Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 59-70
Profil Darah Ikan Kakap Putih Lates calacalifer Yang Diberi Pakan Mengandung Gracilaria sp.

## Isy Aulia Hanum Sahfitri, Rika Wulandari, Aminatul Zahra
Jurusan Budidaya Perairan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Maritim Raja Ali Haji
INFO NASKAH ABSTRAK
Kata Kunci:
Kakap Putih, Gracilaria sp., Hematokrit, Limfosit, Monosit Neutrofil Penelitian  mengenai  Profil  Darah  Ikan  Kakap  Putih  yang  Diberi  Pakan Mengandung Gracillaria sp.  dilakukan  untuk  mengkaji  bahan  yang  mempunyai kemampuan  menstimulasi  hematokrit  dan  diferensial  leukosit  dengan  adanya kandungan polisakarida sulfat.  Penelitian ini dilaksanakan pada bulan November 2020.  Pemeliharaan  ikan  uji  dilakukan  di  keramba  jaring  apung  Desa  Madong, Kelurahan  Kampung  Bugis,  dan  uji  darah  dilakukan  di  Laboratorium  Marine Biotechnology, Fakultas Ilmu  Kelautan dan Perikanan, Universitas Maritim Raja
Ali  Haji.  Penelitian  ini  dilakukan  menggunakan  metode  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  dengan  4  perlakuan  dan  3  ulangan,  dengan  perlakuan  K (Pemberian  pakan  tanpa  penambahan  Gracilaria  sp.),  A  (Pakan  dengan  tepung
Gracilari a  sp.  15  gram/kg  pakan),  B  (Pakan  dengan  tepung Gracilaria sp.  20 gram/kg pakan), dan C (Pakan dengan tepung Gracilaria sp. 25 gram/kg pakan). Ikan kakap putih diberi pakan perlakuan secara at satiation sebanyak 2 kali sehari selama  14  hari.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  tepung
Gracilaria sp.  pada  pakan  memberikan  pengaruh  signifikan  terhadap  hematokrit dan  diferensial  leukosit  jenis  limfosit  pada  ikan  kakap  putih,  tetapi  tidak memberikan pengaruh signifikan pada monosit dan neutrofil ikan kakap putih.
Gedung  FIKP  Lt.  II  Jl.  Politeknik  Senggarang,  29115,  Tanjungpinang,  Telp: (0771-8041766, Fax. 0771 - 7004642. Email: Isyyauliahanumsahfitrii@gmail.com
Blood Profile of White Snapper Lates calcalifer Feed Containing Gracilaria sp.

## Isy Aulia Hanum Sahfitri, Rika Wulandari, Aminatul Zahra
Departement of Aquaculture, Faculty of Marine Science and Fisheries, Raja Ali Haji Maritime University
ARTICLE INFO ABSTRACT
Keywords :
White snapper, Gracilaria sp.,
Hematocrit, Lymphocyte, Monocytes, Neutrophils Research on the Blood Profile of White Snapper Lates calcalifer Feed Containing
Gracilaria sp..  conducted  to  test  materials  that  have  the  ability  to  stimulate hematocrit  and  differential  leukocytes.  One  of  the  ingredients  contained  in Gracilaria sp.  is  the  presence  of  sulfate  polysaccharides.  This  research  was conducted  in  November  2020.  The  maintenance  of  test  fish  was  carried  out  in floating net cages in Madong Village, Bugis Village, and blood tests were carried out  at  theLaboratory Marine  Biotechnology, Faculty  of  Marine  Science  and Fisheries, Raja Ali Haji Maritime University.  This research was conducted using a  completely  randomized  design  (CRD)  method  with  4  treatments  and  3 replications, with treatment K (Feeding without the addition of Gracilaria sp.), A (Feed with Gracilaria sp. 15 gram / kg of feed), B (Feed with flour of Gracilaria sp. 20 grams / kg of feed), and C (feed with Gracilaria sp. 25 grams / kg of feed). White  snapper  was  fed  at  satiation  treatment  2  times  a  day  for  14  days.  The results showed that Gracilaria sp. In feed, it has a significant effect on hematocrit and  differential  of  lymphocyte  type  leukocytes  in  white  snapper,  but  does  not have a significant effect on monocytes and neutrophils of white snapper.
Gedung  FIKP  Lt.  II  Jl.  Politeknik  Senggarang,  29115,  Tanjungpinang,  Telp  : (0771-8041766, Fax. 0771 - 7004642. Email: Isyyauliahanumsahfitrii @gmail.com

## PENDAHULUAN
Ikan Kakap Putih Lates calcarifer atau lebih dikenal dengan nama seabass dan    baramundi  merupakan  salah  satu  komoditas  budidaya  laut  unggulan,  yang mempunyai  nilai  ekonomis  dan  nilai  gizi  yang  tinggi  sebagai  ikan  konsumsi. Selain  itu  ikan  kakap  putih  juga  memiliki  pertumbuhan  relatif  cepat.  Menurut Rayes et.al (2013)  pertumbuhan  ikan  kakap  putih  dapat  mencapai  laju pertumbuhan harian 0,5%/hari.
Pengembangan Budidaya ikan kakap putih sudah banyak dilakukan namun yang  menjadi  kendala  dalam  budidayanya  adalah  masalah  kesehatan  ikan  yang menyebabkan sistem kekebalan tubuh ikan menurun. Upaya yang dapat dilakukan untuk meningkatkan kesehatan ikan adalah pemberian  suplemen dari bahan alami yang  ditambahkan  ke  dalam  pakan.  Penggunaan  bahan  alami  sebagai  bahan suplemen di dalam pakan memiliki beberapa keunggulan, yaitu ramah lingkungan, aman  bagi  konsumen  dan individu  ikan itu  sendiri.  Salah  satu  bahan  alami  yang dapat  digunakan  yaitu  rumput  laut Gracilaria sp.  Bahan  rumput  laut  yang mempunyai kemampuan menstimulasi adalah adanya polisakarida bersulfat. Hasil uji fitokimia ekstrak rumput laut G. verrucosa menunjukkan kandungan senyawa alkaloid,  flavonoid  dan  steroid  (Siregar et  al .  2012).    Gambaran  sel  darah merupakan  salah  satu  faktor  yang  dapat  digunakan  untuk  menentukan  kondisi kesehatan  ikan.  Gambaran  darah  juga  mampu  menyajikan  status  fisiologis  ikan, baik  dipengaruhi  oleh  proses  didalam  tubuh  ikan  itu  sendiri  maupun  dari linkungan  hidup  ikan.  Pengamatan  gambaran  darah  yang  bisa  diamati  meliputi, persentase  deferensial  leukosit  dan  persentase    hematokrit.  Menurut  Lusiastuti (2013), pengamatan deferensial leukosit untuk mengetahui perubahan jumlah total leukosit sehingga dapat mengetahui respon kekebalan tubuh ikan.
Beberapa penelitian telah dilakukan untuk mengamati dampak penggunaan rumput laut Gracilaria sp. dalam peningkatan sistem kekebalan tubuh organisme akuatik.  Seperti  penelitian  Satyantini  (2016),  dengan  penambahan  ekstrak Gracilaria verrucossa dengan dosis 3% dapat meningkatkan total hemosit udang galah sebesar (38,49 x 106 sel/ml). Puspari (2010), ekstrak Gracilaria verrucosa dosis 1.0 g/k pakan  meningkatkan kadar hematokrit ikan lele sebesar 33,75%, dan Amanda  (2016),  yang  mendapatkan  pemberian  bubuk  rumput  laut  merah ( Gracilaria sp.)  125  mg/l  dengan  cara  perendaman  efektif  meningkatkan  total leukosit ikan lele dumbo sebesar 61.125 sel/ml. Namun belum ada penelitian yang dilakukan untuk mengamati dampak penggunaan rumput laut Gracilaria sp. pada ikan  kakap  putih  melalui  pengamatan  parameter  sistem  kekebalan  tubuh,  yang meliputi  analisis  persentase  neutrofil,  monosit,  limfosit,  dan  hematokrit  Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian tentang penambahan rumput laut Gracilaria sp.  sebagai  bahan  alami  ke  dalam  pakan  untuk  meningkatkan  sistem  kekebalan tubuh ikan kakap putih.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan November 2020. Pemeliharaan ikan uji  dilakukan  di  Desa  Madong,  Kelurahan  Kampung  Bugis,  Tanjung  Pinang, Provinsi  Kepulauan  Riau.  dan  pengamatan  uji  darah  dilakukan  di  Laboratorium Marine  Biotechnology Fakultas  Ilmu  Kelautan  dan  Perikanan,  Universitas Maritim Raja Ali Haji. Bahan –yang digunakan dalam penelitian ini yaitu sampel
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 59-70
rumput  laut Gracilaria sp.,  ikan  kakap  putih  yang  berasal  dari  Desa  Madong.
Akuades,  methanol,  EDTA,  Giemsa,  dan  Pellet  Megami  Gr-3.  Penelitian  ini menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL),  dengan  menggunakan  4 perlakuan dan 3 ulangan. Perlakuan yang digunakan dalam penelitian ini sebagai berikut:
Perlakuan Kontrol : Pemberian pakan tanpa penambahan gracilaria sp. Perlakuan A : Pakan dengan tepung Gracilaria sp. 15 gram/kg pakan Perlakuan B : Pakan dengan tepung Gracilaria sp. 20 gram/kg pakan Perlakuan C : Pakan dengan tepung Gracilaria sp. 25 gram/kg pakan

## Prosedur Kerja
1. Pengambilan Sampel
Sampel rumput laut gracilaria sp. diperoleh dari Desa Madong, Kelurahan Kampung  Bugis,  Kota  Tanjung  Pinang,  Provinsi  Kepulauan  Riau.    Pengambilan sampel  dilakukan  dengan  cara mengumpulkan Gracilaria sp.  yang  melekat  pada tepi  keramba  jaring  apung.  Kemudian  sampel  rumput  laut Gracilaria sp.  dibilas menggunakan  air  tawar  hingga  kotoran  yang  menempel  hilang  dan  rumput  laut Gracilaria sp. dimasukkan ke dalam kantong sampel. Pengeringan Gracilaria sp. dilakukan  dalam  udara  terbuka  (kering  udara). Gracilaria sp.  yang  telah  kering dihaluskan  menggunakan  blender  lalu  diayak  dengan  saringan  sampai  mendapat serbuk halus.
2. Persiapan Wadah dan Ikan Uji
Wadah  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  waring  dengan  ukuran (0.5mx0.5mx1m)  dengan  jumlah  12  waring.  sebelum  dilakukan  pemasangan waring  dilakukan  persiapan  keramba  dengan  membagi  1  petak  keramba  menjadi 12  lubang  menggunakan  pembatas  berupa  kayu.  Ikan  yang  digunakan  dalam penelitian ini yaitu ikan kakap putih sebanyak 120 ekor. Panjang 15.40±0.55 cm cm  dengan  kepadatan  ikan  10  ekor/waring.    ikan  terlebih  dahulu  diadaptasikan hingga  nafsu  makan  ikan  kembali  normal.  Selama  proses  adaptasi  ikan  diberi pakan komersil dengan frekuensi pemberian pakan sebanyak 2 kali sehari.
3. Persiapan Pakan Uji
Pembuatan campuran pakan dengan tepung Gracilaria sp. diawali dengan penimbangan Gracilaria sp.  (bobot  kering)  sesuai  dengan  dosis  yang  telah ditentukan.  Proses  pembuatan  pakan  uji  dilakukan  dengan  metode  repelleting. Pembuatan  pakan  perlakukan  dilakukan  dengan  menggunakan  pelet  komersil yang  dihaluskan  menggunakan  blender  sampai  menjadi  tepung.  Selanjutnya tepung  rumput  laut Gracilaria sp.  dicampur  dengan  tepung  pelet  sesuai  dengan perlakuan  dalam  penelitian.  kemudian  diaduk  sampai  merata.  ditambahkan  air sebanyak  80  ml/100  g  dari  jumlah  campuran  pakan  hingga  menjadi  kalis  dan dapat dicetak (Oktaviana et al . 2015)
4. Pemeliharaan Hewan Uji
Sebelum  dilakukan  perlakuan  ikan  diadaptasikan  terlebih  dahulu  untuk menyesuaikan kondisi lingkungan diwadah penelitian dan diberikan pakan 2 kali sehari  secara  at  satiation.  Sebelum  diberikan  pakan  dengan  penambahan  tepung Gracilaria  sp.  ikan  dipuasakan  selama  1  hari  dengan  tujuan  pengosongan lambung.  Ikan  kakap  putih  diberi  pakan  berupa  pellet  megami  yang  telah dicampur  tepung Gracilaria sp.  sesuai  dosis  yang  telah  ditentukan  sesuai  dosis
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 59-70
yang telah ditentukan dengan metode Ad satiation dan frekuensi pemberian pakan dua kali sehari pagi 09.00 WIB dan sore 16.00 WIB.  Ikan kakap putih diberikan pakan perlakuan selama 14 hari.
5. Pengukuran Kualitas Darah
Waktu  pengambilan  sampel  darah  dilakukan  saat  perlakuan  H-0  dan    H- 15.  Pengambilan sampel darah diambil dengan menggunakan syaringe 5 mL yang sebelumnya telah dibilas dengan antikoagulan EDTA. Sampel darah diambil pada bagian vena caudal.
a. Total Diferensial Leukosit
Pembuatan  preparat  ulas  darah  dilakukan  dengan  menempatkan  setetes darah pada gelas obyek, dibuat preparat ulas dan dibiarkan kering udara kemudian diwarnai. Terlebih dahulu dilakukan fiksasi dengan merendam preparat yang telah kering  ke  dalam  metanol  selama  5  menit,  kemudian  dikeringkan  dalam  udara, setelah  itu  dimasukkan  ke  dalam  larutan  Giemsa  10%  selama  30  menit.  Setelah diwarnai,  preparat  dikeringkan  dan  siap  untuk  diamati  di  bawah  mikroskop dengan perbesaran 1000 kali. Pengamatan dan penghitungan masing-masing jenis sel  dilakukan  hingga  jumlah  semua  jenis  sel  mencapai  100,  dan  hasilnya dinyatakan dalam % (Anderson dan Siwicki 1993).
b. Nilai Hematokrit
Pengukuran kadar hematokrit dilakukan dengan cara darah dihisap dengan menggunakan  tabung  hematokrit  sampai  volume  ¾  bagian.  Selanjutnya,  darah disentrifuse  selama  15  menit  dengan  kecepatan  3500  rpm.  Lalu  dilakukan pengukuran volume padatan dan volume total darah dengan menggunakan jangka sorong (Anderson dan Siwicki 1993).

## 6.  Parameter Penelitian

## a.  Nilai Hematokrit
Perhitungan  kadar  hematokrit  dilakukan  menggunakan  rumus  dari Anderson dan Siwicki (1993) sebagai berikut:

## Kadar Hematokrit (%)

## Keterangan:
T = Tinggi tabung yang berisi sel darah merah
t = Tinggi tabung yang berisi keseluruhan darah

## b. Diferensial Leukosit
Perhitungan  jumlah  absolut  dari  masing-  masing  jenis  leukosit  dihitung dengan rumus sebagai berikut:
Jumlah jenis leukosit (sel/mm 3 ) = x 100

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  diolah  dengan  mengguanakan  perangkat  lunak Microrosoft Excel dan data di analisis dengan menggunakan analisis sidik ragam (ANOVA). Pada selang kepercayaan 95%. Perbedaan nyata selanjutnya dianalisis uji  lanjut  Tukey.  Analisis  statistik  dilakukan  dengan  perangkat  lunak  statistik SPSS 22. Data kualitas air dianalisis secara deskriptif.

## HASIL

## 1. Nilai Hematokrit
Hasil  perhitungan  nilai  hematokrit  ikan  kakap  putih  yang  diberi  pakan mengandung Gracilaria sp. dapat dilihat pada gambar 1 berikut:
Gambar  1.  Persentase  hematokrit  ikan  kakap  putih.  K(Kontrol),  A  (tepung Gracilaria sp.  15  gram),  B  (tepung Gracilaria sp.  20  gram),  C (tepung Gracilaria sp. 25 gram). Angka berbeda diatas setiap bar menunjukkan  berbeda  signifikan  antar  pra  perlakuan  pakan  dan huruf  berbeda  diatas  setiap  bar  menunjukkan  berbeda  signifikan antar pasca perlakua pakan.
Kadar hematokrit ikan kakap putih pra perlakuan pakan pada perlakuan C menunjukkan nilai kadar hematokrit tertinggi yaitu sebesar (41.80±0.55%), diikuti dengan  perlakuan  K  (41.75±0.71%),  Perlakuan  A  (41.57%±0.501%)  dan Perlakuan  B  (41.51±0.05%).  Setelah  dianalisis  One  –  Way  ANOVA  didapatkan bahwa  kadar  hematokrit  pra  perlakuan  pakan  tidak  berbeda  signifikan  (P>0.05). Kadar  hematokrit  pasca  perlakuan  pakan  terjadi  peningkatan  antar  perlakuan. Peningkatan  tertinggi  terjadi  pada  perlakuan  B  yaitu  sebesar  (45.84±0.38%), diikuti  dengan  perlakuan  C  (45.09±0.23%),  perlakuan  A  (44.55±0.75%)  dan perlakuan  perlakuan  K  (43.14±0.54%).  Setelah  dianalisis  One  –  Way  ANOVA didapatkan  bahwa  kadar  hematokrit  pasca  perlakuan  pakan  berbeda  signifikan (P<0.05).  Perlakuan  Kontrol  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  A,  dan  sangat berbeda nyata dengan perlakuan B, dan C dan perlakuan A berbeda nyata dengan perlakuan B.
2. Diferensial Leukosit
a. Limfosit
Hasil  pengamatan  persentase  limfosit  pada  ikan  kakap  putih  dengan pemberian  pakan  mengandung G racilaria sp.  pada  masing  –  masing  perlakuan tersaji pada gambar 2 berikut ini:
Gambar  2.  Persentase  Limfosit  ikan  kakap  putih.  K  (Kontrol),  A  (tepung Gracilaria sp.  15  gram),  B  (tepung Gracilaria sp.  20  gram),  C (tepung Gracilaria sp.  25  gram).  Angka  berbeda  diatas  setiap  bar menunjukkan berbeda signifikan antar pra perlakuan pakan dan huruf berbeda  diatas  setiap  bar  menunjukkan  berbeda  signifikan  antar pasca perlakuan pakan.
Hasil pengamatan ulasan darah bentuk sel limfosit pada ikan kakap putih dapat dilihat pada gambar 3 berikut ini:
Gambar 3. Hasil pengamatan ulasan darah bentuk sel Limfosit
Gambar  2  Menunjukkan  persentase  limfosit  ikan  kakap  putih  pra perlakuan pakan. Persentase limfosit  pada perlakuan K, B, dan C  menunjukkan nilai  yang  sama  yaitu  sebesar  (70.33±0.58%)  dan  nilai  rata  –  rata  terendah terdapat  pada  perlakuan  A  (69.67±0.58%).  Setelah  di  analisis  One  –  Way ANOVA didapatkan bahwa persentase limfosit pra perlakuan pakan tidak berbeda signifikan  (P>0.05).  Pasca  perlakuan  pakan  persentase  limfosit  ikan  kakap  putih mengalami peningkatan. Nilai rata – rata yang tertinggi terdapat pada perlakuan B
(77.00±1.00%),  diikuti  dengan  perlakuan  C  (76.00±1.00%),  Perlakuan  A (75.67±0.58%)  dan  perlakuan  K  (74.33±0.58%).  Setelah  di  analisis  One  –  Way ANOVA  didapatkan  bahwa  persentase  limfosit  pasca  perlakuan  pakan  berbeda signifikan  (P<0.05).  Perlakuan  kontrol  berbeda  signifikan  dengan  perlakuan  B tetapi tidak berbeda signifikan pada perlakuan A dan C.
b. Neutrofil
Hasil pengamatan persentase neutrofil ikan kakap putih dengan pemberian pakan  mengandung  Gracilaria  sp.  pada  masing  –  masing  perlakuan  tersaji  pada gambar 4 berikut ini:
Gambar  4.  Persentase  Neutrofil  ikan  kakap  putih.  K(Kontrol),  A  (tepung Gracilaria sp.  15  gram),  B  (tepung Gracilaria sp.  20  gram),  C (tepung Gracilaria sp.  25  gram)  Angka  berbeda  diatas  setiap  bar menunjukkan berbeda signifikan antar pra perlakuan pakan dan huruf berbeda  diatas  setiap  bar  menunjukkan  berbeda  signifikan  antar pasca perlakuan pakan.
Hasil pengamatan ulasan darah bentuk sel neutrofil pada ikan kakap putih dapat dilihat pada gambar 5 berikut ini:
Gambar 5. Hasil pengamatan ulasan darah bentuk sel neutrofil
Persentase  neutrofil  pada  ikan  kakap  putih  pra  perlakuan  pakan menunjukkan nilai rata – rata yang tidak jauh berbeda antar perlakuan. Persentase
neutrofil  pada  perlakuan  K  dan  B  menunjukkan  nilai  yang  sama  (9.33±0.58%), diikuti dengan perlakuan A (9.00±0.58%) dan perlakuan C (8.33±1.53%). Setelah di  analisis  One  –  Way  ANOVA  didapatkan  bahwa  persentase  neutrofil  pra perlakuan  pakan  tidak  berbeda  signifikan  (P>0.05).  Persentase  neutrofil  ikan kakap  putih  pasca  perlakuan  pakan  diperoleh  nilai  rata  –  rata  tertinggi  pada perlakuan  B  yaitu  (10.33±0.58%)  diikuti  dengan  perlakuan  K  (9.67±0.58%) perlakuan A (9.33±0.58%) dan perlakuan C (9.00±1.41%). Setelah di analisis One –  Way  ANOVA  didapatkan  bahwa  persentase  neutrofil  pasca  perlakuan  pakan tidak berbeda signifikan (P>0.05).
c. Monosit
Hasil  pengamatan  persentase  limfosit  pada  ikan  kakap  putih  dengan pemberian  pakan  mengandung  Gracilaria  sp.  pada  masing  –  masing  perlakuan tersaji pada gambar 6 berikut ini:
Gambar  6.  Persentase  Monosit  ikan  kakap  putih.  K(Kontrol),  A  (tepung Gracilaria sp.  15  gram),  B  (tepung Gracilaria sp.  20  gram),  C (tepung Gracilaria sp.  25  gram).  Angka  berbeda  diatas  setiap  bar menunjukkan  berbeda  signifikan  antar  pra  perlakuan  pakan  dan huruf  berbeda  diatas  setiap  bar  menunjukkan  berbeda  signifikan antar pasca perlakuan pakan.
Hasil pengamatan ulasan darah bentuk sel monosit pada ikan kakap putih dapat dilihat pada gambar 7 berikut ini:
Gambar 7. Hasil pengamatan ulasan darah bentuk sel monosit
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 59-70
Persentase  monosit  pada  ikan  kakap  putih  pra  perlakuan  pakan menunjukkan nilai rata – rata yang tidak jauh berbeda antar perlakuan. Persentase monosit  nilai  yang  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  B  dengan  nilai  rata  –  rata (7.33±0.58%),  pada  perlakuan  K  dan  A  menghasilkan  nilai  yang  sama  yaitu (6.67±0.58%)  dan  perlakuan  C  (6.33±1.15%).  Setelah  di  analisis  One  –  Way ANOVA didapatkan bahwa persentase monosit pra perlakuan pakan tidak berbeda signifikan  (P>0.05).  Pasca  perlakuan  pakan  persentase  monosit  mengalami peningkatan  dengan  nilai  rata  –  rata  yang  tidak  jauh  berbeda  setiap  perlakuan. Pada  perlakuan  B  mengalami  peningkatan  dengan  nilai  rata  –  rata  sebesar (7.67±0.58%), perlakuan A (7.33±0.58%), Perlakuan C (7.00±1.00) dan perlakuan K tidak mengalami peningkatan dengan nilai rata – rata (6.67±1.15%). Setelah di analisis  One  –  Way  ANOVA  didapatkan  bahwa  persentase  monosit  pasca perlakuan pakan tidak berbeda signifikan (P>0.05).

## PEMBAHASAN
Hematokrit merupakan persentase jumlah sel darah merah yang ada dalam satuan volume darah utuh. Hematokrit menunjukkan kemampuan organisme yang terkait  dengan  fungsi  sel  darah  merah  dalam  mengangkut  O2  untuk  proses metabolisme serta mengikat dan mengangkut CO2  untuk dibuang melalui paru – paru (Muntasiroh et al . 2019). Hasil dari perhitungan nilai rata  – rata hematokrit ikan  kakap  putih  setelah  diberikan  pakan  mengandung Gracilaria sp.  Pada perlakuan  A,  B  dan  C  terjadi  peningkatan,  dari  perbandingan  kontrol  nilai tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  B.  Dari  awal  sampling  diperoleh  nilai (41.51±0.05%)  menjadi  (45.84±0.38%)  pada  akhir  sampling  (H14).  Pemberian pakan yang mengandung Gracilaria sp. dapat meningkatkan status kesehatan ikan kakap putih dikarenakan persentase hematokrit pasca perlakuan pakan  meningkat dibandingkan  dengan  hematokrit  ikan  tanpa  penambahan Gracilaria sp.  hal  ini diduga  karena Gracilaria sp.  mengandung  bahan  yang  berfungsi  sebagai immunostimulan  yang  dapat  meningkatkan  sistem  pertahanan  non  spesifik  ikan. Menurut Astuti et al . (2017), bahwa meningkatnya persentase hematokrit, diduga karena  pengaruh  dari  pemakaian  imunostimulan.  Imunostimulan  berpengaruh terhadap nilai hematokrit walaupun dengan presentase yang kecil.
Pengamatan  diferensial  leukosit  bertujuan  untuk  mengetahui  perbedaan persentase  komponen  sel  leukosit.  Komponen  sel  leukosit  yang  diamati  pada penelitian ini meliputi analisis persentase limfosit, neutrofil dan monosit. Limfosit berperan  untuk  merespon  antigen  (benda-benda  asing)  dengan  membentuk antibody  dan  pengembangan  imunitas  (Bikrisirna  2013).  Hasil  dari  perhitungan pesentase limfosit ikan kakap putih yang diberi pakan mengandung Gracilaria sp. menunjukkan  perlakuan  kontrol  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  B  dengan  nilai rata – rata sebesar 77.00%. Nilai persentase limfosit yang dihasilkan menunjukkan sistem  kekebalan  tubuh  ikan  masih  dalam  kisaran  normal.  Sesuai  dengan pernyataan  Hidayat et  al .  (2014),  Persentase  limfosit  Ikan  kakap  putih  yang distimulasi  dengan  jintan  hitam  dan  efektifitasnya  terhadap  bakteri Vibrio algynolyticus pada  setiap  perlakuan  yaitu  berkisar  antara  73–77%.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  penambahan  rumput  laut Gracilaria sp.  pada  pakan memberikan  kemampuan  homeostasi  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  tanpa penambahan  rumput  laut Gracilaria sp.  Peningkatan  persentase  limfosit  terjadi
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 59-70
diduga  karena  kandungan  bioaktif  yang  ada  didalam  rumput  laut Gracilaria sp. Sesuai  dengan  pernyataan  Amanda  (2016),  Rumput  laut  merah  ( Gracilaria sp.) mengandung  polisakarida  yang  dapat  menunjang  peningkatan  sistem  imun. Menurut  Rijoly  (2014),  Kandungan  sulfat  dari  ekstrak  G. verrucosa berkisar antara 3.25 – 4.79%.
Neutrofil  merupakan  jenis  sel  darah  putih  yang  juga  berperan  dalam mekanisme  pertahanan  tubuh.  hasil  pengamatan  rata  –  rata  persentase  neutrofil ikan  kakap  putih  setelah  diberikan  pakan  mengandung Gracilaria sp. menunjukkan  pengaruh  yang  tidak  berbeda  nyata  antar  perlakuan  yang  artinya tidak  ada  perbedaan  antara  pra  perlakuan  pakan  dan  pasca  perlakuan  pakan dengan penambahan tepung Gracilaria sp. Menurut Utami (2013), neutrofil akan mengalami  peningkatan  jika  disebabkan  mekanisme  kekebalan  tubuh  yang bekerja  sebagai  respon  adanya  infeksi  didalam  tubuh.  Hal  ini  berkaitan  dengan fungsi utama neutrofil yaitu penghancuran bahan asing melalui proses fagositosis. Rata  –  rata  persentase  neutrofil  pasca  perlakuan  pakan  yang  menunjukkan  nilai tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  B  yaitu  sebesar  10.33%.  Berdasarkan  pendapat Rustikawati  (2012),  jumlah  neutrofil  ikan  normal  berkisar  20-25%.  Persentase neutrofil  yang  rendah  menunjukkan  tidak  adanya  serangan  mikroorganisme sehingga  neutrofil  belum  banyak  di  produksi  oleh  tubuh  ikan.  Mahasri et  al .
(2011), melaporkan bahwa berdasarkan fungsinya neutrofil tidak terlalu berperan dalam  proses  pertahanan  tubuh  terhadap  lingkungan  sehingga  tubuh  ikan  tidak melakukan  produksi  sel  neutrofil  dan  persentasinya  dalam  darah  menjadi berkurang.  Pada  penelitian  ini  persentase  nilai  rata-rata  neutrofil  yang  rendah diimbangi  dengan  peningkatan  persentase  limfosit.  Sesuai  dengan  pernyataan Harpeni et  al .  (2015),  Penurunan  persentase  neutrofil  diimbangi  dengan peningkatan persentase limfosit sehingga sistem imun non spesifik terbentuk oleh limfosit.
Monosit  berperan  sebagai  makrofag  dan  banyak  dijumpai  pada  daerah peradangan  atau  infeksi.  Hasil  dari  perhitungan  persentse  monosit  ikan  kakap putih pasca perlakuan pakan didapatkan pengaruh yang tidak berbeda nyata antar perlakuan.  Hal  ini  diduga  karena  ikan  dalam  keadaan  normal  dan  belum  ada infeksi  yang  masuk  kedalam  tubuh  yang  merangsang  monosit  didalam  tubuh. Sesuai  dengan  pernyataan  Bijanti  (2010),  peningkatan  monosit  akan  terjadi selama  kebutuhan  jaringan  untuk  proses  fagositosis  dan  dapat  ditemukan  pada fase  penyembuhan  infeksi.  Robert  (2012),  Jumlah  monosit  pada  ikan  akan meningkat  dalam  waktu  yang  singkat  jika  ikan  terinfeksi.  Rata  –  rata  jumlah monosit pada penelitian ini berkisar antara 6,33  – 7,67%. Menurut sitepu (2016), nilai  monosit  ikan  dalam  kondisi  normal  adalah  7,75  –  29,20%.  Rendah  nya persenatse  monosit  yang  dihasilkan  berkaitan  dengan  fungsi  monosit  itu  sendiri sebagai  makrofag  sehingga  monosit  tidak  terlalu  banyak  dibutuhkan  untuk memfagosit,  dikarenakan  belum  ada  infeksi  yang  masuk  kedalam  tubuh  ikan. Menurut (Novita et al . 2020), persentase monosit didalam darah ikan sekitar 0.1% dari  total  populasi  leukosit  yang  bersirkulasi.  jumlah  sel  limfosit  paling  banyak, kemudian sel neutrofil dan jumlah paling sedikit adalah sel monosit.

## KESIMPULAN
Kesimpulan  penelitian  ini  adalah  ikan  kakap  putih  yang  diberi  pakan mengandung Gracilaria sp.  berpengaruh  nyata  terhadap  persentase  hematokrit dan persentase limfosit, tetapi tidak memberikan pengaruh nyata pada persentase monosit  dan  neutrofil  ikan  kakap  putih.  Hasil  persentase  hematokrit  tertinggi sebesar 45.84%  dan limfosit tertinggi sebesar  77.00% terdapat pada perlakuan B dengan dosis 20g/kg pakan.

## DAFTAR PUSTAKA
Amanda, S.,  Ayuzar, E. 2016. Efektifitas Bubuk Rumput  Laut Merah Gracillaria Sp  Sebagai  Imunostimulan  Terhadap  Infeksi  Bakteri  Streptococcus  Iniae Pada Ikan Lele Dumbo Clarias Gariepinus. Acta Aquatica, 3:2. 81-87.
Anderson,  D.P.,  Siwicki,  A.K.  1993.  Basic  Haemotology  And  Serologi  For  Fish Health  Program.  Paper  Presented.  In  Second  Symposium  On  Disease  In Asian  Aquaculture  Aquatic  Animal  Health  And  The  Eviromen  Phuket, Thailand.
Bijanti, R. 2010. Hematologi Ikan (Teknik Pengambilan Darah Dan Pemeriksaan Hematologi  Ikan).  Edisi  2.  Fakultas  Kedokteran  Hewan.  Universitas  Air Langga. Surabaya: Pt Revkapetra Media. ISBN: 978602798231-4
Harpeni,  E.,  Santoso,  L.,  Sari,  R.W.  2015.  Kajian  Ulva  Sp.  Sebagai  Suplemen Pakan  Terhadap  Perfoma  Pertumbuhan  Dan  Respon  Imun  Non-Spesifik Ikan Nila (Oreochromis Niloticus). Maspari Journal. 7(2):65-84.
Hidayat,  R.,  Harpeni,  E.,  Wardiyanto.  2014.  Profil  Hematologi  Kakap  Putih (Lates Calcallifer) Yang Distimulasi Dengan Jintan Hitam (Nigela Sativa) Dan  Efektifitasnya  Terhadap  Infeksi  Vibrio  Alginolyticus.  e-Jurnal Rekayasa dan Teknologi Budidaya Perairan. 3(1).
Lusiastuti,  M.A.,  Sumiati,  T.,  Hadie,  W.  2013.  Probiotik  Bacillus  firmus  Untuk Pengendalian  Penyakit  Aeromonas  hydrophila  Pada  Budidaya  Ikan  Lele Dumbo, Clarias gariepinus. Balai Penelitian dan Pengembangan Budidaya Air Tawar. Bogor.
Mahasri, G. P., Widyastuti,  L., Sulmatiwi. 2011. Gambaran Leukosit Darah Ikan Koi (Caprynus Carpio) Yang Terinfeksi Icht-Hypohthirius Multifillis Pada Derajat Infestasi Yang Berbeda Dengan Metode Kohabitasi. Jurnal Ilmiah Perikanan Dan Kelautan.Vol. 3 (1) : 91-96.
Muntasiroh, S., Purbomartono, C., Mulia, S.D. 2020. Kombinasi Ekstrak Rumput Laut Cokelat (Padina Sp.) Dan Vitamin C Melalui Pakan Terhadap Imun Non-Spesifik Lele Dumbo (Clarias Gariepinus). SAINTEKS. 17(1): 7-17.
Novita,  Setyowati,  N.D.,  Astriana,  H.B.  2020.  Profil  Darah  Ikan  Kakap  Putih Yang Diinfeksi Bakteri Vibrio Sp. Dengan Pemberian Lidah Buaya (Aleo Vera). Jurnal Perikanan. 10(1): 55-69
Oktaviana,  N.  H.,  Sasanti,  D.  A.,  Fitriani,  M.  2015.  Pencegahan  Infeksi Aeromonas  Hydrophyla  Pada  Ikan  Lele  Sangkuriang  Menggunakan Tepung  Buah  Mahkota  Dewa  Dalam  Pakan.  Jurnal  Akuakultur  Rawa Indonesia, 3(2) :14-24.
Puspari, N. 2010. Efektivitas Ekstrak Rumput Laut Gracilaria Verrucosa Sebagai Imunostimulan Untuk Pencegahan Infeksi Bakteri Aeromonas Hydrophila
Intek Akuakultur.  Volume 5. Nomor 2 . Tahun 2021. E-ISSN 2579-6291. Halaman 59-70
Pada  Ikan  Lele  Dumbo  Clarias  Sp.  [Skripsi].  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor.
Rayes,  R.  D.,  I.  W.  Sutresna.,  N.  Diniarti  Dan  A.  I.  Supii.  2013.  Pengaruh Perubahan  Salinitas  Terhadap  Pertumbuhan  Dan  Sintasan  Ikan  Kakap Putih (Lates Calcarifer Bloch). Jurnal Kelautan. 6(1): 47-56.
Rijoly,  A.M.S.  Pemanfaatan  Ekstrak  Rumput  Laut  (Gracilaria  Verrucosa)  Untuk Pengendalian Infeksi Aeromonas Hydrophila Pada Ikan Lele (Clarias Sp.) 2018. [Tesis]. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Roberts, R. J. 2012. Fish Pathology. Wiley-Blackwell. Iowa. Pp. 31-35.
Rustikawati,  I.  2012.  Efektivitas  Ekstrak  Sargassum  Sp.  Terhadap  Diferensial Leukosit  Ikan  Nila  Oreochromis  Niloticus  Yang  Diinfeksi  Streptococus Iniae. Jurnal Akuatika. 3(2):125-134).
Satyantini,  H.  W.,  Kurniawan,  A.,  Kusdarwati,  R.  2016.  Penambahan  Ekstrak Gracilaria Verrucosa Terhadap Peningkatan Total Hemosit, Kelangsungan Hidup Dan Respon Fisiologi Udang Galah (Macrobracahium Rosenbergii). Jurnal Akuatika Indonesia. 1(2): (120-129).
Siregar, F. Sabdono, A. Pringgenies D. 2012. Potensi Antibakteri Ekstrak Rumput Laut  Terhadap  Bakteri  Penyakit  Kulit  Pseudomonas  Aeruginosa, Staphylococcus Epidermidis, Dan Micrococcus Luteus. Journal Of Marine Research. Vol. 1(2):152-160.
Sitepu,  L.L.E.  2016.  Efek  Perendaman  Ekstrak  Spirulina  Platenis  Sebagai Imunostimulan Terhadap Jumlah Leukosit Dan Hitung Jenis Leukosit Ikan Gurame  (Osphronemus  Goramy)  Yang  Diinfeksi  Bakteri  Aeromonas Hydrophila. [Skripsi]. Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Surabaya. 79 Hlm.
Utami, T., D. Prayitno, B.,  S.  Hastuti, S. Santika, A. 2013.  Gambaran Parameter Hematologis  Pada  Ikan  Nila  Oreochromis  Niloticus  Yang  Diberi  Vaksin DNA  Streptococus  Iniea  Dengan  Dosis  Yang  Berbeda.  Journal  Of Aquaculture Management  And Technology. 2(4):7-20.