## ISOLATION AND ANTIBACTERIAL TEST OF ENDOPHYTIC FUNGI FROM MANGROVE PLANT Soneratia Alba ON THE COAST OF MANADO CITY

## ISOLASI DAN UJI ANTIBAKTERI JAMUR ENDOFIT DARI TUMBUHAN MANGROVE
Soneratia alba DI PESISIR KOTA MANADO
Nelsyani Pasappa 1) * , Johanis J. Pelealu 1) ,  Agustina Monalisa Tangapo 1)
1) Program Studi Biologi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *nelsyanipasappa14@gmail.com

## ABSTRACT
Symbiosis  of  endophytic  fungi  mutualism  with  plant  tissue  is  able  to  produce  secondary  metabolite compounds  similar  to  their  host.  The  study  aimed  to  isolate,  characterize  and  test  the  antibacterial effectiveness  of  endophytic  fungi  isolates  isolated  from  S.  alba  mangroves.  Methods  used  include  planting explants  in  isolation  and  testing  antibacterial  effectiveness  with  the  modified  Kirby-Bauer  method. The results  of  the  study  obtained  five  endophytic  fungi  isolates  isolated  from  mangrove  S.  alba  with characteristics  of  fungi  isolated  macroscopic  both  color,  shape,  texture  and  speed  of  growth  and microscopically  with the discovery  of  hyphae  that  is blocked,  branched and transparent and some isolates with spreading spores. Antibacterial testing showed all five endophytic fungi isolates positively inhibited the test  bacteria.  The  highest  Sone  3  isolate  inhibited  E.  coli  growth  by  26.67  mm  and  the  Sone  9  isolate provided the highest resistance to S. aures bacteria by 32.33 mm and against P. aeruginosa by 32.33 mm. This suggests all five fungal isolates have antibacterial compounds.
Keywords: Antibacterial, Endophytic fungi,
Secondary metabolite, Soneratia alba.

## ABSTRAK
Simbiosis  mutualisme  jamur  endofit  dengan  jaringan  tumbuhan  mampu  menghasilkan  senyawa  metabolit sekunder  yang  mirip  dengan  inangnya.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi,  mengkarakterisasi  dan menguji  efektivitas  antibakteri  isolat  jamur  endofit  yang  diisolasi  dari  mangrove S.  alba .  Metode  yang digunakan meliputi tanam eksplan dalam isolasi dan  uji efektivitas antibakteri dengan metode Kirby-Bauer yang dimodifikasi. Hasil penelitian diperoleh lima isolat jamur endofit yang diisolasi dari mangrove S. alba dengan  karakteristik  isolat  jamur  yang  berbeda  secara  makroskopis  baik  warna,  bentuk,  tekstur  serta kecepatan pertumbuhannya dan secara mikroskopis dengan ditemukannya hifa yang bersekat, bercabang dan transparan  serta  beberapa  isolat  dengan  spora  yang  menyebar.  Pengujian  antibakteri  menunjukkan  kelima isolat  jamur  endofit  positif  menghambat  bakteri  uji.  Isolat  Sone  3  paling  tinggi  menghambat  pertumbuhan E.coli sebesar 26,67 mm dan isolat Sone 9 memberikan hambatan tertinggi terhadap bakteri S.aures sebesar 32,33 mm dan terhadap P. aeruginosa sebesar 32,33 mm . Hal ini menunjukkan kelima isolat jamur memiliki senyawa antibakteri.
Kata kunci : Antibakteri, Jamur endofit, Metabolit sekunder, Soneratia alba .

## PENDAHULUAN
Pencarian  sumber  bahan  obat  baru  terus dilakukan  sampai  saat  ini,  khususnya  yang bersumber  dari  alam.  Penggunaan  antibiotik sintetik  secara  berlebihan  dalam  penanggulangan penyakit  infeksi  menimbulkan  efek  resistensi patogen  terhadap  antibiotik  (Burhamzah  dan Rante,  2020.  Resistensi  antibiotik  merupakan problematika  di  bidang  kesehatan.  Berbagai  jenis mikroba  patogen  berkembang  menjadi  resisten terhadap  satu  atau  beberapa  jenis  antibiotika. Terdapat  dua  hal  mendasar  terkait  dengan terjadinya  resistensi  bakteri  terhadap  antibiotik yaitu  kemampuan  bakteri  untuk  membentuk pertahanan  diri  terhadap  antibiotik  secara  cepat mati  dan  ketidaktepatan  dosis  dalam  tindakan (Nawea et  al .,  2017).  Perlu  dilakukan  penelitian untuk  menemukan  sumber  bahan  antibiotik alternatif dari bahan alam.
Salah  satu  tumbuhan  yang  banyak mengandung  senyawa  bioaktif  yaitu  tumbuhan mangrove. Ekstraksi dari tanaman menjadi kurang efektif  dengan  kendala  ketersediaan  tumbuhan, maupun degradasi lingkungan  yang  dapat berdampak  pada  hilangnya  keanekaragaman hayati  (Hasiani et  al .,  2015).  Pemanfaatan mikroba  endofit  dapat  menjadi  salah  satu pendekatan untuk eksplorasi senyawa bioaktif dari tumbuhan  dengan  tidak  membutuhkan  sampel tumbuhan  dalam  jumlah  besar  (Kuncoro,  2011). Menurut Mukhlis (2018), mikroba endofit mampu menghasilkan  senyawa  metabolit  sekunder  yang sama  atau  mirip  dengan  inangnya,  maka  isolasi senyawa  bioaktif  tersebut  tidak  harus  menebang tanaman  inang  sebagai  simplisianya,  sehingga biodiversitas  tanaman  tersebut  di  alam  tetap terjaga.
Penggunaan media kultur mikroba dalam menghasilkan  metabolit  sekunder  lebih  unggul, dari  segi  media  untuk  kultur  sel  mikoba  lebih sederhana,  murah  dengan  persediaan  yang melimpah  dan  biaya  produksi  yang relatif  rendah (Debbab,  2010).  Senyawa  bioaktif  sebagai metabolit sekunder dapat dihasilkan oleh keberadaan mikroba yang terdapat dalam tumbuhan  (Fitriani  dan  Putrie,  2015).  Mikroba endofit dapat berupa bakteri ataupun jamur.
Berdasarkan  hasil  penelitian  Sinaga  (2015), isolat-isolat jamur endofit memiliki daya antibakteri  yang  potensial  dengan  spektrum  luas. Jamur  endofit  yang  terdapat  pada  jaringan tumbuhan inangnya mampu menghasilkan senyawa yang memiliki khasiat yang sama dengan tumbuhan  inangnya,  walaupun  jenis  senyawanya berbeda  atau  bentuk  turunannya.  Bahkan  pada
beberapa jenis, aktivitas senyawa yang dihasilkan jamur  endofit  biasanya  lebih  besar  dibandingkan aktivitas  senyawa  tumbuhan  inangnya  (Sinaga, 2015).
Sejauh  ini,  telah  banyak  peneliti  yang berhasil  mengisolasi  jamur  endofit  dan  senyawa metabolit  sekunder  dari  berbagai  jenis  tanaman. Peneliti yang mengisolasi jenis jamur endofit dari mangrove S. alba serta informasi mengenai jamur endofit  pada  mangrove S.  alba sebagai  penghasil senyawa  bahan alami masih  terbatas  di  Indonesia terkhusus  di  Kawasan  Ekosistem  Mangrove Manado,  Sulawesi  Utara.  Terbatasnya  informasi tersebut, maka penulis telah melakukan penelitian mengenai  isolasi  dan  aktivitas  antibakteri  jamur endofit  pada  tumbuhan  mangrove S.  alba yang diambil  dari  kawasan  mangrove  Sulawesi  Utara tepatnya  di  Desa  Bahowo  dan  Desa  Tiwoho. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi, mengkarakterisasi dan menguji efektivitas antibakteri isolat jamur endofit yang diisolasi dari mangrove S.  alba .  Maka  dari  penelitian  ini  dapat dijadikan sebagai pengembangan ilmu pengetahuan mengenai potensi jamur endofit yang diisolasi  dari  mangrove S.  alba sebagai  alternatif yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai  sumber  bahan obat  antibakteri  baru  yang  penting  untuk dikembangkan.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Sampel  tumbuhan  mangrove  diambil  di pesisir Desa Bahowo dan Desa Tiwoho Kelurahan Tongkaina, Kecamatan Bunaken, Sulawesi Utara. Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Lanjut Jurusan Biologi FMIPA Universitas Sam
Ratulangi selama bulan Oktober sampai Desember 2021.

## Alat dan Bahan
a. Alat Cawan  petri  (kaca  dan disposable ),  tabung reaksi, gelas ukur, gelas baker, tabung Erlenmeyer, pinset, cutton bud , scalpel, inkubator, api  bunsen,  jarum  ose,  mikroskop, cover  glass, objek glass , autoklaf, hot plate, stirrer , cork borer ukuran  6  mm,  tisu,  gunting,  spidol,  penggaris, plastik wrap, aluminium foil, tissue, karet gelang, sarung tangan dan masker.
b. Bahan
Daun  mangrove  jenis Soratia  alba , bakteri Staphylococcus aureus , bakteri Eschericha coli ,  bakteri Pseudomonas  aeruginosa ,  natrium hipoklorit, alkohol 70%, medium Potato Dextrose
Agar (PDA),  medium Nutrient Agar (NA), medium Nutrient Broth (NB), medium Trypticase Soya  Broth (TSB), Lactophenol  Cotton  Blue (LCB), chloramphenicol  Dish Oxoid 30  μg . spiritus dan akuades.

## Tahapan Penelitian
Pembuatan Media Nutrient Agar (NA )
Serbuk  NA  sebanyak  14  gram  dilarutkan  sampai volume  500  mL  dengan  menggunakan  akuades dan  dipanaskan  di  atas  hot  plate  sambil  diaduk menggunakan stirrer sampai media larut sempurna,  selanjutnya  disterilkan  dalam  autoklaf pada  suhu  121°C  selama  15  menit.  Media  NA akan  digunakan  dalam  mengecek  keberhasilan sterilisasi permukaan  sampel daun mangrove.

## Pembuatan  Media  Potato  Dextrose  Agar (PDA)
Serbuk  PDA  sebanyak  19,5  gram  sampai  volume 500  mL  dengan  menggunakan  akuades  dan dipanaskan  di  atas  hot  plate  sambil  diaduk menggunakan stirrer sampai media larut sempurna,  selanjutnya  disterilkan  dalam  autoklaf pada  suhu  121°C  selama  15  menit.  Media  PDA digunakan dalam isolasi jamur.

## Pembuatan Media Trypticase Soya Broth (TSB)
Serbuk  TSB  ditimbang  sebanyak  2  gram  dan dilarutkan  menggunakan  aquades  sampai  sampai terbentuk  media  sebanyak  100  ml.  Media kemudian  dituang  kedalam  tabung  sentrifugasi masing-masing  sebanyak  5  ml,  selanjutnya disterilisasi  dalam  autoklaf  pada  suhu  121°C selama 15 menit.

## Sterilisasi Permukaan Sampel dan Isolasi Jamur Endofit
Daun  mangrove  jenis S.  alba dibersihkan pada  air  mengalir  dan  disterilkan  dengan  alkohol 70%  setelah  itu  selama  5  menit  dicuci  dengan natrium  hipoklorit  5,25%  yang  diencerkan  (250 ml  natrium  hipoklorit  diencerkan  dalam  750  ml akuades),  kemudian  dibilas  dengan  air  steril sebanyak  3-5  kali.  Sampel  kemudian  dikeringkan dengan tisu steril di dalam cawan petri. Proses ini dilakukan secara aseptik. Alat-alat yang digunakan  juga  disterilkan  untuk  menghindari kontaminasi dari bakteri. Untuk mengecek proses sterilisasi,  sampel  dipotong-potong  membentuk persegi  masing-masing  sebanyak  4  buah  dengan ukuran 1 cm×1 cm, bagian permukaan dijejakkan dan  eksplan  ditanam  pada  media  NA  dan diinkubasi  selama  24  jam.  Sampel  yang terkontaminasi  tidak  digunakan  untuk  analisis
selanjutnya.  Sampel  yang  tidak  terkontaminasi dalam  waktu  24  jam  di  media  NA  kemudian dipindahkan  ke  media  PDA.  Sampel  tersebut diinkubasi  di  media  PDA  selama  5-7  hari  dan suhu ± 28°C (Desriani et al ., 2014).

## Purifikasi dan Karakterisasi Makroskopis dan Mikroskopis Jamur Endofit
Jamur  endofit  yang  sudah  tumbuh  diambil menggunakan kawat ose steril dan dipindahkan ke media  PDA  lainnya  dengan  maksud  untuk memurnikan  pertumbuhan  jamur  endofit.  Hal  ini dilakukan  pada  setiap  jamur  endofit  yang  secara morfologi  berbeda  yang  tumbuh  pada  daun mangrove tersebut. Pemurnian ini bertujuan untuk memisahkan  koloni  endofit  dengan  morfologi berbeda untuk dijadikan isolat tersendiri. Selanjutnya  isolat  murni  disimpan  pada  suhu ruangan.  Selanjutnya  pengamatan  makroskopis dilakukan dengan mengamati kecepatan pertumbuhan  koloni,  warna  koloni,  tekstur  dan tepian  koloni  jamur  endofit.  Pengamatan  secara mikroskopis  antara  lain,  hifa  mulai  dari  bersekat atau  tidak  bersekat,  pertumbuhan  hifa  yakni bercabang  atau  tidak  bercabang  hifa  tersebut, selanjutnya  warna  hifa  yang  gelap  atau  hialin (transparan). Selain hifa ada tidaknya konidia dan bentuk konidia (bulat, lonjong, berantai atau tidak beraturan)  dan  warna  konidia  (gelap  atau  hialin transparan.  Pengamatan  mikroskopis  dilakukan dengan  cara  mengambil  potongan  jamur  dan diletakkan  pada  tisu  selanjutnya  kaca  preparat steril  ditetesi  larutan Lactophenol Cotton  Blue (LCB)  kemudian  jamur  diambil  menggunakan selotip,  apabila  jamur  sudah  menempel  dibawa selotip  selanjutnya  diletakkan  pada  kaca  preparat yang  sudah  ditetesi  larutan  LCB  selanjutnya diamati  pada  mikroskop  dengan  perbesaran  40x dan 100x (Ramadhanty, 2021).

## Peremajaan dan Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri uji yang digunakan dalam penelitian ini  adalah Escherichia  coli,  Staphylococcus aureus, dan Pseudomonas aeruginosa . Bakteri uji yang digunakan diremajakan terlebih dahulu pada media Trypticase  Soya  Broth (TSB)  sebelum digunakan  dalam  pengujian.  Satu  ose  biakan murni E.  coli,  S.  aureus, dan P.  aureginosa diinokulasikan  pada  5  ml  media  TSB,  lalu diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  24  jam.  Hasil peremajaan  yang  diperoleh,  diambil  10%  dan diinokulasikan  pada  5  ml  media  TSB  yang  baru lalu  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  18  jam (Ramadhanty,  2021).  Kekeruhan  yang  diperoleh
pada media TSB setelah masa inkubasi menandakan bakteri uji sudah tumbuh.

## Uji Antibakteri
Uji  antibakteri  secara  kualitatif  dilakukan dengan  cara  menanam  tiga  potongan  jamur endofit  di  atas  media  PDA  sebagai  ulangan  1, ulangan 2 dan ulangan 3 yang telah diinokulasikan dengan bakteri uji yaitu E. coli, S. aureus, dan P.  aeruginosa ,  disertakan  paper  disk yang  mengandung  kloramfenikol  sebagai  kontrol positif  (+)  dan  paper  disk  yang  direndam  dalam akuades  steril  sebagai  kontrol  negatif  (-).  Cawan petri  berisi  jamur  endofit  dan  bakteri  uji diinkubasi  selama  1x24  jam  pada  suhu  37°C. Pengamatan  akan  dilakukan  pada  zona  bening yang terbentuk. Selanjutnya diameter zona hambat diukur menggunakan penggaris.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Isolasi dan Karakterisasi Jamur Endofit
Sampel daun mangrove S. alba yang dipilih ialah daun yang agak tua Penggunaan bagian daun untuk  diisolasi  dikarenakan  jamur  endofit  yang diperoleh  dari  daun  lebih  banyak.  Hal  ini disebabkan karena daun memiliki lapisan kutikula yang  tipis  dan  luas  permukaannya  lebih  besar sehingga  lebih banyak  jamur  endofit  yang masuk  ke dalam  jaringan  tanaman  (Kumala, 2014)  Menurut  Ramadhani  (2017)  bahwa  pada daun  tua  lebih  banyak  diperoleh  jamur  endofit yang  disebabkan  oleh  beberapa  faktor  yaitu adanya perubahan biokomia daun yang mempengaruhi kolonisasi untuk distribusi endofit, terdapatnya biomassa yang lebih tinggi menyediakan  sumber  daya  yang  lebih  untuk mendukung  keberadaan  jamur . Pada  penelitian  ini sampel  daun S.  alba terlebih  dahulu  disterilisasi permukaan. S terilisasi  permukaan  sangat penting dalam mengisolasi jamur endofit daun agar tidak terkontaminasi dengan
mikroorganisme  lain  yang  bukan  endofit ( Satria, 2017).
Hasil isolasi dilanjutkan pemurnian dengan memindahkan jamur yang berbeda dari segi warna dan  teksturnya  ke  media  PDA  yang  baru  yang bertujuan  utnuk  memperoleh  isolat  jamur  yang murni.  Berdasarkan  hasil  isolasi  dan  pemurnian diperoleh  lima  isolat  jamur  endofit  yang  dapat dilihat pada Gambar 1.

## a                  b                      c
d                e Gambar 1. Koloni isolat jamur endofit . (a) Isolat Sone  3,  (b)  Isolat  Sone  8,  (c)  Isolat Sone  9,  (d)  Isolat  Sone  10  dan  (c) Isolat Sone 11
Isolat jamur yang diperoleh secara makroskopis  memperlihatkan  bentuk  morfologi yang  berbeda-beda  dari  segi  warna,  tekstur,  tepi dan kecepatan pertumbuhannya. Secara mikroskopis dilakukan karaterisasi dengan menggunakan  larutan.  Karakterisasi  isolat-isolat jamur endofit tersebut dilakukan secara makroskopis dan mikroskopis dengan menggunakan larutan Lactophenol Cotton Blue dan diamati dibawa mikroskop. Hasil pengamatan  secara  makroskopis  dan  mikroskopis dari  kelima  isolat  dapat  dilihat  pada  Tabel  1.
Tabel 1. Karakterisasi makroskopis dan mikroskopis jamur endofit
Pengamatan Makrosopis Pengamatan Mikroskopis Deskripsi Deskripsi Gambar Sone 3 Berwarna  orange,  permukaan  datar  kasar, tepi bergerigi, pertumbuhan cepat (inkubasi  hari  ke-4  sudah  memenuhi media ) Spora  yang  menyebar  dan hifa yang bersekat . Sone 8 Berwarna  abu-abu,  tepi  rata,  permukaan datar dan halus, terlihat seperti beludru dan pertumbuhan  cepat  (inkubasi  hari  ke-4 sudah memenuhi media ) Spora  berkumpul  (tidak menyebar) dengan hifa yang bersekat dan transparan Sone 9 Berwarna  putih,  bagian  bawah  berwarna orange,  permukaan  datar,  kasar  serta  tepi tidak rata, pertumbuhan agak lambat Hifa yang bercabang, transparan dan bersekat Sone 10 Berwarna putih bersih, tepi rata, pertumbuhan koloni tebal seperti serabut Hifa  bersekat  dan  dan bercabang Sone 11 Berwarna abu-abu pada bagian tengah dan putih  pada  bagaian  tepi  jamur  lingkaran konsentris,  tepi  rata  dan  permukaan  datar dan  kasar,  berserabut  dan  pertumbuhan agak lambat Hifa  bersekat,  bercabang dan transparan dengan spora yang bersatu

## Uji Aktivitas Antibakteri Isolat Jamur Endofit
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  lima  isolat jamur  endofit  terhadap  pertumbuhan  bakteri E. coli,  S.  aureus, dan P.  aeruginosa ditampilkan pada  Tabel  2.  Diameter  zona  bening  yang terbentuk  disekitar  isolat  jamur  menandakan adanya  penghambatn  terhadap  bakteri  uji,  hal tersebut karena  senyawa  metabolit  yang  dihasilkan isloat jamur tersebut berpotensi sebagai antibakteri. Uji antibakteri secara kualitatif dilakukan dengan cara menanam  tiga  potongan  jamur  endofit  di  atas media  PDA  sebagai  ulangan  1,  ulangan  2  dan ulangan  3  yang  telah  diinokulasikan  dengan bakteri  uji  yaitu E.  coli,  S.  aureus, dan P. Aeruginosa , disertakan paper disk yang mengandung kloramfenikol sebagai kontrol positif (+) dan paper disk yang direndam dalam akuades steril  sebagai  kontrol  negatif  (-).  Cawan  petri berisi  jamur  endofit  dan  bakteri  uji  diinkubasi selama  1x24  jam  pada  suhu  37°C.  Pengamatan akan  dilakukan  pada  zona  bening  yang  terbentuk yang dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Uji aktivitas antibakteri
Kode Isolat E. coli S. aureus P. Aeruginosa Sone 3 Sone 8 Sone 9 Sone 10 Sone
11
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  untuk mengetahui  kemampuan  yang  dihasilkan  jamur endofit  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri uji.  Pengujian  ini  menggunakan  bakteri  yang berumur  24  jam  karena  bakteri  masih  dalam keadaan  aktif  dan  pertumbuhannya  masih  dalam kondisi optimal (Zulfa, 2016). Sebagai pembanding  dalam  pengujian  digunakan  kontrol positif menggunakan paper disk yang mengandung kloramfenikol yang termasuk golongan  antibiotik  berspektrum  luas  yang mampu  menghambat  bakteri  Gram  positif  dan bakteri  Gram  negatif  (Zakiyah et  al., 2015)  dan kontrol  negatif  menggunakan  paper  disk  yang direndam di dalam akuades steril.
Tabel 3 . Hasil pengukuran diameter zona bening Kode isolat Diameter zona bening (rerata±standar deviasi) mm E. coli S. aureus P. Aeruginosa Sone 3 26,67±0,58  30,00±0,00  25,00±5,00 Sone 8 18,33±5,77  30,00±0,00  25,33±0,58 Sone 9 24,33±0,58  32,33±2,08  32,33±0,00 Sone 10 24,33±0,58  27,33±2,52  26,00±3,61 Sone 11 10,00±0,00  28,33±1,53  24,67±0,58 K+ 24,80±2,95  27,20±1,64  24,20±1,30 K- - - - *K+ = Kontrol + ( Cloramphenicol ) *K-  = Kontrol - (akuades steril)
Hasil pengamatan aktivitas antibakteri pada media  yang  mengandung  bakteri  uji  setelah diinkubasi  1×24  jam  menunjukan  bahwa  5  isolat jamur  endofit  memberikan  daya  hambat  terhadap pertumbuhan  bakteri E.  Coli, S.  Aureus dan P. aeruginosa dengan  diameter  zona  bening  yang bervariasi.  Menurut  Hapsari  (2015)  ada  beberapa kriteria  penghambatan  yaitu  kriteria  lemah  (5-10 mm),  kriteria  sedang  (11-20  mm),  dan  kriteria kuat  (>20  mm).  berdasarkan  data  pada  Tabel  3, kemampuan lima isolat jamur endofit dengan luas zona  hambat  yang  terbentuk  dapat  digolongkan dalam  kategori  kemampuan  daya  hambat  lemah, sedang  dan  kuat.  Luas  zona  hambat  yang dihasilkan  jamur  endofit  bahkan  ada  yang  lebih besar  dibandingkan  rerata  zona  hambat  yang dihasilkan kontrol positif sebesar 24,80±2,95 mm terhadap  bakteri E.  coli ,  sebesar  27,20±1,64  mm terhadap bakteri S. aureus dan sebesar 24,20±1,03 mm terhadap P. aeruginosa.
Rerata  zona  hambat  paling  besar  terhadap bakteri E.  coli ditunjukkan  oleh  isolat  Sone  3 sebesar  26,67  mm  dan  paling  rendah  oleh  isolat Sone  11  sebesar  10,00  mm  (tergolong  lemah). Pengujian terhadap bakteri S. aureus menunjukkan rerata zona hambat paling besar yaitu  32,09  mm  (tergolong  kuat)  yang diperoleh dari kode isolat Sone 9. Rerata zona hambat  yang  paling  besar  dari  bakteri P. aeruginosa yaitu  sebesar  35,00  (tergolong kuat) yang diperoleh dari  kode isolat  Sone 9. Hal  tersebut  membuktikan  bahwa  jamur endofit  yang  diisolasi  dari  mangrove  spesies S. alba berpotensi sebagai antibakteri.
Perbedaan  zona  bening  yang  terbentuk kemungkinan  disebabkan  oleh  perbedaan jenis dan kemampuan menghasilkan senyawa antibakteri dari tiap isolat jamur endofit . Ada beberapa faktor yang menyebabkan perbedaan kemampuan diameter zona hambat pada  setiap  isolat  jamur  endofit  diantaranya berbedanya  sifat  yang  dimiliki  jamur  baik secara morfologi maupun fisiologinya, adanya perbedaan  dari  kandungan  dan  senyawa metabolit  sekunder  yang  dihasilkan  jamur sebagai antibakteri seperti enzim yang mampu mendegradasi  dinding  sel  bakteri  (Sangeetha, 2015)
Komposisi  dinding  sel  bakteri  uji  juga mempengaruhi  kemampuan  senyawa  antibakteri dalam  menghambat  bakteri  uji.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa aktivitas antibakteri terhadap bakteri  uji S.  aureus (bakteri  Gram  positif) merupakan  yang  tertinggi,  sedangkan  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri  uji E.  coli dan P. aeruginosa (bakteri  Gram  negatif)  cenderung lebih rendah. Perbedaan respons terhadap senyawa  antibakteri  dipengaruhi  oleh  perbedaan struktur  dinding  sel  bakteri.  Bakteri  Gram  positif memiliki  struktur  dinding  sel  dengan  komposisi peptidoglikan,  sedangkan  bakteri  Gram  negatif memiliki komposisi dinding sel berupa lipopolisakarida  dan  protein.    Bakteri  Gram negatif  memiliki  struktur  dinding  sel  lebih  tebal jika  dibandingkan  dengan  bakteri  Gram  positif. Hal ini mengakibatkan bakteri Gram negatif lebih tahan  terhadap  senyawa  antibakteri  (Rosalina et al., 2018).  Menurut  Jawetz et  al. (2017), E.  coli adalah  bakteri  Gram  negatif  yang  resisten terhadap  beberapa  antibakteri  hal  ini  disebabkan karena  tiga  lapisan  dinding  sel  pada  bakteri  ini, sehingga beberapa senyawa tidak
mampu merusak jaringan dari  dinding  sel  bakteri E.  coli .  Dinding  sel  bakteri  Gram  negatif mengandung  tiga  polimer  yaitu  lapisan  luar lipoprotein,  lapisan  tengah  lipopolisakarida  dan lapisan  dalam  peptidoglikan  dan  membran  luar berupa  bilayer  (mempunyai  ketahanan  lebih  baik terhadap  senyawa-senyawa  yang  keluar  atau masuk sel dan menyebabkan efek toksik).
Menurut  Septiani  (2017),  pada  dasarnya dinding  sel  yang  paling  mudah  terjadi  denaturasi adalah dinding sel yang tersusun oleh polisakarida di  bandingkan  dengan  dinding  sel  yang  tersusun oleh  fosfolipid.  Gram  positif  dinding  selnya mengandung peptidoglikan  dan juga asam teikoat dan  asam  teikuronat.  Oleh  sebab  itu  dinding  sel bakteri Gram positif sebagian adalah polisakarida, sedangkan  pada  dinding  sel  bakteri  Gram  negatif terdapat  peptidoglikan  yang  sedikit  sekali  dan berada  diantara  selaput  luar  dan  selaput  dalam dinding  sel.  Dinding  sel  bakteri  Gram  negatif sebelah  luar  merupakan  komponen  yang  terdiri dari  fosfolipid  dan  beberapa  protein  yang  sering disebut  sebagai auto  layer .  Dapat  disimpulkan bakteri Gram positif mengalami proses denaturasi sel  terlebih  dahulu  dibandingkan  dengan  bakteri Gram negatif.
Mekanisme  penghambatan  jamur  endofit dalam  menekan  pertumbuhan  bakteri  adalah melalui  mekanisme  mikoparasitisme.  Proses mikoparasitik  terdiri  atas  empat  tahapan  yaitu pertumbuhan  kemotropis, pengenalan  (rekognisi), pelekatan  dan  pelilitan  serta  terjadinya  lisis (Kumala et  al .,  2017).  Sedangkan  menurut Hasiani et  al. (2018)  ada  beberapa  mekanisme kerja  senyawa  antimikroba  dalam  menghambat patogen  diantaranya  dengan  merusak  dinding sel, menghambat  proses  metabolisme  sel  mikroba, menghambat  proses  sintesis  protein  dan  asam nukleat  sel  mikroba  serta  jamur  endofit  masuk secara  langsung  atau  membentuk  kait  di  sekitar hifa patogen sebelum penetrasi

## KESIMPULAN
Jamur endofit berhasil diisolasi dari tumbuhan mangrove  spesies S.  alba sebanyak  lima  isolat masing-masing.    Karakterisasi  isolat-isolat  jamur tersebut memperlihatkan perbedaan secara makroskopis  baik  warna,  bentuk,  tekstur  serta kecepaan pertumbuhannya dan secara mikroskopis  ditemukannya  hifa  yang  bersekat, bercabang  dan  transparan  serta  beberapa  isolat dengan  spora  yang  menyebar.  Uji  evektifitas antibakteri  menunjukkan  kelima  isolat  jamur endofit  positif  menghambat  bakteri  uji.  Isolat
Sone 3 paling tinggi menghambat pertumbuhan E. coli dan  isolat  Sone  9  memberikan  hambatan tertinggi  terhadap  bakteri S.  aures dan P. aeruginosa

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  selanjutnya untuk  mengetahui  jenis  senyawa  metabolit  yang dihasilkan  oleh  jamur  endofit  tersebut  yang berpotensi sebagai antibakteri.

## DAFTAR PUSTAKA
Burhamzah,  R.  dan  Rante,  H.  2020.  Isolasi  dan Skrining  Aktinomisetes  Laut  Penghasil Senyawa Antibakteri-Multi Drug Resistance dari  Sedimen  Laut  Pantai  Galesong. Jural Farmasi dan Farmakologi . 23(3) : 79–81. Debbab  A.,  Kjer  J.,  Aly  A.H.,  Proksch  P.  2010.
Methods  for  Isolation  of  Marine-Derived Endophytic  Fungi  And  Their  Bioactive Secondary Products. Nature protocols . 5(3) : :479-490.
Desriani,  D.,  Masriza  Indah  Pratiwi,  E.  dan
Fajrina,  A.  2019.  Senyawa  Antimikroba Dari Jamur Endofit Trichoderma koningiopsis Sakb1  yang  Diisolasi  dari Tanaman Mangrove Sonneratia alba . Jurnal Sains Farmasi & Klinis , 6(2) : 78–84. Fitriani,  R.  dan  Putrie,  W.  2015,  Mikroba Endofitik  Tanaman,  Primadona  yang  Tidak Kasat Mata, Pharmacon, 1(3) : 9– 13.
Hapsari,  M.E.  2015.  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Herba Meniran ( Phyllanthus niruri ) Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Bacillus cereus dan Escherichia  coli .  [Skripsi]. Universitas Sanata Dharma, Yogjakarta.
Hasiani, V. V., I. Ahmad., L. Rijai. 2015. Isolasi Jamur  Endofit  dan  Produksi  Metabolit Sekunder  Antioksidan  dari  Daun  Pacar ( Lawsonia  inermis L.). Jurnal  Sains  dan Kesehatan . 1(4) : 146. Jawetz., Melnick., dan Adelberg. 2017.
Mikrobiologi  Kedokteran. Edisi  23.  EGC, Jakarta.
Kumala,  Shirly  dan  Izzati,  H.  2017.  Isolation IPG3-1 and IPG3-3 Endophytic Fungi from Delima ( Punica granatum Linn.) Twigs and In  Vitro  Assessment  of  Their  Anti Microbial  Activity. International  Research Journal of Pharmacy . 4(6) :49- 53.
Kuncoro, H., Sugijanto, N.E. 2011. Jamur Endofit
Biodiversitas, Potensi dan Prospek
Penggunaannya  Sebagai  Sumber  Bahan Obat  Baru. J.  Trop.  Pharm.  1(3) :  251-265.
Mukhlis,  D.  K.  dan  Hendri,  M.  2018.  Isolasi  dan
Aktivitas  Antibakteri  Jamur  Endofit  pada Mangrove Rhizophora apiculata Dari Kawasan  Mangrove  Tanjung  Api-Api Kabupaten  Banyuasin  Sumatera  Selatan. Maspari Journal , 10(2) : 151–160.
Nawea,  Y.,  Mangindaan,  E.P.M.  dan  Bara,  R.A. 2017.  Uji  Antibakteri  Jamur  Endofit  dari Tumbuhan Mangrove Sonneratia alba yang Tumbuh  di  Perairan  Pantai  Tanawangko. Jurnal Pesisir dan Laut Tropis . 1(1) : 24-35. Ramadhani,  S.  H.,  Samingan,  Iswadi.  2017.
Isolasi  dan  Identifikasi  Jamur  Endofit  pada Daun  Jamblang  ( Syzygium  cumini L).
Jurnal Ilmiah Mahasiswa Fakultas Keguruan  dan  Ilmu  Pendidikan  Unsyiah . 2(2) :45-53.
Ramadhanty,  M.  A.  dan  Lunggani,  A.  T.  2021. Isolasi  Bakteri  Endofit  Asal  Tumbuhan
Mangrove Avicennia marina dan Kemampuannya Sebagai Antimikroba Patogen Staphylococcus aureus dan Salmonella  typhi  Secara  In  Vitro, Jurnal Biologi Tropikal. 4(1) : 16–22 .
Rosalina,  R.,  Ningrum,  S. R.,  Prima,  A.  L.  2018. Aktifitas Antibakteri Ekstrak Jamur Endofit Mangga Podang ( Mangifera indica L.) Asal Kabupaten  Kediri  Jawa  Timur. Jurnal Biologi Biosfera , 3(3) :139- 144.
Satria,  O.  2013.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun Mangrove Jenis Avicennia marina Terhadap Bakteri  Vibrio  parahaemolyticus.  [Skripsi]. Fakultas  Ilmu  Kelautan  dan  Perikanan: Universitas Hasanuddin, Makassar.
Sinaga  E,  Noverita  dan  Fitria  D.  2015.  Daya Antibakteri  Jamur  Endofit  yang  Diisolasi dari  Daun  dan  Rimpang  Lengkuas  ( Alpinia galangal Sw.). Jurnal  Farmasi  Indonesia .
4(4) :161-70.
Zakiyah,  A.,  Nani,  R.,  dan  La  Ode,  S.  (2015). Aktivitas  Antibakteri  Kapang  Endofit  Dari Tanaman Kina. Al-Kauniyah. Jurnal Biologi , 8(2) : 51-58.
Zulfa,  Ismatuz.  2016.  Isolasi  dan  Uji  Aktivitas Antibakteri  Kapang  Endofit  Akar  Tanaman Kayu Jawa ( Lannea coromandelica (Houtt.)
Merr.)  [Skripsi].  UIN  Syarif  Hidayatullah, Jakarta.