https://e-journal.upr.ac.id/index.php/JK DOI: 10.37304/jkupr.v12i1.12853

## AKTIVITAS ANTIBAKTERI PROPOLIS MADU PUTIH SUMBAWA TERHADAP PERTUMBUHAN
Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus dan Escherichia coli
ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF SUMBAWA WHITE HONEY PROPOLIS ON THE GROWTH OF Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus and Escherichia coli
Eustachius Hagni Wardoyo 1 , Nurmi Hasbi 1* , Rosyunita 1 , Adelia Riezka Rahim 2 , Ida Ayu Arnawati 2 , Saskia Safarina Haza 2 , Lale Nandhita Hulfifa 2 , Abiel Dwi Cahya Firdaus Alamsyah 2 , I Komang Satya Validika 2
1 Departemen Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Mataram, Mataram, Nusa Tenggara Barat, Indonesia. *email: nurmihasbi@unram.ac.id
2 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Mataram, Mataram, Nusa Tenggara Barat, Indonesia
( Naskah diterima: 11 Maret 2024. Disetujui: 28 April 2024)
Abstrak. Saat ini kematian akibat resistensi antimikroba di dunia mencapai 700 ribu orang per tahun. Salah satu bahan yang dapat digunakan sebagai obat infeksi mikroba adalah propolis madu. Propolis madu putih Sumbawa menjadi salah satu produk hayati yang belum banyak dieksplorasi sifat antibakterinya. Tujuan penelitian untuk mengetahui kandungan fitokimia dan potensi antibakteri propolis  madu putih Sumbawa terhadap Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli. Penelitian  ini  merupakan true  experiment desain post-test  only  control  group .  Propolis diekstrak  secara  maserasi  menggunakan  propilen  glikol.  Konsentrasi  yang  digunakan  100%,  75%,  50%  dan  25%. Kontrol positif kloramfenikol dan kontrol negatif DMSO 10%. Deteksi uji antibakteri dilakukan sebanyak tiga replikasi pada Mueller Hinton Agar secara difusi cakram dengan mengukur zona hambat. Data dianalisis menggunakan uji One Way  Anova .  Propolis  madu  putih  Sumbawa  mengandung  senyawa  flavonoid,  tanin  dan  triterpenoid.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  propolis  tidak  mampu  menghambat E.  coli zona  hambat  sebesar  0  mm.  Propolis  madu  putih Sumbawa  mampu  menghambat  pertumbuhan S.  epidermidis dan S.  aureus .  Namun  propolis  madu  putih  Sumbawa terhadap  kedua  bakteri  gram  positif  masuk  dalam  katerori  lemah  dibandingkan  kontrol  positif.  Hal  ini  dikarenakan aktivitas propolis madu putih Sumbawa  memiliki diameter zona hambat sebesar ≤ 5 mm dibandingkan kontrol positif kloramgenikol sebesar ≥ 20 mm.
Kata kunci: Antibakteri, Escherichia coli , propolis madu putih, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis
Abstract. Currently, deaths due to antimicrobial resistance the world 700 thousand people per year. One ingredient that can  be  used  as  medicine  for  microbial  infections  is  honey  propolis.  Sumbawa  white  honey  propolis  is  a  biological antibacterial  have  not  been  widely  explored.  The  aim  was  to  determine  the  phytochemical  content  and  antibacterial potential  of  Sumbawa  white  honey  propolis  against Staphylococcus  epidermidis , Staphylococcus  aureus and Escherichia  coli .  This  research  is  a  true  experiment  post-test  only  control  group  design.  Propolis  is  extracted  by maceration  using  propylene  glycol.  The  concentrations  are  100%,  75%,  50%  and  25%.  Chloramphenicol  positive control and 10%DMSO negative control. The antibacterial  was detected in three replications on Mueller Hinton  Agar by disc diffusion by measuring the inhibition zone. Data were analyzed the One WayAnova test. Sumbawa white honey propolis  contains  flavonoids,  tannins  and  triterpenoids.  The  results  showed  propolis  was  unable  to  inhibit E.  coli in 0mm  zone.  Sumbawa  white  honey  propolis  is  able  to  inhibit  the  growth  of S.  epidermidis and S.  aureus .  However, Sumbawa white honey propolis against both gram-positive bacteria was in the weak category compared to the positive control, Because Sumbawa white honey propolis has an inhibitory zone diameter of ≤ 5 mm compared to the positive control of ≥ 20 mm.
Keywords: antibacterial, Escherichia coli , Staphylococus aureus, Staphylococcus epidermidis, white honey propolis

## PENDAHULUAN
Permasalahan  resistensi  antimikroba  di  bidang kesehatan  menjadi  perhatian  bagi  semua  pihak,  selain
pandemi Covid-19 yang masih berlangsung hingga saat ini.  Kondisi  tersebut  terjadi  akibat  penggunaan antibiotik  yang  tidak  sesuai  prosedur,  dan  perubahan atau  evolusi  mikroorganisme  itu  sendiri.  Saat  ini
kematian  akibat  resistensi  antimikroba Antimicrobial Resistance (AMR)  mencapai  700 ribu orang per tahun dan  diprediksi  pada  tahun  2050  bisa  mencapai  10  juta orang  per  tahun  di  seluruh  dunia.  Penyebaran  terbesar
berada  di  Asia  sekitar  4,7  kasus,  Afrika  sebanyak  4,1 juta kasus dan lainnya tersebar di Australia, Eropa, dan Amerika.  Penyebab  terjadinya  resistensi  antimikroba ditinjau dari sudut pandang kesehatan, mulai dari tidak
adanya  indikasi  penggunaan  antimikroba  yang  tidak rasional,  pemilihan  antimikroba  yang  tidak  tepat,  dan dosis  yang  tidak  tepat.  AMR  menimbulkan  ancaman kesehatan  global  yang  signifikan  terhadap  populasi  di seluruh  dunia.  Melalui  perdagangan  dan  perjalanan global,  mikroorganisme  yang  resisten  dapat  menyebar dengan  sangat  cepat  sehingga  tidak  ada  negara  yang aman dari AMR 1 . Staphylococus epidermidis, Staphylocccous aureus dan Escherichia  coli merupakan  kelompok bakteri  resistensi  antibiotik  yang  sering  menginfeksi manusia. S.  epidermidis dan S.  aureus merupakan bakteri  gram  positif  yang  sering  menginfeksi  manusia dan  sering  menjadi  penyebab  penyakit  infeksi nosokomial  di  rumah  sakit.  Prevalensi  penyakit  ini  di dunia  mencapai  sebesar  9%  atau  kurang  lebih  1,4  juta pasien. E.  coli merupakan  bakteri  gram  negatif berbentuk  batang  dan  beberapa    strainnya  bersifat resisten serta patogen   bagi  manusia. Bakteri ini  dapat menyebabkan  gangguan  sisstem  pencernaan  yang dapat  menyebabkan  terjadinya  diare.  Salah  satu  cara untuk  mengatasi  berbagai  permasalahan  di  atas  adalah penggunaan  antibiotik.  Namun  pemberian  antibiotik yang  kurang  rasional  dapat  berdampak  efek  negatif bagi  tubuh  manusia  terutama  yang  berasal  dari  bahan kimia.  Bahan  kimia  yang  menumpuk  dalam  tubuh dapat  berdampak  penumpukan  toksin  juga  bagi  tubuh jika  digunakan  dalam  jangka  waktu  yang  lama.  Oleh karena  itu  diperlukan  usaha  untuk  menemukan antibiotik  alami  yang  dapat  menimalkan  risiko  bahaya toksiknya.
Propolis  madu telah lama dikenal  secara  umum sebagai  suplemen  alami  bagi  tubuh.  Propolis merupakan  resin  alami  yang  dihasilkan  oleh  lebah madu  yang  diperoleh  dari  kumpulan  bahan  tanaman untuk perbaikan dan pembuatan sarang serta perlindungan  dari  dunia  luar 2 .  Propolis  madu mengandung  berbagai  komponen  yang  mendukung sebagai antibakteri. Komposisi kimia propolis diantaranya  adalah  sebanyak  50%  resin,  30%  lilin, 10% minyak atsiri, 5% serbuk sari, dan zat lain seperti asam  fenolik,  flavonoid,  terpen,  aldehida  aromatik, alkohol,  stilben,  serta  β-steroid 3 .  Propolis  mempunyai efektivitas  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri pencemar  susu  penyebab  penyakit  bawaan  makanan pada  produk  susu  kemasan 4 .  Propolis  mampu menurunkan  pertumbuhan  jumlah  koloni  bakteri Streptococcus  mutans sebagai  penyebab  terbentuknya karies gigi 5 . Propolis mampu menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli. Produksi propolis  yang  tinggi  dihasilkan  oleh  lebah  jenis Trigonna sp dan Apis mellifera 6 . Apis mellifera dikenal sebagai  lebah  penghasil  madu  berwarna  putih.  Madu putih ini merupakan salah satu produk hayati unik yang terdapat  di  Pulau  Sumbawa,  Nusa  Tenggara  Barat. Potensi  madu  putih  sebagai  penghasil  antibakteri
berasal sudah ada yang melaporkan mampu menghambat  pertumbuhan  beberapa  jenis  bakteri patogen  seperti Escherihia  coli dan Staphyloccous aureus 7 . Namun sejauh pengamatan penulis, belum ada laporan  mengenai  potensi  propolis  madu  putih Sumbawa terhadap berbagai bakteri patogen. Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kandungan  fitokimia dan  potensi  antibakteri  propolis  madu  putih  Sumbawa terhadap  pertumbuhan Staphylococcus  epidermidis , Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Penelitian ini  diharapkan  dapat  menemukan  potensi  propolis madu  putih  Sumbawa  sebagai  alternatif  antibiotik  di masa mendatang untuk beberapa jenis bakteri patogen.

## METODE
Penelitian  ini  menggunakan  metode true experiment dengan  jenis  desain post-test  only  control group .  Sampel  dan  variabel  independen  diacak  secara maksimal dengan menggunakan teknik single blinding , sehingga  peneliti  tidak  mengetahui  alokasi  variabel independen  pada  setiap  sampel.  Penelitian  ini merupakan  percobaan  laboratorium  untuk  melihat potensi  antibakteri  propolis  madu  putih  Sumbawa terhadap  pertumbuhan  bakteri  patogen.  Penelitian dilaksanakan  dari  bulan  Juli  hingga  Desember  tahun 2023.  Penelitian  dilaksanakan  di Laboratorium Farmakologi  dan  Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Mataram. Alat-alat  yang  digunakan  antara  lain  peralatan  gelas laboratorium (Iwaki® dan Pyrex®), timbangan analitik (Pioneer™), (Iwaki® dan Pyrex®), Bio Safety Cabinet (Jisico), vortex (Heidolph),  incubator  skaker  (Labnet), blender,  penetes,  penggaris,  kertas  saring.  Bahan  yang digunakan  antara  lain  propolis  madu  Putih  Sumbawa yang  berasal  dari  Gunung  Tambora  Pulau  Sumbawa, Nusa  Tenggara  Barat , isolat  klinis Escherichia  coli, Staphylococcus  aureus,  Staphylococcus  epidermidis yang  berasal  dari  Laboratorium  Kesehatan  Daerah Provinsi Nusa Tenggara Barat. , NaCl 0,9% (Widatra), HCl 2N, propilen glikol, cakram antibiotik kloramfenikol 10 µg, kertas cakram kosong (Macherey-Nagel), larutan Mc Farland , media Mueller Hinton Agar, n-heksana, bubuk magnesium, HCl pekat, senyawa  tanin,  H 2 SO 4 ,  kloroform,  amonia,  pereaksi Wagne r, Mayer , dan Dragendorff dan akuades.

## Proses ekstraksi propolis
Metode ekstraksi yang digunakan pada penelitian  ini  adalah  metode  maserasi.  Langkah pertama  yang  dilakukan  yaitu  membekukan  propolis dalam  refrigerator  pada  suhu  -18°C  hingga  menjadi keras.  Tahapan  selanjutnya  propolis  yang  baku dihaluskan  menggunakan  blender.  Rendam  sampel ekstrak  propolis  yang  telah  dihaluskan  dalam  pelarut propilen glikol dengan perbandingan propolis: propilen
glikol yaitu sebesar 1:3.25. Sampel ditempatkan dalam inkubator shaker selama  24  jam.  Ekstrak  propolis dimurnikan  dengan  cara  menyaringnya  menggunakan kertas  saring  untuk  menyaring  residu  propolis 8 . Tahapan  selanjutnya  residu  disaring  dan  ditambahkan kembali  pelarut  propilen  glikol  sebanyak  300  ml, mengulangi  proses  sebelumnya  hingga  7  hari  pada suhu  kamar  dengan  tekanan  sekitar  1  atm  hingga diperoleh  filtrat  yang  jernih  dan  murni.  Kemudian dibuat  ekstrak  propolis  dengan  berbagai  konsentrasi yang  dibutuhkan  yaitu  25%,  50%,  75%  dan  100%. Konsentrasi –  konsentrasi  uji  dibuat  dengan mengencerkan  100%  ekstrak  propolis  hasil  proses maserasi  menggunakan  Dimetil  sulfoksida  (DMSO). Rumus pengenceran ekstrak propolis dapat menggunakan persamaan berikut: N1 x V1 = N2 x V2 Keterangan:
N1  : Konsentrasi awal N2  : Konsentrasi akhir V1  : Volume awal V2  : Volume akhir

## Skrining fitokimia Uji flavonoid
Ekstrak  propolis  sebanyak  0,05gram  dilarutkan dalam  n-heksana  dan  dimasukkan  ke  dalam  tabung reaksi.  Tahapan  selanjut  ditambahkan  0,1  mg  bubuk magnesium  dan  5  tetes  HCl  pekat.  Hasil  positif ditunjukkan  dengan  perubahan  warna  menjadi  warna kuning, oranye dan merah.

## Uji tanin
Ekstrak  propolis  dimasukkan  ke  dalam  tabung reaksi.  Ekstrak  direaksikan  dengan  FeCl 3 .  Jika  larutan mengandung  senyawa  tanin  maka  akan  menghasilkan warna hijau kehitaman atau biru tua.

## Uji triterpenoid
Sebanyak  1  ml  larutan  ekstrak  propolis dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi,  ditambahkan kloroform  dan  asam  sulfat  pekat.  Endapan  berwarna coklat kemerahan menunjukkan adanya triterpenoid.

## Uji alkaloid
Ekstrak propolis
sebanyak
0.05gram
ditambahkan  2  ml  kloroform  dan  2  ml  amonia  dan disaring.  Filtratnya  ditambahkan  3  sampai  5  tetes H 2 SO 4 pekat dan dikocok hingga membentuk 2 lapisan. Fraksi  asam  diambil,  kemudian  ditambahkan  pereaksi Wagne r, Mayer ,  dan Dragendorff masing-masing sebanyak  4  hingga  5  tetes.  Terbentuknya  endapan menunjukkan  bahwa  sampel  mengandung  alkaloid dengan  pereaksi Wagner memberikan  endapan berwarna coklat, pereaksi Mayer memberikan endapan putih,  dan  pereaksi Dragendorff memberikan  endapan kuning-merah.

## Uji saponin
Ekstrak  propolis  sebanyak  0,05gram  dilarutkan dalam  pelarut  n-heksana,  kemudian  dimasukkan  ke dalam  tabung  reaksi  dan  ditambahkan  5  ml  air  panas lalu  dikocok  kuat-kuat  selama  15  detik.  Ekstrak tersebut  ditambahkan  1  tetes  HCl  2  N.  Hasil  positif ditunjukkan  dengan  terbentuknya  busa  yang  stabil tidak kurang dari 10 menit dengan ketinggian 1-10 cm.

## Uji  Aktivitas  Antibakteri  Dengan  Metode  Difusi Kertas Cakram
Bakteri  patogen  diambil  sebanyak  1  ose dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  berisi  10  ml larutan  NaCl,  kemudiandihomogenisasi  menggunakan vortex dan disamakan kekeruhannya menggunakan Mc Farland.  Uji  sensitivitas  bakteri  pathogen  terhadap antibakteri  dari  propolis  madu  putih  dilakukan  dengan metode  difusi  cakram  pada  media Mueller  Hinton Agar .  Cakram  antibiotik  kloramfenikol  digunakan sebagai  kontrol  positif  dan  DMSO  sebagai  kontrol negatif.  Cakram  kosong  ditetesi  20  µL  larutan  uji hingga  merata  ke  seluruh  permukaan  cakram  dengan berbagai  konsentrasi  yang  telah  disiapkan.  Cakram tersebut  kemudian  diletakkan  pada  media  uji  yang telah ditambahkan bakteri, kemudian diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 o C. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan. Aktivitaz zona hambat  dihitung  dari  diameter  zona  hambat  yang terbentuk  di  sekitar  kertas  cakram.  Diameter  zona hambat diukur menggunakan penggar

## Analisis data
Data  penelitian  berupa  nilai  diameter  zona hambat propolis madu putih Sumbawa terhadap kontrol positif  dan  negatif  dianalisis  secara  statistik.  Data diameter  zona  hambat  propolis  madu  putih  berbagai konsentrasi  dan  kontrol  negatif  hambat  berdistribusi normal pada uji normalitas dianalisis menggunakan uji parametrik  One  Way  ANOVA  dengan  tingkat kepercayaan  95%  dengan  uji  lanjut.  Selanjutnya dilakukan  uji Post  Hoc .  Analisa  ini  dilakukan  antara perlakuan  propolis  madu  putih  dengan  kontrol  negatif untuk  mengetahui  ada  tidaknya  pengaruh  yang  nyata pada pemberian ekstrak terhadap bakteri patogen.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Skrining Fitokimia propolis
Skrining fitokimia merupakan salah satu metode yang digunakan untuk mengetahui kandungan senyawa dari  suatu  sampel  ataupun  bahan  uji.  Hasil  skrining fitokimia  menunjukkan  bahwa  ekstrak  propolis  madu putih  Sumbawa  mengandung  beberapa  senyawa metabolit  yaitu  flavonoid,  terpenoid  dan  tanin. Sedangkan  senyawa  alkaloid  dan  saponin  tidak ditemukan  dalam  propolis  madu  putih  sumbawa  pada tabel 1. Kandungan utama yang terdapat pada propolis adalah  flavonoid,  fenolat,  dan  campuran  bahan aromatik 3 .

## Tabel 1. Hasil skrining fitokimia propolis madu putih sumbawa
Uji Hasil Indikator Flavonoid + Perubahan warna Tanin + Perubahan warna dari hijau muda menjadi hijau kehitaman Triterpenoid + Endapan coklat kemerahan Alkaloid - Tidak ada endapan Saponin - Tidak terbentuk busa
Hasil  skrining  fitokimia  dapat  dipengaruhi oleh  jenis  pelarut  yang  digunakan.  Pelarut  propilen glikol  dilaporkan  dapat  menarik  senyawa  flavonoid dengan sangat baik pada sampel propolis 11 . Pernyataan ini  sesuai  dengan  hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh tim  peneliti,  yaitu  propolis  madu  putih  sumbawa mengandung  senyawa  flavonoid.  Propolis  yang diesktrasi menggunakan pelarut etanol dapat mengandung  senyawa  fitokimia  diantaranya  yaitu flavonoid,  alkaloid  dan  tanin 13 .  Hal  ini  menunjukkan bedanya  jenis  pelarut  yang  digunakan,  maka  akan menghasilkan  senyawa  fitokimia  yang  berbeda. Kandungan  senyawa  fitokimia  dalam  propolis  juga dapat  dipengaruhi  oleh  kondisi  geografis  dimana sampel tersebut didapatkan. Propolis yang berasal dari Jawa  Timur  memiliki  kandungan  senyawa  saponin, sedangkan  proprolis  yang  berasal  dari  Brazil  tidak ada 14 .  Propolis  yang  berasal  dari  Italia  mengandung kandungan  senyawa  fitokimia  berupa  flavonoid  dan fenolik 15 .  Hasil  berbeda  juga  ditemukan  bahwa propolis  yang  berasal  dari  Tanah  Laut  Soppeng memiliki kandungan flavonid dan fenolik 16 .

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  propolis  madu  putih Sumbawa terhadap Staphylococcus epidermidis , Staphylococus  aureus dan Escerichia  coli .  Propolis
madu putih Sumbawa pada penelitian ini hanya mampu menghambat  pertumbuhan  kelompok  bakteri  Gram positif  yaitu S.  epidermidis dan S. aureus . Ini berbeda dengan bakteri gram negatif yaitu E. coli tidak terdapat aktivitas  zona  hambat  dengan  diameter  sebesar  0  mm. Tabel  2  menunjukkan  hasil  penelitian  bahwa  propolis pada  berbagai  konsentrasi  mampu  menghambat pertumbuhan  bakteri S.  epidermidis .  Pada  konsentrasi 100%  didapatkan  rerata  sebesar  4.9  mm,  konsentrasi 75%  rerata  sebesar  4  mm,  konsentrasi  50%  rerata sebesar 2.9 mm dan konsentrasi 25% rerata sebesar 2.1 mm.  Diamater  zona  hambat  pada  kontrol  positif  yaitu cakram  kloramfenikol  menunjukkan  aktivitas  yang sangat  kuat  yaitu  sebesar  22  mm.  Kontrol  negatif DMSO  10%  sebesar  0  mm  yang  artinya  tidak  ada aktivitas zona hambat yang dihasilkan. Kontrol negatif dalam  penelitian  ini  dianggap  sebagai  pelarut  yang tepat  untuk  digunakan.  Zona  hambat  propolis  madu putih  Sumbawa  dalam  menghambat  pertumbuhan S. epidermidis termasuk  dalam  kategori  lemah,  hal  ini dikarenakan diameter zona hambatnya di bawah nilai 5 mm.  Jika  dibandingkan  penelitian  ini  dengan  hasil penelitian oleh peneliti lainnya, propolis yang diekstrak dengan  etil  asetat  mampu  menghambat  pertumbuhan S.epidermidis pada  konsentrasi  5%  sebesar  10  mm 17 . Hasil  ini  diduga  berbedanya  pelarut  yang  digunakan dapat menyebabkan berbeda juga aktivitas antibakterinya.
Tabel 2.  Antibakteri Propolis Madu Putih Sumbawa terhadap S. epidermidis Konsentrasi Diameter zona hambat (mm) Total (mm) Rerata (mm) ± SD Aktivitas I II III 25 2 2.3 2 6.3 2.1 ± 0.17 lemah 50 3 2.3 3.3 8.6 2.9 ± 0.51 lemah 75 4.1 4 4 12.1 4.0 ± 0.05 lemah 100 5 5 4.9 14.9 4.9 ± 0.05 Sedang Kontrol positif 22 22 22 66 22 Kuat Kontrol negatif 0 0 0 0 0 Tidak ada
Tabel 3. ANOVA RAL antibakteri propolis madu putih sumbawa terhadap S. epidemidis SK DB JK KT Fhit Ftab Ket 0.05 0.01 Perlakuan 3 15.61 5.20 111.49 3.3 5.56 * Galat/sisa 14 0.65 0.05 Total 17 16.26
Ket: TN: Berbeda tidak nyata dan *: Berbeda nyata
Tabel 4. Antibakteri propolis madu putih sumbawa terhadap S. aureus
Konsentrasi Diameter zona hambat (mm) Total (mm) Rerata (mm) ± SD Aktivitas I II III 25 0 0 0 0 0 Tidak ada 50 1.3 1.3 1.2 3.8 1.26 ± 0.05 lemah 75 2 2.3 3 7.3 2.0 ± 0.51 lemah 100 2.4 3 3 8.4 2.8 ± 0.34 lemah Kontrol positif 18 18 18 54 18 Tinggi Kontrol negatif 0 0 0 0 0 Tidak ada
Hasil  penelitian  menyajikan  bahwa  konsentrasi 100%  propolis  madu  putih  Sumbawa  memiliki  zona hambat  yang  paling  tinggi  dibandingkan  tiga konsentrasi  lainnya  (75%,  50%  dan  25%)  dalam menghambat  pertumbuhan S.  epidermidis .  Hal  ini menunjukkan semakin besar konsentrasi maka semakin besar  zona  hambat  yang  terbentuk.  Hasil  penelitian dilanjutkan dengan uji ANOVA untuk melihat signifan atau tidaknya data yang diperoleh berdasarkan berbagai konsentrasi. Hasil uji ANOVA menunjukkan bahwasanyaa  masing-masing  konsentrasi  berbeda secara  nyata  pada  tabel  3.  Hasil  analisis  ANOVA menunjukkan  hasil  nilai  Fhit  berbagai  konsentrasi madu  putih  Sumbawa  lebih  besar  dibandingkan  Ftab 0.05 dan Ftab 0.001. Hasil penelitian ini mengindikasikan  bahwa  tiap  perlakuan  konsentrasi propolis  madu  putih  Sumbawa  berpengaruh  secara signifikan  atau  berbeda  sangat  nyata.  Uji  aktivitas antibakteri  propolis  madu  putih  Sumbawa  terhadap
pertumbuhan S.  aureus dapat  dilihat  pada  tabel  4. Aktivitas  antibakteri  propolis  madu  putih  pada berbagai konsentrasi menunjukkan mampu menghambat  pertumbuhan  dari S.  aureus .  Diameter zona hambat pada konsentrasi 100% sebesar  2.8 mm, konsentrasi  75%  sebesar  2.4  mm,  konsentrasi  50% sebesar  1.3  mm  dan  konsentrasi  25%  tidak menunjukkan aktivitas yaitu sebesar 0 mm. Hasil rerata zona  hambat  dari  berbagai  konsentrasi  propolis terhadap S.  aureus dilakukan  uji  lanjut  ANOVA. Berdasarkan perhitungan ANOVA menunjukkan bahwa  tiap  konsentrasi  berbeda  secara  nyata. Walaupun aktivitasnnya sangat rendah. Hasil ini dapat dilihat  pada  tabel  5.  Berdasarkan  tabel  tersebut diperoleh  nilai  Fhitung  lebih  besar  dibandingkan  nilai Ftabel  0.05  dan  Ftabel  0.001.  Nilai  Fhitung  sebesar 87.29  sedangkan  nilai  pada  Ftabel  0.05  dan  0.01 masing-masing sebesar 3.3 dan 5.56.
Tabel 5. ANOVA RAL uji antibakteri propolis madu putih sumbawa terhadap S. aureus
SK DB JK KT Fhit Ftab Ket 0.05 0.01 Perlakuan 3 14.34 4.78 87.29 3.3 5.56 * Galat/sisa 14 0.77 0.05 Total 17 15.11 Ket: TN: Berbeda tidak nyata dan *: Berbeda nyata
Tabel 6. aktivitas antibakteri propolis madu putih Sumbawa terhadap E. coli Konsentrasi Diameter zona hambat (mm) Total (mm) Rerata (mm) Aktivitas I II III 25 0 0 0 0 0 Tidak ada 50 0 0 0 0 0 Tidak ada 75 0 0 0 0 0 Tidak ada 100 0 0 0 0 0 Tidak ada Kontrol positif 24 24 24 24 24 Tinggi Kontrol negatif 0 0 0 0 0 Tidak ada
Uji  aktivitas  antibakteri  propolis  madu  putih Sumbawa  pertumbuhan E.coli dapat  dilihat  pada  tabel 6.  Aktivitas  antibakteri  propolis  madu  putih  pada berbagai  konsentrasi  menunjukkan  tidak  mampu menghambat  pertumbuhan  dari E.  coli .  Diameter  zona
hambat  pada  semua  konsentrasi  sebesar  0  mm.  Hasil penelitian  ini  juga  didukung  oleh  penelitian  lain  yang mengatakan  bahwa  propolis  cair  tidak  mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram  negatif Escherichia  coli 18 .  Propolis  madu  hanya  mampu
menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram  negatif dibandingkan  bakteri  gram  negatif 18 . Hasil  penelitian ini  didukung  oleh  hasil  penelitian  lainnya  yang menyatakan  propolis  merek  komersil  pada  konsentrasi 100%  mampu  menghambat  terhadap  pertumbuhan S. aureus dengan  diameter  zona  hambat  sebesar  sebesar 8.62  mm 19 .  Jika  dibandingkan  dengan  hasil  penelitian penulis pada  konsentrasi  yang sama hanya  sebesar 2.8 mm,  maka  perbandingan  aktivitasnya  sebesar  1:4. Hasil kemungkinan dapat disebakan oleh jenis propolis yang digunakan. Pada penelitian tersebut menggunakan  propolis  bermerek  x  dalam  kemasan, sedangkan  propolis  yang  digunakan  oleh  peneliti merupakan  propolis  kasar  yang  langsung  diambil  dari alam  yang  hanya  melewati  proses  ekstraksi  secara maserasi tanpa ada campuran bahan tambahan lainnya. Hasil  penelitian  juga  menunjukkan  bahwasanya propolis  madu  putih  sumbawa  memiliki  kemampuan dalam menghambat bakteri S. epidermidis dibandingkan bakteri S. aureus pada semua konsentrasi.  Meskipun  kedua  jenis  bakteri  ini merupakan bakteri gram positif, akan tetapi memberikan  efek  antibakteri  propolis  yang  berbeda dengan  perbandingan  1  :  2  pada  semua  konsentrasi. Namun jika dimasukkan dalam  kategori diameter zona hambat  termasuk  dalam  kategori  yang  rendah  karena diameternya  dibawah  5  mm.  Propolis  mampu menghambat  pertumbuhan S.  aurues 20 , dan S. epidermidis 21. .  Hasil  penelitian  juga  meunjukkan bahwasanya  propolis  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri gram positif dibandingkan bakteri gram negatif. Hasil  ini  diakibatkan  propolis  dapat  berpengaruh terhadap  permeabiltas  membran  bakteri  patogen  dan gangguan  permebalitas  membrannya.  Propolis  dapat berinteraksi  dengan  dinding  sel  strain  bakteri  tersebut. Bakteri  gram  negatif  memiliki  struktur  spesifik  yang disebut  enzim  hidrolitik.  Enzim  ini  diduga  dapat memecah  komponen  aktif  dari  propolis  yaitu artepilin 22 .

## KESIMPULAN
Hasil  skrining  fitokimia  dari  propolis  madu putih  Sumbawa  yaitu  flavonoid,  terpenoid  dan  tanin. Propolis madu putih Sumbawa memiliki aktivitas zona hambat  terhadap  bakteri  gram  positif  yaitu S.aureus dan S.  epidermidis dan aktivitas  zona  hambantnya termasuk  dalam  kategori  rendah.  Sedangkan  pada bakteri  Gram  Negatif  yaitu E.coli tidak  terdapat diameter zona hambat atau diameternya 0 mm.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  kepada  disampaikan kepada  Lembaga  Penelitian  Pengabdian  Masyarakat (LPPM)  Universitas  Mataram  atas  Dana  PNBP Penelitian Peningkatan Kapasitas Tahun 2023. Ucapan terima  kasih  juga  disampaikan  kepada  Fakultas Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan  Universitas  Mataram
atas  dukungan,  semangat  dan  turut  mendoakan kelancaran terhadap penelitian ini. Ucapan terima kasih kepada  bapak  pencari  madu  di  hutan  Sumbawa  NTB yang  sudah  membantu  dalam  proses  pengambilan sarang  lebah  sebagai  bahan  dasar  pembuatan  propolis madu putih Sumbawa.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Kemenkes RI. Pedoman Penggunaan Antibiotik. Pedoman Pengguna Antibiot. 2021;1–97.
2. Wagh  VD.  Propolis:  A  wonder  bees  product and  its  pharmacological  potentials.  Adv Pharmacol Sci. 2013. (1) doi: 10.1155/2013/308249.
3. Barlak  Y,  Deǧer  O,  Çolak  M,  Karatayli  SC, Bozdayi  AM,  Yücesan  F.  Effect  of  Turkish propolis  extracts  on  proteome  of  prostate cancer  cell  line.  Proteome  Sci.  2011;  9:1–11. doi: 10.1186/1477-5956-9-74.
4. Hanifa  F,  Purwaningrum  R,  Ladyani  Mustofa F, Patologi Klinik D, Pertamina Bintang Amin Artikel  info  R.  The  Effectiveness  of  Pure Honey  and  Propolis  on  Pollutant  Bacteria  in Milk  Causing  Foodborne  Disease  in  Packaged Milk  Products.  J  Ilm  Kesehat  Sandi  Husada [Internet]. 2020;11(1):47–52. doi: 10.35816/jiskh.v11i1.217.
5. A.E.  Zainal  Hasan  ,  I  Made  Artika  PAKL. Propolis  Sebagai  Alternatif  Bahan  Antikaries Gigi.  Chem  Prog.  2011;4(1):45–53.    doi: 10.35799/cp.4.1.2011.26504.
6. Wilujeng  R.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Propolis  Terhadap  Escherichia  Coli Secara  In  Vitro  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Etanol  Propolis  Terhadap Escherichia coli . Skripsi Fak Pertanian, Univ Jember. 2010.
7. Manguntungi  B,  Mustopa  AZ,  Meilina  L, Nurfatwa M, Vanggy  LR, Irawan S, et al. The profile  analysis  of  lactic  acid  bacteria  (Lab) from  sumbawa  white  honey  and  its  potential producing antibacterial compounds. Walailak J Sci Technol. 2021;18(15):1–12. doi:10.48048/wjst.2021.22204.
8. Oroian  M,  Dranca  F,  Ursachi  F.  Comparative evaluation  of  maceration,  microwave  and ultrasonic-assisted  extraction  of  phenolic compounds  from propolis. J Food Sci Technol 2020;57(1):70–8.  doi:  10.1007/s13197-019- 04031-x.
9. Yuliawan  VN,  Aziz  A,  Kustiawan  PM.  Uji
Fitokimia  Fraksi  Etil  Asetat  Dari  Propolis Lebah  Kelulut  Heterotrigona  Itama  Asal  Kutai Kartanegara. Lumbung Farm J Ilmu Kefarmasian. 2021;2(2):131. doi:10.31764/lf.v2i2.5496. 10. Rismawati  SN,  Ismiyati.  Pengaruh  Variasi  pH Terhadap  Kadar  Flavonoid  Pada  Ekstraksi.  J Konversi. 2017;6(2):89–94.
doi:
10.24853/konversi.6.2.89-94 11. Rodiahwati  W,  Ariskanopitasari,  K  Saleh  I. Identifikasi Senyawa Bioflavonoid Pada Propolis  Hasil  Ekstraksi  Dari  Sarang  Lebah Madu  Hutan  Sumbawa  (Apis  Dorsata).  J TAMBORA. 2019;3(2):8–12 doi: 10.36761/jt.v3i2.239. 12. BPOM. Propilen Glikol.
2016;1–130. Available from: http://ik.pom.go.id/v2016/katalog/Propilen Glikol.pdf 13. Zahra NN, Muliasari H, Andayani Y, Sudarma IM.  Karakteristik  Fisikokimia  Ekstrak  Madu
Dan Propolis Trigona Sp. Asal Lombok Utara.
J Agrotek Ummat. 2021;8(1):7. doi: 10.31764/jau.v8i1.3826.
14. Halim E, Sutandyo N, Sulaeman  A,  Artika M, Agung  AD,  Masyarakat  DG,  et  al.  Kajian Bioaktif  dan  Zat  Gizi  Propolis  Indonesia  dan Brasil.  J  Gizi  dan  Pangan.  2012;7(1):1–6. doi:10.25182/jgp.2012.7.1.1-7.
15. Hernández  Zarate  MS,  Abraham  Juárez  M  del R, Cerón García A, Ozuna López C, Gutiérrez Chávez  AJ,  Segoviano  Garfias  J  de  JN,  et  al. Flavonoids,  phenolic  content,  and  antioxidant activity  of  propolis  from  various  areas  of Guanajuato,  Mexico.  Food  Sci  Technol. 2018;38(2):210–5 doi:10.1590/fst.29916.
16. Yusika DA, Islam I, Sahlan M. Analisis Kadar Polifenol  Total  dan  Flavonoid  Total  Propolis Asal Tanah Laut dan Soppeng. 2023;1(1):7–12 https://jurnal.uts.ac.id/index.php/biomaras/artic le/view/3059.
17. Cyndia  A.  Uji  Aktivitas  Antiacne  Fraksi  Etil Asetat  Propolis  Dari  Lebah  Trigona  (Apis Trigona) Terhadap Staphylococcus epidermidis
Antiacne  Activity  Test  Of  Ethyl  Acetate Fraction  Of  Propolis  From  Trigona  Bee  (Apis Trigona)  Against  S taphylococcus  epidermidi s. [Skripsi] Universitas Hasanudin; 2022.
18. Yusuf  Bangun  Azhari,  Djamal  A.  Asterina. Perbedaan  Daya  Hambat  Bakteri  dari  Propolis Cair Yang ada di Pasaran Terhadap Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus Seca In Vitro. Jurnal Kesehatan Andalas . 2015 doi:10.25077/jka.v4i3.373.
19. Apriliana E, Tjiptaningrum A, Julianingrum R.
Perbandingan  Efektivitas  Ekstrak  Propolis Dalam Menghambat Pertumbuhan Pertumbuhan Bakteri Gram Positif
(S taphylococcus  aureus )  dan  Gram  Negatif (E scherichia  coli )  Secara  In  Vitro.  J  Kedokt
Univ  Lampung  [Internet].  2019;3(1):129–34. doi: 10.23960/jkunila31129-134.
20.       Prestianti, I., Baharuddin, M., Sappewali, S. Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstra  Sarang  Lebah Hutan  (Apis  dorsata)  terhadap  Pertumbuhan Staphylococcus  aureus , Eschericha  coli dan Pseudomonas  aeruginosa .  2018.  14(1):  79. :10.20961/alchemy.14.1.13028.179-194.
21. Wojtyczka RD., Kepa M., Idzik D., Kubina R., Kabala, D.A., Dziedzic A., Wasik TJ.  In Vitro Antimikrobial  Acitivity  Of  Ethanolic  Extract Of  Polish  Propolis  Againts  Biofilm  Forming Staphylococcus Epidermidis Strains. 2013. doi: 10.1155/2013/590703.
22. Pryzybylek,  I.,  Dan  Karpinski,  T.  M. Antibacterial Properties Of Propolis.
Molecules .  2019:  24(11),  2047.    doi:10.3390/ molecules24112047.