## Jurnal Analis Laboratorium Medik
Avalilable Online http://e-journal.sari-mutiara.ac.id/index.php/ALM

## UJI DIAGNOSIS NS1, IgG DAN IgM DENGUE METODE IMMUNOKROMATOGRAFI DAN ELISA
Suryanata Kesuma
1 Poltekkes Kemenkes Kalimantan Timur, DIII Teknologi Laboratorium Medis Email: suryanatakesuma@gmail.com

## ABSTRACT
Dengue fever is a disease caused by the dengue virus (DENV). Detection of NS1 antigen can be useful for early confirmation of DENV infection. NS1 antigen can be detected from the first day of illness and lasts up to 9-10 days. Other supporting examinations are dengue virus IgG  and IgM examinations. The purpose of this study was to review the sensitivity and specificity of the dengue  virus  NS1,  IgG,  and  IgM  tests  through  literature  testing.  This  type  of  research  is descriptive. The literature used is scientific journals which are the top journals searched using the google search engine and contains complete information and data related  to the sensitivity and specificity of NS1, IgG, and IgM Dengue Virus examinations. Based on the review, it  was found that the sensitivity of the NS1 antigen in the Rapid Immunochromatographic method was in  the  range  of  48%-92%  and  specificity  was  73%-100%,  in  the  ELISA  method  the  sensitivity range  was  42%-84%  and  specificity  was  89%-99%.  In  the  examination  of  IgG  and  IgM antibodies  using  the  Rapid  Immunochromatography  method,  the  sensitivity  ranges  from  6%- 73%  and  specificity  36%-100%.  Examination  of  IgG  and  IgM  antibodies  using  the  ELISA method obtained sensitivity in the range of 6%-58% and specificity 56%-100%. The results of the  review  conducted  showed  that  the  sensitivity  of  the  NS1,  IgG,  and  IgM  tests  for  Dengue Virus  with  the  Rapid  Immunochromatography  method  was  better  than  the  ELISA  method,  but the specificity for the NS1, IgG, and IgM tests for Dengue Virus ELISA method was better than the  Rapid  Immunochromatography  method.  In  addition,  the  Rapid  Immunochromatography method  of  NS1  antigen  examination  showed  higher  accuracy  than  IgG  and  IgM  antibodies  in screening for dengue virus infection.
Keywords : Dengue Virus, NS1, IgG, IgM, Rapid Immunokromatografi, ELISA

## PENDAHULUAN
Demam  dengue  merupakan  penyakit menular  yang  disebabkan  oleh  virus dengue (DENV) yang dapat
ditransmisikan  oleh  gigitan  nyamuk
Aedes  aegypti,  Aedes  albopictus dan Aedes  polynesiensis sebagai  vector (Situmorang & Effrata, 2022) . Di Indonesia  penyakit  ini  merupakan penyakit endemik dengan angka kejadian  nasional  24,75  kasus  per 100.000  penduduk  dan  mengakibatkan
467 kematian pada tahun 2018. Menurut data  WHO,  Asia  Pasifik  menanggung 75%  dari  beban  dengue  di  dunia  antara tahun 2004 – 2010, sementara Indonesia dilaporkan  sebagai  negara  ke-2  dengan kasus  DBD  terbesar  diantara  30  negara wilayah  endemis  (Kemenkes  RI,  2019; Siti Maimunah, 2018) Metode  diagnostik  utama  yang  tersedia yaitu  kultur  virus,  deteksi  RNA  virus dengan  RT-PCR,  dan  tes  serologis seperti  IgM  (MAC-ELISA).  Namun untuk  diagnosis  dini  demam  berdarah
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
masih  menjadi  permasalahan,  karena semua pemeriksaan ini memiliki kelemahannya  sendiri.  Isolasi  virus dengan kultur sel dan deteksi selanjutnya  dengan    imunofluoresense, meskipun  gold  standar  namun  tidak dapat  digunakan  sebagai  diagnostik rutin  karena  rendahnya  sensitivitas, prosedur yang melelahkan dan memakan  banyak  waktu.  Dan  pada metode molekular (RT-PCR)
membutuhkan  personel  khusus  yang telah  terlatih,  kebutuhan  peralatan canggih  juga  faktor  biaya  menjadikan metode  tersebut  juga  tidak  dapat digunakan  sebagai  diagnostik  rutin (Shenoy  et  al.,  2014;  Zuardi  et  al., 2016).
Namun  saat  ini  terdapat  beberapa paramter yang sering digunakan dilaboratorium dalam mendeteksi infeksi  virus  dengue  yaitu  pemeriksaan antigen  NS1,  antibodi  IgG  dan  IgM. Bahkan  di  negara-negara  endemik  pun lebih  banyak  tersedia  pemeriksaan serologis  dengue  daripada  pemeriksaan virologi.  Pemeriksaan  ini  mudah  untuk dilakukan  dan  tidak  terlalu  mahal. Deteksi  antigen  NS1  dapat  berguna untuk  konfirmasi  awal  infeksi  DENV. Ditemukannya  antigen  NS1  didalam serum  pasien  menunjukkan  bahwa pasien  terinfeksi  DENV,  yang  dapat dideteksi  sejak  hari  pertama  sakit  dan akan bertahan hingga 9-10 hari. Protein non-struktural 1 (NS1) adalah
glikoprotein  dengan  BM  44.000  - 49.000  Da  yang  sangat  terkonservasi penting  untuk  kelangsungan  hidup DENV  dan  diproduksi  baik  dalam bentuk membran maupun sekretori oleh virus.    NS1  ini  beredarah  didalam peredaran  darah  selama  tahap  akut, sehingga  dapat  ditemukan  di  serum penderita  (Santoso  dkk,  2020,  Sakinah, 2019  dan  Shenoy  dkk,  2014)  (Santoso et al., 2020; Shenoy et al., 2014). Pemeriksaan  serologis  yang  banyak digunakan  juga  yaitu  pemeriksaan
antibodi  IgG  dan  IgM  virus  dengue. ELISA IgG dan IgM memiliki keuntungan karena lebih mudah dilakukan juga cocok untuk pengawasan dan  studi  skala  besar.  Banyak  tes ELISA  komersial  dan  standar  untuk deteksi  antibodi  IgM  dan  IgG  juga menjadi  tersedia.  Beberapa  penelitian telah  dilakukan  untuk  membedakan infeksi  DENV  primer  dan  sekunder menggunakan  rasio  IgG  dan  IgM  di berbagai hari timbulnya gejala. Antibodi ini dapat diperiksa setelah 3-4 hari setelah onset gejala (Cucunawangsih  et  al.,  2015;  Pal  et  al., 2014,  2015;  Palomares-Reyes  et  al., 2019). Uji diagnostik dilakukan untuk mengetahui apakah metode yang digunakan  valid  atau  tidak,  dapat digunakan  atau  tidak  dalam  mendeteksi dini virus dengue. Dibeberapa daerah di Indonesia  tidak  semua  rumah  sakit memiliki  alat  canggih  PCR,  maka  dari itu perlu diadakannya pengujian diagnostik  pemeriksaan  antigen  NS1 dan  antibodi  IgG  dan  IgM  dalam screening  test  penyakit  DBD.  Tujuan dari  penelitian  ini  yaitu  melakukan review  sensitivitas  dan  spesifisitas pemeriksaan  NS1,  IgG  dan  IgM  Virus Dengue.

## METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian deskriptif.  Data  peneltian  ini  adalah jurnal yang dapat diakses secara online. Kriteria  jurnal  yang  dijadikan  data adalah  jurnal  teratas  yang  dicari menggunakan searching  engine google dan  berisikan  informasi  dan  data lengkap terkait sensitifitas dan spesifisitas  pemeriksaan  NS1,  IgG,  dan IgM Virus Dengue.
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1. Hasil senstivitas dan spesifisitas antigen NS1 metode Rapid

## Immunokromatografi
No. Gold Standard Merk Reference NS1 Sensitivitas Spesifisitas 1 92% 96% RT - PCR SD Bioline Dengue NS1 Ag Uji Diagnostik Pemeriksaan Antigen Nonstruktural 1 untuk Deteksi Dini Infeksi Virus Dengue pada Anak (Megariani et al., 2016)
2 71% 100% RT-PCR Answer Dengue Ag Rapid Test Diagnostic accuracy of 5 different brands of dengue virus non- structural protein 1 (NS1) antigen rapid diagnostic tests (Rapid Immunokromatografi) in Indonesia (Santoso et al., 2020)
3 73% 100% RT-PCR Rapid Dengue NS1 Antigen Test Card (Xiamen Boson Biotech) Diagnostic accuracy of 5 different brands of dengue virus non- structural protein 1 (NS1)
antigen rapid diagnostic tests (Rapid Immunokromatografi) in Indonesia (Santoso et al., 2020)
4 73% 100% RT-PCR SD Bioline Dengue NS1 Ag Diagnostic accuracy of 5 different brands of dengue virus non- structural protein 1 (NS1) antigen rapid diagnostic tests (Rapid
Immunokromatografi) in Indonesia (Santoso et al., 2020)
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
5 80% 100% RT-PCR Dengue NS1 BSS (Biosynex) Diagnostic accuracy of 5 different brands of dengue virus non- structural protein 1 (NS1) antigen rapid diagnostic tests (Rapid Immunokromatografi) in Indonesia (Santoso et al., 2020)
6 74% 100% RT-PCR Panbio Dengue Early Rapid Diagnostic accuracy of 5 different brands of dengue virus non- structural protein 1 (NS1) antigen rapid diagnostic tests (Rapid Immunokromatografi) in Indonesia (Santoso et al., 2020) 7 63,30% 100%
RT-PCR Humasis Comparative evaluation of three dengue duo rapid test kits to detect NS1, IgM, and IgG associated with acute dengue in children in Myanmar (Jang et al., 2019) 8 48,62% 100%
RT-PCR SD Bioline Comparative evaluation of three dengue duo rapid test kits to detect NS1, IgM, and IgG associated with acute dengue in children in Myanmar (Jang et al., 2019) 9 79,82% 100% RT-PCR CareUS Comparative evaluation of three dengue duo rapid test kits to detect NS1, IgM, and IgG associated with acute dengue in children in Myanmar
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
(Jang et al., 2019) 10 90,90% 100% RT-PCR SD Dengue Duo Comparison of two rapid diagnostic tests during a large dengue virus serotype 3 outbreak in the Solomon Islands in 2013 (Liu et al., 2018) 11 92,60% 78,80% RT-PCR Dengue Ag Rapid Test- Cassette Comparison of two rapid diagnostic tests during a large dengue virus serotype 3 outbreak in the Solomon Islands in 2013 (Liu et al., 2018) 12 70,40% 99,20% RT - PCR BioRad NS1 Ag STRIP Sensitivity and Specificity of a Novel Classifier for the Early Diagnosis of Dengue (Tuan et al., 2015) 13 89,70% 91,90% RT-PCR SD Bioline Evaluation of rapid diagnostic tests to detect dengue virus infections in Taiwan (Liu et al., 2020) 14 85,30% 94,60% RT-PCR Bio-Rad NS1 Evaluation of rapid diagnostic tests to detect dengue virus infections in Taiwan (Liu et al., 2020) 15 89,00% 73,00% RT-PCR CTK NS1 Evaluation of rapid diagnostic tests to detect dengue virus infections in Taiwan (Liu et al., 2020)
Saat  ini  pemeriksaan  infeksi  virus dengue  lebih  banyak  dilakukan  dengan mendeteksi  antigen  NS1  dan  juga antibodi  IgG  dan  IgM  walaupun pemeriksaan  gold  standardnya  yaitu
RT-PCR ( Reverse Transkiptase Polymerase Chain Reaction ). Pemeriksaan  ini  dipilih  karena  tidak
membutuhkan  waktu  yang  lama  dan juga harganya lebih terjangkau dibanding  dengan  RT-PCR.  Pengujian antigen  NS1,  antibodi  IgG  dan  IgM dapat dilakukan dengan metode imunokromatografi dan juga ELISA. RT-PCR dijadikan sebagai gold  standar pada pemeriksaan virus dengue
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
dikarenakan  pemeriksaan  ini  lebih sensitif  dan  juga  dapat  membedakan bermacam-macam  serotipe  dari  virus dengue.  Pemeriksaan  ini  juga  dapat dilakukan  pada  fase  akut.  Meskipun pemeriksaan  ini  lebih  sensitif  tetapi pemeriksaan ini juga memiliki kekurangan dimana
memerlukan personel  khusus  dalam  pengerjaannya, biaya yang relatif mahal, dan juga tidak semua  laboratorium  memiliki  alat canggih tersebut.
Berdasarkan  hasil tabel 1 pada nomor 1 diperoleh  hasil  nilai  sensitivitas  (92%) dan  spesifisitas  (96%)  yang  tinggi  pada pemeriksaan antigen NS1 dengan
metode  Rapid  Immunokromatografi  hal ini terjadi dikarenakan pada peneliti ini, waktu pengambilan sampel yang dilakukan  adalah  pasien  pada  demam hari  ke  1,2  dan  3.  Hasil  peneliti menunjukkan  pasien  pada  demam  hari ke-3  persentase  positif  lebih  banyak dibanding hari ke-1 dan 2 (Megariani et al., 2016)
Berdasarkan  hasil  tabel  1  nomor 2,3,4,5,6 diperoleh hasil nilai sensitivitas dan spesifisitas pada pemeriksaan antigen NS1 dengan metode Rapid  Immunokromatografi dari  berbagai  merk  yang  berbeda  yaitu Answer  Dengue  Ag  Rapid  Test  (71% dan 100%), Rapid Dengue NS1 Antigen Test Card (73% dan 100%), SD Bioline Dengue  NS1  Ag  (73%  dan  100%), Dengue NS1 BSS (Biosynex) (80% dan 100%), dan Panbio Dengue Early Rapid (74%  dan  100%).  Didapatkan  pada merk  Dengue  NS1  BSS  (Biosynex) memiliki nilai sensitivitas dan spesifisitas  tertinggi  dibanding  dari merk-merk  yang  lain.  Semua  Rapid
Immunokromatografi  yang  dievaluasi menunjukkan  sensitivitas  yang  lebih tinggi terhadap infeksi primer.
Mekanisme  yang  mendasari  hal  ini diduga  disebabkan  oleh  pembentukan kompleks imun antara antigen NS1 dan
antibodi  IgG  yang  sudah  ada  yang reaktif  terhadap  DENV.  Peneliti  ini menemukan bahwa sampel yang dikumpulkan  pada  awal  hari  demam kurang  dari  4  hari  menunjukkan sensitivitas  yang  lebih  baik  daripada sampel  yang  dikumpulkan  pada  hari demam  lebih  dari  5  hari.  Peneliti  ini juga  menunjukkan  sensitivitas  lebih tinggi disemua merk pada orang dewasa di  atas  usia  14  tahun  dibandingkan dengan  anak  usia  14  tahun  ke  bawah (Santoso et al., 2020).
Berdasarkan  hasil  pada  tabel  1  nomor 7,8 dan 9 diperoleh nilai sensitivitas dan spesifisitas  pada  pemeriksaan  antigen NS1 yang berbeda-beda disetiap merknya. Studi ini menggunakan 3 jenis merk  yang  berbeda  yaitu  Humasis (63,30%  dan  100%),  SD  Bioline (48,62%  dan  100%),  dan  CareUs (79,82%  dan  100%)  dimana  masing- masing  memiliki  nilai  sensitivitas  yang tidak  cukup  tinggi  tetapi  untuk  nilai spesifisitas  dari  ketiga  merk  tersebut memiliki  nilai  yang  sama  yakni  100%. Hal  ini  terjadi  dikarenakan  pasien dengan  infeksi  sekunder  lebih  banyak dibanding pasien dengan infeksi primer. Waktu pengambilan sampel pada peneliti  ini  dikumpulkan  pada  demam hari ke 1 sampai 7. Sehingga hasil yang diperoleh  tidak  cukup  sensitif  dalam mendeteksi  infeksi  virus  dengue  (Jang et al., 2019).
Berdasarkan  tabel  1  nomor  10  dan  11 diperoleh  nilai  sensitivitas  yang  cukup tinggi  pada  kedua  merk  yakni  SD Dengue  Duo  (90,90%)  dan  Dengue  Ag Rapid  Test  Cassette  (92,60%).  Namun pada  merk  SD  Dengue  Duo  nilai spesifisitanya  lebih  tinggi  yaitu  100% dibanding pada merk Dengue Ag Rapid Test-Cassette  (78,80%).  Hal  ini  terjadi dikarenakan  pasien  dengan  infeksi primer jumlahnya lebih banyak dibanding pasien dengan infeksi sekunder. Kemudian waktu
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
pengambilan  sampel  diambil  pada pasien  dengan  demam  ≤  3  hari  (Liu  et al., 2018)
Berdasarkan tabel 1 nomor 12 menunjukkan  nilai  sensitivitas  dan spesifisitas  yang  cukup  tinggi  pada pemeriksaan antigen NS1 dengan metode Rapid  Immunokromatografi yaitu 70,40% dan 99,20% dengan merk BioRad  NS1  Ag  Strip.  Pada  studi  ini berdasarkan  ukuran  sampel  yang  besar peneliti mendemonstrasikan dengan presisi tinggi sensitivitas diferensial dari NS1  Ag  STRIP  untuk  serotipe  DENV yang berbeda. Tes ini sensitif (antara 75 - 85%) untuk infeksi DENV-1, -3 dan - 4,  tetapi  kurang  sensitif  pada  infeksi DENV-2  (46,4%).  Sensitivitas  yang lebih  rendah  sebagian  disebabkan  oleh sebagian  besar  infeksi  DENV-2  yang dikaitkan  dengan  respons  serologis sekunder,  meskipun  peneliti  mencatat sensitivitas  juga  rendah  pada  primer infeksi DENV-2 (Tuan et al., 2015) Berdasarkan  hasil  pada  tabel  1  nomor 13,14 dan 15 diperoleh nilai sensitivitas dan  spesifisitas  pada  pemeriksaan antigen NS1 yang berbeda-beda disetiap merknya.  Studi  ini  menggunakan  3 merk  yang  berbeda  yaitu  SD  Bioline (89,70%  dan  91,90%),  Bio-Rad  NS1 (85,30%  dan  94,60%)  dan  CTK  NS1 (89%  dan  73%)  dimana  masing-masing memiliki nilai sensitivitas dan spesifisitas berbeda. Sensitivitas
tertinggi  yaitu  pada  merk  SD  Bioline dan spesifisitas tertinggi pada merk Bio- Rad NS1 (Liu et al., 2020) Jika  dibandingkan  dengan  hasil  pada tabel  1  nomor  1,4,8  dan  13  terdapat merk  yang  sama  digunakan  tetapi  nilai sensitivitas nya berbeda, seperti peneliti Megariani (2014), Santoso (2020), Jang 2018)  dan  juga  Liu  (2020)  sama-sama menggunakan  merk  SD  Bioline  tetapi nilai  sensitivitas  nya  berbeda  ini dikarenakan  oleh  faktor  pengambilan waktu  sampel  dan  juga  infeksi  primer dan sekunder. Nomor 1 waktu pengambilan  pada  demam  hari  ke  1-3, nomor  4  pada  demam  hari  <  4  >  4, pada  nomor  8  demam  hari  ke  3-7,  dan pada nomor 13 demam hari ke 0-6. NS1 akan  terbentuk  pada  demam  hari pertama  dan  akan  meningkat  bahkan sampai  hari  ke  7.  Namun  lama kelamaan  NS1  ini  akan  hilang  dan antibodi  akan  terbentuk.  Sehingga waktu pengambilan sampel ini sangatlah berpengaruh terhadap sensitivitas alat Rapid Immunokromatografi tersebut. Kemudian  faktor  infeksi  sekunder  dan primer,  NS1  pada  metode  Rapid Immunokromatografi lebih sensitif pada infeksi primer dibanding infeksi sekunder  (Jang  et  al.,  2019;  Liu  et  al., 2020; Megariani et al., 2016; Santoso et al., 2020)

## Tabel 2. Hasil senstivitas dan spesifisitas antigen NS1 metode ELISA
No. NS1 Gold Standar Merk Reference Sensitivitas Spesifisitas 1 84% 98% RT - PCR InBios DENV Detect™ Serodiagnosis of dengue virus infection using commercially available antibody and
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
NS1 antigen
ELISAs (Granger et al., 2017) 2 42% 89% RT - PCR Euroimmun ELISA Dengue diagnosis in an endemic area of Peru:
Clinical characteristics and positive frequencies by RT-PCR
and serology for NS1, IgM, and IgG (Palomares- Reyes et al., 2019) Selain metode Rapid Immunokromatografi, pemeriksaan
antigen  NS1  pun  dapat  dilakukan dengan  metovde  ELISA.  Berdasarkan hasil  pada  tabel  2  nomor  1  diperoleh nilai  sensitivitas  dan  spesifitas  yang cukup  tinggi  yaitu  84%  dan    98%. ELISA  InBios  NS1  telah  dievaluasi sebelumnya  dengan  kisaran  sensitivitas yang  dilaporkan  sebesar  86%  -  95%  di antara  pasien  dengan  durasi  gejala hingga  6  hari;  ini  mirip  dengan karakteristik  kinerja  yang  dilaporkan untuk  tes  antigen  NS1  format  ELISA lainnya.  Penelitian  ini  menunjukkan bahwa  menggunakan  InBios  ELISA untuk  menguji  antigen  NS1  saja  sudah cukup  efisien  untuk  diagnosis  infeksi DENV  yang  baru  didapat.  Berdasarkan hasil  pada  tabel  2  nomor  2  didapatkan nilai  sensitivitas  dan  spesifisitas  NS1 lebih  rendah  dibanding  dengan  hasil peneliti  Granger  yaitu  42%  dan  89%. Hal ini terjadi dikarenakan
pengumpulan  sampel  dilakukan  pada demam  ≤  7  hari.  Peneliti  ini
menggunakan  RT-PCR  sebagai  tes referensi (Granger et al., 2017; Palomares-Reyes et al., 2019)
Pada  hasil  sensitivitas  dan  spesifisitas antigen  NS1  memiliki  perbedaan  hasil, perbedaan hasil tersebut bisa dikarenakan  oleh  kit  yang  berbeda.  Kit yang menggunakan antibodi
monoklonal  dalam  mendeteksi  antigen NS1  hasilnya  hasilnya  lebih  baik dibanding kit yang menggunakan antibodi  poliklonal  ini  dikarenakan antibodi  monoklonal  lebih  spesifik dibanding  degan  antibodi  poliklonal. Antibodi  monoklonal  sebagai  dasar pemeriksaan  mempunyai  keunggulan dibanding poliklonal, yakni lebih mudah untuk distandarisasi pada laboratorium yang berbeda-beda. McBride dkk membandingkan antara kit monoklonal  dengan  poliklonal  dan didapatkan hasil kit monoklonal sensitivitasnya 73,6% dengan kit poliklonal 63,7%. Lalu ada juga peneliti
Dussart dkk yang membandingkan 2 kit tersebut  dengan  hasil  kit  monoklonal
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
lebih sensitif yakni 87,4% dibanding kit poliklonal  yaitu  60,4%  (Megariani  et
al., 2016)
Tabel 3. Hasil senstivitas dan spesifisitas antibodi IgG dan IgM metode Rapid Immunokromatografi No Rapid Immunokromatografi Gold Standar Merk Reference IgG IgM Sensitivitas  Spesifisitas  Sensitivitas Spesifisitas 1 6,60% 100% 9% 100,00% RT- PCR SD Dengue Duo Comparison of two rapid diagnostic tests during a large dengue virus serotype 3 outbreak in the Solomon Islands in 2013 (Liu et al., 2018)
2 73% 36,50%
47% 75,90% RT- PCR Dengue Ag Rapid Test- Cassette Comparison of two rapid diagnostic tests during a large dengue virus serotype 3 outbreak in the Solomon Islands in 2013 (Liu et al., 2018) Selain  metode  ELISA,  pemeriksaan antibodi  IgG  dan  IgM  dapat  dilakukan dengan metode Rapid Immunokromatografi. Berdasarkan hasil  pada  tabel  3  diperoleh  nilai sensitivitas  pada  pemeriksaan  antibodi
IgG  dan  IgM  dengan  metode  Rapid Immunokromatografi
pada merk Dengue  Ag  Rapid  Test-Cassette  lebih tinggi yaitu IgG (73% dan 36,50%) IgM (47%  dan  75,90%)  dibanding  dengan
merk  SD  Dengue  Duo  IgG  (6,60%  dan 100%)  IgM  (9%  dan  100%),  namun untuk  nilai  spesifisitasnya  diperoleh pada merk SD Dengue Duo lebih tinggi yakni  100%  dibanding  dengan  merk Dengue Ag Rapid Test-Cassette. Hal ini terjadi  dikarenakan  waktu  pengambilan sampel  dilakukan  pada  demam  hari  ke 0-6.  Hal  tersebut  sangat  berpengaruh terhadap  nilai  sensitivitas  antibodi  IgG dan IgM (Liu et al., 2018)
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
Tabel 4. Hasil senstivitas dan spesifisitas antibodi IgG dan IgM metode ELISA
No ELISA Gold Standar Merk Reference IgG IgM Sensitivitas Spesifisitas Sensitivitas Spesifisitas 1 58,20% 55,60% 40% 97,80% RT - PCR InBios DENV Detect ™ Serodiagnosi s of dengue virus infection using commercially available antibody and NS1 antigen ELISAs (Granger et al., 2017) 2 36% 91,40% 13% 90,40% RT - PCR Euroim mun ELISA Dengue diagnosis in an endemic area of Peru:
Clinical characteristic s and positive frequencies by RT-PCR
and serology for NS1, IgM, and IgG
(Palomares- Reyes et al., 2019)
3 6,60% 100% (-) (-) RT-PCR IgG capture ELISA Rapid test kits to detect NS1, IgM, and IgG associated with acute dengue in children in Myanmar (Jang et al., 2019) 4 (-) (-) 42,20% 100% real time qRT- PCR IgM capture ELISA Rapid test kits to detect NS1, IgM, and IgG
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
Berdasarkan hasil pada tabel 4 nomor 1 diperoleh nilai sensitivitas pada
pemeriksaan  antibodi  IgG  lebih  tinggi (58,20%) dibanding dengan nilai
sensitivitas  antibodi  IgM  (40%)  namun untuk  nilai  spesifisitas  berbanding terbalik  dimana  nilai  spesifisitas  pada pemeriksaan  antibodi  IgM  lebih  tinggi (97,80%) dibanding antibodi IgG (55,60%). Peneliti ini melakukan pemeriksaan  antibodi  IgG  dan  IgM dengan metode ELISA. Peneliti menyebutkan bahwa spesimen dikumpulkan dari pasien yang sakit akut di  mana  respon  anti-DENV  IgG mungkin tidak diharapkan, dan sementara keparahan penyakit ditentukan,  spesimen tidak  distratifikasi secara  merata  sepanjang  hari  p.f.o., kelompok  klasifikasi  dengue  WHO, atau  serotipe  DENV  (Granger  et  al., 2017) Berdasarkan hasil pada tabel 4 nomor 2 diperoleh nilai sensitivitas pada
pemeriksaan  antibodi  IgG  dengan metode  ELISA  lebih  tinggi  dibanding
(36%) dengan nilai sensitivitas antibodi IgM (13%), tetapi untuk nilai spesifisitas  kedua  pemeriksaan  ini memiliki  nilai  yang  hampir  sama  yaitu 91,40%  (IgG)  dan  90,40%  (IgM). Berdasarkan hasil pada tabel 4 nomor 3 dan  4  diperoleh  nilai  sensitivitas  pada pemeriksaan  antibodi  IgG  metode ELISA  sangat  rendah  (6,60%)  namun untuk  nilai  spesifisitasnya  tinggi  yakni 100%.  Pada  pemeriksaan  antibodi  IgM nilai  sensitivitas  nya  lebih  tinggi (42,20%) dibanding dengan nilai sensitivitas  antibodi  IgG  dan  nilai spesifisitasnya  pun  tinggi  yaitu  100%.
Ini  terjadi  dikarenakan  oleh  status infeksi  pasien,  pada infeksi  primer  IgM akan  lebih  sensitif  dibanding  infeksi sekunder  bahkan  IgM  dibeberapa  kasus tidak  terlihat.  Berbanding  terbalik dengan  antibodi  IgG  dimana  pada infeksi sekunder akan lebih sensitif. Berdasarkan hasil pada tabel 4 nomor 3 diperoleh  nilai  senstivitas  IgG  yang rendah  yakni  6,60%  dengan  spesifisitas 100%. Hal ini terjadi dikarenakan waktu pengumpulan  sampel  diambil  pada demam  ke  0-6  hari,  dimana  antibodi IgG  pada  infeksi  primer  baru  akan terbentuk  pada  demam  hari  ke-10. Berdasarkan hasil pada tabel 4 nomor 4 diperoleh  nilai  sensitivitas  IgM  42,20% dan  spesifisitas  100%.  Hal  ini  terjadi dikarenakan waktu pengambilan sampel yang  diambil  pada  penelitian ini  adalah pada  demam  hari  ke  2,  hal  tersebut menjadikan  sensitivitas  IgM  rendah karena  antibodi  ini  baru  akan  terbentuk pada  hari  ke  3-5  demam  pada  infeksi primer (Granger et al., 2017; Jang et al., 2019; Palomares-Reyes et al., 2019) Dari  hasil  tabel  3  dan  4  bisa  dilihat bahwa nilai sensitivitas dan
spesifisitasnya  tidak  lebih  tinggi  dari pemeriksaan  antigen  NS1.  Ini  bisa  jadi dikarenakan  antibodi  belum  terbentuk secara sempurna  ketika  dilakukan penelitian.  Antibodi  IgM  baru  dapat terbentuk 3-5 hari dan paling lambat 2-3 bulan  pada  infeksi  primer,  sedangkan antibodi  IgG  baru  akan  terbentuk  pada hari  ke  10.  Salah  satu  keterbatasan  kit IgM  /  IgG  Rapid  Immunokromatografi adalah ketidakmampuannya untuk mendeteksi  antibodi  DENV  pada  fase akut infeksi DENV, karena associated with acute dengue in children in
Myanmar
(Jang et al.,
2019)
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
membutuhkan  waktu  3–5  dan  10–14 hari untuk antibodi anti-DENV IgM dan IgG  menjadi  terdeteksi  (Jang  et  al., 2019)
Dari  data-data  yang  telah  dikumpulkan terhadap nilai sensitivitas dan
spesifisitas  pada  pemeriksaan  antigen
NS1 menggunakan metode Rapid Immunokromatografi  memiliki  nilai sensitivitas  dan  spesifisitas  yang  tinggi dalam  membantu  diagnosis  dini  infeksi virus dengue dibanding dengan pemeriksaan  antibodi  IgM  dan  IgG  ini dikarenakan  antibodi  IgM  baru  akan muncul setelah 3-5 hari gejala sedangkan IgG baru akan muncul 7 hari setelah  gejala  berbeda  dengan  NS1 antigen ini dapat dideteksi bahkan pada hari  pertama  gejala.  Alat  uji  diagnostik cepat  ini  dapat  memberikan  hasil kurang dari 20 menit dan sangat mudah untuk  dilakukan.  (Granger  et  al.,  2017; Liu et al., 2018, 2020; Megariani et al., 2016;  Santoso  et  al.,  2020;  Tuan  et  al.,
2015)
Perbedaan  kinerja  diagonstik  cepat  ini memiliki faktor-faktor yang menyebabkan  perbedaan  tersebut  yaitu merk  dari  yang  digunakan  oleh  peneliti masing-masing, lalu ada hari pengambilan  sampel  yang  tentunya setiap peneliti memiliki caranya masing-masing, kemudian infeksi primer  dan  sekunder  yang  memang menjadi  sebabnya  perbedaan  tersebut untuk  NS1  sendiri  antigen  ini  memang dapat  dideteksi  baik  sekunder  maupun primer namun beberapa peneliti mengemukakan  bahwa  titer  antigen lebih tinggi pada  infeksi primer daripada  sekunder  namun  antigen  ini dapat dideteksi dari hari pertama hingga 9  setelah  onset  gejala.  Sama  halnya dengan  antibodi  IgM  lebih  tinggi  pada infeksi primer dibanding dengan sekunder  bahkan  pada  beberapa  kasus tidak terlihat, berbeda halnya denga IgG pada  infeksi  primer  lebih  rendah
daripada  infkesi  sekunder  yang  titernya paling  tinggi  meskipun  pada  fase  akut dan  bertahan  sampai  10  bulan  kedepan. Dan  juga  serotipe  DENV  yang  berbeda mempengaruhi kinerja tes cepat
diagnostik  ini  (Jang  et  al.,  2019;  Liu  et al., 2020; Nugraheni et al., 2016) Berdasarkan  review  yang  dilakukan dengan  menganalisis  nilai  sensitivitas dan  spesifisitas  berdasarkan  jurnal- jurnal  yang  telah  dikumpulkan  bahwa pemerikasaan antigen NS1
menunjukkan  keakuratan  yang  lebih tinggi  dibanding  antibodi  IgM  dan  IgG dalam skirinning infeksi DENV dengan pembacaan  kurang  dari  20  menit.  Dari tabel  yang  ditunjukkan  hasil  antigen NS1 metode Rapid Immunokromatografi lebih sensitif
dibanding  dengan  pemeriksaan  lainnya. Mesikupun  begitu  tes  antigen  NS1 harus digunakan sebagai pelengkap dan bukan  digunakan  sebagai  pengganti untuk  tes  lainnya.  Jika  dikombinasikan dengan IgM capture ELISA, sensitivitas dan spesifitasnya terbukti meningkat. Review ini menunjukkan bahwa pemeriksaan  antigen  NS1  antibodi  IgG dan  IgM  baik  itu  pada  metode  Rapid Immunokromatografi  ataupun  ELISA memiliki  sensitivitas  dan  spesifisitas yang berbeda, sehingga kita benar-benar harus  memilih  mana  yang  dapat  kita gunakan  dan  yang  mana  harus  kita lakukan  pada  waktu  yang  tepat.  Karena jika  kita  melakukan  pemeriksaan  dihari atau  waktu  yang  salah  walaupun sensitivitas dan spesifisitas alat tersebut bagus  hasil  yang  didapat  tentu  tidak cukup  baik  dalam  mendiagnosis  infeksi virus  dengue  tersebut.    Keterbatasan dari review jurnal ini yaitu dimana hasil sensitivitas dan spesifisitas pada pemeriksaan  antigen  NS1  antibodi  IgG dan  IgM  hanya  mengambil  dari  jurnal- jurnal  saja  tidak  memasukan  hasil sensitivitas dan spesifisitas yang sebenarnya  dari  alat  tersebut  yang  bisa
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
diambil  dari  kit  insert  masing-masing alat

## SIMPULAN
Hasil review yang dilakukan didapatkan Sensitivitas pemeriksaan NS1, IgG, dan
IgM  Virus  Dengue  metode  Rapid Immunokromatografi lebih baik daripada metode ELISA, namun spesifisitas  pemeriksaan  NS1,  IgG,  dan IgM Virus Dengue metode ELISA lebih baik daripada Rapid Immunokromatografi.

## DAFTAR PUSTAKA
Cucunawangsih,  Lugito,  N.  P.  H.,  & Kurniawan, A. (2015). Immunoglobulin G (IgG) to IgM ratio in  secondary  adult  dengue  infection using  samples  from  early  days  of symptoms  onset. BMC  Infectious Diseases , 15 (1). https://doi.org/10.1186/s12879-015- 1022-9 Granger,  D.,  Leo,  Y.  S.,  Lee,  L.  K.,  & Theel,  E.  S.  (2017).  Serodiagnosis  of dengue virus infection using commercially  available  antibody  and
NS1  antigen  ELISAs. Diagnostic Microbiology  and  Infectious  Disease , 88 (2), 120–124. https://doi.org/10.1016/j.diagmicrobio .2017.03.015
Jang,  W.  S.,  Kwak,  S.  Y.,  May,  W.  L.,
Yang,  D.  J.,  Nam,  J.,  &  Lim,  C.  S.
(2019).  Comparative  evaluation  of three  dengue  duo  rapid  test  kits  to detect  NS1,  IgM,  and  IgG  associated with  acute  dengue  in  children  in
Myanmar. PLoS ONE , 14 (3). https://doi.org/10.1371/journal.pone.0 213451
Liu, L. T., Chen, C. H., Tsai, C. Y., Lin, P.
C.,  Hsu,  M.  C.,  Huang,  B.  Y.,  Wang, Y. H., & Tsai, J. J. (2020). Evaluation of  rapid  diagnostic  tests  to  detect
dengue  virus  infections  in  Taiwan. PLoS ONE , 15 (9 September). https://doi.org/10.1371/journal.pone.0 239710 Liu, L. T., Dalipanda, T., Jagilly, R., Wang, Y. H., Lin, P. C., Tsai, C. Y., Lai, W.
ter,  &  Tsai,  J.  J.  (2018).  Comparison of  two  rapid  diagnostic  tests  during  a large dengue virus serotype 3 outbreak in the Solomon Islands in 2013. PLoS
ONE , 13 (8). https://doi.org/10.1371/journal.pone.0 202304 Megariani, M., Mariko, R., Alkamar, A., &
Putra,  A.  E.  (2016).  Uji  Diagnostik Pemeriksaan  Antigen  Nonstruktural  1 untuk  Deteksi  Dini  Infeksi  Virus Dengue  pada  Anak. Sari  Pediatri , 16 (2), 121. https://doi.org/10.14238/sp16.2.2014. 121-7 Nugraheni, E., Sulistyowati, I., Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Bengkulu,  B.,  &  Anatomi  Fakultas Kedokteran dan Imu Kesehatan
Universitas  Bengkulu,  B.  (2016). Diagnosis  Molekuler  Virus  Dengue. In JK Unila | (Vol. 1).
Pal, S., Dauner, A. L., Mitra, I., Forshey, B.
M.,  Garcia,  P.,  Morrison,  A.  C., Halsey, E. S., Kochel, T. J., & Wu, S. J. L. (2014). Evaluation of dengue ns1 antigen rapid tests and elisa kits using clinical  samples. PLoS  ONE , 9 (11). https://doi.org/10.1371/journal.pone.0 113411
Pal,  S.,  Dauner,  A.  L.,  Valks,  A.,  Forshey, B. M., Long, K. C., Thaisomboonsuk, B.,  Sierra,  G.,  Picos,  V.,  Talmage,  S., Morrison,  A.  C.,  Halsey,  E.  S., Comach,  G.,  Yasuda,  C.,  Loeffelholz, M., Jarman, R. G., Fernandez, S., An, U.  S.,  Kochel,  T.  J.,  Jasper,  L.  E.,  & Wu,  S.  J.  L.  (2015).  Multicountry prospective  clinical  evaluation  of  two
Suryanata Kesuma  | Review: Uji Diagnosis NS1, IgG Dan IgM Dengue Metode Immunokromatografi Dan Elisa
enzyme-linked  immunosorbent  assays and  two  rapid  diagnostic  tests  for diagnosing  dengue  fever. Journal  of Clinical  Microbiology , 53 (4),  1092–
1102.
https://doi.org/10.1128/JCM.03042-14
Palomares-Reyes,  C.,  Silva-Caso,  W.,  del Valle,  L.  J.,  Aguilar-Luis,  M.  A., Weilg,  C.,  Martins-Luna,  J.,  Viñas- Ospino,  A.,  Stimmler,  L.,  Mallqui Espinoza,  N.,  Aquino  Ortega,  R., Espinoza Espíritu, W., Misaico, E., & del Valle-Mendoza, J. (2019). Dengue diagnosis  in  an  endemic  area  of  Peru: Clinical  characteristics  and  positive frequencies  by  RT-PCR  and  serology for  NS1,  IgM,  and  IgG. International Journal  of  Infectious  Diseases , 81 , 31–37. https://doi.org/10.1016/j.ijid.2019.01. 022
Santoso,  M.  S.,  Yohan,  B.,  Denis,  D.,
Hayati,  R.  F.,  Haryanto,  S.,  Trianty, L.,  Noviyanti,  R.,  Hibberd,  M.  L.,  & Sasmono,  R.  T.  (2020).  Diagnostic accuracy  of  5  different  brands  of dengue  virus  non-structural  protein  1 (NS1)  antigen  rapid  diagnostic  tests (RDT) in Indonesia. Diagnostic
Microbiology  and  Infectious  Disease ,
98 (2).
https://doi.org/10.1016/j.diagmicrobio .2020.115116
Shenoy,  B.,  Menon,  A.,  &  Biradar,  S. (2014).  Diagnostic  utility  of  dengue
NS1  antigen. Pediatric  Infectious Disease , 6 (3), 110–113. https://doi.org/10.1016/j.pid.2014.08.0 02 Siti  Maimunah,  O.  (2018). HUBUNGAN
HASIL  PEMERIKSAAN  ANTIGEN
NON-STRUKTURAL  1  (Ag  NS1) DENGAN  DIAGNOSIS  PENYAKIT
INFEKSI  DENGUE  DI  RS  URIP SUMOHARJO BANDARLAMPUNG .
Situmorang,  I. M., & Effrata, N. P. (2022).
IDENTIFIKASI  DAN  GAMBARAN
INDEKS KEPADATAN LARVA AEDES  AEGYPTI  DI  SEKOLAH TINGGI ILMU KESEHATAN YANG  ADA  DI  BEKASI  TAHUN 2021. JURNAL ANALIS LABORATORIUM  MEDIK , 7 (1),  35– 41. https://doi.org/10.51544/jalm.v7i1.283 6
Tuan,  N.  M.,  Nhan,  H.  T.,  van  Vinh  Chau,
N.,  Hung,  N.  T.,  Tuan,  H.  M.,  van Tram,  T.,  le  Da  Ha,  N.,  Loi,  P., Quang,  H.  K.,  Kien,  D.  T.  H., Hubbard, S., Chau, T. N. B., Wills, B., Wolbers,  M.,  &  Simmons,  C.  P. (2015). Sensitivity and Specificity of a Novel Classifier for the Early Diagnosis of Dengue. PLoS Neglected Tropical Diseases , 9 (4). https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0 003638
Zuardi,  M.,  Herman,  R.,  Litbang,  B.  P.,
Bumbu,  T.,  Lokalitbang  Gunung Tinggi, J., Litbang Biomedis Aceh, L., Sultan  Iskandar  Muda  Lrg  Tgk Dilangga  No,  J.,  Besar,  A.,  & Biomedis dan Teknologi Dasar Kesehatan, P. (2016). Medical Laboratory Technology Journal KESESUAIAN HASIL PEMERIKSAAN  RT  PCR,  RDT NS1,  DAN  RDT  IgM  PASIEN PENYAKIT DENGUE. Medical Laboratory  Technology  Journal , 2 (2), 56–60. http://ejurnal- analiskesehatan.web.id