## Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan
PERBANDINGAN EFEKTIVITAS BAKTERIOSIN Lactobacillus acidophillus ATCC 4356 DENGAN NISIN PADA PERTUMBUHAN Salmonella typhi ATCC 6539 (COMPARISON OF THE EFFECTIVENESS OF BACTERIOSIN Lactobacillus acidophillus ATCC 4356 WITH NISIN ON THE GROWTH OF Salmonella typhi ATCC
6539)
Siska Telly Pratiwi 1 , Sayu Putu Yuni Paryati 1 , Elizabeth Noviana Lumban Raja 2 , Panca Andana 2
1 Departemen Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi, Jawa Barat, Indonesia
2 Program Studi Sarjana Kedokteran, Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Achmad Yani,
Cimahi, Jawa Barat, Indonesia
Email korespondensi : siska.telly@lecture.unjani.ac.id

## ABSTRAK
Demam tifoid termasuk penyakit infeksi serius di Indonesia. Permasalahan yang sering timbul sehubungan  penanganan  kasus  demam  tifoid  salah  satunya  adalah  resistensi  antibiotik. Resistensi    antibiotika  menjadi  masalah  global  terutama  dalam  menangani  masalah  infeksi. WHO  melaporkan  Asia  Tenggara  memiliki  angka  tertinggi  dalam  kasus  resistensi  antibiotik di  dunia.  Penggunaan  antimikroba  yang  tidak  rasional  dan  berkembangnya  resistensi antibiotika  membuka  ketertarikan  untuk  menggunakan  alternatif  antimikroba  alami  seperti bakteriosin. Bakteri Lactobacillus acidophilus (L. acidophilus) menghasilkan zat bakteriosin. Bakteriosin  memiliki  aktivitas  bakterisidal  dan  bakteriostatik.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  aktivitas  bakteriosin L.  acidophilus ATCC  4356  terhadap  pertumbuhan Salmonella typhi  secara  in  vitro  sebagai  antibiotik  dibandingkan  dengan  kontrol  negatif  dan kontrol  positif.  Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah  kloramfenikol  dan  nisin.  Rancangan penelitian  ini  adalah  eksperimental  laboratoris  dengan post-test  only  control  group  design menggunakan  metode  difusi  agar  Kirby-Bauer  pada  media Mueller  Hinton  Agar (MHA). Hasilnya  didapatkan  bakteriosin L.acidophilus ATCC  4356  mampu  menghasilkan  efek  anti mikroba  terhadap Salmonella  typhi dengan  kekuatan  sedang,  nisin  menghasilkan  efek  anti mikroba  terhadap Salmonella  typhi dengan  kekuatan  kuat  dan  kloramfenikol  menghasilkan efek  anti  mikroba  terhadap Salmonella  typhi dengan  kekuatan  sangat  kuat.  Bakteriosin bekerja  dengan  cara  membentuk  pori  pada  membran  sel  bakteri  yang  akan  merusak permeabilitas membran sitoplasma target dan  menyebabkan kematian sel.
Kata kunci: bakteriosin, sactobacillus acidophilus , nisin, salmonella typhi
DOI DOI

## ARTIKEL PENELITIAN

## ABSTRACT
Typhoid  fever  is  a  serious  infectious  disease  in  Indonesia.  One  of  the  problems  that  often arise  in  relation  to  handling  cases  of  typhoid  fever  is  antibiotic  resistance.  Antibiotic resistance  is  a  global  problem,  especially  in  dealing  with  infections.  WHO  reports  that Southeast  Asia  has  the  highest  number  of  cases  antibiotic  resistance  in  the  world.  The irrational use of antimicrobials and the development of antibiotic resistance have opened an interest  in  using  natural  antimicrobial  alternatives  such  as  bacteriocins.  Lactobacillus acidophilus  (L.  acidophilus)  bacteria  produce  antimicrobial  substances,  one  of  which  is bacteriocin.  Bacteriocins  have  bactericidal  and  bacteriostatic  activity.  This  study  aimed  to determine the activity of bacteriocin L. acidophilus ATCC 4356 on the growth of Salmonella typhi  in  vitro  as  an  antimicrobial.  Positive  controls  used  were  chloramphenicol  and  nisin. This  research  design  was  experimental  laboratory  with  post-test  only  control  group  design using Kirby-Bauer agar diffusion method on Mueller Hinton Agar (MHA) media. The results showed  that  bacteriocin  L.  acidophilus  ATCC  4356  was  able  to  produce  an  antimicrobial effect against Salmonella typhi with moderate strength, nisin produced an antimicrobial effect against  Salmonella  typhi  with  a  strong  strength  and  chloramphenicol  produced  an antimicrobial  effect  against  Salmonella  typhi  with  a  very  strong  strength.  Bacteriocins worked by forming pores in the bacterial cell membrane which will damage the permeability of the target cytoplasmic membrane and cause cell death.
Keywords: bacteriocin, lactobacillus acidophilus, nisin, salmonella typhi

## PENDAHULUAN
Salmonella typhi (S. typhi) merupakan bakteri basil Gram negatif yang bersifat patogen  dan menyebabkan demam tifoid. 1 Demam  tifoid  termasuk  penyakit infeksi  serius  yang  hingga  saat  ini  masih menjadi problem epidemiologik, khususnya  di  daerah  tropik  termasuk Indonesia. 2,3 Berdasarkan  data World Health  Organization (WHO)  tahun  2020, kasus demam tifoid secara global mencapai  20.000.000  kasus  per  tahun  dan mengakibatkan  161.000  kematian  setiap tahunnya. 4 Di Indonesia, prevalensi demam  tifoid  pada  pasien  rawat  inap  di rumah  sakit  tahun  2013  sebesar  5,13%. 5
Kasus demam tifoid di Indonesia meningkat setiap tahun. 6 Data
Kementerian  Kesehatan  pada  tahun  2013, prevalensi kasus demam tifoid sebesar 300 sampai  dengan  810  per  100.000  penduduk per tahun dengan angka CFR 2%. 7
Pengobatan  infeksi S.  typhi adalah antibiotika.  Pengobatan  antibiotika  lini pertama (drug  of  choice) untuk  infeksi S.typhi adalah  kloramfenikol.  Pilihan pengobatan  lini  kedua  yaitu  sefriakson, cefixim,  dan  quinolone.  Permasalahan yang sering timbul sehubungan penanganan  kasus  demam  tifoid  salah satunya  adalah  resistensi.  Perubahan  atau mutasi  genetika S.typhi menyebabkan timbulnya  resistensi.  Resistensi  antibiotika ini dilaporkan makin meningkat. Resistensi dapat  terjadi  pada  antibiotika  lain  yaitu seperti  ampisilin,  kotrimoksazol,  dan
kuinolon.  Resistensi  terhadap  berbagai macam  antibiotika  ini  dapat  menyebabkan
Multi  Drug  Resistance  Salmonella  typhi (MDRST),  sehingga  dibutuhkan  penelitian lebih  lanjut  mengenai    antimikroba alternatif  yang  dapat  melawan S.typhi . 6
Penelitian  Jamila  (2015)  di  Makassar mengenai  evaluasi  keberadaan  gen  catP terhadap  resistensi  kloramfenikol  pada penderita  demam  tifoid  menunjukkan adanya  resistensi  terhadap  kloramfenikol sebesar  37,7%  pada  uji disc  diffusion dan 43,4% pada uji Polymerase Chain
Reaction (PCR). 8 Pada penelitian Jefri dan Jhons  (2017)  di  Rumah  Sakit  Immanuel
Bandung
ditemukan
resistensi kloramfenikol sebanyak 0,95%. 9 Lactobacillus acidophilus (L. acidophilus) adalah  bakteri  asam  laktat normal dalam saluran pencernaan manusia.
L.  acidophilus menghasilkan  asam  laktat,
produksi hidrogen peroksida dan bakteriosin. 10 Bakteriosin
memiliki aktivitas  bakterisidal  dan  bakteriostatik.
Bakteriosin  memiliki  spektrum  luas  yang dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri patogen  Gram  positif  dan  negatif. 11-13
Bakteriosin aman dijadikan sebagai
biopreservatif makanan, komponen
pelengkap antibiotik, dan formula probiotik untuk manusia. 14,15
L. acidophilus merupakan  bakteri  probiotik dengan  efek  antagonis  melawan  infeksi Salmonella  spp. Bakteriosin  memiliki
karakteristik  yang  menguntungkan  dari bakteri  probiotik  karena  dapat  melindungi dan menghambat kolonisasi bakteri patogen  gastrointestinal  pada  sel  inang. Setiap strain L.acidophilus menghasilkan bakteriosin yang berbeda dalam menghambat  pertumbuhan S.  typhi . 10,16,17
Bakteriosin yang dihasilkan L. acidophilus adalah  lactatin,  acidocin,  acidophilin,  dan acidophilicin.  Nisin    adalah    bakteriosin yang    dihasilkan  oleh    BAL Lactococcus lactis ,    dinilai    aman    dan    diijinkan penggunaannya    di    banyak    negara, termasuk    Indonesia.  Berdasarkan  hal tersebut,  pada  penelitian  ini  dilakukan pengujian  bakteriosin L.acidophilus untuk
mengetahui aktivitas antimikroba bakteriosin L.acidophilus dalam menghambat  pertumbuhan S.typhi sebagai antimikroba dibandingkan dengan kloramfenikol dan nisin.

## BAHAN DAN METODE

## Desain Penelitian
Jenis penelitian ini adalah experimental  laboratories .  Perlakuannya dengan  ekstraksi  bakteriosin  dari  bakteri asam  laktat L.acidophilus kemudian  diuji daya hambatnya terhadap S. typhi. Penelitian  ini  sudah  mendapatkan ethical clearance dari  komite  etik  Fakultas Kedokteran  Universitas  Jenderal  Achmad Yani No. 008/UH1.09/2020.

## Bahan dan Metode
Sumber  mikroba  yang  terdiri  dari L.acidophilus dan S.  typhi diambil  dari isolat  murni  yang  diperoleh  dari  ATCC. Media pertumbuhan bakteri yang dipergunakan  antara  lain man  rogosa  and sharpe (MRS) broth dan agar, CM sukrose (Sukrose  1%,  yeast  exstract  1%,  pepton 0,45%,  KH2PO4  2,84%,  NaCl  0,2%, MgSO4  0,02%,  MnSO4  0,005%)  nutrient agar  dan  broth, digunakan  sebagai  media pertumbuhan  Bakteri  Asam  Laktat  (BAL) penghasil  bakteriosin,  sedangkan  media muller  hinton  agar (MHA)  digunakan sebagai  media  untuk  pengujian  aktivitas bakteriosin.

## Sterilisasi Alat dan Bahan
Sebelum  melaksanakan  penelitian, semua  alat,  bahan  dan  media  harus disterilisasi terlebih dahulu dengan autoklaf pada  tekanan  1  atm,  suhu  121 0 C selama  15  menit.  Sedangkan  untuk  alat yang  tidak  tahan  panas  dapat  dilakukan sterilisasi  menggunakan  alkohol  atau pembakaran di atas api bunsen. 18

## Pembuatan Media
Pembuatan media MRS agar dilakukan  dengan  cara  2,5  g  MRSA dilarutkan dalam 100 mL akuades kemudian  disterilkan  dengan autoklaf dan tuang  media  steril  ke  cawan  petri  steril. Pembuatan  media  NA  dilakukan  dengan cara  2,8  gr  dilarutkan  dalam  100  mL akuades  dan  dipanaskan  di  atas hot  plate.
Kemudian  disterilkan  dengan autoklaf dan
tuang  media  steril  ke  cawan  petri  steril. 19
Pembuatan media MHA dilakukan dengan cara  38  g  MHA  dilarutkan  dalam  1L akuades di erlenmeyer lalu didihkan di atas hot  plate . Magnetic  stirer dimasukkan untuk  mempercepat  pelarutan  hingga larutan  media  berwarna  kuning  jernih. Erlenmeyer kemudian ditutup menggunakan alumunium foil dan disterilisasi  dengan autoklaf dan  tuang media steril ke cawan petri steril. 20

## Identifikasi Bakteri
Identifikasi bakteri dilakukan dengan  uji  pewarnaan  Gram.  Hasil pewarnaan  ditetesi  minyak  emersi  lalu diamati  di  bawah  mikroskop  pembesaran 1000x. Bakteri Gram positif akan berwarna ungu  dan  bakteri  Gram  negatif  akan berwarna merah. 18

## Ekstraksi Bakteriosin
Isolat L. acidophilus 10 ml diinokulasikan ke dalam media MRS broth 400  ml  dan  diinkubasi  pada  suhu  37°C selama  24  jam.  Kekeruhan  inokulum disamakan  dengan  larutan  0,5  Mc  Farland sehingga  konsentrasi L.  acidophilus setara 5x10 8 CFU/ml. Kultur disentrifugasi dengan  kecepatan  10.000  rpm  pada  suhu 4°C  selama  15  menit.  Penambahan  NaOH 1N  untuk  netralisasi  pH  filtrat  hingga  pH 7.  Filtrat  dimurnikan  dengan  amonium sulfat  yang  dimasukkan  sedikit  demi sedikit  dan  dihomogenkan  dengan strirer perlahan  selama  2  jam  pada  suhu  4 o C.
Filtrat  disterilkan  dengan  filter  bakteri berdiameter  0,45  μm  ke  dalam  tabung steril untuk memperoleh supernatan antibakteri  netral  bebas  sel.  Ekstrak bakteriosin disimpan pada suhu 4°C. 11,21-26

## Uji Sensitivitas Bakteriosin terhadap Enzim Proteolitik
Enzim  tripsin  sebanyak  750  µL konsentrasi  1  mg/mL  dilarutkan  dalam dapar  fosfat  pH  7,6  untuk  enzim  tripsin. Kemudian ditambahkan supernatan bakteriosin sebanyak 250 µL dan diinkubasi  selama  2  jam  pada  suhu  25 o C.
Filtrat  disterilkan  dengan  filter Millipore berdiameter  0,22  µm  ke  dalam  tabung steril.  Sebanyak  20  µL  supernatant antibakteri  diteteskan  pada  kertas  cakram steril  berdiameter  6  mm.  Kertas  cakram diletakkan  di  atas  media  MHA  yang mengandung  bakteri  indikator.  Diameter zona  hambat  yang  dihasilkan  diukur dengan menggunakan jangka sorong setelah  diinkubasi  selama  24  jam  pada suhu 37 o C. 11

## Uji Aktivitas Antibakteri Bakteriosin
Uji  aktivitas  bakteriosin  terhadap (acidophillin  dan  nisin) dilakukan  dengan metode difusi Agar. Supernatan bakteriosin  yang  sudah  disterilkan  dan diatur pH nya diteteskan pada cakram steril sebanyak  20  μL.  Cakram  bakteriosin diletakkan  bersamaan  dengan  cakram kloramfenikol  dan  nisin,  serta  cakram akuades  pada  media  MHA  yang  sudah
ditanam S.typhi .  Kemudian  diinkubasikan pada  suhu  37°C  selama  24  jam.  Diameter zona  hambat  diukur  menggunakan  jangka sorong  dalam  satuan  milimeter  (mm).
11,21,23 Menurut Susanto dkk. hasil pengukuran  zona  hambat  diinterpretasikan sebagai  sangat  kuat  (diameter  >20  mm), kuat  (diameter  11-20  mm),  sedang (diameter  6-10  mm),  dan  lemah  (diameter < 5 mm). 21,27,28,29-32
Pengukuran zona hambat digunakan rumus sebagai berikut:
Keterangan: dv: Diameter vertikal dh: Diameter horizontal dc: Diameter cakram

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Peremajaan Bakteri dan Reidentifikasi
Bakteri L.acidophilus dilakukan reidentifikasi  dan  peremajaan  terlebih dahulu  untuk  memastikan  bakteri  yang digunakan  dalam  penelitian  adalah  benar bakteri  yang  dimaksud  dan  dalam  kondisi yang good  condition dan good  nutrition . Pertumbuhan Lactobacillus pada  medium de  Man  Ragosa  Sharpe  Agar (MRSA) umumnya  berukuran  2  sampai  dengan  5 mm.  Koloni  berwarna  putih  opak  seperti susu  dan  berbentuk  konveks. 12,33 MRSA merupakan  media  yang  spesifik  untuk bakteri  asam  laktat.  MRS Agar dan Broth direkomendasikan  untuk  isolasi  dan  kultur
Diameter Zona Hambat=(dv+dh /2 )- dc
spesies Lactobacillus. 34-35 Hasil  kultur dilakukan pemeriksaan mikroskopis
dengan  pewarnaan  Gram  dan  dilihat  di bawah  mikroskop  dengan  pembesaran
1000x dengan penambahan minyak emersi. Hasil  yang  didapatkan  adalah  bakteri batang Gram positif (Gambar 1 dan 2)
Gambar 1 Hasil peremajaan L. acidophilus di MRSA.
Gambar 2 Pewarnaan Gram L. acidophilus.
Bakteri Salmonella typhi ditumbuhkan  di  media  TSA  kemudian
untuk  reidentifikasi  berikutnya  dilakukan
pewarnaan  Gram.  Dari  hasil  pewarnaan Gram  didapatkan  bakteri Gram negatif batang (Gambar 3).

## Uji Sensitivitas BakteriosinL. Acidophilus terhadap Enzim Tripsin
Uji  sensitivitas  bakteriosin  terhadap enzim  tripsin  pada  Gambar  4 didapatkan hasil tidak ada zona hambat. Enzim tripsin termasuk  ke  dalam  enzim  proteolitik  yang mampu menguraikan atau memecah molekul  protein. 36 Bakteriosin  merupakan substansi  protein  aktif  dengan  berat
molekul  kecil yang disintesis di ribosom. 12
Bakteriosin L. acidophilus memiliki sensitivitas  terhadap  enzim  proteolitik seperti enzim tripsin, pepsin, dan papain. 10,23 Berdasarkan  hasil  uji  ini  maka dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  yang diambil  dari  bakteri L.  acidophilus merupakan bakteriosin.
Gambar  4 Uji sensitivitas bakteriosin terhadap enzim Tripsin. (a) Bakteriosin tidak memiliki zona hambat saat uji sensitivitas terhadap Tripsin. (b) Kloramfenikol sebagai kontrol positif dan (c) Akuades sebagai kontrol negatif.
Kemudian dilakukan uji
pendahuluan bakteriosin L.acidophilus terhadap Salmonella  typhi menggunakan disk  kosong  dan  dilakukan  kontak  dengan bakteri  uji  selama  24  jam  pada  suhu inkubasi 37◦C pada kadar CO 2 7,5%. Pada pembacaan  hasil  penelitian  hari  pertama didapatkan  zona  hambat  pada  pH2  dan
suhu 40◦C dengan diameter 9,5 mm. Pada kontrol  negatif  tidak  ada  zona  hambar sedangkan pada kontrol positif 1 (kloramfenikol)  ada  zona  hambat  dengan diameter  28,00  mm,  sedangkan  kontrol positif 2 (nisin konsentrasi 100) didapatkan zona  hambat  dengan  diameter  12,50  mm (Gambar 5 dan 6).
a b c
Gambar 5 (a) Kontrol positif kloramfenikol dan (b) Kontrol negatif berupa akuades.
Gambar 6 (a) Kontrol positif nisin, (b) Bakteriosin L.acidophilus dan (c) Kontrol negatif berupa akuades.
Menurut Susanto dkk. hasil pengukuran  zona  hambat  dari  bakteriosin L.acidophilus pada penelitian ini diinterpretasikan  memiliki  daya  aktivitas bakteri  sedang  karena  berada  diantara diameter  6-10mm,  nisin  memiliki  daya aktivitas bakteri kuat sedangkan kloramfenikol  masuk  dalam  kategori sangat kuat karena memiliki diameter zona hambar di atas 20mm.
L.  acidophilus dapat  menghasilkan asam  laktat,  hidrogen  peroksida  dan bakteriosin.  Bakteri  ini  memiliki  sifat
antagonis terhadap mikroorganisme perusak  makanan  seperti Staphylococcus aureus,  Salmonella  sp ,  dan  Gram  negatif.
Bakteriosin L. acidophilus sebagai antimikroba  dapat  diaplikasikan  sebagai biopreservatif  dan  produk  susu  fermentasi yang  dapat  menghambat  bakteri  patogen. Bakteriosin  yang  dihasilkan  oleh L. acidophilus disebut lactatin, acidophilucin,
acidocin,  acidophilicin,  dan  acidophilin. 10
Ukuran  dari  bakteriosin L.  acidophilus yaitu 2,5 sampai dengan 100 kDa. 29
a b b b a b a a a c a a a c a a a
Bakteriosin L.  acidophilus memiliki spektrum  yang  luas  sehingga  dapat menghambat  bakteri  Gram  positif,  Gram negatif,  dan  jamur . 23 Bakteriosin L. acidophilus AA11  yaitu acidocin D20079 dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Gram  negatif  seperti Escherichia  coli,
Salmonella spp, Shigella spp. 10
L. acidophilus sebagai bakteri probiotik dapat melawan infeksi
Salmonella  thypimurium . 37 L.  acidophilus sebagai  probiotik  memiliki  potensi  untuk digunakan sebagai pengobatan pada infeksi gastrointestinal, intoleransi laktosa,
menurunkan  kolesterol,  dan  pencegahan diare. 21 L.acidophilus aman  dan  tidak berbahaya  bagi  manusia  jika  ditambahkan dalam  pangan  karena  statusnya  sebagai Generally Recognized As Safe (GRAS) dari United
States Food and Drug Administration (USFDA) yaitu
mikroorganisme yang tidak berisiko terhadap  kesehatan,  bahkan  beberapa  jenis bakteri berguna bagi kesehatan. 38
Bakteriosin  merupakan  salah  satu substansi antimikroba yang dihasilkan oleh bakteri  asam  laktat. 13 Bakteriosin  bekerja dengan cara membentuk pori pada membran sel yang akan merusak permeabilitas membran sitoplasma target. 39
Hal  ini  dapat  menyebabkan  kebocoran metabolit  dan  menghilangkan  gaya  gerak proton  atau Proton  Motif  Force (PMF).
PMF adalah gradien elektrokimia
membran sitoplasma yang mengatur sintesis Adenosine  Triphosphate (ATP). Penurunan PMF akan menyebabkan
kematian sel karena berhentinya pembentukan energi. 40 Target utama bakteriosin adalah membran sitoplasma sel bakteri.  Lipid  membran  sitoplasma  yang bermuatan  negatif  merupakan  reseptor utama  bakteriosin  dan  berperan  dalam pembentukan pori. Bakteriosin akan berikatan  dengan  membran  sel  target dengan cara interaksi elektrostatik. 41,42

## KESIMPULAN
Pada  penelitian  ini  didapatkan bakteriosin L.acidophilus memiliki  daya aktivitas bakteri sedang walaupun kemampuan  aktivitas  bakterinya  masih  di bawah nisin ataupun klorampenikol.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Penulis      menyatakan      bahwa tidak  ada  konflik  kepentingan  pada  semua pihak yang terkait dalam penelitian ini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kami      mengucapkan      terima kasih  kepada  LPPM  Universitas  Jenderal Achmad  Yani  sebagai  pemberi  hibah  dan para laboran di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas  Kedokteran  Universitas  Jenderal Achmad  Yani  yang  ikut  serta  dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Cita YP. Bakteri Salmonella typhi dan
Demam Tifoid. J Kesehat Masy.2011;6(1):42–6.
2. Amarantini C. Seleksi Bakteri
Salmonella  typhi  dari  Kultur  Darah
Penderita  Demam  Tifoid.  Pros  Semin
Nas Penelitian, Pendidik dan Penerapan MIPA. 2009;13–20.
3. Darmawati S. Keanakeragaman Genetik  Salmonella  typhi.  J  Kesehat. 2008;2(1):27–33.
4. World  Health  Organization.  Typhoid Fever [Internet]. WHO.  Geneva; 2020 [cited  2020  Jun  2].  Available  from: https://www.who.int/features/qa/typho id-fever/en/
5. Saputra  R,  Majid  R,  Bahar  H.
Hubungan  Pengetahuan,  Sikap  dan Kebiasaan  Makan  dengan  Gejala Demam  Thypoid  pada  Mahasiswa Fakultas Kesehatan
Masyarakat Universitas  Halu  Oleo  Tahun  2017.  J Ilm  Mhs  Kesehat  Masy  Unsyiah.
2017;2(6):1–7.
6. Supari SF. Keputusan Menteri Kesehatan  Republik  Indonesia  No. 364  tentang  Pedoman  Pengendalian Demam  Tifoid.  Menteri  Kesehatan Republik Indonesia. 2006. p. 41.
7. Sjahrian T. Faktor-Faktor Yang
Berhubungan Dengan
Kejadian
Demam  Tifoid  Pada  Anak.  J  Med Malahayati. 2015;2(1):1–7. 8. Jamilah.  Evaluasi  Keberadaan  Gen
catP terhadap
Resistensi
Kloramfenikol Pada Penderita Demam Tifoid.  Pros  Semin  Nas  Mikrobiol Kesehat dan Lingkung. 2015;146–52.
9. Sandika  J,  Suwandi  JF.  Sensitivitas Salmonella  thypi  Penyebab  Demam Tifoid  terhadap  Beberapa  Antibiotik. Majority. 2017;6(1):41–5.
10. Ahmed  Z,  Wang  Y,  Cheng  Q,  Imran M. Lactobacillus Acidophilus Bacteriocin, From Production to Their Application:  An  overview.  African  J Biotechnol. 2010;9(20):2843–50.
11. Sari R, Apridamayanti P, Octaviani M, Sari R, Apridamayanti P, Octaviani M. Optimasi  Aktivitas  Bakteriosin  yang Dihasilkan  oleh  Bakteri  Lactobacillus plantarum  dari  Minuman  Ce  Hun Tiau. Pharm Sci Res. 2018;5(1):1–6.
12. Puspadewi R,  Adirestuti P,  Anggraeni G. Aktivitas Metabolit Bakteri Lactobacillus  plantarum  dan  Perannya dalam  Menjaga  Kesehatan  Saluran Pencernaan.  Konf  Nas  Sains  Dasar dan Apl. 2011;(June 2011):1–11.
13. Suardana IW, Suarsana IN. Karakterisasi  Fisikokimia  dan  Uji Aktivitas  Bakteriosin  dari  Bakteri Asam  Laktat  Isolat  13  B  Hasil  Isolasi Kolon  Sapi  Bali.  Indones  Med Veterinus. 2017;6(4):278–87.
14. Liu  YW,  Liong  MT,  Tsai  YC.  New perspectives of Lactobacillus
plantarum  as  a  probiotic:  The  gut-
heart-brain axis. J Microbiol.
2018;56(9):601–13.
15. Seddik HA, Bendali F, Gancel F, Fliss I,  Spano  G,  Drider  D.  Lactobacillus plantarum  and  Its  Probiotic  and  Food Potentialities.  Probiotics  Antimicrob
Proteins. 2017;9(2):111–22.
16. Monadi  AR,  Mirzaei  H,  Javadi  A,
Hosseinzade  N,  Amjadi  Y.  Effect  of Some  probiotics  on  Salmonella  typhi
During  Associated  Growth  in  Milk. African J Microbiol Res.
2010;4(24):2708–11.
17. Nakazato  G,  Paganelli  FL,  Lago  JC,
Aoki  FH,  Mobilon  C,  Brocchi  M,  et al. Lactobacillus Acidophilus Decreases  Salmonella  typhimurium
Invasion  In  Vivo.  J  Food  Saf.
2011;31(2):284–9.
18. Benigna M. Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Keji Beling (Srobilanthes Crispa Bl.)  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri
Salmonella  typhi  Secara  In  Vitro.
Universitas Sanata Dharma; 2015.
19. Juariyah  S,  Sari  WP.  Pemanfaatan
Limbah  Cair  Industri  Tahu  Sebagai Media Alternatif Pertumbuhan
Bacillus  sp.  J  Anal  Kesehat  Klin
Sains. 2018;6(1):24–9.
20. Hidayat  T.  Uji  Aktivitas  Antibakteri
Fraksi  Etil  Asetat  Kulit  Buah  Citrus
reticulata terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus.  Universitas Muhammadiyah Malang; 2018. 21. Pratiwi ST, Paryati SPY. The Effect of Bacteriosin from Lactobacillus
acidopillus  on  Growth  of  Salmonella typhi.  Int  J  Psychosoc  Rehabil. 2020;24(8).
22. Arief  II,  Jenie  BSL,  Suryati  T,
Ayuningtyas G, Fuziawan A. Antimicrobial  activity  of  bacteriocin from indigenous Lactobacillus plantarum 2C12 and its application on beef  meatball  as  biopreservative.  J Indones Trop Anim Agric.
2012;37(2):90–6.
23. Zhao  R,  Duan  G,  Yang  T,  Niu  S, Wang Y. Purification, Characterization and Antibacterial
Mechanism of Bacteriocin from Lactobacillus acidophilus XH1. Trop J Pharm Res. 2015;14(6):989–95.
24. Usmiati  S,  Marwati  T.  Seleksi  dan Optimasi  Proses  Produksi  Bakteriosin dari  Lactobacillus  sp.  J  Pascapanen. 2007;4(1):27–37.
25. Mustopa AZ, Amelia S. Temperature , pH  ,  Enzyme  and  Surfactan  Effect  to Encapsulation of Plantaricin F
Recombinant  as  Antibacterial  of Staphylococcus aureus and Salmonella typhi.  J  Biol  Indones.  2018;14(1):61– 71.
26. Yulinery  T,  Nurhidayat  N.  Aktivitas Antimikroba dan Analisis Gen
Plantarisin  F  dari  Isolat  Lactobacillus Asal  Buah-Buahan  Tropis.  J  Ilmu
Kefarmasian Indones.
2013;11(2):147–55.
27. Siregar  TN.  The  Isolation  And
Identification  Of  Bacteria  Salmonella Sp  On  Quail  Egg  Shell  In  Traditional Markets  Ulee  Kareng  Banda  Aceh.  J Med Vet. 2019;13(1):79–87.
28. Hernández-Aquino S, Miranda- Romero  LA,  Fujikawa  H,  de  Jesús Maldonado-Simán  E,  Alarcón-Zuñiga B.  Antibacterial  activity  of  lactic  acid bacteria  to  improve  shelf  life  of  raw meat. Biocontrol Sci. 2019;24(4):185– 92.
29. Gaspar  C,  Donders  GG,  Palmeira-de-
Oliveira  R,  Queiroz  JA,  Tomaz  C, Martinez-de-Oliveira J, et al.
Bacteriocin Production of The Probiotic  Lactobacillus  acidophilus
KS400.  AMB  Express  [Internet].
2018;8(1). Available from: https://doi.org/10.1186/s13568-018- 0679-z
30. Sandika  J.  Pola  Kepekaan  Isolat Bakteri Salmonella typhi pada
Penderita  Demam  Tifoid  terhadap Antibiotik  di  RSUD  Abdoel  Moeloek
Bandar Lampung. Universitas
Lampung; 2017.
31. Abdurrachman,  Febrina  E.  Evaluasi Penggunaan  Antibiotik  pada  Pasien Anak  Penderita  Demam  Tifoid  di Rumah  Sakit  Al  Islam  Bandung. Farmaka. 2018;16(2):87–96.
32. Utami  E  K.  Antibiotika,  Resistensi, dan  Rasionalitas  Terapi.  El-Hayah. 2011;1(4):191–8.
33. Yang  Y,  Greenleaf  Z,  Kann  W,  Sha M.  Microaerobic  Fermentation  of Lactobacillus  acidophilus  within  Gut Microbiome  Physiological  Conditions by  BioFlo  ®  Bioprocess  Control
Stations. Eppend Appl Note. 2019;(412):1–8.
34. Safitri  N,  Sunarti  TC,  Meryandini  A. Formula  Media  Pertumbuhan  Bakteri Asam Laktat Pediococcus pentosaceus Menggunakan  Substrat  Whey  Tahu. Sumberd Hayati. 2016;2(2):31–8.
35. Zimbro DAPMJ. Difco& BBL Manual Manual  of  Microbiological  Culture Media.  11th  ed.  Maryland:  The  Difco Manual; 1998.
36. Suhartono S, Artika W. Isolasi dan Uji Aktivitas  Protease  dari  Aktinobakteri Isolat  Lokal  (AKJ-09)  Aceh.  J Bioleuser. 2017;1(3):116–20.
37. Antono  A,  Pamuji  DB.  Daya  Hambat Susu  Hasil  Fermentasi  Lactobacillus acidhopillus Terhadap Salmonella thypimurium. PharmaScientia. 2012;1(2).
38. Bull  M,  Plummer  S,  Marchesi  J, Mahenthiralingam E. The Life History of  Lactobacillus  acidophilus  as  a Probiotic:  A  tale  of  Revisionary Taxonomy, Misidentification and
Commercial Success. FEMS
Microbiol Lett. 2013;349(2):77–87.
39. Fuziawan A. Aplikasi Bakteriosin dari Lactobacillus  plantarum  2C12  sebagai Bahan  Pengawet  pada  Produk  Bakso. Institut Pertanian Bogor; 2012.
40. Rizki S. Pengaruh Konsentrasi Inokulum dan Lama Fermentasi terhadap Aktivitas Antibakteri Bakteriosin  yang  Dihasilkan  oleh Lactobacillus  plantarum.  Universitas
Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim;
2018. 41. Basarang  M.  Pengaruh  Bakteriosin dari Streptococcus thermophilus sebagai  Pengawet  terhadap  Lama Penyimpanan  Dangke.  Universitas Hasanuddin Makassar; 2013.
42. Viogenta P. Karakteristik Anti Bakteri Isolat  Lactobacillus  dari  Tempoyak.
Universitas Lampung; 2010.