Studi Potensi Sifat Anti-Aging Ekstrak Kedelai Hitam ( Glycine max (L.) Merrill) Varietas Detam 1 melalui Uji Antioksidan
Annissa Amalia 1*) , Ristiana Kusumawinahyu 2 , Iin Ruliana Rohenti 2
1) Program Studi Analisis Kimia, Politeknik AKA Bogor Jl. Pangeran Sogiri No.283, Tanah Baru, Bogor Utara, Kota Bogor, Jawa Barat 16154
2) Program Studi Farmasi, STIKES Bani Saleh Bekasi, Jl. RA Kartini No.66, Margahayu, Kec. Bekasi Tim., Kota Bekasi, Jawa Barat 17113
*) Email: annissa.amalia@yahoo.co.id (Received : 8 November 2021; Accepted: 15 Desember 2021; Published: 20 Desember 2021)

## Abstrak
Kulit  merupakan bagian utama perlindungan tubuh  yang  bersentuhan langsung dengan lingkungan. Salah satu  faktor  penyebab  kerusakan  kulit  adalah  paparan  radikal  bebas.Pencegahan  terhadap  berkembangnya radikal bebas dapat diatasi dengan menggunakan senyawa antioksidan yang saat ini banyak dimanfaatkan sebagai  anti-aging  pada  berbagai  produk  kosmetik.  Peneliti  terdahulu  menyebutkan  bahwa  kedelai  hitam memiliki kandunganantioksidan isoflavon, polifenol total, flavonoid dan antosianin masing -masing dalam kadar  6,13  mg/g;  2,19  mg/g;  0,65mg/g.  Selain  itu,  ekstrak  kedelai  hitam  dianggap  memiliki  nilai antioksidan yang lebih baik dari kedelai kuning karena kandungan senyawa yang dimilikinya. Berdasarkan hasil  penelitian  ini  diketahui  bahwa  kedelai  hitam  berpotensi  memiliki  sifat  antioksidan  yang  dapat dimanfaatkan  sebagai  anti-aging.  Tujuan  dilakukannya  penelitian  ini  adalah  untuk  menguji  aktivitas antioksidan  dari  ekstrak  etanol  kedelai  hitam  dari  varian  detam  1.  Penelitian  ini  dilakukan  secara eksperimental  laboratorium,  yang  meliputi  uji  susut  pengeringan,  uji  skrining  fitokimia,  danuji  aktivitas antioksidan melalui metode DPPH menggunakan spektrofotometer UV-Visdengan pembanding Vitamin C (Asam Askorbat). Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak kedelai hitam detam 1 memilikinilai susut pengeringan  sebesar  7,90%  dan  positif  terhadap  adanya  flavonoid,  alkaloid,  triterpenoid  dan  saponin. Hasil  uji  antioksidan  menunjukkan  bahwa  nilai  IC 50 ekstrak  kedelai  hitam  sebesar  220,42  ppm  dan tergolong memiliki sifat antioksidan sedang.
Kata Kunci: Kedelai hitam; Antioksidan, DPPH

## Abstract
Skin is the primary part of the body's protection which is in direct contact with the environment. One of the  factors  that  cause  skin  damage  is  exposure  to  free  radicals.  The  prevention  of  free  radical development  can  be  overcome  by  using  antioxidant  compounds  currently  widely  used  as  anti-ageing  in various  cosmetic  products.  Previous  researchers  mentioned  that  black  soybeans  contain  antioxidants isoflavones, including total polyphenols, flavonoids, and anthocyanins at levels of 6.13 mg/g; 2.19 mg/g; 0.65mg/g. In addition, black soybean extract is considered to have a better antioxidant value than yellow soybean  because  of  its  compound  content.  Based  on  this  study,  it  is  admitted  that  black  soybeans potentially  have  antioxidant  properties  that  can  be  adopted  as  anti-ageing.  This  study  aimed  to  test  the antioxidant activity of the black soybeans ethanol extract. This research was conducted experimentally in a laboratory, including drying shrinkage test, phytochemical screening test, and antioxidant activity test using  the  DPPH  method  using  UV-Vis  spectrophotometer  with  comparison.  Vitamin  C  (Ascorbic  Acid). The results showed that black soybean extract Detam 1 had a drying shrinkage value of 7.90% and was positive for the presence of flavonoids, alkaloids, triterpenoids, and saponins. The antioxidant test results showed that the IC50 value of black soybean extract was 220.42 ppm and classified as having moderate antioxidant properties.
Keywords:Black Soybeans; Antioxidant; DPPH

## PENDAHULUAN
Kulit merupakan bagian utama perlindungan  tubuh  yang  bersentuhan  langsung dengan  lingkungan.  Salah  satu  faktor  penyebab kerusakan  kulit  adalah  radikal  bebas.  Senyawa  ini dapat  mempercepat  terjadinya  penuaan  dini  atau yang  saat  ini  lebih  dikenal  dengan  istilah  aging. Pencegahan terhadap berkembangnya radikal bebas dapat  diatasi  dengan  menggunakan  senyawa antioksidan. (Muliyawan & Suriana, 2013).
Antioksidan  adalah  senyawa  yang  dapat menangkal  atau  meredam  dampak  negatif  oksidan yang  bekerja  dengan  cara  mendonorkan  satu elektronnya  kepada  senyawa  yang  bersifat  oksidan (Sayuti  &  Yenrina,  2015).  Dalam  kosmetik, antioksidan  seringkali  digunakan  sebagai  anti- aging pada  produk  topikal.  Kosmetik  ini  dinilai mampu  mencegah  terjadinya  penuaan  kulit  yang disebabkan oleh paparan sinar matahari ( photoaging )  atau  radikal  bebas    (Fauzi  & Nurmalina, 2012).
Salah  satu  bahan  alam  yang  mengandung senyawa  antioksidan  adalah  kedelai.  Senyawa antioksidan  dalam kedelai  adalah  golongan isoflavon  (senyawa  flavonoid)  yang  memiliki kemampuan  dalam  mencegah  terjadinya  kerusakan karena  adanya  radikal  bebas.  Salah  satu  jenis kedelai  yang  dapat  digunakan  sebagai  antioksidan berasal  dari  genus Glycine ,  yaitu Glycine  max (L.) Merrill (kedelai hitam).
Beberapa  peneliti  terdahulu  menyebutkan bahwa kedelai hitam memiliki kandungan antioksidan yang berasal dari isoflavon, kandungan total  polifenol,  flavonoid  dan  antosianin  dalam jumlah  masing-masing  6,13  mg/g;  2,19  mg/g; 0,65mg/g (Fawwaz, Muliadi, & Muflihunna, 2017; Mueller et al ., 2012). Suatu penelitian  menyatakan bahwa kedelai hitam memiliki kandungan senyawa antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan kedelai kuning (Fawwaz et al ., 2017). Untuk  mempelajari  aktivitas  antioksidan dari  kedelai  hitam,  penelitian  ini  dilakukan  untuk menguji  aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  etanol kedelai hitam.

## BAHAN DAN METODE
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini antara lain biji kedelai hitam, akuades, anhidrida asam  asetat,  asam  sulfat  2  N,  asam  klorida  2  N, etanol 70%, etanol pro analitik, kloroform, natrium hidroksida 20%, pereaksi Mayer, pereaksi Dragendorff,  pereaksi  besi(III)klorida  1%,  serbuk DPPH, dan vitamin C.
Kedelai hitam yang digunakan berasal dari Kebun  Percobaan  Citayam,  yang  berada  di Departemen  Pertanian  Cipayung  Jaya,  Kec. Cipayung,  Kota  Depok,  Jawa  Barat  dan  dari  BB Biogen  Kedung  Jaya,  Kec.  Tanah  Sereal,  Kota Bogor,  Jawa  Barat.  Varietas  kedelai  hitam  yang digunakan adalah detam 1.

## Determinasi Tanaman
Kedelai  hitam  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  dideterminasi  di  Lembaga  Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Cibinong Bogor.

## Sortasi Kering
Sampel  disortir  secara  visual  untuk dipisahkan  antara  butir  rusak  dan  butir  baiknya. Kemudian dilakukan penyerbukan dengan menggunakan alat blender .

## Pembuatan Esktrak Kedelai Hitam
Serbuk  kedelai  hitam  di  maserasi  dengan pelarut etanol 70% dalam  wadah kaca dan tertutup rapat selama 4x24 jam disimpan pada tempat  yang terlindungi dari sinar matahari langsung. Kemudian filtrat  dipekatkan  menggunakan rotary  evaporator pada suhu 40°C kecepatan 80 rpm hingga diperoleh ekstrak kental (Sari, 2018).

## Uji Susut Pengeringan
Dengan  metode  oven,  cawan  porselen dengan penutup dikeringkan dalam oven pada suhu 100-105°C  selama  1  jam.  Kemudian  didinginkan dalam  desikator  selama  30  menit,  ditimbang  berat cawan  porselen  tersebut.  (A)  (Ginting  &  Tastra, 2016).
Sampel  ditimbang  sebanyak  5  gram  di dalam  cawan  porselen  yang  sudah  ditimbang sebelumnya  (B).  Dikeringkan  kembali  di  dalam oven  pada  suhu  100-105 °C selama  16  jam.
Dilanjutkan dengan didinginkan di dalam desikator selama  30  menit.  Dan  ditimbang  kembali  untuk mengetahui  berat  akhirnya  (C).  Dihitung  %  susut pengeringanekstrak kedelai hitam dengan menggunakan  rumus  (Rikomah,  Enti,  Elmitra,  & Akademi, 2017).:
(1)
Keterangan:
A = Berat cawan kosong (g)
B = Berat cawan yang diisi dengan sampel (g)
C = Berat cawan dengan sampel yang sudah dikeringkan (g)
Uji Skrining Fitokimia  (Harborne, 1987; Mercy Uwem, 2017) Uji Flavonoid ( Alkaline Reagent Test ) Sampel  sebanyak  0,05  g  ekstrak  kedelai hitam  ditambahkan  0,2  g  serbuk  Mg  (seujung spatula),  lalu  ditambahkan  HCl  2  N  sebanyak  5 tetes.  Hasil  uji  dinyatakan  positif  jika  larutan berwarna jingga atau merah.
Uji Alkaloida ( Dragendorff, Mayer Test ) Sampel  sebanyak  0,05  g  dilarutkan  dalam asam  sulfat  (H 2 SO 4 )  2  N  sebanyak  2  tetes.
Campuran  tersebut  ditetesi  pereaksi  Mayer  dan Dragendorff.  Hasil  uji  dinyatakan  positif  jika dengan  pereaksi  Mayer  terbentuk  endapan  putih kekuningan, sedangkan dengan pereaksi Dragendorf  terbentuk  endapan  merah  hingga jingga.
Uji Tanin ( Braymer’s Test ) Sampel  sebanyak  0,05  g  diseduh  dengan air  panas  yang  telah  didihkan  selama  3  menit, sampel tersebut ditetesi dengan FeCl 3 1%. Hasil uji positif  jika  larutan  berwarna  biru  tua/hijau kehitaman.
UjiSteroid/Triterpenoid ( LiebermanBourchard
Test)
Sampel sebanyak 0,05 g ditambah dengan
2  mL  kloroform,  kemudian  ditetesi  dengan anhidrida  asam  asetat  sebanyak  5  tetes  dan  3  tetes asam  sulfat  pekat  (H 2 SO 4 )  2  N.  Hasil  positif  uji steroid  jika  warna  larutan  berubah  menjadi  biru, sedangkan  hasil  positif  uji  triterpenoid  jika terbentuk  warna  merah  kecoklatan  pada  lapisan permukaan sampel.
Uji Saponin ( Foam Test )
Sampel  sebanyak  0,05  g  diletakan  dalam tabung  reaksi.  Sampel  tersebut  ditambahkan  air panas  dan  kemudian  dikocok.  Busa  yang  stabil selama 30 menit dan tidak hilang pada penambahan HCl  2  N  sebanyak  1  tetes  menunjukkan  adanya kandungan saponin.

## Uji Antioksidan Ekstrak Kedelai Hitam Pembuatan Larutan Induk DPPH
Sebanyak  8  mg  serbuk  DPPH  ditimbang menggunakan  neraca  analitik,  dilarutkan  dengan menggunakan  etanol  pro  analitik  dalam  labu  ukur 50 mL. Lalu dikocok sampai homogen dan dibantu dengan menggunakan vortex (Rahmatullah, Permadi, & Utami, 2019).

## Penentuan Panjang Gelombang
Sebanyak 3 mL larutan DPPH dimasukkan dalam tabung reaksi. Tambahkan dengan etanol pro analitik sebanyak 1 mL. Lalu campuran dihomogenkan dengan menggunakan vortex. Masukkan  dalam  tabung  reaksi  dan  inkubasi selama  30  menit  pada  suhu  37 °C .  Panjang gelombang  maksimumnya  ditentukan  dengan diukur  absorbansinya  pada  panjang  200-800  nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis (Rahmatullah et al ., 2019).

## Persiapan  Larutan  Sstandar  Induk  Ekstrak Kedelai Hitam 1000 ppm
Sebanyak  50  mg  ekstrak  kedelai  hitam ditimbang menggunakan neraca analitik, dilarutkan dengan  menggunakan  etanol  pro  analitik  dalam labu ukur 50 mL sampai tanda batas.  Lalu dikocok
sampai homogen dan dibantu dengan menggunakan vortex.  Sehingga  didapatkan  larutan  induk  ekstrak kedelai  hitam  dengan  konsentrasi  1000  ppm (Andriyanti et al., 2018).

## Pembuatan  Deret  Standar  Larutan  Ekstrak Kedelai
Deret larutan ekstrak  kedelai hitam dibuat dalam  beberapa  konsentrasi,  yaitu  50,  100,  150, 200  dan  250  ppm.  Larutan  induk  ekstrak  kedelai hitam dipipet sebanyak 1,25; 2,5; 3,75; 5; 6,25 mL, lalu  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  25  mL  dan dilarutkan  dengan  etanol  pro  analitik  sampai  tanda batas.  Lalu  masing-masing  dikocok  sampai homogen  dibantu  dengan  menggunakan  vortex. Pada  masing-masing  deret  dipipet  sebanyak  1  mL, lalu  ditambahkan  3  mL  larutan  DPPH  dalam  gelas ukur,  lalu  dihomogenkan  kembali  dan  dibantu dengan menggunakan vortex. Campuran diinkubasi dengan  didiamkan  selama  waktu  optimum  (30 menit)  pada  suhu  kamar  (37°C)  (Andriyanti et  al ., 2018).

## Persiapan  Larutan  Pembanding  Induk  Vitamin C 100 ppm
Ditimbang  5  mg  vitamin  C  menggunakan neraca  analitik,  dilarutkan  dengan  menggunakan etanol  pro  analitik  dalam  labu  ukur  50  mL  sampai tanda  batas.    Lalu  dikocok  sampai  homogen  dan dibantu  dengan  menggunakan  vortex  sehingga didapatkan  larutan  induk  vitamin  C  dengan konsentrasi 100 ppm.  (Andriyanti et al ., 2018).

## Pembuatan  Deret  Standar  Larutan  Vitamin  C Sebagai Kontrol Positif
Deret  larutan  vitamin  C  dibuat  dalam beberapa  konsentrasi,  yaitu  1,  2,  3,  4  dan  5  ppm. Larutan  induk  vitamin  C  dipipet  sebanyak  0,25; 0,5; 0,75; 1; 1,25 mL, lalu masukkan ke dalam labu ukur  25  mL  dan  dilarutkan  dengan  etanol  pro analitik  sampai  tanda  batas.  Masing-masing  labu lalu  dikocok  sampai  homogen  dibantu  dengan menggunakan  vortex.  Pada  masing-masing  deret dipipet  sebanyak  1  mL,  lalu  ditambahkan  3  mL larutan DPPH dalam gelas ukur, lalu dihomogenkan  kembali  dan  dibantu  dengan menggunakan vortex. Diinkubasi dengan didiamkan selama waktu optimum (30 menit) pada suhu kamar (37°C) (Andriyanti et al ., 2018).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pernyortiran  kedelai  hitam  dilakukan secara visual. Sebanyak 1 kg kedelai hitam disortir antara  butir  rusak  dan  butir  baik,  serta  dilakukan perhitungan  terhadap  persen  (%)  butir  rusak.  Hasil penyortiran  kedelai  hitam  dapat  dilihat  pada  Tabel 1. Hasil ini dibandingkan dengan persyaratan mutu biji kedelai menurut SNI 01-3922-1995 pada Tabel 2  untuk  mengetahui  mutu  biji  kedelai  yang digunakan.
Sesuai  dengan  hasil  penyortian  yang  telah  di  dapat pada  Tabel  1 dapat  dinyatakan  bahwa  kedelai  hitam yang  digunakan  untuk  penelitian  ini  memiliki kemiripan hasil dengan persyaratan mutu IV. Namun, untuk  kategori  butir  belah  maksimum  5%,  kedelai memiliki  nilai  10%,  begitupun  pada  kategori  butir keriput  maksimum  5%,  kedelai  uji  memiliki  nilai 7,3%.  Ketidaksesuaian  ini  dapat  terjadi  karena kondisi kedelai yang diuji semakin tidak baik selama masa penyimpanan di perkebunan.
Identifikasi  tanaman  dilakukan  di  Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Cibinong, Bogor. Determinasi  dilakukan  untuk  mengetahui  kebenaran spesies  tanaman  yang  digunakan  untuk  menghindari kesalahan  terhadap  penamaan  dan  perlakuan.  Hasil determinasi  menunjukkan  bahwa  tanaman  yang digunakan  adalah  Kedelai  Hitam  ( Glycine  max (L.) Merrill).
Dari  hasil  penyortiran  didapatkan  sebanyak 859  gram  butir  baik  yang  kemudian  diserbukkan. Penyerbukan dilakukan bertujuan untuk mendapatkan luas permukaan total yang besar pada simplisia,  sehingga  kontak  simplisia  dengan pelarutnya  akan  semakin  besar,  yang  dapat meningkatkan  kadar  rutin  yang  terekstraksi  karena luasnya area kontak pelarut dengan serbuk simplisia tersebut.  Hasil  akhirnya  didapatkan  serbuk  kedelai hitam dengan ukuran partikel yang kecil.
Ekstraksi dilakukan melalui metode maserasi.  Metode  ini  efektif  untuk  mengekstraksi suatu  simplisia  yang  lembut/tidak  keras  seperti kecambah. Maserasi dilakukan selama 4 hari, dengan melarutkan serbuk kedelai hitam dengan etanol 70%. Senyawa  isoflavon/flavonoid  cocok  dengan  etanol 70%  terkait  dengan  kepolaran.  Asam  amino,  gula, alkaloid,  dlavonoid,  dan  glikosida  flavonoid  serta klorofil  terlarut  dalam  pelarut  polar  sehingga
senyawa  yang  terekstrak  dengan  pelarut  etanol  70% ini  cukup  banyak  (Mailana,  Nuryanti,  &  Harwoko, 2016).  Di  samping  itu,  pelarut  ini  efektif  dalam menghindarkan  kerusakan  senyawa  aktif  yang terkandung  dalam  simplisia  termasuk  senyawa flavonoid.
Selama  proses  maserasi  setiap  harinya terjadi  perubahan  warna  larutan  yang  berbeda-beda, semakin hari-semakin bertambah kepekatan warnanya.  Larutan  hari  pertama  berwarna  kuning terang, larutan kedua berwarna kuning sedikit jingga, larutan  ketiga  berwarna  kuning  jingga,  dan  larutan hari  ke  empat  berwarna  jingga  kecoklatan.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  setiap  harinya  selama  proses maserasi  terjadi  penarikan  senyawa-senyawa  dalam simplisia.
Ekstrak  hasil  maserasi  dikentalkan  dengan menggunakan rotary  evaporator .  Filtrat  hasil maserasi  hari  ke  empat  dipisahkan  dari  ampasnya. Setelah  terpisah,  filtrat  diproses  dengan rotary evaporator pada  suhu  40 ℃ dengan  kecepatan  80 rpm.  Suhu  ini  dapat  digunakan  karena  selain  dapat memisahkan antara uap dengan cairan, suhu ini dapat menjaga  kestabilan  senyawa  dalam  sampel.  Proses pengadukan dengan menggunakan kecepatan putaran 80 rpm untuk membantu percepatan proses distribusi solven  ke  dalam  jaringan  tanaman,  sehingga pemisahan  antara  ekstrak  dengan  pelarut  terjadi secara sempurna.
Total ekstrak kental yang didapatkan adalah 40,87  gram  dengan  nilai  %  rendemen  ekstrak  kental adalah 8,17%. Hasil ini memenuhi syarat hasil persen rendemen  kedelai  hitam  varietas  detam,  yang dinyatakan  olehHasanah,  W,  &  Sari(2019)  bahwa persen  rendemen  ekstrak  kedelai  varietas  detam adalah 8,8%.
Tabel 1. Hasil Penyortiran Kedelai Hitam
Parameter Sortir Total Keriput Warna Lain Belah Rusak Kotoran (g) (%) (g) (%) (g) (%) (g) (%) (g) (%) (g) (%) Butir Baik 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 859 85,9 Butir Rusak 73 7,3 55 5,5 10 10 3 3 0 0 141 14,1
Tabel 2. Persyaratan Mutu Biji Kedelai
Jenis uji Satuan Persyaratan I II III IV Kadar air (maksimum) % 13 14 14 16 Butir belah (maksimum) % 1 2 3 5 Butir rusak (maksimum) % 1 2 3 5 Butir warna lain (maksimum) % 1 3 5 10 Butir keriput (maksimum) % 0 1 3 5 Kotoran (maksimum) % 0 1 2 3
Metode yang digunakan pada uji kadar air ini ialah air  oven  method atau  metode  oven.  Sebelum sampel  dimasukan,  oven  dipanaskan  terlebih  dahulu hingga  suhu  100–105 °C .  Setelah  oven  panas,  cawan porselen  dimasukan  terlebih  dahulu  dan  dipanaskan selama  1  jam.  Lalu  cawan  porselen  didinginkan  di desikator  selama  30  menit  lalu  ditimbang  di  neraca analitik  dan  didapatkan  berat  37,4597  gram  (A). Cawan  porselen  setelah  ditimbang  di  tambah  sampel ekstrak  kedelai  hitam  sebanyak  5  gram,  lalu  timbang dan  didapatkan  hasil  42,4631  gram  (B).  Massa  B dikeringkan  kembali  di  dalam  oven  selama  16  jam. Hasil  yang  didapatkan  adalah  sebesar  42,0676  gram dan nilaipersen susut pengeringanadalah 7,90%.
Skrinning Fitokimia
Skrinning  fitokimia  ini  dilakukan  untuk  mengetahui kandungan senyawa yang terdapat di dalam simplisia dan ekstrak kedelai hitam (Gambar 1).
Tabel 3. Hasil Skrinning Fitokimia Golongan Senyawa Hasil Ekstrak Kedelai Hitam Flavonoid ++ Alkaloid ++ Tanin – Steroid/Triterpenoid – /+ Saponin +
Tabel  4.  Hasil  Nilai  IC ₅ ₀ Ekstrak  Kedelai  Hitam terhadap Pembanding Sampel Nilai IC50 Vitamin C (Pembanding) 3,60 Ekstrak Kedelai Hitam 220,42
(a)
(b) (c)
(d) (e)
(f)
Gambar 1. Skrinning Fitokimia: (a) Uji Flavonoid; (b) Uji Alkaloid dengan pereaksi Meyer ; (c) Uji Alkaloid dengan pereaksi Dragendorff; (d) Uji Tanin; (e) Uji Trterpenoid; dan (f) Uji Saponin.
Berdasarkan hasil skrinning fitokimia pada Tabel 3 ekstrak  kedelai  hitam  diketahui  mengandung senyawa  flavonoid,  alkaloid,  triterpenoid,  dan saponin.  Hasil  skrinning  penelitian  ini  memiliki kemiripan  dengan  hasil  peneliti  sebelumnya  yang dilakukan  (Yanti,  Purba,  &  Djamil,  2019) menyatakan bahwa biji kacang kedelai memperoleh hasil  positif  pada  senyawa  flavonoid,  alkaloid, triterpenoid,  saponin,  serta  hasil  negatif  pada senyawa tanin dan steroid.
Kandungan  senyawa  flavonoid,  alkaloid, dan  saponin  merupakan  kandungan  senyawa  pada tanaman  yang  dapat  mendukung  adanya  fungsi antioksidan  pada  tanaman  tersebut.  Senyawa triterpenoid  hasil  uji  skrinning  pada  senyawa triterpenoid menunjukkan hasil positif menyatakan bahwa  senyawa  triterpenoid  yang  dapat  dijumpai pada  tumbuhan  diketahui  berfungsi  sebagai pelindung  untuk  menolak  serangga  dan  serangan mikroba (Firdayani & Winarni Agustini, 2015).
Senyawa flavonoid merupakan kelompok senyawa  bioaktif  yang  banyak  terkandung  dalam tubuh hewan maupun tumbuhan. Senyawa bioaktif ini  memiliki  berbagai  manfaat  bagi  kehidupan manusia,  di  antaranya  dapat  dijadikan  sebagai sumber  antioksidan,  antibakteri,  antiinflamasi  dan antikanker. Kedelai hitam juga memiliki kandungan isoflavon (golongan flavonoid). Isoflavon merupakan suatu zat dalam kedelai yang yang mempunyai kemampuan sebagai antioksidan serta dapat mencegah kerusakan  yang diakibatkan oleh radikal bebas (Fawwaz etal ., 2017). Senyawa flavonoid  yang  terkandung  dalam  kedelai  hitam adalah  isoflavon,  senyawa  isoflavon  di  antaranya adalah  aglikon  (daidzein,  gycitein,  genistein)  dan glikosida  (daidzin,  gycitin,  genistin)  (Hasanah et al .,  2019).  Hasil  uji  skrinning  ekstrak  kedelai hitam pada senyawa  flavonoid menunjukkan hasil positif  adanya  senyawa  flavonoid.  Hasil  positif ditunjukan  dengan  perubahan  warna  jingga kemerahan atau jingga pada larutan uji.
Senyawa saponin pada uji ini menunjukkan  hasil  positif  adanya  senyawa saponin.  Senyawa  saponin  banyak  terkandung  di dalam tumbuhan. Sesuai penelitian yang dilakukan terdahulu  juga  dinyatakan  bahwa  hasil  skrinning biji  kacang  kedelai  menunjukkan  positif  adanya saponin.  Saponin  termasuk  dalam  golongan fenolik  yang  diduga  dapat  menghambat  radikal bebas (Firdayani & Winarni Agustini, 2015).
Hasil  positif  skrinning  fitokimia  ini menjadi rujukan awal yang mendukung kemungkinan  adanya  aktivitas  antioksidan  dari ekstrak  kedelai  hitam.  Senyawa-senyawa  tersebut dapat  memiliki  potensi  sebagai  antioksidan  alami yang dapat menangkal radikal bebas.

## Aktivitas Antioksidan
Uji  antioksidan  pada  ekstrak  kedelai hitam  dilakukan  dengan  menggunakan  metode
DPPH.  Sampel  dibuat  dengan  konsentrasi  1000 ppm.  Kemudian  deret  standar  dibuat  pada  5  deret konsentrasi  yakni 50, 100, 150, 200 dan 250 ppm untuk menentukan persen inhibisi terhadap DPPH. Panjang gelombang atau lamda maksimum DPPH yang didapatkan yakni 525 nm. Setelah mendapatkan  data  absorbansi  dan  menghitung  % inhibisi pada ekstrak kemudian dilakukan perhitungan  nilai  IC 50 dengan  memasukan  nilai konsentrasi sebagai nilai X dan % inhibisi sebagai nilai Y (Tabel 4).
Berdasarkan data yang diperoleh, didapatkan  persamaan  regresi  linear  vitamin  C sebagai kontrol positif atau pembanding yakni y = 20,454  +  8,204x  dengan  nilai  IC ₅ ₀ sebesar  3,60 ppm.  Kemudian,  didapatkan  pula  regresi  linear ekstrak kedelai hitam yakni y = 10,795 + 0,17786x dengan nilai IC 50 sebesar 220,42 ppm.
Berdasarkan  hasil  ini  dan  dilihat  pada Tabel  5, dapat  dinyatakan  bahwa  ekstrak  kedelai hitam  memiliki  sifat  antioksidan.  Meskipun demikian  aktivitas  antioksidan  pada  esktrak kedelai  hitam  jauh  lebih  rendah  dibandingkan dengan aktivitas vitamin C.
Tabel 5. Intensitas Antioksidan
Intesitas Antioksidan Nilai IC 50 Sangat Kuat < 50 ppm Kuat 50-100 ppm Sedang 100-250 ppm Lemah 250-500 ppm
Kekuatan  intensitas  IC ₅₀ sebesar  220,42 ppm  menunjukkan  bahwa  ekstrak  kedelai  hitam termasuk  dalam  antioksidan  sedang.  Pengukuran aktivitas  antioksidan  dapat  dipengaruhi  oleh beberpa  hal,  di  antaranya  metode  ekstraksi  yang digunakan.  Selain  itu,  juga  dapat  disebabkan  oleh kondisi  operasi  saat  proses  ekstraksi  yang digunakan  di  antaranya  volume  pelarut,  ukuran partikel serbuk simplisia, waktu ekstraksi, suhu dan pelarut  yang  digunakan  (Firdayani  &  Winarni Agustini,  2015).    Penelitian  sebelumnya  yang  di lakukan oleh (Az-Zahrah, 2011)menyatakan bahwa ekstrak etil asetat kedelai ( Glycine max Linn. Merr) menggunakan metode DPPH memberikan nilai IC 50 sebesar  211,7  ppm.  Perbedaan  varietas  kedelai hitam  dapat  dianggap  mempengaruhi  perbedaan hasil  nilai  IC ₅₀ yang  diperoleh,  karena  kedelai memiliki 8 varietas lain selain detam 1.

## KESIMPULAN
Hasil  uji  antioksidan  menunjukkan bahwa  ekstrak  kedelai  hitam  memiliki  aktivitas antioksidan yang tergolong sedang dengan nilai IC 50 sebesar 220,42 ppm. Nilai ini menunjukkan adanya  aktivitas  dari  kedelai  hitam  sehingga dapat  dilakukan  pembuatan  sediaan  anti-aging dari  kedelai  hitam.  Untuk  meningkatkan
kekuatan  antioksidan  pada  sediaan  dapat dilakukan  penambahan  bahan  alam  antioksidan lain  yang  memiliki  manfaat  tambahan  dalam sediaan.

## DAFTAR PUSTAKA
Adie,  M.  M.,  &  Krisnawati,  A.  (2007).  Biologi Tanaman Kedelai. Balai Penelitian Kacang-Kacangan  Dan  Umbi-Umbian, Malang.
Andriyanti,  P.,  Indriati,  D.,  &  Wardatun,  S.  (n.d.). Uji  Antioksidan  Sediaan  Sugar Body Scrub yang Mengandung Katekin Gambir
( Uncaria  gambir  (Hunter)  Roxb )  dan
Essensial Oil Jeruk Nipis ( Citrus aurantifolia L. ) dengan Metode DPPH. 1– 5.
Az-Zahrah,  F.  (2011).  Uji  Aktivitas  Antiradikal Bebas  Ekstrak  Etil  Asetat  Kedelai ( Glycine max Linn. Merr) dengan Metode DPPH. Skripsi .
Dajanta,  K.,  Janpum,  P.,  &  Leksing,  W.  (2013).
Antioxidant  Capacities,  Total  Phenolics and  Flavonoids  in  Black  and  Yellow Soybeans  Fermented  by  Bacillus  subtilis: A  Comparative  Study  of  Thai  Fermented Soybeans  ( thua  nao ). International  Food Research Journal , Vol. 20(6) . Fauzi,  A.  R.,  &  Nurmalina,  R.  (2012). Merawat Kulit dan Wajah . Jakarta: PT. Elex Media Komputindo.
Fawwaz,  M.,  Muliadi,  D.  S.,  &  Muflihunna,  A. (2017).  Kedelai  Hitam  ( Glycine  soja ) Terhidrolisis  Sebagai  Sumber  Flavonoid Total. Jurnal  Fitofarmaka  Indonesia . https://doi.org/10.33096/jffi.v4i1.227
Firdayani,  F.,  &  Winarni  Agustini,  T.  (2015).
Ekstraksi Senyawa Bioaktif sebagai
Antioksidan  Alami  Spirulina  Platensis
Segar  dengan  Pelarut  yang  Berbeda. Jurnal  Pengolahan  Hasil  Perikanan Indonesia , 18 (1), 28–37.
https://doi.org/10.17844/jphpi.2015.18.1.2 8
Ginting,  E.,  &  Tastra,  I.  K.  (2016).  Standar  Mutu
Biji  Kedelai. Kedelai:  Teknik  Produksi Dan Pengembangan , (i)444 - 463 . Harborne,  J.  B.  (1987). Metode  Fitokimia:
Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan ,  diterjemahkan  oleh  Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro.
Penerbit ITB, Bandung .
Hasanah,  S.  U.,  W,  D.  P.,  &  Sari,  N.  N.  (2019). Total  Flavonoid  Levels  in  Various Varieties of Soybean Seeds ( Glycine Max ) in  Indonesia. Www.Journal.Uniga.Ac.Id , 132–138.
Hertina,  T.  N.,  &  Dwiyanti,  S.  (2013).
Pemanfaatan  Ampas  Kedelai  Putih  dan
Ampas Kopi Dengan Perbandingan
Berbeda Dalam Pembuatan Lulur
Tradisional  Untuk  Perawatan  Tubuh. Universitas Negeri Surabaya . Joe, W. (2011). 101++ Keajaiban Khasiat Kedelai (1st  ed.;  B.  R.  W,  editors.).  Yogyakarta: CV. ANDI OFFSET.
M, V. P., Pakki, E., & Mirawati. (2016). Formulasi Lulur Krim yang Mengandung Kombinasi Yoghurt  dan  Pati  Beras  Hitam  ( Oryza sativa L .). Asy-Syifa , 08 (2) . Markham,  K.  R.  (1988). Cara  Mengidentifikasi Flavonoid . Bandung: ITB.
Mercy Uwem,  U. (2017). Proximate  Composition, Phytoconstituents  and  Mineral  Contents of  Soybean  ( Glycine  Max )  Flour  Grown and  Processed  in  Northern  Nigeria.
Advances
in Applied Sciences .
https://doi.org/10.11648/j.aas.20170204.1 2
Mueller,  N.  T.,  Odegaard,  A.  O.,  Gross,  M.  D., Koh,  W.  P.,  Yu,  M.  C.,  Yuan,  J.  M.,  & Pereira,  M.  A.  (2012).  Soy  Intake  and Risk  of  Type  2  Diabetes  Mellitus  in Chinese  Singaporeans:  Soy  Intake  and Risk  of  Type  2  Diabetes. European Journal of Nutrition . https://doi.org/10.1007/s00394-011-0276-
2
Muliyawan, D., & Suriana, N. (2013). A-Z tentang kosmetik .  Jakarta:  PT.  Elex  Media Komputindo.
Ningsi,  S.,  Nonci,  F.  Y.,  &  Sam,  R.  (2015). Formulasi  Sediaan  Lulur  Krim  Ampas Kedelai  Putih  dan  Ampas  Kopi  Arabika. Jf Fik Uinam , 3(1) 1 - 4 .
Putri, A. A. ., & Hidajati, N. (2015). Uji Aktivitas Antioksidan  Senyawa  Fenolik  Ekstrak Metanol  Kulit  Batang  Tumbuhan  Nyiri Batu  ( Xylocarpus  moluccensis ). Unesa Journal of Chemistry , 4 (1), 37–42.
Rahmatullah,  S.,  Permadi,  Y.  W.,  &  Utami,  D.  S.
(n.d.).  Formulasi  dan  Uji  Aktivitas Antioksidan  Sediaan Hand  and  Body Lotion Ekstrak  Kulit  Nanas  ( Ananas comosus (L.)  Merr)  dengan  Metode DPPH. Jf Fik Uinam , 7 . Salim,  E.  (2012). Kiat  Cerdas  Wirausaha  Aneka Olahan  Kedelai (I;  Th.  Arie  Prabawati, editors.). Yogyakarta: Lily.
Sari,  M.  I.  (2018).  Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Kulit  Bawang  Merah (Allium ascalonicum  L.,) dengan  Metode  DPPH (2,2-Diohenyl-1-Picrylhydrazyl)) . Sayuti,  K.,  &  Yenrina,  R.  (2015).  Antioksidan Alami  dan  Sintetik,  Andalas  University Press. In  Andalas  University  Press . Padang:  Asosiasi  Penerbit  Perguruan Tinggi Indonesia (APPTI).
Syamsuni.  (2006). Farmasetika  Dasar  dan Hitungan Farmasi . Jakarta: Buku
Kedokteran EGC. Yanti,  L.  N.,  Purba,  A.  V.,  &  Djamil,  R.  (2019). Pengembangan  Sediaan  Krim  Pencerah Kulit  dari  Kombinasi  Ekstrak  Rimpang Temulawak ( Curcuma Xanthorrhiza Roxb)  dan  Ekstrak  Biji  Kacang  Kedelai ( Glycine  Max (L.)  Merill). Buletin Penelitian  Kesehatan , 47 (1),  55–66. https://doi.org/10.22435/bpk.v47i1.1385