## JIFI (JURNAL ILMIAH FARMASI IMELDA)
Vol.2 No.2, Maret 2019, pp. 82-88 ISSN: 2597-7164 (Online), 2655-3147 (Print) https://jurnal.uimedan.ac.id/index.php/JURNALFARMASI
 82

## PENENTUAN CAMPURAN PARASETAMOL, PROPIFENAZON DAN KOFEIN SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET DENGAN METODE PRINCIPAL COMPONENT REGRESSION DAN RASIO ABSORBANSI TAHUN 2018
Ainil Fithri Pulungan Program Studi S1 Farmasi STIKes Imelda Medan
Article Info

## ABSTRACT
In this study, analysis of Principal Component Regression (PCR) and Absorbance  Ratio  (RA)  spectrophotometric  methods  will  be  carried out to determine levels of PCT, PRO and KOF in tablet preparations without  any  separation  stage,  so  that  this  method  is  expected  to  be applied  routinely  by  interested  parties.  The  recovery  test  is  carried out by measuring the percentage of recovery in three specific ranges, namely: 80%, 100% and 120%. Where in each specific range, 70% of the  samples  (PCT,  PRO  and  KOF)  were  analyzed  and  30%  came from  the  added  standard.  Then  the  sample  (tablet)  and  standard mixture were analyzed by the same procedure as for the sample.
Keywords: Paracetamol Propifenazone Kofein Chemometrics UV Spectrophotometry Regression and Ratio Absorbance This is an open access article under the CC BY-SA license.

## Corresponding Author:
Ainil Fithri Pulungan, Program Studi S1 Farmasi, STIKes Imelda Medan, Jl. Bilal No. 52 Kelurahan Pulo Brayan Darat I Kecamatan Medan Timur, Medan - Sumatera Utara. Email: ainilfithri240@gmail.com

## 1. INTRODUCTION
Obat yang beredar sebagian besar adalah kombinasi dari beberapa bahan aktif, yang masing-masing bertujuan  untuk  meningkatkan  efek  terapi  obat  dan  kemudahan  dalam  pemakaiannya  (Naid  et  al,  2011). Tablet yang mengandung parasetamol (PCT), propifenazon (PRO) dan kofein (KOF) merupakan kombinasi yang  paling  banyak  digunakan  untuk menghilangkan rasa nyeri.  PCT,  PRO  dan  KOF dalam  kombinasinya menyebabkan  pengurangan  jumlah  prostaglandin,  sedangkan  KOF  juga  diketahui  dapat meningkatkan  efek analgesik  PCT  dan  KOF  secara  sinergis,  manfaat  dari  kombinasi  obat  ini  dapat  mengurangi  sakit  kepala, nyeri  otot,  neuralgia,  sakit  punggung,  nyeri  sendi,  nyeri  rematik,  migrain,  sakit  gigi  dan  nyeri  haid. Kombinasi ini juga terbukti efektif untuk penyakit demam yang berasal dari infeksi bakteri atau virus, dengan efek samping yang terbatas dan kombinasi ini cocok untuk semua umur (Delvadiya et al, 2011).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Aktas  (2014),  telah  melakukan  analisis  PCT  dan  KOF  dengan menggunakan  metode  kemometrik  diantaranya  metode  Regresi  Kuadrat  Terkecil  Sebagian  ( Partial  Least Square ,  PLS),  Regresi  Komponen  Utama  ( Principal  Component  Regression ,  PCR)  dan Artificial  Neural Network (ANN),  hasil  penelitiannya  menunjukkan  bahwa  metode  spektrofotometri  yang  dikombinasikan dengan  kalibrasi  multivariat  mampu  menetapkan  kadar  senyawa  multikomponen  yang  overlapping  pada
83 spektrum ultaviolet.
Penelitian yang dilakukan oleh Saraan (2015), dengan menggunakan metode zero crossing derivatif spectrophotometric pada penetapan kadar PCT, IBU, KOF menggunakan pelarut dapar posfat pH 7,2, hasil dari penelitiannya menunjukkan bahwa metode tersebut dapat digunakan dalam menentukan kadar zat aktif secara simultan tanpa melakukan tahap pemisahan sebelumnya.
Penelitian  yang  dilakukan  Dzulfianto  (2015),  dengan  menggunakan  metode  spektrofotometri ultraviolet  kemometrika  Regresi  Kuadrat  Terkecil  Sebagian  (RKTS), hasil dari  penelitiannya  menunjukkan bahwa metode kalibrasi multivariat dapat digunakan dalam menentukan kadar zat aktif secara simultan tanpa melakukan tahap pemisahan.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Sianipar  (2017),  dengan  menggunakan  metode  spektrofotometri ultraviolet  dengan  teknik zero-crossing ,  rasio zero-crossing dan mean  centering  of  ratio  spectra , menunjukkan bahwa hasil dari penelitiannya memenuhi syarat validasi metode dengan menggunakan pelarut campuran dapar posfat pH 7,2 dan metanol dengan perbandingan 70:30.
Metode Spektrofotometri Kemometrik dapat diaplikasikan pada campuran sediaan obat yang terdiri dari dua atau tiga komponen obat atau lebih dan mempunyai panjang gelombang berdekatan ketika dilakukan tumpang tindih spektrumnya.
Metode Spektrofotometri Kemometrik menggunakan metode multivariat yang menawarkan banyak keuntungan  dalam  melakukan  analisis  spektroskopi  kuantitatif  berbagai  jenis  campuran  obat  (Muchlisyam dan  Pardede,  2016).  Bila  dibandingkan  dengan  KCKT,  metode  spektrofotometri  kemometrik  memiliki tahapan yang lebih mudah dilakukan dalam penelitian, serta alat yang digunakan memiliki biaya operasional yang relatif lebih murah dan waktu untuk menentukan hasil analisisnya lebih efisien.
Metode  Rasio  Absorbansi  ( Q-Absorbance  Ratio )  melibatkan  pengukuran  absorbansi  pada  dua panjang  gelombang  yaitu titik iso-absorptif  dan  panjang  gelombang maksimum  (Muchlisyam  dan  Pardede, 2016).
Penelitian yang dilakukan dengan menggunakan metode Rasio Absorbansi (RA) untuk menetapkan kadar  obat  secara  simultan,  seperti  yang  dilakukan  oleh  Chitlange  et al,  (2009)  telah melakukan  penetapan kadar dexibuprofen dan parasetamol secara simultan  dengan menggunakan metode RA, panjang gelombang yang dihasil kan pada titik iso absorptif dan panjang gelombang maksimum adalah 235,5 nm dan 249,5 nm.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Pandey  (2013)  telah  menetapkan  kadar  lamivudin  dan  isoniazid dengan  menggunakan  metode  RA  dengan  menggunakan  dua  panjang  gelombang  diantaranya  panjang gelombang maksimum 272 nm dan panjang gelombang isoabsorpsi 246 nm dengan konsentrasi larutan 5-30 µg/mL dan telah divalidasi sesuai pedoman International Conference on Harmonization (ICH).
Berdasarkan  uraian  diatas,  dalam  penelitian  ini  akan  dilakukan  analisis  metode  spektrofotometri Principal Component Regression (PCR) dan Rasio Absorbansi (RA) untuk penetapan kadar PCT, PRO dan KOF  dalam  sediaan  tablet  tanpa  adanya  tahap  pemisahan,  sehingga  metode  ini  diharapkan  dapat diaplikasikan secara rutin oleh pihak-pihak yang berkepentingan.

## Perumusan Masalah
a. Apakah  pelarut  dapar  posfat  pH  7,2 merupakan  jenis  pelarut  yang lebih  baik  jika  dibandingkan  dengan pelarut metanol, campuran  dapar posfat pH 7,2 dan metanol dengan perbandingan (90:10; 70:30; 50:50; 30:70; 10:90) untuk menetapkan kadar PCT, PRO dan KOF pada sediaan tablet?
b. Apakah metode  RKU  dan  RA  yang  dilakukan,  dapat  diaplikasikan  untuk  menetapkan  kadar  PCT,  PRO dan KOF pada sediaan tablet?
c. Apakah metode RKU dan RA memenuhi syarat validasi metode?

## Hipotesis
a. Pelarut  dapar  posfat  pH  7,2  merupakan  jenis  pelarut  yang  lebih  baik  jika  dibandingkan  dengan  pelarut metanol,  campuran  dapar  posfat  pH  7,2  dan  metanol  dengan  perbandingan  (90:10;  70:30;  50:50; 30:70; 10:90) untuk menetapkan kadar PCT, PRO dan KOF pada sediaan tablet.
b. Metode  RKU dan RA dapat dilakukan dan dapat diaplikasikan untuk menetapkan kadar PCT, PRO dan KOF pada sediaan tablet.
c. Metode RKU dan RA yang dilakukan memenuhi syarat validasi metode.

## Tujuan Penelitian
a. Untuk  dapat  menentukan  jenis  pelarut  terbaik  dengan  melakukan  optimasi  pada  pelarut  metanol,  dapar posfat  pH  7,2,  campuran  dapar  posfat  pH  7,2  dan  metanol  dengan  perbandingan  (90:10;  70:30;  50:50; 30:70; 10:90) pada penetapan kadar PCT, PRO dan KOF pada sediaan tablet.
b. Untuk  dapat  dapat  mengaplikasikan  metode  RKU  dan  RA  pada  penetapan  kadar  PCT,  PRO  dan  KOF pada sediaan tablet.
84
c. Untuk dapat mengetahui apakah metode RKU dan RA memenuhi syarat validasi metode.

## Manfaat Penelitian
Diharapkan metode hasil pengembangan dari penelitian ini dapat menjadi salah satu metode yang dapat diaplikasikan oleh instansi terkait untuk menentukan kadar PCT, PRO dan KOF dalam sediaan tablet.

## 2. RESEARCH METHOD
Penelitian ini bersifat eksperimental yang akan dilakukan pada bulan Maret 2018 sampai Juni 2018 di Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Univesitas Sumatera Utara.

## Alat dan Bahan
Alat-alat
Spektrofotometer  UV-Vis  1800  (Shimadzu)  serta  seperangkat Personal  Computer (PC)  yang dilengkapi  dengan  software  UV-Probe  2.34,  Microsoft  Excel  dan  Minitab  2017,  kuvet  1  cm,  alat-alat  gelas (Oberoi), lumpang dan alu, neraca analitik (Sartorius). Sonikator (Branson 1510).
Bahan-bahan
Semua pereaksi yang digunakan adalah grade analysis kecuali dinyatakan lain. PCT (Anqiu Lu’an Pharmaceutical  Co.  Ltd),  PRO  (Shandong  Xinhua  Pharmaceutical  Co.  Ltd),  KOF  (PT.  Kimia  Farma), metanol  (E-Merck),  akuabidestilata  (PT.  Ika  Pharmindo),  kertas  saring  whatman  no.42,  tablet  P  (PT. Konimex) dan tablet S (PT. Bayer Indonesia).

## 3. RESULTS AND ANALYSIS
Prosedur Penelitian
1. Pembuatan Pelarut Kalium Dihidrogenfosfat 0,2 M
Dilarutkan  27,218  g  kalium  dihidrogenfosfat  dalam  akuabidestilata,  dicukupkan  volumenya  hingga 1000 mL dengan akuabidestilata.

## 2. Pembuatan Pelarut Natrium Hidroksida 0,2 N
Dilarutkan  8  g  natrium  hidroksida  dalam  akuabidestilata,  dicukupkan  volumenya  hingga  1000  mL dengan akuabidestilata.
3. Pembuatan Pelarut Dapar Posfat pH 7,2
Dicampurkan  50,0  mL  kalium  dihidrogenfosfat  0,2  M  dengan  34,7  mL  natrium  hidroksida  0,2  N, diencerkan dengan akuabidestilata hingga 200 mL.

## Optimasi Pelarut
Dilakukan  optimasi  dengan  mengukur  serapan  yang  dihasilkan  oleh  PCT,  PRO  dan  KOF  dalam metanol, dapar fosfat pH 7,2, campuran dapar  posfat pH 7,2 dan metanol dengan perbandingan 90:10; 70:30; 50:50; 30:70; 10:90.

## 1. Pembuatan Larutan Induk Baku Parasetamol
Ditimbang  dengan  seksama  50  mg  baku  PCT  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  100  mL, dicukupkan volumenya dengan pelarut sampai garis tanda (500µg/mL)(LIB I), kemudian dipipet 5 mL dari LIB I kedalam labu ukur 100 mL dan ditambah pelarut hingga garis tanda (25µg/mL) (LIB II).

## 2. Pembuatan Larutan Induk Baku Propifenazon
Ditimbang  dengan  seksama  50  mg  baku  PRO  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  100  mL, dicukupkan volumenya dengan pelarut sampai garis tanda (500µg/mL)(LIB I), kemudian dipipet 5 mL dari LIB I kedalam labu ukur 100 mL dan ditambah pelarut hingga garis tanda (25µg/mL) (LIB II).

## 3. Pembuatan Larutan Induk Baku Kofein
Ditimbang  dengan  seksama  50  mg  baku  KOF  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  100  mL, dicukupkan volumenya dengan pelarut sampai garis tanda (500µg/mL)(LIB I), kemudian dipipet 5 mL dari LIB I kedalam labu ukur 100 mL dan ditambah pelarut hingga garis tanda (25µg/mL) (LIB II).

## 4. Pembuatan Spektrum Serapan Parasetamol
Dipipet  masing-masing  3;  4,5;  6;  7,5;  9;  10,5  mL  dari  LIB  II  kedalam  labu  ukur  25  mL,  kemudian dicukupkan  volumenya  dengan  menggunakan  pelarut  sampai  garis  tanda  untuk  mendapatkan  larutan  PCT konsentrasi  3;  4,5;  6;  7,5;  9;  10,5  µg/mL  secara  berturut-turut.  Dari  larutan  tersebut  dibuat  spektrum serapannya.
5. Pembuatan Spektrum Serapan Propifenazon
Dipipet masing-masing 5; 7,5; 10; 12,5; 15; 17,5 mL dari LIB II kedalam labu ukur 25 mL, kemudian dicukupkan  volumenya  dengan  menggunakan  pelarut  sampai  garis  tanda  untuk  mendapatkan  larutan  PRO konsentrasi  5;  7,5;  10;  12,5;  15;  17,5  µg/mL  secara  berturut-turut.  Dari  larutan  tersebut  dibuat  spektrum serapannya.

## 6. Pembuatan Spektrum Serapan Kofein
Dipipet  masing-masing  4,5;  6,5;  8,5;  10,5;  12,5;  13  mL  LIB  II  kedalam  labu  ukur  25  mL,  kemudian dicukupkan  volumenya  dengan  menggunakan  pelarut  sampai  garis  tanda  untuk  mendapatkan  larutan  KOF konsentrasi  4,5;  6,5;  8,5;  10,5; 12,5; 13  µg/mL  secara  berturut-turut.  Dari  larutan tersebut  dibuat  spektrum serapannya.
7. Pembuatan Spektrum Serapan Campuran Parasetamol, Propifenazon, Kofein
Dibuat  larutan  campuran  PCT,  PRO  dan  KOF  dengan  cara  dipipet  6  mL  LIB  II  PCT,  10  mL  LIB  II PRO  dan  8,5  mL  LIB  II  KOF  kedalam  labu  ukur  25  mL,  kemudian  dicukupkan  volumenya  menggunakan pelarut sampai garis tanda. Dari larutan tersebut dibuat spektrum serapannya.
8. Pembagian  Spektrum  Serapan  Parasetamol,  Propifenazon  Dan  Kofein  Secara  Double  Divisor (Dua Pembagi) Pada Metode Rasio Absorbansi
Pembagian  spektrum  PCT  dibagi  dengan  spektrum  PRO  10  µg/ml  dan  spektrum  KOF  8,5  µg/ml. Pembagian spektrum PRO dibagi dengan spektrum PCT 6 µg/ml dan spektrum KOF 8,5 µg/ml. Pembagian spektrum  KOF  dibagi  dengan  spektrum  PCT  6  µg/ml  dan  PRO  10  µg/ml.  Dilakukan  pembagian  dengan menggunakan bantuan software UV-probe.

## 9. Pembuatan Larutan Kalibrasi Pada Metode PCR
Dibuat  larutan  kalibrasi  dengan  memipet  sejumlah  tertentu  larutan  standar,  kemudian  dimasukkan kedalam  labu  ukur  10  mL, dilarutkan  dengan pelarut  sampai  garis tanda.  Larutan  standar  digunakan  untuk mengatur konsentrasi  kalibrasi dan validasi dengan nilai kisaran 3 – 10,5 µg/mL untuk PCT, 5 – 17,5 µg/mL untuk PRO dan 4,5 – 13 µg/mL untuk KOF yang diukur pada 200 - 400 nm.

## Penetapan Kadar Campuran Parasetamol, Propifenazon Dan Kofein Pada  Sediaan Tablet P
Ditimbang  dan  diserbukkan  20  tablet  yang  mengandung  PCT  250  mg,  PRO  150  mg  dan  KOF  50 mg. Timbang seksama sejumlah serbuk setara 50 mg PCT, dimasukkan kedalam labu ukur 50 mL, dilarutkan dengan  pelarut  kurang  lebih  25  mL,  disonikasi  selama  10  menit,  kemudian  ditambahkan  dengan  pelarut sampai garis tanda. Saring larutan dengan kertas saring Whatman® no.42, buang 10 mL filtrat pertama. Pipet 0,16  mL  filtrat  kedalam  labu  ukur  25  mL,  kemudian  ditambahkan  dengan  pelarut  sampai  garis  tanda. Absorbansi kemudian diukur sesuai dengan prosedur hasil optimasi dengan menggunakan metode  PCR dan RA.

## 1. Tahap Pengolahan Data Dengan Analisis Multivariat Pada PCR
Spektrum  yang  dihasilkan  menunjukkan  spektrum  yang  saling  tumpang  tindih,  sehingga  untuk memprediksi  konsentrasi  kandungan  obat  dalam  campuran  harus  diolah  dengan  pengolahan  data  secara analisis multivariat. Data analisis berupa absorbansi pada panjang gelombang 200 – 400 nm dengan berbagai variasi  konsentrasi  dibentuk  dalam  sebuah  matriks  data.  Matriks  data  diuji  normalitasnya  dengan  uji normalitas  kemudian  diolah  dengan  metode  pengolahan  data  secara  analisis  multivariat  yaitu  PCR menggunakan software Minitab 2017.

## Validasi Metode
1. Linearitas, batas deteksi ( Limit of Detection , LOD) dan batas kuantifikasi ( Limit of Quantification , LOQ)
Dipipet masing-masing 3; 4,5; 6; 7,5; 9; 10,5 mL dari (25µg/mL) (LIB II) PCT kedalam labu ukur 10 mL, kemudian dicukupkan volumenya dengan menggunakan pelarut sampai garis tanda untuk mendapatkan konsentrasi larutan PCT 3; 4,5; 6; 7,5, 9; 10,5 µg/mL.
Dipipet masing-masing 5; 7,5; 10; 12,5; 15; 17,5 mL dari (25µg/mL) (LIB II) PRO kedalam labu ukur 10  mL,  kemudian  dicukupkan  volumenya  dengan  menggunakan  pelarut  sampai  garis  tanda  untuk mendapatkan konsentrasi larutan PRO 5; 7,5; 10; 12,5; 15; 17,5 µg/mL.
Dipipet  masing-masing  4,5;  6,5;  8,5;  10,5;  12,5;  13  mL  dari  (25µg/mL)  (LIB  II)  KOF  kedalam  labu ukur  10  mL,  kemudian  dicukupkan  volumenya  dengan  menggunakan  pelarut  sampai  garis  tanda  untuk mendapatkan konsentrasi larutan KOF 4,5; 6,5; 8,5; 10,5; 12,5; 13 µg/mL.
Larutan–larutan  diatas  dilihat  serapannya  pada  λ  analisis  masing-masing  zat  yang  telah  ditentukan. Kemudian dilakukan analisis hubungan antara konsentrsi dengan serapan untuk masing-masing zat, sehingga didapat persamaan regresi linear dan juga nilai korelasinya. y = a + bx
Berdasarkan absorbansi pada λ analisis dilakukan pula perhitungan LOD dan LOQ.
SD =   2 2   
n Yi Y
86
LOD = slope SD x 3,3 LOQ = slope SD x 10
Keterangan : SD     = Standard Deviation Slope = b (y=ax+b).

## 2. Uji Perolehan Kembali
Uji  perolehan  kembali  dilakukan  dengan  pengukuran  persentase  perolehan  kembali  pada  tiga  rentang spesifik, yakni: 80%, 100% dan 120%. Dimana pada masing-masing rentang spesifik digunakan 70% sampel (PCT,  PRO  dan  KOF)  yang dianalisis  dan  30%  berasal  dari  baku  yang  ditambahkan.  Kemudian  campuran sampel  (tablet)  dan  baku  dianalisis  dengan  prosedur  yang  sama  seperti  pada  sampel.  Persentase  perolehan kembali dihitung menggunakan rumus:
Y = CF−CA CA ∗ x 100%
Keterangan: Y  = Persentase perolehan kembali C F = Jumlah analit yang terukur C A = Jumlah analit dalam sampel (70% berasal dari sampel) C A ∗ = Jumlah bahan baku yang ditambahkan (30% berasal dari baku)

## 3. Pengujian Presisi
Presisi  dinyatakan  dengan  SD  atau  RSD  dari  serangkaian  data.  Untuk  mencari  RSD  menggunakan rumus :
RSD = SD X x 100%
Keterangan: RSD   = Relative standard deviation SD     = Standard deviation X       = Data yang telah dirata-ratakan

## 4. Analisis Data Secara Statistik
Uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah uji t, menggunakan rumus:
t hitung = X−X ̅ SD/√n kadar sebenarnya dengan taraf kepercayaan 99%, dihitung dengan menggunakan rumus: µ = 𝑋̅ ± t( 1 1 2 𝛼) dk x 𝑆𝐷 √𝑛 Keterangan : µ     = interval kadar sebenarnya X ̅ = kadar rata-rata sampel X    = kadar sampel t      = harga t tabel sesuai dengan dk = n-1 dk   = derajat kebebasan (n-1) α     = tingkat kepecayaan SD  = standar deviasi n     = jumlah perlakuan

## 4. CONCLUSION
Uji  perolehan  kembali  dilakukan  dengan  pengukuran  persentase  perolehan  kembali  pada  tiga rentang spesifik, yakni: 80%, 100% dan 120%. Dimana pada masing-masing rentang spesifik digunakan 70% sampel  (PCT,  PRO  dan  KOF)  yang  dianalisis  dan  30%  berasal  dari  baku  yang  ditambahkan.  Kemudian campuran sampel (tablet) dan baku dianalisis dengan prosedur yang sama seperti pada sampel.

## REFERENCES
Abdel-Hay, M., Azza, A. G., Ekran, M.H., and  Tarek,  S.B.  (2008).  Derivative  and  Derivative  Ratio  Spectrophotometric  Analysis  of  Antihypertensive Ternary Mixture of Amiloride Hydrochloride, Hydrochlorthiazide and Timolol Maleate. Journal of The Chinese Chemical Society . Vol 55 (01): 971.
Adupa,  S.,  Adupa,  Sr.,  Simhadri,  H., and  Kalidindi,  S.V.  (2014).  Simultaneous  Estimation  of  Paracetamol, Caffeine  and  Propyphenazone  in  Bulk  and  Pharmaceutical  Dosage  Form  by  RP-HPLC. Journal  of Pharmacy Research . Vol. 8(3): 331 – 335.
Aktas,  A,  H  and  Kitis,  F.  (2014).  Spectrophotometric  Simultaneous  Determination  of  Caffeine  and Paracetamol  Commercial  Pharmaceutical  by  Principal  Component  Regression,  Partial  Least  Squares and Artificial Neural Networks Chemometric Methods. Coartica Chemica Acta . Vol. 87(01) : 69 – 74.
Appasaheb,  H.S.,  Subhash,  K.P.,  Atmaram,  D.V.,  and  Shankar,  D.P.  (2013).  Simultaneous  Estimation  and Validation  of  Paracetamol,  Chlorpheniramine  Maleate  and  Phenylephrine  Hydrochloride  in  Bulk  and Tabalet Dosage Form By Using Different Spectrophotometric Method. International Research Journal of Pharmacy . Vol 4(10): 39-43.
Bagary,  R,  I.,  Kady,  E,  F  and  Matari,  A,  A.  (2017).  Simultaneous  Spectrophotometric  Determination  of Diclofenac  Sodium,  Paracetamol  and  Chlorzoxazone  in  Ternary  Mixture  Using  Chemometric  and Artificial  Neural  Networks  Techniques. Asian  Journal  Of  Pharmaceutical  Clinical  Research .  Vol.  10 (11) : 225 – 230.
Chitlange,  S,  S.,  Soni,  R.,  Wankhede,  S,  B  and  Kulkarni,  A,  A  (2009).  Spectrophotometric  Methods  for Simultaneous Estimation of Dexibuprofen and Paracetamol. Asian J. Research Chem . Vol. 02(01) : 30 – 33.
Dachriyanus,  (2004). Analisis  Struktur  Senyawa  Organik Secara  Spektroskopi .  Padang:  Andalas  University Press, Hal. 8-9.
Day,  R.A.,  and  Underwood,  A.L.  (1998). Quantitative  Analysis .  Sixth  Edition.  Penerjemah:  Sopyan,  I. Analisis Kimia Kuantitatif. Edisi Keenam. Jakarta: Erlangga. Hal. 396,399. Delvadiya,  K.,  Kimbahune,  R.,  Kabra,  P.,  Sunil,  K.,  and  Patel,  P.  (2011).  Spectrophotomeric  Simultaneous Analysis of Paracetamol, Propyphenazone and Caffeine in Tablet Dosage Forms. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Science . Vol. 3 (3): 170- 174. Depkes  RI.  (1995). Farmakope  Indonesia .  Edisi  Keempat.  Jakarta:  Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia. Hal. 254, 649, 1067.
Depkes RI. (1979). Farmakope Indonesia . Edisi Ketiga. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Hal. 742.
Dzulfianto,  A.  (2015). Analisis  parasetamol,  kofein  dan  propifenazon  dengan  metode  spektrofotometri  UV dan kemometrika tanpa tahap pemisahan . Yogyakarta. Skripsi. Universitas Sanata Dharma. Hal. 1. Ermer, J and John, H. M. M. (2005). Methdod Validation in Pharmaceutical Analysis. Weinheim: WILEY- VCH Verlag GmbH dan Co. KgaA. Hal 3-19
Gandjar,  I.  G  .,  dan  Rohman,  A.  (2012). Analisis  Obat  secara  Spektrofotometri  dan  Kromtografi . Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal. 64, 92.
Ganesh,  K.  D., Chimkode,  R.  M.,  Gaurav,  K.,  Yogesh,  K.,  Rohini,  K.,  Anita,  G., and  Ashwini,  K.  (2015). Development  and  Validation  of  UV-  Visible  Spectrophotometric  Methods  For  the  Estimation  of Paracetamol  and  Diclofenac  Sodium  in  Bulk  and  Tablet  Dosage  Form. International  journal  of pharmaceutical research and education . Vol. 5 :52.
Gohel,  R.  V.,  Parmar,  S.  J., and  Patel,  B.  A.  (2014).  Development  and  Validation  of  Double  Divisor  Ratio Spectra Derivative Spectrophotometric Method for Simultaneous Estimation of Olmesartan Medoxomil, Amlodipin  Besylate  and  Hydrochlortiazide  in  Tablet  Dosage  Form. International  Journal  of  Pharm Tech Research . 06 (05): 1518-1525.
Guidline. (2005). Validation of Analytical Procedures : Text and Methodology Q2 (R1). USA. Hal. 6-13 Kamal. A.H., El-Malla. S.F., and Hammad. S.F. (2016). A Review On UV Spectrophotometric  Methods For Simultaneous Multicomponent Analysis. European journal pharmaceutical and medical research. Vol. 3(2), 348-360.
Khopkar, S.M. (1990). Basic Concepts of Analytical Chemistry . Penerjemah: Saptoraharjo, A., dan Nurhadi,
A. Konsep Dasar Kimia Analitik . Jakarta: UI-Press. Hal. 215.
Lotfy,  H.M.,  and  Saleh,  S.S.  (2016).  Recent  Development  in  Ultraviolet  Spectrophotometry  Through  The Last  Decade  (2006  –  2016):  A  Review. International  Journal  of  Pharmacy  and  Pharmaceutical Sciences. Vol. 8(10): 232.
Moffat, A.C., Osselton,M.D and Widdop, B. (2004). Clarke’s Analysis of Drug And Poisons . Thirth Edition. London: Pharmaceutical Press. Electronic version. Hal. 686, 688.
88
Moffat,  A.C.,  Osselton,  M.D  and  Widdop,  B.  (2011). Clarke’s  Analysis  of  Drugs  and  Poisons .  Fourth Edition. London: Pharmaceutical Press. Hal. 1337, 2138. Muchlisyam  dan  Pardede,  T.R.  (2016). Spektrofotometri  dan  Analisis  Multikomponen  Obat .  Medan:  USU Press. Hal. 7, 8, 12, 29, 31, 32, 35, 36. Mulja, M., dan Suharman. (1995). Analisis Instrumental . Surabaya: Airlangga University Press. Hal. 34, 52.
Naid,  T.,  Kasim,  S.  dan  Pakaya,  M.  (2011),  Penetapan  Kadar  Parasetamol  dalam  Tablet  Kombinasi Parasetamol dengan Kafein Secara Spektrofotometri  Ultraviolet sunar tampak. Majalah  Farmasi dan Farmakologi . Vol. 15 : 77 – 82.
Pandey,  G  and  Mishra,  B.  (2013).  A  New  Analytical  Q-  Absorbance  Ratio  Method  Development  and Validation fot Simultaneous Estimation of Lamnivudine and Isoniazid. Hindawi. Vol. 2013.Hal. 1-5. Prajapati, P.R., Rathod, D. N., Modi, V. S., and Basuri, T. (2016). Chemometric and its Applications in UV Spectrophotometry . International Journal of Pharmaceutical Chemistry  and Analysis . Vol. 3(1), 43-48. Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis . Cetakan Pertama. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal. 224-233, 240-243.
Rohman,  A.  (2014). Statistika  dan  Kemometrika  Dasar  Dalam  Analisis  Farmasi .  Cetakan  Pertama. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Hal. 245.
Saraan, S.M.D., Sinaga, S.M., and Muchlisyam (2015). Development Method for Determination of Ternary Mixture of Paracetamol, Ibuprofen and Caffeine in Tablet Dosage Form Using Zero-crossing Derivative Spectrophotometric. International Journal of PharmTech Research . Vol. 7. No. 2, 349-353.
Satiadarma, K., Mulja, H.M., Tjahjono, D.H.,dan Kartasasmita, R.E. (2004). Asas Pengembangaan Prosedur Analisis . Edisi Pertama. Surabaya: Airlangga University Press. Hal. 46-47. Sianipar,  A.  Y.  (2017). Aplikasi  dan  Validasi  Metode  Spektrofotometri  Ultraviolet  Secara  Spektrofotometri Derivatif  dan  Mean  Centering  of  Ratio  Spectra  Terhadap  Ternary  Mixture  yang  Mengandung Parasetamol, Propifenazon dan Kofein . Tesis. Medan: Universitas Sumatera Utara. Hal. 1.
Simanjuntak,  H.L  dan  Putra,  E.D.L. Penetapan  Kadar  Simultan  Binary  Mixture  Parasetamol  dan  Kofein dalam  Sediaan  Tablet  secara  Spektrofotometri  Ultraviolet  dengan  Metode  Mean  Centering  of  Ratio Spectra (MCR). Skripsi. Medan: Universitas Sumatera Utara. Hal. 64. Singh, G., Kumar, D., Sharma, D., Singh, M and Kaur, S. (2012). Q- Absorbance Ratio Spectrophotometric Method for the Simultaneous Estimation of Prednisolone and 5- Amino Salicylic Acid in Tablet Dosage Form. Journal of Applied Pharmaceutical Science . Vol. 02(06) : 222 – 226.
Soponar,  F.,  Moise,  G.,  Staniloae,  D  and  David,  V.  (2013).  Simultaneous  Determination  Of  Paracetamol, Propyphenazone and Caffeine From Pharmaceutical Preparations in the Presence Of Related Substances Using a Validated HPLC-DAD Method . Review Article . 58 (4-5): 433-440.
Tjay,  T.  H.  dan  Rahardja  K.  (2007). Obat-obat  Penting .  Edisi  Keenam.  Cetakan  Pertama.  Jakarta:  Elex Media Komputindo. 664.
Üstűndag,  O.,  Dinҫ,  E.,  Özdemir,  N  and  Tilkan,  G.  (2015).  Comparative  Application  of  PLS  and  PCR Methods to Simultaneous Quantitative Estimation and Simultaneous Dissolution Test of Zidovudine  – Lamivudine Tablets. Acta Chim Slov . Vol. 62 :437 – 444.
Vijayageetha, R and Shantha, A. (2017). Simultaneous Spectrophotometric Determination of Etoricoxib and Paracetamol  in  Tablets  by  Chemometric  Methods. European  journal  pharmaceutical  and  medical research. Vol. 04(06) : 159 – 164.