## STUDI PERBANDINGAN KEMAMPUAN Nannochloropsis sp. DAN Chlorella sp. SEBAGAI AGEN BIOREMEDIASI TERHADAP LOGAM BERAT TIMBAL (Pb)

## COMPARATIVE STUDY OF ABILITY Nannochloropsis sp. AND
Chlorella sp. AS AGENT BIOREMEDIATION OF HEAVY METAL PLUMBUM (Pb)
Khilyatun Nisak, Boedi Setya Rahardja dan Endang Dewi Masithah
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
Microalgae  species Nannochloropsis sp.  can  used  as  heavy  metal  biosorben  because  of  it’s adsorption capability that caused  by the active  cluster which contained  in that species (Sembiring et  al., 2008). Chlorella sp. is one of phytoplankton species that has the bioaccumulation ability of heavy metals and easily cultivated (Arifin, 1997). Lead (Pb) is a mineral belonging to microelements, is a heavy metal and  is  a  potentially  toxic  material.  Water  bodies  that  have  been  polluted  by  compounds  or  ions  Pb because can lead to the death of aquatic biota, the number of Lead (Pb) present in water bodies exceeding the proper concentration (Palar, 2004). One way to anticipate the increasing heavy metal pollution in the water is to bioremediation.
The research using experimentally, the research design used was completely randomized design (CRD) consisting of four treatments with five replications. The concentrations of heavy metals Plumbum (Pb)  used  is  0  ppm  and  0.9  ppm.  The  main  parameters  in  this  study  is  the  ability  of  bioremediation Plumbum (Pb) by Nannochloropsis sp. and Chlorella sp. SPSS  analytics  normality test results and test  the  ability  of  T 95%  in Nannochloropsis sp. and Chlorella sp. in absorbing heavy metals Plumbum (Pb) concentrations of 0 ppm and 0.9 ppm indicate that the data is normal and the results obtained were significantly different / significant. While the analysis of SPSS test T on heavy metal absorption capability comparison Plumbum (Pb) concentration of 0 ppm and 0.9 ppm by Nannochloropsis sp. and Chlorella sp. showed that the results were not significantly different / non significant. On average results obtained, Nannochloropsis sp. have a higher capacity than Chlorella sp. in the bioremediation process of heavy metals Plumbum (Pb).
Keywords : Nannochloropsis sp., Chlorella sp., Plumbum(Pb) and Bioremediation

## Pendahuluan
Pencemaran  logam  berat  merupakan masalah  yang  sangat  serius  terhadap  kondisi lingkungan  dan  ekosistem  perairan  pada  saat ini.  Semakin  banyak  logam  berat  yang terakumulasi  dalam  perairan  maka  kehidupan organisme  dalam  perairan  semakin  terganggu termasuk  ikan-ikan  yang  hidup  di  perairan tersebut  juga  terkontaminasi  logam  berat (Friberg et al ., 1974 dalam Connell dan Miller, 1995).
Timbal  (Pb)  merupakan  mineral  yang tergolong mikroelemen, merupakan logam berat dan  berpotensi  menjadi  bahan  toksik.  Badan perairan  yang telah tercemar senyawa atau ion- ion  Pb,  sehingga  jumlah  Timbal  (Pb)  yang  ada dalam badan perairan melebihi konsentrasi yang semestinya, dapat mengakibatkan kematian bagi biota  perairan  (Palar,  2004).  Salah  satu  cara untuk mengantisipasi meningkatnya pencemaran  logam  berat  dalam  suatu  perairan adalah  dengan  cara  bioremediasi.  Menurut Munir (2006), bioremediasi merupakan pengembangan dari bidang bioteknologi lingkungan dengan memanfaatkan proses biologi dalam mengendalikan pencemaran.
Salah  satu  organisme  yang  dapat digunakan untuk bioremediasi adalah mikroalga jenis Nannochloropsis sp.  Mikroalga  ini  dapat dimanfaatkan  untuk  mengadsorpsi  ion-ion logam.  Kemampuan  adsorpsinya  cukup  tinggi karena  di  dalam Nannochloropsis sp.  terdapat gugus  fungsi  amina,  amida,  dan  karboksilat yang dapat berikatan dengan ion logam (Wisnu, 2006). Nannochloropsis sp.  digunakan  sebagai biosorben  karena memiliki toleransi yang tinggi terhadap  logam  berat  dan  tidak  memiliki proteksi khusus untuk masuknya logam berat ke dalam  sel.  Penelitian  tentang  kemampuan Nannochloropsis sp.  sebagai  agen  bioremediasi terhadap  logam  berat  Timbal  (Pb)  telah dilakukan  oleh  Wardhany  (2010)  dan  diperoleh hasil  bahwa pada  perlakuan konsentrasi  Timbal (Pb)  sebesar  0,3  ppm,  0,6  ppm  dan  0,9  ppm,
kemampuan Nannochloropsis sp.  didapatkan paling efektif pada perlakuan 0,9 ppm.
Chlorella sp.  salah  satu  jenis  alga bersel tunggal, mempunyai kemampuan produktifitas  tinggi  dan  berkembang  biak dengan  cepat  (Venkataraman,  1969). Chlorella sp.  merupakan  salah  satu  spesies  fitoplankton yang memiliki kemampuan bioakumulasi logam berat  dan  mudah  dibudidayakan  (Arifin,  1997). Kemampuan  masing-masing  spesies  plankton sebagai  agen  bioremediasi  adalah  tidak  sama. Kemampuan  masing-masing  spesies  plankton dalam  bioremediasi  perlu  diketahui  sehingga dalam pemanfaatannya diharapkan akan diperoleh  hasil  yang  optimal.  Oleh  karena  itu, penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui kemampuan Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp.  dalam  menyerap  logam  berat  Timbal  (Pb) dan  perbandingan  kemampuan  bioremediasi logam berat timbal (Pb) antara Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp.
Metodologi Penelitian ini dilaksanakan di
Laboratorium  Pendidikan  Perikanan  Fakultas Perikanan  dan  Kelautan,  Universitas  Airlangga Surabaya  pada  bulan  April  sampai  Juni  2013. Pengujian  kandungan  Timbal  (Pb)  yang terkandung  didalam  media  dilakukan  di  Balai Besar Laboratorium Kesehatan Surabaya.
Alat-alat yang diperlukan dalam penelitian  ini  adalah  seperangkat  alat Atomic
Absorbent  Specthropothometric (AAS)  atau Spektrometri Serapan Atom (SSA) di Laboratorium Pengujian, gelas plastik Polietilen untuk kultur plankton, batu aerasi, selang aerasi, kran  aerasi,  mikroskop, cover  glass ,  pipet, haemacytometer ,  DO  meter,  lampu  neon  40 watt, beaker glass, handtally counter, termometer, kertas saring, lux  meter, kertas pH, filter bag, labu ukur, kapas dan tisu.
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah biakan murni Nannochloropsis sp.  dan Chlorella sp.  yang diperoleh  dari  Balai  Besar  Budidaya  Air  Payau di  daerah  Situbondo,  logam  berat  Pb,  air  laut, aquades, klorin, deterjen, Na-Thiosulfat, aluminium  foil  dan  media  Walne  (1  mL/1000 mL) sebagai pupuk untuk kultur plankton.
Penelitian ini dilakukan secara eksperimental, rancangan penelitian yang digunakan  adalah  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL) yang terdiri dari empat perlakuan dengan lima ulangan yaitu:
- Perlakuan A  :  kultur Nannocloropsis sp.
tanpa pemberiam logam berat Pb (0 ppm)
- Perlakuan B  :  kultur Chlorella sp.  tanpa pemberiam  logam  berat  Pb (0 ppm)
- Perlakuan C  :  kultur Nannocloropsis sp dengan  pemberian  logam berat Pb sebesar 0,9 ppm
- Perlakuan D  :  kultur Chlorella sp  dengan pemberian  logam  berat  Pb sebesar 0,9 ppm
Pemberian  logam  berat  Timbal  (Pb) sebesar  0,9  ppm  berdasarkan  hasil  Wardhany (2010)  bahwa  kemampuan Nannocloropsis sp. dalam  menyerap  Timbal  (Pb)  paling  efektif adalah pada konsentrasi 0,9 ppm.
Persiapan  dan  sterilisasi  media  kultur yang  akan  digunakan  sebagai  media  kultur Nannochloropsis sp.  untuk  steriliasi  air  laut perlu digunakan larutan klorin. Air laut disaring dengan filter  bag kemudian  disterilkan  dengan klorin  60  ppm  selama  1  jam  dan  dinetralisir dengan  larutan  Na-  Thiosulfat  40-45  ppm sampai  tidak  berbau  klorin.  Air  yang  telah disterilkan  kemudian  diaerasi  dan  disimpan dalam wadah tertutup dan terhindar dari cahaya matahari  agar  mencegah  pertumbuhan  lumut dan fitoplankton yang tidak diinginkan.
Pembuatan  larutan  stok  timbal  diawali dengan menimbang  Pb(NO3) 2 sebanyak 1  gram kemudian  dilarutkan  ke  dalam  gelas  ukur dengan 100  mL aquades, dihomogenkan di atas magnetic  stirrer .  Larutan  induk  ini  kemudian dipindah  ke  dalam  Erlenmeyer  1000  mL  dan ditambah aquades sebanyak 500 mL. Pengambilan stok timbal yang akan diperlakukan  menggunakan  rumus  berikut (Gunawati, 2011):
V 1 N 1 = V 2 N 2
Keterangan : V 1 =   volume stok yang dicari N 1 =   konsentrasi stok yang dicari V 2 =   volume stok yang diketahui N 2 =   konsentrasi stok yang diketahui
A. Kultur Fitoplankton Sebelum diberi perlakuan,
Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. diaklimatisasi  selama  tiga  hari  di  dalam akuarium  agar  dapat  beradaptasi  terhadap kondisi  dan  lingkungan  kultur  penelitian.  Pada tahap  pemberian  perlakuan, Nannochloropsis sp.  dan Chlorella sp.  dimasukkan  ke  dalam botol-botol  perlakuan  yang  dilapisi  dengan plastik  polietilen (PE) didalamnya, dikarenakan botol  perlakuan  yang  terbuat  dari  gelas  kaca menyebabkan  sebagian  logam  berat  yang terdapat  dalam  media  akan  teradsorpsi  pada dinding  gelas  sehingga  perlu  dilapisi  dengan
plastik  polietilen  (PE)  (Hutagalung,  1995). Media  kultur  yang  digunakan  adalah  air  laut sebanyak 130 mL dan pupuk Walne sebanyak 2 mL/L kemudian diberikan aerasi yang bertujuan agar tidak terjadi pembentukan koloni. Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. dimasukkan  ke  dalam  botol  perlakuan  yang telah dilapisi plastik polietilen dengan
kepadatan 1x10 5 unit/mL.
Guna mengetahui
kemampuan penyerapan  Timbal  (Pb)  oleh  Fitoplankton dilakukan  pengukuran  konsentrasi  Timbal  (Pb) pada  media  pemeliharaan  plankton  pada  awal dan  akhir  penelitian.  Konsentrasi  Timbal  (Pb) yang  tersisa  pada  media  pemeliharaan  plankton pada  akhir  penelitian  menunjukkan  sisa  Timbal (Pb)  yang  tidak  terserap  oleh  plankton. Selanjutnya  kedua  konsentrasi  Timbal  (Pb) tersebut  dimasukkan  dalam  rumus  (Gunawati, 2011):
Keterangan: N1 = Konsentrasi Timbal (Pb) media pada awal penelitian N2 = Konsentrasi Timbal (Pb) media pada akhir penelitian
Parameter  utama  dalam  penelitian  ini adalah  kandungan  logam  berat  Timbal  (Pb) pada  media  oleh Nannochloropsis sp.  dan Chlorella sp. Pengujian kandungan Timbal (Pb) yang terkandung didalam air dilakukan di Balai Besar Laboratorium Kesehatan Surabaya.
Sebagai  parameter  penunjang  juga  diamati kualitas  air  meliputi  suhu,  pH,  oksigen  terlarut, dan salinitas.
Data  penelitian  studi  perbandingan kemampuan Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp.  sebagai  agen  bioremediasi  terhadap  logam berat  timbal  (Pb)  dianalisis  menggunakan  uji normalitas  dan  uji  T  statistik  berpasangan (paired  comparison).  Uji  T  digunakan  apabila percobaan  dikatakan  berpasangan  apabila  tiap-
tiap ulangan ditempatkan pada media yang sama atau  2  perlakuan  dibandingkan  dalam  keadaan yang sama (Kusriningrum, 2008).

## Hasil dan Pembahasan
Kandungan  Logam  Berat  Timbal  (Pb)  Dalam Media Kultur
Data  rata-rata  konsentrasi  logam  berat Timbal  (Pb)  pada  media  kultur  dapat  dilihat pada  Tabel  1.  Terhadap  media  kultur  tanpa penambahan  logam  berat  Timbal  (Pb),  juga dilakukan  analisa  kandungan  logam  berat Timbal  (Pb)  dan  diketahui  bahwa  pada  media tersebut juga terdapat logam berat Timbal (Pb).
Berdasarkan  data  tersebut,  dilakukan analisa  uji  T  menggunakan  SPSS,  masing- masing  terhadap:  1)  kandungan  logam  berat media  kultur Nannochloropsis sp.  pada  awal dan akhir penelitian, 2) kandungan logam  berat media  kultur Chlorella sp. pada awal dan  akhir penelitian, 3) presentase penurunan logam  berat media kultur Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp.  pada  akhir  penelitian.  Berikut  grafik penurunan konsentrasi logam  berat Timbal (Pb) yang  telah  di  serap  oleh Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp.
Hasil  uji  T  kandungan  logam  berat media Nannochloropsis sp.dengan  Timbal  (Pb) 0  ppm  dan  0,9  ppm  pada  awal  dan  akhir penelitian  diketahui  bahwa  terdapat  perbedaan yang  nyata  terhadap  kandungan  logam  berat Timbal  (Pb)  pada  awal  dan  akhir  penelitian (<0,05).
Hasil  uji  T  kandungan  logam  berat media Chlorella sp. dengan Timbal (Pb) 0 ppm dan  0,9  ppm  pada  awal  dan  akhir  penelitian diketahui bahwa terdapat perbedaan  yang nyata terhadap  kandungan  logam  berat  Timbal  (Pb) pada awal dan akhir penelitian (< 0,05).
Pada  hasil  uji  T  presentase  penurunan logam berat pada media kultur Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. dengan Timbal (Pb) 0 ppm dan  0,9  ppm  pada  akhir  penelitian,  diketahui bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang  nyata terhadap  kemampuan Nannochloropsis sp.  dan
Tabel 1. Rata-rata  konsentrasi logam  berat  Timbal (Pb) dalam air  media  perlakuan Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp.
Hari ke- Perlakuan A B C D 0 0,0130 0,0344 0,9006 0,8696 1 0,0108 0,0309 0,7973 0,7825 Presentase penurunan konsentrasi Timbal (Pb) 16,9230 10,1744 11,4701 10,0160
Chlorella sp.  dalam  menyerap  logam  berat Timbal (Pb).
Data  kualitas  air  selama  penelitian menunjukkan  bahwa  kondisi parameter  kualitas air  media  kultur  seperti  pH,  suhu,  kandungan oksigen terlarut (DO) dan salinitas masih berada dalam  kondisi  optimal.  Hasil  pengukuran kualitas  air  media  kultur Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp.  selama  penelitian  di  sajikan pada tabel 2 dan tabel 3.
Hasil  pengukuran  logam  berat  pada media kultur Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. tanpa penambahan logam berat Timbal (Pb), ternyata  masih  terdapat  logam  berat  di dalamnya. Di duga logam berat Timbal (Pb) ini berasal  dari  air  media  yang  sebelumnya mengandung logam berat.
Hasil  uji  T  terhadap  kandungan  logam berat  pada  media  kultur Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp.,  baik  tanpa  penambahan Timbal  (Pb)  maupun  dengan  penambahan Timbal  (Pb)  menjelaskan  adanya  perbedaan (<0,05). Hal ini menunjukkan bahwa Nannochloropsis sp.  maupun Chlorella sp. memiliki  kemampuan  untuk  menyerap  logam berat  Timbal  (Pb).  Dengan  kata  lain,  mampu melakukan proses bioremediasi.
Hasil  uji  T  terhadap  presentase penurunan  logam  berat  dalam  media  kultur Nannochloropsis sp.  dan Chlorella sp.,  baik dengan penambahan Timbal (Pb) maupun tanpa penambahan  Timbal  (Pb)  menunjukkan  hasil yang  tidak  berbeda  nyata.  Akan  tetapi  pada perhitungan rata-rata presentase hasil penurunan logam  berat  pada  awal  dan  akhir  penelitian menunjukkan angka
hasil
presentase Nannochloropsis sp.  lebih  tinggi  dibandingkan dengan Chlorella sp.  Hal  ini  menunjukkan bahwa Nannochloropsis sp. memiliki kemampuan lebih tinggi dalam menyerap logam berat  Timbal  (Pb)  dibandingkan  dengan Chlorella sp.  meskipun  dalam  analisis  hasil  uji T menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata. Menurut  Darmono  (1995) dalam Pandebesie  dan  Hermana  (2001), Chlorella sp.
tidak mempunyai kemampuan untuk meregulasi logam  berat  Timbal  (Pb)  dalam  konsentrasi tinggi  karena  timbal  bukan  merupakan  logam essensial  bagi Chlorella sp.  Menurut  Palar (2004), timbal (Pb) merupakan logam berat non essensial  yang  mampu  berikatan  dengan jaringan  sel  sehingga  sel  hanya  mampu mengekskresikan  logam  berat  Timbal  (Pb) dengan konsentrasi  yang sangat rendah.  Hal ini mengakibatkan  terjadi  akumulasi  Timbal  (Pb) secara  perlahan  sampai  akhirnya  mencapai tingkat  yang  bersifat  racun  yang  menyebabkan kematian  sel.  Sehingga  pada  penelitian  ini presentase  penurunan  kandungan  logam  berat Timbal  (Pb)  pada  media  kultur Chlorella sp. lebih rendah dibandingkan Nannochloropsis sp. Hasil  analisa  kandungan  logam  berat Timbal  (Pb)  dalam  air  media  yang  diabsorbsi oleh Nannochloropsis sp.  dan Chlorella sp. menunjukkan  bahwa Nannochloropsis sp. memiliki kemampuan lebih tinggi dibandingkan Chlorella sp.  dalam  menyerap  logam  berat Timbal  (Pb).  Menurut  Wardhany  (2010), Nannochloropsis sp. merupakan jenis alga hijau bersel  satu  yang  dapat  dimanfaatkan  untuk mengabsorbsi  ion-ion  logam.  Kemampuan absorbsinya  cukup  tinggi  karena  di  dalam  alga Nannochloropsis sp.  terdapat  gugus  fungsi amina, amida, sulfat dan karboksilat yang dapat berikatan  dengan  ion  logam.  Gugus  fungsi tersebut  dapat  melakukan  pengikatan  dengan ion  logam  disebabkan  karena  adanya  reaksi antara muatan negatif yang terdapat pada gugus fungsi  di  dalam  dinding  sel  dengan  muatan positif  ion  logam  berat  Timbal  (Pb)  sehingga terjadi  pengikatan  ion  akibat  dari  perbedaan muatan tersebut.
Hasil data kualitas air selama penelitian menunjukkan bahwa kondisi parameter  kualitas  air  media  kultur  seperti  pH, suhu,  kandungan  oksigen  terlarut  (DO)  dan salinitas  masih  berada  dalam  kondisi  optimal. Salinitas  air  media  relatif  tinggi  pada  kisaran optimumnya  yaitu  35  ‰.  Menurut  Sylvester et al .  (2002),  kisaran  salinitas  yang  paling
Tabel 2. Nilai rata-rata kualitas air pada media kultur Nannochloropsis sp. Konsentrasi logam berat Timbal (Pb) Suhu (°C) pH Salinitas (‰) DO mg/l pagi sore Pagi Sore 0 ppm 33 °C 34 °C 8 8 35 4 0,9 ppm 34 °C 35 °C 8 8 35 4
Tabel 3. Nilai rata-rata kualitas air pada media kultur Chlorella sp. Konsentrasi logam berat Timbal (Pb) Suhu (°C) pH Salinitas (‰) DO mg/l pagi sore Pagi Sore 0 ppm 33 °C 34 °C 8 8 35 4 0,9 ppm 34 °C 35 °C 8 8 35 4
optimum  untuk  pertumbuhan  mikroalga  adalah 25-35%.  Menurut  Fachrullah  (2011),  Salinitas media  meningkat  karena  terjadi  penguapan akibat  pengaruh  dari  panas  lampu  yang digunakan  saat  kultivasi.  Selain  itu,  kenaikan salinitas  juga  diduga  berasal  dari  pengadukan media kultur dari aerator sehingga mengakibatkan terjadinya penguapan.
Derajat  Keasaman  (pH)  pada  media kultur  adalah  8  pada  awal  dan  akhir  penelitian. Hasil  ini  termasuk  dalam  kisaran  batas  atas  pH optimum.   Kisaran pH optimum untuk alga laut antara  7,5-8,5  (Cotteau,  1996;  Taw,  1990). Hasil  pengukuran  suhu  media  kultur  pada  awal dan  akhir  penelitian  diperoleh  kisaran  suhu  33- 35°C.

## Kesimpulan
Pada  hasil  uji  T  kandungan  logam berat  media Nannochloropsis sp.  dan Chlorella sp.  dengan  konsentrasi  Timbal  (Pb)  sebesar  0 ppm  dan  0,9  ppm  pada  awal  dan  akhir penelitian menunjukkan bahwa terdapat perbedaan  yang  nyata  terhadap  kandungan logam  berat  Timbal  (Pb)  pada  awal  dan  akhir penelitian (<0,05). Hal ini  menunjukkan  bahwa Nannochloropsis sp.  memiliki  kemampuan untuk menyerap logam berat Timbal (Pb).
Hasil  uji  T  terhadap  presentase penurunan  logam  berat  dalam  media  kultur Nannochloropsis sp.  dan Chlorella sp.,  baik dengan penambahan Timbal (Pb) maupun tanpa penambahan  Timbal  (Pb)  menunjukkan  hasil yang  tidak  berbeda  nyata.  Akan  tetapi  pada perhitungan rata-rata presentase hasil penurunan logam  berat  pada  awal  dan  akhir  penelitian menunjukkan angka
hasil
presentase Nannochloropsis sp.  lebih  tinggi  dibandingkan dengan Chlorella sp.  Hal  ini  menunjukkan bahwa Nannochloropsis sp. memiliki kemampuan lebih tinggi dalam menyerap logam berat  Timbal  (Pb)  dibandingkan  dengan Chlorella sp.  meskipun  dalam  analisis  hasil  uji T menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata.
Dari  hasil  penelitian  disarankan  untuk menggunakan Nannochloropsis sp. dan Chlorella sp. dalam bioremediasi pada pencemaran  air  oleh  logam  berat  Timbal  (Pb) dan perlu adanya  penelitian lebih lanjut tentang bioremediasi  oleh Nannochloropsis sp.  dan Chlorella sp. untuk jenis logam berat lainnya.

## Daftar Pustaka
Arifin.  1997.  Studi  Interaksi  antara  Kadmium dan  Fitoplankton  Lingkungan  Laut, Thesis . Program Pasca Sarjana
Program  Studi  Kimia  FMIPA  UGM.
Yogyakarta. Darmono.  2001.  Lingkungan  Hidup  Dan Pencemaran Hubungannya Dengan Toksikologi Senyawa Logam. Universitas Indonesia Press. Jakarta. Fachrullah,  M.  R. 2011.  Laju  Pertumbuhan
Mikroalga  Penghasil  Biofuel  Jenis Chlorella sp.  dan Nannochloropsis sp. yang  Dikultivasi  Menggunakan  Air Limbah  Hasil  Penambangan  Timah  di Pulau  Bangka.  Skripsi.  IPB.  Bogor. 102 Hal.
Friberg,  L.,  Piscator,  M.,  Nordberg,  G.  F.  and Kjellstrom,  L.  1974.  Cadmium  in  the Environment. Dalam: Connel,  D.  W. dan  Miller,  G.  J.  1995.  Kimia  dan Otoksikologi  Pencemaran.  Cetakan Pertama. Universitas Indonesia. Jakarta. Gunawati,  W.  D.  2009.  Bioremoval  Timbal
Oleh Sprirulina  platensis. Skripsi. Program  Studi  Biologi.  Fakultas  Sains dan  Teknologi.  Universitas  Airlangga. Surabaya.
Hutagalung,  H. 1995. Heavy  Metals Content in Sediment  in  Jakarta  Bay,  Indonesia.
Dalam : Asean Criteria and Monitoring. Advance in Marine Environmental Management and
Human  Health  Protection  (Watson  D, KS  Wong  and  Vigers  Eds)  Asean
Canada CPMS  II. Proceeding  of Asean Canada  Midterm  Technical  Review Conference on Marine Science, Singapore  24-28  Oktober  1994.  Hal: 273-275
Kusriningrum.  2008.  Perancangan  Percobaan.
Airlangga  University  Press.  Surabaya. Hal 21. Munir,  E.  2006.  Pemanfaatan  Mikroba  dalam Bioremediasi: Suatu Teknologi Alternatif untuk Pelestarian Lingkungan.  Pidato  Pengukuhan  Guru Besar Tetap dalam Bidang
Mikrobiologi  FMIPA  USU.  Sumatera
Utara. Hal 5.
Palar,  H.  2004.  Pencemaran  dan  Toksikologi Logam  Berat . PT  Rineka  Cipta.
Jakarta. Pandebesie,  S.  E.  Dan  J,  Hermana.  2001. Inhibisi Kadmium Terhadap Pertumbuhan  Algae  Hijau  ( Chlorella sp.). Jurnal Purifikasi . 2: 301-306. Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 8 Tahun 2001 tentang
Pengendalian  Pencemaran  Air  dan Pengelolaan Kualitas Air.
Sembiring,  Z.,  Suharso.,  Regina.,  Marta  F.  dan Murniyarti. 2008. Studi proses adsorpsi-desorpsi  ion  logam  Pb(II), Cu(II),  dan  Cd(II)  terhadap  pengaruh waktu  dan  konsentrasi  pada  biomassa Nannochloropsis sp. yang terenkapsulasi  aqua-gel  silika  dengan metode  kontinyu.  Jurnal  Kimia  dalam Seminar Nasional Sains dan Teknologi II. Universitas Lampung. 17-18 November 2008. Venkataraman,  G.  S.  1969.  The  Cultivation  of Algae  Indian  Council  of  Agricultural Research. New Delhi. Wardhany,  S.  Y.  2010.  Analisa  Kemampuan Mikroalga Nannochloropsis
sp. Sebagai  Bioremediator  Timbal  (Pb)
Dengan  Konsentrasi  Berbeda.  Skripsi. Universitas Brawijaya. Malang.
Wisnu, C. 2006. Analisis dan Aspek  Kesehatan
Bahan Tambahan Pangan. Bumi Aksara, Jakarta.