JURNAL ILMIAH KESEHATAN RUSTIDA | Page : 76-86 Vol. 10 No. 01 Januari 2023 | p-ISSN2356-2528; e-ISSN 2620-9640

## IDENTIFIKASI BAKTERI COLIFORM PADA SUSU KEDELAI
MENGGUNAKAN METODE MPN (MOST PROBABLE NUMBER)
Vincentia Ade Rizky 1CA
Email: vincentiarizky@gmail.com ( Corresponding Author )
Program  Studi  DIV Teknologi Laboratorium Medik,  Institut Kesehatan  Medistra Lubuk Pakam Saadah Siregar 2
Program  Studi DIV Teknologi Laboratorium Medik,  Institut Kesehatan  Medistra Lubuk Pakam Asvia Rahayu 3
Program  Studi DIV Teknologi Laboratorium Medik,  Institut Kesehatan  Medistra Lubuk Pakam Visensius Krisdianilo 4
Program  Studi DIV Teknologi Laboratorium Medik,  Institut Kesehatan  Medistra Lubuk Pakam Suci Mustika Mawardani 5
Program  Studi DIV Teknologi  Laboratorium Medik,  Institut Kesehatan  Medistra Lubuk Pakam Dian Pratiwi 6
Program  Studi DIV Teknologi Laboratorium Medik,  Institut Kesehatan  Medistra Lubuk Pakam

## ABSTRAK
Escherichia  coli  yaitu  bakteri  yang  hidup  diusus  manusia,  sebagai  flora  normal. Akan  tetapi  bakteri  ini  juga  sering  mengkontaminasi  dan  dapat  menyebabkan penyakit  pada  manusia.  Pengolahan  pangan  yang  tidak  hygienis  dapat menyebabkan  berkembangnya  bakteri  ini.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengidentifikasi  adanya  bakteri  Coliform  pada  susu  kedelai  yang  disimpan disuhu  kulkas  dan  suhu  ruangan  metode  MPN  (Most  Probable  Number). penelitian  ini  bersifat  deskriptif  analitik  dengan  populasi  susu  kedelai  yang disimpan  disuhu  kulkas  dan  suhu  ruangan  pada  penyimpanan  ½,  1,  1  ½,  dan  2 hari.  Berdasarkan  hasil  pengujian  dengan  metode  presumptive  test,  confirmative test  dan  complete  test  didapatkan  hasil  pada  penyimpanan  disuhu  kulkas penyimpanan ½ hari dan 1 hari sampel 1,2,3,4,5 yaitu <3 CFU/mL, penyimpnana 1  ½  hari  sampel  1,  2  dan  3  didapatkan  15  CFU/mL,  sampel  4  dan  5  yaitu  11 CFU/mL.  Penyimpanan  2  hari  didapatkan  20  CFU/mL.  Sedangkan  pada penyimpanan  disuhu  ruangan  ½  hari  sebesar  <3  CFU/mL,  penyimpanan  1  hari pada  sampel  1,2  dan  3  yaitu  11  CFU/mL,  sampel  4  dan  5  yaitu  7  CFU/mL. Penyimpanan 1 ½ hari didapatkan sampel 1,2 dan 3 yaitu 21 CFU/mL, sampel 4 dan  5  yaitu  20  CFU/mL,  penyimpanan  2  hari  yaitu  28  CFU/mL.  Pada
penyimpanan  ½  hari  dan  1  hari  pada  penyimpanan  disuhu  kulkas  serta penyimpanan pada suhu ruangan ½ hari dinyatakan tidak ada pengaruh dan layak dikonsumsi serta memenuhi syarat mutu, Sedangkan pada penyimpanan 1 ½ hari dan  2  hari  pada  suhu  kulkas  dan  1,  1  ½,  dan  2  hari  pada  suhu  ruangan  terdapat pengaruh penyimpanan dan tidak memenuhi syarat mutu konsumsi.
Kata kuci : Bakteri Coliform, Suhu kulkas, Suhu ruangan, Susu kedelai, Uji MPN

## PENDAHULUAN
Susu kedelai murni adalah susu yang terbuat dari bahan dasar kacang kedelai.  Susu  ini  banyak  dikonsumsi oleh  masyarakat  sebagai  pengganti susu sapi bagi mereka yang mengalami intoleransi laktosa. Adapun  kandungan  susu  kedelai sangat  baik  bagi  tubuh  antara  lain mengandung protein, zat besi, fosfor, karbohidrat, lemak, vitamin provitamin  A  dan  B.  Pengolahan susu kedelai murni yang kurang baik dapat menyebabkan susu terkontaminasi  oleh  mikroorgnisme seperti  coliform  (Sunarti,  2015; Jiwintarum dkk., 2017). Susu  kedelai  murni  memiliki kandungan nutrisi yang juga menguntungkan  bagi  mikroorgnisme kontaminasi,  sehingga  kualitas  susu rusak  dan  tidak  layak  konsumsi (Molita dkk., 2019).
Produk  olahan  kedelai  bukan lagi  makanan  asing,  dan  olahan kedelai  seperti  susu  kedelai  menjadi sumber  utama  susu  nabati  yang bernutrisi. Susu kedelai dapat ditemukan pada produkrumahan,
supermarket dan pasar. Faktor utama yang    mempengaruhi  pertumbuhan susu  kedelai  antara  lain  lama penyimpanan, proses pembuatan (produksi)  hingga  sampai  ketangan konsumen, kelembaban, suhu,
oksigen, dan pH.
Mikroba yang bermanfaat dalam susu kedelai adalah Lactobacillus bulgaricus dan Streptococcus thermophilus . Mikroba ini membantu memfermentasi  susu  dengan  cara mengubah gula susu (laktosa) menjadi  asam  laktat.  Sementara  itu bakteri  yang  bisa  berbahaya  antara antara  lain  E.  coli.  Infestasi  besar  E. coli dan sistem kekebalan tubuh yang lemah  dapat  merusak  kesehatan  dan menyebabkan  diare (Safrida  dkk., 2019).
Escherichia  coli atau  bakteri yang  hidup  di  usus  manusia, biasa disebut  sebagai  flora  normal,  atau kumpulan mikroba yang secara alami ada  dalam  tubuh  manusia  yang normal  dan  sehat.  Akan  tetapi apabila bakteri E. coli yang mengkontaminasi makanan atau minuman  maka  akan  menyebabkan bakteri  tersebut  menjadi  pathogen dan  menyebabkan  infeksi.  Infeksi yang  dapat  ditimbulkan  antara  lain diare,  kram  perut,  muntah,  dan  sakit perut  ringan  hingga  berat  yang bermanifestasi
sebagai
demam
(Rahayu dkk, 2018). Terdapat beberapa  mikroba  kontaminasi  dan terdapat pada produk susu antara lain E.  coli,  Klabsiella  sp,  Lactobacillus sp,  Salmonella  sp,  Streptococcus  sp, dan  Staphylocpccus  sp .  Kontaminasi bakteri  yang  paling  sering  terlihat adalah  bakteri  coliform.  Coliform
merupakan    kelompok  bakteri  yang digunakan  sebagai  indikator  mutu lingkungan, air, tanah, atau makanan. Penyebaran  kontaminasi  bakteri  ini melalui  tangan  yang  terkontaminasi bakteri maupun air yang
terkontaminasi  akibat  bakteri  E.coli yang terdapat di feses (Pratiwi,2013). Makanan  yang  tidak  terjamin kebersihannya  dapat  dengan  mudah terkontaminasi.  Kontaminasi  juga dapat  terjadi  ketika  patogen  seperti E.  coli  tumbuh  selama  penyimpanan jangka  panjang.  E.  coli  merupakan mikroba  yang  sering  digunakan sebagai indikator apakah suatu sumber  air  terkontaminasi  patogen. Escherichia  coli  adalah  sekelompok bakteri  yang  digunakan  sebagai indikator kekotoran dan kondisi yang tidak  menguntungkan  pada  air, makanan,  susu,  dan  produk  susu. Coliform  sebagai  suatu  kelompok dicirikan  sebagai  kelompok  aerob fakultatif  berbentuk  batang,  Gram- negatif,  tidak  membentuk  spora, yang  memfermentasi  laktosa  untuk menghasilkan  asam  dan  gas  dalam waktu 48 jam .
Berdasarkan  penelitian  yang dilakukan menurut Ruhi, dkk (2020), susu  kedelai  layak  dikonsumsi  bila disimpan  pada  hari  ke-1,  dengan penyimpanan  terpengaruh  dan  tidak layak dikonsumsi pada hari ke-3 dan ke-6. Menurut Anggraeni & Prihandarini (2013) menyatakan bahwa penyimpanan pada suhu ruang dengan suhu 25 °C terjadi pertumbuhan mikroba setelah 12 jam penyimpanan. Pengujian yang dapat dilakukan dilaboratorium dapat menggunakan  metode  MPN  (Most Probable Number) yaitu metode yang menghitung  Coliform  berdasarkan
angka  perkiraan  terdekat.  Estimasi terdekat  adalah  perhitungan  dalam suatu  range  yang  dihitung  sebagai estimasi  terdekat  secara  statistik dengan  melihat  table  MPN  (Most Probable  Number).  Metode  MPN (Most  Probable  Number)  merupakan metode  enumerasi  mikroorganisme yang  menggunakan  data  dari  hasil pertumbuhan  mikroba  pada  medium cair  spesifik  dalam  seri  tabung  yang ditanam  dari  sampel  padat  atau  cair sehingga  dihasilkan  kisaran  jumlah mikroorganisme dalam jumlah perkiraan terdekat (Harti, 2015).
Mikroorganisme  dalam  susu kedelai  juga  dapat  dideteksi  dengan uji  angka  lempeng  total.  Tujuan  dari uji angka lempeng total adalah untuk mengetahui  jumlah  mikroba  dalam suatu sampel.
Hasil pengujian menunjukkan  bahwa  peningkatan jumlah mikroba dengan menyesuaikan sampel, dimana jumlah total mikroba tergantung pada generasi  mikroba  di  dalam  media pertumbuhan  dan  akan  membentuk koloni yang tunggal (Theofanny dkk, 2021).

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas Farmasi  Institut  Kesehatan  Medistra Lubuk Pakam. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan April – Juni 2022.  Penelitian  yang  digunakan adalah  penelitian  deskriptif  analitik. Penelitian
deskriptif dengan rancangan  penelitian  cross  sectional yang  bertujuan  untuk  menentukan jumlah  bakteri  Coliform  dalam  susu kedelai  yang  didinginkan  dan  suhu kamar.
Sampel yang diambil dalampenelitian  sebanyak  5  sampel
susu  kedelai  untuk  masing-masing perlakuan pada penyimpanan ½ hari, 1 hari, 1 ½ hari dan 2 hari.
Uji pendugaan (Presumptive) Media yang telah disterilkan
dipindahkan tabung reaksi yang telah diisi  media  kedalam  alat  laminar  air flow. Pipet sampel kedalam 3 tabung raksi  sebanyak  10  ml,  lalu  3  tabung reaksi  1  ml  sampel,  setelah  itu  3 tabung  reaksi  0,1  ml  sampel. Penelitian  ini  menggunakan  metode MPN  dengan  seri  3  3  3  sehingga dibutuhkan  9  tabung  reaksi  pada setiap  sampel.  Setelah  sampel  siap masukkan ke inkubasi selama 24 jam pada  suhu  37°C  dan  amati  hasilnya jika  ada  gelembung  maka  hasilnya positif  (+)  atau  mengandung  bakteri sehingga harus dilakukan uji berikutnya.
Uji Penegas (Confirmed test) Hasil  dari  uji  penduga  (presumptive Test)  yang  positive  (+)  dilanjutkan dengan  uji  penegas  (Confirmative Test).  Sampel  yang  positif  diambil dengan ose steril dan dimasukkan ke dalam  media  Brillian  Greean  Bile Lactose Broth (BGLB), kemudian itu diinkubasi  selama  2x24  jam  pada suhu 37°C untuk hasil yan maksimal. Hasil  positif  ditunjukkan  dengan adanya gas.
Uji Kelengkap (Completed Test) Hasil  positif  pada  uji  penegas (Confirmatife
test)
dipindahkan sebanyak  1x  jarum  ose  dari  masing- masing  tabung  yang  membentuk  gas kedalam  cawan  petri  yang  berisi media  Eosin  Methylen  Blue  Agar (EMBA).  Jarum  ose  digoreskan kedalam  cawan  petri  secara  zig-zag dengan  kuadran  3  kemudian  cawan
petri  diincubator  dan  dicatat  hasil positif  terdapat Escherichia  coli ditandai  dengan  warna  hijau  metalik pada cawan petri (Hainil dkk., 2021).

## HASIL
Tabel  1.  Jumlah  sampel  susu kedelai dan suhu penyimpanan
NO SUHU PENYIMPANAN JUMLAH SAMPEL 1 Suhu Ruangan 5 2 Suhu Kulkas 5 Total Sampel 5
Berdasarkan  hasil  penelitian 5  sampel  susu  kedelai  yang  telah disimpan  disuhu  kulkas  dan  suhu ruang  dari  pedagang  dikawasan lubuk  pakam.  menggunakan  metode penyimpanan ½ hari, 1 hari, 1 ½ hari, dan 2 hari penyimpanan.
Tabel 2. Hasil uji penduga (presumptive  tes)  menggunakan media LB (Lactose Broth) penyimpanan  ½  hari  di  suhu kulkas Samp el Hasil tabung positif Pada Uji Pendugaan 10 mL 10 mL 10 mL 1 mL 1 mL 1 ml 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 1 - - - -  -  - - - - 2 - - - -  -  - - - - 3 - - - -  -  - - - - 4 - - - -  -  - - - - 5 - - - -  -  - - - - Berdasarkan data yang didapat  pada  penyimpanan  ½  hari pada tabung reaksi dengan menggunakan media LB menunjukkan  bahwa  pada  sampel yang  disimpan  disuhu  kulkas  tidak
terdapat  cemaran  bakteri colifrom yang  didapat  hasil  negatif  yang ditunjukkan  dengan  tidak  adanya gelembung gas.
Tabel 3. Hasil uji penduga (presumptive  tes)  menggunakan media LB (Lactose Broth) penyimpanan  1  hari  di  suhu kulkas Sa mp el Hasil tabung positif Pada Uji Pendugaan 10 mL 10 mL 10 mL 1 mL 1 mL 1 ml 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 1 - - - -  -  - - - - 2 - - - -  -  - - - - 3 - - - -  -  - - - - 4 - - - -  -  - - - - 5 - - - -  -  - - - - Berdasarkan data yang didapat Berdasarkan data yang didapat hasil positif pada penyimpanan  1  hari  pada  tabung reaksi  dengan  menggunakan  media LB menunjukkan bahwa pada sampel yang  disimpan  disuhu  kulkas  tidak terdapat  cemaran  bakteri colifrom yang  didapat  hasil  negatif  yang ditunjukkan dengan adanya gelembung gas. Tabel 4. Hasil uji penduga (presumptive  tes)  menggunakan media LB (Lactose Broth) penyimpanan  1  ½  hari  di  suhu kulkas Sam pel Hasil tabung positif pada uji penduga 10 mL 10 mL 10 mL 1 mL 1 mL 1 ml 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 1 + + + + + + - - - 2 + + + + + + - - - 3 + + + + + + - - - 4 + + + + + + - - - 5 + + + + + + - - - Berdasarkan data yang didapat hasil positif pada
penyimpanan  1½  hari  pada  tabung
reaksi  dengan  menggunakan  media LB menunjukkan bahwa pada sampel 1,2,3,4  dan  5  yang  disimpan  disuhu kulkas  terdapat  cemaran  bakteri colifrom yang  didapat  hasil  positif yang ditandai dengan adanya gelembung gas. Tabel 5. Hasil uji penduga (presumptive  tes)  menggunakan media LB (Lactose Broth) penyimpanan  2  hari  di  suhu kulkas Sampe l Hasil tabung positif pada uji penduga 10 mL 10 m L 10 mL 1 mL 1 m L 1 ml 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 1 +  + +  +  + +  +  +  + 2 +  + +  +  + +  +  +  + 3 +  + +  +  + +  +  +  + 4 +  + +  +  + +  +  +  + 5 +  + +  +  + +  +  +  + Berdasarkan data yang didapat hasil positif pada
penyimpanan  2  hari  pada  tabung reaksi  dengan  menggunakan  media LB menunjukkan bahwa pada sampel 1,2,3,4  dan  5  yang  disimpan  disuhu kulkas  terdapat  cemaran  bakteri colifrom yang  didapat  hasil  positif yang ditandai dengan adanya gelembung gas.
Tabel 6. Hasil uji penduga (presumptive  tes)  menggunakan media LB (Lactose Broth) penyimpanan  ½  hari  di  suhu ruangan Sa m pe l Hasil tabung positif pada uji penduga 10 mL 10 mL 10 mL 1 mL 1 mL 1 mL 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 1 -  - - - -  - - - - 2 -  - - - -  - - - - 3 -  - - - -  - - - - 4 -  - - - -  - - - -
5 -  - - - -  - - - - Berdasarkan data yang didapat hasil positif pada penyimpanan  ½  hari  pada  tabung reaksi  dengan  menggunakan  media LB menunjukkan bahwa pada sampel yang disimpan disuhu kulkas tidak  terdapat cemaran  bakteri colifrom yang  didapat  hasil  negatif yang ditandai dengan adanya gelembung gas. Tabel 7. Hasil uji penduga (presumptive  tes)  menggunakan media LB (Lactose Broth) penyimpanan  1  hari  di  suhu ruangan Sam pel Hasil tabung positif pada uji penduga 10 mL 10 mL 10 mL 1 mL 1 mL 1 mL 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 1 + +  + - - - + + + 2 + +  + - - - + + + 3 + +  + - - - - - - 4 + +  + - - - - - - 5 + +  + - - - - - - Berdasarkan data yang didapat hasil positif pada penyimpanan  1  hari  pada  tabung reaksi  dengan  menggunakan  media
LB menunjukkan bahwa pada sampel
1,2,3,4  dan  5  yang  disimpan  disuhu ruangan  terdapat  cemaran  bakteri colifrom yang  didapat  hasil  positif yang ditandai dengan adanya gelembung gas. Tabel 8. Hasil uji penduga (presumptive  tes)  menggunakan media LB (Lactose Broth) penyimpanan  1  ½  hari  di  suhu ruangan Sa mp el Hasil tabung positif pada uji penduga 10 mL 10 mL 10 mL 1 Ml 1 mL 1 mL 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL
1 + +  +  +  +  + + + +
2 + +  +  +  +  + + + + 3 + +  +  +  +  + + + +
4 + +  +  +  +  + + + +
5 + +  +  +  +  +
+ + + Berdasarkan data yang didapat hasil positif pada
penyimpanan  1½  hari  pada  tabung reaksi  dengan  menggunakan  media LB menunjukkan bahwa pada sampel 1,2,3,4  dan  5  yang  disimpan  disuhu ruangan  terdapat  cemaran  bakteri colifrom yang  didapat  hasil  positif yang ditandai dengan adanya gelembung gas. Tabel 9. Hasil uji penduga (presumptive  tes)  menggunakan media LB (Lactose Broth) penyimpanan  2  hari  di  suhu ruangan SSampel Hasil tabung positif pada uji penduga 10 mL 10 mL 10 mL 1 mL 1 mL 1 mL 0,1 mL 0,1 mL 0,1 mL 1 +  +  +  +  +  +  +  +  + 2 +  +  +  +  +  +  +  +  + 3 +  +  +  +  +  +  +  +  + 4 +  +  +  +  +  +  +  +  + 5 +  +  +  +  +  +  +  +  + Berdasarkan data yang didapat hasil positif pada
penyimpanan  2  hari  pada  tabung reaksi  dengan  menggunakan  media LB menunjukkan bahwa pada sampel 1,2,3,4  dan  5  yang  disimpan  disuhu kulkas  terdapat  cemaran  bakteri colifrom yang  didapat  hasil  positif yang ditandai dengan adanya gelembung gas.
Tabel 10.  Hasil  uji  penegas (Confirmative Test) ½ hari Sam pel Hasil tabung positif MPN per
10 mL 1 mL 0,1 mL g/ml 1 0 0 0 <3 2 0 0 0 <3 3 0 0 0 <3 4 0 0 0 <3 5 0 0 0 <3 Berdasarkan hasil yang didapat  pada  uji  penegasan  pada media  BGLB  pada  penyimpanan  ½ hari didapatkan hasil cemaran bakteri Coliform pada sampel 1,2,3,4  dan  5  diperoleh  nilai  MPN <3/ml
Tabel 11. Hasil  uji  penegas (Confirmative Test) 1 hari Sampel Hasil tabung positif MPN per g/ml 10 mL 1 mL 0,1 mL 1 0 0 0 <3 2 0 0 0 <3 3 0 0 0 <3 4 0 0 0 <3
5 0 0 0 <3
Berdasarkan  hasil  yang  didapat  pada uji  penegasan  pada  media  BGLB pada penyimpanan 1 hasil didapatkan hasil  cemaran  bakteri  Coliform  pada sampel  1,2,3,4  dan  5  diperoleh  nilai MPN <3/ml.
Tabel 11.  Hasil  uji  penegas (Confirmative Test) 1 ½ hari Sampe l Hasil tabung positif MPN per g/ml 10 mL 1 mL 0,1 mL 1 2 1 0 15 2 2 1 0 15 3 2 1 0 15 4 1 2 0 11 5 1 2 0 11 Berdasarkan hasil yang
didapat  pada  uji  penegasan  pada
media  BGLB  pada  penyimpanan  1½ hari didapatkan hasil cemaran bakteri Coliform pada  sampel  1,2dan  3 diperoleh  hasil  nilai  MPN  15/ml sedangkan  pada  sampel  4  dan  5 terdapat hasil nilai MPN 11/ml.
Tabel 12. Hasil  uji  penegas (Confirmative Test) 2 hari Sampel Hasil tabung positif MPN per g/ml 10 mL 1 mL 0,1 mL 1 2 2 1 20 2 2 2 1 20 3 2 2 1 20 4 2 2 1 20 5 2 2 1 20
Berdasarkan  hasil  yang  didapat pada  uji  penegasan  pada  media BGLB  pada  penyimpanan  2  hari didapatkan  hasil  cemaran  bakteri Coliform pada  sampel  1,2,3,4  dan  5 diperoleh hasilnilai MPN 20/ml.
Tabel 13. Hasil  uji  penegas
(Confirmative Test) ½ hari Sampel Hasil tabung positif MPN per g/ml 10 mL 1 mL 0,1 mL 1 0 0 0 <3 2 0 0 0 <3 3 0 0 0 <3 4 0 0 0 <3 5 0 0 0 <3 Berdasarkan hasil yang didapat  pada  uji  penegasan  pada media  BGLB  pada  penyimpanan  ½ hari didapatkan hasil cemaran bakteri
Coliform  pada  sampel  1,2,3,4  dan  5 diperoleh nilai MPN <3/ml.
Tabel 14. Hasil  uji  penegas
(Confirmative Test) 1 hari Sampel Hasil tabung positif MPN per g/ml 10 mL 1 mL 0,1 mL 1 1 1 1 11 2 1 1 1 11 3 1 1 1 11 4 1 1 0 7
5 1 1 0 7 Berdasarkan hasil yang didapat  pada  uji  penegasan  pada media  BGLB  pada  penyimpanan  1 hari didapatkan hasil cemaran bakteri Coliform pada  sampel  1,2  dan  3 diperoleh  hasil  nilai  MPN  11/ml sedangkan  pada  sampel  4  dan  5 terdapat hasil nilai MPN 7/ml.

## Tabel
15. Hasil  uji  penegas
(Confirmative Test) 1 ½ hari Sampel Hasil tabung positif MPN per g/ml 10 mL 1 mL 0,1 mL 1 2 2 0 21 2 2 2 0 21 3 2 2 1 20 4 2 2 1 20 5 2 2 1 20 Berdasarkan hasil yang didapat  pada  uji  penegasan  pada media  BGLB  pada  penyimpanan  1½ hari didapatkan hasil cemaran bakteri Coliform pada  sampel  1  dan  2 diperoleh  hasil  nilai  MPN  21/ml
sedangkan  pada  sampel  3,4  dan  5 terdapat hasil nilai MPN 20/ml.
Tabel 16. Hasil  uji  penegas (Confirmative Test) 2 hari Sampel Hasil tabung positif MPN per g/ml 10 mL 1 mL 0,1 mL 1 2 2 1 28 2 2 2 1 28 3 2 2 1 28 4 2 2 1 28 5 2 2 1 28 Berdasarkan hasil yang didapat  pada  uji  penegasan  pada media  BGLB  pada  penyimpanan  2 hari didapatkan hasil cemaran bakteri Coliform pada  sampel  1,2dan  3 diperoleh  hasil  nilai  MPN  28/ml sedangkan  pada  sampel  4  dan  5 terdapat hasil nilai MPN 21/ml.

## Hasil  uji  pelengkap  (Completed
Test)
Berdasarkan  dari  hasil  uji pelengkap (Completed  tes) dengan menggunakan media EMBA didapatkan  hasil  pada  suhu  kulkas pada penyimpanan ½ hari dan 1 hari tidak terdapat adanya cemaran bakteri Coliform  (Escherichia  coli) , 1  ½  hari  dan  2  hari  terdapat  adanya cemaran bakteri Coliform (Escherichia  coli), sedangkan  pada suhu  ruangan  penyimpanan  ½  hari tidak terdapat cemaran bakteri Coliform  (Escherichia  coli) namun pada  penyimpanan  1  hari,  1  ½  hari dan  2  hari  terdapat  adanya  bakteri Coliform (Escherichia coli).

## Hasil penetapan MPN
Berdasarkan  hasil  penentuan tabel MPN ( Most Praobable Number )  pada  suhu  kulkas  pada penyimpanan  ½  hari  dan  1  hari didapat hasil <3 dan pada penyimpanan  1  ½  hari  sampel  1,2 dan  3  didapatkan  hasil  15  dan  pada sampel  4  dan  5  didapat  hasil  11 sedangkan  pada  penyimpanan  2  hari didapatkan  hasil  20.  Pada  suhu ruangan  pada  penyimpanan  ½  hari didapatkan  <3,  pada  penyimpanan  1 hari  pada  sampel  1,2  dan  3 didapatkan 11 dan pada sampel 4 dan 5 didapatkan dengan hasil 7, penyimpanan  1  ½  hari  didapatkan hasil  pada  sampel  1  dan  2  yaitu  21, sedangkan  pada  sampel  3,4  dan  5 didapat hasil 20, dan pada penyimpanan selama 2 hari didapatkan hasil pada sampel 1,2,3,4
dan 5 yaitu 28.

## PEMBAHASAN
Sampel  yang  menunjukkan hasil positif dapat dikarenakan bakteri  tersebut  memfermentasikan laktosa yang menghasilkan asam dan gas  di  dalam  tabung  BGLB.  Dari hasil  penelitian  terhadap  nilai  MPN pada  sampel  susu  kedelai  pada penyimpanan ½ hari pada penyimpanan suhu kulkas memenuhi syarat, sedangkan pada penyimpanan 1,  1  ½  hari  dan  2  hari  tidak memenuhi syarat. Menurut SNI 2019 bukti keberadaan bakteri Escherichia coli dalam  sampel  susu  kedelai menunjukkan  bahwa  bakteri  yang berstandart  dan  memenuhi  syarat adalah  sekitar  <3/ml.  jika  susu kedelai  telah  tercemar  oleh  bakteri Escherichia  coli dapat  menyebabkan
penyakit  khususnya  diare,  sehingga bakteri  coliform  dijadikan  indikator pencemaran makanan dan air (Widiyanti, 2004).
Berdasarkan  pada  uji  penduga dengan  mengunakan  media  Lactose Broth (LB) yang telah dilakukan dari 5 sampel yang diambil di pasar lubuk pakam  dengan  penyimpanan  ½  hari, 1 hari, 1 ½ hari, dan 2 hari pada suhu kulkas  dan  suhu  ruangan.  Diperoleh hasil  yang  positif  dapat  dilihat dengan  terjadinya  pembentukan  gas pada  tabung  durham  yang  dimana media (LB) Lactose broth
mengandung  laktosa  yang  berfungsi untuk menyediakan karbohidrat yang dapat  difermentasi  untuk  organisme bakteri Coliform.
Hasil  uji  MPN  menunjukkan sampel  1  sampai  sampel  5  pada penyimpanan  ½  hari  dan  1  hari disuhu kulkas tidak ada pertumbuhan bakteri Escherichia coli . Akan tetapi pada penyimpanan ½ hari dan 1 hari jumlah  bakteri  masih  memenuhi standart  APM Escherichia coli dengan  hasil  <3/ml  dengan  melihat pada  SNI  2019  Sedangkan  pada penyimpanan  1  ½  hari  dan  2  hari pada  suhu  kulkas  terdapat  cemaran bakteri Escherichia  coli dan  tidak memenuhi standart APM SNI dengan hasil  nilai  MPN  15/ml  -  28/ml, Kemudian  pada  hasil  uji  MPN  pada sampel  1  sampai  sampel  5  dengan masa  penyimpanan  ½  hari  yang disimpan  pada  suhu  ruangan  tidak terdapat
pertumbuhan bakteri Escherichia coli , dan masih memenuhi standart APM SNI,
kemudian  pada  sampel  1,  1  ½  hari dan 2 hari pada penyimpanan disuhu ruangan terdapat
pertumbuhan bakteri Escherichia  coli dan  tidak memenuhi standart APM SNI.
Namun,  susu  kedelai  memiliki  daya simpan yang rendah (Pratiwi&Suharto 2015). Berdasarkan dari hasil pengamatan  pada  uji  penegasan dengan  menggunakan  uji  MPN  dari waktu penyimpanan selama ½ hari, 1 hari, 1 ½ hari dan 2 hari menunjukkan tingkat kecemaran bakteri  Escherichia  coli  semangkin meningkat  dari penyimpanan ½ hari,
1 hari, 1 ½ hari dan 2 hari dari hasil nilai  MPN  mulai  dari  <3/ml  sampai dengan  nilai  MPN  28/ml  pada penyimpanan disuhu kulkas dan suhu ruangan.  Uji  penegasan  dengan media BGLB dapat digunakan untuk pemeriksaan  MPN  Coliform,  adalah pemeriksaan  yang  digunakan  untuk mengetahui perkiraan yang digunakan untuk mengetahui perkiraan  jumlah  bakteri.  Adapun komposisi media BGLB yang mengandung  laktosa  dan  garam empedu  dan  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  gram  positif (Supomo & Amin 2016).
Uji  bakteri Escherichia  coli pada  susu  kedelai  menggunakan  uji pelengkap yaitu dengan menggunakan  media  EMBA  (Eosin Metilen  Blue  Agar)  media  tersebut untuk  mempertegas  adanya  bakteri Escherichia coli pada masing-masing sampel  positif  pada  uji  penegasan dengan media BGLB bakteri
Coliform  diambil  menggunakan  ose dan  diinokulasi  pada  media  EMBA dan diinkubasi selama 24 jam dengan suhu  37°C.  serta  koloni  membentuk hijau  metalik  yang  tumbuh  pada media  EMBA  menunjukkan  adanya bakteri Escherichia coli.
KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian identifikasi  bakteri  Coliform  pada susu  kedelai  yang  disimpan  pada suhu  ruang  dan  suhu  kulkas  pada penyimpanan ½ hari, 1 hari, 1 ½ hari dan  2  hari  dengan  metode  MPN terdapat pengaruh penyimpanan. Pada penyimpanan ½ dan 1 hari pada penyimpanan disuhu kulkas tidak ada pengaruh  dan  layak  konsumsi  serta memenuhi  syarat  mutu,  begitu  juga pada  penyimpanan  disuhu  ruangan pada  waktu  penyimpanan  ½  hari tidak  terdapat  bakteri  dan  layak konsumsi.
Sedangkan
pada penyimpanan  1  ½  dan  2  hari  pada suhu  kulkas  sudah  ada  pertumbuhan bakteri  dan  tidak  layak  konsumsi, dan pada suhu ruangan penyimpanan 1,  1  ½  serta  2  hari  terdapat pertumbuhan bakteri dan ada pengaruh  penyimpanan  serta  sudah tidak  layak  konsumsi  dan  sudah  di atur oleh SNI 2019 yaitu <3/ml (SNI 2019).

## REFERENSI
Anggraeni,  F.F.,  &  Prihandarini,  R.
2013. Pengaruh Jenis Komoditi Kedelai (Organik dan Anorganik) Dan Suhu Penyimpanan  Terhadap  Umur Simpan  Susu  Kedelai.  Jurnal Ilmuilmu Pertanian “AGRIKA”, Vol. 7, No.2.
Hainil,  S.,  Elfasyari,  T.Y.,  & Sulistya, R.I. 2021. Identifikasi Bakteri  Escherichia  coli  Susu Kedelai  Murni  di  Pasar  Jodoh Kota  Batam.  Jurnal  Surya Medika, Vol. 7, No.1.
Harti,  A.S.,  2015.  Mikrobiologi Kesehatan : Peran Mikrobiologi  dalam  Bidang
Kesehatan. Yogyakarta : Andi Offset. Jiwintarum, Y., Agrijanti, & Septiana,  B.  L.  2017. Most Probable Number (Mpn) Coliform Dengan Variasi Volume  Media  Lactose  Broth Single  Strength  (Lbss)  Dan Lactose Broth Double Strength (LBDS). Jurnal Kesehatan Prima, Vol. 11, No.1, Hal : 11- 17 Molita,  A.  D.,  Ramadhian,  R.,  & Lisiswanti, R. 2019. Uji Kualitas Mikrobiologi  Pada Minuman Susu Kedelai Bermerek dan Tidak Bermerek di Kota  Bandar Lampung. Jurnal Medula, Vol. 9, No.1. Pratiwi,  A.D.  &  Suharto,  I.  2015. Pengaruh Temperatur dan Tebal Lapisan  Susu  Kedelai Pada  Tray  Dalam  Pengeringan Busa Terhadap Kualitas Susu Kedelai Bubuk. Prosiding Seminar Nasional Teknik Kimia “Kejuangan”. Pratiwi, R,H. 2013. Distribusi bakteri Coliform di  SITU  cilodong Depok jawa Barat.  Faktor Exacta, Vol.6, No.4, Hal : 290- 297 Rahayu,  W.P.,  Nurjanah,  S.,  & Komalasari, E. 2018. Escherichia coli : Patogenitas, Analisis  dan  Kajian  Risiko. Bogor : IPB Press Ruhi,  S.,  Nurlila,  R.U.,  Kartina,  I. 2020. Pengaruh Lama Penyimpanan  Susu  Kedelai Pada  Suhu  Kulkas  2-8ºC Terhadap  Bakteri  Coliform
Metode MPN (Most Probable
Number).  Jurnal  MediLab Mandala  Waluya  Kendari,
Vol.4, No.2.
Safrida, Y.D., Raihanaton, R., Ananda, A. 2019. Uji Cemaran Mikroba  Dalam  Susu  Kedelai Tanpa  Merek  Di  Kecamatan Jaya  Baru  Kota  Banda  Aceh Secara Total Plate Count (TPC). Jurnal Serambi Engineering Vol.4, No.1. SNI  7388.2019.  Batas  maksimum cemaran mikroba dalam pangan Badan  standardisasi nasional Indonesia. Sunarti,  R.N.  2015.  Uji  Kualitas  Air Sumur  Dengan  Menggunakan Metode  MPN ( Most Probable Numbers) . Bioilmi Vol.1, No.1. Supomo, Kusunawati, E., d & Amin, M. 2016. Uji Cemaran Coliform  Pada  Ice  Coffe Blended Dengan Menggunakan  Metode  MPN (Most Probable  Number). Jurnal  Kebidanan,  Vol.2,  No.
2, Hal : 92 – 96.
Theofanny,  M.J.,  Gunam,  I.B.W.,  & Suwariani, N.P. Angka Lempeng Total dan Kontaminan  Koliform  pada Susu  Kedelai  Bermerek  yang Beredar  di  Kota  Denpasar. Jurnal Rekayasa dan Manajemen Agroindustri, Vol. 9, No. 1, Hal : 141-148 Widiyanti, R. 2004. Analisis kualitatif  bakteri  coliform pada  depot  air  minum  isi ulang  di  singaraja  bali,  jurnal ekologi  Kesehatan  vol  3,  No 1 april 2004