## PENGENDALIAN HAYATI PENYAKIT LAYU FUSARIUM PISANG
( Fusarium oxysporum f.sp. cubense ) DENGAN Trichoderma sp.
THE BIOCONTROL OF FUSARIUM WILT OF BANANA ( Fusarium oxysporum f.sp . cubense) WITH Trichoderma sp.
Albertus Sudirman * 1) , Christanti Sumardiyono 2) , dan Siti Muslimah Widyastuti 3)
1) Program Pascasarjana Fakultas Pertanian Universitas Gadjah Mada
2) Fakultas Pertanian Universitas Gadjah Mada, Jln. Flora 1 Bulaksumur, Yogyakarta 55281
3) Fakultas Kehutanan Universitas Gadjah Mada, Jln. Agro No. 1 Bulaksumur, Yogyakarta 55281 *Penulis untuk korespondensi. E-mail: albertussudirman36@gmail.com

## ABSTRACT
The aim of this research was  to study the inhibiting ability of Trichoderma sp. to control fusarium wilt of banana in greenhouse condition. The experiments consisted of the antagonism test between Trichoderma sp. and Fusarium oxysporum f.sp. cubense (Foc) in vitro using dual culture method and glass house experiment which was arranged in 3×3 Factorial Complete Randomized Design. First factor of the latter experiment was the dose of Trichoderma sp. culture (0, 25, and 50 g per polybag) , second factor was time of Trichoderma culture application (2 weeks before Foc inoculation, at same time with Foc inoculation and 2 weeks after Foc inoculation). Trichoderma sp. was cultured in mixed  rice brand and chaff medium. The disease intensity was observed with scoring system of wilting leaves (0 – 4) . The results showed that Trichoderma sp. was antagonistic against Foc in vitro and inhibited 86% of Foc colony development. Mechanism of antagonism between Trichoderma sp. and Foc was hyperparasitism . Trichoderma hyphae coiled around Foc hyphae. Lysis of Foc hyphae was occurred at the attached site of Trichoderma hyphae on Foc hyphae . Added banana seedling with Trichoderma sp. Culture reduced disease intensity of Fusarium wilt . Suggested dose  of  Trichoderma  culture  application  in  glass  house  was  25  g/polybag,  given  at  the  same  time  with Foc inoculation .
Key words: biological control , Trichoderma sp., Fusarium wilt of banana , Foc

## INTISARI
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan Trichoderma sp. untuk pengendalian penyakit layu fusar- ium pisang di rumah kaca. Penelitian meliputi pengujian daya hambat Fusarium oxysporum f.sp. cubense (Foc) in vitro dan kemampuan menekan intensitas penyakit di rumah kaca. Penelitian in vitro meliputi uji antagonisme dan mekanismenya yang dilakukan secara dual culture . Uji pengaruh Trichoderma sp. terhadap penyakit layu  Fusarium dilakukan di rumah kaca  dengan Rancangan Acak Lengkap Faktorial. Faktor pertama adalah dosis biakan Tricho- derma sp., dengan tiga aras (0, 25, 50 g/per bibit dalam polibag). Faktor kedua adalah waktu pemberian dengan tiga aras (dua minggu sebelum, bersamaan, dan dua minggu setelah inokulasi dengan Foc). Tiap perlakuan terdiri atas 10 ulangan. Intensitas penyakit diamati dengan sistem scoring (1–4) terhadap kelayuan daun. Biakan Trichoderma sp. di- tumbuhkan dalam medium campuran sekam dan bekatul (2:1, g/g). Hasil penelitian menunjukkan bahwa Trichoderma sp. bersifat antagonistik terhadap Foc in vitro dengan daya hambat terhadap perkembangan koloni Foc 86%. Mekanisme penghambatan berupa hiperparasitisme. Hifa Trichoderma sp. menempel, melilit pada hifa Foc sehingga terjadi lisis hifa. Lisis hifa Foc terjadi pada tempat persinggungan antara hifa Foc dan hifa Trichoderma sp. Hasil pengujian di rumah kaca menunjukkan bahwa penyakit layu Fusarium dapat dihambat dengan pemberian Trichoderma sp. dalam medium campuran dedak dan bekatul sebanyak 25 g pada per polibag yang dilakukan bersamaan dengan waktu inoku- lasi Foc.
Kata kunci: Foc, pengendaliah hayati, penyakit layu pisang, Trichoderma sp.
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia, Vol. 17, No.1, 2011: 31– 35

## PENGANTAR
Salah satu kendala pada budidaya pisang adalah penyakit layu Fusarium. Thurston (1984) melapor- kan pisang Ambon maupun pisang komersil lainnya sangat  rentan  terhadap  penyakit  layu  Fusarium. Penyakit  ini  disebabkan  oleh  jamur Fusarium oxysporum f.sp. cubense (Foc). Gejala yang ditim- bulkan antara lain tepi bawah daun berwarna kuning tua, cokelat, dan akhirnya mengering. Jika batang
palsu dan bonggol yang terinfeksi dibelah akan tam- pak garis-garis cokelat kehitaman. Penyakit ini sulit dikendalikan karena Foc bertahan lama dalam tanah dengan  membentuk  klamidospora  (Booth,  1987; Semangun,  2000.  Foc  menginfeksi  lewat  akar lateral  atau  cabang-cabang  pendek  akar,  lalu melakukan penetrasi ke dalam jaringan pengangkut- an dan berkembang luas di dalam xilem (Brown & Ogle, 1997).
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia                                                                Vol. 17 No. 1
32
Pengendalian  secara  kimia  dengan  fungisida tidak  dimungkinkan  karena  akan  mencemari lingkungan tanah dan air. Kecuali itu pengendalian kimia tidak ekonomis karena memerlukan fungisida yang banyak.
Salah satu alternatif pengendalian layu Fusarium yaitu  dengan  pengendalian  hayati  menggunakan jamur antagonis yang juga hidup di dalam tanah. Trichoderma spp. merupakan salah satu jenis jamur antagonis yang berpotensi sebagai agens pengendali hayati  beberpa  penyakit  tanaman.  Beberapa  pe- nelitian  terdahulu  menunjukkan  bahwa  isolat Trichoderma spp. mempunyai aktivitas pengham- batan yang tinggi terhadap Rigidoporus lignosus (Widyastuti et  al .,  1998a), Ganoderma  philippii (Widyastuti et al ., 1998b), dan jamur-jamur terbawa tanah  yang  lain  (Widyastuti  &  Sumardi,  1998). Sivan et al . (1986) menemukan bahwa Trichoderma harzianum dapat mengendalikan Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) pada tomat di rumah kaca.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui daya hambat Trichoderma sp. dan mekanisme pengham- batan secara in vitro . Selain itu juga untuk menge- tahui kemampuan kultur Trichoderma sp. dalam menghambat laju penyakit layu Fusarium pisang di rumah kaca.

## BAHAN DAN METODE
Isolat F.  oxysporum f.sp. cubense (Foc) A13 virulen  didapat  dari  koleksi  Laboratorium  Ilmu Penyakit  Tumbuhan  Klinik,  Fakultas  Pertanian UGM  dan  isolat Trichoderma sp.  didapat  dari koleksi  Balai  Proteksi  Tanaman  Pangan  dan Hortikultura (BPTPH) Gesikan, Bantul, DIY.
Pengujian  daya  hambat Trichoderma sp.  ter- hadap Foc secara in vitro dilakukan  secara dual culture dengan  menumbuhkan  kedua  jamur  dari biakan  murni  berdiameter  5  mm,  diletakkan berhadapan dengan garis tengah dalam satu cawan petri (diameter 9 cm) yang berisi PDA. Jarak antara kedua jamur tersebut adalah 3 cm. F. oxysporum f.sp. cubense ditumbuhkan  tiga  hari  lebih  dulu. Untuk kontrol hanya ditumbuhkan Foc  dalam satu cawan  petri.  Pengamatan  luasan  penghambatan dilakukan  dengan  menggunakan dot-grid .  Peng- amatan  dilakukan  hingga  Foc  memenuhi  per- mukaan medium pada perlakuan kontrol. Perhitungan daya hambat menggunakan rumus sebagai berikut:
Pengamatan mekanisme antagonisme dilakukan sebagai  berikut:  Pada  tempat  pertemuan  antara biakan Trichoderma sp.  dan  biakan  Foc  dibuat preparat dicat dengan laktofenol biru katun dan di- amati di bawah mikroskop cahaya.
Pengujian daya penghambatan Trichoderma sp. terhadap perkembangan penyakit layu Fusarium di- lakukan di rumah kaca. Percobaan rumah kaca di- susun dengan rancangan Faktorial Acak Lengkap 3×3,  dan  diulang  10  kali.  Faktor  I  adalah  dosis kultur Trichoderma sp. terdiri 3 aras (0 g, 25 g, 50 g per polibag) dan faktor II adalah waktu pemberian Trichoderma sp. (2 minggu sebelum inokulasi Foc, bersamaan  dengan  inokulasi  Foc,  dan  2  minggu sesudah  inokulasi  Foc  )  Isolat Trichoderma sp. diperbanyak dengan media bekatul dan sekam de- ngan  perbandingan  2:1  (v/v)  (Sulistianingsih et al ., 1995). Bibit pisang yang ditanam pada poli- bag  umur  5  bulan  diperlakukan  dengan  kultur Trichoderma sp. sesuai perlakuan. Inokulasi Foc di- lakukan dengan menuangkan 25 ml suspensi spora dengan kerapatan 10 7 /ml. Parameter yang diamati adalah persentase daun pisang yang layu atau kuning. Pengamatan pertama dilakukan empat minggu setelah inokulasi Foc dan berikutnya dua minggu sekali pada masing-masing perlakuan.  Nilai  skoring  dilakukan  pada  tiap tanaman pisang dengan metode Gao et al . (1994) yang dimodifikasi sebagai berikut:
C = Besarnya daya hambat Trichoderma a = Rata-rata luas koloni jamur Foc tanpa Trichoderma sp. (kontrol) b = Rata-rata luas koloni jamur Foc dengan Trichoderma sp.
Skor
Keterangan 0 Daun sehat 1 1 helai daun kuning/layu 2 2–3 daun kuning/layu 3 4–5 daun kuning/layu 4 >5 daun kuning/layu/tanaman mati
Nilai skoring digunakan untuk menghitung intensi- tas penyakit sebagai berikut:
Keterangan: IP = intensitas penyakit n = jumlah daun dari tiap skor serangan v = nilai dari setiap skor serangan
N = skor tertinggi
Z = jumlah tanaman yang diamati
C = a – b ×100% a
IP =  ∑(n×v) ×100%
N×Z
Tabel 1. Penghambatan Trichoderma sp. terhadap pertumbuhan Foc in vitro
Hari pengamatan ke (setelah interaksi) Luas koloni (cm 2 ) Penghambatan (%) F. oxysporum f.sp. cubense F. oxysporum f.sp. cubense
dengan Trichoderma sp. 1 12,42 11,75 5,41 2 17,18 14,00 18,51 3 21,33 16,24 23,86 4 23,16 16,57 28,41 5 25,40 16,57 34,76 6 27,44 16,38 40,32 7 29,60 14,04 52,57 8 32,87 13,42 59,87 9 34,60 12,40 64,16 10 36,16 10,29 71,53 11 38,84 9,71 75,01 12 41,16 8,09 80,00 13 43,71 7,53 82,00 14 45,56 6,36 86,00
Analisis data dengan ANOVA dan Uji beda nyata dilakukan dengan DMRT pada aras 5 %.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Daya Hambat Trichoderma sp. terhadap Foc in vitro
Daya  hambat Trichoderma sp.  terhadap  Foc pada 14 hari setelah kedua jamur berinteraksi adalah 86% (Tabel 1).
Hasil pengamatan menunjukkan adanya pola in- teraksi  antagonisme  antara Trichoderma sp.  dan Foc.  Perkembangan  koloni  Foc  mulai  terhenti empat hari setelah persinggungan. Harman et al. (1981) menyatakan bahwa peristiwa penekanan ter- hadap populasi patogen oleh jamur antagonis telah diketahui yaitu terjadinya mikoparasitisme, yang di- dahului dengan peristiwa lisisnya dinding sel pato- gen oleh enzim kitinase dan ß-(1-3) glukanase.
Mekanisme Antagonisme Pada kultur in vitro terlihat proses penempelan awal hifa Trichoderma sp. pada hifa Foc, pelilitan, dan pelisisan hifa Foc. Peristiwa pelisisan yang di- awali  dengan  penempelan  hifa Trichoderma sp. pada hifa Foc, kemudian pelilitan, dan akhirnya pelisisan hifa dengan ditandai keluarnya sitoplasma dari hifa Foc. Chet (1990) menyatakan bahwa pada tahap pengenalan banyak kasus bersifat parasitisme, sehingga sifat antagonistik satu jenis Trichoderma hanya  efektif  untuk  jamur  patogen  tertentu. Degradasi  dinding  sel  inang  terjadi  dengan  di- produksinya enzim-enzim litik oleh Trichoderma sehingga mengakibatkan lisisnya dinding sel inang (Gambar 1)
Trichoderma sp.  tumbuh  di  atas  koloni  Foc (hiperparasit). Hal ini diduga karena Trichoderma sp. mampu menghasilkan enzim yang dapat melisis dinding sel dan memarasit jamur Foc.
Hadar et  al .  (1979)  membuktikan  bahwa T. harzianum mampu  tumbuh  di  atas  jamur Rhizoctonia solani dan memanfaatkan dinding sel R. solani sebagai sumber karbon. Penelitian yang dilakukan  oleh Widyastuti  (1998b)  juga  menun- jukkan hasil bahwa Trichoderma sp. mampu tum- buh  di  atas Ganoderma  philippii sehingga miseliumnya  tidak  mampu  berkembang  dengan baik. Harjono (2000) juga melaporkan endokitinase T. reesei mempunyai aktivitas litik dan antifungal terhadap pertumbuhan hifa G. philippii secara in vitro .
Persentase Daun Layu dan Intensitas Penyakit Uji  jarak  berganda  Duncan  (DMRT)  menun- jukkan  adanya  interaksi  antara  dosis  dan  waktu pemberian Trichoderma sp.  Dosis  pemberian Trichoderma berpengaruh  nyata  dibandingkan dengan kontrol dalam hal intensitas penyakit jika dilakukan  bersamaan  dengan  saat  inokulasi  Foc (Tabel  2).  Jika  dilakukan  dua  minggu  sebelum atau  sesudah  inokulasi  Foc,  pemberian  dosis Trichoderma tidak berbeda nyata dengan kontrol. Perkembangan  penyakit  layu  Fusarium  dapat juga dipengaruhi oleh faktor-faktor lain seperti kon- disi lingkungan di atas dan di dalam tanah, virulensi Foc,  dan  tingkat  kerentanan  tanaman  pisang  itu sendiri. Trichoderma sebagai jamur saprofit sangat membutuhkan nutrisi bagi perkembangannya. Pada perlakuan pemberian Trichoderma sp. dua minggu
Sudirman et al .: Pengendalian Hayati Penyakit Layu Fusarium Pisang dengan Trichoderma sp. 33
Perlakuan Rerata persentase daun layu W0T0 82,0      ab W0T1 75,0      b W0T2 66,3      b W1T0 100,0      a W1T1 59,6      b W1T2 52,6      b W2T0 71,5      b W2T1 79,6      a W2T2 76,5      b
Tabel 2. Interaksi pengaruh dosis dan waktu pemberian Trichoderma sp. terhadap persentase daun layu umur 10 minggu setelah inokulasi F. oxysporum f.sp. cubense
Keterangan: Tiap angka merupakan rerata dari 10 ulangan. Data ditransformasi arc sin √x. Angka yang diikuti dengan huruf yang sama tidak berbeda pada uji Duncan 5%. W0 = Waktu pemberian Trichoderma sp. 2 minggu sebelum inokulasi Foc; W1 = Waktu pemberian Trichoderma sp. bersamaan inokulasi Foc; W2 = Waktu pemberian Trichoderma sp. 2 minggu sesudah inokulasi Foc; T0 = Tanpa Trichoderma sp.; T1 = dosis Trichoderma sp. 25 g per polibag;  T2 = dosis Trichoderma sp. 50 g per polibag.
Gambar 1. Proses penempelan, pelilitan, dan pelisisan hifa oleh Trichoderma sp. terhadap hifa Fusarium oxysporum f.sp. cubense (umur 6 hari setelah Trichoderma sp. ditumbuhkan); proses awal penempelan (A), pelilitan hifa (B), proses pelilitan hifa (C), hifa Trichoderma sp. (a), hifa Fusarium oxysporum f.sp. cubense (b)
Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia                                                                Vol. 17 No. 1 34
sebelum  dan  bersamaan  inokulasi F.  oxysporum f.sp. cubense diduga Trichoderma telah mampu ber- adaptasi  dengan  rizosfer  perakaran  pisang  serta masih  tersedianya  nutrisi.  Pada  perlakuan  pem- berian Trichoderma sp. dua minggu sesudah inoku- lasi F. oxysporum f.sp. cubense lebih dahulu berada pada rizosfer pisang  sehingga nutrisi yang ada telah digunakan  Foc.  Keberadaan Trichoderma sp. yang  lebih  dulu  pada  rizosfer  perakaran  pisang akan  menghambat  perkembangan  penyakit  layu Fusarium. Menurut Blakeman dan Fokhema (1982), aktivitas jamur saprofit terhadap patogen tergantung pada kondisi mikroklimat dan lingkungan kimia. Kemampuan jamur saprofit dalam mengkonsumsi nutrisi tergantung ketersediaan nutrisi dalam tanah, yang sangat menentukan dalam menekan perkem- bangan patogen.

## KESIMPULAN
1. Trichoderma sp. bersifat antagonis dan mempu- nyai kemampuan menekan perkembangan koloni Foc.
2. Trichoderma sp. adalah hiperparasit terhadap Foc. 3. Berdasarkan penelitian di rumah kaca, pemberian Trichoderma 25 g per tanaman bersama dengan inokulasi Foc, menunjukkan penurunan intensitas penyakit layu fusarium pisang terbaik.

## DAFTAR PUSTAKA
Blakeman, J.P. & N.J. Fokhema. 1982. Potential for  Biological  Control  of  Plant  Disease  on  the Phylloplane. Annual Review of Phytopathology 20: 167–192.
Booth, C. 1971. The Genus Fusarium . Common- wealth Mycological Institute. Kew Surrey, England, 237 p.
Brown, J. &  H. Ogle 1997. Fungal Diseases and their Control, p. 443–466. In J. Brown & H. Ogle (eds), Plant Pathogens and Plant Diseases . The University of New England Printery, Armidal.
Chet, I. 1990. Biological Control of Soil-borne Plant Pathogen with Fungal Antagonists in Combination with Soil Treatment, p. 15–25. In D. Hornby (ed.), Biological Control of Soil-borne Plant Pathogens . CAB International, Wallingford, United Kingdom. Gao, H. C.H. Beckman, & W.C. Muller. 1994. The Rate of Vascular Colonization as a Measure of the
Genotype Interaction between Various Cultivars of Tomato and Various Formae or Races of Fusarium oxysporum . Physiological  and  Molecular  Plant Pathology 46: 29–43.
Hadar, Y., I. Chet, & Y. Henis. 1979. Biological Control of Rhizoctonia solani Damping off with Wheat Brand Culture of Trichoderma harzianum . Phytopathology 69: 64–68. Harjono.  2001.  Antifungal  Activity  of  Purified Endochitinase  Produced  by  Biocontrol  Agent Trichoderma  reesei against Ganoderma  philipii . Pakistan Journal of Biological Sciences 4: 1232– 1234.
Harman, G.E., I. Chet, & R. Baker. 1981. Factors Affecting Trichoderma hamatum Applied to Seed as a Biocontrol Agent. Phytopathology 71: 569– 572.
Semangun, H. 2000. Penyakit-Penyakit Tanaman Hortikultura .  Gadjah  Mada  University  Press, Yogyakarta. 850 p.
Sivan,  A.,  U.  Ona  &  I.  Chet  1986.  Biological Control  of Fusarium spp.  in  Cotton,  Wheat and  Muskmelon  by Trichoderma  harzianum . Phytopathology 116: 39–47.
Sulistianingsih,  N.,  Djajati,  S.  Santoso,  &  L. Sulistyowati.  1995.  Pengaruh  Inokulasi  Jamur Trichoderma sp. terhadap Penyakit Busuk Batang Vanili  oleh F.  batatatis var. vanillae (Tucker), p. 374–376. In Parman (ed.), Prosiding Kongres Nasional XIII dan Seminar Ilmiah Perhimpunan Fitopatologi Indonesia . Mataram, 27–29 Septem- ber 1995.
Thurston, H.D. 1984. Tropical Plant Diseases . APS Press. St. Paul, Minnesota. 208 p.
Widyastuti, S.M. & Sumardi. 1998. Antagonistic Potential  of Trichoderma spp.  against  Root  Rot Pathogen of Forest Tree Species. Asian Journal of Sustainable Agriculture 1: 1–8.
Widyastuti, S.M., Sumardi, & N. Hidayati. 1998a. Kemampuan Trichoderma spp. untuk Pengendalian Hayati  Jamur Akar  Putih  pada Acacia  mangium secara In vitro . Buletin Kehutanan 36: 24–38.
Widyastuti, S.M., Sumardi, A. Sulthoni, & Harjono. 1998b. Pengendalian Hayati Penyakit Akar Merah pada  Akasia  dengan Trichoderma spp. Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia 4: 65–72.
Sudirman et al .: Pengendalian Hayati Penyakit Layu Fusarium Pisang dengan Trichoderma sp. 35