## Perbandingan Jumlah Total Bakteri pada Penggunaan Wadah Penyimpanan Air Susu Ibu (ASI) yang Berbeda

## Dwimei Ayudewandari Pranatami
Program Studi Pendidikan Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Walisongo Semarang Email: dwimeibiologi@walisongo.ac.id

## ABSTRACT
At the beginning of its life, breast milk is the best food for babies because breast milk contains all the nutrients that can be used for optimal growth and development of the baby. Therefore, the government has promoted exclusive breastfeeding programs for infants 0-4 months or up to 6 months if possible. However, the current phenomenon especially among working mothers, there are regulatory difficulties in giving milk to children. Breast milk can still be given by a working mother the pumping method and stored first. To facilitate the storage of breast milk, three types of containers are widely used, namely plastic clips, plastic bottles, and glass bottles. In the period of storage, it must be ensured that breast milk can be maintained with good quality and integrity. This study aims to compare the total number of bacteria that can grow in breast milk after being stored in three different types of containers. The sampling technique used in this study is total sampling. The treatment in this study was by placing breast milk in three different containers, namely  plastic bottles (A),  glass bottles (B),  and plastic bags for storing  breast milk  (C) stored at room temperature (16-26 0 C)  with  three  replications. Breast  milk is  obtained from volunteers  who have been predetermined  and  then  accommodated  in  sterile  containers.  Statistical  test  results  showed  that  the variation of the container did not affect the total bacterial colony with a p-value of 0.246 (P> 0.05) with the highest number of bacteria in plastic bag storage with an average of 5.4x10 3 CFU/ml.
Keywords: Breast milk, Breast milk containers, Total bacterial colonies

## ABSTRAK
Pada  awal  masa  kehidupanya,  air  susu  ibu  (ASI)  adalah  makanan  terbaik  bagi  bayi  karena  ASI mengandung  semua  nutrisi  yang  dapat  digunakan  untuk  pertumbuhan  dan  perkembangan  bayi  secara optimal.  Oleh karena itu, pemerintah telah mensosialisasikan program ASI ekslusif pada bayi 0-4 bulan atau sampai 6 bulan bila memungkinkan. Namun fenomena sekarang terlebih pada kalangan ibu pekerja, terjadi kesulitan pengaturan dalam memberikan ASI pada anak. ASI tetap dapat diberikan oleh seorang ibu pekerja dengan metode pumping dan disimpan terlebih dahulu. Untuk memudahkan dalam penyimpanan ASI  banyak  digunakan  tiga  tipe  wadah  yaitu  klip  plastik,  botol  plastik  dan  botol  kaca.  Dalam  masa penyimpananya, harus dipastikan bahwa ASI  dapat tetap terjaga kualitas dan kesetrilanya dengan baik. Pada penelitian kali ini bertujuan untuk membandingkan jumlah total bakteri yang dapat tumbuh dalam ASI  setelah  disimpan  dalam  ketiga  tipe  wadah  yang  berbeda.  Teknik  sampling  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah total sampling . Perlakuan pada penelitian ini dengan menempatkan ASI dalam ketiga wadah berbeda yaitu botol plastik (A), botol kaca (B) dan kantong plastik penyimpan ASI (C) yang disimpan pasa suhu ruang (16-26 0 C) dengan tiga kali ulangan. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni (true experimental) di laboratorium dengan desain Rancangan Acak Lengkap (RAL). ASI diperoleh dari sukarelawan yang sudah ditentukan sebelumnya kemudian ditampung dalam wadah steril.  Hasil uji statistik menujukkan bahwa variasi wadah tidak berpengaruh terhadap total koloni bakteri dengan nilai p- value 0,246 (P>0,05) dengan jumlah bakteri tertinggi pada penyimpanan kantong plastik dengan rata-rata 5,4x10 3 CFU/ml.
Kata kunci: Air Susu Ibu Perah (ASIP), Wadah ASIP, Total koloni bakteri

## Pendahuluan
Sistem  pencernaan  pada  bayi  yang  belum sempurna  mengakibatkan  tidak  semua  jenis makanan  dapat  dikonsumsinya.  Air  susu  ibu (ASI)  selain  mengandung  semua  gizi  yang diperlukan oleh bayi juga sangat mudah dicerna. Pada  awal  dihasilkanya,  pada  ASI  terkandung kolostrum  yang  berwarna  kekuningan  dan transparan.  Pada  kolostrum  mengandung  15  % protein yang terdiri dari laktalbumin, laktaglobulin  dan  kasein  dimana  bermanfaat untuk membantu pencernaan bayi sehingga feses kotoran yang dikeluarkan tidak terlalu keras dan tidak pula terlalu lembek. Begitu pentingnya ASI pada  awal  perkembangan  bayi  sehingga menuntut kesadaran penuh dari para ibu untuk dapat  fokus  memberikan  ASI  kepada  anaknya terlebih pada 4-6 bulan pertama. Pada masa awal kehidupan  bayi,  ASI  sudah  dapat  memenuhi semua kebutuhan nutrisi bagi bayi. Karbohidrat dalam  ASI  berupa  laktosa,  lemak  ASI  banyak mengandung polyunsaturated  fatty  acid (asam lemak  tak  jenuh  ganda),  protein,  kandungan vitamin  dan  mineralnya  banyak,  rasio  kalsium- fosfat  sebesar  2:1  yang  ideal  bagi  penyerapan kalsium  serta  ASI  mengandung  zat  infeksi (Arisman, 2004).
Pemerintah mengeluarkan Peraturan Menteri Kesehatan  yang  mendukung  program  ASI Eksklusif dalam Permenkes RI Nomor 15 Tahun 2013  tentang  Tata  Cara  Penyediaan  Fasilitas Khusus  Menyusui  dan/atau  Memerah  Air  Susu Ibu,  dimana  setiap  tempat  kerja  diharuskan menyediakan  fasilitas  khusus  untuk  menyusui atau memerah ASI, bahkan menyimpan ASI. Hal ini sangat membantu bagi para ibu yang bekerja, khususnya  ibu-ibu  yang  sedang  menyusui sehingga  mereka  dapat  tetap  bekerja  dan  tetap memberikan  ASI  eksklusif  bagi  bayi  mereka. Sehingga  tidak  menjadi  alasan  lagi  bahwa pekerjaan  yang  menyebabkan  ibu  yang  bekerja tidak punya waktu untuk menyusui bayi mereka, bahkan cakupan ASI eksklusif bisa tercapai. Data Pemantauan Status Gizi di Indonesia pada 2017 menunjukkan  cakupan  pemberian  ASI  secara eksklusif selama 6 bulan pertama oleh ibu kepada bayinya  masih  sangat  rendah  yakni  35,7%. Artinya  ada  sekitar  65%  bayi  yang  tidak mendapatkan ASI secara eksklusif selama 6 bulan pertama  lahir,  serta  sesuai  data  dan  informasi Profil  Kesehatan  Indonesia  persentase  bayi mendapat ASI eksklusif sampai usia enam bulan menurut provinsi tahun 2017, pada provinsi Jawa Timur  hanya  sebesar  34,92%.  Angka  ini  masih jauh dari target cakupan ASI eksklusif pada 2019 yang ditetapkan oleh WHO maupun Kementerian Kesehatan yaitu 50% (Kemenkes, 2015)
Banyaknya  ibu  pekerja  seharusnya  tidak menjadi kendala pada proses pemberian ASI bagi sang anak. Cara yang dapat dilakukan untuk tetap memberikan  ASI  sekalipun  menjadi  ibu  pekerja adalah dengan memerah ASI saat ditempat kerja dan  disimpan  terlebih  dahulu  baru  kemudian dapat  diberikan  kepada  sang  anak.  Terdapat tantangan dalam menjaga kualitas ASI tetap baik sampai  dapat  diberikan  pada  anak  diantaranya adalah  suhu  penyimpanan,  waktu  atau  durasi penyimpanan  dan  wadah  penyimpanan  yang harus menjaga ASI tetap  baik.  Beberapa tempat penyimpanan sementara untuk ASI yang banyak dijual dipasaran adalah botol plastik, botol kaca dan kantong plastik penyimpan ASI. Wadah yang digunakan dalam penyimpanan harus aman dan menjaga ASI dari kontaminasi mikroba, sekalipun di  dalam  ASI  pun  juga  mengandung  mikrobia.
Faktor-faktor
yang menyebabkan mengingkatnya  aktivitas  mikrobia  antara  lain; nutrisi, aktivitas air, waktu, suhu dan PH. Durasi penyimpanan ASI sejak di perah hingga diberikan pada  bayi  memberikan  waktu  bagi  mikroba untuk  berkembang,  terutama  ASI  sangat  kaya dengan  nutrient  sehingga  wadah  penyimpanan harus dicari yang paling aman (Suardana, 2009).
Penelitian  tentang  wadah  penyimpanan  Air Susu  Ibu  Perah  (ASIP)  telah  dilakukan  oleh peneliti sebelumnya, yaitu Yu-Chuan Chang et al. (2012)  yang  memperoleh  hasil  terdapat penurunan  signifikan  dalam  kandungan  lemak setelah  proses  penyimpanan,  pembekuan,  dan pencairan, tetapi tidak ada penurunan siginfikan dalam  kandungan  energi  pada  sembilan  wadah penyimpanan  ASIP.  Penelitian  lain  dilakukan oleh  Goldblum  (1981)  yang  memperoleh  hasil penggunaan  wadah  penyimpanan  ASIP  dengan botol  kaca  lebih  direkomendasikan  karena jumlah  leukosit  mengalami  peningkatan  yang lebih besar daripada ASIP yang disimpan dalam botol  berbahan  plastik.  Berdasarkan  latar belakang  tersebut  dan  belum  adanya  kajian tentang  jumlah  bakteri  menggunakan  wadah penyimpanan ASIP dengan bahan yang berbeda, maka peneliti ingin melakukan penelitian dengan judul pengaruh variasi wadah  penyimpanan Air Susu  Ibu  Perah  (ASIP)  terhadap  total  koloni bakteri.

## Metode Penelitian
Penelitian  dilakukan  sepanjang  bulan Agustus  2019.  Lokasi  pengambilan  sampel dilakukan  di  RT/RW  03/01,  Kelurahan Begadung,  Kecamatan  Nganjuk  dan  lokasi pemeriksaan dilakukan di Laboratorium Bakteriologi  Institut  Ilmu  Kesehatan  Bhakti Wiyata  Kediri.  Pengambilan  sampel  yang
dilakukan  dalam  penelitian  ini  menggunakan teknik total  sampling .  Dengan  populasi  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  ibu menyusui  di  RT/RW  03/01,  Kelurahan Begadung,  Kecamatan  Nganjuk.  Jenis  penelitian ini  adalah True  Experimental dengan  desain penelitian  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL). Faktor  pada  penelitian  ini  adalah  jenis  wadah ASIP  yang  terdiri  dari  A  (botol  kaca),  B  (botol plastik),  dan  C  (kantong  plastik  ASIP)  yang disimpan pada suhu ruang (16-26°C) dengan tiga kali ulangan.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah  wadah  ASIP  berbahan  botol  kaca,  botol plastik,  dan  kantong  plastik,  pompa  ASI,  pipet ukur,  pipet  volume,  push  ball,  erlenmeyer, handgloves ,  masker,  tabung  reaksi,  batang pengaduk, gelas ukur, lampu spiritus, cawan petri (plate),  neraca  analitik,  sendok,  beaker  glass, oven, autoclave, inkas, dan incubator. Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah media Plate Count  Agar (PCA),  NaCl  0,9%,  alkohol  70%, alumunium foil, dan ASIP
a. Persiapan
Pada penelitian ini menggunakan jenis wadah ASIP  yang  terdiri  dari  A  (botol  kaca),  B  (botol plastik),  dan  C  (kantong  plastik  ASIP  yang disimpan  pada  suhu  ruang  dengan  tiga  kali ulangan. Teknik sampling yang digunakan dalam penelitian ini yaitu total sampling sebanyak lima responden ibu menyusui. Semua peralatan yang digunakan  untuk  memerah,  menyimpan  ASIP sampai  pada  pengujian  harus  steril  sehingga prosedur awal adalah mensterilkan semua alat.

## b. Pemerahan ASI
Proses  pengambilan/pemerahan  ASI  diawali dengan  meminimalisir  kontaminasi  silang bakteri dari para ibu ke dalam ASIP dengan cara meminta  responden  untuk  mandi,  mencuci tangan dengan sabun antiseptik terlebih dahulu, memotong  kuku,  dan  menggunakan  masker. Pemerahan  ASIP  dilakukan  sendiri  oleh  masing masing  relawan  agar  merasa  nyaman  dan optimal.  ASIP  yang  ada  di  dalam  botol  pompa selanjutnya  dibagi  ke  dalam  masing-masing  3 wadah  penyimpanan ASIP  berbahan botol kaca, botol  plastik,  dan  kantong  plastik  dan  diberi label/kode  perlakuan.  Sampel  ASIP  selanjutnya di analisis total koloni bakteri di laboratorium.

## c. Prosedur total koloni bakteri
Prosedur perhitungan bakteri yang digunakan dalam penelitian ini adalah penghitungan bakteri secara tidak langsung menggunakan cawan petri ( Total Plate Count /TPC/SPC). Sampel ASIP yang akan
dianalisis, diencerkan dengan
menggunakan  larutan  NaCl  0,9%.  Pengenceran dilakukan dengan tingkat pengenceran 10 -1 , 10 -2 ,
10 -3 .    Pengenceran  10 -1 :  sampel  ASIP  di  pipet secara aseptik sebanyak 1 ml, dan dimasukkan ke dalam  9  ml  larutan  NaCl  0,9%,  dihomogenkan. Demikian  seterusnya  sampai  pengenceran  10 -3 .
Selanjutnya,  dari  setiap  pengenceran  diambil sebanyak  satu  ml  suspensi,  dan  dimasukkan  ke dalam  plate  yang  steril  dan  telah  diberi  label sesuai  dengan  tingkat  pengencerannya,  lalu secara hati-hati dituang media PCA sebanyak 15 ml ke dalam plate dan homogenkan suspensi dan media,  diamkan  media  hingga  media  menjadi padat/keras. Inkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C dengan posisi terbalik. Setiap pengenceran untuk  penuangan  pada plate dibuat  tiga  kali ulangan. Jumlah koloni yang dihitung pada plate adalah antara 30-300 koloni dan dalam keadaan koloni  bebas.  Selanjutnya,  jumlah  koloni  yang diperoleh  dikalikan  dengan  satu  per  tingkat pengencerannya (Siahaya et al. , 2017).
d. Pengolahan dan Analisis Data
Pada  penelitian  ini  pengolahan  dan  analisis data  menggunakan  software  SPSS  versi  20. Dilakukan  uji  homogenitas  varian  dan  uji normalitas data terlebih  dahulu,  jika memenuhi persyaratan yaitu data homogen dan terdistribusi  normal  di  lanjutkan  dengan  uji Analysis of Varians One Way (ANOVA satu arah) jika  data  tidak  memenuhi  persyaratan  tersebut digunakan uji kruskal-wallis.

## Hasil dan Pembahasan
Pada  Penelitian  ini  ditujukan  untuk  melihat pengaruh  variasi  wadah  yang  digunakan  untuk menyimpan ASIP engan jumlah total bakteri. Data yang  didapatkan  adalah  data  dari  uji  TPC  yaitu jumlah  total  koloni  bakteri  pada  variasi  wadah penyimpanan  ASIP.  Hasil  penelitian  pada pemeriksaan  jumlah  koloni  bakteri  dengan pengaruh  variasi  wadah  penyimpanan  ASIP terhadap total koloni bakteri dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Data hasil jumlah koloni bakteri pada
variasi wadah penyimpanan ASI Jenis Wadah Rata-rata CFU/ml A (Botol Kaca) 4,3x10 3 B (Botol Plastik) 4,4x10 3 C (Kantong Plastik) 5,4x10 3
Berdasarkan Tabel 1, didapatkan jumlah bakteri pada perlakuan variasi wadah penyimpanan ASIP dengan  jumlah  rata-rata  bakteri  pada  wadah  A (botol  kaca)  adalah  4,3x10 3 CFU/ml,  wadah  B (botol plastik) 4,4x10 3 CFU/ml, dan pada wadah C  (kantong  plastik)  sebanyak  5,4x10 3 CFU/ml. Gambar  untuk  masing-masing  perlakuan  dapat dilihat  pada  Gambar  1.  dimana  dapat  terlihat koloni  bakteri  yang  paling  banyak  ada  pada penyimpanan  pada  kantong  plastik.  Semakin tinggi  pengenceran  maka  koloni  bakteri  yang ditemukan semakin sedikit. Uji  normalitas  digunakan  untuk  mengetahui populasi  data  berdistribusi  normal  atau  tidak. Jika data berdistribusi tidak normal maka metode yang digunakan adalah  statistik non-parameter. Dasar  pengambilan  keputusan  adalah:  1)  Jika nilai  signifikansi  <0,05  (P<0,05),  maka  data berdistribusi  tidak  normal,  2)  Jika  nilai signifikansi  >0,05  (P>0,05),  maka  data berdistribusi normal. Uji homogenitas digunakan untuk mengetahui varian dari beberapa populasi sama  atau  tidak.  Dasar  pengambilan  keputusan adalah : 1) Jika nilai signifikansi <0,05 (P<0,05), maka dikatakan  bahwa varian dari dua atau lebih kelompok  populasi  data  adalah  tidak  sama,  2) Jika  nilai  signifikansi  >0,05  (P>0,05),  maka dikatakan  bahwa  varian  dari  dua  atau  lebih kelompok  populasi  data  adalah  sama  Hasil  uji normalitas  dan  homogenitas  data  seperti  pada Tabel 2. dan Tabel 3. dibawah ini.
Tabel 2. Hasil uji normalitas data pengaruh variasi wadah ASIP terhadap total koloni bakteri
WADAH ASIP Kolmogorov- Sminov Shapiro-Wilk Stati stik df Sig. Stati stik df Sig. Botol Kaca .115  15  .200  .986  15 .994 Botol Plastik .196  15  .127  .887  15 .061 Kantong Plastik .206  15  .086  .807  15 .005
Tabel 3. Uji homogenitas data pengaruh variasi wadah ASIP terhadap total koloni bakteri Levene statistic Sig. BAKT ERI Based on Mean 2.543 .091 Based on Median 2.209 .122 Based on Median and with adjusted df 2.209 .134 Based on trimned mean 2.298 .113
Kesimpulan  yang  dapat  diambil  dari  uji normalitas  dan  homogenitas  adalah  data berdistribusi  tidak  normal  dan  mempunyai varian  yang  sama  (homogen),  maka  untuk  uji hipotesis  menggunakan  uji  non-parameter kruskal-wallis. Uji non-parameter kruskal-wallis digunakan  untuk  mengetahui  pengaruh  variasi wadah penyimpanan ASIP terhadap total koloni bakteri dengan tarif signifikasi (α) 5% atau 0, 05. Hasil  analisis  uji  kruskal-wallis  menunjukkan bahwa  pengaruh  variasi  wadah  penyimpanan ASIP  tidak  berpengaruh  terhadap  total  koloni bakteridengan nilai P-value sebesar 0,246 dapat dilihat seperti pada Tabel 4.
Tabel 4. Hasil uji kruskal-wallis pengaruh variasi wadah ASIP terhadap total koloni bakteri
Hasil Akhir Penelitian Chi-Aquare 2.804 Df 2 Asymp.Sig .246
ASI  dianggap  sebagai  susu  yang  steril,  tetapi faktanya  ASI  merupakan  salah  satu  sumber utama  bakteri  komensal,  mutualistik  dan probiotik  pada  usus  bayi  karena  bayi mengonsumsi ASI sekitar 800 ml/hari dan akan menelan antara 1x10 5 -1x10 7 bakteri setiap hari (Fernandez  et  al,  2013).  Untuk  itu  metode  dan bahan yang digunakan dalam penyimpanan ASIP sangat  penting  untuk  dikaji  agar  tidak
mempengaruhi  kualitas  dari  ASIP,  diantaranya adalah kualitas mikrobologisnya. Jumlah bakteri yang  terkandung  di  dalam  susu  sangat menentukan kualitas susu, bakteri tersebut dapat merubah sifat-sifat fisika, kimia dan organoleptik. Pencemaran pada susu dapat terjadi sejak proses pemerahan  yang  berasal  dari  berbagai  sumber, seperti  kualitas  susu  dalam  kalenjar  susu  ibu dapat  dikatakan  steril,  setelah  keluar  dari kalenjar susu ibu dapat terjadi kontaminasi Dari hasil  penelitian  jumlah  bakteri  pada  wadah kantong  plastik  mempunyai  rata-rata  tertinggi yaitu  5,4x10 3 CFU/ml,  dan  rata-rata  jumlah bakteri  pada  botol  plastik  sebanyak  4,4x10 3 CFU/ml  dan  pada  botol  kaca  sebanyak  4,3x10 3 CFU/ml.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  bahan- bahan  tersebut  menunjukkan  hasil  yang  bagus sebagai  wadah  penyimpanan  ASIP  karena  tidak banyak bisa terkontaminasi bakteri dari luar. Hal ini  dapat  disebabkan  karena  jenis  wadah  ASIP
yang  digunakan  sudah  sesuai  dengan  Standar Operasional  Prosedur.  Kantong  plastik  terbuat dari  bahan  polietilen  (PE)  dan  botol  plastik terbuat dari bahan polipropilen (PP) merupakan kemasan  plastik  yang  umum  digunakan  untuk mengemas  suatu  produk  pangan.  Berdasarkan hasil  penelitian  diatas  dapat  dilihat  bahwa penyimpanan  ASIP  pada  kantong  plastik mempunyai  rerata  total  koloni  bakteri  lebih tinggi daripada pada botol kaca dan botol plastik karena  polietilen  mempunyai  permeabilitas terhadap  oksigen  yang  sedikit  tinggi  yang menyebabkan  tersedianya  oksigen  yang  cukup banyak  untuk  memacu  pertumbuhan  mikroba aerob karena mudah menyerap oksigen dari luar. Bahan  gelas  dan  polipropilen  mempunyai permeabilitas terhadap uap air yang lebih rendah dan dapat mencegah kontak antara bahan dengan oksigen  sehingga  lebih  mampu  mencegah terjadinya kontaminasi mikroorganisme.
(a) (b1)                              (b2)                     (b3) (c1)                            (c2)                          (c3)
(d1)                              (d2)                        (d3)
Gambar  1.  Hasil  Uji  TPC  pada  ASIP  (a)  Kontrol,  (b1)  Botol  Kaca  pengenceran  10 -1 ,  (b2)  Botol  kaca pengenceran 10 -2 , (b3) Botol kaca pengenceran 10 -3 , (c1) Botol Plastik pengenceran 10 -1 , (b2)
Botol  Plastik  pengenceran  10 -2 ,  (b3)  Botol  Plastik  pengenceran  10 -3 ,  (d1)  Kantong  Plastik pengenceran 10 -1 , (d2) Kantong Plastik pengenceran 10 -2 , (d3) Kantong Plastik pengenceran 10 -3 .
Air susu ibu termasuk salah satu bahan yang sangat  mudah  ditumbuhi  bakteri  karena komposisi  gizi  karbohidrat,  vitamin,  mineral, protein, dan lemak yang cukup tinggi yang sangat menguntungkan untuk pertumbuhan mikroorganisme. Bakteri yang terkandung  pada ASI antara lain Lactobacillus spp., Staphylococcus spp., Bacillus spp. , Streptococcus
spp.,
Corynebacterium spp., Enterococcus spp.  ASI mengandung  bakteri  probiotik  yang  banyak dikenal termasuk dalam kelompok Bakteri Asam Laktat (BAL) (Damayanti, 2018). BAL mempunyai  manfaat  untuk  meningkatkan kualitas  dan  keamanan  bahan  pangan  melalui penghambatan
secara
alami terhadap mikroorganisme  yang  bersifat  patogen,  dan
menghasilkan  beberapa  komponen  antimikroba yaitu karbondioksida, asam organik (asam asetat, asam  laktat,  asam  format),  hidrogen  peroksida, dan  bakteriosin  yang  bersifat  antibakteri (Amezquita  &  Brashears,  2002).  Antibakteri merupakan  suatu  zat  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  atau  bahkan  dapat  mematikan bakteri  dengan  cara  mengganggu  metabolisme mikroba  yang  merugikan.  Sifat  antibakteri  oleh genus Lactobacillus mampu  menghambat pertumbuhan bakteri patogen golongan Enterobacteriaceae ( Salmonella sp., Escherichia coli , Shigella sp . ) ,  Staphylococcus  aureus ,  dan Bacillus cereus (Khikmah, 2015; Anggreani et al . , 2019). ASI juga mengandung bakteri non patogen yang berasal dari jalur endogen ibu (Fernandez et al ., 2013). Responden yang mengikuti kuesioner dalam  penelitian  ini  menggunakan  wadah penyimpanan  ASIP  yang  berjenis  botol  kaca sebanyak  dua  responden  dan  kantong  plastik sebanyak  tiga  responden.  Kondisi  ASIP  yang disimpan pada ketiga jenis wadah tersebut pada suhu  ruang  masih  dalam  keadaan  baik  karena berada  di  bawah  batas  jumlah  bakteri  yang terkandung  dalam  ASIP  yang  diizinkan  yaitu 1x105 CFU/ml (Arslanoglu et al. , 2010). Menurut Kelly  Bonyata, International  Board  Certified  of Lactation Consultant (IBCLC) penyimpanan ASIP pada suhu ruang dapat bertahan < 8jam (Monika, 2014).

## Kesimpulan
Variasi  wadah  penyimpanan  ASIP  tidak berpengaruh  terhadap  total  koloni  bakteri dengan nilai p-value 0,246 (P>0,05).

## Daftar Pustaka
Amezquita,  A.,  Brashears,  M.M.  (2002).
Competitive inhibition of Listeria monocytogenes in ready to eat products by lactic acid bacteria. Journal Food Prot. 65 , 316-325.
Anggreani,  Y.D.A.,  Mariani,  N.P.,  Okarini,  I.A. (2019). Fisikokimia dan mikrobiologi susu
kambing  peranakan  etawah  selama penyimpanan  suhu  ruang. Journal  of Tropical Animal Science, 7 (1), 9-20.
Arisman.  (2004). Gizi  dalam  Daur  Kehidupan . Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta.
Arslanoglu,  S.,  Bertino,  E.,  Tonetto,  P.,  Nisi,  G., Ambruzzi,  A.M.,  Biasini,  A.,  Profeti,  C., Spreghini,  M.R.,  Moro,  G.E.  (2010). Guidelines  for  the  establishment  and operation  of  a  donor  human  milk  bank. Journal  of  Maternal-Fetal  and  Neonatal Medicine . 23 (2), 1-20.
Chang,  Y.,  Chen,  C.,  Lin,  M.  (2012).  The Macronutrient in Human Milk Change after Storage  in  Various  Containers. Pediatrics and Neonatology . 53 , 205-209.
Damayanti, S. (2018). Pengaruh lama penyimpanan  Air  Susu  Ibu  (ASI)  terhadap jumlah  bakteri  Coliform .  Skripsi.  Fakultas Sains  dan  Teknologi  Universitas  Islam Negeri Alauddin Makasar.
Fernandez, L., Langa, S., Martin, V., Maldonado, A., Jimenez,  E.,  Martin,  R.,  Rodriguest,  J.M. (2013). Origin and potential roles in health and  disease. Journal  Pharmacologial
Research . 69, 1-10. Kementrian  Kesehatan  Republik  Indonesia. (2015). Rencana Strategis Progam Direktorat Jenderal Bina Gizi dan KIA.
Khikmah,  N.  (2015).  Uji  antibakteri  susu fermentasi      komersial  pada  bakteri patogen. Jurnal  Penelitian  Saintek , 20 (1), 45-52.
Monika,  F.B.  (2014). Buku  Pintar  ASI  dan Menyusui. Noura  Books  (PT  Mizan Publika). Jakarta.
Suardana,  I.W.  (2009). Higiene  Makanan .
Udayana University Press. Denpasar.