ISSN: 2723-4959 (online)
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI Vibrio sp. DARI DAUN SERNAI ( Wedelia biflora )
Antibacterial Activity Of Sernai Leaves ( Wedelia biflora ) Againts Vibrio Sp.
Hendro  Hitijahubessy 1*) ,  Aprianti  Samid 2) ,  Welda  Kristiyanti  Jalmaf 3) ,  Nurani  Hasanela 4) ,  Laury Marcia Ch Huwae 5) 1*,2,3) Politeknik  Perikanan  Negeri  Tual,  Langgur.  e-mail : hendro@polikant.ac.id , apriantisamid@gmail.com , weldajalmaf@gmail.com
4) Jurusan  Kimia  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Pattimura,  Ambon.  e-mail : hasanela.nurani2@gmail.com
5) Jurusan  Biologi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Pattimura,  Ambon.  e-mail : lauryhuwae@gmail.com
1 *) Corresponding Author e-mail: hendro@polikant.ac.id
Informasi Abstrak. Kata kunci : antibakteri, fitokimia, Vibrio sp.,
Penyakit Vibriosis pada ikan kakap, udang vaname dan rumput laut sering disebabkan disebabkan  oleh  bakteri Vibrio sp . Penyakit  tersebut  dapat  dideteksi  dengan mengisolasi  bakteri  dan  menanamnya  pada  media  agar  selektif Vibrio sp.  yaitu Thiosulfate  Citrate  Bile  Sucrose (TCBS)  agar.  Daun  sernai  ( Wedelia  biflora )  adalah tumbuhan  yang  banyak  diteliti  dan  berguna  sebagi  antimikroba  atau  antibakteri. Berdasarkan kegunaan sebagai anti bakteri diharapkan dalam penelitian ini bahwa daun sernai  dapat  menjadi  antibakteri Vibrio sp.  Efektifitas  dan  efisiensi  dari  daun  sernai sebagai antibakteri Vibrio sp. dalam penelitian ini dapat diperoleh dengan menentukan rendemen ekstrak, analisis fitokimia dan uji aktifitas ekstrak sebagai antibakteri Vibrio sp  dengan  metode disc  diffusion Kirby-Bauer.  Rendemen  ekstrak  daun  sernai  yang dihasilkan  sebesar  11,7  %,  dengan  kandungan  metabolit  sekunder  hasil  uji  fitokimia serbuk daun sernai menunjukan positif adanya senyawa alkaloid, terpenoid, flavonoid, dan  saponin.  Ekstrak  daun  sernai  dengan  konsentrasi  100  %  mampu  menghambat bakteri  dengan  respon  hambat  pertumbuhan  bakteri Vibrio sp.  yang  kuat  atau  sensitif dan mempunyai respon hambat yang sama dengan tetrasiklin 30 mg. Information Abstract. Key words : anti- bacterial, Phytochemical, Vibrio
sp.
Vibriosis  disease  in  snapper,  vaname  shrimp  and  seaweed  is  often  caused  by  the bacterium Vibrio sp. The disease can be detected by isolating the bacteria and planting them  on Vibrio sp.  selective  agar  media,  namely  Thiosulfate  Citrate  Bile  Sucrose (TCBS) agar. Sernai leaf ( Wedelia biflora ) is a plant that is widely researched and is useful  as  an  antimicrobial  or antibacterial.  The  effectiveness  and  efficiency  of  sernai leaves as antibacterial Vibrio sp. in this study can be obtained by determining the yield of the extract, phytochemical analysis and test activity of the extract as an antibacterial Vibrio sp  with disc  diffusion Kirby-Bauer  method.  The  yield  of  sernai  leaf  extract produced was 11.7%, with secondary metabolite content from the phytochemical test results  of  sernai  leaf  powder  which  showed  a  positive  presence  of  alkaloids, terpenoids, flavonoids, and saponins. Sernai leaf extract with a concentration of 100% was able to inhibit bacteria by inhibiting the growth of Vibrio sp. which are potent or sensitive and have the same inhibitory response as tetracycline 30 mg.
Received: 21 April 2022 Accepted: 29 Mei 2022 ©2022 Jurusan Biologi FMIPA Unpatti, IAIFI Cab. Ambo

## A. PENDAHULUAN
Vibrio sp.  adalah  bakteri  gram  negatif  yang  bentuknya  seperti  batang  melengkung  dan bersifat anaerob fakultatif di air asin. Anggota tubuh bakteri ini bergerak dengan flagel di ujung sel  dan  terdapat  selubung.  Spesies-spesies  bakteri Vibrio sp.  bersifat  patogen  dan  salah  satu akibat dari bakteri ini adalah gastroenteritis (Soedarto, 2015). Penyakit Vibriosis pada ikan kakap (Zaenudin  dkk.,  2019),  udang  vaname  (Rusadi  dkk.,  2019)  dan  rumput  laut  (Susiyanto  dkk., 2021) sering disebabkan disebabkan oleh bakteri Vibrio , yang sudah diidentifikasi jenis-jenisnya yaitu V.  alginolyticus , V.  anguillarum ,  dan V.  parahaemolyticus (Felix  dkk.,  2011).  Penyakit tersebut  dapat  dideteksi  dengan  mengisolasi  bakteri  dan  menanamnya  pada  media  agar  selektif Vibrio ,  yaitu  TCBS  agar.  Pada  media  ini  koloni  bakteri  yang  tumbuh  tampak  berwama  kuning dan hijau (Effendi, 1998).
Daun sernai  ( Wedelia biflora ) adalah tumbuhan  yang banyak diteliti dan berguna sebagi antimikroba  atau  antibakteri  (Yoganandam  dkk.,  2015;  Afnidar,  2014),  antidermatitis  (Rinidar dkk.,  2005),  antipanosoma  (Harahap  dkk.,  2013),  antiplasmodium  (Isa,  2014)  dan  antipiretik (Rinidar dkk., 2013). Berdasarkan kegunaan sebagai anti bakteri diharapkan dalam penelitian ini bahwa  daun  sernai  dapat  menjadi  antibakteri Vibrio sp.  untuk  dapat  menolong  budidaya  ikan kakap,  udang  vaname  dan  memelihara  lingkungan  pesisir  pantai  untuk  budidaya  rumput  laut menjadi  lebih  efektif  dan  efisien.  Efektifitas  dan  efisiensi  dari  daun  sernai  sebagai  antibakteri Vibrio sp.  dalam  penelitian  ini  dapat  diperoleh  dengan  menentukan  rendemen  ekstrak,  analisis fitokimia dan uji aktifitas ekstrak sebagai antibakteri Vibrio sp.

## B. METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi  dan  Laboratorium  Hama  dan Penyakit Politeknik Perikanan Negeri Tual.

## Alat dan Bahan
Alat. Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  cawan  petri,  neraca  analitik, spatula,  erlenmeyer,  gelas  ukur,  labu  ukur, beaker  glass , hot  plate ,  alumunium foil ,  pipet  ukur, pipet  tetes, magnetic  strirrer ,  bunsen,  pemantik  api, cotton  swab steril, incubator  air concept , evaporator , oven, tabung reaksi, plat tetes, jangka sorong dan autoclave .
Bahan. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun sernai ( Wedelia biflora ), air  laut,  aquades,  media  Thiosulfate  Citrate  Bile  Sucrose  (TCBS),  alkohol  70%,  kertas  cakram antibiotik  tetrasiklin  30  mg,  kertas  cakram  kosong,  kapas,  amoniak,  kloroform,  asam  sulfat, pereaksi  Mayer,  pereaksi  Dragendorff,  pereaksi  Wagner,  asam  klorida,  asam  asetat  anhidrat, bubuk Mg, FeCl 3 1%, kertas lakmus  dan tissue.

## Penentuan Rendemen Ekstrak
Preparasi Sampel. Daun sernai yang diperoleh, dicuci dengan menggunakan air mengalir untuk  menghilangkan  kotoran  dan  cemaran  lain  yang  masih  menempel  pada  daun.  Kemudian, daun bidara ditempatkan pada nampan untuk ditiriskan dan diangin-anginkan selama 5 hari.
Pembuatan Ekstrak . Daun sernai yang telah dibersihkan kemudian dikeringkan dengan menggunakan  kering  anginkan  selama  5  hari.  Daun  yang  sudah  diangin-anginkan,  kemudian disusun  pada  loyang  dengan  ketebalan  yang  sama  agar  kering  daun  merata.  Daun  kering  yang dihasilkan  kemudian  dihancurkan  menggunakan  blender  dan  diayak  menggunakan  ayakan  60 mesh sehingga menghasilkan bubuk daun sernai.
Proses maserasi dilakukan dengan menimbang 1000 gram bubuk daun sernai yang sudah diayak menggunakan ayakan dan dimasukkan ke dalam labu erlenmeyer, kemudian ditambahkan pelarut  etanol  sebanyak  2000  ml.  Proses  ekstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi menggunakan  suhu  ruang  selama  5  hari.  Selanjutnya  ekstrak  disaring  menggunakan  kain  yang menghasilkan  filtrat  dan  ampas.  Filtrat  ekstrak  yang  diperoleh  dimasukkan  ke  dalam  labu erlenmeyer  untuk  dihilangkan  pelarut  yang  terdapat  dalam  ekstrak  sehingga  didapatkan  ekstrak kental,  dalam  penelitian  ini  proses  pengeringan  ekstrak  dilakukan  dengan  menggunakan evaporator sampai ekstrak membentuk pasta. Ekstrak pasta yang diperoleh dimasukkan ke dalam botol sampel.
Penentuan  Rendemen  Ekstrak . Rendemen  merupakan  hasil  bagi  dari  berat  produk (ekstrak)  yang  dihasilkan  dibagi  dengan  berat  bahan  baku  dikalikan  dengan  100%.  Perhitungan rendemen ekstrak adalah sebagai berikut:

## Analisis Fitokimia
Analisis  Senyawa  Alkaloid . Sampel  daun  sernai  sebanyak  4  g  dihaluskan,  kemudian ditambahkan kloroform lalu selanjutnya dihaluskan lagi. Ditambahkan 10 ml amoniak dan 10 ml kloroform.  Larutan  yang  terbentuk  disaring  ke  dalam  tabung  reaksi,  filtrat  ditambahkan  asam sulfat 2N sebanyak 10 tetes. Filtrat dikocok dengan dengan vortex, kemudian dibiarkan beberapa lama sampai terbentuk dua lapisan. Lapisan bagian atas dipindahkan ke dalam tiga tabung reaksi masing-masing  sebanyak  2,5  ml.  Ketiga  larutan  yang  dipisahkan  selanjutnya  dianalisis  dengan pereaksi Mayer, Dragendorff dan Wagner. Terbentuknya endapan menunjukkan contoh tersebut mengandung  alkaloid.  Reaksi  dengan  pereaksi  Mayer  akan  terbentuk  endapan  berwarna  putih, dengan  pereaksi  Dragendorff  akan  terbentuk  endapan  berwarna  merah  jingga  dan  dengan pereaksi Wagner terbentuk endapan  berwarna cokelat.
Analisis  Senyawa  Terpenoid  Dan  Steroid . Sampel  daun  sernai  sebanyak  50-100  mg yang telah dihaluskan, ditempatkan pada plat tetes dan ditambahkan asam asetat anhidrat sampai sampel  terendam  semuanya,  dibiarkan  selama  kira-kira  15  menit,  enam  tetes  dari  larutan  yang dipindahkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan  ditambah  2-3  tetes  asam  sulfat  pekat.  Adanya triterpenoid  ditunjukkan  dengan  terjadinya  warna  merah  jingga  atau  ungu,  sedangkan  adanya steroid ditunjukkan perubahan warna menjadi warna biru.
Analisis Senyawa Flavanoid . Sampel daun sernai sebanyak 200 mg yang telah diekstrak dengan  5  ml  etanol  dan  kemudian  dipanaskan  selama  lima  menit  dalam  tabung  reaksi. Selanjutnya  ditambahkan  beberapa  tetes  HCl  pekat,  lalu  selanjutnya  ditambahkan  0,2  g  bubuk Mg. Hasil positif ditunjukkan dengan timbulnya warna merah tua (magenta).
Analisis Senyawa Saponin . Sampel daun sernai sebanyak 2 g yang telah dihaluskan dimasukkan ke  dalam  tabung  reaksi,  ditambah  akuades  sehingga  seluruh  cuplikan  terendam,  kemudian dididihkan  selama  2-3  menit,  dan  didinginkan,  kemudian  dikocok  kuat-kuat.  Hasil  positif ditunjukkan dengan terbentuknya buih/busa  yang stabil. Analisis senyawa tannin : Sebanyak 20 mg  sampel  daun  sernai  yang  telah  dihaluskan,  ditambahkan  etanol  sampai  cuplikan  terendam semuanya.  Kemudian  sebanyak  1  ml  larutan  dipindahkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan larutan FeCl3 1% sebanyak 2-3 tetes. Hasil positif ditunjukkan dengan warna hitam kebiruan atau hijau.

## Uji Aktifitas Antibakteri
Pengambilan  Sampel  Air  Laut . Pengambilan  sampel  air  laut  dilakukan  dengan  botol yang yang sudah disterilkan. Sampel air laut diambil di Pesisir Pantai Watdek Kabupaten Maluku Tenggara dan langsung dipakai untuk analisis selanjutnya.
Pengenceran Ekstrak . Ekstrak daun sernai yang masih berupa pasta dikeringkan sampai berbentuk  bubuk  dengan  menggunakan  oven  dengan  suhu  80 o C.  Ekstrak  75%  bisa  dibuat  dari 3,75 gram bubuk ekstrak dilarutkan dalam 0,5 ml DMSO dan 5 ml aquades. Ekstrak 50% dibuat dengan melarutkan 2,5 gram dilarutkan dalam 0,5 ml DMSO dan 5 ml aquades, sedangkan untuk konsetrasi 25% sampai 1,5625% dilakukan pengeceran bertingkat. Pengenceran bertingkat untuk konestrasi  25%  dilakukan  dengan  cara  mengambil  2,5  ml  dari  pengenceran  ekstrak  50% dilarutkan dalam 5 ml aquades. Konsentrasi 12,5% dilakukan dengan cara diambil 2,5 ml ekstrak 25%  dilarutkan  dalam  5  ml  aquades.  Selanjutnya  dilakukan  pengenceran  dengan  metode  yang sama di dalam tabung reaksi untuk konsentrasi yang lebih kecil (v/v).
Isolasi Vibrio sp . Dan Metode Disc Diffusion Kirby-Bauer . Sampel air laut dari pesisir Watdek  diambil  dan  disimpan  dalam  botol  sampel,  kemudian  diambil  dengan  menggunakan teknik  pengulasan  yaitu  dengan  menggunakan cotton swab  sterill dan  diusapkan  di  atas  media TCBS lalu diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Sebelum dinkubasi dilakukan metode disc diffusion Kirby-Bauer  untuk  kontrol  positif,  kontrol  negatif  dan  ekstrak,  koloni  isolat  bakteri Virio sp . diinokulasi  pada  media  TCBS  dengan  suhu  37°C  selama  24  jam  untuk  mendapatkan isolat  bakteri Vibrio sp  dan  zona  bening.  Bakteri Vibrio sp.  yang  telah  diisolasi  dari  sampel rumput laut yang terinfeksi ice-ice dikultur pada media TCBS. Selanjutnya dutaruk kertas cakram kontrol positif, kontrol negatif dan ekstrak dan kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.  Kertas  cakram  yang  sudah  direndam  di  dalam  ekstrak  daun  sernai,  Pelarut  DMSO  dan antibiotik diletakkan di atas permukaan media TCBS dengan rapi, selanjutnya diinkubasi dengan bakteri  yang  akan tumbuh pada suhu 37 °C selama 24 jam. Ekstrak  yang digunakan  yaitu  pada konsentrasi  100  %  yaitu  konsentrasi  ekstrak  dalam  bentuk  pasta,  selanjutnya  ekstrak  pada konsentrasu 75 %, 50 %, 25 %, 12,5 %, 6,25 % dan 3,125 % . Pengamatan dilakukan selama 24 jam  dan  48  jam  dengan  parameter  yang  diukur  zona  bening  yang  terbentuk  disekitar  kertas cakram.
Penentuan Zona Hambat. Pengujian aktivitas ekstrak daun sernai menggunakan metode disc  diffusion Kirby-Bauer.  Penggunaan  metode  ini  bertujuan  untuk  melihat  seberapa  besar aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  sernai  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Vibrio sp.
dengan jenis konsentrasi yang dilihat dari zona hambatnya. Diameter zona hambat dapat diukur dengan jangka sorong dan dihitung dengan rumus:
Diameter  zona  hambat  =  {(diameter  panjang  zona  bening  -  diameter  cakram)  –  (diameter  lebar zona bening - diameter kertas cakram)}:2

## Analisis Data
Data  dalam  penelitian  ini  dianalisis  dengan  analisis  DMRT  ( Duncan’s  Multiple  Range Test ) pada taraf nyata 5%.

## C. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Penentuan Rendemen Ekstrak Daun Sernai
Ekstrak daun sernai  yang didapat dalam penelitian ini menggunakan pelarut etanol. Berat awal  serbuk  daun  sernai  yang  sudah  kering  sebanyak  1000  gram  yang  diekstrak  dengan  2  liter pelarut  etanol.  Ekstrak  dalam  bentuk  pasta  yang  diperoleh  sebanyak  117  gram.  Hasil  rendemen ekstrak  daun  sernai  dengan  pelaurt  etanol  sebesar  11,7  %.  Rendemen  ekstrak  dihitung  dengan maksud  adalah  mengetahui  potensi  jumlah  ekstrak  yang  akan  terikut  dengan  pelarut  yang  akan digunakan. Pelarut  yang digunakan dalam magang ini adalah etanol. Etanol adalah pelarut  yang bersifat  semipolar  sehingga  mampu  mengekstrak  senyawa-senyawa  yang  bersifat  polar  dan nonpolar.  Sehingga  hasil  rendemen  ekstrak  yang  diperoleh  akan  jauh  lebih  baik  dibandingkan dengan pelarut yang hanya bersifat polar atau pelarut nonpolar.

## Analisis Fitokimia
Analisis  fitokimia  sampel  daun  sernai  dalam  penelitian  ini  meliputi  analisis  senyawa alkaloid, terpenoid, steroid, flavonoid dan saponin. Analisis fitokimia dilakukan sebanyak 2 kali atau duplo dengan hasil yang dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Hasil uji fitokimia daun sernai
No Uji fitokimia Hasil uji 1 Alkaloid: Wagner Mayer Dragendorff + + - 2 Terpenoid + 3 Steroid - 4 Flavonoid + 5 Saponin +
Uji fitokimia dari sampel serbuk daun sernai diperoleh hasil positif untuk senyawa alkaloid dengan dua pelarut yaitu Wagner dan Mayer dengan memberikan endapan berwarna cokelat dan endapan  berwarna  putih,  sedangkan  pereaksi  Dragendorff  tidak  menunjukan  perubahan  warna positif yaitu merah jingga. Uji fitokimia untuk senyawa terpenoid menunjukan warna ungu yang terbentuk  menandakan  hasil  pengujian  positif  adanya  senyawa  terpenoid,  sedangkan  pengujian steroid tidak menunjukan warna positif yang diinginkan yaitu warna biru. Uji senyawa flavonoid
menunjukan  hasil  positif  dengan  terbentuknya  warna  merah  tua  (magenta)  dan  uji  saponin  juga menghasilkan  busa  yang  dapat  bertahan  ketika  diuji  dengan  akuades.  Menurut  Naim  (2005), setiap  tanaman  mempunyai  kemampuan  untuk  mensintesis  senyawa  aromatik.  Senyawa  itu merupakan  senyawa  metabolit  sekunder  dan  beberapa  diantaranya  telah  berhasil  diisolasi. Senyawa  aromatik  tersebut  dapat  berfungsi  sebagai  pertahanan  tumbuhan  terhadap  lingkungan yaitu dari mikroorganisme dan serangga.

## Uji Aktifitas Antibakteri
Uji  aktifitas  antibakteri  dalam  penelitian  ini  menggunakan  metode disc  diffusion Kirby- Bauer.  Hasil  dari  penelitian  ini  diperoleh  zona  hambat  yang  terbentuk  dari  ekstrak  daun  sernai, kemudian selanjutnya dibandingkan dengan kontrol positif yaitu antibiotik tetrasiklin 30 mg dan kontrol  negatif  yaitu  pelarut  DMSO  10  %.  Konsentrasi  ekstrak  daun  sernai  yang  digunakan dalam penelitian ini mulai dari konsentarsi 100 %, 75 %, 50 %, 25 %, 12,5 %, 6,25 % dan 3,125 %. Hasil zona hambat yang terbentuk dalam penelitian ini dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Zona hambat ekstrak daun sernai
Konsentrasi ekstrak Zona hambat 1 (mm) Zona hambat 2 (mm) Rata-rata zona hambat (mm) 100 % 22,95 18,15 20,55 a 75 % 11,5 10,65 11,075 c 50 % 5,65 6,1 5,875 c 25 % 4,5 5,1 4,8b c 12,5 % 3,1 3,15 3,125 c 6,25 % 3 2,4 2,7 c 3,125 % 1,5 1,8 1,65 c Kontrol (+) 26,1 25,3 25,7 a Kontrol (-) 0 0 0
Keterangan: Analisis Duncan’s Multiple Range Test , huruf yang sama menyatakan data tersebut tidak berbeda nyata; Zona hambat 1: Pengulangan 1; Zona hambat 2: Pengulangan 2; kontrol (+): Tetrasiklin 30 mg; Kontrol (-): DMSO 10 %.
Berdasarkan analisis Duncan maka diperoleh hasil zona hambat yang sama antara kontrol positif  dan  ekstrak  daun  sernai  100  %.  Hal  ini  menunjukan  bahwa  kemampuan  ekstrak  daun sernai dapat menghambat dengan kuat (sensitif) terhadap bakteri Vibrio sp. sama baiknya dengan antibiotik tetrasiklin 30 mg. Konsentrasi ekstrak daun sernai 75 %, 50 %, 25 %, 12,5 %, 6,25 % dan  3,125  %  memiliki  hasil  yang  tidak  berbeda  nyata,  tetapi  sangat  berbeda  nyata  dengan konsentrasi 100%. Hal ini menunjukan kemampuan menghambat bakteri Vibrio sp. untuk ekstrak dibawah  konsentrasi  100  %  bersifat  lemah  atau  resisten.  Klasifikasi  respon  hambatan pertumbuhan bakteri dalam kategori lemah, sedang dan kuat dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Klasifikasi respon hambatan pertumbuhan bakteri (Greenwood, 1995; Pratama 2005)
Diameter zona terang Respon hambatan pertumbuhan …> 20 mm Kuat (sensitif) 16 - 20 mm Sedang (Intermediet) 1 – 15 mm Lemah (Resisten) … 0 mm Tidak ada
Respon  hambatan  pertumbuhan  bakteri Vibrio sp.  dalam  penelitian  ini  dipengaruhi  oleh metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam  daun  sernai.  Penelitian  Bontjura  dkk.,  (2015) menyatakan  bahwa  fungsi  metabolit  terpenoid  sebagai  antibakteri  adalah  dapat  merusak membran sitoplasma dan dinding sel bakteri. Kemampuan metabolit alkaloid sebagai antibakteri menurut  penelitian  Rijayanti,  (2014)  yaitu  alkaloid  dan  saponin  dapat  merusak  susunan peptidoglikan  dinding  sel  bakteri  dan  flavonoid  langsung  merusak  DNA  bakteri.  Daun  sernai menunjukan positif adanya saponin. Menurut Ben Ahmed dkk., (2012) dan Maatalah dkk., (2011) memiliki kemampuan sebagai antibakteri.

## D. KESIMPULAN
Adapun  kesimpulan  dari  penelitian  ini  adalah  rendemen  ekstrak  daun  sernai  ( Wedelia biflora )  dalam  pelarut  etanol  yang  dihasilkan  sebesar  11,7  %,  dengan  kandungan  metabolit sekunder hasil uji fitokimia serbuk daun sernai ( W. biflora ) menunjukan positif adanya senyawa alkaloid, terpenoid, flavonoid, dan saponin. Ekstrak daun sernai ( W. biflora ) dengan konsentrasi 100 % mampu menghambat bakteri dengan respon hambat pertumbuhan bakteri Vibrio sp. yang kuat atau sensitif dan mempunyai respon hambat yang sama dengan tetrasiklin 30 mg.

## E. UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  dapat  terlaksana  dengan  baik  dan  lancar.  Oleh  sebab  itu,  peneliti  ingin mengucapkan  terima  kasih  kepada  Kepala  Laboratorium  dan  seluruh  laboran  di  Laboratorium Mikrobiologi  dan  Laboratorium  Hama  dan  Penyakit  Politeknik  Perikanan  Negeri  Tual.  Peneliti juga mengucapkan terima kasih kapada Ketua Program Studi Bioteknologi Perikanan Politeknik Perikanan  Negeri  Tual  yang  selalu  memberikan  motivasi  dan  dorongan  untuk  menyelesaikan penelitian ini.

## F. DAFTAR PUSTAKA
Afnidar.  2014.  Fitokimia  dan  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  kalus  tumbuhan  sernai  ( Wedelia biflora (L)DC). JESBIO Vol. III No. 4.
Ben Ahmed B, Chaieb I, Salah KB, Boukamcha H, Jannet H, Mighri Z, dan M Daami-Remadi. 2012.  Antibacterial  and  antifungal  activities  of  Cestrum  parqui  saponins:  possible interaction  with  membrane  sterols. International  Research  Journal  of  Plant  Science . 3(1): 001-007.
Bontjura,  S.,  Waworuntu,  O.A.,  Siagian,  K.V.  2015.  Uji  efek  antibakteri  ekstrak  daun  leilem ( Clerodendrum  minahassae L.)  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans . Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi UNSRAT . 4(4), 96-101. Effendi, N. 1998. Dasar-Dasar Keperawatan Kesehatan Masyarakat . Edisi 2. EGC. Jakarta Felix F, Nugroho TT, Silalahi S, dan Y Octavia. 2011. Screening of indonesian original bacteria Vibrio sp  as  a  cause  of  shrimp  diseases  based  on  16s  ribosomal  dna-technique. Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis . Vol. 3, No. 2, Hal. 85-99.
Greenwood. 1995. Antibiotic susceptibility (sensitivity) test, antimicrobial and chemotherapy. Mc Graw Hill Company . USA.
Harahap  DH,  Fahrimal  Y,  dan  H  Budiman.  2013.  Gambaran  darah  tikus  yang  diinfeksikan Trypanosoma  evansi  dan  diberi  ekstrak  daun  sernai  (Wedelia  biflora). J.  Med.  Vet . 7(2):126-129.
Isa M. 2014. Identifikasi kandungan senyawa kimia pada Wedelia Biflora dan uji bioaktivitasnya sebagai antiplasmodium berghei. J. Med. Vet . 8(1):51-55.
Maatalah  MB,  Bouzidi  NK,  Bellahouel  S,  Merah  B,  Fortas  Z,  Soulimani,  Saidi  R,  dan  A Derdour. 2012. Antimicrobial activity of the alkaloids and saponin extracts of Anabasis articulata. Journal of Biotechnology and Pharmaceutical Research . 3(3): 54-57.
Naim  R.  2005.  Senyawa  Antimikroda  dari  Tanaman. Dosen  FKH  dan  Pascasarjana  IPB . http://www. Iptek.net.id [29 maret 2022].
Pratama  MR.  2005.  Pengaruh  ekstrak  serbuk  kayu  siwak  ( Saivadora  persica )  terhadap pertumbuhan  bakteri Streptococcus  mutan dan Staphylococcus  aureus dengan  metode difusi agar. Skripsi . IPB. Bogor. http://skripsi.blogsome.com/. Diakses Tanggal : 18 mei 2022.
Rijayanti,  R.P.  2014.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  etanol  daun  mangga  bacang  ( Mangifera feotida L.)  terhadap Staphylococcus  aureus secara  in-vitro. Skripsi .  Universitas Tanjungpura Pontianak.
Rinidar,  Isa  M,  dan  Sugito.  2005.  Pengaruh  pemberian  infusa  daun  sernai  terhadap  peradangan reaksi alergi. Laporan Penelitian . Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Syiah Kuala, Banda Aceh.
Rinidar,  Isa  M,  dan  T  Armansyah.  2013.  Nilai  inhibition  concentration  (IC50)  ekstrak  metanol daun sernai  (Wedelia biflora) terhadap plasmodium  falciparum  yang diinkubasi  selama 32 dan 72 jam. J. Med. Vet . 7(1): 8-12.
Rusadi D, Wardiyanto dan R Diantari. Treatmen of vibriosis disesase ( Vibrio harveyi ) in vaname shrimp ( Litopenaeus vannamei , Boone 1931) using Avicenia alba leave extract. e-Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan . Volume VIII No 1. Soedarto. 2015. Mikrobiologi Kedokteran . CV. Sagung Seto. Jakarta.
Susiyanto AY, Hitijahubessy H, Samid A, dan O Cesar. 2021. Pengaruh ekstrak lamun Enhalus acoroides secara in  vitro sebagai  antibakteri Vibrio sp. penyebab penyakit ice-ice pada rumput laut Eucheuma cottoni . MjoCE . Vol 11 No 2. Hal. 93-98.
Yoganandam  GP,  Gowri  R,  dan  D  Biswas.  2015.  Evaluation  of  Wedelia  biflora  (Linn)  for anthelmentik and antimicrobial activity. J. Pharm . Res . 2(2):374-377.
Zaenuddin A, Nuraini YL, Faries A, dan S Wahyuningsih. 2019. Pengendalian penyakit vibriosis pada ikan kakap putih . Jurnal Perekayasaan Budidaya Air Payau dan Laut . No. 14: 77- 83.