Sri-Sukamto dan Yuliantoro
1) Peneliti (Researcher); Pusat Penelitian Kopi dan Kakao Indonesia, Jl. P.B. Sudirman 90, Jember 68118, Indonesia. 2) Alumni (Graduate); Universitas Jember, Jl. Kalimantan III/123, Jember 68121, Indonesia.
Pelita Perkebunan 2006, 22(1), 40 — 57

## Pengaruh Suhu Penyimpanan Terhadap Viabilitas
Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. Dalam Beberapa Pembawa
Effect of Storage Temperature on
Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. Viability on Several Carriers
Sri-Sukamto 1) dan  Kelik Yuliantoro 2)

## Ringkasan
Salah  satu  jenis jamur entomopatogen  yang banyak diteliti  dan  memiliki potensi  sebagai  mikoinsektisida  adalah  Beauveria  bassiana (Bals.) Vuill.  Untuk mendukung  keefektifan  dan  patogenesitas  B.  bassiana,  diperlukan  penambahan bahan pembawa (carrier) yang berfungsi untuk melindungi spora dari sinar ultra violet  matahari.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  suhu penyimpanan  terhadap  viabilitas  spora  B.  bassiana  dalam  bahan  pembawa. Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Penyakit Tanaman Pusat Penelitian Kopi dan Kakao Indonesia, disusun menggunakan rancangan acak lengkap (RAL) faktorial, tiga  kali  ulangan.  Faktor  pertama  berupa  macam  pembawa  (C)  :  C 1 =tepung beras;  C 2 =tepung  maizena;  C 3 =tepung  tapioka.  Faktor  kedua  dosis  (D) : D 1 = 1 g B. bassiana + 1 g pembawa; D 2 = 1 g B. bassiana + 5 g pembawa; D 3 = 1 g B. bassiana + 10 g pembawa. Faktor ketiga suhu penyimpanan (T): T 1 = 5 O C; T 2 = 23 O C; T 3 = 29 O C. Data  hasil  pengamatan  dianalisis  varians  dan  uji  jarak  berganda  DMRT  5%. Viabilitas  spora  jamur  B.  bassiana  diamati  dengan  melihat  perkembangan  100 blastospora  yang  ditentukan  secara  acak  di  bawah  mikroskop  cahaya  dengan perbesaran 400 kali. Pengamatan dilakukan secara duplo setelah spora B. bassiana kering disimpan berturut-turut 2, 4, 8 dan 16 minggu. Hasil penelitian menunjukkan bahwa  penambahan  tepung  tapioka  sebanyak  1  g  dan  suhu  penyimpanan  5 O C, mempunyai potensi yang baik dalam mempertahankan viabilitas spora B. bassiana sekurang-kurangnya sampai dua bulan penyimpanan. Hal tersebut disebabkan oleh kemampuan  daya simpan tepung  tapioka  yang lebih baik daripada  tepung beras dan maizena serta didukung oleh suhu rendah yang sesuai untuk mempertahankan viabilitas spora B. bassiana. Terjadi penurunan viabilitas spora kering B. bassiana lebih cepat, seiring dengan semakin meningkatnya dosis pembawa, suhu dan lama penyimpanan.  Penyimpanan  pada  suhu  5 O C  menunjukkan  kemampuan  mem- pertahankan viabilitas spora  B. bassiana kering murni lebih lama daripada kondisi suhu 23 O C dan suhu 29 O C.

## Summary
One of the entomopatogenous fungus types commonly observed and showed potency as myco-insectiside is Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. In order to sup- port effectiveness  and patogenous  activity  of  B. bassiana,  it is  necessary  to add a  carrying  agent  that  protects  its  spores  from  ultra  violet  ray.  This  study  aims to investigate the effect of storage temperature on viability of B. bassiana spores on  the  carrier  material.  The  observation  was  carried  out  in  the  Laboratory  of Plant  Diseases,  Indonesian  Coffee  and  Cocoa  Research  Institute.  The  research was arranged in completely randomized design by three factors. The first factor was  carrier  (C),  that  consists  of  C 1 =  rice  flour,  C 2 =  maize  flour  and  C 3 = tapioca  flour.  The  second  factor  was  dosage  (D),  that  consists  of  D 1 =  1  g B.  bassiana  +  1  g  carrier;  D 2 =  1  g  B.  bassiana  +  5  g  carrier  and  D 3 =  1  g B. bassiana + 10 g  carrier. The third factor was temperature  of the storage (T),  that consists  of  T 1 =  5 O C;  T 2 =  23 O C  and  T 3 =  29 O C.  Viability  of  B.  bassiana spores was examined by observing development of 100 blastopores randomly and determined  under  light  microscope  with  400  times  magnification.  Observation was  conducted  in  two  replicates  after  the  spores  of  B.  bassiana  were  kept  in the storage for 2, 4, 8 and 16 weeks. The result showed that by adding 1 g tapioca flour  and  temperature  of  storage  of  5 O C  was  potentiall  in  keeping  viability  of B. bassiana  spores  at least  for  2  months.  It  was  due  to  that  tapioca  flour  gave better  effect  than rice  and  maize  flours  in  keeping  the  storage  and  appropriate low temperature.  Viability of  B. bassiana spores  decreased with increasing  car- rier dosage,  temperature  and  duration  of  the storage. Whereas, storage  at  5 O C
was found to be a better con- dition  in  keeping  viability  of dry pure B. bassiana spores longer than  conditions  of  23 O C  and 29 O C.
Key word : Beauveria bassiana, tem- perature,  viability, carrier.

## PENDAHULUAN
Peluang penggunaan agens hayati pada saat  ini  semakin  meningkat  sehubungan dengan semakin meningkatnya  kesadaran masyarakat  akan  kelestarian  lingkungan. Pengendalian hama secara hayati berkembang dengan  adanya  faktor  pendorong  seperti semakin  tingginya  harga  pestisida  dan
dampak negatif penggunaan pestisida kimia sintetik.  Sebagai  gantinya,  saat  ini mulai tersedia  agens  pengendalian  hayati  serta teknologi pengembangbiakannya (Sulistyowati & Junianto, 2000).
Pengendalian hayati adalah pemanfaatan musuh alami untuk mengendalikan populasi hama, sebagai salah satu komponen utama di dalam sistem Pengendalian Hama Terpadu (Oka, 1995). Jenis musuh alami yang dapat menekan populasi hama terdiri atas berbagai macam golongan yaitu predator, parasitoid dan  patogen  (Untung,  1996).  Salah  satu jenis entomopatogen yang banyak diteliti dan memiliki  potensi  sebagai  mikoinsektisida adalah  Beauveria  bassiana  (Bals.)Vuill (Junianto & Sri-Sukamto, 1995). Menurut
Sudarmadji  &  Gunawan  (1994),  peluang pemanfaatan  B.  bassiana  didukung  oleh beberapa hal antara lain aplikasi yang aman bagi hewan, manusia dan lingkungan, pem- biakan massal jamur mudah dilakukan.
B.  bassiana  merupakan  jamur  yang mempunyai prospek baik untuk pengendalian banyak serangga hama (Jauharlina, 1999). Jamur ini sudah digunakan secara luas di Indonesia, khususnya untuk mengendalikan hama penghisap buah kakao (Helopeltis spp.) (Sudarmadji  &  Gunawan  cit.  Junianto  & Sulistyowati, 2000), penggerek buah kakao (Conopomorpha  cramerella)  (Junianto  & Sulistyowati, 2000) dan penggerek batang kakao (Zeuzera  coffeae)  (Utomo  et  al .  cit. Junianto & Sulistyowati, 2000).
Keberhasilan B. bassiana di lapangan masih  belum  konsisten.  Beberapa  faktor penyebabnya  adalah  viabilitas  dan  virulensi (Sudarmadji  &  Gunawan,  1994;  Junianto et al., 2000), kondisi lingkungan (Inglish et al., 1997) dan formulasi (Knudsen et al. cit. Junianto et al., 2000). Untuk menjaga viabilitas maupun virulensinya, spora jamur B. bassiana dapat diawetkan dengan cara pengeringan karena pada kadar air rendah aktivitas metabolismenya kecil. Simpodulo- spora B. bassiana yang dikering-anginkan masih dapat bertahan hidup sampai 2 tahun bila  disimpan  pada suhu  5 O C,  sedangkan spora yang tidak diawetkan hanya berumur beberapa minggu (Bustamante, cit. Junianto & Sulistyowati, 2000).
Untuk  mendukung  keefektifan  dan patogenesitas B. bassiana di lapangan, perlu dilakukan  penambahan  bahan  pembawa
(carrier). Junianto & Sulistyowati (2000) melaporkan  bahwa  bahan  tepung  jagung merupakan pembawa yang efektif bagi spora B. bassiana. Tepung ini ukurannya secara fisik lebih besar daripada spora B. bassiana, sehingga dapat berfungsi melindungi spora dari sinar UV. Penambahan bahan pembawa berupa bahan perata-perekat dan tepung kanji juga diketahui mempunya potensi baik dalam meningkatkan patogenesitas B. bassiana ter- hadap ulat Plutella xylostella (Wulandari, 2003).
Persyaratan bahwa suatu patogen ber- hasil baik untuk digunakan sebagai agens pengendalian hayati yaitu apabila viabilitas- nya tetap terpelihara tinggi. Penyimpanan spora B. bassiana yang telah melalui proses pengeringan akan mampu mempertahankan viabilitasnya dalam waktu yang lama. Spora B. bassiana yang diaplikasikan di lapangan sering  mengalami  penurunan  efektivitas. Faktor kesesuaian kondisi penyimpanan spora kering B. bassiana dan peran pembawa dalam aplikasinya  di  lapangan  akan  mendukung upaya pengembangan potensi jamur entomo- patogen B. bassiana sebagai bio-insektisida. Sampai saat ini belum diketahui daya  hidup spora  B.  bassiana  yang  telah  bercampur dengan  bahan  pembawa  pada  berbagai kondisi suhu dan penyimpanan.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui suhu penyimpanan yang mampu menjaga viabilitas spora B. bassiana kering setelah ditambah  pembawa.  Di samping  itu  juga untuk  mengetahui  m acam   dan  dosis pembawa yang paling baik bagi B. bassiana setelah diperlakukan pada berbagai kondisi suhu dan waktu penyimpanan.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian dilakukan di Laboratorium Penyakit Tanaman Pusat Penelitian Kopi dan Kakao  Indonesia.  Penelitian  berlangsung selama empat bulan dari Februari sampai Mei 2004.
Bahan yang digunakan meliputi media PDA (Potato Dekstrosa Agar), tepung beras, tepung maizena, tepung tapioka dan spora kering B. bassiana dalam bentuk tepung spora murni.
Penelitian disusun menurut rancangan acak  lengkap  faktorial  dengan  tiga  kali ulangan.  Faktor  pertama  adalah  macam pembawa  (C)  :  C 1 =  tepung  beras;  C 2 = tepung maizena; C 3 = tepung tapioka. Faktor kedua adalah dosis (D) : D 1 = 1 g B. bassiana + 1 g pembawa; D 2 = 1 g   B. bassiana + 5 g
pembawa; D 3 = 1 g B.  bassiana  +  10  g pembawa.  Faktor  ketiga  adalah  suhu penyimpanan (T): T 1 = suhu  5 O C  (dalam almari es); T 2 = suhu 23 O C (dalam ruangan dilengkapi  AC);  T 3 =  suhu  29 O C  (dalam ruangan tanpa AC).
Kombinasi antarafaktor perlakuan adalah sebagai berikut :

## Pelaksanaan Penelitian

## Pencampuran bubuk spora B. bassiana dengan bahan pembawa
Penelitian ini mempergunakan bubuk spora kering B. bassiana hasil perbanyakan secara massal di Pusat Pengembangan Agens Hayati (Bioinsektisida) B. bassiana Labora- torium Penyakit Tumbuhan, Pusat Penelitian Kopi dan Kakao Indonesia. Pemilihan isolat Bb  Y—725  sebagai  sumber  inokulan,  di- karenakan dari penelitian sebelumnya telah teruji  dengan  hasil  yang  efektif,  mampu menghasilkan  banyak  spora  dan  virulen terhadap Helopeltis spp. dan Conopomorpha cramerella (Penggerek buah kakao). Bubuk spora  kering  B.  bassiana  murni  ini, sebelumnya telah diawetkan melalui proses pengering-bekuan dan penyimpanan dalam refrigerator 5 O C.
Bahan pembawa tepung beras, tepung maizena dan tepung tapioka, disimpan dalam lemari  kedap  udara.  Bubuk  spora  kering B.  bassiana  hasil  perbanyakan  maupun pembawa tepung dalam penentuan komposisi dosisnya,  masing-masing  diambil  dan ditimbang  dengan  neraca  analitik  sesuai dengan perlakuan. Campuran tepung spora kering  dengan  pembawa  tepung  dikocok
Kontrol T 1 Kontrol T 2 Kontrol T 3 C 1 D 1 T 1 C 1 D 1 T 2 C 1 D 1 T 3 C 1 D 2 T 1 C 1 D 2 T 2 C 1 D 2 T 3 C 1 D 3 T 1 C 1 D 3 T 2 C 1 D 3 T 3 C 2 D 1 T 1 C 2 D 1 T 2 C 2 D 1 T 3 C 2 D 2 T 1 C 2 D 2 T 2 C 2 D 2 T 3 C 2 D 3 T 1 C 2 D 3 T 2 C 2 D 3 T 3 C 3 D 1 T 1 C 3 D 1 T 2 C 3 D 1 T 3 C 3 D 2 T 1 C 3 D 2 T 2 C 3 D 2 T 3 C 3 D 3 T 1 C 3 D 3 T 2 C 3 D 3 T 3 Tabel 1. Kombinasi perlakuan Table 1. Treatment combinations
Catatatan (Notes) :
T : Suhu (Temperature) : T 1 = 5 O C; T 2 = 23 O C; T 4 = 29 O C C : Pembawa (Carrier) :
C 1 = Tepung beras (Rice flour);
C 2 = Tepung maizena (Maezina flour);
C 3 =  Tepung  tapioka  (Tapioka  flour). D : Dosis (Dose)  :
D 1 =  1  g  spora  B.  bassiana  +  1  g  pembawa (Carrier);
D 2 =  1  g  spora  B.  bassiana  +  5  g  pembawa (Carrier); D 3 =  1  g  spora  B.  bassiana  +  10  g  pembawa (Carrier).
sampai  homogen  dan  sebagai  kontrol/ pe mbanding  digunakan  bubuk  spora B.  bassiana  kering  tanpa  penambahan pembawa.
Campuran  homogen  tadi  kemudian dimasukkan dalam suatu kemasan (wadah) kantung  plastik  yang  aseptik  non  vakum yaitu suatu penutupan bahan dengan kondisi tekanan di dalam dan di luar kemasan sama. Penggunaan wadah ini memegang peranan dalam perlindungan bahan dalam kemasan dari berbagai macam bentuk kemungkinan kerusakan, dimaksudkan dapat melindungi dan  mengawetkan  bahan  sampai  peng- gunaannya untuk selalu dalam keadaan baik (Supardi & Sukamto, 1999).

## Penyimpanan kemasan bubuk spora
Kemasan  yang  masing-masing  berisi bubuk  spora  kering  B.  bassiana  murni (tanpa pembawa) dan bubuk spora kering B.  bassiana  yang  telah  ditambah  dengan pembawa sesuai perlakuan, disimpan pada suhu 5 O C, 23 O C dan 29 O C. Perkecambahan spora B. bassiana  diamati dengan mikroskop cahaya, setelah 2, 4, 8 dan 16 minggu masa penyimpanan.

## Uji viabilitas spora B. bassiana
Metode Slide Culture (Riddel) sering dipakai untuk mengamati struktur morfologi dari jamur (Bibiana, 1994). Pada penelitian ini, metode Slide Culture digunakan untuk mengamati daya kecambah spora B. bassiana.
Suspensi blastospora B. bassiana dibuat
dalam  laminar  air  flow  dengan  cara mengambil sebanyak 1 spatula bubuk spora kering  B.  bassiana  murni  maupun  yang telah ditambah pembawa tepung (setelah me- lewati masa penyimpanan) sesuai perlakuan, dimasukkan ke dalam larutan tabung per- kecambahan yang mengandung larutan 10% (90 ml air suling + 5 ml asam laktat dan 5 ml tween/perata). Setelah itu diberi getaran dengan alat stearrer selama 30 detik untuk memisahkan  spora  yang  berkelompok, sehingga  dapat  diperoleh  suspensi  yang homogen.
Untuk mengetahui pengaruh suhu pe- nyimpanan terhadap perkecambahan spora B. bassiana, dilakukan Metode Slide Cul- ture, dengan mengecambahkan spora pada potongan media PDA berbentuk lempengan dengan ukuran luas sekitar 1 cm 2 dengan ketebalan  1—2  mm.  Potongan  media  ini diletakkan di atas gelas benda. Gelas benda ditempatkan  secara  berjajar  dalam  kotak plastik yang sebelumnya telah diberi tissue basah sehingga kelembapan terus terjaga. Di atas  media  ditetesi  10  µ l  suspensi  spora B. bassiana dan selanjutnya diinkubasi dalam kotak plastik bertutup kaca pada suhu kamar selama ± 14 jam. Setiap perlakuan diulang sebanyak 3 kali.
Setelah diberi setetes larutan pewarna sekaligus  pemfiksasi  Cotton  Blue  Lacto- phenol tepat di atas media perkecambahan, kemudian  ditutup  dengan  gelas  penutup. Daya kecambah spora B. bassiana diamati di  bawah  mikroskop  cahaya  dengan  per- besaran 400 kali.
Blastospora B. bassiana dinyatakan ber- kecambah apabila panjang buluh kecambah melebihi diameternya atau lebih dari 3 µm
(Inglish et al., 1997). Daya kecambah ditentukan dari 100 butir blastospora yang ditentukan secara  acak.  Pengujian  daya  kecambah dilakukan secara duplo setelah blastospora disimpan berturut-turut selama 2, 4, 8 dan 16 minggu. Blastospora dinyatakan masih viabel jika mempunyai daya kecambah lebih dari 80%.  Menurut Susilo  et  al.  cit.  Suwarso (1997), untuk mengetahui persentase spora yang berkecambah dapat menggunakan rumus :
K  = Persentase spora yang berkecambah.
T  = Jumlah spora yang berkecambah.
M = Jumlah spora yang tidak berkecambah.
Data hasil pengamatan dianalisis dengan analisis varians untuk membedakan urutan rerata antara perlakuan dilakukan uji Duncan Multiple Range Test (DMRT) pada taraf 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengaruh Macam Pembawa

## Dari uji viabilitas, bubuk spora kering
B.  bassiana  diketahui  mempunyai  daya kecambah sebesar 88%. Menurut Junianto &  Sulistyowati  (2000),  spora  kering  B. bassiana  dapat  dinyatakan  mempunyai viabilitas yang tinggi apabila daya kecambah yang dihasilkan lebih dari 80%. Angka ini memenuhi  syarat  layak  sebagai  agens pengendali hayati  hama di lapangan. Makin
tinggi tingkat viabilitas spora B. bassiana, makin  besar  pula  peluang  jamur  entomo- patogen ini untuk mematikan serangga sasaran (Ferron cit. Burges, 1981; Sudarmadji & Gunawan, 1994).
Pengaruh  interaksi  antara  macam pembawa  dan  dosis  pembawa  terhadap viabilitas  spora  B.  bassiana  kering  pada penyimpanan dua minggu tercantum pada Tabel  2.  Persentase perkecambahan pada perlakuan  kontrol  (bubuk  spora  kering B.  bassiana  tanpa  perlakuan  pembawa tepung) diketahui lebih tinggi dibandingkan dengan  perlakuan  bubuk  spora  kering B.  bassiana  yang  telah  ditambah  dengan pembawa  tepung  (Gambar  4).  Tingginya viabilitas spora B. bassiana pada perlakuan kontrol, dikarenakan oleh kondisi penyimpanan yang masih sesuai serta masih pendeknya umur simpan, sehingga dimungkinkan daya hidup belum banyak mengalami penurunan.
Dari hasil perlakuan macam pembawa diketahui bahwa penambahan 1 g pembawa tepung tapioka pada 1 g bubuk spora kering B.  bassiana  m embe rikan  persenta se perkecambahan spora paling tinggi, yaitu sebesar  80,89%;  sedangkan  persentase perkecambahan spora terendah dihasilkan oleh 1 g bubuk  spora kering B.  bassiana yang telah ditambahkan pada pembawa tepung maizena  dengan  dosis  10  g,  yaitu  sebesar 71,67%  (Gambar  1).  Penurunan  kualitas spora B. bassiana yang disimpan bersama bahan  pembawa  tepung  diakibatkan  oleh kerusakan spora.
Pembawa  tepung  beras  dan  maizena mengakibatkan penurunan viabilitas yang lebih  tinggi  daripada  pembawa  tepung
K =                     x 100%
T
T + M
tapioka. Semakin tinggi dosis pembawa yang diberikan, berakibat menurunkan viabilitas dari spora B. bassiana. Tepung beras dan maizena yang mengandung kadar air dan lemak tinggi cenderung menyebabkan daya simpannya  tidak  bertahan  lama.  Hal  ini ber keba lika n  de ngan  tepung  tapioka (Winarno et al., 1980). Pada bahan tepung yang  mempunyai  daya  simpan  pendek, kerusakan dan kehilangan viabilitas spora B.  bassiana  lebih  tinggi.  Semakin  tinggi dosis  bahan  pembawa  berdaya  simpan pendek, kualitas spora B. bassiana maupun bahan pembawa semakin turun.
Menurut Winarno et al. (1980), pada umumnya  keawetan  bahan  pangan  mem- punyai hubungan erat dengan kadar air yang dikandungnya. Bahan pangan yang mem- punyai kadar air yang rendah, daya simpan- nya lebih lama dibandingkan dengan bahan yang berkadar air tinggi. Bahan pangan yang mengandung  lemak  tinggi  cenderung mengikat oksigen dari udara. Penyimpanan pada  kondisi  seperti  pencahayaan  secara langsung serta keadaan udara yang terlalu
lembab  atau  kering  dalam  waktu  lama, lambat-laun akan menurunkan kualitas bahan pangan.
Kelebihan yang dimiliki tepung tapioka daripada tepung-tepung yang lain, adalah kaya akan sumber karbohidrat, daya ikat dan rekatnya yang tinggi serta tidak menim- bulkan gumpalan dalam media air (Radiyati & Agusto, 1993). Butiran tepung tapioka yang secara fisik ukurannya lebih besar akan lebih sempurna menyelimuti butiran spora B.  bassiana  yang  ukurannya  lebih  kecil dalam suspensi air.

## Pengaruh  macam  pembawa  dan  suhu penyimpanan
Perkecambahan  spora  B.  bassiana dipengaruhi oleh suhu lingkungan (Junianto & Sri-Sukamto, 1995). Pengaruh penam- bahan  macam  pembawa  dan  suhu  pe- nyimpanan terhadap viabilitas spora kering B. bassiana terlihat pada Tabel 3.  Perlakuan kontrol menunjukkan bahwa viabilitas spora kering B. bassiana tanpa pembawa dengan
Kontrol (B. bassiana tanpa pembawa)
Control (B. bassiana without carrier)
85.00 a C 1 (Tepung Beras) (Rice flour) 79.44 b 79.44 b 78.56 def C 2 (Tepung Maizena)(Maezina flour) 75.11 de 72.89 ef 71.67 f C 3 (Tepung Tapioka) (Tapioca flour) 80.89 b 78.33 bc 76.11 cd
Tabel 2. Pengaruh interaksi macam pembawa dengan dosis pembawa terhadap viabilitas spora B. bassiana kering setelah 2 minggu penyimpanan
Table 2. Interaction effect of carrier type and their dose on spore B. bassiana viability at 2 weeks storing
Keterangan  :  Data  yang  diikuti  huruf  yang  sama  tidak  berbeda  nyata  menurut  uji  Duncan  taraf  5%.  (Data  followed  by  the same letter were not significantly different at 5% level according to DMRT). Perlakuan Treatment Persentase perkecambahan spora
Percentage of spore germinating
D 2 (1 g B. bassiana + 1 g carrier) D 2 (1 g B. bassiana + 5 g carrier) D 3 (1 g B. bassiana + 10 g carrier)
penyimpanan pada suhu 5 O C paling tinggi dibandingkan cara penyimpanan lainnya (suhu 23 O C dan suhu 29 O C). Hal ini diperkuat oleh pernyataan Junianto et al. (2000), bahwa suhu 5 O C dapat mempertahankan daya kecambah spora B. bassiana paling tinggi dan lama daripada suhu penyimpanan lainnya.
Spora kering B. bassiana yang disimpan pada  suhu  5 O C  lebih  lambat  mengalami kematian daripada penyimpanan pada suhu 23–29 O C (Smith & Onions cit. Junianto et al., 2000).  Pada  suhu  5 O C,  metabolisme  sel berlangsung    minimum  atau  terhenti  sama sekali, akibatnya akan menyebabkan kadar air spora kering B. bassiana tetap rendah sehingga viabilitas sporanya tetap stabil.
Kondisi ruangan seperti halnya ruangan ber-AC  dengan  suhu  23 O C  dan  ruangan
tanpa AC dengan suhu 29 O C, merupakan keadaan yang kurang menguntungkan bagi stabilitas hidup spora kering  B.  bassiana selama dalam penyimpanan. Kondisi tersebut mengekspos  banyak  cahaya  dan  oksigen, sehingga berakibat kematian pada sel spora kering B. bassiana secara cepat. Junianto et al. (2000) melaporkan bahwa udara dan suhu tinggi akan menyebabkan spora cepat mengalami  deteriorasi  atau  kehilangan viabilitasnya.
Hasil  pengamatan  viabilitas  spora B. bassiana menunjukkan adanya interaksi antara suhu penyimpanan dengan penam- bahan pembawa  tepung selama penyimpanan dua  minggu.  Pada  perlakuan  dengan pembawa diketahui bahwa penyimpanan pada suhu  5 O C  menunjukkan  persentase  per-
Catatan  (Notes)  :  Kode  perlakuan  sama  dengan  Tabel  1  (Treatment  codes  similar  with Table  1).
Gambar 1. Pengaruh interaksi macam pembawa dengan dosis pembawa terhadap viabilitas spora B.  bassiana  kering  setelah  2  minggu  penyimpanan).
Figure  1. Interaction between carrier type and carrier dose on B. bassiana spore viability after  2  weeks  storing.
Perlakuan (Treatment) V ia bi lit as , % V ia bi lit y, % 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 9.0 Kontrol C3D1 C1D1 C1D2 C3D2 C3D3 C2D1 C1D3 C2D2 C2D3
peningkatan dosis pembawa, suhu dan umur simpan.
Perlakuan dengan pembawa menunjukkan bahwa penyimpanan bubuk spora B. bassiana
Tabel 3. Pengaruh interaksi macam pembawa dengan suhu penyimpanan terhadap viabilitas spora B. bassiana kering setelah 2 minggu penyimpanan
Table 3. Interaction effect of carrier type and storage temperature on  B. bassiana spore viability after 2 weeks storing
Kontrol (B. bassiana tanpa pembawa) Control (B. bassiana without carrier) 88.00 a 85.67 ab 81.33 cd C 1 (Tepung Beras) (Rice flour) 84.00 bc 76.22 f 72.22 g C 2 (Tepung Maizena) (Maezina flour) 80.89 de 70.78 g 68.00 h C 3 (Tepung Tapioka) (Tapioca flour) 85.11 b
78.44 ef
71.78 g
Persentase perkecambahan spora B. bassiana kering
Percentage of  dried spora B. bassiana germination
T 1 (5 O C) T 2 (23 O C) T 3 (29 O C) Perlakuan Treatment
Keterangan (Notes):    Data  yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda  nyata  pada  Uji Duncan taraf  5%. (Data followed the same letter were are significantly different at 5% level according DMRT).
kec ambaha n  spora  yang  lebih  tinggi dibandingkan dengan cara penyimpanan pada suhu 23 O C dan  suhu 29 O C (Gambar 2). Penurunan daya kecambah spora B. bassiana se cara   nya ta  terja di  seir ing  dengan
Gambar 2. Pengaruh  interaksi  penambahan  macam  pembawa  dengan  suhu    penyimpanan  terhadap  viabilitas spora B.  bassiana  kering  setelah  2  minggu  penyimpanan.
Figure  2. Interaction between  carrier type and  storage temperature  on  spore B.  bassiana viability  after 2  weeks  storing.
Catatan  (Notes)  :  Kode  perlakuan sama  dengan Tabel  1  (Treatment codes similar  with  Table  1). Perlakuan (Treatment) V ia bi lit as , % Sp or e vi ab il it y, % Ko nt ro l T 1 Ko nt ro l T 2 Ko nt ro l T 3 C3 T1 C3 T2 C3 T3 C2 T1 C2 T2 C2 T3 C1 T1 C1 T2 C1 T3 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
kering  dengan  pembawa  tepung  tapioka pada suhu 5 O C, menghasilkan perkecambahan yang tertinggi, yaitu sebesar 85%; sedangkan daya kecambah paling rendah dihasilkan oleh bubuk spora B. bassiana dengan pembawa tepung maizena dengan penyimpanan suhu 29 O C,  yaitu  sebesar  68%.  Jadi,  pada penyimpanan selama 2 minggu, pembawa spora B. bassiana yang baik adalah tepung tapioka   dengan dosis sebesar 1 g. Suhu 5 O C diketahui  efektif  untuk  mempertahankan viabilitas spora B. bassiana.
Tepung  tapioka  diketahui  sebagai pembawa yang baik bagi spora B. bassiana daripada tepung lainnya. Hal ini disebabkan ka rena   tepung  tapioka   mem punyai ketahanan yang lebih baik daripada tepung beras  dan  maizena  dalam  penyimpanan. Menurut Imdad & Nawangsih (1999), mutu tepung tapioka akan mulai menurun setelah disimpan  selama  tiga  bulan,  sedangkan tepung  beras  dan  maizena hanya  mampu bertahan kurang dari satu bulan.

## Penyimpanan 4 Minggu
Pengaruh suhu simpan terhadap viabi- litas spora bubuk spora kering B. bassiana setelah penambahan pembawa tepung beras, maizena dan tapioka disajikan pada Tabel 4.
Penyimpanan selama empat minggu pada suhu  5 O C,  B.  bassiana  tanpa  pembawa menunjukkan  persentase  perkecambahan tinggi,  yaitu sebesar  87,67%. Penyimpanan pada suhu 5 O C, daya hidup spora B. bassiana masih  tinggi,  hal ini  terlihat  dengan  adanya keefektifan  jamur  ini  dalam  membentuk buluh kecambah spora.  Kondisi suhu simpan 23 O C dan 29 O C menurunkan daya kecambah
secara nyata,  yakni  berturut-turut  menjadi 76,33% dan 60%.
Jamur B. bassiana memerlukan nutrisi dan udara yang steril  dalam suatu  sistem tertutup yang tidak berhubungan langsung dengan udara bebas. Peningkatan suhu dan lama  penyimpanan  mempercepat  proses penurunan  viabilitas  spora  B.  bassiana. Oksigen  dan  udara  dapat  menyebabkan kematian spora secara cepat. Kadar air spora B. bassiana sangat rendah, sehingga bersifat higroskopis, akibatnya spora mudah menyerap udara dan oksigen di sekitarnya (Junianto & Sulistyowati, 2000; Bell & Meller  cit. Junianto et al., 2000).
Dari hasil pengamatan terlihat bahwa penambahan pembawa tepung pada bubuk spora B. bassiana menunjukkan penurunan viabilitas yang bervariasi. Peningkatan dosis pembawa,  suhu  dan  lama  penyimpanan mengakibatkan  penurunan  viabitas  spora B. bassiana secara nyata.
Penyimpanan  setelah  empat  minggu, menunjukkan bahwa  dari perlakuan  C 3 D 1 T 1 (1 g spora kering B. bassiana + 1 g pembawa tepung tapioka dengan penyimpanan di suhu 5 O C) menghasilkan daya kecambah spora sebesar 85,33%, sedangkan daya kecambah spora  B.  bassiana  yang  paling  rendah dihasilkan pada perlakuan C 2 D 3 T 3 (yakni; 1  g  spora  kering  B.  bassiana  +  10  g pembawa tepung maizena dengan penyim- panan di suhu 29 O C), sebesar 36,33%.
Pada  perlakuan  pembawa  diketahui bahwa penyimpanan pada suhu 5 O C dapat mempertahankan stabilitas spora B. bassiana. Berdasarkan  dari  nilai  persentase  per- kacambahan  spora  B.  bassiana  yang  di- peroleh dari setiap penambahan tiga macam
bahan  tepung,  tepung  tapioka  diketahui sebagai pembawa yang paling baik dalam menjaga  viabilitas  spora  B.  bassiana (Gambar 3). Daya hidup spora B. bassiana pada pembawa tepung tapioka masih tinggi dan hanya sedikit saja buluh kecambah yang tidak tumbuh.
Perbedaan jenis komoditas dari bahan tepung yang dipergunakan sebagai pembawa, ikut menyebabkan ketahanan masing-masing bahan  tersebut  dalam  penyimpanan  juga berbeda. Tepung tapioka diketahui mem- punyai tingkat ketahanan yang lebih tinggi dibandingkan  dengan  tepung  beras  dan maizena  (Imdad  &  Nawangsih,  1999). Setelah  memasuki  empat  minggu  masa penyimpanan, dimungkinkan mutu tepung beras dan maizena sudah mulai mengalami penurunan sehingga berakibat merusak spora
B. bassiana selama penyimpanan. Penurunan viabilitas lebih nyata terjadi pada penyim- panan pada suhu 23 O C dan suhu 29 O C .

## Penyimpanan 8 minggu

## Pengaruh suhu terhadap viabilitas spora
B. bassiana dalam bahan pembawa tepung pada penyimpanan selama delapan minggu terlihat pada Tabel 5. Pada kontrol diketahui bahwa  pada  suhu  simpan  5 O C,  masih menunjukkan  daya  kecambah  sebesar 85,67%. Peningkatan suhu simpan sampai 23 O C  dan  suhu  29 O C  menyebabkan penurunan daya kecambah secara berturut- turut  55,00%  dan  52,67%.  Kehilangan viabilitas spora B. bassiana semakin tinggi terjadi seiring dengan peningkatan suhu dan umur simpan (Junianto & Sulistyowati, 2000).
Kontrol (B. bassiana tanpa pembawa) Control (B. bassiana without carrier) 87.67 a 76.33 g 60.00 jk C 1 (Tepung Beras) D 1 (1 g Bb + 1 g C) 84.33 c 68.33 hi 56.00 l Rice flour D 2 (1 g Bb + 5 g C) 82.33 cd 61.33 j 45.33 o D 3 (1 g Bb + 10 g C) 79.33 ef 58.67 k 41.00 p C 2 (Tepung Maizena) D 1 (1 g Bb + 1 g C) 81.00 de 55.33 l 41.00 p Maezina flour D 2 (1 g Bb + 5 g C) 79.00 ef 51.67 m 41.00 p D 3 (1 g Bb + 10 g C) 77.67 fg 48.00 n 36.33 q C 3 (Tepung Tapioka) D 1 (1 g Bb + 1 g C) 85.33 ab 70.00 h 59.67 jk Tapioca flour D 2 (1 g Bb + 5 g C) 84.67 bc 66.00 i 51.33 m D 3 (1 g Bb + 10 g C) 80.67 de 60.67 jk
Tabel 4. Pengaruh interaksi penambahan macam pembawa, dosis pembawa dan suhu simpan terhadap viabilitas spora B. bassiana kering setelah 4 minggu penyimpanan
Table 4. Interaction between carrier type and storage temperature on spore B. bassiana viability after 4 weeks storing
Persentase perkecambahan spora B. bassiana kering Percentage of  dried spore B. bassiana germination
Perlakuan Treatment
Keterangan  (Notes)  :  Data  yang  diikuti  huruf  yang  sama  tidak  berbeda  nyata  pada  Uji  Duncan  taraf  5%  (C  =  Pembawa (Carrier); D  = Dosis  (Dose); T  = Suhu Simpan  (Storage temperature);  Bb = B. bassiana). (Data followed  the same letter were are significantly different at 5% level according DMRT).
T 1 (5 O C) T 2 (23 O C) T 3 (29 O C)
Penyimpanan selama delapan minggu menunjukkan bahwa  penurunan viabilitas secara nyata terjadi pada semua perlakuan bubuk  spora  kering  B.  bassiana  yang ditambah  pembawa tepung.  Makin  tinggi suhu simpan, persentase kehilangan viabilitas spora B. bassiana dalam pembawa tepung cenderung lebih tinggi. Pada penyimpanan suhu  5 O C,  penurunan  viabilitas  spora B. bassiana dalam pembawa tepung cenderung lebih rendah. Junianto & Sulistyowati (2000) melaporkan bahwa penyimpanan pada suhu 5 O C cukup efektif dalam mempertahankan viabilitas spora B. bassiana.
Pada suhu  simpan 5 O C,  penambahan 1 g dosis pembawa tepung tapioka, dapat
mempertahankan viabilitas spora kering B. bassiana  tetap  tinggi  (80,00%).  Perlakuan C 2 D 3 T 3 (1 g pembawa tepung maizena yang ditambahkan pada 10 g bubuk spora kering B. bassiana dengan penyimpanan pada suhu 29 O C) menyebabkan kehilangan viabilitas sebesar 23,67% (Gambar 4). Kehilangan viabilitas spora B. bassiana akan semakin meningkat sejalan dengan meningkatnya dosis pembawa, suhu dan umur simpan.
Penyimpanan pada suhu rendah (5 O C), diketahui dapat menjaga mutu dan daya tahan bahan  tepung  (Sumoprastowo,  2000; Winarno,  1993).  Daya  simpan  tepung tapioka lebih baik daripada tepung beras dan maizena, apalagi didukung dengan rendahnya
Gambar 3. Pengaruh interaksi penambahan macam pembawa, dosis pembawa dan suhu  simpan terhadap viabilitas  spora  B. bassiana  kering  setelah 4  minggu  penyimpanan.
Figure  3. Interaction  between  carrier  type,  carrier  dose  and  storing  temperature  on  B.  bassiana  spore viability  after 4 weeks  storing.
Perlakuan (Treatment) V ia bi lit as , % V ia bi lit y, % Tanpa Pembawa Without carrier Tepung Beras
Rice flour
Tepung Maizena Maezina flour Tepung Tapioka Tapioca flour 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
Catatan  (Notes)  :  Kode  perlakuan sama  dengan Tabel  1  (Treatment codes similar  with  Table  1).
D1 D2 D3 D1 D2 D3 D1 D2 D3 T 1 T 2 T 3
Kontrol (B. bassiana tanpa pembawa) Control  (B. bassiana without carrier) 85.67 a 55.00 fg 52.67 g C 1 (Tepung Beras) D 1 (1 g Bb + 1 g C) 78.00 bc 55.67 f 45.00 ij Rice flour D 2 (1 g Bb + 5 g C) 76.33 cd 41.33 kl 38.67 r D 3 (1 g Bb + 10 g C) 73.67 e 30.33 qr 30.00 qr C 2 (Tepung Maizena) D 1 (1 g Bb + 1 g C) 77.67 bcd 43.00 cd 34.67 o Maezina flour D 2 (1 g Bb + 5 g C) 77.00 cd 37.33 n 28.67 s D 3 (1 g Bb + 10 g C) 73.00 e 32.67 op 23.67 s C 3 (Tepung Tapioka) D 1 (1 g Bb + 1 g C) 80.00 b 53.67 fg 45.67 i Tapioca flour D 2 (1 g Bb + 5 g C) 76.67 cd 48.33 h 40.00 lm D 3 (1 g Bb + 10 g C) 75.33 de 32.67 op 29.00 qr
Tabel 5. Pengaruh  interaksi  penambahan  macam  pembawa,  dosis  pembawa  dan  suhu  simpan  terhadap  viabilitas  spora B. bassiana kering setelah 8 minggu penyimpanan
Table 5. Interaction between carrier type, carrier dose and storing temperature on B. bassiana spore viability after 8 weeks storing
Keterangan (Notes) :   Data yang  diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata  pada Uji Duncan taraf  5%. (Numbers followed the same letter were not significantly different at 5% level according DMRT).
Perlakuan Treatment
Persentase perkecambahan spora B. bassiana kering
Percentage of dried spore B. bassiana germination T 1 (5 O C) T 2 (23 O C) T 3 (29 O C)
Gambar 4. Pengaruh Pengaruh  interaksi penambahan macam pembawa,  dosis pembawa dan  suhu simpan terhadap  viabilitas spora B. bassiana kering  setelah 8  minggu penyimpanan.
Figure  4. Interaction  between  carrier  type,  carrier  dose  and  storing  temperature  on  spore  B.  bassiana viability  after 8 weeks  storing.
Catatan  (Notes)  :  Kode  perlakuan sama  dengan Tabel  1  (Treatment codes similar  with  Table  1). D1 D2 D3 D1 D2 D3 D1 D2 D3
Non carier
Beras
Maizena Tapioka
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Perlakuan (Treatment) Tanpa Pembawa Without carrier Tepung Beras Rice flour Tepung Maizena Maezina flour Tepung Tapioka Tapioca flour D1 D2 D3 D1 D2 D3 D1 D2 D3 V ia bi lit as , % Sp or e vi ab il it y, % T 1 T 2 T 3
komposisi dosis dan suhu simpan, sehingga menyebabkan proses penurunan viabilitas spora B. bassiana dapat dihambat. Tepung tapioka sebanyak 1 g cukup efektif untuk membawa  1  g spora  B.  bassiana  dengan penyimpanan pada suhu 5 O C.
Bubuk  spora  kering  B.  bassiana  dan bahan  tepung,  masing-masing  bersifat higroskopik.  Kandungan  air  pada  kedua bahan tersebut sangatlah rendah, akibatnya cenderung mudah sekali menjadi lembab, terutama bila cara penyimpanannya kurang sesuai (Imdad & Nawangsih, 1999). Dalam penelitian ini, penyimpanan pada suhu 5 O C merupakan  alternatif  penyimpanan  yang paling  tepat karena  kondisi suhu tersebut mampu melindungi bahan kering tepung dan spora B. bassiana dari penyerapan uap air dan oksigen.
Penyimpanan  pada  kondisi  ya ng memungkinkan  terjadinya  kontak  antara bahan simpanan dengan oksigen dalam udara maupun proses difusi uap air dan pengaruh cahaya akan memberi pengaruh pada mutu (keawetan) bahan kering dalam simpanan (Syarif  &  Irawati, 1986).  Hal ini  serupa dengan penyimpanan pada suhu 23 O C dan suhu 29 O C.
Penyerapan uap air oleh bahan tepung dan bubuk spora  kering  B.  bassiana  me- nyebabkan butiran bahan-bahan ini saling berlekatan satu dengan yang lain dan akan membentuk agregat (gumpalan) yang lebih besar dan mengelompok (Imdad & Nawangsih, 1999). Hal ini terlihat nyata bila bahan-bahan ini dimasukkan dalam suspensi air. Akibatnya, mudah terjadi kerusakan pada bahan tepung dan aktivitas perkecambahan spora B. bassiana
menjadi terhambat, bahkan bisa mengakibatkan kematian.

## Penyimpanan 16 minggu
Penyimpanan selama 16 minggu me- nunjukkan bahwa perlakuan kontrol yang disimpan  pada  suhu  5 O C,  viabilitasnya masih  tetap  tinggi  yakni  sebesar  86%. Peningkatan  suhu  penyimpanan  menjadi 23 O C—29 O C menyebabkan penurunan daya kecambah  secara  nyata  berturut-turut menjadi 46,67% dan 34,67% (Gambar 5 ). Menurut  Junianto  (2000),  spora  kering B.  bassiana  yang  disimpan  dalam  refri- gerator pada suhu 5 O C selama 5 bulan masih mempunyai daya kecambah sekitar 84%. Penurunan  viabilitas  terus  berlangsung seiring dengan peningkatan suhu dan lama penyimpanan (Tabel 6).
Pada perlakuan dengan pembawa, secara keseluruhan viabilitas spora dari B. bassiana terlihat terus mengalami penurunan secara drastis, sejalan dengan meningkatnya dosis pembawa,  suhu  dan  lama  penyimpanan (Gambar 5).  Hasil ini  ditunjukkan  dengan rata-rata persentase perkecambahan spora B. bassiana yang nilainya di bawah angka 80% (Achmadi, 1992).
Diketahui bahwa setelah penyimpanan selama  16  minggu,  bubuk  spora  kering B.  bassiana  yang  diperlakukan  dengan pembawa,  daya  hidup  sporanya  sudah mengalami  penurunan  sehingga  tidak memenuhi  kriteria  dasar  sebagai  agens pengendalian hayati. Persyaratan bahwa suatu patogen masih baik untuk digunakan sebagai agens  pengendalian  hayati,  yaitu  apabila masih mempunyai viabilitas spora yang tetap
Kontrol (B. bassiana tanpa pembawa) Control  (B. bassiana without carrier) 86.00 a 46.67 f 34.67 g C 1 (Tepung Beras) D 1 (1 g Bb + 1 g C) 65.67 c 46.00 f 30.00 h Rice flour D 2 (1 g Bb + 5 g C) 63.00 cd 30.33 h 20.67 k D 3 (1 g Bb + 10 g C) 56.67 e 24.00 i 14.67 m C 2 (Tepung Maizena) D 1 (1 g Bb + 1 g C) 61.00 d 36.33 g 23.33 ij Maezina flour D 2 (1 g Bb + 5 g C) 56.67 e 28.67 h 17.67 l D 3 (1 g Bb + 10 g C) 46.67 f 21.33 jk 12.00 n C 3 (Tepung Tapioka) D 1 (1 g Bb + 1 g C) 71.33 b 46.67 f 34.67 g Tapioca flour D 2 (1 g Bb + 5 g C) 65.33 c 35.00 g 25.00 i D 3 (1 g Bb + 10 g C) 58.00 e 30.00 h 16.00 lm
Tabel 5. Pengaruh  interaksi  penambahan  macam  pembawa,  dosis  pembawa  dan  suhu  simpan  terhadap  viabilitas  spora B. bassiana kering setelah 16 minggu penyimpanan
Table 5. Interaction  between  carrier  type,  carrier  dose  and  storing  temperature  on  B.  bassiana  spore  viability  after 16 weeks storing
Keterangan  (Notes)  :  Data  yang  diikuti  huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama  tidak  berbeda  nyata  pada  Uji  Duncan  taraf 5%. Data followed the same letter were not significantly different at 5% level according DMRT.
Persentase perkecambahan spora B. bassiana kering
Percentage of dried spora B. bassiana germination
T 1 (5 O C) T 2 (23 O C) T 3 (29 O C) Perlakuan Treatment
Gambar 5. Pengaruh  interaksi penambahan  macam  pembawa,  dosis  pembawa  dan  suhu  simpan  terhadap viabilitas  spora  B.  bassiana  kering  setelah  16  minggu  penyimpanan.
Figure  5. Interaction  between  carrier  type,  carrier  dose  and  storing  temperature  on  spore  B.  bassiana viability after 16  weeks  storing.
D1 D2 D3 D1 D2 D3 D1 D2 D3
Non c arier Beras Maiz ena Tapioka V ia bi lit as , % V ia bi lit y, % 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 Perlakuan (Treatment) 100 Tanpa Pembawa Without carrier Tepung Beras Rice flour Tepung Maizena Maezina flour Tepung Tapioka Tapioca flour D3 D1 D2 D3 D1 D2 D3 D1 D2
Catatan  (Notes)  :  Kode  perlakuan sama  dengan Tabel  1  (Treatment codes similar  with  Table  1).
T 1 T 2 T 3
terpelihara (Wahyuni, 1996).
Waktu penyimpanan yang lama akan menyebabkan kerusakan bahan yang lebih besar. Hal ini dialami juga oleh bahan tepung yang disimpan bersama dengan bubuk spora kering  B.  bassiana.  Udara  yang  terlalu kering  dan  lembab  serta  adanya  sinar, merupakan kondisi yang tidak dapat dihindari terutama  pada  penyimpanan  dalam  suhu 23 O C dan 29 O C.
Kerusakan bahan pembawa didukung oleh  kondisi  tempat  penyimpanan  yang kurang sesuai, seperti kondisi suhu tinggi 23 O C dan 29 O C. Viabilitas spora B. bassiana dalam  pemba wa  tepung  me ngalami penurunan yang cukup drastis. Kerusakan pa ling  nya ta  terja di  pada   per lakuan B. bassiana dengan pembawa tepung beras dan  maizena  dan  diikuti  oleh  tepung tapioka. Pada suhu 5 O C, ketahanan bahan pem bawa   tepung  suda h  me ngalami penurunan, viabilitas spora B. bassiana terus menurun secara lambat.

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian tersebut  di  atas dapat disimpulkan bahwa :
1. Tepung  tapioka  1  g  sebagai  pembawa 1 g spora dan suhu simpan 5 O C mem- punyai potensi yang baik untuk memper- tahankan  viabilitas  spora  B.  bassiana. Setelah disimpan 16 minggu perkecam- bahan spora masih 71,33%, sementara kontrol  (tanpa  pembawa)  persentase
perkecambahan spora sebesar 86%.
2. Penurunan viabilitas spora B. bassiana dapat terjadi pada penambahan pembawa tepung  beras  dan  maizena  sekalipun disimpan dalam suhu simpan 5 O C yaitu dengan persentase perkecambahan spora sebesar  65,67%  dan  61,00%  setelah penyimpanan selama 16 minggu.
3. Semakin banyak pembawa serta semakin meningkat suhu simpan dan lama simpan, penurunan viabilitas spora B. bassiana
makin besar.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmadi, D.N. (1992). Perbanyakan Cendawan B. bassiana Pada Media Jagung dan Patogenisitasnya Terhadap Bubuk Buah Kopi.  Skripsi.  Program  Studi  Ilmu Hama dan Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Jember, 71—72.
Bibiana, L.  W  (1994).  Analisis Mikroba  di Laboratorium.  PT.  Raja  Grafindo Persada, Jakarta.
Burges, H.D. (1981). Microbial Control of Pest and Plant Diseases 1970—1980. Aca- demic Press, New York.
Imdad,  H.P.  &  A.A.  Nawangsih  (1999). Menyimpan Bahan Pangan. Penebar Swadaya. Jakarta.
Inglish, G.D.; M.S. Goettel & D.L. Johnson (1997).  Presistence  of  the  entomo- phatogenic fungi Beauveria bassiana on phylloplanes crested wheatgrass and alfafa. Biological Control, 3, 258—270.
Junianto,  Y.D.  &  E.  Sulistyowati  (2000). Produksi dan aplikasi jamur B. bassiana
(Deuteromycotina, Hypomycetes) untuk pengendalian Penghisap Buah Kakao (Helopeltis spp.) dan Penggerek Buah Kakao (Conopomorpha cramerella). Pelita Perkebunan, 15, 1—19.
Junianto, Y.D. & Sri Sukamto (1995). Pengaruh kelembaban  relatif  terhadap  per- kecambahan, pertumbuhan dan sporu- lasi beberapa isolat Beauveria bassiana. Pelita Perkebunan, 11, 64—74.
Junianto, Y.D.; H. Semangun; A. Harsojo & E.S. Rahayu  (2000).  Viabilitas dan virulensi  blastospora  Beauveria bassiana (Bals.) Vuill kering-beku pada beberapa  suhu  simpan.  Pelita  Per- kebunan, 16, 30—39.
Junianto, Y.D. & H. Semangun (2000). Susu skim dan monodosium glutamat sebagai medium pensuspensi dalam pengering- bekuan  spora  B.  bassiana.  Pelita Perkebunan, 16 , 100—101.
Muljohardjo, M. (1983). Pengolahan Ubi Kayu. Fakultas Teknologi Pertanian Univer- sitas Gadjah Mada. Yogyakarta.
Radiyati, T. & W.M. Agusto  (1993). Teknologi tepat guna: tentang pengolahan Pangan Tepung  Tapioka.  IPTEKnet  Sentra Informasi IPTEK BPPT, Jakarta.
Sudarmadji, D. & S. Gunawan (1994). Pato- genitas fungi entomopatogen Beauveria bassiana terhadap Helopeltis antonii, Menara Perkebunan, 62, 1—4.
Sulistyowati,  E.  &  Y.D.  Junianto  (2000).
Produksi dan Aplikasi Agens Pengen- dalian Hayati Hama Utama Kopi dan Kakao.  Pusat  Penelitian  Kopi  dan Kakao Indonesia, Jember.
Sumoprastowo, C.D.A. (2000). Memilih dan Menyimpan Sayur-Mayur, Buah-Buahan dan Bahan Makanan. Bumi Aksara,
Jakarta.
Supardi, I. & Sukamto (1999). Mikrobiologi dalam  Pengolahan  dan  Keamanan Pangan. Penerbit Alumni. Bandung.
Suwarso, D.L.  (1997). Pertumbuhan  jamur entopatogenik (Beauveria spp.) pada beberapa  macam  media  buatan. Laporan Penelitian. Lembaga Pene- litian Universitas Jember.
Syarif R. & A. Irawati (1988). Pengetahuan Bahan  Untuk  Industri  Pertanian. Mediyatama Sarana Perkasa, Jakarta.
Untung, K. (1996). Pengantar Pengelolaan Hama
Terpadu.  Gadjah  Mada  University Press, Yogyakarta.
Wahyuni, D.A. (1996). Pemanfaatan B. bassiana (Balsamo) dan M. anisopliae Metch. Terhadap Mortalitas Larva H. armigera (Hubner)  Pada  Tanaman  Kedelai. Skripsi. Program Studi Ilmu Hama dan Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Jember.
Winarno, F.G.; S. Fardiaz & D. Fardiaz (1980).
Pengantar Teknologi Pangan. PT Gra- media, Jakarta.
Winarno (1992). Kimia Pangan dan Gizi. PT Gra- media Pustaka Utama, Jakarta.
Wulandari, A.D. (2003). Pengaruh Bahan Pem- bawa Terhadap Efektivitas B. bassiana (Bals.) Vuill. Pada Ulat Kubis Plutella xylostella (L.). Skripsi. Program Studi Ilmu Hama dan Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Jember.
***********