Uji Efek Antidepresan Ekstrak Metanol Jamur Tlethong (Psilocybe cubensis) Pada Tikus Putih Jantan (Rattus norvegicus): ditinjau dari Immobility Time Dengan Metode Forced Swim Test

## Nofri P. Kurama, Widdhi Bodhi, Weny Wiyono
Program Studi Farmasi, FMIPA UNSRAT Manado

## ABSTRACT
Tlethong mushroom (Psilocybe cubensis) contains psilocybin that potential as antidepressant. The aim of this research was to examine the  effect of Tlethong extract  as antidepressant on white  male  wistar  (Rattus  norvegicus).  Antidepressant  test  were  evaluate  on  white  male wistar  which  divided  into  5  groups.  The  first  group  were  administered  with  aquadest  as negative control, Second group were administered with amitriptilin as positive control, third group were administered with Tlethong extract with dose 500 mg/KgBB,  625 mg/KgBB and 750  mg/KgBB  then  tail  suspension  test  were  conducted.  Immobility  time  dengan  metode forced  swim  test.  Obtained  data  were  analyzed  by  one  way  ANOVA.  The  result  shows  that Tlethong extract possess antidepressant activity evaluated by its immobility time using forced swim test method.
Keywords: Antidepressant, immobility time, forced swim test, tail suspension test, Psilocybe cubensis

## ABSTRAK
Jamur Tlethong (Psilocybe cubensis) mengandung senyawa kimia psilocybin yang berpotensi sebagai  obat  antidepresan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  membuktikan  efek  ekstrak  jamur Tlethong  sebagai  obat  antidepresan  pada  tikus  putih  jantan  (Rattus  norvegicus).  Uji  efek antidepresan  dilakukan  pada  tikus  putih  jantan  yang  dibagi  menjadi  5  kelompok  perlakuan. Kelompok pertama diberi aquades sebagai kontrol negatif, kelompok ke-2 diberi amitriptilin sebagai  kontrol  positif,  kelompok  ke-3  diberi  ekstrak  jamur  Tlethong  dengan  dosis  500 mg/KgBB,  kelompok  ke-4  diberi  ekstrak  jamur  Tlethong  dengan  dosis  625  mg/KgBB  serta kelompok  ke-5  diberi  ekstrak  jamur  Tlethong  dengan  dosis  750  mg/KgBB  kemudian dilakukan tail suspension test untuk membuat tikus stres lalu diamati immobility time dengan metode forced swim test. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan metode ANOVA satu arah.  Hasil  penelitian  menunjukkan  ekstrak  jamur  Tlethong  memiliki  efek  sebagai  obat antidepresan dilihat dari immobility time dengan metode forced swim test.
Kata kunci : Antidepresan, immobility time, forced swim test, tail suspension test, Psilocybe cubensis

## PENDAHULUAN
Depresi merupakan gangguan emosional  dan  jiwa  yang  paling  umum  di dunia.  Depresi  adalah  gangguan  kondisi emosional  atau  jiwa  seseorang.  Depresi umumnya terjadi pada wanita sekitar 25%, pria 10% dan remaja 5%. Penyebab utama terjadinya  depresi  yaitu  adanya  gangguan keseimbangan  neurotransmitter  di  otak serta  adanya  faktor  keturunan  (Tjay  dan Raharja,  2007).  Saat  ini  telah  tersedia banyak  obat-obat  sintetis  yang  digunakan sebagai antidepresan diantaranya amitriptilin dan imipramin. Namun,
penggunaan obat-obat tersebut menimbulkan efek samping yaitu penglihatan  kabur,  obstipasi,  mulut  kering dan  retensi  urin.  (Gunawan,  2009).  Hal inilah  yang  membuat  masyarakat  ingin menggunakan  obat-obatan  yang  efektif dalam  penyembuhan    dan  memiliki  efek samping  yang  lebih  sedikit  dari  obat-obat antidepresan  sintetis  yaitu  obat-obatan tradisional.
Jamur Tlethong (Psilocybe cubensis)  yang  lebih  dikenal  masyarakat dengan  nama  magic  mushroom.  Jamur  ini telah  lama  disalahgunakan  dengan  tujuan non-medis  yaitu  untuk  mengubah  suasana hati  dan  memperoleh  sensasi  dengan berhalusinasi.  Menurut  Gartz  (1993), Jamur  Tlethong  (Psilocybe  cubensis) mengandung senyawa kimia seperti psilocybin yang berpotensi sebagai antidepresan

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  di Laboratorium  Farmasi  dan  Laboratorium Advance  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi  Manado  pada  Desember  2012 sampai April 2013.
Alat yang digunakan adalah : Tiang penggantung,timbangan  analitik,  kandang, stopwatch,  alumunium  foil,  kertas  saring whatman  no.42,  oven,  corong,  ayakan mesh  65,  label,  cawan  petri,    evaporator, alat  gelas  (pyrex),  lumpang  dan  alu, kamera,  waterbath,  batang  pengaduk,
dispo  1ml  (terumo).  Bahan  penelitian  : Tikus  putih  jantan  (Rattus  norvegicus), ekstrak jamur Tlethong (Psilocybe cubensis), metanol, pakan tikus, aquades. Pembuatan  Ekstrak  Metanol  Jamur Tlethong (Psilocybe cubensis)
Jamur Tlethong (Psilocybe
cubensis)  yang  akan  digunakan  diambil lalu  dicuci  dengan  air  mengalir  kemudian dikeringkan dengan  cara diangin-anginkan dan  dimasukkan  kedalam  oven  40 o C selama  3  hari  kemudian  ditimbang simplisia  kering  yang  dihasilkan  lalu digerus  kemudian  dimaserasi  dengan menggunakan  pelarut  metanol  240ml selama  3  hari.  Ekstrak  yang  dihasilkan disaring menggunakan kertas saring kemudian dimasukkan ke dalam
evaporator  untuk  menguapkan  pelarut kemudian di waterbath untuk
mendapatkan ekstrak kental. Perlakuan Hewan Uji Tikus putih jantan (Rattus norvegicus)  diadaptasi  selama  1  minggu, setelah  itu  tikus  dibuat  stres  dengan  cara menggantung  ekor  tikus  (tail  suspension test)  selama  10  hari  kemudian  pemberian ekstrak jamur Tlethong (Psilocybe cubensis)  dilakukan  pada  hari  ke-11  dan diukur  immobility  time  seluruh  kelompok dengan cara forced swim test. Tikus dibagi kedalam lima kelompok  perlakuan dengan kontrol  positif  amitriptilin  dan  aquadest sebagai kontrol negatif.

## Pemberian Ekstrak Jamur Tlethong
Dosis  penggunaan  jamur  Tlethong pada  manusia  dewasa  (50kg)  adalah  5g. Karena  faktor  konversi  dari  manusia (70kg)  ke tikus (200g) adalah 0,018, maka dosis  yang  akan  diberikan  kepada  tikus adalah  70/50  x  0,018  x  5g  =  0,125 g/200gBB = 0,625g/KgBB (0,018
merupakan  faktor  konversi  dosis  dari manusia ke tikus).
Pemberian Obat Antidepresan
Obat antidepresan yang akan digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah Amitriptilin  tablet  25mg.  Karena  dosis lazim  pada  manusia  dewasa  adalah  25mg, maka dosis Amitriptilin untuk tikus adalah
70/50 x 25mg x 0,018 = 0,63 mg/200gBB = 3,15 mg/KgBB (0,018 merupakan faktor konversi dosis dari manusia ke tikus).

## PEMBAHASAN
Pengujian  efek  antidepresan  jamur Tlethong dilakukan dengan cara tikus yang akan  digunakan  dibuat  stres  dengan  cara menggantung  ekor  tikus  pada  tiang setinggi 50 cm selama 3 menit setiap hari, perlakuan  ini  dilakukan  selama  10  hari (Tail suspension test). Kemudian pada hari ke-11  dilakukan  pengujian  forced  swim test  dengan  cara  tikus  yang  telah  dibuat stres  dimasukkan  kedalam  wadah  yang telah  diisi  air  dengan  ketinggian  25  cm selama  8  menit    pengukuran  immobility time  dilakukan  pada  6  menit  terakhir (Porsolt RD, et.al., 1977).

## Tabel 1. Rerata dan Standar Deviasi Immobility Time
Perlakuan Rerata Immobility Time (Detik) Standar Deviasi Kontrol Positif 43,67 ± 6,11 Kontrol Negatif 161,33 ±17,01 500 mg/KgBB 124 ±18,33 625 mg/KgBB 81,33 ±17,89 750 mg/KgBB 62,67 ±21,07
Forced  swim  test  adalah  salah  satu metode  yang  biasa  digunakan  untuk mengukur  efek  suatu  obat  antidepresan pada  hewan  uji.  Khasiat  dari  suatu  obat antidepresan diukur melalui lama immobility  time  yang  lebih  singkat dibandingkan  dengan  kelompok  uji  yang tidak  diberikan  obat  antidepresan  atau ekstrak yang berfungsi sebagai antidepresan.  Immobility  time  pada  tikus diartikan  sebagai  keadaan  putus  asa  pada manusia  yang  merupakan  salah  satu penyebab dari terjadinya depresi
Sesuai dengan hasil pengujian yang dilakukan  dapat  dilihat  bahwa  kontrol positif  (amitriptilin)  memiliki  rata-rata immobility  time  yang  paling  sedikit  yakni 43,67  detik  dan  kontrol  negatif  dengan
rata-rata  immobility  time  paling  tinggi yakni  161,33  detik  serta  waktu  rata-rata dari  ekstrak  jamur  Tlethong  dengan  dosis 500 mg/KgBB adalah 124 detik,  dosis 625 mg/KgBB  adalah  81,33  detik  dan  dosis 750  mg/KgBB  adalah  62,67  detik.  Dari hasil  diatas  maka  dapat  disimpulkan bahwa  semakin  besar  dosis  ekstrak  jamur Tlethong  yang  diberikan  maka  rata-rata immobility  time  dari  tikus  semakin  kecil, menunjukkan  adanya  efek  sebagai  obat antidepresan.
Untuk  mendapatkan  data  yang lebih spesifik mengenai rata-rata immobility time sebagai  obat antidepresan, maka  dilakukan  analisis  statistik  dengan menggunakan  uji  one  way  anova  dan dilanjutkan  dengan  uji  Duncan.  Untuk melakukan pengujian Anova, data rata-rata immobility time terlebih dahulu harus diuji keseragaman  data    agar  data  yang diperoleh  valid.  Apabila  signifikan  Yang dihasilkan  dari  pengujian    keseragaman data  <0,05  maka  tidak  dapat  dilanjutkan pada pengujian Anova. Dari hasil pengujian  keseragaman  data  dihasilkan nilai  signifikan  0,430.  berdasarkan  dari hasil  keseragaman  data  menunjukan  nilai signifikan  >0,05  maka  dapat  dilanjutkan untuk pengujian Anova.
Uji  Anova  dijadikan  dasar  dalam pengambilan  suatu  keputusan  dari  suatu hipotesis.  Pada  penelitian  kali  ini  terdapat 2  hipotesis  yakni  H 0 dan  H 1 .  H 0 yakni ekstrak  Jamur  Tlethong  dengan  dosis  500 mg/KgBB,  625  mg/KgBB,  dan  750 mg/KgBB  tidak  memiliki  efek  sebagai obat  antidepresan,  dan  H 1 yakni  ekstrak Jamur Tlethong dengan dosis 500
mg/KgBB,
625 mg/KgBB, dan
750mg/KgBB  memiliki  efek  sebagai  obat antidepresan. Pengambilan keputusan hipotesis  yang  diterima  didasarkan  pada perbandingan  antara  F  hitung  dan  F  tabel, apabila  F  hitung  lebih  besar  dari  F  tabel maka H 0 ditolak dan H 1 diterima, sebaliknya apabila F hitung lebih kecil dari F  tabel  maka  H 0 diterima  dan  H 1 ditolak. Berdasarkan  hasil  pengujian  one  way anova  pada  immobility  time  dari  tikus
diperoleh  F  hitung  23,928  sig.  .000. dibandingkan  dengan  F  tabel  dengan perhitungan  V 1 sebagai  jumlah  perlakuan dikurangkan  1  (5-1  =4).  V 2 diperoleh dengan mengurangkan jumlah pengulangan  dengan  jumlah  perlakuan (15-5  =  10).  Setelah  pembacaan  F  tabel maka  diperoleh  F  tabel  pada  titik  3,48. Dengan  demikian  dapat  disimpulkan bahwa  F  hitung  lebih  besar  dari  F  tabel (23,928  >  3,48)  maka  hipotesis  yang ditolak  adalah  H 0 dan  hipotesis  yang diterima  adalah  H 1 yaitu  ekstrak  Jamur Tlethong dengan dosis 500 mg/KgBB, 625 mg/KgBB,  dan  750  mg/KgBB  memiliki efek sebagai obat antidepresan.
Kemudian dilanjutkan pada pengujian  Duncan  untuk  mengetahui apakah  terdapat  perbedaan  bermakna  dari setiap perlakuan yang diberikan. Dari hasil pengujian  yang  dilakukan  dapat  dilihat bahwa  kontrol  negatif  berada  pada  satu kolom  subset  yang  berbeda  dengan kelompok perlakuan lainnya. Ini menunjukkan bahwa antara kontrol negatif dengan  kontrol  positif  dan  ekstrak  dengan dosis  bertingkat  memiliki  perbedaan  yang bermakna. Kontrol negatif yang digunakan adalah  aquades,  dapat  disimpulkan  bahwa aquades  tidak  memberikan  pengaruh terhadap immobility time dari tikus.
Kelompok  kontrol  positif  pada pengujian  Duncan  berada  dalam  satu kolom  subset  yang  sama  dengan  ekstrak dosis 750 mg/KgBB. Hal ini menunjukkan bahwa  antara  kontrol  postif  dan  ekstrak dengan dosis tertinggi memiliki perbedaan, walaupun  secara  statistik  perbedaan  yang ada  dianggap  tidak  bermakna.  Kelompok kontrol  positif  (Amitriptilin)  dan  ekstrak dengan dosis 750 mg/KgBB juga memiliki efek  yang  paling  besar  sesuai  dengan pengujian yang dilakukan.
Pengujian Duncan terhadap ekstrak Jamur  Tlethong  menunjukkan  bahwa ekstrak  dengan  dosis  750  mg/KgBB  dan 625  mg/KgBB  berada  dalam  satu  kolom subset  yang  sama  ini  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  antara  dosis  750 mg/KgBB  dengan  dosis  625  mg/KgBB
walaupun  dalam  statistik  dianggap  tidak bermakna.  Dapat  dikatakan  juga  kedua ekstrak tersebut memiliki efek pengobatan yang  sama,  sehingga  ekstrak  dengan  dosis 625  mg/KgBB  dapat  dikatakan  sebagai dosis  yang  efektif  karna  memberikan  efek yang  hampir  sama  dengan  dosis  tertinggi yakni ekstrak dengan dosis 750 mg/KgBB. Sedangkan  ekstrak  dengan  dosis  500 mg/KgBB berada dalam satu kolom subset yang  berbeda  ini  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  bermakna  antara dosis  500mg/KgBB  dengan  dosis  750 mg/KgBB  dan  625  mg/KgBB.  Hal  ini menunjukkan bahwa dosis terendah dengan  kedua  dosis  lainnya  memiliki  efek pengobatan yang berbeda.
Berdasarkan  Penelitian  yang  telah dilakukan  menunjukkan  bahwa  zat  aktif yang  terdapat  dalam  jamur  Tlethong (Psilocybe  cubensin)  yakni  Psilocybin memiliki  efek  sebagai  obat  antidepresan dengan menghambat pengambilan kembali serotonin  dan/atau  noradrenalin.  Sesuai dengan mekanisme kerja dari obat antidepresan  yakni  dengan  menghambat pengambilan  kembali  serotonin  dan/atau noradrenalin  dari  celah  sinaptik  ke  dalam akloplasma,  hambatan  dari  pengambilan kembali  serotonin  ini  akan  menyebabkan mood  menjadi  lebih  baik  sedangkan hambatan dari pengambilan kembali noradrenalin akan menyebabkan meningkatkan aktivitas (Mutscler, 1999).

## PENUTUP

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah dilakukan serta pembahasannya dapat disimpulkan bahwa ekstrak Jamur Tlethong  (Psilocybe  cubensis)  memiliki efek  sebagai  obat  antidepresan  yang ditinjau  dari  immobility  time  dari  tikus dengan  metode  forced  swim  test.  Dapat disimpulkan  juga  bahwa  ekstrak  dengan dosis  750  mg/KgBB  dan  625  mg/KgBB memiliki efek yang lebih baik dibandingkan  dengan  ekstrak  dosis  500 mg/KgBB.

## Saran
1.  Sebaiknya  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  dengan  metode  pengujian  yang berbeda.
2.  Dapat  dilakukan  penelitian  mengenai dosis  letal  dari  ekstrak  jamur  Tlethong (Psilocybe cubensis).

## DAFTAR PUSTAKA
Gartz,  J.  1993.  Extraction  and  Analysis  of Indole  Derivates  from  Fungal Biomass. Germany : Department of Fungal Biotransformation. Gunawan,  2009.  Farmakologi  dan  Terapi. Edisi  ke-5  Jakarta:  Balai  Penerbit Fakultas Kedokteran UI. Mutschler, E. 1999.  Dinamika Obat. Edisi ke-5, Bandung: ITB Press. Porsolt  R.D,  Le  Pinchon  M,  Jalfre  M 1977.Depression:  A  new  animal model  sensitive  to  antidepressant treatments. Nature.
Tjay,  T.H.,  Raharja,  K.  2007.  Obat-obat
Penting.  Edisi  ke-6,  Jakarta:  PT Elex Media Komputindo Kelompok Kompas – Gramedia.