Jurnal Pro-Life, Volume 11 Nomor 2, Juli 2024

## Vitex trifolia L. (Botani, Metabolit Sekunder, dan Bioaktivitasnya)
Marina Silalahi 1* , Revis Asra 2
1 Program Studi Pendidikan Biologi, FKIP, Universitas Kristen Indonesia, Jakarta 2 Program Studi Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Jambi, Jambi *Corresponding author : marina_biouki@yahoo.com ; marina.silalahi@uki.ac.id

## Article History
Received    :   29 April 2024 Approved   :   28 Juni 2024 Published   :  19 Juli 2024

## Keywords
Vitex trifolia, anticancer, casticin, artemetin

## ABSTRACT
Legundi, or Vitex trifolia (Verbenaceae), is an indigenous Indonesian plant that has been long used as traditional medicine. This study aims to explain the botany, secondary metabolites, benefits, and bioactivity of V. trifolia. The method used in this research is a literature review obtained online in 1996–2022, especially from Google Scholar, using the  keywords  V.  trifolia,  uses  of  V.  trifolia,  and  bioactivity  of  V. trifolia.  Description  V.  trifolia  is  a  shrub  or  small  tree;  leaves  are spread out with 1–5 leaves; compound flowers have a purple crown. The bioactivities of V. trifolia include anticancer, antiinflammatory, antimicrobial, antioxidant, antidiabetes mellitus, and hepatoprotective. The V. trifolia bioactivity as an anticancer is more prominent  than  the  others.  Some  bioactive  compounds  against  V. trifolia cancer are vitexicarpin, casticin, vitepyrroloids, rotundifuran, persicogenin, artemetin, luteolin, penduletin, vitexicarpin, chrysosplenol, vitexilactone, vitetrifolin, viterotulin, and vitexilactone.  The  compounds  artemetin,  casticin,  and  vitexilactone are associated with anticancer and antiinflammatory activity. Further study  of  anticancer  compounds  needs  to  be  carried  out  so  that  the development  of  V.  trifolia  into  a  standardized  herbal  medicine, especially anticancer, can be developed.

## PENDAHULUAN
Tumbuhan  obat  memiliki  senyawa bioaktif  yang  dapat  digunakan  untuk menyembuhkan  berbagai  macam  penyakit manusia.  Salah  satu  jenis  tumbuhan  obat yang telah lama dimanfaatkan oleh berbagai masyarakat  lokal  di  Indonesia  adalah sialagundi (Batak),  legundi  (umum)  atau
yang  dikenal  dengan  nama  ilmiah Vitex trifolia . Vitex  trifolia ini  merupakan tumbuhan indigenous Indonesia  (POWO 2023)  sehingga  melekat  dengan  budaya Indonesia khususnya etnis Batak. Pedagang tradisional  tumbuhan  obat  di  Kabanjahe talah lama memperjualbelikan dan menggunakannya  untuk  mengatasi  batuk
© 2024 Universitas Kristen Indonesia Under the license CC BY-SA 4.0

## Pro-life

## Jurnal Pendidikan Biologi, Biologi, dan Ilmu Serumpun
ejo
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
dan  demam  (Silalahi  et  al.,  2015b). V. trifolia memiliki  struktur  dan  warna  bunga yang indah sehingga mulai dibudidayakan di kebun dekat rumah maupun di pekarangan di Sumatera.
Fakta  empiris  menunjukkan  bahwa
masyarakat Siam (Malaysia) yang mengonsumsi V.  trifolia ternyata  dapat hidup sehat dan lebih lama umurnya (Aweng et al., 2012). Berbagai pengobatan
tradisional Tiongkok (Annamalai & Thangam,  2022)  dan  Asia-Pasifik,  Afrika Timur (Matsui et al., 2012) menggunakan V. trifolia untuk  untuk  mengatasi  peradangan.
Di China, buah kering V. trifolia digunakan untuk mengobati penyakit rinitis dan pusing, sedangkan  daunnya  untuk  mengobati  nyeri rematik (Wee et al., 2020).
Etnis Batak
Simalungun
memanfaatkan  daun V.  trifolia untuk mengatasi  hipertensi,  gangguan  ginjal, gangguan saluran pencernaan (Silalahi et al., 2015a).  Daun V.  trifolia dikonsumsi  untuk meningkatkan  daya  ingat,  menghilangkan rasa sakit, menghilangkan rasa tidak enak di mulut dan menyembuhkan demam (Rajan et al.,  2012).  Ekstrak  daun V.  trifolia sebagai anti  kanker  sedangkan  buahnya  digunakan untuk mengatasi amenore (Parkhe & Bharti 2019).
Pemanfaatan V.  trifolia sebagai  obat tradisional berhubungan dengan bioaktivitasnya  dan  kandungan  metabolit sekundernya. V.  trifolia sebagai  kandidat
sangat  potensial  dikembangkan  dalam pengobatan  kanker  serviks  di  masa  depan (Gong  et  al.,  2021).  Ekstrak V.  trifolia memiliki  aktivitas  antituberkular  terhadap Mycobacterium tuberculosis yang berhubungan  dengan  senyawa  9-hidroksi- 13(14)-labden-15,16-olida  (Tiwari  et  al., 2013).
Vitexicarpin mampu  memblokir  efek histamin  yang  dilepaskan  dari  sel  mast tersensitisasi mungkin dengan menstabilkan mast fungsi membran sel (Alam et al., 2002). Senyawa casticin atau vitexicarpin V. trifolia menunjukkan  sitotoksisitas  yang kuat  terhadap  berbagai  garis  sel  kanker melalui mode aksi  molekuler yang berbeda (Chan  et  al.,  2016). Vitex  trifolia dapat memberikan  perlindungan  yang  signifikan terhadap cedera hepatoselular yang diinduksi  oleh  CCl 4 (Manjunatha  &  Vidya 2008).
Banyak  penelitian  tentang V.  Trifolia sudah dilakukan tetapi kajian komprehensif sebagian  besar  hanya  membahas  manfaat atau bioaktivitas tertentu saja. Kajian dalam penelitian ini bertujuan menjelaskan botani, metabolit sekunder, manfaat dan bioaktivitas  dari V.  trifolia sehingga potensinya  dapat  dikembangkan.  Hasil kajian  ini  akan  menjadi  sumber  informasi untuk  pengembangan  pemanfaatan V. Trifolia sebagai  bahan  obat  tradisional maupun sebagai obat herbal.
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024

## METODE PENELITIAN
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  kajian  pustaka  yang diperoleh  secara online terutama  dari Google Scholar dan eksplorasi di lingkungan sekitar. Eksplorasi dilakukan di Desa Bah Bolon, Kecamatan Pane Tongah, Sumatera  Utara.  Beberapa  kata  kunci  yang digunakan dalam pencarian dokumen, yaitu V. trifolia , uses of V. trifolia dan bioactivity of  V.  trifolia .  Informasi  yang  diperoleh disintesiskan  sehingga  menjelaskan  botani, manfaat  dan  bioaktivitas V.  trifolia .  Untuk melengkapi  informasi  botaninya,  maka dilakukan  eksplorasi  di  lingkungan  sekitar untuk  mendapatkan  foto-foto  meliputi habitus, daun, bunga dan buah.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Botani Vitex trifolia L.
V.  trifolia pada  awalnya  masuk  pada Famili  Verbenaceae  namun  selanjutnya dimasukkan pada Famili Lamiaceae (Meerts 2018). Vitex merupakan  salah  satu  genus dari  Lamiaceae  yang  banyak  digunakan sebagai  obat  tradisional  dan  penghasil minyak atsiri.  Genus Vitex L. Diperkirakan terdiri  sekitar  250  spesies  yang  hampir semuanya  ditemukan  di  daerah  tropis (Mabberley,  2017)  termasuk  Indonesia. Morfologi exine serbuk  sari  dari genera yang  berbeda  Lamiaceae  dan  Verbenaceae menyebabkan  perubahan  takson  ini  (Azimi et al., 2006).
V.  trifolia merupakan  semak  atau pohon  kecil  dengan  cabang  muda  puber padat  dengan  rambut  keabu-abuan.  Tinggi tanaman 1–3,5 meter. Daun tunggal hingga majemuk  dengan  jumlah  anak  daun  1–5- daun.  Tata  letak  daun  tersebar.  Helai  daun berbentuk  lonjong-elips  ke oblanceolate atau obovate atau hampir bulat, 1,5–7 x 0,8– 4  cm, emarginate atau  bulat  sampai  akut atau  meruncing  di  puncak,  runcing  untuk menipis di dasar, puberulous ke glabrescent dan ± kelenjar di atas, tomentose di bawah. Panjang  tangkai  daun  0,6–3,3  cm;  panjang anak tangkai daun 1-20 mm.
Bunga V.  trifolia merupakan  bunga majemuk.  Perbungaan  terminal,  biasanya bersama  dengan  aksila  dari  ketiak  atas, bercabang banyak, panik. Calyx panjang 4– 5 mm, tomentose putih di luar. Corolla biru ke  ungu, puberous di  luar;  panjang  tabung 10–13 mm; bibir bawah hingga 6 mm. Buah bulat atau bulat telur, c. berdiameter 5 mm; kelopak  buah  berbentuk  cangkir,  c.  lebar  5 mm  (POWO  2023;  Azimi  et  al.,  2006). Bunga  muncul  di  musim  panas  atau  akhir musim panas (Rajan et al., 2012).
Empat puluh satu senyawa diidentifikasi secara total dalam minyak dan konstituen  utama  yang  dikarakterisasi adalah  β-caryophyllene,  sabinene,  dan caryophyllene oxide. Ekstrak yang diperoleh dari  tanaman  musim  dingin  dan  musim panas  memiliki  fenolik  total  tertinggi. Jumlah  maksimum  kandungan  flavonoid
total  diukur  pada  musim  dingin  (Desember dan  Januari),  sedangkan  jumlah  minimum diamati  pada  musim  semi  (Maret).  Sampel musim  panas  dan  musim  dingin  masing- masing menunjukkan kandungan flavon dan flavanol tertinggi  dan  terendah,  sedangkan kandungan antosianin lebih tinggi di musim
dingin daripada di musim panas. Selain itu, aktivitas  antiradikal  ekstrak  pada  sampel musim panas dan musim dingin lebih tinggi dibandingkan musim lainnya (Boveiri et al., 2019). Morfologi Legundi ( Vitex trifolia L.) disajikan pada Gambar 1.
Gambar  1. Legundi  ( Vitex  trifolia L.).  (A)  Ranting  dengan  daun  majemuk  beranak  tiga;  (B)  Bunga majemuk dengan mahkota berwarna ungu; dan (C) Ranting yang menopang buah. [Dokumentasi Pribadi]
A
B C
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
Metabolit Sekunder Vitex trifolia L.
Tumbuhan  menghasilkan  berbagai metabolit sekunder sebagai adaptasi terhadap  perubahan  lingkungan  maupun perkembangan. Berbagai metabolit sekunder  tumbuhan  telah  lama  digunakan manusia  sebagai  bahan  obat  seperti flavonoid,  alkaloid  dan  minyak  atsiri. Minyak atsiri merupakan kandungan utama dari V.  trifolia .  Kandungan  metabolit sekunder  pada  setiap  organ  tumbuhan bervariasi  termasuk V.  trifolia .  Berikut  ini dijelaskan  kandungan  metabolit  sekunder dari setiap organ V. trifolia .
Ekstrak  daun V.  trifolia mengandung karbohidrat, flavanoid, protein, asam amino, tanin,  fitosterol,  minyak  atsiri  saponin, diterpen  jenis halimane,  vitetrifolin (Rajan et  al.,  2012).  Daun V.  trifolia mengandung senyawa artemetin,  casticin,  vitexilactone dan  asam  maslinat  (Wee  et  2020).  Ekstrak etil  asetat daun V. trifolia mengandung (-)- O-methylcubebin  (MC),  (-)-hinokinin,  dan (-)-cubebin (Ukiya et al., 2019a). V. trifolia mengandung  triterpen  lanostane  baru,  3α- hydroxylanosta-8,24E-dien-26-oic acid,
matairesinol
4′-O-β-Dglucopyranoside,
ecdysone, 20-hydroxyecdysone, 20- hydroxyecdysone 2,3-monoacetonide,
turkesterone,  dan  polipodin  B.  Daun V. trifolia mengandung asam palmitat, asam p- hidroksibenzoie, etil-p-hidroksibenzoat, asam
3,4-dihidroksibenzoat, 4-
hidroksibenzoat,  4-hidroksi-  Asam  3-
metoksibenzoat, asam caffeic, cis-p- hidroksil  etil  sinamat,  trans-p-hidroksil  etil sinamat,  luteolin,  quercetin,  apigenin,  dan asam  oleanolie  (Yong-Sheng  et  al.,  2011), butylated hydroxytoluene, 2,4-di-tert- butylphenol, campesterol, artemetin, casticin, vitexilactone dan asam maslinat(Wee  et  al.,  2020).  Fraksi  larut heksana  dari  ekstrak  metanol  daun  Vitex triifolia  mengandung  diterpenoid  halimane (13-hidroksi-5(10),14-halimadien-6-satu), diterpenoid  labdan  (6α,7α-diacetoxy-13- hidroksi-8(9),14-labdadien; 9-hidroksi- 13(14)-labden-15,16-olida)  (Tiwari  et  al., 2013).    Daun  segar  menghasilkan  0,21% minyak  dengan  kandungan  utama  1R-α- pinene,  Ocimene,  3-carene,  Toluene,  p- ethyl-, Eucalyptol dan 3-metoksi-5- metilfenol. V.  trifolia mengandung  tingkat yang  cukup  besar  dari  jumlah  kandungan fenolik  total  (74,66μg  GAE/100mg)  dari berat  segar  dan  aktivitas  penangkapan radikal  bebas  DPPH  (IC50  =  5,2  µg/ml) (Devi  &  Singh  2014).  Ekstrak  etil  asetat daun V.  trifolia mengandung  (-)-O- methylcubebin (MC), (-)-hinokinin, dan (-)- cubebin. Senyawa (-)-O-methylcubebin (MC) (Ukiya et al., 2019a).
Batang V.  trifolia mengandung  β- rosaterol  palmitate,  uvaol,  3-epi-ursolic acid;  2-α,  3-β,  24-trihydroxyolean-12-en- 28-oic acid; asam 2-α, 3-α,  24- trihidroksiurs-12-en-28-oat;  asam  2-α,  3-α, 24-trihidroksiolean-12-en-28-oat;  2-α,  3-α,
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
24-trihidroksiolean  -12-en-28-oic  acid-28- O-β-D-glucopyranosyl ester; (Z)-9-
hexadecenoic  acid;  octacosyl  alcohol;  β- sitosterol;  dan  β-daucosterol  (Liu  et  al., 2014).  Ranting V.  trifolia mengandung  3- Oxotaraxer-14-en-30-al, taraxerone, asam 3- epiursolat,  2α,3β-dihydroxyurs-12-en  asam -28-oat,  lupeol,  asam  betulinat,  kastisin, artemetin, luteolin, asam 4-hidroksibenzoat, asam dokosanoat, tetrakosanoat asam, asam cerotik,  β-sitosterol,  dan  β-daucosterol (Huang et al., 2013).
Buah V. trifolia mengandung senyawa viterotulin  D,  diterpenoid,  monoterpenoid, steroid,  flavonoid,  fenol  (Djimabi  et  al 2021),  asam  rho-hidroksibenzoat,  beta- sitosterol, beta-sitosterol-3-O-glukosida, kastisin  dan,  3,6,7  -trimetilquersetagetin (Zeng et al., 1996), vitexifolin E, vitexifolin F,  vitexilactone,  6-acetoxy-9  -hidroksi- 13(14)-labden-16,15-olida, dan previteksilakton (Kiuchi et al., 2004). Jenis metabolit sekunder buah yang terdapat yang ditemukan dipengaruhi oleh senyawa pelarut.  Ekstrak  metanol  buah V.  trifolia mengandung  asam  3β-hidroksi-30-al-urs- 12-en-28-oat,  asam ursolat,  taraxerol, taraxerone, α-amyrin, β-amyrin, lupeol, dan asam  betulinic  (El-Sayed  et  al.,  2011). Ekstrak aseton buah V. trifolia mengandung Diterpen tipe abietane, bernama vitetrifolin A,  dan  dua  diterpen  tipe  labdane,  bernama vitetrifolin B dan C, rotundifuran, dihydrosolidagenone dan abietatriene 3β-ol
(Ono  et  al  2000).  Ekstrak  etanol  buah V. trifolia mengandung vitetrolin A-D (Djimabi et al., 2022).
Manfaat dan Bioaktivitas Vitex trifolia L.
V.  trifolia telah  lama  dimanfaatkan sebagai obat tradisional berhubungan dengan  biaoktivitasnya.  Berikut  ini  akan dibahas lebih lanjut manfaat dan bioaktivitas V. trifolia sebagai antikanker, antiinflamasi, antimikroba, antioksidan, antidiabetes mellitus, dan hepatoprotektif.
Antikanker
Kanker merupakan salah satu penyebab kematian manusia, oleh karena itu eksplorasi  bahan  alam  sebagai  antikanker terus dilakukan termasuk V. trifolia . Prinsip utama  bahan  alam  antikanker  adalah menghambat/mematikan  pembelahan  sel kanker  (menyebabkan  apostosis/kematian sel  terprogram)  tetapi  tidak  berpengaruh terhadap  sel  normal  (Li  et  al.,  2005).  Bila ditelusuri  lebih  lanjut  laporan  bioaktivitas V. trifolia sebagai antikanker lebih menonjol dibandingkan  dengan  yang  lainnya. Vitex trifolia dapat  menjadi  obat  yang  ampuh untuk  pengobatan  kanker  (Vasanthi  et  al., 2014; Li et al., 2005).
Ekstrak V.  trifolia telah  terbukti mampu menghambat pertumbuhan berbagai sel  kanker  seperti  sel  kanker  nasofaring manusia (Luo et  al., 2017b), garis sel Hep- G2  (El-Sayed  et  al.,  2011),  kanker  MCF-7 ( Breast garis  sel  kanker),  HT-29  (garis  sel kanker  kolorektal),  dan  WRL-68  (garis  sel
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
hati normal) (Aweng et al., 2012), sel kanker Hep  G2  dan  HeLa  (Vasanthi  et  al.,  2014). Kemampuan V. trifolia sebagai obat kanker dihubungkan dengan kemampuannya penghambat siklus sel baru dan penginduksi apoptosis (Li et al., 2005b). Efek antitumor sering  dihubungkan  dengan  kemampuan menghambat spesies oksigen reaktif (ROS) yang menginduksi apoptosis yang bergantung  pada  mitokondria  melalui  jalur sinyal  MAPK  dan  PI3K  /  Akt  (Gong  et  al 2021).
Berbagai  senyawa  yang  berhasil diisolasi  dan  diekstrak  dari V.  trifolia memiliki  bioaktivitas  sitotoksik  seperti vitexicarpin (Wang et al., 2005; Chan et al., 2016),  asam  3β-hidroksi-30-al-urs-12-en- 28-oat (Huang et al., 2016), casticin (Huang et  al.,  2013;  Chan  et  al.,  2016), vitepyrroloids  A–D  (Luo  et  al.,  2017b), rotundifuran (Gong et al., 2021), persicogenin, artemetin, luteolin, penduletin,  vitexicarpin  dan  chrysosplenol- D  (Li  et  al.,  2005),  vitexilactone,  (rel 5S,6R,8R,9R,10S)-6-acetoxy-9-hydroxy- 13(14)-labden-16,15-olide, rotundifuran, vitetrifolin  D,  dan  vitetrifolin  E  (Li  et  al., 2005b), viterotulin C vitexilactone D (Fang et al., 2018), vitetrifolin H, vitetrifolin I (Wu et al., 2009).
Vitexicarpin  dari V.  trifolia secara signifikan  menghambat  proliferasi  sel kanker  manusia  (Wang  et  al.,  2005). Senyawa asam 3β-hidroksi-30-al-urs-12-en-
28-oat  dari  buah V.  trifolia menunjukkan aktivitas sitotoksik yang signifikan terhadap sel  tumor  (Huang  et  al.,  2016).  Senyawa casticin  atau  vitexicarpin V.  trifolia menunjukkan  sitotoksisitas  yang  kuat terhadap  berbagai  garis  sel  kanker  melalui mode aksi molekuler yang berbeda (Chan et al.,  2016).  Daun V.  trifolia mengandung senyawa  Vitepyrroloids  A–D  merupakan senyawa diterpenoid labdane yang mengandung  cincin  pirol  2-cyano  yang menghambat pertumbuhan kanker nasofaring  (Luo  et  al.,  2017b).  Aktivitas sitotoksisitas  ekstrak V.  trifolia memiliki aktivitas antikanker MCF-7 (Breast garis sel kanker), HT-29 (garis sel kanker kolorektal), dan  WRL-68  (garis  sel  hati  normal),  dan hasilnya  menunjukkan  bahwa,  aktivitas sitotoksisitas  (nilai  IC50  masing-masing 78,87μg/ml,  77,50μg/ml,  dan  78,29μg/ml) (Aweng et al., 2012).
Senyawa vitepyrroloids A dari daun V. trifolia menunjukkan  aktivitas  sitotoksik terhadap  garis  sel  karsinoma  nasofaring manusia (CNE1) dengan nilai IC50 8,7 μM (Luo  et  al.,  2017b).  Sel-sel  yang  diobati dengan vitexicarpin menunjukkan karakteristik  morfologi  yang  khas  untuk apoptosis  dan  memberikan  puncak  sub- G0/G1  yang  bergantung  pada  dosis  dalam analisis  sitometri  aliran  dan  tangga  DNA pada elektroforesis gel agarosa. Vitexicarpin menginduksi  apoptosis  pada  sel  K562 melalui  jalur  apoptosis  yang  dikendalikan
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
mitokondria  (Wang  et  al.,  2005).  Ekstrak metanol V. trifolia sitotoksik terhadap garis sel  Hep-G2  (El-Sayed  et  al.,  2011). Senyawa  rotundifuran  yang  diisolasi V. trifolia dapat  menekan  proliferasi  garis  sel kanker serviks, termasuk sel HeLa dan SiHa (dengan  IC50  kurang  dari  10 μM),  melalui induksi  apoptosis  in  vitro  (Gong  et  al., 2021).    Efek  antitumor  rotundifuran mungkin  terkait  dengan  spesies  oksigen reaktif  (ROS)  yang  menginduksi  apoptosis yang  bergantung  pada  mitokondria  melalui jalur sinyal MAPK dan PI3K / Akt (Gong et al.,  2021).    Uji  MTT  menunjukkan  bahwa ekstrak heksana Vitex trifolia sangat efektif terhadap  lini  sel  kanker  Hep  G2  dan  HeLa pada konsentrasi 80 µg/ml (Vasanthi et  al., 2014).
V.  trifolia mengandung  senyawa flavonoid  seperti  persicogenin,  artemetin, luteolin, penduletin, vitexicarpin dan chrysosplenol-D memiliki aktivitas inhibitor siklus sel menghambat proliferasi sel kanker tikus (Li et al., 2005b).  Cara kerja senyawa tersebut dengan menghambat siklus sel pada fase  G2/M  (Li  et  al.,  2005).    Flavonoid merupakan  inhibitor  siklus  sel,  antikanker dan  merupakan  penginduksi  apoptosis  (Li et., al 2005). Senyawa diterpene tipe labdana dari V.  trifolia seperti    vitexilactone,  (rel 5S,6R,8R,9R,10S)-6-acetoxy-9-hydroxy- 13(14)-labden-16,15-olide, rotundifuran, vitetrifolin D, dan vitetrifolin E menginduksi  apoptosis  pada  konsentrasi
yang lebih tinggi sementara pada konsentrasi  yang  lebih  rendah  mereka menghambat  perkembangan  siklus  sel  sel tsFT210  dan  K562  pada  fase  G0/G1  (Li  et al., 2005b).
Kemampuan ekstrak V. trifolia menghambat pertumbuhan sel kanker sangat bervariasi  dipengaruhi  berbagai  faktor antara lain: komposisi (Mathankumar et al., 2015)  dan  organ  yang  digunakan  (Fang  et al.,  2018;  Huang  et  al.,  2013). Triticum aestivum dan V.  trifolia melindungi mikrosom hati terhadap serangan degranulasi oleh karsinogen 3,8-Diamino-5- etil-6-pheylphenanthridinium bromide (EB) menunjukkan  penurunan  yang  signifikan dalam proliferasi garis sel kanker HCT 116 dan  A549.  Ekstrak V.  trifolia dan  T. aestivum bertindak secara sinergis, memiliki sifat  antikarsinogenik  yang  cukup  besar, berdasarkan  kemampuan  mereka  untuk menghambat  degranulasi  mikrosomal  hati yang  diinduksi  EB  (Mathankumar  et  al., 2015).
Senyawa yang diekstraksi dari buah V. trifolia adalah viterotulin C dan vitexilactone  D  bersama  dengan  lima diterpen  lainnya  menghambat  aktivasi  NF- κB  yang  diinduksi  TNF-α,  dengan  tingkat penghambatan  yang  berbeda-beda  (Fang  et al., 2018). Senyawa diterpenoid dari buah V. trifolia seperti vitetrifolin H dan vitetrifolin I,  vitexoid  menunjukkan  penghambatan proliferasi sel Hela, dengan nilai IC50 dalam
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
kisaran  4 – 28  μM  (Wu  et  al.,  2009). Senyawa vitetrifolin I menginduksi penghentian  fase  G0/G1  siklus  sel  dan apoptosis  sel  Hela  (Wu  et  al.,  2009). Senyawa  kastisin  yang  diekstrak  dari  daun dan  ranting V.  trifolia menunjukkan sitotoksisitas  terhadap  PANC-1,  K562,  dan BxPC-3,  dengan  nilai  IC50  masing-masing sebesar 4,67, 0,72, dan 4,01 μg/ml. Senyawa kastisin  menunjukkan  bahwa  gugus  3′-OH dalam  polimetoksi  flavonoid  penting  untuk aktivitas antitumor (Huang et al., 2013). Antiinflamasi
Berbagai pengobatan tradisional Tiongkok  (Annamalai  &  Thangam,  2022) dan  Asia-Pasifik,  Afrika  Timur  (Matsui  et al.,  2012)  menggunakan V.  trifolia untuk untuk  mengatasi  peradangan.  Di  China, buah  kering V.  trifolia digunakan  untuk mengobati  penyakit  artirinitis  dan  pusing, sedangkan  daunnya  untuk  mengobati  nyeri rematik (Wee et al.,2020).
Senyawa  yang  digunakan  untuk mengatasi peradangan dikenal  juga sebagai antiinflamasi.  Uji  aktivitas  antiinflamasi  di laboratorium dapat dilakukan dengan menggunakan metode induksi karagenan. Di laboratorium  peradangan  akut  dihasilkan dengan  menyuntikkan  suspensi  homeogen karagenan  (Ankalikar  et  al  2017).  Ekstrak metanol daun V. trifolia (100 mg/kg dan 200 mg/kg)  secara  signifikan  menghambat edema  kaki  yang  diinduksi  oleh  karagenan dan  secara  efektif  mengurangi  infiltrasi
leukosit inflamasi (Annamalai & Thangam, 2022).  Ekstrak  daun V.  trifolia memiliki potensiasi aktivitas analgesik dengan pentazocine (10 mg/kg, i.p.) dan aspirin (25 mg/kg, i.p.) (Ukiya et al., 2019).
Bioaktivitas  anti  inflamasi  ekstrak metanol  daun V.  trifolia berhubungan dengan  aktivitas  penghambatan  kadar Interleukin  (IL)  -1β,  IL-6,  tumor  necrosis factor  (TNF)-α  (Annamalai  &  Thangam, 2022). Ekstrak metanol dari daun V. trifolia secara signifikan meningkatkan konsentrasi jaringan  sitokin  anti-inflamasi  IL-10  dan secara  signifikan  melemahkan  degradasi IκBα  dan  translokasi  inti  NF-κB  p65 (Annamalai & Thangam, 2022). Ekstrak air daun V.  trifolia menunjukkan  aktivitas penghambatan  tergantung  dosis  dan  waktu yang  signifikan  pada  interleukin  (IL)  -1β, IL-6 dan sintesis mRNA iNOS, tetapi sedikit efek  pada  tumor  necrosis  factor  (TNF)  -α, yang  semuanya  terlibat  dalam  respon peradangan  (Matsui  et  al.,  2009).  Gen inflamasi dan apoptosis yang diinduksi LPS di  bawah  kendali  NF-κB  juga  ditekan  oleh ekstrak V. trifolia (Matsui et al., 2012).
Disregulasi sitokin proinflamasi seperti tumor necrosis factor-α (TNF-α) dan interleukin-1β  (IL-1β)  membentuk  dasar antiinflamasi yang dimediasi imun (Wee et al.,  2020).  Sifat  antiinflamasi  dimediasi melalui  regulasi  transduksi  sinyal  NF-κB (Annamalai  &  Thangam,  2022)  dan pemberian ekstrak V. trifolia
mengakibatkan  penghambatan  translokasi NF-κB  melalui  penurunan  tingkat  ekspresi NF-κB  p50  (Matsui  et  al.,  2012).  Daun V. trifolia mengandung  senyawa  artemetin (Liou  et  al.,  2018),  casticin,  vitexilactone dan asam maslinat  (Wee et  al., 2020) yang dihubungkan dengan aktivitas antiinflamasi. Casticin dapat mengurangi sitokin proinflamasi  dan  ekspresi  ICAM-1  dalam sel epitel paru inflamasi (Liou et al., 2018). Casticin mengurangi hiper-responsif saluran napas  (AHR),  hiperplasia  sel  goblet,  dan respons oksidatif di paru-paru tikus dengan asma  (Liou  et  al.,  2018).  Casticin melemahkan  tingkat  sitokin  Th2  dalam cairan lavage bronchoalveolar dan mengatur ekspresi  sitokin  Th2  dan  gen  kemokin  di paru-paru (Liou et al., 2018). Casticin adalah imunomodulator kuat, memperbaiki perubahan  patologis  dengan  menekan ekspresi sitokin Th2 pada tikus dengan asma (Liou et al., 2018).
Antimikroba
Senyawa antimikroba merupakan senyawa  yang  menghambat  pertumbuhan atau mengakibatkan kematian mikroorganisme. Ekstrak V. trifolia menghambat  pertumbuhan  jamur  Candida spp.  (Devi  &  Singh,  2014), Trypanosoma (Kiuchi  et  al.,  2004), Pseudomonas aeruginosa (Mary  &  Banu,  2015),  dan Mycobacterium  tuberculosis (Tiwari  et  al., 2013).  Minyak  atsiri  daun V.  trifolia (500 µg/ml)  memiliki  antijamur Candida  krusei
dan C. kefyr dengan diameter zona hambat sebesar  27,97±0,4  mm  dan  23,88±0,8  mm secara berurutan (Devi & Singh, 2014).
Bioaktivitas  antimikroba  ekstrak V. trifolia khususnya Pseudomonas aeruginosa berhubungan dengan aktivitas menghambat produksi protease (68%), elastase (48%) dan eksopolisakarida  (96%)  (Mary  &  Banu, 2015).  Ekstrak  metanol  daun V.  trifolia aktivitas antituberkular terhadap Mycobacterium  tuberculosis  H37Rv  yang berhubungan  dengan  senyawa  9-hidroksi- 13(14)-labden-15,16-olida  (Tiwari  et  al., 2013).  Bioaktivitas  trypanocidal  ekstrak aseton buah V. trifolia diduga berhubungan dengan kandungan vitexifolin E, vitexifolin F,  vitexilactone,  6-acetoxy-9  -hidroksi- 13(14)-labden-16,15-olida, dan previteksilakton (Kiuchi et al., 2004).
Antioksidan
Senyawa antioksidan merupakan senyawa  yang  mampu  menghambat  atau mengurangi  radikal  bebas.  Bioaktivitas antioksidan V. trifolia berhubungan dengan kandungan senyawa fenolik (Devi & Singh 2014),  flavonoid  (Saklani  et  al.,  2017). Terdapat  korelasi  yang  signifikan  antara aktivitas  antioksidan  dan  total  kandungan fenolik dan flavonoid (Saklani et al., 2017). Jumlah  kandungan  fenolik  total  (74,66μg GAE/100mg)  dari  berat  segar  daun V. trifolia dan  aktivitas  penangkapan  radikal bebas  DPPH  (IC50  =  5,2  µg/ml)  (Devi  & Singh.,  2014).  Senyawa  bioaktif V.  trifolia
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
adalah  Negundoside,  agnuside  dan  6′-p- hydroxy benzoyl mussaenosidic acid menunjukkan  aktivitas  yang  signifikan dalam  uji  pemulungan  radikal  DPPH  dan NO (Tiwari et al., 2012).
Antidiabetes Mellitus
Diabetes mellitus merupakan gangguan metabolisme yang mengakibatkan kadar  glukosa  darah  di  atas  normal  atau sering juga disebut sebagai hiperglikemia. V. trifolia digunakan sebagai agen antidiabetes dan perlindungan hati di Myanmar (Ukiya et al.,  2019a).  Senyawa  yang  berpotensi sebagai  antidiabetes  adalah  senyawa  yang mampu menghambat aktivitas α- glukosidase.  Senyawa  (-)-O-methylcubebin dari daun V. trifolia dapat menjadi senyawa utama untuk pengembangan obat antidiabetes yang tidak menunjukkan peningkatan  berat  badan  yang  merupakan efek samping dari rosiglitazone (Ukiya et al., 2019a).  Diterpenoid  dari  buah V.  trifolia yang  diisolasi  dievaluasi  untuk  aktivitas penghambatan  α-glukosidase  (Djimabi  et al.,  2022).  Senyawa  (-)-O-methylcubebin dari  daun  menunjukkan  efek  yang  mirip dengan rosiglitazone yang digunakan sebagai kontrol positif, rosiglitazone mendorong migrasi GLUT4 dari sitoplasma ke membran sel (Ukiya et al., 2019a).

## Hepatoprotektif
Hepatoprotektif  merupakan  senyawa yang melindungi hati dari berbagai senyawa toksik.  Aktivitas  hepatoprotektif  dapat
diukur dari berbagai parameter biokimia hati seperti  total  bilirubin,  protein  total,  alanin transaminase,  aspartat  transaminase,  dan aktivitas alkali fosfatase ditentukan (Manjunatha  &  Vidya,  2008).  Ekstrak  air dan etanol daun V. trifolia memiliki aktivitas hepatoprotektif  terhadap  kerusakan  hati akibat  karbon  tetraklorida  (Manjunatha  & Vidya, 2008; Anandan et al., 2009). Jaringan hati  yang  diberi  dengan  etanol  dan  ekstrak air menunjukkan arsitektur hati yang normal dengan  sedikit  lobulus  lemak  (Manjunatha &  Vidya,  2008).  Pengobatan  tikus  yang diberi  perlakuan  CCl 4 kemudian  diberi ekstrak V. trifolia secara signifikan mengubah  serum  tingkat  enzim  biomarker mendekati  normal  sebanding  dengan  obat standar,  silymarin  (100  mg/kg,  p.o.) (Anandan et al., 2009).

## SIMPULAN
V.  trifolia memiliki  karakter  botani, antara  lain  semak  atau  pohon  kecil;  daun tersebar dengan jumlah anak daun 1–5-daun; dan  bunga  majemuk    dengan  mahkota berwarna  ungu.  Bioaktivitas V.  trifolia meliputi: antikanker, antiinflamasi, antimikroba, antioksidan, antidiabetes mellitus,  dan  hepatoprotektif.  Senyawa bioaktif  antikanker V.  trifolia, antara  lain vitexicarpin, casticin, vitepyrroloids, rotundifuran, persicogenin, artemetin, luteolin, penduletin, vitexicarpin,
chrysosplenol,  vitexilactone,  vitetrifolin,
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
viterotulin, vitexilactone. Senyawa artemetin,  casticin,  vitexilactone  dari V. trifolia biasanya  dihubungkan  dengan aktivitasnya sebagai antikanker dan antiinflamasi.

## DAFTAR PUSTAKA
Alam,  G.,  Wahyuono,  S.,  Ganjar,  I.G., Hakim,  L.,  Timmerman,  H.,  & Verpoorte, R. (2002). Tracheospasmolytic activity of viteosin-A  and  vitexicarpin  isolated from  Vitex  trifolia. Planta  Medica , 68(11), 1047-1049.
Anandan, R., Jayakar, B., Karar, B., Babuji, S.,  Manavalan,  R.,  &  Kumar,  R.S. (2009).  Effect  of  ethanol  extract  of flowers  of Vitex  trifolia Linn.  On CCl 4 induced  hepatic  injury  in  rats. P ak. J. Pharm. Sci , 22(4), 391-394. Ankalikar,  A.,  Viswanathswamy,  A.H.,  & Viswanathswamy,  A.H.M.  (2017). Effect of leaves of Vitex trifolia Linn on  different  stages  of  inflammation. Indian J Pharm Educ , 51(3), 461-471.
Annamalai,  P.,  &  Thangam,  E.B.  (2022).
Vitex trifolia
L. modulates inflammatory  mediators  via  down- regulation  of  the  NF-κB  signaling pathway in carrageenan-induced acute  inflammation  in  experimental rats. Journal  of  Ethnopharmacology , 298, 115583.
Aweng,  E.R.,  Hanisah,  N.,  Mohd  Nawi, M.A.,  Nurhanan  Murni,  Y.,  & Shamsul,  M.  (2012).  Antioxidant activity  and  phenolic  compounds  of Vitex trifolia var. simplicifolia associated  with  anticancer. ISCA Journal of  Biological Sciences , 1(3), 65-68.
Azimi,  A.R.,  Jamzad,  Z.,  Sefidkon,  F.,  & Bakhshi, K.G.R. (2006). The potential value of phytochemical and micromorphological  characters  in taxonomic treatment of genus Vitex L.
(Lamiaceae). Iran. Journ. Bot . 12 (1), 1-23 Boveiri Dehsheikh, A., Mahmoodi Sourestani,  M.,  Boveiri  Dehsheikh, P.,  Vitalini,  S.,  Iriti,  M.,  & Mottaghipisheh, J. (2019). A
comparative  study  of  essential  oil constituents and phenolic compounds of  Arabian  Lilac  ( Vitex  trifolia var. Purpurea):  An  evidence  of  season effects. Foods , 8(2), 52.
Chan,  E.W.C.,  Baba,  S.,  Chan,  H.T.,
Kainuma,  M.,  &  Tangah,  J.  (2016). Medicinal  plants  of  sandy  shores:  A short  review  on Vitex  trifolia L.  and Ipomoea pes-caprae (L.) R. Br. Indian Journal  of  Natural  Products  and
Resources (IJNPR)[Formerly Natural  Product  Radiance  (NPR)], 7(2), 107-115.
Devi,  W.R.,  &  Singh,  C.B.  (2014).
Chemical composition, anti- dermatophytic  activity,  antioxidant and total phenolic content  within the leaves  essential  oil  of Vitex  trifolia .
International Journal of Phytocosmetics and Natural Ingredients , 1(1), 5-5. Djimabi,  K.,  Wang,  R.Y.,  Li,  B.,  Chen, X.H.,  Liu,  X.,  Wang,  M.J.,  ...  &
Zhang,  Z.X.  (2022).  Diterpenoids with α-glucosidase inhibitory activities  from  the  fruits  of Vitex trifolia Linn. Fitoterapia , 161, 105248.
Djimabi,  K.,  Li,  B.,  Chen,  X.H.,  Su,  P.J., Liu,  X.,  Wang,  R.Y.,  ...  &  Zhang, Z.X.  (2021).  Chemical  constituents from  the  fruits  of Vitex  trifolia L.(Verbenaceae) and their chemotaxonomic significance. Biochemical Systematics and
Ecology , 97, 104305. El-Sayed,  M.  M.,  El-Hashash,  M.  M., Mohamed,  M.  A.,  &  Korany,  T.  M. (2011).  Cytotoxic  activity  of Vitex trifolia purpurea  extracts. Journal  of the Egyptian Society of Parasitology , 41(2), 409-416.
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
Fang, S.M., Liu, R., Li, L., Yao, J.L., Liu, E.W.,  Fan,  G.W.,  ...  &  Gao,  X.M.
(2018). Anti-inflammatory diterpenes from the fruits of Vitex trifolia L. var.
simplicifolia Cham. Journal of Asian natural products research .
Gong, G., Shen, Y.L., Lan, H. ., Jin, J. ., An, P., Zhang, L. ., ... & Zhang, H. (2021). The  Cyr61  Is  a  potential  target  for rotundifuran,  a  natural  labdane-type diterpene  from Vitex  trifolia L.,  to trigger  apoptosis  of  cervical  cancer cells. Oxidative Medicine and Cellular Longevity , 2021, 1-15. Huang, M.Y., Zhong, L.J., Xie, J.M., Wang, F.,  &  Zhang,  Y.H.  (2013).  A  new taraxastane‐type triterpene from Vitex trifolia var.  simplicifolia. Helvetica Chimica Acta, 96(11), 2040-2045. Huang, M., Zhang, L., Zhou, F., Ma, X., Li, Z., Zhong, T., & Zhang, Y. (2016). A new  ursane  triterpenoid  possessing cytotoxicity  from  the  fruits  of Vitex trifolia var.  simplicifolia .  Chemistry of Natural Compounds , 52, 660-663. https://powo.science.kew.org/taxon/urn:lsi d:ipni.org:names:866039-1/general- information retrieved Maret, 1 2023).
Kiuchi, F., Matsuo, K., Ito, M., Qui, T. K.,
& Honda, G. (2004). New norditerpenoids  with  trypanocidal activity from Vitex trifolia . Chemical and Pharmaceutical Bulletin , 52(12), 1492-1494.
Li, W.X., Cui, C.B., Cai, B., Wang, H.Y., & Yao,  X.S.  (2005a).  Flavonoids  from Vitex  trifolia L.  inhibit  cell  cycle progression  at  G2/M  phase  and induce  apoptosis  in  mammalian cancer cells. Journal of Asian Natural Products Research , 7(4), 615-626. Li,  W.X.,  Cui,  C.B., Cai,  B.,  &  Yao,  X.S. (2005b).  Labdane-type  diterpenes  as new  cell  cycle  inhibitors  and apoptosis inducers from Vitex trifolia
L. Journal of Asian Natural Products Research , 7(2), 95-105.
Liou,  C.J.,  Cheng,  C.Y.,  Yeh,  K.W.,  Wu,
Y.H.,  &  Huang,  W.C.  (2018). Protective  effects  of  casticin  from
Vitex  trifolia alleviate  eosinophilic airway  inflammation  and  oxidative stress  in  a  murine  asthma  model. Frontiers In Pharmacology , 9, 635.
Liu,  Q.Y.,  Chen,  Y.S.,  Wang,  F.,  Chen, S.W.,  &  Zhang,  Y.H.  (2014). Chemical of Vitex trifolia . Zhongguo Zhong  yao  za  zhi=  Zhongguo zhongyao  zazhi= China  Journal  Of Chinese  Materia  Medica ,  39(11), 2024-2028.
Luo,  P.,  Xia,  W.,  Morris-Natschke,  S.L., Lee, K.H., Zhao, Y., Gu, Q., & Xu, J. (2017).  Vitepyrroloids  A–D,  2- cyanopyrrole-containing labdane diterpenoid alkaloids from the leaves of Vitex  trifolia . Journal  of  Natural Products , 80(5), 1679-1683. Mabberley D.J. (2017). Mabberley’s Plant- book. 4th Ed. Cambridge , Cambridge University
Press. https://doi.
org/10.1017/9781316335581
Manjunatha,  B.K.,  &  Vidya,  S.M.  (2008).
Hepatoprotective  activity  of Vitex trifolia against  carbon  tetrachloride- induced  hepatic  damage. Indian Journal  of  Pharmaceutical  Sciences , 70(2), 241.
Mary, R.N.I., & Banu, N. (2015). Screening of  antibiofilm  and  anti-quorum sensing  potential  of Vitex  trifolia in Pseudomonas  aeruginosa. Int  J Pharm Pharm Sci , 7(8), 242-5.
Matsui, M., Kumar-Roine, S., Darius, H.T., Chinain, M., Laurent, D., & Pauillac, S.  (2009).  Characterisation  of  the anti-inflammatory  potential  of Vitex trifolia L.(Labiatae),  a  multipurpose plant  of  the  Pacific  traditional medicine. Journal of
Ethnopharmacology ,  126(3),  427- 433.
Matsui,  M.,  Adib-Conquy,  M.,  Coste,  A., Kumar-Roiné,  S.,  Pipy,  B.,  Laurent, D.,  &  Pauillac,  S.  (2012).  Aqueous extract  of Vitex  trifolia L.(Labiatae) inhibits LPS-dependent regulation of inflammatory  mediators  in  RAW 264.7 macrophages through
inhibition of Nuclear Factor kappa B
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
translocation and expression. Journal of  Ethnopharmacology ,  143(1),  24-
32.
Mathankumar, M., Tamizhselvi, R., Manickam, V., & Purohit, G. (2015).
Assessment of anticarcinogenic potential of Vitex trifolia and Triticum aestivum Linn  by  in  vitro  rat  liver
microsomal degranulation.
Toxicology International , 22(1), 114.
Meerts,  P.  (2018).  Synopsis  of  the  genus
Vitex (Lamiaceae) in the Democratic Republic of the Congo. Plant Ecology and Evolution , 151(3), 380-392. Ono, M., Sawamura, H., Ito, Y., Mizuki, K., &  Nohara,  T.  (2000).  Diterpenoids from  the  fruits  of  Vitex  trifolia. Phytochemistry , 55(8), 873-877.
Parkhe,  G.,  & Bharti, D.  (2019). Phytochemical investigation and determination  of  total  phenols  and flavonoid  concentration  in  leaves extract of Vitex trifolia Linn. Journal of  Drug  Delivery  and  Therapeutics , 9(4-A), 705-707.
Rajan,  D.,  Suresh,  J.,  Paramakrishnan,  N.,
Reddy,  A.,  &  Nayeem,  M.  (2012).
Review on phytochemical and pharmacological  properties  of Vitex trifolia Linn. Research  Journal  of Pharmacognosy and Phytochemistry , 4(2), 124-129.
Saklani,  S.,  Mishra,  A.P.,  Chandra,  H., Atanassova,  M.S.,  Stankovic,  M.,
Sati, B., ... & Suleria, H. A.R. (2017). Comparative evaluation of
polyphenol  contents  and  antioxidant activities between ethanol extracts of
Vitex  negundo and Vitex  trifolia L. leaves  by  different  methods. Plants , 6(4), 45.
Silalahi,  M.,  Supriatna,  J.,  Nisyawati,  & Walujo, E.B. (2015a). Local knowledge of medicinal plants in sub- ethnic  Batak  Simalungun  of  North Sumatra,  Indonesia. Biodiversitas , 16(1), 44-54.
Silalahi, M., Walujo, E.B., Supriatna, J., & Mangunwardoyo,  W.  (201b5).  The local  knowledge  of  medicinal  plants
trader  and  diversity  of  medicinal plants  in  the  Kabanjahe  traditional market,  North  Sumatra,  Indonesia. Journal of Ethnopharmacology , 175, 432-443.
Tiwari, N., Thakur, J., Saikia, D., & Gupta,
M.M. (2013). Antitubercular diterpenoids  from  Vitex  trifolia.
Phytomedicine , 20(7), 605-610.
Ukiya, M., Sato, D., Kimura, H., Koketsu, M., Phay, N., & Nishina, A. (2019a).
(-)-O-methylcubebin from Vitex
trifolia enhanced  adipogenesis  in 3T3-L1  Cells  via  the  Inhibition  of ERK1/2 and p38MAPK Phosphorylation. Molecules ,  25(1), 73.
Ukiya, M., Sato, D., Kimura, H., Koketsu, M., Phay, N., & Nishina, A. (2019b). (-)-O-Methylcubebin from Vitex trifolia enhanced  adipogenesis  in 3T3-L1  cells  via  the  inhibition  of ERK1/2 and p38MAPK phosphorylation. Molecules ,  25(1), 73.
Vasanthi,  V.J.,  Radhjeyalakshmi,  R.,  &
Nasrin,  F.  (2014).  Evaluation  of anticancer  activity  using  hexanic extract  of Vitex  trifolia on  two different  cancer  cell  lines. Int  J Pharmacognosy Phytochem Res , 6(3), 449-453.
Wang,  H.Y.,  Cai,  B.,  Cui,  C.B.,  Zhang,
D.Y., & Yang, B.F. (2005).
Vitexicarpin,  a  flavonoid  from Vitex trifolia L., induces apoptosis in K562
cells  via  mitochondria-controlled apoptotic pathway. Acta Pharmaceutica Sinica , 40(1), 27-31. Wee,  H.N.,  Neo,  S.Y.,  Singh,  D.,  Yew,
H.C.,  Qiu,  Z.Y.,  Tsai,  X.R.C.,  ...  & Koh,  H.L.  (2020).  Effects  of Vitex trifolia L. leaf extracts and phytoconstituents on cytokine
production in human U937
macrophages. BMC  Complementary Medicine and Therapies , 20(1), 1-15 Wu,  J.,  Zhou,  T.,  Zhang,  S.  W.,  Zhang, X.H., & Xuan, L.J. (2009). Cytotoxic terpenoids  from  the  fruits  of Vitex
Jurnal Pro-Life, 11(2): 96-110, Juli 2024
trifolia L. Planta  Medica ,  75(04), 367-370.
Yong-Sheng,  C.,  Xiao-Yan,  L.,  Lin-Jing, Z.,  Jie-Ming,  X.,  &  Yong-Hong,  Z. (2011).  Chemical  constituents  of Vitex  trifolia L. Natural  Product Research & Development , 23(6).
Zeng,  X.,  Fang,  Z.,  Wu,  Y.,  &  Zhang,  H.
(1996).  Chemical  constituents  of  the fruits  of Vitex  trifolia L.  Zhongguo Zhong  yao  za  zhi=  Zhongguo zhongyao  zazhi= China  Journal  Of Chinese Materia Medica , 21(3), 167- 8.