## Analisis GC-MS ekstrak tanaman terfermentasi (ETT) dari kulit buah jengkol (Pithecellobium jiringa Prain)
Refilda Suhaili 1 *, Lucy Prima Ardi 1 , Emil Salim 2 , Mai Efdi 2 Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Andalas
Padang, 25161, Indonesia
e-mail: * refilda@sci.unand.ac.id
Diterima: 31 Oktober 2019/ Disetujui: 2 Mei 2020/ Dipublikasi online: 31 Mei 2020 DOI: https://doi.org/10.22437/chp.v5i1.7957

## ABSTRAK
Ekstrak  Tanaman  Terfermentasi  (ETT)  dari  kulit  buah  jengkol  dapat  digunakan sebagai  biopestisida  pada  tanaman  tomat,  tanaman  tomat  yang  diolah  dengan ETT dapat meningkatkan ketahanan terhadap serangan hama. Namun, senyawa aktif  yang  berperan  sebagai  biopestisida  dalam  ETT  dari  kulit  buah  jengkol  ini belum diidentifikasi. Analisis senyawa aktif dari ETT yang dibuat dari kulit buah jengkol menggunakan aktivator EM-4 telah dilakukan dengan metode kromatografi gas-spektroskopi  masa  (GC-MS).  Hasil  menunjukkan  ada  88  senyawa  yang terdapat  dalam  ETT,    7  senyawa  utama  yang  memiliki  luas  puncak  di  atas  1% adalah asam suksinat; etil hidrogen suksinat; 1,2,3-benzetriol; 3,3-dimetilhexanal; L-prolin,  1-meil-5-okso-metil  ester;  asam  3-metoksisinamat  dan  asam heksadekanoat. Berdasarkan hasil  analisis menunjukkan bahwa senyawa  yang terkandung  dalam  ETT  kulit  buah  jengkol  adalah  senyawa  yang  berpotensi sebagai pestisida alami.
Kata kunci: EM-4, ETT, GC-MS, kulit buah jengkol, pestisida alami

## ABSTRACT
Fermented Plant Extract (FPE) from ngapi nut peel can be used as a biopesticide on tomato  plants,  tomatoes  plant  treated  with  FPE  could  increase  resistance  to  pest attack.  However,  active  compounds  that  play  a  role  as  biopesticides  in  FPE  of ngapi nut peel has not been identified yet. In this study, active compounds in FPE from the ngapi nut peel using Effective Microorganism-4 (EM-4) has been analyzed by Gas  Chromatography-Mass  Spectroscopy  (GC-MS) .  There  were  88  compounds found in fermented plant extract, the major content with the area above 1% were 7 compounds such as succinic acid; ethyl hydrogen succinate; 1,2,3-benzetriol; 3,3- dimethylhexanal;  L-proline,  1-methyl-5-oxo-methyl  ester;  3-methoxycinnamic  acid and  hexadecanoic  acid .  Based  on  GC-MS  analysis,  fermented  plant  extract indicated that several compounds that have potential as biopesticides.
Keywords:  Biopesticides,  EM-4,  FPE,  GC-MS,  ngapi  nut  (Pithecellobium  jiringa Prain) peel

## PENDAHULUAN
Jengkol  (Pithecellobium  jiringa  Prain)  adalah  tanaman  asli  Asia  Tenggara dari  keluarga  Leguminosae.  Di  Indonesia  dinamakan  jengkol,  di  Kamboja namanya krakos, di Thailand disebut niang-yai dan di Malaysia disebut dengan jering . Di negara-negara ini, biji Pithecellobium jiringa Prain dikonsumsi bersama
nasi sementara  kulitnya  tidak dimanfaatkan dan dibuang begitu saja  (Bakar  et al, 2012).
Aktivitas  manusia  sehari-hari  di  berbagai  tempat  menghasilkan  banyak limbah,  terutama  sampah  organik.  Kulit  buah  jengkol  (Pithecellobium  jiringa) telah diklasifikasikan sebagai sampah organik yang tersebar di pasar tradisional dan  tidak  memberikan  nilai  ekonomis  ini  menunjukkan  bahwa  perhatian terhadap  kulit  buah  jengkol  masih  sangat  kurang.  Kulit  buah  jengkol  adalah limbah  yang  tidak  diperhatikan  oleh  masyarakat.  Saat  ini,  kulit  buah  jengkol hanya dianggap sebagai limbah yang tidak memberikan manfaat dan berdampak negatif  bagi  lingkungan.  Para  peneliti  mencoba  memanfaatkan  kandungan  biji buah  jengkol  dan  kulitnya  untuk  digunakan  dalam  kehidupan.  Senyawa metabolit sekunder yang ditemukan dalam ekstrak etanol dan etil asetat batang Pithecellobium  jiringa  adalah  tanin,  flavonoid,  terpenoid  dan  saponin  yang menunjukkan  aktivitas  antimikroba  yang  ditandai  (Hussin  et  al,  2018).  Asam yang  terkandung  dalam  P.  jiringga  juga  digunakan  sebagai  pestisida  organik (Abdul dan Muslim, 2010).
Limbah  organik  padat  dapat  diolah  menjadi  bahan  yang  lebih  bermanfaat seperti  pupuk  organik  dan  pestisida  alami.  Ekstrak  tanamanan  terfermentasi (ETT)  merupakan  hasil  fermentasi  dari  berbagai  jenis  bahan  organik,  bahan- bahan  ini  difermentasi  oleh  berbagai  mikroorganisme  yang  menghasilkan  zat aktif  yang  memberikan  banyak  manfaat  bagi  tanaman  seperti  sumber  nutrisi dan  juga  dapat  berperan  sebagai  biopestisida  (Feng  et  al,  2017).  Ekstrak tanaman  fermentasi  dari  limbah  organik  dapat  meningkatkan  aktivitas  fenolik, flavonoid  dan  antibakteri  total  (Nazami  et  al,  2016).  Ekstrak  tanaman terfermentasi dapat digunakan sebagai pengendali hama (Leng et al, 2011). ETT dari daun nimba  (Azadirachta  indica) juga dapat digunakan sebagai insektisida alami (Boadu et al, 2011). Microorganism Efektif (EM-4) mengandung sekitar 80 genus  mikroorganisme  yang  bekerja  secara  efektif  dalam  fermentasi  bahan organik,  memperpanjang  umur  simpan:  menghasilkan  metabolit  seperti  asam organik,  etanol,  bakteriosin  untuk  menghambat  pertumbuhan  bakteri berbahaya.   Fermentasi kulit  buah  Pithecellobium jiringa menggunakan larutan Effective Microorganism-4 (EM) dan larutan gula aren digunakan sebagai sumber pupuk  organik  dan  pestisida  pada  tanaman  tomat.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  ETT  dari  kulit  buah  jengkol  dapat  digunakan  sebagai biopestisida pada tanaman tomat, tanaman tomat yang diberi perlakuan dengan
ETT  dapat  meningkatkan  ketahanan  terhadap  serangan  hama  karena  ETT mengandung  senyawa  fenolik.  Setelah  pengamatan  selama  30  hari,  hama penyakit  paling  banyak  terdapat  pada  tanaman  tanpa  diberi  ETT  dengan persentase 42,17% sedangkan tanaman yang diberi ETT tidak ditemukan hama penyakit (Refilda et al, 2018). Namun senyawa yang berpotensi sebagai pestisida dalam  ETT  yang  dibuat  dari  kulit  buah  jengkol  belum  diidentifikasi.  Dalam penelitian  ini  senyawa  yang  terkandung  dalam  ETT  kulit  buah  jengkol  yang berpotensi sebagai biopestisida ditentukan dengan metode GC-MS
Senyawa  yang  berpotensi  sebagai  pestisida  dalam  Ekstrak  Tanaman Terfermentasi  dari  kulit buah  jengkol perlu diketahui secara kualitatif. Analisis menggunakan GC-MS telah terbukti menjadi metode yang selektif untuk analisis komponen  non-polar  dan  minyak  atsiri  yang  mudah  menguap,  asam  lemak, lipid,  alkaloid,  terpenoid  dan  steroid  (Hema  et  al,  2011).  Ekstrak  metanol  dari dua  Artemisia  sp  (Artemisia  vulgaris  dan  Artemisia  campestris)  mengandung fenolik, flavonoid dan quercetin, dari kedua spesies. Ekstrak A. campestris lebih kaya  quercetin  daripada  A.  vulgaris  dan  aktivitas  antimikroba  juga  lebih  baik daripada  A.  vulgaris.  (Karabegovi  et  al,  2011).  Dalam  penelitian  ini,  dilakukan analisis  GC-MS  terhadap  senyawa  pestisida  alami  dalam  ekstrak  tanaman terfermentasi (ETT) dari kulit buah jengkol (Pithecellobium jiringa Prain). GC-MS dapat  digunakan  untuk  mengidentifikasi  komponen  campuran,  karena  metode ini  cepat,  sensitif  dan  menghasilkan  puncak-puncak  senyawa.  Analisis  GC-MS yang  dilakukan  dalam  penelitian  ini  tidak  menggunakan  larutan  standar, sehingga  jumlah  senyawa  tidak  dapat  dihitung  secara  tepat.  Besarnya persentase  luas  puncak  senyawa  belum  tentu  menunjukkan  tingginya konsentrasi senyawa itu dalam sampel.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Bahan dan alat
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  kulit  buah jengkol.  Bahan  lainnya  adalah  kertas  saring,  air  suling,  n-butanol,  gula  aren, Effective Microorganism-4 (EM-4), dan aluminium foil.
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini adalah botol plastik 1,5 L, timbangan  analitik,  selang  kecil,  botol  semprot,  corong  pisah,  klem  standar, botol  vial,  spatula,  ayakan,  grinder,  oven,  desikator,  ultrasonik,  rotary
evaporator,  GC-MS,  serta  alat-alat  gelas  lainnya  yang  biasa  digunakan  di laboratorium.

## Preparasi Sampel
Kulit  jengkol  diambil  di  pasar  Tradisional  di  Padang,  Sumatra  Barat. Sampel dicuci dengan air dan kemudian dipotong dan dikering anginkan selama 8 hari kemudian digiling dengan penggiling sampai menjadi bubuk halus. Bubuk kulit  jengkol  disimpan  dalam  wadah  kering  dan  tertutup  untuk  digunakan dalam pekerjaan selanjutnya.

## Pembuatan Ekstrak Tanamana Terfermentasi (ETT) dari Kulit Buah Jengkol
Sebanyak  50  g  bubuk  kulit  buah  jengkol  ditimbang  dan  kemudian difermentasi  dengan  25  mL  EM-4,  25  mL  gula  aren  (1kg/L)  dan  450  mL  air suling  dalam  botol  plastik  selama  ±  15  hari,  tutup  botol  dibuka  setiap  hari untuk mengeluarkan gas yang terbentuk.  Sampel fermentasi disaring dan filtrat diisolasi  dengan  1:1  n-butanol  untuk  mendapatkan  ekstrak  n-butanol  dan kemudian diuapkan dengan rotary evaporator, sehingga diperoleh ekstrak pekat. Ekstrak  pekat  disimpan  dalam  botol  vial  pada  suhu  kamar  (Stanisavljevi  et  al, 2009).

## Uji Fitokimia ETT dari Kulit Buah Jengkol
Uji fitokimia terhadap ETT kulit buah jengkol dilakukan seperti flavonoid, fenolik, saponin, terpenoid dan alkaloid.

## Analisis GC-MS Ekstrak Tanaman Terfentasi dari Kulit Buah Jengkol
Kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  dalam  ekstrak  tanaman terfermentasi dari kulit buah jengkol diidentifikasi dengan menggunakan Agilent GC-MS 19091S-433, kolom HP-5MS 30m x 250 μm x 0,25 μm, suhu oven (0°C- 325°C),  Antarmuka  (250°C),  Mode  kontrol  (split),  tekanan  (10.523  psi),  total aliran (104 mL/menit) ), split ratio (100:1), split flow (100 mL/mnt), gas (He) dan detektor (MSD)

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Uji Fitokomia ETT Kulit Buah Jengkol
Uji  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui  senyawa  aktif  yang  terdapat dalam  ETT  kulit  buah  jengkol.  Hasil  uji  fitokimia  ETT  dari  kulit  buah  jengkol dapat dilihat pada Tabel 1.
Table 1. Hasil uji fitokimia ETT kulit buah jengkol Senyawa Metabilit Sekunder Hasil Uji Flavonoid +++ Fenolik +++ Saponin ++ Terpenoid + Alkaloid -Meyer - -Dragendroff -
Catatan : + (positif) = ada, - (negatif) = tidak ada
Hasil pada Tabel 1 menunjukkan bahwa dalam ekstra  kulit  buah jengkol yang  difermentasi  mengandung  cukup  banyak  senyawa  aktif.  ETT  kulit  buah jengkol  positif  mengandung  flavonoid,  fenolik,  saponin  dan  terpenoid  tetapi negatif untuk alkaloid. Kehadiran senyawa fitokimia seperti flavonoid dan fenolik menunjukkan  bahwa  ETT  kulit  buah  jengkol  berpotensi  menjadi  antioksidan (Pratt,  1992).  Ekstrak  kulit  buah  jengkol  mengandung  senyawa  metabolit sekunder  yang  berperan  sebagai  antibakteri,  antibiotik,  anti-inflamasi  dan antioksidan  (Yanti  et  al,  2015).  Berdasarkan  penelitian  sebelumnya  ekstrak tanaman  terfermentasi  (ETT)  dari  kulit  buah  jengkol  yang  dihasilkan  dari komposisi (250 g kulit  buah jengkol: 40 mL EM-4: 40 mL gula  aren Kg/L: 920 mL  air  suling)  diperoleh  setelah  fermentasi  15  hari.  ETT  memiliki  pH  4,30 dengan warna cokelat muda dan mengandung total senyawa fenolik 414,1 mg/L (Refilda et al, 2018).

## GC-MS dari Ekstrak Tanaman Terfermentasi Kulit Buah Jengkol
Kromatogram GC-MS dari ETT kulit buah jengkol menunjukkan bahwa ada 88 senyawa  yang terkandung didalamnya  seperti yang terlihat pada Gambar  1, beberapa senyawa yang memiliki luas puncak besar dari 1% dicantumkan pada Tabel. 2 dan strukturnya ditunjukkan pada Gambar. 2.
Analisis  GC-MS  menunjukkan  adanya  beberapa  senyawa  penting  yang ditunjukkan pada Gambar 1. Dari kromatogram, puncak yang berbeda diperoleh pada  waktu  retensi  yang  berbeda.  Berdasarkan  data  internal  standar  dari  MS, senyawa  yang  ditampilkan  dengan  menggunakan  berat  molekul.  Senyawa dengan  luaspuncak  besar  dari  1%  dicantumkan  pada  Tabel  2.  ETT  kulit  buah jengkol  mengandung  asam  suksinat  (1),  etil  hidrogen  suksinat  (2),  1,2,3- benzetriol  (3),  3,3-dimetilheksanal  (4),  L-prolin,  1  -metil-5-okso-metil  ester  (5), asam  3-metoksisinamat  (6),  dan  asam  heksadekanoat  (7)  dengan  struktur seperti yang ditunjukkan pada Gambar .2.
Gambar. 1 Kromatogram GC-MS dari ETT Kulit Buah Jengkol
Table 2. Senyawa yang mayoritas terdapat pada ETT kulit buah jengkol.
Waktu Retensi Nama senyawa % Luas Puncak 9,2 Asam suksinat 2,87 9,9 Etil hydrogen suksinat 2,93 10,4 1,2,3-Benzetriol 3,55 12,9 3,3-Dimetilheksanal 2,23 13,0 L-proline,1-metil-5-okso-metil ester 2,74 14,8 Asam 3-metoksisinamat 6,39 17,5 Asam heksadekanoat 2,20
Analisis  GC-MS  dari  Archidendron  bubalinum  Jack  dalam  ekstrak  n- heksana,  etil  asetat,  dan  metanol  ditemukan  adanya  asam  heksadekanoat  dan esternya,  yang  kemungkinan  besar  berkontribusi  dalam  aktivitas  antioksidan dan  antimikroba  (Irawan,  2018).  Asam  heksadekanoat  juga  terkandung  dalam ekstrak  metanol  daun  Justicia  adhatoda  (Linn)  yang  dapat  digunakan  sebagai insektisida (Jayapriya et al, 2015).

## Gambar  2.  Struktur  senyawa  yang  terdapat  pada  ETT  ekstrak  butanol  kulit
buah jengkol
Senyawa-senyawa di atas memiliki efek penghambatan terhadap jamur dan bakteri. Beberapa senyawa kimia yang berpotensi sebagai aktivitas antimikroba diekstraksi dari kulit buah jengkol. Akibatnya, aktivitas antimikroba dari ekstrak ini terutama tertarik pada keasaman total termasuk asam organik dan beberapa senyawa  bioaktif  yang  berasal  dari  tanaman  itu  sendiri.  Ekstrak  butanol  kulit buah  jengkol  yang  telah  difermentasi  juga  telah  diuji  pada  tanaman  tomat sebagai biopestisida dan pupuk hayati dan memberikan respon yang lebih baik untuk  melindungi  tanaman  tomat  dari  serangan  hama  dan  sumber  nutrisi (Refilda  et  al,  2018).  ETT  dari  limbah  kelapa  muda  mengandung  senyawa metabolit  sekunder  seperti  tanin  dan  alkaloid,  tanin  digunakan  sebagai antibakteri  dan  antijamur  pada  tanaman  kangkung  (Ipomoea  reptana).  Hama menyerang  Ipomoea  reptana  tanpa  pemberian  ETT,  sementara  Ipomoea  reptana yang diberi  dengan ETT  tidak diserang hama (Refilda et al, 2019).
Ekstrak kloroform dan n-heksana dari Albizia adhiantifolia Schumach dan Pteracarpus  angolensis  (DC)  mengandung  asam  n-heksadekanoat  (asam palmitat) (Mustapa  et  al, 2016).  Asam heksadekanoat diinduksi ke akar  melon, batang dan daun (HxIR), hasilnya menunjukkan tanaman melon tahan terhadap virus  (MNSV)  (Fernandez  et  al,  2017).  Analisis  GC-MS  ekstrak  etanol  daun Pleiospermium alatum  dan kulit batangnya memiliki potensi sebagai antioksidan kuat,  antibakteri,  anti-inflamasi,  antikanker,  antitumor,  pencegahan  kanker, (Parthipan et al, 2015).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  tanaman terfermentasi (ETT) dari kulit buah jengkol mengandung beberapa senyawa yang berperan  sebagai  pestisida.  Analisis  Kromatografi  Gas-Mass  Spectrometry  (GC- MS) menunjukkan ada 88 senyawa dalam ETT dari  kulit buah jengkol dengan 7 senyawa mayoritas (Asam suksinat; etil hidrogen suksinat; 1,2,3-benzetriol; 3, 3- dimetilheksanal;  L-prolin,  1-metil-5-okso-metil  ester;  asam  3-metoksi  sinamat; asam  heksadekanoat)  yang  sebagian  besar  dapat  berkontribusi  terhadap pestisida, penolak serangga, dan antimikroba.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis mengucapkan terimakasih kepada Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi,  Kementerian  Riset,  Teknologi  dan  Pendidikan  Tinggi,  yang  telah mendanai  penelitian  ini  sesuai  dengan  Perjanjian  Hibah  Pendidikan  Tinggi: PNBP  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Andalas; Nomor 14/UN.16.03.D/PP/FMIPA/2018.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdul.  M.  A,  Muslim.  N.  2010.  Pithecellobium  Jiringa:  A  Traditional  Medicinal Herb. WebmedCentral Complementary Medicine;1(12):WMC001371
Bakar, R. A,  Imran, A and Shaida, F. S. 2012. Effect of Pithecellobium Jiringa as Antimicrobial Agent Bangladesh J Pharmacol, (7): 131-134
Boadu,  K.  O,  Tulashei,  S.  K,  Anang,  M.  A,  Kpan,  D,  J.  2011.  Production  of natural insecticide from neem Leaves (Azadirachta indica). Asian J. Plant Sci. Res, 1(4), 33-38.
Feng,  Y,  Zang.  M,  Mujundar.  A.  S,  Gao.  Z.  2017.  Recent  Research  Process  of Fermented  Plant  Extract:  a  Review,  Trends  in  Food  Science  &  Technology. 65: 40-48.
Fernandez, E. C, Jose, A. N, Marta, S. S, Ivan, F, Pilar, G. A, Vicenta, P., Carmen. G. B. 2017.  Hexanoic acid treatment Prevents Systemic MNSV Movement in Cucumis  melo  Plants  by  Priming  Callose  Deposition  Correlating  SA  and OPDA Accumulation, Frontiers in Plant science, 8, 1-15
Hema,  R.,  Kumaravel,  S.,  Alagusundaram  K.  2011.  GC/MS  determination  of bioactive components of Murraya koenigii. J Am Sci.; 7(1):80-3.
Hussin.  M.  Z,  Osman.  A.  N,  Harun.  A,  Daud.  S,  2018.  Phytochemical  and Antimicrobial  Evaluation  of  Pithecellobium  jiringa  Stem  Barks  Extraxts. Malaysian Journal of Analytical sciences. 22(1): 123 - 127
Irawan  C.  2018.  Vollatile  Compound  Analysis  using  GC-MS,  Phytochemical Screening  and  Antioxidant  Activities  of  the  husk  of  “julang-jaling” (Archidendron  bubalinum  (Jack)  I.C  Nielsen)  from  Lampung,Indonesia. Pharmacogn J. 10(1):92-98.
Jayapriya.  G,  F.  Gricilda.  S.  2015.  GC-MC  analysis  of  bio-active  compounds  in methanolic leaf extract of  Justicia adhatoda  (Linn.), J. Pharmacognosy and Phytochem. 4(1): 113-117
Karabegovi  I,  Nikolova  M,  Veliˇckovi  D,  Stojiˇcevi  S,Veljkovi,  V,Lazi  M.  2011, Comparison  of  antioxidant  and  antimicrobial  activities  of  methanolic extracts  of  the  Artemisia  sp.  recovered  by  different  extraction  techniques. Chin J Chem Eng; 19(3): 504-511.
Leng,  P,  Zhiming.  Z,  Guangtang.  P,  Maojun.  Z,  Applications  and  development trends  in biopesticides, African Journal of Biotechnology,  2011,  10(86),  pp. 19864-19873.
Mustapa. N, Abubakar, Ranner R. T. Majinda, GC-MS Analysis and Preliminary Antimicrobial  Activity  of  Albizia  adiantifolia  (Schumach)  and  Pterocarpus angolensis (DC), Medicines, 2016, 3(3) : 1-9
Nazami,  R.,  Purnaman,  D,  Umar,  Eni,  H.  The  Effect  of  Fermentation  on  Total Phenolic,  Flavonoid,  and  Tanin,  content  and  Its  Relation  to  antibacterial activity in Jaruk Tigarun (Crataeva nurvala, Buch HAM). International Food Research Journal, 2016, 23 (1), 309-315.
Parthipan.  B,  Suky.  MGT,  Mohan  V.R.  2015.  GC-MS  Analysis  of Phytocomponents  in  Pleiospermium  Alatum  (Wall.ex  Wight  and  Arn) Swingle  (Rutaceae).  Journal  of  pharmacognosy  and  phytochemistry.:  4(1): 216-222.
Pratt,  D.  E.  1992.  Natural  Antioxidants  from  Plant  Material  in  Phenolic Compounds  in  food  and  their  Effects  on  Health  (Vol.  II).  Antioxidants  and Cancer  Prevention;  Huang,  M-T.  Ho,  C-T,  Lee,  C,  Eds  :  ACS  Symposium Series 507; American Chemical Society, Washington DC. 54-71
Rajput.P.A,  Patil.S.A.  Synthesis,  Antimicrobial  Activity  and  Docking  Study  of Substituted  Bis  (2-(Phenyl  Carbamoyl)Phenyl)  Phthalate.  IOSR  Journal  of Applied Chemistry, 2016, Vol 9, Issue 11, Ver.II 62-69
Refilda, Yasmine Sabrina, Zilfa. 2019. Characterization and Utilization of Young Coconut  Waste  (Cocos  Nucifera  L)  for  Manufacturing  Fermented  Plant Extracts  that  Potential  as  A  Natural  Fertilizer  and  Pesticides.  Research Journal of Chemistry and Environnment. 23(2), 23-30
Refilda,  Pranesa,  T.O,  Emil,  S,  Indrawati.  2018.    Utilization  of  fermented  ngapi nut peel (Pithecellobium jiringa prain) as Natural Fertilizer and Pesticides on tomatoes  (Solanum  lycopersicum  Mill)  plant.  J.  Phys:  Conf.  Ser.    1116 042029, 1-9.
Stanisavljevi  I,  Stojiˇcevi  S,  Veliˇckovi  D,  Veljkovi  V,  Lazi  M.  2009.  Antioxidant and  antimicrobial  activities  of  echinacea  (Echinacea  purpurea  L.)  extracts obtained  by  classical  and  ultrasound  extraction.  Chin  J  Chem  Eng.  17(3): 478-483.
Yanti,  F.  Irnawati,  M.  Vivian,  Y.  R.  E.  Wulandari.  2015.  Extraction  Yield  and Antiooxidant  Activity  of  Biomolecule  and  Bioactive  Fractions  from  Seed  and Peel Parts of Pithecellobium jiringa, Scholars  Academic Journal of Biosciences (SAJB). 9(3): 790-795
Zekeya.  N,  Chacha.  M,  Shahada.  F  and  Kidukuli.  A.  2014.  Analysis  of Phytochemical Composition of Bersama abyssinica by Gas Chromatogravy-
Mass  Spectrometry.  Journal  of  Pharmacognosy  and  Phytochemistry. 3(4):246-252