Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
Uji toksisitas akut (LC 50 ) limbah pengeboran minyak bumi terhadap Daphnia magna
D. A. Anggraini 1 , H. Effendi 2* , M. Krisanti 1
1 Departemen Manajemen Sumberdaya Perairan, Institut Pertanian Bogor, Bogor, Indonesia
2 Pusat Penelitian Lingkungan Hidup, Institut Pertanian Bogor, Bogor, Indonesia
Abstrak .
Kegiatan  eksplorasi  minyak  dan  gas  bumi  dapat menghasilkan  limbah  yang  berpotensi  toksik  bagi lingkungan  perairan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk menghitung  konsentrasi  supernatan cutting yang  dapat mematikan  50%  biota  uji  dengan  waktu  pemaparan  96 jam.  Percobaan  menggunakan  wadah  kaca  untuk menentukan nilai LC 50 pada waktu pemaparan 24, 48, 72 dan  96  jam.  Kegiatan  penelitian  dibagi  menjadi  dua tahapan, yaitu uji pendahuluan dan uji utama.  Berdasarkan hasil penelitian, nilai LC 50 -96 jam dari supernatan cutting sebesar  58.241  ppm.  Dengan  demikian,  sesuai PerMenESDM  Nomor  45  Tahun  2006  bahwa  limbah minyak bumi tersebut dapat dibuang langsung ke perairan, karena  nilai  LC 50 -96  jam  >30.000  ppm.  Semakin  lama D. magna terpapar cutting , semakin banyak bagian tubuh D. magna yang mengalami kerusakan.
Kata kunci: cutting , Daphnia magna , uji toksisitas akut, LC 50
Abstract . Oil  and  gas  exploration  activities  can  potentially  produce toxic waste for the aquatic environment. This study aimed to calculate  the  concentration  of  cutting  supernatant  which can kill 50% of the test biota with 96 hours exposure time. The experiment used a glass container to determine the LC ₅₀ value  at  the  time  of  exposure  24,  48,  72,  and  96  hours. Research activities were divided into two stages, namely the preliminary test and the main test. Based on the results of the study, the LC ₅₀ -96 hour value of the supernatant cutting was 58,241  ppm.  Accordingly,  according  to  Minister  of  Energy and  Mineral  Resources  Regulation  No.  45  of  2006  that petroleum  waste  can  be  disposed  directly  into  the  waters, because the value of LC ₅₀ -96 hours> 30,000 ppm. The longer D.  magna  is  exposed  to  cutting,  the  more  body  parts  of  D. magna are damaged.
Keywords: cutting , Daphnia magna , acute toxicity test, LC 50

## 1. PENDAHULUAN
Minyak bumi merupakan salah satu sumber daya alam yang melimpah dan dimanfaatkan untuk memenuhi kebutuhan energi bagi pengembangan industri, rumah tangga, angkutan, perdagangan, dll. Kegiatan pertambangan minyak bumi terdiri dari eksplorasi, eksploitasi, pengolahan atau pemurnian dan pemasaran hasil. Kegiatan eksploitasi  minyak bumi, yaitu melakukan pengeboran minyak bumi  secara  bertahap  dan  setiap  tahapannya  akan  menghasilkan  limbah  baik padat maupun cair. Beberapa bahan yang terkait dengan kegiatan pengeboran minyak  bumi  diantaranya drilling  mud dan soil cutting (Breuer et  al .  2004). Kegiatan  eksploitasi,  pengolahan  atau  pemurnian  dapat  mengakibatkan gangguan  keseimbangan  yang  cukup  besar,  salah  satunya  adalah  lingkungan perairan. Penambangan minyak bumi dapat mengakibatkan dampak terhadap lingkungan, seperti penurunan kualitas air, perubahan tata guna lahan dan air, serta gangguan terhadap organisme perairan (Fikirdesici et al . 2010). Salah satu organisme yang memegang peranan penting di dalam ekosistem perairan  tawar  adalah Daphnia  magna .  Organisme D.  magna memiliki  siklus hidup  yang  relatif  singkat,  mudah  dikultur  dalam  skala  laboratorium  dan
* Korespondensi Penulis Email : ditta.anggraini2@gmail.com
merupakan  mata  rantai  dalam  jaring-jaring  makanan  di  perairan  (Tyagi et  al . 2007).  Dodson et  al .  (2000)  menyatakan  bahwa D.  magna merupakan  hewan yang  sensitif  terhadap  berbagai  zat  pencemar.  Organisme  tersebut  juga  telah digunakan sebagai standar dalam uji toksisitas (USEPA 1987).  Asupan limbah pengeboran  minyak  ke  dalam  perairan  akan  menimbulkan  pencemaran  yang berpengaruh terhadap kelangsungan hidup D. magna.
Pencemaran  yang  dihasilkan  dari  kegiatan  pertambangan  minyak  dapat dicegah,  yaitu  dengan  menentukan  batasan  volume  dari  limbah  pengeboran minyak.  Ketentuan  tentang  limbah  pengeboran  minyak  terdapat  pada PerMenESDM Nomor 45 Tahun 2006 tentang Pengelolaan Lumpur Bor, Limbah Lumpur  dan  Serbuk  Bor  pada  Kegiatan  Pengeboran  Minyak  dan  Gas  Bumi. Ketentuan tentang limbah pengeboran minyak dilihat dari ukuran nilai LC 50 -96 jam  yang  memiliki  nilai ≥30 .000  ppm.  Nilai  LC 50 digunakan  untuk  melihat konsentrasi efektif toksikan yang mampu mematikan 50% biota uji dalam waktu tertentu. Jika limbah pengeboran minyak mempunyai nilai LC 50 -96 jam ≤30 .000 ppm, maka limbah tidak dapat langsung dibuang ke perairan melainkan harus melewati pengolahan terlebih dahulu. Jika nilai LC 50 -96 jam limbah pengeboran minyak ≥30 .000 ppm, maka limbah dapat langsung dibuang ke perairan karena limbah tidak bersifat toksik (PerMenESDM Nomor 45 Tahun 2006). Berdasarkan uraian  di  atas,  maka  diperlukan  penelitian  mengenai  toksisitas  limbah pengeboran  minyak  terhadap D.  magna melalui  studi bioassay untuk menentukan nilai LC 50 -96 jam.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menghitung  konsentrasi  supernatan  dari limbah serbuk bor ( cutting ) yang dapat mematikan 50% D. magna sebagai biota uji dengan waktu pemaparan 96 jam. Penelitian ini dapat memberikan informasi mengenai  limbah  pengeboran  minyak  bumi  yang  dapat  dibuang  langsung  ke lingkungan sekitar atau melalui pengolahan terlebih dahulu berdasarkan pada PerMenESDM Nomor 45 Tahun 2006.

## 2. METODOLOGI

## 2.1. Lokasi kajian dan waktu penelitian
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Januari  hingga  Mei  tahun  2016. Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium  Riset  Plankton,  Departemen Manajemen  Sumberdaya  Perairan,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan, Institut Pertanian Bogor.

## 2.2. Prosedur penelitian
Sebagian besar metode kerja dalam penelitian ini diadopsi dari Procedures for Conducting Daphnia magna Toxicity Bioassay (USEPA 1987).

## 2.2.1. Aklimatisasi dan pemeliharaan hewan uji
Hewan uji yang digunakan dalam penelitian adalah D. magna yang berasal dari  pembudidaya D.  magna yang  berlokasi  di  daerah  Dramaga,  Bogor.  Induk diaklimatisasi di dalam wadah agar dapat hidup sesuai kondisi fisik dan kimia yang diinginkan (Mehdipour et al. 2011). Induk D. magna diaklimatisasi ke dalam akuarium (30×30×30 cm). Air yang digunakan sebagai media hidup adalah Air PDAM.  Pada  proses  aklimatisasi,  media  lama  diganti  dengan  media  baru.  Air PDAM ditampung dalam bak penampung dan diaerasi sekurang-kurangnya 24 jam sebelum digunakan untuk mengurangi kandungan klor.
Pemeliharaan D. magna dilakukan setelah air yang digunakan diberi pupuk berupa  kotoran  ayam.  Bahan  pupuk  berupa  kotoran  ayam  kering  yang dimasukkan  ke  dalam  kain  kemudian  dibenamkan  ke  dasar  akuarium. Pemupukan  ini  dapat  menimbulkan  efek  pada  warna  air  setelah  4  hari,  yaitu perubahan  pada  warna  air  dari  bening  menjadi  kuning  kecokelatan.  Sebelum digunakan,  air  kotoran  ayam  tersebut  disaring  terlebih  dahulu.  Selain  untuk memberikan  kondisi  lingkungan  yang  sesuai,  kotoran  ayam  ini  merupakan bahan organik yang menjadi pakan alami D. magna (Zahidah et al . 2012). Selama tahap pemeliharaan, diberikan pakan buatan berupa EM ₄ dan ragi (Jusadi et  al .  2008).  Pembagian  waktu  kultur D.  magna dalam  1  hari  dengan menggunakan 16 jam cahaya dan 8 jam tidak menggunakan cahaya, serta kisaran suhu antara 24 – 28 0 C (Guilhermino et al. 2000).

## 2.2.2. Penyediaan neonat
Kegiatan penyediaan neonat diawali dengan memisahkan 10 induk yang memiliki embrio dari wadah kultur yang dilakukan 24 jam sebelum uji.  Ciri-ciri induk yang memiliki embrio matang (siap menetas) biasanya terlihat dari telur yang ada di punggungnya ( brood chamber ) telah berwarna oranye (Stollewerk 2010). Induk-induk ini kemudian ditempatkan di dalam cawan petri yang sudah dicampurkan  air  tawar  dan  pakan.  Dalam  kurun  waktu  kurang  dari  24  jam induk-induk tersebut akan menetaskan neonat. Instar pertama D. magna yang berumur  ≤24  jam  mer upakan  neonat  (Barata  and  Baird  2000).  Neonat  inilah yang akan digunakan sebagai biota uji dalam penelitian.

## 2.2.3. Pembuatan toksikan
Toksikan yang digunakan berupa limbah serbuk bor ( cutting ) yang berasal dari salah satu perusahaan minyak dan gas di Balikpapan, Kalimantan Timur. Air tawar yang digunakan adalah air PDAM yang telah diaerasi selama 24 jam.
Toksikan  yang  akan  digunakan  untuk  uji  pendahuluan  dan  uji  toksisitas adalah  supernatan  yang  merupakan hasil  pencampuran  antara  limbah pengeboran  minyak  dengan  air  tawar.  Perbandingan  antara  bobot  limbah dengan volume air tawar yaitu sebesar 1 kg/l. Konsentrasi supernatan limbah
(hasil pelarutan limbah dengan air tawar) yaitu sebesar 1.000.000 ppm, dengan asumsi pelarutan limbah bersifat homogen. Setelah itu dilakukan pengenceran limbah dengan volume tertentu pada uji pendahuluan dan uji toksisitas.

## 2.2.4. Uji pendahuluan
Uji pendahuluan dilakukan untuk menentukan selang konsentrasi limbah yang akan digunakan pada uji utama. Uji pendahuluan dilakukan dengan cara menguji beberapa konsentrasi supernatan limbah terhadap hewan uji. Hewan uji pada uji pendahuluan berjumlah 10 ekor yang dipaparkan terhadap toksikan di dalam wadah kaca selama 24 jam. Perlakuan berupa lima variasi pengenceran limbah dan kontrol, masing-masing dengan tiga kali ulangan. Setiap wadah uji berkapasitas 250 ml dan volume larutan 100 ml.
Uji pendahuluan digunakan untuk menentukan konsentrasi ambang atas (N)  dan  konsentrasi  ambang  bawah  (n).  Penentuan  konsentrasi  awal  dan konsentrasi  selanjutnya  menggunakan  rasio  atau  perbandingan  sebesar  0,5 (APHA 1995). Konsentrasi ambang atas (N) adalah  konsentrasi terendah  dari toksikan yang menyebabkan seluruh hewan uji mati pada pemaparan waktu 24 jam, sedangkan konsentrasi ambang bawah (n) adalah konsentrasi tertinggi dari toksikan yang tidak menyebabkan kematian hewan uji pada pemaparan waktu 24 jam. Menurut Komisi Pestisida (1983) in Adhiarni (1997), penentuan selang kepercayaan  dari  konsentrasi  tertinggi  dan  konsentrasi  terendah  dapat ditentukan dengan persamaan sebagai berikut:
Log N n =k log a n ......................... (1)
a n = b a = c b = d c = N e .......................... (2)
Keterangan:
N =  Konsentrasi tertinggi n =  Konsentrasi terendah k =  Jumlah konsentrasi yang diuji a, b, c, d dan e   =  Konsentrasi antara konsentrasi terendah dan konsentrasi tertinggi, a adalah konsentrasi terkecil setelah uji pendahuluan dilakukan kemudian ditentukan konsentrasi  tertinggi  dan  terendah  untuk  kontaminasi.  Selang  konsentrasi untuk kontaminasi (k=5) ditentukan menggunakan persamaan di atas.

## 2.2.5. Uji utama
Bentuk  percobaan  pada  uji  utama  adalah short  term  bioassay dengan menggunakan tipe statik tes (USEPA 1991). D. magna yang telah diaklimatisasi, memiliki kondisi yang baik/sehat dan berukuran seragam, dipilih sebagai hewan uji  (Hooper et  al .  2008).  Sebanyak  10  ekor  neonat D.  magna dimasukkan  ke masing-masing wadah kaca yang sudah diberi kontaminan dengan konsentrasi tertentu. Terdapat enam wadah kaca berukuran 250 ml, lima diantaranya diberi
perlakuan kontaminan dan sisanya sebagai kontrol, dengan ulangan sebanyak tiga kali. Selama percobaan 96 jam D. magna tidak diberi pakan.

## 2.2.6. Pengamatan tingkah laku dan kerusakan morfologi
Pengamatan tingkah laku dilakukan berdasarkan geometrik seri yaitu pada pemaparan waktu 0, 3, 6, 12, 24, 48, 72 dan 96 jam (Novotny and Olem 1994). Pengamatan  kerusakan  morfologi  organisme  uji  dilakukan  pada  pemaparan waktu 24, 48, 72 dan 96 jam (Wang et al. 2011). Pengamatan dilakukan terhadap kedua antena, badan malphigi, rostrum, ekor dan bulu sensorik pada hewan uji setelah  kontaminasi.  Pengamatan  kerusakan  morfologi  dilakukan  dengan menggunakan mikroskop binokuler (Wang et al. 2011).

## 2.3. Prosedur analisis data

## 2.3.1. Analisis probit manual
Pendugaan  nilai  LC 50 yaitu  dengan  menggunakan  metode  probit,  yakni analisis  regresi  yang  peubah  tidak  bebasnya  berupa  kategori.  Metode  probit mencakup  transformasi  proporsi  mortalitas  dengan  transformasi  probit  dan transformasi konsentrasi toksikan ke dalam bentuk logaritma. Hubungan antara variabel yang digunakan pada analisis probit adalah linear dalam bentuk regresi. Transformasi  yang  dilakukan  pada  metode  probit  meliputi  penentuan  nilai probit empiris, probit harapan, probit kerja dan koefisien pemberat.
Menurut  Busvine  (1971),  tahapan  pada  penentuan  nilai  LC 50 dengan menggunakan metode probit secara manual adalah:
1. Transformasi konsentrasi toksikan ke dalam bentuk logaritma basis 10.
2. Proporsi mortalitas yang akan ditransformasi dengan transformasi probit, terlebih  dahulu  dikoreksi  dengan  menggunakan  persamaan Abbot’s
(1925) in Busvine (1971).
P= p i - C 100-c x 100 %
Keterangan: P    =  Mortalitas terkoreksi (%) P i =  Mortalitas pengamatan (%) c    =  Mortalitas pada kontrol (%)
3. Probit  empiris  ditentukan  dari  proporsi  mortalitas  yang  ditransformasi dengan  menggunakan  tabel  transformasi  probit  (Bliss  1957 in Busvine 1971).
4. Probit  harapan  ditentukan  dari  persamaan  regresi  linear  antara  log konsentrasi (x) dengan nilai probit empiris (y).  Nilai probit harapan (Y) ditentukan  dengan  memasukkan  nilai  log  konsentrasi  (X)  ke  dalam persamaan regresi tersebut.
Y (probit harapan) = a + bX
Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
5. Probit kerja dan koefisien pembobot merupakan hasil penjumlahan probit kerja  minimum  (y o )  dengan  konstanta  (K),  dikalikan  dengan  persen kematian  hewan  uji  menggunakan  nilai  probit  harapan  (Y)  yang  di transformasikan  dengan  tabel  koefisien  dan  nilai  probit  (Bliss  1935 in Busvine 1971). Perhitungan dilakukan menggunakan persamaan di bawah.
Y (Probit Kerja) = y o + ( K (Tabel Probit) x persen kematian)
6. Nilai pemberat (w) ditentukan  dengan mengalikan antara nilai koefisien pembobot pada tabel Bliss dengan jumlah hewan uji.
7. Tentukan nilai wx dengan mengalikan antara log volume (x) dengan nilai pemberat (w).
8. Tentukan nilai wy dengan mengalikan antara probit kerja (y) dengan nilai pemberat (w).
9. Tentukan nilai wx 2 dengan mengalikan antara nilai pemberat (w) dengan log volume (x) yang telah dikuadratkan.
10. Tentukan nilai wxy dengan mengalikan antara nilai pemberat (w) dengan log volume (x) dan probit kerja (y).
11. Tentukan nilai X ̅ dengan menggunakan persamaan berikut:
X ̅ = ∑ wx ∑ w
12. Tentukan nilai Y ̅ dengan menggunakan persamaan berikut:
Y ̅ = ∑ wy ∑ w
13. Menentukan  nilai a dengan menggunakan persamaan berikut:
a = Y ̅ -bX ̅
14. Menentukan  nilai b dengan menggunakan persamaan berikut:
b = ∑ wxy- X ̅ ∑ wy ∑ wx 2 -X ̅ ∑ wx 15. Nilai a dan b yang telah didapatkan kemudian dimasukkan ke dalam bentuk persamaan  regresi  berikut  dengan  nilai  Y  (probit)  yang  telah ditransformasikan dengan menggunakan tabel probit.
Y(probit) = a + bX
Estimasi nilai LC 50 adalah antilog dari hasil perhitungan di atas.
16. Perhitungan ragam (varian) ditentukan dengan menggunakan persamaan:
V = 1 b ( 1 b 2 + (m-x) 2 wx 2 -( ∑ wx) 2 / ∑ w )
Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
Keterangan: m =  x (nilai probit)
17. Selang atas dan selang bawah nilai LC 50 diperoleh melalui persamaan:
m ±1,96 √V

## 2.3.2. Analisis probit berbasis software
Perhitungan LC 50 juga dapat menggunakan Software EPA Probit Analysis Program  Versi  1.5.  Pada User’s  guide yang  disertakan  oleh  EPA,  disebutkan bahwa  program  ini  mampu  menghitung  estimasi  nilai  LC/EC 50 dengan  selang kepercayaan sebesar 95%.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1. Nilai ambang atas (N) dan ambang bawah (n)
Konsentrasi limbah dan jumlah kematian pada uji pendahuluan pertama disajikan  pada Tabel  1. Kematian  100%  biota  terdapat  pada  konsentrasi 400.000 ppm, sedangkan kematian 0% terdapat pada konsentrasi 25.000 ppm.
Tabel 1 . Konsentrasi limbah dan jumlah kematian pada uji pendahuluan 1.
Konsentrasi Volume limbah (ml) Volume air (ml) Jumlah biota Jumlah yang mati (%) % ppm 40 400.000 40 60 10 100 20 200.000 20 80 10 80 10 100.000 10 90 10 90 5 50.000 5 95 10 70 2,5 25.000 2,5 97,5 10 0
Hasil  dari  percobaan  pertama  menunjukkan  bahwa  selang  konsentrasi ambang atas (N) dan ambang bawah (n) masih terlalu besar. Dengan demikian, maka  dilakukan  rangkaian  percobaan  berikutnya  dengan  selang  konsentrasi yang lebih kecil ( Tabel 2 ).
Tabel 2. Konsentrasi limbah dan jumlah kematian pada uji pendahuluan 2.
Konsentrasi Volume limbah (ml) Volume air (ml) Jumlah biota Jumlah yang mati (%) % ppm 30 300.000 30 70 10 100 15 150.000 15 85 10 40 7,5 75.000 7,5 92,5 10 20 3,75 37.500 3,75 96,25 10 0 1,875 18.750 1,875 98,125 10 0
Seluruh  biota  uji  mengalami  kematian  pada  konsentrasi  300.000  ppm. Kematian  biota  tidak  terjadi  pada  konsentrasi  37.500  ppm.  Berdasarkan  uji
pendahuluan  1  dan  2  terlihat  bahwa  nilai  ambang  atas  (N)  pada  konsentrasi 300.000  ppm,  sedangkan  nilai  ambang  bawah  (n)  adalah  37.500  ppm.  Nilai tersebut  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  persamaan  (1)  dan  (2)  untuk mendapatkan konsentrasi toksikan yang digunakan pada uji utama.

## 3.2. Hasil uji utama
Respon  mortalitas D.  magna pada  masing-masing  konsentrasi  media  uji bervariasi  sejak  waktu  pemaparan  24  hingga  96  jam  ( Gambar  1 ).  Waktu pemaparan selama 24 jam menunjukkan bahwa media uji dengan konsentrasi 298.000 ppm menyebabkan sebanyak  70% D. magna mati. Waktu pemaparan selama 48 jam pada konsentrasi yang sama menyebabkan mortalitas meningkat menjadi 90%. Selanjutnya dengan waktu pemaparan selama 72 jam dan 96 jam, mortalitas mencapai 100% pada konsentrasi limbah yang sama.
Gambar 1. Hubungan antara konsentrasi limbah (ppm) dengan jumlah kematian (%) pada pemaparan waktu tertentu.
Analisis nilai LC 50 dilakukan dengan waktu pemaparan yang berbeda, yaitu 24 jam, 48 jam, 72 jam dan 96 jam. Nilai LC 50 yang didapatkan berdasarkan hasil perhitungan secara manual dan software EPA Probit Analysis Program Versi 1.5 secara lengkap dapat dilihat pada Tabel 3 .
Tabel 3 . Nilai LC 50 uji toksisitas 24, 48, 72 dan 96 jam.
Waktu (jam) Nilai LC ₅₀ Kisaran Nilai LC ₅₀ dengan Selang Kepercayaan 95 % (ppm) Perhitungan Software Perhitungan Manual 24 232.790 233.154 176.006 – 420.173 48 114.964 113.291 65.075 – 176.020 72 76.384 76.367 37.008 – 105.005 96 58.241 57.619 13.658 – 84.979
Hasil  uji  dengan  selang  kepercayaan  95%  menunjukkan  bahwa  limbah cutting dengan  konsentrasi  58.241  ppm  dapat  mematikan  50%  populasi D. magna selama 96 jam. Selain itu, hasil uji juga menunjukkan bahwa nilai LC 50
K em at ian ( % )
semakin menurun seiring dengan meningkatnya  waktu  pemaparan.  Studi lain dari Utomo (2008) menemukan bahwa LC 50 -96 jam dari limbah cutting terhadap benur udang windu ( P . monodon ) adalah sebesar 91.706 ppm. Berdasarkan PerMenESDM Nomor 45 Tahun 2006, batasan nilai LC 50 -96 jam limbah pengeboran minyak ( used drilling mud and cutting ) adalah ≥30.000 ppm. Nilai LC 50 – 96 jam pada penelitian ini sebesar 58.241 ppm (memenuhi batas ketentuan regulasi), sehingga limbah cutting dapat langsung dibuang ke perairan tanpa dilakukan pengolahan terlebih dahulu.
3.3. Pengaruh limbah terhadap tingkah laku dan kerusakan morfologi D. magna
Tingkah laku hewan uji masih terlihat normal saat dimasukkan ke dalam media  uji  pada  waktu  ke-0.  Pada  waktu  jam  ke  3, D.  magna pada  media  uji (298.000 ppm) mulai menunjukkan tingkah laku yang tidak normal. D. magna mulai  mengalami  stres,  berenang  di  permukaan  dan  beberapa  mengalami moulting pada jam ke 6. Organisme D. magna pada seluruh konsentrasi mulai melemah  dan moulting serta berada  pada permukaan  wadah pada jam ke 12. Pada  jam  ke  24  terlihat  respon  semakin  lemah,  pergerakan  menurun  dan moulting terjadi pada seluruh media uji, kecuali pada kontrol. Kematian beberapa D. magna terjadi pada semua media uji pada jam ke-48. Setelah 72 – 96 jam, seluruh biota uji mengalami kematian dan perubahan warna pada  konsentrasi  298.000  ppm.  Gejala D.  magna sebelum  mati  secara  visual adalah sangat lemahnya pergerakan dan respon terhadap rangsangan dari luar. Kematian ditandai dengan perubahan warna tubuh.
Kerusakan  bentuk  tubuh  dapat  dilihat  dengan  membandingkan  antara bentuk  tubuh  biota  uji  pada  wadah  kontrol  dan  perlakuan. Gambar  2 merupakan  kondisi D.  magna sebelum  dilakukan  pemaparan,  terlihat  bahwa kondisi D. magna masih dalam keadaan normal. Setelah dilakukan pemaparan selama 24 jam terlihat bahwa morfologi D. magna mulai mengalami perubahan, yaitu  kedua  antena  mulai  hilang  ( Gambar  3 ).  Selanjutnya  kondisi D.  magna semakin memburuk, ditandai dengan ekor, kedua antena dan tubuh D. magna mulai  rusak  setelah  pemaparan  selama  48  jam  ( Gambar  4 ).  Pada  waktu pemaparan  72  jam  kondisi D.  magna terlihat  lebih  buruk  dari  kondisi sebelumnya,  organ  dalam  tubuh D.  magna mulai  keluar  ( Gambar  5 ).  Pada pemaparan  selama  96  jam,  kondisi  tubuh  sangat  buruk  dibandingkan  kondisi sebelumnya, struktur morfologi tubuh menjadi tidak terlihat jelas ( Gambar 6 ).
Gambar 2. Daphnia magna normal.
Gambar 3. Morfologi Daphnia magna setelah dipaparkan toksikan selama 24 jam.
Gambar 4. Morfologi Daphnia magna setelah dipaparkan toksikan selama 48  jam.
.
Gambar 5. Morfologi Daphnia magna setelah dipaparkan toksikan selama 72  jam.
Gambar 6. Morfologi Daphnia magna setelah dipaparkan toksikan selama 96 jam
Organisme D. magna pada wadah kontrol tidak ada yang mati. Konsentrasi media  uji  yang  paling  berpengaruh  terhadap  mortalitas D.  magna adalah konsentrasi  tertinggi,  yaitu  298.000  ppm.  Media  uji  memberikan  respon mortalitas  yang  begitu  cepat  terhadap D.  magna pada  awal  pemaparan, menandakan  kadar  toksikan  yang  tinggi  pada  limbah  dengan  konsentrasi tertentu.  Secara  umum  mortalitas  meningkat  seiring  dengan  bertambahnya waktu pemaparan, semakin tinggi konsentrasi toksikan maka sel tubuh D. magna semakin  mengalami  kerusakan.  Hal  tersebut  disebabkan  oleh  limbah pengeboran minyak yang mengandung zat-zat toksik yang dapat merusak organ tubuh.  Melnikov  and  Freitas (2010)  menjelaskan,  kromium  merupakan  salah satu komponen limbah cutting yang membahayakan kehidupan Daphnia . Besar kemungkinan  bahan-bahan  penyusun cutting inilah  yang  menyebabkan kematian pada D. magna . Pemaparan  terhadap cutting juga  dapat  memberikan  dampak  terhadap perubahan  tingkah  laku D.  magna .  Perubahan  tingkah  laku  ditandai  dengan pergerakan D.  magna .  yang  tidak  normal  seperti  berenang  ke  permukaan. Kondisi  ini  kemudian  menyebabkan  kerusakan  struktur  fisiologis D.  magna , seperti moulting , rusaknya kedua antena dan hancurnya struktur tubuh bagian dalam. Altindag et al . (2008) menjelaskan, salah satu dampak dari toksikan yaitu terjadi kerusakan bentuk tubuh biota uji. Perubahan morfologi atau kerusakan tubuh  hewan  uji  diduga  akibat  pengaruh  dari  salah  satu  komponen  limbah cutting , yaitu kadmium dan arsen yang dapat merusak bagian-bagian tubuh D. magna . Fenomena ini serupa dengan hasil uji toksisitas akut kadmium dan arsen terhadap D. magna yang dilakukan oleh Fikirdesici et al . (2010), yaitu kadmium dan arsen dapat merusak bagian tubuh D. magna .

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN
Hasil  analisis  probit  menunjukkan  nilai  LC 50 dari supernatan cutting terhadap D.  magna pada  waktu  pemaparan  96  jam  adalah  58.241  ppm. Supernatan cutting diduga bersifat tidak toksik karena nilai LC 50 -96 jam masih dalam kisaran yang telah ditetapkan dalam PerMenESDM Nomor 45 Tahun 2006 yaitu  ≥30.000  ppm. Oleh  karena  itu,  berdasarkan  regulasi  yang  sama,  limbah cutting dapat  langsung  dibuang  ke  lingkungan  tanpa  dilakukan  pengolahan terlebih dahulu. Namun demikian dalam pembuangannya harus mendapatkan izin dari pemerintah.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
Adhiarni  R.  1997.  Pengaruh  lanjut  kontaminasi  brine  terhadap  pertumbuhan ikan  mas  ( Cyprinus  carpio, Linn)  ukuran  4-6  cm  [Skripsi].  Departemen
Manajemen Sumberdaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Altindag A, Ergonul MB, Yigit S and Baykan O. 2008. The acute toxicity of lead nitrat  on Daphnia  magna Straus.  African  Journal  of  Biotechnology 7(23):4298-4300.
[APHA]  American  Public  Health  Association.  1995.  Standard  methods:  for  the examination of water and wastewater 19th edition . APHA. Washington DC. Barata C and Baird DJ. 2000. Determining the ecotoxicological mode of action of chemicals from measurement made on individuals : results from-instar test with Daphnia magna Straus. Aquatic Toxicology 48:195-209. Breuer E, Stevenson AG, Howe JA, Carroll J and Shimmield GB. 2004. Drill cutting accumulations  in  the  Northern  and  Central  North  Sea:  a  review  of environmental  interactions  and  Chemical  fate.  Marine  Pollution  Bulletin 48:12-25.
Busvine  JR.  1971.  A  critical  review  of  the  techniques  for  testing  insecticides, second edition. Commonwealth Agricultural Bureaux. Slough. Dodson SI, Merritt CM, Shurin JB and Redman KG. 2000. Daphnia reproductive bioassay  for  testing  toxicity  of  aqueous  sample  and  presence  of  an endocrine disrupter. US Patent 6,150,126:1-7.
Fikirdesici S, Altindag A and Ozdemir E. 2010. Investigation of acute toxicity of cadmium-arsenic mixtures to Daphnia magna with toxic units approach. Turk J Zool 36(4):543-550.
Guilhermino L, Diamantino T, Silva MC and Soares AMVM. 2000. Acute toxicity test with Daphnia magna: an alternative to mammals in the prescreening of chemical toxicity.  Ecotocxicology and Environmental Safety 46:357-362.
Hooper  HL,  Cannon  R,  Callaghan  A,  Fryer  G,  Buchanan  SY,  Biggs  J,  Steve  J, Hutchinson TH and Sibly RM. 2008. The ecological niche of Daphnia magna characterized using population growth rate. Ecology 89(4):1015-1022. Jusadi D, Meylani I dan Utomo NBP. 2008. Kadar vitamin c dalam tubuh Daphnia sp . yang diperkaya dengan vitamin c pada lama waktu pengkayaan yang berbeda. Jurnal Akuakultur Indonesia 7(1):11-17.
Mehdipour  N,  Fallahi  M,  Takami  A,  Vossoughi  G  and  Mashinchian  A.  2011. Freshwater  green  algae Chlorella  sp and Scenedesmus  obliquus enriched with B group of vitamins can enhance fecundity of Daphnia magna. Iranian Journal of Science & Technology A2:157-163.
Melnikov P and Freitas T. 2010. Evaluation of  acute chromium (III) toxicity in relation  to Daphnia  similis .  Journal  of  Water  Resource  and  Protection 3:127-130.
Novotny  V  and  Olem  H.  1994.  Water  quality:  prevention,  identification  and management of diffuse pollution. Van Nostrand Reinhold. New York.
Tersedia di http://www.bkpsl.org/ojswp/index.php/jplb
PerMenESDM (Peraturan Menteri Energi dan Sumber Daya Mineral) Nomor 45 Tahun 2006 tentang pengelolaan lumpur bor, limbah lumpur dan serbuk bor pada kegiatan pengeboran minyak dan gas bumi.
Stollewerk A. 2010. The water flea Daphnia a new model system for ecology and evolution. Journal of Biology 21:1-4.
Tyagi VK, Chopra AK, Durgapal NC and Kumar A. 2007. Evaluation of Daphnia magna as  an  indicator  of  toxicity  and  treatment  efficacy  of  municipal sewage  treatment  plant.  Journal  Applied  Science  Environmental Management 11:61 – 67.
[USEPA] United States Environmental  Protection Agency. 1987. Procedure for conducting Daphnia magna toxicity bioassay prepare for the office of solid waste. USEPA. Washington DC.
[USEPA]  United  States  Environmental  Protection  Agency.  1991.  Methods  for measuring the acute toxicity of effluent and receiving waters to freshwater and marine organisms (fourth edition) . USEPA. Washington DC.
Utomo BA. 2008. Uji toksisitas limbah hasil pengeboran minyak menggunakan studi bioassay LC 50 pada hewan uji benur udang windu ( Penaeus monodon ) [Skripsi].  Departemen  Manajemen  Sumberdaya  Perairan,  Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Wang  KS,  Lua  CY  and  Changa  SH.  2011.  Evaluation  of  acute  toxicity  and teratogenic effects of plant growth regulators by Daphnia magna embryo assay. Journal of Hazardous Materials 190:520 – 528. Zahidah, Gunawan W dan Subhan U.  2012.  Pertumbuhan populasi Daphnia spp yang diberi pupuk limbah budidaya Karamba Jaring Apung (KJA) di Waduk Cirata yang telah di fermentasi EM 4 . Jurnal Akuatika 3(1):84-94.