## PEMBERIAN MINYAK IKAN LELE ( Clarias gariepinus ) TERHADAP BOBOT BADAN DAN PERUBAHAN HISTOPATOLOGI HATI, GINJAL, DAN OTAK TIKUS GALUR Sprague dawley YANG DIBERI PAKAN HIPERKOLESTEROLEMIA
( The effect of c atfish [ Clarias gariepinus ] oil intervention to weight gain and histopathology liver, kidney and brain changes of Sprague dawley rats fed hypercholesterolemia diets )
Hardi Firmansyah 1 , Katrin Roosita 1 , Clara Meliyanti Kusharto 1* , Ekowati Handharyani 2 1 Departemen Gizi Masyarakat, Fakultas Ekologi Manusia (FEMA), Institut Pertanian Bogor, Bogor 16680 2 Departemen Klinik Reproduksi Patologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor, Bogor 16680

## ABSTRACT
The objective of this study was to analyze changes in body weight and cell morphology in liver, kidney and brain tissue of Sprague dawley rats administered  hypercholesterolemia diets for four weeks. Four  diet  treatments  were  applied  in  this  study:  control,  catfish  oil,  catfish  oil  with  the  addition  of omega 3 and catfish oil with the addition of omega 3 and vitamin E. Four weeks after the intervention, the rats were sacrificed and the internal organs (liver, brain, and kidney) were taken for histological preparations  by  hematoxylin-eosin  (HE)  and  immunohistochemistry  test.  The  study  showed  that  the catfish oil intervention tend to reduced weight gain of rats fed hypercholesterolemia diets. More lipid accumulation  in  liver  of  the  control  group  was  found  than  the  intervention  groups.  However,  there was no difference in the histopathology of the kidney and brain tissues between the control group and intervention groups. It is concluded that catfish oil study provides a positive effect in rat liver tissue, but no difference exists between the brain and kidney tissue. There is no defect found at hippocampus of rats by formed of amyloid plague.
Keywords: brain, catfish oil, histopathology, kidney, liver

## ABSTRAK
Tujuan penelitian ini adalah menganalisis perubahan bobot badan dan morfologi sel di hati, ginjal dan otak tikus Sprague dawley yang diberi pakan hiperkolesterolemia selama empat minggu. Penelitian ini terdiri atas empat perlakuan yaitu kontrol, minyak ikan lele, minyak ikan lele dengan penambahan omega 3 serta minyak ikan lele dengan penambahan omega 3 dan vitamin E. Empat minggu setelah intervensi, tikus-tikus dimatikan, kemudian hati, ginjal dan otak diambil untuk persiapan histologis dengan metode hematoksilin eosin (HE) dan imunohistokimia. hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian minyak ikan lele pada tikus yang diberi pakan hiperkolesterolemia cenderung menekan kenaikan bobot badan. Akumulasi lipid lebih banyak ditemukan pada hati tikus kelompok kontrol dibandingkan kelompok intervensi yang diberikan minyak ikan lele, namun tidak ada perbedaan antara kelompok kontrol dan kelompok intervensi pada ginjal dan jaringan otak. Hal ini menunjukkan bahwa minyak ikan lele memberikan efek positif pada jaringan hati tikus, namun tidak ada perbedaan pada jaringan ginjal dan otak. Plak amiloid belum terbentuk pada hipokampus otak tikus.
Kata kunci : ginjal, hati, histopatologi, minyak ikan lele, otak
* Korespondensi: Telp: +622518624907, Surel: kcl_51@yahoo.co.id
J. Gizi Pangan, Volume 12, Nomor 2, Juli 2017 85
ISSN 1978-1059  EISSN 2407-0920 DOI: 10.25182/jgp.2017.12.2.85-92 Terakreditasi SK Menristek Dikti 12/M/Kp/II/2015

## PENDAHULUAN
Penyakit Alzheimer (PA) merupakan sin- drom dengan apoptosis (kematian) sel-sel otak yang terjadi dalam waktu yang bersamaan. Pen- derita sindrom ini pada umumnya merupakan individu yang berusia lanjut (60 tahun ke atas). Tanda-tanda PA biasanya berupa hilangnya neu- ron, cairan ektraseluler yang mengandung pep-
tida  amiloid  β  (Aβ)  dan  kusutnya  neurofibril serta terjadinya hiperfosforilasi dari mikrotubu- lar TAU protein. Penyebab terjadinya PA adalah munculnya plak amiloid dan neuro tangled pada neurofibril.  Beberapa  studi  yang  mempelajari oksidasi dan inflamasi pada proses PA, terdapat fakta bahwa gangguan pada metabolisme lipid juga berperan. Individu yang mengalami PA akan mengalami kepikunan, kehilangan kemampuan

## Firmansyah dkk.
berbahasa, penurunan fungsi kognitif, kelainan psikososial, halusinasi, bahkan kehilangan ken- dali pada tubuh, dan emosional (Reitz et al. 2011; Kolorev 2014; Alzheimer’s Association 2017). Salah satu faktor risiko individu mende- rita PA adalah tingginya konsumsi lemak pada diet harian (Reitz et al. 2011). Individu yang me- ngonsumsi diet tinggi lemak selama tiga sampai empat dekade terakhir memiliki peningkatan yang  signifikan  terhadap  risiko  PA  dimasa  tua (Cooper 2003). Penelitian Davidson et al. (2010) menunjukkan bahwa tikus yang diberi diet tinggi lemak dapat menimbulkan risiko disfungsi saraf. Granholm et al. (2008) menjelaskan bahwa kon- sumsi pakan tinggi kolesterol selama delapan minggu mampu merusak morfologi hipokam- pus tikus. Hal ini diperkuat dengan penelitian Freeman & Granholm (2012) yang menemukan bahwa terdapat banyak respons imunitas pada hi- pokampus tikus yang diberi pakan tinggi lemak selama enam bulan.
Bahan yang dapat mengurangi kadar koles- terol dalam darah diantaranya adalah minyak ikan. Minyak ikan merupakan produk turunan dari ikan yang dihasilkan dari proses ektraksi te- pung ikan atau pengalengan ikan, yang dapat di- produksi baik dari ikan air laut maupun ikan air tawar serta memiliki manfaat kesehatan dan gizi (Irianto & Soesilo 2007). Minyak ikan diketahui mengandung omega 3 dan omega 6 yang berman- faat bagi kesehatan jika dikonsumsi sebagai sup- lemen (Minis et al. 2006). Beberapa penelitian menunjukkan bahwa omega 3 dapat menurunkan kadar trigliserida, meningkatkan High  Density Lipoprotein (HDL) dan menurunkan kadar Low Density Lipoprotein (LDL) (Covington 2004); mengurangi risiko kerusakan dan penurunan kemampuan kognitif pada lansia (Gonzales et al. 2010);  meredakan  reaksi  inflamasi  dan  me- ngurangi tingkat komplikasi inflamasi (Wei et al . 2014). Cooper (2003) mengatakan bahwa hal ini disebabkan lemak tak jenuh seperti omega 3 di- perkirakan memiliki sifat melindungi (protektif) sel saraf dari risiko PA. Minyak ikan lele merupakan hasil sam- ping dari proses pembuatan tepung ikan lele. Minyak ikan lele diketahui memiliki 12,37% omega 6 dan 1,31% omega 3 (Srimiati et al. 2015). Penelitian Dainy et al. (2016) menemukan bahwa minyak ikan lele yang ditambah omega 3 dapat menurunkan nilai trigliserida secara signifi - kan dan cenderung meningkatkan kadar HDL. Sejauh ini belum cukup diperoleh informasi il- miah mengenai pengaruh konsumsi minyak ikan lele murni (tanpa penambahan omega 3) terhadap berat badan dan plak amiloid pada lansia. Minyak ikan lele pada penelitian ini selain menggunakan minyak ikan lele murni, juga menggunakan mi- nyak ikan lele yang ditambah omega 3 dan vita-
min E. Omega 3 ditambah untuk menyeimbang- kan rasio omega 3 dan omega 6 dalam minyak ikan lele, sedangkan vitamin E berfungsi untuk memperpanjang masa simpan minyak ikan lele.
Tikus merupakan hewan rodensia yang banyak digunakan sebagai hewan coba dalam penelitian karena memiliki kesamaan dengan ma- nusia dalam sistem reproduksi, sistem saraf, dan penyakit serta mudah, murah, dan banyak terse- dia (Zarafoza et al. 2011). Pakan hiperkolestero- lemia merupakan pakan yang sengaja dibuat un- tuk meningkatkan kadar kolesterol darah hewan coba (Hardiningsih & Nurhidayat 2005; Astuti 2015). Pakan hiperkolesterolemia dapat menye- babkan perlemakan hati pada tikus (Krisnansari et al. 2014). Selain itu Noeman et al. (2011) me- nyebutkan bahwa obesitas yang dipicu diet tinggi lemak dapat memengaruhi organ hati, ginjal, jan- tung dan otak.
Berdasarkan uraian tersebut, penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk menguji efek dari pemberian minyak ikan lele terhadap perubahan bobot badan serta histopatologi hati, ginjal, dan otak tikus Sprague dawley yang diberi pakan hi- perkolesterolemia.

## METODE
Desain, tempat, dan waktu Penelitian dilakukan secara eksperimen- tal menggunakan desain Randomized Controlled Trial ( RCT ) . Rancangan percobaan yang digu- nakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan empat perlakuan yaitu kontrol, minyak ikan lele, minyak ikan lele dengan penambahan omega 3, serta minyak ikan lele dengan penam- bahan  omega 3 dan vitamin E. Penelitian dilaku- kan pada bulan Juli-September 2015 yang meru- pakan bagian dari Penelitian Unggulan Perguruan Tinggi (PUPT) tahun 2015 yang berjudul minyak ikan lele ( Clarias gariepinus ) sebagai suplemen alternatif pencegah alzheimer pada lansia. Tikus dipelihara di Unit Pengelola Hewan Laboratori- um (UPHL) Fakultas Kedokteran Hewan (FKH), Institut Pertanian Bogor. Pelaksanaan nekropsi, pembuatan preparat serta analisis histopatologi dilakukan di Laboratorium Patologi Fakultas Ke- dokteran Hewan IPB.
Jumlah dan cara pengambilan sampel Hewan coba yang digunakan dalam pene- litian ini adalah tikus jantan Sprague dawley ber- umur 6-8 bulan dengan berat 400-500 g yang di- peroleh dari Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor yang telah memperoleh persetu- juan atas perlakuan etik dari Komisi Etik Hewan LPPM IPB No 09A-2015 IPB. Tikus sebanyak 24 ekor dibagi menjadi 4 kelompok perlakuan ya- itu kelompok kontrol (A1), kelompok intervensi
Pengaruh minyak ikan lele terhadap histopatologi tikus jantan minyak ikan lele tanpa penambahan konsentrat minyak omega 3 (A2), kelompok intervensi mi- nyak ikan lele dengan penambahan konsentrat minyak omega 3 (A3) serta kelompok intervensi minyak ikan lele dengan penambahan omega 3 dan vitamin E (A4).
Bahan dan alat Bahan yang digunakan adalah tikus jantan galur Sprague dawley, kloroform, minyak ikan lele ( Clarias gariepinus ), citrate  buffer,  phos - phate buffered saline, H 2 O 2 , larutan biotin, strep- tavidin, diaminobenzidine, air , entelan, omega 3 (K-omegaSqua Plus, PT K-Link Indonesia), vita- min E ( DL-α-tocopherol acetate , Sigma Aldrich, Singapura), pakan standar, dan pakan tinggi kolesterol. Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah set kandang perlakuan, surgery set, kaca objek, kaca penutup ( cover glass ), mikros- kop cahaya, kamera, alat sonde, timbangan, dan kit pewarnaan imunohistokimia.
Tahapan penelitian Tikus terlebih dahulu diberikan pakan hi- perkolesterolemia sebanyak 30 g untuk menaik- kan kadar kolesterol dalam darah. Bahan dari pakan ini adalah tepung ikan (8%), bungkil ke- delai (20%), minyak kelapa (6%), CaCO 3 (1%), garam (1%), tepung jagung (60%), kuning telur (3%), mineral premix (1%). dan air (Astuti 2015). Pakan hiperkolesterolemia yang diguna- kan pada penelitian ini mengandung kolesterol sebesar 0,154 mg/g (Astuti 2015) serta karbo- hidrat sebesar 60,59%, protein 17,08%, lemak 7,35%, kadar air 9,87 %, kadar abu 5,45% dan kadar serat kasar 3,66%. Pakan standar me- ngandung protein kasar 23%, lemak 4%, dan kadar abu 8%. Pakan hiperkolesterolemia diberi- kan selama 2 minggu kepada semua tikus untuk meningkatkan kadar kolesterol darah tikus (Gani et al. 2013). Hasil penelitian Laksitoresmi et al. (2016) yang menggunakan tikus yang sama menunjukkan bahwa setelah dua minggu pembe- rian pakan hiperkolesterolemia, tikus mengalami hiperkolesterolemia. Kadar kolesterol total sebe- sar 77,0±9,9 mg/dl dimana kadar kolesterol total tikus normal sebesar 10-45 mg/dl (Harini & Okid 2009), kadar trigliserida sebesar 139,0±67,9 mg/ dl dimana kadar trigliserida darah tikus normal sebesar 32,94-70,79 mg/dl (Ihedioha et al . 2013), kadar HDL sebesar 33,5±4,9 mg/dl lebih rendah dibanding kadar normal sebesar 39,02-72,20 mg/ dl (Ihedioha et al. 2013), sedangkan kadar LDL sebesar 14,5±2,1 mg/dl masih dalam batas nor- mal diantara 2,39-27,34 mg/dl (Ihedioha et al. 2013). Intervensi dilanjutkan dengan pemberian minyak ikan lele kepada tikus kelompok inter- vensi A2, A3, dan A4 secara oral dalam bentuk cairan dengan alat sonde selama dua minggu
berikutnya (Wood et al. 2010). Minyak ikan lele yang diberikan sebanyak 0,8 ml per ekor per hari (Mona 2014). Bobot badan tikus ditimbang setiap minggu. Minyak ikan lele yang digunakan dalam penelitian ini adalah minyak ikan yang sama de- ngan penelitian Kusharto et al. (2015) dan Laksi- toresmi et al. (2016) yang menggunakan metode Srimiati et al. (2015). Hari ke-15 setelah pemberian minyak ikan lele berbagai perlakuan, hewan coba dibius de- ngan menggunakan ketamin dan dilakukan pem- bedahan untuk mengambil  organ hati, ginjal, dan otak besar. Organ tersebut kemudian dibuat pre- parat histologisnya dan dilakukan analisis pada tampilan jaringan organ yang menggunakan mik- roskop dengan pembesaran 10 x 40. Tampakan plak beta amiloid pada jaringan otak dianali- sis menggunakan pewarnaan imunohistokimia (Wresdiyati et al. 2015), sedangkan perubahan sel pada otak, ginjal, dan hati menggunakan metode perwarnaan hematoksilin eosin (HE).
Pengolahan dan analisis data Data perubahan bobot tikus dianalisis menggunakan analisis paired t-test untuk perbe- daan pada awal dan akhir intervensi serta anali- sis sidik ragam untuk perbedaan antar kelompok perlakuan. Pengamatan yang dilakukan terhadap preparat yang dihasilkan menggunakan mikros- kop dengan pembesaran 10x40. Data yang di- hasilkan diolah dengan cara deskriptif (memper- hatikan gambaran histopatologis jaringan).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Perubahan bobot tikus Tikus diberikan pakan tinggi kolesterol dan ditimbang bobot badannya selama empat minggu. Selama intervensi, hanya seekor tikus yang mati yakni tikus perlakuan A3. Gambar 1 menunjukkan bahwa bobot tikus mengalami pe- ningkatan setelah diberikan pakan hiperkoleste- rolemia selama dua minggu pertama. Hal ini se- suai dengan penelitian yang dilakukan Nikasa et al. (2016) yang menunjukkan bahwa diet tinggi kolesterol secara signifikan meningkatkan bobot badan tikus. Beberapa penelitian serupa menun- jukkan bahwa tikus yang diberikan pakan tinggi lemak bobot badannya akan meningkat secara signifikan  (Davidson et al. 2010; Chien et al . 2016; Marques et al. 2016). Pada minggu ketiga dan keempat mulai diberikan intervensi berdasar- kan kelompok perlakuan. Gambar 1 menunjuk- kan bahwa pada minggu ketiga dan keempat kelompok yang diberikan minyak ikan lele (A2 dan A3) cenderung mengalami penurunan bobot badan dan A4 mengalami peningkatan lebih ren- dah dibandingkan kelompok kontrol (A1).
Tabel 1 menunjukkan bahwa bobot badan tikus  mengalami  peningkatan  yang  signifikan pada kelompok kontrol (p<0,05), sedangkan pada kelompok A2 dan A3 bobot badan tikus cenderung mengalami penurunan namun tidak signifikan. Bobot tikus perlakuan A4 cenderung meningkat  namun  tidak  signifikan.  Hal  ini  di - duga karena kandungan omega 3 dalam  minyak ikan lele mampu menekan kenaikan berat badan. Simopoulos (2016)  menyatakan bahwa omega 3 mampu menghalangi terbentuknya enzim li- pogen yang berperan dalam pembentukan lemak yang akan terakumulasi pada sel adiposa. Peneli- tian yang dilakukan oleh Hassanali et al. (2010) menjelaskan bahwa pemberian suplemen omega 3 mampu menurunkan berat badan pada kondisi hiperkolesterolemia, sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Ruzickova et al. (2004) dan Mendez-Sanchez et al. (2001). Hasil analisis ANOVA menunjukkan bahwa tidak terdapat per- bedaan yang signifikan antar perlakuan.
Perubahan histopatologi hati Pemberian pakan hiperkolesterolemia pada tikus Sprague dawley selama empat ming- gu menyebabkan perubahan di dalam jaringan hati (Gambar 2). Tikus yang diberi pakan hi- perkolesterolemia  tanpa pemberian minyak ikan lele (perlakuan A1) terjadi akumulasi lipid yang nyata di dalam sel-sel hati (hepatosit) diban- dingkan dengan hepatosit tikus yang diberikan minyak ikan lele. Akumulasi lipid dalam sel hati ditunjukkan dengan munculnya vakuola lemak pada sitoplasma (Gambar 2.A1) dalam jumlah
Firmansyah dkk.
yang signifikan, dilatasi sinusoid, dan degenerasi hidropis. Gambaran histopatologi tikus yang mendapat perlakuan A1 ditemukan akumulasi lemak/lipid. Perubahan yang terlihat berupa aku- mulasi lemak pada sitoplasma hepatosit, diser- tai degenerasi hidropik dan nekrosis. Perubahan lain yang ditemukan adalah pelebaran sinusoid. Hal ini membuktikan bahwa asupan lemak yang berlebihan dapat mengakibatkan perlemakan dan mengganggu fungsi hati. Penelitian yang dilaku- kan oleh Laksitoresmi et al. (2016) menunjukkan bahwa kenaikan asupan pakan kolesterol dapat menaikkan jumlah total kolesterol dalam serum darah. Penelitian tersebut juga menjelaskan bah- wa kadar kolesterol total, trigliserida dan LDL pada kelompok tikus yang tidak diberi minyak ikan lele (A1) cenderung lebih tinggi daripada tikus yang diberi minyak ikan lele (A2, A3 dan A4). Nurdin et al. (2016) menyatakan bahwa akumulasi lipid pada hati tikus terjadi lebih dahu- lu dibandingkan perubahan profil lipid pada se - rum dan juga mengindikasikan bahwa penilaian akumulasi lipid pada histopatologi jaringan hati lebih sensitif untuk mengamati perbedaan hasil perlakuan pemberian minyak dengan komposisi lemak jenuh dan lemak tak jenuh yang berbeda apabila dibandingkan dengan penilaian profil li- pid serum. Herpandi (2005) menunjukkan bahwa kadar kolesterol berlebihan dapat menyebabkan gangguan pada proses metabolisme lemak, se- hingga terjadi kondisi hiperkolesterolemia. Pada kondisi hiperkolesterolemia,  kolesterol yang ma- suk ke dalam hati tidak dapat diangkut seluruh-

## Gambar 1. Grafik peningkatan bobot badan tikus per minggu
Jenis intervensi Sebelum intervensi (g) Sesudah intervensi (g) Perubahan bobot badan (g) p 1 p 2 A1 382,17±55,26 398,00±52,94 15,83 0,000* 0,090 A2 423,00±65,91 410,33±59,61 -12,67 0,357 A3 399,50±82,09 390,67±87,95 -8,83 0,359 A4 349,33±68,24 350,67±59,25 1,33 0,797 K eterangan: *signifikan pada α=0,05;
1 analisis paired t-test sebelum dan setelah intervensi; 2 analisis ANOVA antar perlakuan.
Tabel 1. Perubahan bobot badan tikus sebelum dan sesudah intervensi
Pengaruh minyak ikan lele terhadap histopatologi tikus jantan
nya oleh lipoprotein dari aliran darah sehingga membuat kadar total kolesterol dan LDL mening- kat. Gambaran histopatologi kelompok A2, A3, dan A4 mempunyai kemiripan yaitu vakuola le- mak masih ditemukan namun dalam jumlah yang sedikit dan berukuran kecil di dalam sitoplasma sel-sel hati. Selain itu, pada kelompok A2, A3, dan A4 ditemukan pula beberapa sel hati yang mengecil (atrofi) sebagai dampak dari pelebaran sinusoid (dilatasi) (Gambar 2. A2). Perlakuan pada A2 dan A3, masih terdapat beberapa sel hepatosit yang mengalami dege- nerasi pada sitoplasmanya, namun dibandingkan dengan A1, sel hepatosit A2 dan A3 cenderung mengarah menuju perbaikan. Perlakuan A4 juga mengalami perbaikan walau masih terdapat sel hepatosit yang mengalami degenerasi hidropik (Gambar 2. A4). Kemungkinan perbaikan sel ini terjadi karena kandungan minyak ikan lele yang dapat memberikan pengaruh positif pada hepato- sit. Srimiati et al. (2015) mengatakan bahwa mi- nyak ikan lele mengandung omega 6 dan omega 3 walaupun perbandingan omega 6 lebih tinggi dari omega 3. Hal ini sesuai dengan pernyataan Chen et al. (2016) yang menyatakan bahwa pem- berian omega 3 dapat meningkatkan steatosis hati dan memperbaiki fungsi hati.
Perubahan histopatologi ginjal Gambar histopatologi ginjal tiap perlakuan dapat dilihat di Gambar 3. Kondisi glomerulus dan tubulus yang terdapat pada jaringan ginjal
kelompok A1 tidak mengalami perubahan akibat pemberian pakan hiperkolesterolemia. Hal ini memperlihatkan bahwa intervensi yang diberi- kan tidak menyebabkan perubahan pada struk- tur ginjal. Hasil pemeriksaan histopatologi dapat dijelaskan bahwa tidak terdapat perbedaan secara mikroskopik antara perlakuan A1, A2, A3, dan A4. Sel yang terdapat pada ginjal tiap perlakuan tampak tidak menunjukkan perubahan yang me- ngarah pada kerusakan dan malfungsi dari gin- jal. Hal ini  diduga karena kadar LDL darah tikus tiap perlakuan masih berada dalam kadar normal setelah 4 minggu pemberian pakan hiperkoles- terolemia yaitu berkisar antara 9,67±4,07 sam- pai 12,67±7,23 mg/dl (Laksitoresmi et al. 2016). Bhagaskara et al. (2015) menyatakan bahwa ada hubungan erat antara kadar LDL dalam darah dengan kadar ureum dan kreatinin dalam urin pasien ginjal kronik. Penelitian Wresdiyati et al.
Gambar 2. (A1) hati kelompok  A1, (A2) hati ke- lompok (A3) kelompok hiperkoleste- rol+minyak ikan lele+omega 3, (A4) hati kelompok A4
Keterangan: Tanda panah pada A1 menunjukkan akumulasi lipid yang signifikan pada sitoplasma; tanda panah pada A2 menunjukkan dilatasi sinusoid yang menyebabkan atrof; tanda panah pada A4 menunjukkan sel hepatosit mengalami degenerasi hidropik; kelompok A2, A3 dan A4 terjadi dila- tasi sinusoid (d); pewarnaan Hematoksilin dan Eosin/HE, perbesaran objektif 40x.
(2011) menunjukkan bahwa ketika nilai koles- terol total mendekati normal maka jaringan ginjal mengalami perbaikan. Hal ini menunjukkan bah- wa meningkatnya kadar lipid dalam darah, dapat berisiko tinggi terhadap fungsi organ ginjal.
Perubahan histopatologi otak Gambar  4 menunjukkan bahwa tidak ter- dapat perbedaan gambaran histopatologi pada struktur sel neuron penyusun hipokampus baik pada perlakuan A1, A2, A3, dan A4. Hal ini menunjukkan bahwa asupan lemak yang berasal dari pakan yang diberikan selama empat minggu tidak berpengaruh pada struktur sel neuron hipo- kampus. Hasil penelitian ini berbeda dengan hasil penelitian Granholm et al. (2008) yang memper- lihatkan bahwa asupan asam lemak jenuh, koles-
Gambar 3. ginjal kelompok A1; ginjal kelompok A2; ginjal kelompok A3; dan ginjal kelompok A4
Keterangan: Pewarnaan HE, objektif 40x.

## Firmansyah dkk.

## KESIMPULAN
Pemberian minyak ikan lele cenderung menekan bobot badan tikus yang di intervensi oleh pakan hiperkolesterolemia. Pemberian mi- nyak ikan lele secara tunggal atau dikombinasi- kan dengan omega 3 atau omega 3 dan vitamin E dapat memengaruhi perubahan sel pada preparat jaringan hati dibandingkan dengan kontrol, na- mun tidak ada perbedaan antara perlakuan pem- berian minyak ikan lele. Pemberian minyak ikan lele dan kombinasinya juga tidak memberikan perbedaan berarti dibanding kontrol pada pre- parat ginjal dan otak. Disarankan agar waktu in- tervensi pemberian minyak ikan lele pada tikus hiperkolesterolemia pada penelitian berikutnya diberikan dalam waktu lebih lama minimal sem- bilan bulan. Hal ini diharapkan dapat memberi- kan pengaruh terhadap perubahan sel pada pre- parat hati, ginjal, dan otak tikus yang nyata antar perlakuan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti menyampaikan terimakasih ke- pada Kemenristekdikti yang telah mensponsori pendanaan penelitian ini melalui skim Peneli- tian Unggulan Perguruan Tinggi tahun anggaran 2015.

## DAFTAR PUSTAKA
Alzheimer’s Association. 2017. Alzheimer’s As- sociation Report: 2017 Alzheimer’s di- sease facts and figures. Alzheimer’s & De - mentia:1-50. http://dx.doi.org/10.1016/j. jalz.2017.02.001. Arsenault D, Julien C, Chen CT, Bazinet RP, Calon F. 2012. Dietary intake of unsaturated fatty acid modulates physiological properties of ethorhinal cortex neurons in mice. Jour- nal of Neurochemistry:1-17. https://doi. org/10.1111/j.1471-4159.2012.07772.x. Astuti DA. 2015. Diet untuk hewan model. Bo- gor: IPB press.
Bhagaskara, Liana P, Santoso B. 2015. Hubung- an kadar lipid dengan kadar ureum dan kreatinin pasien ginjal kronik di RSUP Dr. Mohammad Hoesin Palembang Periode 1 Januari-31 Desember 2013. Jurnal kedok- teran dan kesehatan 2(2):223-230.
Chen  LH,  Wang  YF,  Xu  QH,  Chen  SS.  2016. Omega-3 fatty acids as a treatment for non- alcoholic fatty liver disease in children: A systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Clinical Nutrition:1-6. http://dx.doi.org/10.1016/j. clnu.2016.12.009.
Gambar 4. (A1) hipokampus kelompok kontrol, (A2) hipokampus kelompok pembe- rian minyak ikan lele murni (A3), hi- pokampus kelompok pemberian mi- nyak ikan lele+ omega 3, (A4)  hipo- kampus kelompok pemberian mi- nyak ikan lele+ vitamin E.
Keterangan: Pewarnaan HE,  objektif 40x.
terol dan lemak terhidrogenasi selama delapan minggu dapat merusak kemampuan memori dan morfologi hipokampus pada tikus. Perbedaan hasil ini kemungkinan disebabkan jangka waktu intervensi yang singkat (4 minggu)  sehingga be- lum muncul kerusakan yang berarti pada sel hi- pokampus.
Beta amiloid pada jaringan otak Hasil pewarnaan imunohistokimia pada ja- ringan otak yang diamati di bagian hipokampus tidak terlihat plak beta amiloid pada semua per- lakuan (A1, A2, A3 dan A4). Hal ini diperkirakan karena waktu penelitian ini hanya empat ming- gu sehingga kemungkinan proses terbentuknya plak beta amiloid belum terjadi. Arsenault et al. (2012) menyatakan bahwa pengaruh pemberian diet tinggi omega 3 dan asam lemak tidak jenuh akan terlihat apabila waktu penelitian dilakukan selama 9-13 bulan (36-52 minggu). Hal ini ter- kait dengan perbandingan rasio konsumsi pangan rendah omega 3 dan omega 6 yang dapat mening- katkan protein tau yang tidak dapat dibuang tu- buh pada tikus intervensi. Hal ini juga sesuai dengan Phivilay et al. (2010) yang mengatakan bahwa pemberian 6-12 bulan asam lemak trans kepada tikus model al- zheimer dapat mengubah profil asam lemak yang terdapat di otak. Penelitian Julien et al. (2010) menyatakan bahwa konsumsi diet tinggi le- mak dengan rasio PUFA omega 6 dan omega 3 yang rendah mampu meningkatkan konsentrasi amiloid pada bagian korteks otak tikus yang di- berikan diet sampai berusia 13 bulan.
Pengaruh minyak ikan lele terhadap histopatologi tikus jantan
Chien MY, Ku YH, Chang JM, Yang CM, Chen CH. 2016. Effect of herbal mixture extracts on obesity in rats fed a high-fat diet. J Food Drug Anal 24(3):594-601. Cooper JL. 2003. Dietary lipids in the aetiology of alzheimer’s disease: implications for therapy. Drugs Aging 20(6):399-418.
Covington MB. 2004. Omega 3 fatty acid. Am Fam Physician 70(1):133-140.
Dainy NC, Kusharto CM, Madanijah S, Nasrun
MWS. 2016. Catfish ( Clarias gariepinus ) biscuit and oil supplementation and its ef- fect on lipid profile, oxidative stress mark - ers and cognitive function of the elderly. IJBAR 28(3):181-194.
Davidson EP, Coppey LJ, Calcut NA, Oltman CL, Yorek MA. 2010. Diet induced obesity in
Sprague Dawley rat causes microvascular and neural dysfunction. Diabetes Metab Res Rev 26(4):306-318. Freeman LR, Granholm ACE. 2012. Vascular change in rat hippocampus following a high saturated fat and cholesterol diet. Jour- nal of cerebral blood flow and metabolism
32(4):643-653. https://doi.org/10.1038/
jcbfm.2011.168 Gonzales S, Huerta JM, Fernandez S, Patterson AM, Lasheras C. 2010. The relationship between dietary lipids and cognitive per- formance in an eldery population. Int J Food Sci Nutr 61(2):217-225. https://doi. org/10.3109/09637480903348098
Gani N, Momuat LI, Pitoi MM. 2013. Profil lip - ida plasma tikus wistar yang hiperkoles- terolemia pada pemberian gedi merah ( Abelmoschus manihot L.). Jurnal MIPA UNSTRAT online  2(1):44-49.
Granholm ACE, Bimonte-Nelson HA, Moore AB, Nelson ME, Freeman LR, Sambamurti K. 2008. Effects of a saturated fat and high cholesterol diet on memory and hippocam- pal morphology in the middle-aged rat. J
Alzheimers Diseases 14(2):133-145. Hardiningsih R, Nurhidayat N. 2006. Pengaruh pemberian pakan hiperkolesterolemia ter- hadap bobot badan tikus putih wistar yang diberi bakteri asam laktat. Biodiversitas 7(2):127-130.
Harini M, Okid DA. 2009. Blood Cholesterol Level of Hypercholesterolemia Rat ( Rattus norvegicus ) After VCO Treatment. J Biosci 1(2):53-58.
Hassanali Z, Ametaj BN, Field CJ, Proctor SD,
Vine DF. 2010. Dietary supplementation of n-3 PUFA reduced weight gain and im- proves postpandrial lipaemia and the asso- ciated inflammatory response in the obese JCR:LA-cp rat. Diabetes, Obesity and
Metabolism 12(2):139-147. https://doi. org/10.1111/j.1463-1326.2009.01130.x
Herpandi. 2005. Aktivitas Hipokolesterolemik Tepung Rumput Laut Pada Tikus Hiper- kolesterolemia. [Tesis]. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Ihedioha JI, Noel-Uneke OA, Ihedioha TE. 2013. Reference values for the serum lipid pro- file  of  albino  rats  ( Rattus norvegicus ) of varied ages and sexes. Comp Clin Pathol 22(1):93-99. https://doi.org/10.1007/
s00580-011-1372-7. Irianto HE, Soesilo I. 2007. Dukungan Teknologi Penyediaan Produk Perikanan. Badan Riset Kelautan dan Perikanan. Departemen Ke- lautan dan Perikanan:1-20.
Julien C, Tremblay C, Phivilay A, Berthiaume L, Emond V, Julien P, Calon F. 2010. High- fat diet aggravates amyloid-beta and tau pathologies in the 3xTg-AD mouse model. Neurology of Aging 31(9):1516-1531.
Kolorev IO. 2014. Alzheimer’s disease: a clinical and basic science review. Med Student Res J 4:24-33.
Krisnansari D, Sulistyo H, Ati VRB. 2014. Efek propolis terhadap fungsi dan perlemakan hati tikus putih ( Rattus norvegicus ) model hhiperkolesterolemia. Penel Gizi Makan 37(1):77-85.
Kusharto CM, Madanijah S, Suseno SH. 2015. Minyak ikan lele ( Clarias gariepinus ) se- bagai suplemen alternatif pencegah Alz- heimer pada lansia [Laporan Penelitian]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.
Laksitoresmi DR, Kusharto CM, Sinaga T, Sulae- man A. 2016. Catfish ( Clarias gariepinus ) oil intervention and its effect on lipid pro - file  and  MDA  levels  of  hypercholesterol - emic male Sprague dawley rats. Journal of Biology, Agriculture and Healthcare 6(22):67-73.
Marques C, Meireles M, Norberto S, Leite J, Frei- tas J, Pestana D, Faria A, Calhau C. 2016. High-fat diet-induced obesity rat model: a comparison between Wistar and Sprague- Dawley rat. Adipocyte 5(1):11-21.
Mendez-Sanchez N, Gonzalez V, Aguayo P, San- chez JM, Tanimoto MA, Elizando J, Uribe M. 2001. Fish oil (n-3) polyunsurated fatty acids beneficially  affec biliary cholesterol nucleation time in obese women losing weight. J Nutr 131(9):2300-2303.
Minis R, Haq I, Jackson PR, Yeo W, Ramsay L. 2006. Oily fish and fish oil supplements in the prevention of coronary heart disease. J Hum Nutr Dietetics 5:449-459. https://doi. org/10.1046/j.1365-277X.1998.00074.x.

## Firmansyah dkk.
Simopoulos AP. 2016. An increase in omega 6/ omega 3 fatty acid ratio increase the risk of obesity. Nutrients 8(128):1-17.
Srimiati M, Kusharto CM, Tanziha I, Suseno SH.
2015.  Effect  of  different  bleaching  tem - peratures  on  the  quality  of  catfish  ( Clar- ias gariepinus ) oil. Procedia Food Science 3:223-230. Wei Z, Wang W, Chen J, Yang D, Yan R, Cai Q.
2014. A prospective, randomized, con- trolled study of omega-3 fish oil fat emul - sion-based parenteral nutrition for patients following surgical resection of gastric tu- mors. Nutrition Journal 13:25-36.
Wood JT, Williams JS, Pandarinathan L, Janero
DR, Lammi-Keefe CJ, Makriyannis A.
2010. Dietary docosahexaenoic acid sup- plementation alters select physiological en- docannabinoid-system metabolites in brain and plasma. J Lipid Res 51(6):1416-1423. https://doi.org/10.1194/jlr.M002436 Wresdiyati  T,  Hartanta  AB,  Astawan  M.  2015. Tepung rumput laut ( Eucheuma  cottonii ) menaikkan level superoksida dismutase (SoD) ginjal tikus hiperkolesterolemia. Ju- rnal Veteriner 12(2):126-135.
Wresdiyati T, Karmila A, Astawan M, Karnila R. 2015. Teripang pasir meningkatkan kand- ungan antoksidan superoksida dismutase pada pancreas tikus diabetes. Jurnal Veteri- ner 16(1):145-151.
Zarafoza C, Gomez-Guerrero C, Martin-Ven- tura JL, Blanco-Colio L, Lavin B, Mall- via B, Tarin C, Mas S, Ortiz A, Egido J.
2011. Animal model of cardiovascular disease. Journal of Biomedicine and Bio- technology 497841:1-13. http://dx.doi.
org/10.1155/2011/497841.
Mona CLHF. 2014. Pengaruh diet minyak ikan terhadap waktu pembekuan darah pada ti- kus galur wistar jantan. [skripsi]. Fakultas Kedokteran Gigi. Universitas Negeri Jem- ber.
Nikasa M, Karimi P, Rajavand H, Afshari F, Ja- farlou M, Soltanali M. 2016. High choles- terol diet increase expression of cholesterol 24-hydroxylase and BACE1 in rat hippo- campi:  implications  for  the  effect  of  diet cholesterol on memory. Iran Red Crescent Med J 18(12):1-8.
Noeman SA, Hamooda HE, Baalash A. 2011.
Biochemical study of oxidative stress markers in the liver, kidney and heart of high fat diet induced obesity in rats. Diabe- tol Metab Syndr 3(1):1-17.
Nurdin MN, Rimbawan, Marliyati SA. 2016. Akumulasi lipid hati dan profil lipid darah tikus Sprague dawley yang diintervensi minyak super olein dan olein. J Gizi Pa- ngan 11(1):67-74.
Phivilay A, Julien C, Tremblay C, Berthiaume L, Julien P, Giguere Y, Calon F. 2009. High dietary consumption of trans fatty acids decreases brain docosahexaenoic acid but does not alter amyloid-β  and tau patholo - gies in the 3xTG-AD model of alzheimer’s disease. Neuroscience 159:296-307. Reitz C, Brayne C, Mayeux R. 2011. Epidemiol- ogy of Alzheimer disease. Nat Rev Neurol 7(3):137-152. https://doi.org/10.1038/nr- neurol.2011.2.
Ruzickova J, Rossmeisl M, Prazak T, Flachs P,
Sponarova J, Vecka M, Tvrzicka E, Bryhn M, Kopecky J. 2004. Omega-3 PUFA of marine origin limit diet-induced obesity in mice by reducing cellularity of adipose tis- sue. Lipids 39(12):1177-1185.