## UJI LAPANGAN FORMULA CAIR Pseudomonas fluorescens P60 TERHADAP LAYU Fusarium PADA TANAMAN TOMAT

## FIELD TRIAL OF LIQUID FORMULA OF
Pseudomonas fluorescens P60 AGAINST Fusarium WILT ON TOMATO
Loekas Soesanto * , Endang Mugiastuti, Ruth Feti Rahayuniati, dan Abdul Manan Fakultas Pertanian Universitas Jenderal Soedirman, Jln. dr. Suparno, Karangwangkal, Purwokerto 53123
* Penulis untuk korespondensi. E-mail: lukassus26@gmail.com

## ABSTRACT
A research aimed at knowing 1) the effect of Pseudomonas fluorescens P60 in liquid formula on Fusarium wilt of tomato, 2) the effect of P. fluorescens P60 in the formula on tomato growth and yield, and 3) P. fluorescens P60 mechanisms on tomata was carried out at tomato field of Selomoyo Village, Kaliangkrik Subdistrict, Magelang Regency at altitude of 826 m above sea level. Randomized block design was used with seven treatments and four replicates. The treatments were control, with P. fluorescens P60 soaked for 15 min and without fungicide, pathogen without P. fluorescens P60 with fungicide (PBG1), pathogen with P. fluorescens P60 without fungicide, pathogen with pouring P. fluorescens P60 1, 3, and 5 times. Result indicated that application of formulated P. fluorescens P60 for 5 times  decreased  the  disease  intensity  as  high  as  26.77%,  and  late  population  of  the  pathogen  but  increased P. fluorescens P60 as high as 4.54 × 10 10 cfu ml -1 . P. fluorescens P60 affected growth and yield of tomato. P. fluorescens P60 induced tomato resistance by increasing qualitatively its phenolic compound content (saponin, tannin, glycoside). Key words: Fusarium wilt, liquid formula, Pseudomonas fluorescens P60, tomato

## INTISARI
Penelitian dengan tujuan untuk mengetahui: 1) pengaruh Pseudomonas fluorescens P60 dalam formula cair ter- hadap penyakit layu fusarium pada tanaman tomat, 2) pengaruh P. fluorescens P60 dalam formula cair terhadap per- tumbuhan dan produksi tanaman tomat, dan 3) mekanisme P. fluorescens P60 pada tanaman tomat dilakukan di lahan Desa Selomoyo, Kecamatan Kaliangkrik, Kabupaten Magelang dengan ketinggian 826 m di atas permukaan laut. Penelitian menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK), dengan 7 perlakuan dan jumlah ulangan 4 kali, dan se- tiap unit terdiri atas 8 tanaman. Perlakuan tersebut meliputi kontrol; dengan P. fluorescens P60 rendam 15 menit dan tanpa fungisida; dengan patogen; tanpa P. fluorescens P60; dengan fungisida (PBG1); patogen, tanpa P. fluorescens P60, tanpa fungisida; patogen, dengan penyiraman P. fluorescens P60 1 kali; patogen, dengan penyiraman P. fluorescens P60 3 kali; dan patogen, dengan penyiraman P. fluorescens P60 5 kali. Pemberian P. fluorescens P60 selama 5 kali mem- berikan pengaruh sangat nyata dalam menekan penyakit layu fusarium yang disebabkan Fusarium oxysporum. Hal ini ditunjukkan pada penurunan intensitas penyakit sebesar 26,77%, rendahnya kepadatan akhir F. oxysporum serta tingginya  nilai  kepadatan P.  fluorescens P60  sebesar  4,54×10 10 unit  pembentuk  spora/ml.  Pengaruh  pemberian P. fluorescens P60 belum menunjukkan pengaruh nyata pada komponen pertumbuhan dan hasil. P. fluorescens P60 mampu mengimbas ketahanan tanaman tomat dengan meningkatkan kandungan senyawa fenol (saponin, tanin, glikosida).
Kata kunci: formula cair, penyakit layu fusarium, Pseudomonas fluorescens P60, tomat

## PENGANTAR
Tomat merupakan salah satu sayuran yang pen- ting di Indonesia. Produksi tomat nasional meng- alami peningkatan dari tahun ke tahun. Menurut data dari Badan Pusat Statistik dan Dirjen Hortikul- tura (2010), produksi tomat tahun 2010 mencapai 890.169 ton. Adapun data produksi tomat nasional selengkapnya dari tahun 2006–2010 disajikan pada Tabel 1.
Budidaya tomat tidak dapat terlepas dari berba- gai  kendala  yang  dapat  memengaruhi  produksi.
Kendala tersebut termasuk adanya gangguan pato- gen. Salah satu patogen yang paling membahayakan adalah Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici . Jamur ini merupakan penyebab penyakit layu Fusarium (Semangun, 2000).
Pengendalian  menggunakan  agensia  hayati muncul setelah mengetahui pengaruh negatif yang ditimbulkan dari penggunaan bahan kimia sintetis. Soesanto (2008) mengatakan, bahwa apabila diban- dingkan dengan penggunaan kimia sintetis, agensia pengendali  hayati  jelas  tidak  beracun  terhadap manusia. Produk pertanian tidak menyimpan residu
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia, Vol. 17, No. 2, 2011: 82–90
Penyiapan Isolat Isolat jamur patogen F. oxysporum , yang diiso- lasi dari rizosfer tanaman tomat, dibiakkan pada medium  PDA  dan  kemudian  diperbanyak  pada medium  PDB  dalam  erlenmeyer.  Selanjutnya F. oxysporum pada  medium  PDB  dikocok  dengan Daiki orbital shaker dengan kecepatan 150 rpm se- lama 6 hari pada suhu 28°C. Isolat bakteri antago- nis P. fluorescens P60 (Soesanto & Termorshuizen, 2001)  diperbanyak  pada  medium  King’s  B  cair dalam erlenmeyer, dikocok dengan orbital shaker (Daiki) pada kecepatan 150 rpm selama 2 hari pada suhu ruang (26±1°C).
Penyiapan Formula Antagonis Formula  bakteri  antagonis  disiapkan  dengan bahan kaldu dari keong mas, sesuai dengan hasil penelitian Soesanto et al . (2010). Kaldu dalam kon- disi panas dimasukkan ke dalam jerigen steril, dan ditutup rapat sampai dingin. Setelah dingin, isolat bakteri antagonis dimasukkan dan dikocok sesering mungkin selama 2–3 hari.
Penyiapan Bahan Tanaman Benih tomat varietas Arthaloka disiapkan de- ngan disemaikan pada polibag plastik, yang telah diisi campuran tanah dengan pupuk kandang sapi dengan perbandingan 1:1. Berdasarkan perlakuan, tanah yang dijadikan sebagai medium tumbuh bibit tomat  dipisahkan  menjadi  dua.  Ada  tanah  yang dicampur P. flourescens P60 dan ada tanah yang tidak  dicampur P.  flourescens P60.  Bibit  berada pada tempat penyemaian selama 22 hari.
Penyiapan Lahan Tanam Lahan pertanaman diolah dua kali dan dibuat be- dengan dengan jarak antar-bedengan 60 cm, tinggi bedengan 50 cm, panjang bedengan 6,10 m, dan jarak tanam 40×50 cm. Ke dalam masing-masing lubang  tanam  diberikan  pupuk  kandang  sebagai pupuk dasar.
Inokulasi Jamur Patogen Inokulasi  jamur  patogen  dilakukan  dengan penyiraman F. oxysporum f.sp. lycopersici dengan kepadatan 1×10 6 konidium/ml sebanyak 20 ml per lubang tanam sebelum tanaman ditanam.
agensia pengendali hayati di dalamnya, sehingga aman dikonsumsi (Sharma et al. , 2009). Pseudomonas kelompok fluorescens merupakan bakteri antagonis yang banyak dimanfaatkan seba- gai agensia hayati untuk beberapa jamur dan bak- teri patogen tanaman. Menurut Soesanto (2008), bakteri P.  fluorescens mempunyai  sifat  sebagai Plant Growth Promoting Rizhobacteria (PGPR), menghasilkan antibiotika yang dapat menghambat pertumbuhan patogen terutama dari golongan tular- tanah,  dan  mempunyai  kemampuan  mengkoloni akar  tanaman.  Di  sisi  lain  Sumardiyono  (2000), mengatakan  bahwa  bakteri  antagonis  juga  dapat meningkatkan  ketahanan  terimbas  tanaman  ter- hadap serangan patogen.
Produk agensia hayati harus diformulakan untuk mempertahankan  keefektifannya.  Formula  yang akan  digunakan  harus  tersusun  oleh  bahan  yang sesuai dengan Agensia Pengendali Hayati (APH). Salah satu formula yang praktis dan mudah dalam pengaplikasiannya  adalah  formula  cair.  Kaldu keong merupakan salah satu bahan yang digunakan dalam  pembuatan  formula  cair  (Soesanto et  al ., 2010).
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui: 1) pengaruh P. fluorescens P60 dalam formula cair ter- hadap penyakit layu fusarium pada tanaman tomat, 2) pengaruh P. fluorescens P60 dalam formula cair terhadap pertumbuhan dan produksi tanaman tomat, dan 3) mekanisme P. fluorescens P60 pada tanaman tomat.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  dilaksanakan  di  lahan  Desa  Selo- moyo, Kecamatan Kaliangkrik, Kabupaten Mage- lang  dengan  ketinggian  tempat  826  m  di  atas permukaan laut (dpl), suhu udara 23−24ºC , suhu tanah  26ºC,  pH  5,5–6,5,  curah  hujan  rata-rata 4404,8  mm/tahun,  kelembapan  udara  80%,  dan jenis tanah andisol. Penelitian dilaksanakan dari bulan  Juni  sampai    September  2011.  Persiapan penelitian dilakukan di Laboratorium Perlindungan Tanaman, Fakultas Pertanian Universitas Jenderal Soedirman.
Tabel 1. Produksi tomat nasional dari tahun 2006–2010 (ton)
Sumber: Badan Pusat Statistik dan Dirjen Hortikultura (2010). Tahun 2006 2007 2008 2009 2010 Produksi 629.744 635.474 725.973 853.061 890.169 Soesanto et al. : Uji Lapangan Pf P60 terhadap Layu Fusarium Tomat
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia                                                                Vol. 17 No. 2
84
Infestasi P. fluorescens P60 Infestasi P. fluorescens P60 dalam formula cair diaplikasikan melalui dua cara yaitu untuk peren- daman biji sebelum penyemaian dengan dosis 10 ml per  40  biji  tomat  dan  penyiraman  langsung  ke lubang tanam sebanyak 20 ml per lubang tanam dengan kepadatan 10 9 upk/ml, yang dilakukan sete- lah penanaman dengan interval 5 hari untuk penyi- raman selanjutnya.
Rancangan Percobaan Penelitian  menggunakan  Rancangan  Acak Kelompok (RAK), dengan 7 perlakuan dan jumlah ulangan 4 kali, dan setiap unit terdiri atas 8 tanam- an. Perlakuan dalam penelitian ini terdiri atas: K0= Tanpa patogen, tanpa antagonis, dan tanpa fungi- sida, K1= Tanpa patogen, dengan P. fluorescens P60 rendam  15  menit,  tanpa  fungisida,  K2=  Dengan patogen, tanpa P. fluorescens P60, dengan fungisida (PBG1), K3= Dengan patogen, tanpa P. fluorescens P60, tanpa fungisida, K4= Dengan patogen, dengan penyiraman P.  fluorescens P60 1 kali, K5= Dengan patogen, dengan penyiraman P. fluorescens P60 3 kali, dan K6 = Dengan patogen, dengan penyiraman P. fluorescens P60 5 kali.
Peubah Pengamatan Pengamatan terhadap komponen patosistem ter- diri atas masa inkubasi (hari setelah inokulasi = hsi). Intensitas  penyakit  (%)  dihitung  dengan  rumus IP=[∑(n×v)/Z×N] x 100% dengan keterangan: IP =
Intensitas penyakit (%), n = Jumlah daun bergejala dalam setiap kategori, v  = Nilai kategori serangan patogen, Z = Nilai kategori serangan patogen ter- tinggi, dan N = Jumlah daun yang diamati. Kategori penilaian menggunakan skor 0 = Tidak ada gejala, 1 = Gejala daun menguning  0–20%, 2 = Gejala daun menguning 21–40%, 3= Gejala daun men- guning  41–60%, 4= Gejala daun menguning  61– 80%,  dan  5=  Gejala  daun  menguning  >80  % (Gambar 1).
Pengamatan juga dilakukan terhadap populasi akhir P. fluorescens P60 dan F. oxysporum (upk/g). Penghitungan populasi antagonis dan patogen terse- but dilakukan dengan mengambil 10 g sampel tanah dari medium tanam di akhir pengamatan, kemudian dilarutkan dalam 90 ml  air steril dan dilakukan seri pengenceran hingga 10 9 . Pada pengenceran terakhir diambil 0,1 ml  suspensi, kemudian ditumbuhkan pada medium King’s B untuk penghitungan popu- lasi P. fluorescens P60. Penghitungan populasi akhir F. oxysporum juga berasal dari sampel tanah yang sama, kemudian dilakukan seri pengenceran hingga 10 -3 . Pada pengenceran terakhir diambil 0,1 ml  sus- pensi, kemudian ditumbuhkan pada medium PDA, kemudian diinkubasi pada suhu ruang. Selain itu, pengamatan juga dilakukan terhadap komponen pertumbuhan dan hasil, yang meliputi tinggi  tanaman  (cm),  saat  berbunga,  berat  hasil tanaman (g/petak), berat basah tanaman (g), berat kering  tanaman  (g),  berat  basah  akar  (g),  berat
Gambar 1. Kategori serangan gejala layu fusarium
kategori 0 kategori 1 (0–20%) kategori 2 (21–40%) kategori 3 (41–60%) kategori 4 (61–80%) kategori 5 (>80%)
(2006)  bahwa  adanya  penundaan  masa  inkubasi terjadi karena persaingan antara patogen dengan an- tagonis. Lebih lanjut, Santoso et al . (2007) mela- porkan, bahwa perlakuan dengan P. fluorescens P60 dapat memperlambat masa inkubasi penyakit moler pada bawang merah sebesar 62,47% dibandingkan kontrol.
Masa inkubasi tercepat terjadi pada perlakuan: dengan patogen tanpa P. fluorescens P60, dan de- ngan  fungisida  PBG1  (K2)  sebesar  32,38  hsi. Diduga  fungisida  yang  digunakan  tidak  mampu mencapai keberadaan patogen, sehingga tidak ber- pengaruh terhadap keaktifan patogen tular-tanah. Hamzah (2010) melaporkan, bahwa masa inkubasi dipengaruhi  oleh  keaktifan  patogen  Fusarium  di dalam tanah yang mampu berkembang dengan baik.
Hasil uji lanjut DMRT 5% terhadap data peng- amatan intensitas penyakit menunjukkan perbedaan yang  sangat  nyata  (Tabel  3).  Intensitas  tertinggi terjadi pada perlakuan tanpa patogen, tanpa antago- nis tanpa fungisida (K0) sebesar 28,82%. Hal ini menunjukkan, bahwa secara endemi sudah terdapat inokulum  awal  dalam  lahan  yang  digunakan dan  lahan  tersebut  merupakan  daerah  endemi
kering akar (cm), dan panjang akar terpanjang (cm), yang diukur diakhir penelitian. Analisis kandungan fenol dilakukan untuk mengetahui secara kualitatif kandungan saponin, tanin, dan glikosida, yang di- lakukan berdasar Chairul (2003).

## Analisis Data
Data dianalisis dengan uji F pada tingkat ke- salahan  5%. Apabila  berbeda  nyata,  dilanjutkan dengan DMRT pada tingkat kesalahan 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh Perlakuan terhadap Komponen Pato- sistem
Berdasarkan data masa inkubasi yang diperoleh belum menunjukkan perbedaaan nyata (Tabel 2). Meskipun demikian, masa inkubasi terlama ditun- jukkan  pada  perlakuan  dengan  patogen  dengan penyiraman P. fluorescens P60 1 kali dan 5 kali (K4 dan K6) dengan data hasil masing-masing sebesar 32,67 dan 32,63 hsi. Hal ini diduga P. fluorescens P60  telah  mengkoloni  pada  rizosfer  sehingga mampu melindungi akar dari infeksi patogen tanah. Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  Prabowo et  al .
Tabel 2. Pengaruh perlakuan terhadap komponen patosistem
Perlakuan Masa inkubasi Intensitas Penyakit (%) K0 32,62 28,82 d K1 32,58 20,59 a K2 32,38 27,23 cd K3 32,50 28,12 cd K4 32,67 22,49 bc K5 32,62 21,69 ab K6 32,63 22,90 bcd
Keterangan: Angka diikuti huruf sama pada kolom yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata pada DMRT 5%.
K0 = kontrol, K1 = tanpa patogen, rendam P. fluorescens P60 15 menit, K2 = patogen, fungisida, tanpa P. fluorescens P60, K3 = patogen, tanpa P. fluorescens P60, tanpa fungisida, K4 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 1 kali, K5 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 3 kali, dan K6 = patogen, penyi- raman P. fluorescens P60 5 kali.

## Tabel 3. Pengaruh perlakuan terhadap kepadatan akhir patogen dan antagonis
Perlakuan Kepadatan akhir (upk g -1 ) F. oxysporum P. fluorescens P60 K0 1×10 2 2,13×10 10 K1 1×10 2 2,63×10 10 K2 2×10 2 1,41×10 10 K3 3×10 2 2,51×10 10 K4 2×10 2 3,37×10 10 K5 1×10 2 4,54×10 10 K6 1×10 2 4,24×10 10 Keterangan: K0 = kontrol, K1 = tanpa patogen, rendam P. fluorescens P60 15 menit, K2 = patogen, fungisida, tanpa P. fluorescens P60, K3 = patogen, tanpa P. fluorescens P60, tanpa fungisida, K4 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 1 kali, K5 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 3 kali, dan K6 = patogen, penyi- raman P. fluorescens P60 5 kali.
F. oxysporum . Agrios (2005) mengatakan bahwa F. oxysporum akan selalu ada di dalam tanah bekas tanaman  terserang,  baik  dalam  bentuk  miselium maupun klamidospora yang berdinding tebal dan bersifat aktif.
Intensitas penyakit terendah terjadi pada per- lakuan: tanpa patogen, biji di rendam dengan P. fluorescens P60,  selama  15  menit  (K1)  sebesar 20,59% atau dapat menurunkan intesitas penyakit sebesar 26,77% apabila dibandingkan dengan per- lakuan  dengan  patogen,  tanpa P.  fluorescens P60, tanpa fungisida, (K3). Hal ini menunjukkan bahwa dengan perendaman biji dalam suspensi P fluorescens P60, maka biji sudah terlindungi oleh antagonis. Widodo (1993) mengatakan bahwa pato- gen sukar melakukan penetrasi apabila sistem per- akaran terdominasi oleh antagonis. Lebih lanjut, Djatnika et  al .  (2003)  melaporkan,  bahwa  daya hambat P. fluorescens terhadap F. oxysporum f.sp. cubense menunjukkan nilai lebih kurang 54,8%. Berdasarkan data yang diperoleh dari variabel pengamatan kepadatan akhir F. oxysporum dapat disampaikan bahwa nilai tertinggi terjadi pada per- lakuan dengan patogen, tanpa P. fluorescens P60, tanpa fungisida (K3) sebesar 3×10 2 upk/g (Tabel 3). Hal  ini  disebabkan  oleh  karena  pada  petak  per- cobaan  K3  tidak  diinfestasi  antagonis,  sehingga perkembangan patogen terjadi dengan cepat. Ke- cepatan peningkatan populasi patogen, sampai pada awal suatu epidemi, jauh lebih besar dibanding se- lama epidemi berlangsung (van der Plank, 1963).
Kepadatan populasi P. fluorescens P60 tertinggi terjadi  pada  perlakuan:  dengan  patogen,  dengan penyiraman P. fluorescens P60 3 kali dan 5 kali (K5 dan K6) masing-masing 4,54×10 10 dan 4,24×10 10 upk/g (Tabel 3). Hal ini diduga P. fluorescens P60 yang diberikan ke lahan percobaan mampu mem- pertahankan diri di rhizosfer dengan didukung oleh
Tabel 4. Hasil pengujian kandungan fenol tanaman tomat secara kualitatif
Perlakuan Analisis fenol Saponin Tanin Glikosida K0 ++ + ++
K1 ++
+ ++ K2 ++
++
+
K3 ++
+ +++ K4 + +++ + K5 +++ ++ +++ K6 ++ +++ +++
Keterangan: + = sedikit fenol, ++ = cukup fenol, +++ = banyak fenol. K0 = kontrol, K1 = tanpa patogen, rendam P. fluorescens P60 15 menit, K2 = patogen, fungisida, tanpa P. fluorescens P60, K3 = patogen, tanpa P. fluorescens P60, tanpa fungisida, K4 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 1 kali, K5 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 3 kali, dan K6 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 5 kali.
keadaan lingkungan yang menguntungkan terhadap perkembangan P. fluorescens P60 (Soesanto, 2008). Lebih  lanjut  Sutedjo et  al .  (1991)  mengatakan, bahwa berbagai faktor berpengaruh atas berlimpah- nya  populasi  mikroba  dalam  tanah,  yang  paling penting yaitu bahan organik, kelembapan, suhu, dan aerasi. Kepadatan populasi P. fluorescens P60 terendah ditunjukkan pada perlakuan: yang tidak dilakukan inokulasi P. fluorescens P60, meliputi K0, K2, dan K3 masing-masing sebesar, 2,13×10 10 , 1,41×10 10 , dan 2,51×10 10 upk/g. Hal ini diduga karena pada ketiga perlakuan tersebut tidak dilakukan inokulasi antagonis sehingga kepadatan akhir P. fluorescens P60 rendah.
Analisis Kandungan Senyawa Fenol Berdasarkan hasil analisis jaringan dapat dike- mukakan bahwa kandungan senyawa fenol (gliko- sida, saponin, dan tanin) yang terdapat pada akar dan batang bagian bawah tanaman tomat menun- jukkan  bahwa  kandungan  fenol  tertinggi  ditun- jukkan pada perlakuan dengan patogen, penyiraman P. fluorescens P60 3 kali dan 5 kali (K5 dan K6) (Tabel  4).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa P. fluorescens P60  dapat  meningkatkan  kandungan fenol (Soesanto, 2008). Lebih lanjut, senyawa fenol secara alami sudah terdapat pada setiap tanaman tingkat  tinggi  walaupun  dalam  jumlah  sedikit (Chairul, 2003), seperti halnya yang ditunjukkan pada perlakuan K0 (kontrol).
Pengaruh  Perlakuan  Komponen  Pertumbuhan dan Hasil Hasil analisis data komponen pertumbuhan dan hasil tanaman tomat yang terdiri atas tinggi tanam- an,  masa  berbunga,  bobot  segar  tanaman,  bobot segar akar, bobot kering tanaman dan akar, akar ter- panjang,  belum  menunjukkan  perbedaan  nyata
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia                                                                Vol. 17 No. 2 86
Komponen pertumbuhan . Tanaman tertinggi di- tunjukkan oleh perlakuan: dengan patogen, tanpa P. fluorescens P60, tanpa fungisida (K3) sebesar 204,84 cm (Tabel 5). Selanjutnya tinggi tanaman terendahnya terjadi pada perlakuan dengan patogen, penyiraman P. fluorescens P60 3 kali (K5) sebesar 177,18 cm. Hal ini disebabkan berbagai kondisi abiotik meliputi suhu yang kurang mendukung ter- hadap perkembangan agensia hayati (Soesanto et al ., 2010).  Lebih lanjut kondisi ketinggian maupun curah hujan di tempat  penelitian yang kurang sesuai untuk  budidaya  tanaman  tomat  menyebabkan pertumbuhan  tanaman  tidak  seragam  di  lapang (Wiryanta, 2002).
Masa berbunga tercepat ditunjukkan oleh per- lakuan: tanpa patogen, biji di rendam dengan P. fluorescens P60 selama 15 menit (K1) yaitu 22,04 hst (Tabel 5). Hal ini diduga disebabkan oleh peren- daman  dengan P.  fluorescens P60  memberikan pengaruh yang lebih baik dalam percepatan. Masa berbunga terlama ditunjukkan oleh perlakuan: de- ngan patogen, dengan fungisida tanpa P. fluorescens P60 (K2) sebesar 23,08 hst. Hal ini diduga dise- babkan oleh fungisida yang diberikan tidak mampu
(Tabel  5  dan  6).  Hal  ini  diduga  karena  patogen maupun  antagonisnya  bukan  berasal  dari  daerah tempat penelitian, jadi mikroba tersebut memer- lukan  penyesuaian  terhadap  kondisi  di  lapang. Soesanto et al . (2010) melaporkan bahwa suhu op- timum untuk perkembangan P. fluorescens yaitu sekitar  25–35°C,  sedangkan  suhu  lingkungan di lokasi penanaman berkisar 23–24°C, sehingga hal  tersebut  berpengaruh  terhadap  keefektifan P.  fluorescens termasuk sifat PGPR yang dihasilkan antagonis tersebut untuk mendukung pertumbuhan dan perkembangan tanaman.
Wiryanta (2002) mengatakan bahwa tomat vari- etas Arthaloka tergolong tanaman yang sesuai untuk ditanam di dataran tinggi dengan ketinggian ber- kisar 1000–1.250 m di atas permukaan laut (dpl), curah hujan rata-rata optimum untuk pertumbuhan tanaman tomat berkisar antara 750–1250 mm per tahun. Berdasarkan data yang diperoleh dari balai pertanian  setempat  menunjukkan  bahwa  kondisi lahan penelitian memiliki ketinggian tempat 800 m dpl dengan curah hujan rata 4404,8 mm/tahun. Hal ini diduga sebagai penyebab tanaman tumbuh tidak normal sehingga pertumbuhan dan perkembangan tanaman tomat di lapang tidak seragam.
Tabel 5. Pengaruh perlakuan terhadap komponen pertumbuhan
Perlakuan Tinggi tanaman (cm) Masa bunga (hst) Panjang akar (cm) K0 193,92 22,50 64,94 K1 197,43 22,04 74,67 K2 179,68 23,08 64,06 K3 204,84 22,25 74,86 K4 196,74 21,50 78,25 K5 177,18 22,46 65,25 K6 178,67 22,21 67,50 Keterangan: K0 = kontrol, K1 = tanpa patogen, rendam P. fluorescens P60 15 menit, K2 = patogen, fungisida, tanpa P. fluorescens P60, K3 = patogen, tanpa P. fluorescens P60, tanpa fungisida, K4 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 1 kali, K5 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 3 kali, dan K6 = patogen, penyi- raman P. fluorescens P60 5 kali.

## Tabel 6. Pengaruh perlakuan terhadap komponen hasil
Perlakuan Bobot segar tanaman Bobot segar akar Hasil tomat per petak Bobot kering tanaman Bobot kering akar K0 657,08 37,92 1623,18 107,25 7,50 K1 844,58 29,20 2067,05 127,75 8,50 K2 587,08 36,67 2065,45 120,75 9,75 K3 780,83 35,63 2268,30 133,25 7,75 K4 837,83 42,71 2172,34 148,00 9,50 K5 694,83 32,50 1872,73 128,50 8,25 K6 731,94 23,63 2013,86 87,50 8,00 Keterangan: K0 = kontrol, K1 = tanpa patogen, rendam P. fluorescens P60 15 menit, K2 = patogen, fungisida, tanpa P. fluorescens P60, K3 = patogen, tanpa P. fluorescens P60, tanpa fungisida, K4 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 1 kali, K5 = patogen, penyiraman P. fluorescens P60 3 kali, dan K6 = patogen, penyi- raman P. fluorescens P60 5 kali.
mengendalikan penyakit F. oxysporum , sehingga pertumbuhan dan perkembangan tanaman terham- bat. Di samping itu, pengaruh kondisi abiotik lain- nya kurang sesuai di lahan penelitian.
Panjang akar terpanjang ditunjukkan oleh per- lakuan: dengan patogen, dan dengan penyiraman P. fluorescens P60 1 kali (K4) yaitu sebesar 78,25 cm (Tabel 5). Diduga pada petak percobaan ini P. fluorescens P60 mampu mengkoloni dan mendom- inasi rhizosfer sehingga patogen tular-tanah tidak mampu  menginfeksi  bagian  perakaran  tanaman yang  akhirnya  pertumbuhan  dan  perkembangan akar tetap berjalan normal (Soesanto, 2008). Lebih lanjut Asha et al . (2011) melaporkan, bahwa  aplikasi P. fluorescens dapat mendukung pertumbuhan dan perkembangan tanaman.
Nilai terendah dari panjang akar terpanjang ter- jadi pada perlakuan: dengan patogen, dengan fungi- sida tanpa P. fluorescens P60 (K2) sebesar 64,04 cm. Hal ini menunjukkan bahwa fungisida yang di- aplikasikan tidak mampu mengendalikan patogen tular-tanah yang menginfeksi bagian perakaran se- hingga  memengaruhi  pertumbuhan  dan  perkem- bangan akar tanaman. Sudarmo (1988) mengatakan bahwa berbagai hal yang memengaruhi keefektifan fungisida dalam pengendalian meliputi suhu, angin, kelembapan, curah hujan yang terjadi di lapang.
Komponen hasil tanaman tomat . Bobot segar tanaman tomat terberatnya pada perlakuan: tanpa patogen, biji direndam dengan P. fluorescens P60 selama 15 menit (K1) yaitu 844,58 g (Tabel 6) atau terjadi  peningkatan  sebesar  22,20%  dari  kontrol (K0). Hal ini diduga disebabkan oleh karena biji sudah terlindungi oleh bakteri P. fluorescens P60 se- belum dilakukan penyemaian. Penggunaan bakteri P. fluorescens sangat efektif dalam mempercepat perkecambahan biji dan vigor biji sehingga akan memengaruhi tingkat perkembangan tanaman dan lebih lanjut terhadap bobot segar tanaman (Asha et al ., 2011). Bobot segar tanaman terendah ditunjukkan oleh perlakuan: dengan patogen, dan dengan fungisida tanpa P. fluorescens P60 (K2) sebesar 587,08 g. Hal ini diduga disebabkan oleh karena pengaruh dari penggunaan fungisida menyebabkan pengaruh ne- gatif terhadap perkembangan antagonis yang telah ada secara endemi dan tidak mampu dalam mengen- dalikan  serangan  patogen  tular-tanah.  Purnomo (2009) mengatakan, bahwa penggunaan pestisida tidak  hanya  membunuh  organisme  pengganggu, akan tetapi juga membunuh organisme non-target maupun mikroba.
Data hasil penelitian pada variabel pengamatan bobot segar akar menunjukkan bahwa pada per- lakuan: dengan patogen, dan dengan penyiraman P. fluorescens P60 1 kali (K4) memiliki bobot terberat 42,71 g. Selanjutnya bobot terendahnya diperlihat- kan oleh perlakuan: dengan patogen, dan dengan penyiraman P. fluorescens P60 5 kali (K6) yaitu 23,63 g (Tabel 6) . Hal ini diduga kondisi suhu yang kurang mendukung agensia hayati maupun kondisi tempat penelitian yang kurang sesuai untuk budi- daya tanaman tomat varietas Arthaloka (Wiryanta, 2002; Soesanto et al ., 2010).
Hasil  produksi  tanaman  tomat  tertinggi  ter- jadi  pada  perlakuan:  dengan  patogen,  tanpa P. fluorescens P60, dan tanpa fungisida (K3) dengan nilai sebesar 2268,30 g. Hal ini diduga karena kon- disi suhu yang kurang mendukung agensia hayati, sehingga keefektifan P. fluorescens P60 kurang op- timum  (Soesanto et  al .,  2010).  Soesanto  (2008) mengatakan bahwa suhu berpengaruh langsung ter- hadap interaksi antara patogen tanaman dan anta- gonis di dalam tanah. Lebih lanjut hal ini didukung pula oleh kondisi ketinggian dan curah hujan tempat penelitian yang kurang sesuai untuk tanaman tomat varietas Arthaloka (Wiryanta, 2002).
Produksi  terendah  terjadi  pada  kontrol  (K0) sebesar 1623,18 g. Hal ini diduga disebabkan oleh tidak adanya antagonis yang berperan sebagai peng- hambat patogen, sehingga patogen dengan mudah masuk  menyerang  ke  dalam  jaringan  tanaman, akhirnya proses pengangkutan unsur hara terham- bat.  Sastrosuwignyo  (1991)  mengatakan,  bahwa patogen dapat menimbulkan dampak buruk terha- dap fungsi fisiologi tumbuhan akibat tanaman inang bereaksi terhadap serangan patogen.
Data hasil bobot kering tanaman terberat ditun- jukkan oleh perlakuan: dengan patogen, dan dengan penyiraman P. fluorescens P60 1 kali (K4) sebesar 148  g.  Selanjutnya  angka  terendah  ditunjukkan perlakuan dengan patogen, dengan penyiraman P. fluorescens P60 5 kali (K6) sebesar 87,5 g. Hal ini disebabkan  oleh  karena  kondisi  lahan  penelitian yang kurang sesuai terhadap agensia hayati maupun tanaman.
Bobot kering akar menunjukkan bahwa semua perlakuan  yang  diberi P.  fluorescens P60  mem- berikan angka yang lebih tinggi dibandingkan K0 dan K3 (7,5 g dan 7,75 g). Diduga P. fluorescens P60 telah mengkoloni di perakaran tanaman sehing- ga mempu menghambat patogen menginfeksi akar. Hal ini sesuai dengan pendapat Asha et al. (2011), yang menyatakan bahwa P. fluorescens merupakan
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia                                                                Vol. 17 No. 2
In vivo . Skripsi. Fakultas Pertanian Universitas Jen- deral  Soedirman,  Purwokerto.  52  p.  (Tidak  di- publikasikan).
Prabowo, A.K., N. Prihatiningsih, & L. Soesanto. 2006. Potensi Trichoderma harzianum dalam Me- ngendalikan Sembilan Isolat Fusarium oxysporum Schlecht  f.sp. zingiberi Trujillo  pada  Kencur. Jurnal Ilmu-Ilmu Pertanian Indonesia 8: 76–78.
Purnomo, H. 2009. Pengendalian Hayati . Penerbit Andi, Yogyakarta. 198 p. Santoso,  S.E.,  L.  Soesanto,  & T.A.D.  Haryanto. 2007.  Penekanan  Hayati  Penyakit  Moler  pada Bawang Merah dengan Trichoderma harzianum , Trichoderma koningii , dan Pseudomonas fluorescens P60. Jurnal Hama dan Penyakit Tumbuhan Tropika 7: 53–61.
Sastrosuwignyo. 1991. Ilmu Penyakit Tumbuhan Umum . Jurusan Hama Penyakit Tumbuhan, Fakul- tas Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Bogor. 255 p.
Semangun, H. 2000. Penyakit-Penyakit Tanaman Hortikultura di Indonesia . Gadjah Mada University Press, Yogyakarta. 850 p. ....................... 2001. Pengantar Ilmu Penyakit Tum- buhan . Gadjah Mada Unversity Press, Yogyakarta. 754 p.
Sharma, R.R., D. Singh, & R. Singh. 2009. Biologi- cal Control of Postharvest Diseases of Fruits and Vegetables by Microbial Antagonists: A Review. Biological Control 50: 205–221. DOI: 10.1016/j.bio- control.2009.05.001.
Soesanto, L. & A.J. Termorshuizen. 2001. Pseudo- monas  fluorescens P60  sebagai  Agensia  Hayati Jamur-jamur Patogen Tular-tanah,  p. 183–186. In M. Machmud, Hartono, T.S. Silitonga, K. Mulya, I.S. Dewi, M. Yunus, & I.N. Orbani (eds.), Prosi- ding Kongres XIV dan Seminar Nasional PFI , IPB, Bogor 22–24 Agustus 2001.
…………... 2008. Pengantar Pengendalian Hayati Penyakit  Tanaman .  PT  Raja  Grafindo  Persada, Jakarta. 573 p.
Soesanto, L., E. Mugiastuti, & R.F. Rahayuniati. 2010. Perakitan  Biopestisida Pseudomonas fluorescens P60 sebagai Agensia Hayati Penyakit Tanaman untuk Meningkatkan Produksi Tanaman. Laporan Hibah Kompetensi T.A. 2010. Universitas Jenderal  Soedirman,  Purwokerto.  52  p.  (Tidak dipublikasikan).
Sudarmo. S. 1988. Pestisida Tanaman . Kanisius, Yogyakarta. 124 p. Sumardiyono,  C.  2000.  Ketahanan  Terimbas, Kendala  dan  Prospeknya  dalam  Pengendalian
kelompok bakteri rhizosfer yang mampu menekan pembusukan akar akibat infeksi patogen.

## KESIMPULAN
1. Pemberian P. fluorescens P60 selama 5 kali mem- berikan pengaruh sangat nyata dalam menekan penyakit  layu  fusarium  yang  disebabkan F. oxysporum , Hal ini ditunjukkan pada penurunan intensitas penyakit sebesar 26,77%, rendahnya kepadatan  akhir F.  oxysporum serta  tingginya nilai kepadatan P. fluorescens P60 sebesar  unit pembentuk spora/ml.
2. Pengaruh pemberian P. fluorescens P60 belum menunjukkan pengaruh nyata terhadap kompo- nen pertumbuhan dan hasil.
3. P. fluorescens P60 mampu mengimbas ketahanan tanaman tomat dengan meningkatkan kandungan senyawa fenol (saponin, tanin, glikosida).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih disampaikan kepada Direktur Per- guruan Tinggi, Kementrian Pendidikan dan Kebu- dayaan, atas bantuan pembiayaan penelitian melalui Hibah Kompetensi Batch III Tahun 2011. Terima kasih juga disampaikan kepada Sigit Mustofa dan C. Basir serta para mahasiswa grup keong atas ban- tuan teknisnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Agrios, G.N. 2005. Plant Pathology , 5 th edition . Academic Press, New York. 922 p.
Asha, B.B., C. Nayaka, U. Shangkar, & S. Niranjana. 2011. Biological Control of F. oxysporum f.sp. ly- copersici Causing Wilt of Tomato by Pseudomonas fluorescens . International Journal of Microbiology Research 1: 79–84.
Badan Pusat Statistik dan Dirjen Hortikultura. 2010. Produksi Tomat. (On-Line). http://www.hortikul- tura.deptan.go.id/index.php?option=com_con- tent&task=view&id=134&Itemid=2,diakses 26/5/11.
Chairul.  2003.  Identifikasi  Secara  Cepat  Bahan Bioaktif  pada  Tumbuhan  di  Lapangan. Berita Biologi 6: 621–628.
Djatnika, I., C. Sunyoto, & Elisa. 2003. Peranan Pseudomonas  fluorescens MR96  pada  Penyakit Layu Fusarium Tanaman Pisang. Jurnal Hortikul- tura 13: 212–218.
Hamzah, A. 2010. Kajian Mekanisme Antagonis Pseudomonas fluorescens P60 terhadap Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici pada Tanaman Tomat
Penyakit Tumbuhan. Pidato Pengukuhan Jabatan Guru  Besar  pada  Fakultas  Pertanian  Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, 11 Maret 2000. 28 p.
Sutedjo. M. M, Kartasapoetra, & Sastroatmodjo. 1991. Mikrobiologi Tanah . Rineka Cipta, Jakarta.
446 p. van der Plank, J.E. 1963. Plant Diseases: Epidemics and Control . Academic Press, New York, 349 p.
Widodo. 1993. Penggunaan Pseudomonas Kelom- pok fluorescens untuk  mengendalikan  Penyakit Akar Gada pada Caisin ( Brassica campestris var. chinensis ). Thesis Pasca Sarjana. Institut Pertanian Bogor, Bogor. 41 p. (Tidak dipublikasikan). Wiryanta, B.T.W. 2002. Bertanam Tomat . Agromedia Pustaka, Jakarta. 100 p.
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia                                                                Vol. 17 No. 2 90