IDENTIFIKASI PEWARNA SINTESIS PADA PRODUK OLAHAN BUNGA ROSELLA
( Hibiscus sabdariffa ) DENGAN METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
Identification of Synthetic Dyes on Rosella Flower Products ( Hibiscus sabdariffa ) by Thin Layer Chromatography
*Rezqi Handayani & Henilisa Yuliyana Larasati
Pharmacy Study Program, Universitas Muhammadiyah Palangkaraya, RTA Milono St. Km.1,5 Palangka Raya, Indonesia
*e-mail : rezqi.handayani@gmail.com

## ABSTRAK
Bahan tambahan  pangan sering  digunakan  atau ditambahkan  secara sengaja  ke  dalam produk  olahan makanan  atau minuman adalah pewarna. Pewarna terbagi atas dua jenis yaitu pewarna alami dan pewarna sintetis. Sirup yang beredar di masyarakat umumnya banyak mengandung pewarna sintetis, hal ini dilakukan produsen untuk menekan biaya produksi dan membuat tampilan bahan menjadi menarik. Pemakaian pewarna sintetis selain memiliki dampak positif bagi produsen serta  konsumen,  dapat  pula  menimbulkan  dampak  negatif  terutama  bagi  konsumen.  Apabila  dibandingkan  dengan pewarna alami, pewarna sintetis lebih memiliki dampak negatif bagi kesehatan. Saat ini kelompok tani asal Kelurahan Kalampangan mengolah bunga Rosella sebagai sirup. Terbukti dari hasil observasi di lapangan sirup Rosella produksi kelompok  tani  tersebut  cukup  dimiminati  oleh  masyarakat  setempat.  Oleh  karena  itu  penelitian  ini  bertujuan  untuk menganalisa  pewarna  sintetik  pada  produk  olahan  bunga  Rosella  yang  diproduksi  oleh  kelompok  tani  asal  Kelurahan Kalampangan, Palangka Raya. Sampel sirup bunga Rosella dianalisa secara kualitatif dengan metode Kromatografi Lapis Tipis  (KLT).  Pada  metode  Kromatografi  Lapis  Tipis  perlakuan  sampel  dilakukan  dengan  penarikan  zat  pewarna menggunakan benang wol bebas lemak. Ada 4 (empat) pewarna sintetis yang dialkukan identifikasi pada sampel yaitu Ponceau, Carmoisin, Briliant Blue dan Rhodamin B. Hasil yang di dapatkan adalah  pada Eluen I (Etil Metil Keton : Aseton : Air) Rf baku Ponceau 4R 0,7667, Rf baku Carmoisin 0,8266, baku Rf Brilliant Blue 0,7466, dan Rf baku Rhodamin B 0,8667 sedangkan pada sampel tidak terdapat noda. Eluen II (2 g NaCl dalam Etanol 50%) didapatkan Rf baku Ponceau 4R 0,9400, Rf baku Carmoisin 0,9400, baku Rf Brilliant Blue 0,6467, dan Rf baku Rhodamin B 0,8867 sedangkan pada sampel tidak terdapat noda. Dari hasi tersebut dapat diketahui bahwa sirup Rosella produksi kelompok tani asal Kelurahan Kalampangan, Palangka Raya tidak mengandung pewarna sintetis.
Kata kunci: Pewarna sintesis, Sirup Bunga Rosella, Kromatografi Lapis Tipis

## ABSTRACT
Food additives are often used or added intentionally into processed food or beverage products are dyes. Dyes are divided into two types: natural dyes and synthetic dyes. Syrup circulating in the community generally contains a lot of synthetic dyes, this is done by manufacturers to reduce production costs and make the appearance of materials to be attractive. The use of synthetic dyes in addition to having a positive impact for producers and consumers, can also cause negative impact, especially for consumers. When compared with natural dyes, synthetic dyes have more negative impact on health. Currently  farmer  groups  from  Kalampangan  Village  treat  Rosella  as  syrup.  Evident  from  the  observations  in  the  field Rosella syrup production of farmers groups are quite dimiminati by community setelmpat. Therefore this study aims to analyze  synthetic  dyes  on  Rosella  processed  products  produced  by  farmer  groups  from  Kalampangan  Urban  Village, Palangka Raya. Rosella flower syrup samples were analyzed qualitatively by Thin Layer Chromatography (TLC) method. In the Thin Layer Chromatography method the sampling treatment was carried out by the withdrawal of the dye using a fat  free  wool  yarn.  There are 4  (four) synthetic  dyes identified  by  the  identification  in  the sample  Ponceau,  Carmoisin, Briliant Blue and Rhodamin B. The result obtained is on Eluen I (Ethyl Methyl Keton: Acetone: Water) Rf raw Ponceau 4R 0.7667, Rf raw Carmoisin 0.8266, Rf Brilliant Blue 0.7466 raw, and Rf raw Rhodamin B 0.8667 while in the sample there is no stain. Eluen II (2 g NaCl in 50% Ethanol) obtained Rf Ponceau 4R standard 0.9400, Rf raw Carmoisin 0,9400, Rf Brilliant Blue 0.6467 standard, and Rf standard Rhodamin B 0.8867 while in the sample there were no stains. From the results can be seen that Rosella syrup production from Kalampangan, Palangkaraya does not contain synthetic dyes.
Keywords: Synthetic dyes, Rosella flower syrup, Thin Layer Chromatography

## PENDAHULUAN
Makanan  serta  minuman  merupakan  salah  satu kebutuhan  dasar  manusia  yang  terpenting  dan juga merupakan faktor  yang sangat esensial bagi pertumbuhan dan perkembangan manusia.
Penambahan  bahan  tambahan  pangan  ke  dalam produk  makanan  atau  minuman  bertujuan  agar menarik  perhatian  konsumen.  Makanan  dan minuman yang tersedia di pasar maupun swalayan tanpa  adanya  bahan  tambahan  pangan  menjadi kurang  menarik,  tidak  dapat  dinikmati  dan  tidak awet. Salah satu masalah pangan yang memerlukan pemecahan yaitu penggunaan bahan tambahan  pangan  untuk  keperluan  pada  industri pengolahan    pangan,  maupun  dalam  pembuatan makanan dan minuman, yang umumnya dihasilkan oleh industri kecil atau rumah tangga (Winarno dan Rahayu, 1994).
Menurut Purba (2009), Bahan Tambahan Pangan adalah  senyawa  (atau  campuran  berbagai senyawa)  yang  sengaja  ditambahkan  ke  dalam makanan dan minuman dalam proses pengolahan, pengemasan  dan  penyimpanan  dan  bukan merupakan  bahan  ( Ingredient )  utama.  Bahan Tambahan Pangan tersebut dapat berupa pengawet, pewarna, pemanis, penyedap, antioksidan, antikempal, dan pengemulsi. Menurut Peraturan  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia No.  033  Tahun  2012  menyebutkan  pewarna sebagai salah satu bahan tambahan pangan dapat berupa  pewarna  alami  ( Natural  Colour) dan pewarna  sintetis  ( Syntetic  Colour ),  yang  ketika ditambahkan  atau  diaplikasikan  pada  pangan mampu memberi atau memperbaiki warna. Salah  satu  jenis  bahan  tambahan  pangan  yaitu pewarna  secara  umum  sering  digunakan  dalam makanan  ataupun  minuman  olahan  terbagi  atas
pewarna  sintetis  (buatan)  dan  pewarna  natural (alami).  Pewarna  sintetis  pada  umumnya  terbuat dari  bahan-bahan  kimia.  Misalnya Ponceau  4R , Carmoisin , Briliant Blue , Tartrazin , atau Allura Red merupakan pewarna sintetis yang masih diperbolehkan  penggunaannya.  Kadang-kadang pengusaha  nakal  juga  menggunakan  pewarna bukan makanan ( non-food grade ) untuk memberikan  warna  pada  makanan.  Salah  satu contoh pewarna bukan makanan adalah Rhodamin B yang sebenarnya diperuntukan untuk pewarnaan tekstil (Nugraheni, 2013).
Pemakaian  pewarna  sintetis  selain  memiliki dampak  positif  bagi  produsen  serta  konsumen, dapat pula menimbulkan dampak negatif terutama bagi  konsumen.  Apabila  dibandingkan  dengan pewarna  alami,  pewarna  sintetis  lebih  memiliki dampak negatif bagi kesehatan. Hal ini dikarenakan  zat-zat  sintetis  jika  pemakaian  yang terus menerus dan dalam jangka waktu yang lama, akan  mempengaruhi  organ  di  dalam  tubuh. Penggunaan bahan pewarna buatan yang dilarang dapat menyebabkan gangguan kesehatan. Pewarna yang dilarang dapat meracuni ginjal dan mengakibatkan  gangguan  fungsi  hati  maupun kanker  karena  umumnya  pewarna  yang  dipakai merupakan  pewarna  tekstil  (Irianto  &  Waluyo, 2007).
Salah  satu  produk  minuman  yang  sering ditambahkan  dengan  zat  warna  adalah  sirup. Minuman  ini  sangat  digemari  karena  warna  yang menarik serta cara penyajiannya yang mudah dan sederhana.  Sirup  yang  beredar  dimasyarakat umumnya  tidak  berasal  dari  pewarna  alami  yang didapatkan  dari  tumbuhan,  hewan  atau  mineral, kebanyakan warna yang terkandung didalam sirup merupakan  pewarna  sintetis  untuk  makanan.
Sehingga  dalam  sirup  Rosella  diduga  juga mengandung pewarna sintetis.
Rosella  sendiri  sudah  banyak  dikembangkan  di pulau  Jawa  dan  banyak  penelitian  mengenai tanaman  ini.  Di  Kalimantan  sendiri  khususnya  di kota  Palangka  Raya,  Kalimantan  Tengah  sudah ada  produsen  yang  memproduksinya,  salah satunya di Kelurahan Kalampangan yang mengolahnya  dalam  bentuk  kemasan  seperti  teh dan  sirup  dari  bunga  Rosella.  Rosella  sangat potensial  untuk  dikembangkan  sebagai  bahan baku  makanan  dan  minuman  karena  nilai  nutrisi yang  terkandung  dalamnya,  seperti  vitamin  A,  C, D, B 1 dan B 2 . Pada umumnya setelah pemanenan Rosella diproses menjadi beberapa olahan seperti sirup. Proses pembuatan yang panjang serta suhu yang  ekstrim  dapat  membuat  warna  alami  dari Rosella  akan  rusak  sehingga  produk  olahan tersebut  perlu  ditambahkan  pewarna  sintetis.  Zat pewarna  sintetis  juga  lebih  murah  dan  dapat mengefisiensikan  pengolahan  produk,  sehingga dapat menekan biaya produksi.
Metode  kromatografi  yang  dilakukan  adalah pemeriksaan  larutan  uji  dan  larutan  pembanding yang ditotolkan pada lempeng dengan menggunakan  teknik  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT).  Menurut  Farmakope  Indonesia  Edisi  III (1979)  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  umumnya lebih berguna untuk uji identifikasi karena cara ini khas  dan  mudah  dilakukan  untuk  zat  dengan jumlah  sedikit.  Kromatografi  merupakan  metode yang  umum dilakukan sebagai  pemeriksaan awal suatu senyawa atau zat serta memberikan resolusi yang kurang baik dan kadang-kadang bercak atau noda  tidak  terbentuk  dengan  baik.  Metode kromatografi tidak sebaik metode spektrofotometri yang  memiliki  tingkat  keakuratan  yang  tinggi.
Berdasarkan permasalahan di atas peneliti tertarik untuk  melakukan  analisa  pewarna  sintetis  pada produk olahan bunga Rosella yang beredar di kota Palangka  Raya  dengan  menggunakan  metode kromatografi.

## METODOLOGI

## Tempat Penelitian
Penelitian
dilaksanakan dilaksanakan di Laboratorium  Kimia  dan  Laboratorium  Instrumen Fakultas Ilmu Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Palangkaraya.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  selama  penelitian  ini diantaranya  adalah  Spektrofotometer  UV-Vis Shidmazu  type  UV-1700,  Kuvet,  Neraca  analitik, Gelas Ukur 100 mL, Beaker Glass 250 mL;, Pipet Kapiler,  Kertas  Saring,  Batang  Pengaduk, Hot Plate ,  Oven,  Plat  Kromatografi  Lapis  Tipis, Chamber atau  Bejana,  dan  Benang  wol  bebas lemak.
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Sirup Bunga Rosella, Amoniak 10%, Asam Asetat 10%, Aqua destilata, Aseton pekat, Etil Metil Keton pekat,  NaCl  2  gram, Brilliant  Blue  FCF (CI  No.
42090) 20 ppm, Carmoisin (CI No. 14720) 20 ppm, Dietil  Eter  pekat,  HCl  0,1  N,  NaOH  10%,  NaOH 0,5%, Etanol 50%, Ponceau 4R (CI No. 16255) 20 ppm, dan Rhodamin B 0,01 g dalam 50 mL air.

## Prosedur
Sampel  dimasukkan  ke  dalam beaker  glass 100 mL  sebanyak  50  mL.  Asam  asetat  10% ditambahkan  ke  dalam  beaker  glass  sebanyak  5 mL.  Benang  wol  dimasukkan  dan  direndam  ke dalam sampel tersebut kemudian dipanaskan dan didiamkan  sampai  mendidih  (10  menit).  Benang wol diambil dan dicuci dengan aquades. Amoniak
10%  ditambahkan  ke  dalam  benang  wol  yang sudah  dibilas  tersebut  sebanyak  25  mL.  Benang wol  dipanaskan  sampai  warna  tertarik  pada benang  wol (luntur). Benang  wol dibuang, larutan diuapkan sampai kering.  Kemudian residu ditambahkan  beberapa  tetes  metanol,  untuk ditotolkan pada plat kromatografi yang siap pakai. Plat  kromatografi  ditotolkan  sampel  serta  zat warna pembanding yang cocok. Jarak rambat elusi 12  cm  dari  tepi  bawah  plat.  Plat  Kromatografi dielusi dengan  eluen  I (Etil Metil Keton :  Aseton  : Air = 70 : 30 : 30) dan eluen II (2 g NaCl dalam 100 ml  etanol  50%)  kemudian  plat  kromatografi dikeringkan  pada  udara  dan  suhu  kamar.  Bercak yang  timbul  diamati  secara  visual  dan  dibawah cahaya lampu Ultraviolet (UV). Bercak mula-mula diamati  dengan  cahaya  Ultraviolet  gelombang pendek  (254  nm)  dan  kemudian  gelombang panjang  (366  nm)  jarak  tiap  bercak  diukur  dan dicatat (SNI, 1992).

## Analisis Data
Analisis data dilakukan dengan menghitung nilai Rf sampel yang kemudian akan dibandingkan dengan nilai Rf baku pewarna sintetis yang digunakan yaitu Ponceau, Carmoisin, Briliant Blue dan Rhodamin B

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  zat  pewarna  sintetis secara
kualitatif
menggunakan
metode
Kromatografi  Lapis  Tipis  pada  sampel  dan  baku pembanding diperoleh hasil pada tabel berikut:
Tabel 1. Hasil Pengujian Menggunakan Metode Kromatografi Sampel Pewarna Nilai Rf pada Eluen I (Etil Metil Keton : Aseton : Air) Nilai Rf pada Eluen II (2 g NaCl dalam 100 ml Etanol 50%) Ponceau 4R 0,7667 0,9400 Carmoisin 0,8266 0,9400 Rhodamin B 0,8667 0,6467 Brilliant Blue 0,7466 0,8867 Sampel - - Eluen I (Etil Metil Keton : Aseton : Air)

## Eluen II (2 g NaCl dalam Etanol 50 %)

## Gambar 1. Hasil Kromatogram
Sirup  bunga  Rosella  dilakukan  preparasi  dan ekstraksi menggunakan benang  wol bebas lemak yaitu dengan memasukan sebanyak 50 mL sampel sirup serta baku pembanding berupa zat pewarna sintetis  yang  diizinkan  dan  yang  dilarang  yaitu Ponceau  4R , Carmoisin , Brilliant  Blue dan Rhodamin  B ke  dalam  masing-masing beaker
glass 100  mL  yang  kemudian  diasamkan  dengan menambahkan 5  mL Asam Asetat 10%.
Memasukan  dan  merendam  benang  wol  bebas lemak ke dalam masing-masing beaker glass tadi, kemudian  dipanaskan  dan  didiamkan  sampai mendidih.  Dalam  suasana  asam  dan  pemanasan yang dilakukan, pewarna sintetis akan tertarik atau menempel  pada  benang  wol  bebas  lemak. Pemanasan akan membantu mempercepat reaksi penarikan warna dengan benang wol bebas lemak, kemudian dicuci dengan aquades.
Masing-masing  benang  wol  yang  mengikat pewarna sintetis Ponceau 4R , Carmoisin , Brilliant Blue , dan Rhodamin B ditambahkan amoniak 10% sebanyak  25  mL  dan  memanaskannya  hingga warna  pada  benang  menjadi  luntur.  Zat  pewarna sintetis  yang  diizinkan  pada  makanan  yaitu Ponceau 4R , Carmoisin dan Brilliant Blue setelah penambahan  suatu  basa  lemah  (Amoniak  10%) dan pemanasan, warna pada benang wol menjadi luntur.  Sedangkan  zat  pewarna  sintetis  untuk bahan tekstil yaitu Rhodamin B setelah penambahan  Amoniak  10%  dan  dilakukan pemanasan,  warna  pada  benang  wol  tidak seluruhnya  luntur.  Penambahan  25  mL  Amoniak 10%  ke  dalam  benang  wol  bebas  lemak dimaksudkan untuk melepaskan atau melunturkan pewarna  yang  ada  pada  benang  wol  tersebut sehingga  larut  dalam  pelarut  Amoniak.  Dalam suasana  basa  lemah  pewarna  akan  terlepas  dari benang wol bebas lemak. Pelepasan warna pada benang  wol  bebas  lemak  dibantu  dengan  proses pemanasan yang menyebabkan warna akan lebih mudah  terlepas  dari  benang  wol,  hal  ini  ditandai dengan  jenuhnya  pelarut  Amoniak  dari  tidak berwarna menjadi berwarna.
Pada Eluen I berupa Etil Metil Keton : Aseton : Air didapatkan  nilai  Rf  masing-masing  pewarna  yaitu nilai  Rf  pada  baku Ponceau  4R sebesar  0,7667, nilai  Rf  baku Carmoisin sebesar  0,8266,  nilai  Rf baku Rhodamin  B sebesar  0,8667,  dan  nilai  Rf baku Brilliant  Blue sebesar  0,7466.  Sedangkan pada  sampel  sirup  bunga  Rosella  tidak  terdapat noda. Pada Eluen II berupa 2g NaCl dalam 100 mL Etanol  50%  didapatkan  nilai  Rf  masing-masing pewarna  yaitu  nilai  Rf  pada  baku Ponceau  4R sebesar  0,9400,  nilai  Rf  baku Carmoisin sebesar
0,9400, nilai Rf baku Rhodamin B sebesar 0,6467,
dan  nilai  Rf  baku Brilliant  Blue sebesar  0,8867, sedangkan pada sampel sirup bunga Rosella tidak terdapat  noda.  Berdasarkan  tabel  diatas,  sampel tidak  mengandung  pewarna  sintetis Ponceau  4R , Carmoisin , Rhodamin  B ,  dan Brilliant  Blue , sedangkan pada sampel sirup bunga Rosella tidak terdapat  noda  sehingga  Rf  tidak  ada.  Hal  ini dikarenakan  pada  proses  preparasi  warna  pada sampel tidak tertarik oleh benang wol bebas lemak.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  identifikasi  pewarna  sintetis pada  sirup  produk  olahan  bunga  Rosella  dengan metode Kromatografi Lapis Tipis dapat disimpulkan  bahwa  sirup  bunga  Rosella  asal Kelurahan  Kalampangan,  kota  Palangka  Raya tidak  menggunakan  pewarna  sintetis  baik  yang diizinkan maupun yang dilarang.

## DAFTAR PUSTAKA
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1979. Farmakope Indonesia edisi III . Jakarta.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2012. Peraturan  Menteri  Kesehatan  RI  No.  033
Tahun  2012  tentang  Bahan  Tambahan Pangan . Jakarta
Departemen  Perindustrian  Republik  Indonesia. 1992. SNI 01-2895-1992 Cara Uji  Pewarna Tambahan Makanan . Jakarta
Irianto,  Kus  dan    Kusno  Waluyo.  2007. Gizi  dan Pola  Hidup  Sehat .  Bandung  :  CV.  Yrama Widya.  Dalam  Purba,  Elisabet  R.  2009. “ Analisis Zat Pewarna Pada Minuman Sirup Yang  Dijual  Di  Sekolah  Dasar  Kelurahan Lubuk Pakam III Kecamatan Lubuk Pakam ”. Skripsi  Fakultas  Kesehatan  Masyarakat Universitas Sumatera Utara.
Nugraheni, Mutiara. 2013. Pewarna Alami Sumber dan Aplikasinya pada Makanan &
Kesehatan . Yogyakarta, Graha Ilmu.
Purba,  Elisabet  R.  2009.  “ Analisis  Zat  Pewarna Pada Minuman Sirup Yang Dijual Di Sekolah Dasar Kelurahan Lubuk Pakam III Kecamatan  Lubuk  Pakam ”.  Medan:  Skripsi Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Sumatera Utara.
Winarno,  F.G.  dan  S.F.  Rahayu.  1994. Bahan Tambahan untuk Makanan dan Kontaminan .
Jakarta, Pustaka  Sinar  Harapan.