Identifikasi Metabolit Sekunder dan Uji Proksimat Ekstrak Daging Keong Mas ( Pomacea canaliculata L.)
Identification of Secondary Metabolites and Proximate Analysis of Golden Apple Snails (Pomacea canaliculata L . ) Meat Extract
Dina Dyah Saputri *) , Meilisha Putri Pertiwi Prodi Pendidikan Biologi, FKIP, Universitas Pakuan, Bogor
* E-mail: dina.dyah@unpak.ac.id

## ABSTRACT
The growth of golden apple snails is very rapid and causes losses of paddy production. Therefore snails are also called pest, especially agricultural pest. Control of golden apple snails can be done by  physical  hand  sorting  and  then  processed  into  animal  feed.  Based  on  research  golden  apple snails proven have good nutritional content. Efforts to use golden apples nails pets become useful things  such  as  animal  feed  is  a  sustainable  conservation.  Therefore,  this  study  aims  to  carry  out secondary  metabolites  identification,  proximate  testing,  and  antioxidant  content  of  golden  apple snails as an initial reference  for the basic  ingredients of animal  feed  manufacturing. The  method use is hand sorting of golden apple snails at the research location, then brought to the laboratory to carry  out  the  process  of  secondary  metabolites  identification,  proximate  testing,  and  antioxidant analysis.  The  results  showed  a  golden  apple  snails  ( Pomacea  canaliculata L.)  extract  containing active  compunds  of  alkaloids,  flavonoids,  tannins  and  polyphenols,  steroids,  and  glycoside. Proximate analysis showed that golden apple snails extract had a high protein content of 40,83% compared to carbohydrates and fats. These findings suggested that golden apple snailsmeat extract has the potential to be further utilized as an alternative feed for Pangasius sp.
Keywords: golden apple snails. Pangasius sp., proximate testing, secondary metabolites.

## PENDAHULUAN
Keong  mas, Pomacea  canaliculata dan P. insularum merupakan  spesies  introduksi  yang merusak  persawahan  di  Asia  (Marwoto  &
Isnaningsih, 2011). Keong ini telah terdistribusi luas di Asia Selatan. Diduga keong ini  diintroduksi  ke  Indonesia  dari  Malaysia (Rawlings et al ., 2007).
Keong  mas  merupakan  satu-satunya  keong air  tawar  yang  termasuk  daftar  100  hama berbahaya dan sulit
dikendalikan pertumbuhannya  (Joshi,  2007).  Populasinya terus  meningkat  dalam  jangka  waktu  yang relatif cepat, sehingga kerusakan tanaman padi yang  disebabkan  oleh  hama  keong  mas  juga berlangsung  dalam  kurun  waktu  yang  sangat cepat.  Salah  satu  usaha  pengendalian  hama keong mas adalah dengan cara mengolahnya.
Selama ini, ada anggapan bahwa keong mas hanyalah  hama  yang  tidak  menguntungkan. Namun, pandangan tersebut tidak benar  secara keseluruhan.  Kandungan  gizi  keong  mas diketahui  mengandung  asam  lemak  omega  3, omega 6, dan omega 9, sehingga penggunaannya  baik  untuk  pakan  ikan  air tawar  (Edo et  al .,  2019).  Pemberian  pakan berbasis  protein  keong  mas  pada  pakan  ikan gabus  (Hidayat et  al .,  2013),  pakan  udang
vannamae (Anggraini et al ., 2018; Agustono et al .,  2019),  dan  pakan  bebek  (Subhan et  al ., 2015)  memberikan  pertumbuhan  yang  baik pada hewan-hewan budidaya tersebut.
Kandungan nutrisi dan kandungan antioksidan  yang  tinggi  pada  keong  mas menunjukkan  bahwa  keong  mas  sangat berpotensi  untuk  dimanfaatkan  sebagai  bahan baku  produk  pakan  ikan  budidaya,  salah satunya  ikan  patin  pasupati  ( Pangasius sp.) yang dikenal bernilai ekonomis tinggi. Dagingnya  yang  berwarna  putih,  tekstur lembut,  gurih,  serta  laju  pertumbuhan  yang cepat  menjadi  nilai  ekspor  yang  tinggi (Gustiano et al ., 2016).
Ikan  patin  memiliki  nilai  budidaya  yang tinggi.  Kebutuhan  ikan  patin  yang  semakin meningkat  dalam  memenuhi  kebutuhan  gizi dan  protein  guna  mempertahankan  ketahanan pangan  lokal  sejalan  dengan  target  pemerintah dalam  produksi  ikan  patin  sebanyak  333.000 ekor dari tahun 2020 hingga 2024 (Kementerian  Kelautan  dan  Perikanan,  2020). Pertumbuhan  ikan  yang  optimal  serta  kualitas daging  ikan  yang  baik  akan  terpenuhi  dengan pemberian pakan nutrisi yang tepat (Poernomo et  al .,  2015).  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui kandungan metabolit  sekunder  serta  kadar  karbohidrat,
protein,  lemak,  abu,  dan  air  pada  ekstrak daging keong mas sebagai informasi dasar bagi pemanfaatan  ekstrak  daging  keong  mas  secara optimal  dalam  pengembangan  produk  pakan ikan patin.

## METODE
Ekstraksi keong mas ( Pomacea canaliculata ) Sampel  keong  mas  berasal  dari  area  sawah  Desa Sukaharja,  Kecamatan  Cijeruk,  Kabupaten  Bogor. Tahap  ini  menggunakan  3  jenis  pelarut  yaitu  etanol 70%,  etil  asetat,  dan  kloroform.  Simplisia  berupa daging  keong  mas  dimaserasi  sebanyak  100  gram dengan  pelarut  etanol  70%,  etil  asetat  96%,  dan kloroform 98% dengan perbandingan bahan : pelarut yaitu  1:10  selanjutnya  disimpan  pada  suhu  ruang selama  5x24  jam  (Amanda  &  Kurniaty,  2017) selanjutnya  dilakukan  penyaringan  sampel.  Filtrat yang  didapatkan  dari  hasil  penyaringan  dievaporasi menggunakan  rotavapor  pada  temperatur  60  °C untuk  menguapkan  dan  mendapatkan  ekstrak  pekat (berbentuk  pasta).  Rendemen  didapatkan  dengan menimbang  ekstrak  pekat  ( Association  of  Official Analytical    Chemists ,  2016).  Perhitungan  rendemen ditentukan dengan rumus : hi    h h .
Identifikasi kualitatif metabolit sekunder ekstrak keong mas ( Pamocea canaliculata ) Prosedur  identifikasi  metabolit  menurut  Paterson, (1999),  meliputi  identifikasi  flavonoid,  alkaloid, saponin, steroid, tanin dan polifenol, serta glikosida.

## Uji flavonoid
Ekstrak ditimbang sebanyak dua gram. Pereaksi HCl pekat  digunakan  dalam  pengujian.  Sebanyak  dua tetes  HCl  pekat  dimasukkan  ke  sampel  ekstrak. Kemudian  ekstrak  dikocok  dengan  kuat  dan ditambahkan Mg serbuk. Pengocokan dilakukan lagi dengan  kuat.  Indikasi  sampel  uji  memiliki kandungan  flavonoid  dengan  pereaksi  HCl  pekat yaitu  perubahan  warna  buih-buih  dan  larutan menjadi jingga (Paterson, 1999).

## Uji alkaloid
Ekstrak ditimbang dan dipindahkan kedalam tabung A  dan  B,  masing-masing  sebanyak  dua  gram. Ditambahkan  pereaksi  Dragendorff  dan    Wagner pada  tabung  A  dan  B.  Indikasi  tabung  A  memiliki kandungan  alkaloid  yaitu  terbentuknya  endapan kemerahan.  Sementara  tabung  B  ditandai  dengan terbentuknya endapan kecoklatan (Paterson, 1999).

## Uji saponin
Sampel  ditimbang  seberat  dua  gram.  Setelah  itu ditambahkan  2  tetes  HCl  2N.  Kemudian  sampel dikocok  dengan  kuat.  Sampel  didiamkan  selama  10 menit  dan  diamati  apakah  buih-buih  terbentuk setelahnya.  Indikasi  sampel  memiliki  kandungan saponin  yaitu  banyaknya  buih-buih  yang  terbentuk dan bertahan hingga 10 menit (Paterson, 1999).

## Uji steroid
Sampel  ditimbang  seberat  dua  gram.  Lalu,  sampel dilarutkan  dengan  etanol  70%,  etil  asetat,  dan kloroform  (1:1)  di  dalam  masing-masing  tabung reaksi. Selanjutnya ekstrak diteteskan pada plat tetes sejumlah  dua  kali.  Ekstrak  dibiarkan  hingga mengering.  Kemudian  ditambahkan  satu  tetes  asam sulfat  pekat.  Indikasi  sampel  memiliki  kandungan steroid  yaitu  terjadi  perubahan  warna  menjadi  biru, ungu, atau hijau (Paterson, 1999).

## Uji tanin dan polifenol
Satu  ml  larutan  Fe(III)  klorida  10%  ditambahkan dengan  dua  gram  ekstrak.  Indikasi  sampel mengandung  tanin  dan  polifenol  yaitu  terjadinya perubahan  warna  menjadi  biru  tua,  biru  kehitaman, atau hitam kehijauan (Paterson, 1999).

## Uji glikosida
Reaksi Lieberman-Buchard digunakan untuk pengujian  glikosida.  Masing-masing  dua  gram ekstrak  pekat  dilarutkan  dalam  pelarut  etanol  70%, etil  asetat,  dan  kloroform.  Selanjutnya,  proses penguapan  dilakukan  di  atas  penangas  air. Kemudian, dilakukan pelarutan dengan ditambahkan 5  ml  (CH 3 CO) 2 O  serta  H 2 SO 4 pekat  sebanyak  10 tetes.  Indikasi  positif  yaitu  warna  biru  atau  hijau yang terbentuk pada sampel (Paterson, 1999).

## Uji proksimat ekstrak etil asetat keong mas
Hasil  identifikasi  metabolit  dipilih  ekstrak  yang paling  banyak  mengandung  komponen  bioaktif diantaranya  alkaloid,  flavonoid,  steroid,  tanin  dan polifenol  yaitu  ekstrak  etil  asetat.  Uji  proksimat dilakukan terhadap 10 gram ekstrak etil asetat untuk mengetahui  kandungan  gizi  dalam  ekstrak  keong mas.

## Kadar abu
Pengeringan  cawan  porselen  menggunakan  oven pada temperatur 105ºC selama 60 menit, selanjutnya diletakkan  dalam  eksikator  selama  15  menit  untuk proses pendinginan. Setelah dingin cawan ditimbang sampai  didapatkan  massa  tetap.  Lima  gram  ekstrak diletakkan dalam cawan porselen kemudian dipanaskan  di  atas  api  hingga  tidak  muncul  asap. Kemudian  dimasukan  ke  dalam muffle  furnace dengan  temperatur  600ºC  selama  60  menit,  setelah itu  ditimbang  sampai  didapatkan  massa  tetap. Persentase .. kadar .. abu .. dihitung
menurut Association of Official Analytical Chemists (2016).

## Kadar air
Cawan  porselen  dikeringkan  selama  60  menit  di dalam  oven  pada  suhu  105ºC  untuk  menentukan kadar  air.  Selanjutnya  cawan  didinginkan  dengan dimasukkan  pada  eksikator  selama  15  menit kemudian  ditimbang.  Lima  gram  sampel  diletakkan pada  cawan  kemudian  dikeringkan  dengan  oven selama  5  jam  pada  temperatur  105ºC  selanjutnya ditimbang. Cawan berisi sampel ekstrak didinginkan pada  eksikator  dan  selanjutnya  kembali  ditimbang. Nilai kadar air dihitung menurut AOAC (2016).
Kadar air (%) = -
Keterangan: a = berat sampel awal (g) b = berat sampel setelah didinginkan (g)

## Kadar lemak
Analisis  kadar lemak  menggunakan metode Soxhlet menurut  Santi et  al .  (2012).  Dua  gram  sampel diekstraksi  dengan  n-heksana  selama  6  jam menggunakan  soxlet.  Proses  penguapan  hasil ekstraksi dilakuan. Selanjutnya dilakukan pengeringan  menggunakan  oven  pada  suhu  105 ⁰ C. Untuk  durasi  15  menit,  sampel  diletakkan  di eksikator. Penimbangan  dilakukan hingga mencapai berat konstan.

## Kadar protein
Analisis  kadar  protein  dilakukan  dengan  metode Kjedahl  menurut  Santi et  al .  (2012) . Labu Erlenmeyer  diisi  dengan  0,1  gram  sampel,  1  gram katalis, 2,5 ml H 2 SO 4 pekat, dan bebeapa butir batu didih.  Larutan  dikocok  sampai  homogen  dan menghasilkan  larutan  jernih  kemudian  didinginkan. Hasil  destruksi  ditambahkan  15 ml  NaOH  50%  dan dimasukkan  ke  dalam  alat  destilasi.  Indikator mengsel sebanyak 2-4 tetes ditambahkan dengan  25 ml  HCl  0,02  N  dimasukkan  dalam  Erlenmeyer. Bagian ujung alat destilasi berupa tabung kondensor dimasukkan  ke  larutan  HCl.  Volume  larutan mencapai  dua  kali  volume  awal  selama  destilasi terjadi.  Pembilasan  dengan  akuades  dilakukan terhadap  ujung  kondensor  yang  terendam  HCl  dan ditampung  dengan  Erlenmeyer.  Perubahan  warna menjadi  ungu  akan  terjadi  setelah  proses  titrasi larutan  dengan  NaOH  0,02  N.  Kemudian  dilakukan penetapan blanko.
Pengukuran  kadar  protein  kasar  (%)  dapat dihitung menggunakan rumus Santi et al . (2012) . kadar protein kasar (%) =
( - )
Keterangan : a   = ml NaOH untuk titrasi blanko b   = ml NaOH untuk titrasi sampel
N  = normalitas NaOH
W = berat sampel (g) (Santi et al ., 2012)

## Kadar karbohidrat by difference
Analisis kadar karbohidrat dengan metode Anthrone menurut Santi, et al . (2012) . Kadar karbohidrat (%) ditentukan dengan  rumus Santi, et al . (2012) . : Kadar karbohidrat (%) = 100% - (A + B + C + D) Keterangan : A = Kadar air B = Kadar abu C = Kadar lemak D = Kadar protein

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Rendemen daging keong mas
Rendemen  adalah  perbandingan  berat  ekstrak kering  yang  dihasilkan  dengan  berat  bahan baku (Senduk et al., 2020). Ekstrak keong mas yang  digunakan  pada  setiap  pelarutnya  yaitu sebanyak 100 gram. Berdasarkan hasil pengukuran,  rendemen  ekstrak  kloroform daging  keong  mas  sebesar  48,67%,  rendemen ekstrak  etil  asetat  daging  keong  mas  sebesar 56,95%,  dan  rendemen  ekstrak  etanol  70% daging  keong  mas  yaitu  27,28%.  Tingginya nilai  rendemen  mengindikasikan  banyaknya komponen  bioaktif  yang  mampu  diekstraksi oleh  etil  asetat  (Akerina et  al., 2015). Pernyataan  di  atas  juga  didukung  oleh penelitian  Karmilah et  al. (2019)  yang menyatakan  bahwa  ekstrak  etil  asetat  gonad landak  laut  memiliki  rendemen  yang  tinggi dengan kandungan saponin dan steroid.
Identifikasi  metabolit  sekunder  ektsrak daging keong mas ( Pomacea canaliculata ) Identifikasi  metabolit  sekunder  merupakan salah  satu  upaya  untuk  menganalisis  golongan senyawa  yang  terkandung  dalam  satu  sampel (Wijaya et  al .,  2015)  sebagai  antibiotik, antioksidan,  dan  antikanker  (Atmoko  & M ’ uf,  2  9).  Pengujian  parameter  steroid, alkaloid, saponin, flavonoid, tanin dan polifenol,  serta  glikosida  dengan  sejumlah pereaksi dilakukan dilakukan
guna menganalisis  golongan  senyawa  dalam  ekstrak daging keong mas. Pengujian positif diindikasikan  dengan  terjadinya  perubahan warna sesuai ketentuan masing-masing parameter.  Proses  pengujian  menggunakan pelarut  etanol  70%,  etil  asetat,  dan  kloroform (Tabel 1).
Tabel  1.  Hasil  identifikasi  kualitatif  metabolit
sekunder ekstrak daging keong mas Kandungan kimia Ekstrak daging keong mas Etanol 70% Etil Asetat Kloroform Alkaloid - + + Flavonoid - + - Tanin & polifenol + + + Saponin - - - Steroid - + - Glikosida + + +

## Identifikasi alkaloid
Adanya  kandungan  alkaloid  di  dalam  ekstrak daging  keong  mas  diindikasikan  dengan terbentuknya  endapan  pada  pereaksi  Mayer,
Wagner,  dan  Dragendorff.  Reaksi  positif  ini ditunjukkan  pada  ekstrak  etil  asetat  dan kloroform.  Larutan  HCl  (asam)  ditambahkan karena  sifat  basa  alkaloid  sehingga  perlu dilakukan  ekstraksi  dengan  pelarut  asam. Berdasarkan  uji  Mayer,  adanya  alkaloid ditandai  dengan  terbentuknya  endapan  coklat. Sementara  itu,  berdasarkan  uji  Dragendorff adanya  alkaloid  ditandai  dengan  terbentuknya warna jingga. Selain itu, juga terdapat endapan putih hasil bentukan kompleks kalium-alkaloid (Marliana et al., 2005). Terbentuknya endapan coklat  pada  uji  Wagner  menunjukkan  bahwa sampel  positif  mengandung  alkaloid.  Endapan ini disebut kalium-alkaloid. Warna coklat yang terbentuk  dari  ion  I 3 merupakan  hasil  reaksi iodin  dengan  ion  dari  KI.  Berdasarkan  uji Dragendorff, adanya kandungan alkaloid ditandai  dengan  terbentuknya  warna  jingga. Pelarutan bismuth nitrat (ketika proses pembuatan  pereaksi  Dragendorff)  di  dalam HCl  dilakukan  guna  menghindari  reaksi hidrolisis. Hal ini bersifat preventif karena sifat garam-garam bismuth yang mudah terhidrolisis (Svehla, 1985).
Berdasarkan  penelitian  Abdullah et  al., (2017)  diketahui bahwa ekstrak aseton pigmen telur  keong  mas  mengandung  senyawa  aktif alkaloid,  flavonoid,  steroid,  dan  triterpenoid dan  pada  ekstrak  metanol  terkandung  alkaloid dan  saponin.  Alkaloid  secara  alami  dapat disintesis  oleh  berbagai  jenis  organisme termasuk  hewan,  tanaman,  bakteri,  dan  fungi (Abdullah et  al., 2017).  Alkaloid  banyak menunjukkan aktivitas farmakologis dan fisiologis  yang banyak  memiliki  manfaat. Ikan nila merah ( Oreochromis niloticus ) yang diberi pakan  produk  komersil  dengan  isokuinolin alkaloid  dengan  dosis  25,  50,  75,  dan  100 mg/kg selama 60 hari menunjukkan peningkatan  yang  signifikan  (P<0,05)  dalam rata-rata  pakan  harian,  pertambahan  berat, SGR,  dan  total  kadar  leukosit  (Chakraborty et al., 2013).

## Identifikasi flavonoid
Identifikasi  flavonoid  menunjukan  warna jingga  yang  berarti  positif  mengandung flavonoid. Terbentuknyagelembung-gelembung gas  H 2 akibat  dari  reaksi  magnesium  dengan HCl. Tujuan digunakannya logam Mg dan HCl pekat  yaitu  terjadi  proses  reduksi  inti benzopiron  pada  struktur  flavonoid.  Proses inilah  yang  membuat  terbentuknya  perubahan warna  menjadi  jingga  (Tiwari et  al .,  2011). Hasil uji ekstrak daging keong mas
menunjukan  bahwa  ekstrak  etil  asetat  keong mas positif mengandung flavonoid.

## Identifikasi tanin dan polifenol
Identifikasi  tanin  dan  polifenol  menggunakan pereaksi FeC1 3 . Identifikasi tanin dan polifenol pertama  dilakukan  dengan  menambahkan FeC1 3 10%.  Gugus  hidroksil  pada  tanin menyebabkan  terjadinya  perubahan  warna menjadi biru tua atau biru kehitaman  (Sangi et al .,  2012;  Artini, et  al ,  2013).  Berdasarkan pengujian  yang telah dilakukan, semua sampel ekstrak  yaitu  etanol  70%,  ekstrak  etil  asetat, dan  ekstrak  kloroform  memiliki  kandungan tanin dan polifenol.
Penggunaan  tanin  sebagai  bahan  tambahan pakan  ruminan  dalam  kadar  rendah  dapat meningkatkan  efisiensi  mikroba  dalam  rumen, memiliki efek antioksidan, dan dapat melindungi sel terhadap bahan toksik (Makkar , 2003).  Selain  itu,  pemberian  tanin  kayu chestnut (0,20%)  juga  dapat  mempercepat pertumbuhan  dan  mengurangi  kematian  ayam pedaging (Schiavone et al., 2008). Penambahan ekstrak  buah  delima  yang  kaya  polifenol  dan antioksidan  dapat  berpotensi  meningkatkan sistem  imun  dan  kesehatan  ternak  ruminan (Shabtay et al., 2008; Oliviera et al., 2010).

## Identifikasi saponin
Kandungan saponin pada ekstrak daging keong mas  diuji  dengan  menggunakan  uji  Forth.
Penambahan HCl 1N mengakibatkan terbentuknya buih yang bertahan ada hingga 10 menit.  Kemampuan  hidrolisis  glikosida  yang terpecah  menjadi  glukosa  dan  senyawa  lain sehingga menimbulkan buih dalam air pada uji Forth  (Marliana et  al .,  2005).  Pada  uji  ekstrak daging  keong  mas  dengan  ketiga  pelarut  tidak menunjukan  adanya  buih  yang  konsisten sehingga  menandakan  bahwa  ekstrak  daging keong mas negatif mengandung saponin.
Saponin merupakan komponen aktif permukaan dan bersifat seperti sabun dan dapat dideteksi berdasarkan
kemampuannya membentuk  busa  (Apri,  2014).  Senyawa saponin  bersifat  polar  menunjukkan  hasil positif pada pelarut aseton saja (Firdiyani et al., 2015). Skrining fitokimia S. platensis menunjukkan  positif  adanya  saponin  hanya pada  pelarut  polar  saja  (Shalaby  &  Sanaa, 2012).
Identifikasi steroid Kemampuan
suatu senyawa dalam memunculkan  warna  asam  sulfat  pekat  pada pelarut  asetat  anhidrida  merupakan  dasar  dari
identifikasi  steroid  (Sangi et  al .,  2012).    Hasil yang  diperoleh  pada  ekstrak  etil  asetat  keong mas  positif  mengandung  steroid  ditunjukan dengan adanya perubahan warna hijau.

## Identifikasi glikosida
Hasil  positif  ini  pengujian  glikosida  ditandai dengan  batas  cairan  bercincin  ungu  sesudah diberi H 2 SO 4 pekat. Sementara itu, warna hijau yang terbentuk menandakan kandungan senyawa  non  gula  (Jannah et  al .,  2017). Ekstrak daging keong mas merupakan senyawa non  gula  dan  positif  mengandung  glikosida dengan  terbentuknya  warna  hijau  pada  ekstrak etanol  70%,  ekstrak  etil  asetat  dan  ekstrak kloroform  keong  mas.  Penelitian  Reyaz et  al. (2019) menyebutkan bahwa ekstrak temulawak yang  dimasukkan  ke  dalam  pakan  ikan  dapat meningkatkan  proses  biokimia  dan  hematologi dalam  darah  ikan Labeo  rohita .  Ikan  yang diberi  pakan  herbal  menunjukkan  peningkatan sel darah merah, darah putih, protein serum dan globulin  yang  signifikan  serta  memperbaiki gangguan  enzim  hepatik  yang  dianggap sebagai  tanda  perbaikan  status  kesehatan.  Hal ini  dapat  dikarenakan  adanya  komponen  aktif yaitu  karbohidrat,  protein,  glikosida,  alkaloid, dan flavonoid.
Identifikasi  metabolit  sekunder  dengan menggunakan  pelarut  etanol  70%,  etil  asetat, dan  kloroform  menunjukkan  hasil  yang  paling optimal  dengan  menggunakan  pelarut  etil asetat  dengan  terbentuknya  reaksi  positif  pada uji alkaloid, flavonoid, steroid, glikosida, tanin dan polifenol. Hal ini sejalan dengan penelitian Prabowo  (2009)  yang  menunjukkan  bahwa  uji fitokimia terhadap keong mata merah mengandung senyawa bioaktif golongan alkaloid  dan  flavonoid.  Terdapatnya  aktivitas farmakologi ditunjukkan pada tiap-tiap senyawa  tersebut.  Pengertian  dari  aktivitasdi adalah  fungsi  anti  tumor  dan  antioksidan  oleh flavonoid  (Ramamoorthy  &  Bono,  2007; Agrawal, 2011), serta fungsi anti mikroba oleh tannin  (Min et  al .,  2008).  Kandungan  seluruh senyawa  bioaktif  dipengaruhi  oleh  perbedaan pelarut  yang  digunakan  saat  ekstraksi  sampel (Santoso et al ., 2012). Hal tersebut dikarenakan sifat  kepolaran  masing-masing  pelarut  yang berbeda-beda  (Rashid et  al .,  2018).  Baik senyawa  polar  atau  pun  nonpolar  dari  ekstrak daging  keong  mas,  dapat  ditarik  oleh  pelarut semi  polar  etil  asetat,    dengan  kandungan toksisitas rendah.  Keunggulan etil asetat  untuk ekstraksi  disebabkan  sifatnya  yang  memiliki toksisitas rendah, tidak higroskopis, dan mudah
diuapkan (Wardhani & Sulistyani, 2012).

## Uji  proksimat  ekstrak  etil  asetat  daging keong mas
Hasil  analisis  kualitatif  metabolit  sekunder menunjukan  ekstrak  etil  asetat  keong  mas mampu  mengekstrak  paling  banyak  senyawa bioaktif.  Informasi  mengenai  komponen  aktif sangat berguna untuk memprediksi manfaatnya bagi tubuh organisme (Copriyadi et al., 2005). Selanjutnya ekstrak etil asetat digunakan untuk analisis  proksimat  untuk  mengetahui  lebih lanjut  kandungan  gizi  dari  daging  keong  mas terkait pemanfaatannya sebagai pakan alternatif.  Hasil  nilai  uji  proksimat  merujuk pada Tabel 2.
Tabel  2. .. Hasil  uji .. proksimat .. ekstrak .. daging keong mas Parameter uji Hasil uji Kadar air 7,20 % Kadar abu 18,06 % Protein 40,83 % Lemak 6,44 % Karbohidrat ( by difference ) 27,46 %

## Kadar air pada ekstrak daging keong mas
Tujuan  penghitungan  kadar  air  dimaksudkan untuk mengetahui kandungan zat dalam ekstrak sebagai  persen  sampel  kering  dan  untuk menentukan  daya  tahan  suatu  sampel  dalam masa penyimpanan (Merdekawati et al ., 2017). Kadar  air  kurang  dari  10%  dalam  sampel menunjukkan  sampel  tahan  disimpan  dalam waktu  yang  cukup  lama  dan  cenderung terhindar  dari  kontaminasi  jamur  maupun bakteri  (Purwaningsih et  al .,  2011).  Mikroba akan  lebih  mudah  tumbuh  pada  suatu  sampel yang  mengandung  kadar  air  tinggi  (Yamin  & Hasnawati,  2017).  Berkurangnya  kadar  air pada bahan dapat memudahkan proses penghancuran  sampel  menjadi  serbuk  untuk mempercepat  proses  ekstraksi,  sedangkan lisisnya  dinding  sel  ketika  sampel  dikeringkan akan memudahkan pengeluaran senyawa dalam sampel (Fitriana et al ., 2015). Kadar air dalam ekstrak daging keong mas adalah 7,20%. Hasil tersebut  menunjukkan  bahwa  sampel  ekstrak daging  keong  mas  mampu  disimpan  dalam jangka waktu relatif lama.

## Kadar abu pada ekstrak daging keong mas
Eksistensi  mineral  anorganik  dideteksi  dengan banyaknya kadar abu dalam suatu bahan pakan. Abu  tersusun  atas  bermacam-macam  mineral beserta  ragamnya  komposisi  dari  suatu  bahan
pangan. Sebagian besar bahan pangan mengandung bahan anorganik dan air. Sementara  itu,  mineral  dan  abu  sebagai  sisa kandungan  bahan  pangan  yang  bersifat anorganik. Ekstrak daging keong mas memiliki kadar  abu  sebesar  18,06%.  Penentuan  kadar abu pada penelitian ini tidak memenuhi standar SNI  01-3775-1995  Standarisasi  mutu  daging kornet  yaitu  maksimal  2,0%  (Apriyanti et  al., 2016).  Menurut  (Purwaningsih et  al .,  2011) sampel  yang  memiliki  nilai  kadar  abu  tinggi menunjukkan  adanya  mineral  Na,  P,  dan  Ca yang tetap utuh.

## Kadar  protein  pada  ekstrak  daging  keong mas
Metode  Kjedahl  digunakan  untuk  penetapan kadar  protein  sampel.  Ekstrak  daging  keong mas  memiliki  kadar  protein  sebesar  40,83%. Nilai  ini  telah  memenuhi  syarat  mutu  pangan. Persyaratan  kandungan  protein  berdasarkan SNI  01-3751-2006  maupun  SNI  3751-2009 yaitu minimal 7,5% (Hartanto, 2012).

## Kadar  lemak  pada  ekstrak  daging  keong mas
Metode  ekstrak  Soxhlet  digunakan  untuk penentuan  kadar  lemak.  Prosedur  ini  bekerja melalui  ekstraksi  lemak  dengan  n-heksana sebagai  pelarut  organik.  Ekstrak  daging  keong mas  menghasilkan  angka  6,44%  untuk  kadar lemak.  Dari  hasil  uji  tersebut  telah  memenuhi persyaratan  mutu  tepung  ikan  yang  telah ditetapkan  oleh  SNI  01-2715-1996  dengan kadar  lemak  maksimal  12%.  Ekstrak  daging keong  mas  memiliki  nilai  kadar  karbohidrat sebesar  27,46%  berdasarkan  metode by difference .  Metode by  difference merupakan pengujian  kadar  karbohidrat  bahan  pangan dalam  serat  kasar.  Nilai  kadar  karbohidrat  ini diindikasikan  dengan  adanya  serat  kasar  dan glikogen  dalam  bahan  pangan  berupa  tepung ikan.  Hal  ini  disebabkan  karbohidrat  yang terdapat  pada  hewan  pada  umumnya  dalam bentuk  glikogen  (Purwaningsih et  al .,  2011). Tingginya  kadar  karbohidrat  pada  ekstrak daging  keong  mas  berhubungan  erat  dengan kelimpahan makanan bagi keong di persawahan.  Karbohidrat  ini  berasal  dari  padi di  area  persawahan  sebagai  sumber  bahan makanannya.  Kondisi  persawahan  padi  yang merupakan habitat keong kemungkinan terhindar  dari  polusi  yang  mengakibatkan tingginya  ketersediaan  pangan  bagi  keong (Haslianti et al ., 2017).

## Potensi  ekstrak  daging  keong  mas  ditinjau dari kandungan proksimat
Kadar  protein  ekstrak  daging  keong  mas  ini sebesar  40,83%,  diketahui  terbesar  daripada kandungan  yang  lain.  Hal  ini  menandakan bahwa  ekstrak  daging  keong  mas  sangat berpotensi  sebagai  upaya  alternatif  pakan  ikan patin. Menurut Savitri et al . (2015), kandungan protein  pakan  sebesar  28-30%  dibutuhkan dalam  usaha  budidaya  ikan  patin.  Penjelasan sejenis juga dengan hasil penelitian Subamia et al. (2017), 35% kadar protein yang terkandung pada  pakan  serta  memiliki  energi  sejumlah 2.9875,5 kkal/kg menunjukkan performa juvenil Pangasianodon  hypophthalmus yang baik.  Kualitas .. pakan .. dinilai  dengan  kadar protein  yang  optimal.  Pakan  dengan  kualitas baik  dapat  menyokong  pertumbuhan  serta menjaga  kesehatan  ikan.  Selain  itu  mutu produksi  ikan  juga  dapat  meningkat.  Oleh karena  itu,  diperlukan  nutrisi  berupa  protein. Takaran kebutuhan protein berbeda disesuaikan dengan  jenis  ikan  dan  umur  ikan.  Selama  ini, kadar  protein  dengan  kisaran  32-40%  dalam pakan telah digunakan dalam pembenihan ikan patin  pasupati.  Penelitian  kebutuhan  protein ikan  patin  siam  untuk  performa  yang  baik dilakukan  oleh  (Syamsunarno et  al .,  2011), penelitian  serupa  juga  dilakukan  terhadap  ikan sepat ( Trichogaster pectoralis ) (Fran & Akbar, 2016), serta terhadap juvenile ikan kerapu pasir ( Epinephelus corallicola ) (Marzuqi & Anjusary, 2013).
Sebagai  sumber  energi  utama,  kemampuan lemak  untuk  menghasilkan  energi  jauh  lebih besar  dibandingkan  karbohidrat  dan  protein. Namun,  karena  ikan  mempunyai  kemampuan yang  sangat  baik  dalam  mengonsumsi  protein, peranan lemak sebagai sumber energi menempati  urutan  kedua  setelah  protein (Afrianto & Liviawaty, 2005). Sementara kadar abu  dalam  pakan  sangat  penting  untuk pertumbuhan  gigi  dan  sisik  (Sutikno,  2011). Kadar  karbohidrat  pakan  >  45%    sangat menentukan  bagi  pertumbuhan  segala  jenis ikan.  Sedangkan  untuk  kadar  karbohidrat  < 45%  juga  sangat  baik  untuk  jenis  ikan omnivora.  Hal  ini  karena  ikan  omnivora membutuhkan  kandungan  karbohidrat  dalam pakan  berkisar  10-50%  (Gunawan  &  Khalil, 2015).    Pertumbuhan  ikan  secara  optimal  dan efisiensi  pakan  didukung  dengan  pemberian nutrisi pakan yang tepat.

## KESIMPULAN
Ekstrak  daging  keong  mas  mengandung senyawa  alkaloid,  flavonoid,  tanin,  polifenol, steroid  dan  glikosida.  Kandungan  proteinnya sangat  tinggi  (40.83%)  sehingga  potensial untuk  dimanfaatkan  sebagai  alternatif  pakan ikan patin.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdullah,  A.,  Nurjanah  &  Reyhan,  M.  2017.
Karakterisasi  dan  Identifikasi  Senyawa
Aktif  Ekstrak  Pigmen  Telur  Keong  Mas.
Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan
Indonesia. 20 (2): 286-295. Afriyanto  &  Liviawaty,  E.  2005. Pakan  Ikan. Kanisius:Yogyakarta.
Agrawal A.D. 2011. Pharmacological Activities  of  Flavonoids:  A  Review. International  Journal  of  Pharmaceutical Sciences and Nanotechnology . Agustono  A,  Al  Arif  MA  &  Dewi  FS.  2019. Pemanfaatan Tepung Keong Mas ( Pomacea canaliculata )  sebagai  Substitusi  Tepung Ikanpada Pakan Udang Vannamei
( Litopenaeus  vannamei )  terhadap  Nilai Kecernaan  Serat  Kasardan  Bahan  Ekstrak tanpa Nitrogen (BETN). Journal of Aquaculture and Fish Health .
Akerina FO, Nurhayati T & Suwandi R. 2015. Isolasi dan karakterisasi senyawa antibakteri dari  bulu  babi. Jurnal  perikanan  dan  ilmu kelautan IPB. JPHPI. 18 (1): 61-73
Amanda  A  &  Kurniaty  I.  2017.  Pengaruh waktu  maserasi  terhadap  rendemen  zat antosianin  pewarna  alami  minuman  jelly dari terong ungu. jurnal.umj.ac.id/index.php/semnastek.
Anggraini  TP,  Hudaidah  S  &  Utomo  DSC. 2018.  Pengaruh  Proporsi  Tepung  Ikan  dan Tepung Keong Mas ( Pomacea canaliculata ) yang  Berbeda  sebagai  Bahan  Baku  Utama Pembuatan  Pakan  terhadap  Pertumbuhan
Benih Udang Vannamei ( Litopenaeus vannamei ). E-Jurnal Rekayasa Dan
Teknologi Budidaya Perairan . Apri  R.  2014.  Kandungan  senyawa  aktif  dan uji  fitokimia Sinularia sp.  dan Lobophytum sp.  dari  perairan  Pulau  Pongok  Bangka Selatan  [tesis].  Bogor:Institut  Pertanian Bogor.
Apriyanti,  Nurfaika  A,  Bauzir  E,  Choiriyah  U &  Dinastian  N.  2016.  Analisis  potensi keong  mas  sebagai  substitusi  daging  sapi dalam  pembuatan  kornet  sebagai  makanan olahan  kaya  protein. Jurnal  Risenologi.
ISSN. 2502-5643.
Artini  P,  Astuti  K  &  Warditiani  N.  2013.  Uji fitokimia  ekstrak  etil  asetat  rimpang  bangle ( Zingiber purpureum Roxb.). Jurusan Farmasi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana . Association  of  Official  Analytical  Chemists. 2016.  Appendix  F:  Guidelines  for  Standard Method  Performance  Requirements. AOAC Official Methods of Analysis .
A m     T  &  M ’ uf  A.  2  9.  Uji  Toksisitas dan  Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Tumbuhan Sumber  Pakan  Orang  Utan  terhadap  Larva. Jurnal  Penelitian  Hutan  Dan  Konservasi Alam . 6 (1): 37-46.
Chakraborty  SB,  Horn  P  &  Hancz  C.  2013. Application  of  Phytochemicals  as  Growth- promoters  and  Endocrine  Modulators  in Fish Culture. Review in Aquaculture. 5 :1-19 Copriyadi  J,  Yasmi  E  &  Hidayati.  2005.
Isolation and Characterization
of Coumarines  from  Peels  of  Orange  ( Citrus hystrix DC). Jurnal Biogenesis. 2 : 13-25 Edo  MR,  Duan  FK  &  Amalo  D.  2019. Pengaruh  Pemberian  Daging  Keong  Mas ( Pomacea canaliculata ) terhadap
Pertumbuhan  dan  Kadar  Lemak  Ikan  Nila ( Oreochromis  niloticus ). Jurnal  Biotropikal Sains. 16 (1): 28-37.
Firdiyani F, Agustini TW & Ma'ruf WF. 2015.
Ekstraksi Senyawa Bioaktif sebagai Antioksidan  Alami Spirulina  platensis
Segar dengan Pelarut yang Berbeda. JPHPI.
18 (1): 28-37.
Fitriana  WD,  Fatmawati  S  &  Ersam  T.  2015. Uji  Aktivitas  Antioksidan  terhadap  DPPH dan ABTS dari Fraksi-fraksi. SNIP Bandung .
Fran  S  &  Akbar  J.  2016.  Pengaruh  Perbedaan Tingkat  Protein  dan  Rasio  Protein  Pakan terhadap Pertumbuhan Ikan Sepat
( Trichogaster  pectoralis ). Fish  Scientiae .
3 (5): 53-63.
Gunawan & Khalil M. 2015. Analisa Proksimat
Formulasi  Pakan  Pelet  dengan  Penambahan Bahan Baku Hewani yang Berbeda. Aquatic Sciences  Journal. 2 (1):23-30 .  ISSN.  2406- 9825.
Gustiano  R,  Kristanto  AH,  Tahapari  E  & Iswanto  B.  2016.  Evaluation  of Pangasius djambal Bleeker  1846  and Pangasianodon hypophthalmus (Sauvage  1878)  Hybrids: Biometric, Growth, and Ovarian Maturation. Buletin Plasma Nutfah . 8 (1): 32-37. Hartanto  ES.  2012.  Kajian  Penerapan  SNI
Produk  Tepung  Terigu  sebagai  Bahan Makanan. Jurnal  Standardisasi. 14 (2):164 - 172.
Haslianti,  Inthe  MG  &  Ishak  E.  2017. Karakteristik  Keong  Kowoe  dan  Aktivitas Antioksidannya. Jurnal  Pengolahan  Hasil Perikanan Indonesia . Hidayat  D,  Sasanti  AD  &  Yulisman.  2013.
Kelangsungan  Hidup,  Pertumbuhan  dan Efisiensi  Pakan  Ikan  Gabus  ( Channa striata )  yang  Diberi  Pakan  Berbahan  Baku Tepung  Keong  Mas  ( Pomacea sp.). Jurnal Akuakultur Rawa Indonesia . 1 (2): 161-172. Jannah  R,  Husni  MA  &  Nursanty  R.  2017.
Inhibition  Test  of  Methanol  Extract  from Soursop  Leaf  ( Annona  muricata Linn.) against Streptococcus  mutans Bacteria. Jurnal Natural . 17 (1): 23-30.
Joshi RC. 2007. Problems with the management  of  the  golden  apple  snail Pomacea  canaliculata :  An  important  exotic pest of rice in Asia. In Area-Wide Control of Insect  Pests:  From  Research  to  Field Implementation . Karmilah,  Reymon,  Setiawan  MA,  Arifin  EA, Musdalipah.  2019.  Identifikasi  Senyawa Saponin  Ekstrak  Etil  Asetat  Gonad  Landak Laut  ( Diadema  setosum L.)  dan  Efektivitas
Antihiperkolesterol  terhadap  Mencit  Balb/c Hiperkolesterolemia. Jurnal Medika Udayana. 8 (12).
Kementerian  Kelautan  dan  Perikanan.  2020. Rencana  Strategis  Tahun  2020-2024.  Dari https://kkp.go.id/an- component/media/upload-gambar- pendukung/DJPB/Renstra%202020%20- %202024/4.%20Renstra%20DJPB%202020 -2024.pdf (2 Februari 2021). Makkar HPS. 2003. Effect and Fate of Tannins in  Ruminant  Animals,  Adaptation  to Tannins,  and  Strategies  to  Overcome Detrimental  Effects  of  Feeding  Tannin-rich Feed. Small Rum Res. 49 : 241-256.
Marliana  SD,  Suryanti  V  &  Suyono.  2005.
Skrining Fitokimia
dan Analisis Kromatografi Lapis Tipis Komponen Kimia
Buah  Labu  Siam  ( Sechium  edule Jacq  . Swartz.)  dalam  Ekstrak  Etanol. Biofarmasi . 3 (1): 26-31
Marwoto  RM  &  Isnaningsih  NR.  2011.  Notes on  the  distribution  of  invasive  freshwater snail Pomacea  Canaliculata (Lamarck, 1822)  and P.  Insularum (D’   ig y,   835) in Indonesia. Biotropia . 18 (2): 123-128. Marzuqi  M  &  Anjusary  DN.  2013.  Kecernaan
Nutrien  Pakan  dengan  Kadar  Protein  dan Lemak  Berbeda  pada  Juvenil  Ikan  Kerapu Pasir  ( Epinephelus  corallicola ). Ilmu  dan Teknologi Kelautan Tropis . 5 (2): 311-323. Merdekawati  D,  Nurhayati  T  &  Jacoeb  A.
2017.  Kandungan  Proksimat  dan  Mineral dari  Keong  Mata  Lembu  ( Turbo  setosus Gmelin 1791). Jurnal Mina Sains . 3 (1): 47- 53.
Min  BR,  Pinchak  WE,  Merkel  R,  Walker  S,
Tomita G & Anderson RC. 2008. Comparative  Antimicrobial  Activity  of Tannin  Extracts  from  Perennial  Plants  on Mastitis  Pathogens. Scientific  Research  and Essays . Oliviera  RA,  Narsico  CD,  Bisinotto  RS, Perdomo  MC,  Ballou  MA,  Dreher  M, Santos  JEP.  2010.  Effects  of  Feeding Polyphenols  from Pomegranate Extract  on Health,  Growth,  Nutrient  Digestion,  and Immuno  Competence  of  Calves. J  Dairy Sci. 93 : 4280-4291.
Paterson.  1999.  Phytochemical  Methods.  A Guide  to  Modern  Techniques  of  Plant Analysis. London: Chapman & Hall.
Poernomo  N,  Utomo  NBP  &  Azwar  ZI.  2015.
Pertumbuhan  dan  Kualitas  Daging  Ikan Patin Siam yang Diberi Kadar Protein Pakan Berbeda. Jurnal  Akuakultur  Indonesia .
14 (2): 104-111
Prabowo  TT.  2009.  Uji  Aktivitas  Antioksidan dari  Keong  Matah  Merah  ( Cerithidea obtusa )  [skripsi].  Bogor:  Institut  Pertanian Bogor.
Purwaningsih S, Salamah E & Mirlina N. 2011. Pengaruh  pengolahan  terhadap  kandungan mineral  keong  matah  merah  ( Cerithidea obtusa ). Prosiding  Pertemuan  Ilmiah  Dan Seminar Nasional MPHPI.
Ramamoorthy PK & Bono A. 2007. Antioxidant  Activity,  Total  Phenolic  and Flavonoid  Content  of Morinda  citrifolia Fruit  Extracts  from  Various  Extraction Processes. Journal  of  Engineering  Science and Technology . 2 (1): 70-80.
Rashid  MA,  Akhtar  MN,  Ashraf  A,  Nazir  S, Ijaz A, Omar NA, Noor S, Basit A & Tareen RB.  2018.  Chemical  Composition  and Antioxidant,  Antimicrobial  and  Haemolytic Activities  of  Crambe  cordifolia  Roots. Farmacia . 66 (1): 165 Rawlings TA, Hayes KA, Cowie RH & Collins TM.  2007.  The  Identity,  Distribution,  and Impacts  of  Non-native  Apple  Snails  in  The
Continental United States. BMC
Evolutionary Biology . 7 (97): 1-14. Reyaz  MA,  Jehan  SQ  &  Sanjay  T.  2019. Formulation  of  Fish  Feed  using  Medicinal Herb Curcuma  amada and  Its  Biochemical and  Haemotological  Changes  in Labeo rohita.  Journal  of  Drug  Deliery  and Therapeutics. 9 (3-s): 96-99.
Sangi  MS,  Momuat  LI  &  Kumaunang  M. 2012. Uji Toksisitas dan Skrining Fitokimia Tepung  Gabah  Pelepah  Aren  ( Arenga pinnata ). JURNAL  ILMIAH  SAINS . 12 (2): 127-134.
Santi  A,  Sunarti  V,  Santosa  D  &  Triwisari  A. 2012. Komposisi Kimia dan Profil Polisakarida  Rumput  Laut  Hijau. Jurnal Akuatika  Indonesia . 3 (2):  105-114.  ISSN. 0853-2523.
Santoso  J,  Anwariyah  S,  Rumiantin  RO,  Putri AP,  Ukhty  N  &  Yoshie-Stark  Y.  2012. Phenol  Content,  Antioxidant  Activity  and Fibers  Profile  of  Four  Tropical  Seagrasses from Indonesia. Journal of Coastal Develpopment . 15 (2): 189-196.
Savitri  A,  Hasani  Q  &  Tarsim  T.  2015.
Pertumbuhan Ikan Patin Siam ( Pangasianodon hypopthalmus )
yang Dipelihara  dengan  Sistem  Bioflok  pada
Feeding  Rate yang  Berbeda. E-Jurnal Rekayasa Dan Teknologi Budidaya Perairan . IV (1): 453-459.
Schiavone  A,  Guo  K,  Tassone  S,  Gasco  L, Hernandez E, Denti R & Zoccarato I. 2008. Effects  of  a  Natural  Extract  of  Chesnut Wood  on  Digestibility,  Performance  Traits, and  Nitrogen  Balance  of  Broiler  Chicks.
Poult Sci. 87 : 521-527.
Shabtay A, Eitam H, Tadmor Y, Orlov A, Meir A,  Weinberg  P,  Weinberg  ZG,  Chen  Y, Brosh  A,  Izhaki  I  &  Kerem  Z.  2008. Nutritive  and  Antioxidative  Potential  of Fresh and Stored Pomegranate Industrial by Product  as  a  Novel  Beef  Cattle  Feed. J Agric Food Chem. 56 :10063-10070. Shalaby EA & Sanaa MMS. 2012. Comparison of DPPH and ABTS Assays for Determining Antioxidant Potential of Water and Methanol Extracts of Spirulina platensis.
Indian
Journal of Geo-Marine Sciences. 42 (5):556-
564.
Standar  Nasional  Indonesia  Kornet  Daging Sapi. SNI 01-3775-2006.
Standar  Nasional  Indonesia  Persyaratan  Mutu Tepung Ikan. SNI 01-2715-1996.
Subamia  IW,  Suhenda  N  &  Tahapari  E.  2017.
Pengaruh  Pemberian  Pakan  Buatan  dengan Kadar  Lemak  yang  Berbeda  terhadap Pertumbuhan  dan  Sintasan  Benih  Ikan Jambal  Siam  ( Pangasius  hypophthatmus ). Jurnal  Penelitian  Perikanan  Indonesia .
9 (1): 37-42.
Subhan A, Yuwanta T, Zuprizal Z & Supadmo S.  2015.  The  Use  of Pomacea  canaliculata Snails in Feed to Improve Quality of Alabio duck  ( Anas  plathyrinchos Borneo)  Meat. Journal  of  the  Indonesian  Tropical  Animal Agriculture. 40 (4):238-244. Sutikno  E.  2011. Pemuatan  Pakan  Ikan Bandeng .  Direktorat  Jenderal  Perikanan
Budidaya Balai Besar Pengembangan Budidaya Air Payau. Jepara.
Svehla.  1985.  Analisis  Anorganik  Makro  dan Semimikro. Media Pustaka, Jakarta . Syamsunarno  MB,  Mokoginta  I  &  Jusadi  D. 2011.  Pengaruh  Berbagai  Rasio  Energi Proteinpada Pakan Iso Protein 30% terhadap Kinerja  Pertumbuhan  Benih  Ikan  Patin ( Pangasius  hypophthalmus ). Jurnal  Riset Akuakultur . 6 (1): 3-70.
Tiwari  P,  Kumar  B,  Mandeep  K,  Kaur  G  & Kaur H. 2011. Phytochemical screening and Extraction: A Review. Internationale Pharmaceutica Sciencia .
Wardhani  LK  &  Sulistyani  N.  2012.  Uji
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etil  Asetat Daun  Binahong  ( Anredera  scandens (L.) Moq.)  terhadap Shigella  flexneri beserta Profil Kromatografi Lapis Tipis. Pharmaciana . 2 (1): 1-15.
Wijaya  D,  Yanti  PP,  Setya  AR,  Rizal  M  & Setya  AR.  2015.  Screening  Fitokimia  dan Aktivitas  Antioksidan  Daun  Eceng  Gondok ( Eichhornia crassipes ). Jurnal Kimia VALENSI . 1 (1): 65-69.
Yamin  &  Hasnawati.  2017.  Potensi  Ekstrak Daun  dan  Batang  Katola  ( Arcangelisia flava L.Merr) sebagai Antimikroba.
Pharmauho . 3 (2): 23-27.
110                                       Identifikasi Metabolit Sekunder dan …                    (Saputri & Pertiwi)