Indonesian Journal of Pharmaceutical Science and Technology Journal Homepage : http://jurnal.unpad.ac.id/ijpst/ UNPAD
Characterization of Nanosilver Biosynthesis by Citrus sinensis (L.) Osbeck and Peel-off Mask Formulation with Variation Polyethylene Glycol 400-Glycerin Concentration
Dian E. Ermawati*, Agung P. Surya, Adi Yugatama Department of Pharmacy, Mathematics and Natural Science Faculty, Universitas Sebelas Maret, Jalan Ir. Sutami 36 A Kentingan, Jebres, Surakarta 57126
Submitted 15 October 2020; Revised 8 December 2021; Accepted 11 December 2021; Published 30 December 2021 *Corresponding author: dianekae@staff.uns.ac.id

## Abstract
Sweet orange contains flavonoids and citric acid that have the potential as a capping agent in the nanosilver biosynthesis process. The antibacterial activity of silver can be increased in nanoparticles, then it can be applied to treat acne through a peel-off mask preparation. Glycerin and Polyethylene glycol 400 are humectants that combined to obtain good physicochemical properties of the preparation. This study aims to determine the character of nanosilver biosynthesis and the effect of humectant combination on the physicochemical properties of the preparation. The characterization of nanosilver was employed by UV-VIS Spectrophotometry, Particle Size Analysis, and Scanning Electron Microscope. The Glycerin- PEG 400 combination was F1 (0:100%); F2 (25:75%); F3 (50:50%); F4 (75:25%) and F5 (100:0%). The results of nanosilver biosynthesis have an absorption peak of nanoparticles at 421-423nm, rod shape, the particle size of 83.2±7.2nm. Statistical analysis showed that the combination of Glycerin- PEG 400 had a significant effect on organoleptic, viscosity, and dry time, but did not affect the pH of preparation. The combination of Glycerin-PEG 400 (75%:25%) is the best formula because it has stable viscosity, dry time, and pH value during storage for four weeks.
Keywords: nanosilver, biosynthesis, Citrus sinensis , humectants, peel off mask
Karakterisasi Perak Nanopartikel Hasil Biosintesis Infusa Kulit Jeruk ( Citrus sinensis (L.) Osbeck) dan Formulasi Sediaan Masker Peel-off dengan Variasi Konsentrasi Gliserin-Polietilen Glikol 400

## Abstrak
Jeruk manis mengandung flavonoid dan asam sitrat yang berpotensi sebagai bioreduktor dan capping agent pada biosintesis perak nanopartikel. Aktivitas antibakteri perak dapat ditingkatkan dalam ukuran nano, selanjutnya dapat diaplikasikan untuk perawatan kulit berjerawat melalui sediaan masker peel- off . Gliserin dan PEG 400 adalah humektan yang akan dikombinasikan untuk mendapatkan sifat fisika- kima sediaan yang baik. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakter perak nanopartikel hasil biosintesis,  dan  pengaruh  kombinasi  humektan  terhadap  sifat  fisik-kimia  sediaan  masker peel-off . Karakterisasi perak nanopartikel dilakukan dengan Spektrofotometri UV-VIS, Particle Size Analysis , dan Scanning Electron Microscope . Kombinasi Gliserin-PEG 400 yaitu F1 (0:100%); F2 (25%:75%); F3 (50%:50%); F4 (75%:25%) and F5 (100%:0). Hasil biosintesis menghasilkan perak nanopartikel dengan serapan maksimal khas nanopartikel pada 421-423 nm, bentuk morfologi batang berukuran 83,17±7,19 nm. Analisa statistika menunjukan kombinasi Gliserin-PEG 400 berpengaruh signifikan terhadap sifat organoleptis, viskositas, dan waktu kering sediaan, namun tidak berpengaruh pada pH. Kombinasi Gliserin-PEG 400 (75%:25%) merupakan formula terpilih karena memiliki nilai viskositas, waktu kering, dan pH yang stabil selama penyimpanan empat minggu pada suhu ruang. Kata Kunci: perak nanopartikel, biosintesis, Citrus sinensis, humektan, masker peel-off
1. Introduction Timbulnya jerawat ditandai adanya flora  normal  kulit  seperti Straphylococcus aureus dan Straphylococcus epidermidis pada komedo. 1 Penggunaan antibiotik topikal seperti Clindamycin dan Eritromycin untuk mengatasi jerawat, dalam jangka panjang dapat memicu perkembangan resistensi bakteri. 2 Untuk mengatasi hal tersebut perlu dikembangkan agen antibakteri yang aman digunakan salah satunya perak nanopartikel. Perak digunakan sebagai antiseptik dan menunjukan aktivitas biosidal dengan spektrum yang luas. 3 Dengan dibuat ukuran nano, aktivitasnya akan meningkat sebagai antibakteri serta dapat meningkatkan stabilitas jika digunakan sebagai bahan aktif dalam formula kosmetik. 4 Nilai konsentrasi efektif minimal perak nanopartikel dalam sediaan kosmetik yaitu setara dengan 10 mg/ Kg. 5 Nanopartikel yang memiliki ukuran 20- 200 nm hanya mampu menembus stratum korneum  sejauh  2-3  μm  saja  (stratum korneum merupakan lapisan terluar kulit dengan  ukuran  15-20  μm)  sehingga  perak nanopartikel tidak masuk ke dalam saluran sistemik. Science Committee on Consumer Safety (SCCS) membatasi paparan perak pada tubuh tidak boleh melebih 10.000 ppm. 6 Pembuatan perak nanopartikel dapat dilakukan  dengan  metode  fisika  dan  kimia yang biasanya berisiko dan menghasilkan limbah yang merugikan lingkungan. Ekstrak tanaman dikembangkan sebagai agen biosintesis perak dengan pertimbangan lebih aman, sederhana dan tidak menghasilkan limbah berbahaya bagi lingkungan. Infusa kulit  jeruk  manis  ( Citrus sinensis )  dapat dimanfaatkan sebagai capping agent dalam pembentukan perak nanopartikel dan terbukti memiliki aktivitas antibakteri spektrum luas dengan ukuran partikel antara 10-35 nm. 3 Kulit jeruk manis ( C. sinensis ) menghasilkan ukuran partikel perak yang terkecil dibandingkan dengan tumbuhan segenus seperti lemon ( C. limon )  dan  jeruk  nipis  manis  ( C.limetta ), dimana masing-masing menghasilkan perak nanopartikel dengan ukuran 17,3-61,2 nm sedangkan menggunakan jeruk nipis manis menghasilkan nanoperak dengan ukuran 107
nm. 7 Perak nanopartikel dapat diaplikasikan ke kulit salah satunya melalui sediaan masker peel-off . Sediaan masker peel-off dipilih sebab mudah diaplikasikan, tidak meninggalkan residu saat dihilangkan dan memberikan sensasi bersih. Selain itu mampu mengoptimalkan kerja perak nanopartikel sebagai antimikroba ketika polimer membentuk lapisan oklusif di permukaan stratum korneum kulit menurut hasil penelitian. 8 Humektan  merupakan  bagian  penting dalam formula masker peel-off .  Humektan dalam sediaan masker peel-off memiliki dua fungsi yakni berkontribusi dalam hidrasi kulit dengan cara menarik air dari lapisan lebih dalam epidermis dan dermis menuju lapisan terluar kulit serta mencegah evaporasi air pada saat penyimpanan sehingga sediaan masker peel-off menjadi lebih stabil dari segi viskositas. Selain itu humektan melengkapi fungsi dari polivinil alcohol , dimana PVA dapat  membentuk  lapisan  film  yang  lembut dan kuat pada keadaan lembab. 9  PEG  400 dan gliserin merupakan bahan yang dapat berfungsi sebagai humektan dengan fungsi yang sama namun memiliki sifat berbeda. PEG 400 dan gliserin selain sebagai humektan, kedua bahan ini dapat berfungsi sebagai pelembab yang pada masker dibutuhkan dengan  dengan  konsentrasi  0,01%  -  20%.10 Sifat dari kedua bahan yang mempengaruhi sifat sediaan masker peel-off yakni viskositas dan water-binding capacity . Viskositas bahan akan mempengaruhi viskositas sediaan. Kombinasi humektan diharapkan dapat mengoptimalkan kerja perak nanopartikel dan menghasilkan sediaan peel-off mask yang memenuhi syarat sediaan gel yang baik sesuai SNI No. 06-2588-1992.
2. Materials and methods
2.1.  Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini mortar, stamper, hot plate , termometer,  cawan  porselin,  pH  meter (PH-009(I)A:  China),  timbangan  analitik (Mettler  Toledo  AL204,  d  =  0,0001g, Colombus: Ohio), timbangan digital (Precisa
XB620C, d=0,01g, Moosmattstrasse: Swiss), Spektrofotometer  UV-Vis  (GenesysTM, Thermo  Fisher  Scientific:  USA),  pot, sentrifugator  (Mini  Spin  Plus,  Eppendorf AG:  Jerman),  sendok  tanduk,  viscometer (Viskotester  VT-04,  Kokubunji:  Jepang), cawan patri, dan inkubator (Memmert IN30, Mammert:  Jerman), Particle Size Analyzer (PSA) (HORIBA: USA), Scanning Electron Microscope (SEM)(FEI  Quanta  200:  USA), serta  alat-alat gelas (Pyrex, Singapura).
2.2.  Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini AgNO 3  99,8%  (Merck, Darmstadt,  Jerman),  kulit  jeruk  manis  ( C. sinensis ), PVA (Kurray Asia Pacific PTE LTD, Singapura),  PEG  400  (PT.  DOW  Chemical, Indonesia),  Gliserin  (P&G  Chemical, Singapura), Phenoxyethanol , akuades dan akuabides  (dikemas  ulang  oleh  CV  Agung Jaya, Solo).
2.3.  Pembuatan Perak Nanopartikel
2.3.1. Penyiapan Rebusan Kulit Jeruk Kulit jeruk segar diambil kemudian dicuci dan dipotong menjadi bagian lebih kecil.  Diambil  4,0  g  kulit  lalu  ditambah akuabides  40  mL  kemudian  direbus  selama dua menit. Rebusan disaring menggunakan kertas Whatman No. 1. 11
2.3.2. Proses Biosintesis Perak Larutan  AgNO3 1,0 mM disiapkan. Tambahkan rebusan kulit jeruk sebanyak 3,0 mL pada 40 mL larutan AgNO3 1,0 mM, selanjutnya dipanaskan diatas waterbath pada suhu  60  ºC  selama  45  menit.  Terbentuknya koloid perak nanopartikel ditandai dengan perubahan warna dari tak berwarna menjadi coklat kekuningan. 11
2.4.  Karakterisasi Perak Nanopartikel Hasil Biosintesis 2.4.1. Analisa Spektroformetri UV-VIS Karakterisasi ukuran nanopartikel perak dilakukan dengan instrumen spektrofotometer UV-Vis.  Larutan  hasil  biosintesis  dilakukan pembacaan absorbansi pada rentang SPR ( Surface Plasmon Resonance )  perak
nanopartikel  yaitu  350-540  nm,  dengan akuades sebagai blanko.

## 2.4.2. Particle Size Analysis
Sejumlah  1,0  mL  larutan  perak nanopartikel hasil biosintesis dilakukan pembacaan menggunakan alat Particle Size Analyzer. PSA digunakan untuk mengetahui distribusi ukuran partikel dari partikel sampel.

## 2.4.3. Scanning Electron Microscope
SEM digunakan untuk melihat morfologi dari nanopartikel yang terbentuk. Analisis SEM sampel yang dibutuhkan berupa serbuk. Serbuk perak nanopartikel didapatkan dengan cara koloid perak nanopartikel yang selesai dilakukan proses biosintesis, disentrifugasi pada putaran 10.000 rpm selama 15 menit. Pellet akan mengendap pada bagian bawah effendorf lalu pellet dipindahkan pada cawan petri. Cawan petri berisi pellet dipanaskan pada oven pada suhu 60 °C selama 24 jam. Perak nanopartikel yang kering diambil lalu ditambahkan pellet KBr dan dilakukan pembacaan menggunakan alat SEM yang dilengkapi dengan carbon coating. 12
2.5.  Formulasi Masker Peel-off
Sediaan basis masker dibuat dalam lima formula dengan variasi konsentrasi gliserin dan  PEG  400.  Rentang  konsentrasi  gliserin dan  PEG  400  berperan  sebagai  humektan dalam  masker  peel-off  yaitu  0,01%-20%. Formula  yang  dibuat  merupakan  modifikasi dari  sediaan  masker  peel-off  Badnore  et al.  (2019).13 Formula dibuat ditampilkan pada tabel 1. Basis masker dibuat dengan cara akuades dipanaskan terlebih dahulu hingga suhu 80 0C.  Polivinil  alkohol  (PVA) dimasukan secara bertahap keakuades yang telah dipanaskan, lalu diaduk hingga melebur dan  homogen  (campuran  1).  Perbandingan akuades dan PVA yang digunakan yaitu (4:1).  PVA  dipindahkan  ke  mortar  dan ditambah  kombinasi  Gliserin-PEG  400 sesuai perbandingan masing-masing formula. Sisa akuades, ditambahkan ke campuran 1, terakhir koloid perak nanopartikel dan parfum ditambahkan lalu diaduk hingga homogen. Pindahkan sediaan pada wadah gelap tertutup.
2.6.  Uji Sifat Fisika dan Kimia Sediaan 2.6.1  Uji Organoleptis Pengamatan terhadap sediaan yang meliputi konsistensi, warna dan aroma menggunakan panca indra.
2.6.2  Uji Viskositas
Viskositas diukur dengan alat Viscometer Rion dengan spindel nomor 2. Cup diisi sediaan masker, selanjutnya rotor ditempatkan pada bagian tengah cup. Alat dinyalakan, tunggu 1 menit kemudian catat viskositas sediaan masker. 14 Viskositas yang baik dari sediaan masker yakni 300-5000 dPas sesuai SNI No. 06-2588-1992. 15
2.6.3  Uji Waktu Kering
Sediaan masker diambil sejumlah 1,0 gram sediaan masker peel-off, kemudian oleskan pada kulit lebar dengan ukuran 7x7 cm.  Waktu  yang  dibutuhkan  masker  untuk membentuk  film  diukur  menggunakan menggunakan stopwatch . Waktu kering yang baik untuk sediaan masker peel-off  yakni 15- 30 menit berdasarkan SNI No. 06-2588-1992. 16 2.6.4  Pengujian pH sediaan pH  meter  dikalibrasi  menggunakan buffer  pH  4,01  dan  pH  6,86.  Elektroda dimasukan sediaan masker, lalu diaduk hingga  menunjukan  angka  pH  konstan. kemudian amati dan catat pH. Masker yang baik memiliki pH sesuai kulit yakni 4,5-6,5 sesuai SNI No. 06-2588-1992. 17 Masker peel-off disimpan pada suhu ruang  tanpa  paparan  sinar  matahari  (20-
25 0C).  Sifat  fisik  sediaan  diuji  pada  pada minggu pertama, kedua, ketiga dan keempat. Replikasi dilakukan sebanyak tiga kali.
2.7.  Analisa Data Data yang telah diperoleh dari uji sifat fisik  dan  kimia  dianalisis  secara  statistik menggunakan IBM SPSS Statistic 22. Data  dianalisis  menggunakan  Saphiro  Wilk untuk mengetahui distribusi data. Jika data terdistribusi normal maka dilanjutkan uji One- Way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%, kemudian  dilanjut  dengan  uji  LSD  ( Least Significant Difference ) (data yang homogen) dan uji Games-Howell (data tidak homogen) untuk mengetahui perbedaan signifikansinya. Data tidak terdistribusi normal diuji secara non-parametrik menggunakan Kruskal- Wallis H, jika nilai signifikansi p<0,05 maka dilanjutkan  uji  Mann  Whitney  siknifikansi antar kelompok.
3. Result Hasil biosintesis
menunjukan bahwa rebusan kulit jeruk manis mampu menghasilkan perak nanopartikel dengan karakteristik perubahan warna pada proses biosintesis coklat kekuningan, absorbansi maksimum  pada  rentang  421-423  nm, berbentuk batang dan rata-rata ukuran partikel 83,17±7,19 nm dengan Polidispers Indeks 0,224±0,103.
Spektra UV-VIS digunakan untuk memonitoring peristiwa reduksi dari ion perak  (Ag+)  menjadi  nanoperak  (Ag°) pembacaan  sampel  tidak  lebih  dari  1x24
Tabel 1 . Formula Masker peel off perak nanopartikel hasil biosintesis dengan variasi humektan
Bahan Bobot (gram) F1 F2 F3 F4 F5 Perak nanopartikel 27,8 27,8 27,8 27,8 27,8 Gliserin - 0,12 0,25 0,38 0,5 PEG 400 0,5 0,38 0,25 0,12 - PVA 13,0 13,0 13,0 13,0 13,0 Phenoxyethanol 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 Parfum qs qs qs qs qs Akuades 58,6 58,6 58,6 58,6 58,6
jam  setelah  selesai  proses  biosintesis.  Hasil biosintesis perak nanopartikel menggunakan infusa kulit jeruk manis dapat dilihat pada Gambar  1,  spektra  absorbansi  dapat  dilihat pada  Gambar  2  serta  hasil  karakterisasi morfologi  SEM  dapat  dilihat  pada  Gambar 5. 18 Hasil uji organoleptis menunjukan bahwa tiap formula memiliki konsistensi yang berbeda, berwarna coklat kekuningan bening dan odorless . Selama penyimpanan empat minggu tiap formula mengalami perubahan warna yang berbeda signifikan dimana warna sediaan berubah menjadi lebih gelap. Hal ini dikarenakan semakin lama proses biosintesis tetap berlangsung sehingga menyebabkan warna semakin gelap.
Hasil  uji  viskositas  menunjukan sediaan memiliki viskositas dengan rentang 995±5,77 dPas-1100±10 dPas dimana F1, F2 dan F4 memiliki viskositas tidak berbeda signifikan (p>0,05) serta F3 dan F5 memiliki viskositas tidak berbeda signifikan (p>0,05). F3 memiliki nilai viskositas paling kecil. Sediaan yang beredar di pasaran brand Wardah®  memiliki  viskositas  yang  tidak berbeda  signifikan  (p>0,05)  dengan  kelima
sediaan  masker  peel-off  yang  telah  dibuat pada penelitian ini. Formula 2 dan formula 4 merupakan sediaan yang tidak mengalami perubahan viskositas selama penyimpanan empat minggu (p>0,05).
Waktu  kering  sediaan  masker peel-off yang dibuat kurang dari 30 menit. F1 dan F2 memiliki waktu kering tercepat kemudian dilanjutkan  dengan  F4  dan  F5,  sedangkan F3 merupakan masker peel-off dengan waktu kering paling lama. Kelima formula mengalami perubahan waktu kering selama penyimpanan empat minggu dimana semua formula mengalami peningkatan waktu kering menjadi lebih lama, kecuali F3. Hasil uji viskositas dan waktu kering dari sediaan masker peel-off ditampilkan pada gambar 3 dan 4. Hasil  uji  pH  menunjukan  kelima formula  memiliki  nilai  pH  menyerupai  pH kulit  yakni  4,5-6,5.  Perbedaan  konsentrasi Gliserin  dan  PEG  400  tidak  mempengaruhi nilai pH sediaan dan kelima sediaan masker peel-off  tidak  mengalami  perubahan  pH yang  signifikan  selama  penyimpanan  empat minggu (p>0,05) pada suhu ruang.
Gambar 1 . Hasil visual proses biosintesis perak nanopartikel menggunakan infusa kulit jeruk manis.
Gambar 2. Hasil absorbansi larutan perak nanopartikel hasil biosintesis pada rentang SPR nanopartikel 350-540 nm

## 4. Discussion
Biosintesis perak nanopartikel dilakukan dengan cara mereaksikan antara larutan perak  nitrat  (AgNO3)  dengan  rebusan  kulit jeruk manis. Senyawa yang diduga berperan dalam proses biosintesis yaitu senyawa asam sitrat  dan  flavonoid  karena  kedua  senyawa ini memiliki gugus karbonil dan hidroksil serta tinggi kandungannya pada kulit jeruk C. sinensis . 11;19 Biosintesis perak nanopartikel dari larutan AgNO 3 1,0 mM dengan bantuan rebusan kulit jeruk dapat terjadi melalui reaksi reduksi yang melibatkan transfer elektron. Reaksi reduksi ialah suatu reaksi yang menyebabkan sebuah senyawa atau
substansi menerima suatu elektron sehingga terjadi  reduksi  (penurunan)  muatan  pada atom substansi tersebut. 21 Proses biosintesis dilakukan pada suhu 60 o C, reaksinya lebih cepat selesai dan ukuran partikel yang dihasilkan lebih kecil dibandingkan proses biosintesis yang dilakukan pada suhu ruang. 11 Keberhasilan terbentuknya nanopartikel perak hasil biosintesis menggunakan kulit jeruk manis ditandai adanya perubahan warna menjadi coklat kekuningan sehingga pada penelitian ini menunjukan bahwa koloid perak nanopartikel berhasil terbentuk. Spektrofotometri UV-VIS  merupakan
Gambar 3 . Hasil uji viskositas sediaan peel-off mask perak nanopartikel
Gambar 4. Hasil SEM perak nanopartikel hasil biosintesis (a) dan serbuk perak nitrat (b).
Gambar 4 . Hasil uji waktu kering sediaan peel-off mask perak nanopartikel
metode yang digunakan untuk melihat optical properties dari perak nanopartikel. 20 Optical properties tersebut berupa adanya absorbansi maksimal pada daerah SPR yakni 350-450  nm. 22 Perak nanopartikel memiliki serapan maksimal 421-423 nm sehingga hal ini menunjukan perak nanopartikel berhasil terbentuk  pada  penelitian  ini.  Hasil  yang ditunjukkan dari hasil PSA bahwa perak nanopartikel memiliki ukuran partikel rata- rata 83,17±7,19 nm. Perak nanopartikel hasil biosintesis dari penelitian Kaviya et al (2011) memiliki ukuran partikel rata-rata 10±1 nm. Perbedaan ukuran ini mungkin disebabkan oleh perbedaan kadar agen pereduksi pada kulit jeruk manis yakni asam sitrat dan flavonoid.  Perbedaan  kandungan  senyawa ini  dipengaruhi  oleh  perbedaan  geografis, lamanya paparan sinar matahari, temperatur lingkungan. 23 Hasil karakterisasi morfologi menunjukan  perbedaan  signifikan  antara perak nanopartikel hasil biosintesis dengan serbuk perak nitrat pada permukaannya. Pada Gambar 5 permukaan perak nitrat sangat halus dan tidak terdapat partikel yang melapisinya, namun setelah dibiosintesis terlihat adanya material biologi atau senyawa yang melapisi bagian permukaan perak nanopartikel yang terbentuk yang diduga material biologi tersebut berasal dari rebusan kulit jeruk yang berfungsi sebagai capping agent . 24
Masker Peel-off yang dibuat pada penelitian ini terdiri dari 5 formula dengan replikasi 3 kali pada tiap formulanya. Tiap formula memiliki variasi konsentrasi Gliserin dan PEG 400 dengan jumlah bahan keduanya yaitu 0,5 gram. Kedua bahan tersebut memiliki fungsi sebagai humektan yang berperan dalam menjaga viskositas sediaan dengan cara mencegah evaporasi air dan menyerap air dari lingkungan. Kedua humektan ini dikombinasikan sebab memiliki fungsi yang sama namun karakteristik yang berbeda dimana gliserin memiliki viskositas dan kemampuan menyerap air lebih besar dibandingkan PEG 400. PVA pada penelitian ini  berperan  sebagai  film  forming  agent. PVA  memiliki  kelebihan  yakni  film  yang dihasillkan memiliki sifat adhesif yang baik
sehingga memberikan sensasi rasa bersih, selain itu film yang dihasilkan bersifat ramah lingkungan dan non toksik. 25 PVA memiliki interaksi  terhadap  Gliserin  dan  PEG  400, salah satu faktor yang mempengaruhinya kemampuan membentuk film dari PVA yaitu kelembaban. Pada kelembapan yang rendah, PVA akan membentuk suatu film yang keras dan rapuh, ketika kelembaban ditingkatkan maka sifat fisik film yang terbentuk yaitu lunak dan  fleksibel.  Perak  nanopartikel  berperan sebagai zat aktif. Phenoxyethanol berfungsi sebagai pengawet. Parfum berfungsi sebagai odoris agent.
Kelima formula memiliki warna coklat kekuningan bening. Warna ini berasal dari zat aktif perak nanopartikel yang dibiosintesis dengan rebusan kulit jeruk. Salah satu keunggulan menggunakan perak nanopartikel sebagai zat aktif dalam suatu sediaan yaitu dapat meningkatkan penampilan dari sediaan sehingga lebih menarik salah satunya warna yang dihasilkan lebih transparan sehingga pada penelitian ini telah menghasilkan sediaan yang diharapkan yaitu menghasilkan sediaan yang bening. 5 Semua formula menghasilkan aroma yang khas yang yang relatif sama berasal dari parfum yang digunakan. Perubahan  warna  yang  signifikan  pada  tiap formula selama penyimpanan empat minggu disebabkan oleh interaksi zat aktif perak nanopartikel dengan komponen penyusun formula sediaan. Gliserin, PEG 400 dan PVA memiliki kemampuan untuk mereduksi perak sehingga membentuk menstabilkan perak nanopartikel. 26;27;28 Ketiga komponen tersebut memiliki gugus hidroksil yang mampu berinteraksi dengan ion perak sehingga ion perak tereduksi. Perubahan warna pada sediaan kemungkinan diakibatkan proses lanjutan reaksi reduksi sehingga proses sintesis perak nanopartikel masih terjadi ketika koloid nanopartikel perak dimasukan dalam sediaan masker dengan formula tersebut. Perbedaan konsentrasi gliserin- PEG  400  mempengaruhi  nilai  viskositas sediaan. F1 memiliki viskositas yang lebih besar dibandingkan F5, hal ini menunjukan penambahan  PEG  400  pada  sediaan memberikan viskositas yang lebih besar
dibandingkan  menggunakan  Gliserin.  Hal ini dapat dikaitkan dengan kemampuan masing-masing bahan dalam menyerap air. Kemampuan menyerap air pada humektan dipengaruhi  oleh  gugus  -OH  yang  dimiliki, dimana  semakin  banyak  gugus  -OH  pada humektan akan meningkatkan kemampuan penyerapan air. Gliserin memiliki gugus -OH lebih banyak dibandingan PEG 400 sehingga Gliserin dapat mengikat air lebih banyak dari lingkungan sehingga viskositas pada F5 lebih kecil dibandingkan F1. Gliserin dan PEG 400 ketika dikombinasikan dengan komposisi 50:50 kemampuan higroskopisitasnya meningkat secara signifikan yang ditunjukan oleh viskositas F3 paling kecil dibandingkan keempat formula lainnya. Komposisi Gliserin dan  PEG  400  mempengaruhi  perubahan viskositas sediaan masker peel-off selama penyimpanan empat minggu. Penurunan viskositas secara berkelanjutan pada F1 disebabkan  oleh  kadar  PEG  400  yang tinggi.  PEG  400  merupakan  suatu  polimer yang memiliki karakteristik yang khas. PEG  400  memiliki  kemampuan  mengikat air dipengaruhi oleh gugus hidroksilnya, selain  itu  karakteristik  khas  PEG  yaitu memiliki kinematik viskositas. Karakter khas  ini  diperoleh  dari  rantai  polimer  PEG 400  yang  panjang  dimana  rantai  tersebut memiliki kemampuan melipat-lipat sehingga terbentuk  suatu  segmen-segmen  pada  PEG 400 yang dapat membentuk ikatan hidrogen dengan air sehingga kandungan air dalam sediaan semakin meningkat. F5 mengalami peningkatan viskositas secara berkelanjutan yang kemungkinan disebabkan oleh PVA. PVA pada saat proses formulasi, dilakukan pemanasan.  Hal  ini  menyebabkan  ikatan hidrogen intra maupun inter molekul menjadi putus sehingga kelarutan PVA meningkat dan viskositasnya menurun, setelah proses pemanasan selesai, terjadi penurunan suhu, hal ini menyebabkan ikatan-ikatan hidrogen yang awalnya terputus, akan terbentuk kembali secara bertahap sehingga viskositas sediaan  meningkat.  Gliserin  dan  PEG  400 0,38:0,12 g maupun sebaliknya merupakan komposisi optimal. Hal ini ditunjukan oleh F2 dan F4 memiliki viskositas yang stabil selama
penyimpanan empat minggu. Kemampuan menyerap  air  dari  Gliserin  dan  PEG  400 mampu mengimbangi fenomena ikatan hidrogen pada PVA sehingga viskositas tidak berubah secara signifikan tiap minggunya. Komposisi Gliserin dan PEG 400 juga mempengaruhi waktu kering sediaan masker peel-off perak nanopartikel. Sediaan dengan adanya  komposisi  PEG  400  lebih  besar (F1  dan  F2)  memiliki  waktu  kering  yang lebih cepat dibandingkan dengan sediaan dengan komposisi gliserin lebih besar hal ini disebabkan oleh kemampuan dalam menarik air komponen ke sediaan masker peel-off . Pada  minggu  pertama  Gliserin  memiliki kemampuan menarik air ke sediaan lebih besar dibandingkan PEG 400 sehingga kandungan air dalam sediaan lebih besar sehingga akan meningkatkan waktu kering sediaan masker peel-off . 29 F3 memiliki waktu kering yang paling lama karena kemungkinan dengan komposisi  Gliserin-PEG  400  (0,25:0,25  g) mampu memberikan efek sinergis dalam menarik air dari lingkungan sehingga kandungan air pada sediaan F3 lebih banyak daripada keempat formula lainnya. Semua formula mengalami peningkatan waktu kering selama penyimpanan empat minggu kecuali F3. Hal ini disebabkan Gliserin dan PEG 400 memiliki sifat higroskopis dimana terjadi mekanisme penyerapan air dari lingkungan sekitar. Adanya peningkatan air pada sediaan dapat mempengaruhi waktu kering. Pada F3 aktivitas PVA dalam meningkatkan viskositas sediaan lebih besar dibandingkan dengan kemampuan penyerapan air oleh kombinasi humektan. Dapat disimpulkan kombinasi Gliserin-PEG  400  dengan  perbandingan 25:  25%  berdampak  pada  penurunan  waktu kering. Selain kandungan air, waktu kering juga dipengaruhi oleh viskositas dimana semakin tinggi viskositas maka waktu kering akan semakin berkurang. 30

## 5. Conclussion
Perak nanopartikel yang dihasilkan dari proses biosintesis menggunakan rebusan kulit jeruk manis memliki karakteristik perubahan warna menjadi coklat kekuningan, absorbansi maksimum pada rentang 421-423

## Activity. Spectrochimica Acta Part
A Molecular and Biomolecular Spectroscopy, 124C: 194-198 8.  Velasco., D Pohl1., A Surrey., A Bonatto- Minella.,  A  Hernando.,  P  Crespo., Rellinghaus.2012. On the stability of AuFe alloy nanoparticles. Nanotechnology, 25: 215703
9.  Ogur, E., 2005. Polyvinyl Alcohol: Materials, Processing and Applications, Rapra Tecnology. UK.
10. Liew,  S.S.,  Ho,  W.Y.,  Yeap,  S.K.,  Bin Sharifudin, S.A. 2018. Phytochemical Composition  and  in  Vitro  Antioxidant Activities of Citrus sinensis Peel Extracts. PeerJ, 6: 1–16.
11. Kaviya, S., Santhanalakshmi, J., Viswanathan, B., Muthumary, J., Srinivasan, K. 2011. Biosynthesis of Silver Nanoparticles Using Citrus sinensis Peel Extract and its Antibacterial Activity. Spectrochimica Acta - Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy, 79:
594–598.
12. Kaushik, U., Joshi, S.C. 2015. Silver Nanoparticles:  Green  Synthesis,  Optical Properties, Antimicrobial Activity and Its Mechanism Using Citrus sinensis. innovareacademics.org, 8: 179–184.
13. Badnore, A.U., Sorde, K.I., Datir, K.A., Ananthanarayan, L., Pratap, A.P., Pandit, A.B. 2019. Preparation of Antibacterial Peel-off  Facial  Mask  Formulation Incorporating Biosynthesized Silver Nanoparticles. Applied Nanoscience (Switzerland), 9: 279–287.
14. Puspitasari, A.D., Setyowati, D.A. 2019. Evaluasi Karakteristik Fisika Kimia dan  Nilai  SPF  Sediaan  Gel Tabir  Surya Ekstrak Etanol Daun Kersen (Muntingia calabura  L).  Jurnal  Pharmascience,  5: 153–162.
15. Pertiwi, R.D., Kristanto, J., Praptiwi, G.A.  2016.  Uji  Aktivitas  Antibakteri Formulasi  Gel  Untuk  Sariawan  Dari Ekstrak  Daun  Saga  ( Abrus  precatorius Linn.)  terhadap  Bakteri  Staphylococcus aureus. Jurnal Ilmiah Manuntung, 2: 1–9.
16. Cahyani, I.M., Putri, I.D.C. 2018.
Formulation of Peel-Off Gel From Extract
nm, berbentuk batang dan rata-rata ukuran partikel 83,17±7,19 nm dengan Polidispers Indeks  0,224±0,103.  Perbedaan  konsentrasi Gliserin dan PEG 400 pada formula masker peel-off  memberikan  pengaruh  signifikan terhadap  sifat  fisik  sediaan  yang  meliputi viskositas dan waktu kering, namun tidak mempengaruhi  sifat  kimia  yaitu  pH  masker peel-off.  Komposisi  Gliserin  dan  PEG  400 dengan  perbandingan  25:  75%  dan  75: 25%  memiliki  viskositas,  waktu  kering  dan pH  yang  tidak  berbeda  signifikan  selama penyimpanan empat minggu pada suhu ruang.
References 1. Dreno, B., Martin, R., Moyal, D., Henley, J.B., Khammari, A., Seité, S. 2017. Skin Microbiome and Acne vulgaris: Staphylococcus, a New Actor in Acne. Experimental Dermatology, 26: 798–803.
2. Fox, L., Csongradi, C., Aucamp, M., Du Plessis,  J.,  Gerber,  M.  2016.  molecules Treatment Modalities for Acne. Molecules, 27: 1–20.
3. Ahmed,  S.,  Ahmad,  M.,  Swami,  B.L., Ikram, S. 2016. A Review on Plants Extract  Mediated  Synthesis  of  Silver Nanoparticles for Antimicrobial Applications: A Green Expertise. Journal of Advanced Research, 7: 17–28.
4. Sakharwade, S. 2016. Silver Nanoparticles in Cosmetics. Journal of Cosmetics, Dermatological Sciences and Applications, 6: 48–53.
5. Pulit-Prociak,  J.,  Grabowska,  A., Chwastowski, J., Majka, T.M., Banach, M. 2019. Safety of the Application of Nanosilver and Nanogold in Topical Cosmetic Preparations. Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 18: 110416.
6. Campbell, C.S.J., Contreras-Rojas, L.R., Delgado-Charro, M.B., Guy, R.H. 2012. Objective Assessment of Nanoparticle Disposition in Mammalian Skin After Topical Exposure. Journal of Controlled Release, 162: 201–207.
7. Nisha,  S.Najimu., Aysha,Q.S.,  Rahman, SN.,  Kumar,  RV.  2014.  Lemon Peels Mediated Synthesis of Silver Nanoparticles and its Antidermatophytic
Of Curcuma heyneana Val & Zijp Using Carbopol 940. Journal of Pharmaceutical and Medicinal Sciences, 2: 48–51.
17. Budiman,  A.,  Aulifa,  D.L.,  Kusuma, A.S.W.,  Kurniawan,  I.S.,  Sulastri,  A. 2017.  Peel-off  Gel  Formulation  from Black Mulberries (Morus nigra) Extract as Anti-acne Mask. National Journal of Physiology, Pharmacy and Pharmacology,
7: 987–994.
18. Logeswari,  P.,  Silambarasan,  S., Abraham, J. 2012. Synthesis of Silver Nanoparticles  Using  Plants  Extract  and Analysis of Their Antimicrobial Property. Journal of Saudi Chemical Society, 19: 311–317.
19. Canan,  I.,  Gundogdu,  M.,  Seday,  U., Oluk, C.A., Karasahin, Z., Eroglu, E.C., Yazici, E., Unlu, M. 2016. Determination of  Antioxidant,  Total  Phenolic,  Total carotenoid,  Lycopene,  Ascorbic  Acid, and Sugar Contents of Citrus species and Mandarin hybrids. Turkish Journal of Agriculture and Forestry, 40: 894–899. 20. Kotz, J., Treichel, P., Townsend, J. 2010. Chemistry and Chemical Reactivity, Seventh  Ed.  ed.  Thomson  Higher Education, USA.
21. Shnoudeh,  A.J.,  Hamad,  I.,  Abdo, R.W.,  Qadumii,  L.,  Jaber, A.Y.,  Surchi, H.,  Alkelany,  S.Z.  2019.  Synthesis, Characterization and Applications of Metal Nanoparticle, in: Tekade, R.K. (Ed.), Biomaterial and Bionanotechnology. Academic Press, pp. 527–612.
22. Logeswari,  P.,  Silambarasan,  S., Abraham, J. 2012. Synthesis of Silver Nanoparticles  Using  Plants  Extract  and Analysis of Their Antimicrobial Property. Journal of Saudi Chemical Society, 19: 311–317.
23. Ghasemzadeh,  A.,  Jaafar,  H.Z.E., Bukhori, M.F.M., Rahmat, M.H., Rahmat,
A. 2018. Assessment and Comparison of Phytochemical Constituents and Biological Activities of Bitter bean (Parkia  speciosa  Hassk.)  Collected from  Different  Locations  in  Malaysia. Chemistry Central Journal, 12: 1–9.
24. Ibrahim, H.M.M. 2015. Green

## Synthesis and Characterization of Silver
Nanoparticles Using Banana Peel Extract and Their Antimicrobial Activity Against Representative Microorganisms. Journal of Radiation Research and Applied Sciences, 8: 265–275.
25. Kathe,  K.,  Kathpalia,  H.  2017.  Film Forming Systems for Topical and Transdermal Drug Delivery. Asian Journal of Pharmaceutical Sciences, 12: 487–497.
26. Mohammed, A.A., Mahmood, S.T. 2018. Easy and New Chemical Synthesis of Stable Nano Sliver using Propylene Glycol and Glycerin as Reducing Agents 36: 131–135.
27. Oliveira,  R.N.,  Quilty,  B., Alves,  G.G., Soares, G.D.A., Rouze, R., Mcguinness, G.B., Thire, R.M.S.M. 2013. Mechanical Properties and In Vitro Characterization of Polyvinyl Alcohol- Nano-silver Hydrogel  Wound  Dressings.  Interface Fokus, 4: 1–11.
28. Reshma, Raju, S., Veerasomaiah, P. 2018. Synthesis and Characterization of PEG- Ag Nanoparticles : Investigation of their Antibacterial Properties 11: 7–12.
29. Santoso, I., Prayoga, T., Agustina, I., Rahayu,  W.S.  2020.  Formulasi  Masker Gel Peel-off Perasan Lidah Buaya (Aloe vera L.) dengan Gelling Agent Polivinil Alkohol. Jurnal Riset Kefarmasian Indonesia, 2: 17–25.
30. Mahyun, F., Kusuma, A.., Tamhid, H.A.  2018.  Formulation  Peel-off  gel mask of Impatiens balsamina l. as an antibactery against Staphylococcus aureus. Indonesian Journal of Medicine and Health, 9: 1552–1565.