## Skrining Fitokimia Dan Uji Toksisitas Dari Ekstrak Daun Mahang ( Macaranga bancana )
Rianti Putri 1 , Rudi Hendra Sy 1 , Hilwan Yuda Teruna 1,*
1 Program Studi Pasca Sarjana Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Riau Korespondensi Email: hyteruna@lecturer.unri.ac.id

## Abstrak
Macaranga  bancana (Euphorbiaceae) dikenal    sebagai  “mahang” yang  banyak  tersebar  di  Indragiri  Hulu,  Provinsi Riau  dan  juga  diyakini  memiliki  khasiat  sebagai  obat.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengeksplorasi  kandungan metabolit  sekunder  dan  aktivitas  toksisitas  dari  berbagai  ekstrak  daun M.  bancana. Proses  ekstraksi  dilakukan menggunakan  metode  maserasi  dengan  berbagai  pelarut,  yaitu n -heksana,  diklorometana,  etil  asetat,  metanol  dan etanol.  Analisis  toksisitas  dilakukan  dengan  metode Brine  shrimp  Lethality  Test (BSLT).  Hasil  skrining  fitokimia menunjukkan  bahwa  daun M.  bancana mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  golongan  terpenoid,  steroid, flavonoid  dan  fenolik.  Hasil  uji  toksisitas  menunjukkan  bahwa  ekstrak n -heksana  memiliki  toksisitas  yang  tinggi diikuti  dengan  ekstrak  diklorometana,  etil  asetat,  dan  metanol  dengan  nilai  LC 50 masing-masing  65;  87;  227;  605 μ g/mL,  sedangkan  ekstrak  etanol  tidak  toksik.  Oleh  karena  itu,  dapat  disimpulkan  bahwa M.  bancana memiliki aktivitas toksisitas yang baik dan dapat dijadikan sebagai uji pendahuluan untuk antikanker.
Kata kunci: Brine shrimp Lethality Test (BSLT), Macaranga bancana , toksisitas

## Abstract
Macaranga bancana  (Euphorbiaceae) known as “mahang” which is wide spread in Indragiri  Hulu, Riau Province and also believed to has medicinal properties. This study to evaluate the secondary metabolites contents and toxicity activity from  various  extracts  of  M.  bancana  leaves.  Extraction  process  were  done  by  using  maceration  method  with  various solvents, such as n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate, methanol, and ethanol. Toxicity analysis was done by Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). The results of phytochemical screening showed that M. bancana leaves contain terpenoid, steroid, flavonoid and phenolic. Toxicity analysis showed that n-hexane extracts prossessed the highest level of toxicity followed  by  dichloromethane,  ethyl  acetate  and  methanol  extracts  with  LC 50 value of  65;  87;  227;  605  μg /mL, respectively while ethanol extract has not toxic. Therefore, it could be concluded that M. bancana has good toxicity level and could be used as screening for anticancer.
Keywords: Brine Shrimp Lethality Test (BSLT), Macaranga bancana, toxicity

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  salah  satu  negara  dengan  penyebaran  tumbuhan  tropis  terbesar  dan  kaya  akan keanekaragaman  hayati.  Oleh  karena  itu,  sumber  kekayaan  alam  tersebut  banyak  dimanfaatkan  bagi masyarakat Indonesia sebagai bahan obat-obatan (Amirta et al ., 2017). Salah satu tumbuhan yang sangat bermanfaat sebagai obat adalah tumbuhan mahang.
Mahang merupakan tumbuhan yang berasal dari famili Euphorbiaceae yang berupa pohon dengan tinggi mencapai  30  meter  dan  dimanfaatkan  pada  umumnya  oleh  masyarakat  sebagai  bahan  bangunan,  kayu bakar,  peralatan  rumah  tangga  serta  acara  ritual  adat  (Amirta et  al .,  2017).  Salah  satu  spesies  mahang
yang  berasal  dari  suku  Talang  Mamak  di  Indragiri  Hulu,  Provinsi  Riau  adalah Macaranga  bancana. Masyarakat suku  tersebut  memanfaatkan  bagian kulit  batang sebagai lem,  pada bagian  akar  digunakan sebagai pewarna kuning, serta daun dan buahnya untuk obat diare dan sariawan dengan cara meminum air rebusannya (Amirta et al ., 2017).
Penelitian  sebelumnya  yang  telah  dilaporkan  oleh  Hasanat et  al .  (2015),  menunjukkan  bahwa  ekstrak metanol  daun M.  denticulata memiliki  aktivitas  toksisitas  yang  baik.  Namun,  tidak  banyak  yang melaporkan  tentang  uji  toksisitas  dari  jenis  tumbuhan  mahang  ini,  terutama  dari  spesies M.  bancana. Mengingat  bahwa  toksisitas  dapat  menjadi  uji  pendahuluan  untuk  uji  antikanker. Oleh  karena  itu, penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder  dan  aktivitas  toksisitas  dari berbagai ekstrak daun M. bancana .

## METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  antara  lain  satu  set  alat  destilasi,  ultrasonicator  (Kery Pulsatron), satu unit rotavapor Buchi R-114, dan peralatan lain yang umum digunakan sesuai cara kerja. Bahan  kimia  yang  digunakan  adalah  pelarut n- heksana  (C 6 H 14 ),  diklorometana  (CH 2 Cl 2 ),  etilasetat (C 4 H 8 O 2 ), metanol (CH 3 OH), etanol (C 2 H 5 OH), dimetil sulfoksida ((CH 3 ) 2 SO), kloroform (CHCl 3 ), amoniak (NH 3 ), pereaksi Dragendorff, pereaksi Mayer, pereaksi Liebermann Burchard, HCl pekat, larutan besi(III) klorida 1% dan aqua DM.
Persiapan Sampel Sampel  daun  segar M.  bancana diambil  dari  Kecamatan  Kelayang,  Kabupaten  Indragiri  Hulu,  Provinsi Riau pada bulan Maret 2018. Daun M. bancana ini dikeringkan anginkan dan dihaluskan hingga diperoleh serbuk halus.
Uji Fitokimia
Identifikasi  kandungan  metabolit  sekunder  pada  daun M.  bancana dilakukan  sesuai  dengan  prosedur Harborne (1995) dengan sedikit modifikasi, meliputi: identifikasi terpenoid, steorid, alkaloid, flavonoid, fenolik dan saponin.
Ekstraksi
Serbuk halus daun M. bancana dimaserasi dengan pelarut n- heksana, diklorometana, etil asetat, metanol dan  etanol  selama  3x24  jam  dan  diulang  hingga  maserasi  diperoleh  warna  bening.  Maserat  yang diperoleh diuapkan pelarutnya menggunakan alat rotary evaporator , sehingga didapat ekstrak kental.
Uji Toksisitas Uji toksisitas dilakukan dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) menggunakan larva Artemia salina Leach  (Carballo et  al. ,  2002).  Uji  ini  dilakukan  terhadap  ekstrak n- heksana,  diklorometana,  etil asetat, metanol dan etanol dengan konsentrasi 10, 100, 1000 μ g/mL. Masing-masing ekstrak sebanyak 20 mg  dilarutkan  dalam  2  mL  metanol  untuk  memperoleh  larutan  induk  10.000 μ g/mL,  kemudian diencerkan menjadi konsentrasi 1000, 100 dan 10 μ g/mL dalam vial yang telah dikalibrasi dan dibiarkan kering. Pada masing-masing vial ditambahkan 50 μ L DMSO dan ditambahkan ± 3 mL air laut. Selanjutnya, dimasukkan 10 ekor larva udang laut  berumur 2 hari dan  diencerkan dengan air laut hingga mencapai
volume 5 mL. Sebagai kontrol negatif digunakan 50 μ L DMSO dalam 5 mL air laut. Pengujian dilakukan selama 24 jam dan kemudian dihitung persentase kematian (mortalitas) larva udang sebagai berikut:
% mortalitas = Jumlah larva udang mati Jumlah larva udang  hidup x 100%
Berdasarkan perhitungan tersebut, dibuat grafik antara log konsentrasi terhadap mortalitas dan dihitung nilai LC 50 .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Mahang  merupakan  salah  satu  tumbuhan  yang  dimanfaatkan  sebagai  obat.  Hal  ini  dikarenakan beragamnya  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terkandung  didalamnya.  Magadula  (2014)  melaporkan berdasarkan  uji  fitokimia  dari  26  spesies  mahang,  terdapat  senyawa  terpenoid,  steroid,  flavonoid  dan fenolik dari bagian daun, akar dan batang tumbuhan tersebut. Spesies mahang yang berasal dari Indragiri Hulu,  Provinsi  Riau  telah  berhasil  diidentifikasi  sebagai  spesies M.  bancana dan  telah  dilakukan  uji fitokimia.  Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh, M.  bancana mengandung  senyawa  metabolit  sekunder golongan terpenoid, steroid, flavonoid dan fenolik. Hasil uji fitokimia daun M. bancana dapat dilihat pada Tabel 1 berikut.
Tabel 1. Hasil uji fitokimia daun M. bancana No  Golongan senyawa Pereaksi Hasil 1 Terpenoid/steroid Liebermann-Burchard + 2 Alkaloid Mayer Dragendorff - - 3 Flavonoid Mg-HCl + 4 Fenolik FeCl 3 1% + 5 Saponin H 2 O -
Keterangan: (+) = terdapat senyawa metabolit sekunder, (-) = tidak terdapat senyawa metabolit sekunder Ekstrak daun M. bancana diperoleh melalui ekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut n - heksana, diklorometana, etil asetat, metanol dan etanol. Pemilihan metode maserasi karena metode ini merupakan metode konvensional yang mudah dilakukan  dan pengerjaanya tanpa  menggunakan panas, sehingga tidak merusak senyawa.
Uji toksisitas dari daun M. bancana dilakukan terhadap kelima ekstrak dengan metode BSLT (Carballo et al. , 2002). Pemilihan metode BSLT ini dikarenakan metode yang sederhana (tanpa teknik aseptik), murah, jumlah organisme banyak tersedia dan hanya membutuhkan sedikit sampel pada pengujiannya (Meyer et al ., 1982). Pada pengujian ini digunakan sebanyak 10 larva Artemia salina Leach. Hasil uji toksisitas dapat dilihat pada Tabel 2 berikut.
Tabel 2. Hasil uji toksisitas dari berbagai ekstrak daun M. bancana dengan metode BSLT Sampel
LC 50 ( μ g/mL) Keterangan n -Heksana 65 Toksik Diklorometana 87 Toksik Etil asetat 227 Sedikit toksik
Metanol 605 Sedikit toksik Etanol >1000 Tidak toksik Kontrol negatif - -
Tabel 2 memberikan informasi adanya pengaruh konsentrasi terhadap persentase kematian larva udang. Semakin besar konsentrasi ekstrak, maka persentase kematian juga akan semakin besar. Kelima ekstrak dengan  konsentrasi  1000 μ g/mL  memberikan  persentase  kematian  yang  tinggi  dibanding  konsentrasi 100  dan  10 μ g/mL.  Berdasarkan  analisis  probit  antara  log  konsentrasi  dengan  persentase  kematian, maka nilai LC 50 dapat dihitung. Nilai ini menyatakan konsentrasi yang menyebabkan kematian 50% larva udang.  Hasil analisis (Tabel 2)  menunjukkan  nilai  LC 50 ekstrak n -heksana  65 μ g/mL,  diklorometana  87 μ g/mL, etil asetat 227 μ g/mL, metanol 605 μ g/mL dan etanol >1000 μ g/mL. Menurut Meyer et al . (1982), suatu senyawa dinyatakan sangat toksik apabila memiliki nilai LC 50 kurang dari 30 μ g/mL, dikategorikan toksik  jika  memiliki  nilai  LC 50 <1000 μ g/mL,  dan  dikategorikan  tidak  toksik  apabila  LC 50 >1000 μ g/mL. Hasil  tersebut  menunjukkan      bahwa        ekstrak n -heksana  lebih  toksik  dibandingkan  dengan  ekstrak diklorometana,  etil  asetat  dan  metanol,  sedangkan  ekstrak  etanol  tidak  toksik  sama  sekali.  Ekstrak n - heksnana memiliki tingkat     toksisitas    yang     lebih    tinggi dimungkinkan adanya senyawa-senyawa yang bersifat toksik yang terkandung pada ekstrak tersebut. Diperolehnya nilai LC 50 yang  kecil,  maka  dapat  dikatakan  tumbuhan  ini  kemungkinan  berpotensi  sebagai  antikanker,  karena metode ini dapat dijadikan sebagai uji pendahuluan untuk uji antikanker.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa  daun  tumbuhan M.  bancana mengandung senyawa  metabolit  sekunder  golongan  terpenoid,  steroid,  flavonoid  dan  fenolik.  Uji  toksisitas menggunakan  metode  BSLT  menunjukkan  bahwa  ekstrak n -heksana lebih  toksik  daripada  ekstrak lainnya dan dapat dijadikan sebagai uji pendahuluan antikanker.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada hibah penelitian tim pascasarjana KEMENRISTEKDIKTI tahun anggaran 2018 yang telah  membiayai  penelitian  ini  dengan  kontrak  Nomor:  339/UN.19.5.1.3/PP/2018,  tanggal  19  Februari 2018.

## DAFTAR PUSTAKA
Amirta,  R.,  Angi,  E.  M.,  Ramadhan,  R.,  Kusuma,  I.  W.,  Wiati,  C.  B.,  &  Haqiqi,  M.  T.  (2017). Potensi Pemanfaatan Macaranga . Samarinda: Mulawarman University Press.
Carballo, J. S., Hernandez-Inda, Z. L., Perez, P., & Garcia-Gravalos, M. D. (2002). A comparison between two brine  shrimp  assays  to  detect  in  vitro  cytotoxicity  in  marine  natural  products. Biomed  Central Biotechnology , 2 (17), 1 – 5.
Hasanat,  A.,  Jakaria,  M.,  Tarek,  I.,  Chowdhury,  T.  A.,  Arifujjaman,  &  Ali,  M.  S.  (2015).  Bioassay  of  brine shrimp  lethality  and  thrombolytic  activity  of  methanolic  extract  of Macaranga  denticulata leaves.
Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry , 3 (6), 43 – 46.
Magadula, J. J. (2014).  Phytochemistry and pharmacology of  the genus Macaranga: A review. Journal  of Medicinal Plant Research , 8 (12), 489 – 503.
Meyer, B. N., Ferrigni, N. R., Putnam, J. E., Jacobsen, L. B., Nichols, D. E., & McLaughlin, J. L. (1982). Brine shrimp:  a  convenient  general  bioassay  for  active  plant  constituents. Journal  of  Medicinal  Plant Research , 45 , 31 – 34.