## ANALISIS RHODAMIN B PADA LIPSTIK YANG BEREDAR DI PASAR KOTA MANADO

## Lidya Valda Mamoto. Fatimawali Gayatri Citraningtyas
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA UNSRAT Manado

## ABSTRACT
Rhodamin  B  is  a  synthetic  dye  that  banned  for  use  in  cosmetics  and  is  certified  as  a hazardous  material  according  to  Minister  of  Health  of  Indonesian  Republic  No. 376/Menkes/Per/1990  because  it  cause  liver  damage,  kidney  and  lymph  glands  damage, followed with anatomy  changes such  as organ enlargement.  Rhodamin  B dye is often used for food and beverage products. The study was conducted to identify Rhodamin B in lipstick in  the  market  of  Manado  City.  Samples  was  taken  from  3  main  market  in  Manado  city, namely  Karombasan  market,  Pasar  45  market,  and  Bersehati  market.  Samples  were  soaked with  amonia  solution,  then  using  wool  yarn  to  extract  rhodamin  B  dye,  followed  by identification  using  thin  layer  chromatography  (TLC)  then  detected  with  UV  light  254  and 366 nm. Rhodamin B was evaluated using UV-Vis spectrophotometry. The result shows that 9 examined samples doesn’t contain rhodamin B
Keywords : Rhodamin B, Lipstick, thin layer chromatography (TLC), UV-Vis Spectrophotometry.

## ABSTRAK
Rhodamin  B  merupakan  zat  warna  sintetik  yang  dilarang  penggunaannya  dalam  kosmetik dan dinyatakan sebagai bahan yang berbahaya menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI No. 376/Menkes/Per/1990  karena  dapat  menyebabkan  kerusakan  hati,  ginjal  dan  limfa  diikuti perubahan  anatomi  berupa  pembesaran  organ.  Rhodamin  B  seringkali  digunakan  untuk mewarnai  suatu  produk  makanan,  minuman,  obat-obatan  dan  kosmetik.  Penelitian  ini dilakukan  untuk  mengidentifikasi  dan  menentukan  kadar  rhodamin  B  pada  lipstik  yang beredar di pasaran Kota Manado. Sampel lipstik diambil dari 3 pasar besar yang ada di Kota Manado  yaitu  Pasar  Karombasan,  Pasar  45,  dan  Pasar  Bersehati.  Sampel  direndam  dengan amonia untuk menarik zat warna rhodamin B menggunakan benang wol, dilanjutkan dengan identifikasi  menggunakan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  kemudian  dideteksi  dengan  lampu UV 254 nm dan 366 nm. Pembacaan kadar rhodamin B menggunakan spektrofotometri UV- Vis.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  dari  9  sampel  yang  diperiksa  tidak  teridentifikasi adanya zat warna rhodamin B.
Kata Kunci : Rhodamin B, Lipstik, KLT dan Spektrofotometri UV-Vis.

## PENDAHULUAN
Di  zaman  modern  ini  penggunaan kosmetik untuk menambah estetika semakin  meningkat.  Kosmetika  adalah sediaan  atau  paduan  bahan  yang  siap digunakan pada bagian luar badan (epidemis,  rambut,  kuku,  bibir  dan  organ kelamin luar), gigi dan rongga mulut untuk membersihkan,  menambah  daya  tarik, mengubah  penampakan,  melindungi  kulit supaya tetap dalam keadaan baik, memperbaiki  bau  badan  tetapi  tidak dimaksudkan untuk mengobati atau menyembuhkan  suatu  penyakit  (Anonim, 1998).  Salah  satu  produk  kosmetika  yang sering  digunakan  khususnya  bagi  para wanita yaitu lipstik.
Lipstik  adalah  sediaan  kosmetika yang  digunakan  untuk  mewarnai  bibir dengan  sentuhan  artistik  sehingga  dapat meningkatkan  estetika  dalam  tata  rias wajah,  tetapi  tidak  boleh  menyebabkan iritasi  pada  bibir  (Mukaromah,  2008). Menurut  Tranggono  dan  Latifah  (2007), bahan-bahan  utama  dalam  lipstik  yaitu lilin,  minyak,  lemak,  acetoglycerides,  zat- zat pewarna, surfaktan, antioksidan, bahan pengawet,  bahan  pewangi.  Pewarna  pada lipstik berdasarkan sumbernya ada 2 yaitu, pewarna  alami  merupakan  zat  warna  yang diperoleh dari akar, daun, bunga dan buah. Seperti  zat  warna  hijau  dari  daun  suji  dan zat  warna  orange  dari  wortel.  Sedangkan pewarna  sintetis  berasal  dari  reaksi  antara dua  atau  lebih  senyawa  kimia  contohnya seperti rhodamin B.
Bahan pewarna ditambahkan dalam lipstik  untuk  menambah  daya  tarik konsumen  terhadap  produk  tersebut,  akan tetapi  banyak  oknum-oknum  yang  tidak bertanggungjawab  menambahkan  pewarna berbahaya  pada  sediaan  lipstik  seperti rhodamin B. Adanya produsen yang masih menggunakan rhodamin B pada produknya disebabkan  oleh  pengetahuan  yang  tidak memadai  mengenai  bahaya  penggunaan bahan  kimia  tersebut  pada  kesehatan  dan juga  karena  tingkat  kesadaran  masyarakat yang masih rendah. Selain itu, rhodamin B sering  digunakan  sebagai  pewarna  karena
harganya  relatif  lebih  murah,  warna  yang dihasilkan  lebih  menarik  dan  tingkat stabilitas  warnanya  lebih  baik  daripada pewarna  alami.  Ciri-ciri  produk  yang mengandung rhodamin B adalah warnanya cerah  mengkilap  dan  lebih  mencolok, terkadang warnanya terlihat tidak homogeny  (rata),  adanya  gumpalan  warna pada produk, pada produk tidak mencantumkan kode, label, merek, informasi  kandungannya,  atau  identitas lengkap  lainnya.  Pemerintah  Indonesia melalui  peraturan  Menteri  Kesehatan (PerMenKes)  No.239/MenKes/Per/V/1985 menetapkan 30 lebih zat pewarna berbahaya, salah satunya rhodamin B.
Rhodamin  B  merupakan  pewarna yang dipakai untuk industri cat, tekstil dan kertas.  Rodamin  B  merupakan  zat  warna sintetis  berbentuk  serbuk  kristal,  tidak berbau,  berwarna  merah  keunguan,  dalam bentuk  larutan  berwarna  merah  terang berpendar  (berfluoresensi).  Zat  warna  ini dapat  menyebabkan  iritasi  pada  saluran pernapasan dan merupakan zat karsinogenik  (dapat  menyebabkan  kanker) serta  Rhodamin  dalam  konsentrasi  tinggi dapat  menyebabkan  kerusakan  pada  hati. Kromatografi  adalah  teknik  pemisahan diantara  dua  fase,  yaitu  fase  diam  (padat atau  cair)  dan  fase  gerak  (cair  atau  gas). Kromatografi  lapis  tipis  merupakan  salah satu  analisis  kualitatif  dari  suatu  sampel yang  ingin  dideteksi  dengan  memisahkan komponen-komponen  sampel  berdasarkan perbedaan  kepolaran   Kromatografi  Lapis Tipis. Spektrofotometri
UV/Vis Penyerapan  sinar  tampak  atau  ultraviolet oleh suatu molekul yang dapat menyebabkan  eksitasi  electron  dalam orbital  molekul  tersebut  dari  tingkat energy  dasar  ke  tingkat  energi  yang  lebih tinggi (Khopkar, S. M., 1990).
Penggunaan  rhodamin  B  tentunya berbahaya  bagi  kesehatan.  Penumpukkan rhodamin  B  dilemak  dalam  jangka  waktu yang  lama  jumlahnya  terus  menerus bertambah  di  dalam  tubuh  dan  dapat menimbulkan kerusakan  pada organ tubuh sampai  mengakibatkan  kematian  (Agus  et
al.,  2007).  Hal  ini  mendorong  peneliti untuk melakukan pengujian analisis kandungan  rhodamin  B  yang  beredar  di pasar  Kota  Manado  menggunakan  metode Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  dan Spektrofotometri UV-Vis.

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan metode deskriptif laboratorik, yaitu dengan melakukan  observasi  pada  sampel  lipstik yang  dicurigai  mengandung  rhodamin  B yang  dilarang  untuk  digunakan  dan dilanjutkan  dengan  melakukan  analisis sampel  di  Laboratorium  (Notoatmodjo, 2010 ; Widana dan Yuningrat, 2007).
Sebagai subyek penelitian adalah 1 K  :  sampel  lipstik  pada  penjual  satu  dari pasar  karombasan,  2  K  :  sampel  lipstik pada penjual dua dari pasar karombasan, 3 K  :  sampel  lipstik  pada  penjual  tiga  dari pasar  karombasan,  1  B  :  sampel  lipstik pada penjual satu dari pasar bersehati, 2 B : sampel lipstik pada penjual dua dari pasar bersehati, 3 B : sampel lipstik pada penjual tiga  dari  pasar  bersehati,  1  45:  sampel lipstik  pada  penjual  satu  dari  pasar  45,  2 45  :  sampel  lipstik  pada  penjual  dua  dari pasar 45, 3 45: sampel lipstik pada penjual tiga dari pasar 45.
Prinsip  kerja  dalam  identifikasi  zat warna  rhodamin  B  pada  cakalang  fufu akan  menggunakan  identifikasi  secara kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  dan spektrofotometri UV-Vis.
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  ialah  Erlenmeyer  (Pyrex), tabung  reaksi  (Pyrex),  timbangan  analitik (Preeisa  XB  220A),  corong,  labu  takar (Pyrex),  gelas  kimia  (Pyrex),  gelas  ukur (Pyrex),  pipet  tetes,  pipet  kapiler,  sendok tanduk,  batang  pengaduk  (Pyrex),  kertas saring (Whatman No. 1), lempeng kromatografi  lapis  tipis  (Merck),  benang wol,  hot  plate  (Health  Thermostatic Magnetic  Stirre),  oven,  chamber  (Pyrex), dan spektrofotometer UV-Vis (PG Instrument T 80 UV-Vis).
Adapun bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini ialah lipstik
yang berwarna merah yang dijual bebas di 3  pasar  besar  di  kota  Manado,  aquades, larutan  HCl  (Merck),  larutan  amonia (Merck),  n-butanol  (Merck),  etil  asetat (Merck), asam asetat (Teknis), etanol 70%. Tahap  pertama,  tahap  pengambilan  dan penyiapan  sampel.  Sampel  diambil  di  tiga pasar  yang  ada  di  Kota  Manado  yaitu Pasar  Karombasan,  Pasar  Bersehati  dan Pasar  45,  dimana  disetiap  Pasar  diambil pada 3 penjual lipstik.
Tahap  kedua,  tahap  ekstraksi  dan pemurnian yang dilakukan dengan menggunakan prosedur berdasarkan penelitian  dari  Utami  dan  Suhendi  tahun 2009  yang  mengambil  acuan  dari  Djalil dkk tahun 2005.
a. Sebanyak  1  gram  sampel  (lipstik) dimasukkan  ke  dalam  Erlenmeyer kemudian  direndam  dalam  10  ml larutan  amonia  2%  (yang  dilarutkan dalam etanol 70%) selama semalaman.
b. Larutan  disaring  filtratnya  dengan menggunakan  kertas  saring  whatman no.  1.  Larutan  dipindahkan  kedalam gelas kimia kemudian dipanaskan diatas hot  plate.  Residu  dari  penguapan dilarutkan  dalam  10  ml  air  yang mengandung asam (larutan asam dibuat dengan  mencampurkan  10  ml  air  dan  5 ml asam asetat 10%).
c. Benang  wol  dengan  panjang  15  cm dimasukkan ke dalam larutan asam dan dididihkan  hingga  10  menit,  pewarna akan  mewarnai  benang  wol,  kemudian benang wol diangkat dan dicuci dengan aquades. Kemudian benang wol dimasukkan  kedalam  larutan  basa  yaitu 10  ml  amonia  10%  (yang  dilarutkan dalam etanol 70%) dan didihkan.
d. Benang wol akan melepaskan pewarna, pewarna  akan  masuk  ke  dalam  larutan basa.  Larutan  basa  yang  didapat selanjutnya  akan  digunakan  sebagai cuplikan sampel pada analisis kromatografi lapis tipis.
Tahap  ketiga,  tahap  pembuatan larutan  baku  untuk  pembuatan  linieritas kurva  kalibrasi.  Larutan  baku  rhodamin  B dibuat  dengan  konsentrasi  200  ppm.  Dari
larutan  baku  ini  dibuat  larutan  baku dengan konsentrasi 0,5; 1; 1,5; 2; 5; 6; 7,5 ppm.  Pelarut  yang  digunakan  larutan  HCl 0,1 N (Putri, 2009).
Tahap  keempat,  tahap  identifikasi sampel. Lempeng KLT berukuran 20 x 20 cm  diaktifkan  dengan  cara  dipanaskan dalam  oven  pada  suhu  100 0 C  selama  30 menit.  Sampel  ditotolkan  pada  lempeng KLT  dengan  menggunakan  pipa  kapiler pada  jarak  2  cm  dari  bagian  bawah  plat, jarak  antara  noda  adalah  1,5  cm. Kemudian  dibiarkan  beberapa  saat  hingga mengering.  Lempeng  KLT  yang  telah mengandung  cuplikan  dimasukkan  ke dalam  chamber  yang  lebih  terdahulu  telah dijenuhkan  dengan  fase  gerak  berupa  n- butanol  :  etil  asetat  :  amonia  (10:4:5). Dibiarkan hingga lempeng terelusi sempurna, kemudian lempeng KLT diangkat  dan  dikeringkan.  Diamati  warna secara  visual  dan  dibawah  sinar  UV,  jika secara  visual  noda  berwarna  merah  jambu dan dibawah sinar UV 254 nm dan 366 nm berfluoresensi  kuning  atau  orange,  hal  ini menunjukkan  adanya  rhodamin  B  (Ditjen POM,  2001;  Djalil  et  al  dalam  Utami  dan Suhendi, 2009; Putri, 2009).
Tahap  kelima,  Penetapan  Kadar Zat  Warna  Rhodamin  B.  Penetapan  kadar rhodamin B dilakukan dengan
spektrofotometri  cahaya  tampak  pada panjang gelombang 400-800 nm.
Sedangkan untuk menghitung kadar rhodamin  B  dalam  sampel  37  dihitung dengan  menggunakan  kurva  kalibrasi dengan persamaan regresi : y = ax ± b.

## PEMBAHASAN
Pemeriksaan  Kualitatif  Rhodamin  B Pada Sampel
Berdasarkan hasil pemeriksaan kualitatif  rhodamin  B  pada  sampel diperoleh  data,  seperti  ditunjukkan  pada lampiran 1.
Hasil identifikasi pewarna rhodamin  B  pada  lipstik  dengan  metode kromatografi lapis tipis, pada larutan baku rhodamin  B  menghasilkan  warna  noda merah  jambu  secara  visual  dan  di  bawah
sinar UV 254 nm dan 366 nm berfluoresensi kuning  atau orange, dengan tinggi  bercak  pada  lempeng  yaitu  16  cm dan  tinggi  eluen  17  cm  dan  nilai  R f 0,94. Untuk ke 9 sampel lipstik tidak menunjukkan  bercak  yang  sama  dengan bercak  baku  rhodamin  B  serta  tidak menunjukkan  adanya  noda  pada  lempeng KLT.
Penetapan Kadar 1. Panjang Gelomabang Maksimum Larutan Rhodamin B Penentuan panjang gelombang maksimum  larutan  baku  rhodamin  B dengan  konsentrasi  3  ppm  diperoleh panjang gelombang 558 nm.
2. Kurva Kalibrasi
Larutan

## Rhodamin B
Dari  hasil  perhitungan  persamaan regresi  kurva  kalibrasi  diatas  diperoleh persamaan  garis  y  =  0.1275x  +  0.0081 dengan  koefisien  korelasi  (r)  sebesar 0,981.
Meskipun tidak teridentifikasi adanya  zat  pewarna  rhodamin  B  pada  9 sampel  lipstik,  namun  diperlukan  sikap kehati-hatian  dalam  pemakaian  lipstik yang  berwarna  merah  pekat  yang  dijual bebas  dipasaran.  Menurut  Cahyadi  (2008) bahan  pewarna  sintetis  yang  dilarang  di Indonesia yang didasarkan pada Permenkes  RI  No.722  /Menkes/  Per/  IX/ 1988  tentang  bahan  pewarna,  tidak diizinkan menggunakan zat warna rhodamin  B  karena  pewarna  ini  hanya digunakan  untuk  pewarna  industri  tekstil seperti  kain,  kertas  dan  cat.  Rhodamin  B mengandung senyawa klorin (Cl). Senyawa  klorin  merupakan  senyawa anorganik  yang  reaktif  dan  berbahaya. Senyawa  ini  akan  berusaha  mencapai kestabilan  dalam  tubuh  dengan  cara mengikat  senyawa  lain  dalam  tubuh,  hal inilah  yang  bersifat  racun  bagi  tubuh (Depkes, 1999).
Dari 9 sampel yang dianalisis tidak teridentifikasi  adanya  zat  warna  rhodamin B  untuk  sampel  3  dari  pasar  karombasan, sampel 2 dan sampel 3 dari pasar bersehati telah  mencantumkan  nomor  batch  sesuai
dengan  Keputusan  Kepala  Badan  POM Republik  Indonesia  No.  HK.  00.  05.  4.
1745 tentang Kosmetik dan Kode kosmetik.  Untuk  6  sampel  yang  lain  tidak mencantumkan nomor batch pada kemasan produk tersebut.

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa pada 9 sampel  lipstik  yang  beredar  di  pasar  Kota Manado  tidak  teridentifikasi  adanya  zat warna    Rhodamin  B  yang  diidentifikasi dengan  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT) dan Spektrofotometri UV-Vis.

## SARAN
1.  Disarankan  untuk  tetap  adanya  sikap kehati-hatian  dalam  memilih  kosmetik lipstik  agar  tidak  dapat  membahayakan kesehatan konsumen.
2.  Diperlukan penelitian selanjutnya tentang  zat  warna  rhodamin  B  pada kosmetik lain yang berwarna merah.
3.  Lanjutkan penelitian rhodamin B menggunakan metode lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  1979.  Farmakope  Indonesia.
Edisi  ke-3.  Departemen  Kesehatan RI, Jakarta.
Anonim. 1985. Permenkes RI No. 239/Menkes/Per/1985  tentang  Zat Warna  Tertentu  yang  Dinyatakan sebagai Bahan Berbahaya. Departemen Kesehatan, Jakarta. Anonim. 1990. Permenkes RI No.
376/Menkes/Per/1990 tentang Bahan,  Zat  Warna,  Pengawet  dan tabir Surya pada Kosmetika. Jakarta:
Departemen Kesehatan.
Anonim. 1990. Keputusan Direktur Jenderal  Pengawasan  Obat  dan Makanan No. 00386/C/SK/II/90 tentang Perubahan Lampiran Peraturan  Menteri  Kesehatan  No. 239/Menkes/Per/V/85  tentang  Zat Warna  Tertentu  yang  Dinyatakan sebagai Bahan Berbahaya. Departemen Kesehatan, Jakarta.
Anonim.  1995.  Farmakope  Indonesia.
Edisi  ke-4.  Departemen  Kesehatan
RI, Jakarta.
Cahyadi,  W.  2006.  Kajian  dan  Analisis
Bahan Tambahan Pangan.Edisi Pertama. Bumi Aksara, Jakarta. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1992. Direktorat Pengawasan  Obat  dan  Makanan,
Peraturan Menteri Kesehatan RI No.
722/Menkes/Per/IX/1988, Tentang
Bahan Tambahan Makanan. Edisi II, Jilid II 1992. Departemen Kesehatan RI, Jakarta.
Ditjen  POM  RI.  2001.  Metode  Analisis PPOMN. Ditjen POM, Jakarta.
Khopkar,  S.  M.  1990.  Konsep  Dasar
Kimia Analitik. Jakarta: UI Press.
Mukaromah  A.  H.,  Maharani  E.  T.  2008. Identifikasi  Zat  Warna  Rhodamin  B Pada  Lipstik  Berwarna  Merah.
Universitas Muhamrnadiyah,
Semarang.
Notoadmojo,  S.  2010.  Metode  Penelitian
Kesehatan. Rineka Cipta, Jakarta.
Tranggono,  R.  I.,  dan  F.  Latifah.  2007. Buku  Pegangan  Ilmu  Pengetahuan Kosmetik. PT. Gramedia, Jakarta.
Utami,  W  dan  Suhendi,  A.  2009.  Analisis Rhodamin  B  dalam  Jajanan  Pasar Dengan  Metode  Kromatografi  Lapis Tipis.  Jurnal  Penelitian  Sains  dan Toksikologi,  Vol.10,  No.2,  halaman 148-155, Surakarta.

## LAMPIRAN

## Lampiran 1. Hasil pemeriksaan kualitatif rhodamin B pada sampel
No. Kode Sampel Visual Sinar UV 254 dan 366 Tinggi Bercak (cm) Harga R f 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
8. 9. 10. Baku pembanding rhodamin B 1 B 2 B 3 B 1 45 2 45 3 45
1 K 2 K 3 K Merah jambu - - - - - - - - - Orange - - - - - - - - - 16 - - - - - - - - - 0,94 - - - - - - - - -
Lampiran 2. Lempeng KLT yang menunjukkan adanya rhodamin B pada sampel
Lampiran 3. Kurva Kalibrasi Larutan Rhodamin B dengan berbagai konsentrasi secara spektrofotometri sinar tampak pada panjang gelombang 558 nm
y = 0.1275x + 0.0081 r = 0.981 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 0 1 2 3
4 5 6 7 8 A b so rb a n si
Konsentrasi (ppm)
Filename: 11 Directory: C:\Documents and Settings\User\My Documents Template: C:\Documents and Settings\User\Application Data\Microsoft\Templates\Normal.dotm Title: Subject:
Author:
lidya Keywords: Comments: Creation Date: 5/1/2013 9:43:00 PM Change Number: 19 Last Saved On: 5/7/2013 1:32:00 PM Last Saved By: User Total Editing Time: 189 Minutes Last Printed On: 5/7/2013 1:32:00 PM As of Last Complete Printing Number of Pages:  6 Number of Words:  2,432 (approx.) Number of Characters:
13,867 (approx.)