Studi Ekstrak Metanol Biji Mahoni ( Swietenia mahagoni ) terhadap SOD Serum Tikus Putih ( Rattus novergicus ) Pasca Induksi MLD-STZ
Deasy Luandayanti 1)* , Muhaimin Rifa’i 1) , Aulanni’am 2
1 Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya, Malang
2 Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya, Malang
1) * bundhud@gmail.com

## ABSTRAK
Diabetes  mellitus  (DM)  merupakan  suatu  gejala  yang  timbul  pada  seseorang  dimana  keadaan hiperglikemia  (kadar  gula  yang  tinggi)  yang  kronik  dengan  disertai  berbagai  kelainan  metabolik  akibat gangguan  hormonal.  Salah  satu  tumbuhan  yang  digunakan  masyarakat  untuk  pengobatan  DM  adalah mahoni  ( Swietenia  mahagoni ).  Bagian  yang  digunakan  dari  tumbuhan  tersebut  adalah  bijinya.  Namun mekanisme ekstrak metanol biji mahoni belum banyak diketahui. Pada penelitian ini menggunakan tikus model DM dengan induksi MLD-STZ. Tikus dikelompokkan dalam 5 kelompok, yaitu kelompok kontrol negatif,  kontrol  positif,  dan    kelompok  DM  dengan  terapi  100,  250  dan  400  mg/KgBB.  Metode  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  meliputi  pengekstrakan  biji  mahoni,  induksi  DM  dengan  injeksi  MLD- STZ secara intraperitonial dan uji aktivitas SOD serum. Hasil penelitian menunjukkan bahwa  nilai SOD serum  yang  didapatkan  berdasarkan  kelompok,  yaitu  98,99;  61,12;  70,05;  79,29  dan  84,49  unit/ml. Pemberian terapi ekstrak metanol biji mahoni pada tikus model DM mampu menaikkan aktivitas SOD.
Kata Kunci : diabetes mellitus (DM), SOD (superoksida dismutase), STZ (streptozotocin)

## ABSTRACT
Diabetes  mellitus  (DM)  is  a  symptom  that  occurs  in  a  person  where  the  chronic  hyperglycemia condition  (high  blood  sugar  level)  with  various  metabolic  abnormalities  disorders  accompanies  by hormonal disorders.  One of the plant used for treatment of DM is mahogany ( Swietenia mahagoni ). The part used of the plant is seed. But mechanism of  methanol extract of mahogany seeds not widely known. On this research using  a rat model DM by induction of MLD-STZ. Rats were grouped in 5 groups, which is  the  control  negative,  control  positive,  and  DM  group  with  therapy  100,  250,  and  400  mg/KgWB.  The methods  used  in  this  research  include  seed  extraction,  DM  rats  induced  by  injection  MLD-STZ  with intraperitonial  and  activity  SOD  assay.  The  result  showed  that  the  value  of  serum  SOD  is  98,99;  61,12; 70,05; 79,29 dan 84,49 unit/ml. Therapy of methanol extract to DM type 1 rats model is able to raise the activity of SOD.
Keyword: diabetes mellitus (DM), SOD (superoksida dismutase), STZ (streptozotocin)

## PENDAHULUAN
Diabetes  mellitus  (DM)  merupakan  suatu gejala  yang  timbul  pada  seseorang  dimana keadaan  hiperglikemia  (kadar  gula  yang  tinggi) yang  kronik  dengan  disertai  berbagai  kelainan metabolik  akibat  gangguan  hormonal.  Diabetes mellitus  sebagai  suatu  penyakit  kronis  yang mulai marak sebagai morbiditas dan mortalitas di negara-negara yang sedang berkembang termasuk Indonesia [1].
Menurut data yang diambil dari International  Diabeter  Federation (IDF),  angka prevalensi  penyakit  DM  di  Amerika  Serikat 8,3%  dan  di  Cina  3,9%.  Di  Malaysia  bahkan mencapai  14,9%  berdasarkan  data  yang  diambil dari National  Health and Mortality & Morbidity Survey in Malaysia pada tahun 2006 [2].
Negara Indonesia menempati urutan keempat  dari  negara-negara  berkembang  yang mengidap penyakit DM menurut WHO. Setyadrian  [3]  menyebutkan  bahwa  penderita DM  di  Indonesia  meningkat  sejak  tahun  2000 dan pada tahun 2030 diperkirakan mencapai 21,3 juta  orang.  Pernyataan  tersebut  dipertegas dengan  data  Survey  Kesehatan  Rumah  Tangga (SKRT)  Indonesia  yang  menunjukkan  angka prevalensi  atau  angka  kejadian  DM  juga meningkat dari tahun 2001 sebesar 7,5% menjadi 10,4%  pada  tahun  2004.  Adapun  hasil  survei BPS  (Badan  Pusat  Statistik)  pada  tahun  2003 yang  menunjukkan  prevalensi  DM  di  perkotaan mencapai 14,7% dan 7,2% terjadi di pedesaan.
Penyakit  DM  dapat  diakibatkan  karena adanya  stress  oksidatif  yang  berkaitan  dengan peningkatan  ROS  ( Reactive  Oxygen  Species )
sehingga  akan  menganggu  sistem  pertahanan antioksidan yang dapat mengakibatkan peroksidasi  lipid,  perubahan  enzim  antioksidan dan  ketidakefektifan  dalam  menanggulangi kelebihan  ROS.  Gangguan  utama  penyakit  DM adalah  ketidakstabilan  pembentukan  enzim antioksidan,  adanya  gangguan  metabolisme glutationin  dan  penurunan  kadar  asam  askorbat. Berbagai  penelitian  membuktikan  bahwa  stress oksidatif yang terbentuk akibat keadaan hiperglikemia dapat mempercepat dan memperberat penyakit DM serta kompikasinya.
Akibat  adanya  paparan  stress  oksidatif, antioksidan  endogen,  yaitu  enzim  superoksida dismutase  (SOD)  akan  meningkat  aktivitasnya untuk  mengontrol  stress  oksidatif  tersebut dengan  mengubah  anion  superoksida  (O 2 - ) menjadi  hidrogen  peroksida  (H 2 O 2 )  dan  oksigen (O 2 )  sehingga  dapat  melindungi  sel-sel  β pancreas.  Penurunan  SOD  dapat  terjadi  pada penderita  diabetes  mellitus  sehingga  biasanya pada penderita akan mengalami komplikasi pada ginjal, liver, dsb [4].
Salah  satu  metode  yang  digunakan  untuk menyebabkan  stres  oksidatif  adalah  STZ (Streptozotocin).  STZ  bekerja  langsung  pada  sel β  pankreas,  dengan  aksi  sitotoksik  yang dimediatori oleh Reactive Oxygen Species (ROS) sehingga  dapat  digunakan  sebagai  induksi  DM. STZ  masuk  ke  sel  β  pankreas  melalui glucose transpoter (GLUT2)  dan  akan  menyebabkan alkilasi DNA. Alkilasi DNA ini akan menyebabkan kerusakan fragmentasi DNA [6].
Banyaknya  kejadian  dan  tingginya  angka prevalensi DM yang terjadi di Indonesia, banyak orang  melakukan  penelitian  untuk  mengobati penyakit  tersebut  secara  kimiawi  maupun  alami. Obat-obatan kimiawi tersebut seperti Sulfonylureas, Meglitinida, Metformin (Biguanida),
Thiazolidinedione, Alpha- Glucosidase  Inhibitors,  Vidagliptin,  Insulin,  dan lain-lain.  Banyak  juga  obat-obatan  herbal  yang yang  diguanakan,  contohnya  buah  mahkota dewa,  brotowali,  mengkudu,  lidah  buaya,  teh hijau, dan lai-lain [9].
Akhir-akhir  ini  penderita  DM  mulai beralih  ke  pengobatan  herbal.  Obat  herbal merupakan  obat  yang  diramu  dari  tanaman- tanaman  berkhasiat  obat  yang  ditujukan  untuk penyakit  tertentu.  Obat  herbal  menjadi  pilihan utama dalam pengobatan karena khasiatnya yang sudah  terbukti  dan  tidak  mempunyai  efek samping  seperti  pada  kebanyakan  obat  medis. Obat  herbal  dapat  memperbaiki  sel-sel  organ tubuh  yang  rusak  dan  dapat  memberikan  efek penyembuhan yang permanen [10].
Salah  satu  tumbuhan  yang  digunakan masyarakat  untuk  pengobatan  DM  adalah mahoni  ( Swietenia  mahagoni ).  Bagian  yang digunakan dari tumbuhan tersebut adalah bijinya. Biji mahoni memiliki efek farmakologis antipiretik, antijamur, menurunkan tekanan darah tinggi  (hipertensi),  menurunkan  kadar  gula darah, meningkatkan nafsu makan, menyembuhkan  rematik,  menurunkan  demam, menyembuhkan  masuk  angin  dan  eksim  [11]. Menurut  Dutta,  dkk  [12]  tanaman  yang mengandung tetranorterpenoids atau limonoid ini memiliki  efek  hipoglikemia  yang  terkandung dalam ekstrak biji mahoni. Ekstrak tersebut dapat juga  mengurangi  jumlah  kolesterol  pada  level serum  sekitar  18,56%  dan  trigliserid  sekitar 10,41% serta meningkatkan pengurangan glikogen pada level liver.
Berdasarkan  uraian  tersebut,  peneliti tertarik untuk mengetahui aktivitas SOD sebagai pengontrol radikal bebas.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  telah  mendapatkan  sertifikat Kelaikan  Etik  No:  155-KEP-UB  tertanggal  27 Mei 2013.
Penelitian  ini  menggunakan  tikus  yang putih  ( Rattus  novergicus )  strain  wistar  jantan dengan  berat  100-130  g  dan  berumur  2  bulan. Jumlah  keseluruhan  yang  digunakan  20  ekor dengan masing-masing 4 ekor kelompok negatif, 4  ekor  kelompok  DM  tanpa  terapi  (kontrol positif),  12  ekor  kelompok  tikus  DM  dengan terapi  100,  250  dan  400  mg/KgBB.  Sebelum dilakukan  perlakuan,  tikus  dipelihara  terlebih dahulu  kurang  lebih  15  hari  untuk  penyesuaian lingkungan.
Pembuatan Ekstrak Biji Mahoni . Pelarut yang digunakan  untuk  pengekstrakan  adalah  metanol 96%. Biji dijadikan serbuk kemudian dimasukkan  ke  dalam  botol  gelap  kemudian ditambahkan  pelarut  dan  dibiarkan  selama  dua hari  dengan  terlindung  cahaya.  Setelah  itu maserasi disaring hingga diperoleh maserat yang jernih.  Maserat  yang  sudah  jernih  diuapkan dengan  evaporator  pada  suhu  ±  40 o C  sampai diperoleh  ekstrak  metanol  kental.  Ekstrak dikeringkan dengan freeze dryer .
Pembuatan Larutan Streptozotocin (STZ) dan Injeksi Intraperitonial . STZ 100 mg dilarutkan pada 3 ml buffer sitrat dengan pH 4,5 kemudian dilakukan  homogenasi  dengan  vortex.  Larutan STZ  tersebut  digunakan  dalam  pembuatan  tikus DM, diambil dari stok untuk injeksi dengan dosis yang volume pengambilannya disesuaikan
dengan  berat  tikus.  Larutan  tersebut  disimpan dalam suhu 4 o C sampai digunakan kembali. STZ  yang  digunakan  dalam  pembuatan tikus  DM,  diambil  dari  stok.  Volume  yang diambil  dari  stok  tersebut  disesuaikan  dengan berat  badan  tikus  dengan  injeksi  intraperitonial. Dosis  yang  digunakan  sebanyak  20  mg/KgBB sebanyak  5  kali  yang  dilakukan  berturut-turut [6].  Untuk  injeksi  intraperitonial  dilakukan dengan  memposisikan  tikus  menghadap  ke  arah frontal hingga terlihat bagian abdomennya. Pada bagian  atas  abdomen  tikus,  disemprotkan  etanol 70%,  kemudian  kulit  abdomen  dicubit  hingga terasa  bagian  ototnya.  Spuit  dimasukkan  ke dalam  abdomen  lalu  digerakkan  spuitnya. Apabila  terasa  berat,  maka  sudah  masuk  ke bagian intraperitonial. Setelah ituSTZ disuntikkan secara perlahan-lahan sampai larutan yang  berada  dalam  spuit  habis.  Setelah  itu, abdomen  tikus  disemprot  dengan  etanol  70% kembali.
Tikus  yang  telah  diinjeksi  dengan  STZ diinkubasi  selama  7  –  14  hari.  Selama  masa inkubasi,  tikus  dipantau  kadar  glukosa  darahnya dengan menggunakan glukometer untuk mengetahui  kondisi  tikus  diabetes.  Tikus  sudah menderita  DM  apabila  kadar  glukosa  darahnya mencapai  ≥  250  mg/dL  <  350  mg/dL  dan  siap digunakan sebagai penelitian.
Pengukuran Kadar Glukosa Darah .
Pengukuran  kadar  glukosa  darah  dilakukan setelah  diberikan  pelakuan  dengan  mengambil darah  dari  ekor  tikus  yang  selanjutnya  kadar glukosa darah diperiksa dengan glukometer.
Isolasi  Serum. Darah  diambil  melalui  ekor sebanyak 1 ml dan ditempatkan pada mikrotube. Kemudian  diinkubasi  pada  suhu  ruang  selama  3 –  5  jam  dalam  keadaan  miring.  Kemudian  jika sudah  terbentuk  endapan,  serum  diambil  dan ditempatkan  di    mikrotube  baru.  Setelah  itu disentrifugasi  dengan  kecepatan  3000  g  selama 15  menit  dalam  suhu  ruang.  Jika  tidak  terjadi endapan,  darah  langsung  disentrifus  dengan kecepatan  dan  waktu  yang  sama  untuk mendapatkan  serum.  Kemudian  supernatan diambil  dan  peletnya  dibuang.  Supernatan tersebut berisi serum yang akan digunakan untuk uji selanjutnya.

## Penentuan Aktivitas SOD
Penentuan aktivitas SOD dilakukan menggunakan kit SOD (Cat. K335-100, Biovision).  Satu  sampel  mempunyai  3  larutan blanko  (seperti  pada  Tabel  1).  sampel  serum dimasukkan  ke  dalam  sumuran  sampel  dan blanko 2 sebanhyak 20 µl, pada sumuran blanko 1  dan  3  dimasukkan  sebanyak  20  µl  aquades.
Working  solution pada  setiap  sumuran  diberi sebanyak  200  µl,  selanjutnya  pada  sumuran blanko 2 dan 3 diberi dilution buffer sebanyak 20 µl.  Kemudian  pada  setiap  sumuran  diberi  20  µl larutan enzim dan dihomogenasi dengan meletakkan mikroplate yang  telah  ditutup alumunium  foil di  atas shaker .  Kemudian mikroplate diinkubasi pada suhu 37 o C selama 20 menit.  Lalu mikroplate diukur  pada  panjang gelombang 450 nm.
Tabel  1.  Jumlah  larutan  yang  ditambahkan  pada sampel, blanko 1, blanko 2 dan blanko 3
Sampel  Blanko 1 Blanko 2 Blanko 3 Sampel 20 µl - 20 µl - Aquades - 20 µl - 20 µl WST Solution 200 µl 200 µl 200 µl 200 µl Enzyme Solution 20 µl 20 µl - - Buffer - - 20 µl 20 µl Untuk prosentase penghambatan dapat dihitung dengan rumus sebagai berikut:
Keterangan: Fp
: faktor pengenceran 50%    : penghambatan kecepatan reduksi sitokrom C.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Induksi  MLD-STZ  terhadap  Kadar  Glukosa Darah  Tikus  DMT  1. Pada  penelitian  ini menggunakan  hewan  coba  tikus  putih  ( Rattus novergicus ) yang diinduksi dengan streptozotocin (STZ) agar dapat menjadi diabetes mellitus  tipe  1  (DMT1).  Dosis  yang  digunakan untuk menginduksi tikus putih adalah dosis yang rendah dan berulang ( Multiple Low Dose , MLD- STZ).  Dosis  untuk  MLD-STZ  yang  digunakan adalah 20 mg/KgBB dengan injeksi intraperitonal (i.p)  yang dilakukan selama 5 hari berturut-turut [6].
0 100 200 300 400 500 600 700 800 1 2 3 4 Ka da r Gl uk o sa D ar ah (mg /d L) Ulangan Tikus Kontrol Tikus DM Tipe 1
Terapi 100 mg/dL Terapi 250 mg/dL
Terapi 400 mg/dL
Gambar 1. Perbandingan kadar glukosa darah tikus kontrol,  DM  tipe  1  dan  terapi  ekstrak metanol biji mahoni.
Berdasarkan hasil penelitian, terjadi peningkatan  kadar  glukosa  darah  paling  tinggi, yaitu  645,75  ±  29,409  mg/dL  yang  terjadi  pada kelompok tikus DM Tipe 1 dengan induksi STZ yang  dibandingkan  dengan  kelompok  tikus kontrol  yang  berada  pada  kisaran  141,25  ± 21,282.  Menurut  ADA  (2004),  kisaran  kadar glukosa  darah  normal  adalah  85-102  mg/dL, sedangkan  pada  tikus  DM  pada  kisaran  >539 mg/dL.
Dari  data  hasil  pengukuran  menunjukkan bahwa  kadar  glukosa  darah  tikus  mengalami penurunan  yang  signifikan  pasca  terapi  ekstrak metanol biji mahoni secara berturut-turut dengan dosis  100;  250;  400  mg/KgBB,  yaitu  (591.75  ± 4.856);  (537.5  ±  8.062)  dan  (340  ±  10)  mg/dL. Hasil  tersebut  didukung  oleh  analisis  statistik One  Way  Anova dan  dilanjutkan  dengan  uji Tukey  (lampiran  6),  menunjukkan  perbedaan yang  nyata  (p>0,05)  antara  kadar  glukosa  darah kelompok  DMT  1  dengan  kelompok  tikus  yang mendapat  terapi  ekstrak  methanol  biji  mahoni dosis  100;  250;  dan  400  mg/KgBB.  Terapi ekstrak  biji  mahoni  dengan  dosis  300  mg/KgBB memberikan  penurunan  kadar  glukosa  darah yang paling mendekati kadar glukosa darah tikus kontrol  dengan  dosis  100  dan  250  mg/KgBB walaupun  hasil  statistika  masih  menunjukkan bahwa  adanya  perbedaan  yang  nyata  antara kelompok control dan dosis 400 mg/KgBB.
Aktivitas  Superoksida  dismutase  (SOD)  pada Tikus DMT I yang Mendapat Terapi Ekstrak Metanol  Biji  Mahoni. Aktivitas  SOD  diukur melalui reaksi dismutasi ion superoksida menjadi O 2 dan  H 2 O 2 .  Tabel  4.2  menunjukkan  hasil aktivitas  SOD  pada  serum  tikus  kelompok kontrol,  kelompok  DMT1,  kelompok  terapi ekstrak  biji  mahoni  dengan  dosis  100;  250;  dan 400  mg/KgBB.  Berdasarkan  Tabel  4.2  dapat diketahui  bahwa  SOD  pada  serum  kelompok
DMT1  lebih  rendah  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol.  Terdapat  perbedaan  yang signifikan  (p>0,05)  antara  aktivitas  SOD  serum kontrol  dan  SOD  serum  DMT1.  Begitu  juga dengan kelompok terapi dosis 100; 250; dan 400 mg/KgBB yang memiliki nilai SOD serum lebih tinggi  daripada  kelompok  DMT1.  Akan  tetapi, kelompok  terapi  dosis  400  mg/kgBB  berbeda secara  signifikan  (p>0,05)  dengan  kelompok kontrol,  sehingga  dosis  400  mg/KgBB  dapat dikatakan  masih  belum  dapat  menaikkan aktivitas  SOD  pada  penyakit  DMT1  seperti keadaan normal.
Pada  pasien  diabetes,  fungsi  glutathione berkurang  sebagai  penangkap  radikal  bebas atau sebagai  kosubstrat  untuk  glutathione  peroxide (GPx)  dimana  akan  menyebabkan  penurunan konsentrasi  GSH  dengan  peningkatan  stress oksodatif. Pada pasien diabetes, hasil autooksidasi glukosa menghasilkan pembentukan hidrogen  peroksida  yang  akan  meng-inaktivasi SOD.  Oleh  karena  itu,  hidrogen  peroksida  yang terakumulasi  pada  penderita  penyakit  diabetes mellitus akan mengakibatkan penurunan aktivitas SOD (Shinde, dkk., 2011).
Berdasarkan  Gambar  2,  menunjukkan bahwa  dengan  meningkatkan  dosis  sampai  400 mg/KgBB,  dapat  meningkatkan  SOD  sampai 84,487  unit/ml  walaupun  masih  berbeda  nyata secara signifikan (P<0,05). Hal tersebut dimungkinkan  kurangnya  waktu  terapi  yang diberikan,  sehingga  dosis  400  mg/KgBB  masih belum dapat menjadi dosis optimum.
Gambar 2. Perbandingan  Aktivitas  Serum  SOD pada  Tikus  Kontrol,  DM  Tipe  1  dan Terapi Ekstrak Metanol Biji Mahoni
Superoksida  dismutase  merupakan  enzim antioksidan  endogen  yang  berfungsi  untuk mengontrol  stress  oksidatif  dalam  tubuh.  Pada penyakit diabetes mellitus, keadaan hipergliemia akan menyebabkan peningkatan produksi Reactive  Oxygen  Species (ROS).  Jika  ROS berlebihan  dalam  tubuh,  maka  akan  memicu
terjadinya stress oksidatif, yaitu keadaan dimana jumlah  radikal  bebas  yang  diproduksi  melebihi kapasitas  tubuh  untuk  menangkalnya.  SOD berperan untuk  meredam  stress  oksidatif  dengan merubah  anion  superoksida  (O 2 * )  menjadi hydrogen  peroksida  (H 2 O 2 )  dan  oksigen  (O 2 ) sehingga  dapat  melindungi  sel-sel  β  pankreas (Wiryana, 2008).
Dengan  adanya  paparan  stress  oksidatif pada  tikus  DMT1,  enzim  superoksida  dismutase (SOD)  sebagai  antioksidan  endogen  akan meningkat  aktivitasnya  untuk  mengontrol  stres oksidatif  tersebut.  Apabila  stres  oksidatif  telah dapat  diatasi,  maka  aktivitas  SOD  kembali normal.

## KESIMPULAN
Pemberian  terapi  ekstrak  metanol  biji mahoni  dengan  dosis  100;  250  dan  400 mg/KgBB  pada  tikus  yang  diinduksi  MLD-STZ mampu  menaikkan  aktivitas  SOD  pada  serum tikus  walaupun  tidak  secara  signifikan  dengan masing-masing  aktivitas  70,04;  79,29  dan  84,49 Unit/ml.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian ini adalah bagian dari penelitian payung  penelitian  Prof.  Dr.  Aulanni’am,  drh, DES  pengganti  terapi  tubuh  untuk  penyakit diabetes mellitus (DM).

## DAFTAR PUSTAKA
1. Winasis,  B.  E.  2009.  Hubungan  antara Konsep  Diri  dengan  Depresi  pada  Pasien Diabetes Mellitus di Rumah Sakit Parancimantoro  Wonogiri. Skripsi .  Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Suyono.  2009.  Kecenderungan  Peningkatan Pasien  Diabetes  Mellitus. Penatalaksanaan Diabetes Terpadu . FKUI: Jakarta.
3. Setyadian.  2010. Prevalensi  Penderita Diabetes  Mellitus dalam  Seminar  Diabetes Mellitus. Harian Kompas: Yogyakarta.
4. Patel,  S.S.,  Shah,  R.S.  and  Goyal,  R.K.
2009. Antihyperglicemic Antihyperlipidemic and Antioxidant Effects of Dihar, a Polyherbal Ayurdevic Formulation  in  Streptozotocin  Imduced Diabetics Rats. Indian Journal of
Experimental Biology . 47:564-570.
5. Dabla,  P.K.,  2010.  Renal  function  in diabetic  nephropathy. World  J  Diabetes . 1(2):48-56.
6. Aulanni’am.  2011.  Superoksida  Dismutase (SOD)  Activity  and  Histological  Pancreas
of Type 1 Diabetes Mellitus Rats which Get the  Temu  Giring  ( Curcuma  heyneana ) Extract  Treatment. Media  Kedokteran Hewan . 27(1).
7. Daroux, M., Grossin, N., and Boulanger, E.
2012. AGE, RAGE and Diabetic
Nephropathy. Touch Medical Media . 84-88.
8. Sumali.  2012.  Aneka  Herbal  Penurun  Gula Darah. Harian Kompas : Yogyakarta.
9. Hariana,  A.  2007. Tumbuhan  Obat  dan Khasiatnya . PT. Penebar Swadaya: Jakarta.
10. Dutta,  M.,  Raychaudhuri.,  Chakroborty,  R. and  Maji,  D.  2011.  Role  of  Diet  and  Plants on  Diabetic  Patients  a  Critical  Appraisal. Science and Culture . 77(3-4):115-122.
11. De,  D.,  Chatterjee,  K.,  Ali,  K.M.,  Bera, T.K.,  dan    Ghosh,  D.  2010.  Antidiabetic potentially of the aqueos-methanolic extract of seed of Swietenia mahagoni (L.) Jacq. in streptozotocin-induced  diabetic  male  albino rat:  a  correlative  and  evidence-based approach with antioxidative and antihyperlipidemic activities. Evidence- Based  Complementary  and  Alternative Medicine .
12. Shinde,  S.N.,  Dhadke,  V.N.,  and  Suryakar, A.N. 2011. Evaluation of oxidative stress in type 2 diabetes mellitus and follow-up along with  vitamin  E  supplementation. Ind  J  Clin Biochem . 26(1):74-77.
13. Wiryana,  M.  2008. Peranan  Terapi  Insulin Intensif  terhadap  SOD,  TNF-α  dan  IL-6 pada Penderita Kritis dengan Hiperglikemia . Pasca S3 Universitas Udayana: Denpasar.