Volume 11, Nomor 2, Tahun 2022, Halaman 105-113 Online di : http://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jnc/
Submitted: 02 September 2021 Accepted: 10 April 2022
POTENSI TANGKAI TERONG ( Solanum melongena ) SEBAGAI IMMUNE BOOSTER
Liesty Kurnia Ratri, Chatarina Devi Aristi Nugraha, Nikitasari Hilmia Rahma, Diana Nur Afifah *
Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Sudarto SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275, Indonesia
* Korespondensi : E-mail: d.nurafifah.dna@fk.undip.ac.id

## ABSTRACT
Background :  Eggplant  calyx  (Solanum  melongena)  is  considered  as  waste  which  is  usually  thrown  away.  However, based  on  several  studies,  it  was  reported  that  eggplant  calyx  contains  the  highest  antioxidant  content  in  the  form  of phenolic compounds when compared to other eggplant parts.
Objective :  This  study  aimed  to  determine  the  content  of  bioactive  compounds  in  eggplant  calyx  extract  and  its effectiveness through phenolic, flavonoid, IC 50 , and in vitro tests for protein denaturation inhibition. Methods : Eggplant calyxs were obtained from Bandungan sub-district, Semarang district. This research was conducted in vitro. Eggplant calyx extraction was carried out using the maceration method with ethyl acetate as a solvent. Total phenolic assays used the Folin-Ciocalteau method, total flavonoids were tested using quercetin and routine standards, IC 50 using DPPH, and protein denaturation inhibition was performed using albumin as a control and diclofenac sodium as a positive control.
Results: The results showed that the total phenolic extract of eggplant calyx was 190.47 mgGAE/g which was high, the total flavonoid based on quercetin and routine standards was 62.38 mgQE/g and 427.61 mgRE/g which was high, IC 50 test of eggplant calyx extract showed a value of 255 ppm and categorized as very weak antioxidant activity, and based on the protein denaturation inhibition test at 30 minutes, the percent denaturation of eggplant  calyx extract, diclofenac sodium, and albumin was 14.70%, 1.30%, and 25.84%.
Conclusion : Eggplant calyx extract is high in phenolic and flavonoid content but the antioxidant activity based on IC 50 is classified as very weak. Eggplant calyx extract has good protein denaturation inhibition. Testing the effectiveness of eggplant calyxs in vivo should be done to get more accurate results.
Keywords: Protein denaturation; Phenolic; Flavonoids; IC 50 ; Eggplant calyx

## ABSTRAK
Latar  belakang :  Tangkai  terong  (Solanum  melongena)  merupakan  limbah  dan  biasanya  dibuang  karena  tidak  dapat dimanfaatkan kembali. Namun, berdasarkan beberapa penelitian melaporkan bahwa tangkai terong memiliki kandungan antioksidan dalam bentuk senyawa fenolik yang paling tinggi jika dibandingkan dengan bagian terong lainnya.
Tujuan :  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kandungan  senyawa  bioaktif  ekstrak  tangkai  terong  dan efektivitasnya melalui uji fenolik, flavonoid, IC 50 , dan uji in vitro daya hambat denaturasi protein. Metode : Tangkai terong diperoleh dari kecamatan Bandungan, kabupaten Semarang. Penelitian ini dilakukan secara in vitro.  Ekstraksi  tangkai  terong  dilakukan  menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  etil  asetat.  Pengujian  total fenolik  menggunakan  metode  Folin-Ciocalteau,  total  flavonoid  diuji  menggunakan  standar  quersetin  dan  rutin, pengujian  IC 50 menggunakan  DPPH,  dan  daya  hambat  denaturasi  protein  dilakukan  menggunakan  albumin  sebagai kontrol dan natrium diklofenak sebagai kontrol positif.
Hasil: Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  total  fenolik  ekstrak  tangkai  terong  sebesar  190,47  mgGAE/g  yang tergolong  tinggi,  total  flavonoid  berdasarkan  standar  quersetin  dan  rutin  sebesar  62,38  mgQE/g  dan  427,61  mgRE/g yang  tergolong  tinggi,  uji IC 50 ekstrak  tangkai  terong  menunjukan  nilai  255  ppm  dan  dikategorikan  aktivitas antioksidannya sangat lemah, dan berdasarkan uji daya hambat denaturasi protein pada menit ke-30, persen denaturasi ekstrak tangkai terong, natrium diklofenak, dan albumin sebesar 14,70%, 1,30%, dan 25,84%.
Simpulan : Ekstrak tangkai terong tinggi akan kandungan fenolik dan flavonoid tetapi aktivitas antioksidan berdasarkan nilai  IC 50 tergolong  sangat  lemah.  Ekstrak  tangkai  terong  memiliki  daya  hambat  denaturasi  protein  yang  cukup  baik. Penguji efektivitas tangkai terong secara in vivo sebaiknya dilakukan untuk mendapatkan hasil yang lebih akurat.
Kata Kunci : Denaturasi protein; Fenolik; Flavonoid; IC 50 ; Tangkai terong

## PENDAHULUAN
Terong  ( Solanum  melongena )  termasuk  salah satu  komoditi  sayuran  terbesar  Indonesia,  bahkan menurut FAO, Indonesia menduduki peringkat ke-6 dunia  pada  2011  sebagai  negara  penghasil  terong
dan  terus  mengalami  peningkatan  jumlah  hasil produksi  setiap  tahunnya. 1 Terong  ( Solanum melongena )  merupakan  sayuran  yang  dapat  diolah menjadi berbagai macam olahan serta memiliki nilai ekonomi yang relatif stabil. Bagian dari terong yang
sering  diolah  yakni  buahnya  sedangkan  bagian tangkai  biasanya  dibuang  sebagai  limbah  karena dianggap  tidak  dapat  dimanfaatkan  kembali. Berbagai penelitian dilakukan untuk mengidentifikasi  sumber  antioksidan  alami  pada terong.  Tangkai  terong  mengandung  antioksidan paling  tinggi  seperti  fenolik  jika  dibandingkan dengan  bagian  terong  lainnya  sehingga  berpotensi menjadi  suplemen  makanan  untuk  meningkatkan daya tahan tubuh. 2,3 Berdasarkan penelitian, ekstrak tangkai  terong  mengandung  vitamin  dan  mineral berkonsentrasi  tinggi  sehingga  memungkinkan untuk  dapat  meningkatkan  kekebalan  tubuh  dan menghilangkan  rasa  nyeri. 3 Oleh  karena  itu, diperlukan pemanfaatan limbah tangkai terong salah satunya sebagai sumber antioksidan.
Antioksidan adalah senyawa yang menghalangi  proses  oksidasi,  sehingga  mencegah reaksi  berantai  yang  dapat  merusak  sel  organisme. Terapi antioksidan telah lama diteliti sebagai upaya untuk mengurangi penyebaran cedera akibat radikal bebas. 4 Asupan  tinggi  antioksidan  seperti  asam askorbat, tocopherol ,  karotenoid,  dan  polifenol dapat  mendukung  pertahanan  antioksidan  yang dapat  ditemukan  pada  buah-buahan,  sayuran, minuman,  sereal,  dan  produk  makanan  lainnya. 5 Salah  satunya  ditemukan  dalam  tangkai  terong dalam  bentuk  senyawa  fenolik  atau  polifenol  yang kandungannya  paling  tinggi  apabila  dibandingkan dengan bagian terong lainnya. 2,3
Senyawa  fenolik  atau  polifenol  saat  ini menjadi  perhatian  khusus  dalam  penelitian,  hingga saat  ini  sudah  teridentifikasi  8000  struktur  fenolik pada  tumbuhan. 6 Polifenol  merupakan  metabolit sekunder yang penting untuk pertumbuhan, perkembangan,  dan  reproduksi  tumbuhan,  senyawa ini  dapat  dijadikan  sebagai  antioksidan  alami  dan memiliki banyak manfaat diantaranya penghambatan  peroksidasi  lipid;  penghambatan karsinogenesis  dan  aktivitas  mikroba;  sebagai fitohormon  alami;  dan  lain-lain. 7 Namun,  hingga saat  ini  belum  terdapat  penelitian  yang  menguji efektivitas polifenol tangkai terong sebagai immune booster baik  pada  hewan  coba  maupun  pada manusia. Immune  booster mencakup  vitamin, mineral, antioksidan, probiotik, dan pangan fungsional  serta  obat  alternatif  untuk  meningkatkan sistem imunitas tubuh. 8
Inflamasi  atau  peradangan merupakan  respon jaringan  terhadap  reaksi  tubuh  yang  dapat menimbulkan  kerusakan  sel.  Kerusakan  sel  dapat disebabkan oleh bakteri, zat kimia, trauma mekanik ataupun trauma fisik. 9 Inflamasi dapat terjadi karena adanya denaturasi protein. Denaturasi protein adalah proses  dimana  protein  kehilangan  struktur  tersier dan  struktur  sekundernya  yang  disebabkan  karena senyawa  eksternal,  seperti  asam  kuat,  basa  kuat,
garam  organik  terkonsentrasi,  organik  pelarut,  dan pemanasan. 9 Senyawa  yang  dapat  menghambat denaturasi protein digunakan sebagai obat antiinflamasi. Beberapa obat antiinflamasi menunjukkan  kemampuan  menghambat  denaturasi protein  yang  disebabkan  oleh  suhu,  salah  satunya adalah natrium  diklofenak. 10 Selain  itu,  pengujian secara in  vitro pengaruh  pemanasan  terhadap antidenaturasi Bovine  Serum  Albumin ,  dapat digunakan  untuk  mendeteksi  adanya  senyawa antiinflamasi. Hal ini dikarenakan metode pengujian denaturasi  protein  dengan  pemanasan  merupakan metode yang layak, sederhana, dan tidak membutuhkan  biaya  yang  mahal  untuk  menilai potensial obat antiinflamasi. 11
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas  dan d ikarenakan semakin tingginya kebutuhan masyarakat  akan  antioksidan  saat  ini  serta  belum didapatkannya hasil yang maksimal, maka p enelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan  senyawa  bioaktif  ekstrak  tangkai  terong dan  efektivitasnya  melalui  uji  fenolik,  flavonoid, IC 50 , dan uji in vitro daya hambat denaturasi protein.

## METODE
Penelitian  dilakukan  secara in  vitro di Laboratorium  Terpadu  Universitas  Diponegoro selama satu bulan. Sampel tangkai terong diperoleh dari  kecamatan  Bandungan,  kabupaten  Semarang Alat yang digunakan antara lain blender, timbangan, oven,  tabung  reaksi,  dan  spektrofotometer  UV-Vis. Bahan yang digunakan meliputi tangkai terong 2 kg, pelarut  etil  asetat, Folin-Ciocalteau ,  standar quersetin  dan  rutin,  DPPH,  BSA  ( Bovine  Serum Albumin ),  larutan  TBS  ( Tris  Buffer  Solution ),  dan Natrium Diklofenak.
Ekstraksi tangkai terong dilakukan menggunakan  metode  maserasi,  dengan  sampel basah  sebanyak  2  kg  tangkai  terong.  Ekstraksi tangkai  terong  dimulai  dengan  proses  pengeringan menggunakan oven, setelah kering dilakukan proses penepungan dengan menghaluskan ekstrak menggunakan  blender.  Setelah  didapatkan  serbuk halus,  lalu  dilanjutkan  dengan  proses  maserasi. Kemudian  dilakukan  filtrasi  dan  evaporasi  untuk memisahkan  ekstrak  dari  pelarutnya. 12 Pelarut  yang digunakan  yaitu  etil  asetat  dengan  perbandingan sampel  :  pelarut  yaitu  1:2. 11 Waktu  pembuatan ekstrak  yaitu  3  hari  pengeringan,  3  hari  ekstraksi, dan 1 hari evaporasi.
Analisis  kandungan  fenolik  menggunakan sampel  0,105  gram  ekstrak  tangkai  terong  dan menambahkan  reagen  Folin-Ciocalteau  dengan variasi  konsentrasi  standar  asam  galat  yaitu  0  ppm, 200  ppm,  400  ppm,  600  ppm,  dan  800  ppm. Kemudian disentrifugasi dan dianalisis
menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  dengan panjang gelombang 765 nm. 13
Analisis kandungan  flavonoid  menggunakan standar  quersetin  dan  standar  rutin  dengan menggunakan  sampel  0,105  gram  ekstrak  tangkai terong.  Konsentrasi  quersetin  yang  digunakan  yaitu 0 ppm, 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm, dan 100 ppm  sedangkan  konsentrasi  rutin  yang  digunakan yaitu 0 ppm, 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm, 100 ppm,  200  ppm,  300  ppm,  400  ppm,  dan  500  ppm. Kemudian  dilakukan  sentrifugasi  dan  dianalisis menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  dengan panjang  gelombang  434,2  nm karena  pada  panjang gelombang  ini  didapatkan  kepekaan  dan  serapan yang  maksimal. Jumlah  kandungan  fenolik  dan flavonoid dinyatakan sebagai
Gallic Acid
Equivalent (GAE), Quercetin  Equivalent (QE),  dan Rutin Equivalent (RE) menggunakan rumus 14 C= (c xV)/m dimana C adalah kandungan kandungan total senyawa fenol dan flavonoid sampel (µg/mg ekstrak tangkai  terong  dalam  GAE,  QE,  dan  RE);  c  adalah konsentrasi  GAE,  QE,  or  RE  dihitung  dari  regresi persamaan  (µg/mL);  V  adalah  volume  ekstrak tangkai  terong  (mL);  dan  m  adalah  berat  ekstrak tangkai terong (mg).
Pengujian IC 50 dengan  sampel  0,105  gram ekstrak  terong  dianalisis  menggunakan  DPPH dengan variasi konsentrasi DPPH 0 ppm, 5 ppm, 10 ppm,  15  ppm,  15  ppm,  20  ppm,  25  ppm,  dan  30 ppm.  Kemudian  disentrifugasi  dan  dianalisis menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  dengan panjang  gelombang  414,2  nm.  Persen  hambat dihitung menggunakan rumus 15 persen penghambatan  denaturasi  adalah  (Abs  kontrol-Abs ekstrak)/Abs  kontrol  x  100%.  Apabila  persen aktivitas  hambatan  telah  diperoleh,  maka  dapat dihitung  nilai  IC 50 dari  persamaan  regresi  linier. Dimana  y  adalah  persen  hambat  senilai  50 sedangkan  x  adalah  nilai  IC 50 . Besarnya  nilai  IC 50 dapat  dikategorikan  menjadi  5,  yakni  apabila  nilai IC 50 <  50  ppm  maka  senyawa  tersebut  memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat, nilai IC 50 50 – 100 ppm  dikategorikan  senyawa  memiliki  aktivitas antioksidan  kuat,  nilai  IC 50 101  –  150  ppm dikategorikan  aktivitas  antioksidan  sedang,  nilai IC 50 150  –  200  ppm  dikategorikan  aktivitas antioksidan  lemah  serta  nilai  IC 50 >  200  ppm dikategorikan senyawa memiliki aktivitas antioksidan  sangat  lemah.  Semakin  kecil  nilai  IC 50 maka  semakin  efektif  senyawa  tersebut  sebagai antioksidan.  Semakin  besar  nilai  IC 50 maka  dapat dikatakan  bahwa  senyawa  tersebut  kurang  efektif sebagai antioksidan. 16
Uji in  vitro dilakukan  dengan  metode penghambatan  denaturasi  protein.  Pengujian  daya
hambat  dan  daya  denaturasi  protein  dilakukan  pada suhu  70 o C  dengan  variasi  waktu  7  tingkat  yakni  0 menit,  5  menit,  10  menit,  15  menit,  20  menit,  25 menit,  dan  30  menit.  Sampel  yang  digunakan  yaitu 120 µL ekstrak tangkai terong dengan menambahkan  0,5  mL  albumin  dan  380  µL  TBS. Kontrol  menggunakan  0,5  mL  albumin  dan  0,5 mL TBS.  Sedangkan  kontrol  positif  menggunakan  120 µL  natrium  diklofenak  dengan  menambahkan  0,5 mL  albumin  dan  380  µL  TBS.  Kemudian  pada masing-masing variasi waktu dianalisis menggunakan  spektrofotometer  dengan  panjang gelombang 280 nm. Persen penghambatan denaturasi protein dihitung berdasarkan rumus (Abs kontrol-Abs ekstrak)/Abs kontrol x 100%. 17

## HASIL

## Ekstraksi  Tangkai  Terong  dan  Pengujian Kandungan Fenolik
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  adalah ekstraksi maserasi dengan menggunakan pelarut etil asetat. Ekstrak  tangkai  terong  yang  diperoleh sebanyak  1  gram  dari  2  kg  sampel  tangkai  terong. Total  fenolik  yang  terkandung  di  dalam  sampel ekstrak tangkai terong ditentukan dengan menggunakan Folin-Ciocalteu sebagai  reagen  dan asam galat sebagai senyawa standar. Penentuan total kandungan  fenolik  dinyatakan  dalam  miligram ekuivalen asam galat tiap gram subfraksi (mgGAE/g). Absorbansi untuk berbagai pengenceran  asam  galat  dengan  reagen Folin- Ciocalteu dijelaskan  seperti  pada  Gambar  1 sehingga  didapatkan  kurva  standar;  y  =  0,0011x  + 0,0576  dengan  R 2 =  0,9918.  Dimana  y  adalah absorbansi  pada  765  nm  dan  x  adalah  total kandungan  fenol  dalam  ekstrak  sampel.  Senyawa fenolik merupakan salah satu jenis antioksidan yang berperan  dalam  penghambatan  radikal  bebas. 18 Berdasarkan Tabel 1, total fenolik yang terkandung dalam  ekstrak  tangkai  terong  yaitu  sebesar  190,47 mgGAE/g (19,047%).

## Pengujian Kandungan Flavonoid
Penentukan  kadar  senyawa  flavonoid  total pada  sampel  ekstrak  tangkai  terong  dinyatakan dalam  miligram  ekuivalen  quersetin  tiap  gram subfraksi  (mgQE/g)  dan  dinyatakan  pula  dalam miligram  ekuivalen  rutin  tiap  gram  subfraksi (mgRE/g). Berdasarkan pengukuran absorbansi dari standar quersetin dan standar rutin dihasilkan kurva linier  yang  dibuat  untuk  mengetahui  hubungan antara  nilai  absorbansi  dengan  konsentrasi  larutan sehingga didapatkan konsentrasi sampel.
Gambar 1. Grafik Absorbansi Sampel Berdasarkan Konsentrasi Sampel
Tabel 1. Kandungan Fenolik Ekstrak Tangkai Terong
Åsampel Konsentrasi (ppm) Sampel (g) Vadd (ml) FP mg GAE/g %Fenol 0,108 51 0,105 4 100 194,28 19,428 0,106 49 0,105 4 100 186,66 18,666 Rata-rata 190,47 19,047
Pembuatan  kurva  standar  kuersetin  dapat  dilihat pada Gambar 2. Persamaan yang diperoleh yaitu y = 0,0081x  –  0,0428  dengan  koefisien  korelasi  (R 2 ) =0,9679. Persamaan ini digunakan untuk menghitung  kadar  flavonoid  total  dalam  sampel ekstrak  tangkai  terong,  dimana  y  menyatakan  nilai absorbansi dan x menyatakan kadar flavonoid dalam sampel.  Semakin  tinggi  konsentrasi, semakin  tinggi pula absorbansinya.
Berdasarkan  Tabel  2,  dapat  diketahui  bahwa total  flavonoid  yang  terkandung  dalam  ekstrak tangkai  terong  berdasarkan  standar  quersetin  yaitu didapatkan  sebesar  62,38  mgQE/g  (6,238%). Percobaan dilakukan sebanyak 2x dengan hasil yang diperoleh keduanya adalah sama.
Gambar 2. Grafik Absorbansi Sampel Berdasarkan Konsentrasi Sampel
Tabel 2. Kandungan Flavonoid Ekstrak Tangkai Terong Berdasarkan Standar Quersetin
Åsampel  Konsentrasi (ppm) Sampel (g) Vadd (ml) FP mg QE/g %Flavonoid 0,482 65,5 0,105 1 100 62,38 6,238 0,482 65,5 0,105 1 100 62,38 6,238 Rata-rata 62,38 6,238
Persamaan  yang  diperoleh  berdasarkan absorbansi rutin terhadap konsentrasi sampel yaitu y = 0,0015x + 0,0337 dengan koefisien korelasi (R 2 ) = 0,9657.  Grafik  absorbansi  terhadap  konsentrasi sampel  dapat  dilihat  pada  Gambar  3.  Berdasarkan
Tabel  3,  berdasarkan  standar  rutin  diperoleh  total flavonoid  pada  ekstrak  tangkai  terong  sebesar 427,61  mgRE/g  (42,761%).  Percobaan  dilakukan sebanyak  2x  dengan  hasil yang  diperoleh  keduanya adalah sama.
y = 0.0081x - 0.0428 R² = 0.9679 -0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 0 20 40 60 80 100 120 Abs o rba ns i Konsentrasi (ppm) y = 0.0011x + 0.0576 R² = 0.9918 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 0 200 400 600 800 1000 A b so rb an si
Konsentrasi (ppm)
Gambar 3. Grafik Absorbansi Sampel Berdasarkan Konsentrasi Sampel
Tabel 3. Kandungan Flavonoid Ekstrak Tangkai Terong Berdasarkan Standar Rutin
Åsampel Konsentrasi (ppm) Sampel (g) Vadd (ml) FP mg RE/g %Flavonoid 0,482 449 0,105 1 100 427,61 42,761 0,482 449 0,105 1 100 427,61 42,761 Rata-rata 427,61 42,761
Pengujian IC 50 Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  berdasar  nilai IC 50 pada  ekstrak  tangkai  terong  ditunjukan  pada Gambar  4.  Berdasarkan  kurva  pada  Gambar  4, diketahui  peningkatkan  konsentrasi  berbanding lurus  dengan  besarnya  %  inhibisi  dan  diperoleh persamaan  y  =  0,1676x  +  7,3942  dengan  koefisien
korelasi (R 2 ) = 0,9375 sehingga diperoleh nilai IC 50 sebesar  255  ppm,  yang  artinya  bahwa  ekstrak tangkai terong memiliki aktivitas antioksidan sangat lemah.  Nilai  IC 50 antara  200-1000  tetap  berpotensi sebagai  antioksidan  namun  sifatnya  kurang  aktif 15,19 .
Gambar 4. Grafik Inhibisi Ekstrak Tangkai Terong Berdasarkan Konsentrasi Sampel Pengujian Daya Hambat dan Daya Denaturasi Protein
Berdasarkan data Gambar 5 dan Tabel 4, hasil pengujian  daya  hambat  dan  daya  denaturasi  protein menunjukan  bahwa  natrium  diklofenak  memiliki persen  denaturasi  paling  kecil  yaitu  sebesar  2,80% pada  5  menit  pertama.  Sedangkan  ekstrak  tangkai terong  memiliki  persen  denaturasi  sebesar  7,37% pada 5 menit pertama. Kemudian pada menit ke-30,
persen  denaturasi  ekstrak  tangkai  terong,  natrium diklofenak,  dan  albumin  sebesar  14,70%,  1,30%, dan 25,84%. Apabila dibandingkan dengan albumin, ekstrak  tangkai  terong  memiliki  daya  hambat  yang lebih  baik,  tetapi  apabila  dibandingkan  dengan natrium diklofenak, ekstrak tangkai terong memiliki daya hambat yang lebih rendah.
y = 0.0015x + 0.0337 R² = 0.9657 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 0 100 200 300 400 500 600 Abs o rba ns i Konsentrasi (ppm) y = 0.1676x + 7.3942 R² = 0.9375 0 10 20 30 40 50 60 70 0 50 100 150 200 250 300 350 %I n h ib is i Konsentrasi
Gambar 5. Grafik Daya Hambat dan Daya Denaturasi Protein
Tabel 4. Daya Hambat dan Daya Denaturasi Albumin, Natrium Diklofenak, dan Ekstrak Tangkai Terong
Waktu Denaturasi (%) Albumin Natrium Diklofenak Ekstrak Tangkai Terong 0 0,00 0,00 0,00 5 10,29 2,80 7,37 10 9,08 1,33 9,77 15 25,15 2,80 14,97 20 31,89 1,30 10,17 25 23,08 2,78 8,04 30 25,84 1,30 14,70

## PEMBAHASAN
Ekstraksi Tangkai Terong
Ekstraksi tangkai terong menggunakan pelarut  etil  asetat  dipilih  karena  berdasarkan penelitian,  etil  asetat  merupakan  salah  satu  pelarut terbaik  pada  ekstrak Sargassum  polycystum dengan karakteristik  rendemen  sebesar  0,91%,  total  fenol sebesar 2,61 mgGAE/100g, total karotenoid sebesar 0,23%,  tingkat  kecerahan  sebesar  5,17,  tingkat kemerahan  sebesar  -3,00,  dan  tingkat  kekuningan sebesar  37,28. 20 Selain  itu,  beberapa  penelitian menunjukkan bahwa pelarut etil asetat sangat cocok digunakan  untuk  ekstraksi  senyawa  fenolik,  hal  ini sesuai  dengan  penelitian  lain  yang  menyebutkan bahwa  kandungan  fenolik  tertinggi  terdapat  pada ekstrak  yang  menggunakan  etil  asetat  sebagai pelarutnya dibandingkan dengan pelarut alkohol. 21

## Kandungan Fenolik
Total  fenolik  yang  terkandung  dalam  ekstrak tangkai  terong  yaitu  sebesar  190,47  mgGAE/gram (19,047%).  Pada  penelitian  lain  menunjukkan  hasil total  fenolik  yang  terkandung  pada  beberapa tumbuhan,  seperti  Iranian Ocimum sebesar  22,9- 615,5  mgGAE/g, Adhatoda  vasica  Nees sebesar 63,95  sampai  92,4  mgGAE/g,  dan Aegle  marmelos
sebesar 27,12 sampai 65,20 mgGAE/g. 18,22
Penelitian  lain  menunjukan  hasil  total  fenolik  pada ekstrak  buah  terong  sebesar  134,23  mgGAE/g. 23 Penelitian  dengan  melihat  kandungan  fenolik  total pada  beberapa  bagian  terong  dengan  pelarut  etanol menunjukkan  hasil  sebesar  32,02  mgGAE/g  pada tangkai  terong,  37,86  mgGAE/g  pada  daun,  28,73 mgGAE/g  pada  batang,  dan  55,19  mgGAE/g  pada kulit terong. 2 Apabila dibandingkan dengan penelitian-penelitian  tersebut,  kandungan  total fenolik  dalam  ekstrak  tangkai  terong  termasuk tinggi.

## Kandungan Flavonoid
Total flavonoid berdasarkan standar quersetin didapatkan  sebesar  62,38  mgQE/g  (6,238%).  Pada penelitian lain yang menggunakan standar quersetin pada  kulit  terong  dengan  pelarut  etanol  diperoleh kadar flavonoid total sebesar 7,66% melalui metode pengeringan  oven  suhu  40 o C  dengan  berat  ekstrak kental  sebesar  7,55  gram. 24 Apabila  dibandingkan dengan  penelitian  tersebut,  kadar  flavonoid  total dengan  standar  quersetin  pada  tangkai  terong hasilnya  lebih  tinggi  karena  dengan  berat  ekstrak 0,105  gram  didapatkan  flavonoid  total  sebesar 6,238%.
0.00 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 0 5 10 15 20 25 30 35 Dena tura si ( %) Waktu (menit) Denaturasi (%) Albumin
Denaturasi (%) Natrium Diklofenak
Denaturasi (%) Ekstrak Terong
Total  flavonoid  berdasarkan  standar  rutin sebesar  427,61  mRE/g  (42,761%)  Penelitian  lain menunjukan hasil bahwa total flavonoid berdasarkan  standar  rutin  pada  ekstrak  buah  terong didapatkan sebesar 101.79 ± 3.4 mgRE/g, yang jika dibandingkan dengan penelitian tersebut, kandungan total flavonoid pada ekstrak tangkai terong termasuk tinggi. 23
Kandungan IC 50 Uji  aktivitas  antioksidan  secara  kuantitatif dapat dinyatakan dalam IC 50 (Inhibition Concentration). IC 50 dapat  diartikan  sebagai besarnya konsentrasi sampel yang dibutuhkan dalam menghambat  50%  radikal  bebas.  Nilai  IC 50 dapat menunjukkan besarnya aktivitas antioksidan senyawa sampel. Nilai IC 50 yang diperoleh yaitu 255 ppm  yang  dapat  digolongkan  sangat  lemah,  hal  ini disebabkan  beberapa  faktor  diantaranya  konsentrasi pelarut,  proses  ekstraksi  pada  suhu  tinggi,  dan  zat pengotor. 25,26
Nilai IC 50 yang diperoleh yaitu 255 ppm yang tergolong sangat lemah, hal ini disebabkan beberapa faktor  diantaranya  konsentrasi  pelarut,  proses ekstraksi  pada  suhu  tinggi,  dan  zat  pengotor. Konsentrasi  pelarut  yang  digunakan  memiliki polaritas  yang  berbeda  dan  berkaitan  dengan kandungan  metabolit  sekunder  yang  terlarut  saat proses  ekstraksi  sehingga  akan  berpengaruh  pada aktivitas  antioksidan  sampel.  Proses  ekstraksi  pada suhu  tinggi  dapat  menyebabkan  ketidakstabilan senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam  sampel sehingga  aktivitas  antioksidannya  dapat  melemah. 25 Selain  itu,  adanya  keberadaan  zat  pengotor  yang ikut  tersaring  saat  proses  ekstraksi  juga  dapat mengurangi  kadar  senyawa  aktif  yang  terkandung dalam sampel. 26
Penelitian  yang  menguji  nilai  IC 50 pada  buah terong  belanda  ( Solanum  betaceum  Cav. )  dengan ekstrak etanol dan ekstrak n-butanol dihasilkan nilai IC 50 sebesar 1.302,08 ppm dan 606,06 ppm. 27 Selain itu, penelitian lain yang dilakukan pada ekstrak buah terong  ungu  ( Solanum  melongena )  dengan  pelarut etanol  didapatkan  nilai  IC 50 sebesar  385,06  ppm dapat  disimpulkan  nilai  IC 50 pada  penelitian  ini menunjukan  hasil  yang  lebih  baik  apabila dibandingkan dengan kedua penelitian tersebut. 12

## Daya Hambat dan Daya Denaturasi Protein
Daya  hambat  pada  natrium  diklofenak  ini disebabkan  karena  kemampuan  natrium  diklofenak dalam  mengikat  albumin  dan  menjadikan  protein lebih  stabil,  sehingga  ketika  diinduksi  oleh  suhu tinggi,  protein  tidak  mengalami  denaturasi. 28 Natrium diklofenak terbukti dapat berikatan dengan serum  albumin  pada  residu  triptofan. 29 Natrium diklofenak  merupakan  obat  golongan  NSAID  ( non-
steroidal  anti-inflammatory  drug )  yang  mempunyai efek  analgesik,  antiinflamasi,  dan  antipiretik. NSAID  adalah  obat  yang  dapat  menghadang  reaksi dari COX (siklooksigenase) sehingga dapat mengurangi  prostaglandin  yang  berfungsi  sebagai mediator  inflamasi  dan  nyeri  sehingga  dapat digunakan  untuk  meredakan  berbagai  jenis  rasa nyeri, encok dan migrain. 30
Ekstrak tangkai terong memiliki daya hambat yang  cukup  baik  sehingga  memungkinkan  sebagai agen  antiinflamasi.  Hal  ini  karena  terjadi  aktivitas penghambatan  dari  metabolit  sekunder  seperti senyawa  flavonoid  dan  fenolik  yang  mengikat albumin  dan  menjadikan  protein  lebih  stabil.  Oleh karena  itu,  saat  dilakukan  pemanasan  protein  tidak mengalami  denaturasi.  Selain  itu,  penghambatan denaturasi  protein  dapat  terjadi  karena  adanya interaksi  gugus  hidroksil  dan  cincin  aromatik senyawa flavonoid dengan residu asam amino. 31,32

## SIMPULAN
Kandungan senyawa bioaktif  ekstrak  tangkai terong  berdasarkan  uji  fenolik  sebesar  190,47 mgGAE/gram yang tergolong tinggi, total flavonoid berdasarkan  standar  quersetin  dan  rutin  sebesar 62,38  mgQE/g  dan  427,61  mgRE/g  yang  tergolong tinggi,  uji  IC 50 ekstrak  tangkai  terong  menunjukan nilai  255  ppm,  dan  uji  daya  hambat  denaturasi protein  pada  ekstrak  tangkai  terong  diperoleh denaturasi pada menit ke-5 sebesar 7,37% dan pada menit ke-30 sebesar 14,70%. Apabila dibandingkan dengan  natrium  diklofenak,  ekstrak  tangkai  terong memiliki  daya  hambat  yang  lebih  rendah.  Namun, apabila  dibandingkan  dengan  albumin,  ekstrak tangkai  terong  memiliki  daya  hambat  yang  lebih baik.  Penelitian  selanjutnya,  diharapkan  dapat menguji  efektivitas  tangkai  terong  secara in  vivo sehingga  didapatkan  hasil  yang  lebih  akurat  dan presisi.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  rasa  terima  kasih kepada  Kementerian  Pendidikan,  Kebudayaan, Riset, dan Teknologi yang telah mendanai penelitian ini  melalui  Program  Kreativitas  Mahasiswa  (PKM) tahun 2021.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Dewana  SF,  Rohmani  S.  Uji  aktivitas antioksidan  ekstrak  kulit  terong  (solanum melongena  l  .)  dan  uji sifat  fisika  kimia  dalam sediaan krim. Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik,  2012;  Prosiding  seminar  nasional Perkembangan  Terbaru  Pemanfaatan  Herbal sebagai  Agen  Preventif  Pada  Terapi  Kanker: 139–44.
http://dx.doi.org/10.31942/jiffk.v0i0.1215 2.   Jung  EJ,  Bae  MS,  Jo  EK,  Jo  YH,  Lee  SC.
Antioxidant  activity  of  different  parts  of eggplant. Journal of Medicinal Plant Research. 2011;5(18):4610–5. https://doi.org/10.5897/JMPR.9000196
3.   Nachar  K  Al,  Hasian  J,  Khatib  R  Al. Investigation  and  measurement  of  some mineral  and  vitamins  in  eggplant  fruit  calyx, and  the  possibility  of  being  used  as  food supplements  and  alternative  medicine.  J  Food Nutr, 2019; 5: 1-10. Available at : http://www.jscholaronline.org/full- text/JFN/5_102/Investigation-and- Measurement.php
4.   Pawar  RK,  Bhagure  GR,  Chavan  RP.
Antioxidants  and  their  role  in  nurture  human life  and  industry:  A  review.  International Journal  of  Chemical  Studies.  2016;4(3):22–6.
Available at
:
https://www.chemijournal.com/archives/2016/v ol4issue3/PartA/4-2-19.pdf
5.   Lourenço  SC,  Moldão-Martins  M,  Alves  VD.
Antioxidants  of  natural  plant  origins:  From sources to food industry applications. Molecules. 2019;24(22):14– 6. https://doi.org/10.3390/molecules24224132 6.   Ignat  I,  Volf  I,  Popa  VI.  A  critical  review  of methods  for  characterisation  of  polyphenolic compounds  in  fruits  and  vegetables.  Food
Chemistry. 2011;126(4):1821–35. http://dx.doi.org/10.1016/j.foodchem.2010.12.0 26
7.   Tanase  C,  Boz  I,  Stingu  A,  Volf  I,  Popa  VI. Physiological and biochemical responses induced  by  spruce  bark  aqueous  extract  and deuterium  depleted  water  with  synergistic action  in  sunflower  (Helianthus  annuus  L.) plants. Industrial Crops and Products. 2014;60:160–7. http://dx.doi.org/10.1016/j.indcrop.2014.05.039 8.   Sloan AE, Hutt CA. Repositioning nutraceutical  products  for  growth  markets. Nutraceuticals World. 2015 Sep;42–9. Available at: https://www.nutraceuticalsworld.com/issues/20
15-09/view_features/repositioning- nutraceutical-products-for-growth-markets/
9.   Novika  DS,  Ahsanunnisa  R,  Yani  DF.  Uji Aktivitas  antiinflamasi  ekstrak  etanol  daun belimbing wuluh (averrhoa bilimbi l.) terhadap penghambatan  denaturasi  protein.  Stannum : Jurnal Sains dan Terapan Kimia. 2021;3(1):16– 22. h ttps://doi.org/10.33019/jstk.v3i1.2117 10.   Alaraa OR, Abdurahmana NH, Mudalipa SKA,
Olalerea OA. Phytochemical and Pharmacological Properties of Vernonia
amygdalina: A Review. International Journal of Research in Pharmaceutical Sciences. 2017;2:80–96. https://doi.org/10.15282/jceib.v2i1.3871
11.   Abidin Z, Putri UA, Widiastuti H. Potensi anti- inflamasi  fraksi  etil  asetat  ranting  patah  tulang (euphorbia tirucalli l.) dengan uji penghambatan  denaturasi  protein.  ad-Dawaa’
Journal of
Pharmaceutical Sciences. 2020;2(2):49–54.
https://doi.org/10.24252/djps.v2i2.11549
12.  Martiningsih  NW,  Sukarta  IN,  Yuniana  PE. Skrining Fitokimia dan uji aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol buah terong ungu (Solanum melongena L.). Jurnal Kimia. 2014 Jul;8(2):145–52. https://doi.org/10.24843/JCHEM.2014.v08.i02.
p01
13.  Helilusiatiningsih  N,  Yuan  C,  Long  P,  Ping  X, Liang  B,  Fu  Y,  et  al.  Uji  aktivitas  antoksidan dan  senyawa  fitokimia  pada  tanaman  terung pokak  (Solanum  torvum).  Jurnal  Ilmiah Teknologi Pertanian.
2021;6(1):1–8. https://doi.org/10.24843/JITPA.2021.v06.i01.p
01
14.   Rusmana D, Wahyudianingsih R, Elisabeth M, Balqis,  Maesaroh,  Widowati  W.  Antioxidant activity  of  Phyllanthus  niruri  extract,  rutin  and quercetin.  Indonesian  Biomedical  Journal. 2017;9(2):84–90.
https://doi.org/10.18585/inabj.v9i2.281
15.   Molyneux P. The  use of the stable free radical diphenylpicryl-hydrazyl  (dpph)  for  estimating antioxidant  activity.  Songklanakarin Journal of Science and Technology. 2004;26(2):211–9.
16.  Siswarni  M,  Putri  YI,  Rinda  R.  Ekstraksi Kuersetin dari Kulit Terong Belanda (Solanum betaceum  Cav.)  Menggunakan  Pelarut  Etanol dengan  Metode  Maseri  dan  Sokletasi.  Jurnal Teknik Kimia USU. 2017;6(1):36. Available at : https://www.e-jurnal.com/2017/05/ekstraksi- kuersetin-dari-kulit-terong.html
17.  Verma  AM,  Kumar  AP,  Anurag.  Anti denaturation  and  antioxidant  activities  of annona cherimola in-vitro. International Journal of Pharma and Bio Sciences. 2011;2(2):1–6.
18.  Maurya  S,  Singh  D.  Quantitative  analysis  of total  phenolic  content  in  Adhatoda  vasica  nees extracts.  International  Journal  of  PharmTech Research. 2010;2(4):2403–6.
19.  Satria  MD,  Sari  R,  Wahdaningsih  S.  Uji Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  N-heksan  Buah Lakum  (Cayratia  Trifolia)  dengan  Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil). Jurnal
mahasiswa Farmasi Fakultas Kedokteran
UNTAN,  2014;  1(1):  1-8:  Available  at  :
https://jurnal.untan.ac.id/index.php/jmfarmasi/a
rticle/view/4284/4325 20.  Savitri  I,  Suhendra  L,  Wartini  NM.  Pengaruh jenis  pelarut  pada  metode  maserasi  terhadap karakteristik  ekstrak  Srgassum  polycystum. Jurnal  Rekayasa  dan Manajemen  Agroindustri. 2017;5(3):93–101. Available at :
https://ojs.unud.ac.id/index.php/jtip/article/vie w/35504
21.   Huliselan YM, Runtuwene MRJ, Wewengkang
DS.  Antioxidant  activity  of  ethanol,  ethyl acetate  and  n-hexane  extract  from  seswanua leaves (Clerodendron squamatum Vahl.). Pharmacon. 2015;4(3):155–63.
https://doi.org/10.35799/pha.4.2015.8855 22.  Sharma  GN,  Dubey  SK,  Sati  N,  Sanadya  J.
Phytochemical  screening  and  estimation  of total phenolic content in aegle marmelos seeds. International  Journal  of  Pharmaceutical  and Clinical
Research. 2011;3(2):27–9.
https://doi.org/10.25258/ijpcr.v3i2.2
23.   Frond  AD,  Iuhas  CI,  Stirbu  I,  Leopold  L,
Socaci  S,  Andreea  S,  et  al.  Phytochemical characterization  of  five  edible  purple-reddish vegetables:  anthocyanins,  flavonoids,  and phenolic  acid  derivatives.  Molecules.  2019; 24(18):
1536.
https://doi.org/10.3390/molecules24081536
24.  Rizqi  NS,  Kusnadi,  Purgiyanti.  Pengaruh metode  pengeringan  terhadap  kadar  flavonoid total  ekstrak  kulit  terong  ungu  (Solanum melongena  L.).  Politeknik  Harapan  Bersana. Skripsi. 2019.
25.  Lantah  PL,  Montolalu  LADY,  Reo  AR. Kandungan Fitokimia dan aktivitas antioksidan ekstrak  metanol  rumput  laut  kappaphycus alvarezii.  Jurnal  Media  Teknologi  Hasil
Perikanan.
2017;5(3):73–9. https://doi.org/10.35800/mthp.5.3.2017.16785
26.   Fauziah A, Sudirga SK, Parwanayoni NMS. Uji antioksidan  ekstrak  daun  tanaman  leunca
(Solanum nigrum L.). Metamorfosa: Journal of
Biological Sciences. 2021;8(1):28. https://doi.org/ 10.24843/METAMORFOSA.2021.V08.I01.P0
3
27.   Asih  IAR,  Sudiarta  IW,  Suci  AAW.  Aktivitas antioksidan senyawa golongan flavonoid ekstrak  etanol  daging  buah  terong  belanda (Solanum  Betaceum  Cav.).  Jurnal  Kimia. 2015;9(1):35–40. https://doi.org/10.24843/JCHEM.2015.v09.i01. p06 28.   Hossain  MK,  Khatun  A,  Rahman  M,  Akter MN, Chowdhury SA, Alam SMM.
Characterization  of  the  effect  of  drug-drug interaction  on  protein  binding  in  concurrent
administration of sulfamethoxazol and diclofenac sodium using bovine serum albumin.  Advanced  Pharmaceutical  Bulletin [Internet].
2016;6(4):589–95. http://dx.doi.org/10.15171/apb.2016.073
29.  Czub  MP,  Handing  KB,  Venkataramany  BS,
Cooper  DR,  Shabalin  IG,  Minor  W.  Albumin- based transport of nonsteroidal anti- inflammatory  drugs  in  mammalian  blood plasma.  Journal  of  Medicinal  Chemistry. 2020;63(13):6847–62.
https://doi.org/10.1021/acs.jmedchem.0c00225 30.  Hutahuruk  T,  Rosita  A,  Oktavianawati  I.
Synthesis 2-(2-(N-(2,6-dichlorophenyl)-4- fluoro  benzamido)phenil)acetat  Acid  as  Drugs Candidate of Inhibitor COX (Cyclooxygenase). e-Jurnal Pustaka Kesehatan. 2014;2(2):215–20. 31.  Kumar A, Ghosh S, Vaishali. An experimental evaluation of Ageratum conyzoides on membrane stabilization and protein
denaturation  during  acute  inflammation  and arthritis. Biomedical and Pharmacology Journal.  2011;4(2):313–7.  Available  at  : http://biomedpharmajournal.org/?p=2029
32.  Zinellu  A,  Sotgia  S,  Scanu  B,  Forteschi  M, Giordo  R,  Cossu  A,  et  al.  Human  serum albumin  increases  the  stability  of  green  tea catechins  in  aqueous  physiological  conditions.
PLoS ONE. 2015;10(7):1–12. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0134690