## Pengaruh Penambahan Glukosa pada Pengencer Masa Kriopreservasi
The Effect of Adding Glucose to Andromed Diluent on Limousin Cow Semen During The Cryopreservation Period

## M. Nuralamsyah, Musdalifa Mansur, Armayani M
Prodi Peternakan, Fakultas Sains Dan Teknologi, Universitas Muhammadiyah Sidenreng Rappang Alamat Email: musdalifa.mansur@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  pengaruh  suplementasi  glukosa  dalam  pengencer  AndroMed terhadap  kualitas  spermatozoa  sapi  lomousin  serta  untuk  mengetahui  konsentrasi  glukosa  yang  terbaik dalam  mempertahankan  kualitas  spermatozoa  sapi  limousine  selama  kriopreservasi.Penelitian ini menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  5  taraf  perlakuan  dan  4  kali  ulangan  yaitu,  0%, 0,125%, 0,25%, 0,5%, dan 1%. Parameter yang diamati yaitu Motilitas Spermatozoa, Viabilitas Spermatozoa, Abnormalitas  Spermatozoa.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  perlakuan  penambahan  glukosa berpengaruh  sangat  nyata  terhadap  Motilitas  Spermatozoa,  Perlakuan  dengan  penambahan  glukosa  1% menghasilkan Motilitas yang lebih tinggi, Hasil penelitian ini menun jukkan bahwa perlakuan penanbahan glukosa  berpengaruh  sangat  nyata  terhadap  Viabilitas  Spermatozoa.  Perlakuan  dengan  penambahan glukosa  1%  menghasilkan  Viabilitas  yang  lebih  tinggi,  Penambahan  glukosa  tidak  berpengaruh  nyata terhadap  Abnormalitas  Spermatozoa  setelah  masa kriopreservasi, Disimpulkan  bahwa: Suplementasi glukosa  dalam pengencer  andromed  berpengaruh  terhadap  viabilitas  dan  motilitas  setelah  masa kriopreservasi  namun  tidak  berpengaruh  terhadap  abnormalitas  setelah  masa  kriopreservasi,  Dan Presentase  glukosa  yang  terbaik  dalam  mempertahankan  kualitas  spermatozoa  sapi  limousine  selama kriopreservasi adalah penambahan glukosa 1%. Kata Kunci : Glukosa, Kriopreservasi, Spermatozoa, Sapi Limosin

## ABSTRACT
This study aims to determine the effect of glucose supplementation in andromed diluent on the quality of limousine cow sperm during the cryopreservation period and to determine the best glucose concentration in maintaining the quality of limousine cow spermatozoa during the cryopreservation period. This research used a Completely Randomized Design (CRD)  with  5  treatment  levels  and  4  replications,  namely,  0%,  0.125%,  0.25%,  0.5%,  and  1%.  The  parameters observed  were  Spermatozoa  Motility,  Spermatozoa  Viability,  Spermatozoa  Abnormalities.  The  results  of  this  study show that the glucose addition treatment has a very significant effect on the motility of spermatozoa. The treatment with  the  addition  of  1%  glucose  produces  higher  motility.  The  results  of  this  study  show  that  the  glucose  addition treatment has a very significant effect on the viability of the spermatozoa. Treatment with the addition of 1% glucose resulted  in  higher  viability.  The  addition  of  glucose  had  no  significant  effect  on  spermatozoa  abnormalities  after  the cryopreservation period. It was concluded that: Glucose supplementation in Andromed diluent had an effect on viability and motility after the cryopreservation period but had no effect on abnormalities after the cryopreservation period. And The best glucose percentage in maintaining the quality of limousine cow spermatozoa during cryopreservation is the addition of 1% glucose.
Keyword : Glucose, Cryopreservation, Spermatozoa, Limousine Cow

## PENDAHULUAN
Ternak  sapi  merupakan  salah  satu sumber  daya  penghasil  bahan  makanan berupa  daging  dan  susu  yang  memiliki  nilai ekonomis  yang  tinggi  dan  penting  artinya  di dalam  kehidupan  masyarakat.  Sapi  potong dipelihara  dengan  tujuan  utama  sebagai penghasil  bahan  makanan  berupa  daging. Penyediaan daging sapi di Indonesia belum
mencukupi  kebutuhan  konsumsi  masyarakat yang terus meningkat. Salah satu penyebabnya  adalah  laju  pertumbuhan populasi  manusia  yang  tinggi  namun  tidak diikuti  oleh  laju  pertumbuhan  populasi  sapi potong (Siregar  et  al.,  2009).  Mutu  genetik sapi  potong  dapat  menentukan  produksi daging  yang  dihasilkan.  Untuk  itu, diperlukan upaya perbaikan mutu genetik
ternak,  khususnya  sapi  lokal  dengan memanfaatkan  teknologi  seperti  inseminasi buatan (IB).
IB  atau  kawin  suntik  pada  sapi adalah suatu  cara  atau  teknik  untuk memasukkan semen yang telah dicairkan dan telah  diproses  terlebih  dahulu  yang  berasal dari  ternak  jantan  ke  dalam  saluran  alat kelamin betina dengan menggunakan metode dan  alat  khusus  yang  disebut  ‘insemination gun‘ . Inseminasi Buatan (IB) merupakan salah satu  teknik  untuk  menghasilkan  sapi  unggul serta  perbaikan  mutu  genetik (Pasino  et  al., 2020). IB  dapat  memperbaiki  mutu  genetik ternak karena dapat megoptimalkan penggunaan  bibit  pejantan  unggul  secara lebih  luas  dalam  jangka  waktu  yang  lama (Feradis, 2010).
Perkembangan  peternakan  sapi  di Indonesia  secara  umum  masih  sangat memprihatinkan.  Sebagian  besar  produksi daging  sapi  di  Indonesia  hampir  seluruhnya diperoleh  dari  peternakan  rakyat  (78%). Sisanya  dari  impor,  sekitar  lima  %  berupa daging sapi dan 17% ternak hidup (Soehadji, 2000  dalam  Saleh  et  al.  2014).  Pola pemeliharaan  ternak  di  Indonesia  akan  tetap didominasi  oleh  usaha  peternakan  berskala kecil dengan karakteristik sebagai berikut: (1) Rata-rata  kepemilikan  ternak  rendah  (2) Ternak digunakan sebagai tabungan hidup (3) Ternak  dipelihara  dalam  pemukiman  padat penduduk  dan  dikandangkan  di  belakang rumah  (4)  Terbatas  lahan  pemeliharaan sehingga pakan harus dicari di kawasan yang seringkali jauh dari rumah; (5) Usaha beternak dilakukan secara turun temurun (6) Jika tidak ada  modal  untuk  membeli,  peternak menggaduh dengan pola bagi hasil.
Salah  satu  upaya  untuk  meningkatkan usaha ternak di Indonesia adalah dibentuknya Sekolah  Peternakan  Rakyat  (SPR).  Program SPR diharapkan dapat menjadi media transfer ilmu  pengetahuan  dan  teknologi  untuk membangun  kesadaran  peternak  dalam
menjalankan usaha ternak untuk meningkatkan dan mengembangkan wawasan,  pengetahuan,  berpikir  kreatif  dan inovatif  serta  mendorong  tindakan  kolektif dengan didampingi oleh pakar dan akademisi yang berkompeten dari berbagai disiplin ilmu (Zakiah et al., 2017).
IB  atau  kawin  suntik  pada  sapi adalah suatu  cara  atau  teknik  untuk memasukkan semen yang telah dicairkan dan telah  diproses  terlebih  dahulu  yang  berasal dari  ternak  jantan  ke  dalam  saluran  alat kelamin betina dengan menggunakan metode dan  alat  khusus  yang disebut  ‘insemination gun‘. IB  dapat  memperbaiki  mutu  genetik ternak karena dapat megoptimalkan penggunaan  bibit  pejantan  unggul  secara lebih  luas  dalam  jangka  waktu  yang  lama (Feradis, 2010).
Andromed  merupakan  salah  satu pengencer komersial berbahan dasar tris yang paling  populer  digunakan  untuk  pengencer semen  beku  sapi.  Andromed®  merupakan bahan  pengencer  komersial  terdiri  dari fosfolipid,  tris-(hidroksimetil)-aminometan, asam  sitrat,  fruktosa,  gliserol,  tilosin  tartrat, gentamisin  sulfat,  spektinomisin,  dan linkomisin  (Minitub,  2001).  Penggunaan andromed sebagai pengencer sering dikombinasikan  dengan  larutan  NaCl  atau akuades dengan perbandingan 1:4 (Herold et al., 2006)
Sapi  Limousin  merupakan  salah  satu jenis sapi  potong  yang  sedang  dikembangkan  di Indonesia.  Sapi  Limousin  berasal  dari  benua Eropa  yang  banyak  ditemukan  di  negara Perancis.  Sapi  Limousin  yang  dipelihara peternak  Indonesia  adalah  Peranakan Limousin  yang  merupakan  hasil  persilangan dengan  Peranakan  Ongole  (PO),  Brahman, Hereford dan jenis sapi lainnya (Syamsul dan Ruhyadi,  2012). Sapi  yang  memiliki  ukuran tubuh besar akan menghasilkan pertumbuhan yang optimal dan menghasilkan bobot karkas yang tinggi.
Bobot hidup akan mempengaruhi bobot karkas,  bobot  karkas  berhubungan  dengan luas urat daging mata rusuk, luas urat daging mata  rusuk  bukanlah  satusatunya  indikator yang  mempengaruhi  bobot  karkas.  Bobot Karkas  dapat  juga  dipengaruhi  oleh  tingkat umur  dan  kondisi  tubuh  ternak (Andi Fachruddin, 2012).
Kualitas  spermatozoa  selama  proses kriopreservasi  akan  mengalami  penurunan yang signifikan apabila bahan pengencer yang digunakan tidak mampu memenuhi kebutuhan  spermatozoa  selama  proses tersebut.  Menurut  Susilawati (2011) syarat penting  yang  harus  dimiliki  oleh  setiap pengencer adalah mempunyai daya preservasi tinggi,  mengandung  unsur  yang sifat  fisik  dan  kimiawinya  hampir  sama dengan  semen  dan  tidak  mengandung  zat yang  bersifat  racun  bagi  spermatozoa,  dapat mempertahankan daya fertilisasi spermatozoa serta tidak terlalu kental sehingga menghambat  fertilisasi. Pada  ternak  sapi keberhasilan fertilisasitergantung pada qualitas spermatozoa dan ovum. Spermatozoa yang  baik  adalah  persentase  jumlah  sperma yang  motil,  hal  tersebut  digunakan  sebagai parameter  di  balai  inseminasi  untuk menentukan  apakah  pejantan  tersebut baik atau tidak (Patel & Goyena, 2019).
Pengencer  merupakan  faktor  penting bagi  spermatozoa  pasca  ejakulasi,  karena sperma  akan  mendapat  suplai  nutrien  dari bahan tersebut. Pengencer yang baik biasanya mengandung  beberapa  subtansi  penting seperti  gula  sederhana  seperti  glukosa, gliserol,  kuning  telur  dan  anti  biotik  (Holt, 2000).  Selanjutnya,  Purdy  (2006)  melaporkan bahwa  gula  sederhana  dalam  pengencer sangat  penting  untuk  sumber  energy  pada spermatozoa.  Berdasarkan  hal  tersebut  maka kualitas  spermatozoa  dapat  dipertahankan dengan  baik  tergantung  dari  pengencer, karena pengencer akan berinteraksi langsung dengan spermatozoa untuk dapat
memproteksi  selama  proses  pendinginan, pembekuan  dan  pengenceran  kembali (thawing). Evaluasi  kualitas  spermatozoa termasuk  motilitas,  acrosome  integrity  dan membrane  integrity  merupakan  hal  penting dalam  rangka keberhasilan  kebuntingan (Mehmood  et  al.,  2008;  Rota,  et  al.,  2000). Berdasarkan  hal  tersebut  maka  penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  perbandingan kualitas  spermatozoa  sapi  jantan  pasca thawing  dengan  pengencer  yang  berbeda (Patel & Goyena, 2019). Penelitian sebelumnya menunjukkan  bahwa  motilitas  dan  viabilitas spermatozoa sapi limousin post thawing di BIB Ungaran  relatif  rendah  yaitu  masing-masing 36% dan  48.2% (Lubis et al., 2011), demikian juga  dengan  peneliti  lain  yang  menunjukkan bahwa  motilitas  spermatozoa  sapi  limousin post  thawing yaitu  40,97%  menggunakan pengencer  susu  skim-kuning  telur (Yahaq  et al.,  2019).  Pengencer  andromed  dilaporkan lebih  baik  jika  dibandingkan  pengencer  tris kuning  telur  dalam  mempertahankan spermatozoa sapi Bali post-thawing (Salmah et al., 2021).
Karbohidrat  sederhana  seperti  glukosa dapat ditambahkan dalam pengencer sebagai sumber  energi  dan  krioprotektan.  Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa penambahan  glukosa  menghasilkan  kualitas spermatozoa  babi post-thawing lebih baik jika dibandingkan fruktosa dan galaktosa (Gómez-Fernández  et  al.,  2012).  Keberadaan glukosa dalam pengencer dilaporkan memberikan  efek  krioprotektif  yang  lebih besar  pada  spermatozoa  babi (Gómez- Fernández  et  al.,  2012).  Penelitian  lainnya menunjukkan  bahwa  penambahan  glukosa dalam  pengencer  tris  efektif  meningkatkan kualitas semen beku domba garut (Rizal et al., 2006). Berdasarkan dari penelitian sebelumnya  maka  dilakukan  penelitian penambahan  Glukosa  dalam  Pengencer Semen  sapi  Limousine  selama  masa Kriopservasi.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini  akan  dilaksanakan  pada bulan  Mei  hingga Juni  2023  di  Laboratorium Produksi  Semen,  Unit  Pelaksana  Teknis Pelayanan  Inseminasi  Buatan  dan  Produksi Semen,  Kabupaten  Maros. Penelitian  ini  di lakukan  untuk  mengetahui  pengaruh penambahan  glukosa  pada  pengencer andromed  terhadap  sapi  limousine  selama masa kriopreservasi.
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini adalah Vagina Buatan, Mikroskop Cahaya, Layar Monitor, Kaca Preparat, Kaca Penutup, Goblet, Rak Pembeku, Mesin Fealing, Kulkas, Mikropipet,  Styrofoam,  Water  Bath,  Gelas Erlenmeyer,  Healing  Table,  Pinset,  Sealing, Container  Nitrogen  cair. Bahan  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah Semen Sapi  Limousin,  Pengencer  Andromed, Glukosa,  Nitrogen  Cair,  Aquabidest, Air hangat, Tissue.
Penelitian ini menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  5 taraf  perlakuan  dan  4  kali  ulangan (K. Ratnayani  et  al.,  2018) Taraf  perlakuan  yang digunakan adalah:
P0  = pengencer andromed P1  = pengencer andromed + glukosa 0,125% P2  = pengencer andromed + glukosa 0,25% P3  = pengencer andromed + glukosa 0,5% P4  = pengencer andromed + glukosa 1% Adapun prosedur penelitian ini yaitu:

## A. Pembuatan pengencer
Langkah  pertama  dalam  tahapan penelitian  ini  adalah  membuat  pengencer terlebih  dahulu  dengan  cara  menyiapkan andromed,  aquabidest  dan  gelas  ukur. Mencampurkan  andromed  dan  aquabidest dengan perbandingan 1:4 kemudian ditambahkan  glukosa  sesuai  perlakuan  dan dihomogenkan
secara perlahan dan selanjutnya  disimpan  pada water  bath pada suhu 32-35 o C ( Susilawati, 2011).

## B. Koleksi semen
Koleksi  semen  merupakan  tahapan pengambilan  semen  dari  pejantan.  Tahapan ini  dilakukan dengan  menyiapkan  pejantan yang akan ditampung kemudian menyiapkan vagina buatan yang telah disterilisasi dan diisi air  hangat  ke  dalam  vagina  buatan.  Setelah vagina  buatan  siap  maka  selanjutnya dilakukan  penampungan  setelah  pejantan telah melakukan mounting kemudian memasukkan  organ  reproduksi  jantan  ke dalam  vagina  buatan  sehingga  terjadi ejakulasi (Hanifi et al., 2016).
C. Pengenceran dan pengemasan semen Pengenceran semen dilakukan dengan menyiapkan  gelas  erlenmeyer,  memasukkan pengencer  1  ml  kedalam  gelas  erlenmeyer, memasukkan semen segar langsung ke dalam dasar  tabung,  memasukkan  sisa  pengencer sesuai dengan kebutuhan kemudian dihomogenkan  secara  perlahan  selanjutnya diuji  kualitasnya  menggunakan  mikroskop. Setelah  pengenceran  kemudian  dilakukan pengisian dan printing straw yakni pemberian kode  pejantan,  kode  produksi  dan  nama pejantan (Nur Jamiah Rangkuti et al., 2021) .
D. Ekuilibrasi semen
Proses ini merupakan proses penyesuaian
spermatozoa setelah
penambahan  pengencer  dari  suhu  3-5 o C sampai suhu -140 o C,  straw  yang  telah disusun di atas rak kemudian dimasukkan ke dalam  kulkas  selama  2-4  jam,  kemudian dilakukan pengujian kualitas spermatozoa.

## E. Pre- freezing
Pada  proses  ini  straw  yang  telah tersusun di atas rak straw diletakkan 10 cm di atas permukaan nitrogen cair dalam styrofoam selama 9-15 menit hingga suhu mencapai -140 o C.
F. Pembekuan semen atau freezing
Pada proses ini semen yang telah
memalui proses pre-preezing akan dimasukkan  ke  dalam  goblet  dan  direndam dalam  nitrogen  cair  yang  bersuhu -196 o C (Aini et al., 2014) .

## G. Thawing semen
Thawing  semen  merupakan  proses pencairan  kembali  semen  yang  telah dibekukan.  Semen  dicairkan  kembali  pada suhu  37 o C  selama  30  detik  dalam waterbath .
Kemudian  dilakukan  pengujian  kualitas spermatozoa post thawing .
Adapun  parameter  penelitian  ini adalah  :  Motilitas Spermatozoa, Viabilitas Spermatozoa, Abnormalitas Spermatozoa (Aini et al., 2014).
H. Analisis Data
Analisis  data  dilakukan  dengan  model matematika sebagai berikut:
Yij = µ + Pi + ԑ ij
Keterangan : Yij : nilai  pengamatan  penggunaan  berbagai level glukosa dan ulangan ke-j µ : nilai rataan umum Pi : pengaruh  perlakuaan  berbagai  level glukosa
ԑ ij : pengaruh galat percobaan dari perlakuan level glukosa ke-i  pada ulangan ke-j

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Motilitas  Setelah Masa Kriopreservasi
Motilitas  individu  merupakan  salah satu    syarat    penilaian    kualias    semen. Persentase  spermatozoa        yang        motil (bergerak      progresif)      dapat      digunakan sebagai  ukuran  kesanggupan    untuk membuahi    ovum (Saputra  et  al.,  2017). Perhitungan  motilitas  spermatozoa  lebih bersifat  subyektif  dibandingkan  dengan viabilitas,  oleh  sebab  itu  untuk  mengeliminir subyektifitas pengamat, maka perlu dilakukan pelatihan atau diuji lebih dari satu orang (Irvanto et al., 2020). Tabel 1. Motilitas Masa Kriopreservasi Perlakuan Ulangan Total rata-rata 1 2 3 4 P0 49 52 51 55 56 50 52 52 54 57 51 51 53 56 58 48 52 53 54 59 198 207 209 219 230 49,5 51,75 52,25 54,75 57,5 P1 P2 P3 P4 Grand total 1063 53,15
Sumber : Data ini diperoleh dari uji anova
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa penambahan  glukosa  berpengaruh  sangat nyata  terhadap  motilitas  setelah  masa kriopreservasi. Perlakuan yang menghasilkan persentase  motilitas  paling  tinggi  setelah pengenceran  yaitu  kontrol  dan  glukosa  1%. Hal  ini  tidak  sesuai  dengan  penelian sebelumnya yang mengatakan (Mirajuddin et al., 2021) bahwa penambahan glukosa dalam pengencer  cenderung  menurunkan  motilitas
progresif  spermatozoa  sapi  Donggala  yang disimpan selama 3 hari.
Pada  sapi  Bali,  ditemukan  bahwa penambahan  glukosa  2%  dalam  pengencer skim  antibiotik  kuning  telur  menghasilkan viabilitas yang setelah equilibrasi yaitu 61.36% (Mukminat et  al., 2014) lebih  tinggi  dari penggunaan 1% glukosa dalam penelitian ini. Hal  ini  mungkin  disebabkan  perbedaan  jenis pengencer dan jenis sapi yang digunakan.

## B. Viabilitas  Spermatozoa  Setelah  Masa Kriopreservasi
Viabilitas      merupakan      salah      satu indikator      penentukualitas      semen, penilaian persentase   viabilitas   spermatozoa dapat      menggunakan      pewarnaan  eosin negrosin.  Spermatozoa    yang    hidup    akan
berwarna    terang,  sedangkan    spermatozoa yang mati    akan  berwarna    ungu    karena menyerap eosin  negrosin. Spermatozoa  yang mati    mengalami  kerusakan  membran  sel sehingga  menyerap  zat  warna  eosin  yang diberikan (Rf & Dh, 2019).
Tabel 2. Viabilitas Spermatozoa Setelah Masa Kriopreservasi
Sumber : Data ini diperoleh dari olah data anova
Hasil  dari penelitian  ini  diketahui bahwa
penambahan glukosa yang menghasilkan  persentase  viabilitas  tertinggi yaitu pada penambahan glukosa 1%, Dengan presentase  79,8325%,  penelitian  ini  sangat berbedah  dari  penelian  sebelunya (Pambudi et  al.,  2015) yang  mengatakan  bahwa penambahan  0.6%  glukosa  merupakan  level ideal  dalam  mempertahankan  kualitas spermatozoa  kalkun  selama  penyimpanan suhu 5 o C, namun peningkatan level glukosa hingga 0.9% justru menurunkan motilitas dan viabilitas spermatozoa.
Pada  sapi  Bali,  ditemukan  bahwa penambahan  glukosa  2%  dalam  pengencer skim  antibiotik  kuning  telur  menghasilkan viabilitas yang setelah equilibrasi yaitu 61.36%
(Mukminat et  al., 2014) lebih  rendah  dari penggunaan 1% glukosa dalam penelitian ini. Hal  ini  mungkin  disebabkan  perbedaan  jenis pengencer dan jenis sapi yang digunakan.

## C. Abnormalitas  Spermatozoa  Setelah  Masa Kriopreservasi
Abnormalitas  adalah  salah  satu indikator  dalam  menentukan  kuliatas spermatozoa  secara  fisik.  Spermatozoa merupakan  kelainan  yang  terjadipada morfologi spermatozoa. Presentase abnormalitas  yang  tinggi pada  spermatozoa dapat  menyebabkan  infertilitas,  karena spermatozoa  yang  memiliki  struktur  sel abnormal  dapat  menjadi  salah  satu  faktor penghambat  dalam  proses  fertilitas (Mahfud et al., 2019).
Perlakuan Ulangan Total rata-rata 1 2 3 4 P0 61,76 70,47 71,29 74,29 61,27 69,37 75,81 75,81 62 70,81 70,81 76,19 63 70,28 76 73,7 248,03 62,0075 P1 280,93 70,2325 P2 293,91 73,4775 P3 299,99 74,9975 P4 79,14 79,55 79,82 80,82 319,33 79,8325 Grand total 1442,19 72,1095
Tabel 3. Abnormalitas Spermatozoa Setelah Masa Kriopreservasi Perlakuan Ulangan Total rata-rata 1 2 3 4 P0 P1 13 10 18 21 13 10 12 15 18 17 14 10 12 11 10 11 10 11 12 11 48 42 56 62 51 12 10,5 14 15,5 12,75 P2 P3 P4 Grand total 259 12,95 Sumber : Data ini diperoleh dari olah data anova Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa penambahan
glukosa tidak berpengaruh  nyata    terhadap  abnormalitas spermatozoa setelah ekulibrasi. Abnormalitas spermatozoa  pada  semua    perlakuan  dalam penelitian  ini  lebih  rendah  dari  penelitian sebelumnya (Indriani et al., 2013) yaitu 16.07% pada  sapi  Limousin  yang  diencerkan  dengan CEP-2  kuning  telur (Rf  &  Dh,  2019). Abnormalitas pada penelitian ini masih layak untuk  diinseminasikan  karena  hasil  yang didapatkan  dibawah  20%.  Sesuai  dengan pernyataan  McAuliffe  et  al. (2010) dan  Perry et  al. (2002) maksimal  abnormalitas  yang disarankan  untuk  spermatozoa  sapi  adalah 20%.

## PENUTUP

## Kesimpulan
Suplementasi glukosa dalam
pengencer  andromed berpengaruh  terhadap viabilitas  dan  motilitas  setelah  masa kriopreservasi  namun  tidak  berpengaruh terhadap abnormalitas setelah masa kriopreservasi.
Presentase glukosa yang terbaik dalam mempertahankan  kualitas  spermatozoa  sapi limousine  selama  kriopreservasi  adalah penambahan glukosa 1%.
Saran
Untuk  pengambilan  data  motilitas spermatozoa  sebaiknya  menggunakan  alat Computer-Assisted  Sperm  Analysis (CASA) untuk mendapatkan data yang lebih lengkap.

## DAFTAR PUSTAKA
Aini,  K.,  Suharyati,  S.,  &  Hartono,  M.  (2014). Pengaruh  Jarak  Straw  dengan  Nitrogen Cair  pada  Proses  Pre  Freezing  terhadap Kualitas  Semen  Beku  Sapi  Limousin. Jurnal Ilmiah Peternakan Terpadu , 2 (3), 62– 70. Andi  Fachruddin.  (2012).  pengertian  sapi limousin. ץראה , 8.5.2017 , 2003–2005.
Feradis.  (2010). Bioteknologi  Reproduksi  pada Ternak . Bandung: Alfabeta. Gómez-Fernández,  J.,  Gómez-Izquierdo,  E.,
Tomás,  C.,  Mocé,  E.,  &  De  Mercado,  E. (2012). Effect of different monosaccharides  and  disaccharides  on boar sperm quality after cryopreservation. Animal  Reproduction Science , 133 (1–2), 109–116. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.20 12.06.010
Hanifi, H., Ihsan, M., & Susilawati, T. (2016). Pengaruh  Lama  Ekuilibrasi  Pada  Proses Pembekuan  Terhadap  Kualitas  Semen Sapi  Wagyu  Menggunakan  Pengencer Andromed. TERNAK TROPIKA Journal of Tropical  Animal  Production , 17 (1),  31–41. https://doi.org/10.21776/ub.jtapro.2016. 017.01.4
Indriani,  Susilawati,  T.,  &  Wahyuningsih,  S. (2013).  Daya Hidup  Spermatozoa  Sapi Limousin  yang  Dipreservasi  dengan Metode  Water  Jacket  dan  Free  Water Jacket. Jurnal  Veteriner  September , 14 (3), 379–386. Irvanto,  R.,  Hardijanto,  H.,  Paramita,  W., Susilowati, S., Damayanti L, T., & Safitri, E.  (2020).  Kualitas  Motilitas  Dan Viabilitas Spermatozoa Dari Semen Afkir Sapi  Limousin  Pada  Pengencer  Susu Skim  Kuning  Telur  Sitrat  Dengan
Penambahan  Berbagai  Kadar  Glukosa. Ovozoa :  Journal  of  Animal  Reproduction ,
7 (2), 96.
https://doi.org/10.20473/ovz.v7i2.2018. 96-101 K.  Ratnayani,  N.  M.,  A.  Dwi  Adhi,  S.,  &
Gitadewi.  (2018).  Penentuan  Kadar Glukosa dan Fruktosa pada Madu Randu dan Madu Kelengkeng dengan METODE Kromatografi Cair Kinerja Tinggi. FMIPA Universitas  Udayana,  Bukit  Jimbaran , 10 , 77–86.
Lubis, T. M., Putro, P. P., & Junaidi, A. (2011).
Characteristics  of  frozen-thawed  semen on  Simmental  and  Limousin  bulls  in Ungaran  ,  Indonesia. Proceedings  of  The Annual  International  Conference  Syiah Kuala University , 1 (1), 136–140. Mahfud, A., Isnaini, N., Puspita Anugra Yekti, A.,  Kuswati,  K.,  &  Susilawati,  T.  (2019). Kualitas  Spermatozoa  Post  Thawing Semen Beku Sperma Y Hasil Sexing Pada Sapi  Limousin. TERNAK  TROPIKA
Journal  of  Tropical  Animal  Production , 20 (1), 1–7.
https://doi.org/10.21776/ub.jtapro.2019. 020.01.1 McAuliffe, P., Johnston, P. H., Johnston, J., & Perry, V. E. A. (2010). Ejaculators,Morphology  and  Microscopes . Barton, ACT: Australian Cattle Veterinarian. Mirajuddin, Duma, Y., Mumu, M. I., Ladjama, M.  R.,  A’Fia,  N.,  Abas,  A.  M.,  & Ringgiallo,  A.  (2021).  Effects of  various diluents  on  the  quality  and  shelf  life  of Donggala  bull  semen. IOP  Conference Series:  Earth  and  Environmental  Science ,
902 (1). https://doi.org/10.1088/1755- 1315/902/1/012005
Mukminat,  A.,  Suharyati,  S.,  &  Siswanto,  S.
(2014).  Pengaruh  penambahan berbagai sumber  karbohidrat  pada  pengencer skim  kuning  telur  terhadap  kualitas semen  beku  sapi  Bali. Jurnal  Ilmiah Peternakan
Terpadu , 2 (2), 87–92. https://doi.org/10.23960/jipt.v2i2.p%25
p Nur  Jamiah  Rangkuti,  Tatik  Suteky,  &  Heri Dwi  Putranto.  (2021).  Pengaruh  Waktu Pre  Freezing  terhadap  Kualitas  Semen Beku  Sapi  Bali  di  UPTD  IB  Bengkulu.
Prosiding  Seminar  Nasional  Pembangunan Dan  Pendidikan  Vokasi  Pertanian , 2 (1),
165–176.
https://doi.org/10.47687/snppvp.v2i1.1 83 Pambudi,  J.  R.,  Budiasa,  M.  K.,  &  Bebas,  W. (2015).  Dosis  Glukosa  Ideal  pada Pengencer  Kuning  Telur  Fosfat  Dalam Mempertahankan Kualitas Semen Kalkun  pada  Suhu  5  °  C  IDEAL GLUCOSE  DOSAGE  ON  EGG  YOLK PHOSPHATE BUFFER FOR MAINTAINING. Indonesia Medicus
Veterinus , 4 (2), 104–110. Pasino,  S.,  Waru,  A. T.,  &  Mirnawati.  (2020). Peningkatan  Produktivitas  Sapi  Betina Melalui  Inseminasi  Buatan  Dengan Metode  Rektovaginal. Jurnal  Peternakan Lokal , 2 (2), 39–45.
Patel,  &  Goyena,  R.  (2019). Perbandingan Kualitas  Spermatozoa  Sapi  Jantan  Pasca Thawing  Dengan  Pengencer  Yang Berbeda. Journal  of  Chemical  Information and Modeling , 15 (2), 9–25. Perry,  V.  E.,  Phillips,  N.,  Fordyce,  G., Gardiner,  B.,  Entwistle,  K.,  Chenoweth, P.,  &  Doogan,  V.  J.  (2002).  Semen collection  and  evaluation.  In  G.  Fordyce (Ed.), Bull Fertility: Selection &Management in  Australia . Brisbane:  Australian Association of Cattle Veterinarians. Rf,  P.,  &  Dh,  H.  (2019). Kualitas  Semen  Cair Kambing  Boer  selama  Penyimpanan  Suhu Ruang  dengan  Penambahan  Ekstrak  Daun Kemangi  (Ocimum  sanctum) .  334–344. https://doi.org/10.14334/pros.semnas.t pv-2019-p.334-344
Rizal,  M.,  Herdis,  Boediono,  A.,  Aku,  A.,  & Yulnawati.  (2006).  Peranan  Beberapa Jenis Gula dalam Meningkatkan Kualitas Semen  Beku  Domba  Garut. Jurnal  Ilmu Ternak Dan Veteriner , 11 (2), 123–130. Salmah, N., Toleng, A. L., Yusuf, M., Masturi, Sahiruddin,  Hasrin,  &  Masir,  U.  (2021). Motility,  Viability,  and  Abnormality  of the  Frozen  Bali  Bull  Semen  with Andromed  and  Egg  Yolk-Tris  Extender. Hasanuddin  J.  Anim.  Sci. , 3 (1),  8–14. https://doi.org/10.20956/hajas.v3i1.141 71
Saputra,  D.,  Ihsan,  M.,  &  Isnaini,  N.  (2017). Korelasi  Antara  Lingkar  Skrotum

## Dengan Volume Semen, Konsentrasi Dan
Motilitas Spermatozoa Pejantan Sapi Bali. TERNAK  TROPIKA  Journal  of  Tropical
Animal Production , 10 (2), 59–68. https://doi.org/10.21776/ub.jtapro.2017. 018.02.9
Siregar,  S.,  Surya,  &  Amri.  (2009). Analisis Pendapatan  Peternak  Sapi  Potong  di Kecamatan  Stabat,  Kabupaten  Langkat . Skripsi. Universitas Sumatera Utara. Susilawati,  T.  (2011). Spermatology .  Malang: UB Press. Yahaq,  M. A.,  Ondho,  Y.  S.,  &  Sutiyono. (2019). Pengaruh penambahan vitamin C dalam  pengencer  semen  sapi  limousin yang  dibekukan  terhadap  kualitas  post thawing. Jurnal Sain Peternakan Indonesia ,
14 (4), 380–386. https://doi.org/https://doi.org/10.3118 6/jspi.id.14.4.380-386.
Zakiah,  Z.,  Saleh,  A.,  &  Matindas,  K.  (2017). Gaya  Kepemimpinan  dan  Perilaku Komunikasi  GPPT  dengan  Kapasitas Kelembagaan Sekolah Peternakan Rakyat di  Kabupaten  Muara  Enim. Jurnal Penyuluhan , 13 (2), 133. https://doi.org/10.25015/penyuluhan.v
13i2.14977.