## AKTIVITAS ESTROGENIK EKSTRAK ETANOL 70% HERBA KEMANGI
(Ocimum americanum L.) PADA TIKUS PUTIH BETINA (Rattus norvegicus) PRE-

## MENOPAUSE
E.Mulyati Effendi 1 , Hera Maheshwari 2 , Mega Listya M.I 3
1,3) Program Studi Farmasi FMIPA Universitas Pakuan
2) Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor Email : mulyatichandra@ymail.com

## ABSTRAK
Ocimum  americanum L.(Lamiaceae)  dikenal  sebagai  Kemangi  di  Indonesia, merupakan  tanaman  semak  dengan  bau  aromatik  yang  kuat.  Bagian  daun  dan  akar  secara tradisional  digunakan  untuk  berbagai  pengobatan.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui aktivitas estrogenik ekstrak etanol 70% herba kemangi ( Ocimum americanum L.) pada tikus putih betina ( Rattus norvegicus ) pre-menopause. Sebanyak 20 tikus putih  betina dibagi  menjadi  5  kelompok  perlakuan,  masing-masing  diberi  perlakuan  dengan  etinil estradiol (kontrol positif), CMC-Na 1% (kontrol negatif), ekstrak etanol 70% dosis I, II dan II (0,8g/200gBB, 1,6g/200gBB, 3,2g/200gBB). Siklus estrus,  vaskularisasi ovarium dan uterus diamati untuk mengetahui efek dari masing-masing perlakuan. Perlakuan dosis 0,8g/200g BB dapat  memperpanjang  siklus  estrus,  meningkatkan  vaskularisasi  dan  bobot  ovarium dibandingkan dengan kontrol negatif dan setara dengan etinil estradiol (9×10 -3 mg/200gBB).
Kata kunci: Herba kemangi, estrogenik, pre-menopause
ESTROGENIC ACTIVITIES OF ETHANOLIC 70% EXTRACTED OF KEMANGI (Ocimum americanum L.) HERBS IN PRE-MENOPAUSE FEMALE
WHITE RATS (Rattus norvegicus)

## ABSTRACT
Ocimum americanum L.(Lamiaceae) commonly known as Kemangi in Indonesia, is a small  shrub  with  strong  aromatic  odor.  The  plant  leaves  and  roots  are  traditionally  used  to possess a wide range of medicinal activities.  The main objective of this study is to evaluate the  estrogenic  activity  of  70%  ethanol  basil  herbs  extract  in  female  white  rats  ( rattus norvegicus )  pre-menopause  use  whitten  effect  method.  Twenty  female  white  rats  were divided  into  five  treatment  groups,  each  group  treated  with  ethynil  estradiol  (positive control),  CMC-Na  1%  (control  negative),  70%  ethanol  extract  dose  I,  II  and  II  (0.8g/200g BW,  1.6g/200g  BW,  3.2g/200g  BW).  Estrus  cycle,  uterine  and  ovarian  vascularization evaluated to know the effect of each treatment. Dose treatment of 0.8g/200 g BW has resulted in  extended  estrus  cycle,  improved  vascularization  and  ovarian  weights  compared  with negative control and equal with etinil estradiol (9×10 -3 mg/200g BW).
Key words: Ocimum americanim L. herbs, estrogenic, pre-menopause

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang beriklim  tropis  dan  kaya  akan  sumber  daya
alam  dengan  berbagai  macam  tanaman  obat yang  yang  dapat  digunakan  sebagai  obat tradisional.  Berbagai  macam  tanaman  obat
telah  terbukti  mengobati  berbagai  macam penyakit,  tetapi  secara  ilmiah  masih  belum dapat dipertanggung jawabkan.
Salah  satu  tanaman  obat  yaitu kemangi  ( Ocimum  americanum L.)    famili Lamiaceae (Labiatae) memiliki bau dan rasa yang  khas,  digunakan  sebagai  lalapan  segar untuk  dimakan  dan  memiliki  berbagai macam khasiat (Hadipoentyanti & Wahyuni, 2008).  Spesies Ocimum merupakan  salah satu  tanaman  yang  berkhasiat  sebagai kemopreventif  dan  berkhasiat  sebagai  obat (Karthikeyan et  al. , 1999,  Rastogi et  al. , 2007).  Kandungan  utamanya  adalah  minyak atsiri,  flavonoid,  fitosterol,  karbohidrat  dan tanin.  Penggunaannya  yang  utama  sebagai antimikroba,  antioksidan,  antelmintika  dan antidiabetika  (Khare,  2007).  Adanya  anetol, boron  dan  stigmasterol  merupakan  senyawa aktif  pada  kemangi    yang  berhubungan dengan  aktivitas  seksual  yaitu  merangsang keluarnya  hormon  reproduksi  yaitu  estrogen (Gunawan, 2004).
Whitten  Effect merupakan  metode yang digunakan untuk mengamati perubahan yang  terjadi  pada  vagina  untuk  menentukan siklus  estrus  (persiapan  kawin)  pada  hewan laboratorium  kecil  seperti  mencit  atau  tikus putih  (Ochiogu et  al ., 2009;  Khazaei et  al ., 2011).  Durasi  siklus  estrus  pada  mencit selama  4-6  hari,  tahap  siklus  estrus  dapat dilihat pada perubahan sel epitel vagina atau vulva.  Ciri-ciri  hewan  estrus  dapat  dilihat dari  keadaan  vulva  yang  bengkak,  berwarna merah dan basah (Nongae, 2008). Sinkronisasi  birahi  pada  tikus  betina  dengan mencium  bau  feromon  yang  keluar  bersama urin  tikus  jantan.  Ketika  tikus  betina  tidak membau  feromon  tikus  jantan,  maka  tikus betina  mengalami  fase  anestrus,  sedangkan pada saat tikus betina membau feromon yang ikut  disekresikan  bersama  urin  tikus  jantan, maka  pada  hari  ke  3  berikutnya  tikus  betina mengalami estrus. Pada fase estrus sel epitel berubah  menjadi  sel  superfisial  dan  sel tanduk  yang  menandakan  hewan  dalam keadaan puncak estrus (Seire et al ., 1991). Berdasarkan  penelitian  sebelumnya diatas,  maka  tujuan  penelitian  ini  adalah untuk mengetahui aktivitas estrogenik
ekstrak etanol 70% herba kemangi pada tikus putih betina ( Rattus norvegicus ) premenopause  juga  melakukan  pengamatan vaskularisasi  ovarium  dan  uterus  pada  fase estrus.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan Juni sampai September 2013 bertempat di Laboratorium Farmasi Universitas Pakuan.

## Bahan
Tikus  putih  ( Rattus  norvegicus ) betina galur Sprague-Dawley pre-menopause berumur  8-9    bulan  dengan  bobot  badan sekitar  200-250  g  sebanyak  20  ekor,  NaCl fisiologis,  herba  kemangi,  pewarna  Giemsa, metanol  10%,  etanol  70%,  etinil  estradiol dan CMC-Na 1%.

## Alat
Rotary evaporator (BUCHI), grinder , ayakan  40  Mesh,  mikroskop,  sonde,  kaca arloji,  stop  watch,  pengaduk  gelas,  alat maserasi, gelas kimia, kain flannel, timbangan  analitik,  perlengkapan  untuk membuat  preparat  apus  vagina  ( cotton  bud , gelas  objek,  cawan  petri,  bunsen),  kandang tikus ukuran 30 x 40 cm, lampu, bak plastik, kawat penutup, dan botol minum.

## Cara Kerja
Penelitian  terbagi  menjadi  2  tahap yaitu tahap pra-penelitian dan tahap penelitian.

## 1. Ekstraksi
Sebanyak  1  kg  simplisia  herba kemangi  yang  telah  dihaluskan,  dimaserasi dengan  pelarut  etanol  70%  (perbandingan 1:10)  dalam  tabung  selama  3  x  24  jam. Kemudian disaring dan ampasnya dimaserasi kembali  sebanyak  2  kali  dengan  perlakuan yang sama. Maserat yang terkumpul dievaporasi  dengan  menggunakan rotary evaporator pada  suhu  30-40°C  hingga terbentuk  ekstrak  kental  etanol.  (Harborne, 1987).
2. Penapisan Fitokimia
Ekstrak  kental  di  uji  terhadap alkaloid,  saponin,  tanin,  flavonoid  dan steroid (Harborne, 1987).
3. Tahap Pra-Penelitian
a. Adaptasi  dilakukan  pada  20  ekor  tikus betina ( Rattus norvegicus ) tikus percobaan selama 1 minggu dengan berat badan sekitar 200-250 g.
b. Setelah satu minggu, tikus-tikus percobaan  tersebut  dibagi  menjadi  5 kelompok  perlakuan  dengan  masing- masing  kelompok  terdiri  dari  4  ekor tikus.  Kelompok  kontrol  positif  (P1) diberi  per  oral  etinil  estradiol  dengan dosis  9×10 -3 mg/  200g  BB  dalam  CMC- Na  1%    sebanyak  3  mL  (Ganiswara, 1995).
c. Kelompok kontrol negatif (P2) diberi per oral CMC-Na 1% / 200g BB sebanyak 3 mL.  Kelompok Uji I (P3) diberi per oral ekstrak  etanol  70%  herba  kemangi dengan  dosis  yang  setara  dengan  1  mL ekstrak kental dalam dosis 0,8g/200g BB dalam  CMC-Na  1%  sebanyak  3  mL. Kelompok  Uji  II  (P4)  diberi  per  oral ekstrak  etanol  70%  herba  kemangi dengan  dosis  yang  setara  dengan  2  mL ekstrak kental dalam dosis 1,6g/200g BB dalam  CMC-Na  1%  sebanyak  3  mL. Kelompok  Uji  III  (P5)    diberi  per  oral ekstrak  etanol  70%  herba  kemangi dengan  dosis  yang  setara  dengan  4  mL ekstrak kental dalam dosis 3,2g/200g BB dalam  CMC-Na  1%  sebanyak  3  mL. Semua  perlakuan  dilakukan  secara  per oral  selama  satu  kali  siklus  estrus, dimulai  pada  saat  berlangsungnya  fase estrus.  Penyeragaman  saat  fase  estrus dilakukan  dengan  metode Whitten  Effect dengan  cara  meletakkan  kandang  tikus jantan diatas kandang tikus betina.

## 4. Tahap Penelitian
Tahap  penelitian  dilakukan  terhadap lama siklus estrus, vaskularisasi ovarium dan uterus  dan  bobot  ovarium  dan  uterus  pada fase estrus.
a. Lama Siklus Estrus
Pengamatan  siklus  estrus  dilakukan setiap  3  jam  setelah terjadinya  estrus  hingga
estrus  berikutnya  dengan  mengamati  sel-sel yang ditemukan dalam apusan vagina secara mikroskopik.  Pengamatan  dilakukan  selama 12  jam  berdasarkan  hasil  penelitian  bahwa pemberian daun kemangi dapat memperpanjang  siklus  estrus  (Suntoro, 1983).  Peengamatan  fasse  di  dalam  siklus estrus  yaitu  proestrus,  estrus,  metestrus  dan diestrus  dilakukan  dengan  pemeriksaan preparat  ulas  vagina  kemudian  diamati dengan mikroskop pembesaran 10x. Preparat apus  vagina  disiapkan  dengan  mengulaskan kapas  ( cutton  bud )  yang  telah  dibasahi dengan  saline  guna  menghindari  terjadinya iritasi  ke  dalam  lubang  vagina  tikus kemudian  diulaskan  pada  gelas  objek (Suntoro,  1983).  Sampel  yang  diperoleh kemudian  difiksasi  menggunakan  metanol 10%  selama  5  menit.  Setelah  itu  preparat ulas  diwarnai  dengan  pewarna  Giemsa selama  30  menit,  kemudian  dicuci  dengan akuades  dan  dikeringkan.  Warna  yang dihasilkan  merah  dadu  (Beimborn et  al ., 2003).

## b. Vaskularisasi  Ovarium  Dan    Uterus Pada Fase Estrus
Pengamatan  vaskularisasi  ovarium dan  uterus  pada  tikus  betina  dilakukan dengan  cara  mematikan  tikus  dengan  eter pada  saat  tikus  mengalami  masa  estrus,  lalu dibedah  untuk  dikeluarkan  ovarium  dan uterusnya,  setelah  itu  dilihat  warna  mukosa pada ovarium dan uterus tikus. Penilaian dan pengamatan vaskularisasi dinyatakan dengan skoring,  sesuai  dengan  modifikasi  metode (Setiawan, 2010).
c. Pengukuran  Bobot  Ovarium  dan Uterus Pada Fase Estrus
Koleksi ovarium dan uterus dilakukan terlebih dahulu setelah pengamatan vaskularisasi, setelah itu dilakukan  penimbangan  bobot  ovarium  dan uterus.  kemudian  dilakukan  penimbangan bobot ovarium dan uterus (Nodine & Siegler, 1961).
d. Rancangan Penelitian
Pengaruh  estrogenik  dari  ekstrak etanol  70%  herba  kemangi  pada  tikus  putih betina  dapat  dilihat  dari  hasil  penggunaan uji statistik Rancangan Acak Lengkap (RAL)
dengan    lima  perlakuan  dan  enam  ulangan. Apabila  uji  F  menunjukkan  pengaruh  yang nyata  dimana  nilai  Fh>0,05,  maka  untuk melihat  adanya  perbedaan  antar  perlakuan, dilakukan  uji  lanjut  menggunakan  Uji Duncan. Sidik ragam untuk Rancangan Acak Lengkap  disajikan  pada  Tabel    (Sudjana, 1998).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## 1. Ekstraksi Dan Penapisan Fitokimia
Ekstrak  kental  yang  diperoleh  121g, maka  rendemen  ekstrak  etanol  70%  adalah 12,1  %.  Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia kandungan  ekstrak  etanol  70%  herba kemangi  adalah  saponin,  tanin  dan  steroid. Senyawa saponin dan tanin memberikan efek antelmintika
(Medica dkk.,
2004).
Kandungan  utama Ocimum  americanum L. selain  minyak  atsiri  adalah  flavonoid, karbohidrat, fitosterol dan tanin (Sarma & A. Venkata, 2011). Fitosterol merupakan prekursor  senyawa  bioaktif  steroid,  faktor pertumbuhan  dan  substrat  untuk  sintesis
senyawa  metabolit  sekunder  pada  tanaman (Piironen et  al .,  2003).  Steroid  merupakan struktur  dasar  hormon  estrogen  terutama sebagai hormon seks wanita. Estrogen dalam plasma  hewan  betina  yang  utama  adalah  17 β-estradiol,  estron,  dan  estriol  (Johnson,  & Everitt, 1984).

## 2. Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Etanol 70%  Herba  Kemangi  Terhadap  Lama Siklus Estrus
Estrus merupakan fase periode birahi. Lama  estrus  pada  tikus  9-20  jam  dan  siklus estrus  berlangsung  selama  empat  sampai enam  hari.  Siklus  estrus  dibagi  menjadi empat  fase  yaitu  fase  proestrus,  estrus, metestrus,  dan  diestrus  (Turner  &  Bagnara, 1976).
Hasil  pengujian  ekstrak  terhadap lama siklus estrus dilakukan dengan mengamati  sel-sel  yang  ditemukan  dalam apusan  vagina  secara  mikroskopik  yang dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1 . Fase-fase Pada Siklus Reproduksi Tikus Keterangan: A. Sel Epitel Berinti, B. Sel
Kornifikasi, C. Sel Tidak Berinti, D. Leukosit
Pada  fase  proestrus  ditandai  dengan sel epitel berinti banyak. Fase ini menandakan  akan  datangnya  birahi  (Turner & Bagnara, 1976). Preparat apus vagina fase estrus ditandai dengan terbentuknya cornified  cell (sel  menanduk)  sebagai gambaran  banyaknya  mitosis  yang  terjadi  di dalam  mukosa  vagina.  Menjelang  estrus berakhir,  lumen  vagina  membentuk  sel-sel menanduk dengan inti berdegenerasi (Turner &  Bagnara,  1976).  Pada  fase  metestrus  sel menanduk berkurang dan ovary mengandung korpus  luteum  yang  mengandung  sel-sel lutein  dan  folikel-folikel  kecil  yang  tidak berinti.  Fase  diestrus  didominasi  oleh  sel
leukosit  dan  mulai  muncul  sel  epitel  berinti (Turner & Bagnara, 1976).
Waktu siklus estrus ditampilkan pada Tabel  1  yang  menunjukkan    bahwa perlakuan ekstrak etanol 70% herba kemangi dengan  konsentrasi  terendah  mengalami estrus  selama  165  jam  (mendekati  7  hari) sudah  setara  dengan  kontrol  positif  dan konsentrasi  tertinggi.  Durasi  total  siklus estrus  (proestrus,  estrus,  metaestrus  dan diestrus)  adalah  4-5  hari  (Waynforth,  & Flecknell,  1992).  Perlakuan  kontrol  negatif (CMC-Na1%)  memberikan  waktu  siklus estrus  yang  paling  pendek  yaitu  107  jam dibandingkan  ke  empat  kelompok  perlakuan
lainnya.  Hasil  uji  statistik  menunjukkan bahwa CMC-Na 1%, etinil estradiol, ekstrak etanol  70  %  herba  kemangi  dosis  0,8g/200g BB;  1,6g/200g  BB  dan  3,2g/200g  BB memberikan  pengaruh  yang  sangat  beda nyata  terhadap  peningkatan  (lebih  lamanya) waktu siklus estrus (P<0,01).
Hasil  uji  Duncan  untuk  mengetahui perbedaan  antar  perlakuan  menunjukkan bahwa,  semua  perlakuan  pemberian  ekstrak etanol  70%  herba  kemangi  pengaruhnya
sama dengan etinil estradiol 9×10 -3 mg/200gBB sebagai  kontrol  positif  terhadap memperpanjang  siklus  estrus  pada  tikus putih betina pre-menopause. Melalui pemberian  dosis  terendah  yaitu  0,8g/200g BB pengaruhnya sudah setara dengan kontrol positif  dengan  perbedaan  yang  sangat  nyata terhadap memperpanjang siklus estrus.
Data  pengukuran  waktu  siklus  estrus  dapat dilihat pada Tabel 1.

## Tabel 1 .  Waktu Siklus Estrus.
Keterangan :   Angka yang diikuti superkrip yang sama pada baris yang sama menunjukkan pengaruh yang tidak berbeda nyata (P>0.05).
Hasil pada pengujian ini menunjukkan  bahwa  dengan  pemberian ekstrak herba kemangi meyebabkan terjadinya  peningkatan  hormon  estrogen pada  fase  estrus  sehingga  cenderung  akan memperpanjang siklus estrus.

## 3.  Vaskularisasi  Ovarium  Dan    Uterus Pada Fase Estrus
Pengujian  ekstrak  etanol  70%  herba kemangi  terhadap  vaskularisasi  uterus  dan ovarium  menggunakan  modifikasi  metode Rugh (1968) berdasarkan skoring yang dapat dilihat  dari  perbedaan  mukosa  ovarium  dan uterus pada Gambar 2 di bawah ini.
Estrogen bertanggung jawab terhadap peningkatan  jumlah  buluh  darah  ke  uterus. Peningkatan  jumlah  vaskularisasi  pada uterus  akan  memperlancar  aliran  darah  ke uterus (Albrecht & Pepe, 2007).
Hasil  pengujian  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  herba  kemangi  pada  dosis 0,8g/200g BB mampu meningkatkan vaskularisasi  dari  mukosa  ovarium  dan uterus  tikus  dibandingkan  dengan  kontrol negatif. Hal  ini  terlihat  dari  penilaian  yang
dilakukan  secara  deskriptif.    Berdasarkan hasil  skoring,  dosis  3,2g/200g  BB  bernilai rata-rata  3  untuk  setiap  ulangan  (Tabel  2). Pada  dosis  1,6g/200g  BB  menunjukkan terjadinya  peningkatan vaskularisasi mukosa yang  sama  dengan  dosis  0,8g/200g  BB dimana    nilai  rata-rata  skoring  adalah  2,7. Kontrol negatif memberikan skoring vaskularisasi  mukosa  ovarium  dan  uterus yang paling rendah.
Pemberian  ekstrak  etanol  herba kemangi  pada  dosis  3,2g/200gBB  dapat menghasilkan warna yang sangat merah pada mukosa  uterus  dan  ovarium  tikus.  Hal  ini disebabkan  ekstrak  etanol  herba  kemangi bersifat estrogenik yang dapat meningkatkan vaskularisasi.  Hasil  uji  statistik,  diketahui bahwa  CMC-Na1%,  etinil  estradiol  9×10 -3 mg/200g  BB,  ekstrak  etanol  herba  kemangi 0,8g/200g  BB  sebagai  dosis  uji  I,  ekstrak etanol  herba  kemangi  1,6g/200g  BB  sebagai dosis  uji  II  dan  ekstrak  etanol  herba kemangi  3,2g/200g  BB  sebagai  dosis  uji  III memberikan  pengaruh  yang  beda  nyata terhadap  vaskularisasi  pada  ovarium  dan
Jumlah Ulangan Lamanya Siklus (jam) Perlakuan P1 P2 P3 P4 P5 1 165 100 165 159 174 2 163 120 165 165 165 3 165 104 165 174 165 4 164 104 165 165 165 Total 657 428 660 663 669 Rata-rata 164.3 a 107 a 165 ac 165.75 ac 167.3 ac
uterus  (P<0,05).  Penentuan  perbedaan  antar perlakuan  dilanjutkan  dengan  uji  Duncan.
Gambar 2. Penampangan Ovarium dan Uterus Pada Fase Estrus Tikus Keterangan:
A (Ovarium); B (Uterus) dan C (Vaskularisasi). Skor 0 (tidak berwarna), skor 1 (sedikit merah), skor 2 (merah), dan skor 3 (sangat merah)
Tabel 2. Pengamatan Vaskularisasi Pada Ovarium dan Uterus
Hasil  Uji  Duncan  menunjukkan bahwa,  semua  perlakuan  pemberian  ekstrak etanol  herba  kemangi  berpengaruh  sangat nyata  dibandingkan  dengan  etinil  estradiol 9×10 -3 mg/200gBB pada vaskularisasi ovarium  dan  uterus  pada  tikus  putih  betina. Hasil penelitian ini dapat menjelaskan bahwa dengan dosis ekstrak kemangi terendah yaitu 0,8g/200g  BB  pengaruhnya  sudah  setara dengan  dosis  1,6g/200g  BB  dan  dosis 3,2g/200g  BB    dengan  perbedaan  yang sangat  beda  nyata  terhadap  vaskularisasi ovarium dan uterus tikus putih betina.

## 4.  Peningkatan  Bobot  Ovarium  dan Uterus Pada Fase Estrus
Pada  permukaan  ovarium  terlihat adanya tonjolan-tonjolan yang diyakini dapat memperlihatkan  perkembangan  folikel.  Hal ini  menguatkan  dugaan  bahwa  pada  fase estrus  telah  terjadi  perkembangan  folikel secara  maksimal  yang  siap  diovulasikan (Dellmann,  1992).  Data  pengukuran  bobot ovarium  dan  uterus  yang  dapat  dilihat  pada Tabel 3.
Hasil ini menunjukkan bahwa perlakuan ekstrak etanol herba kemangi pada konsentrasi  terendah  pun  sudah  setara
Kode Hewan Skor Warna Ovarium dan Uterus Pada Perlakuan P 1 P 2 P 3
P 4 P 5 1 3 0 3 3 3 2 2 1 3 3 3 3 2 1 3 2 3 4 3 0 2 3 3 Total 10 2 11 11 12 Rat-rata 2,5 a 0,5 a 2,7 c 2,7 c 3 bc
dengan  kontrol  positif.  Hasil  pengujian berdasarkan  rata-rata  bobot  ovarium  dan uterus menunjukkan bahwa perlakuan ekstrak  etanol  herba  kemangi  pada  dosis 3,2g/200gBB menunjukkan peningkatan bobot ovarium dan uterus yang paling tinggi bila dibandingkan dengan keempat perlakuan lainnya.  Sedangkan  pada  kontrol  negatif menunjukkan  bahwa  bobot  ovarium  dan uterus  paling  rendah  dibandingkan  dengan keempat  perlakuan  lainnya.  Pada  hasil pengujian  skoring,  menunjukkan  bahwa perlakuan  ekstrak  etanol  herba  kemangi memberikan  pengaruh  yang  sama  (P>0,05)
terhadap  peningkatan  bobot  ovarium  dan uterus  tikus.  Setelah  di  uji  lanjut  dengan Duncan,  memperlihatkan  hasil        bahwa perlakuan     pemberian ekstrak etanol herba kemangi dosis 0,8g/200gBB, dosis 1,6g/200gBB  setara  pengaruhnya  dengan kontrol  positif  (etinil  estradiol)  terhadap bobot  ovarium  dan  uterus.  Bahkan  dengan pemberian dosis
3,2g/200gBB
memperlihatkan  bobot  ovarium  dan  uterus yang  lebih  berat  dibanding  dengan  kontrol positif  secara  beda  nyata  terhadap  bobot ovarium dan uterus tikus.

## Tabel 3. Data Penimbangan Bobot Ovarium dan Uterus Tikus Pada Setiap Perlakuan
Kode Hewan Pengukuran Bobot P 1 P 2 P 3
P 4 P 5 1 1,10 0,90 1,50 1,50 2,00 2 1,50 1,50 2,00 1,50 2,00 3 2,00 1,50 1,30 2,00 1,60 4 2,00 1,00 2,00 2,00 2,00 Total 6,60 4,90 6,80 7,00 7,60 Rat-rata 1,65 a 1,23 a 1,70 ab 1,75 ab 1,90 bc
Keterangan:  Angka yang diikuti superkrip yang sama pada baris yang sama menunjukkan pengaruh yang tidak berbeda nyata (P>0,05) antar perlakuan

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Perlakuan  ekstrak  etanol  70%  herba kemangi  ( Ocimum  americanum  L .)  dapat meningkatkan  aktivitas  estrogenik  tikus putih  betina (Rattus  norvegicus) pre- menopause. Pada  dosis  0,8g/200g  BB  dapat memperpanjang siklus estrus, juga meningkatkan vaskularisasi dan meningkatkan  bobot  ovarium  dibandingkan kontrol  negatif  (CMC-Na1%). Perlakuan dengan  konsentrasi  terendah  sudah  setara dengan  kontrol  positif  etinil  estradiol  (9x10 - 3 mg/200g BB ).

## Saran
a. Perlu  dilakukan  penelitian  dengan menggunakan  dosis  yang  lebih  rendah pada penelitian ini.
b. Perlu dilakukan metode bioassay melalui  pemeriksaan  serum  darah  tikus untuk  mendapatkan  hasil  yang  lebih akurat.

## DAFTAR PUSTAKA
Albrecth,  E.D.,  and  Pepe,  G.J.  2007.
Estrogen maintains pregnancy,
triggers fetal maturation.
http://www.sciencedaily.com/news/health_m edicine/pregnancy_and_childbirth [20  Juni 2013].
Banerjee,  S.,  Prashar,  R.,  Kumar,  A.  and Rao,  A.  R.  (1996).  Modulatory influence  of  alcoholic  extract  of ocimum leaves on carcinogen- metabolizing  enzyme  activities  and reduced  glutathione  levels  in  mouse. Nutr Cancer, 25, 205-17.
Beimborn,  V.,  H.L.  Tarpley,  P.J.  Bain  and K.S.  Latimer.  2003.  The  canine estrous  cycle:  staging  using  vaginal cytological examination.
Bhardwaj,  S.,  Mathur,  R.  1979.  Antifertility screening  of  fruits  of  Ocimum gratissimum  in  female  albino  rats. Comp Physiol Ecol. 4: 277-279.
Dellmann,  H.D.  1992. Buku  Teks  Histologi Veteriner .  Terjemahan:  R.  Hartono.
Edisi  ke-3  UI-Press.  Jakarta:  517- 520.
Ganiswara,  S.G.  1995. Farmakologi  dan Terapi .  Alih  bahasa:  1.  Setiawan. Buku Kedokteran EGC. Jakarta: 444.
Godhwani, S., Godhwani, J. L. and Vyas, D. S.  (1987). Ocimum  sanctum :  An experimental  study  evaluating  its anti-inflammatory, analgesic and antipyretic  activity  in  animals. J Ethnopharmacol, 21, 153-63. Gunawan,  D.  2004.  Ramuan  Tradisional Untuk  Keharmonisan  Suami  Istri. Penebar Swadaya, Jakarta.
Hadipoentyanti,  E.,  Wahyuni,  S.  2008. Keragaman  selasih  ( ocimum spp.) berdasarkan karakter morfologi produksi  dan  mutu  herba.  Jurnal Littri. Desember; 14 (4): 141-8.
Hafez,  E.S.E.  1980.  Reproduction  in  Farm Animal. 4 th Edition. Philadelphia: 30- 78.
Harborne. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan. Terjemahan: Kosasih Padmawinata. ITB. Bandung: 85-93..
Johnson  M,  and  Everitt  B.  1984. Essential Reproduction. 2 nd edition.  London
dan Beccles: William Clowes Limited Karthikeyan,  K.,  Ravichandran,  P.  and Govindasamy, S. (1999).
Chemopreventive  effect  of ocimum sanctum on  DMBA-induced  hamster buccal  pouch  carcinogenesis. Oral Oncol, 35, 112-9.
Khare,  C.P.  2007.    Indian  Medicinal  Plants An  illustrated  Dictionary,  Springer, New Delhi, 444.
Khazaei,  M.,  Montaseri,  A.,  Khazaei,  M.R., Khanahmadi,  M.  2011.  Study  of Foeniculum vulgare effect on folliculogenesis  in  female  mice. Int. J. Fertill Steril . 5 (3): 122-127. Medica, V.,  Ruslan, W., Nawawi, A., 2004. Telaah  Fitokimia  Daun  Kemangi ( Ocimum  americanum L.).  Fakultas Farmasi  Institut  Teknologi  Bandung. Skripsi.
Nodine,  J.H.  and  Siegler,  P.E.  1961. Pharmacologic  Techniques  in  Drug Evaluation.  Year  Book  Medical Publisher. Chicago: 568. Nongae, 2008. Estrus Cycle.
http://nongae .gsnu.ac.kr/~cspark/teachi ng/chap5.html.  Tanggal  akses  2  Juni 2013.
Ochiogu,  I.S.,  Oguejiofor, C.F and Nwagbo, A.N. 2009. Males Non- Enhancement of  Bruce  And  Whitten  Effects  In Female Albino Mice - Mus musculus .
Animal Research International . 6 (3): 1077-1081.
Piironen,  V.,  Toivo,  J.  Puupponen-Pimi,  R. and  Lampi,  A.M.  2003.  Plant  sterols in  vegetables,  fruits  and  berries. Journal  o  f the  Science  of  Food  and Agriculture , 83: 330-337.
Rastogi,  S.,  Shukla,  Y.,  Paul,  B.N.,  Chowdhuri, D. K., Khanna, S. K. and Das, M. 2007.
Protective  effect  of Ocimum  sanctum on 3-methylcholanthrene, 7,12- dimethylbenz(a)anthracene  and  aflatoxin
b1. Nig. J, Physiol. Sci 224, 228-40. Rugh,  R.  1968. The  Mouse  Reproductions and Development. Burgess. Publishing  Company .  Minneapolis. USA.
Sarma,  D.S.K.  and  A.  Venkata  S.  B.  2011. Pharmacognostic And Phytochemical Studies  of Ocimum  americanum.  J. Chem. Pharm. Res., 3 (3): 337-347.
Seire,  J.V.,  Venter,  F.S.,  Fincham,  J.E.,  and Taljaard,  J.J.F.  1991.  Hormonal vagina  cytology  of  vervet  monkeys.
J. Med Primatol . 20:1-5.
Setiawan.  2010.  Aktivitas  ekstrak  methanol buah adas ( Foeniculum vulgare Mill) terhadap  lama  siklus  estrus  serta bobot uterus dan ovarium tikus putih. Skripsi  Fakultas  Kedokteran  Hewan.
Institut Pertanian Bogor.
Smith, J.B. dan Mangkoewidjojo, S. 1988. Pemeliharaan,  Pembiakan  dan Penggunaan Hewan Coba Di Daerah Tropis . UI-Press. Jakarta: 10-3.
Sudjana,  M.A.  1998. Metode  Statistik .  Edisi ke-5. Penerbit Tarsio. Bandung: 508.
Suntoro,  H.  1983.  Metode  Pewarnaan (Histologi  &    Histokimia).  Jakarta: Penerbit Bharatara Karya Aksara, Turner,  C.D.  dan  Bagnara,  J.J.  1976.
Endokrinologi Umum . Harjoso,
penerjemah.  Surabaya: Airlangga University Press Waynforth,  H.B.  and  Flecknell  P,A.1992. Experimental and Surgical Technique in  the  Rat .  San  Diego:  Academic Press Inc.
Willmann,  M.R.  2000.  Sterols  as  regulators of  plant  embryogenesis. Trends  in Plant  Science,  Journal  Club ,  5  (10): 416.