EKSPLORASI STATUS RESISTENSI NYAMUK Aedes Sp TERHADAP INSEKTISIDA GOLONGAN ORGANOFOSFAT SECARA BIOKIMIA DI KABUPATEN BANYUMAS TAHUN 2017
Aryanti Puspitasari *) , Aris Santjaka **) , Arif Widyanto ***)
Jurusan Kesehatan Lingkungan, Politeknik Kesehatan Kemenkes Semarang, Jl.Raya Baturaden KM 12 Purwokerto, Indonesia

## Abstrak
Jumlah  kasus  DBD  pada  tahun  2016  meningkat  tajam  bila  dibandingkan  tahun  2015  di Kabupaten  Banyumas.  Penggunaan  insektisida  telah  dilakukan  untuk  pengendalian  vektor  Demam Berdarah dalam waktu yang lama. Insektisida Golongan Organofosfat jenis malathion telah digunakan sejak tahun 1991 dan sudah tidak digunakan lagi sejak tahun 2013 di Kabupaten Banyumas. Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  status  resistensi  terhadap  insektisida  golongan  organofosfat  pada populasi  nyamuk Aedes  Sp di  Kabupaten  Banyumas  dengan  uji  biokimia.  Jenis  penelitian  ini eksploratif.  Metode  penelitian  menggunakan  uji  biokimia  (uji  mikroplat/  uji  enzimatis).  Peningkatan aktivitas  enzim  esterase  dibaca  dengan  menggunakan  ELISA reader dengan  panjang  gelombang  450 nm.  Hasil  penelitian  secara  keseluruhan  menunjukkan  bahwa  di  Desa  Kedungrandu  nyamuk  resisten 8,33%,  nyamuk  toleran  66,67%  dan  rentan  25%  sedangkan  di  Desa  Sidamulih  nyamuk  toleran  masih 90,9%  dan  nyamuk  rentan  9,1%.  Hasil  uji  statistik independent  T-Test dengan  nilai  siginifilkansi =0,565, menunjukkan bahwa  pemeriksaan  kandungan enzim esterase di dalam  tubuh  nyamuk diantara kedua  desa  tersebut  dinyatakan  tidak  ada  perbedaan,  artinya  paparan  insektisida  organofosfat  yang diterima  oleh  nyamuk Aedes  Sp dikedua  desa  tersebut  relatif  sama.Kesimpulan  penelitian  yaitu  status resistensi  nyamuk Aedes  Sp terhadap  insektisida  golongan  organofosfat  di  Desa  Kedungrandu  8,33% nyamuk dinyatakan resisten sedangkan  yang toleran Desa  Sidamulih 1,36% lebih tinggi dibandingkan Desa Kedungrandu. Disarankan kepada pemerintah Dinas Kesehatan Kabupaten Banyumas hendaknya pergantian  insektisida  menggunakan  insektisida  yang  belum  pernah  digunakan  dalam  program pengendalian vektor penyakit DBD di Indonesia demi efektivitas dan keberhasilan program itu sendiri serta mengutamakan upaya pemberantasan sarang nyamuk di masyarakat.
Kata kunci: Aedes Sp ; Organofosfat; Resistensi

## Abstract
EXPLORATION OF
Aedes Sp MOSQUITO RESISTENCE STATUS AGAINST ORGANOPHOSPHAT INSECTICIDE  BIOCHEMICALLY IN BANYUMAS DISTRICT YEAR OF 2017. The number of case DBD in 2016 increase comparison in 2015 at District. Utilisinng insecticide has  been  used  to  contol  the  vector  of  DBD  for  a  long  time.  Orgsnophosphate  insecticide  type  of malathion has been used since 1991 and not used again since 2013 at Banyumas District. This research a purpose to find out of resistence status of population Aedes Sp to organophosphate insecticide class at Banyumas  District  with  biochemical  assay.  The  type  of  this  research  is  explorative.  The  research method  used  biochemical  assay  (microplate  assays).    Increase  of  activitity  enzim  esterase  using  Elisa reader with wavelength of 450 nm.Overall, the result of this research in Kedungrandu Village show that 8,33  %  mosquito  are  resistence,  66,67  %  mosquito  are  tolerant  and  25%  mosquito  are  susceptible. Thereafter in Sidamulih Village 90,9% mosquito are still tolerant and mosquito susceptible are 9,1%. The  statistic  of  result  with  independent  t-test  significance=  0,565,  show  that  examination  of  esterase enzyme activity of these mosquitoes between two villages there is no different. it's means that effect of organophosphate  insecticide  accepting  by  mosquito  Aedes  Sp  at  two  village  are  relatively  same.The conclusion is resistence status of mosquito Aedes Sp with organophospate insecticide in Kedungrandu
Village 8,33% are resistence and then in Sidamulih Village 1,36% higher compared with Kedungrandu Village.  Recommended  to  the  Health  district  of  Banyumas  should  be  monitoring  and  evaluating  the status of mosquito resistence to insecticide used and need replacement insecticide which has never been used  for  control  of  vector  DHF  in  Indonesia  for  effectiveness  and  succes  of  the  program  as  well  as priority mosquito eradication efforts in the community.
Keywords: Aedes Sp; Organophosphate; Resistence

## 1. Pendahuluan
Permenkes  RI  Nomor  50  Tahun  2017  tentang Standar  Baku  Mutu  Kesehatan  Lingkungan  dan Persyaratan  Kesehatan  untuk  Vektor  dan  Binatang Pembawa  Penyakit  Serta  Pengendaliannya  bahwa penyakit  menular  melalui  Vektor  dan  Binatang Pembawa  Penyakit,  kini  masih  menjadi  masalah kesehatan  masyarakat  di  Indonesia  dengan  angka kesakitan  dan  kematian  yang  cukup  tinggi  serta berpotensi  menimbulkan  Kejadian  Luar  Biasa  (KLB) dan/  atau  wabah  serta  memberikan  dampak  kerugian ekonomi  masyarakat,  sehingga  perlu  dilakukan  upaya pengendalian Vektor dan Binatang Pembawa Penyakit. Salah satu penyakit yang dapat menimbulkan Kejadian Luar  Biasa  (KLB)  dan/  atau  wabah  yaitu  Demam Berdarah Dengue (DBD).
Tahun  2016  terdapat  jumlah  kasus  DBD  di Indonesia  yang  dilaporkan  sebanyak  204.171  kasus dengan  jumlah  kematian  sebanyak  1.598  orang. Jumlah kasus DBD tahun 2016 meningkat dibandingkan  jumlah  kasus  tahun  2015  (129.650 kasus). Jumlah kematian akibat DBD tahun 2016 juga meningkat  dari  tahun  2015  (1.071  kematian). Incidence Rate (IR) / angka kesakitan DBD tahun 2016 juga  meningkat  dari  tahun  2015,  yaitu  50,75  menjadi 78,85/ 100.000 penduduk. Namun, Case Fatality Rate ( CFR )  mengalami  penurunan  dari  0,83%  pada  tahun 2015  menjadi  0,78%  pada  tahun  2016  (Profil Kesehatan Indonesia Tahun 2016).
Penyakit DBD masih merupakan permasalahan serius  di  Provinsi  Jawa  Tengah,  berdasarkan  hasil pendataan  dari  Dinas  Kesehatan  Provinsi  Jawa Tengah,  terbukti  35  kabupaten/kota  sudah  pernah terjangkit  penyakit  DBD.  Angka  kesakitan/ Incidence Rate (IR)  DBD  di  Provinsi  Jawa  Tengah  pada  tahun 2016  sebesar  43,4/  100.000  penduduk,  mengalami penurunan bila dibandingkan dengan tahun 2015 yaitu 47,9/    100.000  penduduk  dan  angka  kematian/ Case Fatality Rate (CFR) DBD di Jawa Tengah tahun 2016 sebesar 1,46% menurun bila dibandingkan CFR tahun 2015 yaitu 1,56 persen.
*) E-mail: aryanti.puspitasari@gmail.com
**) E-mail: arissantjaka@gmail.com ***) E-mail: arifwidyanto74@yahoo.com
Pada  tahun  2016,  kematian  akibat  penyakit  DBD terjadi  di  hampir  seluruh  kabupaten/  kota  di  Jawa Tengah.  Hanya dua kabupaten/ kota  yang  melaporkan tidak  terjadi  kematian  akibat  DBD  yaitu  Wonosobo dan Kota Pekalongan (Dinas Kesehatan Provinsi Jawa Tengah Tahun 2016).
Angka  kesakitan/ Incidence  Rate (IR)  di Kabupaten  Banyumas  pada  tahun  2016  sebesar 49,0/100.000 penduduk dengan jumlah kasus 990. Hal ini meningkat tajam bila dibanding tahun 2015 sebesar 13,6/  100.000  penduduk  dengan  jumlah  kasus  264. Angka  IR  di  Kabupaten  Banyumas  tahun  2016  masih diatas  target  nasional  yaitu  <2/100.000  penduduk. Angka kematian/ Case Fatality Rate (CFR) pada tahun 2016  adalah  sebanyak  1  orang  atau  1,6%  (Profil Kesehatan Kabupaten Banyumas Tahun 2016).
Pengendalian  kimia  dengan  menggunakan insektisida  banyak  digunakan  oleh  masyarakat  karena dapat menurunkan populasi nyamuk dengan cepat dan penggunaannya  praktis,  tetapi  penggunaan  insektisida terbukti  banyak  menimbulkan  dampak  negatif,  antara lain  matinya  organisme  bukan  sasaran,  adanya  residu sehingga terjadi pencemaran lingkungan serta munculnya  nyamuk  yang  resisten  (Tarumingkeng, 1992 dalam Agustinus, 2010). Perkembangan resistensi  dapat  terjadi  akibat  seringnya  dilakukan penggunaan insektisida terutama penyemprotan insektisida  ( fogging  focus) pada  wilayah  kasus  DBD. Bertambahnya  jumlah  kasus  DBD,  maka  jumlah fogging focus juga ditingkatkan.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Irawan  Endy Pratama  tahun  2016  di  Desa  Sidamulih  Kecamatan Rawalo,  bahwa  hasil  analisis  statistik  antara  sebelum fogging  focus pertama  dengan  3  hari  setelah fogging focus pertama  menunjukkan  beda  mean  =  .61765 dengan  p=0,474  (p>0,05)  hasil  tersebut  tidak signifikan,  artinya  tidak  ada  beda  densitas  nyamuk sebelum fogging pertama  dengan  3  hari  setelah fogging pertama. Hasil analisis statistik antara sebelum fogging  focus pertama  dengan  3  hari  setelah fogging focus kedua  menunjukkan  beda mean =  -.29412 dengan  p=0,733    (p>0,05),  artinya  tidak  ada  beda densitas  nyamuk  sebelum fogging pertama  dengan  3 hari setelah fogging kedua, 3 hari setelah fogging focus kedua  mengalami  peningkatan.  Hal  itu  menjadi indikasi  adanya  resistensi  nyamuk Aedes  sp terhadap
insektisida  tertentu  di  Desa  Sidamulih  sedangkan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Elsa  Endiyani  tahun 2016  di  Desa  Kedungrandu  Kecamatan  Patikraja diketahui  bahwa,  densitas  nyamuk  2  hari  sebelum fogging petama  71  ekor  dan  6  hari  setelah fogging kedua  24  ekor.  Presentase  penurunan  sebesar  66,1%, dapat  disimpulkan  secara  nyata  pelaksanaan fogging focus dapat  menurunkan  densitas  nyamuk  6  hari setelah  pelaksanaan fogging  focus siklus  kedua,  tetapi berdasarkan hasil uji One Way Anova menunjukkan P value = .056 > α 0,05.  P value = .056, nilai ini hampir atau  mendekati  nilai  α  0,05  kesimpulannya  Ho diterima  karena  perbedaan  tidak  signifikan.  Sehingga secara  statistik  tidak  ada  pengaruh fogging  focus terhadap penurunan densitas nyamuk . Malathion merupakan jenis insektisida golongan  organofosfat  dan  paling  sering  digunakan. Menurut  penuturan  pemegang  program  Demam Berdarah Dengue Dinas  Kesehatan  Kabupaten Banyumas,  malathion  telah  digunakan  sebagai insektisida  sejak  tahun  1991.  Berdasarkan  data  dari Dinas  Kesehatan  Kabupaten  Banyumas  dari  tahun 2010  sampai  dengan  2014  telah  dilakukan  330  kali pelaksanaan fogging  focus di  Kabupaten  Banyumas dimana  lebih  dari  50%  atau  183  kali  diantaranya menggunakan insektisida malathion. Dari total fogging focus dengan  insektisida  malathion  di  Kabupaten Banyumas dari tahun 2010 sampai 2014, 43% atau 78 kali  diantaranya  dilaksanakan  di  Kota  Purwokerto (Dinas  Kesehatan  Banyumas,  2014  dalam  Irawan Endy, 2016). Insektisida organofosfat  melalui aplikasi fogging bekerja dengan menghambat enzim asetilkolinesterase,  sehingga  terjadi  penumpukan asetilkolin  yang  berakibat  terjadinya  kekacauan  pada sistem pengantar impuls saraf ke sel-sel otot. Keadaan ini  menyebabkan  impuls  tidak  dapat  diteruskan,  otot menjadi  kejang,  dan  akhirnya  terjadi  kelumpuhan (paralisis)  dan  akhirnya  serangga  mati.  Penggunaan insektisida  organofosfat  dalam  waktu  lama  dapat berakibat pada resistensi nyamuk terhadap organofosfat  tersebut.  Hal  ini  didasarkan  pada pernyataan Georgio dan Melon dalam Heni prasetyowati  (2016)  yang  menyebutkan  bahwa penggunaan  insektisida  kimia  dalam  jangka  lama dengan  frekuensi  yang  tinggi  secara  bertahap  akan menekan  dan  menyeleksi  serangga  (nyamuk  vektor) sasaran  untuk  menjadi  toleran  sampai  resisten terhadapnya.  Pengelolaan  penggunaan  insektisida untuk  pengendalian  vektor  dalam  satuan  eko- epidemiologi  tidak  bisa  menggunakan  insektisida dengan  jenis  dan  cara  kerja  ( mode  of  action )  yang sama  secara  terus  menerus.  Pergantian  jenis  dan  cara insektisida  untuk  ngendalian  vektor  harus  dilakukan dalam periode waktu maksimal 2-3 tahun atau 4-6 kali aplikasi (Kemenkes, 2013).
Resistensi Ae.  aegypti terhadap  insektisida golongan  organofosfat  telah  dilaporkan  oleh  Heni Prasetyowati  di  Tiga  Kotamadya  DKI  Jakarta  pada tahun 2016, kemudian di Jawa Tengah seperti di Kota Semarang, Kabupaten Kendal, Grobogan dan Purbalingga  dilaporkan  oleh  Sunaryo  dkk  pada  tahun 2014. Hasil penelitian oleh Kartini Lidia dan Elisabeth Levina  Sari  Setianingrum  tahun  2008  tentang  uji biokemis  terhadap  nyamuk Ae.albopictus di  daerah Palu  disimpulkan  bahwa  nyamuk  tersebut  sebagian besar  99,58%  telah  toleran  (resisten sedang) sedangkan  0,92%  telah  resisten  (resisten  tinggi) terhadap  insektisida  organofosfat  (malation  dan temefos).
Diperlukan  adanya  deteksi  resistensi  vektor terhadap  insektisida  di  Kabupaten  Banyumas  adapun beberapa jenis uji resistensi salah satunya uji resistensi dengan  menggunakan  biokimia.  Tujuan  penellitian yaitu mengetahui  status  resistensi  nyamuk Aedes  sp sebagai  vektor  utama  DBD  terhadap  insektisida organofosfat dI Kabupaten Banyumas . . 2. Bahan dan Metode Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian eksploratif untuk mengetahui status resistensi  nyamuk Aedes  Sp terhadap  insektisida golongan  organofosfat  di  Kabupaten  Banyumas  tahun 2017,  karena  di  Kabupaten  Banyumas  belum  pernah dilakukan  uji  resistensi.  Nyamuk  uji  yang  digunakan dari  hasil  penangkapan  dengan  menggunakan  ovitrap, pemasangan  ovitrap  dilakukan  di  Desa  Kedungrandu Kecamatan  Patikraja  dan  Desa  Sidamulih  Kecamatan Rawalo  radius  100  m  dari  rumah  indeks  kasus.  Hasil penangkapan  telur  nyamuk  yang  diperoleh  kemudian dibawa  ke  Laboratorium  Entomologi  Balai  Litbang P2B2  Banjarnegara  untuk  dilakukan  proses rearing hingga  menjadi  nyamuk  dewasa  F1  dan  uji  resistensi nyamuk Aedes Sp terhadap insektisida organofosfat
3. Hasil dan Pembahasan
a. Prevalensi Kasus DBD Analisis
prevalensi dilakukan untuk mengetahui  seberapa  sering  kasus  Demam  Berdarah Dengue (DBD)  terjadi  di  Desa  Kedungrandu Kecamatan Patikraja dan Desa Sidamulih Kecamatan Rawalo.  Prevalensi  di  dapatkan  dari  perhitungan jumlah kasus baru ditambahkan dengan jumlah kasus lama  dibagi  jumlah  penduduk  kemudian  dikalikan dengan 100%. Pada tahun 2015 jumlah kasus DBD di wilayah Kecamatan Patikraja terdapat 32 kasus, salah satu  desa  yang  mempunyai  kasus  DBD  yang  banyak adalah  Desa  Kedungrandu  dengan  5  kasus,  maka prevalensinya  adalah  0,06.  Pada  tahun  2016  kasus DBD  di  wilayah  Kecamatan  Rawalo  terdapat  83
kasus,  salah  satu  desa  yang  mempunyai  kasus  DBD yang  banyak  adalah  Desa  Sidamulih  sebanyak  7 kasus, maka prevalensinya adalah 0,1.
Lokasi  Desa  Kedungrandu  terletak  langsung pada  tepi  jalan  nasional,  dekat  dengan  sungai, sedangkan  Desa  Sidamulih  jauh  dari  tepi  jalan nasional  dan  didaerah  perbukitan.  Ketinggian  tempat di  kedua  desa  tersebut  masih  dibawah  1000  m keadaan tersebut berpotensi menjadi tempat perkembangbiakannya  nyamuk.  Wilayah  dengan ketinggian  di  atas  1.000  m  tidak  dapat  ditemukan nyamuk  karena  pada  ketinggian  tersebut  suhu  terlalu rendah sehingga tidak memungkinkan bagi kehidupan nyamuk  hidup.  Suhu  rata-rata  harian  di  kedua  desa tersebut masih lebih dari 10 o C atau masih kurang dari 40 o C,  pada  suhu  tersebut  nyamuk  masih  mampu berkembangbiak. Kategori curah hujan Desa Kedungrandu dan Desa Sidamulih ter masuk kategori curah hujan sedang karena masih dibawah 3000 mm. Penyebaran  kasus  DBD  di  Desa  Kedungrandu  dan Desa  Sidamulih  sangat  dipengaruhi  oleh  letak geografisnya yang berpotensi mejadi tempat perkembangan vektor DBD yaitu nyamuk.
Gambar 1 . Grafik Bulanan Kasus DBD di Desa Kedungrandu Tahun 2015 (Sumber: Data Puskesmas Patikraja Tahun 2015)
Kasus  DBD  di  Desa  Kedungrandu  tertinggi pada  Bulan  September  dapat  dilihat  pada  gambar  1, hal ini disebabkan kondisi lingkungan di sekitar Desa Kedungrandu  mempunyai  potensi  penularan  kasus DBD.  Lokasi  Desa  Kedungrandu  langsung  berada ditepi  jalan  nasional,  bersebrangan  dengan  kebun maupun  hutan,  dekat  dengan  sungai  dan  banyak blukar.  Kondisi  fisik  rumah-rumah  responden  masih jauh  dari  perilaku  hidup  bersih  dan  sehat,  seperti sampah yang masih berserakan di pekarangan rumah, banyaknya  barang-barang  bekas  yang  sudah  tidak digunakan  di  simpan  dalam  rumah  dan  juga menumpuk  di  sekitar  rumah,  hal  ini  dapat  menjadi tempat  perkembangbiakan  ( breeding  place) dan tempat  tinggal (resting  place) nyamuk . Ehler  dan Steel, 1990 dalam Lintje Boekoesoe, 2013
mengemukakan  bahwa  sanitasi  lingkungan  adalah usaha  mencegah  terjadinya  suatu  penyakit  dengan cara  menghilangkan  atau  mengatur  faktor-faktor lingkungan  yang  berkaitan  dengan  rantai  penularan. Berdasarkan  pengertian  ini  maka  sanitasi  lingkungan mempunyai  peranan  besar  terhadap  terciptanya lingkungan yang sehat. Pada prinsipnya usaha sanitasi bertujuan untuk menghilangkan tempat perkembangbiakan  ( breeding  place) dan  tempat tinggal (resting place) yang sangat dibutuhkan vektor dan binatang pengganggu.
Gambar 2 . Grafik Bulanan Kasus DBD di Desa Sidamulih Tahun 2016
(Sumber: Data Puskesmas Rawalo Tahun 2016)
Kasus  DBD  di  Desa  Sidamulih  tertinggi  pada Bulan  Maret  dan  April  dapat  dilihat  pada  gambar  2, hal itu disebabkan karena pada Bulan Maret dan April adalah peralihan dari musim hujan ke musim kemarau. Curah hujan akan mempengaruhi naiknya kelembaban nisbi udara dan menambah jumlah tempat perkembangbiakkan/ breading  places (Depkes  RI, 2007). Intensitas curah hujan yang lebat diikuti dengan angin  dalam  waktu  yang  relatif  lama,  justru  dapat menghilangkan  tempat  perindukan,  karena  aliran  air yang  deras  membawa  larva  dalam  tempat  perindukan dan pada akhirnya larva akan mati atau hanyut pindah lokasi,  dengan  demikian  siklus  hidup  nyamuk  akan terputus mata rantainya. Hujan dengan intensitas tidak terlalu  deras  dan  diselingi  oleh  panas,  akan memperbanyak tempat perindukan, sehingga memperbesar  kesempatan  nyamuk  untuk  berkembang secara optimal (Depkes RI, 2007). Pengaruh intensitas curah  hujan  lainnya  adalah  bisa  menigkatkan kandungan  uap  air  di  udara,  sehingga  kelembaban akan  lebih  tinggi,  akibatnya  usia  nyamuk  semakin panjang.  Pada  saat  suhu  udara  yang  panas  akan menyebabkan frekuensi nyamuk menggigit lebih cepat karena  tubuh  nyamuk  mengalami  dua  hal  yaitu konveksi  udara  panas  dan  masuknya  udara  panas  saat terjadi  inspirasi  oksigen,  sementara  nyamuk  tidak mempunyai  regulator  pengaturan  kelembaban  tubuh, sistem  kelembaban  sangat  tergantung  pada  cairan haemolymp yang  terdiri  dari  asam  amino,  lemak protein, glukosa dll dengan masuknya udara panas dan
JANFEB MA R APRMEI JUN I JULI AG UST SEP T OKT NO P DES 2015 3 4 4 0 2 2 2 0 9 2 3 1 0 2 4 6 8 10 Jumlah Penderita 0 1 2 3 Jumlah Penderita
konveksi  panas  terhadap  tubuh  nyamuk,  maka evaporasi  cairan haemolymp akan  terjadi  lebih  cepat, dengan  demikian  nyamuk  akan  mengalami  dehidrasi dan  tubuhnya  kering,  inilah  yang  menyebabkan mortalitas nyamuk dalam  jumlah besar (Aris Santjaka, 2013).
Tabel 1 . Pengukuran Kondisi Lingkungan Fisik
No Desa Suhu ( 0 C) Rata-rata Kelembaban (%) Rata-rata 1 Kedungrandu 28 91 2 Sidamulih 31 86 Sumber: Data Primer Terolah
Suhu  rata-rata  optimum  untuk  perkembangan nyamuk  adalah  25 o C-27 o C.  Nyamuk  tidak  tahan  pada suhu  lebih  dari  33 o C  (Manson’s,  2009  dalam  Aris Santjaka,  2013),  karena  siklus  ekstrinsik  agen terganggu  pada  tubuh  nyamuk,  sedangkan  hasil penelitian  dengan  menggunakan  estimasi  33,69 o C itupun  dengan  catatan  sinar  matahari  masuk  ke permukaan  tanah,  sehingga  mengurangi  kelembaban. Hal  ini  disebabkan  karena  kelemahan  fisiologis nyamuk itu sendiri. Nyamuk mengalami dehidrasi dan mati,  sehingga  agen  tidak  dapat  menyelesaikan  siklus ekstrinsiknya  (Aris  Santjaka,  2016).  Pertumbuhan nyamuk  akan  terhenti  sama  sekali  bila  suhu  kurang dari 10 o C atau lebih dari 40 o C. Hasil pengukuran rata- rata suhu di kedua desa dapat dilihat pada tabel 1, hasil pengukuran  tersebut  melebihi  suhu  optimum  untuk perkembangan  nyamuk,  tetapi  masih  dibawah  suhu maksimal yaitu lebih dari 33 o C.
Hasil  pengukuran  dilapangan  menunjukkan rata-rata  kelembaban di  kedua desa dapat dilihat pada tabel  1,  hasil  pengukuran  tersebut  berpotensi  untuk perkembangan  hidup  nyamuk  karena  diatas  60%. Nyamuk  umumnya  menyukai kelembaban diatas 60% (Martens,  1995  dalam  Aris  Santjaka,  2013).  Pada kelembaban  kurang  dari  60%  umur  nyamuk  akan menjadi  lebih  pendek,  sehingga  siklus  sprogoninya tidak terbentuk (Depkes RI, 2007).  Menurut Sukowati (2010)  dalam  Gustina  Fajarwati  (2014)  adanya peningkatan  suhu  dan  kelembaban  udara  dapat mempengaruhi  bahkan  merubah  perilaku  menggigit dan rata-rata angka gigitan ( bitting rate ) suatu populasi nyamuk.  Kondisi  tersebut  juga  memicu  semakin cepatnya  perkembangbiakan  nyamuk  dan  semakin pendeknya masa kematangan parasit nyamuk (Hidriyah, 2010).
b. Indikator Potensi Penularan Kepadatan  populasi  nyamuk  di  suatu  daerah dapat  menggambarkan  potensi  penularan  DBD,  salah satu cara  yaitu  yang bisa dilakukan dengan  mengukur ovitrap  index  (Oi)nya  (WHO,  1997  dalam  Siwi Pramatama,  dkk,  2017).  OI  menggambarkan  jumlah
ovitrap  yang  positif  telur  dari  sejumlah  ovitrap  yang diobservasi.  OI  ini  menjadi  cara  menggambarkan aktivitas  bertelur  nyamuk  dewasa  baik  di  dalam maupun  di  luar  rumah.  Angka  ini  bisa  untuk menambah  informasi  dari  survey  jentik  seperti House Index (HI), Breteau  Index (BI)  dan Container  Index (CI).
Tabel  2 .  Hasil  Pemasangan  Ovitrap  di  Lokasi Penelitian
No Desa Jumlah Rumah Jumlah Ovitrap Ovitrap positif Indeks Ovitrap 1. Kedungran- du 23 46 15 34,7 2. Sidamulih 39 78 10 12,8 Jumlah 62 124 25 47,5
Sumber: Aris Santjaka 2017
Hasil  ovitrap  index  seperti  yang  ditunjukkan pada  tabel  2,  dari  kedua  desa  tersebut  OI  Desa Kedungrandu  1,5  lebih  besar  dibandingkan  dengan Desa Sidamulih.
Tabel 3 .  Densitas Larva Nyamuk
No Desa HI (%) CI (%) BI (%) ABJ (%) 1. Kedungrandu 25 77,78 35 75 2. Sidamulih 7,69 55,55 12,8 92,3 Ratio 3,25 1,40 2.73 0,84 Sumber: Aris Santjaka 2017
Nilai  HI,  CI  dan  BI  Desa  Kedungrandu  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  Desa  Sidamulih,  kecuali nilai  ABJ  Desa  Kedungrandu  yang  lebih  rendah daripada Desa Sidamulih. Nilai ABJ Desa Kedungrandu  yang  relatif  rendah  (kurang  dari  95%) memperbesar  peluang  terjadinya  transmisi  virus  DBD (Hasyimi  dkk,  2005  dalam  Ary  Oktsari  Y.S,  2012), sedangkan nilai ABJ Desa Sidamulih walaupun masih dibawah ≥95% tetapi sudah mendekati angka tersebut, maka  kebersihan  di  lingkungan  yang  diperiksa  lebih ditingkatkan  lagi,  sehingga  resiko  terjadinya  DBD semakin  berkurang.  Berdasarjkan  hasil  perhitungan kepadatan  jentik (density  figure) yang  dihitung berdasarkan  nilai  HI,  CI,  dan  BI  kemudian dikategorikan  menjadi  kepadatan  rendah,  sedang  dan tinggi menggunakan kriteria dari Queensland Government (2011) dalam  Arum  Sih  Joharina  (2014), Desa  Kedungrandu  memiliki  kategori density  figure tinggi  sedangkan  Desa  Sidamulih  memiliki  kategori density figure sedang. Pada CI dan BI semakin banyak jumlah container yang  positif  (+)  jentik  maka  hal  ini dapat  mengindikasi  masyarakat  yang  masih  kurang dalam  mengendalikan  nyamuk Aedes  Sp di  desa tersebut,  apabila  hal  ini  dibiarkan  maka  akan
menjadikan  Desa  Kedungrandu  menjadi  daerah  yang mempunyai resiko penularan tinggi DBD.
Tingginya  indeks  ovitrap,  HI,  BI,  CI  dan density  figure di  Desa  Kedungrandu  harus  menjadi perhatian  karena  dimungkinkan  angka  kepadatan nyamuknya juga akan tinggi. Kepadatan nyamuk yang tinggi  dapat  berpotensi  untuk  menularkan  virus dengue .  Apabila  terdapat  penderita  DBD  di  daerah dengan  kepadatan  nyamuk  yang  tinggi,  potensi  untuk dapat  menyebar  ke  sekelilingnya  juga  tinggi  karena adanya  vektor  yang  kompeten  (Scott  dan  Marrison, 2010 dalam Siwi Pramatama, 2017).
c. Hasil Uji Resistensi Secara Biokimia
Uji  biokimia  untuk  melihat  aktivitas  enzim esterase  yang  berfungsi  mengidentifikasi  mekanisme yang  mendasari  terjadinya  resistensi  serangga terhadap insektisida golongan organofosfat. Kelemahan  dari  uji  biokimia  adalah  hanya  dapat mendeteksi resistensi
berdasarkan golongan insektisida,  tidak  dapat  mendeteksi  berdasarkan  jenis insektisidanya.  Terjadinya  resistensi  ditandai  dengan adanya  peningkatan  aktivitas  enzim  yang  dapat diketahui dari pengukuran absorbansinya.
Mekanisme  resistensi  insektisida  mempunyai suatu  dasar  biokimia  (Brogdon  dan  McAllister,  1998 dalam  Marisa,  2007).  Terdapat  dua  bentuk  biokimia sebagai sisi target resistensi terhadap insektisida yang terjadi  ketika  insektisida  tidak  lagi  berikatan  dengan target  dan  terjadi  detoksifikasi  oleh  enzim  esterase yang mencegah insektisida mencapai sisi target asam- asam  amino  yang  merupakan  pengikat  insektisida pada  sisi-sisi  aktifnya  menyebabkan  insektisida tersebut  kurang  atau  menjadi  tidak  efektif.  Pada serangga  adanya  enzim  esterase  sangat  penting, karena  fungsinya  untuk  mendetoksifikasi  insektisida. Enzim esterase mempunyai sifat bekerja sangat cepat dalam  mengikat  titik  tangkapnya  dan  lambat  dalam memulihkan  kembali  kedalam  keadaan  normal. Secara  ringkasnya,  enzim  ini  lebih  cepat  dalam mengikat  toksin  insektisida  dibandingkan  dengan memetabolisme insektisida tersebut. (Hemingway and Ranson, 2000 dalam Dwi Jayanti Gunandhini dan P.B Wicaksana, 2005).
Uji Biokimia menggunakan 24 sampel nyamuk hasil  dari  pembiakkan  telur  dari  setiap  rumah  yang ditemukannya  telur  dikedua  desa,  13  sampel  rumah dari  Desa  Kedungrandu  dan  11  sampel  rumah  dari Desa  Sidamulih.  Proses  penentuan  aktivitas  enzim esterase  secara  biokimia    yaitu  :  sampel  nyamuk digerus  dengan  menggunakan  alat  homogenisator hingga menjadi homogenat kemudian sampel nyamuk dihomogenisasi  dalam  100  µl  buffer  fosfat  (pH  7,4). Sebanyak  20  µl aliquot dari homogenate masing- masing nyamuk dimasukkan dalam sumuran microplate  lalu ditambahkan  50 µl  substrat  α-nafthyl
asetat.  Selanjutnya  pada  masing-masing  sumuran ditambahkan 50 µl coupling raagent sebagai indikator warna. Microplate diinkubasi  selama  10  menit  pada suhu  ruang.  Intensitas  warna  yang  dihasilkan  pada masing-masing sumuran diukur absorbansinya menggunakan ELISA reader.
Malathion  0,8%  telah  digunakan  sebagai insektisida  sejak  tahun  1991.  Berdasarkan  data  dari Dinas  Kesehatan  Kabupaten  Banyumas  dari  tahun 2010  sampai  dengan  2014  telah  dilakukan  330  kali pelaksanaan fogging  focus di  Kabupaten  Banyumas dimana  lebih  dari  50%  atau  183  kali  diantaranya menggunakan  insektisida  malathion  0.8%.  Dari  total fogging  focus dengan  insektisida  jenis  malathion 0,8%  di  Kabupaten  Banyumas  dari  tahun  2010 sampai  2014,  43%  atau  78  kali  diantaranya dilaksanakan  di  Kota  Purwokerto  (Dinas  Kesehatan Banyumas, 2014 dalam Irawan Endy, 2016).
Tabel 4 . Hasil Uji Resistensi Berdasarkan Desa
Kategori Desa Kedungrandu Sidamulih Σ % Σ % Rentan 3 25 1 9,1 Toleran 8 66,67 10 90,9 Resisten 2 8,33 0 0 Jumlah Sampel 12 100 11 100
Sumber: Aris Santjaka 2017
Hasil penelitian sebagaimana pada tabel 4 yang menunjukkan  resistensi  yaitu  Desa  Kedungrandu sebesar 8,33% sedangkan yang toleran Desa Sidamulih 1,36%  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  Desa Kedungrandu.  Insektisida  golongan  organofosfat  jenis malathion terakhir digunakan pada tahun 2013 di Desa Kedungrandu  dan  di  Desa  Sidamulih,  kemudian  di rotasi  dengan  menggunakan  insektisida  golongan pyretroid  yaitu  jenis  cypermethrin.  Hal  tersebut diketahui  bahwa  insektisida  golongan  organofosfat yaitu  malathion  sudah  tidak  digunakan  lagi  selama  5 tahun,  dengan  demikian  walaupun  insektisida  itu sudah  lama  tidak  digunakan  proses  resistensi  itu bersifat  permanen.  Penelitian  ini  membantah  teori rotasi,  menurut  Kementerian  Kesehatan  tahun  2013 mengenai  pengelolaan  penggunaan  insektisida  yaitu salah  satunya  dengan  melakukan  rotasi  penggunaan insektisida  untuk  mengurangi daya resistensi terhadap insektisida  tersebut  harus  dilakukan  rotasi  dalam periode  waktu  tertentu,  karena  mekanisme  reduksi akan  mengurangi  kandungan  insektisida  dalam  tubuh nyamuk  melalui  sistem  ekskresi.  Tetapi  faktanya berbalik  dengan  menyatakan  resistensi  bersifat permanen.  Permanennya  resistensi  nyamuk  dapat dijelaskan melalui mekanisme biomolekuler.
Mekanisme  biomolekuler  melihat  resistensi  dari  sisi yang  terjadi  pada  rangkaian  molekul  baik  dalam  sel maupun  kromosom.  Penyakit  yang  ditularkan  melalui vektor  mengalami double  burden, beban  pertama berupa tekanan di manusia yaitu dengan menggunakan obat-obatan,  beban  kedua  terletak  di  tubuh  nyamuk yaitu  berupa  harus  menghadapi  jenis  insektisida  yang sudah dipaparkan dalam waktu yang cukup lama (Aris Santjaka,  2016).  Lama  penggunaan  insektisida  yang sama atau sejenis dalam waktu yang lama secara terus menerus  dapat  mempengaruhi  resistensi  terhadap insektisida  Aplikasi  insektisida  yang  terus  menerus akan  merangsang  terjadinya  perubahan  gen-gen  pada tubuh menjadi gen-gen yang resisten. Perilaku nyamuk yang  sering  berimigrasi  ke  daerah  lain  dalam  radius 100  meter  dan  jumlah  insektisida  yang  disemprotkan, hal  ini  berpengaruh  juga  terhadap  evolusi  resistensi nyamuk di daerah tersebut. Pengaruh migrasi ini akan terjadi  jika  nyamuk  yang  mempunyai  gen  resisten bertelur di tempat lain sehingga akan terdapat generasi dari  nyamuk  tersebut  yang  membawa  sifat  resisten (Rizki Anindita dan Tri Wulandari, 2007).
Uji  statistik  digunakan  untuk  mengetahui perbedaaan  nilai  ELISA reader diantara  kedua  desa, sehingga  diketahuii  daya  paparan  keduanya  yang hasilnya sebagai berikut;
Tabel 5 . Hasil Uji Statistik
Desa Rata-rata Panjang Gelombang Signifikansi Kesimpulan Kedungrandu 0,72039 0,565 Ho diterima Sidamulih 0,75255
Sumber: Aris Santjaka 2017
Hasil  uji  statistik  dinyatakan  kandungan  enzim di  kedua  desa  relatif  sama  dengan  nilai  signifikansi 0,565,  sebagaimana  ditunjukkan  pada  tabel  5,  hal  itu disebabkan  karena  di  kedua  desa  tersebut  sudah mengalami  paparan  insektisida  yang  sama  sehingga menghasilkan  enzim  esterase,  terdapat  dua  bentuk biokimia  sebagai  sisi  target  resistensi  terhadap insektisida  yang  terjadi  ketika  insektisida  tidak  lagi berikatan  dengan  target  dan  terjadi  detoksifikasi  oleh enzim  esterase  yang  mencegah  insektisida  mencapai sisi target asam-asam amino yang merupakan pengikat insektisida  pada  sisi-sisi  aktifnya  menyebabkan insektisida  tersebut  kurang  atau  menjadi  tidak  efektif sehingga  nyamuk  tidak  mati  ketika  terkena  paparan insektisida.
Hal  ini  terjadi  juga  di  Kabupaten  Pekalongan, penelitian  yang  dilakukan  oleh  Ikawati  tahun  2016, hasil  pengamatan  aktivitas  enzim  esterase  pada populasi nyamuk dari ketiga desa menunjukkan bahwa persentase  nyamuk  yang  mengalami  peningkatan
aktivitas enzim esterase yang paling besar ada di Desa Simbangkulon  dan  Desa  Kedungwuni  Barat,  yaitu 62,5%  untuk  masing-masing  desa.  Sedangkan  Desa Karangsari  persentase  nyamuk  yang  mengalami peningkatan  aktivitas  enzim  esterasenya  lebih  kecil (50%). Masyarakat di Kabupaten Pekalongan menggunakan  obat  nyamuk  bakar  dengan  bahan  aktif transfluthrin 3%. Selain itu malathion digunakan tahun 1998-2004 dan sudah tidak lagi digunakan sejak tahun 2004.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  populasi  nyamuk Ae.aegypti di  Kabupaten  Pekalongan  sudah  relatif jarang  terpapar  malathion dalam  5  tahun  terakhir. Namun  sifat  resisten  terhadap  malathion masih ditemukan  pada  populasi  nyamuk Ae.aegypti di Kabupaten Pekalongan.
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan, diharapkan hasil penelitian ini sebagai bahan informasi dan  pertimbangan  untuk  Institusi  Pemerintahan Kabupaten  Banyumas  dalam  manajemen  penggunaan insektisida,  apabila  ingin  melakukan  pergantian insektisida  yang  akan  digunakan  selanjutnya  demi keberhasilan  pengendalian vektor DBD.

## 4. Simpulan
Kondisi  lingkungan  fisik  yang  telah  diukur meliputi  suhu  dan  kelembaban.  Rerata  suhu  di  Desa Kedungrandu  28 0 C  sedangkan  di  Desa  Sidamulih 31 0 C.  Rerata  kelembaban  di  Desa  Kedungrandu  91% sedangkan di Desa Sidamulih 86%.
Indeks  larva  nyamuk Aedes  Sp yang  diukur meliputi  HI,  BI,  CI  dan  ABJ,  di  Desa  Kedungrandu HI=  25%,  BI=  35%,  CI=  77,78%  dan  ABJ=  75% sedangkan di Desa Sidamulih HI= 7,69%, BI= 12,8% , CI= 55,55% dan ABJ= 92,3%.
Status  resistensi  nyamuk Aedes  Sp terhadap insektisida  golongan  organofosfat  di  Kabupaten Banyumas  secara  biokimia  didapatkan  hasil  bahwa  di Desa  Kedungrandu  kondisi  nyamuk  kategori  resisten 8,33%,  kategori  toleran  66,67%  dan  kategori  rentan 25%  sedangkan  di  Desa  Sidamulih  kondisi  nyamuk kategori  resisten  0  %,  kategori  toleran  90,9%  dan kategori  rentan  9,1%.  Ditinjau  dari  uji  statistiknya pemeriksaan kandungan enzim esterase di dalam tubuh nyamuk diantara kedua desa tersebut dinyatakan tidak ada perbedaan, artinya paparan insektisida organofosfat  yang  diterima  oleh  nyamuk Aedes  Sp oleh dikedua desa tersebut relatif sama

## 5. Saran
Bagi  instustusi  pemerintahan  Dinas  Kesehatan Kabupaten hendaknya melakukan pergantian insektisida  menggunakan  insektisida  yang  belum pernah  digunakan  di  wilayah  tersebut  dengan  terlebih dahulu  melakukan  pengujian  efektifitas  insektisida tersebut.
Bagi masyarakat, hendaknya tidak sembarangan  memakai  berbagai  jenis  insektisida karena  akan  mengakibatkan  resistensi  nyamuk,  akan lebih baik kalau menggunakan metode  Pemberantasan Sarang Nyamuk  (PSN)  seminggu sekali  dan pencegahan  seperti  3M+  (Menutup,  menguras, menggunakan kembali,  dan  abatisasi).  sebagai tindakan  menghilangkan  tempat breeding  place dan resting place nyamuk vektor DBD.

## Daftar Pustaka
Adang  Iskandar,  dkk.  1985. Pedoman  Bidang  Studi Pemberantasan Serangga dan Binatang Pengganggu Akademi Penilik Kesehatan Teknologi  Sanitasi  (APK-TS) .  Jakarta:  Pusat Pendidikan Tenaga Kesehatan Depkes RI
Agustinus.  2010.  Status  Kerentanan  Nyamuk  Aedes aegypti Terhadap Insektisida Malation Di Kota Surabaya. Thesis .  Bogor:  Institut  Pertanian Bogor, at http://repository.ipb.ac.id/jspui/bitstream/12345 6789/56009/8/Cover.pdf  diakses  pada  tanggal 22 Oktober 2017 pukul 20.20 WIB
Aris  Santjaka.  2013. Malaria  Pendekatan  Model Kausalitas. Yogyakarta: Nuha Medika
.  2016. Zika  dalam  Perspektif  Vektor dan  Upaya  Pengendaliannya. Purwokerto: Politeknik Kesehatan Semarang Jurusan Kesehatan Lingkungan Purwokerto
Arum  Sih  Joharina,  Widiarti.  2014.  Kepadatan  Larva
Nyamuk  Vektor  sebagai  Indikator  Penularan
Demam  Berdarah  Dengue  di  Daerah  Endemis di  Jawa  Timur. Jurnal  Vektor  Penyakit ,  Vol.8 No.2:33-40, at http://ejournal.litbang.depkes.go.id/index.php/v ektorp/article/view/3637 diakses  pada  tanggal
13 Januari 2018 pukul 10.31
Chasan  Sudjain  Kusnadi.  2006. Pengendalian  Vektor dan  Binatang  Pengganggu  (Vecto  Control Manual). Makassar: Institut Penerbitan Jurusan Kesehatan Lingkungan Poltekkes Makassar

## Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  2001.
Pedoman  Ekologi  dan  Aspek  Perilaku  Vektor . Jakarta:  Direktorat  Jenderal  Pengendalian Penyakit Dan Penyehatan Lingkungan
2007. Ekologi  dan  Aspek  Perilaku Vektor . Jakarta: Direktorat Jenderal Pengendalian Penyakit Dan Penyehatan Lingkungan 2013. Pedoman Pengendalian
Demam  Berdarah  Dengue  Di  Indonesia . Jakarta:  Direktorat  Jenderal  Pengendalian Penyakit Dan Penyehatan Lingkungan
Dwi  Anggriani  Wahyu  Mukti.  2016.  Resistensi Nyamuk    Aedes  aegypti  Sebagai  Vektor  DBD Terhadap Bahan Aktif Racun Nyamuk Formulasi Bakar. Skripsi. Semarang: Universitas  Muhammadiyah  Semarang  , at http://repository.unimus.ac.id/28/1/FULL%20T EXT%20fix.pdf  diakses  pada  tanggal  23 Desember 2017 pukul 03.32 WIB
Dwi  Jayanti  Gunandini  dan  P.B.  Wicaksana.  2005.
Peningkatan dan Aktivitas Enzim Asetilkolinesterase Pada Nyamuk Aedes
aegypti yang  Di  Seleksi  dengan  Malation . Jurnal  Entomologi  Indonesia ,  Vol.2  No.2, at https://pei- pusat.org/jurnal/index.php/jei/article/view/294/ D.J.Gunandini%26P.B.Wicaksana.pdfdiakses pada  tanggal  23  Desember  2017  pukul  03.20 WIB
Dyah  Widiastuti,  Bina  Ikawati,  2016.  Resistensi Malathion  dan  Aktivitas  Enzim  Esterase  Pada Populasi  Nyamuk Aedes  aegypti di  Kabupaten Pekalongan. Balai Litbang P2B2 Banjarnegara , Vol.12 No.2:61-70, at http://repository.unimus.ac.id/28/1/FULL%20T EXT%20fix.pdf  diakses  pada  tanggal  02 Januari 2018  pukul 09.22 WIB
Elsa  Endiyani.  2016.  Kohort  Densitas  Nyamuk  Pada
Fogging Focus Di Desa Kedungrandu Kecamatan  Patikraja  Kabupaten  Banyumas Tahun  2016. Karya  Tulis  Ilmiah .  Purwokerto. Poltekkes Kemenkes Semarang
Esther Sri Majawati. 2017. Kerentanan Vektor Demam
Berdarah Dengue Terhadap Insektisida Golongan  Organofosfat .  Jurnal  Kedokteran Meditek , Vol.21 No. 56, at http://ejournal.ukrida.ac.id/ojs/index.php/Ked/a rticle/viewFile/1259/1320  diakses  pada  tanggal 02 Januari 2018 pukul 09.22 WIB
Evi  Sulistyorini.  2016.  Faktor  Penentu  Keberadaan Larva Aedes  Spp .  Pada  Daerah  Endemis Demam  Berdarah Dengue Tertinggi  dan Terendah di kota Bogor. Thesis . Bogor: Institut Pertanian Bogor, at http://repository.ipb.ac.id/handle/123456789/8
2199 diakses pada tanggal 16 April 2018 pukul 07.24 WIB
Firda  Yanuar  Pradani,  Mara  Ipa,  Rina  Marina,  Yuneu Yuliasih. 2011. Status Resistensi Aedes aegypti dengan  Metode  Susceptibility  di  Kota  Cimahi terhadap Cypermethrin . Jurnal Aspirator Vol.3 No.1:18-24,
at http://ejournal.litbang.depkes.go.id/index.php/a spirator/article/view/2955  diakses  pada  tanggal 20 Desember 2017 pukul 09.45 WIB
Gustina  Fajarwati  Sihombing,  Irnawati  Marsaulina,
Taufik  Ashar.  2014.  Hubungan  Curah  Hujan, Suhu  Udara,  Kelembaban  Udara,  Kepadatan Penduduk Dan Luas Lahan Pemukiman Dengan Kejadian  Demam  Berdarah Dengue Di  Kota
Malang Periode Tahun 2002-2011. Jurnal USU Vol 3, No 1, at https://jurnal.usu.ac.id/index.php/lkk/article/vie w/4238 diakses  pada  tanggal  16  April  2018 pukul 06.56 WIB
Hamim  Sudarsono.  2015. Pengantar  Pengendalin Hama Tanaman . Yogyakarta: Plantaxia
Heni  Prasetyowati,  Joni  Hendri,  Tri  Wahono.  2016.
Status  Resistensi Aedes  aegypti (  Linn  .) terhadap Organofosfat di Tiga Kotamadya DKI Jakarta .  BALABA Vol.12  No.1:  23-30 ,  at http://ejournal.litbang.depkes.go.id/index.php/b lb/article/viewFile/4454/4359 diakses pada tanggal 29 Desember 2017 pukul 02.21 WIB Hasan  Boesri,  2011 . Biologi  dan  Peranan Aedes Albopictus (Skuse)  1894  sebagai  Penular Penyakit .  Jurnal  Aspirator Vol.  No.  2, at http://ejournal.litbang.depkes.go.id/index.php/a spirator/article/view/2966  diakses  pada  tanggal 02 Januari 2018 pukul 09.23 WIB
Irawan Endy Pratama. 2016. Kohort Evaluasi Nyamuk
Dewasa Setelah Pelaksanaan Fogging foccus Di Desa Sidamulih Kecamatan Rawalo Kabupaten Banyumas  Tahun  2016. Skripsi. Purwokerto  : Politeknik Kesehatan Kemenkes Semarang.
Kartini  Lidia,  Elisabeth  Levina  Sari  Setianingrum.
2008.  Deteksi  Dini  Resistensi  Nyamuk  Aedes albopictus  Terhadap  Insektisida  Organofosfat Di  Daerah  Endemis  Demam  Berdarah  Dengue Di  Palu  (Sulawesi  Tengah). Jurnal  Media Kesehatan Masyarakat Vol.3 No.2:105-110. , at https://mediakesehatanmasyarakat.files.wordpr
ess.com/2012/06/artikel-6.pdf diakses pada tanggal 22 Desember 2017 pukul 23.32 WIB Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia.  2012.
Petunjuk Teknis Pemberantasan Sarang Nyamuk Demam Berdarah Dengue (PSN DBD) Oleh Juru Pemantau Jentik (Jumantik). Jakarta: Direktorat  Jenderal  Pengendalian  Penyakit  dan Penyehatan Lingkungan Direktorat Pengendalian Penyakit Bersumber Binatang 2012. Pedoman Penggunaan Insektisida  (Pestisida)  Dalam  Pengendalian Vektor . Jakarta: Direktorat Jenderal Pengendalian Penyakit dan Penyehatan Lingkungan Jakarta 2013. Pedoman Pengendalian
Demam  Berdarah  Dengue  Di  Indonesia . Jakarta:    Direktorat  Jenderal  Pengendalian Penyakit Dan Penyehatan Lingkungan
Lintje  Boekoesoe.  2013.  Kajian  Faktor  Lingkungan Terhadap  Kasus  Demam  Berdarah  Dengue (DBD) Studi Kasus Di Kota Gorontalo Provinsi Gorontalo. Laporan  Akhir  Hibah  Disertasi Doktor . Gorontalo: Universitas Negeri Gorontalo, at http://repository.ung.ac.id/riset/show/2/949/kaji an-faktor-lingkungan-terhadap-kasus-demam- berdarah-dengue-dbd-studi-kasus-di-kota- gorontalo-provinsi-gorontalo.html diakses pada tanggal 16 April 2018 pukul 06.33 WIB
Marisa. 2007. Toleransi Larva Nyamuk Dewasa Aedes aegypti  Terhadap  Temefos  dan  Malation  Di Wilayah  Endemik  Kelura  han  Duren  Sawit Jakarta Timur. Skripsi. Bogor: Institut Pertanian
Bogor, at https://text-
id.123dok.com/document/9ynj6gjz-toleransi- larva-dan-nyamuk-dewasa-aedes-aegypti terhadap-temefos-dan-malation-di-wilayah- endemik-kelurahan-duren-sawit-jakarta-timur- 1.html diakses pada tanggal 02 November 2017 pukul 19.30 WIB
Mutia  Dwi  Putri,  Adrial  Adrial,  Lili  Irawati.  2016. Hubungan  Tindakan  Pemberantasan  Sarang Nyamuk  (PSN)  dengan  Keberadaan  Jentik Vektor  Chikungunya  di  Kampung  Taratak Paneh Kota Padang. Jurnal Kesehatan Andalas Vol.5, No. 3 at http://jurnal.fk.unand.ac.id/index.php/jka/article /view/563  diakses  pada  tanggal  16  April  2018 pukul 07.40 WIB
Peraturan  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia Nomor  50  Tahun  2017    tentang  Standar  Baku Mutu  Kesehatan  Lingkungan  dan  Persyaratan Kesehatan untuk Vektor dan Binatang Pembawa Penyakit Serta Pengendaliannya
Rahmayanti  Amini.  2016.  Status  Resistensi  Vektor Demam  Berdarah  Dengue  (Aedes  aegypti) Terhadap  Insektisida  Jenis  Fenitrothion  1%  Di Kabupaten Kudus Provinsi Jawa Tengah Tahun 2017. Karya  Tulis  Ilmiah .  Purwokerto  :
Politeknik Kesehatan Semarang Jurusan Kesehatan Lingkungan Purwokerto
Ratna  Pramuditya.  2016.  Efektivitas  Beberapa  Jenis Atraktan  dalam  Menangkap  Telur  Nyamuk Aedes  Sp  di  Kelurahan  Teluk  Kecamatan Purwokerto  Selatan  Kabupaten  Banyumas Tahun  2016. Skripsi .  Purwokerto  :  Politeknik Kesehatan Kemenkes Semarang
Risky  Supratiwi.  2016 . Eksplorasi  Status  Resistensi Nyamuk  Aedes  aegypti  Terhadap  Insektisida Jenis  Malathion  0,8%  Di  Kabupaten  Kudus Tahun  2017. Karya  Tulis  Ilmiah. Purwokerto  : Politeknik Kesehatan Semarang Jurusan Kesehatan Lingkungan Purwokerto
Rizki  Anindita,  Tri  Wulandari  Kesetyaningsi.  2007.
Deteksi Resistensi Larva Aedes aegypti dengan Uji  Biokimia  Berdasarkan  Aktivitas  Enzim Esterase  di  Kabupaten  Bantul  DIY. Jurnal Mutiara  Medika Vol.  7  No  2:  88-94, at http://journal.umy.ac.id/index.php/mm/article/v iewFile/1661/1705  diakses  pada  tanggal  02 November 2017 pukul 19.30 WIB
Rizki  Anindita,  Tri  Wulandari  Kesetyaningsi.  2007.
Deteksi Resistensi Larva Aedes aegypti dengan Uji  Biokimia  Berdasarkan  Aktivitas  Enzim Esterase  di  Kabupaten  Bantul  DIY. Jurnal Mutiara  Medika Vol.  7  No  2:  88-94, at http://journal.umy.ac.id/index.php/mm/article/v iewFile/1661/1705  diakses  pada  tanggal  02 November 2017 pukul 19.30 WIB
Roy Nusa, Mara Ipa, Titin Delia, Marliah Santi. 2008.
Penentuan Status Resistensi Aedes aegypti Dari Daerah  Endemis  DBD  Di  Kota  Depok Terhadap  Malathion. Jurnal  Bultein  Penelitian Kesehatan Vol. 36 No. 1, at http://ejournal.litbang.depkes.go.id/index.php/B PK/article/view/2154  diakses  pada  tanggal  2
November 2017 pukul 20.34 WIB
Shinta,  Supratman  Sukowati,  Asri  Fauziah . 2008 . Kerentanan  Nyamuk  Aedes  aegypti  Di  Daerah Khusus  Ibukota  Jakarta  dan  Bogor  Terhadap Insektisida  Malathion  dan  Lambdacyhalothrin. Jurnal  Ekologi  Kesehatan Vol  7  No.  1:  722-
731, at
http://ejournal.litbang.depkes.go.id/index.php/je k/article/view/1648  diakses  pada  tanggal    02 November 2017 pukul 19.30 WIB
Siwi  Pramatama  Mars  Wijayanti,  Dian  Anandari, Arrum Firda Ayu Maqfiroch. 2017. Pengukuran Ovitrap
Index (Oi) Sebagai Gambaran
Kepadatan  Nyamuk  Di  Daerah  Endemis Demam  Berdarah Dengue (DBD)  Kabupaten Banyumas Jurnal  Kesmas  Indonesia ,  Vol.  9 No. 1, Hal 56-63, at
http://jos.unsoed.ac.id/index.php/kesmasindo/ar ticle/view/228/200 diakses  pada  tanggal  19 April 2018 pukul 06.54 WIB
Soedarmo,  Sumarmo  Sunaryo  Poorwo.  2009. Demam Berdarah  (Dengue)  Pada  Anak .  Jakarta:
Penerbit Universitas Indonesia(UI-Press)
Soedarto.  2012. Demam  Berdarah  Dengue .  Jakarta: Sagung Seto
Soegeng  Soegijanto.  2006. Demam  Berdarah  Dengue edisi  kedua .  Surabaya  :  Airlangga  University Press
Sunaryo,  Bina  Ikawati,  Rahmawati,  Dyah  Widiastuti. 2014.  Status  Resistensi Vektor  Demam Berdarah  Dengue  (Aedes  aegypti)  Terhadap Malathion  0,8%  dan  Permethrin  0,25%  Di
Provinsi Jawa Tengah. Jurnal Ekologi Kesehatan , Vol. 12, No.2,
at http://ejournal.litbang.depkes.go.id/index.php/je k/article/view/3952  diakses  pada  tanggal  22 Oktober pukul 10.31 WIB
Suri  Dwi  Lesmana.  2010.  Resistensi  Aedes  aegypti terhadap  Insektisida  Golongan  Organofosfat. Jurnal  Ilmu  Kedokteran Vol.4  No.1, at https://ejournal.unri.ac.id/index.php/JIK/article/ view/4246/4075  diakses  pada  tanggal  03 Januari 2018 pukul 12.36 WIB
Tri  Cahyono.  2018. Panduan  Penulisan  Skripsi. Purwokerto  :  Kementerian  Kesehatan  RI Politeknik Kesehatan Jurusan Kesehatan Lingkungan Purwokerto