## IDENTIFIKASI FITOKIMIA DAN UJI DAYA HAMBAT DARI EKSTRAK
ETANOL TANGKAI BUAH PINANG YAKI ( Areca vestiaria giseke) TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus , Escherichia coli ,

## DAN Pseudomonas aeruginosa
Danni U.W Redwik 1) , Herny E. Simbala 1) , Hosea Jaya Edy 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Areca  nut  (Areca  vestiaria  Giseke),  which  is  a  kind  of  wild  palm,  is  a  multi-functional  plant.  The North  Sulawesi  people  empirically  use  this  plant  to  cure  various  diseases.  This  study  aims  to determine  the  phytochemical  content  and  antibacterial  activity  of  ethanol  extracts  of  areca  nut against  the  inhibitory  growth  of  Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus,  and  Pseudomonas aeruginosa  using  5  concentrations  namely  1%,  2%,  3%,  4%  and  5%.  Extraction  was  done  by maceration  using  96%  of  ethanol.  Antibacterial  activity  testing  was  using  paper  disc  diffusion method  (Kirby and Bauer  diffusion). The results  of  this study indicate that the ethanol extracts  of areca  nut  stem  contains  flavonoids,  saponins,  triterpenoids  that  have  the  potential  to  be antibacterial  and  has  antibacterial  strength  against  Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus,  and Pseudomonas  aeruginosa,  at  concentrations  of  4%  and  5%,  which  are  concentrations  which  are included  in  the  group  that  categorize  as  strong  to  inhibit  the  bacteria  E.  coli  and  P.  aeruginosa, while  the  extract  concentration  of  2%,  3%,  4%,  and  5%  which  are  included  in  the  group  that categorize as strong to inhibit the S. aureus bacteria.
Keywords : Agar diffusion method, Antibacterial, Areca nut, Phytochemical.

## ABSTRAK
Pinang Yaki (Areca vestiaria Giseke ) yang merupakan sejenis palem liar, merupakan tanaman yang multi  fungsi.  Masyarakat  Sulawesi  Utara  secara  empiris  menggunakan  tanaman  ini  untuk menyembuhkan  berbagai  macam  penyakit..  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kandungan fitokimia  dan  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  etanol  tangkai  buah  pinang  yaki  terhadap  daya hambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli , Staphylococcus  aureus ,  dan Pseudomonas aeruginosa menggunakan  5  konsentrasi  yakni  1%,  2%,  3%,  4%,  dan  5%.  Ekstraksi  dilakukan dengan  cara  maserasi  menggunakan  etanol  96%.  Pengujian  aktivitas  antibakteri  menggunakan metode  difusi  dengan  cakram  kertas  (difusi  Kirby  dan  Bauer).  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  tangkai  buah  Pinang  Yaki  memiliki  kandungan  flavonoid,  saponin, triterpenoid  yang  berpotensi  sebagai  antibakteri  dan  memiliki  kekuatan  antibakteri  terhadap Escherichia  coli , Staphylococcus  aureus ,  dan Pseudomonas  aeruginosa, pada  konsentrasi  4%  dan 5% merupakan konsentrasi yang termasuk dalam golongan kuat untuk menghambat bakteri E. coli dan P.  aeruginosa, sedangkan  pada  konsentrasi  ekstrak  2%,  3%,  4%,  dan  5%  termasuk  dalam golongan kuat menghambat bakteri S. aureus.
Kata kunci : Pinang Yaki, Fitokimia, Antibakteri,metode difusi agar

## PENDAHULUAN
Antibakteri  merupakan  suatu  zat  atau metabolit  yang  di  peroleh  dari  berbagai  jenis mikroorganisme yang dalam konsentrasi kecil dapat membasmi atau menghambat pertumbuhan  mikroorganisme  lainnya  (Radji, 2010). Pengobatan
infeksi dengan menggunakan bahan alami  bertujuan mencari antimikroba baru untuk mengurangi resistensi terhadap  antibiotik.  Mogaddam et  al .(2010) menyatakan  resistensi  multiobat  merupakan masalah  medis  yang  dihadapi  di  seluruh dunia. Untuk mengatasinya diperlukan antimikroba  baru  dari  sumber  daya  alam. Kuete et al. (2011) menyebutkan antimikroba alami  dapat  berasal  dari  tumbuhan,  hewan, atau  mikroorganisme.  Menurut World  Healt Organization (WHO)  tanaman  obat  akan menjadi  sumber  terbaik  untuk  berbagai  obat. Sheikh et  al. (2012)  menyatakan  ekstrak tumbuh-tumbuhan  mempunyai  peran  penting terhadap  penghambatan  kuman  patogen. Penggunaan  ekstrak  tanaman  dengan  sifat antimikroba sangat penting dalam penyembuhan penyakit.
Menurut  Simbala  (2005)  salah  satu tanaman  asli  Indonesia  yang  tersebar  dengan luas  di  beberapa  daerah  di  Indonesia  yang berpotensi untuk dikembangkan yaitu tanaman  Pinang  yaki  ( Arecca  vestiaria ). Penelitian  tentang  pinang  yaki  ( Areca vestiaria )  relatif  masih  sangat  sedikit, informasi  yang  ada  masih  sebatas  morfologi tanamannya,  sedangkan  Bioekologi  baru dilakukan pada tahun 2005 (Pada tahun 2006 penelitian dilanjutkan mengenai aspek
Etnobotani.    Selanjutnya  pada  tahun  2007 dilakukan pengujiam Fitokimia. Areca vestiaria oleh  masyarakat  di  kawasan  Taman Nasional  Bogani  Nani  Wartabone,  selain digunakan sebagai antifertilitas, juga digunakan sebagai anti diabetes dan antitumor.  Tanaman  Pinang  Yaki  memiliki
senyawa  metabolit  sekunder  yaitu  flavonoid, triterpenoid,  tanin,  dan  saponin.  Oleh  karena banyaknya  kandungan yang  terkandung dalam  tanaman  Pinang  Yaki  yang  terdapat pada buah, biji, bahkan kulit biji dari tanaman ini  maka  kali  ini  peneliti  ingin  meneliti kandungan  senyawa  dari  tangkai  buah tanaman Pinang Yaki.
Berdasarkan uraian fakta-fakta tersebut  dan  kandungan  kimia  dari  buah pinang  yaki  maka  peneliti  tertarik  untuk meneliti  lebih  lanjut  daya  hambat  antibakteri dari  ekstrak  etanol  tangkai  buah  Pinang  yaki ( Arecca  Vestiaria ).    Pada  penelitian  ini digunakan bakteri yang menginfeksi kulit dan infeksi  pada  pencernaan  serta  merupakan bakteri  yang  saat  ini  mulai  resisten  terhadap beberapa  antibiotik  spektrum  luas  antara  lain Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli

## METODOLOGI PENELITIAN Bentuk Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental yang dilaksanakan di laboratorium

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Mei  2019  –  Agustus  2019  di  Laboratorium Penelitian  Farmasi  Lanjut  Program  Studi Farmasi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi Manado.

## Alat dan Bahan

## a. Alat
Alat yang digunakan yaitu Erlenmeyer 500  mL,  gelas  ukur  500  mL  dan  100  mL, aluminium  foil ,  timbangan  digital,  3  tabung reaksi,  9  cawan  petri, hot  plate , laminar  air flow ,  gelas  piala  500  ml  dan  100  ml,  lampu Bunsen,  jarum  inokulasi  lurus,  autoklaf,
lemari  pendingin,  mortar  dan  pestle,  rak tabung,  korek  api,  kapas,  kertas  label, gunting,  pinset,  pisau,  evaporator,  oven, cakram  kertas  jenis  Whatman  No  42  dengan diameter  6  mm,  mistar  dan  kain  lap, kamera,kacamata  pengaman,  sarung  tangan, mikropipet (10-1000 µL).

## b. Bahan
Bahan  yang  digunakan  yaitu  tangkai buah Areca  vestiaria yang  diperoleh  dari kawasan  di  bawah  lereng  Gunung  Mahawu Kota Tomohon, Sulawesi Utara, biakan murni bakteri Staphylococcus  aureus , Escherichia coli ,dan Pseudomonas  aeruginosa yang diperoleh  dari  Laboratorium  Farmasi  Lanjut FMIPA  UNSRAT,  medium Nutrient  Agar (NA),  NaCl  0.9%,  akuades,  etanol  96%  dan zat antibiotik (ciprofloxacin).

## Prosedur Penelitian

## Ekstraksi
Serbuk  dari  Tangkai  buah Areca vestiaria ditimbang sebanyak 580 g kemudian dimasukkan  ke  dalam  wadah  dan  dimaserasi dengan  pelarut  etanol  96%  sebanyak  2,5  L selama  3  hari  sambil  sesekali  diaduk  dan ditutup  dengan aluminium  foil .    Setelah dimaserasi  selama  3  hari,  larutan  tersebut disaring  menggunakan  kertas  saring  yang kemudian  dimasukkan  ke  dalam  gelas Erlenmeyer  untuk  dipisahkan  residu  dari filtrat  dan  dihasilkan  filtrat  1    dan  residu  1 (Frengki  et  al.,  2014),  residu  yang  ada kemudian  ditambahkan  lagi  etanol  96% sebanyak  1,5  L,  ditutup  dengan aluminium foil ,  dan  dibiarkan  selama  2  hari  sambil sesekali  diaduk.  Setelah  2  hari,  sampel disaring menggunakan kertas saring menghasilkan  filtrat  2  dan  residu  2.  Filtrat  1 dan  2  dicampur  menjadi  satu,  kemudian diuapkan  dengan  menggunakan vacuum rotary  evaporator pada  suhu  40 o C  sampai
diperoleh ekstrak etanol  yang pekat.  Ekstrak etanol  pekat  lalu  diuapkan  di  dalam  oven dengan suhu 40 o C sampai kering 1 x 24 jam. Ekstrak  kering  dari  Tangkai  buah Areca vestiaria kemudian  ditimbang  dan  didapat berat ekstrak kering 46.5 g, Setelah itu ekstrak etanol  dari Areca  vestiaria dilarutkan  di dalam 100 mL akuades (Adam, 2014).
Identifikasi Fitokimia a. Identifikasi Flavonoid Sebanyak 0.5 gram ekstrak ditambahkan  2  mL  etanol  96%,  kemudian dipanaskan  dalam  penangas  air  sampai mendidih. Dipipet lapisan yang atas kemudian ditambahkan  2-3  tetes  HCL  pekat  dan  0.1 gram serbuk Mg. Selanjutnya diamkan selama 3 menit, bila terjadi perubahan warna menjadi merah atau kekuning-kuningan berarti menunjukkan  adanya  flavonoid  (Sangi, et al ,2008).
b. Identifikasi Saponin
Sebanyak 0.5 gram ekstrak ditambahkan  5  mL  aquades  sambil  dikocok kuat  selama  1  menit.  Pada  tabung  sampel terdapat  buih  setinggi  3.5  cm  dan  bila  busa yang  terbentuk  tetap  stabil  ±  7  menit,  berarti menunjukan adanya banyak saponin (Sangi, et al ,2008).
c. Identifikasi Triterpenoid
Sebanyak 0.5
gram ekstrak ditambahkan CH3COOH glacial sebanyak 10 tetes  dan  H2SO4  pekat  sebanyak  2  tetes. Larutan  kemudian  dikocok  perlahan  dan dibiarkan  selama  beberapa  menit.  Steroid memberikan warna biru atau hijau, sedangkan triterpenoid  memberikan  warna  merah  atau ungu (Sangi, et al ,2008).

## d. Identifikasi Tanin
Sebanyak 0.5 gram ekstrak ditambahkan etanol 96%. Kemudian
didiamkan  ±  15  menit,  lalu  disaring.  Filtrat yang didapat dipipet dan ditambahkan 2 tetes NaCL  10%  dan  3  tetes  FeCl3  1%. Terbentuknya  warna  biru/hitam  kehijauan menunjukkan adanya tannin(Sangi, et al, 2008).

## Sterilisasi Alat
Untuk mencegah
terjadinya kontaminasi  pada  saat  melakukan  uji  difusi dilakukan  sterilisasi  alat  –  alat  gelas  yang digunakan  terlebih  dahulu.    Proses  sterilisasi menggunakan autoclave pada  suhu  121 o C tekanan 2 atm selama 15 menit (Adam, 2014)

## Pembuatan Media Bakteri
a. Pembuatan Media Agar Miring
nutrient  Agar (NA)  sebanyak  2.8  g dilarutkan dalam 100 mL aquades menggunakan erlenmeyer. Setelah itu dihomogenkan  dengan stirer diatas  penangas air  sampai  mendidih.  Sebanyak  5  ml dituangkan  masing-masing  pada  3  tabung reaksi  steril  dan  ditutup  dengan aluminium foil . Media tersebut disterilkan dalam outoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit, kemudian dibiarkan  pada  suhu  ruangan  selama  ±  30 menit sampai media memadat pada kemiringan 30 o . Media Agar miring digunakan  untuk  inokulasi  bakteri  (Lay, 1994). b. Pembuatan Media dasar
Media  dasar  dibuat  dengan  cara ditimbang Nutrient  Agar (NA)  sebanyak  5.6 g,  lalu  dilarutkan  dalam  200  mL  aquades menggunakan erlenmeyer. Media dihomogenkan  dengan stirer diatas  penangas air  sampai  mendidih.  Media  yang  sudah homogen ini disterilkan dalam autoclave pada suhu  121 o C  selama  15  menit,  kemudian didinginkan  sampai  suhu  ±  45-50 o C.  Media dasar  digunakan  dalam  pembuatan  media pengujian.

## Pembiakan Bakteri
Bakteri  uji  diambil  dengan  jarum  ose steril,  lalu  ditanamkan  pada  media  agar miring  dengan  cara  menggores.  Selanjutnya diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu  37 o C selama  24  jam.  Perlakuan  yang  sama dilakukan  pada  setiap  jenis  bakteri  uji (Siregar, 2009).
Pembuatan  Standar  Kekeruhan  Larutan (Larutan Mc. Farland )
Larutan H 2 SO 4 1% sebanyak 9,95 mL dicampurkan  dengan  larutan  BaCl 2 .2H 2 O 1,75%  sebanyak  0,05  mL  dalam  erlenmeyer. Kemudian  dikocok  sampai  terbentuk  larutan yang  keruh.  Kekeruhan  ini  dipakai  sebagai standar  kekeruhan  suspensi  bakteri  uji (Victor, 1980).

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri  uji  yang  telah  diinokulasi diambil  dengan  kawat  ose  steril  lalu disuspensikan  kedalam  tabung  yang  berisi  2 mL  larutan  NaCl  0,9%  hingga  di  peroleh kekeruhan yang sama dengan standar kekeruhan  larutan Mc.  Farland .  Perlakuan yang sama dilakukan pada setiap jenis bakteri uji.

## Pembuatan Larutan Kontrol Positif
Kontrol  positif  dibuat  dari  sediaan obat tablet Ciprofloxacin 500 mg.  Kemudian serbuk Ciprofloxacin dilarutkan dalam larutan  aquades  untuk  memperoleh  larutan Ciprofloxacin 50µg/ 50µL.

## Pembuatan Larutan Uji
Dibuat  larutan  uji  1%;  2%;  3%;  4%; 5% dengan cara ditimbang 0.01 g; 0.02 g; dan 0.03  g;  0,04  g;  0,05  g  ekstrak  etanol  biji
pinang  yaki  kemudian  masing  –  masing dilarutkan dalam 10 mL  CMC.

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  metode  Kirby-Bauer, yaitu  metode  difusi  dengan  cakram  kertas. Medium NA dituang kecawan petri  sebanyak 10 mL, masing-masing Bakteri Pseudomonas aeruginosa , Staphylococcus  aureus ,  dan Escherichia  coli sebagai  biakan  uji,  dipipet dari  medium  larutan  NaCl  0.9%  ke  3  cawan petri  steril  masing-masing  sebanyak  200  µL. cawan  petri  kemudian  digoyang  secara perlahan-lahan  untuk  menyebarkan  biakan bakteri  secara  merata  dan  didiamkan  hingga medium memadat (Rostinawati, 2009). Masing-masing  dari  cakram  kertas  steril dipindahkan  secara  aseptik  menggunakan pinset  steril  ke  konsentrasi  yakni,  1%,  2%, 3%  , 4%, 5%  serta larutan antibiotik  (kontrol positif)  dan  larutan  CMC  (kontrol  negatif) direndam  ±  1  menit  (Tangapo,  2005). Cakram  kertas  yang  telah  direndam  dengan ekstrak  etanol Tangkai  Buah Areca vestiaria , larutan  CMC,  serta  antibiotik  Ciprofloxacin, dipindahkan  dengan  pinset  steril  ke  medium NA berisi Pseudomonas aeruginosa , Staphylococcus  aureus ,  dan Escherichia  coli secara aseptic, kemudian diinkubasi selama 1 x  24  jam  dengan  suhu  37 o C.    setelah diinkubasi, diamati zona bening yang terdapat disekitar kertas cakram dan diukur diameternya. Pengujian daya hambat antibakteri  ekstrak  etanol  Tangkai  Buah
Areca vestiaria terhadap Pseudomonas aeruginosa , Staphylococcus  aureus ,  dan Escherichia coli dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan  untuk  setiap  konsentrasi  yang diuji (Tangapo, 2005).

## Analisis Data
Zona  bening  atau  daya  hambat  dari diameter  ekstrak  etanol  Tangkai  buah Areca vestiaria disajikan  dalam  tabel  dan  gambar.
Penggolongan  kekuatan  antibakteri  dari  daya hambat yang diperoleh ekstrak etanol tangkai
buah Areca  vestiaria digolongkan  menurut Davis dan Stout (1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi tangkai buah pinang yaki
Setelah  dimaserasi  dengan  etanol  96 %  selama  3  hari  dan  di  remaserasi  selama  2 hari,  filtrat Areca  vestiaria yang  dihasilkan berwarna  merah  kehitaman.  Filtrat  1  dan  2 dicampur  menjadi  satu  kemudian  dievaporasi menggunakan oven pada suhu 40 0 C selama 2 hari.    Hasil  ekstraksi  tangkai  buah Areca vestiaria diperoleh sebanyak 850 mL.  setelah dievaporasi  dihasilkan  filtrat  kental.    Filtrat kental  yang  didapat  dari  hasil  ekstraksi tangkai  buah Areca  vestiaria kemudian dikeringkan, sehingga diperoleh 46.5 g.

## Identifikasi fitokimia
Identifikasi  fitokimia  bertujuan  untuk mengetahui  kandungan  golongan  senyawa sebagai informasi awal  aktivitas biologi suatu tanaman.  Pada  penelitian  ini  dilakukan identifikasi  fitokimia  untuk  menguji  ada tidaknya  golongan  senyawa  yang  berpotensi sebagai  antioksidan  dan  berpotensi  toksik, yaitu  golongan flavonoid,  tanin, saponin,  dan triterpenoid.  Hasil  pengujian  fitokimia  dapat dilihat pada Tabel 1.
Berdasarkan  hasil  dari  identifikasi fitokimia  didapat  data    ekstrak  etanol  Pinang Yaki  positif  mengandung  senyawa  metabolit sekunder  seperti  flavonoid,  Saponin,  dan Triterpenoid  tapi  negative  untuk  senyawa metabolit  tanin.  Hal  ini  ditunjukkan  dengan terbentuknya  warna  merah  kuning  pada identifikasi  flavonoid,  adanya  busa  pada identifikasi  saponin,  dan  adanya  cincin kecoklatan  atau  violet  pada  identifikasi triterpenoid.
Tabel 1. Hasil Identifikasi Fitokimia.
Konsentrasi Rata-rata Diameter Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri (mm) E. coli S. aureus P. aeruginosa 1%                    6.66                               7.66                                         9.83 2%                    7.63                              10.53                                       9.58 3%                     8.5                               13.26                                        9.66 4%                   11.18 14.38 10.91 5% 13.25 15.98 10
Kontrol (+)         16.33                             30.38                                         36.6
Kontrol (-)                0                                    0                                               0
Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  tangkai buah pinang yaki ( areca vestiaria )
Pengukuran  diameter  zona  hambat dilakukan  untuk  menggolongkan  antibakteri. Zona  bening  yang  terdapat  disekitar  cakram kertas  yang  diuji  menandakan  bahwa  terjadi bakteri aktivitas daya hambat.
Senyawa Metabolit Perubahan Positif Perubahan yg terjadi (Ektrak Etanol) Flavonoid Warna merah, kuning, atau jingga Warna kuning (+) Saponin Busa stabil setinggi 1-10 cm Ada busa Stabil (+) Tanin Warna hitam kebiruan atau hijau Hitam pekat (-) Triterpenoid Cincin kecoklatan atau violet Cincin  kecoklatan  atau  violet (+) Adanya zona bening disekitar cakram  kertas merupakan daerah difusi dalam mempengaruhi pertumbuhan bakteri. Kekuatan antibakteri dapat diketahui dengan mengukur  besarnya  diameter  dari  zona hambat  yang  terbentuk  oleh  ekstrak  yang diuji.
Tabel 2. Diameter Zona Hambat Ekstrak Tangkai Buah Areca vestiaria Terhadap Escherichia coli , Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa
Hasil  pengujian  dari  esktrak  etanol tangkai buah Areca vestiaria terhadap bakteri Escherichia  coli ,  terlihat  memiliki  zona bening  di  konsentrasi  1%,  2%,  3%,  4%,  dan 5%  masing-masing  sebesar  6.66  mm,  7.63 mm,  8.5mm,  11.18mm,  dan  13.25  (lampiran 7).    Kemampuan  menghambat  dari  ekstrak biji  pinang  yaki  tampaknya  lebih  lemah dibandingkan dengan antibiotika ciprofloxacin yaitu sebesar 16.33 mm. namun dari  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa ekstrak tangkai buah pinang  yaki mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Escherichia  coli ,  hal  ini  terlihat  dari  zona bening  yang  terbentuk  disekitar  cakram. Daya  hambat  ekstrak  etanol  tangkai  buah pinang yaki pada konsentrasi 1%, 2%, dan 3% memiliki kekuatan antibakteri yang sedang,sedangkan  untuk  konsentrasi  4%  dan 5% memiliki kekuatan antibakteri yang kuat.
Hasil pengujian ekstrak etanol tangkai buah Areca  vestiaria terhadap  bakteri Staphylococcus aureus , terlihat memiliki zona bening  di  konsentrasi  1%,  2%,  3%,  4%,  5% masing-masing  sebesar  7.66  mm,  10.53  mm, 13.26  mm,  14.38  mm,  dan  15.98  mm (lampiran  8).    hal  ini  menunjukkan  bahwa ekstrak  tangkai  buah  pinang  yaki  memiliki aktivitas antibakteri dan mampu menghambat pertumbuhan  bakteri S.  aureus .  Daya  hambat ekstrak  etanol  biji  pinang  yaki  terhadap bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi  1  %  (7.66  mm)  memiliki kekuatan  antibakteri  yang  termasuk  kategori sedang,  sedangkan  pada  konsentrasi  2% (10.53  mm)  3%  (13.26  mm)  4%  (14.38  mm) dan  5%  (15.98  mm)    memiliki  kekuatan antibakteri  kategori    kuat.  Kemampuan menghambat dari ekstrak tangkai buah pinang yaki  tampaknya  lebih  lemah  dibandingkan dengan antibiotika ciprofloxacin yaitu sebesar 30.38 mm.
Hasil pengujian ekstrak etanol tangkai buah Areca  vestiaria terhadap  bakteri
Pseudomonas  aeruginosa ,  terlihat  memiliki zona bening di konsentrasi 1%, 2%, 3%, 4%, dan  5%  masing-masing  yaitu  sebesar  9.83 mm,  9.58  mm,  9.66  mm,  10.91  mm  dan  10 mm  (lampiran  9).    Hal  ini  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  biji  pinang  yaki memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri P.  aeruginosa pada  konsentrasi  1%  (9.83 mm)  2%  (9.58  mm)  dan  3%  (9.66  mm) memiliki  kekuatan  antibakteri  yang  termasuk kategori  sedang,  sedangkan  pada  konsentrasi 4%  (10.91  mm)  dan  5%  (10  mm)  memiliki kekuatan antibakteri kategori  kuat.
Menurut Davis dan Stout (1971), dimana kekuatan antibakteri dapat dikelompokkan sebagai berikut :
a. Daerah hambatan 20 mm atau lebih
:
sangat kuat
b. Daerah hambatan 10-20 mm :  kuat
c. Daerah hambatan 5-10 mm :  sedang
d. Daerah hambatan 5 mm atau kurang : lemah
Berdasarkan  kriteria  tersebut,  maka daya  antibakeri  esktrak  tangkai  buah Areca vestiaria pada bakteri Escherichia coli dengan konsentrasi ekstrak 1%, 2%, dan 3% termasuk sedang,dan  pada  konsentrasi  4%  dan  5% termasuk kuat. Daya antibakteri Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi esktrak 1% termasuk sedang, konsentrasi 2%, 3%,  4%  dan  5%  termasuk    kuat.  Sedangkan daya  antibakteri Pseudomonas  aeruginosa pada  konsentrasi  1%,  2%,  3%  termasuk sedang,  konsentrasi  4%  dan  5%  termasuk kuat.  Dengan  demikian  diketahui  bahwa dalam  kelima  konsentrasi  yang  digunakan untuk bakteri
Escherichia coli,
Staphylococcus  aureus ,  dan Pseudomonas aeruginosa ,  menandakan  bahwa  ekstrak  ini sudah  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri mulai dari konsentrasi sedang sampai tinggi.
Hasil pengujian dari kelima konsentrasi yang digunakan didapat juga pada bakteri Escherichia  coli bahwa  konsentrasi
4%  (11,18  mm)  dan  5%  (13,25  mm)
merupakan konsentrasi yang memiliki diameter  zona  paling  besar  di  bandingkan pada  konsentrasi  1%,  2%,  dan  3%,  pada Staphylococcus aureus konsentrasi 4% (14,38 mm) dan 5% (15,98 mm), pada Pseudomonas aeruginosa konsentrasi  4%  (10,91  mm)  dan 5%  (  10  mm).  Disini  menunjukan  semakin kecil  konsentrasi,semakin  kecil  zona  hambat yang terbentuk ( Hidayat et al, 2015).
Daya  hambat  dari  ekstrak  etanol tangkai  pinang  yaki  terhadap  bakteri  Gram negatif  ( Escherichia  coli dan Pseudomonas aeruginosa )  memiliki  aktivitas  antibakteri yang  tergolong  kuat,  namun  dari  kelima konsentrasi  yang  digunakan  ternyata    ekstrak etanol  tangkai  buah  pinang  yaki  masih tergolong lemah dibandingkan dengan antibotik yang digunakan yaitu ciprofloxacin. Hal  ini  disebabkan  karena  bakteri  gram negatif  lebih  banyak  mengandung  lipid, sedikit  peptidoglikan,  membran  luar  berupa bilayer (berfungsi  sebagai  pertahanan selektif senyawa -senyawa yang keluar atau masuk sel dan menyebabkan efek toksik). Membran luar terdiri  dari  fosfolipid  (lapisan  dalam)  dan lipoposakarida  (lapisan  luar).  Hal  ini  yang menyebabkan  senyawa  aktif  dalam  ekstrak etanol  tangkai  buah  pinang  yaki  lebih  sulit untuk  masuk  kedalam  sel  sehingga  aktivitas antibakteri lebih lemah dibandingkan antibiotik yang digunakan yaitu ciprofloxacin.
Daya  hambat  dari  ekstrak  etanol  biji pinang  yaki  terhadap  bakteri  Gram  positif ( Staphylococcus  aureus )  memiliki  aktivitas antibakteri  yang  tergolong  kuat,  hal  ini disebabkan  karena  bakteri  Gram  positif memiliki  dinding  sel  dengan  lebih  banyak peptidoglikan,  sedikit  lipid,  dan  dinding  sel mengandung  polisakarida  (asam  teikoat). Asam  teikoat  merupakan  polimer  yang  larut dalam  air,  yang  berfungsi  sebagai  transport ion  positif  untuk  keluar  atau  masuk.  Sifat larut  air  inilah  yang  menunjukkan  bahwa
dinding  sel  bakteri    Gram  positif    bersifat lebih polar. Menurut penelitian Simbala 2007 Pinang  Yaki  memiliki  kandungan  flavonoid yang  bersifat  polar,  dari  hal  inilah  sehingga senyawa  aktif  dari  ekstrak  lebih  mudah menembus lapisan peptidoglikan yang bersifat  polar  daripada  lapisan  lipid  yang nonpolar.    Sehingga  menyebabkan  aktivitas antibakteri yang lebih besar.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh  Mpila (2012) memberikan hasil bahwa ekstrak daun mayana memiliki aktivitas antibakteri terhadap Escherichia  coli , Staphylococcus aureus , dan Pseudomonas aeruginosa . Menurut  penelitian  Sari  (2010)  memberikan hasil  bahwa  ekstrak  infusa  daun  Sirsak memiliki aktivitas antibakteri terhadap Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus . Menurut  Oroh  (2015)  memberikan  hasil bahwa  ekstrak  tumbuhan  paku  memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli. Menurut Rundengan  (2017)  ekstrak  etanol  dari  biji pinang  yaki  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap Escherichia  coli , Staphylococcus aureus , dan Pseudomonas aeruginosa .

## KESIMPULAN
1.  Ekstrak  etanol  tangkai  buah  Pinang  Yaki ( Areca vestiaria ) memiliki senyawa metabolit sekunder yaitu Flavonoid, Saponin, dan Triterpenoid.
2.  Ekstrak  etanol  tangkai  buah  Pinang  Yaki ( Areca vestiaria ) memiliki aktivitas sebagai  antibakteri  terhadap E.  coli , S. aureus , dan P. aeruginosa. Konsentrasi 4% dan  5%  merupakan  konsentrasi  yang termasuk  dalam  golongan  kuat  untuk menghambat  bakteri E.  coli dan P. aeruginosa sedangkan    pada  konsentrasi ekstrak  2%,  3%,  4%,  dan  5%    merupakan konsentrasi  yang  termasuk  golongan  yang kuat untuk  menghambat bakteri S. aureus.

## SARAN
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk  mengetahui  senyawa  spesifik  yang berkhasiat  sebagai  antibakteri  pada  tangkai buah  Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria )  dan aktivitas antibakterinya pada bakteri pathogen yang lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Adam  A.    A.    2014 . Aktivitas  Antibakteri Esktrak  Kasar  Tunikata Polycarpa
aurata Terhadap Streptococcus mutans . [Skripsi]. Manado.
Universitas Sam Ratulangi Manado.
Davis  dan  Stout,  1971. Disc  Plate  Method  Of Microbiological Antibiotic Essay .
Journal Of Microbiology.  Vol 22 No 4. Frengki., Roslizawaty., Pertiwi D.  2014. Uji Toksisitas  Ekstrak  Etanol  Sarang Semut  Lokal  Aceh  (Mymercodia  sp.) Dengan  Metode  BSLT  Terhadap Larva  Udang  Artemia  salina  Leach .
Jurnal  Medika  Viterinaria  8(1):  0853- 194 Hidayat  S.,  Hanum.  F.,  Ismail.  A.  2015.
Efektivitas  Daya  Hambat  Dan  Daya Bunuh  Bakteri Ulkus  Traumatikus Pada Mukosa Mulut Dengan Berbagai Konsentrasi  Propolis  ( Trigona  sp ). Media  Dental  Intelektual  .  Vol  (2)  : 79-84.
Kuete,  V., Justin K., Lois  P.  S.,  Banthelemi
N.,    Herve  MP.  P.,  Pantaleon  A.,  & Banaventure T. N. 2010. Antimicrobial activities of the
methanol extract, fractios and compounds  from  Ficus  polita  Vahl . (Moraceae). BMC  Complementary and Alternative Medicine , 11:6.
Lay,  B.    W.    1994. Analisis  Mikroba  di Laboratorium .  Edisi 1.  Raja Grafindo Persada, Jakarta
Mogaddam,  K.  M.,  Mohammad  A.,  Jamal R.,    Sassan  R.,  Parisa  J.    F.  7  Ahmad R.    G.  2010 .    The  Antifungal  Activity of Sarcococca saligna Ethanol Extract and  its  Combination  Effect  with Aspergillus  Species .    Appl Biochem Biotechmol .  162: 127-133
Mpila,  Deby.    A.    2012.    Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun
Mayana (Coleus  Atropurpuneus  [L] Benth) Terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan
Psedumonas  aeruginosa .    Program Studi  Farmasi  FMIPA  UNSRAT, 95115 Oroh SB. Kandou FEF. Pelealu J.Pandiangan D.  2015.Uji  Daya  Hambat  Ekstrak Methanol Selaginela  Delicatula Dan Diplazium
Dilatatum
Terhadap
Bakteri Stapyhlococcus  aureus dan Escherichia  coli. Jurnal  Ilmiah  Sains.
15(1): 52-58
Rostinawati,  T.,  2009,  Aktivitas  Antibakteri
Ekstrak Etanol Bunga Rosella (Hibiscus  Sabdariffa  L.)  Terhadap Escherichia  Coli,  Salmonella  Typhi Dan  Staphylococcus  Aureus  Dengan Metode Difusi Agar, Penelitian Mandiri : Fakultas Farmasi, Universitas Padjajaran. Radji, Maksum., 2010. Buku Ajar Mikrobiologi  :  Panduan  mahasiswa
Farmasi  dan  Kedokteran.  Jakarta: EGC.
Rundengan,  C.  H.,  Fatimawali.,  H.  Simbala. 2017.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak Etanol  Biji  Pinang  Yaki  ( Areca vestiaria ) Terhadap Bakteri Stapyhlococcus  aureus,  Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa. Jurnal Ilmiah Farmasi . 6:( 1 ) 37-46
Simbala  H  E  I,  Rondonuwu  S  J,  Syamsul  A
A, de Queljoe E, 2005. Pemberdayaan Keanekaragaman Tumbuhan  Obat  di  Sulawesi  Utara (Tahap II) tahun 2005.
Simbala H E I.  2007.  Uji Toksisitas dan Uji Preklinik  Areca  vestiaria/Pinang  yaki sebagai antifertilitas.
Simbala,  H.E.I.  2006.  Keanekaragaman
Floristik  dan  Pemanfaatannya  sebagai Tumbuhan Obat di Kawasan Konservasi II Taman Nasional Bogani Nani  Wartabone  (Kabupaten  Bolaang Mongondow Sulawesi Utara).
Disertasi .  Institut  Pertanian  Bogor, Bogor.