## IMUNITAS ALAMIAH: EOSINOPHIL EXTRACELLULAR TRAPS (EET)
Safari Wahyu Jatmiko Departemen Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Surakarta Correspondence to: Safari Wahyu Jatmiko Email: safari.wahyu@ums.ac.id

## ABSTRACT
Eosinophils play a role in the defense against viruses, bacteria, fungi and parasites, as well as be involved in the pathogenesis of allergic and autoimmune diseases. The role of eosinophils in the defense against bacterial run by enzymes found in the granules such as MBP, ECP, EPO, and EDN, and spending EET. EET formation is determined by the presence of free radicals and intracellular calcium. The antimicrobial  function of EET played by Histon.

## Keywords : eosinophil , Eosinophils extracellular traps
Sistem imun alami adalah sistem imun yang sudah ada pada manusia sehat, mampu mengenali patogen yang masuk secara non-antigen spesi ﬁ k, dan memberikan respons segera terhadap patogen tanpa adanya aktifasi sistem imun terlebih dahulu. Berbagai sel terlibat dalam sistem imun alamiah, diantaranya  adalah  sel  eosino ﬁ l(Maddof  dan Kasper, 2008; Warrington et al, 2011).
EOSINOFIL Eosino ﬁ l adalah granulosit yang berukuran 12–17  µm,  inti  berlobus  2-6  dengan  sitoplasma biru pucat dan dipenuhi granula eosino ﬁ lik (Bain, 2011).Granula  eosino ﬁ lik  tersebut  mengandung major  basic  protein (MBP), eosinophil  cationic protein (ECP), eosinophil  peroxidase (EPO), dan eosinophil-derivedneurotoxin (EDN) (Blanchard dan Rothenberg, 2009).
Eosino ﬁ l mengekpresikan berbagai molekul di permukaan membran sel nya. Diantara molekul  tersebut  adalah  reseptor  imunoglobulin untuk IgG (FcgRII/CD32) dan IgA (FcaRI/CD89), reseptor  komplemen  (CR1/CD35,  CR3,  dan CD88),  reseptor  sitokin (IL-3R, IL-5R,GM-CSF, IL-1aR,IL-2R,  IL-4R,  IFN- α R,  dan  TNF- α R); reseptor  kemokin  (CCR1  dan  CCR3),  molekul adhesi  ( very  late  antigen  4 ,  a4b7,  dan  siglec-8), reseptor  leukotrin  (CysLT1R,  CysLT2R,  dan reseptor  LTB4),  reseptor  prostaglandin,  reseptor platelet-activating factor (PAF), dan TLRs (Stone, Prussin, dan Metcalfe, 2010).
Esoino ﬁ l  mempunyai  banyak  fungsi. Beberapa fungsi diantaranya adalah:
1.  Maturasi uterus
2.  Pembentukan kelenjar mammae
3.  Terlibat  dalam  seleksi  negativ double  positive thymocytes
4.  Presentasi antigen dan proliferasi sel T
5.  Sebagai regulator fungsi sel mast
6.  Terlibat  dalam  imunitas  terhadap  infestasi cacing,  infeksi  virus,  jamur,  dan  bakteri (Blanchard dan Rothenberg, 2009).
Meskipun  eosino ﬁ l  diyakini  berperan dalam  imunitas  alamiah,  akan  tetapi  fungsinya dalam  melawan  bakteri  belum  diketahui  dengan jelas.  Penelitian  yang  dilakukan  youse ﬁ et  al (2010)menunjukkan  bahwa  lipopolisakarida  dari bakteri gram negatif akan mengaktifkan eosino ﬁ l untuk  melepaskan  DNA  mitokondria.  Pelepasan ini  tergantung  dengan  adanya reactive  oxygen Species .Proses  pelepasan  DNA  terjadi  dengan cepat  dalam  waktu  kurang  dari  satu  detik.  Di ruang ekstraselular, DNA mitokondria dan protein granul  membentuk  struktur  ekstraseluler  yang mampu mengikat dan membunuh bakteri.Sebuah proses yang sekarang dikenal dengan istilah EET (Simon et al, 2012) .

## EOSINOPHIL EXTRACELLULAR TRAPS
(EET)
Pada  tahun  2004,  Brinkmann  dan koleganya  menunjukkan  bahwa  netro ﬁ l  bisa
mengeluarkan kromatinnya ke media ektraseluler dan mebuat ikatan dengan berbagai protein untuk membentuk netrophil  extracellular  trap .  Hal  ini terjadi  ketika  netro ﬁ l  diaktifkan  oleh phorbol myristate  acetate ,  lipopolisakarida,  interleukin 8,bakteri Gram positive, dan bakteri  gramnegatif (Guimaraes-Costa et  al, 2012).  Kini  diketahui bahwa sel-sel  yang  lain  seperti  baso ﬁ l,  sel mast, monosit,  makrofag,  dan  eosino ﬁ l  juga  memiliki kemampuan yang  sama (Goldmann dan Medina, 2013). Pada eosino ﬁ l, proses tersebut dinamakan EET (Simon et al, 2012).
Eosinophil  extracellular  trap merupakan bagian  dari respon  imun  bawaan  dan  dapat
ditemukan pada beberapa keadaan seperti infeksi, alergi,  dan  penyakit  autoimun.  EET  terdiri  dari anyaman  serat  DNA  ( Deoxyribo  Nucleic  Acid ) dan protein granul eosino ﬁ l seperti MBP dan ECP. Deoxyribo  Nucleic Acid dalam  EET  berasal  dari mitokondria eosino ﬁ l. Hal ini yang menyebabkan eosino ﬂ tidak  mengalami  kematian  setelah mengeluarkan EET ( Youse ﬁ , Simon, dan Simon, 2012) .  Meskpiun  demikian,  Ueki et  al (2013) melaporkan  bahwa  sumber  DNA  EET  juga  bisa berasal dari inti sel. Ia juga membuktikan bahwa eosino ﬁ l yang mengalami EET pun bisa mati.
Gambar 1. EET yang disertai dengan kematian sel
Gambar 2. EET yang tidak disertai dengan kematian sel
Eosino ﬁ l  dapat  diaktifkan  oleh  banyak hal.  Toll  like  receptor,  sitokin,  kemokin,  dan reseptor  adhesi  bereperan  sebagai  inisiator aktivasi eosino ﬁ l. Bila eosino ﬁ l telah aktif, maka terjadi  serangkaian  proses  yang  akan  memicu terbentuknya  EET  (Chunet  al,  2007;  Morshedet al,  2012; Youse ﬁ ,  Simon,  dan  Simon,  2012) . Aktifasi eosino ﬁ l memicu teraktifkannya Protein
Kinase  C  (PKC)  (Kato  et  al,  2005).    Setelah PKC  aktif,  ia  akan  merangsang  enzim  NADPH oksidase (In-Heeet  al, 2014).  Hasil  dari  aktifnya NADPH oksidase adalah terbentuknya O 2 - .  Selain pembentukan radikal bebas, aktifasi eosino ﬁ l juga mengakibatkan  peningkatan  kalsium  intrasel. Peningkatan ini akan mengaktifkan PAD4. Ketika
PAD4  aktif  maka  ia  akan  mengubah  histon menjadi  tersitrulinasi.  Radikal  bebas  dan  histon yang  telah  mengalami  sitrulinasi  ini  kemudian mengakibatkan  terjadinya  kolaps  nuklear  dan disintegrasi membran sel. Hasil akhir dari proses ini  adalah  dikeluarkannya  EET (Goldmann  dan Medina, 2013; Guimaraes-Costaet al, 2012).

## Gambar 3. Proses Terjadinya EET.
Pada  awalnya  EET  ditengarai  hanya berperan  dalam  imunitas  terhadap  bakteri  saja. Akan  tetapi  sekarang  EET diketahui mempunyai peran yang lain diluar imunitas terhadap bakteri. Sebagai  contoh  adalah    EET  terlibat  dalam penyakit  kulit  in ﬂ amasi  baik  karena  infeksi maupun non infeksi dan terutama pada sindroma wells (Simon et al, 2012). Bahkan diketahui juga bahwa  EET  terlibat  dalam  patogenesi  penyakit asma bronkiale (Dworski et al, 2011).
Pada  konteks  penyakit  infeksi,  EET diyakini sebagai strategi yang dikembangkan oleh sel  inang  untuk  mengontrol  dan  mengeliminasi patogen.  Sejumlah  bakteri,  fungi,  dan  parasit dilaporkan  terjebak  dan  dibunuh  oleh  EET. Mekanisme  molekuler  bagaimanakah  EET membunuh  mikroorganisme  belum  diketahu dengan  pasti.  Banyak  hipotesis  diajukan  untuk
menjawab  pertanyaan  ini.  Salah  satunya  adalah interaksi  elektrostatik  antara  EET  dengan permukaan bakteri. Setelah terikat maka patogen akan dirusak oleh histon. Histon H2B mempunyai daya  antibakteri  terhadap  bakteri  Gram  positive, gram negatif dan terhadap jamur (Goldmann dan Medina, 2013) .

## KESIMPULAN
Eosino ﬁ l adalah bagian dari sel lekosit yang berperan  dalam  imunitas  alamiah.  Struktur  sel eosino ﬁ l  ditandai  dengan  jumlah  lobus inti  yang berjumlah 2-6 dengan granula stoplasma terwarna eosino ﬁ lik. Sel eosino ﬂ dilengkapi dengan struktur permukaan  membran  sel  yang  diperlukan  untuk menjalankan  fungsinya  serta  granula  sitoplasma yang tersususn atas zat-zat khusus.
Di  bidang  imunologi  klinik,  eosino ﬁ l
diketahui  terlibat  dalam  penyakit  alergi  dan autoimun.  Selain  itu,  Eosino ﬁ l  berperan  dalam imunitas  terhadap  patogen  seperti  virus,  jamur, cacing  dan  bakteri.  Salah  satu  mekanisme eosino ﬁ l dalam  melawan patogen  adalah  dengan mengeluarkan EET.
Eosinophil  extracellular  traps terdiri  dari anyaman  serat  DNA  ( Deoxyribo  Nucleic  Acid ) dan  protein  granul  eosino ﬁ l  seperti  MBP  dan ECP. Deoxyribo  Nucleic Acid dalam EET berasal dari  mitokondria  eosino ﬁ l  ataupun  inti  sel. Pembentukan  EET  tergantung  dengan  adanya radikal bebas dan peningkatan ion kalsium intrasel.
Sifat  antimikroba  dari  EET  belum  banyak diketahui. Hipotesis yang ada menjelaskan bahwa efek  antimikroba  EET  diperankan  oleh  histon. Selain itu enzim MBP dan ECP bersifat destruktif terhadap patogen dan jaringan.

## DAFTAR PUSTAKA
Bain, Barbara J., 2011, Blood cell morphology in health and  disease,  in:  Bain,  Barbara  J.,Bates, Imelda.,  Laffan,  Michael  A.,  Lewis,  S. Mitchell., (eds), Dacie and Lewis Practical Haematology , 11 th ed, Philadelphia:Churchill LivingstoneElsevier, 94
Blanchard, Carine., Rothenberg, Marc E., 2009, Biology of the Eosinophil, Adv Immunol ,101, 81–121 Chun,  K.  Wong.,  Cheung,  Phyllis  F.  Y.,  Wai,  K.  Ip.,
Lam, Christopher W. K., 2007, Intracellular Signaling  Mechanisms  RegulatingToll- Like  Receptor–Mediated  Activation  of Eosinophils, Am J Respir Cell Mol Biol , 37, 85–96
Dworski,  Ryszard.,  Simon,  Hans-Uwe.,  Hoskins, Aimee.,  Yousef,  Shida.,  2011,  Eosinophil and  neutrophil  extracellular  DNA  traps  in humanallergic asthmatic  airways, J Allergy Clin Immunol , 127:1260-6.
Goldmann,Oliver.,  Medina,  Eva.,  2013,  The expanding  world  of  extracellular  traps: not  onlyneutrophils  but  much  more, Front Immunol, 3(420),1-10
Guimaraes-Costa, Anderson B., Nascimento, Michelle T. C., Wardini, Amanda  B., Pinto-da-Silva, Lucia H., Saraiva, Elvira M., 2012, ETosis: A  Microbicidal  Mechanism  beyond  Cell Death, J Parasitol Research , 929743,1-11
In-Hee,  Cho.,  Ju-Hyun,  Gong.,  Min-Kyung,  Kang., Eun-Jung,  Lee.,  Jung,  Han  Yoon  Park., Sang-Jae,  Park.,  Young-Hee,  Kang.,  2014,
Astragalin  inhibits  airway  eotaxin-1 induction  andepithelial  apoptosis  through modulating oxidativestress-responsive
MAPK signaling, BMC Pulmonary Med ,14(122), 1-11
Kato,  Masahiko.,  Yamaguchi,  Takafumi,.  Tachibana, Atsushi.,  Suzuki,  Masato.,  Izumi, Takashi., Maruyama,  Kenichi.,  Hayashi,  Yasuhide., Kimura,  Hirokazu.,  2005,  An  atypical protein  kinase  C,  PKC  f,  regulates  human eosinophileffector functions, Immunol , 116, 193–202
Maddof,  Lawrence  C.,  Kasper,  Dennis  L.,  2008, Basic  Consideration  in  Infectious  Disease, in:  Fauci,  Anthony  S.,  Kasper,  Dennis  L., Longo, Dan L., Braunwald, Eugene., Hauser, Stephen  L.,  Jameson,  J  Larry.,  Loscalzo, Joseph.,  (eds) Harrison’s  Principle  of Internal  Medicine ,  17th  Ed,  New  York: McGraw Hill Medical, 750
Morshed,  M.,  Youse ﬁ ,  S.,  Sto¨ckle,  C.,  Simon, H.U.,  Simon,  D.,  2012,  Thymic  stromal lymphopoietin  stimulates  the  formationof eosinophil  extracellular  traps, Allergy ,  67,
1127–37.
Simon,  Dagmar.,  Hoesli,  Susanne.,  Roth,  Nina., Staedler,  Simon.,  Youse ﬁ ,  Shida.,  Simon, Hans-Uwe.,  2011,  Eosinophil  extracellular DNA  traps in skin  diseases, J Allergy Clin Immunol ,127,194-9
Stone,  Kelly  D.,  Prussin,  Calman.,  Metcalfe,  Dean D.,  2010,  IgE,  mast  cells,  basophils,  and eosinophils, J  Allergy  Clin  Immunol ,  125, S73-80
Ueki, Shigeharu.,Melo, Rossana C. N., Ghiran, Ionita., Spencer,  Lisa A., Dvorak, Ann  M., Weller, Peter F., 2013, Eosinophil extracellular DNA trap cell death mediates lytic release offree secretion-competent  eosinophil  granules  in humans, Blood, 121(11), 2074-83
Warrington,  Richard.,  Watson,  Wade.,  Kim,  Harold L.,  Antonetti,  Francesca  Romana.,  2011, An  introduction  to  immunology  and immunopathology, Allergy  Asthma  Clin Immunol , 7(Suppl 1), 1-8
Youse ﬁ ,  Shida.,  Gold,  Jeffrey  A.,  Andina,  Nicola.,
Lee,  James  J.,  Kelly,  Ann  M.,  Kozlowski, Evelyne.,  Schmid, Inès.,  Straumann, Alex., Reichenbach,  Janine.,  Gleich,  Gerald  J., Simon,  Hans-Uwe.,  2008,  Catapult-like release of mitochondrial DNA by eosinophils contributes  to  antibacterial  defense, Nat Medicine , 14, 949 –53
Youse ﬁ , Shida., Simon, Dagmar., Simon, Hans-Uwe., 2012,  Eosinophil  extracellular  DNA  traps: molecular  mechanisms  and  potential  roles in  disease, Curr  Opinion  Immunol ,  24(6),
736–9