Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 4 Nomor 1, Maret 2022
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v4i1.13566
Histopatologi Organ Pankreas Tikus DM tipe 2 yang diberi Ekstrak Etanol Daun Gedi Merah ( Abelmoscus manihot L. Medik)
Nuralifah 1* , La Ode Muhammad Fitrawan 1 , Parawansah 1, 2 , Mesrawati Trisetya 1
1 Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Halu Oleo, Jl. HEA Mokodompit  Anduonohu, Kendari, 93231, Indonesia
2 Departemen Farmakologi, Fakultas Kedokteran,  Universitas Halu Oleo, Jl. HEA Mokodompit  Anduonohu, Kendari, 93231, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: nuralifah@uho.ac.id

## ABSTRAK
Daun Gedi Merah ( Abelmochus manihot L.Medik) merupakan tumbuhan tropis dimanfaatkan oleh masyarakat sebagai obat tradisional untuk menurunkan kadar kolesterol, hipertensi dan antidiabetes.  Diabetes  melitus  merupakan  gangguan  metabolisme  karbohidrat,  protein  dan lemak  karena  kekurangan  hormone  insulin  sehingga  glukosa  dalam  darah  mengalami peningkatan  yang  ditandai  dengan  perubahan  struktur  histopatologi  pulau  langerhans pankreas. Tujuan penelitian ini untuk melihat gambaran histopatologi organ pankreas pada tikus  putih  jantan  ( rattus  norvegicus )  galur  wistar  model  diabetes  melitus  tipe  II  dengan pemberian  ekstrak  etanol  daun  gedi  merah  ( Abelmoschus  manihot L.Medik).  Pemodelan diabetes melitus pada hewan uji dilakukan dengan pemberian diet tinggi lemak serta induksi streptozotocin 30 mg/kgBB secara intraperitoneal. Setelah dilakukan pemodelan, tikus jantan dikelompokkan  menjadi  6  kelompok  perlakuan  yaitu  kelompok  kontrol  normal,  kelompok kontrol positif, kelompok kontrol negatif, dan kelompok yang diberikan ekstrak etanol daun gedi merah dosis 75 mg/kgBB, 150 mg/kgBB  300 mg/kgBB. Hasil penelitian pemeriksaan histopatologi pankreas dan jumlah sel endokrin ini menunjukan bahwa ekstrak etanol daun gedi  merah  ( Abelmoschus  manihot L.Medik)  memiliki  efektivitas  terhadap  perbaikan  sel  β pankreas dan meregenarasi sel endokrin pada pulau langerhans.
Kata Kunci:
Strepzotocin, Histopatologi Pankreas, Sel Endokrin
Diterima: 9-02-2022 Disetujui: 17-02-2022 Online: 25-02-2022

## ABSTRACT
Gedi  Merah  leaf  (Abelmoschus  manihot  L.Medik)  is  a  tropical  plant  used  by  the  community  as  a traditional medicine to reduce cholesterol, hypertension, and antidiabetic levels. Diabetes mellitus is a disorder of carbohydrate, protein, and fat metabolism due to a lack of the hormone insulin so that glucose in  the  blood  increases  which  is  characterized  by  changes  in  the  histopathological  structure  of  the pancreatic islets of Langerhans. The purpose of this study was to see the histopathological description of the pancreas in male white rats (Rattus norvegicus) Wistar strain model of type II diabetes mellitus by administering ethanol extract of red gedi leaves (Abelmoschus manihot L.Medik). Modeling of diabetes mellitus in experimental animals was carried out by administering a high-fat diet and intraperitoneal induction of streptozotocin 30 mg/kg. After modeling, male rats were grouped into 6 treatment groups, namely a normal control group, a positive control group, a negative control group, and a group that was given the ethanol extract of red gedi leaves at a dose of 75 mg/kg BW, 150 mg/kg BW 300 mg/kg BW. The results of the histopathological examination of the pancreas and the number of endocrine cells showed that the ethanolic extract of red gedi leaves (Abelmoschus manihot L.Medik) was effective in repairing pancreatic cells and regenerating endocrine cells in the islets of langerhans.
Copyright © 2022  Jsscr. All rights reserved.
Keywords:
Strepzotocin, Histopathology Pancreas, Endocrine Cells
Received: 2022-02-9 Accepted: 2022-02-17 Online: 2022-02-25

## 1. Pendahuluan
Diabetes  melitus  ditandai  dengan  hiperglikemia  kronis  dengan  gangguan metabolisme karbohidrat, lemak, dan protein akibat sekresi insulin, aksi insulin, atau keduanya.  Hiperglikemia  kronis  berkontribusi  terhadap  stres  oksidatif  yang menyebabkan keseimbangan redoks tubuh berubah dengan produksi berlebihan spesies oksigen  reaktif.  Stres  oksidatif  menyebabkan  peningkatan  protein,  lipid,  karbohidrat dan oksidasi DNA, sehingga menyebabkan kerusakan jaringan dan organ. Kondisi ini menyebabkan komplikasi mikro dan makrovaskular DM [1]. World Health Organization (WHO) memprediksi adanya peningkatan jumlah penderita DM tiap tahunnya, baik di Indonesia  maupun  dunia.  WHO  memprediksi  kenaikan  jumlah  penderita  DM  di Indonesia  dari  8,4  juta  di  tahun  2000  menjadi  sekitar  21,3  juta  pada  tahun  2030  [2]. International Diabetes Federation (IDF) Atlas 2015, memprediksi untuk usia 20-79 tahun jumlah penderita diabetes di Indonesia dari 10 juta pada tahun 2015 menjadi 16,2 juta pada tahun 2040. Dengan angka tersebut Indonesia  menempati  urutan ke-6  di dunia pada tahun 2040, atau naik satu peringkat dibanding data IDF pada tahun 2015 yang menempati peringkat ke-7 di dunia [3].
Pada diabetes melitus tipe-2 tubuh kita mengalami disfungsi sel-β pankreas atau tidak  memproduksi insulin yang cukup untuk mempertahankan tingkat glukosa yang normal[4]. Diabetes melitus dapat disebabkan oleh beberapa faktor, salah satunya yaitu obesitas.  Obesitas  merupakan  suatu  keadaan  yang  melebihi  dari  berat  badan  relatif seseorang sebagai akibat penumpukan zat gizi terutama karbohidrat, lemak dan protein. Menurut  Depkes  RI  2012,  kegemukan  dan  obesitas  terjadi  akibat  asupan  energi  dan lemak  lebih  tinggi  daripada  energi  yang  dikeluarkan  (kurangnya  aktivitas  fisik  dan sedentary  life  style )  [5].  Penyakit  diabetes  berhubungan  dengan  karakteristik  dan
perubahan  progresif  terhadap  struktur  sel  β  pankreas  yang  terjadi  secara  kuantitatif (pengurangan jumlah atau ukuran) dan kualitatif (nekrosis, degenerasi). Perubahan ini dapat dibuktikan melalui foto jaringan pankreas [6]. Pemberian diet tinggi lemak pada hewan  uji  akan  berdampak  terhadap  kenaikan  berat  badan,  gangguan  metabolisme glukosa,dan sensitifitas insulin. STZ merupakan salah satu senyawa diabetogenik untuk diabetes melitus yang lebih baik daripada aloksan karena rentang dosisnya lebih lebar selain  itu  tikus  bisa  mempertahankan  hiperglikemia  yang    lebih  lama[7].  Dosis  STZ (Streptozotocin) yang diberikan sebesar 30 mg/kgBB secara intraperitonial. Tiga hari setelah  injeksi  STZ,  dilakukan  pengukuran  kadar  glukosa  darah  [8].  Streptozotocin bekerja dengan cara membentuk radikal bebas sangat reaktif yang dapat menimbulkan kerusakan  pada  membran  sel,  protein,  dan Deoxyribo  Nucleic  Acid (DNA),  sehingga menyebabkan gangguan produksi insulin oleh sel beta langerhans pankreas [9].
Di Indonesia daun gedi digunakan secara tradisonal sebagai bahan herbal karena kaya akan vitamin A, B1, B2: B3, C, E dan kalsium, kalium, tembaga, zink serta kolagen serta berbagai senyawa sekunder seperi flavonoid, saponin dan senyawa fenolit yang memiliki aktivitas penangkal radikal bebas dan hydrogen peroksida [10], [11]. Flavonoid merupakan senyawa fenolik dari tanaman yang bermanfaat sebagai antioksidan, anti mikroba,  dan  antikanker.  Sebagai  antioksidan,  flavonoid  dapat  menangkap  radikal bebas yang dapat merusak sel tubuh [11].

## 2.  Metode
Penelitian  ini  adalah  penelitian  eksperimental  untuk  mengetahui  pengaruh gambaran histopatologi ekstrak etanol daun gedi merah ( Abelmoschus manihot L.Medik) pada pankreas tikus jantan galur wistar model diabetes melitus tipe 2  yang di induksi streptozotosin dengan diet tinggi lemak.

## Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah daun gedi merah ( Abelmoschus manihot L.Medik), tikus jantan  ( Rattus norvegicus L.)  galur  wistar,  metformin,  Etanol 96%,  air  suling (aquades), kloroform, Na-CMC, NaCl fisiologis 0,9%, buffer neutral formalin (BNF) 10%, xylol, paraffin, Hematoxylin-Eosin, alkohol 96%, 90%, 80%, 70%, 60%,  50%,  30%,  Buffer  sitrat  pH  4,5,  ekstrak  daun  gedi  merah  ( Abelmoschus    manihot L.Medik), Streptozotocin, kertas saring, aluminium foil, hands glove, tissue dan bahan pakan tikus.

## Determinasi, pengumpulan sampel dan ekstraksi
Sampel  daun  gedi  merah  ( Abelmoschus  manihot L.Medik)  yang  digunakan dideterminasi  di  Laboratorium  Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam  Universitas  Halu  Oleo.  Tujuan  determinasi  untuk  mendapatkan  kebenaran identitas  dengan  jelas  dari  tanaman  yang  diteliti  dan  menghindari  kesalahan  dalam pengumpulan bahan utama penelitian. Sampel daun gedi merah diambil di Kelurahan Sabilambo, Kecamatan Kolaka, Kabupaten Kolaka, Provinsi Sulawesi Tenggara. Setelah itu, diambil bagian daunnya kemudian disortasi basah dengan membersihkan simplisia dari  benda-benda  asing  yang  tidak  diinginkan.  Selanjutnya  dilakukan  pencucian
menggunakan  air  mengalir.  Kemudian  dilakukan  perajangan  yang  berfungsi  untuk mempermudah  proses  pengeringan.  Setelah  itu  dikeringkan  dengan  cara  diangin- anginkan  dan  dikeringkan  dibawa  sinar  matahari  yang  ditutup  dengan  kain  hitam. Kemudian dilakukan proses sortasi kering untuk memisahkan bendabenda asing dan kotoran lain yang masih ada dan tertinggal pada daun gedi merah. Setelah itu, sampel daun  gedi  merah  dihaluskan  dengan  menggunakan    blender  untuk  mendapatkan serbuk simplisia.
Metode  ektraksi  yang  digunakan  yaitu  metode  maserasi,  serbuk  daun  gedi merah ditimbang sebanyak 2000 gram. Sampel yang telah ditimbang dimasukkan dalam wadah tertutup dan direndam menggunakan etanol 96% sampai terendam sempurna dan dimeserasi selama 3 hari. Campuran serbuk dan pelarut diaduk setiap  saat  selama 24  jam  pada  suhu  kamar.  Setelah  3  hari,  sampel  yang dimaserasi disaring dengan kertas penyaring. Filtrat yang diperoleh dipekatkan dengan alat rotary evaporator pada suhu 50 0 C sampai tidak terjadi pengembunan pelarut pada kondensor. Kemudian hasil evaporator  dikentalkan  menggunakan  oven  selama  3  jam  pada  suhu  50 0 C  hingga diperoleh  ekstrak  kental  daun  gedi  merah  ( Abelmoschus  manihot L.Medik),  kemudian ditimbang    untuk      mengetahui  bobotnya.  Ekstrak  yang  dihasilkan  disimpan  dalam kulkas pada suhu 4 0 C untuk penggunaan dalam waktu yang lama.  Rendemen ekstrak dihitung dengan rumus [12]
% 𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 = 𝐵𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑝𝑒𝑟𝑜𝑙𝑒ℎ (𝑔𝑟𝑎𝑚) 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑠𝑒𝑏𝑒𝑙𝑢𝑚 𝑑𝑖 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘𝑠𝑖 (𝑔𝑟𝑎𝑚) 𝑥 100%

## Pemodelan hewan uji
Tikus  putih  jantan  dengan  berat  200  s/d  250  gram  diadaptasikan  dengan lingkungan  selama  satu  minggu,  setelah  itu  diberikan  pakan  tinggi  lemak  kolesterol dengan komposisi pakan standar (80%), lemak babi (15%), dan kuning telur bebek (5%) dengan Jumlah konsumsi makanan setiap harinya maksimum sebanyak 20  g/tikus dan diberikan selama 4 minggu [13]. Kemudian diberikan STZ ( Streptozotocin ) dosis tunggal sebesar 30 mg/KgBB secara intraperitonial dan dosis diberikan berdasarkan berat badan tikus. Tiga hari setelah injeksi STZ, dilakukan pengukuran kadar glukosa darah [8]. Jika kadar glukosa darah puasa ≥ 126 mg / dL dianggap diabetes.

## Pengelompokan hewan uji
Sebanyak 24 ekor tikus telah diberi pakan diet tinggi lemak dan diinduksi STZ dibagi 6 kelompok sebagai berikut:
Kelompok kontrol normal (KN) :  Kelompok  yang  tidak  diinduksi  streptozotocin, diberikan makanan standar pakan dan akuades Kelompok kontrol positif (K(+)  :  Kelompok  tikus  diabetes  yang  diberikan  obat Metformin + Pakan
Kelompok kontrol negatif (K (-) :  Kelompok tikus diabetes yang diberikan NaCMC 0,5% + pakan Kelompok perlakuan 1 (KP 1)   : Kelompok  tikus  diabetes  yang  diberikan  ekstrak etanol  daun  gedi  merah  dosis  75  mg/kgBB  + pakan
Kelompok perlakuan 2 (KP 2)  :
Kelompok  tikus  diabetes  yang  diberikan  ekstrak etanol  daun  gedi  merah  dosis  150  mg/kgBB  + pakan Kelompok perlakuan 3 (KP 3)  : Kelompok  tikus  diabetes  yang  diberikan  ekstrak etanol  daun  gedi  merah  dosis  300  mg/kgBB  + pakan
Permeriksaan Histopatologi Pankreas .
Pembuatan preparat histopatologi pankreas yang dilakukan meliputi proses nekropsi, isolasi  sampel,  fiksasi,  dehidrasi,  penjernihan  ( clearing ),  penanaman  ( embedding ), pemotongan jaringan, pewarnaan ( staining ), dan pengamatan dengan mikroskop cahaya [14].
1) Pengambilan Organ Pankreas Semua tikus dianastesi  general dengan kloroform. Selanjutnya tikus dibedah dan diambil organ pankreas. Organ pankreas kemudian dicuci dengan NaCl fisiologis 0,9%  dan  difiksasi  dengan  buffer  neutral  formalin  (BNF)  10%  untuk  dilanjutkan dengan pembuatan preparat histopatologi.
2)    Pembuatan Preparat Histopatologi
a) Fiksasi Fiksasi jaringan dengan cara merendam dalam formalin buffer fosfat 10% selama 24  jam,  kemudian  diiris  ( trimming )  dengan  ketebalan  ±  3  mm  agar  dapat dimasukkan dalam kaset untuk diproses dalam tissue processor.
b) Dehidrasi Jaringan yang berada di dalam kaset dimasukkan ke dalam tissue processor untuk dilakukan  dehidrasi.  Proses  dehidrasi  dilakukan  menggunakan  alkohol  dengan konsentrasi bertingkat yang terdiri dari alkohol 70%, 80% dan 96% masing-masing selama  2  jam.  Selanjutnya  dijernihkan  ( clearing )  dengan  memasukkan  kaset  ke dalam xylol I, xylol II dan xylol III.
c) Perendaman ( Embedding ) dan Pencetakan ( Blocking )
Jaringan  dimasukkan  ke  dalam  parafin  cair  dengan  suhu  56°C  selama  2  jam sebanyak 2 kali. Jaringan kemudian diambil dengan pinset, dilanjutkan dengan pemblokan menggunakan parafin blok.
d) Pemotongan
Pemotongan  ( cutting )  dilakukan  dengan  menggunakan  mikrotom  dengan ketebalan  4-5  µm.  Jaringan  yang  terpotong  dikembangkan  di  atas  air  dalam waterbath dan  ditangkap  dengan  gelas  objek. Kemudian  dikeringkan  pada suhu kamar dan preparat siap diwarnai dengan Hematoxylin Eosin (HE).
e) Pewarnaan Hematoxilin Eosin (HE)
Pewarnaan  dilakukan  dengan  cara  preparat  di  atas  gelas  objek  direndam dalam  xylol  I,  II  dan  III  masing-masing  selama  5  menit.  Kemudian  preparat direndam dalam  alkohol  96%,  80% dan 70%  masing-masing 5 menit,  selanjutnya dicuci dengan aquades dan kemudian direndam dalam Hematoxilin meyer selama 7  menit.  Dicuci  menggunakan  air  mengalir  selama  5  menit.  Preparat  kemudian dicelupkan ke dalam  Eosin  selama  10  detik.  Selanjutnya  preparat  direndam dalam    alkohol  bertingkat  alkohol  70%,  80%,  96%  masing-masing  5  menit,  dan
dijernihkan dalam xylol I, II, dan III masing-masing 5 menit. Preparat dikeringkan dan  dilakukan  mounting  dengan  menggunakan  entelan.  Preparat    diperiksa  di bawah mikroskop untuk pemeriksaan terhadap perubahan histopatologi [15].
f) Pengamatan Histopatologi Preparat  histopatologi  diperiksa  di    bawah  mikroskop  masing-masing  pada  5 lapang pandang mikroskopik. Pemeriksaan dengan mikroskop dilakukan dengan pembesaran  100x  kemudian  dilanjutkan  dengan  pembesaran  400x.  Perubahan histopatologi yang diamati meliputi adanya degenerasi lemak dan nekrosis [15]
g) Pengamatan jumlah sel endokrin Pengamatan  preparat  dilakukan  dengan  mengamati  seluruh  lapang  pandang. Perhitungan  jumlah  sel  dilakukan  terhadap  sel  yang  bereaksi  positif  dan mempunyai inti sel  yang jelas pada perbesaran rendah lalu dihitung jumlah selnya yang mengalami fibrosif dan klasifikasi dari tiap lapang padang.

## Analisis data
Analisis  data  dengan  menggunakan  metode  deskriptif  yang  disajikan  dalam bentuk gambar, data bentuk sel dan data jumlah sel endokrin dinyatakan sebagai rata- rata ± SD.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Determinasi  tanaman  daun  gedi  merah  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi, Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Halu  Oleo.  Kunci determinasi  sampel  yaitu  1b-32a-3b  yang  menunjukkan  bahwa  tanaman  dalam penelitian  ini  adalah  benar-benar  tanaman  daun  gedi  merah  ( Abelmoschus  manihot L.Medik). Metode ekstraksi yang digunakan  adalah metode maserasi  dengan pelarut etanol  karena  dapat  mengurangi  resiko  kerusakan  senyawa  karena  pemanasan (thermolabil), relatif sederhana, pelarut yang digunakan relatif sedikit dan etanol 96% merupakan  salah  satu  pelarut  yang  dapat  mengekstraksi  sebagian  besar  golongan senyawa aktif baik yang bersifat polar maupun non polar karena sifatnya semi polar [16]. Nilai rendemen  ekstrak  etanol daun gedi merah ( Abelmoschus manihot L.Medik) yang diperoleh sebesar 5.78%. Nilai tersebut menunjukkan bahwa Semakin tinggi nilai rendemen ekstrak maka semakin tinggi  kandungan zat yang tertarik ada pada suatu bahan baku [17].

## Gambaran Histopatologi organ Pankreas
Pengamatan  histopatologi  organ  pankreas  tikus  menggunakan  metode pewarnaan Hematoxylin-Eosin. Hematoxylin dan eosin  adalah zat warna yang sering digunakan  untuk  mewarnai  jaringan  agar  lebih  mudah  diamati  dengan  mikroskop. Prinsip pewarnaan ini yaitu inti sel yang bersifat asam akan menarik zat yang bersifat basa  sehingga  akan  berwarna  biru.  Sitoplasma  bersifat  basa  akan  menarik  zat  yang bersifat  asam  sehingga  berwarna  merah.  Pengamatan  histopatologi  penelitian  ini menggunakan  mikroskop  dengan  perbesaran  400x.  Hewan  uji  yang    mengalami diabetes  melitus  memiliki  gambaran  histopatologi   yang berbeda dengan hewan uji normal yang dapat terlihat berdasarkan jumlah sel endokrin dan bentuk sel endokrin yang mengalami nekrosis dan degenerasi sel.
Gambar 1 . Gambaran histopatologi pulau langerhans pankreas tikus kelompok uji setelah  diberi  perlakuan  selama  7  hari  pada  perbesaran  400x  dengan pewarnaan HE. Sel pankreas normal (        ) nampak berbentuk bulat dan terdapat inti pada bagian tengah, sel pankreas yang mengalami degenerasi (       ) terlihat adanya vakuola yang ukurannya bervariasi dan sel yang mengalami nekrosis (         ) ditandai dengan hilangnya inti sel.
Hewan  uji  yang  diberikan  terapi  akan  menunjukkan  terjadinya  pengurangan jumlah sel endokrin pada pulau langerhans yang mengalami degenerasi dan nekrosis.
(a) Kontrol Normal (b) Kontrol Negatif (c) Kontrol Positif (d) Kelompok Dosis 75 mg/kgBB (e) Kelompok Dosis 150 mg/kgBB (f) Kelompok Dosis 300 mg/kgBB
Degenerasi merupakan kelainan sel endokrin yang mengenai struktur dalam sel yang menyebabkan pengurangan jumlah massa sel dan susunan sel endokrin menjadi tidak teratur,  menjadi  lebih  kecil  bahkan  ada    yang   hancur    dan    menghilang,  sedangkan nekrosis  merupakan  salah  satu  pola  dasar  kematian  sel  yang  ditandai  oleh  adanya ruang-ruang  kosong  pada  pulau  langerhans . Gambaran  histopatologi  pankreas  tikus sehat  menunjukkan  sel-sel  endokrin  masih  dalam  kondisi  utuh  dan  rapat.  Inti  sel endokrin terlihat berwarna ungu kebiruan dan sitoplasma berwarna merah muda [14]. Hasil pengamatan histopatologi dapat dilihat pada gambar 1.
Berdasarkan  gambar  1(a) menunjukkan  adanya  keteraturan  susunan  sel endokrin  yang  menyebar  pada  pulau  langerhans.  Kondisi  sel    endokrin  pada  tikus kelompok normal juga dalam keadaan relatif baik yang ditandai dengan kondisi islet langerhans dalam keadaan utuh dan rapat. Hal ini dikarenakan tidak adanya pengaruh zat toksik yang masuk ke dalam tubuh tikus sehingga tidak terjadi keadaan diabetes yang  ditunjukkan  dengan  tidak  adanya  proporsi  kerusakan  struktur  pankreas  tikus pada  kelompok  normal.  Pada  gambar  1(b).  Berdasarkan  gambar  terlihat  bahwa  islet langerhans  mengalami  kerusakan  berupa  degenerasi  yang  diikuti  dengan  nekrosis. Menurut hermawati (2020) degenerasi dan nekrosis yang ditemukan merupakan respon sel  setelah  terpajan  toksikan  berupa  pemberian  glukosa  dosis  tinggi    yang    dapat merusak jalur metabolisme pada tikus sehingga jika diamati secara mikroskopis terlihat adanya perubahan bentuk sel endokrin pada pulau langerhans tikus. Pada gambar 1(c) dapat  dilihat  bahwa  proporsi  susunan  sel  endokrin  yang  mengalami  degenerasi  dan nekrosis pada tikus kelompok kontrol positif lebih sedikit dibandingkan dengan  tikus diabetes  kelompok  negatif  yang  tidak  diberikan terapi. Degenerasi sel terjadi akibat gangguan  yang  mengenai  struktur  dalam  sel  yang  dapat  mengganggu  proses metabolisme sel. Kerusakan ini sifatnya reversible. Pada gambar 1(d) Kelompok dosis 75 mg/kgBB menunjukkan terjadinya degenerasi dan nekrosis pulau langerhans lebih sedikit  dibandingkan  kelompok  negatif  dan  memiliki  kemiripan  dengan  kelompok normal berupa susunan sel-sel endokrin yang rapat. Pada gambar 1(e) kelompok dosis 150 mg/kgBB menunjukkan terjadinya degenerasi dan nekrosis pulau langerhans tikus diabetes  lebih  sedikit  dibandingkan  kelompok  negatif  yang  ditandai  dengan berkurangnya area nekrosis pada  pulau  Langerhans yang memberikan efek regeneratif pada sel ß pankreas serta efektif dalam menurunkan kadar glukosa darah. Pada gambar 1(f) Kelompok dosis 300 mg/kgBB menunjukkan adanya proporsi jumlah sel endokrin yang mengalami degenerasi dan nekrosis lebih sedikit dibandingkan hewan uji kontrol negatif.
Tabel 1. Analisis data bentuk Pulau Langerhans No Kelompok Percobaan Hasil Pengamatan Normal  Nekrosis  Degenerasi 1 Kelompok Normal (KN) 477 11 381 2 Kelompok Kontrol Positif (K(+) 372 27 313 3 Kelompok Kontrol Negatif (K(-) 280 173 240 4 Kelompok Dosis 75 mg/kgBB 264 131 228 5 Kelompok Dosis 150 mg/kgBB 370 12 326 6 Kelompok Dosis 300 m g/kgBB 323 86 299
Gambar 2. Jumlah Sel Endokrin
Perbaikan pulau langerhans selain dilihat dari gambaran histopatologi, juga di dukung oleh bentuk sel endokrinnya yang dapat dilihat pada tabel  1 dan jumlah sel endokrin pada gambar 2. Jumlah sel endokrin pada pulau langerhans dipengaruhi oleh adanya  kemampuan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  ekstrak  etanol daun gedi merah berupa flavonoid. Metabolit sekunder yang terdapat pada daun gedi merah berperan sebagai antioksidan untuk meregenerasi sel beta pankreas yang rusak. Flavanoid diketahui memiliki aktivitas antioksidan yang diyakini mampu melindungi tubuh terhadap kerusakan yang disebabkan spesies oksigen reaktif, sehingga mampu menghambat terjadinya penyakit degeneratif seperti diabetes melitus. Flavanoid dapat menurunkan  kadar  glukosa  darah  dengan  kemampuannya  sebagai  zat  antioksidan. Flavanoid  bersifat  protektif  terhadap  kerusakan  sel  β  sebagai  penghasil  insulin  serta dapat mengembalikan sensitivitas reseptor insulin pada sel dan bahkan meningkatkan sensitifitas insulin [18].

## 4.  Kesimpulan
Ekstrak  etanol  daun  gedi  merah  ( Abelmoschus  manihot L.Medik)  memiliki efektivitas antidiabetes yang dapat dilihat dari gambaran histopatologi organ pankreas tikus jantan galur wistar yang mengalami diabetes melitus tipe 2 ditunjukkan dengan terjadinya  perbaikan  sel  pulau  langerhans  yang  diamati  dari  banyaknya  jumlah  sel endokrin yang mengalami regenerasi pada pulau langerhans untuk semua kelompok perlakuan. Dosis yang paling efektif yaitu pada dosis 150 mg/kgBB yang memiliki hasil tidak jauh berbeda dengan kontrol positif/obat.

## Referensi
[1]  R.  Noriega-Cisneros et  al. ,  “Hypolipidemic  activity  of  eryngium  carlinae  on streptozotocin-induced  diabetic  rats,” Biochem.  Res.  Int. ,  vol.  2012,  2012,  doi: 10.1155/2012/603501.
0 100 200 300 400 Klp Normal (KN) Klp Kontrol Positif (K+) Klp Kontrol Negatif (K- ) Klp Dosis 75 mg/KgBB Klp Dosis 150 mg/KgBB Klp Dosis 300 mg/KgBB 351 ± 13.663 340 ± 13.885 270 ± 17.078 278 ± 11.180 331 ± 17.888
290 ± 11.762
Jumlah Sel Endokrin
[2]  I.  A.  M.  Kshanti et  al. ,  “Pedoman  Pemantauan  Glukosa  Darah  Mandiri,” Perkumpulan Endokrinol. Indones. , p. 28 halaman, 2019.
[3]  M.  Sahlan  Zamaa  and  S.  Sainudin,  “Hubungan  Kepatuhan  Pengobatan  Dengan Kadar Gula Darah Sewaktu Pada Pasien Diabetes Melitus Tipe II,” Jambura Nurs. J. , vol. 1, no. 1, pp. 11–18, 2019, doi: 10.37311/jnj.v1i1.2057.
[4]  A. Petersmann et al. , “Definition, Classification and Diagnosis of Diabetes Mellitus,” Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes , vol. 127, pp. S1–S7, 2019, doi: 10.1055/a-1018-9078.
[5]  D. S. Ayu and O. W. Kasmini Handayani, “Diary Teratas (Terapi Anak Obesitas) Dalam Perubahan Perilaku Gizi Siswa Sekolah Dasar,” Unnes J. Public Heal. , vol. 5, no. 2, p. 167, 2016, doi: 10.15294/ujph.v5i2.10125.
[6]  E.  Zubaidah  and  I.  N.  F,  “Efek  Cuka  Apel  dan Cuka  Salak  terhadap Penurunan Glukosa Darah dan Histopatologi Pankreas Tikus Wistar Diabetes Effects of Apple Vinegar  and  Salacca  Vinegar  on  Reducing  Blood  Glucose  and  Pancreatic Histopathology of Diabetic Wistar Rats,” Kedokt. Brawijaya , vol. 28, no. 4, pp. 297– 301, 2015.
[7]  M. Mutiyani, D. W. Soeatmadji, and B. R. Sunindya, “Effect of High Carbohydrate Diet and High Fat Diet on Blood Glucose and Beta Cell Pancreas Density in Wistar Rats,” Indones. J. Hum. Nutr. , vol. 1, no. 2, pp. 106–113, 2014.
[8]  I. A. A. Pidada, N. L. E. Setiasih, and I. B. O. Winaya, “Daun Kelor Memperbaiki Histopatologi  Hati  Tikus  Putih  yang  Mengalami  Diabetes  Melitus,” Bul.  Vet. Udayana , vol. 10, no. 1, p. 50, 2018, doi: 10.24843/bulvet.2018.v10.i01.p08.
[9]  N. T. Saputra, I. N. Suartha, and A. A. G. O. Dharmayudha, “Agen Diabetagonik Streptozotocin  untuk  Membuat  Tikus  Putih  Jantan  Diabetes  Mellitus,” Bul.  Vet. Udayana , vol. 10, no. 2, p. 116, 2018, doi: 10.24843/bulvet.2018.v10.i02.p02.
[10]  V. Anggi, “Penerapan Tanaman Daun Gedi Merah Sebagai Pengobatan Tradisional Antikanker Payudara di Desa Maku Provinsi Sulawesi Tengah,” Celeb. Abdimas J. Pengabdi. Kpd. Masy. , vol. 1, no. 2, pp. 96–100, 2019, doi:
10.37541/celebesabdimas.v1i2.187.
[11]  N. P. Dewi, A. S. Afifah, J. Tandi, and Yusriadi, “Efek Ekstrak Etanol Daun Jambu Air (Syzigium aqueum (Burm.f.) Alston ) Terhhadap Histopatologi Pankreas Tikus Putih,” Farmakol. J. Farm. , vol. 15, no. 1, pp. 18–26, 2018.
[12]  H. Wijaya, Novitasari, and S. Jubaidah, “Perbandingan Metode Ekstraksi Terhadap Rendemen  Ekstrak  Daun  Rambui  Laut  (Sonneratia  caseolaris  L.  Engl),” J.  Ilm. Manuntung , vol. 4, no. 1, pp. 79–83, 2018.
[13]  Y. Tandi, J., H Z, M., Yuliet, Y., & Yusriadi, “Efektivitas Ekstrak Daun Gedi Merah Terhadap  Glukosa  Darah,  Malondialdehid,  8-Hdroksi-Deoksiguanosin,  Insulin Tikus Diabetes,” Sci. Surverying Mapp. , vol. 41, no. 4, pp. 264–276, 2016.
[14]  C. M. Hermawati, A. J. Sitasiswi, and S. N. Jannah, “Studi Histologi Pankreas Tikus Putih (Rattus norvegicus L. ) Setelah Pemberian Cuka Dari Kulit Nanas (Ananas comosus L. Merr ),” J. Pro-Life Vol. , vol. 7, no. 1, pp. 61–70, 2020.
[15]  I. M. I. Swarayana, I. W. Sudira, and I. K. Berata, “Perubahan Histopatologi Hati Mencit (Mus musculus) yang Diberikan Ekstrak Daun Ashitaba (Angelica keiskei),” Bul. Vet. Udayana , vol. 4, no. 2, pp. 119–125, 2012.
[16]  S.  Sutomo  ,  Arnida  ,  M.  Ikhwan  Rizki,  Liling  Triyasmono,  Agung  Nugroho,  Evi Mintowati, “Skrining Fitokimia dan Uji Kualitatif Aktivitas Antioksidan Tumbuhan Asal Daerah Rantau Kabupaten Tapin Kalimantan Selatan,” J. Pharmascience , vol. 3,
no.  Vol  3,  No  1  (2016):  JURNAL  PHARMASCIENCE,  pp.  66–74,  2016,  [Online]. Available: http://jps.ppjpu.unlam.ac.id/index.php/jps/article/view/56.
[17]  T. W. Senduk, L. A. D. Y. Montolalu, and V. Dotulong, “The rendement of boiled water extract of mature leaves of mangrove Sonneratia alba,” J. Perikan. Dan Kelaut. Trop. , vol. 11, no. 1, p. 9, 2020, doi: 10.35800/jpkt.11.1.2020.28659.
[18] F. W. Sasmita, E. Susetyarini, H. Husamah, and Y. Pantiwati, “Efek Ekstrak Daun Kembang Bulan (Tithonia diversifolia) terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus Wistar (Rattus norvegicus) yang Diinduksi Alloxan,” Biosfera , vol. 34, no. 1, p. 22, 2017, doi: 10.20884/1.mib.2017.34.1.412.