EKSTRAKSI ACETOGENIN DARI DAUN DAN BIJI SIRSAK ( Annona muricata L )

## DENGAN PELARUT ASETON
Siswarni MZ, Nurhayani, Suci Damayanti Sinaga * Departemen Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Sumatera Utara, Jl. Almamater Kampus USU, Medan 20155, Indonesia
* Email : damayanti.suci55@yahoo.com

## Abstrak
Sirsak  ( Annona  muricata  L )    mengandung  senyawa  bioaktif  yang  disebut  acetogenin.  Acetogenin merupakan  metabolit  sekunder  dari Annonaceae yang  disintesis  melalui  reaksi  antara  asam  asetat turunan  polikatida  yang  memiliki  rantai  panjang  pada  asam  lemak  yaitu  35-39  atom  karbon. Penelitian  ini  bertujuan untuk  menentukan  variabel  yang  berpengaruh dalam  ekstraksi  daun dan biji sirsak sehingga diperoleh yield yang tinggi serta dapat menunjukkan keberadaan senyawa acetogenin secara  kualitatif.  Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah  daun  sirsak,  biji  sirsak  dan  pelarut  aseton. Varibel berubah dalam penelitian ini adalah massa sampel serbuk daun sirsak yaitu 15 g, 25 g, 35 g dan serbuk biji sirsak yaitu 10 g, 20 g, 30 g dengan waktu ekstraksi 30 menit, 40 menit, 50 menit dan 60 menit. Pelaksanaan penelitian ini terdiri dari dua tahap. Tahap pertama adalah ekstraksi daun dan biji  sirsak  dengan  metode  sokletasi  menggunakan  pelarut  aseton sebanyak  250  mL  untuk daun, 200 mL  untuk  biji  dan  suhu  ekstraksi  ±  58 o C.  Tahap  kedua  adalah  pemurnian  hasil  ekstraksi  dengan menggunakan distilasi. Hasil penelitian diperoleh yield ekstrak daun sirsak tertinggi  adalah 55,33 % yaitu  pada  massa  sampel  15  g  dengan  waktu  ekstraksi  selama  60  menit.  Pada  biji  sirsak  diperoleh yield  ekstrak  biji  sirsak  tertinggi  adalah  62  %  dengan  massa  sampel  10  g  dan  waktu  ekstraksi  40 menit. Analisa menggunakan FTIR menunjukkan keberadaan dari gugus fungsi seperti lakton, THF, hirdroksil dan rantai alipatik yang menandakan adanya acetogenin.
Kata Kunci : acetogenin, daun sirsak, biji sirsak, sokletasi

## Abstract
Annona  muricata  L  contain  bioactive  compounds  acetogenins.  Acetogenins  which  was  synthesized through  reaction between polyketide derived-acetic acid with 35-39 carbon atom in fatty acid, is the secondary  metabolite  of  Annonaceae  plant.  This  research  aims  to  determine  the  variable  that influence in leaf and Annona muricata seed extraction so that high yield value can be obtained and to prove the presence of acetogenins compound qualitatively. The materials used are Annona muricata leaves, Annona muricata seeds and aceton. The changing variables in this research is the mass of the samples  for  Annona  muricata  leaves  powder   that  are  15 g,  25  g,  35  g  and  Annona  muricata  seeds powder that are 10 g, 20 g, 30 g which the extraction time are 30 minutes, 40 minutes, 50 minutes and 60 minutes. This research divided into two steps. The first step is the extraction of Annona muricata leaves  and  Annona  muricata  seeds  using  soxhletation  method  with  250  mL  acetone  for  Annona muricata leaves, 200 mL aceton for Annona muricata seeds  and extraction temperature is ± 58 o C. The second step is purification of the extract using distillation process.  In this research, the highest yield  value  extract of  Annona  muricata  leaves  obtained  is  55,33%  with  15g  mass  of  sample  and 60 minutes for the extraction time. The highest yield value extract of Annona muricata seeds obtained is 62  %  with  10  g  mass  of  sample  and  40  minutes  for  the  extraction  time.  FTIR  analysis  showed  the presence of functional groups such as lactone, THF, hyrdroxyl and aliphatic  chains which indicates acetogenins compound’s presence.
Keywords : acetogenins, Annona muricata leaves, Annona muricata seeds, soxhletation
Pendahuluan Selama ribuan tahun manusia telah menggunakan  berbagai  jenis  tanaman    untuk meringankan  atau  menyembuhkan  penyakit. Indonesia merupakan salah satu mega biodiversity country yang  dikenal  sebagai  gudang  tumbuhan obat. Sekitar 9.600 spesies dari 30.000 jenis flora yang  ada  di  hutan  tropika  Indonesia  diketahui memiliki  khasiat  sebagai  obat  -  obatan.  Sirsak ( Annona  muricata  L )  merupakan  salah  satu tanaman  obat  yang  ada  di  Indonesia.  Sirsak memiliki  berbagai  manfaat  baik  bagi  kesehatan
maupun sebagai insektisida nabati, yang diperoleh dari  bagian  daging  buah,  daun  maupun  bijinya. Kandungan  kimia  pada  sirsak  berupa  tanin, fitosterol,  kalsium  oksalat,  alkaloid  murisin,  dan mono tetra hidrofuran acetogenin yang bermanfaat  untuk  pengobatan  antara  lain  sebagai antibakteri,  antivirus,  antijamur,  antiparasit, antihipertensi,  antistres  dan  menyehatkan  sistem syaraf [9].
Tanaman ini biasa digunakan untuk pengidap  kanker  selama phytotherapy, juga sebagai spektrum internal dan eksternal [8].
Dalam  penelitian  ini  yang  menjadi  masalah adalah  bahwa  penggunaan  acetogenin  yang semakin  meningkat  terutama  dalam  bidang kesehatan  (sebagai  anti  kanker)  dan  insektisida nabati,  yang  berasal  dari  daun  dan  biji  sirsak belum  mendapatkan  hasil  yang  maksimal. Sehingga  diperlukan  cara  yang  efektif  dalam proses ekstraksi.

## Teori
Acetogenin  merupakan  senyawa  metabolit sekunder  dari Annonace yang  disintesis  melalui reaksi antara asam asetat, turunan polikatida yang memiliki  rantai  panjang  pada  asam  lemak  yaitu 35-39 atom karbon. Sifat dari senyawa ini berupa rantai  panjang  alipatik  dengan  gugus  hidroksil, dan asetil karbonil serta cincin 1-3 tetrahidrofuran [4].  Acetogenin  juga  ditandai  dengan  keberadaan dua unit  fungsional tetrahydrofuran hydroxylated (THF), dan cincin γ-lakton β- unsaturated [7]. Secara  ilmiah  acetogenin  memiliki  nama (IUPAC) ( 5S)-5-Methyl-3-[(2R,8R,13R)-2,8,13- trihydroxy-13-[(2,5R)-5-[(iR)-1-hydroxytridecyl]- 2-tetrahydrofuranyl]-[tridecyl-5H-furan-2-one].
Molekular  formula  dari    acetogenin  C 35 H 64 O 7 serta massa molekul relatif (Mr) 596,88 g/mol [1]. Metode yang digunakan dalam  mengekstrak acetogenin  dari  daun  dan  biji  sirsak  adalah metode  sokhletasi.  Prinsip  kerja  dari  metode sokhletasi  adalah  sampel  ditumbuk  halus  dan ditempatkan dalam kantong berpori atau extraction  chamber yang  terbuat  dari  kaca  yang kuat,  ditempatkan  dalam  ruang  dari  alat  sokhlet, pelarut  dipanaskan,  kemudian  uap  dari  pelarut dikondensasi  dengan  menggunakan    kondensor. Kemudian  uap  kontak  dengan  pelarut,  sehingga pelarut  yang  bercampur  ekstrak  bergerak  menuju ke  pipa  kapiler.  Ketika  cairan  meningkat,  lama kelamaan akan memenuhi pipa kapiler, kemudian pelarut  yang  bercampur  dengan  ekstrak    turun menuju  labu  distilasi.  Proses  ini  terjadi  secara terus  menerus  dan  dilakukan  sampai  pelarut  dari pipa  kapiler  tidak  meninggalkan  residu  saat menguap [2].
Aseton  merupakan  senyawa  non  polar  yang ditandai  dengan  memiliki  tetapan  dielektrik 20,7 + [1].  Acetogenin  adalah  senyawa  non  polar yang  ditandai  dengan    nilai  log  P  sebesar  7,71. Selain  itu  aseton  (C 3 H 6 O)  lebih  non  polar  bila dibandingkan dengan etanol dan  metanol. Aseton memiliki titik didih 56 o C [11], aseton juga aman (tidak beracun) dan tidak menyebabkan kebakaran  ataupun  ledakan,  karena  suhu  selama proses ekstraksi tidak  mencapai suhu 60 o C  maka aseton dapat mengekstrak daun dengan baik tanpa merusak senyawa acetogenin didalamnya.

## Metodologi Penelitian
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  daun  dan  biji  sirsak  sebagai bahan  baku,  dan  aseton  (C 3 H 6 O)  sebagai  pelarut ekstraksi.  Sedangkan  peralatan  yang  digunakan antara  lain  alat  sokhlet  berupa  labu  distilasi, extraction  chamber ,  refluks  kondensor,  serta  alat distilasi .
Tahap Ekstraksi Bahan baku yang telah dihaluskan, ditimbang  dan  dimasukkan  kedalam extraction chamber kemudian  dimasukkan  sejumlah  pelarut aseton  (C 3 H 6 O)  kedalam  labu.  Dirangkai  alat soklet  berupa  labu,  reflusk  kondensor, extraction chamber serta  statif  dan  klem.  Setelah  alat dirangkai,  lalu  dipanaskan  di  atas hot  plate pada suhu ± 58 ºC selama waktu tertentu.
Tahap Pemurnian Ekstrak
Hasil  ekstrak  dari  proses  ekstraksi  tersebut dimasukkan  kedalam  labu  distilasi,  alat  distilasi dirangkai  berupa  labu  distilasi,  pipa  bengkok, pendingin  leibig  dan erlenmeyer. Selanjutnya ekstrak  dipanaskan  dengan  menggunakan hot plate pada  suhu  ±  58  ºC  selama  waktu  tertentu, hingga  pelarut  teruap  dengan  baik.  Pelaksanaan proses ekstraksi kemudian di ulangi untuk variasi massa  sampel  tertentu  dan    waktu  ekstraksi selama 30, 40, 50, 60 menit.

## Hasil dan Pembahasan
Analisis Ekstrak Daun dan Biji Sirsak Hasil  ekstrak  yang  diperoleh  pada  daun sirsak  berwarna  hijau  tua  dan  hasil  ekstrak  biji sirsak  yang  diperoleh  berupa  cairan  kental berwarna kuning. Untuk membuktikan keberadaan  dari  senyawa  acetogenin  maka dilakukan  analisis  ekstrak  daun  dan  biji  sirsak dengan FTIR yang ditunjukkan pada tabel 1.

## Tabel 1. Data Vibrasi Hasil Analisis FT-IR
Gugus Fungsi Vibrasi FTIR (cm -1 ) Hasil Ekstrak Daun Sirsak Standar [5] Hasil Ekstrak Biji Sirsak OH 3380,07 3420-3250 3007,79 CH 3 -CH 2 2926,47 2990-2850 2921,96 C=O - 1750-1740 1743,32 Lactam 1699,49 1700-1510 - THF 1232,77 1375-1275 1360,53 C-O-C - 1280-1150 1159 Epoksida - 950-860 913 CH 2 - 740-720 722
30 g 20 g 10 g
Acetogenin  merupakan  senyawa  dengan rantai  panjang  asam  lemak  35-37  karbon  yang diakhiri  oleh  sebuah  -lakton  baik  jenuh  maupun tidak jenuh serta memiliki 1-3 cincin tetrahydrofuran (THF).  Dari  tabel  1  dapat  dilihat bahwa  terdapat  beberapa  gugus  yang  sama  untuk kedua  gambar  yang  mana  gugus  tersebut merupakan gugus yang menunjukkan  keberadaan dari  senyawa    acetogenin.  Maka  hasil  dari ekstraksi  daun  dan  biji  sirsak  dengan  pelarut aseton ini tidak jauh berbeda dengan standar yang ada, dimana  untuk ekstrak  daun sirsak  hasil  yang diperoleh  menunjukkan  jenis  acetogenin mono tetra hydrofuran dan untuk ekstrak biji sirsak cis- annonacin.

## Pengaruh Massa Sampel Terhadap Yield
Massa  sampel  merupakan  variabel  yang berhubungan  langsung  dengan  hasil  ekstrak  yang diperoleh selama proses ekstraksi. Semakin besar massa sampel,  maka hasil ekstrak  yang diperoleh semakin  meningkat [10]. Pengaruh  massa sampel terhadap yield dapat dilihat pada gambar 1 dan 2 berikut:
Gambar 1. Pengaruh Massa Serbuk Terhadap Yield Ekstrak Daun Sirsak
Gambar 2. Pengaruh Massa Serbuk Terhadap Yield Ekstrak Biji Sirsak
Berdasarkan  gambar  1  dan  2  di  atas  dapat dilihat  bahwa  secara  keseluruhan  penambahan massa  sampel  berbanding  terbalik  terhadap  yield yang dihasilkan.
Pada penelitian ini digunakan jumlah pelarut yang  sama  untuk  semua  variasi  massa.  Sehingga dapat  dijadikan  suatu  perbandingan  (rasio  w/v) jumlah pelarut dengan massa sampel. Secara teori dinyatakan  bahwa  semakin  besar  perbandingan rasio  antar  bahan  baku  dan  jumlah  pelarut  akan meningkatkan  yield  secara  signifikan  [10].  Dari kedua  gambar  dapat  dilihat  bahwa  secara keseluruhan  hasil  yang  diperoleh  telah  sesuai dengan teori yang ada.

## Pengaruh Waktu Ekstraksi Terhadap Yield
Waktu  ekstraksi  merupakan  waktu  yang dibutuhkan  pelarut  untuk  mencapai  zat  terlarut yang terdapat dalam sampel, mengikat zat terlarut dan  membawanya  ke  dalam  larutan  [13]. Pengaruh  waktu  ekstraksi  terhadap  yield  ekstrak daun  dan  biji  sirsak  dapat  dilihat  pada  gambar  3 dan 4 berikut:
Gambar 3. Pengaruh Waktu Ekstraksi Terhadap Yield Ekstrak Daun Sirsak
Gambar 4. Pengaruh Waktu Ekstraksi Terhadap Yield Ekstrak Biji Sirsak
10 g 20 g 30 g
Dari  gambar  3  dan  4  di  atas  dapat  dilihat bahwa  secara  garis  besar  penambahan  waktu ekstraksi  dapat  meningkatkan  yield  ekstrak  yang diperoleh.  Pada  ekstraksi  sistem  padat-cair, perpindahan  massa  terjadi  secara  difusi  di  dalam padatan  [12].  Semakin  lamanya  waktu  ekstraksi maka  semakin  lama  pula  waktu  kontak  antara pelarut dengan bahan baku, sehingga proses difusi dapat  berjalan  secara  efisien  [3].  Semakin  lama waktu  ekstraksi  maka  yield  yang  diperoleh  akan semakin tinggi. [4].
Pada    gambar  4  dapat  dilihat  bahwa  pada menit  ke  60  terjadi  penurunan  yang  signifikan untuk  setiap  variasi.  Penurunan  hasil  yield  yang terjadi  dapat  disebabkan  oleh  beberapa  faktor antara  lain  selama  proses  ekstraksi  berlangsung pelarut  akan  terus  mengalami  siklus  penguapan dan  pengembunan,  pada  titik  tertentu  akan tercapai  suatu  kesetimbangan  dimana  laju  difusi solut  dari  permukaan  padatan  ke  pelarut  akan sama besar dengan laju difusi solut dari pelarut ke padatan  atau  terjadi  kejenuhan  sehingga  pelarut yang teruapkan tidak murni lagi dan menyebabkan  zat  yang  ingin  diekstrak  akan  ikut teruapkan  dan  kembali  ke  bagian extraction chamber dan  akan  menempel  pada  kapas sehingga  hal  ini  menyebabkan  yield  akan berkurang.
Hasil  yield  ekstrak  daun  sirsak  yang tertinggi  diperoleh  pada  variasi  massa  sampel  15 g dengan waktu ekstraksi 60 menit yaitu 55,33 % dan  untuk  hasil  yield  ekstrak  biji  sirsak  yang tertinggi  diperoleh  pada  variasi  massa  sampel  10 g dengan waktu ekstraksi 40 menit yaitu 62%.

## Kesimpulan
Pelarut  aseton  (C 3 H 6 O)    dapat  digunakan untuk  mengekstraksi  senyawa  acetogenin  yang terdapat  pada  daun  dan  biji  sirsak.  Berdasarkan hasil  analisis  FTIR  terhadap  hasil  ekstraksi terdapat  gugus  lakton,  hidroksil, tetrahydrofuran , dan  rantai  karbon  alifatik  yang  menunjukkan keberadaan  dari  senyawa  acetogenin.  Hasil  yield ekstraksi  daun  sirsak  tertinggi  diperoleh  pada variasi massa sampel 15 g dengan waktu ekstraksi selama  60  menit  yaitu  sebesar  55,33%  dan  hasil yield ekstraksi biji sirsak tertinggi diperoleh pada variasi massa sampel 10 g dan waktu ekstraksi 40 menit sebesar 62 %.

## Daftar Pustaka
[1]  Adib, Perbandingan Metode Ekstraksi Maserasi  dan  Infundasi  Terhadap  Kadar
Asetogenon  Hasil  Isolasi  Daun  Sirsak ( Annona  muricata  L ),  Yogyakarta,  2014,  p. 16.
[2]   Christie  J  Geankoplis,  Transport  Processes and Unit Operations, Prentice-Hall
International, New York, 1993, p. 733.
[3]  Dyah  Tri  Wahyuni,  Simon  Bambang Widjanarko, The Effect of Different Solvent and  Extraction  Time  of  Caratenoid  Extract From  Pumpkin  with  Ultrasonic  Method, Food and Agroindustry , 3 (2015) 390-401.
[4]  Ika  Fidianingsih,  Ety  Sari  Handayani, Annona muricata Aqueous Extract
Suppresses  T47D  Breast  Cancer  Cell Proliferation,  Universa  Medicina , XXXIII (2014) 19-26.
[5]  Joseph  B.  Lambert et  al .,  Introduction  to Organic  Spectroscopy,  Macmillan  Public, New York, 1987), p. 173-177.
[6]  Marilza  S.  Costa, et  al., Larvicidal  and Cytotoxic  Potential  of  Squamocin  on  the Midgut  of Aedes  aegypti (Diptera  :
Culicidae), Toxins , VI (2014) 1169-1176.
[7]  Motoyuki  Takada, et  al .,  Definition  Of Crucial  Structural  Factors  of  Acetogenins, Potent
Inhibitors Of Mitochondrial Complex,  Biochimicaet  Biophysica  Acta, 1460 (2000) 302-310.
[8]    Mulyawati,  A.P,  dkk.,  Uji  Efektivitas  dan Identifikasi  Senyawa  Ekstrak  Biji  Sirsak ( Annona  muricata  Linn )  yang  Bersifat Bioaktif  Insektisida  Nabati  terhadap  Hama Thrips, Alchemy . II (2010) 104-157.
[9]    Rifki  Brahmono  Idrus,  Nurhayati  Bialangi, La. Alio. “Isolasi dan Karakterisasi Alkaloid dari Biji Tumbuhan Sirsak ( Annona muricata  L ).’’  Skripsi,  Program  Sarjana Fakultas  MIPA  UNG,  Gorontalo,  2012,  hal. 21
[10] Rosdiana  Moeksin,  Stevanus  Ronald  HP, Pengaruh  Kondisi,  Perlakuan  dan  Berat Sampel  Terhadap  Ekstraksi  Antosianin  dari Kelopak  Bunga  Rosela  dengan  Pelarut Aquadest  dan  Etanol,  Jurnal  Teknik  Kimia 16, (2009) 4 .
[11]  Sigma-Aldrich,  “Materil  Safety  Data  Sheet Acetone”,  2012.Ekstraksi  Agar  –  Agar, Ekuilibrium 6, (2007) 53-58.
[12]  Sperisa Distantina, Endah Fadilah, Artati K. Enny, Pengaruh Rasio Berat Rumput Laut  – Pelarut  Terhadap  Ekstraksi  Agar  –  Agar, Jurnal Ekuilibrium 6, (2007) 53-58.
[13]  Trupti  P.  Sawant  and  Rajendra  S.  Dongre, Bio-Chemical  Compositional  Analysis  Of Annona  muricata :  A  Miracle  Fruit’s Review,  International  Journal  of  Universal Pharmacy and  Bio  Sciences,  3,  (2014)  87- 93.