## UJI EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN SALAM ( Syzygium polyanthum
(Wight.) Walp) TERHADAP PENURUNAN KADAR ASAM URAT TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR ( Rattus novergicus L.) YANG DIINDUKSI POTASIUM OKSONAT
Agnes Filadelfia Sinaga 1 , Widdhi Bodhi 1 , Widya Astuty Lolo 1
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  effect  of  ethanol  extracts  of  bay  leaves  ( Syzygium poliyanthum (Wight.) Walp) on the uric acids  level  of white male rats  winstar strain  ( Rattus norvegius L.) induced by potassium oxonate. Extraction was done by maceration using 96% solvent. The subject of this research were 15 white male rats winstar strain who were divided into  3  groups  which  are  positive  control  group,  negative  control  group  and  treatment  with doses  3.207  gram/weight,  6.413  gram/weight  and  12.826  gram/weight.  This  study  was experimental  laboratorium  research.  The  data  were  processed  in  the  form  of  ANOVA  and LSD  (Least  Significantly  Difference)  test  results  to  compare  the  positive  control  group, negative  control  group  and  treatment  group.  Statistic  result  analysis  showed  that  significant differences  between  the  negative  control  group  and  treatment  group,  positive  control  group and  the  treatment  group,  but  did  not  show  significant  differences  between  positive  control group and treatment.
Key words : Bay leaves, Uric acids, Potassium oxonate, Rattus norvegius L.

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efek  ekstrak  etanol  daun  Salam  ( Syzygium polyanthum (Wight.)  Walp)  terhadap  penurunan  kadar  asam  urat  tikus  putih  jantan  galur wistar ( Rattus  norvegicus L.)  yang diinduksi potasium oksonat.  Ekstraksi dilakukan dengan cara  maserasi  menggunakan  pelarut  96%.  Subjek  penelitian  berupa  tikus  putih  jantan  galur wistar  ( Rattus  norvegicus L.)  berjumlah  15  ekor  yang  dibagi  dalam  3  kelompok  yaitu kelompok  kontrol  positif,  kelompok  kontrol  negatif  dan  kelompok  perlakuan  dengan  dosis 3,207 g/BB, 6,413 g/BB, dan 12,826 g/BB. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium dengan menggunakan tikus putih jantan jantan galur wistar sebagai hewan uji. Data  diolah  berupa  hasil  uji  ANOVA  dan  LSD  ( Least  Significantly Difference )  untuk membandingkan  antara  kelompok  kontrol  positif,  kelompok  kontrol  negatif,  dan  kelompok perlakuan.  Hasil  analisis  statistika  menunjukkan  perbedaan  signifikan  antara  kelompok kontrol  negatif  dan  perlakuan,  kelompok  kontrol  positif  dan  perlakuan,  tetapi  tidak menunjukkan perbedaan signifikan kelompok kontrol kontrol positif dan perlakuan.
Kata  kunci  :  Daun  Salam,  Kadar  Asam  Urat,  Potasium  Oksonat, Rattus  norvegicus L..

## PENDAHULUAN
Asam urat merupakan substansi hasil akhir  pemecahan  purin  atau  produk  sisa dalam  tubuh  yang  merupakan  hasil  dari katabolisme purin yang dibantu oleh enzim guanase  dan  xantin  oksidase  (Shamey, 2005).  Asam  urat  ini  dibawa  ke  ginjal melalui  aliran  darah  untuk  dikeluarkan bersama  urin,  jika  terjadi  gangguan eliminasi  asam  urat  melalui  ginjal  maka menyebabkan  menurunnya  sekresi  asam urat  ke  dalam  tubuli  ginjal  (Mutshler, 1991),  sehingga  akan  terjadi  peningkatan kadar  asam  urat  dalam  darah,  hal  ini merupakan  suatu  kondisi  yang  disebut hiperurisemia.  Hiperurisemia  yang  lanjut dapat  berkembang  menjadi gout dan  pirai yaitu  penyakit  yang  menyerang  sendi. Hiperurisemia  beresiko  tinggi  terhadap beberapa gangguan seperti penyakit artrithis gout, batu ginjal, kerusakan ginjal, serta hipertensi (Walker, dkk. 2003).

## BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini yaitu daun Salam yang segar ( Syzygium  polyanthum (Wight)  Walp), larutan  etanol  96%,  potasium  oksonat, allopurinol  dan  aquades,  darah  tikus  putih jantan galur wistar dan pakan ternak.
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  kandang  pemeliharaan hewan,  tempat  air  minum,  alat-alat  gelas ( Pyrex ),  timbangan  analitik,  oven,  rotary evaporator,  ayakan  no.  65  mesh,  blender (Maspion),  cawan  petri  ( Pyrex ),  jarum suntik, gunting, alat ukur asam urat ( Nesco multi check ),  ( Uric  Acid only self-testing ), jarum  suntik nasogastric  tube no.  5, disposable  syringe 3  ml,  aluminium  foil, sudip dan masker.

## Identifikasi Tanaman
Identifikasi  tanaman  dilakukan  di Laboratorium Biologi Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam (MIPA) Universitas Sam Ratulangi.
Pembuatan Ekstrak Daun Salam Sampel berupa daun Salam ( Syzygium  polyanthum (Wight)  Walp) dibersihkan  lalu  diiris  menjadi  potongan- potongan  halus  dan  menghasilkan  350 gram.    Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara maserasi dengan menggunakan etanol 96% sebanyak  2000  mL.    Sampel  dimaserasi dalam  bekker  gelas  selama  5  hari  dan sesekali diaduk.  Setelah 5 hari, rendaman tersebut  disaring  dengan  kertas  saring (filtrat  1)  dan  sisanya  diekstrak  kembali dengan  etanol  96  %  sebanyak  1500  mL selama 2 hari lalu disaring (filtrat 2), filtrat 1  dan  filtrat  2  digabung  kemudian diuapkan  dengan evaporator pada  suhu 60°C  sampai  menjadi  endapan  yang  tidak terlalu  kental  dan  dilanjutkan  dengan pengeringan dengan menggunakan waterbath pada suhu 40°C sampai menjadi ekstrak kental.

## Pembuatan Larutan Allopurinol
Dosis  Allopurinol  pada  manusia dewasa  adalah  100  mg.  Takaran  konversi dosis  allopurinol  untuk  manusia  dengan berat badan 70 kg pada tikus dengan berat 200 gram adalah 0,018.

## Pembuatan Larutan Potasium Oksonat
Dosis  potasium  yang  digunakan didasarkan  pada  dosis  potasium  mencit yaitu 300 mg/kgBB per oral.

## Pembuatan  Larutan  Ekstrak  Daun Salam
Takaran konversi dosis untuk manusia  dengan  BB  70  kg  pada  tikus dengan BB 200 g adalah 0.018.  Rata-rata orang  Indonesia  beratnya  50  kg.  Dosis daun  Salam  ( Syzygium  polyanthum )  yang biasa digunakan adalah 25,45 g.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pemilihan daun Salam sebagai sampel  untuk  uji  kadar  asam  urat  karena secara  empiris  masyarakat  menggunakan daun  untuk  mengobati  asam  urat  dalam darah  didukung  dengan  adanya  senyawa flavonoid  yang  terkandung  didalam  daun
Salam yang bersifat
analgesik, antiinflamasi dan antibakteri.
Sediaan  uji  yang  digunakan  untuk menurunkan  kadar  asam  urat  dalam penelitian  ini  adalah  maserasi.  Pada penelitian ini maserasi proses paling cepat untuk obat yang sudah halus dimungkinkan  untuk  merendam  dalam menstrum sampai meresap dan melunakkan  susunan  sel  sehingga  zat mudah larut.
Dalam penelitian ini, perlu diperhatikan kemungkinan adanya senyawa  pengganggu  dalam  penetapan kadar  asam  urat.  Senyawa  pengganggu tersebut  terutama  terdapat  dalam  sel-sel darah  merah.  Senyawa  dalam  sel  darah merah  yang  diketahui  paling  mengganggu adalah  glutation  dan  ergotion.  Untuk mengurangi  gangguan  maka  digunakan
darah  yang  tidak  hemolisis,  sehingga glutation dan ergotionen tidak mudah lepas dari sel darah merah.
Untuk masing-masing tikus diberikan  larutan  potasium  dengan  dosis 42  mg/200  gBB  tikus  untuk  membuat kondisi hiperurisemia pada tikus. Setelah 1 jam  pemberian  larutan  potasium  oksonat, diukur kadar darah tikus. Hasil pengukuran kadar  darah  setelah  1  jam  pemberian larutan  potasium  terlihat  peningkatan kadar  asam  urat  darah  tinggi,  ini menunjukan  telah  terjadi  penyerapan potasium  oksonat oleh  tubuh tikus dikarenakan pengaruh fisoilogis dari tubuh tikus sendiri. Pada (gambar 1) dapat dilihat kadar asam urat darah tikus yang diinduksi dengan  larutan  potasium  pada  masing- masing kelompok mengalami kenaikan.
Kelompok  kontrol  positif  diberi larutan  allopurinol  dengan  dosisi  2,52 mg/200  gBB.  Setelah  pemberian  larutan allopurinol,kadar  asam  urat  darah  pada tikus  menujukan  adanya  penurunan  mulai dari waktu t 5 hingga pada waktu t 6 .
Kelompok  perlakuan  pertama  diberi ekstrak  daun  Salam  dengan  dosis  3,207 g/BB  hasil  pengukuran  kadar  asam  urat darah  pada  tikus  menunjukkan  penurunan kadar  asam  urat  darah  mulai  waktu  ke  t 5 hingga  waktu  t 6 .ini  menunjukkan  ekstrak
daun  salam  memberikan  efek  penurunan kadar asam urat pada tikus.
Kelompok  perlakuan  kedua  diberi ekstrak  daun  Salam  dengan  dosis  6,413 g/BB    hasil  pengukuran  kadar  asam  urat darah  pada  tikus  menunjukkan  kenaikan pada  waktu  t 2 .  Selanjutnya  pada  waktu  t 6 mengalami  penurunan  yang  cepat  dalam darah.  Hal  ini  menunjukkan  ekstrak  daun Salam memberikan efek terhadap penurunan  kadar  asam  urat  darah  pada tikus.
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 1 2 3 4 5 6 K a da r Asa m Ura t (m g /dL ) Waktu Kadar Asam Urat Rata-Rata Kontrol (-) Kontrol (+) Dosis 1 Dosis 2 Dosis 3 t t t t t t
Kelompok  perlakuan  ketiga  diberi ekstrak  daun  Salam  dengan  dosis  12,826 g/BB  dan  hasil  pengukuran  kadar  asam urat darah pada tikus menujukkan kenaikan  yang  tercepat  dibandingkan kelompok pertama dan kedua. Pada waktu t 4 terjadi  kenaikan  yang  lebih  cepat  dari waktu sebelumnya. Berdasarkan data yang diperoleh  dapat  dilihat  kadar  asam  urat darah  sebelum  perlakuan  dan  sesudah perlakuan menunjukan ada perbedaan yang signifikan  untuk  kelompok  perlakuan kedua,  kelompok  perlakuan  ketiga  dan kontrol  positif.  Dari  hasil  pengukuran kadar asam urat darah menunjukkan ketiga dosis dari ekstrak daun Salam memberikan efek  menurunkan  kadar  asam  urat  darah pada tikus dan pada dosis 6,413 g/BB dan 12,826  g/BB  lebih  memberikan  efek menurunkan  kadar  asam  urat  darah  pada tikus.
Hasil dari analisis data yang dilakukan  menunjukkan  F  hitung  lebih besar dari F tabel  (2,926<2,76 ) dan dapat disimpulkan  rata-rata  kadar  asam  urat darah  (mg/dl)  untuk  setiap  perlakuan  ada perbedaan  (lampiran  9).  Karena  hasil ANOVA  menyatakan  H 1 diterima,  maka dilanjutkan  dengan  uji  LSD  ( Least Significantly  Difference )  untuk  melihat adanya  perbedaan  rata-rata  kadar  asam urat darah antar perlakuan.
Hasil  pengujian  LSD  menunjukkan pasangan  kelompok  perlakuan  antara kelompok  kontrol  negatif,  kelompok kontrol  positif  dan  kelompok  perlakuan ekstrak  ada  perbedaan.  Kelompok  kontrol negatif  berbeda  dengan  kelompok  positif dan kelompok perlakuan ekstrak, sedangkan  kelompok  positif  sama  dengan kelompok  perlakuan.  Ini  menunjukkan
bahwa  pemberian  ekstrak  daun  Salam ( Syzygium  polyanthum (Wight.)  Walp) memiliki  efek  menurunkan  kadar  asam urat  darah  pada  tikus  ( Rattus  norvegicus L.).
Ekstrak  daun  Salam  memberi  efek kadar  asam  urat  darah  pada  tikus.  Ini dikarenakan  daun  Salam  mengandung flavonoid,  yang  mempunyai  aktifitas sebagai antioksidan yang dapat menghambat  kerja  radikal  bebas  sehingga kerusakan  sel  terhambat  (Robinson,  T., 1995).

## PENUTUP Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan maka disimpulkan bahwa ekstrak  etanol  daun  Salam  ( Syzygium polyanthum (Wight)  Walp)  memiliki  efek menurunkan  kadar  asam  urat  darah  pada tikus  putih  jantan  galur  wistar    ( Rattus norvegicus L.)  yang  diinduksi  potasium oksonat.

## DAFTAR PUSTAKA
Mutschler,  E.  1991. Dinamika  Obat  Buku Ajar  Farmakologi  dan  Toksiologi . ITB. Bandung. Shamley,  D.  2005. Pathophysiology  An Essential  Text  for  the  Allied  Health Professions , Elsevier Limite. USA. Walker, R. and Edward, C. 2003, Clinical Pharmacy  And  Therapeutics ,  Edisi
3. Churchill Livingstone. USA. Robinson,  T.  1995,  Kandungan  Organik Tumbahan Tinggi Jilid 6, diterjemahkan oleh kosasih padmawinata, 191-193, ITB. Bandung.
Lampiran. Hasil Pengukuran Kadar Asam Urat Tikus ( Rattus Norvegicus L.)
Keterangan: EDS
: Ekstrak Daun Salam t 1 : Pemeriksaan kadar asam urat darah puasa
t 2 : Pemeriksaan kadar asam urat setelah 1 jam diinduksi potasium oksonat
t 3 : Pemeriksaan kadar asam urat darah setelah pemberian sediaan pada jam ke- 1 t 4 : Pemeriksaan kadar asam urat darah setelah pemberian sediaan pada jam ke- 2 t 5 : Pemeriksaan kadar asam urat darah setelah pemberian sediaan pada jam ke- 4 t 6 : Pemeriksaan kadar asam urat darah setelah pemberian sediaan pada jam ke- 6
Perlakuan No Hewan Uji BB (g) Hewan Uji Kadar Asam Urat (mg/dL) Pada Waktu t1 (Puasa) t2 (Induksi) t3 t4 t5 t6 Kontrol Negatif (-) 1 156 3,2 5,3 3,8 2,9 6,8 8,5 2 196,1 2,9 6,8 6,3 6,1 1,9 5,4 3 164,5 1,6 2,3 1,9 1,9 2,7 2,0 Rata-rata 172,2 2,5 4,8 4 3,6 3,8 5,3 Kontrol Positif (+) 1 184,6 2,0 2,0 1,5 2,2 2,0 2,0 2 192,4 2,0 7,4 5,4 4,6 5,3 2,0 3 176,6 1,9 2,3 3,0 4,0 2,7 2,0 Rata-rata 184,5 1,9 3,9 3,3 3,6 3,3 2 EDS 3,207 g/BB 1 185,6 1,9 2,6 2,1 3,7 2,0 2,2 2 182,6 1,5 5,5 5,2 6,1 2,2 2,7 3 181,2 1,9 2,0 2,3 2,1 2,0 2,0 Rata-rata 183,1 1,7 3,3 3,2 3,9 2,2 2,3 EDS 6,413 g/BB 1 192,1 2,3 2,3 1,4 2,2 2,0 2,0 2 207,6 1,9 4,2 6,9 3,1 4,0 2,2 3 178,5 3,0 6,8 3,9 6,3 8,6 5,4 Rata-rata 192,7 2,4 4,4 4,0 3,8 4,8 3,2 EDS 12,826 g/BB 1 159,3 1,9 3,8 4,7 4,9 3,5 2,0 2 156,3 5,4 5,4 4,6 8,5 13,0 7,1 3 150 1,4 2,6 3,1 3,5 2,0 2,0 Rata-rata 155,2 3,0 2,9 4,1 5,6 6,1 3,7