## POTENSI CEMARAN BAKTERI Escherichia coli PADA LIMBAH CAIR RUMAH POTONG AYAM (RPA) TERHADAP LINGKUNGAN DI KOTA MAGELANG
Alfian Syarifuddin 1* , Fitriana Yuliastuti 2 , Missya Putri Kurnia Pradani 3
1,2,3 Departemen Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Magelang, Jalan Mayjen Bambang Soegeng, Glagak, Sumberrejo, Kec. Mertoyudan, Magelang 56172, Jawa Tengah, Indonesia
*Email: 1 alfiansy@ummgl.ac.id; 2 fitrianayuliastuti@ummgl.ac.id;
3 missyaputri@gmail.com
Tanggal Submisi: 29 April 2020; Tanggal Penerimaan: 27 Mei 2020

## ABSTRAK
Kualitas air secara biologis ditentukan oleh banyak parameter, antara lain parameter mikroba  pencemar/  patogen.  Bakteri Escherichia  coli merupakan  salah  satu bakteri yang menjadi salah satu parameter kualitas suatu air. Jumlah kasus diare di Kota  Magelang  tahun  2014  mengalami  kenaikan  dibanding  kasus  diare  tahun 2013,  yaitu  sebanyak  3.577  kasus  dengan  persentase  sebesar  139,59%  yang disebabkan oleh bakteri. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui ada tidaknya cemaran  bakteri Escherichia  coli dan  mengetahui  nilai  Angka  Lempeng  Total (ALT)  cemaran  bakteri Escherichia  coli pada  air  bilasan  pada  Rumah  Potong Ayam  (RPA)  yang  dapat  berpotensi  sebagai  pencemar  di  lingkungan  Kota Magelang.  Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  cawar  sebar dengan  menggunakan  media  untuk  pengujian  adalah  media  TBX  agar.  Hasil penelitian  menunjukkan  adanya  cemaran  bakteri Escherichia  coli yang  melebihi 1x10 1 CFU/ml  pada  air  bilasan ayam pada beberapa RPA  di  Kota  Magelang,  yaitu 61,1%  sampel  uji  atau  sekitar  11 tempat sampling  dari  total  sebanyak  18  tempat pemotongan  ayam.  Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  air  hasil  bilasan  tersebut dapat berpotensi sebagai salah satu sumber cemaran bakteri Escherichia coli pada daging  ayam  dan  air  tanah  lingkungan  sekitar  pembuangan  limbah  air  bilasan. Hanya  terdapat  38,9%  dari  18  RPA  masih  memenuhi  ambang  batas  cemaran bakteri Escherichia coli . Oleh karena itu, perlu adanya langkah-langkah strategis berikutnya,  yaitu  pengolahan  air  limbah  RPA  dengan  proses biofilter,  serta dapat disosialisasikan terkait cara mengolah daging yang benar.
Kata Kunci : Air, Angka lempeng total, Escherichia coli, Rumah potong ayam.
ISSN 1979-7621 (Print). ISSN 2620-7761 (Online)

## ABSTRACT
Biological water quality is determined by many parameters, including pollutant / pathogen  microbial  parameters. Escherichia  coli bacteria  is  one  of  the  bacteria that becomes one of the parameters of the quality of  water. The number of cases of  diarrhea  in  Magelang  City  in  2014  increased  compared  to  2013  cases  of
diarrhea, which was 3,577 cases with a percentage of 139.59% caused by bacteria. This study was conducted to determine the Escherichia coli contamination and to know the value of the Total Plate Count Escherichia coli bacterial contamination in  rinse  water  in  Chicken  Slaughterhouses  which  could  potentially  act  as pollutants in the City of Magelang. The method used in this research is scattered cawar  by  using  media  for  testing  was  TBX  agar.  The  results  showed  that Escherichia coli from chicken’s rinse water indicated more than 1x10 1 CFU/ml in several Chicken Slaughterhouses in Magelang City, which was found in 11 of 18 sampling points or as much as 61.1%. These results indicate that the rinse water can potentially be one of the sources of Escherichia coli in the chicken meat and the  environment.  There  was  38.9%  of  chicken  slaughters  which  was  below  the Escherichia  coli contamination  threshold.  Therefore,  it  is  necessary  to  have  the next  strategic  steps,  namely  the  treatment  of  wastewater  by  biofilter  process  and can be socialized about how to process meat properly.
Keywords : Chicken slaughterhouse, Escherichia coli, Total plate count, Water .

## PENDAHULUAN
Air merupakan salah satu komponen  lingkungan  yang  memiliki fungsi penting bagi kehidupan manusia.  Air  secara  tidak  langsung juga menunjang pembangunan perekonomian. Ditinjau dari kebutuhan,  air  yang  digunakan  untuk memenuhi  kehidupan  penduduk,  maka perlu diperhatikan kualitas air tersebut(Imamudin 2001). Kualitas  air  secara  biologis ditentukan  oleh  banyak  parameter, antara lain parameter mikroba pencemar atau patogen. Banyak mikroba  yang  sering  mencemari  air, khususnya  pada  air  tanah  dangkal.
Mikroba  yang paling berbahaya adalah mikroba  yang  berasal  dari  feses,  yaitu bakteri Escherichia Coli . Mikroba yang berasal  dari  air  yang  tercemar  dapat menyebabkan gangguan kesehatan bagi manusia(Pakpahan, Picauly, and Mahayasa 2015). Beberapa bakteri yang merupakan  indikator  kualitas  suatu perairan  adalah coliform , Escherichia coli, dan Salmonella (Arifudin,
Khotimah, and Mulyadi 2013) . Escherichia coli adalah bakteri penyebab  diare  terbanyak  setelah rotavirus(Halim  et  al.  2017).  Jumlah kasus  diare  di  Kota  Magelang  tahun 2014  mengalami  kenaikan  dibanding kasus  Diare  tahun  2013,  yaitu  3.577 kasus dengan persentase sebesar 139,59%. (Anon n.d.) Berdasarkan latar belakang tersebut,  tujuan  dari  penelitian  ini adalah  untuk  mengetahui  ada  tidaknya cemaran  bakteri Escherichia  coli  dan mengetahui  nilai  Angka  Lempeng Total (ALT) cemaran bakteri Escherichia  coli pada  air  hasil  bilasan pemotongan ayam di Kota Magelang.

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan desain penelitian eksperimental. Pengambilan sampel pada penelitian ini adalah  sampel  air  tanah  di  18  lokasi usaha  Rumah  Potong  Ayam  (RPA)  di wilayah kota Magelang. Seluruh pengujian  penelitan  ini  dilakukan  di Laboratorium mikrobiologi, Departemen  Farmasi,  Fakultas  Ilmu
Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Magelang.
Alat : hot  plate , shaker,  mikropipet, Laminer  Air  Flow ,  Inkubator,  Oven, Autoclave , cawan  petri, gelas  beker, dan colony counter .
Bahan : media selektif Tryptone Bile X- glucuronide atau  TBX  (HIMEDIA), Aquades steril.
Prosedur  dalam  penelitian  ini  meliputi pembuatan  media  pengujian,  proses sterilisasi  alat  dan  bahan  yang  akan  di pergunakan,  pengambilan  sampel  uji, pengujian, pengamatan dan perhitungan  jumlah  angka  lempeng total bakteri E-Coli, analisis data.

## Pembuatan Media TBX
Pembuatan media selektif pengujian dilakukan dengan menimbang  36,5  g  media  kemudian dilarutkan dalam 1 Liter aquades steril. Panaskan sampai medidih untuk melarutkan keseluruhan media (Sasongko 2014).
Sterilisasi Alat dan Bahan Media  yang  telah  dilarutkan disterilkan pada suhu 121 o C selama 15 menit  pada  autoklaf  (Syarifuddin, Sulistyani, and Kintoko 2019). Seluruh peralatan  gelas  dan  botol  sampel  yang akan  digunakan  dilakukan  sterilisasi dengan  menggunakan  oven  pada  suhu 180 o C  selama  1  jam(Syarifuddin, Sulistyani, and Kintoko 2018).

## Preparasi Sampel
Preparasi  sampel  dengan  cara mengambil 5 mL air disetiap air hasil
bilasan  karkas  yang  akan  dilakukan pengujian.  Air  hasil  pengambilan dimasukkan  ke  dalam  wadah  secara aseptik.  Masing-  masing  sampel  air diambil 1 mL dan dimasukkan ke dalam tabung  yang berisi 9 mL aquades  steril (10-1) kemudian dilakukan pengenceran bertingkat 10-2,10-3,10-4, dan  10-5.  Masing-masing  pengenceran dilakukan  penanaman  Pada  media spesifik,  yaitu  media  TBX  dengan teknik  spread  plate.  Tuang  sebanyak 100µL  cairan  sampel  pada  masing- masing media dan diratakan menggunakan spreader steril.
Perlakuan  per  pengenceran  dilakukan inkubasi  selama  18-24  jam  pada  suhu 37ºC (Syarifuddin, Kamal, et al. 2019).

## Analisis Data
Jumlah  koloni  bakteri  yang muncul  dihitung  dengan  menggunakan alat colony counter (Sutiknowati 2018). Masukkan  ke  dalam  rumus  untuk penentuan  Angka  Lempeng  Total (ALT) (Ahmad 2018a). ALT= (Jumlah Koloni/ volume sampel) x pengenceran

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penentuan  lokasi  pengambilan sampel  berdasarkan  observasi  lahan pada  tahun  2019,  terdapat  18  Tempat Pemotongan  Ayam  dengan  kegiatan operasional  aktif  di  Kota  Magelang. Jadwal  operasional  produksi  masing- masing  TPA  khususnya  pemotongan ayam,  yaitu  rentang  pukul  21.30  – 06.00  WIB.  Berikut  daftar  TPA  yang yang disajikan pada Tabel   1.
Tabel 1. Data Rumah Potong Ayam (RPA) di Kota Magelang No. Lokasi Produksi/ hari (ekor) Keterangan Jam Kerja 1.  Tidar krajan  A 100 aktif 02.00 2.  Tidar krajan B 50 aktif 04.30 3.  Tidar krajan C 60 aktif 04.30 4.  Tidar krajan D 300 aktif 01.00 5.  Tidar krajan E 50 aktif 23.00 6.  Tidar krajan F 200 aktif 01.00 7.  Tidar dudan A 75 aktif 02.00 8.  Tidar dudan B 40 aktif 24.00 9.  Tidar dudan C 30 aktif 23.30 10.  Kp. Tulung 33 aktif 04.00 11.  Menowo 50 aktif 04.00 12.  Salakan 20 aktif 24.00 13.  Tidar Warung A 70 aktif 04.30 14.  Tidar Warung B 50 aktif 24.00 15.  Potrobangsan 10 aktif 06.00 16.  Nambangan A 20 aktif 03.00 17.  Nambangan B 15 Aktif 05.00 18.  Paten Jurang 20 Aktif 02.00 Pengamatan Koloni Pengujian  pada  masing-masing Tempat Pemotongan Ayam dilakukan  sampling.  Setiap  sampling dilakukan  pengujian  dengan  media spesifik TBX untuk mengetahui cemaran  bakteri Escherichia  coli. Agen kromogenik X-Glucuronide dalam media ini membantu mendeteksi aktivitas glukururididase. Sel-sel Escherichia coli menyerap x- glukuronide dan glukuronidase intraseluler  memisahkan  ikatan  antara kromofor  dan  glukuronid.  Kromofor yang  dilepaskan  memberi  warna  hijau kebiruan pada
koloni(Barcella,
Barbaro, and Rogolino 2016). Hasil  pengamatan  pengujian sampel  diperoleh  ditunjukkan  pada
Tabel  2,  hasil  bahwa  3  dari  18  sampel uji tidak menunjukkan adaya pertumbuhan  koloni  spesifik  bakteri Escherichia coli, yaitu sampel
Menowo,  Tidar  warung  A,  dan  Paten jurang.  Namun,  selain  3  sampel  yang tidak  terdapat  pertumbuhan  koloni Escherichia  coli ,  terdapat  4  tempat yang  lain  angka  cemaran  yang  masih dapat masuk dalam kriteria, yaitu Tidar Dudan  C,  Salakan,  Potrobangan,  dan Nambangan  A. Sedangkan  12  sampel uji lainya menunjukkan adanya pertumbuhan  koloni  berwarna  hijau kebiruan  pada  media  TBX  dengan jumlah  lebih  dari  batas  kriteria  yang ditetapkan.  Berikut  perbedaan  visual hasil  pengujian  sampel  pada  media TBX.
Gambar 1. Media TBX tanpa Pertumbuhan Bakteri . Gambar 2. Media TBX dengan Pertumbuhan Bakteri
Gambar 3. Media TBX dengan Pertumbuhan Bakteri Escherichia Coli.
Bakteri Escherichia  coli dapat mengakibatkan  keracunan  makanan serius  pada  manusia,  antara  lain  diare berdarah karena eksotoksin yang dihasilkan bernama verotoksin. Sumber bakteri  ini  contohnya  adalah  daging yang  belum  masak,  seperti  daging hamburger yang belum matang.
Pengujian angka lempeng total menunjukkan  terdapat  mikroba  pada sampel air hujan yang disebabkan oleh adanya sumber kontaminasi di antaranya  berasal  dari  atap  dan  bak penampung (Wiratna and Linda 2019).

## Perhitungan Angka Lempeng Total
Perhitungan jumlah koloni
bakteri    yang tumbuh  dilakukan  pada
koloni bakteri dengan ciri warna koloni spesifik  hijau  kebiruan  menggunakan colony counter (Ahmad 2018b).
Jumlah  bakteri  dinyatakan  dalam satuan  cfu/ml  ( colony-forming  unit/ml )
(Sutiknowati 2018).
Hasil pengujian dikatakan masuk  dalam  kriteria  dapat  ditinjau berdasarkan SNI No: 7388-2009 tentang  batas  maksimum  cemaran mikroba. Batasan-batasan tersebut meliputi: total  plate  count maksimal  1 x  10 6 CFU/  mL  total  cemaran Escherichia  coli tidak  boleh  melebihi angka 1 x 10 1 CFU/mL(Adhianto 2015).  Berikut  data  hasil  pengujian disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Pengujian ALT Bakteri Escherichia coli pada Media TBX
Berdasarkan data pengujian diatas,  pengkategorian  tingkat cemaran berdasarkanbatas  maksimum  cemaran mikroba.  Sebanyak  11  dari  18  sampel uji  dinyatakan  sebagai  sampel  dengan kategori  pencemaran  tinggi.  Data sampel  yang  diambil  pada  lokasi Rumah  Potong  Ayam  dengan  aktifitas produksi  sedikit  dan  banyak  tidak mempengaruhi  pencemaran  pada  air bilasan tersebut, angka cemaran bakteri
Escherichia coli , yaitu 1 x 10 1 CFU/ml. Aktifitas  produksi  pada  lokasi  usaha rumah  pemotongan  hewan  menjadi salah satu faktor terjadinya pencemaran air sekitar.

## KESIMPULAN
Terdapat  61,1%  sampel  dari air bilasan  daging  ayam  dari  total  18 tempat  pemotongan  ayam  di  Kota
Magelang  tercemar  dengan  angka cemaran melebihi dari ambang batas. Perlu adanya langkah-langkah berikutnya, yaitu pengolahan air limbah  RPA  dengan  proses biofilter . Serta  dapat  disosialisasikan  terkait  cara mengolah  daging  menjadi  makanan lauk  pauk  dengan  benar  sebagai  upaya untuk  mengurangi  cemaran  bakteri Escherichia  coli pada  lingkungan  dan daging ayam.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis mengucapkan terimakasih  kepada  Badan  Penelitian dan  Pengembangan  (BALITBANG) KOTA  MAGELANG  atas  dukungan dana  atas  penelitian  tersebut.  Penulis juga  mengucapkan  terimakasih  kepada semua  pihak  yang  telah  membantu sehingga penelitian ini dapat terlaksana. No . Nama Produksi/ Hari (ekor) ALT (CFU/ml) 101  Keterangan 1.  Tidar krajan A 100 3 + 2.  Tidar krajan B 50 >300 + 3.  Tidar krajan C 60 21 + 4.  Tidar krajan D 300 >300 + 5.  Tidar krajan E 50 >300 + 6.  Tidar krajan F 200 31 + 7.  Tidar dudan A 75 >300 + 8.  Tidar dudan B 40 >300 + 9.  Tidar dudan C 30 1 + 10. Kp. Tulung 33 >300 + 11. Menowo 50 0 - 12. Salakan 20 1 + 13. Tidar Warung A 70 0 - 14. Tidar Warung B 50 >300 + 15. Potrobangsan 10 1 + 16. Nambangan A 20 1 + 17. Nambangan B 15 6 + 18. Paten Jurang 20 0 -

## DAFTAR PUSTAKA
Adhianto, K. ( 2015 ) .  Kandungan Mikroba pada Daging Sapi dari beberapa Pasar Tradisional di Bandar Lampung. 3(2):27–30.
Ahmad,  M. ( 2018 ) .  Pemeriksaan  Angka  Lempeng  Total  Bakteri  pada  Minuman Sari  Kedelai  yang  Diperjualbelikan  di  Kecamatan  Manggala  Kota Makassar. Jurnal Media Analis Kesehatan 1(1).
Anon. n.d. Anonim, ( 2014 ) , Profil Kesehatan Kota Magelang Tahun 2014.
Arifudin, S., Khotimah, S., Mulyadi, A. 2013. Analisis Sebaran Bakteri Coliform Di Kanal A Kuala Dua Kabupaten Kubu Raya. 3:7.
Barcella,  L.,  Barbaro,  A.P.,  Rogolino,  S.B. ( 2016 ). Colonial  Morphology  of Escherichia  Coli:  Impact  of  Detection  in  Clinical  Specimens. Microbiologia Medica 31(2):51–55.
Halim,  F.,  Warouw,  S.M,  Rampengan,  N.H.,  Salendu,  P. ( 2017 ) .  Hubungan Jumlah  Koloni  Escherichia  Coli  dengan  Derajat  Dehidrasi  pada  Diare Akut. Sari Pediatri 19(2):81–85.
Imamudin,  M.  2001.  Peranan  Air  Dalam  Perspektif  Al-Quran  (Air  Sebagai Sumber Kehidupan).” el–Hayah 3(1):41–45.
Pakpahan,  R.S.,  Picauly,  I.,  Mahayasa,  I.N.W. ( 2015 ). Cemaran  Mikroba Escherichia  coli  dan  Total  Bakteri  Koliform  pada  Air  Minum  Isi  Ulang. Kesmas: National Public Health Journal 9(4):300–307.
Sasongko, H. ( 2014 ). Uji Resistensi Bakteri Escherichia Coli dari Sungai Boyong Kabupaten  Sleman  terhadap  Antibiotik  Amoksisilin,  Kloramfenikol, Sulfametoxasol, dan Streptomisin. Jurnal Bioedukatika. 2(1):25.
Sutiknowati,  L.I. ( 2018 ). Keragaman  Bakteri  pada  Perairan  Sabang,  Provinsi Aceh. 35(2):9.
Syarifuddin,  A.,  Kamal,  S.,  Yuliastuti,  F.,  Pradani,  M.P.K.,  Septianingrum, N.M.A.N. ( 2019 ). Ekstraksi  Dan  Identifikasi  Metabolit  Sekunder  Dari Isolat  Al6  Serta  Potensinya  Sebagai  Antibakteri  Terhadap  Escherichia Coli. Jurnal Bioteknol Biosains Indones . 6(2):210.
Syarifuddin,  A.,  Nanik,  S.,  &  Kintoko. ( 2018 ). Profil  Klt-Bioautografi  dan Densitometri Fraksi Teraktif(Isolatkp13) dari Bakteri Rizosfer Kayu Putih
(Melaleucaleucadendron  L.). Jurnal  Farmasi  Sains  dan  Praktis 5(1):27– 33.
Syarifuddin,  A.,  Sulistyani,  N.,  Kintoko,  K. ( 2018 ). Activity  of  Antibiotic Bacterial  Isolate  Kp13  and  Cell  Leakage  Analysis  of  Escherichia  coli Bacteria. jifi. 16(2):137.
Wiratna,  G.,  Linda  ,  R. ( 2019 ). Angka  Lempeng  Total  Mikroba  pada  Minuman Teh di Kota Pontianak. 8:5..