## Pola Pertumbuhan dan Identifikasi Genetik Turbo setosus Gmelin, 1791
[Turbinidae, Gastropoda]
Dandi Saleky 1 , Febriyani Eka Supriyatin 2 , Muhammad Dailami 2 *
1 Jurusan Manajemen Sumberdaya Perairan, Universitas Musamus Jl. Kamizaun Mopah Lama, Merauke, 99600, Indonesia 2 Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Brawijaya Jl. Veteran, Kota Malang, 65149, Indonesia Email: muhdailami@ub.ac.id

## Abstract
Growth Pattern and Genetic Identification of Turbo setosus Gmelin, 1791 [Turbinidae, Gastropod]
Morphological dan genetic identification is an essential part of biology and ecological study. Environmental degradation, physical and chemical facto in water, and utilization of gastropod by society  will  give  impact  in  distribution  pattern,  population  size,  morphology  and  genetic characteristic of the snail. This research aims to analyze the growth pattern and molecular aspect of Turbo setosus. The variable that examined is total weight and length, and cytochrome oxidase subunit  one  gene  sequence.  The  growth  factor  of  T.  setosus  is  negative  allometric,  which  means weight growth is slower than the length growth. The total length of cytochrome oxidase subunit 1 of these samples were 650 base pairs. Based on the DNA barcoding analysis, the sequence is 96.92% identic with the sequence of T. setosus in GenBank. The phylogenetic tree was reconstructed with neighbour-joining methods and 1000 replication bootstrap, show the clade grouping based on the similarity and genetic distance of the species. The sequence data is vital for species identification fast and accurately.
Keywords : growth; negative allometric; DNA barcoding; phylogenetic; Turbo setosus

## Abstrak
Identifikasi  morfologi  dan  genetik  menjadi  bagian  penting  dari  setiap  studi  biologi  maupun ekologi, degradasi lingkungan, faktor fisik-kimia lingkungan dan pemanfaatan gastropoda secara terus menerus akan mempengaruhi penyebaran, penurunan populasi,  karakteristik morfologi dan juga karakter molekuler spesies. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis pola pertumbuhan dan karakter molekuler Turbo setosus. Variabel yang diukur adalah berat total dan panjang total serta identifikasi molekuler dengan menggunakan gen sitokrom oksidase I. Pola pertumbuhan T. setosus adalah  allometrik  negatif  yang  berarti  pertambahan  berat  lebih  lambat  dari  pertambahan panjang.  Hasil  identifikasi  dengan  DNA  barcoding  diperoleh  spesies  T.  setosus  dengan  panjang sekuen  DNA  650  bp.  Rekonstruksi  filogenetik  dengan  metode  Neighbor-Joining  boostrap  1000x memperlihatkan  pengelompokan  sekuen  berdasarkan  kimiripan  dan  jarak  genetik  antar  spesies. penting dalam identifikasi spesies secara cepat, tepat dan akurat.
Kata kunci : pertumbuhan; allometrik negatif; DNA barcoding; filogenetik; Turbo setosus

## PENDAHULUAN
Gastopoda  dan  bivalvia  banyak dimanfaatkan sebagai sumber bahan makanan  dan  protein  bagi  masyarakat
(Saleky et  al .,  2016;  Soeharmoko,  2010). Degradasi  lingkungan,  faktor  fisika-kimia perairan,  lingkungan  dan  pemanfaatan gastropoda  secara  terus  menerus  akan mempengaruhi  penyebaran,  (Ramesh  &
Ravichandran, 2008; Rumahlatu
dan Leiwakabessy,  2017),  ukuran  populasi  (Putra, Zainuri,  &  Endrawati,  2014),  karakteristik morfologi dan juga karakter molekuler spesies tersebut (Saleky et al ., 2016).  Keanekaragaman gastopoda  yang  tinggi    menimbulkan kesulitan  dalam  identifikasi  spesies  (Layton, Martel, & Hebert, 2014).
Identifikasi  morfologi  dan  genetik menjadi  bagian  penting  dari  setiap  studi biologi  maupun  ekologi,  sehingga  perlu dilakukan  identifikasi  spesies  secara  cepat, tepat  dan  akurat  (Galan,  Mendez,  &  Cruz, 2018;  Layton et  al .,  2014).  Salah  satu  kunci identifikasi  gastropoda  secara  morfologi adalah  bagian  cangkangnya  (Galan et  al ., 2018). Selain itu,  cangkang  ini juga berperan penting  sebagai  perlindungan  tubuhnya yang  lunak  dan  juga  perlindungan  diri  dari pemangsa (Sälgeback, 2006).
Penggunaan  karakter  morfologi  dalam mengidentifikasi  spesies  gastropoda  sering kali  terjadi  kesalahan  akibat  adanya kemiripan  morfologi  maupun    warna  (Rao et al .,  2018).  Selain  itu,  adanya  struktur tambahan pada cangkang
dan
mereduksinya  beberapa  karakter  cangkang (Karyanto
&
Indrowati, 2004) juga
berkontribusi  dalam  kesalahan  identifikasi secara
morfologi.
Penggunaan DNA
barcoding sebagai
alat
dalam mengidentifikasi    spesies  sangat  penting ketika identifikasi dengan morfologi menemui kendala  (Naseem  &  Tahir,  2018).    DNA barcoding telah  banyak  digunakan  untuk melengkapi  pendekatan  morfologis  dalam identifikasi  spesies  dan  dalam  merekonstruksi filogenetik  (Hebert,  Ratnasingham,  &  de Waard, 2003a; 2003b). Kompleksitas lingkungan  mempengaruhi  struktur  genetik baik  keragaman  dan  juga  jarak  genetik  dari gastropoda  (Arnaud et  al .,  1999).  DNA barcoding sebelumnya telah dilakukan pada kelompok  gastropoda  Turbinidae  seperti Turbo  sparverius , Turbo  bruneus , Lunella sp. serta  digunakan  dalam  menguji  bahan makanan,  mengidentifikasi  parasit  serta memantau perdagangan ilegal suatu spesies (Tahir & Akhtar, 2016).
Kepala  Burung  Papua  kaya  akan sumberdaya  alam  yang  memiliki  berbagai
jenis  gastropoda,  salah  satunya  yaitu  bia mata  bulan  ( Turbo sp.)  (Saleky et  al .,  2016). Penelitian ini dilakukan untuk menginventarisir Turbo sp.  di  daerah  Kepala  Burung  Papua ( Headbird  Seascape  Papua ).  Data  yang dihasilkan dapat menunjang kegiatan pengelolaan  dan  konservasi  sumberdaya khususnya  dalam  menghadapi  masalah  - masalah  lingkungan  seperti  fragmentasi habitat dan tekanan antropogenik (Layton et al ., 2014).

## MATERI DAN METODE
Sampel  diambil  di  perairan  Pulau Mansinam  Kabupaten  Manokwari  Papua Barat  (Gambar  1).  Sampel  dikoleksi  pada malam  hari  saat  terjadinya  surut  air  laut dengan  cara  koleksi  bebas.  Jumlah  sampel yang diambil adalah 123 individu.
Identifikasi  morfologi  dilakukan  dengan menggunakan  buku  identifikasi  gastropoda Indonesian  Shells  I  (Dharma,  1988)  dan Recent  &  Fossil  Indonesian  Shell  (Dharma, 2005).  Pengukuran  morfometrik  dilakukan dengan  mengukur  panjang  cangkang  dan berat  total  dengan  menggunakan  jangka sorong  dan  timbangan  digital,  dilanjutkan dengan  pengambilan  sampel  jaringan (tissue) untuk  analisis  DNA.  Sampel  jaringan disimpan  dan  diawetkan  menggunakan etanol 96% sampai digunakan.

## Analisis molekuler
Genom  DNA  diambil  dari  bagian  kaki perut T . setosus .  Proses  Isolasi  DNA  dilakukan dengan  menggunakan  DNA extraction kit (Qiagen  kit,  USA)  dengan  prosdeur  standar dari produsen.
Perbanyakan
COI menggunakan  Teknik polymerase  chain reaction (PCR)  dengan  primer  forward LCO1490 (5’ -ggtcaacaaatcataaagatattgg- 3')  dan  primer  reverse  HCO2198 (5’ - taaacttcagg  gtgaccaaaaaatca- 3’) (Folmer et al , 1994). Reaksi PCR dilakukan dalam total volume 25 µl dengan jumlah template DNA 1 -  4  µl.  Profil  suhu  dalam  proses  PCR  yaitu denaturasi  94 o C,  annealing  50 o C,  dan extension  72 o C.  Produk  PCR  dielektroforesis untuk  dengan  menggunakan  gel  agarosa 1%,  buffer  TBE  dengan  tegangan  100-volt selama  30  menit.  Pewarnaan  DNA  dilakukan
Gambar 1 . Lokasi penelitian Morfogenetik Turbo setosus
dengan  menggunakan  Etidium  Bromida  dan divisualisasi  menggunakan  UV  transluminator. Sekuensing  dilakukan  dengan  mengirim produk PCR ke lembaga 1 st Base Malaysia.

## Analisis Data
Panjang  dan  berat  total  adalah variabel  terukur  dalam  penelitian  ini.  Analisis panjang-berat menggunakan uji regresi linear dengan  menggunakan software Microsoft Excel 2010  dengan  rumus:  W  =  aL b yang mana  W  adalah  berat  tubuh  (gram),  L adalah panjang tubuh (mm) sedangkan nilai a dan b adalah konstanta.
Data  sekuen  DNA  dari  dua  rah  yaitu forward  dan  reverse,  disesuaikan  dengan elektroferogram  yang  dihasilkan.  Penjajaran (alignment)  menghasilkan  satu  sekuens dengan  urutan  yang  sama  dan  disimpan dalam  format  fasta.  Sekuens  dari  semua sampel  disejajarkan  (alignment)  dengan metode  ClustalW  (1.6)  (Kumar,  Stecher,  & Tamura,  2016)  dalam  program  MEGA ( Moleculer  Evolutionary  Genetic  Analysis )  6
(Tamura et  al .,  2013).  Data  sekuen  DNA dibandingkan dengan data GenBank
(National
Center for Biotechnology
Information  (NCBI)  dengan  aplikasi  BLAST ( basic local alignment search tools ) (Morgulis et  al .,  2008)  untuk  menentukan  spesies berdasarkan data pembanding yang tersedia  di  GenBank.  Analisis  DNA  juga dilanjukan dengan menghitung jarak genetik antar  spesies  dan  juga  analisis  pohon filogenetik Turbo sp.  menggunakan  metode Neighbor-Joining (NJ)  (Saitou  &  Nei,  1987) dengan  model  Kimura  2-parameter,  nilai bootstrap 1000x  (Efron,  Halloran,  &  Holmes, 1996).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Jumlah  sampel  gastropoda  yang diambil  dari  Pulau  Mansinam  Kabupaten Manokwari  Papua  Barat  sebanyak  123 individu. Hasil identifikasi morfologi menunjukkan bahwa sampel tersebut adalah dari spesies Turbo setosus . Sampel ini memiliki operculum yang  berwarna  putih  dengan corak  hijau  gelap.  Cangkang  bagian
dalamnya  berwarna  putih  dan  cangkang luar berwarna hijau kehitaman . Pada bagian luar cangkang terdapat lurik yang cembung sehingga  mebuat  cangkangnya  seakan bergelombang  kecil.  Adapun  foto  morfologi dari  sampel  yang  dianalisis  yaitu  disajikan pada Gambar 2.
Gambar 2. Bentuk Morfologi Turbo setosus
Turbo  setosus merupakan  gastropoda laut  yang  termasuk  dalam  famili  Turbinidae yang  dimanfaatkan  oleh  masyarakat  pesisir sebagai sumber makanan yang mengandung  berbagai    protein  dan  mineral (Lestari,  Azrianingsih,  &  Hendrian,  2018). Spesies  ini,  secara  ekologi    menjadi  bagian yang  tidak  terpisahkan  dari  rantai  makanan yang  ada  di  perairan  (Srimariana,  2015). T. setosus kebanyakan  hidup  pada  daerah intertidal  berbatu  (Baharuddin,  Basir,  & Zainuddin, 2019; Saleky et al ., 2019).

## Hubungan Panjang Berat dan Pola Pertumbuhan
Hasil  pengukuran  Panjang  dan  berat dari sampel T. Setosus , diperoleh nilai panjang total berkisar 32.27 - 60.02 mm dan berat total berkisar  10.9  -  67.29  gr.  Hewan  ini  dapat mencapai  ukuran  6  -  7  cm  dan  berada  di perairan  yang  tenang  (Dharma,  2005)  dan dapat  ditemukan  pada  daerah  intertidal berbatu  di  pesisir  utara.  Spesies T.  setosus sering  ditemukan  hidup  bersama  dengan spesies lain seperti T. sparverius dan T. bruneus (Saleky et al ., 2019, 2016) .
Hasil  perhitungan  panjang  berat T. setosus diperoleh  persaman  W  =  0.00057L 2.841 dengan  nilai  R²  =  0.953,  dimana  W  adalah berat  (gram)  dan  L  adalah  Panjang  (cm). Hubungan panjang dan berat total T. setosus yang diperoleh menunjukkan hubungan linier dengan persamaan garis Y = 0.4898x + 30.229 dengan  nilai  koefisien  korelasi  r  =  0.976  dan nilai R² = 0.953 (Gambar 3). Berdasarkan nilai R²  yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa kontribusi panjang cangkang terhadap berat adalah  0.953  %.  Hubungan  ini  juga menunjukkan  ukuran  panjang  cangkang dapat diduga dari ukuran  bobot tubuh.
Pola  pertumbuhan T.  setosus dapat dilihat  dari  nilai  b  pada  hasil  regresi  linear yaitu sebesar
2.841462
(<3) yang menunjukkan  nilai  yang  lebih  rendah  dari  3. Hasil  tersebut    mengindikasikan  bahwa  pola
Gambar 3. Regresi linear hubungan panjang-berat T. setosus
y = 0.4898x + 30.229 R² = 0.9139 n=123 0 10 20 30 40 50 60 70 0 20 40 60 80 Bera t To ta l ( gr) Panjang Total (mm)
pertumbuhan  relatif T.  setosus yang  dikoleksi dari  Pulau  Mansinam  Manokwari  adalah allometrik  negatif  yang  dapat  diartikan bahwa penambahan berat lebih lambat dari pada  panjang.  Pola  pertumbuhan  allometrik negatif juga ditemukan pada jenis T. bruneus , T.  sparverius (Saleky et  al .,  2016), Modiolus modulaides (Zabarun,  2016)  dan Strombus luhuanus (Jala, Haumahu, & Uneputty, 2014). Pertumbuhan  gastropoda  dicirikan  dengan bertambahnya  ukuran  dan  bobot  yang dipengaruhi  oleh  berbagai  faktor  seperti makanan,  jenis  kelamin,  faktor  fisik-kimia perairan (Jala et al ., 2014).

## Karakter Molekuler
DNA  sekuens  yang  dihasilkan  dari  hasil amplifikasi  dan  sekuensing  gen  sitokrom oksidase I (COI) gastropoda yang dikoleksi di Pulau  Mansinam  Manokwari,  Papua  barat memiliki  panjang  sekuen  DNA  650  pasang basa  (pb).  Hasil  identifikasi  dengan  teknik DNA barcoding menunjukkan bahwa sampel dalam penelitian ini adalah spesies T. setosus dengan tingkat similaritas 95.85 - 96.92 % dan query coverage sebesar 100 % (Tabel 1).
Semua sekuens gen COI dari sampel T. setosus tidak semuanya  memiliki urutan basa nukleotida  yang  identik.  Terdapat  10  titik perbedaan  nukleotida  yang  ditemukan dalam sekuens tersebut (Tabel 3). Terdapat 8 titik  perbedaan  yang  terjadi  akibat  adanya
mutasi  dari  basa  A  menjadi  G  atau sebaliknya, dan juga ditemukan 2 perbedaan nukleotida yang diakibatkan oleh mutasi  dari  basa  C  menjadi  T.  Mutasi  antara basa G dan A lebih banyak ditemukan pada sampel ini dari pada mutase antara A dan T.
DNA barcoding menjadi teknik identifikasi
spesies
dan membantu mempercepat penemuan spesies baru  (Tahir et  al .,  2016).  Keragaman  DNA  mitokondria terutama  disebabkan  oleh  tingkat  mutasi yang  tinggi  dan  memiliki  implikasi  potensial untuk morfologi dan evolusi (Fourdrilis, Martins, &  Backeljau,  2018).  Gen  COI  dapat digunakan  sebagai  marka  gen  dalam identifikasi  dan  taksonomi  baik  pada tingkatan populasi maupun spesies (Nuryanto & Solihin, 2006), dalam kegiatan pengelolaan dan  juga  konservasi  spesies  penting  dari kepunahan (Ghosh et al., 2019).
Kandungan  nukleotida  G+C  dari seluruh  sampel T.  Setosus rata  rata  sebesar 36.95  % sedangkan  kandungan  A+T sebesar 63.05 % (Tabel 2). Kandungan A+T  sampel ini lebih  rendah  dari  pada  kandungan  G+C yang  menjadikan  sekuens  ini  mudah didenaturasi  pada  saat  proses  amplifikasi dengan  menggunakan polymerase  chain reaction .  Suhu  denaturasi  yang  digunakan dalam proses PCR sampel ini yaitu 94 o C, yang termasuk dalam kategori relative rendah.
Tabel 1. Hasil identifikasi dengan menggunakan BLAST ( Basic Local Alignment Search Tool ) No  Identifikasi spesies Lokasi Query Coverage (%)  Hasil BLAST (%) 1 Turbo setosus Pulau Mansinam, Manokwari 100 96.92 2 Turbo setosus Pulau Mansinam, Manokwari 100 95.85 3 Turbo setosus Pulau Mansinam, Manokwari 100 96.92 4 Turbo setosus Pulau Mansinam, Manokwari 100 96.77
Tabel 2. Komposisi nukleotida T. setosus asal Pulau Mansinam Spesies T (%) C  (%) A  (%) G  (%) C + G (%) A + T (%) Turbo setosus -1 39.4 16.1 23.4 21.1 37.2 62.8 Turbo setosus -2 39.7 15.8 23.9 20.6 36.4 63.6 Turbo setosus -3 39.4 16.1 23.4 21.1 37.2 62.8 Turbo setosus -4 39.4 16.1 23.6 20.9 37 63 Rata - rata 39.5 16.0 23.6 20.9 36.95 63.05
Tabel 3. Tabel mutasi gen COI yang menyebabkan polimorfisme dari 4 sampel T. setosus
68 146 197 254 370 476 500 503 554 629 Turbo setosus (1) A G G G C A G G C G Turbo setosus (2) G A A A T G . A T A Turbo setosus (3) . . . . . . . . . . Turbo setosus (4) . . . . . . A . . .
Sekuen  DNA T.  setosus dapat mengalami  perubahan  yang  disebut  mutasi. DNA  mitokondrai  dan  DNA  inti  memiliki  laju mutasi yang berbeda yang dapat menggambarkan  perbedaan  aspek  sejarah dan biologi populasi (Sunnucks, 2000). Mutasi gen  dapat  terjadi  secara spontaneous mutation dan induced mutation yang dapat berdampak  baik  ataupun  negatif  yang dapat  berupa transition ataupun mutasi transvertion (Sobrizal,  2017).  Mutasi  antara basa G dan A, basa C dan T disebut sebagai mutase transisi karena terjadi antar basa purin dengan purin atau pirimidin dengan pirimidin. Mutasi transisi merupakan mutase yang sering terjadi dibandingkan dengan mutasi transversi, karena mutasi ini umumnya bersifat nonsynonymous. Perubahan nukleotida dapat  terjadi  akibat  dari  pola  adaptasi organisme  terhadap  perubahan  lingkungan (Prehadi et  al .,  2015).  Terdapat  beberapa jenis  mutasi  lain  yang  biasa  terjadi  pada makhluk hidup yaitu  delesi, inversi, translokasi dan transposisi  (Nuryanto & Solihin, 2006).
Analisis haplotype dari ke 4 sekuen DNA T.  setosus diperoleh  3  haplotipe  yang berbeda
dengan keanekaragaman haplotype sebesar 0.83 (Tabel 4). Pengelompokan haplotype tersebut
didasarkan pada adanya perbedaan urutan sekuens gen COI dari sampel yang dianalisis. Sampel satu dan tiga memiliki urutan sekuens yang 100% identik sehingga dapat dikelompokkan  menjadi  satu  haplotype. Berbeda  halnya  dengan  sampel  2  dan  4 yang  memiliki  perbedaan  nukleotida  dari sampel 1 dan 3, sehingga dipisahkan menjadi haplotype tersendiri.
Haplotype  adalah  sekelompok  alel dalam  suatu  organisme  yang  diwarisi  dari induk  kepada  keturunannya  (Bergstrom, 2001). Keragaman haplotype sangat penting bagi kehidupan kelompok organisme, karena
memungkinkan suatu spesies dapat bertahan terhadap
perubahan lingkungan.
Keragaman
genetik yang rendah
meningkatkan  risiko  kepunahan  karena mengurangi
potensi spesies
untuk beradaptasi  dengan  perubahan  lingkungan (Hobbs,  Herwerden,  Jerry,  Jones,  &  Munday, 2013).
Tabel 4. Daftar  haplotipe  gen  COI  dari  4 sampel T. setosus
Haplotipe Sekuen DNA 1 1,3 2 2 3 4
Jumlah  haplotype  sangat  dipengaruhi oleh jumlah sampel yang dianalisis, kemungkinan jumlah haplotype akan bertambah  dengan  bertambahnya  jumlah sampel  yang  dianalisis.  Hasil  analisis  juga memperlihatkan  haplotype T.  setosus asal Pulau Mansinam berbeda dengan haplotype T. setosus yang dikoleksi dari Taiwan (Williams, 2007).  Kondisi  tersebut  dapat  terjadi  akibat tidak  terjadinya  aliran  karakter  genetik  antar populasi T.  setosus .  Organisme  laut  seperti gastropoda cenderung menetap dan mengalami fase larva planktonik. Hal ini yang menyebabkan gastropoda cendrung memiliki  struktur  genetik  yang  lebih  rendah dibandingkan  dengan  organisme  yang  aktif berpindah (Kyle & Boulding, 2000).
Rekonstruksi pohon filogenetik T. setosus (Gambar  4)  dibentuk  dari  4  sekuen  DNA T. setosus asal  Pulau  Mansinam  dengan beberapa  sekuen  DNA  dari  GenBank  dan Trochus niloticus (Geiger & Thacker, 2005) dan Trochus_maculatus (Kano,  2007) sebagai out grup.  Informasi  mengenai  asal  lokasi,  nomor akses  sekuens  Genbank  dan  referensinya disajikan  dalam  Tabel  5.  Pohon  filogenetik membentuk 2 clade yaitu clade 1 terdiri atas
spesies T. setosus , T. sparverius dan T. bruneus dan clade 2 terdiri atas spesies T. marmoratus , T. revii , T. jourdani dan T. petholatus . T. setosus asal Mansinam juga membentuk clade yang sama dengan T. setosus asal Taiwan dengan nilai boostrap 100.
Sejarah  populasi  dan  spesies  dari berbagai  tingkat  kehidupan  dapat  dipelajari dari  pohon  filogenetik  berdasarkan  data molekuler  (Grande et  al .,  2004).  Filogenetik
merupakan    klasifikasi  secara  taksonomi spesies  berdasarkan  sejarah  evolusi,  analisis yang  dilakukan  berdasarkan  analisis  sekuen DNA  spesies.  Model  matematika  digunakan dalam  menyimpulkan  sejarah  evolusi  spesies melalui  data  molekuler  (Yuan,  Zhu,  &  Liu, 2014).
Tingginya nilai boostrap
mempengaruhi  rekonstruksi  filogenetik  yang terbentuk, semakin tinggi nilai boostrap maka semakin  baik  pohon  yang  terbentuk  (Horiike et al ., 2009).
Gambar 4. Rekonstruksi  pohon  filogenetik  dengan  metode  Neighbor-Joining  menggunakan  11 sekuen  DNA  dari  GenBank  dengan Trochus  niloticus dan Trochus  maculatus sebagai out grup.
Tabel 5. Sekuens  gen  COI  dari  GenBank  NCBI  yang  digunakan  dalam  pembuatan  pohon filogenetik
No  Species Lokasi Acc. GenBank  Referensi 1 T. bruneus Manokwari, Papua barat MK273558 (Saleky et al ., 2016) 2 T. bruneus Manokwari, Papua barat MK273557 (Saleky et al ., 2016) 3 T. bruneus Manokwari, Papua barat MK273556 (Saleky et al ., 2016) 4 T. setosus Taiwan AM403909 (Williams, 2007) 5 T. sparveius Taiwan AM403911 (Williams, 2007) 6 T. reevii Ogasawara Islands, Japan  AB297736 (Nakano, Takahashi, & Ozawa, 2007) 7 T. petholatus Japan AM403877 (Williams, 2007) 8 T. jourdani Japan AM049382 (Williams & Ozawa, 2006) 9 T. mamoratus Japan AM403895 (Williams, 2007) 10 Trochus niloticus Moorea, French Polynesia AY923938 (Geiger & Thacker, 2005) 11 T. maculatus Japan AB365224 (Kano, 2007)
Turbo setosus-1-Mansinam
Turbo setosus-3-Mansinam
Turbo setosus-4-Mansinam
Turbo setosus-2-Mansinam
AM403909.Turbo setosus
MK273557.Turbo bruneus
MK273556.Turbo bruneus
MK273558.Turbo bruneus
AM403911.Turbo sparverius
AM403895.Turbo marmoratus
AB297736.Turbo reevii
AM049382.Turbo jourdani
AM403877.Turbo petholatus
AY923938.Trochus niloticus
AB365224.Trochus maculatus

## Tabel 6. Jarak genetik sekuens gen COI dari T. setosus
Spesies 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Turbo setosus -1- Mansinam * * * * * * * * * * * * * Turbo setosus -2- Mansinam 0.006 * * * * * * * * * * * * Turbo setosus -3- Mansinam 0.000 0.006 * * * * * * * * * * * Turbo setosus -4- Mansinam 0.001 0.007  0.001 * * * * * * * * * * AM403911. Turbo sparverius 0.053 0.049  0.053  0.052 * * * * * * * * * MK273557. Turbo bruneus 0.047 0.045  0.047  0.047  0.045 * * * * * * * * MK273556. Turbo bruneus 0.048 0.046  0.048  0.047  0.046  0.001 * * * * * * * MK273558. Turbo bruneus 0.048 0.046  0.048  0.047  0.046  0.001  0.000 * * * * * * AM403909. Turbo setosus 0.014 0.019  0.014  0.014  0.059  0.050  0.051  0.051 * * * * * AM049382. Turbo jourdani 0.072 0.070  0.072  0.071  0.064  0.058  0.059  0.059 0.076 * * * * AM403877. Turbo petholatus 0.081 0.077  0.081  0.081  0.077  0.072  0.073  0.073 0.083 0.059 * * * AB297736. Turbo reevii 0.059 0.058  0.059  0.058  0.061  0.056  0.057  0.057 0.067 0.048 0.059 * * AM403895. Turbo marmoratus 0.065 0.061  0.065  0.065  0.054  0.054  0.055  0.055 0.063 0.060 0.067  0.059 * AY923938. Trochu s niloticus 0.100 0.099  0.100  0.100  0.104  0.096  0.095  0.095 0.105 0.108 0.107  0.099  0.091 AB365224. Trochu s_maculatus 0.126 0.129  0.126  0.125  0.122  0.127  0.126  0.126 0.128 0.136 0.119  0.123  0.136 0.119
Jarak  genetik  antar  individu T.  setosus asal  Pulau  Mansinam  sebesar  0 – 0.7  %, sedangkan jarak genetik T. setosus asal Pulau Mansinam  dengan T.  setosus asal  Taiwan berkisar  1.4 – 1.9  %.  Jarak  genetik  rata-rata semua  sampel  sebesar  6.7  %.  Jarak  genetik dalam spesies yang sama adalah kurang dari 4 % sedangkan antar spesies lebih dari 4 %.

## KESIMPULAN
Pertumbuhan  dari  T.  setosus  yang diambil dari daerah adalah alometrik negatif, artinya pertumbuhan Panjang tubuhnya lebih cepat  dari  pada  berat  tubuhnya.  Data sekuens  gen  COI  yang  diperoleh  memiliki Panjang  650  pasang  basa  dan  memiliki kemiripan  antara  95.85  -  96.92%  dengan sekuens T.  setosus dari  GenBank.  Pohon filogenetik  menunjukkan  bahwa  sekuens  T. setosus  asal  pulau  Mansinam  berada  dalam satu  kelompok  dengan  T.  setosus  dari Genbank  dengan  dukungan  nilai  bootstrap 100%.

## DAFTAR PUSTAKA
Arnaud,  J.,  Madec,  L.,  Bellido,  A.,  &  Guiller, A.,1999.  Microspatial  genetic  structure  in the land snail Helix aspersa (Gastropoda : Helicidae). Heredity ,  83:110 – 119.  doi:
10.1046/j.1365-2540.1999.00565.x
Baharuddin, N., Basir, N. H. M., & Zainuddin, S. N. H., 2019. Tropical intertidal gastropods:
Insights on diversity, abundance, distribution  and  shell  morphometrics  of Pulau  Bidong,  Malaysia. AACL  Bioflux ,
12(4): 1375 – 1387. Bergstrom,  D.  E.,  2001. Haplotype .  In  S. Brenner & J. H. Miller (Eds.), Encyclopedia of Genetics (pp. 911 – 912). doi: 10.1006/rwgn.2001.0584
Coenye, T., & Vandamme, P., 2003. Extracting phylogenetic  information  from  whole- genome  sequencing  projects:  The  lactic acid bacteria as a test case. Microbiology ,  149(12):  3507 – 3517.  doi:
10.1099/mic.0.26515-0
Dharma,  B.,  1988.  Indonesian  shells  I.
California: Hemmen. 135 p.
Dharma,  B.,  2005.  Recent  and  Fossil Indonesian  Shells.  California:  Hemmen. 424 p.
Efron,  B.,  Halloran,  E.,  &  Holmes,  S.,1996.
Bootstrap
confidence
levels for phylogenetic trees. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A , 93(23):13429 – 13434. doi: 10.1073/pnas.93.14.7085
Folmer,  O.,  Black,  M.,  Hoeh,  W.,  Lutz,  R.,  & Vrijenhoek,  R.,  1994.  DNA  primers  for amplification
of
mitochondrial
cytochrome  c  oxidase  subunit  I  from diverse  metazoan  invertebrates. Mol. Mar. Biol. Biotechnol. , 3(5): 294 – 299.
Fourdrilis,  S.,  Martins,  A.M.  de  F.,  &  Backeljau, T.,  2018.  Relation  between  mitochondrial DNA  hyperdiversity,  mutation  rate  and mitochondrial  genome  evolution  in Melarhaphe  neritoides (Gastropoda: Littorinidae) and other
Caenogastropoda. Sci. Rep. , 8(17964): 1 – 12. doi: 10.1038/s41598-018-36428-7
Galan,  G.  L.,  Mendez,  N.  P.,  &  Cruz,  R.  Y.
Dela.,  2018.  DNA  bacoding  of  three selected gastropod species
using cytochrome  oxidase  (COI)  gene. An. West  University  Timisoara,  Ser.  Biolog. , 21(1): 93 – 102.
Geiger, D.L., & Thacker, C.E., 2005. Molecular phylogeny  of  Vetigastropoda  reveals non-monophyletic Scissurellidae,
Trochoidea,  and  Fissurelloidea. Mollusc. Res. , 25(1):47 – 55. doi: 10.1.1.435.4190
Ghosh,  A.,  Basu,  S.,  Khatri,  H.,  Chandra,  K., & Thakur,  M.,  2019.  Ascertaining  species  of origin  from  confiscated  meat  using  DNA forensics. Mitochon.  DNA  Part  B:  Res. ,
4(1):329 – 331. doi: 10.1080/23802359.2018.1544041
Grande,  C.,  Templado,  J.,  Cervera,  J.L.,  &
Zardoya, R., 2004. Phylogenetic relationships  among  Opisthobranchia
(Mollusca: Gastropoda) based on mitochondrial cox 1, trnV, and rrnL genes. Mol.  Phylogenet.  Evol. ,  33(2):  378 – 388.
doi: 10.1016/j.ympev.2004.06.008
Hebert,  P.D.N.,  Cywinska,  A.,  Ball,  S.L.,  &  de
Waard, J.R., 2003a. Biological
identifications  through  DNA  barcodes. Proc.  Royal  Soc.  B ,  270(1512):  313 – 321. doi: 10.1098/rspb.2002.2218 Hebert,  P.D.N.,  Ratnasingham,  S.,  &  de Waard, J.R., 2003b. Barcoding animal life: cytochrome  c  oxidase  subunit  1
divergences  among  closely  related species. Proc.  Royal  Soc.  B. ,  270:96 – 99. doi: 10.1098/rsbl.2003.0025
Hobbs,  J.P.,  Herwerden,  L.  van,  Jerry,  D., Jones,  G.,  &  Munday,  P.,  2013.  High Genetic  Diversity  in  Geographically Remote  Populations  of  Endemic  and Widespread  Coral  Reef  Angelfishes (genus:  Centropyge). Diversity ,  5(1):39 – 50. doi: 10.3390/d5010039
Horiike, T., Miyata, D., Hamada, K., Saruhashi, S.,  Shinozawa,  T.,  Kumar,  S.,  Tateno,  Y., 2009.  Phylogenetic  construction  of  17 bacterial  phyla  by  new  method  and carefully  selected  orthologs. Gene ,  429:
59 – 64. doi: 10.1016/j.gene.2008.10.006 Jala,  S.,  Haumahu,  S.,  &  Uneputty,  P.,  2014. Variasi  Morfometrik  dan  Hubungan Panjang Berat. J. Triton , 10(2): 122 – 130.
Kano, Y., 2007. Vetigastropod phylogeny and a  new  concept  of  Seguenzioidea: independent  evolution  of  copulatory organs  in  the  deep-sea  habitats. Zool. Scr. ,  37(1):1 – 21.  doi:  10.1111/j.1463-6409.
2007.00316.x
Karyanto, P., & Indrowati, M., 2004. Cangkang Gastropoda Ekosistem Mangrove
Ekosistem  Mangrove  Cilacap  Sebagai Alternatifsumber  Pembelajaran  Moluska; Gastropoda. Bioedukasi ,  1(1):1 – 6.  doi: 10.20961/bioedukasi-uns.v1i1.3984
Kumar,  S.,  Stecher,  G.,  &  Tamura,  K.,  2016. MEGA7:  Molecular Evolutionary Genetics Analysis  Version  7.0  for  Bigger  Datasets. Mol.  Biol.  Evol. ,  33(7):1870 – 1874.  doi:
10.1093/molbev/msw054 Kyle, C.J., & Boulding, E.G., 2000. Comparative population genetic
structure  of  marine  gastropods  (  Littorina spp.)  with  and  without  pelagic  larval dispersal. Mar.  Biol. ,  137:835 – 845.  doi:
10.1007/s002270000412
Layton,  K.K.S.,  Martel,  A.L.,  &  Hebert,  P.D., 2014.  Patterns  of  DNA  Barcode  Variation in  Canadian  Marine  Molluscs.  PLoS  ONE, 9(4):1-9. doi: 10.1371/journal.pone.0095003
Lestari,  D.A.,  Azrianingsih,  R.,  &  Hendrian,  H., 2018.  Filogenetik  Jenis-jenis  Annonaceae dari  Jawa  Timur  Koleksi  Kebun  Raya Purwodadi  Berdasarkan  Coding  dan Non-coding sekuen DNA. J.  Trop. Biodiv. Biotechnol. ,  3:1 – 7.  doi:  10.22146/jtbb.28 308
Morgulis,  A.,  Coulouris,  G.,  Raytselis,  Y.,
Madden,  T.L.,  Agarwala,  R.,  &  Schäffer, A.A.,  2008.  Database  indexing  for production MegaBLAST searches. Bioinformatics ,  24(16):1757 – 1764.  doi:
10.1093/bioinformatics/btn322
Nakano,  T.,  Takahashi,  K.,  &  Ozawa,  T.,  2007.
Description  of  an  Endangered  New Species of Lunella (Gastropoda:Turbinidae) from the Ogasawara Islands, Japan. J. Malacolog. Soc. Japan , 66(1): 1 – 10. doi: 10.18941/venus.66.1-2_1
Naseem,  S.,  &  Tahir,  H.M.,  2018.  Use  of mitochondrial COI gene for the identification  of  family  Salticidae  and Lycosidae  of  spiders. Mitochondrial  DNA Part A , 29(1): 96 – 101. doi:
10.1080/24701394.2016.1248428
Nuryanto,  A.,  &  Solihin,  D.D.,  2006.  Variasi Sekuens  Gen  Mitokondrial  Sitokrom  C Oksidase  I  dari  Siput  Lola  ( Trochus niloticus ). Biosfera ,  23(1):  31 – 37.  doi:
10.20884/1.mib.2006.23.1.143
Prehadi,  P.,  Sembiring,  A.,  Kurniasih,  E.M., Rahmad,  R.,  Arafat,  D.,  Subhan,  B.,  & Madduppa,  H.H.,  2015.  DNA  barcoding and phylogenetic reconstruction of shark species  landed  in  Muncar  fisheries landing  site  in  comparison  with  Southern Java  fishing  port. Biodiversitas,  J.  Biolog. Div. , 16(1):55 – 61. doi: 10.13057/biodiv/d160107 Putra,  Y.A.,  Zainuri,  M.,  &  Endrawati,  H.,  2014. Kajian Morfometri Gastropoda Di Perairan  Pantai  Desa  Tapak  Kecamatan
Tugu  Kota  Semarang. J.  Mar.  Res. , 3(4):566 – 577. doi: 10.14710/jmr.v3i4.11416
Ramesh,  R.,  &  Ravichandran,  S.,  2008.
Seasonal  Variation  on  the  Proximate Composition of Turbo brunneus. International Journal of Zoological Research, 4(1): 28 – 34. Doi:
10.3923/ijzr.2008.28.34
Rumahlatu,  D.,  &  Leiwakabessy,  F.,  2017. Biodiversity  of  gastropoda  in  the  coastal waters of ambon island, Indonesia. AACL
Bioflux , 10(2):285 – 296.
Saitou,  N.,  &  Nei,  M.,1987.  The  neighbor- joining  method:  a  new  method  for reconstructing  phylogenetic  trees. Mol.
Biol. Evol. , 4(4):406 – 425. doi: 10.1093/oxfordjournals.molbev.a040454
Saleky,  D.,  Leatemia,  S.  P.,  Yuanike,  Y., Rumengan,  I.,  &  Putra,  I.N.G.,  2019. Temporal  Distribution  of  Gastropods  In Rocky Intertidal Area In North Manokwari, West  Papua. J.  Sumberdaya  Akuatik Indopasifik ,  1 – 10.  doi:  10.30862/jsai-fpik- unipa.2019.vol.3.no.1.58
Saleky,  D.,  Setyobudiandi,  I.,  Toha,  A.H.A., Takdir,  M.,  &  Madduppa,  H.H.,  2016.
Length-weight
relationship and population  genetic  of  two  marine gastropods  species  (Turbinidae:  Turbo sparverius and  Turbo bruneus)  in the Bird Seascape  Papua,  Indonesia. Biodiv.
J.Biol. Div. , 17(1): 208 – 217. doi:
10.13057/biodiv/d170130
Sälgeback, J., 2006. Functional Morphology of Gastropods and Bivalves. Acta Uniersitatis Upsaliensis Uppsala. 31 p.
Sobrizal,  D.,  2017.  Potensi  Pemuliaan  Mutasi untuk  Perbaikan  Varietas  Padi  Lokal Indonesia. J.  Ilmiah  Aplikasi  Isotop  Rad. , 12(1):23 – 36. doi: 10.17146/jair.2016.12.1.3198 Soeharmoko., 2010. Inventarisasi jenis kekerangan yang dikonsumsi masyarakat di  Kepulauan  Riau. J.  Dinamika  Maritim , 2(1):45 – 53.
Srimariana,  E.S.,  2015.  Potensi  kerang  manis (Gafrarium  tumidum)  di  pesisir  Pantai Negeri  Laha,  Teluk  Ambon  sebagai sumber  mineral. Biodiv.  J.  Biol.  Div. ,  1:
843 – 847. doi: 10.13057/psnmbi/m010431 Sunnucks,  P.,  2000.  Efficient  genetic  markers for population biology. Trends in Ecology
& Evolution , 15(5):199 – 203. doi: 10.1016/S0169-5347(00)01825-5
Tahir, M.H. & Akhtar, S., 2016. Services of DNA barcoding in different
fields.
Mitochondrial  DNA  Part  A ,  27(6):4463 – 4474. doi: 10.3109/19401736.2015.1089572 Tahir,  H.M.,  Mehwish,  Kanwal,  N.,  Butt,  A.,
Khan,  S.Y.,  &  Yaqub,  A.,  2016.  Genetic diversity in cytochrome  c oxidase I  gene of  Anopheles  mosquitoes. Mitochondrial DNA  Part  A ,  27(6):  4298 – 4301.  doi:
10.3109/19401736.2015.1082104
Tamura,  K.,  Stecher,  G.,  Peterson,  D.,  Filipski, A.,  &  Kumar,  S.,  2013.  MEGA6:  Molecular evolutionary genetics analysis version 6.0. Mol.  Biol.  Evol. ,  30(12):  2725 – 2729.  doi:
10.1093/molbev/mst197
Tindi,  M.,  Mamangkey,  N.G.F.,  &  Wullur,  S., 2017.  DNA  Barcode  dan  Analisis

## Filogenetik Molekuler Beberapa Jenis Bivalvia
Asal Perairan Sulawesi Utara Berdasarkan Gen COI. J. Pesisir Laut Trop. , 1(2):32 – 38.
Williams,  S.T.,  2007.  Origins  and  diversification of  Indo-West  Pacific  marine  fauna: evolutionary history and biogeography of turban  shells  (Gastropoda,  Turbinidae). Biol.  J.  Linnean  Soc., 92(3):573 – 592.  doi:
10.1111/j.1095-8312.2007.00854.x
Williams,  S.T.,  &  Ozawa,  T.,  2006.  Molecular phylogeny suggests polyphyly of both the turban  shells  (family  Turbinidae)  and  the superfamily
Trochoidea (Mollusca: Vetigastropoda). Mol.  Phylogenet.  Evol. ,
39(1):33 – 51. doi: 10.1016/j.ympev.2005.12. 017 Yuan, J., Zhu, Q., & Liu, B., 2014. Phylogenetic and Biological Significance of Evolutionary  Elements  from  Metazoan Mitochondrial  Genomes. PLoS  ONE ,
9(1):1 – 13.  doi:  10.1371/journal.pone.0084
330
Zabarun, A., 2016. Hubungan panjang berat , faktor  kondisi  dan  rasio  berat  daging Kerang  Pasir  ( Modiolus  modulaides )  di perairan  Bungkutoko  Kota  Kendari. J. Manag.  Sumberdaya  Perairan ,  2(1):21 – 32.