e-ISSN 2540-9840 p-ISSN 1412-3770
Accredited by Ministry of Education, Culture,                                      DOI: https://doi.org/10.35799/jis.v23i2.49392 Research and Technology No: 105/E/KPT/2022         Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/v3/index.php/jis

## Pengaruh Konsentrasi Flavonoid Bajakah Tampala Merah sebagai Antibakteri pada Bacillus subtilis
Devika Khoirul Hafifah 1*) , Suparno 2)
1,2) Program Studi Fisika, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Yogyakarta, Yogyakarta 55281, Indonesia *Corresponding author: devikakhoirul.2019@student.uny.ac.id

## ABSTRAK
Bajakah tampala merah ( Spatholobus littoralis Hassk.) adalah salah satu jenis bajakah yang dimanfaatkan  masyarakat  Dayak  sebagai  obat  tradisional.  Akar  bajakah  tampala  merah mengandung senyawa kimia yaitu flavonoid yang memiliki aktivitas antibakteri. Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  konsentrasi  flavonoid  ekstrak  akar  bajakah tampala merah terhadap daya hambat bakteri Bacillus subtilis dan lamanya waktu bertahan. Ekstrak  akar  bajakah  diperoleh  dengan  metode  dekoktasi.  Kandungan  flavonoid  yang terdapat pada ekstrak bajakah ditentukan dengan metode spektrofotometri visible . Ukuran partikel ditentukan dengan Particle Size Analyzer (PSA) dan daya hambatnya diuji dengan teknik Kirby  Bauer .  Sebagai  upaya  untuk  mengidentifikasi  ekstrak  akar  bajakah  telah dilakukan  pengukuran  massa  jenis,  viskositas,  dan  indeks  bias.  Hasil  uji  dengan  metode spektrofotometri visible diketahui  bahwa  sampel  memiliki  konsentrasi  flavonoid  sebesar 16,28 ppm. Sedangkan hasil uji PSA diperoleh ukuran partikel ekstrak bajakah sebesar 94,6 nm. Hasil uji antibakteri menunjukkan bahwa diameter zona bening meningkat dari (6,23 ± 0,03) mm hingga (7,18 ± 0,06) mm sesuai dengan peningkatan konsentrasi flavonoid dari 10 ppm  hingga  30  ppm.  Kemampuan  ekstrak  bajakah  bertahan  dalam  menghambat  bakteri bervariasi dari 48 jam hingga 72 jam. Hasil pengukuran massa jenis, viskositas, dan indeks bias  adalah  (0,960 ± 0,002)  gram/cm 3 ,  (0,890 ± 0,010) 𝑁. 𝑠/𝑚 2 ,  dan  1,3350 ± 0,0005 secara berurutan.
Kata kunci: Bajakah tampala merah; Bacillus subtilis ; dekoktasi; flavonoid

## Effect of Red Bajakah Tampala Flavonoid Concentration as Antibacterial on Bacillus subtilis

## ABSTRACT
Red bajakah tampala ( Spatholobus littoralis Hassk.) is one type of bajakah that the Dayak people use as traditional medicine. Red bajakah tampala roots contain chemical compounds, namely flavonoids, which have antibacterial activity. This study aims to determine the effect of flavonoid concentration of red  bajakah tampala root extract on the inhibitory power of Bacillus subtilis bacteria and the length of survival time. Bajakah root extract is obtained by decoctation  method. The  flavonoid  content  contained  in  bajakah  extract  was  determined using the visible spectrophotometric method. The particle size was determined by a particle size analyzer (PSA), and the inhibition was tested by the Kirby Bauer technique. In an effort to identify bajakah root extract, density, viscosity, and refractive index were measured. The test  results  using  the  visible  spectrophotometric  method  showed  that  the  sample  had  a flavonoid  concentration  of  16.28  ppm.  Meanwhile,  the  PSA  test  results  showed  that  the particle size of bajakah extract was 94.6 nm. The antibacterial test results showed that the diameter of the clear zone increased from (6.23 ± 0.03) mm to (7.18 ± 0.06) mm according to the increase in flavonoid concentration from 10 ppm to 30 ppm. The ability of bajakah
extract  to  survive  in  inhibiting  bacteria  varied  from  48  hours  to  72  hours. The  results  of measurements  of  density,  viscosity,  and  refractive  index  are (0,960 ± 0,002)  gram/cm 3 , (0,890 ± 0,010) 𝑁. 𝑠/𝑚 2 , dan 1,3350 ± 0,0005 respectively.
Keywords: Bacillus subtilis ; decoctation ; flavonoids; red bajakah tampala
(Article History:  Received 11-07-2023; Accepted 11-10-2023; Published 12-10-2023)

## PENDAHULUAN
Bajakah tampala merah ( Spatholobus littoralis Hassk.) merupakan tanaman khas dari pulau  Kalimantan.  Masyarakat  tradisional  Dayak  yang  tinggal  di  pulau  ini  secara  turun temurun  telah  memanfaatkan  bajakah  sebagai  obat  tradisional  (Adawiyah et  al .,  2019). Tanaman tersebut sering dimanfaatkan untuk menyembuhkan luka, mengobati diare, pegal linu,  disentri, menyembuhkan  kanker,  dan  berbagai  penyakit  lainnya  (Nastiti  &  Nugraha, 2022).
Bajakah  tampala  merah  mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  salah  satunya yaitu flavonoid. Senyawa flavonoid memiliki aktivitas antioksidan yang berkontribusi dalam meningkatkan  pertahanan  tubuh  dari ancaman  bakteri  patogen,  menangkal  radikal  bebas, dan  mencegah  berbagai  penyakit  (Saputera  &  Ayuchecaria,  2018;  Hasna et  al .,  2021). Menurut Fitriani & Saputra (2020), aktivitas antioksidan pada flavonoid bajakah tampala merah khususnya bagian akar mempunyai kategori sangat kuat sehingga memiliki potensi besar untuk dijadikan sebagai bahan antibakteri.
Bacillus subtilis merupakan salah satu bakteri penyebab munculnya banyak penyakit. Bakteri ini dapat menginfeksi beberapa organ tubuh sehingga menyebabkan penyakit antara lain endokarditis, meningitis, infeksi mata, dan infeksi gastroenteristis (Armayani, 2013). Infeksi  gastroenteristis  akibat Bacillus  subtilis ditularkan  melalui  kontaminasi  makanan (Sudarwati, 2018). Gejala infeksi gastroenteristis antara lain diare, muntah, sakit kepala, dan abdominal (Prihandani et al ., 2015).
Pengobatan  infeksi  akibat  bakteri  ini  dapat  dilakukan  dengan  menekan  populasi Bacillus  subtilis pada  tubuh.  Secara  umum,  pengobatan  yang  biasa  dilakukan  untuk mengatasi  infeksi  akibat  bakteri  yaitu  dengan  pemberian  obat  antibiotik.  Namun, penggunaan  antibiotik  yang  berlebihan  dapat  menimbulkan  resistensi  bakteri  terhadap antibiotik  yang  dapat  memperburuk  kesehatan  (Fakhrurrozi  &  Subrata,  2021).  Menurut World Health Organization (2019), jika tidak ada upaya penanganan lebih lanjut terhadap resistensi antibiotik maka diperkirakan akan terdapat kematian sebanyak 10 juta jiwa setiap tahunnya pada tahun 2050. Oleh karena itu, dengan penggunaan akar bajakah tampala merah sebagai salah salah bahan obat yang berasal dari alam dapat menjadi alternatif pengganti obat antibiotik yang diharapkan tidak meningkatkan resistansi.
Resistansi  bakteri  terhadap  bahan  antibakteri  kimiawi  dapat  diatasi  dengan  cara fisikawi. Secara fisika, bahan antibakteri dengan ukuran partikel 1-100 nm (nanopartikel) memiliki kemampuan antibakteri dan tidak menimbulkan resistansi (Deviyanti, 2019). Oleh karena itu, dalam penelitian ini ekstrak akar bajakah diproses sehingga menjadi nanopartikel.
Di samping ukuran partikelnya, juga telah ditentukan beberapa besaran fisika yang lain.  Besaran  fisika  tersebut  adalah  massa  jenis,  viskositas,  dan  indeks  bias.  Pengukuran tersebut dilakukan dalam rangka identifikasi dan karakterisasi ekstrak akar bajakah tampala
merah yang dimanfaatkan sebagai bahan antibakteri selama penelitian ini.
Penelitian  untuk  mengungkap  efektivitas  ekstrak  akar  bajakah  tampala  merah sebagai  bahan  antibakteri  telah  dilakukan.  Penelitian  itu  dilakukan  dengan  metode eksperimen  dengan  membandingkan  efektivitas  ekstrak  akar  bajakah  sebagai  bahan antibakteri  dengan  kloramfenikol  sebagai  kontrol  positif  dan  akuades  sebagai  kontrol negatif.    Tujuan  penelitian  ini  yaitu menganalisis  pengaruh  konsentrasi  flavonoid ekstrak akar  bajakah  tampala  merah  terhadap  daya  hambat  bakteri Bacillus  subtilis dan  lamanya waktu bertahan.

## METODE PENELITIAN

## Preparasi Ekstrak Akar Bajakah Tampala Merah
Preparasi  sampel  bajakah  tampala  merah  dilakukan  dengan  metode  dekoktasi. Metode ini dilakukan dengan merebus simplisia akar bajakah tampala merah sebanyak 150 gram dalam 1500 ml akuades menggunakan titik didih air yaitu 100 °C sampai volumenya berkurang 50% (Atun, 2014).

## Karakterisasi Ekstrak Akar Bajakah Tampala Merah

## A. Penentuan Kandungan Flavonoid
Kandungan  flavonoid  ekstrak  bajakah  tampala  merah  ditentukan  dengan spektrofotometer visible di Laboratorium komersial Cendekia Nanotech Hutama, Semarang. Penentuan flavonoid ini menggunakan metode kolometri (AlCl 3 ), dengan kuersetin sebagai larutan  standar.  Untuk  menentukan  kadar  flavonoid  total  pada  sampel  digunakan metode kalibrasi kurva baku (Puspitasari & Prayogo, 2016).

## B. Penentuan Ukuran Partikel
Ukuran  partikel  ekstrak  bajakah  ditentukan  mengunakan particle  size  analyzer Microtrac Nanotrac Wave II untuk mengetahui ukuran partikel yang terlarut. Sebelumnya, partikel yang terlarut di dalam ekstrak bajakah  diperkecil melalui proses sentrifugasi dan filtrasi  dengan milipore .  Pertama,  ekstrak  bajakah  dilakukan  proses  sentrifugasi menggunakan Jiawanshun 8x20 ml PRP Centrifuge Machine WCY091 dengan kecepatan 4000 rpm selang waktu 30 menit selama 2 jam (Setiawan & Nurjanah, 2018). Kedua, ekstrak bajakah  yang  telah  melalui  proses  sentrifugasi  kemudian  difilter  menggunakan  filter milipore dengan  ukuran  pori  0,22 𝜇𝑚 dan  diameter  25  mm  untuk  mendapatkan  ukuran partikel sampel mencapai nanopartikel (Hamida, 2021).
C. Penentuan Massa Jenis, Viskositas, dan Indeks Bias
Penentuan  sifat  fisik  lain  yang  dilakukan  untuk  mengidentifikasi  ekstrak  bajakah tampala  merah  yaitu  massa  jenis,  viskositas,  dan  indeks  bias.  Penentuan  massa  jenis dilakukan menggunakan volumetric flask , viskositas menggunakan viskometer Ostwald, dan indeks bias menggunakan hand held refractometer HT312ATC.

## Pembuatan Variasi Konsentrasi Flavonoid
Sampel  induk  dengan  konsentrasi  32,5  ppm  diencerkan  dengan  menggunakan akuades menjadi sampel dengan konsentrasi 10 ppm, 15 ppm, 20 ppm, 25 ppm, dan 30 ppm dengan menggunakan persamaan (Setiawan, 2013):
𝐶 1 𝑉 1 = 𝐶 2 𝑉 2 (1)
dimana, 𝐶 1 = konsentrasi larutan induk (ppm)
𝐶 2 = konsentrasi yang diinginkan (ppm) 𝑉 1 = volume larutan yang ditambahkan akuades (ml)
𝑉 2 = volume yang diinginkan (ml)

## Pengujian Sifat Antibakteri Ekstrak Akar Bajakah Tampala Merah
Uji  antibakteri  dilakukan  di  Laboratorium  mikrobiologi  Fakultas  Matematika  dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Yogyakarta dengan menggunakan teknik Kirby Bauer yang diawali dengan pembuatan Nutrien Broth (NB) untuk media peremajaan bakteri dan Mueller Hinton Agar (MHA) untuk media pertumbuhan bakteri. Satu ose isolate bakteri dimasukkan ke dalam 20 ml media NB dan di letakkan pada shaker selama 24 jam. Setelah diremajakan, bakteri tersebut diratakan ke dalam cawan petri berisi media MHA yang telah padat dan diatasnya diletakkan 7 paper disk blank yang sebelumnya telah direndam ke dalam sampel  (5  buah),  kloramfenikol  (1  buah)  sebagai  kontrol  positif  dan  akuades  (1  buah) sebagai kontrol negatif. Selanjutnya  di lakukan pengamatan dan pengukuran zona bening yang terukur di sekitar blank disk setiap 3 jam selama 72 jam pada suhu 25 °C (Palupi & Suparno, 2020). Hasilnya disajikan dalam bentuk grafik hubungan antara waktu pengamatan dan  diameter  zona  bening  untuk  5  buah  konsentrasi  sampel  yang  berbeda.  Skema pembentukan zona bening dapat dilihat pada Gambar 1 .
Gambar 1 . Zona bening di sekitar paper disk blank

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses  dekoktasi  yang  dilakukan  menghasilkan  ekstrak  bajakah  tampala  merah dengan  konsentrasi  200  g/l.  Ekstrak  bajakah  tersebut  setelah  diuji  dengan  menggunakan spektrofotometer visible di  laboratorium  Cendekia  Nanotech  Hutama  Semarang menghasilkan  kandungan  flavonoid  sebesar  16,28  ppm.  Menurut  Henaulu  &  Kaihena (2020),  senyawa  antibakteri  yang  terkandung  pada  ekstrak  meningkat  seiring  dengan peningkatan konsentrasi ekstrak. Oleh sebab itu, sampel dipekatkan dengan cara penguapan untuk meningkatkan konsentrasi dan diperoleh sampel induk dengan konsentrasi 32,5 ppm. Dari  sampel  induk  ini  diturunkan  5  buah  sampel  lain  dengan  metode  pengenceran menggunakan akuades sehingga diperoleh sampel dengan konsentrasi 10 ppm, 15 ppm, 20 ppm, 25 ppm, dan 30 ppm.
Penentuan ukuran partikel menggunakan particle size analyzer (PSA) menghasilkan bahwa ekstrak akar bajakah tampala merah yang terlarut menunjukkan bahwa 83% volume dari  sampel  berukuran  94,6  nm.  Artinya,  ukuran  94,6  nm  tersebut  dominan  dengan presentase mendekati 100% dan termasuk kedalam rentang ukuran nanopartikel yaitu 1-100 nm  (Manurung,  2018).  Ukuran  partikel  ekstrak  bajakah  dalam  skala  nanometer  ini diharapkan mampu menembus bakteri Bacillus subtilis yang mempunyai lebar 0,7 𝜇𝑚 dan panjang 2 𝜇𝑚 dengan aktivitas merusak sel bakteri hingga mematikan bakteri (Wakita et al ., 2001). Dalam hal ini, partikel ekstrak dengan ukuran nanometer diharapkan mudah masuk ke dalam bakteri sehingga dapat merusak bakteri atau hingga mematikan bakteri.
Penentuan  fisik  massa  jenis,  viskositas,  dan  indeks  bias  menghasilkan  (0,960 ± 0,002) gram/cm 3 , (0,890 ± 0,010) 𝑁. 𝑠/𝑚 2 , dan 1,3350 ± 0,0005 secara berurutan. Beberapa sifat fisik tersebut dapat menggambarkan ciri khas dari ekstrak akar bajakah tampala merah. Oleh karena itu, penentuan ini sangat penting agar kita dapat mengetahui perlakuan yang tepat  untuk  tetap  mempertahankan  kualitas  dari  ekstrak  akar  bajakah  tampala  merah. Perlakuan yang dapat dilakukan untuk menjaga kualitas dari ekstrak bajakah ini yaitu dengan penyimpanan  ekstrak  dengan  baik  pada  lemari  pendingin  dan  menjaga  suhunya  dalam kondisi  konstan,  sehingga  dapat  meminimalkan  risiko  penggumpalan  yang  dapat mempengaruhi  besarnya  massa  jenis,  viskositas,  dan  indeks  bias  pada  ekstrak  bajakah tampala merah.
Pengujian kemampuan antibakteri yang dilakukan menggunakan Teknik Kirby Bauer menunjukkan bahwa di sekeliling kloramfenikol dan semua sampel ekstrak bajakah tampala merah menunjukkan adanya zona bening. Di luar daerah zona bening itu bakteri tumbuh dengan  baik  sedangkan  di  daerah  zona  bening  bakteri  tidak  mampu  tumbuh.  Sedangkan untuk paper  disk blank yang  direndam  dengan  akuades  tidak  menunjukkan  adanya  zona bening.  Pemilihan  akuades  sebagai  kontrol  negatif  karena  akuades  tidak  memiliki  sifat antibakteri  sehingga  dapat  menunjukkan  bahwa  zona  bening  yang  terbentuk  murni  dari aktivitas senyawa aktif yang terdapat pada ekstrak akar bajakah tampala merah. Zona bening yang terbentuk pada fase stasioner pada setiap konsentrasi  dimulai dari jam ke-21 hingga jam ke-48 sedangkan pada kloramfenikol terjadi pada jam ke-36 hingga jam ke-48. Di atas jam  ke-48  ekstrak  akar  bajakah  dan  kloramfenikol  masih  menunjukkan  adanya  aktivitas antibakteri sampai jam ke-72 meskipun sangat kecil. Nilai rata-rata diameter zona bening pada konsentrasi 10 ppm, 15 ppm, 20 ppm, 25 ppm, dan 30 ppm berturut-turut yaitu (6,23 ± 0,03) mm, (6,41 ± 0,05) mm, (6,92 ± 0,06) mm, (7,06 ± 0,06) mm, dan (7,18 ± 0,06) mm. Sedangkan  pada  kloramfenikol  memiliki  rata-rata  diameter  (11,86  ±  0,58)  mm.  Hasil pembentukan zona bening dapat dilihat pada Gambar 2 dan rata-rata diameter zona bening pada fase stasioner pada Tabel 1.
Ket: A=10 ppm, B=15 ppm, C= 20 ppm, D=25 ppm, E= 30 ppm
− = Kontrol negatif, + = Kontrol positif Gambar 2. Pembentukan diameter zona bening pada fase stasioner
Tabel 1. Nilai rata-rata diameter zona bening pada fase stasioner
Bahan Antibakteri Rata-Rata Diameter Zona Bening (mm) 10 ppm 6,23 ± 0,03 15 ppm 6,41 ± 0,05 20 ppm 6,92 ± 0,06 25 ppm 7,06 ± 0,06 30 ppm 7,18 ± 0,06 Kloramfenikol 11,86 ± 0,58
Dari Tabel 1 dapat diketahui bahwa diameter zona bening meningkat sejalan dengan peningkatan  konsentrasi  flavonoid  sebagai  bahan  antibakteri.  Hal  tersebut  boleh  jadi diakibatkan karena semakin besar konsentrasi flavonoid, semakin banyak ‘pasukan’ yang dapat  dikerahkan  untuk  membunuh  bakteri  uji  sehingga  mereka  mampu  membebaskan daerah yang lebih luas dari musuhnya (bakteri Bacillus subtilis ). Hasil tersebut sesuai dengan penyataan Brooks et al . (2005) yang menyatakan bahwa efektivitas dari bahan antibakteri dipengaruhi oleh konsentrasi zat yang diberikan, semakin tinggi konsentrasi semakin tinggi pula  bahan  aktif  antibakteri  sehingga  dapat  meningkatkan  kemampuannya  dalam menghambat  bakteri.  Pernyataan  tersebut  didukung  pula  oleh  penelitian  yang  dilakukan Tanauma et al . (2016) dan Dhuha et al . (2016), bahwa kemampuan dari bahan antibakteri dipengaruhi  oleh  konsentrasi  zat  antibakteri  yang  terkandung  didalamnya.  Keberadaan senyawa  flavonoid  pada  ekstrak  bajakah  boleh  jadi  memiliki  peranan  penting  dalam menghambat bakteri uji berdasarkan mekanismenya sebagai bahan antibakteri. Mekanisme antibakteri dari senyawa flavonoid yaitu melalui penghambatan sintesis dinding sel bakteri, fungsi membran sel, sintesis protein dan asam nukleat (Husniah & Gunata, 2020; Heni et al .,  2015).  Mekanisme  penghambatan  inilah  yang  dapat  mengganggu  pertumbuhan  atau
bahkan hingga membunuh bakteri yang ditunjukkan melalui pembentukan zona bening.
Berdasarkan data yang disajikan pada Tabel 1, diketahui bahwa diameter zona bening semua sampel ekstrak masih jauh berada di bawah diameter zona bening kloramfenikol. Hal ini  boleh  jadi  disebabkan  karena  konsentrasi  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  masih relatif  rendah.  Sehingga  untuk  mendapatkan  efek  antibakteri  seperti  kloramfenikol, konsentrasi  flavonoid  perlu  ditingkatkan  hingga  ke  tingkat  yang  diperlukan.  Konsentrasi flavonoid  ekstrak  bajakah  tersebut  dapat  ditingkatkan  dengan  cara  penguapan  melalui pemanasan.  Selain  itu,  akuades  yang  menjadi  kontrol  negatif  tidak  menunjukkan  adanya aktivitas antibakteri karena akuades merupakan bahan organik yang dibutuhkan oleh semua makhluk hidup termasuk bakteri Bacillus subtilis .
Setiap  konsentrasi  ekstrak  bajakah  dan  kloramfenikol  memiliki  kemampuan  yang berbeda berdasarkan lama waktu bertahan. Apabila terdapat kenaikan konsentrasi flavonoid ekstrak maka semakin lama waktu interaksi antara ekstrak dengan bakteri sehingga semakin banyak  bakteri  yang  terhambat  pertumbuhannya  (Sabir,  2005). Hasil  pengamatan  pada penelitian  ini  diketahui  bahwa  ekstrak  akar  bajakah  tampala  merah  dengan  konsentrasi flavonoid sebesar 10 ppm, 15 ppm, 20 ppm, 25 ppm, dan 30 ppm dapat menghambat bakteri uji berturut turut yaitu selama 48 jam, 51 jam, 57 jam, 69 jam, dan 72 jam. Sedangkan pada kloramfenikol zona bening yang teramati dapat bertahan lebih dari 72 jam.  Hasil tersebut dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar 3. Grafik hubungan antara waktu pengamatan terhadap diameter zona bening
Berdasarkan Gambar 3 terlihat bahwa semakin tinggi konsentrasi flavonoid semakin lama  menunjukkan  kemampuan  menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Hal  itu  boleh  jadi disebabkan  karena  semakin  tinggi  konsentrasi  yang  digunakan  maka  kemampuannya semakin kuat dalam membunuh dan menghambat pertumbuhan bakteri sehingga semakin lama bakteri terhambat untuk tumbuh kembali. Dengan demikian, lamanya waktu bertahan
5.00 7.00 9.00 11.00 13.00 15.00 17.00 19.00 21.00 0 6 12 18 24 30 36 42 48 54 60 66 72 78 D iamet er Z o n a B en in g (mm) Waktu Pengamatan (jam) 10 ppm 15 ppm 20 ppm 25 ppm 30 ppm Kloramfenikol
atau lamanya bahan antibakteri berinteraksi (kontak) dengan bakteri dapat menjadi indikator untuk mengetahui daya hambat dari bahan antibakteri (Dwiyanti et al ., 2018).

## KESIMPULAN
Ekstrak  akar  bajakah  tampala  merah  memiliki  kemampuan  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri meskipun masih di bawah bahan antibakteri komersial, kloramfenikol. Semakin  tinggi  konsentrasi  flavonoid  maka  semakin  tinggi  pula  kemampuannya  dalam menghambat  bakteri Bacillus  subtilis dan  kemampuannya  menghambat  bakteri  dapat bertahan hingga 72 jam.

## DAFTAR PUSTAKA
Adawiyah, R., Maimunah, S., & Rosawanti, P. (2019). Keanekaragaman Tumbuhan Potensi Obat Tradisional di Hutan Kerangas Pasir Putih KHDTK UM Palangkaraya. Talenta Conference Series: Agricultural and Natural Resources (ANR) , 2 (1), 71–79.
Armayani, M. (2013). Pengaruh Iradiasi Gamma terhadap Aktivitas Antibakteri Kombinasi Ekstrak Etanol Temu Putih ( Curcuma zedoaria (Christm.) Roscoe.) dan Mahkota Dewa ( Phaleria  macrocarpa (Scheff)  Boerl.)  pada  Bakteri Bacillus  subtilis dan Staphylococcus  aureus. [Skripsi] . Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan, Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta, Jakarta.
Atun, S. (2014). Metode Isolasi dan Identifikasi Struktural Senyawa Organik Bahan Alam. Jurnal Konservasi Cagar Budaya Borobudur , 8 (2), 53–61.
Brooks,  Geo  F.,  Butel,  J.S.,  &  Morse,  S.A.  (2005).  Mikrobiologi  Kedokteran.  Salemba Medika, Jakarta.
Deviyanti,  S.  (2019).  Potensi  Antimikroba Photo  Activated  Disinfection terhadap Enterococcus faecalis pada Perawatan Saluran Akar Gigi. Cakradonya Dental Journal , 11 (1), 13–22.
Dhuha, S., Bodhi, W., & Kojong, N. (2016). Aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun lamun ( Syiringodium  isoetifolium )  terhadap  bakteri Pseudomonas  aeruginosa . Pharmacon , 5 (1), 231–237.
Dwiyanti, R.D.,  Muhlisin, A., & Lutpiatina, L. (2018). Efektivitas air perasan jeruk nipis ( Citrus aurantifolia ) dalam menghambat pertumbuhan Escherichia coli . Jurnal Skala Kesehatan , 9 (2).
Fakhrurrozi, M., & Subrata, I.M. (2021). Gambaran Penderita Diare  pada Balita di UPTD Puskesmas  II  Dinas  Kesehatan  Kecamatan  Denpasar  Barat  Periode  Juni-November Tahun 2019. Archive Community Health , 8 (3), 398–408.
Fitriani, E.S., & Saputra, S.H. (2020). Karakteristik Tanaman Akar Bajakah ( Spatholobus littoralis  Hassk )  dari  Loakulu  Kabupaten  Kutai  Kartanegara. Jurnal  Riset  Teknologi Industri , 14 (2), 365–376.
Hamida, F. (2021). Aktivitas antibakteri ekstrak kasar bakteriosin termofilik yang dihasilkan oleh Pediococcus  pentosaceus terhadap Salmonella  enteritidis dan Enterococcus casseliflavus . Sainstech Farma , 14 (1), 59–62.
Hasna,  L.Z.,  Sehkhaemi,  P.,  &  Aviciena,  M.A.  (2021).  Review:  Akar  Kayu  Bajakah  dan Manfaatnya  untuk  Kesehatan. FoodTech:  Jurnal  Teknologi  Pangan , 4 (1),  32–39. https://doi.org/10.26418/jft.v4i1.56637.
Henaulu,  A.H.,  &  Kaihena,  M.  (2020).  Potensi  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Kecipir ( Psophocarpus tetragonolobus (L.) DC) Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli dan Staphylococcus aureus In Vitro. Biofaal Journal , 1 (1), 44–54.
Heni,  Arreneuz,  S.,  &  Zaharah,  T.A.  (2015).  Efektivitas  antibakteri  ekstrak  kulit  batang belimbing  hutan  ( Baccaurea  angulata Merr.)  terhadap Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli . Jurnal Kimia Khatulistiwa , 4 (1), 84–90.
Husniah,  I.,  &  Gunata,  A.F.  (2020).  Ekstrak  kulit  nanas  sebagai  antibakteri. Jurnal Penelitian Perawat Profesional , 2 (1), 85–90.
Manurung,  P.G.  (2018).  Nanomaterial:  Tinjauan  Ilmu  Masa  Kini.  Penerbit  Andi, Yogyakarta.
Nastiti,  K.,  &  Nugraha,  D.F.  (2022).  Aktivitas  Antiinflamasi  Ekstrak  Kayu  Bajakah ( Spatholobus  littoralis Hask ):  Anti-inflammatory  Activity  of  Bajakah  Wood  Extract ( Spatholobus littoralis Hask ). Jurnal Surya Medika (JSM) , 7 (2), 45–50.
Palupi,  S.K.I.,  &  Suparno,  S.  (2020).  Ionic  Silver  Nanoparticles  (Ag+)  Sebagai  Bahan Antibiotik Alternatif Untuk Salmonella Typhymurium. Indonesian Journal of Applied Physics , 10 (01), 8–15.
Prihandani,  S.,  Poeloengan,  M.,  Noor,  S.M.,  &  Andriani.  (2015).  Uji  daya  antibakteri bawang putih ( Allium sativum L.) terhadap bakteri Staphylococcus aureus , Eschericia coli , Salmonella  typhimurium dan Pseudomonas  aeruginosa dalam  meningkatkan keamanan pangan. Informatika Pertanian , 24 (1), 53–58.
Puspitasari,  A.D.,  &  Prayogo,  L.S.  (2016).  Pengaruh  waktu  perebusan  terhadap  kadar flavonoid total daun kersen ( Muntingia calabura ). Jurnal Inovasi Teknik Kimia , 1 (2), 104–108.
Sabir,  A.  (2005).  Aktivitas  antibakteri  flavonoid  propolis  Trigona  sp  terhadap  bakteri Streptococcus mutans (in vitro). Majalah Kedokteran Gigi , 38 (3), 135–141.
Saputera, M.M.A., & Ayuchecaria, N. (2018). Uji efektivitas ekstrak etanolik batang bajakah tampala  ( Spatholobus  littoralis Hassk.)  terhadap  waktu  penyembuhan  luka. Jurnal Ilmiah Ibnu Sina , 3 (2), 318–327.
Setiawan, A.A. (2013). Pengaruh Konsentrasi Ion Pb 2+ Terhadap Daya Serap Kulit Kacang Tanah, Sekam Padi Dan Serbuk Gergaji. Sainmatika: Jurnal Ilmiah Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam , 10 (1), 51–58.
Setiawan,  N.C.E.,  &  Nurjanah,  A.  (2018).  Inhibisi  Xantin  Oksidase  oleh  Ekstrak  Daun Salam  ( Syzygium  polyanthum ). JC-T  (Journal  Cis-Trans):  Jurnal  Kimia  Dan Terapannya , 2 (1).
Sudarwati,  T.P.L.  (2018).  Aktivitas  Antibakteri  Daun  Pepaya  ( Carica  Papaya ) Menggunakan Pelarut Etanol Terhadap Bakteri Bacillus subtilis. Journal of Pharmacy and Science , 3 (2), 13–16.
Tanauma, H.A., Citraningtyas, G., & Lolo, W.A. (2016). Aktivitas antibakteri ekstrak biji kopi robusta ( Coffea canephora ) terhadap bakteri Escherichia coli . Pharmacon , 5 (4), 243–251.
Wakita, J., Shimada, H., Itoh, H., Matsuyama, T., & Matsushita, M. (2001). Periodic colony formation  by  bacterial  species  Bacillus  subtilis. Journal  of  the  Physical  Society  of Japan , 70 (3), 911–919.
World Health Organization. (2019). New report calls for urgent action to avert antimicrobial resistance crisis. Available at: https://www.who.int/news/item/29-04-2019-new-report- calls-for-urgent-action-to-avert-antimicrobial-resistance-crisis.  Diakses  tanggal  1 Februari 2023.