## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 27-33
Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Benalu Langsat (Dendropthoe sp) Terhadap Bakteri Klebsiella Pneumoniae
Greti M. Kurama 1 *, Wilmar Maarisit 1 , Einstein Z. Karundeng 2 , Nerni O. Potalangi 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon 2 Program Studi Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon

## *Penulis Korespondensi; gretykurama@gmail.com

## ABSTRAK
Antibakteri adalah zat yang digunakan untuk menghambat pertumbuhan atau membunuh mikroorganisme. Klebsiella pneumoniae merupakan bakteri Gram-negatif yang dapat menyebabkan infeksi saluran kemih, infeksi  pernapasan  dan  bakteremia  pada  daya  tahan  tubuh  yang  lemah.  Daun  benalu  langsat  memiliki kandungan  senyawa  flavonoid,  alkaloid,  saponin  dan  tanin  yang  berperan  sebagai  antibakteri.  Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  benalu  lansat Dendropthoe sp. terhadap bakteri Klebsiella pneuminiae . Uji aktivitas antibakteri menggunakan metode difusi cakram. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun benalu langsat memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Klebsiela pneumonia yaitu pada konsentrasi 20% (12,5 mm) 40% (12,6 mm), 60% (15,6 mm), 80% (16,3 mm) dan  100% (20,5 mm) .
Kata kunci : Antibakteri, Klebsiella pneuminiae , Dendropthoe sp.

## ABSTRACT
Antibacterial are substances that are used to inhibit growth or kill microorganisms . Klebsiella pneumoniae is a Gram-negative bacteria that can cause urinary infections, respiratory infections and bacteremia in weak immune systems. Benalu Langsat Dendropthoe sp leaves contain flavonoid compounds, alkaloids, saponins and tannins which act as antibacterial. The aim of this study was to determine the antibacterial activity of the ethanol extract of the leaves D endropthoe sp. against the Klebsiella pneuminiae bacteria. Antibacterial activity test using the disc diffusion method. The results showed that the D endropthoe sp leaf extract had antibacterial activity against the Klebsiela pneumonia bacteria at a concentration of 20% (12.5 mm) 40% (12.6 mm), 60% (15.6 mm), 80% (16.3 mm). mm) and 100% (20.5 mm).
Keywords : Antibacterial, klebsiella pneumoniae, Dendropthoe sp.

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  jenis  penyakit  yang paling  banyak  diderita  oleh  penduduk  di  negara berkembang,   termasuk   Indonesia.   Salah  satu penyebab  penyakit  infeksi  adalah  bakteri  [1]
Istilah infeksi menggambarkan pertumbuhan atau replikasi  mikroorganisme  di  dalam  tubuh  inang.

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 27-33
Penyakit  timbul  bila  infeksi  menghasilkan perubahan pada fisiologi normal tubuh [2].
Salah  satu  Bakteri  yang  dapat  menyebabkan infeksi  adalah Klebsiella  pneumonia. Bakteri  ini merupakan  bakteri  Gram-negatif  yang  dapat menyebabkan  infeksi  saluran  kemih,  infeksi pernafasan dan bakteremia terutama pada individu yang  daya  tahan  tubuhnya  lemah  [3].  Dalam mengatasi  masalah  infeksi  tersebut  sangat diperlukan penggunaan antibakteri atau antiinfeksi [4].
Antibakteri  adalah  zat  yang  digunakan  untuk menghambat  pertumbuhan  atau  membunuh mikroorganisme, antibakteri juga dapat diklasifikasikan  berdasarkan  komponen  seluler atau sistem yang mempengaruhi, apakah antibakteri dapat menyebabkan kematian sel (agen bakterisida) atau hanya menghambat pertumbuhan sel (agen bakteriostatik) [5].
Tanaman  herbal yang dikenal sebagai  obat tradisional  banyak  digunakan  oleh  masyarakat dalam  hal  penanggulangan  suatu  penyakit,  baik digunakan sebagai pencegahan maupun pengobatan penyakit tersebut. Sebagian pengobatan tradisional disukai masyarakat karena ketersediaannya yang luas [6]
Tumbuhan Benalu langsat merupakan salah satu  tanaman  tradisional  yang  termasuk  dalam suku Loranthaceae [7].  Tanaman  yang  termasuk dalam  suku Loranthaceae ini  mengandung metabolit  sekunder  yaitu,  flavonoid,  tanin, alkaloid dan saponin. Secara empiris daun benalu digunakan  sebagai  ramuan  obat  [8]  Tanaman  ini juga  dapat  di  manfaatkan  sebagai  antioksidan, antiinflamasi, antibakteri, antitoksin dan antikanker.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  adalah  erlenmeyer, gelas  ukur,  pipet  tetes,  cawan  petri,  jarum  ose, autoklaf,  inkubator,  spatula,  korek  api,  batang pengaduk,  kamera,  mikropipet,  api  bunsen, timbangan  analitik,  gelas  arloji,  jangka  sorong, aluminium  foil,  kertas  label,  laminar  air  flow, rotary evaporator, toples, kertas saring, corong.
Bahan yang digunakan adalah ekstrak daun benalu  langsat,  media  Nutrient  agar  (NA),  kultur murni Klebsiella pneumonia, aquades, Ciprofloxacin.

## Prosedur Pelaksanaan Penelitian

## Penyiapan Sampel
Sampel  yang  di  gunakan  adalah  daun benalu  langsat  yang  berwarna  hijau  dan  masih segar,  yaitu  sebanyak  500  gram  yang  diperoleh dari  desa  Paca,  Kabupaten  Halmahera  Utara, Provinsi Maluku Utara.

## Pembuatan Ekstrak
Sampel  segar  yang  di  dapat  kemudian diekstraksi  dengan  metode  maserasi.  Sampel diambil  sebanyak  500  gr  dimasukan  kedalam wadah  kaca  dan  direndam  dengan  pelarut  etanol 70%  di  tutup  dengan  alumunium  foil  dan  di biarkan  selama  24  jam.  Kemudian  di  saring menggunakan  kertas  saring  untuk  menghasilkan filtrat dan residu, kemudian residu di remaserasi 2 kali.
Filtrat yang dihasilkan di campurkan untuk diperoleh filtrat total, selanjutnya filtrat dipekatkan  menggunakan rotary  evaporator hingga  memperoleh  ekstrak  kental.  Ekstrak kemudian di timbang dan di simpan dalam wadah

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 27-33
kaca  tertutup  sebelum  di  gunakan  untuk pengujian.
Pengujian Aktivitas Antibakteri.
1. Pembuatan  Larutan  Nutrient  Agar  (NA) dan Media Agar Miring Untuk  larutan Nutrient  Agar (NA),  di  ambil sebanyak 0,28 gram kemudian  dilarutkan  dengan 10  mL  aquadest  dalam  erlenmeyer,  selanjutnya dihomogenkan,  larutan  NA  digunakan  untuk pembuatan  media  agar  miring  [9].  Kemudian sebanyak 5 mL Larutan NA dituangkan ke dalam tabung reaksi dan diletakan  dengan posisi  miring dan dibiarkan hingga memadat. Media agar miring digunakan untuk peremajaan bakteri uji.

## 2. Sterilisasi Alat
Alat-alat yang akan dipakai dalam pengujian di cuci bersih dengan sabun, kemudian dikeringkan.  Setelah  itu,  dibungkus  dengan alumunium  foil.  Alat-alat  yang  akan  digunakan disterilkan  bersama  dengan  larutan  NA  dengan menggunakan  autoclaf  pada  suhu  121 0 C  selama 15 menit [9].
3. Peremajaan Bakteri
Bakteri klebsiella  pneumoniae yang  berasal  dari biakan  murninya,  diambil  sebanyak  1  ose kemudian  diinokulasikan  dengan  cara  digores pada  medium  Nutrient  Agar  (NA)  miring kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  18- 24 jam [10].

## 4. Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri uji yang telah diremajakan, diambil satu  ose  kemudian  disuspensikan  kedalam  2  ml larutan NaCl 0,9% steril, setelah itu dihomogenkan [10].
5. Pembuatan Media Padat
Pembuatan media dilakukan dengan cara menyiapkan  bahan-bahan  untuk  medium  yaitu dengan  menimbang  media Nutrient  Agar (NA) sebanyak  4.2  gr  kemudian  dilarutkan  dengan aquades  sebanyak  150  ml.  kemudian  diaduk hingga  homogen,  setelah  homogen  disterilkan dengan autoclave pada  suhu  121 0 C  selama  15 menit [11].

## 6. Pembuatan Larutan Stok
Sebanyak  5  gram  ekstrak  kental  daun benalu  langsat  dilarutkan  dalam  5  ml  aquades sebagai  larutan  stok  kemudian  di  buat  5  serial konsentrasi  yaitu  20%,  40%,  60%,  80%,  100%. Untuk kontrol positif menggunakan Ciprofloxacin dan  dilarutkan  dengan  50  ml  aquades  dan  untuk kontrol negatif digunakan aquades.

## 7. Pengujian Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  etanol  daun banalu  langsat  dilakukan  dengan  menggunakan metode  difusi  cakram  ( disc). Kertas  cakram ditotolkan kedalam masing-masing serial konsentrasi ekstrak daun benalu langsat. Kemudian  Supensi  bakteri  di  masukan  kedalam erlenmeyer  yang  berisi  150  ml  media  padat kemudian dihomogenkan hingga bakteri suspensi tercampur  dengan  media,  selanjutnya  media dituang kedalam cawan petri sebanyak 30 ml dan dibiarkan  hingga  memadat.  Setelah  memadat, letakkan kertas cakram pada media pengujian dan di  inkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama  24  jam. Selanjutnya  diukur  zona  hambat  menggunakan jangka sorong [9].
8. Cara Perhitungan Zona Hambat
Perhitungan diameter zona hambat [12]. Rumus : 𝑑 = 𝐴+𝐵 ……… (1) 2
Keterangan :

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 27-33
d = diameter zona hambat A = diameter vertikal B = diameter horizontal 9. Analisis Data
Data  hasil  pengujian  aktivitas  antibakteri ekstrak  daun  benalu  langsat  terhadap  bakteri K. pneumoniae dianalisis menggunakan uji One Way ANOVA tingkat kepercayaan 95% (α=0,05).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  ekstraksi  dari  daun  benalu  langsat yang memiliki berat 500 gram menghasilkan filrat yang  berwarna  hijau  kecoklatan  kemudian  filtrat dipekatkan dengan menggunakan rotary evaporator untuk menghailkan ekstrak kental yaitu  sebanyak  23.4  gram.  Pada  penelitian  ini proses ekstraksi menggunakan metode maserasi, karena  pengerjaan dan  peralatan  yang digunakan mudah dan sederhana.  Pelarut yang digunakan adalah etanol  70%,  etanol  70%  dapat menarik senyawa-senyawa baik polar maupun non polar [6].
Ekstrak daun benalu langsat kemudian di uji  antibakteri.  Pengujian  ini  dilakukan  untuk mengetahui  kemampuan  ekstrak  daun  benalu langsat  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri K. pneumoniae . Hasil pengujian antibakteri dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Pengujian Daya Antibakteri
Dari  Tabel  1  diatas  dapat  dilihat  pada masing-masing konsentrasi yang dapat membentuk zona hambat pada media padat yaitu
konsentrasi  20%  dengan  zona  hambat  rata-rata sebesar  12.5  mm.  konsentrasi  40%  dengan  zona hambat  rata-rata  sebesar  12.7  mm.  Konsentrasi 60%  dengan  zona  hambat  rata-rata  sebesar  15.7 mm.  konsentrasi  80%  dengan  zona  hambat  rata- rata  sebesar  16.3  mm.  Konsentrasi  100%  dengan zona hambat rata-rata sebeasar 25.5 mm. Kemudia kontrol  positif  didapat  zona  hambat  rata-rata sebesar 39.3 mm sedangkan  kontrol  negatif tidak membentuk  zona  hambat  pada  media  yang ditumbuhi  oleh  bakteri K.  pneumoniae .  Hal  ini dapat  menunjukan  bahwa  ekstrak  daun  benalu langsat  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri K. pneumoniae.
Dari  semua  konsentrasi  nilai  zona hambat  terbesar  terdapat  pada  konsentrasi 100% dengan zona hambat sebesar 25.5 mm. Hal  tersebut  yang  telah  dilakukan  oleh  [13]. bahwa  konsentrasi  yang  semakin  tinggi, maka daya hambat yang akan dihasilkan oleh bahan antibakteri juga tinggi.
Ekstrak  etanol  daun  benalu  lansat memiliki aktivitas antibakteri karena mengandung  senyawa  flavonoid,  alkaloid saponin  dan  tannin.  Senyawa  flavonoid mampu bekerja sebagai antibakteri. Mekanisme kerja flavonoid sebagai antibakteri  yaitu  mengganggu  komponen penyusun  peptidoglikan  pada  sel  bakteri, sehingga  lapisan  dinding  tidak  terbentuk secara  utuh  dan  menyebabkan  kematian  sel tersebut [14].
Alkaloid dapat bekerja sebagai antibakteri  yaitu  dengan  cara   mengganggu komponen  penyusun  polipepdoglikan  pada  sel

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 27-33
bakteri  sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak terbentuk  dan  menyebapkan  kematian  sel tersebut  [15].  Saponin  dapat  bersifat  sebagai antibakteri  dengan  merusak  membran  sel yang  dapat  menyebapkan  substansi  penting keluar  dari  sel  dan  juga  dapat  mencegah masuknya bahan bahan penting ke dalam sel. Jika  fungsi  membran  sel  rusak  maka  akan menyebapkan kematian sel [16].
Tanin mempunyai kemampuan menginaktivasi  adhesi  sel  bakteri  dan menginaktivasi  enzim,  serta  menggangu transpor  protein  pada  lapisan  dalam  sel.  Tanin mempunyai  target  pada  polipeptida  dinding sel sehingga pembentukan dinding sel bakteri menjadi kurang sempurna. Hal ini menyebabkan sel bakteri menjadi lisis karena tekanan  osmotik  maupun  fisik  sehingga  sel bakteri akan mati [17].
Tabel 2. Hasil Uji Anova
Dari  Tabel  3  dapat  dilhat  bahwa  kontrol  negatif, konsentrasi  100%,  dan  kontrol  positif  berbeda signifikan  dengan  semua  konsentrasi  ekstrak. Konsentrasi  20%  berbeda  signifikan  dengan control  negatif,  konsentrasi  100%,  dan  kontrol positif

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bawah  ekstrak  daun  benalu  langsat  memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Klebsiela pneumonia yaitu pada konsentrasi 20% (12,5 mm) 40% (12,6 mm), 60% (15,6 mm), 80% (16,3 mm) dan  100% (20,5 mm) .

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  Radji, M., 2011,  Buku Ajar Mikrobiologi
Panduan Mahasiswa Farmasi dan Sum of Squares Df Mean Square F Sig. Kedokteran,  Jakarta,  Penerbit  Buku Kedokteran EGC. Hal 2.

## Groups
Dari Tabel 2. dapat dilihat pada nilai sig. 0.00 < α =  0.05.  Ini  menunjukkan  tiap-tiap  perlakuan memiliki  zona  hambat  yang  berbeda,  maka dilanjutkan  dengan  uji  TukeyHSD  5%  untuk melihat  perlakuan-perlakuan  mana  saja  yang memberikan efek yang berbeda sebagai antibakteri terhadap bakteri Klesiella Pneumoniae
Tabel 3. Hasil Uji Tukey
[3] Schroll, C., Barken, K. B., Krogfelt, K. A., &
Struve, C., 2010, Role Of Type 1 And Type 3 Fimbriae    In Klebsiella pneumoniae BiofilmFormation,http://ww w.biomedcentral.com,  1471-2180.  10. Tarina,  nimas tika inas.  2010. Deteksi Bakteri Klebsiella pneumonia, 15(2):Hal. 119 .
[4] Priyanto,  2008,  Farmakologi  Dasar  untuk
Mahasiswa Keperawatan dan Farmasi, 83, Bandung, Leskonfi. Hal 2. Between 2699,976 6 449,996  46,266  ,000 [2]  Pratiwi,  S.  T.,  2008,  Mikrobiologi  Farmasi, Within Erlangga, Jakarta : 150-171. Relationship Groups 136,167 Total 2836,143 14 20
9,726
and  Infectious  Risk. Periodontologi  2000 (No. 55) Pp 46-69.

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 27-33
[5] Kohanski M.A, Dwyer D.J, Collins J.J., 2010,
How  Antibiotics  kill  Bacteria  :from targets to networks. Macmillan Publishers
Limited.  Nature  Reviews  Microbiology volume 8. Hal 423 .
[6] Triswanto  S  Dan  R.  Permatasari  2015  uji aktivitas  ekstrak  Dtanol  Daun  Alpukat ( Persea  americana mill.)  Terhadap
Penyembuhan Luka Bakar Pada Punggung Mencit Putih Jantan ( Musmusculus ) Jurnal Ilmiah
Manuntung, 1(2), 100-106.
[7] Tristanti, I., Fatimawali., Bodhi, W. 2013. Uji Efek  Hepatoprotektor  Ekstrak  Etanol Daun  Benalu  Langsat  ( Dendrophthoe pentandra (L.)  Miq).  Terhadap  Kadar Malondialdehid (MDA) pada Hati Tikus Putih  Jantan  Galur  Wistar  yang  di Induksi  Karbon  Tetraklorida  (CCl4).
Jurnal Ilmiah Farmasi . 2(3):
[8] Purnomo,  B.  (2000).  Uji  Ketoksikan  Akut
Fraksi Etanol Daun Benalu ( Dendropthoe SP)  Pada  Mancit  Jantan Dan  Uji  Kanduanga  Kimia.  [Skripsi] Yogyakarta: Fakultas Farmasi
Universita Gadja Mada.
[9] Niswah  Lukluatun.  2014.  Uji  Aktivitas
Antibakteri  Dari  Ekstrak  Buah  Parijoto
( Medinilla speciosa blume)
Menggunakan  Metode  Difusi  Cakram.
Program studi farmasi, fakultas kedokteran dan ilmu kesehatan universitas islam negeri syarif
hidayatullah Jakarta.
[10] Dwyana,  Z  dan  E.  Johannes.  2012.  Uji
Efektivitas  Ekstrak  Kasar  Alga  Merah
( Eucheuma cottonii )
Sebagai Antibakteri  Terhadap  Bakteri  Patogen. Repository  Jurusan  Biologi  Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Universitas Hasanuddin Makassar. [11] Jauhari,  L.T.  2010.  Seleksi  dan  Identifikasi Kapang  Endofit  Penghasil  Antimikroba Penghambat Pertumbuhan Mikroba Patogen . Skripsi Program Studi Biologi.
UIN  Syarif  Hidayatullah  Jakarta.  hal. 31.
[12] Audies, A. 2015. Uji Efektivitas Antibakteri Ekstrak  Kulit  Nanas  ( Ananas  comosus.
L )
Terhadap Pertumbuhan Streptococcus  Mutans Penyebab  Karies Gigi. Skripsi Program Studi Kedokteran Gigi Fakultas Kedokteran Gigi
Universitas Andalas Padang.
[13] Amrie  AGA, Ivan,  Anam S, Ramadanil. Uji Efektivitas  Ekstrak  Daun  Dan  Akar Harrisoniaperforata  Merr.  Terhadap Pertumbuhan  Bakteri  Vibrio  Cholerae. Online  Jurnal  Of  Natural  Science. 2014;3(3):331-340
[14] Rika,  P.  R.  2014.  Uji  Aktivitas  Antibakteri
Ekstrak Etanol Daun Mangga (Mangifera foetida L.) Terhadap
Staphylococcus  aureus  Secara  In  Vitro.
Skripsi.  Program  Studi  Pendidikan Dokter, Fakultas
Kedokteran,UniversitasTanjungpura,
Pontianak.
[15] Darsana,  I.G.O.,  2012,  Potensi  Daun Binahong  ( Anredera  Cordifolia  Tenore
Steenis) Dalam  Menghambat

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 27-33
Pertumbuhan  Bakteri Escherecihia  coli
Secara In  Vitro,  Indonesia  Medicus
Vaterinus, 1(3) ,337-351.
[16] Monalisa, D., Handayani T., & Sukmawati D.
2011.  Uji  Daya  Antibakteri  Ekstrak
Daun  Tapak  Liman  (Elepthantopus Scaber  L.)  Terhadap  Staphylococcus Aureus  dan  Salmonella  Typhi Jurnal BIOMA, 9(2), 13-20.
[17] Napanggala, A , Susianti , dan E. Aprilliana.
2014.  Effect  of  Jatrophas’s  ( Jatropha curcas  l )  sap  Topically  in  the  Level  of
Cuts  Recovery  on  White  Rats  Sprague Dawley Strain. Journal Majority .
3(5):26-35.