## 1. Pendahuluan
Bahan  obat  alam  yang  berasal  dari tumbuhan porsinya lebih besar dibandingkan yang  berasal  dari  hewan  atau  mineral, sehingga  sebutan  obat  tradisional  hampir selalu identik dengan tanaman obat. Hal ini disebabkan    karena  sebagian  besar  obat tradisional  berasal  dari  tanaman  obat  salah satunya  merupakan  tanaman  apotik  hidup (Katno dan Pramono, 2006).
Salah  satu  tanaman  apotik  hidup adalah kunir putih ( Kaempferia rotunda L.). Bagian  tanaman  yang  sering  digunakan sebagai  obat  adalah  rimpangnya.  Rimpang kunir  putih  secara  empiris  digunakan  oleh masyarakat untuk mengobati mulas, disentri, mencret, pelangsing tubuh, dan keputihan.
Keputihan  merupakan  infeksi  pada vagina  yang  disebabkan  oleh Candida albicans ,  biasanya  ditandai  dengan keluarnya lendir yang kental berwarna putih kekuningan,  berbau  tidak  sedap,  dan menimbulkan rasa gatal pada selaput vagina.
Berdasarkan penelitian Yuanita (2005) dan  Budiarti  (2006),  diketahui  bahwa rimpang  kunir  putih  mengandung  minyak atsiri  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri.
Selain sebagai antibakteri, minyak atsiri juga berfungsi sebagai antijamur (Agusta, 2000). Oleh  karena  itu,  perlu  diketahui  aktivitas antijamur minyak atsiri rimpang kunir putih. Minyak  atsiri  rimpang  kunir  putih  diisolasi dengan metode penyulingan uap air.
Pada  produksi  minyak  atsiri  terdapat hasil  sampingan  yang  bernilai  ekonomis, baik  untuk  dijual  maupun  dimanfaatkan kembali  untuk  kepentingan  penyulingan seperti  briket  organik  dan  pupuk  organik (Armando,  2009;  Ketaren,  1985.  Rimpang kunir putih selain mengandung minyak atsiri juga  mengandung  alkaloida,  saponin, flavonoid  (Handayani,  2003)  sehingga dimungkinkan  pada  limbah  simplisia  sisa proses penyulingan masih terdapat senyawa aktif  yang  tahan  pemanasan  yang  juga bernilai  ekonomis  dan  dapat  dimanfaatkan sebagai  pengobatan  seperti  minyak  atsiri rimpang  kunir  putih,  salah  satunya  sebagai antijamur.  Ekstraksi  limbah  simplisia menggunakan  metode  soxhletasi.  Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui aktivitas antibakteri  dari  minyak  atsiri  dan  juga  dari limbah sisa destilasi terhadap jamur Candida albicans .  Pengujian  daya  antijamur
JURNAL FARMASI SAINS DAN KOMUNITAS, Mei 2014, hlm. 18-22
ISSN : 1693-5683
DAYA HAMBAT MINYAK ATSIRI DAN EKSTRAK LIMBAH SISA DESTILASI RIMPANG KUNIR PUTIH ( Kaempferia rotunda L.) TERHADAP PERTUMBUHAN
Candida albicans ATCC 10231 1 2
3
CHRISTINA ASTUTININGSIH , RATIH OCTAVIANI , SRI SURATININGSIH
1 Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi “YAYASAN PHARMASI” Semarang
2 Sekolah Tinggi Ilmu Pertanian Farming  Semarang
Abstract: White turmeric rhizome contains alkaloid, saponin, flavonoid, polifenol, and essential oils. The purpose of this research is to determine the antifungal activity of essensial oil and residual destillation of white turmeric rhizome against Candida albicans. Essential oils of white turmeric rhizome isolated by steam distillation method, the extraction of waste with soxhletasi method. Antifungal activities were investigated by the paper disc method method. The test results showed antifungal activity of essential oil of white turmeric rhizome in different concentrations (0.75, 1, 2, and 2.25%) were 0.0 ; 0.736 ; 0.894 ; 1.041 cm. The antifungal activities of the residual distillation of extract (2.25, 2.5, 3, and 4%) were 0.0, 0.674, 0.743 and 0.874 cm. There was a difference of the zone of inhibition of Candida albicans growth between essential oils and residual distillation of white turmeric rhizome.
Keywords : White turmeric, Candida albicans, essential oils, extract of waste, inhibiton.
dilakukan  dengan  metode  kertas  cakram. Aktivitas  antijamur  dapat  dilihat  dari  zona bening yang tampak pada lapisan media.

## 2 . Bahan dan Metode Penelitian
Bahan yang digunakan adalah rimpang kunir  putih  ( Kaempferia  rotunda L.) diperoleh di daerah Pati, Jawa Tengah. Jamur yang  digunakan  adalah Candida  albicans y a n g   d i p e r o l e h   d a r i   L a b o r a t o r i u m Mikrobiologi Balai Laboratorium Kesehatan Semarang.
Bahan  lain  yang  digunakan  adalah rimpang  kunir  putih  segar,  aqua  destilata, etanol  70%,  silika  gel  GF  254,  toluen,  etil asetat,  n-butanol,  asam  asetat,  kloroform, metanol,  anisaldehid,  asam  sulfat  p, dragendroff, uap amonia, AlCl  dalam etanol, 3 Candida  albicans , Sabouraud  Dekstrosa Agar , Sabouraud Dekstrosa Broth , larutan ½ Mc Farland, nistatin.
A l a t   y a n g   d i g u n a k a n   a d a l a h serangkaian  alat  destilasi  uap  air, serangkaian alat soxhlet, lampu UV 254 nm dan  365  nm,  a utoclave ,  inkubator,  alat-alat gelas laboratorium, jangka sorong.
Determinasi  tanaman  kunir  putih ( Kaempferiae  rotunda L.)  dilakukan  di Laboratorium  Biologi  Farmasi  Sekolah Tinggi  Ilmu  Farmasi  “Yayasan  Pharmasi” Semarang.

## 3. Tata Cara Penelitian

## 3.1. Penyulingan Minyak Atsiri
Rimpang kunir putih yang digunakan adalah rimpang kunir putih segar. Rimpang kunir  putih  setelah  dicuci  bersih,  dipotong dengan  tebal  +  2-5  mm.  Ditimbang  10000 gram  rimpang  kunir  putih,  dimasukkan  ke dalam  dandang  yang  berisi  air.  Dandang dipasang  pada  rangkaian  alat  destilasi  dan pemanas. Suhu selama penyulingan + 100°C. Pemanasan  dihentikan  jika  sudah  tidak terdapat  lagi  penambahan  volume.  Destilat yang  diperoleh  dipisahkan  dari  air  dengan menggunakan  corong  pisah.  Ditambahkan Na SO  untuk menarik sisa air. Minyak atsiri 2 4 disimpan  dalam  wadah  tertutup  rapat  dan terhindar  dari  sinar  matahari  dalam  suhu kamar.

## 3.2. Ekstraksi limbah simplisia sisa destilasi
Limbah simplisia dari proses destilasi dikeringkan, dijemur di bawah sinar matahari dan  ditutup  kain  hitam.  Setelah  kering, dihaluskan dengan blender kemudian diayak dengan  ayakan  no.  40.  Ditimbang  serbuk kering  sejumlah  25  gram,  kemudian disoxhlet  dengan  etanol  70%.  Soxhlet dihentikan jika warna lapisan sudah bening. Ekstrak  diuapkan  diatas waterbath sampai diperoleh sari yang pekat. Ekstrak disimpan dalam wadah tertutup rapat.

## 3.3. Identifikasi
Minyak  atsiri  rimpang  kunir  putih ditotolkan  pada  lempeng  silika  gel  GF  254 dan  dielusi  dalam  chamber  yang  telah dijenuhkan  dengan  fase  gerak  toluen  :  etil
v asetat  (93  :  7)  / .  Hasil  dideteksi  dengan v lampu  UV  254  nm,  kemudian  disemprot dengan  penampak  bercak  anisaldehid-asam sulfat  p,  dan  dipanaskan  dalam  oven  pada suhu  110°C  selama  5  sampai  10  menit. Pengamatan  dilakukan  dengan  mengamati warna bercak dan diukur harga Rf-nya. Ekstrak ditambah 5 ml metanol (p.a). Larutan  yang  diperoleh  ditotolkan  pada lempeng  silika  gel  GF  254  nm  dan  dielusi dengan  kloroform-metanol-air  (64:50:10) untuk  saponin,  n  butanol-asam  asetat-air (4:1:5)  untuk  flavonoid,  dan  etil  asetat- etanol-air  (100:13,5:10)  untuk  alkaloid dengan jarak elusi 10 cm.
Pendeteksian  bercak  dengan menggunakan sinar UV 254 nm, anisaldehid- asam  sulfat  untuk  saponin,  uap  amonia dilanjutkan  dengan AlCl   1%  dalam  etanol 3 untuk  flavonoid,  dan  dragendroff  untuk alkaloid.

## 3.4. Uji daya antijamur
Dua cawan petri masing-masing diberi 6 kertas  cakram.  Pada  cawan  petri  pertama, masing-masing  kertas  cakram  diteteskan kontrol  positif  (nistatin),  kontrol  negatif (PEG  400),  minyak  atsiri  0,75;  1;  2  dan 2,25%  sebanyak  5µl.  Cawan  petri  kedua masing-masing  kertas  cakram  diteteskan kontrol  positif  (nistatin),  kontrol  negatif

## ASTUTININGSIH, OCTAVIANI, SURATININGSIH
(alkohol  70%),  ekstrak  limbah  2,25;  2,5;  3 dan  4%  sebanyak  5µl.  Kedua  cawan  petri o diinkubasi  pada  suhu  37 C  selama  24  jam. Dilakukan  5  kali  replikasi  untuk  pengujian daya  antijamur.  Diukur  diameter  daerah hambatan menggunakan jangka sorong.

## 4. Hasil dan Pembahasan
Minyak  atsiri  rimpang  kunir  putih diisolasi dengan metode penyulingan uap air. Prinsip  dari  penyulingan  uap  air  adalah penetrasi uap terjadi secara merata ke dalam jaringan  rimpang  sehingga  dapat  diperoleh rendemen  minyak  yang  lebih  besar. Rendemen  minyak  atsiri  yang  diperoleh adalah  0,05%,  dengan  organoleptos  tersaji pada Tabel 1.
Warna  bercak  yang  muncul  pada kromatogram  adalah  merah  muda,  kuning, dan  coklat  (Tabel  2)  yang  menunjukkan bahwa  minyak  atsiri  rimpang  kunir  putih mengandung  timol,  kurkumin,  dan  safrol (Depkes, 1987).
E k s t r a k s i   l i m b a h   s i m p l i s i a menggunakan  metode  soxhletasi.  Ekstraksi menggunakan  penyari  etanol  70%.  Etanol 70%  digunakan  untuk  melarutkan  senyawa polar seperti alkaloid, flavonoid, dan saponin yang kemungkinan masih terdapat di dalam limbah simplisia. Rendemen ekstrak limbah yang diperoleh sebesar 2,92%.
Tabel  3  menunjukkan  bahwa  ekstrak limbah  mengandung  alkaloid.  Hal  ini diperjelas dengan uji KLT (Tabel 4) dimana hasil  kromatogram  menunjukkan  bahwa ekstrak  tidak  mengandung  senyawa
flavonoid  dan  saponin  yang  ditunjukkan tidak terbentuknya bercak berwarna kuning pada deteksi flavonoid dan bercak berwarna ungu,  biru  ungu  atau  kekuningan  pada deteksi  saponin.  Namun  hasil  deteksi senyawa alkaloid memberikan bercak orange yang  menunjukkan  bahwa  ekstrak  limbah simplisia  positif  mengandung  alkaloid (Wagner, 1996).
Uji  daya  antijamur  minyak  atsiri  dan ekstrak  limbah  dilakukan  dan  diamati pengaruhnya  terhadap  pertumbuhan  jamur Candida  albicans menggunakan  metode kertas  cakram.  Kontrol  positif  yang digunakan adalah nistatin. Mekanisme kerja Nistatin  adalah  merusak  membran  sel melalui  pengikatan  diri  atau  bergabung dengan  sterol  yang  terdapat  di  dalam membran  sel  sehingga  mengakibatkan k e r u s a k a n   p a d a   m e m b r a n   s e l   d a n menyebabkan  kebocoran  isi  sitoplasma sehingga  dapat  membunuh  jamur Candida albicans (Tjay, 2007). Kontrol negatif yang digunakan adalah PEG 400 dan etanol 70%, dengan  tujuan  untuk  mengetahui  apakah pelarut  mempunyai  kemampuan  aktivitas antijamur.
Konsentrasi  masing-masing  senyawa yang  ditetapkan  untuk  pengujian  antijamur adalah  0,75;  1;  2  dan  2,25%  untuk  minyak atsiri;  2,25;  2,5;  3  dan  4%.  Pengujian  daya a n t i j a m u r   m a s i n g - m a s i n g   s e n y a w a dilakukan  pada petridisk yang  berbeda karena  minyak  atsiri  merupakan  minyak yang  mudah  menguap  sehingga  dapat mempengaruhi  daya  antijamur  ekstrak limbah simplisia.
Tabel 5 menunjukkan pada konsentrasi yang  sama,  yaitu  2,25%,  minyak  atsiri memberikan daerah hambatan sebesar 1,041 cm sedangkan ekstrak limbah simplisia tidak memberikan  daerah  hambatan  sama  sekali. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  minyak  atsiri rimpang  kunir  putih  memberikan  daerah hambatan  lebih  besar  dibandingkan  dengan ekstrak  limbah  simplisia  sisa  destilasi rimpang kunir putih.
Gambar  1  menunjukkan  adanya peningkatan  daerah  hambatan  yang ditimbulkan  pada  masing-masing  senyawa
Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas
Tabel 1. Organoleptis Minyak Atsiri Rimpang Kunir Putih
Tabel 2. Hasil KLT Minyak Atsiri

## ASTUTININGSIH, OCTAVIANI, SURATININGSIH
dimana  semakin  tinggi  konsentrasi  maka diameter daerah hambat pertumbuhan jamur semakin besar.
Data yang diperoleh menunjukkan data yang berdistribusi normal dan homogen. Hal ini  ditunjukkan  dengan  signifikansi  >  0,05 maka H  diterima artinya sampel berasal dari 0 populasi  yang  berdistribusi  normal  dan homogen,  maka  selanjutnya  dilakukan  uji analisa  varian  (anava)  satu  jalan  untuk mengetahui  adanya  perbedaan  daya antijamur  antara  minyak  atsiri  dan  ekstrak limbah.
Hasil  uji  Anava  menunjukkan signifikansi < 0,05 maka H  ditolak artinya 0 adanya  perbedaan  bermakna  antara konsentrasi minyak atsiri dan ekstrak limbah simplisia  terhadap  pertumbuhan Candida albicans dengan kata lain terdapat pengaruh
konsentrasi minyak atsiri dan ekstrak limbah terhadap  rata-rata  diameter  pertumbuhan jamur.  Uji  statistik  dilanjutkan  dengan  uji Scheffe  untuk  membandingkan  apakah kelompok  konsentrasi  antara  satu  dengan lainnya  memiliki  nilai  signifikasi  yang berbeda.
Hasil  dari  uji  Scheffe  menunjukkan semua konsentrasi minyak atsiri dan ekstrak limbah  berbeda  signifikan  dengan  kontrol positif  (Nistatin)  dengan  signifikasi  <  0,05 maka H  diterima artinya minyak atsiri dan 0 ekstrak  limbah  mempunyai  aktivitas  untuk menghambat  pertumbuhan Candida albicans secara  signifikan.  Namun konsentrasi  antara  minyak  atsiri  dengan ekstrak  limbah  menunjukkan  perbedaan yang  tidak  signifikan,  yaitu  antara  minyak atsiri  0,75%  dan  ekstrak  limbah  2,25%;
Tabel 3. Hasil Uji Pendahuluan Ekstrak Limbah
Tabel 4. Hasil KLT Ekstrak Limbah
Tabel 5. Diameter Zona Hambat (cm) Pertumbuhan Candida albicans

## ASTUTININGSIH, OCTAVIANI, SURATININGSIH
minyak  atsiri  1%  dengan  ekstrak  limbah 2,5%  dan  3%;  minyak  atsiri  2%  dengan ekstrak  limbah  4%.  Hal  ini  menunjukkan kemampuan daya hambat yang setara antara minyak atsiri 0,75% dengan ekstrak limbah 2,25%;  minyak  atsiri  1%  dengan  ekstrak limbah  2,5%  dan  3%;  minyak  atsiri  2% dengan ekstrak limbah 4%.
Minyak  atsiri  dapat  menghambat pertumbuhan Candida albicans . Mekanisme kerja  antijamur  minyak  atsiri  yaitu  gugus fenol  dalam  minyak  atsiri  membentuk kompleks dengan protein dalam membran sel sehingga terjadi penggumpalan. Protein yang menggumpal  mengalami  denaturasi sehingga  menyebabkan  permeabilitas membran  sel  menurun,  transport  nutrisi dalam sel terganggu sehingga pertumbuhan jamur  terganggu  (Jawetz  dkk,  1996; Siswandono dan Soekardjo, 2000).
Ekstrak limbah mengandung senyawa alkaloid.  Gugus  nitro  dalam  alkaloid berperan  untuk  aktivitas  antijamur  dimana gugus  nitro  tereduksi  menjadi  amin  primer yang  kemudian  bergabung  dengan  asam ribonukleat  dan  menghambat  sintesis  asam n u k l e a t   s e r t a   p r o t e i n   j a m u r   y a n g menyebabkan ketidakseimbangan metabolik sehingga  menghambat  pertumbuhan  atau m e n i m b u l k a n   k e m a t i a n   s e l   j a m u r (Siswandono, 2000: 66).

## 4. Kesimpulan dan Saran
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa  minyak  atsiri  dan  ekstrak  limbah simplisia  sisa  destilasi  rimpang  kunir  putih ( K a e m p f e r i a   ro t u n d a L . )   m a m p u
menghambat  pertumbuhan Candida albicans .  Terdapat  perbedaan  daya  hambat antara minyak atsiri ekstrak limbah simplisia sisa  destilasi  rimpang  kunir  putih  terhadap pertumbuhan Candida albicans .
Perlu  dilakukan  pengujian  daya antijamur  minyak  atsiri  dan  ekstrak  limbah simplisia  sisa  destilasi  rimpang  kunir  putih ( Kaempferia rotunda Linn.) dengan metode dan jamur yang berbeda, baik dalam bentuk senyawa  maupun  dalam  bentuk  sediaan. Perlu  juga  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk mengetahui struktur kimia kandungan senyawa  dalam  minyak  atsiri  dan  ekstrak limbah simplisia sisa destilasi rimpang kunir putih  ( Kaempferia rotunda  Linn.)  yang berkhasiat antijamur.

## Daftar Pustaka
Agusta,  A.  2000. Minyak  Atsiri  Tumbuhan  Tropika Indonesia . Bandung: ITB. Armando,  R.  2009. Memproduksi  15  Jenis  Minyak Atsiri Berkhasiat . Jakarta: Penerbit Swadaya. Budiarti ,  S.  2006.  Isolasi  dan  Identifikasi  Senyawa Aktif  Minyak  Atsiri  Rimpang  Kunir  Putih ( Kaempferia rotunda L.) yang Memiliki Aktivitas Antibakteri  Terhadap Bacillus  subtilis . Skripsi . Semarang: STIFAR Yayasan Pharmasi. Departemen  Kesehatan  RI.  1987. Analisis  Obat Tradisional. Jakarta: Depkes RI. Handayani,  L.  2003. Tanaman  Obat  Untuk  Masa Kehamilan  dan  Pasca  Melahirkan .  Jakarta: Agromedia Pustaka.
Jawetz,  E,  Melnick,  J.L,  dan  Adelberg,  E.A.  1996.
Mikrobiologi  Kedokteran.  Diterjemahkan  oleh Edi  Nugroho  dan  Maulani.  Edisi  20.  Jakarta  : Penerbit Buku Kedokteran EGC Katno, dan Pramono, S. 2006. Tingkat Manfaat dan Keamanan Manfaat Obat dan Obat Tradisional . Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada. Ketaren, S. 1985. Pengantar Teknologi Minyak Atsiri . Jakarta: Balai Pustaka.
Siswandono  dan  Soekardjo,  H.B.  2000. Kimia Medisinal  II .  Surabaya:  Universitas  Airlangga Press.
Tjay, T. H. dan Rahardja, K. 2007. Obat-Obat Penting K h a s i a t ,   P e n g g u n a a n ,   d a n   E f e k - E f e k Sampingnya. Edisi  6.  Jakarta:  Elex  Media Komputindo.
Yuanita,  F.  2005.  Uji  Daya  Hambat  Minyak  Atsiri Rimpang  Kunir  Putih  ( Kaempferia  rotunda L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Bacillus subtilis ATCC  25416. Skripsi .  Semarang:  STIFAR Yayasan Pharmasi.
Wagner, Hieldebert, Baldt, Sabine. 1996. Plant Drug Analysis  A  Thin  Layer  Chromatography  Atlas, Second Edition Germany: Springer
Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas
Gambar 1. Grafik Hubungan Perbandingan Diameter

## Daerah Hambat antara Minyak Atsiri dan
Ekstrak Limbah Simplisia

## ASTUTININGSIH, OCTAVIANI, SURATININGSIH