AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK TANAMAN MANGROVE ( Rhizophora stylosa )

## TERHADAP BAKTERI Vibrio parahaemolyticus
ANTIBACTERIAL ACTIVITIES OF MANGROVE PLANT EXTRACT (Rhizophora stylosa) TO THE GROWTH OF BACTERIA Vibrio parahaemolyticus
Agus Triwanda 1* , Yuni Puji Hastuti 2 , dan Sinung Rahardjo 3
1 Pasca Sarjana Manajemen Perikanan, Universitas Terbuka, Tanggerang, Indonesia
2 IPB University, Bogor, Indonesia
3 Politeknik Ahli Usaha Perikanan, Jakarta, Indonesia *Korespondensi: agustriwanda96@gmail.com (A Triwanda) 19 September 2022 – Disetujui 17 Februari 2023
ABSTRAK. Bakteri Vibrio parahaemolyticus tergolong pada jenis bakteri halofilik gram negatif hidup pada muara sungai dan pantai. Bakteri ini merupakan agen penyebab septikemia pada udang saat periode larva dan post larva. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak  daun,  akar,  batang  dan  kepala  buah  mangrove Rhizophora  stylosa terhadap  pertumbuhan bakteri V.  parahaemolyticus . Rancangan percobaan menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  perlakuan  kontrol  positif  ( Papper  disk yang  mengandung chloramphenicol ); Kontrol negatif ( Papper disk yang mengandung metanol) P1 = ekstrak mangrove 100 mg/L; P2 = ekstrak mangrove 200 mg/L; P3 = ekstrak mangrove 400 mg/L dan diulang sebanyak 3 kali. Parameter penelitian adalah  mengukur  zona  hambat  bakteri.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak  daun,  akar, batang  dan  kepala  buah mangrove R. stylosa berpengaruh  nyata  terhadap  zona  hambat  bakteri  dan semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun, akar, batang dan kepala buah mangrove R. stylosa semakin luas zona hambat bakteri.  Konsentrasi  400  mg/L  ekstrak  daun,  akar,  batang  dan  kepala  buah  mangrove R.  stylosa merupakan konsentrasi yang paling efektif untuk menghambat pertumbuhan bakteri V. parahaemolyticus yang menunjukkan zona hambat rata-rata akar 9,5 mm, daun 7,7 mm, batang 6,5 mm, dan kepala buah 4,8 mm.
KATA KUNCI : Bakteri, konsentrasi ekstrak, zona hambat.
ABSTRACT. Vibrio parahaemolyticus is a gram-negative halophilic bacterium that lives in estuaries and beaches. These bacteria are agents that cause septicemia in shrimp during the larval and post larvae period. This study aims of this experiment is to determine the effect of mangrove leaf, root, stem and fruit extracts of Rhizophora stylosa growth of the V. parahaemolyticus bacteria. The experimental design used a completely randomized design (CRD) with positive control treatment (Papper disk containing chloramphenicol); Negative control (Papper disk containing methanol) P1 = mangrove extract 100 mg/L; P2 = 200 mg/L mangrove extract; P3 = 400 mg/L mangrove extract and in doing it on 3 times. The research parameter was measuring the bacterial inhibition zone. The results showed that the mangrove leaf, root, stem and fruit extracts of R. stylosa significantly affected on the inhibition zone and of high concentrations of the leaf, root, stem extract concentrations of R. stylosa mangrove fruit, the wider the bacterial inhibition zone. The concentration of 400 mg/L extracts of leaves, roots, stems and fruit heads of R. stylosa mangroves was the most effective concentration to inhibit the growth of V. parahaemolyticus bacteria, which showed an average root inhibition zone of 9.5 mm, leaves 7.7 mm, stems 6.5 mm, and fruit heads 4.8 mm.
KEYWORDS: Bacteria, extract concentration, obstacles zone.

## 1. Pendahuluan
Keberhasilan usaha budidaya udang salah satunya dipengaruhi oleh kesehatan udang. Penyakit yang menyerang pada budidaya udang umumnya disebabkan oleh jamur, parasit, virus dan bakteri (Supono et  al .,  2019).  Bakteri Vibrio merupakan  salah  satu  penyebab  timbulnya  penyakit  pada  udang.  Jenis spesies  bakteri V.  parahaemolyticus tergolong  pada  jenis  bakteri  halofilik  gram  negatif.  Selain menimbulkan  penyakit  pada  udang  budidaya,  bakteri  ini  juga  dapat  mengontaminasi  biota  budidaya,
AURELIA JOURNAL VOL. 5 (1) APRIL 2023 : 47-54
E-ISSN 2715-7113 e-mail: aurelia.journal@gmail.com
sehingga  ketika  biota  tersebut  dikonsumsi  dapat  menimbulkan  penyakit  atau  keracunan  (Vergara  & Jimenez,  2017).  Pengobatan  dan  antisipasi  penularan  penyakit  yang  disebabkan  oleh  bakteri  perlu dilakukan secara dini, misalnya dengan menggunakan antibiotik.   Penggunaan antibiotik secara terus menerus  dengan  dosis  yang  tidak  tepat  akan  mengakibatkan  bakteri  menjadi  resisten.  Penggunaan antibiotik tidak direkomendasikan oleh FAO telah melalui code of conduct for responsible fisheries (Widhi & Imam, 2021).
Upaya pencegahan dan pengobatan alternatif yaitu dengan menggunakan tumbuhan obat alami yang bersifat antibakteri. Bahan alami yang berpotensi sebagai antibiotik adalah tumbuhan yang banyak tumbuh  di  daerah  pantai  dan  muara  (Ardiputra,  2022).  Tumbuhan  mangrove  mengandung  senyawa metabolit  sekunder  yang  aktif  sebagai  antibakteri  seperti  saponin,  flavonoid,  dan  alkaloid.  Senyawa metabolit  sekunder  tersebut  diduga  turut  berperan  mengendalikan  populasi  mikroorganisme  patogen sehingga  dapat  mempertahankan  kelangsungan  hidup  ikan  dan  udang  yang  hidup  di  perairan  hutan mangrove (Manuhuttu & Nur, 2021). Terdapat pendugaan kandungan senyawa metabolit sekunder yang dimiliki  tanaman  mangrove R. s tylosa dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri V.  parahaemolyticus dengan penggunaan konsentrasi yang rendah, sehingga senyawa metabolit sekunder tersebut nantinya dapat dinyatakan efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri V. parahaemolyticus.

## 2. Metode Penelitian

## 2.1 Preparasi
Sampel  diambil dari  ekosistem  mangrove  yang  ada  di  Politeknik  Ahli  Usaha  Perikanan  Kampus Serang. Bahan ekstrak yang digunakan yaitu bagian akar, batang dan daun yang berasal dari satu pohon mangrove, sedangkan untuk bagian kepala buah diambil dari beberapa pohon mangrove  yang hidup dalam satu kawasan ekosistem. Selanjutnya proses pengeringan yang bertujuan untuk memudahkan dalam  proses  penepungan  bahan  ekstraksi.  Tujuan  dari  penepungan  yaitu  untuk  meningkatkan efektivitas pada saat proses perendaman bahan ekstraksi dengan bahan pelarut. Bahan pelarut akan lebih mudah menembus dinding bahan ekstraksi (Immanuela, 2018).

## 2.2 Ekstraksi
Proses  ekstraksi  dilakukan  dengan  metode  maserasi  yaitu  dengan  cara  merendam  bahan  sampel dengan cairan pelarut, tujuan proses ini untuk mendapatkan senyawa metabolit sekunder dari tanaman mangrove yang disiapkan (Chairunnisa, 2019). Proses ekstraksi dilakukan dengan memasukkan bahan serbuk halus tanaman mangrove sebanyak 200 g ke dalam labu erlenmeyer, selanjutnya menuangkan pelarut sebanyak 600 mL. Jenis pelarut yang digunakan yaitu metanol 70%, pelarut ini merupakan pelarut yang  sering  digunakan  dalam  proses  ekstraksi,  karena  memiliki  sifat  polar  dan  non  polar  sehingga dikenal  sebagai  pelarut  universal  (Ramdani et  al. ,  2017).  Perendaman  dilakukan  selama  72  jam, berikutnya disaring untuk memisahkan bahan ekstrak mangrove dengan pelarut yang telah mengikat senyawa  metabolit,  hasil  penyaringan  selanjutnya  dievaporasi  dengan  alat rotary  evaporator selama kurang lebih 1 jam dengan suhu 50˚C hingga diperoleh ekstrak kental, selanjutnya dipanaskan dengan water bath dengan suhu 50˚C hingga membentuk gel (Sabiladiy ni et al ., 2018). Masing-masing ekstrak mangrove selanjutnya dibagi menjadi tiga konsentrasi yaitu 100 mg/L, 200 mg/L, dan 400 mg/L dengan menggunakan metanol sebagai bahan pelarut agar memperoleh nilai konsentrasi yang diinginkan untuk proses uji daya hambat bakteri.

## 2.3 Uji Daya Hambat
Proses uji daya hambat dilakukan dengan metode Kirby Bauer . Tahapan awal uji daya hambat yaitu mempersiapkan  media  agar  sebagai  media  hidup  bakteri.  Jenis  agar  yang  gunakan  yaitu  TCBS ( Thiosulfate Citrate Bile Salt Sucrose ). Bahan agar TCBS ditimbang dengan menggunakan timbangan analitik sebanyak 22,5 g, kemudian dilarutkan dengan akuades sebanyak 1 L pada wadah erlenmayer, selanjutnya larutan agar dipanaskan dengan menggunakan hot plate sambil diaduk hingga mendidih dan
Triwanda et al. , 2023                                                                                                                    E-ISSN 2715-7113 Aurelia Journal, Vol. 5 (1): 47-54
homogen. Larutan agar kemudian disterilisasi dengan menggunakan autoklaf pada suhu 121˚C selama 15 menit dengan tekanan 1 atm, larutan agar selanjutnya dituangkan ke dalam cawan petri setebal 3 mm.  Tahapan  berikutnya  yaitu  inokulasi  bakteri V.  parahaemolyticus pada  media  agar.  Bakteri  yang digunakan berasal dari stok kultur murni, proses inokulasi bakteri menggunakan media kapas swab yang dioleskan merata pada semua permukaan media agar.
Tahapan selanjutnya pemasangan kertas cakram  ( paper disc ) dengan diameter 6  mm pada media agar yang telah diinokulasi dengan bakteri. Kertas cakram sebelumnya telah direndam selama 24 jam pada larutan ekstrak mangrove yang telah dibuat untuk perlakuan dengan konsentrasi 100 mg/L, 200  mg/L,  dan  400  mg/L,  selain  direndam  dengan  perlakuan  konsentrasi  ekstrak  mangrove  kertas cakram  juga  direndam  dengan  metanol  sebagai  kontrol  negatif  dan chloramphenicol sebagai  kontrol positif (Supono et al. , 2022). Masing-masing percobaan dilakukan dengan tiga ulangan. Media agar yang telah diinokulasi bakteri dan dipasang kertas cakram selanjutnya diinkubasi pada  suhu 37˚C selama 24 jam.  Kondisi  adanya  potensi  daya  hambat  bakteri,  diketahui  dengan  munculnya  zona  bening  (zona hambat) pada sekeliling kertas cakram, untuk selanjutnya diukur diameter zona hambat yang dihasilkan oleh masing-masing perlakuan. Pengukuran dilakukan secara vertikal dan horizontal (Novaryatiin et al. , 2018).

## 2.4 Analisis Data
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan mempertimbangkan homogenitas penelitian.  Penelitian  dilakukan  dengan  lima  perlakuan  dan  tiga  ulangan.  Adapun  perlakuan  berupa konsentrasi ekstrak tanaman mangrove R. stylosa yang berbeda. P1= ekstrak mangrove 100 mg/L, P2= ekstrak  mangrove  200  mg/L,  P3=  ekstrak  mangrove  400  mg/L,  kontrol  positif  ( chloramphenicol )  dan kontrol negatif (metanol). Data penelitian dianalisis secara statistik menggunakan metode Analysis of Variance (ANOVA) dan dilanjutkan dengan uji Tukey (Persulessy et el. , 2016).

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1     Analisis Kualitatif Fitokimia Ekstrak Mangrove
Analisis fitokimia dilakukan untuk mengidentifikasi jenis senyawa metabolit sekunder yang terkandung pada ekstrak tanaman mangrove. Hasil uji kualitatif ekstrak tanaman mangrove R. stylosa pada Tabel 1 menunjukkan  bahwa  pada  akar  terdapat  senyawa  flavonoid,  alkaloid,  tanin,  triterpenoid,  fenol  dan saponin. Batang terdapat kandungan senyawa alkaloid, tanin, triterpenoid, dan fenol. Daun mengandung senyawa flavonoid, tanin, triterpenoid, fenol,  dan saponin. Kepala buah mengandung senyawa tanin, triterpenoid, dan fenol.
Tabel 1. Hasil Uji Kualitatif Fitokimia Ekstrak Tanaman Mangrove R. stylosa.
Identifikasi Senyawa Jenis bahan sampel Akar Batang Daun Kepala buah Flavonoid + - + - Alkaloid • Mayer • Dragendrof • Bouchardat + + + + + + - - - - - - Tanin + + + + Terponid • Steroid • Triterpenoid - + - + - + - + Fenol + + + + Saponin + - + -
Keterangan: (+) terkandung senyawa metabolit,
(-) tidak terkandung senyawa metabolit
Senyawa  metabolit  sekunder  bermanfaat  untuk  menjaga  kondisi  makhluk  hidup  agar  mampu bertahan terhadap ancaman dari luar atau lingkungannya (Yusfachri et al. , 2019). Nilai atau kandungan pada  senyawa-senyawa  tersebut  dipengaruhi  oleh  keadaan  lingkungan  saat  senyawa  tersebut diproduksi,  selain  itu  kondisi  makanan  dan  ruang  gerak  juga  dapat  mempengaruhi.  Masing-masing senyawa memiliki manfaat terutama untuk menjaga kesehatan (Sudjatha & Ni Wayan, 2017).
Senyawa  flavonoid  mengandung  antioksidan  yang  berfungsi  sebagai  penangkal  radikal  bebas yang menjadi penyebab masalah kesehatan,  selain itu dapat membantu  penyerapan vitamin C yang dapat meningkatkan imun. Senyawa alkaloid juga memiliki sifat antioksidan serta bersifat racun yang banyak digunakan untuk pengobatan (Batubara et al ., 2017). Proses antioksidan flavonoid dan alkaloid secara  umum  yaitu  cincin  benzena  tidak  jenuh  disertai  gugus  hidroksil  (-OH),  asam  amino  (-NH 2 ), ataupun hidrogen (-H). Gugus tersebut yang bertugas untuk mengikat radikal bebas sehingga menjadi komponen yang tidak aktif (Manongkoa et al. , 2020).
Senyawa  tanin  memiliki  antioksidan  dan  senyawa  saponin  dapat  mematikan  moluska  dan protozoa, membantu penyerapan vitamin, mineral dan protein dalam usus, serta sebagai anti jamur dan anti virus. Senyawa triterpenoid dan steroid mengandung anti inflamasi, penenang dan insektisida, selain itu steroid memiliki manfaat untuk meningkatkan stamina (Widyanto et al ., 2019) . Senyawa fenol juga memiliki antioksidan yang dapat menangkal radikal bebas serta memiliki mineral – mineral penting dan kaya akan serat iodium (Setyati et al ., 2020).
3.2     Uji Daya Hambat Ekstrak Mangrove R. stylosa terhadap V. parahaemolyticus
Uji daya hambat bakteri dilakukan dengan metode Kirby Bauer yaitu metode uji daya hambat bakteri dengan menggunakan kertas cakram ( paper disc ) sebagai media difusi. Kelebihan metode ini yaitu lebih fleksibel  dalam  menentukan  bahan  ekstrak  atau  obat  yang  akan  diuji  (Rahman et  al. ,  2022).  Hasil pengujian pada media agar akan terlihat zona bening (zona hambat) pada sekitar kertas cakram yang telah  di  difusi  dengan  bahan  ekstrak  tanaman  mangrove  yang  mengandung  antibakteri,  untuk selanjutnya dilakukan pengukuran agar dapat menilai potensi dari ekstrak tanaman mangrove sebagai bahan antibakteri V. parahaemolyticus ( Gambar 1 ).
Selain  dengan  bahan  ekstrak  mangrove,  uji  daya  hambat  ini  juga  menggunakan  bahan chloramphenicol sebagai kontrol positif (+), bahan ini dipilih karena memiliki spektrum yang luas sehingga mampu menghambat bakteri gram positif dan gram negatif. Untuk kontrol negatif (-) menggunakan bahan metanol  yang  merupakan  bahan  pelarut,  untuk  memastikan  bahwa  bahan  tersebut  tidak  memiliki kandungan antibakteri.
Gambar 1. Madia Agar Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Mangrove.
Berdasarkan uji daya hambat diperoleh hasil bahwa ekstrak tumbuhan mangrove R. stylosa dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri V.  parahaemolyticus ,  akan tetapi  nilai  respon  daya  hambat  yang dihasilkan berbeda-beda pada setiap perlakuan ( Tabel 2 ).
Tabel  2.  Nilai  Rata-rata  Zona  Hambat  Ekstrak  Mangrove R.  stylosa terhadap  Bakteri V. parahaemolyticus.
Ekstrak Mangrove Nilai Rata-rata Perlakuan (mm) Kontol Negatif Kontrol Positif 100 (mg/L) 200 (mg/L) 400 (mg/L) Akar 0 13,2 6,4 8,1 9,5 Daun 0 13,2 6,9 7,1 7,7 Batang 0 13,2 5,4 6,2 6,5 Kepala Buah 0 13,2 2,6 3,8 4,8 Signifikansi * * *
Keterangan: *) berbeda nyata ( P < 0,05 )
Hasil analisis sidik ragam ANOVA menunjukkan adanya pengaruh ekstrak tumbuhan mangrove (akar, daun, batang dan kepala buah) R. stylosa terhadap pertumbuhan bakteri V. parahaemolyticus . Hasil uji Tukey taraf 5% menunjukkan bahwa ekstrak kepala buah dengan konsentrasi 100 mg/L, 200 mg/L, 400 mg/L tidak menghasilkan perbedaan yang nyata. Pada ekstrak akar, daun, dan batang yang diberikan dengan konsentrasi 100 mg/L, 200 mg/L, 400 mg/L menunjukan daya hambat yang berbeda nyata.  Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  akar,  daun,  dan  batang  mangrove R.  stylosa semakin berdampak dalam menghambat pertumbuhan bakteri V. parahaemolyticus . Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  ekstrak  tanaman  mangrove R.  stylosa terhadap pertumbuhan bakteri V. parahaemolyticus diperoleh hasil tertinggi pada ekstrak akar dengan nilai rata- rata diameter yaitu 6,4-9,5 mm, nilai tersebut dalam kategori sedang (Wanja et al ., 2020). Nilai tertinggi kedua setelah ekstrak akar yaitu ekstrak daun dengan nilai rata-rata diameter 6,9-7,7 mm, nilai tersebut termasuk dalam katagori sedang (Wanja et al ., 2020). Nilai tertinggi urutan ketiga yaitu ekstrak batang dengan nilai rata-rata diameter 5,4-6,5 mm, nilai tersebut termasuk pada katagori rendah (Wanja et al ., 2020) dan nilai rata-rata yang terendah yaitu pada ekstrak kepala buah dengan nilai rata-rata diameter 2,6-4,8 mm, nilai ini termasuk katagori rendah (Wanja et al ., 2020).
Hasil pengukuran diameter nilai zona hambat ekstrak akar yaitu pada nilai rata-rata 6,4 mm pada dosis 100 mg/L, nilai rata-rata 8,1 mm pada dosis 200 mg/L dan nilai rata-rata 9,5 mm pada dosis 400 mg/L. Hasil pengukuran diameter zona hambat ekstrak batang yaitu pada nilai rata-rata 5,4 mm pada dosis 100 mg/L, nilai rata-rata 6,2 mm pada dosis 200 mg/L dan nilai rata-rata 6,5 mm pada dosis 400 mg/L. Hasil pengukuran diameter zona hambat ekstrak daun yaitu pada nilai rata-rata 6,9 mm pada dosis 100 mg/L, nilai rata-rata 7,1 mm pada dosis 200 mg/L dan nilai rata-rata 7,7 mm pada dosis 400 mg/L. Hasil pengukuran diameter zona hambat ekstrak kepala buah yaitu pada nilai rata-rata 2,6 mm pada dosis 100 mg/L, nilai rata-rata 3,8 mm pada dosis 200 mg/L dan nilai rata-rata 4,8 mm pada dosis 400 mg/L. Untuk nilai pada kontrol positif ( chloramphenicol ) yaitu 13,2 mm dan nilai untuk  kontrol negatif (metanol) yaitu 0 mm.
Tinggi dan rendahnya nilai diameter zona hambat bakteri pada ekstrak tanaman mangrove diduga dipengaruhi oleh jumlah kandungan senyawa metabolit sekunder yang terkandung pada masing-masing bagian  ekstrak  tanaman  (Egra et  el. ,  2019).  Setiap  senyawa  metabolit  sekunder  memiliki  peranan tersendiri dalam menghambat pertumbuhan bahkan membunuh bakteri sesuai dengan jumlah dosis yang diberikan (Maftucha et al. , 2018).
Senyawa metabolit sekunder yang terkandung pada ekstrak mangrove yaitu flavonoid. Senyawa ini dapat merusak membran sel mikroba serta membentuk kompleks dengan protein ekstraseluler terlarut pada  dinding  sel  mikroba  sehingga  senyawa  ini  dapat  digolongkan  sebagai  senyawa  antimikroba. Flavonoid juga dapat menimbulkan efek toksik terhadap bakteri, dengan mekanisme merubah transpor
nutrisi  dan  komponen  organik,  proses  perubahan  tersebut  disebabkan  oleh  gugus  hidroksil  yang terkandung pada senyawa flavonoid (Sungkar et al. , 2018).
Senyawa  alkaloid  memiliki  unsur  toksik  yang  berpengaruh  terhadap  mikroba,  sehingga  dapat menyebabkan kematian terhadap bakteri dan virus ( Ningrum et al. , 2016 ). Selain itu senyawa alkaloid juga dapat  merusak  komponen  penyusun  peptidoglikan  yang  menyebabkan  lapisan  dinding  sel  tidak terbentuk sempurna dan mengakibatkan kematian sel (Suhartati & Dodi, 2017).
Senyawa fenol memiliki kemampuan menyebabkan lisis (hancur) sel bakteri serta mampu merusak membran sel bakteri (Hidayah et al. , 2017), selain itu fenol juga memiliki sifat toksik yang menyebabkan kandungan protein pada bakteri ter denaturasi hal tersebut terjadi akibat struktur protein bakteri yang terganggu  sehingga  menjadi  struktur  acak  tanpa  kerusakan  struktur  kerangka  kovalen.  Deret  asam amino  protein  bakteri  setelah  denaturasi  tetap  dalam  kondisi  utuh,  akan  tetapi  kegiatan  biologisnya mengalami kerusakan yang mengakibatkan protein tidak lagi mampu melakukan fungsinya (Olla, 2019).
Senyawa saponin dapat menyebabkan kematian pada sel bakteri dengan mekanisme merusak kestabilan  pada  membran  sel,  yang  mengakibatkan  terhambatnya  perkembangan  sel  serta menyebabkan  kebocoran  pada  sitoplasma,  sehingga  menyebabkan  senyawa  intraseluler  keluar  dari dalam sel dan menyebabkan kematian sel bakteri (Suyani et al ., 2019).
Senyawa tanin dapat membuat dinding sel bakteri menjadi mengerut hal tersebut mengakibatkan aktivitas hidup bakteri menjadi terganggu bahkan mengalami kematian, karena permeabilitas sel yang mengalami gangguan akibat dari mengerutnya dinding sel. Selain itu tanin juga memiliki gugus hidroksil yang  memiliki  nilai  polaritas  yang  berbeda  dengan  lipid,  semakin  tinggi  nilai  lipid  pada  bakteri  maka diperlukan dosis yang lebih tinggi lagi untuk menghancurkan bakteri (Babychan & Jk, 2017).
Senyawa steroid/triterpenoid dapat menyebabkan perubahan komponen penyusun pada bakteri hal  tersebut  akibat  dari  penghambatan  yang  dilakukan  oleh  senyawa  steroid/triterpenoid  terhadap sintesis protein sehingga terjadi akumulasi. Selain itu senyawa terpenoid memiliki sifat dapat mudah larut dalam lipid inilah yang menyebabkan senyawa terpenoid dapat mudah menembus membran sel pada jenis bakteri gram positif maupun bakteri gram negatif (Anggraini et al. , 2019).
Selain  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  ekstrak  mangrove,  faktor lainnya yang mempengaruhi nilai zona hambat yaitu jenis bakteri yang digunakan sebagai bahan uji daya hambat. Bakteri yang digunakan dalam uji daya hambat yaitu V. parahaemolyticus yang merupakan jenis bakteri gram negatif dengan struktur dinding sel yang lebih kompleks dibandingkan dengan bakteri gram positif. Dinding sel bakteri gram negatif terdiri dari tiga lapis, lapis luar yaitu lipoprotein, lapisan tengah lipopolisakarida dan lapisan dalam peptidoglikan. Ketiga lapis dinding tersebut menyebabkan dinding sel tidak  mudah  dirusak  oleh  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam  ekstrak  tanaman mangrove (Putri et al. , 2019). Pada lapisan terluar (lipoprotein) mengandung porin yang bersifat hidrofilik sedangkan senyawa metabolit sekunder memiliki komponen molekul yang bersifat hidrofobik, perbedaan tersebut  menyebabkan  senyawa-senyawa  pada  ekstrak  mangrove  sulit  untuk  masuk  ke  dalam  sel bakteri. Lapisan tengah (lipopolisakarida) mampu menyeleksi zat-zat asing yang akan masuk dan pada lapisan tengah. Pada lapisan dalam (peptidoglikan) bermanfaat melindungi sel agar tidak mengalami kebocoran dari protein periplasma (Koemtjoro & Endry, 2020).

## 4. Kesimpulan
Tumbuhan  mangrove R.  stylosa berpotensi  sebagai  antibakteri  karena  memiliki  senyawa  metabolit sekunder yang aktif sebagai antibakterial seperti flavonoid, alkaloid, fenol dan saponin. Ekstrak akar R. stylosa menunjukkan  nilai  daya  hambat  yang  terbaik  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri V. parahaemolyticus , diikuti ekstrak daun dan ekstrak batang, sedangkan aktivitas antibakteri dari ekstrak kepala buah R. stylosa dengan konsentrasi yang berbeda tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan. Konsentrasi 400 mg/L merupakan nilai konsentrasi yang menghasilkan zona hambat paling tinggi dalam menghambat pertumbuhan bakteri V. parahaemolyticus .

## Daftar Pustaka
Anggraini, W., Siti, C. N., Ria, R. D. A., & Burhan, M. Z. A. (2019). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol 96%  Buah  Blewah  ( Cucumis  melo  L.  var.  cantalupensis )  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia coli. Pharmaceutical Journal Of Indonesia. 5(1), 61-66. Ardiputra, S. (2022). Sosialisasi dan Edukasi Manfaat Penanaman Bakau di Desa Panyampa Kecamatan Campalagian Kabupaten Polewali Mandar. Communnity Development Journal . 3(1), 283-289. Babychan, N., & Jk, D. R. (2017). Analysis of Antioxidant Properties of Moringa Oleifera Lam in Urban and Coastal Area. International Journal of Applied Research . 3(6),1098-1101. Batubara, M. S., Emita, S., & Masitta, T. (2017). Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Andaliman ( Zanthoxylum  acanthopodium DC.)  terhadap  Gambaran  Morfologi  Ovarium  Mencit  ( Mus musculus L .) Strain DDW. Klorofil . 1(1), 5-10.
Chairunnisa,  S.,  Ni  Made,  W.,  &  Lutfi,  S.  (2019).  Pengaruh  Suhu  dan  Waktu  Maserasi  terhadap Karakteristik  Ekstrak  Daun  Bidara  ( Ziziphus  mauritiana  L .)  sebagai  Sumber  Saponin. Jurnal Rekayasa dan Manajemen Agroindustri . 7(4), 551-560.
Egra,  S.,  Mardhiana.,  Mut,  R.,  Muhammad,  A.,  Nur,  J.,  Harlinda,  K.,  &  Tohru,  M.  (2019).  Aktivitas Antimikroba  Ekstrak  Bakau  ( Rhizophora  mucronata )  dalam  Menghambat  Pertumbuhan Ralstonia Solanacearum Penyebab Penyakit Layu. Agrovigor . 12(1), 26-31. Hidayah, N., Dewi, M., & Siti, H. B. (2017). Aktivitas Antibakteri Infusa Simplisia Sargassum muticum terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus. Life Science . 6(2), 49-54. Immanuela, J. (2018). Pengaruh Jenis Pelarut dan Lama Waktu Maserasi terhadap Aktivitas Antibakteri Mikroalga Porphyridium cruentum . Skripsi . Universitas Brawijaya Malang Koemtjoro, M. P., & Endry, N. P. (2020). Dinamika Struktur Dinding Sel Bakteri . Surabaya: CV. Jakad Media Publishing
Maftucha., Heny, S., & Febby, H. S. (2018). Uji Daya Hambat Ekstrak Chaetoceros calcitrans Terhadap Bakteri Aeromonas salmonicida . Journal of Fisheries and Marine Research . 2(1), 39-46. Manongkoa, P. S., Meiske, S. S., & Lidya, I. M. (2020). Uji Senyawa Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Tanaman Patah Tulang ( Euphorbia tirucalli L .). Jurnal MIPA . 9(2), 64-69.
Manuhuttu,  D.,  &  Nur,  A.  S.  (2021).  Potensi  Ekstrak  Daun  Mangrove  ( Sonneratia  alba )  Sebagai Antibakteri terhadap Salmonella, Staphylococcus aureus dan Escherichia coli . Biopendix . 7(2), 71-79.
Ningrum,  R.,  Elly,  P.,  &  Sukarsono.  (2016).  Identifikasi  Senyawa  Alkaloid  dari  Batang  Karamunting ( Rhodomyrtus tomentosa ) Sebagai Bahan Ajar Biologi untuk SMA Kelas X. Jurnal Pendidikan Biologi Indonesia . 2(3), 231-236. Novaryatiin,  S.,  Rezqi,  H.,  &  Rizqi,  C.  (2018).  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Etanol  Umbi  Hati  Tanah ( Angiotepris Sp .) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus . Jurnal Surya Medika . 3(2), 23-31.
Olla,  L.  R.  Y.  (2019).  Uji  Aktivitas  Antimikroba  Ekstrak  Daun  Sirih  Hijau  ( Piper  Betle  L .)  terhadap Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus  aureus . Karya  Ilmiah .  Politeknik  Kesehatan  Kemenkes Kupang Persulessy, E. R., Ferry, K. L., & Herman, D. (2016). Penilaian Cara Mengajar Menggunakan Rancangan Acak Lengkap (Studi Kasus: Jurusan Matematika FMIPA UNPATTI). Jurnal Ilmu Matematika dan Terapan . 10(1), 9-16.
Putri, N. H. S., Dewi, N., Sintia, L., Billyardi, R., Muhammad, E., & Novik, N. (2019). Aktivitas Antibakteri Ekstrak  Tangkai  dan  Daun Begonia  Multangula  Blume terhadap Porphyromonas  Gingivalis . Jurnal Biologi Universitas Andalas . 7(1), 51-58.
Ramdani, D., Marjuki., & Siti, C. (2017). Pengaruh Perbedaan Jenis Pelarut dalam Proses Ekstraksi Buah Mengkudu ( Morinda citrifolia L .) pada Pakan terhadap Viabilitas Protozoa dan Produksi Gas in- vitro . Jurnal Ilmu-Ilmu Peternakan . 27(2), 54-62.
Rahman, I. W., Risky, N., Fadlilah, R. N., Ka’bah., Hasti, N. K., & Ayusti, D. (2022). Potensi Ekstrak Daun Jambu  Biji  ( Psidium  guajava )  dalam  Menghambat  Pertumbuhan Serratia  marcescens . Jurnal Ilmu Alam dan Lingkungan . 13(1), 14-22.
Sabiladiyni, H. A., Agus, T., & Ali, D. (2018). Uji Pendahuluan Aktivitas Produk Biotransformasi Daun Mangrove Avicennia  marina dengan  Isolat  Jamur  terhadap  Bakteri  Patogen Klebsiella pneumonia dan Enterobacter aerogenes . Journal of Marine Research . 7(4), 273-282. Setyati, W. A., Rini, P., & Chrisna, A. S. (2020). Analisis Kadar Senyawa Fenol dan Kapasitas Antioksidan Berbagai Ekstrak S argassum dari Pantai Jepara. Buletin Oseanografi Marina . 9(2), 83-92. Sudjatha,  W.,  &  Ni  Wayan,  W.  U.  (2017). Fisiologi  dan  Teknologi  Pascapanen ( Buah  dan  Sayuran ). Denpasar: University Udayana Press
Suhartati,  R.,  &  Dodi,  A.  R.  (2017).  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Kulit  Buah  Naga  Merah ( Hylocereus  polyrhizus )  terhadap  Bakteri Streptococcus  pyogenes . Jurnal  Kesehatan  Bakti Tunas Husada . 17(2), 513-518.
Sungkar, O. F., Safira, K., & Rizki, A. P. (2018). Aktivitas Antibakteri Bedak yang Diperkaya dengan Konsentrasi Ekstrak Buah ( Rhizopora mucronata ). Jurnal Teknologi Pangan . 2(2), 135-140. Supono., Wardiyanto., Harpeni, E., Khotimah A. K., & Ningtyas, A. (2019). Identification of Vibrio sp. as a Cause of White Feces Diseases in White Shrimp Penaeus vannamei and Handling with Herbal Ingredients in East Lampung Regency, Indonesia. AACL Bioflux. 12(2), 417-425. Supono., Siti, N. M., & Yeni, E. (2022). Efektivitas Ekstrak Mangrove Rhizophora apiculata (Tomlinson, 1986) dalam Menghambat Vibrio parahaemolyticus Penyebab Penyakit pada Udang Vaname Litopenaeus vannamei (Boone, 1931). Jurnal Akuakultur Rawa Indonesi . 10(2), 199-211.
Suryani, N., Devi, N., & Dimas, D. I. (2019). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Batang Kecombrang ( Etlingera elatior (Jack) R.M.Sm.) terhadap Bakteri Plak Gigi Streptococcus mutans. Jurnal Kartika Kimia. 2,(1), 23-29 .
Vergara., & Jimenez. (2017). Bioactive Components in Moringa Oliefera Leaves Protect Againts Chronic Disease. Anttioxidant . 6(4), 91-95.
Wanja, D. W., Paul, G. M., Robert, M. W., Lilly, C. B., Helena, A. N., & Philip, N. N. (2020). Antibiotic and Disinfectant Susceptibility Patterns of Bacteria Isolated from Farmed Fish in Kirinyaga County, Kenya. International Journal of Microbiology . Article ID 8897338, 8 pages.
Diambil 31 Januari 2023 dari situs World Wide Web: https://doi.org/10.1155/2020/8897338.
Widhi,  A.  P.  K.  N.,  &  Imam,  N.  Y.  S.  (2021).  Residu  Antibiotik  Serta  Keberadaan  Escherichia  Coli Penghasil  ESBL  pada  Daging  Ayam  Broiler  di  Pasar  Kota  Purwokerto. Jurnal  Kesehatan Lingkungan Indonesia . 20(2), 137-142.
Widyanto, S. W., Ma’muri., & Nanda, R. P. (2019). Desain Prototipe Antifouling pada Pengembangan Teknologi Pemantauan untuk Budidaya Laut di Wakatobi. Seminar Nasional Pendidikan Biologi dan Saintek ke-IV, 407-416.
Yusfachri,  P.  A.,  Yayuk,  P.,  Yenni,  A.,  Murni,  S.  R.,  &  Nurhayati.  (2019).  Pemanfaatan  Kandungan Metabolit Sekunder yang Dihasilkan Tanaman pada Cekaman Biotik. Agriland . 7(1), 39-47.