Indigenous Biologi Jurnal pendidikan dan Sains Biologi Volume 1(3) 2018
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PADA GANGGANG COKELAT ( Sargassum polycystum ) DAN GANGGANG HIJAU (Euchema cottonii) PADA PERAIRAN DAHI ’

## AE
Melkianus Mola Kore, Sonya Titin Nge, Merpiseldin Nitsae
Program Studi Pendidikan Biologi, Fakultas Keguruan Dan Ilmu Pendidikan, Universita Kristen Artha Wacana, Kupang-NTT
Coressponding Author : melkikore94@gmail.com, merpinitsae@gmail.com

## ABSTRAK
Rumput    laut    merupakan    tumbuhan    yang    hidup    di    laut    dan    merupakan    jenis makroalga.   Tanaman ganggang  ini adalah  ganggang multiseluler  devisi Thallophyta. Rumput laut tidak termaksud tumbuhan sejati karena tidak  memiliki  akar,  batang  dan  daun.  Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan  pada ganggang  cokelat jenis Sargassum polycystum dan  ganggang  hijau jenis Eucheuma  cottonii pada  perairan  Dahi ’Ae. Penelitian  ini bersifat  eksperimental  dengan  mengunakan  metode  1,1 -diphenyl -2- picrylhydrazi l  (DPPH), dengan mengunakan 3 variasi konsentrasi (50 ppm, 75 pm, dan 100 ppm)  dan 5 kali ulangan. Data yang diperoleh dianalisis untuk mendaptkan nilai % IC50. Dari plot tersebut akan diperoleh persamaan regresi linear y = ax + b. Berdasarkan persamaan  ini  aktivitas  antioksidan  secara berturut-turut  pada Sargassum  polycystum adalah  242,02  ppm  dan Euchema cottoni adalah 169,06  ppm.  Kedua  sampel  tersebut  tergolong  dalam  aktivitas  antioksidan  sedang,  sehingga perlu  dianalisis  aktivitas  antioksidan  untuk S.  polycystum pada  konsentrasi  tinggi  sedangkan E.cottoni pada konsentrasi rendah.
Kata Kunci : Antioksidan, Sargassum polycystum, Euchema cottoni , Metode DPPH, perairan Dahi ’ Ae.

## ABSTRACT
Seaweed is a kind of macro algae plant which lives in the sea. This alga is multicellular algae in Thallophyta division. Seaweed is not a kind of frond because there are no roots, steam and leaf. The aim of this research is to know the antioxidant activity of brown algae, Sargassum Polycystum type  and  green  algae  Euchema  Cottoni  type  in  Dahi ’  Ae  waters.  This  research  is  experimental research  which  used  1,1  d-diphenyl -2- picrylhydrazi l (DPPH)  method,  with  3  variations concentrations (50 ppm, 75 pm   and 100 ppm) and 5 times repetitions.  The data was found were analyzes to found score %1C 50. From that plot will found linear regression equation which is y= ax + b. Based on this equation the antioxidant activity successively in Sargassum Polycystum is 242,02 ppm and 169,06 ppm in Euchema cottoni. Both of those sample classified into medium antioxidant activity,  so  there  is  need  to  analyzed  the  antioxidant  activity  for  S.  Polycystum  used  high concentration and low concentration for E. cottoni.
Key Words: Antioxidant, Sargassum Polycystum, Euchema Cottonii, DPPH Method,  Dahi ’ Ae Waters.

## PENDAHULUAN
Rumput    laut   merupakan   tumbuhan yang hidup di laut dan merupakan jenis makroalga. Tanaman ganggang ini adalah ganggang multiseluler divisi Thallophyta. Rumput  laut  tidak  termasuk tumbuhan  sejati karena tidak memiliki akar, batang dan daun. Tumbuhan ini biasanya hidup di dasar perairan masih terkena  cahaya  matahari.  Berdasarkan pigmen,  warna  rumput  laut  terbagi atas  4 jenis  yaitu  ganggang  biru (Cynophyceae), ganggang  hijau (Clorophyceae), ganggang  merah (Rodophyceae), dan ganggang cokelat (Phaeophyceae ) (Yudhi, 2009).
Rumput    laut    memiliki  nutrisi  yang  sangat  beragam  dengan  kadar  yang  cukup  tinggi, mencapai 10-20 kali lipat dibandingkan dengan tanaman darat. Rumput laut menghasilkan senyawa koloid yang disebut fikokoloid yakni agar, alginat, dan keraginan (Kadi, 2004); oleh karena itu rumput laut  menjadi  sumber  pembuatan  tepung  keraginan  yang  dapat  diolah  menjadi  produk  lain,  selain untuk  sumber  pangan  dan  hidrokoloid,  rumput  laut  juga  sebagai  antikanker,  mencegah kardiovaskuler, makanan diet, bahan obat- obatan serta klorofil sebagai antioksidan.
Kabupaten    Sabu    Raijua      merupakan pusat    inkubator    rumput    laut    di    mana kluster pengembangannya tersebar di seluruh kecamatan. Kecamatan Raijua salah satu kecamatan  yang menjadi    sentra pengembangan     rumput      laut    terbesar    di Kabupaten Sabu Raijua. Sebagian besar masyarakat  Kabupaten Sabu  Raijua khususnya kecamatan Raijua    bermata    pencaharian sebagai   nelayan   rumput   laut.   Oleh   karena itu,   pantai   yang   terdapat   di   Kecamatan Raijua ini dimanfaatkan sebagai tempat budidaya  rumput  laut.  Kegiatan budidaya rumput  laut  sendiri  di kecamatan  Raijua  ini sudah   berlangsung   sejak   tahun   2002   dan terus  berkembang  sampai dengan    saat    ini.  Sejak  awal  pengembangannya,  rumput    laut  terbukti  memiliki  sangat  banyak kontribusi  kepada  masyarakat    di  kecamatan  Raijua  khususnya    diantaranya    pengentasan kemiskinan   serta penyerapan tenaga kerja.
Rumput  laut  menghasilkan berbagai jenis  antioksidan  untuk  menangkal tekanan lingkungan (Lesser,  2006).  Oleh  karena  itu,  rumput  laut  merupakan  sumber  potensial  dari  antioksidan  baru. Sebagai  tambahan,  antioksidan  lebih  diterima  dari  pada  sintesis  antioksidan  karena  tidak mengandung bahan kimia kontaminan dan menampilkan berbagai fungsi yang bermanfaat. Dengan demikian,  antioksidan  alami  dianggap  aman  untuk  digunakan    sebagai    bahan    dalam    obat, suplemen makanan, dan kosmetik dengan tujuan meningkatkan kesehatan konsumen, mengurangi efek  penyakit  berbahaya dan lainnya  sebagai aspek  yang  lebih  luas dari fungsi sistem kekebalan tubuh  (Shahidi,  2009).  Tujuan    dalam    penelitian      ini    adalah      untuk  mengetahui  aktivitas antioksidan pada ganggang  cokelat      jenis Sargassum polycystum dan  ganggang   hijau   jenis Eucheuma cottonii yang terdapat pada perairan Dahi ’Ae.

## METODE PENELITIAN

## Tempat Dan Waktu Penelitian
Pengambilan Sampel dilakukan di Perairan Dahi ’Ae, Kelurahan Ledeunu, Kecamatan  Raijua, Kabupaten  Sabu  Raijua dan  di  analisis  di  Divisi  Laboratorium Material-Energi-informatika  UPT Laboraturium Riset Terpadu Universitas Nusa Cendana Kupang pada bulan Oktober sampai dengan November 2017.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  diperlukan dalam penelitian      ini     meliputi    spektrofotometer UV-Visible , rotary  vacuum  evaporator ,  vortex,  tabung  reaksi,  gelas  ukur,  pipet  tetes,  pipet  mikro,  labu Erlenmeyer, labu ukur, kaca arloji, coolbox , pisau, karung, gunting, kertas saring, saringan (ayakan). Bahan utama  yang  digunakan dalam penelitian  ini adalah  rumput  laut  cokelat ( Sargassum polycystum) dan  rumput  laut  hijau  ( Euchema  cottoni) ,  yang  diambil  dari  perairan  Dahi ’Ae, Kelurahan      Ledeunu,      Kecamatan  Raijua,  Kabupaten  Sabu  Raijua.  Bahan-bahan  lain  yang dibutuhkan  untuk  ekstraksi S.  polycystum dan Eucheuma  cottonii meliputi  metanol.  Bahan  yang digunakan untuk uji antioksidan            meliputi      ekstrak      kasar metanol Pro Analis ( p.a ),  Kristal 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil  (DPPH).

## Metode Penelitian
Jenis penelitian yang dilakukan adalah penelitian  eksperimental.  Metodologi penelitian ini meliputi  pengumpulan  dan  preparasi  bahan,  pembuatan  ekstrak,  dan  uji  aktivitas  antioksidan dengan menggunakan metode DPPH ( Andayani et al ., 2008).

## Prosedur Penelitian

## 1.   Pengambilan Sampel
Pengambilan sampel rumput  laut dilakukan dengan cara  memetik  langsung dari substratnya pada saat surut. Rumput laut yang telah diambil di isi dalam karung, diberi label dan disimpan dalam coolbox yang telah berisi air  laut  untuk menjaga kesegaran rumput  laut selama perjalanan menuju laboratorium.  Preparasi  rumput  laut  cokelat  ( Sargassum  polycystum ) dan  rumput  laut  hijau ( Eucheuma cottonii ) dimulai dengan proses pencucian, pengeringan dan penggilingan. Rumput laut segar  dicuci  dengan  menggunakan  air  tawar.  Sampel  dikeringkan  di  tempat  yang  terlindung  dari sinar  matahari  secara  langsung  selama  ±  10  hari.  Rumput  laut  yang  telah  kering  dihaluskan menggunakan blender dan dimasukkan ke dalam wadah kemudian ditimbang menggunakan neraca analitik dan disimpan dalam kondisi kering untuk selanjutnya dilakukan proses ekstraksi.

## 2.   Ekstraksi Sampel
Tahap  selanjutnya  adalah  ekstraksi  bahan  aktif.  Metode  ekstraksi  yang  digunakan  adalah metode  ekstraksi  tunggal  yang mengacu pada (Quinn, 1988 dalam Darusman et al. 1995).   Pelarut yang  digunakan  dalam penelitian ini  yaitu pelarut  metanol.  Masing – masing  sampel dihancurkan ditimbang sebanyak 150 gram dan dimaserasi dengan pelarut  metanol  sebanyak  500  ml  selama 48  jam.  Hasil  maserasi  yang  berupa  larutan  kemudian  disaring  dengan  kertas  saring  sehingga diperoleh filtrat dan residu. Filtrat yang diperoleh dievaporasi hingga pelarut memisah dengan ekstrak menggunakan Rotary  Vacuum  Evaporator pada  suhu  kurang  dari  45o  C.      Ekstrak      ini    dibagi menjadi   dua,   yang pertama ekstrak S.   polycystum dan kedua ekstrak Euchema cottoni .

## 3.   Uji Aktivitas Antioksidan Dengan Metode DPPH
Uji  aktivitas  antioksidan  dengan metode DPPH pertama kali dijelaskan oleh Blois. Uji aktivitas antioksidan yang dilakukan pada penelitian ini menggunakan prosedur Blois, yaitu absorbansi yang dihitung dari 1 ml sampel  dicampur  1  ml  DPPH  dan  diencerkan dengan 2 ml methanol (Molyneux, 2004).

## 4.   Pembuatan Larutan DPPH
Sebanyak 2,5 mg DPPH dilarutkan dalam 25 ml metanol sehingga diperoleh konsentrasi 100 μg/ml (Molyneux, 2004).
5.   Optimasi Panjang Gelombang DPPH
Larutan DPPH  dengan konsentrasi 100 μg/ml yang telah dibuat diukur absorbansinya pada panjang gelombang 400-700 nm ditentukan ƛ optimumnya ( Molyneux, 2004).
6.   Pengujian Absorbansi Larutan Blanko Sebanyak   1      ml    larutan    DPPH   100 μg/ml  dimasukkan  dalam  tabung   reaksi  lalu ditambah  2  ml  metanol kemudian dihomogenkan.  Larutan  diinkubasi dalam penangas air  37  0C selama 30  menit kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang optimum, ( Molyneux, 2004).

## 7.   Pengujian Ekstrak
Sebanyak  25  mg  dari  ekstrak  rumput laut cokelat ( Sargassum polycystum) dan rumput laut hijau ( Euchema cottoni) ,) masing- masing dilarutkan dalam 25 ml metanol Pro Analis (p.a) > 99,5% sehingga diperoleh konsentrasi 1000 μg/ml.  Dilakukan pengenceran  sehingga  diperoleh  larutan dengan  konsentrasi  50 μg/ml,  75  μg/ml  dan 100  μg/ml.  Caranya  dengan  memipet  larutan induk berturut-turut  sebanyak  0,5  ml;  0,75  ml; 1  ml,  dimasukkan pada  labu  ukur  10 ml dan diencerkan dengan metanol pro analis (p.a) hingga   tanda    batas.    Sebanyak    2    ml   dari masing-masing konsentrasi   larutan   sampel (ekstrak) dimasukkan dalam tabung reaksi, ditambah    2    ml    DPPH 100 μg/ml    dan diencerkan  dengan  2  ml  metanol pro  analis (p.a) kemudian     dihomogenkan.
Masing- masing larutan dalam tabung reaksi diinkubasi dalam penangas air 37 0C selama 30 menit dan diukur absorbansinya satu per satu pa da ƛ max (Molyneux, 2004).
8.   Uji Aktivitas Antioksidan
50
Data  hasil  absorbansi  masing-masing  sampel    digunakan    untuk    mencari    %  inhibisinya. Perhitungan yang digunakan adalah :
% 𝑎𝑘𝑡𝑖𝑣𝑖𝑡𝑎𝑠 𝑎𝑛𝑡𝑖𝑜𝑘𝑠𝑖𝑑𝑎𝑛  = Abs blangko−Abs sampel Abs blangko 𝑋100%
Keterangan : Abs blanko =  Absorbansi pada  DPPH tanpa  sampel; Abs Sampel =  Absorbansi  pada DPPH setelah ditambah sampel
Hasil perhitungan persen (%) inhibisi disubstitusikan ke dalam persamaan linear Y= aX+b. Y =    %    Inhibisi    a    =    Gradien    X    =    Konsentrasi  ( μg/ml)  b=  Konstanta.  Persamaan  linear  yang dihasilkan  digunakan  untuk  memperoleh  nilai  IC50.  Nilai  IC50    merupakan  konsentrasi  yang diperoleh pada saat % inhibisi sebesar 50 dari persamaan Y=aX+b. Pada saat % Inhibisi = 50, maka untuk menghitung nilai IC50 persamaannya menjadi: 50 = aX+b. 𝑋 = 50−b 𝑎 ,  dimana  harga X adalah IC50 dengan satuan μg/ml.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh diplotkan dalam grafik  sehingga  diperoleh persamaan regresi linear. Berdasarkan persamaan regresi tersebut akan diperoleh nilai IC50.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Rumput laut hijau (Euchema cottoni) dan rumput laut cokelat (Sargassum polycystum) . Rumput   laut   hijau (E.   cottoni) dan rumput laut cokelat ( S. polycystum) yang diambil dari perairan Dahi ’ Ae, Kecamatan Raijua, Kabupaten Sabu Raijua. Jenis rumput laut ini merupakan jenis rumput laut yang dibudidaya (E.  cottoni) dan  tidak  dibudidaya (S. polycystum) oleh masyarakat setempat. Pemanfaatan E.  cottoni oleh  masyarakat setempat  hanya  sebagai bahan  mentah  yang dijual kepada pedagang    untuk keperluan rumah tangga,  dengan demikian pemanfaatan E.  cottoni ini  tidak  dimaksimalkan  dengan baik,   sedangkan S.   polycystum merupakan jenis  rumput  laut cokelat    yang  tumbuh  dan tidak  dibudidayakan       oleh  masyarakat setempat serta keberadaanya cukup banyak.
Rumput laut  jenis  ini  tumbuh  dengan memerlukan sinar matahari untuk proses fotosintetis. Rumput   laut E. cottoni hidup pada   lapisan   fotik,   yaitu kedalaman   sejauh sinar matahari masih mampu mencapainya, sedangkan S. polycystum merupakan salah satu contoh rumput   laut cokelat yang mempunyai holdfast,  stipe ,  serta blade. Tubuh S. polycystum didominasi oleh warna cokelat dengan bentuk talus silindris. Tubuh utama bersifat diploid atau merupakan sporoit, yang mana talus mempunyai cabang yang menyerupai tumbuhan angiospermae.
Rumput laut jenis ini memiliki penampakan bentuk agak gepeng, licin, dan batang utamanya agak kasar. E. cottoni dan S.polycystum dikeringkan dengan tujuan membuat  rumput  laut  menjadi lebih  mudah  untuk  dihancurkan,  sehingga  penghalusan  juga  menjadi  lebih  mudah.  Pengeringan merupakan proses pengurangan kadar  air  sampai  tanda  batas  terbaik,  yaitu  8-10 %, karena pada tingkat kadar air tersebut, sampel terhindar  dari pencemaran  yang disebabkan oleh  jamur,  bakteri dan  insektisida.  Proses  pengeringan  yang  mengurangi  kadar  air  ini  juga  berguna  dalam  proses evaporasi. E.  cottoni dan S.  polycystum yang  sudah  dikeringkan  diubah  menjadi  bentuk  serbuk dengan cara diblender hingga halus, dan disaring menggunakan penyaring (ayakan) dengan ukuran 60-250  mesh,  tujuan  penghalusan  sampel  yaitu  untuk  memperbesar  ukuran  permukaan  sampel sehingga  proses  ekstraksi  berjalan  optimal  karena  semakin  luas  permukaan      sampel      maka interaksi   antara pelarut   dan   sampel   semakin   besar,   dapat dilihat pada gambar 1.
A
Gambar   1 (a) Rumput laut E. cottoni ;   (b) Serbuk E. cottoni ; (c) Rumput laut S. polycystum ; (d) Serbuk S. polycystum (Dok. Pribadi, 2017).
2.   Ekstrak kasar E. cottoni dan S. polycystum.
Tahap   selanjutnya      adalah   ekstraksi bahan aktif. Metode yang digunakan adalah metode ekstraksi tunggal  yang  mengacu  pada Quinn,  (1988) dalam Darusman et al. (1995). Rumput  laut hijau (E. cottoni) dan rumput cokelat ( S. polycystum) diekstrasi dengan metode maserasi (ekstraksi cara dingin). Metode   ini   dipilih   karena   dapat   mencegah terurainya metabolit yang tidak tahan pemanasan.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  menggunakan  pelarut  tunggal  dengan  pelarut  metanol.
Pelarut metanol memiliki titik didih sebesar 64,7 0C pada tekanan 760 mmHg. Menurut Matanjun et al. (2008),  Ekstraksi  dengan    menggunakan    metanol  memilki  hasil  rendemen  tertinggi  karena banyak  kompenen  bioaktif  yang  larut  dengan  pelarut  metanol.  Metanol  memiliki  hasil  rendemen yang paling maksimal untuk ekstraksi  rumput laut.
Masing-masing   sampel,   rumput   laut hijau (Euchema  cottoni) dan  rumput  cokelat ( S. polycystum) ditimbang  masing-masing  sebanyak  150  gram  dan  kemudian  dimaserasi  dengan pelarut metanol sebanyak 500 ml selama  48  jam  dan  diaduk  beberapa  kali hingga sampelnya merata.  Pengadukan  ini  bertujuan  untuk  memperbesar  kemungkinan  tumbukan    antara    bahan pelarut  yang digunakan berdifusi ke dalam sel untuk melarutkan   senyawa   bioaktif   yang   dapat terlarut  ke dalam pelarut  tersebut  dan  juga pelarut  yang  digunakan  berdifusi ke  dalam  sel untuk melarutkan  senyawa  yang  terkandung  didalamnya  dan  larutan  melewati  dinding  sel  serta bercampur  dengan  cairan  di  sekitarnya sehingga terbentuk keseimbangan. Hasil ekstraksi yang diperoleh  akan  bergantung  pada  beberapa    faktor    yaitu,    kondisi    alamiah  senyawa  tersebut, metode ekstraksi yang digunakan,   ukuran   partikel   sampel,   kondisi dan  waktu  penyimpanan, lama  waktu ekstraksi,  serta  perbandingan  jumlah  pelarut dan sampel.
Filtrat yang diperoleh ditampung dan diuapkan  dengan  alat rotary  vaccum evaporator 450C hingga metanol menguap seluruhnya.   Alat    ini   bekerja   berdasarkan prinsip diagram fase air, yaitu  tekanan  udara  diturunkan,  maka  titik  didih  akan  turun.  Tekanan  yang  digunakan  adalah tekanan vaccum (500  mmHg),  sehingga  suhu  ±  450C  dapat  digunakan  untuk  menguapkan pelarut. Kondisi demikian merupakan kondisi yang diinginkan.  Hal  ini  karena  pada  saat  kondisi
C B D
tersebut  lebih dari 95% kandungan nutrisi, vitamin, ferment , dan komponen bioaktif lainnya dapat terselamatkan.
Penggunaan vaccum memungkinkan pelarut  dapat  menguap  pada  suhu  rendah. Kadar air yang  berkurang  saat  pengeringan  berguna  dalam  evaporasi,  yaitu  jika  air  masih  terkandung didalamnya, maka akan sangat sukar      dipisahkan      dengan      menggunakan pemanasan suhu rendah  karena  memiliki  titik  didih    yang    lebih    tinggi    dari    pelarut.  Pemanasan  yang  dilakukan dengan menggunakan suhu tinggi,  yaitu suhu 1000C, tekanan  1  atm (760  mmHg),  dikhawatirkan akan merusak komponen bioaktif yang memiliki sifat sebagai antioksidan karena panas.
Gambar   2. (a)   Ekstrak   kasar E.   cottoni ;   (b) Ekstrak kasar . S. polycystum (Dok . Pribadi, 2017)
3 . Aktivitas  Antioksidan  pada  ekstrak rumput laut hijau (Euchema cottoni) dan  rumput  laut coklat (Sargassum polycystum) .
Pengukuran  absorbansi  sampel  rumput laut hijau (Euchema cottoni) dan rumput laut cokelat (Sargassum  polycystum) ,  masing- masing  dilakukan  pada  konsentrasi 50  ppm,  75  ppm,  dan  100 ppm.  Pengenceran  ini bertujuan untuk memperluas  jangkauan konsentrasi dengan  rentang   yang konstan  sehingga  titik- titik  persimpangan  dapat  disubtitusikan sebagai persamaan  linear  secara akurat, dengan demikian IC50  dapat diperoleh dari persamaan y = ax + b.
Metode uji aktivitas antioksidan dengan menggunakan radikal bebas  DPPH dipilih karena metode  sederhana,  mudah,  cepat,  peka  dan    hanya    memerlukan  sedikit    sampel,    akan  tetapi jumlah    pelarut    pengencer    yang  diperlukan  dalam  pengujian  ini  cukup  banyak.  Pelarut  yang digunakan  adalah  metanol.  Metanol  dipilih  sebagai  pelarut  karena  methanol  dapat  melarutkan kristal DPPH  dan  juga memiliki  sifat   yang   dapat   melarutkan komponen  polar  didalamnya.  Uji aktivitas antioksidan  dilakukan  secara  kuantitatif dengan menggunakan spektrofotometer UV- Vis. Hasil uji dilaporkan sebagai IC50.   IC50 merupakan salah satu parameter  yang biasa digunakan menginterpretasikan  hasil  dari  pengujian  DPPH.  Nilai  IC50  ini  dapat  didefinisikan  sebagai konsentrasi  substrat  yang  dapat  menyebabkan  berkurangnya  50%  aktivitas      DPPH.      Semakin kecil   nilai   IC50 berarti nilai aktivitas antioksidan semakin tinggi. Perhitungan persen (%) inhibisi dimulai  dengan  menentukan  panjang  gelombang  maksimal  ( ƛ max)  dengan  larutan        DPPH mengunakan kisaran panjang gelombang 400-700 nm dengan mengunakan alat spektrofotometer UV-Vis  dengan  melihat  absorbansi  tertinggi  maka  panjang  gelombang  maksimumnya  dipilih. Berdasarkan gambar 3. di peroleh λ max sebesar 516 nm.
A B
Gambar    3. Panjang    gelombang    maksimal ( λmaks ) S. polycystum dan E. cottoni.
Berdasarkan data tabel 1 lampiran 3. dapat   disubtitusikan   ke   dalam   persamaan linear y = ax + b. persamaan dapat dilihat pada gambar 4.
Gambar 4. Grafik persen (%) inhibisi pada sampel S. Polycystum .
Dari persamaan grafik pada gambar 4. dapat disubtitusikan dalam persamaan linear Y =  aX+b  maka  diperoleh  nilai  IC50    242.09  ppm.  Nilai  ini  menunjukan  bahwa S.  polycystum tergolong  memiliki  aktivitas  yang  sedang.  Berdasarkan  data  tabel  2  lampiran  3 . dapat disubtitusikan kedalam persamaan linear Y = aX+b. Persamaan dapat dilihat pada gambar 5.
Gambar 5. Grafik persen (%) inhibisi pada sampel E. Cottoni
Dari persamaan grafik pada gambar 5. dapat disubtitusikan dalam persamaan linear Y =   aX+b   maka   diperoleh   nilai   IC50    adalah 169,06 ppm. Nilai ini menunjukan bahwa E. cottoni tergolong memiliki nilai aktivitas antioksidan yang sedang. Berdasarkan   perhitungan grafik persen (inhibisi)  antara E.  cottoni dan S.  polycystum menunjukkan  terdapat  perbedaan  antara  kedua sampel  tersebut.    Pada S.    polycystum dengan  bertambahnya  konsentrasi  ekstrak  maka absorbansi sampel akan naik dan nilai tingkat inhibisi akan   semakin naik pula,  sedangkan pada E.  cottoni menunjukkan    bahwa  dengan  bertambahnya  konsentrasi  ekstrak,  maka  absorbansi sampel  naik  dan  tingkat  inhibisinya  akan  semakin  menurun.  Absorbansi  sampel  turun  karena
elektron  pada  DPPH  menjadi  berpasangan  dengan  elektron  sampel  yang mengakibatkan  warna berubah dari ungu menjadi pekat kuning bening dan absorbansi pada  panjang  gelombang  pada 516  nm  akan menghilang,  hal  ini  sesuai dengan  pernyataan Green (2004).  Nilai tingkat  inhibisi meningkat  seiring  meningkatnya  konsentrasi  sampel  dikarenakan  semakin  banyak  senyawa antioksidan pada sampel yang menghambat radikal bebas.
Uji  aktivitas  antioksidan  menunjukan  bahwa  ekstrak  rumput  laut S.  polycystum memilik  nilai  IC50 242,09 ppm. Hal ini berarti bahwa pada konsentrasi 242, 09 ppm sampel dapat menghambat 50 % radikal  bebas  DPPH. Menurut  Jun et  al .  (2003)  ekstrak tersebut mempunyai aktivitas  antioksidan yang sedang. Dan nilai ekstrak kasar rumput E. cottoni mempunyai nilai IC50 sebesar 169,06 ppm dan mempunyai  antioksidan  yang  tergolong sedang, karena mempunyai nilai 101-250 ppm.
Aktivitas antioksidan dinyatakan dalam IC50  berdasarkan  pengukuran  nilai  absorbansi dan persen (%) inhibisi dapat diperoleh nilai IC50 dari masing-masing ekstrak metanol E. cottoni dan S. polycystum .  Jun et  al (2003)  berpendapat  bahwa  senyawa  dikatakan  sebagai  antioksidan  sangat kuat  apabila  nilai  IC50   kurang  dari  50  ppm, apabila nilai IC50 antara 50-100 ppm kuat, sedang apabila nilai IC50  101-250 ppm, lemah apabila  IC50     berkisar  antara  250-500    ppm. Berdasarkan hasil  penelitian  di  atas  disimpulkan  bahwa E.  cottoni dan S.  polycystum termaksud  kategori antioksidan sedang,    tetapi    memiliki    nilai    IC50     yang berbeda.

## PENUTUP

## Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian ekstrak kasar  rumput  laut  jenis S.  polycystum dan E. cottoni menunjukan nilai aktivitas antioksidan secara  berturut-turut  adalah  242,09  ppm  dan 169,06 ppm dan tergolong dalam aktivitas antioksidan yang sedang.

## Saran
1. Perlu   dilakukan   penelitian   lanjutan mengenai  uji  aktivitas  antioksidan  pada E.  cottoni pada rentang konsentrasi 0-50 ppm.
2.  Perlu    dilakukan    penelitian    lanjutan  mengenai  aktivitas  antioksidan  pada S.  polycystum pada rentan konsentrasi lebih besar dari 100 ppm.
3. Perlu   dilakukan   penelitian   lanjutan mengenai aktivitas antioksidan menggunakan  fraksi  pelarut yang berbeda.
4. Identifikasi    dan     isolasi     senyawa antioksidan pada E. cottoni dan S. polycystum.

## DAFTAR PUSTAKA
Andayani,    R.,    Y    Lisawati,    Maimunah. 2008.  Penentuan  Aktivitas Antioksidan, Kadar Fenolat Total dan Likopen Pada Buah Tomat ( Solanun licopersium L ). Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi., 13 (1).
Darusman  LK.  Sajuthi  D.  Komar  &  Pamungkas    J.1995. Ekstraksi  komponen      bioaktif sebagai   bahan obat dari karang-karangan, bunga  karang  dan  ganggang laut  di  perairan Pulau Pari Kepulauan Seribu, Buletin kimia , Institut Pertanian Bogor.
Green,    R.J  (2004). Antioxidant    activity  of  Peanut  plant  tissues. Nort  Caroline  State University:  Departemen  Of Food Science, Raleigh.
Jun,  M.H.Y.,  J.,  Fong,  X.,  Wan,  C.S., Yang, C.T., Ho.  2003.  Camparison of Antioxidan Activities of Isoflavones Form  Kudzu  Root  (Puerarua  labata O) , Journal Food Science Institue of Technologist, 68; 2117-2122.
Kadi, A. 2004. Potensi Rumput  Laut Dibeberapa Perairan Pantai Indonesia. Oesena. 29(4): 25-36.
Lesser MP. 2006. Oxidativ strees in marine environments biochemistry & physiological. Physiol 68 : 253-278
Matanjuan,     P.,     S.     Mohamed,     N.M. Mustapha,   K.   Muhammad   &   C.H.Ming, 2008.   Antioxidant   activities and phenolics content of eight species of seaweads from north Borneo. J. Appl. Phycol., 20: 367-373.
Molyneux,  P.  2004  The  use  of  stable  free  radical    diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH)  for estimating antioxidant activity. Journal of Science Technology , Volume 26, No. 2.
Shahidi    F.    2009.    Phenolics      in    food    &  natural    products:    an    overview.  Phenolic Campounds in Food & Natural Health Products. Edited by Shahidi. USA. Oxford University Press. pp 1-8
Yudhy.    2009. Kriteria    Kualitas    Rumput  Laut    yang    Dijual .    Tersedia    di  http://kir- /2011/11/kriteria-kualitas- rumput-laut-yang-dijual.html. Diakses pada tanggal 21 September 2016
Indigenous Biologi Jurnal pendidikan dan Sains Biologi Volume 1(3) 2018