Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol dan Minyak Atsiri Daun Kemangi ( Ocimum sanctum ) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus ,
Salmonella thypii dan Eschericia coli
Anti-Bacterial Activity of Etanolic Extract and Essential Oil of Basil (Ocimum sanctum) on Growth Staphylococcus aureus
Salmonella thypii and Eschericia coli
Melania Perwitasari *) , Reza Anindita, Maya Uzia Beandrade, Dede Dwi Nathalia, Wahyu Nurani Hasmar, Intan Kurnia Putri Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Mitra Keluarga *E-mail: melania.perwitasari@stikesmitrakeluarga.ac.id

## ABSTRACT
Antimicrobial resistance is one of the biggest health problems. Indonesia is a country with a positive high number of E. coli (71%) Extended Spectrum Beta Lactamase (ESBL) in the Asia Pacific. Many studies  report  that  essential  oils  and  extracts  from  several  species  of Ocimum have  antimicrobial activity  against  gram-positive  and  negative  bacteria.  Antibacterial  activity  is  related  to  active compounds contained in plants that are also affected by the place of growth, harvesting and post- harvesting. Research related to the activity of basil ( Ocimum sanctum ) that already exists does not provide complete and comprehensive data related to where to grow, harvest and post-harvest basil leaves. Basil leaves that have been set parameters for growth, harvest and post-harvest processes are extracted  using  maceration  method  with  70%  etanol  solvent  and  distilled  to  obtain  essential  oils (EO).  Etanolic  extract  (EE)  and  EO  were  tested  for  their  activity  against Escherichia  coli, Staphylococcus  aureus and Salmonella  thypii bacteria.  The  results  showed  that  the  basil  leaves obtained from Margahayu sub-district, East Bekasi, had a dry simplicia yield of 12.8% ± 1.5, yield of EE 16.9% ± 1.6, EO content of 0.56%. The etanolic extract of basil leaves contains alkaloids, saponins, tannins, phenolics, flavonoids, glycosides, triterpenoids and steroids. The conclusion from the results of this study is the etanol extract and essential oils of basil leaves can inhibit the growth of bacteria, both basile leaves. The inhibition zone diameter is higher in gram positive bacteria ( S. aureus ) than gram negative bacteria ( S. thypii and E. coli ).
Keywords: Antibacterial, basil leaves, Ocimum americanum , etanolic extract, essential oil.

## PENDAHULUAN
Penyakit infeksi merupakan masalah salah satu masalah  kesehatan.  Salah  satu  penyebab penyakit  infeksi  adalah  bakteri.  Adapun  terapi pengobatan penyakit infeksi bakteri yang masih digunakan  saat  ini  adalah    penggunaan antibiotik. Namun, praktik penggunaan antibiotik  seringkali  tidak  tepat  sehingga menimbulkan resistensi bakteri terhadap antibiotic (Ng & Shamsi 2022). Munculnya resistensi antibiotik menyebabkan peningkatan angka mortalitas dan morbiditas yang memicu rawat inap berkepanjangan  sehingga  meningkatkan  biaya perawatan  kesehatan  juga  (Dadgostar,  2019). Founou et  al .  (2017)  memperkirakan  bahwa jika  tidak  ada  tindakan  global yang  efektif, resistensi  antibiotik  akan  membunuh  10  juta jiwa  di  seluruh dunia  setiap  tahunnya.  Angka tersebut melebihi kematian akibat kanker, yakni 8,2 juta  jiwa  pertahun,dan  bisa  mengakibatkan total kerugian global mencapai US$ 100 triliun .
Adapun  persentase  kasus  resistensi  bakteri di Indonesia ditunjukkan pada data Kementerian Kesehatan RI (2021) yang dikompilasikan dari penelitian Antimicrobial
Resistence in Indonesia (AMRIN)  yang  melaporkan  bahwa bakteri  dengan  prevalensi  resistensi  26%-58% antara lain Mycobacterium tuberculosis ,
Klebsiella pneumonia , Escherichia coli, Salmonella  thypii dan Staphylococcus  aureus. Semua  bakteri  tersebut  tergolong  bakteri patogen  penyebab  infeksi  nosokomial  yang menimbulkan angka kematian tertinggi kedua di dunia setelah penyakit jantung iskemik. Hal ini ditunjukkan  pada  data  tahun  2019  yang melaporkan  bahwa  jumlah  kematian  akibat bakteri patogen sebanyak 7,7 (13,6%) dari total kematian  penduduk  dunia  (Global  Burdence Disease, 2022)
Adapun  upaya  saat  ini  untuk  mengatasi permasalahan  penggunaan  antibiotik  sebagai obat  modern  adalah  memperkuat  penelitian berbasis  bukti  ilmiah  melalui  surveilans
penggunaan  antibiotik  dan  penemuan    bahan alam berpotensi antibakteri. Mengingat surveilans antimicrobial  resistance (AMR) masih  dilakukan  secara  terbatas  dan  belum dapat  mewakili  gambaran  menyeluruh  di Indonesia,  maka  upaya  penelitian  uji  bahan alam berpotensi antibakteri merupakan langkah awal  penemuan  obat  baru  ( new  drug  of discovery ) untuk meninggalkan ketergantungan masyarakat  terhadap  antibiotik  di  masa  depan (WHO, 2014).
Mengacu pada masalah, dampak dan bentuk upaya  pengendalian  dari  resistensi  antibiotik maka  penulis  tertarik  untuk  melakukan penelitian mengenai pengujian bahan alam yang berpotensi sebagai antibakteri. Salah satu bahan alam  yang  ingin  diuji  dalam  penelitian  ini adalah kemangi ( Ocimum sanctum ). . Adapun  beberapa  riset  yang  melandasi pemilihan kemangi sebagai bahan uji antibakteri antara lain penelitian  Chowdhury et al . (2017) ; Oyedemi et al. (2017) yang melaporkan bahwa kemangi merupakan salah satu dari 200 spesies dari Ocimum (suku  Lamiaceae).  Tanaman  ini banyak  tersebar  di  berbagai  belahan  dunia. Tanaman  kemangi  banyak  digunakan  sebagai bumbu  makanan  dan  pengobatan  seperti  flu, batuk, katarak dan bronchitis   Ekstrak  metanol O. americanum memiliki aktifitas farmakologis yang  sinergis  jika  dikombinasikan  dengan norfloxacin dalam menghambat pertumbuhan S. aureus .  Adam  &  Omer  (2015);  Helal et  al .
(2019);  Zengin et  al .  (2019)  menambahkan bahwa  kandungan  minyak  atsiri  dari O. americanum dan Bacillicum dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme seperti S. aureus (4,4 mm - 13,9 mm), S. typhimurium (20 mm), dan C. albicans (45 mm) .
Riset  mengenai  uji  ekstrak  daun  kemangi juga pernah dilakukan di Indonesia, antara lain penelitian Angelina et al . (2015); Solikhah et al . (2016)    yang  melaporkan  bahwa  pemberian ekstrak etanol daun kemangi mampu menghambat  bakteri S.  aureus (16,75  mm) ,  E. coli (14,94  mm) , dan Neisseria  gonorhoeae. Variasi  konsentrasi  yang  digunakan  pada penelitian sebelumnya sebesar 20%, 60%, 80% dan 100 %
Pemilihan S.  aureus , S.  thypii ,  dan E.coli merujuk pada hasil literatur review (Hanganeni et  al .,  2023)  yang  menyebutkan  bahwa  ketiga bakteri tersebut sebagai agen infeksi nosokomial  dan  berbagai  penyakit  lainnya. Bakteri tersebut bersifat bakteremia dan secara signifikan  menyebabkan  multidrug  resistance
(MDR  yang  meningkatkan  resiko  angka morbiditas dan mortalitas (Britto et al. , 2018) Adapun  perbedaan  penelitian  ini  dengan penelitian sebelumnya, sekaligus keterbaharuan dari  penelitian  ini  adalah  penggunaan  ekstrak etanol dan minyak atsiri dari daun kemangi dan penggunaan  tiga  bakteri  uji  sekaligus,  yaitu S. aureus,  S.  thypii dan E.coli. Baik  ekstrak maupun  minyak  atsiri  diberikan  pada  ketiga bakteri  uji  dengan  tujuan  untuk  mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol dan minyak atsiri  terhadap  pertumbuhan  bakteri  uji.  Hasil penelitian  ini  diharapkan  dapat  memberikan informasi ilmiah mengenai efektif atau tidaknya daun kemangi dalam menghambat pertumbuhan bakteri patogen pada manusia.

## METODE
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi, daun kemangi yang diambil dari daerah Bekasi Timur pada  pukul  06.00-07.00  dan  etanol  70%  (Brataco). Proses  ekstraksi  dilakukan  di  Laboratorium  STIKes Mitra  Keluarga  Bekasi  Timur.  Bakteri  yang digunakan adalah Staphylococcus aureus, Salmonella thypii  dan  E.coli yang  dibeli  dari  laboratorium mikrobiologi  Universitas  Indonesia.  Alat  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah rotary evaporator (IKA  RV8V), shaker, waterbath
(Memmert) swab steril, cawan petri,  ose, autoclave , dan inkubator.
Penyiapan  sampel  daun  kemangi  dilakukan dengan  proses  sortasi  basah  dan  dikeringkan anginkan. Daun kemangi yang telah kering diserbuk dan  diayak  dengan  ukuran  saringan  20  mesh  untuk mendapatkan ukuran serbuk yang seragam.
Ekstraksi serbuk daun kemangi dilakukan dengan metode  maserasi.  Sebanyak  1  bagian  (gram)  serbuk simplisia  kering  direndam  dengan  10  bagian  (mL) etanol  70%.  Proses  maserasi  menggunakan shaker selama  2  x  24  jam  dengan  kecepatan  100  rpm. Maserat dipisahkan dengan cara difiltrasi pada 24 jam pertama lalu dilanjutkan dengan perendaman kembali pada  residu  sisa  ekstraksi  dengan  etanol  70% sebanyak  setengah  bagian  dari  volume  pelarut sebelumnya.  Filtrasi  dilakukan  kembali  pada  hari kedua  dimana  seluruh  maserat  yang  ada  dicampur hingga homogen. Penguapan maserat untuk mendapatkan  ekstrak  kental  dilakukan  dengan metode rotary  evaporator dengan  suhu  45 o C  dan kecepatan  10  rpm  kemudian  dilanjutkan  dengan penguapan  menggunakan  metode  penangas  air  pada suhu 80 o C hingga didapatkan ekstrak kental. Ekstrak disimpan pada wadah tertutup dengan suhu 4 o C dan terhindar dari cahaya matahari (Hanani, 2016) .
Adapun  destilasi  minyak  atsiri  dilakukan terhadap simplisia kering daun kemangi yang belum diserbuk  dengan  metode  destilasi  uap,  sedangkan senyawa  fitokimia  yang  terkandung  dalam  ekstrak etanol  diuji  secara  kualitatif  menggunakan  pereaksi kimia (Sastrohamidjojo, 2017).
Sampel  bakteri  uji  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah satu isolat bakteri Staphylococcus aureus, Salmonella thypii dan E.coli pada  media  NA  miring,  lalu  diinkubasi  pada  suhu 37°C selama 24 jam.  Selanjutnya koloni dari media NA  miring  diambil  menggunakan  ose.  Koloni tersebut  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang sudah berisi NaCl steril, kemudian divortex   hingga diperoleh larutan homogeny dengan kekeruhan yang sesuai  standar  0,5  McFarland.  Selanjutnya  diambil suspensi  bakteri  uji  dari  tabung  reaksi  yang  sudah sesuai  dengan  standar Mc.  Farland lalu  digoreskan secara  streak  pada  media Mueller  Hinton  Agar (MHA)  dengan swab steril.  Sebanyak  30  μl  ekstrak daun  kemangi  dengan  konsentrasi  25%  (b/v),  50% (b/v), dan 75% (b/v) diteteskan pada masing-masing cakram kosong.
Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah  cakram antibiotik ampisilin 30µg, sedangkan kontrol negatif berupa  akuades  steril.  Cakram  berisi  ekstrak  daun kemangi,  ampisilin  dan  akuades  diletakkan  diatas permukaan medium Mueller Hinton Agar yang telah diinokulasi  oleh  bakteri  uji.  Media  uji  kemudian diinkubasi pada inkubator dengan suhu 37°C selama 24  jam.  Setelah  inkubasi,  diukur  zona  inhibisi (penghambatan)  yang  terbentuk  pada  medium  agar dengan jangka sorong atau penggaris .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  proses  pengeringan  simplisia  daun kemangi  selama  empat  hari  dengan  cara diangin-anginkan menghasilkan nilai rendemen sebesar  12,8%.  Ekstrak  etanol  yang  diperoleh melalui  proses  maserasi  dengan  pelarut  etanol memiliki  nilai  rendemen  16,9%  dengan    ciri organoleptis  berwarna  coklat  kehitaman  dan aroma  khas  kemangi,  sedangkan  minyak  atsiri yang  diperoleh  dari  proses  destilasi  memiliki kadar  0,56%  dengan  warna  coklat  tua  dan  bau
khas  kemangi.  Adapun  uji  skrining  fitokimia ekstrak etanol daun kemangi pada penelitian ini diperoleh adanya kandungan senyawa alkaloid, saponin,  tanin,  fenolik,  flavonoid,  triterpenoid, steroid,  dan  glikosida.  Hasil  uji  skrining fitokimia  pada  penelitian  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Hasil  positif  pada  Tabel    1  disebabkan pelarut  yang  digunakan  dalam  ekstraksi  daun kemangi adalah etanol 70% yang bersifat semi polar. Penggunaan pelarut etanol  secara efektif mampu  menarik  senyawa  metabolit  sekunder seperti  alkaloid,  saponin,  tannin, fenol, flavonoid,  glikosida,  triterpenoid  dan  steroid yang bersifat polar dan terdeteksi positif dengan pereaksi  kimia  secara  kualitatif.  Selain  itu, penggunaan etanol 70% dimaksudkan agar tidak toksik  dibandingkan  dengan  metanol  dengan harga yang lebih murah untuk skala produksi.
Hasil pada Tabel 1 sesuai dengan penelitian Vieira et al . (2003) ; Zengin et al. (2019) yang melaporkan  bahwa  senyawa  fitokimia  serupa Tabel  1.  juga  diperoleh  pada  ekstrak  metanol dan  infusa O.  americanum yang  diperoleh  di daerah Ivory Coast , Afrika Barat, Afrika Selatan dan Timur
Menurut  Pandey et  al .  (2014)  komponen senyawa  minyak  atsiri  yang  umum  ditemukan dalam  kelas Ocimum antara  lain  1 ,8-cineol, linalool,  pinene,  eugenol,  camphor,  methyl chavicol,  ocimene,  terpinene, dan limonene. Mondello et al. (2002) menambahkan kandungan O. basilicum , sanctum dan americanum yang tumbuh di Bangladesh antara lain monoterpene, eugenol/sesquiterpene, citral, neral, geranial dan camphor .
Tabel 1. Hasil uji skrining fitokimia ekstrak etanol daun kemangi
Uji Fitokimia Pereaksi Hasil Kesimpulan Alkaloid Pereaksi Dragendorf Pereaksi Bauchardat Endapan putih Endapan coklat + Saponin Dikocok dengan H 2 O panas Timbul busa + Tanin FeCl 3 Biru tua/ hijau Kehitaman + Fenolik NaOH Berwarna merah + Flavonoid H 2 SO 4 (p) Berwarna merah + Glikosida Asam asetat glacial FeCl 3 H 2 SO 4 (p) Timbul cincin ungu + Triterpenoid Eter Asam asetat anhidrat H 2 SO 4 (p) Berwarna merah ungu + Steroid Eter Asam asetat anhidrat H 2 SO 4 (p)
Berwarna hijau +
Tabel 2. Rata-rata diameter zona hambat (mm) ekstrak etanol daun kemangi terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus, S. thypii dan E. coli Mikroorganisme Perlakuan (30µl/disc) 25 % 50 % 75 % K(+) K(-) S. aureus 23,2 aS ± 0,95 26,1 abS ± 2,0 27,3 bS ± 1,7 34,7 cS ± 0,6 0 dR ± 0 S. thypii 14,7 aI ± 2,60 17,6 abI ± 1,6 21,1 bcS ±1,7 29,1 dS ± 1,31 0 eR ± 0 E. coli 5,0 aR ± 0,09 5,9 bR ± 0,1 6,9 cR ± 0,1 0 eR ± 0 0 eR ± 0
Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama menunjukkan perbedaan tidak nyata R : Resisten. I : Intermediet. S: Sensitif
Selanjutnya,  pengaruh  dari  ekstrak  etanol dan  minyak  atsiri  daun  kemangi  dilakukan pengujian antibakteri terhadap bakteri S. aureus S.  thypii dan E.coli .  Adapun  hasil  uji  ekstrak etanol  daun  kemangi  menunjukkan  bahwa pemberian ekstrak etanol daun kemangi mampu meningkatkan  diameter  zona  hambat  pada bakteri  uji.  Analisis  statistik  memperlihatkan perbedaan secara nyata (P<0,05) rata-rata zona hambat bakteri antara kelompok perlakuan pada semua bakteri uji yaitu S. aureus , S. thypii dan E.coli yang dapat dilihat pada Tabel 2 . Hasil  pada  Tabel  2.  disebabkan  ekstrak etanol  daun  kemangi  mengandung  senyawa metabolit  sekunder  yang  berfungsi  sebagai antibakteri.  Beberapa  senyawa  tersebut  antara lain  alkaloid,  saponin,  tanin,  fenol,  flavonoid dan  triterpenoid.  Salah  satu  bukti  bahwa senyawa  metabolit  sekunder  mampu  berperan sebagai  agen  antimikroba  ditunjukkan  dalam penelitian  Taleb-contini et  al .  (2003)  yang melaporkan  bahwa  flavonoid  memiliki  gugus hidroksi
yang
mampu menghambat pertumbuhan  bakteri  gram  positif  dan  negatif seperti E. coli dan S. aureus dengan nilai MIC 100-500  µg.  Cushnie  &  Lamb  (2005) menyatakan bahwa mekanisme senyawa flavonoid  yang  memberikan  efek  antibakteri yaitu  dengan  cara  menghambat  proses  sintesis protein.  Pada  flavonoid  mampu  menghambat pembentukan  RNA,  aktivitas  enzim  girase sehingga menghentikan sintesis protein pada S. aureus , E.coli dan S. thypii . Efek antibakteri lain dari  flavonoid  yaitu  dengan  cara  merusak membran  sel  dan  mengganggu  metabolisme energi, namun efek ini terjadi lebih efektif pada S.  aureus dibandingkan E.coli .  Cushnie et  al .
(2014)  menambahkan  bahwa  alkaloid  juga berfungsi sebagai antibakteri, yaitu menghambat  pembentukan  asam  nukleat  dan mengganggu  homeostasis  bakteri  dengan  cara merusak  membran  sel  sehingga  menyebabkan kebocoran sitoplasma.
Senyawa  metabolit  lain  yang  berfungsi sebagai  antibakteri  pada  penelitian  ini  adalah
saponin.    Bukti  bahwa  saponin  mampu berpengaruh pada pertumbuhan bakteri ditunjukkan pada penelitian  Khan et al. (2018) yang  menyatakan  bahwa  saponin  mampu menimbulkan lisis pada dinding sel bakteri yang ditunjukkan dengan peningkatan AKP ( Alkaline Phosphatase )  dan  protein  terlarut.    Semakin tinggi  kandungan  AKP  dan  protein  terlarut maka tingkat kerusakan dinding sel bakteri yang disebabkan  saponin  juga  semakin  tinggi. Adapun  tingkat  kerusakan  dinding  sel  oleh saponin  lebih  tinggi  pada  bakteri S.  aureus dibandingkan E. coli dan S. thypii .
Fungsi  sebagai  senyawa  anti  bakteri  juga ditunjukkan oleh senyawa tanin. Pada penelitian Doss  &  Rangasamy  (2009)  memberikan  hasil riset bahwa senyawa tanin mampu menghambat sintesis  dinding  sel,  namun  aktivitas  tanin kurang  efektif  pada  bakteri enterobacteriae seperti Salmonella dan E.coli .
Pada  penelitian  ini,  bakteri S.  aureus menghasilkan nilai rata-rata zona hambat  yang lebih  tinggi  tinggi  dibandingan  bakteri E.coli dan S.  thypii .  Mahmud  &  Ibrahim  (2017) menyatakan  bahwa  pengujian  ekstrak  etanol pada  tanaman  herbal  lebih  dominan  dalam menghambat pertumbuhan bakteri gram positif dibandingkan gram negatif. Hal ini disebabkan bakteri  gram  positif  tidak  memiliki barrier fosfolipid  pada  lapisan  peptidoglikan  sehingga mudah  ditembus  zat  terlarut  yang  bersifat lipofilik seperti alkaloid, saponin dan flavonoid. Berbeda  dengan  bakteri  gram  negatif  yang memiliki  memiliki barrier fosfolipid  pada lapisan  peptidoglikan  sehingga  tidak  mudah ditembus zat terlarut yang bersifat lipofilik.
Adapun hasil uji ekstrak minyak atsiri daun kemangi  menunjukkan  bahwa  pemberian ekstrak  minyak  atsiri  daun  kemangi  mampu meningkatkan  diameter  zona  hambat  pada bakteri  uji.  Analisis  statistik  menunjukkan perbedaan secara nyata (P < 0,05) rata-rata zona hambat  bakteri  antara  kelompok  perlakuan ( S. aureus , S. thypii dan E.coli) , kontrol positif dan negatif. Hasil ini dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Rata-rata diameter zona hambat minyak atsiri daun kemangi terhadap pertumbuhan bakteri
uji Mikroorganisme Perlakuan (30 µl/disc) 25 % 50 % 75 % K(+) K(-) S. aureus 15,9 aI ± 0,12 23,9 bS ± 0,12 24,0 bcS ± 0,08 34,7 dS ± 0,6 0 eR ± 0 S. thypii 4,9 aR ± 1,12 5,0 aR ± 0,12 14,9 bR ± 0,17 29,2 cS ± 1,21  0 dR ± 0 E. coli 4,9 aR ± 1,12 6,9 bR ± 1,18 7,9 cR ± 1,17 0 dR ± 0 0 dR ± 0
Keterangan: Angka yang diikuti huruf yang sama menunjukkan perbedaan tidak nyata R : Resisten. I : Intermediet. S: Sensitif
Hasil berbeda nyata yang ditunjukkan pada Tabel  3  disebabkan  minyak  atsiri  yang umumnya  merupakan  golongan  monoterpen mampu  mengganggu  integritas  dan  fungsi membran  sel,  mengubah  potensial  membran, menyebabkan kerusakan sitoplasma dan menghambat  rantai  respirasi  baik  pada  bakteri gram  negatif  atau  positif  (Semeniuc et  al ., 2017).  Silva et  al. (2015)  melaporkan  bahwa paparan  minyak  atsiri  dapat  mengganggu ekspresi  gen  penyandi  faktor  virulensi  seperti enterotoksin  pada  bakteri S.  aureus .  Selain  itu minyak atsiri juga mampu menghambat ekspresi protein membran pada Salmonella . Hasil  nilai  rata-rata  diameter  zona  hambat pada  penelitian  ini  menunjukkan  hasil  yang lebih tinggi pada bakteri gram positif ( S. aureus ) dibandingkan bakteri gram negatif ( S. thypii dan E.coli ). Bhattacharjya et al. (2019) menjelaskan bahwa  bakteri  gram  positif  lebih  sensitif terhadap pemberian minyak atsiri dibandingkan bakteri  gram  negatif.  Sensitivitas  bakteri  gram positif  disebabkan  bakteri  tersebut  tidak memiliki  membran  luar  yang  melindungi dinding  sel  secara  langsung.  Akibatnya,  suatu senyawa antibakteri seperti minyak atsiri dapat dengan mudah menghancurkan dinding sel dan sitoplasma  yang  berdampak  pada  kebocoran sitoplasma.  Berbeda  dengan  bakteri  gram negatif  yang memiliki membran luar pelindung dinding  sel.  Adanya  membran  luar  berupa fosfolipid mampu menjadi penghalang masuknya  banyak  molekul  antibiotik  dan antibakteri.  Selain  itu,  adanya  enzim  dalam ruang  periplasma  bakteri  gram  negatif  diduga mampu  memecah  molekul  antibakteri  seperti minyak atsiri.
Hasil penelitian ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Adam & Omer (2015) yang menunjukkan  bahwa  ekstrak  minyak  atsiri Ocimum basilicum dengan konsentrasi 6,25 µg, 12,5  µg,  25  µg,  50  µg,  dan  100  µg    mampu menghambat  semua  bakteri  patogen  seperti Escherichia coli (7,8 mm-13,6 mm) , Pseudomonas  aeruginosa (7,8  mm-13,9  mm) , Proteus mirabilis (5,4 mm - 14 mm , Klebsiella
pneumonia (5,4 mm - 13 mm) , Staphylococcus aureus (4,4  mm  -  13,9  mm) dan Enterococcus faecalis (5,5 mm - 13,6 mm) secara nyata. Bukti yang  sama  juga  ditunjukkan  pada  penelitian yang dilakukan oleh Eriotou et al. (2015) bahwa ekstrak  minyak  atsiri  dari  daun Ocimum bacilicum mampu berpengaruh terhadap bakteri gram  positif  dan  negatif.  Adapun  pengaruh tersebut  lebih  signifikan  pada  bakteri  gram positif dibandingkan gram negatif.
Kelebihan penelitian ini adalah penggunaan minyak  atsiri  sebagai  senyawa  uji  dan  tiga bakteri  uji  ( S.  aureus,  S.  thypii dan E.  coli ). Namun  penelitian  ini  memiliki  keterbatasan antara  lain  penyiapan  sampel  yang  belum terstandarisasi  dan  belum  dilakukan  analisis minyak atsiri menggunakan GC-MS

## KESIMPULAN
Pemberian  ekstrak  etanol  dan  minyak  atsiri daun  kemangi  dengan  konsentrasi  25  %,  50% dan  75%  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri S.  aureus,  E.  coli dan S.  aureus secara nyata.  Namun  respon  sensitifitas  bakteri terhadap  ekstrak  uji  daun  kemangi  masih menunjukan  kategori  resisten  pada  bakteri E. coli.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Tim peneliti mengucapkan terima kasih kepada Kementerian  Riset, Teknologi, dan Pendidikan Tinggi (RISTEK DIKTI) karena telah memberikan  hibah  Penelitian  Dosen  Pemula (PDP).  Selain  itu  juga  kepada  STIKes  Mitra Keluarga  dan  seluruh  pihak  yang  telah membantu dalam kelancaran penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Adam  ZA  &  Omer  AFA.  2015.  Antibacterial Activity of Ocimum basilicum (Rehan) Leaf Extract  against  Bacterial  Pathogens  in Sudan. American  Journal  of  Research Communication . 3 (8): 94-99.
Angelina M, Turnip M & Khotimah S. 2015. Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Kemangi  ( Ocimum  sanctum L.)  Terhadap
Pertumbuhan  Bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus . Protobiont . 4 (1): 184-189.
Bhattacharjya D, Adhikari S, Biswas A, Anil B, Parthadeb  G  &  Saha  S.  2019.  Ocimum Phytochemicals  and  Their  Potential  Impact on Human Health. Intech Open . 1-26. Britto CD, Wong VK, Dougan G & Pollard A. J. 2018. A Systematic Review of
Antimicrobial  Resistance  in Salmonella Enterica Serovar Typhi ,  The  Etiological
Agent of typhoid. PLoS Neglected Tropical Diseases . 12 (10): 1-15.
Chowdhury T, Mandal A, Chandra S & Sarker DDe.  2017.  Diversity  of  The  Genus Ocimum  (Lamiaceae)  Through  Morpho- molecular  (RAPD)  and  Chemical  (GC  - MS  )  Analysis. Journal  of  Genetic Engineering and Biotechnology. 15 (1): 275- 286.
Cushnie  T,  Cushnie  B  &  Lamb  AJ.  2014.
Alkaloids :  An  Overview  of  Their Antibacterial,  Antibiotic-Enhancing  And Antivirulence Activities. International Journal of Antimicrobial Agents . 44 (5): 377- 386 Cushnie  T  &  Lamb  AJ.  2005.  Antimicrobial Activity of Flavonoids. International
Journal of Antimicrobial Agents . 26 (5): 343- 356.
Dadgostar  P.  2019.  Antimicrobial  Resistance: Implications and Costs. Infection and Drug Resistance . 12 (2019): 3903-3910.
Doss, A., & Rangasamy, D. (2009). Antibacterial  Activity of Tannins from The Leaves of Solanum trilobatum Linn. Indian Journal of Science and Technology . 2 (2): 1-
4. Eriotou E, Anastasiadou K, Nikolopoulos D & Koulougliotis  D.  2015.  Antimicrobial  and Free Radical Scavenging Activities of Basil ( Ocimum  basilicum )  Essential  Oil  Isolated from  Five  Plant  Varieties  Growing  in Greece. Journal  of  Nutrition  &  Food Sciences . 5 (3): 1-9.
Founou  RC,  Founou  LL  &  Essack  SY.  2017. Clinical and Economic Impact of Antibiotic Resistance  in  Developing  Countries:  A Systematic Review and Meta-analysis. PLoS ONE . 12 (12): 1-18. GBD 2019 Antimicrobial Resistance
Collaborators.  2022.  Global  mortality associated  with  33  bacterial  pathogens  in 2019: A Systematic Analysis for the Global Burden  of  Disease  Study  2019. Lancet
(London, England) . 400 : 2221-2248.
Hanganeni  E,  Ndakolo  D,  Hedimbi  M,  Vainio O, Hakanen A & Vuopio J. 2023. Resistance Antimicrobial  Resistance  Prevalence  of
Escherichia coli and Staphylococcus aureus Amongst  Bacteremic  Patients  in  Africa :  a Systematic  Review. Journal  of  Global Antimicrobial Resistance , 32 :35-43. Helal  IM,  El-Bessoumy  A,  Al-Bataineh  E, Joseph MRP, Rajagopalan P, Chandramoorthy HC & Ben Hadj Ahmed S. 2019. Antimicrobial Efficiency of Essential Oils  From  Traditional  Medicinal  Plants  of
Asir  Region,  Saudi  Arabia,  Over  Drug
Resistant Isolates. BioMed Research
International. 2019 : 1-9.
Khan  MI,  Ahhmed  A,  Shin  JH,  Baek  JS,  Kim MY  &  Kim  JD.  2018.  Green  Tea  Seed Isolated  Saponins  Exerts  Antibacterial Effects  against  Various  Strains  of  Gram Positive  and  Gram  Negative  Bacteria,  a Comprehensive Study In Vitro and In Vivo.
Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine . 2018 : 1-12.
Mahmud PIA & Ibrahim, N. 2017. Antibacterial Activity of Alkaloid Extracts from Ochrosia oppositifolia.  Sains  Malaysia. 46 (8):  1279- 1284.
Mondello L, Zappia G, Cotroneo A, Bonaccorsi I,  Chowdhury  JU,  Yusuf  M  &  Dugo  G.
2002. Studies on The Essential Oil-Bearing Plants of Bangladesh. Part VIII.
Composition  of  Some  Ocimum  oils O. basilicum L. var. purpurascens; O. sanctum L.  green; O.  sanctum L.  purple; O. americanum L., citral type; O. americanum
L.,  camphor  type. Flavour  and  Fragrance Journal . 17 (5): 335-340.
Ng  IMJ  &  Shamsi  S.  2022.  Graphene  Oxide (GO):  A  Promising  Nanomaterial  against Infectious  Diseases  Caused  by  Multidrug- Resistant Bacteria. International Journal of Molecular Sciences . 23 (16): 1-16.
Oyedemi SO, Oyedemi BO, Coopoosamy RM,
Prieto JM, Stapleton P & Gibbons S. 2017. South African Journal of Botany Antibacterial and nor  Floxacin Potentiation
Activities  of Ocimum  americanum L. against methicillin resistant Staphylococcus aureus South  African  Journal  of  Botany ,
109 : 308-314.
Pandey  AK,  Pooja  S  &  Tripathi  NN.  2014. Chemistry  and  Bioactivities  of  Essential Oils  of  Some  Ocimum  Species:  An Overview. Tropical Biomedicine. 4 (9): 682-
694.
Kementerian    Kesehatan,  RI.  2021. Peraturan Menteri Koordinator Bidang Manusida dan
Kebudayaan  Republik  Indonesia .  Jakarta: Kemenkes.
Semeniuc  CA,  Pop  CR  &  Rotar  AM.  2017. Antibacterial  Activity  And  Interactions  of Plant  Essential  Oil  Combinations  Against Gram-Positive and Gram-Negative Bacteria. Journal of Food and Drug Analysis . 25 (2), 403-408.
Silva VA, Sousa JP, Guerra FQS, Pessôa HLF, Freitas  AFR,  NALB,  &  Lima  EO.  2015.
Antibacterial Activity of Ocimum basilicum Essential  Oil  and  Linalool  on  Bacterial Isolates of Clinical Importance. International  Journal  of  Pharmacognosy and  Phytochemical  Research . 7 (6):  1066- 1071.
Solikhah, Kusuma W, Ardana BS & Wijayanti N. 2016. Uji Aktivitas Antimikroba Ekstrak Etanol Batang dan Daun Kemangi ( Ocimum basilicum L.). Indonesian  Journal  of
Chemical Science . 5 (2): 104-107.
Taleb-contini SH, Salvador MJ, Watanabe E, Ito IY & de Oliveira DCR. 2003. Antimicrobial activity  of  flavonoids  and  steroids  isolated from  two  Chromolaena  species. Brazilian Journal  of  Pharmaceutical  Sciences. 39 : 403-408.
Vieira  RF,  Grayer  RJ  &  Paton  AJ.  2003. Chemical profiling of Ocimum americanum
Using External Flavonoids. Phytochemistry ,
63 : 555-567.
WHO. 2014. Antimicrobial resistance. Antimicrobial Resistance Global Report on Surveillance .
Zengin  G,  Ferrante  C,  Estelle  D,  Ibrahime  K,
Tirillini B & Menghini L. 2019. Comprehensive Approaches on The Chemical Constituents And Pharmacological  Properties  of  Flowers  and Leaves  of  American  Basil  ( Ocimum americanum L). Food Research International . 125 (August).
150                                                       Aktivitas Antibakteri Ekstrak …                     (Perwisari, dkk)