## 66 VOLUME 12 NOMOR 2 DESEMBER 2016
PENGARUH EKSTRAK DAUN LIDAH MERTUA ( Sansevieria trifasciata laurentii ) TERHADAP KADAR HEMOGLOBIN TIKUS PUITH JANTAN ( Rattus norvegicus strain wistar ) YANG DIINDUKSI TIMBAL PER-ORAL
Rif ’atul  Ifada 1 ,  Diah  Hermayanti 2 ,  Yuliono  Trika  Nur  Hasan 3
Fakultas  Kedokteran,  Universitas  Muhammadiyah  Malang, Jalan  Bendungan  Sutami  188A,  Malang,  65145
Email  :  faa_rifa@ymail.com

## ABSTRAK
Logam berat timbal yang masuk kedalam tubuh dalam waktu singkat dan jumlah yang banyak dapat menyebabkan keracunan  timbal  sub-akut.  Di  sisi  lain,  daun  Lidah  Mertua  ( Sansevieria  trifasciata  laurentii )  memiliki  kandungan pregnane glycoside dan  vitamin  C  sebagai  antioksidan  yang  mampu  mengikat  logam  berat  timbal.Tujuan  :  Mengetahui  pengaruh pemberian  ekstrak  daun  Lidah  Mertua  ( Sansevieria trifasciata  laurentii )  terhadap  kadar  hemoglobin  pada  tikus  putih  jantan ( Rattus norvegicus starin wistar ) yang telah diinduksi oleh timbal per-oral.Metode Penelitian : Penelitian ini menggunakan desain True  Experimental  Post  Test  Only  Group  Design .  Penelitian  ini  dilakukan  selama  15  hari  dengan  lima  kelompok  tikus,  yaitu kelompok tanpa perlakuan (K-), kelompok yang diinduksi timbal saja (K+), kelompok P1, P2, dan P3 yang diberi ekstrak daun  Lidah  Mertua  dengan  dosis  8,3;  41;  83  mg/kgBB/hari,  kemudian  dilakukan  induksi  timbal  menggunakan  larutan timbal asetat dosis 15 mg/100gBB/hari. Pengambilan sampel darah tikus melalui ventrikel kemudian dilakukan uji kadar hemoglobin menggunakan metode cyanomethemoglobin. Hasil Penelitian dan Diskusi  : Hasil penelitian 4 minggu didapatkan rerata hemoglobin kelompok K- adalah 12,98 g/dL, kelompok K+ adalah 13,18 g/dL, kelompok P1 adalah 12,16 g/dL, kelompok P2 adalah 12,64 g/dL, dan kelompok P3 adalah 12,96g/dL. Setelah diuji komparasi oneway ANOVA didapatkan nilai signifikansi 0,521 > p (0,05) yang berarti penelitian ini tidak terdapat perbedaan bermakna antara kadar hemoglobin pada seluruh kelompok.Kesimpulan : Pemberian ekstrak daun Lidah Mertua ( Sansevieria trifasciata laurentii ) tidak berpengaruh terhadap  peningkatan  kadar  hemoglobin  tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus  strain  wistar )  yang  diinduksi  timbal  per-oral.
Kata  Kunci  : Sansevieria  trifasciata  laurentii, Mother  in  Law  Tongue  Leaves,  plumbum,  hemoglobin  level.

## ABSTRACT
Metal plumbum that entry intro the body in short time and in subtantial amount can cause sub-acute lead poisoning. Meanwhile, Mother in Law Tongue Leaves (Sansevieria trifasciata laurentii) contained pregnande glycoside and vitamin C as antioxidant that can adsorb metal  plumbum.Objective  :  This  experiment  to  find  the  effect  of  Mother  in  Law  Tongue  Leaves  (Sansevieria  trifasciata  laurentii)  extract to hemoglobyn level in male rat blood (Rattus norvegicus  strain wistar) that induced by orally plumbum intervention.Methode : The method was  True  Experimental  Post  Test  Only Group  Design  for  15  days.  There  were  five  groups of  rats:  without  intervention  of  plumbum  and extract  (K-);  Pb-only  intervention  (K+),  group  P1,  P2,  and  P3  intervented  by  Mother  in  Law  Tongue  Leaves  (Sansevieria  trifasciata laurentii)  extract  for  each  group  sequentially  was  8.3;  41;  83  g/KgBB,  then  induced  by  plumbum  use  plumbum  acetate  solution  was  15 mg/100  gBB. Then, rat blood  from ventricle is tested by using cyanomethemoglobin methode for hemoglobin level.Result and Discuss :  The experiment result showed mean hemoglobin from K- group was 12.98 g/dL,  K+ group was 13.18 g/dL, P1 group was 12.16 g/dL, P2 group was 12.64 g/dL, and P3 group was 12.96 g/dL. After that, tested with oneway ANOVA was 0,521 > p (0,05), it was mean that  there  was  not  sigficant  different  among  hemoglobyn  level  in  every  group.Conclusion  :  Giving  of   Mother  in  Law  Tongue  Leaves (Sansevieria  trifasciata  laurentii)  didn’t  affect  to  increase  hemoglobin  level  of   male  rats  (Rattus  norvegicus  strain  wistar)  induced  by  orally plumbum  intervention.
Keywords  : Sansevieria  trifasciata  laurentii, Mother  in  Law  Tongue  Leaves,  plumbum,  hemoglobin  level.

## PENDAHULUAN
Timbal  atau  disebut  juga  sebagai  timah hitam  merupakan  salah  satu  logam  berat  beracun dan  berbahaya.  Timbal  banyak  ditemukan  sebagai pencemar dan cenderung mengganggu kelangsungan hidup  organisme  perairan.  Timbal  yang  masuk  ke dalam  perairan  dapat  berasal  dari  limbah  industri kimia,  industri  percetakan  serta  industri  yang menghasilkan  logam  dan  cat.  Sehingga akibat  dari pencemaran perairan ini dapat mengakibatkan timbal terakumulasi pada ikan. Disisi lain, ikan merupakan salah  satu  dari  makanan  manusia  sehingga  timbal yang  terakumulasi  pada  ikan  dapat  terdistribusi  ke tubuh manusia. (Aunurohim, Yulaipi S, 2013) Sehingga, sekitar  65%  timbal  dapat  masuk  ketubuh  manusia melalui makanan, 20% melalui air, serta 15% melalui udara. (Batubara  I,  Latifah  K  D,  Lela  M  Y,  2014) Kriteria diagnosis peningkatan kadar timbal dalam  darah  untuk  orang  dewasa  (³16  tahun) menurut Clinical  Laboratory Improvement  Amendments (CLIA) adalah  ³5mg/dL  (0,24  mmol/L). 3 CDC, 2016  Kadar  timbal  yang  melebihi  Nilai  Ambang Batas  (NAB)  dapat  menyebabkan  gangguan  pada tubuh  manusia,  salah  satunya  gangguan  pada hemoglobin.  Selain  itu,  timbal  di  dalam  darah merupakan radikal bebas yang mengakibatkan kadar ROS  ( Reative  Oxygen  Species )  meningkat  sehingga dapat  merusak  membran  sel  yang  mengandung lipid salah satunya sel darah merah. Pada kerusakan membran  sel  darah  merah  dapat  menyebabkan hemolisis dan penurunan kadar Hb. 4 Djokomoejanto, Ag  S,  Iswari  S  et  al,  2012  Selain  itu,  timbal  juga dapat  menghambat  enzim  ALAD  (Asam  ä- Aminolevulinat  Dehidrase)  dan ferrochelase pada proses pembentukan heme. (Hashemian A H, Haji A Y,  2013,Lubis  B,  Flora  M  P,  Nelly  R  et  al,  2013) Tindakan  medis  untuk  mengurangi  efek toksik dari timbal adalah dengan terapi kelasi. Agen kelasi  hingga  saat  ini  memiliki  harga  yang  sangat mahal,  tidak  tersedia  secara  kontinyu,  tidak  dapat diperoleh  tanpa  resep  dokter,  dan  dalam  jumlah yang  mencukupi.  Berdasarkan  kendala  tersebut, terapi kelasi pada manusia yang mengalami keracunan timbal  tidak  ditangani  dengan  cepat  dan  tepat. Sehingga  penundaan  terapi  dapat  berakibat  fatal bahkan sampai terjadi kematian. (Andriyanto, Aulia A M,  Ietje  W  et  al,    2014) Lidah  Mertua  atau  dikenal  dengan  nama ilmiah Sansevieria  trifasciata  laurentii memiliki kemampuan  menyerap  zat  polutan  berbahaya
dikarenakan  Lidah  Mertua  memliki  bahan  aktif Pregnane Glikoside , yang berfungsi untuk mereduksi polutan  menjadi  asam  organik,  gula  dan  asam amino, yang tidak berbahaya bagi manusia (Dewi Y S, Indri H, 2012), Selain itu juga memiliki antioksidan berupa  vitamin  C  dan  vitamin  E  yang  dapat berpengaruh  terhadap  kuantitas  hemoglobin  dan efektif   mengatasi  radikal  bebas  timbal. (Cahyati  Y, Didik  R  S,  Roni  P  et  al,  2014) Pada  penelitian  yang  telah  dilakukan sebelumnya  secara in-vitro terhadap  limbah  cair timbal  dengan  konsentrasi  0,1  M  sebanyak  5ml diperoleh  hasil  bahwa  ekstrak  daun  Lidah  Mertua dengan  kepekatan  100%  sebanyak  5,5ml  dapat menyerap  >80%  timbal  yang  terkandung  di dalamnya. (Kurniawan A F, Amirul M, Sri E L et al, 2013)

## TINJAUAN  PUSTAKA
Lidah  Mertua
Klasifikasi Tanaman Lidah Mertua: Kingdom : Plantaeymax Subkingdom : Tracheobionta Super Divisi : Spermathophyta Divisi : Magnoliophyta Sub Divisi : Angiospermae Kelas : Monocotyledonae Sub-kelas : Lilidae Ordo : Liliales Famili : Agavaceae Genus : Sansevieria Jenis : Sansevieria trifasciata . Daun  Lidah  Mertua  mengandungan mengandung  bahan  aktif pregnane  glikoside . (Dewi  Y S,  Indri  H,  2012) Selain  itu,  Lidah  Mertua  juga mengandung senyawa lain  yaitu carotenoids, phytates, saponins, dan tannins .  Dalam  penelitian  lain  juga disebutkan  bahwa  Lidah  Mertua  banyak mengandung vitamin C. Satu tanaman Lidah Mertua dewasa yang berdaun 4-5 helai dapat menyegarkan udara  dalam  ruangan  seluas  20m 2 .
Timbal Timbal  atau  timah  hitam  (Pb)  adalah kelompok logam berat golongan IVA dalam sistem periodik  unsur  kimia  yang  memiliki  nomor  atom 82  dengan  berat  atom  207,2  dan  memiliki  berat jenis  11,4/L.  Timbal  juga  memiliki  empat  bentuk isotop  yang  berwarna  kebiru-biruan  atau  abu-abu keperakan dengan titik leleh pada 327,5°C dan titik

## 68 VOLUME 12 NOMOR 2 DESEMBER 2016
didih pada 1.740°C di atmosfer. (Lubis B, Flora M P,  Nelly  R  et  al,  2013) Timbal  yang  diserap  oleh  tubuh,  99% timbal  akan  terikat  pada  eritrosit,  sehingga  kadar timbal  dapat  diperiksa melalui  darah (Lubis,  Flora, Nelly  et  al,  2013) .  Timbal  yang  berada  di  dalam darah  dapat  mengganggu  sistem hemopitik pada sintesa heme dengan  dua  mekanisme,  yakni menggangu penyatuan Glycine dan Succinyl Co-Enzyme A melalui  depresi  terhadap    d-aminolevulinat dehidrase  (d-ALAD)  serta  mengganggu  enzim Ferrochetalase yang  berfungsi  melekatkan  besi  (Fe) terhadap protoporphyrin. Akibatnya, pembentukan heme  menurun. (Lubis B,  Flora M  P,  Nelly R  et al, 2013) Pemberian timbal asetat dapat menurunkan aktivitas  enzim  katalase  yang  bekerja  untuk menetralisir  oksidan  hidrogen  peroksida  (H 2 O 2 ). H 2 O 2 merupakan salah satu senyawa Reative Oxygen Species (ROS) yang dapat menyebabkan peroksidasi lipid  dari  asam  lemak  tak  jenuh  dengan  tiga  atau lebih  ikatan  rangkap.  Sumber  utama  ROS  adalah dari hasil respirasi seluler dan proses metabolisme. Sedangkan  peroksida  lipid  merupakan  hasil  reaksi yang  dicetuskan  oleh  logam  timbal  dalam  bentuk ion  dan  berfungsi  untuk  memasok  radikal  bebas sehingga terjadi reaksi peroksida berikutnya. Radikal lipid  akan  bereaksi  dengan  oksigen  membentuk radikal  peroksi-lipid  dan  lipid  peroksida  serta malondialdehyde (MDA) yang larut dalam air dan dapat  dideteksi  dalam  darah.
Selain  itu,  ROSmempunyai  peran  krusial pada proses patologis. ROS berperan dalam fungsi imun, tiroid, kognitif dan modulasi sensor nutrien dan  umur.  ROS  juga  berimplikasi  pada  beberapa penyakit antara lain cancer , penyakit kardiovaskuler (termasuk  hipertensi),  penyakit  saraf,  gangguan pernapasan  dan  penyakit  psikiatrik.  Peningkatan ROS  dan  MDA  dapat  menyebabkan  kerusakan membran  sel  yang  mengandung  senyawa  lipid termasuk  eritrosit.  Peroksidasi  membran  eritrosit menyebabkan hemolisis sehingga terjadi penurunan kadar Hb. (Djokomoejanto, Ag S, Iswari S et al, 2012) Akumulasi  timbal  dalam  tubuh  dapat menyebabkan  keracunan  timbal  akut  dan  kronis. Keracunan  timbal  akut  dan  subakut  disebabkan dengan  paparan  dosisi  yang  relatif   tinggi,  waktu paparan  yang  relatif  singkat  dan  efek  yang ditimbulkan terjadi secara dramatis, seperti kematian tiba-tiba kram perut yang parah, anemia, perubahan perilaku,  dan  kehilangan  nafsu  makan.  Sedangkan
untuk keracunan timbal kronik disebabkan paparan timbal  yang  sedikit  demi  sedikit  dalam  jangka waktu  yang  lama  serta  gejala  yang  ditimbulkan tidak  spesifik  pada  hampi  semua  sistem  dalam tubuh. (Andriyanto, Aulia A M, Ietje W et al,   2014)
Hemoglobin Hemoglobin  (Hb)  merupakan  komponen utama eritrosit yang berfungsi mentransport oksigen dan  karbondioksida. 18 Sintesis  Hb  dimulai  dari proeritoblas  dan  berlanjut  sampai  retikulosit membentuk sel darah merah (eritrosit). Tahap dasar pembentukan  Hb  dimulai  dari  suksinil-KoA  yang telah dibentuk dalam siklus Krebs berikatan dengan glisin untuk membentuk molekul pirol. Kemudian, dari  empat  pirol  bergabung  untuk  membentuk protoporfirin  IX  yang selanjutnya akan  bergabung dengnan  besi  untuk  membentuk heme. Akhirnya, setiap  molekul heme bergabung  dengan  rantai polipeptida  panjang  atau  disebut  dengan globin sehingga  menjadi  rantai hemoglobin. Empat  rantai hemoglobin  akan  berikatan  longgar  untuk membentuk  molekul  hemoglobin  yang  lengkap.
Pengaruh  Ekstrak  Daun  Lidah  Mertua terhadap  Kadar  Hemoglobin Tanaman Daun Lidah Mertua mengandung senyawa aktif pregnane glikosid yang berfungsi untuk mereduksi polutan menjadi asam organik, gula dan asam  amino,  yang  tidak  berbahaya  bagi  manusia. Adapun polutan yang direduksi sekitar 107 polutan diantaranya ada asap rokok, limbah perak (Ag) dan timbal  (Pb).  Sedangkan,  enzim  ALA  dehidrase merupakan enzim yang peka terhadap inhibisi oleh timbal.  Dengan metabolic  breakdown yang  dilakukan oleh senyawa  aktif pregnane  glikosid dianggap  dapat mereduksi timbal di dalam tubuh. Sehingga enzim ALA dehidrase tidak terinhibisi dan produksi heme kembali  baik. (Dewi  Y  S,  Indri  H,  2012) Selain  itu,  antioksidan  yang  terdapat  di dalam daun Lidah Mertua dapat menangkap radikal bebas yang ada di dalam tubuh. Beberapa senyawa antioksidan  dapat  ditemui  pada  vitamin  C  dan  E yang  dapat  berpengaruh  terhadap  kuantitas hemoglobin  dan  efektif  mengatasi  radikal bebas.Vitamin C merupakan antioksidan kuat yang bekerja dengan mendonorkan elektron ke senyawa logam  serta  menyumbangkan  elektron  ke  dalam reaksi  biokimia  intraseluler  dan  ektraseluler  serta mampu  menghilangkan  senyawa  oksigen  reaktif  di dalam sel. Sedangkan vitamin E merupakan vitamin
yang  larut  dalam  lemak  dan  berperan  penting dalam  mengatasi  kerusakan  radikal  bebas.  Peran vitamin  E  adalah  mengendalikan  peroksida  lemak dengan menyumbangkan hidrogen dan menghambat aktivitas  yang  dilakukan  oleh  peroksida  dalam perusakan  sel  akibat  radikal  bebas.
Kombinasi  vitamin  C  dan  E  dosis  tinggi sebagai  antioksidan  dapat  menghentikan  reaksi berantai  radikal  bebas  dengan  mengikat  radikal bebas yang mempengaruhi sumsum tulang sehingga efek  penurunan  sistem  hemopoetik  dapat  dicegah dan mencegah kerusakan sel-sel normal. Vitamin C dan  E  bekerja  secara  sinergis,  saling  menetralkan produk teroksidasi masing-masing vitamin. Vitamin C berperan penting dalam mempertahankan jumlah vitamin E di dalam sel dengan cara mendaur ulang radikal  vitamin  E  menjadi  bentuk  yang  tereduksi dan kerusakan DNA karena teroksidasi oleh vitamin C  juga  dapat  dihambat  oleh  vitamin  E.

## BAHAN  DAN  METODE
Jenis  Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian True Experimental dengan  menggunakan  metode The Post  Test Only  Control  Group  Design.

## Lokasi  dan  Waktu  Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan selama 4 minggu di  Laboratorium  Biomedik  Fakultas  Kedokteran Universitas  Muhammadiyah  Malang  dan  di Laboratorium Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya.
Populasi
Populasi  dalam  penilitian  ini  adalah  tikus putih jantan (Rattus norvegicus strain wistar) .
Sampel
Sampel  yang  digunakan  adalah  tikus  putih jantan (Rattus  norvegicus  strain  wistar) dengan  berat badan  antara  180  –  240  gram  dan  berusia  2  –  3 bulan  dengan  kondisi  sehat  yang  ditandai  dengan gerakan  aktif  serta  mata  yang  jernih.

## Alat  Penelitian
Alat pembuatan ekstrak daun Lidah Mertua, antara  lain:  blender,  timbangan  analitik,  corong, erlenmeyer, gelas  ukur, oven, labu ukur, rotavator, ayakan mesh 200.
Alat  pembuatan  larutan  timbal,  antara  lain: tabung  labu,  timbangan,  botol,  batang  pengaduk.
Alat pemeliharaan tikus, antara lain: kandang tikus, penutup kandang dari anyaman kawat, botol air, timbangan, tempat makan tikus, sarung tangan.
Alat  pembedahan  tikus,  antara  lain:  gunting bedah,  pinset,  tempat    darah  (botol  sediaan), handscoon, pengait jaringan, jarum, spuit injeksi 3 ml.
Alat analisis hemoglobin yaitu sprektofotometer.
Alat lain, antara lain: sonde modifikasi, kamera digital, kertas, alat tulis, kalkulator.

## Bahan  Penelitian
Bahan pembuatan ekstrak daun Lidah Mertua, antara  lain:  daun  Lidah  Mertua,  kertas  saring, metanol.
Bahan pembuatan larutan timbal, antara lain: kristal  timbal  asetat  (Pb(CH 3 COO) 2 )  dan  aquades. Bahan  perawatan  tikus,  antara  lain:  pakan ternak,  air  minum,  sekam.
Bahan analisis hemoglobin, antara lain: reagen cyanomethemoglobin.
Pembuatan  Ekstrak  Daun  Lidah  Mertua Daun  Lidah  Mertua  ( Sansevieria  trifasciata laurentii ) dicuci bersih dibawah air mengalir, ditiriskan, dipotong-potong  dan  dikeringkan  dengan  cara diangin-anginkan  tanpa  terkena  sinar  matahari langsung  selama  4  jam.  Selanjutnya,  dikeringkan dalam  oven  pada suhu  50°C kemudian  dihaluskan menggunakan  blender  dan  diayak  menggunakan ayakan  mesh  200  sehingga  diperoleh  serbuk simplisia.  Serbuk  simplisia  daun  Lidah  Mertua sebanyak 50 gram direfluks dengan metanol (1:10) selama  30  menit.  Sari  metanolik  dipisahkan  dari ampas dan diuapkan menggunakan rotavator hingga kental.

## Penentuan Dosis Ekstrak Daun Lidah Mertua
Dosis  ekstrak  daun  Lidah  Mertua  yang digunakan  pada  penelitian ini  mengikuti  penelitian sebelumnya  yang  dilakukan  oleh  Laimeheriwa, Adeanne,  Widya  tahun  2015  pada  penelitiannya yang  berjudul  “Uji  Efek  Ekstrak  Etanol  Daun Lidah  Mertua  terhadap  Penurunan  Kadar  Gula

## 70 VOLUME 12 NOMOR 2 DESEMBER 2016
Darah  Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar  yang diinduksi  Sukrosa”  dengan  dosis  8,3  mg/kgBB dan  83  mg/kgBB,  serta  di  ambil  dosis  tengah diantara  keduanya  41  mg/kgBB.

## Pembagian  Kelompok Tikus
a.  Kelompok  kontrol  negatif  (K-)  :  diberi  pakan standar tanpa diberikan larutan timbal per-oral serta  tanpa  pemberian  ekstrak  daun  Lidah Mertua  selama  15  hari.
b.  Kelompok  kontrol  positif   (K+)  :  diberi  pakan standar  dan  diberi  larutan  timbal  15mg/100  g BB per-oral dengan sonde tanpa diberi ekstrak daun  Lidah  Mertua  selama  15  hari.
c.  Kelompok  Perlakuan  1  (P1)  :  diberi  pakan standar dan ekstrak daun Lidah Mertua dengan dosis  8,3  mg/kgBB  dan    dilanjutkan  dengan pemberian larutan timbal 15mg/100 g BB per- oral  dengan  sonde  selama  15  hari.
d.  Kelompok  Perlakuan  2  (P2)  :  diberi  pakan standar dan ekstrak daun Lidah Mertua dengan dosis  41  mg/kgBB  dan    dilanjutkan  dengan pemberian larutan timbal 15mg/100 g BB per- oral  dengan  sonde  selama  15  hari.
e.  Kelompok  Perlakuan  3  (P3)  :  diberi  pakan standar dan ekstrak daun Lidah Mertua dengan dosis  83  mg/kgBB  dan    dilanjutkan  dengan pemberian larutan timbal 15mg/100 g BB per- oral  dengan  sonde  selama  15  hari.

## Persiapan  Hewan  Coba
Tiga  puluh  ekor  tikus  jantan  dipilih  dan dipelihara  selama  1  minggu  sebagai  tahap penyesuaian terhadap lingkungan. Pakan tikus yang diberikan  adalah  pakan  standar  dan  minum diberikan  secara  ad  libitum.  Selain  itu,  pada  masa adaptasi  ini  dilakukan  penimbangan  berat  badan tikus. 26
Pemberian  Ektrak  Daun  Lidah  Mertua Ekstrak daun Lidah Mertua diberikan selama 15 hari melalu sonde modifikasi. Dosis pemberian ekstrak  daun  Lidah  Mertua  yang  diberikan  yaitu:
Dosis I :  8,3  mg/kgBB Dosis II :  41  mg/kgBB Dosis III :  83  mg/kgBB

## Pemberian Larutan Timbal
Pemberian paparan timbal dilakukan dengen mencekok  tikus  percobaan  dengen  timbal  asetat yang sebelumnya telah dibuat dan disiapkan selama 15 hari dengan dosis 15mg/100 g BB secara sonde pe-oral  pada  semua  kelompok  kecuali  kelompok kontrol  negatif. 26

## Pembedahan  Hewan  Coba
Pada tahap ini dilakukan dengan memasukkan hewan coba ke dalam toples kaca yang didalamnya telah diletakkan kapas yang mengandung kloroform. Pembiusan dilakukan satu persatu dengan harapan pembiusan  dapat dilakukan  secara inhalasi  dengan dosis  eter  0,67mL/hewan  coba  selama  ±60  detik. Selanjutnya,  ketika  hewan  coba  sudah  teranastesi yang  ditandai  dengan  tidak  adanya  respon  nyeri, diletakkan  pada  meja  paraffin  dan  keempat  kaki tikus difiksasi menggunakan jarum pentul. Kemudian tikus dibedah menggunakan gunting dari abdomen hingga setinggi leher, kemudian faring dipenggang dengan  pinset  anatomis  dan  diiris  menggunakan scapel . Setelah ditemukan jantung, ambil darah dari ventrikel  kiri  hewan  coba  dengan  menggunakan spuit 5 cc.
Hewan  coba  yang  telah  dibedah,  pastikan tidak mengalami recovery atau denyut nadinya sudah berhenti. Selanjutnya, dilakukan proses penguburan dengan cara tikus dibungkus menggunakan polybag , lalu dimasukkan kedalam lubang pada tanah kering dengan  kedalaman  1  meter  dan  jarak  250  meter dari  sumber  air  serta  masing-masing  lubang  tidak lebih dari sepuluh ekor tikus.

## Pemeriksaan Kadar  Hemoglobin
Pengukuran kadar Hemoglobin menggunakan metode cyanomethemoglobin. Darah sebanyak  20mL  dicampur  ke  dalam  5mL  reagen cyanomethemoglobin  lalu  dihomogenkan.  Nilai absorbansnya  dibaca  dengan  menggunakan spektrofotometer  dengan  panjang  gelombang  540 nm.  Perhitungan  kadar  hemoglobin  dilakukan dengan  mengalikan  nilai  absorbans  dengan  368  g Hb/100mL. 26

## HASIL  DAN  PEMBAHASAN
Berdasarkan penelitian yang dilakukan selama 4 minggu dengan menggunakan tikus putih jantan ( Rattus  norvegicus  strain  wistar )  pada  lima  kelompok
PENGARUH EKTRAK DAUN LIDAH MERTUA 71
yaitu  kontrol  negatif  (K-),  kontrol  positif  (K+) yang hanya di berikan larutan timbal asetat 15mg/ 100gBB, dosis ekstrak daun Lidah Mertua 8,3 mg/ kgBB  (P1),  41  mg/kgBB  (P2),  dan  83  mg/kgBB (P3)  serta  dilanjutkan  pemberian  larutan  timbal 15mg/100gBB  didapatkan hasil kadar hemoglobin (Hb) sebagai  berikut.
Tabel  5  Hasil  Kadar  Hemoglobin  Tikus Putih
Berdasarkan tabel diatas diatas terlihat bahwa rerata kadar  hemoglobin  yang  paling  tinggi  adalah kelompok  K+  yaitu  13,18  g/dL  dan  rerata hemoglobin  yang  paling  rendah  adalah  kelompok P1  yaitu  12,16  g/dL  Berdasarkan  hasil  tersebut apabila dimasukkan kedalam grafik akan didapatkan bentuk sebagai  berikut.
Gambar  5  Grafik  Rerata  Kadar  Hemoglobin Tikus
Berdasarkan  grafik  diatas,  diketahui  bahwa pemberian  larutan  timbal  asetat  pada  kelompok K+  didapatkan  rerata  kadar  hemoglobin  13,18  g/ dL, dimana rerata tersebut lebih tinggi dibandingkan rerata  dari  kelompok  K-  yaitu  12,98  g/dL.  Hal tersebut tidak sesuai dengan harapan peneliti bahwa apabila timbal berada di dalam darah maka terjadi gangguan  sistem hemopitik pada  sintesa heme serta mengganggu  enzim Ferrochetalase yang  berfungsi melekatkan  besi  (Fe)  terhadap protoporphyrin yang berakibat  pembentukan  heme  menurun.
Penelitian sebelumnya tentang “Potensi Putih Telur  Bebek  dalam  Mengatasi  Keracunan  Timbal Subakut” disebutkan bahwa pemberian timbal asetat sebesar  15mg/100g  BB  pada  tikus  putih  putih jantan ( Rattus norvegicus strain wistar ) selama 15 hari menimbulkan gejala klinis berupa diare dan letargi. Tetapi  dalam  penelitian  ini  gejala  klinis  diare  dan letargi  tidak teramati oleh peneliti, hanya saja ada kemungkinan  bahwa  dalam  penlitian  ini  terjadi gejala  klinis  yang  sama  yang  dapat  mengakibatkan terjadinya  dehidrasi  Pada  kondisi  dehidrasi  terjadi penurunan  volume  total  cairan  tubuh  sehingga terjadi  pula  penurunan  volume  cairan  intrasel  dan ekstrasel,  salah  satunya  penurunan  pada  plasma darah.  Dari  penjelasan  tersebut  masih  ada kemungkinan bahwa penurunan kadar hemoglobin tetap terjadi tetapi akibat penurunan plasma darah karena  dehidrasi  sehingga  menutupi  kondisi penurunan  hemoglobin  akibatnya    nampak  rerata kadar  hemoglobin  melebihi  kelompok  K-.
Hasil  uji  homogenitas  dalam  penelitian  ini didapatkan hasil tidak homogen, hal ini juga dapat menjadi salah satu penyebab tingginya rerata kadar hemoglobin  dari  kelompok  K+.  Data  bersifat tidak homogen bisa disebabkan dari berbagai faktor, baik faktor endogen maupun faktor eksogen. Faktor eksogen  adalah  berupa  kondisi  lingkungan  tikus sebelum  menjadi  hewan  coba  yang  mungkin menyebabkan kadar Hb dalam masing-masing tikus tidak  sama. Fakor  eksogen  ini  telah  diminimalisir oleh  peneliti  dengan  memakai  tikus  dengan lingkungan  yang  sama  dari  peternakan  tikus  yang sama.  Selain  itu,  kemampuan  adaptasi dan  asupan nutrisi  dari  makanan  dan  minuman  tikus  juga mempengaruhi  kemampuan  metabolisme  untuk menangkal  efek  zat  radikal  bebas. Faktor  ini  juga telah diminimalisir oleh peneliti dengan mengontrol makanan  dan  minuman  serta  menempatkan  tikus dalam  kondisi  lingkungan  yang  sama,  baik  dalam
Kelo mpok Jumlah Kadar Hb Tikus (g/dL) Rerata  SD (g/dL) 1 2 3 4 5 K- 12,8 12, 8 12, 6 14, 7 12 12,98  1,016 K+ 14,5 11, 9 12, 5 14, 9 12, 1 13,18  1,411 P1 13,6 11, 2 13, 3 12, 5 10, 2 12,16  1,436 P2 12,5 11, 8 13, 2 12, 2 13, 5 12,64  0,702 P3 14,1 13, 1 12, 6 12, 5 12, 5 12,96  1,100

## 72 VOLUME 12 NOMOR 2 DESEMBER 2016
cahaya,  suhu,  maupun  kelembaban.  Sedangkan untuk  faktor  endogen  antara  lain,  kemampuan absorbsi zat aktif daun Lidah Mertua pada saluran pencernaan  tikus,  kemampuan  absorbsi  terhadap larutan  timbal  asetat,atau  senyawa  antioksidan endogen. Namun,  untuk  faktor  endogen  ini  tidak dapat  diminimalisir  oleh  peneliti,  sehingga  diduga menjadi  penyebab  data  bersifat  tidak  homogen.
Pada pemberian ekstrak daun Lidah Mertua ( Sansevieria  trifasciata  laurentii )  pada  dosis  8,3  mg/ kgBB  pada  kelompok  P1  didapatkan  rerata  kadar hemoglobin 12,16  g/dL, dosis  41 mg/kgBB  pada kelompok P2 didapatkan rerata kadar hemoglobin 12,64  g/dL,  dan  dosis  83  mg/kgBB  pada kelompok P3 didapatkan rerata kadar hemoglobin 12,96 g/dL. Dari hasil tersebut dapat dilihat bahwa terjadi peningkatan kadar hemoglobin pada masing- masing  kelompok  meningkat  sesuai  penambahan dosis ekstrak daun Lidah Mertua ( Sansevieria trifasciata laurentii ),  hal  ini  sesuai  dengan  harapan  peneliti bahwa  dengan  pemberian  ekstrak  daun  Lidah Mertua  ( Sansevieria  trifasciata  laurentii )  yang mengandung  senyawa  aktif pregnane  glikosid yang mampu  mereduksi  polutan  serta  kandungan antioksidan  seperti  vitamin  C  dan  E  yang  dapat berpengaruh  terhadap  kuantitas  hemoglobin  serta dapat  mengatasi  radikal  bebas. Namun,  jika dibandingkan dari masing-masing rerata kelompok P1,  P2,  dan  P3  dengan  rerata  kelompok  K+ didapatkan  rerata  kelompok  pemberian  ekstrak Lidah  Mertua  ( Sansevieria  trifasciata  laurentii )  masih lebih rendah dibandingkan dengan rerata kelompok K+.  Hal  ini  diduga  disebabkan  pengaruh  dari ekstrak  daun  Lidah  Mertua  ( Sansevieria  trifasciata laurentii )  yang  mereduksi  polutan  timbal  sebelum mengakibatkan gejala  klinis  berupa dehidrasi yang dapat  menutupi  penurunan  hemoglobin,  sehingga tikus  tersebut  benar-benar  mengalami  penurunan hemoglobin.  Selain  itu,  kandungan  ekstrak  daun Lidah  Mertua  ( Sansevieria  trifasciata  laurentii )    juga membantu  dalam  memperbaiki  gangguan  sistem hemopitik pada sintesa heme serta enzim Ferrochetalase yang  berfungsi  melekatkan  besi  (Fe)  terhadap protoporphyrin yang diakibatkan oleh timbal sehingga seiring  kenaikan  dosis ekstrak daun Lidah  Mertua ( Sansevieria trifasciata laurentii ) terjadi pula peningkatan kadar  hemoglobin.
Hasil  uji  parametrik One  Way  ANOVA didapatkan  nilai  signifikasi  0,521  >  p  (0,05)  yang berarti  bahwa  dalam  penelitian  ini  tidak  terdapat
perbedaan  bermakna  antara  kadar  hemoglobin tikus putih jantan ( Rattus norvegicus strain wistar ) pada seluruh kelompok. Padahal, dari olahan data primer didapatkan bahwa pada  kelompok P1,  P2, dan  P3 terjadi peningkatan kadar hemoglobin pada masing- masing  kelompok  meningkat  sesuai  penambahan dosis ekstrak daun Lidah Mertua ( Sansevieria trifasciata laurentii ), namun peningkatan ini tidak sejalan dengan hasil statistik yang didapatkan hasil tidak bermakna. Hal  ini  diduga  disebabkan  karena  rentang  dosis daun  Lidah  Mertua  ( Sansevieria  trifasciata  laurentii ) yang digunakan pada penelitian ini terlalu sempit.
Berdasarkan  olahan  data  primer  yang  telah dilakukan,  penelitian  ini  memiliki  beberapa kelemahan  dan  keterbatasan,  diantaranya  adalah kelemahan peneliti yang tidak memperhatikan adanya gejala klinis pada tikus putih jantan ( Rattus norvegicus strain  wistar )  berupa  diare  dan  letargi  yang  bisa menyebabkan  penurunan  hemoglobin  tersamar akibat  penurunan  plasma  darah  akibat  dehidrasi. Selain itu, kelemahan dan keterbatasan penelitian ini adalah  dosis  timbal  yang  diberikan  terlalu  sedikit sehingga efek penurunan hemoglobin hanya sedikit serta rentang dosis yang digunakan pada penelitian ini terlalu sempit dan belum memberikan hasil yang bermakna terhadap peningkatan kadar hemoglobin tikus putih jantan ( Rattus norvegicus strain wistar ).
Dari hasil analisis data yang diperoleh, maka hipotesis tentang pengaruh pemberian ekstrak daun Lidah Mertua ( Sansevieria trifasciata laurentii ) terhadap kadar hemoglobin tikus putih jantan ( Rattus norvegicus strain  wistar )  yang  diinduksi  timbal  per-oral  adalah tidak terbukti. Pengaruh ekstrak daun Lidah Mertua ( Sansevieria  trifasciata  laurentii )  pada  penelitian  ini berupa  pencegahan  efek  timbal  terhadap pembentukan  hemoglobin  yang  diperankan  oleh pregnane  glycosid dan  vitamin  C  yang  terkandung dalam  ekstrak  daun  Lidah  Mertua  ( Sansevieria trifasciata  laurentii )  tidak  menimbulkan  perbedaan yang bermakna pada peningkatan kadar hemoglobin tikus  putih  jantan  ( Rattus  norvegicus  strain  wistar ). Namun,  masih  diperlukan  penelitian  lebih  lanjut tentang peningkatan pemberian dosis timbal asetat yang  diberikan,  variasi  dosis  ekstrak  daun  Lidah Mertua( Sansevieria trifasciata laurentii )  dengan rentang yang lebih luas serta dosis toksik dari ekstrak daun Lidah  Mertua  ( Sansevieria trifasciata laurentii ).

## KESIMPULAN  DAN  SARAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan  pada penelitian  ini  dapat  diambil  kesimpulan  sebagai berikut:  Pemberian  ekstrak  daun  Lidah  Mertua ( Sansevieria trifasciata laurentii ) tidak pengaruh terhadap peningkatan  kadar  hemoglobin  tikus  putih  ( Rattus norvegicus  strain  wistar )  yang  diinduksi  timbal  per- oral.  Tidak  ditemukan  dosis  efektif  ekstrak  daun Lidah  Mertua  ( Sansevieria  trifasciata  laurentii )  yang berpengaruh  terhadap  kadar  hemoglobin  akibat keracunan  timbal.  Peningkatan  rerata  kadar hemoglobin  yang  terjadi  pada  kelompok  yang mendapat  ekstrak  daun  Lidah  Mertua  ( Sansevieria trifasciata laurentii ) dengan dosis 8,3 mg/kgBB sebesar 12,16 g/dL, dengan dosis 41 mg/kgBB didapatkan hasil rerata kadar hemoglobin sebesar 12,64 g/dL, serta  pada  dosis  83  mg/kgBB  didapatkan  hasil rerata  kadar  hemoglobin  sebesar  12,96g/dL.
Berdasarkan  kesimpulan  yang  telah dikemukakan  maka  diberikan  saran-saran  yang dipergunakan dalam mengadakan perbaikan di masa yang  akan  datang,  yaitu  sebagai  berikut:  Perlu dilakukan penelitian pendahuluan tentang pengaruh timbal terhadap kadar hemoglobin tikus putih jantan ( Rattus  novergicus  strain  wistar ).  Perlu  dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai dosis ekstrak daun Lidah Mertua ( Sansevieria trifasciata laurentii ) dengan rentang  terapi  yang  lebih  lebar  sertavariasi  dosis yang  lebih  beragam  dan  konsisten  untuk  mencari dosis  optimal  untuk  meningkatkan  kadar hemoglobin darah tikus putih jantan ( Rattus novergicus strain wistar )  yang diinduksi timbal  secara per-oral. Perlu dilakukan penelitian tentang dosis toksik dari ekstrak  daun  Lidah  Mertua  ( Sansevieria  trifasciata laurentii ).

## DAFTAR  PUSTAKA
Adawiyah  A  R,  Nia  D  A,  Raisha  S  et  al,  2013, Panda Sansevieria (Pengharum Ruangan Anti Debu dan Asap Rokok dengan Sistem Penetralsir Sirkulasi Udara), Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa,  vol.  3  no. 1,  hal.  35  –  38.
Alexandru  I,  2011, Experimental  Use  of  Animals  in Research Spa, Balneo-Research Journal, vol. 2 no.  1,  hal.  65  –  69.
Amin L Z, 2015, Tatalaksana Diare Akut , Continuing Medical  Education,  vol.  42  no.  7,  hal.  504- 508.
Ambarwanto  S  T,  Nurjazuli,  Mursid  R,  2015, Hubungan Paparan Timbal dalam Darah  dengan Kejadian  Hipertensi  pada  Pekerja  Industri Pengecoran  Logam  di  Ceper  Klaten  tahun  2015 , Jurnal Kesehatan Lingkungan Indonesia, vol. 14  no.  2,  hal.  35  –  39.
Aminullah  Y,  Neni  S,  Wiratno,  2012, Pengaruh Kombinasi Vitamin C dan E Dosis Tinggi terhadap Sistem  Hematopoetik  Penderita  Kanker  Kepala dan  Leher  yang  Mendapat  Kemoterapi  Cisplatin , Medica Hospitalia, vol.  1 (2), hal.  89 – 94. Andriyanto,  Aulia  A  M,  Ietje  W  et  al,    2014,
Kemampuan berbagai Putih Telur Unggas sebagai Kelator dalam Mengatasi Keracunan Logam Berat Timbal, Jurnal  Veteriner,  vol.  15  no.3,  hal. 406  –  410.
Asterina,  Endrinaldi,  2014 ,  Pengaruh  Timbal  (Pb) Terhadap  Kadar  MDA  Serum    Tikus  Putih Jantan, Jurnal  FK  Unand,  hal.  531  –  535. Aunurohim,  Yulaipi  S,  2013, Bioakumulasi  Logam Berat  Timbal  (Pb)  dan  Hubungannya  dengan Laju  Pertumbuhan  Ikan  Mujair  (Oreochromis mossambicus), Jurnal  Sains  dan  Seni  Pomits, vol.  2  no.  2,  hal.  166  –  170.
Ayalogu O E, Ikhewuchi C C, Ikhewuchi C J et al, 2010, Proximate  and  Phytochemical  Profile  of Sansevieria liberica Gerome and Labroy, JASEM, vol.  14  (2),  hal.  103  –  106.
Baldy  C  M,  2012, Gangguan  Sel  Darah  Merah ,  In: Dewi  A  M,  Huriawati  H,  Natalia  S,  et  al, Patofiologi, edisi 6, EGC, Jakarta, hal. 255 – 267.
Batubara I, Latifah K D, Lela M Y, 2014, Sansevieria trifasciata  Properties as  Lead  (II)  Ion Biosorbent, In  Press,  vol.  18  no.  2,  hal.  59  –  64. Cahyati Y, Didik R S, Roni P et al, 2014, Pengaruh Pemberian Kombinasi Vitamin C dan E terhadap Jumlah Hemoglobin, Leukosit, dan Trombosit Pasca Iradiasi Sinar Gamma, Natural B, vol. 2 no. 3, hal.  289  –  295.
Caroline  W  A,  2015, Penetapan  Kadar  Saponin  pada Ektrak  Daun  Lidah  Mertua  (Sansevieria trifasciata  Prain  varietas  S.  Laurentii), Jurnal Ilmu dan Teknologi Kesehatan, vol. 2 no. 2, hal.  65  –  69.
CDC,  2016, Lead,  Elevated  Blood  Levels  2016  Case Definition ,  National  Notifiable  Disease Survilance System, viewed 31 January 2017,

## 74 VOLUME 12 NOMOR 2 DESEMBER 2016
www.cdc.gov/nnds/conditions/lead- elevated-blood-levels/case-defintion/2016/
Dewi  Y  S,  Indri  H,  2012, Kajian  Efektivitas  Daun Puring  (Codiaeum  varigatum)  dan Lidah  Mertua (Sanseviera tripasciata) dalam Menyerap Timbal di Udara Ambien, Jurnal Ilmiah Universitas Satya Negara  Indonesia,  vol.  5  no.  2,  hal.  1  –  7.
Djokomoejanto,  Ag  S,  Iswari  S  et  al,  2012,
Hubungan antara Stress Oksidatif dengan Kadar Hemoglobin  pada  Penderita  Thalassemia/Hbe , Jurnal Kedokteran Brawijaya, vol.  27  no.  1, hal.  38  –  42.
Gusnita  D,  2012, Pencemaran  Logam  Berat  Timbal (Pb)  di  Udara  dan  Upaya  Penghapusan  Bensin Bertimbal ,  Berita  Dirgantara,  vol.  13  no.  3, hal.  95  –  101.
Guyton  A  C,  John  E  H.,  2014, Sel-Sel  Darah Merah,  Anemia,  dan  Polisistemia, In:  Antonia Tanzil, Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, edisi 12 , Elsevier,  Singapura,  hal.  445  -454. Hashemian  A  H,  Haji  A  Y,  2013, The  Effect  of Occupational  Exposure  to  Lead  on  Blood Hemoglobin  Concentration  in  Workers  of Kermanshah  Oil  Refinery, Irian  Journal  of Toxicology,  vol.  6  no.  19,  pp.  765  –  770.
Ikewuchi C C, Jude C I, 2009, Amino Acid, Mineral, and  Vitamin  Composition  of  Sansevieria  liberica Gerome  and  Labroy, The  Pacific  Journal  of Science  and  Technology,  vol.  10  no.  1,  pp. 477  –  482.
Iryani  M,  Tan  M,  2011, Hubungan  Kadar  Timbel dalam  Darah  dengan  Kadar  Hemoglobin  dan Hematokrit  pada  Petugas  Pintu  Tol  Jagorawi,
Jurnal Kesehatan Masyarakat  Nasional, vol.
6  no.  1,  hal.  35  –  41.
Leksana E, 2015, Strategi Terapi cairan pada Dehidrasi , CKD,  vol.  42  no.  1,  hal.  70-73. Lubis B, Flora M P, Nelly R et al, 2013, Hubungan Keracunan Timbal dengan Anemia Defisiensi Besi pada Anak , Cermin Dunia Kedokteran-200, vol.  40  no.  1,  hal.  17  –  21.
Margarita M L, 2014, Potensi Putih Telur Bebek dalam Mengatasi  Keracunan  Timbal  Subakut, Institut Pertanian  Bogor,  hal.  1  –  11.
Murray  R  K,  Granner  D  K,  Rodwell  V  W,  2013, Porfirin & Pigmen Empedu, In : Frans D, Leo R,  Liena  et  al,  Biokimia  Harper,  edisi  27, EGC,  Jakarta,  hal.  288  –  294.
Kurniawan  A  F,  Amirul  M,  Sri  E  L  et  al,  2013, Pemanfaatan  Ektrak  Lidah  Mertua  (Sanseviera trifasciata laurentii) sebagai Bahan Penyerap Logam Toksik Timbal dalam Limbah Cair, Universitas Brawijaya.
Nurcahyo  A  D,  Erista  V  A,  Rika  R  et  al,  2012, Pengaruh  Lama  Adsorbsi  Ekstrak  Sansevieria (Lidah Mertua) sebagai Adsorben Logan Ag dari Limbah  Industri  Perak  di  Kotagede ,  PELITA, vol.  VIII  no.  2,  hal.  55  –  64. Queljoe  E,  Astrid  G  S,  Benny  W,  2015, Perbedaan antara Efek Pemberian Vitamin C dan Vitamin E  terhadap  Kualitas  Spermatozoa  Tikus  Wistar (Rattus Norvegicus) Jantan setelah diberi Paparan Asap Rokok , Jurnal e-Biomedik, vol. 3 no. 1, hal  65  –  71 Sayuti  K,  Rina  Y,  2015, Antioksidan  Alami  dan Sintetik, Andalas  University Press, Padang. Suciani  S,  2007, Kadar  Timbal  Dalam  Darah  Polisi Lalu  Lintas  dan  Hubungannya  dengan  Kadar Hemoglobin ,  Phd  thesis,  Universitas Diponegoro,  Semarang.
Swadaya  N,  2008. Sansevieria,  200  Jenis  Spektakuler, 400  Foto, Trubus,  Jakarta.