Daya Antibakteri Sari Buah Majapahit ( Crescentia cujete L.) terhadap Bakteri Aeromonas salmonicida Secara In Vitro
Antibacterial Activity of The Juice Majapahit Fruit ( Crescentia cujete L.) To Bacteria Aeromonas salmonicida Against In Vitro
Boedi Setya Rahardja, Fitria Yusmita Sari dan Yudi Cahyoko
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031 - 5911451

## Abstract
Bacteria are single-celled organisms, reproduce by dividing themselves (asexual) that reproduce by way of extending the cell nucleus followed by cell division called binary fission (Prajitno, 2005) and can only be viewed with a microscope because of their small size (Dwijoseputro, 1989 .) One of the bacteria that cause the greatest failures in the cultivation of freshwater fish and sea water is furunculosis (presence of a number of furuncles at the same time) caused by the bacterium Aeromonas salmonicida (Cipriano and Bullock, 2001). A. salmonicida is divided into several subspecies, among others, A. salmonicida subspecies salmonicida , subspecies masoucida , subspecies achromogenes and subspecies smithia (Hiney and Olivier, 1999).
Fish infected with these bacteria will show symptoms such as fish body color becomes darker, the ability to swim  down,  resulting haemorrhagic  septicemia ,  the  abdomen  looks  bloated,  the  eyes  and  slightly  protruding damaged fish ( exopthalmia ), all damaged fins, and gills become pale and damaged (Buller, 2004).
The  method  used  in  the  research  is  experimental  method.  This  study  aims  to  determine  whether  fruit majapahit juice ( C. cujete L.) has antibacterial power against bacteria A. salmonicida and find out whether or not sensitive majapahit juice ( C. cujete L.) in inhibiting the growth of bacteria A. salmonicida with standard comparator antibiotic kanamycin.
Research conducted at the Laboratory of Bacteriology Hall Fish Quarantine Airport Highway Ir. H. Juanda Street No.23, Semambung Village Sedati- Sidoarjo District, East Java Province in February 2011.
The results showed that the juice majapahit ( C. cujete L.) could inhibit bacterial growth of A. salmonicida against in vitro , but when compared with standard antibiotic kanamycin 30 µ g still relatively insensitive to inhibit bacterial growth of A. salmonicida.
Keywords : Aeromonas salmonicida , Crescentia cujete L.,  Antibiotic kanamycin

## Pendahuluan
Bakteri  adalah  organisme  bersel  satu, berkembang  biak  dengan  membelah  diri  (aseksual) yaitu  berkembang  biak    dengan  cara  memanjangkan sel  kemudian  diikuti  dengan  pembelahan  inti  yang disebut pembelahan biner (Prajitno, 2005) dan hanya dapat  dilihat  dengan  mikroskop  karena  ukurannya yang  sangat  kecil  (Dwijoseputro,  1989).  Salah  satu penyakit  yang  menyebabkan  kegagalan  paling  besar pada  usaha  budidaya  ikan  air  tawar  dan  air  laut adalah bakteri A. salmonicida (Cipriano and Bullock,
2001).  Penyebaran  penyakit  ini  tergolong  cepat,  dan dapat mencapai tingkat mortalitas yang tinggi dalam kurun waktu 2-3 hari (Cipriano, 1983).
Selama  ini  pengobatan  penyakit  secara sintesis  dirasakan  terlalu  mahal  sehingga  sulit  untuk dijangkau  oleh  masyarakat,  selain  itu  juga  dapat menimbulkan  efek  samping  yang  cukup  berbahaya.
Oleh  karena  itu  perlu  adanya  alternatif  lain  yang dapat  digunakan  sebagai  obat  antibakteri  yaitu dengan  cara  memanfaatkan  beberapa  jenis  tanaman seperti buah majapahit ( C. cujete L.) yang selama ini hanya  digunakan  sebagai  tanaman  hias,  peneduh jalan  atau  dibiarkan  tumbuh  liar  ditepi  jalan.  Hal  ini
dikarenakan  kurangnya  informasi  tentang  manfaat dari  tumbuhan  ini.  Buah  majapahit  ( C.  cujete L.) mengandung  beberapa  zat  antibakteri  antara  lain flavonoid  0,52%,  tanin  0,64%  dan  fenol  0,46% (Ogbuagu, 2008).
Menurut  Harborne  (1994),  flavonoid  pada tumbuhan  mempunyai  pengaruh  farmakologis  zat antimikroba.  Selain  itu  flavonoid  juga  dapat mendenaturasi  protein  sel  bakteri  dan  merusak membran sel tanpa dapat diperbaiki lagi (Pelezar dan Chan,  1988).  Tanin  mampu  menghambat  aktivitas kerja enzim pada bakteri, yaitu dengan cara mengikat dan mengendapkan protein pada mukus dan sel epitel mukosa  (Darout  and  Ismail, 2000).  Sedangkan fenol mempunyai kemampuan untuk merusak membran sel dengan  cara  menurunkan  tegangan  permukaan (Syahrurachman dkk., 1994).
Dengan kandungan yang dimiliki oleh buah majapahit  ( C.  cujete L.)  ini  diharapkan  dapat menghambat  pertumbuhan  dari  bakteri A. salmonicida yang  nantinya  dibandingkan  dengan standar  umum  antibiotika  yang  biasa  digunakan dalam  menanggulangi  penyakit  yang  ditimbulkan oleh  jenis  bakteri  ini,  dan  dalam  hal  ini  antibiotika
yang  digunakan  adalah  antibiotika  kanamycin, karena  antibiotika  kanamycin  ini  setelah  diujikan pada  bakteri A.  salmonicida menunujukkan  hasil yang  sangat  peka  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri A. salmonicida.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui apakah sari buah majapahit ( C. cujete L.) mempunyai  daya  antibakteri  terhadap  bakteri A. salmonicida dan mengetahui peka tidaknya sari buah majapahit  ( C.  cujete L.)  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri A.  salmonicida dengan  standar pembanding antibiotika kanamycin.
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi bagi masyarakat bahwa buah majapahit ( C. cujete L.)  dapat  digunakan  sebagai  obat  herbal antibakteri terhadap bakteri A. salmonicida penyebab furunculosis ,  dan  diperoleh  informasi  pengobatan alternatif  dari furunculosis yang  berasal  dari  sumber daya alam yang selama ini kurang dimanfaatkan.

## Metodologi
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Bakteriologi Balai Karantina Ikan Juanda Jalan Raya Bandara  Ir.  H.  Juanda  No.23  Desa  Semambung Kecamatan  Sedati  Kabupaten  Sidoarjo,  Jawa  Timur pada  bulan  Februari  2011.  Bahan  yang  digunakan dalam penelitian adalah buah majapahit ( C. cujete L.) yang  diperoleh  dari  sekitar  daerah  Bluru  Kidul, Sidoarjo.  Bakteri  yang  digunakan  adalah A. salmonicida yang  diperoleh  dari  Laboratorium  Balai Karantina  Ikan,  Sidoarjo. Tryptone  Soy Agar (TSA), paper  disk ,  antibiotika  kanamycin disk, aquades steril,  alkohol  70%.  Alat  yang  digunakan  dalam penelitian  adalah  tabung  erlenmeyer,  tabung  reaksi, cawan  petri,  pipet,  rak,  jarum  ose,  spatula, laminary air  flow , autoclave ,  oven,  pembakar  bunsen,  kapas, saringan  kecil,  kertas  saring, juicer ,  corong, penggaris,  aluminium  foil,  kertas  label,  mikropipet dan vortex . Metode penelitian yang dilakukan adalah metode eksperimental.
Prosedur  kerja  dari  penelitian  ini  yaitu melakukan persiapan alat dan bahan untuk kemudian di  sterilisasi,  kemudian  mempersiapkan  larutan  sari buah  majapahit  ( C.  cujete L.)  dengan  berbagai konsentrasi  dan  tiap-tiap  konsentrasi  dimasukkan paper disk untuk direndam sampai jenuh. Setelah itu mempersiapkan suspensi bakteri A. salmonicida yang 6 telah  disetarakan  dengan  kepadatan  bakteri  10 CFU/ml dan ditanam pada media TSA ( Tryptone Soy Agar )  sebanyak  0,2  ml.  Kemudian  paper  disk ditempelkan  pada  media  dan  sebagai  kontrol  pada media  ditempelkan  antibiotika  disk  kanamycin  30
µ g.  Setelah  itu  diinkubasi  dan  diukur  diameter  zona h a m b a t   y a n g   t e r b e n t u k   u n t u k   k e m u d i a n dibandingkan  dengan  standar  umum  antibiotika kanamycin.

## Hasil dan Pembahasan
B e r d a s a r k a n   h a s i l   p e n e l i t i a n   y a n g dilakukan secara in vitro dapat diketahui bahwa pada sari  buah  majapahit  ( C.  cujete L.)  pada  konsentrasi terendah (0,2%) sampai konsentrasi tertinggi (100%) ternyata  tidak  dapat  digolongkan  peka  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri A.  salmonicida karena  diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  pada media TSA  ( Tryptone  Soy Agar )  berukuran  dibawah standar umum antibiotika kanamycin.
Hasil  penelitian  tentang  daya  antibakteri sari  buah  majapahit  ( C.    cujete L.)  terhadap  bakteri
A.  salmonicida, dapat  diketahui  bahwa  sari  buah majapahit  kurang  mempunyai  kemampuan  yang maksimal  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri A.  salmonicida walaupun  pada  konsentrasi  tertinggi sekalipun,  yaitu  pada  konsentrasi  100%.  Hal  ini karena  pada  konsentrasi  0,2%  sampai  konsentrasi 100% besar zona hambat yang dihasilkan belum bisa mencapai  standar  umum  antibiotika  yang  telah ditentukan  yaitu  minimal  sebesar  14  mm.  Berbeda halnya  dengan  penggunaan  antibiotika  kanamycin yang  digunakan  sebagai  kontrol  dan  pembanding dalam penelitian ini.
Antibiotika  kanamycin  mempunyai efektivitas  yang  sangat  peka  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri A.  salmonicida, hal  ini  dapat dilihat  pada  besarnya  diameter  zona  hambat  yang dihasilkan  berbeda  jauh  dengan  besarnya  diameter zona  hambat  yang  dihasilkan  oleh  antibiotika  alami yaitu  dengan  menggunakan  sari  buah  majapahit  ( C. cujete L.).  Sehingga  dapat  dinyatakan  bahwa antibiotika kanamycin sesuai untuk digunakan dalam upaya  menghambat  pertumbuhan  bakteri A. salmonicida .
Zona  hambat  yang  dihasilkan  pada  semua konsentrasi  disebabkan  karena  zat  antibakteri  yang terkandung  dalam  buah  majapahit  ( C.  cujete L.) antara  lain  flavonoid,  tanin  dan  fenol  tidak  bisa didapatkan  secara  maksimal  karena  dalam memperoleh  sari  buah  majapahitnya  proses  hanya dengan  pengejusan  saja. Akan  tetapi  dengan  adanya penelitian  ini  dapat  diketahui  bahwa  buah  majapahit ( C.  cujete L.)  ini  memang  benar-benar  memiliki kandungan zat antibakteri, hal ini dibuktikan dengan adanya zona hambat yang terbentuk atau dengan kata lain  bahwa  bakteri A.  salmonicida bisa  terhambat
pertumbuhannya  dengan  pemberian  zat  antibakteri yang berasal dari buah majapahit ( C. cujete L.).
Dengan  hasil  tersebut  dapat  dikatakan bahwa  sari  buah  majapahit  ( C.  cujete L.)  bersifat bakteriostatik  terhadap  bakteri A.  salmonicida, namun  belum  bisa  dimanfaatkan  secara  optimal untuk  pengobatan  karena  zona  hambat  yang dihasilkan masih dibawah standar umum antibiotika. Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  Setiabudy  dan Vincent  (1995),  bahwa  zat  antibakteri  bersifat bakteriostatik  dengan  tidak  adanya  pertumbuhan koloni bakteri pada media agar (bersifat menghambat pertumbuhan bakteri).

## Kesimpulan
Sari  buah  majapahit  ( C.  cujete L.)  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri A.  salmonicida secara in vitro.
Sari  buah  majapahit  ( C.  cujete L.)  tidak peka  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri A. salmonicida bila  dibandingkan  dengan  standar antibiotika kanamycin 30 µ g.
Perlu  dilakukannya  penelitian  lebih  lanjut tentang  pemanfaatan  buah  majapahit  ( C.  cujete L.) sebagai  antibakteri  dengan  menggunakan  metode yang lainnya.

## Daftar Pustaka
Buller,  N.B.  2004.  Bacteria  from  Fish  and  Other Aquatic Animals. CABI Pub. USA. Cipriano,  R.C.  1983.  Bacterial  and  Viral  Disease  of Fish. University of Washington, Seattle. and  Bullock,  G.L.  2001. Furunculosis and Other Disease Caused By
Aeromonas  salmonicida .  Fish  Disease Leaflet. 66 pp.
Darout  and  A.  Ismail.  2000.  Antimicrobial  Anionic Components  In  Miswar  Extracc.  Jurnal  Of Pharmacology. Department of Odonitology. Faculty of Denstistry. University of Bergen.
Norway.
Dwidjoseputro,  D.  1989.  Dasar-dasar  Mikrobiologi. Djambatan. Jakarta. 215 hal.
Harborne,  J.B.  1994. The  Flavonoids.  Chapman  and Hall. London.
Hiney,  M.  and  G.  Olivier.  1999.  Furunculosis
( Aeromonas  salmonicida ).  New  York. 3:341-425 pp.
Ogbuagu,  M.N.  2008.  The  Nutritive  and  Anti
Nutritive  Compositions  of  Calabash ( Crescentia  cujete L.)  Fruit  Pulp.  J  Anim
Vet Adv. 7 (9):1069-1072.
Pelezar,  M.J.,  dan  S.  Chan.  1988.  Dasar-dasar Mikrobiologi  2,  Universitas  Indonesia- Press. Jakarta.
Prajitno, A. 2005. Diktat Kuliah Parasit dan Penyakit Ikan.  Universitas  Brawijaya.  Malang.  104 hal.
Setyabudi,  R.  dan  H.S.  Vincent.  1995.  Farmakologi d a n   Te r a p i .   E d i s i   4 .   F a r m a k o l o g i Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta.
Syahrurachman, A., A. Chatim, A. Soebandrio W.K., A.  Karuniawati  dan A.U.S.  Santoso.  1994. Buku  Ajar  Mikrobiologi  Kedokteran  Edisi Revisi. Binarupa Aksara. Jakarta.