DOI: https://doi.org/10.36423/agroscript.v4i2.1122
P-ISSN (2685-9505) E-ISSN (2685-9491)
URL: https://e-journal.unper.ac.id/index.php/agroscript

## UJI METABOLIT SEKUNDER Metarhizium spp. UNTUK PENGENDALIAN KUMBANG JANUR KELAPA
SECONDARY METABOLITE TEST OF Metarhizium spp. FOR CONTROLLING PALM LEAF

## BEETLE
Erwin Irawan Permana 1) , Farriza Diyasti 2) 1 Balai Proteksi Tanaman Perkebunan (BPTP) Pontianak Jl. Budi Utomo No. 57, Siantan Hulu, Pontianak 78241
2 Direktorat Perlindungan Perkebunan, Direktorat Jenderal Perkebunan Kementerian Pertanian Gedung C Jl. RM. Harsono, RT 5/RW 7, Ragunan, Kec. Ps. Minggu,
Kota Jakarta Selatan, Daerah Khusus Ibukota Jakarta 12550 Kata kunci: Brontispa Hayati Kelapa Metabolit Sekunder Metarhizium ABSTRAK
Kumbang Brontispa  longissima merusak  atau  menyerang  pucuk  kelapa terutama tanaman kelapa yang masih muda, sehingga mengakibatkan pucuk tanaman tidak dapat berkembang sempurna, bahkan dapat mengakibatkan kematian. Penggunaan berbagai variasi aplikasi cendawan entomopatogen Metarhizium  anisopliae terbukti  cukup  efektif  menekan  serangan B. longissima. Metabolit  sekunder yang  dihasilkan  oleh  cendawan  ini  mulai banyak  dipopulerkan  sebagai  alternatif  formulasi  cara  baru.  Tulisan  ini bertujuan  menguji  efektivitas  metabolit  sekunder  dalam  mengendalikan hama  kumbang  janur  kelapa  ( B.  longissima )  dan  membandingkannya dengan  suspensi  murni  spora Metarhizium spp.  Metabolit  sekunder diproduksi  dengan  metode  perbanyakan  agens  hayati  secara  cair menggunakan  media  perbanyakan  air  cucian  beras  ditambah  air  kelapa. Serangga  uji B.  longgissima diambil  dari  lapangan  dan  dipisahkan  di laboratorium  menurut  tahap  perkembangannya  (telur,  larva,  pupa  dan imago).  Pengamatan  dilakukan  di  Laboratorium  Lapangan  Balai  Proteksi tanaman  Perkebunan  (BPTP)  Pontianak  dengan  Metode  Rancangan  Acak Lengkap (RAL) yang terdiri dari 6 perlakuan dan 4 ulangan. Hasil pengujian menunjukkan  perlakuan  suspensi  spora Metarhizium spp.  dan  formulasi metabolit sekunder Metarhizium spp. tidak berbeda nyata berdasarkan uji jarak  berganda  Duncan.  Suspensi  spora Metarhizium spp.  menyebabkan mortalitas  serangga  uji  sebesar  55  %  pada  hari  ke-6  setelah  aplikasi, sedangkan  formulasi  metabolit  sekunder Metarhizium spp.  menyebabkan mortalitas 50 % pada hari ke-7.
Keywords:
Bioligical Brontispa Palm Metarhizium Secondary Metabolite

## ABSTRACT
Palm leaf beetles ( Brontispa longissima ) damage or attack coconut shoots, especially young coconut plants, resulting in plant shoots not being able to fully develop, and can even lead to death. The use of various applications of the  entomopathogenic  fungus Metarhizium  anisopliae proved  to  be  quite effective  in  suppressing  the  attack  of B.  longissima .  The  secondary metabolites  produced  by  this  fungus  have  begun  to  be  popularized  as  an alternative  to  new  formulations.  This  paper  aims  to  examine  the effectiveness of secondary metabolites in controlling the palm leaf beetle ( B. longissima )  when  compared  to  the  spore  suspension  of Metarhizium spp.
Secondary  metabolites  were  produced  by  the  method  of  propagation  of biological agents in a liquid using rice washing water plus coconut water as a propagation medium. The test insects of B. longgissima were taken from the field and separated in the laboratory according to their developmental stages (eggs, larvae, pupae and imago). Observations were made at the Field Laboratory of Plantation Protection Center in Pontianak with a Completely
Randomized Design Method consisting of 6 treatments and 4 replications. The  test  results  showed  the  suspension  of Metarhizium spp.  and  the secondary  metabolite  formulation  of Metarhizium spp.  not  significantly different  based  on  Duncan's  multiple-range  test.  Spore  suspension  of Metarhizium spp. caused the mortality of the test insects by 55% on the 6th day  after  application,  while  the  secondary  metabolite  formulation  of Metarhizium spp. cause 50% mortality on the 7th day after application.

## PENDAHULUAN
Kumbang  janur  kelapa  ( Brontispa longissima ) merupakan  salah  satu  hama utama  yang  menyerang  hampir  semua tahap  pertumbuhan  kelapa,  dan  dapat menyebabkan kerusakan daun hingga 40%. Dengan  rusaknya  daun,  maka  akan berdampak  pada  kehilangan  produksi kelapa  hingga  50%  (DITJENBUN,  2017). Penggunaan  cendawan  entomopatogen dalam  mengendalikan  serangga  hama cukup  baik,  karena  memiliki  beberapa kelebihan, diantaranya efisien baik dari segi biaya maupun mudah
dalam pembuatannya;  selektifitas  tinggi;  dapat berkembang  biak  di  alam  sehingga berperan menciptakan ekosistem yang baik; meminimalisir  resistensi  dan  resurgensi, serta  tidak  berdampak  buruk  bagi lingkungan  (Sopialena,  2018).  Beberapa cendawan entomopatogen mampu membentuk  spora  yang  tahan  terhadap cekaman  lingkungan  (Indriyanti et al., 2016).
Mekanisme cendawan entomopatogen dalam melumpuhkan hama sasaran yaitu dengan membentuk kecambah  spora  kemudian  melakukan penetrasi  pada  kutikula  inang  dan  masuk ke hemosoel,  kemudian  cendawan  akan
menghasilkan  zat  metabolik  sebagai  racun dalam  melumpuhkan  pertahanan  alami inang  (Sa’diyah,  2019). Racun  yang dihasilkan cendawan entomopatogen merupakan  metabolit  sekunder  yang dibentuk saat mendekati tahap stasioner/selama  akhir  pertumbuhan  dan merupakan  sisa  metabolisme  (Soesanto, 2014).
Menurut Soesanto (2014), kandungan metabolit sekunder dari formula cair jamur M.  anisopliae mengandung  beberapa senyawa yang berperan sebagai pendegradasi  pati,  pendekomposisi  kitin, lemak  dan  glikogen,  antagonis  ke  jamur patogen, serta enzim dan berbagai senyawa lainnya. Lebih jauh dijelaskan perlindungan yang  diberikan  oleh  metabolit  sekunder suatu agens pengendali hayati (APH) yaitu meningkatkan  senyawa  kimia  di  dalam tanaman  yang  berimbas  pada  ketahanan tanaman  terhadap  serangan  Organisme Pengganggu  Tumbuhan  (OPT),  berbeda dengan  APH  konvensional  (dalam  bentuk spora)  dengan  kemampuan  berkompetisi terhadap  OPT  dari  bagian  luar  tanaman. Formula cair Metarhizium anisopliae dibuat dengan  mencampur  limbah  cucian  beras dan  air  kelapa.  Larutan  kemudian ditambahkan  10  g/L  gula  dan  direbus
sampai mendidih. Larutan didinginkan dan dimasukkan  kedalam  jerigen  yang  telah steril (DITJENBUN, 2018).
Menurut  Freed et al.  (2012), M. anisopliae telah  mampu  mengendalikan serangga  hama  dari  berbagai  ordo  baik dalam  bentuk  formulasi  sederhana  berupa suspensi  spora  maupun  menggunakan metabolit  sekunder,  namun  pengendalian terhadap  kumbang  janur  kelapa  ( B. longissima )  masih  terbatas  informasinya.
Tulisan  ini  bertujuan  menguji  efektifitas APH  dalam  bentuk  suspensi  spora (konvensional) dibandingkan dengan bentuk  formulasi  metabolit  sekunder Metarhizium spp.  pada  kumbang  janur kelapa ( Brontispa longissima ).

## BAHAN DAN METODE
Kegiatan pengambilan sampel
serangga  uji B.  longissima dilaksanakan  di Desa  Malikian  Kecamatan  Sungai  Kunyit Kabupaten  Mempawah,  Kalimantan  Barat. Serangga uji yang diambil untuk perlakuan adalah  larva  instar  4-5  dari B.  longissima sebelum  fase  pre-pupa.  Bahan  yang
diperlukan
berupa biakan spora
Metarhizium spp.  yang  merupakan  koleksi Laboratorium OPT Balai Proteksi Tanaman Perkebunan  (BPTP)  Pontianak,  insektisida kimiawi berbahan aktif asefat dengan dosis 0,5  mL/L  sebagai  kontrol  positif.  Cara pembuatan  formulasi  metabolit  sekunder Metarhizium spp.  dilakukan  melalui  tahap sebagai berikut:
1. Menyiapkan air cucian beras dan air kelapa (dari  kelapa  tua)  pada  wadah  yang  steril dengan perbandingan 4:1. Tambahkan 15 g gula  pasir,  kemudian  direbus  sampai mendidih. Setelah media mendidih kemudian dimasukkan kedalam jerigen atau wadah  sejenisnya  yang  tertutup  (media masih  dalam  keadaan  panas).  Didiamkan hingga  dingin.  Setelah  media  perbanyakan dingin  kemudian  disaring  dan  dimasukkan ke  dalam  gelas  erlenmeyer  steril. Inokulasikan  10  g Metarhizium spp.  /liter media  perbanyakan.  Media  perbanyakan yang  telah  ditambahkan Metarhizium spp. kemudian  digoyang-goyangkan  selama  7  x 24  jam  menggunakan shaker .  Setelah  itu,
tercium aroma fermentasi yang menandakan  perbanyakan  pada  berhasil. Metabolit  hasil  perbanyakan  kemudian disaring  dengan  menggunakan  kertas Whatman No.  41  (d=125  mm)  dan dituangkan  pada  gelas  erlenmeyer  yang steril dan siap untuk digunakan.
Gambar 1. Metabolit sekunder hasil perbanyakan
Gambar  2. Metabolit  sekunder  yang  telah melalui penyaringan
Pengujian  ini  terdiri  dari  5  (lima) perlakuan dan 1 (satu) kontrol (Tabel 1).
Tabel 1. Jenis perlakuan dalam pengujian Perlakuan Keterangan A Kontrol (Air) B Metabolit  sekunder  tanpa pengenceran C Metabolit sekunder (10 %) D Metabolit sekunder (1 %) E Suspensi M. anisopliae F Insektisida (b.a asefat)
Untuk  tiap  perlakuan  (Tabel  1) menggunakan  10  ekor  serangga  uji B. longissima ,  sehingga  membutuhkan  240 ekor  serangga  untuk  satu  set  pengujian  (6 perlakuan x 10 ekor x 4 ulangan). Perlakuan dilakukan  dengan  cara  penyemprotan langsung  dan  pencelupan  pakan  untuk masing-masing  jenis  perlakuan.  Pakan berupa janur kelapa segar yang diambil dari pohon  kelapa  di  kebun  koleksi  BPTP Pontianak.  Daun  kelapa  dipotong  dengan ukuran  yang  sama  (5  cm  lebar  x  1  cm Panjang). Sebelun ditempatkan pada kotak untuk pengujian aplikasi perlakuan metabolit sekunder, daun kelapa dicelupkan pada larutan metabolit sekunder kemudian dikering anginkan.
Gambar 3. Pakan yang telah siap untuk aplikasi perlakuan
Daun untuk aplikasi suspensi spora M.
anisopliae dan insektisida langsung ditempatkan pada kotak pengujian.
Sejumlah  20  helai  daun  ditempatkan  pada kotak  yang  telah  disediakan.  Serangga  uji kemudian diinfestasikan sebanyak 10 ekor untuk tiap kotak perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Mortalitas Serangga Uji
Pengamatan  dilakukan  setiap  hari selama  7  hari  setelah  aplikasi  (HSA). Parameter  yang  diamati  yaitu  kematian serangga uji (mortalitas). Data pengamatan pada 7 HSA (Tabel 2) menunjukkan aplikasi pestisida  (Kode  Perlakuan  F)  mematikan seluruh  serangga  uji  dalam  tiap  ulangan pada  hari  ke-2.  Perlakuan  pengaplikasian formulasi  metabolit  sekunder  tanpa pengenceran (Kode Perlakuan B)
mematikan 50 % populasi serangga uji pada 7  HSA  (168  jam)  sedangkan  perlakuan pengaplikasian suspensi spora Metarhizium spp.  (Kode  Perlakuan  E)  dapat  mematikan 50% populasi serangga uji pada 6 HSA (144 jam).
Wati & Hardanti (2019) menyatakan bahwa penggunaan cendawan
entomopatogen sebagai musuh alami dalam usaha pengendalian hama memiliki banyak keunggulan dibandingkan dengan penggunaan  insektisida  kimiawi  karena bersifat selektif dan aman bagi lingkungan,
namun  di  sisi  yang  lain,  membutuhkan waktu  yang  relatif  lebih  lama  dalam menimbulkan efek infeksi terhadap serangga sasaran.
Tabel 2. Mortalitas B. Longissima pada 7 24, 48, 72, 96, 120, 144 dan 168 jam setelah aplikasi Perlakuan Ulangan Mortalitas (%)/jam 24 48 72 96 120 144 168 Kontrol 1 0 0 0 0 0 0 0 (A) 2 10 0 0 0 0 0 0 3 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 0 Rata-rata 10 0 0 0 0 0 0 Total Kumulatif 10 10 10 10 10 10 10 Metabolit Sekunder Murni 1 10 10 10 10 0 0 0 (B) 2 10 0 10 10 30 10 10 3 10 0 20 0 10 0 0 4 10 10 0 0 20 0 0 Rata-rata 10 5 10 5 15 2.5 2.5 Total Kumulatif 10 15 25 30 45 47.5 50 Metabolit Sekunder 10% 1 0 0 10 0 0 0 20 (C) 2 0 0 0 0 0 0 10 3 10 0 0 0 0 0 10 4 10 0 0 0 0 10 0 Rata-rata 5 2.5 2.5 0 0 2.5 10 Total Kumulatif 5 7.5 10 10 10 12.5 22.5 Metabolit Sekunder 1% 1 0 0 0 10 0 0 0 (D) 2 0 10 0 0 0 40 0 3 0 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 10 0 0 0 Rata-rata 0 2.5 0 5 0 10 10 Total Kumulatif 0 2.5 2.5 7.5 7.5 17.5 17.5 Suspensi M. anisopliae 1 10 0 0 20 0 0 20 (E) 2 0 0 10 0 10 50 0 3 0 1 10 0 10 50 0 4 0 0 0 0 10 10 0 Rata-rata 2.5 2.5 5 5 7.5 27.5 5 Total Kumulatif 2.5 5 10 15 22.5 50 55 Insektisida b.a. asefat 1 80 20 0 0 0 0 0 (F) 2 60 40 0 0 0 0 0 3 60 40 0 0 0 0 0 4 90 10 0 0 0 0 0 Rata-rata 72.5 27.5 0 0 0 0 0 Total Kumulatif 72.5 100 100 100 100 100 100 Pada  perlakuan  C  dan  D  juga menunjukkan adanya  mortalitas terhadap serangga  uji,  namun  dengan  nilai
persentase  yang  lebih  kecil  seiring  makin besarnya  nilai  pengenceran  yaitu  22.5% dan  17.45%.  Susanti et al.  (2013)
menyatakan  penetrasi  dan  infeksi  tidak terjadi pada konsentrasi inokulum rendah karena cendawan belum mampu
menguraikan lapisan kitin dan lemak dari kutikula serangga.
Data hasil pengamatan pertama kali diuji dengan analisis ragam untuk melihat ada  atau  tidaknya  pengaruh  yang  nyata pada  perlakuan.  Analisis  ragam  dihitung dengan  menggunakan  bantuan  aplikasi SPSS  (versi  17).  Sebelum  memulai penghitungan  analisis  ragam,  data  harus diuji  untuk  mengetahui  homogenitasnya. Uji  homogenitas  data  menggunakan Levene’s test pada aplikasi SPSS. Data hasil pengamatan  dihomogenkan  pada  aplikasi SPSS  dengan  syntax  SQRT  (Mortalitas). SQRT  merupakan  singkatan  dari square root atau  di- ‘akar  pangkat  dua’ -kan, berguna  untuk  memperbaiki  data  yang terdistribusi Positive  Skew dan Unequal Variances .  Untuk  mendapatkan  hasil  yang sepadan  di  antara  perlakuan,  maka  data mortalitas  insekstisida  tidak  dimasukkan dalam  uji  analisis  ragam  dan  uji  lanjutan jarak berganda Duncan (jika hasil analisis ragam terdapat pengaruh nyata). Dari hasil L evene’s  Test diperoleh  nilai  Sig.  0.436 (blok  warna  merah),  jika  nilai  Sig  >  0.05, maka  data  dianggap  homogen  dan  dapat dilanjutkan  dengan  uji  analisis  ragam. Berikut adalah hasil dari pengolahan data dengan  aplikasi  SPSS  untuk  tingkat homogenitas data :
bahwa nilai F hitung > F tabel, dapat diartikan terdapat perlakuan yang memberikan  pengaruh  nyata.  Untuk mengetahui faktor perlakuan yang
Berdasarkan  hasil  pengujian  jarak bergandan  Duncan,  perlakuan  dibagi menjadi 3 kelompok berdasarkan pengaruhnya terhadap mortalitas serangga uji.  Subset  tersebut  dapat  diterjemahkan dalam bentuk notasi menjadi seperti pada Tabel 3.
Tabel  3. Perlakuan  berdasarkan  Uji  Jarak Berganda Duncan KODE PERLAKUAN JENIS PERLAKUAN SUBSET (notasi) A Kontrol (air) a B Metabolit tanpa pengenceran c C Metebolit Sekunder 10% bc D Metabolit Sekunder 1% ab E Metarhizium spp c F Insektisida - Catatan:  notasi  pada  subset  yang  sama  tidak berbeda nyata
Selain  insektisida,  jenis  perlakuan yang  paling  tinggi  persentasenya  dalam mematikan  serangga  uji  yaitu  perlakuan dengan  pengaplikasian  suspensi  spora Metarhizium spp. sebesar 55%, diikuti oleh pengaplikasian formulasi metabolit sekunder Metarhizium spp. tanpa pengenceran  sebesar  50%.  Tabel  3 menunjukkan  kedua  perlakuan  berada pada subset yang sama yang berarti tidak berbeda nyata antara perlakuan metabolit sekunder Metarhizium spp  dan  perlakuan suspensi spora Metarhizium spp. Hipotesis awal yang terbangun yaitu aplikasi dengan metabolit sekunder Metarhizium spp. akan
lebih  efektif  daripada  pengaplikasian suspensi spora murni. Pengujian ini dapat menjadi dasar untuk pengujian selanjutnya dengan memperbaiki beberapa hal terkait produksi  metabolit  sekunder.  Salah satunya  perbaikan  pada  proses  tahap pembuatan formulasi  metabolit  sekunder, misalnya  dengan  menambahkan  metode ekstraksi  dan  uji  kandungan  serta  kadar metabolit  sekunder  yang  terkandung dalam  formulasi  tersebut.  Menurut  Seidel (2012), sebelum mengisolasi dan memurnikan  suatu  senyawa  metabolit sekunder yang memiliki aktivitas antifungi, metabolit  sekunder  harus  diekstraksi terlebih dahulu.
Penelitian yang dilakukan Handayani (2016)  dengan  memanfaatkan  cendawan endofit tanpa melakukan ekstraksi terlebih dahulu  tidak  memperoleh  informasi  sifat kimia  metabolit  sekunder  yang  berperan sebagai  antifungi  antraknosa  pada  cabai. Kandungan  senyawa  metabolit  sekunder dapat ditentukan melalui analisis kualitatif (uji  warna)  dan  kuantitatif  (kromatografi dan  spektrometri).  Secara  kuantitatif, kandungan  senyawa  metabolit  sekunder harus  melalui  proses  pemisahan  melalui kromatografi ( paper chromatography, thin layer chromatography, gas liquid chromatography,  high  performance  liquid chromatography ) dan
diidentifikasi
menggunakan  detektor  ( spektrofotometer UV-vis, spektrofotometer IR, NMR
spectroscopy,  dan  mass  spectroscopy )
(Astuti & Respatie, 2022).
Narasswati et al. (2017)  menduga adanya  ketidakmampuan  ekstrak  dalam menghambat organisme sasaran disebabkan  oleh  isolat  cendawan  tidak menghasilkan  metabolit  yang  berpotensi sebagai senyawa antibakteri dan metabolit yang dihasilkan dalam jumlah sedikit. Pada pengujian ini, formulasi metabolit sekunder Metarhizium spp.  terhadap serangga  uji B.  longissima tidak  diketahui dengan  pasti  jenis  dan  jumlah  metabolit sekunder yang terkandung dalam formulasi tersebut.
Proses  pembuatan  formulasi  yang dilakukan  pada  pengujian  ini  merupakan salah  satu  metode  pemisahan  metabolit sekunder  secara  ekstraseluler.  Metode  ini merupakan cara sederhana dalam memisahkan  metabolit  sekunder  melalui filtrasi  dan  sentrifugasi  (Tredwell et  al.,
2011). Menurut Pinu & Boas (2017), dalam melakukan  analisis  metabolit,  hal  yang paling  penting  diperhatikan  yaitu  terkait waktu  pendinginan  untuk  menghentikan reaksi  biokimia  yang  terjadi,  serta penyimpanan  media  kultur  pada  ruang gelap dan suhu rendah (⃪ 20°C). Saryanah (2019)  menyatakan  Produksi  metabolit sekunder  dari  filtrat  kultur  cendawan endofit  perlu  ditingkatkan,  terutama  jika akan diaplikasikan dalam skala besar.
Optimasi  dapat  dilakukan  terhadap kondisi kultur saat dilakukan perbanyakan. Proses  ekstraksi  metabolit  sekunder yang tepat  dapat  menghasilkan  metabolit sekunder  yang  diinginkan,  baik  dari  segi
jenis  maupun  jumlahnya.  Sebaliknya proses  ektraksi  yang  kurang  tepat menyebabkan kurang
optimalnya formulasi  metabolit  sekunder  yang dihasilkan.  Dengan  nilai  mortalitas  yang tidak berbeda nyata, penggunaan metabolit sekunder dengan metode ini dirasa kurang efisien karena membutuhkan proses lebih banyak  dan  waktu  yang  lebih  panjang.
Dengan demikian diperlukan pengembangan metode pemisahan
metabolit  sekunder  yang  tepat,  serta eksplorasi  lebih  lanjut  menggunakan mikroba patogen lain dan potensi aktivitas lain seperti produksi enzim hidrolitik.
Gejala  Cadaver  B.  Longissima  akibat perlakuan
Serangga  uji  yang  mati  karena perlakuan  formulasi  metabolit  sekunder dan  suspensi  spora Metarhizium spp. memiliki ciri yang berbeda pada jasadnya (Gambar  4  dan  5).  Pada  perlakuan metabolit  sekunder,  serangga  uji  yang terpapar  menunjukkan  gejala  pergerakan melemah karena infeksi pada hemocoel dan pada  akhirnya  mati  dengan  gejala  pada bagian mulut menghitam menuju abdomen yang  memucat  pada  hari  ke-7  (Tabel  2). Sedangkan  serangga  uji  yang  mati  karena suspensi  spora Metarhizium spp.,  infeksi dimulai  pada  kutikula  sehingga  tubuh nampak bercak hitam yang merupakan hifa dari  perkembangan  spora Metarhizium spp.  pada  hari  ke-6.  Kematian  serangga lebih  cepat  satu  hari  dengan  gejala  yang sedikit  berbeda  dengan  cadaver  serangga
uji yang terinfeksi metabolit sekunder yang berawal dari mulut (oral).
Gambar  4. Brontispa  dengan  perlakuan metabolit sekunder
Gambar  5. Brontispa  dengan  perlakuan suspensi M. anisopliae
Cendawan M. anisopliae memproduksi  racun Cyclic  Peptida yang disebut Destruxin ,  senyawa  ini  tersusun dari lima asam amino yaitu Prolin, Isoleusin,
Methyl-Valin,  Methyl-Alanin, dan  beta- alanin  (Liu  &  Tzeng,  2012). Destruxin memiliki efek yang menyebabkan kelainan fungsi  lambung  tengah,  hemocyt,  tubulus malphigi  dan  jaringan  otot  pada  inang. Destruxin telah digunakan sebagai insektisida  generasi  baru  (Tampubolon et al.,  2013).  Mekanisme  infeksi  spora M. anisopliae diawali  dengan  menempelnya spora  dan  masuk  ke  tubuh  serangga kutikula kemudian membentuk hifa mulai dari  jaringan  epidermis  hingga  seluruh jaringan tubuh serangga. Dengan dipenuhinya  seluruh  tubuh  serangga dengan  hifa,  maka  tubuh  terdesak  dan terinfeksi  oleh  racun  yang  dihasilkan sehingga serangga mati. Setelah inang mati,
kumpulan  hifa  tersebut  akan  membentuk spora  primer  dan  sekunder.  Pada temperatur 22-27 ºC dan kelembaban 90%, Metarhizium  anisopliae akan  tumbuh optimum membentuk kecambah (Prayogo, 2012).
Menurut  Vinale et al.  (2014), metabolit sekunder dapat menjadi elisitor yang berfungsi dalam ketahanan tanaman terhadap  serangan  organisme  penganggu tanaman  (OPT).  Di  samping  itu,  metabolit sekunder  mengandung  senyawa  lengkap seperti  antibiotik,  enzim,  hormon,  dan toksin  yang  dapat  terangkut  oleh  air  dan hara  sehingga  dapat  mencapai  jaringan pembuluh.  Senyawa  metabolit  sekunder dapat  berfungsi  sebagai  pertahanan tanaman  terhadap  herbivora,  hama,  dan patogen (Ahmed et al., 2017).
Formula  cair  yang  mengandung metabolit  sekunder Metarhizium spp. diaplikasikan  dengan  cara  infus  batang dilakukan  pada  beberapa  tanaman, terutama  yang  memiliki  batang  keras. Metabolit  sekunder Metarhizium spp. mengandung  beberapa  senyawa,  di antaranya  senyawa  pendegradasi  pati, pendekomposisi kitin, lemak dan glikogen, antagonis  terhadap  cendawan  patogen, bersifat  khitinolisis,  sitokalasin  C  dan  D (zigosporin A), siklodepsipeptida destruksin A, B, C, dan D, L-prolil-L-leusin anhidrid,  L-prolil-L-valin  anhidrid,  dan Desmetil destruksin B (Vinale et al., 2014).
Pemanfaatan formula cair metabolit sekunder  telah  banyak  diaplikasikan
diberbagai  tempat  dan  telah  diproduksi secara  masal  (Soesanto,  2017).  Formula cair juga dapat meningkatkan jumlah daun, tinggi tanaman, dan diameter batang bibit kakao  (Harni et al.,  2017).  Berdasarkan
hasil penelitian Sa’diyah (2019), pemberian formula cair yang mengandung metabolit sekunder
cendawan
Metarhizium spp. cenderung meningkatkan jumlah  pertambahan  daun  baru  tanaman kelapa. Namun demikian, sebagai alternatif pengendalian  secara  hayati,  penggunaan metabolit  sekunder  memerlukan  banyak pengujian terutama pada tingkat produksi, penyimpanan  dan  aplikasi  praktis  untuk penanggulangan OPT di lapangan.
Metabolit  sekunder  merupakan senyawa  yang  diproduksi  oleh  hampir semua  jenis  organisme  hidup  terutama bakteri dan cendawan yang hidup didalam tanah.  Tidak  seperti  metabolit  primer, metabolit  sekunder  tidak  berpengaruh langsung terhadap pertumbuhan organisme  yang  memproduksinya  dalam hal  ini  cendawan  atau  bakteri  (Brakhage, 2013).  Senyawa  metabolit  sekunder  tidak berpengaruh  secara  langsung  terhadap perkembangan atau siklus energi organisme  asalnya,  senyawa  metabolit sekunder  berkontribusi  secara  tidak langsung terhadap
kelangsungan organisme  asalnya  pada  ekologi  yang menjadi  tempat  hidupnya  (Boruta,  2018). Cendawan  entomopatogen  berkembang dalam  inangnya  menjadi  struktur  bersel tunggal  atau  bersel  banyak  (protoplas,
blastospora,  badan  hifa),  yang  akan membunuh  inangnya  dan  menghasilkan konidia  yang  lebih  infektif  untuk menginfeksi serangga lain atau mengalami fase istirahat (spora istirahat seksual atau aseksual,  klamidospora  dan  mumifikasi inang)  untuk  bertahan  hidup  (persisten) pada  lingkungannya  (Indriyanti et al., 2016).  Senyawa  metabolit  sekunder  tidak dapat  mempertahankan  persistensinya setelah  diaplikasikan  untuk  pengendalian OPT  tanpa  organisme  asalnya  berupa bakteri  atau  cendawan.  Oleh  karenanya pengulangan  aplikasi  metabolit  sekunder untuk pengendalian OPT diperlukan.

## KESIMPULAN
Pemanfaatan  metabolit  sekunder untuk  pengendalian  hama  kumbang cendawan  kelapa Brontispa  longissima cukup  efektif  dalam  skala  laboratorium. Perlakuan suspensi spora Metarhizium spp. dan  metabolit  sekunder Metarhizium spp. tidak berbeda nyata berdasarkan uji jarak berganda  Duncan.  Suspensi Metarhizium spp. dan metabolit sekunder Metarhizium spp.  menyebabkan  mortalitas  serangga sebesar  50  %  pada  hari  ke-6  (enam)  dan ke-7  (tujuh)  setelah  aplikasi.  Suspensi spora  murni Metarhizium spp.  cenderung masih  lebih  efisien  dibandingkan  dengan formulasi  metabolit  sekundernya  dengan nilai  patogenisitas  yang  tidak  berbeda nyata.
Pengujian  ini  dapat  menjadi  dasar untuk  pengujian  selanjutnya  dengan
memperbaiki beberapa hal terkait produksi metabolit sekunder, aplikasi pada serangga  uji  atau  memilih  pembanding pengendalian  lainnya  sebagai  kontrol negatif.  Produksi  metabolit  sekunder dengan  menambahkan  faktor  aerasi  dan penambahan kecepatan penggojokan
(agitasi) bisa dipilih sebagai alternatif pada pengujian  selanjutnya,  sedangkan  untuk kontrol negatif bisa menggunakan insektisida  nabati  jika  dibandingkan dengan insektisida kimia. Variasi konsentrasi  metabolit  sekunder  dapat dibuat menjadi lebih banyak dengan jarak yang  tidak  terlalu  berbeda  jauh  untuk mengetahui efektivitasnya dalam
mematikan serangga uji.

## DAFTAR PUSTAKA
[DITLINBUN].  Direktorat  Perlindungan Perkebunan.  (2017). “Tetrastichus brontispae” pembunuh hama kumbang  janur  kelapa.  [Diakses pada  16  Agustus  2022].  Available from: https://ditjenbun.pertanian.go.id/t etrastichus-brontispae-pembunuh- hama-kumbang-janur-kelapa-2/ . [DITLINBUN].  Direktorat  Perlindungan Perkebunan.  (2018).  Buku  saku pembuatan  mol  (mikroorganisme lokal)  dan  pembuatan  MS  APH (metabolit sekunder agens pengendali hayati). Direktorat Jenderal  Perkebunan.  Kementerian Pertanian. Jakarta. Ahmed,  E.,  M.  Arshad,  M.  Z.  Khan,  M.  S. Amjad, H. M. Sadaf, I. Riaz, S. Sabir, N. Ahmad, & Sabaoon. (2017).
Secondary  metabolites  and  their multidimensional  prospective  in plant life. Journal of Pharmacognosy and  Phytochemistry,  6 (2),  205-214. Available from:
https://www.phytojournal.com/arc hives/2017/vol6issue2/PartC/6-2- 2-130.pdf . Astuti,  W.  Y.,  &  Respatie,  D.    W.,  (2022).
Kajian senyawa metabolit sekunder pada mentimun ( Cucumis sativus L.). J  Vegetalika,  11 (2),  122-134. Available from: https://doi.org/10.22146/veg.6088 6. Boruta,  T.  (2018).  Uncovering  the repertoire  of  fungal  secondary metabolites: From Fleming's laboratory  to  the  International Space  Station. Bioengineered , 9 (1), 12-16. Available from: https://doi.org/10.1080/21655979 .2017.1341022 . Brakhage,  A.  A.  (2013).  Regulation  of fungal secondary metabolism. Natural Reviews Microbiology,  11 (2013), 21 – 32. Available from: https://doi.org/10.1038/nrmicro2 916 . Freed, S. Jin, F. L.,  Naeem, M., Ren,  S.  X & Hussian,  M.  (2012).  Toxicity  of proteins secreted by entomopathogenic  fungi  against Plutella  xylostella (Lepidoptera:
Plutellidae). Int. J. Agric. Biol., 14 (2), 291-295. Available from: http://www.fspublishers.org/publi shed_papers/37590_..pdf .
Handayani, R. M. (2016). Potensi cendawan endofit  dalam  upaya  pengendalian penyakit antraknosa (Colletotrichum capsici)  pada  tanaman  cabai  merah [Tesis]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Harni,  R.,  Amaria,  W.,  Syafaruddin,  &
Mahsunah,  H.  (2017).  Potensi metabolit  sekunder Trichoderma spp. untuk mengendalikan penyakit Vascular Streak Dieback (VSD) pada bibit kakao. Jurnal Tanaman Industri dan Penyegar , 4 (2), 57 – 66. Available from: http://dx.doi.org/10.21082/jtidp.v
4n2.2017.p57-66 .
Indriyanti,  D.  R.,  Pertami,  A.  R.,  &
Widiyaningrum, P. (2016). Intensitas serangan Oryctes rhinoceros pada  tanaman  kelapa  di
Jepara. J Sains dan Teknologi, 14 (1), 39-49. Available from: https://www.google.com/url?sa=t& rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=
&ved=2ahUKEwj475j96YT8AhWhX mwGHT_rBWYQFnoECBoQAQ&url= https%3A%2F%2Fjournal.unnes.ac. id%2Fnju%2Findex.php%2Fsainte knol%2Farticle%2Fdownload%2F7 615%2F5294&usg=AOvVaw0PI6Ei T_m91UGoUffMpJbt . Liu,  B.  L,  &  Tzeng,  Y.  M  (2012)
Development  and  applications  of destruxins:  a  review. J  Biotechnol Adv,  30 (6),  1242 – 1254.  Available from: https://doi.org/10.1016/j.biotecha dv.2011.10.006 . Narasswati,  N.,  Oktavia,  R.,  Nenci,  N.,
Eryanti,  Y.,  Nugroho,  T.  T.,  & Nurulita, Y. (2017). Potensi metabolit sekunder dari Trichoderma sp.  LBKURCC22  tanah gambut  hutan  sekunder  sebagai antibiotik. J Chimica et Natura Acta, 5 (2). 85-89. Available from: https://doi.org/10.24198/cna.v5.n 2.14692 .
Pinu,  F.  R.,  &  Boas,  S.  G.  V.  (2017).
Extracellular microbial
metabolomics:  the  state  of  the  art.
Metabolites, 7 (3),  43-50.  Available from: https://doi.org/10.3390/metabo70 30043 . Prayogo,  Y.  (2012).  Efikasi  cendawan entomopatogen Beauveria  bassiana (Bals.)  Vuill.  (Deuteromycotina: Hyphomycetes)  dan  Metarhizium anisoplae  terhadap  kepik  hijau ( Nezara  virdula L.).  J. HPT  Tropika, 2 (1), 1-14.
Sa’diyah. (2019). Efek pemberian formula
cair mengandung metabolit sekunder jamur metarhizium anisopliae  terhadap  pertambahan daun baru tanaman kelapa. [Skripsi]. Universitas Negeri Semarang. Saryanah,  N.  F.  (2019).  Potensi  metabolit sekunder cendawan endofit sebagai antifungi  terhadap Colletotrichum acutatum pada cabai merah. [Tesis]. IPB University.
Seidel,  V.  (2012).  Initial  and  bulk extraction  of  natural  products isolation. Methods Mol Biol, 864 (2012),  27-41.  Available  from: https://doi.org/10.1007/978-1- 61779-624-1_2 . Soesanto,  L.  (2014).  Metabolit  sekunder agensia pengendali hayati: terobosan baru pengendalian organisme  pengganggu  tanaman perkebunan. Available from: https://www.researchgate.net/pub lication/278261729 . Soesanto,  L.  (2017). Pengantar  pestisida hayati : adendum metabolit sekunder  agensia  hayati.  Rajawali Pers: Jakarta.
Sopialena.  (2018).  Pengendalian  hayati dengan  memberdayakan  potensi mikroba.  Mulawarman  University Press. Susanti, U., Salbiah D., Loah, J. H. (2013). Uji beberapa  konsentrasi Metarhizium anisopliae (Metsch)  sorokin  untuk mengendalikan  hama  kepik  hijau ( Nezara  viridula L.)  pada  kacang panjang  ( Vigna  sinensis L.). Jurnal
Universitas  Riau,  1 (2013),  1-10. Available from: https://repository.unri.ac.id/bitstre am/handle/123456789/3740/Unik %20Susanti.pdf?sequence=1&isAllo wed=y . Tampubolon,  D.  Y.,  Pangestiningsih,  Y., Zahra,  F.,  &  Manik,  F.  (2013).  Uji patogenisitas Bacillus  thuringiensis dan Metarhizium anisopliae terhadap  mortalitas Spodoptera litura Fabr (Lepidoptera: Noctuidae)
di  Laboratorium. Jurnal  Online Agroekoteknologi.  1 (3),  784-  791. Available from:
https://doi.org/10.32734/jaet.v1i3.
3004 .
Tredwell, G. D. Edwards, J. B., Leak, D. J. &
Bundy, J. G. (2011). The development of metabolomic sampling  procedures  for  pichia pastoris,  and  baseline  metabolome data. PLoS  ONE  6 (2011),  e16286. [CrossRef]  [PubMed].  Available from: https://doi.org/10.1371/journal.po ne.0016286 .
Vinale,  F., et  al. (2014).  Trichoderma secondary  metabolites  active  on plants  and  fungal  pathogens. The Open  Mycology  Journal,  8 (1),  127 – 139. Available from: http://doi.org/10.2174/18744370 01408010127 .
Wati,  C.,  &  Hardanti,  S.  (2019).  Buku Petunjuk  Praktikum:  Bioteknologi Pertanian. Hal 47-74. Buku petunjuk praktikum  bioteknologi  pertanian pusat  pendidikan  pertanian.  Badan Penyuluhan  dan  Pengembangan SDM Pertanian. Kementerian Pertanian.