## JURNAL INTEGRASI PROSES

## Website: http://jurnal.untirta.ac.id/index.php/jip
Submitted : 9 October 2023 Revised : 13 November 2023 Accepted : 10 December 2023
EKSTRAKSI KITOSAN BERBASIS CANGKANG KEONG MAS ( Pomacea canaliculata )

## MENGGUNAKAN GELOMBANG ULTRASONIKASI
Nufus Kanani 1* , Endarto Yudo Wardhono 1 , Muhammad Triyogo Adiwibowo 1,3 , Mekro Permana Pinem 2 , Wardalia 1 , Harly Demustila 1 , Muhamad Farhan 1 , Ropi Anwari 1
1 Program Studi Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Sultan Ageng Tirtayasa, Cilegon, 42435, Indonesia
2 Program Studi Teknik Mesin, Fakultas Teknik, Universitas Sultan Ageng Tirtayasa, Cilegon, 42435, Indonesia
2 Laboratorium Valorisasi Biomassa, Center of Excellent, Universitas Sultan Ageng Tirtayasa, Cilegon, 42435, Indonesia
* Email: nufus.kanani@untirta.ac.id

## Abstrak
Kitosan adalah polisakarida yang berasal dari kitin, suatu zat yang ditemukan dalam cangkang hewan golonagn krustasea.  Kitosan  memiliki sifat-sifat  tertentu  yang  membuatnya  bermanfaat  dalam  berbagai  bidang  industri, seperti farmasi, kesehatan, dan pangan. Kitosan merupakan hasil deasetilasi dari kitin. Sumber kitin bisa diperoleh dari  jenis  hewan  arthropoda  salah  satunya  yaitu  pada  keong  mas  ( Pomacea  canaliculata ).  Keong  mas  adalah organisme invasif yang dapat merusak tanaman padi dan tanaman air lainnya dan dapat menjadi ancaman serius bagi pertanian. Proses ekstraksi untuk mendapatkan kitosan dari cangkang keong mas melalui tiga tahapan proses yaitu  deproteinasi, demineralisasi,  dan  deasetilasi  menggunakan  gelombang  ultrasonikasi  yang  membutuhkan beberapa variasi agar mendapatkan hasil optimal. Penelitian ini memiliki tujuan untuk menginvestigasi pengaruh jenis pelarut pada proses demineralisasi (HCl 1M, FeCl 3 1%, dan HCl : FeCl 3 2:1), konsentrasi NaOH pada proses deasetilasi  (20,  30,  dan  40%),  serta  lama  waktu  ekstraksi  terhadap  derajat  deasetilasi  (DD)  dari  kitosan. Perhitungan  DD  dilakukan  menggunakan  metode  titrasi.  Nilai  derajat  deasetilasi  optimal  diperoleh  pada penggunaan variasi demineralisasi menggunakan pelarut HCl 1M : FeCl 3 1% 2:1, dengan konsentrasi NaOH proses deasetilasi yaitu 40% dan lama waktu deasetilasi selama 60 menit menghasilkan nilai derajat deasetilasi sebesar 88,35%.
Kata Kunci : Kitin; Kitosan; Keong mas

## Abstract
Chitosan is a bioactive material with applications in diverse industries such as pharmaceuticals, healthcare, and food. It  is  derived  from  the  deacetylation  of  chitin,  sourced  from  arthropod  animals,  including  the  golden  apple  snail (Pomacea canaliculata). This mollusk is categorized as a plant pest organism (PPO) or a significant threat to rice plants (Oryza sativa) in paddy fields. The extraction process for obtaining chitosan from the golden apple snail shell through  three  stages,  including  deproteinization,  demineralization,  and  deacetylation,  using  ultrasonic.  Optimal results  necessitate  variations  in  this  process.  This  research  aims  to  explore  the  impact  of  solvent  types  in  the demineralization process (HCl 1M, FeCl3 1%, and HCl: FeCl3 2:1), NaOH concentration in the deacetylation process (20%, 30%, and 40%), and extraction time on the degree of deacetylation of chitosan. The degree of deacetylation is assessed using titration methods. The highest degree of deacetylation is achieved through demineralization using the HCl 1M:FeCl3 1% 2:1 solvent variation, 40% of NaOH concentration in the deacetylation process, and deacetylation time of 60 minutes, resulting in a degree of deacetylation value of 88.35%.
Keywords : Chitin; Chitosan; Golden apple snail

## 1. PENDAHULUAN
Kitosan adalah polisakarida yang berasal dari kitin, suatu  zat  yang  ditemukan  dalam  cangkang  hewan golongan  krustasea.  Kitosan  memiliki  sifat-sifat tertentu yang membuatnya bermanfaat dalam berbagai bidang industri, seperti farmasi, kesehatan, dan pangan (Damayanti  et  al.,  2016).  Sifat  antimikroba  kitosan dapat  menghambat  pertumbuhan  dan  aktivitas mikroorganisme, termasuk bakteri patogen, jamur, dan bakteri  gram  positif  maupun  negatif  (Nurainy  et  al., 2008).
Kitosan  adalah  polimer  linear  yang  terbuat  dari kitin  setelah  mengalami  proses  deasetilasi.  Kitin tersusun  atas  unit-unit  N-acetylglucosamine  yang terikat  bersama  protein  dan  minaeral  di  dalam cangkang  hewan  krustasea.  Kitin  sering  dianggap sebagai senyawa turunan selulosa karena strukturnya yang mirip dengan selulosa, namun dengan perbedaan kunci. perbedaan utama antara keduanya terletak pada gugus fungsional yang terikat pada atom C-2 dari unit glukosa dalam rantai polimer. Pada selulosa, atom C-2 memiliki gugus hidroksil (-OH), sedangkan pada kitin, gugus  hidroksil  digantikan  oleh  gugus  asetamida  (- NHCOCH3), yang terdiri dari satu molekul asam asetat dan satu molekul amonia (Malis et al., 2023). Struktur kimia kitin dan kitosan ditunjukkan di Gambar 1 dan 2 sebagai berikut.
Gambar 1 . Kitin
Gambar 2 . Kitosan
Keong  mas  merupakan  hewan  air  tawar  jenis Pomacea  canaliculate ,  berbentuk  bulat,  berwarna kuning  hingga  coklat  tua  (Isnaningsih  et  al.,  2011). Cangkang  keong  mas  memiliki  kandungan  protein, mineral, dan kitin yang dapat diekstraksi dan disintesis mejadi  kitosan.  Sintesis  kitosan  dari  cangkang  keong mas melibatkan tiga tahap proses utama: deproteinasi, demineralisasi,  dan  deasetilasi.  Tahap  deproteinasi bertujuan untuk menghilangkan protein dari cangkang, umumnya  dihilangkan  dengan  menggunakan  larutan alkali  atau  asam.  Demineralisasi  dilakukan  untuk
menghilangkan  mineral-mineral  seperti  kalsium karbonat  yang  terdapat  dalam  cangkang.  Tahap  ini biasanya dilakukan dengan menggunakan larutan asam yang lemah. Hasil dari demineralisasi ini berupa kitin. Deasetilasi  merupakan  tahapan  terakhir  yaitu  proses penghilangkan gugus asetil menjadi amina.
Gambar 3. Keong mas
Hasil ekstraksi kitosan pada cangkang keong mas diperngaruhi oleh beberapa faktor seperti penggunaan jenis  pelarut,  konsentrasi  pelarut,  temperatur,  lama waktu  proses  ekstraksi. Berdasarkan  penelitian  Putri dan  Septiana  (2014),  cangkang  keong  mas mengandung  air.  5,8%;  protein  2,20%;  dan  mineral 15,22%.  Cangkang  keong  mas  terdiri  dari  kalsium karbonat  (CaCO 3 )  sebagai  komponen  utama.  Kalsium karbonat ini terbentuk dari unsur-unsur penyusunnya, yaitu kalsium (Ca), karbon (C), dan oksigen (O). Proses pembentukan cangkang umumnya terjadi secara alami di dalam tubuh keong mas (Pancawati, 2016; Septiani, 2017; Nurjannah et al., 2019).

## 2. BAHAN DAN METODE
Cangkang  keong  mas  diperoleh  dari  Lebak, Provinsi  Banten,  Indonesia.  Bahan  dan  reagen  kimia yang  digunakan  untuk  proses  ekstraksi  terdiri  dari NaOH, HCl, FeCl 3 , dan akuades.

## 2.1 Tahap Persiapan
Cangkang keong dibersihkan dengan air mengalir, kemudian dikeringkan di bawah sinar matahari secara langsung  selama  1 × 24  jam,  selanjutnya  dihaluskan hingga mendapatkan ukuran 100 mesh.

## 2.2 Tahap Deproteinasi
Gelas  kimia  diisi  dengan  larutan  NaOH  4%  yang ditambahkan  dengan  serbuk  keong  mas  yang  sudah halus dengan perbandingan 10:1 mL larutan/g serbuk, kemudian  masukkan  ke  dalam  ultrasonikator  dengan suhu  proses  60°C  selama  1  jam.  Setelah  reaksi deproteinasi  selesai,  suspensi  disaring,  dicuci,  dan dinetralkan  dengan  akudes,  kemudian  dikeringkan dengan  oven  selama  2  jam  pada  suhu  75°C.  Filtrat kering selanjutnya dihaluskan menggunakan mortar.

## 2.3 Tahap Demineralisasi
Gelas  kimia  diisi  dengan  larutan  asam.  Variasi penggunaan larutan asam pada penelitian ini yaitu HCl
1M,  FeCl 3 1%,  dan  perbandingan  campuran  larutan HCl:FeCl 3 2:1  v/v,  kemudian  ditambahkan  dengan serbuk  keong  mas  yang  sudah  melewati  tahap deproteinasi dengan perbandingan 10:1 mL larutan/g serbuk,  kemudian  dipanaskan  dalam  ultrasonikator yang sudah panas dengan suhu 40°C selama 60 menit. Filtrat  selanjutnya  disaring,  dicuci  dan  dinetralkan menggunakan  aquadest.  Padatan  yang  diperoleh selanjutnya dikeringkan menggunakan oven pada suhu 70°C selama 2 jam.

## 2.4 Tahap Deasetilasi
Gelas  kimia  diisi  dengan  larutan  NaOH  yang penggunaannya  divariasikan  (20,  30,  dan  40%) kemudian  ditambahkan  dengan  serbuk  hasil  proses demineralisasi  dengan  perbandingan  10:1  mL larutan/g  serbuk,  kemudian  dipanaskan  dalam ultrasonikator  yang  sudah  panas  dengan  suhu  60°C dengan  variasi  waktu  (10,  30,  dan  60  menit).  Setelah reaksi  berlangsung,  padatan  dipisahkan,  dicuci, dinetralkan, dan dikeringkann kedalam oven selama 2 jam suhu 75 o C.

## 2.5 Penentuan Derajat Deasetilasi
Penentuan  nilai  DD  pada  sampel  hasil  reaksi dianalisis  menggunakan  metode  titrasi  asam  basa seperti yang diusulkan oleh Jia dan Shen (2002). 0,1 g sampel  dilarutkan  ke  dalam  10  mL  HCl  0,1  M  dalam erlenmeyer  dan  ditambahkan  indikator  fenolftalein (PP)  sebanyak  2  tetes,  kemudian  dititrasi  dengan larutan NaOH 0,1 M. Derajat deasetilasi (%DD) dihitung dengan menggunakan rumus:
𝐷𝐷 (%) = (𝐶 1 𝑉 1 −𝐶 2 𝑉 2 ) 𝑊×0,0994 × 0,016 × 100% (1) Dimana:  C 1 konsentrasi  larutan  standar  HCl  (M);  C 2 konsentrasi  larutan  standar  NaOH  (M);  V 1 volume larutan  HCl  (mL);  V 2 volume  larutan  NaOH  (mL);  W adalah berat sampel (g).
2.6 Identifikasi Senyawa Kitosan Secara Kimia
Identifikasi  gugus  fungsi  sampel  dianalisis menggunakan fourier transform infra red (FTIR).
3. HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1 Ekstraksi Kitin
Deproteinasi adalah proses penghilangkan protein didalam  sampel  cangkang.  Sementara  demineralisasi untuk  membuang  kandungan  garam  mineral  yang umumnya adalah CaCO 3 dan MgCO 3 . Dalam penelitian ini, produk kitin yang dihasilkan setelah penghilangan protein dan mineral berwarna kecoklatan.
Menurut  Nopriansyah  et  al.  (2016)  dihasilkan sebanyak  20  gram  kalsium  karbonat  dari  80  gram cangkang  keong  mas  atau  sebesar  28,75%  CaCO 3 . Proses  demineralisasi  dengan  HCl  yaitu  sebagai berikut:
2 HCl + CaCO 3 → CaCl 2 + H 2 O + CO 2 (1) Sementara  proses  demineralisasi  dengan  FeCl 3 yaitu sebagai berikut: 2 FeCl 3 + 3 CaCO 3 → Fe 2 (CO 3 ) 3 + 3 CaCl 2 (2)
Proses ini akan menghasilkan gas CO 2 , sehingga ketika proses  sedang  berlangsung  akan  terbentuknya gelembung.
Derajat  deasetilasi  mengacu  pada  sejauh  mana gugus  asetil  dihilangkan  dari  rantai  molekul  kitin, menghasilkan kitosan dengan gugus amina (-NH 2 ) yang lebih  dominan.  Semakin  tinggi  derajat  deasetilasi, semakin  banyak  gugus  asetil  yang  dihilangkan,  dan kandungan gugus amina menjadi lebih besar. Kualitas kitosan dapat dipengaruhi oleh derajat deasetilasi ini. Skematik reaksi deasetilasi ditampilkan  pada Gambar 4.  Proses  pembentukan  kitosan  dari  kitin  melibatkan reaksi  hidrolisis  amida,  di  mana  ikatan  amida  dalam molekul kitin dipecah oleh suatu basa. Proses ini dapat dijelaskan secara umum sebagai berikut:
Kitin + Basa → Kitosan + Asam asetat (3) Reaksi ini melibatkan pemecahan ikatan amida antara unit  N-acetylglucosamine  dalam  molekul  kitin.  Basa digunakan  untuk  menyediakan  ion  hidroksida  (OH-) yang berperan sebagai nukleofil dalam serangan pada karbon karbonil (C=O) dalam ikatan amida. Hasil akhir dari reaksi ini adalah pembentukan kitosan dan asam asetat (Nurmala et al. 2018).
Gambar 4 . Deasetilasi kitin menjadi kitosan (Nurmala et al. 2018)
Menurut  Trisnawati  et  al.  (2013)  derajat deasetilasi  kitin  adalah  persentase  gugus  asetil  yang masih  ada  dalam  strukturnya.  Jika  derajat  deasetilasi kurang dari 70%, itu biasanya disebut kitin. Jika derajat deasetilasinya lebih dari 70%, hasilnya disebut kitosan. Derajat  deasetilasi  adalah  parameter  penting  dalam produksi kitosan karena menentukan seberapa banyak gugus  amino  pada  kitin  yang  telah  diubah  menjadi gugus  amida  melalui  proses  deasetilasi.  Hal  ini mempengaruhi properti fisik kitosan sehingga menjadi penentu jenis aplikasi apa yang tepat dari produk akhir kitosan.
3.2 Pengaruh Jenis Pelarut Pada Tahap
Demineralisasi Terhadap Derajat Deasetilasi Pengaruh  konsentrasi  pelarut  alkali  terhadap pembentukan  derajat  deasetilasi  yang  dihasilkan ditunjukkan  pada  Gambar  5.  Pengamatan  dilakukan terhadap pembentukan derajat deasetilasi dari reaksi selama  10,  30,  dan  60  menit  dari  masing-masing
produk  kitin  yang  menggunakan  tiga  jenis  pelarut, yaitu HCl, FeCl 3 , dan kombinasi HCl+FeCl 3 . (a) (b) (c)
Gambar 5. Derajat deasetilasi pada variasi pelarut demineralisasi terhadap waktu reaksi (a)10 menit, (b) 30 menit, dan (c) 60 menit
Pada percobaan demineralisasi atau penghilangan mineral  menggunakan  campuran  HCl  dan  FeCl 3 diperoleh hasil yang terbaik dari beberapa variasi asam yang  digunakan,  hal  ini  terjadi  dikarenakan pencampuran  FeCl 3 dengan  HCl  mampu  memberikan pasangan  elektron  bebas  berupa  Cl - sehingga  akan semakin  banyak  mineral  yang  terlarut  dan  juga  akan mengontrol degradasi agar lebih mengarah ke mineral yang terkandung dalam kitin, sehingga dengan adanya penambahan  dari  FeCl 3 maka  mineral-mineral  yang terkandung dalam cangkang keong mas akan semakin berkurang  yang  menyebabkan  persentase  dari  kitin akan semakin tinggi.
Fe𝐶𝑙 3 +  HCl → Fe𝐶𝑙 2 + HCl + 𝐶𝑙 − (4)
2𝐶𝑙 − + 𝐶𝑎𝐶𝑂 3 → Ca𝐶𝑙 2 + (𝐶𝑂 3 ) 2− (5)
Mekanisme reaksi proses pemisahan mineral yang terjadi ditunjukkan pada Gambar 6. Proses pemisahan diawali dengan pencampuran antara FeCl 3 dan HCl. HCl akan bereakasi dengan Cl yang dimiliki FeCl 3 kemudian karena Cl memberikan pasangan elektron pada H maka Cl  yang  ada  di  HCl  akan  lepas  yang  mengakibatkan menjadi  elektron  bebas  menjadi  Cl - .  Ketika  campuran ini  dimasukkan  ke  serbuk  cangkang  keong  melalui tahapan demineralisasi menggunakan alat ultrasonikasi,  karena  Cl - mampu  memberikan pasangan  elektron  dan  Ca 2+ mampu  menerima pasangan  elektron  maka  elektron  bebas  Cl - akan bereaksi  dengan  kandungan  mineral  Ca 2+ menjadi CaCl + .  Kemudian  CaCl + akan  bereaksi  kembali  karena masih mampu menerima pasangan elektron dengan Cl - yang  dimiliki  oleh  HCl  yang  menyebabkan  CaCl + berubah menjadi CaCl 2 dan juga akan terbentuk ion H + dan FeCl 2+ (Jenial et al., 2018).
Fe + Cl Cl Cl Fe + Cl Cl HCl + Fe + Cl Cl HCl + Cl Cl + Fe + Cl Cl + O C O O Fe + Cl Cl + O C O O H Ca Cl Cl + H Cl Ca 2+ O C O O Cl Ca H Cl
Gambar 6 . Mekanisme reaksi deasetilasi CaCl 2 ini adalah senyawa anorganik, sebuah garam yang  apabila  dilakukan  pencucian  (agar  menetralkan sampel)  maka  kandungan  ini  akan  hilang  karena larutan ini sangat larut dalam air, sehingga dalam kasus ini semakin banyak kandungan CaCl 2 yang larut dalam air maka kandungan kitin dalam cangkang keong mas akan  semakin  bersih  dari  pengotor  berupa  mineral mineral  seperti  kalsium  (Ca),  dan  magnesium  (Mg) maka konsentrasi kitin yang dihasilkan akan semakin tinggi  dan  karena  konsentrasi  kitin  semakin  tinggi, maka  proses  pembentukan  kitosan  di  tahap selanjutnya  akan  semakin  baik karena  pengotor  yang mengganggu telah dihilangkan.
3.3 Pengaruh  Konsentrasi  Basa  Pada  Tahap Deasetilasi Terhadap Nilai Derajat Deasetilasi Proses deasetilasi melibatkan penggunaan natrium hidroksida  (NaOH)  untuk  memutuskan  ikatan  antara gugus  asetil  (-CH 3 COO)  dan  nitrogen  pada  molekul kitin. Gugus asetil ini dilepaskan, dan hasilnya adalah kitosan, yang memiliki rantai polimer yang terdiri dari gugus amina  (Citrowati et al., 2017).
0 20 40 60 80 100 NaOH 20% NaOH 30% NaOH 40% De ra ja t De as eti la si (% ) HCl FeCl₃ HCl+FeCl₃ 0 20 40 60 80 100 NaOH 20% NaOH 30% NaOH 40% De ra ja t De as eti la si (% ) HCl FeCl₃ HCl+FeCl₃ 0 20 40 60 80 100 NaOH 20%NaOH 30%NaOH 40% De ra ja t De as eti la si (% ) HCl FeCl₃ HCl+FeCl₃
(a) (b) (c)
Gambar 7. Derajat deasetilasi pada variasi konsentrasi deasetilasi dengan penggunaan pelarut demineralisasi berbeda (a)HCl 1M, (b) FeCl 3 1%, dan (c)HCl 1M : FeCl 3 1% 2:1
Pada  Gambar  7  telihat  bahwa  terdapat  kenaikan nilai derajat deasetilasi baik untuk ketiga jenis pelarut yang digunakan pada tahapan demineralisasi.
Penggunaan  NaOH  sebagai  larutan  basa  untuk proses deasetilasi dengan variasi konsentrasi NaOH 20, 30,  dan  40%  menunjukan  bahwa  konsentrasi  NaOH 40% mampu menghasilkan derajat deasetilasi tertinggi dibandingkan  dengan  variasi  lainnya.  Hasil  ini mengindikasikan  adanya  korelasi  positif  antara konsentrasi  basa  dan  derajat  deasetilasi.  Semakin tinggi konsentrasi basa yang digunakan, semakin tinggi pula  nilai  derajat  deasetilasi  kitosan.  Menurut Wulandari  et  al.  (2020).  NaOH  (natrium  hidroksida) adalah basa kuat yang dapat menyebabkan deasetilasi pada  polimer  kitin.  Reaksi  adisi  antara  ion  hidroksil (OH-)  dan  gugus  karbonil  pada  kitin  dapat menyebabkan  pelepasan  gugus  asetat  (deasetilasi), membentuk amina. Semakin tinggi konsentrasi NaOH,
semakin  banyak  ion  hidroksil  yang  tersedia  untuk reaksi  adisi,  sehingga  derajat  deasetilasi  meningkat. Penggunaan  NaOH  dengan  konsentrasi  yang  tinggi akan  mampu  melepas  gugus  asetil  dari  gugus amidanya,  sehingga  memungkinkan  basa  dengan konsentrasi tinggi akan teradisi ke dalam kitin semakin kuat  dan  lebih  cepat  sehingga  proses  pelepasannya lebih  efisien,  namun  menurut  Azhar  (2010) konsentrasi larutan basa dan suhu yang terlalu tinggi dapat  menyebabkan  depolimerasi  dan  degradasi polimer.

## 3.4 Pengaruh  Waktu  Perendaman  Pada  Tahap
Deasetilasi Terhadap Nilai Derajat Deasetilasi Gambar 8 menunjukkan peningkatan waktu dalam prosedur deasetilasi dapat meningkatkan penghilangan  gugus  asetil  dari  kitin  karena memberikan  lebih  banyak  waktu  bagi  reaksi  kimia untuk terjadi. Jika reaksi deasetilasi memerlukan lebih banyak waktu, maka kemungkinan besar lebih banyak gugus asetil akan terlepas dari rantai polisakarida kitin. Ini  dapat  menghasilkan  produk  dengan  derajat deasetilasi yang lebih tinggi.
Nilai  derajat  deasetilasi  tertinggi  diperoleh  pada saat  melakukan  proses  deasetilasi  dengan  waktu selama 60 menit. Peningkatan nilai derajat deasetilasi ini  dikarenakan  semakin  lamanya  waktu  kontak sehingga  mengakibatkan  lebih  banyak  kitin  yang terkonversi  menjadi  kitosan.  Menurut  Wahyuni  et  al. (2020)  Seiring  berjalannya  waktu,  molekul-molekul dapat  mengalami  transformasi  lebih  lanjut,  sehingga derajat deasetilasi dapat meningkat seiring waktu.
Menurut Arifin (2012) semakin lama proses yang dilakukan  maka  reaksinya  akan  semakin  lama  yang mengakibatkan  senyawa  basa  (dalam  hal  ini  NaOH) yang teradisi ke dalam kitin semakin banyak, sehingga memungkinkan  gugus  asetil  yang  lepas  dari  gugus amidanya  akan  semakin  banyak  juga,  sehingga banyaknya gugus asetil yang lepas dari gugus amidanya berbanding lurus dengan nilai derajat. Karena menurut Khairi  et  al.  (2019)  semakin  tinggi  nilai  derajat deasetilasi  menggambarkan  semakin  banyak  gugus fungsi  asetil  yang  terkonversi  menjadi  amina.  Nilai derajat  deasetilasi  yang  maksimum  diperoleh  pada penggunaan waktu 30 menit dengan konsentrasi NaOH 40%  yang  telah  melewati  tahapan  proses demineralisasi dengan campuran larutan HCl 1M : FeCl 3 1% 2:1.
0 20 40 60 80 100 10 menit 30 menit 60 menit De ra ja t De as eti la si (% ) NaOH 20% NaOH 30% NaOH 40% 0 20 40 60 80 100 10 menit 30 menit 60 menit De ra ja t De as eti la si (% ) NaOH 20% NaOH 30% NaOH 40% 0 20 40 60 80 100 10 menit 30 menit 60 menit De ra ja t De as eti la si (% ) NaOH 20% NaOH 30% NaOH 40%
(a) (b) (c)
Gambar 8. Derajat deasetilasi pada variasi waktu deasetilasi dengan penggunaan pelarut demineralisasi berbeda (a)HCl 1M, (b) FeCl 3 1%, dan (c)HCl 1M : FeCl 3 1% 2:1

## 3.5 Identifikasi Senyawa Kitosan
Metode  spektroskopi  FTIR  digunakan  untuk menganalisis gugus fungsi pada sampel kitosan untuk memberikan informasi tentang ikatan kimia dan gugus fungsional yang hadir dalam struktur polimer tersebut. Hasil analisa FTIR ditunjukkan pada Gambar 9.
Gambar 9. Spektrum FTIR kitosan
Hasil  dari  pengujian  FTIR  dari  berbagai  jenis pelarut  (HCl,  FeCl 3 ,  dan  HCl+FeCl 3 )  ini  disandingkan dengan parameter standar kitosan yang disajikan pada Tabel 1. Pita serapan pada panjang gelombang 3425,57 cm -1 pada  spektrum  inframerah  kitosan  hasil penelitian.  Serapan  ini  menunjukkan  adanya  vibrasi pembengkokan gugus OH dan NH. Vibrasi ini mungkin terkait  dengan  ikatan  hidrogen  dalam  gugus-gugus tersebut.  Selanjutnya,  pada  spektrum  inframerah kitosan  standar,  terdapat  serapan  pada  bilangan gelombang  3377,95  cm -1 .  Serapan  ini  juga menunjukkan  adanya  vibrasi  yang  mungkin  terkait dengan gugus OH atau NH dalam kitosan.
Tabel 1. Tabel karakterisasi spektrum FT-IR
Gugus fungsi
Bilangan Gelombang (cm -1 ) Kitosan Standar Kitosan hasil percobaan (vb) O-H tumpang tindih (vs) N-H 3377,95 3425,57 (vs) C-H alifatik 2922,85 2924,08 (vs) C-H aromatik 2361,41 2376,30 (v) C=O amida sekunder 1660,55 1651,06 (v) C=O protonasi amida sekunder 1587,94 1635,63 (v) N-H asetamida 1558,48 1558,48 (v) C-H 1422,73 1419,60 (vs) C-O 1154,64 1157,28 (v) C-O-C 1026,63 1033,84 (ω) β -1,4- glikosidik 897,41 871,82 (Keterangan: v : vibrasi peregangan, vs : vibrasi peregangan simetris, vb : vibrasi pembengkokan, ω :
vibrasi ulur)
Sumber: Dompeipen, (2017)
0 20 40 60 80 100 NaOH 20% NaOH 30% NaOH 40% De ra ja t De as eti la si (% ) Deasetilasi 10 menit Deasetilasi 30 menit Deasetilasi 60 menit 0 20 40 60 80 100 NaOH 20% NaOH 30% NaOH 40% De ra ja t De as eti la si (% ) Deasetilasi 10 menit Deasetilasi 30 menit Deasetilasi 60 menit 0 20 40 60 80 100 NaOH 20% NaOH 30% NaOH 40% De ra ja t De as eti la si (% )
Deasetilasi 10 menit
Deasetilasi 30 menit Deasetilasi 60
menit
Vibrasi  peregangan  pada  bilangan  gelombang 1651,06  cm⁻¹  menunjukkan  adanya  ikatan  C=O (karbonil)  pada  suatu  gugus  amida  sekunder. Sementara pita serapan 2924.08 cm -1 mengindikasikan vibrasi pembengkokan pada gugus OH dan gugus NH₂. Gugus  OH  dapat  terdapat  dalam  senyawa-senyawa yang  mengandung  gugus  hidroksil  (-OH),  sementara gugus  NH₂  menunjukkan  adanya  amina  primer. Keberadaan  dua  puncak  gelombang  ini  menunjukkan adanya  pita  serapan  yang  sama  Spektrum  kitosan standar  1660,55  cm⁻¹  dan  2922,85  cm⁻¹. Ciri  utama dari  senyawa  kitosan  adalah  adanya  serapan peregangan  lemah  pada  daerah  gelombang  bilangan gelombang  1650 cm⁻¹.  Serapan  ini  mengindikasikan keberadaan  gugus  fungsi  C=O  pada  ikatan  - NHCOCH₃ (Citrowati et al., 2017). Puncak  gelombang  pada  2924.08  cm -1 untuk sampel hasil ekstraksi dan 2922,85 cm- 1 pada sampel kitosan  standar  menunjukkan  adanya  vibrasi peregangan simetris gugus C-H.
Puncak  gelombang  1635,63  cm -1 pada  sampel kitosan  hasil  penelitian  menunjukkan  adanya  ikatan karbonil C=O yang umumnya terdapat dalam senyawa- senyawa yang mengandung gugus keton atau aldehida. Pada  spektrum  kitosan  standar  memunculkan penyerapan  yang  sama  pada  1587,94  cm -1 .  Bilangan gelombang  ini  sering  kali  terkait  dengan  vibrasi  atau gerakan  atomik  tertentu  dalam  molekul  kitosan. Frekuensi  sekitar  1157.28  dan  1033.84  cm -1 pada spektrum  IR  dapat  diasosiasikan  dengan  ikatan  C-O. Hal  yang  sama  juga  ditunjukkan  pada  sampel kitosan standar.  Bilangan  dengan  panjang  gelombang  871,82 cm⁻¹  menunjukkan  adanya  vibrasi ulur  yang mengindikasikan adanya ikatan β -1,4-glikosidik. Ikatan ini umumnya terkait dengan struktur glikosaminoglikan, seperti yang terdapat pada kitosan. Sementara 897,41 cm⁻¹pada spektrum kitosan standar terkait  dengan  ikatan  atau  kelompok  fungsional tertentu dalam molekul kitosan. Dari hasil analisis FTIR menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang signifikan antara kedua sampel hasil reaksi dan kitosan standar.  Spektrum  utama  dengan  panjang  gelombang tertentu  dari  spektogram  mengindikasikan  bahwa sampel  hasil  proses  deastilasi  dalam  penelitian  ini adalah kitosan.

## 4. KESIMPULAN
Kitosan  dari  cangkang  keong  mas  ( Pomacea canaliculate )  telah  berhasil  diekstrak  menggunakan gelombang  ultrasonikasi.  Pada  variasi  jenis  pelarut demineralisasi  menunjukkan  pelarut  campuran  HCl 1M:FeCl 3 1% berat menunjukan hasil DD adalah 80%. Pada variasi konsentrasi NaOH menunjukkan semakin pekat  konsentrasi  NaOH  akan  menghasilkan  derajat deasetilasi yang tinggi. Pada variasi lama waktu reaksi menggunakan  ultrasonikasi  menunjukkan  semakin panjang waktu reaksi akan menghasilkan nilai derajat deasetilasi  yang  lebih  tinggi  dengan  maksimum 88,53%.  Hasil  analisis  kualitatif  menggunakan  FTIR menunjukkan bahwa sampel hasil reaksi memilii gugus fungsi yang sama dengan adalah kitosan standar.

## 5. DAFTAR PUSTAKA
Atika, D. S., R. Nurhafizah, & Sabariah. (2013). Potensi Zat  Kitin  Pada  Hama  Keong  Mas  (Pomacea Canaliculata)  Sebagai  Pengawet  Organik  Buah Klimaterik  Lokal  Kalimantan  Barat  Dalam  Upaya Mewujudkan Ketahanan Pangan Nasional. (Skripsi, Universitas Tanjungpura Pontianak).
Arifin, Z. (2012). Pemanfaatan Teknologi Sonikasi Tak Langsung  Dalam  Rangka  Produksi  Kitosan. Konversi, 1(1), 1 – 6. https://doi.org/10.20527/k.v1i1.66
Azhar, M., Efendi, J., Syofyeni, E., Lesi, R.M. & Novalina, S.  (2010).  Pengaruh  konsentrasi  NaOH  dan  KOH terhadap derajat deasetilasi kitin dari limbah kulit udang. Eksakta, 1(11), 1-8
Brugnerotto, J., J. Lizardi, F. M. Goycoolea, W. Argüelles- Monal,  J.  Desbrières,  &  M.  Rinaudo.  (2001).  An infrared  investigation  in  relation  with  chitin  and chitosan  characterization.  Polymer,  42(8),  3569 – 3580. https://doi.org/10.1016/S0032-3861(00)00713-8 Citrowati,  A.N.,  Satyantini,  W.H.,  Mahasri,  G.,  (2017). Pengaruh  kombinasi  NaOH  dan  suhu  berbeda terhadap  nilai  derajat  deasetilasi  kitosan  dari cangkang  kerang  kampak  (Atrina  pectinata).  J. Aquac. Fish Health 6, 48 – 56.
Damayanti, W., Rochima, E., Hasan, Z., (2016). Aplikasi kitosan sebagai antibakteri pada filet patin selama penyimpanan  suhu  rendah.  J.  Pengolah.  Has. Perikan. Indones. 19, 321 – 328. https://doi: 10.17844/jphpi.2016.19.3.321 Delvita,  H.,  Djamas,  D.,  &  Ramli.  (2015).  Pengaruh variasi temperatur kalsinasi terhadap karakteristik kalsium  karbonat  (CaCO 3 )  dalam  cangkang  keong sawah  (Pila  ampullacea)  yang  terdapat  di Kabupaten  Pasaman  (The  effect  of  calcination temperature  variations  on  the  characteristics  of calcium carbonate (CaCO 3 ) in the shells of rice field snails  (Pila  ampullacea)  found  in  Pasaman Regency). Pillar Of Physics, 6(2). https://doi.org/10.24036/1933171074 Dompeipen, E.  J.  (2017).  Isolasi  Dan  Identifikasi  Kitin dan  Kitosan  dari  Kulit  Udang  Windu  (Penaeus Monodon)  Dengan  Spektroskopi  Inframerah. Majalah Biam, 13(1), 31 – 41. https://doi.org/10.29360/mb.v13i1.3120 Hargono,  H.,  Abdullah,  A.,  &  Sumantri,  I.  (2008). Pembuatan  Kitosan  Dari  Limbah  Cangkang  Udang Serta  Aplikasinya  Dalam  Mereduksi  Kolesterol Lemak Kambing. Reaktor, 12(1), 53 – 57.
https://doi.org/10.14710/reaktor.12.1.53-57
Isnaningsih,  N.  R.,  &  Marwoto,  R.  M.  (2011).  Keong
Hama  Pomacea  Di  Indonesia:  Karakter  Morfologi dan Sebarannya (Mollusca, Gastropoda: Ampullariidae). Berita Biologi, 10(4), 441 – 447. https://doi.org/10.14203/beritabiologi.v10i4.761 Jenial, S., Fadli, A., Aziz, Y., (2018). Studi kinetika reaksi pada  proses  deasetilasi  kitin  dari  limbah  industri ebi. J. Online Mhs. JOM Bid. Tek. Dan Sains 5, 1 – 7. Jia, Z. & Shen, D. (2002). Effect of reaction temperature and  reaction  time  on  the  preparation  of  low- molecular-weight  chitosan  using  phosphoric  acid.
Carbohydrate Polymers, 49(4), 393 – 396. https://doi.org/10.1016/S0144-8617(02)00026-7 Khairi, S., Wibowo, P., Wijoyo, R.B.T., Rezeki, S., (2019) Pengaruh Konsentrasi NaOH pada Deasetilasi Kitin dari Cangkang Udang Putih (Litopenaeus vannamei) dan  Aktivitasnya  pada  Air  Gambut.  J.  Teknol. Lingkung. Lahan Basah 7, 037 – 043.
Kusumaningsih,  T.,  A.  Masykur,  &  U.  Arief.  (2004). Pembuatan  Kitosan  dari  Cangkang  Bekicot (Achatina fulica). Biofarmasi, 2(2), 64-68.
Malis,  E.,  Rosyid  Ridho,  R.,  Fuad  Ardiyansyah,  A., (2023).  Pembuatan  Dan  Karakterisasi  Membran Komposit  Kitosan/  Montmorilonit-Glutaraldehid /Kitosan (Cs/Mmg-Ga) Aplikasinya Dalam Fuel Cell. J. Cryst. Publ. Penelit. Kim. Dan Ter. 4, 37 – 74.
Mastuti,  E.  (2005).  Pengaruh  Konsentrasi  NaOH  dan Suhu  pada  Proses  Deasetilasi  Khitin  dari  Kulit Udang. Ekuilibrium, 4(1), 21-25. https://doi.org/10.20961/ekuilibrium.v4i1.49600 Nopriansyah,  E.,  Baehaki,  A.,  &  Nopianti,  R.  (2016). Pembuatan Serbuk Cangkang Keong Mas (Pomacea canaliculata L.) serta Aplikasinya sebagai Penjernih Air  Sungai  dan  Pengikat  Logam  Berat  Kadmium. Jurnal FishtecH, 5(1), 1 – 10. https://doi.org/10.36706/fishtech.v5i1.3513 Nurainy, F., Rizal, S., & Yudiantoro, Y. (2008). Pengaruh Konsentrasi Kitosan Terhadap Aktivitas Antibakteri Dengan  Metode  Difusi  Agar  (Sumur).  Jurnal Teknologi  &  Industri  Hasil  Pertanian,  13(2),  117 – 125. https://doi.org/10.23960/jtihp.v13i2.117-125 Nurjanah, Nurhayati, T., Hidayat, T., & Ameliawati, M. A. (2019).  Profile  of  Macro-Micro  Mineral  and Carotenoids  in  Pomacea  Canaliculata.  Current Research  in  Nutrition  and  Food  Science  Journal, 7(1), 287 – 294. https://doi.org/10.12944/CRNFSJ.7.1.29 Nurmala,  N.  A.,  Susatyo,  E.  B.,  &  Mahatmanti,  F.  W. (2018).  Sintsis  Kitosan  dari  Cangkang  Rajungan Terkomposit  Lilin  Lebah  dan  Aplikasinya  sebagai Edible  Coating  pada  Buah  Stroberi.  Indonesian Journal  of  Chemical  Science,  7(3),  278 – 284. https://doi.org/10.15294/ijcs.v7i3.22064 Pancawati,  L.  (2016).  Preparasi  dan  karakterisasi limbah biomaterial cangkang keong mas (Pomacea canaliculata  Lamarck)  dari  daerah  Peringsewu sebagai  bahan  dasar  biokeramik.  (Skripsi, Universitas Lampung).
Pujiastuti,  P.  (2001).  Kajian  Transformasi  Khitin Menjadi  Khitosan  Secara  Kimiawi  Dan  Enzimatik. (Seminar  Nasional  Jurusan  Kimia,  Surakarta, Jurusan Kimia FMIPA UNS).
Putri,  M.,  B.,  &  Septiana,  H.,  M.,  (2014).  Pembuatan Kitosan Dari Cangkang Keong Mas Untuk Adsorben Fe Pada Air Sumur. (Laporan Tugas Akhir Diploma Teknik  Kimia  Fakultas  Teknik  Universitas  Sebelas Maret).
Puvvada, Y. S., Vankayalapati, S., & Sukhavasi, S. (2012). Extraction of chitin from chitosan from exoskeleton of  shrimp  for  application  in  the  pharmaceutical industry.  International  Current  Pharmaceutical Journal, 1(9), 258 – 263.
https://doi.org/10.3329/icpj.v1i9.11616 Saputra, K., Sutriyono, S., & Brata, B. (2018).  Populasi dan Distribusi Keong Mas (Pomacea canaliculata L.) sebagai  Sumber  Pakan  Ternak  pada  Ekosistem Persawahan  di  Kota  Bengkulu.  Jurnal  Sain Peternakan Indonesia, 13(2), 189 – 201. https://doi.org/10.31186/jspi.id.13.2.189-201 Septiani, T., Hidayati, N., & Mohadi, R. (2017). Calcium oxide  from   Pomacea  canaliculata  and  Babylonia spirata  snails.  Science  and  Technology  Indonesia, 2(3), 68 – 70. https://doi.org/10.26554/sti.2017.2.3.68-70 Suptijah  P,  Y.  Gushagia,  dan  D.  R.  Sukarsa.  (2008). Kajian  efek  daya  hambat  kitosan  terhadap kemunduran  mutu  filet  ikan  patin  (Pangasius hypopthalmus)  pada  penyimpanan  suhu  ruang. Bulletin Teknologi Hasil Perikanan, 11(2), 89-101. http://repository.ipb.ac.id/handle/123456789/29 566
Trisnawati,  E.,  Andesti,  D.,  &  Saleh,  A.  (2013). Pembuatan Kitosan dari Limbah Cangkang Kepiting sebagai Bahan Pengawet Buah Duku dengan Variasi Lama Pengawetan. Jurnal Teknik Kimia, 19(2), 17 – 26.
Wahyuni,  S.,  Selvina,  R.,  Fauziyah,  R.,  Prakoso,  H.  T., Priyono,  P.,  &  Siswanto,  S.  (2020).  Optimasi  Suhu dan  Waktu  Deasetilasi  Kitin  Berbasis  Selongsong Maggot (Hermetia ilucens) Menjadi Kitosan. Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia, 25(3), 373 – 381. https://doi.org/10.18343/jipi.25.3.373 Wulandari,  W.  T.,  Nurzaman,  Pratita,  A.  T.  K.,  & Idacahyati, K. (2020). Pengaruh Variasi Konsentrasi NaOH  Terhadap  Nilai  Derajat  Deasetilasi  Kitosan dari Limbah Cangkang Kerang Hijau (Perna viridis L): KOVALEN: Jurnal Riset Kimia, 6(3), 171 – 176. https://doi.org/10.22487/kovalen.2020.v6.i3.152 77
Younes,  I.,  &  Rinaudo,  M.  (2015).  Chitin  and  Chitosan Preparation  from  Marine  Sources.  Structure, Properties  and  Applications.  Marine  Drugs,  13(3),
1133 – 1174. https://doi.org/10.3390/md13031133