## AKTIVITAS ANTIMIKROBA KAPANG ENDOFIT DARI TUMBUHAN
PESISIR SARANG SEMUT ( Hydnophytum formicarum ) HASIL KULTIVASI
Antibacterial Activity of Cultivated Endophytic Fungi from Coastal Plant Sarang
Semut ( Hydnophytum formicarum )
Nurzakiah 1 , Desniar 2 , Kustiariyah Tarman 2,3*
1 Sekolah Pascasarjana IPB, Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor
2 Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor Kampus IPB Darmaga, Jalan Agatis, Bogor 16680 Jawa Barat, Indonesia
3 Divisi Bioteknologi Kelautan, Pusat Kajian Sumberdaya Pesisir dan Lautan, Institut Pertanian Bogor Kampus IPB Darmaga, Jalan Agatis, Bogor 16680 Jawa Barat, Indonesia
Telepon (0251)8622909-8622906, Faks. (0251)8622907 *Korespondensi: kustiaz@apps.ipb.ac.id

## ABSTRAK
Tujuh isolat kapang endofit dari tumbuhan sarang semut ( Hydnophytum formicarum ) telah dilakukan  pengamatan  aktifitas  antimikrobanya.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  menentukan periode  kultur  kapang  endofit  sarang  semut  yang  memiliki  aktivitas  antimikroba  terbaik.  Uji aktivitas  antimikroba  kapang  endofit  menunjukkan  bahwa  isolat  kapang  RS1A  memiliki  zona hambat yang lebih tinggi dengan rata-rata diameter 4,7 mm terhadap bakteri Escherichia coli dan Bacillus  subtilis .  Hasil  uji  aktivitas  antimikroba  menunjukkan  ekstrak  isolat  RS1A  pada  kultur statis hari ke-21 memiliki zona hambat lebih tinggi.  Zona hambat terhadap bakteri E. coli yaitu 10 mm pada konsentrasi 2 mg/sumur dan 7 mm  pada konsentrasi 1 mg/sumur, sedangkan zona hambat terhadap bakteri B. subtilis masing-masing 7 mm dan 6 mm.
Kata Kunci : antimikroba, endofit, kapang laut, lama kultur, sarang semut

## ABSTRACT
Seven  isolates  of  endophytic  fungi  from  sarang  semut  plant  ( Hydnophytum  formicarum ) was observed for their antibacterial activity. This study aimed to determine the culture period of sarang  semut  endophytic  fungi  that  has  the  best  antibacterial  activity.  Screening  of  endophytic fungi resulted that RS1A isolate showed the widest zone of inhibition, which was 4.7 mm against Escherichia coli and Bacillus subtilis . The highest antibacterial activity of RS1A was shown by the extracts from static culture harvested on day 21. Zone of inhibition against Escherichia coli was  10  mm  at  a  concentration  of  2  mg/well  and  7  mm  at  a  concentration  of  1  mg/well,  while zone of inhibition against Bacillus subtilis was 7 mm and 6 mm, respectively.
Keywords : antibacterial , culture period, endophytes , marine fungi , sarang semut

## I. PENDAHULUAN
Sarang  semut  merupakan  tumbuhan epifit  yang hidup menempel pada tumbuhan lain. Secara empiris, tumbuhan sarang semut digunakan  sebagai  obat  terutama  oleh masyarakat  Papua.  Manfaat  sarang  semut telah dibuktikan melalui beberapa penelitian antara  lain  memiliki  aktivitas  antikanker terhadap  sel  kanker  HeLa  dan  sel  kanker MCM-B2  (Soeksmanto  et al. 2010), antioksidan  (Engida et  al .,  2014;  Sanjaya et al . 2014), immunomodulator (Hertiani et al. 2010), meningkatkan kinerja liver (Sujono et al. 2014),  menurunkan  kadar  asam  urat (Ernawati  and  Susanti,  2014;  Tayeb et  al. 2014),  dan  agen therapeutic (Zuas et  al. 2014).  Ekstrak  sarang  semut  mengandung flavonoid  (Engida et  al. 2014),  fenol,  tanin dan  karbohidrat,  serta  memiliki  aktivitas sitotoksik  dan  antioksidan  (Bustanussalam 2010). Sarang semut juga diketahui memiliki aktivitas inhibisi terhadap beberapa  mikroba  seperti Staphylococcus aureus,  Escherichia  coli, dan Candida albicans (Efendi and Hetiani 2013) .
Kapang  endofit  memiliki  kemampuan menghasilkan  senyawa  bioaktif  yang  mirip dengan  inangnya  (Strobel  1996;  Tan  dan Zou 2001). Kapang endofit dapat menghasilkan  senyawa  antibiotik  yang  aktif terhadap  bakteri  patogen  manusia  dan tanaman. Beberapa penelitian tentang mikroba  endofit,  khususnya  kapang  endofit menunjukkan bahwa kapang endofit memiliki aktivitas biologis sebagai antibakteri  (Samuel et  al. 2011),  antikanker (Visalakchi dan Muthumary 2010), antimalaria  dan  antioksidan  (Strobel  2003). Kapang  endofit  juga  dapat  melindungi  dan menjaga kelestarian tumbuhan inang (Kjer et al. 2010).
Sahara  (2013)  telah  melakukan  isolasi kapang  endofit  yang  berasal  dari  umbi sarang  semut  ( Hydnophytum  formicarum ) dan  menghasilkan  tujuh  isolat  kapang endofit  berbeda.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  menentukan  metode  dan  periode kultur  kapang  endofit  sarang  semut  yang memiliki aktivitas antimikroba terbaik.

## II. METODE PENELITIAN
Seleksi kapang endofit (Papuangan 2009) Seleksi  kapang  endofit  dilakukan pada  7  isolat  kapang  koleksi  Laboratorium Mikrobiologi  Hasil  Perairan,  Departemen Teknologi  Hasil  Perairan,  Institut  Pertanian Bogor.  Hasil  isolasi  dari  umbi  tumbuhan pesisir sarang semut ( Hydnophytum formicarum ) yang berasosiasi dengan tumbuhan  bakau Avicennia sp.  dari  Sorong, Papua  (kode  RS1A,  RS1B,  RS2A,  RS2B, RS3,  RS6A,  dan  RS6B).  Isolat  kapang endofit  tumbuhan  sarang  semut  koleksi laboratorium diremajakan dengan ditumbuhkan  dalam  media  PDA  ( Potato Dextrose Agar )  dan  diinkubasi  pada  suhu ruang  (27-29 o C)  selama  7  hari.  Seleksi kapang  endofit  dilakukan  secara  langsung terhadap mikroba uji, yaitu B. subtilis dan E. coli yang  dikultur  dalam  media  NB ( Nutrient Broth )  steril.  Isolat  kapang dipotong  bulat  (diameter  1  cm)  dan dipindahkan  ke  cawan  media semisolid NA ( Nutrient Agar )  yang  berisi  kultur  bakteri sebanyak  100  μL  dan  diinkubasi  pada  suhu 37 o C selama 24 jam.  Aktivitas antimikroba ditunjukkan  dengan  terbentuknya  zona bening.
Kultivasi  isolat  terpilih  (Srikandace et  al. 2007)
Kapang  terpilih  hasil  seleksi  yang dikultur pada media PDA ditumbuhkan pada media  PDB  (prekultur)  selama  7  hari. Kapang  hasil  prekultur  diinokulasikan  ke dalam  200  mL  media  PDB  steril  dan dikultivasi  pada  suhu  ruang  selama  30  hari dengan  perlakuan  kultur shaker dan  secara statis.  Sampling  dilakukan  setiap  interval  3 hari  untuk  mengetahui  pertumbuhan  isolat kapang tersebut. Kurva pertumbuhan kapang ditentukan  berdasarkan  waktu  kultivasi  dan bobot  biomassa.  Penentuan biomassa kering kapang dilakukan dengan menyaring miselia menggunakan  kertas  saring,  kemudian dikeringkan  menggunakan  oven  (suhu  40 o C).  Bobot  kering  miselia  ditimbang sehingga  didapatkan  biomassa  kapang,
kondisi  pH  media  juga  diamati  selama proses kultivasi.
Ekstraksi  kapang  endofit (Tarman et  al.
2011)
Proses  ekstraksi  dilakukan  terhadap media  kultur  yang  telah  dipisahkan  dari miselianya.  Ekstraksi  menggunakan  pelarut etil  asetat  dengan  metode  maserasi.  Proses maserasi  dilakukan  dengan  menambahkan etil  asetat  pada  media  kultur  kemudian diberi goyangan menggunakan shaker selama  24  jam.  Ekstrak  yang  diperoleh kemudian dipisahkan dari media menggunakan  corong  pisah.  Proses  ini dilakukan sebanyak 3 kali. Ekstrak dipekatkan  menggunakan vacuum  rotary evaporator pada  suhu  40  °C  sehingga diperoleh ekstrak kasar dari media kultur.
Uji  aktivitas  antimikroba  (Holo et  al. 1991)
Uji  dilakukan  menggunakan  metode difusi  sumur  ( well  diffusion  method ) terhadap  mikroba E.  coli and B.  subtilis . Mikroba uji disiapkan dengan menumbuhkan  bakteri  uji  dalam  media  NA dan diinkubasi  selama 24 jam pada suhu 37 o C.  Mikroba  uji  kemudian  dikultur  pada media NB steril dan  diinkubasikan kembali. Bakteri kultur diukur kepadatannya menggunakan  spektrofotometer  UV-VIS pada panjang gelombang 600 nm. Bakteri uji 20 μL ditambahkan ke  dalam 20 mL media MHA steril kemudian dihomogenisasi menggunakan vortex dan  dituang  pada cawan  petri  steril.  Media  didiamkan  hingga memadat,  lubang  (sumur)  dibuat  dengan diameter  6  mm  secara  aseptis.  Ekstrak kapang endofit dimasukkan ke dalam lubang masing-masing  20  μL  dengan  konsentrasi  1 mg,  dan  2  mg,    kontrol  positif  dan  negatif. Kontrol  positif  menggunakan  antibiotik kloramfenikol  300  μg  dan  kontrol  negatif menggunakan  pelarut  yang  sama  dalam ekstraksi (etil asetat). Masing-masing perlakuan  dilakukan  secara  duplo.  Cawan tersebut  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama 24  jam.  Pengukuran  diameter  zona  hambat dilakukan dengan mengurangi diameter zona
hambat  yang  terbentuk  sekeliling  lubang dengan diameter lubang (6 mm).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Seleksi kapang endofit
Pengujian  antagonis  isolat  kapang endofit  dari  tumbuhan  pesisir  sarang  semut memiliki aktivitas menghambat pertumbuhan mikroba E. coli dan B. subtilis (Gambar  1).  Terdapat  perbedaan  antara isolat  kapang  yang  berasal  dari  satu  inang yang  sama.  Kemampuan  tiap  isolat  kapang untuk menghasilkan metabolit yang memiliki  aktivitas  antimikroba  tidak  sama. Kapang  endofit  juga  dapat  memproduksi komponen  bioaktif  selain  zat  antimikroba (Pelaez et  al. 1998).  Jenis  kapang  yang berbeda memungkinkan terjadinya perbedaan  komponen  aktif  yang  terdapat pada  kapang  tersebut  (Huang et  al. 2008). Isolat  RS1A  memiliki  nilai  penghambatan mikroba  tertinggi  dengan  nilai  rata-rata diameter  zona  hambat  4,7  mm  terhadap kedua jenis bakteri uji, sehingga isolat RS1A ini  dipilih  sebagai  isolat  yang  digunakan pada uji selanjutnya.
Gambar 1 . Zona Hambat kapang endofit sarang semut terhadap E. coli (      ) dan B. subtilis (      ) (Rataan ± standar deviasi; 3
ulangan)

## Pertumbuhan isolat RS1A
Pertumbuhan  kapang  terdiri  dari empat fase, yaitu fase lag (adaptasi), fase log (pertumbuhan),  fase  stasioner  dan  fase kematian  (Carlile et  al .  2001).  Isolat  RS1A yang dikultivasi dengan shaker menunjukkan fase adaptasi hingga hari ke-6, pada  fase  ini  terjadi  penyesuaian  kapang
0 1 2 3 4 5 6 1A 1B 2A 2B 3 6A 6B Z o n a h am b at (m m ) Kapang endofit
dengan  lingkungan.  Fase  pertumbuhan berlangsung hingga hari ke-18. Pertumbuhan kapang pada fase ini meningkat, penambahan jumlah sel terjadi dengan cepat. Hari  ke-18  hingga  hari  ke-30  kultivasi, kapang  RS1A  berada  pada  fase  stationer yang  ditandai  dengan  pertumbuhan  kapang yang lambat. Berat biomassa kering tertinggi pada  kultivasi  terjadi  pada  hari  ke-24  yaitu sebesar 0,6985 g/100 mL (Gambar 2.)
Isolat  kapang  RS1A  yang  dikultur pada  kondisi  statis  mengalami  fase  adaptasi hingga  hari  ke-9,  fase  pertumbuhan  hingga hari  ke-12  dan  hingga  hari  ke-27  kapang RS1A berada pada fase stasioner. Hari ke-30 kultivasi  pada  kedua  jenis  kultur  belum menunjukkan  penurunan  biomassa  kapang yang  menandakan  mulai  terjadinya  fase kematian. Pertumbuhan isolat kapang RS1A yang dikultur dengan kondisi statis menunjukan  pertumbuhan  tertinggi  pada hari  ke-27  dengan  bobot  biomassa  kering sebesar 0,7180 g/100 mL (Gambar 3).
Gambar 2. Pertumbuhan isolat RS1A pada kultur shaker (      biomasa kering,     pH media), (Rataan ± standar deviasi; 2 ulangan)
Gambar 3. Pertumbuhan isolat RS1A pada pada kultur statis (       biomasa kering, pH media),
(Rataan ± standar deviasi; 2 ulangan) Penggunaan shaker pada  kultivasi bertujuan  untuk  menciptakan  kondisi  aerasi yang  aktif  dengan  cara  menggoyangkan substrat atau media pertumbuhan. Pertumbuhan  dipengaruhi  oleh  ketersediaan oksigen dan nutrien. Pengaruh oksigen pada biomassa ditunjukkan dengan meningkatnya berat  biomassa  (Choiron et  al. 2013). Kondisi  aerasi  juga  membantu  penyebaran nutrien  dalam  media.  Kultur  dalam  kondisi statis  menyebabkan  nutrien  dalam  media cenderung  terperangkap  dibagian  bawah kapang.  Hal  ini  yang  diduga  dapat menyebabkan terbatasnya nutrisi yang dapat diserap  oleh  kapang.  Pertumbuhan  pada kedua metode kultivasi  yaitu dengan shaker dan  statis  menunjukkan  perbedaan  (Gambar 4.)  Menurut  Gandjar et.  al. (2006),  pada media dengan kultur yang digoyang ( shaker ) akan  terlihat  kapas-kapas  kecil  melayang dalam  media.  Bentuk  seperti  kapas  tersebut adalah  spora  atau  konidia  tunggal  yang sudah tumbuh menjadi miselia.
Shahriarinour et  al. (2011)  menyebutkan miselia  pada  kultur  statis  tumbuh  dan membentuk  lapisan  diatas  media  yang mempengaruhi waktu dan area kontak antara sel kapang dan substrat media.
0 1 2 3 4 5 6 7 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 pH B io m asa k er in g ( g /1 0 0 m L ) Periode kultivasi (hari) 0 1 2 3 4 5 6 7 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 0 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 pH B io m asa k er in g ( g /1 0 0 m L )
Periode kultivasi (hari)
Gambar 4. Isolat RS1A kultur pada 21 hari (kiri: kultur shaker , kanan: kultur statis)
Metabolit  sekunder  yang  dihasilkan kapang  endofit  berkolerasi  dengan  faktor lingkungan (Samuel et al. 2011).
Pertumbuhan  kapang  dipengaruhi  oleh substrat,  kelembapan,  temperatur,  senyawa kimia  lingkungan  dan  derajat  keasaman (pH).  Fungi  biasanya  lebih  menyukai  pH  di bawah 7 (Gandjar et  al. 2006). Rajasekar et al. (2012)  menyebutkan  produksi  agen antimikroba  sangat  dipengaruhi  kondisi  pH media,  yaitu  pH  antara  5-9.  Nilai  pH  yang dihasilkan pada penelitian ini masih berkisar pada pH optimum kapang dalam memproduksi zat aktif yaitu berkisar 4,5-5.

## Aktivitas antimikroba isolat RS1A
Hasil  pengujian  difusi  sumur  ( well diffusion assay ) ekstrak isolat kapang RS1A kedua  kondisi  kultur  menunjukkan  zona hambat  terhadap  mikroba E.  coli dan B. subtilis (Gambar  4  dan  5).  Ekstrak  hasil media kultivasi statis lebih tinggi hambatannya  dibanding  hasil  metode  kultur shaker .  Nilai  zona  hambat  tertinggi  dari kultur media statis (21 hari) terhadap E. coli yaitu  sebesar  10  mmpada  konsentrasi ekstrak  2  mg/sumur  dan  7  mm  pada konsentrasi  1  mg/sumur,  sedangkan  zona hambat  terhadap B.  subtilis masing-masing sebesar 7 mm dan 6 mm.
Gambar  5. Aktivitas  antimikroba  ekstrak isolat RS1A (kultur shaker )
terhadap E. coli ( 1 mg,      2 mg) dan B. subtilis ( 1 mg,
2  mg)  (C  kontrol  positif) (Rataan  ±  standar  deviasi;  2 ulangan)
Gambar  6. Aktivitas  antimikroba  ekstrak isolat RS1A (kultur statis) terhadap E. coli ( 1 mg,       2
mg)  dan B. subtilis ( 1 mg,
2  mg)  (C  kontrol  positif) (Rataan  ±  standar  deviasi;  2 ulangan)
Waktu  kultivasi  memengaruhi  zona hambat yang dihasilkan ekstrak isolat RS1A. Hari  ke-21  kultivasi  kapang  RS1A  pada perlakuan  kultur  statis  berada  pada  fase stationer.  Hal  ini  menunjukkan  senyawa antimikroba  pada  isolat  RS1A  terakumulasi pada fase ini. Fase stasioner merupakan fase penting  karena  banyak  metabolit  sekunder dapat  dipanen  pada  fase  ini  (Gandjar et  al. 2006).
0 2 4 6 8 10 12 14 16 3 6 9 12 15 18 21 C Z o n a h am b at (m m ) Periode kultivasi (hari) 0 2 4 6 8 10 12 14 16 3 6 9 12 15 18 21 C Z o n a h am b at (m m )
Periode kultivasi (hari)
Augustine et  al. (2005)  menyebutkan produksi  metabolit  yang  dikeluarkan  ke lingkungan  maksimum  pada  akhir  fase  log dan  relatif  konstan  selama  fase  stasioner. Srikandance et al. (2007) juga menyebutkan bahwa  pada  fase  ini  jumlah  sel  tetap,  laju pertumbuhan menurun dan beberapa sel mati karena  nutrien  dalam  media  berkurang. Metabolisme  pada  fase  ini  masih  terus berlangsung  dan  produk  metabolisme  yang cenderung  menumpuk.  Sintesis  metabolit sekunder  dimulai  pada  saat  mulai  habisnya beberapa  komponen  utama  nutrien  pada media  pertumbuhan.  Sel-sel  kapang  pada fase  ini  diduga  juga  lebih  tahan  terhadap keadaan ekstrim.

## IV. KESIMPULAN
Isolat RS1A merupakan isolat kapang  yang  terpilih  dari  uji  antagonis terhadap  bakteri Escherichia  coli dan Bacillus  subtilis .  Aktivitas  antimikroba ekstrak  isolat  RS1A  menunjukkan  nilai inhibisi  lebih  tinggi  pada  kultivasi  statis yang dipanen 21 hari, dengan rata-rata zona hambat terhadap E. coli 10 mm dan terhadap B.  subtilis 7  mm  pada  konsentrasi  2 mg/sumur.

## V. DAFTAR PUSTAKA
Augustine  SK,  Bhavsar  SP,  Kapadnis  BP. 2005. Production of a growth dependent  metabolite  active  against dermatophytes by Streptomyces rochei AK  39.  Indian  J  Med  Res  121:164- 170.
Bustanussalam.  2010.  Penentuan  struktur molekul  dari  fraksi  air  tumbuhan “sarang  semut” Myrmecodia  pendens Merr.  &  Perry  yang  mempunyai aktivitas sitotoksik dan sebagai antioksidan  [tesis].  Bogor  (ID):  Bogor Agricultural University.
Carlile J, Watkinson SC, Gooday GW. 2001.
The  Fungi .  Ed  ke-2.  UK  (GB):
Elsevier Academic Press.
Choiron  M,  Jyus,  Suwasono  S.  2013. Pengaruh  ketersediaan  oksigen  pada
produksi  epligukan  oleh Epicoccum nigrum menggunakan  media  molases.
Agrointek. 7(1):11-20.
Efendi  YN, Hertiani T.  2013.  Antimicrobial potency of ant-plant extract ( Myrmecodia  tuberosa jack.)  against C andida  albicans , Escherichia  coli, and
Staphylococcus aureus . Traditional Medicine Journal. 18(1):53-58. Engida AM,  Kasim NS,  Tsigie YA,  Ismadji S ,  Huynh  LH,  Ju  YH.  2013.
Extraction, identification and quantitative HPLC analysis of flavonoids from sarang semut ( Myrmecodia pendan ). Industrial
Crops and Products . 41: 392-396. Engida  AM,  Faika  S,  Nguyen-Thi  BT,  Ju YH. 2014. Analysis of major antioxidants from extracts of
Myrmecodia  pendans by  UV/visible spectrophotometer, liquid chromatography/tandem mass
spectrometry,  and  high-performance liquid chromatography/UV techniques. Journal  of  Food  and  Drug  Analysis. 30: 1-7.
Ernawati, Susanti H, 2014. In vitro xanthine oxidase inhibition  activity  of  the sarang  semut  ( Myrmecodia  tuberosa (non  Jack)  Bl.)  ethanol  extract . Pharmaciana. 4(1): 15-22 .
Gandjar  I,  Sjamsuridzal  W,  Oetari  A.  2006.
Mikologi  Dasar  dan  Terapan .  Jakarta (ID): Yayasan Obor Indonesia.
Hertiani  T,  Sasmito  E,  Sumardi,  Ulfah  M. 2010. Preliminary study on immunomodulatory  effect  of  sarang- semut  tubers Myrmecodia  tuberosa and Myrmecodia  pendens. Journal  of Biological Sciences . 10(3): 136-141.
Holo  H,  Nilssen  O,  Nes  IF.  1991.
Lactococcin A, a new bacteriocin from Lactococcus  lactis subsp. cremoris : isolation  and  characterization  of  the protein  and  its  gene. Journal  of Bacteriology. 173(12):3879-3887.
Huang  W  Y,  Cai  YZ,  Hyde  KD,  Corke  H, Sun M. 2008. Biodiversity of endophytic  fungi  associated  with  29
traditional  Chinese  medicinal  plants. Fungal diversity. 33:61-75.
Kjer J, Debbab A, Aly HA, Proksch P. 2010. Methods  for  isolation  of  marine- derived  endophytic  fungi  and  their bioactive  secondary  products. Nature
Protocols . 5(3):479-490.
Papuangan N. 2009. Aktivitas penghambatan  senyawa  antimikrob
Streptomyces spp.  terhadap  mikrob patogen tular tanah secara in vitro dan in  planta [tesis].  Bogor  (ID):  Bogor Agricultural University.
Pelaez  F,  Collado  J,  Arenal  F,  Basilio  A,
Cabello  A,  Diez  Mataz  MT,  Garcia JB,  Gonzalez  del  val  A,  Gonzalez  V, Gorrochategui  J,  Hernandez  P,  Martin I,  Platas  G,  Vicente  F.  1998. Endophytic fungi from plants living on gypsum  soils  as  source  of  secondary metabolites with antimicrobial activity. Mycological  Research .  102
(6):755-761.
Rajasekar  T,  Balaji  S,  Kumaran  S,
Deivasigamani  B,  Pugzhavendhan  R. 2012. Isolation and characterization of marine  fungal  metabolites  against clinical patogen. Asian Pasific Journal of Tropical Disease 387-392.
Sahara  R.  2013.  Kapang  endofit  dari tumbuhan pesisir sarang semut
( Hydnophytum formicarum ) dan
potensinya  sebagai  antihiperglikemik [skripsi]. Bogor (ID): Bogor
Agricultural University.
Samuel  P,  Prince  L,  Prabakaran  P.  2011.
Antibacterial activity of marine derived  fungi  collected  from  South
East  Coast  of  Tamilnadu,  India.
Journal of Microbiology and
Biotechnology Research 1(4):86-94.
Sanjaya  RE,  Tedjo  YY,  Kurniawan  A,  Ju YH,  Ayucitra  A,  Ismadji  S.  2014.
Investigation  on  supercritical  CO2 extraction of phenolic- phytochemicals from an epiphytic plant tuber ( Myrmecodia  pendans ). Journal  of CO2 Utilization. 6:26-33
Shahriarinour  M,  Wahab  MNA,  Mohamad R,  Mustafa  S,  Ariff  AB.  2011.  Effect of  medium  composition  and  cultural
condition  on  cellulase  production  by Aspergillus terreus . African Journal of Biotechnology. 10(38):7459-7467. Soeksmanto    A,  Subroto  MA,  Wijaya  H,
Simanjuntak  P.  2010.  Anticancer activity  for  extracts  of  Sarang-Semut plant  ( Myrmecodia  pendens )  to  HeLa and  MCM-B2  cells. Pakistan  Journal of Biological Sciences. 13: 148-151. Srikandace  Y,  Hapsari  Y,  Simanjuntak  P.
2007. Seleksi mikroba endofit Curcuma zedoaria dalam memproduksi senyawa kimia antimikroba. Jurnal Ilmu Kefarmasian
Indonesia 5(2):77-84.
Strobel  GA.  1996.  Endophytic  fungi  :  New sources for old and new pharmaceuticals.
Pharmaceutical News . 3(6):7-9.
Strobel GA. 2003. Endophytes as sources of bioactive  products. Microbes  and Infection. 5:535-544.
Sujono  TA,  Munawaroh  R,  Wijayanti  PK,
Lestari YP. 2014. The protective effect of sarang-semut ( Myrmecodia tuberose )
tubers infusion on gentamicin-piroxicam induced
nephrotoxicity  in  rats. Indonesian Journal of Pharmacy . 25(2) : 91-97.
Tan RX, Zou WX. 2001. Endophytes : a rich source  of  functional  metabolites. Natural Product Reports . 18: 448-459. Tarman  K,  Lindequist  U,  Wende  K,  Porzel A,  Arnold  N,  Wessjohan  LA.  2011. Isolation of a new natural product and cytotoxic  and  antimicrobial  activities of  extracts  from  fungi  of  Indonesia marine  habitats. Marine  Drugs. 9(3): 294-306.
Tayeb R, Amelia V, Usmar. 2012. Pengaruh pemberian infus sarang semut ( Myrmecodia  pendens ) terhadap kadar asam urat darah pada kelinci ( Oryctolagus cuniculus ). Majalah Farmasi  dan  Farmakologi .  16(1):  31-
36. Visalakchi  S,  Muthumary  J.  (2010).  Taxol (anticancer drug) producing
endophytic fungi: an overview. International  Journal  of  Pharma Biosciences. 1:1-9.
Zuas  O,  Hamim  N,  Sampora  Y.  2014.  Bio- synthesis  of  silver  nanoparticles  using water  extract  of Myrmecodia  pendan
(Sarang Semut plant). Materials
Letters . 123:156-159.