## PERBANDINGAN KADAR AKRILAMIDA PADA MINYAK GORENG BEKAS SEBELUM DAN SESUDAH DIJERNIHKAN DENGAN KARBON AKTIF
1 Neni Sri Gunarti
2 Lilis Tuslinah
3 Saeful Amin
1 Prodi Farmasi Universitas Buana Perjuangan Karawang, neni.gunarti@ubpkarawang.ac.id
2 Jurusan Farmasi STIKes BTH Tasikmalaya, lilistuslinah@yahoo.com
3 Jurusan Farmasi STIKes BTH Tasikmalaya, saefulamin@yahoo.com

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  analisis  kadar  akrilamida  pada  minyak  goreng  bekas  sebelum dan  sesudah  dijernihkan  dengan  karbon  aktif  dengan  menggunakan  metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ( KCKT ). Kondisi percobaan yang digunakan adalah sebagai  berikut  :  campuran  Asetonitril  dan  Dapar  Fosfat  pH  2,5  (5:95)  sebagai  fase gerak , ZORBAX Eclipse XDB-C18 ( 3x150 mm, 3,5  m), laju alir 0.5 ml/menit, suhu 25 0 C, volume sampel  yang disuntikkan 20  l dan panjang gelombang 210 nm. Metode ini  memiliki  parameter  validasi  Kecermatan 100,873%,    koefisien  variasi  untuk  waktu retensi  dan  AUC  masing-masing  0,361  dan  1,995  %.  Metode  ini  memiliki Koefisien Korelasi  (  r  )  0,998, nilai  koefisien  variasi  garis  regresi  (Vx 0 )  4,854%, batas  deteksi 0, 156 ppm dan batas kuantitasi 0,404 ppm . Penjernihan minyak goreng bekas dilakukan dengan 5 gram karbon aktif pada suhu 95 0 C selama 80 menit. Akrilamida diisolasi dari minyak goreng bekas dengan cara ekstraksi menggunakan diklorometana dan fase gerak lalu  dilakukan  penguapan  diklorometana  selama  5  jam.  Hasil  pengujian  menunjukkan kadar  akrilamida  minyak  goreng  bekas  sebelum  dan  sesudah  penjernihan  masing masing  adalah 0,147  ppm  menjadi  1,079  ppm  dengan  peningkatan  kadar  akrilamida lebih dari 100% dari kadar sebelum dijernihkan.
Kata Kunci : Akrilamida, Penjernihan, KCKT, Karbon aktif, validasi metode

## ABSTRACT
Acrylamide  had  been  analized  from  frying  oil  after  and  before  bleaching  with activied carbon use High Performance Liquid Chromatography (HPLC) method. Under following  conditions  :  a  mixture  of  phosphoric  acid  solution  pH  2,5  and  acetonitrile (95:5)  as  mobile  phase, a  ZORBAX  Eclipse  coloum  XDB-C18  (  3x150  mm,  3,5  m), flow  rate    0.5  ml/menit,  at  25 0 C,  a  UV  Detector  at  210  nm.  The  method  gave  a percentage  recovery  100,873  %,  relative  standard  deviation  (RSD)  for  retention  time and  AUC  respectively  0,361  and  1,995  %,  a  method  has  correlation  coefficient  (r) 0,998, regression variation coefficient (Vx 0 ) 4,854%, limit of detection 0,156 ppm and limit  of  quantitation  0,404  ppm.  Frying  oil  bleaching  has  applied  with  extraction  use diclorometahne  and  mobile  fase,  and  then  dicloromethane  evaporated  for  5  hours.  A result  has  shown  acrylamide  consentration  before  and  after  frying  oil  bleaching respectively  0,147  to  1,075  ppm  with  increasing  consentration  more  than  100%  from before bleaching.
Keywords : Acrylamide, Bleaching, HPLC, Actived Carbon, Validation method.

## PENDAHULUAN
Minyak  goreng  adalah  hasil  akhir  ( refined  oils )  dari  sebuah  proses  pemurnian minyak  nabati  (golongan  yang  biasa  dimakan)  dan  terdiri  dari  beragam  jenis  senyawa trigliserida.  Minyak  dapat  digunakan  sebagai  medium  penggoreng  bahan  pangan. Dalam  penggorengan,  minyak  goreng  berfungsi  sebagai  medium    penghantar  panas, menambah  rasa  gurih,  menambah  nilai  gizi  dan  kalori  dalam  bahan  pangan.  Tetapi pemanasan minyak secara berulang-ulang pada suhu tinggi dan waktu yang cukup lama, akan  menghasilkan  senyawa  polimer  yang  berbentuk  padat  dalam  minyak.  Kerusakan minyak  selama  proses  penggorengan  akan    mempengaruhi  mutu  dan  nilai  gizi  dari bahan pangan yang digoreng (Ketaren, 1986).
Minyak  yang dipanaskan akan menghasilkan aldehid akrilat atau akrolein yang memiliki  bau  seperti  lemak  terbakar  dan  ditandai  dengan  asap  putih.  Akrolein merupakan salah satu senyawa pembentuk akrilamida selain terbentuk dari asam amino langsung  dan  dari  dehidrasi  atau  dekarboksilasi  beberapa  asam  organik  tertentu. Akrolein  selanjutnya  dapat  mengalami  oksidasi  membentuk  asam  akrilat  atau membentuk  senyawa  antara  berupa  radikal  akrilat.  Kedua  senyawa  tersebut,  dengan adanya  sumber  nitrogen  (umumnya  gugus  amina  dari  asam  amino)  dan  kondisi  yang
sesuai, dapat membentuk akrilamida. Semakin tinggi suhu dan lama pemanasan minyak goreng, semakin tinggi kadar akrilamida yang ditemukan (Napitupulu,2008).
International  Agency  for  Research  on  Cancer  (IARC),  U.S.  Environmental Protection  Agency  (EPA),  Food  and  Drug  Administration  (FDA), serta The  National Toxicology  Program telah  mengklasifikasikan  akrilamida  sebagai  senyawa  yang menyebabkan  kanker  atau  berpotensi  sebagai  karsinogenik  pada  manusia  (grup  2A). Berdasarkan  studi  hewan  coba,  akrilamida  diketahui  berpotensi  menyebabkan kerusakan  sel-sel  saraf  dan  gangguan  reproduksi  pada  hewan  coba  serta  pemberian akrilamida dalam jangka panjang dapat menyebabkan tumor.
Penggunaan  adsoben    telah  banyak  digunakan  untuk  meningkatkan  kualitas minyak goreng  bekas. Karbon aktif  telah terbukti dapat meningkatkan kualitas minyak goreng  bekas  (Rosita.et.al,2008).  Arang  tempurung  kelapa  merupakan  salah  satu sumber  karbon  aktif  yang  dapat  digunakan.  Namun  belum  diketahui  pengaruhnya terhadap  kadar  akrilamida  hasil  penjernihan  dengan    karbon  aktif.  Maka  dilakukan penelitian  untuk  mengetahui  kadar  akrilamida  dari  minyak  sebelum  dan  sesudah dijernihkan  dengan  karbon  aktif  dengan  metode  Kromatografi  Cair  Kinerja  Tinggi (KCKT).

## METODE PENELITIAN
Bahan dan Alat
Bahan penelitian yang digunakan adalah minyak goreng bekas, Karbon aktif dari PT.Brataco, Asetonitril pro. HPLC dari J.T. Baker,  Asam  Fosfat dari 85% pro.analisis dari  PT.Merck,  Dinatrium  hidrogen  fosfat  dari  PT.  Merck,  diklorometana  dari PT.MERCK,  Etanol  dari  PT.Brataco,  Akrilamida  SIGMA  A3553,  Aqua  Bidestilata Steril dari PT.IKA.
Alat  penelitian  yang  digunakan  adalah  Spektofotometer  UV-Vis  SHIMADZU 1240, HPLC  Agilent Technologies 1120 Compact LC dilengkapi dengan detector UV- Visible, kolom ZORBAX Eclipse XDB-C18 ( 3x150 mm, 3,5  m), syringe , filter eluen dan  sampel,  membrane  filter  Whatman  Nylon  0,2  m,  vial,  penangas  air  0-100 0 C, sentrifuga,  pH-Meter,  termometer, heater , magnetic  stirrer ,  timbangan  analitis  Metler Toledo,  Vortex  Mixer,  dan  alat-alat  gelas  yang  umum  digunakan  dalam  laboratorium analisis.

## Prosedur Penelitian

## Penyiapan sampel
Sampel minyak goreng bekas rumah tangga dimasukkan ke dalam botol coklat. Dibagi dua untuk yang akan dilakukan penjernihan dan tidak dilakukan penjernihan.

## Penjernihan dengan Karbon Aktif
Ditimbang sampel 250 g minyak goreng bekas  ke dalam beaker glass berukuran 500 ml, ditimbang 5 gram karbon aktif dimasukkan ke dalam beaker glass  yang berisi minyak lalu aduk dengan magnetic stirrer selama 80 menit  pada suhu 95 0 C. Minyak tersebut disaring setelah itu siap dianalisis.

## Penyiapan fase gerak dan Baku Pembanding
Fase  gerak  (eluen)  yang  digunakan  adalah  dapar  fosfat  pH  2,5–asetonitril dengan perbandingan 95:5. Pembuatan dapar fosfat adalah dengan cara melarutkan 6.9 g Na 2 HPO 4 dengan aqua bidestilata steril, tambahkan asam fosfat hingga pH mencapai 2,5  dengan  pH-Meter  lalu  di  add  dengan  aqua  bidestilata  steril  sampai  1000  ml. Selanjutnya dapar disaring dengan filter eluen, lalu buat eluen dengan mencampur 950 ml dapar fosfat pH 2,5 dan 50 ml asetonitril sehingga perbandingannya 95:5.
Larutan  induk  akrilamida  dibuat  10  ppm  dengan  cara  melarutkan  1  mg akrilamida dengan fase gerak hingga 100 ml.
Larutan  standar  eksternal  yang  dibuat  adalah  0,5  ;  1  ;  1,5  ;  2  ;  2,5  ppm  dalam sampel yang dianalisis.

## Penentuan Kesesuaian Sistem KCKT
Kondisi  percobaan  dipilih  pada  kolom  ZORBAX  Eclipse  XDB-C18  (  3x150 mm, 3,5 µ m), laju alir 0.5 ml/menit, suhu 25 0 C, volume sampel yang disuntikkan 20 µ l dan  panjang  gelombang  210  nm.  Penentuan  kondisi  optimum  mengacu  pada  beberapa parameter  kualitas  pemisahan,  yaitu  waktu  pemisahan  (t R ),  faktor  kapasitas  (k’)  dan efisiensi kolom (N). Persyaratan kesesuaian sistem kromatografi, yaitu waktu retensi (5 menit  <  t R <  10  menit),  faktor  kapasitas ( 1  ≤ 𝑘 ′ ≤ 10 ) dan  jumlah  pelat  teoritik (𝑁  ≥ 10.000 ).

## Validasi Metode

## Kelinieran
Larutan baku eksternal 0,5 ; 1 ; 1,5 ; 2 ; 2,5 ppm ppm disuntikkan sebanyak 20  l ke  dalam  kolom  pada  kondisi  yang  telah  ditentukan.  Dibuat  kurva  antara  konsentrasi (sumbu  x)  terhadap  luas  puncak  (sumbu  y).  Diperoleh  persamaan  regresi  y=  bx+a, koefisien korelasi (r) dan determinasi (r 2 ), nilainya harus mendekati 1.
Keseksamaan ( Presision )
Larutan baku eksternal berdasarkan Batas Deteksinya sebagai konsentrasi 80%. Sehingga  analit  yang  diukur  yaitu  yang  memiliki  konsentrasi  80,  100  dan  120  %, selanjutnya  disuntikkan  sebanyak  20  l ke  dalam  kolom  pada  kondisi  yang  telah ditentukan,diulang  sebanyak  6  kali.  Diperoleh  Simpangan  Baku  Relatif  (SBR)  nilai persyaratannya kurang dari 2%.
Kecermatan ( Recovery )
Kecermatan  dilakukan  dengan spiked  method dengan  cara  membuat  larutan simulasi 0 (blangko); 0,5 ; 1 ; 1,5 ; 2 ; 2,5 ppm akrilamida dalam sampel. Disuntikkan sebanyak  20  l ke  dalam  kolom  pada  kondisi  yang  telah  ditentukan  dan  didapat  persen recovery .

## Penetapan kadar akrilamida dalam sampel minyak
Ditimbang  15  g  sampel  minyak  yang  mengandung  larutan  standar  eksternal, kemudian  dilarutkan  dalam  60  ml  diklorometana,  ditambahkan  3  ml  etanol,  kemudian dikocok dengan laboratory shacker pada kecepatan 200 RPM selama 10 menit. Larutan tersebut disaring, filtrat ditampung dan residu dicuci  dengan diklorometana sebanyak 2 x  5  ml  dan  disaring  kembali,  kemudian  filtrat  digabung  dan  ditambahkan  25  ml  fase gerak  yang  digunakan.  Diklorometana  dan  etanol  diuapkan  di  atas  penangas  air  pada suhu 80 0 C selama 5 jam, kemudian disentrifugasi dengan kecepatan 8000 RPM selama 15  menit,  diambil  lapisan  fase  gerak  lalu  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  50  ml  dan tambahkan  fase  gerak  yang  dugunakan  dan  digenapkan  sampai  batas.  Larutan  sampel disaring  dengan  penyaring  sampel  Whatman  0.45 𝜇𝑚. Larutan  sampel  disuntikkan sebanyak 20 𝜇𝐿 ke dalam kolom kemudian dicatat luas puncaknya.
Kadar  akrilamida  sampel  berdasarkan  rumus  regresi  yang  diperoleh  dari pengukuran  larutan  standar  eksternal  dimana  nilai  y  =  0  sehingga  didapat  nilai  x  dan dikali 2 kali pengenceran yang merupakan kadar sampel yang sebenarnya.

## PEMBAHASAN
Hasil spektrofotometri UV-Visible menunjukkan serapan maksimum Akrilamida 197,5 nm dalam eluen asetonitril : buffer fosfat pH 2,5 sebagai pelarutnya. Pengukuran Akrilamida dilakukan dengan menggunakan metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi. Metode  keromatografi  cair  kinerja  tinggi  dipilih  karena  waktu  analisisnya  cepat,  cara kerjanya  sederhana,  dan  relatif  murah.  Detektor  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah  detektor  UV-VIS.  Akrilamida  mempunyai  gugus  kromofor  (gugus  yang mempunyai ikatan rangkap berkonjugasi) dan gugus auksokrom (gugus  yang memiliki pasangan  elektron  bebas)  sehingga  dapat  terjadi  transisi  elektronik  walaupun  lemah. Panjang  gelombang  yang  digunakan  untuk  mendeteksi  akrilamida  dalam  sampel  tidak menggunakan  panjang  gelombang  197,5  nm  namun  yang  digunakan  adalah  210  nm. Asetonitril memiliki serapan 200 nm, sehingga dibutuhkan panjang gelombang dimana zat pengotor tidak ikut terserap sehingga dipilih panjang gelombang 210 nm.
Minyak  goreng  dapat  membentuk  akrilamida  karena  salah  satunya  terdapat akrolein  hasil  degradasi  minyak,  sehingga  dengan  adanya  sumber  nitrogen  yang  ada dalam makanan dapat membentuk akrilamida yang larut dalam air. Selain dari akrolein pembentukan  akrilamida  juga  berasal  dari  asam  amino  yang  memiliki  struktur  mirip akrilamida  seperti  metionin,asparagin  dan  juga  gula  pereduksi  yang  membentuk akrilamida pada suhu diatas 120 0 C.
Proses  ekstraksi  akrilamida  dalam  minyak  menggunakan  diklorometana  untuk melarutkan  zat  yang  nonpolar,  untuk  meningkatkan  kelarutan  akrilamida  dalam diklorometana  maka  ditambahkan  etanol.  Proses  ekstraksi  tidak  dilakukan  secara langsung  dengan  ekstraksi  cair-cair  menggunakan  diklorometana  dan  air  karena akrilamida tidak terekstraksi seluruhnya dalam air. Oleh karena itu ekstraksi dilakukan dengan  cara  penambahan  diklorometana  dan  air  selanjutnya  diklorometana  diuapkan. Cara  ini  telah  terbukti  meningkatkan  perolehan  kembali  (97%)  dibandingkan  dengan ekstraksi  cair-cair  secara  langsung  (60%)  (Harahap,2005).  Dengan  adanya  penguapan diklorometana  akrilamida  yang  ada  dalam  fase  diklorometana  akan  terlarut  ke  dalam fase air tanpa terbawanya senyawa organic yang tidak larut dalam pelarut polar namun proses penguapannya memerlukan waktu 4-5 jam.
Kromatografi  Cair  Kinerja  Tinggi  yang  digunakan  adalah  jenis  elusi  isokratik, artinya pencampuran eluen dilakukan di awal sebelum dimasukkan ke botol eluen. Cara
ini  memungkinkan  kurangnya  ketepatan  perbandingan  eluen  dan  kemungkinan penguapan asetonitril tinggi sehingga mempengaruhi pada komposisi eluen. Eluen yang digunakan  adalah  asetonitril  dan  dapar  fosfat  pH  2,5  dengan  perbandingan  5:95. Akrilamida  bersifat  polar  sehingga  pemilihan  fase  geraknya  polar  sedangkan  fase diamnya dipilih kolom C18  yang bersifat nonpolar. Maka dari itu proses kromatografi yang digunakan adalah fase terbalik.
Kondisi  percobaan  dipilih  pada  kolom  kolom  ZORBAX  Eclipse  XDB-C18  ( 3x150 mm, 3,5  m), laju alir 0.5 ml/menit, suhu 25 0 C, volume sampel yang disuntikkan 20  l dan panjang  gelombang 210 nm. Penentuan Uji Kesesuaian sistem menghasilkan parameter yang memenuhi persyaratan  yaitu waktu retensi akrilamida 8,587 menit dan faktor selektifitas 1,139.
Kelinieran ditentukan dengan standar eksternal yaitu dimulai dari blangko; 0,5; 1;  1,5;  2;  2,5  ppm.  Cara  ini  dipilih  karena  kadar  analit  dalam  sampel  kecil  dan menghindari hilangnya analit yang berlebihan selama preparasi sampel. Selain itu cara ini juga dapat sekaligus digunakan untuk uji kecermatan (recovery).
Persamaan  regresi  yang  didapat  dari    standar  eksternal  dari  minyak  goreng bekas sebelum penjernihan adalah   y =  500.138,571 x + 36.745,619 dengan koefisien korelasi  (r)  0,998.  Nilai  ini  sudah  memenuhi  persyaratan  artinya  kadar  analit  dengan menggunakan  kurva  kalibrasi  tersebut  terjamin  kebenarannya.  Nilai  koefisien  variasi garis regresi 4,854% artinya memenuhi persyaratan (kurang dari 5%).
Berdasarkan  hasil  perhitungan  batas  deteksi  dan  batas  kuantitasi  akrilamida masing-masing adalah 0,156 dan 0,404 ppm. Hal ini berarti batas konsentrasi minimal akrilamida yang dapat dikuantisasi dengan baik untuk uji keseksamaan dan kecermatan adalah 0,404 ppm. Dari persamaan regresi maka dapat dihitung kadar sampel pada saat y = 0 kadar akrilamida dalam minyak goreng sebelum penjernihan dengan  karbon aktif adalah  0,073  ppm,  dikarenakan  dilakukan  pengenceran  dua  kali  sehingga  konsentrasi realnya  menjadi  0,147  ppm.  Sedangkan  kadar  akrilamida  dalam  minyak  goreng  bekas setelah penjernihan adalah 0,539 ppm dikali dua kali pengenceran menjadi 1,079 ppm.
Uji kecermatan dilakukan dengan cara spiked method sekaligus untuk menentukan kelinieran. Perolehan kembali ( recovery) didapat dari hasil pengukuran baku eksternal 0,5; 1; 1,5; 2; 2,5 ppm. Hasil perolehan kembali ( recovery ) dapat dilihat pada tabel 1
Tabel 1 Hasil perolehan kembali (% recovery ) ppm, Xi AUC, Yi Kons.persamaan Konsentrasi real %  Recovery 0,5 329.712 0,543 1,086 108,626 1 545.763 0,990 1,980 98,988 1,5 755.695 1,424 2,848 94,931 2 1.039.063 2,010 4,020 100,496 2,5 1.292.084 2,533 5,066 101,324 Rata-rata 100,873
Persen  perolehan  kembali  yang  diperbolehkan  untuk  analit  1  ppm  sampai  100 ppb  adalah  80-110  %  (Harmita,2004).  Maka  berdasarkan  persyaratan  tersebut  persen perolehan  kembali  (% recovery )  telah  memenuhi  persyaratan. Kecermatan  hasil  analis sangat  tergantung  kepada  sebaran  galat  sistematik  di  dalam  keseluruhan  tahapan analisis. Oleh karena itu untuk mencapai kecermatan yang tinggi hanya dapat dilakukan dengan cara mengurangi  galat sistematik tersebut seperti menggunakan peralatan yang telah dikalibrasi, menggunakan pereaksi dan pelarut yang baik, pengontrolan suhu, dan pelaksanaannya yang cermat, taat asas sesuai prosedur (Harmita,2004).

## Tabel 2 Hasil Pengukuran Keterulangan Sistem KCKT
No Waktu Retensi AUC 1 9,903 902.799 2 9,930 894.863 3 9,950 871.939 4 9,977 868.977 5 9,980 875.293 6 10,000 855.417 RT 9,957 878.215 SD 0,036 17.519 KV 0,361% 1,995 %
Hasil pengukuran menunjukkan koefisien variasi untuk waktu retensi dan AUC masing-masing  adalah  0,361  dan  1,995  %.  Nilai  tersebut  memenuhi  persyaratan Koefisien Variasi (KV) berdasarkan ICH yaitu ≤ 2%. Kadar akrilamida dalam minyak goreng bekas sebelum dan setelah penjernihan mengalami peningkatan dari 0,147 ppm menjadi 1,079 ppm. Nilai ini menunjukkan adanya peningkatan kadar akrilamida 0,932 ppm.  Peningkatan  kadar  akrilamida  ini  dapat  dikarenakan  proses  otooksidasi  minyak akibat  pemanasan  pada  proses  penjernihan  dengan  karbon  aktif.  Selain  itu  proses otooksidasi  terjadi  lebih  cepat  pada  minyak  yang  dipucatkan  dengan  menggunakan arang  aktif  ( activated  carbon )  (Ketaren,1985).  Proses  oksidasi  minyak  menghasilkan gliserol  dan  asam  lemak.  Hasil  oksidasi  zat  tersebut  membentuk  akrolrin  selanjutnya menjadi  asam  akrilat  yang  kedua-duanya  merupakan  precursor  pembentuk  akrilamida. Pembentukan  akrilamida  sangat  tergantung  dengan  suhu  dan  lamanya  pemanasan. Makin tinggi  suhu dan lama pemanasan makin tinggi akdar akrilamida yang terbentuk (Napitupulu,2006).  Meskipun  penggunaan  karbon  aktif  sebagai  penjernih  minyak goreng  bekas  telah  terbukti  mampu  meningkatkan  mutu  minyak  berdasarkan  SNI namun  disisi  lain  meningkatkan  kadar  akrilamida  sehingga  tidak  layak  untuk dikonsumsi kembali karena sifat karsinogeniknya.

## PENUTUP

## Simpulan
Penentuan kadar akrilamida dalam minyak goreng bekas menggunakan metode kromatografi  cair  kinerja  tinggi  dengan  kondisi  percobaan  dipilih  pada  kolom  kolom ZORBAX Eclipse XDB-C18 ( 3x150 mm, 3,5 µ m), laju alir 0,5 ml/menit, suhu 25 0 C, volume  sampel  yang  disuntikkan  20 µ l  dan  panjang  gelombang  210  nm.  Metode  ini memiliki  parameter  validasi  kelinieran,  kecermatan  dan  keterulangan  yang  memenuhi syarat. Kadar akrilamida dalam minyak goreng bekas sebelum dan setelah penjernihan mengalami peningkatan 0,932 ppm. Peningkatan kadar akrilamida ini dapat dikarenakan proses  otooksidasi  minyak  akibat  pemanasan  pada  proses  penjernihan  dengan  karbon aktif.

## Saran
Disarankan  untuk  melakukan  analisis  kadar  akrilamida  dalam  sampel  minyak goreng bekas yang telah dijernihkan dengan adsorben lain selain karbon aktif .

## DAFTAR PUSTAKA
Ketaren, S. 1986. Pengantar Teknologi Minyak dan Lemak Pangan, Edisi 1. Jakarta: UI Press; p. 45-70
Napitupulu,  Toga.  2008.  Pengaruh  Suhu  dan  Lama  Pemanasan  terhadap  Pembentukan Akrilamida  pada  Pembuatan  Minyak  Kelapa  dengan  Cara  Panas  [Skripsi].
Bandung: Program Studi Sains dan Teknologi Farmasi ITB
Rosita,  Alinda.et.al.  2007.  Peningkatan  Kualitas  Minyak  Goreng  Bekas  dari  KFC dengan  Menggunakan  Adsorben Karbon  Aktif [Makalah  Seminar].  Semarang: UNDIP; p.3
Harahap, Yardiana, 2005. Optimasi Penetapan Kadar Akrilamida yang Ditambahkan ke dalam  Keripik  Kentang  Simulasi  Secara  Kromatografi  Cair  Kinerja  Tnggi,
Majalah Ilmu Kefarmasian, Volume II No 3 : 154-163
Harmita.  2004.  Petunjuk  Pelaksanaan  Validasi  Metode  dan  Cara  Perhitungannya. Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol. I, No.3 : 117