## IDENTIFIKASI PENYAKIT YANG DISEBABKAN OLEH VIRUS PADA TANAMAN ANGGREK
Cattleya sp. DI MALANG, JAWA TIMUR
Fery Abdul Choliq, Tutung Hadi Astono, Erlina Eka Putri
Jurusan Hama dan Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Brawijaya
Korespondensi : feryac@ub.ac.id

## ABSTRAK
Kota  Malang,  merupakan  salah  satu  sentra  budidaya  tanaman  hias  jenis  anggrek  di  Jawa Timur. Salah satu anggrek yang dibudidayakan adalah jenis anggrek Cattleya sp. Anggrek Cattleya sp. memiliki  julukan  sebagai The  Queen  of  Orchid karena  ukuran  serta  keindahan  bunganya.  Anggrek jenis ini adalah tanaman hias yang memiliki potensi untuk dikembangkan dari segi produktivitasnya. Adanya  kendala  budidaya  tanaman  anggrek Cattleya sp.  di  Malang  diduga  disebabkan  oleh  virus. Sampai  saat  ini  belum  diketahui  virus  penyebab  penyakit  yang  menginfeksi  anggrek Cattleya sp. Identifikasi penyakit adalah salah satu langkah awal untuk mengetahui jenis virus penyebab penyakit sehingga  dapat  digunakan  untuk  mencegah  atau  mengurangi  intensitas  serangan  penyakit. Identifikasi penyakit yang disebabkan oleh virus dengan menggunakan metode pengujian sifat fisik virus dalam sap dan pengujian kisaran inang dapat menjadi salah satu solusi untuk mengetahui virus penyebab  penyakit  pada  anggrek Cattleya sp.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  pertama  yang akan memberikan informasi terkait identifikasi virus penyebab penyakit pada Anggrek Cattleya sp. di Malang Jawa Timur dengan menggunakan pengujian sifat fisik virus dalam sap.
Penelitian dilaksanakan pada bulan Maret sampai Juli 2016 di Green House yang berlokasi di Ds. Karang Widoro, Kec. Dau, Kab. Malang dan Laboratorium Penyakit Tumbuhan Jurusan Hama dan Penyakit  Tumbuhan,  Fakultas  Pertanian,  Universitas  Brawijaya.  Sumber  inokulum  virus  diperoleh dari  daun  anggrek Cattleya sp.  yang  diduga  bergejala  virus.  Metode  penelitian  yang  digunakan adalah  penelitian  eksploratif  untuk  mengetahui  jenis  virus  yang  menyerang  tanaman  anggrek melalui pengujian kisaran inang dan pengujian sifat fisik virus.
Beberapa  hasil  pengujian  sifat  fisik  virus  yang  dilakukan  diketahui  bahwa  virus  yang menginfeksi anggrek Cattleya sp. adalah Odontoglossum Ringspot Virus (ORSV). Anggrek Cattleya sp. yang terserang ORSV menunjukkan gejala klorosis beserta nekrosis berwarna coklat kehitaman yang hampir menutupi seluruh bagian daun. Pada pengujian kisaran inang hasilnya menunjukkan bahwa ORSV  dapat  menginfeksi C.  amaranticolor,  C.  quinoa,  N.  tabacum,  G.  globosa,  Z.  ellegans, Dendrobium sp. , dan Phalaenopsis sp.  Hasil  kisaran  inang  juga  menunjukkan  bahwa  ORSV  tidak dapat  menginfeksi C.  sativus dan C.  vulgaris .  Hasil  pengamatan  partikel  virus  diketahui  bahwa partikel ORSV memiliki bentuk batang kaku dengan ukuran kurang lebih 300 x 18 nm.
Kata kunci : Orchid, Cattleya sp., ORSV

## ABSTRACT
Malang is one of the  cultivation places  of orchid in East  Java.  A kind of orchid  that  can  be cultivated is Cattleya sp. Cattleya sp. called as the queen of orchid because it has big size and it is a beautiful  flower.  This  kind  of  orchid  is  one  of  the  ornamental  plants  that  has  potential  to  be developed  as  seen  from  productivity.  The  constraint  at  Malang  in  cultivating Cattleya sp.  was suspected  to  be  caused  by  a  virus.  The  virus  which  caused  the  infection  on Cattleya sp.  was  not identified yet. Identification of the disease is one of the first steps to determine the kind of virus that causes  the  disease  so  that  it  can  be  used  to  prevent  or  reduce  the  intensity  of  the  disease.  The identification of the disease that caused by a virus by  using virus physical-characteristic test in the sap  and  using  virus  host  range  test  can  be  one  of  the  solutions  to  find  out  the  virus  that  cause disease  in Cattleya sp.    This  was  the  first  research  that  would  give  the  information  about  the
identification of disease which was caused by virus in Cattleya sp. in Malang, East Java by using virus physical-characteristic test in the sap.
The  reasearch  was  conducted  on  March  until  July,  2016  in  the  Green  House  located  in Village  Karang  Widoro , Subdistrict  Dau , Regency  Malang  and  in  the  Laboratory  of  Disease  in Department  of  Pests  and  Plant  Diseases,  Faculty  of  Agriculture,  Brawijaya  University.  The  virus inoculum  source  was  obtained  from symptomatic  leave  of Cattleya sp.  The  research method  used was  exploratory  research  in  determining  the  kind  of  virus  that  infected Cattleya sp.  by  using  host range test and virus physical-characteristics test.
The  results  of  virus  physical-characteristics  test  in  the  sap  showed    that  the  virus  which infected Catttleya sp.  was Odontoglossum  Ringspot  Virus (ORSV).  The Cattleya sp.  which  was infected by ORSV showed the chlorotic and necrotic symptoms with dark brown-black that covered almost  all  parts  of  the  leave.  The  host  range  test  showed  that  the  ORSV  could  infect C. amaranticolor,  C.  quinoa,  N.  tabacum,  G.  globosa,  Z.  elegans,  Dendrobium, and Phalaenopsis .  The ORSV could not infect the C. sativus and C. vulgaris . The observation on virus particles showed that ORSV particles have rod-shape with a measure 300 x 18 nm.
Keywords : Orchid, Cattleya sp., ORSV

## PENDAHULUAN
Kota  Malang  merupakan  salah  satu sentra budidaya tanaman hias di Jawa Timur. Tanaman  hias  yang  dibudidayakan  salah satunya  adalah  anggrek.  Tanaman  anggrek merupakan  salah  satu  tanaman  hias  yang memiliki nilai ekonomi tinggi. Salah satu jenis anggrek yang cukup potensial untuk dikembangkan  dari  segi  produktivitasnya  dan memiliki  nilai  ekonomi  tinggi  adalah  jenis anggrek Cattleya sp.  (Badan  Penelitian  dan Pengembangan Pertanian , 2005).
Anggrek Cattleya sp.  merupakan  jenis anggrek  berbunga  tunggal  yang  memiliki julukan  sebagai The  Queen  of  Orchid karena ukuran  bunganya  yang  umumnya  besar  dan warna bunganya yang indah (Sarwono, 2002). Anggrek Cattleya sp.  menjadi  salah  satu tanaman  hias  jenis  anggrek  yang  banyak diminati oleh sebagian besar masyarakat, baik masyarakat  yang  berada  di  wilayah  Malang maupun di luar wilayah Malang. Anggrek jenis Cattleya sp. ini juga dikenal dengan harganya yang cukup mahal (Andri et al., 2015). Seiring berjalannya  waktu  permintaan  pasar  akan anggrek  tersebut  juga  semakin  meningkat sesuai dengan kebutuhan. Hal ini menyebabkan  sentra  budidaya  anggrek dituntut  untuk  memelihara  tanaman  anggrek yang sehat agar tidak mengurangi nilai jualnya (Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian, 2005).
Serangan  OPT  khususnya  penyakit dapat  menyebabkan  rusaknya  tanaman anggrek  baik  pada  bunga  maupun  daun. Rusaknya  bagian  tanaman  pada  anggrek tersebut dapat mempengaruhi kualitas bunga dan mengakibatkan penurunan hasil ekonomi. Serangan  OPT  yang  menjadi  masalah  dalam proses  budidaya  anggrek Cattleya sp.  diduga diakibatkan  oleh  virus.  Tanaman  anggrek dapat  terinfeksi  kurang  lebih  50  jenis  virus tanaman  (Navalienskiene et  al., 2005).
Terdapat  dua  jenis  virus  penting  yang menyerang  tanaman  anggrek  dan  menyebar luas  di  dunia,  virus  tersebut  adalah Cymbidium  Mosaic  Virus (CymMV)  dan Odontoglossum
Ringspot Virus (ORSV) (Grisoni et  al., 2004).  Anggrek Cattleya sp. adalah  salah  satu  jenis  anggrek  yang berpotensi  terserang  kedua  virus  tersebut dengan daerah penyebaran yang cukup luas di Jawa, Ujung Pandang, dan Bali (Inouye, 1996). Kejadian  penyakit  oleh  ORSV  pada  sentra produksi  anggrek  ditemukan  di  beberapa daerah  yaitu  Bogor,  Bandung,  Magelang, Surabaya,  dan  Malang  dengan  kisaran kejadian  penyakit  antara  40-100%  sedangkan pada CymMV antara 30-65%  (Lakani, 2012).
Sampai  saat  ini,  belum  diketahui  virus penyebab  penyakit  pada  tanaman  anggrek Cattleya sp.  Identifikasi  penyakit  yang disebabkan  oleh  virus  dengan  menggunakan metode  pengujian  sifat  fisik  virus  dalam  sap dan  pengujian  kisaran  inang  dapat  menjadi
salah  satu  solusi  untuk  mengetahui  virus penyebab penyakit pada anggrek Cattleya sp. Sejauh ini, penelitian mengenai identifikasi  penyakit  yang  disebabkan  oleh virus  pada  tanaman  anggrek Cattleya sp. dengan  menggunakan  pengujian  sifat  fisik virus dan kajian kisaran inang di Malang, Jawa Timur  belum  pernah  dilakukan.  Oleh  karena itu identifikasi penyakit yang diakibatkan oleh virus pada tanaman anggrek Cattleya sp. perlu dilakukan, mengingat
Kota
Malang merupakan  salah  satu  sentra  budidaya tanaman  hias  khususnya  anggrek  di  Jawa Timur.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian pertama  yang  akan  memberikan  informasi terkait  identifikasi  virus  penyebab  penyakit pada  anggrek Cattleya sp.  di  Malang,  Jawa Timur  dengan  menggunakan  pengujian  sifat fisik  virus  dalam  sap.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  memberikan  informasi  mengenai  virus penyebab penyakit yang menyerang tanaman anggrek Cattleya sp. sehingga dapat digunakan  sebagai  pertimbangan  dalam menentukan teknik pengendaliannya.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Tempat dan Waktu
Penelitian dilaksanakan di Green House yang  berlokasi  di  Ds.  Karang  Widoro,  Kec. Dau,  Kab.  Malang  serta  Laboratorium Penyakit,  Jurusan  Hama  dan  Penyakit Tumbuhan,  Universitas  Brawijaya,  Malang. Penelitian dilakukan pada bulan Maret sampai Juli 2016.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian adalah polybag berukuran  3  kg,  mortar,  kain kasa,  timbangan  analitik,  gunting/ cutter , pipet,  gelas  ukur,  mikrotube,  tabung  reaksi, water  bath,  centrifuge,  stirer ,  label,  dan kamera.
Bahan yang digunakan dalam penelitian adalah  daun  tanaman  anggrek  yang  diduga terinfeksi  virus,  tanaman  indikator  untuk pengujian  sifat  fisik  virus  ( Chenopodium amaranticolor ),  tanaman  yang  digunakan untuk  pengujian  kisaran  inang  terdiri  dari  9 spesies  dari  6  famili  tanaman  yaitu Orichidaceae ( Dendrobium sp . dan Phalaenopsis sp.),  Solanaceae  ( Nicotiana
tabacum ),  Curcubitaceae  ( Cucumis  sativus dan Citrullus  vulgaris ),  Asteraceae  ( Zinnia elegans ), Chenopodiaceae ( Chenopodium amaranticolor dan Chenopodium quinoa ), dan Amaranthaceae
( Gomphrena globosa ).
Karborundum  600  mesh,  alkohol  70%, aquadest steril, buffer fosfat 0,01 M pH 7, dan kloroform.

## Rancangan Penelitian
Penelitian  yang  digunakan  adalah penelitian deskriptif eksploratif untuk mengetahui  jenis  virus  yang  menyerang tanaman  anggrek  melalui  pengujian  kisaran inang,  pengujian  sifat  fisik  virus,  dan morfologi partikel virus. Penelitian eksploratif adalah  jenis  penelitian  yang  bertujuan  untuk menemukan  sesuatau  yang  baru  berupa pengelompokan  suatu  gejala,  fakta  dan penyakit tertentu. Penelitian deskriptif eksploratif  bertujuan  untuk  menggambarkan keadaan suatu fenomena, dalam penelitian ini dan  tidak  dimaksudkan  untuk  menguji hipotesis tertentu tetapi hanya menggambarkan  apa  adanya  suatu  variabel, gejala atau keadaan (Arikunto, 2002).

## Pelaksanaan Penelitian

## Penanaman Tanaman Indikator
Tanaman  indikator  digunakan  untuk identifikasi awal dan pengujian sifat fisik virus. Tanaman  indikator  yang  digunakan  adalah tanaman C.  amaranticolor. Penanaman tanaman  indikator  dilakukan  dengan  cara meletakkan  benih  dalam  media  tanah  dan kompos  dengan  perbandingan  1:1  kedalam polybag 3 kg.

## Pembuatan Cairan Perasan (sap)
Penularan  virus  dalam  penelitian  ini menggunakan  cara  mekanis.  Inokulum  virus yang  akan  digunakan  terlebih  dahulu disiapkan  dalam  bentuk  sap  atau  cairan perasan.  Daun  tanaman  anggrek Cattleya sp. yang  menunjukkan  gejala  serangan  virus terlebih  dahulu  dicuci  untuk  menghilangkan kotoran  yang  ada  pada  daun,  lalu  daun  yang telah  dicuci  disterilkan  menggunakan  alkohol 70%  (termasuk  alat,  meja,  dan  tangan) kemudian  bagian  daun  yang  bergejala dipisahkan  dengan  bagian  daun  yang  masih
sehat  dengan  cara  dipotong  menggunakan gunting/ cutter dan  ditimbang  sebanyak  5  gr kemudian  diberikan  buffer  fosfat  0,01  M dengan  pH  7  sebanyak  10  ml  dan  daun ditumbuk  menggunakan  mortar.  Setelah penumbukkan  selesai,  kemudian  disaring menggunakan  kain  kasa.  Hasil  saringan  yang berupa  cairan  tersebut  adalah  sap  yang  siap digunakan untuk inokulasi.

## Inokulasi pada Tanaman Uji
Tanaman  yang  telah  siap  untuk diinokulasikan  kurang  lebih  berumur  22  hari setelah tanam. Sap yang telah siap kemudian diinokulasikan  secara  mekanis  pada  daun tanaman  uji.  Tanaman  uji  yang  digunakan adalah  tanaman  untuk  pengujian  kisaran inang  dan  tanaman  indikator.  Sebelum diinokulasi,  permukaan  daun  tanaman  sehat dilukai dengan cara ditaburi bubuk karborundum  600  mesh.  Setelah  ditaburi bubuk karborundum, sap tanaman yang telah siap kemudian dioleskan secara perlahan dan searah  pada  permukaan  daun.  Pengolesan dilakukan dengan hati-hati. Setelah pengolesan  selesai  kemudian  dilakukan pembilasan  dengan  menggunakan aquadest untuk  meminimalisir  luka  mekanis  yang terjadi  dan  berfungsi  untuk  menurunkan antiviral  dalam  sap  sehingga  luka  akan  cepat sembuh sebelum mengering.

## Pengujian Kisaran Inang
Pengujian ini dilakukan untuk mengetahui  reaksi  tanaman  terhadap  jenis virus yang belum diketahui. Pengujian kisaran inang  dilakukan  dengan  menginokulasikan virus  secara  mekanis  pada  tanaman-tanaman tertentu. Pengujian kisaran inang menggunakan 9 spesies dari 6 famili tanaman yaitu  Orichidaceae  ( Dendrobium sp.  dan Phalaenopsis sp.),  Solanaceae  ( Nicotiana tabacum ),  Curcubitaceae  ( Cucumis  sativus dan Citrullus  vulgaris ),  Asteraceae  ( Zinnia elegans ), Chenopodiaceae ( Chenopodium amaranticolor dan Chenopodium quinoa ), dan Amaranthaceae  ( Gomphrena  globosa ).  Daun tanaman C.  amaranticolor hasil  perbanyakan inokulum yang telah menunjukkan gejala virus kemudian  dibuat  sap.  Sap  yang  telah  siap tersebut dapat langsung diinokulasikan secara
mekanis  pada  daun  tanaman  yang  digunakan sebagai pengujian kisaran inang.

## Pengujian Sifat Fisik Virus
Thermal Inactivation Point (TIP)
TIP  digunakan  untuk  mengetahui ketahanan  virus  penyebab  penyakit  melalui pemanasan.  Metode  yang  dilakukan  yaitu  2 ml sap yang telah siap dimasukkan ke dalam 9 tabung  reaksi.  Kemudian,  tabung  reaksi  yang telah  berisi  sap  dimasukkan  ke  dalam waterbath dengan  suhu  30 0 C,  40 0 C,  50 0 C,
60 0 C, 70 0 C, 80 0 C, 85 0 C, 90 0 C, 95 0 C, dan 100 0 C masing-masing  selama  10  menit.  Setelah  itu tabung  reaksi  yang  telah  dipanaskan  selama 10  menit  tersebut  diangkat  dan  didinginkan dalam  air  es.  Setelah  didinginkan,  masing- masing  sap  diinokulasikan  pada  tanaman indikator C.  amaranticolor di  rumah  kaca dengan cara mekanis. Masing-masing perlakuan dilakukan sebanyak 3 kali.
Dillution End Point (DEP)
Metode yang digunakan dalam pengujian DEP adalah menggunakan sap yang telah diencerkan. Untuk membuat sap dengan konsentrasi  10 -1 maka  setiap  1  ml  sap ditambahkan  dengan  9  ml  buffer  fosfat  dan jika membuat konsentrasi 10 -2 maka 1 ml sap yang  berasal  dari  10 -1 diambil  menggunakan pipet  kemudian  ditambahkan  dengan  9  ml buffer fosfat dan seperti itu seterusnya hingga 10 -9 .  Setelah  diencerkan,  sap  diinokulasikan secara  mekanis  pada  tanaman  indikator C. amaranticolor .  Setiap  perlakuan  diulang sebanyak 3 kali.

## Longevity In Vitro (LIV)
LIV  digunakan  untuk  mengetahui ketahanan  virus  penyakit  tanaman  terhadap lama  penyimpanan  dalam  suhu  kamar.  Cara yang  dilakukan  adalah  sap  yang  telah  siap dimasukkan ke dalam tabung reaksi sebanyak 2  ml  kemudian  tabung  reaksi  yang  telah  diisi sap  ditutup  dan  disimpan  pada  suhu  kamar (20-24 0 C).  Waktu  penyimpanan  sap  dibagi dalam 7 interval waktu yaitu 1, 7, 14, 21, 30, 45,  50  dan  60  hari.  Setelah  penyimpanan tersebut  maka  sap  diujikan  pada  tanaman indikator C.  amaranticolor .  Setiap  perlakuan diulang sebanyak 3 kali.
5 Identifikasi Menggunakan Mikroskop Elektron Pembuatan  sampel  uji  ini  digunakan untuk mengidentifikasi virus penyebab penyakit  tanaman  menggunakan  mikroskop elektron.  Pembuatan  sampel  uji  ini  dilakukan dengan cara  membuat  sap yang berasal dari daun tanaman yang memiliki gejala terserang virus.  Bagian  daun  tanaman  yang  terinfeksi virus  tersebut  kemudian  ditimbang  sebanyak 5 gr dan ditambahkan buffer fosfat 0,01 M pH 7  sebanyak  10  ml.  Setelah  itu  kedua  bahan tersebut  ditumbuk  menggunakan  mortar  dan disaring  menggunakan  kain  kasa.  Hasil saringan  tersebut  kemudian  ditambahkan dengan  kloroform  dan  diaduk  menggunakan stirer kemudian disentrifugasi pada 8000 rpm selama  20  menit.  Kemudian  supernatan  hasil sentrifugasi  yang  telah  terpisah  dapat langsung  dikumpulkan  (Gambar  lampiran  2). Supernatan  yang  telah  didapat  tersebut  siap digunakan sebagai sampel uji untuk diidentifikasi menggunakan Transmission Electron  Microscope (TEM)  di  Laboratorium Kimia Universitas Gadjah Mada.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gejala Penyakit yang Disebabkan oleh Virus pada Anggrek C attleya sp.
Pada anggrek Cattleya sp. yang diamati menunjukkan  gejala  penyakit  yang  diduga diakibatkan  oleh  virus  penyakit  tanaman. Gejala  yang  tampak  pada  tanaman  anggrek Cattleya sp. adalah klorotik dan nekrotik yang berwarna  cokelat  sampai  hitam  dan  hampir menutupi  seluruh  bagian  daun.  Gejala  ini pada awalnya muncul pada bagian ujung daun dan semakin lama melebar (Gambar 1) .
Gambar 1. Gejala penyakit pada daun anggrek Cattleya sp. yang diamati
Hasil  inokulasi  secara  mekanis  yang telah  dilakukan  pada  tanaman  indikator C. amaranticolor diketahui bahwa penyakit yang menyerang  tanaman  anggrek Cattleya sp. disebabkan  oleh  virus.  Hal  ini  dikarenakan tanaman C. amaranticolor menujukkan gejala lesio  lokal  dengan  masa  inkubasi  7  hari (Gambar  2).  Menurut  Hadiastono  (2012) inokulasi  pada  tanaman  yang  cukup  rentan terhadap  virus  dapat  menunjukkan  gejala salah satunya adalah lesio lokal.
Gambar 2. Daun tanaman indikator C. amaranticolor a) daun sehat tidak diinokulasi b) daun bergejala lesio lokal setelah diinokulasi (7 hari setelah inokulasi)
Lesio lokal yang terbentuk pada daun C. amaranticolor merupakan  tipe  gejala  lokal, yaitu  gejala  hanya  tampak  pada  bagian  daun yang telah diinokulasi virus. Gejala lesio lokal tersebut  ditunjukkan  dengan  adanya  bercak- bercak  kecil  berwarna  kuning  pada  bagian daun  yang  diinokulasi.  Wahyuni  (2005) menyatakan  bahwa  ukuran  lesio  yang dihasilkan  oleh  beberapa  tanaman  inang penghasil  lesio  lokal  adalah  berbeda,  dari mulai  sekecil  tusukan  jarum  hingga  sebesar biji kedelai.
Morfologi Partikel Virus
Partikel virus diamati dengan menggunakan  TEM.  Kenampakan  morfologi partikel  virus  adalah  informasi  awal  yang diperoleh  untuk  mengetahui  jenis  dari  suatu virus.  Hasil  foto  TEM  menunjukkan  bahwa virus  yang  menyerang  tanaman  anggrek
Cattleya sp. memiliki partikel virus berbentuk batang kaku dengan panjang sekitar 250-300 x 18 nm (Gambar 3).
Gambar 3. Morfologi partikel virus hasil tangkapan Transmission Electron Microscope (TEM)
International  Commitee  on  Taxonomy of  Viruses (ICTV)  (2006)  menjelaskan  bahwa
ORSV memiliki bentuk batang kaku yang tidak diselubungi oleh enveloped , virus ini memiliki panjang  kurang  lebih  300  nm  dan  lebar  18 nm.  Chun  Lin et  al. (2015)  dan  (Choliq  et  al., 2017) dalam penelitiannya juga menyebutkan bahwa  partikel  ORSV  memiliki  panjang  300  x 18  nm  (Gambar  11).  Isnawati  (2009)  juga menjelaskan  bahwa  ORSV  memiliki  partikel berbentuk batang kaku yang berukuran 300 x 18 nm, virus ini merupakan ciri dari kelompok Tobamovirus. Sedangkan  pada  virus  CymMV, tidak termasuk dalam kelompok Tobamovirus melainkan Potexvirus dengan famili Flexiviridae (Sherpa et al., 2003) . Arditti et al ,.
(2002)  mengatakan  bahwa  CymMV  memiliki bentuk partikel batang lentur dengan panjang 480  x  13  nm.  Plant  Virus  Online  (2016)  juga menjelaskan  bahwa  CymMV  merupakan kelompok Potexvirus berbentuk batang lentur (Gambar 4).
Gambar  4.  Perbandingan  hasil  tangkapan  TEM  berdasarkan  literatur  a)  partikel  virus  ORSV  (Chun  Lin et  al., 2015)  b) partikel virus CymMV ( Plant Virus Online, 2006)
Hasil  tangkapan  TEM  menunjukkan bahwa  virus  yang  menginfeksi  tanaman anggrek Cattleya sp.  merupakan  kelompok dari Tobamovirus .  Kelompok Tobamovirus merupakan  kelompok  virus  yang  memiliki stabilitas tinggi dalam sap. Untuk mengetahui virus tersebut adalah kelompok dari Tobamovirus ,  maka  perlu  dilakukan  uji-uji lainnya  seperti  pengujian  kisaran  inang  dan pengujian  sifat  fisik  virus  dalam  sap. Pengujian-pengujian  selanjutnya  diharapkan dapat  memperkuat  informasi  terkait  virus yang  menyebabkan  penyakit  pada  tanaman anggrek Cattleya sp.

## Pengujian Kisaran Inang
Penelitian  ini  menggunakan  9  jenis tanaman  dari  6  famili  yang  berbeda.  Setiap tanaman  pada  pengujian  kisaran  inang melalui penularan secara mekanis menunjukkan hasil yang bervariasi baik gejala maupun  masa  inkubasi  (Tabel  1).  Masing- masing tanaman inang memiliki masa inkubasi yang berbeda yaitu 6 hingga 20 hari. Tanaman C.  quinoa , N.  tabacum ,  dan G.  globosa menunjukkan  masa  inkubasi  tercepat  yakni  6 hari.  Sedangkan  spesies  tanaman  dari  famili Orichidaceae  menunjukkan  masa  inkubasi terlama yakni 11 hingga 20 hari.
a b
Tabel 1. Hasil uji kisaran inang melalui penularan secara mekanis Tanaman Uji Reaksi Tanaman Gejala Masa Inkubasi Chenopodiaceae Chenopodium amaranticolor + LL 7 hari Chenopodium quinoa + LL 6 hari Solanaceae Nicotiana tabacum + KL,LL 6 hari Amaranthaceae Gomphrena globosa + NK,LL 6 hari Asteraceae Zinnia elegans + KL 9 hari Curcubitaceae Cucumis sativus - - - Citrulus vulgaris - - - Orichidaceae Phalaenopsis sp. + NK 11 hari Dendrobium sp. + KL 20 hari
Keterangan : (LL) = lesio lokal, (KL) = klorotik, (NK) = Nekrotik, (-) = tidak bergejala.
Tanaman C.  amaranticolor dan C. quinoa menunjukkan  gejala  yang  sama  yaitu lesio  lokal.  Gejala  lesio  lokal  yang  tampak ditandai  dengan  munculnya  lingkaran  kecil berwarna  kuning  kecokelatan  dan  semakin lama  lingkaran  tersebut  akan  melebar  dan menyebabkan daun tanaman menjadi klorosis dan  akhirnya  layu  (Gambar  5).  Hal  ini disebabkan  tanaman C.  amaranticolor dan C. quinoa merupakan  salah  satu  inang  dari penyakit  yang  diduga  virus.  Dari  hasil penelitian  Menisa  (2009)  menyatakan  bahwa C. amaranticolor merupakan salah satu inang dari  CymMV  dengan  gejala  lesio  lokal  yang ditandai  dengan  bercak  berwarna  hijau  dan semakin lama bercak tersebut berubah warna menjadi  hijau  kekuningan  dengan  masa inkubasi  16  hari.  Isnawati  (2009)  juga menyatakan  bahwa C.  amaranticolor dan C. quinoa merupakan  inang  dari  ORSV  dengan gejala  lesio  lokal  nekrotik  berwarna  cokelat pada permukaan daun dengan masa inkubasi berkisar antara 3-6 hari.
Gejala  penyakit  yang  disebabkan  oleh virus  juga  ditunjukkan  oleh  tanaman N. tabacum,  G.  globosa, dan Z.  elegans .  Ketiga tanaman  tersebut  menunjukkan  gejala  yang berbeda pada daun yang telah diinokulasi. N. tabacum dan G.  globosa menunjukkan  gejala yang  sama  dengan C.  amaranticolor dan C. quinoa yaitu lesio lokal berupa bercak-bercak berwarna  kuning  (Gambar  12).  Menurut Odoux dan Grisoni (2011) N. tabacum adalah inang  dari  ORSV  dan  bukan  inang  dari
CymMV.  Gejala  yang  ditimbulkan  akibat serangan  ORSV  pada  tanaman N.  tabacum adalah klorotik lesio lokal (Arditti et al., 2002). Gejala  klorosis  pada  daun  juga  ditunjukkan tanaman Z. elegans (Gambar 12). Berdasarkan hasil  tersebut  diketahui  bahwa  tanaman N. tabacum,  G.  globosa dan Z.  elegans merupakan  inang  dari  virus  yang  diamati tersebut.
Famili  Curcubitaceae  yakni C.  sativus dan C. vulgaris tidak menunjukkan gejala baik pada  daun  muda  maupun  daun  yang  telah diinokulasi  (Gambar  5).  Hal  ini  menunjukkan bahwa  tanaman C.  sativus dan C.  vulgaris bukan  inang  dari  virus  tersebut.  Menurut Arditti et al., (2002) C. sativus tidak termasuk salah  satu  inang  dari  ORSV,  akan  tetapi tanaman  ini  rentan  terhadap  serangan  virus CymMV.
Famili  Orichidaceae  yaitu Dendrobium sp. dan Phalaenopsis sp. , keduanya menunjukkan  gejala  terserang  virus.  Anggrek Phalaenopsis sp. gejala menunjukkan nekrotik berbentuk  lingkaran-lingkaran  kecil  berwarna cokelat  kehitaman  yang  cekung  dan  semakin lama  meyebabkan  daun  berubah  warna menjadi  kuning.  Gejala  yang  muncul  pada anggrek Dendrobium sp.  adalah  klorosis kemudian  diikuti  dengan  lingkaran  berwarna kuning  kecokelatan  (Gambar  5).  Gejala  yang ditunjukkan  pada  anggrek Phalaenopsis sp. dan Dendrobium sp. sesuai dengan penyataan Syahierah  (2010)  yaitu  anggrek Phalaenopsis sp. yang  terinfeksi  ORSV  menunjukkan  gejala
klorosis  disertai  cekungan  bulat,  sedangkan pada Dendrobium sp. menunjukkan  gejala klorosis dan nekrotik.
Gambar  5.  Gejala  infeksi  virus  pada  berbagai  tanaman  inang  setelah  diinokulasi.  a) C.  amaranticolor (lesio lokal), b) C. quinoa (lesio lokal), c) N. tabacum (klorotis), d) Z. elegans (klorosis) , e) G. globosa (nekrotik  lesio  lokal),  f)  Anggrek Dendrobium sp.  (klorosis) , g)  Anggrek Phalaenopsis sp.
(nekrotik) , h) C. sativus (tidak bergejala), i) C. vulgaris (tidak bergejala)
Hasil  pengujian  kisaran  inang  yang dilakukan  menunjukkan  bahwa  virus  yang menginfeksi  tanaman  anggrek Cattleya sp. dapat  menginfeksi  tanaman  dari  family Chenopodiaceae, Amaranthaceae, Asteraceae,  Solanaceae,  dan  Orichidaceae, pengujian Sifat Fisik Virus.
Thermal Inactivation Point (TIP) Pengujian TIP digunakan untuk mengetahui  ketahanan  suatu  virus  ketika dipanaskan.  Pengujian  sifat  fisik  virus, digunakan tanaman indikator C. amaranticolor sebagai  tanaman  uji.  Pada pengujian  TIP  menunjukkan  masa  inkubasi yang  bervariasi  pada  tiap  suhu  pemanasan. Pada  pemanasan  30:C  hingga  40:C  virus dapat menginfeksi daun tanaman C. amaranticolor dengan  masa  inkubasi  7  hari dan menunjukkan gejala lesio lokal. Pemanasan 50:C hingga 70:C virus masih bisa menginfeksi  daun  tanaman  uji  dengan  masa inkubasi 8 hari. Pada pemanasan 80:C sampai 85:C gejala mulai tampak pada 9 hari setelah inokulasi,  kemudian  pada  pemanasan  90:C gejala mulai muncul setelah 10 hari inokulasi.
Akan  tetapi  gejala  tidak  muncul  lagi  pada pemanasan  95:C  dan  100:C  setelah  kurang lebih 21 hari setelah inokulasi (hsi).
Pengujian  sifat  fisik  virus  untuk  TIP, gejala  lesio  lokal  yang  muncul  pada  daun dihitung  untuk  mengetahui  infektivitas  virus tersebut.  Setiap  perlakuan  suhu  atau pemanasan  memiliki  jumlah  lesio  lokal  yang berbeda.  Perlakuan  suhu  paling  rendah  yaitu 30:C, rata-rata jumlah lesio lokal yang muncul adalah  77  lesio  lokal  per  daun.  Sedangkan pada perlakuan suhu 90:C, memiliki rata-rata jumlah  lesio  lokal  yang  paling  sedikit  yaitu  3 lesio  lokal  per  daun.  Gejala  lesio  lokal  tidak muncul pada perlakuan suhu 95:C dan 100:C. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pada  perlakuan pemanasan  95:C  virus  tidak  dapat  lagi menginfeksi.  Berdasarkan  hal  tersebut  maka titik  batas  suhu  inaktivasi  virus  dalam  sap yang  diamati  adalah  95:C  (Gambar  6). Masing-masing  virus  memiliki  kriteria  sifat fisik  virus  dalam  sap.  Arditti et  al. (2002) menjelaskan  bahwa Odontoglossum  Ringspot Virus (ORSV) memiliki nilai Thermal
Inactivation  Point (TIP)  berkisar  antara  90:C
sampai  95:C.  Pada Cymbidium  Mosaic  Virus
(CymMV)  memiliki  nilai  TIP  berkisar  antara
60:C hingga 80:C.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 30 40 50 60 70 80 85 90 95 100 Σ Le si o lo k al /da un Suhu ( ⁰ C)
Gambar 6. Rata-rata jumlah lesio lokal yang dihasilkan tiap daun pada I pengamatan Thermal Inactivation Point (TIP)
Windayati  (2007)  menyatakan  bahwa semakin  tinggi  suhu  yang  digunakan  pada pengujian  TIP  maka  jumlah  lesio  lokal  yang muncul  akan  semakin  sedikit  atau  bahkan tidak muncul. Perbedaan suhu yang digunakan khususnya suhu yang tinggi, secara tidak  langsung  dapat  menghambat  virus dalam tubuh tanaman sehingga menyebabkan beberapa  virus  tidak  menunjukkan  gejala. Stabilitas  virus  dalam  sap  yang  tinggi  yang dimiliki oleh Tobamovirus dapat mengakibatkan  virus  bertahan  hingga  pada pemanasan  yang  tinggi.  Hasil  pengujian  TIP yang  dilakukan  menunjukkan  bahwa  virus yang  menginfeksi  tanaman  anggrek Cattleya sp.  adalah Odontoglossum  Ringspot  Virus (ORSV).
Dillution End Point (DEP)
Pengujian  DEP  adalah  salah  satu metode  dari  pengujian  sifat  fisik  virus. Pengujian  ini  digunakan  untuk  mengetahui ketahanan  virus  dalam  sap  ketika  dilakukan pengenceran.  Tanaman  uji  yang  digunakan adalah C. amaranticolor . Perbedaan pengenceran dalam sap dapat mempengaruhi muncul  tidaknya  gejala  lesio  lokal  pada tanaman uji.
Hasil  pengujian  DEP  diketahui  bahwa virus  dalam  sap  dapat  menginfeksi  daun
tanaman C.  amaranticolor pada  pengenceran 10 -1 hingga 10 -4 dengan masa inkubasi 7 hari. Pada pengenceran 10 -5 gejala lesio lokal mulai muncul  pada  8  hsi  kemudian  diikuti  dengan pengenceran 10 -6 dengan masa inkubasi 9 hsi. Pada pengenceran 10 -7 hingga 10 -9 gejala lesio lokal tidak muncul setelah kurang lebih 21 hsi. Hal ini terjadi karena konsentrasi virus dalam sa yang telah dilakukan pengenceran berulang kali semakin lama semakin sedikit.
Pada pengenceran 10 -1 rata-rata jumlah gejala lesio lokal yang muncul adalah 66 lesio lokal  per  daun.  Kemudian  seiring  dengan semakin banyaknya pengenceran yang dilakukan,  jumlah  lesio  lokal  pun  semakin menurun  tiap  daunya  (Gambar  14).  Pada pengenceran 10 -6 jumlah lesio lokalnya adalah yang paling sedikit yaitu 1 lesio lokal per daun. Pada pengenceran 10 -7 gejala lesio lokal tidak lagi  muncul,  hal  ini  berarti  titik  batas pengenceran  pada  virus  yang  diamati  adalah 10 -7 .  Arditti et  al. (2002)  mengatakan  bahwa ORSV dan CymMV memiliki nilai Dillution End Point (DEP)  yang  sama  yaitu  berkisar  antara 10 -6 hingga 10 -7 . (Wahyuni, 2005) mengatakan bahwa  kebanyakan  virus  memiliki  nilai  DEP antara 10 -3 sampai 10 -7 .
0 10 20 30 40 50 60 70 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Σ L e s io l o k a l/ d a u n Pengenceran Sap (10 - )
Gambar 7. Rata-rata jumlah lesio lokal yang dihasilkan tiap daun pada
I pengamatan Dillution End Point (DEP)
Konsentrasi  virus  dalam  sap  yang semakin  sedikit  dapat  membuat  kemampuan virus  dalam  menginfeksi  semakin  rendah sehingga  virus  tidak  lagi  infektif  (Windayati, 2007). Semakin sering dilakukannya pengenceran  sap  pada  pengujian  DEP  maka akan  semakin  rendah  kemampuan  virus tersebut  dalam menginfeksi dan berlaku pula sebaliknya.  Wahyuni  (2005)  menjelaskan bahwa  ketika  1  lesio  lokal  yang  terbentuk terdapat  satu  atau  lebih  partikel  virus,  maka dapat  diasumsikan  bahwa  jumlah  lesio  lokal yang muncul akan semakin sedikit apabila seri pengenceran  sap  yang  dibuat  juga  semakin rendah.

## Longevity In Vitro (LIV)
LIV  adalah  pengujian  sifat  fisik  virus yang terakhir dari ketiga metode sebelumnya. Metode  ini  dilakukan  untuk  mengetahui ketahanan  virus  dalam  sap  terhadap  lama penyimpanan  di  suhu  ruang.  Tanaman  uji yang  digunakan  masih  tetap  sama  yaitu C. Amaranticolor. Hasil pengamatan LIV
menunjukkan bahwa lama penyimpanan virus dalam  sap  pada  suhu  ruang  yang  dilakukan
pada  1  hari  penyimpanan  hingga  60  hari penyimpanan  menunjukkan  bahwa  virus masih  dapat  menginfeksi  tanaman  uji C. amaranticolor dengan gejala lesio lokal. Virus yang  diamati  juga  memiliki  masa  inkubasi yang  bervariasi  pada  setiap  perlakukan suhunya.  Virus  ini  juga  menginfeksi  semua jumlah  tanaman  uji  dari  tiap-tiap  perlakuan yang dilakukan.
Pada  LIV  juga  dilakukan  perhitungan terhadap  jumlah  gejala  lesio  lokal  pada  tiap daun yang menunjukkan gejala tersebut. Dari hasil  perhitungan  gejala  lesio  lokal  tiap daunnya, diketahui bahwa lama penyimpanan sap pada suhu ruang menunjukkan penurunan  rata-rata  jumlah  lesio  lokal  tiap daunnya,  meskipun  tidak  menyebabkan tanaman uji kehilangan infektivitasnya (Gambar 8). Pada lama penyimpanan satu hari menunjukkan  rata-rata  jumlah  lesio  lokal paling  banyak  yaitu  91  lesio  lokal  per  daun. Pada penyimpanan 60 hari menunjukkan rata- rata  jumlah  lesio  lokal  paling  sedikit  yaitu  52 lesio lokal per daun.
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 1 7 14 21 30 45 50 60 Σ L e s io l o k a l/ d a u n Lama Penyimpanan (hari)
Gambar 8. Rata-rata jumlah lesio lokal yang dihasilkan tiap daun pada I pengamatan Longevity In Vitro (LIV)
Adisarwanto (1989) menjelaskan bahwa keinfektivan  virus  dipengaruhi  oleh  lama penyimpanan,  virus  yang  disimpan  dalam jangka waktu cukup lama akan menyebabkan kemampuan  menginfeksi  virus  tersebut berkurang  dan  akan  berlaku  juga  sebaliknya. Tidak  infektifnya  virus  dalam  menimbulkan gejala  meskipun  telah  disimpan  selama  60 hari,  menunjukkan  bahwa  nilai  LIV  dari  virus yang  diamati  adalah  lebih  dari  60  hari penyimpanan.  Plant  Viruses  Online  (2016) menyatakan  bahwa  virus  CymMV  memiliki nilai  LIV  25  hari  penyimpanan,  sedangkan menurut  Arditti et  al. (2002)  ORSV  memiliki nilai LIV yang cukup lama yaitu kurang dari 10 tahun  penyimpanan.  Virus  yang  diketahui dapat  bertahan  pada  beberapa  hari  bahkan bulan  dalam  sap  yang  disimpan  pada  suhu ruang  adalah  TMV,  akan  tetapi  virus  lain misalnya Cucumber Mosaic Virus (CMV) hanya dapat  bertahan  satu  hari  pada  suhu  ruang (Wahyuni, 2005). TMV adalah salah satu virus yang termasuk kedalam kelompok Tobamovirus. Ini  menunjukkan  bahwa  virus yang  menyerang  tanaman  anggrek Cattleya sp.  adalah  kelompok  dari Tobamovirus dan ORSV  adalah  salah  satu  virus  yang  termasuk dalam kelompok tersebut.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Beberapa hasil pengujian sifat fisik virus diketahui  bahwa  virus  yang  menyerang tanaman  anggrek Cattleya sp.  adalah
Odontoglossum Ringspot Virus (ORSV) dengan bentuk  batang  kaku  dengan  ukuran  kurang lebih 300 x 18 nm. Tanaman anggrek Cattleya sp. yang  terserang  ORSV  menunjukkan  gejala klorosis  beserta  nekrosis  berwarna  coklat kehitaman  yang  hampir  menutupi  seluruh bagian  daun.  Pada  pengujian  kisaran  inang hasilnya  menunjukkan  bahwa  ORSV  dapat menginfeksi C.  amaranticolor , C.  quinoa,  N. tabacum, G. globosa, Z. ellegans, Dendrobium sp., dan Phalaenopsis sp.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan mengenai  karakteristik  molekuler  yang  lebih lengkap  serta  upaya  pengendalian  dalam menekan  penyebaran  virus  ORSV  pada tanaman anggrek.

## DAFTAR PUSTAKA
Adisarwanto, T., A. Kasno, dan N. Saleh. 1989. Identifikasi Virus Mosaik Pada
Tanaman Jagung di Indonesia. Risalah Seminar  Hasil  Penelitian  Tanaman Pangan.  Balai  Penelitian  Tanaman Pangan Malang.
Agrios,  G.  N.  2004.  Plant  Pathology:  Fifth Edition. Academic Press. Florida.
Ajjikutira, P. A., C.L. Lim Ho, M. H. Woon, K. H. Ryu,  C.  A.  Chang,  C.  S.  Loh,  S.  M. Wong. 2002. Genetic Variability in The Coat  Protein  Genes  Of  Two  Orchid Viruses: Cymbidium  Mosaic  Virus and
Odontoglossum Ringspot Virus . J. Arch Virology 147: 1943-1954.
Akin,  H.  M.  2006.  Virologi  Tumbuhan. Kanisius. Yogyakarta.
Andri,  K.  B.,  J.  F.  Willem,  dan  A.  Tumbuan.
2015. Potensi Pengembangan Agribisnis Bunga Anggrek di Kota Batu Jawa  Timur.  Jurnal  LPPM  Bidang
EkoSosBudKum 2: 19-30.
Arditti,  J.,  T.  Kull,  dan  S.  M.  Wong.  2002. Orchid  Biology:    Reviews  and Perspective  VIII.  Kluwer  Academic Publisher. Dordrecht, Belanda.
Arikunto,  S.  2002.  Prosedur  Suatu  Penelitian:
Pendekatan  Praktek.  Edisi  Revisi Kelima. Rineka Cipta. Jakarta.
Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian.  2005.  Prospek  dan  Arah
Pengembangan  Agribisnis  Anggrek. Departemen Pertanian, Jakarta.
Bottom,  S.  2012.  Virus  in Cattleya Orchid -
CymMV and ORSV (Online).
http://www.staugorchidsociety.org. Diakses pada 22 Januari 2016.
Choliq, F.A., Chen, T.-H., Sulistyowati, L., 2017.
Molecular  Characterization  of  a  Rigid
Rod-Shaped Virus Isolated from Frangipani  (Plumeria  sp.)  Showing Mosaic  Symptom  in  Taiwan.  J.  Exp.  Life Sci. 7, 1–6.
Chun Lin, P., C. H. Wen, C. L. Shu, L. C. Ying, Y. L. Chi, R. C. Yet, D. L. Li Yu, Y. C. Po, S. L. Shih, C. C. Ya. 2015. Aplication of an Integerated  Omics  Approach  for Identifying Host Proteins that Interact with Odontoglossum  Ringspot  Virus Capsid  Protein.  J. Molecular  Plant- Microbe Interaction 88 (6): 711-726.
Darmono,  D.  2003.  Menghasilkan  Anggrek Silangan . Penebar Swadaya. Jakarta. Ginting,  Y.  2012.  Pengaruh  Konsentrasi Ekstrak  Wortel  dan  Air  Kelapa terhadap Pertumbuhan Tunas Anggrek Cattleya 'Blc.  Mount  Mary' Secara  In  Vitro  pada  Media  Dasar Pupuk Lengkap . Skripsi. Univ. Padjadjaran.
Grisoni,  M.,  F.  Davidson,  C.  Hyrondelle,  K. Farreyrol, M. L. Caruana, M. Pearson.
2004. Nature, Incidence, and Symptomatology  of  Viruses  Infecting
Vanilla tahitensis in French Polynesia.
J. Plant Dis 88: 199-124.
Hadiastono,  T.  2012.  Virologi  Tumbuhan Dasar . Universitas Brawijaya. Malang.
Inouye,  N.  dan  I.  W.  Gara.  1996.  Detection and  Identification  Virus  Of  Orchid  In Indonesia.  Bull,  Res,  Inst.  Bioresour Okayama Univ 4: 109-118.
International  Commitee  on  Taxonomy  of
Viruses  (ICTV).  2006. Odontoglossum Ringspot Virus (Online). http://www.ICTVdb/VirusDescription/
/. Diakses pada 6 Januari 2016.
Isnawati,  L.  2009.  Deteksi  dan  Identifikasi Odontoglossum Ringspot Virus ( ORSV ) pada  Tanaman  Anggrek . Skripsi. Institut Pertanian Bogor.
Iswanto,  H.  2010.  Petunjuk  Praktis  Merawat Anggrek . Agromedia Pustaka. Jakarta.
Lakani,  I.  2012.  Identifikasi  dan  Karakterisasi Beberapa  Virus  yang  Menginfeksi Tanaman  Anggrek  di  Jawa  serta Induksi  Ketahanan  SIstemik  Tanaman Anggrek  dengan  Asam  Salisilat . Disertasi. Institut Pertanian Bogor.
Lee, C. S. dan C. Y. Chang. 2006. Multiple RT- PCR  Detection  of  Orchid  Viruses  with An  Internal  Control  of  Plant  nad5 mRNA. Plant Pathology 15: 187-196.
Matthews,  R.  1992.  Plant  Fundamental  of Plant  Virology . Academic  Press  Inc. California.
McMillan,  Jr.  R.  T.,  W.  A.  Vendrame.  2005. Color  Break  in  Orchid  Flower  .  Proc. Fla State Horticulture 118: 287-288.
Menisa,  F.  2009.  Deteksi  dan  Identifikasi Cymbidium  Mosaic  Virus  ( CymMV ) Pada  Tanaman  Anggrek . Skripsi. Institut Pertanian Bogor.
Muharam,  A.,  Y.  Sulyo,  I.  B.  Rahardjo,  E.
Diningsih, dan Suryanah. 2013.
Penyebaran Tobaco  Mosaic  Virus
Strain  Orchid dan Cymbidium  Mosaic Virus dengan Metode DAS ELISA pada Tanaman  Anggrek  Komersil  di  Pulau Jawa  dan  Bali  serta  Teknologi Pembebasannya.  J.  Hortikultura  23:
56-64.
Navalienskie, M. J. Raugalas, dan M. Samuitie. 2005. Viral Diseases Of Flower Plants : Identification  of  Viruses  Affecting Orchid  (Cymbidium  Sw).  Biologija  2: 29-34.
Nurhayati.  2012.  Virus  Penyebab  Penyakit Tanaman . Unsri Pers. Palembang.
Odoux,  E.  dan  M.  Grisoni.  2011.  Vanilla:
Medicinal & Aromatic Plants- Industrial  Profile.  CRC  Press.  Boca Raton, Florida. Plant Viruses Online. 2016. Cymbidium Mosaic Potexvirus (Online). http://sdb.im.ac.cn/vide/descr274.ht
m. Diakses pada 11 Februari 2016.
Priatni, D., M. Alifuddin, dan D. Djokosetiyanto. 2006. Pengaruh Pemanasan pada Temperatur Berbeda Selama 30 Menit terhadap Patogenisitas White  Spot  Syndrome Virus (WSSV)  pada  Udang  Windu ( Penaeus monodon Fabr.). J.
Akuakultur Indonesia 5 (1): 5-12.
Reimer, E. 2007. Cattleya-orchid (Cattleya sp.) (Online). http://ereimer.net/
20070323/10422_erCB720.htm.
Diakses pada 18 Januari 2016.
Sarwono,  B.  2002.  Mengenal  dan  Membuat Anggrek  Hibrida . Agromedia  Pustaka. Depok.
Seoh,  M.  L.,  S.  M  Wong  dan  L.  Zhang.  1998. Silmutaneus  TD/RT-PCR  Detection  of
Cymbidium  Mosaic  Potexvirus and Odontoglossum Ringspot Tobamovirus with  a  Single  Pair  of Primers. J. Virology Methods 72: 197-
204.
Sherpa,  A.  R.,  Hallan,  V.,  Ram,  R.,  Vij,  S.  P., Pathak,  P.,  Garg,  I.  D.,  Zaidi,  A.  A. 2003.  The  first  report  of  Cymbidium mosaic virus (CymMV) in Orchids from
India  (Online).  BSPP  Web,  New Disease Reports. http://www.ndrs.org.uk/article.php?i d=007010.  Diakses  pada  14  Agustus 2016.
Syahierah,  P.  2010.  Respon  Berbagai  Jenis
Anggrek (Orchidaceae) terhadap Infeksi Cymbidium  Mosaiv  Virus (CymMV) dan Odontoglossum Ringspot Virus (ORSV) . Skripsi. Institus Pertanian Bogor.
United  States  Department  Of  Agriculture (USDA)  Plant.  2016. Classification  for Kingdom  Plantae  Down  to  Family
Orchidaceae (Online). http://plants.usda.gov/java/Classificat ionServlet.  Diakses  pada  18  Januari 2016.
Wahyuni,  W.  S.  2005.  Dasar-Dasar  Virologi Tumbuhan. UGM Press. Yogyakarta.
Widiastoety,  D.  2005.  Agar  Anggrek  Rajin Berbunga . Penebar Swadaya. Jakarta.
Windayati,  T.  2007.  Identifikasi  Virus  Mosaik pada Tanaman Jagung di Sragen Jawa Tengah  (Reaksi  Inang  dan  Sifat  Fisik Virus). Skripsi. Universitas Brawijaya.
Zulfia,  A.  2014.  Material  Elekton  Mikroskop (Online). http://staff.ui.ac.id/ system/files/users/anne.zulfia/materi al/electronmikroskop.  Diakses  pada 17 September 2016.