Biosfera 32 (3) September 2015
168
Neurospora  spp.  on  growth  of Aspergillus  flavus and A.  parasiticus and  accumulation  of  aflatoxin  B1  in groundnut. Mycological Research, 93: 518-523.
Nurdini  AL,  Nuraida  L,  Suwanto  A  dan Suliantari.  2015.  Microbial  growth dynamics  during  tempe  fermentation in  two  different  home  industries. International  Food  Research  Journal 22(4): 1668-1674. Journal homepage: http://www.ifrj.upm.edu.my.
Roubous-van  de  Hil  PJ,  Dalmas  E,  Nout MJR, Abee T. 2010. Soya bean tempe extract  show  antibacterial  activity against  Bacillus  cereus  cells  and spore. Journal of Applied Microbiology (109):  137-145.  DOI:  10.1111/j.1365- 2672.2009.04637.x.
Roubus-van  de  Hill  PJ,  Nout  MJR.  2011. Anti-Diarrhoeal  aspect  of  fermented soya beans. Soybean and health. El- Shemy  H  (Ed).  ISBN:  978-953-307- 535-8.  In Tech.  DOI:  10.5772/17997. [internet][cited 12 Nov 2015]. Available from  http://cdn.intechopen.com/pdfs- wm  19757.pdf / Soka S, Suwanto A, Sajuthi D, Rusmana I. 2 0 1 4 .   I m p a c t   o f   Te m p e h Supplementation  on  Gut  Microbiota Composition in Sprague-Dawley Rats. Research  Journal  of  Microbiology. DOI: 10.3923/jm.2014. [internet] [cited 13  Nov  2015].  Available  from: http://docsdrive.com/pdfs/academicjo urnals/jm/0000/64126-64126.pdf

## Kelimpahan dan Potensi Biofuel Mikrofitobenthos dari Perairan Sungai Pekacangan yang terkena Limbah Cair Tapioka
Christiani; A. Ilalqisny Insan; dan Dwi Sunu Widyartini Fakultas Biologi Unsoed Jl. Dr Soepano Purwokerto 53122 email: hj.christiani@yahoo.com ; insan.illal@yahoo.com;dwisunuwidyartini@yahoo.co.id

## Abstract
Microphytobenthic a benthic plants, found in the waters of the sunlight reaching the bottom waters. In addition to acting as a primary producer also has the potential to produce renewable biofuels   The purpose of this study was to determine the microphyitobenthic abundance of river Pekacangan affected tapioca liquid industrial waste and to estimate its potential as a biofuels. This research used survey method with the sampling technique is purposive sampling based on existing environmental setting. As the main parameters are the types of microphytobenthic, while supporting research parameters are temperature,  light  penetration,  pH,  dissolved  O ,  BOD 5 ,  current  velocity,  TSS,  TDS,  nitrate, 2 orthophosphate and silica. Microphytobenthic obtained at stations affected by the waste, in screening to determine its oil content.Abundance of microphytobenthic at a station directly exposed tapioca liquid -2 waste 620 ind.mm .Isolated microphytobenthic River Pekacangan affected tapioca liquid waste had 22 isolates of microphytobenthos and after screened allegedly 7 isolates potential as a biofuel, namely Navicula sp., Amphora libyca , Ulothrix sp., Anabaena sp. , Planctonema sp. , Cymbella sp., and Eunotia sp.
Keywords: Tapioca liquid waste;microphytobenthic; abundance; screening; Pekacangan river

## Abstrak
Mikrofitobenthos merupakan benthos tumbuhan, terdapat pada perairan dengan cahaya matahari mencapai bagian dasar perairan. Mikrofitobenthos berperan sebagai produsen primer perairan, juga memiliki potensi untuk menghasilkan biofuel . Tujuan penelitian ini untuk mengetahui kelimpahan mikrofitobenthos dari Sungai Pekacangan yang terkena limbah cair industri tapioka dan untuk mengetahui  potensinya  sebagai  bahan  bakar  nabati. Penelitian  ini  menggunakan metode  survai dengan  teknik  pengambilan  sampel  secara purposive  sampling . Parameterutama  yang  diamati adalah kelimpahan mikrofitobenthos, sedangkan parameter pendukung penelitian adalah suhu, penetrasi cahaya, pH, O terlarut, BOD , kecepatan arus, TSS, TDS, nitrat, ortofosfat dan silika.
2
5
Mikrofotobenthos yang  diperoleh  pada  stasiun  yang  terkena  limbah,  diskrining  untuk  mengetahui kandungan minyaknya. Kelimpahan mikrofitobenthos pada stasiun yang langsung terkena limbah cair 2 tapioka 620 ind/ mm . Hasil isolasi diperoleh 22 isolat mikrofitobenthos dan setelah diskrining 7 isolat berpotensi sebagai biofuel , yaitu Navicula sp., Amphora libyca , Ulothrix sp., Anabaena sp. , Planctonema sp. , Cymbella sp., dan Eunotia sp.
Katakunci: Limbah cair tapioka; Mikrofitobenthos; kelimpahan, skrining; Sungai Pekacangan .
Pendahuluan Pada  Industri  tapioka  selain menghasilkan  tepung  yang  bermanfaat,  di sisi lain menghasilkan limbah. Limbah pada dasarnya suatu bahan yang terbuang atau dibuang  dari  suatu  sumber  hasil  aktivitas manusia, maupun proses-proses alam dan tidak atau belum mempunyai nilai ekonomis (Murtadho dan Said, 1988). Limbah industri tapiokaberupa limbah padat dan limbah cair. Limbah cairyang masuk ke badan air sungai dapat  menimbulkan  gangguan,  baik terhadap  lingkungan  maupun  kehidupan disekitar aliran limbah.
Industri  tapioka  ”Pabrik Aci  55”  yang
berada  di  Desa  Timbang  Kecamatan Kejobong  Kabupaten  Purbalingga, merupakan  salah  satu  industri  yang memanfaatkan Sungai Pekacangan sebagai tempat  pembuangan  limbah  cair  tapioka, sehingga  akan  mempengaruhi  kualitas  air sungai. Kualitas air sungai dapat menurun akibat  masuknya  limbah  cair  ke  badan  air sungai, sehingga mempengaruhi ekosistem perairan  sungai  termasuk  kualitas  fisik- kimia,  yang  pada  akhirnya  akan  mem- pengaruhi  biota  yang  hidup  di  dalamnya (Agustira, 2013).
Mikrofitobenthos  merupakan  salah satu  biota  yang  hidup  di  perairan  sungai
(Wahyudi,2012).  Kelimpahan  mikro fitobenthos  di  Sungai  Pekacangan Purbalingga,  dapat  digunakan  sebagai bioindikator  pada  perairan  terkena  limbah cair industri tapioka. Mikrofitobenthos yang mampu  bertahan  hidup  lama  juga  dapat dipergunakan  dalam  pemanfaatan  kembali limbah  agar  lebih  berdaya  guna.  Sebagai mikroalga, mikrofitobenthos juga berpotensi sebagai (bahan  bakar  nabati)  yang biofuel cukup potensial sebagai pengganti minyak yang dapat diperbaharui.
Biofuel terdiri  dari  bioethanol  dan biogas yang dihasilkan oleh biomassa, baik tumbuhan, hewan, mikroba maupun limbah (Chisti,  2007).  Menurut  Gunawan  (2010) beberapa  hasil  penelitian  yang  telah dilakukannya menujukkan bahwa mikroalga merupakan salah satu mikroorganisme yang memiliki potensi untuk menghasilkan bahan bakar  nabati  ( ).  Berdasarkan  hal biofuel tersebut  maka  dilakukan  penelitian  yang bertujuan  mengetahui  kelimpahan mikrofitobenthos  di  Sungai  Pekacangan Purbalingga  yang  terkena  limbah  cair industri  tapiokadan  potensinya  sebagai bahan bakar nabati (biofuel). Hasil penelitian ini dapat dijadikan sebagai data dasar untuk monitoring  kualitas  perairan  Sungai Pekacangan,  Purbalingga.  Penelitian  ini juga  dapat  memberikan  informasi  dasar tentang potensi isolat mikrofitobenthos yang berpotensi sebagai biofuel. Metode  PenelitianObyek  yang  diteliti adalah  mikrofitobenthos  dan  sampel  air. Bahan-bahan kimia berupa larutan MnSO , 4 KOH-KI,  H SO ,  Indikator  amilum  dan 2 4
Na S O  0,025 N untuk mengukur O  terlarut
2 2 3 2

## dan  BOD ,  indikator  Phenolphathalein  dan
5
Na CO  0,01 N untuk mengukur CO  bebas,
2 3 2
larutan  standar  nitrat,  larutan  asam  fenol sulfolinik  dan  larutan  NH CH  10%  untuk
4
mengukur  kadar  nitrat,  larutan  standar fosfat, larutan reduktor SnCl  dan larutan NH
2 4
molibdat untuk mengukur kadar orthofosfat. Alat  penelitian  meliputi  planktonet  no.25, keping  Secchi,  thermometer,  labu Erlenmeyer  250  ml,  botol  Winkler  250  ml, botol sampel, mikroskop, , object glass cover glass ,  inkubator,  kuas,  botol  spray,  ember, meteran,  pipet  tetes,  pipit  seukuran,  botol plastik,  kertas  pH,  oven,  desikator,  kertas Whatman  No.41,  timbangan  elektrik,  labu takar, tabung reaksi, spektrofotometer, kotak pendingin,  statif  dan  buret,  batu  didih,
hotplate stopwatch , alat tulis, , dan kamera.
Pengambilan  sampel  dilakukan  di  Sungai Pekacangan  Kabupaten  Purbalingga  yang berada  di  sekitar  pabrik  aci  55  di  Desa Timbang.  Penelitian dengan menggunakan metode survei. Teknik pengambilan sampel dilakukan dengan cara purposive sampling pada  5  stasiun.  Pengambilan  sampel dilakukan  dengan  3  kali  ulangan  dalam interval  waktu  2  minggu.  Pengambilan s a m p e l   m i k r o f i t o b e n t h o s   d e n g a n menggunakan pipa PVC yang berdiameter 1 cm  dan  tinggi  4  cm.  Substrat  diencerkan dengan akuades dipisahkan dari bahan- dan bahan lain dengan menggunakan saringan bertingkat.  Air  hasilpenyaringan  yang mengandung  mikrofitobenthos  diencerkan dan  disaringkembali  menggunakan plankton-net no.25 untuk dikonsentra kan. t Parameter yang diamati meliputi parameter utama  yaitu  kelimpahan  mikrofitobenthos. Parameter pendukung yaitu parameter fisik (kecepatan  arus,  suhu,  substrat  dasar, kedalaman,  penetrasi  cahaya,  TDS  dan TSS) dan parameter kimia (DO, CO , BOD ,
2
5 nitrat,  orthofosfat  dan  pH).  Sampel mikrofitobenthosdiidentifikasi menggunakan pustaka  (Sachlan,  1982).  Perhitungan kelimpahan  dikonservasikan  dari  ' 'Inverted Microscope Method Counts'' ((APHA), 1985). Rumus  perhitungan  kelimpahan  (Fachrul,
2007)sebagai berikut :
171 170 Keterangan : N  : Jumlah organisme yang diamati Ac  : Luas daerahhitung (1,11279 mm2) At  : Luas gelas penutup (324 mm2) Vs  : Volume air yang diamati (ml) Vt  : Volume air yang terkonsentrasi (ml) As  : Luas permukaansubstrat (mm2)
Isolasi  mikrofitobenthos  dilakukan  dengan menggunakan  pipet  Pasteur  yang dipanaskan  dan  ditarik  hingga  ujungnya lebih kecil. Setelah itu dihisap secukupnya sehingga  masuk  ke  ujung  pipet. Mikrofitobenthos  yang  didapat  kemudian dipindahkan  ke  tabung  reaksi  yang  berisi media pertumbuhan.. Kandungan  lipid  pada  mikro  fitobenthos dapat diketahui melalui pewarnaan dengan larutan Nile  Red (Cooksey et  al .,  1987). Mikro  fitobenthos  dibuat  preparat  segar, diwarnai,  dan  diamati  di  bawah  mikroskop flourescense dengan filter blue violet dengan panjang  gelombang  (400  -  440  nm). Mikrofitobenthos  yang  mempunyai kandungan  lipid  akan  menampakan pembendaran berwarna kuning atau merah mengkilat.  Analisis  data  secara  dekskiptif dengan  memberi  tanda  (+)  pada  hasil skrining  yang  menunjukkan  pembendaran warna  kuning  atau  merah  dideksripsikan mengandung biofuel dan  diberi  tanda  (-) p a d a   y a n g   t i d a k   m e n u n j u k k a n pembendaran,  berarti  tidak  berpotensi sebagai biofuel. .
Hasil dan Pembahasan Hasil  pengamatan  mikrofitobenthos dari  perairan  Sungai  Pekacangan  yang
terkena  limbah  cair  tapioka  didapatkan  71 spesies,  dengan  total  kelimpahan  999-
2 3.573ind/mm pada stasiun sebelum terkena limbah  dan  kelimpahan  tertinggi  sebesar
2 620-2.350 ind/mm . Stasiun yang langsung terkena  limbah  cair  tapioka,  memiliki kelimpahan  terendah  yaitu  620  ind/
2 mm (Tabel  1).  Spesiesyang  paling  banyak ditemukan  adalah Navicula sp.  Sebanyak 2
1085ind/mm .  Kelimpahan  Relatif  (KR ) Navicula sp.  tertinggi    yaitu  sebesar
89,41%,Genus Navicula ini  hampir terdistribusi secara merata di semua stasiun. Abel  (1989),  menyatakan  distibusi    dan melimpahnya  organisme  dipengaruhi  oleh kondisi  air  yang  merupakan  tempat hidupnya. Organis meyang toleran terhadap lingkungan akan mampu bertahan hidup dan terdapat  melimpah,  sedangkan  yang  tidak toleran dapat hilang. Martin dan Fernandez (2012)  menyatakan  bahwa, Navicula terdistribusi  secara  luaspada  semua perairan.  Tingginya  rentang  toleransi terhadap  kondisi  lingkungan,  karena Navicula memiliki  tangkai  berlendir, digunakan sebagai alat penempel yang kuat pada  substrat  sehingga  dapat  hidup  pada perairan berarus.
No Divisi Spesies 2 Stasiun (mm ) Jumlah KR (%) Sebelum terkena limbah Setelah terkena limbah I II III IV V 1 Haematococuss sp. 62 0 0 17 6 85 3,13 2 Closterium sp. 0 6 0 27 0 33 1,74 3 Closteriumnavicula 17 0 0 6 27 50 3,77 4 Microspora sp. 0 0 0 185 27 212 10,81 5 Mesotaenium sp. 6 0 6 0 0 12 1,14 6 Cylindrocystis sp. 6 0 0 0 0 6 0,17 7 Cylindrocystisbrebisonii 278 0 0 0 0 278 7,78 8 Rhizoclonium sp. 124 0 0 0 0 124 3,47 9 Ulothrix sp. 0 0 31 124 0 155 10,21 10 Closteridium sp. 6 0 0 62 31 99 6,26 11 Spondylosiumpulchellum 0 0 6 0 0 6 0,97 12 Planctonema sp. 0 0 27 0 0 27 4,36 13 Scenedesmus sp. 0 11 0 62 0 73 3,71 14 Chlorellavulgaris 0 0 0 6 0 6 0,25 15 Treubariatriapendixculata 0 0 0 6 6 12 0,93 16 Treubariaquadrispina 6 0 0 0 0 6 0,17 17 Cosmarium sp. 0 0 0 6 0 6 0,25 18 Cosmariumcontractum 6 0 0 0 0 6 0,17 19 GonyostomumSemen 6 0 0 17 6 29 1,56 20 Cryptomonas sp. 17 0 0 28 0 45 1,65 21 Chilomonas sp. 31 0 0 0 0 31 0,87 22 Navicula sp. 0 440 62 429 154 1085 89,41 23 NaviculaProtaktoides 0 17 0 27 0 44 2,84 24 Navicularadiosa 495 0 0 31 62 588 22,14
Biosfera 32 (3) September 2015
(Wahyudi,2012).  Kelimpahan  mikro fitobenthos  di  Sungai  Pekacangan Purbalingga,  dapat  digunakan  sebagai bioindikator  pada  perairan  terkena  limbah cair industri tapioka. Mikrofitobenthos yang mampu  bertahan  hidup  lama  juga  dapat dipergunakan  dalam  pemanfaatan  kembali limbah  agar  lebih  berdaya  guna.  Sebagai mikroalga, mikrofitobenthos juga berpotensi sebagai (bahan  bakar  nabati)  yang biofuel cukup potensial sebagai pengganti minyak yang dapat diperbaharui. Biofuel terdiri  dari  bioethanol  dan biogas yang dihasilkan oleh biomassa, baik tumbuhan, hewan, mikroba maupun limbah (Chisti,  2007).  Menurut  Gunawan  (2010) beberapa  hasil  penelitian  yang  telah dilakukannya menujukkan bahwa mikroalga merupakan salah satu mikroorganisme yang memiliki potensi untuk menghasilkan bahan bakar  nabati  ( ).  Berdasarkan  hal biofuel tersebut  maka  dilakukan  penelitian  yang bertujuan  mengetahui  kelimpahan mikrofitobenthos  di  Sungai  Pekacangan Purbalingga  yang  terkena  limbah  cair industri  tapiokadan  potensinya  sebagai bahan bakar nabati (biofuel). Hasil penelitian ini dapat dijadikan sebagai data dasar untuk monitoring  kualitas  perairan  Sungai Pekacangan,  Purbalingga.  Penelitian  ini juga  dapat  memberikan  informasi  dasar tentang potensi isolat mikrofitobenthos yang berpotensi sebagai biofuel. Metode  PenelitianObyek  yang  diteliti adalah  mikrofitobenthos  dan  sampel  air. Bahan-bahan kimia berupa larutan MnSO , 4 KOH-KI,  H SO ,  Indikator  amilum  dan 2 4
Na S O  0,025 N untuk mengukur O  terlarut
2 2 3
2
dan  BOD ,  indikator  Phenolphathalein  dan
5 Na CO  0,01 N untuk mengukur CO  bebas,
2 3
2
larutan  standar  nitrat,  larutan  asam  fenol sulfolinik  dan  larutan  NH CH  10%  untuk
4 mengukur  kadar  nitrat,  larutan  standar fosfat, larutan reduktor SnCl  dan larutan NH 2
4
molibdat untuk mengukur kadar orthofosfat. Alat  penelitian  meliputi  planktonet  no.25, keping  Secchi,  thermometer,  labu Erlenmeyer  250  ml,  botol  Winkler  250  ml, botol sampel, mikroskop, , object glass cover glass ,  inkubator,  kuas,  botol  spray,  ember, meteran,  pipet  tetes,  pipit  seukuran,  botol plastik,  kertas  pH,  oven,  desikator,  kertas Whatman  No.41,  timbangan  elektrik,  labu takar, tabung reaksi, spektrofotometer, kotak pendingin,  statif  dan  buret,  batu  didih, hotplate stopwatch , alat tulis, , dan kamera.
Pengambilan  sampel  dilakukan  di  Sungai Pekacangan  Kabupaten  Purbalingga  yang berada  di  sekitar  pabrik  aci  55  di  Desa Timbang.  Penelitian dengan menggunakan metode survei. Teknik pengambilan sampel dilakukan dengan cara purposive sampling pada  5  stasiun.  Pengambilan  sampel dilakukan  dengan  3  kali  ulangan  dalam interval  waktu  2  minggu.  Pengambilan s a m p e l   m i k r o f i t o b e n t h o s   d e n g a n menggunakan pipa PVC yang berdiameter 1 cm  dan  tinggi  4  cm.  Substrat  diencerkan dengan akuades dipisahkan dari bahan- dan bahan lain dengan menggunakan saringan bertingkat.  Air  hasilpenyaringan  yang mengandung  mikrofitobenthos  diencerkan dan  disaringkembali  menggunakan plankton-net no.25 untuk dikonsentra kan. t Parameter yang diamati meliputi parameter utama  yaitu  kelimpahan  mikrofitobenthos. Parameter pendukung yaitu parameter fisik (kecepatan  arus,  suhu,  substrat  dasar, kedalaman,  penetrasi  cahaya,  TDS  dan TSS) dan parameter kimia (DO, CO , BOD , 2 5 nitrat,  orthofosfat  dan  pH).  Sampel mikrofitobenthosdiidentifikasi menggunakan pustaka  (Sachlan,  1982).  Perhitungan kelimpahan  dikonservasikan  dari  ' 'Inverted Microscope Method Counts'' ((APHA), 1985). Rumus  perhitungan  kelimpahan  (Fachrul, 2007)sebagai berikut :
170
Keterangan : N  : Jumlah organisme yang diamati Ac  : Luas daerahhitung (1,11279 mm2) At  : Luas gelas penutup (324 mm2) Vs  : Volume air yang diamati (ml) Vt  : Volume air yang terkonsentrasi (ml) As  : Luas permukaansubstrat (mm2)
Isolasi  mikrofitobenthos  dilakukan  dengan menggunakan  pipet  Pasteur  yang dipanaskan  dan  ditarik  hingga  ujungnya lebih kecil. Setelah itu dihisap secukupnya sehingga  masuk  ke  ujung  pipet. Mikrofitobenthos  yang  didapat  kemudian dipindahkan  ke  tabung  reaksi  yang  berisi media pertumbuhan..
Kandungan  lipid  pada  mikro  fitobenthos dapat diketahui melalui pewarnaan dengan larutan Nile  Red (Cooksey et  al .,  1987). Mikro  fitobenthos  dibuat  preparat  segar, diwarnai,  dan  diamati  di  bawah  mikroskop flourescense dengan filter blue violet dengan panjang  gelombang  (400  -  440  nm). Mikrofitobenthos  yang  mempunyai kandungan  lipid  akan  menampakan pembendaran berwarna kuning atau merah mengkilat.  Analisis  data  secara  dekskiptif dengan  memberi  tanda  (+)  pada  hasil skrining  yang  menunjukkan  pembendaran warna  kuning  atau  merah  dideksripsikan mengandung biofuel dan  diberi  tanda  (-) p a d a   y a n g   t i d a k   m e n u n j u k k a n pembendaran,  berarti  tidak  berpotensi sebagai biofuel. .

## Hasil dan Pembahasan
Hasil  pengamatan  mikrofitobenthos dari  perairan  Sungai  Pekacangan  yang
terkena  limbah  cair  tapioka  didapatkan  71 spesies,  dengan  total  kelimpahan  999- 2 3.573ind/mm pada stasiun sebelum terkena limbah  dan  kelimpahan  tertinggi  sebesar
2 620-2.350 ind/mm . Stasiun yang langsung terkena  limbah  cair  tapioka,  memiliki kelimpahan  terendah  yaitu  620  ind/
2 mm (Tabel  1).  Spesiesyang  paling  banyak ditemukan  adalah Navicula sp.  Sebanyak 2 1085ind/mm .  Kelimpahan  Relatif  (KR ) Navicula sp.  tertinggi    yaitu  sebesar 89,41%,Genus Navicula ini  hampir terdistribusi secara merata di semua stasiun. Abel  (1989),  menyatakan  distibusi    dan melimpahnya  organisme  dipengaruhi  oleh kondisi  air  yang  merupakan  tempat hidupnya. Organis meyang toleran terhadap lingkungan akan mampu bertahan hidup dan terdapat  melimpah,  sedangkan  yang  tidak toleran dapat hilang. Martin dan Fernandez (2012)  menyatakan  bahwa, Navicula terdistribusi  secara  luaspada  semua perairan.  Tingginya  rentang  toleransi terhadap  kondisi  lingkungan,  karena Navicula memiliki  tangkai  berlendir, digunakan sebagai alat penempel yang kuat pada  substrat  sehingga  dapat  hidup  pada perairan berarus.
No Divisi Spesies
2 Stasiun (mm )
Jumlah KR (%) Sebelum terkena limbah Setelah terkena limbah I II III IV V 1 Haematococuss sp. 62 0 0 17 6 85 3,13 2 Closterium sp. 0 6 0 27 0 33 1,74 3 Closteriumnavicula 17 0 0 6 27 50 3,77 4 Microspora sp. 0 0 0 185 27 212 10,81 5 Mesotaenium sp. 6 0 6 0 0 12 1,14 6 Cylindrocystis sp. 6 0 0 0 0 6 0,17 7 Cylindrocystisbrebisonii 278 0 0 0 0 278 7,78 8 Rhizoclonium sp. 124 0 0 0 0 124 3,47 9 Ulothrix sp. 0 0 31 124 0 155 10,21 10 Closteridium sp. 6 0 0 62 31 99 6,26 11 Spondylosiumpulchellum 0 0 6 0 0 6 0,97 12 Planctonema sp. 0 0 27 0 0 27 4,36 13 Scenedesmus sp. 0 11 0 62 0 73 3,71 14 Chlorellavulgaris 0 0 0 6 0 6 0,25 15 Treubariatriapendixculata 0 0 0 6 6 12 0,93 16 Treubariaquadrispina 6 0 0 0 0 6 0,17 17 Cosmarium sp. 0 0 0 6 0 6 0,25 18 Cosmariumcontractum 6 0 0 0 0 6 0,17 19 GonyostomumSemen 6 0 0 17 6 29 1,56 20 Cryptomonas sp. 17 0 0 28 0 45 1,65 21 Chilomonas sp. 31 0 0 0 0 31 0,87 22 Navicula sp. 0 440 62 429 154 1085 89,41 23 NaviculaProtaktoides 0 17 0 27 0 44 2,84 24 Navicularadiosa 495 0 0 31 62 588 22,14

## 172
No Divisi Spesies 2 Stasiun (mm ) Jumlah KR (%) Sebelum terkena limbah Setelah terkena limbah I II III IV V 25 Brachysira sp. 31 0 0 0 0 31 0,87 26 Achnanthes sp . 0 0 0 0 6 6 0,68 27 Achnanthesspeciosa 220 0 0 0 0 220 0,48 28 Achanthescleveivarbottnica 124 0 31 6 31 192 12,21 29 Achnantestaeniata 185 0 0 0 0 185 5,18 30 Amphoraveneta 155 0 0 0 0 155 4,34 31 Amphoralibyca 429 31 38 0 0 498 21,24 32 Eunotia sp. 71 99 31 82 93 376 30,82 33 Synedra sp. 0 17 0 6 0 23 1,95 34 Synedracapitata 27 0 0 0 0 27 0,76 35 Synedraulnavarcontrata 39 0 0 0 0 39 1,06 36 Fragilaria sp. 62 0 0 0 0 62 1,74 37 Fragilariacrotonensis 6 0 0 0 0 6 0,17 38 Stauroneissmithii 31 6 0 0 62 99 8,45 39 Stauroneisanceps 186 0 0 0 0 186 5,21 40 Caloneisbacillum 104 0 17 31 17 169 8,87 41 Denticulatenuis 38 0 0 0 17 55 2,98 42 Cymbella sp. 0 104 6 440 116 666 42,93 43 Cymbellaventricosa 11 0 0 0 0 11 0,31 44 Gyrosigma sp . 124 27 11 185 31 378 19,21 45 Gyrosigmaattenuatum 309 0 93 0 0 402 23,65 46 Diatomavulgaris 38 0 0 0 0 38 1,06 47 Craticula sp. 0 6 6 0 6 18 2,24 48 Achnanthidiumclevei 0 0 0 0 17 17 1,91 49 Cocconeisplacentula 124 0 0 0 0 124 3,47 50 Geminella sp . 31 0 0 0 0 31 0,87 51 Urosoleniaeriensis 38 0 0 0 0 38 1,06 52 Cyclostephanosdubius 6 0 31 0 0 37 5,17 53 Characiopsispyriformis 6 0 0 0 0 6 0,17 54 Gomphonema sp. 31 55 31 17 6 140 12,76 55 Pinnularia sp. 49 0 0 0 0 49 1,37 56 Epipyxis sp. 0 0 6 0 0 6 0,97 57 Cymatopleurasolea 0 0 6 0 0 6 0,97 58 Melosira sp . 0 6 31 0 0 37 5,60 59 Nitszcia sp. 38 124 0 216 155 533 40,01 60 Cyclotella sp . 0 11 0 6 0 17 1,35 61 Derepyxis sp . 0 33 0 31 0 64 4,61 62 Surirellarobustasplendida 0 0 0 6 6 12 0,93 63 Mallomonas sp . 0 0 31 309 0 340 17,98 64 Chrysococcus sp . 0 0 0 0 6 6 0,66 65 Ephitemia sp. 0 0 0 6 0 6 0,25 66 Anabaena sp. 0 0 28 0 0 28 4,52 67 Synechococcus sp. 0 0 17 0 0 17 2,74 68 Oschilatorialimosa 0 6 0 0 0 6 0,60 69 Policycstis sp. 0 0 0 6 0 6 0,25 70 Ceratiumhorridum 0 0 6 0 0 6 0,97 71 Ceratiumhirundinella 0 0 6 0 0 6 0,97 JumlahKeseluruhan 3573 999 620 2380 888 8460
K e b e r a d a a n   m a s i n g - m a s i n g mikrofitobenthos  pada  tiap-tiap  stasiun pengamatan  cukup  bervariasi,  tergantung
kandungan limbah cair yang masuk sungai dan aktivitas masyarakat sekitar yang dapat mempengaruhi kualitas perairan (Tabel 2).
Tabel 2. Data hasil pengukuran parameter fisika dan kimia perairan di Sungai Pekacangan yang terkena limbah industri cair tapioka No Parameter Satuan Stasiun Kisaran I II III IV V 1 Suhu Air 0 C 28 27 27,33 28 28 27-28 2 SuhuUdara 0 C 30 28 28,67 29 29 28-30 3 Penetrasicaha ya cm 7,33 1,83 3.83 3 27 1,63-7,33 4 pH - 7 6 6 7 7 6-7 5 KuatArus -1 m.dt 0,11 0,51 0,16 0,12 0,5 0,11-0,51 6 Nitrat -1 mg.I 0.504 0.32 0.46 0.59 0,49 0,32-0,59 7 Silika -1 mg.I 0.315 0.46 0.875 0.29 0,017 0,29-0,875 8 ortofosfat -1 mg.I 0.021 0.009 0.013 0.024 0,29 0,01-0,024 9 TSS -1 mg.I 0.8 2 1 1.5 0,75 0,8-2 10 TDS -1 mg.I 99.16 68.53 60.745 80.405 80,40 60,75-99,16 11 BOD 5 -1 mg.I 3.43 5.43 3.78 3.25 3,23 3,25-5,43 12 O terlarut 2 -1 mg.I 4 2,2 2,99 2,88 2,88 2,2-4
Organisme  yang  toleran  terhadap lingkungan   yang langsung terkena limbah dapat  sebagai  bioindikator.  Werner  (1997) yang  menyatakan  bahwa  anggota  dari Diatom bentik termasuk Navicula ditemukan pada substrat yang keras maupun sedimen- sedimen seperti lumpur. Kandungan nitrat dan fosfat menurun pada stasiun III dibandingkan stasiun I, II, IV dan V. Nitrat  merupakan  nutrien  yang  sangat penting  dalam  mendukung  kehidupan mikrofitobenthos, semakin tinggi kandungan nitrat  maka  semakin  tinggi  kehidupan sehingga  kelimpahan  yang  tinggi. Selanjutnya nilai ortophosfat pada stasiun III juga  mengalami  penurunan.  Kandungan -1 fosfat  antara  0-0,021  mg.l   kesuburan perairannya  rendah.  Fosfat  dalam  bentuk ortofosfat  dipergunakan  sebagai  petunjuk kesuburan  perairan,  karena  bentuk  ini mudah diserap oleh organisme (Saraswati, 2010). Ortofosfat, bentuk paling sederhana dan  dapat  dimanfaatkan  secara  langsung sedangkan  polifosfat  harus  mengalami hidrolisis  sebelum  dapat  dimanfaatkan. Menurut  Zebek  (2007),  tinggi  rendahnya kandungan  ortofosfat  di  perairan  akan
berpengaruh  terhadap  keragaman mikrofitobenthos  (Reynold,  1993).  Silika atau  silicon  dioksidasi  (SiO )  adalah  salah 2 satu  senyawa  kimia  yang  paling  umum. Kristal SiO  murni ditemukan di alam, dalam 2 tiga  bentuk  polymorfis,  yang  paling  umum diantaranya  adalah  kuarsa  (Simanullang, 2009).  Silika  merupakan  nutrien  yang dibutuhkan oleh Bacillariophyta (Diatomae) untuk membentuk frustule atau dinding sel. Hasil  skrining  terhadap  22  spesies mikrofitobenthos  yang  teridentifikasi  dari stasiun  yang  terkena  limbah  langsung, menggunakan  larutan Nile  red dengan b a n t u a n   m i k r o s k o p f l o u r e s c e n c e menunjukkan  7  spesies  mikrofitobenthos mengalami  pembendaran  warna,  yaitu Navicula sp., Amphora libyca , Ulothrix sp.,
Anabaena sp. , Planctonema sp. , Cymbella sp., dan Eunotia  sp. Pembendaran  warna kuning mengkilap atau merah menujukkan bahwa  spesies  tersebut  berpontensi sebagai  penghasil biofuel Scragg et al. (2003} .  Menurut  Cooksey et  al. (1987) kandungan  minyak  berhubungan  dengan kandungan lipidnya, ada tidaknya lipid pada
Christiani, dkk,. Kelimpahan dan Potensi Biofuel Mikrofitobenthos : 169 - 175
Biosfera 32 (3) September 2015
172
No Divisi Spesies 2 Stasiun (mm ) Jumlah KR (%) Sebelum terkena limbah Setelah terkena limbah I II III IV V 25 Brachysira sp. 31 0 0 0 0 31 0,87 26 Achnanthes sp . 0 0 0 0 6 6 0,68 27 Achnanthesspeciosa 220 0 0 0 0 220 0,48 28 Achanthescleveivarbottnica 124 0 31 6 31 192 12,21 29 Achnantestaeniata 185 0 0 0 0 185 5,18 30 Amphoraveneta 155 0 0 0 0 155 4,34 31 Amphoralibyca 429 31 38 0 0 498 21,24 32 Eunotia sp.
71
99
31
82 93 376 30,82 33 Synedra sp. 0 17 0 6 0 23 1,95 34 Synedracapitata 27 0 0 0 0 27 0,76 35 Synedraulnavarcontrata 39 0 0 0 0 39 1,06 36 Fragilaria sp. 62 0 0 0 0 62 1,74 37 Fragilariacrotonensis 6 0 0 0 0 6 0,17 38 Stauroneissmithii 31 6 0 0 62 99 8,45 39 Stauroneisanceps 186 0 0 0 0 186 5,21 40 Caloneisbacillum 104 0 17 31 17 169 8,87 41 Denticulatenuis 38 0 0 0 17 55 2,98 42 Cymbella sp. 0 104 6 440 116 666 42,93 43 Cymbellaventricosa 11 0 0 0 0 11 0,31 44 Gyrosigma sp . 124 27 11 185 31 378 19,21 45 Gyrosigmaattenuatum 309 0 93 0 0 402 23,65 46 Diatomavulgaris 38 0 0 0 0 38 1,06 47 Craticula sp. 0 6 6 0 6 18 2,24 48 Achnanthidiumclevei 0 0 0 0 17 17 1,91 49 Cocconeisplacentula 124 0 0 0 0 124 3,47 50 Geminella sp . 31 0 0 0 0 31 0,87 51 Urosoleniaeriensis 38 0 0 0 0 38 1,06 52 Cyclostephanosdubius 6 0 31 0 0 37 5,17 53 Characiopsispyriformis 6 0 0 0 0 6 0,17 54 Gomphonema sp. 31 55 31 17 6 140 12,76 55 Pinnularia sp. 49 0 0 0 0 49 1,37 56 Epipyxis sp. 0 0 6 0 0 6 0,97 57 Cymatopleurasolea 0 0 6 0 0 6 0,97 58 Melosira sp . 0 6 31 0 0 37 5,60 59 Nitszcia sp. 38 124 0 216 155 533 40,01 60 Cyclotella sp . 0 11 0 6 0 17 1,35 61 Derepyxis sp . 0 33 0 31 0 64 4,61 62 Surirellarobustasplendida 0 0 0 6 6 12 0,93 63 Mallomonas sp . 0 0 31 309 0 340 17,98 64 Chrysococcus sp . 0 0 0 0 6 6 0,66 65 Ephitemia sp. 0 0 0 6 0 6 0,25 66 Anabaena sp. 0 0 28 0 0 28 4,52 67 Synechococcus sp. 0 0 17 0 0 17 2,74 68 Oschilatorialimosa 0 6 0 0 0 6 0,60 69 Policycstis sp. 0 0 0 6 0 6 0,25 70 Ceratiumhorridum 0 0 6 0 0 6 0,97 71 Ceratiumhirundinella 0 0 6 0 0 6 0,97 JumlahKeseluruhan 3573 999 620 2380 888 8460
K e b e r a d a a n   m a s i n g - m a s i n g mikrofitobenthos  pada  tiap-tiap  stasiun pengamatan  cukup  bervariasi,  tergantung
kandungan limbah cair yang masuk sungai dan aktivitas masyarakat sekitar yang dapat mempengaruhi kualitas perairan (Tabel 2).
Tabel 2. Data hasil pengukuran parameter fisika dan kimia perairan di Sungai Pekacangan yang terkena limbah industri cair tapioka No Parameter Satuan Stasiun Kisaran I II III IV V 1 Suhu Air 0 C 28 27 27,33 28 28 27-28 2 SuhuUdara 0 C 30 28 28,67 29 29 28-30 3 Penetrasicaha ya cm 7,33 1,83 3.83 3 27 1,63-7,33 4 pH - 7 6 6 7 7 6-7 5 KuatArus -1 m.dt 0,11 0,51 0,16 0,12 0,5 0,11-0,51 6 Nitrat -1 mg.I 0.504 0.32 0.46 0.59 0,49 0,32-0,59 7 Silika -1 mg.I 0.315 0.46 0.875 0.29 0,017 0,29-0,875 8 ortofosfat -1 mg.I 0.021 0.009 0.013 0.024 0,29 0,01-0,024 9 TSS -1 mg.I 0.8 2 1 1.5 0,75 0,8-2 10 TDS -1 mg.I 99.16 68.53 60.745 80.405 80,40 60,75-99,16 11 BOD 5 -1 mg.I 3.43 5.43 3.78 3.25 3,23 3,25-5,43 12 O terlarut 2 -1 mg.I
4 2,2 2,99 2,88 2,88 2,2-4
Organisme  yang  toleran  terhadap lingkungan   yang langsung terkena limbah dapat  sebagai  bioindikator.  Werner  (1997) yang  menyatakan  bahwa  anggota  dari Diatom bentik termasuk Navicula ditemukan pada substrat yang keras maupun sedimen- sedimen seperti lumpur. Kandungan nitrat dan fosfat menurun pada stasiun III dibandingkan stasiun I, II, IV dan V. Nitrat  merupakan  nutrien  yang  sangat penting  dalam  mendukung  kehidupan mikrofitobenthos, semakin tinggi kandungan nitrat  maka  semakin  tinggi  kehidupan sehingga  kelimpahan  yang  tinggi. Selanjutnya nilai ortophosfat pada stasiun III juga  mengalami  penurunan.  Kandungan -1 fosfat  antara  0-0,021  mg.l   kesuburan perairannya  rendah.  Fosfat  dalam  bentuk ortofosfat  dipergunakan  sebagai  petunjuk kesuburan  perairan,  karena  bentuk  ini mudah diserap oleh organisme (Saraswati, 2010). Ortofosfat, bentuk paling sederhana dan  dapat  dimanfaatkan  secara  langsung sedangkan  polifosfat  harus  mengalami hidrolisis  sebelum  dapat  dimanfaatkan. Menurut  Zebek  (2007),  tinggi  rendahnya kandungan  ortofosfat  di  perairan  akan
berpengaruh  terhadap  keragaman mikrofitobenthos  (Reynold,  1993).  Silika atau  silicon  dioksidasi  (SiO )  adalah  salah 2 satu  senyawa  kimia  yang  paling  umum. Kristal SiO  murni ditemukan di alam, dalam 2 tiga  bentuk  polymorfis,  yang  paling  umum diantaranya  adalah  kuarsa  (Simanullang, 2009).  Silika  merupakan  nutrien  yang dibutuhkan oleh Bacillariophyta (Diatomae) untuk membentuk frustule atau dinding sel. Hasil  skrining  terhadap  22  spesies mikrofitobenthos  yang  teridentifikasi  dari stasiun  yang  terkena  limbah  langsung, menggunakan  larutan Nile  red dengan b a n t u a n   m i k r o s k o p f l o u r e s c e n c e menunjukkan  7  spesies  mikrofitobenthos mengalami  pembendaran  warna,  yaitu Navicula sp., Amphora libyca , Ulothrix sp., Anabaena sp. , Planctonema sp. , Cymbella sp., dan Eunotia  sp. Pembendaran  warna kuning mengkilap atau merah menujukkan bahwa  spesies  tersebut  berpontensi sebagai  penghasil biofuel Scragg et al. (2003} .  Menurut  Cooksey et  al. (1987) kandungan  minyak  berhubungan  dengan kandungan lipidnya, ada tidaknya lipid pada

## 174
dapat diketahui dengan menggunakan Nile r e d .   M e n u r u t   G u n a w a n   ( 2 0 1 0 ) pembendaran warna dikarenakan pada sel mikroalga mengandung lipid, sehingga Nile red apabila  bereaksi  dengan  lipid  yang terkandung  dalam  sel  mikroalga  akan mengubah  ligand  warna  merah  menjadi kuning atau merah. Kandungan  lemak  tergantung  dari spesies  mikrofitobenthos,  rata-rata pertumbuhan dan kondisi lingkungan hidup (Chisti, 2007). Menurut Schenk (2008) dari departemen energi Amerika Serikat, ada 3 komponen  zat  utama,  yaitu  Karbohidrat, Protein,  dan Triacyglycerols .  Karbohidrat difermentasikan  menjadi  alkohol,  protein diolah  menjadi  produk  makanan  dan kecantikan,  dan Triacyglycerols diubah menjadi asam lemak.

## Simpulan
Hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bahwa  1.  Mikrofitobenthos  di  Sungai Pekacangan  yang  terkena  limbah  cair tapioka  memiliki  kelimpahan  yang  rendah dibandingkan  dengan  sebelum  pem- buangan  limbah  cair  tapioka.  22  spesies mikrofitobenthos diisolasi dari perairan yang terkena langsung limbah cair tapioka, dan 2. Spesies  mikrofitobenthos  yang  ditemukan berpotensi sebagai biofuel , yaitu Navicula sp., Amphora libyca , Ulothrix sp., Anabaena sp. , Planctonema  sp. , Cymbella  sp., dan Eunotia sp.

## Ucapan Terima Kasih
Pada  kesempatan  ini  penulis mengucapkan  terima  kasih  kepada penyandang  dana  melalui  DIPA  BLU Unsoed  dengan  Nomor  Kontrak:  DIPA- 023.04.2.189899/2015  Tanggal    14 Nopember 2014

## Daftar Pustaka
Abel, P. D. 1989. Water Polution Biology. Ellis Harwood. Limited Colchester. 213 hlm Agustira,R.,Kemala,S.L.,&  Jamilah.,2013. Kajian Karakteristik Kimia Air,Fisika Air dan Debit Sungai Pada Kawasan Das Padang  Akibat  Pembuangan  Limbah T a p i o k a . J u r n a l   O n l i n e Agroekoteknologi 1(3), pp.615-625. American  Public  Health  Association (APHA).,  1985. Standard  Method  for th The  Examination  of  Water 18 ed.
American  Public  Health  Assosiation Inc. Washington. Chisti, Y., 2007. Biodiesel from microalgae. Elsevier: Biotechnology Advabces , 25. pp.294-306. Cooksey, K.E., J.B. Guckert, S.A. Williams,
P.R.  Collis.  1987.  Fluorometric determination  of  the  neutral  lipid content of microalgal cells using Nile Red . J Microbiol Methods , 6:333-345. Fachrul,  M.F.,  2007. MetodeSampling Bioekologi . BumiAksara, Jakarta. Gunawan.  2010.  Keragaman  dan karakterisasi mikroalga dari sumber air panas  yang  berpotensi  sebagai sumber  biodiesel.  Tesis  (tidak dipublikasikan).  Bogor:  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor.
Martin,G.,&Fernandez,  M,R.,2012. DiatomsasIndicatorsofWaterQualityan d  Ecological    Status:    Sampling, Analysis    and    Some  Ecological Remarks.  dalam  Voudouris  (editor), Ecological  Water  Quality  –Water Treatmentand Reuse. In Tech Europe. Croatia. Murtadho,DdanE.G.Said.1988. Penangana ndanPemanfaatanLimbahPadat .Medi atama SaranaPerkasa, Jakarta. Odum, E. P., 1971. Fundamental of Ecology . Third  Edition.  Philadelphia:  W.B. Saunders Company. Reynold,  C.  S.,  1993. The  Ecology  of F r e s h w a t e r   P h y t o p l a n k t o n . Cambridge University press. London. Sachlan, M., 1982. Planktonologi . Fakultas Peternakan  dan  Perikanan  UNDIP Semarang.
Saraswati,  M.  N.  A.,  2010.  Hubungan Konsentrasi  Nutrien  Terlarut  dengan Kelimpahan  Fitoplankton  di  Perairan Waduk  Panglima  Besar  Soedirman. Skripsi .  Fakultas  Biologi.  Universitas Jenderal Soedirman Purwokerto. Schenk  P.M.  2008.  Second  Generation Biofuels:  High-Efficiency  Microalgae for  Biofuel  Production. Bioenergy . Res. 1:20–43. Scragg, A.H. Morrison, J. Shales S.W. 2003. The use of a fuel containing Chlorella vulgaris in  a  diesel  engine. Enzyme and  Microbial  Technology, 33: 884–889.
Simanullang,  M.,  2009. Penentuan  Kadar Silika  di  Multi  Fuel  Bioler  dengan
Spektrofotometer  Uv .  Visibel  di  PT. Toba  Pulp  Lestari,  Tbk,  Persero. P r o g r a m   S t u d i   D   I I I   K i m i a AnalisisDepartemen  Kimia  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam. Universitas Sumatera Utara. Wahyudi. 2012. Keanekaragaman Makhluk Hidup  dan  Pelestarian  Ekosistem. http://wahyudi-educationforall. blogspot.com/2012/02/keanekaragam an- makhluk-hidup-dan.html .  Diakses pada tanggal  3/11/2014.\
Werner, D., 1997. The Biology of Diatome.
Botanical Monographe (13). Blackwell
Scientific publications, Oxford. Zebek,  E.,  2007.  Change  of  Species Diversity  of  Phytoplankton  and Physicochemical Water Parameters in Annual  Cycles  in  The  Urban  Lake J e z i o r a k M a l y .
J o u r n a l   o f Oceanographya : 49-55.
Christiani, dkk,. Kelimpahan dan Potensi Biofuel Mikrofitobenthos : 169 - 175
Biosfera 32 (3) September 2015

## 174
dapat diketahui dengan menggunakan Nile r e d .   M e n u r u t   G u n a w a n   ( 2 0 1 0 ) pembendaran warna dikarenakan pada sel mikroalga mengandung lipid, sehingga Nile red apabila  bereaksi  dengan  lipid  yang terkandung  dalam  sel  mikroalga  akan mengubah  ligand  warna  merah  menjadi kuning atau merah.
Kandungan  lemak  tergantung  dari spesies  mikrofitobenthos,  rata-rata pertumbuhan dan kondisi lingkungan hidup (Chisti, 2007). Menurut Schenk (2008) dari departemen energi Amerika Serikat, ada 3 komponen  zat  utama,  yaitu  Karbohidrat, Protein,  dan Triacyglycerols .  Karbohidrat difermentasikan  menjadi  alkohol,  protein diolah  menjadi  produk  makanan  dan kecantikan,  dan Triacyglycerols diubah menjadi asam lemak.

## Simpulan
Hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bahwa  1.  Mikrofitobenthos  di  Sungai Pekacangan  yang  terkena  limbah  cair tapioka  memiliki  kelimpahan  yang  rendah dibandingkan  dengan  sebelum  pem- buangan  limbah  cair  tapioka.  22  spesies mikrofitobenthos diisolasi dari perairan yang terkena langsung limbah cair tapioka, dan 2. Spesies  mikrofitobenthos  yang  ditemukan berpotensi sebagai biofuel , yaitu Navicula sp., Amphora libyca , Ulothrix sp., Anabaena sp. , Planctonema  sp. , Cymbella  sp., dan Eunotia sp.

## Ucapan Terima Kasih
Pada  kesempatan  ini  penulis mengucapkan  terima  kasih  kepada penyandang  dana  melalui  DIPA  BLU Unsoed  dengan  Nomor  Kontrak:  DIPA- 023.04.2.189899/2015  Tanggal    14 Nopember 2014

## Daftar Pustaka
Abel, P. D. 1989. Water Polution Biology. Ellis Harwood. Limited Colchester. 213 hlm Agustira,R.,Kemala,S.L.,&  Jamilah.,2013. Kajian Karakteristik Kimia Air,Fisika Air dan Debit Sungai Pada Kawasan Das Padang  Akibat  Pembuangan  Limbah T a p i o k a . J u r n a l   O n l i n e Agroekoteknologi 1(3), pp.615-625. American  Public  Health  Association (APHA).,  1985. Standard  Method  for th The  Examination  of  Water 18 ed.
American  Public  Health  Assosiation Inc. Washington. Chisti, Y., 2007. Biodiesel from microalgae. Elsevier: Biotechnology Advabces , 25. pp.294-306. Cooksey, K.E., J.B. Guckert, S.A. Williams, P.R.  Collis.  1987.  Fluorometric determination  of  the  neutral  lipid content of microalgal cells using Nile Red . J Microbiol Methods , 6:333-345. Fachrul,  M.F.,  2007. MetodeSampling Bioekologi . BumiAksara, Jakarta. Gunawan.  2010.  Keragaman  dan karakterisasi mikroalga dari sumber air panas  yang  berpotensi  sebagai sumber  biodiesel.  Tesis  (tidak dipublikasikan).  Bogor:  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Martin,G.,&Fernandez,  M,R.,2012. DiatomsasIndicatorsofWaterQualityan d  Ecological    Status:    Sampling, Analysis    and    Some  Ecological Remarks.  dalam  Voudouris  (editor), Ecological  Water  Quality  –Water Treatmentand Reuse. In Tech Europe. Croatia. Murtadho,DdanE.G.Said.1988. Penangana ndanPemanfaatanLimbahPadat .Medi atama SaranaPerkasa, Jakarta. Odum, E. P., 1971. Fundamental of Ecology . Third  Edition.  Philadelphia:  W.B. Saunders Company. Reynold,  C.  S.,  1993. The  Ecology  of F r e s h w a t e r   P h y t o p l a n k t o n . Cambridge University press. London. Sachlan, M., 1982. Planktonologi . Fakultas Peternakan  dan  Perikanan  UNDIP Semarang. Saraswati,  M.  N.  A.,  2010.  Hubungan Konsentrasi  Nutrien  Terlarut  dengan Kelimpahan  Fitoplankton  di  Perairan Waduk  Panglima  Besar  Soedirman. Skripsi .  Fakultas  Biologi.  Universitas Jenderal Soedirman Purwokerto. Schenk  P.M.  2008.  Second  Generation Biofuels:  High-Efficiency  Microalgae for  Biofuel  Production. Bioenergy . Res. 1:20–43. Scragg, A.H. Morrison, J. Shales S.W. 2003. The use of a fuel containing Chlorella vulgaris in  a  diesel  engine. Enzyme and  Microbial  Technology, 33: 884–889. Simanullang,  M.,  2009. Penentuan  Kadar Silika  di  Multi  Fuel  Bioler  dengan
Spektrofotometer  Uv .  Visibel  di  PT. Toba  Pulp  Lestari,  Tbk,  Persero. P r o g r a m   S t u d i   D   I I I   K i m i a AnalisisDepartemen  Kimia  Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam. Universitas Sumatera Utara. Wahyudi. 2012. Keanekaragaman Makhluk Hidup  dan  Pelestarian  Ekosistem. http://wahyudi-educationforall. blogspot.com/2012/02/keanekaragam an- makhluk-hidup-dan.html .  Diakses pada tanggal  3/11/2014.\
Werner, D., 1997. The Biology of Diatome. Botanical Monographe (13). Blackwell Scientific publications, Oxford.
Zebek,  E.,  2007.  Change  of  Species Diversity  of  Phytoplankton  and Physicochemical Water Parameters in Annual  Cycles  in  The  Urban  Lake J e z i o r a k M a l y . J o u r n a l   o f Oceanographya : 49-55.