## UJI AKTIVITAS ANTIDIABETES DARI EKSTRAK DAUN
SESEWANUA ( Clerodendron squamatum Vahl.) TERHADAP TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR ( Rattus norvegicus L . )
Billy Nathaniel Nangoy 1) , Edwin de Queljoe 2) , Adithya Yudistira 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado,
2) Program Studi Biologi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Sesewanua leaves contain flavonoids which can be potentially as antidiabetic. Flavonoids reduce blood sugar  levels  by  capturing  free  radicals  that  cause  damage  to  pancreatic  beta  cells  and  inhibit pancreatic  beta  cell  damage.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  effect  of  antidiabetic activity  on  the  administration  of  Sesewanua  (Clerodendron  squamatum  Vahl.)  Leaf  extracts  in  wistar white  rats  (Rattus  norvegicus)  induced  by  Aloxan.  This  type  of  research  is  a  laboratory  experiment using a completely randomized design. Test animals are grouped into 5 groups each consisting of 3 test animals. The negative control group (K-) was not treated, the positive control group (K +) was given metformin, groups 2, 3, and 4 were treated with different extract concentration of 200, 400, and 800 mg. Before  the  treatment  was  done  the  rats  were  examined  the  initial  blood  sugar  level,  then  induced alloxan monohydrate 120 mg / kg BW intraperitonially (ip), and checked the blood sugar level on the 3 rd day and continued with the administration of the leaf extracts of the animal every two days until the 14th day. The results showed that sesewanua leaf extracts with a concentration of 200, 400, and 800mg had a decreased activity in blood sugar levels from day 4 to day 14 with a decrease of 13.66 mg / dL in the concentration group 1, 43 mg / dL in the dose concentration 2, and 103 mg / dL in the concentration group 3.
Keywords : Blood Glucose, Clerodendron squamatum Vahl., Flavonoids, Rattus norvegicus

## ABSTRAK
Daun  sesewanua  mengandung  flavonoid  yang  dapat  berpotensi  sebagai  antidiabetes.  Flavonoid menurunkan  kadar  gula  darah  dengan  cara  menangkap  radikal  bebas  penyebab  kerusakan  sel  beta pankreas  dan  menghambat  kerusakan  sel  beta  pankreas.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  mengetahui  efek aktivitas  antidiabetes  terhadap  pemberian  ekstrak  Daun  Sesewanua  ( Clerodendron  squamatum Vahl.) pada  Tikus  Putih  Galur  Wistar  ( Rattus  norvegicus )  yang  telah  diinduksi  Aloksan.  Jenis  penelitian  ini adalah  eksperimen  laboratorium  menggunakan  rancangan  acak  lengkap.  Hewan  uji  dikelompokan dalam  5  kelompok  masing-masing  terdiri  dari  3  ekor  hewan  uji.  Kelompok  kontrol  negatif  (K-)  tidak diberi  perlakuan,  kelompok  kontrol  positif  (K+)  diberikan  metformin,  Kelompok  2,  3,  dan  4  diberi perlakuan  dengan  konsentras  ekstrak  yang  berbeda-beda  yaitu  200,  400,  dan  800  mg.  Sebelum perlakuan dilakukan tikus diperiksa kadar gula darah awal, kemudian diinduksi aloksan monohidrat 120 mg/kgBB  secara  intraperitonial  (ip),  dan  diperiksa  kadar  gula  darah  pada  hari  ke-3  dan  dilanjutkan dengan  pemberian  ekstrak  daun  sesewanua  setiap  dua  hari  sekali  sampai  hari  ke-14.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  sesewanua  dengan  konsentrasi  200,  400  ,  dan  800mg  memiliki aktivitas penurunan kadar gula darah dari hari ke-4 sampai hari ke-14 dengan penurunan sebesar 13.66 mg/dL  pada  kelompok  konsentrasi  1,  43  mg/dL  pada  kelompok  konsentrasi  2,  dan  103  mg/dL  pada kelompok konsentrasi 3.
Kata Kunci: Clerodendron squamatum Vahl., Flavonoid, Glukosa Darah, Rattus norvegicus

## PENDAHULUAN
Angka  kejadian  Diabetes  Mellitus dari  tahun  ke  tahun  terus  mengalami peningkatan yang cukup dratis dan memprihatinkan.  Menurut  data  World Health  Organization  (WHO)  tahun  2005 Negara  Indonesia  menempati  peringkat  ke- 4  jumlah  penderita  diabetes  terbanyak  di dunia  setelah  India,  China,  dan  Amerika Serikat. Prevalensinya mencapat 8,6 persen dari  total  penduduk  dan  diperkirakan  akan terus  meningkat  mencapai  21,3  juta penderita pada tahun 2030 (Iskandar, 2010).
Diabetes mellitus merupakan kelompok penyakit metabolik yang ditandai dengan  meningkatnya  kadar  glukosa  darah di atas nilai normal karena kelainan sekresi insulin,  kerja  insulin  atau  keduanya (Perkeni,  2011).  Gejala-gejala  karakteristik diabetes mellitus meliputi, kehausan berlebihan,  polifagi,  poliuria,  kehilangan berat  badan,  sering  terjadi  bisul,  gatal  di anggota  badan,  dan  impotensi.  Pengobatan diabetes  mellitus  dapat  dilakukan  secara medis  dengan  obat-obatan  modern  dan suntikan  tetapi  karena  tingginya  biaya pengobatan  cara  medis  ini  terkadang  sulit dilakukan.  Diabetes  Melitus  juga  dapat diatasi  dengan  pengobatan  alami  dengan memanfaatkan  tanaman  berkhasiat  obat. Tanaman  berkhasiat  obat  dapat  diperoleh dengan  mudah,  dapat  dipetik  langsung untuk pemakaian segar atau dapat dikeringkan.  Oleh  karena  itu,  pengobatan tradisional    dengan  tanaman  obat  menjadi langkah  alternatif  untuk  mengatasinya (Buraerah, 2010).
Sesewanua ( Clerodendron squamatum Vahl.)  secara  empiris  telah digunakan  oleh  masyarakat  di  beberapa daerah  di  Sulawesi  Utara  khususnya  di wilayah Minahasa untuk mengobati demam, patah tulang, dan penurun bengkak.  Daun  sesewanua  mengandung flavonoid dan alkaloid yang dapat berpotensi  sebagai  antioksidan  (Huliselan, 2015).  Metabolit  sekunder  pada  daun sesewanua  seperti  flavonoid  dan  alkaloid
yang  dapat  berpotensi  sebagai  antioksidan serta perbedaan polaritas pelarut yang dapat menghasilkan  perbedaan  jumlah  dan  jenis metabolit sekunder.
Flavonoid merupakan pigmen tumbuhan  dengan  warna  kuning,  kuning jeruk,  dan  merah  dapat  ditemukan  pada buah,  sayuran,  kacang,  biji,  batang,  bunga, herba, rempah-rempah, serta produk pangan dan  obat  dari  tumbuhan  seperti  minyak zaitun, teh, cokelat, anggur merah, dan obat herbal.  Flavonoid  juga  dikenal  sebagai vitamin  P  dan  citrin,  dan  merupakan pigmen  yang  diproduksi  oleh  sejumlah tanaman  sebagai  warna  pada  bunga  yang dihasilkan.  Bagian  tanaman  yang  bertugas untuk memproduksi flavonoid adalah bagian  akar  yang  dibantu  oleh  rhizobia, bakteri  tanah  yang  bertugas  untuk  menjaga dan  memperbaiki  kandungan  nitrogen dalam tanah (Harbone, 1987).

## METODOLOGI PENELITIAN Alat
Alat-alat  yang  digunakan  adalah ayakan  100  mesh,  oven(Memmert®), Glukometer,  sonde  oral,  dispesible  1  cc, batang  pengaduk,  neraca  analitik  (Mettler Toledo  tipe  PL  303,  Dragon  205),  gelas ukur  ( Pyrex ),  beker  gelas  ( Pyrex ),  kertas saring,  sarung  tangan,  masker,  botol sampel,  gunting,  blender,  cawan  petri ( Pyrex ), kandang, tempat makan mencit.

## Bahan
Bahan-bahan   yang digunakan adalah tikus  putih  jantan  galur  wistar  ( Rattus novergicus )  15  ekor,  daun  sesewanua ( Clerodendron squamatum Vahl.), aquades, etanol  96  %,  Aloksan,  Metformin,  pangan tikus  wistar  jantan  ( Rattus  novergicus ) berupa beras jagung.

## Bentuk penelitian
Jenis penelitian ini adalah eksperimen laboratorium.  Menggunakan  Rancangan Acak Lengkap (RAL). Hewan uji
dikelompokan  dalam  5  kelompok  masing- masing  terdiri  dari  3  ekor  hewan  uji. Kelompok  1  tidak  diberi  perlakuan  dan sebagai kontrol negatif. Kelompok 2, 3, dan 4  diberi  perlakuan  dengan  dosis  yang berbeda-beda  yaitu  200,  400,  dan  800  mg. Sementara itu kelompok 5 diberi perlakuan dengan dosis metformin 500 mg.

## Prosedur Kerja

## Pengambilan sampel
Daun  sesewanua  diambil  dari  daerah Amurang Kabupaten Minahasa Selatan.

## Preparasi sampel
Daun  sesewanua  dicuci  dengan  air mengalir dan ditiriskan, kemudian dikeringkan  dalam  oven  pada  suhu  ±  40 o C sampai kadar air < 10%.

## Pembuatan ekstrak daun sesewanua
Sampel  daun  sesewanua  yang  sudah menjadi  serbuk  simplisia  ditimbang  dan dimasukkan ke dalam cawan petri kemudian diekstraksi menggunakan metode maserasi  dengan  cara  serbuk  simplisia direndam  dalam  pelarut  etanol  96%  dan dibiarkan  selama  3  hari  kemudian  disaring menggunakan  kertas  saring,  kemudian ampas  dari  sampel  diremaserasi  selama  2 hari.  Filtrate  lalu  diuapkan  dengan  oven pada suhu ± 40 o C sampai kental.

## Penyiapan Hewan Uji
Tikus  putih  jantan  galur  wistar ( Rattus norvegicus ) sebagai hewan uji yang terbagi  atas  5  kelompok  di  mana  masing- masing  kelompok  terdiri  atas  3  ekor  tikus putih  jantan  galur  wistar  jantan  yang dipelihara  dalam  kandang  yang  dibuat  dari keranjang  berisi  serbuk  kayu  dan  diberi pakan beras jagung. Hewan coba diaklimatisasi  selama  kurang  lebih  2 minggu sebelum perlakuan.

## Pembuatan Larutan Uji
Pembuatan larutan uji diawali dengan menimbang  ekstrak  kental  daun  sesewanua ( Clerodendron  squamatum Vahl.)  sesuai dengan  dosis  (3.6  mg;  7.2  mg;  14.4  mg), kemudian  masing-masing  ekstrak  yang telah ditimbang dimasukan dalam labu ukur 10 mL disonifikasi sampai homogen selama 120  menit.  Setelah  homogen,  masing- masing dosis ekstrak dimasukkan ke dalam botol sampel dan diberi label.

## Pembuatan Larutan Aloksan
Dosis  induksi  aloksan  pada  tikus adalah  120mg/kgBB,  maka  jumlah  aloksan yang  diberikan  pada  tikus  dengan  berat 100g  =  (100g  /1000g)  x120  mg/kgBB  =
12mg/tikus 100g. Serbuk aloksan monohidrat dilarutkan dengan cara diencerkan  menggunakan  larutan  aquades. Konsentrasi larutan induksi 12mg/ml.

## Pembuatan Larutan Metformi
Berdasarkan
tabel konversi perhitungan  dosis  untuk  berbagai  jenis hewan  uji  dari  berbagai  spesies  dan manusia,  maka  konversi  dosis  manusia dengan  berat  badan  70  kg  pada  tikus dengan  berat  badan  200  g  adalah  0,018 (Ngatidjan,  1991).  Dosis  metformin  yang dipakai untuk orang dewasa adalah 500 mg, jadi  dosis  untuk  tikus  200g  adalah  9mg  . Untuk  tikus  dengan  berat  100  gram  adalah 4,5 mg.
Timbang tablet metformin yang sudah digerus  halus  sebanyak  45mg.  Kemudian dimasukkan  ke  dalam  labu  10  ml  dan ditambahkan  aquades  sampai  10  ml,  dan kocok sampai homogen.

## Pemberian Larutan Aloksan
Tikus dibuat menjadi diabetes dengan menginjeksikan  larutan  aloksan  melalui interperitonial.  Aloksan  diberikan  sekali sebanyak 1 ml. Proses penyimpanan sampai proses penyuntikan aloksan dilakukan pada suhu  dingin  supaya  aloksan  tidak  rusak (Sujono dan Munawaroh, 2009).

## Pemberian Ekstrak Daun Sesewanua
Pemberian perlakuan untuk penelitian ini
masing-masing konsentrasi menggunakan 3 Tikus untuk tiap kelompok hewan  uji.  Ekstrak  daun  sesewanua diberikan sesuai dosis perlakuan yaitu 1 mL pada  setiap  tikus  untuk  masing-masing konsentrasi  secara  oral  menggunakan  alat penyekok  oral  (Sonde)  dengan dispo dua hari sekali selama 14 hari.

## Pemberian Larutan Metformin
Pemberian perlakuan untuk kelompok pembanding  dengan  3  ekor  tikus  sebagai hewan  uji.  Larutan  Metformin  diberikan sesuai  dosis  yaitu  1  mL,  perlakuan  secara oral  menggunakan  alat  penyekok  oral (Sonde)  dengan dispo setiap  hari  sekali untuk satu ekor tikus selama 14 hari.

## Pemeriksaan Gula Darah
Darah  diambil  pada  bagian  ekor dengan  cara  memotong  ekor  tikus  dan diukur  kadar  gula  darah  dengan  alat glukometer accu check.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hewan  uji  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah tikus putih jantan galur wistar  karena  karakteristik  genetik  dan biologisnya  mirip  dengan  manusia,  dan untuk  pemilihan  kelamin  dipilih  jantan karena  tidak  terpengaruh  adanya  hormon. Tikus  diaklimatisasi  selama  dua  minggu bertujuan  agar  tikus  bisa  beradaptasi dengan lingkungan dan tidak stres.
Sebelum melakukan pengujian, semua tikus ditimbang berat badannya agar bisa  menghitung    dosis  yang  akan diberikan.  Berat  badan  rata  –  rata  dari semua tikus adalah 95,67 g yang dibulatkan menjadi  100  g.  Kemudian  semua  tikus diperiksa  kadar  gula  darah  awal    dan diperoleh  data  kadar  gula  darah  awal  tikus berada  pada  keadaan  normal  dengan  rata- rata  79,67  -  90,67  mg/dL.  Kusumawati
(2004),  menyatakan  bahwa  kadar  gula darah  normal  pada  tikus  berada  pada  50- 135 mg/dL.
Pada  kelompok  kontrol  negatif,  tikus dibuat menjadi diabetes yang bertujuan agar dapat  mengetahui  pengaruh  metabolisme terhadap  penurunan  kadar  gula  darah  tikus dan juga dapat mengetahui penurunan kadar gula  darah  normal  tikus  selama  melakukan penelitian.  Hasil  pengukuran  gula  darah kemudian  dibandingan  dengan  kelompok yang lain. Kadar gula darah pada kelompok negatif mengalami kenaikan dan penurunan yang  tidak  terlalu  signifikan,  tetapi  berada pada  keadaan  normal,  dengan  kata  lain metabolisme  tidak  membantu  menurunkan kadar gula darah tikus menjadi normal.
Pada  hari  ke  tiga  (T3)  setelah diinduksi  aloksan,  hasil  rata-rata  yang didapatkan  adalah    kelompok  kontrol positif,  kontrol  negatif,  D1,  D2,  dan  D3 semuanya  mengalami  kenaikan  gula  darah antara 99-179,33 mg/dL, hal ini disebabkan karena  aloksan  menghambat  glukosa  yang disebabkan  karena  sekresi  insulin  melalui spesifik penghambat glukokinase,hasil sensor  glukosa  sel  beta  akan  menyebabkan keadaan diabetes pada tikus.
Pada  kontrol  positif  yang  diberikan metformin  kadar  gula  darah  mengalami penurunan yang besar. Pemilihan metformin  sebagai  pembanding  dianggap tepat  karena  mekanisme  kerja  metformin dalam tubuh dengan memperbaiki sensitivitas  hepar  dan  jaringan  perifer terhadap  insulin  tanpa  mempengaruhi sekresi  insulin.  Efek  ini  terjadi  karena adanya  aktivitas  kinase  di  sel  (AMP- activated kinase). Metformin meningkatkan pemakaian  glukosa  oleh  sel  usus  sehingga menurunkan  glukosa  darah  dan  juga menghambat  absorbs  glukosa  di  usus sesudah asupan makanan (Soegondo, 2006).
Tabel 1. Rata-rata Kadar Gula Darah Tikus Putih Jantan Galur Wistar
Pada  D1  yang  diberikan  ekstrak daun  sesewanua  dengan  dosis  200mg  (3,6 mg/mL)  hasil  pengukuran  gula  darah  rata- rata  menunjukkan  penurunan  kadar  gula darah pada T4, yang sebelumnya kadar gula darah tikus rata-rata 132,33 mg/dL pada T3, menjadi  106,67  mg/dL  pada  t4,  dan
kembali  mengalami  kenaikan  kadar  gula darah  pada  T6  menjadi  128,33  mg/dL  dan mengalami  penurunan  kembali  pada  T8 menjadi  97  mg/mL,  kemudian  mengalami kenaikkan    pada  T10  menjadi  118,67 mg/dL  dan  mengalami  penurunan  kembali menjadi  97  mg/mL  pada  T12.  Pada  T14 mengalami  kenaikkan  menjadi  118,67 mg/dL.  Dengan  demikian  dapat  dikatakan bahwa  ekstrak  daun  sesewanua  dengan dosis 200mg (3,6 mg/mL) dapat
menurunkan  kadar  gula  darah  tikus,  tetapi tidak terlalu besar.
Pada D2 yang diberikan ekstrak daun sesewanua  dengan  dosis  400  mg  (7,2 mg/mL) hasil pengukuran kadar gula darah yang didapat pada T4 mengalami penurunan  dari  123,33  mg/dL,  yang sebelumnya adalah 130,67 mg/dL pada T3. Kadar  gula  darah  mengalami  penurunan menjadi  82  mg/dL  pada  T6,  kemudian mengalami sedikit kenaikkan
pada  T8  menjadi  90,33  mg/dL.  Kadar  gula darah  mengalami  kenaikkan  lagi  menjadi 102,33  mg/dL  pada  T10  dan  mengalami penurunan  pada  T12  menjadi  87,33  mg/dL dan  mengalami  sedikit  kenaikkan  menjadi 87,67  mg/dL  pada  T14.  Dengan  demikian dapat  dikatakan  bahwa  ekstrak  daun
sesewanua  dengan  dosis  400  mg  (7,2 mg/dL) dapat menuunakan kadar gula darah tikus.
Pada  D3  yang  diberikan  ekstrak daun sesewanua dengan dosis 800mg (14,4 mg/mL) hasil pengukuran kadar gula darah yang didapat pada T4 mengalami penurunan  dari  129,67  mg/dL yang sebelumnya pada T3 adalah 179,33 mg/dL, kemudian  mengalami  penurunan  sampai 80,67  mg/dL  pada  T6  dan  kembali mengalami  kenaikan  menjadi  89,33  mg/dL pada  T8  dan  mengalami  kenaikkan  lagi menjadi  105,33  mg/dL  pada  T10  dan mengalami  penurunan  menjadi  89  mg/dL pada T12 dan kembali mengalami penurunan menjadi 76,33 mg/dL pada T14. Dengan  demikian  dapat  dikatakan  bahwa ekstrak  daun  sesewanua  dengan  dosis  800 mg ( 14,4 mg/dL) dapat menurunkan kadar gula darah.
Kelompok Kadar Gula Darah Tikus (mg/dL) Sebelum Aloksan Sesudah Aloksan Perlakuan Hari ke-4 (T1) Hari ke-6 (T3) Hari ke-8 (T5) Hari ke-10 (T7) Hari ke- 12 (T9) Hari ke-14 (T11) Negatif(K-) 90,67 108 136 55,67 77 99,67 95 71,67 Metformin(K+) 79,67 99 96 94 90,67  87,67 74 67,67 D1 (200mg) 90,67 132,33 106,67  128,33  97 118,67  97 118,67 D2 (400mg) 88,67 130,67 123,33  82 90,33  102,33  87,33  87,67 D3 (800mg) 84,67 179,33 129,67  80,67 89,33  105,33  89 76,33
0 50 100 150 200 0 2 4 6 8 10
K- K+
Gambar 1. Rata-rata peningkatan dan penurunan kadar gula darah tikus
Pada  D1  (200mg),  D2  (400mg), dan  D3  (800mg)  mengalami  penurunan kadar  gula  darah.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  daun  sesewanua  dapat memberikan  efek  penurunan  kadar  gula darah.  Penurunan  kadar  gula  darah  yang paling besar pada D3 (800mg)  yang berarti semakin  tinggi  dosis  yang  diberikan  maka penurunan kadar gula darah semakin besar. Penurunan kadar gula darah yang dihasilkan  dari  ekstrak  daun  sesewanua disebabkan oleh kandungan senyawa Flavonoid  yang  merupakan  salah  satu antioksidan. Aktivitas antioksidan mampu menangkap radikal bebas penyebab
kerusakan sel beta pankreas dan menghambat  kerusakan  sel  beta  pankreas, sehingga  sel  beta  yang  tersisa  masih  tetap berfungsi. Antioksidan tersebut
diperkirakan  mampu  melindungi  sejumlah sel-sel  beta  yang  tetap  normal,  sehingga memungkinkan terjadinya regenerasi sel-sel beta yang masih ada melalui proses mitosis atau  melalui  pembentukan  pulau  baru dengan  cara  proliferasi  dan  diferensiasi endokrin  dari  sel-sel ductal dan ductular (Suryani et al , 2013).
Pada  uji  statistic Kruskal  Wallis dapat  dilihat  bahwa  kelima  grup  memiliki bentuk sebaran yang berbeda-beda,
sehingga pada uji Kruskal Wallis yang bisa diinterpretasikan hanya perbedaan rata-rata. Pada hasil uji Kruskal Wallis rata-rata skala paling  tinggi  terdapat  pada  kelompok  D1. Nilai P value ditunjukkan oleh nilai Asymp. Sig.  Pada  hasil  ditunjukkan  nilai  P  Value sebesar 0,053 di mana lebih dari 0,05 yang berarti  H0  diterima  yang  berarti  tidak terdapat  perbedaan  yang  bermakna  antara ekstrak daun sesewanua dengan metformin. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun sesewanua  memiliki  efektivitas  terhadap penurunan  kadar  gula  darah  tikus  yang hampir sama dengan metformin

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat simpulkan bahwa, Ekstrak Daun Sesewanua ( Clerodendron  squamatum Vahl.)  dapat memberikan  efek  anti  diabetes  terhadap tikus  putih  jantan  galur  wistar  ( Rattus norvegicus L. ) yang diinduksi aloksan.

## SARAN
Perlu  diadakan  penelitian  lebih  lanjut untuk  menentukkan  dosis  efektif  dan  dosis maksimum  dari  ekstrak  daun  sesewanua untuk menurunkan kadar gula darah.

## DAFTAR PUSTAKA
Buraerah,  H.  2010.  Analisis  Faktor  Risiko Diabetes Melitus tipe 2 di Puskesmas Tanrutedong,
Sidenreng  Rappang. Jurnal  Ilmiah Nasional .  35:( 4 ).
Harbone. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara  Modern  Menganalisis. ITB press, Bandung .
Huliselan, Y., Runtuwene, M., Wewengkang,  D.  2015.  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol, EtilAsetat,  dan n -Heksan  dari sesewanua ( Clerodendron squamatum Vahl.). Jurnal  Ilmiah Farmasi . 4:( 3 ), 155-156
Iskandar.  2010. Metodologi  Penelitian
Pendidikan dan Sosial (Kuantitatif dan  Kualitatif). Jakarta:  Gaung Persada Press (GP Press).
Kusumawati,  D.  2004. Bersahabat  dengan Hewan Coba . Yogyakarta : Gadjah Mada University Press.
Perkeni.  20011 .  Konsensus  Pengelolaan dan Pencegahan Diabetes Mellitus  Tipe  2  di  Indonesia. Perkumpulan Endokrinologi Indonesia . Jakarta: PB PERKENI Sujono T.A., Munawaroh, P. 2009. Interaksi Quercetin Dengan Tolbutamid:  Kajian  Terhadap Perubahan  Kadar  Glukos  Darah Tikus  Jantan  Yang  Diinduksi
Aloksan. Jurnal  Penelitian  Sains
& Teknologi . 10: ( 2 ), 121-129.
Suryani,  N.,  Murdani,  P.  (2013). Jurnal Megister Kedokteran Keluarga . 1
( 1 ). 67- 69