FORMULASI DAN UJI EFEKTIVITAS KRIM ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN BELUNTAS ( Pluchea indica Less .) TERHADAP BAKTERI Propionibacterium acnes
Eunike Suru 1) , Paulina V.Y Yamlean 1) , Widya Astuty Lolo 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Beluntas  plants  contain  flavonoid  compounds,  which  are  know  to  have  antibacterial  activity.  This study aims to make a formulate and test the physical stability of antibacterial cream prepared from Beluntas Leaf extract (Pluchea indica Less.) with three variations in extract concentrations of 5%, 10% and 15%, and test the effectiveness of antibacterial against Propionibacterium acnes bacteria. The method of this research is  experimental  laboratory  research.  Beluntas  leaves  extract  (Pluchea  indica  Less.)  was  obtained  by maceration  using  96%  of  ethanol  and  formulated  into  cream  preparations  with  various  extract concentrations. The result showed that Beluntas Leaf extract cream fulfilled the requirements of the physical properties of cream preparations, which included organoleptic test, homogeneity, pH, dispersion, adhesion, emulsion  type  and  cycling  test.  On  the  result  of  antibacterial  activity  testing,  the  average  diameter  of  the clear  zone  of  prepared  cream  of  Beluntas  leaf  extract  was  at  concentration  of  5%,  10%  and  15%, respectively  ie  6.16  mm,  7.83  mm,  10.16  mm.  Based  on  the  classification  of  antibacterial  category,  the inhibiting  ability  of  the  test  bacteria  by  5%  and  10%  cream  was  categorized  as  moderate,  and  15%  was categorized as strongly which is the most effective cream inhibiting the activity of Propionibacterium acnes.
Keywords : Beluntas leaves, antibacterial cream, Propionibacterium acnes

## ABSTRAK
Tanaman  Beluntas    merupakan  salah  satu  tanaman    yang  berkhasiat  obat.  Tanaman  Beluntas mengandung senyawa flavonoid yang diketahui memiliki aktivitas antibakteri. Penelitian ini bertujuan untuk membuat formula dan uji stabilitas fisik sediaan krim antibakteri dari ekstrak Daun Beluntas ( Pluchea indica Less .) dengan tiga variasi konsentrasi ekstrak yaitu 5%, 10% dan 15%, serta menguji efektivitas antibakteri terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes. Metode  penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental laboratorium. Ekstrak daun Beluntas ( Pluchea indica Less .) diperoleh dengan cara maserasi dengan pelarut etanol  96%  dan  diformulasikan  menjadi  sediaan  krim  dengan  variasi  konsetrasi  ekstrak.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  krim  ekstrak  Daun  Beluntas  memenuhi  persyaratan  sifat  fisik  sediaan  krim  yang meliputi uji organoleptik, homogenitas, pH, daya sebar, daya lekat, tipe emulsi dan cycling test .Pada hasil pengujian  aktivitas  antibakteri,  diameter  rata-rata  zona  bening  sediaan  krim  ekstrak  daun  beluntas  pada konsetrasi  5%,  10%  dan  15%  berturut  –turut  yaitu  6,16  mm,  7,83  mm,  10,16  mm.  Berdasarkan  klasifikasi kekuatan daya antibakteri, maka kemampuan penghambatan bakteri uji oleh krim konsentrasi 5% dan 10% dikategorikan  sedang,  serta  15%  dikategorikan  kuat  yang  merupakan  krim  paling  efektif  menghambat aktivitas bakteri Propionibacterium acnes.
Kata kunci : Daun Beluntas, krim antibakteri, Propionibacterium acnes .

## PENDAHULUAN
Indonesia  memiliki  beraneka  ragam tanaman yang diyakini oleh masyarakat dapat menyembuhkan penyakit. Dalam tanaman ada banyak komponen kimia yang dapat digunakan  sebagai  obat  yang  disebut  sebagai tumbuhan berkhasiat obat. Masyarakat Indonesia telah lama menggunakan tumbuhan berkhasiat obat untuk menyembuhkan penyakit. Seiring berjalannya waktu pengetahuan  tentang  tumbuhan  obat  makin berkembang,  kini  tanaman  obat  telah  digali manfaatnya.  Pengetahuan  tentang  mengolah tumbuhan  berkhasiat  obat  telah  diwariskan secara  turun  temurun  dari  satu  generasi  ke generasi  berikutnya.  (Sibarani,  2013).  Salah satu tanaman  yang berkhasiat obat yang telah lama dikenal oleh masyarakat Indonesia sejak dahulu, yaitu tanaman Beluntas.
Salah  satu  tanaman    yang  berkhasiat obat yang telah lama dikenal oleh masyarakat Indonesia  sejak  dahulu,  yaitu  tanaman Beluntas.  Beluntas  umumnya  tumbuh  liar  di daerah  kering  pada  tanah  yang  keras  dan berbatu, atau ditanam sebagai tanaman pagar. Daun beluntas mengandung alkaloid, flavonoid,  tanin,  minyak  atsiri,  natrium, kalium, aluminium, kalsium, magnesium, dan fosfor.  Sedangkan  akarnya  mengandung flavonoid  dan    tannin.  Daun  Beluntas  berbau khas  aromatis  dan  rasanya  getir,  berkhasiat untuk  meningkatkan  nafsu  makan  (stomatik), penurun demam (antipiretik), peluruh keringat (diaforetik),  penyegar,  TBC  kelenjar,  nyeri pada  rematik  dan  keputihan  (Dalimartha, 1999).
Penelitian  dan  menunjukkan  bahwa Daun  Beluntas  memiliki  aktivitas  antibakteri karena  adanya  senyawa  flavonoid,  hasil penelitian  yang  dilakukan  oleh  Anggita (2015),  diketahui  bahwa  ekstrak  Daun Beluntas  dapat  menghambat  pertumbuhan
bakteri Propionibacterium acnes pada konsetrasi 1% sebesar 9 mm .
Propionibacterium  acnes merupakan salah  satu  bakteri  penyebab  Jerawat.  Bakteri ini  tidak  patogen  pada  kondisi  normal,  tetapi bila  terjadi  perubahan  kondisi  kulit,  maka bakteri  tersebut  berubah  menjadi  invasif. Sekresi kelenjar keringat dan kelenjar sebasea menghasilkan  air,  asam  amino,  urea,  garam dan asam lemak  yang menjadi sumber nutrisi bagi bakteri. Bakteri ini berperan pada proses kemotaktik inflamasi dan pembentukan enzim lipolitik  pengubah  fraksi  sebum  menjadi massa  padat,  yang  menyebabkan  terjadinya penyumbatan  pada  saluran  kelenjar  sebasea (Jawetz,2000).
Berdasarkan  latar  belakang  tersebut maka  peneliti  tertarik  untuk  melakukan penelitian tentang formulasi dan uji efektivitas  antibakteri  krim  ekstrak  Daun Beluntas  terhadap  bakteri Propionibacterium acnes. Bentuk sediaan krim lebih disukai oleh masyarakat  karena  mudah  dibersihkan  dan mudah  menyebar  (Ansel,  1989).  Penggunaan sediaan  krim  juga  dapat  memberikan  efek dingin,  mengkilap  dan  melembabkan  kulit. Sediaan  krim  tipe  M/A  dibuat  dengan  cara mendispersikan  minyak  dan  air.  Keunggulan kim  tipe  M/A  yaitu  memberikan  efek  yang optimum  karena  mampu  menaikkan  gradien konsentrasi  zat  aktif  yang  menembus  kulit sehingga absorbsi perkutan menjadi meningkat (Engelin,2013).
Keuntungan sediaan  krim  antara  lain  lebih  mudah diaplikasikan,  lebih  nyaman  digunakan  pada wajah tidak lengket dan mudah dicuci dengan air (Sharon et al , 2013).

## METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan November 2018 – April 2019 di Laboratorium  Penelitian  Farmasi  Lanjut
Program  Studi  Farmasi  dan  Laboratorium
Biologi  Dasar  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu
Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi
Manado.

## Bentuk Penelitian
Penelitian
yang dilakukan bersifat eksperimental laboratorium. Alat dan Bahan
a. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian  ini  ialah,  Erlenmeyer  (Pyrex®), tabung  reaksi  (Iwaki  Asahi  glass®),  kertas saring,  oven  (Infus  HT),blender  (Philips), batang  pengaduk,  gelas  ukur,  corong,  gelas kimia  (pyrex),    timbangan  analitik  (AE Adam®), hot  plate (Nesco®Lab),  ayakan (Eckhardt),  lumpang  dan  alu,  inkubator (Ecocell), Laminar  Air  Flow (LAF),cawan petri,  pH  meter  (Elmetron),  autoklaf  (ALP), pipet  mikro  (eccopipette™),  pot  krim,  sudip, mistar,  jangka  sorong,  pecadang,  jarum  ose, pingset, spritus, kamera.

## b. Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  yaitu  daun Beluntas,  Etanol  96%, Nutrien  Agar (NA), asam  stearat,    adeps  lanae,  nipagin,  nipasol, paraffin cair, TEA, aquades, krim Klindamisin,  H 2 SO 4 ,  BaCl 2 .H 2 O  1,175%, NaCl  0,9%, alumunium  foil. Bakteri  yang digunakan yaitu Propionibacterium acnes . Prosedur Penelitian

## Ekstraksi
Proses  ekstraksi  dilakukan  dengan menggunakan  metode  maserasi.  Serbuk  daun Beluntas  ditimbang    sebanyak  200  g dimasukkan  dalam  wadah,  ditambahkan larutan etanol 96% sebanyak 800 mL, dengan perbandingan 1:4, selanjutnya ditutup dengan penutup  wadah  didiamkan  selama  5  hari sambil sesekali diaduk. Setelah 5 hari ekstrak disaring  dengan  menggunakan  kertas  saring dan menghasilkan filtrat I dan residu I. Residu yang  ada  kemudian  diremaserasi  dengan pelarut etanol 96%   sebanyak 600 mL dengan perbandingan  1:3,  ditutup  dengan  penutup wadah  didiamkan  selama  2  hari  sambil sesekali  diaduk.  Setelah  2  hari,  sampel disaring  sehingga  menghasilkan  filtrat  2  dan residu  2.  Filtrat  1  dan  filtrat  2  digabungkan lalu dievaporasi menggunakan alat evaporator kemudian  dimasukkan  dalam  oven  dengan suhu  40 0 C  selama  2  hari,  sehingga  diperoleh ekstrak  kental.  Ekstrak  kemudian  ditimbang dan  diperoleh  sebanyak  17,8  gram  ekstrak kental.  Ekstrak  kental  kemudian  disimpan dalam wadah gelas tertutup sebelum digunakan untuk pengujian.

## Formulasi  dan  Pembuatan  Krim  Ekstrak daun Beluntas
Pada penelitian ini dibuat sediaan krim ekstrak  etanol  daun  Beluntas  dengan  tiga variasi  konsentrasi,  yaitu  5%,10%  dan  15% dapat dilihat pada Tabel 1.
Komponen Konsentrasi 5% Konsentrasi 10% Konsentrasi 15% Ekstrak daun Beluntas 2,5 g 5 g 7,5g Asam stearate TEA 7,25 g 0,75 g 7,25 g 0,75 g 7,25 g 0,75 g Adeps lanae 1,5 g 1,5 g 1,5 g Parrafin Cair 12,5 g 12,5 g 12,5 g Nipagin 0,05 g 0,05 g 0,05 g Nipasol 0,025 g 0,025 g 0,025 g
Tabel 1. Formulasi Krim Ekstrak Etanol Daun Beluntas 5%,10%,15%

## Pembuatan Krim
Cara  pembuatan  yakni  semua  bahan yang  digunakan  ditimbang  terlebih  dahulu sesuai  dengan  formulasi.  Basis  krim  yang dibuat terdiri dari dua fase, yaitu fase minyak (paraffin  cair,adeps  lanae,  asam  stearat  dan nipasol)  dan  fase  air  (Aquades,  TEA, nipagin).  Fase-fase  tersebut  dipanaskan  pada suhu  70 0 C ditangas  air.  Fase  minyak dipindahkan  ke  dalam  lumpang  yang  telah berisi  fase air diaduk hingga terbentuk  massa krim,ekstrak kental daun Beluntas konsentrasi 5%  dimasukkan  ke  dalam  basis  krim  diaduk sampai  homogen  kemudian  disimpan  dalam wadah  krim.  Untuk  pembuatan  krim  dengan konsentrasi  10%  dan  15%  dilakukan  dengan cara  yang  sama  dengan  pembuatan  krim ekstrak etanol daun Beluntas.  Setelah itu, di

## Evaluasi sediaan Krim Ekstrak daun Beluntas
Pengujian  stabilitas  sediaan  krim ekstrak daun Beluntas menggunakan beberapa jenis  pengujian  yang  merupakan  persyaratan kelayakan sediaan krim diantaranya adalah : a. Uji Organoleptis Pemeriksaan ini bertujuan untuk mengamati  ada  tidaknya  perubahan  bentuk, warna  dan  bau.  Krim  yang  baik  adalah  krim yang  memiliki  ciri  organoleptis  warna  putih, tidak  berubah  warna,  basis  dan  bau  dalam penyimpanan (Ansel,1989).
b. Uji pH
Krim  yang  akan  diamati    disiapkan, kemudian  diukur  pHnya  menggunakan  pH meter,  dimana  pH  krim  harus  sesuai  dengan pH kulit yaitu 4,5-6,5 (Tranggono dan Latifa, 2007).
c. Uji daya sebar Ditimbang  1  gram  krim,  diletakkan  di tengah  cawan  petri  yang  berada  dalam  posisi terbalik. Diletakkan sekeping objek transparan  yang  lain  diatas  krim,  dibiarkan  1
menit.  Kemudian  ditambahkan  200  gram beban  tambahan,  didiamkan  1  menit.  Dicatat diameter  krim  yang  menyebar.  Daya  sebar yang baik yaitu 5,6-6,4 cm (Rajalakshmi,2009). d. Uji Homogenitas Uji Homogenitas dilakukan dengan meletakkan  krim  secukupnya  diantara  dua kaca objek, kemudian diamati adanya butiran kasar atau tidak (Setiawati, 2014).
e. Uji Daya Lekat
Uji  daya  lekat  dilakukan  dengan  cara  0,5 g krim diletakkan diatas dua gelas objek yang telah  ditentukan,  kemudian  ditekan  dengan beban  250  g  selama  5  menit.  Setelah  itu dipasang  objek  gelas  pada  alat  uji  lalu ditambahkan  beban  80  g  pada  alat  uji. Kemudian  dicatat  waktu  yang  dibutuhkan beban tersebut untuk memisahkan kedua kaca tersebut (Sikawin,2018).
f. Uji Tipe Emulsi
Uji  tipe  emulsi  menggunakan  metode pengenceran. Krim yang telah dibuat dimasukkan  kedalam  gelas  kimia  kemudian diencerkan dengan aquadest, jika emulsi tidak tercampur  dengan  air  maka  tipe  emulsinya A/M,  jika  tercampur  dengan  air  maka  tipe emulsinya M/A (Farida et al, 2016).
g. Cycling Test
Salah  satu  cara  mempercepat  evaluasi kestabilan fisik adalah dengan metode dengan cycling  test  ini  dilakukan  sebanyak  6  siklus. Sediaan  krim  disimpan  pada  suhu  dingin  ± 4 0 C  selama  12  jam  lalu  dikeluarkan  dan ditempatkan  pada  suhu  ±  40 0 C.  proses  ini dihitung  1  siklus.  Kondisi  fisik  krim dibandingkan  selama  percobaan  dengan sediaan sebelumnya (Dewi, 2010).

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Uji aktivitas antibakteri terhadap krim ekstrak  Etanol  daun  Beluntas  menggunakan bakteri Propionibacterium acnes dengan cara
Aquades ad 50 50 50
difusi agar. 3 sumuran untuk setiap konsentrasi krim ekstrak Etanol daun Beluntas 5%, 10% dan 15% dan dua sumuran
lain  untuk  kontrol  positif  (krim  klindamisin) dan kontrol negatif (basis krim).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## HASIL
Tabel 2. Hasil Uji Organoleptik Krim Ekstrak Etanol Daun Beluntas
Tabel 3. Hasil Uji Homogenitas Krim Ekstrak Daun Beluntas
Tabel 4. Hasil Uji pH Krim Ekstrak Etanol Daun Beluntas
Sebelum Penyimpanan Setelah Penyimpanan Krim                       Ph pH Basis                         6,05 F5%                          5,74 F10%                        5,77 F15%                        5,56 5,88 5,68 5,54 5,48
Tabel 5. Hasil Uji Daya Sebar Krim Ekstrak Etanol Daun Beluntas Sebelum Penyimpanan Setelah Penyimpanan Krim              Diameter Sebar Krim Diameter Sebar Krim Sebelum Penyimpanan Setelah Penyimpanan Krim   Bau    Warna    Bentuk Bau          Warna             Bentuk Basis Khas         Putih       Semi Padat Minyak Hewani F5%   Khas        Hijau      Semi padat
Ekstrak    Muda
F10% Khas        Hijau      Semi padat Ekstrak F15% Khas        Hijau      Semi padat Ekstrak     Tua Khas           Putih               Semi Padat Minyak Hewani Khas            Hijau             Semi padat Ekstrak Khas           Hijau Tua       Semi padat Ekstrak Khas           Hijau Tua       Semi padat Ekstrak Sebelum Penyimpanan Setelah Penyimpanan Krim              Homogenitas Homognenitas Basis                Homogen F5%                 Homogen F10%               Homogen F15%               Homogen Homogen Homogen Homogen Homogen
Basis                       6,0 cm F5%                        5,7 cm F10%                      5,6 cm F15%                      5,6 cm 6,2 cm 5,9 cm 5,8 cm 6,0 cm
Tabel 6. Hasil Uji Daya Lekat Krim Ekstrak  Etanol Daun Beluntas
Sebelum Penyimpanan Setelah Penyimpanan Krim                     Waktu Waktu Basis                      9,23 detik F5%                       8,04 detik F10%                     6,11 detik F15%                     5,40 detik 8,05 detik 6,07 detik 5,35 detik 4,45 detik
Tabel 7. Pengujian Tipe Emulsi Krim Ekstrak Etanol Daun Beluntas Sebelum Penyimpanan Setelah Penyimpanan Krim                  Tipe Emulsi Tipe Emulsi Basis                 Minyak dalam Air F5%                  Minyak dalam Air F10%                Minyak dalam Air F15%                Minyak dalam Air Minyak dalam Air Minyak dalam Air Minyak dalam Air Minyak dalam Air
Tabel 8. Hasil Pegujian Mikrobiologi Krim Ekstrak Etanol Daun Beluntas Formulasi Diameter daerah hambatan (mm) Ulangan I I Ulangan
II Ulangan III
Rata-rata K (-) 0 0 0 0 K (+) 25,00 25,00 25,00 25,00 F5% 5,00 6,50 7,00 6,16 F10% 8,50 8,00 7,00 7,83 F15% 10,00 10,50 10,00 10,16

## PEMBAHASAN
Penelitian ini dilakukan dengan memformulasikan  sediaan  krim  antibakteri dengan  menggunakan  ekstrak  daun  dari Tanaman Beluntas. Tanaman Beluntas mengandung    senyawa  alkaloid,  flavonoid, tanin, minyak atsiri, natrium, kalium, alumunium,  kalsium,  magnesium  dan  fosfor.
Tanaman    Beluntas  memiliki  sifat  antibakteri karena  adanya  senyawa  flavonoid  (Purnomo, 2001).
Proses  awal  daun  Beluntas  dibuat menjadi  simplisia  dengan  cara  pengeringan sampel.  Proses  pengeringan  ini  bertujuan untuk  menurunkan  kadar  air  dalam  daun Beluntas,  mengurangi  kadar  air  juga  dapat
mencegah reaksi enzimatik dimana kandungan  kimia  yang  terkandung  dalam bahan  diubah  menjadi  produk  lain  atau dirusak oleh enzim. Ekstraksi terhadap serbuk simplisia  daun  Beluntas  dilakukan  dengan menggunakan  ekstraksi  cara  dingin,  yaitu metode  maserasi..  Proses  ekstraksi  dilakukan dengan  menggunakan  pelarut  Etanol  96% karena pelarut ini menyari hampir keseluruhan  kandungan  simplisia  baik  non polar,semi polar maupun polar (Iswanti,2009).  Pelarut  ini  bersifat  selektif, tidak  beracun  dan  bersifat  universal  yang cocok  untuk  mengekstrak  semua  golongan senyawa  metabolit  sekunder  (Kristanti et al, 2008).
Pengujian  stabilitas  fisik  terhadap Sediaan  Krim  Ekstrak  Etanol  Daun  Beluntas pada  konsetrasi  berbeda  yaitu  5%,  10%  dan 15%.  Pengujian  ini  meliputi  uji  organoleptik, uji  homogenitas,  uji  pH,daya  sebar,  daya lekat,  tipe  emulsi  dan cycling  test. Pengujian fisik ini bertujuan untuk melihat stabilitas dan kelayakan suatu sediaan.
Pengujian organoleptik meliputi bentuk,  warna  dan  bau.  Hasil  pengamatan menunjukkan  bahwa  semua  formulasi  krim yang dihasilkan berbentuk semipadat karakteristik  dari  krim  pada  umumnya, berwarna  dan  memiliki  bau  khas  Tanaman Beluntas. Semakin tinggi penambahan konsentrasi  ekstrak  daun  Beluntas,  maka semakin  kuat  bau  yang  dihasilkan  dan  warna krim berubah. Hal  ini tampak dari perubahan warna  dari  krim,  semakin  tinggi  kadar konsetrasi yang terkandung, maka warna krim akan    semakin  hijau.  Begitu  pula  halnya dengan  bau    khas  Tanaman  Beluntas  yang tercium  dari  krim  konsetrasi  5%,  10%  dan 15%.  Semakin  tinggi  konsentrasi,  maka semakin tercium bau khas Tanaman Beluntas. Setelah dilakukan penyimpanan terjadi perubahan  warna  pada  sediaan  krim  dari warna  hijau  muda  menjadi  hijau  gelap  ini
dapat  diartikan  bahwa  krim  ekstrak  daun Beluntas  memiliki  stabilitas  yang  tidak  baik dalam  penyimpanan.  Namun  bentuk  dan  bau dari  krim  tetap  sama  pada  waktu  sebelum penyimpanan dan sesudah penyimpanan. Pengujian homogenitas bertujuan untuk  melihat  dan  mengetahui  tercampurnya bahan-bahan  sediaan  krim  sehingga  tidak terlihat adanya butiran-butiran kasar. Pengujian  dilakukan  terhadap  basis  krim  dan krim  ekstrak  daun  Beluntas  konsentrasi  5%, 10%  dan  15%.  Hasil  pengamatan  pada  basis krim  sebelum  dan  setelah  penyimpanan menunjukkan  susunan  yang  homogen  dan dari  ketiga  formulasi  sediaan  krim  daun Beluntas  sebelum  dan  sesudah  penyimpanan menunjukkan  susunan  yang  homogen  (  tidak adan  butiran  kasar)  Hal  ini  sesuai  dengan persyaratan homogenitas krim yaitu menunjukkan  susunan  yang  homogen  serta tidak  adanya  butiran  kasar  pada  krim (Anonim, 1986).
Pengujian  pH  pada  krim  untuk mengetahui kadar asam dan basa dari sediaan krim.  Nilai  pH  untuk  sediaan  topikal  harus sesuai  dengan  pH  kulit  yaitu  4,5-6,5. Pengujian pH pada sediaan krim menggunakan pH meter dengan memasukkan alat pH meter kedalam krim yang telah dibuat .Hasil pengukuran pH krim sebelum penyimpanan  didapatkan  hasil  untuk  basis krim 6,05 , krim dengan konsentrasi 5% niali pH  5,74,  krim  dengan  konsentrasi  10%    nilai pH  5,77  dan  untuk  krim  dengan  konsentrasi 15%  nilai  pH  5,56.  Pengukuran  pH  setelah penyimpanan  krim    untuk  basis  krim  5,88 konsentrasi  5%  niali  pH  5,68,  konsentrasi 10% nilai  pH 5,54, konsentrasi  15% nilai  pH 5,48  dan  terjadi  penurunan  pH  setelah penyimpanan  namun  masih  sesuai  dengan persyaratan pH sediaan yaitu 4,5-6,5 sehingga aman digunakan pada kulit.
Pengujian  daya  sebar  merupakan pengujian  yang  dilakukan  untuk  mengetahui
kemampuan penyebaran krim pada permukaan  kulit  dimana  diharapkan  krim mampu  menyebar  dengan  mudah  pada  saat diaplikasikan  pada  permukaan  kulit.  Daya sebar  5-7  cm  menunjukkan  konsistensi  yang sangat nyaman dalam penggunaan (Garg et al , 2002).  .Hasil  pengujian  daya  sebar  untuk sediaan krim sebelum dilakukan penyimpanan, basis krim 6,0 cm,  konsentrasi 5%  5,7  cm,  konsentrasi  10%  5,6  cm  dan konsetrasi 15% yaitu 5,6 cm. Hasil pengujian daya sebar krim setelah dilakukan penyimpanan  untuk  basis  krim  6,2  cm konsentrasi  5%  5,9  cm,  konsentrasi  10%  5,8 cm  dan untuk  konsentrasi  15% 6,0  cm  . Dari hasil  uji  daya  sebar  sebelum  dan  sesudah penyimpanan  dengan  menggunakan  beban yang sama terjadi perubahan yaitu daya sebar meningkat  sesudah  penyimpanan  hal  ini terjadi  karena  perubahan  viskositas  dapat merubah  daya  penyebaran,  semakin  menurun viskositas maka semakin besar daya penyebarannya.
Pengujian  daya  lekat  sediaan  krim ekstrak  daun  Beluntas  dilakukan  untuk mengetahui  waktu  yang  dibutuhkan  krim tersebut untuk  melekat pada kulit. Daya lekat yang  baik  memungkinkan  krim  tidak  mudah lepas  dan  semakin  lama  melekat  pada  kulit, sehingga  dapat  menghasilkan  efek  yang diinginkan.  Persyaratan  daya  lekat  yang  baik untuk sediaan topikal adalah lebih dari 4 detik (Rachmalia et  al ,  2016).  Hasil  pengukuran daya  lekat  krim  ektsrak  daun  Beluntas  pada tiga  variasi  konsentrasi  sebelum  dan  sesudah penyimpanan  memenuhi  syarat  topikal  yang baik.
Pengujian  tipe  emulsi  menggunakan metode pengenceran dengan cara mengencerkan  1  g  krim  kedalam  100  mL aquadest dan diaduk hingga homogen, apabila krim  tersebut  larut  dalam  aquades  maka  tipe krim  ini  yaitu  minyak  dalam  air  (M/A).  Hal ini  disebabkan  karena  jumlah  fase  terdispersi
(minyak/lemak)  yang  digunakan  dalam  krim lebih  kecil  dari  fase  pendispersi  (fase  air), sehingga fase minyak akan terdispersi merata ke  dalam  fase  air  dan  membentuk  emulsi minyak dalam air dengan bantuan emulgator.
Metode  yang    digunakan  untuk  uji aktivitas  antibakteri  adalah  difusi  agar menggunakan  sumuran    dengan    media Nutrien  Agar (NA).  Metode  ini  dilakukan untuk  mengetahui  besarnya  diameter  zona bening pada bakteri Propionibacterium acnes setelah  inkubasi  selama  24  jam. Daya hambat  menurut  Davis  dan  Stout  (1971) terbagi  atas  :  sangat  kuat  (zona  hambat  > 20mm),  kuat  (zona  hambat  10-20  mm), sedang  (zona  hambat  5-10  mm)  dan  lemah (zona  hambat  <5  mm).  Pengujian  aktivitas antibakteri  ditentukan  berdasarkan  diameter zona  hambat  disekitar  pencadang  yang  berisi larutan  uji.  Pengujian  krim  ekstrak  daun Beluntas  dengan  konsentrasi  5%,  10%  dan 15% menunjukan aktivitas antibakteri dengan terbentuknya zona hambat  disekitar sumuran. Diameter  zona  hambat  diukur  menggunakan jangka  sorong  dengan  cara  mengukur  secara horizontal  dan  vertikal  dan  hasil  yang didapatkan  dikurangi  diameter  sumuran sebesar  7  mm.  Krim  dengan  ekstrak  daun Beluntas    konsentrasi  5%  memberikan  daya hambat sedang dengan zona hambat 6,16 mm. Krim ekstrak daun  Beluntas konsentrasi 10% memberikan  daya  hambat  sedang  dengan zona  hambat  7,83  mm,  dan  untuk  Krim ekstrak  daun  Beluntas  konsentrasi  15% memberikan  daya  hambat  kuat  dengan  zona hambat 10,16 mm. Kontrol positif memberikan  daya  hambat  kuat  dengan  zona hambat  25,00  mm  dan  kontrol  negatif  tidak memberikan daya hambat karena menghasilkan  zona  hambat  0  mm.  Dari  hasil tersebut  dapat  dilihat  bahwa  krim  ekstrak daun  Beluntas  dengan  konsentrasi  5%,  10% dan  15%  dapat  menghambat  aktivitas  bakteri Propionibacterium  acnes. Pada  penelitian
sebelumnya,  hasil  uji  antibakteri  ekstrak etanol  daun  Beluntas,  mempunyai  KHM  1% yaitu  9  mm.  Pada  sediaan  krim  yang  telah dibuat,  krim  yang  sudah  dicampur  dengan ekstrak  etanol  daun  Beluntas  memiliki  daya hambat namun semakin menurun dibandingkan  dengan  ekstrak  etanol  daun Beluntas.  Hal  ini  disebabkan  karena    basis sulit  berdifusi  sehingga  zat  aktif  tidak  dapat lepas  dengan  baik  dari  basis  sehingga  daya hambat  terhadap  bakteri    semakin  menurun. Adanya  zona  hambat  yang  terbentuk  pada kim  ekstrak  daun  Beluntas  karena  adanya senyawa antibakteri pada daun Beluntas.Senyawa tersebut merupakan senyawa flavonoid. Mekanisme kerja flavonoid sebagai antibakteri adalah membentuk senyawa kompleks dengan protein  ekstraseluler  dan  terlarut  sehingga dapat  merusak  membran  sel  bakteri  dan diikuti dengan keluarnya senyawa intraseluler (IndoBIC,  2005  dalam  Nuria et  al ,  2009).
Sitoplasma  dalam  sel  dibatasi  oleh  membran sitoplasma,  yang  berperan  sebagai  barrier permeabilitas  selektif  fungsi  transport  aktif dan  kemudian  mengontrol  komposisi  internal sel.  Jika  fungsi  integritas  sel  membrane sitoplasma  dirusak,  makromolekul  dan  ion keluar  dari  sel,  kemudian  sel  rusak  atau terjadi kematian (Brooks et al , 2005).
Analisis  data  dapat  dilakukan  dengan menggunakan  uji statistic  one  way ANOVA dengan  tujuan  sebagai  dasar  pengambilan keputusan  dari  suatu  hipotesis.  Hasil  uji  one way  ANOVA  pada  penelitian  ini  yaitu menunjukkan adanya perbedaan antar perlakuan sig (0,000) < (0,05) artinya P-value <  α  (0,05),  maka  H 0 ditolak  H 1 diterima. Maka  terdapat  perbedaan  signifikan  zona bening  antara  basis  krim  dan  krim  ekstrak Etanol  daun  Beluntas    konsentrasi  5%,  10% dan  15%.  Pengujian  dilanjutkan  dengan  uji Duncan  untuk  melihat  perlakuan  mana  yang memberikan  efek  berbeda  atau  tidak  jauh
berbeda.  Dan  didapatkan  hasil  menunjukkan perbedaan  yang  signifikan  untuk  aktivitas antibakteri  pada  konsentrasi  5%,  10%,  15% dan  untuk  konsentrasi  15%  dengan  kontrol positif  didapatkan  hasil  yang  juga  signifikan, maka diperoleh hasil bahwa setiap konsentrasi memiliki  aktivitas  antibakteri  tetapi  yang paling  efektif  digunakan  ialah  krim  ekstak etanol daun Beluntas konsentrasi 15%.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa : 1.Ekstrak etanol daun Beluntas dapat diformulasikan  menjadi  sediaan  krim antibakteri  dengan  konsentrasi  5%,  10% dan  15%  yang  telah  memenuhi  syarat pengujian  organoleptik,  homogenitas,  pH, daya  sebar,  daya  lekat,  tipe  emulsi  dan cycling test .
2. Sediaan Krim ekstrak Etanol daun Beluntas dapat memberikan efek antibakteri terhadap  bakteri Propionibacterium  acnes dengan  zona  hambat  pada  konsentrasi  5% 6,16  mm,  konsentrasi  10%  7,83  mm  yang termasuk  kategori  daya  hambat  sedang, konsentrasi  15%  10,16  mm    dikategorikan kuat  yang  merupakan  krim  paling  efektif menghambat aktivitas bakteri Propionibacterium acnes.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lagi  untuk pengujian ditambahkan  uji lainnya seperti uji viskositas  terhadap  sediaan  krim  agar  dapat memenuhi semua parameter uji kualitas.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggita,R.H.,Tri,  C.,  Toni,  S.,dan  Rahayu,  I, L.2015.  Uji  aktivitas  antibakteri ekstrak daun  Beluntas
(Pluchea indica ( L .)) terhadap bakteri Propionibacterium  acnes penyebab
Jerawat. UINSGD Bandung . (9) :141-
144.
Anonim.1986. Sediaan Galenika . Departemen Kesehatan Republik Indonesia,Jakarta.
Ansel, H. 1989. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi Edisi ke-4 . UI Press, Jakarta.
Brooks,J.S.Butel.,S.A.Morse.2007.
Mikrobiologi Kedokteran .Salemba Medika,Jakarta.
Dalimartha,  S.  1999. Atlas  Tumbuhan  Obat
Jilid I . Trubus Agriwidya,Jakarta.
Davis,  W.W.,  Stout,  T.R.  1971.  Disc  plate method  of  microbiological  assay.
Journal  of  microbiology . 22 (4):659- 665.
Dewi,R.K.2010. Optimasi Formulasi Mikroemulsi Sediaan Hormon Testosteron  Undekanoat    [Skripsi]. Universitas Negeri Islam
Negeri Syarif Hidayatullah,Jakarta.
Engelin.2013.  Optimasi  Krim  Sarang  Burung
Walet  Putih  Tipe  M/A  Dengan Variasi    Emulgator  Sebagai  Pencerah Kulit  Menggunakan Simplex  Lattice Design .  [Skripsi].Fakultas  Kedokteran Universitas Tanjungpura,  Pontianak.
Farida,  Y.,  N.,  Nushalati.,  T.,  Qoriatul,.
A.2016. Formulasi dan Uji Stabilitas
Fisik   Krim  Susu  Kuda  Sumbawa dengan Emulgator Non Ionik dan Anionik. Jurnal JF FIK UINAM. (4):4 .
Garg, A., Aggarwal, D., Garg, S., Sigla, A. K. 2002. Spreading of semisolid Formulation: An Update. Pharmaceutical Technology. 84:102.
Iswanti,D.A.  2009.Uji  aktivitas  antibakteri Fraksi  N-heksan,Fraksi  Etil  Asetat dan Fraksi  Etanol  96%  Daun  Ekor
Kucing (Achalypha  Hispida  Burn.  F)
terhadap bakteri Staphylococcus aureus  ATCC  25923  secara  Dilusi [Skripsi]. Fakultas Farmasi
Universitas Setia Budi, Surakarta.
Jawetz,  E.,  Melnick,  J.  L.,  and  Adelberg,  E.
A.,  2000. Mikrobiologi  Kedokteran. Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran,  Universitas  Airlangga, Salemba Medika, Jakarta. Kristanti, A.N., Aminah.,M. Tanjung.,
B.,Kurniadi. 2008. Buku Ajar Fitokimia. Unair Press, Surabaya. Nuria, Maulia Cut., A. Faizatun., Sumantri. 2009. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol  Daun Jarak Pagar ( Jatropha  curcas L)  terhadap  Bakteri
Staphylococcus  aureus  ATCC  25923, Escherichia  coli  ATCC  25922,  dan Salmonella typhi ATCC 1408.Mediagro . 5:(2 ):26- 37.
Purnomo,M.  2001.Isolasi  Flavonoid  dari Daun  Beluntas  ( Pluchea  indica (L).) yang Mempunyai Aktivitas Antimikroba [Skripsi].  Universitas
Airlangga, Jakarta.
Rachmalia.,N,. Mukhlishah., I,. Sugihartini, N,  Yuwono.,  T,.  (2016).  Daya  iritasi dan  sifat  fisik  sediaan  salep  minyak atsiri bunga cengkih (Syzigum aromaticum) pada  basis  hidrokarbon. Jurnal  Majalah  Farmaseutik. 12:372- 376.
Rajalakshmi,G.N . 2009. Formulation and
Evaluation of Clotrimazole and Ichtammo  Ointment. International Journal of Pharma and Bioscience. 4 :10-12.
Setiawati,E.  2014.  Pengaruh  Peningkatan Konsentrasi  Setil  Alkohol  sebagai Pengental  Terhadap  stabilitas    Fisik Krim  Tipe  M/A  Ekstrak  Rimpang Jahe Gajah ( Zingiber Officinale Roscoe) [Skripsi]. Universitas Muhamadiyah, Jakarta.
Sharon,N.,Anam,S.,Yuliet,.  2013.  Formulasi
Krim Ekstrak Etanol Bawang Hutan  (Eleutherine palmifolia L. (Merr). Online  Jurnal  of  Natural Science . 2(3) : 111-122.
Sibarani, R,V., Wowor, M,P,. Awaloei,H,. 2013. Uji efek analgesik ekstrak Daun Beluntas ( Pluchea indica (L.) pada mencit ( mus musculus ). Jurnal e-Biomedik (eBM), ( 1)1 :621-628.
Sikawin,M,.B.  2018.  Formulasi  Sediaan  Gel Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Tanaman Sereh  ( Cymbopongon  ciratus (DC.) Stapf ) dan  uji  aktivitas  antibakteri (Staphylococcus  aureus) secara in vitro [Skripsi].  Universitas  Sam Ratulangi, Manado.