Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33
Skrining  Komponen  Bioaktif  Ethanol  96% Sargassum sp.  sebagai  Antibakteri Terhadap Vibrio Harveyi
Yuni Naina 1 , Rika Wulandari 2 , Tengku Said Raza’i 2
1 Alumni Jurusan Budidaya Perairan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Maritim Raja Ali Haji
2 Jurusan Budidaya Perairan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Maritim Raja Ali Haji
INFO NASKAH

## ABSTRAK
Kata Kunci: Sargassum sp.,Senyawa bioaktif, Antibakteri, Vibrio Harveyi Skrining  Komponen  Bioaktif  Ethanol  96% Sargassum sp.  sebagai  Antibakteri
Terhadap Vibrio  Harveyi .  Alga  cokelat  (Sargassum  sp.)  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  di  peroleh  dari  sepanjang  Garis  Pantai  Trikora  Pulau  Bintan, Kepulauan Riau. Yang dimaserasi menggunakan pelarut etanol 96% untuk melihat senyawa  bioaktif  yang  terkandung  pada  sampel  kemudian  dilakukan  uji  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri  vibrio  harveyi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  komponen  senyawa  bioaktif Sargassum sp.  sebagai  antibakteri terhadap patogen jenis vibrio harveyi. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Fakultas  Ilmu  Kelautan  dan  Perikanan,  Universitas  Maritim  Raja  Ali  Haji. Penelitian ini dirancang menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 5 perlakuan  (6000  ppm,  7000  ppm,  8000  ppm,  control  (+),    control  (-))  dan  3 ulangan.  Hasil  skrining  fitokimia  Sargassum    sp.  mendapatkan  sampel  positif mengandung  flavonoid.  Aktivitas  daya  hambat  sargassum  sp.  terbaik  ada  pada perlakuan  6000  ppm  sebesar    27.00  mm  dengan  Ketegori  (Sangat  Kuat),  untuk Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  Perlakuan  6000  Ppm,  dangan  rata  –  rata daya  bunuhnya  12.33  mm  dengan  Ketegori    (Kuat).    terhadap  kontro  positif (Amoxicillin) sebesar 33.30 mm. Gedung  FIKP  Lt.  II  Jl.  Politeknik  Senggarang,  29115,  Tanjungpinang,  Telp  : (0771-8041766, Fax. 0771 - 7004642. Email: yuninaina@gmail.com rika.wulandaridwan@umrah.ac.id tengku.saidrazai@gmail.com ,
Screening  of  Bioactive  Components  Ethanol  96%  Sargassum  sp.  as  an Antibacterial Against Vibrio Harveyi
Naina Yuni 1 , Wulandari Rika 2 , Raza’I Said Tengku 2
1 Alumnus of Aquaculture Department, Faculty of Marine Science and Fisheries, Raja Ali Haji Maritime University
3 Department of Aquaculture, Faculty of Marine Science and Fisheries, Raja Ali Haji Maritime University ARTICLE INFO

## ABSTRACT
Keywords : Sargassum sp., Bioactive compound, Antibacterial, Vibrio Harveyi Screening  of  Bioactive  Components  Ethanol  96%  Sargassum  sp.  as  an Antibacterial  Against  Vibrio  Harveyi.  Chocolate  algae  (Sargassum  sp.)  Used  in this study were  obtained  from along the  Trikora Coastline in  Bintan Island, Riau Islands.  Macerated  using  ethanol  96%  solvent  to  see  the  bioactive  compounds contained  in  the  sample  then  tested  the  antibacterial  activity  against  the  vibrio harveyi  bacteria.  This  study  aims  to  determine  the  components  of  the  bioactive compounds Sargassum sp. as an antibacterial to the vibrio harveyi type pathogen. This  research  was  carried  out  at  the  Laboratory  of  the  Faculty  of  Marine  and Fisheries, Maritime University  of Raja Ali Haji.  This study was designed using a Completely Randomized Design (CRD) with 5 treatments (6000 ppm, 7000 ppm, 8000  ppm,  control  (+),  control  (-))  and  3  replications.  The  results  of phytochemical  screening  of  Sargassum  sp.  get  a  positive  sample  containing flavonoids. Inhibitory activity of sargassum sp. the best is in the treatment of 6000 ppm  at  27.00  mm  with  a  category  (very  strong),  for  the  Minimum  Killer Concentration  (KBM)  Treatment  of  6000  Ppm,  with  an  average  killing  power  of 12.33 mm with a category (strong). against positive  controversy (Amoxicillin)  of 33.30 mm.
Gedung  FIKP  Lt.  II  Jl.  Politeknik  Senggarang,  29115,  Tanjungpinang,  Telp  :
(0771-8041766, Fax. 0771 - 7004642. Email: yuninaina@gmail.com rika.wulandaridwan@umrah.ac.id tengku.saidrazai@gmail.com ,
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33

## PENDAHULUAN
Sargassum sp.  merupakan  alga  cokelat yang  keberadaannya  melimpah  di sepanjang  garis  pantai  Kabupaten  Bintan.  Menurut  Penelitian  Dolorosa et  al. (2017),  jenis  alga  ini  mengandung  senyawa  antioksidan  dan  nilai  nutrisi  yang tinggi.  Senyawa  antioksidan  yang  di  kandung  bahan  ini  diantaranya  adalah Saponin, Tanin, Safranin, Flavonoid dan jenis bioaktif lainnya, sedangkan makro molekul  yang  di  kandung  adalah  protein,  vitamin  C,  Fenol  dan  jenis  nutrien lainnya. Jenis Sargassum ini sering dimanfaatkan sebagai pakan ternak alternatif untuk  menunjang  kebutuhan  nutrisi  dan  kesehatan  hewan  ternak.  Hasil  laut  ini menarik  untuk  diteliti  mengingat  pemanfaatannya  sebagai  penunjang  nutrisi  dan kesehatan  organisme,  bukan  tidak  mungkin  hal  ini  bermanfaat  dalam  kegiatan akuakultur.
Permasalahan  yang  ada  pada  kegiatan  akuakultur  salah  satunya  adalah Vibriosis.  Vibriosis  ini  timbul  akibat  infeksi  bakteri  vibrio.  Menurut  penelitian Ramesh et  al. (2014),  Vibriosis  akibat  infeksi  pathogen  jenis Vibrio  harveyi menyebabkan  kematian  massal  komoditi  ikan  laut  dalam  waktu  yang  relatif singkat  terutama  pada  udang,  larva  rajungan  ( Portunus  pelagicus ),  dan  kerang- kerangan. Vibrio  harveyi dapat  menginfeksi  organisme  budidaya  yang  berada pada kondisi stress, malnutrisi, kualitas air yang buruk, kepadatan tinggi, suhu air tinggi,  rendahnya  oksigen  (DO)  serta  infeksi  parasit.  Dalam  publikasi  NOAA Grant  pada  tahun  2016,  menyebutkan  bakteri  Vibrio  ini  bertanggungjawab terhadap  80.000  kasus  penyakit  dan  100  kasus  kematian  ikan  budidaya  di Amerika  Serikat  setiap  tahunnya.  Di  Indonesia,  bakteri  ini  berkembang  antara bulan  Mei  dan  Oktober  pada  musim  panas  dan  menyebabkan  penurunan  jumlah produksi hingga kegagalan panen.
Penanganan  penyakit  vibriosis  ini  dilakukan  dengan  pemberian  pakan dengan  antibiotik,  akan  tetapi  pemakaian  antibiotik  ternyata  menimbulkan masalah  baru  karena  sifatnya  yang  tidak  ramah  lingkungan.  Zat-  zat  antibiotik tersebut  dapat  meningkatkan  resistensi  terhadap  bakteri  patogen  (Alzaini  2011). Antibiotik  menimbulkan  resistensi  mikrobia,  munculnya  sifat  resistensi  dan infeksi  patogenitas  bakteri  membuat  para  ilmuwan  berupaya  untuk  menemukan obat  baru.  Salah  satu  upaya  y  ang  dilakukan  adalah  pemanfaatan  organisme  laut sebagai agen antibakteri alami (Felicia et al. 2015)
Penelitian  sebelumnya  telah  melakukan  pengujian  terhadap  potensi antibakteri  yang  berasal  dari  organisme  laut  (Fitriani et  al. 2015).  Deleo  (2016) menemukan Phaeophyceae di daerah tropis memproduksi metabolit sekunder, dan Phaeophyceae (alga  cokelat)  menunjukkan  aktivitas  antioksidan  tinggi dibandingkan Rhodophyceae dan Chlorophyceae.
Beberapa penelitian telah melaporkan manfaat Sargassumsp. Sebagai salah satu  produk  sintesis  alami  yang  paling  produktif  memiliki  sejumlah  metabolit bioaktifsebagai  senyawa  antibakteri,  Khotimah  (2013),  menyatakan  bahwa Sargassumsp. memiliki kandungan tanin, iodin dan fenol yang berpotensi sebagai bahan  antimikroba  terhadap  beberapa  jenis  bakteri  patogen.  Mengacu  pada  hal tersebut, maka perlu dilakukan pengujian hasil uji fitokimia ekstrak Alga Cokelat ( Sargassum sp.) sebagai sumber senyawa  bioaktif dalam menanggulangi infeksi Vibrio  harveyi yang menyerang ikan laut.
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33
Tujuan dari penelitian ini adalah Mengetahui Hasil skrining fitokimia Alga Cokelat  ( Sargassum sp.)  dengan  pelarut  etanol  96%,  Mengetahui  respon  daya hambat  dan  daya  bunuh    ekstrak  Alga  Cokelat  ( Sargassum sp.)  sebagai  bahan antibakteri  terhadap  bakteri V.  harveyi dan  Mengetahui  potensi  bahan  aktif  yang di kandung Alga Cokelat ( Sargassum sp.) terhadap bakteri V. harveyi

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium  Biologi  dan  Laboratorium  Kimia. Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Maritim Raja Ali Haji dengan menggunakan Rancangan Acak  Lengkap  (RAL) dengan 5 Perlakuan (6000 ppm, 7000  ppm,  8000  ppm,  kontrol  positif  (Amoxicillin),  dan  kontrol  negative (Akuades)) dan 3 Ulangan.

## Prosedur Penelitian
1. Preparasi
Preparasi  alga  cokelat (Sargassum sp .) dimulai  dengan  proses  pencucian Sargassum sp . Dicuci  menggunakan  air  tawar  sekitar  3  –  5  kali  bilas  agar kotoran, lumut, lumpur dan pasir tidak ada lagi yang menempel di Sargassum sp . kemudian  sampel  ditimbang  untuk  mengetahui  berat  basahnya,  dan  sampel dikeringkan di bawah sinar matahari secara langsung. Sargassum sp . yang telah kering  di  timbang  kembali  mengunakan  timbangan  analitik  untuk  mengetahui berat  keringnya,  kemudian Sargassum sp . dihaluskan  menggunakan  blender. Setelah  diblender  sampel  yang  sudah  halus  dimasukan  kedalam  kantong  sampel untuk selanjutnya dilakukan proses ekstraksi.
2. Ekstraksi Dingin (Maserasi)
Pembuatan  ekstrak  dengan  menggunakan  etanol  96%  secara  maserasi Sargassum sp.  di  timbang  sebanyak  500  gram  yang  dibasahi  dengan  pelarut etanol etanol 96% hingga basah sekitar 2000 ml, (1 : 4 ) yang didiamkan selama kurang  lebih  3  hari  dalam  wadah  tertutup  dan  dibuka  setiap  kali  2  jam  untuk  di lakukan  pengadukan.  Setelah  3  hari  ekstrak  disaring  menggunakan  kertas whatmen  no  45.  Kemudian  hasil  larutan  yang  di  saring    uapkan  dalam  cawan sekitar ±14 hari dengan suhu lebih kurang 40 o C hingga diperoleh pasta.
3. dentifikasi Kandungan Fitokimia Ekstrak Sargassum sp.  yang  diperoleh  dari  hasil  maserasi  yang  berbentuk pasta.  Dilakukan  identifikasi  fitokimia  secara  kualitatif  yang  didasarkan  pada perubahan  warna  atau  terbentuknya  suatu  endapan.    identifikasi  fitokimia mengacu  pada  metode  yang  dilakukan  oleh  Matasyoh  dan  Lex  (2014),  dengan indikator  uji  meliputi  :  uji  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tanin,  triterpenoid  dan steroid
4. Uji aktivitas antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak Sargauum sp.  dilakukan  dengan menggunakan  metode  difusi  cakram  kertas,  dimana  metode  ini  memiliki kelebihan  yaitu  cepat,  mudah  dan  murah  karena  tidak  memiliki  alat  khusus. Tujuan  dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  adalah  untuk  melihat  kemampuan  dari ekstrak kulit pisang kepok kuning dalam menghambat bakteri uji.
a. Persiapan Ekstrak pada kertas cakram
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33
Uji  ini  dilakukan  dengan  persiapan  Ekstrak Sargassum sp.  dengan menggunakan  pengikat  etanol  96  %  Adapun  kosentrasi  yang  digunakan  antara lain : 6000 ppm, 7000 ppm, 8000 ppm, kontrol positif (amoxicillin), dan kontrol negatif (akuades). Sebelum ekstrak diteteskan pada kertas cakram, terlebih dahulu dihitung  berapa  banyak  ekstrak  yang  akan  digunakan  lalu  dilakukan penimbangan.  Untuk  kosenterasi  6000  ppm  menggunakan  sebanyak  0,003  gr ekstrak dan 0,5 ml pelarut, lalu untuk kosenterasi 7000 ppm menggunakan 0,035 gr  ekstrak  dan  0,5  ml  pelarut,  serta  kosenterasi  8000  ppm  menggunakan  ekstrak sebanyak  0,004  gr  dengan  0,5  ml  pelarut.  Dihitung  dengan  menggunakan  rumus substitusi . Lalu diteteskan pada tiap kertas cakram dan biarkan hingga mengering di dalam laminar air flow.
b. Penanaman Bakteri Vibrio harveyi
Tahap  pertama  menyiapkan  media  agar  TSA  pada  cawan  petri  yang  sudah dimasukan  bakteri  bakteri Vibrio harveyi . sebanyak  1  ose  Kemudian  digores secara zig zag.
c. Pengujian Diameter Daya Hambat dan Diameter Daya Bunuh Pengujian  KHM  dan  KBM  dilakukan  dengan  meletakkan  kertas  cakram  yang telah  di  tetesi  ekstrak Sargassum sp.  pada  cawan  petri  yang  berisi  media  TSA yang didalamnya telah ditanami bakteri Vibrio harveyi serta diinkubasi selama 48 jam.
d. Pengukuran Diameter Daya Hambat dan Diameter Daya Bunuh
Pengukuran  KHM  dan  KBM  dilakukan  pada  sekeliling  kertas  cakram  yang terdapat  pada  masing-masing  titik.  Pengukuran  dilakukan  dengan  menggunakan jangka sorong.

## HASIL
1. Kadar Air Sargassum sp
Kadar  air  merupakan  banyaknya  air  yang  dikandung  dalam  suatu  bahan,  dan bisa juga dinyatakan berdasarkan berat basah maupun berat kering dan dinyatakan dalam persen. Menurut Fenodorosa et al. (2010) kadar air terikat pada sargassum
sp.  dapat  dihitung  menggunakan  rumus  :
hasil perhitungan  mendapatkan presentase kadar air sampel sebesar 14.3%.
2. Total Rendemen Sargassum sp 0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M ET

## ER ZO NA
H A M BA T
(m m )
0,0 0± 0,0 0 19,33± 7,09 25,00 ± 7,93 29,33± 4,04 40,66± 4,04
95% 5% Total Rendemen Sampel Rendemen
Rendemen  merupakan  bobot  total  keseluruhan  senyawa  metabolit  sekunder yang  terdapat  pada  suatu  sampel.  Menurut  Puji et  al. (2017)  kuantitas  rendemen yang ditarik oleh pelarut tergantung pada  total kadar air yang masih terikat pada sampel. Semakin sedikit total kadar air semakin kental pula kadar rendemen yang didapatkan.  Total  rendemen  pada  sargassum  sp  adalah  sebesar  2,7%.  yang dihitung menggunakan rumus :

## Rendemen
3. Tabulasi  Data  Nilai  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  dan Konsentrasu Bunuh Minimum  (KBM)
Tabulasi adalah pembuatan tabel-tabel yang berisi data yang telah diberi kode sesuai dengan analisis yang dibutuhkan. Berikut ini merupakan tabulasi data yang terdiri  dari  5  perlakuan  yang  didalamnya  terdapat ā  (nilai  rata-rata)  dan  Stedev (standar deviasi).
NO PERLAKUAN ā KHM STDEV ā KBM STDEV 1 6000 ppm 27.00 4.36 20.00 0.00 2 7000 ppm 19.00 8.72 12.33 6.43 3 8000 ppm 5.33 0.58 9.67 9.07 4 Kontrol Positif 33.33 0.58 26.33 1.15 5 Kontrol Negatif 0.00 0.00 0.00 0.00
4. Grafik  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  dan  Konsentrasu  Bunuh Minimum  (KBM)
Berikut  ini  adalah  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  dan  Konsentrasu
Bunuh  Minimum    (KBM)  Ekstrak Sargassum sp.  yang  menunjukkan  potensi antibakteri yang dimiliki bahan.
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33
5. Hasil Uji Fitokimia Sargassum sp Adapun hasil uji fitokimia sampel Sargassum sp. berdasarkan hasil identifikasi, senyawa bioaktif yang berhasil ditarik oleh pengikat etanol 96% adalah senyawa Flavonoid.
No Parameter Hasil Satuan Teknik Analisis
1. Flavonoid + Positif Visualisasi Warna 2. Alkaloid
Wagner - Negatif Mayer - Negatif Dragendorf - Negatif 3. Tanin - Negatif 4. Saponin - Negatif 5 Quinon - Negatif 6 Steroid - Negatif 7 Triterpenoid - Negatif
Keterangan : Laporan hasil uji No. (Sertifikat)  405.030/LPSB IPB / 111 / 19

## PEMBAHASAN
Total  kadar  air  sampel  yang  akan  diuji  lanjut  tidak  melebihi  dari  ±10%. Menurut  Fenoradosoa et  al. (2010),  total  kadar  air  yang  masih  berada  di  atas angka 10% memungkinkan pertumbuhan jamur dan kemampuan pelarut mengikat bahan  bioaktif.  Alamsyah et  al. (2014),  menyatakan  bahwa  komposisi  kadar  air pada alga cokelat Sargassum sp mempengaruhi kelarutan nutrient seperti vitamin, mineral dan senyawa bioaktif pada bahan basah.
Hasil  kadar  air  sampel  alga  cokelat  (sargassum  sp.)  sebesar  14,3%,  dengan proses yang sama kadar yang dihasilkan hampir sama dengan kadar air Sargassum sp.  yang  diteliti  oleh  Putri  (2010)  yang  besarnya  12,32%.  Kadar  air  mempunyai peranan  penting  dalam  menentukan  daya  awet  suatu  bahan.  Menurut  Winarno (2004), apabila kandungan air bahan berkisar 12-25 % kira-kira setara dengan a w 0,8. Aktivitas air (water activity = aw) merupakan jumlah air di dalam bahan yang tersedia untuk pertumbuhan mikroorganisme. Penghambatan mikroba secara total akan  terjadi  pada  a w bahan  <  0,6  setara  dengan  kadar  air  <  7%.  Kadar  air  S. vulgare  masih  tergolong  tinggi  karena  %  kadar  air  lebih  besar  dari  7%  sehingga pertumbuhan mikroba cenderung dapat terjadi, untuk mengantisipasi hal tersebut penyimpanan sampel serbuk kering pada lemari pendingin.
Hasil rendemen ekstrak Sargassum sp. yang diekstraksi menggunakan pelarut etanol  96%  sebesar  2,7  %,  hasil  rendemen  yang  didapatkan  lebih  besar  apabila
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0
D IA M ET ER ZO NA H A M BA T
(m m )
0,00± 0,00
6,66± 6,11
16,33± 4,04
40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0
D IA M

## ET ER ZO NA H
A M BA T
(m m ) KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00
6,66± 6,11
16,33± 4,04
40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11 16,33± 4,04 40,66± 4,04
7,66± 10,78
0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500 0 D IA M

## ET ER ZO NA H

## A M BA
T (m m )
KONSENTRASI EKSTRAK (ppm)
0,00± 0,00 6,66± 6,11
16,33± 4,04
40,66± 4,04 7,66± 10,78 0 10 20 30 40 50 20000 40000 60000 500
0 D IA M

## ET ER ZO NA H
A M BA T
(m m )
0,0 0± 0,0 0 19,33± 7,09 25,00 ± 7,93 29,33± 4,04 40,66± 4,04
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33
dibandingkan dengan penelitian Khotimah et al. (2013) yang menyatakan bahwa hasil  rendemen Sargassum fillipendula  yang  didapatkan  untuk  isolat  kuning kehijauan yaitu sebesar 0.33% dan untuk isolat orange sebesar 0.46%.
Hal  tersebut  berkebalikan  dengan  hasil  penelitian  Husni et  al. (2014)  bahwa persentase  rendemen  yang  dihasilkan  dari  ekstraksi  makroalga  dengan menggunakan  pelarut  etanol  berkisar  2-3%.  Jumlah  rendemen  ekstrak  yang dihasilkan dipengaruhi oleh beberapa faktor, yaitu ukuran simplisia, jenis pelarut, tingkat  kepolaran  pelarut  dan  lama  maserasi.  Menurut  Pendit  (2016),  tingkat kepolaran pelarut yang digunakan mempengaruhi tingkat kelarutan suatu senyawa bahan  yang  diekstraksi  ke  dalam  pelarut.  Jenis  dan  tingkat  kepolaran  pelarut menentukan  jenis  dan  jumlah  senyawa  yang  dapat  diekstrak  dari  bahan. Rendemen  ekstrak  akan  cenderung  meningkat  dengan  semakin  meningkatnya rasio bahan pelarut yang digunakan.
Uji  aktifitas  antibakteri  pada  alga  cokelat  ( Sargassum sp.)  terhadap  bakteri Vibrio  harveyi memberikan  hasil  yang  signifikan.  Uji  aktifitas  antibakteri  pada alga  cokelat  ( Sargassum sp.)  yang  dibuat  dalam  beberapa  konsentrasi memperlihatkan respon bunuh dan hambat  terhadap pertumbuhan bakteri Vibrio harveyi. Respon  bunuh  dan  hambat    yang  terbentuk  bervariasi  tergantung  dari konsentrasi  yang  diberikan.  Menurut  Manivannam et  al. (2010),  adanya  respon hambat  dan  bunuh  oleh  aktifitas  antibakteri  pada  alga  cokelat  ( Sargassum sp.) dikarenakan  terdapatnya  senyawa  bioaktif  yang  mempunyai  sifat  sebagai antibakteri,  seperti  senyawa  metabolit  sekunder  seperti  flavonoid,  steroid,  tanin, dan  saponin.  Hasil  uji  aktifitas  antibakteri  pada  alga  cokelat  ( Sargassum sp.) memperlihatkan  respon  hambatan  yang  bervariasi  pada  setiap  konsentrasi  yang diberikan.
Menurut Adebin dan Taha (2008), Sifat antibakteri suatu bahan terdiri dari dua jenis,  yakni  bakterisidal  (membunuh  bakteri,  zona  bening),  dan  bakteriostatik (menghambat  perkembangan  sel  bakteri,  zona  halo).  Mekanisme  bakteriostatik biasanya  terjadi  pada  ribosom  yang  menyebabkan  penghambatan  sintesis  protein sel bakteri, sedangkan zat yang bersifat bakterisidal membunuh sel bakteri tetapi tidak menyebabkan lisis atau pecahnya sel bakteri.
Uji  antibakteri  dilakukan  untuk  melihat  kemampuan  ekstrak Sargassum sp dengan  pelarut  etanol  96%  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri  patogen. Menurut Wulandari (2014), daya hambat dapat dilihat dengan terbentuknya zona bening  pada  sekitaran  koloni.  Zona  bening  tersebut  menunjukkan  bahwa  ekstrak tersebut  memproduksi  asam.  Pengujian  daya  hambat  dilakukan  dengan  cara menumbuhkan  isolat  bakteri  vibrio  harveyi    pada  media  TSA.  Selanjutnya  isolat di  teteskan  pada  kertas  cakram  steril  beserta  control  positif  (+)  Amoxicillin  500 mg dan control negatif (-) akuades , kemudian diletakkan pada media TSA  yang telah di gores bakteri Vibrio  harveyi.
Pengukuran  zona  hambat  larutan  uji  ekstrak  alga  coklat  ( Sargassum sp.) dengan pelarut etanol 96%, dapat menghambat dan membunuh  jenis bakteri uji. Ekstrak  alga  coklat  ( Sargassum sp.)  dengan  pelarut  etanol  96%  memberikan indeks  penghambatan  tertinggi  pada  perlakuan  ke  4  yaitu  kontol  (+),  kemudian pada sampel penghambatan tertinggi adalah pada perlakuan 1(6000 ppm), 2 (7000 ppm),  3  (8000  ppm)  dan  perlakuan  5  (0  ppm).  Untuk  daya  bunuh  juga
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33
memberikan  indeks  bunuh    tertinggi  pada  perlakuan  ke  4  yaitu  kontol  (+), kemudian  pada  sampel  penghambatan  tertinggi  adalah  pada  perlakuan  1  (6000 ppm), 2 (7000 ppm), 3 (8000 ppm) dan perlakuan 5 (0 ppm).
Akuades  sebagai  larutan  kontrol  negatif  dari  sampel  uji  menunjukan    tidak adanya  aktivitas  antibakteri.    Hal  ini  dapat  dilihat  dengan  tidak    adanya  zona hambat  dan  zona  bunuh    yang  terbentuk  pada  media  bakteri  sehingga  akuades sebagai larutan kontrol negatif tidak ada pengaruhnya terhadap larutan uji ekstrak alga cokelat ( Sargassum sp.) dalam pengujian aktivitas antibakteri.
Kontrol  positif  menggunakan  amoxicillin.  Amoxicillin  merupakan  derivat penisilin yang merupakan kelompok antibiotik β –laktam yang memiliki spektrum antimikroba  yang  luas.  Amoxicillin  efektif  terhadap  mikroba  Gram  positif  dan Gram  negatif.  Mekanisme  kerja  Amoxicillin  yaitu  menghambat  sintesis  dinding sel  bakteri  dengan  cara  menghambat  pembentukan  mukopeptida,  karena  sintesis dinding  sel  terganggu  maka  bakteri  tersebut  tidak  mampu  mengatasi  perbedaan tekanan  osmosa  di  luar  dan  di  dalam  sel  yang  mengakibatkan  bakteri  mati (Kuntaman et al. 2016).
Keberadaan  zona  bening  menunjukkan  aktivitas  antibakteri,  aktivitas antibakteri dari ekstrak alga cokelat ( Sargassum sp.) dengan pelarut etanol 96% menunjukkan bahwa senyawa yang terdapat dalam alga cokelat ( Sargassum sp.) mudah larut pada kedua pelarut yag digunakan dan bersifat polar sehingga dapat ditarik  oleh  etanol.  Menurut    penelitian  Shanmugam et  al. (2010)  menunjukkan bahwa  senyawa  antibakteri  mudah  larut  pada  senyawa  etanol.  Senyawa  tersebut mampu mengontrol fungsi membran sel bakteri uji, walaupun bakteri uji termasuk mikroba yang resisten terhadap beberapa antibiotik.
Pada tingkat yang lebih tinggi dari kelarutan prinsip aktif dalam pelarut seperti etanol  sebagai  antibakteri  lebih  tinggi,  Kegiatan  tercatat  dalam  ekstrak  pelarut polar dibandingkan untuk ekstrak pelarut non polar. Menurut Putra et al. (2014), perbedaan zona hambat pada berbagai penelitian di atas karena adanya perbedaan kandungan zat antibakteri  terhadap ekstrak masing-masing, sehingga menyebabkan  perbedaan  kemampuan  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri. Kemampuan ekstrak etanol menunjukan bahwa etanol adalah pelarut yang terbaik untuk ekstraksi.
Menurut  Behbahani et  al. (2018),  mekanisme  kerja  senyawa  antibakteri  alga cokelat  ( Sargassum sp.)  diduga  dengan  cara  mengganggu  komponen peptidoglikan pada sel bakteri, sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk secara utuh  dan  menyebabkan  kematian  sel  tersebut.  Efektifitas  antibakteri  dapat bereaksi  pada  beberapa  target  sasaran  pada  membran  bakteri,  sehingga menyebabkan  kerusakan  atau  autolisis  dan  juga  terhambatnya  pertumbuhan  atau bahkan  kematian  sel.  Menurut  penelitian  Evi el  al. (2017),  senyawa  metabolit sekunder  pada  alga  laut  yang  berpotensi  sebagai  antibakteri  adalah  flavonoid, tanin, saponin steroid.
Senyawa  flavonoid  diduga  mekanisme  kerjanya  mendenaturasi  protein  sel bakteri  dan  merusak  membran  sel  tanpa  dapat  diperbaiki  lagi.  Flavonoid  juga bersifat  lipofilik  yang  akan  merusak  membran  mikroba.  Di  dalam  flavonoid mengandung  suatu  senyawa  fenol.  Pertumbuhan  bakteri  Vibrio  harveyi  dapat terganggu  disebabkan  senyawa  fenol.  Fenol  merupakan  suatu  alkohol  yang
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33
bersifat  asam  sehingga  disebut  juga  asam  karbolat.  Fenol  memiliki  kemampuan untuk  mendenaturasikan  protein  dan  merusak  membran  sel.  Kondisi  asam  oleh adanya  fenol  dapat  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  bakteri  Staphylococcus aureus (Rahayu, 2000).
Flavonoid  dapat  berfungsi  sebagai  antibakteri  karena  dapat  merusak  dinding sel  bakteri.  Menurut  Abad et  al. (2011),  flavonoid  dapat  mengganggu permeabilitas membran sel, proses sintesis protein dan DNA. Aktivitas antibakteri senyawa flavonoid terdapat pada gugus hidroksil bebas pada cincin A, C 5 dan C7 (Saleem et  al. 2010).  Selain  itu  pada  gugus  hidroksil  pada  cincin  B,  3’,4’,5’- trihydroxyflavonoids.
Flavonoid    juga  merupakan  suatu  senyawa  fenol  yang  tersebar  luas  pada hampir  semua  tumbuh-tumbuhan.  Lebih  dari  4.000  flavonoid  telah  diidentifikasi pada tumbuhan tingkat tinggi dan rendah hingga saat ini. Penelitian Setyowati et al. (2014),  secara  in  vivo  maupun  in  vitro  menunjukkan  bahwa  flavonoid memiliki  aktivitas  16  biologis  maupun  farmakologis,  antara  lain  bersifat antibakteri,  antiinflamasi,  antialergi,  antikarsinogen,  antioksidan,  dan  melindungi pembuluh  darah.  Flavonoid  juga  berperan  dalam  mempercepat  proses penyembuhan luka pasca pencabutan gigi dengan cara meningkatkan Flavonoid umumnya terikat pada gula sebagai glikosida dan aglikon flavonoid yang  terdapat  pada  tumbuhan  dalam  beberapa  bentuk  kombinasi  glikosida. Menurut  Septianana  dan  Ari  (2012),  flavonoid  merupakan  bahan  aktif  yang banyak  dijumpai  pada  daun,  benih,  kulit  dan  bunga  tanaman.  Flavonoid melindungi  tumbuhan  dari  radiasi  UV,  patogen  dan  hewan  herbivor.  Flavonoid sebagai  inhibitor  tirosinase  meliputi  tujuh  grup  mayor  yaitu  flavones,  flavonols, flavononess, flavanols, isoflavonoids, chalcones dan catechin.

## KESIMPULAN
Berdasarklan  hasil  iji  fitokimia  Senyawa  bioaktif  yang  berhasil  ditarik  pada ekstrak sargassum sp.  menggunakan  pelarut  atanol  96%  adalah  flavonoid  Uji aktivitas antibakteri pada V. harveyi menggunakan ekstrak Sargassum sp. adalah Untuk  Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) Perlakuan 6000 ppm, dengan rata –  rata  daya  hambatnya    27.00  mm  dengan  Ketegori  (Sangat  Kuat)  Dan  untuk Konsentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM)  Perlakuan  6000  Ppm,  dangan  rata  –  rata daya  bunuhnya  12.33  mm  dengan  Ketegori    (Kuat).    Ekstrak  alga  cokelat sargassum sp.  yang  di  ekstrak  menggunakan  pelarut  etanol  96%  mampu menghambat dan membunuh bakteri V. harveyi.

## DAFTAR PUSTAKA
Alamsyah, H., Ita, W., Agus S. 2014. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Rumput
Laut Sargassum    cinereum (J.G.  Agaradh)  Dari  Perairan  Pulau Panjang  Jepara  Terhadap  Bakteri Eschericia  coli dan Staphylococcus epidermidis. Journal Of Marine Research, 3(2) : 69 – 78
Abad, M. J., Bedoya, L.M., Bermejo P. 2011. Marine Compounds and their Antimicrobial  Activities .  Departamento  de  Farmacología,  Facultad  de
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33
Farmacia,  Universidad  Complutense,  Avda.  Complutense  s/n,  28040, Madrid, Spain.
Alzainy,  Z.A.A. 2011. The Occurrence, Hemolytic, Cytotoxic  Activity and Antibiotic Susceptibility of Aeromonas hydrophila Isolated from Fish Samples in Baghdad. The Iraqi J. Vet. Med. 35 ( 2 ): 123 – 135; 2011.
Abedin, R.M.A., Taha, H.M., 2008. Antibacterial and antifungal activity of cyanobacteria  and  green  microalgae  evaluation  of  medium components  by  Plackett–Burman  design  for  antimicrobial  activity  of Spirulina plastensis. Global J. Biotechnol. Biochem. 3 (1), 22–31. Behbahani,  B.A.,  Yazdi,  F.T.,    Shahidi,  F.,  Noorbakhsh,  H.,  Vasiee,  A.,. Alghooneh,  A.  2018.  Phytochemical  analysis  and  antibacterial activities  extracts  of  mangrove  leaf  against  the  growth  of  some pathogenic bacteria. Microbial pathogenesis , 114:225-232. http://dx.doi.org/10.1016/j.micpath.20 17.12.004.
Dolorosa T.M., Nurjanah, Purwaningsih, S., Effionora, A., Taufik, H. 2017. Kandungan  senyawa  bioaktif  bubur  rumput  laut Sargassum plagyophyllum  dan  Eucheuma  cottonii  sebagai  bahan  baku  krim pencerah  kulit.  Jurnal  Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia.  20(3):
633-644.
DeLeo,  F,R.,  Otto,  M.,  Kreiswirth,  B.N.,  Chambers,  H.F.  2016. Community-associated  meticillin-resistant  Staphylococcus  aureus. Laboratory  of  Human  Bacterial  Pathogenesis.  Rocky  Mountain Laboratories.  National  Institute  of  Allergy  And  Infectious  Diseases. National Institutes of Health. Hamilton, MT 59840, USA.
Evy, Yulianti, Anna, R. 2017. Screening and Characterization of Phosphate Solubilizing  Bacteria  from  Isolate  of  Thermophilic  Bacteria.  AIP Conference Proceedings 1868, 090015 (2017); doi: 10.1063/1.4995207.
Fitriani, A.,  Fajrul,  I., Yanti,  H., Maemunah. 2015. Antibacteria activity of Shewanella and Pseudomonas as endophytic bacteria from the root of Ageratum  conyzoides  L.  Asian  Journal  of  Applied  Sciences.  3:  415- 420.
Fenoradosoa, T.A., Ali, G., Delattre, C., Laroche, C., Petit, E., Wadouachi, A.,  Michaud.  2010  Ps.Extraction  and  characterization  of  an  alginate from the brown seaweed Sargassum  turbinarioides Grunow. J. Appl. Phycol ., 22 , 131–137.
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33
Felicia,  C.S.,  Kumar  P.A.,  Patterson,  J.  2004.  Incidence  and  antibiotic susceptibility  of vibrio parahaemolyticus  from  sea  foods  of  tuticorin. Indian j. Fish.,51(1) : 43-47, jan.-mar.2004.
Kuntaman  K.,  Hadi  U.,  Setiawan  F.,  Koendori  E.  B.,  Rusli  M., Santosoningsih  D.,  Saverin  J.,  Verbrugh  H.  A.,  2016,  Prevalence  of Methicillin Resistant Staphylococcus aureus from Nose and Throat of Patients  on  Admission  to  medical  Wards  of  Dr.  Soetomo  Hospital, Surabaya,  Indonesia,  Southeast  Asian  J  Trop  Med  Public  Health,  47 (1), 66-70.
Khotimah, K., Darius dan B.B. Sasmito. 2013. Uji Aktivitas Senyawa Aktif Alga  Coklat  ( Sargassum fillipendulla)  Sebagai  Antioksidan  Pada Minyak  Ikan  Lemuru  (Sardinella  longiceps).  THPi  Student  Journal.
I(1): 10- 20.
Matsyoh.  M.,  Lex.  G.,  2014.  Antimicrobial  Assay  and  Phyto-cemical Analysis  of Solanum  nigrum Complex  Growing  in  Kenya. African Journal of Microbiology Research . Vol. 8 (50)
Manivannan,  K.,  Karthikai devi,  G.,  Anantharaman,P., Balasubramanian,T. 2011.  Antimicrobial  potential  of  selected  brown  seaweeds  from Vedalai  coastal  waters,  Gulf  of  Mannar. Asian  Pacific  Journal  of Tropical Biomedicine 114-120
Puji,  L.,    Lantah.,  Lita.,  A.D.Y.,    Montolalu.,  Albert,  R.,  Reo.  2017. Phytochemical  Content  and  Antioxidant  Activity  of  Seaweed Kappaphycus alvarezii Extracted with Methanol. 5(3): 167-172
Putra.  A.  A.  B.,  Bogoriani.  N.W.,  Diantariani.  N.P.,  Sumadewi.  N.L.U.
2014.  Ekstraksi  zat  warna  alam  dari  bonggol  tanaman  pisang  (Musa paradiasciaca  L.)  dengan  metode  maserasi,  refluks,  dan  sokletasi,
Jurnal Kimia, 8, 113 – 119.
Ramesh, K., Natarajan, M., Sridhar H., Umamaheswari, S. 2014. Virulence Determination  Among  Vibrio  harveyi  Hatchery  Isolates  Through Haemolysis  and  Growth  Constraint.  Global  Journal  of  Bio-Science and Biotechnology. 3(1):109-114.
Setyowati,  W.A.E.,  Ariani,  S.R.D.,  Ashadi,  Mulyani,  B.,  Rahmawati,  C.P. 2014.  Skrining  Fitokimia  dan  Identifikasi  Komponen  Utama  Ekstrak Metanol  Kulit  Durian  (Durio  zibethinus  murr.)  Varietas  Petruk. Seminar Nasional Kimia dan Pendidikan Kimia VI. Prodi Pendidikan Kimia Jurusan FMIPA FKIP Universitas Surakarta
Intek Akuakultur. Volume 3. Nomor 2. Tahun 2019. E-ISSN 2579-6291. Halaman 22-33
Septiana, A.T., Ari. A. 2012. Kajian Sifat Fisikokimia Ekstrak Rumput Laut Coklat Sargassum duplicatum  Menggunakan  Berbagai  Pelarut  dan Metode Ekstraksi. AGROINTEK. vol. 6:1
Shanmugam, S.K., Kumar, Y., Yar, K.M.S., Gupta, V., De Clercq, E. 2010. .  Antimicrobial  and  Cytotoxic  Activities  of Turbinaria  conoides (J.Agardh)  Kuetz. Iranian  Journal  of  Pharmaceutical  Research. 9 (4): 411-416
Saleem, M., Nazir, M., Ali, M.S., Hussain, H., Lee, Y.S., Riaza, N., Jabbara, A.2009.    Antimicrobial  Natural  Products:  an  Update  on  Future Antibiotic Drug Candidates. DOI: 10.1039/b916096e. First published as an Advance Article on the web 25th November.
Wulandari,  R.  2014.  Isolasi  Bakteri  Asam  Laktat  dari  Usus  Ikan  Lele Clarias batracus untuk Pengendalian Bakteri Streptococcus pada Ikan
Nila Oreochromis Niloticus . Universitas Hasanuddin. Makassar.