## Original Research Paper
Pelatihan  Preparasi  Oosit  untuk  Pengamatan  Kromosom Lampbrush pada Guru-Guru Biologi di Lombok Barat
AA. Sukarso 1 , I Gde Mertha 1* , Ahmad Raksun 1 , I Wayan Merta 1 , Syamsul Bahri 1
1 Program Studi Pendidikan Biologi, FKIP, Universitas Mataram, Mataram, Indonesia

## https://doi.org/10.29303/jpmpi.v5i4.2584
Sitasi  :  Sukarso,  A.A.,  Mertha,  I.  G.,  Raksun,  A.,  Merta,  I.  W.,  &  Bahri,  S.  (2022). Pelatihan  Preparasi  Oosit  untuk Pengamatan  Kromosom  Lampbrush  pada  Guru-Guru  Biologi  di  Lombok  Barat. Jurnal  Pengabdian  Magister Pendidikan IPA , 5(4)

## Article history
Received: 20 Oktober 2022
Revised: 30 November 2022 Accepted: 8 Desember 2022
*Corresponding Author: I  Gde Mertha , Program Studi Pendidikan Biologi, FKIP, Universitas Mataram, Mataram, Indonesia
Email:
igdemertha@yahoo.co.id
Abstract: Kromosom lampbrush merupakan kromosom raksasa. Pasangan loop yang  muncul  pada  kromosom  ini dapat menjadi sumber belajar  untuk pengamatan  konfigurasi kromosom dan  model proses transkripsi, sehingga dapat dijadikan solusi untuk mengatasi kesulitan belajar siswa pada  materi ekspresi  gen.  Karena  ukurannya  yang  besar,  kromosom lampbrush mudah terlihat  dibawah  mikroskop  cahaya.  Guru-guru  biologi  di  Kabupaten Lombok  Barat  belum  memiliki  keterampilan  dalam  pembuatan  kromosom lampbrush. Oleh  sebab  itu  guru-guru  biologi  perlu  diberikan  teknik pembuatan  preparat  kromosom lampbrush yang  dilanjutkan  dengan pengamatannya  di  bawah  mikroskop.  Kegiatan  pengabdian  ini  telah dilaksanakan  di  SMAN  1  Narmada  dan  Universitas  Mataram.    Tujuan pengabdian  ini  adalah  memberikan  pelatihan  mikroteknik  pembuatan preparat  mikroskopis  kromosom lampbrush sel-sel  oosit  kodok  sawah ( Fejervarya  cancrivora ) dan  melatih  keterampilan  observasi  (pengamatan) konfigurasi  dan  struktur  detail  kromosom lampbrush dibawah  mikroskop. Metode  yang  digunakan  pada  kegiatan  pengabdian  ini  adalah  unjuk  kerja dalam  bentuk  praktek,  yang  dikombinasikan  dengan  ceramah,  diskusi  dan tanya  jawab. Hasil  pelatihan  menunjukkan  bahwa  (1)  Pengabdian  ini menambah  wawasan  dan  keterampilan  sangat  bermakna  bagi  guru  mitra dalam  pembuatan  preparat  kromosom lampbrush untuk  pengamatan kiasmata,  loop  lateral  yang  berperan  dalam  transkripsi,  kromomer,  dan aksis  kromosom  serta  teknik  visualisasinya  dibawah  mikroskop,  (2) Ketekunan  dan  semangat  yang  tinggi  guru  mitra  sangat  mendukung keberhasilan pembuatan preparat kromosom lampbrush sel-sel oosit kodok sawah  ( Fejervarya  cancrivora ) ,  (3)  Keterampilan  yang  diperoleh  guru mitra  dalam  pelatihan  ini  merupakan  pengalaman  berharga  untuk perencanaan  praktikum,  dan  (4)  Produk  preparat  kromosom lampbrush yang  dihasilkan  dapat  digunakan  sebagai  sumber  belajar  genetika  berbasis praktikum di sekolah.
Keywords: Kromosom Lampbrush, Loop Lateral, Oosit.

## Pendahuluan
Ekspresi  gen  sangat  penting  bagi  mahluk hidup  (Kimball,  1998).   Dalam  proses  ini  DNA digunakan  untuk  membuat  protein,  yang  kemudian menjalankan  berbagai  fungsi  penting  dalam  tubuh.
Proses  ekspresi  gen  berlangsung  pada  semua makhluk hidup termasuk eukariota, prokariota (bakteri dan arkea), dan  dimanfaatkan  oleh  virus untuk  menghasilkan mesin makromolekul untuk kelangsungan hidupnya.  Beberapa  tahapan  dalam  proses  ekspresi gen  yaitu  transkripsi,  penyambungan  atau splicing
RNA, translasi,  dan  modifikasi  pasca  translasi  dari protein
Dalam  genetika,  ekspresi  gen  merupakan tingkat  paling  mendasar  yang  mana  genotipe memunculkan  fenotipe,  yaitu  sifat  yang  dapat diamati.  Kode  genetik  yang  disimpan  dalam  DNA "ditafsirkan"  oleh  ekspresi  gen,  dan  sifat-sifat ekspresi tersebut memunculkan fenotipe organisme. Fenotipe  semacam  itu  sering  diekspresikan  oleh sintesis  protein  yang  mengendalikan  bentuk organisme, atau yang bertindak sebagai enzim yang mengkatalisasi  lintasan  metabolisme  spesifik  yang menjadi  ciri  organisme.  Regulasi  ekspresi  gen dengan  demikian  penting  untuk  perkembangan suatu organisme.
Sesuai Kurikulum Tingkat Satuan Pendidikan,  materi  genetika  konsep  ekspresi  gen diajarkan  di  sekolah  pada  jenjang  SMA.  Materi ekspresi  gen  termasuk  dalam  kelompok  substansi materi  genetik  bersama  dengan  kromosom,  DNA dan  gen.  Materi  ekspresi  gen  (sintesis  protein)  ini dibagi dalam sub materi, yaitu (1) Hubungan DNA- RNA-Protein,  (2)  Struktur  DNA,  RNA  serta  sifat perbedaan  dan  fungsinya,  (3)  Proses  tahapan sintesis protein terdiri dari 2 tahap, yaitu transkripsi dan  translasi.  Kedua  tahapan  tersebut  mengalami proses  inisiasi,  elongasi,  dan  terminasi  dengan karakteristik  yang  berbeda,  dan  (4)  Kode-kode genetik dan macam-macam kode genetik. Konsep  ekspresi  gen  (sintesis  protein) dianggap  materi  yang  sulit  dipahami  oleh  sebagian besar  siswa.  Analisis  kesulitan  belajar  siswa  yang dilakukan Murwitaningsih et al. (2021) menunjukkan  bahwa sub  pokok  bahasan  sintesis protein memiliki persentase kesulitan tertinggi yaitu sebesar  70,37%  dengan  kriteria  tingkat  kesulitan tinggi. Faktor kesulitan belajar siswa yang dominan terutama  berasal  dari  guru  bidang  studi,  tingkat pemahaman  siswa,  serta  media  dan  sumber  belajar siswa. Hasil  penelitian  Hala et  al. (2018) menunjukkan  bahwa  materi  genetik  dan  pewarisan sifat melalui ekspresi gen termasuk konsep genetika yang  sering  menjadi  miskonsepsi  pada  siswa  kelas XII IPA SMAN 1 Tondon, sedangkan faktor-faktor yang  menjadi  penyebab  terjadinya  miskonsepsi siswa  pada  materi  tersebut  antara  lain  kemampuan siswa  memahami  konsep  dan  metode  mengajar guru.  Berdasarkan  laporan  tersebut,  guru  perlu melakukan  inovasi  pembelajaran  pada  materi sintesis  protein.  Ekspresi  gen  memiliki  banyak sekali  tahapan-tahapan  yang  tidak  dapat  diamati
secara  langsung.  Gambaran  mengenai  jalannya proses  sangatlah  rumit  (Andraszek  dan  Smalec, 2011), pada umumnya bersifat abstrak (Mahfudhillah et al ., 2014) dan jauh dari kehidupan sehari-hari  siswa  (Tsui  &  Treagust,  2003 dalam Roini, 2013), sehingga sulit dipahami siswa apabila tidak  tervisualkan  dengan  baik.  Dengan  demikian siswa  menganggap  pembelajaran  sintesis  protein melelahkan dan membosankan.
Kromosom lampbrush ( lampbrush chromosomes ,  kromosom  sikat)  merupakan  tipe kromosom  yang  ditemukan  dalam  oosit  yang sedang  berkembang  (telur  belum  matang)  pada semua  hewan  kecuali  mamalia.  Walter  Fleming mendeskripsikan  kromosom  ini  pertama  kali  pada tahun  1882.  Kromosom lampbrush amphibia berekor  dan  tidak  berekor,  burung,  dan  serangga telah  memiliki  deskripsi  yang  baik.  Karena transkripsi aktif banyak gen, kromosom bertransformasi  menjadi  bentuk lampbrush (sikat lampu)  pada  subfase  diploten  dalam  profase  I meiosis.  Kromosom lampbrush pada  profase  awal adalah  bivalen,  dibentuk  oleh  dua  kromatid saudara.    Bagian  aksis  setiap  kromosom  homolog dibentuk oleh kromatid saudara yang terdiferensiasi membentuk  daerah  kromatin  transkripsi  aktif  dan non aktif. Aktivitas transkripsi kromosom lampbrush tampak  sebagai  mantel  simetris  berupa loop sepanjang aksis.
Kromosom lampbrush terdiri  atas  lengkung kromatin  terbuka,  dimana  sebagian  besar  gen ditranskripsi dan lengkung rapat tanpa ekspresi gen (Roy et  al .,  2002;  Gaginskaya et  al .,  2009).  Loop kromosom lampbrush merupakan  contoh  kromatin terbuka.  Loop  ini  berperan  seperti  “puffs”  pada kromosom politen. Kromosom politen berbeda dari kromosom lampbrush .  Kromosom  politen  disusun oleh  kromatid  pararel,  sedangkan  kromosom lampbrush merupakan  untai  tunggal  heliks  DNA. Pengamatan dibawah mikroskop elektron menggambarkan  bahwa  diameter  untai  loop kromosom lampbrush berkaitan  erat  dengan diameter  heliks  DNA,  yaitu  1,9  nm  (Olins  and Olins, 2003; Gaginskaya et al ., 2009).
Aktivitas  transkripsi  kromosom lampbrush dapat diamati dibawah mikroskop cahaya dan dapat ditentukan tingkat keaktifannya berdasarkan perubahan  morfologi  (Andraszek  dan  Smalec, 2011). Oleh karena itu, kromosom lampbrush dapat dijadikan  sebagai  model  untuk  mempelajari regulasi  transkripsi.  Perubahan  aktivitas  transkripsi
kromosom lampbrush dapat  ditandai  dengan adanya  perbedaan  struktur  morfologi  dari  loop (Gall,  1983;  Morgan,  2002).  Selain  itu,  aktivitas transkripsi  yang  tinggi pada mikrokromosom dapat ditandai  berdasarkan  tingkat  kepadatan  gen-gen penyusunnya  (Rodionov,  1996;  Angelier et  al ., 1984;  Morgan,  2002).  Analisis  aktivitas  transkripsi dapat  ditentukan  berdasarkan  asumsi  bahwa  loop lateral  kromosom lampbrush merupakan  daerah aktif  yang  melakukan  transkripsi.  Penurunan aktivitas  transkripsi  dapat  diamati  berdasarkan pengurangan  ukuran  loop  lateral  (Varley et  al ., 1980;  Gall,  1983;  Callan et  al .,  1987;  Gaginskaya dan  Tsvetkov,  1988;  Morgan,  2002,  2007;  Galkina et al ., 2006; Gaginskaya et al ., 2009).
Loop lateral dapat dikelompokkan berdasarkan  tipe  enzim  transkripsinya.  Loop terbesar terjadi transkripsi oleh polimerase II. Loop terkecil  ditranskripsi  oleh  polimerase  III.  Loop tersebut  mengandung  kode  unit  5S  RNA  (Kay  dan Gall,  1981),  tRNA  (Müller et  al .,  1987)  atau sekuens  pendek  hasil  replikasi  (Kroll et  al., 1987). Karena ukuran sekuens 5S RNA pendek dan terbagi oleh  elemen  non  koding,  transkripsi  menjadi terbatas  pada  sekuens  koding,  transkripsi  sekuens demikian  juga  menjadi  pendek,  akibatnya  tidak terjadi  matriks  yang  tegas  terbentuk  pada  filamen RNP.  Itulah  sebabnya  mengapa  filamen  tampak jelas  dibawah  pengamatan  mikroskop  fase  kontras (Murphy et  al .,  2002).  Demikian  pula  pengamatan dibawah  mikroskop  cahaya  pada  preparat  yang diwarnai  dengan ammoniacal  silver  staining (AgAS) (Varley dan Morgan, 1978).
Dengan mengacu pada karakteristik morfologi  kromosom lampbrush yang  telah dijelaskan  diatas,  maka  kromosom  ini  dapat dijadikan  solusi  untuk  mengatasi  kesulitan  belajar siswa  pada  materi  ekspresi  gen.  Dengan  adanya kemudahan  pengamatan  morfologi  kromosom lamprush dibawah  mikroskop  cahaya  terhadap bahan  genetik  yang  berkaitan  dengan  proses sintesis  protein,  seperti  loop  lateral  (tempat  terjadi transkripsi),  variasi  ukuran  loop  (tingkat  aktivitas transkripsi),  dan  tingkat  kondensasi  kromatin  di kedua  ujung  loop  (penentuan  arah  transkripsi), demikian  pula  posisi  matriks  (RNA  dan  protein), maka  dengan  memadukan  semua  visualisasi  bahan genetik perangkat ekspresi gen tersebut dalam suatu kegiatan  praktikum  laboratorium  akan  membantu siswa  untuk  memahami  ekspresi  gen  dengan  lebih baik.  Visualisisi  bahan  genetik  tersebut  mudah
dilakukan  di  sekolah  dan  tidak  memerlukan  biaya yang  mahal,  dimana  bahan  dan  peralatan  yang digunakan  tidak  berbeda  banyak  dengan  kegiatan yang  telah  dilakukan  Mertha et.  al. (2019), Mertha et. al. (2019), Mertha et al. (2020) dan Mertha et al. (2021).    Proses  pembuatan  preparat  kromosom lampbrush dapat  mengacu  petunjuk  lengkap  yang disusun  Gall  dan  Nizami  (2016). Oleh  sebab  itu dalam  upaya  pencapaian  kompetensi  diperlukan pembelajaran  pada  siswa  yang  tidak  hanya berdasarkan konsep tetapi juga berbasis praktik. Berdasarkan  uraian  di  atas,  pembuatan preparat  untuk  pengamatan  kromosom lampbrush akan  sangat  menunjang  peningkatan  indikator pencapaian kompetensi dalam pembelajaran genetika  pada  subkonsep  ekspresi  gen  (sintesis protein) di sekolah. Pembuatan preparat kromosom lampbrush jauh  lebih  singkat  dan  sederhana dibandingkan dengan pembuatan kromosom mitosis dan meiosis, tetapi membutuhkan ketelitian dan  ketekunan.  Kendala  yang  dihadapi  guru-guru mitra dalam praktikum pembuatan  slide  kromosom tersebut  adalah  mereka  belum  memahami  cara isolasi  inti  sel  dalam  oosit,  pemisahan  membran inti, penyebaran kromosom lampbrush dan preparasinya  menjadi  slide  untuk  pengamatan dibawah  mikroskop.  Oleh  sebab  itu  tujuan  yang diharapkan  dari  kegiatan  pengabdian  ini  adalah melakukan  pendamping  praktikum  mikroteknik preparasi  inti  sel  oosit  untuk  pembuatan  preparat kromosom lampbrush dan  melatih  keterampilan observasi  materi  genetik  yang  berperan  dalam proses sintesis protein dibawah mikroskop. Sedangkan  manfaat  yang  diharapkan  dari  kegiatan pengabdian  ini  adalah  peningkatan  keterampilan dan  keahlian  guru-guru  biologi  di  Kabupaten Lombok Barat dalam pembuatan preparat kromosom lampbrush dan  kemampuan  analisis perangkat genentik sintesis protein hasil pengamatan dibawah mikroskop untuk meningkatkan kualitas pembelajaran genetika.

## Metode
Kegiatan pelatihan ini dilaksanakan dengan penyampaian  materi  dan  kerja  praktek.  Peserta pelatihan  (guru-guru  mitra)  diberikan  materi dengan  cara  ceramah,  yang  selanjutnya  dilakukan tanya  jawab  dan  kegiatan  diskusi  tentang  petunjuk praktikum  yang  akan  digunakan.  Setelah  selesai kegiatan penyampaian materi, selanjutnya
dilakukan  kerja  praktek.  Kegiatan  praktikum dilakukan  di  SMAN  1  Narmada  dan  Universitas Mataram.  Untuk  memudahkan  dalam  pengawasan dan  pembimbingan  kegiatan  praktek,  peserta pelatihan  dibagi  menjadi  beberapa  kelompok.  Pada saat  praktek  dilakukan  pendampingan  untuk memberikan  bimbingan  dan  validasi  pada  kinerja praktek guru-guru mitra. Praktek  pembuatan  preparat  kromosom lampbrush pada  subfase  diploten  dilakukan menggunakan  bahan  sel-sel  oosit  kodok  sawah ( Fejervarya  cancrivora ) .  Dengan  bimbingan  tim pengabdian,  setiap  peserta  pelatihan  (guru-guru mitra)  melakukan  pembuatan  preparat  kromosom lampbrush .  Slide  yang  telah  selesai  dikerjakan dilakukan  pengamatan  oleh  masing-masing  peserta dibawah mikroskop dengan bimbingan pendampingan  dari  tim  pengabdian.  Pengamatan dilakukan  mulai  dari  perbesaran  lemah  sampai perbesaran  kuat  untuk  menemukan  struktur morfolgi dan  konfigurasi kromosom yang berperan dalam proses ekspresi gen (sintesis protein). Untuk  mengetahui  keberhasilan  kegiatan pelatihan  dilakukan  evaluasi.  Evaluasi  utama  atas kegiatan  pelatihan  pada  pengabdian  ini  adalah apabila  target  dari  program  ini  tercapai  yaitu minimal  80%  guru  mitra  dapat  menghasilkan preparat  kromosom lampbrush yang  baik,  mampu menunjukkan  struktur  khas  kromosom lampbrush dibawah  mikroskop,  dan  menjelaskan  proses sintesis  protein  berdasarkan  hasil  pengamatan morfologi kromosom tersebut dibawah mikroskop.

## Hasil dan Pembahasan
Pelatihan  ini  terlaksana  dengan  baik  dan guru-guru  mitra  telah  berhasil  melalui  langkah- langkah  pembuatan  preparat  kromosom lampbrush yang meliputi isolasi oosit, isolasi germinal vesicle (inti sel), pemisahan membran inti untuk menyebarkan  kromosom lampbrush ,  pelekatan kromosom  pada  slide,  pewarnaan  dan mounting . Pada  pelatihan  ini  guru  mitra  juga  mendapat pengalaman  teknik  melakukan  visualisasi  struktur kromosom lampbrush dibawah  mikroskop.  Hasil visualisasi  penting  sebagai  dokumen  foto  hasil praktikum  untuk  analisis  proses  transkripsi  pada materi genetika.
Pada  kegiatan  pelatihan  ini,  guru-guru mitra  menunjukkan  antusias  yang  tinggi  untuk membuat  preparat  kromosom lampbrush dengan
benar. Dengan semangat kerja keras dan bimbingan dari  tim  pengabdian,  guru  mitra  telah  berhasil menghasilkan  produk  pelatihan,  yaitu  (1)  preparat (sediaan)  kromosom lampbrush germinal  vesicle sel-sel  oosit  kodok  sawah  ( Fejervarya  cancrivora ) dan  (2) Germinal  vesicle hasil  isolasi  yang dikumpulkan  dan  diawetkan  di  laboratorium  untuk bahan  praktikum  pembuatan  sediaan  kromosom lampbrush .
Guru-guru mitra sangat serius mengamati  preparat  yang  telah  diselesaikannya  di bawah  mikroskop.  Pendampingan  yang  dilakukan tim  pengabdian  pada  saat  pengamatan  preparat membantu  peserta  pelatihan  untuk  menemukan struktur  detail  kromosom lampbrush. Dengan adanya respon  yang  sangat  tinggi,  para  peserta berhasil menunjukkan loop lateral yang merupakan daerah kromatin  transkripsi aktif, adanya kiasmata, dan kromomer.
Isolasi germinal  vesicle sel-sel  oosit dan  preparasinya  menjadi  sediaan  kromosom lampbrush memerlukan  ketelitian  dan  kecermatan. Dengan  melakukan  kerja  yang  tekun  dan  latihan berulang-ulang,  kemampuan  mikroteknik  peserta dalam  pembuatan  sediaan  kromosom  tersebut mengalami  peningkatan.    Hasil  pantauan  selama pelatihan  menunjukkan  bahwa  pada  hari  pertama kurang  dari  50  persen  dari  peserta  berhasil  melalui langkah-langkah pembuatan preparat dengan benar. Kesulitan  yang  banyak  dihadapi  peserta  adalah pada proses isolasi germinal vesicle dan pemisahan selaput germinal tersebut  untuk  penyebaran kromosom.  Melalui  latihan  yang  intensip  dan dengan bimbingan tim pengabdian, pada hari kedua menunjukkan  bahwa  lebih  dari  85  persen  peserta menjadi  trampil  membuat  preparat.  Dengan dikuasai kemampuan mikroteknik sitologi pembuatan  preparat  kromosom lampbrush menjadi bekal yang sangat bermakna dan berharga bagi guru mitra dalam perencanaan dan pelaksanaan praktikum genetika di sekolah.
Gambar  1.  Peserta  pelatihan  dan  penyiapan  bahan, kemikalia  serta  alat-alat  pelatihan.  A.  Kesiapan peserta  (guru  mitra)  untuk  mengikuti  pelatihan.  B. Penjelasan  tim  pengabdian  tentang  kromosom lampbrush dan  teknik  preparasinya.  C.  Persiapan praktek  isolasi germinal  vesicle kodok  sawah ( Fejervarya  cancrivora );  D.  Observasi germinal vesicle hasil isolasi dibawah mikroskop.
Gambar 2. Kegiatan penyiapan bahan pelatihan. A. Guru mitra sedang melakukan praktek pengambilan ovarium,  isolasi  oosit,  dan  isolasi germinal  vesicle (inti sel); B. Ovarium; C. Sel-sel oosit kodok sawah ( Fejervarya  cancrivora ).  Anak  panah  kanan menunjukkan  melanin  (hitam)  dan  anak  panah  kiri menunjukkan  yolk  (putih).  D. Germinal  vesicle yang telah dikeluarkan dari oosit.
Karena  rasa  ingin  tahu  yang  besar, keterlibatan guru mitra dalam praktik sangat tinggi.
Semua  peserta  melakukan  preparasi germinal vesicle sel-sel  oosit  untuk  pembuatan  preparat kromosom lampbrush pada  profase  I  meiosis subtahap diplotene . Partisipasi aktif ini ditunjukkan dengan kinerja mereka yang merampungkan semua tugas  pembuatan  kromosom lampbrush dan  juga visualisasi  kromosom  dibawah  mikroskop.  Setiap preparat  yang  telah  selesai  dikerjakan  selalu dimintakan  verifikasi  pada  tim  pengabdian, demikian pula hasil visualisasi dibawah mikroskop. Melalui  penugasan  yang  terbimbing,  para  peserta telah merampungkan tugas, yaitu (1) praktik teknik koleksi  oosit  dan  isolasi germinal  vesicle ,  (2) praktik  teknik  pemisahan  selaput germinal  vesicle, penyebaran  kromosom lampbrush ,  dan  pelekatan kromosom  pada  slide,  (3)  praktik  fiksasai  dan pewarnaan  kromosom lampbrush ,  (4)  praktik pengamatan kromosom lampbrush dibawah mikroskop, dan (5) praktik visualisasi (pengambilan  foto)  struktur  detail  kromosom lampbrush dibawah mikroskop.
Preparasi  preparat  kromosom lampbrush berdasarkan pada petunjuk praktikum yang memuat langkah  kerja  preparasi germinal  vesicle sel-sel oosit Fejervarya  cancrivora .  Penyediaan  ovarium yang  diambil  dari  kodok  sawah Fejervarya cancrivora betina  dilakukan  untuk  mendapatkan sel-sel oosit. Untuk mendapatkan ovarium, dilakukan  pembedahan  kodok  betina  dalam  larutan anestesia.  Setelah  dilakukan  pengambilan  ovarium secukupnya,  selanjutnya  luka  bedah  pada  katak dijahit.  Selanjutnya  katak  disimpan  dalam  larutan “frog  water”  untuk  proses  penyembuhan.  Jika diperlukan  lagi,  katak  yang  telah  sembuh  dalam satu  atau  dua  bulan  setelah  luka  bedah  dapat dilakukan  pembedahan  lagi  untuk  pengambilan ovarium.  Ovarium  direndam  larutan  OR2  dalam petridish. Dengan menggunakan pinset, sel-sel oosit dipisahkan dari ovarium dalam larutan OR2. Isolasi germinal  vesicle (inti  sel)  dilakukan pada  sel  oosit  dalam  medium GV  isolation . Pengambilan germinal  vesicle dilakukkan  dibawah mikroskop  bedah  dengan  cara  menusuk  bagian oosit  yang  berwarna  hitam  dengan  menggunakan jarum  pentul  pertama  dan  jarum  pentul  kedua ditusukkan  pada  bagian  oosit  yang  berwarna  putih. Untuk  pengeluaran  isi  oosit,  kedua  jarum  pentul digerakkan berlawanan arah. Germinal vesicle (inti sel)  tampak  sebagai  bulatan  bening  yang  masih bergabung  dengan  yolk  atau  telah  terpisah  dari yolk.  Inti  sel  dipisahkkan  dari  yolk  yang  melekat
dan  dijauhkan  dari  yolk  dengan  bantuan  ujung jarum pentul.
Hasil pengamatan selama pelatihan menunjukkan  bahwa  seringkali  tidak  ditemukkan germinal  vesicle ,  hal  ini  disebabkan  karena germinal  vesicle telah  pecah  karena  tertusuk  jarum pentul. Untuk mengatasi kendala tersebut, penusukkan  sel  oosit  dengan  jarum  pentul dilakukkan pada sisi oosit yang berwarna hitam dan putih. Pengambilan germinal vesicle untuk dipindahkan ke slide dilakukkan dengan menggunakan  mikropipet.  Kendala  yang  sering dialami  saat  pengambilan germinal  vesicle dengan mikropipet  bahwa  dengan  penggunaan  mikropipet secara langsung menyebabkan inti sel tersedot jauh kedalam  mikropipet.  Hal  ini  dapat  menyebabkan inti  sel  melekat  pada  dinding  mikropipet,  sehingga kesulitan  dalam  pengeluaran  inti  hasil  isolasi tersebut.  Untuk  mengatasi  kendala  ini,  sebelum dilakukan  isolasi germinal  vesicle (inti  sel)  maka mikropipet  diisi  dulu  dengan  larutan  isolasi  atau diatur  volume  sampai  20  uL  kemudian  digunakan untuk  pengambilan  inti  sel.  Dengan  teknik  ini, germinal  vesicle tidak  terserap  terlalu  jauh  dalam mikropipet sehingga mudah dikeluarkan kembali. Untuk  pemisahan  membran  inti, germinal vesicle diletakkan  dalam  permukaan  slide  yang telah  dibuat  “chamber”  dari  plastik.  Pada “chamber”  yang  telah  diisi  larutan  medium spreading diletakkan inti hasil isolasi. Pemisahan  membran  inti  dari  isi  inti  dilakukan dengan  cara  merusak  membran  inti  dengan  ujung jarum  pentul  sehingga  isi  inti  tersebar  dalam “chamber”.  Selanjutnya  “chamber”  ditutup  dengan gelas  penutup,  bagian  tepi  gelas  penutup  disegel dengan  parafin  dan  dilakukkan  sentrifugasi  untuk melekatkan  kromosom lampbrush pada  slide. Setelah  sentrifugasi,  gelas  penutup  dan  “chamber” dibuang.  Fiksasi  kandungan  nukleus  dilakukkan dalam paraformaldehyde 2-4%. Kandungan nukleus (kromosom lampbrush )  yang  telah  difiksasi dilakukan immunostaining dan in situ Hybridization .
Dalam  pembuatan  preparat  kromosom lampbrush ini pendampingan intensif dilakukan tim pengabdian  pada  guru  mitra,  karena  langkah- langkah preparasi membutuhkan kecermatan. Berkat keseriusan dalam latihan dan pendampingan dari  tim  pengabdian,  semua  guru  mitra  menjadi terampil  dan  berhasil  melakukan  pengambilan oosit, isolasi germinal vesicle , pemisahan membran
inti  dan  penyebaran  kromosom,  fiksasi,  serta staining .  Selanjutnya,  dengan  adanya  preparat kromosom lampbrush yang  bagus  (tidak  tumpang tindih,  tersebar)  dan  dengan  bimbingan  oleh  tim pengabdian,  guru  mitra  dapat  dengan  mudah melakukan pengamatan struktur kromosom lampbrush , khususnya loop lateral tempat transkripsi.  Begitu  pula  perilaku  khas  kromosom khususunya diploten tergambar dengan sangat jelas. Pengamatan  struktur  detail  kromosom lampbrush pada  fase  profase  I  meiosis  dilakukan dibawah  mikroskop  pada  perbesaran  lemah  dan kuat.  Melalui  observasi  struktur  detail  preparat yang  mereka  buat  sendiri,  guru  mitra  dapat menunjukkan  variasi  ukuran  morfologi  loop, adanya  kromomer,  bagian  aksis  kromosom,  dan kiasmata  dengan  mudah  dan  benar.  Loop  lateral kromosom lampbrush merupakan  contoh  kromatin terbuka.  Loop  ini  berperan  seperti  “puffs”  pada kromosom politen. Kromosom politen berbeda dari kromosom lampbrush .  Kromosom  politen  disusun oleh  kromatid  pararel,  sedangkan  kromosom lampbrush merupakan  untai  tunggal  heliks  DNA. Andraszek  dan  Smalec  (2011)  menyatakan  bahwa aktivitas  transkripsi  kromosom lampbrush dapat diamati  dibawah  mikroskop  cahaya  dan  dapat ditentukan tingkat keaktifannya berdasarkan perubahan  morfologi.  Oleh  karena  itu,  dengan melakukan pengamatan kromosom lampbrush guru mitra  telah  mempelajari  regulasi  transkripsi. Menurut Morgan (2002) bahwa perubahan aktivitas transkripsi  kromosom lampbrush dapat  ditandai dengan  adanya  perbedaan  struktur  morfologi  dari loop.  Dengan  melakukan  pengamatan  loop  lateral kromosom lampbrush pada pelatihan ini, guru mitra dapat  mengetahui  daerah  aktif  yang  melakukan transkripsi.  Pertanyaan  yang  diajukan  peserta pelatihan dari hasil pengamatan kromosom lampbrush adalah “Mengapa kromosom lampbrush membentuk  loop  lateral  yang  banyak?”  “Mengapa ukuran  lateral  loop  tersebut  berbeda-beda?” Jawaban  yang  disampaikan  tim  pengabdian  untuk pertanyaan  pertama  adalah  “pembentukan  loop berkaitan  erat  dengan  transkripsi.  Sel  telur amphibia  yang  sedang  tumbuh  memerlukan cadangan  makanan  berupa  yolk  yang  diperlukan untuk  pertumbuhan  embrio.  Oleh  sebab  itu, dilakukan  transkripsi  mRNA  yang  dilakukan  oleh banyak loop agar dapat membentuk banyak protein dalam  pembentukan  yolk”.  Jawaban  pertanyaan kedua adalah “ukuran loop menunjukkan perbedaan
aktivitas  transkripsi,  semakin  besar  ukuran  loop maka aktivitas transkripsi semakin tinggi”.
Gambar  3.  Materi  pelatihan  kromosom lampbrush yang  dimabil  dari  Joseph  G.  Gall  dan  Zehra  F. Nizami.  2016. Isolation  of  Giant  Lampbrush Chromosomes  from  Living  Oocytes  of  Frogs  and Salamanders .  A.  Hasil  immunostaining  yang  diamati dibawah  mikroskop  fluorescens;  B.  Kromosom  yang sama  yang  diamati  dengan  penyinaran  gelap  terang; C.  Kromosom lampbrush hasil  immunostaining  yang diamati dengan mikroskop fluorescens pada perbesaran  kuat.  Anak  panah  menunjukkan  loope, lokasi terjadi transkripsi.
Dokumentasi  foto  (visualisasi)  morfologi kromosom lampbrush dan  struktur  detailnya  yang mencakup  morfologi  loop,  kromomer,  bagian  aksis kromosom,  dan  kiasmata  dibawah  mikroskop  pada pelatihan ini semuanya dilakukan mengunakan kamera handphone.  Hal  ini  disebabkan  karena  kamera  pada mikroskop  yang  digunakan  untuk  platihan  ini mengalami  gangguan  sehingga  tidak  berfungsi. Visualisasi  dengan  menggunakan  kamera  handphone tanpa  perangkat  khusus  mengacu  pada  Mertha et  al. (2020). Sedangkan visualisasi menggunakan handphone  dengan  perangkat  khusus  digunakan microscope  phone  holder yang  dipasang  pada  tabung okuler mikroskop.
Foto (visualisasi) kromosom lampbrush subfase diploten  pada  kodok  sawah Fejervarya cancrivora yang  dihasilkan  dalam  pengabdian  ini dapat  menjadi  sumber  belajar  dalam  pembelajaran genetika berbasis praktikum. Untuk memahami proses pindah  silang  ( crossing  over )  dan  transkripsi  mRNA dalam  proses  sintesis  protein  dapat  dijelaskan  dengan
mudah  melalui  pengamatan  kromosom lampbrush . Gambaran  variasi  ukuran  loop  lateral  kromosom tersebut  dapat  menjadi  indikator  terjadinya  perubahan aktivitas transkripsi.

## PENUTUP
Berdasarkan  hasil  monitoring  dan  evaluasi selama  pelatihan,  dapat  disimpulkan:  (1) Pengabdian ini  menambah  wawasan  dan  keterampilan  sangat bermakna  bagi  guru  mitra  dalam  pembuatan  preparat kromosom lampbrush untuk  pengamatan  kiasmata, loop  lateral  yang  berperan  dalam  transkripsi, kromomer,  dan  aksis  kromosom  serta  teknik visualisasinya dibawah mikroskop, (2) Ketekunan dan semangat  yang  tinggi  guru  mitra  sangat  mendukung keberhasilan pembuatan preparat kromosom lampbrush sel-sel  oosit  kodok  sawah  ( Fejervarya cancrivora ) ,  (3)  Keterampilan  yang  diperoleh  guru mitra  dalam  pelatihan  ini  merupakan  pengalaman berharga  untuk  perencanaan  praktikum,  dan  (4) Produk preparat kromosom lampbrush yang dihasilkan dapat  digunakan  sebagai  sumber  belajar  genetika berbasis praktikum di sekolah.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  kepada  Universitas  Mataram yang  telah  memberikan  dukungan  material  dan  moral terhadap  terlaksananya  kegiatan  pengabdian  kepada masyarakat ini. Terimakasih disampaikan juga kepada bapak  Hulwani,  S.Pd.,  M.M,  selaku  Kepala  Sekolah SMAN 1 Narmada yang telah memberikan kesempatan dalam pelaksanaan pengabdian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Andraszek,  K.  dan  E.  Smalec.  2011.  Structure  and functions of lampbrush chromosomes. BioTechnologia Vol. 92(4): 337-344.
Angelier  N.,  Paintraud  M.,  Lavaud  A.,  Lechaire  J.P.
(1984)  Scanning  electron  microscopy  of amphibian lampbrush chromosomes.

## Chromosoma 89: 243-253.
Callan  H.G.,  J.  G.  Gall,  dan  C  A.  Berg.  1987.  The lampbrush  chromosomes  of  Xenopus  laevis: preparation,  identification,  and  distribution of  5S  DNA  sequences. Chromosoma  95:
236-250.
Gall,  J.G.  dan  Z.  F.  Nizami.  2016.  Isolation  of  Giant Lampbrush  Chromosomes  from  Living Oocytes  of  Frogs  and  Salamanders. J.  Vis. Exp. (118): e54103.
Gaginskaya  E.R.  dan  A.  G.  Tsvetkov.  1988.  Electron microscopy  research  on  the  chromatin structure of dispersed lampbrush chromosomes in the hen. Tsitologiia 30: 142-
150.
Gaginskaya  E.,  T.  Kulikova,  dan  A.  Krasikova.  2009. Avian  lampbrush  chromosomes:  a  powerful tool  for  exploration  of  genome  expression. Cytogenet. Genome Res. 124: 251-267.
Galkina  S.,  S.  Deryusheva,  V,  Fillon,  A.  Vignal,  R.
Crooijmans,  M.  Groenen,  A.  Rodionov,  dan E.  Gaginskaya.  2006.  FISH  on  avian lampbrush  chromosomes  produces  higher resolution gene mapping. Genetica 128: 241-
251
Gall  J.M.  1983.  Transcription  of  repetetive  sequences on Xenopus lampbrusch chromosomes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80: 3364-3367.
Hala,  Y.,  A.  I.  Mangoling,  dan  A.  F.  Arsal.  2018.
Identifikasi  Miskonsepsi  Siswa  Kelas  XII IPA  Pada  Konsep  Genetika  Dengan  Metode Certainty of Response Index (CRI). Prosiding  Seminar  Nasional  Pendidikan Biologi (ISBN: 978-602-61265-2-8).
Kimball, J.W. 1998. Biologi. Erlangga. Jakarta.
Kroll  A.,  P.  Carbon,  J.P.  Ebel,  dan  B.  Appel.  1987. Xenopus  tropicalis  U6  snRNA  genes transcribed  by  Pol  III  contain  the  upstream promoter  elements  used  by  Pol  II  dependent U-snRNA genes. Nucl. Acids Res. 15: 2463- 2478.
Mahfudhillah,  H.T.,  S.  Zubaidah,  dan  E.  Suarsini. 2014.  Pengembangan  Media  Genetik  Box Pada  Materi  Genetika  Kelas  XII. Seminar Nasional XI Pendidikan Biologi FKIP UNS.
Mertha,  I.G.,  A.  Al  Idrus,  S.  Bahri,  P.  Sedijani,  dan
D.A.C.  Rasmi.  2019.  Pelatihan  teknik pembuatan preparat squash ujung akar untuk pengamatan  kromosom  pada  guru-guru biologi  di  Kota  Mataram. Jurnal  Pendidikan dan  Pengabdian  Masyarakat,  Vol.  2,  No.  4: 454 – 459.
Mertha, I.G., S. Bahri, L. Zulkifli, A. Ramdani, dan N. Lestari.  2019.  Pelatihan  pembuatan  preparat kromosom  dan  peyusunan  karyotipe  di Fakultas  Mipa  program  studi  Biologi Universitas Islam Al-Azhar Mataram. Jurnal
Pengabdian Magister Pendidikan IPA, Vol. 2 (1): 75-78.
Mertha, I.G., A. Raksun, Syachruddin, S. Bahri. 2020. Pelatihan  Pembuatan  Preparat  Kromosom Politen Drosophila Melanogaster Pada Guru- Guru  Biologi  Di  Lombok  Barat .  Jurnal Pengabdian Magister Pendidikan IPA, Vol. 3 (2): 181-188.
Mertha, I. G. , I. W, Merta, S. Bahri1, A. Raksun1, A. A. Sukarso. 2021.  Pelatihan Pembuatan Dan Pengamatan  Preparat  Kromosom  Profase  I Meiosis Pada Guru-Guru Biologi Di Lombok Barat. Jurnal Pengabdian Magister Pendidikan IPA, Vol. 4 (4): 312-319.
Morgan  G.T.  2002.  Lampbrush  chromosomes  and associated bodies: new insights into principles  of  nuclear  structure  and  function. Chromosome Res. 10: 177-200.
Morgan  G.T.  2007.  Localized  co-transcriptional recruitment  of  the  multifunctional  RNA- binding  protein  CELF1  by  lampbrush chromosome transcription units.
Chromosome Res. 15: 985-1000.
Müller  F.,  S.  G.  Clarkson,  dan  D.J.  Galas.  1987.
Sequence  of  a  3.18  kb  tandem  repeat  of Xenopus  laevis  DNA  containing  8  tRNA genes. Nucl. Acid Res. 15: 7191.
Murphy  C.,  Z.  Wang,  R.G.  Roeder,  J.G.  Gall.  2002.
RNA  polymerase  III  in  Cajal  bodies  and lampbrush  chromosomes  of  the  Xenopus oocyte  nucleus. Mol.  Biol.  Cell  13:  3466- 3476.
Murwitaningsih,  S.,  S.  Susilo,  H.  N.  Yarza,  dan  D.
Wibisono.  2021. Memahami  Aspek  Kognitif Terkait  Kesulitan  Belajar  Pada  Siswa Sekolah  Mengengah  Atas:  Fokus  Pada Materi Sel.
Olins  D.E.  dan  A.  L.  Olins.  2003.  Chromatin  history: our  view  from  the  bridge. Nature  Rev.  Mol.

## Cell Biol. 4: 809-814
Rodionov A.V. 1996. Micro versus macro: a review of  structure  and  functions  of  avian  micro- and  macrochromosomes. Genetika  32: 597-608.
Roini,  C.  2013.  Organisasi  konsep  genetika  pada buku  biologi  SMA  kelas  XII. Jurnal EduBio  Tropika,  Volume  1,  Nomor  1, Oktober 2013: 1-60.
Roy J.P., J.M. Stuart., J. Lund, dan S.K. Kim. 2002. Chromosomal clustering of muscle-
expressed genes in Caenorhabditis elegans. Nature 418: 975-979.
Varley  J.M.,  H.C.  Macgregor,  dan  H.P.  Erba.  1980. Satelite  DNA  is  transcribed  on  lampbrush chromosomes. Nature 283: 686-688.
Varley,  J.  M.  dan  G.  T.  Morgan.  1978.  Silver staining of the lampbrush chromosomes of Triturus  cristatus  carnifex. Chromosoma, Volume 67: 233–244