Does Expired-Larvicides Impacted to Plankton Abundance and Diversity?
Isni Uswatun Khasanah * , Endah Setyaningrum, Tugiyono, Gregorius Nugroho Susanto
Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung, Jl. Soemantri Brojonegoro, Gedung Meneng, Bandar Lampung, 35145, Lampung, Indonesia *Email: isniuswatun98@gmail.com

## ABSTRACT
The  using  of  chemical  insecticides  for  controlling Aedes  aegypti can  cause  mosquitoes resistant to insecticides. One of the natural insecticides commonly used in controlling Ae. aegypti is Bacillus thuringiensis israelensis (Bti). Bti has been proven effective as larvae of the Ae. aegypti, but its effect on non-target organisms such as plankton is not well known. The purpose of this study was to determine the effect of Bti on plankton abundance and diversity  index  as  a  non-target  organism. The  study  was  conducted  at  the  Laboratory  of Aquatic  Molecular  Biology,  Department  of  Biology,  Faculty  of  Mathematics  and  Natural Sciences,  the  University  of  Lampung  during  April  2019  to  June  2019,  a  completely randomized design (CRD) with Bti concentrations of 0 ppm, 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm  100  ppm  and  Bti  expires  20  ppm  with  4  replications.  Parameters  observed  were plankton abundance and diversity index and water quality after larvicide treatments on the 5th day. Data was Analysis of Variance (ANOVA) at α = 0.05. The results showed that Bti treatments did not have a significant effect (p> 0.05) on plankton abundance and diversity index at different concentrations, so it’s safe to use in the shrimp pond area.
Keywords : Aedes aegypti , Bacillus thuringiensis israelensis , plankton

## PENDAHULUAN
Nyamuk Aedes  aegypti dikenal  sebagai vektor  penyakit  Demam  Berdarah  Dengue (DBD).  Usaha  yang  digunakan  untuk mengendalikan vektor DBD antara lain yaitu fogging , pemberian abate, kegiatan 3M plus dan  pemeliharaan  ikan  yang  menjadi predator  alami  larva  nyamuk  (Perwitasari et al ., 2015 ).
Pengendalian menggunakan insektisida kimia  dapat  menunjukan  hasil  yang  cepat, tetapi  nyamuk  dan  larva  nyamuk  menjadi resisten  terhadap  insektisida  tersebut.  Oleh karena  itu,  perlu  dilakukan  pengendalian populasi  nyamuk  dengan  cara  yang  lebih aman  dan  tidak  mencemari  lingkungan, seperti penggunaan bakteri Bacillus thuringiensis israelensis ( Bti ) (Komariah dan Malaka, 2011).
Bti digunakan sebagai pengendali biologi
dari  nyamuk Ae.  aegypti ,  termasuk  dalam kelompok  bakteri  gram  positif  dan  saat kondisi kurang menguntungkan dapat membentuk  spora  untuk  bertahan  hidup. Saat  bakteri  ini  membentuk  kapsul,  maka terbentuk  juga  toksin  yang  akan  termakan oleh  larva  nyamuk.  Toksin Bti akan menganggu pencernaan pada larva nyamuk menyebabkan  kematian  (Poopathi  dan Abidha 2011). Konsentrasi Bti yang semakin tinggi  pada  saat  inokulasi  menyebabkan peluang kematian nyamuk yang lebih besar. Tempat berkembangbiak nyamuk berpengaruh pada dosis Bti yang diperlukan untuk membunuh larva (Darnely, 2010).
Kegiatan hatchery
udang selain menghasilkan keuntungan ekonomi, ternyata menyisakan persoalan jika kegiatan tambak  tidak  lagi  dilanjutkan.  Salah  satu dampak dari kegiatan tambak yang tidak lagi
produktif  atau  terlantar  adalah  menjadi tempat  perindukan  nyamuk.  Pada hatchery udang  terdapat    juga  beberapa  jenis makhluk  hidup  lainnya,  misalnya  plankton. Keberadaan plankton dapat dijadikan sebagai bioindikator kondisi perairan karena plankton memiliki batasan toleransi terhadap zat tertentu (Faza, 2012). Perubahan kondisi fisik dan kimia akan mempengaruhi ekosistem  perairan  dan  organisme  yang tinggal  didalamnya,  khususnya  keberadaan plankton. Perubahan ekosistem akibat dampak  dari  pemberian  insektisida  dan organisme lain yang dapat berperan sebagai agen  pengendalian  biologi  pada  larva nyamuk Ae.  aegypti harus  dikontrol  sekecil mungkin agar tidak mengganggu pertumbuhan dan  kelangsungan hidup plankton. Sejauh ini belum banyak dilakukan penelitian  tentang  pengaruh Bti terhadap organisme non target seperti plankton.

## METODE PENELITIAN

## Persiapan alat
Toples,  dan  pipet  tetes  direndam    larutan kaporit  100  ppm  dalam  air  tawar  selama  4 jam.  Selanjutnya  peralatan  dicuci  dengan sabun  dan  dibilas  menggunakan  air  tawar, kemudian  disemprot  dengan  alkohol  70%, dan  dikeringkan.  Kemudian  aerator,  selang dan  selang  penghubung  dipasang  pada masing-masing  toples  kaca  yang  sudah dicuci bersih.

## Persiapan bahan
Air  sampel  yang  akan  digunakan  diambil dari tempat perindukan nyamuk yang berada di  desa  Sukajaya,  Lampung  Selatan, menggunakan  plankton  net,  dimasukkan dalam  toples  kaca  dengan  jumlah  28 dengan  masing-masing  volume  500  ml  dan diletakkan  di  bawah  lampu  TL,  kemudian diberi  pupuk  conwy  dengan  takaran  1  ml/L untuk pemeliharaan plankton.
Pemberian Bti berbagai konsentrasi Air  sampel  yang  sudah  dipelihara,  diberi larvasida Bti dengan  merek  dagang  yaitu Bactivec yang sudah diencerkan menggunakan  air  dengan  konsentrasi  0 ppm, 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm, 100 ppm,  dan  kadaluarsa  20  ppm  pada  hari kedua  sesuai  konsentrasi  yang  tertera  di label toples yaitu:
P0  = konsentrasi larvasida Bti 0 ppm P1 = konsentrasi larvasida Bti 20 ppm P2 = konsentrasi larvasida Bti 40 ppm
P3 = konsentrasi larvasida Bti 60 ppm
P4 = konsentrasi larvasida Bti 80 ppm P5 = konsentrasi larvasida Bti 100 ppm K  = konsentrasi larvasida Bti kadaluarsa 20 ppm

## Pengamatan kualitas air
Pengamatan  kualitas  air  dilakukan  dengan mengukur  suhu  mengunakan  termometer, pH  air  dengan  menggunakan  pH  meter digital, serta salinitas menggunakan refraktometer . Pengamatan dilakukan dengan  menghitung  kemelimpahan  dan indeks  keanekaragaman  plankton  sebagai organisme  non  target  pada  pemberian larvasida Bti untuk  dilakukan  setelah pemberian Bti yang  dilakukan  pada  hari  ke- 2,  kemudian  dilakukan  pengamatan  pada hari  ke-7  pemeliharaan  plankton  (hari  ke-5 setelah perlakuan).

## Pengamatan plankton
Pengamatan sampel plankton menggunakan mikroskop  binokuler  dengan  perbesaran 10x40.  Perhitungan  plankton  menggunakan Haemocytometer dengan  cara  menyisir  5 kotak  sedang  dalam  satu  kotak  besar  di tengah,  yaitu  pojok  kanan  dan  kiri  atas, pojok  kanan  dan  kiri  bawah  dan  tengah Haemocytometer ,  kemudian menghitung plankton yang tercacah di Haemocytometer. Plankton  yang  ditemukan  dalam  5  kotak sedang  diidentifikasi  dengan  buku Easy identification of the most common freshwater algae (Vuuren, 2006), Phytoplankton Identiﬁcation Catalogue (Botes, 2001),

## Perhitungan plankton
Perhitungan  indeks  keanekaragaman  (H’) menggunakan rumus Shannon-Wiener [6]:
s
H’ = -Σ pi ln pi i=1 Keterangan:
H’  =  Indeks keanekaragaman jenis Shannon-Wiener Pi =  ni/N ni =  jumlah individu suatu jenis
N =  jumlah total individu
s =  jumlah jenis plankton dalam contoh
Perhitungan kemelimpahan
plankton dilakukan  di  bawah  mikroskop  dengan perbesaran 10 x 40 dan dihitung
menggunakan
haemocytometer . Kemelimpahan  plankton  per  liter  dihitung berdasarkan rumus:
Di = ni (Vs/Vc) (1/A)
Keterangan: Di =  Kemelimpahan jenis i (ind/L).
ni =  Jumlah individu jenis i.
Vs  =  Total volume seluruh sampel (ml). Vc  =  Volume  sampel  yang  dihitung [(jumlah kotak) (Vf)] (ml).
Vf =  Volume sampel (ml)
A =  Volume  sampel  air  yang  disaring
(L)

## Analisis data
Data  kemelimpahan  plankton  disajikan dalam  bentuk  grafik,  kemudian  dilakukan analisis dengan Analisis of Variance (ANOVA)  taraf ɑ  =  0,05.  Data  indeks keanekaragaman  plankton  disajikan  dalam bentuk  grafik,  dan  data  kualitas  lingkungan disajikan  dalam  bentuk  tabel,  kemudian dianalisis secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh Bti Terhadap  Kemelimpahan Plankton Hasil  penelitian  pengaruh Bti terhadap kemelimpahan  plankton  pada  hari  ke- 5(setelah  perlakuan)  tidak  menunjukan pengaruh  yang  nyata  (p>0,05).  Rata-rata kemelimpahan  plankton  pada  hari  ke-5 setelah  diberi  perlakuan Bti memiliki  nilai terendah berada pada perlakuan Bti 60 ppm dan tertinggi pada Bti 20 ppm (Gambar 1).
Berdasarkan Gambar
1, penelitian pengaruh Bacillus thuringiensis - israelensis ( Bti )  sebagai  larvasida  nyamuk Aedes aegypti menunjukan  bahwa  pemberian Bti dengan  konsentrasi  yang  berbeda  tidak berpengaruh  nyata  pada  kemelimpahan plankton.  Tidak  ditemukan  efek  negatif perlakuan Bti selama periode 3 tahun pada
Gambar  1.  Rata-rata  kemelimpahan  plankton hari ke-5 setelah pemberian
perlakuan Bti
zooplankton  atau  burung.  Komunitas  fauna yang  diamati  lebih  terpengaruh  pada  faktor- faktor lainnya seperti predasi, dan pengambilan  sampel  [8].  Tetapi  ditemukan efek  yang  relatif  besar  pada  serangga bentik,  paparan  larvasida  jangka  panjang dapat mempengaruhi kemelimpahan serangga.  Toksin  pada Bti tidak  menyerang plankton  (tidak  termasuk  organisme  yang memiliki usus atau sistem pencernaan yang bersifat  alkali),  tetapi  hanya  menyerang pencernaan  beberapa  jenis  dalam  ordo serangga yang spesifik.
Analisis ANOVA pada pengaruh Bti terhadap
kemelimpahan plankton menunjukan  bahwa Bti dengan  berbagai konsentrasi tidak berpengaruh nyata terhadap  kemelimpahan  plankton  (p>0,05) disajikan dalam Tabel 1.
Tabel  1.  Analisis  ANOVA  pada  kemelimpahan plankton  setelah  pemberian Bti konsentrasi berbeda
ANOVA Sum of Squares df Mean Square F Sig. H 5 Between Groups 1,120 6 ,187 ,366 ,891 Within Groups 9,186 18 ,510 Total 10,307 24
Dari  analisis  ANOVA  di  atas  menunjukan bahwa
pengaruh Bti
terhadap
kemelimpahan plankton tidak berbeda nyata secara statistik.
Pengaruh Bti Terhadap Indeks Keanekaragaman Plankton Hasil  penelitian  pengaruh Bti terhadap indeks keanekaragaman plankton, didapatkan  data  yang  menunjukan  bahwa Bti dengan  berbagai  konsentrasi  tidak berpengaruh nyata pada indeks keanekaragaman  plankton  seperti  yang terdapat pada Gambar 2.
Gambar 2. Rata-rata indeks keanekaragaman plankton hari ke-5 setelah perlakuan Bti dengan berbagai konsentrasi
Berdasarkan  gamabar  di  atas,  indeks keanekaragaman plankton setelah pemberian Bti menunjukan  nilai  kurang  dari 2,306  pada  hari  ke-5  penelitian  dan  hasil tersebut dikategorikan sebagai keanekaragaman  rendah.  Keanekaragaman plankton  yang  rendah  pada  penelitian  ini kemungkinan karena terjadi dominansi suatu jenis  plankton  tertentu  serta  rendahnya variasi  plankton  yang  ditemukan  dalam suatu perairan. Jenis plankton yang ditemukan  dalam  perlakuan  dan  ulangan tertentu  hanya  ditemukan  dalam  jumlah sedikit,  dan  terkadang  hanya  dijumpai  1 spesies  sehingga  nilai  keragamannya  0. Kenaikan atau penurunan indeks keanekaragaman  plankton  tidak  disebabkan oleh  adanya  toksik  dari Bti ,  kemungkinan terjadi  karena  teknik  pengambilan  sampel saat  di  laboratorium  dan  di  perairan  bekas tambak. Kelangkaan suatu kelompok organisme  plankton  dalam  penelitian  lebih dimungkinkan  karena  teknik  pengambilan sampel dibandingkan dengan efek
perlakuan larvasida pada saat memberantas nyamuk.

## Parameter Kualitas Air
Kualitas air sangat mempengaruhi
kehidupan plankton, sehingga perlu dilakukan  pengambilan  data  dengan  untuk mengetahui  perubahan  kualitas  air  selama pemeliharaan  plankton.  Kualitas  air  yang diukur  dalam  penelitian  pengaruh Bti pada plankton  yaitu  suhu,  salinitas  dan  pH. Terdapat perubahan salinitas pada hari ke-5 setelah  perlakuan,  salinitas  yang  diukur berkisar  0-4  ppt.  Suhu  ruangan  yang digunakan adalah 25 o C, dan suhu dalam air kultur  plankton  adalah  24 o C.    Pengukuran pH  pada  air  selama  pemeliharaan  plankton menunjukan  pH  basa  (>7).  Data  tersebut dapat dilihat pada Tabel 2:
Tabel 2. Rerata parameter kualitas air No.  Perlakuan Suhu air ( o C) pH Salinitas (ppt) 1 P0 ( Bti 0 ppm) 24 8,8 0 2 P1 ( Bti 20 ppm) 24 8,8 0 3 P2 ( Bti 40 ppm) 24 8,8 0 4 P3 (Bti 60 ppm) 24 8,8 0 5 P4 ( Bti 80 ppm) 24 8,8 0 6 P5 ( Bti 100 ppm) 24 8,8 0 7 K ( Bti kadaluarsa 20 ppm) 24 8,9 2
Suhu  air  di  pada  saat  pengambilan  sampel yaitu  30 o C,  sedangkan  suhu  ruangan  saat pemeliharaan  plankton  berkisar  antara  23- 25 o C. Suhu ruangan maupun suhu lingkungan  tersebut  masih  dalam  batas normal, karena suhu ideal untuk pertumbuhan  plankton  di  perairan  tropis adalah 21-35 o C (Wardoyo, 1983).
Kebanyakan biota aquatik memiliki sensitifitas pada perubahan pH dan umumnya  pH  6,6-8,5  adalah  kisaran  pH yang  layak  untuk  kehidupan  organisme perairan  (Welch,  1952).  Perairan  produktif adalah  perairan  dengan  pH  6,7-7,5  dan perairan yang tidak poduktif memiliki pH 5,5- 6,5 dan 7,5-8,5 (Banerjea, 1967). Pada saat
pengambilan  sampel  air,  pH  yang  terukur menggunakan  pH  meter  sebesar  7,4  yang berarti  mendekati  pH  air  netral  dan  masih termasuk  pH  yang  layak  untuk  kehidupan plankton.  Sedangkan  pH  saat  kultur  di laboratorium  berkisar  antara  8,7-8,9  yang menunjukan pH tersebut termasuk basa dan saat  pH  melewati  8,5  berarti  air  tersebut sudah berkurang kelayakannya untuk mendukung  kehidupan  serta  produktifitas plankton.
Pengambilan  sampel  air  di  wilayah  perairan bekas  tambak  menunjukan  salintas  2-3  ppt. Pada  hari  ke-5  memiliki  salinitas  0-4  ppt. Hari  ke-5  memiliki  salinitas  air  yang cenderung  seperti  air  tawar  dan    menjadi payau.  Penyebaran  salinitas  di  suatu perairan  dipengaruhi  oleh  faktor  tertentu, seperti penguapan, aliran permukaan, jumlah  air  tawar  yang  masuk  ke  perairan, kedalaman  laut,  pasang  surut,  musim  dan curah hujan (Nurhayati, 2010).

## KESIMPULAN
Kesimpulan  penelitian  ini  adalah  pemberian Bacillus thuringiensis-israelensis (Bti) sebagai  larvasida  nyamuk Aedes  aegypti dengan beberapa konsentrasi tidak berpengaruh secara nyata terhadap kemelimpahan dan indeks keanekaragaman plankton,  sehingga  aman  digunakan  untuk mengendalikan  nyamuk  vektor  DBD  pada wilayah tambak udang.

## DAFTAR PUSTAKA
Perwitasari,  D.,  D.A.  Musadad,  H.S.P. Manalu,  A.  Munif.  (2015).  Effect  of Several
Dosages of Bacillus thuringiensis  var  Israelensis  Serotype H-14  Against  Aedes  aegypti  Larvae  in West Kalimantan. Jurnal Ekologi Kesehatan, 14 (3), 229-237.
Komariah, Pratita S., dan  Malaka T. (2011).
Pengendalian
Vektor.
Jurnal
Kesehatan Bina Husada, 6(1).
Poopathi,  S.  and  Abidha,  S.  (2011). Mosquitocidal bacterial toxins ( Bacillus sphaericus and Bacillus  thuringiensis serovar  israelensis ):  Mode  ofaction, cytopathological
effects and mechanism  of  resistance. Journal  of Physiology and Pathophysiology, 1(3), 22-38.
Darnely.  (2010).  Penggunaan Bacillus thuringiensis israelensis untuk Memberantas Aedes  aegypti . Majalah Kedokteran FK UKI 2010 XXVII No.4.
Faza,  F.  (2012).  Struktur  Komunitas Plankton  di  Sungai  Prasanggrahan dari  Bagian  Hulu  (Bogor,  Jawa  Barat) hingga  Bagian  Hilir  (Kembangan  DKI Jakarta).  Jakarta:  Laporan  Penelitian Universitas Indonesia.
Wardoyo,
S.T.H. (1983). Metode Pengukuran  Kualitas  Air,  Training: Penyusunan Analisis Mengenai Dampak  Lingkungan .  Bogor:  Institut
Pertanian Bogor.
Welch,  P.S.  (1952). Limnological  Methods .
USA: Mc Grow-hill Book Company Inc.
Banerjea,  S.M.  (1967).  Water  Quality  and Soil  Condition  of  Fish  Pond  in  Some Stages  of  India  in  Relation  to  Fish Production. Indian  J.  Fish ,  14(1-2),
115-114.
Nurhayati.    (2010).    Fluktuasi  suhu  dan salinitas  di  perairan  pantai  Teluk Jakarta  pada  bulan  Februari  dan  Juni 2009. Dinamika  Ekosistem  Perairan Kepulauan  Seribu,  Teluk  Jakarta . Jakarta: Pusat Penelitian Oseanografi.
Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia.