## EKSTRAKSI DAN KARAKTERISASI MINYAK HATI CUCUT PISANG

## Extraction and characterization of liver oil from silky shark
Anhar Rozi 1 *, Sugeng Heri Suseno 2 , Agoes Mardiono Jacoeb 2
1 Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar Meulaboh Universitas Teuku Umar, Kampus UTU Meulaboh, Jalan Alue Penyareng, Meulaboh 23615 Aceh Barat
Telepon (0655) 7110535
2 Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor Institut Pertanian Bogor, Kampus IPB Dramaga, Jalan Agatis, Bogor 16680 Jawa Barat Telepon (0251) 8622909-8622906, faks (0251) 8622915
*Korespondensi: anharrozi89@gmail.com
Diterima: 8 Juni 2015/ Review: 22 Juli 2016/ Disetujui: 10 Agustus 2016
Cara sitasi: Rozi A, Suseno SH, Jacoeb AM. 2016. Ekstrak dan karakterisasi minyak hati cucut pisang. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia 19(2): 100-109.
Abstrak
Ikan cucut mempunyai hati yang beratnya 10-15% dari berat tubuhnya, 50% dari total minyak ikan cucut terdapat pada bagian hati. Penelitian ini bertujuan menentukan kandungan logam berat, profil asam lemak bahan baku, ekstraksi minyak ikan, dan parameter oksidasinya. Metode pengujian logam berat pada hati ikan cucut pisang yang mengacu pada SNI dan analisis asam lemak mengacu pada AOAC. Metode ekstraksi menggunakan panas oven dengan perlakuan suhu (50, 60, 70, dan 80°C) selama 8 jam. Hasil kandungan logam berat tertinggi adalah kadmium (Cd) dengan nilai sebesar 0,88±0,01 ppm, asam lemak SFA yaitu 18,46% dengan asam palmitat sebagai asam lemak yang dominan (12,59%). Kandungan MUFA sebesar 24,54% dengan asam oleat (17,86%) sebagai asam lemak dominan. Kandungan PUFA sebesar 19,11% dengan DHA (14,35%) sebagai asam lemak dominan, sementara kandungan asam lemak EPA sebesar 1,5%. Rendemen minyak hati ikan cucut terbesar didapatkan dari hasil ekstraksi pada suhu 50°C sebesar 24,47%. Oksidasi minyak hati cucut pisang hasil ekstraksi menunjukkan perlakuan terbaik adalah suhu 50°C dengan nilai peroksida (PV), nilai p-Anisidin (p-AV), persentase asam lemak bebas (%FFA), bilangan asam (AV), dan total oksidasi (TOTOX) masing-masing yaitu 7,26±1,27 mEq/kg, 16,79±0,28 mEq/kg, 5,47±0,12%, 10,88±0,25 mg KOH/kg, dan 31,31±2,26 mEq/kg.
Kata kunci: asam lemak, cucut pisang, ekstraksi, kualitas minyak

## Abstract
Silky shark liver was 10-15%  of  its body mass and 50% of oil is contained in the liver. The aimed of this study was to determine heavy metal content, fatty acid profile on raw material, extraction of its oil, and parameter of oxidation. The method of  heavy metal test stated on the SNI and fatty acid analysis referred to AOAC. The extraction was oven methode at 50, 60, 70, and 80°C in 8 hours. Cadmium (Cd) as the highest heavy metal content with 0.88±0.01 ppm, SFA was 18.46% composed by palmitic acid dominantly (12.59%). The MUFA was 24.54 % with the highest oleic acid (17.86%). PUFA was 19.11 % that consist of DHA (14.35%) as the most abundantly present while EPA was 1.50%. Shark liver oil which was extracted at 50°C had the highest yield (24.47%). The oxidation of silky shark liver oil extraction indicated the best treatment at 50°C with peroxide value (PV), p-Anisidine value (p-AV), percentage of free fatty acid (% FFA), acid value (AV), and total oxidation (TOTOX) were 7.26±1.27 mEq/kg, 16.79±0.28 mEq/kg, 5.47±0.12%, 10.88±0.25 mg KOH/kg, and 31.31±2.26 mEq/kg respectively.
Keywords: extraction, fatty acid, silky shark, quality of oil
sebesar 3,35%. Ikan cucut memiliki rendemen by-product berupa hati yang memiliki berat hingga mencapai 20% dari berat tubuhnya (Navarro et al. 2000), 50% dari total minyak ikan  cucut  terdapat  pada  bagian  hati (Kjerstad et al. 2003). Profil asam lemak pada minyak hati ikan cucut meliputi asam lemak jenuh dan asam emak tak jenuh. Menurut Edward (1976), asam lemak tak jenuh pada ikan cucut meliputi asam oleat 25,2%, asam linoleat 2,3%, asam linolenat 0,4%, asam stearidonat 1,4%, asam gondorat 9,2%, asam arachidonat 3,1%, EPA 9,2%, asam erukat 6,6%, DPA 3,4% dan DHA 7,3%.
Huli et al. (2014) melakukan penelitian ekstraksi minyak terhadap kulit ikan swangi metode wet rendering dengan perlakuan suhu 60, 70, 80, 90, 100°C mendapatkan kualitas minyak terbaik pada perlakuan suhu 60°C berdasarkan uji kualitas minyak (FFA, PV, p-anisidin, TOTOX, dan AV), sedangkan rendemen tertinggi pada perlakuan suhu 80°C selama 30 menit sebesar 1,23%.
Penelitian sebelumnya melaporkan bahwa by-product pengolahan ikan cucut berpotensial sebagai sumber minyak ikan yang kaya akan omega-3 dan squalen (Damongilala 2008; Budiatin 2005; dan Undjung 2005). Penelitian ini bertujuan  menentukan kandungan logam berat, profil asam lemak hati cucut pisang, ekstraksi minyak ikan dengan metode dry rendering dan parameter oksidasinya.

## BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi hati ikan cucut pisang hasil samping dari pengasinan, KOH (Merck), CH 3 COOH (Merck), kloroform (Merck), Na 2 S 2 O 3 (Merck), trimethylpentane (Merck), larutan p-Anisidin (Sigma aldrich). Alat yang digunakan adalah burret (Iwaki Pyrex), spektrofotometer UV-VIS (Agilent 8453), timbangan digital (Quattro), mikropipet (Axygen), Shimadzu GC 2010 Plus dan Atomic Absorption Spectroscopy (AAS) shimadzu-7000.

## PENDAHULUAN
Industri perikanan adalah bidang usaha yang sangat luas dengan sistem multi proses, salah satunya adalah industri pengasinan ikan cucut, yang memiliki permasalahan produk sampingan ( by-product ). By-product ini memiliki potensi untuk diolah menjadi minyak ikan. Produksi minyak ikan dari hasil samping industri ikan sudah banyak dilakukan, yakni pada ikan tuna (Suseno 2015), sardin dan sidat (Suseno et al. 2014), patin (Arifianto et al. 2013), lele (Kalalo et al. 2013), carp (Crexi et al. 2010) dengan rendemen mencapai 38%.
Hati ikan cucut diketahui banyak mengandung minyak dan squalen yang dapat digunakan sebagai bahan obat-obatan. Minyak hati ikan cucut pada umumya dikenal adalah sebagai sumber vitamin A (Sudjoko 1991). Jenis ikan cucut yang banyak tertangkap di
Indonesia, yaitu cucut palu ( Zygaena sp.),
cucut caping ( Alopiar vulpinus ) dan cucut biru ( Prionace glauca ) yang berkadar minyak 20-60%, dengan kandungan vitamin A pada minyak sekitar 2.000-15.300 SI/gram (Raharjo & Saharto 1972). Proses produksi minyak ikan meliputi proses ekstraksi dan pemurnian. Ekstraksi yang banyak digunakan adalah ekstraksi basah (wet-rendering) yang meliputi pemasakan ikan dengan uap air panas ( steam ) untuk merusak struktur sel dan pengepresan terhadap minyak yang telah dipanaskan (Estiasih 2009).
Damongilala (2008) mengekstraksi minyak hati ikan cucut botol dengan pemanasan.
Suseno et al. (2014) melakukan ekstraksi minyak dari ikan sardin dengan beberapa metode, antara lain metode Bligh and Dyer mendapatkan  rendemen  minyak  sebesar 0,60-23,44%, metode soxhlet dengan rendemen minyak sebesar 0,9-39,00%, dan metode    wet rendering dengan rendemen minyak sebesar 0,00-10,00%. Suseno (2015) menganalisis proksimat by-product ikan tuna dengan kadar lemak tertinggi pada bagian ekor

## Metode Penelitian
Penentuan Kandungan Logam Berat (BSN 2009)
Sampel dipreparasi dan dianalisis sesuai dengan pengujian logam berat (Cd, Pb, Hg, Ni, As) pada analisis air (APHA 3110 untuk logam Cd, Pb, dan Ni; metode 3114 untuk As; dan metode 3112 untuk Hg). Filtrat dianalisis menggunakan Atomic Absorption Spectroscopy (AAS). Analisis kandungan logam dapat dihitung dengan persamaan berikut:

## Penentuan Profil Asam Lemak
(AOAC 2005)
Metode analisis yang digunakan menggunakan prinsip mengubah asam lemak menjadi turunannya, yaitu metil ester sehingga dapat terdeteksi oleh alat kromatografi. Hasil analisis akan ditunjukkan melalui beberapa puncak pada waktu retensi tertentu sesuai dengan karakter masing- masing asam lemak dan dibandingkan dengan standar. Lemak diekstraksi dari bahan terlebih dahulu sebelum melakukan injeksi metil ester lalu metilasi dilakukan untuk terbentuk metil ester dari masing-masing asam lemak yang didapat sehingga mampu dideteksi oleh alat kromatografi gas.

## Ekstraksi Minyak Ikan (Damongila
2008)
Ekstraksi minyak hati cucut pisang dilakuakn dengan sistem dry rendering menggunakan oven. Hati ikan cucut pisang dimasukkan ke dalam oven yang menggunakan sistem listrik lewat elemen pengatur suhu, kemudian dipanaskan dengan suhu yang berbeda (suhu 50, 60, 70, dan 80°C) selama 8 jam. Minyak ditampung dalam wadah dan disentrifugasi untuk memisahkan kotoran.

## Analisis Nilai Peroksida (PV) (AOCS
1995)
Nilai peroksida dianalisis dengan metode
AOCS Cd-8b-90 yaitu menentukan bilangan peroksida menggunakan prinsip titrasi iodin yang dilepaskan dari senyawa potassium iodida oleh peroksida menggunakan standar larutan tiosulfat sebagai titran dan larutan pati sebagai indikator. Metode ini mendeteksi semua zat yang mengoksidasi potassium iodida dalam kondisi asam. Sampel ditimbang sebanyak 5 g dimasukkan ke dalam labu erlenmeyer ukuran 250 mL, kemudian ditambah 30 mL larutan asam asetat dan kloroform dengan perbandingan 3:2, kemudian ditambah 0,5 mL larutan potassium iodide (KI). Larutan kemudian dikocok dengan hati-hati agar tercampur, kemudian ditambah 30 mL aquades. Tahap selanjutnya dititrasi dengan larutan 0,01 N sodium tiosulfate (Na 2 S 2 O 3 ) hingga larutan berubah warna menjadi kuning, setelah itu ditambah 0,5 mL larutan indikator kanji 1% yang akan mengubah warna larutan menjadi biru, titrasi dilanjutkan bersamaan dengan terus mengocok larutan hingga berubah warna menjadi biru muda yang menandakan pelepasan iodine dari lapisan kloroform, titrasi dilanjutkan dengan hati-hati hingga warna biru pada larutan hilang.
Perhitungan nilai peroksida dilakukan dengan persamaan berikut:
Keterangan: S  : Jumlah sodium tiosulfate (mL) M : Konsentrasi sodium tiosulfate (0,01 N)
Analisis Nilai p-Anisidin (p-AV) (AOCS
1998)
Analisis nilai p-Anisisdin dilakukan dengan metode AOCS Cd 18-90. Pengujian nilai p-Anisidin diperlukan dua nilai absorbansi dari dua larutan uji yang berbeda.
Kadar logam = Konsentrasi logam (µ g mL ) Bobot sampel 𝑥𝑥 V pelarutan (ppm) Nilai peroksida = S x M x 1000 Berat sampel (g)
Larutan uji 1 dibuat dengan cara melarutkan 1 g sampel ke dalam 25 mL trimethylpentane. Larutan uji 2 dengan cara menambahkan 1 mL larutan p-anisidin (2,5 g/L) ke dalam
5 mL larutan uji 1, kemudian dikocok dan dihindarkan dari cahaya. Larutan referensi dibuat dengan cara menambahkan 1 mL larutan p-anisidine (2,5 g/L) ke dalam 5 mL larutan trimetilpentana, dikocok dan dihindarkan dari cahaya. Nilai absorbansi larutan uji 1 diukur pada 350 nm. Larutan uji 2 diukur pada 350 nm tepat 10 menit setelah larutan disiapkan, dengan menggunakan larutan referensi sebagai kompensasi. Nilai anisidin ditetapkan dengan persamaan berikut:
Keterangan:
A1 : Absorbansi larutan uji 1 A2 : Absorbansi larutan uji 2 G : Massa sampel yang digunakan pada larutan uji 1 (1 g)
Analisis Presentase Asam Lemak Bebas (%FFA) (AOCS 1998)
Asam lemak bebas sangat berkaitan dengan flavour dan tekstur yang kurang menarik pada minyak. Nilai FFA pada industri pengolahan minyak berkaitan dengan jumlah alkali yang akan digunakan pada proses pemurnian (Sathivel et al.
2003). Analisis persentase asam lemak bebas dilakukan dengan metode AOCS Ca 5a-4 yaitu dengan menimbang sebanyak 10 gram minyak kemudian ditambah 25 mL alkohol
95% (erlenmeyer 200 mL), dipanaskan dalam penangas air selama 10 menit, kemudian campuran tersebut ditetesi indikator PP sebanyak 2 tetes. Campuran tersebut dikocok dan dititrasi dengan KOH 0,1 N hingga timbul warna pink yang tidak hilang dalam 10 detik. Persentase FFA dihitung berdasarkan persamaan berikut:
Keterangan:
A  : Jumlah titrasi KOH (mL)
N  : Normalitas KOH
G  : Berat sampel (g)
M : Bobot molekul asam lemak dominan (asam oleat) (282,5)

## Analisis Bilangan Asam (AV) (AOCS
1998)
Nilai keasaman dianalisis berdasarkan metode AOCS Ca 5a-40. Penentuan derajat keasaman dilakukan dengan cara titrasi KOH terhadap sampel, yang menggunakan prinsip jumlah KOH yang diperlukan (mg) untuk menetralkan 1 g lemak. Persamaan untuk mendapatkan derajat keasaman (mg KOH/ mL lemak) adalah:
Keterangan:
N : Konsentrasi KOH (mg/mL) V : Volume KOH untuk titrasi (mL) K : Berat molekul KOH (56,1) G : Berat sampel (g)
Analisis Nilai Total Oksidasi (TOTOX) (AOCS 1998)
Nilai total oksidasi (TOTOX) dilakukan dengan metode AOCS Cd 18-90 dengan persamaan :
Nilai total oksidasi = (2PV + p-AV)
Keterangan: PV     : Nilai Peroksida (mEq/kg) p-AV : Nilai Anisidin (mEq/kg)

## Analisis Data (Walpole dan Ronald
1995)
Analisis statistik yang digunakan yaitu RAL (Rancangan acak lengkap) pada
Nilai anisidin = 25 𝑥𝑥 (1,2 𝐴𝐴2 − 𝐴𝐴1)
𝐺𝐺 %FFA  = A x N x M 10G
Bilangan asam = V x N x K 10G
evaluasi kualitas minyak hati cucut. Analisis data dilakukan dengan
Analysis of Variant
(ANOVA) pada selang kepercayaan 95% (α = 0,05). Perlakuan yang berpengaruh terhadap respon, selanjutnya diuji lanjut Duncan, dengan rumus sebagai berikut :
Keterangan: μ = Rataan umum
Yij = Respon pengaruh perlakuan pada taraf i ulangan ke-j Σij = Galat  ke-i, ulangan ke-j αi = Pengaruh perlakuan pada taraf ke-i

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Residu Logam Berat
Residu logam berat yang terdapat pada hati ikan cucut pisang masih dalam ambang batas yang ditetapkan BSN (2009) kecuali kandungan Cd dengan nilai sebesar 0,88±0,01 ppm, diduga perairan tersebut banyak mengandung limbah cat dan baterai. Residu logam berat pada hati ikan cucut pisang ditunjukkan pada Tabel 1. Logam berat di dalam tubuh makhluk hidup akan mengalami bioakumulasi sehingga kadarnya di dalam tubuh lebih besar dari pada lingkungan perairan (Darmono 2001; Effendi 2003). Logam berat dapat menimbulkan efek samping pada makhluk hidup apabila melebihi ambang batas yang dibutuhkan oleh tubuh. Logam berat kadmium (Cd) bersifat kumulatif dan juga sangat toksik karena logam ini dapat menyebabkan gangguan fungsi ginjal dan paru-paru, peningkatan tekanan darah dan menyebabkan kemandulan pada pria (Effendi 2003).

## Nilai pH
Hasil pengujian pH produk segar dan olahan filet lele dumbo asap berbumbu ditunjukkan pada Tabel 2. Produk segar memiliki pH-6,8 mendekati pH netral, sedangkan produk olahan memiliki pH yang cenderung asam yaitu pH-5,47 (asap goreng) dan pH-5,73 (asap oven). Perubahan pH cenderung asam pada pengasapan dikarenakan asap cair memiliki pH asam (≤pH-4). Penelitian sebelumnya oleh Kaba et al. (2013) pada pengasapan ikan roa menunjukkan pH-5,16.

## Profil Asam Lemak
Uji asam lemak dilakukan untuk mengetahui kandungan asam lemak baik itu asam lemak jenuh/saturated fatty acid (SFA), asam lemak tak jenuh tunggal/ mono unsaturated fatty acid (MUFA), dan asam lemak tak jenuh majemuk/poly unsaturated fatty acid (PUFA). Total SFA pada hati ikan cucut pisang yaitu 18,46% dan didominasi oleh asam palmitat (12,59%). Kandungan total MUFA yaitu 24,54%, didominasi oleh asam oleat (17,86%), sedangkan pada PUFA yaitu 19,11% didominasi DHA (14,35%). Profil asam lemak hati ikan cucut pisang ditunjukkan pada Tabel 2.
Minyak ikan memiliki kandungan asam lemak yang berbeda (Berghe dan Branathan 2005), lingkungan dan jenis makanan juga mempengaruhi komposisi asam lemak pada ikan (Ould El Kebir et al. 2003). Saito et al. (1997) menyatakan asam lemak berbeda antara spesies ikan dan tergantung berbagai faktor seperti musim, suhu, tempat berkembang,
Tabel 1 Residu logam berat pada hati cucut pisang
( Charcharinus falciformis ) Logam berat ppm Batas ambang SNI (2009) Timbal (Pb) 0,00±0,00 1 Kadnium (Cd) 0,88±0,01 0,5 Merkuri (Hg) <0,005 1 Arsen (As) <0,005 1 Nikel (Ni) 0,68±0,01 1 Yij= μ + αi+ Σij
spesies ikan, umur, jenis kelamin, dan kebiasaan makan.
Okland et al. (2005) melaporkan bahwa kandungan PUFA ikan laut dalam didominasi oleh DHA dan memiliki kisaran 29,55- 39,67%. Kandungan MUFA didominasi oleh asam oleat (13,56-22,53%). Kandungan SFA didominasi oleh asam palmitat (9,84-12,49%).
Suseno et al. (2010) meneliti profil asam lemak ikan laut dalam dan memperoleh hasil berupa
SFA (0,86-43,18%), MUFA (37,10-50,09%), dan PUFA (2,52-16,10%)

## Ekstraksi Minyak
Rendemen hasil ekstraksi pada hati ikan cucut pisang ( Charcharinus falciformis ) menggunakan oven suhu (50, 60, 70, dan 80°C) yaitu 24,47, 20,16, 16,06, dan 17,20%. Damongilala (2008) menyatakan ekstraksi hati ikan cucut botol dengan pemanasan
Tabel 2 Persentase profil asam lemak hati cucut pisang ( Charcharinus falciformis ) Nama asam lemak Struktur Hati ikan cucut Asam laurat C12:0 0,04 Asam tridekanoat C13:0 0,02 Asam miristat C14:0 1,60 Asam pentadekanoat C15:0 0,54 Asam palmitat C16:0 12,59 Asam heptadekanoat C17:0 0,52 Asam stearat C18:0 2,91 Asam arakidat C20:0 0,11 Asam heneikosanat C21:0 0,03 Asam behenat C22:0 0,06 Asam lignoserat C24:0 0,04 Total SFA 18,46 Asam miristoleat C14:1 0,04 Asam palmitat C16:1 2,58 Asam cis-10-heptadecanoat C17:1 0,61 Asam Elaidat C18:1n-9t 0,13 Asam oleat C18:1n-9c 17,86 Asam cis-11-eicosenoat C20:1 2,48 Asam erukat C22:1n-9 0,45 Asam Nervonat C24:1 0,39 Total MUFA 24,54 Asam linoleat C18:2n-6c 0,70 Asam cis-11, 14-eicosedienoat C20:2 0,34 Asam cis-13, 16-docosadienoat C22:2 0,04 Asam cis-8, 11, 14-eicosetrienoat C20:3n-6 0,16 Asam arachidonat C20:4n-6 2,02 Asam eicosapentaenoat (EPA) C20:5n-3 1,50 Asam docosahesaenoat C22:6n-3 14,35 Total PUFA 19,11
menggunakan oven menghasilkan asam lemak tak jenuh lebih besar dibandingkan pemanasan menggunakan sinar matahari. Lubis dan Nova (2013) menyatakan bahwa rendemen dari hasil ekstraksi sangat tergantung pada suhu dan waktu ekstraksi. Penelitian lain terhadap ikan patin Arifianto et al. (2013) memperoleh rendemen tertinggi sebesar 18,75% pada perlakuan suhu 75°C dan rendemen terendah sebesar 8,13% pada perlakuan suhu 50°C.
Parameter Oksidasi Nilai Peroksida (PV),  Nilai p-Anisidin (p-AV), dan Nilai TOTOX
Nilai peroksida terendah didapatkan pada hasil ekstraksi dengan suhu 50°C sedangkan nilai tertinggi pada suhu 80°C. Nilai p-anisidin terendah didapatkan pada hasil ekstraksi suhu 50°C, sedangkan nilai tertinggi pada suhu 80°C. Nilai total oksidasi terbaik yang didapatkan pada penelitian ini pada ekstraksi suhu 50°C dan merupakan nilai terendah dibandingkan dengan perlakuan suhu lain, sedangkan nilai terbesar didapatkan pada suhu 80°C.
Kerusakan minyak ikan disebabkan oleh cahaya, panas, peroksida lemak, logam berat, hemoglobin, mioglobin, klorofil dan enzim lipooksidase (Ketaren 2005). Nilai oksidasi sangat penting sebagai indikator mutu minyak, semakin rendah nilai oksidasi maka kualitas minyak akan semakin baik. International Fish Oil Standard (IFOS) menetapkan nilai bilangan peroksida <3,75 meq/Kg sebagai standar minyak kategori layak konsumsi.
Analisis nilai peroksida terhadap minyak kasar hasil ekstraksi dilakukan
untuk menentukan jumlah hidroperoksida pada minyak yang merupakan hasil proses oksidasi primer (Aidos et al. 2002). Aidos et al. (2002) menyatakan bahwa nilai peroksida sangat tergantung pada suhu ekstraksi, semakin rendah suhu ekstraksi maka semakin baik kualitas minyak ikan. Nilai peroksida ditunjukkan pada Tabel 3. Analisis p-anisidin dilakukan untuk mengetahui oksidasi sekunder yang dicirikan oleh degradasi lemak yang diinisiasi oleh hidroperoksida, sehingga menghasilkan produk samping karbonil yang bersifat non- volatile (Aidos et al. 2002). Estiasih et al. (2009) menyatakan lama ekstraksi dan suhu dapat mempengaruhi nilai sekunder oksidasi, faktor lain yang memicu oksidasi misalnya kontak dengan oksigen, pemanasan berulang, cahaya, katalis logam seperti besi dan tembaga, serta derajat ketidak jenuhan asam lemak dalam minyak.
Minyak yang berkualitas bagus harus memiliki nilai p-anisidin dibawah 20 mEq/Kg (Hamilton et al. 1988), 4-60 mEq/Kg (Bimbo 1998), ≤15 mEq/Kg (BPOM-RI dan IFOS). Waktu penyimpanan merupakan faktor yang menyebabkan terbentuknya senyawa p-anisidin disamping antioksidan alami yang terkandung dalam minyak ikan. Nilai p-anisidin ditunjukkan pada Tabel 3.
Nilai total oksidasi merupakan penjumlahan x 2 nilai peroksida dan p-anisidin (Perrin 1996). Bimbo (1998) menyatakan nilai TOTOX untuk minyak layak konsumsi antara 10-60 mEq/Kg. Sementara IFOS menyatakan minyak layak konsumsi harus memiliki nilai TOTOX dibawah 20 mEq/Kg. Nilai total oksidasi ditunjukan pada Tabel 3.
Tabel 3 Analisis nilai peroksida minyak hati cucut pisang ( Charcharinus falciformis ) Perlakuan Suhu Nilai peroksida (mEq/Kg) Nilai p-Anisidin (mEq/Kg) Nilai TOTOX (mEq/Kg) 50°C 7,26 ± 1,27 a 16,79 ± 0,28 a 31,31 ± 2,26 a 60°C 10,33 ± 2,82 a 18,28 ± 0,19 b 38,94 ± 5,85 a 70°C 20,62 ± 0,53 b 19,65 ± 0,27 c 60,89 ± 1,34 b 80°C 21,32 ± 1,42 b 22,65 ± 0,27 d 65,29 ± 3,12 b
Keterangan : Huruf superscript yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan adanya perbedaan nyata ( p <0,05)

## Persentase Asam Lemak Bebas
(%FFA)
Persentase asam lemak bebas dimana perlakuan suhu 50ºC memberikan nilai terbaik, sedangkan nilai tertinggi didapatkan pada suhu ekstraksi 80°C. FFA adalah produk dari reaksi hidrolisis triasilgliserida yang sangat erat kaitannya dengan proses penyimpanan. Sathivel et al. (2003) menyatakan bahwa nilai
FFA sangat berkaitan dengan jumlah alkali yang akan digunakan pada proses pemurnian.
Minyak yang memiliki persentase asam lemak bebas yang tinggi akan memiliki aroma dan rasa yang kurang baik (Sathivel et al. 2003). Parameter oksidasi primer dan sekunder berhubungan erat dengan warna, bau, rasa dan pengotor lain dalam minyak ikan (Suseno et al. 2012). Nilai persentase asam lemak bebas ditunjukkan pada Tabel 4.

## Bilangan Asam (AV)
Nilai bilangan asam terendah pada suhu ekstraksi 50°C, sedangkan nilai tertinggi didapatkan pada suhu ekstraksi 80°C. Nilai bilangan asam berkaitan erat dengan jumlah KOH yang digunakan untuk menetralkan 1 g minyak. Bilangan asam sangat mempunyai hubungan dengan nilai asam lemak bebas (FFA). Bilangan asam didapatkan dengan perkalian konstanta 1,99 dengan nilai asam lemak bebas (FFA). Meningkatnya ketengikan minyak adalah karena perubahan triasilgliserida (TAG) menjadi asam lemak bebas dan gliserol. Nilai bilangan asam ditunjukkan pada Tabel 4.
Kualitas asam lemak bebas, kadar air,
warna, nilai p-anisidin, dan nilai peroksida minyak ikan sangat menentukan harga minyak ikan tersebut di pasaran (European Comission 2006). Bilangan asam merupakan parameter yang penting untuk menentukan keberadaan nilai FFA dan komponen asam non-lemak lainnya. Bilangan asam sangat tergantung pada komposisi minyak, metode ekstraksi, dan kesegaran bahan mentah (Mohanarangan 2012; Aidos et al. 2002)

## KESIMPULAN
Residu logam berat berada dalam ambang batas, hanya Cd yang melewati ambang batas dengan nilai 0,88±0,01 ppm. Profil asam lemak meliputi SFA sebesar 18,46%, MUFA sebesar 25,54%, dan PUFA sebesar 19,11% serta asam lemak oleat merupakan asam lemak dominan dengan nilai sebesar 17,86%. Perlakuan suhu 50°C merupakan perlakuan terbaik berdasarkan rendemen dan parameter oksidasi. Perlakuan suhu 50°C menghasilkan rendemen 24,47%; nilai peroksida (PV) sebesar 7,26±1,27 mEq/Kg; nilai p-Anisidin (p-AV) sebesar 16,79±0,28 mEq/Kg; nilai total oksidasi (TOTOX) sebesar 31,31±2,26 mEq/ Kg; persentase asam lemak bebas (%FFA) sebesar 5,47±0,12% dan bilangan asam (AV) sebesar 10,88±0,25 mg KOH/Kg.

## DAFTAR PUSTAKA
Aidos I, van-der-Padt A, Boom RM, Luten JB. 2002. Seasonal changes in crude and lipid composition of herring fillets, by-products and respective produced oils. Journal of Agricultural and Food
Tabel 4 Persentase asam lemak bebas (FFA) dan bilangan asam (AV) minyak hati cucut pisang ( Charcharinus falciformis ) Perlakuan Suhu Asam lemak bebas (%FFA) Bilangan asam (mg KOH/Kg) 50°C 5,47 ± 0,12 a 10,88 ± 0,25 a 60°C 5,68 ± 0,36 a 11,30 ± 0,73 a 70°C 7,70 ± 0,24 b 15,32 ± 0,47 b 80°C 10,63 ± 0,05 c 21,15 ± 0,11 c
Keterangan : Huruf superscript yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan adanya perbedaan nyata ( p <0,05)
Chemistry 50: 4589-4599. [AOAC] Association of Official Analytical Chemist. 2005. Official Method of Analysis of The Association of Official Analytical of Chemist. Arlington. Virginia. USA. Published by The Association of Analytical Chemist. Inc. [AOCS] American Oil Chemists Society. 1998. Official Methods and Recommended Practices of the American Oil Chemists’ Society, 5th ed. AOCS Press, Champaign. Arifianto TB, Nurjanah, Suseno SH. 2013. Karakterisasi bahan dan ekstraksi minyak ikan dari hasil samping ikan patin ( Pangasius hypoptalmus ). Jurnal Teknologi Industri Pertanian . in press. Berghe  JP, Branathan G. 2005. Fatty acids from lipids of marine organism: molecular biodiversity, roles as biomarkers, biologically active compounds, and economical aspects. Adv. Biochem. Engin/
Biotechnol 96: 49-125.
Bimbo AP. 1998. Guidelines for characterizing food-grade fish oil. Inform, 9: 473-483. Brody J. 1965. Fishery By-Products Technology. AVI, Westport. [BSN] Badan Standardisasi Nasional. 2009. Batas maksimum cemaran logam berat dalam pangan. Jakarta: Departemen Perindustrian RI. SNI 7387:2009.
Budiatin AS. 2005. Elusidasi struktur isolat skualena dari ikan hiu cucut botol ( Centrophorus sp.). Berk. Penel. Hayati. 11: 67-72.
Crexi VT, Maurucio LM, Leonor AdZS, Luiz
AAP. 2010. Production and refinement of oil from carp ( Cyprinus carpio ) viscera. Food Chemistry 119: 945-950. Damongilala LJ. 2008. Kandungan asam lemak tak jenuh minyak hati ikan cucut botol ( Centrophorus sp.) yang diekstraksi dengan cara pemanasan. Jurnal Ilmiah
Sains 8: 249-253. Darmono. 2001. Lingkungan Hidup dan Pencemaran. Jakarta: UI Press. [EC] European Commission. 2006. Commission regulation (EC) No
1199/2006 amending regulation (EC) No 466/2001 setting maximum levels for certain contaminants in food stuffs as regards dioxins and dioxin-like PCBs. Off. J. EU, L32/34. Edward HG. Jr. 1967. Fatty Acid Composition. Di dalam Stansby ME. Fish Oils, Their Chemistry, Technology, Stability, Nutritional, Properties, and Uses. The AVI Publishing Company Inc. Westport Connecticut. USA. Effendi H. 2003. Telaah Kualitas Air Bagi Pengelolaan Sumberdaya dan Lingkungan Perairan. Yogyakarta: Kanisius. Estiasih T. 2009. Minyak Ikan, Teknologi dan Penerapannya untuk Pangan dan Kesehatan. Yogyakarta: Graha Ilmu. Estiasih T, Ahmadi KGS, Nisa CF, Kusumastuti F. 2009. Optimasi kondisi pemurnian asam lemak omega-3 dari minyak hasil samping penepungan tuna ( Thunnus sp) dengan kristalisasi urea. Jurnal Teknologi dan Industri Pangan 20(2): 135-142.
Hamilton RJ, Kalu C, McNeill GP, Padley FB,
Pierce JH. 1988. Effects of tocopherols, ascorbyl palmitate and lecithin on autoxidation of fish oil. J Am Oil Chem
Soc 75(7): 813–821. Huli LO, Suseno SH, Santosos J. 2014. Kualitas minyak ikan dari kulit ikan swangi. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia 17 (3): 233-242. Kalalo PL, Nurjanah, Suseno SH. 2013.
Karakterisasi bahan dan ekstraksi minyak ikan dari hasil samping ikan lele ( Clarias sp.). Jurnal Teknologi Industri Pertanian . in press. Ketaren S. 2005. Minyak dan Lemak Pangan. Jakarta: UI Press.
Kjerstad M, Fosse I, Willemsem H. 2003.
Utilization of deep–sea sharks at Hatton Bank in the North Atlantic. J Northwest Atlantic Fisheries Science (31): 333–338.
Lubis MR, Nova M. 2013. Leaching of oil from tuna fish liver by using solvent of methyl- ethyl ketone. Jurnal Rekayasa Kimia dan Lingkungan 9(4): 188-196.
Mohanarangan AB. 2012. Extraction of omega-3 fatty acids from Atlantic Herring
( Clupea herengus ). [Tesis]. Dalhousie University. Halifax, Nova Scotia. Navarro G, Pacheco R, Vallejo B, Ramirez J, Bolaños A. 2000. Lipid composition of the liver oil of shark species from the Caribbean and Gulf of California waters. Journal of Food Composition and Analysis 13: 791-798. Okland HMW, Stoknes IS, Remne JF, Kjerstad M, Synnes M.  2005.  Proximate composition, fatty acid and lipid class composition of the muscle from deep- sea teleosts and elasmobranches.
Comparative Biochemistry and Physiology, Part B. 140: 437-443. Ould El Kebir MV, Branathan G, Siau Y, Miralles J, Gaydou EM. 2003. Fatty acid distribution in muscle, liver and gonads of rays ( Dasyatis marmorata , Rhinobatos cemiculus , and Rhinoptera marginata ) from the East Tropical Atlantic Ocean. J.
Agric. Food. Chem 51: 1942-1947. Perrin JL. 1996. Determination of alteration. In: Karleskind A, Wolff JP. (Eds.) Oils and Fats, Manual vol. 2. Lavoisier Publishing, Paris (France). Raharjo AA, Saharto I. 1972. Cara-cara Ekstraksi Minyak Hati Ikan Hiu. Bulletin, K-7. Bandung: Lembaga Kimia Nasional. Sathivel S, Prinyawiwatkul W, King JM, Grimm CC, Lloyd S. 2003. Oil production from catfish viscera. Journal of American Oil Chemistry Society 80(4): 277–382. Saito H, Ishihara K, Murase T. 1997. The fatty acid composition in tuna (bonito,
Euthynnus pelamis ) caught at tree defferent localities from tropics to temperete. J. Sci. Food. Agric. 73: 53-59.
Shahidi F. 2007. Maximixing the Value of Marine by-products. CRC Press, Boca Raton, Florida. ISBN 1 84569 013 3. Sudjoko B, 1991. Pemamfaatan ikan cucut.
Jurnal Osena 16(4): 31-37.
Suseno SH, Tajul AY, Nadiah WA, Hamidah, Asti, Ali. 2010. Proximate, fatty acid and mineral composition of selected deep sea fish species from Southern Java Ocean and Western Sumatra Ocean, Indonesia. International Food Research Journal 17:
905-914.
Suseno SH, Tajul AY, Nadiah WA, Noor AF.
2012. Improved of colour properties on Sardiniella lemuru oil during adsorbent refining using magnesol XL. International Food Research Journal 19(4): 1383–1386.
Suseno SH, Syari C, Zakiyah ER, Jacoeb AM,
Izaki AY, Saraswati, Hayati S. 2014. Low temperature extracktion and quality of oil from spotted sardinella ( Amblygaster srim ) and goldstrip sardinella ( Sardinella gibbosa ). World Journal of Fish and
Marine Sciences 6(5): 435-440.
Suseno SH. 2014. Fatty acid profiles of tropical eel ( Anguila sp.) by-products. Advance Journal of Food Science and Technology
6(6): 802-806.
Suseno SH. 2015. Proximate, fatty acid, amino acid and mineral composition of tuna ( Thunnus sp.) by-product from West Sumatra Povince, Indonesia. Pakistan Journal of Nutrition 14(1): 62-66.
Undjung D. 2005. Continous production of pure squalene by using column chomatography. Indo. J. Chem 5(3): 251-
254. Walpole, Ronald E. 1995. Pengantar Statistika.
Edisi ke-3. Bandung: ITB. .