## ISSN: 0215-7950
Alamat penulis korespondensi: Departemen Proteksi Tanaman, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Jalan Kamper, Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680 Tel: 0251-8621267, Faks: 0251-8621267, Surel: munif73@gmail.com

## Volume 17, Nomor 6, November 2021
Halaman 233–242 DOI: 10.14692/jfi.17.6. 233–242
Keefektifan Isolat Tunggal, Campuran dan Konsorsium Bakteri Endofit terhadap Fusarium solani dan Meloidogyne spp. secara in Vitro
Effectivity of Single Isolates, Mixtures, and Consortium of Endophytic Bacteria Against Fusarium solani and Meloidogyne spp. in Vitro
Resky Wulandari R. Jahuddin 1 , Abdul Munif 1 * , Bonny Poernomo Wahyu Soekarno 1 , Gusmaini 2
1 Institut Pertanian Bogor, Bogor 16680
2 Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat, 16111

## ABSTRAK
Fusarium solani dan Meloidogyne spp.  merupakan  dua  jenis  patogen  yang  berasosiasi  dengan penyakit  kuning  lada.  Pemanfaatan  bakteri  endofit  dalam  pengendalian  penyakit  kuning  lada  perlu dievaluasi. Oleh karena itu, penelitian dilakukan dengan tujuan mengevaluasi aktivitas biokontrol isolat  bakteri  endofit  yang  diaplikasikan  secara  tunggal  ( B. siamensis dan B. velezensis ), campuran ( B. subtilis dan B. wiedmannii ) dan konsorsium (PTM3) dalam menekan F. solani dan Meloidogyne spp. secara in vitro . Metode penelitian meliputi isolasi F. solani dan ekstraksi Meloidogyne spp. dari akar  tanaman  lada,  uji  patogenisitas,  uji  dual  kultur  dan  uji  mortalitas,  serta  karakterisasi  fisiologi isolat bakteri endofit. Isolat F. solani dan Meloidogyne spp. terbukti bersifat patogenik pada bibit lada dan menyebabkan munculnya gejala penyakit kuning. Empat isolat bakteri endofit yang diuji mampu menghambat pertumbuhan miselium F. solani . Penghambatan tertinggi pada medium TSA ditunjukkan oleh isolat tunggal B. siamensis ,  yaitu  sebesar  57.25%;  sedangkan  pada  medium ADK  ditunjukkan oleh isolat campuran B. subtilis dan B. wiedmannii , yaitu sebesar 56.47%. Mortalitas larva juvenil 2 Meloidogyne spp. mengalami peningkatan tertinggi pada perlakuan B. velezenziz , yaitu sebesar 75.24%.
Isolat B. siamensis dan B. velevenzis menunjukkan aktivitas protease dan selulase; sedangkan isolat campuran B. subtilis dan B. wiedmannii serta isolat konsorsium PTM3 menunjukkan aktivitas kitinase, protease dan selulase.
Kata kunci: biokontrol, dual kultur, mortalitas, penyakit kuning lada

## ABSTRACT
Fusarium solani and Meloidogyne spp. is known as pathogens associated with pepper yellow disease. The use of endophytic bacteria for controlling this disease needs to be evaluated. Therefore, this study was conducted with the aim of evaluating the biocontrol activity of endophytic bacterial isolates applied singly ( B. siamensis and B. velezensis ), mixed ( B. subtilis and B. wiedmannii ) and consortium (PTM3) in suppressing F. solani and Meloidogyne spp. in vitro . Research methods included the isolation of F. solani and extraction of Meloidogyne spp. from the roots of infected plant, pathogenicity test, dual culture and mortality test, as well as physiological assay of endophytic bacterial isolates. The isolates of F. solani and Meloidogyne spp. proven to be pathogenic in pepper seedlings and causing yellow symptoms. Four
isolates of endophytic bacteria were able to inhibit mycelium growth of F. solani . The highest inhibition on TSA medium was shown by a single isolate of B. siamensis , i.e. 57.25%; while on PDA medium was shown by mixed isolates of B. subtilis and B. wiedmannii , i.e. 56.47%. Application of B. velezenziz caused the highest mortality rate of Juvenile larval 2 Meloidogyne spp., i.e. 75.24%. Both B. siamensis and B. velevenzis isolates showed protease and cellulase activity; while mixed isolates of B. subtilis and B. wiedmannii and the PTM3 consortium isolates showed chitinase, protease and cellulase activity.
Keywords: biocontrol, dual culture, mortality, pepper yellow disease

## PENDAHULUAN
Penyakit  kuning  lada  merupakan  salah satu  penyakit  yang  menimbulkan  kerugian yang  cukup  besar  di  daerah  sentra  lada seperti Bangka Belitung dan Kalimantan Barat  (Mustika  2005).  Cendawan Fusarium solani dan nematoda Meloidogyne incognita merupakan  patogen  yang  berasosiasi  dengan penyakit  kuning  pada  tanaman  lada  di Kalimantan  Barat  (Suryanti et al. 2015). Pengelolaan  penyakit  kuning  lada  dengan aplikasi  agens  hayati  sampai  saat  ini  masih terbatas pada salah satu patogen seperti nematoda atau cendawan saja. Oleh karena itu dibutuhkan suatu alternatif pengendalian yang  efektif  dalam  menekan  interaksi  dari dua  patogen  tersebut,  misalnya  dengan penggunaan bakteri endofit.
Secara  alami  bakteri  endofit  dan  patogen berada pada niche yang sama dalam jaringan tanaman sehingga bakteri endofit sangat sesuai dijadikan  sebagai  agens  biokontrol  yang mampu melawan penyebab penyakit tanaman (Munif et al. 2012).  Beberapa bakteri endofit dapat hidup bersama dalam niche yang sama disebut sebagai konsorsium endofit (Halimah et al. 2015) dan atau merupakan gabungan lebih  dari  satu  isolat  tunggal  (Santoyo et al . 2021);  sedangkan,  isolat  campuran  bakteri endofit  merupakan  gabungan  dua  atau lebih  dari  isolat  bakteri  tunggal  yang  saling kompatibel (Hidayati et al. 2014; Stockwell et al . 2011). Asmoro  dan  Munif  (2019)  menyebutkan isolat  tunggal  APE35–( B. siamensis ),  yaitu bakteri  endofit  yang  diisolasi  dari  tanaman paku  terestrial  ( Pteris ensiformis ) mampu mengendalikan Rhizoctonia solani secara in vitro . Selain itu isolat APE35 ( B. siamensis )
dan EG113 ( B. velezensis ) yang berasal dari kelapa sawit juga efektif dalam menekan pertumbuhan Ganoderma boninese (Anggita 2019). Adapun penggunaan isolat konsorsium bakteri  endofit  seperti  PTM3  yang  diisolasi dari tanaman putri malu mampu meningkatkan mortalitas Meloidogyne spp. pada tanaman tomat (Saputra 2020). Berdasarkan hal tersebut, penggunaan berbagai  jenis  bakteri  endofit,  baik  yang bekerja secara tunggal, campuran, maupun konsorsium merupakan hal menarik dan perlu dipelajari  potensinya  dalam  mengendalikan patogen penyakit kuning lada. Oleh sebab itu, penelitian ini bertujuan mengevaluasi aktivitas biokontrol isolat tunggal, campuran dan konsorsium  bakteri  endofit  dalam  menekan pertumbuhan F. solani dan Meloidogyne spp. secara in vitro .

## BAHAN DAN METODE
Patogen  yang  digunakan  pada  penelitian ini  diisolasi  dari  sampel  tanaman  lada  yang bergejala  penyakit  kuning.  Tanaman  berasal dari areal pertanaman lada di desa Sungai Kunyit  Hulu,  Kecamatan  Sungai  Kunyit Kabupaten Mempawah, Kalimantan Barat.
Perbanyakan Bakteri Endofit Bakteri  endofit  yang  digunakan  pada penelitian ini merupakan isolat koleksi Laboratorium Nematologi, Departemen Proteksi Tanaman, Institut Pertanian Bogor. Isolat tunggal Bacillus siamensis strain TSS18 16S dan B. velevenzis strain Bac57 diperbanyak dengan metode cawan gores pada medium tryptic soy agar (TSA).  Isolat  campuran B. subtilis strain VD1 16S + B.wiedmannii strain FSL W8-0169 diperoleh dari hasil pengujian
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Jahuddin et al. kompatibilitas dengan metode goresan silang (Hidayati et al. 2014).  Perbanyakan  isolat campuran dilakukan dengan mengambil masing-masing 1 ose bakteri tunggal B . subtilis dan B. wiedmannii digabung dan digores bersama pada medium TSA. Adapun isolat konsorsium  PTM3  merupakan  kumpulan mikrob yang berada di niche yang sama dan diperoleh dari hasil isolasi pada akar tanaman putri malu (Saputra 2020). Isolat konsorsium tersebut diperbanyak pada medium cair tryptic soy broth , selanjutnya diambil sebanyak 1 ose untuk  diperbanyak  pada  medium  TSA  steril dengan metode cawan gores.
Isolasi Fusarium solani Isolat F. solani diisolasi dari akar tanaman lada  yang  memiliki  gejala  penyakit  kuning. Sampel akar dicuci dan dipotong antara bagian sakit dan sehat dengan ukuran 1 cm, kemudian disterilisasi permukaan menggunakan NaOCl 1%, alkohol 70% dan dibilas dengan akuades steril. Sampel akar tersebut ditumbuhkan pada medium agar-agar dekstrosa kentang (ADK)  dan  dinkubasi  selama  48  jam. Selanjutnya miselium cendawan yang tumbuh diidentifikasi berdasarkan karakter morfologi (Leslie dan Summerell 2006).
Ekstraksi Meloidogyne spp. Nematoda Meloidogyne spp. diekstraksi dari akar tanaman lada dengan metode pengabutan ( mist chamber ) (Luc et al . 2005). Sebanyak 10 g sampel akar lada dibersihkan dan dipotong sepanjang 1 cm, lalu diletakkan pada  saringan  yang  di  bawahnya  terdapat corong dan gelas plastik untuk menampung hasil ekstraksi. Proses pengabutan dilakukan selama  48  jam.  Air  yang  tertampung  pada gelas plastik disaring menggunakan penyaring 400  mesh.  Nematoda  yang  tersaring dimasukkan ke dalam botol koleksi untuk pengamatan  morfologi  dan  identifikasi mengacu pada Root-knot nematodes : Meloidogyne species and races (Eisenback dan Triantaphyllou 1991). Adapun  perbanyakan Meloidogyne spp. dilakukan pada bibit tanaman tomat berumur 3–4 minggu dengan cara nematoda hasil
ekstraksi diinfestasikan pada perakaran bibit tomat sehat. Pemeliharaan dilakukan hingga umur 50 hari setelah perlakuan. Akar tomat yang bergejala puru kemudian diekstraksi kembali untuk digunakan pada pengujian mortalitas.

## Uji Patogenisitas
Patogen yang diisolasi dan diekstraksi dari tanaman  lada  selanjutnya  diinokulasi  pada tanaman lada varietas Natar 1 umur 1 bulan untuk melihat sifat patogenisitasnya. Miselium cendawan F. solani umur 6 hari pada medium ADK digerus dan ditambahkan akuades sebanyak  10  mL,  kemudian  dilakukan  pe- ngenceran hingga kerapatan 10 -6 konidia mL -1 . Inokulasi F. solani dilakukan dengan me- nuangkan sebanyak 10 mL suspensi F. solani pada perakaran tanaman lada uji. Adapun inokulasi Meloidogyne spp. dilakukan dengan cara menginfestasikan nematoda juvenil 2 pada bagian perakaran tanaman lada sebanyak ± 500 ekor per tanaman (Suryanti et al . 2017).
Uji  Dual  Kultur  Bakteri  Endofit dan F. solani Pengujian  antagonis  bakteri  endofit terhadap F. solani dilakukan menggunakan metode dual kultur pada medium ADK dan TSA mengikuti metode Nascimento et al.
(2015). Pengujian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) dengan 5 perlakuan yaitu isolat tunggal B. siamensis , B. velevenzis , isolat campuran B. subtilis dan B.wiedmannii , isolat  konsorsium  PTM3  dan  kontrol  tanpa bakteri endofit. Miselium cendawan F. solani diambil menggunakan cork borer (diameter 0.5 cm) dan diletakkan di bagian tengah cawan pada perlakuan kontrol maupun perlakuan bakteri endofit. Isolat bakteri endofit berumur 48 jam digores pada samping kanan, kiri, atas dan bawah berjarak 3 cm dari miselium F. solani . Setiap pengujian terdiri atas 3 ulangan. Persentase penghambatan (RI) dihitung pada hari ke-6 setelah inokulasi dengan rumus:
(R1 – R2)
RI (%) =
R1

## × 100%, dengan
R1, jari-jari miselium cendawan kontrol; dan R2,  jari-jari  miselium  cendawan  yang  diberi perlakuan.
Uji Mortalitas Meloidogyne spp. Uji mortalitas Meloidogyne spp. dilakukan dengan metode Yus et al. (2014) disusun dalam RAL yang terdiri atas 5 perlakuan dan diulang sebanyak 3 kali. Isolat tunggal B. siamensis , B. velevenzis , isolat campuran B. subtilis dan B.wiedmannii dan  isolat  konsorsium  PTM3 ditumbuhkan pada medium TSB selama 48  jam.  Suspensi  bakteri  endofit  kemudian diencerkan hingga kerapatan 10 7 cfu mL -1 . Pengujian dilakukan dengan memasukkan 35 ekor nematoda Meloidogyne juvenil 2 (J2) pada cawan hitung yang berisi 3 mL suspensi bakteri. Pengamatan mortalitas dilakukan pada 6 dan 24 jam menggunakan mikroskop stereo. Mortalitas  nematoda  dihitung  berdasarkan jumlah nematoda mati dengan rumus:
∑ nematoda uji Mortalitas = ∑ nematoda yang mati × 100%
Karakterisasi Fisiologi Bakteri Endofit Uji Kitinase. Masing-masing  isolat tunggal, campuran dan konsorsium bakteri endofit diremajakan pada medium TSB selama 48 jam. Pengujian dilakukan menggunakan paper disk (0.5  cm)  yang  direndam  dalam suspensi  bakteri  endofit.  Selanjutnya paper disk diletakkan pada medium koloidal kitin  (medium  TSA  100  %  yang  diperkaya koloidal kitin 0.4%). Isolat diinkubasi selama 48–72 jam pada suhu ruang kemudian diamati pembentukan zona bening disekitar bakteri (Herdyastuti et al. 2009). Uji Protease . Isolat tunggal, campuran dan konsorsium  bakteri  endofit  berumur  48  jam digores pada medium skim milk agar (TSB 10 g L -1 , skim milk 100 mL L -1 ) kemudian diinkubasi selama 48 jam di suhu ruang untuk melihat zona bening disekitar bakteri. Zona bening  yang  terbentuk  menandakan  isolat tersebut  positif  protease  (Nurkasanah  dan Widodo 2015).
Uji  Selulase .  Masing-masing  isolat tunggal, campuran dan konsorsium bakteri endofit digores pada medium carboxyl methil cellulose (CMC  5  g  L -1 , KH 2 PO 4 1 g L -1 , MgSO 4 .7H 2 O 5 g L -1 , dan ekstrak khamir 2 g L -1 ) dan diinkubasi pada suhu ruang selama
48  jam  untuk  melihat  zona  bening  yang terbentuk disekitar koloni (Lubis et al. 2015). Uji  Senyawa  Organik  Volatil .  Metode yang digunakan, yaitu cawan terpisah dengan isolat tunggal, campuran dan konsorsium bakteri endofit digores pada medium TSA di bagian alas dan F. solani (0.5 cm) diletakkan pada medium ADK dibagian penutup. Kedua cawan direkatkan dan dilakukan pengamatan terhadap penghambatan diameter pertumbuhan F. solani selama 6 hari (Zhang et al. 2020).
Analisi Data Data hasil penelitian dianalisis meng- gunakan analysis of variance (Anova) dengan perangkat lunak Microsoft Excel dan SAS 9.0. Adapun untuk melihat pengaruh tiap perlakuan dilakukan  uji  lanjut  dengan  uji  Tukey  pada taraf 5 %.

## HASIL
Patogenisitas F. solani dan Meloidogyne spp. pada Tanaman Lada Isolasi cendawan dari tanaman lada mendapatkan F. solani dengan ciri koloni pada medium ADK berupa miselium berwarna putih pada permukaan atas dan berwarna krem pada permukaan bawah dengan tekstur halus. Berdasarkan pengamatan  mikroskopis ditemukan makrokonidium dengan 3–5 septa, mikrokonidia 0–2 septa, klamisdospora berbentuk bulat, memiliki hifa hialin dan bersepta  (Leslie  dan  Summerell  2006). Sementara  itu,  nematoda  yang  berhasil diekstrak dari sampel akar tanah ialah Meloidogyne spp. dengan ciri-ciri nematoda betina  berbentuk  bulat  menyerupai  buah  pir, leher  pendek,  memiliki  stilet  yang  pendek dan menempel pada akar tanaman. Panjang tubuh betina 331.78–486.49 µm dengan lebar 298.79–421.29 µm. Selain itu bentuk juvenil 2 dari nematoda tersebut menyerupai cacing (Suryanti et al. 2015). Inokulasi cendawan F. solani dan nematoda Meloidogyne spp. pada bibit lada menyebabkan  munculnya  penyakit  dengan gejala daun menguning pada 45 hari setelah inokulasi (HSI). Gejala semakin berkembang
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Jahuddin et al. menjadi daun menguning, kaku, dan mudah gugur  serta  menyebabkan  pertumbuhan tanaman  terhambat  atau  kerdil  (Gambar  1A dan 1B). Gejala nekrotik terjadi pada bagian pembuluh  pangkal  batang,  yang  merupakan ciri infeksi F. solani (Gambar  1C).  Akar tanaman berwarna hitam dan terjadi kerusakan rambut akar. Selain itu, terjadi pembengkakan atau  puru  akar  yang  merupakan  ciri  infeksi Meloidogyne spp. (Gambar 1D dan 1E).
Kemampuan  Antagonis  Bakteri  Endofit terhadap F. solani dan Meloidogyne spp. Empat  isolat  bakteri  endofit  yang  diuji mampu menghambat pertumbuhan miselium F. solani . Penghambatan tertinggi pada medium TSA ditunjukkan oleh isolat tunggal B. siamensis ,  yaitu  sebesar  57.25%  dan  berbeda nyata dengan perlakuan lainnya. Pada medium ADK, penghambatan isolat campuran B. subtilis dan B. wiedmannii dapat menghambat pertumbuhan F. solani sebesar  56.47%  tetapi tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  isolat tunggal B. siamensis dan B. velezensis (Tabel 1). Mortalitas Meloidogyne spp. juvenil 2 mengalami peningkatan pada pengamatan 6  jam  hingga  24  jam.  Mortalitas  nematoda tertinggi terjadi pada perlakuan B. velezenziz
pada pengamatan 24 jam, yaitu sebesar 75.24%; sedangkan  mortalitas  terendah—72.38%— pada perlakuan isolat tunggal B. siamensis dan isolat konsorsium PTM3 (Tabel 2).
Sifat Fisiologi Bakteri Endofit Dua  isolat  bakteri  endofit,  yaitu Bacillus siamensis dan B. velevenzis menunjukkan aktivitas  protease  dan  selulase;  sedangkan isolat campuran B. subtilis dan B. wiedmannii serta  isolat  konsorsium  PTM3  menunjukkan aktivitas kitinase, protease dan selulase yang ditandai  dengan  adanya  zona  bening  pada medium uji (Tabel 3). Keempat isolat bakteri endofit  menghasilkan  senyawa  volatil  yang dapat menghambat pertumbuhan miselium F. solani dengan penghambatan tertinggi terjadi pada perlakuan PTM3.

## PEMBAHASAN
Patogen yang diisolasi dari akar tanaman lada  bergejala  penyakit  kuning  di  desa Sungai  Kunyit  Hulu,  Kecamatan  Sungai Kunyit  Kabupaten  Mempawah,  Kalimantan Barat diketahui merupakan F. solani dan Meloidogyne spp..  Dilaporkan  sebelumnya oleh  Suryanti et al. (2015)  bahwa  patogen
Gambar 1  Gejala penyakit kuning pada tanaman lada di rumah kaca: A, Gejala pada permukaan atas tanaman; B, Daun menguning; C, Kerusakan pada rambut akar dan nekrotik pada pangkal batang; D, Puru pada akar; dan E, Gejala pada pangkal batang tanaman lada.
Tabel 1  Daya hambat isolat bakteri endofit tunggal, campuran, dan konsorsium terhadap pertumbuhan miselia Fusarium solani pada hari ke-6
Kode isola t Daya hambat (%) Medium TSA Medium ADK Isolat tunggal B. siamensis 57.25 a 50.20 a B. velezensis 52.94 b 51.37 a Isolat campuran B. subtilis + B.wiedmannii 44.31 c 56.47 a Isolat konsorsium PTM3 39.61 d 22.35 b Kontrol 0 e 0 c
Angka pada kolom tiap peubah pengamatan yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut pada uji Tukey taraf 5%
Tabel  2    Pengaruh  isolat  bakteri  endofit  tunggal,  campuran,  dan  konsorsium  terhadap  mortalitas Meloidogyne spp.
Kode isolat Mortalitas nematoda (%) 6 jam 24 jam Isolat tunggal B. siamensis 24.76 c 72.38 a B. velezensis 33.33 bc 75.24 a Isolat campuran B. subtilis + B.wiedmannii 42.86 b 72.38 a Isolat konsorsium PTM3 56.19 a 73.33 a Kontrol 1.90 d 3.73 b Angka pada kolom tiap peubah pengamatan yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata menurut pada uji Tukey taraf 5%
Tabel 3  Karakterisasi fisiologis isolat bakteri endofit tunggal, campuran, dan konsorsium
Kode isolat Karakterisasi fisiologi Kitinase Protease Selulase Volatil Isolat tunggal B. siamensis - + + + B. velezensis - + + + Isolat campuran B. subtilis + B.wiedmannii + + + + Isolat konsorsium PTM3 + + + +
Keterangan: -, bereaksi negatif;  dan +, bereaksi positif.
yang berasosiasi dengan penyakit kuning lada di Kalimantan Barat adalah M. incognita dan F. solani ;  sedangkan  penyakit  kuning  lada yang  banyak  ditemukan  di  Bangka  Belitung diketahui berasosiasi dengan nematoda Radopholus similis dan/atau M. incognita yang berinteraksi dengan cendawan F. solani dan F. oxysporum (Mustika 1990).
Pemanfaatan  agens  hayati  dalam pengendalian  penyakit  tanaman  telah banyak  diaplikasikan  untuk  berbagai  jenis patogen. Perlakuan bakteri endofit yang diuji pada penelitian ini mampu menghambat pertumbuhan miselium F. solani secara in vitro melalui mekanisme kompetisi ruang dan antibiosis. Beberapa isolat
Jurnal Fitopatologi Indonesia
bakteri  endofit,  diantaranya Bacillus spp. diketahui  menghasilkan  senyawa  bioaktif seperti  surfactin,  fengycin  dan  iturin  yang bersifat toksik terhadap patogen dan dapat berperan  sebagai  antifungal  (Jahuddin et al. 2018;  Koumoutsi et al. 2004).  Dilaporkan oleh Karim et al. (2018)  bahwa Bacillus spp. memiliki kemampuan penghambatan antibiosis dan kompetisi ruang terhadap Fusarium sebesar 80.46%. Aktivitas kitinase pada pengujian dual kultur antara B. subtilis dengan F. graminearum ditandai dengan terbentuknya pada zona bening pada medium uji (Zhao et al. 2014).
Perlakuan bakteri endofit yang menghambat F. solani secara in vitro pada penelitian ini juga mampu meningkatkan mortalitas Meloidogyne spp. Bakteri  endofit dapat menjadi agens biokontrol bagi nematoda parasit dengan memproduksi senyawa toksik yang bersifat nematisidal (Sikora et al. 2007). B. veleznesis mampu mematikan M. incognita
J2 sebesar 52%–89% secara in vitro dan dapat mengurangi jumlah telur M. incognita dalam akar kapas pada percobaan di rumah kaca (Xiang et al . 2017). Lebih jauh El-Nagdi dan Abd-El-Khair  (2019)  mengonfirmasi  bahwa
perlakuan kombinasi antara Bacillus spp. dengan B. subtilis dapat mengurangi juvenil 2, jumlah puru, dan jumlah massa telur nematoda.  Kombinasi mikroorganisme dalam konsorsium dapat mengendalikan berbagai patogen tanaman dengan lebih efektif karena memiliki  mekanisme  penekanan  penyakit yang  berbeda  (Kumar  dan  Jagadeesh  2016). Bakteri konsorsium memiliki hubungan saling ketergantungan  yang  bersifat  positif,  yaitu senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan oleh masing-masing isolat dapat digunakan untuk menunjang kehidupan isolat lain (Sumpethanaya et al. 2017).
Senyawa metabolit yang umum diproduksi oleh  bakteri  endofit  ialah  enzim  kitinase, protease, selulase, pektinase dan lipase (Hallmann et al. 2006). Enzim kitinase yang dihasilkan oleh isolat campuran B. subtilis dan B. wiedmannii serta isolat konsorsium PTM3  banyak  dimanfaatkan  sebagai  agens biokontrol terhadap cendawan patogen karena dapat  mendegradasi  kitin  yang  merupakan komponen utama dinding sel cendawan seperti Fusarium (Herdyastuti et al. 2009). Enzim kitinase dan protease diketahui dapat berpengaruh terhadap penetasan telur
Gambar 2  Penghambatan pertumbuhan miselium cendawan Fusarium solani pada medium tryptic soy agar (A) dan agar-agar dekstrosa kentang (B) pada uji dual kultur yang diamati pada hari ke-6. a, Zona bening antara miselium cendawan dan isolat bakteri endofit; b, Kompetisi ruang; c, Miselium F. solani menipis mendekati isolat bakteri endofit; dan d, Perubahan warna miselium menjadi kemerahan
nematoda dan aktivitas nematoda juvenil 2 yang  merupakan  fase  menginfeksi  tanaman (Tran et al . 2019). Adapula enzim hidrolitik yang  dihasilkan  keempat  bakteri  endofit– seperti selulase–sangat penting untuk kolonisasi inter/intraseluler akar tanaman sehingga dapat mencegah invasi patogen (Widowati et al. 2020).  Selain  itu,  senyawa volatil  yang  dihasilkan  keempat  isolat  dapat menekan pertumbuhan miselium F. solani dan diketahui berpotensi digunakan dalam mengendalikan beberapa jenis patogen tular tanah (Zhang et al. 2020). Disimpulkan bahwa F. solani dan Meloidogyne spp.  merupakan  patogen  yang berasosiasi  dengan  penyakit  kuning  pada tanaman lada di Kalimantan Barat. Perlakuan bakteri endofit baik secara tunggal, campuran maupun berupa konsorsium berpotensi mengendalikan  penyakit  kuning  lada, yaitu  melalui  mekanisme  penghambatan pertumbuhan miselium cendawan dan peningkatan mortalitas nematoda.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggita  SA.  2019.  Potensi  bakteri  endofit sebagai  agens  biokontrol  penyakit  busuk pangkal  batang  ( Ganoderma boninense) pada tanaman kelapa sawit [tesis]. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Asmoro  PP,  Munif A.  2019.  Bakteri  endofit dari tumbuhan paku-pakuan sebagai agens hayati Rhizoctonia solani dan pemacu pertumbuhan tanaman padi. J Fitopatol Indones. 15(6):239–247. DOI: https://doi. org/10.14692/jfi.15.6.239-247. Eisenback JD, Triantaphyllou HH. 1991. Root- knot nematodes : Meloidogyne species and races. Di dalam Nickle WR, editor. Manual of Agricultural Nematology . Marcell Dekker:  New York.
El-Nagdi  WMA,  Abd-El-Khair  H.  2019. Application of Bacillus spesies for controlling root knot nematode Meloidogyne incognita in eggplant. Bulletin of the National Research Centre. 43:154. DOI: https://doi.org/10.1186/ s42269-019-0187-6.
Halimah  D,  Munif  A,  Giyanto.  2015. Effectiveness  of  endophytic  bacterial consortium  of  coffee  plant  on  mortality of Pratylenchus  coffeae in vitro. Pelita Perkebunan. 31(3):175–185. DOI: https://doi.org/10.22302/iccri.jur. pelitaperkebunan.v31i3.205.
Hallmann  J,  Berg  G,  Schulz  B.  2006. Isolation  procedures  for  endophytic microorganisms. Di dalam: Schulz BJE, Boyle  CJC,  Sieber TN,  editor. Microbial Root Endophytes (Soil Biology) . Heidelberg (DE): Springer. hlm 299–319. DOI: https:// doi.org/10.1007/3-540-33526-9_17.
Herdyastuti N, Raharjo TJ, Mudasir, Matsjeh S.  2009.  Chitinase  and  chitinolitic microorganism: isolation, characterization and  potential.  Indo  J  Chem.  9(1):37–47. DOI: https://doi.org/10.22146/ijc.21580. Hidayati U, Chaniago IA, Munif A, Siswanto, Santosa DA. 2014. Potensi kultur campuran bakteri endofit sebagai pemacu pertumbuhan bibit tanaman karet. Jurnal Penelitian  Karet.  32(2):129–138.  DOI: https://doi.org/10.22302/jpk.v32i2.159. Jahuddin R, Jamila, Awaluddin, Suriani.
2018.  Exploration  and  screening  for endhophytic microbes of maize plant root against Fusarium verticillioides . J HPT Tropika.  18(1):57–64.  DOI: https://doi. org/10.23960/j.hptt.11857-64. Karim  H,  Hamda  L,  Kurnia  N,  Juanda  M. 2018.  Effectivity  of  antagonistic  bacteria in controlling of Fusarium wilt diseases of banana ( Musa paradisiaca ) by in vitro. IOP Conf. Series: Journal of Physics: Conf. Series 1028: 012014. DOI: https://doi. org/10.1088/1742-6596/1028/1/012014.
Koumoutsi A, Chen XH, Henne A, Liesegang H, Hitzeroth G, Franke P, Vater J, Borriss R. 2004. Structural and functional characterization of gene clusters directing nonribosomal synthesis of bioactive cyclic lipopeptides in Bacillus amyloliquefaciens strain FZB42. J Bacteriol .  186(4):1084– 1096. DOI: https://doi.org/10.1128/ JB.186.4.1084-1096.2004.
Kumar  KH,  Jagadeesh  KS.  2016.  Microbia consortia-mediated plant defenseagaint
Jurnal Fitopatologi Indonesia
Jahuddin et al.
phytophatogens  and  growth  benefits. SIJBS.  2(4):395–403.  DOI: https://doi. org/10.22205/sijbs/2016/v2/i4/103445.
Leslie JF dan Summerell BA. 2006. The Fusarium Laboratory Manual . Victoria: Blackwell Publishing. DOI: https://doi. org/10.1002/9780470278376.
Lubis    S,  Riwayati,  Idramsa.  2015.  Seleksi dan karakterisasi bakteri endofit dari  tumbuhan  Raru  ( Cotilelobium melanoxylon ) pendegradasi selulosa. J Biosains . 1(3):100–105.  DOI: https://doi. org/10.24114/jbio.v1i3.2929.
Luc  M,  Sikora  RA,  Bridge  J.  2005. Plant Parasitic Namatodes in Subtropical and Tropical Agriculture . Wallingford (GB): CABI Publishing. DOI: https://doi. org/10.1079/9780851997278.0000 Munif   A,    Hallmann   J,    Sikora    R.    2012. Isolation    of    endophytic    bacteria    from tomato  and  their  biocontrol  activities against  fungal  diseases . J    Microbiol . 6(4):148–156. DOI:10.5454/mi.6.4.2 Mustika  I.  2005.  Konsepsi  dan  strategi pengendalian nematoda parasit tanaman perkebunan di Indonesia. Perspektif. 4(1):20–32.
Mustika  I.  1990.  Studies  on  the  interactions of Meloidogyne incognita , Radopholus similis and Fusarium solani on black pepper  ( Piper nigrum L.) [disertasi]. Wageningen : Landbouw universitet. Nascimento  SB,  Lima  AM,  Borges  BN,  de Souza  CRB.  2015.  Endophytic  bacteria from Piper tuberculatum Jacq.: isolation, molecular characterization, and in vitro screening for the control of Fusarium solani f.sp piperis , the causal agent of root  rot  disease  in  black  pepper  ( Piper nigrum L.). J Genet Mol Res. 14(3):7567– 7577. DOI: https://doi.org/10.4238/2015. July.3.32.
Nurkasanah  S,  Widodo.  2015.  The  effect  of different media content of protease activity Bacillus subtilis . J Biotropika . 3(2):104–
106.
Santoyo  G,  Guzmán-Guzmán  P,  Parra- Cota  FI,  Santos-Villalobos  Sdl,  Orozco- Mosqueda  MdC,  Glick  BR.  2021.  Plant
growth stimulation by microbial consortia. Agronomy.  11(2):219.  DOI:  https://doi. org/10.3390/agronomy11020219.
Saputra R. 2020. Konsorsium bakteri endofit asal keladi, alang-alang dan putri malu sebagai pemacu pertumbuhan dan pengendali Meloidogyne incognita pada tomat  [skripsi].  Bogor  (ID):  Institut Pertanian Bogor.
Sikora RA, Schafer K, Dababat AA.
2007.  Modes  of  action  associated  with microbially  induce  in  planta  suppression of plant-parasitic nematodes. Plant Pathol.  36(2):124–134.  DOI: https://doi. org/10.1071/AP07008.
Stockwell VO, Johnson KB, Sugar D, Loper JE.  2011.  Mechanistically  compatible mixtures of bacterial antagonists improve biological  control  of  fire  blight  of  pear. Phytopathology. 101:113–123. DOI: https:// doi.org/10.1094/PHYTO-03-10-0098.
Sumpethanaya DB, Yuliani, Lisdiana L. 2017. Potensi konsorsium tiga dan empat isolat bakteri endofit dari akar tanaman ubi jalar varietas papua patippi dalam memproduksi IAA. LenteraBio. 6(2): 32–37.
Suryanti,  Hadisutrisno  B,  Mulyadi,  Jaka  W.
2015. Identifikasi Fusarium dan nematoda parasitik  yang  berasosiasi  dengan penyakit  kuning  lada  di  Kalimantan Barat. JPTI 19(1):19–26. DOI: https://doi. org/10.22146/jpti.16019. Suryanti,  Hadisutrisno  B,  Mulyadi,  Widada J. 2017. Interaksi Meloidogyne incognita dan Fusarium solani pada penyakit kuning lada.  JPTI.  21(2):127–134.  DOI:  https:// doi.org/10.22146/jpti.29760.
Tran TPH, Wang SL, Nguyen VB, Tran DM, Nguyen DS, Nguyen AD. 2019. Study of novel  endophytic  bacteria  for  biocontrol of black pepper root-knot nematodes in the Central Highlands of Vietnam. Agronomy. 9:714. DOI: https://doi.org/10.3390/ agronomy9110714.
Widowati T, Simarmata R, Lekatompessey SJR. 2020.  Keragaman  bakteri  endofitik  dari tanaman kunyit putih (C urcuma zedoaria rosc.) sebagai pemacu pertumbuhan tanaman.  Bul  Littro.  31(2):97–106.
DOI:  https://doi.org/10.21082/bullittro. v31n2.2020.97-106.
Xiang N, Lawrence KS, Kloepper JW, Donald PA, Melnroy JA. 2017. Biological control of Meloidogyne incognita by spore-forming plant growth-promoting rhizobacteria on cotton. Plant Dis . 101:774–784. DOI: https://doi.org/10.1094/PDIS-09-16-1369- RE.
Yus  IDM,  Rahardjo  BT,  Himawan  T.  2014.
Pengaruh aplikasi bakteri Pseudomonas fluoresncens dan Bacillus subtilis terhadap mortalitas nematoda puru akar
( Meloidogyne javanica ) di laboratorium. J
HPT. 2(3): 9–17.
Zhang D, Yu S, Yang Y, Zhang J, Zhao S, Pan Y, Fan S, Yang Z, Zhu J. 2020. Antifungi effects  of  volatiles  produced  by Bacillus subtilis against Alternaria solani in potato. Front  Microbiol.  11:1196.  DOI: https:// doi.org/10.3389/fmicb.2020.01196. Zhao Y, Selvaraj JN, Xing F, Zhou L, Wang
Y, et al . 2014. Antagonistic action of Bacillus subtilis strain SG6 on Fusarium graminearum . PLOS ONE. 9(3): e92486. DOI: https://doi.org/10.1371/journal. pone.0092486.