## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN EKOR KUCING
( Acalypha hispida Burm. F.) TERHADAP BAKTERI
Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli

## SECARA IN-VITRO
Kevin Caesar Moningka 1) , Novel S. Kojong 1) , Sri Sudewi 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Through  the  last  view  years,  the  incidence  of  infectious  disease  by  microorganisms  was increase, one of which is bacterial pathogens. This research aims to investigate antibacterial activity  of  hexane,  etil  asetat,  and  ethanol  extract,  and  the  most  effective  of  ekor  kucing leaves  of Staphylococcus  aureus and Escherichia  coli. Extraction  was  done  by  maceration used hexane, etil asetat and ethanol as the solvents. The antibacterial activity test used Kirby and  Bauer agar  difussion  method.  The  results  was  showed  that  all  the  extracts  have antibacterial  activity.  Ethanol  extract  has  the  highest  antibacterial  activity  compared  to  the other  extracts  against Staphylococcus  aureus (19.33  mm)  and Escherichia  coli (18.50mm). The  result  of  antibacterial  activity  test  was  analyzed  with  Oneway  Anova,  continue  with Turkey test. The result showed that ekor kucing leaves extract with concentration 10%, 20%, 40%,  80%  has  antibacterial  activity  against  the  test  bacterial.  The  concentration  80%  is  the most  effective  concentration  with  a high  inhibition  diameter of Staphylococcus  aureus and Escherichia coli .
Keywords : Acalypha  hispida Burm.  F., Antibacterial  activity , Staphylococcus        aureus , Escherichia coli.

## ABSTRAK
Selama  beberapa  tahun  terakhir,  terjadi  peningkatan  timbulnya  penyakit  infeksi  yang disebabkan oleh mikroorganisme salah satunya ialah bakteri patogen. Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak  heksana,  etil  asetat,  etanol  dan ekstrak  yang paling efektif daun ekor kucing terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara  maserasi  menggunakan  pelarut  heksana,  etil  asetat  dan etanol.  Pengujian  aktivitas  antibakteri  menggunakan  metode  difusi  agar  (Kirby  dan  Bauer). Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  menunjukkan  semua  ekstrak  memiliki  aktivitas  antibakteri. Ekstrak etanol memiliki aktivitas antibakteri yang paling tinggi dibandingkan dengan ekstrak yang  lainnya  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus (19.33  mm),  dan Escherichia  coli (18.50  mm).  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  dianalisa  dengan  metode Oneway Anova, dilanjutkan  dengan  Uji  Turkey.  Data  Anova  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  ekor  kucing pada  konsentrasi  10%,  20%,  40%,  80%  telah  memberikan  aktivitas  antibakteri  terhadap bakteri  uji.  Konsentrasi  80%  menunjukkan  konsentrasi  yang  paling  efektif  untuk menghambat bakteri Staphylococcus aureus dan  bakteri Escherichia coli . Hal ini terlihat dari semakin besar diameter zona hambat yang dihasilkan..
Kata kunci : Acalypha hispida Burm. F., Aktivitas antibakteri, Staphylococcus      aureus , Escherichia coli.

## PENDAHULUAN
Selama  beberapa  tahun  terakhir, terjadi  peningkatan  timbulnya  penyakit infeksi  yang  disebabkan  oleh  bakteri seiring  dengan  bertambahnya  populasi manusia.  Penyakit  infeksi  merupakan masalah  kesehatan  yang  sangat  penting dan merupakan salah satu penyebab utama penyakit  dan  kematian  pada  manusia. Penyakit  infeksi  ini  disebabkan  oleh mikroorganisme salah satunya ialah bakteri  patogen.  (Swamy  and  Jayaveera, 2007).  Pengobatan  terhadap  penyakit infeksi  biasanya  digunakan  antibiotik  dan telah  banyak  dikembangkan.  Akan  tetapi penggunaan  antibiotik  yang  tidak  tepat dapat  menyebabkan  resistensi  bakteri terhadap  antibiotik.  Situasi  ini  mendorong para  ilmuwan  untuk  mengembangkan senyawa antibakteri baru yang berasal dari tumbuhan (Yenny, 2007).
Sejak  zaman  dahulu  masyarakat Indonesia  telah  menggunakan  tumbuhan obat sebagai salah satu upaya menanggulangi  masalah  kesehatan.  Salah satu  tanaman  yang  sudah  digunakan  ialah tanaman  Ekor  kucing.  Tanaman  Ekor kucing  merupakan  tanaman  asli  dari Hindia  Barat.  Umumnya,  ditanam  sebagai tanaman  hias  di  halaman  atau  di  taman- taman. Tanaman ekor kucing telah dikenal oleh  masyarakat  untuk  pengobatan  bercak putih  dikulit  (vitiligo),  batuk  darah, sariawan, disentri, dan mimisan (Dalimarta, 2007).
Dalam pengobatan tradisional khasiat  tanaman  ekor  kucing  ini  sebagai obat  hemostatis,  batuk  darah,  pengobatan bercak  putih  di  kulit,  luka  bakar,  radang usus,  cacingan,  muntah  darah,  berkhasiat sebagai  penutup  luka  dan  peluruh  air  seni (Dalimarta, 1991).
Penelitian  yang  dilakukan  oleh (Rima,  2009)  tanaman  ekor  kucing ( Acalypha hispida Burm. F.) menghasilkan senyawa  kimia  yang  berguna  dalam pengobatan, diantaranya mengandung saponin,  tanin,  flavonoid,  acalyphin  dan minyak  atsiri  yang  salah  satu  fungsinya sebagai  antibakteri.  Ekstrak  daun  ekor
kucing  ( Acalypha  hispida Burm.  F.) mempunyai  aktivitas  antibakteri  terhadap bakteri Staphylococcus  aureus yang  lebih efektif daripada ekstrak daun anting-anting ( Acalypha indica Linn.).
Berdasarkan  penelitian-penelitian diatas  dapat  dikatakan  daun  ekor  kucing berpotensi  mempunyai  aktivitas  sebagai antibakteri.  Akan  tetapi  perlu  dilakukan pengujian kelarutan zat  aktif  yang bersifat sebagai  antibakteri.  Karena  itu  perlu dilakukan penelitian untuk menguji aktivitas  zat  akitf  pada  daun  ekor  kucing ( Acalypha hispida Burm. F.) yang diekstrak  dengan  beberapa  pelarut  dalam menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli .

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  November  2014  –  Juni  2015  di Laboratorium Mikrobiologi Program Studi Farmasi Universitas Sam Ratulangi Manado. Alat yang digunakan ialah timbangan analitik, wadah toples, aluminium  foil,  autoklaf,  tabung  reaksi, erlenmeyer, gelas ukur, gelas kimia, cawan petri,  batang  pengaduk,  stirer,  hot  plate, inkubator,  jarum  ose,  lampu  spiritus, rotary  evaporator,  laminar  air  flow, blender,  ayakan  mesh  65,  corong,  kaca arloji,  mikropipet,  lumpang,  rak  tabung reaksi, mistar berskala, pinset, gunting.
Bahan  yang  digunakan  ialah  daun ekor  kucing  ( Acalypha  hispida Burm.  F.), biakan  bakteri Staphylococcus  aureus , Escherichia  coli ,  etanol,  etil  asetat, heksana,  nutrient  agar  (NA),  carboxy methyl cellulose (CMC), alkohol, aquadest, ciprofloxacin 500mg, larutan Mc Farland ,  NaCl  0,9%,  kertas  saring  no.1, kertas  cakram  6  mm,  kapas,  kertas  label, handskun, masker, tissue.

## Pengambilan Sampel
Sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  daun  ekor  kucing  ( Acalypha hispida Burm.  F.).  Sampel  dikumpulkan
kemudian dibersihkan dengan menggunakan air mengalir bersih kemudian  dikeringkan    dengan  cara diangin-anginkan.  Sampel  yang  telah kering  dibuat  menjadi  serbuk  dengan menggunakan  blender,  lalu  serbuk  yang dihasilkan  diayak  dengan  menggunakan ayakan  mesh  65  hingga  diperoleh  serbuk yang halus dan seragam. Hasilnya dimasukkan  ke  dalam  wadah  gelas tertutup.

## Pembuatan Ekstrak
Ekstraksi  dilakukan  menggunakan metode  maserasi  dengan  tiga  pelarut  yang berbeda tingkat kepolarannya, yaitu heksana  (non  polar),  etil  asetat  (semi polar),  dan  etanol  (polar).  Perbandingan antara  bahan  dan  pelarut  ialah  1:5  (w/v) selama  5  hari  sambil  sesekali  diaduk. Setelah  5  hari,  masing-masing  sampel tersebut  disaring  menggunakan  kertas saring menghasilkan filtrat 1 dan residu 1. Residu  yang  ada  kemudian  ditambahkan pelarut  dengan  perbandingan  1:3  (w/v) selama  2  hari  sambil  sesekali  diaduk. Setelah  2  hari,  masing-masing  ekstrak disaring menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat 2 dan ampas 2. Filtrat 1 dan 2 dicampur menjadi  satu,  kemudian filtrat  yang  diperoleh  dari  masing-masing ekstrak  diuapkan  dengan  menggunakan alat  rotary  evaporator  sehingga  diperoleh ekstrak kental dari masing-masing pelarut.

## Sterilisasi Alat
Alat-alat  gelas  disterilkan  dalam autoklaf pada suhu 121 ⁰ C selama 15 menit jarum  ose  dan  pinset  dibakar  dengan pembakaran diatas api langsung dan media disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu 121 ⁰ C selama 15 menit.
Pembuatan Standar Kekeruhan
(Larutan Mc. Farland ) Larutan  H2SO4  0,36  N  sebanyak 99,5  mL  dicampurkan  dengan  BaCl2 2H2O  1,175%  sebanyak  0,5  mL  dalam sebuah  tabung.  Tabung  dikocok  sampai terbentuk  larutan  keruh.  Kekeruhan  ini
dipakai  sebagai  standar  kekeruhan  bakteri (Lay, 1995).

## Pembuatan  Larutan  Uji  Ekstrak  Daun Ekor kucing
1. Larutan uji konsentrasi 10% : ditimbang ekstrak  daun  ekor  kucing  0,02g  kemudian dilarutkan  dalam  0.2  mL  CMC  (1:1). 2.Larutan uji konsentrasi 20% : ditimbang ekstrak  daun  ekor  kucing  0,04g  kemudian dilarutkan  dalam  0.2  mL  CMC  (1:1). 3.Larutan uji konsentrasi 40% : ditimbang ekstrak  daun  ekor  kucing  0,08g  kemudian dilarutkan  dalam  0.2  mL  CMC  (1:1). 4.Larutan uji konsentrasi 80% : ditimbang ekstrak  daun  ekor  kucing  0,16g  kemudian dilarutkan dalam 0.2 mL CMC (1:1).

## Pembuatan Media
Nutrien  agar  (NA)  ditimbang sebanyak  5  g  di  larutkan  dalam  250  mL aquadest (23g/1000 mL) kemudian dipanaskan  diatas  hot  plate  sampai mendidih  dan  diperoleh  larutan  jernih. Disterilkan  di  dalam  autoklaf  pada  suhu 121 ⁰ C selama 15 menit

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Proses
suspensi bakteri menggunakan NaCl 0,9% dengan prosedur kerja  sebagai  berikut:  Disuspensikan bakteri  uji  dengan  larutan  NaCl  0,9% sebanyak 3 mL, kemudian suspensi bakteri ini dibuat disetarakan kekeruhannya dengan larutan standar Mc. Farland.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Pengujian  aktivitas  ekstak  daun ekor  kucing  dilakukan  dengan  cara memberikan  ekstrak  heksana,  etil  asetat dan  etanol  daun  ekor  kucing.  dengan prosedur  sebagai  berikut:  Dipipet  0,1  mL suspensi  bakteri  uji  dimasukkan  ke  dalam cawan  petri.  Selanjutnya  media  nutrien agar  (NA)  dituang  ke  dalam  cawan  petri sebanyak 15 mL, kemudian dihomogenkan dan  didiamkan  hingga  media  memadat. Setelah  media  padat  diletakkan  5  kertas cakram  berukuran  6mm  dan  diatur sedemikian  rupa  sehingga  terdapat  daerah
yang cukup untuk mengamati zona hambat yang terjadi. Kertas cakram telah diresapkan  ekstrak  heksana  (non  polar), etil  asetat  (semi  polar)  dan  etanol  (polar) pada konsentrasi 100%, kontrol positif dan kontrol  negatif.  Kemudian  diinkubasi dalam  inkubator  pada  suhu  37 ⁰ C  selama 1x24 jam.

## Pengujian Efektivitas Antibakteri
Pengujian  efektivitas  antibakteri yang  memiliki  zona  hambat  paling  besar dilakukan dengan cara memberikan larutan uji  ekstrak  daun  ekor  kucing.  Ekstrak dibuat  dengan  konsentrasi  10%  b/v,  20% b/v, 40% b/v, 80% b/v serta kontrol positif dan  kontrol  negatif  dengan  prosedur sebagai  berikut:  Dipipet  0,1  mL  suspensi bakteri  uji  dimasukkan  ke  dalam  cawan petri. Selanjutnya media nutrien agar (NA) dituang ke dalam cawan petri sebanyak 15 mL,  lalu  dihomogenkan  dan  didiamkan hingga  media  memadat.  Setelah  media padat diletakkan 6 kertas cakram berukuran  6mm  dan  diatur  sedemikian rupa sehingga terdapat  daerah  yang cukup untik  mengamati  zona  hambat  yang terjadi.  Kertas  cakram  masing-masing telah  diresapkan  larutan  uji  dengan konsentrasi  10%,  20%,  40%,  dan  80%, kontrol  positif  dan  kontrol  negatif. Kemudian  diinkubasi  dalam  inkubator pada suhu 37 ⁰ C selama 1x24 jam.

## Pengamatan
Pengamatan dilakukan setelah 1x24  jam    masa  inkubasi.  Daerah  pada sekitaran  cakram  menunjukkan  kepekaan bakteri  terhadap  antibiotik  atau  bahan antibakteri  yang  digunakan  sebagai  bahan uji yang dinyatakan dengan diameter zona hambat.  (Vandepitte et al, 2005).

## Analisis Data
Data diperoleh dari hasil pengukuran  diameter  zona  hambat  yang sudah  terbentuk  di  sekitar  kertas  cakram dari  masing-masing  larutan  uji  setelah diinkubasi  selama  1x24  jam.  Data  yang terkumpul ditabulasi dan dianalisis
menggunakan  metode  Oneway  ANOVA dengan  program  SPSS  v  20.0  untuk melihat perbedaan tiap perlakuan terhadap peningkatan  konsentrasi,  apabila  ada perbedaan  akan  dilanjutkan  dengan  Uji Turkey.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Determinasi Sampel
Determinasi tanaman Acalypha hispida
Burm. F dilakukan di Laboratorium  Taksonomi  Tumbuhan  di FMIPA  UNSRAT  Program  studi  Biologi. Hasil  determinasi  menunjukkan  bahwa jenis  tanaman  yang  diteliti  ialah Acalypha hispida Burm. F. (lampiran 1). Determinasi  dilakukan dengan tujuan agar tidak terjadi kesalahan dalam pengambilan sampel  yang  akan  digunakan  pada  uji aktivitas antibakteri.

## Ekstraksi
Daun  ekor  kucing  yang  berwarna hijau  diambil  dari  pekarangan  rumah warga  di  daerah  Ranomuut,  Kecamatan Tikala  kota  Manado,  sampel  dikumpulkan sebanyak  1,2  kg  kemudian  dibersihkan dengan  menggunakan  air  mengalir  bersih kemudian  dikeringkan    dengan  cara diangin-anginkan.  Pengeringan  dengan cara  diangin-anginkan  bertujuan  untuk menurunkan  aktivitas  kadar  air  dalam bahan sehingga mikroorganisme penyebab kerusakan  bahan  tidak  dapat  hidup  dan dapat  disimpan  dalam  jangka  waktu  yang lama. Simplisia yang telah kering diserbukkan dengan menggunakan blender,  dan  diayak  dengan  menggunakan ayakan  mesh  65  hingga  diperoleh  serbuk yang  halus  dan  seragam.  Pembuatan serbuk bertujuan untuk memperluas permukaan  yang  berinteraksi  dengan pelarut  sehingga  lebih  banyak  senyawa yang dapat terekstrak.
Dalam  penelitian  ini  ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi.
Tujuan  dalam  pemilihan  metode  maserasi karena cara pengerjaan dan peralatan yang digunakan  sederhana  dan  tidak  merusak senyawa  yang  tidak  tahan  panas.  Pelarut
untuk  ekstraksi  mempunyai  kepolaran yang  sama  dengan  senyawa  yang  akan diambil.  Hal  ini  disebabkan  kandungan kimia  dari  suatu  tumbuhan  hanya  dapat larut dalam pelarut yang sama kepolarannya,  sehingga  suatu  golongan senyawa dapat dipisahkan dari senyawa lainnya (Kochhar, 1990). Untuk pemilihan pelarut  ekstraksi  didasarkan  pada  prinsip like  dissolved  like  yaitu  senyawa  polar akan  cenderung  larut  pada  pelarut  polar dan  senyawa  non  polar  akan  cenderung larut  pada  pelarut  non  polar,  sehingga heksana  akan  melarutkan  senyawa  non polar, etil asetat akan melarutkan senyawa semi  polar,  dan  etanol  akan  melarutkan senyawa polar.
Simplisia daun ekor kucing ( Acalypha hispida Burm. F.) sebanyak 50g diekstraksi  menggunakan  masing-masing pelarut  selama  5  hari,  dan  dilakukan pengulangan  dengan  penggantian  pelarut selama 2 hari, bertujuan untuk mengekstrak  seluruh  senyawa  kimia  yang ada  dalam  sampel.  Selanjutnya  hasil rendaman  dilakukan  pemisahan  yang terdiri  dari  penyaringan  dan  evaporasi. Penyaringan dilakukan untuk  memisahkan sampel dengan pelarut yang telah mengandung bahan aktif. Untuk memisahkan  pelarut  dengan  senyawa bioaktif  yang  terikat  dilakukan  evaporasi menggunakan  rotary  evaporator,  sehingga pelarutnya  akan  menguap  dan  diperoleh senyawa  hasil  ekstraksi  (Khopkar,  2003). Ekstrak  yang  dihasilkan  daun  ekor  kucing berwarna  hijau  kehitaman.  Rendemen ekstrak  yang  diperoleh  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil rendemen ekstrak daun ekor kucing ( Acalypha hispida Burm. F.)

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak heksana,  etil  asetat  dan  etanol  daun  ekor kucing  ( Acalypha  hispida Burm.  F.) terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli menggunakan metode difusi  agar  Kirby  Bauer.  Pengujian menggunakan  kertas  cakram  berdiameter 6mm yang telah disterilkan terlebih dahulu dan setiap kertas cakram diresapi sebanyak 20 μL larutan uji.
Zona hambat yang terbentuk diidentifikasi dengan melihat daerah bening  di  sekeliling  cakram  dan  besarnya zona hambat diketahui berdasarkan pengukuran diameter daerah bening tersebut.  Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  ekstrak  heksana,  etil  asetat  dan etanol daun ekor kucing ( Acalypha hispida Burm. F.) terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli dapat  dilihat pada Tabel 2 dan Tabel 3.
Tabel  2.  Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  ekstrak  heksana,  etil  asetat  dan etanol daun ekor kucing ( Acalypha hispida Burm. F.) terhadap bakteri Staphylococcus aureus .
Tabel  3.  Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  ekstrak  heksana,  etil  asetat  dan etanol daun ekor kucing ( Acalypha hispida Burm.  F.)  terhadap  bakteri Escherichia coli.
Hasil  yang  diperoleh  pada  uji aktivitas antibakteri pada bakteri Staphylococcus  aureus ,  diameter  zona hambat  ekstrak  heksana  sebesar  (7.50 mm),  ekstrak  etil  asetat  (17.83  mm)  dan
No. Pelarut Berat ekstrak (g) Persentase (%) Warna 1 Heksana 0.9 1.8 Hijau kehitaman 2 Etil Asetat 2.3 4.6 Hijau kehitaman 3 Etanol 4.1 8.2 Hijau kehitaman
etanol (19.33 mm). Sedangkan uji aktivitas antibakteri  pada    bakteri Escherichia  coli , diameter  zona  hambat  ekstrak  heksana sebesar  (7.00  mm),  ekstrak  etil  asetat (17.33 mm) dan etanol (18.50 mm).
Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  pada  bakteri Staphylococcus aureus lebih besar dibandingkan  dengan  bakteri Escherichia coli . Adanya perbedaan komponen dinding sel kedua bakteri tersebut, dapat mempengaruhi  kerja  ekstrak  daun  ekor kucing  sebagai  antibakteri.  Bakteri  gram positif  cenderung  lebih  sensitif  terhadap antibakteri.  Hal  ini  disebabkan  oleh struktur  dinding  sel  Gram  positif  lebih sederhana, sehingga memudahkan senyawa  antibakteri  masuk  ke  dalam  sel dan menemukan sasaran untuk bekerja.
Kontrol  pembanding  atau  kontrol posotif  yang  digunakan  ialah  antibiotik Ciprofloxacin. Mekanisme kerjanya dengan  menghambat  topoisemerase  II  (= DNA  girase)  dan  topoisemerase  VI  pada bakteri.  Enzim  topoisomerase  II  berfungsi menimbulkan  relaksasi  pada  DNA  yang mengalami  positive  supercoiling  (pilihan positif  yang  berlebihan)  pada  waktu transkripsi  dalam  proses  replikasi  DNA. Enzim  topoisomerase  VI  berfungsi  dalam pemisahan  DNA  baru  yang  terbentuk setelah  proses  replikasi  DNA  bakteri selesai  (Mpila, 2012). Kontrol  negtif  yang digunakan  ialah  CMC  bertujuan  sebagai pembanding  dan  pelarut  untuk  pembuatan larutan  uji.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  kontrol  negatif  tidak  memberikan zona  hambat.  Hal  tersebut  membuktikan bahwa  pelarut  tidak  berpengaruh  terhadap aktivitas antibakteri, sehingga dapat diketahui bahwa yang mempunyai aktivitas  antibakteri  ialah  zat  uji,  bukan dari pelarut yang dipakai.
Ekstrak heksana menunjukkan adanya  aktivitas  antibakteri  yang  paling kecil  dibandingkan  dengan  ekstrak  lain. Menurut Naufalin (2005), ekstrak heksana bunga  kecombrang  mengandung  minyak atsiri  yang  bersifat  sebagai  antimikroba, namun  kontak  senyawa  antimikroba  dan
minyak  atsiri  dengan  sel  bakteri  terhalang oleh  adanya  minyak  dan  lemak  dalam ekstrak  heksana.  Minyak  dan  lemak lainnya  menggangu  proses  difusi  dan melindungi bakteri dari senyawa antibakteri.  Sedangkan  hasil  penelitian Kanazawa et al.(1995), melaporkan bahwa ekstrak  heksana  (senyawa  minyak  atsiri dan  lipida  lainnya)  yang  mempunyai ukuran  molekul  besar  tidak  dapat  masuk berpenetrasi  ke  dalam  dinding  sel  bakteri. Ukuran  molekul  besar  tersebut  akan menjadi  penghalang  masuknya  komponen minyak  atsiri  maupun  senyawa  fenolik  ke dalam sel akibatnya sel tetap akan tumbuh.
Ekstrak  yang  memiliki  tingkat kepolaran  yang  lebih  besar  selannjutnya ialah ekstrak etil  asetat.  Ekstrak etil  asetat menunjukkan  adanya  aktivitas  antibakteri yang  lebih  besar  dibandingkan  ekstrak heksana.  Etil  asetat  merupakan  pelarut yang  bersifat  semi  polar.  Sifat  etil  asetat yang semi polar menyebabkan ekstrak etil asetat  akan  memiliki  dua  sifat  kelarutan, yaitu  hidrofilik  dan  lipofilik  (Adawiyah, 1998).  Menurut  Kanazawa  et  al.(1995), suatu  senyawa  yang  mempunyai  polaritas optimum akan mempunyai aktivitas antimikoba  maksimum,  karena  untuk interaksi suatu senyawa antibakteri dengan bakteri diperlukan keseimbangan hidrofilik-lipofilik  (HLB  :  hydrophilic lipophilic  balance).  Berdasarkan  hasil penelitian  dapat  dilihat  pada  Tabel  1  dan Tabel  2 diatas, bahwa  ekstrak etanol daun ekor  kucing  ( Acalypha  hispida Burm.  F.) memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  paling besar  dibandingkan  dengan  ekstrak  yang lainnya,  yaitu  sebesar  (19.33  mm)  pada bakteri Staphylococcus  aureus dan  (18.50 mm) pada  bakteri Escherichia coli . Etanol merupakan pelarut universal yang baik untuk ekstraksi semua golongan senyawa  metabolit  sekunder.  Menurut Nuraini  (2007),  komponen  yang  banyak terdapat  pada  tumbuh-tumbuhan  dan bersifat  polar  antara  lain  senyawa  dari golongan  fenolik.  Mekanisme  komponen antibakteri fenolik umumnya akan berinteraksi dengan protein  yang ada pada
dinding  sel  atau  sitoplasma  melalui  ikatan hidrogen dan interaksi hidrofobik. Mekanisme lain kemungkinan ialah dengan  mengganggu  aktivitas  enzim dalam  sel.  Untuk  mengetahui  efektivitas ekstak  etanol  daun  ekor  kucing  maka, dilakukan  pengujian  lanjutan  dengan beberapa  variasi  konsentrasi  pada  bakteri uji.  Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  ekstrak  etanol  daun  ekor  kucing ( Acalypha  hispida Burm.  F.)  terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dapat dilihat pada Tabel 4 dan Tabel 5.
Tabel  4.Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  ekstrak  etanol  daun  ekor  kucing ( Acalypha  hispida Burm.  F.)  terhadap bakteri Staphylococcus aureus .
Tabel  5.Hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  ekstrak  etanol  daun  ekor  kucing ( Acalypha  hispida Burm.  F.)  terhadap bakteri Escherichia coli .
Menurut  Davis  dan  Stout  (1991), ketentuan  daya  antibiotik-antibakteri  yaitu daerah  hambatan  20mm  atau  lebih termasuk  kategori  sangat  kuat,  daerah hambatan 10-20 mm kategori kuat, daerah hambatan  5-10  mm  kategori  sedang,  dan daerah  hambatan  5  mm  atau  lebih termasuk  kategori  lemah.  Hasil  yang diperoleh  pada  uji  aktivitas  antibakteri menunjukkan bahwa diameter zona hambat paling besar terdapat pada pembanding  atau  kontrol  positif,  pada bakteri Staphylococcus  aureus (26.83 mm),  dan Escherichia  coli (23.50  mm) termasuk dalam kategori yang sangat kuat. Sedangkan  untuk  perlakuan  beberapa
variasi konsentrasi ekstrak etanol, diameter zona  hambat  pada  bakteri  Staphylococcus aureus,  untuk  konsentrasi  ekstak  10% (10.16 mm), 20% (11.33 mm), 40% (12.83 mm),  dan  80%  (18.16  mm)  termasuk dalam  kategori  yang  kuat.  Sedangkan diameter  zona  hambat  pada  bakteri Escherichia  coli,  untuk  konsentrasi  ekstak 10%  (9.30  mm)  termasuk  dalam  kategori sedang,  dan  konsentrasi  ekstrak  20% (10.83  mm),  40%  (12.16  mm),  dan  80%
(17.50 mm) termasuk dalam kategori kuat. Dari  hasil  pengujian  ekstrak  etanol  daun ekor  kucing  pada  bakteri  uji,  baik  bakteri
Staphylococcus aureus dan bakteri Escherichia  coli menunjukkan  bahwa konsentrasi  80%  memberikan  efektivitas penghambatan  terbesar.  Hal  ini  terlihat dari  semakin  besar  diameter  zona  hambat yang dihasilkan.
Senyawa  yang  diduga  bersifat sebagai  antibakteri  dalam  ekstrak  daun ekor  kucing  ialah  tanin,  saponin,  minyak atsiri,  flavonoid,  dan  acalyphin.  Menurut Masduki  (1996)  tanin  mempunyai  daya antibakteri  dengan  cara  mempresipitasi protein,  sehingga  sintesis  protein  bakteri akan  terganggu  karena  diduga  tanin mempunyai  efek  yang  sama  dengan senyawa fenolik. Senyawa saponin merupakan metabolit sekunder yang termasuk  golongan  glikosida,  saponin merupakan senyawa aktif permukaan yang bersifat antibakteri dengan cara menurunkan  tegangan  permukaan  yang dapat  mengikat  lipid  sehingga  senyawa antibakteri  dapat  masuk  melalui  membran dan  akan  merusak  membran  sitoplasma dan membunuh sel (Asani, 1991).
Minyak  atsiri  dapat  menghambat pertumbuhan  atau  mematikan  bakteri dengan  mengganggu  proses  terbentuknya membran  atau  dinding  sel,  sehingga membran  atau  dinding  sel  tidak  terbentuk atau  terbentuk  tidak  sempurna  (Ajizah  A, 2004).  Menurut  Masduki  (1996)  dan Winarno (1996) Senyawa flavonoid bersifat  antibakteri  dengan  mekanisme kerjanya ialah merusak membran sel tanpa dapat diperbaiki lagi dan mendegradasikan
protein  sel  bakteri.  Sedangkan  senyawa teraktif  dari  daun  ekor  kucing  ialah acalyphin.  Acalyphin  merupakan  bahan aktif  yang  dapat  ditemukan  pada  tanaman Genus  Acalypha.  Acalyphin  ialah  sejenis sianogenik glikosida dan hydrosianik asid. Acalyphin  mempunyai  rantai  sianida (HCN)  yang  bersifat  racun  sehingga diduga  sianida  masuk  dalam  struktur  sel Staphylococcus  aureus dan  meracuninya sehingga mengganggu proses metabolisme dalam  sel  bahkan  mematikan  sel  (Lenny, 2006).

## Analisis Data
Hasil dari analisa Oneway ANOVA  diameter  zona  hambat  zona bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli (lampiran 8-9),
menunjukkan nilai signifikan 0.00 (sig<0.05)  sehingga  H0  ditolak  H1 diterima,  ini  menunjukkan  bahwa  terdapat perbedaan  yang  signifikan  antar  variasi konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  ekor kucing  terhadap  bakteri  uji.  Dengan  kata lain, pengaruh variasi konsentrasi terhadap diameter  zona  hambat  yang  dihasilkan pada kedua bakteri uji berbeda antara satu dengan yang lainnya.
Hasil  dari  Uji  Turkey  terhadap diameter  zona  hambat  yang  dihasilkan pada  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli (lampiran 8-9)
menunjukkan bahwa kontrol positif berbeda  nyata  dengan  kontrol  negatif  dan beberapa variasi konsentrasi ekstrak etanol daun  ekor  kucing.  Artinya  kontrol  positif memiliki efek penghambatan yang berbeda nyata dengan kontrol negatif dan beberapa variasi  konsentrasi.  Hal  ini  menunjukkan efek  penghambatan  terhadap  bakteri  uji pada  kontrol  positif  berbeda  dengan kontrol  negatif  dan  beberapa  variasi konsentrasi.
Hasil  dari  Uji  Turkey  terhadap diameter  zona  hambat  yang  dihasilkan pada bakteri Staphylococcus aureus (lampiran 8) menunjukkan bahwa konsentrasi  10%  tidak  berbeda  nyata dengan konsentrasi 20%. Artinya
konsentrasi  10%  dan  20%  ekstrak  daun ekor  kucing  memiliki  efek  penghambatan yang sama terhadap bakteri Staphylococcus  aureus.  Konsentrasi  40% berbeda  nyata  dengan  konsentrasi  10%, 20%  dan  80%.  Konsentrasi  80%  berbeda nyata  dengan  konsentrasi  10%,  20%  dan 40%.  Hasil  analisis  menunjukkan  variasi konsentrasi berpengaruh terhadap
penghambatan  pertumbuhan  bakteri  uji, dimana peningkatan konsentrasi menunjukkan  adanya  perbedaan  aktivitas penghambatan terhadap pertumbuhan
bakteri Staphylococcus aureus .
Hasil  dari  Uji  Turkey  terhadap diameter  zona  hambat  yang  dihasilkan pada bakteri Escherichia coli (lampiran 9) menunjukkan  bahwa  konsentrasi  10% tidak  berbeda  nyata  dengan  konsentrasi 20%.  Artinya  konsentrasi  10%  dan  20% ekstrak  etanol  daun  ekor  kucing  memiliki efek  penghambatan  yang  sama  terhadap bakteri Escherichia  coli .  Konsentrasi  20% sama  dengan  konsentrasi  10%  dan  40% tetapi  berbeda  nyata  dengan  konsentrasi 80%.  Konsentrasi  80%  berbeda  nyata dengan  konsentrasi  10%,  20%  dan  40%. Hasil analisis menunjukkan variasi konsentrasi berpengaruh terhadap penghambatan  pertumbuhan  bakteri  uji, dimana peningkatan konsentrasi menunjukkan  adanya  perbedaan  aktivitas penghambatan  terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichia coli .

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan,  maka  dapat  disimpulkan bahwa :
1. Ekstrak heksana,  etil  asetat  dan etanol  daun  ekor  kucing  memiliki aktivitas  sebagai  antibakteri,  dimana ekstrak  etanol memiliki  aktivitas antibakteri yang paling besar dibandingkan  dengan  ekstrak  yang lainnya, yaitu  sebesar  (19.33  mm) pada  bakteri Staphylococcus  aureus dan  (18.50  mm)  pada  bakteri Escherichia coli.
2. Konsentrasi 80% menunjukkan konsentrasi yang paling efektif untuk menghambat  bakteri  uji.  Hal  ini terlihat  dari  semakin  besar  diameter zona hambat yang dihasilkan.

## Saran
1. Perlu  dilakukan  penelitian  pengaruh ekstrak  daun  ekor  kucing  ( Acalypha hispida Burm.  F.)  terhadap  bakteri lain.
2. Perlu  dilakukan  pengujian  uji  lanjut terhadap kandungan kimia daun ekor kucing  ( Acalypha  hispida Burm.  F.) yang bersifat antibakteri.

## DAFTAR PUSTAKA
Adawiyah,
D. R. 1998. Kajian Pengembangan  Metode  Ekstraksi Komponen Antimikroba Buah Atung ( Parinarium gaberium Hassk.). Tesis. FATETA-IPB. Bogor.
Ajizah, Aulia. 2004. Sensivitas Salmonella
typhimurium terhadap Ekstrak Daun Psidium  guajava L. Journal Bioscientiae . 1(1): 31-38.
Davis,  W.W  and  Stout,  T.R.  1971. Disc Plate  Methods  of  Microbiological Antibiotic  Assay .  Microbiology.
22(4) : 659-665
Kanazawa, A., ikeda T. dan Endo T.1995. A novel approach to made of action of  cationic  biocides  morphological effect  on  antibacterial  activity.
New York.
Khopkar, SM. 2003. Konsep Dasar Kimia Analitik .
Saptorahardjo,
penerjemah.  Jakarta:  UI  Press. Terjemahan  dari: Basic  Concept  of Analytical Chemistry
Kochhar,  S.  P.  dan  Rossel,  S.  B.  1990.
Detection, Estimation, and
Evaluation  of  Antioxidant  in  Food
System. Food Antioxidant. Elsevier Sci Publ Ltd. London, New York
Lay,  B.  W.  1994. Analisis  Mikrobia  di Laboratorium .  PT  Raja  Grafindo Persada, Jakarta.
Lenny,  S.  2006. Senyawa  Flavonoid,
Fenilpropanoid dan Alkaloid . USU, Medan Masduki,  I.  1996.  Efek  Antibakteri Ekstrak Biji Pinang ( Areca catechu )  terhadap Staphylococcus Aureus dan Escherichia  Coli. Cermin  Dunia  Kedokteran 109  :
21-24. Mpila,  A  Deby.  2012.  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Mayana (Coleusatro Purpureus Benth) terhadap Escherichia  Coli,  Staphylococcus Aureus dan Pseudomonas Aeruginosa Secara In-vitro [skripsi]. Farmasi Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam, UNSRAT, Manado. Naufalin, R. 2005. Kajian Sifat Antimikroba Ekstrak Bunga Kecombrang  ( Nicolaia  speciosa Horan) Terhadap Berbagai
Mikroba  Patogen  dan  Perusak Pangan.  Sekolah  pasca  Sarjana, IPB. Bogor.
Nuraini,  D  Annisa.  2007.  Ekstraksi komponen  Ekstraksi  Komponen Antibakteri  dan  Antioksidan  dari BijiTeratai( Nymphaea  pubescens ). [skripsi].  Jurusan  Pertanian,  IPB, Bogor.
Rima.  2009.  Perbandingan  Pengaruh Ekstrak  Kasar  Daun  Ekor  Kucing ( Acalypha  hispida Burm.  F.)  dan Daun Anting-anting ( Acalypha indica linn. ) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus  aureus Secara  In
Vitro . [skripsi]. Jurusan  Biologi,
FMIPA, Universitas Negeri Surakarta, Surakarta. Swamy and Jayaveera. 2007. Antimicrobial Properties of
Momordica  cymbalaria  Hook.  F, Pharmacologyonline 3: 505-510.
Yenny, H. E. 2005. Resistensi dari Bakteri Enterik:  Aspek  Global  Terhadap Antimikroba, Universa  Medicina ,
Vol. 26. No. 1 Januari–Marer 2007; 26:46–56.