Vol. 07 No. 3, Desember 2016, Hal 217-222 ISSN: 2086-8227
PENGARUH KOMBINASI PEMANGKASAN AKAR DAN WAKTU INOKULASI FUNGI EKTOMIKORIZA TERHADAP PERTUMBUHAN BIBIT MELINJO (Gnetum gnemon L)
Combination Between Root Pruning and Inoculation Time of Ectomycorrhizal Fungi on Improving Growth of Melinjo (Gnetum gnemon L ) Seedling

## Arum Sekar Wulandari dan Siti Jaenab
Departemen Silvikultur, Fakultas Kehutanan IPB rr_arum@yahoo.com

## ABSTRACT
The  inoculation  of  ectomycorrhizal  fungi  that  conducted  after  root  pruning  could  increase  the  colonization  of ectomycorrhizal  fungi  and  growth  of  melinjo  seedling.  This  research  aimed  to  study  the  effect  of  root  pruning  and inoculation  time  of  ectomycorrhizal  fungi  on  the  growth  of  melinjo  seedlings  ( Gnetum  gnemon L).  The  research were tested in a greenhouse in a completely randomized design with 2 factors for 33 weeks.  The first factor is the root pruning (no root pruning as a control, and root pruning 30%). The second factor is the time fungi inoculation (inoculation in the 1 st ,  2 nd ,  3 rd ,  4 th and  5 th week  after  root  pruning).    The  combination  of  root  pruning  and  inoculation  time  of ectomycorrhizal fungi effected to the growth of melinjo seedlings. The best growth obtained from combination (1) no root pruning  and  inoculated  by  ectomycorrhizal  fungi  in  the  1 st week,  and  (2)  root  pruning  30%  and  inoculated  by ectomycorrhizal fungi in the 3 rd week.
Key words: ectomycorrhiza, Gnetum gnemon , inoculation time, root pruning, Scleroderma

## PENDAHULUAN
Melinjo  ( Gnetum  gnemon L)  termasuk  famili Gnetaceae dan  tergolong  tumbuhan  berbiji  terbuka ( Gymnospermae ).  Melinjo  termasuk  tanaman  yang memiliki  banyak  kegunaan  karena  bagian  daun,  buah, batang,  dan  kulit  batangnya  dapat  dimanfaatkan. Melinjo  dapat  tumbuh  pada  jenis  tanah  yang  beragam seperti pasir, tanah liat, tanah liat berlempung, dan tanah berkapur;  namun  dapat  tumbuh  lebih  baik  pada  tanah yang memiliki pH netral dan drainase yang baik (Cadiz dan  Florido  2001).  Tanaman  melinjo  juga  mampu berasosiasi dengan fungi ektomikoriza yaitu Scleroderma spp. (Bechem dan Alexander 2012).
Ektomikoriza  merupakan  bentuk  hubungan  asosiasi simbiotik  mutualistik  antara  fungi  dan  akar,  umumnya akar  dari  tumbuhan  berkayu.  Akar  bibit  yang berektomikoriza  ditandai  dengan:  (1)  terbentuknya mantel  atau  lapisan  hifa  fungi  yang  menutupi  sebagian dari  ujung  akar,  (2)  berkembangnya  hifa  di  antara  sel- sel akar yang membentuk sel-sel kompleks yang disebut Hartig-net , dan (3) hifa ekstraradikular yang ke luar dari mantel  dan  berkembang  dalam  tanah  (Petterson et  al . 2004).  Adanya  asosiasi  mikoriza  pada  akar  tanaman dapat:  (1)  meningkatkan luas  permukaan  akar  sehingga penyerapan  air  dan  unsur  hara  dari  dalam  tanah meningkat  (Lunt  dan  Hedger  2003),  (2)  mensekresikan faktor  pertumbuhan  yang  merangsang  akar  untuk tumbuh  dan  bercabang  (Tranvan et  al .  2000),  (3) menghasilkan  antibiotik yang  dapat  melindungi
tumbuhan  dari  bakteri  dan  fungi  patogenik  yang  ada dalam tanah (Sen 2001).
Kolonisasi  ektomikoriza  pada  bibit  melinjo  dapat ditingkatkan  dengan  kegiatan  pangkas  akar  yang dikombinasikan  dengan  inokulasi  fungi  ektomikoriza (Wulandari  dan  Supriyanto  2013,  Wulandari  dan Pamujianto 2015, Wulandari et al . 2015). Hal ini karena kegiatan  pangkas  akar  dapat  merangsang  tumbuhnya akar-akar  lateral  baru  (Pourmajidian et  al .  2009), sementara fungi ektomikoriza lebih mudah mengkolonisasi  akar  yang  masih  muda  dibandingkan dengan akar yang sudah berkayu (Wulandari 2002).
Penelitian  Wulandari  dan  Pamujianto  (2015) menunjukkan  bahwa  ektomikoriza  pada  akar  melinjo mulai  terbentuk  3  bulan  setelah  inokulasi.  Beberapa bibit melinjo kontrol (tanpa inokulasi fungi ektomikoriza)  juga  menunjukkan  adanya  kolonisasi fungi ektomikoriza pada bulan ke-5 pengamatan. Hal ini terjadi  karena  adanya  kontaminasi  pada  bibit  melinjo kontrol. Fakta ini menunjukkan bahwa waktu kolonisasi fungi  ektomikoriza  pada  bibit  melinjo  kontrol  terjadi lebih lambat dibandingkan dengan bibit perlakuan (bibit melinjo  yang  diberi  perlakuan  pangkas  akar  dan inokulasi  fungi  ektomikoriza  pada  minggu  ke-1). Dengan  demikian,  kemungkinan  ada  waktu  yang  lebih efektif  untuk  inokulasi  fungi  ektomikoriza  setelah kegiatan  pangkas  akar  yang  dapat  meningkatkan kolonisasi  fungi  ektomikoriza  pada  bibit  melinjo. Penelitian  bertujuan  mengetahui  pengaruh  kombinasi
pemangkasan akar dan waktu inokulasi fungi ektomiko- riza terhadap pertumbuhan bibit melinjo.

## METODE
Persiapan Bahan
Bahan  tanaman .  Bibit  melinjo  yang  digunakan memiliki  tinggi  30–40  cm.  Perakaran  bibit  dipisahkan dari  media  tanamnya,  kemudian  dicuci  dengan  air mengalir.    Setelah  bersih,    akar  melinjo  diperiksa dengan  kaca  pembesar  untuk  melihat  kolonisasi  fungi ektomikoriza  yang  terbawa  dari  lapangan.    Bibit  yang akarnya  sudah  terkolonisasi  ektomikoriza tidak  diguna- kan dalam penelitian ini.
Akar  bibit  dipangkas  dengan  tingkat  0%  (sebagai kontrol,  akar  tidak  dipangkas)  dan  30%,  kemudian direndam  dalam  larutan  stimulan  akar  organik  dengan konsentrasi  2.5%  selama  24  jam.  Daun  bibit  melinjo dipotong ± 50% untuk mengurangi transpirasi.
Media tanam . Media tanam yang digunakan adalah campuran  tanah,  kompos,  kokopit  dan  arang  sekam. Masing-masing  komponen  media  disterilisasi  terlebih dahulu  dengan  menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121 0 C,  tekanan  1  atm  selama  1  jam  sebelum  dicampur. Tanah,  kokopit,  dan  kompos  dengan  nisbah  4:2:4 (v/v/v)  dicampur  terlebih  dahulu.  Media  yang  telah tercampur  kemudian  ditambahkan  arang  sekam  dengan nisbah  media  :  arang  sekam  =  9:1  (v/v).  Media  tanam yang sudah tercampur dimasukkan ke dalam polibag.
Inokulum  Fungi  Ektomikoriza. Inokulum  yang digunakan  berasal  dari  media  tanam  bibit  melinjo bermikoriza.  Jenis  ektomikoriza  yang  berasosiasi dengan  bibit  melinjo  ialah Scleroderma spp. Inokulum fungi ektomikoriza didapatkan dengan cara melepaskan bibit  melinjo  indukan  dari  media  tanamnya.  Media tanam yang sudah tercampur miselium fungi ektomikoriza diambil untuk dijadikan sebagai inokulum, banyaknya inokulum yang digunakan ialah 5 gram/bibit.

## Rancangan Percobaan
Percobaan dilakukan dengan menggunakan rancang- an acak lengkap (RAL) faktorial, dengan 2 faktor yaitu pemangkasan  akar  melinjo  dan  waktu  inokulasi  fungi ektomikoriza.  Pemangkasan  akar  terdiri  atas  2  taraf yaitu 0% dan 30%. Waktu inokulasi fungi ektomikoriza terdiri atas 5 taraf yaitu  minggu ke-1, ke-2,  ke-3,  ke-4, dan  ke-5  setelah  kegiatan  pangkas  akar.  Setiap perlakuan terdiri atas 4 ulangan, 1 ulangan terdiri atas 4 bibit melinjo.

## Pelaksanaan
Media  tanam  yang  sudah  dimasukkan  ke  dalam polibag  disiram  dengan  air  hingga  jenuh.  Permukaan media  tanam  ditugal  sehingga  terbentuk  lubang  untuk memasukkan  akar  bibit  melinjo  dan  inokulum  fungi ektomikoriza.  Bibit  melinjo  yang  sudah  disiapkan dimasukkan ke dalam media tanam. Inokulasi dilakukan dengan  cara  meletakkan  inokulum  di  dekat  perakaran bibit  melinjo.  Inokulasi  dilakukan  sesuai  perlakuan waktu inokulasi, yaitu minggu ke-1 sampai minggu ke-
5.  Bibit  diletakkan  di  bawah  naungan  terlebih  dahulu selama  3  minggu  untuk  beradaptasi,  setelah  itu  bibit dipindahkan ke dalam rumah kaca.

## Pemeliharaan
Pemeliharaan  bibit  melinjo  dilakukan  dengan  cara menyiram  media  tanam  bibit  2  hari  sekali.  Penyiangan gulma  dan  pengendalian  organisme  pengganggu tanaman  dilakukan  jika  diperlukan.  Pemeliharaan  bibit dilakukan selama 33 minggu (3 minggu bibit diletakkan di  bawah  naungan  dan  30  minggu    di  dalam  rumah kaca).

## Pengamatan dan Pengambilan Data
Pertumbuhan  pucuk  dan  akar  melinjo  yang  diamati meliputi  tinggi,  diameter,  biomassa,  dan  kolonisasi ektomikoriza.    Pengamatan  yang  dilakukan  mengacu pada penelitian Wulandari et al . (2015).
Tinggi  Bibit  (cm). Pengukuran  tinggi  bibit  dilaku- kan dengan menggunakan penggaris. Bibit diukur mulai dari  leher  akar  (batas  antara  batang  dengan  akar  diatas permukaan tanah) hingga pucuk. Pengukuran dilakukan setiap 2 minggu.
Diameter  Batang  (mm). Pengukuran  diameter dilakukan  dengan  menggunakan  kaliper.  Bibit  diukur dengan  jarak  1–2  cm  di  atas  leher  akar  yang  sudah diberi  tanda  lidi  untuk mengurangi  kesalahan  pada  saat pengukuran. Pengukuran dilakukan setiap 6 minggu.
Biomassa  Akar  dan  Pucuk  (g). Perhitungan  bio- massa  dilakukan  dengan  mengukur  berat  basah  (BB) dan  berat  kering  (BK)  akar  dan  pucuk.  Pengambilan data  ini  dilakukan  pada  minggu  ke-33  pengamatan. Pengukuran berat basah dan berat kering pada akar dan pucuk dilakukan dengan cara memisahkan tanaman dari media  tanam  kemudian  akar  dicuci  dari  kotoran  dan tanah  yang  menempel.  Setelah  bersih  bagian  akar  dan pucuk dipisahkan. Pucuk dan akar kemudian ditimbang berat  basahnya,  selanjutnya  dikeringkan  dalam  oven pada  suhu  70 0 C  selama  240  jam.  Berat  kering  total diperoleh  dengan  cara  menjumlahkan  berat  kering pucuk dan akar.
Pengamatan  Akar. Pengamatan  akar  dilakukan pada minggu ke-33 setelah kegiatan pangkas akar. Akar bibit  dipisahkan  dari  media  tanam,  kemudian  dicuci dengan  air  mengalir.  Akar  diamati  dengan  mengguna- kan  kaca  pembesar  untuk  melihat  adanya  mantel  dan hifa eksternal fungi ektomikoriza, dan percabangan akar yang terbentuk akibat kegiatan pangkas akar. Persentase  akar  bermikoriza  dan  bibit  bermikoriza dihitung dengan menggunakan rumus:
Persentase akar bermikoriza = Jumlah akar lateral bermikoriza x 100%
Jumlah seluruh akar lateral
Persentase bibit bermikoriza = Jumlah bibit bermikoriza
x 100% Jumlah seluruh bibit yang diamati

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil

## Pertumbuhan bibit melinjo
Bibit  melinjo  mulai  menunjukkan  pertumbuhan tunas  baru  pada  minggu  ke-4  pengamatan.  Pemang- kasan  akar  merangsang  tumbuhnya  tunas  baru  pada bibit  melinjo,  hal  ini  dapat  dilihat  pada  jumlah  bibit melinjo  yang  bertunas  setelah  perlakuan.  Jumlah  bibit yang  bertunas  pada  bibit  melinjo  yang  dipangkas akarnya  (14.38%)  lebih  tinggi  daripada  bibit  melinjo yang tidak dipangkas akarnya (8.13%).
Pangkas  akar  dengan  tingkat  30%  memberikan pengaruh  yang  lebih  baik  terhadap  pertumbuhan  tajuk, akar,  dan  biomasa  bibit  dibandingkan  dengan  kontrol (Tabel  1).  Tinggi  bibit  meningkat  sebanyak  9%, sedangkan  biomasa  bibit  melinjo  meningkat  sebanyak 14%  dibandingkan  dengan  kontrol.    Banyaknya  akar meningkat  sebanyak  240%,  sementara  biomasa  akar meningkat sebanyak 33% dibandingkan dengan kontrol.
Bibit  yang  dipangkas  akarnya  menunjukkan  per- tumbuhan  cabang  akar  baru.  Jumlah  akar  yang terinduksi  untuk  bercabang  pada  satu  bibit  melinjo setelah  kegiatan  pangkas  akar  ialah  1–4  akar.
Banyaknya  cabang  baru  yang  terbentuk  pada  satu  akar melinjo  yang  terinduksi  untuk  bercabang  ialah  2–4 cabang. Pertumbuhan cabang akar baru tidak ditemukan pada bibit melinjo kontrol (Tabel 1).
Waktu inokulasi fungi ektomikoriza hanya berpengaruh  nyata  pada  peubah  diameter  batang  bibit melinjo  (Tabel  2).  Inokulasi  fungi  ektomikoriza  yang dilakukan  pada  minggu  ke-1  dan  minggu  ke-2  setelah kegiatan pangkas akar memberikan pengaruh yang lebih baik  terhadap  pertumbuhan  diameter  batang  bibit melinjo  dibandingkan  dengan  waktu  inokulasi  yang lainnya.
Ada  interaksi  antara  perlakuan  pangkas  akar  dan waktu  inokulasi  fungi  ektomikoriza  terhadap  berat kering  akar,  pucuk,  dan  total  bibit  melinjo  (Tabel  3). Berat  kering  akar  bibit  melinjo  tertinggi  diperoleh  dari kombinasi  perlakuan  pangkas  akar  30%  dan  inokulasi fungi  ektomikoriza  pada  minggu  ke-3,  dan  ke-5.  Berat kering  pucuk  bibit  melinjo  tertinggi  diperoleh  dari kombinasi  perlakuan  pangkas  akar  0%  dan  inokulasi fungi ektomikoriza pada minggu ke-4. Berat kering total tertinggi  diperoleh  dari  kombinasi  perlakuan  pangkas akar  30%  dan  inokulasi  fungi  ektomikoriza  pada minggu ke-3.
Tabel 1  Pengaruh perlakuan pangkas akar terhadap pertumbuhan bibit melinjo selama 33 minggu pengamatan
Peubah Tingkat pangkas akar (%) 0 30 Pertumbuhan tajuk Tinggi (cm) 45.54 b 49.51 a Diameter (mm) 4.52 b 4.80 a Pertumbuhan akar Jumlah akar yang bercabang 0.00 b 2.33 a Banyaknya cabang baru 0.00 b 2.38 a Biomasa Berat kering tajuk (g tanaman -1 ) 3.71 a 3.89 a Berat kering akar (g tanaman -1 ) 1.80 b 2.39 a Berat kering total (g tanaman -1 ) 5.51 a 6.28 a Tingkat kolonisasi fungi ektomikoriza Bibit bermikoriza (%) 100.00 a 100.00 a Akar bermikoriza (%) 41.58 a 35.59 a
Angka-angka dalam baris yang sama yang dikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada taraf uji 5% (uji jarak berganda Duncan).
Tabel 2   Pengaruh perlakuan waktu inokulasi  yang berbeda terhadap pertumbuhan bibit melinjo yang selama 33 minggu pengamatan
Peubah Waktu inokulasi (minggu ke-) 1 2 3 4 5 Perkembangan akar bibit Jumlah akar yang bercabang 1.00 a 1.33 a 1.33 a 1.00 a 1.17 a Banyaknya cabang baru 1.17 a 1.10 a 1.33 a 1.28 a 1.08 a Berat kering akar (g tan -1 ) 2.10 a 2.18 a 2.42 a 1.27 b 2.52 a Pertumbuhan tajuk bibit Tinggi (cm) 51.17 a 44.65 a 48.51 a 45.75 a 47.55 a Diameter (mm) 4.75 a 4.87 a 4.58 b 4.55 b 4.57 b Berat kering pucuk (g tan -1 ) 4.02 a 3.95 a 4.15 a 3.33 a 3.53 a Berat kering total (g tan -1 ) 6.12 a 6.13 a 6.56 a 4.60 a 6.05 a Tingkat kolonisasi ektomikoriza Bibit bermikoriza (%) 100.00 a 100.00 a 100.00 a 100.00 a 100.00 a Akar bermikoriza (%) 29.53 a 40.00 a 33.37 a 40.35 a 49.67 a
Angka-angka dalam baris yang sama yang dikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada taraf uji 5% (uji jarak berganda Duncan), tan = tanaman.
Tabel 3  Pengaruh  kombinasi  perlakuan  pangkas  akar  dan  waktu  inokulasi  fungi  ektomikoriza  terhadap pertumbuhan bibit melinjo selama 33 minggu pengamatan
Tingkat pangkas akar (%) Waktu inokulasi (minggu ke-) 1 2 3 4 5 .........................Jumlah akar yang bercabang...................... 0 0.00 a 0.00 a 0.00 a 0.00 a 0.00 a 30 2.00 a 2.67 a 2.67 a 2.00 a 2.33 a ...........................Banyaknya cabang baru............................ 0 0.00 a 0.00 a 0.00 a 0.00 a 0.00 a 30 2.33 a 2.20 a 2.66 a 2.57 a 2.17 a ......................Berat kering akar (g tanaman -1 )...................... 0 1.90 b 1.77 b 1.57 bc 1.93 b 1.83 b 30 2.30 ab 2.60 ab 3.27 a 0.60 c 3.20 a .......................................Tinggi (cm)................................. 0 51.37 a 43.64 a 44.75 a 44.73 a 43.22 a 30 50.97 a 45.65 a 52.27 a 46.77 a 51.88 a ......................................Diameter (mm)............................. 0 4.68 a 4.83 a 4.39 a 4.42 a 4.28 a 30 4.81 a 4.89 a 4.76 a
4.68 a 4.85 a .....................Berat kering pucuk (g tanaman -1 ).................... 0 3.60 ab 3.67 ab 3.73 ab 4.67 a 2.87 bc 30 4.43 ab 4.23 ab 4.57 ab 2.00 c 4.20 ab ...................Berat kering total (g tanaman -1 )......................... 0 5.50 abc 5.43 abc 5.30 bc 6.60 abc 4.70 cd 30 6.73 abc 6.83 abc 7.83 a 2.60 d 7.40 ab ...............................Bibit bermikoriza (%).............................. 0 100.00 a 100.00 a 100.00 a 100.00 a 100.00 a 30 100.00 a 100.00 a 100.00 a 100.00 a 100.00 a .............................Akar bermikoriza (%).............................. 0 30.82 a 49.79 a 34.25 a 47.15 a 45.87 a 30 28.23 a 30.21 a 32.48 a 33.54 a 53.46 a
Angka-angka dalam baris yang sama yang dikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada taraf uji 5% (uji jarak berganda Duncan).

## Kolonisasi mikoriza pada akar melinjo
Tingkat  kolonisasi  fungi  ektomikoriza  terdiri  atas peubah persentase akar bermikoriza dan persentase bibit bermikoriza.    Tabel  3  menunjukkan  bahwa  perlakuan pangkas  akar  dan  waktu  inokulasi  fungi  ektomikoriza tidak  berpengaruh  terhadap  peubah  persentase  bibit melinjo  bermikoriza  dan  akar  melinjo  bermikoriza. Semua  bibit  melinjo  yang  digunakan  dalam  penelitian terkolonisasi  oleh  fungi  ektomikoriza  dan  tidak  ada perbedaaan  nyata  dalam  persentase  akar  melinjo  yang terkolonisasi.  Hasil  pengamatan  menunjukkan  bahwa akar  bibit  melinjo  yang  tidak  terkolonisasi  fungi ektomikoriza  memiliki  panjang  akar  lateral  sekitar  1–2 cm,  sedangkan  bibit  yang  terkolonisasi  oleh  fungi ektomikoriza  mempunyai  akar  lateral  yang  lebih pendek.    Bibit  melinjo  yang  terkolonisasi  oleh  fungi ektomikoriza Scleroderma  sinannmariense dicirikan dengan  adanya  mantel  berwarna  kuning  dan  memiliki panjang  akar  lateral  sekitar  0.2–0.5  cm.  Bibit  melinjo yang  terkolonisasi  oleh  fungi  ektomikoriza Scelero-
derma sp.  dicirikan  dengan  adanya  mantel  berwarna putih  dan  memiliki  panjang  akar  lateral  sekitar 0.2–0.7 cm.

## Pembahasan
Pemangkasan  akar  dilakukan  untuk  merangsang pertumbuhan  akar  baru  dengan  cara  memotong  bagian akar  lateral  pada  bibit  melinjo.  Bibit  melinjo  yang dipangkas  akar  lateralnya  sebanyak  30%  memberikan pengaruh  yang  lebih  baik  terhadap  pertumbuhan dibandingkan  dengan  bibit  yang  tidak  dipangkas akarnya.  Penambahan  jumlah  akar  melinjo  yang bercabang  dan  banyaknya  cabang  baru  yang  terbentuk, dapat  meningkatkan  volume  akar  dan membantu  dalam penyerapan  unsur  hara  sehingga  dapat  meningkatkan pertumbuhan bibit melinjo. Respon positif dari kegiatan pemangkasan  akar  dan  pucuk  terhadap  pertumbuhan bibit  juga  dihasilkan  oleh  Ariadi  (2004).  Kegiatan pemangkasan  akar  dan  pucuk  yang  diterapkan  pada bibit  mahoni  berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  daun,
berat  kering  akar,  dan  nilai  kekokohan  semai  selama  4 bulan pengamatan.  Hal sebaliknya terjadi pada tanaman pinus  (Burner et  al .  2009),  pemangkasan  akar  meng- akibatkan pertumbuhan diameter batang dan tinggi lebih rendah dibandingkan dengan kontrol.
Pemangkasan  akar  dapat  menurunkan  konsentrasi hormon  sitokinin  yang  menyebabkan  transportasi hormon  auksin  dari  meristem  apikal  menuju  akar berjalan lancar sehingga merangsang pertumbuhan akar lateral  (Campbell et  al. 2003).  Hormon  auksin  dan sitokinin  akan  membantu  tanaman  dalam  proses pemulihan  keseimbangan  antara  tunas  dan  akar  setelah kegiatan  pemangkasan  akar  (Vysotskaya et  al. 2001). Pertumbuhan  tunas  baru  pada  bibit  melinjo  (baik  yang dipangkas  akarnya  maupun  tidak)  mulai  terjadi  pada minggu ke-4 pengamatan.  Hal ini menunjukkan bahwa kegiatan  pangkas  akar  tidak  mempengaruhi  pertum- buhan  bibit melinjo (Wulandari et al . 2013). Ferre et al. (2000) juga menemukan bahwa pemangkasan akar tidak mempengaruhi  pertumbuhan  tanaman  anggur.  Adanya pertumbuhan  tunas  juga  menunjukkan  bahwa  bibit melinjo  sudah  mulai  mengalami  pemulihan  akibat pangkas  akar  sehingga  dapat  bermetabolisme  secara normal  dan  mampu  beradaptasi  dengan  lingkungan baru .
Pada  semua  perlakuan  bibit  melinjo  terkolonisasi oleh fungi ektomikoriza. Hal ini menunjukkan inokulasi fungi ektomikoriza secara buatan dapat dilakukan untuk memperoleh  bibit  melinjo  yang  berasosiasi  dengan Scleroderma spp.  (Wulandari  dan  Supriyanto  2013). Bibit  yang  telah  terkolonisasi  fungi  ektomikoriza  akan membantu  tanaman  dalam  meningkatkan  penyerapan unsur hara.  Peningkatan  penyerapan  unsur hara  dan air oleh  tanaman  akan  diikuti  oleh  penambahan  volume pada batang sehingga dapat meningkatkan pertumbuhan bibit  melinjo.  Inokulasi  fungi  ektomikoriza  pada Pinus radiata dapat  membantu  meningkatkan  penyerapan  air dan meningkatkan  pertumbuhan tanaman  (Ortega et  al. 2004).
Kolonisasi  fungi  ektomikoriza  terbentuk  di  akar lateral.  Akar  lateral  merupakan  akar  yang  muncul  dari perisikel akar yang sudah jadi. Pada akar lateral, rambut akar dapat ditemukan dalam jumlah besar. Rambut akar berfungsi  untuk  meningkatkan  luas  permukaan  akar (Smith  dan  Read  2008).  Pada  akar  yang  terkolonisasi ektomikoriza rambut akar hilang,  karena  fungsi rambut akar akan digantikan oleh hifa ektomikoriza. Akar yang terkolonisasi  fungi  ektomikoriza  lebih  tebal,  lebih pendek  dan  lebih  bercabang-cabang  dibandingkan dengan akar yang tidak terkolonisasi fungi ektomikoriza (Onguene  dan  Kuyper  2001).  Pembentukan  kolonisasi fungi  ektomikoriza  pada  bibit  eucalyptus  dengan menggunakan  teknik cellophane-over-agar ( in  vitro ) terlihat  pada  hari  ke-7  setelah  inokulasi  (Malajczuk et al .  1990)  sedangkan  pembentukan  kolonisasi  fungi ektomikoriza pada bibit melinjo ( in vivo ) di rumah kaca terlihat  pada  3  bulan  setelah  inokulasi  (Wulandari  dan Supriyanto  2013).  Pembentukan  kolonisasi  fungi ektomikoriza in  vitro terlihat  lebih  cepat  dibandingkan dengan in vivo . Hal ini karena kondisi lingkungan yang berbeda,  kondisi  lingkungan in  vitro lebih  aseptik dibandingkan  dengan  kondisi  lingkungan  di  rumah kaca. Selain itu, pengamatan kolonisasi fungi
ektomikoriza in  vitro dilakukan  dengan  bantuan  alat (mikroskop)  sedangkan  pengamatan  kolonisasi  fungi ektomikoriza di rumah kaca diamati tanpa bantuan alat. Pada  penelitian  ini  pengamatan  dilakukan  pada  33 minggu  setelah  pangkas  akar  sehingga  semua  bibit melinjo sudah terkolonisasi oleh fungi ektomikoriza.
Kombinasi  perlakuan  pangkas  akar  dan  inokulasi fungi  ektomikoriza  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan bibit  melinjo.  Bibit  melinjo  yang  dipangkas  akarnya dengan tingkat 30% dan diinokulasi fungi ektomikoriza pada  minggu  ke-3  meningkat  pertumbuhannya  pada peubah berat kering akar, berat kering pucuk, dan berat kering total. Biomassa bibit melinjo  meningkat 42.36% dibandingkan  dengan  kontrol  pada  minggu  ke-33 pengamatan.  Hasil  penelitian  Wulandari et  al .    (2015) juga menunjukkan bahwa kombinasi perlakuan pangkas akar  dan  inokulasi  fungi  ektomikoriza  berpengaruh terhadap  pertumbuhan  bibit  melinjo  pada  peubah panjang  akar  sekunder,  jumlah  akar  yang  bercabang, banyaknya  cabang  baru,  berat  basah  akar,  berat  kering akar,  tinggi,  diameter,  berat  basah  pucuk,  dan  berat kering  pucuk.  Biomassa  bibit  melinjo  meningkat 47.27%  dibandingkan  dengan  kontrol  pada  bulan  ke-6 pengamatan.
Bibit  melinjo  yang  dipangkas  akar  membutuhkan waktu  untuk  pemulihan  akibat  stres  saat  kegiatan pangkas  akar,  sehingga  inokulasi  fungi  ektomikoriza kurang  efektif  jika  dilakukan  secara  bersamaan  dengan kegiatan  pangkas  akar.  Inokulasi  fungi  ektomikoriza pada  bibit  yang  dipangkas  akar  lebih  efektif  dilakukan pada minggu  ke-3  setelah  pangkas  akar.  Hal  ini karena tanaman  sudah  dapat  bermetabolisme  secara  normal sehingga  kolonisasi  fungi  ektomikoriza  dapat  lebih optimal.  Pada Prunus  avium dan Castanea  sativa , pemulihan metabolisme tanaman terjadi 1 bulan setelah kegiatan pangkas, hal  ini dilihat  dari potensial  air daun dan  konduktansi  daun  terhadap  penguapan  air  yang sudah  kembali  berjalan  normal  (Hipps et  al. 1999). Pemangkasan  akar  dengan  tingkat  30%  dan  inokulasi fungi  ektomikoriza  pada  minggu  ke-4  menunjukkan pertumbuhan  bibit  melinjo  yang rendah.  Hal  ini karena pada  minggu  ke-4  setelah  kegiatan  pangkas  akar  bibit melinjo  sedang  melakukan  pertumbuhan  awal  tunas baru  sehingga  membutuhkan  nutrisi  yang  banyak mendukung  pertumbuhannya.  Andersen et  al .  (2000) menyatakan  bahwa  pemangkasan  akar  dapat  ber- pengaruh  positif  atau  negatif  terhadap  pertumbuhan tanaman,  bergantung  pada  jenis  akar  dan  banyaknya akar yang dipotong.

## SIMPULAN
Pertumbuhan  bibit  melinjo  terbaik  diperoleh  pada kombinasi  perlakuan  (1)  bibit  melinjo  yang  tidak dipangkas  akarnya  dan  diinokulasi  pada  minggu  ke-1, dan  (2)  bibit melinjo  yang dipangkas akarnya  30%  dan dinokulasi  pada  minggu  ke-3  setelah  kegiatan  pangkas akar.

## DAFTAR PUSTAKA
Andersen  L,  Rasmussen  HN,  Brander  PE.  2000. Regrowth  and  dry  mattter  allocation  in Quercus robur (L.)  seedlings  root  pruned  prior  to transplanting. New Forests 19: 205-213.
Ariadi.  2004.  Pengaruh  pemangkasan  pucuk  dan  akar terhadap  pertumbuhan  semai  mahoni  ( Swietenia macrophylla king)  hasil  cabutan  anakan  alam [skripsi].  Manokwari  (ID):  Fakultas  Kehutanan, Universitas Negeri Papua.
Bechem EE,  Alexander  IJ.    2012.  Mycorrhiza  status  of Gnetum spp. in Cameroon: evaluating diversity with a  view  to  ameliorating  domestication  efforts. Mycorrhiza .  22(2):99-108.  doi:  10.1007/s00572- 011-0384-0.
Burner  DM,  Pote  DH,  Belesky  DP.  2009.    Effect  of loblolly pine root pruning on allley cropped herbage production  and  tree  growth. Agron  J. 101:184-192. doi:10.2134/agronj2008.0185.
Cadiz  RT,  Florido  HB.  2001.  BAGO Gnetum  gnemon Linn. Research  Information  Series  on  Ecosystems 13(2): 3-4.
Campbell  NA,  Reece  JB,  Mitchell  LG.  2003. Biologi . Manalu  W,  penerjemah.  Jakarta  (ID):  Erlangga. Terjemahan dari: Biology .
Ferre  DC,  Scurlock  DM,  Johns  GR,  Riesen  R.  2000. Root  pruning  has  little  effect  on  Seyval,  Catawba, and Concord grapevines .  Small Fruits Review 1(2): 19-27.
Hipps  NA,  Higgs  KH,  Collard  LG.  1999.    Effects  of root  wrenching  on  growth  and  water  relations  of Prunus  avium and Castanea  sativa seedlings  in nursery  bed  and  after  transplanting. Can  J  For Res . 29: 696-704.
Lunt  PH,  Hedger  JN.    2003.    Effects  of  organic enrichment  of  mine  soil  on  growth  and  nutrient uptake  in  oak  seedlings  inoculated  with  selected ectomycorrhizal  fungi. Restoration  Ecology 11(2): 125-130.
Malajczuk  N,  Lapeyrie  F,  Garbaye  J.  1990.  Infectivity of  pine  and  eucalyptus  isolates  of Pisolithus- tinctorius on  the  roots  of Eucalyptus  urophylla in vitro. New Phytologist 114: 627–631.
Onguene  NA,  Kuyper  TW.    2001.    Mycorrhizal associations  in  the  rain  forest  of  South  Cameroon. Forest Ecology and Management 140: 277-287.
Ortega U, Duñabeitia M, Menendez S, Gonzalez-murua S,  Majada  J.  2004.  Effectiveness  of  mycorrhizal inoculation  in  the  nursery  on  growth  and  water relations of Pinus radiata in different water regimes. Tree Physiology 24: 65-73.
Petterson  RL,  Massicotte  HB,  Melville  LH.  2004. Mycorrhiza:  Anatomy  and  Cell  Biology .  Ottawa: NRC Research Press.
Pourmajidian  MR,  Ammi  S,  Taban  M,  Spahbodi  K,
Parsakhoo  A.  2009.  Effect  of  the  extent  of  root pruning on growth, biomass, and nutrient content of oak  ( Quercus  castaneifolia C.A.Mey,)  seedlings. JABS. 3(1): 87-91.
Sen  R.    2001.    Multitrophic  interactions  between  a Rhizoctonia sp.  an  mycorrhizal  fungi  affect  Scots pine  seedling  performance  in  nursery  soil. New Phytologist 152: 543-553. Smith S, Read D. 2008. Mycorrhizal Symbiosis . 3rd Ed. USA: Elsevier.
Tranvan  H,  Habricot  Y,  Jeannette  E,  Gay  G,  Sotta  B.
2000.  Dynamics  of  symbio-tic  between  an  IAA- overproducing mutant of the ectomycorrhizal fungus Hebeloma cylindrosporum and Pinus  pinaster . Tree Physiology 20: 123-129.
Vysotskaya  LB,  Timergalina  LN,  Simonyan  MV, Veselov  SY,  Kudoyarova  GR.  2001.  Growth  rate, IAA  and  cytokinin  content  of  wheat  seedling after  root  pruning .  Plant  Growth  Regulation 33: 51-57.
Wulandari  AS.    2002.    Beberapa  gatra  biologi ektomikoriza Scleroderma pada  melinjo  [disertasi].
Bogor:    Program  Pascasarjana,  Institut  Pertanian Bogor.
Wulandari  AS,  Supriyanto.  2013.  Teknik  pangkas  akar untuk meningkatkan produksi bibit melinjo bermikoriza. Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia (JIPI) 18(3): 167-171.
Wulandari  AS,  Supriyanto,  Febrianingrum  HW.  2013. Pruning akar: teknik untuk meningkatkan kolonisasi ektomikoriza  pada  akar  melinjo. Mikoriza  untuk Membangun Kemandirian Pertanian dan
Pelestarian  Lingkungan  Hidup . Prosiding  Seminar Nasional  Mikoriza  III ;  2013  Nov  25-26;  Bogor, Indonesia. Bogor: Seameo Biotrop. hlm: 21-22. Wulandari  AS,  Pamujianto  R.  2015.    Aplikasi  pangkas akar  untuk  meningkatkan  kolonisasi  ektomikoriza pada  bibit  melinjo  ( gnetum  gnemon )  umur  2  bulan. Pembaruan Silvikultur untuk Mendukung Pemulihan Fungsi  Hutan  menuju  Ekonomi  Hijau.  Prosiding Seminar  Nasional  Silvikultur  III; 2015  Agt  28-29; Yogyakarta,  Indonesia.    Yogyakarta:  Universitas Gadjah Mada.  Hlm 574-581.
Wulandari  AS,  Supriyanto,  Febrianingrum  HW.  2015.
Pengaruh  kombinasi  pemangkasan akar  dan  sumber inokulum  ektomikoriza  terhadap  pertumbuhan  bibit melinjo. Jurnal  Ilmu  Pertanian  Indonesia  (JIPI) 20(3): 236-241.  DOI:10.18343/jipi.203.236.