Analisis Kadar Kafein pada Minuman Kopi Import yang Beredar di Kota Batam dengan Menggunakan Metode Spektrofotometri UV
Yuliyana 1 , Hesti Marliza 1* , Mawardi Badar 1 , Yunisa Friscia Yusri 1
1 Program Studi Sarjana Farmasi, Institut Kesehatan Mitra Bunda, Batam, Kepulauan Riau, Indonesia.
A R T I C L E  I N F O

## O R I G I N A L   A R T I C LE
Article Type :
Research
contains  chemical  compounds,  one  of  which  is  caffeine.  If  consumed  in  excess,  caffeine negatively  affects  the  human  body,  such  as  nervousness,  tremors,  insomnia,  hypertension,
and  seizures.  UV  spectrophotometry.  Analysis  of  caffeine  content  of  imported  coffee  was qualitatively  used  parry  reagent,  and  analysis  of  caffeine  content  of  imported  coffee  was quantitatively determined using UV spectrophotometry at a wavelength of 273.05 nm. Based on  the  qualitative  test  conducted,  seven  samples  of  imported  coffee  were  positive  for caffeine. In sample A, 43.15 mg caffeine content, sample B 95.1 mg caffeine content, sample C  49.3  mg  caffeine  content,  sample  D  106.05  mg  caffeine  content,  sample  E  45.81  mg caffeine  content,  sample  F  57,  2  mg  caffeine  content,  sample  G  22  mg  caffeine  content. Based on the research that has been done, three samples of imported coffee do not meet the SNI standard, namely 50 mg/serving and four samples of coffee that meet the SNI standard.
Keywords : Caffeine , Imported Coffee, Parry Reagent, Spectrophotometry UV.
Article History: Received: 11/13/2021 Accepted: 12/28/2021
Corresponding author Email: hesti79id@gmail.com

## ABSTRAK
Pendahuluan: Kopi  merupakan  salah  satu  minuman  lezat  yang  banyak  digemari  oleh masyarakat. Kopi ( Coffea sp ) memiliki kandungan senyawa kimia salah satunya yaitu kafein. Kafein memiliki efek negative pada tubuh manusia jika dikonsumsi secara berlebihan seperti, gugup,  tremor,  insomnia,  hipertensi  dan  kejang.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  Untuk mengetahui  berapa  kadar  kafein  pada  kopi  Import  yang  beredar  dikota  Batam  dan  apakah sudah  memenuhi  standar  SNI  dengan  menggunakan  metode  spektrofotometri  UV.  Analisis kadar  kafein  kopi  import  secara  kualitatif  menggunakan  reagen  parry  dan  analisis  kadar kafein  kopi  import  secara  kuantitatif  ditentukan  menggunakan  spektrofotometri  UV  pada panjang gelombang 273,05 nm. Berdasarkan uji kualitatif yang dilakukan tujuh sampel kopi import positif mengandung kafein. Pada sampel A 43,15 mg kadar kafein, sampel B 95,1 mg kadar kafein, sampel C 49,3 mg kadar kafein, sampel D 106,05 mg kadar kafein, sampel E 45,81 mg kadar kafein, sampel F 57,2 mg kadar kafein, sampel G 22 mg kadar kafein. Dari hasil penelitian yang telah dilakukan disimpulkan terdapat tiga sampel kopi import yang tidak memenuhi  standar  SNI  yaitu<50  mg/sajian  yaitu  sampel  B,  D,  F  dan  empat  sampel  kopi yang memenuhi standar SNI yaitu sampel A, C, E dan G.
Kata Kunci: Kafein, Kopi Import, Reagen Parry, Spektrofotometri UV.

## PENDAHULUAN
Pulau  Batam  merupakan  salah  satu  kota  yang  berada  di  Kepulauan  Riau,  yang  terletak diperbatasan. Posisi pulau yang memiliki akses laut yang luas, garis pantai yang Panjang serta laut  yang  tidak  terlalu  dalam  dan  tenang  merupakan  potensi  pulau  Batam  untuk  menjadi pelabuhan  internasional.  Tidak  hanya  menjadi  pelabuhan  bebas  pulau  Batam  juga  diformat menjadi kawasan perdagangan bebas. Status Batam sebagai kawasan perdagangan bebas dan

## AHMAR METASTASIS HEALTH JOURNAL
Available online at: http://journal.ahmareduc.or.id/index.php/AMHJ Vol. 1. No. 3. Desember 2021, Halaman 1 06 -11 1 P-ISSN: 2797-6483  E-ISSN: 2797-4952

## ABSTRAC T
Introduction: Coffee is one of the delicious drinks that many people like. Coffee (Coffeasp)
pelabuhan  bebas  (KPBPB)  ditetapkan  oleh  Undang-  undang  No.  44  Tahun  2007  (Muzwardi, 2016).  Status  Batam  sebagai  Kawasan  perdagangan  bebas  menjadikan  Batam  sebagai  pintu masuk  barang-barang  import.  Berbagai  jenis  barang  import  mudah  ditemukan  di  Batam  dari elektronik hingga makanan dan minuman salah satunya adalah kopi. Keberadaan kopi import di Batam banyak berasal dari negara Malaysia, Thailand serta Vietnam.
Kopi  merupakan  jenis  tumbuhan  yang  dapat  diolah  menjadi  minuman  lezat.  Saat  ini  kopi menjadi  minuman  paling  disukai  masyarakat  dunia  setelah  air  dan  teh  (Cornelis,  2019).  Hasil penelitian  menyebutkan  bahwa  kopi  mengandung  sedikit  nutrisi,  tetapi  mengandung  lebih  dari ribuan  bahan  kimia  alami  seperti  karbohidrat,  lipid,  senyawa  nitrogen,  vitamin,  mineral,  alkaloid dan  senyawa  fenolik.  Beberapa  di  antaranya  berpotensi  menyehatkan  dan  beberapa  yang  lain berpotensi  bahaya.  Salah  satu  senyawa  alkaloid  yang  berpotensi  berbahaya  untuk  kesehatan adalah kafein (Lire Wachamo, 2017)
Kafein memiliki efek ketergantungan dan memiliki efek positif pada tubuh manusia dengan dosis rendah yaitu ≤ 400 mg seperti peningkatan gairah, peningkatan kegembiraan, kedamaian dan  kesenangan  (Willson,  2018).  Kafein  juga  terdapat  di  obat-obatan  yang  beredar  dipasaran, yang  kegunaannya  untuk  menghilangkan  rasa  sakit  kepala.    Efek  berlebihan  mengkonsumsi kafein dapat menyebabkan gugup, gelisah, tremor, insomnia, hipertensi dan kejang (Setiabudy, 2002).  Efek  lainnya  yaitu  dapat  meningkatkan  detak  jantung  yang  tidak  normal,  sakit  kepala, munculnya  perasaan  was-was,  cemas,  ingatan  berkurang  dan  dapat  menyebabkan  gangguan pada lambung dan pencernaan (Ozpalas & Ozer, 2017).
Kafein  hanya  dapat  menimbulkan  kecanduan  jika  dikonsumsi  dalam  jumlah  yang  banyak dan  rutin  (Willson,  2018).  Menurut  SNI  01-7152-2006  batas  maksimum  kafein  dalam  makanan dan  minuman  adalah  150  mg/hari  dan  50  mg/sajian.  Biasanya  seseorang  mengkonsumsi  kopi yang disajikan sekitar 3 g dalam satu cangkir. Adapun tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui apakah  kopi  import  yang  beredar  di  Batam  sudah  memenuhi  batas  maksimum  kafein  menurut SNI yaitu 50 mg/sajian.

## METODE PENELITIAN
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  Spektrofotometer  UV, rotary  evaporator , hot  plate,  timbangan,  tabung  reaksi,  corong,  labuukur,  erlenmeyer,  beker  glass,  pipet  tetes, corong  pisah,  pipet  gondok.  Bahan  yang  digunakan  pada  penelitianiniadalahstandartkafein, kloroform  (CHCl 3 ),  kalsium  karbonat  (CaCO 3 ),  alkohol,  amonia  encer,  akuades,  sampel  kopi import,  reagen  parry.  Prosedur  Pengolahan  dan  Pengambilan  sampel penelitian  yang  akan digunakan  adalah  7  merek  kopi  import  yang  beredar  di  kota  Batam. Uji kualitatif kafein metode parry yaitu  sejumlah  zat  dilarutkan  dalam  alkohol  70%,  kemudianditambahkanreagen  parry  dan ammonia encer. Larutan bewarna biru tua/hijau menyatakan terdapat kafein. Pembuatan larutan baku  kafein  dengan  sebanyak  250  mg  kafein  standar,  dimasukkan  kedalam  labu  ukur  250  mL. Lalu  diencerkan  aquades  sampai  tanda  batas  dan  homogenkan  kemudian  dipipetkan  larutan standar  tadi  sebanyak  2,5  mL,  dan  dimasukkan  kedalam  labu  ukur    25  mL  lalu  diencerkan dengan  aquades  sampai  tanda  batas  dan  dihomogenkan  sehingga  memperoleh  100  ppm  (Sri Hainil,  2019). Untuk penentuan panjang gelombang d eteksi absorbansi larutan standar pada rentang panjang  gelombang  200-400  nm,  sebagai  uji  blanko  digunakan  aquadest  dengan  menggunakan spektrofotometer  UV.  Catat  panjang  gelombang  yang  memiliki  absorbansi  tertinggi.  Dalam  p embuatan kurva standar dari larutan baku kafein 100 ppm dipipet atau diambil dengan tepat masing-masing 6,10,14,16 mL lalu dimasukkan ke labu ukur 100 mL diencerkan dengan aquades hingga tanda batas dan dihomogenkan. Sehingga konsentrasi yang diperoleh adalah 6;10;14;16 mL/L. Larutan baku kafein diukur dengan menggunakan alat Spektrofotometri UV dengan panjang maksimum yang  telah  ditentukan.  Untuk  penetapan  kadar  kuantitatif  kafein  ekstrak  kafein  bebas  pelarut dimasukkan  kedalam  labu  ukur  100  mL,  lalu  diencerkan  menggunakan  aquades  hingga  tanda batas dan dihomogenkan. Kemudian ditentukan kadar kafein dengan Spektrofotometri UV pada panjang  gelombang  273,05  nm.  Pengujian  Kuantitatif  Kafein  dilakukan  sebanyak  2  g  kopi  +
aquades  panas  lalu  diaduk  sampai  larut  dan  disaring  menggunakan  kertas  saring  kemudian ditimbang  1,5  g  kalsium  karbonat  (CaCO 3 )  dan  larutan  kopi  yang  sudah  disaring  dimasukkan kedalam corong pisah di tambah 25 mL kloroform (homogenkan) lalu, dipisahkan lapisan paling bawah  (ektraksi  dilakukan  sebanyak  3  kali  dengan  penambahan  masing-masing  kloroform  25 mL)  lapisan  paling  bawah  yang  telah  dipisahkan,  diuapkan  dengan  rotary  evaporator  hingga kloroform menguap seluruhnya, ekstrak kafein bebas pelarut dimasukkan kedalam labuukur 100 mL  lalu  tambahkan  aquades  hingga  tanda  batas  dan  dihomogenkan  kemudian,  dilakukan pengenceran  dengan  mengambil  10  mL  dari  volume  total  sampel  dan  dimasukkan  ke  dalam labuukur  100  mL  dan  ditambahkan  aquades  hingga  tanda  batas  homogenkan  dan  ditentukan kadar nya dengan spektrofotometri UV pada panjang gelombang 273,05 nm
Analisis data Kadar kafein pada kopi import diperoleh dari analisis berdasarkan persamaan garis linear dari kurva baku, Y = ax + b, sehingga X bisa didapatkan dari persamaan:
𝑋 = !"# $ ………………………….Persamaan (1).
Selanjutnya kadar kafein dalam mg/mL dapat dihitung menggunakan Persamaan 2.
Kadar kafein ( %& %' ) = ((*+/-) 0123*4 51562 76*842 (-) 9 :8 ;<=$>?$%@<A (%') …………Persamaan (2)
Dimana: Y = absorbansi A = slope b = intersep X = konsentrasi kafein (mg/ L) Fp= faktor pengenceran

## HASIL PENELITIAN
Dalam  penelitian  ini  dilakukan  uji  kualitatif  dengan  menggunakan  metode  reagen  parry ketujuh  sampel  positif  mengandung  kafein  ini  ditandai  dengan  terbentuknya  endapan  bewarna hijau lumut. Warna hijau lumut yang dihasilkan tersebut berasal dari reaksi antara ion kobalt (Co) yang bermuatan dua positif dalam reagen parry yang mengikat gugus nitrogen yang ada di dalam senyawa  kafein.  Reagen  parry  dibuat  dengan  mereaksikan  Cobalt  Nitrat  [Co(NO 3 ) 2 ]  dengan metanol (Maramis, Citraningtyas, and Wehantouw, 2013).
Tabel 1. Hasil pengujian kualitatif kafein metode parry.
No Sampel Perubahan Warna Positif/Negatif 1 Kopi A Hijau Lumut Positif 2 Kopi B Hijau Lumut Positif 3 Kopi C Hijau Lumut Positif 4 Kopi D Hijau Lumut Positif 5 Kopi E Hijau Lumut Positif 6 Kopi F Hijau Lumut Positif 7 Kopi G Hijau Lumut Positif
Dari tabel pengujian kualitatif kafein dengan metode parry didapatkan semua sampel positif mengandung kafein ini ditandai dengan perubahan warna sampel dari hitam menjadi hijau lumut. Sebelum  melakukan  analisa  kuantitatif  menggunakan  spektrofotometri  UV  sampel  kopi diekstraksi  terlebih  dahulu.  Ekstraksi  yang  digunakan  untuk  memperoleh  ekstrak  kafein  bebas
pelarut ialah ekstraksi cair. Ekstraksi cair merupakan pemisahan komponen kimia diantara 2 fase pelarut yang tidak saling bercampur dimana sebagian komponen larut pada fase 1 dan sebagian larut pada fase 2, lalu fase yang mengandung terdispersi diguncang, pengguncangan dilakukan untuk  kesetimbangan  konsentrasi  zat  yang  diekstraksi  pada  2  lapisan  fase  terbentuk.  Lalu didiamkan  sampai  menjadi  pemisahan  sempurna  dan  terbentuk  2  lapisan  fase  cair  dan komponen  kimia  akan  terpisahkan  ke  dalam  kedua  fase  tersebut  sesuai  dengan  tingkat kepolarannya  dengan  perbandingan  konsentrasi  yang  tetap.  Bahan-bahan  organik  tidak  selalu larut dalam air, oleh karena itu dapat dipisahkan menggunakan corong pisah (Djamal, 2012).
Dalam ekstraksi kafein menggunakan corong pisah ada penambahan CaCO 3 itu berfungsi untuk  memutuskan  ikatan  kafein  dengan  senyawa  lain,  sehingga  kafein  akan  ada  dalam  basa bebas,  dan  penambahan  kloroform,  kafein  dalam  basa  bebas  tadi  akan  diikat  oleh  kloroform. Kloroform  merupakan  pelarut  pengekstraksi  yang  tidak  bercampur  dengan  pelarut  semula  dan dapat  melarutkan  beberapa  zat  khasiat  salah  satunya  alkaloid.  Kafein  merupakan  senyawa alkaloid maka, dengan penambahan kloroform akan memudahkan pelarutan kafein (Djajanegara & Wahyudi, 2009).
Metode  spektrofotometri  UV  ini  dalam  analisis  kimia  kuantitatif  merupakan  salah  satu metode yang sangat penting. Kelebihan dari spektrofotometri adalah dapat menjelaskan tentang informasi dari struktur berdasarkan panjang gelombang maksimum suatu senyawa dan metode spektrofotometri  UV  ini  memberikan  cara  sederhana  untuk  menetapkan  kuantitas  zat  yang sangat  kecil  (Aptika et  al .,  2015).  Spektrofotometri  UV  ini  juga  memiliki  kinerja  yang  cepat, murah,  mudah  digunakan  serta  memiliki  ketelitian  yang  cukup  tinggi  (Aisha,  Hardjomidjojo,  & Yassierli, 2013).
Penentuan kurva kalibrasi dilakukan pada konsentrasi larutan standar kafein 6; 10; 14; 16 mg/L  yang  diukur  absorban  masing-masingnya  menggunakan  aquades  sebagai  blanko, menghasilkan kurva linearitas terhadap konsentrasi larutan baku kafein untuk mendapatkan garis linear  dan  persamaan  regresi.  Penentuan  kurva  kalibrasi  larutan  baku  kafein  dengan  panjang gelombang  273,05  nm.  Diperoleh  hubungan  linear  antara  konsentrasi  dan  serapan  dengan koefisien  korelasi  (r)  adalah  0.988  kriteria  penerimaan  koefisien  korelasi  >0.95  dan  persamaan garis  regresi  y=0,047x–0,032.  Berarti  ada  korelasi  hubungan  antara  absorban  dengan konsentrasi sehingga penggunaan metode tersebut dapat digunakan untuk analisis kadar kafein pada kopi import (Harmita, 2004), didapatkan hasil sebagai berikut:
Tabel 2. Data absorban dan kadar kafein mg/sajian sampel kopi import
Sampel  Absorban Konsentrasi kafein (mg/L) Kadar kafein dalam 1 g sampel (mg) Berat kopi/sajian Kadar Kafein (mg/sajian) A 0,374 4,315 2,157 20 g 43,14 B 0,862 9,51 4,755 20 g 95,1 C 0,895 9,86 4,93 10 g 49,3 D 0,633 7,07 3,535 30 g 106,05 E 0,475 5,39 2,695 17 g 45,81 F 0,237 2,86 1,43 40 g 57,2 G 0,175 2,2 1,1 20 g 22
y = 0,0479x - 0,0324 R² = 0,988
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0 5 10 15 20 Absorbansi Absorbansi Linear (Absorbansi)
Gambar 1. Kurva kalibrasi larutan baku.
Dari  data  tabel  2.  dan  kurva  kalibrasi  larutan  baku  diatas  dapat  dihitung  kadar  kafein menggunakan  persamaan  regresi  y=0,0479x–0,0324  maka  didapatkan  didapatkan  dari  tujuh sampel  yang  dianalisa  terdapat  tiga  sampel  yang  mengandung  kafein  yang  melebihi  standar yang  telah  ditetapkan  SNI  yaitu>  50  mg/sajian.  Berdasarkan  hasil  penelitian  mengkonsumsi kafein dengan dosis tinggi dapat mengakibatkan efek samping diantaranya palpitasi, insomania, tremor, mual serta muntah selain itu mengkonsumsi kafein secara reguler dapat mengakibatkan ketergantungan (Hastuti, 2015). (Kamaruddin et al., 2019)

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan  maka  dapat  disimpulkan  dari  tujuh  sampel kopi import terdapat tiga sampel kopi import yang tidak memenuhi standar SNI karena melebihi batas yaitu 50 mg/sajian dan empat sampel kopi import yang memenuhi standar SNI.

## REFERENSI
Aisha, A. N., Hardjomidjojo, P., & Yassierli. (2013). Effects of Working Ability, Working Condition, Motivation  and  Incentive  on  Employees  Multi-Dimensional  Performance. International Journal of Innovation,
Management
and Technology , 4 (6), 605–609.
https://doi.org/10.7763/IJIMT.2013.V4.470
Aptika,  N.  M.  D.,  Tunas,  I.  K.,  &  Sutema,  I.  A.  M.  P.  (2015).  Analisis  Kadar  Kafein  pada  Kopi Hitam  di  Bukian  Gianyar  Menggunakan  Spektrofotometer  UV-Vis.  Chemistry  Laboratory. Chemistry Laboratory , 2 (1), 30–37. Retrieved from https://docplayer.info/63034603-Analisis- kadar-kafein-pada-kopi-hitam-di-lebah-bukian-gianyar-menggunakan-spektrofotometer-uv- vis.html
Cornelis, M. (2019). The Impact of Caffeine and Coffee on Human Health. Nutrients , 11 (2), 416. https://doi.org/10.3390/nu11020416
Djajanegara,  I.,  &  Wahyudi,  P.  (2009).  Pemakaian  Sel  HeLa  dalam  Uji  Sitotoksisitas  Fraksi Kloroform  dan  Etanol  Daun  Annona  Squamosal. Jurnal  Ilmu  Kefarmasian  Indonesia , 7 (1),
7–11. Retrieved from http://jifi.farmasi.univpancasila.ac.id/index.php/jifi/article/view/386 Djamal,  R.  (2012). Prinsip-prinsip  Dasar  Isolasi  dan  Identifikasi. Padang:  Universitas Baiturrahman. Retrieved from http://lib.uho.ac.id/library/index.php?p=show_detail&id=26889 Harmita,  H.  (2004).  Petunjuk  Pelaksanaan  Validasi  Metode  dan  Cara  Perhitungannya. Majalah Ilmu Kefarmasian , 1 (3), 117–135. https://doi.org/10.7454/psr.v1i3.3375
Hastuti,  D.  S.  (2015).  Kandungan  Kafein  Pada  Kopi  dan  Pengaruh  Terhadap  Tubuh. Media Litbangkes , 25 (3), 185–192.
Kamaruddin,  M.,  Hasrawati,  Usmia,  S.,  Jusni,  Misnawaty,  &  Handayani,  I.  (2019).  Korelasi Antara  Status  Gizi  Dan  Kadar  Hemoglobin  Pada  Kejadian  Anemia  Ibu  Hamil  Trimester  Iii. Medika  Alkhairaat :  Jurnal  Penelitian  Kedokteran  Dan  Kesehatan , 1 (3),  82–88. https://doi.org/10.31970/ma.v1i3.32
Lire Wachamo, H. (2017). Review on Health Benefit and Risk of Coffee Consumption. Medicinal & Aromatic Plants , 6 (4). https://doi.org/10.4172/2167-0412.1000301 Maramis, R. K., Citraningtyas, G., & Wehantouw, F. (2013). Analisis Kafein Dalam Kopi Bubuk di Kota  Manado  Menggunakan  Spektrofotometri  UV-VIS. Pharmacon , 2 (4),  122–127. Retrieved from https://ejournal.unsrat.ac.id/index.php/pharmacon/article/view/3100
Muzwardi,  A.  (2016).  Analisis  Pengelolaan  Pelabuhan  di  Kawasan  Perdagangan  Bebas  dan Pelabuhan  Bebas  (KPBPB)  Batam. Government:  Jurnal  Ilmu  Pemerintahan , 9 (1),  31–38. Retrieved from https://journal.unhas.ac.id/index.php/government/article/view/1030
Ozpalas, B., & Ozer, E. A. (2017). Kafeinin İnsan Sağlığı Üzerindeki Etkileri. Nevşehir Bilim ve Teknoloji Dergisi , 6 , 297–305. https://doi.org/10.17100/nevbiltek.331845
Setiabudy,  R.  (2002). Farmakologi  dan  Terapi (4th  ed.).  Jakarta:  FK-UI.  Retrieved  from https://onesearch.id/Record/IOS4125.slims-6109
Sri  Hainil,  Suhaera,  L.  (2019).  Quantitative  Analysis  of  Caffeine  Levels  in  Local  Coffee  (Coffea sp) Powder on Dabo Island with UV-Vis Spectrophotometry. Borneo Journal of Pharmacy ,
2 (2), 82–86. https://doi.org/10.33084/bjop.v2i2.897
Willson,  C.  (2018).  The  clinical  toxicology  of  caffeine:  A  review  and  case  study. Toxicology Reports , 5 (October), 1140–1152. https://doi.org/10.1016/j.toxrep.2018.11.002