OPTIMASI TEKANAN DAN RASIO REFLUKS PADA DISTILASI FRAKSINASI VAKUM TERHADAP MUTU EUGENOL DARI MINYAK DAUN CENGKEH ( Eugenia caryophyllata )
Mariam Malahayati 1 , Rahmawati 2
Jurusan Teknologi Pangan, Universitas Sahid, Jakarta rahmafarasara@usahid.ac.id 2
ABSTRAK . Eugenol merupakan komponen utama minyak daun cengkeh dan memiliki nilai ekonomis tinggi. Hal ini dipengaruhi oleh tingkat kemurniannya. Untuk mendapatkan eugenol dengan tingkat kemurnian tinggi dan memenuhi standar United States Pharmacopeia / USP (2010)  yaitu  minimal  99,5%,  maka  pada  penelitian  ini  dipelajari  tekanan  dan  rasio  refluks pada  distilasi  fraksinasi  vakum  minyak  daun  cengkeh.  Metode  yang  digunakan  adalah eksperimen  dengan  variabel  tekanan  (4, 6,  10  mmHg)  dan  rasio  refluks  (10/5, 20/4, 40/4). Hasil  menunjukkan  bahwa  tekanan  mempengaruhi  kemurnian,  rendemen,  bobot  jenis, indeks bias, dan putaran optik eugenol secara nyata (α = 0,01). Tekanan distilasi fraksinasi vakum  terbaik  adalah  10  mmHg  dengan  rasio  refluks  20/4  dan  menghasilkan  eugenol beraroma  khas  cengkeh  dan  tidak  berwarna  dengan  kemurnian  99,65%  (sesuai  standar USP),  rendemen  64,61%,  bobot  jenis  1,0656,  indeks  bias  1,5407,  putaran  optik  -0,10, kelarutan eugenol dalam etanol 70% sebesar 1:1.
Kata kunci: eugenol, tekanan, rasio refluks, distilasi fraksinasi

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan
negara penghasil  cengkeh,  terutama  di  daerah  - daerah  sentra  produksi  cengkeh  seperti pulau  Jawa.  Di  pulau  Jawa  luas  areal penanaman  cengkeh  mencapai  ±  50.000 ha,  di  mana  diperkirakan  terdapat  daun cengkeh  yang  gugur  dengan  potensi sekitar  ±  305 ton  per  hari. Daun cengkeh dikenal  menghasilkan  berbagai  jenis minyak.  Dari  daun  yang  gugur  ini  dapat diperoleh  sekitar  4,4  ton  minyak  daun cengkeh  per  hari  (Balittro,  2008).  Minyak daun cengkeh tersusun dari 23 komponen yang berbeda dengan
komponen    utama    yaitu    eugenol    (70- 90%) dan β - kariofilen   (5-12%) (Ketaren, 1985).
Eugenol  adalah  komponen  utama minyak daun cengkeh berupa  cairan tidak berwarna, beraroma khas, dan
mempunyai  rasa  pedas  yang    banyak dimanfaatkan  dalam  industri fragrance dan flavor karena    memiliki    aroma    yang khas  dan  industri farmasi  karena  bersifat antiseptic,  sedangkan β -kariofilen  adalah pengotor  yang  harus   dihilangkan   karena menurunkan  tingkat      kemurnian  minyak cengkeh (Ketaren, 1985).
Menurut standar United States Pharmacopeia/USP (2010),  untuk  dapat diperdagangkan secara internasional, eugenol harus memiliki tingkat
kemurnian  minimal  99,5%.  Selain  itu, dengan  meningkatnya  kemurnian  eugenol maka  harga  jualnya  juga  meningkat.
Minyak  daun  cengkeh  dengan  kadar eugenol kurang dari 70%
diperdagangkan  dengan  harga  US$  4- 5/kg  di  dalam  negeri,  sedangkan  yang berkadar  98-99% diperdagangkan  dengan harga  US$ 30-40/kg (± 8  kali   lebih tinggi) (Kurnia et  al. ,  2010).  Melihat  potensi eugenol  dan  didukung  oleh nilai  ekonomi yang  lebih  tinggi  dibandingkan  bahan bakunya  (minyak  daun  cengkeh),  maka perlu  dilakukan  pemisahan  atau  isolasi eugenol dari minyak daun cengkeh.
Salah satu cara pemisahan komponen  minyak  atsiri  adalah  distilasi fraksinasi vakum. Distilasi fraksinasi minyak  atsiri  adalah  pemisahan    minyak
atsiri menjadi beberapa fraksi berdasarkan  perbedaan  titik  didihnya. Minyak  atsiri  tidak  difraksinasi  pada tekanan  atmosfir  tetapi  dalam  keadaan vakum,  karena  pada  tekanan  dan  suhu yang tinggi dapat menyebabkan dekomposisi  dan  resinifikasi,  sehingga distilat  mempunyai  bau  dan  sifat  fisiko kimia  yang berbeda dengan minyak murni. Penggunaan  tekanan  tidak  lebih  dari  10 mmHg  pada  distilasi  fraksinasi  vakum, akan  menghindari  minyak  dari  kerusakan akibat suhu   yang tinggi (Guenther,  1990). Distilasi fraksinasi vakum dilengkapi dengan  unit  refluks,  yang  digunakan untuk  meningkatkan  kemurnian  fraksi yang  diperoleh.  Perbandingan  antara jumlah  kondensat  yang  dikembalikan  ke kolom  (jumlah  refluks)  persatuan  waktu terhadap  jumlah  distilat  yang  diambil persatuan  waktu  disebut  rasio  refluks (Handojo,  1995).  Menurut  Furniss et  al .
(1984), faktor-faktor penting yang mempengaruhi pemisahan campuran menjadi  fraksi  murni  salah  satunya adalah  rasio  refluks.  Rasio  refluks  yang baik  menurut  hasil  penelitian  Haznan (2002)  adalah  10/5,  20/4,  dan  40/4. Kondisi  ini  menghasilkan  kemurnian  yang tinggi  dan  rendemen  yang  besar  pada pemurnian  minyak  pala,  minyak  sereh, dan  minyak  nilam  serta  minyak  cengkeh (eugenol hitam).
Berdasarkan  hal  tersebut,  penelitian ini  dilakukan  untuk  melihat  seberapa besar  pengaruh  tekanan  dan  rasio  refluks pada  distilasi  fraksinasi  vakum  minya k da un cen gkeh sehingga diperoleh eugenol  dari  minyak  daun  cengkeh  yang memenuhi  standar  kemurnian  eugenol USP (2010)
yaitu minimal 99,5%.
Tekanan yang digunakan adalah 4,  6, dan 10  mmHg  dengan  rasio  refluks  10/5, 20/4,  dan  40/4  pada  distilasi  fraksinasi vakum terhadap mutu eugenol dari minyak daun  cengkeh.   Mutu  eugenol ditentukan melalui uji kimia yaitu kemurnian eugenol;  uji  fisik  yaitu  rendemen,  bobot jenis,  indeks  bias,  putaran  optik,  dan kelarutan  eugenol dalam  etanol 70%; dan uji  organoleptik  yaitu  warna  dan  aroma eugenol.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Bahan dan Alat
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah minyak  daun  cengkeh  dan  bahan-bahan kimia untuk analisis.  Alat-alat yang digunakan adalah distilasi fraksinasi
vakum,  timbangan  analitik,  penangas  air,
alat - alat gelas, piknometer, refraktometer, polarimeter, dan gas kromatografi ( GC ).

## Metode Penelitian
Penelitian  dilakukan  dalam  dua  tahap.
Tahap I bertujuan mengetahui karakteristik minyak daun cengkeh
sebelum dimurnikan. Tahap II mempelajari pengaruh  tekanan  dan  rasio  refluks  pada distilasi  fraksinasi  vakum  terhadap  mutu eugenol  dari  minyak  daun  cengkeh  yang dihasilkan.  Rancangan  penelitian  yang digunakan      adalah  rancangan  lengkap faktorial  3x3  dengan  tiga  kali  ulangan. Alur proses disajikan pada Gambar 1.

## Metoda  Analisa
Proses  distilasi  fraksinasi  vakum  eugenol minyak daun cengkeh terdiri dari:
(1)  Persiapan pompa vakum
Persiapan dilakukan dengan mengisi tabung  trap  dengan  campuran  es  dan garam  untuk  mencegah  tersedotnya  fase gas  ke  dalam  pompa  vakum,  kemudian menghubungkan  alat  distilasi  dengan listrik  1000-1500  Watt  sehingga  unit distilasi  dapat  dinyalakan  pada  panel kontrol.

## (2)  Pengisian labu umpan
Sebanyak  2,5  L  minyak  cengkeh dimasukkan ke dalam labu umpan dengan kapasitas  labu  sebesar  5  L.  Labu  umpan ini  dilengkapi  dengan  motor  dan  batang pengaduk  agar  minyak  tetap  homogen (kecepatan  1000  rpm);  jaket  pemanas sebagai  sumber  panas  serta  menjaga kestabilan  suhu;  dan  termokopel  umpan untuk mengontrol suhu distilasi.

## (3)  Pemanasan
Minyak  cengkeh  dipanaskan  selama ± 3 jam pada tekanan vakum (4, 6, dan 10 mmHg).

## (4)  Pendinginan
Kondensor  merubah  uap    minyak yang  keluar  dari  kolom  distilasi  menjadi cairan.  Air  yang  digunakan  di  kondensor sebagai  fluida  pendingin  berasal  dari  bak penampungan  air  dengan  suhu  15-16 0 C.
Persiapan pompa vakum P = 6 mmHg P = 10 mmHg Pengisian labu umpan Pemanasan ± 3 jam P = 4 mmHg Pemurnian dengan rasio refluks 10/5, 20/4, 40/4
Pengambilan destilat
Eugenol murni

## Gambar 1. Alur proses distilasi fraksinasi vakum eugenol dari minyak daun cengkeh (5)  Pemurnian
Pemurnian  dilakukan  dalam  unit refluks.  Rasio  refluks  yang  digunakan 10/5,20/4, dan 40/4. Rasio refluks menunjukkan perbandingan waktu
pengembalian  kondensat  ke  dalam  kolom fraksinasi  dan  kondensat  yang  ditampung sebagai  distilat.  Rasio  refluks  10/5  berarti selama  10  detik  pertama  katup  magnetis pengatur  pengeluaran  kondensat  tertutup dan  kondensat  dikembalikan  ke  kolom fraksinasi,  pada  saat  tersebut  proses pemisahan komponen berlangsung kembali,  kemudian  5  detik  berikutnya katup
tersebut
terbuka, sehingga
kondensat  keluar  dan  masuk  ke  dalam wadah penampung sebagai distilat. Distilat yang keluar merupakan fraksi-fraksi (eugenol  murni  dan  residu)  yang  telah tertampung  di  dalam  penampung  fraksi dikeluarkan  untuk  diukur  volume  dan dianalisa sifat-sifat fisika dan kimianya.
HASIL PENELITIAN

## DAN PEMBAHASAN

## Penelitian  Tahap 1
Karakteristik  minyak  daun  cengkeh sebelum  dimurnikan  disajikan  pada  Tabel 1.
Tabel 1. Karakteristik minyak daun cengkeh
No. Jenis Uji Satuan Nilai SNI 06-2387-2006 1 . Keadaan a. Warna b. Aroma/Bau - - Coklat gelap Khas minyak cengkeh Kuning – coklat tua Khas minyak cengkeh 2 . Berat jenis 20  C/20  C - 1 , 0 2 8 2 1.025 – 1.049 3 . Indeks Bias ( n D20) - 1 , 5 2 8 9 1.528 – 1.535 4 . Putaran optic - Tidak terbaca (-1.3o) – (0.0o) 5 . Kelarutan dalam etanol 70% - 1:2 jernih 1:2 jernih 6 . Total eugenol (GC method) % 7 3 , 7 0 Minimum 78 7. β-kariofilen % 2 1 , 3 9 Maksimum  17 Dari Tabel  1 terlihat bahwa
minyak  daun  cengkeh  yang  digunakan belum  memenuhi  SNI  minyak  daun cengkeh,  yaitu  untuk  kadar  eugenol, kadar β -kariofilen dan putaran optik.  Hal ini  karena  adanya  ion  logam  yang berasal  dari  alat  penyulingan  yang terbuat  dari  drum  besi  dan  bahan  baku yang  kotor  (Brahmana,  1991;  EOA, 1975;  Rusli,  1991),  yang  dapat  bereaksi dengan senyawa dalam minyak, terutama  eugenol.  Logam-logam  yang terdapat  dalam  minyak  daun  cengkeh antara  lain  Fe,  Mg,  Mn,  Zn,  dan  Pb (Marwati et  al., 2005).  Logam-logam tersebut  berasal  dari  daun  dan  alat penyuling.  Akumulasi  logam  dalam  daun terjadi  karena  penyerapan  logam  dari tanah  melalui  akar  dan  penyerapan logam  dari  udara  melalui  stomata  daun (Pahlesson, 1989).

## Penelitian Tahap 2
1.  Kemurnian eugenol Kemurnian  eugenol  hasil  distilasi fraksinasi  vakum  pada  tekanan  dan  rasio refluks  berbeda  disajikan  pada  Tabel  2. Hasil  penelitian  menunjukkan  kemurnian eugenol  berkisar  antara  89,30%  sampai 99,65%.  Kemurnian  eugenol  cenderung meningkat dengan semakin tinggi tekanan dan rasio refluks sampai 20/4. Pada  rasio refluks 40/4 kemurnian eugenol menurun.
Hasil  Anova  menunjukkan  bahwa tekanan  dan  rasio  reflux  memengaruhi kemurnian eugenol secara nyata (α=0,01), namun tidak ada interaksi antara keduanya. Hasil uji lanjut Duncan menunjukkan  bahwa  rasio  refluks  10/5, 20/4  dan  40/4  memengaruhi  kemurnian eugenol  secara  berbeda,  sedangkan tekanan  4  dan  6  mmHg  menghasilkan kemurnian  eugenol  yang  sama,  namun berbeda dengan tekanan 10 mmHg Hal ini
karena  eugenol  yang  bertitik  didih  tinggi belum  tersuling  secara  sempurna  pada tekanan  4  dan  6  mmHg.  Titik  didih eugenol  pada  tekanan  4  dan  6  mmHg berturut-turut adalah 106,70  C dan
114,15  C.  Hal  ini  sejalan  dengan  hasil penelitian    Guenther  (1990),  bahwa  suatu
fraksi  yang  mengandung  seskuiterpen (C 15 )  yang  mendidih  pada  suhu  250  C pada tekanan atmosfir, sebaiknya disuling dengan  tekanan  10  mmHg  pada  suhu sekitar  120  C  agar  komponen  minyak yang  bertitik  didih  tinggi  tersuling  secara sempurna dalam keadaan vakum.
Tabel 2. Nilai rata-rata kemurnian eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda
Rasio Refluks Tekanan (mmHg) Rata-rata 4 6 10 10/5 95,55 95,66 96,85 96,02 b 20/4 98,45 98,51 99,65 98,87 a 40/4 89,30 89,60 90,56 89,82 c Rata-rata 94,43 b 94,59 b 95,69 a
Keterangan: kode huruf sama berarti tidak berbeda nyata antara perlakuan dan kode huruf berbeda berarti berbeda nyata antara perlakuan (α=0,01)
Tabel 2 menunjukkan bahwa kemurnian  eugenol  tertinggi  diperoleh pada rasio refluks 20/4 dan terendah rasio refluks  40/4.  Hal  ini  karena  saat  distilat dikembalikan  ke  kolom  terjadi  kontak antara uap dengan cairan secara berulang-ulang  dengan  dengan  waktu yang  lebih  lama  dibandingkan  dengan perlakuan  lain  (40  detik).  Kondisi  ini menyebabkan beberapa komponen terdegradasi menjadi komponen lain sehingga kemurnian eugenol lebih rendah dibandingkan rasio refluks lainnya (Agustian et  al .,  2007).  Hal  ini  sejalan dengan  Cook  dan  Cullen  (1987),  yaitu semakin  tinggi  nilai  rasio  refluks,  maka semakin besar efisiensi proses pemisahan, tetapi peningkatan rasio refluks  di  atas  nilai  tertentu  tidak  akan menaikkan tingkat pemisahan atau efisiensi  kolom,  sehingga  rasio  refluks seharusnya  divariasikan  sesuai  dengan tingkat  kesulitan  pemisahan  fraksinasi. Kemurnian eugenol yang memenuhi standar  USP  (2010)  dihasilkan  pada tekanan  10  mmHg  dan  rasio  refluks  20/4, yaitu 99,65%.
2.  Rendemen Rendemen eugenol adalah perbandingan bobot eugenol yang
diperoleh  dari  tiap  satuan  bobot  minyak daun cengkeh yang digunakan. Hasil rata- rata  rendemen  eugenol  dengan  tekanan dan  rasio  refluks  berbeda  disajikan  pada Tabel 3.
Tabel  3  menunjukkan  rendemen eugenol berkisar antara 51,34% - 69,56%. Rendemen  eugenol  cenderung  meningkat dengan  semakin  rendahnya  tekanan  dan cenderung  menurun  dengan  semakin tingginya  rasio  refluks.  Hasil  Anava menunjukkan  bahwa  tekanan  dan  rasio reflux berbeda memengaruhi rasio eugenol  secara  nyata  (α=0,01).  Ada interaksi diantara keduanya dalam memengaruhi rendemen eugenol.
Nilai  rata-rata  rendemen  eugenol tertinggi  diperoleh  dari  perlakuan  rasio refluks  terendah  (10/5)  dan  sebaliknya rata-rata  rendemen  eugenol  terendah diperoleh  dari  perlakuan  rasio  refluks tertinggi  (40/4).  Hal  ini  karena  semakin tinggi  rasio  refluks,  maka  jumlah  distilat yang ditampung dalam wadah penampung semakin  rendah  dalam  satuan  waktu, sehingga  perlakuan  rasio  refluks  yang lebih  besar  relatif  menghasilkan  fraksi dengan rendemen yang lebih kecil (Furniss et  al .,  1984).  Rendemen  eugenol tertinggi dihasilkan pada tekanan 4 mmHg dan rasio refluks 10/5.
Tabel 3. Nilai rata-rata rendemen eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda Rasio Refluks Tekanan (mmHg) Rata-Rata 4 6 10 10/5 69,56 a 69,35 b 68,24 c 69,05 a 20/4 65,67 d 65,57 d 64,61 e 65,28 b 40/4 52,77 f 52,40 g 51,34 h 52,17 c Rata-Rata 62,67 a 62,44 b 61,40 c
Keterangan: kode huruf sama berarti tidak berbeda nyata antara perlakuan dan kode huruf berbeda berarti berbeda nyata antara perlakuan (α=0,01
3.  Bobot jenis
Nilai  rata-rata  bobot  jenis  eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda disajikan  pada  Tabel  4,  di  mana  bobot jenis  eugenol  berkisar  antara  1,0502-
1,0675.  Bobot  jenis  eugenol  cenderung meningkat dengan semakin tinggi  tekanan dan  rasio  refluks  sampai  20/4  yang selanjutnya menurun.
Tabel 4. Nilai rata-rata bobot jenis eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda
Rasio Refluks Tekanan (mmHg) Rata-Rata 4 6 10 10/5 1,0604 1,0610 1,0633 1,0616 b 20/4 1,0644 1,0649 1,0675 1,0656 a 40/4 1,0502 1,0510 1,0535 1,0516 c Rata-Rata 1,0583 c 1,0590 b 1,0614 a
Keterangan: kode huruf sama berarti tidak berbeda nyata antara perlakuan dan kode huruf berbeda berarti berbeda nyata antara perlakuan (α=0,01)
Hasil  Anova  menunjukkan  bahwa tekanan dan rasio refluks berbeda memengaruhi  bobot  jenis  eugenol  secara nyata (α = 0,01), namun tidak ada interaksi dari  keduanya  dalam  memengaruhi  bobot jenis  eugenol.  Meningkatnya  bobot  jenis eugenol dipengaruhi oleh kemurnian eugenol  yang  juga  meningkat  dengan semakin  tinggi  tekanan.  Demikian  juga rasio  refluks  sampai  20/4  menghasilkan bobot jenis eugenol yang semakin meningkat.  Hal  ini  sejalan  dengan  nilai kemurnian  eugenol.  Bobot  jenis  eugenol berhubungan  dengan  berat  komponen yang  terkandung  didalamnya.  Semakin besar fraksi berat  yang  terkandung  dalam minyak,  semakin  besar  pula  nilai  bobot jenis  atau  densitasnya.  Biasanya,  bobot jenis komponen hidrokarbon teroksigenasi lebih besar dibandingkan dengan hidrokarbon  tak  teroksigenasi,  sehingga semakin  tinggi  kemurnian  eugenol  akan menyebabkan bobot jenis minyak semakin tinggi,  karena  eugenol  merupakan  fraksi
berat  dalam minyak  daun cengkeh (Armando,  2009).  Bobot  jenis  yang memenuhi  standar USP (2010)  diperoleh pada  tekanan  10  mmHg  dan  rasio  refluks 20/4, yaitu 1,0656.
4.  Index bias
Nilai  rata-rata  indeks  bias  eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda disajikan  pada  Tabel  5.  Hasil  penelitian menunjukkan indeks bias eugenol berkisar antara  1,5332  -  1,5390,  di  mana  indeks bias eugenol cenderung meningkat dengan  semakin  tinggi  tekanan  dan  rasio refluks sampai 20/4. Hasil Anava menunjukkan  bahwa  tekanan  dan  rasio refluks  memengaruhi  index  bias  minyak eugenol,  dan  ada  interaksi  diantaranya dalam  memengaruhi  index  bias  secara nyata  ( α=0,01).  Indeks  bias  eugenol tertinggi  diperoleh  dari  tekanan  tertinggi (10  mmHg)  dan  terendah  dari  tekanan terendah  (4  mmHg).  Semakin  tinggi
tekanan menghasilkan kemurnian eugenol
semakin meningkat.
Tabel 5. Nilai rata-rata indeks bias eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda
Rasio Refluks Tekanan (mmHg) Rata-Rata 4 6 10 10/5 1,5381 c 1,5384 bc 1,5390 b 1,5385 b 20/4 1,5399 a 1,5401 a 1,5407 a 1,5403 a 40/4 1,5332 e 1,5339 de 1,5346 d 1,5339 c Rata-Rata 1,5371 c 1,5375 b 1,5381 a
Keterangan: kode huruf sama berarti tidak berbeda nyata antara perlakuan dan kode huruf berbeda berarti berbeda nyata antara perlakuan (α=0,01)
Semakin  tinggi  rasio  refluks  sampai 20/4  menghasilkan  indeks  bias  eugenol yang  semakin  meningkat.  Menurunnya index  bias  pada  rasio  refluks  40/4 dipengaruhi oleh kemurnian eugenol yang menurun pada kondisi ini.
Indeks bias merupakan perbandingan antara kecepatan cahaya di dalam udara dengan kecepatan cahaya di dalam  zat  tersebut  pada  suhu  tertentu. Sama  halnya  dengan bobot  jenis  di  mana komponen  penyusun  minyak  atsiri  dapat memengaruhi nilai indeks biasnya.
Semakin  banyak  komponen  hidrokarbon teroksigenasi ikut tersuling maka
kerapatan medium minyak akan bertambah  sehingga  cahaya  yang  datang akan  lebih  sukar  dibiaskan.  Hal  ini menyebabkan  indeks  bias  minyak  lebih besar.  Sehingga  kemurnian  eugenol  yang meningkat  menyebabkan  indeks  bias minyak  semakin  tinggi  (Armando,  2009). Indeks  bias  eugenol  yang  memenuhi standar USP (2010)  (1,5400-1,5420)
dihasilkan  pada  tekanan  10  mmHg  dan rasio refluks 20/4 (1,5407).
5.  Putaran optik
Nilai  rata-rata  putaran  optik  eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda dapat  dilihat pada Tabel 6. Hasil menunjukkan putaran optik eugenol berkisar antara (-1,23  ) - (-0,10  ), di mana putaran optik cenderung meningkat dengan  semakin  tingginya  tekanan  dan rasio  refluks  sampai  20/5.  Hasil  analisis ragam  menunjukkan  tekanan  dan  rasio reflux mempengaruhi putaran optik eugenol  berbeda  secara  nyata (α  =  0,01) dan  ada  interaksi  antara  keduanya  dalam mempengaruhi  putaran  optik  eugenol. Semakin  tinggi  tekanan  menghasilkan putaran  optik  eugenol  yang  semakin meningkat,  hal  ini  dipengaruhi  oleh  nilai kemurnian  eugenol  yang  juga  meningkat dengan semakin tinggi tekanan.
Tabel 6. Nilai rata-rata putaran optik eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda
Rasio Refluks Tekanan (mmHg) Rata-Rata 4 6 10 10/5 -0,57 o d -0,47 o cd -0,40 o c -0,48 o b 20/4 -0,27 o b -0,23 o b -0,10 o a -0,20 o a 40/4 -1,23 o g -1,00 o f -0,83 o e -1,02 o c Rata-Rata -0,69 o c -0,57 o b -0,44 o a
Keterangan: kode huruf sama berarti tidak berbeda nyata antara perlakuan dan kode huruf berbeda berarti berbeda nyata antara perlakuan (α=0,01)
Putaran  optik  eugenol  meningkat sampai rasio refluks 20/4, namun menurun pada rasio refluks 40/4. Hal ini dipengaruhi
oleh  kemurnian  eugenol  yang  meningkat sampai  rasio  refluks  20/4  dan  menurun pada rasio refluks 40/4. Jika suatu cahaya
terpolarisasi  dilewatkan  pada  senyawa optik aktif maka bidang cahaya terpolarisasi tersebut akan berputar. Besar arah berputarnya bidang cahaya terpolarisasi dinyatakan  dengan  nilai putaran  optik.  Sebagian  besar  minyak atsiri  memiliki  sifat  memutar  bidang polarisasi  ke  arah  kanan  ( dextrorotary ) atau  ke  arah  kiri  ( laevorotary )  jika ditempatkan dalam cahaya yang dipolarisasikan.  Menurut  Ketaren  (1985), seskuiterpenal  berupa  senyawa  naftalen (C 10 H 8 )  dalam  minyak  daun  cengkeh merupakan  persenyawaaan  optik  aktif. Senyawa  ini  merupakan  turunan  dari seskuiterpen (kariofilen)  dan  mempunyai kemampuan  memutar  bidang  polarisasi cahaya ke arah kiri ( laevorotatory ). Hal ini menyebabkan  semakin  rendah  kemurnian
eugenol  (kandungan  kariofilen  masih  ada dalam  jumlah  tertentu)  maka  nilai  putaran optik  eugenol  cenderung  semakin  negatif. Perlakuan  yang  menghasilkan  putaran optik sesuai standar USP (2010) ((-0,5 o ) – (+0,5 o )),  adalah  tekanan  10  mmHg  dan rasio refluks 20/4 (-0,10 o ).
6.  Kelarutan  eugenol  dalam  etanol 70%
Hasil  rata-rata  kelarutan  eugenol dalam etanol 70% disajikan  pada Tabel 7. Tabel 7 menunjukkan bahwa semua rata – rata  kelarutan  eugenol  dalam  etanol  70% adalah 1:1, artinya 1  volume  (ml)  eugenol larut dalam 1 volume (ml) etanol 70% dan membentuk larutan yang jernih.
Tabel 7. Nilai rata-rata kelarutan eugenol dalam alkohol 70% dengan tekanan dan rasio
refluks berbeda (ml eugenol : ml etanol) Rasio Refluks Tekanan (mmHg) Rata-Rata 4 6 10 10/5 1:1 1:1 1:1 1:1 20/4 1:1 1:1 1:1 1:1 40/4 1:1 1:1 1:1 1:1 Rata-Rata 1:1 1:1 1:1 1:1
Standar  kelarutan  eugenol  menurut USP (2010)  dalam  etanol  70%  maksimal 1:2.  Berdasarkan  hal  tersebut,  maka seluruh  perlakuan  memenuhi  standar kelarutan  eugenol USP  (2010). Minyak atsiri  dapat  larut  dalam  etanol  pada perbandingan  dan  konsentrasi  tertentu. Dengan  demikian,  dapat  diketahui  jumlah dan  konsentrasi  etanol  yang  dibutuhkan untuk  melarutkan  sejumlah  minyak  atsiri secara sempurna. Umumnya minyak atsiri yang  mengandung  senyawa  hidrokarbon teroksigenasi  lebih  mudah  larut  daripada minyak atsiri yang mengandung hidrokarbon (terpen). Semakin  tinggi kandungan  terpen,  semakin  rendah  daya larutnya  atau  semakin  sukar  larut.  Hal tersebut  disebabkan  senyawa  terpen merupakan  senyawa  nonpolar  yang  tidak mempunyai  gugus  fungsional.  Hal  ini menyebabkan kemurnian eugenol
semakin rendah karena masih mengandung  kariofilen  dalam  jumlah tertentu. Hal ini
menghasilkan perbandingan  kelarutan  eugenol  dalam etanol  70%  semakin  tinggi.  Daya  larut eugenol  yang  rendah  dalam  etanol  70%, menunjukkan  bahwa  minyak  tersebut masih  mengandung  sesquiterpen  dalam jumlah  tertentu.  Pencampuran  minyak atsiri  dengan  bahan –  bahan  lain  dapat memengaruhi kelarutan.
7.  Warna Menurut  Sastrohamidjojo  (2004),
eugenol  berwujud  cairan  jernih  tidak berwarna  yang  akan  berubah  secara lambat  menjadi  kekuningan  bila  terkena udara.  Hasil  rata-rata  warna  eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda disajikan  pada  Tabel  8.  Hasil  uji  anava menunjukkan  bahwa  tekanan  dan  rasio
refluks berbeda, tidak memengaruhi warna eugenol secara nyata (α= 0,01).
Dengan  distilasi  fraksinasi  vakum, eugenol  yang  dihasilkan  tidak  berwarna dan  jauh  lebih  baik  dibandingkan  warna bahan  baku  (minyak  daun  cengkeh)  yang
berwarna  coklat  gelap.  Logam –  logam dan kotoran yang terdapat di dalam bahan baku  tertinggal  di  ketel  sebagai  residu (tidak  ikut  menguap)  sehingga  eugenol yang dihasilkan tidak berwarna.
Tabel 8. Nilai rata-rata warna eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda.
Rasio Refluks Tekanan (mmHg) Rata-Rata 4 6 10 10/5 1,00 1,00 1,00 1,00 20/4 1,00 1,00 1,00 1,00 40/4 1,02 1,02 1,00 1,01 Rata-Rata 1,01 1,01 1,00
Keterangan:  skor  1=amat  sangat  kuning;  2=sangat  kuning;  3=kuning;  4=agak  kuning;  5  =
tidak berwarna 8.  Aroma Menurut Sastrohamidjojo (2004), eugenol  memiliki  aroma  /  bau  yang  kuat seperti cengkeh dan bila dicicipi
mempunyai  rasa  yang  pedas.  Nilai  rata- rata  aroma  eugenol  dengan  tekanan  dan rasio  refluks  berbeda  dapat  dilihat  pada Tabel 9.
Tabel 9. Nilai rata-rata aroma eugenol dengan tekanan dan rasio refluks berbeda
Rasio Refluks Tekanan (mmHg) Rata-Rata 4 6 10 10/5 3,50 3,47 3,48 3,48 b 20/4 3,77 3,72 3,85 3,78 a 40/4 2,48 2,67 2,70 2,62 c Rata-Rata 3,25 3,28 3,34
Keterangan:  skor  1  =  amat  sangat  khas  cengkeh;  2  =  sangat  khas  cengkeh;  3  =  khas cengkeh; 4 = agak khas cengkeh; 5 = tidak beraroma
Keterangan: kode huruf sama berarti tidak berbeda nyata antara perlakuan dan kode huruf berbeda berarti berbeda nyata antara perlakuan (α = 0,01)
Aroma  eugenol  berkisar  antara  2,48 sampai  3,85  (sangat  khas  cengkeh-khas cengkeh).  Aroma  eugenol  relatif  sama dengan  semakin  tinggi  tekanan  dan cenderung  menguat  dengan  semakin tinggi  rasio  refluks.  Hasil  uji  anova menunjukkan bahwa tekanan tidak mempengaruhi  aroma  eugenol  secara sangat  nyata  ( α=0,01),  namun  rasio refluks  memengaruhi  aroma  eugenol secara  sangat  nyata (α=0,01).  Aroma eugenol  terkuat  diperoleh  pada  rasio refluks  40/4  (sangat  khas  cengkeh)  dan terlemah  pada  rasio  refluks  10/5  (khas cengkeh).
Sebagian  besar  minyak  atsiri  terdiri dari  campuran  hidrokarbon  (monoterpen, sesquiterpen,  diterpen,  dan  politerpen), hidrokarbon teroksigenasi (alkohol, aldehida,  keton,  oksida,  ester,  dan  eter), dan  sejumlah  kecil  residu  kental  atau padat  yang  tidak  dapat  menguap  (resin dan lilin). Dari kesemuanya, persenyawaan  hidrokarbon  teroksigenasi merupakan  penyebab  utama  bau  wangi dalam minyak atsiri, sedangkan hidrokarbon  (terpen  dan  sesquiterpen) berpengaruh kecil terhadap aroma minyak. Persenyawaan hidrokarbon teroksigenasi mempertinggi kelarutan
dalam  alkohol  encer  (kecuali  beberapa senyawa  golongan  aldehida),  dan  lebih tahan serta stabil terhadap proses oksidasi  dan  resinifikasi.  Persenyawaan terpen  dan  sesquiterpen  yang  tidak  jenuh mengalami proses oksidasi dan resinifikasi di  bawah  pengaruh  cahaya  dan  udara, atau  pada  kondisi  penyimpanan  yang kurang  baik,  sehingga  merusak  aroma serta menurunkan kelarutan minyak dalam etanol (Guenther, 1990).
Hal  ini  menyebabkan  kemurnian eugenol  semakin  rendah  (kandungan kariofilen / terpen masih ada dalam jumlah tertentu)  maka  aroma  eugenol  cenderung semakin tidak beraroma khas cengkeh.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Hasil penelitian menunjukkan bahwa: 1.  Secara keseluruhan tekanan memengaruhi  kemurnian,  rendemen,
bobot  jenis,  indeks  bias,  dan  putaran optik  eugenol  secara  nyata (α=0,01), namun  tidak  memengaruhi  warna  dan aroma eugenol secara nyata (α=0,01).
Tekanan  distilasi  fraksinasi  vakum terbaik adalah 10 mmHg.
2.  Secara keseluruhan rasio refluks memengaruhi  kemurnian,  rendemen, bobot jenis, indeks bias, putaran optik, dan  aroma  eugenol  secara  nyata (α=0,01),  namun  tidak  memengaruhi warna  eugenol  secara  nyata (α=0,01). Rasio refluks terbaik adalah 20/4.
3.  Ada interaksi antara tekanan dan rasio refluks dalam memengaruhi
rendemen,  indeks  bias,  dan  putaran optik  secara  nyata (α=0,01),  tetapi tidak ada  interaksi  yang  memengaruhi kemurnian,  bobot  jenis,  aroma  dan warna  eugenol  secara  nyata (α=0,01).
Interaksi  yang  menghasilkan  eugenol sesuai  standar USP (2010),  yaitu beraroma  khas  cengkeh  dan  tidak berwarna  dengan  rata-rata  kemurnian 99,65%,  rendemen  64,61%,  bobot jenis  1,0656,  indeks  bias  1,5407, putaran  optik  -0,1 0 , serta  kelarutan eugenol dalam etanol 70% sebesar 1:1 adalah  perlakuan  tekanan  10  mmHg
dan  rasio  refluks  20/4  dan  merupakan perlakuan terbaik.

## Saran
Disarankan  untuk  (1)  melakukan proses  isolasi/pemisahan  eugenol  dari minyak daun cengkeh dengan metode lain seperti metode penyulingan uap, penyulingan  dengan  CO 2 superkritik,  dan molecular  distillation untuk  meningkatkan kemurniannya; (2) mempelajari
pembuatan  vanilin  sintetik  dari  eugenol minyak  daun  cengkeh  karena  memiliki nilai ekonomis tinggi.

## DAFTAR PUSTAKA
Armando,  R.  2009. Memproduksi  15 Minyak  Asiri  Berkualitas. Penebar
Swadaya, Jakarta.
Balittro.  2008. Produksi  Cengkeh  2008 dan  Prakiraan  Produksi  Cengkeh sampai  2012  di  Indonesia .  Balai Penelitian  Tanaman  Rempah  dan Obat, Bogor. Brahmana, HR. 1991. Pengaruh penambahan  minyak  kruing  dan besi  oksida  terhadap  Mutu  Minyak
Nilam  (Patchouli  Oil). Komunikasi Penelitian 3     (4):33()"341. BSN.  1996. Syarat  mutu  minyak  daun cengkeh (SNI 06-2387-2006). Badan Standardisasi Nasional, Jakarta. Cook  T.M.  dan  D.J.  Cullen.  1987. Industri kimia.  Operasi,  Aspek –  aspke Kemanan dan Kesehatan . Terjemahan. PT. Gramedia, Jakarta. EOA .  1975. EGA  Specifications  and standards. Essential Oil Association of USA, New York. Furniss,  B.,  S.  Haanaford,  V.  Rogers, P.W.G.  Smith,  dan  A.R.  Tatchell. 1984. Vogel’s Textbook of Practical Organic Chemistry . ELBS, Longman. Guenther,  E.  1990. Minyak  Atsiri  Jilid  I . Penerjemah S. Ketaren. Universitas Indonesia, Jakarta. Guenther, E. 1990. Minyak Atsiri Jilid IV-B . Penerjemah S. Ketaren. Universitas Indonesia, Jakarta.
Handojo,  L.  1995. Teknologi  Kimia  Jilid  II. PT. Gramedia, Jakarta. Haznan,  A.  2002. Pemisahan  Komponen Minyak Atsiri dengan Menggunakan  Teknologi  Distilasi Fraksinasi .  LIPI.  Pusat  Penelitian Kimia, Serpong. Ketaren,  S.  1985. Pengantar  Teknologi Minyak  Atsiri .  PN  Balai  Pustaka, Jakarta. Kurnia,  A.  dan  A.  Widyadhana.  2010. Kesetimbangan  Cair –  cair  Sistem Eugenol + β-Caryophyllene  +
Etanol + Air pada Rentang Temperatur  303K-323K. Institut Teknologi Surabaya, Surabaya.
Marwati,  T.,  M.S.  Rusli,  E.  Noor  dan  E.
Mulyono.  2005. Peningkatan  Mutu
Minyak  Daun  Cengkeh  Melalui Proses Pemumian . Jurnal Penelitian  Pascapanen  Pertanian.
2 (2). Pahlesson  AB.  1989. Toxicity  of  Heavy Metals (Zn, Cu, Cd, Pb) to Vascular Plants . Water, Air, and Soil Polutan 2:3-4. Rusli,  M.S.  2010. Sukses  Memproduksi Minyak Atsiri . PT AgroMedia
Pustaka, Jakarta. Sastrohamidjojo,  H.  2004. Kimia  Minyak Atsiri . Gajah Mada University Press, Yogyakarta. USP .  2010. United  States  Pharmacopeia
28 . Conventon.Inc, USA.