## FORMULATIONS AND ANTIOXIDANT EFFICACY THE CREAM LEAF
EXTRACT OF THE BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi L. ) USING DPPH METHOD ( 1,1- Diphenyl- 2 -Picrylhydrazyl)
FORMULASI DAN UJI EFEKTIVITAS ANTIOKSIDAN SEDIAAN KRIM EKSTRAK ETANOL DAUN BELIMBING WULUH (Averrhoa bilimbi L. )

## DENGAN MENGGUNAKAN METODE DPPH
( 1,1 -diphenyl- 2 -picrylhydrazyl)
Feiby Ariem 1) , Paulina V.Y Yamlean 1) , Julianri Sari Lebang 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *feibyariem@gmail.com

## ABSTRACT
Belimbing  wuluh  leaves  (Averrhoa  bilimbi  L.)  Contains    flavonoids,  phenols,  alkaloids,  tannins  and coumarin. The aim of this research is formulated ethanol extract of Belimbing Wuluh leaves in the form of cream  preparations,  as  well  as  test  the  effectiveness  of  antioxidants  using  the  DPPH  method.  Extract  was made  by  maceration  method  using  ethanol  96%  formulated into  a  cream  with  a  concentration  of  3%,  5%, 7%. The results of the cream preparations evaluation before and after cycling test meet the requirements of organoleptis,  homogeneity,  pH,  adhesiveness,  coverage.  The  test  results  of  antioxidant  activity  with  the DPPH  method  using  the  most  effective  UV-Vis  spectrophotometer  as  the  antioxidant  cream  of  the  leaves extract Belimbing Wuluh is 7% has a value of IC50 = 0.118 ppm and vitamin C as comparator has a value of IC50 = 0.0327 ppm. From this research can be concluded that Belimbing Wuluh leaves ethanol extract cream can be formulated as a stable cream and has a very strong antioxidant activity.
Keywords : : Belimbing Wuluh Leaves,cream, antioxidant,DPPH

## ABSTRAK
Daun  Belimbing  Wuluh  ( Averrhoa  bilimbi L.)    mengandung  senyawa  flavonoid,  fenol,  alkaloid,  tanin  dan kumarin.  Tujuan  penelitian  ini  membuat  formulasi  ekstrak  etanol  daun  Belimbing  Wuluh  dalam  bentuk sediaan  krim,  serta  menguji  efektivitas  antioksidan  menggunakan  metode  DPPH.  Pembuatan  ekstrak dilakukan dengan metode maserasi menggunakan etanol 96 % diformulasi menjadi krim dengan konsentrasi 3%,  5%  ,7%.  Hasil  evaluasi  sediaan  krim  sebelum  dan  sesudah cycling  test memenuhi  persyaratan organoleptis, homogenitas, pH, daya lekat, daya sebar. Hasil uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis yang  paling  efektif  sebagai  krim  antioksidan  dari  ekstrak  daun Belimbing Wuluh adalah 7 % memiliki nilai IC 50 = 0,118 ppm dan vitamin C sebagai pembanding memiliki nilai IC 50 = 0,0327 ppm. Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa krim ekstrak  etanol daun Belimbing Wuluh dapat diformulasikan sebagai sediaan krim yang stabil dan memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat.
Kata kunci : Daun Belimbing Wuluh, Krim, Antioksidan, DPPH

## PENDAHULUAN
Kulit  merupakan  bagian  tubuh  terbesar,  yang menutupi  serta  melindungi  otot  dan  organ  yang mendasar.  Sepanjang  tubuh,  karakteristik  kulit bervariasi  dalam  ketebalan,  warna,      tekstur  dan folikel  rambut  (Mackiewicz  dan  Rimkevicius, 2008).  Bentuk  sediaan  kosmetik  yang  sering digunakan  untuk  perawatan  kulit  adalah  bentuk sediaan krim (Ansel, 1989).
Krim  adalah  sediaan  setengah  padat  berupa emulsi mengandung air tidak kurang dari 60% dan dimaksudkan  untuk  pemakaian  luar  (Ditjen  POM RI, 1979). Sifat umum sediaan krim ialah mampu melekat pada permukaan tempat pemakaian dalam waktu  yang  cukup  lama  sebelum  sediaan  ini dicuci atau dihilangkan (Anwar, 2012). Penerimaan  oleh  pasien  merupakan  hal  penting dalam  emulsi  yang  digunakan  secara  topikal. Berdasarkan  tipe  emulsi  m/a  lebih  banyak digunakan  sebagai  basis  obat  yang  dapat  tercuci dengan  air  untuk  tujuan  kosmetik  umum (Lachman  et al., 2008).
Belimbing Wuluh ( A. bilimbi L.)  disebut juga Belimbing  asam  merupakan  sejenis  pohon  yang diperkirakan  berasal  dari  kepulauan  Maluku (Suryaningsih,2016). Belimbing Wuluh merupakan  tanaman  jenis  buah  dan  obat tradisional.  Daun  Belimbing  Wuluh  mengandung senyawa  flavonoid,  fenol,  alkaloid,  tanin  dan kumarin (Valsan dan Raphael, 2016). Kemampuan  flavonoid  sebagai  antioksidan  telah banyak  diteliti,  dimana  flavonoid  memiliki kemampuan  untuk  merubah  atau  mereduksi radikal bebas dan juga sebagai anti radikal bebas. Antioksidan  adalah  senyawa  yang  mempunyai struktur molekul yang dapat memberikan elektronnya  kepada  molekul  radikal  bebas  tanpa terganggu  sama  sekali  fungsinya  dan  dapat memutus reaksi berantai radikal bebas (Ramadhan, 2005).
Salah  satu  uji  untuk  menentukan  aktivitas antioksidan  penangkap  radikal  adalah  metode DPPH  (1,1 Dipheny l-2- picrylhidrazyl ).  Metode DPPH memberikan  informasi reaktivitas  senyawa yang  diuji  dengan  suatu  radikal  stabil.  Menurut penelitian  yang  dilakukan  oleh  Yupi  Yulianita Arifin  (2017)  berjudul  Ekstrak  Etanol  Daun Belimbing Wuluh (A.bilimbi L .) sebagai Antioksidan dan Antiinflamasi memiliki nilai IC 50 sebesar 16.99 ± 0.12 µg/mL.
Berdasarkan  kandungan  antioksidan  pada daun  Belimbing  Wuluh,  maka  peneliti  mencoba membuat  sediaan  kosmetik  dalam  bentuk  krim dengan  menambahkan  ekstrak  etanol  daun
Belimbing  Wuluh  serta  menguji  efektivitas antioksidan  yang  terkandung  didalam  sediaan tersebut menggunakan metode DPPH.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan November  2019  –  Maret  2020  di  Laboratorium Farmasi  lanjut,  Program  Studi  Farmasi  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi.

## Bentuk Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  menggunakan metode  eksperimental  laboratorium  yang  akan membuat  formulasi  krim  3%,  5%  dan  7%  serta menguji  efektifitas  antioksidan  sediaan  dari ekstrak daun Belimbing Wuluh.

## Alat dan Bahan Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  ialah alat-alat  gelas  (
),  timbangan digital  ( ), hotplate  magnetic  stirrer ( Lab),  mikropipet,  pH  meter,  oven,
blender  ( ),  penggaris  berskala,  jangka sorong, wadah krim, vortex, mixer,lemari pendingin,  ayakan  60  mesh, aluminium  foil , lumpang  dan  alu,  lemari  pendingin,  ayakan  100 mesh dan spektrofotometer UV-Vis.

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan,  yaitu ekstrak  daun  Belimbing  Wuluh,  asam  stearat, gliserin,  setil  alkohol,  aquadest,  TEA,  paraffin cair,  metil  paraben,  etanol  96%,    etanol  p.a, Vitamin C p.a dan DPPH.

## Prosedur Penelitian

## Penyiapan dan Pengambilan Sampel
Sampel  yang  digunakan  pada  penelitian adalah daun Belimbing segar sebanyak 5 kg yang diambil  di  Matani  Satu  Kecamatan  Tomohon Tengah,  Kota  Tomohon,  Sulawesi  Utara.  Sampel kemudian  dicuci  dan  ditiriskan,  dikeringkan selama  1  minggu  di  suhu  ruangan  hingga  kering, dimana  jika  sampel  tersebut  sudah  kering kemudian  di  haluskan  menggunakan  blender sampai  menjadi  serbuk  simplisia,  serbuk  yang dihasilkan diayak dengan ayakan 60 mesh, hingga diperoleh  serbuk  yang  halus.  Simpan  dalam wadah  toples  yang  tertutup  rapat,  terlindung  dari panas dan sinar matahari.

## Ekstrasi Sampel
Ekstraksi  dilakukan  secara  maserasi dengan  memasukkan  500  gram  serbuk  simplisia ke  dalam  bejana.  Simplisia  direndam  dengan penyari  etanol  96%  sebanyak  2,500  mL.  Biarkan selama  5  hari,  diaduk  sehari  sekali,  disaring dengan menggunakan kertas saring dan menghasilkan filtrat 1 dan debris 1. Debris 1 yang ada  kemudian  direndam  lagi  (remaserasi)  dengan pelarut  yang  sama  sebanyak  1,500  mL  selama  3
hari sambil sesekali diaduk. Setelah 3 hari, sampel disaring  sehingga  menghasilkan  filtrat  2  dan debris  2.  Filtrat  1  dan  filtrat  2  dicampurkan menjadi  satu  lalu  diuapkan  didalam  oven  40°C sehingga diperoleh ekstrak kental daun Belimbing Wuluh  lalu  di  timbang  kemudian  didapatkan 50,01  gr  kemudian  di  simpan  di  wadah  yang tertutup rapat.
Formulasi Sediaan Krim Ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh Tabel 1. Formula krim ekstrak daun belimbing wuluh
Formulasi (% b/v) Nama Bahan FI 3 % FII 5% FIII 7% Ekstrak Daun Belimbing Wuluh 3 gr 5  gr 7  gr Asam Stearat 16 gr 16  gr 16  gr Setil Alkohol 2 gr 2  gr 2  gr Gliserin 8,5 ml 8,5  ml 8,5  ml TEA 7 tetes 7  tetes 7  tetes Parafin Cair 10 ml 10  ml 10  ml Metil paraben 0,2 gr 0,2 gr 0,2 gr Aquadest (dihitung) ad 100 ad 100 ad 100

## Pembuatan Krim
Alat  dan  bahan  disiapkan.  masing-masing bahan ditimbang sesuai dengan perhitungan bahan. basis krim yang di buat terdiri dari dua fase, yaitu fase  minyak  (asam  stearat,  parafin  cair,  setil alkohol,)  dan  fase  air  (trietanolamin,  gliserin  dan metil  paraben)  dan  aquades.  fase  –  fase  tersebut beserta aquades dipanaskan pada suhu 70 di atas hot  plate dan  didiamkan    sampai  melebur sempurna.
Dipanaskan lumpang porselen dan alu dengan cara menaruh etanol 96% kemudian di bakar dengan api sampai  apinya  menghilang,  kemudian  dikeringkan lumpang  dan  alu,  masukkan  fase  air  ke  dalam lumpang  yang  panas  sambil  di  gerus  lalu masukkan  fase  minyak  terakhir  ditambahkan aquades  sedikit  demi  sedikit  digerus  konstan sampai  terbentuk  massa  krim.  Setelah  terbentuk massa  krim  tambahkan  ekstrak  daun  belimbing wuluh  sedikit  demi  sedikit,  digerus  sampai terbentuk krim yang homogen. pembuatan dilakukan  dengan  cara  yang  sama  untuk  semua formula dengan konsentrasi ekstrak daun belimbing wuluh yang berbeda.

## Evaluasi Fisik Sediaan Krim Uji Organoleptik
Pengamatan  dilakukan  secara  visual  dengan melihat  bentuk,  warna  dan  bau.  Ini  dilakukan untuk mengetahui krim  yang dibuat sesuai dengan warna  dan  bau  ekstrak  yang  digunakan  (Arifin, 2010).

## Uji Homogenitas
Krim tersebut dikatakan homogen jika terdapat persamaan warna yang merata dan tidak ditemukan partikel  –  partikel  dalam  krim  (Ida  dan  Noer, 2012).  Diambil  1  gram  krim  kemudian  dioleskan pada sekeping kaca transparan. Diamati jika masih ada partikel – partikel kasar dan terjadi pemisahan fase .
Uji pH Pengukuran pH dilakukan dengan menggunakan  pH  meter.  Caranya  yaitu  dengan menimbang 1 gram krim dan dilarutkan dengan 10 ml  aquades.  Kemudian,  gunakan  pH-  meter  yang bagian  sensornya  dan  dibaca  pH  pada  bagian monitor.  pH  sediaan  yang  memenuhi  kriteria  pH kulit yaitu sekitar 4,5 – 6,5  (Tranggono dan Latifa, 2007).

## Uji Daya Sebar
Pengujian  daya  menyebar  dilakukan  untuk mengetahui  kualitas  daya  menyebar  krim  saat dioleskan  pada  kulit.  Persyaratan  yang  baik  akan menghasilkan  daya  sebar  sebesar  5-7  cm (Wasiaatmadja, 1997). Dengan cara krim sebanyak 0,5 gram diletakkan ditengah tengah plat kaca, dan dibiarkan  selama  1  menit.  Setelah  itu  diberi penambahan beban setiap 1 menit 50 g hingga 250 g  lalu  diukur  diameter  sebarnya  untuk  melihat pengaruh  beban  terhadap  perubahan  diameter sebar.

## Uji Daya Lekat
Pengukuran  daya  melekat  bertujuan  untuk mengetahui kualitas daya melekat krim pada kulit. sesuai persyaratan daya lekat krim yang baik yaitu lebih  dari  4  detik  (Wasiaatmadja,  1997).  Uji  daya lekat  dilakukan  dengan  cara  0,5  gram  krim dioleskan  pada  plat  kaca.  Kedua  plat  kaca ditempelkan hingga plat menyatu, diberikan beban seberat  250  gram  selama  5  menit  setelah  itu dilepaskan, lalu  diberi  beban  pelepasan  seberat  80 gram.n

## Uji Cycling
Sampel  krim  disimpan  pada  suhu  4°C  selama 24  jam  dan  suhu  40°C  selama  24  jam  dilakukan sebanyak  6  siklus  dan  diamati  terjadinya perubahan fisik dari krim pengamatan organoleptik,  homogenitas,  pH,  daya  lekat,  daya sebar (Dewi, 2010).

## Uji Aktivitas Antioksidan Sediaan Krim

## Pembuantan Larutan Induk DPPH
Ditimbang DPPH ( 1,1-difenil-2- picrylhidrazil ) sebanyak 10 mg kemudian dilarutkan  dalam  etanol  p.a  hingga  tanda  batas dengan  menggunakan  labu  ukur  100  ml  (  100 ppm),  sebagai  larutan  stock  lalu  ditempatkan dalam botol kaca berwarna gelap.

## Pembuatan Larutan Blanko DPPH
Dipipet  1  ml  larutan  DPPH  ke  dalan  labu ukur  5  ml,  kemudian  dilarutkan  dengan  etanol  p.a hingga  tanda  dan  dihomogenkan.  Didiamkan selama  30  menit  dan  diukur  absorbansinya  pada panjang gelombang 517 nm.

## Uji Aktivitas Antioksidan Larutan Uji
Ditimbang  sampel  krim  daun  Belimbing Wuluh  10  mg    kemudian  dilarutkan  dengan etanol  p.a  dalam  labu  ukur  10  ml  selanjutnya  di
vortex  selama  2  menit,  diperoleh  larutan  stok dengan  konsentrasi  1000  ppm.  Dengan  masing- masing konsentrasi 100 pnpm, 150 ppm, 200 ppm, 250  ppm,  dan  300  ppm  dihitung  dengan menggunakan rumus pengenceran, nyaitu : Pada  kelima  konsentrasi,  masing-masing  hasil yang didapatkan dari hasil V 1 dipipet 0,5 mL, 0,75 mL,  1  mL,  1,25  mL  dan  1,5  mL,  dicukupkan volumenya  dengan  etanol  p.a    sampai  tanda batas  dalam  labu  ukur  (  5  mL),    kemudian masing-masing    konsentrasi  diambil  sebanyak  1 mL  di  masukan  kedalam  tabung  reaksi  dengan menggunakan pipet dan ditambahkan 2 mL larutan DPPH.  dilakukan  sebanyak  3  replikasi  dan divorteks selama 2 menit.  Berubahnya warna ungu menjadi  warna  kuning  menunjukkan  efisiensi penangkal  radikal  bebas.  Pengukuran  absorbansi pada  spektrofotometer  UV-Vis  dengan  panjang gelombang  517  nm  setelah  diinkubasi  selama  30 menit pada suhu ruangan.

## Pembuatan Larutan Pembanding
Ditimbang  vitamin  C  sebanyak  10  mg kemudian dilarutkan dengan etanol p.a menggunakan  labu  ukur  (10  mL),  diperoleh larutan  stok  dengan  konsentrasi  1000  ppm. Pengujian  dilakukan  dengan  cara  membuat pengenceran 5 seri konsentrasi larutan pembanding  vitamin  C,    10  ppm,  15  ppm,  20 ppm, dan 25 ppm dan 30 ppm. Dari larutan stok masing-masing  dipipet  0,05  mL,  0,075  mL,  0,1 mL,  0,125  mL  dan  0,15  mL  masing-masing dicukupkan volumenya dengan etanol p.a dalam labu ukur  (5 mL), Kemudian disetiap konsentrasi diambil  1  mL  dan  ditambahkan  2  ml  larutan DPPH. Campuran tersebut divortex dan diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  kamar. Masing-masing larutan tersebut diukur serapannya  pada  panjang  gelombang  517  nm, replikasi dilakukan sebanyak 3 kali.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ektraksi daun belimbing wuluh
Ekstraksi  menggunakan  metode  cara  dingin, yaitu  maserasi  menggunakan  2500  mL  pelarut etanol 96%, selama 5 hari sambil sesekali di aduk dan  di  remaserasi  selama  3  hari.  Hasil  maserasi kemudian  di  saring  dengan  kertas  saring.  Semua maserat yang diperoleh dikumpulkan dan diuapkan dengan  oven  pada  suhu  40  hingga  diperoleh ekstrak  kental  sebanyak  52,14  g.  Rendemen  yang diperoleh  10,42 % b/v.

## Evaluasi Fisik Sediaan Krim
a. Uji Organoleptik Tabel 2. Hasil uji organoleptik
Gambar 1. Hasil Pengujian Organoleptik
Hasil  uji  organoleptis  sediaan  krim  telah  dibuat berbentuk  semi  padat.  Bentuk  dari  sediaan  krim ekstrak  etanol  daun  Belimbing  Wuluh  dengan konsentrasi  5%  dan  7%  sedikit  lebih  encer dibandingkan  dengan  konsentrasi  3%  yang  lebih kental. Hal ini menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  Belimbing  Wuluh maka  semakin  encer  bentuk  sediaan  krim  yang dihasilkan.
Hasil  uji  organoleptis  menunjukkan  bahwa  ketiga formula  krim  ekstrak  etanol  daun  Belimbing Wuluh  (FI,  F2  dan  F3)  stabil  secara  fisik  baik sebelum maupun sesudah penyimpanan cycling test pada  suhu  ±  4°C  selama  24  jam  lalu  di  keluarkan dan di tempatkan pada suhu ± 40°C selama 24 jam (1  siklus),  dilakukan  hingga  6  siklus.  Hal  ini dikarenakan  selama  masa  penyimpanan  sediaan krim  tersimpan  dalam  wadah  yang  tertutup  rapat dan terlindung dari cahaya langsung.
b. Uji Homogenitas
Tabel 3. Hasil uji homogenitas
konsentrasi Sebelum Penyimpanan Sesudah Penyimpanan tekstur Warna Bau tekstur Warna Bau F1 semi solid Hijau khas  daun Belimbing Wuluh semi solid Hijau khas daun Belimbing Wuluh F2 semi solid Hijau tua   khas  daun Belimbing Wuluh semi solid Hijau tua khas daun Belimbing Wuluh F3 semi solid Hijau tua  khas  daun Belimbing Wuluh semi solid Hijau tua khas daun Belimbing Wuluh Pengulangan Sebelum Cycling Test Sesudah Cycling Test Siklus 1 – Siklus 6 F1 Homogen Homogen F2 Homogen Homogen F3 Homogen Homogen
Gambar 2. Hasil Pengujian Homogenitas
Berdasarkan hasil pemeriksaan uji homogenitas terhadap sediaan krim ekstrak etanol daun  Belimbing  Wuluh  yang  dilakukan  sebelum dan  sesudah  penyimpanan  cycling  test  pada  suhu ±  4°C  selama  24  jam  lalu  di  keluarkan  dan  di tempatkan  pada  suhu  ±  40°C  selama  24  jam  (1 siklus),dilakukan hingga 6 siklus. Seluruh sediaan krim  tidak  memperlihatkan  adanya  butir-butir kasar  pada  saat  sediaan  dioleskan  pada  kaca transparan.  Sifat  zat  aktif  dari  ekstrak  daun
belimbing  wuluh  mudah  bercampur  dengan  basis M/A  sehingga  tidak  terjadi  penggumpalan  dan pemisahan fase. Hal ini menunjukan sediaan yang dibuat  mempunyai  susunan  yang  homogen (Ditjen  POM,  1985).  krim  tersebut  dikatakan homogen  jika  terdapat  persamaan  warna  yang merata  dan  tidak  ditemukan  partikel  –  partikel dalam krim (Ida dan  Noer, 2012).
c. Uji pH Tabel 4. Hasil uji pH
Gambar 3. Hasil Pengujian pH
Dari  data  hasil  pengukuran  pH  krim  dengan menggunakan  alat  pH  meter,  menunjukkan  bahwa dari tiap formula sebelum dan sesudah penyimpanan cycling test pada suhu ± 4°C selama 24  jam  lalu  di  keluarkan  dan  di  tempatkan  pada
suhu  ±  40°C  selama  24  jam  (1  siklus),dilakukan hingga  6  siklus  diperoleh  nilai  pH  yang  berbeda untuk  tiap  sediaan.  Pada  konsentrasi    3% didapatkan  nilai  pH  rata  –  rata  5,46.  Pada konsentrasi 5% didapatkan nilai pH rata – rata 5,14
Waktu F1 (3%) F2 (5%) F3 (7%) Siklus 0 5,13 5,79 6,01 Siklus 1 6,51 5,75 4,93 Siklus 2 5,48 4,75 5,47 Siklus 3 5,16 5,59 5,91 Siklus 4 4,93 4,52 5,55 Siklus 5 4,87 4,51 4,76 Siklus 6 6,11 5,05 5,15 rata-rata 5,46 5,14 5,40
.  Pada  konsentrasi  7%  didapatkan  nilai  pH  rata  – rata  5,40.    Perbedaan  tersebut  disebabkan  oleh perbedaan  tingkat  keasaman  bahan  aktif  yang ditambahkan  kedalam  sediaan  Krim.  Penurunan pH  juga  terjadi  dengan  bertambahnya  waktu penyimpanan  tetapi  masih  menunjukkan  kisaran pH  yang  sesuai  dengan  pH  kulit  yaitu  4,5-6,5  ini menunjukkan  bahwa  pH  tersebut  aman  untuk sediaan krim dan tidak mengiritasi kulit.
Berdasarkan hasil uji Independent T test yang telah dilakukan  untuk  membandingkan  pH  krim  ekstrak daun  Belimbing  Wuluh  dari  siklus  0  sampai  pada
siklus  6.  Hasil  data  statistika  uji  pH  pada konsentrasi  3%  didapatkan  nilai  signifikannya yaitu  0,01  atau    ≥0,05.  Pada  konsentrasi  5% didapatkan  nilai  signifikannya  yaitu  0,05  atau ≥0,05.  Pada  konsentrasi  7%  didapatkan  nilai signifikannya  yaitu  0,01  atau  ≥0,05.  dapat disimpulkan  uji  pH  krim  dari  konsentrasi  3%,5% dan  7%  ada  perbedaan  bermakna  sebelum  dan sesudah cycling test . Perbedaan bermakna tersebut disebakan  karena  faktor  suhu  yang  tidak  stabil sehingga  dapat  mempengaruhi  pH  dari  setiap formula.
d . Uji Daya sebar Tabel 5. Hasil Uji daya sebar
Gambar 4. Hasil Pengujian Daya sebar
Dari hasil pengujian daya sebar pada setiap sediaan  krim  ekstrak  daun  belimbing  Wuluh menunjukkan  adanya  perubahan  sebelum  dan sesudah penyimpanan cycling test hingga 6 siklus. Pada  konsentrasi  3%  didapatkan  nilai  daya  sebar rata  –  rata  5,33  .  Pada  konsentrasi  5%  didapatkan nilai daya sebar rata – rata 5,24 . Pada konsentrasi 7%  didapatkan  nilai  daya  sebar  rata  –  rata  5,06. Dari  hasil  uji  daya  sebar  menunjukkan  bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  maka  daya  sebarnya semakin  menurun.  Penurunan  kemampuan  daya sebar  ini  seiring  dengan  peningkatan  viskositas. Hasil  tabel  5 pengujian  daya  sebar  krim  ekstrak etanol  daun  Belimbing  Wuluh  menunjukkan bahwa  konsentrasi  3%,  5%,  dan  7%    memenuhi
persyaratan yang baik sebesar 5-7 cm (Wasiaatmadja, 1997).
Berdasarkan hasil uji Independent T test yang telah dilakukan  untuk  membandingkan  daya  sebar krim  ekstrak  daun  Belimbing  Wuluh  dari  siklus  0 sampai pada siklus 6. Hasil data statistika uji daya sebar  pada  konsentrasi  3%  didapatkan  nilai signifikannya  yaitu  0,01  atau    ≥0,05.  Pada konsentrasi  5%  didapatkan  nilai  signifikannya yaitu  0,85  atau  ≥0,05.  Pada  konsentrasi  7% didapatkan  nilai  signifikannya  yaitu  0,56  atau ≥0,05.  (dilihat  pada  lampiran  23).  dapat disimpulkan  uji  daya  sebar  krim  pada  konsentrasi 3%,  5%  dan  7%  tidak  ada    perbedaan  bermakna sebelum  dan sesudah  cycling  test .  Dari  hasil
WAKTU Formula 1 Formula 2 Formula 3 Siklus 0 5,0 5,16 5,06 Siklus 1 5,52 5,87 4,83 Siklus 2 4,50 5,27 5,20 Siklus 3 5,30 5,46 5,66 Siklus 4 6,23 5,17 5,17 Siklus 5 5,07 4,53 4,73 Siklus 6 5,70 5,23 4,80 rata-rata 5,33 5,24 5,06
analisa  data  tersebut  menunjukan  bahwa  ketiga
formula krim memiliki daya sebar yang stabil.
e. Uji Daya lekat Tabel 6. Hasil Uji daya  lekat
Gambar 5. Hasil Pengujian Daya Lekat
Hasil  uji  daya  lekat  sebelum  dan  sesudah penyimpanan selama 6 siklus Pada konsentrasi 3% didapatkan nilai daya lekat rata – rata 26,53 . Pada konsentrasi  5%  didapatkan  nilai  daya  lekat  rata  – rata  35,38.  Pada  konsentrasi  7%  didapatkan  nilai daya  lekat  rata  –  rata  42,23.  menunjukan  bawah formula  7%    lebih  lama  dibandingkan  dengan formula 3% dan 5%. semakin lama waktu yang di perlukan hingga kedua objek  glass terlepas, maka makin baik daya melekat sediaan krim tersebut.semakin  lama  krim  melekat  pada  kulit maka efek yang di timbulkan  juga semakin  besar. Hasil  tabel  8  pengujian  daya  lekat  krim  ekstrak etanol  daun  Belimbing  Wuluh  menunjukkan bahwa  konsentrasi  3%,  5%,  dan  7%    memenuhi persyaratan  yang  baik  yaitu  lebih  dari  4  detik (Wasiaatmadja, 1997).
Berdasarkan hasil uji Independent T test yang telah dilakukan  untuk  membandingkan  daya  lekat krim  ekstrak  daun  Belimbing  Wuluh  dari  siklus  0 sampai pada siklus 6. Hasil data statistika uji daya lekat  pada  konsentrasi  3%  didapatkan  nilai signifikannya  yaitu  0,25  atau  ≥0,05.  Pada konsentrasi  5%  didapatkan  nilai  signifikannya yaitu  0,94  atau  ≥0,05.  Pada  konsentrasi  7% didapatkan  nilai  signifikannya  yaitu  0,85  atau ≥0,05.  (dilihat  pada  lampiran  24).  dapat disimpulkan  uji  daya  lekat  krim  pada  konsentrasi 3%,  5%  dan  7%    tidak  ada    perbedaan  bermakna sebelum  dan sesudah  cycling  test .  Dari  hasil analisa  data  tersebut  menunjukan  bahwa  ketiga formula  krim  memiliki  daya  sebar  yang  stabil.

## Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan
Tabel 7. Hasil Perhitungan IC 50 dari krim ekstrak etanol daun Belimbing Wuluh
Konsentrasi % inhibisi sampel krim Persamaan Garis Linear (ppm) 100 ppm 150 Ppm 200 ppm 250 ppm 300 ppm WAKTU Formula 1 Formula 2 Formula 3 Siklus 0 10,67 34,02 42,02 Siklus 1 15,00 34,48 44,30 Siklus 2 36,55 43,11 45,24 Siklus 3 51,17 23,86 23,64 Siklus 4 17,65 50,90 53,11 Siklus 5 35,98 41,99 47,25 Siklus 6 18,70 19,32 40,07 rata-rata 26,53 35,38 42,23
FI 3 % 39,18 40,38 41,11 41,46  43,75 y  =  1,022x + 38,11 R² = 0,922 11,866 FII 5 % 49,63 52,64 53,48 56,12  56,49 y  =  1,72x  + 48,512 R² = 0,943 0,865 FIII 7% 54,56 60,45 69,35 73,43  77,76 y  =  5,938x + 49,296 R² = 0,9788 0,118
Tabel 8. Hasil Perhitungan IC 50 dari vitamin C
Pada  penelitian  ini,  dilakukan  uji  efektifitas antioksidan  sediaan  krim  ekstrak  daun  Belimbing Wuluh  dengan  metode  DPPH  ( 1,1-difenil-2 pikrilhidrazil ) dengan menggunakan
spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang  517  nm  yang  merupakan  panjang gelombang  maksimum  untuk  DPPH.  Formula krim  yang  dibuat  berdasarkan  variasi  konsentrasi ekstrak  terbagi  dalam  tiga  konsentrasi  yaitu    3%, 5%,  dan  7%  dilakukan  replikasi  sebanyak  tiga kali.  Vitamin  C  digunakan  sebagai  pembanding pada  uji  aktivitas  antioksidan  karena  vitamin  C mempunyai  gugus  hidroksi  bebas  yang  bertindak sebagai penangkap radikal bebas dan jika memiliki gugus polihidroksi hal tersebut akan mengakibatkan meningkatnya aktivitas antioksidan (Maryam et al., 2016)
Parameter yang digunakan untuk pengukuran  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol daun Belimbing Wuluh adalah nilai IC 50 ( Inhibitor Concentration 50%)  yang  menyatakan  besarnya konsentrasi  larutan sampel  yang  dibutuhkan  untuk mereduksi  radikal  bebas  DPPH  sebesar  50% (Nurjanah et  al .  2011).  Semakin  kecil  nilai  IC 50 berarti  semakin  tinggi  aktivitas  antioksidannya. Aktivitas  antioksidan  dari  suatu  senyawa  dapat digolongkan berdasarkan nilai IC 50 yang diperoleh. Jika  nilai  IC 50 suatu  esktrak  berada  dibawah  50 ppm maka aktivitas antioksidannya sangat kuat,
nilai  IC 50 berada  diantara  50-100  ppm  berarti aktivitas  antioksidannya  kuat,  nilai  IC 50 berada diantara 100-150 ppm berarti aktivitas antioksidannya  sedang,  nilai  IC 50 berada  diantara 150-200  ppm  berarti  aktivitas  antioksidannya lemah,  sementara  apabila  nilai  IC 50 berada  diatas 200  ppm  maka  aktivitas  antioksidannya  sangat lemah (Bahriul, 2014).
Berdasarkan  hasil  pengamatan  dari  uji efektivitas  krim  antioksidan  ekstrak  etanol  daun Belimbing  Wuluh  terhadap  DPPH  diperoleh  hasil bahwa  formula  I  dengan  konsentrasi  ekstrak  3% memiliki nilai IC 50 sebesar 11,866 ppm, formula II dengan konsentrasi ekstrak 5% memiliki nilai IC 50 sebesar 0,865 ppm  formula III dengan konsentrasi 7%    memiliki  nilai  IC 50 sebesar  0,118  ppm.  dari hasil pengujian aktivitas krim antioksidan terhadap DPPH untuk masing- masing formula FI, FII, FIII, yang  paling  efektif  sebagai  krim  antioksidan  dari ekstrak  daun  Belimbing  Wuluh  adalah  FIII  (7%) memiliki  nilai  IC 50 sebesar  0,118  ppm.  Hal  ini dibuktikan setelah dilakukan penelitian yang sama terhadap  DPPH  dengan  vitamin  C  sebagai pembanding  pada  uji  aktivitas  antioksidan  dengan memiliki  nilai  IC 50 sebesar  0,0327  ppm  sehingga krim  ekstrak  etanol  daun  Belimbing  Wuluh memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  sangat  kuat, karena  memiliki  nilai  IC 50 <  50  ppm  (Bahriul 2014).
Vitamin C (ppm) % inhibisi sampel krim Persamaan Garis Linear (ppm) 100 58,14 y = 10,243x + 49,665 R² = 0,9658 0,0327 150 69,42 200 83,42 250 93,85 300 97,14

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  Belimbing  Wuluh dapat  di  formulasi  menjadi  sediaan  krim  dengan konsentrasi  3%,  5%,  7%  dan  memenuhi  uji stabilitas  cycling  test  pada  suhu  dingin  ±  4°C selama 24 jam lalu di keluarkan dan di  tempatkan pada  oven  dengan  suhu  ±  40°C  selama  24  jam  (1 siklus),dilakukan  sebanyak  6  siklus dengan parameter uji yang meliputi pengamatan organoleptik,  homogenitas,  pH,  daya  sebar,daya lekat  dan  efektif  sebagai  antioksidan  pada konsentrasi  7% memiliki nilai IC 50 sebesar 0,118 ppm  yang  tergolong  sangat  kuat  dan  vitamin  C sebagai  pembanding  memiliki  nilai  IC 50 sebesar 0,0327 ppm.

## SARAN
Disarankan  kepada  penelitian  selanjutnya untuk  perlu  dilakukan  evaluasi  fisik  yang  belum dilakukan  yaitu  uji  viskositas,  dan  uji  Iritasi  dan perlu dilakukan penelitian untuk uji antibakteri.

## DAFTAR PUSTAKA
Ansel,  H.C.  1989.  Pengantar  Bentuk  Sediaan Farmasi. Edisi keempat. Universitas Indonesia Press. Jakarta.
Anwar,  E.  2012.  Eksipien  dalam  Sediaan  Farmasi
(Karakterisasi dan  Aplikasi). Dian Rakyat. Jakarta.
Arifin  H.  I.,  2010.  Formulasi  Krim  AntiJerawat
Ekstrak  Lidah  Buaya  (Aloe  vera  (L.) Burm.f)  Terhadap    Staphyloccus  aureus dan Staphyloccus
epidermidis. ,
[ Skripsi].Fakultas  Matematika  dan  Ilmu
Pengetahuan  Alam Universitas Al-Ghifari.
Bandung.
Bahriul  P.  2014.  Uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak daun salam ( Syzygium polyanthum ) dengan menggunakan  1.1-difenil-2-pikrilhidrazil. Jurnal Akademia Kimia . 3(3) :143-149.
Ditjen  POM.  1979.  Farmakope  Indonesia . Edisi Ketiga  .  Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia. Jakarta.
Ditjen  POM.  1985.  Formularium  Kosmetika Indonesia.
Departemen
Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
Dewi R.K. 2010. Optimasi Formulasi Mikroemulsi Sediaan Hormon Testosteron Undekanoa. Universitas  Negeri  Islam  Negeri  Syarif Hidayatullah, Jakarta.
Ida,  N.,  dan  S,  F.,Noer.  2012.  Uji  Stabilitas  Fisik Gel Ekstrak Lidah Buaya ( Aloe Vera L.). Majalah  Farmasi  dan  Farmakologi . 16 (2) : 79-84.
Lachman,  L.,  A.,H  Lieberman  dan  J.,L.Kanig.
2008.  Teori  dan  Praktek  Farmasi  Industri II.  Edisi  ke-3.  Penerbit  Universitas Indonesia. Jakarta.
Mackiewicz  dan  Rimkevicius.  2008.  Skin  Aging. Gerontologija . 9(2) : 103-108.
Maryam  S,  Baits.,  A,Nadia.    2016.  Pengukuran aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  daun kelor ( Moringa oleifera Lam.) menggunakan metode  FRAP  ( Ferric Reducing Antioxidant Power ). JFFI . 2(2) :115-118.
Nurjanah,  Izzati  L,  Abdullah  A.  2011.  Aktivitas antioksidan dan komponen bioaktif kerang pisau ( Solen spp.). IJMS . 16(3) :119-124.
Nurkhasanah. 2013. Uji Organoleptik Dan Kandungan  Vitamin  C  Pada  Pembuatan Selai Belimbing Wuluh Dengan Penambahan Buah Kersen Dan Bunga.[Skripsi].  Fakultas  Keguruan  dan Ilmu Pendidikan, Universitas Muhammadiyah. Surakarta.
Ramadhan, P. 2005. Mengenal Antioksidan . Graha
Ilmu.Yogyakarta.
Suryaningsih S. 2016. Belimbing Wuluh ( Averrhoa  bilimbi, L)  Sebagai  Sumber Energi Dalam Sel Galvani. JPFA . 6(1 ):11- 17.
Tranggono,  R.I.,Latifah,  F.  2007.  Buku  Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik. PT Gramedia Pusaka Utama. Jakarta.
Valsan,A.,  R,K,  Raphael.  2016.  Pharmacognostic profile  of Averrhoa  bilimbi Linn  Leaves. South Indian J Biol Sci . 2(1 ):75-80.
Wasitaatmadja,  S.M.  1997.  Penuntun  Ilmu Kosmetik  Medik.,  Universitas  Indonesia. Jakarta
Wasitaatmadja,  S.M.  1997.  Penuntun  Ilmu Kosmetik  Medik.  Jakarta:  Penerbit Universitas  Indonesia.  Hal.  3,58- 59.62-rotsheki63. 111-112.
Yupi  yulianita  arifin,  2017.  Ekstrak  Etanol  Daun Belimbing  Wuluh  ( Averrhoa  Bilimbi ) Sebagai  Antioksidan  Dan  Antiinflamasi. Institut Pertanian Bogor.