June – November, 2021
Aceh Nutrition Journal Original Article Pages:  173 - 180 p-issn 2527-3310; e-issn 2548-5741
Manfaat pemberian tepung daun kelor ( Moringa oleifera ) terhadap kadar IL-6 dan kolesterol LDL tikus Sprague Dawley dislipidemia Benefits of supplementation moringa leaf flour (Moringa oleifera)  on IL-6 and LDL levels of Sprague Dawley dyslipidemia rats
Welresna J.P Rupiasa 1 , Siti Fatimah-Muis 2* , Ahmad Syauqy 3 , Kusmiyati Tjahjono 4 , Gemala Anjani 5
1 Pascasarjana Program Studi Magister Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran,
Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia.
Email: welresnarupiasa07@gmail.com 2 Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. Email: sitifatimahmuis@gmail.com 3 Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. Email: bang_yoki@yahoo.com 4 Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. Email: kusmiceria@gmail.com 5 Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. Email: gemaanjani@gmail.com *Korespondensi: Departemen  Ilmu  Gizi,  Fakultas  Kedokteran, Universitas Diponegoro. Jln. Prof. Sudarto SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia. Email: sitifatimahmuis@gmail.com
Riwayat Artikel: Diterima  tanggal  15  Juni  2021;  Direvisi tanggal  24  Juli  2021;  Disetujui  tanggal  04 Agustus  2021;  Dipublikasi  tanggal  30 Nopember 2021.
Penerbit:
© The Author(s). 2021 Open Access Artikel ini telah
dilakukan  distribusi berdasarkan atas ketentuan Lisensi  Internasional  Creative
Commons Attribution 4.0

## Abstract
Dyslipidemia  condition  causes  oxidative  stress  that  triggers  inflammation. Moringa leaves are rich in fiber and antioxidants that can prevent oxidative stress and reduce inflammation. This study aimed to see, measure, and analyze the  effect  of  Moringa  flour  supplementation  on  IL-6  and  LDL  levels  of dyslipidemic Sprague Dawley (SD) rats. The type of study was true-experiment with randomized pre-post. Test with control. Group design. Intervention for 28 days in 4 groups of SD rats (n= 24); a consisting group of healthy rats (K-), dyslipidemic  rats  (K+),  dyslipidemic  rats  respectively  given  0.1g/100g  BW moringa flour (P1), and 0.2 g/100g BW moringa flour (P2). ELISA and CHOD- PAP methods measured IL-6 and LDL levels. Statistical analysis used Paired t- test,  One-way  Anova,  and  Post  Hoc  Bonferroni.  The  results  showed  a significant decrease in IL-6 and LDL levels in the intervention group compared to the non-intervention group (p= 0,000). The reduction of IL-6 levels in the P2 group was greater than that in the P1 group but not significant. The decrease. in LDL levels in the P2 group was significantly higher than in the P1 group. It is attributed to the fiber and antioxidant content in Moringa. Fiber that can bind cholesterol and bile acids, antioxidants can regulate fat metabolism, capture free  radicals  and  prevent  oxidative  stress.  In  conclusion,  Moringa  flour supplementation improved lipid profiles and inflammation compared to rats with only standard and high-fat diets.
Keywords: Dyslipidemia, IL-6,  LDL, moringa flour

## Abstrak
Kondisi  dislipisemia  menyebabkan  stres  oksidatif  yang  memicu  inflamasi. Daun  kelor  kaya  akan  serat  dan  antioksidan  yang  dapat  mencegah  stres oksidatif  serta  inflamasi.  Penelitian  ini  bertujuan  melihat,  mengukur  serta menganalisis pengaruh sumplementasi tepung kelor terhadap kadar IL-6 dan LDL  tikus Sprague  Dawley (SD)  dislipidemia.  Jenis  penelitian true eksperimental dengan randomized  prepost  test  with  control  group  design . Sampel yang digunakan adalah tikus putih Sprague Dawley , usia 8-12 minggu, dengan berat badan 150-200 gram, kondisi tikus tanpa cacat fisik. Intervensi selama 28 hari pada 4 kelompok tikus SD (n= 24); kelompok tikus sehat (K-), tikus  dislipidemia  (K+),  tikus  dislipidemia  dengan  intervensi  tepung  kelor 0,1g/100g  BB  (P1),  tikus  dislipidemia  dengan  intervensi  tepung  kelor  0,2 g/100g BB (P2). Kadar IL-6 dan LDL diukur dengan metode ELISA dan CHOD-
PAP. Analisis statistik menggunakan Paired t-test, One way Anova dan Post Hoc Bonferroni . Hasil penelitian menunjukkan terjadi penurunan bermakna kadar IL-6  dan  LDL  setelah  intervensi  tepung  daun  kelor  (p=  0,000).  Penurunan kadar  IL-6  kelompok  P2  lebih  besar  dari  P1  namun  tidak  bermakna. Penurunan kadar LDL kelompok P2 secara bermakna lebih tinggi dari P1. Ini dikaitkan dengan kandungan serat dan antioksidan dalam kelor.  Serat dapat mengikat  kolesterol  dan  asam  empedu,  antioksidan  dapat  meregulasi
174 Manfaat pemberian tepung daun kelor terhadap kadar IL-6 dan kolesterol LDL …
Rupiasa et al.
metabolisme  lemak,  menangkap  radikal  bebas  sehingga  mencegah  stres oksidatif. Disimpulkan bahwa, suplementasi tepung kelor memperbaiki profil lipid  serta  inflamasi  dibandingkan  kelompok  hewan  coba  yang  hanya menerima pakan standar dan pakan tinggi lemak.
Kata Kunci: Dislipidemia, IL-6, LDL, tepung kelor

## Pendahuluan
Dislipidemia adalah sebuah kondisi abnormalitas pada  profil  lipid  dalam  darah  yang  ditandai tingginya kadar LDL dan rendahnya HDL (Linton et al., 2019). Dislipidemia merupakan salah satu faktor  risiko  utama  untuk  pengembangan  dan perkembangan  penyakit  kardiovaskular  (PKV) (Stein  et  al.,  2019).  Data World  Health Organization (WHO)  tahun  2017  menunjukkan PKV  adalah  penyebab  utama  kematian  secara global. Data Riskesdas tahun 2018 menunjukkan prevalensi  PKV  di  Indonesia  juga  mengalami peningkatan.  Prevalensi  stroke  mengalami peningkatan  yaitu  7%  (2013)  hingga  10,9% (2018),  sedangkan  prevalensi  Penyakit  Jantung Koroner (PJK) tidak mengalami penurunan sejak 2013  yaitu  sebesar  1,5%.  Prevalensi  penyakit hipertensi  menurut  diagnosis  juga  meningkat dari  tahun  2013  (25,8%)  menjadi  34,1%  pada tahun 2018 (Riskesdas, 2018).
Studi  prospektif  yang  dilakukan  oleh Brown  (2020)  menunjukkan  bahwa  tingginya kadar  LDL  dan  rendahnya  HDL  mengakibatkan endapan  kolesterol  pada  dinding  pembuluh darah. Kondisi ini menyebabkan LDL teroksidasi sehingga  meningkatkan  produksi  radikal bebas. Keadaan  tersebut  mengakibatkan  ketidak- seimbangan  antara  radikal  bebas  dengan antioksidan  endogen  yang dikenal dengan  stres oksidatif  yang  memicu  terjadinya  kerusakan jaringan  dan  menyebabkan  inflamasi.  Ketika terjadi  inflamasi,  IL-6  yang  dilepaskan  kedalam sirkulasi  menginduksi  perubahan  suhu  tubuh dan menyebabkan demam. Hal ini membuat IL-6 dianggap  sebagai  biomarker  peradangan  yang andal (Brown, 2020). Inflamasi yang berkepanjangan akan memicu penyakit kardiovaskular  (Ariyanti & Besral, 2019). Kandungan  antioksidan  yang  kuat  dalam kelor tidak hanya mampu meregulasi metabolisme  lemak  tetapi  juga  mampu menangkap  radikal  bebas  (Nile  et  al.,  2018) sehingga  dapat  melindungi  jaringan  dari inflamasi  dan  kerusakan.  Dengan  demikian, tubuh  memerlukan  asupan  yang  mengandung
antioksidan  untuk  melindungi  jaringan  dari kerusakan akibat peroksidasi lipid.
Pengobatan  dislipidemia  dapat  dilakukan melalui  pengelolaan  farmakologi  maupun  non- farmakologi  berupa  perubahan  pola  diet  serta penurunan berat badan (Erwinanto et al., 2017). Akan  tetapi,  obat-obatan  farmakologis  yang biasanya digunakan ternyata memiliki beberapa efek  samping  terhadap  penggunanya  seperti keluhan gastrointestinal, miopati hingga keluhan pada  kulit.  Hal  ini  mendorong  berbagai  pihak untuk  mengembangkan  bahan  alami  sebagai alternatif  pengobatan.  Hal  ini  didukung  dengan sifat tanaman kelor yang dapat tumbuh dimana saja sehingga mudah untuk dikembangkan. Daun kelor  kaya  akan  serat  dan  berbagai  jenis antioksidan  seperti  tanin,  saponin,  flavonoid (kuersetin dan kaemferol), asam fenol, alkaloid, β -  sitosterol,  karotenoid,  terpenoid,  dan isotiosianat  dan  vitamin  C  (Aborhyem  et  al., 2016).  Serat  larut  dalam  usus  halus  mampu mengikat  kolesterol,  lemak  dan  asam  empedu. Kandungan  antioksidan  yang  kuat  dalam  kelor tidak  hanya  mampu  meregulasi  metabolisme lemak  tetapi  juga  mampu  menangkap  radikal bebas (Nile et al., 2018). Dengan demikian  dapat melindungi  jaringan  dari  kerusakan.  Daun Moringa  oleifera memiliki  efek  anti  inflamasi secara  in  vitro  menghambat  produksi  berbagai mediator  dan  sitokin  inflamasi  (Ngurah  et  al., 2021;  Syahrial  &  Handayani,  2020)  dan menurunkan  risiko  berbagai  penyakit  kronis yang  disebabkan  oleh  stres  oksidatif  termasuk penyakit  kardiovaskular  (Zheng  et  al.,  2017; Chhikara et al., 2020).
Daun  kelor  dapat  disimpan  dalam  bentuk tepung  kering  selama  berbulan-bulan  tanpa kehilangan nilai gizi yang banyak (Isnan, 2017). Selain itu, aktifitas antioksidan dalam daun kelor kering  diketahui  masih  cukup  unggul  jika dibandingkan  dengan  beberapa  sayuran  lain (Rani et al., 2019), serta sangat signifikan dalam meningkatkan pertumbuhan dan perkembangan berat badan (Irwan et al., 2020). Pembuatan daun kelor  dalam  bentuk  tepung  dimaksudkan untuk mempermudah  pemanfaatan  daun  kelor  kering
Aceh. Nutri. J. Vol: 6, No: 2, 2021
(Isnan  &  Muin,  2017).  Karena  itu,  diperlukan penentuan dosis-respons yang tepat dari tepung daun  kelor  sebagai  bahan  pangan  fungsional. Penelitian tentang pengaruh dosis suplementasi tepung daun kelor terhadap kadar IL-6 dan kadar kolesterol  LDL  masih  sangat  jarang  dilakukan baik  pada  hewan  coba  maupun  pada  manusia, sehingga  peneliti  merasa  perlu  untuk  meneliti terkait  pengaruh  intervensi  tepung  daun  kelor dalam  beberapa  dosis  terhadap  kadar  IL-6  dan kolesterol  LDL  pada  tikus Sprague  Dawley dislipidemia .
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengukur pengaruh intervensi tepung daun kelor terhadap kadar IL-6 dan kadar kolesterol LDL pada tikus Sprague Dawley yang dikondisikan dislipidemia.

## Metode
Penelitian true  experimental dilakukan  melalui Rancangan Acak Lengkap (RAL) pre and post-test control  group  design .  Pembuatan  tepung  daun kelor, pemeliharaan hewan coba, dan pemeriksaan biokimia sampel berlangsung pada dari  bulan  Maret  sampai  April  tahun  2021, dengan lokasi adalah di Laboratorium Gizi Pusat Studi  Pangan  dan Gizi  Universitas  Hadjah Mada (UGM), Yogyakarta.
Sampel  penelitian  adalah  tikus  jantan Sprague Dawley dari laboratorium penelitian dan pengujian  terpadu  (LPPT)  Universitas  Gadjah Mada. Sampel dipilih berdasarkan kriteria inklusi dan eksklusi, dimana kriteria inklusi yaitu tikus putih Sprague Dawley jantan, dengan berat badan 150-200  gram.  berumur  8-12  minggu,    kondisi tikus  sehat  tanpa  cacat  fisik.  Tikus  dieksklusi ketika:  Tikus  mengalami  obesitas  (>300  g),  BB <150 g, Tikus tidak sehat pada periode adaptasi sebelum  diacak.  Penentuan  besar  sampel didasarkan  pada  standar  dari World  Health Organization (WHO) terkait penggunaan sampel hewan  coba  untuk  pemberian herbal  medicin e, yaitu 5 ekor/kelompok ( World Health
Organization , 2000).
Bahan  penelitian  yaitu  daun  kelor,  pakan standar  AD2,  reagen  pemeriksaan  IL-6  dan kolesterol LDL serta pakan tinggi lemak dengan komposisi  pakan  standar AD2 90%,  10%  lemak babi dan 2 ml kuning telur bebek (Andini, 2016). Alat yang digunakan dalam penelitian ini berupa cabinet  dryer,  grinder,  homogenizer  mixer, kandangan  hewan,  wadah  pakan  standar  dan minum,  sonde  lambung,  timbangan  digital,
mikropipet  eppendorf.  Pemilihan  penggunaan lemak babi untuk menginduksi tikus dislipidemia karena  tingginya  kandungan  asam  lemak  dan kolesterol  sehingga  mempercepat  proses pengkondisian dislipidemia.
Periode aklimatisasi selama 7 hari, 24 ekor tikus  menggunakan  kandang  individu  diberi pakan standar 10 g/hari dan air minum  secara ad libitum . Setelah selesai masa aklimatisasi, 24 ekor tikus  dibagi  ke  dalam  4  kelompok  untuk dikondisikan  dislipidemia  selama  14  hari.  4 kelompok tersebut terdiri atas 3 kelompok tikus (K+, P 1 , P 2 ) yang diberi pakan. tinggi lemak dan satu  kelompok  tikus  (K-)  yang  diberi  pakan standar.  Pengkondisian  dislipidemia  dilakukan melalui pemberian  pakan  tinggi  lemak selama 14  hari. Pengambilan darah tikus dilakukan pada hari  ke-15  sebanyak  3  ml  melalui plexus retroorbitalis untuk dianalisis kadar IL-6 dengan uji  ELISA  dan  kadar  kolesterol  LDL dengan metode CHOD-PAP .
Setelah  14  hari,  maka  hewan  coba  akan memasuki masa intervensi selama 28 hari. Pada periode  intervensi,  setiap  kelompok  perlakuan baik  itu  kelompok  P 1 maupun  P 2 diberikan tepung  kelor  sesuai  dosis  masing-masing  yaitu 0,1g/100g  BB  untuk  kelompok  P 1 dan  dosis 0,2g/100g  BB  untuk  kelompok  P 2 .  Selain  diberi intervensi tepung kelor, hewan coba juga diberi pakan  standar  10g  secara  ad  libitum  dan  air minum  melalui  sonde.  Kelompok  K-  dan Kelompok K+ tidak diberi intervensi tepung kelor dan  hanya  menerima  pakan  standar  dan  air minum  dalam  takaran  dan  metode  yang  sama. Setelah  selesai  masa  intervensi,  kembali dilakukan pengambilan darah tikus pada hari ke- 29. Darah diambil untuk dianalisis kadar IL-6 dan kadar kolesterol LDL dalam takaran dan metode yang sama dengan sebelumnya . Langkah pembuatan tepung kelor dimulai dari  pengumpulan  daun  kelor,  dan  pemisahan daun  kelor  dari  bagian  tanaman  lainnya.  Daun kelor  yang  digunakan  adalah  daun  segar  dan berwarna  hijau  tua  karena  memiliki  tekstur yang  sesuai  untuk  pembuatan  tepung.  Daun kelor  yang  telah  dikumpulkan  lalu  dicuci  dan dikeringkan.  Pengeringan  menggunakan  oven dengan  suhu  55°C  selama  60  menit.  Suhu pengeringan  55°C  adalah  suhu  yang  paling optimal untuk kandungan aktivitas antioksidan tinggi (Wulan, 2017).
Deskripsi  data  yang  berdistribusi  normal disajikan  dalam  nilai  rerata  dan  standar  deviasi
176 Manfaat pemberian tepung daun kelor terhadap kadar IL-6 dan kolesterol LDL …
Rupiasa et al. sedangkan  data  yang  tidak  berdistribusi  normal akan disajikan dalam nilai median dan minimum- maximum. Analisis statistik menggunakan Paired t- test untuk  melihat  perbedaan  pada  kelompok sebelum  dan  sesudah  serta  uji Wilcoxon untuk menguji beda antar kelompok perlakuan. Data IL-6 dan kolesterol LDL diuji normalitas menggunakan uji Saphiro  Wilk .  Data  berdistribusi  normal  (p  > 0,05)  dianalisis  menggunakan  uji One  Way  Anova ( α=  0,05 ), jika  ada  perbedaan  bermakna,  maka dilanjutkan  uji post  hoc  test  (α= 0,05). Data  yang berdistribusi    tidak  normal  (p  <  0,05) menggunakan  uji Kruskal  Wallis. Jika  ada perbedaan bermakna, maka dilanjutkan dengan uji Mann  Whitney  ( α =  0,05 ). Penelitian  ini  telah mendapat persetujuan dari Komite Etik Penelitian Kesehatan  Fakultas  Kedokteran  Universitas Diponegoro
Semarang
No.115/EC/H/FK- UNDIP/XI/2020, tanggal 16 Nopember 2020.

## Hasil dan Pembahasan
Penggunaan  diet  tinggi  lemak  selama  14  hari berhasil  membuat  kondisi  dislipidemia  pada hewan  coba yang  ditandai  dengan  peningkatan dan  penurunan  pada  profil  lipid  serta peningkatan  kadar  IL-6  sebagai  penanda inflamasi yang melebihi nilai normal (Arsana et al.,  2019).  Kadar  normal  IL-6  pada  tikus  yaitu <62,5  pg/mL  ( Elisa ,  2020),  sedangkan  kadar normal kolesterol LDL pada tikus adalah 7-27,2 mg/dl (Nurhidajah et al., 2019). Hasil penelitian (Tabel 1) telah menunjukkan  bahwa  terdapat  perubahan  nilai profil  lipid  pada  intervensi.  Kondisi  dilipidemia dibuktikan dari hasil pemeriksaan profil lipid dan status inflamasi hewan coba yang menunjukkan perubahan pada profil lipid dan status inflamasi melebihi nilai normal.
Tabel 1. Rata-rata profil lipid & IL-6 setelah pemberian pakan tinggi lemak Kelompok Intervensi K-Total (mg/dL) LDL (mg/dL) HDL (mg/dL) Trigliserida (mg/dL) IL-6 (pg/ml) Nilai K- 95,54 ± 2,81 23,18 ± 2,51 86,78 ± 2,95 73,04 ± 3,49 40,21 ± 2,92 Nilai K+ 192,13 ± 3,84 78,73 ± 1,23 26,26 ± 2,23 132,01 ± 2,72 79,40 ± 3,95 Nilai P 1 189,44 ± 4,73 81,24 ± 1,17 25,0 ± 1,85 133,21 ± 2,73 79,40 ± 3,78 Nilai P 2 193,89 ± 3,20 80,05 ± 1,54 26,52 ± 2,19 151,05 ± 1,87 80,95 ± 2,68 Keterangan: K-  =  Kelompok Tikus normal sehat dan diberi pakan biasa tanpa tepung daun kelor K+  =  Tikus kelompok kontrol positif diberi pakan tinggi lemak tanpa tepung daun kelor P1  =  Tikus kelompok perlakuan 1 (pakan tinggi lemak + tepung daun kelor dosis 1)
P2  =  Tikus kelompok perlakuan 2 (pakan tinggi lemak + tepung daun kelor dosis 2)
Konsumsi makanan yang tinggi kolesterol  dan  asam  lemak  jenuh  akan menyebabkan
peningkatan sintesis kolesterol  LDL  di  hepar  (Yoeantafara  & Martini,  2017)  menghambat  pembentukan reseptor LDL, sehingga jumlah kolesterol di dalam  darah  akan  terus  meningkat (Sudargo  et  al.,  2017).  Peningkatan  kadar kolesterol  dalam  darah  akan  membuat kolesterol megendap pada dinding pembuluh  darah  sehingga  menimbulkan gangguan  pada  fungsi  endotel,  dengan meningkatkan  produksi  radikal  bebas oksigen. Radikal ini menonaktifkan produksi oksida nitrat, yang memiliki sifat anti-inflamasi (Brown, 2020).
Pemaparan  radikal  bebas  dalam  sel endotel  dinding  arteri  akan  menyebabkan oksidasi  LDL.  LDL  yang  teroksidasi  memicu berbagai  reaksi  inflamasi  sehingga  akan menarik  monosit  dan  neutrofil  ke  area  lesi
dan  menyebabkan  plak  ateromatosa  makin membesar  (Santosa  &  Baharuddin,  2020). Akibatnya  terbentuk  luka  yang  menarik leukosit  ke  sekitar  dinding  pembuluh  darah sehingga  terjadi  pembentukan  sel  busa.  IL-6 kemudian  dilepas  ke  sirkulasi  oleh  neutrofil dan  makrofag  serta  sel-sel  di  lokasi  infeksi sebagai respon terhadap inflamasi. IL-6 yang dilepaskan  dapat  menginduksi  perubahan suhu tubuh di hipotalamus yang menyebabkan demam.
Karena  itulah  IL6  dianggap  sebagai biomarker peradangan yang andal (Rejeki et al.,  2019).  Inflamasi  yang  berkepanjangan akan menebalkan plak pada pembuluh darah sehingga kondisi ini akan mengganggu suplai darah di  dalam  tubuh    dan memicu  penyakit kardiovaskular  (Ariyanti  &  Besral,  2019). Kadar  kolesterol  LDL  mengalami  penurunan setelah  intervensi  tepung  daun  kelor  (Tabel 2).
Aceh. Nutri. J. Vol: 6, No: 2, 2021
Tabel 2. Rata-rata nilai kadar kolesterol LDL (mg/dL) hewan coba pada intervensi tepung kelor Kelompok Sebelum Intervensi Setelah Intervensi ∆ rerata + deviasi Nilai p K-  (mg/dL) 23,18 ± 2,51 a 24,83 ± 2,09 a 1,65 ± 0,73 0,003* K+ (mg/dL) 78,73 ± 1,23 b 80,97 ± 2,11 b 2,24 ± 1,25 0,007* P 1 (mg/dL) 81,24 ± 1,17 b 40,22 ± 2,21 c -41,02 ± 2,11 0,000** P 2 (mg/dL) 80,05 ± 1,54 b 27,39 ± 1,88 a -52,65 ± 2,20 0,000** Nilai p 1 0,000** 0,000** Keterangan: K-  =  Kelompok Tikus normal sehat dan diberi pakan biasa tanpa tepung daun kelor K+  =  Tikus kelompok kontrol positif diberi pakan tinggi lemak tanpa tepung daun kelor P1  =  Tikus kelompok perlakuan 1 (pakan tinggi lemak + tepung daun kelor dosis 1)
P2  =  Tikus kelompok perlakuan 2 (pakan tinggi lemak + tepung daun kelor dosis 2)
P-value = Paired t-test, p 1 = One Way Anova *Signifikan (<0,05), ** Sangat Signifikan (<0,001) a,b,c,d = uji Post-Hoc Bonferroni
Terdapat  perbedaan  bermakna  pada  kadar LDL  sebelum  dan  sesudah  intervensi  tepung daun  kelor  di  setiap  kelompok  (Tabel  2). Peningkatan  kadar  LDL  tertinggi  yaitu  pada kelompok  pada  K+  sedangkan  yang  terendah pada  kelompok  P 2 .    Uji One  Way  Anova menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan  bermakna pada kadar LDL antar kelompok. Uji lanjut Post- Hoc Bonferroni sebelum intervensi menunjukkan perbedaan bermakna terdapat pada kelompok K- dibanding  kelompok  K+,  P1  dan  P2.  Setelah intervensi,  ada  perbedaan  bermakna  pada  tiap kelompok kecuali pada kelompok
K- dibandingkan P 2 (Tabel 2). Pengelolaan  dislipidemia  menempatkan LDL  sebagai  target  utama  dari  konsumsi  obat penurun kolesterol (Erwinanto, 2017). Intervensi  tepung  daun  kelor  terhadap  kadar kolesterol  LDL  baik  pada  dosis  0,1  g/BB/hari maupun dosis 0,2 g/BB/hari mampu menurunkan  kadar  kolesterol  LDL,  hingga mencapai  nilai  normal.  Akan  tetapi,  penurunan lebih besar terjadi pada intervensi tepung kelor dosis  2  yaitu  0,2  g/BB/hari.  Hasil  penelitian  ini membuktikan bahwa tepung daun kelor dengan dosis  yang  lebih  tinggi  memberikan  pengaruh penurunan kadar kolesterol LDL lebih cepat.
Mekanisme penurunan kadar kolesterol LDL oleh  suplementasi  tepung  daun  kelor  dikaitkan dengan kandungan antioksidan melalui
mekanisme  penurunan  sintesis  kolesterol  serta penurunan  absorbsi  kolesterol  di  saluran pencernaan  yang  diperantarai  enzim  lipase (Yunarto  et  al.,  2019).  Kandungan  flavonoid, tanin,  saponin,  dan  β -sitosterol  berperan mengurangi  akumulasi  trigliserida  berlebih  di dalam  tubuh  melalui  mekanisme  peningkatan aktivitas  lipoprotein  lipase  sehingga  secara signifikan  mengurangi  peningkatan  trigliserida dan  kolesterol  LDL  (Helmy  et  al.,  2017) serta memberikan  pengaruh  signifikan  terhadap peningkatan kadar kolesterol HDL (Darrashcytha et al., 2017).
Selain  itu,  kandungan  serat  larut  di  usus halus  juga  dapat  membentuk  gel  yang  dapat mengikat  kolesterol,  lemak, serta  asam  empedu untuk  dikeluarkan  bersama  feses.  Akibatnya asam  empedu  di  hati  akan  berkurang.  Jika ekskresi asam empedu mengalami peningkatan, maka  penyerapan  kolesterol  dalam  tubuh  akan berkurang karena sebagian kolesterol berikatan dengan  asam  empedu  keluar  bersama  feses. Asam  empedu  yang  hilang  akan  diproduksi kembali  oleh  hati  dengan  mengambil  kolesterol dari darah sehingga mengurangi kadar kolesterol dalam darah (Pratiwi, 2016).
Penurunan kadar kolesterol LDL berdampak pada penurunan kadar IL-6. Penurunan kadar IL- 6  setelah  intervensi  tepung  daun  kelor  dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Rata-rata nilai kadar IL-6 (pg/ml) hewan coba pada intervensi tepung kelor Kelompok Sebelum Intervensi Setelah Intervensi ∆ retata + deviasi Nilai p K-  (pg/ml) 40,21 ± 2,92 a 42,22 ± 3,19 a 1,86 (1,86-2,79) 0,000** K+ (pg/ml) 79,40 ± 3,95 b 81,72 ± 3,61 b 2,32 ± 0,97 0,002* P 1 (pg/ml) 79,40 ± 3,78 b 58,49 ± 3,56 c -20,91 ± 3,36 0,000** P 2 (pg/ml) 80,95 ± 2,68 b 54,78 ± 2,01 c -26,18 ± 2,31 0,000** Nilai p 1 0,000** 0,000** Keterangan: K-  =  Kelompok Tikus normal sehat dan diberi pakan biasa tanpa tepung daun kelor K+  =  Tikus kelompok kontrol positif diberi pakan tinggi lemak tanpa tepung daun kelor P1  =  Tikus kelompok perlakuan 1 (pakan tinggi lemak + tepung daun kelor dosis 1) P2  =  Tikus kelompok perlakuan 2 (pakan tinggi lemak + tepung daun kelor dosis 2)
P-value = Paired t-test, p 1 = One Way Anova *Signifikan (<0,05), ** Sangat Signifikan (<0,001) a,b,c,d = uji Post-Hoc Bonferroni
178 Manfaat pemberian tepung daun kelor terhadap kadar IL- 6 dan kolesterol LDL …
Rupiasa et al.
Hasil analisis statistik Paired t-test telah menunjukkan  perbedaan  bermakna  pada kadar  IL-6  sebelum  dan  sesudah  intervensi tepung  daun  kelor  di  setiap  kelompok. Peningkatan  kadar  IL-6  tertinggi  yaitu  pada kelompok  pada  K+  sedangkan  yang  terendah pada  kelompok  P 2 .    Uji One  Way  Anova menunjukkan bahwa ada perbedaan bermakna pada kadar LDL antar kelompok. Uji lanjut Post-Hoc Bonferroni sebelum intervensi menunjukkan  perbedaan  bermakna  terdapat pada kelompok K- dibanding kelompok K+, P1 dan  P2.  Setelah  intervensi,  ada  perbedaan bermakna  pada  tiap  kelompok  kecuali  pada kelompok P 1 dibandingkan P 2 (Tabel 3). Intervensi  tepung  daun  kelor  terhadap kadar IL-6 baik pada dosis 0,1 g/BB/hari maupun dosis  0,2  g/BB/hari  sama-sama  menurunkan kadar  IL-6  hingga  mencapai  nilai  normal.  Akan tetapi,  hasil  uji  lanjut Post-Hoc  Bonferroni menunjukkan  jika  dibandingkan  dosis  1  dan dosis  2  tidak  ada  perbedaan  yang  signifikan artinya setiap dosis memberikan efek yang sama.
Penurunan kadar IL-6 setelah intervensi tepung daun kelor dikaitkan dengan senyawa aktif  flavonoid  dan  vitamin  C  pada  kelor. Senyawa  ini  dapat  menghambat  sekresi sitokin proinflamasi. Flavonoid dapat menstabilkan Reactive  Oxygen  Species (ROS) dengan cara bereaksi dengan senyawa reaktif dari  radikal,  sehingga  radikal  menjadi  inaktif dan  inflamasi  dapat  menurun  (Mataheru., 2020)  dengan  demikian,  dapat  melindungi struktur  sel.    Manfaat  lain  flavonoid  yaitu bersama  dengan  vitamin  C  mencegah terjadinya oksidasi LDL (Wibawa et al., 2020). Kandungan  beta  sitosterol  pada  daun  kelor juga  berperan  dalam  metabolisme  lemak dengan  mekanisme  peningkatan  ekskresi kolesterol  yang  dibuang  dalam  bentuk  asam empedu,  peningkatan  kadar  kolesterol  HDL, dan  penurunan  penyerapan  kembali  asam empedu serta konversinya . menjadi kolesterol (Wahyu et al., 2019).
Penelitian  ini  dapat  dijadikan  acuan pengembangan  pangan  fungsional,  akan  tetapi dosis yang digunakan dalam penelitian ini masih menggunakan  batas  dosis  toksisitas  untuk hewan  coba. Untuk itu, masih diperlukan  studi lebih lanjut pada standarisasi tepung daun kelor untuk  pengembangan  pangan  fungsional berdasarkan  dosis  yang  dianjurkan  dalam penelitian ini.

## Kesimpulan
Pemberian  tepung  daun  kelor secara  bermakna dapat menurunkan kadar IL-6 dan kolesterol LDL tikus  Sprague  Dawley  yang  dikondisikan dislipidemia.  Akan  tetapi,  jika  dibandingkan penurunan  IL-6  pada  dosis  1  dan  dosis  2  tidak berbeda  signifikan  yang  berarti  setiap  dosis memberikan efek yang sama.  Intervensi tepung daun  kelor  terhadap  kadar  kolesterol  LDL  baik pada  dosis  0,1  g/BB/hari  maupun  dosis  0,2 g/BB/hari mampu menurunkan kadar kolesterol LDL dimana penurunan lebih besar terjadi pada intervensi dosis 2 yaitu 0,2 g/BB/hari.
Hasil  penelitian  ini  dapat  dijadikan  acuan untuk  mengembangkan  pangan      fungsional berbahan      baku      tepung  daun      kelor    untuk memenuhi  kebutuhan  gizi  dan  pencegahan penyakit berkaitan dengan kelainan metabolisme lipid.  Penelitian  selanjutnya  dapat  melakukan analisis kandungan gizi dalam tepung daun kelor.

## Acknowledgement
Tim peneliti pada kesempatan ini mengucapkan terimakasih  kepada  semua  pihak  yang  telah terlibat  dalam  penelitian  ini  khususnya  bagi pengelola  Pusat  Antar  Universitas  (PAU) Universitas Gadjah Mada (UGM) Yogyakarta, dan tim laboratorium yang telah membantu jalannya penelitian ini dari awal hingga akhir.

## References
Aborhyem,  S.,  Ismail,  H.,  Agamy,  N.,  &  Tayel,  D. (2016). Effect of moringa oleifera on lipid profile  in  rats. Journal  of  High  Institute  of Public Health , 46 (1), 8 – 14. https://doi.org/10.21608/jhiph.2016.202 01
Andini,  A.  N.,  &  Ardiaria,  M.  (2016).  Pengaruh pemberian kombinasi minyak rami dengan minyak  wijen  terhadap  kadar  trigliserida pada  tikus  Sprague  Dawley  dislipidemia. Journal of Nutrition College , 5 (4), 555 – 564. https://doi.org/10.14710/jnc.v5i4.16472
Ariyanti,  R.,  &  Besral,  B.  (2019).  Dyslipidemia associated with hypertension increases the risks  for  coronary  heart  disease:  A  case- control  study  in  Harapan  Kita  hospital,
National  Cardiovascular  Center,  Jakarta. Journal of Lipids , 2019 , 1 – 6.
Aceh. Nutri. J. Vol: 6, No: 2, 2021
https://doi.org/10.1155/2019/2517013 Arsana, P. M., Rosandi, R., Manaf, A., Budhiarta, A., &  Hikmat  Permana.  (2019).  Pedoman pengelolaan dislipidemi di Indonesia 2019. In Pb. Perkeni (p. 9). https://doi.org/10.1002/bit.22430 Balitbangkes  RI.  (2018).  Hasil  utama  Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas). In Kementerian Kesehatan Republik Indonesia .
Chhikara, N., Kaur, A., Mann, S., Garg, M. K., Sofi, S. A.,  &  Panghal,  A.  (2020).  Bioactive compounds, associated health benefits and safety  considerations  of  Moringa  oleifera
L.:  an  updated  review. Nutrition  &  Food Science , 51 (2), 255 – 277. https://doi.org/10.1108/NFS-03-2020-
0087 Darrashcytha, P. P., Shiva, M. R., & Priyambodo, S. (2017). Pengaruh pemberian ekstrak daun kelor  (Moringa  oleifera)  terhadap  kadar trigliserida  dan  high  density  lipoprotein pada  tikus  putih  (Rattus  norvegicus) dislipidemia. Jurnal Kedokteran Universitas Mataram , 6 (3.1), 50 – 58. Erwinanto.  (2013). Pedoman  tatalaksana dislipidemia (1st  ed.).  (Perhimpunan Kardiovaskular Dokter ), Spesialis Indonesia. Erwinanto.  (2017). Panduan  tata  laksana dislipidemia . Perhimpunan Dokter Spesialis Kardiovaskular Indonesia. Ferreira,  R.,  Bernardino,    Liliana,  &  Passani,
Maria B. (2020). Quantikine ELISA Rat IL-6 Immunoassay . USA R&D Systems, Inc.
Helmy, S. A., Morsy, N. F. S., Elaby, S. M., & Ghaly,
M.  A.  A.  (2017).  Hypolipidemic  effect  of moringa  oleifera  lam  leaf  powder  and  its extract in diet-induced hypercholesterolemic  rats. Journal  of Medicinal Food , 20 (8), 755 – 762. https://doi.org/10.1089/jmf.2016.0155
Irwan, Z., Salim, A., & Adam, A. (2020). Pemberian cookies  tepung  daun  dan  biji  kelor terhadap berat badan dan status gizi anak balita  di  wilayah  kerja  Puskesmas  Tampa Padang. AcTion:  Aceh  Nutrition  Journal , 5 (1), 45 – 54. http://dx.doi.org/10.30867/action.v5i1.1
98
Isnan,  W.,  &  Muin,  N.  (2017).  Ragam  manfaat tanaman  kelor  (Moringa  oleifera  Lamk) bagi masyarakat. Buletin Eboni , 14 (1), 63 – 75.
https://doi.org/10.20886/buleboni.5096 Linton, M. F., Yancey, P. G., Davies, S. S., Jerome, W. G., Linton, E. F., Song, W. L., Doran, A. C., & Vickers, K. C. (2019). The role of lipids and lipoproteins in atherosclerosis (Endotext [). South  Dartmouth  (MA):  MDText.com,  Inc. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/book s/NBK343489/ Mataheru,  J.  S.,  &  Unitly,  A.  J.  A.  (2020).  Kajian pemberian  ekstrak  etanol  rumput  kebar (Biopythum Petersianum Klotzcsh) terhadap diferensiasi leukosit tikus rattus novergicus  terpapar  asap  rokok. Kalwedo Sains , 1 (2), 74 – 83.
Nandarningtiyas  Laras  Pratiwi,  Hardoko,  E.  W. (2016). The effect of crude extract alginate Sargassum  crassifolium  powder  for cholesterol  total  level  on  rats  (Rattus norvegicus). Journal  of  Innovation  and Applied Technology , 2 (2), 309 – 317. Ngurah, G., Candra, H., Adnyana, I. M., & Wijaya, P. (2021).  Molecular  docking  kaempferol sebagai  antiinflamasi  pada  aterosklerosis secara  in  silico  molecular  docking kaempferol  as  anti-inflammatory  in atherosclerosis  in  silico. Jurnal  Ilmiah Medicamento , 7 (1), 13 – 18. https://doi.org/10.36733/medicamento.v
7i1.1497
Nile,  S.  H.,  Keum,  Y.  S.,  Nile,  A.  S.,  Jalde,  S.  S.,  &
Patel,  R.  V.  (2018).  Antioxidant,  anti- inflammatory,  and  enzyme  inhibitory activity  of  natural  plant  flavonoids  and their  synthesized  derivatives. Journal  of Biochemical  and  Molecular  Toxicology , 32 (1), e22002. https://doi.org/10.1002/jbt.22002
Nurhidajah,  Astuti,  R.,  &  Nurrahman.  (2019). Black rice potential in HDL and LDL profile in sprague dawley rat with high cholesterol diet. IOP  Conference  Series:  Earth  and Environmental  Science , 292 (1),  012019. https://doi.org/10.1088/1755- 1315/292/1/012019
Pirahanchi,  Y.,  Marsidi,  J.  L.,  &  Brown,  K.  N.
(2020). Physiology,  Endothelial  Derived
Relaxation  Factor  (EDRF) .  StatPearls Publishing.
https://europepmc.org/article/nbk/nbk5
37010
Rani,  K.  C.,  Ekajayani,  N.  I.,  Darmasetiawan,  N. kresna,  &  Dewi,  A.  D.  rosita.  (2019).
Kandungan  nutrisi  tanaman  kelor.  In
180 Manfaat pemberian tepung daun kelor terhadap kadar IL-6 dan kolesterol LDL …
Rupiasa et al.
Journal  of  Physics  A:  Mathematical  and Theoretical (Vol. 44, Issue 8).
Rejeki, S., Patni, N. M. D., & Kuswardhani, R. A. T. (2019).  Korelasi  albumin  serum  dan interleukin-6  (IL-6)  serum  pada  pasien geriatri  di  RSUP  Sanglah  Denpasar  Bali Indonesia. Medicina , 50 (2),  396 – 399.
https://doi.org/10.15562/medicina.v50i2 .301 Santosa, W. N., & Baharuddin, B. (2020). Penyakit jantung koroner dan antioksidan. KELUWIH: Jurnal Kesehatan Dan Kedokteran , 1 (2), 98 – 103. https://doi.org/10.24123/kesdok.V1i2.25
66
Stein, R., Ferrari, F., & Scolari, F. (2019). Genetics, dyslipidemia,  and  cardiovascular  disease: New  insights. Current  Cardiology  Reports ,
21 (8), 1 – 12. https://doi.org/10.1007/s11886-019-
1161-5
Sudargo, T., Astuti, I., Sholikhah, E. N., Amelia, R., Maknunah,  L.,  Risnhukathulistiwi,  M.,  & Pranoto,  Y.  A.  (2017).  The  effect  of  kersen juice on lipid profile of Spargue Dawley rats: A randomized controlled trial. Asian Journal of  Clinical  Nutrition , 9 (3),  97 – 103.
https://doi.org/10.3923/AJCN.2017.97.103
Syahrial,  S.,  &  Handayani,  M.  (2020).  Pengaruh waktu milling dengan ukuran nano serbuk daun  kelor  (Moringa  oleifera)  dan hubunganya dengan bioavailabilitas secara in-vitro dan in-vivo. AcTion: Aceh Nutrition Journal , 5 (2), 121 – 129. https://doi.org/10.30867/action.v5i2.213
Wahyu, S., Arsal, A. S. F., & Maharani, I. C. (2019).
Efektivitas  ekstrak  daun  kelor  (Moringa oleifera)  terhadap  penurunan  kadar kolesterol  total  pada  tikus  putih  (Rattus novergicus). Green  Medical  Journal , 1 (1), 97 – 110. https://doi.org/10.33096/gmj.v1i1.24 WHO. (2000). General Guidelines for Methodologies on Research and Evaluation of  Traditional  Medicine  World  Health Organization .
Wibawa,  J.  C.,  Wati,  L.  H.,  &  Arifin,  M.  Z.  (2020). Mekanisme  vitamin  C  menurunkan  stres oksidatif setelah aktivitas fisik. JOSSAE : Journal of  Sport  Science  and  Education , 5 (1),  57. https://doi.org/10.26740/jossae.v5n1.p57-63
Wulan,  D.  K.,  Noviar,  H.  dan  Y.  Z.  (2017). Pemanfaatan  daun  katuk  (Sauropus Adrogynus)  dalam  pembuatan  teh  herbal dengan  variasi  suhu  pengeringan. JOM FAPERTA, P. , 4 (2), 101 – 109.
Yoeantafara,  A.,  &  Martini,  S.  (2017).  Pengaruh pola  makan  terhadap  kadar  kolesterol.
Jurnal MKMI , 13 (4), 304 – 309.
Yunarto, N., Aini, N., Oktoberia, I. S., Sulistyowati, I.,  &  Kurniatri,  A.  A.  (2019).  Aktivitas antioksidan serta penghambatan HMG CoA dan  lipase  dari  kombinasi  ekstrak  daun binahong-rimpang  temu  lawak. Jurnal Kefarmasian  Indonesia , 9 (2),  89 – 96.
https://doi.org/10.22435/jki.v9i2.1930
Zheng, J., Zhou, Y., Li, S., Zhang, P., Zhou, T., Xu, D.
P.,  &  Li,  H.  Bin.  (2017).  Effects  and mechanisms of fruit and vegetable juices on cardiovascular  diseases. International Journal  of  Molecular  Sciences , 18 (3),  555. https://doi.org/10.3390/ijms18030555