UJI AKTIVITAS  SALEP ANTI JERAWAT EKSTRAK ETANOL DAUN BINAHONG (Anredera cordifolia (Ten) Steenis ) TERHADAP

## BAKTERI Propionibacterium acnes
Agung Nur Cahyanta 1 ,  Nilla Yuliana Ardiyanti 2 Email : aku.cahyanta@gmail.com
12 Program Studi S1 Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Bhakti Mandala Husada Slawi, Jl. Cut Nyak Dhien No.16 Kalisapu, Slawi, Kabupaten Tegal Telp/Fax (0283) 6197570

## Abstrak
Tanaman  Binahong  ( Anredera  cordifolia  (Ten)  Steenis )  merupakan  tanaman  yang  tumbuh menjalar dan memiliki manfaat yang sangat besar dalam dunia pengobatan. Khasiat daun binahong tidak lepas  dari  kandungan  metabolit  sekundernya  yang  meliputi  flavonoid,  alkaloid,  saponin,  dan  polifenol. Secara  empiris  daun  binahong  dapat  digunakan  untuk  mengatasi  salah  satu  penyakit  kulit  yaitu  jerawat. Jerawat  merupakan  suatu  kondisi  terjadi  penyumbatan  kelenjar  minyak  pada  kulit  disertai  infeksi  dan peradangan.  Salah  satu  penyebab  terjadinya  jerawat  adalah bakteri Propionibacterium  acnes .  Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  salep  anti  jerawat  ekstrak  etanol  daun  binahong dengan  konsentrasi  25%,  30%,  35%  terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes .  Metode  ekstraksi  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%.  Uji  aktivitas antibakteri menggunakan metode cakram. Analisis data menggunakan One Way ANOVA dan dilanjutkan dengan uji Post Hoc. Berdasarkan uji aktivitas antibakteri, salep ekstrak etanol daun binahong memiliki kemampuan  menghambat  pertumbuhan Propionibacterium  acnes terlihat  dengan  adanya  zona  hambat yang  terbentuk.  Diameter  zona  hambat  pada  salep  dengan  konsentrasi  ekstrak  25%  sebesar  17,8  mm, salep dengan konsentrasi 30% sebesar 19,6 mm, salep dengan konsentrasi 35% sebesar 22 mm, dan untuk basis salep tidak mempunyai kemampuan dalam menghambat bakteri Propionibacterium acnes . Hasil uji ANOVA diperoleh nilai signifikan 0,000 < 0,05, dapat disimpulkan bahwa pada taraf kepercayaan 95% terdapat  perbedaan  bermakna  antara zona hambat  dari masing-masing  konsentrasi.  Hasil uji  lanjut Post Hoc menunjukkan ada perbedaan bermakna aktivitas antara basis dengan formula 1, formula 2, formula 3 karena P<0.05.  Hasil pengukuran diameter zona hambat menunjukkan bahwa salep ekstrak etanol daun binahong  memiliki  daya  hambat  dengan  kriteria  kuat  sampai  dengan  sangat  kuat  terhadap  bakteri Propionibacterium acnes.
Kata Kunci : Binahong, Salep, Jerawat, Propionibacterium acnes .

## 1. Pendahuluan
Jerawat  merupakan  salah  satu  penyakit kulit  yang  disebabkan  karena  terjadinya penyumbatan  kelenjar  minyak  pada  kulit yang  disertai  infeksi  dan  peradangan [1]. . Jerawat  umumnya  muncul  pada  wajah, tetapi  dapat  juga  muncul  pada  daerah kepala,  punggung,  dada,  atau  lengan  atas. Jerawat  dapat  disebabkan  oleh  bakteri Propionibacterium acnes [1] . Bakteri
Propionibacterium acnes merupakan  salah  satu  bakteri  gram  positif serta  agen  utama  penyebab  terjadinya inflamasi  jerawat. Propionibacterium  acnes merangsang  pelepasan  IL-1,  IL-8,  TNF-, dan  mengaktifkan  sistem  komplemen [2] . Pengobatan jerawat yang dilakukan di klinik kulit,  biasanya  diberikan  antibiotik  yang
dapat  membunuh  bakteri  dan  menghambat inflamasi, contohnya tetrasiklin, eritromisin. Sementara  itu  penggunaan  obat  antibiotik dalam jangka panjang selain dapat menimbulkan resistensi juga dapat
menimbulkan  kerusakan  organ  dan  imuno hipersensitivitas.
Salah  satu  tanaman  obat  yang memiliki  efek  antijerawat  adalah  daun binahong (Anredera cordifolia (Ten) Steenis.  Kandungan  metabolit  sekunder daun  binahong  meliputi  flavonoid,  saponin, alkaloid,  polifenol,  dan  monopolisakarida termasuk  L-arabinosa,  D-galaktose,  L- rhamnosa. Daun binahong memiliki aktivitas  antioksidan,  asam  askorbat,  dan senyawa  fenolik  dan  senyawa  tersebut
memiliki kemampuan untuk melawan bakteri gram positif dan gram negatif [3] . Sebelumnya  telah  dilakukan  penelitian tentang  daun  binahong  yang  memberikan hasil bahwa ekstrak daun binahong memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Propionbacterium acnes dan
Staphylococcus  epidermis .  Pada  hasil  uji bioautografi menunjukkan  bahwa  senyawa yang  berperan  aktif  sebagai  antibakteri dalam  daun  binahong  terhadap  bakteri propionibacterium acnes diduga  adalah senyawa  flavonoid [4] .  Menurut  penelitian yang  dilakukan  oleh  Khunaifi,  Konsentrasi Hambat  Minimum  (KHM)  ekstrak  daun Binahong  pada  bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi 25% [5] .
Pada penelitian ini, peneliti akan melakukan formulasi  salep  ekstrak  daun  binahong dengan  basis  PEG  dan  dilakukan  uji aktivitas  terhadap  bakteri  penyebab  jerawat Propionibacterium acnes .

## 2. Metode Penelitian
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah penelitian  eksperimental  dengan  rancangan penelitian Post  Test  Control  Group  Design
Only. Penelitian ini dimulai dengan determinasi  tanaman,  pengumpulan  dan pengolahan  daun  binahong,  pembuatan ekstrak dari daun binahong, formulasi salep, dan uji aktivitas terhadap bakteri Propionibacterium  acnes ,  analisis  data menggunakan One Way ANOVA. Alat dan Bahan Bahan yang digunakan dalam
penelitian ini daun binahong yang diperoleh dari  desa  Blubuk  Kabupaten  Tegal,  PEG- 400,  PEG-4000,  Oleum  Citri,  Nipagin, Kertas saring, Kertas Cakram.
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  alat-alat  gelas (Pyrex) ,  timbangan analitik,  inkubator,  autoklaf,  stamper  dan mortir, cawan petri, ose.

## Cara Kerja
Determinasi  dilakukan  dengan  melihat ciri-ciri  tanaman  binahong  yang  diperoleh dari  daerah  Slawi,  Kabupaten  Tegal,  Jawa Tengah.    Hasil  determinasi  sesuai  dengan kunci determinasi Steenis, Tjitrosoepomo.
Daun  Binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten) Steenis) yang  masih segar, dan cukup tua  dilakukan  sortasi  terlebih  dahulu.
Setelah  itu  dilakukan  pencucian  dengan  air mengalir  hingga  bersih  lalu  ditiriskan. kemudian  dikeringkan  dengan  cara  dijemur dibawah  sinar  matahari  ditutup  kain  warna hitam hingga berubah menjadi warna coklat.
Simplisia kemudian dihaluskan menggunakan blender. Setelah itu ditimbang  berat  serbuk  keringnya  dan disimpan  dalam  wadah  tertutup  baik terlindung cahaya matahari.
Pembuatan  ekstrak  dilakukan  dengan metode maserasi yang menggunakan penyari  etanol  96%.  Serbuk  simplisia  daun binahong  sebanyak  450  gram  direndam dengan  4,5  liter  etanol  96%,  kemudian diaduk  dengan  alat electric  stirrer selama  3 jam  dengan  kecepatan  400  rpm  dan didiamkan  selama  5  hari.  Dilakukan penyaringan  tahap  petama  dengan  kapas, kemudian  untuk  penyaringan  tahap  kedua dengan  menggunakan  kertas saring.  Semua maserat  dikumpulkan  dipekatkan  dengan rotary  evaporator suhu  60 0 C  dengan kecepatan 50 rpm.
Tabel 1 . Formula Salep Uji Formula (%) No. Nama FI F II  F III Kontrol Bahan Negatif 1.  Ekstrak 25 30 35 - daun binahong 2.  PEG-4000 29 26 23 40 3.  PEG-400 45 43 41 59 4.  Nipagin 0,18  0,18  0,18 0,18 5.  Oleum qs qs qs qs Citri
Salep  dibuat  dengan  cara  melarutkan nipagin kedalam  PEG-400.  Kemudian meleburkan PEG-4000 kedalam campuran 1 diaduk sampai dingin. Menambahkan ekstrak daun binahong kedalam campuran 2 lalu diaduk sampai
homogen.
Menambahkan  oleum  citri  sedikit  demi sedikit  dalam  campuran  3.  Salep  disimpan dalam pot salep.
Media  pertumbuhan  dibuat  dengan melarutkan  NA  dalam  aquades  dengan dipanaskan.  Didistribusi  sesuai  kebutuhan dalam  tabung  reaksi  dan  ditutup  dengan
kapas  lalu  dilapisi  plastik.  Selanjutnya  di sterilisasi dalam autoklaf pada suhu 121 o C dan tekanan 15 lbs selama 15 menit.
Bakteri  uji  ditumbuhkan  pada  media nutrient  agar dengan  cara  menggoreskan bakteri  dari  biakan  murni  menggunakan jarum  ose  pada  media  NA.  Bakteri  yang sudah  digoreskan  pada  media  kemudian diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  24  jam. Koloni  bakteri  uji  pada  media  biakan  NA umur  24  jam  diambil  sebanyak  1-2  ose, kemudian  dimasukkan  kedalam  tabung berisi  aquades  steril.  Suspensi  bakteri  uji diambil  sebanyak  100  µl,  dituang  secara merata  pada  media  NA  menggunakan metode spread  plate [6] .  Media  ditunggu sampai  mengeras, lalu diinkubasi selama 24 jam  kemudian  diletakkan  kertas  cakram yang  sebelumnya  telah  diolesi  salep  ekstrak daun  binahong  dengan  konsentrasi  25%, 30%,  35%.  Kontrol  negatif  yang  digunakan adalah salep yang hanya menggunakan basis tanpa  adanya  penambahan  ekstrak  daun binahong.
Media  yang  sudah  berisi  bakteri  uji, kontrol negatif dan kertas cakram yang telah diolesi  salep  dengan  konsentrasi  ekstrak yang berbeda-beda, diinkubasi pada suhu 37 0 C  selama  24-48  jam,  kemudian  hasil  zona bening  diukur  dengan  jangka  sorong.  Uji dilakukan dengan 3 kali replikasi.

## 3. Hasil dan Pembahasan
Hasil  determinasi  tanaman  binahong diperoleh : 1b,  2b,  3b,  4b,  6b,  7b,  9a,  41b,  42b,  43b, 54b, 59b, 61b, 62b, 63a, 64b, ..........................................Fam: Basellaceae 1b,..........................................Gen: Anredera 1a,...........................................Spe:  Anredera
cordifolia (Tenore.) Steen.
Ekstrak  etanol  yang  dihasilkan  dari daun  binahong  adalah  ekstrak  kental  warna hijau  pekat,  seberat  107,9  g  dengan rendemen 23,97%.
Berdasarkan uji aktivitas, terlihat adanya  daerah  bening  yang  disekitar  kertas cakram,  daerah  bening  tersebut  merupakan daerah  hambat  salep  ekstrak  etanol  daun binahong  terhadap  pertumbuhan  bakteri Propionibacterium acnes.
Gambar  1. Zona  Hambat  Salep  Ekstrak
Binahong
Uji  aktivitas  antibakteri  salep  ekstrak daun binahong menghasilkan urutan formulasi  yang  memiliki  zona  hambat paling  besar  pada  formula  3  dengan diameter  rata-rata  zona  hambat  22  mm, kemudian  formula  2  dengan  diameter  rata- rata zona hambat 19,6 mm dan yang terakhir formula  1  dengan  diameter  rata-rata  zona hambat  17,8  mm.  Pengukuran  diameter zona  hambat  menunjukkan  bahwa  salep ekstrak etanol daun binahong memiliki daya hambat  kuat  sampai  sangat  kuat  terhadap bakteri Propionibacterium acnes . Penentuan kriteria daya hambat berdasarkan literatur Davis  dan  Stout yang  menyatakan bahwa  kriteria  daya  antibakteri  sebagai berikut : daerah hambatan 20 mm atau lebih termasuk  sangat  kuat,  daerah  hambatan  10- 20 mm kategori kuat, daerah hambatan 5-10 mm kategori sedang, dan daerah hambatan 5 mm atau kurang termasuk kategori lemah [7] . Tabel 2. Hasil Uji Zona Hambat Salep Zona N Rata-rata±SD P Hambat (mm) F1 3 17.8333±4.25245 0.000 F2 3 19.6667±3.32916 F3 3 22.0000±4.27200 Basis 3 .0000±.00000
Hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa, diameter zona hambat cenderung meningkat sebanding  dengan  meningkatnya  konsetrasi ekstrak.  Berdasarkan  hasil  perhitungan analisis One-way Anova pada tabel dibawah, dengan tingkat  kepercayaan  95%  (α  =  5%) diperoleh  nilai  signifikan  0,000  <  0,05, sehingga dapat disimpulkan terdapat perbedaan  bermakna  zona  hambat,  dari masing-masing  formula  salep.    Pada  uji lanjut  menggunakan  uji Post  Hoc untuk
membandingkan zona hambat perlakuan antar kelompok  uji  dengan n ilai  signifikansi  seperti pada tabel dibawah ini.
Tabel  3. Hasil  Uji  Lanjut Post  Hoc Zona
Hambat  Salep  Ekstrak  Etanol  Daun Binahong Formula Perbedaan Sig. Rerata 1 2 -1.83333 1.000 3 -4.16667 1.000 Basis 17.83333 * 0.001 2 1 1.83333 1.000 3 -2.33333 1.000 Basis 19.66667 * 0.001 3 1 4.16667 1.000 2 2.33333 1.000 Basis 22.00000 * 0.000 Basis 1 -17.83333 * 0.001 2 -19.66667 * 0.001 3 -22.00000 * 0.000
Keterangan : (*) : Terdapat Perbedaan Bermakna
Hasil  uji  lanjut Post  Hoc menunjukkan  ada perbedaan  bermakna  aktivitas  antibakteri antara  basis  dengan  formula  1,  formula  2, formula 3 karena P<0.05.
Aktivitas  antibakteri  salep  ekstrak etanol daun binahong diduga karena adanya senyawa-senyawa yang memiliki mekanisme antibakteri diantaranya,
Flavonoid  memiliki  aktivitas  antibakteri melalui  hambatan  fungsi  DNA  girase sehingga  kemampuan  replikasi  bakteri dihambat,  senyawa  ini  kontak  dengan  DNA pada  inti  sel  bakteri,  adanya  perbedaan kepolaran  antara  lipid  penyusun  DNA dengan  gugus  alkohol  pada  senyawa flavonoid  menyebabkan  kerusakan  struktur lipid  DNA  bakteri  sehingga  bakteri  akan lisis  dan mati [8] .  Alkaloid  sebagai antibakteri  dengan  mekanisme  mengganggu komponen  penyusun  peptidoglikan  pada  sel bakteri  sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak terbentuk  secara  utuh  dan  menyebabkan kematian  sel [9] .    Polifenol  pada  daun binahong juga memiliki akivitas antibakteri, mekanisme kerja polifenol sebagai antibakteri yaitu dengan mengganggu fungsi enzim  dan  substratnya,  sehingga  lambat laun akan mengakibatkan kematian sel [10] .
Kandungan  daun  binahong  lainnya  adalah saponin. Mekanisme kerja saponin termasuk dalam kelompok antibakteri yang mengganggu  permeabilitas  membran  sel bakteri,  yang  mengakibatkan  kerusakan membran  sel  dan  menyebabkan  keluarnya berbagai  komponen  penting  dari  dalam  sel antibakteri  yaitu  protein,  asam  nukleat,  dan nukleotida, sehingga bakteri akan lisis [11] .

## 4. Kesimpulan
Salep  ekstrak  Binahong  konsentrasi 25%,  30%  dan  35%    memiliki  aktivitas antibakteri terhadap bakteri Propionibacterium acnes. Hasil pengukuran diameter  zona  hambat  menunjukkan  bahwa salep ekstrak etanol daun binahong memiliki  kriteria  daya  hambat  yang  kuat sampai sangat kuat terhadap bakteri Propionibacterium acne . 5. Daftar Pustaka
[1] Sawarkar, H.A, Khadabadi, S.S., Mankar,  D.M.,  Farooqui,  I.A.,  Jagtap, N.S., 2010.Development and Biological  Evaluation  Of  Herbal  Anti- acne  Gel. International  Journal  Of PharmTech Research, 2(3): 2028-2029
[2] Khan, Z.Z, Assi M., Moore, T.A. 2009.
Recurent  Epidural  Abcess  Caused  by Propionibacterium acnes . Khansas Journal of Medicine:92-95
[3] Astuti,  Sri  Murni.,  Sakinah  A.M, Mimi.,  Andayani  B.M,  Retno.,  Risch, Awalludin. 2011. Determination
[4] Prijayanti,A.J.  2011.  Uji  Aktivitas Antibakteri  Fraksi  Daun  Binahong (Anredera  Cordifolia  (Tenore)  Steen) Terhadap Propionobacterium  acnes ATCC 6919 dan Staphylococcus epidermidis  FNCC  0048 . Skripsi. Fakultas MIPA. Yogyakarta: Universitas Islam Indonesia.
[5] Khunaifi,  Muhid.  2012.  Uji  Aktifitas Antibakteri  Ekstrak  Daun  Binahong (Anredera  Cordifolia (Ten)  Steenis )
Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus  dan  Psedomonas  aeruginosa . Skripsi .  Sains  dan  Teknologi.  Malang:
UIN Maulana Malik Ibrahim.
[6] Aziz, S. 2010. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun dan Umbi Bakung Putih (Crinum  asiaticum  L) Terhadap
Bakteri  Penyebab  Jerawat. Skripsi . Program Studi Farmasi. Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan. Jakarta: UIN Syarif Hidayatullah.
[7] Davis, W. W., T. R. Stout. 1971. Disc Plate Methods  of  Microbiological  Antibiotic Assay . Applied Microbiology
[8] Wulandari  P,  Suswati  E,  Misnawi, Rainul  A.  2012.  Efek  Antibakteri
Ekstrak  Etanol  Biji  Kakao (T.  cacao) terhadap Pertumbuhan Shigella Dysentriae secara In  vitro.  Jurnal Medika Planta, 1(5): 67-7.
[9] Darsana. 2012. Potensi Daun Binahong ( Anredera  cordifolia (Ten)  Steenis) dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri Escherishia  coli Secara  In Vitro. Indonesia  Medicus  Veterinus, 1(3): 337-351.
[10] Fitrianti, D., Noorhamdani, A.S., Karyono, S.S. 2011. Efektivitas Ekstrak Daun Ceplukan sebagai Antimikroba terhadap Methicillin- resistant  Staphylococcus  aureus In Vitro . Jurnal Kedokteran Brawijaya,26(4): 212-215
[11] Wayan  FA,  Betta  K  I.  2015.  Binahong (Cassia  Alata  L) For  Inhibiting  The Growth Of Bacteria Escherichia Coli . J Majority ,4(4)