Potensi ulvan dari Ulva lactuca sebagai sumber antioksidan, Jacoeb et al.

## POTENSI ULVAN DARI Ulva lactuca SEBAGAI SUMBER ANTIOKSIDAN
Agoes Mardiono Jacoeb*, Asadatun Abdullah, Siti Nur Hakimah Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, IPB University Jalan Agatis, Bogor Jawa Barat 16680 Indonesia
Diterima: 28 April 2023/Disetujui: 27 Februari 2024 *Korespondensi: agoes.jacoeb@gmail.com
Cara sitasi (APA Style 7 th ) : Jacoeb, A. M., Abdullah, A., & Hakimah, S. N. (2024). Potensi ulvan dari Ulva lactuca sebagai sumber antioksidan. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia, 27(3), 242-251. http:// dx.doi.org/10.17844/jphpi.v27i3.46950
Abstrak
Dinding sel Ulva lactuca menghasilkan ulvan yang merupakan hidrokoloid  bersulfat dan berpotensi sebagai antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan pengaruh lama pemanasan dalam autoklaf (15 dan 20 menit; 121ºC) terhadap rendemen, kadar gula dan sulfat, serta aktivitas antioksidan ulvan. Rendemen ulvan, kandungan gula dan sulfat diukur masing-masing dengan metode gravimetri dan spektrofotometri. Ekstrak kering oven diuji gugus fungsi dan antioksidannya menggunakan FTIR dan metode DPPH. Ulvan hanya bisa dihasilkan melalui ekstraksi pada suhu 121ºC waktu 15 menit. Ekstrak kering ulvan memberikan rendemen 1,98%, kandungan gula total 46,06±0,16%  dan kadar sulfat 21,53±1,16%. Spektrum FTIR menunjukkan adanya bilangan gelombang  850 dan 790 cm -1 yang merupakan ciri ulvan. Uji DPPH menghasilkan IC 50 sebesar 469 ppm, yang tergolong sebagai antioksidan lemah. Kata kunci: DPPH, FTIR, gravimetri, IC 50 , spektrofotometri

## Potential of Ulvan from Ulva lactuca as An Antioxidant Source
Abstract
Ulva lactuca is a type of marine macroalga that produces a sulfated hydrocolloid known as ulvan, which has been identified as a potent antioxidant. This finding suggests that the U. lactuca cell wall has potential applications in the development of antioxidant-rich products. This study aimed to investigate the influence of heating time in an autoclave (15 and 20 min at 121°C) on the yield, sugar and sulfate contents, and antioxidant activity of ulvan. The yield of ulvan, as well as the sugar and sulfate contents, were determined using graphimetric and spectrophotometric techniques, respectively, and the functional groups and antioxidants of the dried extract were analyzed using Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR) and the 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) method, respectively. The analysis was conducted on the oven-dried samples. Ulvan can be obtained by extracting it at a temperature of 121°C for 15 min; ulvan extraction yielded a percentage of 1.98, with a total sugar content of 46.06±0.16% and a sulfate content of 21.53±1.16%. Infrared spectroscopy revealed the presence of wavenumbers 850 and 790 cm -1 , which are indicative of the presence of ulvans. DPPH assay yielded an IC 50 value of 469 ppm, which was categorized as a relatively weak antioxidant.
Keyword: DPPH, FTIR, graphimetric, IC 50 , spectrophotometric
Available online: journal.ipb.ac.id/index.php/jphpi

## PENDAHULUAN
Ulva sp. merupakan rumput laut yang biasa dimanfaatkan menjadi berbagai produk di antaranya nori (Sihono et al ., 2023;
Valentine et al. , 2020), serum wajah (Nusaibah et al. , 2023), dan garam (Nurjanah et al ., 2018;
Kurniawan et al ., 2019; Nurjanah et al. , 2020; Nurjanah et al. , 2023). Genus Ulva merupakan rumput laut hijau yang dapat berkembang dengan baik di berbagai iklim dan mengandung komponen gizi yang dapat dimanfaatkan, khususnya ulvan (Angell et al ., 2014; Figueira et al., 2020). Dinding sel genus Ulva mengandung hidrokoloid ulvan, yang mencapai 9-36 persen dari berat kering tubuhnya dan terutama mengandung  rhamnose, sulfat, dan asam uronat baik asam glukuronat dan asam iduronat, serta  mengandung xylosa (Ray & Lahaye, 1995; Lahaye & Robic, 2007). Ulvan bersama-sama selulosa, rhamnose sulfat dan asam uronat menjadi komponen dinding sel spesies-spesies dari genus Ulva hingga 45 persen dari berat kering tubuh (Lahaye &
Kaeffer, 1997). Ulvan memiliki potensi pemanfaatan dalam pembuatan pembalut luka, rekayasa jaringan, sebagai antioksidan, anti kanker, antihiperlipidemia, immunostimulan, serta sebagai pangan fungsional (Lahaye & Robic, 2007; Wijesekara et al., 2011; Alves et al., 2013; Venkatesan et al., 2015; Cunha & Grenha 2016). Ulvan juga berperan dalam mendorong produksi hyaluronan (Adrien et al ., 2017).  Aktivitas antioksidan pada ulvan telah diteliti untuk bahan baku pembuatan garam rumput laut (Nurjanah et al ., 2023). Penelitian Li et al . (2018) menunjukkan bahwa ulvan berpotensi sebagai antioksidan dalam melindungi kerusakan sel hati akibat stres oksidatif yang dipicu oleh makanan kaya kolesterol. Ulvan juga memiliki aktivitas antioksidan dalam meredam radikal bebas penyebab karsinogenesis (Kwon & Nam, 2007). Hasil penelitian Maray et al. (2023)
menunjukkan bahwa ulvan dari U. lactuca mampu menghambat perkembangan lung carcinoma (A-549), prostate carcinoma cells (PC-3), virus H-10 serta beberapa bakteri, antara lain Pseudomonas aeruginosa
ATCC9027, Klebsilla pneumonia ATCC13883,
Streptococcus agalactiae ATCC13813. Ulvan dapat diekstraksi dengan bantuan gelombang ultrasonik pada suhu rendah (Ramadhan et al ., 2022). Ulvan dapat diekstraksi menggunakan air destilasi, asam dan enzim (Mo’o et al ., 2020). Ekstraksi menggunakan air  destilasi merupakan metode yang paling banyak dilakukan (He et al ., 2016; Robic et al ., 2009a). Pressured liquid extaction (PLE) merupakan metode ekstraksi biomaterial menggunakan air dengan suhu 50-200°C, tekanan 50-150 atm dan waktu 5-15 menit.  Metode ini dapat meningkatkan efisiensi ekstraksi dalam waktu yang relatif singkat (Wu et al ., 2017).  Penelitian ini bertujuan untuk menentukan pengaruh lama pemanasan dalam autoklaf (15 dan 20 menit; 121 ℃ ) terhadap rendemen, kadar gula dan sulfat, serta aktivitas antioksidan ulvan.

## BAHAN DAN METODE
Preparasi Sampel (Nufus, 2018) U. lactuca diambil dari perairan
Sekotong, Nusa Tenggara Barat, dengan koordinat 8°44’14.2”S sampai 115°57’54.9”E.
U. lactuca dibersihkan dari kotoran, dicuci dengan air laut, ditiriskan, dikeringanginkan 24 jam, dikemas dalam cool box , dan setelah sampai di laboratorium dikeringanginkan kembali selama 3-4 hari. U. lactuca kering dipotong, dihaluskan dengan blender, diayak (30 mesh), dan disimpan dalam wadah plastik.
Ekstraksi Ulvan (Huimin et al .,
2005)
Serbuk kering U. lactuca (25 g) kemudian direndam dalam 1.000 mL akuades, dipanaskan dalam autoklaf (121°C; 15 dan 30 menit). Larutan disaring dengan kertas saring, didialisis dengan kantong dialisis 14 kDA MWCO dengan air destilasi selama 48 jam, dan hasilnya dipekatkan hingga 150-200 mL menggunakan rotary evaporator , kemudian ulvan diendapkan dengan penambahan 4 kali volume etanol 95% selama 24 jam.  Endapan dikeringkan dalam oven 50-60°C hingga beratnya tetap. Ekstraksi pertama-tama dilakukan terhadap U. lactuca dengan suhu 121°C dan waktu 15 menit, kemudian setelah
Potensi ulvan dari Ulva lactuca sebagai sumber antioksidan, Jacoeb et al.
diperoleh ulvan kering dilanjutkan  dengan U. lactuca menggunakan suhu 121°C dan waktu 30 menit.
Pengukuran Intensitas Warna (Weaver, 1996)
Analisis intensitas warna menggunakan color analyzer . Sampel diletakkan di bidang datar putih berukuran 5×5 cm 2 dan diratakan.
Color analyzer dihidupkan dan tombol pembacaan diatur pada L, a, b.  Kecerahan dinotasikan oleh L, sedangkan a dan b menunjukkan kromatisitas.
Rendemen Ulvan (Tsubaki et al. , 2016) Rendemen dihitung dengan cara membagi  ekstrak kering dengan berat bubuk kering rumput laut dikalikan 100%.
Penentuan Kadar Gula Total (Dubois et al ., 1956)
Ekstrak dicairkan dengan 1.000 mL akuades, dihomogenkan, diambil 1 mL, kemudian ditambah 0,5 mL larutan fenol 5% dan 2,5 mL H 2 SO 4 serta didiamkan 10 menit dan dihomogenkan kembali 15 detik. Campuran diperiksa dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 490 nm. Konsentrasi gula total dihitung dengan merumuskan terlebih dahulu kurva standar glukosa.
Penentuan Kadar Sulfat (Kim et al. , 2007) Larutan BaCl 2 -gelatin dipersiapkan dengan melarutkan 2 g gelatin dalam 400 mL air panas (60-70°C), didiamkan pada suhu 4°C selama 6 jam, setelah itu 2 g BaCl 2 dilarutkan dalam larutan tersebut. Ulvan kering 2 g dilarutkan dengan 2 mL akuades dalam tabung bertutup teflon, kemudian ditambah 5 mL TCA 4% dan dipanaskan dalam water bath selama 4 jam.  Hasil hidrolisis diambil 2 mL dan dicampur dengan 2 mL larutan
BaCl 2 -gelatin serta 2,8 mL TCA, diaduk dan diperiksa spetrofotometris pada panjang gelombang 420 nm. Konsentrasi sulfat total dihitung dengan merumuskan terlebih dahulu kurva standar Na 2 SO 4 .

## Penentuan Gugus Fungsi (ASTM,
E1252-98-2013)
Ekstrak 1 mg dan 200 mg KBr digerus dan dibentuk menjadi tablet tipis dan transparan dengan memberikan tekanan 7.000 Pa. Hasilnya  ditempatkan dalam pan dan diperiksa dengan FTIR dengan bilangan gelombang 4.000-500 cm -1 .
Penentuan Aktivitas Antioksidan DPPH (Lee et al ., 2016) Tahap-tahap yang perlu dilakukan dalam metode ini, yaitu penyiapan satu seri konsentrasi larutan sampel, satu seri konsentrasi larutan kontrol positif (asam askorbat), dan penyiapan larutan stok DPPH.
Berikutnya adalah penambahan larutan DPPH ke dalam masing-masing larutan tersebut. Tahap berikutnya adalah penentuan persen inhibisi melalui pengukuran larutan- larutan tersebut dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang  517 nm dan terakhir adalah penentuan IC 50 .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Warna Tepung U. lactuca Ekstrak basah ulvan berwarna putih kecokelatan. Uji warna menggunakan reader analyzer terhadap tepung ulvan menghasilkan nilai L, a*, dan b* masing-masing 33,7; -4,7; dan 23. Tingkat kecerahan (L) berkisar 1-100 dan menyatakan keadaan gelap-terang sampel. Tepung berwarna hijau tua dan warna  hijau tua dikaitkan dengan kandungan klorofil yang tinggi (Pratista et al ., 2017; Khuluq et al ., 2007). Nilai a* mengindikasikan warna hijau hingga merah dan nilai a* yang negatif menunjukkan sampel berwarna hijau (Aryanti et al ., 2016).  Nilai b* positif menunjukkan warna kuning dan mengindikasikan keberadaan xantofil (Gross, 1991).  Wahlström et al .
(2020) dalam penelitiannya terhadap ulvan dari jenis U. lactuca dan U. compressa yang diekstraksi dengan air yang dikombinasikan dengan etanol mengasilkan ulvan dengan kecerahan yang tinggi dengan nilai L, a*, dan b*, masing-masing 82,9-84,9; -0,97 hingga -2,45 serta 6,72 hingga 7,38.  Warna ekstrak ulvan dipengaruhi oleh kandungan pigmen
(Costa et al ., 2012; Glasson et al .,  2017).
Ekstraksi ulvan U. lactuca menggunakan air suhu tinggi disertai presipitasi dengan ethanol akan menghasilkan lignin, yang akan memengaruhi warna ekstrak yang dihasilkan.
Santi et al . (2012) melakukan ekstraksi ulvan menggunakan air pada suhu 100ºC disertai presipitasi dengan etanol memperoleh 2,9%
lignin. U. lactuca mengandung berbagai klorofil dan pigmen.  Da Costa et al . (2018) dalam penelitiannya terhadap U. lactuca dari perairan pantai Kukup,Yogyakarta, menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi, menghasilkan 32 peak, yang mengindikasikan adanya  pigmen korofil a, b, dan c, neoxanthin , antheraxanthin , dinoxanthin , flavoxantin, micronone , vaucheriaxanthin dan pigmen lain yang belum teridentifikasi.
Sifat Ekstrak Kasar Ulvan Etanol merupakan pelarut yang umum digunakan dalam presipitasi hidrokoloid dan kecepatan pengendapan tergantung jumlah dan berat molekul hidrokoloid tersebut. Lama ekstraksi 15 menit menghasilkan gumpalan berwarna putih kekuningan, yang selanjutnya memisah dari pelarut dan sebaliknya lama ekstraksi 30 menit tidak menghasilkan gumpalan. Hasil ekstraksi ulvan dipengaruhi oleh sifat-sifat biomassa dan perlakuan awal, suhu ekstraksi, ekstraktan, rasio ekstraktan terhadap biomassa, ukuran partikel biomassa, dan durasi ekstraksi (Kidgell et al ., 2019). Sifat fisikokimia ulvan yang memengaruhi hasil ekstraksi meliputi kelarutannya yang relatif rendah dalam kondisi air dan stabilisasinya dalam dinding sel tumbuhan, terutama melalui interaksinya dengan kation divalen (misalnya Ca 2+ ), borat, dan ikatan hidrogen (Robic et al ., 2009b) .
Ekstraksi menggunakan air panas hendaknya diusahakan dibawah titik didih air untuk menghindari depolimereisasi dan desulfatasi ulvan (Tsubaki et al .,  2016). Figueira et al . (2020) mengekstraksi ulvan dari U. fasciata menggunakan autoklaf (120˚C; 40 menit), serta etanol, memperoleh rendemen 16,29%. Sebagai bahan alternatif untuk ekstraksi ulvan bisa dipergunakan garam oksalat dan EDTA pada pH mendekati netral.
Asam kuat bisa juga dipergunakan dalam ekstraksi ulvan (Glasson et al., 2017). Yaich et al . (2013) mengekstraksi ulvan dari U. lactuca dalam kondisi pH rendah dan menggunakan alkohol untuk presipitasi, menghasilkan rendemen 21,68-32,67%. Hasil penelitian lebih rendah dibandingkan hasil penelitian lain. Peningkatan rendemen bisa diusahakan dengan menurunkan pH saat ekstraksi dan penggunaan larutan lain, terutama untuk thalus yang masih muda. Variasi penggunaan kombinasi NaOH, HCl, gelombang ultrasonik serta suhu 50-70°C mampu menghasilkan ulvan 6,70-16,87%
(Ramadhan et al ., 2022).  Rendemen, kadar gula, kadar sulfat dan IC 50 hasil ekstraksi 15 menit dicantumkan pada Table 1 .
Kadar gula ulvan bervariasi menurut spesies. Penelitian Mezghani et al . (2013) terhadap U. rigida menghasilkan kadar gula 27,12%. Gula penyusun ulvan dari genus Ulva dilaporkan mengandung Rhamnose (16,8%–45,0% bk), xylose (2,1%–12,0%), glukose (0,5%–6,4%), asam uronat (6,5%– 19,0%), sulfat (16,0%–23,2%) dan asam iduronat (1,1%–9,1%) (Aguilar-Briseño et al ., 2015). Sifat-sifat fisiko-kimia dan aktivitas biologis polisakarida ditentukan antara lain oleh keberadaan gugus ester sulfat, eter metil, amida dan amin.  Sulfat dalam ulvan terikat sebagian besar sebagai Rhamnose 3-sulfat dan sebagian kecil sebagai Xylose 2-sulfat (Kidgell et al ., 2019). Penelitian Hernández-Garibay et al. (2010) terhadap U. clathrata menghasilkan kadar sulfat 35,80%.
Gugus Fungsi Ulvan Spektrum FTIR ulvan dari U. lactuca memperlihatkan beberapa puncak serapan yang berada pada bilangan gelombang 3.395 cm −1 , 2.927 cm −1 , 1.637 cm −1 ,  1.411 cm −1 , 1.257 cm −1 , 1.084 cm −1 ,1.051 cm −1 , 848 cm −1 dan 790 cm −1 . Gugus O-H (alkohol), C-H (alkana), C=O (asam karboksilat asimetrik), C=O (asam karboksilat simetrik), S-O (gugus sulfat) ditunjukkan oleh bilangan gelombang 3.395 cm −1 , 2.927 cm −1 , 1.637 cm −1 ,  1.411 cm −1 , 1.257 cm −1 . Streching vibration O-H ditunjukkan oleh bilangan gelombang 3.600- 3.000 cm −1 (Jayapal et al ., 2013). Figueira et al .
Potensi ulvan dari Ulva lactuca sebagai sumber antioksidan, Jacoeb et al.
(2020) dalam penelitiannya terhadap ulvan dari jenis Ulva  fasciata menunjukkan gahwa gugus O-H berada pada bilangan gelombang sekitar 3.300 cm −1 . Gugus C-H ditunjukkan oleh bilangan gelombang sekitar 2.927 cm −1
(Schwanninger et al ., 2004). Gugus karboksilat ditunjukkan di daerah bilangan gelombang 1.632-1.597, untuk asam karboksilat asimetrik, dan 1.448–1.400 cm −1 untuk asam karboksilat simetrik (Murphy et al ., 2008).  Bilangan gelombang untuk gugus C-O berkisar 1.200-
1.000 cm −1 , yang menggambarkan gugus C-OH dan C-O-C cincin gula dan ikatan glikosidik (Robic et al ., 2009c).  Gugus S=O ditujukkan oleh bilangan gelombang 1.260- 1.240 cm −1 (Pereira et al ., 2009; Sun et al .,
2014). Bilangan gelombang 850 cm −1 dan 780 cm −1 mengindikasikan adanya gugus sulfat ester (Tako et al ., 2015).  Bilangan gelombang 1.150-750 merupakan daerah khas untuk ulvan (Ibrahim et al ., 2022). Figueira et al . (2020) dalam penelitiannya terhadap ulvan dari U. fasciata menyimpulkan bahwa bilangan gelombang 1.147-848 merupakan ciri untuk ulvan.  Gugus sulfat pada ulvan diduga berperan terhadap kemampuan antioksidan suatu bahan (Suresh et al ., 2013). Hasil analisis gugus fungsi menggunakan FTIR terhadap ulvan hasil ekstraksi 15 menit dicantumkan di
Figure 2 .
Aktivitas Antioksidan 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazi l (DPPH) merupakan radikal bebas yang stabil dan
bekerja dengan cara mendelokasi elektron bebas pada suatu molekul, yang akan mengakibatkan molekul tersebut tidak reaktif, dan indikasinya adalah adanya warna ungu (violet) menjadi kuning, yang selanjutnya dapat dikuantifikasi dengan pengukuran pada panjang gelombang 520 nm (Molyneux, 2004).
Beberapa penelitian tentang antioksidan ulvan menunjukkan nilai yang bervariasi.   Penelitian Widowaty et al . (2020) terhadap hasil ekstaksi Ulva sp. dengan campuran metanol, kloroform, dan buffer fosfat menghasilkan IC 50 sebesar  404,73 µg/ mL. Sianipar et al . (2022) menggunakan etanol untuk ekstraksi senyawa bioaktif U. lactuca dari perairan Sumbawa dan memperoleh IC 50 sebesar 220,8 mg/mL.  Kurniasih et al. (2014) meneliti ekstrak n-heksan Ulva spp. dari pantai Krakal-Yogyakarya dan menghasilkan IC 50 sebesar 448,659 ppm.  Penelitian potensi antioksidan ulvan juga dilakukan terhadap spesies lain. Farasat et al . (2014) meneliti potensi antioksisan  ulvan dari U. intestinalis
dan menghasilkan nilai IC 50 1.888 ppm.
Penggunaan pH rendah dalam ekstraksi dapat menghasilkan ulvan dengan kemampuan aktivitas antioksidan yang lebih baik. Yaich et al. (2017) mengekstrasi ulvan dari U. lactuca pada kondisi pH=1,5 menghasilkan ulvan dengan IC 50 =13,56 μg/ mL. Kandungan sulfat berkorelasi positif dengan kemampuan penghambatan terhadap DPPH.  Nilai IC 50 dibawah 50 ppm, 50- 100 ppm, 100-150 ppm, 150-200 ppm,  dan
Table 1 Yield, sugar and sulfate content, and IC 50 of U. lactuca extract Sample Yield (%) Total sugar (%) Sulphate content (%) IC 50 (ppm) U. lactuca with 15 minutes extraction 1.98 46.06±0.16 21.53±1.16 469 U. lactuca a 21.68-32.67 - - - U. lactuca b 6.70-16.87 - - - U. lactuca c 14.83 - 23.84 - U. lactuca d - 65.72 20.43 - U. lactuca e - - - 220.8 Ascorbic acid - - - 4.2 Tabel 1 Rendemen, kadar gula, kadar sulfat dan IC 50 hasil ekstraksi U. lactuca
a Yaich et al . (2013); b Ramadhan et al. (2022); c Hussein et al . (2015); d Barcellos et al. (2018); e Sianipar et al. (2022)
diatas 200 ppm menunjukkan bahwa bahan memiliki aktivitas antioksidan berturut-turut yang sangat kuat, kuat, sedang, lemah dan sangat lemah (Molyneux, 2004).

## KESIMPULAN
Ekstraksi dengan autoklaf 121 ℃ dan waktu 30 menit tidak menghasilkan ulvan, sebaliknya penggunaan suhu 121 ℃ dan waktu 15 menit menghasilkan endapan ulvan dengan rendemen 98%,  kadar gula total 46,1%,  kadar sulfat 21,53% dan aktivitas antioksidan 469 ppm. Ulvan memiliki aktivitas antioksidan yang tergolong lemah. Potensi ulvan sebagai penghasil antioksidan tergolong kecil.

## DAFTAR PUSTAKA
Adrien, A., Bonnet, A., Dufour, D., Bauduoin, S., Maugard, T., & Bridiau, N.  (2017). Pilot production of ulvans from Ulva sp. and their effects on hyaluronan and collagen production in cultured dermal fibroblasts. Carbohydrate Polymers , 157, 1306-1314. https://doi.org/10.1016/j. carbpol.2016.11.014 Aguilar-Briseño, J.A., Cruz-Suarez, L.E., Sassi, J.F., Ricque-Marie, D., Zapata- Benavides, P., Mendoza-Gamboa, E., Rodríguez-Padilla, C., & Trejo-Avila, L.M. (2015).  Sulphated polysaccharides from Ulva clathrata and Cladosiphon okamuranus seaweeds both inhibit viral attachment/entry and cell-cell fusion, in NDV infection. Marine Drugs, 13, 697- 712. http://doi:10.3390/md13020697 Alves, A., Sousa, R.A., & Reis, R.L.  (2013). A practical perspective on ulvan extracted from green algae. Journal of Applied Phycology , 25, 407-424. http:// doi:10.1007/s10811-012-9875-4 American Society for Testing Material. (2013). ASTM E1258-98 : Standar Practice for General Technique for Obtaining Infrared Spectra for Qualitative Analysis . American Society for Testing Material. Angell, A.R., Mata, L., de Nys, R., & Paul, N.A. (2014).  Variation in amino acid content and its relationship to nitrogen content and growth rate in Ulva ohnoi (Chlorophyta). Journal of Applied Phycology, 50, 216-226. https://doi. org/10.1111/jpy.12154 Aryanti, N., Aininu, N., & Fathia, M.W.  (2016). Ekstraksi dan karakterisasi klorofil dari daun suji ( Pleomele angustifolia ) sebagai pewarna pangan alami. Jurnal Aplikasi
Teknologi Pangan, 5(4), 129-139. https:// doi.org/10.17728/jatp.183
Figure 2 FTIR spectrum of ulvan resulting from 15 minutes extraction Gambar 2  Spektrum FTIR ulvan  hasil ekstraksi 15 menit
Wave number (cm -1 )
Potensi ulvan dari Ulva lactuca sebagai sumber antioksidan, Jacoeb et al.
Barcellos, P.G., Rodrigues, J.A.G., de Queiroz,
I.N.L., de Araújo, I.W.F., Benevides,
N.M.B., & de Souza Mourão, P.A.
(2018). Structural and physical-chemical analyses of sulfated  polysaccharides from the sea lettuce Ulva lactuca and their effects on thrombin generation. Acta Scientiarum. Biological Sciences, 40, 1-12. https://doi.org/10.4025/ actascibiolsci.v40i1.34916 Costa, C., Alves, A., Pinto, P.R., Sousa, R.A., da Silva, E.A.B., & Reis, R.L.  (2012). Characterization of ulvan extracts to assess the effect of different steps in the extraction procedure. Carbohydrate Polymers, 88(2), 537-546. http:// doi:10.1016/j.carbpol.2011.12.041 Cunha, L., & Grenha, A. (2016). Sulfated seaweed polysaccharides as multifunctional materials in drug delivery applications. Marine Drugs , 14, 1-42. http://doi:10.3390/md14030042 Da Costa, J.F., Merdekawati, W., & Out, F.R. (2018). Analisis proksimat, antioksidan, dan komposisi pigmen Ulva lactuca L dari perairan Kukup. Jurnal Teknologi
Pangan dan Gizi, 17 (1), 1-17. Dubois, M., Gilles, K.A, Hamilton, J.K, Rebers, P.A, & Smith, F.  (1956). Colorimetric method for determination of sugar and related substances. Analysis Chemical, 6, 281-350. Farasat, M., Khavari-Nejad, R.-A, Nabavi, S.M.B., & Namjooyan, F. (2014). Antioxidant activity, total phenolics and flavonoid contents of some edible green seaweeds from northern coasts of the Persian Gulf. Iranian Journal of Pharmaceutical Research, 13(1), 163- 170. Figueira, T.A., da Silva, A.J.R., Enrich-Prast, A., Yoneshigue-Valentin, Y., & de Oliveira, V.P. (2020).  Structural characterization of ulvan polysaccharide from cultivated and collected Ulva fasciata
(Chlorophyta). Advances in Bioscience and Biotechnology, 11, 206-216. http:// doi.org.10.4236/abb.2020.11.50.16 Glasson, C.R.K., Sims, I.M., Carnachan, S.M., de Nys, R., & Magnusson, M. (2017). A cascading bioreﬁnery process
targeting sulfated polysaccharides
(ulvan) from Ulva ohnoi . Algal Research ,
27, 383–391. https://doi.org/10.1016/j. algal.2017.07.001 Gross, J.  (1991). Pigment invegetable, chlorophylls and carotenoids . Van Nostrand Reinhold. He, J., Xu, Y., Chen, H, & Sun, P.  (2016). Extraction, structural characterization, and potential antioxidant activity of the polysaccharides from four seaweeds. International Journal of Moleculer Sciences , 17(12), 1988. https://doi. org/10.3390/ijms17121988 Hernández-Garibay, E., Zertuche-Gonzáles, J.A., & Pacheco-Ruíz, I. (2011).  Isolation and chemical characterization of algal polysaccharides from the green seaweed Ulva lactuca (Roth) C. Agardh . Journal of Applied Phycology, 23, 537-542. http:// doi:10.1007/s10811-010-9629-0 Huimin, Q., Tingting, Z., Quanbin, Z., Zhien, L., Zengqin, Z., & Ronge, X. (2005).  Antioxidant activity of different molecular weight sulfated polysaccharides from Ulva pertusa (Chlorophyta). Journal of Applied Phycology, 17, 527-534. Hussein, M.H., Hamouda, R.A., El- Naggar, N.E., & Karim-Eldeen, M.A.
(2015).  Characterization, antioxidant potentiality and biological activities of  the polysaccharide ulvan extracted from the marine macroalga Ulva spp. ournal of Agricultural Chemistry and Biotechnology, 6(9), 373-392. http://doi. org/10.21608/jacb.2015.48435 Ibrahim, M.I.A., Amer, M.S., Ibrahim, H.A.H., & Zaghloul, E.H. (2022). Considerable production of ulvan from Ulva lactuca with special emphasis on its antimicrobial and anti-fouling properties. Applied Biochemistry and Biotechnology, 194, 3097–3118.http:// doi.org/10.1007/s12010-022-03867-y Jayapal, N., Samanta, A., Kolte, A.P., Senani, S., Sridhar, M., Suresh, K., & Sampath,
K. (2013). Value addition to sugarcane bagasse: Xylan extraction and its process optimization for xylooligosaccharides production. Indrustial Crops Products,
42, 14–24.   https://doi.org/10.1016/j. indcrop.2012.05.019 Khuluq, A.D.S., Widjanarko, S.B., & Murtini, E.S.  (2007).  Ekstraksi  dan  betasianin daun  darah ( Alternanthera  dentata ): Kajian  perbandingan  pelarut  air:etanol dan  suhu  ekstraksi. Jurnal Teknologi Pertanian , 8(3), 172-181. Kidgell, J.T., Magnusson, M., de Nys, R., & Glasson, C.R.K. (2019).  Ulvan: A systematic review of extraction, composition and function. Algal Research, 39. http://doi.org/10.1016/j. algal.2019.101422 Kim, W. J., Kim, S. M., Kim, H. G., Oh, H. R., Lee, K. B.,Lee Y. K, & Park, Y. I. (2007). Purification and anticoagulant activity of fucoidan from Korean Undaria pinnatifida.  Journal Alga, 22(3), 247- 252. Kurniasih, S.D., Pramesti, R., & Ridlo, A. (2014). Penentuan aktivitas antioksidan ekstrak rumput laut Ulva sp. dari pantai Krakal-Yogyakarta. Journal of Marine Research, 3(4), 617-626. https://doi. org/10.14710/jmr.v3i4.11423 Kurniawan, R., Nurjanah, Jacoeb,  A. M., Abdullah, A., & Pertiwi, R., M.  (2019). Karakteristik  garam  fungsional dari rumput laut hijau. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia . 22(3): 573- 580. https://doi.org/10.17844/jphpi. v22i3.29320 Kwon, M.J., & Nam, T.J.  (2007).  A polysaccharide of the marine Capsosiphon fulvescens induces apoptosis in AGS gastric cancer cells via an IGF-IR-mediated P13K/ Akt pathway. Cellbiology International, 31, 768-775. https://doi.org/10.1016/j. cellbi.2007.01.010 Lahaye, M., & Kaeffer, B.  (1997). Seaweed dietary fibres: structure, psycho- chemical and biological properties relevant to intestinal physiology. Sciences des Aliments , 17, 563-584. Lahaye, M., & Robic, A.  (2007). Structure and functional properties of ulvan, a polysaccharide from green seaweed.
Biomacromolecules, 8, 1765-1774. http:// doi: 10.1021/bm061185q. Lee, N.Y., Yunus, M.A.C, Idham, Z., Ruslan,
M.S.H., Aziz, A.H.A., & Irwansyah, N. (2016). Extraction and identification of bioactive compound from agarwood leaves. Second International Conference on Chemical Engineering (ICCE) 162: 1-6. http://doi:10.1088/1757- 899X/162/1/012028. Li, W., Jiang, N., Li, B., Wan, M., Chang, X., Liu, H., Zhang, L., Yin, S., Qi, H., & Liu, S. (2018).  Antioxidant activity of purified ulvan in hyperlipidemic mice. International Journal of Biological Macromolecules, 113, 971-975. https:// doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2018.02.104 Maray, S.O., Mohamed, S. M., Abdel-Kareem, M.S.M., Mabrouk, M.E.M., El-Halmouch, Y., & Makhlof, M.E.M. (2023). In vitro assessment of antiviral, antimicrobial, antioxidant and anticancer activities of Ulvan Extracted from the Green Seaweed Ulva lactuca. Thalassas: An International Journal of Marine Sciences, 39779–790. https://doi. org/10.1007/s41208-023-00584-z Mezghani, S., Bourguiba, I., Hfaiedh, I., & Amri, M. (2013). Antioxidant potential of Ulva rigida extracts: protection of
HeLa Cells against H 2 O 2 cytotoxicity. The Biological Bulletin, 225, 1–7. http:// doi:10.1086/BBLv225n1p1 Molyneux, P.  (2004). The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity. Songklanakarin Journal of Science and
Technology, 26(2), 211-219. Mo’o, F.R.C., Wilar, G., Devkota, H.P., & Wathoni, N. (2020). Ulvan, a polysaccharide from macroalga Ulva sp.: A review of chemistry, biological activities and potential for food and biomedical applications. Applied Sciences , 10(16), 5488. https://doi. org/10.3390/app10165488 Murphy, V., Hughes, H., & McLoughlin, P. (2008). Comparative study of chromium biosorption  by red, green and brown seaweed biomass. Chemosphere, 70, 1128–1134. http://doi: 10.1016/j.
chemosphere.2007.08.015 Nurjanah, Abdullah. A., & Nufus, C. (2018).
Karakteristik sediaan garam Ulva lactuca
Potensi ulvan dari Ulva lactuca sebagai sumber antioksidan, Jacoeb et al.
dari perairan sekotong Nusa Tenggara Barat bagi pasien hipertensi. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 21(1), 109-117. Nurjanah,  Jacoeb, A. M., Ramlan, & Abdullah, A. (2020).  Penambahan  genjer
( Limnocharis  flava ) pada pembuatan garam rumput laut hijau untuk penderita hipertensi. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 23(3), 459-469. Nurjanah, Ramlan, Jacoeb, A. M., & Seulalae, A. V. (2023).  Komposisi kimia tepung dan aktivitas antioksidan ekstrak Ulva
lactuca dan genjer ( Limnocharis flava ) sebagai bahan baku pembuatan garam rumput laut. Jurnal Pascapanen dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan , 18(1), 63-74. http://dx.doi.org/10.15578/ jpbkp.v18i1.931 Nusaibah, Muhammad, T., Pangestika, W., Siregar, A. N., & Utami, K. D. (2023). Karakteristik  serum  wajah  dari  sediaan filtrat  rumput  laut Eucheuma  cottonii dan Ulva  lactuca . Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 26(3), 545- 559. http://dx.doi.org/10.17844/jphpi. v26i3.46874 Pereira, L., Amado, A.M., Critchley, A.T., Van de Velde, F., & Ribeiro-Claro, P.J.  (2009). Identiﬁcation of selected seaweed polysaccharides (phycocolloids) by vibrational spectroscopy (FTIR-ATR and FT-Raman). Food Hydrocolloids , 23, 1903–1909. https://doi.org/10.1016/j. foodhyd.2008.11.014
Pratista, I.M.I., Suhendra, L., & Wrasiati, L.P. (2017).  Karakteristik pewarna alami pada ekstrak Sargassum polycystum dengan konsentrasi pelarut etanol dan lama maserasi yang berbeda. Jurnal Rekayasa dan Manajemen Agroindustri, 5(4), 51-60. Ramadhan, W., Uju, Hardiningtyas, S.D., Pari, R.F., Nurhayati, & Sevica, D. (2022).  Ekstraksi polisakarida Ulvan dari rumput laut Ulva lactuca berbantu gelombang ultrasonik pada suhu rendah. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia, 25(1), 132-142. http://dx.doi. org/ 10.17844/jphpi.v25i1.40407 Ray, B., & Lahaye, M.  (1995). Cell-wall
polyscharides from the marine algae Ulva rigida (ulvales, chlorophyta). Extraction and chemical composition.
Carboydridrate Research , 274, 251-261. Robic, A.,  Gaillard, C., Sassi, J.F., Leral, Y., & Lahaye, M. (2009a). Ultrastructure of ulvan: A polysaccharide from green seaweeds. Biopolymers, 91, 652–664. https://doi.org/10.1002/bip.21195 Robic, A., Rondeau-Mouro, C., Sassi, J.F., Lerat, Y., & Lahaye, M.  (2009b). Structure and interactions of ulvan in the cell wall of the marine green algae Ulva rotundata (Ulvales, Chlorophyceae). Carbohydrate Polymers , 77, 206–216. https://doi. org/10.1016/j.carbpol.2008.12.023 Robic, A., Bertrand, D., Sassi, J.F., Lerat, Y., & Lahaye, M.  (2009c). Determination of the chemical composition of ulvan, a cell wall polysaccharide from Ulva spp. (Ulvales, Chlorophyta) by FT-
IR and chemometrics. Journal of Applied Phycology , 21, 451–456. http:// doi:10.1007/s10811-008-9390-9 Santi, R.A., Sunarti, T.C., Santoso, D., & Triwisari, D.A. (2012).  Komposisi kimia dan profil polisakarid rumput laut hijau.
Jurnal Akuatika, 3(2), 105-114.
Schwanninger, M., Rodrigues, J., Pereira, H., & Hinterstoisser, B. (2004). Effects of short-  time  vibratory ball milling on the shape of FT-IR spectra of wood and cellulose. Vibrational  Spectroscopy, 36, 23–40.  https://doi.org/10.1016/j. vibspec.2004.02.003 Sianipar, E.A., Satriawan, N., Sumartono, J., & Kambira, P.F.A. (2022).  Pengujian aktivitas   antioksidan makro alga Sumbawa dalam hubungannya dengan kandungan senyawa bioaktif dan efek farmakologi. Jurnal Riset Kesehatan Nasional, 6(2), 151-157. Sihono,  Sinurat,  E.,  Fateha,  Supriyanto, A.,  Suryaningrum,  T.  D.,  Nurhayati, Fransiska, D., Utomo, B. S. B., Subaryono, Sedayu, B. B., Waryanto, Nurjanah, Ramadhan, W., Fadillah, H. M., &
Muzayyanah,  A.  L.  (2023).  Optimasi formula  nori-like  product  dari Ulva spp., Gracilaria sp.,  dan  gliserol menggunakan metode mixture design.
Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 26(3), 433-447. http://dx.doi. org/10.17844/jphpi.v26i3.48337 Sun, L., Wang, L., Li, J., & Liu, H. (2014). Characterization and antioxidant activities of degraded polysaccharides from two marine chrysophyta. Food Chemistry, 160, 1-7. https://doi. org/10.1016/j.foodchem.2014.03.067 Suresh, V., Senthilkumar, N., Thangam, R., Rajkumarc, M., Anbazhagana, C., Rengasamy, R., Gunasekaranc, P., Kannand, S., & Palanib, P. (2013). Separation, purification and preliminary characterization of sulfated polysaccharides from Sargassum plagiophyllum and its in vitro anticancer and antioxidant activity. Process Biochemistry , 48, 364–373.  http://dx.doi. org/10.1016%2Fj.procbio.2012.12.014 Tako, M., Tamanaha, M., Tamashiro, Y., & Uechi, S. (2015).  Structure of ulvan isolated from the edible green seaweed, Ulva pertusa . Advances in Bioscience and Biotechnology, 6, 645-655.  http://dx.doi. org/10.4236/abb.2015.610068. Tsubaki, S., Oono, K., Hiraoka, M., Onda, A., & Mitani, T.  (2016).   Microwave- assisted hydrothermal extraction of sulfated polysaccharides from Ulva spp. and Monostroma latissimum . Food
Chemistry, 210, 311–316. https://doi. org/10.1016/j.foodchem.2016.04.121 Valentine, G., Sumardianto, & Wijayanti, I. (2020). Karakteristik nori dari rumput laut Ulva lactuca dan Gelidium sp. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 23(2): 295-302. https://doi.org/10.17844/ jphpi.v23i2.32340 Venkatesan, J., Lowe, B., Anil, S., Manivasagan, P., Kheraif, A.A.A., Kang, K.H., & Kim, S.K.  (2015).  Seaweed polysaccharides and their potential biomedical application. Starch-Staerke , 67, 381-390. https://doi.org/10.1002/star.201400127 Wahlström, N., Nylander, F., Malmhäll-Bah, E., Sjövold, K., Edlunda, U., Westman, G., & Albers, E.  (2020).  Composition and
structure of cell wall ulvans recovered from Ulva spp. along the Swedish west coast. Carbohydrate Polymers, 233, 1-9. https://doi.org/10.1016/j. carbpol.2020.115852 Weafer, C. (1996). The Food Chemistry Laboratory. CRC Press. Widowaty, W., Setiawan, S., & Perdana, W.W. (2020). Aktivitas antioksidan ekstrak Gracilaria sp. dan Ulva sp. dari pantai
Sayang Heulang. Agroscience , 10(2), 203- 209. Wijesekara, I., Pangestuti, R., & Kim, S.- K.  (2011). Biological activities and potential health benefits of sulfated polysaccharides derive from marine algae. Carbohydrate Polymers , 84, 14-21. https://doi.org/10.1016/j. carbpol.2010.10.062 Wu, H.Z., Wang, J.M., Yang, H., Li, G.Q., Zeng, Y.H., Xia, W., Li, Z.G., & Qian, M.R. (2017). Development and application of an in-cell clean up pressurized liquid extraction with ultra-high- performance liquid chromatography- tandem mass spectrometry to detect prohibited antiviral agents sensitively in livesstock and poultry feces. Journal of Chromatography , 1488, 10-16. https:// doi.org/10.1016/j.chroma.2017.01.070 Yaich, H., Garna, H., Besbes, S., Paquot, M., Blecker, C., & Attia, H.  (2013).   Effect of extraction conditions on the yield and purity of ulvan extracted from
Ulva lactuca . Food Hydrocolloid , 31(2),
375-382. https://doi.org/10.4025/ actascibiolsci.v40i1.34916 Yaich, H., Amira, A.B. , Abbes, F., Bouaziz, M., Besbes, S., Richel, A., Blecker, C., Attia, H., & Garna, H. (2017). Effect of extraction procedures on structural, thermal and antioxidant properties of ulvan from Ulva lactuca collected in Monastir coast. International Journal of Biological Macromolecules , 105(2), 1430-1439. https://doi.org/10.1016/j. ijbiomac.2017.07.141