Accredited by Ministry of Research, Technology                                DOI: https://doi.org/10.35799/jis.v21i2.34635 and Higher Education No: 28/E/KPT/2019                Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/index.php/jis
Isolasi dan Identifikasi Saponin dari Ekstrak Leunca (Solanium ningrum L ) Secara Spektrofotometri Infra Merah
Aden Dhana Rizkita 1) , Sintia Ayu Dewi 2) ,
Emas Agus Prastyo Wibowo 2) , Ilham Maulana 1)
1) Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Bogor Husada, Bogor, Indonesia
2) Jurusan Kimia Universitas Negeri Semarang, Semarang, Indonesia adendhanarizkita@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian ini dilakukan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa saponin dengan maserasi menggunakan etanol 95% sampai mendapat ekstrak kering sebanyak 20 gram dengan dipanaskan menggunakan  evaporator.  Ekstraksi  kedua  dilakukan  menggunakan  corong  pisah  dengan  pelarut dietil eter dan n-butanol. Identifikasi saponin dilakukan dengan tiga parameter uji diantaranya uji busa, uji warna dan gugus fungsi menggunakan Spektrofotometer Infra Merah.  Hasil pengukuran Spektrofotometri  Infra  Merah  menunjukkan  Ekstrak  Daun  Launca  mengandung  beberapa  gugus fungsi sebagai berikut : gugus –OH (puncak yang lebar pada bilangan gelombang 3444,87 cm -1 ), regang –CH alifatik simetri (bilangan gelombang 2926,01 cm -1 dan 2854,65 cm -1 , regang C=C tidak terkonjugasi  pada  bilangan  gelombang  1606,7  cm -1 ,  adanya  regang  C-H  (bilangan  gelombang 1074,35  cm -1 dan  1045,42  cm -1 ),  dan  adanya  vibrasi  bengkokan  simetris  C-O  pada  bilangan gelombang 1386,82 cm -1 .
Kata kunci : Daun leunca; spektrofotometer infra merah; saponin
Isolation and Identification of Saponin from Leunca ( Solanium ningrum L)

## Extract by Infrared Spectrophotometry

## ABSTRACT
This research was conducted to isolate and identify saponin compounds by maceration using 95% ethanol to obtain 20 grams of dry extract by heating using an evaporator. The second extraction was carried  out  using  a  separating  funnel  with  diethyl  ether  and  n-butanol  as  solvents.  Saponin identification  was  carried  out  with  three  test  parameters  including  foam  test,  color  test  and functional  group  using  Infrared  Spectrophotometer.  Infrared  Spectrophotometry  measurement results  show  that  the  Launca  Leaf  Extract  contains  the  following  functional  groups:  -OH  group (wide  peak  at  wave  number  3444.87  cm-1),  aliphatic  symmetrical  -CH  stretch  (wave  number 2926.01 cm-1 and 2854 ,65 cm-1, unconjugated C=C stretch at wave number 1606.7 cm-1, presence of CH stretch (wave number 1074.35 cm-1 and 1045.42 cm-1), and the presence of symmetrical bending vibration of CO at wave number 1386.82 cm-1.
Keywords: Infra red spectrophotometer; leunca leaf; saponin
(Article History:  Received 06-07-2021; Accepted 20-10-2021; Published 29-10-2021)

## PENDAHULUAN
Kebanyakan  Tumbuhan  di  Indonesia pada  umumnya  mengandung  senyawa  aktif dalam  bentuk  metabolit  sekunder  seperti terpenoid,  steroid,  kumarin,  flavonoid  dan alkaloid (Sari et al. , 2015). Senyawa metabolit sekunder  tersebut  telah  banyak  digunakan sebagai  zat  warna,  racun,  aroma  makanan maupun  sebagai  obat-obatan  (Lenny,  2006; Putriantari et  al. ,  2014).  Alkaloid,  flavonoid, senyawa fenol, steroid, dan terpenoid dikenal sebagai  metabolit  sekunder  yang  bersifat antioksidatif  (Marliana,  2007;  Santosa et  al.,
2017). Kegunaan tumbuhan tidak terlepas dari kandungan senyawa kimianya, satu tumbuhan obat  terdapat  lebih  dari  satu  senyawa  kimia (Herlina,  2011).  Tergantung  dari  iklim, ketinggian,  jenis  tanah,  perlakuan  terhadap tanaman (Yuniarti, 2008). Salah satu tanaman yang  mempunyai  khasiat  sebagai  obat tradisional  adalah  daun  leunca  ( Solanum nigrum L)  yang  secara  empirik  digunakan sebagai obat tipoid, menurunkan panas tubuh, dan  tekanan  darah  tinggi  (Arisandi,  2008). Daun  leunca  memiliki  kandungan  kimia seperti  saponin,  polifenol,  sodium,  calcium,
Rizkita et al.: Isolasi dan Identifikasi Saponin dari Ekstrak   ………………… 167 …
miasin, fosfor, folat, dan magnesium (Joseph, 2002; Sabu & Kalpana, 2017).
Penelitian tentang daun leunca
sebelumnya telah dilakukan oleh Putriantari et al .  (2014),  tentang  uji  antiproliferatif  fraksi kloroform  dari  ekstrak  etanol  daun  leunca terhadap  sel  hela  serta  Raditya  Prima  Istiaji, tentang uji fitokimia estrak daun leunca yang berpotensi  sebagai  imunostimulan  sehingga muncul  pemikiran  baru  ketika  diidentifikasi menggunakan instrument penunjang identifikasi  seperti  spektrofotometer  infra merah,  akan  lebih  memastikan  kebenaran kandungan saponin pada daun leunca tersebut. Berdasarkan  uraian  tersebut  diatas maka  permasalahan  yang  timbul  dalam penelitian  adalah  apakah  pada  ekstrak  daun leunca  terdapat  kandungan  saponin  secara spektrofotometri infra merah.
Adapun tujuan dari penelitian ini  yaitu untuk  mengidentifikasi  senyawa  (komponen) saponin  pada  ekstrak  Daun  Leunca  secara spektrofotometri  Infra  merah.    Manfaat penelitian  ini  yaitu  memberikan  informasi tentang  data  kimia  berupa  komponen  kimia saponin  serta  manfaat  yang  terdapat  dalam daun  Leunca  dapat  menjadi  acuan  untuk peneliti selanjutnya.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan di
Laboratorium  Kimia  Prodi  Farmasi,  STIkes
Bogor Husada, pada bulan Januari 2020. Jenis penelitian  yang  dilakukan  adalah  penelitian eksperimental  yang  merupakan  penelitian laboratorium yang menggunakan alat Spektrovotometri Infra merah. Dengan desain penelitian  yaitu  identifikasi  senyawa  saponin dari  ekstrak  Leunca (Solanium  ningrum L ) secara spektrofotometri Infra merah. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah aquades, alumunium foil, alumunium klorida, asam sulfat 10 %,  ekstrak daun leunca , etanol, FeCl 3 , pereaksi Liebermann Burchard (LB), n-butanol, kloroform,  metanol,  Spektrofotometri  infra merah (Lestari et al ., 2016).
Metode Penelitian yang ditempuh yaitu:
1) Pengambilan  sampel,  yaitu  daun  leunca disortir,  dibersihkan,  dipotong  kecil-kecil, dan  dikeringkan  menggunakan  sinar matahari.
2) Bahan  diekstraksi  meggunakan  3  jenis pelarut  yaitu  etanol  95%,  dietil  eter,  n- butanol  (Santosa et  al .,  2015).  Pertama
daun  yang  telah  disortir  di  maserasi menggunakan etanol 95% sampai memperoleh  ekstrak  kering  menggunakan evaporator,  kemudian  ekstrak  methanol tersebut  disuspensi  dengan  air  suling, kemudian diekstraksi dengan dietil eter 50 ml  dalam  corong  pisah,  dilakukan sebanyak  3  kali,  ekstrak  dietil  eter ditampung  lalu  diuapkan  (Pratiwi, et  al. (2011).  Lapisan  air  kemudian  diekstraksi dengan  n-butanol  setelah  itu  diuapkan sampai  diperoleh  ekstrak  kental.  Lapisan air  yang  diperoleh  disuspensi  dengan  air suling,  kemudian  diekstraksi  dengan  n- butanol  50  ml  dalam  corong  pisah dilakukan  sebanyak  3  kali,  dan  diperoleh dua lapisan yaitu lapisan air dan lapisan n- butanol.  Lapisan  n-butanol  diuapkan  dan diperoleh ekstrak n-butanol kental kemudiabn  dicuci  dengan  dietil  eter  dan dilarutkan  dengan  metanol  lalu  disaring kemudian diperoleh dua lapisan yaitu dietil eter dan lapisan metanol, lalu pada lapisan ini ditambahkan dengan dietil eter berlebih lalu  disaring  kembali  dan  endapan  yang diperoleh  menandakan  adanya  endapan saponin,  kemudian  untuk  lebih  jelas dilakukan uji pendahuluan untuk mengetahui  ada  atau  tidaknya  endapan saponin.
3) Uji  pendahuluan  saponin  berupa  uji  busa dan uji warna.
4) Identifikasi  menggunakan  spektrofoto- meter infra merah.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  disajikan  secara  logis,  singkat, dan  sistematis  (tabel  dan  ilustrasi  penting harus  disertakan).    Pembahasan  merupakan tinjauan  atas  hasil  penelitian;  terkait  di dalamnya, argumentasi logis serta perbandingan  dengan  hasil-hasil  penelitian lain (rujukan literatur).
Penelitian yang telah dilakukan didapatkan  hasil,  pada  proses  ekstraksi terhadap  500  gram  sampel  Daun  Leunca ( Solanium  ningrum L)  dengan  memakai pelarut  etanol  95  %  diperoleh  ekstrak  etanol kental,  kemudian  dipartisi  cair-cair  dengan menggunakan  pelarut  yang  sesuai  sampai diperoleh  ekstrak  eter.  Dari  ekstrak  yang diperoleh  dilakukan  uji  pendahuluan  yaitu dengan  menggunakan  uji  busa  dan  pereaksi warna kemudian dilanjutkan dengan spektrofotometri  infra  merah.  Hasil  uji
pendahuluan  saponin  dengan  menggunakan uji  busa  dapat  dilihat  pada  Tabel  1  dimana pada  tabel  ini  membuktikan  adanya  senyawa Saponin  dengan  menggunakan  metode  uji Busa  dengan  pereaksi  HCl.  Hasil  uji pendahuluan  saponin  dengan  menggunakan uji pereaksi warna dapat dilihat pada Tabel 2. hasil ini memperkuat uji pendahuluan dengan indikator  warna.  Tabel  3  menggambarkan hasil  analisis  spektrum  infra  merah  yang menandakan  bahwa  sampel  mengandung Saponin  dengan  melihat  gugus  Hodroksi, Karboksil, dan C=C aromatis (Hedges, 2007).
Tabel  1 .  Hasil  Uji  Pendahuluan  Saponin dengan menggunakan Uji Busa
No Sampel Pereaksi Hasil Ket 1 Simplisia Daun Leunca HCl 2N Busa stabil 1-3 cm (+) Tabel  2 .  Hasil  Uji  Pendahuluan  Saponin dengan menggunakan Uji Pereaksi Warna No Sampel Pereaksi Hasil Ket 1 Simplisia Daun Leunca Kloroform + pereaksi LB Cincin Coklat (+) Tabel 3 . Hasil Analisis Spektrum Infra Merah Pun cak Bilangan gelombang (cm -1 ) Jenis Vibrasi Inte nsit as Isolat 1 Pustaka 1 3444,87 3500-3300 O-H stretch Vs 2 2926,01 2854,65 2900-2700 C-H (Alkana) stretch m-s 3 1606,7 1650-1450 C=C stretch m 4 1386,82 1340-1470 C-O (Alkana) bending of methyl M 5 1074,35 1045,35 1300-1000 C-H stretch of carbonyl m-s
Keterangan: vs ( very strong ), s ( strong ), m ( medium ), w ( weak )
Simplisia  daun  leunca  sebanyak  500 gram  diekstraksi  dengan  maserasi  dalam dengan  etanol  95%.  Etanol  95%  dapat mengikat  semua  ekstrak  yang  terkandung dalam  sampel  yang  telah  dihasilkan,  baik bersifat  polar  maupun  non  polar.dari  hasil
maserasi  dan  penguapan  dengan  rotapavor diperoleh ekstrak kering sebanyak 20 gram.
Tahap selanjutnya ekstrak daun Leunca ini  dipartisi  (dipisahkan)  senyawa  nonpolar, dan  senyawa  polar  dengan  menggunakan metode  partisi  cair-cair  pemisahan  dilakukan berdasarkan  tingkat  kepolarannya.  Pelarut partisi pertama yang digunakan adalah pelarut eter  karena  eter  merupakan  pelarut  nonpolar. Pelarut partisi kedua yang digunakan adalah n- butanol  karena  n-butanol  merupakan  pelarut polar  yang  mampu  menarik  senyawa  polar, dan senyawa  yang  akan ditarik yaitu  saponin yang merupakan senyawa polar.
Untuk identifikasi pertama-tama dilakukan uji pendahuluan dengan
menggunakan  uji  busa.  Uji  busa  meliputi dengan simplisia sebanyak 0,5 gram dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang telah berisikan  aquades  10  ml,  dikocok  dan ditambahkan 1 tetes larutan asam klorida 2 N. Diperhatikan  ada  atau  tidak  adanya  busa stabil.  Sampel  mengandung  saponin  jika terbentuk  busa  stabil  dengan  ketinggian  1-3 cm selama 30 detik dan hasil yang di dapatkan positif  mengandung  saponin.  Setelah  itu dilanjutkan  dengan  uji  pendahuluan  dengan menggunakan uji warna.
Uji  warna  meliputi  simplisia  sebanyak 0,5 gram dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang  telah  berisikan  kloroform  10  ml, dipanaskan  selama  5  menit  dengan  penangas air  sambil  dikocok  kemudian  ditambahkan beberapa  tetes  pereaksi  LB.  Jika  terbentuk cicin  coklat  atau  violet  maka  menunjukkan adanya  saponin  triterpen,  sedangkan  warna hijau atau biru menunjukkan adanya saponin. Dan hasil yang di dapatkan positif mengandung saponin.
Hasil pengukuran spektrofotometri infra merah menunjukkan ekstrak daun leunca mengandung  beberapa  gugus  fungsi  sebagai berikut : gugus –OH (puncak yang lebar pada bilangan  gelombang  3444,87  cm -1 ),  regang  – CH  alifatik  simetri  (bilangan  gelombang 2926,01  cm -1 dan 2854,65  cm -1 ,  regang  C=C tidak  terkonjugasi  pada  bilangan  gelombang 1606,7  cm -1 ,  adanya  regang  C-H  (bilangan gelombang  1074,35  cm -1 dan  1045,42  cm -1 ), dan  adanya  vibrasi  bengkokan  simetris  C-O pada bilangan gelombang 1386,82 cm -1 . Hasil spektrum  pengukuran  gugus  fungsi  ekstrak daun  leunca  menggunakan  spektrofotometri infra merah dapat dilihat pada Gambar 1 yang membuktikan  bahwa  hasil  spektrum  gugus
Rizkita et al.: Isolasi dan Identifikasi Saponin dari Ekstrak   ………………… 169
…
fungsi daun leunca mengandung gugus gugus karbonil,  hidroksi,  cincin  C=C  aromatis,  dan hidrokarbon.
Gambar 1. Hasil  spektrum  gugus  fungsi ekstrak daun leunca menggunakan  spektrofotometri infra merah

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan daun leunca ( Solanium ningrum L) secara  spektrofotometri  infra  merah  maka dapat  disimpulkan  bahwa  daun  leunca ( Solanium ningrum L) tersebut teridentifikasi adanya  senyawa  saponin  dengan  hasil spektum  infra  merah  yang  ditandai  dengan adanya  gugus  –OH,  gugus  karbonil  C-O, cincin C=C aromatis, dan rentangan dua gugus C-H pada kedua senyawa kimia tersebut.

## DAFTAR PUSTAKA
Arisandi,  Y.  2008.  Manfaat  dan  Kegunaan Tanaman  Leunca.  Dinas  Kesehatan Provinsi Bali, Denpasar.
Hedges. 2007. Relationship Between Cemical Structure  and  Biologica  Activities  of Triterpenoid  Saponin  from  Soybean (Review). Biosience Biotechnology and Biochemistry, 62: 2291-2292.
Herlina,  W.  2011.  Tetumbuhan  Sebagai Sumber  Bahan  Obat.  Pusat  Penelitian Universitas Andalas, Padang. Joseph, G.  2002.  Manfaat Tanaman Leunca Bagi Kesehatan Kita, Available (Online). http://giosephid@yahoo.com .
Diaskes 12 Maret 2014.
Lenny,  S.  2006.  Senyawa  flavonoida,
fenilpropanoida dan alkaloida. Departemen Kimia Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam  Universitas  Sumatera  Utara, Medan.
Lestari, Y., Ardiningsih, P. & Nurlina.  2016.
Aktivitas  antibakteri  gram  positif  dan gram  negatif  dari  ekstrak  dan  fraksi daun  nipah  ( Nypa  fruticans wurmb.) asal  pesisirsungai  kakap  Kalimantan Barat. Jurnal Kimia Khatulistiwa , 5(4) : 1-8.
Marliana.    2007.  Tumbuhan  Obat  Nusantara .
Cetakan I . PT Cahaya Abadi, Jakarta. Pratiwi, R.S., Tjiptasurasa & Wahyuningrum, R.  2011.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Kayu  Nangka  (Artocarpus heterophylla  Lmk.)  Terhadap  Bacillus subtilis  dan  E.  coli. Pharmacy , 8(3): 1- 10.
Putriantari,  M.  &  Sentosa,  E.  2014.
Pertumbuhan dan kadar alkaloid tanaman  leunca  ( Solanum americanum Miller)  pada  beberapa  dosis  nitrogen. Jurnal  Hortikultura  Indonesia ,  5(3): 175  182.
Sabu,  R.,  &  Kalpana,  C,A. 2017. Cultivation of  Solanum  nigrum  under  controlled environment  using  organic  fertilizer. International Journal of Applied Home Science, 4(7): 519  524.
Santosa,  E.,  Prawati,  U.,  Sobir,  Mine,  Y.  & Sugiyama, N. 2015. Agronomy, utilization and economics of indigenous vegetables  in  West  Java,  Indonesia. Jurnal  Hortikultura  Indonesia , 6(3): 125  134. https://doi.org/10.29244/ jhi.6.3.125-134.
Santosa, E., Putriantari, M., Nakano, H., Mine, Y.  &  Sugiyama,  N.  2017.  Canopy achitecture, biomass and fruit production  of Solanum  nigrum L.  as determined  by  nitrogen  application. Jurnal  Hortikultura  Indonesia , 8(3): 162  170. https://doi.org/10.29244/
jhi.8.3. 162-170.
Sari, I.D., Yuniar, Y., Siahaan, S., Riswati &
Syaripuddin, M. 2015. Tradisi Masyarakat  dalam  Penanaman  dan Pemanfaatan  Tumbuhan  Obat  Lekat  di Pekarangan. Jurnal Kefarmasian Indonesia, 5(2): 123-132.
Yuniarti.  2008.  Kitab  Tumbuhan  Obat Nusantara . Cetakan I . PT  Buku  Seru. Jakarta.