DAYA HAMBAT EKSTRAK BAWANG PUTIH TERHADAP S.aureus dan TOTAL

## MIKROBA DALAM DAGING

## Dede Zainal Arief, Nana Sutisna Achyadi, Risma Franisa
Program Studi Teknologi Pangan, Fakultas Teknik, Universitas Pasundan, Jl. Dr.Setiabudi No 93, Bandung, 40153, Indonesia
E-mail : dedezainalarief17@unpas.ac.id
Diterima pertama kali: 12 Januari 2020, Direvisi: 13 Januari 2020, Disetujui untuk publikasi: 16 Januari 2020

## Abstract
The research objective is to determine the inhibitory  garlic extract at different concentrations  to inhibit  the  growth of Staphylococcus aureus and lowers total microbes in beef based on the rate of microbial growth. The study consisted of four  stages:  stage one study aims to examine the components contained in extracts of  garlic  with GC-MS. Phase two study  aims  to  determine  the  time  of  maceration  of  garlic  extract  the  most  good,  knowing  how  long  the  antimicrobial compounds found in garlic extract can survive, as well as to determine the relationship when maceration on the number of  colonies  of  microbes  and  microbial  growth  rate.  Three  phase  study  aims  to  determine  the  concentration  of  garlic extract  is  most  effective.  Research  stage  four  which  applications  use  garlic  extract  concentration  and  soaking  time chosen  which can inhibit the  growth of  microbes on beef during storage Based on the results of this study concluded that  the  total  microbes  and  bacteria  Staphylococcus  aureus  contained  in  beef  can  be  inhibited  by  garlic  extract  views from the rate of microbial growth.
Keywords: Garlic extract, Inhibitor, microbes

## 1. Pendahuluan
Tanaman  bawang  putih  termasuk  tanaman  yang sangat  menguntungkan  di  dalam  pengolahan,  baik dijadikan sebagai bumbu masakan maupun obat-obatan. Permintaan  akan  tanaman  bawang  putih  sangat  tinggi dan menempati urutan kedua setelah bawang bombai di dunia.  Khusus  di  dalam  negeri  produksi  bawang  putih semakin  meningkat  seiring  dengan  penanganan  pra panen dan pasca panen yang baik dan efisien yang dapat mengurangi  kerugian  dari  hasil  tersebut.  Menurut kementrian  pertanian  Republik  Indonesia,  luas  panen bawang  putih  di  Indonesia  pada  tahun  2013  adalah 2.479  Ha.  Produksi  bawang  putih  pada  tahun  2013 adalah 15.766 ton dan produktivitas bawang putih tahun 2013  adalah  10,22  ton/Ha  (Kementrian  Pertanian  RI, 2013).
Pada umumnya pemanfaatan bawang putih digunakan  sebagai  bumbu  masak  seperti  digunakan dalam  pengolahan  daging  sapi.  Selain  digunakan sebagai  bumbu  masak,  bawang  putih  juga  memiliki beberapa  manfaat  sebagai  antibakteri,  antijamur, antivirus dan antiprotozoa.
Bawang  putih  memiliki  kandungan  kimia  seperti karbohidrat,  protein,  lemak,  vitamin,  mineral,  sterol, saponin,  alkaloid,flavonoid,  dan  triterpenoid.  Aktivitas antimikroba  bawang  putih  berasal  dari  senyawa organosulfur.  Salah  satu  senyawa  organosulfur  yang bertindak  sebagai  antibakteri  yaitu  allicin.  Allicin mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram  positif maupun gram negatif (Safithri, 2004).
Daging  sapi  merupakan  salah  satu  bahan  pangan yang  memiliki  nilai  gizi  tinggi,  terutama  protein.  Nilai gizi  yang  tinggi  mengakibatkan  bahan  pangan  ini
disukai  konsumen  untuk  memenuhi  kebutuhan  gizi sehari-hari,  sehingga  setiap  hari  daging  sapi  diproduksi dalam  jumlah  yang  banyak.  Pada  saat  ini,  kebutuhan masyarakat  Indonesia  akan  bahan  pangan  ini  terus mengalami  peningkatan  dari  tahun  ke  tahun.  Hal  ini disebabkan oleh semakin pesatnya pertambahan jumlah penduduk  dan  semakin  banyaknya  masyarakat  yang sadar  akan  pentingnya  mengkonsumsi  bahan  pangan yang bernilai gizi tinggi. Namun peningkatan konsumsi daging  tersebut  diikuti  pula  oleh  kesadaran  masyarakat untuk  mendapatkan  daging  dengan  mutu  yang  baik diantaranya  memiliki  penampakan,  warna,  aroma,  rasa bahkan kandungan protein yang tinggi.
Daging sapi termasuk salah satu bahan pangan yang sangat  rentan  terhadap  kontaminasi  mikroorganisme karena  kandungan  nutrisinya  yang  cukup  tinggi  dapat menjadi sumber makanan bagi mikroorganisme. Daging mengandung  nutrisi  berupa  air,  protein,  lemak,  mineral dan  sedikit  karbohidrat.  Kandungan  air  yang  tinggi dalam  daging  sapi,  juga  menjadikan  bahan  pangan  ini sebagai  salah  satu  media  yang  sangat  ideal  bagi pertumbuhan  dan  perkembangan  mikroorganisme. Daging sapi yang sudah terkontaminasi oleh mikroorganisme  akan  mengalami  kerusakan  dan penurunan  daya  simpan,  sehingga  menurunkan  kualitas dari pada bahan pangan tersebut.
Salah satu cara untuk mempertahankan kualitas dan daya  simpan  pada  daging  sapi  dapat  dilakukan  dengan memberikan  perlakuan  pada  daging  sapi  tersebut. Perlakuan  yang  biasa  dilakukan  adalah  dengan penambahan  bahan  pengawet.  Umumnya  pada  saat  ini bahan  pengawet  yang  banyak  digunakan  adalah  bahan pengawet  sintetis,  sehingga  kurang  baik  untuk
kesehatan  konsumen.  Oleh  karena  itu,  bahan  pengawet alami  bisa  menjadi  alternatif  terbaik  yang  dapat digunakan untuk mempertahankan kualitas dan memperpanjang  daya  simpan  daging  sapi  serta  tidak membahayakan  kesehatan  konsumen.  Salah  satu  bahan pengawet  alami  tersebut  adalah  dengan  menggunakan bawang putih (Bayu, 2011).

## 2. Bahan dan Metode Penelitian
Bahan  baku  utama  yang  digunakan  adalah  bawang putih  varietas  lumbu  hijau.  Media  uji  yang  digunakan untuk  mengetahui  aktivitas  zat  antimikroba  yang terdapat pada ekstrak bawang putih adalah sapi lokal.
Bahan  yang  digunakan  untuk  analisa  adalah aquadest, etanol, Nurtien Agar dan Manitol Salt Agar.
Alat  yang  digunakan  dalam  ekstraksi  adalah timbangan,  pisau,  blender,  jar,  kertas  saring  whatman 40, water jet, gelas kimia.
Alat  yang  digunakan  untuk  analisis  adalah  cawan porselen,  timbangan  digital,  oven,  desikator,  tangkrus, penetrometer, pH meter, gelas ukur, gelas kimia, batang pengaduk,    pipet  volumetrik,    tabung  reaksi,    filler, cawan  petri,  inkubator  ,  Autoclave,  jarum  ose,  kapas, kasa, spatula, erlenmeyer, GC-MS.
Penelitian  yang  dilakukan  dibagi  menjadi  4  tahap sebagai berikut.
Tahap  I  : Memeriksa  komponen  yang  terdapat  dalam ekstrak bawang putih dengan menggunakan kromatografi gas GC-MS.
Tahap II : Menentukan waktu maserasi ekstrak bawang putih  yang  paling  baik,  mengetahui  berapa  lama senyawa  antimikroba  yang  terdapat  dalam  ekstrak bawang  putih  dapat  bertahan,  serta  untuk  mengetahui hubungan  waktu  maserasi  terhadap  jumlah  koloni mikroba  dan  laju  pertumbuhan  mikroba.  Pemilihan waktu  maserasi  yang  paling  baik  dapat  dilakukan dengan  cara  melihat  laju  pertumbuhan  Staphylococcus aureus dan total mikroba yang paling rendah.
Tahap  III  : Menentukan  konsentrasi  ekstrak  bawang putih yang paling efektif dalam menghambat Staphylococcus  aureus  dan  total  mikroba,  serta  untuk mengetahui hubungan konsentrasi ekstrak bawang putih terhadap  jumlah  koloni  mikroba.  Pemilihan  konsentasi yang paling efektif dapat dilakukan dengan cara melihat pertumbuhan  Staphylococcus  aureus  dan  total  mikroba yang paling rendah.
Tahap  IV  : Penggunaan  konsentrasi  ekstrak  bawang putih  dan  lama  perendaman  terpilih  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  mikroba  pada  daging  sapi selama penyimpanan.
Rancangan  percobaan  yang  digunakan  adalah regresi linier sederhana dengan metode percobaan
Y= a + bX

## 3. Hasil dan Pembahasan

## Tahap I
Berdasarkan data kromatogram yang diperoleh dari analisis bahwa komponen-komponen senyawa organosulfur  yang  terkandung  dalam  ekstrak  bawang putih diantaranya adalah trisulfide di-2-propenyl dengan waktu  retensi  sebesar  9,300  menit,  luas  area  17,21%, Disulfide  di-2-propenyl  dengan  waktu  retensi  7,010, luas  area  5,43.  Trisulfide,  methyl  2  propenyl  dengan waktu  retensi  sebesar  7,680  menit,  luas  area  3.55%. Tetrasulfida,di 2 propenyl dengan waktu retensi sebesar 7,235 menit, luas area 3,11%. Diallyl disulphide dengan waktu  retensi  7,174  menit,  luas  area  1,73%.  Diallyl disulfide  dengan  waktu  retensi  11,415  menit,  luas daerah  0,45%.  Trisulfide,  dimethyl  (CAS)  2,3,4- Trithiapentan dengan waktu retensi sebesar 5,802 menit, luas area 0,28%.
Ada banyak komponen sulfida yang terdapat dalam bawang putih seperti allicin, diallil trisulfida, metil allil trisulfida,  allil  sulfida,  diallil  tetrasulfida  tetapi,  dalam pengujian GC-MS yang telah dilakukan tidak terdeteksi.
Hal itu dapat disebabkan oleh beberapa faktor yaitu suhu penyimpanan, pelarut yang digunakan, jeda waktu selama pengujian dan penghancuran bawang putih yang tidak sempurna.
Suhu
penyimpanan yang tidak stabil mengakibatkan komponen-komponen sulfida terdegradasi  menjadi  komponen  lain.  Pelarut  yang digunakan  sudah  mengalami  penguapan  sehingga  tidak dapat  mengikat  kuat  komponen–komponen  sulfida. Adanya jeda waktu pada saat akan dilakukan pengujian menyebabkan  senyawa  organosulfur    rusak  sebelum diidentifikasi. Penghancuran bawang putih yang kurang halus  sehingga  menyebabkan  komponen-komponen sulfida tidak muncul dan penyerapan komponen sulfida oleh pelarut kurang optimum.
Allicin  bersifat  tidak  stabil  dan  allicin  hanya bertahan sebentar  untuk selanjutnya  mulai terdegradasi. (Katria, 2006).
Berdasarkan  hasil  analisis  ekstrak  bawang  putih dengan  menggunakan  GC-MS  didapatkan  senyawa diallyl disulfide dengan waktu retensi 7,174 menit, luas area  1,73%  dan  tinggi  area  2,54%.  Senyawa  diallyl disulfide  berfungsi  sebagai  antimikroba  selain  itu, senyawa ini dapat menghambat bakteri gram positif dan gram negatif.

## Tahap II
Hasil  penelitian  tahap  II  dapat  dilihat  pada  grafik jumlah koloni dan laju pertumbuhan dibawah ini
Gambar  1.  Grafik  total  koloni  mikroba  yang  tumbuh  selama  masa inkubasi  24  jam  setelah  dihambat  oleh  ekstrak  bawang putih  yang dibuat  dalam  waktu  maserasi  yang berbeda-beda.
Gambar 2. Grafik jumlah koloni Staphylococcus aureus yang tumbuh selama masa inkubasi 24 jam setelah dihambat oleh ekstrak bawang  putih  yang  dibuat  dalam  waktu  maserasi  yang berbeda-beda
Gambar  3.  Grafik  laju  pertumbuhan  total  mikroba  yang  tumbuh selama masa inkubasi 24 jam setelah dihambat oleh ekstrak bawang  putih  yang  dibuat  dalam  waktu  maserasi  yang berbeda-beda
Gambar  4.  Grafik  laju  pertumbuhan  Staphylococcus  aureus  yang tumbuh  selama  masa  inkubasi  24  jam  setelah  dihambat oleh  ekstrak  bawang  putih  yang  dibuat  dalam  waktu maserasi yang berbeda-beda.
Berdasarkan  grafik  diatas  didapatkan  kurva  linier dari  total  koloni  mikroba  dengan  persamaan  Y= 19,017x-51,4  dan  R2=0,9205  sedangkan  pada  jumlah koloni  Staphylococcus  aureus  didapatkan  kurva  linier dengan  persamaan  Y=  2,2833x–0,8  dan  R2  =  0,9227. Hasil  persamaan  linier  pertumbuhan  mikroorganisme dalam  waktu  24  jam  dapat  disimpulkan  bahwa  waktu maserasi  memiliki  hubungan  yang  cukup  kuat  terhadap pertumbuhan  mikroorganisme.  Persamaan  regresi  linier dapat  digunakan  untuk  menentukan  pendugaan  dalam berapa  jam  jumlah  mikroba  pada  media  yang  diberi ekstrak  bawang  putih  akan  sama  dengan  jumlah mikroba  pada  media  kontrol  (tanpa  ekstrak  bawang putih) Pada persamaan linier Y=19,017x-51,4 didapatkan  nilai  x  =  27,15  jam  sehingga  dapat disimpulkan  bahwa  jumlah  total  mikroba  pada  media yang  diberi  ekstrak  bawang  putih  akan  sama  dengan jumlah total mikroba pada media kontrol (tanpa ekstrak bawang  putih)  dalam  waktu  1  hari  3  jam  7  menit. Persamaan Y= 2,2833x–0,8 dan R2= 0,9277 didapatkan nilai  x=  34,94  jam  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa jumlah  Staphylococcus  aureus  pada  media  yang  diberi ekstrak  bawang  putih  akan  sama  dengan  jumlah Staphylococcus  aureus  pada  media  kontrol  (tanpa ekstrak  bawang  putih)  dalam  waktu  1  hari  10  jam  56 menit.
Selama  penyimpanan,  kandungan  allicin  akan menurun  dan  sebaliknya  diikuti  naiknya  konsentrasi senyawa-senyawa  baru.  Senyawa  yang  dominan terkandung adalah S-alil sistein dan
Sallilmerkaptosistein (SAMC) (Amagase et al.,2001).

## Tahap III
Gambar 5. Grafik jumlah total mikroba yang tumbuh setelah dihambat oleh konsentrasi ekstrak bawang putih yang berbeda-beda.
Gambar 6. Grafik jumlah koloni Staphylococcus aureus yang tumbuh setelah  dihambat  oleh  konsentrasi  ekstrak  bawang  putih yang berbeda-beda
Berdasarkan  grafik  diatas  diperoleh  persamaan linier  Y=-8670x+938,4  dengan  R2=0,9552  pada  grafik total  koloni  mikroba  dan  persamaan  Y=-1295x+120,4 dengan R2= 0,9634 pada grafik jumlah Staphylococcus aureus. Hasil persamaan linier pertumbuhan mikroorganisme  pada  konsentrasi  yang  berbeda-beda dapat  disimpulkan  bahwa  konsentrasi  ekstrak  bawang putih memiliki hubungan yang kuat terhadap pertumbuhan  mikroorganisme  dan  semakin  tinggi konsentrasi ekstrak bawang putih maka semakin rendah jumlah mikroorganisme.
Penurunan  jumlah  mikroorganisme  yang  tajam terjadi  pada  konsentrasi  ekstrak  bawang  putih  8%.  Hal ini  disebabkan  karena  semakin  tinggi  konsentrasi ekstrak  bawang  putih  maka  aktivitas  antibakterinya akan  semakin  tinggi  sehingga  semakin  rendah pertumbuhan mikroba (Nilam, 2013).
Berdasarkan hasil penelitian tahap III, pertumbuhan S.aureus  dan  total  mikroba  yang  paling  rendah  terjadi pada  konsentrasi  8%  sehingga  dapat  disimpulkan konsentrasi  ekstrak  bawang  putih  yang  terpilih  adalah 8%.

## Tahap IV
1. Kadar Air
Gambar 7. Grafik laju kenaikan kadar air pada daging sapi selama penyimpanan 72 jam
Berdasarkan grafik diatas dapat disimpulkan bahwa semakin  lama  penyimpanan  maka  laju  kenaikan  kadar air pada daging sapi semakin meningkat. Laju kenaikan kadar air pada daging kontrol lebih tinggi dibandingkan dengan laju kenaikan kadar air pada daging yang diberi ekstrak bawang putih.
Selama  penyimpanan,  kadar  air  relatif  bertambah hal  ini  salah  satunya  dikarenakan  oleh  penguraian mikroorganisme. Perubahan tersebut secara fisik, kimia, mikrobiologi  dan  organoleptik.  Daging  memiliki karbohidrat  berupa  glikogen  dalam  jumlah  sedikit. Mikroba  akan  mengurai  karbohidrat  yang  bermolekul besar seperti polisakarida menjadi glukosa (monosakarida) atau
maltosa (disakarida). Monosakarida  dalam  proses  glikolisis  akan  diubah menjadi  asam  piruvat.  Asam  piruvat  ini  selanjutnya diubah  menjadi  asam  trikarboksilat  dalam  siklus  Krebs dan akhirnya terpecah menjadi CO2 dan H2O, sehingga kadar air semakin meningkat (Soeparno, 2005).
2. pH

## Gambar 8. Grafik laju kenaikan pH pada daging selama penyimpanan 72 jam
Berdasarkan grafik diatas dapat disimpulkan bahwa semakin  lama  penyimpanan  maka  laju  kenaikan  pH semakin  meningkat  dan  pH  daging  kontrol  lebih  tinggi dibandingkan  dengan  pH  daging  yang  telah  diberi ekstrak.  Nilai  pH  daging  yang  semakin  tinggi disebabkan  karena  mikroba  akan  mendeaminasi  asam amino  dan  menggunakan  sisa  molekulnya  sebagai sumber  energi  sehingga  jumlah  NH3  dan  H2S meningkat,  dengan  meningkatnya  NH3  maka  nilai  pH juga meningkat (Rizki, 2011).

## 3. Tekstur
Gambar  9.  Grafik  laju  kenaikan  tekstur  daging  sapi  selama penyimpanan 72 jam
Berdasarkan grafik diatas dapat disimpulkan bahwa semakin  lama  penyimpanan  maka  terkstur  daging  akan semakin  tinggi.  Seiring  dengan  lamanya  penyimpanan keempukan  dari  daging  semakin  meningkat  hal  ini karena  seiring  dengan  meningkatnya  kadar  air  dari daging dan adanya kerja dari enzim katepsin yang dapat menguraikan serabut otot pada daging.
4. Total Mikroba
Gambar 10. Grafik laju pertumbuhan total mikroba daging sapi selama penyimpanan 72 jam
Gambar  11.  Grafik  laju  pertumbuhan  S.  aureus  pada  daging  sapi selama penyimpanan 72 jam.
Berdasarkan grafik diatas dapat disimpulkan bahwa semakin lama penyimpanan maka jumlah mikroba akan meningkat.  Hal  ini  disebabkan  karena  pada  saat penyimpanan  dilakukan  di  suhu  ruang  ±27oC  dan dilakukan  secara  aerob  sehingga  memungkinkan terkontaminasi oleh bakteri dari udara sehingga populasi jumlah    mikroba  terus  meningkat  dan  kemampuan  zat antimikroba menurun.
Mutu daging salah satunya dapat dinilai dari tingkat kontaminan  terhadap  mikroba  patogen  .  Kontaminasi mikroba  patogen  bahkan  dapat  dikatakan  sebagai indikator  yang  paling  penting  yang  menjadi  acuan apakah  mutu  suatu  daging  masih  baik  atau  sudah  tidak layak  dikonsumsi(karena  sudah  mengandung  banyak mikroba  patogen  yang  membahayakan  kesehatan (Widianingrum, 2013).
Berdasarkan hasil  penelitian,  dapat  diambil kesimpulan sebagai berikut.
1. Hasil  penelitian  pendahuluan  menunjukkan  bahwa kolagen  ikan  gurami  mengandung  kadar  total Nitrogen  sebesar  12,32%,  kadar  Abu  sebesar 0,746%,  pH  6,5  dan  titik  leleh  28°C  yang menunjukan  kolagen  ikan  yang  dihasilkan  sesuai dengan  SNI.  Rendemen  yang  dihasilkan  sebesar 2,34%.
2. Total  mikroba  dan Staphylococcus  aureus dapat dihambat oleh ekstrak bawang putih dilihat dari laju pertumbuhan mikroba.
3. Hasil  pengujian  pada  tahap  I  dapat  diambil kesimpulan  bahwa  salah  satu  senyawa  organosulfur yang  bersifat  antimikroba  adalah  diallyl  disulfide dengan luas area 1,73%.
4. Hasil  pengujian  tahap  II  dapat  disimpulkan  bahwa waktu  maserasi ekstrak bawang putih  terbaik dalam menghambat  mikroorganisme  yaitu  dengan  waktu maserasi selama 6 jam
5. Hasil  pengujian  tahap  III  dapat  disimpulkan  bahwa konsentrasi ekstrak bawang putih yang paling efektif dalam  menghambat  mikroorganisme  yaitu  pada konsentrasi 8%.
6. Hasil  pengujian  tahap  IV  dapat  disimpulkan  bahwa semakin lama penyimpanan maka %Air, pH, tekstur, total  mikroba  dan  jumlah  Staphylococcus  aureus semakin meningkat.

## Daftar Pustaka
1. Amagase,  H.,  B.L.  Petesch,  H.  Matsuura,  S. Kasuga,  dan  Y.  Itakura.  2001. Intake  of  Garlic and  Its  Bioactive  Components .  The  Journal  of Nutrition 131:955S-962S.
2. AOAC.  1995. Official  methods  of  analysis  of AOAC international 16th.ed . AOAC International, Arlington. Arizona.
3. Bayu.  2011. Pengaruh  Perendaman  Daging  Sapi dalam Larutan Kelopak Bunga Rosela (Hibiscus sabdariffa  Linn)  terhadap  nilai  pH,  total  koloni bakteri,  daya  simpan  dan  nilai  organoleptik.
Skirpsi.  Fakultas  Peternakan  universitas  andalas. Padang.
4. Fithri  RNB.  2009. Daya  antibakteri  ekstrak bawang putih (allium sativum) dalam menghambat pertumbuhan staphylococcus aureus dan escherichia  coli pada  daging  sapi .
(Skripsi). Bandung: Institut Teknologi Bandung.
5. Harborne.  1996.  Metode  Fitokimia  : Penuntun Cara  Modern  Menganalisis  Tumbuhan. Terbitan
Kedua.  Terjemahan  :  K.  Padmawinata  dan  I. Soediro. Bandung : Penerbit ITB
6. Katria. 2006. Ekstraksi dan identifikasi komponen sulfide pada bawang putih .Universitas Negri Semarang.
7. Kementrian  Pertanian  RI.  2013. Sub  sector holtikultura.
http://www.pertanian.go.id/ap_pages/mod/datahorti
. Diakses, 7 April 2015.
8. Lingga  ME  &  MM  Rustama.  2005. Uji  Aktivitas Antibakteri  dari  Ekstrak  Air  dan  Etanol Bawang  Putih  (Allium  sativum  L.)  terhadap
Bakteri  Gram  Negatif  dan  Gram  Positif  yang Diisolasi  dari  Udang  Dogol  (Metapenaeus monoceros),  Udang  Lobster  (Panulirus  sp),  dan Udang  Rebon  (Mysis  dan  Acetes). Jurnal  Biotika
5 (2).
9. Nilam,  2013. Uji  efektivitas  ekstrak  bawang putih  sebagai  antibakteri  pada  ikan  bandeng. Tesis. Universitas Negri Semarang. Semarang.
10. Nurwantoro. 2012. Nilai ph, kadar air, dan  total Escherichia  coli  daging  sapi  yang  dimarinasi dalam jus bawang putih . Jurnal aplikasi teknologi pangan.
Fakultas
peternakan. Universitas diponogoro. Semarang
11. Rizki.  2011. Pengaruh  Konsentrasi  asap  cair tempurung  kenari  dan  lama  penyimpanan terhadap  kualitas  kimia  dan  fisik  daging.
Universitas gajah mada, Yogyakarta
12. Safithri  M.  2004. Aktivitas  antibakteri  bawang putih (Allium sativum) terhadap bakteri mastitis subklinis  secara  in  vitro  dan  in  vivo  pada ambing  tikus  putih  (Rattusnovergicus )  [tesis]. Bogor:  Sekolah  pascasarjana,  Institut  Pertanian Bogor.
13. Soeparno.  2005. Ilmu  dan  teknologi  daging . Gajah Mada University. Press. Yogyakarta.
14. Suharti, S. 2004. Kajian Antibakteri Temulawak,
Jahe  dan  Bawang  Putih Terhadap  Bakteri Salmonella  typhimurium  Serta  Pengaruh  Bawang Putih Terhadap Performan dan Respon Imun Ayam Pindang.  Tesis.  Sekolah  Pascasarjana,  Institut
Pertanian Bogor.
15. Sumpeno Putro, (2008). Aplikasi ekstrak bawang putih  untuk  memperpanjang  daya  simpan  ikan kembung segar . Jurnal pascapanen dan bioteknologi kelautan dan perikanan.vol 3 16. Widaningrum, 2013. Kajian pemanfaatan rempah-rempah  sebagai  pengawet  alami  pada
daging.  Seminar  nasional  hari  pangann  sedunia xxvii, Bogor.
17. Wiryawan  KG,  S  Suharti  &  M  Bintang.  2005. Kajian  Antibakteri  Temulawak,  Jahe  dan Bawang
Putih terhadap Salmonella
typhimurium  serta  Pengaruh  Bawang  Putih terhadap  Performans  dan  Respons  Imun  Ayam Pedaging. Media Peternakan 28 (2 ):52-62.