UJI AKTIVITAS SPERMISIDA EKSTRAK ETANOLIK BIJI PARE GAJIH ( Momordica charanti, L ) TERHADAP SPERMA MANUSIA SECARA in vitro

## Nurul Chusna
Dosen Pengajar Program Studi D-III Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Palangkaraya
e-mail : nurulchusnaa@yahoo.com

## ABSTRAK
Biji pare gajih ( Momordica charanti, L ) dalam pengobatan  tradisional digunakan untuk radang tenggorokan, batuk, demam, pingsan karena udara panas, nyeri haid. Kandungan kimia dari   biji   pare   gajih   yaitu   flavonoid,   saponin   dan   polifenol.   Dimana   flavonoid   pada   biji   yang digunakan sebagai antispermatogenesis.
Penelitian   ini   bertujuan   untuk   mengetahui   apakah   ekstrak   soxhletasi   biji   pare   gajih ( Momordica   charanti,   L )   memiliki   aktivitas   spermisida   terhadap   sperma   manusia   dan menentukan kadar letal median (LC ).

## ₅₀
Uji   aktivitas   spermisida   dilakukan   dengan   cara   in   vitro   dengan   konsentrasi   ekstrak 1.000,   2.000,   3.000,   4.000,   5.000,   10.000,   20.000,   30.000,   40.000,   50.000   μg/ml.   LC ₅₀ ditentukan   dengan   menggunakan   metode   persamaan   garis.   Analisa   statistik   dengan menggunakan anava 1 arah dengan taraf kepercayaan 95%.
Ekstrak   biji   pare   gajih   dapat   digunakan   sebagai   spermisida   (berbeda   bermakna terhadap   kontrol   negatif   pada   taraf   kepercayaan   95%)   dengan   LC   probandus   I   sebesar ₅₀
15.138,25 μg/ml, probandus II sebesar 9.164,69 μg/ml, dan probandus III sebesar 8.294,17 μg/ml.
Kata Kunci: Spermisida – ekstrak soxhletasi – biji pare gajih.

## PENDAHULUAN
Penambahan penduduk dunia kira-kira 90 juta per tahun,  diperkirakan bahwa pada tahun   2010   populasi   dunia   akan   mencapai angka 7115 juta manusia dan Indonesia akan mengambil   bagian   sebanyak   238,8   juta. Kendati populasi dunia sudah berlipat ganda dalam abad terakhir, namun produksi pangan selalu   mencukupi   kebutuhan.   Tetapi,   di samping   masalah   makanan,   ledakan pertumbuhan   penduduk   dunia   akan membawa serta banyak aspek sosial lainnya.
Cara mengatasi masalah kependudukan   ini,   banyak   program   yang
dilaksanakan.   Salah  satu  di   antaranya   yang telah   dimulai   sejak   tahun   1970   adalah program   Keluarga   Berencana.   Undang- undang   No.   10   tahun   1992   tentang perkembangan   kependudukan   keluarga sejahtera   dirumuskan   pengertian   Keluarga Berencana   sebagai   berikut,   Keluarga Berencana   merupakan   suatu   cara   efektif untuk   antara   lain   mencegah   mortalitas   ibu dan   anak   dengan   menghindari   kehamilan resiko   tinggi,   mengurangi   angka   kesakitan, menghindari kelahiran yang tidak diinginkan, mengatur   jarak   kehamilan   dan   menentukan jumlah   anak   dalam   keluarga,   berupaya

## Nurul Chusna
meningkatkan   kepedulian   dan   peran   serta melalui   pendewasaan   usia   perkawinan, pembinaan   ketahanan   keluarga   dan peningkatan   kesejahteraan   keluarga   untuk mewujudkan   keluarga   kecil,   bahagia   dan sejahtera.
Pengendalian   kesuburan   pada dasarnya   adalah   pencegahan   kehamilan. Pada   manusia   ada   beberapa   cara pengendalian   kesuburan   seperti   memakai IUD, sterilisasi wanita atau pria, penggunaan kondom,   penggunaan   spermisida/pil   vagina, maupun   obat   kontrasepsi   oral   sampai pemanfaatan   obat   tradisional   seperti   jamu atau tumbuh-tumbuhan tertentu.
Zat   spermisida   adalah   zat   yang memiliki   daya   mematikan   sel-sel   mani (spermatozoa),   digunakan   dalam   bentuk tablet   berbusa,   spray,   krim,   atau   foam kedalam   vagina,   dapat   pula   diberikan   atau ditambahkan   pada   kondom.   Bila dipergunakan   dalam   bentuk   sediaan   intra vaginal, menunjukkan persentase perlindungan yang agak tinggi,  sekitar 97%. Bila   dipakai   dalam   bentuk   kondom   yang diimpregnir   dengan   suatu   zat   spermisida, dapat   menunjukkan   presentase   keamanan praktis 100%.
Biji  pare   gajih ( Momordica  charantia,
L ) merupakan obat alamiah yang bermanfaat untuk   pencuci,   obat   cacing   gelang, memperbanyak   air   susu   ibu   (ASI), memperlancar   buang   air   besar   ( purgatif ) menambah   nafsu   makan,   menyuburkan
rambut,   kencing   manis   ( diabetes ),   wasir, kerusakan hati, penyakit kulit, sariawan, obat batuk, radang tenggorokan ( pharingitis ), haus karena panas dalam, mata sakit dan merah, demam,malaria, pingsan karena udara panas (heat stroke), disentri, reumatik gaout, datang haid   sakit.   Biji   pare   gajih   juga   diketahui mengobati kanker, kontrasepsi pada pria.
Biji  pare   gajih  ( Momordica   charantia, L )   dapat   digunakan   sebagai   spermisida. Pemanfaatan   ini   diduga   karena   adanya kandungan   flavonoid   yang   terdapat didalamnya.   Sifat   flavonoid   yang   dapat membentuk   kompleks   dengan   protein menjadi   landasan   utama   penggunaannya sebagai   spermisida.   Flavonoid   bekerja dengan cara denaturasi protein dari sperma, sehingga   menurunkan   motilitas   dan   daya hidup sperma.
Permasalahan yang lebih luas dalam penelitian ini adalah apakah ekstrak etanolik biji   pare   gajih   ( Momordica   charantia,   L ) bersifat   spermisida   dan   mengetahui   kadar letal median (LC50) dari ekstrak etanolik biji pare gajih ( Momordica charantia, L ) terhadap sperma manusia.
Jurnal Surya Medika Volume 1 No. 2 [2016]
35

## METODE PENELITIAN
Pada penelitian uji aktivitas spermisida bahan   uji   yang   digunakan   adalah   sperma manusia   yang   telah   memenuhi   persyaratan meliputi:   masa   abstinensia   seksualitas probandus,   cara   pengeluaran   sperma, koagulasi   dan   likwefeksi,   warna,   bau,   pH sperma, volume, viskositas, motilitas, jumlah spermatozoa dan morfologi spermatozoa.
Kontrol   positif   dibuat   dengan   setetes larutan   spermisida   (campuran   dari   5   gram NaHCO   dan   1   ml   35%   formaldehida ȝ ditambah larutan NaCl fisiologis ad 100 ml) di atas obyek ditambah setetes sperma diamkan beberapa   detik   kemudian   ditambah   setetes eosin Y (dalam 0,15 M phosphate buffer, pH ± 7,4) dan   10% negrosin, diamkan  1-2 menit, kemudian   dikering   anginkan   dan   diamati   di bawah   mikroskop   kemudian   dihitung   ±   200 spermatozoa   dalam   beberapa   lapang pandang,   dihitung   banyaknya   spermatozoa yang mati dan yang hidup (spermatozoa yang hidup   terlihat   tidak   berwarna,   sedangkan spermatozoa yang mati berwarna merah).
Setetes   larutan   ekstrak   etanolik   biji pare   gajih   dengan   konsentrasi   tertentu diteteskan   diatas   obyek   glass   yang   bersih diberi setetes sperma tunggu beberapa detik kemudian   ditambah   dengan   setetes   larutan 0,5%   eosin   Y   (dalam   0,15   M   phosphate buffer, pH ± 7,4) dan 10% negrosin, diamkan 1-2   menit,   kemudian   dibuat   apusan,   dan dikering anginkan.
Setiap   pembuatan   apusan   sperma untuk   perlakuan   selalu   disertai   dengan pembuatan   apusan   untuk   kontrol   negative yaitu   setetes   larutan   NaCl   fisiologis   di   atas obyek glass ditambah dengan setetes sperma diamkan beberapa detik kemudian ditambah dengan   setetes   eosin   Y   (dalam   0,15   M phosphate   buffer,   pH   ±   7,4)   dan   10% negrosin, diamkan   1-2   menit,   kemudian dibuat apusan dan dikering anginkan.
Kemudian keduanya diamati di bawah mikroskop   dilihat   dengan   mikroskop   dengan memakai minyak emersi kemudian dihitung ± 200   spermatozoa   dalam   beberapa   lapang pandang,   dihitung     banyaknya   spermatozoa yang mati dan yang hidup (spermatozoa yang hidup   terlihat   tidak   berwarna,   sedangkan spermatozoa yang mati berwarna merah).
Pembuatan apusan dengan perlakuan dilakukan   beberapa   kali   dengan   konsentrasi yang   berbeda   disertai   dengan   pembuatan apusan   untuk   kontrol   negative.   Setiap   kali pembuatan apusan dicatat waktunya dihitung setelah ejakulasi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil   determinasi   tanaman   pare ( Momordica   carantia,   L ).   Berdasarkan   C.  A. Backer   (1968)   diperoleh   hasil   determinasi tanaman sampai familia Cucurbitaceae yaitu sebagai berikut : 1b - 2b - 4b - 6b - 7b - 9b - 11b   -   12b   -   13b   -   23a   -   24b   -   25a  Momordica
1a  Momordica charantia, L Jurnal Surya Medika Volume 1 No. 2 [2016] 36
Berdasarkan   hasil   determinasi   dapat diketahui   bahwa   tanaman   yang   digunakan dalam   penelitian   ini   adalah   tumbuhan   pare ( Momordica carantia, L ).
Berdasarkan   pustaka   C.   A.   Backer (1968)   diperoleh   hasil   deskripsi   sebagai berikut : Habitus ; semak semusim, menjalar atau merambat. Batang masif, berusuk lima, masih   muda   berambut,   setelah   tua   gundul, hijau   daun,   tunggal,   bulat   telur,   berbulu, berlekuk,   tangkai   panjang   7-13   cm,   hijau. Bunga, tuunggal, berkelamin satu, kelompok bentuk lonceng, berusuk banyak, benang sari tiga, kepala sari lepas, putik satu, putih, bakal buah   berparuh,   berduru   temple,   halus   dan berambut,   tangkai   bunga   5-15   cm,   daun pelindung hijau, berusuk, jingga. Buah ; bulat, berusuk, jingga, Biji; keras pipih, dengan alur tidak   beraturan,   coklat   kekuningan,   Akar; tunggang, putih kotor.
Penyiapan   serbuk;   buah   pare dikumpulkan   kemudian   dibelah,   biji dikeluarkan.   Biji   pare   dicuci   dengan   air mengalir   kemudian   dikeringanginkan. Pengeringan dilakukan dengan menggunakan oven pada suhu 40 C sampai kering. ⁰
Biji   pare   yang   telah   kering   diserbuk dengan   menggunakan   blender   sampai derajad   halus   tertentu,   yaitu   dengan menggunakan ayakan no. 100. Penyerbukan ini bertujuan untuk membuat partikel menjadi lebih   kecil   dan   memperluas   permukaan partikel menjadi lebih kecil dan memperluas
permukaan   partikel  sehingga   apabila   kontak dengan pelarut penyari dapat lebih efektif dan dapat   menyari   lebih   sempurna.   Penyarian yang   efektif   dan   sempurna   sangat   penting agar   kandungan   bahan   yang   mempunyai aktifitas   spermisida   yang   diduga   terdapat dalam   tumbuhan   tersebut   dapat   tersari dengan baik, sehingga uji aktivitas spermisida akan memberikan hasil yang sebenarnya. Tabel   1.   Hasil   identifikasi   kandungan   kimia serbuk biji pare
Senyawa Serbuk   biji pare Hasil uji Literatur Flavonoid +   serbuk   Mg -   alkohol   : HCl   (1:1)   + amyl alkohol Jingga   pada lapisan   amyl alkohol Merah   atau kuning   atau jingga   pada lapisan   amyl alkohol Saponin +   10   ml   air panas, kocok kuat-kuat selama   10 detik   +   HCl 2N Buih yang mantap setelah ditambah   HCl 2N   buih   tidak hilang Buih   mantap atau   stabil setelah ditambah   HCl 2N   buih   tidak hilang Polifenol +   5   tetes FeCl3 1% Merah ungu Merah   ungun (Harborne, 1987)
Tabel 2. Hasil pembuatan ekstrak etanolik biji pare.
No . Berat   serbuk (gram) Ekstrak   kental (gram) Rendemen ekstrak (%) 1 50,0 3,99 7,96 2 50,0 3,99 7,98 3 50,0 3,88 7,76 X= 3,95 = 7,90 Ẋ
Jurnal Surya Medika Volume 1 No. 2 [2016]
37
Tabel   3.   Hasil   Identifikasi   kandungan   kimia ekstrak etanolik  biji pare.
Senyawa Serbuk   biji pare Hasil uji Literatur Flavonoi d + serbuk Mg - alkohol   :   HCl (1:1)   +   amyl alkohol Jingga pada lapisan amyl alkohol Merah   atau kuning   atau jingga   pada lapisan   amyl alkohol Saponin +   10   ml   air panas,   kocok kuat-kuat selama   10 detik + HCl 2N Buih   yang mantap setelah ditambah HCl 2N buih tidak hilang Buih   mantap atau   stabil setelah ditambah   HCl 2N   buih   tidak hilang Polifenol +   5   tetes FeCl3 1% Merah ungu Merah   ungun (Harborne, 1987)
Tabel   4.   Uji   parameter   sperma   yang digunakan No Jenis pemeriksaan sperma dari ; Probandus I Probandus II Probandus III 1 Masa abstinensia 3 hari 4 hari 3 hari 2 Waktu ejakulasi 08.45 WIB 07.10 WIB 07.30 WIB 3 Waktu penyerahan 08.50 WIB 07.22 WIB 07.45 WIB 4 Cara pengeluaran Onani Onani Onani 5 Volume 3,6 ml 3,3 ml 2,8 ml 6 Warna Putih kanji Putih kanji Putih kanji 7 Bau Khas  seperti bau akasia Khas seperti bau akasia Khas   seperti bau akasia 8 pH 7 7 7 9 koagulum Ada Ada Ada 10 Likuefaksi 20 menit 19 menit 17 menit 11 Viskositas Waktu   1 tetesan   1-2 detik Waktu   1 tetesan   1-2 detik Waktu 1 tetesan   1-2 detik 12 a.   Motilitas baik 69,61% 62,24% 73,74% b.   Motilitas kurang baik 21,57% 19,39% 15,15% c.Non motil 8,82% 18,77% 11,11% 13 Kepadatan per   lapang pandang >150 spermatozo a >150 spermatozo a >150 spermatozoa 14 Jumlah 76,175 juta/ml 70,950 juta/ml 70,730 juta/ml 15 a.   Morologi normal 92,17% 87,75% 87,37% b.   Morfologi abnormal 7,83% 12,25% 12,63%
Tabel   5.   Hasil   percobaan   uji   aktivitas spermisida
N Konsentra % kematian rata-rata spermatozoa dari :
o si Probandus I Probandus II Probandus III X SD X SD X SD 1 Kontrol + 100 0 100 0 100 0 2 Kontrol - 2,43 0,49 2,48 0,90 1,83 0,5 3 3 1.000 μg/ml 9,08 0,10 8,99 0,20 10,8 0 1,2 6 4 2.000 μg/ml 20,9 5 1,58 19,3 3 1,68 19,7 0 1,1 8 5 3.000 μg/ml 27,5 7 2,39 26,4 1 1,36 30,7 8 1,1 5 6 4.000 μg/ml 33,2 0 2,04 47,9 2 1,59 43,6 8 1,3 0 7 5.000 μg/ml 38,5 1 1,08 50,9 8 0,65 50,1 4 1,7 0 8 10.000 μg/ml 39,2 7 1,35 52,8 3 1,23 52,5 0 1,3 2 9 20.000 μg/ml 42,8 0 1,19 60,9 7 1,97 61,8 0 1,4 4 1 0 30.000 μg/ml 52,5 7 2,00 65,3 0 4,51 62,6 1 1,5 7 11 40.000 μg/ml 67,6 0 1,27 72,0 1 1,16 81,5 6 2,6 2 1 2 50.000 μg/ml 78,8 8 1,40 78,2 5 1,76 85,2 4 2,7 0
Tabel   6.   Hasil   perhitungan   LC   ekstrak
₅₀ etanolik biji pare No Keterangan LC ₅₀ 1 Probandus I 15.138,25 μg/ml 2 Probandus II 9.164,69 μg/ml 3 Probandus III 8.294,17 μg/ml
Biji  pare   gajih  ( Momordica   charantia, L )   yang   digunakan   dalam   penelitian   ini diambil   dari   daerah   tawangmangu, Karanganyar, Jawa Tengah. Serbuk biji pare gajih   ditimbang   2   g   kemudian   diukur   kadar airnya   dengan   menggunakan   alat moisture balance selama 30 menit. Sehingga diperoleh kadar   air   dalam   serbuk   biji   pare   sebesar 7,74% yang memenuhi syarat kadar air pada simplisia.   Syarat   kadar   air   pada   simplisia   ≤ 10%   sehingga   dapat   mengurangi   aktivitas enzim   (simplisia   tidak   cepat   busuk),   tidak mudah ditumbuhi kapang dam jamur.
38
Metode   penyarian   yang   digunakan adalah   soxhletasi   karena   dibutuhkan   cairan penyari   yang   lebih   sedikit   dan   secara langsung   diperoleh   hasil   yang   lebih   pekat. Mekanisme kerja spermisida ekstrak etanolik biji   pare   gajih   terhadap   sperma   manusia dengan cara denaturasi protein dengan cara membentuk  ikatan  hydrogen  dengan  protein yang   terdapat   pada   spermatozoa   manusia shingga menurunkan motilitas dan daya hidup dari spermatozoa.
Hasil   penelitian   ini   menunjukkan bahwa ekstrak etanolik biji pare gajih bersifat spermisida   yang   didapat   dari   persen kematian.   Semakin   tinggi   jumlah spermatozoa   yang   mati   sebanding   dengan peningkatan   konsentrasi  ekstrak  etanolik  biji pare gajih yang diberikan.
Hasil yang didapatkan pada penelitian ini   menunjukkan   konsentrasi   yang   dapat membunuh   50%   dari   jumlah   sperma   yang ada.   Perhitungan   dilakukan   dengan   metode grafik  yang   didapat   berdasarkan  persamaan regresi   linier   Y=a+bx.   Pada   probandus   I sebesar   15.138,25   μg/ml,   probandus   II sebesar   9.164,69   μg/ml,   probandus   III sebesar   8.294,17   μg/ml.   LC   yang   didapat ₅₀ dari   ketiga   probandus   menunjukkan perbedaan   yang   mencolok   dikarenakan spermatozoa  dari   ketiga  probandus  memiliki daya tahan hidup yang berbeda-beda.
Sperma   manusia   umumnya   tiap ejakulasi   sebanyak   2-6   ml,   karena
perbandingan   sperma   dan   konsentrasi ekstrak   biji  pare adalah 1:1 yang artinya 1 tetes   larutan   ekstrak   etanolik   biji   pare, sehingga   dosis   yang   dipergunakan   untuk membunuh spermatozoa pada 1 kali ejakulasi adalah   15.138,25   μg/ml   dikali   6   ml   yaitu 90.829,5 mg. Bila dilihat dari dosis pemakaian yang   sebesar   90,8295   mg   maka   dapat dikatakan   bahwa   ekstrak   etanolik   biji   pare gajih   efektif   untuk   digunakan   sebagai spermisida.

## KESIMPULAN
Hasil penelitian uji aktivitas spermisida dan penetapan LC  ekstrak etanolik biji pare ₅₀ gajih   ( Momordica   charntia,   L )   terhadap sperma manusia secara in vitro yaitu, ekstrak etanolik biji  pare gajih  ( Momordica charntia, L )   dengan   metode   soxhletasi   bersifat spermisida terhadap sperma manusia. LC 50 spermatozoa   pada   probandus   I   sebesar 15.138,25   μg/ml,   probandus   II   sebesar 9.164,69   μg/ml,   probandus   III   sebesar 8.294,17 μg/ml.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Anonim., 1993, Pedoman Pengujian dan Pengembangan   Fitofarmaka ,   Yayasan Pengembangan   Obat   bahan  Alam   Phyto Medica, Jakarta, hal 27.
2. Chan,   W.,   1985, Report   of   plant antifertility from Hongkong , in lee, Female Antifertility Evaluation of Natural Product, Natural   Products   Research   Institute, Seoul   National   University   and   Korean Commission for Unesco Seoul, hal 71.
39

## Nurul Chusna
3. Tan   Hoan   Tjay   dan   K,   Raharja,   2002, Obat-obat Penting , Jilid V; Cetakan ke-II,
Jakarta, Elex Media Komputindo, hal 535- 537.
4. Winarno   dan   Sundari,   1997, Informasi Tanaman   Obat   untuk   Kontrasepsi
Tradisional ,   Pusat   Penelitian   dan Pengembangan   Kesehatan. Departemen
Kesehatan   Republik   Indonesia,   Jakarta, hal 27-28. .
Jurnal Surya Medika Volume 1 No. 2 [2016]