Evaluasi vitamin E pada pakan terhadap penurunan nilai malondialdehid hati dan akumulasi logam timbal pada ikan nila Oreochromis niloticus ( Linnaeus, 1758)
[Evaluation of vitamin E addition in the diet for decreasing malondialdehide value and lead accumulation in the nile tilapia Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758)]
Sheny Permatasari 1  , Nur Bambang Priyo Utomo 2 , Kukuh Nirmala 3
1 Program Studi Ilmu Akuakultur, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor
2 Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Kelautan – Institut Pertanian Bogor Jl. Agatis, Kampus IPB, Dramaga, Bogor 16680
Diterima: 21 Oktober 2015; Disetujui: 31 Mei 2016

## Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh penambahan vitamin E dengan dosis berbeda pada pakan terha- dap nilai malondialdehid hati dan akumulasi logam berat pada tubuh ikan nila Oreochromis niloticus (Linnaeus, 1758) yang terpapar timbal (Pb). Rancangan penelitian yang digunakan adalah rancangan acak lengkap dengan empat perlaku- an dan tiga ulangan, dan satu perlakuan kontrol negatif  yang diolah secara deskriptif. Perlakuan penambahan vitamin E: KN (kontrol negatif 0 mg kg -1 tanpa paparan Pb); KP (kontrol positif 0 mg kg -1 ); P100 (100 mg kg -1 ); P300 (300 mg kg -1 ); P500 (500 mg kg -1 ). Ikan nila (13,17±1,06 g ekor -1 ) dipelihara dalam 15 akuarium (volume 135 liter) dengan ke- padatan 13 ekor akuarium -1 selama 60 hari paparan Pb konsentrasi 9,119 mg L -1 kecuali kontrol negatif tanpa paparan. Ikan diberi pakan secara at satiation sebanyak tiga kali sehari pada pukul 08.00, 12.00, dan 16.00. Hasil penelitian me- nunjukkan bahwa vitamin E alpha-tokoperol sebanyak 100 mg kg -1 pada pakan ikan nila yang terpapar Pb (timbal) kon- sentrasi 9,119 mg L -1 dapat menurunkan nilai akumulasi logam Pb dan nilai malondialdehid hati ikan mencapai 1,47 mg kg -1 dan 5,41 µg g -1 .
Kata penting: akumulasi logam Pb , malondialdehid (MDA), Oreochromis niloticus , vitamin E (alpha-tokoperol)

## Abstract
This  study  aimed  to  evaluate  the  effect  of  the  different  doses  of  vitamin  E  in  diet  toward  malondialdehide  value  and accumulation  of  heavy  metal  of  Tilapia Oreochromis  niloticus (Linnaeus  1758)  exposed  by  lead  (Pb).  This  study consists  of  four  treatments,  three  replications  and  one  negative  control  which  was  analyzed  with  descriptive  method. Vitamin  E  supplementation  treatments  in  the  diet  were  KN  (negative  control  0  mg  kg -1 ,  no  exposed  by  lead);  KP (positive control 0 mg kg -1 ); P100 (100 mg kg -1 ); P300 (300 mg kg -1 ); P500 (500 mg kg -1 ). Tilapia (13.17±1.06 g fish -1 ) were reared in 15 aquariums (135 liters volume) with a density of 13 fish in each aquarium for 60 days exposed by lead with 9.119 mg L -1 concentrations (except negative control). Fish were fed thrice a day at at 08.00 am, 12.00 pm, and 16.00 pm  with the satiation level. An addition of Vitamin E alpha-tocopherol of 100 mg kg -1 in diet exposed by lead could decrease the accumulation of lead and MDA in fish liver of 1.47 mg kg -1 and 5.41 µg g -1 , respectively.
Keywords: accumulation of lead (Pb), malondialdehid (MDA), Oreochromis niloticus , Vitamin E (alpha-tocopherol)

## Pendahuluan
Penambangan  bijih  timah  yang  dilakukan secara  konvensional  yang  dilakukan  di  sekitar Kepulauan  Bangka  mengakibatkan  dampak  ne- gatif, salah satunya terjadi kerusakan lahan kare- na  terbentuk  lubang  bekas  galian  yang  luas  (ko- long) dengan jumlah banyak.  Sebagian kecil  ko- long  tua  yang  sudah  mengalami  suksesi  (proses perubahan ekosistem menuju ke arah lingkungan
yang lebih stabil) dan kolong muda yang nilai pH airnya  sudah  mendekati  pH  netral,  telah  diman- faatkan  penduduk  sekitar,  salah  satunya  untuk budi daya perikanan (Henny 2011a). Akan tetapi, hasil analisis kandungan timbal (Pb) pada kolong bekas tambang timah diketahui mencapai kisaran 0,04-0,81 mg L -1 (Henny & Susanti 2009, Henny 2011b), sedangkan nilai ambang batas timbal  Pb pada air budi daya adalah 0,03 mg L -1 (Peraturan Pemerintah nomor  82 tahun 2001 tentang penge- lolaan kualitas air dan pengendalian pencemaran
_____________________________  Penulis korespondensi Alamat surel: heny.permatasari09@gmail.com
air).  Selain  itu,  hasil  analisis  kandungan  Pb  da- lam daging ikan nila hasil budi daya dari kolong bekas  tambang  timah,  ditemukan  mencapai kisaran  nilai  0,21-3,6  mg  kg -1 (Henny  2011b), bahkan  ada  yang  mencapai  4  mg  kg -1 (Henny 2011a).  Nilai  tersebut  melebihi  baku  mutu  yaitu 0,3  mg  kg -1 kandungan  Pb  (Peraturan  Kepala
Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  RI  Nomor HK.00.06.1.52.4011  tentang  penetapan  batas maksimum  cemaran  mikroba  dan  kimia  dalam makanan, 2009).
Pb  (timbal)  merupakan  salah  satu  logam berat berbahaya dan beracun. Pengaruh logam Pb yang terdapat pada daging/tubuh ikan yang dibu- didaya tidak akan terlihat secara kasat mata, akan tetapi memengaruhi fisiologis tubuhnya. Pb yang mencemari  kolong  bekas  tambang  berpotensi masuk  ke  dalam  tubuh  ikan  dan  memberikan efek toksik seperti  yang dilaporkan Mahmoud et al . (2013). Mereka menemukan paparan Pb dapat menyebabkan kenaikan stres oksidatif dilihat dari peningkatan  lipid  peroksida  pada  ikan Clarias gariepinus. Terjadinya stres oksidatif akibat efek toksik  Pb  mengindikasikan  metabolisme  dalam tubuh  terganggu  mengarah  terhadap  kerusakan organ penting ikan. Gangguan metabolisme akan memengaruhi eliminasi tubuh ikan yang terpapar Pb. El-Shebly (2009) menemukan bahwa akumu- lasi dalam tubuh ikan nila terpapar Pb seiring pe- ningkatan  stres  karena  Pb,  akibatnya  ikan  tidak aman untuk dikonsumsi.
Efek toksik Pb dalam tubuh ikan dapat di- kurangi, salah satunya dengan suplementasi vita- min E. Vitamin E  merupakan vitamin  yang larut dalam  lemak,  terdapat  dalam  8  bentuk  berbeda yaitu  4 tocopherol dan  4 tocotrienol dengan masing-masing bentuknya memiliki aktivitas bio- logi spesifik atau fungsi tertentu di dalam tubuh. Alpha-tocopherol merupakan  bentuk paling aktif dari  vitamin  E  serta  merupakan  antioksidan  non
enzimatik  paling  kuat  secara  biologi  (Schneider 2005;  El-Shebly  2009).  Vitamin  E  ini  sebagai antioksidan  memainkan  peranan  penting  dalam memulihkan  stres  oksidatif  (El-Demerdash et  al . 2004). Vitamin E sebanyak 300 mg kg -1 pada pa- kan  ikan  nila  ( O.  niloticus )  dapat  menurunkan akumulasi  Pb  dari  kontrol  (pakan  ditambah  10 mg  kg -1 Pb  tanpa  vitamin  E)  4,09  mg  kg -1 men- jadi  1,93  mg  kg -1 pada  daging  ikan  perlakuan
(pakan  ditambah  vitamin  E  300  mg  kg -1 ).  Mah- moud et al . (2013) menemukan bahwa pada ikan Clarias  gariepinus yang  terpapar  Pb  dengan  pe- nambahan vitamin E sebanyak 50 mg kg -1 pakan, mampu  menurunkan  aktivitas  lipid  peroksidasi pada hati, ginjal dan insang. Pada hasil penelitian Hashish et  al. (2015), Alpha-tocopherol  acetate mampu  menurunkan  stres  oksidatif  dilihat  dari penurunan  malondialdehid  (MDA)  pada  ikan yang disuplementasi sebanyak 200 mg kg -1 .
Penelitian ini dilakukan dengan tujuan un- tuk  mengukur  pengaruh  penambahan  vitamin  E pada pakan terhadap nilai MDA hati dan akumu- lasi Pb pada tubuh ikan nila ( O. niloticus ) dalam media budi daya tercemar Pb. Hasil penelitian di- harapkan  dapat  menyelesaikan  permasalahan logam Pb yang mencemari beberapa keramba ja- ring  apung  tempat  budi  daya  ikan  di  kolong  be- kas tambang timah Pulau Bangka.

## Bahan dan metode

## Waktu dan tempat
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  April 2015  sampai  dengan  Agustus  2015  di  Laborato- rium  Nutrisi  Ikan,  Departemen  Budidaya  Per- airan,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan, Institut Pertanian Bogor. Analisis proksimat dila- kukan  di  Laboratorium  Nutrisi  Ikan  dan  analisis kualitas air dilakukan di Laboratorium Lingkung- an Departemen Budidaya Perairan Fakultas Peri- kanan dan Ilmu Kelautan. Analisis vitamin E dan
logam  berat  Pb  dilakukan  di  Saraswanti  Indo Genetech  (SIG).  Analisis  MDA  dilakukan  di Laboratorium  Fisiologi  Fakultas  Kedokteran Hewan IPB.

## Pembuatan larutan uji
Paparan timbal (Pb) pada penelitian ini di- lakukan melalui media air tempat budi daya ikan. Timbal  (Pb)  yang  digunakan  dalam  bentuk Timbal (II) nitrat Pb(NO 3 ) 2 sebagai senyawa  uji.
Konsentrasi  yang  digunakan  sebesar  2,9%  dari LC 50 96  h  ikan  tilapia  sebesar  9,119  mg  L -1
dengan  nilai  LC50-96  h  sebesar  313,232  mg  L -1
(Yulaipi  &  Aunurohim  2013). Sebanyak  14,77  g Pb(NO 3 ) 2 serbuk  dilarutkan  dalam  1  liter  air  se- bagai  larutan  stok.  Selanjutnya  dilakukan  peng- enceran sesuai dengan konsentrasi yang dibutuh- kan pada masing-masing akuarium.

## Pakan uji
Pakan  uji  yang  digunakan  adalah  pakan buatan dengan kandungan protein berkisar antara 31,37  –  32,04%  dan  energi  berkisar  antara
3994,90-4281,82  kkal  GE  kg -1 pakan.  Formulasi dan hasil proksimat pakan uji disajikan pada Ta- bel 1. Suplementasi  vitamin  E dilakukan dengan cara  penambahan  vitamin  E  berbeda  pada  pakan dengan  lima  perlakuan  yaitu  0  mg  kg -1 pakan
(kontrol positif dan negatif); 100 mg kg -1 pakan;
300  mg  kg -1 pakan;  dan  500  mg  kg -1 pakan.
Vitamin  E  yang  digunakan  adalah α-tocopherol yang  merupakan  produk  SIGMA  kandungan murni 95%.

## Pemeliharaan ikan
Hewan  uji  yang  akan  digunakan  adalah ikan  nila  merah (O.  niloticus )  varietas  sultana yang  didapat  dari  Balai  Besar  Pengembangan Budi  Daya  Air  Tawar  (BBPBAT)  Sukabumi  de- ngan  bobot  awal  berkisar  antara  13,17±1,06  g ekor -1 .
Sebelum  ikan  diberi  perlakuan,  ikan  uji terlebih  dahulu  diaklimatisasi  selama  tujuh  hari. Akuarium  yang  digunakan  berukuran  100  cm  x 50 cm x 50 cm dengan volume air sebanyak 135 L  per  akuarium.  Ikan  nila  ditebar  sebanyak
Tabel 1. Formulasi pakan uji Bahan baku Perlakuan suplementasi Vit E (mg kg -1 ) P0 P100 P300 P500 Tepung ikan (%) 13 13 13 13 MBM ( meat bone meal ) (%) 15 15 15 15 Kedelai(%) 27,3 27,3 27,3 27,3 Pollard(%) 34 33,989 33,968 33,947 Minyak jagung(%) 1 1 1 1 Minyak ikan(%) 3 3 3 3 Vitamin dan mineral mix tanpa Vit E 3,7 3,7 3,7 3,7 Tepung tapioka(%) 3 3 3 3 Vitamin E 0 0,011 0,032 0,053 Jumlah total 100 100 100 100 Hasil proksimat Vitamin E 53,90 163,0 325,1 556,0 Protein 31,90 32,04 31,76 31,37 Lemak 6,84 8,10 8,07 8,12 BETN 38,19 36,83 38,57 42,96 Energy (kkal GE kg -1 ) d 3994,90 4065,94 4117,98 4281,82
Keterangan : BETN (Bahan Ekstrak Tanpa Nitrogen); GE ( Gross Energy ) dihitung berdasarkan Watanabe (1988) dengan perhitungan karbohidrat BETN -1 4,1 kkal g -1 ; protein 5,6 kkal g -1 ; lemak 9,4 kkal g -1 .
13 ekor per akuarium, pakan  diberikan secara at satiation sebanyak  tiga  kali  sehari  yaitu  pukul 08.00,  12.00  dan  16.00  selama  60  hari  masa  pe- meliharaan.
Kondisi  kualitas  air  dijaga  dengan  dua  ti- tik aerasi dan penyiponan. Penyiponan dilakukan tiga  hari  sekali  dengan  pergantian  air  dari  air stok.  Selama  pemeliharaan  kondisi  kualitas  air yaitu  suhu  berkisar  26 o C-29,8 o C,  oksigen  ter- larut sebesar 4,2-7,5 mg L -1 , total amoniak nitro- gen  berkisar  0,03-0,276  mg  L -1 dan  pH  berkisar 6,82-7,93.
Pada awal dan akhir pemeliharaan dilaku- kan  penimbangan  biomassa  dan  analisis  proksi- mat  tubuh  ikan  uji.  Penimbangan  biomassa  di- lakukan  setelah  ikan  dipuasakan  selama  24  jam. Selain  itu,  pada  akhir  pemeliharaan  setelah  pe- nimbangan biomassa beberapa ekor ikan dari se- tiap perlakuan diambil untuk dilakukan uji prok- simat tubuh.

## Pengukuran kandungan Pb pada tubuh ikan
Seluruh  tubuh  ikan  nila  dihaluskan  dan disimpan di dalam botol vial. Sampel diekstraksi sebanyak 10-15 gram berat basah ditambahkan 2 ml  HNO 3 ,  6  ml  HCl  lalu  dipanaskan  pada  suhu 70-80ºC  selama  5-6  jam.  Sampel  kemudian  di- diamkan  selama  satu  malam,  lalu  diencerkan dengan akuades hingga volumenya mencapai 100 ml  (Clesceri et  al. 1989).  Kandungan  Pb  dalam sampel  hasil  ekstraksi  diukur  dengan  alat  AAS (Atomic Absorption Spectrophotometer).

## Pengukuran malondialdehid pada jaringan hati
Konsentrasi  lipidperoksida  diukur  dengan metode asam tiobarbiturat (TBA) yang mengukur adanya  malondialdehid  (MDA)  sebagai  produk- nya.  Metode  ini  berdasarkan  kemampuan  pem- bentukan kompleks bewarna merah jambu antara MDA dan asam tiobarbiturat (TBA) (Capeyron et al . 2002).
Sampel  hati  yang  telah  disimpan  pada freezer -20 o C  dicairkan  terlebih  dahulu  sebelum dilakukan  analisis  pada  suhu  ruang.  Sebanyak 1,25  g  hati  dimasukkan  ke  dalam  gelas  piala  di- cacah dengan syring yang telah dilepas jarumnya dengan  ditambahkan  2,5  mL  buffer  fosfat  yang mengandung  11,5  g  L -1 kalium  klorida  dalam kondisi dingin pH 7,4 (disimpan pada suhu 5 0 C). Campuran  ini  disentrifuse  4000  rpm  selama  10 menit,  kemudian  diambil  supernatan  keruh  dan disentrifuse lagi 4000 rpm selama 10 menit. Sete- lah itu, sebanyak 1 mL supernatan jernih diambil dan  ditambahkan  4  mL  campuran  larutan  asam klorida  dingin  0,25  N  (2,23 ml  asam  klorida  pe- kat  100  mL -1 )  yang  mengandung  15%  asam  tri- kloroasetat  (w  v -1 );  0,38%  asam  tiobarbiurat  dan
0,5% butilat hidroksitoluen. Campuran asam klo- rida  dan  supernatan  tersebut  dipanaskan  80 0 C (inkubator)selama  1  jam,  kemudian  didinginkan dengan  air  mengalir  dan  disentrifuse  3500  rpm selama 10 menit. Supernatan hasil sentrifuse ter- sebut  kemudian  diukur  absorbansinya  pada  pan- jang gelombang 532 nm.

## Analisis data
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  dengan  empat  perlakuan  dan  tiga ulangan. Semua parameter penelitian diuji secara statistik.  Data  yang  diperoleh  ditabulasi  dengan program  SPSS  dan  untuk  uji  ANOVA  dianalisis dengan  menggunakan  program  SPSS.  Perlakuan yang  berbeda  nyata  akan  diuji  lanjut  dengan  uji lanjut Duncan.  Analisis deskriptif digunakan un- tuk  menjelaskan  perlakuan  kontrol  negatif  tanpa paparan  Pb.  Data  disajikan  dalam  bentuk  tabel dan grafik.

## Hasil
Malondialdehid  pada  jaringan  hati  meru- pakan  paramater  yang  mengindikasikan  terjadi- nya stres oksidatif dalam tubuh ikan. Hasil anali-
sis  MDA  jaringan  hati  ikan  nila  setelah  60  hari pemeliharaan  disajikan  pada  Gambar  1.  Hasil pengamatan  menunjukkan  bahwa  paparan  Pb dapat  menyebabkan  peningkatan  stres  oksidatif pada  ikan.  Hal  ini  terlihat  dari  kenaikan  nilai MDA  mencapai  13,46±2,26  µg  g -1 sampel  hati pada  perlakuan  kontrol  positif  (KP),  nilai  terse- but  lebih  tinggi  daripada  kondisi  normal  yaitu perlakuan  kontrol  negatif  (KN)  sebesar  4,61± 0,41 µg g -1 sampel. Penambahan vitamin E pada perlakuan  P100,  P300,  dan  P500  (Tabel  1)  pada pakan  ikan  nila  terpapar  Pb,  berpengaruh  nyata (P<0,05)  terhadap  penurunan  stres  oksidatif.  Ini terlihat dari penurunan nilai MDA hati ikan yang lebih  kecil  dibandingkan  dengan  kontrol  positif yaitu sebesar 9,98±1,24 µg g -1 (P100); 5,41±1 µg g -1 (P300) dan 6,74±0,34 µg g -1 (P500).
Analisis  kandungan  timbal  (Pb)  pada  tu- buh ikan nila setelah 60 hari disajikan pada Gam- bar 2. Hasil analisis menunjukkan bahwa akumu- lasi  terendah  terdapat  pada  kontrol  negatif  (KN) hanya  sebesar  0,09±0,03  mg  kg -1 ,  karena  media pemeliharaan  kontrol  negatif  tanpa  cemaran  Pb. Nilai  akumulasi  tertinggi  didapatkan  pada  kon- trol positif (KP) sebesar 2,75±0,47 mg kg -1 yang merupakan  perlakuan  terpapar  Pb  tanpa  penam- bahan  vitamin  E  pada  pakan.  Perlakuan  penam- bahan  vitamin  E  menunjukkan  pengaruh  nyata (P<0,05)  terhadap  penurunan  akumulasi  Pb dengan  nilai  akumulasinya  mencapai  1,62±0,13 mg  kg -1 (P100);  1,47±0,16  mg  kg -1 (P300)  dan
1,25±0,37 mg  kg -1 (P500) dalam tubuh ikan nila dibanding dengan kontrol positif.
Gambar 1. Profil MDA hati ikan nila ( O. niloticus ) yang dipelihara dalam media dengan dan tanpa paparan timbal (Pb) pada perlakuan yang berbeda yaitu KN (kontrol negatif tanpa paparan); KP (kontrol positif terpapar Pb vitamin E 0 mg kg -1 ), P100 (vitamin E 100 mg kg -1 ); P300 (vitamin E 300 mg kg -1 ); P500 (vitamin E 500 mg kg -1 ). Huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan yang signifi- kan (P<0,05) antarperlakuan.
a b c c 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 KN KP P100 P300 P500 n ilai MD A h atu ik an ( µ g g -1 ) Perlakuan Vit E (mg kg -1 ) KN P500 - Pb + Pb
Gambar 2. Kandungan timbal (Pb) pada seluruh tubuh ikan nila ( O. niloticus ) setelah 60 hari pemeliharaan dalam media dengan dan tanpa paparan timbal (Pb)pada perlakuan yang berbeda yaitu KN (kon- trol negatif tanpa paparan); KP (kontrol positif vitamin E 0 mg kg -1 ); P100 (vitamin E 100 mg kg -1 ); P300 (vitamin E 300 mg kg -1 ); P500 (vitamin E 500 mg kg -1 ). Huruf yang berbeda menun- jukkan perbedaan yang signifikan (P<0,05) antar perlakuan.

## Pembahasan
Dari  hasil  penelitian,  diketahui  bahwa  pa- paran Pb dapat  meningkatkan stres oksidatif dan akumulasi  logam  Pb  pada  tubuh  ikan  nila  terpa- par  Pb.  Efek  toksik  Pb  yang  pertama  terjadi  da- lam tubuh ikan adalah mengakibatkan stres oksi- datif.  Stres  oksidatif  merupakan  proses  oksidasi berlebih  dari Reactive  Oxygen  Species (ROS) yang  tidak  diimbangi  pertahanan  antioksidan. ROS  ini  akan  menghasilkan  molekul  reaktif berupa  radikal  bebas  seperti  superoxide  anion radikal  (O 2 -),  hidroksil  radikal  (OH*),  hidro peroxi    (HO 2 *)  dan  senyawa  yang  mudah  men- jadi  radikal  bebas  H 2 O 2 ,  HOCl,  dan  Ozon  (O 3 ).
Radikal  bebas  tersebut  dapat  mengoksidasi  ma- kromolekul  penting  seperti  lipid,  protein,  karbo- hidrat dan asam nukleat di dalam sel. ROS  yang meningkat  akan  menstimulasi  oksidasi  lipid  da- lam  bentuk  MDA  (Malondialdehid)  (Upasani et al .  2001,  Mahmoud et  al .  2013,  Harabawy  & Mosleh  2014).  Berdasarkan  hasil  pengamatan, terlihat  bahwa  paparan  Pb  dapat  meningkatkan MDA  hati  mencapai  13,46  µg  g -1 hati  yang  me- rupakan  kisaran  MDA  stres  pada  ikan  (Sutari et
al . 2013), sedangkan pada ikan tanpa paparan Pb hanya  mencapai  4,61  µg  g -1 yang  merupakan kisaran  normal  nilai  MDA.  Kenaikan  MDA  ini terjadi  karena  enzim  antioksidan  di  dalam  tubuh menjadi  tidak  aktif  setelah  sisi  aktif  enzim  yaitu gugus –SH berikatan dengan Pb.
Peran  utama  vitamin  E  dalam  melawan efek  toksik  Pb  adalah  menanggulangi  stres  oksi- datif. Hasil penelitian menunjukkan penambahan vitamin  E  dapat  menurunkan  ROS,  sehingga ROS  tidak  bereaksi  dengan  makromolekul  pen- ting  lain  seperti  lipid,  protein,  karbohidrat,  dan asam nukleat. Hal ini terlihat dari penurunan nilai MDA  hati  ikan  nila  terpapar  Pb  dengan  suple- mentasi  vitamin  E  100  (P100);  300  (P300)  dan 500 (P500) mg kg -1 mendekati kisaran  nilai  nor- mal.  Penurunan  MDA  ini  disebabkan  vitamin  E dapat  mencari  radikal  peroksil  lipid  penyebab ROS  dan  mendonorkan  atom  hidrogen  kepada radikal  bebas  tersebut,  sehingga  ikatan  yang terbentuk  menyebabkan  radikal  bebas  menjadi tidak  reaktif  (El-Demerdash et  al .  2004).    Stres oksidatif  yang  berlebih  akan  mengarah  terhadap
a
b b b 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 KN KP P100 P300 P500 A K um ul as i P b pada tubuh ikan (m g kg -1 ) Perlakuan Vit E (mg kg -1 ) KN KP - Pb + Pb
kerusakan  sel  dan  jaringan  salah  satunya  organ penting seperti hati, ginjal, dan insang.
Kerusakan  organ  penting  di  dalam  tubuh ikan  nila  akibat  paparan  Pb  menurunkan  fungsi detoksifikasi  organ  tersebut  terhadap  zat  toksik Pb.  Hal  ini  terbukti  dari  hasil  pengamatan  pada parameter  akumulasi  logam  Pb,  terlihat  bahwa paparan  Pb  menyebabkan  peningkatan  nilai akumulasi  dalam  tubuh  mencapai  2,75  mg  kg -1 melebihi  ambang  batas  baku  mutu  kandungan Pb.  Peningkatan  akumulasi  ini  terjadi  karena  Pb masuk  ke  dalam  tubuh  ikan  melalui  tiga  jalur yaitu  saluran  pencernaan,  insang  dan  penetrasi langsung  lewat  kulit.  Setelah  itu,  sebagian  besar logam  tersebut  akan  berikatan  dengan  eritrosit, dan  dibawa  bersama  aliran  darah  ke  seluruh  ja- ringan tubuh. Pada jaringan tubuh, Pb akan mem- bentuk  ikatan  kovalen  dengan  gugus  metallotio- nin  (sulfihidril  –SH)  dan  amina  (nitrogen  –  NH) dalam  jaringan  tubuh  sehingga  terakumulasi (Yulaipi & Aunurohim 2013). Vitamin E α-toco- pherol  merupakan  salah  satu  antioksidan  yang berpotensi  memberikan  perlindungan  dari  efek toksik  Pb.  Hal  ini  terlihat  dari  hasil  perlakuan penambahan  vitamin  E    pada  pakan  ikan  nila yang  terpapar  timbal  (Pb)  menunjukkan  nilai yang signifikan dalam menyingkirkan kandungan Pb  pada  tubuhnya.  Akumulasi  Pb  pada  tubuh ikan  yang  diberi  vitamin  E  100  mg  kg -1 (P100);
300 mg kg -1 (P300) dan 500 mg kg -1 (P500) sig- nifikan  lebih  kecil  dibandingkan  dengan  kontrol positif  (KP)  tanpa  penambahan  vitamin  E.  Vita- min E dilaporkan dapat memberikan perlindung- an sel dari stres oksidatif dalam tubuh ikan. Me- nurunnya  stres  oksidatif  akan  mengarah  kepada berkurangnya kerusakan jaringan hati, dan detok- sifikasi meningkat sehingga akumulasi Pb menu- run dalam jaringan tubuh 1,62±0,13 mg kg -1 .

## Simpulan
Penambahan vitamin E α-tocopherol seba- nyak 100 mg kg -1 pada pakan ikan nila yang ter- papar timbal (Pb) pada konsentrasi 9,119 mg  L -1 merupakan nilai yang optimal untuk menurunkan stres oksidatif dilihat dari  penurunan nilai MDA dalam hati mencapai 5,41 µg g -1 dan meningkat- kan  kemampuan  ikan  untuk  menyingkirkan  lo- gam  Pb  dalam  tubuhnya  dilihat  dari  penurunan akumulasi Pb mencapai 1,62±0,13 mg kg -1 .

## Daftar pustaka
Clesceri  LS,  Greenberg  AE,  Trussell  RR.  1989. Standard  Method  for  the  Examination  of Water and Waste Water, APHA (America Public  Health  Association)  18th  Edition, Washington DC.
Capeyron CJ, Eric B, Jean P, Pierre MR, Claude LL,  Benard  D  .  2002.  A  diet  cholesterol and  deficient  in  vite  incudes  lipid  peroxi- dation  but  does  not  enhace  antioxidant enzyme  expression  in  rat  liver. The  Jour- nal  of  Nutritional  Biochemistry, 13(5):
296-301.
El-Demerdash  EM,  Yousef  MI,  Kedwany  FS, Baghdadhi  HH.  2004.  Cadmiun  induced changes  in  lipid  peroxidation,  blood hematology,  biochemical  parameters  and semen quality of male rats: protective role of  vitamin  E  and  b-carotene. Food  and Chemical Toxicology , 42(10): 1563-1571.
El-Shebly  AA.  2009.  Protection  of  Nile  tilapia ( Oreochromis  niloticus )  from  lead  pollu- tion and enhancement of its  growth  by α- tocopherol vitamin E. Research Journal of Fisheries and Hydrobiology. 4(1):17-21.
Harabawy  ASA,  Mosleh  YTI.  2014. The  role  of vitamins  A,C,E  and  selenium  as  antioxi- dants  against  genotoxicity  and  cytotoxi- city of cadmium, copper, lead and zinc on erythrocytes  of  Nile  tilapia, Oreochromis niloticus.  Ecotoxicology  and  Environ- mental Safety, 104(1): 28-35.
Hashish  EA,  Elgaml  SA,  El-Murr  A,  Khalil  R. 2015.  Nephroprotective  and  antioxidant significance  of  selenium  and  alpha-toco- pherol  on  lead  acetate-induced  toxicity  of Nile  tilapia  ( Oreochromis  niloticus ). Fish Physiology and Biochemistry , 41(3): 651- 660.
Henny C. 2011a.Kolong bekas tambang timah di Pulau  Bangka:  permasalahan  kualitas  air
dan  alternatif  solusi  untuk  pemanfaatan. Oseanologi  dan  Limnologi  Indonesia, 37(1): 119-138.
Henny  C.  2011 b. Bioakumulasi  beberapa  logam pada ikan di kolong bekas tambang timah di Pulau Bangka. Limnotek, 18(1):83-94.
Henny C, Susanti E. 2009. Karakteristik limnolo- gis kolong bekas tambang timah di Pulau Bangka. Limnotek, 16(2): 119-131.
Mahmoud MU, Ebied AM, Mohamed SM. 2013. Effect  of  lead  on  some  haematological and biochemical characteristics of Clarias gariepinus dietary  supplemented  with  ly- copene and vitamin E. Egyptian Academic Journal  of  Biological  Sciences, 5(1):  67- 89.
Sutari VT, Sugito, Aliza D, Asmarida. 2013. Ka- dar Malondialdehid (MDA)  pada jaringan hati  ikan  nila  ( Oreochromis  niloticus ) yang  diberi  cekaman  panas  dan  pakan
suplementasi  tepung  daun  jaloh  ( Salix  te- trasperma Roxb). Jurnal  Medika  Vetera- nia, 7 (1): 35-38.
Schneider  C.  2005.  Chemistry  and  biology  of vitamin  E. Molecular  Nutritionand  Food Research, 49 (1):7-30.
Upasani  CD,  Khera  A,  Balaraman  R.  2001.  Ef- fect of lead with vitamin E, C or Spirulina on  malondehyde,  conjugated  dienes  and hydroperoxides  in  rats. Indian  Journal  of Experimental Biology , 9(1): 70-71.
Watanabe  T.  1988. Fish  Nutrition  and  Maricul- ture .  Department  of  Aquatic  Bioscience,
Tokyo University of Fisheries. 233 p.
Yulaipi  S,  Aunurohim.  2013.  Bioakumulasi  lo- gam  berat  timbal  (Pb)  dan  hubungannya dengan  laju  pertumbuhan  ikan  mujair ( Oreochromis mossambicus ). Jurnal Sains dan Seni Pomits, 2(2): 166-170.