## KARAKTERISTIK FISIK DAN KIMIA AGAR BAKTO DENGAN PENAMBAHAN KITOSAN

## Physical And Chemical Characteristics of Agar Bacto with Addition Of Chitosan
Asadatun Abdullah * , Pipih Suptijah, Ruddy Suwandi
Departemen Teknologi Hasil PerairanFakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor, Jl. Lingkar Akademik, Kampus IPB, Darmaga, Bogor 16680
Diterima April 2006/ Disetujui Februari 2008

## Abstrak
Agar  adalah  bentuk  koloid  dari  suatu  polisakarida  kompleks  yang  diekstrak  dari  beberapa kelompok  alga  merah  ( Rhodophyceae ).  Salah  satu  pemanfaatan  dari  agar  adalah  sebagai  media  untuk pertumbuhan  mikroba.  Agar  bakto  adalah  salah  satu  medium  kultur  yang  digunakan  untuk  membantu menggelifikasi  berbagai  jenis  larutan  medium  atau  larutan  kaldu  ( broth ).  Penambahan  kitosan  sebagai absorben pada proses pemurnian agar diharapkan dapat menghasilkan agar yang murni ( refine agar ) yang dapat digunakan untuk agar bakto sebagai media pertumbuhan mikroba. Tujuan dari penelitian ini adalah memodifikasi  berbagai  konsentrasi  kitosan  dan  waktu  proses  absorbsi  dalam  pembuatan  agar  bakto sebagai media pertumbuhan mikroba. Penelitian dibagi menjadi dua tahap, yang pertama adalah tahapan proses  isolasi  kitin  dan  deasetilasi  kitin  menjadi  kitosan  dan  penelitian  utama  yang  dilakukan  yaitu pembuatan  agar  bakto  dengan menambahkan  berbagai konsentrasi  kitosan  (0,5  %,  1 %,  1,5  %)  sebagai absorben  terhadap  agar  yang  dihasilkan  dari Gracilaria sp.  dan  agar  batang.  Perlakuan  kedua  yang diberikan yaitu waktu proses absorbsi setelah dilakukan penambahan kitosan. Proses absorbsi yang dipilih 0  menit,  15  menit,  30  menit,  dan  45  menit.  Kombinasi  perlakuan  paling  optimum  untuk  agar  bakto berbahan  baku Gracilaria  s p.  adalah  pada  konsentrasi  kitosan  1  %  dengan  lama  pemanasan  lanjutan ekstraksi  selama  45  menit.  Kombinasi  perlakuan  paling  optimum  untuk  agar  bakto  berbahan  baku agar batang adalah pada konsentrasi kitosan 0,5 % dengan tanpa pemanasan lanjutan.
Kata kunci: agar bakto, Gracilaria sp. , kitosan

## PENDAHULUAN
Makroalga  laut  atau  yang  sering  disebut  sebagai  rumput  laut  merupakan  salah satu komoditi  hasil kekayaan  laut Indonesia  yang banyak dijumpai di seluruh perairan wilayah Nusantara. Makroalga laut mengandung karbohidrat dalam jumlah yang besar, protein  sedikit,  dan  berbagai  vitamin.  Di  Indonesia  makrolaga  laut  digunakan  sebagai bahan  tambahan  makanan,  industri  obat-obatan,  kosmetika  dan  sebagai  bahan  baku pembuatan agar.
Agar adalah bentuk koloid dari suatu polisakarida kompleks yang diekstrak dari beberapa kelompok alga merah ( Rhodophyceae ). Polisakarida kompleks tersebut berupa suatu asam sulfonik (ester dari galaktosa linier) yang berbentuk gel (Afrianto dan Liviawati 1993).
* Korespondensi: telp/fax (022) 91574358, E-mail: sasa@yahoo.com
Salah  satu  pemanfaatan  dari  agar  adalah  sebagai  media  untuk  pertumbuhan mikroba.  Penggunaan  agar  pada  media  mikrob  yang  semula  diusulkan  oleh laboratorium  Koch  pada  awal  1880-an  tetap  digunakan  secara  luas  sampai  kini (Pelczar dan Chan, 1986).  Agar bakto adalah salah satu medium kultur yang digunakan untuk  membantu  menggelifikasi  berbagai  jenis  larutan  medium  atau  larutan  kaldu ( broth ).
Agar yang digunakan untuk kebutuhan bakteriologis merupakan bagian penting dalam industri penghasil koloid dari alga merah. Namun pemanfaatan agar bakto dalam bidang mikrobiologis tidak sebanding dengan produksinya di dalam negeri.  Salah satu solusi  yang  digunakan  adalah  membuat  agar  bakto  produksi  dalam  negeri  dengan karakteristik mutu yang diharapkan sama dengan agar bakto impor.
Kitosan  merupakan  salah  satu  contoh  produk  hasil  pemanfaatan  limbah  udang yang  merupakan  hasil  deasetilasi  dari  kitin.  Kitosan  mempunyai  manfaat  yang  cukup banyak  dalam  berbagai  bidang  kehidupan.  Contohnya,  adalah  kitosan  dapat menghilangkan kontaminan, memisahkan petroleum dari air limbah, pelapis benih yang akan  ditanam  (pertanian),  bahan  anti  kolesterol,  anti  koagulan  dalam  darah,  absorben logam  berat  (Afrianto  dan  Liviawati  1993)  dan  pembentuk  gel  yang  baik  dalam pembuatan bakso (Nurimala et al. 2007).
Dalam penelitian ini media agar atau kultur media yang dibuat adalah agar bakto yang  secara  umum  memiliki  karakteristik  mutu  yang  setara  dengan  agar  bakto  impor. Untuk  mendapatkan  agar  bakto  dengan  kandungan  NaCl,  pigmen,  dan  komponen- komponen  pengotor  yang  rendah  diperlukan  adanya  suatu  perlakuan  khusus. Penambahan  kitosan  sebagai  absorben  pada  proses  pemurnian  agar  diharapkan  dapat menghasilkan  agar  yang  murni  ( refine  agar )  yang  dapat  digunakan  untuk  agar  bakto sebagai  media  pertumbuhan  mikroba.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  memodifikasi berbagai  konsentrasi  kitosan  dan  waktu  proses  absorbsi  dalam  pembuatan  agar  bakto sebagai media pertumbuhan mikroba.

## METODOLOGI

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah timbangan, wadah, timbangan, desikator,  cawan  porselin,  destilator,  erlenmeyer,  kertas  saring,  pemanas  listrik,  oven, cawan petri, inkubator, dan alat-alat gelas lainnya.
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah alga laut Gracilaria sp., agar batang,  kulit  udang,  bahan-bahan  kimia  untuk  analisis  kadar  sulfat,  kadar  garam,  dan TPC.  Analisis  mutu  yang  dilakukan  meliputi  kadar  air,  abu,  garam,  nilai  pH,  sulfat, kekuatan gel, dan uji total bakteri ( total plate count ).

## Metode Penelitian
Penelitian  dibagi  menjadi  dua  tahap,  pertama  adalah  proses  isolasi  kitin  dan deasetilasi kitin menjadi kitosan dan penelitian utama yang dilakukan yaitu pembuatan agar  bakto  dengan  menambahkan  berbagai  konsentrasi  kitosan  (0,5  %,  1  %,  1,5  %) sebagai  absorben  terhadap  agar  yang  dihasilkan  dari Gracilaria sp.  dan  agar  batang. Perlakuan  kedua  yang  diberikan  yaitu  waktu  proses  absorbsi  setelah  dilakukan penambahan kitosan. Waktu proses absorbsi  yang dipilih  0  menit, 15  menit, 30  menit, dan  45  menit.  Agar  bakto  hasil  penelitian  yang  terpilih  adalah  yang  paling  mendekati karakteristik mutu agar bakto komersial.

## Pembuatan kitosan
Tahapan penelitian pendahuluan adalah proses isolasi kitin dan deasetilasi kitin menjadi  kitosan  dengan  menggunakan  metode  yang  telah  dilakukan  oleh Suptijah et al. (1992).

## Pembuatan agar bakto
Bertujuan  untuk  membuat  agar  bakto  dan  membandingkan  pengaruh penambahan berbagai konsentrasi kitosan sebagai absorben. Kitosan yang ditambahkan memiliki  tiga  kombinasi  perlakuan  yaitu  pada  konsentrasi  0,5  %,  1  %,    dan  1,5  %, sedangkan  untuk  proses  lanjutannya  dilakukan  pemanasan  kembali  pada  larutan  agar- agar  yang  telah  ditambah  kitosan  yaitu  selama  0  menit,  15  menit,  30  menit,  dan 45 menit.
Bahan agar batang dimasak atau dipanaskan dalam panci masak dengan kisaran suhu  90-100  ºC  sampai  agar  batang  tersebut  menjadi  lumer  menggunakan  air  aquades perbandingan  1:30  (aquades  terhadap  berat  kering  agar-agar  batang).  Setelah  proses pemasakan  selesai  dapat  dilakukan  proses  pemurnian  agar  dengan  menambahkan kitosan  dengan  konsentrasi  0,5  %,  1  %,  dan  1,5  %,  dengan  suhu  pemasakan  90-92ºC dengan  dua  kali  pengamatan  atau  dua  kali  ulangan  perlakuan.  Waktu  proses  absorbsi dilakukan  untuk  melihat  pengaruh  kitosan  sebagai  absorben  terhadap  logam  yang
menempel di alga laut dan zat-zat pengotor lainnya selama 0 menit, 15 menit, 30 menit, dan  45  menit  pada  setiap  perlakuan  dan  ulangan  perlakuan  atau  ulangan  pengamatan. Selanjutnya  agar  batang  dan  kitosan  disaring  untuk  dapat  memisahkan  agar  murni dengan  serbuk  kitosan.  Kemudian  dilakukan  penjedalan  agar  yang  telah  dimurnikan dengan suhu rendah pada freezer (alat pembeku), agar ditempatkan dalam pan pencetak (loyang). Thawing atau pencairan kembali dan pengeringan dengan menggunakan oven. Makroalga  laut  ( Gracilaria sp)  kering  dibersihkan  dan  disortir  dari  kotoran- kotoran  yang  menempel,  (contohnya  pecahan-pecahan  karang,  pasir  laut,  spesies lainnya  dan  teritip)  dan  dicuci  berulang-ulang  sampai  benar-benar  bersih.  Selanjutnya Gracilaria direndam dan dipucatkan dengan  menggunakan CaO 0,5 %, selama kurang lebih 5 menit. Penetralan dilakukan selanjutnya dengan mencuci di air mengalir sampai pH  netral  (  pH  =  7).  Pra  perlakuan  asam  dilakukan  dengan  merendam Gracilaria sp. dengan  menggunakan  asam  asetat  1  %  selama  1  jam.  Selanjutnya Gracilaria dicuci bersih sampai pH netral dan dihancurkan dengan blender sampai cukup homogen untuk memudahkan  proses  pengekstraksian  makroalga  laut  ( Gracilaria sp).  Tahapan  proses selanjutnya sama dengan pada bahan baku agar batang.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Isolasi Kitosan
Hasil analisis yang didapatkan terhadap produk kitosan dapat dilihat pada Tabel 1. Berdasarkan Tabel 1 dapat dilihat bahwa hasil analisis kadar air kitosan adalah 8,4 % lebih rendah apabila dibandingkan dengan standar mutu kitosan yaitu ≤ 10 %.

## Tabel 1. Hasil uji karakteristik mutu kitosan
Parameter Hasil Ukuran Partikel Butiran/bubuk Kadar air (% berat basah) 8,40 % Kadar abu (% berat kering) 0,08 % Derajat deasetilasi (%) 82,60 % Viskositas 1400 cps Warna larutan Jernih

## Rendemen agar bakto
Nilai  rata-rata  rendemen  yang  diperoleh  pada  agar  bakto  dari Gracilaria sp. berkisar  antara  15,65  %  sampai  dengan  22,45  %.    Nilai  rata-rata  rendemen  pada  agar bakto dari agar batang berkisar antara 29,25 %y sampai dengan 47,13 %, apabila dilihat secara visual maka rendemen tertinggi 47,13 %. Rendemen agar selain dipengaruhi oleh cara ekstraksi, dipengaruhi pula oleh spesies  makroalga  laut, iklim, waktu pemanenan, dan  lokasi  budidayanya  (Chapman  dan  Chapman,  1980).    Perbandingan  nilai  rata-rata rendemen  berdasarkan  berat  kering  pada  agar  bakto  hasil  penelitian  untuk  masing- masing perlakuan dapat dilihat pada Gambar 1.
43,02 34,03 45,73 44,41 42,12 35,93 29,25 47,13 41,21 32,17 38,77 40,14 20,72 16,3 20,3 19,05 21,39 20,38 21,23 16,72 17,96 16,14 22,45 15,65 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0,50% 1% 1,50%
Konsentrasi khitosan dan w aktu absorbsi
R e n d e m e n ( % B K ) Gracilaria sp. Agar-agar batang
Gambar 1. Pengaruh penambahan kitosan dan waktu proses absorbsi terhadap rendemen agar bakto dari Gracilaria sp dan agar-agar batang

## Kadar air agar bakto
Perbandingan  nilai rata-rata kadar air berdasarkan berat kering pada agar  bakto hasil  penelitian untuk  masing-masing perlakuan dapat dilihat pada Gambar  2.  Analisis ragam  yang dilakukan pada agar  bakto dari Gracilaria sp.  menunjukkan  bahwa  hanya perlakuan pemanasan kembali yang memberikan pengaruh nyata terhadap kadar air agar bakto  yang  dihasilkan,  sedangkan  diantara  kedua  faktor  perlakuan  tidak  ditemukan adanya  pengaruh  interaksi  yang  nyata.  Uji  lanjut Duncan’s  multiple  range  test pada perlakuan  waktu  proses  absorbsi  selama  15  menit  dan  tanpa  waktu  absorbsi  tidak ditemukan  adanya  pengaruh  yang  nyata  untuk  pasangan  perlakuan  tersebut.  Pada perlakuan  pemanasan  kembali  selama  30  menit  dan  45  menit  juga  tidak  ditemukan
adanya  pengaruh  yang  nyata  terhadap  kadar  air  agar  bakto  yang  dihasilkan  dari Gracilaria sp.
16,89 20,07 20,37 18,18 24,46 25,06 24,62 22,09 25,38 14,34 19,80 23,79 23,37 19,62 18,70 23,01 22,72 16,97 14,44 17,21 16,88 16,05 14,72 10,64 25,24 0 5 10 15 20 25 30 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0,50% 1% 1,50% Dif co Konsentrasi khitosan dan waktu absorbsi K a d a r a ir ( % B K ) Gracilaria sp. Agar-agar batang Dif co
Gambar 2. Pengaruh penambahan kitosan dan waktu proses absorbsi terhadap kadar air agar bakto dari Gracilaria sp. dan agar-agar batang
Hasil  analisis  ragam  yang  dilakukan  pada  agar  bakto  dari  agar  batang menunjukkan  bahwa ke dua  belas perlakuan penambahan  berbagai konsentrasi kitosan dan waktu proses absorbsi memberikan pengaruh yang berbeda nyata terhadap kadar air agar bakto dari agar batang. Apabila dilihat dari hasil uji lanjut Duncan’s multiple range test pada  perlakuan  berbagai  waktu  proses  absorbsi  menyatakan  bahwa  hanya kombinasi perlakuan waktu proses absorbsi 15 menit dan 45 menit yang tidak berbeda nyata.

## Kadar abu agar bakto
Perbandingan nilai rata-rata kadar abu berdasarkan berat kering pada agar bakto hasil  penelitian untuk  masing-masing perlakuan dapat dilihat pada Gambar 3.  Analisis ragam  menunjukkan  bahwa  kedua  belas  perlakuan  yang  diterapkan  pada  pembuatan agar  bakto  dari Gracilaria sp.  baik  pada  penambahan  berbagai  konsentrasi  kitosan maupun  pada  berbagai  waktu  proses  absorbsi  memberikan  hasil  yang  berbeda  nyata. Pada  uji  lanjut Duncan’s  multiple  range  test untuk  perlakuan  waktu  proses  absorbsi ditemukan  seluruh  kombinasi  perlakuan  memberikan  hasil  yang  berbeda  nyata  antar perlakuan. Hal  ini  menunjukkan  bahwa seluruh waktu proses absorbsi  yang digunakan
memberikan  pengaruh  terhadap  nilai  kadar  abu  dari  agar  bakto  yang  dihasilkan  dari Gracilaria sp.
5,82 3,21 7,13 5,25 5,02 3,81 6,13 6,31 4,50 3,45 6,11 5,36 0,67 1,00 4,18 1,76 1,59 0,78 5,11 0,94 1,03 0,90 2,16 1,20 4,65 0 1 2 3 4 5 6 7 8 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0,50% 1% 1,50% Dif co Konsentrasi khitosan dan waktu absorbsi K a d a r a b u ( % B K ) Gracilaria sp. Agar-agar batang Dif co
Gambar 3. Pengaruh penambahan kitosan dan waktu proses absorbsi terhadap kadar abu agar bakto dari Gracilaria sp. dan agar-agar batang
Analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  ke  dua  belas  perlakuan  penambahan berbagai  konsentrasi  kitosan  dan  waktu  proses  absorbsi  memberikan  pengaruh  yang berbeda nyata terhadap kadar abu agar bakto dari agar batang. Hasil uji lanjut Duncan’s multiple range test menunjukkan  hanya perlakuan waktu absorbsi  15  menit dan waktu absorbsi  30  menit  tidak  memberikan  pengaruh  yang  nyata  untuk  kombinasi  kedua perlakuan  tersebut.  Sedangkan  pada  perlakuan  penambahan  berbagai  konsentrasi kitosan,  terdapat  perbedaan  yang  nyata  untuk  konsentrasi  kitosan  sebesar  0,5  %  dan 1 % yang digunakan.

## Kadar Garam (NaCl) agar bakto
Perbandingan  nilai rata-rata kadar garam (NaCl)  berdasarkan  berat kering pada agar bakto hasil penelitian untuk masing-masing perlakuan dapat dilihat pada Gambar 4. Menurut Harrigan (1998), kadar garam yang dikondisikan sebagai NaCl pada agar bakto atau agar media bakteriologis maksimum adalah 0,05 %, dengan demikian kadar garam agar  bakto  yang  dihasilkan  pada  penelitian  ini  masuk  dalam  standar  maksimum  kadar garam yang diperbolehkan.
0,1213 0,0200 0,0069 0,0076 0,1149 0,0039 0,0215 0,1137 0,0045 0,0029 0,0089 0,0056 0,05 0,0063 0,0041 0,0028 0,0032 0,0022 0,0025 0,0024 0,0092 0,0034 0,0335 0,0024 0,0036 0,0000 0,0200 0,0400 0,0600 0,0800 0,1000 0,1200 0,1400 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0,50% 1% 1,50% Difco Konsentrasi khitosan dan w aktu absorbsi % N a C l Gracilaria sp. Agar-agar batang Dif co
Gambar  4.  Pengaruh  penambahan  kitosan  dan  waktu  proses  absorbsi  terhadap  kadar garam agar bakto dari Gracilaria sp. dan agar-agar batang

## Nilai pH agar bakto
Nilai  pH  medium  pertumbuhan  mikroorganisme  sangat  mempengaruhi  jasad renik yang dapat tumbuh. Perbandingan nilai rata-rata pH berdasarkan berat kering pada agar bakto hasil penelitian untuk masing-masing perlakuan dapat dilihat pada Gambar 5.
5,74 5,66 5,65 5,71 6,25 5,88 6,06 5,75 6,18 6,07 6,14 5,87 6,27 5,88 5,62 5,75 5,72 5,9 5,62 5,67 5,6 5,56 5,56 5,58 5,59 5,2 5,4 5,6 5,8 6 6,2 6,4 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0,50% 1% 1,50% Dif co Konsentrasi khitosan dan waktu absorbsi N il a i p H Gracilaria sp. Agar-agar batang Difco
Gambar 5. Pengaruh penambahan kitosan dan waktu proses absorbsi terhadap nilai pH agar bakto dari Gracilaria sp. dan agar-agar batang

## Kadar Sulfat agar bakto
Kadar sulfat dalam agar dapat dipengaruhi oleh perbedaan jenis dan asal rumput laut,  metode  ekstraksi,  serta  umur  panen.  Peningkatan  umur  panen  dapat  memberi respon terhadap penurunan kandungan sulfat (Suryaningrum, 1988). Perbandingan nilai
rata-rata  kadar  sulfat  berdasarkan  berat  kering  pada  agar  bakto  hasil  penelitian  untuk masing-masing perlakuan dapat dilihat pada Gambar 6.
1,82 1,98 1,44 0,97 1,76 1,72 1,23 1,1 1,66 0,91 1,13 0,58 0,49 0,58 0,43 1,22 0,48 0,52 0,98 1,19 0,7 0,86 1,13 1,24 1,03 0 0,5 1 1,5 2 2,5 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0,50% 1% 1,50% Dif co Konsentrasi khitosan dan waktu absorbsi K a d a r s u lf a t (% ) Gracilaria sp. Agar-agar batang Dif co
Gambar  6.  Pengaruh  penambahan  kitosan  dan  waktu  proses  absorbsi  terhadap  kadar sulfat agar bakto dari Gracilaria sp. dan agar-agar batang
Berdasarkan grafik batang di atas dapat terlihat bahwa secara umum nilai kadar sulfat yang didapatkan mengalami penurunan untuk setiap kenaikan konsentrasi kitosan yang ditambahkan dalam proses pembuatan agar bakto. Adapun peningkatan nilai kadar sulfat  yang  tidak  relevan  dengan  kenaikan  konsentrasi  kitosan  dapat  disebabkan  oleh kesalahan yang dilakukan pada saat melakukan pengendapan sulfat dari agar bakto yang tidak sempurna, sehingga nilai sulfat pada konsentrasi kitosan yang lebih tinggi menjadi semakin meningkat.
Analisis  ragam  yang  dilakukan  menunjukkan  bahwa  ke  dua  belas  perlakuan penambahan  berbagai  konsentrasi  kitosan  dan  waktu  proses  absorbsi  memberikan pengaruh  yang  berbeda  nyata  terhadap  kadar  sulfat  agar  bakto  dari Gracilaria sp. Sedangkan  antara  dua  faktor  perlakuan  ditemukan  adanya  pengaruh  interaksi  yang nyata.  Uji  lanjut Duncan’s  multiple  range  test hanya  pada  waktu  proses  absorbsi  30 menit  dan  45  menit  tidak  ditemukan  adanya  suatu  pengaruh  perlakuan  yang  berbeda nyata.
Analisis  ragam  yang  dilakukan  menunjukkan  bahwa  ke  dua  belas  perlakuan penambahan  berbagai  konsentrasi  kitosan  dan  waktu  proses  absorbsi  memberikan pengaruh yang berbeda nyata terhadap kadar sulfat agar bakto yang dibuat agar batang. Sedangkan  antara  dua  faktor  perlakuan  ditemukan  adanya  pengaruh  interaksi  yang nyata.  Dari  hasil  uji  lanjut Duncan’s  multiple  range  test pada  seluruh  kombinasi
perlakuan  berbagai  waktu  proses  absorbsi  dan  penambahan  berbagai  konsentrasi kitosan, terdapat perbedaan yang nyata.

## Kekuatan gel agar bakto
Kekuatan gel merupakan beban maksimum yang dibutuhkan untuk memecahkan matriks  polimer  pada  daerah  yang  dibebani,  dan  dapat  dinyatakan  sebagai  “breaking force”.  Perbandingan  nilai  rata-rata  kekuatan  gel  berdasarkan  berat  kering  pada  agar bakto hasil penelitian untuk masing-masing perlakuan dapat dilihat pada Gambar 7.
483,33 545,5 583,33 660,48 544 659,52 700 750 494,7 653,33 716,7 750 160,71 116,07 169,64 205,36 178,57 178,57 232,14 341,01 196,43 276,78 383,93 350 343,75 0 100 200 300 400 500 600 700 800 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0' 15' 30' 45' 0,50% 1% 1,50% Dif co Konsentrasi khitosan dan waktu absorbsi K e k u a ta n g e l (g ra m /c m 2 ) Gracilaria sp. Agar-agar batang Difco
Gambar 7. Pengaruh penambahan kitosan dan waktu proses absorbsi terhadap kekuatan gel agar bakto dari Gracilaria sp. dan agar-agar batang
Analisis  ragam  yang  dilakukan  menunjukkan  bahwa  ke  dua  belas  perlakuan penambahan  berbagai  konsentrasi  kitosan  dan  lama  pemanasan  yang  berbeda-beda memberikan  pengaruh  yang  berbeda  nyata  terhadap  kekuatan  gel  agar  bakto  dari Gracilaria sp.  Sedangkan  antara  dua  faktor  perlakuan  ditemukan  adanya  pengaruh interaksi  yang  nyata.  Hasil  uji  lanjut Duncan’s  multiple  range  test hanya  pada pemanasan  kembali  30  menit  dan  45  menit  tidak  ditemukan  adanya  suatu  pengaruh perlakuan  yang  berbeda  nyata.  Sedangkan  pada  seluruh  kombinasi  perlakuan penambahan berbagai konsentrasi kitosan, terdapat perbedaan yang nyata.  Analisis ragam  yang  dilakukan  menunjukkan  bahwa  ke  dua  belas  perlakuan  penambahan berbagai  konsentrasi  kitosan  dan  lama  pemanasan  yang  berbeda-beda  memberikan pengaruh  yang  berbeda  nyata  terhadap  kekuatan  gel  agar  bakto  dari  agar  batang. Sedangkan  antara  dua  faktor  perlakuan  ditemukan  adanya  pengaruh  interaksi  yang nyata.  Dari  hasil  uji  lanjut Duncan’s  multiple  range  test seluruh  perlakuan  pada pemanasan kembali ditemukan adanya suatu pengaruh perlakuan yang berbeda nyata.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Penambahan  kitosan  sebagai  absorben  dalam  proses  pembuatan  agar  bakto Gracilaria sp. dan agar batang menghasilkan agar bakto yang mempunyai karakteristik mutu  fisik  dan  kimia  yang  tinggi.  Kombinasi  perlakuan  paling  optimum  untuk  agar bakto berbahan  baku Gracilaria  s p.  adalah pada  konsentrasi kitosan  1 % dengan  lama pemanasan  lanjutan  ekstraksi  selama  45  menit.  Kombinasi  perlakuan  ini  memberikan hasil  terbaik,  karena  memiliki  karakteristik  fisik  dan  kimia  paling  mendekati  kontrol agar  bakto  komersial  produksi Difco ,  dengan  kandungan  sulfat  1,10  %,  kadar  air 16,89  %,  kadar  abu  3,65  %,  kadar  garam  (NaCl)  0,0215  %,  nilai  pH  5,88,  rendemen yang dihasilkan adalah 21,39 % dan kekuatan gel 341,01 gram/cm 2 .
Kombinasi  perlakuan  paling  optimum  untuk  agar  bakto  berbahan  baku  agar batang  adalah  pada  konsentrasi  kitosan  0,5  %  dengan  tanpa  pemanasan  lanjutan. Kombinasi  perlakuan  tersebut  memberikan  hasil  optimum  (terbaik),  karena  memilki karakteristik fisik dan kimiawi paling mendekati kontrol agar bakto komersial produksi Difco ,  dengan  kandungan  sulfat  1,24  %,  kadar  air  24,46  %,  kadar  abu  4,18  %,  kadar garam (NaCl) 0,0335 %, nilai pH 6,25, rendemen yang dihasilkan adalah 43,02 % dan kekuatan gel 483,33 gram/cm 2 .

## Saran
Sebagai  kelanjutan  dari  penelitian  ini  penulis  menyarankan  untuk  melakukan penelitian  lanjutan dengan  melakukan kajian terhadap pembuatan agar  bakto dari  jenis algae  laut  yang  berbeda  dengan  karakteristik  mendekati  bahan  baku  dari  agar  bakto komersial.  Perlu  dilakukan  juga  analisis  terhadap  kemampuan  agar  bakto  untuk menumbuhkan  mikroorganisme  pada  berbagai  agar  media  di  mikrobiologi.  Penilaian terhadap  nilai  ekonomis  dari  agar  bakto  yang  diproduksi  sendiri  jika  dibandingkan dengan agar bakto komersial produksi pabrik juga perlu untuk dilakukan.

## DAFTAR PUSTAKA
Afrianto, E  dan  E.  Liviawati.  1993.  Budidaya  Rumput  Laut  dan  Cara  Pengolahannya. Jakarta:Penerbit Bhratara.
Angka, S.L & M.T. Suhartono. 2000. Bioteknologi Hasil Laut. Penerbit PKSPL-Institut Pertanian Bogor. Bogor.
AOAC. 1995. Official Methods of Analysis. The Association of Official Analytical and Chemist. 16 th ed. AOAC. Virginia:Inc. Arlington.
Chapman, V.J. dan D.J. Chapman. 1980. Seaweed and Their Uses. Chapman and Hall. London.333p.
Fellow,  J.P.  1990.  Food  Processing  Technology.  Principles  and  Practise.  New  York: Ellis Horwod Published
Fennema, O.R. 1985. Food Chemistry. 2 nd edition. New York: Marchel Dekker Inc.
Fujita, T., 1970. Japanese Patent No. 7. , 013, 500.
G.O.  Phillips  dan  P.A.  Williams.  2000.  Handbook  of  Hidrocolloids.  CRC  Press. WoodHead Publishing Limited. England: Cambridge.
Glicksman,  M.   1969.  Gum Technology in The Food Industry. New York: Academic Press.
.  1982.  Food  Hydrocolloids,  volume  II,CRC  Press,  Tarrytown.  New York
1983.  Gelling  Hydrocolloids  in  the  Food  Product  Application. Butterworth&Co. Publishers Ltd. London.
Harrigan,  F.W.  1998.  Laboratory  methods  in  food  microbiology.  Third  edition. Academic Press (AP). San Diego. California. USA
Hirano,  S.  1989.  Production  and  Aplication  of  Chitin  and  Chitosan  in  Japan.  Dalam Chitin  and  Chitosan,  Sources,  Chemistry.  Biochemistry.  Physicallproperties  and Aplications(Gudmadd et al). Elsevier Science Published Ltd. England. Hal 56-58.
Nurimala  M,  Suptijah  P,  Nurfianti  D.  2007.  Pembentukan  kitosan  sebagai  pembentuk gel  pada  bakso  ikan  kurisi  ( Nemipterus  nemathoporus ). Buletin  Teknologi  Hasil Perikanan 10(1):35-46.
Pelczar. M.J.dan Chan. 1986. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jilid I. Jakarta: Gramedia.
Selby,  H.H.  dan  W.H.  Wyne.  1973.  Agar.  Dalam  Industrial  Gums.  R.L.  Whistler  dan J.M. Be Miller (eds.). Academic Press. New York. 807p.
Steel,  P.G.D.  dan  J.H.  Torrie.  1991.  Prinsip  dan  Prosedur  Statistika  suatu  Pendekatan Geometrik. Terjemahan B. Sumantri. Jakarta: PT Gramedia.
Suptijah,  P.  E.  Salamah,  H.  Sumaryanto,  S.  Purwaningsih  dan  J.  Santoso.  1992. Pengaruh  Berbagai  Metode  Isolasi  Kitin  Kulit  udang  terhadap  Kadar  dan Mutunya. Laporan Akhir Penelitian. Fakultas Perikanan IPB.