Biofaal Journal; Vol 4, No 1. Juni 2023. Pp 40  – 48. ISSN: 2723-4959 (online)
UJI  AKTIVITAS  ANTIBAKTERI Aeromonas  hydrophilla PENYEBAB PENYAKIT  ICE-ICE  DARI  EKSTRAK  RUMPUT  LAUT Kappaphycus alvarezii DAN DAUN MANGROVE ( Rhizophora apiculata )
Antibacterial Activity Efficacy of Extract Seaweed Kappaphycus alvarezii And Leaves of Mangrove  ( Rhizophora  apiculata )  Against Aeromonas  hydrophilla Causes  of  Ice-ice Disease
Hendro  Hitijahubessy 1*) ,  Muniati  Nur  Aisyah  Bandjar 2) , Laury  Marcia  Ch.  Huwae 3) , M. I. H. Hanoatubun 4) 1*,2,4 Program Studi Bioteknologi Perikanan, Jurusan Teknologi Hasil Perikanan, Politeknik Perikanan Negeri Tual
3 Program  Studi  Bioteknologi,  Jurusan  Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam, Universitas Pattimura
1* Corresponding Author e-mail : hendro@polikant.ac.id
Informasi Abstrak. Kata kunci : Aeromonas hydrophilla , Antibakteri, ice-ice , Mangrove, Rumput Laut Maluku  Tenggara,  rumput  laut  menjadi  mata  pencaharian  masyarakat.  Namun,  dalam pembudidayaannya terdapat beberapa kendala umum  yang sering dialami. Salah satunya adalah  penyakit ice-ice yang  disebabkan  oleh  keberadaan  bakteri  seperti Aeromonas hydrophilla .  Oleh  sebab  itu,  pencegahan  yang  dapat  dijadikan  solusi  adalah  dengan menggunakan  antibakteri  alami.  Salah  satu  bahan  alam  yang  dapat  dijadikan  antibakteri adalah  rumput  laut,  karena  kandungan  senyawa  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri,  secara  umum  senyawa  bioaktif  yang  banyak  dijumpai  adalah  flavonoid,  fenol, tanin.  Selain  rumput  laut,  tanaman  mangrove  juga  mempunyai  senyawa  yang  bisa menjadi  antibakteri.  Metode  ekstrak  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode ekstraksi sederhana yang hanya menggunakan satu jenis pelarut, yaitu aquades kemudian dilakukan  perbandingan  konsentrasi  antara  100%,  80%,  60%  dan  40%.  Kemudian pengujian  zona  hambat  dilakukan  dengan  metode  difusi  kertas  cakram  ( paper  disc diffusion ),  yaitu  kertas  cakram  dicelupkan  ke  dalam  masing-masing  ekstrak  dengan konsentrasi  yang  berbeda  dan  ditempelkan  pada  media  dalam  cawan  petri  yang  telah ditumbuhi  bakteri.  Pengukuran  zona  hambat  yang  terbentuk  dilakukan  setelah  cawan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 o C. Hasil pengukuran menunjukkan kedua ekstrak aquades memiliki daya hambat sedang hingga kuat. Kesimpulan dari penelitian ini adalah ekstrak aquades rumput laut dan daun mangrove memiliki daya hambat terhadap bakteri Aeromonas hydrophilla . Information Abstract. Key words : Aeromonas hydrophilla , Antibacterial, ice-ice ,
Mangrove, Seaweed
Southeast  Maluku  area,  seaweed  is  the  livelihood  of  the  community.  However,  in  its cultivation  there are  some  common  obstacles  that  are often  experienced.  One of  them  is ice-ice  disease  caused  by  the  presence  of  bacteria  such  as Aeromonas  hydrophilla . Therefore,  prevention  that  can  be  used  as  a  solution  is  antibacterial.  One  of  the  natural ingredients that can be used as an antibacterial is seaweed, because it contains compounds that  can  inhibit  bacterial  growth.  In  general,  the  most  common  bioactive  compounds found are flavonoids, phenols, and tannins. In addition to seaweed, mangrove plants also have  compounds  that  can  be  antibacterial.  The  extract  method  used  in  this  study  is  a simple extraction method that uses only one type of solvent, namely distilled water. And a comparison of concentrations between 100%, 80%, 60% and 40% was carried out. Then the inhibition zone test was carried out using the paper disc diffusion method, where the disc paper was dipped into each extract with different concentrations and placed in a petri dish that had been overgrown  with bacteria. Measurement of the inhibition zone formed was  carried  out  after  the  plates  were  incubated  for  24  hours  at  37 o C.  The  measurement results  show  that  both  aquades  extracts  have  medium  to  strong  inhibitory  power.  The conclusion  of  this  research  is  that  aquades  extract  of  seaweed  and  mangrove  leaves  has inhibitory power against Aeromonas hydrophilla bacteria.
Received: 9 Februari 2023 Accepted: 7 Mei 2023 ©2023 Jurusan Biologi FMIPA Unpatti, IAIFI Cab. Ambon

## A. PENDAHULUAN
Maluku  Tenggara  merupakan  salah  satu  kabupaten  di  Provinsi  Maluku  dengan memiliki potensi perikanan dan kelautan yang cukup bagus, salah satunya adalah rumput laut. Data  Statistik  Dinas  Kelautan  Dan  Peikanan  Provinsi  Maluku,  Maluku  Tenggara  mampu memproduksi rumput laut hingga 112.229 ton (Talakua dan Pentury, 2017). Sehingga banyak masyarakat  desa  (ohoi)  yang  menjadikan  budidaya  rumput  laut  sebagai  mata  pencaharian. Talakua dan Pentury (2017) juga mengatakan sebanyak 2.624 masyarakat merupakan rumah tangga  perikanan  budidaya  rumput  laut.  Namun  dalam  budidaya  rumput  laut  ini  terdapat beberapa  kendala  umum  yang  sering  dialami  oleh  petani  rumput  laut  seperti  hama  dan penyakit,  aktivitas  pelayaran  dan  sebagainya.  Penyakit  yang  sering  menyerang  rumput  laut ini salah satunya adalah ice-ice .
Penyakit ice-ice merupakan  penyakit  musiman  dengan  ciri thallus yang  berubah warna menjadi putih, rapuh dan mudah patah. Pemicu dari kemunculan penyakit ini menurut Ayunindya,  (2018)  adalah  suhu  yang  ekstrim  dan  kecepatan  arus  yang  rendah  selain  dari kualitas  perairan.  Terjadinya  penyakit  ini  disebabkan  oleh  bakteri  pathogen  tertentu.  Salah satu  bakteri  pathogen  yang  menyerang  rumput  laut  adalah Aeromonas  hydrophilla .  Bakteri ini  diduga  dapat  memproduksi  faktor  endotoksin  dan  eksotoksin  yang  sangat  berpengaruh pada  patogenitas  (Haryani,  2012).  Dampak  dari  penyakit  ini  dapat  menurukan  pendapatan nelayan  dan  menurunnya  komoditi  rumput  laut  yang  ada  di  Maluku  Tenggara.  Sehingga, perlu adanya solusi antibakteri terhadap penyakit ini.
Antibakteri  saat  ini  banyak  dimanfaatkan  dari  bahan  alam  yang  memiliki  senyawa bioaktif  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri,  kandungan  bioaktif  merupakan senyawa  fitokimia  yang  dihasilkan  dari  metabolisme  sekunder.  Menurut  penuturan  Safia (2020) Rumput laut ( Eucheuma cottonii ) memiliki senyawa flavonoid, fenol hidrokuinon, dan tanin.  Flavonoid  dianggap  sebagai  antibakteri  karena  kemampuannya  dalam  membentuk senyawa kompleks dengan protein sehingga dapat merusak membran sel bakteri. (Nurjanah et al., 2018).  Selain  rumput  laut,  tanaman  mangrove  juga  mempunyai  senyawa  antibakteri dibagian daun, kulit, batang, ranting dan buah (Syawal, 2019).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  apakah  zat  antibakteri  yang  terdapat  dalam rumput laut Kapppaphycus alvarezii dan daun mangrove Rhizophora apiculata berpengaruh terhadap Aeromonas hydrophilla. Mengingat rumput laut umumnya di jadikan sebagai bahan dalam  pembuatan  produk.  Selain  itu,  belum  banyak  penelitian  yang  dilakukan  terhadap rumput laut dan daun mangrove khususnya sebagai antibakteri Aeromonas hydrophilla .

## B. METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Adapun alat yang digunakan dalam penelitian adalah Cawan Petri, Erlenmeyer pyrex, Spatula,  Neraca  Analitik  OHOUS  PX224,  Timbangan SCOUT  PRO 6000G,  ,  Micropipet 100-1000  BOECO , Gelas Beker pyrex , Gelas Ukur SANAI LAB BORO 3.3, Hotplate Stirrer Olab Tech MSH-300N , Colony Counter Rocker Galaxy 230 , Blender, Laminar Air Flow SW- CJ-IF  type  clean  bench  air  tech , Incubator air  concept  Yenaco  ync-inc30L , Incubator  bio concept , Orbital incubator Struat SI500 , penyaring, kertas label.
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  rumput  laut  jenis K. alvarezii yang  terinfeksi  penyakit ice-ice dan  juga  rumput  laut  sehat  yang  akan  di  ekstraksi sebagai antibakteri yang didapatkan di perairan Desa Sathean, Maluku Tenggara. Dan bahan ekstraksi  sebagai  antibakteri  lainnya  yaitu  daun  mangrove Rhizophora  apiculata yang  di dapatkan  di  Desa  Ngilngof.  Bahan  lain  yang  digunakan  Media  NA  ( Nutrient  Agar ),  Media RS  ( Rimler  Shotts ),  Alkohol  70%,  Aquades,  Kapas, Aluminium  Foil ,  kertas  cakram  kosong dan kertas cakram antibiotik.
Keterangan : IP = Indeks Penghambatan (mm)

## Metode Pengambilan Sampel
Pengambilan  sampel thallus rumput  laut  yang  terinfeksi ice-ice diambil  dari  laut kemudian  disimpan  dalam  kantong  plastik  steril  yang  telah  disediakan.  Kemudian  sampel dibawa  ke  laboratorium  dan  disimpan  dalam  lemari  pendingin.  Pengambilan  sampel  daun mangrove  dilakukan  dengan  cara  dipetik  langsung  dari  pohonnya  yang  berada  di  Desa Ngilngof.
Ekstraksi Rumput laut K. alvarezii dan Daun Mangrove R. Apiculata Metode yang digunakan untuk ekstraksi Rumput laut K. alvarezii dan Daun Mangrove R.  Apiculata pada  penelitian  ini  menggunakan  metode  maserasi  sederhana  dimana  sampel dicuci  dan  dikeringkan  terlebih  dahulu  kemudian  dihaluskan,  setelah  itu  direndam menggunakan aquades dalam kurun waktu tertentu (Suharli., et al. 2020).
Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Rumput laut K. alvarezii dan Daun Mangrove Pembuatan  Media  NA  dan  Media  RS .  Media  NA  ditimbang  sebanyak  2,8  gr dilarutkan  kedalam  aquades  100  mL  kemudian  dimasukkan  kedalam  erlenmeyer,  mulut tabung  reaksi  ditutup  menggunakan  kapas  dan  aluminium  foil  untuk  dihomogen menggunakan hot  plate dan stirer (Juariah  dan  Sari.,  2018)  Pembuatan  media  RS,  media ditimbang 9,1 gr kemudian dilarutkan aquades 200 mL, lalu dimasukkan kedalam erlenmeyer dan  ditutup  menggunakan  kapas  dan  juga  alumnium  foil  dan  dihomogenkan  menggunakan hot  plate dan stirer .  Setelah  itu  media  NA  (Nutrient  Agar)  disterilisasi  menggunakan autoclave pada suhu 121 o C dengan tekanan 1 atm selama 15 menit. Isolasi A.  hydrophilla dari  thallus Kappapyhcus  alvarezii yang  terinfeksi ice- ice . Sampel thallus yang telah diambil sebelumnya ditimbang sebanyak 10 gr dan aquades 90 mL dimasukkan kedalam blender untuk dihaluskan. Sampel hasil blender dimasukan kedalam tabung, kemudian diambil 1 mL sampel menggunakan micropipet dan disebar di atas media NA  (Nutrient  Agar)  lalu  di  inkubasi  selama  24  jam.  Setelah  itu  bakteri  di  inokulasi  pada media selektif selama 24 jam untuk mendapat bakteri target (Suharli et al ., 2020). Uji Aktivitas Antibakteri. Pengujian aktivitas ekstrak Rumput laut K. alvarezii dan Daun  Mangrove R.  apiculata menggunakan  metode  difusi  cakram.  Penggunaan  metode  ini bertujuan  untuk  melihat  besaran  zona  bening  dari  antibakteri  Rumput  laut  dan  Daun Mangrove terhadap bakteri Aeromonas hydrophilla . Kertas cakram sudah direndam di dalam ekstrak  Rumput  laut K.  alvarezii dan  Daun  Mangrove R.  apiculata diletakkan  di  atas permukaan media RS (Rimler Shotts) untuk kemudian diinkubasi lagi pada suhu 37 o C selama 24 jam. Pengamatan dilakukan dengan parameter ukuran besar zona hambat  yang terbentuk disekitar kertas cakram. (Panjaitan dan Madayanti 2018).
Pengukuran Zona Hambat dan Analisa Data . Pengukuran zona hambat dilakukan dengan menggunakan penggaris dimulai dari zona bening yang terlihat kemudian hasil dari pengukuran tersebut dimasukkan ke dalam rumus Indeks penghambatan (Putri, 2016).

## C. HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  maserasi  sederhana dengan  menggunakan  satu  jenis  pelarut.  Ekstraksi  bertujuan  untuk  mendapatkan  ekstrak rumput laut K. alvarezii dan daun mangrove R. apiculata yang diduga mengandung senyawa
bioaktif untuk selanjutnya diuji zona hambat bakteri. Bahan yang akan diekstrak dihaluskan terlebih  dahulu  dengan  tujuan  untuk  mempermudah  pengadukan  dan  kontak  bahan  dengan pelarutnya pada saat proses perendaman. Pelarut yang digunakan adalah air yang merupakan pelarut  universal  yang  bersifat  polar  sehingga  hanya  dapat  melarutkan  yang  polar.  Akan tetapi, akibatnya senyawa-senyawa non polar tidak dapat larut dalam air. Pada saat maserasi terjadi  proses  pengadukan  terhadap  bahan  yang  diekstrak,  hal  tersebut  bertujuan  untuk memperbesar  kemungkinan  komponen  senyawa  aktif  dapat  keluar  dan  terikat  pada  pelarut yang  digunakan.  Selanjutnya  setelah  proses  maserasi  adalah  tahap  pemisahan  dilakukan menggunakan kertas saring untuk memisahkan pelarut dan ampasnya.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Pengukuran diameter zona hambat pada rumput laut K. alvarezii dan daun mangrove mengikuti  standar  Rundengan et  al., (2017)  yang  menyebutkan  daerah  hambatan  >20  mm dimasukkan ke dalam respon hambat sangat kuat, daerah hambatan 11-20mm (kuat), daerah hambatan  5-10mm  (sedang),  dan  daerah  hambatan  <5mm  (lemah).  Hasil  pengukuran  zona hambat disajikan pada gambar berikut ini.
a b c d
Gambar 1.  Pengukuran  Diameter  Zona  Hambat  Rumput  Laut K.  Alvarezii a.  Konsetrasi  40%,  b.  konsentrasi 60%, c. konsentrasi 80% dan d. konsetrasi 100%
Berdasarkan  pengukuran  diameter  zona  hambat  pertumbuhan A.  hydrophilla pada ekstrak  rumput  laut K.  Alvarezii konsentrasi  40%,  indeks  penghambatan  (IP)  yang  didapat adalah 10 mm, termasuk dalam kategori sedang. Tingginya hasil diameter zona hambat pada konsentrasi  rendah,  hal  ini  mengindikasi  adanya  pengaruh  keberadaan  senyawa  antibakteri yang digunakan. Sehingga hasil pengukuran yang didapat lebih tinggi. Pengukuran diameter zona  hambat  yang  telah  dilakukan,  pengukuran  diameter  zona  hambat  ekstrak  aquades rumput  laut K.  Alvarezii konsentrasi  60%  mendapatkan  IP  8  mm  yang  termasuk  dalam kategori  sedang.  Hasil  ini  menunjukkan  adanya  aktifitas  antibakteri  tetapi  penurunan diameter penghambatan dari konsentrasi sebelumnya bisa diakibatkan oleh berbagai senyawa antibakteri  yang  terkandung  sehingga  tidak  dapat  bekerja  secara  optimal.  Pengukuran diameter  zona  hambat,  ekstrak  aquades  pada  rumput  laut  konsentrasi  80%  mendapatkan diameter dengan IP 9 mm yang termasuk dalam kategori sedang. Hasil dari kosentrasi rumput K.  Alvarezii laut  80%  tidak  memberikan  dampak  signifikan  dari  konsentrasi  60%  meski sudah  bertambah  konsentrasi  yang  diberikan.  Hal  ini  bisa  terjadi  karena  daya  hambat  tidak berpengaruh  dari  pelarut  yang  diberikan  tetapi  dari  kandungan  senyawa  antibakteri. Pengukuran diameter zona hambat yang telah dilakukan, ekstrak aquades pada rumput laut K. Alvarezii konsentrasi  100%  mendapat  indeks  penghambatan  (IP)  11  mm.  Hasil  pengukuran ini bila di bandingkan dengan standar diameter zona hambat maka ekstrak rumput laut 100% masuk  dalam  kategori  kuat.  Hal  ini  mengindikasi  adanya  aktivitas  antibakteri  yang disebabkan  oleh  senyawa  yang  terkandung  didalam  rumput  laut  yang  mampu  menghambat pertumbuhan A. hydrophilla. Bertambahnya diameter zona hambat terhadap konsentrasi yang diberikan  menunjukkan  kemampuan  inhibisi  yang  mempengaruhi  diameter  zona  hambat adalah senyawa yang terkandung serta kemampuan senyawa tersebut sebagai antibakteri.
a b c d
Gambar 2.   Pengukuran  Diameter  Zona  Hambat  Daun  Mangrove  a.  Konsetrasi  40%,  b.  konsentrasi  60%,  c. konsentrasi 80% dan d. konsetrasi 100%
Berdasarkan  pengukuran  diameter  zona  hambat  yang  telah  dilakukan,  ekstrak  daun mangrove  40%  dengan  IP  8  mm  termasuk  dalam  kategori  sedang.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  konsentrasi  daun  mangrove  masih  rendah  yaitu  40%  maka  belum  banyak  senyawa yang  terekstrak  keluar  dan  kandungan  antibakteri  belum  mampu  secara  kuat  dalam menghambat pertumbuhan bakteri. Pengukuran diameter zona hambat yang telah dilakukan, hasil  dari  pengukuran  diameter  zona  hambat  daun  mangrove  60%  adalah  12  mm  yang termasuk  kategori  kuat.  Hasil  dari  pengukuran  daun  mangrove  konsentrasi  60%  meningkat dari  konsentrasi  sebelumnya  yang  hanya  8  mm  hasil  ini  menunjukkan  adanya  senyawa antibakteri  yang  terkandung  serta  membuktikan  adanya  perbedaan  kandungan  senyawa bioaktif  dari  daun  mangrove  dan  juga  rumput  laut K.  alvarezii .  Senyawa  yang  terkandung dalam ekstrak ini daun mangrove ini diduga seperti flavonoid, saponin maupun tanin (Farhan, 2017). Berdasarkan hasil dari diameter konsentrasi ekstrak 80%, diameter terpanjang didapat oleh ekstrak daun mangrove dengan IP 15 mm. konsentrasi 80% ekstrak daun mangrove yang masuk dalam kategori kuat yang menunjukkan adanya aktvitas antibakteri dan menjadi hasil diameter zona hambat terbesar dari seluruh pengukuran. Kemampuan dari sebuah antibakteri sangat  tergantung  dari  kemampuan  senyawa  yang  dimiliki  juga  terhadap  bakteri  yang  diuji. Salah  satu  senyawa  dari  daun  mangrove  salah  satu  senyawa  yang  terkandung  dalam  daun mangrove adalah flavonoid, aktivitas biologis senyawa flavonoid terhadap bakteri dilakukan dengan  merusak  dinding  sel  dari  bakteri  yang  terdiri  atas  lipid  dan  asam  amino  yang  akan bereaksi  dengan  gugus  alkoloid  pada  senyawa  flavonoid  (Marfuah,  2018).  Hasil  dari pengukuran  diameter  daun  mangrove  100%  adalah  IP  7  mm  yang  termasuk  dalam  kategori sedang.  Hasil  pengukuran  ini  sama  pengukuran  rumput  laut K.  alvarezii sebelumnya  yang mendapat  hasil  pengukuran  kecil,  selain  jenis  senyawa  dan  pelarut  yang  menjadi  pengaruh hasil  diameter  zona  hambat.  Kecepatan  dan  efesiensi  kerusakan  mikroba  oleh  senyawa antimikroba  dipengaruhi  oleh  suhu, p H,  waktu,  konsentrasi  dan  adanya  komponen  organik lainnya (Munfaati et al., 2015).
Gambar 3. Pengukuran Zona Hambat Kloramfenikol
Zona  hambat  dari  kontrol  positif  kloramfenikol  mempunyai  diameter  lebih  besar dibandingkan  dengan  diameter  zona  hambat  dari  ekstrak  bahan  alam.  Kloramfenikol merupakan  antibakteri  yang  berspektrum  luas,  sehingga  mampu  membunuh  bakteri  gram positif maupun gram negatif  (Utomo, 2018). Penggunaan kloramfenikol dengan konsentrasi
kecil  masih  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan  kekuatan  tinggi,  dikarenakan kloramfenikol  merupakan  antibiotik  paten  yang  diketahui  mampu  menghambat  berbagai bakteri.
Tabel. 1 Hasil Diameter Zona Hambat
No Perlakuan Indeks Penghambat (mm) Standar Klasifikasi Zona Hambat (mm) Rundengan et al ., (2017) 1 Rumput Laut 40% 10
<5 mm = Sangat Lemah 5-10 mm = sedang
11-20 mm = kuat >20 mm = sangat kuat 2 Rumput Laut 60% 8 3 Rumput Laut 80% 9 4 Rumput Laut 100% 11 5 Daun Mangrove 40% 8 6 Daun Mangrove 60% 12 7 Daun Mangrove 80% 15 8 Daun Mangrove 100% 7 9 Kloramfenikol 22
Berdasarkan  hasil  penelitian  diatas,  konsentrasi  ekstak  rumput  laut  ( Kappaphycus alvarezii )  dan  Daun  Mangrove  ( Rhizophora  apiculata )  berpengaruh  terhadap  diameter  zona hambat  pertumbuhan  bakteri Aeromonas  hydrophilla .  Pada  masing-masing  konsentrasi menghasilkan zona hambat yang menunjukkan adanya aktivitas antibakteri yang terkandung dalam  masing-masing  ekstrak,  pengaruh  dari  hasil  penelitian  ini  dapat  disebabkan  oleh, kekuatan  senyawa  yang  diberikan  terhadap  bakteri  dapat  berbeda  karena  kemampuan senyawa  yang  dimiliki  rumput  laut  ( Kappaphycus  alvarezii )  dan  Daun  Mangrove ( Rhizophora  apiculata ).  Aktivitas  antibakteri  ini  ditandai  dengan  terbentuknya  daerah jernih/bening dekat kertas cakram yang digunakan.
Senyawa  antibakteri  yang  terkandung  dalam  rumput  laut K.  alvarezii dan  daun mangrove R.  apiculata didapat  dari  asam-asam  organik  yang  berpengaruh  mereduksi p H eksternal  menjadi  rendah  sehingga  sitoplasma  menjadi  asam.  Hal  ini  yang  mempengaruhi penghambatan  pertumbuhan  bakteri.  Menurut  (Agustini,  2012)  beragam  aktivitas  biologois seperti  antialga,  antijamur,  antiviral,  dan  antibakteri  didapat  dari  beberapa  senyawa  bioaktif seperti ekspolisakari, hidrokarbon, gliserol, vitamin dan fikobiliprotein.
Senyawa  antibakteri  yang  terkandung  dalam  rumput  laut  yaitu  flavonoid,  fenol hidrokuinon,  dan  tannin  (Nurjanah et  al., 2018)  serta  senyawa  antibakteri  yang  terkandung dalam  daun  mangrove  seperti  flavonoid,  tanin,  terpenpod,  dan  saponin  (Kurniawan,  2021). Bakteri  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah A.  hydrophilla yang  termasuk  dalam kategori bakteri patogen penyebab penyakit, khususnya penyakit yang banyak dijumpai pada usaha budidaya ikan dan udang. Namun, dalam penelitian Wijayanto, 2010 menyebutkan tiga ekstrak algae laut, G. corticata, U. fasciata, E. compressa dengan menggunakan heksan, etil asetat,  klorofrom,  alkohol  dan  metanol,  menunjukkan  penghambatan  terhadap  bakteri pathogen  yaitu, E.  tarda,  V.  alginolyticus,  P.  fluorescens,  P.  aeruginosa dan A.  hydrophila. Sehingga  penelitian  ini  berfokus  pada  bakteri A.  hydrophilla penyakit ice-ice yang  banyak terjadi pada musim tertentu didaerah Maluku tenggara, dengan ekstrak kasar rumput laut K. alvarezii dan daun mangrove sebagai antibakteri.
Penyakit ice-ice sendiri banyak terjadi dikarenakan oleh perubahan lingkungan seperti arus  yang  lemah,  suhu  yang  tinggi,  kekurangan  nutrient  dan  kecerahan  perairan.  Perubahan lingkungan  yang  ekstrim dan tidak dapat ditolelir menyebabkan rumput laut  menjadi  lemah (tidak  sehat).  Melemahnya  rumput  laut  ditandai  dengan  cabang-cabang  tanaman  sedikit, keseluruhan tanaman menjadi pucat  dan thallus menjadi  rapuh.  Pada keadaan stress  rumput laut  akan  membebaskan  substansi  organik  yang  menyebabkan thallus berlendir  dan merangsang bakteri tumbuh melimpah.
Dalam  penelitian  Erbabley  dan  Kelabora  tahun  2018  Bakteri  dominan  yang menginfeksi  rumput  laut  di  perairan  Maluku  Tenggara  adalah  dari  genus Pseudomonas dan Vibrio , hasil penelitian  Kelabora 2018 menunjukan bakteri yang menginfeksi rumput laut di perairan  Maluku  Tenggara  pada  lokasi  Sathean  yaitu  bakteri Pseudomonas  stutzeri , Aeromonas faecalis , Vibrio alginolitycus , Pseudomonas fluorescens sedangkan bakteri  yang terdapat di perairan adalah bakteri Vibrio alginolitycus , Pseudomonas fluorescens . Meskipun bakteri A.  hydrophilla bukan  bakteri  patogen  yang  banyak  jadi  penyebab ice-ice, keadaan lingkungan yang berubah drastis dan rumput laut dalam kondisi rentan, hal inilah dapat yang menyebabkan bakteri A. hydrophilla memungkinkan untuk dijumpai pada perairan laut. Penelitian  ini  dilakukan  ekstraksi K.  alvarezii dan R.  apiculata secara  maserasi dengan pelarut air. Pemilihan air atau akuades sebagai pelarut karena air pelarut yang murah, mudah  diperoleh,  stabil,  dapat  melarutkan  senyawa  kimia  berupa  senyawa  ionik  dan  non- ionik (kovalen), tidak beracun, tidak mudah menguap, dan tidak mudah terbakar (Firyanto et al,  2019).  Pelarut  air  cocok  digunakan  dalam  penelitian  ini  karena  ekstrak  rumput  laut  dan daun  mangrove  mengandung  komponen  fenolik  dan  tanin  serta  tidak  merusak  senyawa antibakteri yang disebabkan oleh kandungan pelarut.
Penelitian Syawal et al (2019) menjelaskan senyawa tanin yang terdapat pada ekstrak daun Rhizophora sp.  dapat  mengkerutkan  dinding  sel  atau  membran  sel,  sehingga mengganggu  permeabilitas  sel  itu  sendiri.  Akibatnya  sel  tidak  dapat  melakukan  aktivitas hidup,  pertumbuhan  terhambat  atau  bahkan  mati.  Efek  antibakteri  tanin,  antara  lain  melalui reaksi  dengan  membrane  sel,  inaktivasi  enzim,  dan  destruksi  atau  inaktivasi  fungsi  materi genetik.  Selain  itu,  tanin  bersifat  astringen  (zat  yang  menciutkan)  membentuk  kompleks ikatan tanin terhadap enzimdan pembentukan suatu kompleks ikatan tanin dengan ion logam yang dapat menambah toksisitas tanin (Syawal et al, 2019).
Aktivitas  biologis  senyawa  flavonoid  terhadap  bakteri  dilakukan  dengan  merusak dinding  sel  dari  bakteri  yang  terdiri  atas  lipid  dan  asam  amino  yang  akan  bereaksi  dengan gugus  alkaloid  pada  senyawa  flavonoid  (Marfuah,  2018).  Cincin  beta  dan  gugus  –OH  pada flavonoid  diduga  sebagai  struktur  yang  bertanggung  jawab  sebagai  aktivitas  antibakteri (Nugraha, et  al .,  2017).  Selain  Flavonoid  yang  dapat  menjadi  antibakteri,  terdapat  senyawa saponin  yang  bisa  menurukan  tegangan  permukaan  yang  dapat  menyebabkan  kebocoran  sel dan mengakibatkan senyawa-senyawa intraseluler akan keluar, dimana akan berdifusi melalui membran  luar  dan  dinding  sel  yang  rentan,  hal  ini  juga  yang  mengakibatkan  kebocoran sitoplasma (Nuraina, 2015)
Berdasarkan  cara  kerja  antibakteri  dapat  dibedakan  menjadi  bakterisidal  dan bakteriostatik.  Antibakteri  bakteriostatik  adalah  zat  yang  bekerja  menghambat  pertumbuhan bakteri,  sedangkan  antibakteri  bakterisidal  adalah  zat  yang  bekerja  mematikan  bakteri (Sinurat, 2019). Dalam penelitian ini antibakteri yang dihasilkan dari ekstrak rumput laut dan daun  mangrove  bersifat  bakteriostatik  yang  hanya  mengikat  sementara  sel-sel  dari  bakteri target.  Sehingga  ketika  ikatan  tersebut  tidak  begitu  kuat  serta  konsentrasi  dan  stabilitas menurun,  senyawa  bahan  aktif  akan  melepaskan  sel  bakteri  sehingga  bakteri  dapat  tumbuh kembali.
Hasil  penelitian  mengalami  penurunan  pada  konsentrasi  ekstrak  yang  tinggi. penurunan aktivitas antibakteri ini bisa terjadi karena bakeri uji yang digunakan serta respon yang  diberikan  bakteri  berbeda  pada  ekstrak  yang  digunakan.  Kandungan  flavonoid  pada ekstrak R.  apiculata diduga  lebih  banyak  disbanding  ekstrak K.  alvarezii .  Flavonoid merupakan  senyawa  antioksidan  yang  biasa  ditemukan  pada  tumbuhan  hijau.  Senyawa flavonoid  diduga  mekanisme  kerjanya  mendenaturasi  protein  sel  bakteri  dan  merusak membran sel tanpa dapat diperbaiki lagi. Flavonoid juga bersifat lipofilik yang akan merusak membran mikroba. Di dalam flavonoid mengandung suatu senyawa fenol.
Selain  faktor  diatas,  jenis  bakteri  juga  berpengaruh  dalam  pengujian  zona  hambat antibakteri. Aeromonas  hydrophilla merupakan  gram  negatif  yang  penyusun  dinding  selnya lebih kompleks dibanding gram positif, hal ini mengakibatkan lebih sulit senyawa antibakteri menyerang bakteri A. hydrophilla . Afriani (2019) menyebutkan kemampuan bakteri melawan aktifitas  antibakteri  bergantung  pada  ketebalan  dan  pembentuk  dinding  selnya.  Penyusun dinding gram negative terdiri dari lipopolisakarida dan lipoprotein Alamsyah et al ., (2014). Hasil penelitian menunjukkan pada konsentrasi ekstrak rumput laut dan ekstrak daun mangrove 40% mampu menghasilkan diameter zona hambat sebesar 11 mm dan 9 mm. Akan tetapi  pada  penelitian  ini  hasil  yang  didapat  tidak  berbanding  lurus.  Artinya  semakin  tinggi konsentrasi ekstrak, diameter zona hambat yang dihasilkan tidak semakin besar. Hal ini dapat terjadi  karena  faktor  yang  menetukan  terbentuknya  zona  hambat  bukan  hanya  dari konsentrasi  senyawa  uji  saja.    Sehingga,  diperlukan  tahap  pemurnian  lebih  lanjut  agar diperoleh ekstrak murni yang hanya mengandung senyawa antibakteri serta pengujian secara fitokimia  hingga  diketahui  secara  pasti  kandungan  senyawa  yang  terkandung  dari  bahan ekstraksi.

## D. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan,  maka  dapat  diambil  kesimpulan bahwa  ekstrak  aquades  rumput  laut K.  alvarezii dan  daun  mangrove  dapat  menghambat bakteri A.  hydrophilla dengan  daerah  hambatan  kuat  dan  daya  hambat  Ekstrak  aquades rumput  laut  dan  daun  mangrove  yang  mampu  menghambat  bakteri A.  hydrophilla yaitu  di konsentrasi  100%  pada  rumput  laut K.  alvarezii dan  konsentrasi  80%  dan  60%  pada  daun mangrove.

## DAFTAR PUSTAKA
Afriani  W.  2019.  Uji  Perbandingan  Aktivitas  Antibakteri  Serbuk  Alginat  Rumput  Laut Coklat  ( Sargassum sp.)  Dengan  Variasi  Agen  Pengekstrak. Skripsi .  Universitas Islam Negeri Ar-Raniry Darussalam-Banda Aceh.
Agustini  N.  W.  S.  2012.  Aktivitas  Antioksidan  dan  Uji  Toksisitas  Hayati  Pigmen Fikobiliprotein  dari  Ekstrak  Spirulina  platensis,  Seminar  Nasional  IX  Pendidikan Biologi FKIP UNS. 1, 535–543.
Alamsyah  K.  H.,  Ita  W.,  S.  Agus.  2014.  Aktivitas  antibakteri  Ekstrak  Rumput  Laut Sargassum  cinereum (J.G  Agardh)  Dari  Perairan  Pulau  Panjang  Jepara  Terhadap Bakteri Escherichia  coli Dan Staphylococcus  epidermis.  Journal  of  Marine Research . 3(2), 69-78.
Ayunindya A. 2018. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Dari Rumput laut Kappaphycus alvarezii Yang Terkena Penyakit Ice-Ice Di Teluk Lampung. Skipsi . Universitas Sriwijaya. Erbabley N. Y. G. F., D. M. Kelabora. 2018. Identifikasi Bakteri Rumput Laut Kappaphycus alvarezii Berdasarkan Musim Tanam di Perairan Maluku Tenggara . Jurnal Akuatika Indonesia . 3(1), 19-25.
Farhan  I.  2017.  Peranan  Mangrove Avicennia  marina dan Rhizophora  apiculata Dalam Menurunkan Logam Zn. Tugas Akhir . Institut Teknologi Sepuluh Nopember. Firyanto  R.,  Fatarina  E.,  N.  Azizah.  2019.  Effectiveness  of  Eugenol  as  An  Antibacterial Toward Staphylococcus epidermidis. IOP  Conf.  Series:  Journal  of  Physics:  Conf. Series 1295 (2019) 012034.
Haryani A., Roffi G., Ibnu D. B., S. Ayi. 2012. Uji Efektivitas Daun Pepaya ( Carica papaya ) Untuk  Pengobatan  Infeksi  Bakteri Aeromonas hydrophilla  Pada  Ikan  Mas  Koki ( Carasaius auratus ). Jurnal Perikanan dan Kelautan . 3(3), 213-230.
Juariah  S.,  P.  S.  Wulan.  2018.  Pemanfaatan  Limbah  Cair  Industri  Tahu  Sebagai  Media Alternatif Pertumbuhan Bacillus sp. Jurnal Analisis Kesehatan Klinikal Sains . 6 (1).
Biofaal Journal; Vol 4, No 1. Juni 2023. Pp 40  – 48. ISSN: 2723-4959 (online)
Kurniawan  R.  2021.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun Rhizophora  apiculata terhadap Bakteri Edwardsiella tarda . Jurnal Natur Indonesia . 19(1), 13-17.
Marfuah  I.,  Eko  N.  D.,  R.  Laras.  2018.  Kajian  Potensi  Ekstrak  Anggur  Laut  ( Caulerpa racemosa )  Sebagai  Antibakteri  Terhadap  Bakteri Escherichia  coli Dan Staphylococcus aureus . Jurnal Peng & Biotek . Hasil Pi . 7(1).
Munfaati  N.  P.,  Evie  R.,  T.  Guntur.  2015.  Aktivitas  Senyawa  Antibakteri  Ekstrak  Herba Maniran  ( Phyllanthus  niruni )  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Shigella  dysenteriae Secara in Vitro. Jurnal Lentera Bio . 4(1).
Nugraha  C.  A.,  Agung  T.  P.,  M.  Sri.  2017.  Isolasi,  Identifikasi,  Uji  Aktivitas  Senyawa Flavonoid Sebagai Antibakteri Dari Daun Mangga. Indonesian Journal of Chemical Science. Indo J Chem . Sci. 6(2)
Nuraina. 2015. Uji  Aktivitas  Antimikroba Ekstrak Daun Garcinia benthami Pierre Dengan Metode Difusi. Skripsi . UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
Nurjanah  B.  E.  A.,  Andika  F.,  Mutirara  R.,  N.  Tati.  2018.  Senyawa  Bioaktif  Rumput  Laut Dan Ampas Teh Sebagai Antibakteri Dalam Formula Masker Wajah. JPHPI . 21(2). Panjaitan  S.  R.,  M.  Fida.  2018.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Lipid Sargassum  polycistum Terhadap Bacillus  cereus dan Staphylococcus  aureus .  Jurnal  Kimia  dan Pendididkan. 3(1).
Putri  U.  S.  2016.  Efek  Ekstrak  Makroalga  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus Dan Methichillin Resisten Staphylococcus aureus . Skripsi . UIN Alauddin Makassar.
Rundengan  H.  C.,  Fatimawali,  H.    Simbala.  2017.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Etanol  Biji Pinang Yaki ( Areca vestiaria ) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus , Escherichia coli , Pseudomonas aeruginosa. Jurnal Ilmiah Farmasi- Unsrat . 6(1).
Safia W., Budiyanti,  Musrif. 2020. Kandungan Nutrisi  Dan Senyawa  Bioaktif Rumput Laut ( Eucheuma  cottonii )  Yang  Dibudidayakan  Dengan  Teknik  Rakit  Gantung  Pada Kedalaman Berbeda. JPHPI . 23(2).
Sinurat P. A. A., Person P. R., Nurlaila E. H., Bertok F. P. S. N., P. Dewi. 2019. Uji Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Metanol  Rumput  Laut Gracillaria  edulis Terhadap  Bakteri Aeromons hydrophilla . Jurnal Enggano . 4(1), 105-114.
Suharli  I.,  Baso  M.,  Riri  M.,  Anggih  C.,  M.  Arif.  2020.  Pengujian  Ekstrak  Daun  Krinyuh Terhadap Pertumbuhan Bakteri Vibrio sp. Yang Menyebabkan Penyakit ice-ice Pada Rumput Laut ( Eucheuma cottoni ). Jurnal Biologica Samudra . 2(1), 1 - 9.
Syawal  H.,  Yuharmen,  K.  Ronal.  2019.  Sensitivitas  Ekstrak  Daun Rhizophora  apiculata Dalam  Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri Aeromonas  hydrophilla . Jurnal  Ruaya . 7(2).
Talakua  G.  E.,  F.  Pentury.  2017.  Maksimasi  Keuntungan  Budidaya  Rumput  Laut  Di  Desa Sathean. Jurnal Papalele . 1(1).
Utomo  B.  S.,  Mita  F.,  Warih  P.  L.,  M.  Sri.  2018.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Senyawa  C-4- Metoksifenilkaliks  Resorsinarena  Termodifikasi  Hexadecyltrimethylammonium- Bromide  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus Dan Escherichia  coli . Jurnal Kimia dan Pendidikan Kimia . 3(3).