## UJI POTENSI EKSTRAK DAUN BENALU BATU (BEGONIA SP) TERHADAP KADAR GLUKOSA DALAM DARAH DAN GAMBARAN HISTOPATOLOGI PANKREAS TIKUS PUTIH JANTAN (RATTUS NORVEGICUS)
Submitted : 14 Agustus 2020
Edited : 22 Desember 2020 Accepted : 29 Desember 2020
Joni Tandi 1 , Dela Erni Paerunan 1 , Nurifa 1 , Yunlis Silintowe Kenta 1 , Sri Mulyani 2
1 Program Studi S1 Farmasi, STIFA Pelita Mas Palu
2 Program Studi Pendidikan Kimia, FKIP, Universitas Tadulako Email : jonitandi757@yahoo.com

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  potential  for  glucose  levels  in  the  blood  of  ethanol extracts of the begonias (Begonia Sp.), the effect of the extract on the pancreatic histopathology of  white  rats  (Rattus  norvegicus)  which  was  induced  by  streptozotocin,  and  the  effective  dose begonias’  extract  leaves  on  the  histopathological  descriptions  of  pancreat ic  male  white  rats. This study was an experimental laboratory where the research group consisted of group I (the control group) as a normal control was given a standard feed, group II (negative control) was given a 0.5% Na CMC suspension, group III (positive control) was orally given glibenclamide and experimental groups IV, V, and VI (doses 50, 100, and 200 mg/kg BW). Were given ethanol extract of begonias leaves. The results showed that the ethanol extract of the begonias (Begonia Sp.)  contained  secondary metabolite  compounds,  namely  flavonoids,  alkaloids,  saponins, polyphenols, and tannins. Ethanol extract of begonias leaves at adose of 50 mg/kg BW was an affective dose in reducing blood glucoselevels by an avarage of 101,8 mg/dL) and a dose of 50 mg/kg BW can affect the histopathological picture of the pancreas in STZ induuced rats with an average damage value of 2 from a maximum of 4.
Keywords: Diabetes, Begonias, Histopathology, Pancreas.

## PENDAHULUAN
Diabetes  melitus  (DM)  adalah  suatu sindroma kelainan metabolisme yang ditandai  dengan  hiperglikemi  abnormal sebagai  akibat  dari  suatu  defisiensi sekresi insulin, berkurangnya aktivitas fungsi biologis  insulin  atau  adanya  resistensi insulin  dan  kemudian  sel- sel  β  menunjukan gangguan pada sekresi insulin fase pertama, artinya sekresi
insulin gagal
mengkopensasikan  resistensi  insulin  (DM tipe  2)  atau kekurangan  insulin  secara absolut (DM tipe 1) (1) .
Pankreas adalah suatu alat tubuh yang sangat panjang terletak retroperitonial dalam
abdomen  bagian  atas,  di  depan  vertebrae lumbalis  I  dan  II (2) .  Organ  pankreas  terdiri atas  eksokrin dan  endokrin.  Bagian  sel-sel endokrin membentuk  pulau  Langerhans. Pulau  Langerhans  dikelilingi  oleh  jaringan ikat  retikulum  dan  beberapa  tersebar  di antara asini, yaitu bagian eksokrin pankreas. Diameter pulau Langerhans biasanya berbentuk  egge-shaped  dan terdiri  atas  sel- sel  yang  berbentuk  poligonal  atau  bulat. Pulau  Langerhans  tampak  lebih  pucat dibandingkan  dengan  area  eksokrin  karena tidak memiliki granul zymogen (3) .
Obat-obatan  sintetik  telah  banyak digunakan  untuk  penyakit  diabetes  melitus
dan pengembangan ilmu pengetahuan mengenai  penyakit,  namun  masyarakat  kini lebih  cenderung  menggunkan  pengobatan tradisional (4) . Pengobatan tradisional
merupakan  salah  satu  warisan  budaya bangsa yang perlu digali, dan dikembangkan agar  dapat  dimanfaatkan  oleh  masyarakat
secara maksimal untuk peningkatan pelayanan kesehatan (5) .
Salah  satu  tanaman  disekitar  yang dapat  dimanfaatkan  untuk  menurunkan kadar  glukosa  darah  adalah  benalu  batu Penelitian  sebelumnya  menyatakan  pada fraksi  etil  asetat  benalu  batu  positif mengandung senyawa flavonoid (3,4) , senyawa  ini  diyakini  memiliki  efek  sebagai penurunan  kadar glukosa  darah  pada keadaan  diabetes  melitus.  Penelitian lain menyatakan  pada Ekstrak  metanol  herba benalu  batu  (Begonia sp.)  memiliki  efek sitotoksik  yang  lebih  kuat  terhadap  sel kanker  leher  rahim  (HeLa)  dengan  nilai IC50 = 70,97 μg/mL. Senyawa kimia dalam ekstrak  metanol  benalu  batu  yang  dinilai mempunyai  aktivitas  antikanker  adalah senyawa golongan
polifenol dan flavonoid (6) .  Penelitian  ini  bertujuan  untuk meningkatkan  derajat  kesehatan  masyarakat dengan  menggali  tanaman  yang  spesifik yang  berada  di  sulawesi  tengah  untuk menekan  peningkatan  penderita  diabetes melitus.

## METODE PENELITIAN Alat
Alat-alat  gelas,  ayakan  40  mesh,  alat
bedah,  batang  pengaduk,  bejana  maserasi,
blender (Cyprus), cawan porselin, embedding  center,  floatation  bath,  gelas kimia, gelas ukur, glukometer (Accu-Chek), glukotest  strip  test  (Accu-Chek),  gunting, kandang  hewan  uji,  keranjang tissue processor,  labu  ukur,  mikroskop,  mikrotom putar,  mortir  dan  stamper,  pelat  pemanas slide, penangas air, pengasah pisau mikrotom,  pisau  mikrotom,  pinset,  pipet
tetes, rak tabung, Rotary Vaccum
Evaporator, seperangkat  alat  bedah  minor, slide staining racks, spuit injeksi, spuit oral, steroform,  tabung  reaksi,  tabung  organ, tempat pemotongan jaringan basah, timbangan analitik, timbangan gram (7,8) .

## Bahan
Alkohol  70%,  Alkohol  90%, Alkohol 100%,  air  suling,  aqua  pro  injeksi,  asam klorida, Besi  (III)  klorida, Citrate-buffer saline, daun  benalu  batu,  Dragendrof  LP,
Etanol 96%, eter, formalin 10%, glibenklamid,  larutan  mayers Hematoxylin
Eosin, , Serbuk Magnesium, Na CMC 0,5%,
Natrium  carboxymethyle  cellulose, Natrium hidroksida,  Natrium  klorida,  Streptozotocin, pereaksi
Liebermann-Burchard, pakan standar,  pereaksi  dragendorff,  kertas  saring, xylol (7,8) .

## Pembuatan  Ekstrak  Etanol Benalu  Batu
(Begonia sp.)
Pembuatan ekstrak benalu batu dilakukan  dengan metode maserasi,  yaitu serbuk  benalu  batu  yang  telah  diayak menggunakan  ayakan  nomor  40  mesh, ditimbang  500  gram  lalu  diekstraksi  selama 3  hari  dengan  menggunakan  pelarut  etanol 96  %  sebanyak  2  liter.  Ekstrak  kemudion disaring  mengunakan  kertas  saring  laluu diperoleh  fiItrat.  Selanjutnya  dievaporasi atau  memisahkan  larutan  menggunakan Rotary Vaccum Evaporator pada suhu 60 ° C dan  dilanjutkan  dengan  penguapan  yang dilakukan  dengan  menggunakan waterbath dengan  suhu  60 ° C  hingga  diperoleh  ekstrak kental (7,8) .

## Pembuatan  Larutan  Koloidal  Na  CMC
0,5%
Natrium  karboksimetil  selulosa  (Na CMC)  ditimbang  sebanyak  0,5  gram ditaburkan dalam lumpang yang berisi 10 ml aquades  yang  telah  dipanaskan,  didiamkan selama  15  menit  hingga  diperoleh  massa yang  transparan,  lalu  dicampurkan  sampai homogen. Larutan Na CMC dipindahkan ke
dalam  labu  ukur  100  ml.  Volumenya dicukupkan  dengan  aquades  hingga 100 ml (9,10,11) .

## Pembuatan Larutan Streptozotocin (STZ)
Streptozotocin  ditimbang  sebanyak 0,32  gram  lalu  dilarutkan  menggunakan citrate-buffer  saline denganpH  4,5  sampai 100  ml,lalu  diinduksikan  pada  tikus  melalui intraperitoneal  (ip).  Dosis streptozotocin yaitu 40 mg/kg BB (12,13) .

## Pengujian Histopatologi pankreas
Pengujian histopatologi pankreas dilakukan setelah perlakuan pada hari ke-28. Hewan  uji  dikorbankan  dengan  cara anastesi,  yaitu  tikus  dimasukkan  kedalam toples berisi kapas yang diberi eter. Tunggu hingga  tikus  kehilangan  kesadaran  dengan cara  memberikan  rangsang  nyeri  pada telapak kaki tikus, bila tidak memberi respon maka  efek  anastesi  sudah  bekerja.  Proses pembedahan  dilakukan  pada  bagian  kulit
perut  sampai  terlihat  bagian  organ dalam perut  tikus.  Organ  pankreas  dipotong  dan dimasukkan  kedalam  wadah  yang  berisi formalin 10% (14,15).

## Analisis Data
Data  hasil  pemeriksaan  mikroskopis yang di peroleh berupah data skoring tingkat kerusakan pankreas tikus  putih  jantan. Selanjutnya  di  analisi  menggunakan  uji nonparametik Kruskall Wallis untuk megetahui  perbedaan  yang  signifikan  antara kelompok  perlakuan  dengan  kelompok kontrol  dengan nilai  p<0,05  di  pilih sebagai tingkat signifikansinya. Jika terdapat perbedaan  yang  signifikan  maka  di  lakukan uji Man  whitney untuk  melihat  perbedan yang bermakna setiap kelompok.
Pengolahan  data  di  lakukan  menggunakan program  software  SPSS  23.  Adapun  hasil penurunan  kadar  glukosa  darah  di  gunakan sebagai nilai rujukan (14,15) .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Benalu Batu (Begonia Sp)
No. Parameter Uji Metode Hasil Persamaan Regresi 1 Total Alkaloid Ekuivalen Quinine Spektrofotometri Uv-vis 1,85 %b/b Y= 1.88853e-004 x -3.955444e-004 Correelation Coefficient R 2 = 0.99926 2 Total Flavonoid Ekuivalen Quercetin Spektrofotometri Uv-vis 32,32 %b/b Y= 0.00404347 x – 0.00637338 Correelation Coefficient R 2 = 0.99786 3 Saponin From Quilaja Bark Spektrofotometri Uv-vis 0,36 %b/b Y= 9.44156e-004 x -0.00380439 Correelation Coefficient R 2 = 0.99959 4 Tanin Total Ekuivalen Tannin Acid Spektrofotometri Uv-vis 5,93 %b/b Y= 0.00116490 x + 2.92199e-004 Correelation Coefficient R 2 =
0.99996
Tabel 2. Hasil Pengukuran Kadar Glukosa Darah Kelompok Hewan Uji Tikus Kadar Glukosa Darah (mg/dL) H-0 H-7 H-14 H-21 H-28 Kontrol Normal 1 82 95 98 92 111 2 92 98 95 98 95 3 83 82 92 95 85 4 83 84 85 85 80 5 80 83 83 82 80 Rata-rata 84 88,4 90,6 90,4 90,2 Kontrol Negatif 1 80 327 150 169 221 (Na CMC 0,5%) 2 82 344 144 187 155 3 103 329 407 398 444 4 91 357 468 415 273 5 71 350 477 402 310 Rata-rata 85,4 341,4 329,2 314,2 280,6 Kontrol Positif 1 84 314 273 100 94 (Glibenklamid) 2 78 267 111 95 85 3 98 289 129 97 78 4 72 271 102 143 96 5 88 298 369 109 127 Rata-rata 84 287,8 196,8 108,8 96 Ekstrak Etanol Daun Benalu Batu 50 mg/Kg BB 1 67 230 178 129 138 2 70 433 214 114 96 3 76 273 193 104 97 4 72 328 197 138 92 5 84 341 199 312 86 Rata-rata 7,8 321 196,2 159,4 101,8 Ekstrak Etanol Daun Benalu Batu 100 mg/Kg BB 1 84 336 72 141 81 2 76 314 89 137 80 3 80 193 84 116 80 4 101 244 294 106 70 5 92 138 96 117 82 Rata-rata 86,6 245 127 123,4 78,6 Ekstrak Etanol Daun Benalu Batu 200 mg/kgBB 1 86 171 128 114 96 2 88 371 104 94 83 3 89 422 136 124 80 4 112 299 114 126 98 5 72 291 112 104 88 Rata-rata 89,4 310,8 118,8 112,4 89
Gambar  1. Diagram  rata-rata  penurunan  Kadar  Glukosa  darah  tikus  putih  jantan setiap kelompok pada hari ke-0, ke-7, ke-14 dan ke-28.
Tabel 3. Skoring tingkat kerusakan pankreas tikus
Perlakuan Skoring histopatologi pankreas hewan uji Rerata ± SD 1 2 3 4 5 Kontrol normal 0 0,2 0,2 0 0 0,08 ± 0.10 Kontrol negatif 1,3 1.8 2,3 2,2 3 2,13 ± 0,62 Kontrol positif 2 1 2,8 1,8 1,6 1,84 ± 0,65 Ekstrak daun benalu batu dosis 50 mg/kg BB 2 2 1,8 1,4 2,8 2 ± 0,50 Ekstrak  daun  benalu  batu  dosis  100  mg/kg BB 2,4 1,2 2,4 2,6 1,6 2,06 ± 0,61 Ekstrak  daun  benalu  batu  dosis  200  mg/kg BB 2,4 0,8 0,4 2,2 - 2,25 ± 1,01

## Tabel 4. Hasil Uji lanjut Man whitney
Kelompok Perlakuan Kontrol Normal Kontrol Negatif Kontrol Positif Dosis 100 mg/kg BB Dosis 200 mg/kg BB Dosis 400 mg/kg BB Kontrol Normal - 0,008* 0,056* 0,032* 0,008* 0,095* Kontrol Negatif 0,008* - 0,151 0,151 0,548 0,421 Kontrol Positif 0,056* 0,151 - 1,000 0,151 0,841 Dosis 50 mg/kg BB 0,032* 0,151 1,000 - 0,151 1,000 Dosis 100 mg/kg BB 0,008* 0,548 0,151 0,151 - 0,151 Dosis 200 mg/kg BB 0,095* 0,421 0,841 1,000 0,151 - a c c c bc a a a a a a b ab b bc a ab ab b b a b bc b c a ab bc b bc 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 Hari ke 0 Hari ke 7 Hari ke 14 Hari ke 21 Hari ke 28 Kontrol normal Kontrol negatif
Kontrol positif dosis 50 mg/kg BB dosis 100 mg/kg BB dosis 200 mg/kg BB
Gambar 2. Grafik nilai rata-rata Tikus Putih Jantan
Gambar histopatologi jaringan pankreas tikus putih jantan (Rattus norvegicus)
Kerusakan skor 0 Ket : Sel radang semua normal
a b b b b b 0 0.5 1 1.5 2 2.5 Kontrol normal Kontrol negatif Kontrol positif Dosis 50 mg/kg BB Dosis 100 mg/kg BB Dosisi 200 mg/kg BB

## Skoring kerusakan pankreas
Gambar C, D : Kerusakan skor 1 Ket: Sel mengalami radang (merah), piknosis (biru), dan kerioreksi (putih)
Gambar E, F : Kerusakan skor 2 Ket: sel mengalami radang (merah), piknosis (biru),degenerasi (kuning), kareoreksi (putih), nekrosis (hijau), dan edema (hitam)
Gambar G,H : Kerusakan skor 3 Ket: sel mengalami radang (merah), piknosis (biru), kereoreksi (putih), nekrosis (hijau), degenerasi (kuning), dan edema (hitam)

## PEMBAHASAN
Penelitian  ini  menggunakan  bahan uji  yaitu  daun  benalu  batu  (Begonia  Sp.) yang  diperoleh  dari  Kabupaten  Morowali Sulawesi  Tengah.  Sebelumnya  tanaman  ini telah diidentifikasi dengan tujuan memastikan bahwa tanaman yang digunakan tersebut benar adalah spesies (Begonia Sp.).
Selanjutnya  dilakukan  uji  penapisan fitokimia dengan tujuan untuk mengidentifikasi kandungan golongan senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak daun benalu batu. Berdasarkan hasil dari uji penapisan  fitokimia  ekstrak  daun  benalu batu  (Begonia  Sp.)  mengandung  senyawa metabolik sekunder yaitu alkaloid, flavonoid,  tanin,  saponin  dan  polifenol.  Hal ini  sesuai  literatur  yang  di  peroleh  bahwa daun  benalu  batu  (Begonia  Sp.)  memiliki kandungan  senyawa  metabolik  sekunder yaitu alkaloid, flavonoid, tanin, saponin dan polifenol.
Pengukuran  kadar  glukosa  darah dilakukan sebanyak lima kali yaitu pada hari ke-0,  hari  ke-7,  hari  ke-14,  hari  ke-21  dan hari  ke-28.  Data  hasil  pengukuran  kadar glukosa  darah  dianalisis  secara  statistik menggunakan  uji  ANOVA  satu  arah  (One Way ANOVA)  dan  Kruskal  Wallis  dengan uji lanjut Mann Whitney.
Data  hasil  pengukuran  rata-rata  kadar glukosa  darah  pada  hari  ke-0  didapat  antara 73,8-89,4 mg/dL. Hal ini menunjukkan tikus putih jantan pada semua kelompok
perlakuan  memiliki  kadar  glukosa  darah normal (50-135 mg/dL). Data kadar glukosa darah  tersebut  kemudian  dianalisis  dengan uji  statistik one  way ANOVA  yang bertujuan  untuk  mengetahui  ada  tidaknya perbedaan  signifikan  kadar  glukosa  darah antar  semua  kelompok  perlakuan.  Hasil  uji menunjukan bahwa terdapat perbedaan tidak signifikan  dengan  nilai P=0,267  (nilai P>0,05).  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  kadar glukosa semua hewan uji sebelum perlakuan dalam keaadaan homogen.
Data  hasil  pengukuran  rata-rata  kadar glukosa  darah  hari  ke-7  untuk  kontrol normal,  kontrol  negatif,  kontrol  positif, kelompok ekstrak etanol dosis 50 mg/kgBB, kelompok ekstrak etanol dosis 100
mg/kgBB,  kelompok  ekstrak  etanol  dosis 200  mg/kgBB  berturut-turut  adalah 341,4 mg/dL,  287,8  mg/dL,  321,4  mg/dL,  245 mg/dL, dan 310,8 mg/dL. Hal ini menunjukkan  bahwa  semua  kelompok perlakuan  kecuali  kontrol  normal  telah mengalami hiperglikemia dan induksi streptozotocin  yang  dilakukan  berhasil membuat  model  hewan  yang  mengalami hiperglikemia. Namun kenaikan kadar glukosa  darah  semua  hewan  uji  bervariasi, dan didapatkan bahwa data tidak terdistribusi  normal,  sehingga  dipakai  uji statistik Kruskal-Wallis.
Hasil uji statistik Kruskal-Wallis pada hari  ke-7  didapatkan  dengan  nilai  P=0,004 (P<0,05)  yang  artinya  terdapat  perbedaan
yang  signifikan  pada  semua  kelompok perlakuan  yang  menunjukkan  adanya  efek dari  pemberian  streptozotocin,  sehingga dilanjutkan  dengan  uji Mann-Whitney untuk melihat  perbedaan  yang  bermakna  antar kelompok  perlakuan.  Hasil  uji lanjut Mann- Whitney menunjukkan bahwa semua kelompok  perlakuan  berbeda  signifikan dengan  kontrol  normal.  Artinya  semua hewan  uji  sudah  dalam  keadaan  tidak  sehat lagi.  Hal  tersebut  diperkuat  dengan  kadar glukosa hewan uji semua kelompok (kecuali normal)  rata-rata  245 – 341  mg/dL.  Karena kondisi  tikus  yang  secara  fisiologi  berbeda- beda sehingga kenaikan kadar glukosa darah pun  berbeda,  kadar  glukosa  darah  masih masuk ke  dalam  kategori  hiperglikemia karena  mengalami  peningkatan  yaitu  >200 mg/dL.  Selanjutnya  diberikan  perlakuan selama  7  hari  berturut-turut  (dari  hari  ke  7 sampai hari ke 14), selanjutnya diukur kadar glukosa darah hari ke 14.
Data  hasil  pengukuran  rata-rata  kadar glukosa darah pada hari ke-14 untuk kontrol normal,  kontrol  negatif,  kontrol  positif, kelompok ekstrak etanol dosis 50 mg/kgBB, kelompok ekstrak etanol dosis 100 mg/kgBB,  kelompok  ekstrak  etanol  200 mg/kgBB  berturut-turut  adalah  90,6  mg/dL, 329,2 mg/dL,  196,8mg/dL,  196,2  mg/dL, 127  mg/dL  dan  118  mg/dL.  Data  tersebut menunjukkan  bahwa  semua  kelompok perlakuan  mengalami  penurunan  tetapi belum  mencapai  keadaan  normal.  Seperti pada  hari  ke  7  kadar  glukosa  hewan  uji sangat  bervariasi,  dari  hasil  analisis  uji normalitas  data  tidak  terdistribusi  normal. Sehingga  digunakan  uji  statsitik  non parametrik.
Hasil uji statistik Kruskal-Wallis pada hari  ke-14  menunjukkan  adanya  perbedaan yang  signifikan  dengan  nilai  P=0,003  (nilai P<0,05)  pada  semua  kelompok  perlakuan, sehingga  dilanjutkan  uji Mann-Whitney untuk  melihat  perbedaan  yang  signifikan antar  untuk  semua  kelompok  perlakuan.
Untuk  melihat  perbedaan  yang  bermakna antar kelompok perlakuan dilanjutkan dengan  uji Mann-Whitney.  Hasil  uji  lanjut Mann-Whitney menunjukkan
bahwa kelompok dosis 50 mg/kg BB berbeda tidak signifikan  dengan  kontrol  negatif  dimana P=0,690  (P>0,05)  dan  berbeda  signifikan dengan  kontrol  normal dimana  p=0,008 (p<0.05) artinya kelompok dosis 50 mg/kgBB  belum  memberikan  efek.  Karena keadaan hewan uji dalam kelompok dosis 50 mg/kgBB  sama  dengan  keadaan  hewan  uji pada  kontrol  negatif,  jika  dibandingkan dengan  kontrol  positif  didapatkan  adanya perbedaan yang tidak signifikan dimana nilai P=0,690  (P>0.05)  artinya  glibenklamid dengan  waktu  pemberian  1  minggu  belum memperlihatkan adanya efek, demikian juga halnya pemberian ekstrak dosis 50
mg/kgBB. Hal ini disebabkan karena jumlah kandungan  metabolit  sekunder  pada  dosis tersebut  sangat  rendah  sehingga  belum mampu  memberikan  efek  penyembuhan. Untuk  kelompok  dosis  100  mg/kgBB berbeda  signifikan  dengan  kontrol  negatif dimana P=0.032 (P<0,05) dan berbeda tidak signifikn  dengan  kontrol  normal  dimana P=(1.000)  (P>0.05).  Artinya dosis  100 mg/kgBB sudah memberikan efek dan sudah kembali  normal.  Hal  tersebut disebabkan karena  kandungan  zat  metabolit  sekunder yang  ada  dalam  ekstrak  sudah  cukup  untuk memberikan  efek  penyembuhan.  Sama halnya  dengan  kelompok  100  mg/kgBB demikian  juga  dengan  kelompok  dosis  200 mg/kgBB  berbeda  tidak  signifikan  dengan kontrol normal dimana nilai P=0.08
(P<0,05)  serta  berbeda  signifikan  dengan kontrol negatif dimana nilai p=0,08 (P>0,05) hal  ini  mengindikasikan  bahwa  hewan  uji pada kelompok pemberian ekstrak dosis 200 mg/kg BB belum sehat namun tidak separah lagi  dengan  hewan  uji  yang ada  pada kelompok kontrol negatif. Artinya
pemberian  dosis  200  mg/kgBB  sudah memberikan  efek  namun  belum  maksimal
karna  belum  sama  dengan  kontrol  normal. Namun  jika  dibandingkan  dengan  kontrol positif  memberikan  hasil  yang  berbeda signifikan  dimana  P=0,08 (P<0,05)  dan jika dilihat  kadar  glukosa  rata-rata  kelompok dosis  200  mg/kgBB  (118,8  mg/dL)  jauh lebih  rendah  dari kadar  glukosa  darah kontrol  positif  yaitu  (196,8  mg/dL)  yang mengindikasikan  bahwa  efek  ekstrak  etanol daun  benalu  batu  dosis  200  mg/kgBB  lebih baik dibandingkan dengan pemberian glibenklamid.
Data  hasil  pengukuran  rata-rata  kadar glukosa darah pada hari ke-21 untuk kontrol normal,  kontrol  negatif,  kontrol  positif, kelompok ekstrak etanol dosis 50 mg/kgBB, kelompok ekstrak etanol dosis 100 mg/kgBB dan  kelompok  ekstrak  etanol  dosis  200 mg/kgBB  berturut-turut  adalah  90,4  mg/dL, 314,2  mg/dL,  108,8  mg/dL,  158,8  mg/dL, 123,4  mg/dL  dan  112,4  mg/dL.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  semua  kelompok perlakuan  mengalami  penurunan  tetapi belum  mencapai  keadaan  normal.  Seperti pada  hari  ke  14  kadar  glukosa  hewan  uji sangat  bervariasi,  dari  hasil  analisis  uji normalitas  data  tidak  terdistribusi  normal. Sehingga  digunakan  uji  statsitik  non parametrik.
Hasil uji statistik Krsukal-Wallis pada hari  ke-21  menunjukkan  adanya  perbedaan yang signifikan nilai P=0,001 (P<0,05) pada semua kelompok perlakuan, sehingga dilanjutkan  dengan  uji Mann-Whitney untuk melihat  perbedaan  yang  signifikan  antar semua  kelompok  perlakuan.  Untuk  melihat perbedaan  yang  bermakna  antar  kelompok perlakuan  dilanjutkan  uji  man  whitney. Hasil uji Mann-Whitney menunjukkan Kelompok  pisitif,  dosis  50  mg/kgBB,  dosis 100  mg/kgBB dan  dosis  200  mg/kgBB mmperlihatkan  hasil  yang  berbeda  tidak signifikan.  Keempat  kelompok  tersebut berbeda  signifikan  dengan  kontrol  negatif artinya  hewan  uji  yang  ada  pada  kelompok tersebut  sudah  mengalami  perubahan  (tidak
sakit),  akan  tetapi  masih  berbeda  signifikan dengan  kelompok  normal  artinya  sekalipun hewan uji sudah mulai mengalami perubahan  namun  belum  sehat  seperti kelompok normal. Hal ini disebabkan karena dosis  50  mg/kgBB  dosis  100  mg/kgBB  dan dosis  200  mg/kgBB  serta  glibenklamid sudah  memberikan  efek  penyembuhan namun belum maksimal. sehingga dilanjutkan  memberikan  pemberian  7  hari kedepan.
Data  hasil  pengukuran  rata-rata kadar glukosa darah pada hari ke-28 untuk kontrol normal,  kontrol  negatif,  kontrol  positif, kelompok ekstrak etanol dosis 50 mg/kgBB, kelompok  ekstrak  dosis  100  mg/kgBB,  dan kelompok  ekstrak  dosis  200  mg/kgBB berturut-turut  adalah  90,2  mg/dL,  280,6 mg/dL, 96 mg/dL, 101,8 mg/dL, 78,6 mg/dL dan  88  mg/dL.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa semua  kelompok  perlakuan  mengalami penurunan  dan  sudah  mencapai  keadaan normal dan hasil analisis uji normalitas data tidak terdistribusi normal, sehingga digunakan uji statsitik non parametrik.
Hasil  uji  statistik Kruskal-Wallis pada  hari  ke-28  didapatkan  nilai  P=0,003 (P<0,05)  yang  artinya  terdapat  perbedaan signifikan  pada  semua  kelompok  perlakuan, sehingga  dilanjutkan  dengan  uji Man- Whitney untuk  melihat  perbedaan  yang bermakna  antar  kelompok  perlakuan.  Hasil uji lanjut Man-Whitney menunjukkan bahwa dosis 50 mg/kgBB dosis 100 mg/kgBB dosis 200  mg/kgBB  kontrol  positif  dan  kontrol normal  memberikan  hasil  yang  berbeda tidak  signifikan.  Jika  dibandingan  dengan kontrol  negatif,  kelima  kelompok  tersebut memberikan  hasil  yang  berbeda  signifikan dengan  hal  ini  menunjukan  bahwa  kontrol positif,  dosis  50  mg/kgBB  dosis  100 mg/kgBB  dan  dosis  200  mg/kgBB  sudah kembali  sama  seperti  hewan  uji  pada kelompok normal.
Pemberian  ekstrak  daun  benalu  batu memperlihatkan  hasil  yang  maksimal  pada
hari  ke  28.  (Pemberian  ekstrak  selama  3 minggu).  Efek  penurunan  kadar  glukosa darah  yang  diberikan  oleh  ekstrak  etanol daun  benalu  batu  disebabkan  karena memiliki  kandungan  senyawa  tanin,  saponi, flavonoid dan alkaloid.
Hasil analisis  uji Mann-whitney pada
pengamatan kerusakan histopatologi pankreas tikus dari masing-masing kelompok  perlakuan,  menunjukkan  bahwa perlakuan ekstrak daun benalu batu dosis 50 mg/kg  BB,  100  mg/kg  BB,  dan  200  mg/kg BB  berbeda  signifikan  (p<0,05)  dengan kelompok  kontrol  normal  yang  menyatakan bahwa  variasi  dosis  bertingkat  tersebut dalam  memperbaiki  sel  pankreas  belum sama  dengan  kontrol  normal.  Hal  ini disebabkan  karena bahan  alam  memiliki efek  farmakologis  yang  lemah  dan  lambat sehingga diperlukan waktu yang relatif lama untuk  memberikan  efek  dibanding  obat kimia.  Hal  ini  juga  disebabkan  karena umumnya  organ  yang  telah  rusak  sangat sukar untuk kembali dalam keadaan normal. Sedangkan  dosis  50  mg/kg  BB,  100  mg/kg BB,  dan  200  mg/kg  BB  berbeda tidak signifikan  dengan  kelompok  kontrol  negatif yang menyatakan bahwa variasi ketiga dosis tersebut  memiliki  tingkat  kerusakan  yang sama  dengan  kontrol  negatif.  Hal  ini menandakan bahwa dosis 50 mg/kg BB, 100 mg/kg  BB,  dan  200  mg/kg  BB belum memberikan  efek  dalam  meregenerasi  sel beta  pankreas.  Hal  ini  disebabkan  karena rentang  waktu  yang  digunakan  untuk  terapi tidak  begitu  lama  sehingga  senyawa metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam ekstrak  daun  benalu  batu  belum  mampu mencapai  efek  perbaikan  dalm  sel-sel pankreas secara maksimal. Hal ini didukung dengan  metode  pengobatan  yang  digunakan yaitu secara non farmkologi atau tradisional. Dimana secara teoritis, pengobatan tradisional  merupakan  obat  yang  bersifat alami atau organik dan umumnya kandungan senyawa  metabolit  sekunder  dalam  tanaman
berjumlah  sedikit.  Sehingga  membutuhkan waktu  terapi  yang  lebih  lama  untuk mencapai  efek  terapi (15,16) . dosis  50  mg/kg BB,  100  mg/kg  BB,  dan  200  mg/kg  BB berbeda  tidak  signifikan  dengan  kontrol positif yang menyatakan bahwa ketiga dosis bertingkat tersebut memiliki efek yang sama dengan  kontrol  positif.  Hal  ini  menandakan bahwa kandungan senyawa metabolit
sekunder  pada  ekstrak  etanol  daun  benalu batu memiliki efek terapi yang sama dengan obat  glibenklamid.  Hal  ini  disebabkan karena obat glibenklamid memiliki mekanisme kerja merangsang sekresi
insulin, sehingga ia hanya dapat menurunkan  kadar  glukosa  darah  tetapi glibenklamid  tidak  dapat  meregenerasi  sel beta pankreas. Hal iniah yang menyebabkan kontrol  positif  tidak  menimbulkan  efek terapi dalam meregenerasi sel beta pankreas (17,18) .
Hasil  perbandingan  dengan  penilitian terdahulu  yaitu  pada  ekstrak  etanol  daun kenikir  pada  dosis  400  mg/kg  BB memiliki efek  terhadap meregenerasi  sel  β  pankreas dengan  nilai  rata-rata  kerusakan  0,25 15 .  Uji efek ekstrak etanol daun kemangi pada dosis 800  mg/kg  BB  memiliki  efek  terhadap regenerasi  sel  β  pankreas  dengan  rata -rata kerusakan 0,2 17 . Penelitian lain  juga menyatakan  ekstrak  etanol  daun  jambu  air pada  dosis  300  mg/kg  BB  efektif  dalam meregenerasi sel β pankreas dengan rata-rata kerusakan 1,3 (19) .
Bila  dibandingkan  dengan penelitian ekstrak  etanol  daun benalu  batu dosis 50 mg/kg BB dengan skoring rata-rata kerusakan  2  penelitian  terdahulu  lebih  baik karena  memiliki  selisih  1,75  dari  daun kenikir, selisih sebesar 1,8 dari daun benalu batu,  dan selisih  sebesar  0,67 dari  daun jambu  air. Ketiga  penelitian ini memiliki rata-rata  kerusakan  yang  lebih  baik  bila dibandingkan  dengan  daun  benalu  batu  Hal ini  menunjukkan  bahwa  daun  benalu  batu kura ng  baik  dalam  meregenerasi  sel  β
pankreas. Penyebab ini dikarenakan tanaman benalu batu merupakan tanaman epifit yaitu tanaman yang hidupnya membutuhkan inang atau tempat tumbuh, benalu batu juga hidup diatas  bebatuan  yang  kering  sehingga memiliki  unsur  hara  yang  sangat  sedikit berupa  metabolit  primer  dibandingkan penelitian terdahulu dan memiliki
kandungan  senyawa  metabolit  sekunder berupa alkaloid, flavonoid, polifenol, saponin dan tanin.

## SIMPULAN
1. Senyawa metabolit sekunder pada ekstrak etanol daun benalu batu (Begonia  Sp.)  yaitu  alkaloid,  flavonoid, tanin, saponin dan polifenol.
2. Ekstrak Ekstrak etanol daun benalu batu (Begonia sp.)  dengan  dosis  50  mg/kg BB  merupakan  dosis  yang  efektif memberikan  efek  terhadap  penurunan kadar  glukosa  darah  tikus putih  jantan (Rattus  norvegicus)  dengan  nilai  rata- rata  penurunan  kadar  glukosa  darah 101,8 mg/dL.
3. Ekstrak  etanol daun  benalu  batu (Begonia  Sp.) pada  variasi  dosis
bertingkat  (50,  100,  200  mg/kg  BB) belum  memberikan efek terapi sehingga belum  menunjukkan  dosis  yang  efektif terhadap gambaran
histopatologi
pankreas  tikus  putih  jantan  yang diinduksi streptozotocin.

## SARAN
Berdasarkan  hasil  peneltian  yang telah dilakukan makadisarankan untuk dilakukan peneltian lanjutann. Perlu dilakukan  penelitian  dengan  rancangan  yang lebih  baik  dan  waktu  penelitian  yang  lebih lama  serta  menggunakan  variasi  dosis  yang lebih  tinggi  sehingga mencapai  efek  terapi yang  lebih  maksimal,  serta  perlu  dilakukan uji fitokimia secara  kuantitatif untuk menghitung kadar senyawa metabolit
sekunder  dalam  tanaman  daun  benalu  batu
agar  dapat  memastikan  ekstrak  etanol  daun benalu batu dapat dijadian sebagai modalitas terapi pada penderita diabetes.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Tandi,  J.  Muthi’ah,  Yuliet,  Y.  (2016) ‘Efektivitas  Ekstrak  Daun  Gedi  Merah Terhadap Glukosa Darah, Malondialdehid, 8-Hdroksi- Deoksiguanosi,  insulin  tikus  diabetes’, j.Trop,  Pharm,  Chem,  3(4),  pp.  264 – 276.
2. S yaifuddin, H. (2011) ‘Anatomi
Fisiologi’,  in.  Jakarta:  Penerbit  Buku Kedokteran EGC, p. 274.
3. Tandi  J.,  Danthy  R,  Purwaningsih, Kuncoro  H.  2019.  Effect  of  Ethanol Extract  from  Purple  Eggplant  skin (Solonum  melongena L.)  on  Blood Glucosa  Leaves  and  Pancriatic  B  Cells Degeneration  on  White  Rats  Male Hypercholesterolemia-Diabetic.  Journal Of  Pharmacy  and  Tecnology,  12(6), pp.34-46.
4. Tandi,  J.  (2017)  ‘Pengaruh  Ekstrak
Etanol  Daun  Jambu  Air  (Syzygium aqueum (Burm  f.)  Alston)  Terhadap Kadar  Glukosa,  Ureum  dan  Kreatinin
Tikus Putih (Rattus norvegicus), Journal  Of  Tropical  Pharmacy  And
Chemistry, 4(2), pp. 43 – 51.
5. Amidi.,  & Marwati.  (2018).  Pengaruh budaya,  persepsi,  dan  kepercayaan terhadap  keputusan  pembelian  obat herbal. Jurnal  Ilmu  Manajemen, 7(2),
168 – 180. 6. Anam,  S.,  Ritna,  A.  and  Dwimurti,  F. (2014) ‘ Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Metanol Benalu Bato ( Begonia sp .):Ethnomedicine Suku Wana
Sulawesi  Tengah  (  Cytotoxic  Activity of  Benalu  Bato  (  Begonia  sp  .) Methanolic Extract : An Ethnomedicine of  Wana  Tribe  Central  Sulawesi  )’, Jurnal  Ilmu  Kefarmasian  Indonesia, 12(1), pp. 10 – 16.
7. Baqarizky,  F. et  al. (2015)  ‘Gambaran Histopatologik  Pankreas  ,  Hepar  Dan Ginjal  Tikus  Diabetes  Mellitus  Yang Diinduksi Streptozotocin Dengan Pewarnaan Hematoksilin Eosin’, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UN Hidayatulla Jakarta, pp.
2 – 13.
8. Tandi,  J.  Rizky  M,  Mariani  M,  F.  A.
(2017)  ‘Uji Efek  Ekstrak  Etanol  Daun Sukun  (Artocarpus  altilis (Parkinson Ex  F.A.Zorn)  Terhadap  Penurunan Kadar  Glukosa  Darah,Kolestrol  Total Dan  Gambaran  Histopatologi  Pankreas Tikus  Putih Jantan (Rattus  Norvegicus) Hiperkolesterolemia- Diabetes’, Jurnal Sains dan Kesehatan,1(8), pp. 384 – 396. 9. Tandi,  J.,  Wulandari,  Asrifa,  (2017)
‘Efek  Ekstrak  Etanol  Daun  Gendola
Merah (Basella alba L.) terhadap Kadar Kreatinin’, Galenika Journal of Pharmacy), 3(2), pp. 93 – 102.
10. Tandi,  J.  Muthi’ah  H  Z,  Yuliet,  Y. (2016)  ‘Efektivitas  Eks trak  Daun  Gedi
Merah Terhadap Glukosa Darah, Malondialdehid, 8-Hdroksi- Deoksiguanosin', Jurnal Farmasi Galentika , 3(4), pp. 5 – 24.
11. Tuldjannah,  M. Tadjio  Y,  Tandi,  J.
(2018)  ‘Efek  Nefropatik  Ekstrak  Daun
Gedi Merah Terhadap Kadar Kreatinin /
Ureum  Tikus  Putih  Jantan  Diinduksi Etilenglikol’, Farmakologi Jurnal Farmasi, 15(2),pp.13-21.
12. Tandi,  J.,  Roem,  M.  and  Yuliet,  Y. (2017)  ‘Efek  Nefroprotektif  Kombinasi Ekstrak  Daun  Gedi  Merah  dan  Daun Kumis  Kucing  pada  Tikus  Induksi
Etilen  Glikol’, Journal  Of  Tropical Pharmacy And Chemistry, 4(1), pp. 27 – 34.
13. Tandi,  J.  (2017)  ‘Penaruh  Ekstrak
Etanol  Daun  Jambu  Air  (  Syzygium aqueum  (  Burm  f  .)  Alston  )  Terhadap Glukosa  Darah  ,  Ureum  Dan  Kreatinin Tikus  Putih  (  Rattus  norvegicus  )’,
Journal  of  Tropical  Pharmacy  Dan Chemistry, 4(2), pp. 43 – 51.
14. Tandi,  J.,  Rahmawati,  Isminarti,  L.
Lapongoyu,  J. (2018)  ‘Efek  Ekstrak Biji  Labu  Kuning  Terhadap  Glukosa, Kolesteroldan  Gambaran  Histopatologi Pankreas  Tikus  Hiperkolesterolemia- Diabetes’, Talenta  Conference  Series: Tropical Medicine (TM), 1(3), pp. 144 – 151.
15. Tandi,  J.,  Claresta,  J.  A.,  Ayu,  G.  and Irwan,  I.  (2018)  ‘Effect  Of  Ethanol Extract  Of  Kenikir  (Cosmos  caudatus
Kunth.)  Leaves  in  Blood  Glucose, Cholesterol and Histopathology
Pancreas  of  Male  White  Rats  (Rattus norvegicus )’, Pharmaceutical  Science and Technology, 1(1), pp. 70 – 78. 16. Tandi,  J. As,  Suryani.  Natzir,  R. Bukhari,  A (2016)  ‘Test  of  ethanol extract  red  gedi  leaves  (albelmoschus manihot. (l.) medik) in white rat (rattus norvegicus )  type  2  diabetes  mellitus’, International Journal  of  Sciences,
30(4), pp. 84 – 94.
17. Tandi,  J.,  Na’i,  A.  dan  Basilingan,  A.
(2019) ‘Uji Efek Kombinasi EEDS dan
DPW  Terhadap  Penurunan  Kadar
Kolesterol  Dan  Glukosa  Darah  Tikus
Putih Jantan Hiperkolesterolemia- Diabetes’, Jurnal  Pharmacy  Medical,
2(1), pp. 8 – 27
18. Tandi,  J.  (2016)  ‘Uji  Efek  Ekstrak Etanol  Kulit  Terung  Ungu  (solanium melonga L) Terhadap Penurunan Kadar Kolestrol  Total  Dan  Kadar  Glukosa Darah  Tikus  Putih  Jantan  (rattus norvegicus) Hiperkolesterolemia- Diabetes’, Indonesian  Journal Of Pharmaceutical Science and Tecnology, 5(1),pp.25-30.
19. Dewi, N. P. et al. (2018) ‘Efek Ekstrak Etanol  Daun  Jambu  Air  (Syzigium aqueum  (Burm.f.)  Alston  )  Terhhadap Histopatologi  Pankreas  Tikus Putih’, Farmakologika: Jurnal Farmasi, 15(1), pp. 18 – 26.