## Pengaruh Pemberian Diet Tinggi Lemak Tinggi Gula terhadap Gambaran Histologi Hati Tikus Wistart Usia Kanak-Kanak
Effect of High Fat High Sugar Diet on Liver Histology of Wistart Rats of Childhood Agethe
Mohammad Ikbal Gusman 1 , Jelita Inayah S 1 , Rosdianah Rahim 1 , Dewi Setiawati 1 , Fatmawati 2 1 Pendidikan Dokter FKIK Universitas Islam Negeri Alauddin, Makassar| email : kedokteran@uin-alauddin.ac.id
2 Departemen Ilmu Falaq FSH Universitas Islam Negeri Alauddin, Makassar| email : piaud.ftk@uin-alauddin.ac.id *Korespondensi Penulis : mohammadikbal1403@gmail.com
Abstrak
Latar belakang: Non Alcoholic Fatty Liver Disease (NAFLD) atau perlemakan hati non alcohol adalah penyakit degeneratif yang berkaitan erat dengan obesitas.
Tujuan: untuk  melihat  pengaruh  pemberian  diet  tinggi  lemak,  tinggi  gula  terhadap  gambaran  hati  tikust  wistar  usia  kanak-kanak  dengan kelompok kontrol. Serta perbandingan berat hati kelompok perlakuan dan kelompok kontrol. Metode: penelitian eksperimental laboratorium dengan sampel penelitian 8 ekor Tikus Wistar berumur 8 minggu dengan berat 180 gram serta dilakukan adaptasi 2 minggu dan dibagi 2 kelompok yaitu kelompok perlakuan dan kelompok kontrol dengan pemberian pakan dan minuman secara ad libitum selama 7 minggu . Analisis data menggunakan uji Independent T-test . Hasil: Rerata perbandingan berat hati lebih besar pada kelompok perlakuan (A) sebesar 12,75 gram dibandingkan kelompok kontrol 9,25 gram. Persentase kerusakan sel hati pada kelompok perlakuan lebih besar didandingkan kelompok kontrol dengan nilai rata-rata kelompok perlakuan (A) sebesar 91,10% dan kelompok kontrol (B) 4,07% (p = 0,000).
Kesimpulan: Pemberian diet tinggi lemak tinggi gula dapat mempengaruhi perubahan gambaran hati tikust wistart usia kanak-kanak dengan perbandingan persentase kerusakan tertinggi pada kelompok perlakuan dibdanding kelompok kontrol. Serta pemberian diet tinggi lemak tinggi gula mempengaruhi penambahan berat hati tertinggi pada kelompok perlakuan dibandingkan kelompok kontrol.
Kata Kunci: NAFLD; Diet Tinggi Lemak; Diet Tinggi Gula

## Abstract
Introduction: Non-Alcoholic Fatty Liver Disease (NAFLD) or non-alcoholic fatty liver is a degenerative disease that is closely related to obesity.
Objective: to see the effect of giving a high-fat, high-sugar diet on the liver picture of Wistar rats of childhood age with the control group. As well as a comparison of the liver weight of the treatment group and the control group.
Method: experimental laboratory research with a research sample of 8 Wistar rats aged 8 weeks weighing 180 grams and carried out 2 weeks of adaptation and divided into 2 groups, namely the treatment group and the control group by giving food and drink ad libitum for 7 weeks. Data analysis using the Independent T-test test.
Result: The mean comparison of liver weight was more significant in the treatment group (A) at 12.75 grams compared to the control group at 9.25 grams. The percentage of liver cell damage in the treatment group was more significant than the control group with an average value of treatment group (A) of 91.10% and control group (B) of 4.07% (p = 0.000).
Conclusion: Giving a high-fat high-sugar diet can affect changes in the liver picture of childhood wistart mice with the highest percentage comparison of damage in the treatment group compared to the control group. As well as giving a high-fat high-sugar diet affects the highest liver weight gain in the treatment group compared to the control group.
Keywords: NAFLD; High-Fat; High-Sugar Diet

## ISSN 2597– 6052
DOI: https://doi.org/10.56338/mppki.v6i12.3996

## MPPKI

## Media Publikasi Promosi Kesehatan Indonesia
The Indonesian Journal of Health Promotion
Research Articles
Open Access

## PENDAHULUAN
Malnutrisi  adalah  keadaan  yang  disebabkan  oleh  ketidakseimbangan  antara  pengambilan  makanan  dengan kebutuhan gizi untuk tumbuh dan berkembang. Indonesia masih menghadapi permasalahan gizi yang berdampak serius terhadap kualitas sumber daya manusia (SDM), salah satunya adalah malnutrisi. Sesorang akan mengalami malnutrisi jika tidak mengonsumsi makanan dengan jumlah, jenis, dan kualitas gizi yang memadai untuk diet yang sehat dalam jangka waktu yang lama (1). Malnutrisi masih menjadi masalah kesehatan anak di Indonesia dengan prevalensi gizi lebih 3,1%, gizi kurang 11,8% dan gizi buruk 3,9% (2).
Dari  data riskesdas  di atas  mengungkapkan  bahwa saat  ini  Indonesia  mempunyai  tiga  beban masalah  gizi ( triple  burden )  yaitu  stunting,  wasting  dan  obesitas.(3)  Obesitas  merupakan  masalah  kesehatan  yang  banyak mengenai anak dan menyebabkan gangguan kesehatan yang dapat berlangsung seumur hidup jika dibiarkan.(4) Studi literatur yang dilakukan Sharma, et al, didapatkan bahwa obesitas akan berisiko tinggi untuk mengalami sindrom metabolik yang terdiri atas hiperglikemia, dislipidemia, hipertensi, resiko kardiovaskuler, gangguan paru, penyakit hati non alcoholic ( Non alcoholic fatty liver disease , NAFLD), dan lainnya.(5) Perlemakan hati ( fatty liver disingkat FL) merupakan penyakit yang ditandai dengan adanya trigliserida dengan jumlah lebih dari 5% pada  hepatosit. FL dibagi menjadi dua: perlemakan hati non-alcoholic (non-alcoholic fatty liver, disingkat NAFLD) dan perlemakan hati alcoholic ( alcoholic fatty liver, disingkat AFLD).(6) NAFLD didefinisikan sebagai deposisi lipid yang signifikan dalam hepatosit >5% dari hepatosit sarat lemak di hati, tanpa bukti cedera hepatoseluler atau fibrosis.(7)
NAFLD adalah akumulasi lemak di sel hati yang mirip dengan penyakit hati alkoholik tanpa adanya asupan alkohol, dimana masih bersifat refersibel namun jika tidak ada perubahan gaya hidup akan meningkat menjadi NASH ( Non alcoholic steatohepatitis ) yang nantinya akan memperbesar terjadinya berbagai derajat fibrosis (8).
Pada  masa  kini  prevalensi  NAFLD  diseluruh  dunia  sekitar  25,24%  dengan  prevalensi  tertinggi  di  Timur Tengah dan Amerika Selatan, terendah di Afrika(9) dan asia 27,4%.(10) NAFDL pada anak usia 5-9 tahun sekitar 3%, remaja 8-11% dan 38% untuk remaja obesitas.(11) Studi terbaru menunjukkan sekitar 25% anak-anak dengan NAFLD memiliki NASH dan telah menunjukan bahwa fibrosis hati merupakan penanda prognostik terpenting dari perkembangan penyakit hati (12).
NAFLD sering dikaitkan dengan diet tinggi lemak, obesitas, dan resistensi insulin yang akan mengarah pada gangguan  lipolisis  di  perifer,  sehingga  mengakibatkan  peningkatan  asam  lemak  ke  hati  meningkat  dan  terjadi Ketidakseimbangan antara sintesis, absorbsi serta sekresi asam lemak yang akan menimbulkan akumulasi di hati membentuk  NAFLD.(13)  Asupan  fruktosa  juga  telah  dikaitkan  dengan  perkembangan  penyakit  hati,  sedangkan menghindari fruktosa mengarah pada perbaikan NAFLD. Metabolisme fruktosa memiliki banyak aspek unik, yang paling terpenting adalah kemampuannya untuk mendukung peningkatan De Novo Lipogenesis (DNL) hati. Studi  pada  hewan  pengerat  dan  manusia  menunjukkan  bahwa  DNL  hati  adalah  kelainan  sentral  dalam perkembangan NAFLD. Fruktosa merangsang lipogenesis dengan cara yang tidak bergantung pada insulin, dan itu menginduksi resistensi insulin dengan mengaktifkan isoform PKC (Protein kinase C) baru dan dengan menghasilkan zat perantara lipid dengan sendirinya dapat meningkatkan perkembangan penyakit hati berlemak. DNL hati, asupan makanan, dan lipolisis adiposit merupakan kontributor penting untuk NAFLD.(14)
NAFLD dapat memicu perubahan bentuk histologi hati terutama pada sel hepatosit dan mempengaruhi struktur di sekitarnya. Perubahan ini juga bisa disertai dengan penambahan berat hati ( hepatomegaly ) akibat akumulasi lemak, lipid droppled ( steatosis ), ballooning hepatosis , peradangan di lobus hati ( inflamasi lobuler ) dan fibrosis.(13) Berdasarakan pemaparan di atas maka kami tertarik untuk melakukan penelitian bagaiaman pola diet tinggi lemak tinggi gula akan mempengaruhi gambaran histologi hati pada tikus wistart yang jika dianalogikan umurnya setara dengan usia kanak-kanak pada manusia.

## METODE
Jenis penelitian yang dilakukan adalah eksperimental laboratorium dengan menggunakan desain rancangan penelitian kelompok kontrol ( post test with control group ). Penelitian ini menggunakan 8 ekor Tikus Putih (Rattus Novergicus) Strain Wistar berumur 8 Minggu dengan berat badan 180 gram dan dibagi menjadi 2 kelompok secara random yaitu kelompok perlakuan (pemberian pakan diet tinggi lemak serta minuman tinggi gula) dan kelompok kontrol (pemberian pakan dan minuman standart). Pemberian pakan dan minuman diberikan selama 7 minggu secara ad libitum. Setelah 7 minggu perlakuan, dilakukan sacrifice (dislokasi servical) kepada 2 kelompok dan dilakukan pengambilan organ hati untuk pembuatan preparate histologi dengan pewarnaan HE. Preparate histologi lalu dilihat di bawah mikroskop untuk menilai kerusakan hati. Penilaian kerusakan hati menggunakan aplkasi image J dengan mengambil  4  sudut  pandang  yaitu  kiri  atas,  kanan  atas,  kirih  bawah  dan  kanan  bawah  yang  dianggap  paling representatif terhadap kerusakan sel hati. Data yang diambil meruapakan data primer yang akan diolah menggunakan uji statistic SPSS 25.0.00 version for windows dengan uji perbandingan independent sampel t test .
Penelitian  ini  telah  mendapat  izin  dari  Komite  Etik  Penelitian  Kesehatan  Fakultas  Kedokteran  dan  ilmu kesehatan UIN Alauddin Makassar dengan B-2134/Un.06.1-FKIK/PP.09/6/2021.

## HASIL
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  didapatkan  data  perbandingan  berat  hati  tikus  kelompok perlakuan dan kelompok kontrol sebagai berikut:
Grafik 1. Perbandingan rerata berat hati kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol Keterangan:
A : Kelompok Perlakuan
B : Kelompok Kontrol
Secara deskriptif diketahui bahwa rata-rata berat hati pada kelompok tikus A sebesar 12,75 gram dan pada tikus  B  sebesar  9,25  gram.  Data  terlebih  dahulu  diuji  normalitas  menggunakan uji  normalitas  Saphiro-Wilk  dan didapatkan hasil data berdistribusi normal, dengan nilai signifikansi kelompok A dan B masing-masing sebesar 0,900 dan 0.086 yang lebih besar dari 0.05, sedemikian sehingga kedua kelompok tikus mengikuti sebaran normal.
Untuk mengetahui homogenitas kedua kelompok sampel dilakukan uji Levene Test pada perbandingan berat hati kelompok A dan kelompok B didapatkan bahwa p > 0,05 sehingga variasi antar kelompok homogen.
Hasil data yang diperoleh berdistribusi normal dan homogen (p > 0,05), maka untuk mengetahui Perbandingan perbedaan berat hati dari kedua kelompok maka dilakukan uji t independent. Berdasarkan hasil yang didapatkan dari uji t independent diketahui nilai signifikansi sebesar 0,116 > 0,05 yang berarti tidak terdapat perbedaan berat hati tikus yang signifikan antara kelompok A dan kelompok B.
Sedangkan hasil Perbandingan gambaran kerusakan sel hati kelompok kontrol dan kelompok perlakuan dapat dilihat sebagai berikut:
Gambar 1. Gambaran histopatologi Hati Kelompok Kontrol pulasan H.E. (B1). Tikus I panah merah : steatosis mikrovasikuler  pada  sel  hepatosit,  Panah  hitam:  Sel  hati  normal  tersusun  rapat  dan  radier,  Panah  hiaju;  Ruang perisinusoid.  (B2).  Tikus  II  Panah  hitam;  Sel  hati  normal  tersusun  rapat,  Panah  hijau;  Ruang  perisinusoid. Pembesaran 40x 10.
Gambar  2. Gambaran  histopatologi  Hati  Kelompok  Perlakuan  pulasan  H.E.  (A1).  Tikus  I  panah  merah  : clearing sitoplasma, Panah hitam: Degenerasi balloning, Panah hiaju; Droplet lipid mikrovasikuler, Panah Kuning; sel bengkak. (A2). Tikus II Panah hijau; sel hepatosit dengan mikrovaskuler.(A3). Tikus III Panah biru; Inflamasi lobuler. Pembesaran 40x 10.
Grafik 2. batang Perbandingan kerusakan hati kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol Keterangan:
A : Kelompok Perlakuan
B
: Kelompok Kontrol
Dari  data  di  atas  dapat  di  lihat  bahwa  nilai  rata-rata  kerusakan  sel  untuk  kelompok  A  sangat  tinggi dibandingkan  kelompok  B  yakni  sebesar  91,10%.  Sedangkan  kelompok  B  hanya  terdapat  kerusakan  sel  sebesar 4,07%.
Uji Shapiro wilk dilakukan untuk kedua kelompok tikus berdasarkan kerusakan sel diketahui berdistribusi normal. Hal tersebut karena nilai signifikansi kedua kelompok tersebut sebesar 0,437 dan 0,919 yang lebih besar dari tingkat signifikansi 0,05. Setelah itu dilakukan uji Levene Test pada perbandingan kerusakan sel hati kelompok A dan kelompok B didapatkan bahwa p > 0,05 sehingga variasi antar kelompok homogen.
Hasil data yang diperoleh berdistribusi normal dan homogen (p > 0,05), maka untuk mengetahui Perbandingan kerusakan sel hati dari kedua kelompok maka dilakukan uji independent t test. Berdasarkan hasil yang didapatkan dari uji independent t test diketahui nilai signifikansi sebesar 0,000 yang berarti kurang dari taraf signfikansi 0,05 sehingga terdapat perbedaan perbandingan kerusakan sel hati yang signifikan dari kedua kelompok.

## PEMBAHASAN Pengukuran berat hati tikus
Perlemakan hati idealnya diikuti dengan kenaikan berat hati.  walaupun hasil secara statistik tidak terdapat perbedaan bermakna yang signifikan, Akan tetapi pada pengukuran langsung setelah sacrifice didapatkan berat hati tertinggi pada kelompok tikus perlakuan adalah 17 gram dan terendah 9 gram sedangkan pada kelompok kontrol tertinggi 12 gram dan terendah 8 gram. Ini membuktikan bahwa perlemakan hati diikuti dengan kenaikan berat hati (hepatomegaly).
Penelitian yang dilakukan oleh Nadia et al, didapatkan bahwa pemberian diet tinggi lemak pada 10 tikus jantan dewasa  selama  6  minggu  menunjukkan  pembesaran  hati  (hepatomegaly).(15)  Pemberian  diet  tinggi  lemak mempengaruhi  sistem  metabolisme  lipid  di  hati  dalam  keadaan  seperti  itu  kadar  lipolisis  trigliserida  basal  (TG) meningkat  di  adiposit,  dan  lebih  banyak  asam  lemak  bebas  (FFA)  dilepaskan  ke  dalam  sistem  peredaran  darah. Kelebihan  FFA  yang  bersirkulasi  dapat  dikirim  ke  jaringan  target  seperti  hati.  Asam  lemak  dioksidasi  oleh mitokondria  atau  dimasukkan  ke  dalam  TG,  mengakibatkan  akumulasi  lipid  di  hati  sehingga  mengakibatkan perlemakan hati (fatty liver) yang diikuti dengan kenaikan berat hati.(16)

## Pengamatan perubahan histologi hati tikus
Pengamatan  dilakukan  dengan  menggunakan  mikroskop  untuk  melakukan  pemeriksaan  hitopatologi  yang menjadi gold standart pada perlemakan hati non alkohol. Dari hasil yang didapatkan pada pemberian diet tinggi lemak  tinggi  gula  ad  libitum  pada  kelompok  perlakuan  dapat  menyebabkan  perubahan  morfologi  sel  hati  yang tadinya baik terjadi kerusakan. Sedangkan pada kelompok kontrol jarang ditemukan perubahan morfologi kerusakan sel  hati,  ini  disebabkan  karena  kelompok  kontrol  hanya  diberi  pakan  standar  ad  libitum  selama  penelitian berlangsung.  Hal  ini  ditandai  dengan  hasil  analisis  statistik  prosentase  kerusakan  sel  hati  menunjukkan  terdapat perbedaan  signifikan  antara  kelompok  perlakuan  dan  kelompok  kontrol.  ini  didukung  oleh  Penelitian  yang dilakaukan oleh Rosa maria et al didapatkan terjadi banyak perubahan morfologi hati pada 4 tikus yang di sacrifice pada  minggu  ke  4  dalam  kelompok  permberian  diet  tinggi  lemak  dibandingkan  4  tikus  pada  kelompok  pakan standart.(17)
Hasil  pengamatan  gambaran  sel hati tikus  kontrol masih tampak sel  hati  normal  tersusun  rapat dan radier mengelilingi vena sentralis yang berhubungan dengan ruang perisinusoid, gambaran intake, intinya ditengah dengan sitoplasma yang normal serta butir-butir glikogen masih tampak secara ultrastruktual. Walaupun di salah satu lapang pandang  terdapat  gambaran  steatosis  mikrovesikuler  dengan  grade  yang  rendah  hal  ini  tidak  menjadi  gambaran adanya kerusakan morfologi sel hati yang bermakna.
Sedangkan  pada  tikus  perlakuan  didapatakan  beberapa  perbedaan  yaitu  pada  sel  hati  tampak  degenerasi ballooning, lipid dropled dengan bentuk mikrovesikuler, tampak sel bengkak dan juga clearing sitoplasma serta inti yang sudah hilang. Kemudian pada beberapa tempat ditemukan inflamasi lobuler walaupun masih minimal, hal ini membuktikan mulai terbentuk peradangan pada lobulus hati, dimana seharusnya peradangan lobulus hati tidak ada pada hati yang normal. Hal ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Rosa maria et al menunjukan pemberian diet tinggi lemak memberikan gambaran perubahan hati yaitu pembengkakan hepatosit dan steatosis makrovesikuler dengan banyak vakuola sitoplasma diamati pada lebih dari 90% hepatosit.(17)
Penelitian yang dilakukan oleh Asgharphour A et al mengenai pemberian diet tinggi lemak tinggi gula pada tikus model selama 8 minggu terbukti membentuk NAFLD dan pemberian selama 16-24 minggu dapat membentuk NASH. Diet tinggi lemak dapat memicu gangguan lipolisis di perifer sehingga kadar asam lemak bebas (FFA) yang diangkut  ke  hati  akan  meningkat.  Peningkatan  sintesis  FFA  yang  tidak  sebanding  dengan  pemanfaatannya  akan memicu akumulasi lipid di hati yang bermanifestasi sebagai perlemakan hati/steatosis. Jika hal ini terus dibiarkan maka  kedepannya  sel-sel  hati akan bertamabah  rusak  dan  membentuk  gambaran  degenerasi ballooning, inflmasi lobuler hingga kerusakan sel hati yang lebih besar.(18)
Pemberian  diet  tinggi  gula  juga  sangat  berkontribusi  besar  dalam  hal  kerusakan  sel  hati.  Penelitian  yang dilakukan  zaki  et  al  menunjukan  pemberian  diet  tinggi  gula  pada  6  tikus  selama  6  minggu  mempercepat  dan memperparah kerusakan sel-sel hati.(19)

## KESIMPULAN
Pada penelitian ini, pemberian diet tinggi lemak tinggi gula mempengaruhi pembesaran hati (hepatomegaly) serta gambaran hati tikus wistart usia kanak-kanak.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Suharidewi IGAT, Pinatih GI. GAMBARAN STATUS GIZI PADA ANAK TK DI WILAYAH KERJA UPT KESMAS BLAHBATUH II KABUPATEN GIANYAR TAHUN 2015. E-Jurnal Med Udayana [Internet]. 2017 Jun 15 [cited 2023 Jul 8];6(6). Available from: https://ojs.unud.ac.id/index.php/eum/article/view/31484
2. Kemenkes RI. Profil Kesehatan Indonesia 2018 [Internet]. Health Statistics. 2019. 207 p. Available from: https://www.kemkes.go.id/downloads/resources/download/pusdatin/profil-kesehatan-indonesia/profil- kesehatan-indonesia-2018.pdf
3. Setiyo  P,  Fakultas  N,  Masyarakat  K,  Muhammadiyah  U,  Timur  K,  No  J,  et  al.  JENIS  KELAMIN  DAN UMUR BERISIKO TERHADAP OBESITAS PADA REMAJA DI INDONESIA. An-Nadaa J Kesehat Masy [Internet].  2020  Dec  19  [cited  2023  Jul  8];7(2):110–4.  Available  from:  https://ojs.uniska- bjm.ac.id/index.php/ANN/article/view/3581
4. Zamzani M, Hadi H, Astiti D. Aktivitas fisik berhubungan dengan kejadian obesitas pada anak Sekolah Dasar. J  Gizi  dan  Diet  Indones  (Indonesian  J  Nutr  Diet  [Internet].  2017  May  22  [cited  2023  Jul  8];4(3):123–8. Available from: https://ejournal.almaata.ac.id/index.php/IJND/article/view/339
5. Sharma V, Coleman S, Nixon J, Sharples L, Hamilton-Shield J, Rutter H, et al. A systematic review and meta- analysis estimating the population prevalence of comorbidities in children and adolescents aged 5 to 18 years. Obes  Rev  [Internet].  2019  Oct  1  [cited  2023  Jul  8];20(10):1341–9.  Available  from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31342672/
6. Ravertio D, Subroto T, Ketut Mariadi I, Somayana G, Made I, Dwipayana P. GAMBARAN PERLEMAKAN HATI  NON-ALKOHOLIK  DI  RSUP  SANGLAH  DENPASAR  PERIODE  TAHUN  2017-2018.  E-Jurnal Med  Udayana  [Internet].  2019  Feb  19  [cited  2023  Jul  8];8(2):2019.  Available  from: https://ojs.unud.ac.id/index.php/eum/article/view/48563
7. Temple JL, Cordero P, Li J, Nguyen V, Oben JA. A Guide to Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in Childhood and  Adolescence.  Int  J  Mol  Sci  [Internet].  2016  Jun  15  [cited  2023  Jul  8];17(6).  Available  from: /pmc/articles/PMC4926480/
8. Bedossa  P.  Histological  Assessment  of  NAFLD.  Dig  Dis  Sci  [Internet].  2016  May  1  [cited  2023  Jul 8];61(5):1348–55. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26874689/
9. Fang  YL,  Chen  H,  Wang  CL,  Liang  L.  Pathogenesis  of  non-alcoholic  fatty  liver  disease  in  children  and adolescence: From “two hit theory” to “multiple hit model.” World J Gastroenterol [Internet]. 2018 Jul 21 [cited 2023 Jul 8];24(27):2974–83. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30038464/
10. Fan JG, Kim SU, Wong VWS. New trends on obesity and NAFLD in Asia. J Hepatol [Internet]. 2017 Oct 1 [cited 2023 Jul 8];67(4):862–73. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28642059/
11. Wegermann K, Suzuki A, Mavis AM, Abdelmalek MF, Diehl AM, Moylan CA. Tackling Nonalcoholic Fatty Liver Disease: Three Targeted Populations. Hepatology [Internet]. 2021 Mar 1 [cited 2023 Jul 8];73(3):1199– 206. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32865242/
12. Corte C Della, Carpino G, De Vito R, De Stefanis C, Alisi A, Cianfarani S, et al. Docosahexanoic Acid Plus Vitamin D Treatment Improves Features of NAFLD in Children with Serum Vitamin D Deficiency: Results from  a  Single  Centre  Trial.  PLoS  One  [Internet].  2016  Dec  1  [cited  2023  Jul  8];11(12).  Available  from: /pmc/articles/PMC5158039/
13. Sari JI, Jusuf AA, Krisnuhoni E. Perbandingan Berat Hati Tikus Spraque Dawley yang Diberikan Diet Kurang Kalori,  Cukup  Kalori,  dan  Tinggi  Kalori  pada  Masa  Pertumbuhan.  Alami  J  (Alauddin  Islam  Medical)  J. 2018;2(2):15.
14. Softic S, Cohen DE, Kahn CR. Role of Dietary Fructose and Hepatic De Novo Lipogenesis in Fatty Liver Disease.  Dig  Dis  Sci  [Internet].  2016  May  1  [cited  2023  Jul  8];61(5):1282–93.  Available  from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26856717/
15. Hassan N, Soliman G, Okasha E, Shalaby A. Histological, Immunohistochemical, and Biochemical Study of Experimentally  Induced  Fatty  Liver  in  Adult  Male  Albino  Rat  and  the  Possible  Protective  Role  of Pomegranate.  J  Microsc  Ultrastruct  [Internet].  2018  [cited  2023  Jul  8];6(1):44.  Available  from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30023266/
16. Zhang Y, Ge S, Yang Z, Li Z, Gong X, Zhang Q, et al. Disturbance of di-(2-ethylhexyl) phthalate in hepatic lipid metabolism in rats fed with high fat diet. Food Chem Toxicol [Internet]. 2020 Dec 1 [cited 2023 Jul 8];146. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33166671/
17. Piña-Zentella  RM,  Rosado  JL,  Gallegos-Corona  MA,  Madrigal-Pérez  LA,  García  OP,  Ramos-Gomez  M. Lycopene Improves Diet-Mediated Recuperation in Rat Model of Nonalcoholic Fatty Liver Disease. J Med Food [Internet]. 2016 Jun 1 [cited 2023 Jul 8];19(6):607–14. Available from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27214602/
18. Asgharpour A, Cazanave SC, Pacana T, Seneshaw M, Vincent R, Banini BA, et al. A diet-induced animal model of non-alcoholic fatty liver disease and hepatocellular cancer. J Hepatol [Internet]. 2016 Sep 1 [cited 2023 Jul 8];65(3):579–88. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27261415/
19. Zaki SM, Fattah SA, Hassan DS. The differential effects of high-fat and high- -fructose diets on the liver of male albino rat and the proposed underlying mechanisms. Folia Morphol (Warsz) [Internet]. 2019 [cited 2023 Jul 8];78(1):124–36. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30009361/