## ANALISIS SPEKTRUM UV-VIS UNTUK MENGUJI KEMURNIAN KOPI LUWAK

## UV-VIS SPECTRUM ANALYSIS TO DETERMINE THE AUTHENTICITY OF CIVET COFFEE
Oleh: Sri Waluyo 1 , Fipit Novi Handayani 2 , Diding Suhandy 1 , Winda Rahmawati 1 , Cicih Sugianti 1 , Meinilwita Yulia 3
1) Dosen Jurusan Teknik Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung
2) Mahasiswa Jurusan Teknik Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung
3) Dosen Jurusan Teknologi Pertanian, Politeknik Negeri Lampung  Komunikasi penulis, e-mail: diding.sughandy@fp.unila.ac.id
Naskah ini diterima pada 10 Maret 2017; revisi pada 28 April 2017; disetujui untuk dipublikasikan pada 13 Juni 2017

## ABSTRACT
This research aims to develop and to test a model developed to identify the authenticity of civet coffee. Materials used are 100% authentic civet coffee and blend of civet-robusta coffee with ratio of 90%: 10%, 80%: 20%, 70%: 30%, 60%: 40%, and 50%: 50%.  In this study, the model was developed and predicted using soft independent modeling of class analogy (SIMCA) method with a significance level of 10%.  The SIMCA data was used to calculate the level of accuracy (AC), sensitivity (S), specificity (SP), and the false alarm rate (FP) using the formula of confusion matrix.  A number of 95 samples was used based on Hotelling T2 elipse, and obtained two building models for the authentic Civet coffee (SLWK) and Civet-Robusta coffee blend (SLWKR).  The following values can be obtained from the SIMCA results: accuracy (AC) 48,48%, sensitivity (S) 50,00%, specificity (SP) 33,33%, and the false alarm rate (FP) 66,67%.
Keywords: Civet Coffee, Robusta Coffee, UV-vis spectroscopy, Modeling, Validation

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk membangun dan menguji model untuk identifikasi kemurnian kopi asli Luwak. Bahan yang digunakan adalah 100% kopi Luwak dan kopi Luwak yang dicampur dengan kopi Robusta dengan perbandingan pencampuran 90%: 10%, 80%: 20%, 70%: 30%, 60%: 40%, dan 50%: 50%. Pada penelitian ini model dibangun dan diprediksi menggunakan metode soft independent modeling of class analogy (SIMCA) dengan taraf signifikan10%, kemudian menghitung tingkat akurasi (AC) , sensitivitas (S), spesifisitas (SP) , dan false alarm rate (FP) menggunakan perhitungan confusion matrix . Dari proses Hotelling T2 elipse 95 sampel, diperoleh dua model untuk mengelompokkan kopi Luwak asli (SLWK) dan kopi campuran Luwak Robusta (SLWKR). Dari uji model didapat nilai akurasi (AC) 48,48%, sensitivitas (S) 50,00%, spesifisitas (SP) 33,33%, dan false alarm rate (FP) 66,67%.
Kata Kunci : Kopi Luwak, Robusta, UV-vis spectroscopy, Permodelan, Validasi

## I. PENDAHULUAN
Kopi  merupakan  salah  satu  hasil  komoditi perkebunan yang memiliki nilai ekonomis yang cukup tinggi di antara tanaman perkebunan lainnya serta berperan sebagai devisa negara. Lampung merupakan  salah satu provinsi  di Indonesia yang memiliki hasil kopi dengan rasa dan aroma yang khas dibandingkan dengan kopi dari daerah lainnya.  Di Indonesia terdapat dua jenis kopi yang umum dibudidayakan yaitu kopi
Robusta dan kopi Arabika.  Selain dua jenis kopi tersebut, Provinsi Lampung juga memproduksi kopi Luwak. Kopi luwak tidak didapat dari jenis tanaman kopi tertentu namun berasal dari buah kopi yang dikonsumsi oleh hewan luwak atau musang ( Paradoxurus hermaproditus ).
Luwak mengkonsumsi buah kopi dengan cara membuka kulit luarnya dan memakan biji serta lendir kopi (Hadipernata dan Nugraha, 2012).
Analisis spektrum UV-VIS.... (Sri Waluyo, Fipit NH,  Diding S, dan dkk)
Selama di dalam pencernaan musang, terjadi proses alamiah di dalam perut luwak, proses tersebut memberikan perubahan komposisi kimia  pada  biji  kopi  dengan  pembentukan senyawa  prekursor  citarasa  seperti  asam organik, asam amino, dan gula sehingga mampu meningkatkan cita rasa kopi menjadi berbeda dari kopi asalnya (Lin, 2010). Proses pengolahan yang unik serta rasa yang khas menyebabkan harga kopi luwak lebih tinggi dibanding kopi pada umumnya (Nurhayat, 2013). Meskipun dengan harga yang cukup tinggi permintaan kopi luwak  terus  meningkat,  banyak  cara  yang digunakan  untuk  memenuhi  permintaan  di antara  dengan  cara  fermentasi  buatan. Fermentasi buatan dilakukan dengan mengisolasi mikroba probiotik dari organ percernaan luwak dan menghasilkan kopi yang memiliki cita rasa dan aroma yang hampir menyerupai kopi hasil pencernaan hewan luwak (Subaidi, 2016).
Namun  tidak  jarang  produsen  yang  nakal memalsukan  atau  mencampur  kopi  luwak dengan kopi biasa yang  harga dan kualitas yang lebih rendah serta dilabeli sebagai kopi luwak untuk  memenuhi  permintaan  konsumen. Pencampuran kopi  luwak terjadi  dalam  tiga bentuk yaitu bentuk biji ( green coffee bean ), biji kopi yang telah disangrai ( roasted bean ), dan biji  kopi  luwak  yang  telah  digiling/  bubuk ( ground bean ).  Pencampuran kopi sangat sulit diidentifikasi apabila biji kopi telah disangrai atau dalam bentuk bubuk.  Ada beberapa metode yang digunakan dalam mengidentifikasi keaslian kopi antara lain dengan human sensory dan metode image  proccesing .    Metode human  sensory mengandalkan obyektivitas serta konsistensi tester dalam menilai kualitas kopi, kelemahan metode ini apabila tester tersebut sakit tidak ada yang bisa menggantikan.  Yang kedua metode image  proccesing ,  metode  ini  biasanya digunakan untuk kopi yang masih berupa biji yang belum disangrai.  Apabila biji kopi dalam keadaan disangrai dan terlebih sudah menjadi bubuk yang warnanya relatif sama akan sulit untuk mengidentifikasi dengan metode ini.
Penelitian ini menggunakan UV-Vis spectroscopy untuk mendeteksi adanya pencampuran pada bubuk kopi luwak secara cepat. Metode ini juga menghasilkan  pola  yang  tepat  dalam mengidentifikasi kopi Brazil dan kopi Brazil
campuran, sehingga dapat diklasifikasikan dan dibedakan pola hasil penerapan PCA ke UV-Vis spektrophotometer dari seluruh sampel yang digunakan (Souto et al , 2015).  Namun belum ada  yang  menggunakan  alat  ini  untuk mengidentifikasi keaslian kopi luwak.

## II. BAHAN DAN METODE

## 2.1 Waktu dan Tempat
Penelitian ini dilakukan pada bulan Mei – Juni 2016 di Laboratorium Rekayasa Bioproses dan Pasca Panen, Jurusan Teknik Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung.
2.2 Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah: Ayakan Tyler MEINZER II dengan mesh 50  ( 297  mikro  meter ),  timbangan  analitik, termometer, heater, rubber bulp , pipet tetes ukuran 25 ml dan 1 ml, CimarecStirrer S130810- 33  (4x4  inch), kertas  saring,  corong,  gelas erlenmeyer 50 ml, gelas ukur, alumunium foil, tisu, GENESYS 10S UV-Vis spectrophotometer , flas disk,  kuvet,  dan alat  tulis.    Bahan  yang digunakan dalam penelitian ini adalah bubuk kopi  luwak  dan  bubuk  kopi  Robusta  yang diperoleh dari produsen kopi di daerah Liwa -
Lampung Barat, Provinsi Lampung.
2.3 Prosedur Penelitian
2.3.1 Proses Mengekstrak Kopi Penelitian ini menggunakan 100 sampel kopi, sebelum dilakukan pengambilan spektra pada kopi, bubuk kopi terlebih dahulu ditimbang sebanyak  1  gram  dengan  komposisi  kopi sebagaimana  ditampilkan pada Tabel 1.  Setelah ditimbang, kopi diseduh menggunakan 50 ml aquades pada suhu 90-98 o C,  diaduk selama 10 menit menggunakan stirrer dengan kecepatan 350 rpm, kemudian disaring selama 1 menit. Hasil saringan kopi diaduk dengan kecepatan 125 rpm selama 10 menit hingga suhu mencapai 24-27 o C (suhu ruang).  Selanjutnya, dilakukan pengenceran larutan dengan perbandingan 1 : 20 ml (Souto et al ,2015) , yaitu 1 ml ekstrak kopi, 20 ml aquades.

## 2.3.2 Proses Pengambilan Spektra
Setelah diencerkan, alat GENESYSY 10 UV-Vis spectrophotometer dihidupkan,  kemudian dimasukan blank dan sampel ke dalam kuvet sebanyak 2 ml.  Kuvet diletakkan ke dalam holders dengan susunan yang sesuai dengan posisi yang
Sampel Luwak (g) Robusta (g) Jumlah (g) Keterangan LM 1-50 1 0 1 Asli LR 51 – 60 0,9 0,1 1 Campuran LR 61 – 70 0,8 0,2 1 Campuran LR 71 – 80 0,7 0,3 1 Campuran LR 81 – 90 0,6 0,4 1 Campuran LR 91 – 100 0,5 0,5 1 Campuran
1
Tabel 1.  Komposisi Sampel
telah ditentukan alat UV-Vis spectrophotometer . Alat kemudian diseting sesuai dengan kebutuhan penelitian, pada tahap ini pengambilan spektra menggunakan panjang gelombang 190-1100 nm dan dalam satu sampel akan menghasilkan 910 data.
2.3.1 Proses Analisis Data Analisis data meliputi membangun dan menguji model untuk mengidentifikasi kopi Luwak dan kopi Robusta.  Semua sampel dikelompokan menjadi dua yaitu sampel untuk membangun model  dan  sampel  untuk  menguji  model menggunakan  SIMCA  ( soft  independent modeling of class analogy ).  Pembangunan model yang akan menunjukkan perbedaan antara kopi asli  dan  kopi  campuran  sehingga  saat  uji berlangsung sampel yang diuji akan otomatis masuk ke dalam model yang telah ditentukan kemudian akan dihitung tingkat keberhasilannya menggunakan rumus confusion matrix .
Keterangan: LM : Kopi luwak murni LR : Kopi luwak tidak murni (dicampur dengan kopi robusta)
Angka di belakang kode adalah nomer sampel

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Gambar 1 menunjukkan grafik spektrum dari seluruh (100) sampel yang diuji.  Dari grafik tersebut tampak bahwa semua sampel memiliki pola spektrum yang serupa. Spektrum memiliki nilai  absorbansi  yang  tinggi  pada  panjang gelombang  rendah  (kisaran  antara  190  nm hingga  350  nm),  sedangkan  pada  panjang gelombang di atas 350 nm absorbansi sangat rendah dan cenderung stagnan pada kenaikan panjang gelombang. Spektrum memiliki tiga buah puncak, yakni pada panjang gelombang 250  nm,  275  nm,  dan  320  nm.  Untuk memperjelas pola spektrum pada daerah panjang gelombang ini, dilakukan ploting spektrum pada panjang  gelombang  200  nm  –  350  nm sebagaimana ditampilkan pada Gambar 2. Dari 100 sampel kopi yang ada, hanya diambil 6 sampel kopi yang mewakili setiap komposisi sampel kopi untuk mengidentifikasi spektrum gelombang terabsorbsi pada bentang panjang gelombang antara 200 nm- 350 nm .
Analisis spektrum UV-VIS.... (Sri Waluyo, Fipit NH,  Diding S, dan dkk)
Gambar 2.  UV-Vis Spektrum 6 sampel pada panjang gelombang 200-350 nm Gambar 2 semakin memperjelas bagian paling informatif  dari spektrum yang  terkait dengan molekul-molekul penyusun bahan yang terdeteksi. Puncak-puncak spektrum merupakan panjang gelombang UV-Vis yang merespon secara sensitif kandungan kimia tertentu pada bahan. Menurut Souto et al (2015) pada panjang gelombang 276 nm – 280  nm merefleksikan kandungan kafein pada bahan, sedangkan pada panjang gelombang 320 nm – 325 nm merepresentasikan absorbansi dari asam kafein. Kopi luwak adalah kopi yang telah mengalami  proses  fermentasi  alami,  sehingga karakteristik kopi berubah. Menurut Hanifah dan Kurniawati (2013), fermentasi dapat menurunkan tingkat keasaman dan kandungan kafein. Pada kopi Robusta yang difermentasi secara basah memiliki tingkat keasaman 8,4% dan kadar kafein 1,41%. Sedangkan kopi Robusta yang difermentasi secara alami oleh musang atau luwak menghasilkan kopi dengan tingkat keasaman 2,34% dan kadar kafein 0,767%. Nilai kadar keasaman dan kafein hasil fermentasi tersebut lebih rendah jika dibandingkan
dengan kopi Robusta tanpa difermentasi, yakni tingkat keasaman 4,5% dan kadar kafein 2%.
Perbandingan tingkat keasaman dan kadar kafein antara kopi robusta tanpa fermentasi dengan kopi yang sudah difermentasi secara alami oleh luwak tampak jauh berbeda. Hal ini diduga karena semakin tinggi perbandingan kopi pencampur akan menyebabkan tingkat keasaman  dan  kadar  kafein  pada  kopi fermentasi luwak semakin tinggi. Pada Gambar 2 terlihat sampel LR91 sedikit berbeda dengan sampel lainnya, hal ini disebabkan persentase pencampuran sebanyak 50%:50%. Penggunaan kopi luwak dan pencampurnya dengan jenis yang sama membuat grafik yang dihasilkan sama.  Kemudian 100 sampel ini dilakukan pemetaan sampel sesuai dengan nilai skor  PC  pada  metode  PCA  ( principle component analysis ) untuk menduga tingkat persentase varians dari seluruh sampel.
(a)
(b)
Gambar 3. PCA 100 sampel (a), PCA 95 (b)
Pada Gambar 3 (a) model PCA dibangun dari 100 sampel dan terdapat 4 sampel yang berada di luar Hotelling T2 elipse yaitu sampel SLWK6, SLWK39, SLWK40 dan SLWK45. Hotelling T2 ellipse adalah batasan garis yang terbentuk untuk mengumpulkan populasi yang dianggap sama, data yang keluar dari batas garis elips dikatakan sebagai kandidat data eror.  Dari data sampel yang berada di luar elips dikatakan tidak kompeten dan lebih baik dihilangkan. Diketahui bahwa 95 %  kepercayaan  elips  berdasarkan  statistik Hotelling T2.  Sampel yang berada di luar elips tidak  dapat  digunakan,  hanya  sampel  yang berada di dalam elips yang dapat digunakan untuk membangun model.
Sebanyak  96  data  sampel  digunakan  untuk pemetaan  ulang  dengan  menggunakan  PCA ( principal  component  analysis )    dan  masih terdapat sampel yang berada di luar elips yaitu
sampel SLWK 11 yang kemudian dihapus.  Dari 95  sampel data yang  ada kembali dibangun model PCA dengan hasil pada Gambar 3 (b).  Dari 95 sampel didapat PC sebesar 73% PC1 dan 11% PC2.  Setelah dilakukan pemetaan klasifikasi multivarian  yang  dilakukan  dengan menggunakan training set dengan pembagian 25 sampel kopi Luwak asli dan 30 sampel kopi Luwak campura, didapatkan hasil model seperti pada Gambar 4.
Dari Gambar 4 terlihat sampel yang tersusun secara acak dan tidak teratur.  PC pada model Asli berwarna biru (a) memiliki persentase 84% PC1 dan 6% PC2, untuk PC model Campuran berwarna hijau (b) memiliki persentase 82% PC1 dan 11% PC2. Kemudian diikuti pengujian model menggunakan 20 sampel kopi Luwak asli dan 20 sampel kopi campuran Luwak Robusta, setelah  itu  hasilnya  dihitung  menggunakan confusion matrix.

## (a) Model SIMCA Asli
(b)Model SIMCA Campuran Gambar 4.  Model SIMCA
Analisis spektrum UV-VIS.... (Sri Waluyo, Fipit NH,  Diding S, dan dkk)
Tabel 2.  Hasil Confusion Matrix Model Class Asli (model) Class Campuran (model) Class Asli (actual) 1 15 Class Campuran (actual) 2 15 1 Perhitungan Confusion Matrix :
Nilai akurasi pengujian model sebesar 48,48%, yang berarti tingkat kemampuan model untuk mendeteksi  secara benar sampel  yang  diuji sebesar 48,48%.  Nilai sensitvitas sebesar 50%, yang  berarti  kemampuan  model  untuk membedakan sampel kopi Luwak asli dan kopi campuran Luwak Robusta sebesar 50%.  Nilai spesifisitas 33,33%, yang berarti kemampuan model untuk mengarahkan sampel kopi Luwak asli dan kopi campuran Luwak Robusta sebesar 33,33%.  Nilai false alarm rate sebesar 66,67%, yang  berarti  banyaknya  sampel  yang  tidak berhasil  diklasifikasikan  dengan  benar berdasarkan  pada  model  yang  diterapkan sebesar 66,67%.
Nilai akurasi, sensitivitas, spesifisitas, dan false alarm  rate  menunjukan  bahwa  model  yang dibangun kurang efektif untuk mengklasifikasikan kopi Luwak asli dan kopi campuran Luwak robusta.  Hal ini dikarenakan bahan yang digunakan merupakan kopi dengan jenis yang sama dan persentase perbandingan kopi  yang  sangat  kecil  membuat  tidak  ada perbedaan antara  kopi Luwak asli  dan kopi campuran Luwak robusta

## IV. KESIMPULAN DAN SARAN
4.1 Kesimpulan Pada penelitian ini dapat disimpulkan bahwa : 1.  Dari 100 sampel yang ada setelah proses Hotelling T2 ellipse hanya 95 sampel yang dapat digunakan.  Dengan pembagian 45 sampel kopi Luwak asli dan 50 sampel kopi campuran Luwak Robusta.  Dua puluh lima sampel kopi Luwak asli digunakan untuk
membangun model asli dan tiga puluh sampel kopi campuran Luwak Robusta digunakan untuk membangun model campuran, dengan nilai varians 84% PC1, 6% PC2 untuk model Asli dan 82% PC1, dan 11% PC2 untuk model campuran. 2.   Prediksi model menggunakan klasifikasi SIMCA ( soft independent modeling of class analogy ) menggunakan dua puluh sampel kopi Luwak asli dan dua puluh sampel kopi campuran Luwak Robusta dengan signifikan 10% didapatkan nilai akurasi (AC) 48,48%, sensitivitas  (S)  50%,  spesivisitas  (SP)
33,33%, dan false alarm rate (FP) 66,67%.

## 4.2 Saran
Dalam  proses  ekstraksi  pencampuran  kopi Luwak perlu adanya variasi pada jenis kopi pencampurnya,  apabila  menggunakan  kopi dengan jenis yang sama persentase banyaknya pencampuran lebih diperbanyak agar terlihat perbedaannya.  Serta perlu adanya analisis yang lebih sensitif untuk proses pengujian model yang dibangun.

## DAFTAR PUSTAKA
Hadipernata,  M.,  dan  S.  Nugraha.    2012. Identifikasi Fisik, Kimia dan Mikrobiologi Biji  Kopi  Luwak  Artificial. Prosiding Seminar  Nasional  Insentif  Riset  Sinas . Bandung.  Hlm.117-121. Hanifah, N., dan Kurniawati.  2013.  Pengaruh Larutan Alkali dan Yeast Terhadap Kadar Asam,  Kafein,  dan  Lemak  Pada  Proses Pembuatan  Kopi  Fermentasi. Jurnal Teknologi Kimia dan Industri .  2(2): 162- 168. Lavine, B. K.  2009.  Validation of Classifier . Dalam B. Walczak, R. Tauler, & S. Brown (Eds.),
Comprehensive  chemometrics .    Elsevier. Amsterdam pp. 587-599.
Lin, C. C.  2010.  Approach of improving coffee industry in Taiwan promote quality of coffee
bean  by  fermentation. The  Journal  of International Management Studies .  5 (1):
154-159.
Maramis,  R.K.,  G.  Citraningtyas.,  dan  F. Wehantouw.  2013.  Analisis Kafein Dalam Kopi Bubuk Di Kota Manado Menggunakan Spektrofotometer  UV-VIS. Jurnal  Ilmiah Farmasi-UNSRAT .  2(4): 122-128.
Nurhayat, W.  2013.  5 Fakta Unik Tentang Kopi Luwak  Indonesia.   Diunduh  dari http://
m.detik.com pada hari Rabu 31/08/2016.
Skoog, Dauglas A., Donald M. West., F. James Holler.,  and  Stanley  R.  Crouch.    2013. Fundamentals of Analytical Chemistry 9E . Cengage Learning . ( e-book ) Part  V. USA. hlm 722-760.
Souto, U. T. C. P., et all. 2015. Identification of Adultration in Ground Roasted Coffees Using UV-Vis spectroscopy and SPA-LDA, LWT - Food Science and Technology 30: 1-5. http:/ /dx.doi.org/10.1016/j.lwt.2015.04.003
Subaidi.  2016.  Kopi  Specialty, Kopi  Luwak Probiotik.    Diunduh  dari http:// bbp2tp.litbang.pertanian.go.id pada hari
Jumat 27 Mei 2016
Analisis spektrum UV-VIS.... (Sri Waluyo, Fipit NH,  Diding S, dan dkk)