Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup Volume 22, Nomor 2, Oktober 2022, Hal.94-103 https://journal.unpak.ac.id/index.php/ekologia

## PERBANDINGAN DAYA HAMBAT DARI EKSTRAK DAN HASIL FERMENTASI BAWANG PUTIH (Allium sativum) TERHADAP BAKTERI Escherichia coli
Oom Komala 1 *, Putri Dwi Antini 2 , Novi Fajar Utami 2
1 Program Studi Biologi, FMIPA, Universitas Pakuan
2 Program Studi Farmasi, FMIPA, Universitas Pakuan *email : oomkomalaunpak@gmail.com
diterima: 29 Oktober 2022; direvisi: 29 Oktober 2022; disetujui: 31 Oktober 2022

## ABSTRAK
Bawang putih merupakan tanaman yang umumnya tumbuh di dataran tinggi dan dimanfaatkan untuk  mengobati  pencernaan,  anti  peradangan,  hipertensi.  Sedangkan  bawang  hasil  fermentasi merupakan bawang putih yang difermentasi selama 40 hari dan dimanfaatkan sebagai obat untuk diabetes, hipertensi hiperkolestrerolemia. Bawang putih dan bawang hasil fermentasi ini memiliki kandungan alkaloid, flavonoid, saponin, dan tannin. Tujuan penelitian ini untuk membandingkan aktivitas  antibakteri  bawang  putih  dan  bawang  putih  hasil  fermentasi  dengan  menentukan konsentrasi hambat minimum (KHM) dan Lebar Daya Hambat (LDH) terhadap bakteri E. coli . Metode:  Fermentasi  bawang  putih  dilakukan  dengan  cara  membungkus  bawang  putih  segar dengan  alumunium  foil  dan  dimasukan  kedalam  rice  cooker  selama  40  hari.  Uji  KHM  pada konsentrasi 20%, 25%, 50% dan 75% dengan metode dilusi agar dan Uji LDH dengan metode difusi cakram pada konsentrasi 25%, 50% dan 75%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak bawang  putih  dan  bawang  putih  hasil  fermentasi  mampu  menghambat  bakteri E.  coli dengan Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  adalah  pada  konsentrasi  25%.  Ekstrak  bawang  putih merupakan  ekstrak  yang  paling  optimal  pada  konsentrasi  75%  memiliki  aktivitas  antibakteri dibandingkan dengan ekstrak bawang hasil fermentasi dengan Lebar Daya Hambat (LDH) rata- rata adalah 7,43 mm dengan kategori sedang. Kesimpulan: ekstrak bawang putih segar memiliki aktivitas antibakteri lebih baik dibandingkan dengan ekstrak bawang putih fermentasi terhadap E.coli .

## Kata Kunci: Bawang putih, E. coli, fermentasi, segar

## THE COMPARISON OF THE INHIBITORY OF GARLIC (Allium sativum) EXTRACT AND GARLIC FERMENTATION AGAINST Escherichia coli BACTERIA

## ABSTRACT
Allium sativum is a plant that generally grows in the highlands and is used to treat digestion, anti-inflammatory, hypertension. Meanwhile, fermented onions are fermented garlic for 40 days and  are  used  as  medicine  for  diabetes,  hypertension,  hypercholesterolemia.  These  fermented garlic and fresh garlic contain alkaloids, flavonoids, saponins, and tannins. The purpose of this study was to compare the antibacterial activity of fermented garlic and garlic by determining the minimum inhibitory concentration (MIC) and Inhibitory Width (LDH) against E. coli bacteria. Method: Garlic fermentation is done by wrapping fresh garlic in aluminum foil and putting it in a  rice  cooker for  40  days. MIC  test  at concentrations  of  20%,  25%,  50%  and  75%  with  agar dilution  method  and  LDH  test  with  disc  diffusion  method  at  concentrations  of  25%,  50%  and 75%. The results showed that fermented garlic and garlic extracts were able to inhibit E. coli bacteria with the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) at a concentration of 25%. Garlic extract  is  the  most  optimal  extract  at  a  concentration  of  75%  having  antibacterial  activity compared to fermented onion extract with an average Inhibitory Width (LDH) of 7.43 mm in the medium  category.  Conclusion:  fresh  garlic  extract  had  better  antibacterial  activity  than fermented garlic extract against E. coli .
Keywords: Allium sativum , Fermented, Fresh, E. coli
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup Volume 22, Nomor 2, Oktober 2022, Hal. 94-103

## PENDAHULUAN
Diare  adalah  peningkatan  pengeluaran tinja  dengan  konsentrasi  lebih  cair  dari biasanya  yang  terjadi  paling  sedikit  3  kali dalam  24  jam.  Mual muntah  serta kekurangan  cairan  adalah  salah  satu  dari gejala  yang  di  derita  penyakit  diare,  selain dari  pencernaan  gejala  tersebut  dipengaruhi oleh  bakteri  makanan  dan  minuman  yang terkontaminasi  oleh  bakteri  yang  masuk kedalam  tubuh  dan  menyebabkan  infeksi. Ada  hubungan  ketersediaan  air  bersih, kebiasaan  cuci  tangan,  sanitasi  makanan, ketersediaan jamban, dan pengelolaan sampah  dengan  kejadian  diare  pada  anak (Tuang,  2021).  Pengobatan  yang  bisa dilakukan untuk penyakit infeksi pencernaan (diare)  yaitu dengan memberikan antibiotik. Antibiotik yang mempunyai sifat menghambat  pertumbuhan  mikroorganisme, salah  satu  contoh  yaitu  amoxicillin.  Efek samping  dari  pengobatan  amoxicillin  yaitu bisa bereaksi alergi sehingga perlu digunakan pengobatan  alternatif  dengan  menggunakan fitobiotik  yaitu  bawang  putih  dan  bawang hasil fermentasi ( Allium sativum ) (Yuniati et al., 2016).
Bawang putih ( Allium sativum ) menunjukan
sifat bakteriosid dan bakteriostatis  yang  luas  terhadap  bakteri gram  positif  dan  gram  negatif  (Sudjatini, 2020).  Senyawa  yang  terkandung  pada bawang  putih  yaitu  allin,  allinase,  allisin, dialil sulfida allil metil tridulfida (Moulia et al .,  2018).  Manfaat  bawang  putih  dan bawang  hasil  fermentasi  bisa  mengurangi tekanan  darah,  menurunkan  kolesterol, mencegah serangan jantung dan kanker, serta menghambat pertumbuhan mikroba.
Sedangkan  efek  farmakologis  dari  bawang putih  yaitu  sumber  antioksidan,  antibakteri, antijamur, antikanker (Agustina et al. , 2020).
Bawang  hasil  fermentasi  yang  merupakan produk  fermentasi  dari  bawang  putih  yang dipanaskan  pada  suhu  65  -  80°C  dengan kelembaban  70-80%  selama  satu  bulan (Astuti  & Palupi, 2018). Pada bawang hasil fermentasi  mengandung  senyawa  S-Allyl cystein tetrahydro-B-Carbolines yang berasal
dari  perubahan  allicin  bawang  putih,  dan kandungan  senyawa  aktif  S-Allyl  cystein tetrahydro-B-Carbolines  pada  bawang  hasil fermentasi  lebih  melimpah  dibandingkan kandungan  pada  bawang  putih  (Agustina  et al., 2020). Perbedaan dari bawang putih dan bawang  hasil  fermentasi  adalah  fisikokimia termasuk rasa, warna, aroma dan kandungan. Dari kandungan yang terdapat pada bawang putih dan bawang hasil fermentasi memiliki potensi sebagai anti bakteri E. coli . Sifat dari E.  coli yang  dapat  merusak  gangguan pencernaan sehingga menyebabkan penyakit diare  yang  berkepanjangan,  juga  dapat menyebabkan  sistematis  peradangan  pada kandung  kemih  (Suryati  et  al.,  2018). Dilakukannya  perbandingan  daerah  hambat pada ekstrak bawang putih dan bawang hasil fermentasi  untuk  menganalisis  aktivitas antibakteri  kedua  ekstrak  tersebut  terhadap bakteri E. coli dengan melihat daerah hambat dari  kedua  ekstrak  tersebut.  Tujuan  dari penelitian adalah untuk membuktikan secara ilmiah  apakah  aktivitas  antibakteri  pada bawang hasil fermentasi memiliki perbedaan secara signifikan dengan bawang putih.

## BAHAN DAN METODE Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini adalah alat penggiling (grinder), pengayak  40  mesh,  timbangan  digital ( LabPRO ®), cawan ( Pyrex ®), oven ( Memment ®),  tanur  ( DAIHAN  Scientific Furnace ®),  kurs,  botol  kaca  coklat,  tabung reaksi ( Pyrex ®), Laminar Air Flow, Vacum dry,  kertas  saring,  pipet  tetes  ( Pyrex ®), Erlenmeyer  ( Pyrex ®),  alumunium  foil, autoklaf  ( ALL  AMERICAN ®),  cawan  petri ( Pyrex ®),  jarum  ose,  pembakar  bunsen, pinset, dan alat pelindung diri (APD).
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah bawang putih ( A. sativum ) varietas Tawangmangu  baru ,  kultur  murni E. coli , aquadest ( Emsure ®), etanol 96%
( Emsure ®),  HCL  2M,  pereaksi  dragendroff ( Merck ®),  mayer  (Merck®),  bouchardat ( Merck ®),  etanol  70%  ( Emsure ®),  paper disk whatman, serbuk Mg, gelatin 1%, NaCl
Oom Komala, dkk: Perbandingan Daya Hambat dari Ekstrak dan Hasil Fermentasi…
10%,  FeCl 3 ,  media  NA  (Nutrient  Agar), NaCl fisiologi 9%, antibiotik Amoksisilin.
Pembuatan  serbuk  simplisia  bawang putih
Pada  pembuatan  serbuk  simplisia, bawang putih  yang masih  segar dibersihkan dan  dicuci  pada  air  mengalir  untuk menghilangkan  kotoran  yang  menempel kemudian  ditiriskan.  Setelah  itu    diiris  tipis untuk  proses  pengeringan  dan  di  jemur dibawah sinar matahari. Bawang putih yang sudah kering (rapuh jika diremas)  kemudian di sortir untuk memasikan tidak ada kotoran yang menempel dan di blender sampai halus kemudian  di  ayak  menggunakan  mesh  40 (Putra et al ., 2017).

## Pembuatan bawang hasil fermentasi
Bawang  putih  yang  digunakan  masih dalam keadaan segar, tidak busuk, dan tidak berjamur. Bawang putih ditimbang sebanyak 5kg,  bahan  dibungkus  terlebih  dahulu menggunakan  alumunium  foil  satu  persatu kemudian  dipanaskan  dalam  rice  cooker dengan  suhu  70°-80°C  selama  40  hari (Agustina et al ., 2020).

## Pembuatan  Serbuk  Simplisia  Bawang Hasil Fermentasi
Bawang  dari  hasil  fermentasi  yang sudah kering dibersihkan untuk menghilangkan  kotoran  yang  menempel kemudian di haluskan menggunakan blender dan di ayak menggunakan mesh 40.
Pengujian  Karakteristik  Simplisia  dan Ekstrak
a. Uji Organoleptik
Pada  uji  organoleptik  meliputi  rasa, warna, aroma, dan tekstur pada simplisia.
b. Penentuan Kadar Air
Penetapan  kadar  air  dilakukan  dengan metode gravimetri dengan cara menimbang 2 g sampel dan memasukannya  kedalam  cawan  yang sudah  ditara  dan  ditimbang  sebelumnya. Kemudian  dioven  dengan  suhu  105°C selama  5  jam  sampai  bobot  konstan.
Bobot  konstan  tercapai  jika    perbedaan antara 2 penimbangan berturut-turut tidak lebih  dari  0,25%.  Penentuan  kadar  air dilakukan  secara  duplo.  Syarat  kadar  air tidak  boleh  lebih  dari  5%  (DepKes  RI, 2013).
c. Penentuan Kadar Abu
Penetapan  kadar  abu  dengan  cara menimbang  2  g  sampel  yang  sudah  di pijarkan  pada  suhu  600°  dan  ditara sebelumnya. Diratakan sampel pada kurs hingga  arang  habis  lalu  didinginkan  dan ditimbang sampai bobot konstan, perbedaan  antara  dua  kali  penimbangan tidak lebih dari 0,25%. Kadar abu ekstrak tidak boleh lebih dari 10,2% (DepKes RI, 2013).

## Ekstraksi  Bawang  Putih  dan  Bawang Hasil  Fermentasi  Menggunakan  Metode Maserasi
Serbuk  simplisia  bawang  putih  dan bawang hasil fermentasi ditimbang sebanyak 300  g  diekstraksi  menggunakan  metode maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96% dengan perbandingan (1:10). Pertama sampel dimasukan  kedalam  botol  kaca  berwarna coklat  sebanyak  300  g  dengan  etanol  96% sebanyak  1000  mL  sampai  seluruh  serbuk terendam  dan  dikocok  selama  5  menit, kemudian  diamkan  selama  24  jam  dan dikocok  setiap  6  jam  sekali  (6  jam  pertama dikocok  setiap  jam)  dalam  waktu  24  jam. Saring ekstrak untuk memisahkan filtrat dan ampas  kemudian  ampas  dimaserasi  kembali menggunakan  etanol  96%  selama  3  hari dengan  pelarut  1000  mL  dan  1000  mL. Maserasi  ke  tiga  dilakukan  selama  1  hari. Maserat  hasil  dari  ekstraksi  1,  II,  dan  III digabungkan  dievaporasi  menggunakan  alat rotary  evaporator  dengan  suhu  45°C selanjutnya  di  waterbath  pada  suhu  50°C untuk memperoleh ekstrak kental.

## Uji Fitokimia Serbuk dan Ekstrak a. Uji Alkaloid
Sampel  serbuk  dan  ekstrak  ditimbang sebanyak 0,5 g  yang dimasukan kedalam tabung reaksi dan ditambahkan 5 mL HCL 2M kemudian dipanaskan dengan
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup Volume 22, Nomor 2, Oktober 2022, Hal. 94-103
penangas air sampai mendidih, didinginkan  dan  disaring.  Filtrat  yang diperoleh  kemudian  dibagi  kedalam  3 tabung preaksi 1) uji dragendroff (kalium ismuth nitrat) ditambahkan beberapa tetes preaksi dragengroff pada tabung pertama, terbentuk  endapan  merah  bata  sampai jingga  yang  menandakan  hasil  positif mengandung  senyawa  alkaloid  2)  uji mayer (kalium merkuri iodida) ditambahkan beberapa tetes preaksi mayer pada  tabung  kedua,  terbentuk  endapan putih kekuningan yang menandakan hasil positif  mengandung  senyawa  alkaloid  3) uji bouchardat (kalium
iodida) ditambahkan  beberapa  tetes  preaksi bouchardat pada tabung ke tiga, terbentuk endapan berwarna coklat kehitaman yang menandakan  hasil  positif  mengandung senyawa alkaloid (Hanani, 2016).
b. Uji Flavonoid
Sampel  serbuk  dan  ekstrak  ditimbang sebanyak  0,5  g  yang  ditambahkan  5  mL etanol  95%.  kemudian  diamil  2  mL larutan  sampel  ditambahkan  0,1  gram serbuk  Mg  dan  10  tetes  HCL  pekat  dari sisi  tabung  kemudian  dikocok  perlahan, terbentuk warna merah kuning atau jingga yang  menunjukan  adanya  kandungan senyawa  golongan  flavonoid  (Hanani, 2016).
c. Uji Saponin (Uji busa)
Sampel  serbuk  dan  ekstrak  ditimbang sebanyak 0,5 g yang ditambahkan 10 mL air  panas  dan  didinginkan,  kemudian dikocok kuat selama 10 detik. Hasil positif ditandai dengan terbentuknya buih setinggi  1-10  cm  yang  ditambahkan  1 tetes asam klorida pekat selama 10 menit (Hanani, 2016)
d. Uji Tannin
Sampel  serbuk  dan  ekstrak  ditimbang sebanyak  0,5  g  dilarutkan  dengan  2  mL aquadest.  Kemudian  ditambahkan  2-3 tetes  gelatin  1%  yang  mengandung natrium khlorida (NaCl) 10%, hasil positif tannin menunjukan  adanya  endapan berwarna  putih.  Sampel  sebanyak  0,5  g ditambahkan  larutan  FeCl 3 terbentuknya
endapan  biru  atau  hitam  menunjukan adanya senyawa tanin (Hanani, 2016).

## Uji Antibakteri a. Pembuatan Suspensi Bakteri
Bakteri  uji  hasil  peremajaan  yang  telah diinkubasi  selama  24  jam  diambil menggunakan  jarum  ose  sebanyak  1  ose lalu disuspensikan kedalam tabung reaksi yang berisi 10 mL NaCl fisiologi 9% yang sudah steril, lalu dihomogenkan kemudian diukur kekeruhannya menggunakan standar  0,5  McFarland  (Edi  Kamal  & Tiara, 2019).
b. Preparasi Kertas Cakram
Kertas  cakram  yang  terbuat  dari  kertas saring  whatman  dibuat  berbentuk  bulat dengan  diameter  6mm  yang  diletakan  di cawan petri kemudian dilakukan sterilisasi  menggunakan  autoklaf  dengan suhu  121°C  selama  15  menit  dengan tekanan 15 atmosfer. Kertas cakram yang telah di sterilkan di rendam dengan larutan uji,  kontrol  positif  dan  kontrol  negatif selama 24 jam. Kemudian sisa dari larutan sampel diambil, dan cawan petri dikeringkan  dalam  oven  sampai  kering dengan suhu 37°C.
c. Pembuatan Larutan Uji Tabung  diisi  dengan  aquadest  sebanyak 10  mL  dan  dibuat  ekstrak  bawang  putih dan  bawang  hasil  fermentasi  dengan konsentrasi 20%, 25%, 50%, dan 75%.  1. Dimasukan  2  g  ekstrak  kedalam  tabung yang  berisi  10  mL  aquadest  steril  pada konsentrasi  20%  2.  Dimasukan  2,5  g ekstrak kedalam tabung yang berisi 10 mL aquadest  steril  pada  konsentrasi  25%3. Dimasukan  5  g  ekstrak  kedalam  tabung yang  berisi  10  mL  aquadest  steril  pada konsentrasi  50%  4.  Dimasukan  7,5  g ekstrask  kedalam  tabung  yang  berisi  10 mL aquadest steril pada konsentrasi 75%.
d. Pembuatan Larutan Pembanding Pada  larutan  pembanding  dibuat  larutan kontrol positif yang menggunakan amoxicillin 10 ppm untuk bakteri E. coli sedangkan kontrol negatif yang digunakan adalah  aquadest.  Pengenceran  dilakukan
untuk  mendapatkan  amoxicillin  10  ppm, dengan cara 100 mg amoxicillin dilarutkan  kedalam  aquades  pada  labu bukur  100  ml  dikocok  ad  homogen, kemudian  dipipet  1  ml  larutan  dan diencerkan  kembali  dalam  100  ml aquadest,  sehingga  diperoleh  konsentrasi 10 ppm.
e. Penentuan Konsentrasi Hambat

## Minimum (KHM)
Penentuan KHM dilakukan menggunakan metode  dilusi  padat  dengan  konsentrasi ekstrak yang di uji yaitu 20%, 25%, 50%, dan  75%  media  yang  digunakan  yaitu Nutrient Agar (NA). Cara untuk
penentuan  KHM  yaitu  dimasukan  15  ml NA pada suhu 45°C kedalam cawan petri dan  ditambahkan  1  mL  masing-masing ekstrak  dengan  berbagai  konsentrasi  uji kemudian  di  homogenkan  dan  dibiarkan sampai  mengeras. Bakteri E.  coli sebanyak  0,2  ml  konsentrasi  0,5Mc Farland  disebarkan  diatas  permukaan Nutrient Agar diinkubasi pada suhu 37°C selama  24  jam  dan  diamati  pertumbuhan pada  bakteri.  Jika  larutan  uji  konsentrasi terkecil  tidak  menunjukan  pertumbuhan bakteri  maka  ini  merupakan  Konsentrasi Hambat Minimum (KHM).
f. Penentuan Lebar Daya Hambat Pengujian ini dilakukan untuk mengetahui lebar daerah hambat ekstrak bawang putih dan  bawang  hasil  fermentasi  terhadap bakteri E.coli dengan  menggunakan metode  difusi  kertas  cakram.  Inokulum bakteri diambil sebanyak 0,2 ml dicampurkan  kedalam  15  ml  NA. Kemudian cawan petri digerakan melingkar  untuk  menyebarkan  bakteri secara  merata.  Jika  agar  sudah  padat dimasukan kertas cakram yang mengandung  larutan  uji  dan  juga amoxicillin  10  ppm  sebagai  kontrol positif.  Kemudian  diinkubasi  selama  24 jam  dengan  suhu  37°C  dalam  inkubator. Diamati dan diukur diameter zona hambat yang  terbentuk  menggunakan  penggaris untuk  mengetahui  lebar  daerah  hambat. Semakin besar LDH maka semakin besar
aktivitas  antibakterinya  (Pratiwi  et  al., 2019).

## Analisa Data
Dilakukan analisis data untuk mengetahui  efektivitas  antibakteri  ekstrak bawang  putih  dan  black  garlic  terhadap E. coli .  Hasil  data  lebar  daya  hambat  (LDH) dianalisis  dengan  menggunakan  rancangan acak lengkap (RAL) factorial 2x3x5 dengan menggunakan  tabel  ANOVA  (Analysis  of Variance).  Kemudian  dilanjutkan  analisis dengan  uji  Duncan  untuk  mengetahui perbedaan setiap konsentrasi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Pembuatan Simplisia Bawang Putih dan Fermentasinya
Bawang putih yang digunakan diperoleh dari pasar Bogor, dimana bawang yang  dipakai  sebanyak  10.000  g  dibagi  2 untuk  difermentasi  Sebagian.  Bawang  putih dipilih  untuk  mendapatkan  bawang  putih yang segar dan seragam kemudian dibersihkan  dari  kotoran  yang  menempel pada  bawang  putih.  5.000  g  bawang  putih kemudian difermentasi menggunakan magicom  selama  40  hari.  Semakin  lama waktu  fermentasi  menggunakan  rice  cooker maka  kandungan  S-allycystein  semakin meningkat (Agustina et al ., 2020). Dari 5.000 g menghasilkan simplisia kering yaitu 1.600 g kemudian digrinde dan diayak menggunakan  mesh  40  sampai  didapatkan hasil serbuk halus yaitu sebanyak 1.400 g dan hasil rendemen  yaitu 28%.  Hasil fermentasi dari bawang putih sebanyak 3.450 g dengan tekstur  kenyal  dan  rasa  asam  kemudian dirajang dan dijemur dibawah sinar matahari langsung, setelah kering sempurna digrinder dan  diayak  menggunakan  mesh  40  untuk didapatkan  serbuk  halus.  Diperoleh  serbuk simplisia hasil fermentasi adalah 1.100 g dan rendemen sebesar 31,8840%. Gambar serbuk simplisia bawang putih dan hasil fermentasi bisa dilihat pada gambar 1.

## a                        b
Gambar 1. (a) Serbuk Bawang putih
(b) Serbuk Bawang putih hasil fermentasi

## Hasil Ekstrak Segar Dan Fermentasi Dari Bawang Putih
Hasil  rendemen  ekstrak  bawang  putih 14,4784 %, dan bawang fermentasi 16,4986 dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Rendemen Ekstrak
No Metode Sampel Bobot Serbuk Simplis ia (gram) Bobot Hasil Ekstra k (gram) Nilai Rende men (%) 1 Maserasi Bawang Putih 300 43,4354 14,4784 2 Maserasi Bawang Fermenta si 300 49,4958 16,4986
Rendemen ekstrak bawang putih hasil fermentasi  lebih  tinggi  dari  ekstrak  bawang putih segar, hal ini disebabkan karena kadar air  ekstrak  hasil  fermentasi  lebih  sedikit, selama  fermentasi  air  terus  menguap.  Hasil ekstraksi dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2 . a . Ekstrak Kental Bawang Putih b. Ekstrak Kental Hasil Fermentasi
Karakteristik  Simplisia  Bawang  Putih Dan Hasil Fermentasi a. Kadar  Air  dan  Abu  Serbuk  Simplisia Dan Ekstrak
Nilai  kadar  air  dapat  dilihat  pada  Tabel  2. Hasil yang diperoleh pada serbuk dan ekstrak kadar air tersebut (Tabel 2) telah memenuhi syarat berdasarkan Farmakope Herbal Indonesia  yaitu  tidak  lebih  dari  10%
(DepKes  RI,  2017).  Penetapan  kadar  air  ini dilakukan  untuk  menentukan  daya  tahan suatu produk terhadap aktivitas mikroorganisme  selama  penyimpanan.  Pada penyimpanan kadar air yang rendah relative stabil  dibandingkan  kadar  air  yang  tinggi karena  akan  menjadi  suatu  media  yang kondusif untuk pertumbuhan mikroorganisme  (Salim  et  al.,  2017).  Nilai kadar abu dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 2. Hasil Kadar Air Serbuk Simplisia dan Ekstrak Sampel Rata-rata Kadar Air ± SD (%) Syarat (Tidak lebih dari) Serbuk Bawang Putih 1,2320 ± 0,0510 10% Serbuk Bawang Fermentasi 1,0334 ± 0,0042 10% Ekstrak Bawang Putih 1,0568 ± 0,0232 12% Ekstrak Bawang Fermentasi 0,3843 ± 0,1921 10% Tabel 3. Hasil Kadar Abu Serbuk Simplisia dan Ekstrak Sampel Rata-rata Syarat Tidak lebih dari Serbuk Bawang Putih 1,0701 ± 0,0106 3% Serbuk Bawang Fermentasi 1,7037± 0,0173 5% Ekstrak Bawang Putih 1,0792 ± 0,4283 2,7% Ekstrak Bawang Fermentasi 1,0164 ± 0,0126 5%
Hasil  kadar  abu  (Tabel  3)  telah memenuhi  syarat  bahwa  kadar  abu  tidak lebih dari 5% (DepKes RI 2013). Penetapan kadar  abu  ini  bertujuan  untuk  memberikan gambaran  kandungan  mineral  pada  suatu simplisia. Tinggi kadar abu dapat mengidentifikasi tingginya kandungan mineral pada sampel (Utami et al., 2017).

## Hasil Uji Fitokimia
Hasil  uji  fitokimia  dapat  dilihat  pada Tabel  4,  hasil  penelitian  ini  sesuai  dengan
20 %
20%
hasil  yang  dilakukan  oleh  Agustina  dkk., (2020)  bahwa  bawang  putih  dan  bawang fermentasi  mengandung  senyawa  alkaloid, flavonoid, tannin dan saponin.
Tabel 4. Hasil uji fitokimia bawang putih dan bawang fermentasi
Sampel
Senyawa (a) (b) (c)  (d)  Pengamatan Flavonoid + + + + Merah kuning  atau jingga Alkaloid + + + + Terbentuk endapan Tanin + + +
+ Endapan putih Saponin
+ + + + Terbentuk buih
Keterangan  :  (a)  serbuk  bawang  putih,  (b)  ekstrak bawang  putih,  (c)serbuk  bawang  fermentasi,  (d) ekstrak bawang fermentasi.

## Hasil Uji Konsentrasi Hambat Minimum
Dari  hasil  penelitian  tidak  adanya  daya hambat  pada  konsentrasi  20%  pada  ekstrak bawang putih (Gambar 3) karena masih ada pertumbuhan bakteri, sedangkan pada konsentrasi  25%,  50%  dan  75%  tidak terdapat pertumbuhan bakteri, oleh karena itu KHM terjadi pada konsentrasi 25%.
Gambar 3 Hasil KHM ekstrak kental bawang putih metode maserasi terhadap bakteri Eschericia coli. KHM pada konsentrasi 25%.
Gambar 4. Hasil uji KHM ekstrak bawang hasil fermentasi metode maserasi terhadap bakteri Eschericia coli , KHM pada konsentrasi 25%
Demikian  juga  bawang  fermentasi pada konsentrasi 20% masih ada pertumbuhan bakteri (Gambar 4), sedangkan
pada konsentrasi konsentrasi 25%, 50% dan 75%  tidak  terdapat  pertumbuhan  bakteri, oleh karena itu KHM terjadi pada konsentrasi 25%.

## Hasil Uji Lebar Daya Hambat
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  bawang  putih  dan  bawang fermentasi  memiliki  aktivitas  antibakteri yang  ditandai  dengan  terbentuknya  zone bening  disekitar  kertas  cakram  yang mengandung  ekstrak  (Gambar  5  dan  Tabel 5).
Gambar  5. (a)  LDH  bawang  putih  (b)  LDH bawang  hasil  fermentasi  Ket:  K+  =  Kontrol positif  (Amoxicillin)  K-  =  Kontrol  negatif (Aquadest)
Tabel 5. Hasil Uji Lebar Daya Hambat Ekstrak Etanol 96% Bawang Putih dan Bawang Hasil Fermentasi Bakteri
Eschericia coli Bakteri Ekstrak Etanol Kon sentr asi Rata-rata ± SD Kategori E. coli Bawang Fermenta si 25% 4,61 ± 0,0849b Lemah 50% 5,21 ± 0,0235c Sedang 75% 5,8 ± 0,0408d Sedang K(+) 10,85 ± 0,0707e Kuat K(-) 0a Tidak Mengham bat Bawang Putih 25% 6,13 ± 0,1027b Sedang 50% 6,81± 0,0471c Sedang 75% 7,43± 0,0471d Sedang K+ 11,93±0,0471e kuat K- 0a Tidak Mengham bat Keterangan : K+ : Amoxicillin K- : Aquadest 75% 20% 25% 50% 75% 20% 25% 50%
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup Volume 22, Nomor 2, Oktober 2022, Hal. 94-103
Bawang  putih  dan  bawang  hasil fermentasi  mengandung  senyawa  metabolit sekunder  yang  meliputi  alkaloid,  flavonoid, tanin  dan  saponin  dimana  senyawa  ini merupakan senyawa antibakteri yang mempunyai mekanisme masing-masing senyawa  untuk  menghambat  pertumbuhan mikroorganisme. Alkaloid dikatakan sebagai antibateri  karena  mekanisme  yang  diduga yaitu  dengan  cara  mengganggu  komponen penyusun  peptidoglikan  pada  sel  bakteri maka  lapisan  dinding  sel  tidak  berbentuk utuh yang dapat menyebabkan kematian pada sel  bakteri  tersebut  (Amalia,  dkk.,  2017). Mekanisme  kerja dari flavonoid yaitu dapat menghambat  sintesis  dinding  bakteri  juga dapat  menghambat  metabolisme  energi (Amalia,  dkk.,  2017).  Mekanisme  kerja saponin yang bersifat antibakteri yaitu dapat menyebabkan  kebocoran  pada  protein  dan enzim  dari  dalam  sel  (Amalia,  dkk.,  2017). Kemudian pada senyawa tanin yang bersifat sebagai  antibakteri  mempunyai  kemampuan untuk  menghambat  fungsi  pada  membran dan dinding sel bakteri (Amalia, dkk., 2017). Faktor  yang  mempengaruhi  terbentuknya zona  hambat  adalah  kemampuan  mendifusi suatu bahan antibakteri ke dalam media dan interaksi  terhadap  bakteri  yang  di  uji,  cepat nya  pertumbuhan  bateri,  tingat  sensitivitas dan  jumlah  yang  diinokulasi  (Amalia,  dkk., 2017).
Hasil LDH yang didapat pada penelitian ini berbeda dengan pada penelitian yang  dilakukan  (Fahmi dkk .,  2019)  dengan menggunaan  bakteri Staphylococus  aureus dimana pada penelitian tersebut mendapatkan  nilai  LDH  lebih  tinggi  yaitu pada konsentrasi 25% didapatkan hasil rata- rata  6,5  mm  dengan  ategori  sedang, konsentrasi  50%  yaitu  13,3  mm  dengan kategori kuat dan 75% adalah 15 mm dengan kategori kuat. Kemudian untuk bawang hasil fermentasi pada penelitian  (Purwandari dkk., 2021)  dengan  bakteri  yang  dipakai  yaitu Streptococus  mutans nilai  LDH  pada konsentrasi  25%  yaitu  9,7  mm  pada konsentrasi  50%  dengan  nilai  11,2  kategori kuat  dan  konsentrasi  75%  yaitu  12,7  mm
dengan kategori kuat, hal ini karena berbeda kualitas ekstrak yang dihasilkan.
Berdasarkan pada tujuan dan hipotesis pada penelitian  ini  ekstrak  bawang  putih  dan bawang hasil fermentasi memberikan pengaruh  pada  pertumbuhan  bakteri E.  coli dengan  terbentuk  zona  hambat.  Efektivitas suatu senyawa antimikroba dipengaruhi oleh konsentrasi  senyawa  antimikroba  yang digunakan. Semakin tinggi konsentrasi suatu esktrak  menyebabkan  makin  besarnya jumlah  senyawa  antimiroba  yang  terdifusi pada medium agar sehingga diharapkan zona hambat  akan  meningkat  (Nurhayati  dkk . , 2020).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang sudah dilakukan dapat disimpulkan bahwa : 1.  Ekstrak  bawang  putih  dan  bawang  hasil fermentasi  mampu  menghambat  bakteri E. coli dengan  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM) adalah konsentrasi 25%.
2. Ekstrak bawang putih merupakan ekstrak yang  paling  optimal  dalam  menghambat bakteri E. coli dibandingkan dengan ekstrak bawang  hasil  fermentasi,  hasil  Lebar  Daya Hambat pada semua konsentrasi  yaitu 25%, 50%,  dan  75%  optimal,  dan  berada  pada kategori sedang.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina,  E.,  Andiarna,  F.,  &  Hidayati,  I. 2020. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Bawang  Hitam  (Black  Garlic)  Dengan Variasi  Lama  Pemanasan.  AlKauniyah:
Jurnal Biologi, 13 (1), 39– 50. Https://Doi.Org/10.15408/Kauniyah.V 13i1.12114
Amalia.,  Tiara  D.,  Handayani  P.  (2017).
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etil Asetat Daun Sembung ( Blumea balsamifera (L.) DC.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Methicillin  Resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Prosiding  Seminar Nasional Biotik , 387–391.
Armaleni,  A.,  Nasir,  N.,  &  Agustien,  A. (2019). Antagonis
Pseudomonas fluorescens Indegenous Terhadap
Oom Komala, dkk: Perbandingan Daya Hambat dari Ekstrak dan Hasil Fermentasi…
Ralstonia  solanacearum Pada  Tanaman
Tomat ( Lycopersicum esculentum ). Metamorfosa:  Journal  of  Biological Sciences, 6 (1), 119. Https://Doi.Org/10.24843/Metamorfos
a.2019.V06.I01.P19
DepKes RI. (2013). Suplemen III Farmakope Herbal  Indonesia,  Edisi  I .  Jakarta. Kementrian Kesehatan RI.
DepKes  RI.  (2017). Farmakope  Herbal Indonesia  Edisi  II. Jakarta.  Kementrian Kesehatan RI.
Edi  Kamal,  S.,  &  Tiara,  D.  L.  (2019).  Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Buah Pepino (Solanum Muricatum Ait) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Esherichia  Coli. Jurnal  Farmasi  Sandi Karsa, 5 (1), 15–18. Https://Doi.Org/10.36060/Jfs.V5i1.31 Purwandari, V., Marpaung, J.K., Suharyanisa.  (2021).  Uji Aktivitas Antibakteri  dari  Black  Garlic  Dengan Variasi Waktu Berbeda Terhadap Streptococcus  mutans  Penyebab  karies
Gigi.  Jurnal  Farmanesia 8 (2),  100-106. https://doi.org/10.51544/jf.v8i2.2797 Putra AH., Corvianindya Y., & Wahyukundari  MA.  2017.  Uji  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Kamboja  Putih  ( Plumeria  acuminata ) terhadap  Pertumbuhan Streptococcus mutans . e-Jurnal  Pustaka  Kesehatan,
5 (3), 449–453.
Hanani, E. (2016). Analisis Fitokimia . ECG: Jakarta.
Kahl, J. D. W., Kulkarni, R., Jenamani, R. K., Pithani,  P.,  Konwar,  M.,  et  al.  (2019).
Teknik  Sklarifikasi  percepatan  dan Peningkatan  daya  Kecambah  Benih Sengon Buti ( Enterolobium cyclocarpum ). Fakultas Kehutanan Universitas Lambung Mangkurat.  2337- 7992.
Tuang,  A.  (2021).  Analisis  Faktor  yang berhubungan dengan kejadian Diare pada Anak. Jurnal  ilmiah  Kesehatan  Sandi
Husada, 10 (2),
534-542.
https://doi.org/10.35816/jiskh.v10i2.643
Moulia,  M.  N.,  Syarief,  R.,  Iriani,  E.  S.,
Kusumaningrum,  H.  D.,  &  Suyatma,  N.
E. (2018). Antimikroba Ekstrak Bawang Putih. Jurnal Pangan, 27 (1), 55–66. Nurhayati,  L.  S.,  Yahdiyani,  N.,  &
Hidayatulloh,  A.  (2020).  Perbandingan Pengujian  Aktivitas  Antibakteri  Starter Yogurt Dengan Metode Difusi Sumuran Dan  Metode  Difusi  Cakram. Jurnal Teknologi  Hasil  Peternakan , 1 (2),  41. https://doi.org/10.24198/jthp.v1i2.2753
Pratiwi,  A.,  Noorlaela,  E.,  &  Mahyuni,  S. (2019). Uji Daya Hambat Sediaan Sabun Cair  Ekstrak  Daun  Pala  ( Myristica fragrans houtt) terhadap Propionibacterium acnes dan Staphylococcus aureus . Ekologia, 19 (2), 80–88.
https://doi.org/10.33751/ekol.v19i2.16 49
Astuti,  D.P.,  &  Palupi,  C.  (2018).
Perbandingan  Efektivitas  Antibakteri Minyak  Atsiri  Bawang  Putih  ( Allium sativum )  Dan  Black  Garlic  Terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus Dan Escherichia coli Dengan Metode Kirby- Bauer. Journal  of  Pharmaceutical Science and Medical Research, 1 (2), 17-
21.
http://e-
journal.unipma.ac.id/index.php/pharmed
/article/view/2966/pdf_1
Salim,  M.,tyaningrum,  N.,  Isnawati,  A.,
Sitorus,  H.,  Yahya,  Y.,  &  Ni’mah,  T. (2017).  Karakterisasi  Simplisaia  dan Ekstrak  kulit  Buah  Duku  ( Lansium domesticum Corr) dari Provinsi Sumatera Selatan  dan  Jambi. Jurnal  Kefarmasian Indonesia,
6 (2), 117-128.
https://doi.org/10.22435/jki.v6i2.6226.1
17-128
Sudjatini. (2020). Pengaruh Cara Pengolahan
Terhadap  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak bawang  Putih  ( Allium  sativum L.) Varietas  Kating  dan  Sinco. Agrotech: Jurnal Ilmiah Teknologi Pertanian, 3 (1), 1-7.
https://doi.org/10.37631/agrotech.v3i1.1 73
Suryati, N., Bahar, E., & Ilmiawati, I. (2018). Uji  Efektivitas  Antibakteri  Ekstrak Aloe vera Terhadap Pertumbuhan Escherichia
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup Volume 22, Nomor 2, Oktober 2022, Hal. 94-103
coli Secara  In  Vitro.  Jurnal  Kesehatan Andalas, 6(3), 518. https://doi.org/10.25077/jka.v6.i3.p51  8- 522.2017
Utami,  Y.P.,  Umar,  A.H.,  Syahruni,  R.,  & Kadullah, I. (2017). Standardisasi
Simplisia  dan  Ekstrak  Etanol  daun
Leilem  ( Clerodendrum ). Journal  of
Pharmaceutical and Medicinal Sciences,
2 (10, 32-39.
Yuniati, R., Mita, N., & Ibrahim, A. (2016). Kajian Penggunaan Antibiotik Penderita
Diare  Pada  Pasien  Pediatrik  Di  Instalasi Rawat Inap Rsud Abdul Wahab Sjahranie Samarinda. April 2016, 109–121. https://doi.org/10.25026/mpc.v3i1.73
Fahmi,  Y.I,  Andriana,  A.,  &  Hidayati,  D.S.
(2019).  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak bawang Putih ( Allium sativum ) Terhadap Bakteri  (Staphylococcus  aureus). Jurnal
Kedokteran, 4 (2), 82-90. http://dx.doi.org/10.36679/kedokteran.v 4i2.109