## OPTIMALISASI PROSES BIOREMEDIASI SECARA IN SITU PADA LAHAN TERCEMAR PESTISIDA KELOMPOK MANKOZEB
SETIYO, Y., MADE S. UTAMA, WAYAN TIKA, DAN IBP. GUNADNYA Program Studi Teknik Pertanian Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Udayana
E-mail: setiyoyohanes@yahoo.com

## ABSTRAK
Kompos sebagai pupuk organik dapat meningkatkan karakteristik fisik, kimia, dan biologi dari tanah dengan cara dapat menyediakan mineral tanah untuk tanaman. Tujuan khusus dari penelitian ini adalah untuk mengoptimalkan proses bioremediasi untuk mendegradasi residu pestisida di Bedugul Agro-Tourism sehingga sistem pertanian organik akan terjaga. Berdasar pada C/N, dan pH, dapat menghasilkan solusi yang lebih baik untuk bioremediasi masalah residu pestisida dilakukan dengan mencampurkan kompos dalam pemeliharaan koltikultura. Penyimpangan pH dalam proses bioremediasi sebesar 0.22, dan pH proses bioremediasi in-situ antara 6.9 dan 7.12 atau pH netral. Pada kondisi ini mikroorganisme akan efektif mengurangi residu pestisida. Proses bioremediasi pada residu pestisida Ditane M-45 pada pemeliharaan holtikultura dibagi menjadi 1.2 g/l/20 m 2 , 2.4 g/l/20 m 2 , dan 3.6 g/l/20 m 2 disebar di area secara sempurna, di mana terlihat dari parameter-parameter akan perkembangan populasi mikroorganisme dan jumlah dari residu pestisida. Residu pestisida untuk setiap dosis adalah 0.25–1.7% pada 35 hari atau nilai ini di bawah 0.003 ppm.
Kata kunci: residu pestisida, kompos campuran, proses bioremediasi

## ABSTRACT
Compost as an organic fertilizer could improve the physical, chemical, and biological characteristics of the soil in a certain way so that soil mineral was available for plant. The special aim of this research was to optimize the bioremediation process for degradation of pesticide residues at Bedugul Agro-tourism so that organic farming system will be sustainable. Based on C/N, and pH, it could be concluded that better solution for bioremediation of pesticide residue problem was by giving mixed-compost in horticulture cultivation. Deviation of pH in bioremediation process was 0.22, and pH in-situ bioremediation process was between 6.9 and 7.12 or neutral pH. In this condition micro-organism would be effective in degrading pesticide residue. Bioremediation process on pesticide residue of Ditane M-45 at horticulture cultivation deploy with 1.2 g/l/20 m 2 , 2.4 g/l/20 m 2 , and 3.6 g/l/20 m 2 spraying dosages took place perfectly, which was showed by parameters on development of micro-organism population and the amount of pesticide residues. Pesticide residue of each spraying dosages was 0.25–1.7% at 35 days or this values were under 0.003 ppm.
Key words: pestiside residue, mixed compost, bioremediation process

## PENDAHULUAN
Bioremediasi  in  situ  menggunakan  pupuk organik  kompos  sangat  efektif,  hasil  penelitian Indrayani  (2006)  mikroorganisme  pada  kompos mampu mendegradasi residu pestisida dalam tanah pada proses bioremediasi secara ex-situ. Selain itu kompos  mampu  memperbaiki  sifat  fisik  tanah (Setiyo, 2009), sifat biologis dan sifat kimia tanah untuk peningkatan kesuburan tanah (Pare et al., 1999; Kondo dan Yasuda, 2003).
Penggunaan  pestisida  dalam  produksi  buah dan sayur di kawasan wisata Bedugul tidak dapat dihindarkan. Hal ini dilakukan agar gagal panen dapat direduksi dan petani tetap meraih keuntungan maksimal. Dampak negatip dari aktivitas ini adalah (1) buah dan sayur masih mengandung pestisida,
(2)  ekosistem  di  lahan  pertanian  tercemar,  (3) dan ekosistem perairan di danau Buyan tercemar. Proses bioremediasi secara ex situ untuk lahan yang luas menjadi kendala, kendala utama adalah tidak mungkin mengangkut tanah dalam jumlah ratusan ton ke laboratorium, sehingga pemberian kompos ke lahan lebih memungkinkan.
Hasil  yang  ditargetkan  adalah  model  proses bioremediasi  menggunakan  kompos  untuk menurunkan tingkat pencemaran lahan pertanian yang  disemprot  pestisida  Dithane  M-25  sebagai upaya mempertahankan sistem pertanian organik berkelanjutan (sustainable organic farming system) dan hortikultura yang berkualitas Pemupukan lahan pertanian menggunakan kompos menurut Reijntjes et  al.  (1999)  merupakan  pengembangan  sistem
pertanian  dengan  input  luar  rendah  dan  sistem sangat efektif.

## METODE
Lahan pertanian yang dibudidayakan tanaman wortel,  sawi,  strowberi,  dan  tomat  diberi  pupuk kompos kotoran sapi atau tanpa dipupuk kompos (sebagai kontrol) dan pada saat tanaman berusia 1 bulan disemprot pestisida Ditane M-45 dengan konsentrasi 1.2 g/l/20 m 2 (dosis redah), 2.4 g/l/20 m 2 (dosis sedang), dan 3.6 g/l/20 m 2 (dosis tinggi). Perkembangbiakan bakteri dan kapang diamati pada sampel tanah yang diambil pada kedalaman 0 cm, 0–5  cm  dan  5–10  cm,  selain  itu  diamati  pula konsentrasi  residu  pestisida  dan  kandungan C-organik dan N organik. Sampel tanah diambil 0, 2, 4, 7, 15, 30, 45, dan 60 hari setelah waktu penyemprotan pestisida.
Analisis  populasi  bakteri  dilakukan  dengan metode  TPC  pada  media  PCA.  Pembuatan  PCA dengan melarutkan 15 g agar, 1 g dextrosa, 5 tripton, 1.5 g yeast ke dalam 1000 ml aquadest. Larutan tersebut dipanaskan sambil diaduk dengan magnetic stirer sampai mendidih dan homogen. Selanjutnya larutan  disterilisasi  dalam  autoclave  pada  suhu 121°  C  selama  15  menit.  Setelah  agak  dingin dituangkan ke dalam cawan petri steril ± 15–20 ml dan didinginkan. Setelah padat cawan petri ditutup dalam posisi terbalik.
Metode TPC dilakukan dengan melarutkan 1 g sampel dengan 9 ml NaCL faali (0.9 %) ke dalam tabung reaksi. Larutan ini pengencerannya 10 -1 dan pengenceran  dilakukan  sampai  10 -6 .  Setiap  kali melakuan pengenceran larutan diaduk menggunakan vortek. Selanjutnya 0.1 ml larutan untuk pengenceran 10 -4 sampai 10 -6 dituang ke media PCA menggunakan ependorf dari stip steril. Selanjutnya larutan disebar dengan sprider yang telah dicelupkan pad alkohol dan dipanaskan. Kemudian diinkubasi pada suhu ruang selama 48 jam. Koloni yang dihitung hanya yang berjumlah 30–300 koloni.
Ekstraksi sampel dilakukan secara langsung. Pengujian dengan Gas Kromatografi, di awali dengan penyaringan, pemurnian dan injeksi ke dalam kolom. Pada proses penyaringan, sampel tanah ditimbang sebanyak 250 gram dan ditambahkan Acetonitril serta 5 gram Na 2 SO 4 anhidrat granuler, kemudian diblender dan disaring. Proses selanjutnya adalah memasukkan sebanyak 93 ml filtrat dalam corong pisah yang berisi 100 ml petroleum eter, dikocok selama 5 menit, dan membuang lapisan air yang terpisah  pada  bagian  bawah.  Pada  sisa  larutan ditambahkan 200 ml Na 2 SO 4 2 %, dikocok selama 2 menit, dan membuang lagi sisa air yang terpisah.
Pada  corong  biasa  diberi  glass  wall  dan  Na 2 SO 4 anhidrat granuler pada lapisan atas, dilewatkan pada  corong  untuk  disaring.  Proses  selanjutnya adalah pemurnian. Pada proses pemurnian, glass wall  ditempatkan  pada  bagian  bawah  kolom kromatografi dan ditambahkan 1.6 gram fluoricyl serta 1.6 gram Na 2 SO 4 anhidrat Granuler, kolom dicuci dengan 50 ml heksan, kemudian dengan 50 ml metanol, dan membuang cairan pencuci. Elusi dengan 11 ml heksan, ditampung masing-masing dalam labu erlemeyer dan diuapkan sampai 0.5 ml diatas water bath. Sampel yang telah diuapkan diatas water bath diambil sebanyak 10 mikroliter dengan menggunakan syringe, kemudian di injeksikan ke dalam  kolom  melalui  septum  secara  bersamaan dengan  menekan  tombol  start.  Dilayar  monitor, diagram kromatogram yang terbentuk dapat dimati. Perhitungan nilai kuantitatif residu yang terdapat pada sampel menggunakan rumus:

## µg/L (ppm) = A×B×C×D E×F×G
Di mana: A  : Konsentrasi  larutan  standart  pestisida (µg/µl), B  : Tinggi puncak hasil pemurnian (mm),
C  : Volume akhir hasil ekstraksi (µl),
D  : Faktor Pengenceran,
E  : Tinggi puncak larutan standart (mm),
F  : Volume hasil pemurnian yang disuntikkan (µl), dan
G  : Volume atau berat dari contoh atau spesimen yang di ekstrak (ml atau gram).
Pengukuran  kandungan  C-oraganik  dengan metoda AOAC 1995, dan pengukuran N-organik dengan metoda CHONS Analyser 1998. Sedangkan pH tanah diukur dengan pengambilan sampel tanah di kedalaman 0–5 cm dan 5–10 cm bersamaan dengan pengukuran  C-organik,  N-organik  dan  populasi mikroba.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penyemprotan  pestisida  pada  tanaman hortikultura sawi, wortel, tomat, stroberi dan cabai pada lahan tidak dipupuk kompos menunjukkan bahwa residu lebih lambat teremediasi dibandingkan dengan residu pestisida pada lahan yang dipupuk dengan kompos. Peluang residu pestisida terbawa run off ke Danau Buyan untuk lahan pertanian tidak dipupuk kompos dari Gambar 1 adalah hampir 45 hari, sedangkan jika lahan dipupuk dengan kompos peluangnya hanya 7 hari.
Nutrien pada proses bioremediasi pada lahan yang dipupuk kompos tersedia dalam bentuk bahan organik, residu tanaman dan residu pestisida. Namun nutrien pada lahan tidak dipupuk kompos hanya tersedia dalam bentuk residu tanaman, sehingga proses bioremediasi di lahan yang dipupuk kompos lebih cepat dibandingkan lahan yang tidak dipupuk kompos.  Nutrien  berupa  pestisida  di  lahan  oleh mikroba diurai untuk dijadikan bahan penyusun sel, (Cookson, 1995). Sedangkan menurut Vidali  (2001) residu pestisida di lahan diremediasi secara aerobik ataupun anaerobik.
Dinamika populasi mikroba berhubungan erat dengan perubahan C/N bahan organik, dinamika C/ N dan populasi mikroba seperti Gambar 2. Kenaikan populasi mikroba di awal proses bioremediasi residu pestisida diikuti dengan penurunan C/N tanah, hal ini disebabkan nutrien C, H, O, N yang ada pada
residu  pestisida  dan  tanah  diurai  oleh  mikroba untuk  dimanfaatkan  sebagai  bahan  penyusun selnya. Sedangkan, puncak populasi mikroba terjadi bersamaan dengan titik minimum C/N tanah. Pada proses selanjutnya sebagian mikroba mati terurai menjadi unsur hara, unsur hara C dan N organik sebagian menaikan C/N dan sebagian lagi diserap perakaran tanaman.
Fase  menurunnya  populasi  mikroba  dan menurunnya C/N secara bersamaan disebabkan oleh suplai unsur hara untuk tanaman hortikultura dari mikroba yang mati belum cukup, sehingga tanaman mengambil unsur hara dari tanah. Hal inilah yang menyebabkan C/N tanah mengalami penurunan. Dinamika populasi mikroba dan C/N pada proses bioremediasi  in-situ  di  Bedugul  identik  dengan penelitian Indrayani (2006).
a. Dosis tinggi b. Dosis sedang c. Dosis rendah Gambar 1. Akumulasi resid in-situ dari penelitian di Kawasan Wisata Bedugul untuk perlakuan pemupukan dengan u pestisida teremediasi
Perlakuan kompos kotoran sapi terfermentasi Perlakuan kompos bokasi
Perlakuan kompos sampah kota
Perlakuan kompos campuran
Gambar 2. Hubungan waktu bioremediasi residu pestisida, populasi mikroba dan C/N tanah
Hubungan antara populasi mikroba dengan pH tanah diilustrasikan seperti Gambar 3. Kenaikan pH  di  minggu  pertama  sampai  minggu  ke  tiga, karena ada demineralisasi bahan organik terutama unsur  mikro  Mg 2+ ,  K + ,  Ca 2+ dari  kompos  dan residu pestisida. Kation-kation ini akan berikatan dengan asam-asam yang terbentuk selama proses dekomposisi menyebabkan pH naik. Pada pH di atas 7 sifat massa yang didekomposisi cenderung basa, sehingga kelebihan ion OH - akan mengakibatkan kehilang  ammonium  dalam  bentuk  NH 3 - dan hidrosilasi beberapa unsur biologis seperti Cu dan Mn  membentuk  campuran  karbonat  yang  sulit terurai (Ton, 1991; Alexander, 1999; Semple et al. 2001; Singer and Crohn, 2002). Pada pH di bawah 7, sifat massa yang didekomposisi cenderung asam, sehingga  kelebihan  ion  H + dapat  menyebabkan penguraian dan pelepasan ion Ca 2+ dan Mg 2+ dari mikroorganisme, ion-ion metal dari mineral dan bahan organik (Sudyastuti, 2007) .
Proses  bioremediasi  in-situ  lahan  tercemar pestisida Dithane M-45 yang disemprot dengan dosis rendah,  menunjukan  bahwa  reaksi  bioremediasi berlangsung  pada  pH  mendekati  netral.  Dari identifikasi  di  lapangan  memang  tidak  ada  bau terdeteksi dari indera penciuman, sehingga pelepasan gas NH 3 penyebab bau tidak terjadi, al ini sesuai dengan  hasil  penelitian  Indrayani  (2006)  untuk proses bioremediasi ex-situ. Reaksi bioremediasi yang berlangsung pada pH sedikit asam adalah perlakuan kontrol, disebabkan karena pelepasan unsur-unsur seperti Mg 2+ , K + , Ca 2+ dari kompos tidak ada.
Pada  perlakuan  pemupukan  dengan  kompos campuran, perubahan pH hanya 0.22 dan pH medium pada keadaan netral, sehingga mikroba akan lebih efektif meremidiasi residu pestisida. Perlakuan ini adalah perlakuan terbaik.
Hubungan  residu  pestisida  dengan  waktu bioremediasi  untuk  kedalaman  tanah  0–5  cm seperti Gambar 4. Perlakuan kontrol untuk dosis
Perlakuan Kontrol Perlakuan kompos kotoran sapi terfermentasi
Perlakuan kompos bokasi
Perlakuan kompos sampah kota
Perlakuan kompos campuran
Gambar 3. Hubungan Waktu Bioremediasi, pH dan populasi mikroba pada proses bioremediasi in-situ
penyemprotan dosis rendah, residu pestisida hampir habis di minggu ke 6, sedangkan untuk dosis sedang dan dosis tinggi masih menyisakan residu di lahan sampai hari ke 60. Pada penyemprotan dosis sedang dan dosis tinggi, jumlah residu pestisida yang masuk ke zona perakaran lebih banyak sehingga proses bioremediasi memerlukan waktu lebih panjang.
Hubungan antara konsentrasi residu pestisida pada kedalaman 0–5 cm, dan 5–10 cm pada dosis penyemprotan  sedang  dan  dosis  tinggi  dengan populasi  mikroba  digambarkan  pada  Gambar  4. Residu pestisida dari perlakuan pemberian pada lahan dengan dosis 12 ton per ha pada minggu ke 5 tersisa antara 0.25–1.7% atau dibawah 0.003 ppm.
Perlakuan terbaik adalah perlakuan pemberian kompos campuran, perlakuan ini pada minggu ke 5 dari dosis penyemprotan tinggi menyisakan residu 0.25 % atau 0.0015 ppm. Populasi mikroba di awal bioremediasi, jumlah nutrien pada kompos, porositas kompos,  kelengasan  tanah,  suhu  dan  pH  tanah mendukung proses bioremediasi residu pestisida secara optimal.
Penyemprotan dosis rendah Penyemprotan dosis rendah
Penyemprotan dosis sedang Penyemprotan dosis sedang Penyemprotan dosis tinggi
Penyemprotan dosis tinggi
Gambar 4. Jumlah residu pestisida yang teremediasi

## SIMPULAN
Berdasarkan dinamika pH, populasi mikroba dan C/N tanah proses bioremediasi residu pestisida secara in-situ pada lahan budidaya hortikultura di Kawasan Wisata  Bedugul  berlangsung  secara  optimal. Perlakuan pemupukan dengan kompos campuran memberikan reaksi bioremediasi dengan perubahan pH hanya 0.22 dan reaksi pada kondisi pH netral, sehingga mikroba akan lebih efektif meremidiasi residu  pestisida.  Residu  pestisida  dari  masing- masing dosis penyemprotan pada hari ke 35 tersisa 0.25% –1.7 % atau dibawah 0.003 ppm. Dari identifikasi awal kelompok aktinomisetes mendominasi proses bioremediasi pada saat kelengasan tanah di bawah 30 %, dan kelompok bakteri mendominasi proses pada kelengasan tanah di atas 30 %.

## DAFTAR PUSTAKA
Alexander, M. 1999. Biodegradation and Bioremediation. Second Edition. Academic Press. London.
Cookson, J.T. 1995. Bioremediation Engineering: Design and Aplication. Mc Graw Hill. Inc. Toronto. Indrayani,  N.  2006.  Bioiremediasi  lahan  tercemar profenofos secara ex-situ dengan cara pengomposan. [Thesis}. Bogor: Sekolah Pasca Sarjana, Institut Pertanian Bogor
Kondo M and Yasuda M. 2003. Effects of temperature, water regime, light, and soil properties on N 2 fixation associated with decomposition of organic mater in paddy soils. JARQ 37(2): 113–119.
Pare T, Dinel H, and Schnitzer M. 1999. Extractability of trace metals during co-composting of biosolids and municipical solid wastes. J. Biol. Fertil. Soils 29: 31–37.
Reijntjes,  C;  B  Harverkort  and  Ann  Waters  B.,  1999. Pertanian Masa Depan. Pengantar Untuk Pertanian Berkelanjutan dengan Input Luar Rendah. Penerbit Kanisius. Yogyakarta.
Semple, K.T., B.J. Reid, and T.R. Fermor. 2001. Impact of composting strategies on the treatment of soil contaminated  with  organic  pollutant.  Reviw. Environmental Pollution 112: 269–283.
Setiyo, Y., Suparta U., Tika W., dan Gunadya, IBP. 2009. Pengembangan Model Bioremediasi Menggunakan Kompos Pada Lahan Tercemar Untuk Meningkatkan Kualitas  Produk  Hortikultura  (Studi  Kasus: Kawasan  Agrowisata  Bedugul-Bali).  Laporan Penelitian  Hibah  Kompetitif  Sesuai  Strategis Nasional.
Singer, A.D., and Crohn. 2002. Persistence and Degradation of Pesticides in Composting California Integrated Waste Management Board (CIWMB). California,
Sudyastuti, T dan Setyawan, N. 2007. Sifat thermal tanah pasiran pantai dengan pemberian bahan pengkondisi tanah dan biomikro pada budidaya tanaman cabai (capsicum annuum). Prosiding seminar nasional teknik pertanian – Yogyakarta.
Ton, S.W., 1991. Environmental Considerations With Use of Pesticides in Agriculture. Paper pada Lustrum Regulations. University of Minnesota.
Vidali, M. 2001. Bioremediation. Pure Appl. Cem. 73: 1163–1172.