## ABSTRAK
Tanaman  sarang  semut  dan  keladi  tikus  digunakan  sebagai  tanaman  obat.  Sarang  semut  memiliki kandungan  tokoferol,  fenolik  dan  flavonoid.  Keladi  tikus  memiliki  kandungan  alkaloid,  saponin, steroid, glikosida dan RIP (Ribosome Inacting Protein) efektif sebagai antioksidan dan penyembuhkan kanker.  Tujuan  penelitian  untuk  mengetahui  aktivitas  antioksidan  kombinasi  tanaman  sarang  semut dan  keladi  tikus  dibandingkan  dengan  bentuk  tunggalnya  dalam  menangkal  radikal  bebas  metode DPPH (2,2-diphenyl-1-picrilhidrazyl). Metode penelitian adalah metode analitik ekperimental dengan tekhnik  quota  sampling.  Uji  aktivitas  antioksidan  menggunakan  metode  spektrofotometri  UV-VIS (Spectrofotometer AES-80).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kombinasi  tanaman  sarang  semut dan keladi tikus 2:1 termasuk paling aktif dengan IC 50 91,7234 ppm dan dikategorikan kuat. IC 50 bentuk tunggal keladi tikus sebesar 369,2582 ppm termasuk kategori sangat lemah. Bentuk tunggal sarang semut sebesar 99,0533 ppm termasuk dalam kategori kuat. Kombinasi sarang semut dan keladi tikus 1:2  sebesar  262,4262  ppm  termasuk  dalam  kategori  sangat  lemah. Aktivitas  antioksidan  kombinasi sarang semut dan keladi tikus lebih kuat pada fraksi butanol dibandingkan dengan bentuk tunggalnya. Kombinasi ekstrak sarang semut dan ekstrak keladi tikus 2:1 memiliki aktivitas antioksidan paling kuat.
Kata kunci : antioksidan, DPPH, keladi tikus, sarang semut, radikal bebas, quota sampling

## ABSTRACT
The  Sarang  semut  plants  and  keladi  tikus  use  as  a  medicinal  plant.  Sarang  semut  plants  contains tocopherol, phenolic and flavonoid. Keladi tikus contains alkaloids, saponins, steroids, glycosides and RIP (Ribosome Inacting Protein) are effective as an antioxidant and cancer healing. This study aims to find out the antioxidant activity of the combination of Sarang semut plant and Keladi tikus compared to the singular in counteracting free radical DPPH(2,2-diphenyl-1-picrilhidrazyl) method. The study used an experimental analytical method with quota sampling technique. Test of the antioxidant activity using UV-VIS spectrophotometry (Spectrophotometer AES-80). The results of research assigmed that combination Sarang semut plants and Keladi tikus 2:1 with with IC 50 91,7234 ppm included in the strong category. IC 50 singular Keladi tikus at 369,2582 ppm including very weak category. Singular Sarang semut of 99,0533 ppm is included in the strong category. The combination of Sarang semut plants and Keladi tikus 1:2 at 262,4262 ppm included in the category of very weak. The antioxidant activity of the

## UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KOMBINASI EKSTRAK SARANGSEMUT ( Myrmecodia pendans ) DAN EKSTRAK KELADI TIKUS
( Typhonium flagelliforme Lodd . )
DENGAN METODE DPPH ( 1,1-Dipheyl-2-Picrilhidrazil)
Wimpy 1) , Tri Harningsih 2)
1,2 Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional Surakarta wimpyzabarjad86@gmail.com tri.harningsih@gmail.com
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada - Januari 2017
combination of the two extracts is stonger on buthanol than of the singular extract. Combination extract sarang Semut and keladi tikus with ratio 2:1 has the highest antioxidant activity.
Keywords : antioxidant, DPPH, keladi tikus, sarang semut, free radical, quota sampling
Iswantini et  al .,  2006).  Penelitian  sebelumnya untuk  tanaman  keladi  tikus  memiliki  aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 56,63 µg/ml (Musir, 2009).
Kombinasi  beberapa  antioksidan  dapat memberikan  aktivitas  antioksidan  lebih  besar daripada  bentuk  tunggalnya,  seperti  penelitian sebelumnya  tentang  uji  aktivitas  antioksidan kombinasi  ekstrak  tanaman  sarang  semut  dan teh  hitam  dengan  metode  DPPH  ( (1,1-difenil -2-pikrilhidrazil) yang  memiliki  aktivitas antioksidan  dengan  nilai  IC 50 2,3925  µg/ml (Utomo,  2012).  Tujuan  penelitian  adalah  :  1). Mengetahui  kombinasi  ekstrak  tanaman  sarang semut  dan  ekstrak  tanaman  keladi  tikus  yang memiliki  aktivitas  antioksidan  paling  kuat  2). Mengetahui aktivitas antioksidan dari kombinasi ekstrak  tanaman  sarang  semut  dan  ekstrak tanaman  keladi  tikus  bila  dibandingkan  dengan aktivitas antioksidan dalam bentuk tunggalnya.

## 2.  PELAKSANAAN
Alat  yang  digunakan  adalah:  Blender, batang  pengaduk, rotary  evaporator ,  neraca elektrik  ACIS  AD  600  g,  tabung  reaksi,  pipet tetes,  Spektrofotometer  UV-Visible  AES-80, neraca analitik ohaus AR 2140 dengan sensitifitas 0,0001, gelas piala pyrex (50 ml), labu ukur pyrex (10 ml, 100 ml), pipet volume, kuvet, gelas ukur pyrex (10 ml, 100 ml).
Bahan  yang  digunakan  yaitu:  kain  hitam, kain  flannel,  ekstrak  sarang  semut  dan  keladi tikus,  metanol,  pereaksi  Dragendorf,  Mayer, Wagner, kloroform, anhidrat asetat, asam sulfat pekat,  asam  sulfat  2N,  serbuk  magnesium, alkohol, HCI 2N, amil alkohol, FeCI 3 5%, DPPH dan vitamin C.

## 3.   METODE PENELITIAN
a.  Pembuatan  Ekstrak  Bentuk  Tunggal  Tana- man Sarang Semut Sebanyak 250 gram serbuk tanaman sarang semut  dilakukan  ekstraksi  secara  maserasi

## 1.  PENDAHULUAN
Berbagai  penyakit  di  dalam  tubuh disebabkan  oleh  adanya  radikal  bebas.  Radikal bebas  merupakan  suatu  senyawa  atau  molekul yang mengandung satu atau lebih elektron tidak berpasangan  pada  orbital  luarnya.  asap  rokok, obat, makanan dalam kemasan, bahan aditif dan lain-lain  (Droge  dalam  Utomo,  2012).  Radikal bebas  dapat  menginduksi  penyakit  kanker, arteriosklerosis dan penuaan dini yang disebabkan kerusakan  jaringan  karena  oksidasi  sehingga diperlukan antioksidan yang mampu menangkap radikal  bebas  (Kikuzaki  and  Nakatami,  1993). Antioksidan  merupakan  senyawa  atau  molekul yang dapat mencegah terjadinya proses oksidasi yang  disebabkan  oleh  radikal  bebas  (Rahardjo dan Hernani, 2005).
Tanaman  obat  yang  berfungsi  sebagai antioksidan adalah sarang semut karena memiliki zat  aktif  yang  berfungsi  sebagai  obat  kanker (Soeksmanto et  al .,  2010).  Sarang  semut  juga digunakan  sebagai  obat  alternatif  maag,  wasir, mimisan,  sakit  punggung,  ruam  kulit,  alergi, gangguan  asam  urat,  stroke,  masalah  jantung koroner,  TBC,  tumor,  hepatitis,  rematik  dan diare.  Berdasarkan  hasil  penelitian  Arianto (2008)  tanaman  ini  mengandung  senyawa  aktif penting  tokoferol,  flavonoid,  fenolik,  dan  kaya berbagai  mineral  yang  sangat  berguna  sebagai antioksidan  dan  anti  kanker.  Penelitian  Utomo tahun  2012,  ekstrak  sarang  semut  memberikan aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 3,6830 µg/ ml.
Selain  sarang  semut  obat  tradisional  lain yang  dapat  menyembuhkan  penyakit  kanker adalah  keladi  tikus.  Umbinya  dimanfaatkan sebagai  obat  dengan  campuran  bahan  tanaman lain  dalam  menyembuhkan  berbagai  penyakit kanker  di  antaranya  kanker  payudara,  usus, kelenjar prostat, hati, leukemia dan leher rahim (Hoesen, 2007). Senyawa yang berkhasiat dalam tanaman  ini  adalah  alkaloid,  saponin,  steroid, glikosida,  dan  antioksidan  (Syahid,  2007;

## Jurnal Kesehatan Kusuma Husada
- Januari 2017
dengan  pelarut  metanol,  lalu  dimasukkan dalam  bejana  maserasi,  dibiarkan  selama  5 hari sambil diaduk dan disaring dengan kain fannel sehinnga didapatkan maserat. Ampas yang  didapat  dimaserasi  menggunakan metanol dengan prosedur yang sama sampai didapatkan  maserat  yang  jernih.  Semua maserat  digabungkan  dan  diuapkan  pada suhu 40 0 C sampai didapatkan ekstrak kental. b.  Pembuataan  Ekstrak  Bentuk  Tanaman  Ke- ladi Tikus
Sebanyak 250 gram serbuk tanaman keladi tikus  dilakukan  ekstraksi  dengan  maserasi dengan  pelarut  metanol.  Selanjutnya dimasukkan dalam bejana maserasi, dibiarkan selama  5  hari  sambil  diaduk  dan  disaring dengan  kain  fannel  sehinnga  didapatkan maserat.  Ampas  yang  didapat  kemudian dimaserasi dengan metanol dengan prosedur yang sama sampai didapatkan maserat yang jernih.Semua  maserat  digabungkan  dan diuapkan pada suhu 40 0 C sampai didapatkan ekstrak kental.
c.  Partisi Sampel Semua  hasil  maserat  metanol  dari  sarang semut  dan  keladi  tikus  masing-masing dilakukan  ekstraksi  menggunakan  butanol dan  air  1:1.  Untuk  partisi  ini  didapatkan ekstrak  kental  fraksi  butanol  dan  fraksi  air sarang semut dan keladi tikus.
d.  Pemeriksaan Fitokimia Ada  3  uji  untuk  untuk  mengetahui  adanya senyawa  fitokimia  dalam  sampel,  yaitu  uji alkaloid  (Uji  Dragendorf,  Uji  Mayer,  Uji Wagner), flavonoid, saponin, dan tanin.
e.  Pembuatan Larutan Induk DPPH Sebanyak 10,0 mg larutan DPPH dilarutkan dalam 100 ml metanol sehingga didapatkan larutan DPPH konsentrasi 100 ppm.
f.  Pembuatan Larutan Kerja DPPH Larutan DPPH 100 ppm sebanyak 40 ml dan ditambah metanol di dalam labu ukur 100,0 ml.
g.  Skrining Panjang  Gelombang  Maksimal Larutan DPPH Larutan 3,0 ml DPPH 40 ppm diukur absor- bansinya  dengan  Spektrofotometer  UV-Vis
pada panjang gelombang 500-560 nm sam- pai  didapat  panjang  gelombang  maksimum dari  spektrum  yang  diperoleh  (Molyneux, 2004).
h.  Operating Time Larutan Uji Ekstrak Diambil  1,5  ml  ekstrak  sampel  ditambah 3,0  ml  larutan  DPPH  40  ppm.  Larutan  uji diukur pada menit ke 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8,….. (sampai  konstan)  pada  panjang  gelombang maksimum  sampai  diperoleh  absorbansi yang stabil.
Persiapan  Sampel  untuk  Pengukuran Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Sarang  Semut, Kombinasi  Ekstrak  Sarang  Semut  dan  keladi tikus (1:2), (2:1) dan Ekstrak Keladi Tikus.
1.  Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  pada Ekstrak Sarang Semut
Sebanyak  50,0  mg  ekstrak  sarang  semut dilarutkan  dengan  50,0  ml  metanol,  lalu dilakukan  pengenceran  sehingga  diperoleh larutan  sampel  dengan  konsentrasi  (10, 30,  50,  70,  90  ppm).  Penentuan  aktivitas antioksidan  setiap  konsentrasi  dipipet  1,5 ml larutan sampel lalu ditambahkan 3,0 ml larutan DPPH 40 ppm, diukur absorbansinya setelah  tercapai  OT  pada  panjang  500-560 nm (Utomo, 2012).
2.  Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  pada Ekstrak Keladi Tikus Sebanyak  50,0  mg  ekstrak  keladi  tikus dilarutkan  dengan  50,0  ml  metanol, kemudian  lakukan  pengenceran  sehingga diperoleh larutan sampel dengan konsentrasi (10, 30, 50, 70, 90 ppm). Penentuan aktivitas antioksidaan  setiap  konsentrasi  dipipet  1,5 ml  larutan  sampel  kemudian  ditambahkan 3,0  ml  larutan  DPPH  40  ppm,  diukur absorbansinya  setelah  tercapai  OT  pada panjang gelombang 500-560 nm. Nilai IC 50 dihitung  menggunakan  persamaan  regresi linier  hubungan  antara  konsentrasi  dan  % inhibisi (Utomo, 2012).
3.  Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  Kombi- nasi Ekstrak Sarang Semut dan Ekstrak Ke- ladi  Tikus  dengan  Perbandingan  (2:1)  dan (1:2).
Sebanyak  50,0  mg  campuran  dari  ekstrak sarang semut dan ekstrak keladi tikus dengan perbandingan  (2:1)  dan  (1:2)  lalu  masing- masing dilarutkan dengan 50,0 ml metanol, dilakukan pengenceran pada masing-masing perbandingan  sehingga  diperoleh  larutan sampel dengan konsentrasi (10, 30, 50, 70, 90  ppm).  Penentuan  aktivitas  antioksidan masing-masing  konsentrasi  dipipet  1,5  ml larutan  sampel  kemudian  ditambahkan 3,0  ml  larutan  DPPH  40  ppm,  diukur absorbansinya  setelah  tercapai  OT  pada panjang gelombang 500-560 nm. Nilai IC 50 dihitung  menggunakan  persamaan  regresi linier  hubungan  antara  konsentrasi  dan  % inhibisi (Utomo, 2012).
4.  Pembuatan  dan  Pengukuran  Larutan  Kon- trol. Sebanyak  1,5  ml  metanol,  ditambahkan 3,0  ml  larutan  DPPH  40  ppm,  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang maksimum.
5.  Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  Vitamin C. Sebanyak  10,0  mg  vitamin  C  dilarutkan dengan  100,0  ml  metanol.  Kemudian diencerkan dari 100 ppm sampai didapatkan konsentrasi 2 ppm, 3 ppm, 4 ppm, 5 ppm dan 6  ppm.  Pengukuran  aktivitas  antioksidan setiap  konsentrasi  dipipet  1,5  ml  ditambah 3,0  ml  larutan  DPPH  40  ppm.  Campuran dikocok  lalu  diinkubasi  pada  suhu  kamar selama 30 menit. Diukur absorbansi setelah tercapai  Operating  Time  pada  panjang gelombang  maksimum.  Nilai  IC 50 dihitung menggunakan  persamaan  regresi  linier hubungan antar konsentrasi dan % inhibisi.

## 4.  HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian yang dilakukan meliputi uji kual- itatif  dan  uji  kuantitatif  kandungan  antioksidan pada sampel. Hasil uji kualitatif yang dilakukan pada sampel meliputi uji alkaloid, uji flavonoid, uji saponin, uji tanin seperti tersaji pada Tabel. 1.
Tabel 1. Hasil analisis fitokimia ekstrak tanaman sarang semut dan keladi tikus Uji Sarang semut Keladi tikus Kategori Positif Alkaloid: Dragendorf + + Endapan merah Mayer + - Endapan putih Wagner + + Endapan coklat Flavonoid + + Warna jingga Saponin + + Adanya busa Tanin + - Warna merah tua Uji  Aktivitas  Antioksidan  dengan  Metode DPPH dari masing-masing ekstrak dengan metode peredaman  radikal  bebas  DPPH  memberikan hasil sebagai berikut:
dipipet  1,5  ml  ditambah  3,0  ml  larutan DPPH  40  ppm.  Campuran  dikocok  lalu diinkubasi  pada  suhu  kamar  selama  30 menit.  Diukur  absorbansi  setelah  tercapai Operating Time  pada panjang gelombang maksimum. Nilai IC 50 dihitung menggunakan  persamaan  regresi  linier hubungan  antar  konsentrasi  dan  % inhibisi.

## 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  yang  dilakukan  meliputi  uji kualitatif  dan  uji  kuantitatif  kandungan antioksidan  pada  sampel.  Hasil  uji  kualitatif yang  dilakukan  pada  sampel  meliputi  uji alkaloid,  uji  flavonoid,  uji  saponin,  uji  tanin seperti tersaji pada Tabel. 1.
Tabel  1.  Hasil  analisis  fitokimia  ekstrak  tanaman sarang semut dan keladi tikus Kategori Uji Sarang semut Keladi tikus Positif Alkaloid: Dragendorf  + + Endapan merah Mayer + - Endapan putih Wagner + + Endapan coklat Flavonoid + + Warna jingga Saponin + + Adanya busa Tanin + - Warna merah tua Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH  dari  masing-masing  ekstrak  dengan metode  peredaman  radikal  bebas  DPPH memberikan hasil sebagai berikut:
Gambar 1. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut Berdasarkan  gambar  1  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,1257x + 12,647, dimana didapatkan nilai IC 50 99,0533 ppm.
Gambar 2. Hubungan konsentrasi dengan %

## inhibisi ekstrak keladi tikus
Berdasarkan  gambar  2  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,0337x  +  12,668,  didapatkan  nilai  IC 50 369,2582 ppm. Gambar 3. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut dan keladi   tikus Berdasarkan  gambar  3  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,0474x  +  12,683,  maka  didapatkan  nilai IC 50 262,4262 ppm. Gambar 4. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut dan keladi tikus Berdasarkan  gambar  4  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,1263x  +  15,246,  maka  didapatkan  nilai IC 50 91,7234 ppm. Gambar 1. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut Berdasarkan gambar 1 menunjukkan grafik yang  menyajikan  persamaan  regresi  y=0,1257x + 12,647, dimana didapatkan nilai IC 50 99,0533 ppm.
dipipet  1,5  ml  ditambah  3,0  ml  larutan DPPH  40  ppm.  Campuran  dikocok  lalu diinkubasi  pada  suhu  kamar  selama  30 menit.  Diukur  absorbansi  setelah  tercapai Operating Time  pada panjang gelombang maksimum.
Nilai IC 50 dihitung menggunakan  persamaan  regresi  linier hubungan  antar  konsentrasi  dan  % inhibisi.

## 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  yang  dilakukan  meliputi  uji kualitatif  dan  uji  kuantitatif  kandungan antioksidan  pada  sampel.  Hasil  uji  kualitatif yang  dilakukan  pada  sampel  meliputi  uji alkaloid,  uji  flavonoid,  uji  saponin,  uji  tanin seperti tersaji pada Tabel. 1.
Tabel  1.  Hasil  analisis  fitokimia  ekstrak  tanaman
sarang semut dan keladi tikus Kategori Uji Sarang semut Keladi tikus Positif Alkaloid: Dragendorf  + + Endapan merah Mayer + - Endapan putih Wagner + + Endapan coklat Flavonoid + + Warna jingga Saponin + + Adanya busa Tanin + - Warna merah tua Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode
DPPH  dari  masing-masing  ekstrak  dengan metode  peredaman  radikal  bebas  DPPH memberikan hasil sebagai berikut:
Gambar 1. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut
Berdasarkan  gambar  1  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,1257x + 12,647, dimana didapatkan nilai IC 50 99,0533 ppm.
Gambar 2. Hubungan konsentrasi dengan %
inhibisi ekstrak keladi tikus Berdasarkan  gambar  2  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,0337x  +  12,668,  didapatkan  nilai  IC 50
369,2582 ppm.
Gambar 3. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut dan keladi   tikus
Berdasarkan  gambar  3  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi
y=0,0474x  +  12,683,  maka  didapatkan  nilai IC 50 262,4262 ppm.
Berdasarkan  gambar  4  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi
y=0,1263x  +  15,246,  maka  didapatkan  nilai IC 50 91,7234 ppm.
Gambar 2. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak keladi tikus
Berdasarkan gambar 2 menunjukkan grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,0337x + 12,668, didapatkan nilai IC 50 369,2582 ppm.
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada - Januari 2017
dipipet  1,5  ml  ditambah  3,0  ml  larutan DPPH  40  ppm.  Campuran  dikocok  lalu diinkubasi  pada  suhu  kamar  selama  30 menit.  Diukur  absorbansi  setelah  tercapai Operating Time  pada panjang gelombang maksimum. Nilai IC 50 dihitung menggunakan  persamaan  regresi  linier hubungan  antar  konsentrasi  dan  % inhibisi.

## 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  yang  dilakukan  meliputi  uji kualitatif  dan  uji  kuantitatif  kandungan antioksidan  pada  sampel.  Hasil  uji  kualitatif yang  dilakukan  pada  sampel  meliputi  uji alkaloid,  uji  flavonoid,  uji  saponin,  uji  tanin seperti tersaji pada Tabel. 1.
Tabel  1.  Hasil  analisis  fitokimia  ekstrak  tanaman sarang semut dan keladi tikus
Kategori Uji Sarang semut Keladi tikus Positif Alkaloid: Dragendorf  + + Endapan merah Mayer + - Endapan putih Wagner + + Endapan coklat Flavonoid + + Warna jingga Saponin + + Adanya busa Tanin + - Warna merah tua
Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH  dari  masing-masing  ekstrak  dengan metode  peredaman  radikal  bebas  DPPH memberikan hasil sebagai berikut:

## Gambar 1. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut
Berdasarkan  gambar  1  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,1257x + 12,647, dimana didapatkan nilai IC 50 99,0533 ppm.
Gambar 2. Hubungan konsentrasi dengan %

## inhibisi ekstrak keladi tikus
Berdasarkan  gambar  2  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,0337x  +  12,668,  didapatkan  nilai  IC 50 369,2582 ppm.
Gambar 3. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut dan keladi   tikus
Berdasarkan  gambar  3  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,0474x  +  12,683,  maka  didapatkan  nilai IC 50 262,4262 ppm.
Gambar 4. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut dan keladi tikus
Berdasarkan  gambar  4  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,1263x  +  15,246,  maka  didapatkan  nilai IC 50 91,7234 ppm.
Gambar 3. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut dan keladi tikus
Berdasarkan gambar 3 menunjukkan grafik yang  menyajikan  persamaan  regresi  y=0,0474x +  12,683,  maka  didapatkan  nilai  IC 50 262,4262 ppm.
dipipet  1,5  ml  ditambah  3,0  ml  larutan DPPH  40  ppm.  Campuran  dikocok  lalu diinkubasi  pada  suhu  kamar  selama  30 menit.  Diukur  absorbansi  setelah  tercapai Operating Time  pada panjang gelombang maksimum. Nilai IC 50 dihitung menggunakan  persamaan  regresi  linier hubungan  antar  konsentrasi  dan  % inhibisi.

## 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  yang  dilakukan  meliputi  uji kualitatif  dan  uji  kuantitatif  kandungan antioksidan  pada  sampel.  Hasil  uji  kualitatif yang  dilakukan  pada  sampel  meliputi  uji alkaloid,  uji  flavonoid,  uji  saponin,  uji  tanin seperti tersaji pada Tabel. 1.
Tabel  1.  Hasil  analisis  fitokimia  ekstrak  tanaman sarang semut dan keladi tikus
Kategori Uji Sarang semut Keladi tikus Positif Alkaloid: Dragendorf  + + Endapan merah Mayer + - Endapan putih Wagner + + Endapan coklat Flavonoid + + Warna jingga Saponin + + Adanya busa Tanin + - Warna merah tua
Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH  dari  masing-masing  ekstrak  dengan metode  peredaman  radikal  bebas  DPPH memberikan hasil sebagai berikut:

## Gambar 1. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut
Berdasarkan  gambar  1  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,1257x + 12,647, dimana didapatkan nilai IC 50 99,0533 ppm.
Gambar 2. Hubungan konsentrasi dengan %

## inhibisi ekstrak keladi tikus
Berdasarkan  gambar  2  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,0337x  +  12,668,  didapatkan  nilai  IC 50
369,2582 ppm.
Gambar 3. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut dan keladi   tikus
Berdasarkan  gambar  3  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,0474x  +  12,683,  maka  didapatkan  nilai IC 50 262,4262 ppm.
Gambar 4. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut dan keladi tikus
Berdasarkan  gambar  4  menunjukkan  grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,1263x  +  15,246,  maka  didapatkan  nilai IC 50 91,7234 ppm.
Gambar 4. Hubungan konsentrasi dengan % inhibisi ekstrak sarang semut dan keladi tikus
Berdasarkan gambar 4 menunjukkan grafik yang menyajikan persamaan regresi y=0,1263x + 15,246, maka didapatkan nilai IC 50 91,7234 ppm.
Uji  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui kandungan  metabolit  sekunder  yang  terekstrak dalam sampel dan untuk mengetahui efektivitas pelarut  dalam  mengekstrak  senyawa  sekunder khususnya  flavonoid.  Ekstrak  yang  diperoleh dilakukan  uji  fitokimia  meliputi  uji  alkaloid, flavonoid, saponin dan tanin. Pengujian tersebut dilakukan guna skrining awal untuk memastikan adanya senyawa yang diduga sebagai antioksidan.
Pengujian  aktivitas  antioksidan  sarang semut, keladi tikus dan kombinasi dari keduanya ini  diawali  dengan  pembuatan  ekstrak  dari simplisia  sarang  semut  dan  keladi  tikus  yang telah  di  keringkan  dibawah  sinar  matahari dan  ditutup  kain  hitam  kemudian  diblender. Setelah  didapatkan  ekstrak  kemudian  ekstrak
dipartisi dengan butanol. Selanjutkan dilakukan pembuatan larutan induk 100 ppm dengan pelarut metanol 70%. Pembuatan larutan baku didapat 40 ppm dilanjutkan pembacaan panjang gelombang operating time .
Larutan  kontrol  yang  digunakan  pada penelitian  ini  1,5  ml  metanol  70%  ditambah dengan 3,0 ml larutan DPPH kemudian dilakukan pembacaan  pada  panjang  gelombang  520  nm. Absorbansi larutan kontrol 0,7877 dan absorbansi sudah memenuhi dari hukum Lambert-Beer yaitu antara 0,4-0,8 (Gandjar, 2007).
Vitamin C digunakan sebagai kontrol positif karena vitamin C berfungsi sebagai antioksidan sekunder yang berasal dari alam (Marzuki, 2012). Vitamin  C  atau  L-asam  askorbat  merupakan antioksidan  yang  larut  dalam  air.  Sebagai antioksidan,  vitamin  C  bekerja  sebagai  donor elektron dengan cara memindahkan satu elektron ke senyawa logam Cu dan pada reaksi biokimia intraseluler  dan  ekstraseluler.  Antioksidan vitamin C mampu bereaksi dengan radikal bebas, kemudian mengubahnya menjadi radikal askorbil. Senyawa radikal terakhir ini akan segera berubah menjadi askorbat dan dehidroaskorbat. Askorbat dapat langsung menangkap radikal bebas oksigen baik  dengan  atau  tanpa  katalisator  enzim. Sedangkan dehidroaskorbat tidak stabil pada pH diatas 6 karena senyawa tersebut akan terpecah menjadi  tartarat  dan  oksalat.  Hal  ini  dapat dicegah  dengan  direduksinya  dehidroaskorbat menjadi askorbat oleh dehidroaskorbat reduktase yang melibatkan glutation (Winarsi, 2007).
Ekstrak  pada  penelitian  ini  juga  dilakukan partisi  dengan  menggunakan  butanol  dengan perbandingan 1:1, n-Butanol dapat mengekstrak senyawa polar seperti glikosida, aglikon dan gula. Sedangkan air dapat mengekstrak senyawa polar, seperti aglikon, glikosida, asam amino dan gula (Houghton  and  Raman,  1998). Air  dan  butanol merupakan  pelarut  yang  sama-sama  mampu untuk menarik senyawa polifenol dan juga tidak saling bercampur diarenakan butanol mengikat 4 atom C dan 1 gugus hidroksil sehingga butanol termasuk ke dalam pelarut semi polar cenderung non  polar. Air  dan  butanol  akan  membentuk  2 lapisan yang saling bercampur dan menyebabkan senyawa  polifenol  terdistribusi  menuju  kedua
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada - Januari 2017
pelarut tersebut. Fase air akan berada di bagian bawah  sedangan  fase  butanol  berada  dibagian atas.  Berat  jenis  butanol  0,810  g/ml  dan  berat jenis air adalah 0,996 g/ml.
Hasil  penelitian  ditinjau  dari  IC 50 yaitu konsentrasi  larutan  uji  yang  memberikan peredaman  DPPH  sebesar  50%.  Nilai  IC 50
digunakan untuk menyatakan aktivitas antioksidan  suatu  bahan  uji  dengan  peredaman radikal bebas DPPH (Molyneux, 2004). Bentuk kombinasi tanaman sarang semut dan keladi tikus 2:1 memiliki nilai IC 50 sebesar 91,7234 ppm yang berarti  memiliki  kemampuan  terbesar  meredam dampak radikal bebas daripada kombinasi sarang semut dan keladi tikus 1:2 yaitu 262,4262 ppm. Bentuk  tunggal  keladi  tikus  yaitu  369,2582 ppm  dan  bentuk  tunggal  sarang  semut  yaitu 99,0533ppm.  Sedangkan  paling  lemah  dalam meredam  dampak  radikal  bebas  yaitu  bentuk tunggal  keladi  tikus  karena  memiliki  nilai  IC 50 paling besar.
Semakin  konsentrasi  ekstrak  meningkat maka  absorbansi  sampel  menurun  dan  nilai tingkat inhibisi menjadi naik. Absorbansi sampel menurun  karena  elektron  pada  DPPH  menjadi berpasangan  dengan  elektron  sampel  yang mengakibatkan warna larutan dari ungu berubah menjadi  kuning  pucat.  Nilai  tingkat  inhibisi meningkat  seiring  meningkatnya  konsentrasi sampel  yang  menghambat  radikal  bebas  DPPH (Marta, 2008).

## 5.   KESIMPULAN
Aktivitas  antioksidan  kombinasi  ekstrak tanaman  sarang  semut  ( Myrmecodia  pendans ) dan  keladi  tikus  ( Typonium  flagelliforme) 2:1 memiliki  aktivitas  antioksidan  terkuat  dengan nilai IC 50 91,7234 ppm.

## SARAN
a.  Bagi  peneliti  selanjutnya  lebih  memperha- tikan  prosedur  kerja  terutama  pada  proses pengentalan ekstrak.
b.  Bagi  peneliti  selanjutnya  dapat  dilakukan penelitian dengan kombinasi yang lain yang diduga memiliki aktivitas antioksidan.

## 6.  REFERENSI
Abraham,  Charles  &  Eamon  Shanley.  2003. Alih bahasa Leony Sally M. Editor : Robert Prihajo  &  Yasmin  Asih. Psikologi  Sosial untuk Perawat . Jakarta : EGC
Arianto,  Joko.  2008.  Katalog  Produk  :  Sarang
Semut Super.: http://www. bursa madu. com
(20 Juli 2015
Droge,  W.  2002. Free  Radicals  in  The Physiological  Control  of  Cell  Function . Physiol Rev. 82. 47-95. Gandjar,  I.G.  2007. Kimia  Farmasi  Analisis . Yogyakarta : Pustaka Pelajar.
Hernani  dan  Rahardjo  M.  2005. Tanaman Berkhasiat  Antioksidan .  Jakarta  :  Penebar Swadaya. Hal : 8-11, 19-20.
Hoesen,  D.S.H.,  2007. Pertumbuhan  dan perkembangan  tunas  Typonium  secata  in vitro. Berita Biologi. 8(5):413-422. Houhgton, P.J. dan A. Raman. 1998. Laboratory Handbook  for  the  fracionation  of  Natural Extract . Chapman and Hall, London Iswantini,  D.,D.Irawan  dan  D.Syabirin.  2006. Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Mahkota dewa,  Temu  putih,  Sambiloto  dan  Keladi Tikus . Prosiding Seminar Nasional Himpunan  Kimia  Indonesia,  12  September 2006. Institut Pertanian Bogor.p.303-306.
Kikuzaki, H. and K. Nakatani. 1993. Antioxidant Effect of Some Ginger Constituents. Journal Food Science 58: 1407-1410.
Marta,  H  dan  Mardawati,  E.  2008. Kajian Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Manggis (Garcinia  mangostana  L)  dalam  Rangka Pemanfaatan  Limbah  Kulit  Manggis di  Kecamatan  Puspahiang  Kabupaten Tasikmalaya. Fakultas  Teknologi  Industri Pertanian Universitas Padjadjaran. Bandung Molyneux,  P.  2004.  The  use  of  the  stable  free radikal  diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH) for  estimating  antioxidant  activity. Journal Science of Tecnology. 26(2): 211-219. Soeksmanto, et al . P. 2010. Anticancer Activity Test  for  Extract  of  Sarang  Semut  Plant ( Mrymecodia  pendans )  to  HeLa  and

## Jurnal Kesehatan Kusuma Husada
- Januari 2017
MCM-B2  Cells. Pakistan  Journal  of Biological Science, 13(3).
Syahid,S.F.  2007. Perbanyakan  Keladi  Tikus (Typonium  flagelliforme)  melalui  kultur jaringan. Warta  Puslitbangbun  2007.13(3): 19-20.
Utomo,  A.B.,  A.  Suprijono,  dan  A.  Risdianto. 2012. Uji  Aktivitas  Antioksidan  Kombinasi
Ekstrak  Sarang  Semut  (Myrmecodia pendans)  &  Ekstrak  Teh  Hitam  (Camellia sinensis) dengan Metode DPPH (1,1-difenil- 2-pikrilhidrazil), Sekolah  Tinggi  Ilmu Farmasi Yayasan Pharmasi. Semarang.
Winarsi, H. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas . Yogyakarta : Kanisius.
-oo0oo-