Karakterisasi Minyak Atsiri Daun Kayu Putih ( Melaleuca leucadendra ) Kota Pontianak dan Aktivitasnya Terhadap Streptococcus mutans
Characterization of The essential oil of Eucalyptus Leaves ( Melaleuca leucadendra ) from Pontianak City and Its Activity Against Streptococcus mutans
Muhamad Agus Wibowo 1*) , Rendi 1 , Warsida 2 , Puji Ardiningsih 1 , Afghani Jayuska 1
1 Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Tanjungpura
2 Jurusan Ilmu Kelautan, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Tanjungpura *E-mail: m.agus.wibowo@chemistry.untan.ac.id

## ABSTRACT
Eucalyptus plants can grow in the city of Pontianak, which is an area with peat soil, although in fact, this  plant  can  grow  well  in  swamps,  sandy  areas,  and  mangroves.  The  difference  in  the  location where eucalyptus grows, causes a difference in the composition of the compounds contained in it, especially  1.8  cineol  which  is  a  potential  compound  to  prevent  dental  caries.  This  study  aims  to isolate  and  characterize  the  essential  oil  of  eucalyptus  leaves  from  the  city  of  Pontianak  and determine its activity in inhibiting the S. mutans bacteria. This research was carried out in two stages: isolating, characterizing, and determining the chemical content of eucalyptus leaf essential oil from Pontianak using Gas Chromatography-Mass Spectroscopy (GC-MS). The second stage was to test the  antibacterial  activity  in  inhibiting  the  growth  of S.  mutans bacteria  using  the  well  diffusion method. The results of the isolation of essential oils obtained a yield of 0.58% (w/w) with a specific gravity characteristic of 0.9288 g/mL, a clear greenish-yellow color, and a characteristic smell of eucalyptus  oil,  and  is  soluble  in  70%  ethanol.  GC-MS  analysis  showed  that  there  were  29 compounds,  with  the  main  compound  being  1.8  cineol  as  much  as  55.71%.  The  results  of  the antibacterial activity test against S. mutans showed that the samples at all test doses were antibacteria with  inhibition  values  of  9.03  mm  (1.393  mg/well),  6.76  mm  (0.697  mg/well),  6.53  mm  (0.348 mg/well), and 5.39 mm (0.174 mg/well). The follow-up test showed that at all doses of the essential oil, it was bacteriostatic against S. mutans bacteria. From the study results, it can be concluded that Pontianak  eucalyptus  oil  meets  the  standards  of  SNI  06-3954-2006  with  1.8  cineol  as  the  main compound and has antibacteria properties against S. mutans .
Keywords: Bioactivity, Eucalyptus, S. mutans .

## PENDAHULUAN
Pontianak, merupakan daerah yang dilalui garis katulistiwa  dan  memiliki  tanah  yang  sebagian besar berupa tanah gambut (Bapeda Pontianak, 2020). Walaupun bertanah gambut, di Pontianak juga  dapat  tumbuh  tanaman  kayu  putih. Kemampuan  ini  karena  kayu  putih  merupakan tumbuhan  yang  mampu  tumbuh  baik  pada lahan-lahan  marginal  maupun  di  daerah  rawa- rawa dan genangan air, mampu beradaptasi pada tanah  dengan  drainase  jelek  (Triana,  2018). Walaupun  dapat  tumbuh  diduga  memiliki kandungan  kimia  yang  berbeda  dengan  kayu putih yang terdapat pada daerah lain.
Kandungan  senyawa  pada  minyak  kayu putih  diketahui  akan  beragam  berdasarkan habitat  tumbuhnya  (Wibowo et  al. ,  2021). Minyak  kayu  putih  kota  Singkawang  yang merupakan  daerah  pesisir  pantai  yang  berpasir memiliki kandungan  5 senyawa dominan  yaitu 1.8  sineol  (71,96%), α -terpineol  (11,44%), β -
caryopilen  (1,78%), α -pinen  (1,77%),    dan β - pinen  (1,66%)  (Wibowo et  al. ,  2021).  Minyak kayu  putih  Desa  Dolok  Nauli,  Kecamatan Parmaksian, Kabupaten Toba Samosir memiliki 5  kandungan  senyawa  dominan  yang α -pinen (24,49%),  1.8  sineol  (23,94%), β -pinen (17,03%),  trans-caryopilen  (9,66%),  dan α - terpineol  (8,96%)  (Sembiring,  2019).  Minyak kayu putih Yogyakarta juga memiliki kandungan  senyawa  dominan  yang  berbeda yaitu  1.8  sineol  (46,46%),  D  (+)  limonene (8,85%), β -caryopilen  (6,14%), α -terpineol (5,39%),  dan α -pinen  (4,16%)  (Pujiarti et  al ., 2011).  Walaupun  konposisi  senyawa  dominan berbeda, dari beberapa penelitian menunjukkan bahwa senyawa 1,8 sineol merupakan senyawa utama pada minyak kayu putih.
Adanya  senyawa  1,8  sineol  memberikan bahwa minyak kayu putih berpotensi digunakan untuk menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus  mutans (Purwaningtyas et  al .,
2019). Senyawa 1,8 sineol merupakan senyawa yang dapat membunuh bakteri gram positif dan negatif  (Şimşek  &  Duman,  2017).  Potensinya dalam  menghambat  pertumbuhan S.  mutans maka  minya  kayu  putih  juga  berpotensi  dalam mencegah terjadinya karies gigi. Hal ini karena,
S.  mutans merupakan  bakteri  yang  dapat menyebabkan terjadinya karies gigi (Forssten et al ., 2010). Kemampuannya ini karena S. mutans dapat  mengubah  glukosa  dan  karbohidrat  pada makanan  menjadi  asam  melalui  fermentasi sehigga  pH  gigi  turun  menjadi  4,5-5,5  yang akan  menyebabkan  terjadinya  demineralisasi pada  enamel  gigi  (Kathleen et  al .,  2017; Apriandi et al ., 2020).
Tabel  1.  Kandungan  kimia  minyak  kayu  putih pada beberapa daerah Senyawa Sumber minyak kayu putih Singka wang (%) Toba Samosi r (%) Yogya karta (%) 1,8 sineol 71,96 23,94 46,46 α-terpineol 11,44 8,96 5,39 β-caryopilen  1,78 - 6,14 α-pinen 1,77 24,49 4,16 β -pinen 1,66 17,03 - trans - caryopilen - 9,66 - limonen - - 8,85 Kajian literatur menunjukkan bahwa tanaman  kayu  putih  dari  kota  Pontianak  yang tumbuh di lahan gambut  merupakan salah satu tanaman  potensial  penghasil  minyak  atsiri dengan kandungan senyawa dominannya adalah 1,8  sineol  (Pujiarti et  al .,  2011;  Sembiring, 2019;  Wibowo et  al. ,  2021).  Adanya  dugaan kandungan 1,8 sineol menjadikannya berpotensi sebagai  penghambat  pertumbuhan  bakteri S. mutans yang  merupakan  bakteri  penyebab terjadinya  karies  gigi  (Purwaningtyas et  al ., 2019). Walaupun senyawa 1,8 sineol
merupakan  senyawa  utama,  namun  sifat  fisika dan prosentase kandungan senyawa ini didalam minyak  kayu  putih  Kota  Pontianak  tentunya akan  memiliki  karakteristik  yang  berbeda dikarenakan tempat tumbuhnya (Wibowo et al. , 2021). Berdasarkan uraian diatas, perlu lakukan kajian  untuk  menentukan  sifat  fisika  dan kandungan kimia minyak kayu putih dari Kota Pontianak,  serta  menentukan  aktivitasnya sebagai  anti-mikroba  terhadap S.  mutans. Penelitian  ini  perlu  mengingat  belum  pernah dilakukan  penelitian  yang  mengkaji  tentang kandungan  senyawa  dan  uji  aktivitas  anti-
bakteri  terhadap S.  mutans dari  minyak  kayu putih  ( M.  leucadendra )  yang  tumbuh  di  kota Ponatianak.

## METODE

## Alat dan bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  pada  penelitaian  ini adalah  akuades,  alkohol 70%,  bakteri Streptococcus mutans ATCC-25175,  daun  kayu  putih  ( Melaleuca leucadendra ), Etil asetat, Media Mueller Hinton Agar (OXOID),  Natrium  Sulfat  Anhidrat  (MERCK), Nutrient Broth (MERCK), Nutrient Agar (MERCK). Peralatan yang digunakan pada penelitian ini  adalah seperangkat  alat  destilasi,  autoklaf  (Hirayama), seperangkat  alat  gelas,  hot  plate  (IKA),  inkubator (Memmer),  laminar  (Clean  Bench  DK-DCB010), vortex (Heidolph), seperangkat alat kromatografi gas – spektroskopi masa (GC-MS Shimadzu QP2010S).
Isolasi Minyak Atsiri Kayu Putih Daun tumbuhan kayu putih ( Melaleuca leucadendra ) yang  digunakan  berasal  dari  kota  Pontianak, Kalimantan  Barat  dan  telah  dideterminasi  di Laboratorium  Biologi  Universitas  Tanjungpura. Isolasi minyak atsiri dari daun kayu putih dilakukan dengan  destilasi uap  terhadap 6 kg  daun  kayu  putih segar.  Destilasi  dilakukan  selama  4  jam  pada  suhu 100-105 o C. Minyak atsiri yang diperoleh dikeringkan dengan natrium sulfat anhidrat (Wibowo et al. , 2021). Terhadap  minyak  yang  diperoleh  kemudian  diukur rendemen dan bobot jenisnya (Supandi et al. , 2019) .

## Analisis Kromatografi Gas - Spektroskopi Masa
Analisis  kromatografi  gas  –  spektroskopi  masa minyak atsiri daun kayu putih dilakukan dengan alat GC-MS Shimadzu QP2010S (Wibowo et al. , 2021). Alat  diseting  menggunakan  kolom  kapiler  RTX  5 panjang  30  m,  gas  pembawa  helium,  dan  kecepatan alir  45,0  mL/menit,  dengan  energi  ionisasi  70  eV. Temperatur  kolom  diatur  pada  suhu  50 o C,  dengan laju  peningkatan  temperatur  dari  5°C/menit  hingga suhu  maksimum  240°C.  Suhu  detektor  diatur  pada 250°C dan suhu injektor 300°C .

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metoda difusi  sumuran  dengan  diameter  smuran  sebesar  6 mm sebanyak 4 lubang dalam  satu petri (Haryati et al. ,  2017).  Biakan  Streptococcus  mutans  yang berumur sekitar 24 jam pada media NB, dioles merata dengan  menggunakan  cutton  buds  pada  permukaan medium MHA, kemudian dibiarkan selama 5 menit. Setelah itu dipipet minyak atsiri konsentrasi 0,625%, 1,25%,  2,5%  dan  5%  (v/v)  dengan  mikropipet sebanyak 30 μL untuk mendapatkan dosis sampel uji secara  berturut-turut  0,174  mg/well,  0,358  mg/well, 0,697  mg/well,  dan  1,393  mg/well.  Dosis  kontrol positif  (amoxicilin)  adalah  0,96  µg/well  dibuat dengan memipet kontrol positif konsentrasi 32 μg/ml sebanyak  30.  Kontrol  negatif  digunakan  etil  assetat PA.  Zona  bening  yang  terbentuk  diukur  dengan jangka sorong.
Uji  aktivitas  bakteriostatik  dan  bakteriosidal dengan  cara  mengambil  satu  ose  pada  area  zona bening semua konsentrasi, lalu digoreskan kepermukaan media MHA dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 36 o (Pankey & Sabath, 2004) .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Isolasi dan Analisis Kandungan Senyawa
Hasil  destilasi  uap  terhadap  6  Kg  daun  kayu putih menghasilkan minyak atsiri sebanyak 37,5 mL  dengan  rendemen  sebesar  0,58%.  Minyak atsiri yang diperoleh berwarna hijau kekuningan, memiliki bau khas kayu putih, larut dalam  etanol  70%  dengan  perbandingan  1:1 hingga  1:10.  Pengukuran  berat  jenis  terhadap minya  atsiri  yang  diperoleh  memberikan  nilai berat jenis sebesar 0,9288 g/mL.
Gambar 1.Minyak kayu putih hasil destilasi Analisis GC-MS terhadap minya kayu putih menunjukkan  bahwa  minyak  kayu  putih Pontianak  mengandung  28  senyawa  dengan  5 senyawa  dominan  1.8  sineol  (55,71%),  trans- caryopilen  (8,61%),  alfa-terpineol  (4,40%), alfa-humulen (4,41%), alfa- bisabolol (3,56%), dan  gamma-terpinen  (3,54%),  seperti  terlihat pada  Tabel  2.  Dari  hasil  analisis  juga menunjukkan bahwa terdapat 66,58% senyawa alkena teroksidasi dan 30,5% senyawa golongan alkena, seperti pada Gambar 3.
Keberadaan  senyawa  1.8  sineol  sebagai senyawa  utama  (55,71%)  pada  minyak  kayu putih  sampel  Pontianak  didukung  oleh  spektra massa dari puncak kromatogram dengan waktu retensi  14,558  menit  (Gambar  2)  yang merupakan  senyawa  1.8  sineol.  Dari  spektra massa gambar 2 menunjukan adanya puncak ion m/z  154  yang  merupakan  ion  molekul  dari senyawa  1.8  sineol  (C 10 H 18 O).  Selanjutnya puncak  ion  molekul  m/z  154  mengalami fragmentasi dengan melepaskan –CH 3 menghasilkan  fragmen  [C 9 H 15 O] + dengan  m/z 139.  Fragmen  ion  dengan  m/z  139  selanjutnya melepas C 7 H 12 menghasilkan fragmen [C 2 H 3 O] + dengan m/z 43 dan pelepasan –CH2
menghasilkan  fragmen  [C 8 H 13 O] + dengan  m/z 125.    Pelepasan  –CH 2 menghasilkan  fragmen [C 7 H 11 O] + dengan  m/z  111.  Pelepasan  –H 2 CO menghasilkan  fragmen  [C 6 H 9 ] + dengn  m/z  81. Pelepasan –C 2 H 2 menghasilkan fragmen [C 4 H 7 ] + dengan  m/z  55.  Pelepasan  –CH 2 menghasilkan fragmen [C 3 H 5 ] + dengan m/z 41. Pelepasan  –CH  menghasilkan  fragmen  [C 2 H 4 ] dengan  m/z  28.  Fragmen  ion  m/z  125  yang merupakan  [C 8 H 13 O] + adalah  hasil  fragmentasi dari fragmen ion m/z 139 yang melepaskan -CH 2 . Fragmen m/z 125 selanjutnya akan  melepaskan  H 2 O  menghasilkn  framen [C 8 H 11 ] + dengan m/z 107.
Tabel  2.  Analisis  komponen  kimia  GC-MS minyak atsiri ( Melaleuca leucadendra) Pontianak No  Nama Senyawa Waktu Retensi (Menit) Persen % 1 Alfa-Felandrena 10.462 0.46 2 Trans-Ocimena 10.741 2.02 3 Beta-Pinena 12.251 0.87 4 Beta-Mircena 12.374 1.41 5 Mircena 12.897 1.92 6 Sikloheksena 13.860 0.80 7 1,8-Sineol 14.555 55.71 8 Gamma-Terpinen 15.435 3.54 9 3-Okten-5-ine, 2,7- dimetil-, 16.460 1.49 10 Sitronella 18.602 0.34 11 Terpineol 19.514 1.02 12 Alfa Terpineol 20.006 4.40 13 Tetradekena 24.699 0.19 14 2-Karene 25.441 0.14 15 Farnesol 25.575 0.18 16 Trans-Kariofilena 26.922 8.61 17 1,3,7-Oktatriena, 3,7-dimetil- 27.825 3.28 18 Megastigma 28.450 0.28 19 Alfa-Humulena 28.708 4.41 20 Gamma-Kadinena 29.140 0.26 21 1,6,10- Dodecatrien-3-ol 30.108 0.21 22 Longipinenepoxide  31.226 0.74 23 alpha-Bisabolol 31.359 3.56 24 1-Nonine 31.878 0.62 25 Naftalena 32.143 0.16
Gambar 2.  Spektra massa puncak ke 7 dengan waktu retensi 14.558 menit

## Gambar 3. Prosentase golongan senyawa
Dilihat  dari  sifat  fisik  minyak  kayu  putih asal  Pontianak,  dari  sisi  bau,  warna,  kelarutan dalam  etanol  70%,  dan  berat  jenisnya  maka sampel  memenuhi  standar  SNI.  Berdasarkan kandungan  sineol  yang  ada,  maka  memiliki kesamaan sifat dengan fisik dengan SNI.  Hasil analisis  sifat  fisik  dan  kandungan  senyawa dominan sampel minyak
kayuputih menunjukkan  bahwa,  minyak  atsiri  yang dihasilkan,  kualitasnya  memenuhi  standar  SNI 06-3954-2006.
Gambar 4. Grafik kandungan 1,8 sineol minyak kayu  putih  berdasarkan  daerah.
(Keterangan:  Ptk=Pontianak;  TS=Toba Samosir; Yog=Yogyakarta; Mer=Merauke; Mlk=Maluku; dan
Skw=Singkawang )
Berdasarkan  kandungan  sineol,  maka  minyak kayu  putik  Pontianak  tergolong  berkualitas  baik, karena  memiliki  kandungan  sineol  55,571%  (BSN, 2005).  Hal  ini  juga  dapat  dilihat  jika  kita membandingkan  kandungan  sineol  pada  beberapa
daeran  seperti  minyak  kayu  putih  Desa  Dolok Nauli, Kecamatan Parmaksian, Kabupaten Toba Samosir  dengan  kandungan  1.8  sineol  sebesar 23,94% (Sembiring, 2019). Minyak kayu putih Yogyakarta yang diambil dari daerah sukun dan gundih  dengan  lahan  tumbuh  tanah  liat  dan berkapur  mengandung  senyawa  dominan  1.8 sineol  sebesar  46,46%  (Pujiarti et  al. ,  2011). Minyak kayu putih Marauke diambil dari daerah Taman  Nasional  Wasur  memiliki  kandungan enyawa  1,8  sineol  sebesar  34,88%  (Widiyanto &  Siarudin,  2014).  Kandungan  1,8  sineol sampel  pontianak  masih  kalah  banyak  jika dibandingkan  dengan  minyak  kayu  putih  dari maluku  dan  singkawang.  Minyak  kayu  putih Maluku  yang  diambil  dari  Desa  Suli, Kecamatan  Salahutu, Kabupaten  Maluku Tengah memiliki kandungan 1.8 sineol sebesar 72,11%,  sedangkan minyak  kayu  putih singkawan  memiliki  kadar  sineol  sebesar 71,98%  (Efruan et  al .,  2015;  Wibowo et  al. , 2021).
Tabel  3.  Perbandingan  sifat  fisika  sampel dengan  Standar  Nasional  Indonesia 06-3954-2006 (BSN, 2005).
Sifat SNI 06-3954- 2006 Karakteristik Warna Jernih  -  kunin g kehijauan Jernih  -  kunin g kehijauan Bau Khas  minyak kayu putih Khas  minyak kayu putih Bobot Jenis  0,900-0,930 g/mL 0,928 g/mL Kelarutan dalam etanoll 70% Larut  dengan perbandingan 1:1 sampai 1:10 Larut  dengan perbandingan 1:1 sampai 1:10 Kandungan Sineol 50% - 65% 55,71%

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  minyak  kayu  putih sampel Pontianak
terhadap bakteri Streptococcus  mutans dilakukan  pada  dosis 1,393 mg/well, 0,6979 mg/well, 0,348 mg/well, dan 0,174 mg/well. Hasil uji memberikan daya hambat  secara  berturut-turut  adalah  9.03  mm
69%
31%
Alkana Teroksidasi Alkena 55,57 23,94 46,46 34,88 72,11 71,98 0 10 20 30 40 50 60 70 80 Ptk TS Yog Mer Mlk Skw P erse n (% ) Daerah Tumbuh
(1,393 mg/well), 6.76 mm (0,697 mg/well), 6,53 mm  (0,348  mg/well),  dan  5,39  mm  (0,174 mg/well),  yang  dapat  dilihat  pada  tabel  4  dan Gambar  5.  Hasil  uji  ini  menunjukkan  bahwa minyak kayu putih yang diisolasi dari daun kayu putih  kota  Pontianak  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans . Uji aktivitas bakteriostatik dan bakterisidal terhadap  sampel  uji  menunjukkan  bahwa minyak  atsiri  sampel  Pontianak  bersifat bakteriostatik,  hal  ini  ditunjukkan  adanya pertumbuhan  bakteri  pada  goresan  setelah diinkubasi selama 24 jam. Aktivitas anti-bakteri terhadap  S.  mutans  ini  sesuai  dengan  sampel minyak kayu putih yang berasal dari mojokerto dengan  kandungan  1,8  sineol  (46.43%), kariofilen  (6%),  α-terpineol  (3,7%),  γ-terpinen (3,09%), dan α-pinen (2,45%)  (Septiana et  al. , 2020).
Tabel  4.  Uji  aktivitas  minyak  kayu  putih terhadap bakteri Streptococcus mutans Sampel uji Dosis (mg/well) Luas Zona Bening (mm) Minyak kayu putih 1,393 9,03 0,697 6,76 0,348 6,53 0,174 5,39 Amoxicilin 0,960 2,95 Kontrol negatif 100% 0 Aktivitas antibakteri dari minyak kayu putih Pontianak dimungkinkan karena adanya senyawa  utama  yang  terdapat  didalamnya seperti  1.8  sineol,  trans-caryopilen,  alfa- terpineol. Senyawa 1.8 sineol pada minyak kayu putih memiliki aktivitas antibkateri dengan cara merusak  bagian  membran  sitoplasma  yang mengakibatkan  sel  mati  (Şimşek  &  Duman, 2017).  Senyawa  alpa-terpineol  pada  minyak kayu putih memiliki aktivitas antibakteri dengan cara merusak bagian dinding  sel dan  membran sel  bakteri  sehingga  terjadinya  penurunan ukuran  sel  yang  menyebakan  pecahnya membran  sel  (Li et  al. ,  2014).  Senyawa  trans- caryopilen  dan  alfa-humulen  bekerja  dengan cara  merusak  struktur  dinding  sel S.  mutans (Azizan et  al. ,  2017).  Kerusakan  sel  pada bakteri  dapat  menganggu  proses  metabolisme pada  bakteri  yang  akan  mengakibatkan  sel bakteri  menjadi  lisis  dan  terjadi  kematian  sel (Bautista-Silva et al. , 2020).
Aktivitas  antibakteri  dari  senyawa  1.8 sineol, trans-caryopilen, alfa-terpineol, dan alfa-
humulen yang terdapat pada minyak kayu putih ini  dikarenakan  adanya  gugus  -OH  yang  dapat bereaksi  dengan  gugus  posfat  pada  fosfolipid sehingga  mengakibatkan  terjadinya  kerusakan didinding  sel  dari  mikrobra  (Sayuti,  2015; Azizan et  al. ,  2017).  Hasil  uji  lanjut  dengan metode  Least  Significance  Different  (LSD) menunjukkan  semua  dosis  (1,393  mg/well; 0,697 mg/well; 0,348 mg/well; 0,174 mg/well) tidak berbeda nyata (p>0,05).
Gambar  5.  Hasil  uji  antibakteri  minyak  kayu putih terhadap bakteri Streptococcus mutans .  Keterangan:  A  Konsentrasi 0,625%,  B  Konsentrasi  1,25%,  C konsentrasi 2,5%, D Konsentrasi 5%, E Kontrol Positif, F Kontrol negatif
Gambar 6. Hasil uji bakteriostatik minyak kayu putih Melaleuca leucadendra
terhadap bakteri Streptococcus mutans .

## KESIMPULAN
Minyak kayu putih kota Pontianak mengandung senyawa  mayor  1,8  sineol  sebanyak  55,71%. Dilihat dari sifat fisik maka minyak kayu putik kota Pontianak memenuhi standar SNI 06-3954- 2006,  dengan  karakteristik  rendemen  sebesar 0,58% (b/b), berat jenis 0,9288 g/mL, berwarna jernih  kuning  kehijauan,  berbau  khas  minyak kayu  putih,  larut  dalam  etanol  70%.  Hasil  uji aktivitas  anti-bakteri  terhadap S.  mutans, minyak  kayuputih  dari  kota  Pontianak  mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri S.  mutan , bersifat bakteriostatik, serta berpotensi digunakan untuk mencegah karies gigi.

## DAFTAR PUSTAKA
Apriandi  R,  Mardianingrum  R  &  Susanti  S. 2020. Uji Aktivitas Antibakteri Streptococcus mutans Penyebab Karies Gigi pada  Family  Zingiberaceae  dan  Myrtaceae Secara Sistematika Review. Pharmacoscript . 3 (2): 127-133. Azizan  N. et  al. 2017.  ‘Composition  and Antibacterial  Activity  of  the  Essential  Oils of  Orthosiphon  stamineus  Benth  and  Ficus deltoidea  Jack  against  Pathogenic  Oral Bacteria. Molecules  (Basel,  Switzerland) , 22 (12): E2135. Bapeda  Pontianak.  2020. Kondisi  Fisik  Dasar Kota Pontianak. Pontianak: BAPPEDA . BSN.  2005.  SNI  06-3954-2006  Minyak  Kayu Putih. Badan Standarisasi Nasional.
Efruan GK, Martosupono M & Rondonuwu FS.
2015.  Identifikasi  Kandungan  Senyawa  a- pinene  dalam  Minyak  Kayu  putih  dengan Menggunakan  Spektroskopi  Infra  Merah dekat (NIRs). Prosiding Semnastek
[Preprint].
Forssten S, Björklund M & Ouwehand A. 2010. Streptococcus mutans, Caries and Simulation Models. Nutrients . 2 : 290–298. Haryati  SD,  Darmawati  S  &  Wilson  W.  2017. Perbandingan  Efek  Ekstrak  Buah  Alpukat (Persea americana Mill) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas aeruginosa  dengan  Metode  Disk  dan Sumuran. Prosiding  Seminar  Nasional  & Internasional . 1 (1). Imam Sayuti A. 2015. Uji Aktivitas Antibakteri Kombinasi Minyak Atsiri Lempuyang Wangi (Zingiber  aromaticum  Val.)  dan  Bangle (Zingiber  cassumunar  Roxb.)  terhadap
Bakteri Staphylococcus aureus dan
Escherichia  coli  (Antibacterial  Activity
Assay  of  Lempuyang  Wangi  (Zingiber
aromaticum  Val.)  and  Bangle  (Zingiber cassumunar Roxb.) Essential Oil Combination on Staphylococcus aureus and Escherichia coli) . UNEJ PRESS. Kathleen  JH,  Lunardhi  CGJ  &  Subiyanto  A. 2017. Kemampuan Bioaktif Glass (Novamin)  dan  Casein  Peptide  Amorphous Calcium  Phosphate  (CPP-ACP)  terhadap Demineralisasi Enamel. Conservative Dentistry Journal . 7 (2): 111–119. Li,  L. et  al. 2014.  Antibacterial  Activity  of  α- terpineol  May  Induce  Morphostructural Alterations  in  Escherichia  coli. Brazilian Journal of Microbiology: [publication of the Brazilian  Society  for  Microbiology] . 45 (4): 1409-1413.
Pankey  GA  &  Sabath,  LD.  2004.  Clinical Relevance of Bacteriostatic Versus
Bactericidal  Mechanisms  of  Action  in  The Treatment  of  Gram-Positive  Bacterial Infections. Clinical Infectious Diseases: An Official  Publication  of  the  Infectious Diseases  Society  of  America .  38(6):  864– 870.
Pujiarti  R,  Ohtani  Y  &  Ichiura,  H.  2011. Physicochemical  Properties  and  Chemical Compositions  of  Melaleuca  leucadendron Leaf  Oils  Taken  from  The  Plantations  in Java,  Indonesia. Journal  of  Wood  Science , 57 (5): 446–451.
Purwaningtyas KW, Wibowo MA & Warsidah.
2019.  Uji  Daya  Hambat  Fraksi  Sisa  Dari Destilasi  Fraksionasi  Minyak  Atsiri  Daun Ujung  Atap  ( Baeckea  Frutescens L.) Terhadap  Bakteri  Streptococcus  mutans. Jurnal Kimia Khatulistiwa . 8 (2). Sembiring  CNB.  2019 Analisa  Kandungan Kimia, Sifat Fisika, Penentuan Kadar Sineol Minyak Atsiri Daun Eucalyptus pellita dari PT  Toba  Lestari  dengan  Metode  GC-MS . https://repositori.usu.ac.id/handle/12345678 9/13281[Accessed: 2022-08-16 22:08:54].
Septiana S. et al. 2020. Cajuputs candy impairs Candida albicans and Streptococcus mutans mixed biofilm formation in vitro. F1000Research . 8 : 1923.
Şimşek M & Duman R. 2017. Investigation of Effect  of  1,8-cineole  on  Antimicrobial Activity of Chlorhexidine Gluconate. Pharmacognosy Research . 9 (3): 234-237. Supandi M, Wibowo MA & Zahara TA. 2019. Karakterisasi  Minyak  Atsiri  Daun  Ujung Atap (Baeckea Frutesces L) dari Hutan Desa Sungai  Nanjung  Kabupaten  Ketapang Kalbar. Indonesian  Journal  of  Pure  and
Applied Chemistry . 2 (2): 74-83. Triana  N.  2018. Analisis  Kesesuaian  Lahan Untuk  Tanaman  Kayu  Putih (Melaleuca Leucadendron) di KPHP Rote Ndao Dengan Menggunakan  Sistem  Informasi  Geografis . https://nenytriana.wordpress.com/2018/03/0 6/analisis-kesesuaian-lahan-untuk-tanaman- kayu-putih-melaleuca-leucadendron-di- kphp-rote-ndao-dengan-menggunakan- sistem-informasi-geografis/  [Accessed:  17 August 2022].
Wibowo MA. et al. 2021. Komposisi Kimia dan Uji  Aktivitas  Antibakteri  Minyak  Atsiri Daun Kayu Putih (Melaleuca cajuputi) dari Kota  Singkawang. Biopropal  Industri .
12 (1): 1-7.
Widiyanto  A  &  Siarudin  M.  2014.  Sifat Fisikokimia  Minyak  Kayu  Putih  Jenis Asteromyrtus  Brasii. Jurnal  Penelitian Hasil Hutan . 32 (4): 243–252.
128                                                 Karakterisasi Minyak Astiri …                               (Wibowo, dkk)