## Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik (JIFFK)
Vol. 16, No. 1, JUNI 2019, Hal. 28 – 35 ISSN: 1693 -7899

## EFEK ANTIDIARE EKSTRAK ETANOL DAUN PARIJOTO
( Medinilla speciosa Blume) PADA MENCIT JANTAN GALUR BALB/C
Yance Anas 1*) , Desi Rakhmawati 2) , Layyinatul Fuadah 2) dan Nola Carina Rahayu 2)
1) Bagian Farmakologi dan Farmasi Klinik Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim
2) Program Studi S1 Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim
* E-mail : yance.apt@gmail.com

## INTISARI
Parijoto adalah salah satu tanaman langka di Indonesia dan daunnya secara tradisional telah digunakan  untuk  mengobati  diare  oleh  masyarakat  di  daerah  Kabupaten  Kudus,  Indonesia.  Daun parijoto  juga  telah  terbukti  mengandung  senyawa  aktif  tanin  dan  flavonoid  yang  diduga  kuat berkahasiat  sebagai  antidiare.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  membuktikan  efek  antidiare  ekstrak etanol daun parijoto (EEDP) pada mencit jantan galur Balb/C yang diinduksi dengan castor oil dan mengungkap mekanisme antidiarenya melalui uji antimotilitas dan antisekretori.
EEDP dibuat dengan metode maserasi. Efek antidiare tiga peringkat dosis EEDP (500, 1.000 dan  2.000)  mg/Kg  BB  diujikan  pada  mencit  diare  yang  diinduksi castor  oil .  Sementara  itu,  efek antimotilitas  dan  antisekretori  EEDP  dilakukan  dengan  metode  transit  intestinal  dan castor  oil induced  enteropooling .  Data  yang  dihasilkan  dalam  penelitian  ini  adalah  onset  diare,  berat  feses cair dan tidak berbentuk (selama 8 jam), rasio usus yang dilalui marker norit dan volume isi usus. Data-data tersebut dianalisis secara statistik pada taraf kepercayaan 95%.
Hasil  penelitian  membuktikan  bahwa  EEDP  terbukti  mampu  menunda  terjadinya  diare  dan mengurangi  terbentuknya  feses  cair-tidak  berbentuk  pada  mencit  jantan  galur  Balb/C  yang diinduksi castor  oil .  Mekanisme  antidiare  EEDP  juga  terungkap  dalam  penelitian  ini  melalui efeknya sebagai antimotilitas dan antisekretori.
Kata kunci : ekstak etanol daun parijoto, antidiare, antimotilitas, antisekretori

## ABSTRACT
Parijoto  is  one  of  a  rare  plant  species  in  Indonesia,  and  its  leaves  have  traditionally  been utilized to treat diarrhea in the area of Kudus Regency, Indonesia. Parijoto leaves contain active compounds of tannin and flavonoid which have antidiarrheal properties. This investigation intends to  demonstrate  the  antidiarrheal  effect  of  parijoto  leaf  ethanol  extract  (EEDP)  on  male  Balb/C mice castor oil-induced diarrheal and reveal its antidiarrheal mechanism through antimotility and antisecretory testing.
EEDP  made  by  maceration  method.  The  antidiarrheal  effects  of  three  series  level  EEDP (500; 1,000 and 2,000) mg / Kg BB tested on diarrhea mice induced by castor oil. Concurrently, the  antimotility  and  antisecretory  effects  of  EEDP  investigated  with  the  intestinal  transit  method and castor oil-induced enteropooling. The data in this study were the onset of diarrhea, the weight of liquid-formless stools (for 8 hours), the ratio of digestion tracts passed by norit markers, and the volume of intestinal contents. These data were analyzed statistically at the 95% confidence level.
The examination presumed that EEDP was able to respite the onset of diarrhea and diminish the formation of liquid-formless feces in male Balb/C mice induced by castor oil. The antidiarrheal mechanism of EEDP also exhibited in this study through its effects as antimotility and antisecretory.
Keywords: Parijoto leaf ethanol extract, antidiarrheal, antimotility, antisecretory
* Corresponding author: Yance Anas Bagian Farmakologi dan Farmasi Klinik Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Jalan Menoreh Tengah X/22 Sampangan Semarang 50232 Telp (+6224) 8505680 Email: yance.apt@gmail.com

## PENDAHULUAN
Diare adalah gangguan saluran pencernaan yang ditandai dengan peningkatan frekensi buang air  besar  dengan  feses  cair-lembek  berair,  lebih  dari  3  kali  dalam  24  jam  (Beugerie  dan  Sokol, 2013).  Walaupun  merupakan  bagian  dari  sistem  pertahanan  tubuh,  diare  akut  masih  merupakan penyebab  utama  kematian  pada  balita  di  seluruh  dunia  (525.000  kematian/tahun).  Kebanyakan kasus  kematian  akibat  diare  pada  balita  terjadi  di  Negara  berkembang  (Farthing  dkk.,  2013). Penyebab diare akut yang paling sering (lebih dari 90% kasus) adalah infeksi bakteri, dengan gejala muntah,  demam  dan  nyeri  pada  abdomen.  Selain  itu,  diare  dapat  disebabkan  oleh  efek  samping obat, keracunan, iskemia dan kondisi lain (Ahlquist dan Camilleri, 2005).
Salah  satu  kekayaan  alam  di  Indonesia  adalah  tumbuhan  parijoto  dengan  nama  latin Medinilla speciosa Blume . (Gambar 1). Ciri khas yang terkenal dari tumbuhan ini adalah daun dan bunganya yang indah sehingga diakui sebagai salah satu genus tanaman hutan tercantik yang ada di dunia (Maria dkk., 2012).  Di Indonesia, parijoto ditemukan tumbuh di Gunung Kinabalu di pulau Kalimantan, Pegunungan Muria, Kudus, Jawa Tengah dan area hutan Gunung Merapi, Yogyakarta (Anggana, 2011). Umumnya, parijoto tumbuh di ketinggian sekitar 1.700 m di atas permukaan laut (Hikosaka  dkk.,  2002).  Masyarakat  sekitar  Pegunungan  Muria  percaya  bahwa  jika  ibu  hamil mengkonsumsi  buah  parijoto,  maka  akan  mendapatkan  bayi  yang  berparas  tampan  atau  cantik (Mumpuni  dkk.,  2015).  Selain  itu,  masyarakat  juga  percaya  bahwa  buah  parijoto  dapat meningkatkan kesuburan dan menjaga kesehatan ibu hamil (Anggana, 2011).
Daun  parijoto  telah  digunakan  secara  tradisional  oleh  masyarakat  sebagai  obat  diare, sariawan  dan  antiradang.  Daun  parijoto  terasa  masam,  pahit,  dan  bersifat  menyegarkan  karena daunnya  mengandung  kardenolin,  senyawa  golongan  saponin,  tanin  dan  flavonoid  (AHN,  2016). Senyawa  aktif  golongan  tanin  dan  flavonoid  dalam  daun  parijoto  diduga  bertanggung  jawab terhadap  klaim  khasiat  antidiare  daun  parijoto.  Walaupun  demikian,  penggunaan  daun  parijoto dalam  mengobati  diare  selama  ini  hanya  berdasarkan  pengalaman  empiris  masyarakat  saja  dan belum pernah dibuktikan khasiatnya melalui penelitian ilmiah (Wibowo dkk., 2012) .
Gambar 1. Tanaman Parijoto

## METODE PENELITIAN Bahan Penelitian
Daun  parijoto  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  daun  yang  sudah  tua  (berwarna hijau), dan dipetik dari daerah Colo, Kecamatan Dawe, Kabupaten Kudus, Jawa Tengah, Indonesia. Etanol  70%  (teknis,  PT.  Bratcho  Chemika  Tbk.)  digunakan  sebagai  cairan  penyari  dalam
pembuatan  EEDP.  Hewan  uji  yang  digunakan  adalah  mencit  jantan  galur  Balb/C,  usia  2-3  bulan dengan  berat  badan  20-30  gram.  Bahan-bahan  lain  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah loperamid HCl (PT. Nufarindo Semarang), Norit (PT. Indofarma Tbk.), larutan Normal Salin NaCl 0,9%  (PT.  Widatra  Bhakti), castor  oil (PT.  Brataco  Chemika  Tbk.),  dan  PGA  (PT.  Brataco Chemika Tbk.).

## Alat Penelitian
Berbagai  alat  yang  digunakan  dalam  membuat  EEDP  adalah  oven  (Memmert),  blender (Maspion),  ayakan  40  mesh,  seperangkat  alat  maserasi  dan  vacuum  rotary  evaporator  (Heidolp). Sementara  itu,  alat-alat  lain  yang  digunakan  untuk  pengujian  efek  antidiare,  antimotilitas  dan antisekretori  adalah  spuit  injeksi  per-oral  (1  mL),  spuit  injeksi  1,0  mL  (Terrumo),  timbangan binatang  (ACIS), stop  watch ,  kertas  saring,  kawat  kassa,  pinset,  alat  bedah,  papan  bedah,  mistar dan tabung eppendorph.

## Jalannya Penelitian

## 1. Pembuatan ekstrak etanol buah parijoto
Sebanyak  11  kg  daun  parijoto  dicuci  bersih,  dipotong-potong  dan  dikeringkan  meggunakan oven  dengan  pengaturan  suhu  ±50°C.  Kadar  air  simplisia  daun  parijoto  diukur  menggunakan moisture balance . Ukuran partikel simplisia daun parijoto diperkecil dengan menggunakan blander dan  diayak  dengan  ayakan  40  Mesh.  Ekstraksi  simplisia  daun  sambiloto  dibuat  dengan  metode maserasi menggunakan lima liter etanol 70% sebagai cairan penyari. Pemekatan ekstrak dilakukan dengan rotary  evaporator sehingga  diperoleh  ekstrak  etanol  daun  parijoto  (EEDP).  selanjutnya, rendemen EEDP dihitung, disimpan dalam desikator dan digunakan untuk pengujian.
2. Uji efek antidiare ekstrak etanol daun parijoto
Metode uji efek antidiare EEDP dilakukan sesuai prosedur yang dilakukan Anas dkk. (2012). Sebanyak  30  ekor  mencit  jantan  galur  Balb/C  yang  memenuhi  kriteria  inklusi  dikelompokkan secara acak ke dalam 6 kelompok perlakuan. Mencit kelompok I (kontrol negatif tanpa perlakuan) diberi suspensi PGA 3% 20 mL/kgBB dan NaCl 0,9% 20 mL/kgBB. Mencit kelompok II (kontrol negatif  dengan  perlakuan)  diberi  suspensi  PGA  3%  20  mL/kgBB.  Mencit  kelompok  III  (kontrol positif)  diberi  loperamid  HCl  dosis  100  mg/kgBB.  Mencit  kelompok  IV,  V,  dan  VI  diberi perlakuan dengan EEDP (500, 1.000, dan 2.000) mg/kgBB. Enam puluh menit setelah pemberian sediaan  uji,  mencit  kelompok  II-VI  diberikan  perlakuan  1,0  mL castor  oil per-oral,  kemudian diletakkan  pada  kandang  plastik  ukuran  18x23  cm  yang  sebelumnya  telah  dialasi  dengan  kawat kassa  dan  dilapisi  dengan  kertas  saring.  Selanjutnya,  data  onset  terjadinya  diare  dihitung  ketika mencit pertama kali mengeluarkan feses cair-tidak berbentuk. Selain itu, data berat feses cair-tidak berbentuk  diamati  tiap  30  menit  selama  8  jam.  Persentase  efek  antidiare  EEDP  dihitung  dengan menggunakan persamaan (1) yang merujuk pada penelitian yang dilakukan oleh Anas dkk., (2012):
% Efek Antidiare   = x  100%  ………… (1)
Keterangan : p : rata-rata berat feses cair dan tidak berbentuk mencit kelompok EEDP dan loperamid HCl k :  rata-rata berat feses cair dan tidak berbentuk mencit kelompok kontrol negatif dengan perlakuan
3. Uji e fek antimotilitas ekstrak etanol daun parijoto
Prosedur  uji  antimotilitas  EEDP  mengacu  pada  prosedur  yang  dilakukan  oleh  Anas  dkk. (2012).  Sebanyak  25  ekor  mencit  jantan  galur  Balb/C  yang  memenuhi  kriteria  inklusi  dipuasakan selama 16-18 jam, dan tetap diberi air minum ad. libitum . Selanjutnya, mencit dibagi secara  acak dalam 5 kelompok perlakuan. Kelompok I (kontrol negative) diberi perlakuan suspensi PGA 3% 10 mL/KgBB,  kelompok  II  (kontrol  positif)  diberi  perlakuan  loperamid  HCl  1,5  mg/KgBB,  dan kelompok III, IV, V diberi perlakuan EEDP (500, 1.000, dan 2.000) mg/KgBB. Perlakuan sediaan uji  pada  mencit  dilakukan  secara  peroral.  Empat  puluh  lima  menit  Setelah  perlakuan  sediaan  uji, semua  mencit  diberi  perlakuan  suspensi  norit  10%  10  mL/KgBB  (p.o).  Pada  menit  ke-65  setelah perlakuan  sediaan  uji , semua  mencit  dikorbankan.  Usus  mulai  dari  pylorus  sampai  rectum dikeluarkan secara hati-hati sampai teregang. Panjang usus yang dilalui market norit diukur dengan
menggunakan  mistar  dan  dibandingkan  dengan  panjang  usus  keseluruhan.  Rasio  jarak  tempuh marker  norit  terhadap  panjang  usus  seluruhnya  dihitung  dengan  menggunakan  persamaan  (2)  dan persentase efek antimotilitas EEDP dihitung dengan menggunakan persamaan (3):
R = ……………… (2)
Keterangan: R = rasio jarak tempuh marker norit N = panjang usus yang dilewati marker norit U = panjang usus keseluruhan
X 100 % ……………… (3)

## Keterangan:
K = Rata- rata rasio panjang usus kelompok kontrol negatif P =  Rata-rata rasio panjang usus kelompok perlakuan (Loperamid dan EEDP)

## 4. Uji efek antisekretori ekstrak etanol daun parijoto
Uji efek antisekretori juga dilakukan menurut prosedur pengujian yang dilakukan oleh Anas dkk.  (2012).  Dua  puluh  lima  ekor  mencit  jantan  galur  Balb/C  yang  memenuhi  kriteria  inklusi dipilih secara acak dan dibagi ke dalam lima kelompok  perlakuan. Semua mencit yang digunakan dalam penelitian, dipuasakan terlebih dahulu selama 16 jam. Mencit kelompok I (kelompok kontrol negatif  tanpa  perlakuan)  diberikan  larutan  NaCl  0,9%  sebanyak  20  mL/kgBB  peroral.  Mencit kelompok II diberikan PGA 3% sebanyak 20 mL/gBB. Mencit  kelompok III,  IV dan V mendapat perlakuan  EEDP  (500,  1.000,  dan  2.000)  mg/kgBB  peroral.  Tiga  puluh  menit  setelah  pemberian sediaan  uji,  mencit  kelompok  II-V  diberi  1,0  mL castor  oil (p.o)  dan  dibiarkan  30  menit. Selanjutnya,  semua  mencit  dikorbankan  dengan  cara  dislokasi  tulang  belakang  dan  dilakukan pembedahan.  Usus  mencit  dari  phylorus  sampai  caecum  dipotong  dan  isinya  dikeluarkan  lalu ditampung dalam tabung effendroph. Volume isi cairan usus diukur menggunakan spuit injeksi 1,0 mL.

## Analisis Data
Semua data dalam penelitian ini dianalisis  secara statistik menggunakan  uji beda pada taraf kepercayaan  95%.  Sebelum  dilakukan  uji  beda,  normalitas  dan  tingkat  homogenitas  varian  data diuji  terlebih  dahulu  dengan  menggunakan  metode Kolsmogorof-Smirnoff dan Levene  Test . Perbedaan  nilai  Rasio  jarak  tempuh  yang  dilalui  marker  norit  dianalisis  dengan  menggunakan Anova satu jalan yang dilanjutkan dengan uji LSD. Sementara itu, perbedaan data onset terjadinya diare, berat feses cair-tidak berbentuk dan volume isi usus dianalisis dengan uji Kruskal-Wallis dan dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kemampuan  EEDP  dalam  Menunda  Terjadinya  Diare  pada  Mencit  yang  Diinduksi Castor Oil Perlakuan castor oil 1,0 mL mampu menginduksi terjadinya diare pada mencit galur Balb/C dalam  waktu  (78±12)  menit.  Diare  tersebut  disebabkan  karena  adanya  kandungan  asam  risinoleat dalam castor oil . Senyawa ini akan menyebabkan iritasi dan inflamasi pada dinding usus yang akan memicu  biosintesis  prostaglandin  serta  hipersekresi  cairan  elektrolit  dan  air  (Katiyar  dkk . ,  2015). Perubahan  fungsi  dan  patofisiologis  lain  yang  diakibatkan  oleh  aksi  asam  risinoleat  pada  dinding usus  adalah  meningkatnya  kecepatan  motilitas  usus;  perubahan  permeabilitas  membran,  serta terganggunya absorpsi air, ion Na ⁺ , dan K ⁺ dalam kolon. Akibatnya, konsistensi feses akan menjadi berair/cair (Balaji dkk . , 2012).
Hasil penelitian ini menyimpulkan bahwa EEDP 1.000 mg/Kg BB dan Loperamid HCl 100 mg/Kg BB dapat menunda terjadinya diare pada mencit jantan galur Balb/C yang diinduksi 1,0 mL castor oil . Mencit yang mendapat perlakuan loperamid HCl 100 mg/kgBB dan ekstrak EEDP 1.000 mg/kgBB  memiliki  onset  terjadinya  diare  yang  lebih  lama  bila  dibandingkan  dengan  mencit kelompok kontrol negatif dengan perlakuan (p<0,05). Mencit yang mendapat perlakuan loperamid HCl  100  mg/Kg  BB  dan  EEDP  1.000  mg/Kg  BB  mengalami  diare  setelah  (438±42)  menit  dan
(144±26)  menit  dari  perlakuan  1,0  mL castor  oil .  Onset  terjadinya  diare  pada  semua  kelompok perlakuan dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2.  Onset terjadinya diare pada semua kelompok perlakuan setelah perlakuan 1,0 mL castor oil . Keterangan : KNDP :   PGA 3% 20 mL/kgBB + castor oil 1,0 mL Loperamid HCl:   Loperamid HCl 100 mg/kgBB + castor oil 1,0 mL EEDP 1 :   Ekstrak etanol daun parijoto 500 mg/kgBB + castor oil 1,0 mL EEDP 2 :   Ekstrak etanol daun parijoto 1.000 mg/kgBB + castor oil 1,0 mL EEDP 3 :   Ekstrak etanol daun parijoto 2.000 mg/kgBB + castor oil 1,0 mL
( * ):   Hasil uji Mann-Whitney ada perbedaan yang bermakna dengan KNDP
Efek Antidiare EEDP pada Mecit Jantan Galur Balb/C yang Diinduksi oleh Castor Oil Castor oil mampu memicu terjadinya diare/sekresi cairan dan elektrolit berlebih dalam usus sehingga  akan  memperlunak  konsistensi  feses  dan  menyebabkan  terjadinya  diare  (Chitme  dkk., 2004).    Dalam  penelitian  ini,  data  berat  feses  cair-tidak  berbentuk  dikumpulkan  dalam  waktu delapan jam setelah pemberian 1,0 mL castor oil . Selama delapan jam pengamatan tersebut, mencit yang  tidak  mendapat  perlakuan  castor  oil  (KNTP)  tidak  mengalami  diare.  Sebaliknya,  perlakuan 1,0  mL castor  oil pada  mencit  kelompok  KNDP  menghasilkan  feses  cair-tidak  berbentuk  seberat (0,1594 ± 0,0216)  g.  Mencit  yang  mendapat  perlakuan  dengan  loperamid  HCl  100  mg/Kg  BB  dan tiga peringkat dosis EEDP memiliki rata-rata berat feses cair-tidak berbentuk yang lebih kecil bila dibandingkan  dengan  kelompok  KNDP.  Berat  feses  cair  dan  tidak  berbentuk  mencit  yang mendapat perlakuan loperamid HCl adalah sebesar (0,0857±0,0216) g, sedangkan perlakuan EEDP (500,  1000,  2.000)  mg/kgBB  berturut-turut  menghasilkan  feses  cair-tidak  berbentuk  seberat (0,1179±0,0087; 0,1096±0,0126 dan 0,0591±0,0035) g. Secara statistik, terdapat perbedaaan yang bermakna pada data rata-rata berat feses cair-tidak berbentuk  kelompok KNDP dengan kelompok loperamid  HCl  dan  EEDP  2.000  mg/kgBB  (p<0,05).  Hasil  penelitian  ini  membuktikan  bahwa EEDP 2.000 mg/kgBB memiliki aktivitas sebagai antidiare. Persentase efek antidiare EEDP 2.000 mg/kgBB  dan  loperamid  HCl  100  mg/Kg  BB  berturut-turut  adalah  sebesar  62,94%  dan  46,25%. Rata-rata berat feses cair-tidak berbentuk pada semua kelompok perlakuan dapat dilihat pada gambar 3.

## Efek  Antimotilitas  EEDP  pada  Mencit  Jantan  Galur  Balb/C  dengan  Metode  Transit intestinal
Efek  antimotilitas  EEDP  diuji  dengan  metode transit  intestinal yang  menggambarkan kemampuan  sediaan  uji  dalam  menghambat  peristaltik  usus  mencit.  Data  penelitian  yang  diukur adalah rasio jarak usus yang ditempuh oleh marker norit terhadap panjang usus keseluruhan dalam waktu  20  menit  (R)  (Sarin  dan  Bafina,  2012;  Komal  dan  Rana,  2013).  Hasil  penelitian menunjukkan  R  mencit  yang  mendapat  perlakuan  EEDP  (500,  1.000  dan  2.000)  mg/Kg  BB  dan Loperamid 1,5 mg/Kg BB lebih kecil dari pada R kelompok kontrol negatif (p<0,05). Oleh karena itu,  penelitian  ini  menyimpulkan  bahwa  salah  satu  mekanisme  antidiare  EEDP  adalah  sebagai antimotilitas.  EEDP  (500-2.000)  mg/  Kg  BB  mampu  menghambat  peristaltik  usus  mencit  jantan galur Balb/C sebesar (22,45-44,36)%. Rata-rata R pada semua kelompok perlakuan dan persentase efek antimotilitas EEDP dan Loperamid dapat dilihat pada Tabel I.
Gambar  3.  Rata-rata berat  feses  cair-tidak berbentuk  semua  kelompok perlakuan  setelah perlakuan 1,0 mL castor oil . Keterangan : KNTP :     PGA 3% 20 mL/kgBB + NaCl 20 mL/kgBB KNDP :     PGA 3% 20 mL/kgBB + castor oil 1,0 mL Loperamid HCl  :   Loperamid HCl dosis 100 mg/kgBB + castor oil 1,0 mL EEDP 1  :     Ekstrak etanol daun parijoto 500 mg/kgBB + castor oil 1,0 mL EEDP 2  :     Ekstrak etanol daun parijoto 1000 mg/kgBB + castor oil 1,0 mL EEDP 3  :     Ekstrak etanol daun parijoto 2000 mg/kgBB + castor oil 1,0 mL
( * ) :     Hasil uji Mann-Whitney menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna dengan rata-rata berat feses cair dan tidak berbentuk kelompok KNDP
( ** ) :     Hasil uji Man-Whitney menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna dengan rata-rata berat feses cair-tidak berbentuk dengan kelompok loperamid HCl
Tabel I. Rata-rata Rasio Panjang Usus yang dilalui Marker Norit (R) Semua Kelompok
Perlakuan dan Persentase Efek Antimotilitas EEDP dan Loperamid HCl Perlakuan R Persentase Antimotilitas (% penghambatan) Kontrol negatif PGA 10 mL/Kg BB 0,5788 ± 0,0209 - Loperamid HCl 1,5 mg/KgBB 0,2118 ± 0,0161* 63,40 EEDP 500 mg/Kg BB 0,4488 ± 0,0120* 22,45 EEDP 1.000 mg/Kg BB 0,3628 ± 0,0131* 37,31 EEDP 2.000 mg/Kg BB 0,3220 ± 0,0023* 44,36
*: Hasil uji Mann-Whitney menunjukkan adanya perbedaan bermakna dengan R  kelompok kontrol negatif (p<0,05)
Efek  Antisekretori  EEDP  pada  Mecit  Jantan  Galur  Balb/C  dengan  Metode Castor  Oil- Induced Enteropooling
Antisekretori  merupakan  senyawa  obat  yang  mampu  menghambat  atau  mengurangi  sekresi cairan  dan  elektrolit  ke  dalam  usus  dan  merupakan  salah  satu  golongan  antidiare.  Uji  aktivitas antisekretori  senyawa  calon  obat  atau  obat  tradisional  dapat  dilakukan  dengan  menggunakan metode castor oil induced enteropooling (Formiga dkk., 2017). Dalam usus halus, c astor oil akan mengalami  hidrolisis  dan  menghasilkan  asam  risinoleat  yang  mampu  merangsang  mukosa  usus, sehingga  mempercepat  gerakan  peristaltik  (Anwar,  2000),  mengurangi  absorpsi  cairan,  dan elektrolit, meningkatkan biosintesis prostaglandin (Akuodor dkk., 2010) serta secara langsung akan menyebabkan  perubahan  permeabilitas  sel  mukosa  intestinal  terhadap  cairan  elektrolit  (Kalaskar dkk., 2010). Data efek antisekretori EEDP dalam penelitian ini adalah volume isi usus (mL). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa volume isi usus mencit yang mendapatkan perlakuan castor oil (kelompok  negatif  dengan  perlakuan)  mencapai  (0,730±0,046)  mL,  lebih  besar  dari  pada  volume isi  usus  mencit  kelompok  kontrol  negatif  tanpa  perlakuan  castor  oil  (0,294±0,022)  mL  (p<0,05). Data ini menegaskan bahwa castor oil mampu menginduksi terjadinya peningkatan sekresi cairan dan  elektrolit  ke  dalam  lumen  usus  mencit  jantan  galur  Balb/C.  Perlakuan  EEDP  (500,1.000,  dan 2.000)  mg/kgBB  pada  mencit  jantan  galur  Balb/C    dalam  penelitian  ini  mampu  menghambat sekresi cairan dan elektrolit ke dalam lumen usus. Rata-rata volume isi usus mencit yang mendapat perlakuan  ketiga  peringkat  dosis  EEDP  tersebut  berturut-turut  adalah  sebesar  (0,498±0,038, 0,512±0,038  dan  0,472±0,028)  mL.  Volume  isi  usus  tersebut  lebih  kecil  dibandingkan  rata-rata
volume isi  usus mencit kelompok kontrol negatif dengan perlakuan (0,730±0,046) (p<0,05). Oleh karena itu, penelitian  ini menyimpulkan bahwa EEDP (500, 1.000 dan 2.000) mg/kgBB  memiliki efek  antisekretori  dengan  persentase  efek  antisekretori  berkisar  antara  (31,78-35,34)%.  Data selengkapnya tersaji pada Tabel II.
Tabel II. Rata-rata Volume Isi Usus Mencit Semua Kelompok Perlakuan setelah Mendapatkan Perlakuan 1,0 mL Castor Oil dan Persentase Efek Antisekretori EEDP Perlakuan Volume Isi Usus (mL) Persentase Antisekretori (% penghambatan) KNTP 0,294±0,022* - KNDP 0,730±0,046 - EEDP 1 0,498±0,038* 31,78 EEDP 2 0,512±0,038* 34,64 EEDP 3 0,472±0,028* 35,34 Keterangan : KNTP : Kontrol negatif tanpa perlakuan (NaCl 0,9% 20 mL/kgBB KNDP : kontrol negatif dengan perlakuan (PGA 3% 20 mL/kgBB + castor oil 1,0 mL) EEDP 1   :Ekstrak etanol daun parijoto 500mg/kgBB + castor oil 1,0 mL EEDP 2  :Ekstrak etanol daun parijoto 1.000 mg/kgBB + castor oil 1,0 mL
EEDP 3  :Ekstrak etanol daun parijoto 2.000 mg/kgBB + castor oil 1,0 mL (*) : Hasil uji Mann-Whitney menunjukkan adanya perbedaan bermakna dengan volume isi usus kelompok kontrol negatif dengan perlakuan (p<0,05)

## KESIMPULAN
EEDP  terbukti  mampu  menunda  terjadinya  diare  dan  mengurangi  terbentuknya  feses  cair- tidak  berbentuk  pada  mencit  jantan  galur  Balb/C  yang  diinduksi castor  oil .  Mekanisme  antidiare EEDP juga terungkap dalam penelitian ini melalui efeknya sebagai antimotilitas dan antisekretori.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahlquist,  D.A.,  and  Camilleri,  M.,  2005, Diarrhea  and Constipation ,  diterjemahkan  oleh  Kasper, D.L., Fauci, A.S., Longo, D.L., Braunwald, E., Hauser, S.L., Jameson, J.L., Eds. Harrison’s Principles of Internal Medicine. 16 th Ed. McGraw Hill, USA, hal. 44-49. AHN,  2016, Medinilla  speciosa L., http://www.herbalisnusantara.com/tanaman  obat/5-062.pdf , diakses tanggal 27 Maret 2018
Akuodor,  G.C.,  Usman,  M.I.,  Ugwu,  T.C.,  Akpan,  J.L.,  Irogbeyi.,  L.A.,  Iwuannyanwu  T.C.,  and Osunkwo,  U.A.,  2010,  Ethanolic  Leaf  Extract  of  Verbena  Hastata  produces  Antidiarrhoeal and  Gastrointestinal  Motility  Slowin  Effect  in  Albino  Rat ,  J.Med.  Plants  Res , 4 (16),1624- 1627
Anas,  Y.,  Fithria,  R.F.,  Purnamasari,  Y.A.,  Ningsih,  K.A.,  Novianto,  A.G.,  dan  Suharjono,  2012, Aktivitas  Antidiare  Ekstrak  Etanol  Daun  Randu  ( Ceibapetandra  L. Gaern . )  pada  Mencit Jantan Galur Balb/C, Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik, 6 : 16-22.
Anggana, A. F., 2011, Kajian Etnobotani Masyarakat di Sekitar Taman Nasional Gunung Merapi,
Skripsi , Institusi Pertanian Bogor, Bogor
Anwar,  J.,  2000, Farmakologi  dan  Terapi ,  diterjemahkan  oleh  Ganiswara,  S.G.,  Setiabudy,  R., Suyatna F.D., Purwantyastuti, dan Nafrialdi, Hipokrates, Jakarta hal. 61
Balaji,  G.,  Chalamaiah,  M.,  Ramesh,  B.,  and  Reddy,  Y.A.,  2012,  Antidiarrhoeal  Activity  of Ethanol and Aqueous Extracts of Carum copticum Seeds in Experimental Rats, Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine , 12 , 151-155
Beugerie,  L.  and  Sokol.,  2013,  Acute  Infectious  Diarrhea  in  Adults:  Epidemiology  and Management, Presse Med . 42 (1), 52-59
Chitme, H.R., Chandra, M., and Kauhik, S.,2004, Studies on Anti-diarrhoeal Activity of Calotropis gigantetea R.Br. in Ekxperimnetal Animals, J Pharm Pharmaceut Sci ,  7(1), 70-75 Farthing, M., Salam, M.A., Lindberg, G., Dite, P., Khalif, I., Salazar-Lindo, E., Ramakrishna, B.S., Goh,  K.L.,  Thomson,  A.  and  Khan,  A.G.,  2013,  Acute  Diarrhea  in  Adults  and  Children:  A Global Perspective. J. Clin. Gastroenterol . 47 , 12–20
Formiga,  R.D.O.,  Quirino,  Z.G.M.,  Diniz,  M.D.F.F.M.,  Marinho.,  A.F.,  Tavares  J.F.,  and Batista, L.M.,  2017,  Maytenus erythroxylon Reissek  ( Celastraceae )  Ethanol  Extract  Present Antidiarrheal  Activity  via  Antimotility  and  Antisecretory  Mechanisms, World  J Gastroenterology, 23 (24), 4381-4389
Hikosaka,  K.,  Nagamatsu,  D.,  Ishii,  H.S.,  and  Hirose,T.,  2002.  Photosynthesis  Nitrogen Relationships  in  Species  at  Different  Altitudes  on  Mount  Kinabalu,  Malaysia, Ecological Research , 17, 305-313
Kalaskar, M.G., Divekar V.B., Chaugule P.D., Surana S.J. and Baheti D.G., 2010, Studies on Anti- Diarrheal Activity of Dalberjia sissoo Roxb. in Experimental Animals, Pharmacologyonline, 1, 453-457
Katiyar, N.S., Singh, A.P., and Saravanan, K., 2015, Evaluation of Antidiarrhoeal Potential of Leaf Extract  of Ocimumsanctum L.  in  Experimental  Rats, International  Journal  of Pharmaceutical Sciences and Research , 6 (11), 4804-4809
Komal,  S.K.,  Rana,  A.C.,  2013,  Herbal  Approaches  for  Diarrhea:  A  Review. International Research Journalof Pharmacy , 1, 31-37
Maria,  C.,  Buta  Erszbet,  Hort  Denisa,  2012,  Medinilla  :  An  Exotic  and  Attractive  Indoor  Plant With Great Value, Journal of Horticulture, Foresty and Biotechnology , 16 (2), 9-12
Mumpuni,  K.E.,  Susilo,  H.,  dan  Rohman,  F.,  2015,  Potensi  Tumbuhan  Lokal  sebagai  Sumber Belajar  Biologi, Makalah ,  disajikan  dalam  Seminar  Nasional  XI  Pendidikan  Biologi  FKIP UNS, Universitas Sebelas Maret, Surakarta
Sarin,  R.V.  and  Bafina,  P.A.,  2012,  Herbal  Antidiarrhoeals,  A  Review, Intenational  Journal  of Research in Pharmaceutical and Biomedical Sciences , 637- 649
Wibowo,  H.A.,  Wasino,  dan  Setyowati,  D.L.,  2012,  Kearifan  Lokal  dalam  Menjaga  Lingkungan Hidup (Studi Kasus Masyarakat di Desa Colo Kecamatan Dawe Kabupaten Kudus), Journal of Education Social Studies , 1 , 25-30