DOI: https://doi.org/10.36086/jpp.v18i2.1972

## PENGARUH LAMA DEMAM TERHADAP POSITIVITAS RATE IgM ANTI
Salmonella typhi PADA PASIEN TERSANGKA DEMAM TIFOID METODE

## INHIBITION MAGNETIC BINDING IMMUNOASSAY

## THE EFFECT OF DURATION OF FEVER ON POSITIVITY RATE IgM ANTI
Salmonella typhi IN PATIENTS SUSPECT OF TYFOID FEVER WITH THE

## INHIBITION MAGNETIC BINDING IMMUNOASSAY METHOD
Info artikel Diterima: 3 Oktober 2023 Direvisi: 2 Desember 2023 Disetujui: 2 Desember 2023
Nuli Nuhayati 1 , Rohayati 2 , Fusvita Merdekawati 3 , Nina Marliana 4 1, 2, 3, 4 Poltekkes Kemenkes Bandung, Indonesia (E-mail penulis korespondensi: nuliinurhayati96@gmail.com@gmail.com)

## ABSTRACT
Background: Typhoid fever is a systemic infectious disease caused by the bacterium Salmonella typhi. The definite clinical manifestation of typhoid fever is fever. Fever occurs when the body is trying to fight off a pathogenic infection by activating the immune system. The typical immune response begins with an increase in IgM antibodies to the stimulating antigen (immunogen). IgM began to form on day 3, and the titer increased until it reached a peak on day 14. Examination of anti-Salmonella IgM uses the IMBI method because it has a high specificity and sensitivity test. The purpose of this study was to determine the effect of duration of fever in patients with typhoid fever on the anti-Salmonella IgM positivity rate.

## Methods:  The  research  was  conducted  at  Sumedang  District  Hospital  and  Bandung  City
Hospital, with the type of cross-sectional analytic observational study. In the period May 2023 the samples taken were 32 typhoid fever patients with IgM levels who were examined using the IMBI method. Sampling was done by purposive sampling and processed using Microsoft Excel. Results: The data obtained from the calculation results, namely the positivity  rate of IgM anti Salmonella typhi for 2 days of fever is 0%; 4 days is 25%; 6 days is 75%; 8 days is 50%. Conclusion: The results of this study showed that the length of fever on days 2, 4, 6, and 8 had an effect on the positivity rate of IgM anti Salmonella typhi.
Keywords: igm anti salmonella; duration of fever in typhoid patients; imbi method.

## ABSTRAK
Latar Belakang: Demam tifoid merupakan suatu penyakit infeksi sistemik yang disebabkan oleh bakteri Salmonella  typhi .  Manifestasi  klinis  demam  tifoid  yang  pasti  adalah  demam.  Demam terjadi pada saat tubuh sedang berusaha untuk melawan infeksi patogen dengan aktivasi sistem imun. Respon imun yang khas dimulai dengan peningkatan antibodi IgM terhadap antigen yang menstimulasi  (imunogen).  IgM  mulai  terbentuk  pada  hari  ke-3,  dan  titernya  meningkat  hingga mencapai puncaknya pada hari ke-14. Pemeriksaan  IgM anti Salmonella menggunakan metode IMBI  karena  memiliki  tes  spesifisitas  dan  sensitifitas  yang  tinggi.  Tujuan  penelitian  ini  untuk mengetahui pengaruh lama demam pada pasien demam tifoid terhadap positivitas rate IgM anti Salmonella . Metode: Penelitian  dilakukan  di  Rumah  Sakit  Kabupaten  Sumedang  dan  Rumah  Sakit  Kota Bandung, dengan jenis penelitian observasional analitik cross sectional .  Pada periode Mei 2023 sampel  yang  diambil  adalah  32  pasien  demam  tifoid  dengan  kadar  IgM  yang  diperiksa menggunakan  metode  IMBI.  Pengambilan  sampel  dilakukan  secara purposive  sampling dan diolah dengan menggunakan Microsoft Excel . Hasil: Data yang diperoleh dari hasil perhitungan yaitu positivitas rate IgM anti Salmonella typhi pada lama demam 2 hari adalah 0%; 4 hari adalah 25%; 6 hari adalah 75%; 8 hari adalah 50%. Kesimpulan: Hasil  penelitian  ini  menunjukan  bahwa  lama  demam  hari  ke  2,  4,  6,  dan  8 berpengaruh secara terhadap positivitas rate IgM anti Salmonella typhi. Kata kunci: IgM anti Salmonella ; lama demam pasien tifoid; metode IMBI

## PENDAHULUAN
Demam tifoid merupakan suatu penyakit  infeksi  sistemik  yang  disebabkan oleh  bakteri Salmonella  typhi . 1 World Health Organization (WHO) memperkirakan  terdapat  sekitar  21  juta kasus tifoid dengan 128.000 sampai 161.000 kematian  setiap  tahun,  kasus  terbanyak terdapat di Asia Selatan dan Asia Tenggara. Di  Indonesia  angka  kejadian  kasus  demam tifoid  dipekirakan  rata-rata  900.000  kasus pertahun  dengan  lebih  dari  200.000 kematian. 2
Manifestasi  klinis  demam  tifoid  yang pasti  adalah  demam.  Gejala  demam meningkat secara bertahap dari sore hingga tengah malam dan menurun seiring berjalannya  hari. 3 Demam  terjadi  pada  saat tubuh  sedang  berusaha  untuk  melawan infeksi patogen dengan aktivasi sistem imun. Aktivasi dan proliferasi berbagai komponen sistem  imun  dapat  terjadi  saat  demam. 4 Respon  imun  yang  khas  dimulai  dengan peningkatan  antibodi  IgM  terhadap  antigen yang  menstimulasi  (imunogen).  Fase  ini diikuti  dengan  produksi  antibodi  IgG terhadap antigen tersebut. 5 Secara umum, kadar antibodi IgM yang bermakna terhadap suatu virus, bakteri atau agen infeksius lain diinterpretasikan sebagai bukti  adanya  infeksi  akut,  sedangkan  kadar IgG  spesifik  yang  tinggi  konsisten  dengan persistensi  imunitas  pada  fase  konvalesen setelah  infeksi  terdahulu.  Waktu  pertama kali  terinfeksi  (infeksi  primer)  tubuh  akan membentuk senyawa IgM, IgM muncul pada hari ke 3-5 sejak  gejala dan bertahan untuk jangka  waktu  30-60  hari.  Antibodi  IgG muncul pada hari ke 14 dan bertahan seumur hidup. 5
Inhibition Magnetic Binding Immunoassay (IMBI),  atau  yang  lebih populer  dengan  nama  dagang  Tubex  TF merupakan  uji  semikuantitatif  kolorimetrik yang  cepat  dan  mudah  untuk  dikerjakan yang  dapat  mendeteksi  IgM  spesifik terhadap lipopolisakarida (LPS) antigen O-9 S.  typhi yang  ada  pada  serum  pasien. Interpretasi  hasil  pemeriksaan  Tubex  TF ® bersifat  semi  kuantitatif  yaitu  dengan membandingkan  warna  yang  muncul  pada hasil  reaksi  pemeriksaan  dengan  warna standar yang terdapat skor pada Tubex TF ® kit. 6 Antigen  O9  bersifat  imunodominant yang dapat merangsang respon imun secara independen,  antigen  ini  dapat  langsung merangsang mitosis sel B tanpa memerlukan bantuan dari sel T. Karena memiliki sifat ini, maka  respon  imun  terhadap  antigen  O9 bersifat  cepat,  sehingga  deteksi  terhadap antibodi anti O9 dapat dilakukan lebih dini, yaitu  pada  hari  ke-5  untuk  indikasi  primer dan hari ke-2 untuk infeksi sekunder. 7 Pada  penelitian  yang  dilakukan  oleh Cahyariza,  N.,  &  Sholihah,  R.,  2019,  yang melakukan  pengujian  IgM  Anti Salmonella typhi (Tubex  TF ® )  pada  pasien  dengan observasi  demam  selama  3  hari  didapatkan hasil  sebagian  besar  negatif  sebanyak  17 sampel (71%) dan positif 7 sampel (29%). 8 Adapun  pada  penelitian  yang  dilakukan Pranata et  al ,  2022.,  yang  melakukan pengujian pada pasien tifoid fase akut yaitu pada  sampel  dengan  onset  demam  berkisar antara  2-8  hari  didadapatkan  hasil  skor Tubex  TF ® ≥4. 9 Pada  penelitian  pernah dilakukan  oleh  Marleni et  al ,  2014.,  yang menguji ketepatan uji Tubex hari ke-4 pada 28  subjek  didapatkan  nilai  duga  positif sebesar 43%. 1 METODE Jenis  penelitian  yang  dilakukan adalah observasional analitik dengan pendekatan cross  sectional pada  pasien tersangka  demam  tifoid  di  Rumah  Sakit Umum  Daerah  Kabupaten  Sumedang  dan Rumah Sakit Umum Daerah Kota Bandung dengan variasi lama demam 2 hari, 4 hari, 6 hari,  dan  8  hari,  yang  kemudian  dilakukan pengambilan serum dan diperiksa dengan uji IgM  Anti Salmonella  typhi metode  IMBI.
Selanjutnya,  hasil  pemeriksaan  tersebut diamati positivitas ratenya dengan memperhatikan skala warna pada kit Tubex TF ® .

## Kriteria Inklusi
Pasien  dengan  gejala  klinis  yang mendukung pada demam tifoid (demam >37 °C), yang mengalami demam selama 2 hari, 4 hari, 6 hari, atau 8 hari.
Kriteria Eksklusi
Vol. 18, No.2, Desember 2023, e ISSN 2654-3427 DOI :
Sampel  darah  yang  hemolisis  atau lipemik,  dan  demam  lain  selain  demam tifoid.

## HASIL
Hasil  pemeriksaan  yang  dilakukan pada  32  sampel  tersangka  demam  tifod, didapatkan  hasil  pasien  yang  positif  secara
keseluruhan  sebanyak  12,  dan  pasien  yang negatif sebanyak 20. Berikut tabel frekuensi hasil pemeriksaannya: Tabel 1. Frekuensi hasil pemeriksaan IgM anti Salmonella typhi Frequency Percent Valid Percent Cumulative Percent Valid  Negatif 20 62.5 62.5 62.5 Positif 12 37.5 37.5 100.0 Total 32 100.0 100.0 Berdasarkan hasil positif pada tabel 1.  didapatkan  12  sampel  yang  positif. Berikut  adalah  pengelompokan  sebaran sampel  yang  positif  pada  variasi  lama demam 2 hari, 4 hari, 6 hari, dan 8 hari:

## Tabel 2. Distribusi Hasil pemeriksaan IgM anti Salmonella typhi
Lama Demam Frekuensi Positif 2 hari 0 4 hari 2 6 hari 6 8 hari 4
Berdasarkan  tabel  2.  pada  lama demam  2  hari  tidak  ada  hasil  yang  positif, untuk lama demam 4 hari terdapat 2 sampel yang  positif,  untuk  lama  demam  6  hari
terdapat  6  sampel  yang  positif,  dan  untuk lama demam 8 hari terdapat 4 sampel yang positif. Tabel 3. Positivitas Rate IgM anti Salmonella typhi Lama Demam Total Sampel Frekuensi Positif Positivitas Rate 2 hari 8 0 0% 4 hari 8 2 25% 6 hari 8 6 75% 8 hari 8 4 50% Positivitas rate IgM Anti Salmonella
typhi merupakan proporsi hasil pemeriksaan yang positif terinfeksi Salmonella typhi pada masing-masing  kelompok  variasi  yang diperiksa.  Positivitas  rate  dihitung  dengan cara  membagi  jumlah  hasil  yang  positif dengan  total  pemeriksaan  yang  dilakukan kemudian dikalikan 100 persen. Berdasarkan  tabel  3.  pada  lama  demam  2 hari  didapatkan  hasil  positivitas  rate  yaitu 0%,  untuk  lama  demam  4  hari  didapatkan hasil positivitas rate yaitu 25%, untuk lama demam  6  hari  didapatkan  hasil  positivitas rate  yaitu  75%,  dan  untuk  lama  demam  8 hari  didapatkan  hasil  positivitas  rate  yaitu 50%.

## PEMBAHASAN
Vol. 18, No.2, Desember 2023, e ISSN 2654-3427 DOI :
Penelitian  dilakukan terhadap  32 sampel  pasien  tersangka  demam  tifoid dengan  4  kelompok  variasi  lama  demam. Setiap kelompok variasi lama demam terdiri dari  8  sampel.  Berdasarkan  hasil  penelitian yang  telah  dilakukan  didapatkan  hasil positivitas  rate  pada  lama  demam  2  hari adalah 0%; 4 hari adalah 25%; 6 hari adalah 75%; dan 8 hari adalah 50%.
Pada pasien dengan lama demam 2 hari memiliki  positivitas  rate  0%.  Hal  ini kemungkinan disebabkan belum munculnya IgM  Anti Salmonella  typhi ,  sesuai  dengan beberapa  kepustakaan  yang  menyatakan bahwa  IgM  akan  muncul  pada  hari  ke  3-4 demam (Marleni et al. , 2014). Ada juga yang menyatakan  antibodi  IgM  terbentuk  pada hari ke4 sampai ke–5 setelah infeksi. 11
Pada pasien dengan lama demam 4 hari memiliki  positivitas  rate  25%.  Pada kelompok  ini  lebih  banyak  pasien  yang diduga negatif, kemungkinan hal ini karena timbulnya  IgM  masih  sedikit  walaupun berdasarkan  kepustakaan  IgM  akan  muncul pada  hari  ke  3-4  demam.  Hasil  ini  juga sesuai  dengan  penelitian  yang  dilakukan oleh  Marleni et  al ,  2014.,  yang  menguji ketepatan uji Tubex hari ke-4 pada 28 subjek didapatkan  nilai  duga  positif  sebesar  43% menunjukkan  peluang  seseorang  menderita demam tifoid. 10 Menurut Marleni 2014, hal ini mungkin disebabkan karena pemeriksaan dilakukan  pada  demam  hari  ke-4  dimana kemungkinan timbulnya IgM masih sedikit. Selain  itu  terdapat  kemungkinan  terkena infeksi  kuman Salmonella grup  D  lain seperti S.enteritidis namun tidak invasif dan
tidak menstimulasi respons antibodi sistemik. 12 Pada pasien dengan lama demam 6 hari memiliki  positivitas  rate  75%.  Pada  lama demam  6  hari  memeiliki  positivitas  rate paling  tinggi  dibanding  kelompok  lama demam  yang  lain.  Hal  ini  berarti  IgM mengalami  banyak  peningkatan  didalam tubuh,  sesuai  dengan  penelitian  yang dilakukan oleh Said, 2007, dengan rata-rata sampel diambil pada saat demam diatas hari ke-5  hasil  Tubex  TF ® melaporkan  hasi positif pada nilai 6-10 sebanyak 30,2%. 13
Pada pasien dengan lama demam 8 hari memiliki positivitas rate 50%. Hal ini terjadi kemungkinan karena pasien sudah melakukan  terapi  atau  pengobatan  karena demam  sudah  lebih  dari  seminggu.  Meski menurut  kepustakaan  IgM  mengalami peningkatan sampai hari ke 14. 14
Deteksi  antibodi  IgM  spesifik  untuk Salmonella typhi . Pengujian anti-
lipopolisakarida  IgM  memberiksan  hasil antara  tifoid  dan  non-tifoid.  IgM  sendiri akan  meningkat  lebih  awal  tetapi  juga menurun lebih cepat sesuai dengan fase akut infeksi,  sedangkan  IgG  akan  bertahan  pada fase penyembuhan. 15
Pada  hasil  identifikasi  antibodi  IgM Salmonella typhi metode IMBI hasil positif belum  tentu  pasien  terinfeksi Salmonella typhi .  Dikarenakan  pasien  dapat  terkena infeksi Salmonella (grup  D1)  yang  lain. Hibridasi grup DNA 1 misalnya Salmonella entereditis , Salmonella typhimurium banyak dari infeksi ini tidak biasa, bahkan sistemik. Sedangkan  hasil negatif belum tentu pasien tersebut  tidak  terinfeksi Salmonella  typhi , dikarenakan  pasien  tersebut  baru  terinfeksi di mana sistem imunitasnya belum terangsang.  Antibodi  IgM  terbentuk  pada hari  ke-4  sampai  ke–5  setelah  infeksi (infeksi primer) dan hari  ke–2 sampai ke–3 setelah infeksi sekunder, kemungkinan juga terjadi  negatif  palsu.  Karena  konsentrasi antibodi IgM O9 pada Salmonella typhi dan Salmonella grup D1  tidak cukup terdeteksi oleh  identifikasi  antibodi  IgM Salmonella typhi metode IMBI. 11 Identifikasi  antibodi    IgM Salmonella metode  IMBI  memberikan  gambaran  hasil diagnosis  yang  lebih  pasti  karena  tidak hanya sekedar hasil positif atau negatif  saja, tetapi  juga  tingkat  akut  fase  infeksi  yang lebih  definitif.  Karena  pada  identifikasi  ini menggunakan  antigen  pemurnian  tinggi, yaitu  protein  LPS-O9 Salmonella  typhi epitop  α-D-tyvelosa yang  sangat  langka  di gula dideoksiheksosa dan antigen  utama ini belum pernah di temukan di mikroorganisme manapun.  Dan  hanya  ada  di Salmonella typhi ,  sehingga  reaksi  silang  dengan Salmonella atau  spesies  lain  sangat  kecil kemungkinan terjadi. 11
KESIMPULAN DAN SARAN
Positivitas  rate  IgM  anti Salmonella typhi pada  lama  demam  2 hari  adalah  0%; pada lama demam 4 hari adalah 25%; pada lama  demam  6  hari  adalah  75%;  dan  pada lama  demam  8  hari  adalah  50%.  Hasil penelitian  ini  menunjukan  bahwa  lama demam  hari  ke  2,  4,  6,  dan  8  berpengaruh secara  terhadap  positivitas  rate  IgM  anti
Salmonella typhi. Saran  untuk  peneliti  selanjutnya,  pada pasien  dengan  lama  demam  2  hari  dengan hasil  IMBI  negatif  disarankan  untuk melakukan pemeriksaan ulang dihari berikutnya  dan  dapat  melakukan  penelitian menggunakan  pemeriksaan  widal  metode aglutinasi, karena pada pemeriksaan tersebut dapat  mendeteksi  titer  antibodi  terhadap Salmonella typhi , dan Salmonella paratyphi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Cahrany,  R.  A.  (2018).  Gambaran Jumlah Leukosit Pada Penderita Demam Tifoid di Rumah Sakit Umum Daerah Kayuagung Tahun 2018. 37-45. doi:10.1088/1751-8113/44/8/085201.
2. WHO  ( World  Health  Organisation ). (2018). Typhoid vaccine: WHO
position  paper  -  March  2018. Weekly
Epidemiological  Record,  13 (98),  153– 172.
3. Ardiaria,  M.  (2019).  Epidemiologi, Manifestasi Klinis, dan Penatalaksanaan  Demam  Thyphoid. JNH (Journal of Nutrition and Health), 7 (2).
4. Satriadi, R., Parinding, JT., Tejoyuwono,  A.  A.  T.,  &  Natalia,  D. (2021). Hubungan antara Lama Demam dengan  Hasil  Pemeriksaan  Kualitatif IgM  dan  IgG  pada  Pasien  Demam Berdarah  Dengue  (DBD)  di  RSUD
Sultan Syarif Mohamad Alkadrie tahun 2018. Jurnal  Vektor  Penyakit,  15 (1), 11-16.
5. Jawetz, E., Melnick, JL., Adelberg, EA. (2018). Medical  Microbiology (26th
Edition ed.). Mac Graw Hill Companies. 6. IDL Biotech. (2021). Tubex-TF, Confidence In Typhoid Fever Diagnosis. Sweden: DRG International
Inc.
7. Widodo,  D.  (2009). Demam  tifoid.  In: Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam (5 ed.). Jakarta: Internal Publishing.
8. Cahyariza, N. I., & Sholihah, R. (2019). The  Comparison  of  Widal  Slide Examination  Results  between  Tubex TF  on  Febrile  Observation  Patients
Over  3  Days. Medical  Laboratory Technology Journal, 5 (1), 54-61.
9. Pranata, I. W. A., Diana, A., Heryanto, M.  R.,  Lukman,  N.,  Kosasih,  H., Djauhari, H., & Alisjahbana, B. (2022). Persistence of anti-Salmonella O9 IgM as  measured  by  Tubex ® TF  may contribute  to  the  over-diagnosis  of typhoid  fever  in  endemic  areas.  . Bali Medcal Journal, 11 (1), 11-17.
10. Marleni, M., Iriani, Y., Tjuandra, W., &
Theodorus.  (2014).  Ketepatan  Uji Tubex TF ® dalam Mendiagnosis Demam Tifoid Anak pada Demam Hari ke-4. Jurnal Kedokteran Dan Kesehatan, 1 (1), 7-11. 11. Andayani, A., & Ermawati, N. (2021). Identifikasi  Antibodi  IgM  Salmonella Typhi Metode IMBI (Inhibition Magnetic Binding Immunoassay) Untuk  Membantu  Diagnosa  Demam Typhoid. Judika  (Jurnal  Nusantara
Medika), 5 (1), 1-5.
12. Rustandi. 2010. Demam Tifoid. Dalam: Imunologi  Klinik.  Rumah  Sakit  Hasan Sadikin. 2010.
13. Said  NF,  Satari  HI,  Tambunan  T  and Oesman  F.  (2007).  Serology  Test  in Diagnostic  of  Typhoid  Fever  at  Child Health Department Cipto Mangunkusumo Hospital. FKUI. Tesis. 14. Roitt,  I.  M.  (2017). Roitt’s  Essential Immunology (13th ed.). United Kingdom: Wiley. 15. Krisnasari, A. S. (2020). Imunoserologi: Teknologi Laboratorium Medik . Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EG