Perbandingan Pengaruh Pendedahan Uap Bensin Jenis Pertamax Dan Premium  Terhadap Gambaran Histologi Bronkus Tikus Putih ( Rattus Norvegicus) Jantan
The Comparison of Effect of Gasoline Vapor Exposure from Pertamax and Premium Types on the Bronchial Histology of White Male Rats (Rattus norvegicus).
Sitilia Muhartiningsih 1. ,Yuningtyaswari Yuningtyaswari 2
1 Mahasiswa, Fakultas Kedoteran, Universitas Muhammadiyah Yogyakarta
2 Bagian Histologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Muhammadiyah Yogyakarta
Corresponding author : yuningtyas@umy.ac.id

## ABSTRAK
Bensin yang tersedia di Indonesia adalah bensin jenis Premium dan Pertamax. Bensin Premium mengandung  tetra-etil-lead  yang  terkandung  timbal  dengan  nilai  oktan  88  sedangkan  Pertamax mengandung metil-tertil-butil-eter atau etil-tertil-butil-eter sebagai pengganti timbal dengan nilai oktan 92. Senyawa  benzena  dan  timbal  merupakan  senyawa  berbahaya  yang  mempengaruhi  sistem  pernapasan seperti bronkus.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pendedahan uap bensin jenis Premium dan Pertamax terhadap gambaran histologi bronkus tikus putih ( Rattus norvegicus ). Subyek penilitian 27 ekor tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan, berumur 8 minggu dengan berat 150-220  gram.  Subyek  dibagi  menjadi  tiga  kelompok  yaitu  kelompok  kontrol  (K),  Pertamax  (P1)  dan Premium (P2). Pada kelompok P1 dan P2 diberikan pendedahan uap bensin 8  jam/hari selama 30 hari dan kelompok K (tidak diberikan perlakuan).
Rata-rata    ketebalan  epitel  bronkus  kelompok  K  (25,2211±3,20932)µm;  P1 (28,4411±2,82673)µm; dan P2 (31,5422±4,11304)µm. Uji Tukey menunjukkan perbedaan ketebalan epitel yang signifikan antara kelompok K dan P2 dengan p=0,002.
Rata-rata  diameter  bronkus  kelompok  K(1284,78±97,778)µm;  P1(1054,67±159,625)µm  dan P2(978,22±219,136)µm.  Uji Tukey menunjukkan  perbedaan  panjang  diameter  bronkus  yang  signifikan antara kelompok K dan P1 dengan p=0,021, sedangkan kelompok K dan P2 dengan p=0,002.
Rata-rata  jumlah  sel  goblet  kelompok  K(6,7778±0,7362);  P1(9,9444±0,99041)  dan P2(11,6356±0,47276).  Uji Tukey menujukkan  perbedaan  jumlah  sel  goblet  yang  signifikan  antara kelompok K, P1 dan P2 dengan p=0,000.
Pendedahan  uap  bensin  kelompok  P1  dan  P2  mempengaruhi  gambaran  histologi  berupa ketebalan epitel, diameter bronkus dan jumlah sel goblet pada tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan. Kata Kunci : Uap, Bensin, Epitel, Bronkus

## ABSTRACT
Premium and pertamax are types of gasoline which are mostly consumed in Indonesia. Premium gasoline contains lead and has an octan number 88 while, Pertamax gasoline containing methyl tertiary butyl ether (MTBE) or ethyl tertiary butyl ether (ETBE) as a substitute for lead with an octane number 92. Benzene and lead compound are the dangerous compound that can affect to respiratory system such as bronchi.
This study aims to determine the effect of Premium and Pertamax gasoline vapor exposure to bronchial histology of the white rat (Rattus norvegicus).
Subjects  of  the  experiment  were 27  white  male  rats  (Rattus  norvegicus),  8  weeks old,  having  weight  150-220 grams. Subjects were divided equally into three groups: control group (K), Pertamax group (P1) and Premium group (P2). The subjects (samples) from Premium group and Pertamax group were exposed to the gasoline vapor for 8 hours per day in 30 days and the control group was exposed to normal environment.
The results of the average number of bronchial epithelial thickness are (25.2211 ± 3.20932)µm for K group; (28.4411  ±  2.82673)µm  for  P1  group  and  (31.5422  ±  4.11304)µm  for  P2  group.  Attractions  Tukey  test  found significant difference in the K group and P2  group with p=0.002.
The result of the average number of diameter are (1284,78±97,778)µm for K group; (1054,67±159,625)µm for P1 group and (978,22±219,136)µm for P2 group. Attractions Tukey test found significant difference in the K and P1 group with  p=0,021, although K dan P2 group with p=0,002.
The result of the average number of goblet cell are (6,7778±0,7362) for K group; (9,9444±0,99041)  for P1 group and (11,6356±0,47276) for P2 group. Attractions Tukey test found significant difference in the K, P1 and P2 group with p=0,000.
P2  and  P1    gasoline vapor  exposure  have  affect on  the  bronchial  histology  from  the  thickness of  the  bronchial epithelium, diameter sum of bronchus and in white male rats (Rattus norvegicus).
Keywords: vapor, Gasoline, epithelium, bronchi

## Pendahuluan
Bensin  merupakan  bahan  bakar  yang mengandung,  rata-rata  sekitar  14%  senyawa aromatik,  80%  parafin,  6%  olefin  dan  sering dalam  jumlah  kecil  alkohol,  eter,  korosi inhibitor,  antioksidan,  dan  oksigenasi 1 .  Jenis bensin  yang  sering  digunakan  oleh  masyarakat adalah  bensin  jenis  tertamax  dan  premium. Kedua jenis bensin ini memiliki kandungan yang hampir  sama  tetapi  perbedaan  keduanya  oleh ada  tidaknya  kandungan  timbal  dan  nilai oktannya 2 .
Bensin  jenis  premium  merupakan  bensin yang  banyak  digunakan  oleh  masyarakat dibandingkan  dengan  bensin  jenis  pertamax. Premium  merupakan  bahan  bakar  minyak berwarna  kekuningan  jernih  akibat  adanya  zat pewarna  tambahan  (dye),  memiliki  kandungan timbal  dan  nilai  oktan  88,  sedangkan  pertamax merupakan bensin tanpa timbal dan mempunyai nilai oktan 92. Timbal merupakan zat kimia yang dapat  mempengaruhi  otak,  sistem  saraf,  darah, sistem pernapasan dan sistem pencernaan 3 . Efek samping yang ditimbulkan menyebabkan  timbal  diganti  dengan  zat  aditif sebagai  penganti  timbal  dalam  meningkatkan nilai  oktan,  seperti  MTBE  dan  ETBE.  ETBE dan  MTBE  merupakan  eter  sintesis  yang  dapat mengurangi efek pada kesehatan dan
pencemaran  udara.  Bahan  kimia  atau  zat  iritan pada  uap  bensin  menyebabkan  operator  SPBU menjadi  objek  yang  sering  terpapar  oleh  kedua jenis uap bensin tersebut.

## Metode
Penelitian ini adalah penelitian eksperimental laboratorium  dengan  rancangan post  test  only control group.
Sampel  yang  diuji  adalah  dua  puluh tujuh  ekor  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan galur  Spraque  dawley.  Dibagi  menjadi  tiga kelompok  yaitu  kelompok  pertamax,  premium, dan  kontrol.  Setiap  kelompok  terdiri  dari sembilan ekor tikus.
Kriteria inklusi adalah tikus putih ( Rattus norvegicus ), jantan, galur Spraque dawley, umur 8 minggu  dengan  berat  badan  150-220  gram. Sedangkan, kriteria eksklusi meliputi tikus putih yang  mempunyai  abnormalitas  anatomi  yang nampak oleh mata, terlihat sakit dan mati selama penelitian.
Sebagai  variabel  bebas  adalah  Paparan uap bensin jenis premium dan pertamax, sedang variabel  tergantung  adalah  Gambaran  histologi bronkus Rattus  norvegicus, yaitu  ketebalan  epitel bronkus (µm), jumlah sel PMN,dan sebukan sel limfosit.  Variabel  terkendali  yakni  Usia,  Jenis Kelamin,  berat  badan,  pola  diit,  tempat

## 21 Sitilia Muhartiningsih et  al
penelitian,  lama  perlakuan,  waktu  pemeriksaan, jenis bensin.
Bahan  dan  alat  yang  digunakan  pada penelitian  kali  ini  adalah  bensin  jenis  premium dan  pertamax, tempat  makanan  tikus  dan  botol minuman  tikus,  kandang  perlakuan,  kandang pemeliharaan  hewan  uji,  ,  corong,  timbangan digital  dengan  skala  0,1  gram,  Perlengkapan bedah,  botol  perlakuan  dengan  volume  80, jerigen bervolume 2 L, mikroskop cahaya, hand
counter, software Optilab.
Penelitian telah dilakukan di laboratorium  hewan  uji  dan  laboratorium histologi Fakultas Kedokteran UMY pada bulan Mei  sampai  Desember  2013 . Sampel  diambil dari  peternakan  hewan  uji  Fakultas  Kedokteran UMY.
Pelaksanaannya diawali dengan perlakuan  percobaan  pada  empat  tikus  yang dijadikan  kelompok  yang  didedahkan  dengan uap  premium  dan  uap  pertamax  8  jam/hari selama  10  hari.  Hari  ke  sebelas  dilakukan pembedahan  dan  pembuatan  preparat  untuk diteliti ketebalan epitel bronkus.
Penelitian  sebenarnya  menggunakan  27 sampel yang dibagi dengan tiga kelompok yaitu, kelompok  pertama  didedahkan  dengan  uap premium,  kelompok  kedua  didedahkan  dengan uap  pertamax,  dan  kelompok  ketiga  adalah kontrol. Pendedahan 8 jam/hari selama 30 hari.
kemudian berat badan tikus putih ditimbang dua hari  sekali  untuk  mengetahui  perbedaan  berat badan dengan sebelumnya. Hari ke-31 dilakukan pembedahan dan pembuatan preparat penelitian. Pembuatan  preparat  dilakukan  di  laboratorium Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran UGM.
Pengambilan  data  melalui  pengamatan histologi  epitel  bronkus  tikus  putih  dengan bantuan optiLab pada setiap sampel.

## Hasil penelitian
1. Ketebalan Epitel Bronkus
Hasil  pengamatan  terhadap  ketebalan  epitel bronkus  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel  1  memperlihatkan  bahwa  ketebalan epitel bronkus yang paling tipis pada kelompok K  sedangkan  kelompok  P2  yang  memiliki ketebalan  epitel  paling  tebal.  Ini  membuktikan bahwa uap bensin jenis P2 mempunyai pengaruh terhadap epitel bronkus. Pada kelompok bensin P1  mempunyai  rata-rata  ketebalan  epitel bronkus  lebih  tebal  dibandingkan  dengan kelompok K, ini membuktikan uap bensin jenis P1 juga berpengaruh terhadap epitel bronkus.
Uji  normalitas  dan  homogeniti  data menggunakan Shapiro  Wilk .  Hasil  dari  uji normalitas  dan  homogeniti  didapatkan  p>0,05 membuktikan bahwa data mempunyai distribusi normal  dan  homogen.  Data  kemudian  diolah mengguanakan uji statistik One Way Anova dan diperoleh  nilai  p=0,003.  Nilai  p<0,005 (signifikan)  berarti  terdapat  perbedaan  yag
Kelompok Perlakuan Epitel Bronkus Rata-rata ±SD (µm) Kontrol (K) 25,2211±3,20932 b Pertamax (P1) 28,4411±2,82673 ab Premium (P2) 31,5422±4,11304 a
bermakna  diantara  kelompok  satu  dengan  yang lain.
Analisis  data  menggunakan  uji  normalitas dilanjutkan  dengan  uji One  Way  Anova untuk mengetahui signifikansi perbedaan antar kelompok penelitian.
Analisis  data  kemudian  dilanjutkan  dengan uji Tukey untuk  mengetahui  perbedaan  yang signifikan diantara ketiga kelompok dengan nilai
p<0,05. Hasil dari Tukey didapatkan perbandingan  antara  kelompok  P1  dan  K dengan  p=0,135,  sedangkan  kelompok  P2  dan P1  dengan  nilai  p=0,155.    Itu  artinya  tidak terdapat  perbedaan  yang  bermakna,  sedangkan pada  kelompok  K  dan  P2  didapatkan  nilai p=0,002  artinya  terdapat  perbedaan  yang bermakna pada kelompok tersebut.
Gambar  1. Grafik Rata-rata Ketebalan Epitel Bronkus
Pada  kelompok  K  didapatkan  gambaran histologi  ketebalan  epitel  bronkus  tiap  lapang pandang dengan rata-rata sebesar
25,2211±3,20932 µm.
Gambar 2.  Histologi bronkus kelompok kontrol dengan  pewarnaan    Hemosilin  Eosin  (HE, 40x10). Keterangan: (1) Epitel; (2) Sel goblet; (3)
0 5 10 15 20 25 30 35 Kontrol (K) Pertamax (P1) Premium (P2) 25.2211 28.4411 31.5422 M ikr o me te r (µ m) Grafik Rata-rata Ketebalan Epitel Bronkus Tikus Putih (Rattus norvegicus) Jantan dengan Perlakuan Kontrol, Pertamax dan Premium Selama 30 Hari X: Kelompok, Y: Pengukuran

## 23 Sitilia Muhartiningsih et  al
Silia;  (4)  Jaringan  submucosa;  (5)  Membrana basalis.
Pada  kelompok  P1,  tikus  yang didedahkan dengan uap bensin jenis P1 terhadap gambaran histologi bronkus mengalami
penebalan  epitel  dibandingkan  K.  Rata-rata ketebalan epitel bronkus sebesar 28,4411±2,82673  µm.  Pada  gambaran  histologi terjadi  perubahan  berupa  infiltrasi  netrofil, limfosit  dan  makrofag  di  lumen  bronkus.
Gambar 3.  Histologi bronkus kelompok Pertamax  dengan  pewarnaan    Hemosilin Eosin  (HE,  40x10).  Keterangan:  (1) Epitel; (2) Sel goblet; (3) Silia; (4) Jaringan Submukos; (5) Membrana Basalis
Pada  kelompok  P2,  gambaran histologi bronkus kelompok P2 didapatkan penebalan  epitel  31,5422±4,11304  µm  dan terjadi  perubahan  berupa  infiltrasi  netrofil, limfosit dan makrofag di lumen bronkus.
Gambar  4.  Histologi  bronkus  kelompok Premium  dengan  pewarnaan  Hemosilin
Eosin (HE, 40x10). Keterangan: (1) Epitel; (2)  Sel  goblet;  (3)  Silia;  (4)  Jaringan
Submukos; (5) Membrana Basalis.
2. Diameter Bronkus
Hasil  pengamatan  terhadap  diameter bronkus  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2  memperlihatkan  bahwa  diameter bronkus  paling  lebar  pada  kelompok  K sedangkan  kelompok  P2  memiliki  jumlah  rata- rata  diameter  paling  sempit.  Pada  kelompok bensin  P1  mempunyai  rata-rata  diameter  lebih sempit dibandingkan kelompok K.
Uji  normalitas  data  menggunakan Shapiro- Wilk diperoleh nilai  p>0,05.  Ini  berarti sebaran data  normal,  oleh  karena  itu  data  selanjutnya diolah  menggunakan  uji Oneway  Anova dan didapatkan  nilai  p=0,002  (p<0,05)  berarti terdapat  perbedaan  diantara  ketiga  kelompok. Analisis  data  kemudian  dilanjutkan  dengan  uji Tukay .
Hasil  uji  statistik Tukey didapatkan perbedaan  yang  signifikan  (p<0,05)  antara kelompok  P1  dan  K  (p=0,021);  kelompok  P2 dan  K  bernilai  (p=0,002).  Perbandingan  hasil antara  kelompok  K  dan  P1  didapatkan  nilai p=0,600  artinya  terdapat  perbedaan  yang  tidak signifikan (p<0,05).
3. Sel Goblet Bronkus
Hasil  pengamatan  terhadap  jumlah  sel goblet  bronkus  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus ) jantan dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel  3  memperlihatkan  bahwa  rata-rata jumlah sel goblet pada bronkus pada kelompok K  dengan  jumlah  paling  sedikit  sedangkan kelompok P2 yang memiliki jumlah sel goblet di bronkus  paling  banyak.  Pada  kelompok  bensin P1 mempunyai jumlah rata-rata sel goblet paling banyak jika dibandingkan dengan kelompok K.
Uji  normalitas  data  menggunakan Shapiro- Wilk dengan  nilai  >0,05.  Ini  berarti  data memiliki  sebaran  yang  normal,  oleh  karena  itu uji statistik dilanjutkan menggunakan uji Oneway Anova. Hasil  yang  diperoleh  mempunyai  nilai p=0,000  berarti  terdapat  perbedaan  yang signifikan diantar ketiga kelompok. Analisis data dilanjutkan  dengan  uji Tukey dan  didapatkan nilai  p=0,000  dari  ketiga  kelompok  yang dibandingkan,  yang  artinya  terdapat  perbedaan signifikan (p<0,05) antar kelompok tersebut.
Tabel 2. Rata-rata Diameter Bronkus Tikus Putih ( Rattus norvegicus) Jantan dengan Perlakuan Kontrol, Pertamax dan Premium Selama 30 Hari.
Kelompok Perlakuan Diameter Bronkus Rata-rata ±SD (µm) Kontrol (K) 1284,78±97,778 b Pertamax (P1) 1054,67±159,625 a Premium (P2) 978,22±219,136 a

## Gambar  5. Grafik Rata-Rata Diameter Bronkus
Tabel 3. Rata-rata Jumlah Sel Goblet Bronkus Tikus Putih ( Rattus norvegicus) Jantan dengan Perlakuan Kontrol, Pertamax dan Premium Selama 30 Hari
Kelompok Perlakuan Sel Goblet Bronkus Rata-rata ±SD Kontrol (K) 6,7778±0,73362 a Pertamax (P1) 9,9444±0,99041 b Premium (P2) 11,6356±0,47276 c
Gambar 6. Grafik Rata-rata Jumlah Sel Goblet Bronkus
Pembahasan 1. Ketebalan Epitel Bronkus Perbedaan nilai yang bermakna kemungkinan  dipengaruhi  oleh  senyawa  yang
terkandung  di  dalam  bensin  jenis  P1  dan  P2 yang  dapat  mempengaruhi  sistem  pernapasan. Substansi  dalam  bensin  tersebutlah  yang  dapat mempengaruhi  ketebalan  epitel  bronkus  pada
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1284.78 1054.67 978.22 m ik r o m e te r ( µ m )
Grafik Rata-rata Diameter Bronkus Tikus Putih ( Rattus norvegicus) Jantan dengan Perlakuan
Kontrol, Pertamax dan Premium Selama 30 Hari X=Kelompok, Y=Pengukuran
0 20 Kontrol (K) Pertamax (P1)
Premium (P2) 6.7778 9.9444 11.6356
Rata-rata Jumlah Sel Goblet Bronkus Tikus Putih ( Rattus norvegicus) Jantan dengan Perlakuan Premium, Pertamax, dan Kontrol Selama 30 Hari
X:Kelompok, Y:Pengukuran
hewan  uji  kelompok  perlakuan  lebih  tebal dibandingkan  dengan  hewan  uji  kelompok  K (tanpa perlakuan).
Seperti  yang  telah  diuraikan  (Kinawy, 2009),  bahwa  penguapan  uap  bensin  dapat dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  yaitu komposisi,  sifat  senyawa,  konsentrasi,  dan perbedaan dari senyawa utama sebagai peningkat nilai  oktan.  Konsentrasi  senyawa  benzena  lebih kecil jika dibandingkan dengan timbal dan metal- tersier-butil-eter (MTBE) sehingga efek benzena terhadap tubuh lebih cepat karena semakin kecil jumlah  konsentrasi  suatu  senyawa  maka, senyawa  tersebut  lebih  cepat  masuk  ke  dalam tubuh dan menimbulkan efek.
Bensin  jenis  P2  dan  P1  mengandung senyawa  benzena  dengan  konsentrasi  0,05  ppm untuk  menimbulkan  efek  pada  saluran pernapasan. Senyawa utama pada bensin jenis P2 mengandung  senyawa  timbal  berupa  tetra-etil- lead  (TEL)  dan  bensin  jenis  P1  terkandung metil-tersier-butil-eter (MTBE). Timbal memiliki sifat mudah menguap sehingga dapat menyebabkan  gangguan  pernapasan  dengan konsentrasi  0,15  ppm.  Sedangkan,  efek  dari MTBE  sebagai  pengganti  timbal  dibutuhkan  35 ppm untuk menyebabkan gangguan pada tubuh dan MTBE lebih banyak diserap oleh air dalam tanah  di  sekitar  tangki  penyimpanan  bensin, sehingga  pencemaran  lebih  banyak  melalui  air yang  terkandung  dalam  tanah.  Hal  tersebutlah yang  menyebabkan  terjadinya  perubahan  epitel bronkus  pada  hewan  uji  P2    lebih  tebal dibandingkan dari hewan uji P1.
Senyawa  benzena  dan  timbal  merupakan sebagian bahan iritan yang terkandung di dalam
bensin  dengan  sifat  mudah  menguap  sehingga dapat  terhirup  melalui  hidung,  trakea  dan selanjutnya  ke  bronkus.  Bronkus  terletak  di pertengahan  dari  saluran  nafas  sehingga absorbsinya belum sempurna seperti paru, tetapi absorbsinya  lebih  baik  dari  trakea  sehingga reaksinya  terhadap  benda  asing  lebih  mudah terabsorbsi  dibandingkan  trakea  sehingga partikel  tersebut  lebih  mudah  mengendap  di dalam bronus. Setiap partikel yang terhirup akan terkumpul  di  saluran  pernapasan  dan  dapat sampai ke peredaran darah. Ukuran partikel yang masuk  menentukan  tempat  terkumpulnya partikel yang terhirup. Jika semakin kecil ukuran partikel,  semakin  jauh  jangkauannya  di  dalam saluran pernapasan.
Pada penelitian ini, pendedahan uap bensin yang  merupakan  zat  iritan  bagi  tubuh  seperti benzena  dan  timbal  dengan  durasi  8  jam/hari selama 30 hari (4 minggu) melalui inhalasi secara terus  menurus  menyebabkan  infiltrasi  sel limfosit,  netrofil  dan  makrofag  yang  ditemukan pada gambaran histologi di lumen bronkus. Pada hewan  uji  kelompok  K  (tanpa  perlakuan)  tidak ditemukan  infiltrasi  sel  limfosit,  netrofil  dan makrofag  dan  pada  hewan  uji  kelompok perlakuan  P2  dan  P1  ditemukan  infiltrasi  sel limfosit,  netrofil  dan  makrofag  pada  lumen bronkus.  Infiltrasi  sel-sel  tersebut  merupakan faktor  pertahanan  dalam  tubuh  akibat  hadirnya benda asing pada saluran pernapasan. Abe et al.
(2000)  menunjukkan  sel  epitel  pada  pernapasan yang  terpapar  zat  iritan  akan  menghasilkan sitokin seperti interleukin (IL) -8 dan granulosit makrofag, yang mungkin memiliki peran penting dalam  induksi  dan  perpanjangan  peradangan
saluran napas dengan menarik dan mengaktifkan sel-sel inflamasi di saluran napas.
Menurut (Keenan, 2002), bahwa pendedahan
kronis melalui inhalasi menyebabkan  terjadinya  pelepasan  berbagai  zat yang  menimbulkan  perubahan  sekunder  pada jaringan.  Perubahan  jaringan  ini  disebut peradangan. Peradangan ditandai oleh vasodilatasi  pembuluh  darah  local  yang mengakibatkan  terjadinya  aliran  darah  setempat berlebihan;  peningkatan  permeabilitas  kapiler, memungkinkan  kebocoran  banyak  sekali  cairan ke  interstisial;  sering  kali  terjadi  pembekuan darah  akibat  fibrinogen;  migrasi  sejumlah  besar granulosit  dan  monosit  dalam  jaringan;  dan pembengkakan sel jaringan. Pelepasan substansi ke  dalam  jaringan  menyebabkan  TNFα  ( Tumor Necrosis  Factor  alfa) terstimulasi.  TNFα merupakan  sitokin  yang  memediasi  respon inflamasi  melalui  jalur  NF-kB  ( Nuclear  Factor Kappa  B ).  TNFmerangsangPKCε  ( Protein  Kinase
C Epsilon )dan kemudian TNFα merangsang IL-6 ( interleukin  6 )  dan  IL-8  ( interleukin  8 ),  yang  pada akhirnya  akan  mengundang  bermigrasinya neutrofil ke lokasi inflamasi 5 .
Ketika  terjadi  peradangan,  penarikan  akan menyebabkan fagositosis zat iritan. Netrofil akan menyerang  dan  menghancurkan  benda  asing sampai  di  sirkulasi  darah.  Sebaliknya  makrofag jaringan  yang  memulai  hidup  sebagai  monosit darah dan memiliki kemampuan untuk melahap jaringan  yang  telah  dihancurkan  pada  beberapa jam.  Tetapi  pada  suatu  saat  makrofag  akan mencederai  jaringan  yang  masih  hidup  dan ketika makrofag masuk ke dalam jaringan, sel-sel mulai membengkak 4 .
Hadirnya  sel-sel  limfosit,  netrofil  dan makrofag  sehinggga  terjadi  penumpukan  sel yang  abnormal  sehingga  jumlah  rata-rata ketebalan epitel yang diberi perlakuan lebih tebal dibandingkan kelompok K.
Gambar  7.    Histologi  Ketebalan  sel  epitel bronkus  kelompok  Kontrol  (He,  100x10). Keterangan:  (1)  Silia;  (2)  Sel  Goblet;  (3)
Membran  Basalis;  (4)  Epitel  Kolumner  Silia; (5) Submukosa; (6) Kartilago
Gambar  8.    Histologi  Ketebalan  sel  epitel bronkus  kelompok  Pertamax  (He,  100x10). Keterangan:  (1)  Silia;  (2)  Sel  Goblet;  (3) Membran  Basalis;  (4)  Epitel  Kolumner  Silia;
(5) Submukosa; (6) Kartilago
Gambar  9.    Histologi  Ketebalan  sel  epitel bronkus  kelompok  Premium  (He,  100x10). Keterangan:  (1)  Silia;  (2)  Sel  Goblet;  (3) Membran  Basalis;  (4)  Epitel  Kolumner  Silia;
(5) Submukosa; (6) Kartilago
2. Panjang  Diameter  Bronkus  Tikus  Putih ( Rattus norvegicus) Jantan
Bronkus  memiliki  epitel  berlapis  silia yang  berfungsi  sebagai  pelindung  dari  iritan. Udara  yang  tercampur  iritan  secara  kronik masuk  ke  saluran  pernapasan  melalui  hidung, trakea,  bronkus,  sampai  menuju  alveolus. Apabila  terjadi  gangguan  pembersihan  pada saluran  bronkus  maka  udara  yang  masuk  dapat menyebabkan  peradangan  pada  bronkus. Peradangan yang terjadi menyebabkan obstruksi pada saluran pernapasan. Obstruksi yang terjadi menyebabkan  lumen  bronkus  melakukan vasokontriksi  sehingga  diameter  lumen  terlihat lebih sempit dibandingkan yang normal 6 .
Lumen  bronkus  pada  hewan  uji  K berbeda  dengan  perlakuan  dikarenakan  adanya substansi  yang  mengiritasi  bronkus  pada kelompok  perlakuan.  Kelompok  P2  memiliki diameter  yang  lebih  sempit  dari  kelompok  P1. Pada  kelompok  P2  terdapat  timbal  yang  ikut masuk  ke  dalam  sistem  pernapasan.  Timbal merupakan  senyawa  yang  memiliki  sifat  mudah menguap  dan  waktu  paruh  dalam  tubuh  lebih lama  dibandingkan  dengan  senyawa  lain.
Sehingga  P2  memiliki  diameter  lebih  kecil daripada P1.
3. Jumlah Sel Goblet Bronkus Tikus Putih
( Rattus norvegicus) Jantan
Uap  bensin  dengan  kandungan  bahan iritan  seperti  benzena  dan  timbal  dapat mempengaruhi  bertambahnya  jumlah  sel  goblet dan  kelenjar  submukosa  membesar  sehingga jumlah  sel  goblet  pada  kelompok  perlakuan lebih banyak dibandingkan dari kelompok K.
Ade et  al. (2000)  menjelaskan  sel  epitel memiliki  peran  dalam  mekanisme  pertahanan saluran  napas  melalui  sistem  mukosiliar  serta hambatan  mekanis.  Dalam  sistem  pernapasan setiap  partikel  dari  senyawa  uap  bensin  seperti benzena dan timbal merupakan iritan. Sel goblet yang berfungsi sebagai penghasil mukus (lendir) melapisi  seluruh  permukaan  dari  hidung  hingga bronkiolus untuk menjaga kelembabannya.
d= 1540 µm Gambar  10.    Panjang  diameter  bronkus  (µm) pada  kelompok  hewan  uji  Kontrol  (K),  (He, 100x10).
d= 1120 µm Gambar 11.  Panjang diameter bronkus (µm) pada kelompok hewan uji Pertamax (P1), (He, 100x10).
d= 980 µm Gambar 12.  Panjang diameter bronkus (µm) pada kelompok hewan uji Premium (P2), (He, 100x10).
Fawcett  (2002)  menjelaskan  bahwa, pendedahan kronik dari uap bensin menyebabkan produksi hasil sekresi mukus dari sel goblet mengalami sedikit modifikasi sehingga mukus  yang  disekresikan  bertambah  banyak namun,  bensin  memiliki  kandungan  alkohol yang  dapat  menurunkan  fungsi  mukosiliaris sehingga kerja silia melambat dalam membersihkan  benda  asing  yang  masuk  ke saluran  pernapasan.  Sel  goblet  mengeluarkan mukus  lebih  banyak  tetapi  proporsi  sel  bersilia terhadap  sel  goblet  tidak  seimbang,  yang sebenarnya  silia  diperlukan  untuk  membantu mendorong  dengan  cepat  bahan  iritan  dari  uap bensin  yang  menempel  pada  permukaan  sel tetapi  akibat  penurunan  kerja  dari  sel  bersilia
sehingga  zat  iritan  yang  ditangkap  oleh  mukus tidak  dapat  dikeluarkan  atau  dipindahkan  oleh silia maka terjadi kongesti saluran pernapasan 2 .
Pada proses fisiologis dalam tubuh ketika awal paparan zat iritan pada permukaan bronkus maka,  mukus  akan  berfungsi  untuk  menangkap partikel-partikel  kecil  dan  besar  agar  tidak mencapai alveolus. Lendir kemudian dikeluarkan dari  saluran  pernapasan  oleh  silia.  Silia menggerakkan  lendir  keluar  dari  paru  secara perlahan-lahan.  Partikel  yang  tertangkap  di dalamnya  kemudian  akan  ditelan  atau dibatukkan 4 .
Namun,  akibat  penurunan fungsi  dari sel silia  menyebabkan  sel  goblet  mengalami peningkatan  fungsi  dalam  memproduksi  mukus dan terjadi peningkatan jumlah sel goblet dalam melindungi  permukaan  epitel.  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  yang  dilakukan  bahwa terdapat  perbedaan  jumlah  sel  goblet  pada bronkus  pada  masing-masing  perlakuan. Perbedaan  tersebut  dikarenakan  kandungan substansi  pada  bensin  P2  dan  P1.  Seperti  yang telah dibahas sebelumnya, substansi yang paling mempengaruhi pernapasan merupakan substansi yang  terdapat  pada  P2  yaitu  timbal.  Timbal merupakan  logam  berat  dan  memiliki  sifat mudah  menguap  sehingga  mudah  untuk mempengaruhi  tubuh.  Logam  berat  memiliki masa  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan substansi  lain  yang  terkandung  dalam  bensin. Sehingga  timbal  lebih  mudah  menempel  pada permukaan  saluran pernapasan sehingga menyebabkan sekresi mukus dari sel goblet lebih banyak.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Keenan,  J.J.,  Gaffney,  S.H.,  Galbraith, D.A.,  Beatty,  P.,  &  Paustenbach,  D.J.  (22 Januari  2010).  Gasoline:  A  complex chemical  mixture,  or  a  dangerous  vehicle for  benzene  exposure?. Jurnal  Chemico- Biological Interactions , dari http://www.sciencedirect.com/science/arti cle/pii/S0009279710000402
2. Stikkers, David E.  (2002, 11 Juni). Octane and the environment. The Science of the Total Environment, http://www.sciencedirect.com/science/arti cle/pii/S0048969702002711
3. Kinawy,  Amal  A.  (2009,  4  Maret).  Impact of gasoline inhalation on some neurobehavioural  characteristics  of  male
rats. Jorrnal  of  BioMed  Central .  Diakses  24 November 2009, dari http://www.biomedcentral.com/1472- 6793/9/21
4. Guyton,  Arthur  C.M.D  &  Hall,  John  E. Ph.D. (2007). Buku Ajar Fisiologi Kedokteran (11 th ed.). Jakarta: EGC.
5. McCaskill , Michael L., Romberger , Debra J., DeVasure, Jane., Boten, Jessica., Sisson, Joseph H., Bailey, Kristina L., et al. (2012, 26  Juni).  Alcohol  exposure  alters  mouse lung  inflammation  in  response  to  inhaled dust .  Jurnal  Nutrients .  Diakses  4  Juli  2012. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles /PMC3407989/