## TINGKAT TOKSISITAS PENTAKLOROFENOL TERHADAP ORGANISME AIR TAWAR
Rina S Soetopo *) , Krisna Aditya, Ilisya  P. Indrasari *) Peneliti Bidang Lingkungan Pada Balai Besar Pulp dan Kertas (BBPK)

## TOXICITY LEVEL OF PENTACHLOROPHENOL ON FRESH WATER ORGANISM

## ABSTRACT
Pentachlorophenol  is  one  of  the  AOX  compound  components  found  in  pulp  bleaching effluents. Pentachlorophenol is bioaccumulative with the  bioconcentration factor in  Daphnia magna about  400  (  OSPARCOM,  1999).  The  research  on  the  influence  of  pentachlorophenol  to  aquatic organism Daphnia magna have been conducted at neutral pH and temperature 29 o C. It was carried out in 2 stages that are acute toxicity test for 24 hour and chronic toxicity test for one cycle live based on  OECD  guidelines  202  (1984).  Acute  toxicity  test  carried  out  at  a  range  pentachlorophenol concentration  about  300  -  550  ppb.  Chronic  toxicity  test  conducted  with  the  semi-static    method  at three pentachlorophenol concentration namely 0,16 pp,; 1,6 ppb, and 16 ppb. Data of  acute toxicity test    are  analyzed  by  probit  analysis  to  calculate  the  24  hour  EC 50 immobilization  concentration (EC 50 -24h) with 95% confidence limit. Data from chronic toxicity test are calculated to find out daily survivorship,  daily age  specific fecundity,  and  net  reproductive  rate according  to  Sorensen  (  1996). The results of experiments indicate that pentachlorophenol have the EC50-24 hour value to Daphnia Magna  at  about  359  –  455  ppb.  The  chronic  effect  of  pentachlorophenol  to  Daphnia  magna  are decreasing  mean  daily  survivorship,  mean  daily  age  specific  fecundity,  and  mean  net  reproductive rate.
Keywords : Pentachlorophenol, Daphnia magna, daily survivorship, daily age specific fecundity, net reproductive rate

## INTISARI
Pentachlorophenol  adalah  salah  satu  komponen  senyawa  AOX  yang  terdapat  dalam  air limbah  proses  pemutihan pulp.  Pentaklorofenol  bersifat  bioakumulatif  dengan  faktor  biokonsentrasi dalam  organisme  Daphnia  magna  400  (OSPARCOM,  1999).  Percobaan  pengaruh  pentaklorofenol terhadap organisme perairan Daphnia magna telah dilakukan pada pH netral dan suhu sekitar 29 o C. Percobaan  dilakukan  dalam  2  tahap  yaitu  uji  toksisitas  akut  dilakukan  selama  24  jam  dan  uji toksisitas  kronis  dilakukan  selama  satu  siklus  hidup  mengacu  pada  metoda  OECD  202  (1984).  Uji toksisitas  akut  dilakukan  pada  5  konsentrasi  pentaklorofenol  (300  –  550  ppb).  Uji  toksisitas  kronis dilakukan dengan metoda semi statis pada 3 konsentrasi pentaklorofenol yaitu  0,16 ppb, 1,6 ppb dan 16 ppb.  Terhadap data  uji  toksisitas  akut  dilakukan  perhitungan nilai  EC50  dengan  analisa  probit, dan  terhadap  data  uji  toksisitas  kronis  dilakukan  perhitungan  kesintasan  harian  (survivorship,  I x ), fekunditas harian (age spesific fecundity, m x ), dan laju reproduktif bersih (net reproductive rate, Ro) menurut  Sorensen  (1996).  Hasil  percobaan,  menunjukkan  bahwa  pentaklorofenol  memiliki  nilai EC50-24jam terhadap organisme akuatik Daphnia magna berkisar antara 359 – 455 ppb dan bersifat kronis. Efek kronis pentaklorofenol terhadap Daphnia magna adalah menurunkan kesintasan harian, fekunditas harian, dan laju reproduktif bersih.
Kata  kunci : Pentaklorofenol,  Daphnia  magna,  EC50,  kesintasan  harian,  fekunditas  harian,  laju reproduksi bersih

## PENDAHULUAN
Industri  pulp  dan  kertas  merupakan salah  satu  industri  andalan  Indonesia  sebagai sumber  penghasil  devisa. Pada  saat  ini  terdapat 81 industri pulp dan  kertas yang terdiri dari 67 industri  kertas,  4  industri  pulp,  dan  11  industri pulp  dan  kertas  terpadu  (APKI,  2005). Diperkirakan  sekitar  50%  pulp  di  Indonesia adalah pulp putih yang diperoleh melalui proses pemutihan.  Proses  pemutihan  pulp  yang digunakan  di  Indonesia  terdiri  dari  proses pemutihan  konvensional,  substitusi  klor,  dan elemental  chlorine  free (ECF).  Pada  proses pemutihan pulp terjadi pelarutan lignin dari pulp untuk  meningkatkan  kecerahan  pulp  menjadi berwarna putih. Reaksi yang terjadi antara lignin dan  bahan  kimia  yang  digunakan  dalam  proses pemutihan pulp menghasilkan senyawa organoklorin  yang  akan  terbuang  bersama dengan air limbah.
Senyawa  organoklorin yang terkandung dalam  air  limbah  industri  pulp  dan  kertas  ini, terutama  yang  berasal  dari  industri  yang melakukan  proses  pemutihan  dengan  khlor, merupakan  senyawa  yang  dapat  mencemari lingkungan,.  Air  limbah  yang  mengandung senyawa-senyawa  organoklorin  dapat  bersifat toksik dan mengancam kehidupan biota akuatik. Jumlah  total  senyawa  organoklorin  yang terkandung dalam air limbah dapat diidentifikasi sebagai  parameter  AOX  (Adsorbable  Organik Halides).
Sehubungan  dengan  masih  adanya industri pulp dan kertas di Indonesia yang masih melakukan  proses  pemutihan  dengan  cara konvensional dan substitusi klor, maka penelitian  penentuan  tingkat  toksisitas  kronis pentaklorofenol  terhadap  organisme Daphnia magna ini  dilakukan  dengan  harapan  pihak industri dapat mengantisipasi terjadinya pencemaran  lingkungan  perairan.  Tulisan  ini melaporkan  hasil  percobaan  tentang  pengaruh pentaklorofenol  terhadap  organisme  perairan Daphnia  magna yang  dilakukan  dengan menggunakan  prosedur  uji  toksisitas  akut  dan kronis  menurut    standar  OECD Guideline  for Testing  of  Chemicals No  202    Tahun 1884 dan 2004.

## TINJAUAN PUSTAKA
AOX  merupakan  komponen-komponen organik  yang  mengandung  satu atau lebih  atom terhalogenasi  (klor,  brom,  iod  dan  fluor)  yang terikat  pada  atom  karbonnya.  Sebanyak  75  –
90%  dari  senyawa  organoklorin  memiliki  berat molekul tinggi  (> 1000),  sulit  diidentifikasi dan memiliki  struktur  yang  sangat  bervariasi, sedangkan  sisanya  10  –  25%  memiliki  berat molekul  yang  rendah,  bersifat  hidrofil  dan lipofil,  berpotensi  toksik  dan  bioakumulatif. Beberapa senyawa organoklorin telah diidentifikasi  dan  salah  satunya  dari  kelompok klorofenol (CEPA,1991).
Pentaklorofenol  merupakan  salah  satu komponen AOX yang terdapat dalam air limbah proses  pemutihan pulp ( Farrokhi. Et all , 2003). Pentaklorofenol memiliki rumus molekul C 6 HCl 5 O,  berat molekul  266,35 bersifat bioakumulatif dengan koefisien partisi Log Kow 3,32 atau Log Koc 4,5 dan faktor biokonsentrasi dalam  organisme  akuatik  antara  100  –  1000 (WHO,  2003).  Tingkat  toksisitasnya  terhadap organisme  akuatik  sangat  tergantung  pada  pH. Menurut  WHO  (2003),  nilai  toksisitas  akut pentaklorofenol  terhadap  organisme  akuatik pada  pH  asam  (pH  4)  lebih  tinggi  dibanding pada  pH  basa  (pH  9).      Dalam  CEPA  (1991), dijelaskan  bahwa  kandungan  pentaklorofenol dalam  badan  air  penerima  limbah  industri  pulp dan  kertas  di  Inggris  adalah  1,7  –  2,8  ppb  dan hasil  uji  toksisitas  akut  menunjukkan  bahwa  air limbah  proses  pemutihan  pulp  kraft  memiliki nilai  LC-50,  96  jam  200  μg/L  terhadap organisme ikan. Rata-rata dekomposisi pentaklorofenol    terdeteksi  sangat  rendah  yaitu di  air  yang  mengalir  (0,01  –  16  μg/L),  dalam sistem air permukaan (1,3 – 12 μg/L) dan di air laut (0,02 – 11 μg/L). Pentaklorofenol mengikat protein  mitokondria  dan  menghambat  aktivitas ATP-ase mitokondria.  Pengikatan enzim protein yang dihasilkan mengawali terjadinya penghambatan  pada  enzim  selular  lain.  Selain itu,  pentaklorofenol  dapat  menyebabkan  iritasi pada  kulit,  mata,  dan  mulut  (ATSDR,  2001). Pendedahan  pentaklorofenol  dalam  jangka panjang  dapat  menyebabkan  kerusakan  pada sistem  endokrin,  sistem  imunitas,  dan  sistem reproduksi (CEPA, 1991).
Daphnia  magna sebagai  biota  perairan dengan  ukuran  tubuh  antara  0,2  –  6  mm, merupakan  organisme  yang  sangat  sensitif terhadap  bahan  pencemar  yang  dibuang  ke perairan  (Parks,  1996).  Daphnia  ( Copepoda ) merupakan salah satu komponen dasar komunitas zooplankton dalam rantai makanan di perairan  air  tawar  (Rossoulzadegan,  2001)  dan merupakan  organisme  air  tawar  dari  kelompok invertebrata  yang  umum  digunakan  sebagai organisme dalam  uji toksisitas yang telah diakui
oleh  organisasi  internasional  seperti United States - Environmental  Protection  Agency (US- EPA),  dan  Organisation  For  Economic  Co- operation  and  Development  (OECD). Daphnia magna memiliki  ukuran  tubuh  antara  0,2  –  6 mm  dan neonate nya dapat  berukuran  0,2 – 0,8 mm.

## BAHAN DAN METODE

## Pentaklorofenol, Organisme Uji dan Medium Nutrisi
Bahan  uji  senyawa  organoklorin  yang digunakan  adalah  pentaklorofenol  98%  dari ALDRICH.  Organisme  uji  yang  digunakan adalah invertebrata dari copepoda yaitu Daphnia magna yang  diperoleh  dari  Laboratorium PUSAIR- Bandung. Medium pengkulturan yang digunakan adalah air kolam yang tidak tercemar. Pengkulturan Daphnia  magna dilakukan  dalam akuarium  volume  5  liter.  Induk  Daphnia  yang sudah  siap  menghasilkan neonate (anak daphnia) dipindahkan dari medium pengkulturan ke medium nutrisi dalam gelas kimia 50 ml, dan biarkan neonate keluar  dari  tubuh  induknya. Umur neonate yang digunakan sebagai organisme uji  maksimal 24 jam.
Pembuatan  medium  nutrisi  dilakukan menurut  OECD-202,  2004  dengan  komposisi 0,096  g  NaHCO 3 ;  0,06  g  CaCl 2 2H 2 O;  0,06  g MgSO 4 7H 2 O;  0,004  g  KCl.  Medium  ini memiliki  konduktivitas  400  μS/cm  dengan  pH diatur pada  pH  7,4 dan di aerasi sampai kadar oksigen  terlarut  tidak  kurang  dari  60%  dari kadar oksigen jenuh.

## Metoda Percobaan
Percobaan  dilakukan  dalam  2  tahap yaitu uji toksisitas akut dilakukan dalam 24 jam dan  uji  toksisitas  kronis  dilakukan  dalam  30 hari. Uji toksisitas akut dan uji toksisitas kronis dilakukan  menurut  metoda    OECD  202-1984. Uji  toksisitas  akut  diawali  dengan  penentuan kisaran konsentrasi kematian organisme uji 0% - 100%    ( range  finding  test )  yang  kemudian dilanjutkan  dengan  penentuan  konsentrasi kematian 50%  ( definite test ). Penentuan kisaran konsentrasi kematian dilakukan pada 5 konsentrasi  pentaklorofenol  dan  satu  kontrol masing-masing  2  ulangan,  dengan  jumlah neonate 50 ekor per konsentrasi. Pengamatan uji toksisitas  akut  dilakukan  terhadap  jumlah
kematian  per  hari  dan  beberapa  parameter kondisi lingkungan yang  meliputi kadar oksigen terlarut, pH, DHL, dan suhu,
Uji  toksisitas  akut  dilakukan  untuk menentukan  nilai Immobilition Concentration , EC50-24  jam,  yang  kemudian  digunakan sebagai  dasar  penentuan    rentang  konsentrasi yang akan digunakan dalam uji toksisitas kronis. Rentang  konsentrasi  yang  digunakan  dalam  uji toksisitas  kronis  adalah  kisaran  konsentrasi aman  atau  No  Observed  Effect  Consentration (NOEC) yang diperoleh dari rumus
  95 . 0 50 052 . 0 LC NOEC  menurut  Forbes, et al .,  (1994)  yang  kemudian  dikali  atau  dibagi faktor  kelipatan  sepuluh  untuk  menentukan konsentrasi  perlakuan  pada  uji  toksisitas  kronis (OECD-202, 1984).
Penelitian  toksisitas  kronis  dilakukan dengan  metoda  semi  statis  dengan  frekwensi pergantian larutan uji 48 jam sekali. Rancangan penelitian menggunakan Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  yang  terdiri  dari  3  variasi konsentrasi  pentaklorofenol  dan  satu  kontrol, dengan  masing-masing  10  kali  replikasi. Volume  total  larutan  medium  untuk  satu perlakuan adalah 40 ml. Umur neonate Daphnia magna yang  digunakan  tidak  lebih  dari  24  jam dengan jumlah 1 ekor per replikasi. Pada kontrol digunakan  medium  air  aquades  yang  telah ditambah  nutrisi  dengan  konduktivitas  larutan 400 µS/cm. Pengamatan dilakukan setiap 24 jam sekali  selama  satu  siklus  hidup  daphnia  dengan parameter  pengamatan  adalah  jumlah  kematian induk  daphnia  per  hari,  jumlah neonate yang lahir  per  induk  per  hari.  Pengukuran  kondisi masing-masing  larutan  uji  dilakukan  terhadap parameter pH, oksigen terlarut dan suhu dengan frekwensi pengukuran 48 jam sekali.

## Pengolahan Data
Terhadap  data  jumlah  kematian  yang diperoleh  dari  uji  toksisitas  akut  dilakukan perhitungan  nilai  EC-50  dengan  menggunakan analisa probit, dan terhadap data jumlah neonate dan  jumlah  induk  yang  hidup  per  hari  yang diperoleh  dari  uji  toksisitas  kronis  dilakukan perhitungan kesintasan harian ( survivorship , I x ), fekunditas  harian ( age  spesific  fecundity ,  m x ), dan  laju  reproduktif  bersih ( net  reproductive rate ,  Ro).  Perhitungan  parameter-parameter tersebut  dilakukan  menurut  rumus-rumus  yang
dikemukakan oleh Sorensen (1996)  seperti yang tertuang dalam Tabel 1.
Pengolahan  data  untuk  mengetahui signifikansi  pengaruh  kronis  pentaklorofenol terhadap beberapa parameter kehidupan Daphnia  magna, menggunakan  statistik  One Way    ANOVA  (SPSS  12)  dengan  p  <  0,05. Parameter  I x ,  m x ,  R o dihitung  pada  hari  ke-21 sesuai OECD 202-1984.
Tabel 1. Rumus Perhitungan Pengaruh Kronis Pentaklorofenol Terhadap Daphnia Perhitungan Rumus Keterangan Kesintasan harian ( survivorship,I x ) I x = 100% A B 
A  =  Jumlah induk  yang hidup B  =  jumlah induk awal C  =  jumlah neonate yang lahir I x = Kesintasan m x = Fekunditas harian fekunditas harian ( age spesific fecundity , m x ), m x = C A
laju  reproduktif bersih ( net reproductive rate , Ro) x n x x m I R    1 0

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Uji Toksisitas Akut
Hasil  pengamatan  mortalitas Daphnia magna pada range  finding  test dan definite  test dapat  dilihat  pada  Gambar  1.    Dari  hasil range finding  test tersebut,  menunjukkan  bahwa   50% kematian  Daphnia  diperoleh  pada  kisaran konsentrasi  pentaklorofenol  antara  300  –  500 ppb.  Kisaran  tersebut  merupakan  acuan  untuk penentuan kisaran konsentrasi pada definite test. Definite  test merupakan  lanjutan  dari range finding  test dengan  mempersempit  rentang konsentrasi.Rentang konsentrasi pentaklorofenol pada definite test adalah 250 ppb – 450 ppb.
Berdasarkan  data  persentase  mortalitas dari definite  test diperoleh  hasil  perhitungan nilai  EC50-24  jam.    Nilai  EC50-24jam pentaklorofenol terhadap Daphnia magna berkisar antara 359 – 455 µg/L. Menurut OECD (2006),  nilai  EC50  pentaklorofenol  terhadap kelompok  organisme  invertebrata  termasuk Daphnia  dan  oligochaeta  berkisar  antara  240  – 2000  µg/L,  sedangkan  menurut  WHO  (1987) nilai  EC50  pentaklorofenol  terhadap Daphnia magna 800 µg/L. Adanya perbedaan nilai EC50 tersebut,  kemungkinan  disebabkan  oleh  kondisi pengujian yang berbeda terutama pH.
Gambar 1. Mortalitas Daphnia magna Pada Uji Toksisitas Akut
Pada  uji  toksisitas  akut  ini,  pH  larutan pentaklorofenol  diatur  pada  kisaran  optimum pertumbuhan  dan  perkembangbiakan  organisme biota  air  tawar  sekitar  6,0  –  8,0.  Hasil pengukuran  pH  larutan  kontrol  dan  semua larutan  perlakuan  konsentrasi  pentaklorofenol
pada uji toksisitas akut pada kisaran antara 7,13 – 7,21.
Selain pH, faktor lain yang berpengaruh terhadap  kehidupan Daphnia  magna adalah suhu.  Suhu  air  sangat  mempengaruhi  seluruh aktivitas  dan  proses  reproduksi  organisme
Definite test test-1 test -2 0 15 30 45 60 75 90 105 120 200 250 300 350 400 450 500 Konsentrasi PCP, ppb M o rt a li ta s (%) Finding Test 0 15 30 45 60 75 90 105 120 0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 Konsentrasi PCP, ppb Mor tal it as ,%
aquatik  termasuk  daphnia  (  OECD,  2006). Percobaan  uji  toksisitas  akut ini dilakukan  pada suhu  kamar  dengan  kisaran  29,3  –  30,1 o C. Kisaran  suhu  tersebut  sama  dengan  percobaan yang  telah  dilakukan oleh Mitchel and Lampert (2000)  yaitu  pada  pada  rentang  suhu  29 o C  – 32 o C,  yang  hasilnya  menyatakan  bahwa  pada kisaran suhu tersebut kepadatan Daphnia magna meningkat.
Konsentrasi  oksigen  terlarut  optimum bagi kehidupan Daphnia adalah minimal 5 mg/L (  OECD,  2006).  Nilai  oksigen  terlarut  selama percobaan uji toksisitas akut berkisar antara 5,39 – 5,55 mg/L.  Hal tersebut dapat diartikan bahwa pelaksanaan  percobaan  ini  dilakukan  pada konsentrasi oksigen yang memenuhi syarat bagi kehidupan Daphnia magna .

## Uji Toksisitas Kronis
Uji  toksisitas  kronis  pentaklorofenol terhadap  Daphnia,  dilakukan  pada  3  variasi konsentrasi  pentaklorofenol  yang  ditentukan berdasarkan  nilai  EC50  dan  perkiraan  NOEC. Variasi  konsentrasi  pentaklorofenol  tersebut adalah  0,16  ppb,  1,6  ppb,  16  ppb  dan  kontrol. Kondisi  larutan  pentaklorofenol  selama  uji toksisitas kronis yaitu rata-rata pH  7,19 – 7,27, suhu  29,59 o C  –  29,76 o C,  dan  konsentrasi oksigen  terlarut  5,39  –  5,93  mg/L.  Hasil pengamatan pengaruh toksisitas kronis pentaklorofenol  terhadap  kesintasan  harian, fekunditas  harian  dan  laju  reproduktif  bersih Daphnia  magna, berturut  turut  dapat  dilihat pada Gambar 2, Gambar 3 dan Gambar 4.
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 Umur Daphnia, hari Kesi n ta san h ar ia n, % Kontrol PCP 0.16 ppb PCP 1.6 ppb
PCP 16 ppb
Gambar 2. Pengaruh Pentaklorofenol Terhadap Kesintasan Induk Daphnia
Kesintasan  harian  merupakan  ekspresi dari jumlah induk  Daphnia  yang dapat  bertahan hidup dalam  suatu populasi  pada  umur  tertentu. Berdasarkan  data  hasil  percobaan  menunjukkan bahwa  lamanya  waktu  hidup  Daphnia  yang didedah  larutan  pentaklorofenol    0,16  ppb,  1,6 ppb,  dan  16  ppb  berkisar  antara  31-32  hari. Sedangkan  yang  tidak  didedah  pentaklorofenol (kontrol)  dapat  hidup  sampai  36  hari.  Hal tersebut dapat diintepretasikan bahwa kesintasan Daphnia  magna sangat  sensitif  terhadap pentaklorofenol. Daphnia yang didedah pentaklorofenol  0,16  –  16  ppb  secara  terus
menerus, dapat berkurang umur hidupnya sekitar 11 - 14%.  Hal tersebut disebabkan oleh karena pentaklorofenol  bersifat  bioakumulatif  yang dapat  mengikat  protein  mitokondria  dan menghambat  aktivitas  ATP–ase  mitokondria, sehingga  terjadi  penghambatan  pembentukan ATP  dan  pelepasan  energi  ke  sel  dari pemecahan ATP menjadi ADP ( Farrokhi. et.al. , 2003).
Fekunditas  harian  merupakan  ekspresi dari  jumlah neonate yang dihasilkan satu induk Daphnia per hari. Berdasarkan data pengamatan, menunjukkan  bahwa neonate pertama  lahir,
umumnya  pada  saat  induknya  berumur  10  hari. Hal  tersebut  sama  dengan neonate pada perlakuan konsentrasi pentaklorofenol 0,16 ppb. Namun,  hal  tersebut  berbeda  dengan  Daphnia yang  diberi  perlakuan  pentaklorofenol  1,6  ppb dan 16  ppb,  yang  menunjukkan  bahwa neonate pertama dihasilkan ketika induknya  berumur  11 hari  dan  12  hari.  Dari  seluruh  perlakuan percobaan,  menunjukkan bahwa jumlah neonate yang  dihasilkan  dari  10  induk  Daphnia  adalah 153  ekor  dari  kontrol,  78  ekor  dari  perlakuan pentaklorofenol 0,16 ppb, 45 ekor dari perlakuan pentaklorofenol  1,6  ppb,  dan  42  ekor  dari pentaklorofenol 16 ppb.
Hasil  perhitungan  fekunditas  induk Daphnia  perhari  dapat  dilihat  pada  Gambar  3. Secara umum, fekunditas induk daphnia per hari sangat  berfluktuasi  dan  cenderung  menurun. Gambar  3  menunjukkan  data  fekunditas  harian
Daphnia  pada  kontrol  berkisaran  antara 0  – 4,2 dengan  rata-rata  0,68  ekor/induk/hari;  pada perlakuan  pentaklorofenol  0,16  ppb  berkisar antara  0  -  1,89  dengan  rata-rata  0,49 ekor/induk/hari; dan pada perlakuan pentaklorofenol 1,6 ppb berkisar antara  0 - 2,60 dengan  rata-rata  0,25  ekor/induk/hari;  serta pada  perlakuan  pentaklorofenol  16  ppb berkisar antara  0  -  1,30  dengan  rata-rata  0,24 ekor/induk/hari.  Berdasarkan data-data tersebut di  atas  menunjukkan  bahwa  pentaklorofenol berpengaruh terhadap fekunditas harian Daphnia magna .  Pendedahan  pentaklorofenol  0,16  -  16 ppb  secara  terus  menerus,  dapat  menurunkan daya  fekunditas  harian  Daphnia  sekitar  28  -  65 %.
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 Umur Daphnia (hari) Fek undi tasi ha ri an d ap hni a Kontrol PCP 0.16 ppb PCP 1.6 ppb
PCP 16 ppb Gambar 3. Fekunditas Harian Daphnia magna
Laju  reproduktif  bersih  merupakan ekspresi  dari  jumlah neonate yang  dihasilkan dari  satu  siklus  hidup  induk  Daphnia. Dapnia magna yang  didedah    larutan  pentaklorofenol secara  terus  menerus  selama  satu  siklus hidupnya  menunjukkan  adanya  penurunan  laju
reproduktif bersih sejalan dengan meningkatnya konsentrasi  pentaklorofenol.  Pentaklorofenol bersifat  bioakumulatif  (CEPA,  1991),  sehingga pengaruhnya  terhadap  laju  reproduksi  dapat terlihat setelah pendedahan dalam jangka waktu panjang (Gambar 4).
0 2 4 6 8 10 12 14 16 L a ju Reprod uktif be rsih, ek o r/i nd uk/ s ikl us hi d up 0 ppb 0.16 ppb
1.6 ppb 16 ppb
Konsentrasi pentaklorofenol, ppb
Gambar 4.  Laju Reproduktif Bersih Daphnia magna per Siklus
Laju  reproduktif  bersih  rata-rata  pada larutan  kontrol  adalah  15,55  ekor/induk  per siklus. Sedangkan pada perlakuan pentaklorofenol  0,16  ppb,  1,6  ppb  dan  16  ppb menunjukkan nilai yang jauh lebih rendah yaitu berturut-turut  7,80  ekor;  4,5    ekor  ;  4,1  ekor/ induk/siklus hidup. Hal tersebut dapat diintepretasikan  bahwa  laju  reproduktif  bersih Daphnia  magna sangat  sensitif  terhadap pentaklorofenol.  Pentaklorofenol  0,16  ppb  –  16 ppb  yang  didedahkan  secara  terus  menerus, dapat  menurun  laju  reproduktif  bersih  Daphnia sekitar 50-74%.
Secara keseluruhan dari hasil percobaan uji  toksisitas  kronis  ini,  menunjukkan  bahwa pentaklorofenol  sangat  berpengaruh  terhadap kesintasan  harian,  fekunditas  harian  dan  laju reproduktif  bersih.  Hasil  percobaan  ini  sesuai dengan  hasil  percobaan  yang  dilakukan  oleh Silva et  al .,  (2001)  yang  menyatakan    bahwa pentaklorofenol  dapat  mengurangi  kemampuan pertumbuhan.  Sedangkan  menurut  Parks  dan Leblanc (1996), menjelaskan bahwa pentaklorofenol  dapat  menurunkan  kemampuan reproduktivitas Daphnia  magna .  Hal  tersebut didukung  pula  dengan  pernyataan  dalam  WHO (2003)  yang menjelaskan, bahwa faktor biokonsentrasi pentaklorofenol dalam organisme akuatik sangat tinggi yaitu berkisar antara 100 – 1000. Menurut
OSPARCOM (1999)
Biokonsentrasi  pentaklorofenol  dalam  jaringan
organisme  daphnia  adalah  400.  Biokonsentrasi pentaklorofenol  dalam  jaringan  organisme daphnia sangat dipengaruhi oleh nilai pH. Makin rendah  nilai  pH,  faktor  biokonsentrasi  makin tinggi.  Dalam  WHO  (2003)  dinyatakan  bahwa pada  pH  4  pentaklorofenol  masuk  ke  dalam jaringan  organisme  dalam  bentuk  proton  dan bersifat  lipofil  sehingga  daya  toksiknya  tinggi. Sebaliknya  pada  pH  9,  pentaklorofenol  berada dalam bentuk ion-ion sehingga daya penetrasinya  ke  dalam  jaringan  organisme menurun  yang  akibatnya  daya  toksiknyapun menurun.  Percobaan  ini  dilakukan  pada  pH netral,  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa pentaklorofenol sangat toksik terhadap kehidupan Daphnia magna.

## KESIMPULAN
1. Nilai  EC50-24jam  pentaklorofenol  pada  pH netral  (7,13  –  7,21)  dan  suhu  29,59 o C  – 29,76 o C  terhadap Daphnia  magna berkisar antara 359 – 455 ppb.
2. Dosis pentaklorofenol 0,16 ppb sudah dapat memberikan  efek  kronis  terhadap Daphnia magna yaitu  dapat  menurunkan  kesintasan induk  Daphnia  sekitar  11%;  menurunkan fekunditas  sebesar  49  %  per  hari  dan menurunkan laju reproduktif 50% per siklus
hidup.    Sedangkan  pentaklorofenol  1,6  ppb dapat menurunkan kesintasan harian Daphnia magna sebesar 14%,  fekunditas 28
%  per  hari  dan    laju  reproduktif  71%  per siklus  hidup.  Pentaklorofenol  16  ppb  dapat menurunkan  kesintasan  induk  Daphnia  per hari  rata-rata  14%;  fekunditas  harian  rata- rata  65%,  dan  laju  reproduktif    rata-rata 74%.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Agency  for  Toxic  substances  and  Diseases (ATSDR).  2001. Public  Health  Statement for  Pentachlorophenol .  [online].  Tersedia  : http//pentachlorophenol/ATSDR  –  ToxFAO Pentachlorophenol.htm.
2. Canadian  Environmental  Protection  Act (CEPA).  1991. Effluents  from  Pulp  Mills using  bleaching .  Priority  Substances  List Assessment report no. 2. Minister of Supply and  Services  Canada    Calogue  No.  En  40- 215/2E ISBN 0-662-1X734-2.
3. Farrokhi,  M. et.al. 2003. Oxidation  of Pentachlorophenol  by  Fenton’s  Reagent. Iranian J Publ Health. Vol. 32. No. 1. pp 6- 10.
4. Forbes,  V.E.,  dan  T.L.  Forbes.  1994. Ecotoxicology  in  theory  and  Practice. Departemen  of  marine  Ecology  and Microbiology . National Environmental Research  Institute.  Chapman  &  Hall. Denmark.
5. OECD  Guideline  for  Testing  of  Chemicals No  202  (1984) “Daphnia  sp.,  Acute Immobilization  Test  and  Reproduction Test”.
6. OECD  Series  on  Testing  and  Assessment, No  55.  2006. Detailed  Review  Paper  on Aquatic  Arthropods  in  Life  Cycle Toxicity
Tests  with  Emphasis  on  Developmental, Reproductive  and  Endocrine  Disruptive
Effects.
7. Mitchel, S.E. and Lampert. 2000. Temperature  Adaption  in  a  Geographically Widespread Zooplanktoner- Daphnia
magna .  Blackwall  Science  Ltd  Vol.  13.  pp 371 – 380.
8. Parks,  L.G.,  Leblane,G.A.,1996. Reduction in  Steroid  Hormone Biotransformation as a Biomarker  of  Pentachlorophenol  Chronic Toxicity .  Journal  Aquatic  Toxicology.  Vol.
34. pp291-303. Elsever science. Amsterdam
9. Rossoulzadegan,  M.  And  Nursei,  A.  2001. An Investigation the Toxic effect of malation
(organophosphate insecticide) on the
Daphnia magna straus (Crustacean cladocera) .  Researce  Article.  Turkey:  Edge
University. 10. Radini, D.N., Gede Suantika,
Taufikurrohman.  2004. Optimasi  Suhu,  pH serta  jumlah  dan  Jenis  pakanpada  kultur Daphnia sp. Jurnal Ilmiah Biologi : Ekologi & Biodiversitas Tropika. Vol. 2. pp 23 -28.
11. Sorensen, R.F., 1996. Life-History Shcedule in  Daphnia  magna  : An Ecological  Activity for multiple laboratory sessions.
Departement  of  Biological  Sciences  Purdue
University.
12. Silva,  J. et.  al. ,  2001. Assesment  of Sensitivity to  Pentachlorofenol  (PCP) in 18 Aquatic  Species  Using  Acute  and  Chronic Ecotoxicity Bioassays , http//eer41017.pdf.
13. WHO,  2003. Health  Risks  of  Persistent Organic  pollutants  From  Long  range transboundary air pollution. WHO Regional Office  for  Europe.  Copenhagen.  Denmark, http://www.euro.who.int.
14. WHO, Environmental Health Criteria No.
71. Pentachlorofenol .  IPCS InChem, http://www.inchem.org/documents/ehc/ehc/ ehc71.htm#SubSectionNumber:7.2.2.