## PERAN ANALISIS  DNA  TERHADAP  INFEKSI  PARASIT  NEUROSISTISERKOSIS
Muhammad Luthfi Al Manfaluthi*

## ABSTRACT
Neurocycticercosis  is  a  infectious  diseases caused  by  T.solium  larvea,  small  amount  of  this  species  can make  heavy  consequences  even  death. DNA analysis was performed to a multi-travelling patient related with T.solium endemicity area. The result suggests the infection have been already  happening  since  10 years  ago  when  in  Nepal

## ABSTRAK
Neurosistiserkosis adalah penyakit infeksi yang disebabkan oleh bentuk larva T.solium, meskipun dalam jumlah minimal infeksi ini mampu menimbulkan dampak yang merugikan bahkan kematian. Telah dilakukan análisis DNA terhadap pasien yang telah tinggal pada beberapa negara  endemis  infeksi  taenia solium (cacing  pita  babi).  Hasil  pemeriksaan DNA  menyebutkan  pasien  terjangkit infeksi  sejak  10 tahun yang lalu saat berada di Nepal.
Penyakit cacing pita babi Taenia solium adalah salah  satu  penyakit  yang  mendapat  prioritas penanggulangan  dikaitkan  dengan  derajat patogenesitasnya. Pada manusia, infeksi jenis parasit ini dibagi menjadi dua berdasar siklus hidupnya: (1) teniasis, infeksi oleh cacing dewasa yang disebabkan oleh  konsumsi  daging  babi  yang  mengandung sistisekus (bentuk larva) dan (2) sistiserkosis, infeksi oleh  stadium  larva  cacing  pita  yang  disebabkan oleh konsumsi makanan yang terkontaminasi telur cacing pita.
Neurosistiserkosis  adalah  infeksi  bentuk larva parasit cacing pita babiyang menyerang susunan syaraf pusat. Infeksi ini sangat membahayakan dan sering  terjadi  tidak  hanya  dibeberapa  negara berkembang  tetapi  juga  pada  negara  maju dikarenakan peningkatan laju migrasi dan pariwisata bahkan  pada  negara-negara  yang  memberlakukan pelarangan  mengkonsumsi  daging  babi  (Ibrahim, 2003).Karenanya sangat penting untuk memastikan dari  mana asal  infeksi  untuk  menilai  faktor  resiko pada  daerah  nonendemis  (Ito,  2003).
Pada  bulan  agustus  1996,  seorang  warga jepang berumur 46 tahun mengeluhkan nyeri kepala bersifat tumpul selama perjalanannya di jakarta, dia
menjalani pemeriksaan kesehatan di rumah sakit di manila  pada  perjalanan  kembali  ke  jepang.  hasil CT-scan menunjukkan tumor pada lobus temporal bagian  kiri.  Kemudian  dia  dirawat  dirumah  sakit Kisato,  observasi  intensif   menunjukkan  lesi  kistik tunggal dengan cincin perkabutan disekitarnya. Dia tidak mengalami ganguan syaraf yang lain dan hasil pemeriksaan darah dalam batas normal. Pada bulan september  pasien  menjalani  operasi  bedah  otak dan ditemukan kapsul berdinding tipis berukuran 1 cm. Pemeriksaan histopatologi mengungkap spesies T.  solium (Yuzawa,  2003) . Pasien  mengalami pemulihan  yang  cepat  dan  dapat  kembali  berkerja setelah  19  hari  setelah  operasi.  Neurosistiserkosis dengan  kista  tunggal  akhirnya  dapat  dipastikan secara  serologis  menggunakan  antibodi  spesifik dari  Universitas  Asahikawa  (Ito,  1999).
Dimanakah pasien terjangkit infeksi? karena jepang  bukan  termasuk  daerah  endemis  teniasis/ sistiserkosis.  Diasumsikan  pasien  terinfeksi  parasit ini diluar jepang. Dia bekerja sebagai menejer teknis perusahaan  internasional  selama  12  tahun  sejak 1970  dan  telah  mengunjungi  Indonesia,  Nigeria, Nepal, and Malaysia, dimana kasus neurosistiserkosis telah sering dilaporkan dari negara-negara tersebut (Murrell, 2005). Dikarenakan pasien telah tinggal di Indonesia  selama  6  tahun  sebelum  onset  penyakit (1990-1996),  dicurigai  pasien  terkena  infeksi  di
66 Vol. 10 No.1 Tahun 2014
Indonesia. Untuk menyelesaikan misteri asal infeksi dilakukan  analysis cytochrome c oxidase  I  ( cox1 ) dengan DNA mitokondria (mtDNA) menggunakan spesimen  histologis  dari  sediaan  formalin  dan paraffin hasil operasi sebelumnya.
Berdasarkan análisis filogenetik menggunakan sekuen mtDNA, T.
solium diklasifikasikan menjadi 2 jenis genotipe yaitu: Asia  dan  Africa  atau  amerika  latin  (Nakao,  2002). Pemeriksaan  histologis  menggunakan  xylene  dan etanol  untuk  menghilangkan  parafin  kemudian direhidrasi  sebelum  ekstraksi  DNA  dengan  set jaringan  DNeasy(Qiagen,  Germany).  Dikarenakan terjadinya  degradasi  DNA,  proses  mengalami kesulitan  untuk  mendapatkan  frogmen  DNA panjang  dari  sediaan  formalin,  sehingga  kami melanjutkan dengan PCR (polymerase chain reaction) menggunakan  primer  utama  dan  diperkuat  milai 100 sampai 200 pasangan fragmen. Laporan primer DNA  terdapat  pada  tabel  1.
Produk  PCR  diurutkan  dan  dibandingkan  dengan sekuens cox1 dari  data  base  utama.  Sekuens  yang digunakan  sebagai  pembanding  adalah  :  China  1 (AB066485),  China  2  (AB066486),  Korea (DQ089663),  Thailand  (AB066487),  Papua  (= sebelumnya  bernama  Irian  Jaya)  (AB066488),  Bali (AB271234),  India  (AB066489),  Mexico/Peru/ Cameroon  (AB066490),  Ecuador/Bolivia (AB066491),  Brazil  (AB066492),  Tanzania/ Mozambique  (AB066493).  Karena  sekuen  cox  1 identik dengan nepal, dimana negara tersebut pernah pasien  tinggali  untuk  supervisi  perusahaan  (1978– 1979,  1984–1986),  maka  dilakukan  pemeriksaan DNA  sistisekus  dari  hewan  babi  pada  3  tempat berbeda  di  Nepal  (Sunsari,  Moranga,  and Kathmandu)  untuk  analysis  cox1.  Diambil  satu sistiserkus dari tiap-tiap lokasi dan dilakukan analisis seperti  sebelumnya  (Nakao,  2002).  Hasilnya,
didapatkan  sekuen  parsial cox1 (1570  bp)  dari pasien (AB494702) dan kedua sekuen yang berbeda sedikit  dengan  sekuen cox1 (1620  bp)  dari  Nepal (Nepal 1: Sunsari,
AB491985,  Nepal  2:  Moranga  and  Kathmandu, AB491986).  Sekuen  dari  pasien  sangat  identik dengan  salah  satu  dari  dua  haplotipe  Nepal  yang diperoleh  dari  daerah  Sunsari.  Untuk mengestimasikan  hubungan  genealogi  diantara haplotipe  didunia  dilakukan  analisis  parsimony berdasarkan sekuen cox1 (1570 bp) dengan program tcs1.2  (Clemen,  2000).  Hasilnya,  haplotipe  secara jelas  dibagi  menjadi  2  kelompok  geografis sebagaimana sudah dilaporkan sebelumnya (Nakao 2002)dari  pasien  ini  didapatkan  basil  berasal  dari asia. Haplotipe dari bali Indonesia tidak disertakan pada analisis DNA dikarenakan sekuensnya terlalu pendek  (1188  bp)  pada  bank  genetik  dunia  dan secara  jelas  memang  berbeda  dengan  kelompok yang  lain.  Hasil  dari  pemeriksaan  DNA  terahir menyimpulkan  bahwa  pasien  memang  tidak terinfeksi T. solium dari indonesia tetapi dari  Nepal, negara endemis sistiserkosis (Amatya, 1999). Hasil analisis DNA juga mengindikasikan pasien terpapar infeksi sebelum tahun 1986 pada kunjungan terahir ke  Nepal  dan  hal  ini  berarti  larva  cacing  tersebut telah  berada  di  otak  pasien  minimal  selama  10 tahun.
Neurosisteserkosis  adalah  penyakit  yang disebabkan oleh masuknya bentuk telur infektif T. solium yang  kemudian  akan  menjadi  bentuk  larva dan  menyebabkan  gangguan  padaorgan  yang dilaluinya, meskipun hanya terinfeksi satu telur tapi dampak  yang  ditimbulkan  sangat  membahayakan bahkan  kematian.  Pengendalian  dan  pencegahan pada  penyakit  ini  sangatlah  penting,  karenanya mengetahui  dimana,  bagaimana  dan  kapan  pola pasien  terinfeksi  sangatlah  penting  terutama  pada negara  yang  tidak  endemis.  Peran  analisis  DNA menggunakan gen cox1 adalah alar ukur yang sangat specific dan sensitif untuk mendeteksi kasus serupa
Peran analisis DNA terhadap infeksi parasit Neurosistiserkosis 67 terutama dengan latar belakang pasien yang selalu berpindah-pindah.  Pada  pasien  ini  kita  dapat dibiaskan antara negara endemis dan non-endemis bahkan negara yang sebelumnya bersih dari infeksi parasit tersebut.

## Daftar  Pustaka
Amatya  BM,  Kimula  Y.  Sistiserkosis  in  Nepal:  a histopathologic  study  of   sixty-two  cases. Am  J  Surg  Pathol  1999;  23:1276–1279. Clement  M,  Posada  D,  Crandall  KA.  TCS:  a computer  program  to  estimate  gene genealogies.  Mol  Ecol.  2000;  9:1657–1659.
Ibrahim  N,  Azman  Ali  R,  Basri  H,  et  al.
Neurosistiserkosis  in  a  Malaysian  Muslim. Neurol  J  Southeast  Asia  2003;  8:45–48.
Ito A, Nakao M, Wandra T. Human taeniasis and sistiserkosis in Asia. Lancet 2003; 362:1918– 1920.
Ito  A,  Nakao  M,  Ito  Y,  et  al.  Neurosistiserkosis case with a single cyst in the brain showing dramatic  drop  in  specific  antibody  titers within 1 year after curative surgical resection. Parasitol  Int  1999;  48:95–99 Murrell  KD.  Epidemiology  of   taeniasis  and sistiserkosis. In: MurrellKD ed. WHO/FAO/ OIEGuidelines  for  the  surveillance, prevention  and  control  of  taeniosis/ sistiserkosis. Paris: OIE, 2005:27–43.
Nakao  M,  Okamoto  M,  Sako  Y,  et  al.  A phylogenetic hypothesis for the distribution of   twogenotypes  of   the  pig  tapeworm Taenia solium worldwide. Parasitology 2002; 124:657–662
Yamasaki  H,  Nakao  M,  Sako  Y,  et  al.  Molecular identification  of   Taenia  solium  cysticercus genotype in the histopathological specimens. Southeast Asian J Trop Med Public Health 2005;  36(Suppl):S131–S134.
Yuzawa  I,  Kawano  N,  Suzuki  S,  et  al.  A  case  of solitary cerebral sistiserkosis. Jpn J Neurosurg 2000;  9:364–369.