Jurnal Perikanan dan Kelautan
p – ISSN 2089 – 3469
Volume 13 Nomor 2. Desember 2023
Halaman :  129 – 138 http://dx.doi.org/10.33512/jpk.v13i2.22352

## POTENSI ANTIBAKTERI EKSTRAK SPONS LAUT KOLEKSI PERAIRAN GRAND WATU DODOL BANYUWANGI
Antibacterial Potential of Sponge Extract from Grand Watu Dodol Banyuwangi Water Collection
Dian Sari Maisaroh 1* , Nor Sa'adah 2 , Yahya Abdillah Al Hanif 1
1 Program Studi Ilmu Kelautan, Universitas Islam Negeri Sunan Ampel, Surabaya, Indonesia, Indonesia
2 Departemen Teknologi Rekayasa Operasi Kapal, Politeknik Bumi AKPELNI, Semarang, Indonesia
* Corresponding author, e-mail : maisaroh.ds@gmail.com
Diterima : 17 Oktober 2023 / Disetujui : 22 Januari 2024

## ABSTRACT
This study aims to the antibacterial activity of sea sponge extract  from the waters of  Grand  Watu  Dodol  Banyuwangi  against  the  pathogenic  bacteria  Staphylococcus aureus,  Vibrio  parahaemolyticus,  Escherichia  coli  and  Escherichia  coli  MDR  (Multi Drug Resistant). This study uses an experimental laboratory method. The samples  found were 3 sponges and macerated using methanol solvent with 3 repetitions. The results of the sponge extract paste were tested by disc diffusion method against pathogenic bacteria S.  aureus,  V.  parahaemolyticus,  E.  coli  and  E.  coli  MDR.  Antibacterial  test  using  a concentration  of  10  mg/ml  with  2  repetitions.  The  extraction  results  obtained  from  the four samples only 3 that can produce bioactive compound extracts. Antibacterial activity against  pathogenic  bacteria  S.  aureus  produced  the  largest  inhibition  zone  obtained  by GWD  B  with  an  average  of  8.89  mm.  Pathogen  E.coli,  the  largest  inhibition  zone obtained  by  GWD  B  with  an  average  of  8.90  mm.  Pathogen  V.  parahaemolyticus  the largest inhibition zone obtained by GWD A produced an inhibition zone with an average of 7.30 mm. Pathogen E.coli MDR produced the largest inhibition zone obtained by GWD A with the largest average inhibition zone of 7.26 mm.
Keywords : antibacterial, Banyuwangi, extract, sponges

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak  spons  laut dari  perairan  Grand  Watu  Dodol  Banyuwangi  terhadap  bakteri  patogen Staphylococcus aureus,  Vibrio  parahaemolyticus,  Escherichia  coli dan Escherichia  coli MDR  ( Multi Drug  Resistant ).  Penelitian  ini  menggunakan  metode eksploratif untuk  mendapatkan sampel  spons  baru  sebagai  antibakteri.  Sampel  yang  ditemukan  berjumlah  4  spons  dan dimaserasi menggunakan pelarut metanol dengan pengulangan 3 kali. Hasil pasta ekstrak spons  diujikan  dengan  metode  difusi  cakram  terhadap  bakteri  patogen S.  aureus,  V. parahaemolyticus, E. coli dan E. coli MDR. Uji antibakteri menggunakan konsentrasi 10 mg/ml dengan pengulangan 2 kali. Hasil  ekstraksi  yang diperoleh dari keempat sampel hanya 3 yang dapat menghasilkan ekstak senyawa bioaktif. Aktivitas antibakteri terhadap bakteri patogen S. aureus menghasilkan zona hambat paling besar yaitu GWD B dengan rata-rata 8,89 mm. Patogen E.coli, zona hambat paling besar yaitu GWD B dengan rata- rata  8,90  mm.  Patogen V.  parahaemolyticus zona  hambat  paling  besar  yaitu  GWD  A menghasilkan zona hambat dengan rata-rata 7,30 mm. Patogen E.coli MDR menghasilkan
zona hambat paling besar yaitu GWD A dengan rata-rata zona hambat paling besar 7,26 mm.
Kata kunci : antibakteri, Banyuwangi, ekstrak, spons

## PENDAHULUAN
Bahan alam laut menjadi salah satu alternatif  sumber obat antibiotik baru atau  agen  antibakteri  untuk  mengatasi  penyakit  infeksi  bakteri  yang  saat  ini menjadi  masalah  karena  sifat  resistensinya  (tahan  terhadap  obat  antibiotik  yang beredar di  pasaran).  Salah satu  jenis bahan  alam laut  yang banyak mengandung substansi  bioaktif  antibakteri  adalah  spons  laut  (Josua et  al .  2021).  Senyawa bioaktif  pada  spons  mencapai  45%,  senyawa  ini  mampu  mencegah  dan menghambat  pertumbuhan  bakteri  patogen  (Maisaroh et  al. 2023).  Menurut Aristyawan et  al .  (2017),  spons  merupakan  biota  yang  memiliki  kandungan senyawa  aktif  lebih  banyak  dibanding algae atau  tumbuhan  darat.  Di  antara invertebrate laut  yang  lain,  spons  menduduki  tempat  teratas  sebagai  sumber substansi aktif.
Keanekaragaman  hayati  yang  tinggi  menyebabkan  terjadinya  kompetisi ruang bagi  biota laut  yang ada di  ekosistem terumbu karang. Bagi  hewan-hewan sessile yang  menempel  pada  subtrat  membutuhkan  kemampuan  kimiawi  untuk menambah ruang hidup  di habitatnya. Hal ini berlaku bagi spons  yang tinggal di ekosistem  terumbu  karang.  Bagaimanapun,  hal  ini  menjadi  respon  adaptasi  yang dilakukan  oleh  spons  untuk  dapat  bertahan  hidup  di  wilayah  yang  ekstrim (keanekaragaman  hayati  yang  tinggi).  Cara  adaptasi  spons  ini  memberikan hipotesis mengenai metabolit sekunder yang dapat dihasilkan spons. Berdasarkan Mohamad et  al. (2017)  metabolit  sekunder  diproduksi  oleh  biota  laut  (spons) untuk  menghadapi  seleksi  alam  sehingga  menghasilkan  respon  spesifik  terhadap lingkungan.  Hasil  dari  metabolit  sekunder  spons  ini  dapat  dimanfaatkan  menjadi produk alam potensial sebagai bahan baku obat, salah satunya sebagai antibiotik.
Pada kegiatan World Antimicrobial Awareness Week yang
diselenggarakan  di  Bali,  24  Nopember  2021  lalu,  disampaikan  bahwa  resistensi bakteri  terhadap  antibiotik  menjadi  salah satu  10 ancaman kesehatan masyarakat terbesar  di  dunia  menurut  WHO  dan  pada  tahun  2050  telah  diprediksi  tingkat kematian  yang disebabkan oleh resistensi antimikroba salah satunya dikarenakan bakteri  akan  mencapai  10  juta  jiwa  yang  mengakibatkan  kerugian  ekonomi mencapai US$ 100 miliar (Adisasmito, 2021). Maka dari itu, pencarian agen baru antibakteri dari spons menjadi topik penelitian yang menarik untuk dilakukan.
Spons  yang  hidup  di  perairan  sekitar  Perairan  Grand  Watu  Dodol Banyuwangi  mengalami  tekanan  kompetisi  ruang  antar  spesies,  maka  senyawa aktif  yang  dihasilkan  juga  akan  semakin  kompleks  dan  berpotensi  untuk dimanfaatkan sebagai  agen antibakteri  patogen.  Tujuan dari penelitian ini  adalah mengeksplorasi  keberadaan  spons  di  ekosistem  terumbu  karang  perairan  Grand Watu  Dodol  Banyuwangi  sebagai  agen  antibakteri  dan  mengetahui  bagaimana aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  spons  laut  terhadap  beberapa  bakteri  patogen yaitu Staphylococcus aureus , Vibrio parahaemolyticus dan Escherichia coli.

## METODE PENELITIAN
Pengambilan sampel dilakukan di Perairan Grad Watu Dodol Banyuwangi pada kedalaman 10 meter pada Bulan Maret  2023.  Sampel  yang diambil  dibawa ke  Laboratorium  Integrasi  UIN  Sunan  Ampel  untuk  dilakukan  ekstraksi  dan  uji antibakteri.  Penelitian  ini  menggunakan  alat  erlemenyer,  corong,  kertas  saring, gunting,  jarum  ose,  rotary  evaporator,  tabung  reaksi,  bunsen,  lemari  inkubasi, pipet tetes,  kertas  cakram,  cawan petri, penjepit  pinset,  jangka sorong  dan bahan diantaranya  bakteri Staphylococcus  aureus, bakteri Escherichia  coli, bakteri Vibrio  parahe dan  bakteri E.  coli MDR,  metanol  96%,  media  Zobell  marine 2261E, Chloramfenicol, aquadest, alkohol Kegiatan  penelitian  dimulai  dengan  skrining  spons  metode  eksploratif.
Metode  eksploratif  adalah  metode  yang  bertujuan  untuk  menggali  secara  luas tentang  sebab  atau  hal  yang  mempengaruhi  terjadinya  sesuatu  (Arikunto,  2016). Metode  ekstraksi  dan  uji  antibakteri  menggunakan  metode  eksperimental laboratoris,  yaitu  suatu  penelitian  yang  dimaksudkan  untuk  menyelidiki kemungkinan  sebab  akibat  dengan  cara  mengenalkan  kepada  satu  atau  lebih kelompok  eksperimental  dan  satu  atau  lebih  kondisi  perlakuan  serta membandingkan  hasilnya  dengan  satu  atau  lebih  kontrol  yang  tidak  dikenai kondisi  perlakuan  (Suryabrata,  2014).  Selanjutnya  data  penelitian  berupa  zona hambat dan karakterisasi struktur dianalisis secara deskriptif.
Tahap  persiapan  meliputi  survey  pendahuluan,  inventarisasi  alat  dan bahan.  Pengambilan  sampel  spons  berdasarkan  metode  yang  digunakan  untuk pengambilan  sampel  biota  laut  menurut  Sa’adah  (2020)  dan  Novitasari et  al.
(2023), yaitu sampel spons  yang diambil dari perairan dimasukkan ke plastik zip lock dan  disimpan  dalam cool  box kemudian  dibawa  ke  Laboratorium  Integrasi UIN  Sunan  Ampel  untuk  dilakukan  ekstraksi  dan  uji  antibakteri.  Sampel  spons yang  didapatkan  diberikan  kode  untuk  memisahkan  sampel  satu  dengan  yang lainnya.  Hal  ini  dimaksudkan  untuk  memudahkan  proses  perlakuan  mulai  dari maserasi sampai dengan uji antibakteri serta identifikasi jenis spons. Tiga sampel spons  yang  didapatkan  diberikan  kode  GWD  A,  GWD  B  dan  GWD  C  dengan ciri–ciri visual tercantum pada Tabel 1.
Tabel 1. Ciri – ciri sampel spons yang didapatkan di Perairan GWD, Banyuwangi
Nama Sampel Keterangan GWD A Bentuk  pertumbuhan  seperti  tabung  dengan  ukuran  kecil, berwarna cokelat tua dengan persebaran oskula teratur. Tekstur halus dengan pori-pori halus. Konsistensi soft . GWD B Warna orange dengan pori-pori halus dan oskula tidak tampak. Konsistensi soft . GWD C Permukaan  bergelombang  dan  beralur,  dengan  perserbaran oskula yang tidak tampak. Warna hitam, konsistensi padat.
Prosedur selanjutnya adalah melakukan ekstraksi  sampel spons. Ekstraksi menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  metanol  selama  3x24  jam (Wijayanti et al .  2016).  Sampel  akan  ditimbang  dahulu  kemudian  direndam  di dalam  erlenmeyer  dengan  metanol  yang  telah  diukur  volumenya.  Perendaman berfungsi  untuk  menyerap  senyawa-senyawa  yang  ada  pada  spons  baik  yang bersifat  polar  maupun  nonpolar.  Maserasi  dilakukan  sebanyak  3  kali  perulangan
yang  tiap  perulangan  dilakukan  penyaringan  dengan  bantuan  corong buchner
(Sukmaningrum et  al .  2021) . Kemudian  memindahkan  filtrat  sampel  ke round bottom flask kemudian menguapkannya dengan suhu 37 o C menggunakan rotary evaporator hingga  semua  pelarut  teruapkan  (Trianto et  al. ,  2011).  Setelah  itu, menimbang ekstrak dengan timbangan analitik.
Tahapan  selanjutnya  adalah  uji  ekstrak  spons  terhadap  bakteri  patogen S. aureus, V. parahaemolyticus dan E. coli dengan metode difusi cakram. Penelitian ini  menggunakan  media  padat  Zobell  2216E  yang  digunakan  untuk  skrining antibakteri. Media Zobell 2216E direkomendasikan untuk pembiakan, isolasi dan perhitungan  bakteri.  Media  ini  dapat  digunakan  untuk  bakteri  air  laut  maupun bakteri  air  tawar.  Tahapan  peremajaan  bakteri  patogen  menggunakan  media Zobell  2216E  dalam  bentuk  cair.  Uji  aktivitas  antibakteri  ini  ditentukan  dengan metode  difusi  agar/cakram  menggunakan  media  Zobell  2216E  (Dhinakaran  dan Lipton, 2012). Urutan prosedur uji secara urut yaitu sterilisasi alat, persiapan dan pembuatan media Zobell 2216E, penyegaran bakteri uji dan uji skrining.
Sterilisasi  dilakukan  dengan  menggunakan autoclave .  Proses  sterilisasi untuk  alat-alat  yang  berbahan  kaca  sebelum  digunakan  dicuci  dahulu  kemudian dibungkus kertas dan dimasukkan ke autoclave pada suhu 121 o C dengan tekanan 1,5  atm  selama  20  menit  dan  dikeringkan  dengan  oven.  Sterilisasi  untuk  media dilakukan dengan cara memasukkan media ke autoclave pada suhu 121 o C dengan tekanan  1,5  atm  selama  15  menit.  Sedangkan  jarum  ose,  pinset, diglasky  glass disterilkan  dengan  cara  dipijarkan  di  atas  bunsen  atau  di  bawah  lampu  UV (Sa’adah, 2020).
Media  yang  harus  disiapkan  yaitu  media  cair  Zobell  2216E  dan  media padat Zobell 2216E. Larutan media dipanaskan sambil diaduk dalam beaker glass menggunakan magnetic  stirer hingga  homogen,  kemudian  media  disterilisasi menggunakan autoclave (Prayitno,  2018).  Bakteri  patogen E.  coli dan S.  aureus yang  akan  digunakan  sebagai  bakteri  uji  harus  disegarkan  ke  dalam  media  cair Zobell  2216E.  Penyegaran  dilakukan  dengan  cara  mengambil  1  ose  masing- masing  bakteri  dari  bakteri  stok/koleksi  bakteri,  kemudian  ditanam  pada  media cair Zobell 2216E steril. Selanjutnya bakteri yang ada di media cair Zobell 2216E dihomogenkan  dengan  menggunakan vortex .  Inkubasi  dilakukan  selama  24  jam pada  suhu  37 o C.  Setelah  24  jam  didapatkan  bakteri  uji  yang  langsung  dapat digunakan untuk pengujian aktivitas antibakteri (Napitulu et al . 2019).
Uji  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  yang  berbeda  dapat  menggunakan metode difusi-cakram.  Bakteri uji ( S. aureus , V. parahaemolyticus, E.coli dan E. coli MDR) yang telah disegarkan, diinokulasikan pada media padat Zobell 2216E sebanyak  1%  (100  µl/100  ml)  lalu  diratakan  menggunakan diglasky  glass . Konsentrasi  ekstrak  spons  yaitu  10mg/ml.  Kontrol  negatif  menggunakan paper disc yang  ditetesi  MeOH. Paper  disc yang  sudah  ditetesi  ekstrak  diletakkan  di dalam cawan petri berisi E. coli dan S. aureus . Setelah itu, diinkubasi pada suhu 37 o C  selama  18-24  jam.  Zona  hambat  yang  terbentuk  diukur  dengan  jangka sorong (Widyowati et al . 2023).
Analisis  data  rendemen  menggunakan  rumus  menurut  Wahyuni  dan Widjanarko (2015) yaitu:
% Rendemen =
x 100%
Analisis  zona  hambat  diukur  secara  kuantitatif  berdasarkan  zona  bening yang  terbentuk  di  sekitar paper  disk menggunakan  jangka  sorong  dengan pengulangan perhitungan sebanyak 3 kali.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  rendeman  ekstrak  pasta  spons  diukur  berdasarkan  rumus  rendemen yang disajikan dalam Tabel 2.
Tabel 2. Persentase berat ekstrak dan residu
Kode Sampel Maserasi Ekstrak (Rendemen) Residu sampel (gr) (gr) (%) (gr) (%) GWD-A 60,2 0,2788 0,46 59,92 99,54 GWD-B 47 0,2540 0,54 46,75 99,46 GWD-C 46,4 0,1268 0,27 46,27 99,73
Spons  yang  menghasilkan  persentase crude  extract paling  banyak  adalah spons  kode  GWD-B  yaitu mendapatkan 0,54%. Residu  paling banyak dihasilkan oleh spons kode GWD-C. Tinggi rendahnya nilai rendemen menunjukkan jumlah ekstrak  yang  dihasilkan  suatu  sampel.  Selain  itu  jumlah  rendemen  berhubungan dengan  senyawa  aktif  yang  terkandung  didalamnya.  Hal  ini  sesuai  dengan Dewatisari et  al .  (2018)  bahwa  apabila  jumlah  rendemen  rendah  maka  ekstrak yang dihasilkan semakin sedikit dan kandungan senyawa aktif juga lebih sedikit. Pada penelitian ini sampel spons yang digunakan bervariasi antara 35,8  –
60,2 gram untuk direndam menggunakan pelarut metanol. Metanol dipilih karena menurut Savitri et al . (2017) ekstrak yang dihasilkan dari rendaman spons dengan metanol  lebih  pekat  dibandingkan  menggunakan  pelarut  lain  yang  memiliki kepolaran  di  bawah  metanol.  Metanol  merupakan  pelarut  universal  yang  dapat melarutkan  senyawa  yang  bersifat  polar  maupun  non  polar  sehingga  kandungan bioaktif pada sampel spons dapat terserap.
Spons  dihancurkan  bertujuan  untuk  memecah  dinding  sel,  memperlebar luas  permukaan  sehingga  mempermudah  pelarut  masuk  kedalam  spons  dan melarutkan  senyawa  bioaktif  (Jones  dsn  Kinghorn,  2006).    Hal  tersebut  yang menyebabkan metabolit sekunder akan terlarut. Tahap maserasi dilakukan dengan merendam  sampel  dalam  pelarut  pada  suhu  ruang  selama  1  x  24  jam.  Selama proses  perendaman  berlangsung  dilakukan  beberapa  kali  pengadukan (Sukmaningrum et al . 2021).
Uji aktivitas antibakteri menggunakan ekstrak pasta spons sampel GWD A terhadap 4 bakteri patogen yaitu S. aureus , V. parahaemolyticus, E.coli dan E. coli MDR  disajikan  pada  Tabel  3.  Hasil  pengujian  difusi  cakram  sampel  GWD  A ditunjukan  pada  Tabel  3,  dimana  pada  pengujian  terhadap  bakteri S.  aureus menghasilkan  nilai  zona  hambat  dengan  nilai  rata-rata  7,87  mm.  Zona  hambat yang dihasilkan jika dibandingkan dengan ketentuan dari Davis dan Stout (1971) dalam Rastina et al. (2015), maka masuk dalam kategori sedang . Kontrol positif berupa kloramfenikol sebagai tolak ukur kemampuan ekstrak dalam menghambat pertumbuhan  bakteri.  Kontrol  positif  kloramfernikol  menghasilkan  nilai    zona hambat  rata-rata  25,11  mm  kategori  kuat.    Hasil  pengujian  difusi  cakram  pada bakteri E. coli menghasilkan zona hambat 7,91 mm, kontrol positif rata-rata 25,21 mm. Uji  difusi  cakram  terhadap bakteri V. parahaemolyticus menghasilkan  zona
hambat  rata-rata  7,30  mm.  Uji  difusi  cakram  terhadap  bakteri E.coli  MDR menghasilkan  nilai  zona  hambat  rata-rata  7,26  mm.  Berdasarkan  Tabel  3,  hasil pengujian  zona  hambat  sampel  GWD  A  terhadap  bakteri E.  coli menghasilkan zona hambat paling besar yaitu 7,91 mm dan zona hambat paling kecil pada E.coli MDR dengan rata-rata 7,26 mm. Hal ini sesuai penelitian Davis dan Stout (1971) dalam Rastina et  al .  (2015),  ukuran  zona  hambat  <5  mm  dikategorikan  lemah  , zona  hambat  berkisar  5-10  mm  dikategorikan  sedang,  zona  hambat  >10  mm dikategorikan  kuat  dan  zona  hambat  berukuran  20-30  mm  dikategorikan  sangat kuat.
Tabel 3. Hasil pengukuran zona hambat spons GWD A
Ekstrak Spons GWD A Kontrol Positif Cloramfenikol Uji Zona Hambat Rata-Rata ± SD (mm) Interpretasi Daya Hambat Rata-Rata ± SD (mm) Interpretasi Daya Hambat S. aureus 7,87 ± 0.01 Sedang 25,11 ± 0,01 Kuat E. coli 7,91 ± 0.01 Sedang 25,21 ± 0,01 Kuat V. parahaemolyticus 7,30 ± 0.01 Sedang 21,31 ± 0,02 Kuat E.coli MDR 7,26 ± 0.01 Sedang 0,00 ± 0,00 Resistant* Ket: * Tidak terbentuk zona hambat
Pengujian  zona  hambat  Ekstrak  Spons  GWD  B  disajikan  pada  Tabel  4. Hasil  menunjukkan  uji  difusi  cakram  ekstrak  GWD  B  aktif  terhadap  bakteri S. aureus dan E. coli pada kriteria zona hambat sedang. Akan tetapi ekstrak GWD B tidak  aktif  terhadap  bakteri V.  parahaemolyticus  dan  E.  coli MDR.  Tidak terbentuknya  zona  hambat  karena  ekstrak  spons  GWD  B  dengan  konsentrasi 10mg/ml  tidak  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri V.  parahaemolyticus dan E. coli MDR. Hal ini diduga karena pengaruh konsentrasi yang kurang tinggi pada  saat  pengujian.  Berdasarkan  (Dharmayani et  al .  (2023)  bahwa  besar  zona hambat dipengaruhi oleh konsentrasi ekstrak/agen antibakter.
Tabel 4. Hasil pengukuran zona hambat spons GWD B
Ekstrak Spons GWD B Kontrol Positif Cloramfenikol Uji Zona Hambat Rata-Rata ± SD (mm) Interpretasi Daya Hambat Rata-Rata ± SD (mm) Interpretasi Daya Hambat S. aureus 8,89 ± 0,01 Sedang 25,11 ± 0,01 Kuat E. coli 8,90 ± 0,01 Sedang 25,21 ± 0,01 Kuat V. parahaemolyticus 0,00 ± 0,00 Resistant* 21,31 ± 0,02 Kuat E.coli MDR 0,00 ± 0,00 Resistant* 0,00 ± 0,00 Resistant*
Ket: * Tidak terbentuk zona hambat
Pengujian zona hambat Ekstrak Spons GWD C disajikan pada Tabel 5. Uji antibakteri terhadap E. coli menghasilkan zona hambat paling besar dengan rata- rata  8,83  mm.  Pada  pengujian  zona  hambat  dengan  bakteri V.  parahaemolyticus tidak  menunjukan  zona  hambat.  Uji  Zona  Hambat E.  coli  MDR menghasilkan zona hambat rata-rata 6,99 mm. Kontrol positif kloramfenikol terhadap bakteri E. coli  MDR tidak  menunjukan  zona  hambat  dimungkinkan  kurangnya  konsentrasi atau dapat juga disebabkan karena merupakan bakteri E. coli MDR sudah resisten
atau  tahan  terhadap  obat  kloramfenikol . Bakteri E.  coli  MDR sendiri  merupakan salah  satu  strain  bakteri  yang  memiliki  kekebalan  pada  beberapa  jenis  antibiotik seperti vancomisin dan methicilin sehingga  diperlukan  dosis  yang  lebih  tinggi untuk  penggunaan  antibiotik  yang  memiliki  spektrum  luas  seperti  kloramfenikol (Oedjijono et al . 2023).
Tabel 5. Hasil pengukuran zona hambat spons GWD C
Ekstrak Spons GWD C Kontrol Positif Cloramfenikol Uji Zona Hambat Rata-Rata ± SD (mm) Interpretasi Daya Hambat Rata-Rata ± SD (mm) Interpretasi Daya Hambat S. aureus 8,10 ± 0,01 Sedang 25,11 ± 0,01 Kuat E. coli 8,83 ± 0,01 Sedang 25,21 ± 0,01 Kuat V. parahaemolyticus 0,00 ± 0,00 Resistant* 21,31 ± 0,02 Kuat E.coli MDR 6,99 ± 0,10 Sedang 0,00 ± 0,00 Resistant* Ket: * Tidak terbentuk zona hambat
Berdasarkan  hasil  pengujian  sampel  spons  yang  ditemukan  di  Perairan GWD  Banyuwangi,  dapat  dikatakan  bahwa  ekstrak  spons  sebagai  antibakteri patogen memiliki potensi  yang berbeda  – beda. Ekstrak spons GWD A memiliki kemampuan  bioaktif  sebagai  antibakteri  terhadap  semua  bakteri  patogen  yang diujikan  dengan  kriteria  zona  hambat  sedang.  Ekstrak  spons  GWD  C  memiliki kemampuan bioaktif sebagai antibakteri terhadap bakteri S. aureus , E. coli dan E. coli MDR.  Ekstrak  GWD  B  memiliki  kemampuan  bioaktif  sebagai  antibakteri terhadap  bakteri S.  aureus dan E.  coli .  Kemampuan  mempengaruhi  aktivitas bakteri  gram  positif  ( S.  aureus )  dan  bakteri  gram  negatif  ( E.  coli,  V. parahaemolyticus  dan  E.coli MDR)  dimiliki  oleh  ketiga  ekstrak  tersebut.  Dapat dikatakan  bahwa  senyawa  antibakteri  ketiga  sampel  tersebut  berspektrum  luas. Menurut  Pelczar  dan  Chan  (2013),  antibakteri  berspektrum  luas  mampu mempengaruhi aktivitas bakteri gram positif dan bakteri gram negatif. Sensitivitas bakteri  terhadap  ekstrak  spons  tersebut  terjadi  karena  adanya  gangguan  pada dinding sel dimana sel menjadi lisis (Madigan et al . 2012).

## KESIMPULAN
Skrining agen antibakteri dari spons laut yang diambil dari Perairan Grand Watu  Dodol  Banyuwangi  terhadap  bakteri  patogen  dilakukan  dengan mengekstraksi  spons  yang  didapat  guna  mendapat  senyawa  bioaktif.  Ekstrak spons yang dihasilkan GWD A 0,2788 gr, GWD B 0,2540 gr  dan GWD C 0,1268 gr.
Aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  spons  laut  yang  berhasil  diperoleh terdapat  3  ekstrak,  hasil  pengujian  dengan  bakteri  patogen S.  aureus ketiganya menghasilkan  zona  hambat  yang  paling  besar  adalah    GWD  B  dengan  rata-rata 8,89  mm.  Hasil  pengujian  dengan  bakteri  patogen E.coli, ketiganya menghasilkan zona hambat dan yang paling besar adalah GWD B dengan rata-rata 8,90  mm.  Hasil  pengujian  dengan  bakteri  patogen V.  parahaemolyticus hanya GWD  A  yang  menghasilkan  zona  hambat  dengan  rata-rata  7,30  mm.  Hasil pengujian  dengan  bakteri  patogen E.coli MDR yang  menghasilkan  zona  hambat
yaitu GWD A dan GWD C dengan rata-rata zona hambat paling besar yaitu GWD A sebesar 7,26 mm.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  disampaikan  kepada  UIN  Sunan  Ampel  Surabaya yang telah mendanai penelitian ini sehingga mendapatkan hasil publikasi.

## DAFTAR PUSTAKA
Adisasmito  W.  2021.  Implementasi  One  Health  dalam  Pengendalian  Resistensi Antimikroba. Prosiding Seminar  Nasional  World  Antimicrobial Awareness  Week.  Bali,  24  November  2021.  Bali:  Kementerian  Kelautan dan Perikanan.
Arikunto S. 2016. Prosedur Penelitian Suatu Pendekatan Praktik . Jakarta: Rineka Cipta. 369 hlm.
Aristyawan AD, Sugijanto  NE,  Suciati  S. 2018. Potensi Antibakteri dari  Ekstrak Etanol  Spons Agelas  cavernosa . Jurnal    Farmasi  Dan  Ilmu  Kefarmasian
Indonesia 4  (1):  39-43. DOI:  https://doi.org/10.20473/jfiki.v4i12017.39-
43 .
Dewatisari  WF,  Rumiyanti  L,    Rakhmawati  I.  2018.  Rendemen  dan  Skrining Fitokimia  pada  Ekstrak  Daun Sanseviera sp. Jurnal  Penelitian  Pertanian
Terapan , 17 (3): 197-202. DOI: https://doi.org/10.25181/jppt.v17i3.336. Dharmayani NKT,  Isnaini, Ulfa M, Sudirman, Yuanita E, Sariningsih  BN. 2023. Antibacterial Activity of Marine Sponge ( Stylotella sp.). Jurnal Penelitian Pendidikan IPA 9 (6): 4801–4805. DOI: https://doi.org/10.29303/jppipa.v9i6.3839 . Dhinakaran  DI,  Lipton  AP.  2012.  Antimicrobial  Potential  of  the  Marine  Sponge Sigmadocia pumila from the South Eastern Region of India. World J. Fish. Mar. Sci. 4 (4): 344-348. DOI: https://doi.org/10.5829/idosi.wjfms.2012.04.04.6353 .
Jones  WP,  Kinghorn  AD.  2006 Extraction  of  Plant  Secondary  Metabolites , Natural  Products  Isolation .  Totowa,  NJ:  Humana  Press.  323–351  hlm. DOI: https://doi.org/10.1385/1-59259-955-9:323 .
Josua  E,  Wewengkang  D,  Suoth  E.  2021.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  dan
Fraksi Spons Liosina paradox dari perairan Pulau Mantehage. Pharmacon
Journal 10 (3): 933-939. DOI: 10.35799/pha.8.2019.29386 . Madigan  MT,  Martinko  JM,  Stahl  DA,  Clark  DP.  2012. Brock  Biology  of Microorganisms. San  Fransisco: Pearson  Education  Inc  publishing  as Benjamin Cummings . 1093 hlm.
Maisaroh  DS,  Hanif  YAA,  Munir  M,  Sa’adah  N.  2023.  Uji  Ekstrak  Spons  Laut Jenis  Ptilocaulis  marquezii  dari  Perairan  Kendit  sebagai  Potensi Antibakteri Escherichia coli. Journal of Marine Research 12 (1): 161–166.
DOI: https://doi.org/10.14710/jmr.v12i1.36278.
Mohamad H, Rosmiati, Muhammad TST, Andrian Y, Bakar K, Ismail N, Saidin J, Latip Musa J, Perenrengi  A. 2017. Potential Secondary Metabolites from Marine  Sponge Aaptos  aaptos for  Atherosclerosis  and  Vibriosis
Tretments. Natural  Product  Communication 12  (8):  1227-1230 . DOI: 10.1177/1934578X1701200819 .
Napitulu HG,  Rumengan IFM, Wullur S, Ginting EL, Rimper JRTSL, Toloh BH.
2019. Bacillus  sp. Sebagai  Agensia  Pengurai  Dalam  Pemeliharaan Brachionus  rotundiformis yang  Menggunakan  Ikan  Mentah  Sebagai Sumber  Nutrisi. Jurnal  Ilmiah  Platax 7  (1):  158-169.  DOI: https://doi.org/10.35800/jip.7.1.2019.22627 . Novitasari  AR,  Satyantini  WH,  Andriyono  S,    Sa’adah  N. 2023.    Isolasi  dan Identifikasi Bakteri Pengurai Mikroplastik Polyethylene Terephthalate dari Sedimen Ekosistem Mangrove Pasir Putih. Journal of Marine Research 12 (1): 52–60. DOI: https://doi.org/10.14710/jmr.v12i1.37503. Oedjijono  O,  Kusharyati  DF,  Hendrat i PM.  2023.  Inhibition  of  Multi  Drug- Resistant  (MDR) Escherichia  coli and Klebsiella  pneumoniae by Bacteriocin  bifidobacteria and  the  viability  of  selected  bifidobacteria encapsulated  with  tapioca. Biodiversitas 24  (7):  4175–4182.  DOI: https://doi.org/10.13057/biodiv/d240762.
Pelczar  MJ,  Chan  EC.  2013. Dasar-Dasar  Mikrobiologi .  Jakarta:  UI-Press.  443 hlm.
Prayitno DI. 2018. Identifikasi Molekuler Berbasis 16s rDNA Bakteri Biopigmen yang  Berasosiasi  dengan Anemon Sp. Jurnal  Laut  Khatulistiwa 1  (1):  7– 12. DOI: https://doi.org/10.26418/lkuntan.v1i1.24003.
Rastina, Sudarwanto M, Wientarsih I. 2015. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun  Kari  ( Murraya  koenigii )  Terhadap Staphylococcus  aureus, Escherichia  coli ,R,  R.,  Sudarwanto,  M.,  dan  Wientarsih,  I.  2015. Jurnal Kedokteran  Hewan  -  Indonesian  Journal  of  Veterinary  Sciences 9  (2): 185-188. DOI: https://doi.org/10.21157/J.KED.HEWAN.V9I2.2842 . Sa’adah  N.  2020  Bakteri  Simbion  Akar  Mangrove Avicennia sp.  Sebagai Pendegradasi  Pewarna  Tekstil. Barakuda  45  Jurnal  Ilmu  Perikanan  dan Kelautan 2 (2): 50-55. DOI: https://doi.org/10.47685/barakuda45.v2i2.91. Savitri  I,  Suhendra  L,  Wartini  NM.  2017.  Pengaruh  Jenis  Pelarut  pada  Metode Maserasi  Terhadap  Karakteristik  Ekstrak  Sargassum  polycystum. Jurnal Rekayasa Dan Manajemen Agroindustri 5 (3): 93–101.
Sukmaningrum  K,  Yudistira  A,  Antasionasti  I.  2021.  Uji  Aktivitas  Antioksidan
Ekstrak  Etanol  Spons  ( Stylissa sp.)  yang  Dikoleksi  Dari  Teluk  Manado. Pharmacon 10 (1): 756-761. DOI: https://doi.org/10.35799/pha.10.2021.32773.
Suryabrata,  S.  (2014) Metode  Penelitian .  2nd  edn.  Jakarta:  Rajawali  Press.  166 hlm
Trianto  A,  Hermawan  I,  Suzuka  T,  Tanaka  J.  2011.  Two  New Cytotoxic Candidaspongiolides from  an  Indonesian  Sponge. ISRN  Pharmaceutics 21: 1-6. DOI: https://doi.org/10.5402/2011/852619 .
Wahyuni DT, Widjanarko SB. 2015. Pengaruh Jenis Pelarut dan Lama Ekstraksi terhadap  Ekstrak  Karotenoid  Labu  Kuning  dengan  Metode  Gelombang Ultrasonik. Jurnal Pangan dan Agroindustri 3 (2): 390-401. Widyowati  W,  Munir  M,  Maisaroh  DS.  2023.  Uji  Potensi  Antibakteri  Ekstrak Metanol  Jeroan  dan  Daging  Teripang  Bola  ( Phyllophorus  sp. )  terhadap Bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus.  Journal  of  Natural Sciences 4 (1): 39-51. DOI: https://doi.org/10.34007/jonas.v4i1.353.
Wijayanti  NPAD,  Dewi  LPMK,  Astuti  KW,  Fitri  NPE.  2016.  Optimasi  Waktu Maserasi  untuk  Manggis  ( Garcinia  mangostana L.)  Rind  Menggunakan
Pelarut Etil Asetat. Jurnal Farmasi dan Ilmu Kefarmasian Indonesia 3 (1):
12-17. DOI: https://doi.org/10.20473/jfiki.v3i12016.12-16 .