## Jurnal Ilmiah Biologi Eksperimen dan Keanekaragaman Hayati
(J-BEKH)
Volume 9, Issue 2, Nov 2022
Article History Received: Mei 23 2022 Accepted: Okt 23 2022
Isolation and Identification of Entomopathogenic Fungi from Teak Leaf Little Soil and Paddy Soil with Various Isolation Methods
(Isolasi dan Identifikasi Kapang Entomopatogen dari Tanah Serasah Daun Jati dan Tanah Sawah Dengan Berbagai Metode Isolasi)
Wahyu Aji Mahardhika 1 *, Gendis Angger Pitaloka 1 , Rizky Nurcahyo 1 , Isworo Rukmi 1 , Agung Suprihadi 1
1 Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro
*Corresponding author: mahardhikaaji@gmail.com Abstrak Abstract Kapang  entomopatogen  merupakan  kapang  yang memiliki kemampuan untuk menginfeksi serangga.  Kapang  tersebut  dapat  menginfeksi dengan cara penembusan hifa ke tubuh serangga inang  melalui  kulit,  saluran  pencernaan,  spirakel dan  lubang  lainnya.  Tujuan  dari  penelitian  ini yaitu  untuk  mengisolasi  dan  mengidentifkasi kapang entomopatogen pada tanah serasah daun jati dan tanah sawah dengan metode isolasi yang berbeda.  Metode  isolasi  kapang  entomopatogen menggunakan  metode insect  bait , insect  bait dengan pengayakan tanah, dan metode pengenceran. Serangga yang digunakan untuk uji larva Tenebrio  molitor .    Isolasi  tanah  sawah berhasil  menumbuhkan  kapang  entomopatogen pada  tubuh  larva  Tenebrio  molitor  ditandai dengan adanya miselium kapang menutupi tubuh larva. Hasil  isolasi  didapatkan  6  isolat  yaitu  S2A, S2B,  S2C,  S3A,  S3B,  S3C.  Keenam  isolat  tersebut merupakan kapang Fusarium sp.
Kata  kunci: Fusarium sp.,  identifikasi,  isolasi, kapang Entomopatogen, T. molitor
Entomopathogenic fungi are molds that can infect insects.  The  mold  infected  the  host  by  penetrating the hyphae into the insect's body through the skin, digestive  tract,  spiracles,  and  other  holes.  The purpose  of  this  study  is  to  isolate  and  identify entomopathogenic  molds  in  teak  leaf  litter  and paddy  fields  with  different  isolation  methods. Entomopathogenic  molds  are  collected  using various techniques such as the insect bait method, insect  bait  with  soil  sieving,  and  the  dilution method. Tenebrio molitor had utilized as an insect object  for  the  larval  test.  Isolation  of  paddy  fields has succeeded in growing entomopathogenic molds on  the  larval  body  of  Tenebrio  molitor.  The presence  of  mold  mycelium  covering  the  larval body supported it. The isolation results obtained six isolates,  namely  S2A,  S2B,  S2C,  S3A,  S3B,  and  S3C. The six isolats were Fusarium sp.
Keywords: Entomopathogenic fungi, Fusarium sp., Identification, Isolation, T. molitor
How to Cite : Mahardhika, W. A., Pitaloka, G. A., Nurcahyo, R., Rukmi, I., & Suprihadi, A. (2022). Isolation And Identification Of Entomopathogenic Fungi From Teak Leaf Little Soil And Paddy Soil With Various Isolation Methods. Jurnal Ilmiah Biologi Eksperimen Dan Keanekaragaman Hayati (J-BEKH) , 9(2), 23 – 30. 10.23960/jbekh.v9i2.228

## PENDAHULUAN
Serangga  pada  bidang  pertanian  dapat berperan  menguntungkan  atau  merugikan bagi tanaman. Keuntungan adanya serangga di  bidang  pertanian  salah  satunya  sebagai polinator,  namun  kerugian  yang  timbul akibat  serangan  serangga  diantaranya adalah  infeksi  pada  jaringan,  merusak bagian  tanaman,  dan  sebagainya,  sehingga tanaman  mati  dan  mengalami  gagal  panen (Meilin  &  Nasamsir,  2016).  Upaya pengendalian  hama  serangga  telah  banyak dilakukan  dengan  pestisida,  akan  tetapi akan menimbulkan  hal  buruk  jika pestisida tersebut  masuk  ke  dalam  tubuh  manusia dan juga berakibat buruk untuk lingkungan, padahal kebutuhan akan pangan yang bebas pestisida meningkat. Salah satu alternatifnya adalah menggunakan pengendalian hayati dengan memanfaatkan musuh  alaminya  (Nicolopoulou-Stamati et al .,  2016).  Pengendalian  hayati  tidak  akan merusak  lingkungan  dan  hanya membunuh organisme  target  yang  dituju  (Tambingsila &  Rudias,  2015).  Cara  tersebut  akan memanfaatkan  faktor  pengendali  yang sudah  tersedia  di  alam  yang  merupakan musuh  alami  dari  organisme  target.  Musuh alami  dapat  mencakup  predator,  patogen, dan parasit (Herlinda et al ., 2015).
Salah  satu  agen  yang  dapat  digunakan adalah kapang.
Kapang merupakan mikroorganisme  yang  mampu  hidup  dalam tanah,  dan  dapat  berasosiasi  dengan organisme  lain.  Kapang  tanah  memiliki peranan  penting  dalam  kehidupan  sebagai dekomposer  utama  flora  maupun  fauna yang  telah  mati  (Watanabe,  2010). Pemanfaatan kapang tanah dapat digunakan  dalam  berbagai  aspek,  baik pertanian,  kesehatan,  dan  sebagainya. Dalam  bidang  pertanian,  selain  digunakan sebagai  biofertilizer,  kapang  tanah  juga digunakan  untuk  bioinsektisida.  Kapang yang mampu menginfeksi serangga tersebut adalah  kapang  entomopatogen.  Kapang tersebut  dapat  menginfeksi  serangga dengan  masuk    melalui  kulit,  saluran pencernaan,  spirakel,  dan  beberapa  bagian tubuh  yang  lain  (Rosa et  al .,  2020).  Hifa kapang  tersebut  akan  menempel  di  tubuh
inang  dan  memenetrasi  secara  mekanik atau kimia dengan menggunakan enzim dan toksin. Kapang kemudian akan menyebar ke seluruh  bagian  serangga  dan menyebabkan kematian  pada  inangnya  (Ebani  & Mancianti,  2021).  Beberapa  kapang  yang dikenal  sebagai  entomopatogen  antara  lain Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Verticillium sp.  dan  lain  sebagainya  (Maina et  al .,  2018).  Selain  itu Ophiocordyceps sinensis dan Cordyceps  militaris juga digunakan  sebagai  agen  biologis  sebagai jamur  entomopatogen  disamping  perannya sebagai  pengobatan  (Wang  &  Yao,  2011; Wāng et al ., 2020).
Kapang  entomopatogen  dapat  digunakan sebagai  agen  pengendalian  hayati  yang tidak berbahaya dikarenakan biodegradable, eco-friendly dan  efektif untuk  serangga.  Berdasarkan  uraian tersebut,  perlu  adanya  penelitian  tentang isolasi  kapang  entomopatogen  dengan beberapa  metode  dan  mengidentifikasi kapang tersebut.

## METODE PENELITIAN

## Pengambilan Sampel
Sampel  tanah  diambil  secara  acak  di beberapa  titik  sampling.  Sampel  tanah seresah daun jati diambil dari 3 lokasi yang berbeda  di  Fakultas  Sains  dan  Matematika Universitas
Diponegoro yaitu dekat lapangan  basket,  area  parkiran  motor gedung  A  dan  sekitar  pos  satpam  dekanat. Sampel  tanah  sawah  diambil  di  sekitar persawahan kelurahan Jabungan, kecamatan  Banyumanik,  Semarang,  Jawa Tengah  (Gambar  1  dan  Tabel  1).  Sampel tanah  diambil  sebanyak  0,5  kg  dengan menggali  tanah  pada  kedalaman  0  -15  cm. Tanah  kemudian  dimasukkan  dalam kantung plastik hitam steril yang sebelumnya  telah  disterilisasi  di  bawah sinar  UV  selama  30  menit.  Pengukuran  pH dan  suhu  dilakukan  sebelum  menggali tanah  dengan soil  tester .  Hasil  pengukuran
pH  dan  suhu  pengambilan  sampel,  secara urut, adalah pH 7,5 dan 37°C.
Gambar 1. Lokasi pengambilan sampel pertama
(merah), kedua (biru) dan ketiga
(kuning)  di  area  persawahan Kelurahan Jabungan. Table 1. Koordinat pengambilan sampel di area persawahan Kelurahan Jabungan Lokasi Koordinat I 7°04'59.7"S 110°26'49.7"E II 7°05'00.4"S 110°26'49.8"E III 7°05'00.8"S 110°26'49.5"E

## Isolasi Kapang Entomopatogen
Isolasi  Kapang  Entomopatogen  dilakukan dengan  3  cara,  yaitu insect  bait dengan menggunakan tanah secara langsung, insect bait dengan  tanah  yang  diayak,  dan pengenceran sampel tanah.
1) Metode insect bait
Sampel  tanah  dimasukkan  ke  dalam wadah  box  plastik,  kemudian  larva umpan  dipaparkan  sebanyak  15  buah ke  dalam  tanah  pada  masing-masing wadah box plastik.  Wadah  ditutup dengan  kain  lalu  dimasukkan  ke  dalam inkubator  dengan  suhu  20  sampai  25 o C selama  dua  minggu.    Selama  proses inkubasi  wadah  yang  berisi  larva dilembabkan  dengan  menyemprotkan
air  dengan sprayer setiap  hari. Pengamatan  terhadap  serangga  umpan dimulai pada hari ke-5 sampai pada hari ke-14. Isolasi dilakukan untuk mendapatkan  jenis-jenis  cendawan entomopatogen.  Serangga  umpan  yang diduga terinfeksi cendawan diambil dan disterilisasi permukaan dengan menggunakan  alkohol  70%  selama kurang  lebih  3 – 5  detik  dan  akuades steril masing-masing selama 5 – 10 detik. Kemudian  dikeringkan  dengan  tissue dan  dimasukkan  kedalam  cawan  yang berisi  tissue  lembab.  Setelah  3  hari tubuh  larva  yang  ditumbuhi  cendawan kemudian ditanam ke media PDA. 2) Metode insect bait dengan pengayakan tanah Sampel  tanah  yang  sudah  dikoleksi diayak  terlebih  dahulu  dengan  ayakan kelapa.  Selanjutnya  tanah  yang  sudah diayak dimasukkan ke dalam wadah box plastik, kemudian larva umpan dipaparkan sebanyak 15 buah ke dalam tanah  pada  masing-masing  wadah  box plastik. Wadah ditutup dengan kain lalu dimasukkan  ke  dalam  inkubator  (suhu 20 – 25 o C)  selama  dua  minggu.    Selama proses inkubasi wadah yang berisi larva dilembabkan  dengan  menyemprotkan air  dengan sprayer setiap  hari. Pengamatan  terhadap  serangga  umpan dimulai pada hari ke-5 sampai pada hari ke-14. Isolasi dilakukan untuk mendapatkan  jenis-jenis  cendawan entomopatogen.  Serangga  umpan  yang diduga terinfeksi cendawan diambil dan disterilisasi permukaan dengan menggunakan  alkohol  70%  selama kurang  lebih  3 – 5  detik  dan  akuades steril masing-masing selama 5 – 10 detik. Kemudian  dikeringkan  dengan  tissue dan  dimasukkan  kedalam  cawan  yang berisi  tissue  lembab.  Setelah  3  hari tubuh  larva  yang  ditumbuhi  cendawan kemudian ditanam ke media PDA.
3) Metode pengenceran Tanah ditimbang 10gram, lalu memasukkan  tanah  kedalam  botol  vial yang  berisi  aquades  steril  90  ml, kemudian diambil sebanyak 1ml dengan
mikropipet  dan  dipindahkan  ke  tabung reaksi  pengenceran  10 -1 secara  aseptis, kemudian  dikocok  sampai  homogen. Selanjutnya  mengambil  1  ml  dari tabung  reaksi  pengenceran  10 -1 dan dipindahkan ke tabung reaksi pengenceran  10
-2 .  Cara  yang  sama dilakukan  hingga  pengenceran  10 -4 . Hasil  pengenceran  dimasukan  kedalam cawan  petri.  Selanjutnya  cawan  petri dimasukan  kedalam  inkubator  selama seminggu.  Larva T.  molitor dimasukan kedalam  cawan  Petri  yang  sudah ditumbuhi  oleh  kapang.  Apabila  larva terinfeksi  maka  kapang  tersebut termasuk kapang entomopatogen.

## Purifikasi Kapang Entomopatogen
Kapang  entomopatogen  yang  tumbuh  pada larva T.  molitor diisolasi  dan  ditumbuhkan di  medium  PDA.  Permukaan  integumen larva  yang  terinfeksi  disterilkan  metode yang  dilakukan  Irwan  (2017).  Integumen disterilkan dengan alkohol 70% selama 3-5 detik  dan  kemudian  dibilas  menggunakan akuades  steril  selama  5-10  detik  ,  lalu dikeringkan  dengan  kertas  tissue  steril. Larva  kemudian  dipindahkan  ke  cawan petri  yang  berisi  tissue  basah  steril  secara aseptis  dan  diinkubasi  untuk  menstimulasi pertumbuhan kapang. Kapang entomopatogen  yang  terdapat  pada  tubuh larva  yang  mati  dipindahkan  ke  medium PDA,  keudian  diinkubasi  selama  7  hari dengan  suhu  25°  C.  Koloni  kapang  yang representatif  kemudian  dipindahkan  ke cawan  Petri  dan  agar  miring  yang  berisi medium PDA.

## Identifikasi Kapang Entomopatogen
Kapangentomopatogen diidentifikasi berdasarkan  morfologi  makroskopis  dan mikroskopos isolat. Karakteristik makroskopis ditinjau berdasarkan morfologi  koloni  yang  meliputi  warna,
diamter,  tekstur  permukaan, reverse  of colony , ada tidaknya growing zone dan tetes eksudat,  sedangkan  mikroskopis  meliputi hifa  (septa/asepta),  sel  kaki,  konidiofor, konidia,  dan  sebagainya.  Hasil  yang  telah didapatkan  kemudian  diidentifikasi  dengan beberapa literatur, (Brown & Proctor, 2013;
Crous  et  al.,  2009;  Guo  et  al.,  2018; Watanabe, 2010).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolasi  Kapang  Entomopatogen  dengan Berbagai Metode
1) Sampel serasah daun jati Isolasi  kapang  entomopatogen  dari tanah seresah daun jati tidak menunjukkan  pertumbuhan  kapang entomopatogen.  Hal  ini  menandakan bahwa  kapang  entomopatogen  tidak ada didalam sampel tanah serasah daun jati.  Ketidakberhasilan  isolasi  kapang entomopatogen  pada  tanah  serasah daun  jati  ini  terjadi  karena  beberapa faktor.  Faktor  pertama  yaitu  terkait  pH tanah  sampel.  Kapang  entomopatogen sendiri  dapat  tumbuh  pada  pH  kurang lebih  3-7.  Mochi et  al .,  (2005) menyatakan  bahwa  konidia  jamur entomopatogen  akan  mati  pada  suhu 40 o C  selama  15  menit.Namun  dapat mentoleransi  kisaran  yang  luas  dari konsenterasi ion hidrogen antara pH 5- 10 dengan pH optimum sekitar 7. Hal ini diperkuat  dengan  pendapat  Lübeck  & Lübeck,  (2022)  bahwa  pH  sangat penting  untuk  pertumbuhan  fungi, karena  enzim-enzim  tertentu  akan mengurai  substrat  sesuai  dengan aktivitasnya pada pH tertentu.

## 2) Sampel tanah sawah
Isolasi  kapang  entomopatogen  dari tanah  sawah  dilakukan  dengan  metode insect  bait .  Hasil  dari  percobaan tersebut,  ditemukan  adanya  perubahan perilaku  dari  larva  yang  tidak  seaktif biasanya, kemudian terdapat larva yang telah  mati  dan  ditumbuhi  oleh  kapang entomopatogen.  Sebanyak  6  larva mengalami  perubahan,  yaitu  terdapat titik hitam di dalam kulitnya. Titik hitam ini  merupakan  mekanisme  tubuh  larva dalam menyerang kapang entomopatogen  yang  tumbuh  di  dalam tubuhnya.  Menurut  Sanjaya et  al .,
(2010),  keadaan  larva  yang  menghitam menjelang  dan  setelah  kematiannya menandakan adanya mekanisme
pertahanan  pada  tubuh  larva S.  litura . Hal ini menunjukkan adanya melanisasi di daerah sekitar infeksi yang bertujuan untuk  mencegah  perkembangan  jamur ke arah yang lebih lanjut. Isolasi dan Pemurnian Kapang Entomopatogen
Sebanyak delapan belas larva T. molitor dari ketiga  lokasi  sampling  diduga  terinfeksi kapang  entomopatogen.  Larva  yang  diduga terinfeksi  lalu  dicelupkan  kedalam  alkohol 70%  dan  aquadest  steril  selama  masing- masing 5 detik.Jumlah larva yang ditumbuhi oleh  kapang  entomopatogen setelah dicelupkan dalam alkohol hanya enam larva saja  dari  delapan  belas.  Keenam  larva selanjutnya  diambil  dan  diinokulasi  pada cawan  petri  berisikan  media  PDA  dan diinkubasi  selama  5  sampai  7  hari.  Koloni
kapang  yang  representatif  kemudian dipindahkan  ke  media  PDA  baru  untuk dilakukan identifikasi.
Isolasi  dari  tanah  sawah  ini  dikatakan berhasil  karena  karakteristik  tanah  sawah yang  terdapat  genangan  air  berpengaruh terhadap pertumbuhan mikroba,
diantaranya  yaitu  kapang  entomopatogen. Hal ini sesuai dengan pendapat Lantoi et al ., (2016)  pada  tanah  sawah,  genangan  air sangat  berpengaruh  terhadap  proses metabolisme  mikroba,  sedangkan  tanaman padi, termasuk akar dan rizosfir merupakan tempat  berakitivitas  mikroba.  Isolasi  dari tanah  sawah  didapatkan  6  isolat  kapang entomopatogen. Keenam isolat ini diantaranya  yaitu  isolat  S2A,  isolat  S2B, isolat  S2C,  isolat  S3A,  isolat  S3B,  dan  isolat S3C (Gambar 2).
Gambar 2. Koloni kapang entomopatogen: (a) isolat S 3A , (b) isolat S 2C , (c) isolat S 2A , (d) isolat S 3C , (e) isolat S 2B , (f) isolat S 3B .
Identifikasi Kapang Entomopatogen Isolat  kapang  kemudian  diidentifikasi secara makroskopis  dan  mikroskopis.  Hasil identifikasi  menyebutkan  bahwa  keenam isolat  kapang  merupakan Fusarium sp. (Gambar  3  dan  4).  Hasil  tersebut  didukung
dengan  morfologi  makroskopis  koloni kapang  yang  bertekstur  seperti  kapas, selain  itu  karakter  mikroskopis  adalah terdapat  makrokonidia  yang  berbentuk lunata pada keenam isolat yang didapatkan.
a b c
d
e f
Gambar  3.    Morfologi  makroskopis  dan mikroskopis Fusarium sp.  pada media  PDA  (A  &  D)  S2A
( Fusarium sp. 1), (B & E) S2B.1 ( Fusarium sp.  2),  (C  &  F)  S2C ( Fusarium sp. 3).
Gambar  4.    Morfologi  makroskopis  dan mikroskopis Fusarium sp.  pada media  PDA.  (A  &  D)  S3A,  (B  & E) S3B, (C & F) S3C.
Fusarium merupakan kapang yang memiliki banyak  peran,  diantaranya  sebagai  endofit, saprofit dan parasit, contohnya parasit pada serangga.  Brown  dan  Proctor  (2013) menyatakan  bahwa  karakterisik  morfologi penting  untuk  mengidentifikasi  Fusarium dengan  kapang  yang  lain.  Karakteristik primer  pada Fusarium sp  dapat  dilihat  dari ukuran  makrokonidia,  mikrokonidia,  dan klamidospora.  Produksi  pigmen  dapat dijadikan  karakteristik  sekunder  untuk mengidentifikasi kapang tersebut. Karakteristik  mikroskopis Fusarium yang paling  khas  adalah  mempunyai  hifa  yang bersekat,  makrokonidia  yang  berbentuk lunata  atau  seperti  pisang,  konidia  yang bersekat, dan memiliki mikrokonidia.
Fusarium telah  banyak  diteliti  mampu menginfeksi  beberapa  serangga.  Penelitian oleh  Prayogo,  (2011)  menyatakan  bahwa Fusarium dapat  diisolasi  dari  lahan pertanian  dan  mempunyai  kemampuan untuk  menginfeksi  berbagai  serangga.  Hal ini  didukung  pula  oleh  Suciatmih et  al .,
(2015) Fusarium dapat  diisolasi  dari berbagai  rizosfer  dan  mampu  menginfeksi serangga  umpan  berupa  ulat Xystroscera festiva dan  rayap Coptotermes sp.  Santos et al .,  (2020)  menyebutkan  pula  berbagai Fusarium seperti F.  chlamidosporum dan F. moniliforme yang  diisolasi  dari  tanah, F. fujikuroi ,  dan  lain  sebagainya  mampu menjadi  kapang  kandidat  biocontrol serangga.  Hal  tersebut  dibuktikan  pula dengan  tingkat  mortalitas  dari  setiap kapang  dalam  menginfeksi  serangga. Penelitian  selanjutnya  perlu  dilakukan  uji postulat  Koch  terhadap  serangga  lain  dan juga  terhadap  tumbuhan,  selain  itu  juga perlu  adanya  identifikasi  molekuler  untuk mengetahui spesies Fusarium tersebut lebih rinci

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan,  metode  yang  berhasil  untuk mendapatkan kapang  entomopatogen adalah  metode insect  baiting .  Kapang tersebut  setelah  dilakukan  identifikasi
A B E D C F A D B C E F
secara  morfologi  diperoleh  isolat  tersebut berasal  dari  genus Fusarium .  Saran terhadap  penelitian  selanjutnya  antara lain  identifikasi  molekuler  terhadap  isolat yang  diperoleh,  uji  Postulat  Koch, virulensinya  terhadap  serangga  dan tanaman,  senyawa  bioaktif,  dan  lain sebagainya agar menjadi kandidat bioinsektisida.

## DAFTAR PUSTAKA
Brown,  D.  W.,  &  Proctor,  R.  H.  (2013). Fusarium.  Genomics,  Molecular  and Cellular Biology.
Crous, P. W., Verkley, G. J. M., Groenewald, J.
Z.,  &  Samson,  R.  A.  (2009). Fungal Biodiversity.  CBS  Laboratory  Manual Series .  Westerdijk  Fungal  Biodiversity
Institute.
Ebani,  V.  V,  &  Mancianti,  F.  (2021).
Entomopathogenic  Fungi  and  Bacteria in a Veterinary  Perspective.  In Biology (Vol. 10, Issue 6). https://doi.org/10.3390/biology1006 0479 Guo, Z., Pfohl, K., Karlovsky, P., Dehne, H.-W., &  Altincicek,  B.  (2018).  Dissemination of Fusarium proliferatum by mealworm  beetle  Tenebrio  molitor. PLOS ONE , 13 (9), e0204602. https://doi.org/10.1371/journal.pone. 0204602 Herlinda,  S.,  Kusuma,  A.,  .  S.,  &  Wijaya,  A. (2015).  Perbandingan  Efek  Pemberian Bioinsektisida  dan  Ekstrak  Kompos terhadap  Produksi  Padi  Ratun  dan Populasi  Serangga  Hama. Jurnal Agronomi Indonesia (Indonesian Journal  of  Agronomy) , 43 (1),  23.
https://doi.org/10.24831/jai.v43i1.95 86 Irwan.  (2017). Eksplorasi  Cendawan  dari Tanah  Sawah  dan  Kebun  dengan Menggunakan  Larva  Tenebrio  mollitor L. (Coleoptera: Tenebrionidae). Universitas Hasanuddin. Lantoi, R. R., Darman, S., & Patadungan, Y. S. (2016).  Identifikasi  Kualitas  Tanah Sawah Pada Beberapalokasi Di Lembah  Palu  Dengan  Metode  Skoring Lowery. Journal  Agroland , 23 (3),  243 –
250. http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index. php/AGROLAND/article/viewFile/832 3/6604 Lübeck,  M.,  &  Lübeck,  P.  S.  (2022).  Fungal Cell  Factories  for  Efficient  and Sustainable Production of Proteins and Peptides. Microorganisms , 10 (4). https://doi.org/10.3390/microorganis ms10040753 Maina, U. M., Um, M., Zakaria, D., Galadima, I. B., & Gambo, F. M. (2018). A review on the  use  of  entomopathogenic  fungi  in the management of insect pests of field crops. Journal  of  Entomology  and Zoology Studies , 6 (1), 27 – 32. https://www.researchgate.net/publica tion/323445876 Meilin, A., & Nasamsir. (2016). Serangga dan Peranannya  Dalam  Bidang  Pertanian dan Kehidupan. Jurnal Media Pertanian , 1 (1), 18. https://doi.org/10.33087/jagro.v1i1.1 2 Mochi,  D.  A.,  A.C.  Monteiro,    and,  &  J.C.
Barbosa.  (2005).  Action  of  pesticides to  Metarhizium  anisopliae  in  Soil. Neotropical  Entomology , 6 (6),  961 – 971. Nicolopoulou-Stamati, P., Maipas, S., Kotampasi,  C.,  Stamatis,  P.,  &  Hens,  L. (2016).  Chemical  Pesticides  and Human  Health:  The Urgent  Need  for  a New  Concept  in  Agriculture. Frontiers in  Public  Health , 4 (July),  1 – 8. https://doi.org/10.3389/fpubh.2016.0 0148 Prayogo, Y. (2011). Isolat Virulen Cendawan Entomopatogen  Lecanicillium  lecanii Sebagai Bioinsektisida untuk Pengendalian  Telur  Kepik  Coklat Riptortus  linearis  (F.)  Pada  Kedelai.
Buletin Palawija , 54 (21), 39 – 54. Rosa,  E.,  Ekowati,  C.  N.,  Handayani,  T., Ikhsanudin,  A.,  Apriliani,  F.,  &
Arifiyanto,  A.  (2020). Characterization of entomopathogenic fungi as a natural biological control of American cockroaches  (Periplaneta  americana) .
21 (11).
https://doi.org/10.13057/biodiv/d21 1131 Sanjaya,  Y.,  Nurhaeni,  H.,  &  Halima,  M.
(2010).  Isolasi,  Identifikasi  dan
Karakterisasai  Jamur  Entomopatogen dari larva Spodoptera litura (Fabricius). Bionatura-Jurnal Ilmu-Ilmu Hayati Dan Fisik , 12 (3), 136 – 141.
Santos, A. C. da S., Diniz, A. G., Tiago, P. V., &
Oliveira, N. T. de. (2020). Entomopathogenic Fusarium species: a review  of  their  potential  for  the biological control of insects, implications  and  prospects. Fungal Biology Reviews , 34 (1), 41 – 57. https://doi.org/https://doi.org/10.10 16/j.fbr.2019.12.002 Suciatmih,  Kartika,  T.,  &  Yusuf,  S.  (2015). Jamur  Entomopatogen  dan  Aktivitas Enzim Ekstraselulernya. Berita Biologi ,
2 (14), 131 – 142. Tambingsila,  M.,  &  Rudias.  (2015).  Isolasi dan  Identifikasi  Cendawan  Berguna Asal  Poso  Potensinya  Sebagai  Agens
Pengendali  Serangga  Hama. AgroPet , 12 (2002), 23 – 30.
Wang,  X.  L.,  &  Yao,  Y. J.  (2011).  Host  insect species  of  ophiocordyceps  sinensis:  A review. ZooKeys , 127 , 43 – 59. https://doi.org/10.3897/zookeys.127. 802 Wāng, Y., Wang, R., Wáng, Y., Li, Y., Yang, R.-
H.,  Gong,  M.,  Shang,  J.-J.,  Zhang,  J.-S.,
Mao, W.-J., Zou, G., & Bao, D.-P. (2020). Diverse  function  and  regulation  of CmSnf1  in  entomopathogenic  fungus Cordyceps  militaris. Fungal  Genetics and Biology , 142 , 103415. https://doi.org/https://doi.org/10.10 16/j.fgb.2020.103415 Watanabe,  T.  (2010). Pictorial  Atlas  of  Soil and  Seed  Fungi:  Morphologies  of Cultured Fungi and Key to Species (3rd ed.). CRC Press.