## JIFI (JURNAL ILMIAH FARMASI IMELDA)
Vol.1 No.1, September 2017, pp. 28-32 ISSN: 2597-7164 (Online), 2655-3147 (Print) https://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALFARMASI
 28

## PENGARUH PEMBELAHAN MELINTANG PADA BIJI MANGGIS GARCINIA MANGOSTANA L TERHADAP TOTIPOTENSI PERTUMBUHAN TUNAS
Ewi Mellysa Barus 1 , Martina Restuati 2
1 Program Studi S1 Farmasi STIKes Imelda Medan
2 Ketua Laboratorium Kultur Jaringan Article Info

## ABSTRACT
Garcinia mangostana L. is a species of the Guttiferae family which is rich  in  compounds  from  the  xanthon  group.  Mangosteen  has  long juvenile  properties.  One  method  that  can  solve  the  problem  of multiplication  of  mangosteen  plants  in  large  quantities,  can  be throughout the season and produce uniform plants is in vitro culture. The  aim  of  this  study  was  to  determine  the  best  concentration between  Benzyl  Amino  Purine  (BAP)  and  honey  against  shoot induction of mangosteen seed explants which were split in vitro. This study  used  a  completely  randomized  design  (CRD)  with  BAP treatment  (0;3  mg/L)  and  honey  (3;6  mg/L)  on  MS  medium (Murashige-Skoog)  with  observations  70  days  after  planting  (hst). The  results  showed  that  both  BAP  and  honey  were  able  to  increase shoot  formation.  The  administration  of  BAP  and  honey  had  a significant effect on the percentage of shoot formation, time of shoot emergence, number  of  shoots  and  shoot  length. The highest number of  shoots  was  found  in  the  3  mg  /  L  BAP  treatment  as  many  as  20 shoots per seed. The combination of treatment with the addition of 3 mg /  L  BAP  +  3  ml /  L honey  resulted  in  the highest  percentage  of shoot formation (100%); the fastest shoot emergence time was 12.75 DAS;  and  the  highest  shoot  length  is  1.86  cm.  In  this  study,  it  was successful in inducing shoots from mangosteen seeds which were cut crosswise from Bengkalis with the addition of BAP and honey.
Keywords: BAP Bengkalis Shoot Induction
Honey
This is an open access article under the CC BY-SA license.

## Corresponding Author:
Ewy Mellysa Barus, Program Studi S1 Farmasi, STIKes Imelda Medan, Jl. Bilal No. 52 Kelurahan Pulo Brayan Darat I Kecamatan Medan Timur, Medan - Sumatera Utara. Email: ewimellysa@gmail.com

## 1. INTRODUCTION
Manggis  (Garcinia  mangostana  L.)  merupakan  salah  satu  buah  tropis  dengan  julukan  Queen  of Tropical  Fruit.  Buah  manggis  mengandung  nilai  gizi  yang  sangat  banyak.  Kandungan  pericarp  kaya  akan senyawa dari golongan xanthon dan senyawa yang paling aktif yaitu α mangostin, γmangostin, dan garsinon- E (Nugroho, 2013). Tanaman ini juga merupakan komoditas ekspor yang terus mengalami peningkatan dari
tahun ke tahun. Tahun 2006 ekspor manggis sebesar 5,6 juta ton dengan nilai 3,6 juta US$ dan pada tahun 2012  mencapai  20,1  juta  ton  dengan  nilai  17,4  juta  US$  (Departemen  Pertanian,  2012).  Banyak  kendala dalam  pembibitan  tanaman  manggis  seperti  produksi  biji  layak  tanam  yang  rendah,  sifat  biji  rekalsitran (Qosim, 2004), pertumbuhan sangat lambat, lemah dan perakaran yang sangat sedikit (Harahap et al., 2014).
Salah satu teknologi perbanyakan yang menjadi solusi yang dapat memecahkan masalah kekurangan bibit  manggis  yaitu  dengan  teknik  kultur  in  vitro  karena  dapat  menyediakan  bibit  dalam  jumlah  banyak, seragam  dan  tidak tergantung musim.  Kultur in  vitro  yang menggunakan media  MS  dan  penambahan  BAP telah banyak  dilaporkan. Penambahan 3 mg/L BAP menghasilkan jumlah tunas tertinggi untuk biji manggis asal  Bengkalis  yang  dibelah  dua  sebesar  1,55  tunas  (Isda  et  al.,  2015).  Menurut  Harahap  et  al.,  (2012), pemberian 5 mg/L BAP menghasilkan jumlah tunas terbanyak sebesar 11,8 tunas. Selanjutnya Sirchl et al., (2008)  menyatakan  pemberian  20  mg/L  BAP  yang  dikombinasikan  dengan  10  mg/L  NAA  menghasilkan jumlah tunas tertinggi sebesar 9,5 tunas. Roostika et al., (2008) menyatakan bahwa pemberian 3 mg/L BAP mampu meningkatkan multiplikasi tunas ketiak.
Modifikasi media dapat dilakukan dengan menambahkan senyawa organik lain untuk meningkatkan pertumbuhan  tunas  tanaman  secara  in  vitro.  Penambahan  bahan  organik  membantu  dalam  proses pertumbuhan  dan  perkembangan  biji  dan  regenerasi  planlet  (Tawaro  et  al.,  2008),  membantu  proses pembentukan  tunas  dan  daun  (Akter  et  al.,  2007)  dan  juga  meningkatkan  ukuran  embrio  somatik  (Al- Khateeb,  2008).  Madu  dapat  digunakan  sebagai  senyawa  organik  tambahan.  Madu  mengandung  air  dan karbohidrat. Madu mengandung beberapa mineral seperti magnesium, posfor, kalsium dan potassium (Bagde et al., 2013), selain itu juga mengandung beberapa vitamin seperti niasin, asam askorbat, asam pantotenat dan riboflavin (Ajibola et al., 2012).
Penelitian  (Sari  et  al.,  2011)  mengkulturkan  bagian  batang  dan  tunas  pucuk  tanaman Grammatophyllum speciosum BL. dengan penambahan 6 ml/L madu Al Shifa pada media MS menghasilkan rata-rata  jumlah  tunas  paling  banyak  (1,08  tunas),  tinggi  tunas  (26,58)  dan  rata-rata  jumlah  daun  (4,43). Penelitian ini bertujuan untuk menentukan konsentrasi BAP dan madu yang optimal pada media MS dalam menginduksi tunas eksplan biji manggis yang dibelah tiga secara melintang.

## 2. RESEARCH METHOD
Penelitian  ini  akan  dilaksanakan  pada  bulan  November  2015  sampai  Maret  2016  di  Laboratorium Biologi Terpadu Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Riau Jl. H.R Soebrantas KM. 12,5 Panam, Pekanbaru. Bahan tanaman yang digunakan adalah biji dari buah yang masak asal  Bengkalis.  Buah  yang  sudah  masak  diambil  dari  pohon  kemudian  diambil  bijinya  dengan  cara dibersihkan daging buahnya. Selanjutnya disterilisasi di dalam laminar air flow berturut-turut menggunakan larutan Nahipoklorit 20% + Tween-80 selama 10 menit dan disterilisasi dengan alkohol 70% selama 5 menit. Setiap pergantian larutan sterilisasi dibilas dengan akuades sebanyak 3 kali.
Biji diletakkan dalam cawan petri yang berisi campuran larutan akuades dan iodin kemudian dibelah menjadi  tiga  bagian  secara  melintang.  Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL). Konsentrasi BAP dan madu yang digunakan terdiri dari 6 taraf perlakuan, yaitu: M1 (0 mg/L atau kontrol); M2 (3 mg/L BAP); M3 (3 ml/L madu); M4 (6 ml/L madu); M5 (3 mg/L BAP + 3 ml/L madu); M6 (3 mg/L BAP + 6 ml/L madu).
Parameter  dalam  penelitian meliputi: persentase  eksplan hidup  (%),  persentase  pembentukan tunas (%) waktu muncul tunas (hst), jumlah tunas (buah), panjang tunas (cm) dan jumlah daun (helai). Data hasil pengamatan  selanjutnya  dianalisis  menggunakan  Analysis  of  Variance  (ANOVA).  Jika  terjadi  pengaruh nyata  dilakukan  dengan  uji  Duncan’s  Multiple  Range  Test  (DMRT)  pada  taraf  kepercayaan  5%  dengan menggunakan aplikasi SPSS.

## 3. RESULTS AND ANALYSIS
3.1 Hasil
Hasil Persentase Eksplan Hidup dan Pembentukan Tunas Hasil penelitian yang dilakukan terhadap eksplan  biji  manggis  yang  dibelah  tiga  bagian  secara  melintang  pada  media  Murashige-Skoog  (MS). Pemberian konsentrasi zat pengatur tumbuh BAP dan madu baik tunggal maupun kombinasi secara in vitro pada hari ke-70 hst, didapatkan hasil yang terlihat pada Tabel 1:
30 Tabel 1. Persentase Eksplan Hidup Dan Pembentukan Tunas Pada 70 Hari Setelah Tanam Kode Perlakuan PERLAKUAN PERSENTASE BAP (mg/l) Madu (ml/l) Eksplan hidup Pembentukan Tunas M1 - - 100 25.00 M2 3 - 100 83.33 M3 - 3 100 16,67 M4 - 6 100 16.67 M5 3 3 100 100.00 M6 3 6 100 83.33
Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  berbeda  pada  kolom  yang  sama  menunjukkan  berpengaruh nyata (P > 0,05) pada uji DMRT taraf 5%.
Tabel 2. Rata-Rata Pertumbuhan Tunas Eksplan Biji Manggis Terhadap Penambahan BAP Dan Madu Pada
70 Hari Setelah Tanam Kode Perlakuan PERLAKUAN PARAMETER PENGAMATAN BAP (mg/l) Madu (ml/l) Waktu muncul tunas Jumlah Tunas Panjang tunas Jumlah daun M1 - - 61.25 1.25 0.30 0.00 M2 3 - 27.50 20.00 1.00 1.50 M3 - 3 69.50 0.75 0.53 0.00 M4 - 6 66.50 10.75 0.53 0.00 M5 3 3 12.75 14.25 2.86 1.75 M6 3 6 40.50 14.25 0.76 2.00
Pada Tabel diatas menunjukkan penambahan  madu  dapat  meningkatkan  persentase  hidup  eksplan pada  70  hst  mencapai  100%.  Eksplan  yang  hidup  ini  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  antara  lain  kondisi fisiologis  eksplan,  umur  eksplan  dan  ukuran  eksplan.  Umur  dan  ukuran  eksplan  mempengaruhi  cadangan makanan  yang  terkandung  dalam  biji,  selain  itu  juga  mempengaruhi  tingkat  kematangan  embrio.  Menurut Sutopo  (2002),  biji  yang  berukuran  besar  dengan  bobot  yang  berat memiliki  cadangan makanan  yang  lebih banyak dibandingkan dengan biji yang berukuran kecil dan bobot yang ringan. Isda et al. (2015) menyatakan bahwa viabilitas eksplan yang berbeda dipengaruhi oleh tingkat kematangan biji karena kondisi fisiologis biji mempengaruhi cadangan makanan dan komposisi embrio didalam biji.
Pertumbuhan  Tunas  Manggis  Hasil  ANOVA menunjukkan bahwa  pemberian zat pengatur tumbuh BAP dan madu baik tunggal maupun kombinasi berpengaruh nyata terhadap parameter waktu muncul tunas dan  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  daun.  Perlakuan  BAP  dan  madu  hanya  berpengaruh  nyata terhadap jumlah tunas dan panjang tunas dari eksplan biji manggis. Ratarata dan hasil uji lanjut terlihat pada Tabel  2.  Pemberian  BAP  dan  madu  berpengaruh  terhadap  jumlah  tunas  yang  dihasilkan.  Jumlah  tunas terbanyak terdapat pada perlakuan 3 mg/L BAP sebanyak 20,00 buah dan jumlah tunas terendah sebesar 0,75 buah pada perlakuan madu tunggal dan tidak berbeda nyata dengan perlakuan kontrol (Gambar 1).
Gambar 1. Pembentukan Tunas Manggis Dengan Tipe Pembelahan Eksplan Secara Melintang Pada 70 hst (a) Tunas Terbanyak Pada Perlakuan 3 mg/L BAP, (b) Tunas Sedikit Pada Perlakuan 6 ml/L Madu, (c)
Pembentukan Tunas Pada Perlakuan Kontrol

## 3.2 Pembahasan
Persentase  Eksplan  Hidup  dan  Pembentukan  Tunas  Kandungan  nutrisi  dalam  media  juga mempengaruhi tingkat persentase hidup eksplan. Adanya penambahan madu pada konsentrasi tertentu diduga meningkatkan  kandungan  nutrisi  yang  cukup  untuk  pertumbuhan  eksplan.  Madu  mengandung  beberapa mineral seperti sodium, kalsium, magnesium, potassium, posfor, seng, dan zat besi (Bogdanov et al., 2008).
Madu mengandung beberapa vitamin seperti riboflavin, niasin, asam pentotenat dan asam askorbat (Bagde et al.,  2013).  Madu  juga mengandung  sakarida,  protein,  enzim, asam amino  dan asam  organik (Manyi-Loh  et al.,  2011).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  penambahan  BAP  dan  madu  tunggal  maupun  yang kombinasi berpengaruh terhadap persentase terbentuk tunas.
Penambahan  3  mg/L  BAP  yang  dikombinasikan  dengan  3  ml/L  madu  menghasilkan  persentase terbentuk  tunas  terbanyak  mencapai  100%  dan  penambahan  madu  tunggal  menghasilkan  persentase terbentuk  tunas  terendah  sebesar  16,67%.  Penambahan  madu  yang  dikombinasikan  dengan  BAP  mampu meningkatkan  persentase  jumlah  tunas  dibandingkan  dengan  perlakuan  tunggal.  Hal  ini  diduga  karena hormon  endogen  pada  eksplan  belum  mencukupi  untuk  meningkatkan  persentase  terbentuknya  tunas sehingga perlu penambahan hormon sitokinin pada media.
Penambahan BAP yang di kombinasi kan dengan madu pada konsentrasi yang tinggi menyebabkan tekanan  osmotik  media  menjadi  tinggi  sehingga  mengganggu  dalam  proses  penyerapan  unsur  hara  dan hormon eksogen sehingga mengganggu pertumbuhan eksplan. Menurut Sari et al. (2011) madu mengandung senyawa  organik  tambahan  yang  dapat  berinteraksi  dengan  hormon  endogen  pada  tanaman  sehingga  dapat menginduksi  terbentuknya  tunas.  Pertumbuhan  Tunas  Manggis  Pada  hasil  penelitian  pemberian  BAP  dan madu  baik  tunggal  maupun  kombinasi  berpengaruh terhadap  waktu  munculnya  tunas  eksplan  biji manggis. Pemberian  BAP  pada  konsentrasi  3  mg/L  yang  dikombinasikan  dengan  3  ml/L  madu  menghasilkan  waktu muncul  tunas  tercepat  pada  12,75  hst,  sedangkan  pemberian  3  ml/L  madu  tunggal  menghasilkan  waktu muncul  tunas  terlama  pada  69,50  hst  dan  tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  kontrol  dan  6  ml/L  madu tunggal.
Hal  ini  diduga  karena  hormon  endogen  yang  terdapat  pada  eksplan  belum  mampu  pempercepat pembentukan tunas sehingga perlu penambahan hornon sitokinin eksogen untuk mempercepat pembentukan tunas. Pemberian BAP yang dikombinasikan dengan 3 ml/L madu mampu menghasilkan waktu muncul tunas tercepat. Hal ini diduga karena penambahan 3 ml/L madu mampu mempercepat terbentuknya tunas.
Hasil  penelitian ini  lebih  cepat  jika  dibandingkan  dengan hasil  penelitian  Isda  et al.,  (2016)  waktu pembentukan  tunas  paling  cepat  dari  eksplan  biji  manggis  asal  Bengkalis  pada  1,55  hst  pada  dengan penambahan 1 mg/L BAP. Perbedaan respon in vitro ini juga dipengaruhi oleh tingat kemiripan genetik yang rendah,  walaupun  manggis  termasuk  tanaman  apomiksis,  namun  terjadi  variasi  genetik  dengan  tingkat kemiripan  yang  berbeda-beda.  Menurut  Triatminingsih  (2008),  konsentrasi  ZPT  merupakan  faktor  penting dalam  keberhasilan  diferensiasi  pertumbuhan  dari  kultur  in  vitro.  Pemberian  BAP  dan  madu  berpengaruh terhadap panjang tunas yang dihasilkan. Panjang tunas tertinggi terdapat pada perlakuan 3 mg/L BAP  yang dikombinasikan  dengan  3  ml/L  madu  sebesar  1,86  cm  dan  panjang  tunas  terendah  sebesar  0,30  cm  pada perlakuan kontrol. Hal ini diduga karena pemberian madu 3 ml/L mampu menyediakan sumber karbon yang mencukupi untuk partumbuhan panjang eksplan.
Hasil  penelitian  ini  lebih  rendah  dibandingkan  dengan  penelitian  Isda  et  al.,  (2016)  menghasilkan panjang  tunas  sebesar  5,10  cm  pada  perlakuan  3  mg/L  BAP  +  3  ml/L  madu.  Menurut  Joni  et  al.,  (2014), kandungan  nitrogen  yang  tinggi  pada  media  MS  akan  menginduksi  terbentuknya  hormon  sitokinin  pada eksplan yang akan memicu pembelahan sel sehingga banyak terbentuk tunas, namun elongasi tunas menjadi terhambat.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  BAP  dan  madu  tidak  berpengaruh  terhadap jumlah  daun  yang  dihasilkan.Namun  pemberian  3  mg/L  BAP  yang  dikombinasikan  dengan  6  ml/L  madu cenderung  menghasilkan  jumlah  daun  terbanyak  sebesar  2  daun.  Namun  pemberian  madu  tunggal  dan kontrol  belum  membentuk  daun  tetapi  pada  perlakuan  ini  lebih  banyak  membentuk  kalus  dan  tunas  yang terbentuk belum memperlihatkan pembentukan daun hanya membentuk tonjolan bakal tunas.
Rata-rata  jumlah  daun  yang  dihasilkan dalam penelitian  ini relatif rendah.  Hal  ini  disebabkan  oleh kebanyakan tunas yang terbentuk tidak memiliki daun, diduga karena adanya persaingan dalam penyerapan unsur  hara  pada  media.  Tidak  terbentuknya  akar  pada  tunas  mempengaruhi  penyerapan  unsur  hara  untuk pembentukan  daun.  Tunas-tunas  yang  terbentuk  perlu  dilakukan  subkultur  untuk  melanjutkan  regenerasi tanaman dalam pembentukan daun.

## 4. CONCLUSION
Jumlah tunas terbanyak terdapat pada perlakuan 3 mg/L BAP sebanyak 20 tunas per biji. Kombinasi perlakuan  dengan  penambahan  3  mg/L  BAP  +  3  ml/L  madu  menghasilkan  persentase  terbentuk  tunas terbanyak (100%); waktu muncul tunas tercepat 12,75 hst; dan panjang tunas tertinggi 1,86 cm.

## REFERENCES
Ajibola,  A,  Chamunorwa,  J.  P.  &  Erlwanger,  K.  H.  (2012). Nutraceutical  values  of  natural  honey  and  its contribution to human health and wealth . Nutrition & Metabolism, 9 (61), 1-12. Akter,  S.,  Nasiruddin,  K.  M.,  &  Khaldun,  A.  B.  M.  (2007). Organogenesis  of  Dendrobium  orchid  using traditional media and organic extracts. Jurnal of Agriculture and Rural Development, 5 (1&2), 30-35.
32
Al-Khateeb,  A.  A.  (2008 ).  Regulation  of  in  vitro  bud  formation  of  date  palm  (Phoenix  dactylifera  l.) Cv. Khanezi by different carbon sources. Bioresource Technology, 99 (14), 6550-6555.
Bagde,  A.  B.,  Sawant,  R.  S.,  Bingare,  S.  D.,  Sawai,  R.  V.,  &  Nikumbh,  M.  B.  (2013). Therapeutic  and nutritional values of honey (madhu ). International Research Journal of Pharmacy, 4 (3), 19-22. Bogdanov,  S.  T.,  Jurendic,  R.  Sieber,  P.  Gallmann.  (2008). Honey  for  nutrition  and  health:  a  Review. American  Journal  of  The  College  of  Nutrition,  27,  677-689.  Departemen  Pertanian.  2012.  (2015 September 3). Retrived from http://database.deptan.go.id.
Harahap, F., Hasratuddin, & Suriani, C. (2012). Shoot growth of in vitro mangosteen (Garcinia mangostana l.) Results  of  benzyl  adenine  plant  growth regulators  and the  different  explants  size.  Saintika  Journal, 12, 1-13.
Harahap,  F.,  Poerwanto,  P.,  Suharsono,  Suriani,  C.,  &  Rahayu,  S.  (2014). In  vitro  growth  and  rooting  of mangosteen  (Garcinia  mangostana  l.) on  medium  with  different  concentration  of  plant  growth regulator. HAYATI Journal of Biociences, 21 (4), 151-158.
Isda,  M.  N.,  Fatonah,  S.,  &  Rahmawati,  R.  Y.  (2015). Induksi  tunas  dari  eksplan  biji  manggis  (Garcinia mangostana L.) asal Bengkalis secara in vitro proceeding Semirata. Pontianak. Joni,  Y.  Z.,  Efendi,  D.,  &  Roostika,  I.  (2014). Morfogenesis  eksplan  keping  biji  dari  tiga  klon  manggis (Garcinia mangostana L.) pada tiga jenis media dasar. Journal Horticulture, 24 (2), 94-101. Manyi-Loh,  C. E.,  Clarke,  A.M.,  &  Ndip,  R.  N.  (2011). An  overview  of  honey: therapeutic  properties  and contribution in nutrition and human health. African Journal of Microbiology Research, 5 (8), 844-852. Nugroho, A. E. (2013 ). Manggis (Garcinia mangostana L.): dari kulit buah yang terbuang hingga menjadi kandidat suatu obat [Bibliografi ]. Yogyakarta: Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada. Qosim,  W.  A.  (2004). Pemuliaan  manggis  tak  sesulit  dibayangkan .  (2015  September  7).  Retrived  from http://www.pikiran-rak yat.com/cetak/1204/cakrawala/lainnya4.html.
Roostika,  I.,  Sumarlim,  N.,  &  Mariska,  I.  (2008). Micropropagation  of  mangosteen  (Garcinia  mangostana L.) . Indonesian Journal of Agriculture, 1 (1), 28-33. Sari, Y. P., Manurung, H., & Novita, V. (2011). Mikropropagasi tanaman anggrek tebu (Grammatophyllum speciosum  bl.)  secara  in  vitro  dari  sumber  eksplan  tunas  pucuk  pada  media  ms  (MurashigeSkoog) dengan penambahan madu. Mulawarman Science, 10, 51-62. Sirchi, M. H. T., Kadir, M. A., Aziz, M.A., Rashid, A. A., Rafat, A., & Javadi, M. B. (2008). Amelioration of mangosteen  mikropropagation  through  leaf  and  seed  segments  (Garcinia  mangostana  L.) .  African Journal of Biotechnology, 7 (12), 2025-2029.
Tawaro,  S.,  Suraninpong,  P.,  &  Chanprame,  S.  (2008). Germination  and  regeneration  of  Cymbidium findlaysonianum  lindl .  On  a  medium  supplemented  with  some  organic  sources.  Walailak  Journal Science and Technology, 5 (2), 125-135.