Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antioksidan Jantung Pisang Goroho ( musa acuminafe l. ) Dengan Metode 1,1-diphenyl-

## 2-picrylhidrazyl
(DPPH)
Widy Susanti Abdulkadir 1*, Hamsidar Hasan 2 ,Ading Alamsyah 3
1,2,3 Jurusan Farmasi, Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo, Gorontalo, Indonesia. * E-mail: widi@ung.ac.id
Article Info: Received: 14 Juli 2021 in revised form: 2 Agustus 2021 Accepted: 15 Agustus 2021 Available Online: 30 Agustus 2021

## ABSTRACT
Goroho banana ( Musa acuminafe L.) has its own characteristics and is one of the local varieties of banana that is not widely known  to  people  outside  North  Sulawesi.  In  addition,  it  is commonly  used  as  an  antioxidant.  Antioxidants  are substances that  can  improve  the  function  of  layers of  blood vessels,  inhibit  blood  platelet  aggregation  where  it  can stimulate  the  production  of  Nitric  Oxide,  which  causes  the relaxation of blood vessels and can reduce the sensitivity of Low-Density Lipoprotein (LDL) to the effects of free radicals. Therefore,  this  research  aims  to  determine  the  chemical content  and  antioxidant  activity  of  Goroho  Banana  ( Musa acuminafe L.)  by  using  DPPH  ( 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ) method. Besides, the extraction of samples is carried out by employing  extraction  graded  with  n-hexane,  chloroform, ethyl  acetate,  and  ethanol  solvents.  Findings  reveal  that Goroho  banana  ( Musa  acuminafe L.)  peel  extract  contains Alkaloid and Flavonoid compounds. Meanwhile, the value of antioxidant activity indicates that the IC 50 value for n-hexane, chloroform, ethyl acetate, and ethanol extracts are 6.38, 5.48, 5.11,  4.19  ug/ml,  respectively.  In  conclusion,  the  IC 50 value discloses that the antioxidant activity is in a strong category.
Keywords :
Musa acuminafe.L
Antioxidant DPPH IC 50

## Corresponding Author:
Widy Susanti Abdulkadir Jurusan Farmasi Fakultas Olahraga dan Kesehatan Universitas Negeri Gorontalo
E-mail: widi@ung.ac.id
Copyright © 2021  IJPE-UNG UNG This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0
International license .
How to cite (APA 6 th Style): Abdulkadir.W.S.,Hasan.H. Alamyah.A., (2021) . Skrining fitokimia dan uji aktivitas antiokaisan jantung pisang goroho ( Musa acuminafe L. ) dengan metode 1,1–diphenyl-2-picylhydrazyl (DPPH). Indonesian Journal of Pharmaceutical (e-Journal),1 (3), 136-141.
Indonesian Journal of Pharmaceutical Education (e-Journal) 2021; 1 (3): 136 – 141 ISSN : 2775- 3670 (electronic) Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/ijpe/index DOI: 10.37311/ijpe.v1i3.11371

## ABSTRAK
Pisang goroho ( Musa acuminafe L. ) memiliki ciri khas tersendiri dan merupakan salah satu jenis pisang  varietas  lokal  yang  belum  banyak  dikenal  masyarakat  diluar  Sulawesi  Utara  dan dimanfaatkan  sebagai  antioksidan.  Antioksidan  mampu  memperbaiki  fungsi  lapisan  pada pembulu  darah,  menghambat  penggumpalan  keping-keping  darah  yang  dimana  dapat merangsang produksi Nitrit Oksida yang menyebabkan relaksasi pembulu darah dan dapat mengurangi  kepekaan Low  Density  Lipoprotein (LDL)  terhadap  pengaruh  radikal  bebas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan kimia dan aktivitas antioksidan jantung pisang goroho ( Musa acuminafe L. ) dengan menggunakan metode 1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl (DPPH).  Ekstraksi  sampel  dilakukan  dengan  metode  ekstraksi  bertingkat  menggunakan pelarut n-heksan, kloroform, etil asetat dan etanol. Hasil penelitian menunjukkan ekstrak kulit Pisang  goroho  ( Musa  acuminafe  L. )  mengandung  senyawa  Alkaloid  dan  Flavonoid.  Nilai aktivitas  antioksidan  menunjukkan  nilai  IC 50 ekstrak  N-heksan,  kloroform,  etil  asetat,  dan etanol  berturut-turut  sebesar  6.38,  5.48,  5.11,  4.19  μg/mL.  Nilai  IC 50 menunjukkan  bahwa aktivitas antioksidan adalah kategori kuat.
Kata Kunci: Jantung Pisang Goroho , Antioksidan , DPPH , IC 50 .

## 1.  Pendahuluan
Seiring  dengan  semakin  tingginya  tingkat  kesadaran  masyarakat  akan  kesehatan, penggunaan  obat  yang  berasal  dari  tumbuhan  atau  pengobatan  dengan  cara  tradisional  juga mengalami  peningkatan,  hal  ini  mungkin  disebabkan  karena  lebih  murah  dan  minim  efek samping dibanding dengan menggunakan obat-obat modern atau obat-obatan dari bahan kimia. Maka dari itu penggunaan obat dari bahan alam bisa digunakan dalam bentuk sediaan tunggal maupun ramuan untuk berbagai macam penyakit [2].
Menurut  pengalaman  empiris  oleh  masyarakat  kabupaten  bolaang  mongondow  dan kotamobagu  bahwa  jantung  pisang  goroho  ( Musa  acuminafe  L .)  dipercaya  berkhasiat  sebagai antihipertensi  sehingga  sebagian  masyarakat  mengolah  jantung  pisang  goroho  untuk dikonsumsi sebagai  obat penurun darah tinggi (hipertensi)[14], hal ini memungkinkan kadar antioksidan  yang  terkandung  dalam  jantung  pisang  sangat  tinggi  [10].,  antioksidan  mampu memperbaiki fungsi lapisan pada pembulu darah, menghambat penggumpalan keeping-keping darah  yang  dimana  dapat  merangsang  produksi  Nitrit  Oksida  yang  menyebabkan  relaksasi pembulu  darah  dan  dapat  mengurangi  kepekaan Low  Density  Lipoprotein (LDL)  terhadap pengaruh radikal bebas [3].
Berdasarkan hal tersebut akan dilakukan penelitian skrining fitokimia dan uji aktifitas antioksidan  jantung  pisang  goroho  ( Musa  acuminafe  L .)  dengan  Metode 1,1-Difenil-2- Picrylhydrazin (DPPH)  untuk  mengetahui  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  dalam jantung pisang goroho serta uji aktifitas antioksidan dengan metode DPPH untuk mengetahui kemampuan ekstrak dalam menghambat radikal bebas DPPH.

## 2.  Metode

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  untuk  penelitian  ini  yaitu  batang  pengaduk,  blender,  cawan porselin, chamber KLT, corong, evaporator, gelas kimia ( pyrex ), gelas ukur ( pyrex ), gunting, kuvet ( Quartz ), tabung reaksi, lampu UV 366 nm, maserator, neraca analitik, penggaris, pensil, pipa kapiler, pipet tetes, pipet mikro ( Perkin elmer ), rak tabung reaksi, spatula, spektrofotometer UV- Vis ( Perkin elmer ), vial, wadah steinlis, wadah maserasi.
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  yaitu  alkohol  70%,  aluminium  foil,  asam klorida,  asam  sulfat  pekat,  aquades,  DPPH,  etanol,  etil  asetat,  ferri  klorida,  kertas  label, kloroform, metanol, n-heksan, pereaksi dragendroff, pereaksi mayer, pereaksi wagner, preaksi shinoda, preaksi Lieberman-Burchard, simplisia Jantung Pisang Goroho ( Musa acuminafe L. ), plat KLT.

## Prosedur Penelitian
Sampel yang digunakan pada penelitian ini yaitu sampel jantung pisang goroho. Sampel dilakukan  pembersihan  dan  dipotong  kecil,  selanjutnya  sampel  dikeringkan  dan  dihaluskan menggunakan  blender  untuk  memperoleh  serbuk  kering.  Sampel  yang  telah  dihaluskan diekstraksi menggunakan metode maserasi bertingkat memakai pelarut n-heksan, kloroform, etil asetat, dan etanol. Pada proses awal, sampel diekstraksi menggunakan n-heksan sebanyak 1500 mL  selama  3  x  24  jam.  Hasil  maserasi  pelarut  n-heksan  kemudian  disaring  dan  filtratnya  di pekatkan  menggunakan  evaporator  sedangkan  residu  diangin-anginkan  sampai  kering kemudian diekstraksi kembali dengan pelarut kloroform sebanyak 1500 mL selama 3 x 24 jam. Hasil maserasi pelarut kloroform kemudian dilakukan penyaringan dan filtratnya dipekatkan menggunakan  evaporator,  sedangkan  residu  diangin-anginkan  sampai  kering  kemudian diekstraksi kembali dengan etil asetat sebanyak 1500 mL selama 3 x 24 jam. Hasil maserasi pelarut etil  asetat  dilakukan  penyaringan  filtrat  kemudian  dipekatkan  dengan  evaporator  sedangkan residunya  diangin-anginkan  kembali  sampai  kering  kemudian  diekstraksi  kembali  dengan pelarut  etanol  sebanyak  1500  mL  selama  3  x  24  jam.  Hasil  maserasi  pelarut  etanol  dilakukan penyaringan  dan  filtrat  hasil  dipekatkan  menggunakan  evaporator  sampai  menjadi  ekstrak kental.

## Skrining Fitokimia
Pengujian komponen kimia ekstrak jantung piang goroho ( Musa acuminafe. L ) meliputi uji Alkaloid, Flavonoid, Saponin, Steroid, Tanin dan Triterpenoid.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Uji aktivitas antioksidan  menggunakan  metode  DPPH.  Pembuatan Larutan DPPH 0,1 mM  dilakukan  dengan  menimbang  0,0019  gram  DPPH  dan  dilarutkan  metanol  p.a  lalu dimasukkan  pada  labu  ukur  50  mL  Kemudian  larutan  DPPH  tersebut  ditentukan  panjang gelombang  maksimumnya  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis.  Pada  penelitian  ini pembuatan larutan uji ekstrak jantung pisang goroho menggunakan seri konsentrasi 5, 10, 25, 50, 100  ppm.  Masing-masing  ekstrak  jantung  pisang  goroho  yang  telah  dibuat  5  seri  konsentrasi diambil 2 mL dan ditambahkan dengan larutan DPPH sebanyak 2 mL, lalu dihomogenkan serta diinkubasi  selama  30  menit  dalam  ruang  gelap.  Kemudian  diukur  nilai  absorbansinya  pada panjang  gelombang  DPPH.  Selanjutnya  dihitung  nilai  persen  inhibisi  dari  masing  –  masing ekstrak dan nilai IC 50 ( Inhibitory Concenctration ).

## 3.  Hasil dan Pembahasan Preparasi Sampel
Dalam penelitian ini mengunkan jantung pisang goroho yaitu ujung bunga pisang yang tersisa  saat  bagian  lainnya  tumbuh  menjadi  buah  pisang.  Sampel  jantung  pisang  tersebut dikumpulkan  dan  mengalami  proses  pencucian  dan  sortasi  untuk  dilanjutkan  ke  tahap perajangan. Sampel jantung pisang dipotong menjadi ukuran yang lebih kecil dan dikeringkan dengan cara diangin-anginkan. Pengeringan ini dilakukan untuk menghilangkan kadar air dari sampel jantung pisang yang telah dijadikan simplisia tersebut. Sampel yang sudah dikeringkan kemudian diserbukan. Tujuan penyerbukan tersebut  untuk memperbesar luas permukan dari sampel, yang akan memperbesar kontak antara pelarut dan sampel [4].
Proses  ekstraksi  jantung  pisang  goroho  dilakukan  dengan  metode  maserasi.  Maserasi dipilih  karena  proses  pengerjaanya  yang  mudah  dan  peralatan  yang  digunakan  cukup sederhana.  Proses  maserasi  dilakukan  secara  bertingkat  menggunakan  empat  pelarut  yang berbeda  yaitu n -heksan,  kloroform,  etil  asetat,  dan  etanol  agar  komponen-komponen  yang bersifat non-polar diharapkan tersari dalam pelarut n -heksan dan kloroform, komponen kimia yang bersifat semi polar tersari dalam etil asetat dan komponen kimia yang bersifat polar dapat tersari dalam etanol. Hasil proses ekstraksi kemudian dipekatkan hingga menjadi ekstrak kental.
Tabel 1. Persen Rendamen Ekstrak Ekstrak Berat Sampel Awal (gr) Berat Ekstrak (gr) % Rendamen N-heksan 500 56 11,2 Kloroform 440 48 10,9 Etil Asetat 389 47 12,8 Etanol 336 40 11,9
Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan  bahwa  masing-masing  rendamen  pada  tiap-tiap pelarut berkisar 10-15%. Menurut [12], yang menyatakan bahwa persen nilai rendamen yang baik didapatkan masuk dalam range persen rendamen yaitu 10-15%.  Rendahnya persen rendamen yang didapatkan dapat dipengaruhi oleh lama ekstraksi Menurut [8], yang menyatakan bahwa faktor yang memungkinkan dapat mempengaruhi nilai rendemen yang dihasilkan yaitu metode ekstraksi  yang  digunakan,  ukuran  partikel  sampel,  kondisi  dan  waktu  penyimpanan,  lama waktu  ekstraksi,  perbandingan  jumlah  sampel  terhadap  jumlah  pelarut  yang  digunakan  dan jenis pelarut yang digunakan. [6], menyatakan bahwa semakin lama waktu ekstraksi, semakin tinggi  rendemen  yang  diperoleh,  karena  kesempatan  bereaksi  antara  bahan  dengan  pelarut semakin  lama  sehingga  proses  penetrasi  pelarut  kedalam  sel  bahan  semakin  baik  yang menyebabkan semakin banyak senyawa yang berdifusi keluar sel.
Hasil Uji Skrining Fitokimia
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Jantung Pisang Goroho Metabolit Sekunder Reagen Ekstrak N-Heksan  Kloroform  Etil Asetat Etanol Alkaloid Pereaksi Dragendroff + + + - Flavonoid Serbuk Mg + HCl - - + + Saponin Aquadest - - - - Steroid Pereaksi Lieberman Burchad - - - - Tanin FeCl 3 1% - - - - Triterpenoid Pereaksi Lieberman Burchad - - - -
Hasil skrining firokimia menunjukkan bahwa senyawa yang terkandung dalam ekstrak jantung pisang goroho yaitu Alkaloid dan Flavonoid.

## Uji Aktivitas Antioksidan
Uji  aktivitas  antioksidan  Jantung  Pisang  Goroho  ( Musa  acuminafe )  dilakukan  dengan menggunakan  metode  penangkapan  radikal  bebas  DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil ).  Metode DPPH  dipilih  karena  merupakan  metode  sederhana,  mudah,  cepat  dan  peka  serta  hanya memerlukan sedikit sampel untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan dari senyawa bahan alam [11].
Ekstrak jantung pisang goroho yang telah dibuat seri konsentrasi ditambahkan dengan larutan  DPPH  0,1  mM  dan  di  inkubasi  selama  30  menit.  Tujuan  di  inkubasi  selama  30  menit
karena  reaksi  berjalan  lambat  sehingga  sampel  membutuhkan  waktu  untuk  dapat  bereaksi dengan  dengan  radikal  bebas.  Proses  berjalannya  reaksi  tersebut  ditandai  dengan  perubahan warna  sampel  jantung  pisang  goroho  ( Musa  acuminafe )  yang  awalnya  ungu  menjadi  warna kuning. Perubahan warna ini menandakan bahwa masing-masing ekstrak memiliki kemampuan sebagai antioksidan[14]. Radikal bebas DPPH yang memiliki elektron tidak berpasangan akan memberikan warna ungu. Warna akan berubah menjadi kuning saat elektronnya berpasangan. Perubahan  intensitas  warna  ungu  ini  terjadi  karena  adanya  peredaman  radikal  bebas  yang dihasilkan  oleh  bereaksinya  molekul  DPPH  dengan  atom  hidrogen  yang  dilepaskan  oleh molekul  senyawa  sampel  sehingga  terbentuk  senyawa difenil  pikrilhidrazin dan  menyebabkan terjadinya  peluruhan  warna  DPPH  dari  ungu  menjadi  kuning.  Perubahan  warna  ini menyebabkan  nilai  absorbansi  menurun  pada  setiap  peningkatan  konsentrasi  dan  terjadi peningkatan nilai % inhibisi pada setiap ekstrak jantung pisang goroho.
Difenil Pikrilhidrazil (Ungu) Difenil Pikrilhidrazin (Kuning)
Gambar 1. Reduksi DPPH dari Senyawa Peredam Radikal Bebas [1]
Parameter yang digunakan untuk mengetahui kekuatan antioksidan ialah IC 50 ( Inhibition Concentration 50 Value ). IC 50 merupakan konsentrasi yang dapat menghambat aktivitas radikal bebas  DPPH  sebanyak  50%  [9].  Semakin  kecil  IC 50 menandakan  semakin  besar  aktivitas antioksidan. Hasil uji aktivitas antioksidan  jantung pisang goroho ( Musa acuminafe L ) terdapat perbedaan  pada  nilai  IC 50 .  Perbedaan  nilai  IC 50 antara  masing-masing  ekstrak  jantung  pisng goroho  ( Musa  acuuminafe  L )    diakibatkan  oleh  kemampuan  masing-masing  senyawa  dalam memberikan elektron kepada DPPH berbeda.
Tabel 3. Nilai IC 50 Ekstrak Jantung Pisang Goroho
Ekstrak IC 50 (μg/mL) N-heksan 6,38 Kloroform 5,48 Etil Asetat 5,11 Etanol 4,19
Pada ekstrak etaanol, etil asetat, kloroform dan N-Heksan memiliki nilai persen inhibisi yan baik dan sama-sama memiliki aktivitas antioksidan. Hal ini dimungkinkan karena senyawa metabolit sekunder yang terkandung pada masing-masing ekstrak, pada ektrak etanol memiliki senyawa  flavonoid  dimana  banyak  gugus  hidroksi  (OH)[15].  Atom  hidrogen  dari  hidroksi tersebut  yang  akan  didonorkan  pada  radikal  bebas  sehingga  menjadi  stabil.  Sedangkan  pada ekstrak  kloroform  memungkinkan  terkandung  juga  senyawa  golongan  flavonoid  dimana menurut [7], agllikon yang kurang polar seperti isoflavon, flavanon, dan flavon serta flavonol yang termetoksilasi cenderung lebih mudah larut dalam pelarut seperti eter dan kloroform, dan pada  ekstrak  etil  asetat  diduga  memiliki  kandungan  senyawa  alkaloid  dan  flavonoid  yang dikarenakn  etil  asetat  merupakan  pelarut  semi  polar,  sedangkan  pada  ekstrak  n-heksan mengandung senyawa alkaloid, dimana mekanisme alkaloid sebagai antioksidan adalah dengan
cara  mendonorkan  atom  H  pada  radikal  bebas.  Mekanisme  ini  menunjukkan  bahwa  alkaloid bekerja sebagai antioksidan primer [5].

## 4. Kesimpuln
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat  ditarik  kesimpulan  bahwa ekstrak jantung pisang goroho ( Musa acuminafe L. ) mengandung senyawa alkaloid dan flavonoid serta  mempunyai  aktivitas  antoksidan  berturut-turut  yaitu  ekstrak  N-Heksan  4,19  µg/ml, ekstrak klorofor 5,11 µg/ml, ekstrak etil asetat 5,48 µg/ml, dan ekstrak etanol 6,38 µg/ml. Semua nilai IC 50 dari masing-masing ekstrak termasuk kategori sangat kuat
Referensi :
[1] Amelia, P. (2011). Isolasi, elusidasi struktur dan uji aktivitas antioksidan senyawa kimia dari daun  Garcinia  benthami  Pierre .  Tesis  Universitas  Indonesia.  ( Online ).  (23  Oktober  2012, 10:45).
[2] Asni,  A  &  Dewi,  Y.  2010. Etnofarmakologi  Tumbuhan  Obat  Pada  Etnis  Bugis  Untuk Pengobatan Gangguan Saluran Cerna Dan Identifikasi Farmakognostiknya . Prosiding Seminar Nasional “Eight Star PerformancePharmacist”. Yogyakarta.
[3] Athiroh  N,  Permatasari  N,  Sargowo  D,  Widodo  MA.  (2013) Antioxidative  and  blood pressure-lowering  effects  of  Scurrula  atropurpurea  on  deoxycorticosterone  acetateesalt hypertensive rats. Biomarkers Genomic Med. 2014.
[4] Ditjen POM. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat . Cetakan Pertama. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
[5] Kurniati  Ruth  Indah.  2013.  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Fraksi  Etanol  Daun  Buas-buas ( premna  cordifolia  linn .)  dengan  Metode  DPPH  (2 ,2-difenil-1-pikrilhidrazil ).  Universitas Tanjungpura:Pontianak.
[6] Mardina, P. Pengaruh Kecepatan Putar Pengaduk dan Waktu Operasi pada Ekstraksi Tannin dari Mahkota Dewa . Jurnal Kimia. 2011; 5(2): 125-132
[7] Markham,  K.R.,  1988. Cara  Mengidentifikasi  Flavonoid ,  diterjemahkan  oleh  Kosasih Padmawinata, 15, Penerbit ITB: Bandung.
[8] Randy Tampa’I (2019), P enghambatan Reaksi Maillard dari Ekstrak Buah Pisang Goroho Putih (Musa  acuminata  Colla)  Sebagai  Pencegahan  Diabetes  Mellitus .  Sekolah  Tinggi  Ilmu Kesehatan Trinita, Manado
[9] Salamah,  N. Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Metanol  Daun  Kelengkeng (Euphoria  longan  (L) Steud.) dengan Metode Penangkapan Radikal 2,2’- Difenil-1-Pikrilhidrazil . Pharmaciana. 2015; 5(1): 25-34.
[10] Siti Maria Ulfa. 2016. Identifikasi dan Uji Aktivitas Senyawa Antioksidan dalam Bekatul dengan Menggunakan  Variasi  Pelarut. Malang:  Universitas  Islam  Negeri  (UIN)  Maulana  Malik Ibrahim.
[11] Sumardika, I.W., dan Jawi, I.M., 2012, Ekstrak Air Daun Ubi Jalar Ungu Memperbaiki Profil Lipid  dan  Meningkatkan  Kadar  SOD  Darah  Tikus  yang  diberi  Makanan  Tinggi  Kolesterol, Medicina, 43(2).
[12] Ulfah Sonia. 2016. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Rambutan (Nephelium lappaceum) dengan Metode DPPH . UIN Hidayatullah Jakarta. Jakarta.
[13] Vitasari, E W. 2013. Antihiperlipidemia Ekstrak Etanol Batang Kayu Kuning (Arcangelisia flafa (L.) Merr.) Terhadap Tius Putih Galur Wistar Yang Diinduksi Pakan Tinggi Lemak . Skripsi. Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Yayasan Farmasi”: Semarang
[14] Youssef,  M.  M.  (2015). Methods  for  Determining  the  Antioxidant  Activity :  A  Review Methods for Determining the Antioxidant Activity
[15] Zuhra, C.F., Tarigan, J. & Sihotang,H. 2008. Aktivitas Antioksidan Senyawa Flavonoid dari Daun  Katuk  (Sauropus  androgumus  (L)  Merr.) .  Jurnal  Biologi  Sumatera.  ISSN  :1907- 5537.3(1) :7-10