Jurnal Pharmascience, Vol. 8, No.2, Oktober 2021, hal: 9-16 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience Research Article

## Skrining Fitokimia dan Antibakteri Ekstrak Etanol
Daun Binjai ( Mangiferacaesia ) Terhadap Bakteri Escherichia coli
Occa Roanisca*, Robby Gus Mahardika
Jurusan Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Bangka Belitung, Bangka, Bangka Belitung, Indonesia
Email: occaroanisca@gmail.com

## ABSTRAK
Escherichia  coli merupakan  bakteri  Gram  negatif  yang  dapat  menimbulkan infeksi  saluran  kemih,  saluran  empedu,    penyakit  serius  lainnya  di  rongga  perut,  dan keracunan makanan yang ditandai dengan diare.  Penyakitinfeksiyang disebabkan oleh bakteri  dapat  diobati  dengan  mengonsumsi  antibiotik.  Akan  tetapi,  resistensi  bakteri terhadap  antibiotik  telah  dilaporkan.  Oleh  karena  itu  perlunya  pencarian  obat  dari bahan  alami.  Berdasarkan  kajian  literatur,  Binjai  ( Mangifera caesia )  telah  dilaporkan memiliki  aktivitas sebagai  antibakteri. Tujuan penelitian ini adalah  untuk mengetahui kandungan  metabolit  sekunder  dan  aktivitas  antibakteri  daun  binjaiasal  Bangka terhadap bakteri Eschericha coli .  Metode ekstraksi pada penelitian ini adalah maserasi dengan  pelarut  etanol  96%  selama  3  x  24  jam.  Skrining  fitokimia  dilakukan  secara kualitatif  dengan  menggunakan  pereaksi,dan  pengujian  antibakteri  menggunakan metode  difusi  cakram.  Berdasarkan  hasil  pengujian  fitokimia  didapatkan  bahwa ekstrak  etanol  daun  binjaididuga  mengandung  metabolit  sekunder  seperti  alkaloid, flavonoid, tanin/fenol hidrokuinon, steroid, terpenoid dan saponin. Ekstrak etanol daun binjaimampu menghambat pertumbuhan bakteri E. coli pada konsentrasi 20% dengan diameter zona beningsebesar 3.94 mm, konsentrasi 40% sebesar 5.38  mm, konsentrasi 60%  sebesar  5,82  mm,  serta  pada  konsentrasiekstrak  80%  membentuk  zona beningsebesar  6,90  mm.Berdasarkan  data  tersebut  bioaktivitas  antibakteri  ekstrak daun binjai tergolong sedang.
Kata Kunci: Mangiferacaesia, Escherichia coli , Antibakteri

## ABSTRACT
Escherichia  coli  is  a  Gram-negative  bacteria  that  can  cause  urinary  tract infections,  bile  ducts,  other  serious  diseases  in  the  abdominal  cavity,  and  food  poisoning characterized by diarrhea. Infectious diseases caused by bacteria can be treated by taking antibiotics. However,  bacterial  resistance to  antibiotics has been reported. Therefore, it is
necessary to search for drugs from natural ingredients. Based on literature review, Binjai (Mangifera  caesia)  has  been  reported  to  have  antibacterial  activity.  The  purpose  of  this study  was  to  determine  the  content  of  secondary  metabolites  and  antibacterial  activity  of Bangka binjai leaves against Eschericha coli bacteria. The extraction method in this study was  maceration  with  ethanol  for  3  x  24  hours.  Phytochemical  screening  was  carried  out qualitatively  using  reagents,  and  antibacterial  testing  using  the  disc  diffusion  method. Based  on  the  results  of  phytochemical  testing,  it  was  found  that  the  ethanol  extract  of binjai  leaves  contained  secondary  metabolites  such  as  alkaloids,  flavonoids,  tannins  / phenol  hydroquinones,  steroids,  terpenoids  and  saponins.  Binjai  leaf  ethanol  extract  was able to inhibit the growth of E. coli bacteria at the concentration of 20% with a clear zone diameter of 3.94 mm, concentration of 40% of 5.38 mm, concentration of 60% of 5.82 mm, and  concentration  of  80%  extractforming  a  clear  zone  of  6.90  mm.  Based  on  these  data, binjai leaves have the potential to be used as an antibacterial drug.

## Keywords: Mangiferacaesia, Escherichia coli, Antibacterial

## I. PENDAHULUAN
Escherichia coli merupakan bakteri Gram  negatif  serta  bakteri  flora  normal yang  mampu  berada  pada  usus  besar manusia selama 40 jam  (Kurhekarand  and Bodhankar,  2013).  Penularan  bakteri E. coli melalui makanan, air atau lendir yang terkontaminasi  bakteri E.  coli .  Bakteri  ini dapat menimbulkan infeksi saluran kemih, saluran empedu,  penyakit serius lainnya di rongga  perut,  dan  keracunan  makanan yang  ditandai  dengan  diare  (Suryati et  al , 2017).
Infeksi  yang  disebabkan  oleh bakteri  merupakan  permasalahan  yang terus  berkembang  di  bidang  kesehatan. Penularannya dapat terjadi dari manusia ke manusia  atau  dari  hewan  ke  manusia. Penyakit  infeksi  dapat  diobati  dengan antibiotik.
Antibiotik  merupakan  senyawa yang dapat menghambat pertumbuhan atau
membunuh  bakteri.  Akan  tetapi,  resistensi bakteri terhadap antibiotik telah dilaporkan baik  di  negara  maju  maupun  di  negara berkembang  (Fauziyah et  al ,  2011).
Resistensi  terhadap  antibiotik  disebabkan oleh penggunaan antibiotik yang berlebihan.  Terjadinya  resistensi  karena bakteri mengalami perubahan yang menyebabkan  turunnya  atau  hilangnya efektifitas  obat  antibiotik  (Utami,  2011), sehingga  perlu  dilakukan  pencarian  obat alternatif  yang  mudah  didapatkan,  murah dan  aman.  Salah  satu  caranya  adalah dengan  terus  melakukan  skrining senyawa bioaktif dengan bioaktivitas sebagai antibakteri  yang lebih baik sehingga dapat dikembangkan  menjadi  obat  yang  dapat menyembuhkan  penyakit  yang disebabkan oleh bakteri.
Binjai ( Mangifera caesia ) merupakan  salah  satu  anggota  dari  famili Anacardiciae, tumbuh  secara  alami  di
Kalimantan,  Semenanjung  Malaya,  dan Sumatera  termasuk  Bangka  Belitung. Pemanfaatan tumbuhan binjai hanya terbatas  pada  bagian  buahnya  saja. Berdasarkan kajian literatur, Spesies binjai mengandung komponen senyawa polifenolat seperti mangiferin dari turunan senyawa  santon,  katekin  dan  epikatekin dengan    bioaktivitas  sebagai  antibakteri terhadapbakteri pathogen seperti Staphylococcus  aureus,  E.  coli,  Bacillus subtilis, Klebsiella pneumoniae dan Pseudomonas  aeruginosa (Ashok et  al , 2014).  Pada  penelitian  lain,  ekstrak  etanol daun M.  foetida Lour.  Mengandung metabolit sekunder fenol, flavonoid, tanin, saponin,  alkaloid,  dan  steroid,  serta mampu  menghambat  pertumbuhan E.  coli dan Streptococcus  mutans (Nuryanto,
2014) . Senyawa-senyawa  tersebut  juga memiliki  bioaktivitas  sebagai  penangkal radikal  bebas,  antibakteri,  antioksidan, antikanker,  dan  antimalaria.  Daun  genus Mangifera l  ain  telah  memiliki  bioaktivitas sebagai  antibakteri  (Wahidah et  al ,  2017) sedangkan  Bagian  daun M.  caesia belum pernah diteliti.
Pada penelitan ini dilakukan skrining fitokimia terhadap esktrak daun M. caesia secara kualitatif. Selanjutnya ekstrak tersebut  dilakukan  pengujian  antibakteri terhadap bakteri E. coli.

## II. METODE

## A. Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  daun M.  caesia dari Desa  Balunijuk,  Kecamatan  Merawang, kabupaten  Bangka,  etanol  96%,bakteri E. coli ,  dimetilsulfoksida  (DMSO),  nutrient agar, nutrient broth, HCl, kloroform, FeCl 3 , serbuk  Mg,  kertascakramoxoid,  H 2 SO 4 , reagen Mayer, reagen Wagner, CH 3 COOH anhidrat,  amoksilin, Mueller-Hinton  agar (MHA), aquades, dankertas saring. Peralatan  yang  digunakan  antara  lain  alat gelas,timbangan  analitik,  kawat  ose,  pipet mikro,  cawan  penguap, autoclave ,  rak tabung,  pipet  volum, inkubator ,  vortex, jangka sorong, rotary evaporator , vacuum pump , Buchner funnel , hot plate , magnetic stirrer .

## B. Ekstraksi Daun Binjai
Sampel  penelitian  daun M . caesia dikeringanginkan,  setelah  itu  digiling sampai menjadi serbuk kering dan diayak. Kemudian  serbuk  kering  sebanyak  500 gram  dengan  ukuran< 0,2 mesh dilakukan ekstraksi. Metode ekstraksi pada penelitian ini  adalah  maserasi.  Serbuk  kering dimaserasi  dengan  pelarut  etanol96% dengan perbandingan antara sampel dengan  pelarut  1:10  selama  3  x  24  jam. Selanjutnya  setiap  1  x  24  jam  dilakukan pengadukan, penyaringan serta
penggantian  pelarut.  Penyaringan  hasil
maserasi  menggunakan  penyaring  vakum. Pemisahan pelarut filtrat dipekatkan menggunakan rotary  evaporator (Senja etal ,  2014).  Tahap  selanjutnya,  ekstrak kental yang didapatkan dilakukan skrining fitokimia dan uji aktivitas antibakteri.

## C. Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  secara  kualitatif dilakukan  dengan  beberapa  metode  uji yang  meliputi  uji  alkaloid,  flavonoid, saponin,  steroid, tannin  dan terpenoid.  Uji alkaloid dilakukan dengan pereaksi Mayer dan  Wagner,  uji  flavonoid  dengan  metode Wilstater Sianidin, uji saponin menggunakan Forth, uji steroid
menggunakan metode Liebermann-
Buchnard, sedangkan uji tannin menggunakan  metode  besi  (III)  klorida (FeCl 3 ) (Sutomo et al. , 2016).

## D. Skrining Antibakteri
Pengujian  antibakteri  dilakukan dengan  menggunakan  metode  difusi  agar. Bakteri E.  coli yang  telah  diinkubasi selama    24  jam  dalam  media  NB  diambil dengan  menggunakan  kawat  ose  untuk disuspensikan ke dalam tabung yang berisi larutan  saline  steril  sebanyak  2  mL. Kemudian divortex agar terbentuk suspensi  yang  halus.  Suspensi  bakteri diinokulasi  pada  permukaan  media  padat (NA)  dalam  cawan  petri.  Selanjutnya kertas  cakram  ukuran  6  mm  yang  telah
dijenuhkan  dengan  larutan  uji  konsentrasi 20% , 40%, 60%,dan 80%(b/v), amoksillin sebagai  kontrol  positif  dan  pelarut  DMSO sebagai  kontrol  negatif    diletakkan  diatas permukaan  media  cawan  petri  yang  telah diinokulasi  bakteri  uji.  Kemudian  cawan petri  diinkubasi  selama  24  jam  pada  suhu 37 0 C (Roanisca, 2018). Pengukuran aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan mengukur  zona  bening  yang  terbentuk menggunakan  jangka  sorong.  Perhitungan zona hambat menggunakan rumus (Warbung et al ., 2014 dalam Khairunnisa,
et al. , 2020).
Zona Hambat = 𝑑1+𝑑2 2 − 𝑑𝑥
Keterangan: d1 : Diameter horizontal zona bening yang terbentuk (mm)
d2:  Diameter  vertikal  zona  bening  yang terbentuk (mm)
dx: Diameter kertas cakram
Selanjutnya  menurut  Davis  dan Stout  (1971)  diameter  zona  bening  yang terbentuk  digolongkan  menjadi  empat kategori,  yaitu<  5  mm  lemah,  5-10  mm sedang,  10-20  mm  kuat  dan  >  20  mm sangatkuat.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Skrining Fitokimia Secara Kualitatif Ekstrak  etanol  daun M.  caesia didapatkan mengandung alkaloid, flavonoid, tanin/fenol hidrokuinon, terpenoid dan saponin (Tabel I).
Tabel I. Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Daun M. caesia Golongan senyawa Skrining Fitokimia Metode uji Indikator Hasi l Alkaloid Wagner Endapan coklat + Mayer Endapan putih kekuningan + Flavonoid Wilstatersianidin Terbentuk warna jingga + Tanin/fenol hidrokuinon  FeCL 3 Terbentuk warna hijau atau hijau biru + Terpenoid danSteroid Liebermann-Burchard Terbentuk warna biru dan hijau + Saponin Uji Forth Terbentuk busa + Keterangan:+ menunjukkan sampel bereaksi positif; menunjukkan sampel bereaksi negatif Berdasarkan hasil
skrining fitokimia  daun M.  caesia menunjukkan metabolit sekunder yang terkandung dalam daun M.  caesia antara  lain  alkaloid, flavonoid,  tanin,  terpenoid,  steroid  dan saponin.  Kandungan  tersebut  memiliki kesamaan dengan metabolit sekunder yang terkandung  dalam  daun Mangifera  foetida Lour (Nuryanto, 2014).
Gambar 1. Daun binjai ( Mangiferacaesia )

## B. Skrining Antibakteri
Ekstrak  etanol  daun M.  caesia mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri E.  coli (Tabel  II)  dengan  terbentuknya zona bening. Kontrol positif menunjukkan diameter  zona  hambat  sebesar  12,45  mm, sedangkan control negatif tidak menunjukkan adanya penghambatan pertumbuhan  bakteri E.  coli (Gambar  2).
Data  diameter  zona  bening  yang  disajikan pada  Tabel  II  merupakan  data  yang  sudah dikurangi dengan diameter kertas cakram.
Tabel II. Zona Hambat Metode Difusi Ekstrak Etanol daun Mangifera caesia
Terhadap Pertumbuhan bakteri Escherichia coli Konsentrasi ekstrak Rerata Zona Hambat± SD (mm) Kekuatan Daya Hanbat 20% 3.94 ±0,56 Lemah 40% 5.38 ±0,32 Sedang 60% 5,82 ±0,28 Sedang 80% 6,90 ±0,06 Sedang Keterangan:  Diameter  kertas  cakram  Oxoid sebesar 6 mm
Aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak etanol  daun M.  caesia diduga  karena adanya  kandungan  senyawa  alkaloid, flavonoid, tanin/fenol hodrokuinon, terpenoid dan saponin. Metabolit sekunder tersebut  saling bersinergi atau mendukung efektivitas  sebagai  antibakteri.  Alkaloid dapat    menggangu  komponen  penyusun dinding  sel  bakteri  yaitu  peptidoglikan, sehingga  lapisan  dinding  sel  bakteri  tidak terbentuk  menyebabkan  kematian  sel bakteri  (Rahman etal, 2017).  Flavonoid dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri melalui penghambatan sintesis asam nukleat,  metabolisme  energi  dan  fungsi membran  sel,  sehingga  menyebabkan kerusakan permeabilitas dinding sel (Ernawati and Sari, 2015) dan terhambatnya pembentukan makromolekul bakteri (Kumar and Pandey, 2013).
Kemampuan senyawa
tanin/fenolhidrokuinon  sebagai  antibakteri dengan cara menginhibisi enzim transkriptase  dan  DNA  topoisomerase menjadi tidak terbentuk, sehingga menyebabkan kematian sel bakteri (Othman et  al ,  2019).  Saponin  dapat menyebabkan  denaturasi  protein  bakteri, dengan cara menurunkan tegangan
permukaan  dinding  sel  bakteri  (Ngazizah et  al ,  2016).  Steroid  mampu  berinteraksi dengan  membran  fosfolipid  sel  sehingga mengakibatkan  penurunan    integritas membrane serta perubahan
morfologiselsehingga  sel  menjadi  rapuh dan  mengalami  lisis  (Sudarmi etal ,  2017).
Terpenoid  bereaksi  dengan  porin  pada membrane  luar  dinding  sel  bakteri, kemudian adanya ikatan polimer yang kuat menyebabkan rusaknya porin (Muchtaromaha et al , 2020).
Gambar  2. Zona  hambat  Ekstrak  uji terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  data  skrining  fitokimia yang  telah  dilakukan,  ekstrak  daun  binjai ( Mangifera  caesia )  diduga  mengandung metabolit  sekunder  alkaloid,  flavonoid, tanin/fenol  hidrokuinon,  saponin,  steroid dan  terpenoid.    Ekstrak  daun M.  caesia mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli pada  konsentrasi  20%, 40% , 60%, dan 80%.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti mengucapkan terima kasih kepada  Kemenristek-BRIN  yang  telah membiayai  penelitian  ini  melalui  program
dana hibah Penelitian Dosen Pemula (PDP) tahun  2020  berdasarkan  SK    No. B/87/E3/RA.00/2020.

## DAFTAR PUSTAKA
Ashok, V.G., Priya, S.B.,and Pranita, A.G., 2014, Evaluation of antibacterial and phytochemical analysis of Mangifera indica  bark  extracts. International Journal  of  Current  Microbiology and  Applied  Sciences ,  Vol.3:  567- 580.
Ernawati  and  Sari,  K.,  2015,  Kandungan senyawa kimia dan aktivitas antibakteri ekstrak kulit buah alpukat (Persea  americana  P.Mill)  terhadap bakteri  Vibrio  alginolyticus, Jurnal Kajian  Veteriner ,  Vol.3,  No.2:203- 211.
Fauziyah, S., Radji, M., Nurgani, A., 2011, Hubungan  penggunaan  antibiotik pada terapi empiris dengan kepekaan bakteri  di  ICU  RSUP  Fatmawati Jakarta. Jurnal  Farmasi  Indonesia , Vol.5, No.3:150-158.
Khairunnisa, A., Wathan, N., Fitriana, M.,
Fadlilaturrahman,  Fiddina, N., 2020, Aktivitas antibakteri ekstrak metanol bunga  teratai  ( Nymphaea  pubescens Willd), Jurnal  Pharmascience ,  Vol. 07, No.02 : 75-88.
Kumar,  S.,  and  Pandey,  A.K.,  2013, Chemistry and biologicalactivities of flavonoids: An overview. The Scientific World Journal , Vol. 2013 : 1- 16.
Kurhekar,  J.V.,  and  Bodhankar,  M.M., 2013,    In  vitro  antibacterial  Activity off  new  medicinal  plants  against
Escherichia  coli,  Vol.17,  No.3:  49-
52.
Muchtaromaha, B., Safitri b, E.S., Fitriasaric, P.D., and Istiwan dhanid, J.,  2020,  Antibacterial  activities  of curcuma  mangga  Val.  extract  in some  solvents  to  Staphylococcus aureus  and  Escherichia  coli. AIP Conference
Proceedings , Chapter2231 : 030005-
1 -03005-6. Ngazizah,  F.N.,  Ekowati,  N.,  Septiana, A.T., 2016, Potensi Daun Trembilungan (Begonia hirtella Link). Biosfera ,Vol.33,  No.3:  126-
133.
Nuryanto, A., 2014, Uji aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  daun mangga  bacang  (Mangifera  foetida l.)  terhadap  Escherichia  coli  secara in  vitro. Naskah  Publikasi  Program Studi  Pendidikan  Dokter  Fakultas Kedokteran Universitas Tanjung
Pura .
Othman,  L.,  Sleiman,  A.,  and  Abdel- Massih,  R.M.,  2019,  Antimicrobial activity of polyphenols and alkaloids in  middle  eastern  plants. Frontiers Microbial , Vol. 10: 1-28.
Rahman,  F.A.,  Haniastuti,  T.,  and  Utami, T.W.,  2017,  Skrining  Fitokimia  dan aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol daun  sirsak  (Annonamuricata  L.) pada  Streptococcusmutans  ATCC 35668. Majalah  Kedokteran  Gigi Indonesia , Vol.3 No.1:
Roanisca, O., 2018, Skrining fitokimia dan potensi  antibakteri  ekstrak  etanol pucuk iding-iding (Stenochlaena palustris)  terhadap  bakteri  Bacillus subtilis,  Staphylococcus  aureus,  and Escherichia coli, Jurnal Kimia Mulawarman , Vol.15, No.2: 99-105. Senja, R.Y., Issusilaningtyas, E., Nugroho, A.K.,  and  Setyowati,  E.P.,  2014, Perbandingan  metode  ekstraksi  dan variasi  pelarut  terhadap  rendemen dan  aktivitas  antioksidan  ekstrak kubis ungu (Brassicaoleracea L. var. capitata f. rubra), Traditional Medicine Journal, Vol. 19, No.1: 43- 48.
Sudarmi,  K.,  Darmayasa,  I.B.G.,  and
Muksin,  I.K.,  2017,  Uji  fitokimia dan daya hambat ekstrak daun juwet (Syzygium cumini) terhadap pertumbuhan  Escherichia  coli  dan Staphylococcusaureus ATCC, Jurnal Simbiosis , Vol.2: 47-51.
Suryati, N., Bahar, E., and Ilmiawati, 2017, Uji  efektifitas  antibakteri  ekstrak Aloe  vera  terhadap  pertumbuhan Escherichia  coli  secara  in  vitro. Jurnal  Kesehatan  Andalas .  Vol.  6, No.3: 518-522.
Sutomo,  Arnida,  Rizki,  M.I.,  Triyasmono, L.,  Nugroho,  A.,  Mintowati,  E.,  and Salamiah, Skrining fitokimia dan uji kualitatif aktivitas antioksidan tumbuhan asal daerah Rantau
Kabupaten Tapin Kalimantan Selatan, Jurnal Pharmascience , Vol.3, No.1:66-74.
Utami,  E.R.,  2011,  Antibiotika,  resistensi, dan  rasionalitas  terapi. El-Hayah , Vol.1, No.4: 191-198.
Wahidah,  L.K.,  Rokiban,  A.,  Widodo,  S., Mainah, D.M., Yulianty,and Kanedi, M.,  2017,  Antibacterial  effects  of ethanolic  leaf  extracts  of  bachang (Mangifera foetidalour.) on Streptococcus mutans. World Journal of Pharmaceutical Research , Vol.6, No.3: 184-192.