## KONSENTRASI HAMBAT MINIMUM (KHM) EKSTRAK ETANOL BUAH SAWO ( Achras zapota
L.) TERHADAP

## PERTUMBUHAN BAKTERI Escherichia coli
M. Arsyad, Ayu Rizki Annisa
Universitas Lambung Mangkurat
Email : muhammadarsyad@unlam.ac.id

## ABSTRAK
Buah sawo ( Achras zapota L.) diketahui mengandung tanin dan flavonoid. Tanin  dan  flavanoid    diketahui  dapat  menghambat  pertumbuhan  Bakteri. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  berapa  konsentrasi  hambat  minimum ekstrak  etanol  buah  sawo  muda  yang  dapat  menghambat  total  pertumbuhan Escherichia  coli .  Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode dilusi.  Konsentrasi  ekstrak  etanol  buah  sawo  yang  diuji  adalah  0%,  2,5%,  5%, 7,5%,  10%,  12,5%,  15%,  17,5%,  20%,  22,5%,  dan  25%.  Hasil  penelitian menunjukkan  Konsentrasi  hambat  minimal  ekstrak  buah  sawo  muda  yang  dapat menghambat total pertumbuhan Escherichia coli adalah 22,5%.
Kata Kunci : Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM),  Buah  Sawo, Escherichia coli

## ABSTRACT
Sapodilla  fruit  (Achras  zapota L .)  is  known  contains  tannins  and flavonoids. Tannins and flavonoids are known can inhibit growth of bacteria. The objectives  of  the  research  were to  determine  how  the  minimum  inhibitory concentration  of  ethanol  extract  of  young  sapodilla  fruit  that  can  inhibit  the growth of Escherichia coli. The method used is t dilution method. concentration of Sapodilla  fruit  ethanol  extract  tested  were  0%,  2.5%,  5%,  7.5%,  10%,  12.5%, 15%,  17.5%,  20%,  22.5%,  and  25  %.  Results  showed  minimum  inhibitory concentration  of  young  sapodilla  fruit  extracts  that  can  inhibit  the  growth  of Escherichia coli  is 22.5%.
Keywords : Minimum  Inhibitory Concentration  (MIC),  Spodilla Fruit, Escherichia coli

## PENDAHULUAN
Sawo  ( Achras  zapota L.) berasal  dari  daerah  tropis  Amerika Tengah  dan  Meksiko.  Di  Indonesia tanaman  ini  sering  dijumpai  di
pekarangan.  Tanaman  ini  berupa pohon  yang  bergetah  (Widyastuti  & Farry,  1993).  Menurut  Winarno  & Dian  (1996),  berdasarkan  hasil penelitian  buah  sawo  merupakan
salah  satu  tanaman  yang  digunakan sebagai obat diare. Beberapa masyarakat  di  Kalimantan  Selatan, khususnya  Kabupaten  Hulu  Sungai Utara  menggunakan  buah  sawo sebagai obat tradisional untuk mengobati  penyakit  diare.  Buah sawo  yang  digunakan  masyarakat adalah buah yang masih muda. Buah sawo  diparut  dan  kemudian  diambil airnya  untuk  diminum.  Berdasarkan pustaka,  buah  sawo  ( Achras  zapota L.)  mengandung  tanin.  Lebih  lanjut Winarno & Dian (1996) menjelaskan bahwa  kandungan  tanin  dan  pektin dapat  melindungi    dinding  mukosa usus  terhadap  rangsangan  isi  usus atau  mengendapkan  racun,  ini  dapat membantu  daya  antibakteri  secara keseluruhannya.
Pada  penelitian  Sebayang (2010),  pemeriksaan  simplisia  buah sawo menghasilkan kadar air 15,33%,  kadar  abu  total  1,89%, kadar  abu  yang  tidak  larut  asam 0,95%,  kadar  sari  yang  larut  dalam etanol  37,45%,  kadar  sari  yang  larut dalam  air  38,01%.  Hasil  skrining fitokimia simpilisia buah sawo menunjukkan adanya flavonoid, glikosida, dan tanin. Hasil  penelitian
Ajizah  dkk  (2007)   tentang  ekstrak kayu    ulin    yang    mengandung alkaloid,    flavonoid,    triterpenoid, tanin    dan    saponin  mampu menghambat    pertumbuhan    S. aureus    pada    konsentrasi    2%    dan 2,5%.
Kandungan
flavanoid,
glikosida dan tanin dalam buah sawo yang dapat berfungsi sebagai antibakteri  ini  perlu  diteliti  lebih lanjut untuk
memastikan pengaruhnya  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri.  Salah  satu bakteri  yang  dapat  menyebabkan penyakit pada manusia adalah Escherichia coli . Sebagaimana
halnya  menurut  Brooks  dkk.  (2007) bahwa Escherichia coli yang umumnya menyebabkan diare terjadi di  seluruh  dunia.  Oleh  karena  itu peneliti  tetarik  meneliti  konsentrasi hambat minium Ekstrak Etanol Sawo ( Achras zapota L.) terhadap pertumbuhan  Bakteri Escherichia coli.
Rumusan masalah dalam penelitian ini adalah berapa konsentrasi hambat minimum ekstrak sawo  muda  yang  efektif  dalam menghambat total pertumbuhan
Escherichia  coli .  Sedangkan  batasan masalah  dalam  penelitian  ini  adalah penelitian  dibatasi  hanya  untuk mengetahui berapa konsentrasi hambat minimum ekstrak sawo muda terhadap  pertumbuhan Escherichia coli secara  in  vitro  dan  buah  sawo muda yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  buah  sawo Manila  yang  tumbuh  di  daerah Amuntai  Kabupaten  Hulu  Sungai Utara.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui berapa konsentrasi hambat minimum ekstrak buah sawo muda  yang  dapat  menghambat  total pertumbuhan Escherichia coli .

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini adalah penelitian  eksperimental  secara  in vitro dengan
menggunakan rangcangan  acak  lengkap  (RAL). Sebagai  faktor  adalah  bakteri  dan konsentrasi  ekstrak  buah  sawo. Bakteri  yang  diuji  dalam  penelitian ini  adalah Escherichia  coli yang telah dibiakan dalam medium agar di Balai  Penyidikan  dan  Pengujian Veteriner  Regional  V  Banjarbaru dengan standar kekeruhan Mc Farland  0,5.  Bakteri  yang  digunakan
merupakan  biakan  murni  dengan kode bakteri Escherichia coli ATCC 8739.  Buah  sawo  yang  digunakan pada penelitian ini adalah buah sawo manila  yang  masih  muda,  yaitu dengan kriteria diameter buah sebesar  3-4  cm.  Buah  sawo  yang digunakan  adalah  buah  sawo  yang tumbuh  di  daerah  Amuntai,  Hulu Sungai  Utara.  Pengujian  ekstrak buah sawo terhadap bakteri Escherichia  coli ini  dilakukan  di Laboratorium Bakteriologi Balai Penyidikan  dan  Pengujian  Veteriner Regional V Banjarbaru.
Alat yang digunakan meliputi colony  counter,  inkubator,  tabung reaksi,  pipet  volumetrik,  dan  cawan petri  steril.  Bahan  yang  digunakan untuk  uji  bakteri  ini  adalah Muller Hinton Agar  (MHA),  biakan  murni Escherichia  coli, ekstrak  etanol buah sawo muda.
Proses  ekstraksi  sampel  buah sawo yaitu diisolasi dengan instrument  soxhlet.  Sampel  buah sawo  diekstraksi  dengan  etanol  96% secara  soxhletasi  selama  ±  8  jam. Metode uji antibakteri untuk mengetahui  kadar  hambat  minimum yang  digunakan  adalah  metode
dilusi.  Konsentrasi  ekstrak  etanol pada  uji  awal  adalah  0%,  25%,  50%
dan  100%.  Konsentrasi  tersebut kemudian diturunkan
untuk
mengetahui konsentrasi hambat
minimum.  Konsentrasi  yang  ekstrak etanol buah sawo pada uji selanjutnya  adalah  0%,  2,5%,  5%,
7,5%,  10%,  12,5%,  15%,  17,5%, 20%, 22,5%, dan 25%. Data  yang  digunakan  untuk mengetahui konsentrasi hambat minimum ekstrak buah sawo
terhadap pertumbuhan
bakteri
Escherichia  coli adalah  data  angka
konsentrasi  ekstrak  etanol  sawo ( Achras  zapota L.)    yang  tidak menunjukkan  adanya  pertumbuhan bakteri.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil
Hasil yang diperoleh berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan berupa perhitungan jumlah koloni bakteri Escherichia coli yang tumbuh  pada  tiap-tiap  konsentrasi larutan uji (ekstrak buah sawo muda) disajikan dalam tabel I.
Tabel I . Jumlah koloni yang tumbuh pada tiap-tiap konsentrasi
Konsentrasi Jumlah Koloni (× 10 8 CFU/ml) Jumlah Rata-Rata Ulangan I Ulangan II Ulangan III 0% 282 305 299 886 295,33 2,5% 272 280 257 809 269,67 5% 174 158 193 525 175 7,5% 144 161 180 485 161,67 10% 90 79 113 282 94 12,5% 78 56 41 175 58,33 15% 15 23 18 56 18,67 17,5% 13 17 20 50 16,67 20% 12 9 7 28 9,33 22,5% 0 0 0 0 0 25% 0 0 0 0 0 Gambar 1 . Diagram rata-rata jumlah koloni pada masing-masing konsentrasi 0 200 400 0% 2.50% 5% 7.50% 10% 12.50% 15% 17.50% 20% 22.50% 25%

## Jumlah rata-rata Koloni
Konsentrasi 0% Konsentrasi 2,5 % Konsentrasi 5% Konsentrasi 7,5% Konsentrasi 10% Konsentrasi 12,5% Konsentrasi 15% Konsentrasi 17,5%
Konsentrasi 20% Konsentrasi 22,5%
Gambar 2 . Koloni Bakteri pada berbagai perlakuan Berdasarkan hasil pengamatan terhadap pengaruh ekstrak  buah  sawo  menunjukkan adanya penghambatan. Hal ini terbukti  dengan  adanya  penurunan jumlah  koloni  bakteri Escherichia
coli setelah  diberikan  perlakuan. Penghambatan  total  jumlah  koloni bakteri Escherichia coli terlihat pada konsentrasi
22,5%. Adapun penampakan koloni bakteri
Escherichia coli pada masing-masing
perlakuan  dapat  dilihat  pada  gambar 2.

## Pembahasan
Penghambatan  total  terhadap pertumbuhan koloni bakteri Escherichia coli tampak pada perlakuan dengan konsentrasi ekstrak buah sawo muda sebesar 22,5%. Hal ini berarti, konsentrasi hambat minimal (KHM) yang dapat menghambat  pertumbuhan  koloni bakteri Escherichia  coli adalah konsentrasi  ekstrak buah sawo muda sebesar 22,5%. Berdasarkan penelitian  yang  telah  dilakukan, ekstrak  buah  sawo  muda  dengan konsentrasi 22,5%
diketahui
memiliki  kemampuan  yang  setara
dengan  kontrol  positif  yaitu  larutan ampicilin  1%  dalam  menghambat pertumbuhan koloni bakteri
Escherichia coli .
Pada  penelitian  Sebayang (2010)  diperoleh  data  bahwa  dalam buah  sawo  terdapat  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  yaitu flavonoid,  glikosida  dan  tanin.  Waji dkk.  (2009)  menyebutkan  bahwa flavanoid  dapat  berperan  langsung sebagai antibiotik dengan mengganggu fungsi dari
mikroorganisme  seperti  bakteri  atau virus.  Sebagaimana  dijelaskan  oleh
Harbone  dalam  Ajizah  dkk.  (2007)
bahwa kandungan flavonoid merupakan  senyawa  fenol.  Lebih lanjut Dwidjoseputro
(1998) menjelaskan  senyawa  fenol  dapat bersifat  sebagai  koagulator  protein yang  merupakan  konstituen  dari protoplasma.  Protein  yang  telah menggumpal itu protein yang mengalami  denaturasi  dan  di  dalam keadaan  yang  demikian  itu  protein tidak berfungsi lagi. Hal ini ditegaskan  oleh  Winarno  &  Dian (1996), flavonoid berdasarkan penelitian dapat menghambat pertumbuhan Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus .
Selain  flavonoid,  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  lainnya yang  diduga  juga  bersifat  sebagai antibakteri  adalah  tanin.  Menurut Winarno  &  Dian  (1996),  kandungan tanin  dapat  melindungi  mukosa  usus terhadap  rangsangan-rangsangan  isi usus  atau  mengendapkan  racun. Masduki  (1996)  menjelaskan  bahwa tanin  mempunyai  daya  antibakteri dengan  cara  mempresipitasi  protein,
karena diduga tanin mempunyai efek yang sama dengan senyawa fenolik.
Lebih  lanjut  Masduki  (1996) menjelaskan  bahwa  efek  antibakteri tanin  antara  lain  melalui:  reaksi dengan  membran  sel,  inaktivitasi enzim dan dekstruksi atau inaktivitasi  fungsi  materi  genetik. Hal  ini  ditegaskan  oleh  Pelczar  &
Chan (1988) bahwa membran sitoplasma  mempertahankan  bahan- bahan  tertentu  di  dalam  sel  serta mengatur  aliran  keluar  masuknya bahan-bahan lain. Membran memelihara  integritas  komponen- komponen  selular.  Kerusakan  pada membran  ini  akan  mengakibatkan terhambatnya  pertumbuhan  sel  atau matinya sel.
Adanya  kemampuan  ekstrak buah sawo muda dengan konsentrasi sebesar  22,5%  dalam  menghambat pertumbuhan  total  koloni  bakteri Escherichia  coli ini  membuktikan bahwa  buah  sawo  muda  berpotensi untuk  digunakan  sebagai  salah  satu bahan  obat    untuk  menghambat pertumbuhan  bakteri  yang  biasanya menjadi penyebab diare, yaitu Escherichia coli .

## KESIMPULAN
Konsentrasi  hambat  minimal ekstrak  buah  sawo  muda  yang  dapat menghambat total pertumbuhan Escherichia coli adalah 22,5%.

## DAFTAR PUSTAKA
Ajizah,  A.,  Thihana,  Mirhanuddin, 2007,  Potensi  Ekstrak  Kayu Ulin  ( Eusideroxylon  zwageri
t  et  b )  dalam  Menghambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus secara
In  Vitro, Bioscientiae ;  4(1):
37-42
Ajizah,  Aulia,  2004,  Sensitivitas
Salmonella typhimurium terhadap Ekstrak Daun Psidium guajava L . Bioscientiae ; 1(1): 31-38 Arianto,  Bayu  Dwi,  Dkk,  2008, Pengujian  Efektivitas  Tanin Sebagai Antibakteri Chlamydia trachomati s. Institut Pertanian Bogor,
Bogor. Brooks,  Geo  F.,  Janet  S.  Butel  dan Stephen  A.  Morse,  2007, Mikrobiologi Kedokteran Edisi 23 , EGC, Jakarta, Dwidjoseputro,  D.  1998. Dasar- Dasar Mikrobiologi . Djambatan, Jakarta Masduki  I,  1996,  Efek  Antibakteri
Ekstrak  Biji  Pinang  (Areca catechu) ter hadap
S. aureus dan E. coli. Cermin Dunia Kedokteran ; 109 : 21-24.
Pelczar, Michael J. dan Chan, E.C.S. 1998. Dasar-Dasar
Mikrobiologi  2 ,  UI  Press,
Jakarta Sebayang,  Marina  Putri.  2010.  Uji Efek Antidiare Ekstrak Etanol  Buah  Tanaman  Sawo ( Achras  zapota L.)  terhadap Mencit Jantan. Skripsi , Fakultas  Farmasi  Universitas Sumatera Utara, Medan. Waji,  Resi  Agestia  dan  Andis Sugrani. 2009. Kimia Organik Bahan Alam Flavanoid (Quercetin). Program  S2  Kimia  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Hasanuddin, Makassar Widyastuti,  Yustina  Erna  dan  Farry B.  Paimin  .  1993. Mengenal Buah Unggul Indonesia .
Penebar Swadaya, Jakarta
Winarno,  M. Wien  dan  Dian
Sundari.  1996. Pemanfaatan
Tumbuhan sebagai Obat Diare  Di  Indonesia .  Pusat Penelitian dan Pengembangan Farmasi Balai Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Departemen  Kesehatan  RI, Jakarta.