisis (B).
Gambar 4. Gambaran Histopatologi Hepar Tikus Kelompok Perlakuan 2 (P4= INH  dan  ekstrak Nigella  sativa dosis  2500  mg/kgBB)  dengan pewarnaan HE. Terdapat 17 sel normal, 1 sel karioereksis (A) dan 2 sel kariolisis (B).
Gambar 5. Gambaran Histopatologi Hepar Tikus Putih Kelompok Perlakuan 3 (P5=  INH  dan  ekstrak Nigella  sativa dosis  3000  mg/kgBB)  dengan pewarnaan HE. Terdapat 17 sel normal, 1 sel karioreksis (A) dan 2 sel kariolisis (B).
A B A B B A
Hasil  pengamatan  histopatologi  oleh  peneliti  kemudian  dilakukan  uji Kappa dengan hasil pengamatan histopatologi oleh ahli. Penilaian skor kerusakan sel  hepar  selanjutnya  dianalisis  dengan  uji  nonparametrik  Kruskal  Wallis  dan dilanjutkan dengan uji Pos Hoc Mann-Whitney .
Tabel 1. Uji Kruskal Wallis Total Skor Histopatologi Kelompok n Skor Histopatologi* p P1 5 0 0,000**
P2
5 163,00(160-181)* P3 5 145,00(133-148)* P4 5 133,00(124-142)* P5 5 142,00(130-148)*
Keterangan:  *=  nilai  dalam  mean  ±  SD;  **= Kruskal  Wallis ;  signifikan p <0,05;  P1=  kontrol negatif; P2= kontrol positif (INH); P3= perlakuan 1 (INH dan ekstrak N. sativa 2000 mg/kgBB);  P4=  perlakuan  4  (INH  dan  ekstrak N.  sativa 2500  mg/kgBB);  P5= perlakuan 3 (INH dan ekstrak N. sativa 3000 mg/kgBB); n= jumlah.
Tabel 2. Hasil Uji Post Hoc Mann-Whitney Kelompok N p P1 vs P2 10 0,005* P1 vs P3 10 0,005* P1 vs P4 10 0,005* P1 vs P5 10 0,005* P2 vs P3 10 0.009* P2 vs P4 10 0.009* P2 vs P5 10 0.009* P3 vs P4 10 0.059* P3 vs P5 10 0,670* P4 vs P5 10 0,090* Keterangan:  *= Post  hoc Mann-Whitney;  signifikan p <0,05;  P1=  kontrol  negatif;  P2=  kontrol positif  (INH);  P3=  perlakuan  1  (INH  dan  ekstrak Nigella  sativa 2000  mg/kgBB);
P4= perlakuan 2 (INH dan ekstrak Nigella sativa 2500 mg/kgBB); P5= perlakuan 3 (INH dan ekstrak Nigella sativa 3000 mg/kgBB).

## PEMBAHASAN
Hasil  analisis  statistik  menggunakan  uji  Kruskal  Wallis menunjukkan gambaran histologi kelompok kontrol positif (P2) yang hanya diberikan isoniazid memiliki  perbedaan  bermakna  ( p <0,05)  dengan  kelompok  (P1)  yang  tidak diberikan  apapun  yang  artinya  isoniazid  dengan  dosis  terapi  maksimal  300  mg menyebabkan kerusakan pada sel hepatosit. Hal ini sejalan dengan penelitian yang mengevaluasi  mekanisme toksisitas INH pada mitokondria memperlihatkan hasil bahwa  INH  berinteraksi  dengan  rantai  pernafasan  mitokondria  dan  menghambat aktivitasnya  dan  juga  terjadi  peningkatan  pada  formasi reactive  oxygen  species (ROS),  peroksidasi  lipid  dan  penurunan  membran  potensial  mitokondria  yang akhirnya menyebabkan sinyal kematian sel (Saha et al., 2019).
INH  saat  ini  merupakan  obat  yang  sangat  efektif  untuk  pengobatan  TB dibandingkan dengan obat  anti-tuberkulosis  yang lain. Akan tetapi  menimbulkan cukup banyak efek samping salah satunya hepatotoksisitas  yang ditandai  dengan abnormalitas  fungsi  hati,  peningkatan  kadar  bilirubin  dan  nekrosis  multilobular yang  terjadi  karena  sitotoksisitas  oleh  bioaktivasi  asetilhidrazin,  suatu  metabolit INH (Vilchèze & Jacobs, 2019).
Kelompok  kontrol  positif  (P2)  jika  dibandingkan  dengan  kelompok perlakuan  P3,  P4  dan  P5  yang  diberikan  ekstrak  jintan  hitam  dosis  bertingkat sebesar  2000,  2500  dan  3000  mg/kgBB  memiliki  perbedaan  bermakna p< 0,05 yang  berarti  bahwa  jintan  hitam  yang  memiliki  kandungan  thymoquinone, flavonoid,  alkaloid  dan  saponin  yang  berfungsi  sebagai  anti-oksidan  mampu mereparasi kerusakan sel hepatosit yang terjadi.
Data  diatas  didukung  oleh  pernyataan  dari  penelitian  sebelumnya  yang menyebutkan  bahwa  kandungan  biji Nigella  sativa yang  terdiri  dari thymoquinone,  saponin,  alkaloid  dan  flavonoid  memiliki  efek  anti-oksidan. Thymoquinone juga telah terbukti menyebabkan peningkatan aktivitas SOD, yang dapat  mengubah  anion  superoksida  menjadi  hydrogen  peroksida  dan  oksigen (Khan,  2019).  Penelitian  lain  juga  melaporkan  bahwa  efek  hepatoprotektor  dari thymoquinone  dibandingkan  dengan  suatu  zat  yang  juga  dikenal  sebagai hepatoprotektor  yaitu  silybin.  Secara  keseluruhan,  efek  hepatoprotektor thymoquinone sama dengan silybin (Niu et al., 2020).
Penelitian  sebelumnya  yang  mengobservasi  gambaran  histopatologi  hepar tikus  yang  diinduksi  morfin  menunjukkan  gambaran  cedera  hati  yang  jelas melalui  mekanisme stress oksidatif,  terlihat  dari  sel  kupffer  yang  lebih terdistribusi di sekitar vena sentral dan terjadi pembesaran vena sentral. Kelompok percobaan yang diberikan morfin dan thymoquinone menunjukkan thymoquinone mengurangi  cedera  hati  yang  diakibatkan  oleh  toksisitas  morfin  dan  menekan infiltrasi limfositik secara luas (Salahshoor et al., 2018).
Beberapa  kandungan Nigella  sativa yang  diketahui  antara  lain  minyak lemak  (36-38%),  protein,  alkaloid,  saponin  dan  minyak  esensial  (0,4%-2,5%). Kandungan  utama  di  dalam  minyak  lemak  adalah  asam  lemak  tak  jenuh,  asam arachidic  dan  asam  eicosadieonic.  Sedangkan  minyak  esensial  paling  banyak mengandung thymoquinone (Tavakkoli et al., 2017).
Ekstrak  jintan  hitam  ( Nigella  sativa )  telah  dilaporkan  memiliki  efek antimikroba,  imunostimulan,  anti-inflamasi,  anti-kanker  dan  antioksidan.  Anti- oksidan  berfungsi  mencegah  hepatotoksisitas  dengan  cara  menghambat peroksidasi lipid dan juga menekan aktivitas enzim hepar seperti AST, ALT dan ALP  (Tabassum  et  al.,  2018).  Jintan  hitam  diketahui  mengandung  beberapa konstituen  antara  lain  thymoquinone,  flavonoid,  alkaloid  dan  saponin.  Saponin yang  terkandung  di  dalam  jintan  hitam  ialah  berupa  α-hederin  yang  berfungsi menekan kenaikan enzim hati CYP450.
Alkaloid  yang  ditemukan  di  dalam  jintan  hitam  adalah  berupa Nigelicine,  Nigellimine  dan  Nigellidine,  diketahui  memiliki  fungsi memperkuat  jaringan.  Kandungan  flavonoid  pada  jintan  hitam  memiliki  efek mengikis  radikal  bebas.  Beberapa  studi  telah  melaporkan  bahwa  flavonoid, terutama quercetrin dan kaempferol, memiliki efek anti-inflamasi dan anti-oksidan thymoquinone dapat menormalkan efek buruk dari berbagai racun atau xenobiotic yang  menyebabkan  kerusakan  oksidatif  dan  disfungsi  organ  yang  mengarah kepada patogenesis berbagai penyakit (Mukhtar et al., 2019).
Penelitian  lain  menyebutkan  thymoquinone,  sebagai  konstituen  utama dalam  minyak  esensial  jintan  hitam,  menjalankan  efek  antioksidannya  dengan cara  melawan  anion  superoksida  dan  meningkatkan  gen  transkripsi  yang bertanggung jawab memproduksi antioksidan alami seperti superoksida dismutase (SOD),  katalase  (CAT)  dan  glutation  peroksidase  (GSH)  (Goyal  et  al.,  2017).
Sebagai  anti-inflamasi,  thymoquinone  telah  dilaporkan  bekerja  dengan  cara menghambat  tromboksan  B2  dan  generasi  B4  leukotrien  (dengan  menghambat siklooksigenase dan 5-lipooksigenase secara berurutan) dan peroksidase membran lipid.  Tromboksan  B2  dan  generasi  B4  leukotrien  adalah  merupakan  eikosanoid mediator lipid yang dilepaskan di lokasi inflamasi (Niu et al., 2020).
Selanjutnya  hasil  analisis  dengan  uji Pos  Hoc Mann-Whitney  dilakukan untuk melihat perbandingan skor kerusakan hepar antara kelompok perlakuan P3 dan  P4  yang  masing-masing  diberikan  ekstrak  jintan  hitam  dengan  dosis  2000 mg/kgBB  dan  2500mg/kgBB  didapatkan  hasil  terdapat  perbedaan  yang  tidak bermakna  secara  statistik  dengan  nilai p =0,059.  Hal  yang  sama  ditemukan  saat melihat perbandingan antara kelompok perlakuan P3 dan P5 yang masing-masing diberikan  ekstrak  jintan  hitam  dengan  dosis  2000  mg/kgBB  dan  3000mg/kgBB memiliki  perbedaan  tingkat  kerusakan  yang  tidak  bermakna  secara  statistic dengan nilai p =0,670. Pada kelompok perlakuan P4 dibandingkan dengan P5 yang diberikan  ekstrak  jintan  hitam  dosis  2500  mg/kgBB  dan  3000  mg/kgBB  juga memiliki  perbedaan  tingkat  kerusakan  yang  tidak  bermakna  secara  statistic dengan nilai p =0,090.
Dilihat dari gambaran histopatologi sel hepatosit berdasarkan pengamatan di bawah  mikroskop,  tikus  kelompok  perlakuan  2  (P4)  yang  diberikan  ekstrak Nigella  sativa dengan  dosis  2500  mg/kgBB  memiliki  tingkat  kerusakan  yang paling  rendah  apabila  dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan  1  (P3)  dan kelompok  perlakuan  3  (P5)  yang  diberikan  ekstrak Nigella  sativa dengan  dosis 2000  mg/kgBB  dan  3000  mg/kgBB.  Hal  ini  bisa  terjadi  karena  pada  konsentrasi tinggi,  aktivitas  antioksidan  sering  lenyap  dan  fungsi  antioksidan  menjadi prooksidan. Metabolit sekunder saponin dan flavonoid apabila dikonsumsi dalam dosis tinggi akan menyebabkan sitotoksik pada sel. Disebutkan juga bahwa kadar senyawa  antioksidan  tertentu  pada  dosis  yang  berlebihan  dapat  berubah  menjadi prooksidan, sehingga dapat  memperparah kerusakan oksidatif (Wei  et  al., 2021). Farooqui  et  al.,  (2017)  juga  menyebutkan  bahwa  ketidakseimbangan  antara prooksidan  dan  antioksidan  akan  menyebabkan  gangguan  konsentrasi  fisiologi ROS sel yang dibutuhkan agar sel dapat berfungsi normal. Antioksidan berlebihan ini akan mengganggu fisiologis sel dan bersifat toksik terhadap tubuh.

## SIMPULAN
Pemberian  ekstrak  jintan  hitam  ( Nigella  sativa )  sebagai  hepatoprotektor, mampu  mengurangi  kerusakan  yang  terjadi  pada  sel  hepar  tikus  berupa  nekrosis (karioreksis  dan  kariolisis)  akibat  pemberian  isoniazid.  Hasil  penelitian menunjukkan  diantara  ketiga  dosis  ekstrak  jintan  hitam  ( Nigella  sativa )  yang digunakan  yaitu 2000 mg/kgBB, 2500 mg/kgBB dan 3000 mg/kgBB, dosis yang memberikan  perbaikan  gambaran  histopatologi  hepar  paling  tinggi  adalah  dosis 2500 mg/kgBB.

## DAFTAR PUSTAKA
Adam,  L.  (2020).  Pengetahuan  Penderita  Tuberkulosis  Paru  terhadap  Kepatuhan Minum  Obat  Anti  Tuberkulosis. Jambura  Health  and  Sport  Journal , 2 (1), 12–18. https://doi.org/10.37311/jhsj.v2i1.4560
Ahmad, M. F., Ahmad, F. A., Ashraf, S. A., Saad, H. H., Wahab, S., Khan, M. I., Ali,  M.,  Mohan,  S.,  Hakeem,  K.  R.,  &  Athar,  M.  T.  (2020).  An  Updated Knowledge of Black Seed ( Nigella sativa Linn): Review of Phytochemical Constituents  and  Pharmacological  Properties. Journal  of  herbal  medicine . https://doi.org/10.1016/j.hermed.2020.100404
Farooqui, Z., Ahmed, F., Rizwan, S., Shahid, F., Khan, A. A., & Khan, F. (2017). Protective Effect of Nigella sativa Oil on Cisplatin Induced Nephrotoxicity and  Oxidative  Damage  in  Rat  Kidney. Journal  of Biomedicine  & Pharmacotherapy , 85 , 7–15. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2016.11.110 Goyal, S. N., Prajapati, C. P., Gore, P. R., Patil, C. R., Mahajan, U. B., Sharma,
C.,  Talla,  S.  P.,  &  Ojha,  S.  K.  (2017).  Therapeutic  Potential  and Pharmaceutical Development of Thymoquinone:  A Multitargeted Molecule of Natural Origin. Frontiers in pharmacology , 8 , 1-19. https://doi.org/10.3389/fphar.2017.00656 Kastien-Hilka,  T.,  Rosenkranz,  B.,  Schwenkglenks,  M.,  Bennett,  B.  M.,  & Sinanovic,  E.  (2017).  Association  between  Health-Related  Quality  of  Life and  Medication  Adherence  in  Pulmonary  Tuberculosis  in  South  Africa. Frontiers in Pharmacology, 8, 1-7. https://dx.doi.org/10.3389%2Ffphar.2017.00919 Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia.  (2018). Tuberkulosis  (TB).
https://pusdatin.kemkes.go.id/resources/download/pusdatin/infodatin/infodat in-tuberkulosis-2018.pdf
Khan, M. A. (2019). Thymoquinone, A Constituent of Prophetic Medicine-Black
Seed,  is  A  Miracle  Therapeutic  Molecule  Against  Multiple  Diseases. International journal of health sciences , 13 (1), 1-2. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6392482/pdf/IJHS-13-1.pdf Mukhtar,  H.,  Qureshi,  A.  S.,  Anwar,  F.,  Mumtaz,  M.  W.,  &  Marcu,  M.  (2019). Nigella  sativa L.  Seed  and  Seed  Oil:  Potential  Sources  of  High-Value Components for Development of Functional Foods snd Nutraceuticals/Pharmaceuticals. Journal  of  Essential  Oil  Research 31 (3), 171–183. https://doi.org/10.1080/10412905.2018.1562388
Niu,  Y.,  Zhou,  L.,  Meng,  L.,  Chen,  S.,  Ma,  C.,  Liu,  Z.,  &  Kang,  W.  (2020).
Recent  Progress  on  Chemical  Constituents  and  Pharmacological  Effects  of the  Genus Nigella . Evidence-Based  Complementary  and  Alternative Medicine , 2020 , 1-15. https://doi.org/10.1155/2020/6756835
Saha,  P.,  Talukdar,  A.  Das,  Nath,  R.,  Sarker,  S.  D.,  Nahar,  L.,  Sahu,  J.,  & Choudhury, M. D. (2019). Role of Natural Phenolics in Hepatoprotection: A Mechanistic  Review  and  Analysis  of  Regulatory  Network  of  Associated Genes. Frontiers in Pharmacology , 10 .
https://doi.org/10.3389/fphar.2019.00509
Salahshoor,  M.  R.,  Vahabi,  A.,  Roshankhah,  S.,  Darehdori,  A.  S.,  &  Jalili,  C. (2018). The Effects of Thymoquinone Against Morphine-induced Damages on Male Mice  Liver. International Journal of  Preventive Medicine , 9 , 1-6. https://doi.org/10.4103/ijpvm.IJPVM_144_16
Tabassum,  H.,  Ahmad,  A.,  &  Ahmad,  I.  Z.  (2018). Nigella  sativa L.  and  Its
Bioactive  Constituents  as  Hepatoprotectant:  A  Review. Current Pharmaceutical Biotechnology , 19 (1), 43–67.
https://doi.org/10.2174/1389201019666180427110007
Tavakkoli, A., Mahdian, V., Razavi, B. M., & Hosseinzadeh, H. (2017). Review on Clinical Trials of Black Seed ( Nigella sativa ) and Its Active Constituent,
Thymoquinone. Journal of Pharmacopuncture , 20 (3), 179–193. https://doi.org/10.3831/KPI.2017.20.021
Vilchèze,  C.,  &  Jacobs  Jr,  W.  R.  (2019).  The  Isoniazid  Paradigm  of  Killing, Resistance,  and  Persistence  in  Mycobacterium  Tuberculosis. Journal  of molecular biology , 431 (18), 3450–3461.
Wei, J., Li, Y., Wang, H., Pei, D., Wang, N., Di, D., & Liu, Y. (2021). Protective Effect  of  Lycium  Barbarum  Polysaccharides  on  Anti-Tuberculosis  Drug- Induced  Injury  to  Human  Hepatocytes  and  Its  Mechanism. Research Square , 1-13. https://doi.org/10.21203/rs.3.rs-698780/v1 World  Health  Organization  (WHO).  (2017). Global  Tuberculosis  Report  2017 . https://www.who.int/tb/publications/global_report/gtbr2017_main_text.pdf