Abstrak — Konsumsi energi meningkat dari tahun ke tahun dan 95%  terpenuhi  dari  bahan  fosil  yang  jumlahnya  terbatas. Biodiesel  sebagai alternatif sumber energi dari tanaman jarak ( Jatropha  curcas )  dan  kelapa  sawit  memiliki  kemampuan oksidasi  yang  rendah    pada  suhu  dingin,  produksi  lipid membutuhkan waktu lama serta kandungan lipid yang berkisar 35%  dan  75,6%.    Di  sisi  lain, Nannochloropsis sp.  dapat memproduksi  lipid  mencapai  90%  dari  berat  kering  biomassa pada kondisi tercekam, panen lebih cepat, mudah dibudidayakan. Waktu panen kultur Nannochloropsis sp. dapat direkayasa  berdasarkan  nutrisi,  suhu,  aerasi,  salinitas, fotoperiode.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  pengaruh cekaman nitrogen dan fotoperiode terhadap lama waktu panen kultur.  Nannochloropsis  sp.,  dikultur  pada  kondisi    normal untuk  mendapatkan  masa  starter  (setengah  eksponensial kultur).  Kultur Nannochloropsis sp.  pada  masa  starter diberikan  perlakuan  kombinasi  nitrogen  pada  pupuk  Conway terdiri  dari  0%,  25%,  50%,  75%  dan  100%  NaNO 3 dengan fotoperiode  (terang:gelap)  12:12,  16:8  dan  24:0.    Kultur Nannochloropsis sp.  dengan  nitrogen  terbatas  memiliki  fase eksponensial  yang  lebih  singkat  sedangkan  pada  perlakuan fotoperiode dengan terang lebih lama, kultur memiliki nilai OD yang  paling  tinggi.  Waktu  panen  paling  cepat  yaitu  perlakuan dengan  nitrogen  0%,  nilai  OD  paling  tinggi  pada  pemberian nitrogen 100% pada berbagai fotoperiode.
Kata  Kunci — Eksponensial,  Fotoperiode, Nannochloropsis sp., Nitrogen, Starter.

## I. PENDAHULUAN
NDONESIA  merupakan negara kepulauan yang memiliki kekayaan alam yang melimpah namun ketersediaan energi dari  tahun  ke  tahun  mengalami  penurunan/krisis.  Krisis energi tersebut terjadi karena tingginya konsumsi energi oleh penduduk  meliputi  sektor  industri  (50%),  transportasi (34%), rumah tangga  (12%) dan komersial (4%). Konsumsi energi  Indonesia  yang  cukup  tinggi  tersebut  hampir  95% dipenuhi  dari  bahan  bakar  fosil.  Dari  total  tersebut,  hampir 50%  merupakan  Bahan  Bakar  Minyak  (BBM).  Sebagai sumber  energi  tidak  terbarukan,  cadangan  BBM  Indonesia sangat  terbatas  [1]  sehingga  diperlukan  sumber  energi alternatif  untuk  menggantikan  fungsi  BBM,  salah  satunya memanfaatkan  sumber  daya  hayati  baik  dari  lemak  hewani maupun nabati [1] sebagai biodiesel. Namun, sumber lemak nabati  (lemak  dari  tanaman  jarak  ( Jatropha  curcas), kelapa sawit/palm)  dan  lemak  hewani  masih  memiliki  kekurangan untuk  dijadikan  sebagai  biodiesel  karena  memiliki kemampuan oksidasi yang rendah pada suhu dingin  [2] laju pertumbuhan  rendah  sehingga  produksi  lipid  memerlukan waktu  yang  lama  [3].  Untuk  mengatasi  kekurangan  tersebut dapat memanfaatkan mikroalga atau fitoplankton [4] sebagai alternatif biodiesel.
Mikroalga laut, Nannochloropsis sp . memiliki kandungan  lemak  yang  cukup  tinggi  yakni  sebesar  12,0- 53,0%  berat  kering  biomassa  tetapi  jika  di  bawah  kondisi tercekam  kandungan  lemak  mencapai  90%  dari  berat keringnya [4][5] yang lebih tinggi daripada lipid jarak pagar sebesar  35%  berat  kering  [6]  dan  kelapa  sawit  sebesar 75,6%  [7]. Nannochloropsis sp  juga    memiliki  laju pertumbuhan  yang  tinggi  [3],  memiliki  kinerja  lebih  baik pada  cuaca  dingin  karena  mengandung  PUFA  dengan  titik cair yang lebih rendah jika dibandingkan dengan asam lemak jenuh [2]. Kandungan lipid serta keunggulan Nannochloropsis tersebut berpotensi sebagai alternatif bahan biodiesel melalui proses kimia transesterifikasi [8].
Produksi  lipid    dan  waktu  panen  Nannochloropsis  dapat direkayasa  berdasarkan  kondisi  kultur,  seperti  mengubah konsentrasi nutrisi dari media, pengaturan suhu, aerasi CO 2 , salinitas,  intensitas  cahaya  dan  fotoperiode  [8]  karena  pada kondisi  yang  tidak  menguntungkan  mikroalga  mengubah jalur  biosintesis  lipid  menuju  pembentukan  dan  akumulasi lipid  netral  dalam  bentuk  triasilgliserol  sebagai  pertahanan [9].  Kondisi  cekaman  lingkungan  tersebut  juga  dapat menurunkan  kecepatan  pembelahan  sel,  sel  akan  merangkai asam  lemak  menjadi  lipid  simpanan  berupa  triasilgliserol untuk  mengisi  ketersediaan  NADP + karena  saat  nutrisi  atau lingkungan tercekam, NADP + mengalami penurunan sehigga NADPH  yang  dihasilkan  dari fotosintesis dikonsumsi untuk pembentukan asam lemak [10].  Perlakuan cekaman nitrogen dapat  meningkatkan  produksi  lipid  yang  lebih  tinggi [11][12]  karena  protein  dari  mikroalga  terpecah  menjadi Asetil-KoA.  Cekaman  fotoperiode  dapat  meningkatkan panen lipid mikroalga serta mempengaruhi fotosinteis untuk produksi  biomassa,  kondisi  terang  dibutuhkan  dalam  fase fotokimia  pembentukan  ATP  dan  NADPH  sedangkan kondisi  gelap  mempengaruhi  sintesis  biokimia  molekul untuk pertumbuhan meliputi pembentukan protein, karohidrat  dan  lemak  [8].    Dalam  penelitian  ini  akan dilakukan  uji  pengaruh  kombinasi  perlakuan  pemberian berbagai  konsentrasi  nitrogen  dan  fotoperiode    terhadap waktu panen Nannochloropsis sp.

## II. URAIAN PENELITIAN

## A. Persiapan Alat dan Bahan
Peralatan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah neraca  analitik,  spektrofotometer  Uv-Vis,  autoklaf,  oven, pH-meter,  lux-meter, hand  refraktometer .  Bahan  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  meliputi  air  laut,  vitamin  B, unsur  maro  dan  mikro  pupuk  Conway,  kultur  murni Nannochloropsis sp.,  alkohol  96%,  aquades,  aquabides, kertas tisu.

## Pengaruh Cekaman Nitrogen dan Fotoperiode terhadap Kurva pertumbuhan Kultur

## Nannochloropsis sp.
S. Dwirejeki dan D. Ermavitalini Departemen Biologi, Fakultas Sains, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS)
e-mail : dinierma@bio.its.ac.id
I

## B. Persiapan Sampel dan Media Kultur
Sampel  yang  digunakan  adalah  mikroalga  jenis Nannochloropsis sp . yang  diperoleh  dari  stok  murni Laboratorium  Pakan  Alami  Balai  Perikanan  dan  Budidaya Air Payau (BBPAP) Situbondo dengan kepadatan stok awal 10 6 sel/ml.  Selanjutnya  dilakukan  kultur  untuk  penentuan masa  starter  dan  masa  panen  dengan  presentase  10% mikroalga  dalam  air  laut  steril.  Air  laut  diperoleh  dari penyedia  komersil.  Media  yang  digunakan  untuk  kultur mikroalga Nannochloropsis sp. adalah air laut [13]. Air laut disaring  dengan  membran  filter,  kemudian  diukur  salinitas pada  30-32  ppt  [14][15]  pH  7-8,  intensitas  cahaya  terang 900-1000 lux, gelap 0-10 lux, suhu 25-27 o C [15].

## C. Pembuatan Pupuk Conway
Pupuk yang digunakan dalam penelitian ini adalah pupuk Conway yang terdiri dari 5 jenis konsentrasi NaNO 3 sebagai variasi  perlakuan  cekaman  nutrisi nitrogen  [16] yang terdiri dari  100%,  75%,  50%,  25%  dan  0%.  Komposisi  100% pupuk  Conway  terdiri  100 gram NaNO 3 dilarutkan dalam 1 L  aquades  [12].  Tabel 1   adalah komposisi pupuk Conway dalam 1 L aquades steril [12]:
Tabel 1. Komposisi Pupuk Conway Komposisi Konsentrasi Na 2 EDTA 45 g/L FeCl 2 .6H 2 O 1,3 g/L H 3 BO 7
33,6 g/L
NaH 2 PO 4 20 g/L
MnCl 2 .4H 2 O 0,36 g/L NaNO 3 100 g/L Trace metal solution 1. ZnCl2 2. CoCl2.6H2O 3. (NH4) 6Mo7O24.4H2O
4. CuSO4.5H2O 5. Aquades  (Sousa et al, 2014) 1 ml 2,1 g/L 2 g/L 0,9 g/L 2 g/L 1 L Vitamin 1. Vitamin B12 2. Vitamin B1 3. Aquabides 1 ml 10 mg 200 mg 200 ml
Media  kultur  pada  penelitian  ini  menggunakan  pupuk Conway dengan konsentrasi 1 ml per 1 L komposisi kultur.

## D. Sterilisasi Alat dan Bahan
Pupuk yang digunakan dalam penelitian ini adalah pupuk Conway yang terdiri dari 5 jenis konsentrasi NaNO 3 sebagai variasi  perlakuan  cekaman  nutrisi  nitrogen  (Yarti  dkk, 2014),  yang  terdiri  dari  100%,  75%,  50%,  25%  dan  0%. Komposisi  100%  pupuk  Conway  terdiri  100  gram  NaNO 3 dilarutkan  dalam  1  L  aquades  [12].  Berikut  adalah komposisi  pupuk  Conway  dalam  1  L  aquades  steril  [12]: Sterilisasi  alat  yang  dilakukan  meliputi  sterilisasi  botol kultur,  pipet  tetes,  pipet  volume,  gelas  ukur,  erlenmeyer. Sterilisasi  alat  tersebut  dilakukan  dengan  perendaman chlorin selama 24 jam dan dicuci dengan pembersih/detergen  kemudian  dibilas  dengan  air  mengalir, dikeringkan,  kemudian  dibungkus  dengan  plastik  tahan panas  dan  disterilisasi  dengan  autoklaf  pada  suhu  121 o C selama 15 menit pada tekanan 15 pt [17].
Sterilisasi  bahan  meliputi  tisu,  karet,  air  laut,  aquadest, aquabidest.  Air  laut,  aquabidest,  aquadest  dimasukkan  ke dalam  botol  kultur  sedangkan  tisu  dan  karet  dibungkus dengan  plastic  tahan  panas,  kemudian  disterilisasi  dengan
autoclave  pada  suhu  121 o C  selama  15  menit  pada  tekanan 15 pt [17].
E. Penentuan Starter Kultur Nannocgloropsis sp.
Penentuan waktu panen dilakukan dengan membuat kultur 10% mikroalga dalam 200 ml kultur. Kultur Nannochloropsis sp.  diukur  setiap  24  jam  hingga  mencapai fase  kematian  dengan  menggunakan  spektrofotoneter  UV- Vis  pada  panjang  gelombang  680  nm  [18]  sehingga membentuk  kurva  pertumbuhan  dengan  koordinat  dimana  x adalah  hari  kultur  dan  y  adalah  nilai  OD.    Masa  starter merupakan  masa  setengah  eksponensial  dari  kultur Nannochloropsis sp. [18][19].
F. Penentuan Waktu Panen Nannocgloropsis sp.
Penentuan waktu panen dilakukan dengan membuat kurva pertumbuhan Nannochlorpsis sp.  pada  kultur  mikroalga yang  diberikan  perlakuan  cekaman.  Perlakuan  Fotoperiode dilakukan  dengan  memberikan  cahaya  pada  kultur  dengan terang:gelap  meliputi  24:0  (kontinyu),  16:8,  12:12. Perlakuan  cekaman  nitrogen  terbagi  menjadi  5  variasi  yaitu pemberian pupuk Conway 100% NaNO 3 , 75% NaNO 3 , 50% NaNO 3 , 25% NaNO 3 dan 0% NaNO3. Kombinasi perlakuan kultur  berjumlah  15  diukur  setiap  24  jam  hingga  mencapai fase  kematian  dengan  menggunakan  spektrofotoneter  UV- Vis  pada  panjang  gelombang  680  nm  [18][19]sehingga membentuk  kurva  pertumbuhan  dengan  koordinat  dimana  x adalah  hari  kultur  dan  y  adalah  nilai  OD.  Fase  akhir eksponensial  ditetapkan  sebagai  waktu  panen  kultur Nannochloropsis sp. [20][21], dan [22].

## G. Perlakuan
Perlakuan  dilakukan  dengan  memasukkan  50  ml mikroalga  dalam  450  ml  air  laut  steril  dan  pupuk  Conway 0,5 ml [13][17] hingga masa starter dengan salinitas 30 ppt, pH 7-8 [12], intensitas cahaya terang 900-1000 lux, gelap 0- 10 lux, suhu 25-27 o C [23]. Kultur dari masa starter diambil 50  ml  untuk  dikultur  kembali  dalam  450  ml  air  laut  steril dengan  kondisi  tercekam  fotoperiode  dan  nitrogen  hingga masa  panen.  Tabel  2  merupakan  kombinasi  perlakuan  pada penelitian ini:
Tabel 2. Kombinasi Perlakuan Variasi Nutrisi Nitrogen Variasi Fotoperiode 12:12 16:08 24:0 0% P1 P2 P3 25% P4 P5 P6 50% P7 P8 P9 75% P10 P11 P12 100% P13 P14 P15
Keterangan:
P1  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  0%  dengan fotoperiode 12:12
P2  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  0%  dengan fotoperiode 16:8
P3  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  0%  dengan fotoperiode 24:0
P4  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  25%  dengan fotoperiode 12:12
P5  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  25%  dengan fotoperiode 16:8
P6  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  25%  dengan fotoperiode 24:0
Gambar 1. Kurva Pertumbuhan Nannochloropsis sp.    Keterangan: a.Fase Lag, b. Fase Eksponensial, c. Fase Stasioner,d. Fase Death.
Gambar 2. Panen Kultur pada Berbagai Perlakuan.
P7  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  50%  dengan fotoperiode 12:12
P8  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  50%  dengan fotoperiode 16:8
P9  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  50%  dengan fotoperiode 24:0
P10  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  75%  dengan fotoperiode 12:12
P11  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  75%  dengan fotoperiode 16:8
P12  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  75%  dengan fotoperiode 24:0
P13  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  100%  dengan fotoperiode 12:12
P14  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  100%  dengan fotoperiode 16:8
P15  =  Kombinasi  Kultur  pada  nutrisi  N  100%  dengan fotoperiode 24:0

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Kurva Pertumbuhan Nannochloropsis sp.
Hasil  kurva  pertumbuhan  dan  penentuan  waktu  starter Nannochloropsis sp. disajikan pada Gambar 1.
Berdasarkan  kurva  pertumbuhan  pada  gambar  4.1 aktivitas  pertumbuhan Nannochloropsis sp.  yang  diukur dengan  spektrofotometer  UV-Vis  berupa  nilai  OD mengalami peningkatan hingga hari ke-10 kultivasi.  Hal ini sesuai  dengan  pernyataan  Rodrigues et  al ,  2011  bahwa Optical  Density  (OD)  pada  spektrofotometer  dapat memonitoring  jumlah  sel  secara  tidak  langsung.  Sel
mikroalga yang teramati pada saat kultivasi, mengalami fase lag  pada  hari  ke-1  hingga  hari  ke-3,  kemudian  mengalami fase eksponensial pada hari ke-3 hingga hari ke-9, kemudian sel  mengalami  pertumbuhan  yang  tetap  /stasioner  pada  hari ke-9 hingga hari ke-10, kemudian sel mengalami penurunan pertumbuhan,  memasuki  fase  kematian  pada  hari  ke-10 hingga  hari  ke-14.  Pada  fase  stasioner,  penambahan kepadatan populasi seimbang dengan laju kematian sehingga pertumbuhan  populasi  yang  terjadi  kecil.  Jumlah  sel cenderung tetap karena telah mencapai titik jenuh. Pada fase death,  jumlah  sel  mengalami  penurunan.  Penurunan kepadatan sel fitoplankton dapat disebabkan oleh pengurangan nutrisi sehingga mikroalga tidak tumbuh [24].
Berdasarkan  kurva  pertumbuhan  tersebut,  massa  starter ditentukan  pada  hari  ke-6,  yaitu  pada  setengah  masa eksponensial kultur Nannochloropsis sp. tersebut karena sel masih  aktif  membelah  serta  dapat  melakukan  metabolisme secara  maksimal  sebelum  memasuki  fase  stasioner  maupun kematian sel [18][19]. Starter digunakan sebagai bibit untuk pembuatan kultur baru atau untuk produksi massal mikroalga [25].

## B. Waktu Panen Kultur pada Berbagai Perlakuan
Berdasarkan  penelitian  yag  telah  dilakukan,  diperoleh kurva  pertumbuhan  kultur Nannochloropsis sp.  pada berbagai  kombinasi  perlakuan  yang  disajikan  pada  Gambar 2.
b a c d
Gambar  3.  Kurva  Pertumbuhan  Perlakuan  Cekaman  Nitrogen  dengan berbagai Konsentrasi dan Fotoperiode
Keterangan:  a.  Fotoperiode  12:12,  b.Fotoperiode  16:8,  c.Fotoperiode 24:0
Berdasarkan Gambar 2 waktu panen mikroalga Nannochloropsis sp.  dengan  berbagai  kombinasi  perlakuan cekaman  nitrogen  dan  fotoperiode  memiliki  waktu  panen yang  berbeda.  Waktu  panen  ditentukan  berdasarkan  fase akhir  eksponensial  kultur  [20]  karena  pada  fase  akhir eksponensial  mikroalga  berada  dalam  kondisi  yang  paling optimal,  sehingga  kandungan  nutrisi  dalam  selnya  sangat tinggi.  Waktu  panen  kultur    hari  ke-6  yaitu  pada  perlakuan P1 (N0, 12:12), P2 (P0, 16:8). Waktu panen kultur hari ke-8 yaitu  pada  perlakuan  P4  (N25,  12:12),  P5  (N25,  16:8). Waktu panen kultur hari ke-9 yaitu pada perlakuan P7 (N50, 12:12),  P13  (N100,  12:12).  Waktu  panen  kultur  hari  ke-10 yaitu  pada  perlakuan  P3  (N0,  24:0),  P6  (N25,  24:0),  P8 (N50, 16:8), P10 (N75, 12:12), P11 (N75, 16:8), P12 (N75, 24:0).  Waktu  panen  kultur  hari  ke-11  yaitu  pada  perlakuan P14 (N100, 16:8). Waktu panen kultur hari ke-12 yaitu pada perlakuan P9 (N50, 24:0), P15 (N100, 24:0).
Berdasarkan  jumlah  selnya,  mikroalga  pada  perlakuan pemberian nitrogen 100% memiliki nilai OD (pertumbuhan) yang  paling  tinggi  dibandingkan  dengan  kultur  dengan nitrogen  dalam  pupuk  75%,  50%,  25%  dan  0%.  Hal  ini berkaitan  dengan  ketersediaan  nutrisi  untuk  tumbuh  serta ketersediaan  cahaya  untuk  fotosintesis  dan  metabolisme  sel lainnya.  Pada  nitrogen  yang  terpenuhi,  sel  mikroalga memiliki  laju  reproduksi  yang  tinggi  sehingga  sel  yang terbentuk lebih [21]  yang ditunjukkan dengan nilai OD pada spektrofotometer yang lebih tinggi.
Gambar 3 adalah kurva pertumbuhan Nannochloropsis sp. pada berbagai konsentrasi nitrogen dan fotoperiode :
Berdasarkan  hasil  pengamatan  tersebut,  pemberian nitrogen  mempengaruhi  pertumbuhan Nannochloropsis sp. dimana  tanpa  pemberian  nitrogen  dengan  fotoperiode  gelap yang  lebih  panjang,  kultur Nannochloropsis sp.  memiliki waktu  panen  yang  singkat.  Hal  ini  sesuai  dengan  literatur yang  mengatakan  bahwa,  kekurangan  nitrogen  pada  alga dapat  mempersingkat  fase  eksponensial  alga  tersebut  [26] sedangkan  pemberian  nitrogen  yang  sesuai  dan  fotoperiode dengan  siklus  terang  yang  panjang,  kultur Nannochloropsis sp.  memiliki  waktu  panen  yang  lebih  lama  serta  jumlah  sel yang lebih banyak karena nutrisi untuk tumbuh sel terpenuhi, sehingga  sel  dapat  membelah  sehingga  ukuran  serta jumlahnya bertambah.
Fotoperiode yang berkaitan dengan intensitas dan lama pencahayaan  berperan  dalam  proses  fotosintesis  dimana terjadi pengubahan bahan anorganik menjadi gula sederhana sebagai  sumber  energi  untuk  metabolisme  sel.  Apabila metabolisme  sel  berjalan  maka  sel  mikroalga  dapat  tumbuh lebih  lama  [27].  Hal  ini  sesuai  dengan  hasil  pengamatan. Selain  itu,  mikroalga  membutuhkan  fotoperiodisme  yang terdiri  dari  terang  dan  gelap  yang  berbeda-beda.  Cahaya terang  digunakan  pada  waktu  proses  fotokimia  untuk menghasilkan ATP, NADPH dan kondisi gelap untuk reaksi biokimia dalam sintesis molekul esensial untuk pertumbuhan [8].

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan bahwa pada nitrogen yang terbatas, fase eksponensial kultur lebih singkat sedangkan  pada  nitrogen  yang  tercukupi  fase  eksponensial kultur  lebih  panjang.  Pada  nitrogen  100%  pada  semua
fotoperiode  menghasilkan  nilai  OD  yang  tertinggi.  Waktu panen  tersebut  dapat  dijadikan  informasi  untuk  produksi biodiesel  dengan  melakukan  uji  lanjutan  pada  kandungan lipid  pada  setiap  perlakuan  dengan  waktu  panen  yang  telah didapatkan.
Tabel 3. Perlakuan Kultur Gambar Keterangan
Nannochloropsis sp dikultur dalam air laut steril. pH kultur diukur dengan menggunakan pH meter. Salinitas diukur pada 900-1000 lux (terang) dan 0-10 lux (gelap)
Kultur diberikan pupuk dengan nitrogen 0%, 25%, 50%, 75% dan 100% pada FP 12:12, 16:8 dan 24:0
Kultur diaerasi dan diukur OD setiap 24 jam dengan spektrofotometer UV Vis 680 nm.
Nilai OD dibuat menjadi kurva pertumbuhan dari fase lag hingga death.
Hasil panen kultur pada fotoperiode 12:12 Hasil panen fotoperiode 16:8 Hasil panen kultur dengan berbagai konsentrasi Nitrogen pada fotoperiode 24:0
Tabel 4. Nilai OD Penentuan Masa Kultur No Hari OD pH Suh u I II Rerata B I II ( o C) 1 2/20/1 8 0.037 0.035 5 0.0362 5 7 7 7 24.5 2 2/21/1 8 0.064 0.061 0.0625 7 8 8 24.5 3 2/22/1 8 0.184 0.148 0.166 7 8 8 24.5 4 2/23/1 8 0.331 0.368 0.3495 7 8 8 24.5 5 2/24/1 8 0.469 0.531 0.5 7 8 8 24.5 6 2/25/1 8 0.609 5 0.63 0.6197 5 7 8 8 24.5 7 2/26/1 8 0.633 5 0.714 5 0.674 8 8 8 24.5 8 2/27/1 8 0.696 5 0.798 0.7472 5 8 8 8 24.5 \9 2/28/1 8 0.821 5 0.914 0.8677 5 8 9 9 24.5 10 3/1/18 0.868 0.989 0.9285 8 9 9 24.5 11 3/2/18 0.824 1.011 0.9175 8 9 9 24.5 12 3/3/18 0.717 5 1.027 0.8722 5 9 9 9 24.5 13 3/4/18 0.673 1.038 5 0.8557 5 9 9 9 23 14 3/5/18 0.523 1.025 5 0.7742 5 1 0 9 9 24.7 Tabel 5. Nilai OD Kultur Fotoperiode 12:12 Hari N0% N25% N50% N75% N100% 0 0.039 0.034 0.0295 0.0315 0.0335 1 0.044 0.031 0.0375 0.0375 0.043 2 0.06 0.038 0.053 0.0545 0.047 3 0.066 0.056 0.066 0.0545 0.061 4 0.07 0.065 0.0735 0.0825 0.0815 5 0.0815 0.072 0.0885 0.118 0.102 6 0.099 0.078 0.095 0.118 0.1155 7 0.104 0.086 0.108 0.163 0.154 8 0.106 0.0975 0.119 0.1685 0.1845
9 0.097 0.086 0.141 0.1745 0.1905 10 0.092 0.083 0.108 0.2015 0.217 11 0.09 0.089 0.108 0.201 0.211 12 0.089 0.085 0.107 0.2 0.212 13 0.089 0.085 0.107 0.2 0.21 14 0.088 0.08 0.095 0.195 0.207 Tabel 6. Nilai OD Fotoperiode 16:8 Hari N0% N25% N50% N75% N100% 0 0.036 0.041 0.0305 0.0295 0.037 1 0.0455 0.054 0.0425 0.044 0.0525 2 0.06 0.06 0.0545 0.0585 0.0565 3 0.0745 0.06 0.078 0.076 0.0815 4 0.0805 0.061 0.0855 0.11 0.108 5 0.085 0.111 0.109 0.112 0.1205 6 0.1025 0.1545 0.136 0.1275 0.1575 7 0.1025 0.173 0.15 0.156 0.15 8 0.0845 0.1835 0.155 0.1635 0.1815 9 0.085 0.1805 0.1615 0.212 0.193 10 0.0855 0.163 0.181 0.232 0.2215 11 0.089 0.169 0.18 0.231 0.241 12 0.103 0.167 0.18 0.216 0.238 13 0.103 0.16 0.179 0.212 0.235 14 0.092 0.167 0.178 0.209 0.235 Tabel 7. Nilai OD Fotoperiode 24:0 Hari N0% N25% N50% N75% N100% 0 0.0325 0.0425 0.029 0.0375 0.041 1 0.0485 0.037 0.032 0.038 0.0505 2 0.068 0.069 0.057 0.059 0.0575 3 0.0895 0.1125 0.066 0.07 0.062 4 0.1025 0.1125 0.106 0.102 0.088 5 0.1 0.1115 0.155 0.114 0.0805 6 0.1005 0.156 0.1875 0.135 0.0865 7 0.1065 0.1815 0.2365 0.195 0.1185 8 0.128 0.191 0.2465 0.2275 0.1745 9 0.146 0.206 0.2555 0.2545 0.2495 10 0.157 0.2495 0.2955 0.2745 0.302 11 0.154 0.229 0.33 0.249 0.352 12 0.155 0.209 0.348 0.23 0.401 13 0.155 0.208 0.261 0.23 0.4 14 0.154 0.205 0.253 0.229 0.4 DAFTAR PUSTAKA [1] S.  Setiadji,  T.  B.  Nila,  S.  Tety,  P.  Eko,  and  W.  N.  Bebeh.,
“ Alternatif  Pembuatan  Biodiesel  Melalui  Transesterifikasi Minyak  Castor  (Ricinus  communis)  Menggunakan  Katalis Campuran  Cangkang  Telur  Ayam  dan  Kaolin, ” J.  Penelit.  dan Pengemb. Ilmu Kim. , vol. 3, no. 1, pp. 1 – 10, 2017.
[2] T.  Prakoso,  P.  Udomsap,  A.  Tanaka,  T.  Hirotsu,  and  S.  Goto, “ Characteristics  of  Oxidative  Storage  Stability  of  Canola  Fatty Acid Methyl Ester Stabilised with Antioxidant, ” J. Eng. Sci. ITB , vol. 4, pp. 303 – 318, 2012.
[3] T.  Maharsyah,  L.  Musthofa,  and  A.N.  Wahyunato, “ Efektivitas Penambahan  Plant  Promoting  Bacteria  (Azospirillum  sp)  dalam Meningkatkan  Pertumbuhan  Mikroalga  (Chlorella  sp)  Pada Media  Limbah  Cair  Tahu  Setelah  Proses  Anaerob, ” J. Keteknikan  Pertan.  Trop.  dan  Biosist. ,  vol.  1,  no.  3,  pp.  258 – 264, 2013.
[4] R.  Kwangdinata,  R.  Indah,  and  M.  Zakir, “ Produksi  Biodiesel dari  Lipid  Fitoplankton  Nannochloropsis  sp.  Melalui  Metode Ultrasonik, ” J. Mar. Chim. Acta , vol. 14, no. 2, pp. 29 – 36, 2013.
[5] M.  Mata,  A.  A.  Martins,  and  N.S.  Caetano, “ Microalgae  for Biodiesel  Production  and  Other  Applications:  A  Review, Renew, ” Sustain. Energy Rev , vol. 14, pp. 217 – 232, 2010.
[6] R.  Alamsyah,  H.  L.  Enny,  and  N.C.  Siregar, “ Esterifikasi- Transesterifikasi  Dan  Karakterisasi  Mutu  Biodiesel  Dari  Biji Jarak  Pagar  (Jatropha  curcas  Linn), ” J.  Kim.  Kemasan ,  vol.  33, no. 1, pp. 124 – 130, 2011.
[7] S.  Arita,  K.  Attaso,  and  S.  Rangga, “ Pembuatan  Biodiesel  Dari Minyak  Kelapa  Sawit  dengan  katalis  CaO  Disinari  Dengan Gelombang  Mikro, ” J.  Tek.  Kim. ,  vol.  19,  no.  4,  pp.  45 – 52,
2013. [8]
M.  Gammanpila  and  S.  C.P.  Rupasinghe, “ Light  Intensity  and Photoperiode  Effect  On  Growth  And  Lipid  Accumulation  Of
Microalgae  Chlorella  Vulgaris  And  Nannochloropsis  sp.  For Biodiesel  Production, ” in Proceedings  of  12th  ISERD International Conference , 2015, pp. 51 – 55.
[9] H.  Schuhman,  D.  K.  Y.  Lim,  and  P.M.  Scenk, “ Perspektive  on Metabolic  Engineering  for  Increased  Lipid  Contents  In Microalage, ” J. Biofuels , vol. 3, pp. 71 – 86, 2011.
[10] Q.  Hu,  S.  Milton,  J.  Maria,  P.  Matthew,  S.  Michael,  and  A. Darzins, “ Microalgal  Tryacylglycerols  as  Feedstock  for  Biofuel Production: Perpectives and and Advances, ” Plant J. , vol. 54, pp. 621 – 639, 20008.
[11] A.  Nur, “ Potensi  Mikroalga  sebagai  Sumber  Pangan  Fungsional di Indonesia, ” J. Eksergi , vol. 11, no. 2, pp. 1 – 6, 2014.
[12] H.  Widianingsih,  Retno,  E.  Hadi,  and  M.  Jane, “ Fatty  Acid Composition  of  Marine  Microalgae in Indonesia, ” J. Trop. Biol. Conserv. , vol. 10, pp. 75 – 82, 2013.
[13] K.  Nisak,  B.  S.  Raharja,  and  E.D.  Masithah, “ Studi Perbandingan  Kemampuan  Nannochloropsis  sp.  Dan  Chlorella sp.  Sebagai  Agen  Bioremidiasi  Terhadap  Logam  Berat  Timbal (Pb), ” J.  Ilm.  Perikan.  dan  Kelaut. ,  vol.  5,  no.  2,  pp.  175 – 180, 2013.
[14] E. Fogg, Algal Cultured and Phytoplankton Ecology . Wisconsin:
The University of Wisconsin Press, 1975.
[15] H.  Endrawati  and  I.  Riniatsih, “ Kadar  Total  Lipid  Mikroalga Nannochloropsis  oculate  yang  Dikultur  Dengan  Suhu  yang Berbeda, ” Bul.  Oseanografi  Mar.  Januari ,  vol.  1,  pp.  25 – 33, 2013.
[16] Yarti, M. Muhaemin, and S. Hudaidah, “ Pengaruh Salinitas Dan Nitrogen  Terhadap  Kandungan  Protein  Total  Nannochloropsis sp., ” J.  Rekayasa  Dan  Teknol.  Budid.  Perair. ,  vol.  2,  no.  2,  pp. 273 – 278, 2014.
[17] S.  Arifah,  B.  S.  Rahardja,  and  E.D.  Masithah, “ Studi Kemampuan  Nannochloropsis  sp.  Dan  Chlorella  sp.  Sebagai
Agen Bioremidiasi Logam Berat Merkuri (Hg) Dan Pengaruhnya Terhadap Pertumbuhan Plankton, ” J. Mar. Coast. Sci. , vol. 6, no.
3, pp. 137 – 147, 2017.
[18] W.  S.  Agustin,  M.  Afriastini,  and M. Yoana, “ Potential of Fatty Acid  from  Microalgae  Nannochloropsis  sp  as  Antioxidant  and Antibacterial, ” Institut Sains Teknologi Nasional, 2012.
[19] Widayat  and  Hadiyanto, “ Pemanfaatan  Limbah  Cair  Industri Tahu  Untuk  Produksi  Biomassa  Mikroalga  Nannochloropsis  sp Sebagai  Bahan  Baku  Biodiesel, ” J.  Reakt. ,  vol.  15,  no.  4,  pp. 253 – 260, 2015.
[20] V.  T.  Duong,  Y.  Li,  E.  Nowak,  and  M.  Scienk, “ Microalagae Isolation  and  Selection  for  Prospective  Biodisel  Production, ” Energies , vol. 5, pp. 1835 – 1849, 2012.
[21] L.  Panggabean,  Sutomo,  N.  Radini,  and  Afdal, “ Mikroalga Laut Sebagai Produsen Biodiesel, ” 2010.
[22] E.  Safitri,  R.  Diantari,  and  M.  Muhaemin, “ Kandungan  Lemak Total  Nannochloropsis  sp  Pada  Fotoperiode  Yang  Berbeda, ” J. Rekayasa dan Teknol. Budid. Perair. , vol. 1, no. 2, pp. 127 – 134, 2013.
[23] H.  Suryanto,  Sukarni,  and  Yanuhar, “ Studi  Eksplorasi  Potensi Mikroalga Laut Sebagai Sumber Energi Terbarukan, ” in Seminar Nasional Teknik Mesin IV , 2009.
[24]
Ru ’ yatin, S. R. Immy, and L. Ali, “ Pertumbuhan Tetraselmi dan Nannochloropsis  pada  Skala  Laboratorium, ” in Pros  Sem  Nas Masy Biodiv Indon , 2015, pp. 296 – 299.
[25] P. Perumal, B. B. Prasath, P. Santhanam, S. Ananth, A. S. Devi, and  S.D.  Kumar, “ Isolation  and  Culture  of  Microalgae : Workshop  on  Advances  in  Aquaculture  Technology, ” Tamil
Nadu, 2012.
[26] M.  Muhaemin,  F.  Practica,  D.  S.  Rosi,  and  A.  Tri, “ Starvasi Nitrogen dan Pengaruhnya Terhadap Biomassa dan Protein Total Nannochloropsis  sp, ” J.  Maspari ,  vol.  6,  no.  2,  pp.  98 – 103,
2014.
[27] A.  Alqadi,  S.  M.  Taib,  M.  F.  Din,  and  H.  Kamyab, “ Effect  Of Photoperiod  On  The  Growth  of  Chlamydomonas  Incerta  And Pollutant  Removal, ” Malaysian  J.  Civ.  Eng. ,  vol.  29,  no.  1,  pp. 69 – 78, 2017.