## Penampakan Morphologi Kulit Luar Marmut Terhadap Pemberian Minyak Atsiri Tanaman Zodia Secara Rutin
Zodia ( Evodia suavealens ) Essential Oil treatment on Guinea Pig’s Skin Morphology
MUHAMAT 1*) dan HIDAYATURRAHMAH 1)
1) PS Biologi FMIPA Universitas Lambung Mangkurat e-mail* : muhamatbjbr@gmail.com
Abstract. Zodia  essential  oil  is an essential  oil  that  has  repellent power  to mosquito’s  activity of sucking blood.  The Zodia can be developed to produce a body protective material.  Therefore, it is needed to do the research about the safety use of this material for human. Taking into acount that the  use of  such  material  is  directly connected  with  skin surface,  this  research  is  focused  on observing skin sightings morphology exposed to Zodia essential oil. Experiment skin irritation test has  been  done using  Draize method by lubricating essential  oil  5%  to guinea  pig’s skin. We observed the guinea pig’s skin morphology macroscopically (eritema and edema), the changes of skin colour and smoothness, and also behaviour changes. The observation results show that the treatment  of Zodia essential oil does not  show indications  of  skin  damage either  in eritema  or edema. The  treatment  of essential  oil results  in smooth, shinning,  and glossy skin  which  is different from the control skin. Furthermore,  the  use  of  Zodia  essential  oil  does  not indicate  any poisoned behaviours such as loosing appetite, vomit, silent or aggressive. In short, the treatment of 5% zodia essential oil does not induce guinea pig’s skin inflammation; even the guinea pig’s skin becomes smoother and silkier.
Key Words: zodia essential oil, edema, eritema, skin
Abstrak. Minyak atsiri  zodia merupakan salah satu  minyak atsiri  yang mempunyai daya penolak dari  aktivitas  nyamuk  menghisap  darah.    Minyak  tersebut dapat  dikembangkan  menjadi  bahan pelindung  tubuh  maka  perlu  dilakukan  penelitian  tentang  keamanan  bahan  ini  terhadap  manusia (pemakai). Karena pemakaian berhubungan langsung dengan permukaan kulit maka penelitian ini difokuskan  pada  pengamatan terhadap  penampakan  morfologi  kulit  akibat  pemaparan  minyak atsiri zodia. Pengujian dilakukan denga uji iritasi primer menggunakan metode Draize dengan cara mengolesi minyak atsiri konsentrasi 5% ke kulit marmut. Pengamatan dilakukan setiap hari meliputi pengamatan morfologi   kulit marmut secara makrokospis (eritema dan edema), perubahan  warna kulit serta kehalusan kulit .  Pengamatan juga dilakukan terhadap  perubahan tingkah laku selama penelitian. Hasil  pengamatan  terhadap  semua  sampel  kulit  marmut  yang diolesi  minyak  atsiri zodia  tidak menunjukkan adanya tanda-tanda kerusakan kulit baik eritema maupun edema.  Kulit yang diolesi minyak atsiri menunjukkan tekstur kulit yang lembut, mengkilat dan licin, yang berbeda dari kulit yang tidak diolesi minyak atsiri. Pengamatan perilaku marmut tidak menunjukkan adanya perilaku  keracunan  seperti  tidak  punya  nafsu  makan,  muntah-muntah,  diam  atau  agresif. Kesimpulan yang dapat diambil dalam penelitian ini adalah minyak atsiri zodia dengan konsentrasi 5% tidak menyebabkan inflamasi pada kulit marmot, bahkan kulit marmut menjadi lebih lembut dan halus.
Kata kunci : minyak atsiri zodia, edema, eritema, kulit

## PENDAHULUAN
Tanaman  Zodia  ( Euodia  suaveolens Scheff) merupakan  salah  satu  tanaman  yang  dapat digunakan  untuk  mengusir  nyamuk.    Tanaman ini berasal dari Papua (Lestari, 2005).
Tanaman ini dapat ditanam dalam pot dan bisa ditempatkan  di  dalam  ruang/kamar  yang bermanfaat  untuk  mengusir  nyamuk  dalam ruang/kamar  tersebut.  Semua  bagian  tubuh Zodia mempunyai  aroma  yang  tidak  disukai nyamuk.    Daun  zodia  yang  masih  segar  bisa
langsung dijadikan pelindung kulit dari serangan  nyamuk  dengan  cara  meremas kemudian mengoleskan  ke  bagian  kulit  tubuh. Nyamuk  akan  menjauh  dengan  mencium aroma  yang  berasal  dari  daun  zodia. Karena itu tanaman  ini  amat  cocok  dikembangkan  di Indonesia sebagai tanaman obat keluarga yang berfungsi untuk mengusir nyamuk.
Budidaya tanaman zodia cukup mudah, sehingga  dengan  cepat  diperoleh  tanaman dalam  jumlah yang banyak.    Jika  produksi tanaman zodia berlebihan maka perlu dilakukan penyimpanan  yang  tepat  sehingga  dapat dipakai  di  waktu  dan  tempat yang  lain.    Salah satu  cara  penyimpanan yang  dapat  dilakukan adalah dengan cara destilasi untuk mendapatkan minyak atsirinya.
Minyak  atsiri  pada  umumnya  dipakai  untuk tujuan  tertentu  misalnya  untuk  obat  kembung dan cairan urut yang umumnya dioleskan pada kulit.      Cara  penggunaan  minyak  atsiri  seperti ini bisa menyebabkan alergi bagi penggunanya. Alergi  ini  bisa  menyebabkan  terkelupasnya kulit/  irirtasi,  penyempitan  atau  pelebaran  pori- pori  kulit  bahkan bias  menimbulkan bengkak. Ada  beberapa  minyak  atsiri yang  dapat menyebabkan  irritasi  kulit  seperti Pimenta racemosa,  Syzygium  aromaticum,  Coriandrum sativum, Cinnamomum camphora var. linaloolifera, Cinnamomum camphora var .glavescens, Linda  umbellata,  Litsea  cubeba, Melissa  officinalis,  Origanum  vulgare,  Pimenta officinalis,  Aniba  rosaedora,  Satureja  hortensis, Satureja  montana,  Tagetes  minuta,  Melaleuca alternifolia, Thymus vulgaris , dan Pinus sylvestris (OECD SIDS, 2002).
Oleh  karena  itu, sebelum  minyak  atsiri  zodia dikembangkan sebagai bahan  pelindung  tubuh dari serangan nyamuk yang menghisap  darah maka  perlu  dilakukan  penelitian  tentang keamanan  bahan  ini bagi pemakainya.  Karena pemakaian  berhubungan  langsung  dengan permukaan  kulit  maka  penelitian  ini  difokuskan pada pengamatan terhadap penampakan morfologi  kulit  akibat  pemaparan  minyak  atsiri zodia.

## BAHAN DAN METODE
Bahan  yang  perlukan  adalah  zodia,  marmut, aquades,  dan  air.    Alat  yang  digunakan  adalah kamera  Canon  E05  70  lensa  EFS  100mm (macro),  alat  suling,  alat  cukur,  pipet  ukur, kandang marmut, ruang uji.
Penyulingan  daun  Zodia  dan  pembuatan konsentrasi. Penyulingan dilakukan mengunakan metode  distilasi  uap Zodia yang sudah dikeringkan dimasukkan ke  dalam  ketel penyuling  yang  telah  berisi  air  kemudian dipanaskan.  Uap  yang  keluar  dari  ketel dialirkan  dengan  pipa  yang  dihubungkan dengan  kondensor.  Uap  yang  merupakan campuran  uap  air  dan  minyak atsiri akan terkondensasi  menjadi  cair  dan  ditampung dalam  wadah.  Selanjutnya  cairan  minyak  dan air  tersebut  dipisahkan  dengan  separator pemisah minyak untuk diambil minyaknya saja. (Windarto,2009). Minyak atsiri zodia diencerkan dengan aquades menjadi konsentrasi 5%
Perlakuan  dan evaluasi  reaksi. Rambut mar- mut  dipotong  dengan  ukuran  16  cm 2 sampai kulitnya  kelihatan  dan  bersih  dari  rambut. Setelah  bersih  bagian  tersebut  diolesi  minyak atsiri  zodia.    Proses  ini  dilakukan  setiap  hari selama 21 hari. Pengujian dilakukan dengan uji iritasi  primer menggunakan metode Draize.
Pengamatan dilakukan pada setiap hari dengan mengamati  morfologi    kulit marmut secara makrokospis (Tabel 1), yaitu eritema ( peristiwa memerahnya  kulit  secara  tidak  normal)  dan edema (pembengkakan jaringan karena kandungan  cairannya  bertambah) (Yuliani,
2005). Selain pengamatan eritema dan edema juga diamati morfologi kulit berupa ada tidaknya perubahan warna dan tingkat kehalusan kulit.

## Tabel 1  Evaluasi reaksi kulit Metode Draize
No Reaksi Kulit Skor 1 Eritema dan Pembentukan Kerak Tanpa eritema 0 Eritema sangat sedikit (hampir tidak nampak) 1 Eritema berbatas jelas 2 Eritema moderat sampai berat 3 Eritema berat (merah bit) sampai sedikit membentuk kerak (luka dalam) 4 Total Skor Eritema yang mungkin 4 2 Pembentuka edema Tanpa edema 0 Edema sangat sedikit (hampir tidak nampak) 1 Edema sedikit (tepi daerah berbatas jelas) 2 Edema moderat (tepi naik kira-kira 1 mm) 3 Edema berat (naik lebih dari 1 mm dan meluas keluar daerah pajanan) 4 Total skor edema yang mungkin 4
Respon reaksi kulit = Jumlah maksimal skor eritema dan pembentukan kerak + jumlah maksimal skor edema/Jumlah marmut

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengujian  minyak  atsiri  pada  kulit  marmut dilakukan di bagian dekat telinga.  Hal ini dipilih karena  daerah  tersebut banyak  pembuluh daerah  kapiler  sehingga  minyak  atsiri  zodia mudah  diserap  kulit  dan  masuk  ke  dalam peredarahan  darah.    Pengujian  dilakukan selama  21  hari  dengan  cara  mengolesi  kulit marmut  dengan  minyak  atsiri  sekali  dalam sehari.
Hasil pengamatan  terhadap  semua  kulit marmut  yang    diolesi  minyak  atsiri  zodia    tidak menunjukkan adanya tanda-tanda  kerusakan kulit  baik  eritema  maupun  edema. Keadaan kulit  sebelum  dan  setelah diberi minyak  atsiri zodia menunjukkan adanya perbedaan morfologi  kulit.    Kulit  yang diolesi  minyak  atsiri menunjukkan tekstur kulit yang lembut, mengkilat  dan  licin  yang  berbeda  dengan  kulit yang  tidak  diolesi  minyak  atsiri  (Tabel 2). Pengamatan  juga  dilakukan  terhadap  perilaku marmut  selama  pengujian.    Marmut  tidak menunjukkan adanya perilaku keracunan seperti  tidak  punya  nafsu  makan,  muntah- muntah, diam atau agresif.
Tabel 2.  Hasil pengamatan morphologi kulit tikus pasca diolesi minyak
atsiri zodia 5% selama 21 hari No Sampel Analisis Morphologi kulit Eritema Edema 1 1 0 0 lembut Mengkilat Licin 2 2 0 0 lembut Mengkilat Licin 3 3 0 0 lembut Mengkilat Licin 4 4 0 0 lembut Mengkilat Licin
Bahan  aktif  dari  tumbuhan  banyak  digunakan sebagai penolak/repelent nyamuk. Tapi penggunaan  minyak  atsiri  yang  berlebihan dapat menimbulkan efek samping.
Penggunaan  minyak  atsiri umumnya  pada konsentrasi di bawah 20% untuk mengantisipasi efek samping, contohnya minyak  atsiri  akar  wangi  konsentrasi  15% sudah  menimbulkan inflamasi  yang  ditandai dengan irritasi (Anggoro, 2003). Selain dimanfaatkan menjadi senyawa penolak nyamuk,  minyak  atsiri  juga bisa digunakan untuk melembutkan kulit.
Inflamasi  adalah    respon  fisiologis  tubuh terhadap  suatu  injuri  dan  gangguan  oleh  faktor eksternal.    Penyebab  inflamasi terbagi  dalam empat kelompok  yaitu: (i) perubahan  aliran darah yang disebabkan oleh perubahan sel otot polos yang menyebabkan  fungsi  vasodilatasi, (ii) perubahan  dalam  permeabilitas  pembuluh
darah yang disebabkan oleh kontraksi sitoskeletal  dalam  sel  endotel, (iii) migrasi leukosit  fagositik  ke  situs  peradangan,  dan (iv) fagositosis.    Dua  tanda  awal  dari  inflamasi adalah eritema dan edema.
Pemberian minyak atsiri zodia tidak menyebabkan  terjadinya  inflamasi.    Hal  ini kemungkinan  disebabkan  oleh  minyak  atsiri zodia  yang  mengandung  evodiamin. Zat  ini dilaporkan memberikan efek  anti-inflamasi  dan anti-nociceptive.  Evodiamin  telah  ditemukan sangat  menghambat  sintesis  prostaglandin  E2 dari  lipopolisakarida  RAW  264,7. Evodiamin juga telah terbukti dapat menghambat siklooksigenase-2  induksi dan  aktivasi  NF-kB (Zhang et al , 2012).  Sekresi dari prostaglandin yang  berlebihan  merupakan  salah  satu  tanda dari inflamasi.
Gambar 1.  Morpfologi kulit marmut yang diolesi dan tidak diolesi minyak atsiri zodia 5%.
(1,2,3, dan 4 Sampel marmut; A. daerah pada kulit yang diolesi minyak atsiri;
B. daerah pada kulit yang tidak diolesi minyak atsiri)
Beberapa  hasil  penelitian  yang  sama  juga diperoleh  misalnya  kandungan  minyak  atsiri pada  daun  dewa  diduga  berperan  sebagai anti inflamasi  yang  mampu  menghambat  enzim siklooksigenase  sehingga  prostaglandin  yang merupakan  suatu  mediator  nyeri  dan  inflamasi tidak  terbentuk.  Minyak  atsiri  daun  dewa menghambat  enzim  siklooksigenase yang berfungsi mengubah asam arachidonat menjadi prostaglandin. Saponin yang merupakan golongan  triterpenoid  diidentifikasi  memiliki kemampuan untuk mengurangi gejala inflamasi (menghambat eritema dan edema), anti mikroba, mempengaruhi kolagen, serta memperbaiki  dan  menguatkan  sel-sel  kulit. Daun  dewa dapat  berperan sebagai  anti koagulan  dan  melancarkan  sirkulasi  darah. Berdasarkan penelitian Ma et al. (2009) dalam Utami et  al. (2011),  ekstrak  daun  embukan
( Paederia  scandens )  juga  dapat  merespon inflamasi  dan  imun  pada  gout arthritis  yang diinduksi  oleh  crystal  MSU  pada tikus.
Berdasarkan  penelitian  tersebut  didapatkan hasil  bahwa  ekstrak  daun  sembukan  dapat menghambat  inflamasi  dengan  menurunkan TNF-α dan IL-1β.
Kulit  yang  menjadi  lembut  ini  kemungkinan disebabkan  oleh  peredaran  darah  menjadi lancar. Hal  ini  dikarenakan  evodiamin  yang terkandung dalam minyak atsiri zodia menyebabkan  vasodilatasi  pembuluh  darah sehingga  suplai  oksigen  dan  nutrisi  terhadap jaringan  disekitarnya  menjadi  lebih  lancar (Chiou et al , 1996).
Hewan  coba    tidak  menunjukkan  gejala keracunan  minyak  atsiri  zodia.    Hal  ini  berarti
A B A A A B A B 1 4 3 2
minyak atsiri zodia tidak berbahaya bagi hewan non target. Gejala keracunan perlu diperhatikan karena ada beberapa jenis minyak atsiri  menyebabkan  keracunan.    Keracunan disebabkan karena sifat dasar dari minyak atsiri merupakan  senyawa  sekunder  yang  dihasilkan oleh  tumbuhan  yang  berfungsi  salah  satunya adalah  sebagai  sistem  pertahanan.    Beberapa senyawa  metabolit  sekunder  yang    dihasilkan oleh  tumbuhan  bersifat  penolak  bagi  herbivora untuk mengkonsumsinya (Jesus, et al , 2010).
Ada  beberapa  minyak  atsiri  yang  dapat mengakibatkan keracunan pada hewan percobaan seperti minyak atsiri dari peppermint dan Cinnamomum  camphora yang dalam konsentrasi  tinggi dapat menyebabkan  mulas, mual,  muntah,  reaksi  alergi,  kemerahan,  dan sakit  kepala  (Maniacal  & Wanwimolruk,  2001; Akdogan et  al ,  2004;.  Bush et  al ,.2007).
Penggunaan  minyak  atsiri  zodia  sebagai penolak  nyamuk  yang  tidak  menyebabkan iritasi  ini  dapat  digunakan  untuk  menggantikan N,N-dietil-m-toluamid DEET. DEET  adalah  zat penolak  serangga  sintetik.    DEET  sebagai bahan  aktif  pada  produk-produk  komersial penolak  serangga  termasuk  penolak  nyamuk.
Penggunaan  DEET  dalam  waktu  yang  lama akan  menyebabkan  epidermis  mengelupas, rambut-rambut  rontok    dan  dermis  mngalami penebalan  serta  terjadinya  vaskurasisasi  pada kulit kelinci (Sammar et al , 2001)

## KESIMPULAN DAN SARAN
Penggunaan minyak  atsiri  zodia  dengan konsentrasi  5%  tidak  menyebabkan  inflamasi pada  kulit  marmot,  bahkan  kulit  marmut menjadi lebih lembut  dan  halus. Penelitian  ini dapat dilanjutkan untuk mengetahui kemampuan minyak  atsiri  zodia  sebagai  anti bakteria dan anti jamur yang ada di permukaan kulit.

## DAFTAR PUSTAKA
Agus  K.  2004. Zodia ( Evodiaa  suaveolens ) Tanaman  Pengusir  Nyamuk. Tabloid Sinar Tani , 23 Juni 2004.
Akdogan M, Ozugner M, Aydin G, & Gokalp O. 2004. Investigantion  of  Biochemical
and Pistopathological Effects of Peppermint Piperita Labiatae and Peppermint Spicata  Labiatae on  Liver Tissue  in  Rats. Hum  Exp. Toxicol .  23:
21-28.
Anggoro,  AB.  2003,  Daya  Repelan  dan  Daya Iritasi
Minyak Atsiri Akar Wangi ( Vetivera zizoniodes (L) Nogh)
terhadap  Nyamuk Aedes  Albopictus ,
Skripsi,  Fakultas  Farmasi,  Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Bush TM, Rayburn KS, Holloway SW, Sanchez- Yamamoto  DS,  Allen  BL,  Lam  T,  So BK,  Tran  de  H,  Greyber  ER,  &  Kantor S.  2007.  Adverse  Interactions  Between Herbal  and  Dietary  Substances  and Prescription  Medications:  a  Clinical Survey. Altern  Ther  Health  Med .  13:
30-5.
Chiou WF,  Liao  JF, &  Chen CF.  1996. Comparative  study  on  vasodilatory effects  of  three  quinazoline  alkaloids isolated from Evodia rutaecarpa . J. Nat. Prod. 59: 374-378.
Jesús  OV,  Angélica  GC,  &  Elena  S. 2010. Toxicity  of  The  Essential  Oil  of  The Cytral  Chemtype  of Lippia  alba (Mill.)
N.  E.  Brown Acta  Toxicol.  Argent .  18 (1): 21-27.
Juniastuti T  &  Kusnoto. 2007. Efek  Ekstrak Zodia  ( Evodia  Suavrolens ,  Scheff) Sebagai  Larvasida  Terhadap  Larva
Nyamuk Aedes  Aegypti Dalam  Upaya Pemberantasan Penyakit Demam Berdarah    Laporan  Penelitian DIPA PNBP Universitas Airlangga.
Lestari MS.  2005  Uji Toksisitas Ekstrak Daun Zodia  ( Euodia  suaveolens Scheff.) terhadap Hama Kubis  ( Crocidolomia binotalis Zell.). dalam Apriyanto  D, Ishak A, Santoso U, Gunawan,
Hermawan  B, Ruswendi, Priyotomo  E. (eds.). Prosiding  seminar  nasional inovasi  teknologi  pertanian  mendukung pembangunan pertanian di lahan kering .  Bengkulu,  11-12  Nov  2005 Pusat  Analisis  Sosial  Ekonomi  dan Kebijakan Pertanian , Bogor.
Maniacal PP, & Wanwimolruk S. 2001. Effect of
Herbal Teas on Hepatic Drug Metabolizing  Enzymes  in Rats. J Pharm Pharmacol . 53:1323-9.
OECD SIDS, 2002. Linalool Unep Publications 26–28 March 2002, Paris, France.
Sammar  AS,  Rehana  S  &  Fouzia  N.  2001. Toxic  Effects  of  Diethyltoluamide  and Dimethylphthalate Creams as Mosquito Repellents  on  Rabbit’s  Skin J  Anat. Soc. India 50(2): 148-152.
Utami  ET,  Kuncoro  RA,  Hutami  IR,    Sari  FT& Handajani  J  2011. Efek  Antiinflamasi Ekstrak  Daun  Sembukan  ( Paederia scandens ) Pada Tikus Wistar. Majalah Obat Tradisional , 16(2):95 – 100.
Zhang  YT,  Huang  ZB,  Zhang  SJ,  Zhao  JH, Wang Z, Liu Y,& Feng N. 2012. In Vitro Cellular  Uptake  of  Evodiamine    and Rutaecarpine  Using  A  Microemulsion. International  Journal  of  Nanomedicine 7: 2465–2472.
Yuliani SH.  2005 . Formulasi  Gel Repelan Minyak  atsiri  Tanaman  Akar  Wangi ( Vetivera zizanioidesi (L) Nogh): Optimasi  Komposisi  Carbopol  3% . b/v . –
Propilenglikol Majalah Farmasi Indonesia , 16(4): 197 – 203.