## Jurnal Teknik Kimia USU
Journal homepage: https://talenta.usu.ac.id/jtk

## Karakterisasi  Biofilm  Selulosa  Bakteri  dengan  Modifikasi  Gliserol secara Ex Situ

## Characterization on Bacterial Cellulose Modified Biofilm with Glycerol by Ex Situ Method
Vera Diana Panjaitan, Iriany * , Lilis Sukeksi
Departemen Teknik Kimia, Universitas Sumatera Utara, Jl.Almamater Kampus USU, Medan 20155, Indonesia * Email: iriany@usu.ac.id
Article history:

## ABSTRAK
Selulosa  bakteri  (SB)  merupakan  biomaterial  hasil  fermentasi  bakteri  yang mengandung  selulosa  dengan  kemurnian  tinggi,  namun  90%  pelikel  SB mengandung air dari proses fermentasinya. Untuk aplikasi yang luas, kandungan air pada SB harus dihilangkan dengan pengeringan. Penelitian ini memodifikasi SB dengan perendaman gliserol pada konsentrasi yang berbeda (0%; 2,5%; 5%; 7,5%;  10%).  Gliserol  ditambahkan  sebagai plasticizer .  Pengeringan  oven dilakukan pada 80 °C dan 120 °C selama 60 menit. Serangkaian perubahan sifat fisik  dan  mekanik  dari  biofilm  SB  dianalisis,  meliputi  kekuatan  tarik  dan elastisitas.  Ikatan  biofilm  SB  diidentifikasi  dengan  FTIR  dan  EDX.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  konsentrasi  gliserol  mampu  meningkatkan elastisitas biofilm dari 3,46% hingga 27,743%. Namun, perendaman gliserol di atas  7,5%  menyebabkan  penurunan  kekuatan  tarik  biofilm  SB.  Variasi pengeringan 120 °C menghasilkan kuat tarik tertinggi sebesar 7,161 MPa pada perendaman  gliserol  7,5%.  Variasi  pengeringan  80  °C  menghasilkan  biofilm dengan  elastisitas  terbaik  sebesar  27,473%. Hasil  analisis  FTIR  dan  EDX mengonfirmasi  bahwa  terdapat  perbedaan  kandungan  pada  SB  yang  telah dimodifikasi.
Kata kunci: biofilm, gliserol, pengeringan, selulosa bakteri, oven

## ABSTRACT
Bacterial cellulose (BC) is biomaterial from bacterial fermentation that contain high  purity  of  cellulose,  but  90%  of  BC  pellicles  retained  water  from  the fermentation process. In this study, BC was modified with glycerol immersion in different concentrations (0%; 2,5%; 5%; 7,5%; 10%). For wide application, water content on BC must be removed by drying. Various oven drying condition are  temperature  80  °C  and  120  °C  and  time  60  minutes.  The  physical  and mechanical properties of the dried BC biofilm were determined including tensile strength and elasticity. BC biofilm bound was identified by FTIR and EDX. The results showed that glycerol concentration was able to increase biofilm elasticity from  3.46%  to  27.743%.  However,  glycerol  immersion  above  7.5%  caused  a decrease in  the tensile strength of BC biofilm. The drying variation of 120 °C produces  the  highest  tensile  strength  of  7.161  MPa  when  soaked  in  7.5% glycerol. The drying variation of 80 °C produced a biofilm with the best elasticity of 27.473%. The results of FTIR and EDX analysis confirmed that there were differences in the contents of the modified BC.
Keyword: biofilm, glycerol, drying, bacterial cellulose, oven
Diterima : 6 September 2023 Direvisi : 22 November 2023 Disetujui : 10 Januari 2024 Mulai online : 23 Maret 2024 E-ISSN: 2337-4888

## How to cite:
Vera  Diana  Panjaitan,  Iriany,  Lilis Sukeksi. (2024). Karakterisasi Biofilm Selulosa  Bakteri  dengan  Modifikasi Gliserol secara Ex Situ . Jurnal Teknik Kimia USU, 13(1), 17-23.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International. https://doi.org/10.32734/jtk.v13i1.13560

## 1. Pendahuluan
Selulosa  bakteri  (SB)  adalah  bahan  biopolimer  yang  memiliki  sifat  biokompatibilitas,  biodegradabilitas, derajat  kristal  dan  porositas  tinggi,  serta  retensi  air  yang  besar  [1].  Melalui  sintesis  biologi  menggunakan bakteri, selulosa dapat dihasilkan dari fermentasi teh dan ragi [2], teh hitam dan limbah jus apel [3], limbah minuman jagung [4], air kelapa tua [2], dan lain sebagainya. Pemanfaatan air kelapa tua sebagai bahan baku selulosa bakteri dinilai menjanjikan karena Indonesia menghasilkan 2.822,60 ribu ton kelapa pada tahun 2021 [5]. Selulosa bakteri membentuk rantai linier residu glukosa yang terkait secara kovalen antara karbon 1 dan 4 (β1-4)  yang  disebut  mikrofibril,  dengan  karakteristik  spesifik  seperti  polaritas  searah  dan  ketebalan  yang bervariasi  [6].  SB  menarik  minat  industri  dari  sektor  tekstil  karena  ketersediaannya  yang  berkelanjutan dibandingkan dengan selulosa tanaman [7]. Potensi penggunaan SB sangat besar karena sifat keberlanjutannya, tetapi  perlu  dilakukan  beberapa  modifikasi  untuk  memperbaiki  sifat  dan  karakteristik  SB  yang  kaku  serta mengandung  banyak  air.  Penelitian  ini  meninjau  modifikasi  dan  proses  penghilangan  kadar  air  untuk memperbaiki karakteristik SB.
Selulosa bakteri murni tanpa modifikasi memiliki elastisitas sebesar 2,28%. Setelah dilakukan modifikasi ex situ dengan perendaman gliserol, elastisitas selulosa bakteri meningkat menjadi 19,21%. Modifikasi ex situ adalah  modifikasi  yang  dilakukan  setelah  SB  terbentuk  [7].    Modifikasi ex  situ dilakukan  dengan  cara merendam SB di dalam larutan gliserol untuk mendapatkan elastisitas yang lebih baik. Gliserol yang digunakan sebagai plasticizer pada  SB  dapat  menyebabkan  penurunan  kekuatan  ikatan  hidrogen  antarmolekul  yang berdekatan pada rantai selulosanya [8]. Modifikasi ini dilakukan untuk mendapatkan hasil elastisitas SB yang paling memuaskan dan tidak mengganggu mekanisme pertumbuhan selulosanya.
SB dari hasil fermentasi mengandung banyak air dan perlu dihilangkan jika SB ingin diaplikasikan secara luas [8]. Pengeringan adalah salah satu operasi utama polimer yang dilakukan sebelum digunakan. SB dalam bentuk  kering  lebih  mudah  ditangani,  ringan,  dan  dapat  memperpanjang  umur  simpan  [9].  Hilangnya fleksibilitas  pada  proses  pengeringan  merupakan  kerugian  untuk  beberapa  aplikasi  seperti  dalam  industri tekstil  dan  sepatu  [10].  Pengeringan  SB  dengan  oven  [4,  10,  11]  telah  dilakukan,  tetapi  tidak  dilaporkan pengaruhnya  terhadap  performa  SB  yang  dihasilkan.  Sejauh  ini,  tidak  pernah  dilakukan  penelitian  tentang selulosa  bakteri  hasil  modifikasi ex  situ dengan  meninjau  pengaruh  pengeringannya.  Penelitian  ini  fokus kepada pembuatan dan karakterisasi modifikasi selulosa bakteri secara ex situ dengan perendaman plasticizer gliserol  serta  perbandingan  variasi  suhu  dan  waktu  pengeringan  menggunakan  tekan-oven  (perlakuan penekanan dan pengeringan).

## 2. Metode

## Bahan dan Peralatan
Lembaran selulosa bakteri diperoleh dari produsen skala industri rumah tangga di Mabar, Medan, Sumatera Utara. Lembaran selulosa bakteri yang digunakan memiliki dimensi 2,5 cm × 20 cm × 45 cm dan dihasilkan dari  fermentasi  air  kelapa  tua  menggunakan bakteri Acetobacter  xylinum ,  serta  gliserol  (diperoleh  dari  CV. Inlo  Kreasi  Mandiri,  Medan)  sebagai plasticizer dan aquadest sebagai  pelarut.  Peralatan  yang  digunakan adalah penyaring stainless  steel , gelas ukur merk Pyrex, wadah tertutup, oven merk Memmert model UNB 200, dan alat beban tekan Gotech Testing Machine model GT-7014-A30C.

## Pemurnian dan modifikasi SB
SB dipisahkan dari media dengan penyaringan menggunakan penyaring stainless steel , kemudian direndam dalam aquadest dengan perbandingan 1 : 2 (massa SB : massa aquadest) pada suhu 80 °C selama 1 jam pada gelas ukur dan perlakuan diulangi sampai pH netral [12].  Setelah pH SB netral, 100 g SB direndam dalam 300 mL gliserol dengan konsentrasi 2,5%  - 10% selama 24 jam pada suhu ruang menggunakan wadah tertutup. Sebelum SB dikeringkan menggunakan oven, pengurangan massa air dilakukan terlebih dahulu. Pengurangan massa air SB dilakukan dengan menggunakan alat beban tekan 25 kg/cm 2 pada suhu kamar (27 ºC) selama 30 detik pada SB, lalu pinggiran SB yang melewati plat alat tekan dipotong. Selanjutnya, SB dikeringkan di dalam oven pada 80 ºC dan 120 ºC selama 60 menit. SB yang telah dikeringkan kemudian dikarakterisasi [7].

## Karakterisasi
Kondisi  pengujian  mengikuti  standar  ASTM  D2209-00  untuk  metode  pengujian  sifat  tarik  bahan  yang menyerupai kulit menggunakan mesin UTM RFT-1350. Kekuatan tarik dan elastisitas dilaporkan sebagai nilai rata-rata yang ditentukan dari setidaknya tiga spesimen. Bentuk morfologi biofilm SB dianalisis menggunakan Scanning  Electron  Microscope (SEM)  tipe  JEOL  JSM-6510LA.  Spesimen  sampel  dipotong  dengan ukuran 0,8 cm × 0,8 cm. Gugus fungsi dan komponen senyawa SB yang telah dimodifikasi dianalisis menggunakan Fourier Transform Infra Red (FTIR) tipe UATR Two ( Parkin Elmer ) dan Energy Dispersive X-Ray (EDX).

## 3. Hasil

## Kuat Tarik dan Elastisitas
Gliserol telah digunakan sebagai plasticizer dalam film berbasis biopolimer karena sifat kelarutannya dalam air,  polaritas,  berat  molekul  yang  rendah,  dan  tidak  mudah  menguap  [9].  Perendaman  gliserol  pada  SB diharapkan  dapat  menambah  elastisitasnya.  Pengaruh  perendaman  gliserol  dengan  konsentrasi  berbeda  dan pengeringan oven selama 60 menit pada SB dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil kuat tarik dan elastisitas SB Konsentrasi Gliserol (%) Suhu (ºC) Kuat Tarik (MPa) Elongasi (% ) 0,0 80 0,942 3,386 120 0,763 2,000 2,5 80 2,610 13,527 120 2,678 9,100 5,0 80 5,040 17,049 120 5,489 10,300 7,5 80 5,894 22,090 120 7,161 15,657 10,0 80 5,828 27,743 120 6,200 17,946
Setelah dilakukan proses perendaman, SB dikeringkan menggunakan oven. Pengeringan memiliki tujuan untuk meningkatkan karakteristik yang diharapkan dari SB [13]. Saat SB dikeringkan dengan oven selama 60 menit dan direndam pada konsentrasi gliserol serta suhu yang berbeda, hasil kuat tarik cenderung menurun saat  dikeringkan  pada  suhu  120  ºC  jika  dibandingkan  dengan  pengeringan  pada  suhu  80  ºC.  Selain pengeringan,  penambahan  konsentrasi  gliserol  juga  menghasilkan  perbedaan  pertambahan  elongasi  yang cukup signifikan pada setiap konsentrasinya karena SB memiliki pelikel pada permukaannya, sehingga jika gliserol dikontakkan dengan SB memungkinkan gliserol itu masuk ke dalam rangkaian fibril selulosa melalui pelikel pada permukaan tersebut [14]. Plasticizer memengaruhi kekuatan interaksi antarmakromolekul dengan meningkatkan  jarak  antarmakromolekul  dan  mengurangi  gaya  internal  yang  memberikan  lebih  banyak fleksibilitas pada film [9]. Tanpa perendaman gliserol, kuat tarik dan elongasi SB saat dikeringkan pada suhu 80 ºC hanya sebesar 0,942 MPa. Setelah direndam dengan gliserol 2,5%; kuat tarik SB meningkat menjadi 2,610 MPa. Gliserol dalam jumlah tertentu dapat meningkatkan kekuatan tarik [15]. Hal ini disebabkan oleh adanya pembentukan ikatan hidrogen tambahan antara gugus hidroksil nanofibril  dan gliserol [16]. Material dapat  bertambah  kuat  karena  ikatan  hidrogennya.  Saat  ikatan  hidrogen  terbentuk  dan  terjadi  pengulangan, maka  akan  terbentuk  kristalisasi  material  yang  membantu  memperkuat  material  tersebut  [17].  Peningkatan kuat tarik terus berlangsung saat konsentrasi gliserol ditingkatkan, tetapi pada perendaman dengan konsentrasi gliserol 10%, kuat tarik SB menurun pada semua variasi suhu pengeringan. Beberapa penelitian menjelaskan bahwa gliserol dapat menyebabkan penurunan kekuatan ikatan hidrogen antarmolekul di antara rantai selulosa yang  berdekatan  [8].  Dari  hasil  penelitian  ini,  diperoleh  bahwa  penurunan  kekuatan  tarik  disebabkan  oleh adanya gliserol sebagai agen plasticizer yang menjadikan SB kurang kaku [9]. Karena kekakuannya yang lebih rendah, nilai elongasi dari SB yang telah direndam gliserol menjadi lebih tinggi jika dibandingkan dengan SB yang tidak direndam gliserol pada setiap variasi suhu pengeringan.
SB tanpa perendaman gliserol saat dikeringkan dengan suhu 80 ºC memiliki nilai elongasi 3,386%. Setelah direndam dengan gliserol dengan konsentrasi 2,5%; nilai elongasi menjadi 13,527%. Nilai elongasi ini terus bertambah  seiring  dengan  bertambahnya  konsentrasi  gliserol.  Hasil  serupa  juga  diperoleh  pada  penelitian Rohaeti dkk (2017). Pada saat SB diberi perlakuan dengan gliserol, SB memiliki nilai % elastisitas yang lebih besar  dibandingkan  dengan SB  yang  tidak diberi  perlakuan  dengan gliserol.  Saat  sebelum  diberi  perlakuan gliserol, nilai elastisitasnya sebesar 22,18% dan setelah diberi perlakuan dengan gliserol, nilai elastisitasnya menjadi 28,12% [18].

## Morfologi SB yang dihasilkan
Biofilm  SB  berbentuk  tipis  dengan  rata-rata  ketebalan  0,2  mm  dengan  warna  putih  transparan  sedikit kekuningan.  Biofilm  SB  yang  direndam  dengan  gliserol  memiliki  warna  lebih  kuning  jika  dibandingkan dengan SB yang tidak direndam dengan gliserol. Perbedaan perlakuan dan hasil biofilm SB diperlihatkan pada Gambar  1.  Secara  fisik,  tidak  dapat  dilihat  perbedaan  yang  terlalu  signifikan,  tetapi  jika  dilihat  lebih  dekat
menggunakan  SEM,  permukaan  biofilm  SB  memiliki  sedikit  perbedaan  saat  direndam  dengan  gliserol. Perbedaan ini disajikan pada Gambar 2.
Gambar 1. Biofilm SB setelah dikeringkan dengan oven
(a)
(b)
Gambar 2.  Morfologi SB (a) tanpa perendaman gliserol dan (b) dengan perendaman gliserol
Jika  dilihat  dari  morfologi  yang diamati  menggunakan SEM,  dapat  diketahui bahwa  terdapat  perbedaan pada setiap perlakuan yang diberikan. Pada perlakuan tanpa perendaman gliserol, dapat terlihat bahwa masih ada  bakteri  yang  memproduksi  untaian  selulosa  dan  tidak  terplastisasi  yang  ditandai  dengan  adanya  dua untaian berwarna lebih terang pada Gambar 2(a). Saat diperhatikan lebih dekat, terdapat benang fibril yang saling  bertautan  dengan  jalinan  benang  nano  yang  dikenal  sebagai  nanofibril.  Hal  ini  juga  terlihat  pada penelitian  Basu  dkk  (2018)  [19].  Selama  bakteri Acetobacter  xylinum melakukan  pertumbuhan,  bakteri  ini akan menghasilkan benang selulosa di antara dirinya sendiri, setelahnya susunan selulosa ini akan membentuk fibril yang lebih padat, berbeda dengan biofilm SB dengan perendaman gliserol yang dikeringkan dengan oven pada Gambar 2(b). Film terlihat lebih kompak dan terdapat lembah yang terbentuk di antara permukaan film yang  kasar.  Permukaan  film  yang  kasar  menyebabkan  terbentuknya  luas  permukaaan  yang  lebih  besar, sehingga  film  menyediakan  tempat  yang  lebih  luas  untuk  mengikat  air  [9].  Permukaan  film  yang  kasar meningkatkan luas area yang dapat menyerap air. Terdapat celah atau ruang kosong ( void ) pada Gambar 2(a) dan  2(b).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  permukaan  biofilm  SB  yang  tidak  rata  disebabkan  oleh  pemberian tekanan  sebelum  SB  dikeringkan  pada  oven.  Celah  ini  terbentuk  disebabkan  oleh  besarnya  tekanan  yang diberikan pada SB, sehingga menyebabkan air keluar merusak matriks SB.

## Gugus Fungsi FTIR dan EDX
Tujuan karakterisasi FTIR SB adalah untuk melihat gugus fungsi SB. Karakterisasi FTIR dari SB setelah direndam  gliserol  dan  dikeringkan  dapat  dilihat  pada  Gambar  3.  Hasil  identifikasi  jenis-jenis  gugus  fungsi terkait dengan pita spektrum FTIR yang terbaca pada bilangan gelombang tertentu dapat dilihat pada Tabel 2.
Hasil  analisis  FTIR  biofilm  SB  pada  Tabel  2  menunjukkan  gugus  hidroksil  (-OH)  muncul  pada  daerah bilangan gelombang 3.344,68 cm -1 . Gugus -OH ini berhubungan dengan bentangan gugus hidrogen intra dan antarrantai  selulosa.  Jika  dilihat  pada  Gambar  3,  terjadi  puncak  frekuensi  yang  tajam.  Penambahan gliserol
menyebabkan puncak vibrasi gugus -OH menjadi lebih tajam. Hal ini karena adanya penambahan gugus -OH dari gliserol, sehingga gugus -OH pada film menjadi lebih banyak [20].
Gambar 3. Pola FTIR biofilm SB
Tabel 2. Analisis spektra FTIR biofilm SB
Bilangan Gelombang SB (cm -1 ) Jenis Ikatan Bilangan Gelombang Referensi (cm -1 ) Sumber 3.344,96 -O-H (regangan) 3.300-3.500 [20] 2.915,69 -C-H (regangan) 2.800-2.900 [21] 1.162,64 C-O-C ( fingerprint )  1.162 [22] 1.032,67 -C-O (regangan) 1.031 [24]
Gugus lainnya yang ditemukan pada biofilm SB muncul pada daerah bilangan gelombang 2.916,69 cm -1 . Bilangan gelombang ini merupakan gugus C-H vibrasi CH 2 dari gugus hidroksimetil (-CH 2 OH) [21]. Gugus glikosidik  (C-O-C)  muncul  pada  daerah  bilangan  gelombang  1.162  cm -1 dalam  selulosa  alam  [22].  Gugus serupa terdapat pada biofilm SB dengan bilangan gelombang 1.161,64 cm -1 . Ikatan SB dari hasil fermentasi bakteri  memiliki  ikatan  glikosidik  selulosanya  dari  tahapan  ketiga  saat  proses  fermentasinya,  yaitu  reaksi intermolekul glukosa melalui ikatan 1,4 β-glikosida [23].
Terdapat puncak gelombang lain yang terdeteksi pada 1.031,53 cm -1 . Pita selulosa khas yang ditunjukkan pada  bilangan  gelombang  1.031  cm -1 sesuai  dengan  peregangan  simetris  C-O  dari  alkohol  primer  [24]. Regangan ini disebabkan adanya ikatan hidrogen yang dibentuk oleh residu -OH dari alkohol primer dan gugus karboksil (-COOH) yang ditemukan dalam jumlah kecil di ujung fibril yang terbentuk selama pemurnian SB [25]. Hal ini didukung dengan hasil analisis biofilm dengan menggunakan EDX yang menunjukkan banyaknya kandungan karbon pada biofilm. Perbedaan kandungan SB saat diberi perlakuan perendaman dengan gliserol dan tanpa gliserol juga mempengaruhi kandungan yang terdapat di dalam biofilm SB. Hasil analisis persentase kandungan biofilm dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil analisis persentase kandungan biofilm SB
Komponen Persentase (% massa) Gliserol Non-Gliserol Karbon (C) 97,28 60,94 Oksigen (O) 0,64 37,02 Lainnya 2,08 2,04

## 4. Kesimpulan
Modifikasi dengan perendaman gliserol 10% menghasilkan kuat tarik biofilm SB yang lebih rendah (5,894 MPa; 80 ºC dan 6,200 MPa; 120 ºC) dibandingkan dengan perendaman gliserol 7,5% (5,828 MPa; 80 ºC dan
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500 4000 4500 3344,96 cm -1 2915,69 cm -1 1032,67 cm -1

## Jurnal Teknik Kimia USU, Vol.13, No.1 (2024) 17–23
7,161 Mpa; 120 ºC). Nilai elastisitas biofilm SB semakin meningkat saat konsentrasi gliserol semakin tinggi. Elastisitas biofilm SB tanpa modifikasi dengan suhu pengeringan 80 ºC memiliki nilai 3,386% menggunakan modifikasi perendaman gliserol 10% dengan suhu pengeringan 80 ºC elastisitas biofilm SB menjadi 27,243%. Kandungan  komponen  karbon  pada  biofilm  SB  tanpa  modifikasi  gliserol  bernilai  60,94%  dan  saat  SB direndam  menggunakan  gliserol,  persen  massa  karbon  menjadi  97,28%.    Modifikasi  gliserol  secara ex  situ pada  SB  mempengaruhi  kuat  tarik,  elastisitas,  serta  mengubah  morfologi  dan  kandungan  komponen penyusunnya.  Dari  modifikasi  ini,  diperoleh  hasil  perlakuan  terbaik  pada  perendaman  gliserol  7,5%  dan pengeringan dengan suhu 120 ºC selama 60 menit.

## 5. Ucapan Terima Kasih
Ucapan terima kasih ditujukan kepada Kementerian Pendidikan, Kebudayaan, Riset, dan Teknologi atas pendanaan yang diberikan melalui Penelitian Dasar-Penelitian Tesis Magister 2023.

## 6. Konflik Kepentingan
Semua penulis tidak memiliki konflik kepentingan ( conflict of interest ) pada publikasi artikel ini.

## Daftar Pustaka
[1] F. P. Gomes, N. H. C. S. Silva, E. Trovatti, L. S. Serafim, M. F. Duarte, A. J. D. Silvestre, C. P. Neto, and C. S. R. Freire, “Production of bacterial cellulose by Gluconacetobacter sacchari using dry olive mill residue,” Biomass and Bioenergy , vol. 55, pp. 205–211, 2013.
[2] K.  Vijeandran  and  T.  A.  V.  Thanh,  “Synthesis  of  vegan  leather  using  plant-based  substrates:  A preliminary study,” Defect Diffus. Forum , vol. 411, pp. 57–66, 2021.
[3] F.  A.  Ngwabebhoh  and  U.  Yildiz,  “Nature‐derived  fibrous  nanomaterial  toward  biomedicine  and environmental remediation: Today’s state and future prospects,” J. Appl. Polym. Sci. , vol. 136, no. 35, p. 47878, 2019.
[4] A. F. de S. Costa, J. D. P. de Amorim, F. C. G. Almeida, I. D. de Lima, S. C. de Paiva, M. A. V. Rocha, G. M. Vinhas, and L. A. Sarubbo, “Dyeing of bacterial cellulose films using plant-based natural dyes,” Int. J. Biol. Macromol. , vol. 121, pp. 580–587, 2019.
[5] Badan Pusat Statistik, “Data Ekspor Impor HS 2 Digit November 2022,” Indonesia, 2023.
[6] C. J. G. da S. Junior, J. D. P. de Amorim, A. D. M. de Medeiros, A. K. L. de H. Cavalcanti, H. A. do Nascimento, M. A. Henrique, L. J. C. do N. Maranhão, G. M. Vinhas, K. K. de O. S. Silva, A. F. de S. Costa, and L. A. Sarubbo, “Design of a naturally dyed and waterproof biotechnological leather from reconstituted cellulose,” J. Funct. Biomater. , vol. 13, no. 2, p. 49, 2022.
[7] P. Cazón, G. Velazquez,  and M. Vázquez, “Characterization of mechanical and barrier properties of bacterial  cellulose,  glycerol  and  polyvinyl  alcohol  (PVOH)  composite  films  with  eco-friendly  UV- protective properties,” Food Hydrocoll. , vol. 99, 2020.
[8] I. Cielecka, M. Szustak, H. Kalinowska, E. Gendaszewska-Darmach, M. Ryngajłło, W. Maniukiewicz, and  S.  Bielecki,  “Glycerol-plasticized  bacterial  nanocellulose-based  composites  with  enhanced flexibility and liquid sorption capacity,” Cellulose , vol. 26, no. 9, pp. 5409–5426, 2019.
[9] N.  Chiaoprakobkij,  S.  Seetabhawang,  N.  Sanchavanakit,  and  M.  Phisalaphong,  “Fabrication  and characterization  of  novel  bacterial  cellulose/alginate/gelatin  biocomposite  film,” J.  Biomater.  Sci. Polym. Ed. , vol. 30, no. 11, pp. 961–982, 2019.
[10] M.  Fernandes,  A.  P.  Souto,  M.  Gama,  and  F.  Dourado,  “Bacterial  cellulose  and  emulsified  AESO biocomposites as an ecological alternative to leather,” Nanomaterials , vol. 9, no. 12, 2019.
[11] H.  Kim,  J.  E.  Song,  and  H.  R.  Kim,  “Comparative  study  on  the  physical  entrapment  of  soy  and mushroom proteins on the durability of bacterial cellulose bio‐leather,” Cellulose , vol. 28, no. 5, pp. 3183–3200, 2021.
[12] L. P. dos S. B. de Sousa, P. M. S. C. M. Leite, A. A. Vieira, A. C. Faria, and L. Vieira, “Effect of water and alkali on purification bacterial cellulose membrane from Kombucha,” Res. Soc. Dev. , vol. 10, no. 15, p. e526101523267, 2021.
[13] R. Laurenti, M. Redwood, R. Puig, and B. Frostell, “Measuring the environmental footprint of leather processing technologies,” J. Ind. Ecol. , vol. 21, no. 5, pp. 1180–1187, 2017.
[14] D. R. Ruka, G. P. Simon, and K. M. Dean, “In situ modifications to bacterial cellulose with the water insoluble polymer poly-3-hydroxybutyrate,” Carbohydr. Polym. , vol. 92, no. 2, pp. 1717–1723, 2013.
[15] Z.  Ye,  H.  Lu,  G.  Chai,  C.  Wu,  J.  Chen,  and  L.  Lv,  “Glycerol‐modified  poly(vinyl alcohol)/poly(ethylene glycol) self‐healing hydrogel for artificial cartilage,” Polym. Int. , vol. 72, no. 1, pp. 27–38, 2023.
[16] S.  V.  Nguyen  and B.-K.  Lee,  “Microfibrillated  cellulose  film  with  enhanced  mechanical  and  water- resistant properties by glycerol and hot-pressing treatment,” Cellulose , vol. 28, no. 9, pp. 5693–5705, 2021.
[17] S. J. Park and M. K. Seo, “Solid-solid interfaces,” Interface Sci. Technol. , vol. 18, pp. 253–331, 2011.
[18] E. Rohaeti, E. F. W. Laksono X, and A. Rakhmawati, “Characterization and the activity of bacterial cellulose prepared from rice waste water by addition with glycerol and chitosan,” ARPN J. Agric. Biol. Sci. , vol. 12, no. 8, p. 2017.
[19] A. Basu, S. V. Vadanan, and S. Lim, “A novel platform for evaluating the environmental impacts on bacterial cellulose production,” Scientific Report , 2018.
[20] S.  Barshan,  M.  Rezazadeh-Bari,  H.  Almasi,  and  S.  Amiri,  “Optimization  and  characterization  of bacterial  cellulose  produced  by  komagatacibacter  xylinus  PTCC  1734  using  vinasse  as  a  cheap cultivation medium,” Int. J. Biol. Macromol. , vol. 136, pp. 1188–1195, 2019.
[21] M.  Ghozali,  Y.  Meliana,  and  M.  Chalid,  “Synthesis  and  characterization  of  bacterial  cellulose  by Acetobacter xylinum using liquid tapioca waste,” in Materials Today: Proceedings , 2021, pp. 2131– 2134.
[22] B.  Surma-Ślusarska,  S.  Presler,  and  D.  Danielewicz,  “Characteristics  of  bacterial  cellulose  obtained from Acetobacter xylinum culture for application in papermaking,” FIBRES & TEXTILES in Eastern Europe , vol. 16, no. 4, pp. 108-111, 2008.
[23] N. R. Nurjannah, T. Sudiarti, and L. Rahmidar, “Sintesis dan karakterisasi selulosa termetilasi sebagai biokomposit hidrogel,” al-Kimiya , vol. 7, no. 1, pp. 19–27, 2020.
[24] G. Pacheco, C. V. de Mello, B. G. Chiari-Andreo, V. L. B. Isaac, S. J. L. Ribeiro, E. Pecoraro, and E. Trovatti, “Bacterial cellulose skin masks-properties and sensory tests,” J. Cosmet. Dermatol. , vol. 17, no. 5, pp. 840–847, 2018.
[25] R. Drozd, M. Szymańska, K. Przygrodzka, J. Hoppe, G. Leniec, and U. Kowalska, “The simple method of  preparation  of  highly  carboxylated  bacterial  cellulose  with  Ni-  and  Mg-Ferrite-based  versatile magnetic carrier for enzyme immobilization,” Int. J. Mol. Sci. , vol. 22, no. 16, p. 8563, 2021.