Aplikasi Amonium Hidroksida (Nh 4 oh) Sebagai ………….…………….…. (Tjahyo Winanto)
APLIKASI AMONIUM HIDROKSIDA (NH 4 OH) SEBAGAI TRIGGER
PEMIJAHAN TIRAM MUTIARA Pinctada maxima (JAMESON)

## Tjahjo Winanto
Jurusan Perikanan dan Kelautan Fakultas Sains dan Teknik Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto

## ABSTRAK
Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui dosis larutan NH 4 OH yang optimum  dan  posisi  injeksi  yang  tepat  sehingga  dapat  menjadi  pemicu  ( trigger )  pemijahan induk tiram mutiara Pinctada maxima (Jameson). Percobaan menggunakan Rancangan Acak Lengkap  Faktorial  (Faktorial-RAL),  dengan  tiga  kali  ulangan.  Perlakuan  yang  diterapkan terdiri dari dua faktor yaitu (I) Posisi Injeksi dan (II) Dosis larutan NH 4 OH. Faktor I terdiri dari  4  taraf  faktor  yaitu  posisi  injeksi  di  bagian  (A)  Otot  aduktor,  (B)  Pangkal  kaki,  (C) Gonad dan (D) Tidak diinjeksi (kontrol). Faktor II terdiri dari 3 taraf faktor yaitu dosis (E) 0,5  ml,  (F)  1,0  ml  dan  (G)  1,5  ml.  Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa  dosis  larutan NH 4 OH  yang  optimum  untuk  memicu  ( trigger )  pemijahan  induk  tiram  mutiara Pinctada maxima (Jameson) adalah 0,5  1,0 ml dengan posisi injeksi terbaik di bagian pangkal kaki.
Kata kunci : Pearl oyster Pinctada maxima; amonium hidroksida (NH 4 OH); spawning

## PENDAHULUAN
Permasalah  utama  pada  budidaya tiram  mutiara  ( hatchery )  saat  ini  adalah ketersediaan  induk  yang  siap  pijah  dan benih  (spat)  yang  sebagian  besar    masih tergantung dari alam. Suplai spat merupakan  bagian  yang  krusial  dari industri  ini,  jika  semata-mata  hanya menggantungkan  pengumpulan  spat  dari alam  (Le  Blanc et  al. 2005).  Sedangkan spat  dan  calon  induk  yang  berasal  dari alam  jumlahnya  terbatas,  sangat  fluktuatif dan  dipengaruhi  musim.  Penyediaan  spat secara terkendali melalui hatchery merupakan  alternatif  yang  tepat  untuk menanggulangi  terbatasnya  spat  alam. Menurut Jeffrey et al . (1990) tujuan utama dari kegiatan pembenihan adalah memproduksi  jutaan  juvenil  (spat)  dengan cara  memelihara  larva  pada  tingkat kepadatan yang lebih tinggi dari kondisi di alam. Produksi melalui hatchery merupakan pendekatan yang paling menguntungkan  dalam  penyediaan  spat (Rupp et al . 2005).
Permasalah lain yang timbul setelah diperoleh  induk  tiram  mutiara  dari  alam
adalah  tiram  tidak  mau  memijah  setelah dipelihara di hatchery. Beberapa perusahaan  tiram  mutiara  di  Indonesia sampai saat ini masih menggunakan bahan kimia untuk mempercepat proses pemijahan  di  hatchery.    Menurut  Dan (1967);  Finkel  and  Wolf  (1980) dalam Longo  (1988),  bahan  kimia  tertentu  yang diaplikasikan pada moluska, ternyata dapat meningkatkan atau memacu reaksi akrosoma.  Aktifitas  sel  telur  maupun spermatozoa  dapat  meningkat  jika  terjadi peningkatan  pH  intra  seluler.  Kondisi perairan  yang  basa  akan  meningkatkan reaksi akrosomal pada spermatozoa, sehingga  berpengaruh  positif  terhadap peningkatan persentase fertilisasi.
Beberapa  jenis  bahan  kimia  seperti Hidrogen Peroksida (H 2 O 2 ), Amonia (NH 4 ),  Natrium  Hidroksida  (NH 4 OH), Larutan  Tris  (Tris  Buffer)  telah  digunakan oleh  Alagarswami et  al (1987)  dan Dharmaraj et  al (1991)  untuk  kegiatan pembenihan  atau  pemijahan  tiram  mutiara Pinctada fucata . Winanto (2004)
menggunakan larutan amonia untuk meningkatkan motilitas spermatozoa,
Aplikasi Amonium Hidroksida (Nh 4 oh) Sebagai ………….…………….…. (Tjahyo Winanto)
persentase pembuahan dan penetasan tiram mutiara Pinctada maxima .
Konsentrasi  larutan  amonia  yang  baik untuk meningkatkan motilitas spermatozoa antara  0,025  %  0,050  %;  persentase pembuahan  tertinggi  pada  konsentrasi larutan  0,050  %  (87,40  %)  dan  tingkat penetasan  tertinggi  pada  konsentrasi  0,025 % (86,25 %).
Aplikasi larutan kimia untuk memicu  pemijahan  organisme  kekerangan umumnya  dilakukan  dengan  perendaman (CMFRI,  1991;  Winanto  2004).  Aplikasi larutan  kimia  dengan  cara  diinjeksikan  di bagian  kaki  dan  otot  aduktor Pinctada fucata telah  dilakukan  Alagarswami et  al (1987). Pengunaan larutan kimia yang tepat dosis sangat bermanfaat dalam meningkatkan kesuburan telur dan sperma, serta  meningkatkan  persentase  fertilisasi. Konsentrasi  larutan  kimia  yang  terlalu tinggi diduga dapat mengakibatkan rusaknya  sel-sel  intra  seluler  gamet, sedangkan  konsentrasi  larutan  yang  terlalu rendah  tidak  akan  berpengaruh  terhadap aktifitas sel gamet.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah mengetahui  dosis  NH 4 OH  yang  optimum dan  posisi  injeksi  yang  tepat  sehingga dapat  memicu  ( trigger )  pemijahan  induk tiram mutiara Pinctada maxima (Jameson).

## BAHAN DAN METODE
Penelitian dilakukan
di laboratorium  pembenihan  tiram  mutiara Balai Besar Pengembangan Budidaya Laut Lampung.  Sebagai  hewan  uji  digunakan tiram  mutiara Pinctada  maxima (Jameson) berukuran  antara  15–17  cm,  dengan  stadia kematangan  gonad  IV  (TKG  IV).  Seleksi induk  dilakukan  secara  visual  mengikuti petunjuk  Winanto  dan  Dhoe  (1992); Winanto  (2004),  Secara  morfologi,  tiram yang  telah  dewasa  (TKG  IV)  dicirikan dengan  berkembangnya  gonad  sampai menutupi  seluruh  organ  bagian  dalam sehingga  tampak  menggembung.  Tiram jantan  gonadnya  berwarn  putih  susu
sampai  krem  keputihan,  betina  berwarna kuning tua.
Tiram  yang  telah  diseleksi  dibawa ke  laboratorium  dan  dipelihara  di  dalam akuarium ukuran 80 liter dan diberi aerasi. Satu  akuarium  diisi  5  pasang  tiram,  posisi tiram  jantan  dipisahkan  dari  tiram  betina dengan tujuan untuk memudahkan pengamatan pemijahan. Percobaan dilakukan dengan menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap Faktorial (Faktorial-RAL), dengan tiga kali ulangan.  Perlakuan  yang  diterapkan  terdiri dari  dua  faktor  yaitu  (I)  Posisi  Injeksi  dan (II)  Dosis  larutan  NH 4 OH.  Faktor  I  terdiri dari  4  taraf  faktor  yaitu  posisi  injeksi  di bagian (A) Otot aduktor, (B) Pangkal kaki, (C)  Gonad  dan  (D)  Tidak  diinjeksi (kontrol).  Faktor  II  terdiri  dari  3  taraf faktor yaitu dosis (E) 0,5 ml, (F) 1,0 ml dan (G) 1,5 ml.
Sebelum  perlakuan  injeksi  larutan
NH 4 OH dilakukan, terlebih dahulu disiapkan tiram yang telah dibuka sebagian cangkangnya  dan  di  ganjal  baji.  Prosedur membuka  cangkang  mengikuti  petunjuk Winanto (2004). Selanjutnya dengan menggunakan  alat  injeksi,  larutan  NH 4 OH disuntikkan sesuai dengan perlakuan.
Parameter  yang  diamati  adalah jumlah  tiram  mutiara  yang  memijah  dan sintasan.  Persentase  pemijahan  dihitung dengan  membandingkan  antara  jumlah tiram  yang  memijah  dengan  jumlah  tiram awal. Sintasan dihitung berdasarkan persentase jumlah spat pada akhir pengamatan  dibagi  jumlah  spat  pada  awal pengamatan.
Data  yang  diperoleh  dianalisis dengan  uji  F.  Jika  terdapat  data  yang penyebarannya tidak normal, maka terlebih dahulu akan dilakukan transformasi dengan logaritma  natural  (Ln).  Apabila  uji  F menunjukkan  adanya  pengaruh  nyata (P<0,05)  pada  tiap  perlakuan,  maka dilanjutkan  analisis  dengan  uji  rerata Tukey (Neter et al . 1990). Pengolahan data
Aplikasi Amonium Hidroksida (Nh 4 oh) Sebagai ………….…………….…. (Tjahyo Winanto)
dilakukan  dengan  menggunakan  software SPSS versi 15 for Windows.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil penelitian menunjukkan bahwa  posisi  injeksi  dan  dosis  larutan NH 4 OH berpengaruh nyata (P<0,05)
terhadap pemijahan tiram mutiara Pinctada
maxima .  Persentase  pemijahan  tertinggi (93,33%  3,4)  terdapat  pada  perlakuan injeksi pada pangkal kaki dengan dosis 1,0 ml (BF),  sedangkan pada perlakuan injeksi pada gonad dengan dosis 1,5 ml dan tanpa injeksi  (kontrol)  tidak  terjadi  pemijahan (Gambar 1)
Gambar  1.  Persentase  rata-rata  pemijahan  tiram  mutiara Pinctada  maxima pada  berbagai posisi injeksi dan dosis larutan NH 4 OH.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  diketahui bahwa  sintasan  tertinggi  (96,0%  3,60) terdapat  pada  perlakuan    injeksi  pada pangkal  kaki  dengan  dosis  0,5  ml  (BE), tetapi tidak berbeda nyata (P>0,05) dengan
perlakuan  BF  atau  injeksi  pada  pangkal kaki  dengan  dosis  1,0  ml  (95,26%  3,68). Sebaliknya  pada  tiram  mutiara  yang  tidak diinjeksi  (kontrol)  tidak  ada  yang  mati (Gambar 2).
Gambar 2. Rata-rata sintasan tiram mutiara Pinctada maxima pada berbagai posisi injeksi dan dosis larutan NH 4 OH. 0 20 40 60 80 100 120 (A) Otot aductor (B) Pangkal kaki (C) Gonad (D) Tidak diinjeksi (kontrol) P er se ntas e P em ij ahan ( % ) Posisi Injeksi dan Dosis NH 4 OH (E) 0,5 ml (F) 1,0 ml (G) 1,5 ml b c f e d h g 0 20 40 60 80 100 120 (A) Otot aductor (B) Pangkal kaki (C) Gonad (D) Tidak diinjeksi (kontrol) Sint asan (% ) Posisi Injeksi dan Dosis NH 4 OH (E) 0,5 ml (F) 1,0 ml (G) 1,5 ml a a b  b c c c d e f f
Aplikasi Amonium Hidroksida (Nh 4 oh) Sebagai ………….…………….…. (Tjahyo Winanto)
Pada penelitian ini, tiram menunjukkan  respon  pemijahan  tertinggi pada perlakuan injeksi pada bagian pangkal kaki  dengan  dosis  larutan  NH 4 OH  1,0  ml (BF). Sebaliknya sintasan tertinggi terdapat pada  perlakuan  injeksi  larutan  NH 4 OH dengan  dosis  0,5  ml  pada  bagian  pangkal kaki  (BE),  karena  perlakuan  BE  dan  BF tidak  berbeda  nyata  maka  dosis  yang dianjurkan  adalah  0,5–1,0  ml.  Diduga bagian  pangkal  kaki  merupakan  bagian organ  yang  sangat  peka,  organ  kaki  terdiri dari jaringan otot dan syaraf sehingga dapat bergerak elastis, dan pusatnya berada pada bagian  pangkal  kaki.  Tidak  mengherankan jika  disuntikkan  bahan  kimia  pada  bagian tersebut  dapat  mengakibatkan  adanya kontraksi  keseluruh  organ  tubuh  dan memicu  pemijahan.  Menurut  Gosling (2004),  Velayudhan  and  Gandhi  (1987), kaki  merupakan  salah  satu  organ  tubuh yang  bersifat  elastis,    bentuknya  seperti lidah.    Kaki  terdiri  dari  susunan  jaringan otot yang menuju keberbagai arah, jaringan  otot  tersebut  secara  menyeluruh dapat  ditembus  oleh  suatu  tekanan  darah, sehingga  dengan  adanya  tekanan  pada aliran  tersebut  kaki  dapat  menjadi  regang ( turgit )  dan  memanjang  hingga  dapat mencapai  tiga  kali  atau  lebih  dari  panjang normal.
Injeksi larutan NH 4 OH pada bagian otot  aduktor  menunjukkan  respon  yang lebih rendah (16,50  46,38%) jika dibandingkan injeksi pangkal kaki. Diduga otot aduktor tidak secara langsung berhubungan  dengan  organ  reproduksi, sehingga  rangsang  bahan  kimia  yang diinjeksikan  tidak  nyata  pengaruhnya. Disampaikan Gosling (2004), pada bivalvia otot  aduktor  mempunyai  tugas  utama khususnya  dalam  membuka  dan  menutup cangkang.  Fungsi  lain  dari  otot  aduktor adalah sebagai tempat penyimpanan
cadangan karbohidrat atau glikogen (Dharmaraj et al ., 1987).
Respon  pemijahan  paling  rendah (3,33–11,15%)  terjadi  pada  perlakuan
injeksi larutan NH 4 OH pada bagian gonad, bahkan pada dosis 1,5 ml semua hewan uji mati. Diduga larutan kimia yang disuntikkan  dapat  mengganggu  aktivitas fisiologi  tiram,  sehingga  respon  yang ditimbulkan  jadi  sebaliknya  yaitu  tidak memijah  karena  sel-sel  gonad  letak  rusak atau  menyebabkan  kematian. Harvey  and Hoar  (1979);  Rodwell  (1984),  menyatakan bahwa larutan basa kuat dengan konsentrasi  tinggi  dapat  merusak  sel-sel telur  dan  sperma,  serta  dapat  merusak aktivitas  enzimatik  atau  biologi  sebagian besar protein. Gonad adalah organ reproduksi,  dalam  kondisi  dewasa  (TKG IV)  gonad  menyelimuti  seluruh  bagian organ  dalam  yang  meliputi  perut,    jantung dan  bagian  utama  usus  yang  berhubungan dengan  massa  jeroan  (Chellam,  1987; Gosling  2004).  Mencermati  susunan  organ gonad,  maka  jika  melakukan  injeksi  harus hati-hati, karena jika jarum injeksi mengenai organ vital dapat mengakibatkan kematian.
Aplikasi bahan kimia sebagai trigger pemijahan tiram atau jenis kekerangan  lainnya  umumnya  dilakukan dengan  cara  perendaman,  bahan  kimia yang  digunakan  berupa  larutan  dan  dapat merubah  pH  air.  Jenis  bahan  kimia  yang umum  digunakan  antara  lain  hidrogen peroksida  (H 2 O 2 ),  natrium  hidroksida (NaOH),  amonium  hidroksida  (NH 4 OH), dan  larutan  tris  (trace  buffer).  Dalam pengaplikasiannya sering dilakukan pencampuran  antara  bahan-bahan  kimia tersebut  (CMFRI,  1991;  Dharmaraj et  al ., 1991;  Winanto  2004).  Penggunaan  larutan NH 4 OH  dengan  dosis  0,1  –  0,3  ml  tang diinjeksikan pada otot aduktor atau pangkal kaki  tiram  mutiara Pinctada  fucata dapat merespon
pemijahan 46–50% (Alagarswami et al , 1987; Winanto, 2004).

## SIMPULAN
Hasil  pengamatan  menunjukkan bahwa dosis larutan NH 4 OH yang optimum untuk  memicu  ( trigger )  pemijahan  induk
Aplikasi Amonium Hidroksida (Nh 4 oh) Sebagai ………….…………….…. (Tjahyo Winanto)
tiram  mutiara Pinctada  maxima (Jameson) adalah  0,5–1,0  ml  dengan  posisi  injeksi terbaik di bagian pangkal kaki.

## DAFTAR PUSTAKA
Alagarswami K, Dharmaraj S, Velayudhan TS, and Chellam A. 1987. Hetchery
Tecnology for Pearl Oyster Production. CMFRI.  Bul 39(9):  62- 71.
Chellam  A.  1987.  Biology  of  Pearl  Oyster Pinctada  fucata (Gould). CMFRI. Bul 39(3): 13-20.
CMFRI.  1991.  Pearl  Oyster  Farming  and Pearl  Culture.  Training  Manual No.  8.  Regional    Seafarming Development  and  Demonstration
Project. RAS/90/002. Bangkok,
Thailand. 103 p.
Dharmaraj,  D.,  Kandasami,  D.,  and Alagarswami,  K.  1987.  Some Aspects  of  Physiology  of  Pearl Oyster. CMFRI. Bul 39(4): 21-28.
Dharmaraj, S, Velayudhan TS, Chellam A, Victor ACC, Gopinathan CP. 1991. Hatchery Production of Pearl Oyster  Spat: Pinctada  fucata . CMFRI  Special  Publication 49. India. 36p.
Gosling  E.  2004.  Bivalve  Molluscs.
Biology,  Ecology  and  Culture. Fishing News Book. Great Britain.
Harvey,  B.J  and  W.S.  Hoar.,  1979.  The Theory  and  Practise  of  Inducced Breeding  in  Fish.  IDRC  –  Ottawa. 48 p.