## 12 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a
Maret 2019, 1(1) 12-19 ; ISSN: 2337-8433
Eksplorasi Fungi Endofit Umbi Lapis Bawang Merah ( Allium cepa ) sebagai

## Antifungi dan Antikolesterol

## Antifungal and Anticholesterol activities of Endophytic Fungi Isolated from Allium cepa

## ABSTRAK
Nur Amalia
Choironi*, Sunarto,
Hanif Nasiatul
Baroroh
Jurusan Farmasi, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto. n.a.choironi@gmail.com
Kata kunci: Allium cepa, fungi endofit, antifungi, antikolesterol
Fungi  endofit  berpotensi  sebagai  alternatif  pengobatan  karena  menghasilkan  senyawa yang sama dengan tumbuhan inangnya. Allium cepa memiliki manfaat sebagai antifungi dan antikolesterol. Tujuan penelitian ini adalah isolasi, identifikasi, serta melakukan uji antifungi dan antikolesterol. Isolat yang diperoleh diidentifikasi secara makroskopik dan mikroskopik.
Metode uji antifungi terhadap Candida albicans adalah metode difusi agar dan metode uji antikolesterol menggunakan rancangan acak lengkap ( pre and posttest control design ). Hasil isolasi fungi endofit diperoleh isolat FEAC 1 dan FEAC 2.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa FEAC 2 memiliki zona hambat sebesar 7,389 mm dan menurunkan kolesterol total secara signifikan serta meningkatkan kolesterol HDL.
Keywords: Allium  cepa, endophytic fungi, antifungal, anticholesterol Endophytic fungi is potential source because produces the same compound with their host plants. The purpose of this study were the isolation, identification, assay of antifungal and  anti-cholesterol  activity  of  isolat  of  endophytic  fungi  Alium  cepa.  Isolates  were identified macroscopically and microscopically. The isolates of endophytic fungi were assay  by  antifungal  activity  with  diffusion  method  and  anti-cholesterol  activity  assay using  completely  randomized  design.  Isolates  of  endophytic  fungi  showed  two  colony were  FEAC  1  and  FEAC  2.  This  study  showed  that  the  FEAC  2  was  inhibitCandida albicans (7.389 mm) and decrease of total cholesterol significantly and increase of HDL cholesterol.
Maret  2019, 1(1) 12-19 ; ISSN: 2337-8433

## Pendahuluan
Fungi  endofit  merupakan  fungi  yang hidup  bersimbiosis  dalam  jaringan tumbuhan inangnya dan mampu menghasilkan beberapa senyawa metabolit sekunder fungsional (Rodriguez et  al .,  2009;  Liu et  al .,
2010).Beberapa fungi dengan strain yang sama  berhasil  diisolasi  dari  beberapa bagian yang berbeda dari satu tumbuhan inang,  sesuai  dengan  kemampuannya untuk  memanfaatkan medium  yang  ada. Metabolit  sekunder  isolat  fungi  endofit yang  sama  dengan  inangnya,  telah banyak  dilaporkan  memiliki  berbagai aktivitas  biologis  antibakteri,  antifungi, antioksidan  dan  inhibitor α -amilase(Aly et  al. ,  2011;  Joseph,  2011).Margiono (2008)  melaporkan  bahwa  isolat  jamur endofit Syzigium aqueum dan Artocarpus heterophyllus mampu memproduksi antibiotik  yang  dapatmenghambat B. subtilis dan
F. oxysporum f.sp. licopersicae . Abdulmyanova et al . (2016) juga  melaporkan  bahwa  jamur  endofit yang  diisolasi  dari Allium  sativum memiliki  efek  penghambatan  pada fitopatogen Rhizoctonia solani
dan
Botrytis  cinerea .  Desmukh et  al. (2018) menyatakan bahwa Xylaria sp. merupakan salah satu jenis fungi endofit yang  memiliki  sembilan  senyawa sesquiterpen  dan  tiga  senyawa  diterpen. Senyawa sesquiterpen tersebut diketahui menghambat C.  albicans dan H. compactum dengan  nilai  MIC  32-256 ppm. Sedangkan senyawa diterpen dapat menghambat C.  albicans,  A.  niger, P.oryzae,  F.  avenaceum dan H. compactum dengan  nilai  MIC  16-256 ppm. Asam helmintosporal yang berasal dari  fungi  endofit C.  specious memiliki aktivitas inhibitor kolesterol- asiltransferase pada mikrosom hati tikus (Qader et al., 2017).
Bawang  merah  mengandung senyawa  kuersetin  pektin  alil  propil
disulfida  dan  allisin  yang  bersifat hipoglikemik (Jaelani, 2007). Richardo et al (2001)  melaporkan  bahwa  quersetin dapat menigkatkan kolesterol HDL serta menurunkan kolesterol LDL dan trigliserida, sedangkan allisin
meningkatkan  kadar  kolesterol  HDL pada tikus hiperkolesterolemia (Elmahdi et  al ,  2008).  Beberapa  penelitian melaporkan bahwa allisin memiliki sifat antibakteri,  antifungi  terhadap  mikroba patogen manusia (Pyun dan Shin, 2014; Amin dan Kapadnis, 2005; Skerget et al , 2009; Benmalek et al , 2013). Kemampuan fungi endofit menghasilkan metabolit sekunder merupakan peluang untuk mengembangkan sumber senyawa bioaktif.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengisolasi  fungi  endofit  dari  umbi bawang  merah  ( Allium  cepa )  sebagai antifungi dan antikolesterol.

## Bahan dan Metode

## Isolasi Fungi endofit
Umbi  bawang  merah  diperoleh  di daerah  Brebes  Jawa  Tengah.  Umbi bawang merah dipotong sepanjang 1 cm. Terhadap  potongan  tersebut  dilakukan sterilisasi  permukaan  dengan  merendam di  dalam  larutan  etanol  70  %  selama  2 menit,  diikuti  dengan  merendam  dalam NaOCl 1 % selama 2 menit dan aquades steril selama 2 menit. Inokulasi dilakukan dengan  cara  meletakkan  umbi  bawang merah  pada  medium  PDA  ( Potato Dextrose  Agar ).  Inkubasi  dilakukan selama  7  hari.  Koloni  fungi  diisolasi menggunakan  ose  dan  diletakkan  pada medium  PDB  ( Potato  Dextrose  Broth ) (Hidayahti, 2010).
Isolat  fungi  endofit  ditumbuhkan dalam medium PDB, diinkubasi selama 5 hari  pada  suhu  30 o C  menggunakan shaker  incubator dengan  kecepatan  150 rpm.  Sel  dipisahkan  dengan  sentrifugasi

## 14 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a
Maret  2019, 1(1) 12-19 ; ISSN: 2337-8433
pada  kecepatan  3000  rpm  selama  15 menit.  Supernatan  dipisahkan  dan digunakan  untuk  uji  antifungi  dan  uji antikolesterol  (Melliawati  dan  Harni, 2009 ; Noverita et al., 2009).

## Identifikasi Isolat Fungi Endofit
Fungi endofit yang diperoleh diidentifikasi  secara  makroskopik  untuk menentukan ciri-ciri morfologinya, yaitu bentuk  dan  warna  koloni.  Identifikasi secara mikroskopik menggunakan mikroskop  binokuler  untuk  melihat morfologi sel endofit.

## Uji  Aktivitas  Antifungi  terhadap Candida albicans
Uji  antifungi  menggunakan  metode paper  disc  diffusion ,  yaitu  dengan merendam paper disc dalam supernatan kultur fungi endofit dan diletakkan pada medium  MHA  ( Muller  Hinton  Agar ) yang ditumbuhi fungi Candida albicans . Inkubasi  dilakukan  pada  suhu  37 o C selama  24  jam.  Aktivitas  antifungi ditunjukkan dengan adanya zona jernih disekitar paper disc (Jawetz et al , 1986).

## Uji Aktivitas Antikolesterol
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah tikus putih jantan galur wistar berumur 2 bulan, dengan berat badan 150-200 g. Penelitian  menggunakan  rancangan acak  lengkap.  Dua  puluh  empat  tikus dibagi menjadi 4 kelompok secara acak dan  diadaptasikan  terlebih  dahulu selama 2 minggu. Pemberian pakan diet tinggi lemak
dilakukan selama penelitian.  Pemberian  fungi  endofit dilakukan  selama  2  minggu  pada  hari ke-8  sampai  dengan  hari  ke-21. Pembagian kelompok hewan uji sebagai berikut :
1) Kelompok  I:  kelompok  kontrol negatif  (pakan diet tinggi lemak + aquades p.o)
2) Kelompok II: kelompok kontrol positif  (pakan  diet  tinggi  lemak
+  Atorvastatin  dosis  0,9  mg/kg BB/hari p.o) 3) Kelompok III: kelompok perlakuan  (pakan  diet  tinggi lemak  +  FEAC  1  12,5  ml/kg BB/hari p.o) 4) Kelompok IV: kelompok perlakuan  (pakan  diet  tinggi lemak  +  FEAC  2  12,5  ml/kg BB/hari p.o)
Analisis  dilakukan  secara  kuantitatif dengan  pengukuran  kadar  kolesterol darah  tikus  masing-masing  kelompok pada hari ke-0, hari ke-8 dan hari ke-21. Analisis  normalitas  menggunakan  uji statistik.

## Hasil dan Pembahasan
Umbi  bawang  merah  ditumbuhkan dalam medium PDA dengan penambahan  antibiotik  amoxicillin  2% untuk  mencegah  pertumbuhan  bakteri dalam  medium.  Fungi  endofit  yang tumbuh  disekitar  umbi  diisolasi  dan dikultivasi menggunakan medium PDB.
Jalgonwala et  al (2011)  menyatakan bahwa setiap sel inang dapat menghasilkan  jenis  isolat  fungi  endofit yang  berbeda  dan  bervariasi  karena merupakan mekanisme adaptasi terhadap  mikroekologi  serta  kondisi fisiologis  yang  spesifik  dari  masing- masing tumbuhan inang. Hasil penelitian menunjukkan adanya 2 jenis fungi endofit yaitu FEAC1 dan FEAC2. PDB  merupakan  medium  untuk memicu pertumbuhan dan menghasilkan metabolit mikroba
masing-masing  isolat.  Joseph et  al, (2011)  melaporkan  bahwa  PDB  dapat digunakan  untuk  menjaring  produksi antimikroba  oleh  isolat-isolat  fungi endofit.
Produksi
antimikroba menggunakan  PDB  menggambarkan sumber  karbon  atau  substrat  spesifik sebagai  pemicu  dalam  metabolisme

## 15 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a
Maret  2019, 1(1) 12-19 ; ISSN: 2337-8433
substrat  menjadi  agensia  antimikroba (Purwanto, 2011).
Identifikasi  fungi  endofit  secara makroskopik dan mikroskopik mengacu pada  buku  petunjuk  menurut  Barnett dan  Barry  (1972).  Hasil  identifikasi fungi endofit dapat dilihat pada Tabel 1 dan Gambar 1 dan 2.
Tabel 1 . Hasil identifikasi makroskopik dan mikroskopik isolat fungi endofit Kode Isolat Morfologi Koloni Morfologi Sel FEAC 1 - Warna koloni putih - Miselium merambat - Koloni tumbuh menyebar - Konidia berbentuk bulat, hialin dan tersusun atas 1 sel - Hifa septat
- Miselium bercabang - Konidiofor panjang dan tidak bercabang FEAC 2 - Warna koloni kuning - Bentuk koloni bulat kecil, berkelompok - Konidia berbentuk ovoid, bulat dan tersusun atas 1 sel
- Hifa septat - Konidiofor bercabang FEAC 1 FEAC 2
Gambar 1. Morfologi isolat fungi endofit
FEAC 1 FEAC 2
Keterangan: a: konidia, b: konidiofor, c: hifa
Gambar 2. Hasil pengamatan mikroskopikisolat fungi endofit
Menurut  Gandjar et  al (2006), identifikasi  secara  makroskopik  dan mikroskopik memiliki kelemahan mengidentifikasi spesies baru atau fungi anamorfik  karena  sering  ditemukan variabilitas  tingkat  strain.  Kelemahan ini  dapat  diatasi  dengan  taksonomi modern yaitu identifikasi secara genotip yang berasal dari DNA atau RNA sel.
Uji aktivitas antifungi metode paper disc diffusion , prinsip metode ini adalah isolat fungi endofit berdifusi dari paper disc ke  dalam  medium  MHA  yang ditumbuhi C.  albicans .  Daerah  jernih disekitar paper  disc (zona  hambat) menunjukkan bahwa isolat fungi endofit mampu  menghambat  pertumbuhan C. albicans .    Hasil  penelitian  uji  aktivitas antifungi  terhadap C.  albicans dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2 . Diameter zona hambat isolat fungi endofit (10 ppm) terhadap C. albicans Kode isolat Repli kasi Diameter zona hambat (mm)
1 2 3 FEAC 1 I 0 0 0 II 0 0 0 III
0 0 0 Rata-rata 0 FEAC 2 I 7,1 8,1 7,0 II 7,7 8,8 6,9

## 16 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a
Maret  2019, 1(1) 12-19 ; ISSN: 2337-8433
III 7,0 7,0 6,3 Rata-rata 7,4 Diameter paper disc : 6mm Isolat FEAC 1 tidak dapat menghambat  pertumbuhan C.  albicans dibandingkan  dengan  isolat  FEAC  2. FEAC 2 mampu menghasilkan metabolit  sebagai  antifungi.Menurut standar NCCLS (2004), sampel termasuk  kategori  peka  terhadap  fungi uji  jika  diameter ≥ 19mm,  intermediet jika  diameter  15-18  mm,  dan  resisten jika  diameter ≤ 14  mm.Pada  penelitian ini, nilai diameter zona hambat sampel termasuk  dalam  kategori  resisten.
Berdasarkan penelitian Alawiyah (2014),  FEAC  2  mengandung  asam tetradekanoat  dan  asam  heksadekanoat yaitu  golongan  asam  lemak  yang memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap
Klebsiella pneumoniae
dengan mekanisme  mengganggu  pembentukan energi sel pada tahap transport elektron dan  fosforilasi  oksidatif.  Selain  itu, golongan  senyawa  asam  lemak  juga mampu menghambat aktivitas enzimatik pada mikroba dan menghasilkan  produk  toksik  yaitu peroksidase  yang  menyebabkan  sel mikroba lisis (Desbois dan Smith, 2010; Akpuaka et al , 2013).
Uji  aktivitas  antikolesterol  isolat fungi  endofit  dilihat  dari  kadar kolesterol  total  dan  kolesterol  HDL tikus. Hasil pengukuran kolesterol total diperoleh  bahwa  semua  kelompok mengalami  peningkatan  pada  hari  ke-0 sampai  hari  ke-8  (Gambar  3).  Hal  ini menunjukkan  bahwa  pemberian  pakan diet tinggi lemak selama 7 hari mampu meningkatkan  kadar  kolesterol  total. Setelah hari ke-21 diperoleh hasil bahwa kelompok kontrol negatif terus meningkat  kadar  kolesterol  totalnya dibandingkan dengan kelompok kontrol positif  maupun  kelompok  perlakuan dengan  isolat  fungi  endofit.  Hasil
penurunan  kolesterol  total  kelompok perlakuan  FEAC  1  (9,05  %)  hampir sama  dengan  kelompok  kontrol  positif (8,20  %).  Sedangkan  penurunan kolesterol  oleh  FEAC  2  lebih  baik dibandingkan dengan kelompok kontrol positif,  yaitu  30,75  %.  Hal  tersebut didukung  dengan  analisa  statistik  yang menunjukkan  bahwa  isolat  FEAC  2 dapat menurunkan kolesterol total pada tikus yang diberi pakan diet tinggi lemak (p<0,05). Beberapa penelitian melaporkan  bahwa  bawang  merah memiliki  salah  satu  derivat  flavonoid dalam  jumlah  banyak  yaitu  senyawa quersetin  yang  memiliki  aktivitas menurunkan kolesterol (Leelarungrayub et  al ,  2006;  Arai,  2000).  Penelitian Casaschi et  al (2002)  menyatakan bahwa  quersetin  dapat  menurunkan kadar  kolesterol  total  dan  kadar kolesterol  LDL  dengan  mekanisme menghambat  sekresi  Apoliprotein  B (Apo  B)  pada  sel  CaCo-2  serta menurunkan  aktivitas  MTP  yang berperan pada pembentukan lipoprotein dengan  mengkatalis  perpindahan  lipid ke molekul Apo B. Penelitian lain juga menyatakan  bahwa  quersetin  juga mampu  menghambat  aktivitas  enzim HMG-KoA  reduktase  yang  berperan dalam pembentukan kolesterol.
Gambar  3. Grafik  kadar  kolesterol  total  tikus hari ke-0, hari ke-8 dan hari ke-21
Hasil  pengukuran  kadar  kolesterol HDL  menunjukkan  bahwa  semua kelompok mengalami peningkatan FEAC 2 Kontrol negatif Kontrol positif FEAC 1
kolesterol  HDL  pada  hari  ke-0  sampai hari ke-8 (Gambar 4). Pemberian FEAC 1  tidak  mampu  meningkatkan  kadar kolesterol  HDL  kelompok  perlakuan dengan  FEAC  1  (9,05  %).  Sedangkan hasil  peningkatan  kolesterol  HDL  oleh FEAC  2  (13,88  %)  lebih  baik dibandingkan dengan kelompok kontrol positif  (8,95  %).  Analisa  statistik menunjukkan bahwa pemberian perlakuan  pada  semua  kelompok  tidak berpengaruh  terhadap  kadar  kolesterol HDL tikus (p<0,05).
Gambar 4 . Grafik kadar kolesterol HDL tikus hari ke-0, hari ke-8 dan hari ke-21
Berdasarkan penelitian ini menunjukkan  bahwa  FEAC  1  dapat menurunkan  kadar  kolesterol  total namun  tidak  menunjukkan  perbedaan signifikan dengan pemberian Atorvastatin serta tidak dapat meningkatkan  kadar  kolesterol  HDL pada  tikus  wistar  jantan.  Sedangkan FEAC  2  mampu  menurunkan  kadar kolesterol  total  secara  signifikan dibandingkan  dengan  Atorvastatin  dan dapat  meningkatkan  kadar  kolesterol HDL pada tikus wistar jantan, meskipun tidak menunjukkan perbedaan
signifikan.
Simpulan
Isolat  FEAC  2  memiliki  aktivitas menghambat  pertumbuhan  fungi C. albicans dalam kategori resisten. Isolat tersebut  juga  menurunkan  kadar kolesterol  total  secara  signifikan dibandingkan Atorvastatin.

## Daftar Pustaka
Abdulmyanova,  L.I.,  Fayzieva,  F.K., Ruzieva,  D.M.,  Rasulova,  G.A., Sattarova,  R.S.,  Gulyamova,  T.G.,
2016, Bioactivity of Fungal
Endophytes  associating  with Allium Plants  Growing  in  Uzbekistan, International  Journal  of  Current Microbiology  and  Applied Science , 5(9) : 769-778.
Akpuaka, A., Ekwenchi, M.M., Dashak, D.A.,  Dildar,  A.,  2013,  Biological Activities of Characterized Isolates of n-hexane  Extract  of Azadirachta Indica A.  Juss  (Neem)  Leaves, New York Science Journal , 6(6) : 119-124.
Alawiyah,  S.Z.,  2014,  Isolat  Fungi Endofit  Umbi  Lapis  bawang  Merah ( Allium  cepa )  sebagai  Antibakteri terhadap Klebsiella pneumonia , Skripsi , Fakultas Ilmu-Ilmu Kesehatan, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto. Aly, A.H., Debbab, A., and Proksch, P., 2011,  Fungal  Endophytes:  Unique Plant Inhibitants with Great Promises, Applied Microbiology and Biotechnology , 90(6) : 1829-1845.
Amin,  M.,  Kapadnis,  B.P.,  2005,  Heat Stable  Antimicrobial  Activity  of
Allium  ascolanicum Against  Bacteria and Fungi, Indian Journal
Experimental Biology , 43 : 751-754.
Arai, Y., Shaw, W., Mitsuru, K., Kayoko, S.,  Rika,  M.,  Naohide,  K.,  2000, Dietary Intakes of Flavonols, Flavnes and  Isoflavones  by  Japanese  Women and The Inverse Correlation Between Quercetin  Intake  and  Plasma  LDL Cholesterol Concentration, Journal of Nutrition , 130(9) : 2243-2250. Benmalek, Y., Ouahiba, A.Y., Aicha, B., and Marie-Laure F., 2013, Antimicrobial and Antioxidant Activitie of Illicum verum , Crataegus
Kontrol negatif
Kontrol positif FEAC 2
FEAC 1

## 18 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a
Maret  2019, 1(1) 12-19 ; ISSN: 2337-8433
oxyacantha, Monogyna sp. and Allium cepa Red  and  White  Varieties, Bioengineered , 4(4) : 244-248.
Barnett,  H.L.,  Barry,  B.H.,  1972, Ilustrated Genera of Imperfect Fungi ,
3 rd Edition,  Burgess  Publishing
Company, Virginia. Casaschi,  A.,  Qi,  W.,  Ka’ohimanu,  D. Alison, R., Andre, T., 2002, Intestinal Apolipoprotein B Secretion is Inhibited by The Flavonoid Quercetin Potential Role of Microsomal Triglycerida  Trasfer  Protein  and Diacylglycerol Acyltransferase, Lipids , 37(7) : 647-652.
Desmukh,  S.K.,  Gupta,  M.K.,  Prakash, V.,  Saxena,  S.,  2018,  Endophytic Fungi :  A  Source  of  Potential Antifungal  Compounds, Journal  of Fungi , 4(3) : 1-42. Desbois,  A.P.,  Smith,  V.J.,  2010, Antibacterial Free Fatty Acid: Activities  Mechanism  of  Action  and Biotechnological  Potential, Applied
Microbiolology  and  Biotechnology ,
85(6) : 1629-1642. Elmahdi, B., Maha, M., Khalil, Afaf, I., Abulgasim, 2008, The Effect of Fresh Crushed Garlic Bulbs ( Allium sativum )  on  Plasma  Lipids  in
Hypercholesterolemic Rats, Research Journal  of  Animal  and  Veterinary Science , 3 : 15-19.
Gandjar,  L.,  Wellyzar,  S.,  Ariyanti,  O., 2006, Mikologi  Dasar  dan  Terapan ,
Fakultas  Kedokteran,  Universitas Indonesia, Jakarta.
Hidayahti,  N.,  2010,  Isolasi  dan
Identifikasi Jamur Endofit pada Umbi Bawang  Putih  ( Allium  sativum ) Sebagai Penghasil Senywa Antibakteri terhadap Bakteri Staphylococcus mutan dan Eschericia coli , Skripsi ,  Fakultas  Sains  dan Teknologi, Universitas Negeri Malang, Malang. Jaelani,  2007, Khasiat  Bawang  Merah , Penerbit Kanisius, Yogyakarta. Jalgonwala, R.E., Bhavna, V.M., Raghunath,  T.M.,  2011,  A  Review: Natural Products from Plant Associated Endophytic Fungi, Journal of  Microbiology  and  Biotechnology
Research , 1(2) : 21-32.
Jawetz, E., Melnick, J.L., Adelberg, E.A., 1986, Mikrobiologi Kedokteran , diterjemahkan oleh Bonang, Edisi 20, EGC Pres, Jakarta.
Joseph, B., Priya, R.M., 2011, Bioactive Compound  from  Endophytes  and Their  Potential  in  Pharmaceutical Effect:  A  Review, American  Journal of  Biochemistry  and  Molecular Biology , 1(3) : 291-309.
Leelarungrayub, N., Vibon, R., Nantaya, C.,  Janusz,  M.G.,  2006,  Quantitative Evaluation  of  The  Antioxidant Properties  of  Garlic  and  Shallot Preparations, Nutrition , 22(3) :  266- 274.
Liu,  C.;  Liu, T.;  Yuan,  F.,  and   Gu,  Y.,
2010,  Isolating  Endophytic  Fungi from Evergreen Plants and Determining their Antifungus Activities , African Journal of
Microbiology  Research , 4(21) :  2243- 2248.
Margiono,  S.,  2008,  Produksi  Metabolit Sekunder  (Antibiotik)  oleh  Isolat Jamur  Endofit  Indonesia, Majalah Farmasi Indonesia , 19(2) : 86-94.
Melliawati,  R.,  Harni,  2009,  Senyawa Antibakteri Eschericia  coli ATCC 35218 dan Staphylococcus  aureus ATCC  25923  dari  Kapang  Endofit Taman  Nasional  Gunung  Halimun, Jurnal Natur Indonesia , 12(1) : 21-27.
National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), 2004, Method  for  Antifungal  Disk Diffusion  Susceptibility  Testing  of Yeasts;  Approved  Guideline ,  NCCLS

## 19 | A c t a   P h a r m a c i a e   I n d o n e s i a
Maret  2019, 1(1) 12-19 ; ISSN: 2337-8433
document  M44-A  Vol  24,  The National  Committee  for  Clinical Laboratory Standards, USA.
Noverita, Dinah, F., 2009, Isolasi dan Uji Aktivitas  Antibakteri  Jamur  Endofit dari  Daun  dan  Rimpang Zingiber otensii Val., Majalah  Farmasi Indonesia , 4(4) : 171-176.
Purwanto,  2011, Isolasi  dan  Identifikasi Senyawa  Penghambat  Polimerisasi Hem  dari  Endofit  Artemisia  annua , Tesis ,  Magister  Farmasi  Sains  dan Teknologi,  Fakultas  Farmasi  UGM, Yogyakarta.
Pyun,  M.S.,  Shin,  S.,  2014,  Antifungal Effect of The Volatile Oil from Allium
Plants Against  Trichophyton  species and  Synergism  of  The  Oils  with Ketoconazole ,  Phytomedicine , 13(6) : 394-400.
Qader,  M.M.,  Kumar,  N.S.,  Jayasinghe, L.,  Araya,  H.,  Fujimoto,  Y.,  2017,
Bioactive  Sesquiterpenes  from  An Endophytic Fungus Bipolaris Sorokiniana  Isolated  from  A  Popular Medicinal  Plant Costus  speciosus ,
Micology An International Journal on Fungal Biology , 8(1) : 17-20.
Richardo,  K.F.S.,  Oliveira,  T.T.D., Nagem,  T.J.,  Pinto,  A.D.S.,  Oliveira, M.G.A.,  Soares,  J.F.,  2001, Effect  of Flavonoids  Morin,  Quercetin  and Nikotinic Acid on Lipid Metabolis of
Rats Experimentally Fed with Triton, Brazilian  Archives  of  Biology  and Technology , 44(3) : 263-267.
Rodriguez,  R.J.,  White  Jr.,  J.F.,  Arnold,
A.E.,Redman,    R.S.,  2009, Fungal Endophytes: Diversity and Functional Roles, New Phytologist , 182(2) : 1-17.
Skerget, M.L., Majhenie, M., Bezjal and
Kenz,  2009,  Antioxidan,  Radical Scavenging and Antimicrobial Activities of Red Onion ( Allium cepa L.)  Skin  and  Edible  Part  Extracts, Chemical and Biochemical
Engineering  Quarterly , 23(4) :  435- 444.