AKTIVITAS ANTIMIKROBA DARI EKSTRAK DAN FRAKSI KARANG LUNAK Sarcophyton sp., DARI PERAIRAN PONTENG DESA TUMBAK MINAHASA TENGGARA TERHADAP MIKROBA PATOGEN Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albicans.
Triswa A. Mokodongan 1) , Herny E. Simbala 1) , Henki Rotinsulu 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Soft  coral  sarcophyton  sp.,  poruduces  natural  chemical  compounds  and  is  known  as  a natural  product.  These  natural  chemical  compounds  have  the  potential  as  a  source  of natural  medicine.  Soft  coral  sarcophyton  sp.,  has  antimicrobial,  antibacterial,  anti-fungal, anti-tumor,neurotoxic,  and  anti-inflammatory  activities  that  are  beneficialt  to  the pharmaceutical industry. This study aims to determine the biological  activity of soft corals Sarcophyton sp., collected from the waters of Ponteng Tumbak Village, Southeast Minahasa Regency  on  microbial  growth  of  staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli,  and  Candida albicans.  Soft  coral  samples  were  macerated  with  96%  of  ethanol  solvent  and  partitioned liquid-liquid  using  methanol,  chloroform,  and  n-hexane  solvents.  Staphylococcus  aureus and  Escherichia  coli  bacteria  with  a  medium  category,    and  were  unable  to  inhibit  the growth of the fungus Candida albicans.
Keywords: Sarcophyton  sp.,  Antimicrobial,  Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli, Candida albicans.

## ABSTRAK
Karang lunak Sarcophyton sp., merupakan salah satu jenis karang lunak yang memproduksi senyawa  kimia  alami  dan  dikenal  dengan  istilah natural  product .  Senyawa  kimia  alami tersebut  berpotensi  sebagai  sumber obat  alami.  Karang lunak Sarcophyton sp., mempunyai aktivitas  antimikroba,  antibakteri,  anti  fungi,  anti  tumor,  neurotoksik,  dan  anti  inflamasi yang bermanfaat bagi industry farmasi.  Karang lunak Sarcophyton sp., ditemukan di daerah perairan  Poteng  Desa  Tumbak  Minahasa  Tenggara.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui adanya aktivitas daya hambat pertumbuhan mikroorganisme dari Karang lunak Sarcophyton sp.,  terhadap  mikroba Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli, dan Candida albicans. Sampel  diekstraksi  metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  dan  fraksinasi menggunakan  pelarut  methanol,  kloroform,  dan  n-heksan. Berdasarkan  hasil  penelitian menunjukkan bahwa masing-masing ekstrak dan fraksi  mampu menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli dengan  kategori  daya  hambat  sedang. Sedangkan  masing-masing  ekstrak  dan  fraksi  pada  Jamur Candida  albicans tidak  mampu menghasilkan aktivitas antibakteri.
Kata Kunci : Sarcophyton sp., Antimikroba, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Candida albican.

## PENDAHULUAN
Karang  Lunak  merupakan  salah satu  dari  biota  laut  yang  kaya  akan senyawa  bioaktif,  seperti  terpenoid, steroid,  dan  streroid  glikosida.  Ada sekitar  50%  ekstrak  karang  lunak  yang menunjukan  sifat  racun  pada  ikan. Selain  itu,  karang  lunak  mengandung metabolit  sekunder  yang  di  hasilkan dari  karang  lunak  yang  memiliki aktivitas  biologi  seperti  anti  fungal, sitotoksik,  anti  neoplastic,  antimikroba, inhibitor  HIV,  dan  anti  inflamantori (Radhika, 2006).
Karang  lunak Sarcophyton sp. adalah  salah  satu  genus  Alcyonaria bertangkai  besar  dengan  ukuran  koloni yang  besar  pula.  Ukuran  koloni  karang lunak ini dapat mencapai 1,5 m, namun pada  umumnya  berukuran  10-20  cm. Sarcophyton sp.  dapat  ditemukan  dari rataan  terumbu  karang  sampai  ke kedalaman  15  m  dengan  konsentrasi pada  kedalaman  3-10  m  .  karang  lunak ini  memiliki  koloni  yang  berukuran besar,  mempunyai  tangkai  berwarna putih  atau  senada  dengan  kapitalium. Kapitalium genus Sarcophyton
berbentuk  melebar  seperti  jamur  atau bundar  dengan  tepi  berlekuk  atau melipat, permukaan halus seperti beludru. Bentuk koloni karang lunak ini bertangkai  panjang  atau  pendek  yang melekat  di  dasar  (Fabricus  dan    Philip, 2001).
Genus Sarcophyton memiliki dimorfik,  yaitu  memiliki  autosoid  dan sifonosoid.  Warna  koloni  genus  ini adalah krem, coklat, kuning, atau hijau. Warna tersebut dihasilkan oleh sejumlah alga simbiotik (zooxanthellae)
yang  hidup  di  dalam  jaringan  tubuh karang. Sarcophyton sp.  bereproduksi secara seksual dan aseksial. Reproduksi aseksual  yang  dilakukan  oleh  genus  ini ada  dua  cara,  yaitu  fragmentasi  atau memisah dan membentuk tunas
( budding ) (Fabricus dan Philip, 2001).
Sarcophyton sp., merupakan salah  satu  jenis  karang  lunak  yang memproduksi senyawa kimia alami dan dikenal  dengan  istilah  natural  produk. Senyawa kimia alami tersebut berpotensi  sebagai  sumber  obat  alami. Hasil  penelitian  yang  dilakukan    oleh Sawant DKK (2006) menyatakan bahwa  senyawa  kimia  aktif  yang terdapat pada karang lunak Sarcophyton sp.,  menunjukkan  aktivitas  sebagai antimikroba, antibakteri, anti fungi, anti tumor, neurotoksik, dan anti inflamantori  yang  bermanfaat  bagi industri farmasi.
Sarcophyton sp.,  adalah  salah satu  jenis  karang  lunak  yang  mampu menghasilkan  bahan  bioaktif.  Bahan bioaktif yang terdapat pada Sarcophyton  sp  adalah  sarcophine. Namun masalah serius dalam pengembangan  senyawa  bioaktif  dari karang  lunak  adalah  masalah  suplai, karena  untuk  mendapatkan  sejumlah relatif kecil senyawa bioaktif, diperlukan sejumlah besar karang lunak (Huda, 2011).
Mikroba  patogen  salah  satu penyebab  penyakit  pada  manusia  dan makhluk  hidup  lainnya.  Banyak  usaha yang telah dilakukan untuk mengantisipasi pengaruh mikroba patogen tersebut yaitu dengan
menemukan  senyawa  kimia  yang  dapat
menghambat pertumbuhan dan membunuh bakteri (Juariah et al , 2014). Berdasarkan latar belakang tersebut di atas peneliti akan melakukan penelitian terhadap uji Aktivitas
Antimikroba  dari  Ektrak  dan  Fraksi Karang Lunak Sarcophyton sp., yang di ambil  dari  perairan  Poteng  Minahasa
Tenggara  terhadap  beberapa  mikroba patogen Staphylococcus aureus , Escherichia  coli, dan  jamur Candida albicans.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Bentuk Penelitian
Bentuk  penelitian  ini  ialah eksperimen  laboratorium  yaitu  menguji komponen  yang  diekstrak  dari  Karang
Lunak Sarcophyton Sp ., sebagai antimikroba yang diperoleh dari perairan Ponteng Desa Tumbak
Minahasa Tenggara.

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  Maret  2019  sampai  Juli  2019  di Laboratorium  Farmasi  Lanjut  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi.

## Alat dan Bahan Alat
Alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  masker,  sarung tangan,  pisau,  telenan,  peralatan  diving berupa  snorkel, fins ,  tabung  udara,  dan masker,  kantong  plastic,  alat-alat  gelas, rotary  evaporator ,  timbangan  analitik, cawan  petri,  autoklaf,  pinset,  pembakar spritus,  magnetic  steerer,  pipet  tetes, batang  pengaduk, Laminar  Air  Flow , lemari  pendingin,  incubator,  kertas
cakram,  desikator,  mikropipet, jangka sorong (kaliper), kamera untuk keperluan dokumentasi.

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan yaitu Karang  Lunak Sarcophyton sp, mikroba  uji Staphylococcus  aureus ,
Escherichia coli , dan Candida albicans , etanol  96%,  akuades,  metanol,  n- heksan,  kloroform, nutrient  broth , nutrien  agar, potato  dextrose  agar , Kloramfenikol,  kertas  cakram,  label, spidol permanen, tissue, aluminium foil, kertas saring, kapas.
Prosedur Kerja Pengambilan Sampel Sampel Karang Lunak Sarcophyton sp , akan  diambil  di perairan Poteng Desa Tumbak
Minahasa  Tenggara  menggunakan  alat bantu  (masker,  tabung  udara,  snorkel, dan  fins).  Sampel  dibersihkan  dari kotoran  yang  menempel  di  sekitarnya, difoto  lalu  dimasukkan  ke  dalam kantong  plastik,  kemudian  langsung dibawa  ke  Laboratorium  Fitokimia  dan Farmakognosi  Program  Studi  Farmasi Universitas  Sam  Ratulangi.  Kemudian sampel  dipotong  kecil-kecil  dengan ukuran  1  cm²  dan  diekstraksi  dengan cara  maserasi  dengan  etanol  96%  lalu diberi  label  serta  nomor  sampel. Sebagian  dari  sampel  disimpan  dalam vial  untuk  diawetkan  sebagai  voucher untuk selanjutnya dideterminasi.

## Ekstraksi
Ekstrak Karang Lunak Sarcophyton sp,  sebanyak  420  g diekstraksi  dengan  menggunakan  cara
maserasi.  Sampel  dipotong  kecil-kecil dengan  ukuran  1  cm²  lalu  dimasukkan ke  dalam  botol  dan  direndam  dengan larutan  etanol  96%  sampai  sampel terendam secara keseluruhan dan dibiarkan  selama  24  jam.  Sampel  yang direndam disaring dengan menggunakan kertas saring
menghasilkan  filtrat  1  dan  debris  1. Debris  1  direndam  dengan  larutan etanol  96%  sampai  sampel  terendam secara  keseluruhan  kemudian  dibiarkan selama 24 jam. Sampel tersebut disaring menggunakan kertas saring
menghasilkan  filtrat  2  dan  debris  2.
Debris  2  kemudian  direndam  dalam larutan  etanol  96%  sampai  sampel terendam secara keseluruhan dan dibiarkan  selama  24  jam,  sampel tersebut  disaring  menggunakan  kertas saring menghasilkan filtrat 3 dan debris 3.  Filtrat  1,  2  dan  3  dicampur  menjadi satu kemudian disaring, lalu dievaporasi menggunakan rotary evaporator sehingga  didapat  ekstrak  kasar  Karang Lunak Sarcophyton sp.,  kemudian ditimbang menggunakan timbangan analitik, diperoleh ekstrak etanol sampel sebanyak  9,3  g.  Selanjutnya  ekstrak etanol  Karang  Lunak Sarcophyton sp., digunakan dalam fraksinasi dan pengujian antimikroba. Fraksinasi Sebanyak  2  g  ekstrak  etanol Karang Lunak Sarcophyton sp., dimasukkan  ke  dalam  Erlenmeyer  dan dilarutkan dengan metanol 80%
sebanyak 100 mL. Setelah sampel larut, sampel  dimasukkan  ke  dalam  corong pisah dan ditambahkan pelarut n-heksan
sebanyak  100  mL.  Sampel  kemudian dikocok  berulangkali  dalam  corong pisah hingga homogen. Sample dibiarkan  hingga  membentuk  lapisan metanol  (MeOH)  dan  lapisan  n-heksan. Masing-masing  lapisan  metanol  dan lapisan  n-heksan  ditampung  di  dalam wadah  yang  berbeda.  Lapisan  n-heksan selanjutnya  dievaporasi  menggunakan rotary  evaporator  hingga  kering,  lalu ditimbang  dengan  timbangan  analitik dan  diperoleh  fraksi  n-heksan  sebanyak 0,085  g.  Selanjutnya  lapisan  metanol ditambahkan  dengan  akuades  100  mL, kemudian  dipartisi  dengan  pelarut kloroform  menggunakan  perbandingan 1:1  v/v  setelah  itu  dikocok  dalam corong  pisah  hingga  homogen.  Lapisan metanol  dibiarkan  hingga  membentuk dua  lapisan  yaitu  lapisan  metanol  dan lapisan kloroform. Masing-masing lapisan  metanol  dan  lapisan  kloroform ditampung  ke  dalam  wadah  yang berbeda. Lapisan kloroform dievaporasi menggunakan  rotary  evaporator  hingga kering lalu ditimbang dengan timbangan  analitik  dan  diperoleh  fraksi kloroform  sebanyak  0,120  g.  Lapisan metanol  yang  ditampung  pada  wadah lain  dievaporasi  menggunakan  rotary evaporator hingga kering lalu ditimbang dengan timbangan analitik dan diperoleh  fraksi  metanol  sebanyak 0,080  g.  Ketiga  fraksi  yang  diperoleh akan digunakan dalam pengujian antimikroba. Rendemen-rendemen ekstrak  dan  fraksi  dihitung  dengan persamaan  berat  hasil  ekstrak/fraksi dibagikan dengan berat awal ekstrak/fraksi kemudian dikalikan dengan 100%.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  gelas  yang  digunakan dalam  penelitian  aktivitas  antimikroba ini  disterilkan  terlebih  dahulu  dengan menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121 ºC  selama  15  menit,  pinset  dibakar dengan pembakaran di atas api langsung dan  media  disterilkan  di  autoklaf  pada suhu  121  ºC  selama  15  menit  (Ortez, 2005).

## Pembuatan Media Cair B1
Pepton  0,5  g, beef  extract 0,3  g, natrium  klorida  0,3  g  dan  akuades sebanyak  100  ml  diaduk  sampai homogen  kemudian  disterilkan  dalam autoklaf  pada  suhu  121˚C  selama  15 menit  dan  setelah  itu  didinginkan. Setelah  dingin,  media  cair  B1  di  tutup dengan aluminium foil (Dwijendra et al , 2014).

## Kultur Mikroba
Mikroba  yang  digunakan  yaitu Escherichia coli, Staphylococcus
aureus dan Candida  albicans .  Masing-
masing  mikroba  diambil  dari  biakan murni menggunakan mikropipet
sebanyak  100  μL  dan  dimasukkan  ke dalam  masing-masing  tabung  reaksi yang  sudah  berisi  media  cair  B1 sebanyak  1  ml  dan  kemudian  ditutup menggunakan aluminium  foil .  Setelah itu,  diinkubasi  dalam  inkubator  pada suhu  37 0 C  selama  1  x  24  Jam (Dwijendra et al , 2014).

## Pembuatan Media Uji
Pepton 0,5 g, beef extract 0,3 g, natrium  klorida  0,3  g,  agar  1,5  g  dan akuades  sebanyak  100  ml  diaduk sampai  homogen  kemudian  disterilkan
di autoklaf pada suhu 121˚C selama 15 menit (Dwijendra et al , 2014).

## Pembuatan Larutan Uji
Larutan  uji  dibuat  dengan  cara  1 mg  ekstrak  kasar  Karang  Lunak Sarcophyton sp . dilarutkan  dalam  200
μL  metanol  dan  dikocok  hingga homogen menggunakan vortex. Perlakuan  yang  sama  dilakukan  pada fraksi  n-heksan,  fraksi  kloroform  dan fraksi metanol (Ortez,2005).
Pembuatan Kontrol Positif dan
Kontrol Negatif Kontrol  positif  dalam  pengujian aktivitas  antimikroba  ini  menggunakan kloramfenikol paper  disc .  Kontrol negatif yang digunakan dalam penelitian ini yaitu menggunakan pelarut  metanol,  dengan  cara  membuat larutan stok metanol dengan mengambil sebanyak  200  μL  metanol  kemudian  di totolkan  pada paper  disc (Lalamentik, 2017).

## Pengujian Aktivitas Antimikroba
Metode  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  metode  difusi  agar ( disc  diffusion  Kirby  and  Bauer ).  Pada pengujian  aktivitas  antimikroba  ini, cakram  ( paper  disc )  yang  digunakan berukuran  6  mm  dengan  daya  serap  50 μL  tiap  cakram.  Sebanyak  300  μL mikroba yang telah dikultur, dipipet dan diinokulasi  pada  30  ml  media  agar  lalu diaduk  hingga  homogen  dan  kemudian dituangkan  ke  dalam  cawan  petri  dan tunggu  sampai  media  agar  mengeras. Kemudian,  larutan  uji  yang  telah disiapkan  ditotolkan  pada  masing- masing  cakram  dengan  menggunakan
mikropipet.  Setelah  agar  mengeras, kertas  cakram  yang  telah  ditotolkan sampel  Karang  Lunak Sarcophyton sp . ,
kontrol  positif  dan  kontrol  negatif diletakkan ke dalam cawan petri dengan menggunakan pinset.
Selanjutnya, cawan  petri  diberi  label  dan  diinkubasi dalam inkubator pada suhu 37 0 C selama 1 x 24 Jam (Ortez, 2005).
Pengamatan dan Pengukuran Diameter Zona Hambat Pengamatan  dilakukan  setelah 24  jam  masa  inkubasi.  Daerah  pada sekitaran cakram menunjukkan
kepekaan  mikroba  terhadap  antibiotik atau bahan antimikroba yang digunakan sebagai  bahan  uji  yang  dinyatakan dengan diameter zona bening. Diameter zona  bening  diukur  menggunakkan digital  caliper .  Kemudian  zona  bening yang telah diukur, dikategorikan berdasarkan  pedoman  Davis  dan  Stout (1971).

## Analisis Data
Teknik pengolahan data dilakukan  dengan  model  penyajian dalam bentuk tabel dan gambar .Aktivitas  antibakteri  di  ukur  dengan menggunakan  jangka  sorong  skala millimeter  berdasarkan  zona  hambat yang terbentuk, kemudian dirata-ratakan dari tiga kali pengujian.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi Sampel Determinasi karang lunak Sarcophyton sp.,  dilakukan  di  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Program Studi Farmasi Universitas Sam Ratulangi. Preparasi Sampel Preparasi dilakukan dengan mengambil sampel karang lunak
Sarcophyton sp.,  dari  perairan  Ponteng Desa  Tumbak  Minahasa  Tenggara dilakukan  dengan  dipotong  kecil-kecil berbentuk dadu
Ekstraksi Karang Lunak Sarcophyton sp.
Ekstraksi  dilakukan  selama  3  x 24  jam,  dan  setiap  24  jam  ekstrak karang  lunak  S arcophyton sp  disaring dan dimaserasi kembali dengan memakai  pelarut  yang  baru,  hal  ini disebut  dengan  remaserasi.  Massa ekstrak beserta rendemen yang dihasilkan  dalam  proses  ekstraksi  dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1. Rendemen Ekstrak Karang Lunak Sarcophyton sp. N o Samp el Massa Ekstra k (gr) Rendem en (%) Warn a Samp el 1 Ekstra k Etanol 9,3 2,21 Cokla t
Fraksinasi Karang Lunak Sarcophyton sp Setelah dilakukan maserasi selanjutnya  dilakukan  proses  fraksinasi dimana metode penelitian ini menggunakan  metode  fraksinasi  cair- cair.  Pelarut  yang  digunakan  untuk fraksinasi ini yaitu n-heksan, kloroform, dan  metanol.  Massa  fraksi  beserta rendemen yang dihasilkan dalam proses fraksinasi dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Massa Fraksi Beserta Rendemen N o Sampel Mass a Ekstr ak (gr) Rendem en (%) Warn a Samp el
1 Fraksi N- Heksan 0,080 gr 4,25 % Cokl at
Keru
h 2 Fraksi klorofo rm 0,120 gr 6,00 % Cokl at 3 Fraksi Metano l 0,085 gr 4,00 % Cokl at Beni ng Table di atas menunjukan bahwa dalam senyawa karang lunak S arcophyton sp., terdapat banyak senyawa yang bersifat semi polar.
Uji Aktivitas Antimikroba Karang
Lunak Sarcophyton sp Pada pengujian aktivitas antimikroba dengan menggunakan mikroba  uji Staphylococcus  aureus,
Escherichia  coli ,  dan Candida  albicans dari ekstrak etanol, fraksi metano, fraksi n-heksan dan fraksi klorofom menggunakan metode difusi agar.
Gambar A. Staphylococcus aureus
Gambar B. Escherichia coli
Gambar C. Candida albicans
Gambar  1.  Hasil  Uji  Aktivitas Antimikroba dari Ekstrak dan Fraksi Karang Lunak
Sarcophyton sp. :(A). Staphylococcus Aureus , (B). Escherichia  coli dan (C) Candida albicans .
Keterangan (1). Fraksi metanol,
(2). Fraksi kloroform,
(3). Fraksi n.heksan,
(4). Ekstraksi etanol,
(5). Kontrol Positif,
(6)  Kontrol Negatif
Tabel    3.  Hasil  rata-rata  Aktivitas Antimikroba  Ekstrak  dan Fraksi Karang Lunak
Keterangan;(Ec) Escherichia coli,
(Sa) Staphylococcus  aureus,
(Ca) Candida  albicans, (EE) Ekstrak  etnol,  (FH)  Fraksi heksan, (FK) Fraksi kloroform, (FM) Fraksi metanol,  (+)  kontrol  positif, (-)  kontrol  negatif,  ( ) jumlah zona bening, ( ̅ jumlah  rata-rata  zona bening
Pada  penelitian  ini  ekstrak etanol  fraksi  metanol  fraksi  n-heksan dan  fraksi  klorofom  merupakan  ekstrak dan fraksi yang efektif dalam
menghambat pertumbuhan bakteri
Gram  positif Staphylococcus  aureus bakteri  Gram  negatif Escherichia  coli sedangkan untuk jamur Candida albicans tidak efektif dalam penghambatan. Pada pengujian aktivitas
antimikroba  dari  sempel  karang  lunak Sarcophyton sp penggolongan kekuatan daya  antimikroba  digolongkan  menurut pedoman  Davis  and  Stout  (1971)  yang ditunjukan pada tabel 4.
Tabel  4. Kategori  Kekuatan  Daya Antimikroba Berdasarkan Pedoman Davis and  Stout. Dari hasil yang diperoleh menunjukan  bahwa  ektra  etanol  fraksi metanol,  fraksi  klorofom  dan  fraksi  n- heksan  efektif  dalam  menghambat pertumbuhan mikroba uji Staphylococcus  aureus dan Escherchia coli sedangkan  untuk  jamur Candida albicans tidak efektif dalam penghambatan.

## KESIMPULAN
Menurut  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan  dapat  disimpulkan bahwa  karang  lunak Sarcophyton sp yang  diperoleh  dari  perairan  Desa Tumbak  Minahasa  Tenggara  memiliki aktivitas antimikroba pada bakteri Gram positif Staphylococcus  aureus dan Escherchia coli yang tergolong aktifitas yang  sedang  dan  untuk  jamur candida albicans tidak memiliki aktivitas antimikroba.

## SARAN
Hasil  dan  pembahasan  dari aktivitas  antimikroba  ekstrak  dan  fraksi karang  lunak Sarcophyton sp , dapat diberikan  saran  yaitu  perlu  dilakukan penelitian  tentang  uji antimikroba dengan metode pengujian yang berbeda atau  dengan  menggunakan  mikroba yang berbeda.

## DAFTAR PUSTAKA
Davis,  W.  W.,  T.R.  Stout.  1971.  Disc
plate method of microbiological assay. Journal  of  microbiology 22: 659-665.
Diameter Zona
Bening(mm)
Kategori
≥20 Sangat Kuat 10-20 Kuat 5-10 Sedang ≤5 Lemah
Fabricius,  K.  Dan  P.  Aldersade.  2001.
Soft  Coral  And  Sea  Fans:  A Comprehensive      Guide  to Tropical Shallow- Water Genera  of  the  Central-West Pasific,  the  indian  Ocean  and The  Red  Sea.  Institut  of
Marine  Science.  Twonsvile. (Diakses Mei 2019)
Huda,  C.  2011.  Penapisan  Aktifitas
Antibakteri dan Bakteri Yang Berasosiasi  Dengan  Karang Lunak Sarcophyton sp. Jurnal.  Program  Studi  Ilmu Kelautan . Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam. Universitas Sriwijaya. Juariah,  S.,  Suryanto,  D.,  dan  Jamilah  , 1. 2014. Aktivitas Antibakteri Spesies      Asterias    Forbesii terhadap Beberapa Jenis Bakteri Patogen. Jurnal Berkala Perikanan Terubuk . Lalamentik, G. 2017. Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Karang Lunak  Klyxum  sp.  yang Diperoleh dari Teluk Manado .  [ Skripsi ].  Program Studi Farmasi FMIPA Universitas  Sam  Ratulangi, Manado.
Ortez,  J.  H.  2005.  Disk  Diffusion
testing in manual of antimicrobial susceptibility Radhika, P. 2006. Chemical constituens and  biological  activities  of the  soft  coral  of  genus
Cladiella: A review.
Biochemical  Systematics  and Ecological 34: 781-789. (Diakses Mei 2019) Sawant,  S.,  Youssef,  D.,  Mayer,  A., Sylvester, P. 2006. Anticancer and Antinflamantory Sulphur ontaining Semisyntethic Derivates of Sarcophine. Chem Phar . 54(8):1119- 1123.