## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI DARI EKSTRAK ETANOL DAUN
ADAM HAWA ( Rhoeo discolor L.Her) TERHADAP Propionibacterium Acnes , Staphylococcus Aureus DAN Staphylococcus Epidermidis
Maria Ulfa 1 , Sukriani Kursia 2 , Mardayani Novita Sari 2
1) Program Studi Profesi Apoteker Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar
2) Program Studi Sarjana Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Makassar
e-mail: 1) mariaulfa.adam@gmail.com
2) sukriani.winie@yahoo.com

## ABSTRAK
Tanaman  adam  hawa  ( Rhoeo  discolor L.  Her)  merupakan  tanaman  hias  yang sering  kita  jumpai  di  berbagai  taman  maupun  pekarangan.  Adapun  yang menjadi  ciri  khas  dari  tanaman  adam  hawa  ( Rhoeo  discolor L . Her)  ditandai dengan  adanya  warna  pigmen  merah  dan  pigmen  hijau  yang dihasilkan  dari senyawa  flavonoid  yaitu  antosianin.  Beberapa  hasil  penelitian  menunjukkan bahwa senyawa antosianin dapat digunakan sebagai agen antimikroba.Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menentukan  aktivitas  antibakteri ekstrak etanol daun adam hawa ( Rhoeo discolor L.Her) terhadap beberapa bakteri. Daun  adam  hawa  ( Rhoeo  discolor L.  Her)  diekstraksi  menggunakan  metode maserasi  dengan  pelarut  etanol  70%.  Selanjutnya  ekstrak  diuji  aktivitas antibakterinya  menggunakan  variasi  konsentrasi  15%,  20%  dan  25%  untuk bakteri Propionibacterium  acnes. Untuk  bakteri Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus  epidermidis menggunakan  variasi  konsentrasi  1%,  5%  dan  10%. Hasil  pengujian  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes diperoleh rata-rata diameter zona hambat sebesar  6,78  mm,  7,13  mm dan 7,21 mm sedangkan pada bakteri Staphylococcus aureus sebesar  6,63 mm, 6,65 mm dan 6,94 mm dan pada bakteri Staphylococcus epidermidis sebesar 6,58 mm, 6,64 mm dan 6,98 mm. Aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun adam hawa ( Rhoeo discolor L. Her) termasuk dalam kategori sedang.
Kata Kunci : Aktivitas antibakter ekstrak , Propionibacterium acnes , Staphylococcusureus, Staphylococcus epidermidis

## ABSTRACT
Rhoeo discolor L.Her is an ornamental plant often found in various gardens and patios. The characteristics of the adam hawa plant (Rhoeo discolor L. Her) are characterized by the  presence  of  red  pigments  and  green  pigments  produced  from  flavonoid compounds,namely  anthocyanins  .  Various  research  results  show  that  anthocyanin compounds can be used as antimicrobial agents. The leaves of adam hawa (Rhoeo discolor L.  Her)  were  extracted  by  the  maceration  method  with  70%  ethanol  as  solvent. Additionally,  the  extract  was  tested  for  its  antibacterial  activity  using  various concentrations  of  15%,  20%,  and  25%  for  the  Propionibacterium  acnes  bacteria.  For Staphylococcus  aureus  and  Staphylococcus  epidermidis  bacteria  using  concentration variations  of  1%,  5%  and  10%.  The  results  of  the  antibacterial  activity  test  against
Propionibacterium  acnes  showed  that  the  mean  diameter  of  the  zone  of  inhibition  was 6.78 mm, 7.13 mm and 7.21 mm while that for Staphylococcus aureus it was 6.63 mm ,
6.65 mm and 6.94 mm and for Staphylococcus epidermidis it was 6.58 mm, 6.64 mm and 6.98  mm. The  antibacterial  activity  of  the  ethanolic  extract  of  the  leaves  of  adam  hawa (Rhoeo discolor L. Her) is in the moderate category.
Keyword : Antibacterial activity, Extract, Propionibacterium acnes Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis

## PENDAHULUAN
Tanaman adam hawa adalah tanaman hias yang sering dilihat di taman dan  pekarangan.  Antosianin  adalah  salah  satu  flavonoid  dalam  kandungan kimia daun tanaman adam hawa. Kandungan kimia lainnya termasuk saponin, karotenoid,  terpenoid,  kumarin,  steroid,  dan  flavonoid  (Esanda,  2016),  Daun adam  hawa  bersifat  toksik  dan  memiliki  aktivitas  antiinflamasi.  Golongan senyawa  yang  berperan  adalah  flavonoid,  steroid  dan  tanin.  (Pratiwi  R  dkk, 2008).
Adapun yang menjadi ciri khas dari tanaman adam hawa ( Rhoeo discolor L . Her)  ditandai  dengan  adanya  warna  pigmen  merah  dan  pigmen  hijau  yang dihasilkan dari senyawa flavonoid yaitu antosianin. Antosianin mempunyai sifat polar  yang  mampu  melarutkan  senyawa  polar.  ekstrak  antosianin  daun  adam hawa memiliki kapasitas antioksidan sebesar 80,2389% (Husniati., dkk, 2020).
Beberapa hasil penelitian menunjukkan bahwa senyawa antosianin dapat digunakan  sebagai  agen  antimikroba  (Sharma et.al 2020).  Hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  oleh  Garcia  dkk,(2015)  menunjukkan  bahwa  efek  antimikroba dari  ekstrak  daun  adam  hawa  ( Rhoeo  discolor L.Her)  menggunakan  beberapa variasi  cairan  penyari  dan  metode  ekstraksi menghasilkan efek bakteriostatik dan bakterisidal.
Hasil  penelitian  lain  yang  telah  dilakukan  (Hance,  Shinde  and  Sangle, 2021)  mengatakan  bahwa  Staphylococcus  aureus,  Bacillus  subtilis,  dan Escherichia  coli  diuji dengan  metode  difusi  cakram. Ekstrak  etanol dan  ekstrak pelarut  menunjukkan  zona  inhibisi  pada  strain  bakteri  di  bawah  16  mm,  yang sesuai  dengan  kriteria  resistensi.  Selain  itu,  didukung  kembali  oleh  penelitian yang  dilakukan  oleh  Shinde  PR et  al ,  2021  Aktivitas  antibakteri  dilakukan terhadap  Staphylococcus  aureus,  Bacillus  subtilis,  Escherichia  coli,  dengan
metode  difusi  cakram.  Di  antara  ekstrak  pelarut,  ekstrak  etanol  menunjukkan zona  inhibisi  kurang  dari  16  mm  pada  strain  bakteri,  yang  diinterpretasikan dengan kriteria resistensi .
Berdasarkan  hal  tersebut  peneliti  ingin  melakukan  uji  aktivitas antibakteri daun adam hawa ( Rhoeo discolor L.Her) terhadap bakteri gram positif lainnya yaitu Propionibacterium acnes dan Staphylococcus epidermidis .  Berdasarkan latar  belakang  diatas,  maka  peneliti melakukan penelitian tentang Uji aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol daun adam hawa  ( Rhoeo discolor L.Her)  terhadap beberapa  bakteri penyebab kulit lainnya.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini adalah autoklaf ( Gea® ),  cawan  petri, Erlenmeyer ( Pyrex® ),  inkubator  ( Memmerk® )   jangka  sorong  ( WIPRO® )  ,jarum ose,  mikropipet,  microwave  ( Sam sung® ),  oven  ( Thermo® ),  rotava  por  ( Buchi® ), timbangan  analitik ( Mettler  Toledo® ),  tabung  reaksi ,vial.

## Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian  ini  adalah  Aquadest,  cotton swab steril, DMSO, ekstrak daun adam hawa ( Rhoeo discolor L.Her), etanol 70% ( ONEMED® ), larutan Mcfarlan d, Fluid Thioglycollate Medium (F TM) ( M.E.R.K® ), media Mueller Hinton agar (MHA) ( M.E.R.K® ), tetradisk ( Oxoid® ).

## Bakteri Uji
Bakteri  uji  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah Propionibacterium  acnes, Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus epidermidis

## Pengambilan Sampel
Sampel  yang  digunakan yaitu  daun  adam  hawa  ( Rhoeo  discolor L.Her)  yang diperoleh dari jalan danau tanjung bunga,       kecamatan Tamalate kota Makassar.

## Pengolahan sampel
Daun adam hawa ( Rhoeo discolor L.Her) yang diperoleh di timbang, lalu disortasi basah,  kemudian  dicuci  dengan  air  mengalir,  lalu  dirajang,  kemudian dikeringkan  dengan  cara  dijemur  dibawah  sinar  matahari  langsung  yang ditutupi  dengan  kain  hitam.  kemudian  disortasi  kering  untuk memisahkan
kotoran  yang  ikut  selama  pengeringan.  Simplisia  yang  telah  kering  diekstraksi dengan metode maserasi.

## Pembuatan Ekstrak Sampel
Pembuatan  ekstrak  dengan  menggunakan  metode  maserasi  menggunakan pelarut  etanol  70%.  Sampel  sebanyak  500  g  diperkecil  kembali  ukurannya  dan dimasukan kedalam  bejana, ditambahkan  5  L  pelarut  .  Direndam  selama  6  jam pertama  sambil  sesekali  diaduk,  kemudian  didiamkan  selama  18  jam.  Maserat dipisahkan,  ampas  hasil  maserasi  kemudian  dilakukan  remaserasi  dengan pengulangan  yang  sama.Maserat  yang  didapatkan  lalu  dipekatkan  dengan bantuan alat vacuum rotary evaporator hingga didapatkan ekstrak yang kental Pengujian  bebas  etanol  ekstrak  daun  adam  hawa  ( Rhoeo  discolor L.Her) dilakukan dengan cara ekstrak sebanyak 1 g dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian  ditambahkan  1  ml  pelarut  asam  sulfat  dan  asam  asetat,  lalu dipanaskan.  Hasil  uji  negatif  bila  tidak  tercium  bau  khas  ester  yang  khas  dari etanol

## Skrining Fitokimia

## Identifikasi Senyawa Antosianin
Identifikasi  antosianin  dilakukan  dengan  50  mg  ekstrak  sampel ditambahkan HCl 2M kemudian dipanaskan 100ºC selama 5 menit, amati warna yang terjadi, hasil positif bila timbul warna merah. Kemudian, sebanyak 50 mg ekstrak  sampel  ditambahkan  NaOH  2M  tetes  demi  tetes  sambil  diamati perubahan  warna  yang  terjadi.Hasil  positif  bila  timbul  warna  hijau  yang memudar secara perlahan-lahan.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  yang  digunakan  disterilkan  terlebih  dahulu.  Alat-alat  dari gelas dicuci  dan  dikeringkan.  Untuk  alat  kaca  yang  memiliki  skala  disterilkan menggunakan autoklaf pada suhu 121ºC selama 15 menit, alat yang terbuat dari kaca yang tidak memiliki skala disterilkan menggunakan oven pada suhu 180ºC selama  2  jam,  dan  ose  bulat  disterilkan  dengan  cara  dipijarkan  menggunakan lampu spiritus.

## Pembuatan Media

## Media FTM
Pembuatan 1000 ml FTM  dilakukan dengan menimbang 29,5gram FTM  dan  20 gram bacto agar dan disuspensikan dalam 1000 ml air suling dalam Erlenmeyer, kemudian dipanaskan hingga larut sempurna, dicek pHnya  yaitu  pada  pH  7. Medium  disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu 121ºC tekanan 1 atm selama 15 menit

## Media MHA
Sebanyak  17gram  MHA  ( Mueller  Hinton  Agar )  dimasukkan  ke  dalam Erlenmeyer dan ditambahkan 500 mL air suling. Campuran diaduk, dipanaskan sampai  larut  dan  mendidih,  lalu  diukur  pH  medium  sampai  pH  7,  medium disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121°C selama 1 jam.

## Peremajaan Bakteri
Masing-masing  bakteri  uji  yang  digunakan  di  ambil  satu  ose menggunakan  jarum  ose  steril  kemudian  diinokulasikan  dengan  cara digoreskan pada media agar miring dan diinkubasi selama 1x24 jam pada suhu 37°C. Setelah itu bakteri uji dapat digunakan.

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Sebanyak  1  ml  hasil  peremajaan  biakan  murni  bakteri  dimasukan kedalam  tabung  reaksi  yang  berisi  5  ml  NaCl  fisiologis  0,9%  kemudian dihomogenkan,  dibandingkan  dengan  standar  Mc  Farland  dengan  kepadatan bakteri  sebanyak  10 8 sel/ml,  kemudian  diencerkan  2  kali  pada  media  NaCl fisiologis

## Pembuatan Larutan Uji
Dibuat larutan uji dengan konsentrasi 15%, 20%, 25% untuk bakteri
Propionibacterium acnes dengan cara di timbang 0,3 g, 0,4 g, 0,5 g  ekstrak  etanol daun  adam  hawa ( Rhoeo  discolor L.  Her)  kemudian masing-masing dilarutkan dalam 2 ml etanol 70%,
Konsentrasi  1%,5%  dan  10%  pada  bakteri Staphylococcus  aureus dan Staphylococcus  epidermidis dengan  di  timbang  0,02  g,  0,1  g  dan  0,2  g  ekstrak kemudian masing-masing dilarutkan dalam 2 ml etanol 70%.

## Pengujian kuantitatif Aktivitas Antibakteri Metode Difusi
Medium  sebanyak  10  ml  dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri  steril. Selanjutnya diambil 1 swab steril suspensi bakteri digoreskan dalam cawan petri. Paper  disk  yang  telah  ditetesi  larutan  uji  20  µl,  diletakkan  di  permukaan medium, tetrasiklin sebagai kontrol positif dan etanol 70% pelarut awal sebagai kontrol  negatif.  Selanjutnya  cawan  petri  tersebut  diinkubasi  selama  1x24  jam pada  suhu  37°C.  Aktivitas  antibakteri  diamati  berdasarkan  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  di  sekeliling  paper  disk  dan  selanjutnya  dilakukan pengukuran terhadap zona hambat tersebut.

## Variabel Penelitian
Pada  penelitian  ini  menggunakan  jenis  variabel  yang terdiri  dari Variabel bebas dan variabel terikat.
1.   Variabel bebas
Konsentrasi aktivitas  antibakteri dari ekstrak etanol daun adam hawa ( Rhoeo discolor L.Her).
2.   Variabel Terikat
Aktivitas  senyawa  antibakteri  yang  memiliki  daya  hambat  terhadap beberapa bakteri .

## Jenis Data
Adapun data  yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah data kualitatif dan data kuantitatif.

## Analisis Data
Analisis  data  dilakukan  dengan  cara  pengamatan  diameter  zona hambat yang mengelilingi paper disk setelah masa inkubasi 1 x 24 jam, diukur menggunakan jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  penelitian  ini  sampel  yang  digunakan  adalah  daun  adam  hawa ( Rhoeo  discolor L.Her).  Pemilihan  daun  adam  hawa  sebagai  sampel  karena terdapat  senyawa  antosianin  yang  telah  diketahui  memiliki  potensi  sebagai antibakteri yang dapat melawan bakteri gram positif dan gram negatif (Garcia dkk, 2015).
Pada  penelitian  ini  pengambilan  zat  aktif    daun  adam  hawa  dilakukan dengan  menggunakan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  70% sebanyak  5  L  dengan  sampel  500  g.  Pemilihan  metode  maserasi  digunakan karena  merupakan  metode  yang  tidak  menggunakan  pemanasan  sehingga dapat  menjaga  stabilitas  senyawa  yang  terkandung  di  dalam  tanaman. Adapun  senyawa  yang  di  maksud  adalah  antosianin.  Hal  ini  sesuai  dengan hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh  (Nasrullah  dkk,2020)  bahwa  antosianin dapat  bertahan  pada  suhu  40ºC  dan  50ºC.  Hal  ini  pula  yang  mendasari penggunaan suhu saat penguapan ekstrak menggunakan suhu 50ºC.
Uji  identifikasi  senyawa  antosianin  ekstrak  etanol  daun  adam  hawa. Identifikasi  senyawa  antosianin  yang  dilakukan  dalam  penelitian  ini  dapat dilihat pada tabel.
Tabel 1. Uji identifikasi Senyawa Antosianin
Golongan Senyawa Perlakuan Literatur Hasil Ket Antosianin Ekstrak + NaoH 2M Warna  Hijau  kebiruan perlahan memudar Terbentuk warna hijau biru memudar + Ekstrak + HCL 2M Dipanaskan Warna merah Terbentuk warna merah +
Keterangan : (+) Mengandung senyawa
Analisis  kualitatif  bertujuan  untuk  mengidentifikasi  keberadaan antosianin  pada  ekstrak  daun  adam  hawa.  Hasil  analisis  kualitatif  dapat dilihat  pada  tabel  1  dimana  dengan  penambahan  HCl  2M  terbentuk  warna merah  dan  penambahan  NaOH  2M  mengubah  warna  merah  menjadi  warna hijau  kebiruan  pada  ekstrak  (H.E.Khoo,  dkk  2017).  Perubahan  warna  ekstrak dari  merah  (kondisi  asam)  menjadi  hijau  kebiruan  (kondisi  basa) memperlihatkan  bahwa  terdapat  antosianin  dalam  ekstrak  daun  adam  hawa. Reaksi  yang  terbentuk  ketika  warna  merah  terbentuk  oleh  kation  flavilium, dimana  jumlah  gugus  metoksi  dalam  struktur  antosianin  lebih  dominan dibandingkan  gugus  hidroksil.  Antosianin  adalah  pigmen  yang  larut  dalam
air  yang  memberikan  warna  merah  muda/merah/ungu/biru  pada  jaringan tanaman.  Perubahan  warna  jaringan  tanaman  biasanya  dikaitkan  dengan variasi nilai pH di vakuola sentral (Yuzuak et al .2023).
Ekstrak  etanol  daun  adam  hawa  dalam  penelitian  ini  diuji  pada konsentrasi  15%,  20%  dan  25%  pada  bakteri Propionibacterium  acnes, dengan menggunakan  metode  difusi  cakram.  Alasan  penggunaan konsentrasi  tersebut karena sebelumnya telah dilakukan orientasi pada konsentrasi 1%, 5% dan 10% menunjukkan tidak adanya aktivitas antibakteri. Berdasarkan hasil pengukuran diameter  zona  hambat  dari  masing-masing  konsentrasi  didapatkan  hasil diameter zona hambat yang paling besar yaitu 7,21 mm pada konsentrasi 25%. Hasil pengukuran diameter zona hambat dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel  2.  Hasil  uji  aktivitas  ekstrak  etanol  daun  adam  hawa  ( Rhoeo  discolor L.Her) terhadap Propionibacterium acnes .
Bakteri Uji Replikasi Diameter Zona Hambat P.acnes (mm) Kontrol (+) (mm) Kontrol (-) (mm) 15% 20% 25% Propionibacterium acnes I 6,51 7,04 7,26 26,80 0 II 6,89 7,15 7,16 26,45 0 III 6,94 7,21 7,29 26,75 0 Rata-rata  6,78 ± 0,23  7,13± 0,08  7,21±0,06  26,66±0,18         0
Tabel 3.Hasil uji aktivitas ekstrak etanol daun adam hawa ( Rhoeo discolor L.Her) terhadap Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis
Berdasarkan  data  yang  ditunjukkan  pada  tabel  uji  aktivitas  terhadap Propionibacterium  acnes hasil  dari  diameter  zona  hambat  tersebut  memiliki aktivitas antibakteri namun termasuk kategori yang lemah, sehingga dilakukan pengujian  terhadap  bakteri  penyebab  jerawat  lainnya  seperti Staphylococcus aureus dan Staphylococcus  epidermidis dengan  menggunakan  variasi  konsentrasi 1%,  5%  dan  10%.  Berdasarkan  hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  pada
Bakteri Uji Diameter Zona Hambat (mm) Kontrol (+) (mm) Kontrol (-) (mm) 1% 5% 10% Staphylococcus aureus 6,63  6,65 6,94 23,89 0 Staphylococcus epidermidis 6,58  6,64 6,98 23,06 0
kedua  bakteri  uji  tersebut  tetap  memberikan  hasil  aktivitas  antibakteri  yang termasuk  dalam  kategori  sedang.  Hal  ini  merujuk  pada  penelitian  yang menggolongkan respon lemah (diameter ≤ 5 mm), sedang (diameter 5-10 mm), kuat  (diameter  10-20  mm),  dan  sangat  kuat  (diameter ≥ 20  mm).  Hal  ini sejalan  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Shinde  PR et  al .  2021  bahwa Aktivitas  antibakteri  dilakukan  terhadap Staphylococcus  aureus,  Bacillus  subtilis,
Escherichia coli , dengan metode difusi cakram. Di antara ekstrak pelarut, ekstrak etanol menunjukkan zona inhibisi kurang dari 16 mm pada strain bakteri, yang diinterpretasikan  dengan  kriteria  resistensi.  Hal  ini  dapat  dikarenakan  pada setiap jenis bakteri memiliki sensitivitas dan respon sel yang berbeda.

## Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  tentang  uji  aktivitas  ekstrak etanol    daun  adam    hawa    ( Rhoeo    discolor L.Her)    terhadap  beberapa  bakteri dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  adam  hawa  memiliki  aktivitas antibakteri yang termasuk kedalam kategori sedang.

## DAFTAR PUSTAKA
Esanda,  H.  2016.  Isolasi,  Identifikasi  Dan  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Senyawa Flavonoid  Fraksi  Kloroform  Dan  Fraksi  Etil  Asetat  Daun  Tanaman Adam  Hawa (Rhoeo  Discolor (L’her.)  Hance)  Dengan  Metode  2,2 - Diphenyl-1-Picrylhydrazyl  (Dpph). Skripsi .  Universitas  Sanata  Dharma; Bali
Garcia V, R., Garcia, R., Barba D, B Fajardo R O., Serna Saldivar, S., & Cardineau, G.  2015.  Antimicrobial  Activi  ty  of  Rhoeo  discolor  Phenoli  c  Rich Extracts Determined by Flow CytometryMolecule s,; 20(10),
H.  E.  Khoo,  A.  Azlan,  S.  T.  Tang,  and  S.  M.  Lim.  2017  .Anthocyanidins  and Anthoc yanins: Colored Pigments as Food, Pharmaceutical Ingre dients, and The Potential Health Benefits, Food Nutr . Res.,; 61(1),
Pratiwi  R.,  Harlia,  Wibowo  M.A. . 2017.  Aktivitas  Antiinflamasi  dan  Toksisitas Dari  Ekstrak  Daun  Nanas  Kerang  ( Rhoeo  Discolor ), Jurnal  Kimia Khatulistiwa , 6(2):29-36.
Hance, Shinde and Sangle, S. 2021 ‘Exploration of pharmacognostic, phytochemical and antibacterial potential of Rhoeo discolor Hance’, in. Available at: https://www.semanticscholar.org/paper/Exploration-of- pharmacognostic%2C-phytochemical-and-Hance-
Shinde/d0574704ca658d409878525218d208620a7ba435 (Accessed: 28 June 2023).
Husniati, Junaidi Permana, Tati Suhartati. 2020. Pengayaan Antioksidan Untuk Beras  Merah Artificial Dengan  Ekstrak  Pewarna  Merah  Alami Rhoeo Discolor L. Her. Biopropal Industri . 11(1): 33-40
Sharma, N., Tiwari, V., Vats, S., Kumari, A., Chunduri, V., Kaur, S., Kapoor, P., & Garg,  M.  2020.  Evaluation  of  Anthocyanin  Content,  Antioxidant Potential and Antimicrobial Activity of Black, Purple and Blue Colored Wheat  Flour  and  Wheat-Grass  Juice  against  Common  Human Pathogens. Molecules (Basel, Switzerland) , 25 (24), 5785.
Shinde PR, Gujrani PV, Gupta AR, Dhondge PG and Sangle SJ. 2021. Eksplorasi potensi farmakognostik, fitokimia dan antibakteri Rhoeo discolor Hance . J Pharmacogn Phytochem ;10(1):1625-1630
Nasrullah,  Husain  H,  Syahrir  M.  2020.  Pengaruh  Suhu  Dan  Waktu  Pemanasan Terhadap Stabilitas Pigmen Antosianin Ekstrak Asam Sitrat Kulit Buah Naga Merah (Hylocereus polyrizus) Dan Aplikasi Pada Bahan Pangan. Jurnal Chemica : 21 (2), 150 - 162
Yuzuak,  Seyit,  Qing  Ma,  Yin  Lu,  and  De- Yu  Xie.  2023.  ‘HPLC -MS(n) Applications  in  the  Analysis  of  Anthocyanins  in  Fruits’.  High Performance  Liquid  Chromatography  -  Recent  Advances  and Applications. IntechOpen. doi:10.5772/intechopen.110466.