Musamus Fisheries and Marine Journal 2023 Vol.5 (No.2): hal 9-16 https://ejournal.unmus.ac.id/index.php/fish doi: 10.35724/mfmj.v5i2.5458 e-ISSN: 2556-7008 dan p-ISSN: 2654-9905 ©2023 Faculty of Agriculture, Musamus University
Patogenitas dan Pengendalian Infeksi Vibrio sp pada Udang Vaname Menggunakan Ekstrak Daun Miana ( Coleus scutellarioides (L) Benth)
Pathogenicity and Control of Vibrio sp Infection in Vaname Shrimp (Litopenaeus vannamei) Using Miana Leaf Extract (Coleus scutellarioides (L) Benth)
Buana Basir 1*) , Halimah 1) , Kariyanti 1)
1) Institut Teknologi dan Bisnis Maritim Balik Diwa
*Email: dina.buana7475@gmail.com Info Artikel ____________________
Sejarah Artikel:
Diterima Februari 2023 Disetujui Maret 2023 Dipublikasikan April 2023 ____________________ Keywords: miana leaves; extraction; vannamei shrimp; disease; Vibrio alginolyticus

## Abstrak
__________________________________________________________ Penyakit  merupakan  kendala  utama  dalam  budidaya  ikan  dan  dapat menimbulkan  kematian  yang  relatif  tinggi.  Salah  satu  jenis  penyakit  yang menyebabkan  kematian  massal  pada  budidaya  udang  yaitu  vibriosis. Penanggulangan penyakit yang selama ini telah dilakukan melalui penggunaan antibiotik, tetapi hal tersebut berdampak pada resistensi dan residu yang terjadi pada udang. Oleh karena itu diperlukan alternatif obat yang bersifat alami yang mengurangi  resiko  tersebut.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui efektivitas daun miana dalam mengobati infeksi penyakit Vibrio sp pada udang vaname. Penelitian dilaksanakan pada bulan Juni-Juli 2020 yang bertempat di Laboratorium Htchery Universitas Hasanuddin, Persiapan bakteri dilaksanakan di  Laboratorium  Kesehatan  Ikan  dan  Lingkungan  BPBAP  Takalar.  Metode penelitian  dirancang  menggunakan  3  perlakuan  dan  3  ulangan,  dengan konsentrasi  ekstrak  daun  miana  yang  digunakan,  yaitu  1000  µg/mL.  Udang dipapar V. alginolitycus . dengan kepadatan bakteri 10 3 , 10 5 , dan 10 7 CFU/mL. Data dianalisis secara deskriptif dengan membandingkan kondisi udang  yang sehat  dan  sakit  karena  infeksi V.  alginolitycus Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa udang yang sakit karena infeksi V. alginolitycus mengalami pemulihan setelah  udang  direndam  dengan  ekstrak  daun  miana  selama  empat  kali perendaman dengan waktu sekali perendaman 10 menit.  Kesimpulan bahwa penggunaan  ekstrak  daun  miana  dapat  menjadi  alternatif  pengobatan  udang yang terinfeksi V. alginolitycus.
Abstract
___________________________________________________________ Disease is the main obstacle because it can cause relatively high mortality. One type of disease that can cause mass death in shrimp is vibriosis. Disease control has been carried out by cultivators using antibiotics. However, this has an impact on resistance and residue in shrimp. Therefore, alternative medicines are needed which are natural in nature which are more environmentally friendly. This study aims  to  determine  the  performance  of  miana  lam  leaves  in  treating  Vibrio  sp disease infection in vannamei shrimp. This research was conducted in June-July 2020  which  took  place  at  the  Hasanuddin  University  Animal  Husbandry Laboratory.  Bacterial  preparations  were  carried  out  at  the  Fish  Health  and Environmental Laboratory of BPBAP (Brackish Water Aquaculture Center) Takalar. The research method was designed using 3 treatments and 3 repetitions with a concentration  of  miana  leaf  extract  of  1000  µg/mL.  Shrimp  exposed  to  V. alginolyticus. with bacterial densities of 103, 105, and 107 CFU/mL. Data were analyzed  descriptively  by  comparing  the  conditions  of  healthy  and  diseased shrimp.  The  results  showed  that  the  shrimp  infected  with  V.  alginolyticus recovered  after  soaking  the  shrimp  with  miana  leaf  extract  for  four  times.  The conclusion  that  the  use  of  miana  leaf  extract  can  be  an  alternative  shrimp treatment that cures V. alginolyticus.

## PENDAHULUAN
Udang vaname merupakan salah satu jenis udang yang berkontribusi penting pada sektor budidaya perikanan di Indonesia. Udang vaname merupakan salah satu komoditas unggulan yang bernilai ekonomis dengan produktivitas yang tinggi secara nasional (Fendjalang, 2016). Produksi udang vaname berdasarkan data Kementerian Kelautan  dan  Perikanan  tahun  2016  sebesar  498.174  ton,  dan pada  tahun  2017 meningkat pesat menjadi 757.793 ton. Produksi udang vaname pada tahun 2018 mengalami sedikit penurunan menjadi 717.094 ton (KKP, 2018).
Produksi  usaha  pengembangan  budidaya  udang  yang  menurun  dapat disebabkan  oleh  beberapa  masalah  yang  terjadi  pada  saat  budidaya.  Salah  satu kendala  budidaya  yang  banyak  terjadi  yaitu  serangan  penyakit  yang  dapat menimbulkan  kematian  relatif  tinggi,  bahkan  dapat  menyebabkan  gagal  panen. Vibriosis merupakan penyakit yang umumnya banyak dijumpai menyerang udang budidaya, dan dapat menyebabkan kematian massal dalam waktu singkat. Penyakit vibriosis dapat disebabkan oleh bakteri Vibrio seperti V. harveyi, V. alginolyticus, V. parahaemolyticus dan V. penaeicida (Asplund, 2013).
Pengendalian  vibriosis  melalui  pengobatan  telah  dilakukan  oleh  para pembudidaya udang dengan menggunakan antibiotik. Antibiotik diberikan melalui pakan,  perendaman,  ataupun  penyuntikan.  Tetapi  tindakan  tersebut  dapat menimbulkan  residu  dan  dapat  pula  menyebabkan  bakteri  penyakit  resisten terhadap  antibiotik  (Maryono  dan  Sundana,  2002).  Oleh  karena  itu  diperlukan alternatif  penggunaan  obat  dari  bahan  alami  yang  dapat  menggantikan  peran antibiotik  terhadap  bakteri  pathogen.  Salah  satu  bahan  alami  yang  mengandung senyawa aktif antibakteri yaitu daun miana (Coleus scutellariodes (L) Benth). Daun miana telah diketahui mengandung saponin dan alkaloid, sebagai hasil metabolit sekunder. Diketahui beberapa jenis saponin memiliki sifat antibiotik dan berfungsi  sebagai  antifungi  dan  antimikroba.  Demikian  pula  alkaloid,  diketahui mampu  mengganggu  proses  pembentukan  jembatan  silang  yang  menyusun peptidoglikan  sel  bakteri.  Hal  tersebut  dapat  menyebabkan  tidak  terbentuknya dinding sel bakteri secara utuh,  sehingga sel bakteri menjadi mati (Robinson, 1995).
Penggunaan bahan alami untuk menangani penyakit yang disebabkan oleh bakteri V.alginolitycus telah  dilakukan  oleh  beberapa  peneliti,  diantaranya  Ayuni (2014) tentang efek antibakteri ekstrak daun mimba (Azadirachta indica (A) Juss) terhadap  bakteri Vibrio  alginolyticus secara in  vitro .  Sifat  antibakteri  dari  daun Tephrosia vogelli terhadap Vibriosis (V. harveyi dan V. alginolyticus ) (Bachtiar et al., 2019) dan aktivitas antibakteri ekstrak daun buah adas (Foeniculum vulgare, Mill) pada V.  harveyi dan V.  alginolyticus (Budianto et  al., 2015).  Penelitian  terkait penggunaan  ekstrak  daun  miana  didalam  mengatasi  penyakit  vibriosis  belum ditemukan. Oleh karena itu, penelitian ini dianggap penting untuk dilaksanakan.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  efektivitas  daun  miana  ( Coleus scutellarioides (L)  Benth)  dalam  mengobati  infeksi  penyakit Vibrio sp  pada  udang vaname.

## BAHAN DAN METODE
Bahan yang digunakan pada penelitian ini yaitu; udang vaname, daun miana, Etanol 96%, n-Heksan, Chloroform, Bakteri V. alginolyticus, etanol 70%, bacto agar, pepton, yeast, Mueller Hinton Broth (MHB).
Penelitian  dirancang  menggunakan  rancangan  acak  lengkap  dengan  3 perlakuan dan 3 kali ulangan dengan konsentrasi perendaman ekstrak daun miana sebesar 1000 µg/mL. Udang vaname dipapar menggunakan bakteri V. alginolitycus dengan  kepadatan  berbeda  yaitu,  (A)  10 3 CFU/mL  (B)  10 5 CFU/mL,  dan  (C)  10 7 CFU/mL

## Persiapan Media, Wadah dan Hewan Uji
Wadah yang digunakan adalah akuarium kaca sebanyak 15 buah yang diisi air  laut  sebanyak  120  L.  Air  laut  yang  digunakan  telah  melalui  penyaringan, sterilisasi dengan klorin, dan dinetralkan menggunakan Na-thiosulfat. Kualitas air diukur  dan  disesuaikan  dengan  standar  baku  pemeliharaan  udang  vaname. Pergantian air dilakukan setiap hari setelah penyiponan.
Hewan uji dalam penelitian ini adalah udang vaname sebanyak 90 ekor yang berukuran  ±  7  cm  dengan  bobot  ±  5  gram  diperoleh  dari  BPBAP  Takalar.  Udang terlebih  dahulu  diaklimatisasi  pada  media pemeliharaan  selama  tiga  hari  dengan pemberian pakan komersil 3 kali sehari secara adlibitium. Setelah udang bergerak aktif maka sudah siap untuk digunakan.

## Persiapan Bakteri Uji
Bakteri  uji  yang  digunakan  yaitu Vibrio  alginolyticus yang  diperoleh  dari Laboratorium Kesehatan Ikan dan Lingkungan BPBAP (Balai Perikanan Budidaya Air Payau) Takalar. Persiapan bakteri uji dimulai dengan persiapan alat dan bahan yang telah disterilisasi. Isolat bakteri Vibrio alginolyticus yang diremajakan, ditanam pada media TCBSA kemudian diinkubasi pada suhu ±30˚C selama 24 jam. Kultur bakteri V. alginolyticus berwarna kuning pada media TCBSA. Selanjutnya inoculum bakteri  diambil  sebanyak  ±  3  koloni  ditanam  pada  media  cair  TSB  2%  NaCl, kemudian diinkubasi pada suhu 30˚C selama 24 jam. Inokulum bakteri pada media TSB  dihitung  kepadatannya  dengan  menggunakan  haemacytometer  dam konsentrasi  yang  diperoleh  yaitu  10 3 CFU/mL.  Bakteri  kemudian  disub  kultur sesuai dengan perlakuan percobaan yaitu, konsentrasi 10 3, 10 5 , dan 10 7 CFU/mL.
Ekstraksi
Persiapan  ekstraksi  dengan  membersihkan  daun  miana  dari  kotoran menggunakan air hingga bersih. Daun miana lalu dikeringkan menggunakan oven pada  suhu  80 0 C  hingga  kering  air.  Daun  miana  digiling  dengan  mesin  hingga menjadi  tepung  dan  diayak.  Pembuatan  ekstrak  daun  miana  dilakukan  dengan metode maserasi. Tepung daun miana direndam menggunakan  etanol 96% dengan perbandingan  1:5  (b/v).  Dilakukan  pengadukan  ±15  menit,  dan  disimpan  selama 1×24 jam dalam keadaan tertutup. Sampel disaring dengan kertas Miliopoere 0,45 µm  dan  fitrat  disimpan  dalam  erlemenyer.  Selanjutnya  endapan  yang  dihasilkan dicampur  kembali  dengan  etanol  96%.  Perendaman  dilakukan  sebanyak  3  kali sampai menghasilkan fitrat ke tiga. Fitrat digabungkan dan diuapkan sampe kering. Ekstrak yang dihasilkan disimpan pada tabung tertutup pada suhu ruang dan tidak lembab.

## Penyuntikan Bakteri
Kondisi  bakteri  harus  dipastikan  sehat  sebelum  infeksi  bakteri  dilakukan. Injeksi  Bakteri V.  alginolyticus dilakukan  secara  intramuscular  pada  abdomen segmen  ketiga (Chau et  al .,  2011)  dengan dosis  0,1 mL/udang uji  menggunakan spoit 1 mL. Setelah diinfeksi, udang ditempatkan kembali ke wadah semula dengan terus  menerus  melakukan  monitoring  terhadap  kondisi  udang.  Dilakukan pengamatan dan pendataan terhadap kondisi dan gejala klinis yang timbul akibat infeksi vibrio.

## Perendaman Ekstrak Daun Miana
Perendaman  ekstrak  daun  miana  dilakukan  setelah  udang  menunjukkan gejala  sakit  pasca  infeksi  bakteri V.  alginolyticus .  Perendaman  dilakukan  dengan memindahkan  udang  yang  sakit  ke  dalam  toples  kaca  yang  sudah  terisi  dengan larutan  ekstrak  daun  miana.  Perendaman  dilakukan  selama  4  hari,  dengan  lama
perendaman 10 menit per hari. Setelah perendaman udang dikembalikan ke wadah pemeliharaan  semula.  Selanjutnya  dilakukan  pengamatan  selama  7  hari  sejak perendaman pertama. Kemudian pencatatan data dilakukan terhadap kondisi dan respon tingkah laku udang.

## Analisis Data
Data yang diperoleh dari penelitian dianalisis secara  deskriptif berdasarkan kondisi morfologi dan tingkah laku udang, dengan membandingkan antara kondisi udang yang sehat dan udang yang terinfeksi V. alginolitycus serta kondisi setelah pengobatan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kondisi Udang Pasca Infeksi Bakteri V. alginolyticus
Kondisi morfologi udang vaname sebelum dan setelah penyuntikan bakteri V. alginolyticus dapat  dilihat  pada  Gambar  1 . Kondisi  tubuh  udang  sebelum penyuntikan  ditandai  dengan  warna  abu-abu  segar  dan  sedikit  kecoklatan,  usus terisi  penuh  dan  karapas  tidak  keropos.  Setelah  infeksi  Vibrio,  tubuh  udang memerah, kaki renang dan kaki jalan memerah, dan hepatopankreas terlihat tidak utuh karena mengalami kerusakan pada lapisan luar (membran) yang membungkus (Gambar 2). Kondisi tersebut diduga merupakan perubahan morfologi tubuh akibat infeksi V. alginolitycus. Kondisi serupa telah dilaporkan oleh Jayasree et al. (2006) bahwa  udang  yang  terserang  vibrio  memperlihatkan  adanya  nekrosis  pada  ekor, perubahan  warna  pada  tubuh  dan  hepatopankreas  yang  semula  berwarna  hijau menjadi berwarna coklat bahkan ada yang menghitam.
Gambar 1. Kondisi Udang Sehat (A) dan Udang Sakit (B) Terinfeksi V. alginolitycus
Gambar  2.  Kondisi  Hepatopankreas  Udang  yang  Terinfeksi Vibrio sp.  (A)  dan Hepatopankreas Udang Sehat (B) setelah 24 jam infeksi
Kondisi tubuh pasca infeksi V. alginolyticus pada tiap perlakuan dapat dilihat pada Gambar 2, Gambar 3 dan Gambar 4.
A B A B A A B B
Gambar 2. Kondisi udang pasca infeksi V. alginolyticus kepadatan 10 3 CFU/mL
Gambar 3. Kondisi udang pasca infeksi V. alginolyticus kepadatan 10 5 CFU/mL
Gambar 4. Kondisi udang pasca infeksi V. alginolyticus kepadatan10 7 CFU/mL Berdasarkan  hasil  pengamatan  kondisi  tubuh  pasca  infeksi V.  alginolyticus dengan  kepadatan  bakteri  10 3 CFU/mL,  10 5 CFU/mL,  dan  10 7 CFU/mL,  terlihat perubahan  kondisi  tubuh  udang  terjadi  pada  menit  ke  45  pasca  penyuntikan. Gambar  2  menunjukkan  kondisi  periopod  dan  pleiopod  udang  memerah,  tubuh udang memerah, hepatopankreas memerah, dan pergerakan udang lemah. Kondisi tubuh udang yang memerah menurut Desrina (2006), dipicu oleh infeksi bakteri yang menyebabkan terjadinya infiltrasi sel radang yang meluas pada lapisan epidermis. Perubahan  ini  juga  dapat  terjadi  sebagai  akibat  udang  mengalami  stress  karena adanya  infeksi  baketri  pathogen  (Sardjito,  2012;  Sardjito  2017)  .  Udang  yang terindikasi adanya bakteri vibrio mengalami perubahan morfologi, seperti pereopoda, pleopoda dan uropoda berwarna kemerahan.
Pada  Gambar  3  dan  4  dapat  dilihat  antenulla  memerah,  hepatopankreas memerah, perubahan tingkah laku udang berenang miring, terjadi melanosis pada kulit  bagian  abdomen,  serta  terjadi  nekrosis  pada  uropoda.  Tingkah  laku  udang berenang miring dan mendekati aerasi. Kondisi tersebut terjadi menurut Austin dan Austin (2007) merupakan indikasi gejala klinis pada udang yang terinfeksi bakteri genus  vibrio.  Melanosis  yang  terjadi  pada  abdomen  disebabkan  oleh  enzim polifenoloksidae  yang  mengoksidasi  fenol  menjadi  quinon.  Polimerisasi  quinon menyebabkan munculnya pigmen hitam yang menimbulkan warna kehitaman pada udang.  Tingkah  laku  udang  vaname  yang  terinfeksi  bakteri V.  alginolyticus juga ditandai dengan pergerakan yang tidak beraturan, berenang miring, dan memutar (Montero et al ,  2004).

## Kondisi Udang Pasca Perendaman Ekstrak Daun Miana
Hasil  pengamatan  kondisi  tubuh  pasca  perendaman  ekstrak  daun  miana yaitu, terlihat pada perendaman pertama belum menunjukkan adanya perubahan
kondisi tubuh pada perlakuan A, B dan C. Tetapi setelah perendaman kedua pada hari  ke-8,  perlakuan  A  sudah  menampakkan  perubahan  warna  tubuh  kembali normal  sebagaimana  warna  tubuh  sebelum  terinfeksi V.  alginolitycus .  Kondisi hepatopankreas juga mengalami perubahan warna kembali normal seperti semula sebelum infeksi. Namun pergerakan masih lemah dan tingkah laku belum normal. Perlakuan  B  dan  C  pasca  perendaman  kedua,  warna  tubuh  belum  menunjukkan pemulihan, tetapi pleopoda dan periopoda tidak lagi memerah. Perendaman ketiga atau  hari  ke-12  pada  perlakuan A  tidak  lagi  ditemukan  gejala  klinis  atau  dengan kata lain udang sudah kembali normal, baik kondisi tubuh maupun tingkah laku. perlakuan  B  dan  C  mengalami  pemulihan  ( recovery )  warna  tubuh.  Kondisi  pada perendaman keempat atau hari ke-16 pada perlakuan A, B dan C, udang kembali normal dan tidak lagi ditemukan gejala klinis.
Kondisi tubuh kembali normal pada perlakuan A, B dan C dapat dilihat pada Gambar 5, Gambar 6 dan Gambar 7.
Gambar 5.  Kondisi udang pasca perendaman ekstrak daun miana pada kepadatan bakteri 10 3 CFU/mL.
Gambar 6. Kondisi udang pasca perendaman  ekstrak daun miana pada kepadatan bakteri 10 5 CFU/mL.
Gambar 7. Kondisi udang pasca perendaman  ekstrak daun miana pada kepadatan bakteri 10 7 CFU/mL.
Pemulihan kondisi tubuh pasca perendaman ekstrak daun miana pada udang diduga  karena  adanya  senyawa  bioaktif  yang  terkandung  pada  daun  miana  yang mampu  mengobati  kondisi  tubuh  udang  akibat  infeksi V.  alginolyticus .  Senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak daun miana berupa saponin, tannin, flavonoid, steroid  dan  alkaloid  yang  melakukan  fungsi  kerjanya  dan  berperan  sebagai antibakteri. Senyawa aktif saponin diketahui dapat menyebabkan pertumbuhan sel bakteri terhambat (Mufti et al ., 2017; Anita et al ., 2019), dengan mekanisme kerja saponin yaitu meningkatkan permeabilitas membran sel sehingga membran menjadi tidak  stabil  dan  berakibat  pada  hemolisis  sel  (Dewi et  al .,  2015).  Saponin menyebabkan kebocoran protein dan enzim dari dalam sel bakteri sehingga bakteri
akan mengalami lisis dan pecah (Madduluri et  al ., 2013; Poeloengan dan Pratiwi, 2012).
Steroid dan flavonoid merupakan senyawa metabolit sekunder yang memiliki aktivitas  sebagai  antibakteri  (Madduliri et  al., 2013;  Anita et  al .,  2018).  Hal  ini menunjukkan bahwa spektrum penghambatan tergantung pada jenis dan kekuatan senyawa  antibakteri  dari  masing-masing  komponen  yang  terekstrak  serta  jumlah komponen  aktif  yang  terekstrak  oleh  pelarut  yang  digunakan.  Steroid  sebagai antibakteri berhubungan dengan membran lipid dan sensifitas terhadap komponen steroid  yang  menyebabkan  kebocoran  pada  lisosom  bakteri,  sehingga  integritas membran  menurun  serta  morfologi  membran  sel  berubah  dan  menyebabkan  sel bakteri rapuh dan lisis (Ji et.,al, 2012)
Senyawa  flavonoid  bersifat  antibakteri  melalui  3  mekanisme,  yaitu: menghambat sintesis protein, menghambat fungsi membran sel dan menghambat metabolisme energi. Flavonoid menghambat pertumbuhan bakteri dengan merusak dinding sel bakteri, mikrosom dan lisosom sebagai interaksi antara flavonoid dengan DNA bakteri (Sabir, 2005).
Kandungan  tanin  pada  ekstrak  mempunyai  kemampuan  menonaktifkan adhesin  bakteri,  menghambat  kerja  enzim,  menghambat  transport  protein  pada selubung sel bakteri (Cowan, 1999). Menurut Akiyama et al (2001) dan Chung et al (2006)  tanin  sebagai  bahan  antibakteri  antara  lain  dapat  merusak  membran  sel bakteri  dengan  mengganggu  proses  sintesa  mukopeptida  dan  berikatan  dengan peptidoglikan dinding sel bakteri sehingga pembentukan sel baru akan terganggu. Bakteri  yang  tumbuh  dalam  kondisi  aerob  memerlukan  zat  besi  untuk  berbagai fungsi.  Ikatan  antara  tanin  dan  besi  akan  menyebabkan  terganggunya  fungsi bakteri.
Konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  pada  pengobatan  penyakit  infeksi V. alginolitycus dapat  dikatakan  efektif  diduga  karena  konsentrasi  ekstrak  yang digunakan  merupakan  konsentrasi  yang  efektif  untuk  menghambat  atau membunuh  bakteri.  Konsentrasi  tersebut  juga  dianggap  aman  bagi  tubuh  udang untuk  melakukan  pemulihan  pasca  infeksi V.  alginolitycus .  Menurut  Basir et  al (2020) bahwa konsentrasi ekstrak daun miana ( Coleus scullaturoides (L) Benth) yang aman digunakan untuk pencegahan  ataupun  pengobatan  pada  udang  vaname yang  terpapar Vibrio sp.  yaitu  pada  konsentrasi  di  bawah  1250    μg/mL.  Karena menurut Basir et al (2020) yang menguji tingkat mortalitas artemia dengan berbagai konsentrasi  mendapatkan  hasil  bahwa  perendaman  ekstrak  daun  miana  pada konsentrasi 2500 μg/mL menimbulkan kematian mencapai 40%. Sementara pada konsentrasi 1250 μg/mL, mortalitas dengan perendaman ekstrak daun miana 31%. Sehingga  kondisi  yang  dianggap  aman untuk  pengobatan  penyakit  vibriosis  pada udang yaitu konsentrasi 1000 µg/mL.

## KESIMPULAN
Penggunaan ekstrak daun miana ( Coleus scutellariodes (L) Benth sebagai obat melalui perendaman efektif terhadap pemulihan kondisi tubuh udang vaname yang terinfeksi Vibrio alginolyticus.

## DAFTAR PUSTAKA
Anita,  Arisanti  D  dan  Fatmawati.  2018.  Potensi  Flavonoid  Ekstrak  Daun  Miana ( Coleus atropurpereus ) sebagai Senyawa Anti Mycobacterium tuberculosis Strain H37rv  dan  Mdr  dengan  Microscopy  Observation  Drug  Susceptibility  (Mods). Jurnal Ilmu Alam dan Lingkungan . 9(18): 61-73.
Ayini U, Harnina S B dan Dewi T C. 2014. Efek Antibakteri Daun Mimba ( Azadirachta indica (A) Juss) terhadap Bakteri Vibrio alginolyticus secara In Vitro . Journal of Biology & Biology Education . 6(1):9-14. Bachtiar E, Syah Y M, Juliwaty L D. 2019. Sifat Antibakteri Daun Tephrosia vogelii terhadap Vibriosis. Jurnal al-Kimia . 6(1) 68-74.
Basir B., Isnansetyo A., Iatiqomah I., dan Jabbar F. B. A. (2020). Toksisitas Daun Miana  ( Coleus  scutellarioides (L)  Benth)  sebagai  Antibakteri  pada  Udang Vannamei ( Litopenaeus vannamei ). SIGANUS: Journal of Fisheries and Marine Science Vol 2. No. 1; 56-61.
Budianto, Prajitno A dan Yuniarti A. 2015. Aktivitas antibakteri Ekstrak Buah Adas ( Foeniculum  vulgare ,  Mill)  pada Vibrio  harveyi dan Vibrio  alginolyticus . Jurnal Agritech . 35(3):266-272.
Cowan  M  M.  1999.  Plant  Products  as  Antimicrobial  Agents. Clin  Micobiol Rev .12(4):564-582.
Dewi Z Y, Nur A dan Hertriani T. 2015. Efek Antibakteri dan Penghambatan Biofilm Ekstrak  Serah  ( Cymbopogon  nardus L)  terhadap  Bakteri Streptococcus muntans. Majalah Kedokteran Gigi Indonesia . 1(2):136-141 Desrina, A. Taslihan, Ambarianto, S. Susiani. 2006. Uji Keganasan Bakteri Vibrio sp pada KerapuMacan ( Epinephelus fuscoguttatus ). J.Ilmu Kelautan UNDIP: 11(3): 119-125.
Fendjalang,  SNM,  Budiardi,  Supriyono,  E.,  Effendi,  I.,  2016.  Production  of  White Shrimp Litopenaeus vannamei in Floating Cage System With Different Stocking Density at Thousand Island Strait . J. 8 (1): 201-214
Jayasree, L., P. Janakiram. and R. Madhavi. 2006. Characterization of Vibrio spp. Associated with Diseased Shrimp from Culture Ponds of Andhra Pradesh (India). Journal of the World Aquaculture Society, Volume 37 Issue 4 Page 523 Ji Y S, Lestari N D dan Rinanda T. 2013. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol 30% dan 96% Kelopak Bunga Rosella ( Hibiscus  sabdariffa ) terhadap Bakteri Streptococcus  pyogenes secara In  Vitro . Jurnal  Kedokteran  Syiah  Kuala . 12(1):31-36.
Kementerian  Kelautan  dan  perikanan,  2018.  Budidaya  Udang  Masih  Sangat Potensial.  ( Online ).  (https://kkp.go.id/djpb/artkel/8688-kkp-budidaya-udang- masih-sangat-potensial, diakses tanggal 20 juli 2020).
Madduliri. S, Rao K B and Sitaram B. 2013. In Vitro Evaluation of Five Indegenous Plants Extract Againts Five Bacterial Phatogens of Human. International Journal of Pharmacy and Phrmaceutical Science. 5(4): 679-684 Maryono  dan  A.  Sundana.  2002.  Teknik  Pencegahan  dan  Pengobatan  Penyakit Bercak Merah Pada Ikan Air Tawar yang Disebabkan Oleh Bakteri Aeromonas hydrophila . Buletin Teknik Pertanian. 7(1): 33-36
Resti M, 2019. Uji In Vitro Daun Miana (Coleus scutellariodes (L) Benth) Terhadap Bakteri Vibrio alginolyticus.
Robinsom T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi . Penerbit: ITB. Bandung. Sabir A. 2005. Aktivitas Antibakteri flavonoid propolis Trigona sp terhadap bakteri Streptococcus mutans ( In Vitro ). Dental Journal . 38(3): 135-141.
Sarjito,  Nigrum,  N.E.W.,  Radjasa,  O.K.,  dan  Prayitno,  S.B.,  2012.  Appication  of Repetittive Sequence Base PCR on The Richness of Vibrio on The Tiger Shrimps (Penaeus monodon F.). Jurnal of Coasral Development, 15 (3) : 304- 310.