## ISOLASI DAN IDENTIFIKASI JAMUR PENGHASIL MIKOTOKSIN PADA BIJI KAKAO KERING YANG DIHASILKAN DI FLORES-LEMBATA
Emilia S.A. Wangge Emilia_wangge@yahoo.co,id
Program Studi Agroteknologi, Fakultas Pertanian-Universitas Flores

## ABSTRACT
A study entitled “Isolation and Identification of Mycotoxin -producing Fungi on Cocoa  Beans  Produced  in  Flores and  Lembata ” was  done  in  order  to  know  the population and species of fungi and to know the concentration of mycotoxin in the dried cocoa  beans.  The  dry  cocoa  beans  used  in  this  study  were  collected  from  several locations  in  Flores.  Isolation  of  the  fungi  was  done  using  Sabouraud  Dextrosa  Agar (SDA). Results of this study showed that,  there  were several  fungi were  found in the dried  cocoa  beans  produced  in  Flores,  namely Aspergillus  niger,  A.  flavus,  A. parasiticus, A. fumigatusandMucor sp.

## PENDAHULUAN
Kakao (Theobroma cacao L.) merupakan salah satu komoditas ekspor yang  dapat  memberikan  kontribusi untuk  peningkatan  devisa.  Indonesia merupakan  negara  pengekspor  kakao terbesar ketiga di dunia dengan kontribusi    sebesar  13  %  setelah  Pantai Gading  (38%)  dan  Ghana  (19%) (Wahyudi et  al.,2008). Permintaan dunia terhadap komoditas kakao semakin meningkat dari tahun ke tahun. Hingga tahun 2011, ICCO (International Cocoa Organization) memperkirakan  produksi  kakao  dunia akan mencapai 4,05 juta ton, sementara konsumsi  akan  mencapai  4,1  juta ton, sehingga  akan  terjadi  defisit  sekitar  50 ribu  ton  per  tahun  (Suryani,  2007). Kondisi  ini  merupakan  suatu  peluang yang  baik  karena  Indonesia  berpotensi untuk  menjadi  produsen  utama  kakao dunia.
Kualitas  biji  kakao  yang  diekspor oleh  Indonesia  dikenal  rendah.  Di
Amerika  Serikat,  biji  kakao  Indonesia selalu
mendapatkan penahanan (automatic  detention)  karena  sering ditemukan jamur, kotoran, serangga dan benda  asing  lainnya  (Rahmadi,  2008). Banyak  faktor  yang  mempengaruhi mutu  biji  kakao  kering,  diantaranya 75 %  oleh  teknik  pengolahan  dan  25  % oleh  jenis  kakao,  situasi  dan  kondisi daerah produksi  (Badrun, 1991).
Tekhnik  pengolahan  biji  kakao seperti  fermentasi  dan  pengeringan berperan dalam menentukan mutu hasil. Biji kakao rentan terhadap pembusukan jamur. Minifie  (1999)  menyatakan produk  biji  kakao  dapat  ditumbuhi jamur  dan  jamur  yang  sering  ditemui pada biji kakao yang proses penanganan dan pengolahan  yang tidak tepat adalah jamur dari genera Aspergillus, Mucorsp,
Agrica, 6 (1): 23-32 (2013)                                           @Fakultas Pertanian Universitas Flores ISSN: 1979-0368
Penicilium, dan Rhyzopus (Aroyeun dan Adegoke, 2006).
Dalam  genera Aspergillus,  tiga
spesies  yang  merupakan  perhatian utama bagi kesehatan masyarakat adalah A.  flavus,  A.  parasiticus, dan A. ochraceus (Cotty,  1997;  Moss,  2002). Selain A.  flavus dan A.  parasiticus,  A. nigerjuga  membahayakan  karena  dapat menghasilkan  mikotoksin  pada  biji kakao  kering  (Rahmadi  dan  Fleet, 2007).  Demikian  pula Mucor  sp dapat menghasilkan mikotoksin
jenis
Alimentary  Toksik  Aleukia (ATA) (Siagian,  2002).Jamur  yang  ada  pada bahan  pangan  dapat  menghasilkan toksin. Hampir semua
jamur memproduksi  toksin,  yang  disebut mikotoksin (Pitt dan Hocking, 1997).
Keberadaan  mikotoksin  terutama aflatoksin  dan  okratoksin  pada  bahan makanan  merupakan  masalah  ekonomi yang  utama  bagi  negara  eksportir,  dan ini akan diperburuk oleh peraturan yang ketat  dari  negara  pengimpor  yang sangat memperhatikan aspek kesehatan. Amerika Serikat melalui Badan administrasi  makanan  dan  obat-obatan (FDA) memberikan batasan konsentrasi aflatoksin untuk semua makanan adalah 20  ppb. Demikian  pula  Indonesia melalui  badan  pengawasan  obat  dan makanan  (2004)  memberikan  batas maksimal  kandungan  mikotoksin  pada makanan  adalah  20  ppb. Konsumsi produk  pangan  yang  terkontaminasi mikotoksin
dapat menyebabkan terjadinya mikotoksikosis, yaitu gangguan  kesehatan  pada manusia  dan hewan dengan berbagai bentuk perubahan klinis dan patologis, misalnya  dapat  menyebabkan  penyakit
kanker  hati,  demam,  pembengkakan otak,  ginjal  dan  gangguan  syaraf (Rahayu, 2006).
Flores  merupakan  salah  satu  dari puluhan  pulau    di  Propinsi  NTT,  yang memiliki  aneka  komoditi    perkebunan yang  cukup  baik.  Di  Flores dan
Lembata terdapat  8 Kabupaten dengan aneka jenis tanaman komoditi perkebunan dan  yang  paling  dominan dibudidayakan  oleh  para  petani  di Flores adalah  kakao. Adapun  produksi biji kakao yang dihasilkan oleh masing- masing  kabupaten  di  Flores  pada  tahun 2007  adalah  dari  Kabupaten  Manggarai Baratsebanyak  177  ton,  Kabupaten Manggarai  Timur  sebanyak  311  ton, Kabupaten Ngada sebanyak 161 ton dan Kabupaten  Nagekeo  sebanyak  579  ton. Sedangkan    produksi  biji  kakao  di Kabupaten  Ende  sebanyak    2886  ton, Kabupaten  Sikka  sebanyak6682  ton, Kabupaten  Flores  Timursebanyak    651 ton  dan  Kabupaten  Lembata  sebanyak 49 ton (BPS NTT, 2011).
Berdasarkan  produksi  kakao  di
Flores dan  Lembatadan    bahaya kontaminasi jamur penghasil
mikotoksin pada biji kakao kering maka penulis  melakukan  suatu  penelitian untuk mengisolasi dan mengidentifikasi jamur  yang  terdapat  pada  biji  kakao kering  yang  berasal  dari  berbagai daerah  di  Flores,  serta  meneliti  tentang jamur    apa  yang dapat  menghasilkan mikotoksin pada biji kakao kering.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan bulan  Juni sampai bulan Agustus 2011. Isolasi dan identifikasi  jamur  dan  pengujian kadar aflatoksin  B1  dan  Okratoksin  A dilaksanakan  di  Laboratorium  Balai
Besar  Veteriner  Denpasar. Biji  kakao kering yang digunakan dalam penelitian merupakan  biji  kakao  kering  yang dihasilkan  di    Flores  yaitu Kabupaten Manggarai Timur, Kabupaten Manggarai  Barat,  Kabupaten  Ngada, Kabupaten  Nagekeo,  Kabupaten  Ende,
Kabupaten  Sikka,  Kabupaten  Flores Timur  dan  Kabupaten  Lembata.  Lokasi pengambilan  sampel  dan  kode  sampel dapat dilihat pada Tabel 1 dan Tabel 2.

## Tabel 1. Lokasi  Pengambilan  Sampel  dan  Kode  Sampel  Biji  Kakao  Kering Terfermentasi  yang Dihasilkan di Flores dan Lembata
No Kode Sampel Lokasi Kabupaten 1 MB1 Puspa Sari Manggarai Barat 2 MB2 Lembor Manggarai Barat 3 MT1 Sinar Mas Manggarai Timur 4 MT2 Mborong Manggarai Timur 5 ND1 Surya Mas Ngada 6 ND2 Aimere Ngada 7 NK1 Surya Indah Nagekeo 8 NK2 Mbay Nagekeo 9 ED1 Perdana Ende 10 ED2 Kawi Indah Ende 11 SK1 Kuda Mas Sikka 12 SK2 Nita Sikka 13 FT1 Belogili Flores Timur 14 FT2 Tanjung Bunga Flores Timur 15 LB1 Adonara Lembata 16 LB2 Solor Lembata
Tabel 2 Lokasi  Pengambilan  Sampel  dan  Kode  Sampel  Biji  Kakao  Kering  tidak  Terfermentasi yang Dihasilkan di Flores dan Lembata No Kode Sampel Lokasi Kabupaten 1 MB3 Welak Manggarai Barat 2 MB4 Komodo Manggarai Barat 3 MT3
Cikal Manggarai Timur 4 MT4
Puspa Manggarai Timur 5 ND3
Soa Ngada 6 ND4 Bena Ngada 7 NK3 Mauponggo Nagekeo 8 NK4 Watu Api Nagekeo 9 ED3 Wolosoko Ende 10 ED4 Fajar Timur Ende 11 SK3 Bintang Timur Sikka 12 SK4 Bina Karya Sikka 13 FT3 Nobo Flores Timur 14 FT4 Boru Flores Timur 15 LB3 Lomblen Lembata 16 LB4
Konga Lembata
Sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  biji  kakao  kering terfermentasi  dan  tidak  terfermentasi yang  dihasilkan  di  Flores.Sampel  biji kakao  kering  tersebut  merupakan  biji kakao  kering  yang  sudah  diolah  petani selama 3-5 hari dan lama
penyimpanannya  di  gudang  2  (dua)
minggu.

## Isolasi dan Identifikasi Jamur
Isolasi  jamur  dilakukan  dengan menggunakan  media  SDA (Sabouraud Dextrosa  Agar).  Proses  pemurnian dilakukan  dengan  cara  mengambil isolate  jamur  berumur  tiga  hari  dalam kultur menggunakan cork borer berdiameter  0,5 mm  kemudian dengan jarum  ose  isolat  jamur  diinokulasikan pada  media  SDA  dan  selanjutnya disimpan  selama  tiga  hari  dalam  suhu kamar.  Pemindahan  isolat    (pemurnian) diulang sebanyak tiga kali sampai isolat benar-benar  murni  dan diamati  secara mikroskopis  dan  diidentifikasi. Proses identifikasi  jamur  berdasarkan  ciri-ciri dan karakter morfologis secara makroskopis  (visual)  dan  mikroskopis dilakukan  di  bawah  mikroskop  dengan pembesaran  400  x.  Pewarnaan  preparat untuk  pengamatan  pada  mikroskop terdiri  atas  larutan Lactophenol  Cotton Blue (pewarna  jamur),  (Cowan  dan
Steel’s,  1993).  Sesuai  dengan  sifat -sifat jamur  ;  hifa,  warna  koloni,  bentuk visikel, ciri-ciri sporangium atau sporangiofor,  konidia,  dan  konidiofor.
Identifikasi jamur
dilakukan berdasarkan  panduan  Pitt  dan  Hocking (1997), Samson et al. (1995),  dan Olds (1975).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Jenis  Jamur  pada Biji Kakao

## Kering di Flores dan Lembata
Berdasarkan  hasil  isolasi  jamur pada  media  Sabouraud  Dextrosa  Agar (SDA),  terdapat  beberapa  jenis  jamur pada  biji  kakao  kering yang  dihasilkan di  Flores.  Koloni  jamur    ditempatkan dalam  cawan  Petri  berisi  media  SDA kemudian  dipilah-pilah    berdasarkan morfologi dan warna. Inkubasi dilakukan  pada  suhu  kamar  (25 0 C).
Berdasarkan hasil isolasi dan identifikasi  terdapat  beberapa  spesies jamur yang mengkontaminasi biji kakao kering di Flores yaitu Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus,  Aspergillus  fumigatus dan Mucor sp.
Berdasarkan  hasil  pengamatan, secara  makroskopis  spesies A.  niger menampakkan koloni kompak berwarna putih,  dan  kuning  pada  permukaan bawah  koloni  yang  akan  berubah
menjadi  coklat  gelap  sampai  hitam setelah terbentuk konidiospora.
Berdasarkan  pengamatan  secara mikroskopis  bentuk  badan  buah A. niger dicirikan  dengan    vesikula berbentuk  bulat  hingga  semi  bulat.
Konidia  bulat  hingga    semi  bulat,  dan berwarna coklat tua.
Spesies
A. flavus) secara
makroskopis  memiliki  ciri  koloninya pada  saat  muda  berwarna  putih,  dan akan  berubah  menjadi  berwarna  hijau kekuningan setelah membentuk konidia. Secara mikroskopis ciri dari badan buah
A.  flavus adalah  vesikula  berbentuk bulat  hingga  semi  bulat  dan  konidia berbentuk bulat hingga semi bulat.
Species A. parasiticus, memiliki ciri-ciri  sebagai  berikut  :  koloni  hijau gelap, konidiofor  dengan  satu  set sterigmata,  bentuk  visikelnya  bulat (globular)  dan  pemukaan  spora  kasar
(bergerigi). Spesies A. fumigatus,
memiliki  ciri-ciri  koloni  saat  muda berwarna  putih  dan  dengan  cepat berubah  menjadi  hijau  seiring  dengan terbentuknya konidia. Konidiofor pendek,    dan  berwarna  hijau    (khusus pada  bagian  atas).  Vesikula  berbentuk gada.Konidia  bulat  hingga  semi  bulat, berdinding  kasar. Mucor sp.  memiliki koloni  berwarna  putih  dan  akhirnya
berwarna  kelabu,  berwarna  kuning  dan halus,  hifa  tidak berseptat  kadang- kadang membentuk cabang, sporangiospora  tumbuh  pada  seluruh bagian  miselium,  kolumela  berbentuk bulat, silinder atau seperti buah advokad dan  tidak  membentuk  stolon    (Fardiaz, 1989).
Populasi  jamur  pada  biji  kakao kering  terfermentasi  yang dihasilkan di Flores dan Lembata.
Hasil  penelitian  menunjukkan pada setiap sampel yang diteliti terdapat lebih  dari  satu  spesies  jamur.  Total populasi  jamur  yang  terdapat  pada sampel  biji  kakao  kering    terfermentasi asal  Flores  berkisar  antara  140  x  10 2 cfu/g  sampai  320  x  10 2 cfu/g.  Total populasi  jamur  terendah  terdapat  pada sampel  NK1  (Nagekeo  1)  dan  total populasi  jamur  tertinggi  terdapat  pada sampel MB1 (Manggarai Barat).
Berdasarkan  Tabel 3 jumlah populasi jamur pada sampel MB1 lebih tinggi dari sampel lain yang diteliti, hal ini disebabkan karena proses fermentasi yang  dilakukan  oleh  petani  asal Manggarai Barat kurang tepat.
Berdasarkan  pengamatan  di  lapangan, proses  fermentasi  yang  dilakukan  oleh petani  Manggarai  Barat  menggunakan alat  yang  kurang  higienes  dan  waktu
yang  kurang  tepat.  Wadah  yang digunakan untuk proses fermentasi oleh para petani adalah  karung-karung bekas mengisi  pupuk  atau  hasil  pertanian lainnya  yang  memungkinkan  adanya kontaminasi mikroba yang tidak diinginkan. Rahmadi (2008)
menyatakan titik kritis fermentasi adalah  pada  flora  awal  dimana  terjadi cemaran  bakteri  pathogen  dan  jamur penghasil toksin.
Waktu fermentasi yang
dilakukan  tidak  sesuai  dengan  waktu fermentasi  yang  ditetapkan.  Lamanya waktu  fermentasi  yang    dilakukan  oleh petani  Manggarai  Barat  adalah  30- 36 jam.  Selama  proses  fermentasi,  tidak dilakukan pembalikan/pengadukan sehingga  cairan  dari  pulp  tidak  dapat keluar dengan baik. Hal ini
menyebabkan    bakteri  penghasil  spora dan  jamur  berfilamen  muncul  dan  pada
umumnya tidak disukai, karena beberapa diantaranya dapat
memproduksi  toksin.  Proses  fermentasi yang kurang tepat yang dilakukan  para petani    tersebut  menyebabkan  populasi jamur  pada  biji  kakao  menjadi  sangat tinggi.  Minifie  (1999)  menyatakan selama  fermentasi  terjadi  proses  yang kompleks  sehingga  memungkinkan  biji kakao tersebut terserang jamur
penghasil  mikotoksin.  Fristo  (2009) menyatakan  bahwa  biji  kakao  kering yang difermentasi lebih rentan terserang jamur.
Wahyudi et al. (2008) menyatakan proses  fermentasi  yang
dapat menghasilkan biji kakao
berkualitas tinggi adalah sebagai
berikut:
1. Buah  hasil  panen  dibelah  dan  biji berselimut pulp dikeluarkan.
2. Biji  dikumpulkan  pada  suatu  wadah.
Jenis  wadah  yang  digunakan  berupa keranjang  yang  dilapisi  oleh  daun, dan  kontainer  kayu.  Pada  umumnya, dasar  kontainer  memiliki  lubang kecil untuk drainase dan aerasi.
3. Biji yang dimasukkan dalam
kontainer  tidak  diisi  secara  penuh, sisakan  10  cm  dari  atas  dan permukaan atas ditutupi dengan daun pisang yang bertujuan untuk menahan panas dan mencegah permukaan biji dari kekeringan.
4. Simpan  kontainer  di  atas  tanah  atau di  atas  saluran  untuk  menampung pulp  juices yang  dihasilkan  selama fermentasi (hasil degradasi pulp).
5. Fermentasi dalam kotak dapat
dilakukan selama 2 – 6 hari, isi kotak
dibalik tiap hari dengan memindahkannya  ke  kotak  lain.
Tabel 3 Populasi Jamur yang Diisolasi dari berbagai Sampel Biji Kakao Kering Terfermentasi yang dihasilkan di  Flores dan Lembata
No Kode Sampel Jamur (x 10 2 cfu/g) Total A. niger A. flavus A. fumigatus A. parasiticus Mucor sp. Jamur 1 MB1 240 40 0 20 20 320 2 MB2 100 40 0
40 40 220 3 MT1 0 60 70
60 40 230 4 MT2 0 50 80
40 20 190 5 ND1 90 0 80
40 30 240 6 ND2 110 0 70
40 20 240 7 NK1 60 0 60
0 20 140 8 NK2 40 0 100
0 20 160 9 ED1 200 40 70
0 0 310 10 ED2 110 50 0
0 0 160 11 SK1 60 60 80
30 0 230 12 SK2 80 20 30
30 0 160 13 FT1 80 40 50
0 0 170 14 FT2 100 50 60
0 0 210 15 LB1 100 30 0 80 0 210 16 LB2 70 40 0
70 0 180 Populasi  jamur  pada  biji  kakao kering yang tidak

## terfermentasi
Hasil  penelitian  menunjukan bahwa  total  populasi  jamur  pada  biji kakao kering  di  Flores dan  Lembata yang tidak terfermentasi berkisar antara 50  x  10 2 cfu/g  sampai  130  x  10 2 cfu/g (Tabel 4).
Berdasarkan Tabel 4,
menunjukkan  bahwa  populasi  jamur pada biji kakao yang tidak terfermentasi tertinggi  terdapat  pada  sampel MT3 (Kabupaten  Manggarai  Timur)  yaitu 130  x  10 2 cfu/g,  sedangkan  populasi
jamur  terendah  terdapat  sampel  ED3 (Kabupaten Ende)  yaitu  50 x 10 2 cfu/g.
Total  populasi  jamur  yang  tinggi  pada biji kakao pada sampel MT3 disebabkan karena proses pengeringan yang dilakukan petani kurang tepat.

## Tabel 4 Populasi  Jamur  yang  Diisolasi  dari  berbagai  Sampel  Biji  Kakao  Kering yang tidak Terfermentasi yang dihasilkan di  Flores dan Lembata
No Kode Sampel Jamur (x 10 2 cfu/g) Total A. niger A. flavus A. fumigatus A. parasiticus Mucor sp. Jamur 1 MB3 40 10 0 20 20 90 2 MB4 40 10 0 10 10 70 3 MT3 10 20 80 0 20 130 4 MT4 0 20 60 0 10 90 5 ND3 30 20 50 0 20 120 6 ND4 20 30 40 0 20 110 7 NK3 0 0 40 20 20 80 8 NK4 0 0 40 10 20 70 9 ED3 20 10 0 20 0 50 10 ED4 10 10 0 40 0 60 11 SK3 30 20 60 0 0 110 12 SK4 20 20 60 0 0 100 13 FT3 10 10 30 0 20 70 14 FT4 20 20 40 0 10 90 15 LB3 60 0 10 0 0 70 16 LB4 40 0 20 0 0 60
Hasil  pengamatan,  wadah  untuk menjemur    tidak  higienes  dan  waktu pengeringan  kurang  sempurna.  Wadah yang  digunakan  oleh  para  petani  untuk menjemur  biji  kakao  adalah  terpal, karung  atau  tikar  bekas.  Selain  itu faktor lain yang menyebabkan tingginya populasi jamur dari kabupaten Manggarai  Timur  adalah  kurangnya sinar  matahari  pada  waktu  penjemuran. Manggarai  Timur  merupakan  daerah dingin  dan  tingkat  kelembaban  yang tinggi  dengan  suhu  berkisar  15-30 0 C (BPS,  2011).  Karena  pengeringan  yang kurang  baik,  maka  kadar  air  pada  biji kakao  menjadi  tinggi  yaitu  lebih  dari
7,5  %.  Hal  ini  menyebabkan  biji  kakao mudah  terserang  jamur.  Pitt  dan Hocking  (1997)  menyatakan  kadar  air bahan  mempengaruhi  daya  tahan  bahan terhadap serangan mikroba.
Pengeringan biji  kakao  yang paling  baik  adalah  dibawah  suhu  60 0 C atau dibawah terik sinar matahari.Pengeringan harus berlangsung cukup cepat untuk mencegah  pertumbuhan  jamur  dan bakteri  penghasil  spora  (Rahmadi, 2008).Adapun  cara  pengeringan  yang perlu  dilakukan  oleh  petani  maupun pengusaha adalah penjemuran dibawah terik  matahari  secara  penuh.  Energi
untuk  penguapan  air  pada  biji  kakao diperoleh  dari  radiasi  sinar  matahari. Secara teknis cara ini akan memberikan hasil  yang  baik,  jika  sinar  matahari mempunyai  intensitas  yang  cukup  dan dapat  dimanfaatkan  secara  maksimal.
Lantai  jemur  dibuat  dari  bahan  yang mempunyai sifat menyerap panas.Tebal tumpukan  biji  kakao  di  lantai  jemur optimal.Pembalikkan  biji  kakao  saat menjemur  harus  dilakukan  agar  dapat mencegah  penyerapan  ulang  air  dari permukaan  lantai  jemur  ke  dalam  biji kakao  (Wahyudi,  1992).  Lebih  lanjut dikatakan  oleh  Susanto  (1994)  bahwa penjemuran  sebaiknya  menggunakan model  para-para  (meja  pengering)  atau lantai semen. Model para-para menggunakan  lantai  jemur  dari  papan kayu atau anyaman bambu dan disangga dengan  kaki-kaki  lebih  kurang  0,50  m dari  permukaan  tanah.  Jika  diperlukan, para-para  dapat  dilengkapi  dengan penutup  dari  kain  terpal  atau  plastik tembus  sinar  (transparan).Duncan et  al.
(1989)  menyatakan  model  penjemuran dengan  lantai  semen  berbeda  dengan model  para-para  yaitu  penjemuran dengan lantai semen mempunyai hamparan  penjemuran  langsung  di  atas permukaan  tanah.Profil  lantai  jemur dibuat miring lebih kurang 5-7 o dengan
sudut  pertemuan  di  bagian  tengahnya. Pinggiran  lantai  dilengkapi  dengan saluran  pembuangan  air  dan  tiang-tiang penyangga  untuk  mengkaitkan  plastik penutup  (terpal).Saat  hari  hujan,  biji kakao  digundukkan  di  bagian  tengah lantai  dan  ditutup  dengan  terpal.Teknik penjemuran yang umum, baik menggunakan  model  para-para  maupun lantai  semen,  adalah  menghamparkan biji kakao dengan tebal lapisan biji 3 - 5 cm (2 - 3 lapis biji atau lebih kurang 8 - 10  kg  biji  basah  per  m2  luas  lantai jemur).Cuaca dan frekuensi pembalikan biji  sangat  berpengaruh  terhadap  waktu dan  kapasitas  penjemuran.Saat  cuaca cerah,  dengan  lama  penyinaran  7 - 8 jam per hari, waktu penjemuran antara 7 - 9  hari  dengan  pembalikan  1 - 2  jam sekali.  Minifie  (1999)  menyatakan pengeringan  merupakan  faktor  yang sangat penting dalam menghasilkan biji kakao kering  yang berkualitas tinggi.

## KESIMPULAN
1. Biji  kakao  kering  di  Flores dan
Lembata baik  yang  terfermentasi maupun  yang    tidak  terfermentasi terkontaminasi oleh lima jenis jamur
yakni : Aspergillus flavus,
Aspergillus  parasiticus,  Aspergillus niger,  Aspergillus    fumigatus dan Mucor sp.
2. Total Populasi jamur pada biji kakao
kering  di  Flores dan  Lembata yang tidak terfermentasi berkisar antara 50 x  10 2 cfu/g  sampai  130  x  10 2 cfu/g, sedangkan  total  populasi  jamur  pada biji  kakao  kering  terfermentasi  di Flores dan  Lembata berkisar antara
140  x  10 2 cfu/g  sampai  320    x  10 2 cfu/g.

## Ucapan Terima Kasih
Pada  kesempatan  ini  penulis  ingin mengucapkan  terima  kasih  kepada semua  pihak  yang  telah  membantu dengan  caranya  masing-masing  dalam melengkapi tulisan ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  2007. Discussion  paper  on ochratoxin  A  in  cocoa.  Codex Alimentarius  Commission,  Codex
Committee  on  Food  Additives  and Contaminants,  First  session.  Beijing, China (16-20 April 2007, CX/CF07/1/19). Badan Pengawasan Obat dan Makanan.
2004. Status regulasi cemaran dalam produk  pangan.  Buletin  Keamanan Pangan, 6 : 4-5.
Badan Pusat Satatistik NTT. 2011. Nusa Tenggara Timur dalam Angka.NTT. Badrun, M. 1991. Program Pengembangan Kakao di Indonesia.Prosiding Komperensi Nasional Kakao III, Medan. Buku 2 : 1-9. Bucheli.P.,  I.  Meyer,  A.  Pittet,  G.
Vuataz, and R.Viani. 1998. Industrial Storage  of  Green  Robusta  Coffee
under  Tropical  Condition  and  Its Impact on Raw Material Quality and Ochratoxin A Content. J Agric Food Chem. (46):4507 – 4511.
Cowan    dan  Steel’s.  197 4.  Manual  of Medical  Bacteria  Revised  by  S.T. Cowan.  Second  Edition.Cambridge University Press London. New York.
Melbourne.
Cotty,  P.  J.  1997.  Aflatoxin-producing
potential of communities of Aspergillus section Flavi from cotton producing areas in the United States, Mycol. Res. 101(6) : 698-704. FAO. 1997. Worldwide Regulations for
Mycotoxins for 1995. A conpendium food  and  nutrition  paper  No.  64 Rome. Pp. 10-15.
Firdausil,    A.B.,    Nasriati,  A.  Yani.
2008.  Teknologi  Budidaya  Kakao. Balai Besar Pengkajian dan Pengembangan  Teknologi  Pertanian. Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian. Fristo, C.C. 2009.Pengaruh Penyimpanan  Biji  Kakao  Hasil Fermentasi  dan  Non  Fermentasi terhadap  Pertumbuhan  Aspergillus sp. dan Kandungan Senyawa Aflatoksin.Skripsi.    Program  Studi Teknologi  Hasil  Pertanian.  Fakultas Teknologi Pertanian. Universitas Andalas.
Hastono,  S.  1995.  Kapang  Toksigenik dari  Pakan,  Komponen  Pakan  dan Hasil    Pertanian  Lain.  Kumpulan Makalah  Lengkap  KONAS  PMKI  I dan Temu Ilmiah. Hal.123-133.