## SINTESIS DAN KARAKTERISASI NANOHERBAL EKSTRAK ETANOL KAYU SECANG ( Caesalpinia sappan L.)
Nabella Dwitarani, Rafiqi Rajauddin Amin, Titik Mardiyanti Sofyah, Disfanya Nichelen Ramadhani, Suyatno Sutoyo*
Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Surabaya
* email : suyatno@unesa.ac.id
Received 24 Oktober 2021 Accepted 3 Desember 2021

## Abstrak
Tanaman  secang  ( Caesalpinia  sappan L.)  merupakan  salah  satu  tanaman  obat  Indonesia yang sudah banyak dimanfaatkan oleh masyarakat.  Ekstrak etanol kayu secang diketahui memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  kuat.  Sediaan  dalam  bentuk  ekstrak  memiliki bioavailabilitas yang rendah karena rendahnya kelarutan dalam air dan tidak stabil terhadap faktor  lingkungan.  Salah  satu  upaya  untuk  mengatasi  masalah  tersebut  yaitu  dengan memformulasikan ke dalam sediaan nanopartikel. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan sintesis  dan  karakterisasi  nanoherbal  ekstrak  etanol  kayu  secang  menggunakan  metode gelasi  ionik.  Ekstrak  kayu  secang  diformulasi  dalam  bentuk  nanopartikel  dengan perbandingan  kitosan-Na-TPP  yaitu  1:1  (F1),  3:2  (F2),  dan  2:1  (F3).  Nanoherbal  hasil sintesis dikarakterisasi menggunakan zetasizer nano untuk menentukan ukuran partikel dan potensial  zeta  serta  spektroskopi  infra  merah  (FTIR).  Hasil  penelitian  menunjukkan nanoherbal F1 memiliki ukuran partikel yang memenuhi syarat sebagai nanopartikel (900,8 nm) dan memiliki potensial zeta sebesar +529,6 mV. Spektrum IR mendukung terjadinya nanopartikel  herbal  yang  ditunjukkan  oleh  pergeseran  bilangan  gelombang  vibrasi  ulur gugus –OH (3297 cm -1 ke 3197 cm -1 ), vibrasi tekuk gugus –NH (1582 cm -1 ke 1557 cm -1 ), serta munculnya puncak vibrasi gugus fosfat pada bilangan gelombang 1071 cm -1 .
Kata kunci : Kayu secang, nanoherbal, kitosan, Na-TPP, gelasi ionik

## Abstract
Secang plant ( Caesalpinia sappan L.) is one of the Indonesian medicinal plant that had been widely used by people. The ethanol extract of secang wood is well-known for its antioxidant activity. Preparations in extracts have poor bioavailability due to low solubility and unstable to environmental factors. One of the efforts to overcome this problem is to formulate it into nanoparticle preparations. This study aims to synthesize and characterize the ethanol extract of  Secang  wood  nanoherbs  using  the  ionic  gelation  method.  Secang  wood  extract  is formulated in the form of nanoparticles with ratio of chitosan:Na-TPP, namely 1:1 (F1), 3:2 (F2),  and  2:1  (F3).  The  results  of  nanoherbs  were  characterized  using  a  zetasizer  to determine the particle size and zeta potential and infrared spectroscopy (FTIR). The results showed that the nanoherb F1 had a particle size that met the requirements of nanoparticles (900,8 nm) and zeta potential of +529,6 mV. The IR spectrum supports the occurrence of herbal nanoparticles as indicated by a shift in the wavenumber of the –OH group (3297 cm - 1 to 3197 cm -1 ), the –NH group (1582 cm -1 to 1557 cm -1 ), and the appearance of a vibrational peak of the phosphate group at a wavenumber of 1071 cm -1 .
Keywords : Secang wood, nanoherbs, chitosan, Na-TPP, ionic gelation

## Pendahuluan
Salah  satu  tanaman  obat  yang  telah banyak  dimanfaatkan  oleh  masyarakat Indonesia adalah tanaman secang ( Caesalpinia  sappan L.).  Kayu  secang mempunyai  aktivitas    antioksidan    yang lebih kuat dibandingkan
dengan
antioksidan  sintetis  seperti  asam  beta hidroksi  dan  butil  hidroksi  toluena (Sugiyanto, et al., 2013).
Kusmiati dan Priadi (2014) menyebutkan bahwa kayu secang memiliki kandungan senyawa aktif berupa flavonoid, alkaloid, saponin, tanin, fenolik, dan brazilin. Kandungan flavonoid, alkaloid,  dan  saponin  dalam  kayu  secang berguna  sebagai  antioksidan,  antifungi, dan  antiinflamasi,  serta  tanin  bersifat sebagai antibakteri dan antivirus. Terdapat 5  jenis  flavonoid  dalam  kayu  secang diantaranya  yaitu  brazilin,  brazilein, sappancalchone,  chalcone,  sappanin,  dan 3’-O-metilbrazilin  yang  berguna  sebagai antioksidan  primer  maupun  sekunder (Rina, 2013).
Selama  ini,  pemanfaatan  herbal  untuk dikonsumsi  berasal  dari  ekstrak  tanaman. Kelemahan sediaan ekstrak yaitu kelarutannya  dalam  air  rendah  sehingga bioavailabilitasnya  rendah  serta  sifat fungsionalnya  dapat  menurun  akibat proses pengolahan hingga lamanya waktu penyimpanan.
Salah  satu  upaya  untuk  meningkatkan kelarutan  dan  menjaga  sifat  fungsional ekstrak  yaitu  dengan  memformulasikan ekstrak dalam sediaan nanopartikel (Ardila,  et  al.,  2017).  Nanopartikel merupakan suatu partikel dengan rata-rata ukuran diameter partikel yaitu 1-1000 nm (Mohanraj  &  Chen,  2006).  Kelebihan nanopartikel  yaitu memiliki karakter fisik yang  berbeda  daripada  partikel  yang memiliki  ukuran  lebih  besar  diantaranya yaitu  menaikkan  kapasitas  penghantaran senyawa    aktif  (Martien,  et  al.,  2012), menambah  kelarutan  senyawa,  serta meningkatkan absorbsi partikel (Rismana, et al., 2013).
Nanopartikel  dari  herbal  (nanoherbal) dapat  dibuat  dengan  beberapa  metode, salah  satunya  yaitu  metode  gelasi  ionik. Kelebihan  metode  ini  yaitu  proses dikontrol  dengan  mudah  serta  tidak memerlukan pelarut organik (Mardliyanti, et al., 2012).
Metode  gelasi  ionik  dilakukan  dengan mencampur  polimer  yang    bersifat polikation    dengan    polianion.  Kitosan merupakan  salah  satu  polimer  polikation yang  biasa  dimanfaatkan  karena  bersifat biodegradable , biocompatible , tidak toksik,  dan  mudah  dikonversi  secara kimia. Sementara itu polianion yang biasa digunakan yaitu natrium tripolifosfat (Na- TPP)  karena  mampu  menjadi  pengikat silang yang baik. Na-TPP akan memperkuat  kekuatan  mekanik  kitosan karena mempunyai muatan negatif dengan kerapatan  yang  tinggi  sehingga  interaksi dengan  polikation  kitosan  meningkat (Kaban, et al., 2006; Shu & Zhu, 2002).
Hasil  penelitian  Luntungan  (2017) menyatakan  bahwa  aktivitas  antioksidan pada nanopartikel mengalami peningkatan karena  biopolimer  alami  kitosan  mampu mengubah  secara  kimia.  Hasil  penelitian lain juga menyebutkan bahwa kitosan yang digunakan untuk pembentukan nanopartikel  ekstrak  temulawak  dapat meningkatkan aktivitas antibakteri (Syarmalina, et al., 2019).
Penelitian  terkait  sintesis  nanoherbal dari  ekstrak  etanol  kayu  secang  belum pernah dilaporkan. Oleh karena itu artikel ini  melaporkan  sintesis  nanoherbal  dari ekstrak etanol kayu secang dengan metode gelasi ionik yang dilanjutkan karakterisasi nanoherbal yang terbentuk.

## Metode Penelitian
Alat dan bahan Peralatan yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  seperangkat  alat maserasi, rotary  vacuum  evaporator (Buchi  R-300),  oven  (Heraeus  ST-5042), pompa  vakum, freeze    dryer (CHRIST Alpha  1-2  LDplus) , corong  Buchner, neraca analitik (Advanturer Ohaus ), lemari
pendingin, magnetic stirrer (Heidolph MR Hei-Standard), Dynamic Light Scattering Zetasizer  Nano  (Malvern),  Spektrometer FT-IR (PerkinElmer), dan peralatan gelas. Bahan  yang  digunakan  yaitu  serbuk  kayu secang,  etanol  p.a.  (Merck),  aquabides, etanol  teknis  (96%),  kitosan  (Himedia), asam  asetat  glasial,  natrium  tripolifosfat (Na-TPP), dan tween-80 (Merck).

## Ekstraksi Sampel
Pembuatan ekstrak  etanol  kayu secang dilakukan dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol teknis (96%). Serbuk kering kayu secang ( C. sappan L.) sebanyak  500  gram  dimaserasi  dengan etanol  teknis  (96%)  dan  ditutup  rapat dalam  waktu  24  jam  pada  suhu  ruang. Hasil    maserasi    disaring  dengan  corong Buchner  dan  pompa  vakum.  Residu  hasil penyaringan dimaserasi kembali sebanyak dua  kali  dengan  prosedur  yang  sama. Ekstrak  etanol  yang  diperoleh  dipekatkan dengan rotavapor, dilanjutkan pengeringan dengan freeze dryer selama 8 jam sehingga diperoleh  ekstrak  etanol  kayu  secang padat.

## Sintesis Nanoherbal
Sintesis nanoherbal dilakukan menggunakan metode gelasi ionik dengan kitosan sebagai biopolimer kation dan Na- TPP sebagi anion multivalent.
Larutan kitosan dibuat dengan 3 variasi konsentrasi sebesar 0,50; 0,75; dan 1,00%. Sebanyak  0,50;  0,75;  dan  1,00  gram
kitosan ditimbang lalu dilarutkan menggunakan larutan asam asetat 5% (v/v) sampai  100  mL  dan  dihomogenkan menggunakan magnetic  stirrer (Pakki,  et al., 2016).
Larutan  Na-TPP  menggunakan  3 variasi  volume  yaitu  20,  30,  dan  40  mL dengan konsentrasi 0,5%. Na-TPP ditimbang  sebanyak  0,10;  0,15;  dan  0,20 gram. Selanjutnya ketiga larutan dilarutkan menggunakan aquabides sampai  20,  30,  dan  40  mL  lalu dihomogenkan  menggunakan magnetic stirrer (Pakki, et al., 2016).
Nanoherbal ekstrak etanol kayu secang dibuat  dengan  3  formulasi  yaitu  F1,  F2, dan  F3.  Larutan  kitosan  dengan  variasi konsentrasi  0,50;  0,75;  dan  1,00% sebanyak  100  mL  dimasukkan  ke  dalam Erlenmeyer. Kemudian tween-80 sebanyak  1  mL  ditambahkan  ke  dalam masing-masing larutan kitosan dan diaduk dengan magnetic  stirrer dalam  waktu  10 menit pada kecepatan 1000 rpm. Selanjutnya ditambahkan 0,1 gram ekstrak etanol kayu secang pada setiap Erlenmeyer dan diaduk  dengan magnetic stirrer dalam waktu 30 menit pada kecepatan 1400 rpm. Lalu  sebanyak  20  mL  larutan  Na-TPP 0,5%  dimasukkan  pada  F1,  30  mL  pada F2, dan 40 mL pada F3, kemudian diaduk dengan magnetic stirrer dalam waktu 120 menit  pada  kecepatan  1400  rpm.  Hasil yang  didapatkan  selanjutnya  didiamkan dengan waktu 24 jam (Pakki, et al., 2016).
Tabel 1. Formula nanoherbal ekstrak etanol kayu secang Bahan F1 F2 F3 Ekstrak Etanol Kayu Secang 0,1 gram 0,1 gram 0,1 gram Larutan Kitosan 0,50% 100 mL - - Larutan Kitosan 0,75% - 100 mL - Larutan Kitosan 1,00% - - 100 mL Larutan Na-TPP 0,5 % 20 mL 30 mL 40 mL Tween-80 1 mL 1 mL 1 mL

## Karakterisasi Nanoherbal
Nanoherbal ekstrak etanol kayu secang hasil  sintesis  dikarakterisasi dengan Zetasizer Nano untuk menentukan ukuran
partikel  dan  potensial  zeta  serta  dengan spektrometer  FTIR  untuk  menentukan gugus fungsi.

## Hasil dan Pembahasan
Ekstraksi Sampel Serbuk kering kayu secang ( C. sappan L.) sebanyak 500 gram dimaserasi dengan pelarut  etanol teknis dalam waktu 24 jam pada  suhu  ruang.  Hasil  maserasi disaring dengan vacuum dan  corong  Buchner  lalu dilakukan  remaserasi  sebanyak  dua  kali pada  residu.  Ekstrak  etanol  kayu  secang yang diperoleh dipekatkan dengan rotavapor, dilanjutkan pengeringan dengan freeze  dryer selama  8  jam  sehingga diperoleh ekstrak etanol kayu secang padat berwarna  merah  tua  sebanyak  21,745 gram.

## Sintesis Nanoherbal
Sintesis nanoherbal ekstrak etanol kayu secang  dilakukan  dengan  metode  gelasi ionik.  Prinsip  pembentukan  nanoherbal dengan  metode  gelasi  ionik  adalah pembentukan  ikatan  silang  polielektrolit dengan pasangan ion multivalennya (Park & Yeo, 2007). Dalam penelitian ini ikatan silang  terjadi  akibat  interaksi  eletrostatik antara  gugus amina (NH 3 + ) pada  kitosan dengan    gugus  bermuatan  negatif  (PO 4 3- ) dari  Na-TPP.  Pembentukan  ikatan  silang memperbesar  kekuatan  mekanis  partikel yang terbentuk (Putri, et al., 2018).
Gambar 1. Ikatan silang kitosan-NaTPP (Mi, et al., 1999)
Nanoherbal ekstrak etanol kayu secang hasil  sintesis  berupa  cairan  koloidal berwarna  kuning  keemasan  seperti  pada Gambar 2.
Gambar  2. Nanoherbal  ekstrak  etanol kayu secang hasil sintesis

## Karakterisasi Nanoherbal
1) Ukuran Partikel Ukuran  partikel  nanoherbal  ekstrak etanol kayu secang hasil sintesis ditentukan dengan zetasizer nano. Tujuan dari  karakterisasi  ini  untuk  menentukan ukuran partikel nanoherbal serta menentukan  apakah  nanoherbal  hasil sintesis memenuhi syarat sebagai nanopartikel yaitu memiliki diameter rata- rata  1-1000  nm  (Buzea,  et  al.,  2007; Mohanraj  &  Chen,  2006).  Hasil  uji menunjukkan  bahwa  rata-rata  ukuran partikel  dari  ketiga  formula  nanoherbal ekstrak etanol kayu secang yang diperoleh F1,  F2  dan  F3  masing-masing  sebesar 900,8;  1475,2;  dan  2438  nm.  Menurut Mohanraj  &  Chen  (2006),  formula  yang memenuhi persyaratan sebagai
nanopartikel  yaitu  F1  karena  memiliki ukuran partikel di bawah 1000 nm. Hal ini sesuai  dengan  penelitian  Husniati  dan Oktarina  (2014)  bahwa  kitosan  dalam larutan  asam  asetat  akan  menghasilkan ukuran  partikel  dengan  rata-rata  sebesar 780-940 nm (Husniati & Oktarina, 2014).
Dari  hasil  tersebut  dapat  diketahui bahwa  perbandingan  konsentrasi  kitosan dan Na-TPP mempengaruhi ukuran partikel  yang  dihasilkan. Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  Ayumi  (2018)  bahwa ukuran  partikel  akan  bertambah  seiring bertambahnya  rasio  konsentrasi  kitosan terhadap Na-TPP.
2) Potensial Zeta Harga  potensial  zeta  ditentukan  untuk memprediksi  stabilitas  larutan  koloid karena  gaya  tolak  menolak  antar  partikel dipengaruhi  oleh  perbedaan  muatan  antar partikel.  Nilai  potensial  zeta  dihasilkan dari  adanya  beda  potensial  antara  muatan listrik pada stern layer dengan difuse layer dari  partikel  koloid.  Harga  potensial  zeta melebihi dari ±30 mV menandakan bahwa koloid  nanoherbal  yang  terbentuk  stabil (Akhtar, et al., 2012).
Hasil uji menunjukkan bahwa rata-rata potensial zeta dari ketiga formula nanoherbal  ekstrak  etanol  kayu  secang
yang  diperoleh  F1,  F2,  dan  F3  berturut- turut  yaitu  +529,6  mV,  +523,6  mV,  dan +546,3  mV.  Ketiga  formula  memiliki harga  potensial  zeta  lebih  dari  +30  mV sehingga  stabilitasnya  tinggi karena memiliki gaya untuk mencegah terjadinya aglomerasi partikel. Ketiga formula nanoherbal  hasil  sintesis  memiliki  sifat yang  stabil  atau  tidak  mudah  mengalami aglomerasi  atau  flokulasi  sehingga  tidak mudah  mengendap  (Murdock,  et  al., 2008).
3) Gugus Fungsi Karakterisasi  gugus  fungsi  ditentukan untuk memprediksi interaksi antara kitosan dengan Na-TPP dan ekstrak etanol kayu  secang.  Pada  karakterisasi  gugus fungsi  ini  hanya  digunakan  nanoherbal ekstrak etanol kayu secang F1 dikarenakan ukuran  partikel  yang  memenuhi  standar partikel  nano  yaitu  F1  dengan  rata-rata ukuran partikel 900,8 nm.
Sebelum  dikarakterisasi,  nanoherbal ekstrak  etanol  kayu  secang  yang  awalnya berbentuk  koloidal  dikeringkan  dengan freezedryer terlebih  dahulu  selama  8  jam hingga  didapatkan  nanoherbal  ekstrak etanol kayu secang padat berwarna merah tua.
Gambar 3. Spektra IR (a) Nanoherbal ekstrak etanol kayu secang; (b) Kitosan
Gambar  3  menyatakan  bahwa  telah terbentuk  nanoherbal  ekstrak  etanol  kayu secang  yang  disintesis  dengan  metode gelasi  ionik.  Hal  ini  ditunjukkan  oleh terjadinya pergeseran bilangan gelombang vibrasi  ulur  gugus  O-H,  vibrasi  tekuk gugus N-H, serta munculnya puncak baru dari  vibrasi  gugus  fosfat  (P=O).  Vibrasi ulur gugus O-H dalam kitosan  mengalami pergeseran  dari  3297  cm -1 menjadi  3197 cm -1 dalam nanoherbal ekstrak etanol kayu secang.  Hal  tersebut  disebabkan  oleh terjadinya  interaksi  antara  gugus  –OH dalam kitosan dengan gugus –OH fenolik dari senyawa fenolik dalam ekstrak etanol kayu  secang.  Vibrasi  tekuk  gugus  N-H dalam kitosan mengalami  pergeseran dari 1582  cm -1 menjadi  1557  cm -1 dalam nanoherbal  ekstrak  etanol  kayu  secang. Hal  tersebut  disebabkan  oleh  terjadinya ikatan  silang  antara  gugus  NH 2 kitosan dengan  Na-TPP  serta  interaksi  dengan gugus  –OH  fenolik  dari  senyawa  fenolik
dalam  ekstrak  etanol  kayu  secang. Munculnya  puncak  vibrasi  gugus  fosfat pada bilangan gelombang 1071 cm -1 dalam nanoherbal  ekstrak  etanol  kayu  secang menunjukkan  telah  terjadi  ikatan  silang ( crosslinking ) antara kitosan dengan gugus fosfat dalam Na-TPP (Putri, et al., 2018).

## Kesimpulan
Pembuatan  nanoherbal  ekstrak  etanol kayu  secang  yang  dilakukan  dengan metode  gelasi  ionik  memberikan  hasil terbaik pada perbandingan kitosan dan Na- TPP 0,5%  : 0,5% (F1). Nanoherbal  yang terbentuk pada perbandingan ini memiliki ukuran rata-rata nanoherbal sebesar 900,8 nm  dan  potensial  zeta  +529,6  mV. Pergeseran  bilangan  gelombang  vibrasi ulur gugus O-H, vibrasi tekuk gugus N-H, serta  munculnya  puncak  baru  dari  vibrasi gugus fosfat (P=O), mendukung terbentuknya nanoherbal.

## Daftar Pustaka
Akhtar, F., Rizvi, M. M. A. & Kar, S. K., 2012.  Oral  Delivery  of  Curcumin Bound  to  Chitosan  Nanoparticles Cured  Plasmodium  yoelii  Infected Mice. Biotechnology Advances, 30(1), pp. 310-320.
Ardila,  A.,  Chairani,  I.,  Nurdiati,  N.  & Fitriyah,  N.  H.,  2017.  Fabrikasi Nanopartikel  Herbal  dalam  Tablet Effervescent  Menggunakan  Metode Solvent  Emulsificassion  Diffusion High  Speed  Homogenizer. Seminar Nasional Sains dan Teknologi, pp. 1- 8.
Ayumi, D., S. & M., 2018. Pembuatan dan Karakterisasi  Nanopartikel  Ekstrak Etanol Daun Ekor Naga (Rhaphidophora pinnata (L.f.) Schott) Menggunakan  Metode  Gelasi  Ionik. Tropical Medicine Conference, Volume 1, pp. 29-33.
Buzea,  C.,  Pacheco,  I.  I.  &  Robbie,  K., 2007.
Nanomaterials
and Nanoparticles:  Sources  and  Toxicity. Biointerphases 2, 2(4), pp. MR17-71.
Husniati  &  Oktarina,  E.,  2014.  Sintesis
Nano Partikel Kitosan dan Pengaruhnya Terhadap Inhibisi
Bakteri  Pembusuk  Jus  Nanas. Jurnal Dinamika  Penelitian  Industri, 25(2),
pp. 89-95. Kaban, J., Bangun, H. D. & Asteria, K. D., 2006. Pembuatan Membran Kompleks Polielektrolit Alginat
Kitosan. Jurnal  Sains  Kimia, 10(1), pp. 10-16.
Kusmiati,  D.  &  Priadi,  D.,  2014.  Analisa Senyawa  Aktif Ekstrak  Kayu Secang (Caesalpinia sappan L.) Yang Berpotensi Sebagai Antimikroba.
Seminar  Nasional  Teknologi  Industri Hijau, Volume 1, pp. 169-174.
Luntungan,  A.  H.,  Mandey,  L.  C.,
Rumengan,  I.  F.  M.  &  Suptijah,  P.,
2017. Pengaruh Penyalutan Nanokitosan Pada Kandungan
Fenolik  Ekstrak  Daun  Kemangi (Ocimum  basilicum  L.). Jurnal  Ilmu dan  Teknologi  Pangan, 5(2),  pp.  20- 25.
Mardliyanti,  E.,  Muttaqien,  S.  E.  &
Setyawati,  D.  R.,  2012.  Sintesis Nanopartikel
Kitosan-Tripoly Phosphate  Dengan  Metode  Gelasi
Ionik:  Pengaruh  Konsentrasi  dan
Rasio Volume Terhadap Karakteristik Partikel. Prosiding Pertemuan Ilmiah Ilmu  Pengetahuan  dan  Teknologi Bahan 2012, Issue 90, p. 93.
Martien,  R.  et  al.,  2012.  Perkembangan Teknologi Nanopartikel Sebagai Sistem  Penghantaran  Obat. Majalah Farmaseutik, 8(1), pp. 133-144.
Mi, F.-L., Shyu, S.-S., Lee, S.-T. & Wong,
T.-B.,  1999.  Kinetic  Study  of
Chitosan-Tripolyphosphate  Complex
Reaction and Acid-Resistive Properties of the Chitosan-
Tripolyphosphate Gel Beads Prepared by in-Liquid Curing Method. Journal of  Polymer  Science, Volume  37,  pp. 1551-1564.
Mohanraj,  V.  J.  &  Chen,  Y.,  2006. Nanoparticles  -  A  Review. Tropical Journal of Pharmaceutical Research, 5(1), pp. 561-573.
Murdock, R. C. et al., 2008. Characterization of Nanomaterial
Dispersion  in  Solution  Prior  to  In Vitro Exposure Using Dynamic Light Scattering  Technique. Toxicological Sciences, 101(2), pp. 239-253.
Pakki,  E.  et  al.,  2016.  Formulasi Nanopartikel  Ekstrak  Bawang  Dayak (Eleutherine  americana  (Aubl)  Merr) dengan  Variasi  Konsentrasi  Kitosan- Tripolifosfat  (TPP). J.  Trop.  Pharm. Chem., 3(4), pp. 251-263. Park,
K. & Yeo, Y., 2007.
Microencapsulation  Technology.  In: Encyclopedia of Pharmaceutical Technology. New  York:  Informa Healthcare USA, pp. 2315-2327.
Putri,  A.  I.,  Sundaryono,  A.  &  Candra,  I. N.,  2018.  Karakterisasi  Nanopartikel
Kitosan Ekstrak Daun Ubijalar (Ipomoea  batatas  L.)  Menggunakan Metode Gelasi Ionik. Jurnal Pendidikan dan Ilmu Kimia, 2(2), pp.
203-207.
Rina, O., 2013. Identifikasi Senyawa Aktif dalam  Ekstrak  Etanol  Kayu  Secang (Caesalpinia  sappan  L.). Prosiding Semirata FMIPA Universitas
Lampung, pp. 215-218.
Rismana,  E.  et  al.,  2013.  Pengujian Stabilitas Sediaan Antiacne Berbahan Baku  Aktif  Nanopartikel  Kitosan Ekstrak  Manggis  -  Pegagan. Buletin Penelitian Kesehatan, 41(4), pp. 207-
216.
Shu, X. Z. & Zhu, K. J., 2002. Controlled Drug  Release  Properties  of  Ionically Cross-linked  Chitosan  Beads:  The
Influence of Anion Structure. International Journal of Pharmaceutics, 233(1-2),  pp.  217-
255.
Sugiyanto, R. N., Putri, S. R., Damanik, F. S.  &  Sasmita,  G.  M.  A.,  2013. Aplikasi  Kayu  Secang  (Caesalpinia sappan  L.)  dalam  Upaya  Prevensi Kerusakan  DNA  Akibat  Paparan  Zat Potensial
Karsinogenik melalui MNPCE  Assay. Prosiding  Pekan Ilmiah Mahasiswa Nasional Program Kreativitas Mahasiswa, pp. 1-6.
Syarmalina,  Wirawan,  D.  &  Rahmat,  D., 2019. Formulasi Nanopartikel Ekstrak Temulawak Berbasis Kitosan Sebagai Antijerawat. Medical Sains, 3(2), pp. 153-158.