## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Mikroalga Laut Chlorella vulgaris terhadap Bakteri Propionibacterium acnes dan Diformulasikan Sebagai Emulgel
The Activity of Marine Microalgae Extract of Chlorella vulgaris Against Propionibacterium acnes and Formulated as Emulgel
Aris Suhardiman 1* , Sinta Purnamasari 1 , Dewi Kurnia 1 Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Bhakti Kencana Jalan Soekarno Hatta No. 754 Kecamatan Panyileukan, Bandung, Indonesia 40164 *E-mail: aris.suhardiman@bku.ac.id
DOI: https://doi.org/10.26874/jkk.v3i1.49
Received : 11 May 2020, Revised : 31 May 2020, Accepted : 31 May 2020, O nline : 31 May 2020

## Abstrak
Chlorella vulgaris merupakan salah satu jenis mikroalga yang mempunyai potensi untuk dimanfaatkan sebagai  antibakteri.  Aktivitas  antibakteri  tersebut  diketahui  karena  adanya  kandungan  asam  lemak. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  dari  mikroalga C.  vulgaris terhadap bakteri Propionibacterium  acnes . C.  vulgaris ditumbuhkan  dalam  medium  Walne  dan  dikultivasi dengan kondisi suhu ruang (±25-27°C), fotoperiod 12:12 (gelap:terang), intensitas cahaya 10.000 lux dan  aerasi  selama  24  jam.  Ekstraksi C.  vulgaris dilakukan  dengan  metode  maserasi  bertingkat menggunakan  pelarut  n-heksana,  kloroform  dan  etanol . Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan metode Broth Microdillution pada konsentrasi 65.536 µg/mL hingga diperoleh konsentrasi terkecil 64 µg/mL dengan pengenceran. Berdasarkan hasil diperoleh nilai KHM pada konsentrasi 8.192 µg/mL dan KBM  pada  konsentrasi  16.384  µg/mL  pada  ekstrak  n-heksana.  Kemudian  dilanjutkan  dengan  uji bioautografi  yang  menunjukkan  senyawa  aktif  antibakteri  berasal  dari  asam  lemak  galaktolipid. Aktivitas  antibakteri C.  vulgaris terhadap  bakteri P.  acnes berpotensi  untuk  dikembangkan  dalam bentuk sediaan emulgel.  Hasil uji aktivitas sediaan emulgel pada konsentrasi 8% diperoleh diameter zona hambat 12,63 mm. Berdasarkan hasil yang diperoleh, dapat disimpulkan bahwa ekstrak dan sediaan emulgel dari mikrolaga C. vulgaris mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri P. acnes.
Kata Kunci : Antijerawat, Propionibacterium acnes, Chlorella vulgaris, Emulgel

## Abstract
Chlorella vulgaris is a microalgae which is potent to be produced as beneficent healthcare product. C. vulgaris has an antibacterial activity due to its fatty acid contents. The purpose of this research was to verify the antibacterial activity of Chlorella vulgaris against Propionibacterium acnes. C. vulgaris is grown in Walne medium and cultivated in room temperature (±25-27°C), with photoperiod of 12:12 (dark:bright), light intensity of 10.000 lux and 24 hours aeration. Multilevel maceration was performed as the extraction method using n-hexane, chloroform and ethanol. The activity test was performed using Broth Microdilution in concentration of 65.536 µg/mL and 64 µg/mL was found to be the smallest concentration  by  dilution.  The  result  shows  the  minimum  inhibition  concentration  (MIC)  is  8.192 µg/mL  and  minimum  bactericidal  concentration  (MBC)  is  16.384  µg/mL  in  extract  of  n-hexane. Bioautography  was  performed  to  identify  the  antibacterial  active  compounds  which  is  fatty  acid  of galactolipid.  Antibacterial  activity  of C.  vulgaris against P.  acnes is  potential  to  be  developed  in emulgel dosage form. The ability of C. vulgaris emulgel against P. acnes in concentration of 8% with inhibition zone of 12,63 mm. Based on the results, it is concluded that extract and emulgel of Chlorella vulgaris has antiacne activity against P. acnes .
Keywords : Antiacnes, Propionibacterium acnes, Chlorella vulgaris, Emulgel
1 Pendahuluan
Jerawat  ( acne )  merupakan  penyakit  yang banyak  diderita  masyarakat  terutama  remaja. Pengobatan yang lazim digunakan untuk mengatasi  jerawat  adalah  dengan  menggunakan antibiotik [1].
Mikroorganisme yang berperan dalam patogenesis jerawat salah satunya adalah Propionibacterium acnes dengan cara memproduksi  metabolit  yang  dapat  bereaksi dengan  sebum  sehingga  meningkatkan  proses inflamasi [2].
P.  acnes mengeluarkan enzim hidrolitik yang menyebabkan  kerusakan  folikel  polisebasea  dan menghasilkan enzim lipase, hialuronidase, protease,  lesitinase,  dan    neuroamidase  yang memegang peranan penting pada proses peradangan. P. acnes mengubah asam lemak tak jenuh  menjadi  asam  lemak    jenuh    yang menyebabkan  sebum  menjadi  padat [2].
Senyawa  antibiotik  dapat  berupa  senyawa kimia sintetik atau senyawa alamiah yang berasal dari  tanaman  obat  atau  bahan  alam  bahari  yang diperoleh melalui proses pengekstrakan [3].
Mikroalga  merupakan  sumber  antibiotik alamiah yang potensial untuk menghambat bakteri penyebab  penyakit  pada  manusia.  Aktivitas antibakteri  dari  spesies  alga  sebagai  bahan  alam bahari  memiliki  efek  samping  minimal  tetapi memiliki  efek  terapi  yang  berpotensi  tinggi daripada antibakteri sintesis [4].
Chlorella  vulgaris merupakan  salah  satu jenis  mikroalga  dari  golongan  Chlorophyta  (alga hijau) yang dapat dimanfaatkan sebagai antibiotik. Telah  diketahui  aktivitas  antibiotik C.  vulgaris efektif terhadap bakteri Gram positif Staphylococcus  aureus,  Streptococcus  pyogenes dan  bakteri  Gram  negatif Klebsiella  pneumonia dan Eschericia coli [5]
Studi penelitian melaporkan bahwa aktivitas antibiotik  alga  hijau  diperoleh  dari  biomassa, karena  adanya  kandungan  asam  lemak  dalam organisme mikroalga [4].
Kelompok  utama  senyawa  antibakteri  yang ditemukan  dalam  mikroalga  adalah  asam  lemak, lipid, pigmen, polifenol, karbohidrat, hidrokarbon sederhana  dan  beberapa  turunan  lainnya.  Selain memiliki  aktivitas sebagai antibakteri, mikroalga juga  menghasilkan  beberapa  vitamin  penting seperti  vitamin  A,  B 1 ,  B 2 ,  B 6 ,  B 12 ,  C,  E, nikotinamida,  biotin,  asam  folat,  dan  asam pantotenat [6].
Berdasarkan  hasil  penelitian  di  atas,  maka dilakukan upaya untuk pengembangan pembuatan sediaan  farmasi  dari  bahan  alam  bahari.  Sediaan
emulgel  merupakan  salah  satu  bentuk  sediaan farmasi  yang  cocok  untuk  digunakan  secara topikal.  Sediaan  emulgel  terdiri  dari  emulsi  dan gel  berupa  sediaan  emulsi  yang  dibuat  dengan penambahan basis gel.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui aktivitas antibakteri berdasarkan data KHM, KBM ekstrak Chlorella vulgaris terhadap bakteri Propionibacterium  acnes dan  dilakukan uji  Bioautografi serta  dibuat  sediaan  emulgel untuk jerawat.

## 2 Metode Penelitian
Penelitian  mengenai  senyawa  antibakteri P. acnes dari  alga  hijau C.  vulgaris dan diformulasikan  sebagai  emulgel  untuk  jerawat dilakukan dengan metode eksperimental.
Penelitian  ini  dilakukan  dalam  beberapa tahapan yaitu aktivasi dan kultivasi mikroalga C. vulgaris dalam  medium  Walne,  pemanenan mikroalga menggunakan alat sentrifuga Beckman Coulter  Avanti  dengan  rotor  besar  JXN-26  pada kecepatan 5.000 rpm selama 10 menit. Supernatan kemudian  dipisahkan  dan  biomassa  basah dikumpulkan. Biomassa basah mikroalga dilakukan  pengeringan  dengan  cara Freeze  Dry. Selanjutnya mengekstraksi mikroalga C. vulgaris dengan metode maserasi bertingkat menggunakan pelarut  n-heksana,  kloroform  dan  etanol.  Setelah didapatkan  tiga  ekstrak  mikroalga C.  vulgaris sesuai  pelarut,  dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri dengan  metode Broth Microdillution dan menentukan KHM (Konsentrasi Hambat Minimum), KBM (Konsentrasi Bunuh Minimum) dan uji bioautografi. Kemudian memformulasikan ekstrak  mikroalga C.  vulgaris yang  memiliki KHM  paling  baik  dan  dilakukan  uji  aktivitas antibakteri  sediaan  emulgel  dengan  metode perforasi serta evaluasi emulgel.

## 2.1 Alat dan bahan
Peralatan  gelas  yang  digunakan  meliputi gelas ukur ( pyrex ), gelas kimia ( pyrex ), botol kaca berkapasitas 1 L, botol gelap,  pipa kaca berbentuk L panjang (untuk aerasi) dan pendek (untuk udara keluar  botol  dan  pengambilan  sampel),  cawan petri,  batang  pengaduk,  pipet  tetes,  cawan penguap, lampu neon ( phillips ), mortar, stamper, tabung reaksi, Erlenmeyer ( pyrex ), krus. Sedangkan  untuk  peralatan  lainnnya  yang digunakan  adalah  sumbat  karet,  kapas  berlemak, kassa,  alumunium  foil,  aerator,  selang  plastik, mikropipet ukuran 0,5-10 μL, 10-100 μL dan 100- 1000 μL, Haemacytometer ( Improved Neurbaeur ) , Mikroskop, timer ,  spatel,  Autoklaf,
Inkubator,  botol  semprot,  bunsen,  korek  api,  tip mikro,  Neraca  Analitik  Mettler  Toledo, Freeze Dryer , Orbital  shaker, Hot  Plate,  Sentrifuga ( Beckman  Coulter  Avanti  JXN-26) ,  Moisture Balance, mikroplate,  Salinity  Hydrometer,  jarum ose,  vortex,  membran  filter  berukuran  0,2  µm, pinset, corong buchner, perforator, jangka sorong.
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  biomassa  mikroalga C. vulgaris yang  merupakan  kultur  murni  yang diperoleh dari laboratorium Fakultas Farmasi serta bakteri P.  acnes ( Remel )  yang  diperoleh  dari Laboratorium  Mikrobiologi,  Institut  Teknologi Bandung.  Bahan-bahan  lain  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  antara  lain  air  laut,  aquades ( Bratachem ),  medium  Walne,  media Mueller Hinton  Broth ( Oxoid )  dan Muller  Hinton  Agar ( Oxoid ).  Bahan-bahan  kimia  yang  digunakan untuk mengekstraksi Chlorella vulgaris adalah n- heksana ( Bratachem ), kloroform ( Bratachem ) dan etanol  70%  ( Bratachem ),  DMSO  ( Bratachem ). Bahan-bahan  untuk  formulasi  sediaan  emulgel diantaranya  HPMC  ( Bratachem ),  Parafin  cair ( Bratachem ),  Span  80  ( Bratachem ),  Tween  80 ( Bratachem ), propilen  glikol ( Bratachem ), metil paraben  ( Merck ),  propil  paraben  ( Merck ),  Butil Hidroksi Toluen ( Merck ), aquadest ( Bratachem ).

## 2.2 Tahapan Penelitian
Tahap  penelitian  dilakukan  dalam  beberapa tahap yaitu.

## Kultivasi Mikroalga C. vulgaris
Kultivasi mikroalga dilakukan setelah 4 hari kultur  mikroalga  tersebut  diaktivasi.  Kultivasi dilakukan  dengan  kondisi  yang  sama  dengan aktivasi  menggunakan  medium  Walne.  Kultivasi pada medium Walne dilakukan selama ±8 hari dan dilakukan secara aseptik.

## Pemanenan Mikroalga C. vulgaris
Pemanenan mikroalga C. vulgaris dilakukan pada  hari  ke  8  menggunakan    alat    sentrifuga Beckman Coulter Avanti dengan rotor besar JXN- 26  pada  kecepatan  5.000  rpm  selama  10  menit. Supernatan  kemudian  dipisahkan  dan  biomassa basah dikumpulkan. Kemudian dilakukan penimbangan  menggunakan  neraca  analitis. Selanjutnya sampel mikroalga dilakukan pengeringan  dengan  cara Freeze  Dry ,  sehingga didapat biomassa kering dan dilakukan penimbangan  kembali  menggunakan  neraca analitis .
Ekstraksi Mikroalga C. vulgaris
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi bertingkat  menggunakan  pelarut  n-heksana, kloroform  dan  etanol  dengan  perbandingan biomassa kering mikroalga C. vulgaris dan pelarut 1:5  (b/v).  Sebanyak  20  g  biomassa  kering C. vulgaris dimasukan ke dalam erlenmeyer 250 mL tambahkan  pelarut  n-heksana  sebanyak  100  mL kemudian disonikasi selama 1 jam. Sampel diaduk menggunakan orbital shaker selama 24 jam pada suhu  ruang  dengan  kecepatan  120  rpm. Selanjutnya dilakukan penyaringan menggunakan kertas  Whatman  No.1  sehingga  terpisah  antara filtrat  dengan  residu.  Bagian  residu  dimaserasi kembali  hingga  3  kali.  Tahap  selanjutnya dilakukan dengan proses yang sama pada sampel yang  sama  (bagian  residu)  untuk  pelarut  yang kedua  yaitu  kloroform  dan  pelarut  ketiga  yaitu etanol.  Filtrat  yang  diperoleh  dari  3  kali  proses maserasi dikumpulkan dan dipekatkan menggunakan rotary evaporator vacuum sehingga diperoleh ekstrak pekat n-heksana, kloroform dan etanol.  Ekstrak  pekat  yang  diperoleh  dihitung rendemennya.

## Uji Aktivitas Antibakteri
KHM  ditentukan  dengan  menggunakan metode Broth Microdillution. Sebanyak  100  µl Mueller  Hinton  Broth (MHB)  steril  dimasukkan ke  dalam  setiap  kolom  mikroplate.  Kolom pertama  sebagai  kontrol  negatif  media.  Pada kolom  ke  12  ditambahkan  100  µL  ekstrak C. vulgaris yang  telah dilarutkan  dalam  DMSO  8% kemudian  dihomogenkan.  Dari  kolom  ke  12, diambil 100 µL kemudian dipindahkan ke kolom 11  kemudian  dihomogenkan.  Pengenceran  terus dilakukan sampai kolom ke 3 yang akan memiliki konsentrasi terkecil, dari kolom ke 3 diambil 100 µL  dan  dibuang.  Kemudian  pada  kolom  ke  2 sampai  kolom  ke  12  ditambahkan  5  µl  suspensi bakteri P.  acnes 10 8 CFU/mL  yang  memiliki absorbansi  0,08-0,10  pada  panjang  gelombang 625  nm.  Kolom  ke  2  merupakan  kontrol  positif yang  berisi  media  dan  bakteri.  Mikroplate diinkubasi pada suhu 37ºC selama 24 jam dalam inkubator  kemudian  diamati  bagian  yang  jernih (tidak  ada  pertumbuhan  mikroba).  Konsentrasi terkecil  dimana  tidak  terlihat  pertumbuhan mikroba  ditetapkan  sebagai  KHM  (Konsentrasi Hambat Mininum.
Pengujian  dilanjutkan  dengan  menentukan KBM  (Konsentrasi  Bunuh  Minimum)  dengan memilih ekstrak yang memiliki bagian yang jernih dan  ditetapkan  sebagai  KHM  kemudian  dikultur ulang dengan cara menggoreskan hasil KHM pada
media padat MHA diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37ºC dalam inkubator dengan posisi cawan petri  dibalik.  Jika  tidak  ada  pertumbuhan  maka disebut KBM.

## Uji Bioautografi
Untuk  mendeteksi  senyawa  aktif  yang mempunyai aktivitas sebagai antibakteri digunakan  metode  bioautografi.  Pelat  KLT  yang telah dielusi di tempelkan pada media MHA steril yang  telah  diinokulasi  dengan  100  µL  suspensi bakteri P. acnes 10 8 CFU/mL. Diamkan selama 60 menit,  diberi  tanda  bagian  bawahnya,  lalu  plat diangkat kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37ºC dalam inkubator dengan posisi cawan petri  dibalik.  Diamati,  bila  bercak  pada kromatogram  tersebut  yang  memiliki  aktivitas antibakteri  maka  dengan  difusi  akan  terbentuk zona  bening  yang  merupakan  zona  hambat  yang memberikan aktivitas antibakteri.

## Formulasi Sediaan Emulgel
Formulasi sediaan emulgel ekstrak mikroalga C.  vulgaris dibuat  dengan  memformulasikan ekstrak  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri berdasarkan data uji antibakteri dilihat dari KHM, KBM  dan  uji  Bioautografi. Gelling  agent yang digunakan yaitu HPMC.
Emulgel  dibuat  dengan  cara  mencampurkan emulsi yang telah dibuat ke dalam basis gel sedikit demi  sedikit  dengan  menggunakan homogenizer
pengadukan  2000  rpm  selama  30  menit  atau hingga terbentuk massa emulgel yang homogen.

## 3 Hasil dan Diskusi
Kultivasi  dilakukan  untuk  mengumpulkan biomassa  sebanyak-banyaknya.  Komposisi  dari medium  akan  mempengaruhi  biomassa  dan kandungan  senyawa  yang  akan  dihasilkan  oleh mikroalga.  Kultivasi  dilakukan  harus  aseptik untuk  mencegah  timbulnya  kontaminan  baik berupa  virus,  bakteri  atau  organisme  lain  yang dapat  mengganggu  pertumbuhan  mikroalga. Gambar 1 memperlihatkan wujud biomassa kering hasil freeze dry mikroalga C. vulgaris .
Gambar  1.  Biomassa  kering  hasil freeze  dry mikroalga Chlorella vulgaris
Pemanenan dilakukan pada hari ke-8 dengan perhitungan  dimulai  dari  hari  ke-0,  saat pemanenan dilakukan pengukuran volume kultur dan  perhitungan  jumlah  sel  rata-rata.  Hal  ini dilakukan untuk mengetahui kepadatan biomassa yang  diperoleh.  Hasil  kultivasi  dan  permanenan diperlihatkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Kultivasi dan Pemanenan
Jumlah Sel (10 6 ) Volume Kultur (mL) Biomassa Basah (gram) Biomassa Kering (gram) 21,175 5500 13,49 2,49 13,225 9500 20,13 4,28 14,7 13000 12,1 3,85 21,550 7000 18,7 3,78 20,175 8270 19,2 4,95 10,125 15300 18,9 3,39 20,138 18900 43,5 7,75 21,896 19360 48,3 9,68
Ekstrak pekat yang dihasilkan berwarna hijau kehitaman  (hijau  pekat).  Hal  ini  diduga  karena adanya kandungan klorofil yang dimiliki oleh C. vulgaris .  Klorofil  merupakan  pigmen  berwarna hijau  yang  diperlukan  dalam  proses  fotosintesis.
Hasil  rendemen  ekstrak (Gambar  2  dan  Tabel  2) menunjukkan  bahwa  ekstrak C.  vulgaris lebih banyak  mengandung  senyawa  polar.  Hal  ini karena  dari  hasil  pemekatan  ekstrak  yang diperoleh  lebih  banyak  senyawa  yang  terlarut
dalam  ekstrak  etanol  yang  merupakan  pelarut polar.  Tetapi  selain  mengandung  senyawa  polar terdapat  pula  senyawa  semi  polar  dan  non  polar
yang  terlarut  dalam  ekstrak  kloroform  dan  n- heksana.
Gambar 2. i) Hasil pemantauan ekstrak secara visual (a) Pengembang non polar; (b) Pengembang semi polar;  (c)  Pengembang  Polar;  (1)  ekstrak  n-heksana;  (2)  ekstrak  kloroform;  (3)  ekstrak etanol;  ii)  Hasil  pemantauan  ekstrak  pada  (A)  UV  365  nm;  (B)  UV  254  nm;  (a) Pengembang non polar; (b) Pengembang semi polar; (c) Pengembang polar; (1) ekstrak n- heksana; (2) ekstrak kloroform; (3) ekstrak etanol
(a)                              (b)                             (c) 1 1 1 2 2 2 3 3 3 ) ( A ( B ) a b c a b c 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 3 3
(i) (ii)
Tabel 2. Hasil Rendemen Ekstrak Pelarut Bobot (g) Randemen (%) n-heksana 0,886 4,43 Kloroform 1,8799 9,39 Etanol 4,4742 22,37
Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan dengan  melihat  hasil  KHM  dan  KBM  ekstrak mikroalga C. vulgaris terhadap bakteri P. acnes. Hasil  (Tabel  3)  menunjukkan  bahwa pengujian  menggunakan  antibakteri  pembanding (klindamisin)  menghasilkan  nilai  KHM  128 µg/mL dengan nilai KBM 256 µg/mL. Pengujian selanjutnya dilakukan penentuan nilai KBM yang dilakukan  pada  semua  sampel  yang  memiliki kejernihan (berdasarkan data absorbansi), kemudian  ditanam  pada  media  agar  steril.  Hasil yang diperoleh yaitu ekstrak n-heksana memiliki aktivitas  paling  baik  dalam  menghambat  bakteri P. acnes pada konsentrasi 8.192 µg/mL dan dapat membunuh  bakteri P.  acnes pada  konsentrasi 16.384 µg/mL. Sedangkan untuk ekstrak kloroform dan etanol nilai KBM >32.768 µg/mL.
Tabel 3. Hasil Pengujian KHM dan KBM Sampel KHM (µg/mL) KBM (µg/mL) Ekstrak n-heksana 8.192 16.384 Ekstrak kloroform 16.384 >32.768 Ekstrak etanol 32.768 >32.768 Klindamisin 128 256
Lipid  adalah  senyawa  organik  yang  larut pada  lemak  atau  pelarut  organik  non  polar  yang umum ditemukan di jaringan tumbuhan. Berdasarkan  hasil  uji  bioautografi  (Gambar  3) asam  lemak  yang  terkandung  dalam  fase  n- heksana  dari  mikroalga C.  vulgaris berperan sebagai  antibakteri.  Di  habitat  alami  mikroalga, asam lemak dilepaskan untuk melindungi diri atau sebagai mekanisme pertahanan C. vulgaris.
Mekanisme  asam  lemak  dari  mikroalga C. vulgaris belum  sepenuhnya  diketahui,  tetapi  ada beberapa bukti efek asam lemak adalah kerusakan pada  membran  sel  bakteri.  Aktivitas  antibakteri dari  asam  lemak  berdasarkan  penghambatan sintesis asam lemak bakteri.
Gambar 3. Hasil uji bioautografi; (a) Sebelum dideteksi; (b) Penampak bercak 0,5% Rhodamin B dalam etanol; (c) Penampak bercak antron 0,2% dalam H2SO4 pekat diikuti pemanasan pelat; (1) ekstrak n-heksana; (2) ekstrak kloroform; (3) ekstrak etanol
4 Kesimpulan
Dari hasil penelitian yang dilakukan, ekstrak mikroalga C. vulgaris memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri P. acnes . Berdasarkan pengujian yang dilakukan diperoleh :
1. Nilai  KHM  dan  KBM  terbaik  dari  aktivitas antibakteri mikroalga C. vulgaris adalah pada ekstrak  n-heksana  terhadap  bakteri P.  acnes yaitu  pada  konsentrasi  8.192  µg/mL  (KHM) dan 16.384 µg/mL (KBM).
2. Senyawa  yang  bertanggung  jawab  sebagai antibakteri  diduga  adalah  asam  lemak  yang merupakan galaktolipid berdasarkan hasil uji bioautografi.
3. Ekstrak terbaik sebagai antibakteri diformulasikan dalam bentuk sediaan emulgel pada  konsentrasi  8%  dengan  diameter  zona hambat 12,63 mm.
1 1 1 2 2 2
3 3 3

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  saya  ucapkan  kepada teman sejawat dosen ibu Dewi Kurnia, M.Si yang telah  memberikan  arahan  dan  masukan  untuk peneliti  dan  juga  Sinta  Purnamasari  salah  satu mahasiswa  yang  telah  banyak  membantu  dalam penelitian ini.

## Daftar Pustaka
[1]   Daud  NS,  Suryanti  E.  Formulasi  Emulgel Antijerawat  Minyak  Nilam  (Patchouli  oil) Menggunakan Tween 80 dan Span 80 sebagai Pengemulsi dan HPMC sebagai Basis Gel. J
Mandala Pharmacon Indones . 2017.
3(02):90–5. http://dx.doi.org/10.35311/jmpi.v3i02.3
[2]   Hafsari AR, Cahyanto T, Sujarwo T, Lestari RI.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun Beluntas (Pluchea indica (L.)Less.) Terhadap Propionibacterium  acnes  Penyebab  Jerawat. In:  ISTEK.  9  ed.  Fakultas  Sains  dan Teknologi  UIN  Sunan  Gunung  Djati Bandung; 2015. hal. 141–61.
[3]   Utami  KS.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Fraksi Etil Asetat, Kloroform, Petroleum Eter, Dan Nheksana  Hasil  Hidrolisis  Ekstrak  Metanol Mikroalga  Chlorella  sp.  Universitas  Islam Negeri Malang; 2014.
[4]   Syed S, Arasu A, Ponnuswamy I. The Uses of Chlorella Vulgaris as Antimicrobial Agent and  as  a  Diet:  the  Presence  of  Bio-active Compounds  which  Caters  the  Vitamins,
Minerals  in  General. Int  J  Bio-Science  Bio- Technology . 2015. 7(1):185–90. http://dx.doi.org/10.14257/ijbsbt.2015.7.1.19
[5]   Ahmed  EA.  Antimicrobial  Activity  of Microalgal  Extracts  Isolated  from  Baharia oasis. Glob  Adv  Res  J  Microbiol .  2016. 5(3):33–41.
[6]   Fasya AG, Khamidah U, Amaliyah S, B. SK, Romaidi R. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol  Mikroalga Chlorella  sp. Hasil Kultivasi  Dalam  Medium  Ekstrak  Tauge (Met)  Pada  Tiap  Fase  Pertumbuhan. Alchemy . 2013. . http://dx.doi.org/10.18860/al.v0i0.2889