Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis Vol. 10 No. 3, Hlm. 547-559, Desember 2018 ISSN Cetak         : 2087-9423 http://journal.ipb.ac.id/index.php/jurnalikt ISSN Elektronik : 2620-309X DOI: http://dx.doi.org/10.29244/jitkt.v10i3.21917
KEPASTIAN TAKSONOMI DAN SEBARAN BELANGKAS 1 Tachypleus tridentatus Leach 1819 DI PERAIRAN BALIKPAPAN TIMUR 2 3 TAXONOMIC CERTAINTY AND DISTRIBUTION OF TRI-SPINE HORSESHOE 4 CRAB Tachypleus tridentatus Leach 1819 IN EAST BALIKPAPAN WATERS 5 6 Erwyansyah 1* , Yusli Wardiatno 2 , Rahmat Kurnia 2 , dan Nurlisa Alias Butet 2 7 1 Program Studi Pengelolaan Sumberdaya Perairan, Sekolah Pascasarjana-IPB, Bogor 8 2 Departemen Manajemen Sumberdaya Perairan, FPIK-IPB, Bogor 9 * E-mail: erwyan.syah@gmail.com 10 11 ABSTRACT 12 The  tri-spine  horseshoe  crab  Tachypleus  tridentatus  is  one  of  marine  benthic  animals  inhabiting  East 13 Balikpapan coastal waters. Information on horseshoe crab population in the location is still limited and 14 IUCN  broadly  classifies  the  crab  in  deficient  data  category.  This  study  was  aimed  at  elucidating  the 15 taxonomic  certainty  genetically and  distribution of T. tridentatus in coastal waters of East Balikpapan. 16 The crabs were collected by local gear of fisherman (dogol – a trawl like fishing-gear and gill net) in the 17 Teritip  and  Manggar  areas,  each at  a distance  of 1 and 2 miles from  coastline. Collecting takes place 18 between  January  to  March  2018  at  different  moon  phases,  location,  number  and  morphological 19 characters of the crabs was recorded and blood was taken from some individuals. Primary morphological 20 characters  in  the  form  of  triangular  shape  of  telson  and  abundant  tiny  spines  on  ophisthosoma, 21 genetically ascertained that the collected crab is T. tridentatus. Most of these crabs found was adult and 22 randomly dispersed; with the width of prosoma ranged from 22.5 to 30.5 cm for males and 28.5 to 37.5 23 cm for females. The highest number of crab was found in the Teritip area and in the third quarter moon 24 phase.  This  study  reinforce  the  certainty  of  T.  tridentatus  in  the  study  site  with  easily  recognized 25 morphological characters and the connectivity with other sites around Eastern Balikpapan waters. 26 27 Keywords: chelicerata, molecular analysis, marine benthic animal, Kalimantan, population 28 29 ABSTRAK 30 Belangkas Tachypleus tridentatus adalah salah satu hewan bentik laut yang menghuni perairan pesisir 31 Balikpapan  Timur.  Informasi  tentang  populasi  belangkas  di  lokasi masih  terbatas,  dan  IUCN secara 32 luas mengklasifikasikannya dalam kategori data deficient . Penelitian ini bertujuan untuk menjelaskan 33
kepastian  taksonomi  secara  genetik  dan sebaran T.  tridentatus di  perairan  pesisir  Balikpapan  Timur. 34 Belangkas  diperoleh  menggunakan  alat  tangkap  nelayan  setempat  (dogol  -  sejenis  pukat  dan  jaring 35 insang) di daerah Teritip dan Manggar, masing-masing pada jarak sekitar 1 dan 2 mil dari garis pantai. 36 Pengambilan  belangkas  dilakukan  mulai  Januari  hingga  Maret  2018  pada  fase  bulan  berbeda. 37 Belangkas  yang  tertangkap  dihitung  dan  dicatat  lokasi  penangkapannya  serta  diamati  karakter 38 morfologinya  untuk  analisis  sebaran  dan  sebagian  belangkas  diambil  darahnya  untuk  analisis 39 kepastian taksonomi dengan menggunakan penanda gen CO1. Karakter morfologi utama berupa telson 40 yang  berbentuk  segitiga  dan  duri  kecil  yang  banyak  terdapat  pada  ophisthosoma,  secara  genetis 41
menunjukkan  bahwa  jenis  yang  dikumpulkan  adalah T.  tridentatus .  Sebagian  besar  belangkas  yang 42 ditemukan  di  lokasi  penelitian  adalah  belangkas  dewasa  yang  menyebar  secara  acak,  dengan  lebar 43 prosoma  berkisar  antara  22,5  hingga  30,5 cm  untuk  jantan  dan  28,5  hingga  37,5  cm  untuk  betina. 44 Jumlah  belangkas  terbanyak  ditemukan  di  daerah  Teritip  dan  berdasarkan  fase  bulan  terjadi  pada 45 kuarter  ketiga.  Penelitian  ini  menguatkan  kepastian  adanya  jenis T.  tridentatus di  lokasi  penelitian 46
dengan ciri yang mudah dikenali serta konektivitas pergerakan T. tridentatus ke lokasi lain di sekitar 47 perairan Balikpapan Timur. 48 49 Kata kunci: chelicerata, analisis molekuler, hewan bentik laut, Kalimantan, populasi 50 51
Kepastian Taksonomi dan Sebaran Belangkas Tachypleus tridentatus . . .
I. PENDAHULUAN 1 2 Belangkas  merupakan  anggota  filum 3 arthropoda,  subfilum  chelicerata,  kelas 4 merostomata,  subkelas  xiphosura,  ordo 5 xiphosurida,  dan  famili  limulidae.  Terdapat 6 empat  spesies  Belangkas  yang  dijumpai 7 hidup  di  dunia,  yaitu Limulus  polyphemus 8 Linnaeus  1758,  hanya  terdapat  di  sepanjang 9 pantai  Atlantik  Amerika  Utara  dan  Teluk 10 Mexico  (21°-44°  LU  dan  68°-90°  BB), 11 sedangkan  tiga  spesies  lainnya  hanya 12 terdapat  di  Asia  (Indo  Pasifik): Tachypleus 13 gigas (Muller,  1785) ,  T.  tridentatus, dan 14 Carcinoscorpius  rotundicauda (Lattreille 15 1802),  dengan  sebaran  geografis  di  6° LS  - 16 31°  LU  dan  90°-125° BT  (Sekiguchi  and 17 Shuster,  2009).  Secara  umum,  ketiga  jenis 18 belangkas  Asia  dapat  ditemukan  di 19 Indonesia,  meskipun  pada  beberapa  perairan 20 hanya  ditemukan  satu  atau  dua  jenis  saja 21 (Sato  and  Soji,  1993;  Nishida  and  Koike, 22 2009;  Sekiguchi  and  Shuster,  2009;  Gauvry, 23 2015; Meilana, 2015; Anggraini et  al. ,  2017; 24 Mashar et  al .,  2017; Sumarmin et  al .,  2017; 25 John et al. , 2018; Vestbo et al. , 2018). 26 Ketiga  jenis  belangkas  tersebut 27 ditetapkan  sebagai  satwa  yang  dilindungi 28 berdasarkan  Peraturan Pemerintah Republik 29 Indonesia  Nomor  7  Tahun  1999  tentang 30 Pengawetan Jenis Tumbuhan dan Satwa serta 31 Peraturan  Menteri  Lingkungan  Hidup  dan 32 Kehutanan  Republik  Indonesia  Nomor  P.20/ 33 MENLHK/SETJEN/KUM.1/6/2018,  tentang 34 Jenis Tumbuhan dan Satwa yang Dilindungi. 35 Botton et  al. (2015)  menjelaskan  bahwa 36 keberadaan  ketiga  spesies  Asia  dalam 37 kategori  IUCN  adalah data  deficient . 38 Pencantuman  taksa  dalam  kategori  ini 39 menunjukkan bahwa diperlukan lebih banyak 40 informasi tentang populasinya. 41 Informasi  populasi  Belangkas  di 42 Indonesia  serta  beberapa  negara  lain  seperti 43 India, Hongkong dan Mexico masih terbatas, 44 basis  data  yang  diperlukan  untuk  menduga 45 status  populasi  belum  dikumpulkan  dan 46 belum  ada  tindakan  monitoring  yang 47 memadai.  Sumber  utama  informasi  tentang 48
status  populasi  berasal  dari  cerita,  bukan 49 berasal dari informasi ilmiah (Berkson et al. , 50 2009).  Pada  dekade  terakhir,  studi  tentang 51 belangkas  Asia  terus  meningkat  di  Jepang, 52 China  dan  India  (Botton et  al. ,  2015), 53 sedangkan  di  Indonesia  masih  terbatas, 54 terutama  untuk  jenis T.  tridentatus ,  yaitu 55 distribusi  di  pantai  utara  Jawa  dan  selatan 56 Madura (Meilana, 2015; Mashar et al., 2017) 57 serta  morfometri  di  pantai  utara  Jawa,  serta 58 Sungai Nipah dan Air Bangis Sumatera Barat 59 (Meilana,  2015;  Sumarmin et  al., 2017). 60 Perairan  pesisir  Balikpapan  Timur  sebagai 61 salah  satu  lokasi  yang  diketahui  keberadaan 62 T.  tridentatus belum  memiliki  informasi 63 lebih  lanjut  tentang  spesies  tersebut. 64 Penelitian  ini  dilakukan  untuk  menjelaskan 65 kepastian taksonomi secara genetik serta pola 66 sebaran spesies tersebut. 67 68 II. METODE PENELITIAN 69 70 2.1.   Waktu dan Lokasi Penelitian 71 Penelitian  dilaksanakan  pada  Januari 72 hingga  Maret  2018  di  perairan  Kota 73 Balikpapan (Gambar 1). Bagian barat perairan 74 Kota  Balikpapan  merupakan  perairan  Teluk 75 Balikpapan yang berbatasan dengan 76 Kabupaten Penajam Paser Utara sedangkan di 77 bagian  timur  dan  selatan merupakan perairan 78 Selat  Makassar.  Lokasi  penelitian  meliputi 79 wilayah  penangkapan  ikan  oleh  nelayan  di 80 pesisir  timur  dan  selatan  Kota  Balikpapan 81 dengan  basis  pendaratan  ikan  di  Tempat 82 Pelelangan  Ikan  (TPI)  Manggar,  Kecamatan 83 Balikpapan Timur Kota Balikpapan. 84 Lokasi  penelitian  dibagi  menjadi 85 empat  kelompok  pengamatan,  yaitu  1  mil  di 86 perairan  Teritip  (T1),  1  mil  di  perairan 87 Manggar (M1), 2 mil di perairan Teritip (T2) 88 dan  dua  2  mil  di  perairan  Manggar  (M2). 89 Lokasi  1  mil  mewakili  kedalaman  5-10  m 90 sedangkan  lokasi  2  mil  mewakili  kedalaman 91 10-20  m.  Lokasi  perairan  Teritip  memiliki 92 karakter  pesisir  yang  banyak  ditumbuhi 93 mangrove  dan  bersubstrat  pasir  berlumpur 94 sedangkan  di  pesisir perairan  Manggar  sudah 95 banyak  dilakukan  pembangunan,  sedikit 96
vegetasi mangrove dan bersubstrat pasir. 97 98 2.2.   Pengambilan Data 99 2.2.1.   Kepastian Taksonomi 100 Data  genetik  diperoleh  dengan 101 pengambilan  sampel  darah  empat  individu, 102 sebanyak  1  mL  dan  ditambahkan  ke  dalam 103 1  mL  alkohol  absolut  pada  mikrotub  2  mL 104 untuk selanjutnya dianalisa di laboratorium. 105 Sampel  darah  diisolasi  untuk  memperoleh 106 total  genom  dengan  prosedur  sesuai 107 protokol  isolasi  GeneAID  Kit.  Hasil isolasi 108 dilanjutkan  dengan  proses  amplifikasi 109 fragmen  gen  CO1 T.  tridentatus meng- 110 gunakan  teknik  PCR  ( Polymerase  Chain 111 Reaction ).  Volume  DNA  sampel  yang 112 digunakan  adalah  5 µ L  ditambah  dengan 113 H 2 O 4,5 µ L, taq 12,5 µ L, serta primer CO1 114 forward 1,5 µ L,  dan reverse 1,5 µ L. 115 Tahapan  PCR  meliputi  predenaturasi  (suhu 116 95 o C  selama  5  menit),  denaturasi  (suhu 117
94 o C  selama  45  detik), annealing (suhu 118 54 o C  selama 1  menit), elongasi (suhu 72 o C 119 selama  1  menit), post  elongasi (suhu  72 o C 120 selama  5  menit),  dan storage (suhu  8 o C). 121 Tahapan  denaturasi, annealing dan elongasi 122 dilakukan  sebanyak  35  siklus.  Setelah  hasil 123 amplifikasi  dinyatakan  cukup  baik  dengan 124 pengujian gel  agarose  elektroforesis , 125 dilakukan  sekuensi  urutan  basa  nukleotida 126 oleh Laboratorium Genetika Science. 127 128 2.2.1.   Sebaran 129 Jenis  data  yang  dikumpulkan  adalah 130 jumlah  individu,  jenis  kelamin  dan  ukuran 131 lebar  prosoma  (Gambar  2).  Pengumpulan 132 individu  dilakukan  sembilan  kali  mengacu 133 pada  perbedaan  fase  bulan.  Alat  tangkap 134 yang  digunakan  adalah  dogol  (pukat  tarik) 135 dan rengge (jaring insang tetap) disesuaikan 136 dengan kebiasaan nelayan setempat. 137 1 2 3
4
Batas%kabupaten Batas%4%NM
Wilayah%penelitian (16%558%Ha) M1,$M2,$ T1,$T2$
Lokasi pengambilan sampel M1 M2 T1 T2
Kepastian Taksonomi dan Sebaran Belangkas Tachypleus tridentatus . . .
1 2 Gambar 2. Pengukuran lebar prosoma. 3 4 Setiap fase bulan dilakukan dua kali 5 sampling  pada  hari  yang  berbeda  oleh  12 6 nelayan  di  empat  stasiun  penelitian 7 (Gambar 1). Tiga nelayan rengge di Stasiun 8 T1, tiga nelayan rengge di Stasiun T2, satu 9 nelayan  rengge  dan  dua  nelayan  dogol  di 10 Stasiun  M1  serta  tiga  nelayan  dogol  di 11 stasiun M2. Rata-rata setiap nelayan rengge 12 menggunakan  2  unit  jaring  berukuran 13 panjang 1200 m, lebar 1,5 m dengan ukuran 14 mata  jaring  4,5  inchi.  Jaring  diletakkan 15 permanen  mengikuti  pola  penangkapan 16 kepiting.  Alat  tangkap  dogol  yang  diguna- 17 kan rata-rata memiliki ukuran mata jaring 2 18 inchi  dan  panjang  tali  ris  15  m.  Setiap  kali 19 pengambilan sampel, dogol dua kali ditarik 20 masing-masing  selama  2,5  jam  pada  ke- 21 cepatan 4 km/jam. 22 23 2.3.   Analisa Data 24 2.3.1.   Kepastian Taksonomi 25 Data  urutan  nukleotida forward dan 26 reverse hasil  sekuen  disejajarkan  meng- 27 gunakan ClustalW pada  perangkat  lunak 28 MEGA  versi  7  (Kumar et  al. ,  2016).  Hasil 29 pensejajaran  disandingkan  dengan  data  yang 30 tersedia  di  GenBank  Home  pada National 31 Center  for  Biotechnology  Information 32 (NCBI) menggunakan Basic Local Alignment 33 Search  Tool (BLAST)  (Zhang et  al., 2000; 34 Morgulis et al. , 2008) untuk kepastian jenis. 35 Selanjutnya  dibandingkan  hubungan  ke- 36 kerabatan  antara  spesies  untuk  memperoleh 37
pohon  filogeni T.  tridentatus dari  lokasi 38 Balikpapan  dengan  data  sekunder  meng- 39 gunakan unweighted pair group method with 40 arithmetic  mean (UPGMA)  Tree  metode  P- 41 distance pada aplikasi MEGA versi 7 (Kumar 42 et al., 2016). 43 44 2.3.2.   Sebaran 45 Jumlah  individu  yang  ditemukan 46 pada  jarak  serta  fase  bulan  yang  berbeda 47 dianalisis  menggunakan  Analisis  Varian 48 (ANOVA)  pada  menu  data  analysis 49 perangkat lunak Microsoft Excel disertai uji 50 lanjut  apabila  hasil  ANOVA  dijumpai 51 perbedaan  yang  signifikan  antar  jarak  serta 52 fase  bulan. Data  yang  diperoleh  dilakukan 53 analisis pola sebaran individu untuk masing- 54 masing  lokasi  berdasarkan  indeks  sebaran 55 Morisita (Krebs, 1989): 56 57 ……….…… (1) 58 59 Id = Indeks dispersi Morisita, n = jumlah titik 60 penangkapan  pada  masing-masing  lokasi 61 penelitian, x i =  jumlah  individu  setiap  titik 62 penangkapan.  Nilai  indeks  diinterpretasikan 63 menyebar acak jika Id = 1, seragam jika Id = 64 0  dan  mengelompok  jika Id >  1.  Uji  lanjut 65 dilakukan dengan uji Chi-square : 66 67 𝜒 # = 𝐼𝑑(∑ 𝑥 * + *,- − 1) + 𝑛 − ∑ 𝑥 + *,- ….. (2) 68 69 Nilai 𝜒 # hitung  dibandingkan  dengan  nilai 70 𝜒 # tabel (db = n - 1), apabila nilai 𝜒 # hitung 71 lebih kecil dari 𝜒 # tabel berarti pola sebaran 72 acak. 73 74 III. HASIL DAN PEMBAHASAN 75 76 3.1.   Hasil 77 3.1.1.   Kepastian Taksonomi 78 Hasil isolasi dan amplifikasi fragmen 79 gen  CO1 T.  tridentatus yang  diperoleh 80
Lebar prosoma
memiliki  kualitas  DNA  yang  baik  (Gambar 81 3), ditunjukkan dengan keberadaan pita DNA 82 yang  tebal  dan  terang,  sehingga  dapat 83 dilanjutkan  untuk  analisis  urutan  pasangan 84 basa nukleotida (sekuen). 85 86 87 88 Gambar 3.  Hasil  isolasi  dan  amplifikasi 89 fragmen  gen  CO1.  Angka 90 1013,1016,  1019,  1031  adalah 91 kode sampel. 92 93 Hasil  pensejajaran  dari  sekuen 94 dengan  primer forward dan reverse 95 didapatkan  panjang  pasang  basa  nukleotida 96 sebesar  551-593  bp.  Hasil  BLAST-n 97 didapatkan  kedekatan  sebesar  99%  dengan 98 beberapa  jenis T.  tridentatus pada  database 99 NCBI  kode  akses  EF460846.1,  JQ739210.1, 100 FJ860267.1,  dan  U09387.1.  Komposisi  basa 101 nukleotida  terdiri  dari  38,3-38,8%  basa 102 timina  (T),  29,3-30,3%  basa  adenina  (A), 103 17,2-18,1% basa sitosina (C) dan 13,8-14,2% 104 basa guanina (G). Konstruksi pohon filogeni 105 T.  tridentatus Balikpapan  dibandingkan 106 dengan  empat  database T.  tridentatus pada 107 NCBI, satu database T. gigas pada NCBI dan 108 tiga data T. gigas lokasi di pantai utara Jawa 109 sebagai outgroup menunjukkan  bahwa  jenis 110 T.  tridentatus Balikpapan  mengelompok 111 dengan  jenis T. tridentatus pada  database 112 NCBI  dan  terpisah  dari  jenis T.  gigas. Jenis 113 T. tridentatus yang  berasal  dari  Balikpapan 114 dan  Malaysia  membentuk  kelompok  yang 115 berbeda  dengan  jenis T.  tridentatus yang 116 berasal  dari  China,  Korea  dan  Jepang 117 (Gambar 4). 118 1 2 3 Gambar 4.  Pohon filogeni Tachypleus tridentatus dengan outgroup T. gigas . 4 Keterangan:  *  sampel  Balikpapan,  **  basis  data  gen  NCBI,  ***  Meilana  2016 5 (komunikasi personal). 6
Kepastian Taksonomi dan Sebaran Belangkas Tachypleus tridentatus . . .
3.1.2. Sebaran 1 Belangkas  jenis T.  tridentatus yang 2 tertangkap sebanyak 105 individu, terdiri dari 3 100  individu  dewasa  dengan  lebar  prosoma 4 antara  31,0-37,5  cm  untuk  betina  dan  22,5- 5 30,5  cm  untuk  jantan,  empat  individu sub- 6 adult betina  dengan  lebar  prosoma  antara 7 26,0-30,5 cm dan satu individu juwana betina 8 dengan  lebar  prosoma  18  cm.  Rata-rata 9 jumlah  individu  yang  tertangkap  dalam  satu 10 periode pengambilan sampel adalah 11,7 ± 3,7 11 individu. 12 Rata-rata  kelimpahan  relatif T. 13 tridentatus paling  tinggi  (57,5%)  diperoleh 14 pada lokasi T1 dan terendah (4,3%) diperoleh 15 pada  lokasi  M1  (Tabel  1).  Rata-rata 16 kelimpahan  relatif  antar  lokasi  tersebut 17 berbeda  secara  signifikan  pada  taraf 18 kepercayaan 95% (p<0,05). Rata-rata 19 kelimpahan relatif di lokasi M1, M2 dan T2 20 berbeda nyata dengan T1 untuk total individu 21 yang  tertangkap.  Hal  ini  juga  berlaku  untuk 22 individu  jantan.  Kelimpahan  relatif  tertinggi 23 individu  betina  (M2)  berbeda  nyata  dengan 24 lokasi  T2  dan  M1,  namun  tidak  berbeda 25 nyata  dengan  T1.  Rata-rata  kelimpahan 26 relatif individu betina paling tinggi di lokasi 27 T1 dan M2 sedangkan untuk individu jantan 28 di  lokasi  T1  dan  T2.  Rata-rata  kelimpahan 29 relatif total T. tridentatus yang tertangkap di 30 daerah Teritip (T1 dan T2), yaitu 69,4% lebih 31 besar  dari  daerah  Manggar  (M1  dan  M2), 32 yaitu  30,6%.  Rata-rata  kelimpahan  relatif 33 antar  daerah  tersebut  berbeda  secara 34 signifikan  pada  taraf  kepercayaan  95% 35 (p<0,05).  Rata-rata  kelimpahan  relatif  total 36 T. tridentatus di  kedalaman  5  s.d.  10  m  (T1 37 dan  M1),  yaitu  61,8%  lebih  besar  dari 38 kedalaman  10  s.d.  20 m  (T2  dan  M2),  yaitu 39 38,2%.  Rata-rata  kelimpahan  relatif  antara 40 kedalaman  tidak  berbeda  secara  signifikan 41 pada taraf 95% (p>0,05). 42 43 Tabel 1. Rata-rata kelimpahan relatif (%) T. 44 tridentatus . 45 46 Lokasi Total Betina Jantan T1 57,5 b 44,1 b 71,4 b
Lokasi Total Betina Jantan T2 11,9 a 3,2 a 17,8 a M1 4,3 a 3,7 a 4,9 a M2 26,3 a 49,0 b 5,9 a 47 Keterangan:  Tanda  superskrip  menunjukkan 48 perbedaan  signifikan  pada a = 49 0,05  ( Tukey's  Honestly  Signi- 50 ficance  Difference  Test/HSD 51 Test ).  T1,  T2,  M1,  M2  adalah 52 lokasi pengambilan sampel. 53 54 Waktu  tertangkapnya  individu T. 55 tridentatus mengalami  perbedaan  antar  fase 56 bulan  (Tabel  2  dan  Gambar  5).  Jumlah 57 individu  memiliki  kecenderungan  banyak 58 ditemukan  pada  kuarter  ketiga,  kemudian 59 menurun  jumlahnya  pada  bulan  baru  dan 60 selanjutnya  meningkat  lagi  pada  kuarter 61 kesatu  dan  mencapai  puncak  pada  kuarter 62 ketiga.  Perbedaan  tersebut  signifikan  pada 63 taraf kepercayaan 95% (P < 0,05). 64 65 66 Gambar 5. Rara-rata dan standar deviasi T. 67 tridentatus tertangkap pada fase 68 bulan berbeda. 69 70 Hasil uji lanjut, jumlah individu total 71 yang  tertangkap  pada  kuarter  III  berbeda 72 secara  signifikan  dengan  bulan  baru, 73 sedangkan  secara  parsial  berdasarkan  jenis 74 betina  dan  jantan  kecenderungan  tersebut 75 tidak  berbeda  nyata  (berturut-turut  P=0,16 76 dan 0,32) pada taraf kepercayaan 95%. Pada 77 jarak  1  mil  dan  2  mil  tidak  ditemukan 78 perbedaan  signifikan  antar  fase  bulan 79 (P=0,57).  Ukuran  individu  rata-rata  yang 80 tertangkap  antara  fase  bulan  tidak  memiliki 81
0 5 10 15 20 Kuarter I Purnama Kuarter III Bulan baru Ra ta -ra ta T. t ri de nt at us te rt angka p (i ndi vi du) Fase bulan
Tabel 2. Jumlah rata-rata (individu) T. tridentatus yang tertangkap pada fase bulan berbeda. 1 2 Kuarter I Purnama Kuarter III Bulan baru Total 11,5 ± 0,7 a,b 12,5 ± 2,1 a,b 16,5 ± 2,1 a 7 ± 2,8 b Betina 7,5 ± 0,7 5,5 ± 2,1 9 ± 0,0 4 ± 2,8 Jantan 5 ± 1,4 7 ± 4,2 7,5 ± 2,1 3 ± 0,0 Keterangan:  Tanda  superskrip  menunjukkan  perbedaan  signifikan  pada a =  0,05  ( Fisher's 3 Least Significance Difference Test/LSD Test ). 4 5 perbedaan  yang  signifikan  pada  taraf 1 kepercayaan 95%, baik untuk betina maupun 2 jantan yaitu dengan nilai P berturut-turut 0,81 3 dan 0,64. 4 Pola  sebaran T.  tridentatus berdasar- 5 kan  perhitungan  indeks  dispersi  Morisita 6 untuk  lokasi  T1,  T2  dan  M2  disajikan  pada 7 Tabel  3.  Nilai  indeks  Morisita  di  ketiga 8 lokasi lebih besar daripada satu memiliki arti 9 sebaran  mengelompok,  namun  berdasarkan 10 uji  lanjut chi-square diperoleh  nilai 𝜒 # 11 hitung  lebih  kecil  dari 𝜒 # tabel,  sehingga 12 pola sebaran T. tridentatus pada ketiga lokasi 13 tersebut adalah acak. 14 15 Tabel 3. Pola sebaran T. tridentatus di 16 perairan Balikpapan Timur. 17 18 Lokasi Indeks Morisita 𝜒 # hitung 𝜒 # tabel Pola sebaran T1 1,4 3,2 6,0 Acak T2 2,2 4,2 6,0 Acak M2 1,4 2,5 6,0 Acak Keterangan: lokasi M1 tidak dapat dihitung 19 berdasarkan data yang tersedia. 20 21 3.2. Pembahasan 22 3.2.1. Kepastian Taksonomi 23 Analisis  molekuler  terhadap  sampel 24 darah T.  tridentatus menggunakan  sekuen 25 gen  CO1  dan  mensejajarkannya  dengan 26 database  pada  situs  NCBI  memberikan 27 kepastian  taksonomi,  bahwa  sampel  tersebut 28 memiliki kedekatan genetik dengan database 29 T.  tridentatus (kode  akses  EF460846.1, 30 JQ739210.1,  FJ860267.1,  dan  U09387.1 31 masing-masing sebesar 99%). Perbedaan 1% 32 untuk  individu  pada  filum  arthropoda  masih 33 menunjukan  jenis  yang  sama  (Hebert et  al., 34
2003).  Komposisi  basa  nukleotida  yang 35 diperoleh  mirip  dengan  jenis T.  gigas di 36 perairan pantai utara Jawa yang lebih banyak 37 memiliki  basa  nukleotida  A  dan  T  yang 38 ikatannya lemah dibandingkan C dan G yang 39 ikatannya kuat, sehingga spesies ini memiliki 40 kemungkinan  mutasi  gen  yang  lebih  besar 41 (Meilana et al. , 2016). 42 Hasil  penelitian  ini  memastikan 43 beberapa  ciri  morfologi  yang  diamati  pada 44 saat  penelitian,  yaitu  bentuk  melintang  ekor 45 membentuk  bangun  segitiga  dan  memiliki 46 duri-duri,  bagian  punggung  opithosoma 47 memiliki  duri-duri  kecil  yang  jumlahnya 48 relatif  banyak,  dan  bentuk  frontal  margin 49 prosoma  jantan  memiliki  lekukan  (Gambar 50 6).  Berdasarkan  hasil  tersebut,  ciri  utama 51 morfologi  tersebut  dapat  dijadikan  kriteria 52 untuk  membedakan  jenis T.  tridentatus 53 dengan  jenis  lainnya,  khususnya T.  gigas. 54 Ciri  jumlah  duri  pada  bagian  ujung 55 opisthosoma  tidak  mutlak  dijadikan  kriteria 56 penentuan  jenis T.  tridentatus karena  kedua 57 jenis Tachypleus tersebut  dapat  memiliki 58 jumlah  duri  yang  sama.  Hasil  ini  juga  dapat 59 menjadi bahan dasar studi keragaman genetik 60 yang  diperlukan  untuk  pengelolaan  sumber- 61 daya  belangkas  sebagaimana  dijelaskan 62 Soewardi,  2007  bahwa  fase  pertama  dalam 63 deskripsi  keragaman  genetik  adalah  ke- 64 tepatan identifikasi jenis. 65 Informasi  genetik T.  tridentatus di 66 Indonesia masih terbatas sehingga 67 pembandingan kekerabatan dilakukan dengan 68 lokasi  di  luar  Indonesia,  yaitu  berdasarkan 69 database  NCBI  kode  akses  U09387.1  di 70 lokasi  Jepang,  FJ860267.1  di  lokasi  China, 71 JQ739210.1 di lokasi Korea dan EF460846.1 72 di lokasi Malaysia (Avise et al., 1994; Baek 73
Kepastian Taksonomi dan Sebaran Belangkas Tachypleus tridentatus . . .
et  al., 2014). T. tridentatus di  Balikpapan 74 memiliki kedekatan genetik yang lebih besar 75 dengan  populasi  di  Malaysia  kemudian 76 Korea  dan  China  dibandingkan  dengan 77 populasi  di  Jepang.  Meskipun  demikian, 78 kelima populasi tersebut seluruhnya memiliki 79 hubungan  kekerabatan  yang  cukup  dekat. 80 Ditinjau  dari  sisi  konservasi  keragaman 81 genetik merupakan hal yang menguntungkan. 82 Jenis  individu  yang  tersebar  luas  memiliki 83 tingkat  keragaman  genetik  yang  tinggi 84 (Frankham et al. , 2002). 85 86 87 88 Gambar 6. Karakter penciri T. tridentatus . 89 90 3.2.2. Sebaran 91 Pada  penelitian  ini  tidak  hanya  jenis 92 T.  tridentatus yang  ditemukan,  terdapat  juga 93 jenis T.  gigas dan C.  rotundicauda . 94 Masyarakat  di  lokasi  penelitian  umumnya 95 tidak mengetahui adanya tiga jenis Belangkas 96 tersebut  di  perairan  mereka.  Berdasarkan 97 pengamatan selama masa penelitian, jenis T. 98 tridentatus tertangkap  bersamaan  dengan 99 jenis T.  gigas di  perairan  lepas  pantai, 100 sedangkan  jenis C.  rotundicauda hanya 101 ditemukan  di  pesisir  pantai  bekas  per- 102 tambakan,  juga  bersamaan  dengan  jenis T. 103 gigas. Berdasarkan  siklus  hidupnya, T. 104 tridentatus melakukan  pemijahan  di  pantai 105
berpasir  di  daerah  yang  terlindung  dari 106 gelombang  tinggi  dan  relatif  datar  di  estuari 107 atau  pantai  pada  di  teluk  (Sekiguchi,  1988; 108 Chiu  and  Morton,  2003;  Hsieh  and  Chen, 109 2009).  Telur  dipendam  dalam  pasir  dan 110 setelah  menetas,  juvenil  akan  melakukan 111 migrasi ke perairan laut yang lebih dalam. T. 112 tridentatus bermigrasi ke arah laut sedangkan 113 C. rotundicauda menghabiskan  masa  hidup- 114 nya  di  sekitar  habitat  bakau  (Botton et  al., 115 1996; Hu et al., 2009; Chen et al. , 2015). T. 116 tridentatus mengalami  tiga  fase  utama  daur 117 hidupnya,  perkembangan  embriologis  terjadi 118 di  daerah  intertidal,  instar  awal  di  daerah 119 intertidal  dan  air  dangkal,  serta  tahap  akhir 120 perkembangan  dan  dewasa  di  perairan  yang 121 lebih dalam (Shuster and Sekiguchi, 2009). 122 Jumlah T. tridentatus yang tertangkap 123 pada  setiap  pengambilan  sampel  (12  alat 124 tangkap) adalah sebanyak 11,7 ± 3,7 individu. 125 Jumlah  ini  relatif  lebih  kecil  dari  pada  di 126 Taiwan,  yaitu  dapat  ditangkap  dua  individu 127 menggunakan  jaring  insang  hanyut  selama 128 tiga hari dan 12 individu menggunakan trawl 129 dasar  selama  satu  hari  (Hsieh  and  Chen, 130 2015). Pola sebaran T. tridentatus di perairan 131 Balikpapan  Timur  bersifat  acak.  Pola  ini 132 serupa  dengan C. rotundicauda di  Kuala 133 Tungkal  (Rubiyanto,  2012)  yang  menunjuk- 134 kan kuatnya daya toleransi terhadap keadaan 135 lingkungan,  keadaan  lingkungan  yang relatif 136 homogen  serta  rendahnya  persaingan  dan 137 hubungan  ketergantungan  antar  individu. 138 Umumnya keberadaan belangkas dipengaruhi 139 oleh  keberadaan  makanan,  antara  lain 140 dicirikan dengan tingginya kandungan bahan 141 organik  dan  jenis polychaeta pada  sedimen 142 (Hsieh dan Chen, 2009). 143 Daerah  Balikpapan  Timur  sangat 144 sedikit  ditemukan T.  tridentatus ukuran 145 yuwana.  Hal  ini  juga  dilaporkan  Shin et  al. , 146 2009  di  perairan  Hongkong  bahwa  tidak 147 semua  perairan  yang  dilaporkan  adanya 148 belangkas  ditemukan  yuwana,  yaitu  hanya  9 149 dari  17  pantai  (metode  susur  pantai)  dan  6 150 dari  17  pantai  (metode  transek).  Kondisi  ini 151 berlainan  dengan  di  Palawan,  Filipina,  yaitu 152 tidak  ditemukan  sama  sekali T.  tridentatus 153
berukuran  dewasa  (Almendral  and  Schoppe, 154 2005).  Pada  penelitian  di  Balikpapan  Timur 155 ini,  ukuran  yang  ditemukan  lebih  kecil 156 dibandingkan  di  lokasi  Air  Bangis,  Sungai 157 Nipah  dan  Tanjung  Limau,  namun  lebih 158 besar  dibandingkan  di  lokasi  Hongkong, 159 Tawau, Inderasabah, Kujushima dan 160 Kitakyushu (Tabel 3). 161 Awal  hipotesa  sebaran  individu T. 162 tridentatus , diduga ketika bulan purnama dan 163 bulan baru terjadi pergeseran jumlah individu 164 yang  ditemukan,  yaitu  lebih  banyak  pada 165 jarak  1  mil  daripada  2  mil  sebagai  bukti 166 adanya pergerakan untuk kegiatan 167 reproduksi.  Namun  pada  penelitian  ini, 168 perbedaan jumlah individu pada kedua lokasi 169 tersebut  tidak  signifikan.  Perbedaan  yang 170 dapat diamati yaitu pada daerah Teritip lebih 171 banyak  ditemukan T.  tridentatus dibanding- 172 kan  daerah  Manggar.  Pesisir  daerah  Teritip 173 merupakan  Daerah  Perlindungan  Mangrove 174 dan  Laut  (DPML),  relatif  sedikit  aktivitas 175 penangkapan  ikan  dibandingkan  daerah 176 Manggar  yang  merupakan  pusat  aktivitas 177 nelayan  di  Balikpapan  Timur.  Perbedaan 178 sebaran  juga  dapat  diamati  berdasarkan 179 perbedaan  fase  bulan,  yaitu  pada  kuarter  III 180 lebih  banyak  daripada  bulan  baru  meskipun 181 secara parsial baik berdasarkan jenis kelamin 182
tidak berbeda. Hasil penelitian ini 183 menjelaskan  bahwa  adanya  perbedaan 184 jumlah  individu  antara  fase  bulan  berbeda 185 namun  tidak  terdapat  perbedaan  antar 186 kedalaman  mengindikasikan  adanya  per- 187 gerakan T. tridentatus pada  bulan  baru  ke 188 lokasi  lain.  Belangkas pada  umumnya  me- 189 rupakan  organisme  yang  aktif  bergerak  dan 190 memiliki kemampuan bergerak yang 191 memadai untuk rentang yang luas serta tidak 192 hanya  untuk  melakukan  reproduksi (Rudloe, 193 1985,  Sekiguchi  and  Shuster,  2009;  Hsieh 194 and Chen, 2009; Wada et al., 2016). Rudloe 195 (1985)  menyatakan  bahwa  perubahan  fase 196 bulan  mempengaruhi  pergerakan  belangkas. 197 Dikatakan  bahwa  pengaruh  tersebut  adalah 198 pertama, terkait dengan pola belangkas untuk 199 bertahan  hidup  pada  kedalaman  tertentu 200 akibat perubahan tinggi pasang surut air laut 201 yang  mempengaruhi  kedalaman.  Kedua, 202 mempengaruhi  pergerakan  untuk  melakukan 203 reproduksi.  Yang et  al. (2009)  menyampai- 204 kan  bahwa  penyebaran  individu  dewasa 205 dapat  menjadi  salah  satu  faktor  penting 206 dalam  rangka  mempertahankan  aliran 207 genetik, dan berdasarkan hasil penelitian ini, 208 tampaknya  aliran  genetik  pada  populasi 209 T. tridentatus masih  mungkin  terjadi  karena 210 adanya pergerakan ke luar lokasi penelitian. 211 1 Tabel 3. Perbandingan rata-rata ukuran T. tridentatus . 2 3 Lokasi Lebar Prosoma (cm) Betina Jantan Air Bangis, Indonesia 40,0 ± 1,1 32,4 ± 1,3 Sungai Nipah, Indonesia 38,8 34,1 ± 0,2 Tanjung Limau, Malaysia 37,0 ± 2,4 30,9 ± 1,9 Balikpapan Timur, Indonesia 34,2 ± 2,0 26,2 ± 2,0 Hongkong 32,9 (26,5-36,7) 26,1 (23,7-30,8) Tawau, Sabah, Malaysia 31,2 ± 2,3 25,7 ± 1,6 Inderasabah, Malaysia 30,7 ± 2,5 25,3 ± 1,6 Kujukushima, Jepang 29,8 (25,0-35,5) 25,3 (24-27) Kitakyushu, Jepang 28,1 (25,0-30,5) 24,3 (22,5-26,7) Keterangan:  Tanda  kurung  adalah  kisaran;  Sumber:  (Chiu  and  Morton,  2003;  Iwaoka  and 4 Okayama,  2009;  Mohamad et  al. ,  2016;  Manca et  al. ,  2017;  Sumarmin et  al. , 5 2017). 6 7
Kepastian Taksonomi dan Sebaran Belangkas Tachypleus tridentatus . . .
IV. KESIMPULAN 1 2 Berdasarkan hasil penelitian ini dapat 3 disimpulkan  bahwa  secara  genetik  dapat 4 dipastikan  bahwa  di  perairan  Balikpapan 5 Timur  terdapat  jenis T.  tridentatus. Ciri 6 morfologi  yang  dapat  digunakan  untuk 7 identifikasi  jenis  ini  dengan  mudah  adalah 8 bentuk  melintang  ekor  membentuk  bangun 9 segitiga  dan  memiliki  duri-duri,  bagian 10 punggung  opithosoma  memiliki  duri-duri 11 kecil  yang  jumlahnya  relatif  banyak,  bentuk 12 frontal  margin  prosoma  jantan  memiliki 13 lekukan.  Pada  bulan  Januari  hingga  Maret, 14 perairan  Balikpapan  Timur  merupakan 15 tempat  individu  dewasa T.  tridentatus yang 16 berada  pada  kedalaman  lebih  dari  5  m 17 dengan  pola  sebaran  bersifat  acak.  Jenis  ini 18 lebih  banyak  tertangkap  pada  kuater  III  dan 19 sedikit tertangkap pada bulan baru 20 menunjukkan  bahwa  terdapat  konektivitas 21 pergerakan T.  tridentatus ke  lokasi  lain  di 22 sekitar perairan Balikpapan Timur. 23 24 UCAPAN TERIMA KASIH 25 26 Penulis  mengucapkan  terima  kasih 27 kepada  Pusat  Pendidikan  Kelautan  dan 28 Perikanan  Kementerian  Kelautan  dan 29 Perikanan  yang  mendanai  tugas  belajar 30 pascasarjana, Laboratorium Biologi 31 Molekuler Departemen Manajemen 32 Sumberdaya  Perairan  Institut  Pertanian 33 Bogor, Prof. Jennifer H. Mattei Department 34 of Biology Sacred Heart University- United 35 States of America, Hery Seputro 36 Koordinator  Pangkalan  Pendaratan  Ikan 37 Manggar,  Dinas  Pangan  Pertanian  dan 38 Perikanan  Kota  Balikpapan  atas  fasilitasi 39 yang  diberikan,  serta  para  reviewer  yang 40 memberikan  masukan  untuk  perbaikan 41 paper ini. 42 43 DAFTAR PUSTAKA 44 45 Anggraini,  R.,  D.G.  Bengen,  dan  N.M.N. 46 Natih.  2017.  Struktur  populasi  dan 47 morfometri  Belangkas Carcinos- 48
corpius  rotundicauda ,  Latreille  1802 49 di Pesisir Kampung Gisi Teluk Bintan 50 Kepulauan  Riau. J.  Ilmu  dan 51 Teknologi Kelautan Tropis, 9(1):211- 52 220.  http://dx.doi.org/10.29244/jitkt. 53 v9i1.17934. 54 Almendral,  M.A.  and  S.  Schoppe.  2005. 55 Population  structure  of Tachypleus 56 tridentatus (Chelicerata:  Merosto- 57 mata)  at  a  nursery  beach  in  Puerto 58 Princesa  City,  Palawan,  Philippines. 59 J.  Nat.  His. ,  39(25):  2319-2329. 60 http://dx.doi.org/10.1080/0022293050 61 0063219. 62 Avise,  J.C.,  W.S.  Nelson,  and  H.  Sugita. 63 1994.  A  speciational  history  of 64 “living fossils”: Molecular 65 evolutionary  patterns  in  horseshoe 66 crabs. Evolution ,  48(6):1986-2001. 67 http://dx.doi.org/10.2307/2410522. 68 Baek, S.Y., E.H. Choi, K.H. Jang, S.H. Ryu, 69 S.M.  Park,  H.Y.  Suk,  C.Y.  Chang, 70 and  U.W.  Hwang.  2014.  Complete 71 mitochondrial genomes of 72 Carcinoscorpius  rotundicauda and 73 Tachypleus  tridentatus (Xiphosura, 74 Arthropoda)  and  implications  for 75 chelicerate  phylogenetic  studies. Int. 76 J. Biol. Sci., 10(5):479-489. http://dx. 77 doi.org/10.7150/ijbs.8739. 78 Berkson, J.,  C.P. Chen, J. Mishra, P. Shin, B. 79 Spear,  and  J.  Zaldivar-Rae.  2009.  A 80 discussion of horseshoe crab 81 management in five countries: Taiwan, 82 India,  China,  United  States,  and 83 Mexico  in  horseshoe  crabs. In : 84 Tanacredi, J.T., M.L. Botton, and D.R. 85 Smith ( eds .). Biology and conservation 86 of  horseshoe  crabs.  Springer.  New 87 York. 465-475pp. 88 Botton, M.L., C.N. Shuster Jr, K. Sekiguchi, 89 and  H.  Sugita.  1996.  Amplexus  and 90 mating  behavior  in  the  Japanese 91 horseshoe crab, Tachypleus 92 tridentatus . Zoolog.  Sci., 13:151-159. 93 http://dx.doi.org/10.2108/zsj.13.151. 94 Botton,  M.L.,  R.H.  Carmichael,  P.K.S.  Shin, 95 and  S.G.  Cheung.  2015.  Emerging 96
issues in horseshoe  crab conservation: 97 A perspective from the IUCN Species 98 Specialist  Group. In :  Carmichael, 99 R.H.,  M.L.  Botton,  P.K.S.  Shin,  and 100 S.G.  Cheung  ( eds. ).  Changing  global 101 perspectives  on  horseshoe  crab 102 biology, conservation and 103 management.  Springer.  New  York. 104 369-381pp. 105 Chen,  C.P.,  M.C.  Yang,  L.F.  Fan,  G.  Qiu, 106 Y.Y. Liao, and H.L. Hsieh. 2015. Co- 107 occurrence  of  juvenile  horseshoe 108 crabs Tachypleus  tridentatus and 109 Carcinoscorpius  rotundicauda in  an 110 estuarine  bay,  southwestern  China. 111 Aquat.  Biol .,  24:117-126.  http://dx. 112 doi.org/ 10.3354/ab00641. 113 Chiu,  H.M.C.  and  B.  Morton.  2003.  The 114 morphological  differentiation  of  two 115 horseshoe  crab  species, Tachypleus 116 tridentatus and Carcinoscorpius 117 rotundicauda (Xiphosura),  in  Hong 118 Kong with a regional Asian 119 comparison. J. Nat. His. , 37(19):2369- 120 2382.  http://dx.doi.org/10.1080/00222 121 930210149753. 122 Frankham,  R.,  J.D.  Ballou,  and  D.A.  Briscoe. 123 2002.  Introduction  to  conservation 124 genetics.  Cambridge  University  Press. 125 Cambridge. 617 p. 126 Gauvry,  G.  2015.    Current  horseshoe  crab 127 harvesting  practices  cannot  support 128 global  demand  for  TAL/  LAL:  The 129 pharmaceutical  and  medical  device 130 industries’  role  in  the  sustainability of 131 horseshoe crabs. In : Carmichael, R.H., 132 M.L.  Botton,  P.K.S.  Shin,  and  S.G. 133 Cheung  ( eds .).  Changing  global 134 perspectives on horseshoe crab biology, 135 conservation and management. 136 Springer. New York. 475-482 pp. 137 Hebert, P.D.N., S. Ratnasingham, and J.R. De 138 Waard.  2003.  Barcoding  animal  life: 139 cytochrome  c  oxidase  subunit  1 140 divergences  among  closely  related 141 species. Proc.  R.  Soc.  Lond.  B.  Biol. 142 Sci. ,  270:96-99.  http://dx.doi.org/10. 143 1098/rsbl.2003.0025. 144
Hsieh,  H.L.  and  C.P.  Chen.  2009. 145 Conservation  program  for  the  Asian 146 horseshoe crab Tachypleus 147 tridentatus in Taiwan: Characterizing 148 the  microhabitat  of  nursery  grounds 149 and  restoring  spawning  grounds. In : 150 Tanacredi, J.T., M.L. Botton, and D.R. 151 Smith ( eds .). Biology and conservation 152 of  horseshoe  crabs.  Springer.  New 153 York. 417-438 pp. 154 Hsieh,  H.L.  and  C.P.  Chen.  2015.  Current 155 status  of Tachypleus  tridentatus in 156 Taiwan  for  Red  List  assessment. In : 157 Carmichael, R.H., M.L. Botton, P.K.S. 158 Shin,  and  S.G.  Cheung  ( eds. ). 159 Changing  global  perspectives  on 160 horseshoe  crab  biology,  conservation 161 and management. Springer. New York. 162 383-396 pp. 163 Hu,  M.,  Y.  Wang,  Y.  Chen,  S.G.  Cheung, 164 P.K.S. Shin, and Q. Li. 2009. Summer 165 distribution and abundance of juvenile 166 Chinese  horseshoe  crabs Tachypleus 167 tridentatus along  an  intertidal  zone  in 168 southern  China. Aquat.  Biol .,  7:107- 169 112.  http://dx.doi.org/10.3354/ab001 170 94. 171 Iwaoka,  C.  and  T.  Okayama.  2009.  Public 172 awareness and community-based 173 conservation for the  horseshoe crab at 174 Saikai  National  Park  in  Nagasaki 175 Prefecture,  Japan. In :  Tanacredi,  J.T., 176 M.L.  Botton,  and  D.R.  Smith  ( eds .). 177 Biology and conservation of horseshoe 178 crabs.  Springer.  New  York.  571-583 179 pp. 180 John,  B.A.,  B.R.  Nelson,  H.I.  Sheikh,  S.G. 181 Cheung, Y. Wardiatno, B.P. Dash, K. 182 Tsuchiya,  Y.  Iwasaki,  and  S.  Pati. 183 2018.  A  review  on  fisheries  and 184 conservation status of Asian 185 horseshoe  crabs. Biodivers  Conserv ., 186 14(27):3573-3598.  http://dx.doi.org/ 187 10.1007/s10531-018-1633-8. 188 Kumar, S., G. Stecher, and K. Tamura. 2016. 189 MEGA7:  Molecular  evolutionary 190 genetic  analysis  version  7.0  for  biger 191 datasets. Mol.  Biol.  Evol., 33:1870- 192
Kepastian Taksonomi dan Sebaran Belangkas Tachypleus tridentatus . . .
1874. http://dx.doi.org/10.1093/ 193 molbev/msw054. 194 Manca,  A.,  F.  Mohamad,  A.  Ahmad, 195 M.F.A.M. Sofa, and N. Ismail. 2017. 196 Tri-spine  horseshoe  crab, Tachypleus 197 tridentatus (L.)  in  Sabah,  Malaysia: 198 the  adult  body  sizes  and  population 199 estimate. J.  Asia  Pac.  Biodivers. ,  10: 200 355-361. http://dx.doi.org/10.4172/ 201 2168-9296.1000171. 202 Mashar,  A.,  N.A.  Butet,  B.  Juliandi,  Y. 203 Qonita,  A.A.  Hakim,  and  Y. 204 Wardiatno.  2017.  Biodiversity  and 205 distribution  of  horseshoe  crabs  in 206 Northern Coast of Java and Southern 207 Coast  of  Madura. IOP  Conf  Ser: 208 Earth Environ. Sci., 54:1-8. 209 http://dx.doi.org/10.1088/1755-1315/ 210 54/1/012076. 211 Meilana,  L.  2015.  Kajian  morfologi  dan 212 genetik Mimi (Xiphosura, Limulidae) 213 sebagai dasar konservasi dan 214 pengelolaan  di  Pulau  Jawa.  Institut 215 Pertanian Bogor. 51 hlm. 216 Meilana,  L.,  Y.  Wardiatno,  N.A.  Butet,  dan 217 M. Krisanti. 2016. Karakter 218 morfologi  dan  identifikasi  molekuler 219 dengan  marka  gen  CO1  pada  mimi 220 ( Tachypleus gigas )  di  perairan  utara 221 Pulau  Jawa. J.  Ilmu  dan  Teknologi 222 Kelautan Tropis, 8(1):145-158. 223 http://dx.doi.org/10.29244/jitkt.v8i1.1 224 2651. 225 Mohamad,  F.,  A.  Manca,  A.  Ahmad, 226 M.F.A.M. Sofa, A.A. Alia’m, and N. 227 Ismail.  2016.  Width-weight  and 228 length-weight relationships of the tri- 229 spine  horseshoe  crab,  Tachypleus 230 tridentatus  (Leach  1819)  from  two 231 populations  in  Sabah,  Malaysia: 232 Implications  for  population  mana- 233 gement. J.  Sustain.  Sci.  Manage. , 234 11(1):1-13.  http://dx.doi.org/10.4172 235 /2168-9296.1000171. 236 Morgulis,  A.,  G.  Coulouris,  Y.  Raytselis, 237 T.L. Madden, R. Agarwala, and A.A. 238 Schäffer. 2008. Database indexing for 239 production  MegaBLAST  searches. 240
Bioinformatics, 24:1757-1764.  http:// 241 dx.doi.org/10.1093/bioinformatics/btn 242 322. 243 Nishida,  S.  and  Koike,  H.  2009.  Genetic 244 structure  of  Japanese  populations  of 245 Tachypleus  tridentatus by  mtDNA 246 AT-rich  region  sequence  analysis. In : 247 Tanacredi, J.T., M.L. Botton, and D.R. 248 Smith ( eds .). Biology and conservation 249 of  horseshoe  crabs.  Springer.  New 250 York. 183-196 pp. 251 Rubiyanto,  E.  2012.  Studi  Populasi  Mimi 252 (Xiphosura)  di  Perairan  Kuala 253 Tungkal  Kabupaten  Tanjung  Jabung 254 Barat,  Jambi.  Tesis.  Universitas 255 Indonesia. 66 p. 256 Rudloe,  A.  1985.  Variation  in  the  expression 257 of lunar and tidal behavioral rhytms in 258 the horseshoe crab, Limulus 259 polyphemus.  Bull.  Mar.  Sci., 36(2): 260 388-395. 261 Sato,  Y.  and  N.  Soji.  1993.  Horseshoe  crab. 262 Sanyo  Shimbun  Publishing.  Okayama 263 City. 95 p. 264 Sekiguchi,  K.,  H.  Seshimo,  and  H.  Sugita. 265 1988.  Post-embryonic  development  of 266 the  horseshoe  crab. Biol.  Bull ., 267 174(3):337-345. 268 http://dx.doi.org/10.2307/1541959. 269 Sekiguchi,  K.  and  C.N.  Shuster  Jr.  2009. 270 Limits  on  the  global  distribution  of 271 Horseshoe Crabs (Limulacea): Lessons 272 learned  from  two  lifetimes  of 273 observations:  Asia  and  America. In : 274 Tanacredi, J.T., M.L. Botton, and D.R. 275 Smith ( eds .). Biology and conservation 276 of  horseshoe  crabs.  Springer.  New 277 York. 5-24 pp. 278 Shin, P.K.S., H.Y. Li, and S.G. Cheung. 2009. 279 Horseshoe  crabs  in  Hong  Kong: 280 Current  population  status  and  human 281 exploitation. In :  Tanacredi,  J.T.,  M.L. 282 Botton, and D.R. Smith ( eds .). Biology 283 and  conservation  of  horseshoe  crabs. 284 Springer. New York. 347-360 pp. 285 Soewardi,  K.  2007.  Pengelolaan  keragaman 286 genetik  sumberdaya  perikanan  dan 287 kelautan.  Departemen  Manajemen 288
Sumberdaya Perairan Fakultas 289 Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  Institut 290 Pertanian  Bogor.  Intramedia.  Bogor. 291 153 p. 292 Sumarmin,  R.,  A.  Razak,  dan  M.I.  Fajri. 293 2017. Morfometri kepiting tapal kuda 294 dari  daerah  Sungai  Nipah  dan  Air 295 Bangis  Sumatera  Barat. J.  Biosains, 296 1(2):24-32. 297 Vestbo,  S.,  M.  Obst,  F.J.Q.  Fernandez,  I. 298 Intanai,  and  P.  Funch.  2018.  Present 299 and  potential  future  distributions  of 300 asian horseshoe crabs determine areas 301 for  conservation. Front  Mar  Sci ., 302 5:164-170.  http://dx.doi.org/10.3389/ 303 fmars.2018.00164. 304 Wada, T., T. Mitsushio, S. Inoue, H. Koike, 305 and  R.  Kawabe.  2016.  Movement 306 patterns and residency of the critically 307 endangered horseshoe crab 308 Tachypleus  tridentatus in  a  semi- 309 enclosed  bay  determined  using 310 acoustic  telemetry. PLoS  ONE. , 311
11(2):1-15.  http://dx.doi.org/10.1371/ 312 journal.pone.0147429. 313 Yang,  M.C.,  C.P.  Chen,  H.L.  Hsieh,  H. 314 Huang,  and  C.A.  Chen.  2009. 315 Phylogeography, demographic 316 history, and  reserves  network  of 317 horseshoe crab, Tachypleus 318 tridentatus ,  in  the  south  and  east 319 China  seaboards. In: Tanacredi,  J.T., 320 M.L.  Botton,  and  D.R.  Smith  ( eds. ). 321 Biology and conservation of 322 horseshoe crabs. Springer. New York. 323 163-181 pp. 324 Zhang,  Z.,  S.  Schwartz,  L.  Wagner,  and  W. 325 Miller.  2000.  A  greedy  algorithm  for 326 aligning  DNA  sequences. J.  Comput. 327 Biol., 7(1):203-214.  http://dx.doi.org/ 328 10.1089/10665270050081478. 329 330 Diterima : 23 Juli 2018 331 Direview : 07 Agustus 2018 332 Disetujui : 23 November 2018 333 1