p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902

## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI SEDIAAN MIKROEMULSI
MINYAK JINTEN HITAM ( Nigella sativa L.) TERHADAP TIGA BAKTERI PENYEBAB JERAWAT
Sani Ega Priani * , Tati Kurniati, Lanny Mulqie Program Studi Farmasi UNISBA
* Email: egapriani@gmail.com
Artikel diterima: 9 Agustus 2019; Disetujui: 10 Maret 2020 DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v5i1.349

## ABSTRAK
Minyak  jinten  hitam  mengandung  senyawa  timokuinon  dan  senyawa  aktif lainnya  yang  diketahui  memiliki  aktivitas  antibakteri  sehingga  potensial dikembangkan  sebagai  agen  antijerawat.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk memformulasikan  minyak  jinten  hitam  menjadi  sediaan  mikroemulsi  gel  dan menguji aktivitas sediaan pada tiga bakteri penyebab jerawat. Minyak jinten hitam dikarakterisasi  dan  selanjutnya  dikembangkan  menjadi  sediaan  mikroemulsi  gel. Sediaan  mikroemulsi  gel  dibuat  menggunakan  tween  80,  gliserin,  dan  HPMC sebagai  surfaktan,  kosurfaktan,  dan gelling  agent .  Sediaan  mikroemulsi  gel dievaluasi    dengan  pengujian  organoleptis,  pH,  viskositas,  daya  sebar,  dan stabilitas  fisik.  Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi  agar sumuran  terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes,  Staphylococcus  epidermidis, dan Staphylococcus  aureus. Hasil  penelitian  menunjukkan  sediaan  mikroemulsi gel  memiliki  penampilan  fisik  yang  jernih  dan  stabil.  Sediaan memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap Propionibacterium  acnes,  Staphylococcus  epidermidis, dan Staphylococcus aureus dengan diameter hambat berturut-turut 15,00 ± 1,70; 12,7 ± 0,42; dan 14,39 ± 0,37 mm.
Kata  kunci :  Minyak  Jinten  Hitam,  Mikroemulsi  Gel, P.  acnes,  S.  aureus,  S. epidermidis

## ABSTRACT
Black  seed  oil  is  known  to  contain  thymoquinone  and  other  active compounds  that  have  antibacterial  activity  and  potential  to  be  developed  as  an anti-acne  agent. The  objective  of  this  research  is  to  develop  microemulsion  gel containing  black  seed  oil  and  determine  the  antibacterial  activity  to  three  acne- causing  bacteria.  Black  seed  oil  was  characterized  and  developed  to microemulsion gel preparation. Microemulsion gel was prepared using tween 80, glycerine,  HPMC  as  surfactant,  cosurfactant,  and  gelling  agent.  Microemulsion gel  was  evaluated  including  organoleptic,  pH,  viscosity,  rheology,  and  stability tests.  Antibacterial  activity  was  conducted  by  a  well  diffusion  method  to Propionibacterium  acnes,  Staphylococcus  epidermidis,  dan  Staphylococcus aureus.  The  result  shows  the  formulated  microemulsion  gives  transparent appearance  and  stabile.  The  microemulsion  gel  has  an  antibacterial  activity  to
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Propionibacterium  acnes,  Staphylococcus  epidermidis,  and  Staphylococcus aureus  with  an  average  inhibitory  zone  15.00  ±  1.70,  12.7  ±  0.42,  14.39  ±  0.37 mm, respectively.
Keywords : Black seed oil, Microemulsion gel, P. acnes, S. aureus, S. epidermidis

## PENDAHULUAN
Jerawat adalah penyakit peradangan  kronis  dari  kelenjar pilosebasea.  Jerawat  sering  muncul pada  daerah  muka,  leher,  dada  dan punggung  (Truter,  2009;  Karmillah, 2018). Jerawat timbul karena beberapa faktor diantaranya peningkatan produksi
sebum, hiperkornifikasi kelenjar pilosebasea, inflamasi,  dan  pertumbuhan  bakteri penyebab  jerawat.  Tiga  bakteri  yang diketahui  memicu  terjadinya  jerawat adalah Propionibacterium  acnes, Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus aureus (Tahir, 2010).
Bakteri utama penyebab jerawat  adalah Propionibacterium
acnes yang  akan  menghidrolisis trigliserida dari sebum untuk selanjutnya memproduksi asam lemak bebas. Propionibacterium acnes menginduksi  dihasilkannya mediator-mediator  inflamasi  seperti interleukin  1α  (IL-1α)  (Tahir et  al,
2010) .  Bakteri  lain  yang  diketahui memicu  terjadinya  jerawat  adalah
Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus  aureus. Penelitian menunjukkan tingginya pertumbuhan kedua  bakteri    tersebut  pada area jerawat.  Kondisi  inflamasi  folikel pada  jerawat  memicu  meningkatnya produksi  bakteri Staphyloccoccus (Thomsen et  al ,  2008;  Khorvash et al ,  2012).  Produksi  enzim  lipolitik oleh Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus aureus menyebabkan pertumbuhan  bakteri  tersebut  dalam lingkungan  yang  kaya  akan  lipid (Saising et  al ,  2008).  Penghambatan pertumbuhan ketiga bakteri penyebab  jerawat  menjadi  salah  satu strategi utama pengobatan jerawat.
Jinten  hitam  (Habbatusauda) adalah  salah  satu  baham  alam  yang diketahui memiliki aktivitas antibakteri. Biji jinten hitam mengandung  sekitar  30%  minyak yang  terdiri nonvolatile  oil and volatile  oil .    Komponen  senyawa volatile seperti  timokuinon  dan  α- pinen  diketahui  memiliki  aktivitas antibakteri. Aktivitas antibakteri
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
yang  dimiliki  oleh  minyak  jinten membuatnya  dapat  digunakan  untuk terapi  antibakteri  pada  jerawat.  (El Tahir et al , 2006; Hadi et al , 2010).
Mikroemulsi adalah sistem emulsi yang stabil secara termodinamik  dengan  ukuran  globul pada kisaran 10-200 nm (Grampurohit et al , 2011).
Mikroemulsi  cocok  digunakan  untuk penghantaran  senyawa  lipofilik  ke kulit  seperti  minyak  jinten  hitam. Pembuatan sediaan mikroemulsi
sesuai  untuk  pengobatan  jerawat karena mampu meningkatkan penetrasi  senyawa  aktif  ke  dalam kelenjar  pilosebasea  yang  bersifat lipofil (Vyas et al , 2014).
Salah  satu  keterbatasan  dari sediaan mikroemulsi adalah viskositasnya  yang  rendah  sehingga menyebabkan  waktu  kontak  yang relatif  singkat.  Untuk  meningkatkan oklusifitas sediaan mikroemulsi dengan kulit maka ke dalam formula ditambahkan gelling  agent sehingga membentuk  sediaan  mikroemulsi  gel (Mehta et al , 2015).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk menghasilkan  sediaan  mikroemulsi gel  mengandung  minyak  biji  jinten
hitam dan selanjutnya menguji aktivitas  sediaan  yang  dihasilkan terhadap tiga bakteri penyebab jerawat.

## METODE PENELITIAN

## Pengumpulan dan Karakterisasi Minyak
Minyak  jinten  hitam  diperoleh dari  PT.  Lantabura  International, Depok. Selanjutnya terhadap minyak yang  diperoleh  dilakukan  penentuan kandungan  senyawa  dengan  metode GC-MS    ( Gas  Chromatography- Mass Spectrophotometry ).

## Pembuatan  Sediaan  Mikroemulsi Gel
Formula  sediaan  mikroemulsi didasarkan  pada  hasil  penelitian sebelumnya
yang
telah dipublikasikan  (Priani  dkk,  2016). HPMC sebagai gelling agent ditambahkan  ke  dalam  formula mikroemulsi  untuk  menghasilkan sediaan  mikroemulsi  gel . Formula sediaan mikroemulsi gel dapat dilihat pada Tabel 1.
Pembuatan  sediaan  diawali dengan mengembangkan gelling agent HPMC terlebih dahulu. Mikroemulsi    gel  dibuat  dengan
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
mencampurkan  minyak  biji  jinten hitam  dengan  tween  80  dan  gliserin kemudian  dipanaskan  pada  suhu  30- 40 o C.  Gel  HPMC  dicampur  dengan air  dan  dipanaskan  pada  suhu  yang sama.  Kedua  fasa  dicampurkan dengan  menggunakan    penganduk mekanik  dengan  kecepatan  150  rpm selama  5-10  menit.    Terhadap sediaan  dilakukan  evaluasi  fisik meliputi  uji  organoleptis,  uji  daya sebar,  pH,  viskositas  dan  sifat  alir, dan  uji  stabilitas  ( freeze  thaw dan sentrifuga)  (Priani dkk, 2018).
Tabel 1. Formulasi sediaan mikroemulsi gel ( Priani dkk, 2016) Bahan Konsentrasi (%) Minyak Jinten Hitam 5 Tween 80 35 Gliserin 40 Gel HPMC 2% 5 Metil Paraben 0,02 Propil Paraben 0,18 Alfa-tokoferol 0,01 Aquadest ad 100

## Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan
Uji aktivitas antibakteri sediaan mikroemulsi  gel  dilakukan  dengan
metode difusi agar sumuran terhadap
Propionibacterium acnes, Staphylococcus epidermidis dan
Staphylococcus aureus . Sebanyak 20 mL  media  agar  steril  diinokulasi
dengan  suspensi  bakteri sebanyak 100  µL  dan  dibiarkan  memadat. Selanjutnya media agar padat dilubangi dengan perforator . Sediaan mikroemulsi gel dan sediaan pembanding  (gel  klindamisin  1,2%) dimasukkan ke dalam masing- masing  sumur  lalu  diinkubasikan selama  18-24  jam  pada  suhu  37ºC. Media yang digunakan adalah media nutrient  agar untuk Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus aureus. Untuk Propionibacterium acnes menggunakan  media Tryptic soy agar (TSA) (Pannu et al., 2011).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 2. Kandungan senyawa minyak jinten hitam hasil uji GC-MS Kandungan Senyawa  Kadar (%) Timokuinon 18,14 p-cymene 15,40 Alpha-thujen 7,59 Alfa-pinen 1,8 Beta-pinen 1,7 Terhadap  minyak  jinten  hitam yang digunakan dilakukan karakterisasi dengan metode GC-MS untuk mengetahui kandungan senyawa  dalam  minyak  terutama yang  diketahui  memiliki  aktivitas antibakteri. Hasilnya diketahui minyak  jinten  hitam  mengandung
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
beberapa  senyawa  yang  diketahui memiliki aktivitas antibakteri.
Tabel 2 memperlihatkan kandungan senyawa yang terkandung dalam  minyak  jinten  hitam  beserta dengan  konsentrasinya  berdasarkan pada hasil pengujian GC-MS.
Terdapat  beberapa  senyawa  yang terkandung  dalam  minyak  jinten hitam yang diketahui memiliki aktivitas  antibakteri.  Timokuinon merupakan komponen senyawa
utama  dari  minyak  menguap  jinten hitam. Timokuinon menjadi senyawa antibakteri dengan menghambat sintesis protein dan RNA dari bakteri (El  Tahir et  al ,  2006).  Komponen lain  dari  minyak  jinten  hitam  yakni p-cymene juga  diketahui  memiliki aktivitas  antibakteri  baik  terhadap bakteri  gram  positif  ataupun  gram negatif (Marchese et al , 2017). Alfa- pinen  dan  beta-pinen  diketahui memiliki  aktivitas  antibakteri  dan antifungi  (Da  sik et  al ,  2012).
Senyawa-senyawa tersebut yang
selanjutnya  berkontribusi  terhadap aktivitas  antibakteri  minyak  jinten hitam. Minyak jinten hitam diformulasi menjadi
sediaan
mikroemulsi  gel.  Tujuannya  adalah untuk  membuat  minyak  jinten  hitam menjadi globul-globul berukuran mikro  yang  terdispersi  dalam  air sehingga  mempermudah  penetrasi minyak  sebagai  bahan  aktif  menuju kelenjar pilosebasea tempat terjadinya  reaksi  inflamasi.  Tween 80  dan  gliserin  digunakan  sebagai surfaktan dan kosurfaktan didasarkan pada  hasil  evaluasi  sebelumnya (Priani  dkk,  2016).  Tween  80  dalam sistem  mikroemulsi  berfungsi  untuk membentuk  sistem  lapisan  antar muka  pada  globul  minyak  dan menurunkan  tegangan  permukaan. Gliserin digunakan sebagai kosurfaktan untuk meningkatkan kerapatan  dan  fleksibilitas  sistem antarmuka juga membantu menurunkan  tegangan  permukaan hingga mendekati nol agar dihasilkan suatu  sistem  dispersi  yang  stabil secara termodinamika. Tween 80 dan gliserin  juga  dapat  menjadi  senyawa peningkat  penetrasi  yang  membantu meningkatkan  penetrasi  perkutan sehingga diharapkan dapat meningkatkan penetrasi minyak jinten hitam menuju kelenjar pilosebasea (Haque et al., 2018).
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Gambar 1. Sediaan Mikroemulsi Gel Minyak Jinten Hitam
Tabel 3. Hasil evaluasi fisik sediaan Parameter Hasil Organoleptis Jernih, kekuningan, bau khas pH 6,75 ± 0,03 Viskositas 220,93 ± 59,46 cps Daya Sebar 8,60 ± 0,10 cm Sifat alir Pseudoplastis Uji Freeze thaw Stabil Uji Sentrifugasi Stabil Sediaan mikroemulsi gel minyak  jinten  hitam  selanjutnya dievaluasi secara fisik. Hasil ditampilkan pada tabel 3.
Berdasarkan  hasil  evaluasi,  sediaan memiliki  karakteristik  yang  baik untuk organoleptis, pH, sifat alir, dan stabilitas. Secara organoleptis terlihat
bahwa sediaan memperlihatkan penampilan fisik yang jernih/transparan  yang  merupakan ciri dari sediaan mikroemulsi.
Ukuran globul pada kisaran mikrometer  pada  mikroemulsi  gel menyebabkan transparansi pada
sediaan. Hasil evaluasi pH menunjukkan  sediaan  memiliki  pH 6,75  ±  0,03.    Sediaan  untuk  kulit umumnya  bersifat  asam  atau  netral (≤  pH  7)  untuk  menghindari terjadinya iritasi (Ali, 2013).
Dari  hasil  uji  viskositas  dan daya  sebar  sediaan  bisa  terlihat bahwa  sediaan  masih  memiliki viskositas  yang  relatif  rendah  karena nilai viskositas (<2000 cps) sehingga berpengaruh  kepada  tingginya  daya sebar (>7 cm). Salah satu karakteristik khas dari sediaan mikroemulsi adalah memiliki viskositas yang rendah. Pada sediaan sudah ditambahkan gel HPMC sebagai  peningkat  viskositas  namun belum mampu meningkatkan viskositas  sediaan  sampai  mencapai viskositas sediaan semisolida. Optimasi konsentrasi dan jenis gelling  agent perlu  dilakukan  pada penelitian selanjutnya, untuk optimalisasi  viskositas  dan  daya sebar sediaan (Garg et al., 2002).
Sifat  alir  sediaan  termasuk  ke dalam  sistem  psedoplastis  (gambar 2).  Sistem  alir  ini  sesuai  untuk sediaan topikal termasuk mikroemulsi gel karena
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
memungkinkan untuk mempermudah
penyebaran ketika diaplikasikan karena  konsistensi  sediaan  akan menurun  ketika  diberikan  gaya (Iradhati et al ., 2017).
Gambar 2. Grafik reologi sediaan
Evaluasi  fisik  terakhir  adalah uji  stabilitas.  Uji  stabilitas  dilakukan dengan  metode freeze  thaw dan sentrifugasi.  Uji  tersebut  dilakukan untuk  menguji  ketahanan  sediaan mikroemulsi  untuk  tidak  terjadi pemisahan  fase  karena  pengaruh gravitasi  ataupun  perubahan  suhu. (Shinde et  al., 2012).  Hasil  uji menunjukkan bahwa sediaan mikroemulsi gel minyak jinten hitam memiliki stabilitas fisik yang baik.
Pengujian  selanjutnya  adalah pengujian  aktivitas  antibakteri  dari sediaan  yang  dihasilkan  (Tabel  4). Sebagai  pembanding  digunakan  gel
klindamisin 1,2% yang umum digunakan  untuk  pengobatan  infeksi jerawat.
Berdasarkan hasil tersebut terlihat bahwa sediaan yang dihasilkan memiliki aktivitas antibakteri  terhadap  ketiga  bakteri uji.  Kandungan  minyak  jinten  hitam dalam sediaan  terbukti mampu
memberikan efek penghambatan pertumbuhan ketiga bakteri penyebab  jerawat.  Bila  dilihat  dari nilai  diameter  hambatnya  aktivitas antibakteri  yang  dihasilkan  terhadap ketiga  jenis  bakteri  tergolong  ke dalam  kategori  kuat  karena  diameter hambat  yang  dihasilkan  ada  pada rentang  10-20  mm  menurut  batasan Davis and Stout, 1971.
Hambatan
pertumbuhan terbesar  dari  sediaan  muncul  pada
Propionibacterium acnes
dibandingkan  dengan  dua  bakteri lainnya . Hal  tersebut  memberikan keuntungan karena bakteri Propionibacterium acnes adalah bakteri  utama  penyebab  jerawat, yang paling sering ditemukan sebagai  penyebab  infeksi  jerawat. (Tahir et al, 2010) .
0 50 100 150 200 2.5 4 5 10 20 50 100 V is k o si ta s (C p s) Rpm
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Untuk  aktivitas  sediaan  gel klindamisin sebagai pembanding terlihat  bahwa  gel  memiliki  aktivitas antibakteri kuat terhadap Propionibacterium acnes dan Staphylococcus  epidermidis. Namun aktivitasnya terhadap bakteri Staphylococcus aureus
masuk kategori sangat kuat karena diameter hambat  >20  mm  (Davis  and  Stout, 1971).
Tabel 4. Hasil uji antibakteri Jenis Bakteri Diameter Hambat (mm) Mikroem ulsi Gel Pembandi ng P. acnes 15,00 ± 1,70 12,33 ± 0,42 S.epidermi dis 12,70 ± 0,42 12,15 ± 0,77 S. aureus 14,39 ± 0,37 21,85 ± 0,07

## KESIMPULAN
Sediaan mikroemulsi gel
minyak jinten hitam memiliki
penampilan fisik transparan,
viskositas rendah, sifat alir
pseudoplastis, dan stabil berdasarkan
hasil uji sentrifugasi dan freeze thaw. Sediaan memiliki aktivitas antibakteri kuat terhadap Propionibacterium acnes, Staphylococcus epidermidis, dan
Staphylococcus aureus dengan diameter hambat berturut-turut 15,00 ±  1,70;    12,7  ±  0,42  ;  dan  14,39  ± 0,37 mm.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  yang  sebesar- besarnya kepada LPPM Unisba yang membiayai  penelitian  ini  dan  PT. Lantabura  Internasional  atas  bantuan bahan berupa minyak jinten hitam.

## DAFTAR PUSTAKA
Ali,  S.  M.,  Yosipovitch,  G.,  2013, Skin  pH  :  From  Basic  Science To  Basic  Skin  Care. Journal Compilation  Acta  Dermato- Venereologica , 93 , 3, 261-7.
Da  Silva,  R.,  A.  C.  Lopes,  P.  M.  de Azevedo,  M.  M.  Cost,  D.  C.
Alviano,  Alviano  D.  S.,  2012, Biological  Activities  of  α- Pinene and β-Pinene Enantiomers. Molecules , 17 ,6, 6305–6316.
Davis, W.W., Stout T.R., 1971, Disc plate method of microbiological antibiotic assay.  I.  Factors  influencing variability  and  error,  Appl Microbiol, 22 , 4, 659-65.
El-Tahir, K. E. H., Dana M B., 2006, The  Black  Seed  Nigella  Sativa Linnaeus  -  A  Mine  For  Multi Cures:  A  Plea  For  Urgent Clinical  Evaluation  Of  Its Volatile  Oil . Journal  Med
Science, 1 ,1, 1-19.
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Garg,  A.  &  Aggarwal,  D.  &  Garg, Surti  &  Singla,  A.K..,  2002,
Spreading of semisolid formulations: An update. Pharmaceutical Technology North America , 26 , 84-105.
Grampurohit, N.,  P. Ravikumar, dan R. Mallya, 2011, Microemulsions  For  Topical Use– A Review. Indian
Journal of Pharmaceutical Education  and  Research, 45 , 100-107.
Hadi,  N.A.,  Ammar  W.A.,  2010,
Nigella  Sativa  Oil  Lotion  vs
Benzoil  Peroxide  Lotion  In Treatment  of  mild  to  moderate acne vulgaris. The Iraqi Postgraduate  Journal , 9 ,  4, 371-376.
Haque,  T.,  Talukder,  M.,  2018, Chemical Enhancer: A Simplistic  Way  to  Modulate Barrier Function of the Stratum
Corneum, Adv  Pharm  Bull , 8 , 2, 169-179.
Iradhati, A., Jufri, M., 2017,
Formulation and physical stability  test  of  griseofulvin microemulsion gel, International Journal of Applied  Pharmaceutics , 9 ,  22- 24.
Karmilah  K,  Musdalipah  M.,  2018, Formulasi  Krim  Antijerawat Ekstrak  AMpas  The  Hijau (Camellia  sinensis  L.), Jurnal Ilmiah  Farmasi  Ibnu  Sina , 1 , 1, 26 -33.
Khorvas,  F.,  Fatemeh  A.,  Hessam H.K., Farahnaz F. N., Tahmineh N., 2012, Staphylococcus aureus in Acne Pathogenesis. North  American
Journal  of  Medicinal  Science ,
4 , 11, 573-576.
Marchese,  A.,  Arciola,  C.  R., Barbieri,  R.,  Silva,  A.  S., Nabavi, S. F., Tsetegho Sokeng,  A.  J.,  Nabavi,  S.  M., 2017, Update on Monoterpenes as  Antimicrobial  Agents:  A Particular Focus on p-
Cymene. Materials, 10 , 8, 947. Mehta,  D.P.,  Hemendrasinh  J.R.,
Dhiren  P.S.,  Chainesh  N.S., 2015, A Review of Microemulsion Based Gel,
Research  J.  Pharm  and  Tech ,
8, 2, 118-126.
Pannu, J.,  McCarthy, A., Martin, A., Hamouda, T.,Ciotti, S., Sutcliffe,  J.,  2011,  In  Vitro Antibacterial  Activity  of  NB- 003  against  Propionibacterium acnes. Antimicrob  agent  and Chemother , 55 , 9, 4211–4217.
Priani,  S.E.,  T.  Kuriniati,  L.  Mulqie, D. Mulyanti, 2016, Uji
Aktivitas  Antibakteri  Minyak Jinten  Hitam  ( Nigella  Sativa Linn.) Terhadap Bakteri Propionibacterium  acnes  Dan Formulasinya  Dalam  Bentuk Sediaan Mikroemulsi, Prosiding SNaPP, 2 , 1, 7-12.
Priani,  S.E,    W.K.  Dewi,  A.  Gadri, 2018, Formulasi sediaan mikroemulsi  gel  anti  jerawat mengandung kombinasi
minyak  jinten  hitam  (Nigella sativa  L.)  dan  minyak  zaitun (Olea  europaea  L.). Kartika: Jurnal  Ilmiah  Farmasi , 6 ,  2,
57-62.
Saising,  J.  dan  Supayang  V.,  2008,
Rhodomyrtone from Rhodomyrtus tomentosa
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
(Aiton)  Hassk.  as  a  Natural Antibiotic  for  Staphylococus Cutaneous  Infections. Journal of  Health  Science, 54 ,  5,  589- 595.
Shinde,  U.,  Pokharkar  S,  Modani  S., 2012, Design and evaluation of microemulsion  gel  system  of nadifloxacin, Indian  J  Pharm Sci , 74 , 3, 237-47.
Tahir,  M.,  2010,    Review  Article Pathogenesis of Acne Vulgaris: Simplified. Journal of Pakistan Association  of  Dermatologists , 20 , 93-97.
Thomsen,  M.B.,  Lomholt  H.  B., Kilian  M.,  2008,  Acne  is  Not Associated with Yrt- Uncultured  Bacteria. Journal of  Clinical  Microbiology , 46 ,
10, 3355-3360.
Truter,  I.,  2009,    EBPP:  Acne Vulgaris. SA  Pharmaceutical Journal , 4 , 12-19.
Vyas,  A.,  Avinesh  K.  S.,  Bina G.,2014.  Carrier-Based  Drug
Delivery System for Treatment of  Acne. The  Scientific  World Journal , 14 ,1-5.