Accredited by Ministry of Research, Technology                           DOI: https://doi.org/10.35799/jis.20.2.2020.28397 and Higher Education No: 28/E/KPT/2019                    Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/index.php/jis
Variations in Leaf Chlorophyll Concentration in Croton Plants ( Codiaeum variegatum L.) Cultivar Gelatik at a Different Leaf Age
Jieni Trivalen Djangaopa 1) , Susan M. Mambu 1) , Song Ai Nio 1*)
1) Program Studi Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi Manado
* Corresponding author: niosongai@unsrat.ac.id
(Article History:  Received 13-05-2020; Accepted 15-06-2020; Published 28-06-2020

## ABSTRACT
The  leaf  color  of  croton  plants  ( Codiaeum  variegatum L.)  cv. Gelatik  varies  from  green,  yellow until red. This study aimed to evaluate the variations of  leaf chlorophyll  concentration in croton plants  cv.  Gelatik  at  a  different  leaf  age.  The  branches  of  the  stem  with  9-10  leaves  were  three times  sampled  from  croton  trees  grown  in  Kalasey  Dua  Village,  Mandolang  District,  Minahasa Regency.  All  leaves  of  each  branch  were  picked  sequentially,  from  the  oldest  leaf  in  the  lowest position  to  the  youngest  leaf  in  the  terminal  of  the  branch.  Leaf  colors  were  determined  using  a color grab program downloaded from the Google Play Store. Each leaf was extracted using 95% ethanol  and  the  chlorophyll  concentration  was  measured  using  the  Nano  Usage spectrophotometer-3000 at the wavelengths of 649 and 665 nm. The results of this study indicated that  total  chlorophyll  concentration  in  croton  leaves  was  3.01-33.14  mg/L,  chlorophyll  a concentration  was  0.03-3.90  mg/L,  and  chlorophyll  b  concentration  was  18.77-31  25  mg/L.  The chlorophyll concentrations in the old leaf with brown-red color was higher than other leaves with different color.
Keywords: croton leaf; chlorophyll concentration; leaf age
Konsentrasi Klorofil Daun pada Tanaman Puring  ( Codiaeum variegatum L.) Varietas Gelatik dengan Umur Daun yang Berbeda

## ABSTRAK
Tanaman  puring  ( Codiaeum  variegatum L.)  varietas  gelatik  menunjukkan  variasi  warna  daun, yaitu  hijau,  kuning,  dan  merah.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengevalusi  ada  tidaknya  variasi konsentrasi klorofil daun pada tanaman puring  varietas gelatik dengan umur daun yang berbeda. Pengambilan sampel dilakukan sebanyak  tiga kali, yaitu cabang  tanaman  puring varietas gelatik dengan 9-10 daun yang diambil dari pohon puring di Desa Kalasey Dua, Kecamatan Mandolang, Kabupaten  Minahasa.  Semua  daun  puring  pada  cabang  pohon  tersebut  dipetik  secara  berurutan, dari  daun  tertua  yang  berada  di  posisi  bawah  sampai  daun  termuda  di  terminal  cabang  pohon tersebut.  Warna  daun  ditentukan  dengan  menggunakan  program color  grab yang  di- download dari Google  Play  Store .  Setelah  daun  diekstrak  dengan  alkohol  95%,  konsentrasi  klorofil  diukur dengan  menggunakan  spektrofotometer-3000  nano  Usage  pada  panjang  gelombang  649 dan  665 nm. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa konsentrasi klorofil total pada daun puring bervariasi antara  3,01-33,14  mg/L,  konsentrasi  klorofil  a  bervariasi  antara  0,03-3,90  mg/L  dan  konsentrasi klorofil b bervariasi antara 18,77-31,25 mg/L. Konsentrasi klorofil pada daun tua yang berwarna coklat-merah cenderung lebih tinggi dibandingkan dengan pada daun dengan warna lain.
Kata kunci: Daun puring; konsentrasi klorofil; umur daun
PENDAHULUAN Tanaman puring ( Codiaeum
variegatum L.)  yang  juga  dikenal  dengan nama croton merupakan  tanaman  yang  dapat
digunakan  sebagai  tanaman  penghias  pagar dan  pekarangan  rumah.  Tanaman  ini  banyak ditemukan  di  daerah  beriklim  tropis  dan subtropis.  Beberapa  varietas  tanaman  puring telah dikembangkan dengan warna daun yang
bervariasi  mulai  dari  hijau,  kuning,  merah, ungu,  dan  campuran  berbagai  warna  tersebut (Gogahu et  al .,  2016;  Nio et  al .,  2018). Tanaman ini banyak diminati oleh masyarakat,  karena  tanaman  puring  memiliki warna  daun  yang  menyolok  dan  bercorak. Variasi warna daun disertai dengan rimbunnya  daun  yang  tumbuh  sehingga memberikan  kesan  asri  yang  menyejukkan dan  tanaman  ini  mudah  untuk  dirawat  dan dapat  dibudidayakan  (Muzayyinah,  2003; Upadani et al ., 2013; Nio et al ., 2018).
Tanaman  yang  termasuk  anggota  suku Euphorbiaceae ini merupakan  tumbuhan bergetah,  tergolong  perdu  dengan  tinggi antara  1-3  m,  batang  bercabang  banyak, bulat,  berkayu,  berkulit  tipis,  dan  kehijauan pada  waktu  muda  lalu  berwarna  coklat setelah  tua.  Bentuk  daun  tanaman  ini  juga bervariasi,  ada  yang  panjang,  lonjong,  dan bergelombang. Daun puring merupakan daun tunggal  berseling,  tangkai  daun  membulat, panjang 1-4 cm. Bentuk daun puring beragam yaitu  lanset,  bulat  telur,  dan  memanjang dengan  permukaan  mengkilap  dan  licin  serta berukuran lebar  2-10 cm  dan panjang  5-38 cm (Webster, 1992).
Pigmen  pada  tanaman  dapat  berupa klorofil,  karotenoid,  dan  antosianin  (Kumari et al., 2012).  Klorofil  adalah  pigmen  yang berwarna hijau yang terdapat dalam kloroplas pada  jaringan  daun.  Klorofil  berperan  untuk mengabsorpsi, menangkap cahaya dan mengubah  energi  cahaya  menjadi  energi kimia yang akan dimanfaatkan oleh tumbuhan.  Pada  dasarnya  ada  dua  kelompok utama klorofil, yaitu klorofil a dan b. Klorofil a  berwarna  hijau,  sedangkan  klorofil  b berwarna  hijau  kebiruan  (Aryulina et  al ., 2006).  Kandungan  klorofil  daun  pada  suatu tanaman  bervariasi  dan  hal  ini  dipengaruhi oleh  umur  daun,  posisi  daun  pada  suatu tanaman  dan  varietas  tanaman  (Sukendro  &
Sugiarto, 2012; Mustafa et al ., 2015).
Tanaman  puring  ( C.  variegatum L.) varietas  gelatik  menunjukkan  variasi  warna daun, yaitu hijau, kuning, dan merah. Bentuk daun  puring  bervariasi  dari  memanjang  , oval, dan tepi bergelombang (Webster, 1992). Perbedaan  warna  daun  ini  dapat  disebabkan oleh  perbedaan  kandungan  pigmen  daun, termasuk  pigmen  klorofil.  Gogahu et  al .,
(2016)  mengukur  konsentrasi  klorofil  daun yang  tertua  dan  termuda  pada  beberapa tanaman  puring  hasil  perbanyakan  stek  yang
masih  berumur  3  bulan.  Kajian  variasi konsentrasi  klorofil  pada  semua  daun  yang tumbuh  pada  suatu  cabang  tanaman  puring ini  dengan  umur  yang  berbeda  belum dilakukan.    Oleh  sebab  itu,  dilakukan penelitian yang bertujuan untuk
mengevaluasi ada tidaknya variasi konsentrasi  klorofil  daun  tanaman  puring varietas  gelatik  dengan  umur  daun  yang berbeda.  Informasi  yang  akan  diperoleh  dari penelitian  ini  diharapkan  dapat  dipakai sebagai  data  pembanding  untuk  penelitian yang berhubungan dengan konsentrasi klorofil  dan  juga  pigmen  lainnya  pada  suatu tumbuhan.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang    digunakan  dalam penelitian  adalah  botol  kaca  coklat  100  mL, gelas  ukur,  mortar  dan  pestel,  alat  tulis- menulis,  timbangan  analitik,  corong,  kertas label, gunting, kamera digital, termohigrometer, program color grab , spektrofotometer-3000  nano  Usage, coolbox , dan kantong plastik.
Bahan-bahan penelitian yang
digunakan  adalah  daun  tanaman  puring  ( C. variegatum L.) varietas gelatik,  alkohol 95%, kertas saring, dan tissue .

## Prosedur Penelitian Pengambilan Sampel Daun
Sampel  daun  diambil  dari  pohon  puring dengan tahapan kerja sebagai berikut:
1. Cabang  batang  tanaman  puring  varietas gelatik  yang  mempunyai  beberapa  daun (Gambar  1)  diambil  dari  pohon  puring yang  tumbuh  di  Desa  Kalasey  Dua,
Kecamatan
Mandolang,
Kabupaten Minahasa.
Gambar 1. Sampel cabang pohon dengan beberapa daun.
2. Semua  daun  puring  pada  cabang  pohon tersebut  dipetik  secara  berurutan,  dari daun  yang  berada  di  posisi  bawah  (daun ke-1  atau  tertua)  sampai  daun  terakhir  di terminal  cabang  pohon  tersebut  (daun termuda).
3. Setiap  daun  pada  cabang  pohon  tersebut diberi label dan diletakkan dalam kantung plastik,  kemudian  semua  sampel  daun tersebut dimasukkan ke dalam coolbox.
4. Selanjutnya  sampel  tersebut  dibawa  ke laboratorium  untuk  ditentukan  warnanya dan konsentrasi klorofilnya.
5. Temperatur  dan  kelembaban  udara  di lokasi  diukur  pada  saat  pengambilan sampel dengan menggunakan termohigrometer.
6. Warna daun ditentukan dengan menggunakan  program color  grab di- download dari Google Play Store .
Penentuan  Konsentrasi  Klorofil  Daun Puring ( C. variegatum L. )
Tahapan-tahapan kerja dalam penentuan konsentrasi  klorofil  daun  puring  adalah sebagai berikut:
1.   Daun puring pada setiap posisi daun yang berbeda  diambil  masing-masing  sebanyak 0,5  g, pada  bagian  helaian  daun  ( lamina ). seperti terlihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Bagian helaian daun yang diambil (*) untuk ekstraksi dan pengukuran klorofil.
2. Selanjutnya helaian daun dipotong-potong, dimasukkan ke dalam mortar dan dihaluskan  dengan  pestel,  kemudian diekstraksi  dengan  50  mL  alkohol  95% sampai semua klorofil terlarut.
3.  Ekstrak  klorofil  disaring  dan  filtrat ditampung  dalam  botol  gelap  berukuran 100 mL.
4.  Konsentrasi  klorofil  diukur  dengan menggunakan spektrofotometer-3000
nano  Usage  pada  panjang  gelombang  649 dan  665  nm.  Konsentrasi  klorofil  total, klorofil  a,  dan  klorofil  b  dapat  dihitung
dengan rumus dari Sasmitamihardja (1990) sebagai berikut: Klorofil total (mg/L) = + Klorofil a (mg/L)       = - Klorofil b (mg/L)       = -
Keterangan: OD  (optical density = nilai absorbansi)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Evaluasi warna daun dan konsentrasi klorofil  daun  pada  tanaman  puring    ( C. variegatum L.)  varietas gelatik dengan umur daun yang berbeda dilakukan dengan tiga kali pengambilan  sampel  cabang  dari  satu  pohon yang  sama.  Sampel  cabang  pohon  yang pertama dan ke dua masing-masing mempunyai  9  helai  daun,  sedangkan  sampel cabang  pohon  yang  ke  tiga  mempunyai  10 helai  daun.  Untuk  memudahkan  penyebutan umur  daun  dalam  pembahasan  selanjutnya digunakan  acuan  penamaan  daun  berumur muda,  sedang,  dan  tua.  Daun  pertama  adalah daun  yang  terletak  pada  pangkal  cabang  dan ditetapkan  sebagai  daun  tertua,  sedangkan daun  terakhir  (urutan  ke  sembilan  dan  ke sepuluh)  adalah  daun  yang  terletak  pada ujung  cabang  yang  dikategorikan  sebagai daun  termuda  dilihat  pada  Tabel  1  dan Gambar 3.
(*) *
Tabel 1. Nomor dan kategori umur daun pada cabang pohon puring
Cabang sampel 1 dan 2 Cabang sampel 3 Daun ke-1 sampai 3: tua Daun ke-1 sampai 3: tua Daun ke-4 sampai 6: sedang Daun ke-4 sampai 6: sedang Daun ke-7 sampai 9: muda Daun ke-7 sampai 10: muda
Gambar 3. Cabang puring dan penomoran daun puring.
Cabang  sampel  yang  pertama  mempunyai  9 helai  daun  dengan  sebaran  warna  jingga, kuning,  dan  hijau.  Sebaran  warna  dan konsentrasi  klorofil  daun  disajikan  Tabel  2. Secara  umum  konsentrasi  klorofil  b  pada kesembilan  daun  puring  ini  lebih  besar daripada  konsentrasi  klorofil  a.  Konsentrasi klorofil  total  berkisar  antara  3,78  mg/L  pada daun ke-9 (berwarna kuning) dan 23,04 mg/L pada  daun  ke-5  (berwarna  hijau  tua). Konsentrasi klorofil a berkisar dari 0,33 mg/L pada  daun  ke-8  (berwarna  kuning-hijau) sampai  dengan  3,90  mg/L  pada  daun  ke-3 (berwarna  kuning).  Kisaran  konsentrasi
klorofil  b  adalah  2,79  mg/L  pada  daun  ke-9 (berwarna  kuning)  sampai  dengan  22,52 mg/L  pada  daun  ke-5  (berwarna  hijau  tua). Konsentrasi  klorofil  total,  klorofil  a,  dan klorofil  b  yang  rendah  diamati  pada  daun dengan kategori umur muda, yakni daun ke-8 (berwarna  kuning-hijau)  dan  ke-9  (berwarna kuning).  Konsentrasi  klorofil  total  dan klorofil  b  yang  tinggi  diamati  pada  daun dengan kategori umur sedang, yaitu daun ke- 5 (berwarna hijau gelap). Konsentrasi klorofil a  yang  tinggi  diamati  pada  daun  dengan kategori umur tua, yaitu daun ke-3 (berwarna kuning).
Daun pertama Daun termuda Daun ke dua
Tabel 2. Warna daun dan konsentrasi klorofil daun tanaman puring dengan umur daun yang berbeda pada cabang sampel pertama.
Daun Ke- Foto Daun Warna Daun [Klorofil total] (mg/L) [Klorofil a] (mg/L) [Klorofil b] (mg/L) 1 Orange:Yellow (Jingga-Kuning) 12,99 0,80 12,21 2 Orange:Yellow (Jingga-Kuning) 9,41 1,93 7,50 3 Yellow (Kuning) 18,12 3,90 14,25 4 Dark Green:Yellow (Hijau tua- Kuning) 11,47 0,58 10,92 5 Dark Green (Hijau tua) 23,04 0,57 22,52 6 Yellow:Orange (Kuning-Jingga) 5,42 1,03 4,40 7 Dark Yellow:Green (Kuning tua- Hijau) 16,94 1,41 15,56 8 Yellow:Green (Kuning-Hijau) 5,04 0,33 4,72 9 Yellow (Kuning) 3,78 1,00 2,79 Cabang sampel yang ke dua mempunyai  9  helai  daun  dengan  sebaran warna  jingga,  kuning,  dan  hijau.  Sebaran warna dan konsentrasi klorofil daun disajikan pada  Tabel  3.  Secara  umum  konsentrasi klorofil  b  pada  kesembilan  daun  puring  ini lebih  besar  daripada  konsentrasi  klorofil  a. Konsentrasi klorofil total berkisar antara 3,01 mg/L  pada  daun  ke-9  (berwarna  hijau- kuning)  dan  19,30  mg/L  pada  daun  ke-3 (berwarna  kuning  tua-jingga).  Konsentrasi
klorofil  a  berkisar  dari  0,12  mg/L  pada  daun ke-9  (berwarna  hijau-kuning)  sampai  dengan 1,39 mg/L pada daun ke-6 (berwarna kuning- hijau).  Kisaran  konsentrasi  klorofil  b  adalah 2,76  mg/L  pada daun  ke-8  (berwarna  jingga- kuning)  sampai  dengan  18,77  mg/L  pada daun  ke-3  (berwarna  kuning  tua-jingga). Konsentrasi  klorofil  total,  klorofil  a,  dan klorofil  b  yang  rendah  diamati  pada  daun dengan kategori umur muda, yakni daun ke-8 (berwarna jingga-kuning) dan ke-9 (berwarna
hijau-kuning).  Konsentrasi  klorofil  total  dan klorofil  b  yang  tinggi  diamati  pada  daun dengan  kategori  umur  tua,  yaitu  daun  ke-3 (berwarna  kuning  tua-jingga).  Konsentrasi
klorofil  a  yang  tinggi  diamati  pada  daun dengan  kategori  umur  tua,  yaitu  daun  ke-6 (berwarna kuning-hijau).
Tabel 3. Warna daun dan konsentrasi klorofil daun tanaman puring dengan umur daun yang berbeda pada cabang sampel kedua.
Daun Ke- Foto Daun Warna Daun [Klorofil total] (mg/L) [Klorofil a] (mg/L) [Klorofil b] (mg/L) 1 Yellow:Green (Kuning:Hijau) 12,68 0,60 12,1 2 Yellow:Orange (Kuning:Jingga) 12,58 0,29 12,32 3 Dark Yellow:Orange (Kuning tua:Jingga) 19,30 0,56 18,77 4 Orange:Yellow (Jingga-Kuning) 14,12 0,69 13,45 5 Yellow:Green (Kuning:Hijau) 9,49 0,19 9,32 6 Yellow:Green (Kuning:Hijau) 14,45 1,39 13,09 7 Dark Green:Yellow (Hijau tua-Kuning) 10,98 0,49 10,51 8 Orange:Yellow (Jingga:Kuning) 3,20 0,44 2,76 9 Green:Yellow (Hijau-kuning) 3,01 0,12 2,89
Tabel  4.  Warna  daun  dan  konsentrasi  klorofil  daun  tanaman  puring  dengan  umur  daun  yang berbeda pada cabang sampel kedua
Daun Ke- Foto Daun Warna Daun [Klorofil total] (mg/L) [Klorofil a] (mg/L) [Klorofil b] (mg/L) 1 Brown:Red (Coklat:Merah) 33,14 1,97 31,23 2 Brown:Red (Coklat:Merah) 24,18 0,64 23,58 3 Orange:Yellow (Jingga:Kuning) 17,33 1,22 16,14 4 Brown:Orange (Coklat:Jingga) 4,96 0,25 4,72 5 Orange:Yellow (Jingga:Kuning) 10,02 1,92 8,11 6 Dark Green:Yellow (Hijau tua:Kuning) 21,30 0,76 20,58 7 Orange: Yellow (Jingga:Kuning) 24,71 3,25 21,50 8 Green:Yellow (Hijau:Kuning) 14,26 0,51 13,78 9 Dark Green:Yellow (Hijau tua:Kuning) 12,84 1,11 11,75 10 Dark Yellow:Orange (Kuning tua:Jingga) 4,03 0,03 4,01 Cabang sampel yang ke tiga mempunyai  10  helai  daun  dengan  sebaran warna  coklat,  merah,  jingga,  kuning,  dan hijau. Sebaran warna dan konsentrasi klorofil daun  disajikan  pada  Tabel  4.  Secara  umum konsentrasi  klorofil  b  pada  kesepuluh  daun puring  ini  lebih  besar  daripada  konsentrasi klorofil  a.  Konsentrasi  klorofil  total  berkisar
dari  4,03  mg/L  pada  daun  ke-10  (berwarna kuning  tua-jingga)  sampai  dengan    33,14 mg/L  pada  daun  pertama  (berwarna  coklat- merah). Konsentrasi klorofil a berkisar antara 0,03 mg/L pada daun ke-10 (berwarna kuning tua-jingga)  sampai  dengan  3,25  mg/L  pada daun  ke-7  (berwarna  jingga-kuning).  Kisaran konsentrasi klorofil b adalah 4,01 mg/L pada
daun ke-10 (berwarna kuning tua-jingga) dan 31,23  mg/L  pada  daun  pertama  (berwarna coklat-merah).  Konsentrasi  klorofil  total, klorofil a, dan klorofil b yang rendah diamati pada  daun  yang  termuda,  yakni  daun  ke-10 (berwarna  kuning  tua-jingga).  Konsentrasi klorofil  total  dan  klorofil  b  yang  tinggi diamati pada daun dengan kategori umur tua, yaitu  daun  pertama  (berwarna  coklat-merah). Konsentrasi  klorofil  a  yang  tinggi  diamati pada daun dengan kategori umur muda, yaitu daun ke-7 (berwarna jingga-kuning).
Temperatur  dan  kelembaban  udara diukur pada saat pengambilan sampel cabang pertama, ke dua, dan ke tiga. Sampel tersebut diambil  dari  pohon  puring  yang  sama  tetapi dengan  waktu  pengambilan  yang  berbeda. Temperatur  rata-rata  adalah  28,6  °C  dan kelembaban  70%  pada  pengambilan  sampel cabang  ke-1.  Temperatur  rata-rata  adalah 30,8  °C  dan  kelembaban  70%  pada pengambilan sampel cabang ke-2. Temperatur rata-rata 29,5 °C dan kelembaban 71% pada pengambilan sampel cabang ke-3.
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  konsentrasi  klorofil  total,  klorofil  a, dan klorofil b yang rendah diamati pada daun dengan  kategori  umur  muda.  Konsentrasi klorofil pada daun tertua pada cabang sampel yang  ke  tiga  dan  berwarna  coklat  merah cenderung  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan pada  daun  yang  berwarna  lain.  Hasil penelitian  sejalan  dengan  yang  dilaporkan oleh  Pratama  &  Laily  (2015),  yaitu  umur daun pada tanaman mempengaruhi konsentrasi klorofil daun.
Variasi pigmen daun dapat dipengaruhi  oleh  faktor  internal  dan  kondisi lingkungan di sekitarnya. Konsentrasi klorofil dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  antara  lain gen,  cahaya, air, unsur hara  (N, Mg, Fe, Mn, Cu,  Zn,  S  dan  O),  umur  daun  dan  tahapan fisiologi  suatu  tanaman  (Dwidjoeseputro, 1994).  Kandungan  pigmen  daun  bervariasi tergantung  pada  spesies  (Sumanta et  al. ,
2014). Konsentrasi klorofil daun puring akan meningkat  dengan  bertambahnya  umur  daun tersebut. Hal  ini berarti bahwa  daun tanaman puring  bervariasi  dalam  hal  warna  daun, sehingga  memiliki  konsentrasi  klorofil  yang berbeda-beda.  Daun  yang  tergolong  muda, yakni di bagian terminal memiliki konsentrasi klorofil  rendah  jika  dibandingkan  dengan daun  yang  lebih  tua dengan posisi di sebelah bawah  daun  yang  muda.  Hal  ini  disebabkan
karena  klorofil  pada  daun  yang  muda  masih berupa  protoklorofil.  Daun  akan  berubah menjadi  berwarna  hijau  setelah  transformasi protoklorofil.  Umumnya  semakin  tua  umur daun  maka  konsentrasi  klorofilnya  akan semakin  tinggi  pula  (Dwidjoseputo,  1980). Setiari  &  Nurchayati  (2009) menyatakan bahwa  umur  daun  dan  tahapan  fisiologis suatu  tanaman  merupakan  faktor  yang  dapat menentukan  kandungan  klorofil.  Cahaya matahari  yang  diterima  oleh  suatu  tanaman puring  juga  mempengaruhi  warna  daun puring yang bervariasi, sehingga pembentukan  klorofil  juga  dipengaruhi  oleh sinar  matahari.  Pigmen  karotenoid  berperan sebagai  pigmen  tambahan  yang  dapat membantu  klorofil  dalam  menyerap  energi cahaya.
Sumenda et  al .  (2011)  melaporkan konsentrasi klorofil pada tingkat perkembangan  daun  mangga  yang  berbeda. Hasil  penelitiannya  menunjukkan  bahwa daun  hijau  tua  memiliki  konsentrasi  klorofil total yang lebih tinggi (47,44 mg/L) daripada daun  hijau  muda  (27,55  mg/L).  Di  samping itu  dalam  perkembangan  daun  menjadi  lebih tua  terjadi  sintesis  klorofil  b  dan  klorofil  a yang lebih banyak dibandingkan dengan daun yang  lebih  muda.  Oleh  sebab  itu  konsentrasi klorofil total pada daun  yang tua lebih tinggi daripada  konsentrasi  klorofil  total  pada  daun yang  muda.  Putri et  al .  (2013)  juga melaporkan bahwa peningkatan kadar klorofil  total  pada  semua  jenis  tanaman terjadi  seiring  dengan  meningkatnya  umur daun.  Hal  tersebut  diamati  pada  tumbuhan daun  pucuk  merah  ( Syzygium  oleana )  yang menunjukkan  bahwa  semakin  tua  daunnya, warna  daunnya  cenderung  berwarna  hijau tua.  Songke et  al. (2019)  juga  melaporkan bahwa kandungan klorofil total pada tanaman puring  berbeda  akibat  faktor  umur  (daun  tua dan  daun  muda).  Kandungan  klorofil  daun tua (28,78 ± 0,46 mg/L) adalah 27,79% lebih tinggi  daripada  daun  muda  (21,37  ±  0,94 mg/L).  Hal  ini  menunjukkan  konsentrasi klorofil  pada  daun  yang  tua  lebih  besar daripada  daun  yang  muda  seperti  yang dilaporkan  dalam  penelitian  ini.  Daun  tertua (daun  pertama)  pada  sampel  cabang  ke  tiga yang  berwarna  coklat  merah  lebih  tinggi daripada daun yang lebih muda dengan warna daun yang bervariasi (Tabel 4).
Selanjutnya  perbedaan  variasi  warna daun  puring  juga  berkaitan  dengan  asimilasi
antosianin,  pigmentasi  dengan  flavonoid  lain dan  pembentukan  kompleks  dengan  non logam  (Papafotiou et  al., 2007).  Gogahu et al., (2016)  melaporkan  bahwa  daun  puring
yang berwarna kuning juga masih mengandung  sejumlah  klorofil.  Hal  ini disebabkan  karena  klorofil  daun  berperan penting  dalam  proses  fotosintesis,  yaitu menyerap  sinar  matahari  yang  merupakan sumber  energi  dalam  proses  fotosintesis. Pada  penelitian  ini  konsentrasi  klorofil  yang tinggi  terukur  pada  daun  yang  berwarna coklat  merah  (diamati  pada  daun  ke-1  dari cabang  sampel  3,  Tabel  4).  Oleh  sebab  itu konsentrasi  karotenoid  dan  antosianin  yang dapat  menyebabkan  daun  puring  tersebut berwarna  merah  atau  kuning  juga  perlu diukur  pada  penelitian  selanjutnya  untuk melengkapi  data  konsentrasi  klorofil  yang telah dilaporkan dalam penelitian ini . Kandungan klorofil pada daun bervariasi  dari  satu  jenis  tanaman  dengan tanaman  yang    lain.  Kandungan  klorofil bahkan  bervariasi  antara  berbagai  varietas tanaman  dalam  satu  spesies.  Kandungan klorofil  pada  tanaman  puring  bervariasi antara  varietas  bor  merah,  puring  cobra,  dan puring lokal. Umur daun juga mempengaruhi adanya  variasi  kandungan  klorofil  pada tanaman (Gogahu et al., 2016).

## KESIMPULAN
Konsentrasi  klorofil  total  pada  daun puring  bervariasi  antara  3,01-33,14  mg/L, konsentrasi  klorofil  a  bervariasi  antara  0,03- 3,90  mg/L  dan  konsentrasi  klorofil  b bervariasi  antara  18,77-31,25  mg/L.  Daun puring  tua  yang  berwarna  coklat-merah mempunyai  konsentrasi  klorofil  yang  lebih tinggi daripada daun lain dengan warna yang bervariasi.

## DAFTAR PUSTAKA
Aryulina,  D.,  C.  Muslim,  S.  Manal,  &  E. Winami.    2006.  Biologi  3.  Erlangga, Jakarta.
Dwidjoseputro,  D.  1980.  Pengantar  Fisiologi Tumbuhan. Gramedia, Jakarta.
Dwidjoseputro, D. 1994. Pigmen Klorofil. Erlangga, Jakarta
Gogahu,  Y.,  S.A.  Nio,  &  P  Siahaan. 2016. Konsentrasi  Klorofil  pada  Beberapa Varietas  Tanaman  Puring  ( Codiaeum variegatum L.). Jurnal  MIPA  UNSRAT Online, 5(2): 76-80.
Kumari,  K.,  S.P.  Kiran,  Y.S.  Vani,  V. Sridevi,  &  M.V.V.  Chandana  Lakshmi. 2012.  Separation  and  Observation  of Plant  Pigments  in  Fertilizers  Affected Medicinal
Plants Using Paper Chromatography. Journal Engineering Science  &  Advanced  Technology, 2(2): 317-326.
Mustafa, N., N. Ya’acob, Z. A. Latif, & A.L. Yusof. 2015. Quantification of Oil Palm Tree  Leaf  Pigment  (Chlorophyll  A) Concentration  Based  on  Their  Age. Jurnal Teknologi, 7(5): 129-134.
Muzayyinah. 2003. Keragaman Puring ( Codiaeum  varigatum L.)  di  Daerah Istimewa Yogyakarta. Jurnal Biodiversitas, 4(1): 43-46.
Nio,  S.A.,  B.J.  Kolondam,  &  T.E.  Tallei. 2018.  Evaluation  of  matK  and  rbcL Genes as Markers in DNA Barcoding of ( Codiaeum  variegatum L.)  Blume.
Journal  Bioscience  Research, 15(1): 192-198.
Papafotiou, M,, B. Avajianneli, & M. Costas. 2007. Coloration, Anthocyanin
Concentration  and  Growth  of  Croton ( Codiaeum varigatum L.) as Affected by Cotton  Gin  Trash  Compost  Use  in  the Potting Medium. Hortscience, 42(1): 83-
87.
Pratama,  A.J.  &  A.N.  Laily.  2015.  Analisis
Konsentrasi Klorofil Gandasuli ( Hedychium  gardnerium Shepard  ex Ker-Gawl) pada Tiga Daerah Perkembangan  Daun  yang  Berbeda. Prosiding  Seminar  Nasional  Konservasi dan  Pemanfaatan  Sumber  Daya  Alam Pendidikan Biologi, Pendidikan Geografi,  Pendidikan  Sains,  PKLHFKIP UNS 2015: 216-219. Putri, W.D.R., E. Zubaidah, & N. Sholahudin.  2013.  Ekstraksi  Pewarna Alami  Daun  Suji,  Kajian  Pengaruh Blanching dan Jenis Bahan Pengekstrak. Jurnal Teknik Pertanian, 4(1): 13-24.
Sasmitamihardja, D. 1990. Penuntun Praktikum  Fisiologi  Tumbuhan.  ITB, Bandung. Setiari, N. & Y. Nurchayati. 2009. Eksplorasi Konsentrasi  Klorofil  pada  Beberapa Sayuran  Hijau  sebagai  Alternatif  Bahan Dasar Suplemen Makanan. Jurnal Bioma, 11(1): 6-10.
Songke, N.G., P. Siahaan, & S.A. Nio. 2019.
Kandungan  Klorofil  Total  Daun  Puring ( Codiaeum variegatum L.) yang Mengalami Cekaman Kekeringan. Jurnal MIPA UNSRAT Online, 8(2): 55-
58.
Sukendro,  A.,  &  E.  Sugiarto.  2012.  Respon Pertumbuhan  Anakan Shorea  leprosula Miq., Shorea  selanica Ridlex, Shorea ovali (Korth)  Blume  dan Shorea  selania (DC)  Blume  terhadap  Tingkat  Intensitas Cahaya  Matahari. Jurnal  Silvikultur Tropikal, 03(1): 22-27. Sumanta,  N.,  C.  I.  Haque,  J.  Nishika,  &  R.
Suprakash.  2014.  Spectrophotometric Analysis of Chlorophylls and Carotenoids  from  Commonly  Grown Fern Species by Using Various
Extracting  Solvents. Journal Chemical Sciences, 4(9): 63-69.
Sumenda,  L.,  H.L.  Rampe,  &  F.R.  Mantiri. 2011.  Analisis  Konsentrasi  Klorofil Daun  Mangga  ( Mangifera  indica L.) pada  Tingkat  Perkembangan  Daun  yang Berbeda. Jurnal Bioslogos, 1(1): 21-24.
Upadani,  W,,  D,P,  Darmawan,  &  I.N. Tenaya.  2013.  Strategi  Pengembangan Agribisnis  Puring  di  Desa  Petiga, Kecamatan  Marga  Kabupaten  Tabanan. Jurnal  Manajemen  Agribisnis, 1(2): 67- 74.
Webster,  G.L.  1992.  Realignments  in
American Croton (Euphorbiaceae). Jurnal Novon, 2(3): 269-273.