PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN KELOR ( Moringa oleifera , Lam)  TERHADAP KESIAPAN KAWIN

## DAN PERKEMBANGAN FOLIKEL OVARIUM KELINCI
Effect of Moringa oleifera (Lam) Leaf Extract on Mating Readiness and Development of Rabbit Ovarian Follicles
Setiasih 1)* Sri Wahjuningsih 2 Sri Winarsih 3 Hendrawan Soetanto 2
1 Balai Pengkajian Teknologi Pertanian JawaTimur 2 Fakultas Peternakan, Universitas Brawijaya
3 Fakultas Kedokteran, Universitas Brawijaya
DOI: http://dx.doi.org/10.21111/agrotech.v6i3.4913
Terima 15 September 2020              Revisi 30 September 2020                  Terbit  30 Desember 2020
Abstrak: Daunkelor  ( Moringa  oleifera ,  Lam)  adalah  bahan  pakan  yang  kaya nutrisi  dan  kaya  zat  bioaktif  termasuk  jenis  fitoestrogen  yaitu  fitosterol  dan isoflavon. Tujuan penelitian ini adalah untuk menguji ekstrak daun kelor dengan pelarut  yang  berbeda  terhadap  kadar  estradiol,  kesiapan  kawin  dan perkembangan  folikel  ovarium  pada  induk  kelinci.  Tiga  ekstrak  daun  kelor yaitu ekstrak kasar etanol (EKE) Ekstrak Fraksi etanol (EFE) dan ekstrak fraksi heksan  (EFH)  digunakan  pada  penelitian  ini.  Tujuh  perlakuan  dicoba  pada  28 ekor  induk  kelinci    dalam  yaitu  pemberian  ekstrak  dalam  pakan  pellet  dengan dosis  0  %  (kontrol),  EFH  0,13%,  EFH  0,26%,  EFE  0,37,  EFE  0,74  %,  EKE 0,54% dan EKE 1,08 %.  Masing-masing perlakuan diulang pada 4 ekor ternak. Variabel  dalam  penelitian  ini  kesiapan  kawin  dan  histologi  perkembangan folikel ovarium. Hasil penelitian menunjukan bahwa perlakuan pemberian  EFH 0,26%  menyebabkan  menyebabkan  kesiapan  kawin  100%  dan  angka kebuntingan  75%.    Perlakuan  penambahan  EFH,  EFE  dan  EKE  menyebabkan penurunan  perkembangan  folikel  pada  ovarium  induk  kelinci  laktasi  pada  hari ke-28.  Dari  penelitian  ini  disimpulkan  bahwa  pemberian  ekstrak  daun  kelor
* Korespondensi email: setiasihchaidar@gmail.com Alamat : Balai Pengkajian Teknologi Pertanian Jawa Timur Jl. Raya Karangploso Km 4 Malang
meningkatkan estradiol darah, mengakibatkan ternak birahi tetapi memiliki efek menurunkan perkembangan folikel pada ovarium kelinci.
Kata kunci: kelor, Moringa oleifer a, reproduksi, fitoestrogen, folikel
Abstract: Moringa  oleifera (Lam)  is  feed  rich  nutrients  and  bioactive compaunds including phytosterogen types namely phytosterols and isoflavones. The  purpose  of  thid  study  was  to  test  moringa  leaf  extracts  with  diferent solvents  against  mating  readiness  and  ovarian  foliccle  development  in  rabbit does . Three moringa leaf extracts namely ethanol coarse extract (EKE) ethanol fraction extract (EFE) and hexan fraction extract (EFH) were used in this study. Seven treatments were tried on 28 rabbit does in the extracts in pellet feed at a dose of 0 % (without extract), EFH 0.13%, EFH 0.26%, EFE 0.37, EFE 0.74%, EKE 0.54% and EKE 1.08%.  Each treatment is repeated on 4  tails rabbit does. The  variables  in  this  study  were  mating  readiness  and  histology  of  ovarian follicle  development.  The  results  showed  that  the  treatment  of  EFH administration  of  0.26%  caused  100%  mating  readiness  and  75%  pregnancy rate.  The addition of EFH, EFE and EKE treatment led to a decrease in follicle development  in  the  ovaries  of  lactation  rabbit  mothers  on  day  28.  From  this study it was concluded that the administration of moringa leaf extract increases blood  estradiol,  resulting  in  passionate  livestock  but  has  the  effect  of  lowering follicle development in the ovaries of rabbits.
Key words: Moringa oleifera , reproduction, phytoestrogen, foliclle

## 1. Pendahuluan
Ternak  pada  masa  reproduksi  membutuhkan  pakan  dalam jumlah  dan  kualitas  yang  memadai  agar  dapat  mencapai  kinerja reproduksi  yang  optimal.  Menurut  Smith  dan  Akinbamijo,  (2000) pengaruh    faktor  nutrisi  pada  kinerja  reproduksi  disebabkan banyak hal seperti kecukupan energi,  protein, vitamin A, vitamin E,  selenium,  cooper  dan  seng  serta  faktor  lain  seperti  adanya fitoestrogen  yang  berhubungan  dengan  fungsi  hormon-hormon reproduksi.
Bahan  pakan  yang  banyak  mengandung  nutrisi  tinggi  dan mengandung  senyawa  fitoestrogen  dapat  dijadikan  alternatif subtitusi  atau  suplementasi  pakan  untuk  meningkatkan  kinerja reproduksi  ternak. Moringa  oleifera Lam.  atau  kelor  merupakan tanaman  yang  memiliki  kandungan  protein  tinggi,  kaya  asam amino  esensial,  mineral  dan  vitamin  dan  mengandung  banyak senyawa  yang  bersifat  bioaktif  (Fahey,  2005).  Daun  kelor merupakan  sumber  protein  dengan  kandungan  asam  amino  yang lengkap  yang bermanfaat  untuk  produksi ternak (Rachmacandran, et  al . 1980), sedangkan  senyawa bioaktif pada daun kelor banyak bermanfaat dalam metabolisme.
Senyawa  fitosterol  dan  isoflavon  yang  merupakan  zat  bioaktif yang terkandung dalam  daun kelor juga  memiliki pengaruh pada reproduksi karena bersifat estrogenik (Ryokkynen, 2006).  Mutiara et  al .  (2013)  melaporkan  kandungan  fitosterol  tergantung  pada pengolahan  yaitu  kandungan  tertinggi  didapatkan  pada  tepung daun  kelor  yang  diberi  perlakuan  blansing  kukus  yaitu mengandung,  stigmasterol  2410  ppm,  kampesterol  348,05  ppm dan β-sitosterol 3321,17 ppm.  Daun kelor merupakan bahan yang kaya kandungan flavonoid termasuk isoflavon. Karthivashan, et al .
(2015)  melaporkan  adanya  senyawa  flavonoid  pada  ekstrak  air daun  kelor  yaitu    quercetin  dan  kaemferol  namun  tidak  ada senyawa  isoflavon,  sedangkan    Khojali, et  al .  (2014)  telah mengidentifikasi  dan  mengisolasi    senyawa  isoflavon    2,6,5’-
trimethyl-8-3’-dimethoxyisoflavone dari ekstrak etanol heksan dari daun  kelor.  Setiasih, et  al .  (2019)  melaporkan  identifikasi  adanya senyawa  fitosterol  (lathosterol,  campesterol,  stigmasterol  dan  β- sitosterol) pada ekstrak kasar etanol dan ekstrak fraksi heksan daun kelor  serta  kandungan  isoflavone      (daidzein,  formononetin, biocanin  A  dan  glycitein)  pada  ekstrak  kasar  etanol  dan  fraksi ekstrak etanol daun kelor.
Keberadaan senyawa fitoestrogen  yaitu fitosterol dan isoflavon pada  daun  kelor  diduga  sebagai  penyebab  jika  diberikan  pada pakan  akan  mempengaruhi  kinerja  reproduksi  ternak.  Isoflavon adalah  golongan  flavonioid  yang  bersifat  estrogenik  karena memiliki struktur mirip dengan estradiol pada mamalia maka dapat berikatan secara langsung dengan reseptor estrogen (Pawiroharsono,  2001).  Menurut  Ryokkynen,  (2006)  fitosterol merupakan senyawa alami yang mempunyai struktur mirip dengan kolesterol  yang  bermanfaat  sebagai  prekursor  hormon-hormon steroid  termasuk  estradiol  dan  progesteron.  Pemberian  fitosterol mempengaruhi hormon-hormon steroid seperti estradiol, androgen dan  progesteron.  Target  hormon  steroid  adalah  organ-organ reproduksi  termasuk  testis,  ovarium,  uterus  dan  glandula  alveoli susu.
Pengaruh  positif  pemberian  daun  kelor  terhadap  kinerja reproduksi kelinci yaitu litter size, berat lahir anak sekelahiran dan produksi susu yang diimplementasikan dari PBBH anak (Alemede,
et  al.,  Ayodele  2014;  et  al.,  2014)  sedangkan  Olla, et  al. ,  (2012) melaporkan  sebaliknya.    Penelitian  ini  bertujuan  untuk  melihat pengaruh  senyawa  bioaktif  yang  terkandung  dalam  ekstrak  daun kelor  dengan  pelarut  yang  berbeda  terhadap  respon  reproduksi kelinci  betina  yaitu  terjadinya  birahi  atau  kesiapan  kawin  dan perkembangan folikel pada ovarium.

## 2. Bahan dan Metode
Sebanyak  28  ekor  ternak  kelinci  betina  jenis  peranakan New Zealand White induk yang pernah beranak sekali – dua kali dengan kisaran  bobot  badan  2,1  –  2,8  kg  dan  7  ekor  pejantan  peranakan New Zealand White bobot badan 2,4- 2,9 kg. Induk kelinci dibagi dalam  empat  kelompok  yaitu  kelompok  I  dengan  rata-rata  bobot badan  2,1  kg,  kelompok  II  2,35  kg,  kelompok  III  2,64  kg    dan kelompok IV  2,85 kg.  Ekstrak dipakai dalam penelitian ini yaitu Ekstrak  Fraksi  Heksan  (EFH),  Ekstrak  Fraksi  Etanol  (EFE)  dan ekstrak  kasar  etanol  (EKE).  Setiap  ekstrak  diuji  coba  pada  dua level  yaitu setara dengan penambahan 10% dan 20% tepung daun kelor dalam pakan konsentrat,  sehingga ada tujuh perlakuan  yang dicoba  dalam  penelitian  ini  yaitu    penambahan  pakan  konsentrat yang  mengandung  protein  kasar  sekitar  18%  dengan  tambahan ekstrak daun kelor  yaitu; TE tanpa ekstrak/kontrol,  0,13 % EFH, 0,26% EFH, 0,37 EFE, 0.74 EFE, 0,54 % EKE, dan  1,08% EKE. Percobaan    menggunakan  rancangan  RCBD    (Randomized
Complete  Block  Design)  dengan  tujuh  perlakuan  dan  empat ulangan.
Pakan  konsentrat  yang  diberikan  adalah  pakan  konsentrat perlakuan  dan  pakan  hijauan.    Pakan  konsentrat  diberikan sebanyak  2  %  dari  berat  badan  dan  pakan  hijuan  (daun  brokoli) diberikan secara adlibitum.  Pakan konsentrat diberikan pada pagi hari dan pakan hijauan diberikan pada sore hari.
Pemberian  pakan  konsentrat  perlakuan  diberikan  pada  5  hari sebelum  kawin,  dan  dihentikan  setelah  ternak  kawin.  Setelah ternak  kawin  sampai  melahirkan,  kelinci  diberi  pakan  kontrol (tanpa  ekstrak)  untuk  menghindari  abortus  karena    pengaruh fitoestrogen.  Kemudian  setelah  melahirkan  induk  kelinci  diberi pakan konsentrat perlakuan kembali.
Variabel  penelitian  adalah  kondisi  vulva  pada  saat  sebelum dikawinkan, kesiapan ternak untuk kawin, dan gambaran histologi dari  ovarium  (jumlah  folikel  primer,  folikel  sekunder,  folikel tersier,  folikel de Graf dan korpus luteum). Kondisi vulva diamati mulai  hari  ke  5-7  pasca  pemberian  pakan.  Pengamatan dilakukansecara  visual  meliputi  keadaan  warna  dan  kebengkaan. Warna  digolongkan  menjadi  4  yaitu  pucat,  merah  muda,  merah dan  ungu.  Sedangkan  kebengkaan    yaitu    dikategorikan  bengkak dan tidak bengkak. Pengamatan dilakukan minimal dua orang yang berpengalaman (> 5 th) sebagai peternak kelinci. Preparat histologi
ovarium dibuat dari ovarium kiri dari induk kelinci fase menyusui hari ke 28 yang dimatikan.
Preparat    ovarium    discan  dan  difoto  menggunakan  Program OlyVia  dengan  pembesaran40  dan  200  x.  Kemudian  dihitung jumlah  folikel  menurut  perkembangannyamenggunakan  Program Image  Raster  3.  Data  dianalisa  anova  RAK  bila  ada  beda  nyata dilanjutkan dengan uji Tukey.

## 3. Hasil dan Pembahasan
Kesiapan kawin ternak kelinci betina dilihat dari kondisi vulva yaitu  berdasar  warna  dan  kebengkakan  (Gomez, et  al. ,  2008).
Warna vulva diklasifikasikan menjadi beberapa warna yaitu pucat, merah  muda,  merah  dan  ungu,  sedangkan  kebengkakan  yaitu bengkak  dan  tidak  bengkak.  Ternak  kelinci  yang  memiliki kesiapan  kawin  tinggi  adalah    betina  dengan  kondisi  vulva berwarna  merah  dan  bengkak.  Bila  kondisi  tidak  seperti  tersebut maka  ternak  tidak  siap  untuk  kawin  atau  bila  dikawinkan  tingkat keberhasilan perkawinan sangat rendah.
Kondisi  vulva  saat  dilakukan  perkawinan  pada  penelitian  ini disajikan seperti pada tabel 1.

## Tabel 1. Perkembangan kondisi vulva, kesiapan ternak untuk kawin dan angka kebuntingan
Perlakuan Warna (%) Kebengkakan (%) Kesiapan kawin (%) Angka Kebuntingan (n=4) (%) Ungu Merah Merah muda Pucat Bengkak  Tidak bengkak TE 25 50 0 25 50 50 75 50 EFH 0.13% 0 50 0 50 75 25 75 25 EFH 0.26% 0 75 25 0 75 25 100 75 EFE 0.37% 25 50 0 25 50 50 50 50 EFE 0.74% 0 50 25 25 50 50 75 25 EKE 0.54% 0 75 25 0 75 25 75 75 EKE 1.08% 25 75 0 0 75 25 75 50
*) superkrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan beda nyata ( P< 0.05) %
Berdasarkan  data  pada  Tabel  2,  diketahui  bahwa  terjadi perkembangan  folikel  pada  ovarium  induk  kelinci  laktasi  tidak bunting  saat  28  hari  post  partum,  namun  perkembangan  folikel pada perlakuan pemberian EFH, EFE dan EKE daun kelor melalui pakan  lebih kecil dari pada perlakuan TE.
Ubilla  dan  Rebollar  (1994)  melaporkan  bahwa  fase  folikuler atau  perkembangan  folikel  pada  induk  kelinci  laktasi  yang  tidak bunting,  diduga  terjadi  pada  hari  ke  23  –  30  laktasi.    Perlakuan pemberian  ekstrak  tepung  daun  kelor  menyebabkan  peningkatan kadar estradiolpada induk laktasi (Setiasih, 2019). Tingginya kadar estradiol dalam darah menghambat hipotalamus sehingga menekan kelenjar  hipofisa  untuk  mensekresikan  hormon  FSH  melalui umpan  balik  negatif.  Menurunnya  kadar  FSH  menyebabkan
terjadinya  penurunan  perkembangan  folikel  dalam  ovarium. Pengaruh pemberian ekstrak yang mengandung senyawa fitosterol dan  isoflavon  menyebabkan  terganggunya  mekanisme  hormonal pada  poros  hipotalamus-hipofisa-ovarium.    Hal  yang  serupa dilaporkan oleh  Musahilah (2010), bahwa  pemberian tepung daun maja  yang  mengandung  senyawa  fitosterol  menyebabkan perlambatan  perkembangan  folikel  sehingga  memperpanjang siklus estrus pada tikus.
Saleh  (2013)  melaporkan  bahwa  pematangan  folikel  atau perkembangan  folikel  tersier  sangat  tergantung  pada  konsentrasi FSH dan LH, selain juga oleh estrogen yang dihasilkan oleh folikel ovarium.    Kegagalan  perkembangan  folikel  kemungkinan  karena tidak cukupnya konsentrasi FSH, LH atau estrogen. Namun atresia folikel  bisa  terjadi  apabila  kelebihan  LH,  estrogen  atau progesteron.
Menurut Lebas, et al (1986) pada ternak kelinci, sebagai ternak dengan ovulasi yang terjadi karena rangsangan ( induced ovulator ),
maka  kopulasi  dapat  menyebabkan  peningkatan  ukuran  folikel secara  cepat  pada  masing-  masing  ovarium.  Kopulasi  atau rangsangan  pada  vagina  menstimulus    hipotalamus  sehingga melepaskan LHRH sehingga hipofisa anterior mensekresikan FSH dan  LH hingga terjadi perkembangan folikel  dan ovulasi. Ovulasi padakelici  biasanya  terjadi  6  -  10  jam    setelah  kopulasi  atau perangsangan.  Laporan  sebaliknya  terjadi  pada  sapi  yaitu
pemberian  daun  kelor  dalam  pakan  tambahan  urea  molasses multinutrien moringa blok (UM3B) untuk induk sapi laktasi dapat memperpendek  dapat  mempercepat  timbulnya  gejala  birahi, memperpanjang  lamanya  birahi,  dan  meningkatkan  persentase angka  kebuntingan    (Suyanto,  et  al,  2020).  Hal  tersebut kemungkinan  disebabkan  karena  faktor  nutrien  atau  karena perbedaan tipe ovulasi.

## 4. Kesimpulan
Pemberian  ekstrak  kelor  yaitu  ekstrak  kasar  etanol,  ekstrak fraksi  heksan  dan  ekstrak  fraksi  etanol  daun  kelor  mempengaruhi terjadinya  birahi  sehingga  meningkatkankesiapan  kawin  pada kelinci  betina,  namun  berakibat  memperlambat  perkembangan folikel pada ovarium pada fase laktasi.

## 5. Referensi
Alemede,  I.C.,  E.A.  Onyeji,  D.N.  Tsado,  E.L.  Shiawoya.  2014.
Reproductive Response of Rabbits Dose To Diets Containing Varying Levels of Horseradish (Moringa oleifera) Leaf Meal,
J ournal  of  Biology,  Agriculture  and  Healthcare .  ISSN  2224-
3208 (paper) ISSN 2225-093X (online). 4 (19) :62-68, 22 Mei
2015.
Ayodele,  A.E.,  J.R.  Adeola,  A.T.  Mayowa.    2014.  Reproductive
Performance  of  Rabbit  Does  Fed  Graded  Levels  of  Moringa
Oleifera  Leaf  Meal  Based  Diet, International  Journal  of Science. (3): 49-53
Estrella,  MCP.,  M.D.,  Jacinto  Blas  V.,  Mantaring  III,  M.D.,  G.Z. David, M.D.,  Michelle A. Taup, M.D. 2000. A Double-blind, Randomized  controlled  trial  on  the  use  of  malunggay (Moringa  oleifera)  for  augmentation  of  the  volume  of breastmilk  among  non-nursing  mothers  of  paterm  infants,
Galacto.Com. Philippine Journal Pediatry 49: 3-6.
Fahey , J.W.  2005. Moringa  oleifera :  A  Review  of  the  Medical Evidence  for  Its  Nutritional,  Therapeutic,  and  Prophylactic Properties.  Part  1,  Johns  Hopkins  School  of  Medicine, Department  of  Pharmacology  and  Molecular  Sciences,  Lewis B. and Dorothy Cullman Cancer Chemoprotection Center, 725 N.  Wolfe  Street,  406  WBSB,  Baltimore,  Maryland,  USA 21205-2185.
Gómez,  R.B.,  PCM.  Becerril,  H.G.  Torres,  and  M.A  Pro.  2004.
Relationship  among  Feeding  Level,  Change  of  Cage  and Fasting  with  Vulva  Color  and  Sexual  Receptivity  in  New
Zealand White and Californian Nulliparous Does.,
Proceedings  of  the  8th  World  Rabbit  Congress ,  no.  1978:
270–275.
Karthivashan,  G.,  P.  Arulselvan,  A.R.  Alimon,  I.S.  Ismail,  and S.Fakurazi.  2015.  Competing  Role  of  Bioactive  Constituents in Moringaoleifera Extract  and  Conventional  Nutrition  Feed
on  the  Performance  of  Cobb  500  Broilers, BioMed  Research International 2015;  .Hindawi  Publishing  Corporation.
Doi:10.1155/2015/970398
Lebas,  F,  P.  Coudert,  R.  Rouvier,  H.  de  Rochambeau,  1986.  The Rabit.  Husbandry,  Health  and  Production.  Food  and Agricultural Organization of United Nations. Rome; 21-65
Musahilah  T ,  2010.    Efek  Pemberian  Ekstrak  Daun Maja (Aegle armelos  Corr.)  terhadap  Fertilitas Tikus Betina.  Tesis. Sekolah Pascasarjana. Institut Pertanian Bogor. Bogor, 2010 Mutiara,  K.T,  Harijono,  T.  Estiasih,  E.S.  Wahyuni.  2013.  Effect Lactagogue Moringa  Leaves  ( Moringa oleifera Lam) Powder in  Rats  White  Female  Wistar, J.  Basic.  Appl.  Sci.  Res. ,
3(4)430-434.
Nath, D., N. Sethi, R.K. Singh, A.K. Jain, 1992. Commonly Used Indian  Abortifacient  Plants  with  Special  Reference  to  Their Teratologic Effect in Rats. Journal of Ethnopharmacology 36
(2); 147-154.
Ola  S.I.,  O.S.  Williams,  I.A.  Obamojure,  A.M.  Okunlola,  2012.
Sexual Receptivity And Conception Rate Of Rabbit Does Fed Selected Perennial Forages In Ile-Ife, Nigeria. Proceedings 10 Th  World  Rabbit  Congress  –  September  3  -  6,  2012–  Sharm El- Sheikh –Egypt, 291 – 295
Pawiroharsono,  S.  2001.  Prospek  dan  Manfaat  Isoflavon  untuk
Kesehatan. Direktorat Teknologi Bioindustri, Badan
Pengkajian dan Penerapan Teknologi; 1-8.
https://www.scribd.com/doc/117479146/Prospek-Dan- Manfaat-Isoflavon-Untuk-Kesehatan . 12 Pebruari  2016
Raj, A., A.Singh., A. Sharma, N. Singh, P. Kumar, V.Bhatia. 2011.
Antifertility  Activity  of  Medicinal  Plants  on  Reproductive system  of  Female  Rat. International  Journal  of  Bio- Engineering Sciences & Technology-
IJBEST. http://technicaljournals.org .  2  (3):  44-50.  4  Maret
2015.
Ramachandran,  C.,  K.V.  Peter  and  K.  Gopalakrishnan,  1980.
Drumstick  ( Moringa  oleifera ):  A  Multipurpouse  Indian
Vegetable. Journal Economic Botany 34 (3): 276 – 283.
Ryokkynen, A., 2006.  Effects  of Phytoestrogens  on Reproduction and Weight Regulation of Mammals. Dissertations in Biology.
. University of Joensuu; 13-21.
Saleh,  A.M.,  2013.  Histological  Study  Of  Ovary  Through  Last
Periods  (Oryctolagus  Cuniculus)  Of  Pregnancy  In  Domestic Rabbit. Veterinary Medical Sciences Vol. (4) 11-19
Setiasih,  Wahjuningsih  Sri,  Winarsih  Sri,  SoetantoHendrawan,
2019.  The  Effects  Of  Adding MoringaOleifera Leaves Extract  On  Rabbit  Does’  Milk  Production  And  Mammary Gland Histology. Rjoas, 8(92), August 2019. Doi
10.18551/Rjoas.2019-08.34: 296-304
Ubilla E., Rebollar P.G., 1994. A study on the evolution of sexual receptivity  and  plasma  estradiol-17beta  levels  throughout  the lactation  period,  in  rabbits  CIHEAM  Cahiers  Options Méditerranéennes; n. 8; 377-381