## PENENTUAN KANDUNGAN FENOLIK TOTAL, SIFAT ANTIOKSIDAN DAN
TOKSISITAS DARI EKSTRAK KULIT BATANG RENGAS ( Gluta renghas L.)

## DETERMINATION OF TOTAL PHENOLIC CONTENT,  ANTIOXIDANT AND TOXIC PROPERTIES OF RENGAS (Gluta renghas L.) STEM BARK EXTRACTS
Emil Salim 1* , Adlis Santoni 2 , Nindi Antika Febriana 3
123 Laboratorium Kimia Organik Bahan Alam, Jurusan Kimia FMIPA Universitas Andalas Kampus Limau Manis, Padang, 25163 Indonesia.
* e-mail korespondensi : emilsalim@sci.unand.ac.id

## Abstrak
Tujuan  penelitian  ini  untuk  menentukan  jumlah  kandungan  fenolik  total,  sifat  antioksidan  dan toksisitas dari  ekstrak kulit  batang rengas (Gluta  renghas L.). Sampel kulit  batang rengas diekstraksi secara bertahap menggunakan pelarut n-heksan, etil asetat dan metanol pada temperatur ruang. Jumlah kandungan  fenolik  total  ditentukan  dengan  metode Folin-Ciocalteau ,  sifat  antioksidan  ditentukan dengan  metode  DPPH  ( 1,1-diphenyl-2-pycrilhydrazil ),  dan  sifat  toksisitas  ditentukan  dengan  metode BSLT ( Brine Shimp Lethality Test ). Ekstrak metanol kulit batang rengas memiliki kandungan  fenolik total  paling  tinggi  (20,042  mg  GAE/g  ekstrak  kering)  dibandingkan  ekstrak  etil  asetat  dan  n-heksan. Sifat  antioksidan  dari  ekstrak  metanol  dan  etil  asetat tergolong  sangat  kuat  dengan  nilai  IC 50 12,252 mg/L dan 48,151  mg/L  secara  berturut-turut, sedangkan ekstrak n-heksan  besifat  lemah dengan  nilai IC 50 206,06  mg/L.  Sifat  toksisitas  kulit  batang  rengas  menunjukkan  bahwa  semua  ekstrak  bersifat toksik,  dimana  ekstrak  metanol  memiliki  sifat  toksisitas  paling  kuat  dengan  nilai  LC 50 54,113  mg/L. Senyawa  aktif  dari  ekstrak  kulit  batang  rengas  ini  selanjutnya  dapat  dilakukan  isolasi  untuk mengetahui strukturnya.
Kata kunci: Gluta renghas L., kandungan fenolik total, antioksidan, toksisitas.

## Abstract
The aim of this study is to determine total phenolic content, antioxidant and toxic properties of rengas stem  bark  ( Gluta  renghas L.)  extracts.  Samples  were  extracted  in  stages  using  n-hexane,  then  ethyl acetate,  and  methanol  in  room  temperature.  Total  phenolic  content  was  carried  out  by  the  Folin- Ciocalteau method, antioxidant property was carried out by the DPPH (1,1-diphenyl-2-pycrilhydrazil) method, and toxicity  by the  BSLT (Brine Shimp  Lethality Test)  method. Methanol extract of rengas stem  bark  has  the  highest  total  phenolic  content  (20,042  mg  GAE/g  dry  extract)  compared  to  ethyl acetate and n-hexane extracts. Antioxidant properties of  methanol and ethyl acetate extracts are very strong with IC 50 12.252 mg/L and 48.151 mg/L, respectively, whereas n-hexane extract is weak with IC 50 206.06 mg/L. All extracts of rengas stem bark are toxic, where methanol extract has the highest toxicity with LC 50 54.113 mg/L. Next, active compounds in rengas stem bark extracts can be isolated to determine their structures.
Keywords : Gluta renghas L., total phenolic content, antioxidant, toxicity.

## PENDAHULUAN
Tumbuhan merupakan salah satu tempat terjadinya proses biosintesis berbagai struktur  senyawa  organik  yang  kompleks, seperti senyawa metabolit sekunder. Tempat tumbuh  sangat  mempengaruhi  jumlah  dan jenis kandungan senyawa metabolit sekundernya.  Ada  beberapa  jenis  tumbuhan yang  dapat  tumbuh  di  daerah  ekstrim.
Informasi  mengenai  kandungan  senyawa metabolit  sekunder  dari  beberapa  tumbuhan ini  masih  sangat  terbatas.  Salah  satunya adalah  tumbuhan  rengas  ( Gluta  renghas L.) yang termasuk kedalam famili
Anacardiaceae.  Spesies  ini  dapat  ditemukan di sepanjang sisi sungai dan anak sungai air tawar.  Tanah  benam  yang  dangkal  dan terendam oleh air merupakan tempat tumbuh
yang  paling  baik  untuk  rengas.  Rengas mampu beradaptasi pada kondisi lingkungan anaerob dan pada daerah yang tergenang air saat  musim  hujan  dimana  pori-pori  tanah tertutup oleh air (Heyne, K., 1987).
Rengas  merupakan  salah  satu  sumber kayu  yang  penting  untuk  bahan  konstruksi bangunan,  seperti  bantalan  rel  kereta  api, jembatan,  perahu,  kayu  lapis  dan  perkakas rumah  tangga.  Pada  umumnya,  para  Petani menanam  rengas  sebagai  tanaman  sela  di hutan  jati  untuk  menghambat  pertumbuhan gulma  (Nana,  S.,  2011).  Rengas  diketahui memiliki  getah  yang  sangat  beracun  yang dapat  menyebabkan  gatal,  iritasi  berat  pada kulit.  Selain  itu,  getah  rengas  juga  dapat menyebabkan  kelumpuhan.  Penduduk  asli biasanya menggunakan getah rengas sebagai racun  untuk  berburu  binatang  (Zuharah, W.F., 2014).
Berdasarkan keunikan dari tumbuhan rengas ini, maka peneliti tertarik untuk menentukan kandungan kimia yang terdapat pada tumbuhan rengas tersebut. Selain itu, penelitian mengenai kandungan golongan senyawa aktif pada ekstrak tumbuhan ini dan aktivitasnya sebagai antioksidan dan toksisitas masih sangat terbatas. Penelitian sebelumnya, getah rengas memiliki beberapa kandungan senyawa yang telah diisoalsi, seperti ursiol, rengol, glutarengol, laccol dan thitsiol (Zuharah, W.F., 2014). Kayu rengas juga telah dilaporkan mengandung golongan senyawa lipid, steroid, flavonoid dan benzenoid (Heyne, K., 1987), namun belum ada dilakukan penelitian terhadap bagian tumbuhan rengas lainnya, yaitu bagian akar, kulit batang, bunga, buah, dan bagian lainnya.
Penelitian ini bertujuan untuk menentukan kandungan kimia yang terdapat pada kulit batang rengas, kemudian ditentukan  jumlah  kandungan  fenolik  total untuk  mendukung  potensi  aktivitasnya sebagai  sumber  antioksidan.  Selain itu  pada penelitian  juga  dilakukan  uji  toksisitas ekstrak  kulit  batang  rengas  terhadap  larva udang Artemia salina .
METODE PENELITIAN
Alat yang digunakan pada penelitian ini yaitu gerinder , neraca analitik, alat distilasi, maserator, rotary  evaporator BUCHI  R- 124 , botol vial , tabung reaksi, chamber, pipa kapiler,  lampu  UV  (254  nm  dan  356  nm), spektrofotometer UV-Vis Thermo Scientific , wadah pembiakan larva udang , micropipette ,  dan  alat  gelas  laboratorium lainnya.
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian ini  yaitu  sampel  bubuk  kulit  batang  rengas, pelarut  (metanol,  etil  asetat  dan  heksan), pereaksi  Mayer,  sianidin  test  (bubuk magnesium  dan  asam  klorida  pekat), pereaksi  Liebermann-Burchad,  anhidrida asetat  dan  asam  sulfat  pekat,  besi  (III) klorida),  ammonia,  natrium  hidroksida, asam  askorbat, 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH),  larva  udang Artemia  salina , karbonat  20%,  DMSO  (dimetil  sulfoksida), asam  galat,  reagen  Folin-Ciocalteau,  dan akuades.

## 1. Uji Profil Fitokimia
Uji  profil  fitokimia  dari  kulit  batang  rengas dilakukan  menurut  prosedur  oleh  Harborne, J.D., 1987 dan Parekh J. et al , 2004 dengan beberapa  modifikasi.  Serbuk  kulit  batang rengas  (±  2  gram)  ditambahkan  10  mL metanol  dalam  tabung  reaksi  dan  kemudian dipanaskan  selama  5  menit  dan  disaring. Larutan  ekstrak  diambil  untuk  analisis selanjutnya.

## Uji Flavonoid
Larutan  ektrak  metanol  (2  mL)  dalam tabung  reaksi  ditambahkan  HCl  pekat  dan beberapa  butir  serbuk  magnesium.  Apabila terbentuk    warna  jingga  sampai  merah, berarti  ada  kandungan  senyawa  flavonoid pada sampel.

## Uji Fenolik
Larutan  ektsrak  metanol  (2  mL)  dalam tabung  reaksi  ditambahkan  5  tetes  larutan FeCl 3 dan diamati perubahan warna larutan. Apabila terbentuk larutan bewarna biru atau hijau pekat menunjukkan adanya kandungan senyawa fenolik.
84 | Jurnal Zarah , Vol. 8 No. 2 (2020)

## Uji Saponin
Larutan  ekstrak  metanol  (2  mL)  dalam tabung  reaksi  dikocok  beberapa  saat. Apabila  terbentuk  busa  dan  tidak  hilang dengan  penambahan  beberapa  tetes  HCl pekat  (±  5  menit),  berarti  ada  kandungan senyawa saponin dalam sampel.

## Uji Triterpenoid/Steroid
Larutan  ekstrak  metanol  (2  mL) ditambah 2 mL akuades, kemudian ditambahkan  2  mL  kloroform  dan  dikocok beberapa  saat  dan  kemudian  didiamkan sehingga  terbentuk  2  lapisan.  Lapisan kloroform  diambil  menggunakan  pipet  tetes dan  diteteskan  pada  pelat  tetes,  ditambah asam  sulfat  pekat  dan  anhidrida  asetat. Apabila  larutan  bewarna  ungu  atau  merah menunjukkan  adanya  kandungan  senyawa terpenoid  dan  jika  terbentuk  warna  hijau atau  biru    berarti  ada  kandungan  senyawa steroid.

## Uji alkaloid
Larutan ektsrak metanol (2 mL) dimasukkan kedalam tabung reaksi dan diuapkan  pelarutnya,  residu  yang  terbentuk ditambahkan  5  mL  HCl  2N,  kemudian ditambahkan  beberapa  tetes  pereaksi  Mayer. Apabila  terbentuknya  endapan  putih  berarti  ada kandungan senyawa alkaloid.

## Uji Kumarin
Larutan  ekstrak  metanol  ditotolkan  pada pelat KLT dan dikeringkan. Plat KLT kemudian dielusi  dengan  eluen  etil  asetat:  metanol  (9:1). Plat KLT hasil elusi diamati dibawah sinar UV λ 365  nm  dan  254  nm.  Adanya  warna  biru  yang berfluorisensi  dan  jika  warna  biru  tersebut bertambah  terang  setelah  disemprot  dengan larutan  NaOH  1M  maka  ada  kandungan senyawa kumarin dalam sampel.

## 2. Ekstraksi Sampel Kulit Batang Rengas
Sampel  kering  berupa  bubuk  (±1000  g) diekstraksi secara bertahap menggunakan 3 jenis pelarut  dengan  tingkat  kepolaran  yang  berbeda (n-heksan,  etil  asetat  dan  metanol)  pada  suhu kamar.  Ekstraksi  pertama  dilakukan  dengan pelarut  non  polar  (n-heksan).  Proses  maserasi dilakukan  secara  berulang  sampai  maserat berwarna  lebih  bening  dan  ketika  diteteskan pada  kaca  arloji  tidak  meninggalkan  bercak
noda. Hasil maserasi yang diperoleh digabungkan dan pelarutnya diuapkan menggunakan rotary evaporator pada suhu 40 o C sehingga  didapatkan  ekstrak  pekat  heksan  dan kemudian  ditimbang.  Ampas  sisa  dari  ekstraksi dengan  pelarut  n-heksan  dikeringanginkan  dan proses  maserasi  dilanjutkan  dengan  pelarut  etil asetat dan tahap terakhir dengan pelarut metanol dengan prosedur kerja yang sama.
3. Penentuan  Kandungan  Fenolik  Total
Ekstrak Kulit Batang Rengas
Masing-masing ekstrak (10 mg) dilarutkan  dengan  10  mL  metanol  untuk mendapatkan  konsentrasi  larutan  induk  1000 mg/L.  Larutan  induk  diencerkan  dengan  cara melarutkan 1 mL dengan metanol di dalam labu 10  mL  sehingga  didapatkan  konsentrasi  100 mg/L.  Larutan  sampel  100  mg/L  sebanyak  0,5 mL  dimasukkan  kedalam  labu  ukur  10  mL  dan ditambah  0,5  mL  reagen Folin-Ciocalteu . Campuran  didiamkan  selama  5  menit  sebelum ditambahkan  1  mL  larutan  Na 2 CO 3 20%  dan kemudian diencerkan sampai tanda batas dengan akuades.  Larutan  dibiarkan  selama  2  jam  dan serapan  diukur  pada  panjang  gelombang  765 nm.  Asam  galat  digunakan  sebagai  larutan standar.  Kandungan  fenolik  total  dinyatakan dalam  GAE  ( Gallic  Acid  Equivalent) (Slinkard, J., 1997).

## 4. Uji  Sifat  Antioksidan  Ekstrak  Kulit Batang Rengas dengan Metode DPPH
Larutan  uji  disiapkan  dengan  melarutkan masing-masing  ekstrak  (100  mg)  dengan metanol  dalam  labu  ukur  100  mL  untuk mendapatkan  larutan  induk  1000  mg/L.  Dari larutan  induk  dibuat  variasi  konsentrasi  400; 200;  100;  50;  25  mg/L  untuk  ekstrak  n-heksan (Aranda, R., 2011), konsentrasi 100; 80; 60; 40; 20  mg/L  untuk  ekstrak  etil  asetat  dan konsentrasi 30; 20; 15; 10; 5 mg/L untuk ekstrak metanol (Ekawati, 2017). Masing-masing variasi konsentrasi dari larutan uji (2 mL) imasukkan ke dalam  vial  dan  ditambahkan  3  mL  DPPH 0,004% (b/v). Campuran didiamkan pada tempat gelap  selama  30  menit  setelah  penambahan DPPH. Serapan diukur pada panjang gelombang 517  nm.  Asam  galat  digunakan  sebagai  kontrol positif.  Dari  nilai  absorban  yang  didapatkan dihitung  persen  inhibisi  larutan  uji  terhadap radikal  DPPH.  Nilai  IC 50 dapat  diperoleh  dari persamaan regresi (Shimada, K., 1992).
Jurnal Zarah , Vol. 8 No. 2 (2020) | 85
5. Uji  Toksisitas  Ekstrak  Kulit  Batang
Rengas  dengan  Metode Brine  Shrimp Lethality Test
Masing-masing ekstrak (50 mg) dilarutkan  dengan  pelarut  masing-masing dalam  labu  ukur  50  mL  sehingga  diperoleh larutan  induk  dengan  konsentrasi  1000 mg/L.  Beberapa  variasi  konsentrasi  sampel dibuat melalui  pengenceran  bertingkat  yaitu 500;  250;  125;  62,5;  31,625;  15,625  dan 7,8125  mg/L  (Ekawati,  2017). Larutan ekstrak  dengan  variasi  konsentrasi  masing- masing  diambil  sebanyak  5  mL  dan kemudian  dimasukkan  ke  dalam  vial, diuapkan pelarutnya. Setelah pelarut menguap, ke dalam vial ditambahkan 50 µL DMSO  dan  2  mL  air  laut.  Prosedur  yang sama  juga  dilakukan  terhadap  kontrol negatif  (tanpa  penambahan  ekstrak).  Sifat toksisitas  ditentukan  memasukkan  10  ekor larva  udang Artemia  salina ke  dalam  vial yang telah berisi larutan uji dengan berbagai konsentrasi.  Volume  kemudian  dicukupkan menjadi  5  mL  dengan  air  laut.  Larutan  uji dibiarkan  selama  24  jam  dan  jumlah  larva yang  mati  dihitung  (Ekawati,  2017). Masing-masing ekstrak dilakukan pengujian sebanyak 3 kali pengulangan (Prawirodiharjo, E., 2014).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Profil Fitokimia Sampel Kulit Batang Rengas Profil fitokimia menunjukkan jenis golongan  senyawa  metabolit  sekunder  yang terdapat  pada  sampel  secara  kualitatif.  Profil fitokimia  dari  ekstrak  metanol  kulit  batang rengas ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1 . Profil fitokimia ekstrak metanol kulit batang rengas
No Uji Kualitatif Hasil Uji 1. Flavonoid + 2. Fenolik + 3. Saponin - 4. Triterpenoid + 5. Steroid - 6. Kumarin + 7. Alkaloid +
Dari data tabel di atas diketahui bahwa kulit batang  rengas  mengandung  beberapa  golongan
senyawa  metabolit  sekunder  yaitu  flavonoid, fenolik, triterpenoid, kumarin dan alkaloid.

## Hasil Ekstraksi Sampel Kulit Batang Rengas
Hasil  proses  ekstraksi  sampel  kulit  batang rengas  menggunakan  pelarut  n-heksan,  etil asetat dan metanol dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Jumlah ekstrak kulit batang rengas yang dihasilkan
Dari  grafik  di  atas  dapat  dilihat  bahwa jumlah  ekstrak  metanol  lebih  banyak  dibanding ekstrak  n-heksan  dan  etil  asetat.  Hasil  ini mengindikasikan bahwa kulit rengas mengandung komponen polar yang lebih banyak dibanding  komponen  yang  bersifat  semi  polar dan  non  polar.  Ini  dapat  terlihat  dari perbandingan  jumlah  ekstrak  metanol  dan ekstrak  n-heksan,  dimana  ekstrak  metanol 12,621%  sedangkan  ekstrak  n-heksan  dan  etil asetat  berturut-turut  1,768%  dan  3,390%.  Jenis pelarut  yang  digunakan  sangat  mempengaruhi jumlah ekstrak yang diperoleh, dimana komponen  senyawa  yang  ada  pada  sampel memiliki  kelarutan  yang  berbeda  pada  pelarut yang berbeda.

## Hasil  Penentuan  Kandungan  Fenolik  Total Ekstrak Kulit Batang Rengas
Persamaan  regresi  larutan  standar  asam galat  (Gambar  2)  digunakan  untuk  menentukan kandungan  fenolik  total  pada  ekstrak  n-heksan, etil asetat dan metanol dari kulit batang rengas.
12,621 5,390 1,768
86 | Jurnal Zarah , Vol. 8 No. 2 (2020)
Gambar 2. Kurva standar asam galat
Dari  gambar  di  atas  dapat  dilihat  bahwa kenaikan  konsentrasi  asam  galat  sebanding dengan  nilai  absorban  yang  diperoleh.  Hal  ini disebabkan  oleh  semakin  banyak  senyawa  asam galat yang dapat mereduksi asam fosfomolibdat- fosfotungstat pada reagen Folin-Ciocalteu membentuk  kompleks  molibdenum  tungsten menghasilkan  larutan  warna  biru  yang  diukur pada  panjang  gelombang  765  nm  sehingga terukur  nilai  serapan  yang  semakin  tinggi. Gambar 3 menunjukkan kandungan fenolik total dari  ekstrak  metanol,  etil  asetat  dan  n-heksan dari kulit batang rengas.
Gambar 3. Kandungan fenolik total eksrak kulit batang rengas
Dari  grafik  di  atas  dapat  dilihat  ekstrak metanol memiliki kandungan fenolik total paling tinggi,  diikuti  oleh  ekstrak  etil  asetat  dan  n- heksan.  Hasil  ini  menunjukkan  sampel  kulit batang  rengas  lebih  banyak  mengandung senyawa fenolik yang bersifat polar.
Hasil Uji Sifat Antioksidan Ekstrak Kulit Batang Rengas
Sifat antioksidan ekstrak kulit batang rengas diuji untuk melihat daya hambatnya (inhibisi) terhadap radikal bebas (DPPH).
Tabel 2 menunjukkan nilai konsentrasi inhibisi sebanyak 50 persen (IC 50 ) dari ekstrak metanol, etil asetat dan n-heksan dari kulit batang rengas
Tabel 2 . Sifat antioksidan ekstrak kulit batang rengas
Sampel uji IC 50 (mg/L) Ekstrak metanol 12,252 Ekstrak etil asetat 48,151 Ekstrak n-heksan 206,062 Asam askorbat 10,592
Dari  nilai  IC 50 di  atas  dapat  dilihat bahwa  ekstrak  metanol  memiliki  sifat antioksidan  yang  paling  kuat  dengan  nilai IC 50 yang  paling  rendah  dan  nilainya mendekati  nilai  IC 50 dari  kontrol  positif (asam  askorbat).  Semakin  kecil  nilai  IC 50 maka  kemampuan  penangkapan  radikal bebas  yang  semakin  tinggi  (Putri,  A.A.S., 2015).  Dari  data  di  atas  menunjukkan ekstrak  metanol  lebih  aktif  antioksidan dibanding  ekstrak  etil  asetat  dan  heksan disebabkan.  Hal  ini  disebabkan  oleh kandungan  fenolik  total  yang  lebih  tinggi terdapat  dalam  ekstrak  metanol,  dimana senyawa  fenolik  merupakan  salah  satu golongan  senyawa  yang  bertanggung  jawab dalam menetralkan radikal bebas.
Menurut  fukumoto  dan  mazza  (2000), sifat  antioksidan  akan  semakin  meningkat dengan semakin bertambahnya gugus
hidroksil  (―OH)  pada  senyawa  fenolik  dan akan  semakin  menurun  dengan  adanya gugus  glikosida  (Zuhra,  C.  F.,  2008).
Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia,  golongan senyawa metabolit sekunder yang berpotensi sebagai  antioksidan  dalam  ekstrak  kulit batang rengas adalah flavonoid, fenolik, dan kumarin.  Senyawa  ini  pada  strukturnya mengandung  gugus  hidroksil  dimana  atom H  bersifat  asam  yang  dapat  didonorkan untuk  menetralkan  radikal  bebas  (Meyer, B.N., 1982).
Nilai  IC 50 digunakan  sebagai  parameter sifat antioksidan. Jika nilai IC 50 < 50 mg/L, maka  sifat  antioksidannya  tergolong  sangat kuat,  jika  nilai  IC 50 50-100  mg/L  tergolong kuat, jika nilai IC 50 101-250 mg/L tergolong sedang,  jika  nilai  IC 50 250-500  mg/L
11,570 20,042
tergolong lemah, dan bersifat tidak aktif jika nilai  IC 50 >  500  mg/L  (Shimada,  1992). Berdasarkan  data  ini,  ekstrak  metanol  (IC 50 12,252  mg/L)  dan  ekstrak  etil  asetat  (IC 50 48,151  mg/L)  tergolong  kuat  sebagai antioksidan, sedangkan ekstrak heksan (IC 50
206,062
mg/L) tergolong sedang
antioksidan.
Hasil  Uji  Toksisitas  dengan  Metode  Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)
Uji  sifat  toksisitas  ekstrak  dilakukan terhadap  larva  udang Artemia  salina menggunakan  metoda  BSLT.  Jumlah  larva udang  yang  mati  dihitung  pada  setiap perlakuan.  Dari  hasil  pengujian  diamati bahwa angka kematian larva udang semakin meningkat  dengan  semakin  besar  nilai konsentrasi  ekstrak  yang  ditambahkan.  Hal ini  sesuai  dengan  pernyataan  Harborne (1987), dimana sifat toksik dari ekstrak akan meningkat dengan bertambahnya konsentrasi dari ekstrak. Tabel 3 menunjukkan  hasil  uji  toksisitas    dari ekstrak  kulit  batang  rengas  terhadap  larva udang Artemia salina .
Tabel  3 .  Sifat  toksisitas  ekstrak  kulit  batang  rengas terhadap larva udang Artemia salina Ekstrak IC 50 (mg/L) Metanol 54,1128 Etil asetat 461,1052 n-Heksan 659,1739
Dari  tabel  diatas  dapat  dilihat  bahwa ekstrak  metanol  memberikan  sifat  toksisitas paling  tinggi  terhadap  larva  udang  dengan nilai  LC 50 54,1128  mg/L.  Tingkat  toksisitas dapat diketahui dari nilai LC 50 -nya, dikatakan  toksik  jika  LC 50 kecil  dari  1000 mg/L  dan  tidak  toksik  jika  LC 50 besar  dari 1000  mg/L  (Agustian,  R.,  2013).  Dari parameter nilai LC 50 , maka diketahui bahwa n-heksan,  etil  asetat  dan  metanol  bersifat toksik.  Senyawa  yang  berpotensi  dalam menyebabkan  sifat  toksik  adalah  senyawa golongan alkaloid, kumarin dan triterpenoid. Hal  ini  didukung  oleh  hasil  uji  profil fitokimia  dari  ekstrak  yang  menunjukkan adanya kandungan senyawa-senyawa tersebut.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  ekstrak metanol  kulit  batang  rengas  mengandung senyawa  metabolit  sekunder  golongan flavonoid, fenolik, triterpenoid, kumarin dan alkaloid.  Kandungan  fenolik  total  dari ekstrak  n-heksan,  etil  asetat  dan  metanol berbeda  secara  signifikan.  Ekstrak  metanol kulit  batang  rengas  memiliki  jumlah kandungan  fenolik  total  paling  tinggi dibandingkan  terhadap  ekstrak  etil  asetat dan  ekstrak  n-heksan.  Pada  uji  sifat antioksidan, ekstrak metanol dan ekstrak etil asetat  tergolong  kuat  sebagai  antioksidan, sedangkan  ekstrak  heksan  bersifat  sedang. Semua  ekstrak  kulit  batang  rengas  bersifat toksik,  dimana  sifat  toksisitas  paling  kuat ditunjukkan oleh ekstrak metanol.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terimakasih penulis ucapkan kepada Analis Laboratorium Kimia Organik Bahan  Alam yang telah membantu dalam menyelesaikan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Heyne,  K.  1987.  Tumbuhan  Berguna Indonesia  Jilid  I  dan  II.  Terjemahan. Badan Litbang Kehutanan: Jakarta.
2. Supriatna, N., Kelana, T. 2011.
Informasi  Singkat  Benih  Renghas ( Gluta  renghas L),  Balai  Pembenihan Tanaman Hutan Jawa dan Madura.
3. Zuharah,  W.F.,  Fadzly,  N.;  Ali,  Y., Zakaria,  R.,  Juperi,  S.,  Asyraf,  M., Dieng,  H.  2014.  Larvicidal  Efficacy Screening of Anacardaciae Crude
Extracts  on  the  Dengue  Hemorrhagic Vector, Aedes Aegypti. Tropical Biomedicine 31(2), 297–304.
4. Aziz,  Enda  Desriyansyah.  2017.  Uji Aktivitas  Sitotoksik  dan  Antibakteri Ekstrak  Daun  Rengas ( Gluta  renghas L.) . Skripsi. Universitas Andalas: Padang.
5. Harborne,  J.D.  1987.  Metode  Fitokimia Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan. ITB: Bandung.
88 | Jurnal Zarah , Vol. 8 No. 2 (2020)
6. Parekh,  J.,  Chanda  S.V.  2007.  In  vitro antimicrobial
activity
and phytochemical  analysis  of  some  Indian medicinal plants. Turk J Biol . 31, 53-58.
7. Slinkard, J., Singleton, V.L. 1997. Total phenol analysis: automation and comparison with manual methods. Am J Enol Vitic . 28, 49-55.
8. Aranda,  R.,  Lopez,  L.,  Arroyo,  J., Garza,  B.,  &  Torres,  N.  2011. Antimicrobial and  antioxidant  activities of  plants  from  Northeast  of  Mexico. Evidence-Based  Complementary  and
Alternative Medicine , 1-6.
9. Ekawati,  Minanti  A.  2017.  Isolasi  dan Identifikasi  Senyawa  Flavonoid    Pada Daun  Sembukan  ( Paederia  foetida L) Serta Uji Aktivitasnya Sebagai
Antioksidan. Jurnal  Kimia .  Jurusan Kimia  FMIPA  Universitas  Udayana, Bukit Jimbaran: Bali, 11(1), 43-48.
10. Shimada, K.,  Fujikawa,  K., Yahara,  K., Nakamura,  T.  1992.  Antioxidative properties  of  xanthone  on  the  auto oxidation  of  soybean  in  cylcodextrin emulsion. J Agric Food Chem . 40, 945- 948.
11. Prawirodiharjo,  E.  2014.  Uji  Aktivitas
Antioksidan  dan  Uji  Toksisitas  Ekstrak Etanol  70%  dan  Ekstrak  Air  Kulit Batang Kayu Jawa ( Lannea coromandelica ). Skripsi .  Program  Studi Farmasi  Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu Kesehatan  UIN  Syarif  Hidayatullah Jakarta.
12. Putri,  A.A.S.,  Hidajati,  N.  2015.  Uji
Aktivitas Antioksidan Senyawa  Fenolik
Ekstrak Metanol
Kulit Batang Tumbuhan  Nyiri  Batu  ( Xylocarpus moluccensis ). UNESA Journal of Chemistry 4(1), 37-42.
13. Zuhra,  C.  F.,  Taringan,  J.  B.,  Sihotang, H. 2008. Aktivitas Antioksidan Senyawa  Flavonoid  dari  Daun  Katuk ( Sauropus  androgunus (L)  Merr.),
Jurnal Biologi Sumatera 1(3), 7-10.
14. Meyer,  B.N.,  Ferrigni,  N.R.,  Putnam, J.E.,  Nicols,  J.L.,  McLaughlin.  1982. Brine  Shrimp:  A  Convenient  General Bioassay  for  Active  Plant  Constituents.
Journal of Medicinal Plant Reseach 45, 31-32.
15. Agustian,  R.,  Yudiati,  E.,  Sedjati,  S. 2013.  Uji  Toksisitas  Pigmen  Kasar Mikroalga Spirulina  platensis dengan Metode  Uji  BSLT  ( Brine  Shrimp Lethality  Test), Journal  of  Marine Research 1(2), 25-31.