## JIUBJ
Jurnal Ilmiah Universitas Batanghari Jambi, 21(3), Oktober 2021, 1091-1094 Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada Masyarakat universitas Batanghari Jambi
Uji Potensi Triterpenoid dari Kulit Batang Waru Jawa (Hibiscus tiliaceus L.) sebagai Kandidat Antiinflamasi pada Mencit (Mus musculus) Model

## Rheumatoid Arthritis Berbasis in Silico
Lisa Savitri 1 *, Elfred Rinaldo Kasimo 1 , Datin An Nisa Sukmawati 2 , Syntia Tanu Juwita 1 , Eka Wahyuningtiyas 1 , Ana Retnowati 1
1 Program Studi Teknologi Laboratorium Medis, Universitas Kadiri, Jalan Selomangleng no. 1 Kota Kediri
2 Program Studi Farmasi, Universitas Kadiri, Jalan Selomangleng no. 1 Kota Kediri *Correspondence email: lisasavitri@unik-kediri.ac.id
Abstrak. Waru  jawa ( Hibiscus  tiliaceus L.)  merupakan tanaman  yang  berfungsi  sebagai  antiinflamasi. Senyawa  dari  tumbuhan waru  jawa  terutama  kulit  batangnya  dapat  dikelompokkan  menjadi  alkaloid,  flavonoid,  triterpenoid,  dan  steroid.  Kandungan triterpenoid  dari  kulit  batang  waru  jawa  diuji  aktivitas  biokimianya,  sehingga  diharapkan  kulit  batang  waru  jawa  dapat dimanfaatkan secara optimal. Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui potensi triterpenoid dari kulit  batang waru  jawa sebagai kandidat  antiinflamasi  pada  mencit  ( Mus  musculus )  model  rheumatoid  arthritis  berbasis in  silico .  Analisis  potensi  triterpenoid pada mencit dilakukan dengan menggunakan aplikasi STITCH, yang merupakan database interaksi yang diketahui dan diprediksi antara  bahan  kimia  dan  protein  yang  ditemukan  pada  makhluk  hidup.  Interaksi  yang  dimaksud  adalah  asosiasi  fisik  dan fungsional, data yang terdapat dalam STITCH berasal dari prediksi komputasional, transfer pengetahuan antar organisme, dan dari interaksi  yang dikumpulkan  dari database lain.  Analisis  mekanisme triterpenoid kulit  batang  waru  jawa terhadap  mencit  model rheumatoid arthritis berbasis in silico menggunakan aplikasi Kegg. Berdasarkan hasil analisis dapat diketahui bahwa triterpenoid yang berasal dari kulit batang waru jawa berperan penting dalam mengurangi peradangan. Triterpenoid menargetkan NF-κB, yang mengarah  ke downregulasi .  Triterpenoid  telah  ditemukan  memiliki  banyak  fungsi,  meskipun  konsentrasi  efektifnya  untuk berbagai  efek  seluler  dapat  sangat  bervariasi.  Tergantung  pada  dosis  yang  diberikan,  triterpenoid  dapat  menginduksi  efek antiinflamasi, penghambatan proliferasi, apoptosis, sitoprotektif, dan pembeda tumor.
Kata kunci : kulit batang waru jawa; triterpenoid; rheumatoid arthritis; in silico
Abstract.  Waru  jawa  (Hibiscus  tiliaceus  L.)  is  a plant  that  functions  as  an  anti-inflammatory.  Compounds  from  the  waru  jawa plant, especially the bark can be grouped into alkaloids, flavonoids, triterpenoids, and steroids. The content of triterpenoids from the waru jawa stem bark was tested for their biochemical activity, so that it is expected that the bark of Javanese waru stems can be  used  optimally.  This  study  aims  to  determine  the  potential  of  triterpenoids  from  waru  jawa  stem  bark  as  anti-inflammatory candidates  in  mice  (Mus  musculus)  rheumatoid  arthritis  model  in  silico-based.  Potential  analysis  of  triterpenoids  in  mice  was carried out using the STITCH, which is a database of known and predicted interactions between chemicals and proteins found in living  things.  Interactions  in  question  are  physical  and  functional  associations,  the  data  contained  in  STITCH  comes  from computational  predictions,  transfer  of  knowledge  between  organisms,  and  from  interactions  collected  from  other  databases. Analysis of the triterpenoid mechanism of waru jawa stem bark against rheumatoid arthritis model mice in silico-based using the bioinformatics application  Kegg. Based  on  the  results of  the  analysis, it can be seen that triterpenoids  derived from  waru jawa stem  bark  sources  play  an  important  role  in  reducing  inflammation.  The  triterpenoids  target  NF-κB,  leading  to  its downregulation.  Triterpenoids  have  been  found  to  have  many  functions,  although  their  effective  concentrations  for  various cellular  effects  may  vary  widely.  Depending  upon  the  dose  administered,  triterpenoids  can  induce  anti-inflammatory, proliferation-arresting, apoptotic effects, cytoprotective, and tumor-differentiating.
Keywords: waru jawa stem bark; triterpenoid; rheumatoid arthritis; in silico

## PENDAHULUAN
Rheumatoid  arthritis  (RA)  adalah  penyakit autoimun  sistemik  (Symmons et  al .,  2006).  Insiden  dan prevalensi  RA  berbeda-beda  berdasarkan  populasi, metode  statistik,  dan  definisi  penyakit.  Kejadian  RA  di Amerika Utara dan Eropa Utara diperkirakan 20 sampai 50  kasus  per  100.000  penduduk  dan  peningkatan prevalensi  dari  0,5%  menjadi  1,1%.  Insiden  dan prevalensi lebih rendah telah dilaporkan di Eropa Selatan dan  beberapa  negara  berkembang.  RA  adalah  penyakit multifaktorial yang dihasilkan dari interaksi antara faktor genetik dan lingkungan (Tobon et al ., 2009).
Darmawan et  al .  (1993)  dalam  Wong, et  al . (2010)  melaporkan  hasil  penelitian  mengenai  RA  di Jawa  Tengah  yang  dilakukan  di  dua  pedesaan  dengan populasi  yang  terdiri  dari  2.499  perempuan  dan  2.184 laki-laki  (total  4.683)  dan  dua  kota  urban  dengan populasi  590  perempuan  dan  481  laki-laki  (total  1.071) (tidak ada stratifikasi sosial dari populasi tersebut). Hasil penelitian  tersebut  menunjukkan  bahwa  kemungkinan penderita  RA  di  pedesaan  sebesar  0,3%,  sedangkan  di perkotaan  sebesar  0,5%.  Prevalensi  penyakit  RA meningkat  sejalan  dengan  peningkatan  usia.  Prevalensi penyakit  ini  pada  penduduk  usia  65  tahun  ke  atas  di
Lisa Savitri et al, Uji Potensi Triterpenoid dari Kulit Batang Waru Jawa (Hibiscus tiliaceus L.) sebagai Kandidat Antiinflamasi pada Mencit (Mus musculus) Model Rheumatoid Arthritis Berbasis in Silico
negara-negara  maju  sebesar  41-53%  pada  tahun  2005 (Mariler dan Eggimann, 2005). RA merupakan inflamasi sendi kronik yang ditandai dengan pola tulang yang khas dan kerusakan sendi.
Inflamasi  kronik  RA  menyebabkan  hipertropi membran  sinovium,  sehingga  terjadi  hambatan  aliran darah  dan  nekrosis  sel.  Interleukin-1  beta  (IL-1β)  dan tumor  nekrosis  faktor-α  (TNF-α).  Beberapa  studi menunjukkan  penurunan  insiden  dan  prevalensi  setelah tahun  1960-an  (Tobon et  al .,  2009).  Obat  yang  paling banyak digunakan untuk terapi nyeri, inflamasi, RA, dan osteoarthritis  adalah  obat  antiinflamasi  nonsteroid (AINS).  Mekanisme  aksi  obat  AINS  adalah  melalui penghambatan  aktivitas  enzim  siklooksigenase  (COX). Enzim  ini  berperan  dalam  mengkatalisis  biosintesis prostaglandin (PG), prostasiklin, dan tromboksan, selain menunjukkan efek antiinflamasi, obat ini juga menunjukkan  efek  kemoprotektif  pada  profilaksis kanker  kolorektal  dan  payudara  (Smith et  al .,  1996; Ashok dan Gaur, 2014; Gupta dan Yadav, 2011).
Popularitas  terapi herbal mulai meningkat saat ini (Kamiensky  dan  Keogh,  2006).  Indonesia  merupakan megabiodiversity terbesar  di  dunia  yang  terdiri  dari tumbuhan  tropis  dan  biota  laut.  Bagian  batang  secara tradisional  oleh  masyarakat  lokal  untuk  membuat  tali dan  juga  ada  yang  sebagai  bahan  kayu  bakar. Berdasarkan laporan di atas, penelitian  ini mengusulkan untuk  melakukan  uji  potensi  triterpenoid  dari  kulit batang  waru  jawa  (Hibiscus  tiliaceus  L.)  sebagai kandidat  antiinflamasi  pada  mencit  (Mus  musculus) model rheumatoid arthritis berbasis in silico .

## METODE
Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah  triterpenoid dari  kulit  batang  waru  jawa  ( Hibiscus  tiliaceus L.). Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah triterpenoid  dari  kulit  batang  waru  jawa  ( Hibiscus tiliaceus L.) berbasis in silico .

## Mengkaji Kandungan Zat dalam Kulit Batang Waru
Jawa
Zat  yang  terdapat  pada  kulit  batang  waru  jawa ( Hibiscus  tiliaceus L.)  dikaji  secara  bioinformatika menggunakan  aplikasi  PubChem,  selanjutnya  dilakukan pemilihan  pada  komponen  zat  yang  mempunyai persentase  paling  tinggi  dan  secara  kajian  teori  dapat dijadikan  sebagai  bahan  antiinflamasi  pada  rheumatoid arthritis.

## Mengkaji Potensi Triterpenoid
Pengkajian  potensi  triterpenoid  pada  kulit  batang waru  jawa  ( Hibiscus  tiliaceus L.)  dilkerjakan  secara bioinformatika dengan aplikasi PASS Online.
Menganalisis  Kerja  Triterpenoid  dari  Kulit  Batang Waru  Jawa  (Hibiscus  tiliaceus  L.)  sebagai  Kandidat
Antiinflamasi  pada  Mencit  (Mus  musculus)  Model Rheumatoid Arthritis Berbasis in Silico
Analisis mekanisme triterpenoid pada kulit batang waru  jawa  ( Hibiscus  tiliaceus L.)  sebagai  kandidat antiinflamasi  pada  mencit  ( Mus  musculus )  model rheumatoid arthritis menggunakan aplikasi bioinformatika Kegg.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Merujuk pada penelitian yang telah dilakukan oleh Savitri  dan  Ihsan  (2020)  mengenai  isolasi  triterpenoid dari  tanaman  waru  jawa  ( Hibiscus  tiliaceus L.)  dengan maserasi  menggunakan  n-heksana  menunjukkan  bahwa maserasi  3,2  kg  serbuk  kering  kulit  batang  waru  jawa menghasilkan ekstrak kental n-heksana sebesar 13,06 g.
Uji fitokimia menggunakan pereaksi Liebermann- Burchard  menunjukkan  ekstrak  kental  n-heksana mengandung triterpenoid. Ekstrak kental n-heksana yang dipisahkan  dengan  kromatografi  kolom  menghasilkan isolat  triterpenoid  sebanyak  6  fraksi.  Identifikasi menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  menunjukkan adanya serapan maksimum untuk fraksi 1, 2, dan 3 pada panjang gelombang 216,50 nm, 217 nm, dan 228,50 nm (Savitri dan Ihsan, 2020).
Triterpenoid  dari  kulit  batang  waru  jawa  berbasis in
silico yang didapatkan dari
https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/65064 dengan Canonical SMILES sebagai berikut: CC1(CCC2(CCC3(C(=CCC4C3(CCC5C4(CCC(C5(C)C OS(=O)(=O)O)O)C)C)C2C1)C)C(=O)O)C.
Hasil  analisis  potensi  triterpenoid  pada  kulit batang waru jawa ditampilkan pada Tabel berikut ini.
Tabel 1. Analisis Potensi Triterpenoid pada Kulit Batang Waru Jawa ( Hibiscus tiliaceus L.) Pa Pi Activity 0,959 0,002 Benzoate-CoA ligase inhibitor 0,951 0,001 Phospholipase C inhibitor 0,949 0,002 Hepatoprotectant 0,949 0,002 Wound healing agent 0,935 0,002 Chemopreventive 0,914 0,001 Transcription factor NF kappa B stimulant 0,914 0,001 Transcription factor stimulant 0,900 0,003 Insulin promoter 0,892 0,001

## Chitinase inhibitor
Berdasarkan  analisis  yang  dilakukan  diketahui bahwa  triterpenoid  pada  kulit  batang  waru  jawa merupakan transcription  factor  NF  kappa  B  (NF-κB) stimulant , dengan  nilai Pa 0,914 dan Pi 0,001, sehingga memiliki  makna  bahwa  aktivitas  tersebut  memiliki  nilai yang tinggi. Peran jalur inflamasi yang dimediasi NF-κB dalam  transformasi  seluler  dapat  dilihat  pada  Gambar berikut ini.
Lisa Savitri et al, Uji Potensi Triterpenoid dari Kulit Batang Waru Jawa (Hibiscus tiliaceus L.) sebagai Kandidat Antiinflamasi pada Mencit (Mus musculus) Model Rheumatoid Arthritis Berbasis in Silico
Gambar 1. Peran Jalur Inflamasi yang Dimediasi NF-κB dalam Transformasi Seluler (Vivek et al ., 2010)
Pada  aktivasi  protein  IκBα,  penghambat  NF-κB, mengalami  fosforilasi,  ubiquitinasi,  dan  degradasi.  p50 dan p65 kemudian dilepaskan  untuk ditranslokasikan  ke nukleus,  berikatan  dengan  DNA  spesifik  sekuens  hadir dalam  promotor  berbagai  gen,  dan  memulai  transkripsi lebih dari 400 gen. Kinase yang menyebabkan fosforilasi IκBα  disebut  IκBα  kinase  (IKK).  Sedangkan  IKKβ memediasi  jalur  aktivasi  NF-κB  klasik/kanonik,  IKKκ memediasi  jalur  nonkanonik  jalan.  IKK  sendiri  harus diaktifkan sebelum dapat mengaktifkan IκBα. Lebih dari selusin  kinase  memiliki  telah  dijelaskan  yang  dapat mengaktifkan IKK.
Sejumlah besar bukti menandakan peran peradangan  dalam  perkembangan  kanker  melalui mediator  seperti  spesies  oksigen  reaktif  (ROS),  radikal bebas,  dan  sitokin  inflamasi  seperti  tumor  faktor nekrosis-α  (TNFα),  limfotoksin,  dan  faktor  angiogenik juga  diketahui  mempengaruhi  onkogenesis  adalah  jalur pensinyalan  yang  pada  sel  normal  terlibat  dalam homeostasis jaringan.
Beberapa  target  molekul  triterpenoid  yang  paling umum  diketahui  terlibat  dalam  pengobatan  dan pencegahan  kanker  telah  ditargetkan  sesuai  dengan pengetahuan  yang  komprehensif  tentang  pertumbuhan tumor dan metastasis. Pendekatan ini akan memaksimalkan  efek  triterpenoid  dan  meminimalkan efek samping dengan multitargeting sel atau proses yang memungkinkan  kanker  untuk  bertahan  hidup  dan menyebar  pada  manusia.  Peradangan  mendorong perkembangan  tumor  baik  melalui  nonimun  maupun imun.
NF-κB  adalah  faktor  transkripsi  sentral  yang memediasi  respon  imun  inflamasi  dan  bawaan.  NF-κB mungkin  diaktifkan  oleh  berbagai  faktor,  termasuk sitokin,  mikroba  patogen,  dan  oksidatif,  genotoksik, fisiologis,  atau  faktor  stres  kimia.  Selain  itu,  sitokin proinflamasi dan infeksi dapat memainkan peran penting dalam  stimulasi  aktivitas  IKK,  yang  mengarah  pada konstitutif aktivasi NF-kB (Karin et al ., 2004; Hayden et al ., 2004; Janssens et al ., 2006)
Disregulasi dan produksi yang berlebihan menyebabkan  kanker  dan  penyakit  lainnya.  TNF  juga berperan  dalam  aktivasi  NF-κB  dengan  mengikat reseptor  TNF  yang  ada  di  permukaan  sel  yang  pada gilirannya  memicu  jalur  yang  mengarah  pada  aktivasi IKK  (Aggarwal et  al .,  2009).  Interleukin  adalah sekelompok  sitokin  yang  dilepaskan  dalam  tubuh  dari banyak sel sebagai respons terhadap berbagai rangsangan.  Saat  IL-1β  bermain  peran  penting  dalam respon  inflamasi  terhadap  infeksi  dengan  meningkatkan ekspresi  faktor  adhesi  endotel,  sehingga  memungkinkan infiltrasi  leukosit  di  tempat  infeksi,  IL-6  adalah  sitokin proinflamasi  yang  dilepaskan  sebagai  respons  terhadap trauma  atau  kerusakan  jaringan.  IL-8,  anggota  dari keluarga  kemokin  CXC  juga  dikenal  sebagai  CXCL8, dapat  berfungsi  sebagai  mitogenik,  angiogenik,  dan faktor mutagenik mempromosikan perkembangan kanker (Xie, 2001).
Sel-sel  inflamasi  dan  regulatornya  ditemukan untuk  memfasilitasi  angiogenesis  dan  mendorong pertumbuhan,  invasi,  dan  metastasis  sel  tumor  (Garg et al .,  2002).  Tingkat  normal  beberapa  enzim  seperti inducible  nitric oksida  sintase  (iNOS)  dan  COX-2 memainkan  peran  penting  dalam  respons  perlindungan fisiologis terhadap cedera jaringan, tetapi jika diekspresikan dalam jumlah berlebihan, enzim inflamasi ini  dapat  menyebabkan  karsinogenesis  (Coussens et  al ., 2002; Nathan, 2002; Balkwill et al ., 2005)
Pada  jaringan  tumor,  kadar  prostaglandin  (PG) sering  meningkat.  PG  merupakan  mediator  inflamasi endogen dan dibentuk dari asam arakidonat oleh COX-1 dan  COX-2  yang  dapat  diinduksi.  Produksi  tingkat  PG yang  lebih  tinggi  diperkirakan  menyebabkan  cedera seluler  dan  akhirnya  menyebabkan  karsinogenesis dengan  menghambat  apoptosis,  merangsang  proliferasi sel, dan mempromosikan angiogenesis dan invasi tumor (Ulrich et  al .,  2001).  Triterpenoid  sikloartana  dari Cimicifuga dahurica menekan ekspresi protein cdc2 dan COX-2.  Hasil  ini  menyiratkan  bahwa  triterpenoid memiliki aktivitas antitumor potensial dan mengerahkan sitotoksisitasnya  melalui  apoptosis  dan  sel  G2/M  siklus penangkapan (Tian et al ., 2005).

## SIMPULAN
Kesimpulan  dari  penelitian  yang  telah  dailakukan adalah triterpenoid dari kulit batang waru jawa ( Hibiscus tiliaceus L.)  memiliki  potensi  sebagai  kandidat antiinflamasi  pada  mencit  ( Mus  musculus )  model rheumatoid  arthritis  berbasis in  silico .  Mekanisme potensi  triterpenoid  dari  kulit  batang  waru  jawa ( Hibiscus  tiliaceus L.)  sebagai  kandidat  antiinflamasi adalah  melalui  faktor  transkripsi  NF-kB  pada  jalur COX-2  pada  mencit  ( Mus  musculus )  model  rheumatoid arthritis  berbasis in  silico ,  dengan  nilai  Pa  0,914 dan  Pi 0,001,  sehingga  memiliki  makna  bahwa  aktivitas tersebut memiliki nilai yang tinggi.
Lisa Savitri et al, Uji Potensi Triterpenoid dari Kulit Batang Waru Jawa (Hibiscus tiliaceus L.) sebagai Kandidat Antiinflamasi pada Mencit (Mus musculus) Model Rheumatoid Arthritis Berbasis in Silico

## DAFTAR PUSTAKA
Aggarwal  B.B.,  Vijayalekshmi  R.V.,  Sung  B.  Targeting inflammatory  pathways  for  prevention  and therapy  of  cancer:  short-  term  friend,  long-term foe. Clin. Cancer Res . 2009;15:425–430.
Ashok,  K.  &  Gaur,  A.  2014.  Review  Article:
Remembering Cyclooxygenases: A Brief Review. Asian Journal of Pharmaceutical Technology and Innovation , 2 (4): 1-8.
Garg  A.,  Aggarwal  B.B.  Nuclear  transcription  factor- kappaB  as  a  target  for  cancer  drug  development. Leukemia. 2002 ;16:1053–1068.
Coussens  L.M.,  Werb  Z.  Inflammation  and  cancer.
Nature . 2002;420:860–867.
Balkwill  F.,  Charles  K.A.,  Mantovani  A.  Smoldering and  polarized  inflammation  in  the  initiation  and promotion  of  malignant  disease. Cancer  Cell. 2005;7:211–217.
Gupta,  V.  &  Yadav,  S.K.  2011.  Review  Article: Cyclooxygenase-2:
Pathway
from Anti Inflammatory  to Anti-Cancer Drugs.  International
Journal of Pharmacy and Life Sciences , 2(2): 571-
582.
Hayden M.S., Ghosh S. Signaling to NF-kappaB. Genes Dev . 2004;18:2195–2224.
Janssens  S.,  Tschopp  J.  Signals  from  within:  the  DNA- damage-induced NF-kappaB response. Cell Death Differ . 2006;13:773–784.
Kamiensky, M. & Keogh J. 2006. Vitamin and Minerals. In: Pharmacology
Demystified.
USA:
Mc.GrawHill Companies Inc.
Karin  M.,  Cao  Y.,  Greten  F.R.,  Li  Z.W.  NF  kappaB  in cancer: from innocent by stander to major culprit.
Nat. Rev. Cancer . 2002;2:301-310.
Mariler, M.M. & Eggimann, B.S. 2005. The  Prevalence of  Rheumatic  Diseases  in  Elderly  in  Developed Countries  an  Its  Evolution  over  Time. Int.  J.  of Public Health , 50 (1): 45-51.
Nathan  C.  Points  of  control  in  inflammation. Nature. 2002;420:846–852.
Savitri,  L.  &  Ihsan,  K.  Aktivitas  Triterpenoid  Kulit Batang  Waru  Jawa  ( Hibiscus  tiliaceus L.) terhadap Bakteri Escherichia coli . J urnal Kesehatan  Perintis  (Perintis’s  Health  Journal) ,  7 (1) 2020: 41-50
Savitri,  L.  &  Ihsan,  K.  Uji  Aktivitas  Triterpenoid  Kulit Batang  Waru  Jawa  ( Hibiscus  tiliaceus L.) terhadap Staphylococcus  aureus . TEKLABMED Jurnal  Teknologi  Laboratorium  Medik, 1  (1) 2020: 13-20.
Smith,  W.L.,  Garavito,  R.M.,  &  DeWitt,  D.L.  1996. Minireview: Prostaglandin Endoperoxide H Synthases  (Cyclooxygenases)-1  and  -  2. The
Journal of Biological Chemistry , 271 (52): 33157- 33160.
Symmons,  D.,  Mathers,  C.,  &  Pfleger,  B.  2006.  The Global  Burden  Rheumatoid  Arthritis  in  the  Year 2000. Global Burden of Disease 2000.
Tian  Z.,  Yang  M.,  Huang  F.,  Li  K.,  Si  J.,  Shi  L.,  Chen S.,  Xiao  P.  Cytotoxicity  of  three  cycloartane triterpenoids  from  Cimicifuga  dahurica. Cancer Lett. 2005;226:65–75.
Tobon,  G.J.,  Youinou,  P.,  &  Saraux,  A.  2009. Autoimmunity  Reviews:  the  Environment,  Geo- Epidemiology, and Autoimmune Disease:
Rheumatoid Arthritis . Brest: Elsevier.
Ulrich  C.M.,  Potter  J.D.  Testing  for  colon  neoplasia susceptibility variants at the human Cox2 locus. J.
Natl. Cancer Inst . 2001;93:1572–1574.
Vivek  R.  Yadav,  Sahdeo  Prasad,  Bokyung  Sung, Ramaswamy Kannappan, and Bharat B.
Aggarwal.  Targeting  Inflammatory  Pathways  by Triterpenoids  for  Prevention  and  Treatment  of Cancer. Toxins  (Basel) .  2010  Oct;  2(10):  2428 2466.
Wong,  R.,  Davis,  A.M.,  Badley,  E.,  Grewal,  R.,  & Mohammed, M. 2010. Prevalence of Arthritis and Rheumatic Diseases Around the World a Growing Burden  and  Implications  for  Health  Care  Needs. Toronto:  Arthritis  Community  Research  and Evaluation Unit.
Xie  K.  Interleukin-8  and  human  cancer  biology.
Cytokine Growth Factor Rev. 2001;12:375–391.