## Efek Anti Histamin Ekstrak Daun Jambu Biji Pada Tikus Putih yang Dinduksi Ovalbumin Dinilai dari Jumlah Eosinofil Jaringan Kulit
Rendra Ristian Wibowo 1 , Ratih Dewi Yudhani 2 , Novan Adi Setyawan 3 1. Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret 2. Bagian Farmakologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret
3. Bagian Patologi Anatomi, Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret
Korespondensi : rendraristianw@student.uns.ac.id

## ABSTRAK
Pendahuluan: Prevalensi  dan  keparahan  penyakit  alergi  terus  meningkat  secara  global, terutama  di  negara  dengan  pendapatan  rendah  sampai  menengah.  Terapi  alergi  saat  ini seperti  kortikosteroid  banyak  memberikan  efek  samping  dalam  penggunaan  jangka panjang.  Ekstrak  daun  jambu  biji  (Psidium  guajava)  berpotensi  sebagai  antihistamin  yang dapat  menjadi  terapi  alternatif  penyakit  alergi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui efek  antihistamin  ekstrak  daun  jambu  biji  (Psidium  guajava)  pada  tikus  putih  (Rattus novergicus) yang diinduksi ovalbumin dinilai dari jumlah eosinofil jaringan kulit.
Metode: Penelitian ini  merupakan penelitian quasi experimental design dengan rancangan post  test  only  with  control  group  design. Subjek  penelitian  tikus  putih  jantan , umur  3-4 bulan,  dan  berat  badan  200-300  gram.  Sampel  24  ekor  tikus  putih  dibagi  secara  random menjadi  enam  kelompok.  Kelompok  kontrol  normal  (K)  tanpa  perlakuan,  kontrol  negatif (KN)  hanya  diinduksi  ovalbumin,  kontrol  positif  (KP)  diberikan  metilprednisolon,  dan kelompok  perlakuan  (KP1,  KP2,  KP3)  diberikan  ekstrak  daun  jambu  biji  dengan  dosis berikut  27  mg/200  gramBB,  54  mg/200  gramBB,  dan  108  mg/200  gramBB.  Efek antihistamin  dinilai  melalui  gambaran  histopatologi  jaringan  kulit  berupa  rata-rata  jumlah infiltrasi  eosinofil  dengan  menggunakan  mikroskop  cahaya.  Data  dianalisis  menggunakan uji Kruskal Wallis dan dilanjutkan uji Post Hoc Mann Whitney (α= 0,05). Hasil: Uji Kruskal  Wallis menunjukkan  perbedaan  signifikan  di  antara  enam  kelompok perlakuan  (p=0,00).  Uji Post  Hoc  Mann  Whitney menunjukkan  perbedaan  signifikan  di antara  semua  pasangan  kelompok  (p=<0,05).  KP3  menunjukkan  rerata  jumlah  eosinofil lebih rendah daripada KP dan signifikan (p=0,021).
Kesimpulan: Ekstrak  daun  jambu  biji  ( Psidium  guajava )  memiliki  efek  antihistamin dengan  menurunkan  infiltrasi  eosinofil  pada  jaringan  kulit  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus ) yang dinduksi ovalbumin.
Kata Kunci: ekstrak daun jambu biji; eosinophil; histopatologi kulit

## ABSTRACT
Introduction: The  prevalence  and  severity  of  allergic  diseases  continues  to  increase globally, especially in countries with low to middle income. Current allergic therapies such as  corticosteroids  have  many  side  effects  in  long-term  use.  Guava  leaf  extract  (Psidium guajava)  has  the  potential  as  an  antihistamine  which  can  be  an  alternative  therapy  for allergic diseases. This study aims to determine the effect of antihistamine extract of guava leaves (Psidium guajava) on white rats (Rattus novergicus) induced by ovalbumin assessed from the number of eosinophils of skin tissue.
SMART MEDICAL JOURNAL (2019) Vol. 2  No. 2. eISSN : 2621-0916
Methods : This research was a quasi experimental design with a post test only design with control  group  design.  The  research  subjects  were  male  white  rats,  aged  3-4  months,  and weighing 200-300 grams. Samples of 24 white rats were randomly divided into six groups. Normal  (K)  control  group  without  treatment,  negative  control  (KN)  was  only  induced  by ovalbumin,  positive  control  (KP)  was  given  methylprednisolone,  and  treatment  groups (KP1,  KP2,  KP3)  were  given  guava  leaf  extract  with  the  following  dosage  27  mg  /  200 gram BW, 54 mg / 200 gram BW, and 108 mg / 200 gram BW. The effect of antihistamines was  assessed  through  histopathology  of  skin  tissue  in  the  form  of  an  average  number  of eosinophil  infiltrations  using  a  light  microscope.  Data  were  analyzed  using  the  Kruskal Wallis test and followed by the Mann Whitney Post Hoc test (α = 0.05).
Result :  The  Kruskal  Wallis  test  showed  significant  differences  between  the  six  treatment groups (p = 0.00). The Mann Whitney Post Hoc test showed significant differences between all group pairs (p = <0.05). KP3 shows the average number of eosinophils lower than KP and significant (p = 0.021).
Conclusion : Guava leaf extract (Psidium guajava) has an antihistamine effect by reducing eosinophil infiltration in ovalbumin-induced white rat (Rattus norvegicus) skin tissue.
Keywords: Guava leaf extract; eosinophil; skin histopathology

## PENDAHULUAN
Prevalensi  dan  keparahan  penyakit alergi terus meningkat secara global, terutama di  negara  dengan  pendapatan  rendah  sampai menengah 1 .  Penggunaan  terapi  alergi  jangka panjang  selain  dapat  menyebabkan  efek samping  berupa  sindroma  Cushing  juga membebani  penderita  dari  segi  ekonomi 2 . Daun  jambu  biji  (Psidium  guajava)  secara tradisional digunakan untuk mengobati inflamasi, diabetes, hipertensi, luka, nyeri, dan demam 3 .  Ekstrak  daun  jambu  biji  kaya  akan flavonoid, terutama turunan quercetin 4 . Quercetin  mampu  menekan  aktivasi  sel  mast atau  memiliki  efek  mast  cell  stabilizer 5 . Quercetin  dalam  daun  jambu  biji  (Psidium guajava) berpotensi sebagai antihistamin yang dapat  menjadi  terapi  alternatif  pada  penyakit alergi  melalui  mekanisme mast  cell  stabilizer dan  penurunan  jumlah  sitokin  yang  berperan dalam  reaksi  alergi 5 .  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  efek  antihistamin  ekstrak daun jambu biji (Psidium guajava) pada tikus putih  (Rattus  novergicus)  yang  diinduksi ovalbumin  dinilai  dari  jumlah  eosinofil jaringan kulit.

## METODE
Penelitian  ini  menggunakan  jenis penelitian  quasi  eksperimental  dengan  desain post  test  only  with  control  group .  Penelitian dilakukan  di  Laboratorium  Farmakologi  dan Laboratorium  Patologi  Anatomi,  Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret.
Hewan  uji  menggunakan Rattus novergicus yang didapatkan dari Laboratorium Histologi, Fakultas Kedokteran, Universitas  Sebelas  Maret,  Tikus  putih ( Rattus  norvegicus )  jantan,  berumur  3-4 bulan,  berat  badan  200-300  gram,  tidak  ada kelainan anatomi. Sampel akan dianggap drop out  apabila  tikus  putih  mati,  tidak  bergerak aktif atau sakit saat dilakukannya penelitian.
Tikus putih dibagi menjadi 6 kelompok  dengan  masing-masing  kelompok terdiri  dari  4  ekor  tikus  putih  secara  random sampling.  Pengelompokan  tikus  putih  terdiri dari  kelompok  kontrol  normal  (K)  tanpa perlakuan,  kontrol  negatif  (KN)  hanya diinduksi  ovalbumin,  kontrol  positif  (KP) diberikan  metilprednisolon,  dan  kelompok perlakuan (KP1, KP2, KP3) diberikan ekstrak daun  jambu  biji  dengan  dosis  berikut  27 mg/200  gramBB,  54  mg/200  gramBB,  dan 108  mg/200  gramBB.  Adaptasi  dilakukan selama tujuh hari (hari ke-1 sampai hari ke-7).
SMART MEDICAL JOURNAL (2019) Vol. 2  No. 2. eISSN : 2621-0916
Tikus  kelompok  perlakuan  1,  2,  dan  3 diberikan  ekstrak  peroral  setiap  hari  dari  hari ke-8  sampai  dengan  hari  ke-13  dengan  dosis masing-masing. Tikus putih kelompok kontrol positif,  kontrol  negatif,  dan  perlakuan  pada hari ke-8, ke-10, dan ke-12 disensitasi dengan injeksi  suspensi  ovalbumin  0,1  %  dalam Al(OH)3  10%  dengan  volume  pemberian  1 mL/200 gramBB secara subkutan di punggung tikus.
Pada  hari  ke-14  dilakukan  perlakuan, sebagai berikut:
a. K tidak diberikan perlakuan.
b. KN  diinjeksikan  dengan  ovalbumin  0,1  % dalam  Al(OH)3  10%  dengan  volume pemberian  1  mL/200  gramBB  secara subkutan di punggung tikus.
c. KP  diberikan  metilprednisolon  sebesar 0,072  mg/200  gram  BB  secara  peroral dengan dilarutkan dalam 2 mL air.
d. KP1, KP2, dan KP3 diberikan ekstrak daun jambu  biji  secara  peroral  dengan  dosis masing-masing  27  mg/200  gram  BB,  54 mg/200  gram  BB,  dan  108  mg/200  gram BB yang dilarutkan dalam 2 mL air.
Setelah  30  menit,  tikus  diinjeksikan dengan  suspensi  ovalbumin  0,1  %  dalam Al(OH)3  10%  dengan  volume  pemberian  1 mL/200 gramBB secara subkutan di punggung  tikus.  Jaringan  kulit  diambil  4  jam setelah  injeksi,  dan  segera  diproses  guna membuat preparat histopatologi dengan pewarnaan  HE.  Semua  data  yang  diperoleh akan  ditabulasi,  dibuat  skoring  jumlah eosinofil per lapang pandang pada perbesaran 400X dan dianalisis. Uji normalitas dilakukan menggunakan uji Shapiro-Wilk , uji homogenitas menggunakan uji Levene . Analisis data menggunakan uji non parametrik  yaitu  uji Kruskal-Wallis dan  uji Post  Hoc  Mann-Whitney karena  syarat dilakukannya  uji One  Way ANOVA  tidak terpenuhi.  Kelaikan  etik  didapatkan  dari KEPK Universitas Sebelas Maret Surakarta.
.

## HASIL

## Data Hasil Penelitian
Tabel 1. Rerata jumlah eosinofil pada setiap kelompok Kelompok Rerata Jumlah Eosinofil K 1,45±0,23 KN 15,95±0,83 KP 2,90±0,21 KP1 7,30±0,14 KP2 4,25±0,17 KP3 2,20±0,35
Keterangan:
K:  kelompok  kontrol  normal;  KN:  kelompok kontrol  negatif;  KP:  kelompok  kontrol  positif; KP1:  kelompok  perlakuan  1;  KP2:  kelompok perlakuan 2; KP3: kelompok perlakuan 3.
Pada  kelompok  K  didapatkan  rerata jumlah  eosinofil  terendah  yaitu  1,45±0,23. Kelompok  KN  menunjukkan  rerata  jumlah eosinofil  tertinggi  yaitu  15,95±0,83.  Rerata kelompok  KP1  (7,3±0,14),  KP2  (4,25±0,17), dan  KP3  (2,2±0,35)  lebih  rendah  daripada kelompok  KN  (15,95±0,83).  Rerata  jumlah eosinofil  jaringan  kulit  terlihat  semakin menurun  dari  kelompok  KP1  hingga  KP3, berturut-turut 7,3±0,14; 4,25±0,17; dan 2,2±0,35.  KP3  (2,2±0,35)  menunjukkan rerata  jumlah  eosinofil  yang  lebih  rendah daripada KP (2,9±0,21).

## Analisis Data
Uji
Shapiro-Wilk menunjukkan bahwa data kelompok K, KN, KP, KP1, KP2, dan  KP3  memiliki  nilai  p  di  atas  derajat kemaknaan  yang  telah  ditentukan  (p>0,05), sehingga  data  semua  kelompok  terdistribusi normal.  Uji  homogenitas  menggunakan  uji Levene  didapatkan  nilai  p  di  bawah  derajat kemaknaan  yang  telah  ditentukan  (p<0.05), sehingga  data  tidak  homogen.  Selanjutnya dilakukan uji alternatif untuk semua kelompok  karena  data tidak  memenuhi  syarat uji  ANOVA  yaitu  data  terdistribusi  normal dan  homogen.  Uji  alternatif  yang  digunakan adalah uji non parametrik Kruskal Wallis .
SMART MEDICAL JOURNAL (2019) Vol. 2  No. 2. eISSN : 2621-0916
Hasil uji Kruskal-Wallis
menunjukkan  nilai  signifikansi  p=<0,05 (p<α).  Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  signifikan  secara statistik  antara  enam  kelompok  perlakuan. Selanjutnya  untuk  mengetahui  kelompok mana yang memiliki perbedaan yang signifikan dilakukan uji Post Hoc menggunakan  Mann  Whitney.  Hasil  uji Post
Hoc  Mann  Whitney menunjukkan  perbedaan yang  signifikan  (p=<0,05)  di  antara  semua kelompok tikus.

## PEMBAHASAN
Rerata  jumlah  eosinofil  kelompok kontrol  negatif    (15,95±0,83)  lebih  besar secara signifikan dibandingkan dengan kelompok  kontrol  normal  (1,45±0,23)  (p= 0,020).  Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa pembuatan sampel model alergi menggunakan induksi ovalbumin dapat meningkatkan jumlah  infiltrasi  eosinofil  jaringan  kulit  tikus putih.  Ovalbumin  mampu  meningkatkan aktivitas limfosit Th2 dalam memproduksi IL- 4,  IL-5  dan  IL-13.  IL-4,  IL-13,  dan  IL-5 secara bersama-sama berperan dalam produksi IgE  oleh  sel  B  plasma  dan  rekrutmen  serta aktivasi eosinofil 6 . Pemberian suspensi Al(OH) 3 sebagai adjuvan dalam penelitian ini bertujuan  untuk  lebih  menginduksi  respon imun  jalur  Th2  yang  berperan  penting  dalam reaksi  alergi 7 .  Proses  inflamasi  pada  jaringan yang terjadi akibat reaksi sel mast menyebabkan pelepasan berbagai chemoattractant seperti CCL5, CCL11, CCL24,  dan  CCL26 8 .  Melalui  beberapa rangkaian  proses  tersebut,  ovalbumin  mampu meningkatkan  jumlah  infiltrasi  eosinofil  pada jaringan  sesuai  dengan  hasil  yang  didapatkan dari penelitian ini.
Gambaran  histopatologi  pada  semua kelompok  perlakuan  (kelompok  perlakuan  1: 7,3±0,14;  kelompok  perlakuan  2:  4,25±0,17;
kelompok perlakuan 3: 2,2±0,35)
menunjukkan  rerata  jumlah  eosinofil  yang
lebih kecil bila dibandingkan dengan kelompok  kontrol  negatif  (15,95±0,83).  Hasil tersebut  menunjukkan  bahwa  pemberian ekstrak  daun  jambu  biji  (Psidium  guajava) mampu menurunkan jumlah infiltrasi eosinofil jaringan  kulit  tikus  putih.  Uji  statistik  yang dilakukan  pada  kelompok  kontrol  negatif  dan kelompok perlakuan 1, 2, dan 3 berturut-turut menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan (p=0,020; p=0,020; p=0,021).
Hasil pengamatan  tersebut  sesuai  dengan  penelitian Park  et  al  (2009)  bahwa  quercetin  mampu menurunkan  jumlah  infiltrasi  eosinofil.  Park et al (2009) dalam penelitiannya menggunakan tikus model asma yang diberikan  quercetin  murni,  quercetin  mampu menurunkan  reaksi  inflamasi  saluran  napas akibat  alergi  dan  hiperresponsitivitas  saluran napas  melalui  perubahan  polarisasi  Th1/Th2 via supresi ekspresi GATA-3 dan peningkatan ekspresi T-bet. GATA-3 merupakan gen yang meningkat ekspresinya saat sel T
berdiferensiasi  menjadi  sel  Th2  dan  menurun saat  sel  T  berdiferensiasi  menjadi  sel  Th1, sedangkan T-bet merupakan faktor transkripsi yang  menjadi  penentu  utama  diferensiasi Th1 9 .  Melalui  mekanisme  tersebut,  quercetin mampu  menekan  jumlah  sel  Th2  yang berperan penting dalam aktivasi dan rekrutmen  eosinofil.    Selain  itu,  quercetin berperan  dalam  menurunkan  jumlah  infiltrasi eosinofil  pada  jaringan  melalui  penekanan aktivasi  sel  mast  (mast  cell  stabilizer) 5 .  Hasil penelitian  Kim  et  al  (2014)  menunjukkan quercetin  secara  signifikan  mampu  menekan ekspresi  TNF-α  dan  IL-4  yang  memiliki peranan penting dalam memicu dan mempertahankan  reaksi  alergi  sel  mast 10 . Selain  melalui  penekanan  sel  mast,  quercetin mampu  menurunkan  sekresi  sitokin  dan ekpresi mRNA yang berperan dalam produksi, maturasi, dan rekrutmen eosinofil 5 . Pemberian quercetin  pada  hewan  coba  model  asma  juga memperlihatkan penurunan IL-4, IL-5, eotaksin CCL11 yang merupakan sitokin yang berperan  dalam  perkembangan,  maturasi,  dan
SMART MEDICAL JOURNAL (2019) Vol. 2  No. 2. eISSN : 2621-0916
rekrutmen eosinofil menuju tempat inflamasi 5,8,11 . Sehingga berdasarkan mekanisme tersebut, quercetin mampu menurunkan  jumlah  infiltrasi  eosinofil  pada jaringan.
Perbandingan  dosis  dari  kelompok perlakuan  1  (KP1),    kelompok  perlakuan  2 (KP2),  dan  kelompok  perlakuan  3  (KP3) menunjukkan bahwa penambahan dosis ekstrak  daun  jambu  biji  (Psidium  guajava) semakin menurunkan infiltrasi eosinofil jaringan  kulit  secara  signifikan  (KP1  dengan KP2:  p=0,019;  KP1  dengan  KP3:  p=0,020; KP2  dengan  KP3:  p=0,020).  Hasil  ini  sesuai dengan  penelitian  Sato  et  al  (2015)  yang menunjukkan supresi reaksi alergi berkolerasi positif  dengan  konsentrasi  quercetin 12 .  Dalam penelitian Park et al (2009) juga menunjukkan korelasi  positif  antara  dosis  pemberian quercetin  dengan  jumlah  infiltrasi  eosinofil. Pemberian quercetin sebesar 8 mg menurunkan jumlah  eosinofil  sebesar 68,79% dibanding  kelompok  kontrol  dan  pemberian quercetin dengan dosis yang lebih besar yaitu 16  mg  mampu  menurunkan  jumlah  eosinofil lebih  besar  daripada  dosis  8  mg  sebesar 73,35%  dibanding  kelompok  kontrol 9 .  Hasil tersebut  menunjukkan  bahwa  penambahan dosis  quercetin  mampu  memberikan  hasil yang  lebih  baik  dalam  menurunkan  jumlah infiltrasi eosinofil.
Gambaran  histopatologi  kelompok kontrol positif menunjukkan penurunan jumlah rerata eosinofil dibandingkan kelompok kontrol negatif, hal ini membuktikan bahwa pemberian
metilprednisolon  mampu  menurunkan  jumlah infiltrasi  eosinofil  pada  jaringan  kulit  tikus. Metilprednisolon mampu  menurunkan jumlah sel  Th2  GATA-3  dan  produksi  sitokin  Th2 seperti IL-4, IL-5, IL-6, dan IL-13 tetapi tidak berpengaruh  besar  terhadap  sel  Th1  T- bet 13 .Melalui
mekanisme tersebut metilprednisolon  mampu  menurunkan  rerata jumlah  infiltrasi  eosinofil  pada  jaringan  kulit tikus  putih.  Dari  ketiga  kelompok  perlakuan,
hanya  kelompok  perlakuan  3  memiliki  rerata jumlah  eosinofil  lebih  rendah  (2,2±0,35) dibandingkan kelompok kontrol positif
(2,9±0,21)  dan  signifikan  secara  statistik  (p=
0,021). Hasil ini menunjukkan bahwa quercetin  dalam  ekstrak  daun  jambu  biji (Psidium guajava) mampu menurunkan jumlah  infiltrasi  eosinofil  melalui  jalur  yang sama dengan metilprednisolon melalui perubahan  polarisasi  Th1/Th2  via  supresi GATA-3 9,13 .    Hasil  ini  juga  menunjukkan bahwa  quercetin  dalam  ekstrak  daun  jambu biji  memiliki  efek  yang  lebih  baik  dalam menurunkan  infiltrasi  eosinofil  jaringan  kulit dengan  pemberian  dosis  ekstrak  daun  jambu biji sebesar 108 mg/ 200 gramBB.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dan  analisis  data menggunakan uji statistik yang telah dilakukan,  maka  dapat  diketahui  bahwa pemberian  ekstrak  daun  jambu  biji  (Psidium guajava)  dapat  memberikan  efek  antihistamin berupa  penurunan  yang  signifikan  terhadap rerata  jumlah  eosinofil  jaringan  kulit  tikus putih.  Adapun  dosis  ekstrak  daun  jambu  biji sebesar  108  mg/  200  gramBB  menunjukkan hasil  yang  lebih  baik  dalam  menurunkan infiltrasi  eosinofil  jaringan  kulit  tikus  putih dibandingkan penggunaan metiprednisolon.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terimakasih kepada  semua  pihak  yang  telah  terlibat  dan membantu  dalam  penyelesaian  penelitian  ini, terutama kepada staff Laboratorium Farmakologi, Laboratorium Patologi Anatomi, dan Laboratorium Histologi,
Fakultas  Kedokteran,  Universitas  Sebelas Maret.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Pawankar  R,  Canonica  RW,  Holgate  ST, Lockey  RL,  &  Blaiss  M.  World  Allergy Organization  (WAO)  White  Book  on
SMART MEDICAL JOURNAL (2019) Vol. 2  No. 2. eISSN : 2621-0916
Allergy:  update  2013.  Milwaukee:  World Allergy Organization; 2013.
2. Ye Q, He XO, & D’Urzo A. A Review on the  Safety  and  Efficacy  of  Inhaled Corticosteroids  in  the  Management  of Asthma. Pulmonary Therapy 2017;3(1);1- 18.
3. Arya  V,  Thakur    N,  Kashyap  CP.
Preliminary phytochemical analysis of the extracts  of  Psidium  leaves.  Journal  of
Pharmacognosy and Phytochemistry 2012;1(1).
4. El Sohafy SM, Metwalli AM, Harraz FM, Omar AA. Quantification of flavonoids of Psidium  guajava L.  Preparations  by
Planar  Chromatography  (HPTLC).  Phcog
Mag 2009;5;61.
5. Sakai-Kashiwabara M, Asano K.
Inhibitory action of quercetin on eosinophil  activation  in  vitro.  Evidence- Based  Complementary  and  Alternative Medicine 2013.
6. Deo  SS,  Mistry  KJ,  Kakade  AM, Niphadkar  PV.  Role  played  by  Th2  type cytokines  in  IgE  mediated  allergy  and asthma.  Lung  India  :  official  organ  of
Indian Chest Society 2010;27(2);66–71.
7. Wang W, Singh M. Selection of adjuvants for  enhanced  vaccine  potency.  World Journal of Vaccines 2011;1(02);33.
8. Ramirez  GA,  Yacoub  MR,  Ripa  M, Mannina D, Cariddi A, Saporiti N, Ciceri F,  et  al.  Eosinophils  from  Physiology  to Disease:  A  Comprehensive  Review.
BioMed research international 2018.
9. Park HJ, Lee CM, Jung ID, Lee JS, Jeong
YI, Chang JH, Chun SH,  et al. Quercetin regulates  Th1/Th2  balance  in  a  murine model of asthma. International immunopharmacology
2009;9(3);261-
267.
10. Kim M, Lim SJ, Kang SW, Um BH, Nho CW.  Aceriphyllum  rossii  extract  and  its active compounds, quercetin and kaempferol inhibit IgE-mediated mast cell activation and passive cutaneous anaphylaxis.  Journal  of  agricultural  and food chemistry 2014;62(17);3750-3758.
11. Fortunato LR, Alves CDF, Teixeira MM,
Rogerio  AP.  Quercetin:  a  flavonoid  with
the  potential  to  treat  asthma.  Brazilian journal of pharmaceutical sciences 2012;48(4);589-599.
12. Sato A, Zhang T, Yonekura L, Tamura H. Antiallergic  activities  of  eleven  onions (Allium cepa) were attributed to quercetin 4′-glucoside  using  QuEChERS  method and  Pearson's  correlation  coefficient. Journal of Functional Foods 2015;14;581- 589.
13. Okano  M.  Mechanisms  and  clinical implications of glucocorticosteroids in the treatment of allergic rhinitis. Clinical and experimental immunology 2009;158(2);164–173 .