Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 4 Nomor 1, Maret 2022
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v4i1.13599
Analisis Cemaran Bakteri Coliform Pada Minuman Jajanan Dengan Metode MPN ( Most Probable Number )
Ervina Surnianingsi Jufri 1 , Ismail Rahman 2
1 Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran Universitas Khairun
2 Departemen Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Khairun
*Penulis Korespondensi. Email : ismailrahman@unkhair.ac.id

## ABSTRAK
Cemaran Coliform pada minuman jajanan dapat memberikan dampak buruk bagi kesehatan para konsumen, salah satunya bisa menyebabkan penyakit diare. Menurut laporan dari World Health Organization (WHO) terdapat kurang lebih 1,7 miliar kasus diare yang terjadi di dunia setiap  tahunnya. Di  Indonesia  berdasarkan  laporan  Kementerian  Kesehatan  Republik Indonesia pada tahun 2017 jumlah penderita diare pada semua umur yang dilayani di sarana kesehatan  sebanyak  4.274.790  penderita  dan  terjadi  peningkatan  pada  tahun  2018  yaitu menjadi  4.504.524  penderita.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  keberadaan  ada tidaknya cemaran bakteri Coliform pada minuman jajanan yang diperoleh di sekitar taman di Kota  Ternate.  Penelitian  ini  adalah  penelitian  deskriptif  dengan  menggunakan  pengujian laboratorium. Pengujian MPN Coliform di lakukan di UPT. Laboratorium Dasar dan Terpadu, Provinsi Maluku Utara. Dilakukan dua pengujian yaitu uji pendugaan dan uji penegasan. Uji dilakukan pada 22 sampel minuman jajanan es serbuk instan di berbagai taman di sekitar Kota Ternate. Hasil penelitian menunjukkan pada 22 sampel ditemukan 20 sampel positif bakteri Coliform yaitu dengan nilai MPN >3/g atau >3/ml dengan presentase sebesar (90,9%) sehingga telah melebihi ambang batas baku mutu berdasarkan Standar Nasional Indonesia (SNI) 7388 tahun 2009 dan terdapat 2 sampel dinyatakan negatif Coliform dengan nilai MPN <3/g atau <3/ml dengan presentase sebesar (9,1%). Kata Kunci: Bakteri Coliform , Minuman Jajanan, Diare.
Diterima: 10-02-2022 Disetujui: 19-02-2022 Online: 27-02-2028

## ABSTRACT
Coliform contamination on street drinks can have a bad impact on consumers health, one of which  can  cause  diarrheal  diseases.  According  to  report  from  World  Health  Organization (WHO) there are approximately 1.7 billion cases of diarrhea that occur in the world every year. In Indonesia based on a report by the Ministry of Health of the Republic Indonesia in 2017 the number of diarrhea sufferers at all ages served in health facilities as many as 4,274,790 patients and  there  was  an  increase  in  2018  to  4,504,524  patients.  This  research  aims  to  find  out  the presence of Coliform bacteria contamination on street drinks obtained around the park in the Ternate  City.  This  reseach  is  Descriptive  research  using  laboratory  testing.  MPN Coliform testing is performed at UPT. Basic and Integrated Laboratory, North Maluku Province. Two tests  were  conducted  namely  the  presumption  test  and  the  affirmation  test.  The  test  was conducted on 22 samples of instant iced street drinks in various parks around ternate city. The results showed that in 22 samples were found 20 positive samples of Coliform bacteria with MPN values of >3 /g or >3 / ml with a percentage of (90.9%) so that it has exceeded the quality standard threshold based on Indonesian National Standard (SNI) 7388 of 2009 and there are 2 samples tested negative Coliform with MPN value <3 / g or <3 / ml with a percentage of (9.1%).
Copyright © 2022  Jsscr. All rights reserved
Keywords: Coliform Bakteria, Street Drinks, diarrhea. Received: 2022-02-10 Accepted: 2022-02-19 Online: 2022-02-28

## 1. Pendahuluan
Minuman jajanan olahan merupakan minuman yang dibuat menggunakan air yang  diolah  dengan  teknologi  yang  sangat  sederhana.  Minuman  jajalan  olahan  yang biasa dijual oleh para pedagang kaki lima adalah campuran beberapa bahan tambahan baik alami maupun sintetik yang siap dikonsumsi dan dijual. Minuman jajanan olahan biasanya di tampilkan dalam berbagai bentuk, warna, dan rasa yang sangat beragam (bermacam-macam varian rasa), harga yang murah serta mudah didapatkan sehingga menjadikan minuman jajanan olahan sangat populer di masyarakat [1].
Minuman jajanan yang dijual dengan tidak memperhatikan higiene dan sanitasi lingkungan dapat berkemungkinan akan menjadi media dan wadah dalam penyebaran penyakit  berupa  bakteri  patogen  seperti Escherichia  coli,  Salmonella  typhosa,  Shigela dysenteriae, dan Vibrio cholera . Beberapa patogen penyebab gangguan kesehatan tersebut di  kelompokkan  dalam  jenis  bakteri Coliform .  Bakteri Coliform adalah  bakteri  yang digunakan  sebagai  indikator  sanitasi  pangan  yang  dapat  menyebabkan  gangguan kesehatan.  Gangguan  kesehatan  yang  dapat  terjadi  berupa  gangguan  pada  saluran pencernaan dengan gejala mual, perut mulas, muntah, dan diare [2]. Penyakit saluran pencernaan yang sering dialami akibat mengkonsumsi makanan jajanan sembarangan adalah diare. Menurut Food and Agricultural Organization (FAO) makanan jajanan adalah makanan  dan  minuman  yang dipersiapkan  untuk  dijual  oleh  pedagang  kaki lima  di jalanan  atau  di  tempat-tempat keramaian  umum  yang  langsung dimakan  atau dikonsumsi tanpa pengolahan atau persiapan lebih lanjut [3].
Menurut World Health Organization (WHO) terdapat kurang lebih 1,7 miliar kasus diare  yang  terjadi  di  dunia  setiap  tahunnya  [4]. Di  Indonesia  berdasarkan  laporan Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia  pada  tahun  2017  jumlah  penderita  diare pada semua umur yang dilayani di sarana kesehatan sebanyak 4.274.790 penderita dan terjadi peningkatan pada tahun 2018 yaitu menjadi 4.504.524 penderita [5]. Sedangkan, Menurut Badan Pusat Statistik (BPS) Provinsi Maluku Utara pada tahun 2017 terdapat 2.110 kasus diare, dan terjadi peningkatan pada tahun 2018 terdapat 17.130 kasus diare. Kasus diare di Ternate menduduki urutan ke 2 di Provinsi Maluku Utara yaitu sebesar 3.439 kasus [6].
Taman di Kota Ternate adalah Ruang Terbuka Hijau (RTH) yang memiliki fungsi sebagai  keindahan  kota  dan  sebagai  tempat  pengunjung  untuk  bersantai  ataupun sekadar ingin berfoto, disamping fungsi taman yang memiliki keindahan tempat orang bersantai terdapat juga jajanan makanan dan minuman yang tersedia sepanjang jalan di sekitar taman di Kota Ternate. Kota Ternate memiliki 12 taman yang bisa bersifat aktif dan bersifat pasif. Taman yang bersifat aktif dimaksud yaitu taman yang tidak hanya bisa  dinikmati  tapi  juga  menjadi  tempat  berbagai  aktivitas  yang  bisa  dilakukan, sedangkan  taman  yang  bersifat  pasif  yaitu  taman  yang  dibentuk  untuk  dinikmati keindahannya tetapi tidak ada aktivitas di dalamnya. Taman di Kota Ternate terdapat sebanyak 5 taman yang aktif penjual minumannya dengan berbagai pedagang minuman yang  berjualan.  Berdasarkan  survei  yang  dilakukan  peneliti  pada  hari  Senin,  29 November 2021 pukul 17.00-18.00 WIT, di beberapa taman di Kota Ternate. Hasil yang di dapatkan bahwa ada 22 pedagang pentol yang menjual minuman es serbuk instan [7].
Berdasarkan uraian diatas, peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang cemaran bakteri Coliform pada minuman jajanan yang dijual di sekitar taman di Kota Ternate.  Untuk  mengetahui  bagaimana  kualitas  pengolahan  dan  sanitasi  minuman jajanan  pada  pedagang  kaki  lima  yaitu  pedagang  pentol  yang  menjual  minuman  es serbuk instan, apakah tercemar bakteri Coliform atau tidak.

## 2. Metode Desain, tempat, dan waktu
Jenis  penelitian  ini  adalah  penelitian  deskriptif,  dengan  menggunakan pemeriksaan  uji  laboratorium,  dan  menggunakan  Metode  MPN  deretan  3  tabung. Penelitian ini dilakukan di UPT. Laboratorium Dasar dan Terpadu Universitas Khairun yang berlokasi di Jl. Jusuf Abdulrahman, Kampus II Universitas Khairun pada bulan Desember 2021 - Januari 2022.

## Alat dan bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  alat-alat  laboratorium mikrobiologi, seperti inkubator, autoklaf, rak tabung, tabung reaksi, tabung Durham, beker  glass ,  batang  pengaduk,  mikropipet,  gelas  ukur,  Erlenmeyer, hot  plate ,  neraca digital, laminar  air  flow ,  lampu  spirtus,  kawat  ose,  serta  peralatan  lain  yang  nanti dibutuhkan  dan  digunakan  di  UPT.  Laboratorium  Dasar  dan  Terpadu.  Bahan  yang digunakan dalam penelitian ini berupa sampel minuman jajanan es serbuk instan, media Lactose Broth , media Brilliant Green Lactose Bile Broth , alkohol 70%, tissu, kapas, kertas aluminium foil, plastik tebal dan label.

## Populasi dan sampel
Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah  minuman  jajanan  yang  dijual  oleh pedagang  pentol  di  sekitar  taman  di  Kota  Ternate.  Pada  penelitian  ini,  teknik pengambilan  sampel  menggunakan  total  sampling,  seluruhnya  dijadikan  sebagai sampel karena jumlah pedagang pentol yang akan diteliti tidak banyak, sehingga harus digunakan  adalah  total  pedagang  pentol.  Minuman  es  serbuk  instan  yang  dimaksud adalah  jajanan  minuman  es  yang  langsung  jadi  dan  siap  dikonsumsi  yang  dijual  di sekitar taman di Kota Ternate. Minuman es serbuk instan diambil sebagai sampel pada pegadang pentol sebanyak 100 ml. Berdasarkan survei yang telah dilakukan pada hari Senin, 29 November 2021 pukul 17.00-18.00 WIT, di beberapa taman di Kota Ternate. Terdapat 22 pedagang pentol yang menjual minuman jajanan es serbuk instan.

## Prosedur Kerja
Alat-alat  yang  akan  digunakan  disterilkan  semua  alat  dicuci  dan  dikeringkan terlebih  dahulu,  dan  disterilisasikan  dalam  autoklaf.  Selanjutnya  pembuatan  media lactose broth (LB) dan Brilliant Green Lactose Bile ( BGLB) timbang sesuai kebutuhan yang dibutuhkan,  media  dimasukkan  ke  dalam  Erlenmeyer,  setelah  itu  dilarutkan  dengan aquades yang dibutuhkan, kemudian dipanaskan di atas hot plate diaduk sampai larut sempurna. Untuk sampel diambil dan dimasukkan ke dalam wadah botol steril bertutup ulir  dan  ditutup  rapat  kemudian  diberi  label  pada  masing-masing  sampel:  sampel berapa,  lokasi  pengambilan,  dan  waktu  pengambilan.  Kemudian  sampel  minuman diencerkan,  dengan  menyediakan  3  tabung  reaksi  secara  aseptik.  Inokulasikan  1  ml sampel  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  sudah  berisi  9  ml  aquades  steril,  kemudian  di homogenkan, sehingga diperoleh pengenceran 1:10, 1:100 dan 1:1000 atau bisa ditulis 10 -1 , 10 -2 , 10 -3 .
Selanjutnya  uji  pendugaan  dilakukan  dengan  beri  tanda  untuk  setiap  sampel dan pengenceran agar tabung tidak tertukar dan mempermudah pengamatan. Siapkan
9 tabung reaksi diisi tabung Durham terbalik dan media LB. Secara aseptik tambahkan sebanyak 1 ml sampel dengan menggunakan pipet steril pada pengenceran 1:10 pada masing-masing  tabung  yang  telah  diberi  label.  Lakukan  seterusnya  sampai  pada pengenceran 1:1000. Selanjutnya diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37 0 C selama 24-48  jam.  Kemudian,  lakukan  pengamatan.  Hasil  dari  uji  pendugaan  tabung  yang positif di lakukan uji penegasan. diinokulasikan ke dalam tabung reaksi yang telah berisi media BGLB, dan masing-masing tabung diisi satu sampai dua ose yang pengerjaannya dilakukan secara aseptik, selanjutnya dimasukkan ke dalam inkubator pada suhu 37 0 C selama 24-48 jam. Kemudian, lakukan pengamatan pada masing-masing tabung reaksi, tabung yang apabila positif maka akan terdapat gelembung gas pada tabung Durham dan  warna  media  menjadi  keruh.  Apabila  setelah  diamati  24  jam  belum  terjadi perubahan,  inkubasi  dilanjutkan  hingga  48  jam.  Pembacaan  hasil  dilakukan  dengan menghitung jumlah tabung yang positif dan angka yang diperoleh dicocokkan dengan tabel MPN Coliform Perhitungan Nilai MPN Coliform
Penentuan  nilai  MPN Coliform pada  sampel  minuman  jajanan  dilihat  dengan adanya  gelembung  gas  pada  tabung  Durham  dan  warna  media  menjadi  keruh,  dan jumlah tabung pada uji pendugaan untuk tiga seri pengenceran dihitung tabungnya. Angka  kombinasi  jumlah  tabung  positif  sesuai  dengan  jumlah  tabung Durham  yang terbentuknya gas dan warna media menjadi keruh pada tiap-tiap pengenceran. Untuk menentukan nilai MPN untuk tiga seri pengenceran berdasarkan nilai pada tabel MPN Coliform .

## Teknik pengumpulan data
Data primer adalah data dari hasil uji laboratorium pada jajanan minuman di ruang  lingkup  sekitar  taman  di  Kota  Ternate.  dan  data  sekunder  adalah  data  yang diperoleh  dari  jurnal,  literatur  dan  referensi  terkait  maupun  dari  buku-buku  yang dipublikasikan  kemudian  dijadikan  landasan  teoritis.  Dokumentasi  adalah  peneliti secara langsung dapat memperoleh bahan dokumentasi dilapangan, berupa foto atau video  dari  hasil  pengamatan.  Observasi  yang  diartikan  sebagai  pengamatan  dan pencatatan yang dilakukan secara sistematik terhadap hal-hal yang tampak pada objek penelitian.

## Analisi data
Analisis  data  berdasarkan  hasil  pengamatan  peneliti  yang  dilakukan  di laboratorium  terhadap  bakteri Coliform yang  terdapat  pada  minuman  jajanan  yang dijual oleh pedagang pentol di sekitar taman di Kota Ternate. Setelah diperoleh data hasil  terhadap  sampel  uji,  data  yang  didapatkan  akan  dilihat  tingkat  cemarannya dengan  nilai  standar  yang  telah  ditetapkan  berdasarkan  Standar  Nasional  Indonesia (SNI) 7388 tahun 2009 tentang batas maksimum mikroba pada minuman serbuk instan. Penyajian  data  yang  dapatkan  ditampilkan  dalam  bentuk  tabel  dan  grafik.  Dengan menggunakan  perhitungan  persentase  minuman  jajanan  yang  memenuhi  syarat  dan tidak memenuhi syarat berdasarkan SNI.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  selama  hampir  1  bulan  di UPT.  Laboratorium  Dasar  dan  Terpadu  kampus  II  Unkhair  yaitu  pada  tanggal  20 Desember sampai 7 Januari 2022 yang dilakukan pada 22 sampel minumam jajanan yang diperoleh  dari  22  pedagang  pentol  yang  berbeda  yang  menjual  minuman  es  serbuk instan yang sudah jadi dan dijual di sekitar taman di Kota Ternate. Pengambilan sampel dilakukan pada waktu sore hingga malam, setelah diambil menggunakan wadah botol
steril bertutup ulir. Sampel dilakukan pengenceran dan diinokulasikan ke dalam media LB untuk dilakukan uji pendugaan dan diidentifikasi selama waktu yang ditentukan, setelah diperoleh sampel positif pada media LB maka dilanjutkan ke media BGLB untuk dilakukan uji penegasan untuk memastikan adanya kontaminasi bakteri Coliform atau bakteri  Gram  negatif.  Adapun  hasil  yang  diperoleh  dapat  dilihat  pada  tabel  1  dan gambar 1 di bawah ini :
Tabel 1. Hasil Uji Pendugaan pada Media Lactose Broth dengan suhu 37
0 C selama 24-48 Jam No Kode Sampel Jumlah Tabung yang Positif Gas 1:10 1:100 1:1000 1 SpA1 + + + + + + + + + 2 SpA2 + + + + + + - - - 3 SpB1 + + + + + + + + + 4 SpC1 - - - - - + + + + 5 SpD1 - - - - - - - - - 6 SpE1 + + + + + + + + + 7 SpA3 + + - - - - - - - 8 SpA4 + + + + + + + + + 9 SpB2 + + + + + + + + + 10 SpB3 + + + +  + + + - + 11 SpB4 + + + + + + + + + 12 SpC2 + + + + + + - - - 13 SpD3 - - + - - - - - - 14 SpD2 - - - - - - - - - 15 SpD6 - - + - - - - - - 16 SpD4 - + - - - - - - - 17 SpD5 + + + + - + + + - 18 SpD7 + + + + + + + + + 19 SpD8 + + + - + - - + + 20 SpD9 + + + + + + + - + 21 SpD10 + + + + + - - + + 22 SpD11 + + + + + + - + +
Keterangan :
A. Hasil negatif tidak terdapat gelembung gas
B. Hasil positif terdapat gelembung gas dan warna media menjadi keruh

## Gambar 1. Uji Pendugaan pada Lactose Broth
Dari  hasil  yang  ditampilkan  pada  tabel  di  atas  dapat  dilihat  pada  gambar  1 bahwa  setelah  diinkubasi  dan  diindentifikasi,  didapatkan  dari  uji  pendugaan  pada media LB terdapat 20 sampel positif ditandai dengan timbulnya gelembung gas pada tabung Durham dan warna media menjadi keruh. Kemudian hasil yang positif dari uji pendugaan dilanjutkan ke uji penegasan yaitu diinokulasikan ke media BGLB. Media BGLB  merupakan  media  yang  digunakan  untuk  mendeteksi  adanya  bakteri Coliform atau Gram negatif. Hasil pengamatan pada uji penegasan dapat dilihat pada tabel 2 dan gambar 2 di bawah ini :
Tabel 2. Hasil Uji Penegasan pada Media Brilliant Green Lactose Bile dengan suhu 37
0 C selama 24-48 Jam No Kode Sampel Jumlah Tabung yang Positif Gas 1:10 1:100 1:1000 1 SpA1 + + + + + + + + + 2 SpA2 + + + + + + - - - 3 SpB1 + + + + + + + + + 4 SpC1 - - - - - + + + + 5 SpE1 + + + + + + + + + 6 SpA3 + + - - - - - - - 7 SpA4 + + + + + + + + + 8 SpB2 + + + + + + + + + 9 SpB3 + + + + + + + - + 10 SpB4 + + + + + + + + + 11 SpC2 + + + + + + - - - 12 SpD3 - - + - - - - - - 13 SpD6 - - + - - - - - -
B A
14 SpD4 - + - - - - - - - 15 SpD5 + + + + - + + + - 16 SpD7 + + + + + + + + + 17 SpD8 + + + - + - - + + 18 SpD9 + + + + + + + - + 19 SpD10 + + + + + - - + + 20 SpD11 + + + + + + - + +
Keterangan :
A. Hasil positif terdapat gelembung gas dan warna media menjadi keruh Gambar 2. Uji Penegasan pada Media Brilliant Green Lactose Bile
Dari hasil yang ditampilkan pada tabel 2 dan gambar 2 dapat diketahui bahwa sampel positif dari media LB yang dinokulasikan ke media BGLB positif mengadung bakteri Coliform yang  ditandai  dengan  terbentuknya  gelembung  gas  pada  tabung Durham dan warna media menjadi keruh. Hasil positif dari uji penegasan dicocokkan dengan tabel MPN Coliform. Hasil pengujian sampel minuman jajanan es serbuk instan di sekitar taman di Kota Ternate Berdasarkan Standar Nasional Indonesia (SNI) 7388 tahun 2009 dengan standar batas maksimum mikroba yang layak dikonsumsi adalah sampel  5  dan  14  yaitu  dengan  nilai  MPN  <3/g  atau  <3/ml  dan  memenuhi  syarat mikrobiologis  yang  ditetapkan  Standar  Nasional  Indonesia  (SNI)  7388  tahun  2009, sedangkan 20 sampel lainnya tidak memenuhi syarat mikrobiologis berdasarkan SNI. Adapapun hasil kombinasi tabung positif dan nilai NPM Coliform dapat dilihat pada tabel 3 di bawah ini :
A
Tabel 3. Hasil Kombinasi Tabung Positif dan Nilai NPM Coliform No Kode Sampel Jumlah Tabung yang Positif Gas Jumlah Kombinasi Tabung Positif MPN Coliform per Gram/ml Keterang an 1:10 1:100 1:1000 1 SpA1 + + + + + + + + + 3-3-3 >1100 TMS 2 SpA2 + + + + + + - - - 3-3-0 240 TMS 3 SpB1 + + + + + + + + + 3-3-3 >1100 TMS 4 SpC1 - - - - - + + + + 0-1-3 12 TMS 5 SpD1 - - - - - - - - - 0-0-0 <3 MS 6 SpE1 + + + + + + + + + 3-3-3 >1100 TMS 7 SpA3 + + - - - - - - - 2-0-0 9,2 TMS 8 SpA4 + + + + + + + + + 3-3-3 >1100 TMS 9 SpB2 + + + + + + + + + 3-3-3 >1100 TMS 10 SpB3 + + + + + + + - + 3-3-2 1100 TMS 11 SpB4 + + + + + + + + + 3-3-3 >1100 TMS 12 SpC2 + + + + + + - - - 3-3-0 240 TMS 13 SpD3 - - + - - - - - - 1-0-0 3,6 TMS 14 SpD2 - - - - - - - - - 0-0-0 <3 MS 15 SpD6 - - + - - - - - - 1-0-0 3,6 TMS 16 SpD4 - + - - - - - - - 1-0-0 3,6 TMS 17 SpD5 + + + + - + + + - 3-2-2 210 TMS 18 SpD7 + + + + + + + + + 3-3-3 >1100 TMS 19 SpD8 + + + - + - - + + 3-1-2 120 TMS 20 SpD9 + + + + + + + - + 3-3-2 1100 TMS 21 SpD10 + + + + + - - + + 3-2-2 210 TMS 22 SpD11 + + + + + + - + + 3-3-2 1100 TMS Keterangan : Sp : Sampel TMS : Tidak Memenuhi Syarat + : Positif MS : Memenuhi Syarat
-        : Negatif
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan  untuk  mengetahui  jumlah persentase bakteri Coliform positif dan negatif pada sampel minuman jajanan es serbuk instan  maka  dilakukan  perhitungan  persentase  yaitu  dengan  menggunakan  rumus perhitungan persentase, dari hasil yang diperoleh dari 22 sampel didapatkan 20 sampel tidak memenuhi  syarat dengan persentase sebesar 90,9% dan yang memenuhi syarat ada  2  sampel  dengan  persentase  sebesar  9,1%.  Dengan  demikian,  maka  secara keseluruhan  jumlah  persentase  sampel  positif  dan  negatif  berdasarkan  perhitungan
persentase dinyatakan tidak sebanding atau sangat berbeda jauh. Hal ini dapat dilihat pada gambar grafik di bawah ini :
Gambar 3. Grafik Jumlah Bakteri pada Sampel Minuman Jajanan Es Serbuk Instan
Berdasarkan  hasil  penelitian  di  atas  pada  sampel  minuman  jajanan  es  serbuk instan  di  sekitar  taman  di  Kota  Ternate  dari  22  sampel  yang  diambil  dan  dilakukan isolasi dengan media LB untuk dilakukan uji pendugaan kemudian diinkubasi selama 24-48 jam. Setelah diinkubasi ditemukan perubahan yaitu terbentuknya gelembung gas pada tabung Durham dan tabung reaksi mengalami kekeruhan, di mana pertumbuhan tersebut terdapat pada 20 sampel dengan jumlah pertumbuhan bakteri Coliform melebihi ambang batas mutu kelayakan konsumsi minuman jajanan es serbuk instan, sedangkan pada  2  sampel  yaitu  sampel  5  dan  14  memenuhi  syarat  mutu  berdasarkan  SNI, dikarenakan jumlah pertumbuhan bakteri Coliform tidak melebihi ambang batas mutu kelayakan minuman jajanan es serbuk instan. Setelah dilakukan uji pendugaan dengan media LB, sampel yang dinyatakan positif akan dilanjutkan uji penegasan pada media selektif  BGLB  untuk  memperkuat  hasil  uji  sebelumnya  tentang  keberadaan  bakteri Coliform pada sampel. Menurut Ferdiaz, 1989 pada uji penegasan media yang digunakan yaitu  BGLB  digunakan  untuk  mendeteksi  adanya  bakteri Coliform .  BGLB  dengan komposisi  berupa  garam  empedu  dan  laktosa  sehingga  mampu  membuat  bakteri Coliform tumbuh dengan optimal (maksimal), selain itu BGLB mengandung garam ox bile berfungsi sebagai inhibitor untuk menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif, sehingga bakteri yang tumbuh berupa bakteri Gram negatif. Laktosa pada media BGLB hanya dapat difermentasikan oleh bakteri Coliform menjadi asam suksinat dan fumarat diikuti pembentukan O 2 oleh bakteri Coliform fakultatif anaerob dan CO 2 oleh bakteri Coliform aerob. Pembentukan gas O 2 dan CO 2 tersebut dijadikan parameter (tolok ukur) ada tidaknya bakteri Coliform dalam sampel [8,9].
Berdasarkan hasil pengujian ditemukan 20 sampel positif adanya pertumbuhan bakteri Coliform dengan ciri khas yaitu timbulnya gelembung gas pada tabung Durham dan warna media menjadi keruh, diduga telah ditumbuhi olah bakteri peragi laktosa yaitu bakteri Coliform . Menurut Putri dkk, 2018 Hal ini terjadi karena tabung reaksi yang tertutup rapat menyebabkan gas karbon pada tabung Durham akan terdorong dalam waktu  24  jam  sehingga  akan  banyak  ruang  gas  yang  terbentuk  dan  menyebabkan
90,9% 9,1% 0% 10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100% Sampel Positif Sampel Negatif

## Persentase Jumlah Bakteri pada Sampel Minuman
Jajanan Es Serbuk Instan
perubahan  warna  akibat  fermentasi  laktosa  [10].  Hasil  penelitian  yang  didapatkan, sejalan dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh Julia & Latumeten dkk, 2017 yang diperoleh  di  depan  kampus  Universitas  Kristen  Indonesia,  Provinsi  Maluku menunjukkan dari 10 sampel yang diperoleh ditemukan 8 sampel positif mengandung bakteri Coliform. [11] Hal  ini  di  dukung  dengan  hasil  penelitian  yang  dilakukan Wulansari dkk, 2017 pada sampel minuman yang diteliti ditemukan 27 sampel positif mengandung  bakteri Coliform dan  Sunarti  2016  pada  sampel  minuman  ditemukan  4 sampel positif mengandung bakteri Coliform [12,13].
Terdapat 2 sampel negatif bakteri Coliform artinya pedagang minuman tersebut memenuhi syarat mutu berdasarkan SNI, kemungkinan bakteri yang terdapat pada air yang  digunakan  dalam  proses  pengolahan  minuman  tersebut  dilakukan  proses pemanasan air sehingga tidak terdapat bakteri sama sekali, selain itu juga dipengaruhi kondisi  sanitasi  yang  cukup  baik,  wadah  penyimpanan  air  bersih,  peralatan  yang digunakan  untuk  mengambil  minuman  dapat  dikatakan  cukup  baik  (bersih),  dan tempat minumannya selalu tertutup. Walaupun tempat penjual dekat dengan sumber pencemar (jalan  raya)  tetapi  sanitasi  dan  hygiene  pedagang  dikatakan  baik  sehingga tidak  memberikan  peluang  untuk  bakteri  tumbuh  dan  hidup  pada  minuman  yang dijual.  Sedangkan  berdasarkan  hasil  observasi,  keberadaan  bakteri Coliform pada  20 sampel positif minuman jajanan es serbuk instan di sekitar taman di Kota Ternate, dapat dipengaruhi oleh keadaan hygiene pedagang yang kurang baik, serta sanitasi tempat jualan  yang  kurang  bersih.  Hygiene  pedagang  yang  kurang  baik  seperti  tempat penyimpanan air yang kotor, penggunaan es batu yang dibeli  dan  digunakan dalam pengolahan  minuman  kemungkinan  tidak  dimasak  pada  suhu  yang  memungkinkan bakteri Coliform dapat bertahan hidup, dan tempat jualan yang dekat dengan sumber pencemar seperti jalan raya berdebu atau tempat sampah sehingga membawa bakteri seperti  lalat  yang  dapat  mengkontaminasi  minuman  jajanan  yang  berjualan  di sekitarnya [11].
Karakteristik  penjual  berdasarkan  observasi  yang  dilakukan  peneliti mendapatkan  bahwa  pedagang  menyajikan  minuman  dengan  kuku  yang  belum digunting  dan  kurang  bersih,  tangan  pedagang  yang  baru  saja  memegang  uang konsumen  melayani  konsumen  berikutnya  tanpa  melakukan  cuci  tangan,  penjual menggunakan  gelas  yang  disentuh  beruang-ulang  tanpa  melakukan  cuci  tangan, ditempatkan di dalam termos yang berisi minuman, dan penjual menggunakan botol plastik  yang  dipotong  sebagai  alat  untuk  penyaringan  minuman  es  serbuk  instan  ke dalam  plastik  es  dan  diletakkan  ditempat  terbuka,  dari  hasil  pengamatan  yang dilakukan peneliti bahwa tempat jualan terletak di pinggir jalan raya, sehingga kotoran, debu, dan sampah lingkungan yang tidak diperhatikan kebersihannya berkemungkinan masuk dan dapat menjadi faktor terkontaminasi bakteri. Hal ini tidak sejalan dengan Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 942/Menkes/SK/VII/2003 tentang pedoman persyaratan hygiene sanitasi makanan dan minuman bahwa sangat penting  menjaga  kebersihan  kuku,  tangan,  rambut,  dan  sandang  (pakaian),  mencuci tangan setiap kali mau mengambil atau menangani makanan dan minuman, memegang makanan  dan  minuman  harus  memakai  alat  (penjepit  makanan)  atau  dengan  alas tangan, tidak sambil merokok, menggaruk bagian badan seperti hidung, telinga, mulut atau  lainnya,  serta  tidak  batuk  atau  bersin  dihadapan  makanan  dan  minuman  yang dihidangkan  tanpa  menutup  mulut  dan  hidung.  Pedagang  harus  memenuhi persyaratan tersebut dengan tidak menderita sakit penyakit menular, seperti influenza, batuk, diare (menceret) [14].

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  maka  diperoleh  kesimpulan bahwa dari 22 sampel yang diambil di beberapa taman di Kota Ternate (5 lokasi) yang berbeda didapatkan 20 sampel minuman jajanan es serbuk instan positif terdapat bakteri Coliform dengan nilai MPN >3/g atau >3/ml dengan persentase sebesar (90,9%).

## Ucapan Terima Kasih
Dengan  selesainya  penelitian  ini  saya  ucapkan  terima  kasih  yang  sebesar-besarnya kepada semua pihak yang telah berkontribusi dan membantu, sehingga penelitian ini dapat terlaksana dengan baik.

## Referensi
[1]. Yani AP, Indriati G, Hidayat Y. Uji Bakteriologis Jajanan Minuman Di Sekolah Dasar Negeri Kecamatan Padang Timur. Jurnal Pendidikan Biologi. 2010;
[2].  Siti Fatimah, Yuliana Prasetyaningsih MFIS. Analisis Coliform Pada Minuman Es Dawet Yang Dijual Di Malioboro Yogyakarta. 2017;978–9.
[3].  Fitri  Dyna,  Veni  Dayu  Putri  DI.  Hubungan  Perilaku  Komsumsi  Jajanan  Pada Pedagang. Kesehatan. 2018;3(3):525,530.
[4].  WHO. Diarrhoeal  Disease . World  H  ealth  Organization .  [Cited  2021  Oct 14].availablefrom:https://www.who.int/newsroom/factsheets/detail/diarrhoeal- disease
[5].  Widgery D. Health Statistics (Profil Kesehatan Indonesia 2018). Vol. 1, Science As Culture. Jakarta: Kementerian Kesehatan Republik Indonesia; 2019. 195–198 P.
[6].  BPS. Badan Pusat Statistik Provinsi Maluku Utara. [Cited 2021 Sep 28]. Available from: https://malut.bps.go.id/indicator/30/41/1/jumlah-kasus-hiv-aids-ims- dbd-diare-tb-dan-malaria-menurut-kabupaten-kota.html
[7].  Said M, Rustam MS. Pembangunan Prasarana Hutan Kota Sebagai Ruang Terbuka Hijau (Rth) Kota Ternate. Dintek. 2020;13(1):72–9. Available from:http://www.jurnal.ummu.ac.id/index.php/dintek/article/view/476
[8]. Ferdiaz. Analisis Mikroiologi Pangan. Departemen pendidikan dan kebudayan IPB, Bogor, 1989
[9].  Adityawarman.  Analisis  bakteri  coliform  dalam  produk  es  batu  kemasan  dari  5 usaha  mikro  dengan  metode  Most  Probable  Number  (Mpn)  di  Kecamatan Danurejan, Yogyakarta. 2012;
[10]. Putri AM, Kurnia P. Identifikasi Keberadaan Bakteri Coliform Dan Total Mikroba Dalam Es Dung-Dung Di Sekitar Kampus Universitas Muhammadiyah Surakarta. Media Gizi Indonesia. 2018;13(1):41.
[11]. Julia P, Latumeten  NC, Souisa G V. Analisis Cemaran Escherichia Coli Pada Jajanan Gorengan Dan Minuman Olahan Di Depan Kampus Universitas Kristen Indonesia Maluku (Ukim) Ambon. 2-Trik Tunas-Tunas Riset Kesehatan. 2017;7(2):149–56.
[12]. Wulansari NT, Marjati J, Yuliantika LA, Strisanti IAS. Analisis Bakteriologi Sample Minuman  Yang  Diambil  Dari  Area  Sekitar  Kampus  Ii  Sekolah  Tinggi  Ilmu Kesehatan Bali. Metamorfosa Journal of Biological Sciences. 2017;4(2):224.
[13]. Sunarti  RN. Uji  kualitas air minum isi  ulang disekitar kampus uin Raden Fatah Palembang. Bioilmi Jurnal Pendidikan. 2016;2(1).
[14].  Kepmenkes.  Keputusan  Menteri  Kesehatan  RI  No.942/Menkes/SK/VII/2003 Tentang Persyatan Hygiene Sanitasi Makanan Jajanan. Mentri Kesehatan Republik Indonesia. 2003;1–10.