Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Volume 19, Nomor 2, Oktober 2019, Hal.80-88
https://journal.unpak.ac.id/index.php/ekologia
e-ISSN: 2686-4894 ; p-ISSN: 1411-9447

## UJI DAYA HAMBAT SEDIAAN SABUN CAIR EKSTRAK DAUN PALA
( Myristica fragrans houtt ) TERHADAP Propionibacterium acnes dan Staphylococcus aureus
Atika Pratiwi 1 , Ella Noorlaela 1 , Siti Mahyuni 1*
1 Program Studi Farmasi FMIPA Universitas Pakuan, Bogor
* e-mail: s.mahyuni@yahoo.com
diterima: 20 Juli  2019; direvisi:22 Agustus 2019 ; disetujui: 3 September 2019

## ABSTRAK
Bakteri  penyebab  jerawat  diantaranya Staphylococcus  aureus dan Propionibacterium  acnes . Daun  pala  merupakan  tanaman  yang  mengandung  zat  antibakteri  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  membuat  sediaan  sabun  dari  ekstrak daun  pala  serta  mengetahui  formula  yang  paling  efektif  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri P.acnes dan Staphylococcus  aureus. Daun  pala  diekstraksi  menggunakan  metode maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%.  Sediaan  sabun  cair  dibuat  sebanyak  4  formula.  Uji aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  dilusi  untuk  KHM  dan  metode  difusi  cakram untuk menentukan LDH sediaan sabun cair. Berdasarkan uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol 96% daun pala memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dengan nilai KHM pada konsentrasi 0,5% dan negatif pada Propionibacterium acnes . Sediaan sabun cair pada F1 (ekstrak 2%) memiliki nilai LDH sebesar 9,87±0,41 mm ; F2 (ekstrak 4%) memiliki  nilai  LDH  sebesar  10,50±0,35  mm  ;  F3  (ekstrak  8%)  memiliki  nilai  LDH  sebesar 10,70±0,25  mm  ;  F4  (ekstrak  10%)  memiliki  nilai  LDH  sebesar  11,87±0,25  mm.  Nilai  LDH paling  tinggi  yaitu  F4  dengan  konsentrasi  ekstrak  10%,  LDH  F4  merupakan  formula  yang memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  paling  mendekati  LDH  kontrol  positif  JF  Sulfur  yang memiliki nilai LDH sebesar 13,25±0,25 mm.
Kata Kunci: Ekstrak Daun Pala, P.acnes, Sabun Cair dan S.aures
LIABILITY TESTS OF PALA LEAVES EXTRACT LIQUID SOAP ( Myristica fragrans houtt)  ON Propionibacterium Acnes AND Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
Bacteria that cause acne include Staphylococcus aureus and Propionibacterium acnes . Nutmeg leaves  are  plants  that  contain  antibacterial  substances  that  can  inhibit  bacterial  growth.  The purpose  of  this study  is  to make  soap  preparations  from  nutmeg  leaf  extracts  and  find  out  the formula  that  is  most  effective  in  inhibiting  the  growth  of  P.acnes  and  Staphylococcus  aureus bacteria.  Nutmeg  leaves  were  extracted  using  maceration  method  with  96%  ethanol  solvent. Liquid soap preparations are made in 4 formulas. Antibacterial activity test was carried out by the  dilution  method  for  MIC  and  disk  diffusion  methods  to  determine  LDH  liquid  soap preparations.  Based  on  the  test  of  the  antibacterial  activity  of  96%  ethanol  extract,  nutmeg leaves  have  the  ability  to  inhibit  the  growth  of  Staphylococcus  aureus  with  a  MIC  value  at  a concentration of 0.5% and negative on Propionibacterium acnes. Liquid soap preparations in F1 (extract 2%) have LDH values of 9.87 ± 0.41 mm; F2 (extract 4%) has an LDH value of 10.50 ± 0.35 mm; F3 (extract 8%) has an LDH value of 10.70 ± 0.25 mm; F4 (extract 10%) has an LDH value of 11.87 ± 0.25 mm. The highest LDH value is F4 with a concentration of 10% extract, LDH F4 is a formula that has the most antibacterial activity approaching LDH positive control JF Sulfur which has an LDH value of 13.25 ± 0.25 mm
Key words: Liquid Soap,  Nutmeg Leaf  Extract,  Propionibacterium  acnes, Staphylococcus aureus
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup

## PENDAHULUAN
Jerawat  atau acne  vulgaris yang  biasa dikenal  sebagai  penyakit  kulit  adalah keadaan  tidak  normal  pada  kulit  yang menginfeksi  kira-kira  80%  yang  berusia antara  11  dan  30  tahun  tanpa  melihat  dari jenis  kelamin  ataupun  ras  (Dipiro et  al ., 2009). Bakteri penyebab jerawat terdiri dari Propionibacterium  acnes (Chomnawang et al ., 2007), Staphylococcus aureus (Sarlina et al ., 2017), Staphylococcus  epidermidis (Suryana et al ., 2017).
Daun  pala  merupakan  salah  satu  dari bagian  tanaman  pala  yang  belum  banyak dimanfaatkan.  Kandungan  yang  terdapat pada  daun  pala  diantaranya  :  saponin, triterpenoid, tanin dan flavonoid  yang dapat dikembangkan  dalam berbagai bidang industri,  misalnya  :  pangan,  kosmestik  dan farmasi  (Ginting et  al .,  2014).  Senyawa yang  diduga  sebagai  antibakteri  yaitu senyawa flavonoid dan terpenoid (Poeloengan, 2010).
Berdasarkan  penelitian  Rizal  (2017), ekstrak  etanol  daun  pala  mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi 0,5%  dengan  diameter  daerah  hambat sebesar  6,46  mm  dan  efektif  pada konsentrasi  6%  dengan  diameter  daerah hambat  sebesar  14,06  mm.  Menurut  Parekh (2006),  diameter  daerah  hambat  antibakteri yang  paling  efektif  terhadap  uji  antibakteri adalah 14 mm.
Bentuk  sediaan  yang  dapat  membantu menjaga  kesehatan  kulit  adalah  sabun.  Sabun merupakan produk yang dihasilkan dari proses reaksi  kimia  antara  asam  lemak  dengan  basa kuat  yang  dapat  mencuci  atau  membersihkan kotoran.  Sabun  dibagi  menjadi  2  jenis  yaitu sabun padat  dan  sabun  cair  (Hernani et  al ., 2010).

## BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  Daun  Pala  ( Myristica  fragrans houtt ), etanol 96% ( Merck® ) sediaan sabun cair  JF  Sulfur  yang  ada  dipasaran,  asam sitrat, sodium lauril sulfat ( Brataco® ), NaCl
( Brataco® ),  propilen  glikol  ( Brataco® ), tryptic soy  agar (TSA), tryptic  soy  broth (TSB), brain  heart  infusion (BHI),  isolat
Staphylococcus
aureus , isolat
Propionibacterium  acnes ,  aquadest dan dimethyl sulfoxide (DMSO) 1%.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah  timbangan  analitik  ( And® ),  rak tabung,  batang  pengaduk,  tabung  reaksi ( Pyrex® ),  cawan  penguap,  jarum  ose,  labu ukur,  autoclaf,  jangka  sorong,  cawan  petri ( Pyrex® ),  pH  meter,  penangas,  inkubator, pipet  tetes,  erlenmeyer  ( Pyrex® ),  kertas cakram,  kapas,  kurs,  tanur  ( Ney® ),  corong, ayakan mesh 40, micro pipet, kertas saring, kain batis, spirtus, , tip pipet mikro dan alat gelas lainnya untuk analisis.

## Metode Pengumpulan Bahan Baku
Daun  yang  digunakan  adalah  daun  yang sudah tua (siap panen). Kemudian dilakukan determinasi  tanaman  (Bahan  Baku)  guna memastikan  bahan  baku  yang  digunakan adalah bahan baku yang seragam dan benar, determinasi  tanaman  ini  dilakukan  di Lembaga  Ilmu  Pengetahuan  Indonesia (LIPI) Komplek CSC – LIP JL. Raya bogor Km  46,  cibinong  16911  Bogor,  Jawa  barat, Indonesia.

## Pembuatan Serbuk Simplisia
Daun pala segar dibersihkan dari kotoran yang  menempel  dengan  menggunakan  air bersih  yang  mengalir  (sortasi  basah), kemudian  ditiriskan  untuk  menghilangkan air dari sisa-sisa pencucian. Daun yang telah bebas  air  dari  pencucian  dan  bersih dikeringkan  dengan  oven  pada  suhu  50˚C selama  3-4  hari  (Depkes  RI,1985).  Setelah kering,  selanjutnya  digiling  menggunakan grinder  sampai  menjadi  serbuk  kemudian diayak  menggunakan  ayakan  no  40,  lalu ditimbang dan disimpan dalam wadah bersih dan tertutup rapat.

## Pembuatan Ekstrak
Sebanyak  800  gram  serbuk  simplisia daun  pala  dimaserasi  dengan  pelarut  etanol 96% sebanyak 75 bagian, dengan
perbandingan 1 : 10. Pelarut yang digunakan adalah  etanol  96%  sebanyak  8000ml.  Pelarut dibagi  menjadi  3  bagian,  pada  maserasi pertama  sebanyak  3000ml,  maserasi  kedua sebanyak  3000ml,  dan  maserasi  ketiga sebanyak  2000ml.  serbuk  dimaserasi  dengan etanol 96% selama 24 jam, setiap 6 jam sekali dikocok  selama  15  menit,  setelah  24  jam filtrat  dipisahkan  menggunakan  kain  batis. Residu dimaserasi kembali dengan menggunakan  proses  yang  sama  seperti sebelumnya. Filtrat didiamkan
selama semalam (dienaptuangkan) untuk menghasilkan filtrat 1, filtrat 2, filtrat 3 dan hasil residu dibuang. Hasil filtrat dikeringkan  dengan Vaccum  dry sampai menjadi ekstrak kering.

## Penetapan Kadar Air
Penentuan kadar air simplisia dan ekstrak dilakukan dengan cara gravimetri. Ditimbang  sebanyak  2-3  gram  sampel dengan teliti. Dimasukan kedalam cawan uap yang  sudah  ditara  kedalam  oven  105˚C selama  10  menit,  diuapkan  didalam  oven 105˚C  hingga  berat  konstan  (Depkes,2000). Penetapan kadar air bertujuan untuk memberikan batasan mineral tentang besarnya  kandungan  air  didalam  bahan  hal ini  terkait  dengan  adanya  kontaminan  serta kemurnian  dalam  simplisia  (Depkes  RI, 2000).

## Penetapan Kadar Abu Total
Bahan uji ditimbang 2-3 gram, kemudian dimasukan  kedalam  krus  silikat  yang  telah dipijarkan  pada  suhu  ±600˚C  dalam  tanur kemudian  ditara,  diratakan  dan  dipijar perlahan-lahan hinga arang habis, kemudian didinginkan  dan  ditimbang  hingga  bobot konstan.  Jika  dengan  cara  ini  arang  tidak dapat dihilangkan, maka dapat ditambahkan dengan  air  panas,  diaduk,  dan  disaring melalui  kertas  saring  bebas  abu.  Dipijarkan sisa dan kertas saring dalam krus yang sama. Filtrat  dimasukan  kedalam  krus  diuapkan dan  dipijar  hingga  bobot  tetap,  kemudian ditimbang.

## Analisis Fitokimia Identifikasi Alkaloid
Ekstrak diambil 0,1 gr kemudian ditambah dengan 5 ml klorofom dan 3 tetes amoniak.  lalu  dibagi  menjaditiga  tabung yang  masing-masing  ditambah  pereaksi dragendrof,  mayer  dan  wagner.  Alkaloid pada  sampel  ditandai  dengan  adanya endapan putih pada pereaksi mayer, endapan merah  pada  pereaksi  dragendrof  dan endapan  cokelat  pada  pereaksi  wagner (Hanani,2015).

## Identifikasi Flavonoid
Ekstrak  diambil  sebanyak  0,1  gr  dan dimasukan  kedalam  tabung  reaksi,  serbuk magnesium  0,1  gr  dan  amil  alkohol  0,4  ml ditambahkan kedalam tabung reaksi. alkohol sebanyak  4  ml  ditambahkan  dan  dicampur hingga  homogen.  reaksi  positif  flavonoid ditunjukan  dengan  terbentuknya  warna merah, kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol (Hanani, 2015).

## Identifikasi Saponin
Ekstrak diambil 0,015 gr dimasukan pada tabung  reaksi.  ditambahkan  aquadest  panas sebanyak  10  ml  dan  dikocok  selama  5 menit, diamkan selama 5 menit. hasil positif dari  adanya  saponin  adalah  terbentuk  busa tebal  ±  1-10  cm  yang  konstan  (Hanani, 2015).

## Identifikasi Tanin
Ekstrak  dimasukan  kedalam  tabung reaksi  ditambahkan  FeCl ₃ sampai  terbentuk warna  hijau-biru  sebagai  uji  pendahuluan adanya  senyawa  tanin.  Pada  tabung  reaksi yang  lain,  ekstrak  dilarutkan  dengan  sedikit aquadest kemudian dipanaskan  dipenangas air  lalu  diteteskan  larutan  gelatin  1%  (1:1). Hasil  positifnya  terbentuk  endapan  putih (Hanani, 2015).

## Identifikasi Steroid dan Triterpenoid
Ekstrak  diambil  sebanyak  0,1  gr  dan dipindahkan  kedalam drop  plate .  larutan acetat anhidrat sebanyak 3  tetes dan larutan H ₂ SO ₄ pekat  1  tetes ditambahkan  pada ekstrak.  hasil  positif  pada  pengujian  ini
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
yaitu terbentuk warna merah yang menandakan  adanya  terpenoid  dan  warna hijau  menandakan  adanya  steroid  (Hanani, 2015).

## Uji Aktivitas Antibakteri
Pembuatan
suspensi bakteri Staphylococcus aureus dan Propioni bacterium  acnes :  Inokulum bakteri  yang telah  diinkubasi  selama  24  jam  diambil beberapa ose kemudian disuspensikan dalam TSB cair. Suspensi dikocok dan kekeruhannya  disetarakan  dengan  standar kekeruhan 0,5 McFarland (NCCLS, 2003).
Penyiapan  larutan  ekstrak  :  Konsentrasi ekstrak daun pala disiapkan dari konsentrasi 0,1%,  0,3%  dan  0,5%  untuk  bakteri Staphylococcus  aureus .  Kosentrasi ekstrak daun  pala  dibuat  dengan  cara  melarutkan masing-masing  0,01  g,  0,03  g,  0,05  g ekstrak dalam 10 mL DMSO 1%. Kemudian konsentrasi ekstrak daun pala disiapkan dari konsentrasi  10%,  25%  dan  50%  untuk bakteri Propionibacterium acnes. Konsentrasi  ekstrak  daun  pala  10%  dibuat dengan cara melarutkan masing-masing 1 g, 2,5 g, 5 g ekstrak dalam 10 ml DMSO 10%.
Pengujian Konsentrasi

## Hambat Minimum (KHM)
Larutan  ekstrak  daun  pala  yang  telah dibuat  dalam  konsentrasi  0,1%,  0,3%  dan 0,5%  yang  telah  dilarutkan  dalam  DMSO 10%  diambil  masing-masing  sebanyak  2 mL,  kemudian  dimasukan  kedalam  cawan petri terpisah yang telah berisi media tryptic soy  agar (TSA)  yang  sudah diinkubasi  dan sudah  dalam  keadaan  dingin.  Setelah  itu, diteteskan  sebanyak  0,2  ml  bakteri  dan diratakan  dengan  ose  steril,  lalu  diinkubasi selama  24  jam  pada  suhu  37°C,  kemudian diamati pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus yang terbentuk.
Larutan ekstrak daun pala yang telah dibuat dalam  konsentrasi  10%,  25%  dan  50%  yang telah  dilarutkan  dalam  DMSO  10%  diambil masing-masing  sebanyak  2  ml,  kemudian dimasukan kedalam cawan petri terpisah yang telah  berisi  media brain heart  infusion (BHI) yang  sudah diinkubasi  dan  sudah  dalam keadaan dingin. Setelah itu,diteteskan sebanyak  0,2  ml  bakteri  dan  diratakan  oleh jarum ose steril lalu diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C, kemudian diamati pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes yang  terbentuk.  Kadar  terkecil  yang  dapat menghambat  pertumbuhan bakteri  disebut konsentrasi hambat minimum (KHM) (Kumar, 2016). Tabel 1 . Formula Sediaan Sabun Cair (% b/v) Kontrol (-) F1 F2 F3 F4 Kontrol (+) Fungsi bahan Ekstrak daun pala - 2 4 8 10 Zat Aktif Sodium Lauril Sulfat 5 5 5 5 5 Surfaktan NaCl 5 5 5 5 5 Sediaan jadi yang beredar di pasaran “JF Sulfur” Peningkat busa Propilenglikol 5 5 5 5 5 Emolient atau pelembab Asam Sitrat 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 Pengawet Aquadest Ad Ad Ad Ad Ad Pelarut (ml) 100 100  100  100  100
Atika Pratiwi, Dkk: Uji Daya Hambat Sediian Sabun Cair Ekstrak Daun Pala ...

## Formulasi Sediaan Sabun Cair
Pembuatan Formula Sabun Ekstrak Daun

## Pala
Formulasi  sabun  cair  mengacu  pada (Sari,  2018).  Konsentrasi  ekstrak  daun  pala mengacu pada (Rizal, 2017). Formula dapat dilihat  pada  Tabel  1.  Ditimbang  masing- masing  bahan  yang  diperlukan  sesuai  yang tertera pada lampiran 3.  Dimasukan sodium lauril sulfat kedalam beaker glass kemudian ditambahkan aquadest dan diaduk menggunakan  batang  pengaduk  sampai larut.  Lalu  ditambahkan  NaCl  dan  sedikit aquadest kemudian ditambahkan asam sitrat dan propilenglikol diaduk hingga larut.
Kemudian  ditambahkan  ekstrak  daun pala  yang  telah  dilarutkan  oleh  aquadest, diaduk  hingga  homogen.  Setelah  semua bahan  sudah  tercampur  lalu  dicukupkan dengan aquadest  hingga  100 ml. Sabun cair dimasukan kedalam wadah bersih yang telah disiapkan.  Pembuatan  sabun  ekstrak  daun pala  disesuaikan  dengan  masing-masing konsentrasi.

## Evaluasi Sediaan Sabun Pengujian Organoleptis
Uji organoleptik dilakukan untuk melihat  tampilan  fisik  sediaan  dengan  cara melakukan  pengamatan  terhadap  bentuk, warna  dan  bau  dari  sediaan  yang  telah dibuat (Depkes RI, 1995).

## Pengujian Homogenitas
Uji homogenitas dilakukan dengan cara tiap  formula  sabun  ditimbang  sebanyak  0,1 gram  diletakan  pada  objek  glass,  kemudian diamati.

## Pengujian Nilai pH
Dilakukan
dengan
mencelupkan
elektroda  pH  meter  pada  buffer  7  yang kemudian dimasukan kedalam setiap sediaan  sabun  yang  akan  diuji.  Setelah elektroda  tercelup,  nyalakan  pH  meter kemudian  didiamkan  hingga  layar  pada  pH meter  menunjukan  angka  yang  stabil (Septiani dkk, 2011).

## Penentuan bobot jenis
Piknometer  yang  sudah  bersih  dan kering  ditimbang  dan  dicatat  beratnya. selanjutnya  aquadest  dan  sabun  masing- masing  dimasukan  kedalam  piknometer dengan  menggunakan  pipet  tetes  sampai penuh.  piknometer  ditutup  hingga  volume cairan  meluap,  kemudian  bersihkan  cairan yang  terbuang  pada  permukaan  luar  pikno dengan menggunakan tissue.

## Tinggi Busa
Ditimbang  1  gram  sabun  kemudian dilarutkan dalam 10 ml  aquadest, kemudian diambil  sebanyak  5  ml  sabun  yang  telah dilarutkan,  kemudian  dimasukan  kedalam tabung  reaksi  lalu  dikocok  tabung  reaksi dengan  cara  membolak-balikan  tabung reaksi.  Busa  yang  terbentuk  kemudian diamati  dan  dicatat  tinggi  busa  sabun (Rafika, 2017).

## Pengujian Lebar Daya Hambat (LDH)
Metode pengujian yang digunakan adalah metode difusi kertas cakram. Inokulum bakteri diambil 0,2 ml dicampur kedalam 15 ml TSA yang telah disterilkan dan didinginkan dengan cara  aseptis,  kemudian  cawan  petri  digerakan melingkar  untuk  menyebarkan  bakteri  secara merata.  Selanjutnya  setelah  agar  memadat, diletakan  kertas  cakram  yang  mengandung larutan uji : sabun  ekstrak  daun  pala,  kontrol  positif dan  basis.  Kemudian  diinkubasi  selama  24 jam pada suhu 37˚C. Setelah diinkubasi, lalu diamati  dan  diukur  LDH  masing-masing cakram terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus .  LDH  diukur dari diameter  zona  bening yang  terbentuk. Semakin  besar  LDH  menunjukan  semakin besar aktivitas antibakterinya (Anonim, 1993).
Gambar 1. Gambar Letak Kertas Cakram
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup

## Analisis data
Untuk  mengetahui  pengaruh  efektivitas berbagai  konsentrasi  sabun  ekstrak  daun  pala sebagai  antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus maka  pengukuran lebar daerah hambat  (LDH) dianalisis menggunakan rancangan  acak  lengkap  (RAL)  dengan  6 perlakuan  (4 perlakuan  dengan  berbagai konsentrasi  sabun  ekstrak  daun  pala,  1 perlakuan dengan kontrol positif menggunakan  sabun  Jf  Sulfur,  dan  1 perlakuan  dengan  basis  sabun  sebagai kontrol negatif).
Jika  terdapat  perbedaan  pada  setiap kelompok  maupun  konsentrasi  formula, maka diuji  lanjut menggunakan Uji  Duncan dengan menggunakan aplikasi SPSS 17.0.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi  tanaman  yang  telah dilakukan  di  Lembaga  Ilmu  Pengetahuan Indonesia (LIPI) Jalan Ir. H. Juanda No. 13, PO  BOX  309  Bogor  16003,  menunjukan bahwa  tanaman  yang  digunakan  dalam penelitian  merupakan  tanaman  pala  jenis
Mysristica
fragrans
Houtt
suku Myristicaceae.
Hasil  ekstrak  yang  diperoleh  adalah ekstrak  kering  berwarna  hitam  dengan rendemen  11,75%.  Hasil  kadar  air  yang diperoleh dari serbuk dan ekstrak daun pala memenuhi  persyaratan  yaitu  5,6869  %Dan 3,8648 % kurang dari 10%. Hasil kadar abu total yang diperoleh dari serbuk dan ekstrak daun  pala  memenuhi  persyaratan  yaitu 4,3343 % dan 3,5689 % kurang dari 10%.

## Uji Fitokimia
Tabel 2. Hasil Uji Fitokimia Serbuk dan Ekstrak Kering Daun Pala
Identifikasi Senyawa Serbuk simplisia daun pala Ekstrak kering daun pala Alkaloid + + Flavonoid + + Saponin + + Steroid + + Tanin + +
Keterangan :
(+) mengandung senyawa fitokimia (-) tidak mengandung senyawa fitokimia

## Konsentrasi Hambat Minimum
Bakteri Staphylococcus aureus , konsentrasi 0,1% masih banyak bakteri yang tumbuh,  konsentrasi  0,3%  koloni  bakteri mulai berkurang, sementara pada konsentrasi 0,5% koloni bakteri sudah tidak terlihat  pada  media  agar.  Sedangkan  hasil KHM  Ekstrak  untuk  bakteri Propioni bacterium  acnes pada konsentrasi  10%,  25% dan  50%  adalah  negatif  sehingga  bakteri masih dapat tumbuh pada media agar.
Gambar 2. Hasil Uji Konsentrasi Hambat Minimum terhadap bakteri
Gambar  3. Hasil  Uji  Konsentrasi Hambat Minimum terhadap bakteri
Propionibacterium acnes

## Pengujan Organoleptis
Tabel 3. Hasil evaluasi organoleptik sediaan sabun cair Pengujian F0 F1 F2 F3 F4 Aroma Tidak berbau Khas pala Khas pala Khas pala Khas pala Bentuk Cair Cair Cair Cair Cair Warna Bening tidak berwarna Coklat  Coklat  Coklat  Coklat
Hasil  evaluasi  sediaan  yang  didapat memiliki  bentuk  yang  cair,  aroma  yang didapat memiliki aroma yang khas dari daun pala.  Sedangkan  warna  yang  didapat  pada sediaan  sabun  cair  berwarna  coklat,  warna coklat pada sediaan sabun cair mengindikasikan  adanya  ekstrak  daun  pala
Atika Pratiwi, Dkk: Uji Daya Hambat Sediian Sabun Cair Ekstrak Daun Pala ...
yang  berbeda  dengan  basis  sabun  yaitu bening tidak berwarna.
Gambar 4. Sediaan Sabun Cair Ekstrak Daun Pala.

## Pengujian Homogenitas
Hasil  evaluasi  homogenitas  sediaan sabun  cair  ekstrak  daun  pala  yang  didapat tidak semua homogen, karena masih adanya endapan  didalam  sediaan  tersebut.  Hal  ini dikarenakan  zat  aktif  yang  digunakan berupa ekstrak kering, ekstrak tersebut tidak mudah  larut  sempurna  dalam  pelarut  air. Selain  itu,  homogenitas  dapat  dipengaruhi dengan proses pengadukan dalam pembuatan formulasi.
Pengujian Nilai pH Tabel 4. Hasil uji pH sediaan sabun cair
ekstrak daun pala Formula Nilai pH F0 2,340 F1 2,372 F2 2,383 F3 2,614 F4 2,647
Berdasarkan  hasil  pengujian  pH  pada sediaan  sabun  cair  tidak  memenuhi  syarat, Penurunan pH bisa disebabkan oleh penambahan  bahan  penyusun  sabun  yaitu asam  sitrat  (Apriani,  2013).  Secara  umum, produk  sabun  cair  memiliki  pH  yang cenderung  basa,  hal  ini  dikarenakan  bahan
dasar  penyusun  sabun  cair  yaitu  KOH, bersifat basa kuat.
Berdasarkan hasil yang diperoleh terbukti  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi ekstrak  yang  digunakan  semakin  tinggi  daya busa  yang  didapatkan.  Tinggi  busa  yang dihasilkan  dari  sediaan  sabun  disebabkan karena  adanya  kandungan  saponin  di  dalam ekstrak  daun  pala,  adapun  karakteristik  busa sabun dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor yaitu adanya bahan surfaktan, penstabil busa dan  bahan-bahan  penyusun  sabun  cair lainnya (Amin, 2006).

## Pengujian  Lebar  Daerah  Hambat  (LDH) Sediaan Sabun Cair
Pengujian aktivitas antibakteri sediaan sabun  daun  pala  dilakukan  menggunakan Lebar  Daerah  Hambat  (LDH)  terhadap  6 perlakuan  dengan  4  kali  pengulangan, dilakukan  pada  4  formula,  kontrol  positif dan  negatif.  Hasil  dari  uji  antibakteri  dapat dilihat pada gambar 5.
Gambar 5. Hasil Uji Lebar Daerah Hambat.
Tabel  5. Hasil  nilai  LDH  Sabun  Cair Ekstrak Daun Pala
Formula Nilai rata- rata LDH SD Kategori F1  2% 9,875 0,414 Sedang (5-10) F2  4% 10,500 0,353 Kuat (10-20) F3  8% 10,750 0,250 Kuat (10-20) F4  10% 11,875 0,216 Kuat (10-20) K+ 13,250 0,250 Kuat (10-20) K- - - - Sumber kategori : Davis & Stout (1971)
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Pengujian Bobot Jenis Tabel 6. Hasil Bobot Jenis sediaan sabun
cair ekstrak daun pala Formula Hasil BJ (g/ml) F0 (basis) 1,0506 F1 1,0506 F2 1,0521 F3 1,0664 F4 1,0474
Bobot jenis sabun cair pada penelitan ini telah memenuhi  standar  dan  mudah  dibersihkan dengan  air  mengalir,  karena  memiliki  bobot jenis yang mendekati dengan bobot jenis air.

## Pengujian Tinggi Busa
Berdasarkan  hasil  pengujian terlihat dimana  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak pada  formula  maka  akan  semakin  besar  lebar daerah  hambat  yang  diperoleh.  Zona  hambat dari  kontrol  positif  lebih  besar  dari  semua konsentrasi  sediaan,  hal  ini  menunjukan bahwa  kontrol  positif berpengaruh  terhadap bakteri Staphylococcus  aureus sehingga aktivitas  antibakterinya  tegolong  kuat. Sedangkan  pada  kontrol  negatif  tidak terdapat aktivitas antbakteri, hal ini menunjukan  bahwa  pengaruh  aktivitas antibakteri yang diperoleh.
Tabel 7. Hasil pengamatan tinggi busa
Formula Tinggi Busa (mm) F0 (basis) 67 F1 90 F2 115 F3 125 F4 135
Pada  formula  berasal  dari  zat  aktif ekstrak daun pala.
Berdasarkan hasil analisis ragam dengan  metode  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL)  maka  dapat  dinyatakan  bahwa sediaan  sabun  cair  ekstrak  daun  pala
memberikan  pengaruh  yang  berbeda  nyata terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dengan terbentuknya daerah hambat disekitar kertas cakram  yang berisi formula sabun cair ekstrak daun pala. Hasil  analisis  ragam  dapat  dilihat  pada lampiran 9, berdasarkan hasil analisis ragam terlihat  bahwa  adanya  perbedaan  antara  6 jenis formula yang dilakukan terhadap lebar daerah  hambat  bakteri.  Untuk  mengetahui pengaruh  antara  formula  maka  dilanjutkan uji lanjut Duncan.

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Sediaan  sabun  cair  ekstrak  daun  pala memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus.  Semakin  tinggi konsentrasi ekstrak daun pala yang digunakan semakin besar nilai Lebar Daerah Hambat  terhadap  bakteri  Staphylococcus aureus.  Ekstrak  daun  pala  tidak  dapat menghambat pertumbuhan bakteri Propionibacterium  acnes .  Formula  yang digunakan  tidak  memenuhi  persyaratan  pH sebagai sediaan sabun cair.

## Saran
Perlunya  reformulasi  sediaan  sabun  cair agar  menghasilkan  pH  yang  memenuhi syarat,  perlu    dilakukannya    uji    panelis untuk  mengukur  tingkat  kesukaan  dari sediaan  serta  perlu  dilakukannya  uji viskositas untuk mengukur tingkat kekentalan dari sediaan.

## DAFTAR PUSTAKA
Amin,  H.  (2006). Kajian  penggunaan kitosan sebagai pengisi dalam pembuatan  sabun  transparan . Fakultas Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  Institut Pertanian Bogor.
Anonim.  (1993). Penapisan  Farmakologi, Pengujian  Fitokimia  dan  Pengujian Klinik . Kelompok Kerja Ilmiah Pengembangan  dan  Pemanfaatan  Obat Bahan Alam.
Apriani,  D,.  (2013). Formulasi  Sediaan Sabu  Mandi  Cair  Minyak  Atsiri  Jeruk Nipis  (Citrus  aurantifolia)  dengan
Cocamid DEA sebagai surfaktan .
Skripsi  Universitas  Muhammadiyah Surakarta, Surakarta.
Chomnawang, M.T.,  Suvimol surrasmo,
Veena  S.  Nukoolkarn,  dan  Wandee Gritsanapan.  (2007) . Effect  of  Garcinia mangostana  on  inflammations  caused by Propionibacterium acnes.
Fitoterapia . Vol.78.(6): 401-408. Davis  &  Stout.  (1971).  Disc  Plate  Method of  Microbiologycal  Antibiotic  Essay. Journal Microbology Vol 22 no.4.
Depkes,  RI.  (1985). Cara  pembuatan simplisia . Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan. Jakarta.
Depkes,  RI.  (1995). Materia  media edisi  V .
Direktorat Jendal Pengawasan Obat dan Makanan. Jakarta.
Depkes,  RI.  (2000). Parameter  standar umum  ekstrak  tumbuhan  obat . Cetakan I.  Direktorat  Jendral  Pengawasan  Obat dan  Makanan,  Direktorat  Pengawasan Obat Tradisional. Jakarta.
Dipiro J.T., Talbert R.L., Yee G.C., Matzke G.R., Wells B.G., and Posey
L.M.,
(2009). Pharmacoterapy A
phatophyciologic  approach  7th  edition , Mc Graw Hill, New York. Hanani,  E.  (2015). Analisis  fitokimia . penerbit buku kedokteran EGC. Jakarta. Hernani, Bunasor, T.K,. dan Fitriati. (2010). Formula  sabun  transparan  antijamur dengan  bahan  aktif  ekstrak  lengkuas (Alpinia galanga L. Swartz.). Bul. Litro . Vol.21(2) : 192-205.
Kumar,
S. (2016). Essentials of Microbiology .  Jaypee Brothers  Medical Publisher, New Delhi. pp. 560-561. NCCLS.  (2003).  Method  for  Delution Antimcobial  Susceptibility  Test  dor Bacteria That Grow Aerobically.
Approve Standard 6.
Parekh,  J.  dan  Canda,  S.  (2006).  In  Vitro Antimicrobial  Activity  of  Trata  Natans
L.  Fruit  rind  Extracted  in  different solvent. Gujarat : Saurashtra University Poeloengan,  M,  &  Pratiwi,  P.  (2010).  Uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  kulit  buah manggis  (Garcinia  mangostana  Linn).
Media penelitian c dan Pengembangan  kesehatan , 20(2):  65-
69.
Rafika, Sari.  (2017) . Pengujian  aktivitas antibakteri  sabun  cair  dari  ekstrak  kulit daun lidah buaya . Pontianak: universitas TanjungPura. 4(3).
Rizal,  Fakhraina  Yamami.  (2017).  Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pala  terhadap Escherichia  coli  dan Staphylococcus  aureus Skripsi sarjana fakultas farmasi : Universitas Sumatera Utara .
Sari, R. K.  (2018). Formulasi  dan Uji  Daya Hambat Sediaan Sabun Cair Kombinasi Ekstrak  Daun  sirih  dan  Kopi  Robusta. Skripsi  sarjana  fakultas  farmasi  : Universitas Pakuan Bogor Sarlina, Abdul Rahman Razaq, dan Muhamad Rinaldhi Tandah. (2017). Uji Aktivitas  Antibakteri  Sediaan  Gel Ekstrak  Daun  Sereh  (Cymbopogin nardus  L.  Rendle)  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus
Penyebab jerawat .  Jurnal  farmasi  galenika Vol. 3(2) : 143-149.
Septiani,  Shanti. Wathoni,  Nasrul dan Mita, Soraya  R.  (2011). Formulasi  Masker Sediaan  Gel    dari    ekstrak    etanol    biji melinjo  (Gnetum  gnemon) .  Bandung  : Universitas Padjajaran.
Suryana,  S.,  Yen  Yen  Ade  Nuraeni,  dan Tina  Rostinawati.  (2017).  Aktivitas Antibakteri    Ekstrak  Etanol  dari  lima tanaman terhadap
bakteri Staphylococcus  epidermidis  dengan metode Mikrodilusi M7-A6CLSI.
IJPST . Vol.4(1): 1-9.