## JANHUS Journal of Animal Husbandry Science
Jurnal Ilmu Peternakan Fakultas Pertanian, Universitas Garut ISSN : 2548-7914
PENGARUH KERAGAMAN GEN DGAT1 TERHADAP KADAR KOLESTEROL DAN TRIGELISERIDA DARAH DOMBA PADJADJARAN
(The Effect of DGAT1 Gene Diversity on Padjadjaran Sheep to Cholesterol and Triglyceride Levels)
Dedi Rahmat 1) , Dudi 2) dan Sayu Putu Yuni Paryati 3)
1,2 Fak. Peternakan Unpad
3 Fak. Kedokteran Unjani
E-mail:
1 dedi.rahmat@unpad.ac.id
2 dudi@unpad.ac.id

## Abstrak
Penelitian  dilakukan  untuk  mengetahui  pengaruh  keragaman  gen  DGAT1  pada  domba Padjadjaran terhadap kandungan kolesterol dan trigiserida darah. Ternak domba yang digunakan dalam  penelitian  ini  merupakan  domba  Padjadjaran  umur  1,5  tahun,  yang  telah  diidentifikasi memiliki  genotipe  tertentu  berdasarkan  gen  DGAT1.  Total  sampel  domba  yang  digunakan sebanyak 15 ekor. Sampel yang digunakan terdistribusi dalam tiga genotipe (5 CC, 5 CT dan 5 TT).  Penilaian  komponen  lemak  meliputi:  (1)    Kandungan    kolesterol  total  dan  Kandungan Trigeliserida. Pemeriksaan kolesterol menggunakan metode: CHOD-PAP ( Cholesterol Oxidase- Peroxidase Aminoantipyrine Phenol ). Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar kolesterol total darah  domba  Padjajaran  berada  pada  kisaran  normal  dan  keragaman  gen  DGAT1  tidak berpengaruh nyata  terhadap kadar kolesterol darah. Dari ketiga genotype DGAT, menunjukkan kelompok  CC  memiliki  kadar  kolesterol  total  paling  rendah,  dibandingkan  kelompok  lainnya, sedangkan kadar trigliserida terendah didapatkan pada genotype TT, namun tidak berbeda nyata dibandingkan dengan genotype CC dan CT.
Kata-kata kunci: domba Padjadjaran, gen DGAT1, kolesterol

## Abstract
The study was conducted to determine the effect of DGAT1 gene diversity on Padjadjaran sheep to cholesterol and triglyceride levels. The sheep used in this study is a 1.5-year-old Padjadjaran sheep, which has a specific genotype based on the DGAT1 gene. Total sample of sheep that used as many as 15 tail. The samples used were distributed in three genotypes (5 CC, 5 CT and 5 TT). Assessment  of  fat  content  are  total  cholesterol  and  Trigeliserida.,using  cholesterol  method: CHOD-PAP (Cholesterol Oxidase-Peroxidase Aminoantipyrine Phenol). The results showed that total DGAT1 did not significantly affect to blood cholesterol level. Of the three DGAT genotypes, the CC group had the lowest total cholesterol levels, compared to the other groups, while the
triglyceride levels were low in the TT genotype, but not significantly different from the CC and CT genotypes.
Keywords : Padjadjaran sheep, DGAT1, Choleseterol

## 1 Pendahuluan
Domba lokal mempunyai posisi yang sangat strategis di masyarakat karena mempunyai fungsi  ekonomis,  sosial  dan  budaya  serta  merupakan  sumber  gen  yang  khas  untuk  digunakan dalam  perbaikan  bangsa  domba  di  Indonesia.  Dengan  demikian  domba  lokal  merupakan sumberdaya genetik (plasma nutfah) ternak yang dapat dikembangkan untuk pengembangan dan perbaikan  mutu  genetik  bangsa  domba  secara  nasional  dengan  tetap  menjaga  kemurnian  dan kelestariannya.
Perbaikan  mutu  genetik  domba  lokal  melalui  seleksi  kearah  produktivitas  tinggi  dan domba pedaging berkualitas perlu dikembangkan secara nasional karena kontribusi daging domba terhadap produksi daging nasional hanya 66.500 ton (3,15%) dari total produksi daging dalam negeri  (Direktorat  Jenderal  Peternakan,  2009).  Kemajuan  dalam  bidang  biologi  molekuler memungkinkan  upaya  seleksi  dapat  dilakukan  pada  tingkat  DNA,  yaitu  dengan  cara  mencari keragaman gen yang mengontrol sifat ekonomis komponen karkas dan kualitas daging.
Keempukan  daging  merupakan  suatu  komponen  penting  produksi  daging  karena memberikan  pengaruh  yang  besar  terhadap  kepuasan  konsumen  (Schenkel et  al .,  2006). Keempukan  daging  berkorelasi  dengan  kandungan  lemak  subkutan  dan  lemak  intramuskular (Fiems et al ., 2000). Oleh sebab itu, gen yang berperanan dalam metabolisme asam lemak dapat dijadikan  sebagai  kandidat  gen  untuk  keempukan  daging.  Acyl  CoA:Diacylglycerol  O- acyltransferase  1  (DGAT1)  merupakan  enzim  yang  terdapat  pada  membran  sel  yang mengkatalisasi dua proses penting dalam sintesis trigliserida (triacylglycerols atau TAG) (Farese et al ., 2000).
Kandungan  lemak  pada  domba  disatu  sisi  dibutuhkan  untuk  keempukan,  namun anggapan sebagian besar konsumen sering menganggap bahwa daging domba sebagai penyebab penyakit kolesterol. Dewasa ini kesadaran masyarakat akan kesehatan semakin tinggi, masyarakat mendambakan bahan pangan asal hewani dengan kandungan rendah lemak seperti kolesterol total dan  trigliserida.  Bahan  makanan  yang  mengandung  kolesterol  dan  trigliserida  tinggi  dapat menyebabkan  gejala  pankreatitis,  pembesaran  hati  dan  meningkatkan  konsentrasi very  low density  lipoprotein (VLDL)  yang  kemudian  akan  meningkatkan  resiko  arterisklerosis  yang menyebabkan berbagai penyakit seperti stroke dan jantung koroner bahkan kematian. Oleh karena itu, perlu upaya menjadikan produk ternak yang rendah kolesterol dan trigliserida
Hasil  penelitian  pada  domba  Padjadjaran  berdasarkan  gen  DGAT  1  diperoleh  tiga kelompok  Genotip  yaitu  CC,  CT  dan  TT.  Sampai  sejauhmana  keragaman  genetik  tersebut berpengaruh terhadap kandungan lemak dan kolesterol daging perlu dilakukan penelitian. Hasil studi literatur di negara lain menunjukkan bahwa keragaman pada gen DGAT1 berpengaruh nyata terhadap keempukan daging, susut masak, skor marbling , dan kandungan lemak intra muskular pada  tiga  bangsa  domba  lokal  Cina.  Hasil  penelitian  yang  dilakukan  Xu et  al .  (2009) menunjukkan  bahwa  keragaman  pada  gen  DGAT1  berpengaruh  nyata  terhadap  keempukan daging, susut masak, skor marbling , dan kandungan lemak intra muskular pada tiga bangsa domba lokal Cina,  genotipe TT memiliki skor dan kandungan lemak intramuskular yang lebih tinggi, serta memiliki nilai (keempukan) dan susut masak yang lebih rendah. Mohammadi etal . (2013)
menunjukkan  bahwa  genotipe  CC  pada  domba  Iran  memiliki  bobot  lemak  ekor  dan  lemak punggung yang lebih tinggi.

## 2 Metodologi

## 2.1 Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan  September  2014  di  Breeding  Station  Domba Padjadjaran Fakultas Peternakan UNPAD.

## 2.2 Bahan dan Metoda Penelitian

## Ternak Domba
Ternak domba yang digunakan dalam penelitian ini merupakan domba Padjadjaran umur 1,5 tahun, yang telah diidentifikasi memiliki genotipe tertentu berdasarkan gen DGAT1. Total sampel domba yang digunakan sebanyak 15 ekor. Sampel yang digunakan terdistribusi dalam tiga genotipe (5 CC, 5 CT dan 5 TT).

## Pengambilan darah domba
Sebanyak 5 mL darah domba diambil dari vena jugularis menggunakan spuit, selanjutnya ditampug dalam tabung steril. Darah disentrifus untuk memisahkan serum dari komponen darah yang lain, selanjutnya dilakukan pemeriksaan terhadap kolesterol total, dan trigliserida.

## Pemeriksaan Kolesterol Total
Pemeriksaan  kolesterol  menggunakan  metode:  CHOD-PAP  ( Cholesterol  Oxidase- Peroxidase Aminoantipyrine Phenol ) dengan prinsip: pengukuran kolesterol total setelah oksidasi dan  hidrolisa  enzym  indikator  kolorimetri,  yaitu chinonimine yang  dihasilkan  dan  4- aminoantipyrine  dan  phenol  dengan  hydrogen  peroksida  dengan  bantuan  katalis  deraxida. Pengukuran dilakukan pada panjang gelombang 546 nm.
Serum dicampur dengan reagen pemeriksaan kolesterol, diinkubasi selama 10 menit pada suhu 37°C, kemudian dibaca hasilnya. Pembacaan absorbansi dengan reagen blangko dilakukan dalam 60 menit.

## Pemeriksaan Trigliserida
Sebanyak 3 tabung reaksi disiapkan, masing-masing untuk standar, blanko dan sampel. Ke dalam  tabung  setiap  tabung  dimasukkan  1000  µL  reagen  trigliserida.  Pada  tabung  sampel dimasukkan 10 µL sampel, diinkubasi selama 10 menit pada 37°C  dan dibaca adsorbannya pada 546 nm.

## Analisis Data
Untuk mengetahui pengaruh keragaman gen DGAT terhadap peubah yang diamati data dianalisis dengan analisis ragam dengan model matematika :
𝑌 𝑖𝑗 = 𝜇 + 𝛼 𝑖 + 𝜀 𝑖𝑗
Keterangan : Y ij = Peubah yang diamati µ    = Rataan umum α i = Pengaruh genotype ke i ε ij = Pengaruh galat
Untuk menguji perbedaan antar genotype diuji dengan uji jarak berganda Duncan.

## 3 Hasil dan Pembahasan

## Pengaruh keragaman genotype  DGAT1 terhadap kolesterol
Hasil pemeriksaan kolesterol darah domba Padjadjaran pada berbagai keragaman DGAT1 dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Kandungan Kolesterol Total Darah
Ulangan Genotype TT CC CT 1 111 118 135 2 113 122 137 3 198 127 126 4 99 103 128 5 119 125 258 Total 640 595 784 Rata-rata 128 119 156.8
Berdasarkan Tabel 1 terlihat bahwa rataan kadar kolesterol domba berkisar antara 128 – 156,8 mg/dl. Kandungan ini untuk domba masih termasuk kisaran normal karena  kondisi normal kolesterol darah pada domba adalah 50–140 mg/dl.  (Smith dan Mangkoewidjojo, 1988; Meyer dan Harvey, 2004). Kandungan kolesterol domba Padjadjaran lebih rendah  dari rata-rata kadar kolesterol darah berbagai jenis itik yang berkisar antara 136,7 mg/dl sampai dengan 203,3 mg/dl (Wijaya,  V  G,  dkk  2013).    Hasil  analisis  ragam  menunjukkan  bahwa  keragaman  gen  DGAT1 tidak berpengaruh nyata  terhadap kadar kolesterol darah.
Nutrisi  merupakan  komponen  lingkungan  yang  memiliki  pengaruh  terbesar  terhadap kualitas daging dan karkas.Cerdeno et al . (2006) melaporkan adanya pengaruh pakan terhadap kandungan  lemak  internal,  skor  penggemukan,  dan  tebal  lemak  subkutan.  Penelitian  yang dilakukan  Jaturasitha et  al .  (2009)  pada  sapi  lokal  Thailand  menunjukkan  bahwa  sapi  yang diberikan campuran rumput dan legum memiliki warna daging yang lebih terang dan lebih empuk dari sapi yang diberikan rumput saja. Kandungan lemak dan kolesterol pada sapi yang diberikan legum  dan  rumput  lebih  tinggi  dari  yang  diberikan  rumput  saja.Hal  tersebut  mengindikasikan bahwa energi pakan yang lebih tinggi menghasilkan kandungan lemak karkas yang lebih tinggi (Soeparno, 2005).
Acyl CoA:Diacylglycerol O-acyltransferase 1 (DGAT1) merupakan enzim yang terdapat pada  membran  sel  yang  mengkatalisasi  dua  proses  penting  dalam  sintesis  trigliserida ( triacylglycerols atau TAG) (Farese et al ., 2000). Reaksi tersebut menyebabkan penggabungan asam acyl CoA dengan digliserida yang disuplai dari proses hirolisis asam phosphatidic dalam
gliserol  phosphat  pathway,  atau  dari  penambahan  acyl  terhadap  monoacylgliserol  dalam monoacylgliserol pathway. Sejauh ini, terdapat dua acyl CoA, yaitu Acyl CoA : Diacylglycerol O-acyltransferase  1 (DGAT1)  dan Acyl  CoA:Diacylglycerol  O-acyltransferase  2 (DGAT2) (Cases  et  al.,  2001).  Enzim  DGAT1  dihubungkan  dengan  peranan  yang  penting  dalam  proses laktasi. Betina yang mengalami defisiensi enzim tersebut tidak mampu menghasilkan susu, yang sangat dimungkinkan tidak terjadinya sintesis trigliserida dalam kelenjar ambing (Smith et al ., 2000). Pada sapi, DGAT dianggap sebagai enzim yang sangat berpengaruh terhadap produksi dan komposisi susu (Farnir et al., 2002).
Faktor genetik yang sangat berpengaruh terhadap keempukan diantaranya gen calpastatin (Lonergan dan Lonergan,2005; Casas et al ., 2006; Schenkel et al ., 2005), leptin (Schenkel et al ., 2005), thyroglobulin (Casas et al ., 2007) dan myostatin F94L (Esmailizadeh et al ., 2008). Variasi kadar kalpastatin sangat tergantung pada spesies (Koohmaraie etal ., 1991) dan jenis otot (Geesink dan Koohmaraie, 1999), semakin tinggi aktifitas kalpastatin akan menurunkan keempukan daging postmortem  (Woodward et  al .  2000).  Pengaruh  yang  nyata  dari  gen  RYR1 ( ryanodinereceptorlocus )  dan  PRKAG3  (Protein  kinase  adenosinemonophosphate  gamma  3 subunit) terhadap beberapa sifat kualitas daging babi telah dilaporkan Otto et al . (2007). Penanda melanocortin -4 receptor (MC4R) dan highmobilitygroupAThook 1 (HMGA1) berpengaruh nyata terhadap susut masak, lactatedehydrogenase A (LDHA), kalpastatin dan
ATPase Ca2+ transportingfasttwitch 1 (ATP2A1) berpengaruh terhadap pH dan kandungan lemak intramuskular.

## Pengaruh keragaman genotype  DGAT terhadap Trigeliserida
Hasil  pemeriksaan  Trigeliserida  darah  domba  Padjadjaran  pada  berbagai  keragaman DGAT1 dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Kandungan Trigeliserida Darah
Ulangan Genotype TT CC CT 1 159 145 145 2 143 142 196 3 133 135 156 4 140 166 135 5 153 169 142 Total 728 757 774 Rata-rata 145.6 151.4 154.8
Berdasarkan hasil analisis ragam, genotype DGAT 1 tidak berpengaruh nyata terhadap kadar  trigeliserida  darah.  Ditinjau  dari  segi  nutrisi,  komponen  lemak  yang  penting  adalah trigliserida,  fosfolipida  kolesterol,  dan  vitamin  yang  terlarut  dalam  lemak.  Trigliserida mengandung asam-asam lemak jenuh dan tidak jenuh.Asam lemak jenuh pada daging meliputi stearat  dan  palmitat,  sedangkan  asam-asam  lemak  tidak  jenuh  pada  daging  antara  lain  oleat, linoleat, dan linolenat (Soepamo, 1989). Trigliserida adalah bentuk lemak lain yang bisa berasal dari makanan atau dibentuk sendiri oleh tubuh. Memiliki trigliserida yang tinggi sering diikuti juga oleh kolestrol total dan LDL yang tinggi, serta kolestrol HDL yang rendah.
Kadar  trigeliserida  darah  domba  Padjadjaran  lebih  rendah  dibandingkan  dengan  kadar trigliserida darah itik berkisar antara 293,33 sampai 753,34 mg (Wijaya, dkk 2013). Rendahnya
kandungan  trigeliserida  menunjukkan  bahwa  domba  Padjadjaran  memiliki  daging  dengan kualitas baik, dengan kadar kolesterol rendah.

## 4 Kesimpulan
Kadar  kolesterol  total  darah  domba  Padjajaran  berada  pada  kisaran  normal  dan keragaman gen DGAT1 tidak berpengaruh nyata  terhadap kadar kolesterol darah. Dari ketiga genotype  DGAT,  menunjukkan  kelompok  CC  memiliki  kadar  kolesterol  total  paling  rendah, sedangkan kadar trigliserida terendah didapatkan pada genotype TT, namun tidak berbeda nyata dibandingkan dengan genotype CC dan CT.

## 5 Daftar Pustaka
Casas E et al. (2006). Effect of calpastatin and micro-calpain markers in beef cattle on tenderness traits. J Anim Sci 84:520-525.
Casas  E et  al .  (2007).  Assessing  the  association  of  single  nucleotide  polymorphisms  at  the thyroglobulin gene with carcass traits in beef cattle. J Anim Sci 85:2807-28014.
Cerdeno A, Vieira C, Serrano E, Lavın P, Mantecon AR. (2006). Effects of feeding strategy during a short finishing period on performance, carcass and meat quality in previously-grazed young bulls. Meat Sci 72:719-726.
Direktorat Jenderal  Peternakan.  (2009). Statistik Peternakan 2009. Jakarta:  Direktorat Jenderal Peternakan Departemen Pertanian RI.
Farese JR R.V., Cases S., Smith S.J., (2000). Triglyceride synthesis: insights from the cloning of diacylglycerol acyltransferase. Current Opinion in Lipidology 11, 229-234. Farnir F, Grisart B, Coppieters W, Riquet J, et al. (2002). Simultaneous mining of linkage and LD to fine map QTL in outbreed half-sib pedigrees: revisiting the location of a QTL with major effect on milk production on bovine chromosome 14 . Genetics 161: 275-287.
Geesink GH, Koohmaraie M. (1999). Effect of calpastatin on degradation of myofibrillar proteins by µ-calpain under postmortem condition. J Anim Sci 77:2685-2692 Jaturasitha S, Norkeaw R, Vearasilp T, Wicke M, Kreuzer M. (2009). Carcass and meat quality of Thai native cattle fattened on Guinea grass ( Panicum maxima ) or Guinea grass–legume ( Stylosanthes guianensis ) pastures. Meat Sci 81:155-162.
Koohmaraie  M,  Whipple  G,  Kretcmar  DH,  Crouse  JD,  Mersmann  HJ.  (1991). Postmortem proteolysis in longissimus muscle from beef, lamb and pork carcasses.
J Anim Sci 69:617-624.
Lonergan E, Lonergan SM.  (2005). Mechanism of water holding capacity of meat: the role of postmortem biochemical and structural changes. Meat Sci 71:194-204
Meyer D J dan J W Harvey .(2004.) Veterinary Laboratory Interpretation and Diagnosis .  W B Sounders Company Philadelphia Schenkel FS et al . (2005). Association of single nucleotide polymorphisms in the leptin gene with carcass and meat quality traits of beef cattle. J Anim Sci 83:2009-2020.
Schenkel  F.S.,  S.P.  Miller,  Z.  Jiang,  I.B.  Mandel,  X.  Ye,  H.  Li,  and  J.W.  Hilton.  (2006).
Association of a single nucleotide polymorphism in the calpastatin gene with carcass and meat quality traits of beef cattle. J  Anim Sci. 84 : 291 – 299. Smith  J  B  dan  Mangkoewidjaja  (1988) Pemeliharaan,  Pembiakan  dan  Pengunaan  Hewan Percobaan di Daerah Tropis. Universitas Indonesia Press. Jakarta
Smith S.J., Cases S., Jensen D.R., Chen H.C., Sande E., Tow B., Sanan D.A., Raber J., Eckel R.H., Farese JR R.V., (2000). Obesity resistance and multiple mechanisms of triglyceride synthesis in mice lacking Dgat. Nature Genetics 25, 87-90.
Spelman RJ, Ford CA, McElhinney P, Gregory GC, et al. (2002). Characterization of the DGAT1 gene in the New Zealand dairy population. J. Dairy Sci. 85: 3514-3517. Soeparno. (2005). Ilmu dan Teknologi Daging . Edisi ke-5. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Wijaya  V  G,  Ismoyowati  dan  D  M  Saleh  (2013)  Kajian  Kadar  Kolesterol  dan Trigeliserida  Darah  Berbagai  Jenis  Itik  Lokal  yang  pakannya  disuplementasi dengan Probiotik. Jurnal Ilmu Peternakan 1(2):661-668
Woodward  BW,  DeNise  SK,  Marchello  JA.  2000.  Evaluation  of  calpastatin  activity measures in ante- and postmortem muscle from half-sib bulls and steers. J Anim Sci 78:804-809