Yuni  Fitrianti,  Arum  Setiawan,  Joko  Marwoto  (2022).  Efek  Fraksi  Aktif  Daun  Gendola  (Basella  alba) terhadap Jumlah Sperma dan Kadar Hormon Testosterone Tikus Putih Jantan (Rattus norvegicus). Syntax Literate; Jurnal Ilmiah Indonesia. 7 (8). E-ISSN: 2548-1398 Published by: Ridwan Institute
Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia p–ISSN: 2541-0849 eISSN: 2548-1398 Vol. 7, No. 8, Agustus 2022
EFEK FRAKSI AKTIF DAUN GENDOLA (Basella alba) TERHADAP JUMLAH SPERMA DAN KADAR HORMON TESTOSTERONE TIKUS PUTIH JANTAN (Rattus norvegicus)

## Yuni Fitrianti, Arum Setiawan, Joko Marwoto
Fakultas Kedokteran, Universitas Sriwijaya Palembang dan Fakultas MIPA Universitas Sriwijaya Palembang, Indonesia Email: yuni.handani30@gmail.com, arum.setiawan@unsri.ac.id, jkmarwoto@gmail.com

## Abstrak
Latar  Belakang: Faktor  Pria  merupakan  30%  faktor  penyebab  infertilitas  pada PASUTRI di masa produktif. Telah banyak usaha yang dilakukan untuk mengatasi infertilitas  pada  pria,  salah  satunya  dengan  penggunaan  obat  penyubur  atau afrodisiak  yaitu  daun  gendola.  Tujuan  penelitian,  untuk  mengetahui  efektivitas fraksi  aktif  daun  gendola  terhadap  jumlah  spermatozoa  dan  kadar  hormone testosterone  tikus  jantan  ( Rattus norvegicus ).  Penelitian  ini  diadakan  pada  bulan Agustus – November 2020 di Fakultas Kedokteran Universitas Sriwijaya. Metode : Penelitian ini menggunakan Post Test Only Control Group Design. Hewan uji yang dipakai  sebanyak  33  ekor  terbagi  secara  random  dalam  11  kelompok  perlakuan. Tiap kelompok terdiri atas 3 ekor tikus dengan rincian kelompok diberi n-heksan 1 mg/kgBB,  n-heksan  5  mg/kgBB,  fraksi n -heksana  dosis  10  mg/kgBB,  fraksi  etil asetat  dosis  1  mg/kgBB,  fraksi  etil  asetat  5  mg/kgBB,  fraksi  etil  asetat  dosis  10 mg/kgBB,  fraksi  methanol  air  dosis  1  mg/kgBB,  fraksi  methanol  air  dosis  5 mg/kgBB, fraksi methanol air dosis 10 mg/kgBB diberikan secara oral selama 30 hari. kelompok kontrol negative diberikan Na CMC 1% sebanyak 1 cc secara oral selama 30 hari. Kelompok kontrol dengan diberikan Testosteron Enanthate dengan dosis 5 mg/kgBB yang dilarutkan dengan sesame oil / minyak wijen sebanyak 1 cc secara  injeksi  intramuscular  di  paha  tikus. Hasil :  Terdapat  peningkatan  kadar hormone testosterone dan jumlah spermatozoa pada tikus jantan setelah pemberian fraksi aktif daun gendola bila dibandingkan dengan testosterone enanthate dan Na CMC  1%. Kesimpulan: Dalam  penelitian  ini  menyatakan  bahwa  fraksi Basella alba berperan dalam meningkatkan kesuburan tikus jantan
Kata Kunci: kesuburan, testosterone, jumlah spermatozoa fraksi, Basella alba

## Abstract
Background: Infertility is 30% caused by male problems. There are so many ways to  solve  this,  one  of  them  is  taking  traditional  medicine,  gendola  leaves.  This research was aim to analyze the effect of gendola leaves to increase sperms count and  testosterone  in  male  rat  (Rattus  norvegicus).  This  study  was  conducted  in Medical Faculty of Sriwijaya University on August until November 2020. Methods:
The  rats  were  classified  to  11  groups  which  consist  of  3  rats.  They  were  given fraction  suspension  of  gendola  leaves  for  30  days  per  oral  in  doses  n-hexan  1 mg/kgBB,  n-hexane  5  mg/kgBB,  n-hexane  10  mg/kgBB,  ethyl  acetate  1  mg/kgBB, ethyl  acetate  5  mg/kgBB,  ethyl  acetate  10  mg/kgBB,  methanol-water  fraction1 mg/kgBB, methanol-water dosis 5 mg/kgBB, methanol-water 10 mg/kgBB given in 30 days. As a negative control given Sodium Carboxymethil Cellulose 1% per oral for  30  days.  As  a  positive  control  given  testosterone  enanthate  5mg/KGBB  on  0 day  and  12  day.  Results:    There  was  increased  of  testosterone  and  sperm  counts after given fraction of Basella alba for 30 days compared to testosterone enanthate and  Na  CMC  1%.  Conclusion:  in  this  study  we  can  conclude  that  fraction  of gendola leaves increase male fertility

## Keywords: fertility, testosterone, sperm counts, fraction, Basella alba

## Pendahuluan
Infertilitas masih merupakan salah satu masalah kesehatan yang menjadi momok bagi pasangan suami istri. Infertilitas merupakan ketidakmampuan pasangan suami istri untuk memiliki anak setelah melakukan aktivitas seksual secara aktif selama  satu tahun tanpa menggunakan alat kontrasepsi (WHO, 2012).
Prevalensi infertilitas di dunia secara global pada tahun 2010 sekitar 50-80 juta jiwa atau 8-10 % pasangan usia subur. Menurut Badan Pusat Statistik bahwa ada sekitar 10-15%  pasangan  infertil  dari  total  237  juta  penduduk  Indonesia.  (BPS,  2013). Penelitian di Palembang, Sumatera Selatan terhadap 246 pasangan infertil menunjukkan faktor pria sebagai penyebab infertilitas sebesar 48,4% (Arsyad, 1987).
Infertilitas dapat disebabkan oleh 30% gangguan pada pria, 60% gangguan pada wanita dan 10% oleh keduanya. (Konsensus Penanganan Infertilitas, 2013). Infertilitas pria dapat disebabkan oleh beberapa faktor meliputi gangguan produksi sperma terkait kelainan  genetic  (sindroma  Klinefelter,  delesi  kromosom  Y),  Gangguan  pada spermatogenesis,  stereidogenesis,  gangguan  regulasi  hormonal  pada  sel-sel  testicular, kerusakan langsung terkait anatomi (cryptochidisme, varicocele) dan faktor idiopatik.
Keadaan  infertilitas  pria  dapat  diketahui  melalui  pemeriksaan  analisis  sperma dan  pemeriksaan  kadar  testosterone  (Khaidir,  2006).  Testosteron  merupakan  hormon androgen  utama  yang  diproduksi  oleh  sel  leydig  dalam  testis  (Walker  2009).  Analisis sperma  dilakukan  untuk  memeriksa  jumlah  spermatozoa,  motilitas  (motilitas  baik, motilitas kurang baik, dan tidak motil), morfologi spermatozoa (normal atau abnormal baik  kepala,  leher,  maupun  ekor),  viabilitas  (daya  hidup),  viskositas  dan  pH  yang merupakan parameter standar pemeriksaan sperma. (Arsyad, 1994).
Telah  banyak  usaha  yang  dilakukan  oleh  pasangan  suami  istri  infertil  untuk mendapatkan  keturunan,  baik  berupa  pengobatan  secara  modern  dan  konvensional. Salah  satu  pengobatan  modern  yang  dipakai  yaitu  penggunaan  testosteron  sebagai hormon terapi pengganti ( testosterone replacement treatment) bagi penderita gangguan disfungsi  seksual  (Grech et  al, 2014).  Akan  tetapi  penggunaan  obat  ini  masih  jarang dipakai,  mengingat  harga  yang  relatif  mahal  dan  memberikan  efek  samping  pusing, mual,  muntah,  tekanan  darah  meningkat,  serta  meningkatkan  resiko  penyakit  jantung
dan  stroke  apabila  testosteron  ini  digunakan  dalam  jangka  waktu  lama (Eva  Decroli, 2017) .
Alternatif penggunaan tanaman obat sebagai penyubur pria sudah mulai dipakai di  dunia  medis.  Di  Indonesia  sendiri,  penggunaan  ramuan  tradisional  untuk meningkatkan  kesuburan  sudah  sering  digunakan  masyarakat  berdasarkan  pengalaman turun-menurun, namun belum ada dasar ilmiah yang jelas (Depkes RI, 1989). Salah satu tanaman yang sering dijadikan obat adalah daun gendola ( Basella alba). Daun gendola digunakan sebagai obat wasir dan anti peradangan di negara India dan Cina (Kumar et al .,  2015).  Menurut  Arokoyo  yang  melakukan  penelitian  dengan  menggunakan  tikus yang dibuat menjadi DM (diberikan streptozotocin 50mg/KgBB secara intraperitoneal) menyatakan bahwa Basella alba memberikan efek antidiabetik (menurunkan kadar gula darah) dan efek profertility (meningkatkan kualitas sperma), terkait dengan kandungan antioksidan dan peningkatan hormon gonad (Arokoyo, 2017) .
Penelitian  di  Kamerun  menyatakan  bahwa  daun Basella  alba dipakai  untuk meningkatkan  kesuburan  pria.  Pemurnian  sel  leydig  yang  didapatkan  dari  tikus  jantan galur Sprague  dawley yang  diinkubasi  dan  diberi  ekstrak Basella  alba selama  4  jam memberikan  efek  peningkatan secara  signifikan  kadar  testosteron,  estradiol  dan  kadar aromaterase mRNA serta meningkatkan viabilitas sel Leydig (Nantia et al., 2011) .
Pada  penelitian  di  Kamerun (Manfo  et  al.,  2014) didapatkan  hasil  bahwa kemampuan ekstrak daun gendola yang diberikan sebanyak 1 mg/KgBB selama 30 hari pada  tikus  Wistar  dan  dilanjutkan  pemberian  ekstrak Carpolobia alba sebanyak  0,1 mg/kgBB selama 60 hari memberikan hasil bahwa ekstrak daun ini dapat melawan efek toksik dari tikus yang diberi pestisida maneb (manganese ethylenebis / dithiocarbamate) dikarenakan  adanya  efek  antioksidan  pada  ekstrak  daun  gendola.  Beberapa  senyawa yang terkandung dalam tanaman gendola memberikan efek antioksidan, seperti senyawa phenol, carotenoids , ascorbic acid , saponin , coumarin dan limonoid .  Penelitian  lain membuktikan  bahwa  ekstrak  methanol Basella  alba memberikan  efek  peningkatan aktivitas androgenik pada produksi testosteron di sel leydig (Nathalie et al., 2015) .
Penggunaan ekstrak daun gendola sudah banyak diteliti penggunaannya bersama dengan  tanaman  lain,  berdasarkan  uraian  diatas  maka  penulis  tertarik  untuk  meneliti penggunaan  daun  gendola  sebagai  obat  untuk  meningkatkan  jumlah  spermatozoa  dan kadar testosteron dengan menggunakan pelarut n-heksan, methanol air dan etil asetat.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  adalah  penelitian  eksperimental  secara in  vivo dengan menggunakan  fraksi  daun  gendola  ( Basella  alba) terhadap  jumlah  spermatozoa  dan kadar  testosteron  tikus  jantan.  Tikus  jantan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini berjumlah  33  ekor  yang  semuanya  telah  memenuhi  kriteria  inklusi  yang  akan  dibagi menjadi  11  kelompok.  Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan  Agustus  sampai  dengan November  2020  di  Laboratorium  Biokimia,  Biologi  Kedokteran  dan Animal  House Fakultas Kedokteran Universitas Sriwijaya.
Perlakuan pada  masing-masing kelompok yaitu dengan diberikan larutan fraksi Basella  alba n-heksan  1  mg/kgBB,  n-heksan  5  mg/kgBB,  fraksi n -heksana  dosis  10 mg/kgBB,  fraksi  etil  asetat  dosis  1  mg/kgBB,  fraksi  etil  asetat  5  mg/kgBB,  fraksi  etil asetat  dosis  10  mg/kgBB,  fraksi  methanol  air  dosis  1  mg/kgBB,  fraksi  methanol  air dosis  5  mg/kgBB,  fraksi  methanol  air  dosis  10  mg/kgBB  diberikan  secara  oral  selama 30  hari.  kelompok  kontrol  negatif  diberikan  Na  CMC  1%  sebanyak  1  cc  secara  oral selama  30  hari.  Kelompok  kontrol  dengan  diberikan  Testosteron  Enanthate  dengan dosis  5  mg/kgBB  yang  dilarutkan  dengan  sesame  oil  /  minyak  wijen  sebanyak  1  cc secara injeksi intramuscular di paha tikus pada hari ke 0 dan 12.

## Fraksi Daun Gendola (Basella alba)
Daun  gendola  ( Basella  alba) didapatkan  dari  Sringganis  Balai  tanaman  obat Bogor  dan  mendapatkan  sertifikat  identifikasi  keaslian  tanaman  dari  LIPI  Cibinong. Basella  alba dikeringkan  didalam  rumah  kaca  Fakultas  MIPA  Universitas  Sriwijaya selama  30  hari.  Setelah  daun  kering,  di  blender  dan  terbentuk  simplisia.  Simplisia dimaserasi  dengan  menggunakan  methanol  96%  selama  2  x  24  jam,  kemudian dilakukan  penyaringan  dengan  corong  pisah  dan  diuapkan  dengan  rotary  evaporator sehingga didapatkan pasta kental. Dari fraksi methanol ini dilanjutkan dengan membuat fraksi dengan menambahkan methanol air dengan perbandingan  1 : 1 sebanyak 200 ml. Selanjutnya  dimasukkan  ke  dalam  corong  pisah,  kemudian  difraksinasi  dengan menambahkan 200ml n -heksana, dikocok lalu didiamkan sampai terbentuk dua lapisan terpisah. Lapisan n -heksana dipisahkan ke dalam botol selai dan ditambahkan n -heksana baru  pada  lapisan  methanol-air.  Proses  ini  diulangi  beberapa  kali  sampai  larutan bewarna bening dengan cara yang sama.
Proses fraksinasi dilanjutkan dengan memakai pelarut etil asetat dengan cara dan volume  yang  sama  utuk  mendapatkan  fraksi  n  heksan.  Fraksi  n-heksan  cair,  fraksi  etil asetat  cair,  dan  fraksi  methanol-air  diuapkan  dengan Rotary  evaporator sampai didapatkan  fraksi  kental  dan  keringkan  dengan hair  dryer sehingga  didapatkan  fraksi kering.  Hasil  fraksi  yang  didapatkan  dapat  dilakukan  uji aktivitas  fraksi  untuk menilai fertilitas (jumlah spermatozoa dan kadar hormon testosteron) tikus.
Perlakuan pada Hewan Uji
Persiapan Hewan
Tikus jantan berusia 2-3 bulan diadaptasi terlebih dahulu selama seminggu serta diberi makan dan minum secara ad libitum , dimasukkan kedalam kandang yang ditutup dengan kassa dengan pengelompokan 3 tikus setiap kandang. Cahaya ruangan dikontrol setiap hari, diatur suhu dan kelembapan kandang 23-39ºC.

## Pengelompokan Hewan Percobaan
Tikus dikelompokkan menjadi 11 kelompok dipilih secara acak masing-masing 3  ekor.  dengan  rincian  kelompok  diberi  n-heksan  1  mg/kgBB,  n-heksan  5  mg/kgBB, fraksi n -heksana  dosis  10  mg/kgBB,  fraksi  etil  asetat  1  mg/kgBB,  fraksi  etil  asetat  5 mg/kgBB,  fraksi  etil  asetat  10  mg/kgBB,  fraksi  methanol  air  1  mg/kgBB,  fraksi methanol air 5 mg/kgBB, fraksi methanol air 10 mg/kgBB diberikan secara oral selama 30  hari.    Kelompok  kontrol  negatif  diberikan  Na  CMC  1%  sebanyak  1  cc  secara  oral
selama  30  hari.  Kelompok  kontrol  dengan  diberikan  Testosteron  Enanthate  dengan dosis  5  mg/kgBB  yang  dilarutkan  dengan  sesame  oil  /  minyak  wijen  sebanyak  1  cc secara injeksi intramuscular di paha tikus.
Setelah  perlakuan  pemberian  fraksi  daun  gendola,  pada  hari  ke-31  tiap  kelompok diambil  dahulu  sampel  darahnya  melalui  vena  sinus  orbita  lalu  simpan  sampel  darah dalam  tabung  darah  EDTA  yang  telah  disediakan.  Kemudian  tikus  dinarkosis  dengan kloroform,  dibedah,  lalu  organ  reproduksi  yang  meliputi  testis,  epididimis,  diambil, dibersihkan  lalu  dilakukan  pemisahan  cauda  epididimis  dari  testis  dengan  cara memotong  bagian  proksimal  corpus  epididimis  dan  bagian  distal  vas  deferens. Selanjutnya, cauda epididimis dimasukkan ke dalam cawan petri yang berisi 1 ml NaCL 0,9%,  kemudian  cauda  epididimis  dipotong-potong  sampai  halus  dan  diaduk  dengan NaCL 0,9% sehingga terbentuk suspensi spermatozoa.

## Jumlah Spermatozoa
Suspensi  spermatozoa  yang  telah  diperoleh  terlebih  dahulu  dibuat  homogen dengan  cara  digetarkan  dengan  tangan  atau  diaduk  dengan  hati-hati  dengan  gelas pengaduk. Suspensi spermatozoa dihisap sebanyak 0,005 ml sampel, setelah itu cairan pengencer dihisap dalam pipet sampai tanda 1,01.
Cara membuat suspensi spermatozoa yang homogen untuk pemeriksaan jumlah spermatozoa, yaitu dengan melihat terlebih dahulu jumlah sperma dengan pembesaran 400X perlapangan pandang. Jika didapatkan lebih dari 101 spermatozoa dalam satu kali lapangan  pandang,  maka  buat  pengenceran  dengan  perbandingan  1:  20  (50µL  semen: 950 µL NaCl 0,9%) dan dihitung pada Grid 5,4 dan 6.
Suspensi spermatozoa diteteskan dari pipet, tepat pada pinggir gelas penutup itu hingga menyebar. Bilik hitung hemasitometer Improved Neubauer diletakkan dibawah mikroskop  dengan  perbesaran  400  kali.  Kemudian  konsentrasi  spermatozoa  pada bidang grid 4, 5, 6 dihitung sebanyak dua chamber (Cao et al., 2011) . Selisih antara dua chamber tidak boleh melebihi jumlah yang diperbolehkan sesuai dengan tabel berikut.

## Tabel 1

## Tabel Selisih perhitungan jumlah spermatozoa menurut WHO (Cao et al., 2011)
Jumlahkan semua spermatozoa yang telah kita lihat pada grid 5, 4, dan 6 pada chamber  1  dan  chamber  2.  Selisih  antara  chamber  1  dan  2  tidak  boleh  melebihi  nilai
yang  ada  pada  tabel  1.  Total  perhitungan  disubsitusi  dalam  rumus  penentuan konsentrasi spermatozoa dalam milliliter (ml) suspensi sekresi cauda epididimis sebagai berikut:
N = Jumlah total spermatozoa yang dihitung pada kotak grid 4, 5, 6. n = jumlah row/baris yang dihitung
Misalnya  konsentrasi  pada  sampel  1  +  19  (pengenceran  1  :  20),    Nilai  N  yang didapatkan  pada  chamber  1  220  spermatozoa  dan  chamber  2  218  spermatozoa,  (220- 218  =  2).  Penjumlahan  220  +  218  =  438.  Maka  berdasarkan  tabel  7  selisih  antara chamber 1 dan 2 masih diperbolehkan.
Jumlah Spermatozoa (C) = (N/n) X (1/v) X dilution factor X10 6
C = 438/15 X 1/20 x 20 spermatozoa per nL = 29,2 X 10 6 Spermatozoa.

## Prosedur Pemeriksaan Kadar Testosteron
Data kadar testosteron bebas didapatkan dengan cara:
1. Mengambil  darah  tikus  sebanyak  2  ml  dengan  kapiler  mikrohematokrit  dari  sinus orbitalis, kemudian dimasukkan kedalam tabung reaksi
2. Tabung  reaksi  kemudian  disentrifugasi  dengan  kecepatan  3500  rpm  selama  15 menit untuk memisahkan serum dan sel-sel darah
3. Dengan  menggunakan  alat  mini-Vidas,  serum  dan  reagen  ditempatkan  dalam Reagent  Strip  siap  pakai  dan  solid  phase  berupa  Solid  Phase  Receptacle  (SPR). Mini-Vidas  adalah  immunology  analyzer  yang  bekerja  secara  otomatis  dengan menggunakan  teknologi  pembacaan  Enzyme-Linked  Fluorescence  Immuno-Assay (ELFA).  Proses  pengetesan  dilakukan  secara  otomatis  dan  hasil  pembacaan Fluorescent  yaitu  Relative  Fluorescent  Value  (RFV)  akan  dikonversikan  menjadi hasil akhir tes kualitatif dan kuantitatif.

## Hasil Dan Pembahasan

## Uji fitokimia
Uji  fitokimia  dilakukan  di  Laboratorium  Biokimia  Unsri  untuk  mengetahui  senyawa yang terkandung di dalam fraksi daun gendola
Tabel 2 Hasil uji fitokimia fraksi daun gendola No Uji Fitokimia Kejadian Metanol air Etil asetat N- heksan 1. Alkaloid a. Pereaksi Dragendorf Endapan warna merah jingga + + - b. Pereaksi Mayer Endapan warna putih jingga + + - 2. Flavonoid Terbentuk warna merah + + - 3. Tannin Warna biru kehitaman + + - 4. Saponin Terbentuk busa yang mantap dan tinggi + - + 5. Triterpenoid Terbentuk cincin kecoklatan + - -
Steroid Terbentuk cincin biru kehijauan - + +
Pada  tabel  di  atas  dapat  disimpulkan  bahwa  fraksi  metanol  air  mengandung senyawa  alkaloid,  flavonoid,  triterpenoid,  saponin  dan  tannin.  Fraksi  etil  asetat mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  steroid,  dan  tannin.  Fraksi  n  heksan mengandung senyawa steroid dan saponin.
Karakteristik Sampel

## Homogenitas Berat Badan Tikus
Hasil  analisis  uji  homogenitas  berat  badan  tikus  diuji  dengan  menggunakan Levene test didapatkan  bahwa  p  =0,078  (p>alpha)  varians  data  berat  badan  tikus  tidak berbeda  bermakna  antar  kelompok  perlakuan  artinya  berat  badan  tikus  homogen. Sehingga pada persyaratan penelitian eksperimental terpenuhi.

## Tabel 3
Homogenitas Berat badan Tikus Levene statistic Df1 Df2 Sig. 2,042 10 22 0,078

## Pengaruh Fraksi Daun Gendola Terhadap Hormon Testosteron Tikus Jantan
Data hormon testosteron yang telah diperoleh dari pemeriksaan melalui alat mini VIDAS dari  BBLK  Palembang,  analisis  perbandingan  hormon  testosteron  terhadap kelompok  perlakuan  diuji  dengan  menggunakan  uji one  way  Anova didapatkan  bahwa terdapat  perbedaaan  yang  bermakna  rerata  kadar  hormon  testosteron  pada  seluruh kelompok perlakuan nilai p=0,000 ( p <0,05). Hasil analisis dapat dilihat pada tabel 4

## Tabel 4
Perbandingan Hormon Testosteron Setelah Pemberian Fraksi Aktif Daun Gendola (Basella Alba) Kelompok Perlakuan N Mean ± SD P value n-heksan 1mg/KgBB n-heksan 5mg/KgBB
n-heksan 10mg/KgBB etil asetat 1mg/kgBB etil asetat 5mg/kgBB etil asetat 10mg/kgBB methanol air 1mg/kgBB methanol air 5mg/kgBB methanol air10mg/kgBB
Testosteron enanthate
Na CMC 1%
3 3 3 3 3 3 3 3
3 3 3 2,80 ± 0,59 3,75 ± 0,74 8,31 ± 0,81 2,02 ± 0,54 2,05 ± 0,64 2,37 ± 0,22 3,71± 0,38 3,63 ± 0,39 5,48 ± 2,18 14,05 ± 1,3 0,40 ± 0,10 0,000

## Uji One Way Anova p<α

## Perbandingan Jumlah Spermatozoa Setelah Pemberian Fraksi Aktif Daun
Gendola (Basella alba)
Hasil  analisis  perbandingan  efektivitas  jumlah  spermatozoa  terhadap  kelompok perlakuan  diuji  dengan  menggunakan  uji One  Way  Anova didapatkan  bahwa  terdapat perbedaaan  yang  bermakna  rerata  jumlah  spermatozoa  pada  seluruh  kelompok perlakuan nilai p=0,000 ( p <0,05). Hasil analisis dapat dilihat pada tabel 5

## Tabel 5

## Perbandingan Jumlah sperma Setelah Pemberian Fraksi Aktif daun Gendola
(Basella Alba) Kelompok Perlakuan N Mean ± SD P value n-heksan 1mg/KgBB n-heksan 5mg/KgBB
n-heksan 10mg/KgBB etil asetat 1mg/kgBB etil asetat 5mg/kgBB etil asetat 10mg/kgBB methanol air 1mg/kgBB
methanol air 5mg/kgBB methanol air10mg/kgBB Testosteron enanthate Na CMC 1% 3 3
3 3 3 3 3 3 3 3 3 32,78±7,30 36,63±3,18 38,40±7,37 17,03±1,95 20,20±1,99 16,58±5,41 33,36±3,88 25,43±1,26 22,20±5,32 42,73±3,59 15,73±1,05 0,000
Uji One Way Anova p<α
Pada  analisis  statistik  dengan  menggunakan  uji One  Way  Anova didapatkan bahwa  terdapat  perbedaaan  yang  bermakna  rerata  kadar  hormon  testosteron  nilai p=0,000  ( p <0,05).  Dilanjutkan  dengan  uji  post  hoc Games Howell didapatkan  pada fraksi  n-heksan  10  mg/kgBB  didapatkan  pvalue  =  0,057,  sedangkan  pada  fraksi methanol  air  10  mg/kgBB  didapatkan  pvalue  =  0,066.  Hal  ini  berarti  tidak  berbeda bermakna  dengan  kontrol  positif  (testosteron  enanthate),  dengan  kata  lain  pada  dosis 10mg/kgBB fraksi n-heksan dan methanol air 10mg/kgBB mempunyai efektivitas yang sama dalam meningkatkan kadar hormon testosteron pada tikus jantan.
Hasil  analisis  perbandingan  efektivitas  jumlah  spermatozoa  terhadap  kelompok perlakuan  diuji  dengan  menggunakan  uji One  Way  Anova didapatkan  bahwa  terdapat perbedaaan  yang  bermakna  rerata  jumlah  spermatozoa  pada  seluruh  kelompok perlakuan  nilai  p=0,000  ( p <0,05).  Kemudian  dilanjutkan  uji Post  Hoc  Games  Howell , didapatkan  jumlah  spermatozoa  pada  masing-masing  kelompok  menunjukkan  bahwa fraksi  n-heksan  dan  methanol  air  pada  dosis  minimum  (1  mg/kgBB)  sudah menunjukkan  tidak  berbeda  bermakna  dengan  kontrol  positif  (testosteron  enanthate), dimana pvalue = 0,0631 (p>0,05) dengan kata lain pada dosis rendah pun n-heksan dan methanol  air  sudah  mempunyai  efektivitas  yang  sama  dalam  meningkatkan  jumlah spermatozoa pada tikus jantan yang terbukti secara statistic.
Berdasarkan  penelitian  Manfo,  dosis Baesella  alba yang  digunakan  adalah  1 mg/KgBB  selama  30  hari  dapat  meningkatkan  kadar  hormone  testosterone (Manfo  et al.,  2014) .  Mekanisme Basella alba ini  adalah  dengan  masuknya  zat-zat  yang terkandung  dalam  tanaman  ini  secara  oral,  diserap  dalam  darah,  masuk  kedalam sirkulasi  darah  mempengaruhi  hypothalamus  yang  menghasilkan Gonadthrophin Releasing Hormon (GnRH) memacu hipofisis anterior memproduksi FSH dan LH. FSH memacu  sel  sertoli  menghasilkan  inhibin  dan Androgen  Binding  Protein (ABP).  LH merangsang sel leydig yang berperan dalam produksi hormone testosterone (androgen). Testosteron yang dihasilkan oleh sel Leydig akan terikat dengan ABP yang berasal dari sel  sertoli  yang  membantu  proses  spermatogenesis.  Testosteron  yang  berada  di epididymis  akan  membantu  pematangan  spermatozoa  sehingga  terbentuklah spermatozoa  dewasa  dengan  motilitas  dan  morfologi  yang  optimal.  Jika  kadar testosterone rendah maka volume semen pun akan turun dan begitu juga dengan jumlah spermatozoa yang dihasilkan melalui proses spermatogenesis.
Peningkatan  jumlah  kadr  testosterone  dan  jumlah  spermatozoa  ini  disebabkan karena  adanya  senyawa  saponin  yang  terdapat  pada  n-heksan  dan  methanol  air,  serta steroid  yang  didapatkan  pada  fraksi  n-heksan.  Senyawa  steroid  akan  berguna  dalam proses  sintesa  testosterone  yang  juga  berpengaruh  dalam  proses  spermatogenesis  di testis.  Peningkatan  sterol  sebagai  akibat  dari  pemberian  fraksi  methanol  air  dan  n- heksan  akan  mengakibatkan  meningkatnya  sintesis  testosterone.  Testosteron  yang dihasilkan  mempengaruhi  hipofisis  untuk  mempengaruhi  GnRH,  merangsang  hipofisis untuk menghasilkan FSH yang menghasilkan sel sertoli dan LH yang menghasilkan sel leydig  yang  juga  menghasilkan  hormone  testosterone  yang  berperan  dalam spermatogenesis. Dengan meningkatnya kadar hormone testosterone di dalam sirkulasi, maka sekaligus akan meningkatkan jumlah spermatozoa.

## Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  dan  pembahasan  dapat  disimpulkan  bahwa  pemberian fraksi aktif daun  gendola dapat meningkatkan jumlah spermatozoa dan kadar hormone testosterone.
Saran  agar  dapat  dikembangkan  penelitian  ini  selanjutnya  dengan  membuat preparat  histologis  dari  tubulus  seminiferus  dan  epididymis  sehingga  dapat  melihat perkembangan  seluruh  staging  dari  spermatogenesis  setelah  pemberian  fraksi  daun gondola ( Basella alba).

## BIBLIOGRAFI
Arokoyo, D. S. (2017). Antidiabetic and profertility mechanisms of aqueous extract of Basella  alba  in  male  Wistar  rats .  http://etd.cput.ac.za/handle/20.500.11838/2769
Google Scholar
Cao, X. W., Lin, K., Li, C. Y., & Yuan, C. W. (2011). [A review of WHO Laboratory Manual  for  the  Examination  and  Processing  of  Human  Semen  (5th  edition)]. Zhonghua  Nan  Ke  Xue  =  National  Journal  of  Andrology , 17 (12),  1059–1063. Google Scholar
Eva  Decroli.  (2017).  Tesroteron  and  Benefit  for  Men’S  Health. Journal  of  Chemical Information and Modeling , 110 (9), 1689–1699.
Manfo, F. P. T., Nantia, E. A., Dechaud, H., Tchana, A. N., Zabot, M. T., Pugeat, M., & Moundipa,  P.  F.  (2014).  Protective  effect  of  Basella  alba  and  Carpolobia  alba extracts  against  maneb-induced  male  infertility. Pharmaceutical  Biology , 52 (1), 97–104. https://doi.org/10.3109/13880209.2013.816860 Google Scholar
Nantia, E. A., Travert, C., Manfo, F. P. T., Carreau, S., Monsees, T. K., & Moundipa, P. F.  (2011).  Effects  of  the  methanol  extract  of  Basella  alba  L  (Basellaceae)  on steroid  production  in  Leydig  cells. International  Journal  of  Molecular  Sciences , 12 (1), 376–384. https://doi.org/10.3390/ijms12010376 Google Scholar
Nathalie,  S.,  Edjenguele,  B.,  Nantia,  E. A.,  Manfo,  P.  T.,  Vidari,  G.,  &  Fewou,  P.  M. (2015). By . September .

## Copyright holder:
Yuni Fitrianti, Arum Setiawan, Joko Marwoto (2022)
First publication right: Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia
This article is licensed under: