## Uji Efektivitas Salep Ekstrak Daun Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) pada Kelinci (Oryctolagus cuniculus) yang Terinfeksi Bakteri Staphylococcus aureus
Niswah Paju, Paulina V.Y. Yamlean, Novel Kojong Program Studi Farmasi, FMIPA UNSRAT Manado

## ABSTRACT
Binahong  leaf  as  traditional  medicine  possess  antibacterial  activity.  The  aims  of  this research  were  to  study  the  effectivity  of  Binahong  (Anredera  cordifolia  (Ten.)  Steenis)  leaf extract ointment on wound infected with Staphylococcus aureus, and to study the differences effectivity  of  Binahong  leaf  extract  ointment  (Anredera  cordifolia  (Ten.)  Steenis)  as antibacterial  with  concentration  10%,  20%  and  40%.  This  research  using  laboratory experimental  method.  The  subjects  in  these  research  were  5  rabits  which  divided  into  5 groups,  namely  negative  control,  positive  control  and  treatments  group  with  concentration 10%,  20%  and  40%  of  Binahong  leaf  extract  ointment.  Rabits  back  were  wounded  2,5  cm and  infected  with  Staphylococcus  aureus.  Research  and  statistical  results  shows  that Binahong leaf extract ointment possess wound healing effectivity to the wound infected with Staphylococcus aureus. At concentration 10%, it already exhibit healing effectivity, although concentration  20%  and  40%  shows  more  healing  effectivity.  The  increases  of  concentration of  Binahong  leaf  extract  ointment  effectively  heal  the  wound  infected  with  Staphylococcus aureus.
Key  words  :  Binahong  (Anredera  cordifolia  (Ten.)  Steenis),  ointment,  extract,  wound healing, rabit.

## ABSTRAK
Daun Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis) memiliki khasiat obat tradisional sebagai antibakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas salep ekstrak daun Binahong  pada  luka  yang  terinfeksi  bakteri  Staphylococcus  aureus  dan  untuk  mengetahui perbedaan  efektivitas  salep  ekstrak  daun  Binahong  sebagai  antibakteri  dengan  konsentrasi 10%,  20%  dan  40%.  Penelitian  ini  menggunakan  metode  penelitian  eksperimental.  Subjek penelitian  berupa  kelinci  berjumlah  5  ekor  yang  dibagi  dalam  5  kelompok  perlakuan  yaitu kontrol  negatif,  kontrol  positif,  salep  ekstrak  daun  Binahong  10%,  salep  ekstrak  daun binahong  20%  dan  salep  ekstrak  daun  Binahong  40%  dengan  membuat  luka  infeksi  pada punggung  kelinci  dengan  panjang  luka  yang  dibuat  2,5  cm.  Hasil  dari  penelitian  dan  hasil analisis statistik bahwa salep ekstrak daun Binahong memiliki efektivitas pada penyembuhan luka  yang  terinfeksi  bakteri  Staphylococcus  aureus  dan  terdapat  perbedaan  efektivitas  pada setiap  kosentrasi.  Konsentrasi  salep  ekstrak  daun  Binahong  10%  telah  memberikan  efek penyembuhan,  sedangkan  pada  konsentrasi  20%  dan  40%  memberikan  efek  penyembuhan yang lebih efekif.
Kata  kunci  :  Binahong  (Anredera  cordifolia  (Ten.)  Steenis),  Salep,  Ekstrak,  Penyembuhan luka, Kelinci.

## PENDAHULUAN
Dengan adanya kesadaran dari para masyarakat  tentang  dampak  negatif  obat- obatan berbahan kimia maka mereka mulai kembali ke pengobatan dengan menggunakan obat tradisional yang berkhasiat  sebagai  obat  untuk  mengobati berbagai  macam  penyakit  yang  tidak merugikan bagi tubuh. Salah satu tanaman yang  memiliki  banyak  khasiat  dalam mengobati penyakit ialah Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis).
Antibakteri  merupakan  zat  yang dapat menghambat atau membunuh bakteri dengan penyebab infeksi. Infeksi
disebabkan oleh bakteri
atau mikroorganisme  yang  patogen,  dimana mikroba  masuk  ke  dalam  jaringan  tubuh dan  berkembang  biak  di  dalam  jaringan. Di antara bakteri yang dapat menyebabkan infeksi  adalah  Staphylococcus  aureus. Staphylococcus aureus dapat menyebabkan pneumonia, meningitis, empiema,  endokarditis  atau  sepsis  dengan supurasi di tiap organ (Jawetz et al, 2001).
Penelitian mengenai aktivitas antibakteri  daun  Binahong  dan  kandungan metabolit  sekundernya  pernah  dilakukan, bahwa  dalam  simplisia  daun  Binahong terkandung  senyawa  alkaloid,  polifenol dan  saponin  (Hidayati,  2009).  Menurut Tshikalange,  dkk,  (2007),  ekstrak  air  akar Binahong dengan dosis 50 mg/ml memiliki  daya  hambat  terhadap  bakteri Gram-positif (B.pumilus,B.subtilis  dan S.aureus) serta bakteri Gram-negatif (Enterobacter  cloacae,  E.coli,  Klebsiella pneumonia,  Serratia  marcescens,  dan Enterobacter  aerogenes)  pada  dosis  60 mg/ml, tetapi tidak pada bakteri B.sereus.
Berdasarkan latar belakang penelitian  di  atas  maka  penulis  ingin melanjutkan  penelitian  dengan  membuat sediaan farmasi penggunaan secara topikal yaitu  salep,  dengan  menggunakan  ekstrak daun Binahong dengan berbagai
konsentrasi zat aktifnya dan untuk menguji efektivitas antibakteri dilakukan pengujian secara  in-vivo.  Dipilih  sediaan  salep karena  salep  memiliki  fungsi  sebagai
bahan  pembawa  obat-obat  topikal,  bahan pelumas kulit dan sebagai pelindung kulit.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  November  2012  –  Februari  2013  di Laboratorium  Farmasetika  dan  Teknologi Farmasi dan Laboratorium Advance Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam UNSRAT Manado. Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini ialah alat-alat gelas laboratorium,  timbangan  analitik,  oven, blender,  evaporator,  batang  pengaduk, alumunium foil, kandang kelinci, pencukur bulu,  lumpang  dan  alu,  jarum  ose,  pisau bedah,  pot  salep,  hot  plate,  magnetic stirrer, mistar, water bath dan kamera.
Bahan-bahan yang digunakan dalam  penelitian  ini  ialah  daun  Binahong (Anredera  cordifolia  (Ten.)  Steen),  kertas saring,  bakteri  Staphylococcus  aureus ATCC  25923,  etanol  96%,  Nutrien  Agar (NA),  vaselin  album,  adeps  lanae,  kelinci, kertas  saring,  tissue,  NaCl  0,9%,  serbet dan alkohol 70%.
Penelitian ini menggunakan jenis penelitian  eksperimen  yang  dilakukan pada  hewan  uji  berdasarkan  Rancangan Acak Lengkap (RAL) sebanyak 5 perlakuan  dengan  2  kali  pengulangan. Dengan  demikian  jumlah  kelinci  yang akan  digunakan  sebanyak  5  kelinci  yang masing-masing  kelinci  dibuat  luka  infeksi menggunakan bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 dengan panjang luka yang  dibuat  2,5  cm,  pembagian  perlakuan sebagai berikut :
Perlakuan A  :  Luka  Infeksi  diberi  dasar salep (Kontrol Negatif).
Perlakuan B  : Luka infeksi diberi Kalmicetine Salep (Kontrol Positif).
Perlakuan C  :  Luka  infeksi  diberi  salep ekstrak daun Binahong 10 %.
Perlakuan D  :  Luka  infeksi  diberi  salep ekstrak daun Binahong 20 %.
Perlakuan E  :  Luka  infeksi  diberi  salep ekstrak daun Binahong 40 %.

## PERSIAPAN SAMPEL
Daun Binahong yang telah diperoleh,  dicuci  bersih,  ditiriskan  dan  di rajang kemudian di keringkan dengan cara diangin-anginkan  kurang  lebih  5  hari  dan dilanjutkan  pengeringan  di  dalam  oven dengan suhu 40 0 C hingga kering.
Kemudian  daun  Binahong  yang  telah kering di blender hingga halus.

## EKSTRAK SAMPEL
Daun  Binahong  basah  didapatkan sebanyak  4,145  kg  setelah  melalui pengeringan  simplisia  yang  didapatkan sebanyak  423,81  gram  dan  dihaluskan menjadi  370  gram.  Sebanyak  370  gram sampel  yang  telah  halus  direndam  dalam pelarut  etanol  96  %  sebanyak  3700  ml dengan perbandingan
1:10 yang disesuaikan dalam Farmakope Indonesia.
Sampel sebanyak 370 gram direndam  dengan  menggunakan  pelarut etanol  96  %  sebanyak  2775  ml  selama  5 hari  di  dalam  gelas  kimia  dengan  sesekali diaduk.  Setelah  5  hari  dipisahkan  debris  I dan  filtrat  I  dengan  menggunakan  kertas saring.  Kemudian  debris  I  direndam kembali  menggunakan  etanol  96  % sebanyak  925  ml  selama  2  hari  dengan sesekali  diaduk.  Kemudian  debris  II  dan filtrat  II  dipisahkan  menggunakan  kertas saring.
Filtrat  I  dan  filtrat  II  digabungkan dan  disaring  kembali  untuk  memastikan tidak  ada  ampas  (debris)  yang  terikut  dan untuk  memperoleh  total  maserat  daun Binahong.  Kemudian  di  evaporasi  dengan menggunakan  alat  vakum  evaporator dengan  suhu  60 o C  sehingga  diperoleh ekstrak  hampir  kental  dan  dilanjutkan dengan  menggunakan  waterbath  dengan suhu 60 o C hingga diperoleh ekstrak kental. Ekstrak  kental  yang  diperoleh  dari  awal maserasi  hingga  proses  waterbath  ini sebanyak 44,95 g.

## PEMBUATAN SALEP EKSTRAK DAUN BINAHONG
a. Penyiapan Bahan Salep
Bahan  yang  akan  digunakan  untuk membuat basis salep dan ekstrak daun Binahong  ditimbang  sesuai  dengan takaran.
b. Basis Salep Basis    yang  akan  digunakan basis  berlemak  yaitu  adeps  lanae  dan vaselin  album.  Sebelum  dibuat  basis salep,  dipanaskan  lumpang  dan  alu  di dalam  oven  dengan  suhu  50 o C  hingga panas,  kemudian  lumpang  dan  alu yang telah panas dikeluarkan dari oven dan  masukkan  adeps  lanae  terlebih dahulu  dan  diaduk  hingga  lebur kemudian dilanjutkan dengan memasukkan vaselin album dan diaduk dengan  kecepatan  konstan  hingga homogen  dengan  membentuk  basis salep.
c. Salep Ekstrak Daun Binahong Basis  salep  yang  telah  dibuat, ditambahkan  dengan  ekstrak  daun Binahong dan diaduk hingga homogen dengan menggunakan lumpang dan alu yang  panas  yang  disesuaikan  dengan masing-masing konsentrasi.
Formula  standar  dasar  salep yang digunakan menurut Agoes Goeswin (2006) ialah : R/ Adeps Lanae 15 g Vaselin Album 85 g m.f salep 100 g Sediaan salep yang akan digunakan pada penelitian ini memiliki masing-masing  konsentrasi  ekstrak daun  Binahong  yaitu  10%,  20%  dan 40% dibuat sebanyak 30 g.
a. Formulasi salep ekstrak daun
Binahong 10 % R/ Ekstrak daun Binahong 3 g Dasar salep 27 g m.f salep 30 g
b. Formulasi salep ekstrak daun
Binahong 20 % R/ Ekstrak daun Binahong 6 g Dasar salep 24 g m.f salep 30 g c. Formulasi Salep ekstrak daun
Binahong 40 % R/ Ekstrak daun Binahong 12 g Dasar salep 18 g m.f salep 30 g

## PENGUJIAN SEDIAAN SALEP
a. Tes Organoleptik Diamati  bentuk,  warna  dan bau dari salep ekstrak daun Binahong.
b. Tes Homogenitas Dioleskan  pada  sekeping  kaca transparan  dimana  sediaan  diambil bagian atas, tengah dan bawah.
c. Tes pH Ditimbang  1  g  masing-masing salep  ekstrak  daun  Binahong  lalu diencerkan  dalam  10  ml  aquades kemudian
diukur pH salep menggunakan pH meter.

## PENYEDIAAN BIAKKAN BAKTERI
NA  (Nutrient  Agar)  ditimbang sebanyak  0,46  gram  dilarutkan  dalam  20 ml aquades (23 g/1000 ml) dan dipanaskan hingga larut sempurna, lalu dimasukkan ke dalam  3  tabung  reaksi  sebanyak  5  ml  dan disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu 121 0 C,  tekanan  1  atm  selama  15  menit. Setelah  steril,  tabung  dimiringkan  dan didiamkan hingga memadat.
Sejumlah  1  jarum  ose  stok  bakteri Staphylococcus  aureus  diinokulasi  ke dalam  media  agar  miring  kemudian diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu 37 0 C  selama  24  jam  (Kusmiyati,  dkk, 2006).

## PEMBUATAN SUSPENSI BAKTERI
Hasil peremajaan bakteri Staphylococcus  aureus  dimasukkan  ke dalam  tabung  reaksi  dengan  kawat  ose steril  yang  berisi  2  ml  NaCl  0,9% kemudian  dikocok  dan  dibandingkan dengan kekeruhan standar Mc Farland.

## PEMBUATAN  LARUTAN  STANDAR
Mc. FARLAND Larutan  H 2 SO 4 0,36  N  sebanyak 99,5  ml  dicampurkan  dengan  larutan BaCl 2 .2H 2 O  1,175%  sebanyak  0,5  ml dalam  Erlenmeyer.  Kemudian  dikocok sampai  terbentuk  larutan  yang  keruh. Kekeruhan  ini  dipakai  sebagai  standar kekeruhan suspensi bakteri.
Pengujian  Efektivitas  Salep  Ekstrak Daun  Binahong  pada  Luka  yang  telah Terinfeksi
Pengamatan  dilakukan  selama  24 jam  untuk  melihat  adanya  infeksi  pada luka  yang  telah  dibuat,  setelah  diamati adanya infeksi kemudian dilakukan pengamatan selama 7 hari untuk penyembuhan  luka  infeksi.  Pengamatan pada  luka  infeksi  ini  dilakukan  sebelum pemberian  dan  sesudah  perlakuan  sampai adanya  tanda-tanda  penyembuhan  dengan mengukur  panjang  luka  yang  telah terinfeksi.  Masing-masing  kelinci  diberi perlakuan sebagai berikut :
Perlakuan A  :  Luka  infeksi  diberi  dasar salep (Kontrol Negatif)
Perlakuan B  : Luka infeksi diberi Kalmicetine Salep (Kontrol Positif) Perlakuan C  :  Luka  infeksi  diberi  salep ekstrak daun Binahong 10 %
Perlakuan D  :  Luka  infeksi  diberi  salep ekstrak daun Binahong 20 %
Perlakuan E  :  Luka  infeksi  diberi  salep ekstrak daun Binahong 40 %
Sediaan  salep  ini  diberikan  dengan cara  dioleskan  pada  bagian  punggung kelinci  yang  dibuat  luka  secara  merata dengan pengolesan tiga kali sehari ± 1 g.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada tes organoleptik sediaan salep ekstrak  daun  Binahong  (SEDB)  dan  dasar salepnya  menunjukkan  sediaan  setengah padat  yang  merupakan  bentuk  dari  salep. Salep  ekstrak  daun  Binahong  memberikan bau  yang  khas  dari  daun  Binahong  dan warna  sediaan  ini  hijau  tua  yang merupakan dasar dari warna daun Binahong.  Hasil  tes  organoleptik  dapat dilihat pada tabel  1 dibawah  ini.

## Tabel 1. Hasil Tes Organoleptik
Jenis Salep Bentuk Bau Warna Dasar Salep Setengah Padat Bau khas dari salep Putih kekuning- kuningan Salep Ekstrak Daun Binahong 10% Setengah Padat Bau khas daun Binahong Hijau agak tua Salep Ekstrak Daun Binahong 20% Setengah Padat Bau khas daun Binahong Hijau tua Salep Ekstrak Daun Binahong 40% Setengah Padat Bau khas daun Binahong Hijau tua pekat Sediaan salep dinyatakan homogen jika  dasar  salep,  bahan  aktif  dan  bahan tambahan  lain  tercampur  merata.  Untuk dapat  mengetahui  sediaan  salep  homogen atau tidak dapat diketahui dengan
mengambil  sedikit  dari  sediaan  dan digoreskan pada sekeping kaca atau bahan transparan  lainnya.  Hasil  tes  homogenitas dapat dilihat pada tabel 2 dibawah ini.
Tabel 2. Hasil Tes Homogenitas
Jenis Salep Homogenitas Dasar Salep Homogen dan tidak menggumpal Salep Ekstrak Daun Binahong 10% Homogen dan tidak menggumpal Salep Ekstrak Daun Binahong 20% Homogen dan tidak menggumpal Salep Ekstrak Daun Binahong 40% Homogen dan tidak menggumpal Dalam  pengujian  pH  sediaan  salep harus  disesuaikan  dengan  pH  kulit manusia  yaitu  4,5-6,5.  Hasil  pengukuran pH  dengan  menggunakan  pH  meter  dapat dilihat pada tabel 3 dibawah ini.
Tabel 3. Hasil Tes pH
Jenis Salep pH Dasar Salep 5,63 Salep Ekstrak Daun Binahong 10% 5,34 Salep Ekstrak Daun Binahong 20% 5,21 Salep Ekstrak Daun Binahong 40% 5,19
Tabel 4. Rata-rata pengukuran panjang luka infeksi pada kelinci
Kelompok Perlakuan Dasar Salep (Kontrol Negatif) Kalmicetine Salep (Kontrol Positif) Salep Ekstrak Daun Binahong 10% Salep Ekstrak Daun Binahong 20% Salep Ekstrak Daun
Binahong 40%
Gambar 6. Grafik Penyembuhan Luka Infeksi.
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 H 0 H 1 P a n ja n g L u k a I n fe k si ( cm )
Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT  Vol. 2 No. 01     Februari 2013 ISSN 2302
rata pengukuran panjang luka infeksi pada kelinci dari hari ke-0 sampai
Panjang luka infeksi hari ke-0 sampai ke 0 1 2 3 4 5 2.50 2.50 2.48 2.35 2.27 2.12 2.50 2.10 1.61 1.41 1.20 0.66 2.50 2.23 2.13 1.95 1.68 1.53 2.50 2.06 1.72 1.52 1.30 0.76 2.50 1.95 1.60 1.40 1.11 0.46
Gambar 6. Grafik Penyembuhan Luka Infeksi.
H 2 H 3 H 4 H 5 H 6 H 7 Hari
Februari 2013 ISSN 2302 - 2493
0 sampai hari ke-7. 0 sampai ke-7 (cm) 6 7 1.83 1.25 0.20 0.00 1.28 0.98 0.32 0.00 0.10 0.00
Hari Negatif
Positif
10% 20% 40%
Proses  penyembuhan  luka  yang terinfeksi  pada  masing-masing  perlakuan tampak  adanya  perbedaan  yang  signifikan dilihat  dari  data  uji  ANOVA,  dimana pelakuan pada kontrol negatif memberikan efek paling lama dalam penyembuhan luka infeksi  dibandingkan  perlakuan  yang  lain. Ini  disebabkan  pada  kontrol  negatif  tidak terdapat  zat  aktif  dari  ekstrak  daun Binahong  karena  hanya  menggunakan dasar  salep  yang  hanya  berfungsi  sebagai penutup  luka  infeksi  tanpa  memberikan efek  penyembuhan  yang  berarti.  Efek penyembuhan  luka  infeksi  pada  kontrol positif  memiliki  kemiripan  penyembuhan dengan  salep  ekstrak  daun  Binahong  20% sedangkan efek penyembuhan luka infeksi yang  diberikan  oleh  salep  ekstrak  daun Binahong  10%  sedikit  lebih  lambat penyembuhannya  dari  kontrol  positif  dan salep ekstrak daun  Binahong 20%. Tetapi, salep  ekstrak  daun  Binahong  10%  masih memberikan  efek  penyembuhan  lebih cepat dibandingkan dengan kontrol negatif karena  pada  salep  ekstrak  daun  Binahong 10% terdapat zat aktif  yang memiliki efek penyembuhan  walaupun  zat  aktif  yang terkandung di salep tersebut sedikit. Proses penyembuhan luka infeksi dengan pemberian  perlakuan  menggunakan  salep ekstrak  daun  Binahong  40%  memberikan efek  penyembuhan  yang  paling  cepat dibandingkan  dengan  efek  penyembuhan pada  salep  ekstrak  daun  Binahong  10% dan  20%,  karena  pada  salep  ekstrak  daun Binahong  40%  terkandung  lebih  banyak zat  aktif  yang  dapat  membantu  proses penyembuhan luka infeksi lebih cepat.
Dari hasil pengamatan yang diperoleh  dilanjutkan  dengan  melalui analisis variabel secara sistematika menggunakan  uji  statistik  ANOVA.  Hal ini dimaksudkan untuk melihat apakah ada efek  dari  kelima  perlakuan  terhadap penyembuhan  luka  infeksi  dengan  data yang  lebih  spesifik  dan  signifikan  secara sistematik.
Dalam pengujian ANOVA diperlukan  hipotesa  data  dimana  Ho  tidak ada  perbedaan  panjang  luka  pada  kelinci
dan  H1  adanya  perbedaan  panjang  luka pada  kelinci  dengan  taraf  signifikan  ( α = 0,05  atau  5%).  Untuk  pengambilan keputusan yang didasarkan pada perbandingan F hitung dan F tabel dengan persyaratan jika F hitung lebih kecil dari F tabel  maka  Ho  diterima  dan  jika  F  hitung lebih besar dari F tabel maka Ho ditolak.
Hasil  dalam  pengujian  ANOVA dengan  menggunakan  uji  F  menunjukkan nilai  F  hitung  sebesar  2,981  dan  sig.  0,32. Jika dibandingkan F tabel, perhitungan V1 menggunakan  jumlah  varian  (perlakuan) dikurangkan  1,  diperoleh  nilai  4  dan  nilai nilai  V2  dengan  menggunakan  jumlah sampel  (40)  dikurangi  dengan  jumlah varian  (5),  sehingga  diperoleh  nilai  35. Pada  titik  inilah  diperoleh  nilai  F  tabel bernilai  2,64.  Sehingga,  F  hitung  lebih besar dari F tabel (2,981 > 2,64) dan dapat disimpulkan  rata-rata  perlakuan  untuk panjang luka infeksi pada hari ke-0 sampai hari  ke-7  (cm)  ada  perbedaan  yang signifikan dan terbukti secara sistematik.
Dari  hasil  pengujian  ANOVA terbukti signifikan adanya perbedaan maka dilanjutkan dengan pengujian Least Significant  Different  (LSD)  atau  uji perbandingan untuk melihat adanya perbedaan  nilai  rata-rata  panjang  luka infeksi  antara  perlakuan  pada  tabel  7 dibawah ini
Pada  proses  penyembuhan  luka infeksi  untuk  kelima  perlakuan  dapat dilihat perbedaan dimana luka infeksi pada hari  ke-7  untuk  salep  ekstrak  daun Binahong (SEDB) 20%, 40% dan Kalmicetine  salep  telah  tertutup  sempurna sedangkan  pada  salep  ekstrak  daun Binahong  10%  luka  infeksi  hampir tertutup  sempurna  dibandingkan  dengan dasar  salep  yang  lebih  lambat  dalam penutupan  luka  karena  tidak  terkandung zat  aktif  untuk  penyembuhan  luka  pada punggung kelinci. Luka infeksi dibuat luka sayatan  di  punggung  kelinci  kemudian disuntikkan  pada  bagian  atas  luka  dengan bakteri Staphylococcus aureus dan didiamkan selama 24 jam untuk pertumbuhan  bakteri.  Pengamatan  secara
patologi  anatomi  pada  hari  ke-0  untuk kelima kelompok perlakuan setelah dilakukan perlakuan, terjadi infeksi bakteri, dimana infeksi bakteri Staphylococcus  aureus  ditandai  dengan kerusakan  jaringan  di  daerah  sekitar  lesi dan  menimbulkan  abses  berupa  nanah, terjadinya  nekrosis  pada  jaringan  luka, kemudian terjadi koagulasi fibrin disekitar lesi  dan  pembuluh  getah  bening,  sehingga terbentuk  dinding  yang  membatasi  proses nekrosis  (Warsa,  1994).  Pembuluh  darah baru  terbentuk  menyebabkan  peningkatan asupan  darah  yang  membawa  benang- benang  fibrin.  Adanya  penggumpalan darah  merupakan  hasil  platelet  yang teraktivasi  dan  protein  fibrinogen  yang banyak  dikeluarkan  oleh  pembuluh  darah akibat dari rangkaian reaksi peradangan.
Pada  hari  ke-1  seluruh  kelompok perlakuan  mengalami  fase  peradangan, dimana  respon  tubuh  dengan  penyempitan pembuluh darah (kontriksi), protein membentuk jaringan fibrosa untuk menutup  luka.  Ketika  trombosit  bersama protein  menutup  luka,  luka  menjadi lengket  dan  lembab  membentuk  fibrin. pembuluh  darah  melebar  dan  karena serotonin yang dihasilkan trombosit. Plasma darah mengaliri luka dan melawan toksin  yang  dihasilkan  bakteri,  kemudian membawa  oksigen  dan  nutrisi  yang dibutuhkan  untuk  penyembuhan  luka  dan membawa  agen  fagosit  untuk  melawan bakteri maupun jaringan yang rusak (Black and Hawks, 2005).
Pada  keempat  perlakuan  (salep ekstrak  daun  Binahong  10%,  20%,  40% serta  dasar  salep)  permukaan  lukanya selalu  terlihat  lembab,  karena  dalam pembuatan  salep  ini  menggunakan  basis salep  berlemak  (campuran  vaselin  album dan adeps lanae). Formulasi salep berlemak  sebagai  bahan  pembawa  yang dapat  mempertahankan  kelembapan  dan menghambat  pengeluaran  cairan  dari  kulit serta  adanya  efek  peningkatan  sirkulasi darah  ke  daerah  luka  hingga  dalam beberapa  hari  pertama  luka  masih  tampak lembab (Ansel, 2005).
Menurut  Ansel  (2005),  faktor- faktor  yang  mempengaruhi  peningkatan absorbsi  perkutan  ialah  faktor  pembawa yang  dapat  dengan  mudah  menyebar  di permukaan kulit. Pembawa yang meningkatkan jumlah uap air yang ditahan kulit  umumnya  cenderung  baik  bagi absorbsi  pelarut  obat.  Pembawa  yang bersifat lemak bekerja sebagai penghalang uap  air  sehingga  keringat  tidak  dapat menembus  kulit  dan  tertahan  pada  kulit sehingga  umumnya  menghasilkan  hidrasi dari kulit di bawah pembawa. Oleh karena itu,  keefektifan  terapi  topikal  dipengaruhi oleh  tiga  komponen  yaitu  obat,  pembawa dan kulit.
Penggunaan formulasi sediaan salep  basis  berlemak  sebagai  media pembawa  bahan  aktif  memperlihatkan hasil yang baik dalam proses penyembuhan  luka  infeksi,  dimana  dasar hidrokarbon  (vaselin  album)  digunakan untuk  melembabkan  permukaan  kulit, dapat  bertahan  pada  kulit  untuk  waktu yang  lama  dan  sukar  dicuci  sehingga mempersulit  benda  asing  masuk  ke permukaan  kulit  yang  luka.  Sedangkan dasar  serap  (adeps  lanae)  memiliki  tujuan agar  dapat  menyerap  cairan  dari  dalam luka.
Pada  salep  ekstrak  daun  Binahong 40%  lebih  cepat  daya  penyembuhan  luka infeksi  kemudian  diikuti  dengan  salep ekstrak daun Binahong 20% yang memiliki daya penyembuhan karena memiliki  zat  aktif  yang  lebih  banyak  dan zat  yang  terkandung  di  dalamnya  berupa saponin, flavonoid, polifenol dan  alkaloid. Saponin  mempunyai  kemampuan  sebagai pembersih  dan  antiseptik  yang  berfungsi membunuh  atau  mencegah  pertumbuhan dari  mikroorganisme  yang  timbul  pada luka  sehingga  luka  tidak  mengalami infeksi  yang  berat  (Robinson,  1995). Flavonoid  bersifat  anti  inflamasi  karena kemampuannya  mencegah  oksidasi  dan menghambat  zat  yang  bersifat  yang  bisa timbul  pada  luka.  Flavonoid  juga  dapat menyebabkan rusaknya susunan dan
perubahan  mekanisme  permeabilitas  dari dinding sel bakteri (Harbone, 1996).
Alkaloid diduga memiliki kemampuan  sebagai  antibakteri  dengan mekanisme mengganggu
komponen penyusun  peptidoglikan  pada  sel  bakteri, sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk  secara  utuh  dan  menyebabkan kematian  sel  tersebut  (Robinson,  1995).
Polifenol
membantu melawan pembentukan  radikal  bebas  dalam  tubuh sehingga  dapat  memperlambat  penuaan dini  (Harbone,  1996).  Secara  garis  besar polifenol memiliki sifat sebagai antibakteri dengan mekanisme kerjanya dengan merusak  membran  sel  bakteri,  senyawa astrigennya
dapat
menginduksi pembentukkan  ikatan  senyawa  kompleks terhadap enzim atau substrat mikroba yang dapat menambah daya toksisitas (Akiyama, dkk, 2001). Pada pemakaian merk dagang salep Kalmicetine
(kontrol positif) juga memiliki  daya  penyembuhan  yang  selaras dengan  salep  ekstrak  daun  binahong  20% karena  isi  dalam  setiap  salep  Kalmicetine mengandung 20 mg kloramfenikol dimana mekanisme  kerja  dari  kloramfenikol  ini menghambat  sintesis  protein  pada  sel bakteri.  Kloramfenikol  berikatan  dengan ribosom 5OS dan menghambat pengikatan asam  amino  baru  pada  rantai  polipeptida oleh enzim peptidil transferase (Setiabudy, dkk, 2007).
Penggunaan  salep  ekstrak  daun
Binahong 10% memiliki efek
penyembuhan  di  bawah  dari  salep  ekstrak daun  Binahong  20%,  40%  serta  kontrol positif. Walaupun memiliki zat aktif tetapi jumlah  yang  terdapat  di  dalamnya  hanya sedikit sehingga lambat dalam penyembuhan luka infeksi. Pada penelitian yang  telah  dilakukan  oleh  Christiawan (2012),  bahwa  ekstrak  etanol  daun Binahong  10%  tidak  memiliki  aktivitas sebagai antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus  aureus  karena  konsentrasi yang  diujikan  terlalu  rendah  konsentrasi ekstraknya  sehingga  bakteri  dapat  tumbuh dengan  subur.  Sedangkan  penelitian  yang
telah  dilakukan  oleh  Khunaifi  (2010), Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM) ekstrak  daun  Binahong  pada  bakteri Staphylococcus  aureus  pada  konsentrasi 25%.
Perlakuan  dengan  menggunakan dasar salep (kontrol negatif) daya penyembuhan  luka  infeksi  terdapat  paling bawah  dibandingkan  salep  ekstrak  daun Binahong 10% dikarenakan kontrol negatif hanya  memberikan  efek  melembabkan bagian  atas  kulit  yang  luka  yang  dimiliki oleh vaselin album sedangkan untuk adeps lanae  dapat  menyerap  cairan  dari  dalam luka. Artinya dasar salep belum memberikan  efek  penyembuhan  yang berarti  karena  tidak  mengandung  bahan aktif  yang  memiliki  fungsi  sebagai penutupan  luka  infeksi.  Tetapi  pada hakekatnya  luka  infeksi  yang  hanya diberikan  dasar  salep  ini  mengalami penyembuhan luka dengan ditandai dengan  pengecilan  panjang  luka  yang terinfeksi  pada  kelinci  karena  pada  tubuh yang  sehat  mempunyai  kemampuan  alami untuk melindungi dan memulihkan dirinya (Taylor, 1997).

## Kesimpulan
a. Dari  hasil  penelitian  dan hasil  analisis  statistik  bahwa  salep  ekstrak daun  Binahong  memiliki  efektivitas  pada penyembuhan  luka  yang  terinfeksi  bakteri Staphylococcus aureus.
b. Terdapat perbedaan efektivitas  pada  setiap  kosentrasi  salep ekstrak  daun  Binahong  dimana  pada konsentrasi  10%  telah  memberikan  efek penyembuhan, sedangkan pada konsentrasi 20% dan 40% memberikan efek penyembuhan  yang  lebih  efekif  dapat dilihat  pada  presentase  penutupan  panjang luka.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut dengan membandingkan dasar salep mana  yang  paling  baik  sebagai  pembawa untuk  ekstrak  daun  Binahong  sebagai antibakteri.

## DAFTAR PUSTAKA

## Agoes,  Goeswin.  2006.  Pengembangan
Sediaan Farmasi. ITB : Bandung. Akiyama,  H.,  Fujii,  K.,  Yamasaki,  O.,
Oono,  T., Iwatsuki,  T.  2001. Antibacterial  Action  of  Several Tannins Agains Staphylococcus aureus,  Journal  of  Antimicrobial Chemotherapy.  Volume  48  :  487- 491.
Ansel,  H.  C.,  Allen,  L.  V.,  and  Popovich, N.  G.  2005.  Ansel’s  Pharmaceutical
Dosage  Forms  and  Drug  Delivery Systems,  Eight  Edition.  Lippincott
Williams  &  Wilkins  a  Wotters Kluver Company, Philadelphia.
Black and Hawks. 2005. Medical-Surgical
Nusrsing,  Clinical  Management  For
Positive Outcomes 7 th Edition. Missouri : Elsevier Saunders.
Christiawan,  A,  Perdanakusuma,  D.  2011.
Aktivitas Antimikroba Daun Binahong  Terhadap  Pseudomonas aeruginosa dan Staphylococcus aureus yang Sering Menjadi Penyulit pada  Penyembuhan  Luks  Bakar. [Skripsi]. Surabaya : Fakultas
Kedokteran  Universitas  Airlangga, RSUD Dr. Soetomo.. Harbone,  J.  B.  1996.  Metode  Fitokimia  : Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. diterjemahkan oleh Padmawinata K., dan  Sudiro  I.  terbitan  kedua.  ITB  : Bandung.
Hidayati,  Isnaini  Wahyu.  2009.  Uji
Aktifitas Salep Ekstrak Daun Binahong (Anredera cordifolia (Ten.)  Steen)  Sebagai  Penyembuh Luka  Bakar  pada  Kulit  Punggung
Kelinci. [Skripsi]. Fakultas Farmasi : Universitas
Muhammadiyah Surakarta. Hostettmann,  K.,  Hostettmann,  M.,  dan Marston, A. 1985. Cara Kromatografi Preparatif : Penggunaan  pada  Isolasi  Senyawa Alam.  Penerjemah:  Padmawinata, K., Penerbit ITB. Bandung. Jawetz,  E.  Melnick,  J.L  dan  Adelberg, E.A. 1996. Mikrobiologi Kedokteran. Surabaya: Salemba. Jawetz, E., Melnick, J. L., Adelberg, E. A. 2001. Mikrobiologi Kedokteran Edisi  XXII.  diterjemahkan  oleh Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran  Universitas  Airlangga, Penerbit Salemba Medika, Jakarta. Khunaifi, M. 2010. Uji Aktivitas
Antibakteri  Ekstrak  Daun  Binahong (Anredera  cordifolia  (Ten.)  Steen)
Terhadap  Bakteri  Staphylococcus aureus dan Psedomonas aeruginosa.
[Skripsi]. Fakultas Sains dan Teknologi, Jurusan Biologi : Universitas  Islam  Negeri  (UIN) Maulana Malik Ibrahim, Malang.
Kusmiyati,  dkk.  2006.  Uji  Aktivitas Senyawa Antibakteri dari Mikroalga Porphyridium  cruentum.  Cibinong  :
Pusat Penelitian Bioteknologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LPI). Lachman, L., Lieberman, A. H., and Kanig
L.  J.  2008.  Teori  dan  Praktek Farmasi Industri, diterjemahkan oleh  Suyatmi  S.  Edisi  ketiga.  UI Press, Jakarta.
Nur  Iman,  M.  2009.  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Metanol  Bunga  Pepaya Jantan (Carica Papaya L) Terhadap Echerichia  coli  Dan  Staphylococcus aureus Multiresisten Antibiotik. [Skripsi]. Surakarta: Fakultas
Farmasi UMS Surakarta. Robinson,  T.  1995.  Kandungan  Organik Tumbuhan Tinggi. Penerjemah:
Padmawinata,  K.  Penerbit  ITB. Bandung. Setiabudy, Rianto, dkk. 2007.
Farmakologi  dan  Terapi.  Edisi  5. Jakarta  :  Departemen  Farmakologi dan Terapeutik, FKUI.
Taylor,  C,  Lilis,  C,  LeMone,  P.  1997. Fundamental  Of  Nursing  :  The  Art And  Science  Of  Nursing  Care.
Lippinott-Raven Publishers : Philadelphia.
Tranggono,  RI,  Latifah,  F.  2007.  Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan
Kosmetika. PT. Gramedia : Jakarta.
Tshikalange, T.E. 2007. In Vitro Anti-HIV-
1  Proporties  Of  Ethnobotanically Selected  South  African  Plants  Used In  The  Treatment  Of  Sexually
Transmitted  Diseases.  University  Of Pretoria. Journal Of Ethnopharmacology.  Volume  96  : 515-519. Voight, R.. 1994. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Penerjemah Soendari,  Noerono  S.  Edisi  Kelima. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Volk  and  Wheeler.  1998.  Mikrobiologi Dasar. Terjemahan : Soenarto
Adisoemarno.  Surabaya:  Penerbit Erlangga. Warsa, dkk. 1994. Buku Ajar : Mikrobiologi Kedokteran. Edisi
Revisi.  Staf  Pengajar  FKUI  :
Binarupa Aksara.
Filename: 9 Directory: C:\Documents and Settings\User\My Documents Template: C:\Documents and Settings\User\Application Data\Microsoft\Templates\Normal.dotm Title:
Subject:
Author:
toshiba Keywords: Comments: Creation Date: 2/1/2013 1:06:00 PM Change Number: 6 Last Saved On: 2/5/2013 4:23:00 PM Last Saved By: User Total Editing Time: 73 Minutes Last Printed On: 2/5/2013 4:24:00 PM As of Last Complete Printing Number of Pages:  11 Number of Words:  4,286 (approx.) Number of Characters:
24,432 (approx.)