## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol dan Akuades Daun Ganitri (Elaeocarpus ganitrus Roxb.) Terhadap Bakteri Streptococcus mutans
Antibacterial activity of Elaeocarpus ganitrus leaf methanol and aquadest extract against Streptococcus mutans

## Naelaz Zukhruf Wakhidatul Kiromah*, Wahyu Rahmatulloh
Program Studi Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Muhammadiyah Gombong, Jl. Yos Sudarso No. 461 Gombong, Kebumen 54412, Indonesia *E-mail: naela.zukhruf18@stikesmuhgombong.ac.id 2018

## Abstrak
Streptococcus  mutans merupakan bakteri  yang dapat menyebabkan karies pada gigi. Tujuan  penelitian  ini  adalah  uji  aktivitas  antibakteri  daun  ganitri.  Metode  yang digunakan adalah difusi paper disk dengan konsentrasi ekstrak 10%; 20%; 30%; 40%; 50%  dan  100%.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  dengan konsentrasi  10%,  30%,  50%  dan  100%  memiliki  daya  hambat  kategori  kuat  dengan zona  hambat  masing-masing  15.74  mm,  16.68  mm,  16.70  mm  dan  17,68  mm. Sedangkan  ekstrak  akuades  pada  konsentrasi  30%  dan  100%  memiliki  zona  hambat kategori  sedang  dengan  diameter  11,04  dan  11,39  mm.  Simpulan  dari  penelitian  ini yaitu  terdapat  perbedaan  diameter  zona  hambat  yang  signifikan  pada  setiap perlakuan.  Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak metanol memiliki daya hambat bakteri lebih baik daripada ekstrak akuades daun ganitri ( Elaeocarpus ganitrus Roxb).
Kata kunci: daun ganitri,  difusi paper disk, streptococcus mutans

## Abstract
Streptococcus  mutans  is  responsible  for  cause  the  dental  caries.  The  purpose  of  this research  was  to  test  antibacterial  activity  of  Ganitrus  leaves.  The  bacterial  activity  of methanol  and  aquadest  by  disc  difusion  method  with  10%;  20%;  30%;  40%;  50%  and 100%.  The extracts showed that methanol extract had activity with susceptible category at  concentration  of  10%,  30%,  50%  and  100%  against  Streptococcus  mutans  with inhibition  zone 15.74mm, 16.68 mm, 16.70 mm  and 17.68  mm, respectively. Aquadest extract showed activity with intermediet category of 30% and 100% with inhibition zone 11,04  mm  and  11,39  mm.  The  methanol  extract  showed  that  activity  of  antibacterial better than the aqueous Elaeocarpus ganitrus Roxb levaes.
Keywords: ganitri leaf,  paper disc diffusion, streptococcus mutans

## Artikel Penelitian

## PENDAHULUAN
Gigi  merupakan  salah  satu  jaringan  tubuh  yang  sangat  mudah  mengalami kerusakan. Prevalensi terjadinya masalah kesehatan gigi dan mulut menurut Hasil  Riset  Kesehatan  Dasar  (RISKESDAS)  pada  tahun  2018  sebanyak 57,6% masyarakat Indonesia mengalami  masalah kesehatan  gigi dan mulut (Kemenkes RI, 2018). Pembentukan karies gigi disebabkan beberapa faktor penting  diantaranya  yaitu  mikroorganisme,  host,  makanan,  dan  waktu (Ramayanti, 2013).
Streptococcus  mutans  menjadi  salah  satu  bakteri  yang  berperan  penting dalam pebentukan karies gigi (Ningsih et al., 2016). Mekanisme terjadinya karies  gigi  menurut  teori  asidogenik  karies  gigi  disebabkan  akibat  dari aktivitas  mikoorganisme  terhadap  karbohidrat  yang  menghasilkan  asam. Reaksi  yang ditandai dengan dekalsifikasi komponen inorganik dilanjutkan desintegrasi substansi organik yang berasal dari gigi (Ramayanti, 2013).
Pengobatan  maupun  pencegahan  pembentukan  karies  gigi  secara  umum dilakukan  dengan  menggunakan  sikat  gigi  atau  dengan  menggunakan mouthwash,  keduanya  mengandung  senyawa  aktif  chlorhexidine  yang merupakan senyawa dari bahan kimia jika dalam penggunaannya dilakukan secara  terus  menerus  akan  menimbulkan  efek  samping  berupa  perubahan warna  gigi,  perubahan  sensasi  pengecapan  hingga  dapat  membentuk kalkulus supragingival (Kasuma et al.., 2016).
Efek samping chlorhexidine dapat diminimalisir dengan mengganti senyawa yang  berasal  dari  bahan  sintetis  dengan  senyawa  yang  berasal  dari  bahan alam.  Penggunaan    bahan  alam  selain  efek  samping  yang  minimal,  bahan yang digunakan mudah didapatkan dan mudah dalam penggunaanya (Novita, 2016).  Daun  ganitri  merupakan  salah  satu  tanaman  yang  memiliki  potensi besar sebagai  antibakteri  dengan kandungan kimia berupa flavonoid, tanin, terpenoid dan steroid, saponin dan alkaloid (Pandey et al., 2016).
Kumar  et  al.  (2011),  mengungkapkan  bahwa  ekstrak  akuades  daun  ganitri dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram  positif  yaitu  S.  aureus,  B. cereus  dan  M.  luteus  dengan  hambatan  maksimal  pada  bakteri  B.  cereus sebesar 15.6 mm. Jayashree et al. (2016), menyatakan bahwa ekstrak aseton, metanol,  dan  air  ganitri  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus  yang  merupakan  bakteri  gram  positif  dengan hambatan pada konsentrasi 200 µg/ml sebesar 18,5 mm.
Pandey  et  al.  (2016),  mengungkapkan  bahwa  ekstrak  etanol  dan  metanol daun  ganitri  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  gram  positif  yaitu Staphylococcus aureus dan Bacilllus subtilis dengan hambatan terbesar pada ekstrak  metanol  terhadap  bakteri  Staphylococcus  aureus  sebesar  20  mm. Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  dan perbedaan  daya  hambat  antara  ekstrak  metanol  dan  akuades  daun  ganitri terhadap bakteri Streptococcus mutans.

## BAHAN DAN METODE
Daun  ganitri  (Elaeocarpus  ganitrus  Roxb.)  diambil  dari  wilayah Kabupaten  Kebumen,  Mueller  Hinton  Agar  (MHA),  metanol  70%, akuades,  cakram kertas,  bakteri  Streptococcus  mutans,  asam  asetat, HCL,
n-butanol,  FeCl 3 ,  pereaksi  meyer,  dragendrof,  wagner,  Laminar  Air  Flow (LAF), inkubator, autoklaf, evaporator, blender, alat-alat gelas.
Pembuatan simplisia
Daun  ganitri  yang  diperoleh  dari  Kabupaten  Kebumen  disortasi  dengan mengambil  daun  yang  berwarna  hijau  didapatkan  berat  sebanyak  2463 gram  kemudian  dicuci  dengan  air  berih  yang  mengalir,  dikeringkan dibawah  sinar  matahari  dengan  ditutup  kain  hitam,  simplisia  yang diperoleh dihaluskan dengan blender (Diniatik, 2015).

## Ekstraksi
Pembuatan ekstrak metanol dan akuades dengan metode maserasi. Serbuk daun  ganitri  diambil  sebanyak  200  gram  untuk  masing-masing  pelarut dengan  perbandingan  pelarut  1:10.  Selanjutnya  didamkan  selama  72  jam untuk pelarut metanol dan 24 jam untuk pelarut akuades dengan dilakukan sesekali  pengadukan.  Maserat  yang  diperoleh  dikentalkan  dengan evaporator pada suhu 40°C hingga diperoleh ekstrak kental (Pandey et al., 2016).

## Uji fitokimia
Pemeriksaan  fitokimia  yang  terkandung  dalam  ekstrak  metanol  dan akuades daun ganitri meliputi pemeriksaan fenol, flavonoid, tanin, saponin, triterpenoid dan steroid, glikosida dan alkaloid.
Pemeriksaan fenol
Sebanyak  50  mg  ekstrak  di  larutan  dengan  akuades  kemudian  ditetesi dengan  larutan  FeCl 3 5%.  Ekstrk  dikatakan  positif  mengandung  senyawa fenol  jika  timbul  warna  hijau  kehitaman  setelah  ditetesi  dengan  larutan FeCl 3 5% (Jayashree et al.., 2016).
Pemeriksaan flavonoid
Pada  uji  pereaksi  basa,  ekstrak  daun  ganitri  dilarutkan  dengan  akuades, kemudian  ditambahkan  dengan  beberapa  tetes  larutan  NaOH  20%  akan timbul warna kuning. Ekstrak positif mengandung senyawa flavonoid jika ditetesi dengan HCL warna kuning akan memudar (Talukdar et al., 2017).
Pada uji Wilstater, larutan ekstrak daun ganitri sebanyak 4 ml dicampurkan dengan  metanol  50%  sebanyak  1,5  ml.  larutan  dipanaskan  ditambahkan logam  magnesium.  Ekstrak  positif  mengandung  flavonoid  jika  larutan berubah  menjadi  warna  orange  atau  merah  setelah  ditetsi  HCL  encer (Jayashree et al.., 2016).
Pemeriksaan tanin
Ekstrak dilarutkan pada  akuades kemudian ditambahkan  dengan beberapa tetes  larutan  FeCl 3 1%.  Ekstrak  dikatakan  positif  mengandung  senyawa tanin  dengan  timbulnya  warna  hitam  atau  biru  kehijauan  (Talukdar  et  al., 2017).
Pemeriksaan saponin
Ekstrak  ganitri  diambil  sebanyak  0,5  gram  ditambhkan  dengan  akuades sebanyak  5  ml  selanjutnya  dikocok  kuat.  Ekstrak  mengandung  senyawa sapoin jika pada larutan terbentuk busa (Kumalasari et al., 2020).

## Pemeriksaan triterpenoid dan steroid
Reaksi  Lieberman-Burchard  dilakukan  dengan  mengambil  sebanyak  0,5 gram  ekstrak  dilarutkan  pada  kloroform  0,5  ml,  kemudian  ditambahan dengan  asam  asetat  anhidrat  sebanyak  0,5  ml,  sebanyak  2  ml  asam  sulfat ditambahkan melalui dinding tabung. Ekstrak positif mengandung senyawa triterpenoid  jika  terbentuk  cincin  warna  kecoklatan  atau  violet  pada perbatasan  larutan,  serta  positif  mengandung  steroid  jika  terdapat  cincin warna biru kehijauan (Astarina et al., 2013).
Pemeriksaan glikosida
Ektrak diambil dan dilarutkan pada 5 ml asam asetat anhidrat ditambahkan dengan  asam  sulfat  pekat  sebanyak  10  tetes.  Ekstrak  positif  mengandung glikosida dengan timbulnya warna biru atau hijau (Simaremare, 2014).
Pemeriksaan alkaloid
Ekstrak  diambil  sebanyak  0,5  gram  ditambahkan  dengan  HCL  2  N  dan akuades  sebanyak  9  ml,  dipanaskan  pada  penangas  air  selama  2  menit, disaring  dan  filtrat  diuji  dengan  pereaksi  meyer  jika  positif  mengandung alkaloid  akan  terbentuk  endapan  warna  putih  atau  kuning,  pada  pereaksi dragendrof  timbul  warna  jingga  serta  pada  pereaksi  wagner  timbul  warna coklat (Rachman et al., 2018).
Identifikasi senyawa dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Identifikifasi  menggunakan  fase  diam  berupa  silika  gel  GF 254 dan  fase gerak  campuran  n-butanol:asam  asetat:air  dengan  perbandingan  3:1:1, diamati pada spektrofotometri UV 254 nm dan 365 nm. Pembanding yang digunakan  berupa  kuarsetin  dan  asam  tanat.  Senyawa  fenol  diidentifikasi dengan  menyemprot  plat  KLT  dengan  penampak  bercak  FeCl 3 ekstrak yang  positif  mengandung  senyawa  fenol  akan  menimbulkan  warna  hijau, merah, coklat, ungu, biru, atau hitam yang kuat (Tripathi et al., 2015).
Inokulasi bakteri
Bakteri  uji  diambil  dari  biakan  murni  kemudian  digoreskan  pada  media agar  miring  yang  telah  disediakan  dengan  jarum  ose  steril,  kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam (Handayani et al., 2016)
Suspensi bakteri
Suspensi bakteri dibuat dengan mengambil biakan bakteri dan dimasukkan kedalam  larutan  NaCl  0,9  %,  kemudian  divortex  dan  dicocokan  dengan larutan standar Mc. Farland (As’ari et al., 2016)
Uji sensitivitas antibiotik
Media diambil sebanyak 20 ml kemudian dituangkan kedalam cawan petri steril  didiamkan  hingga  dingin,  kemudian  ditambahkan  suspensi  bakteri sebanyak  1  ml,  disk  antibiotik  yang  sebelumnya  direndam  pada  larutan amoxicillin,  ciprofloxacin,  dan  kloramfenikol  selama  15  menit  kemudian diletakkan diatas media yang sudah ditambahkan suspensi bakteri  uji dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C (Muhammad et al., 2017).
Clear zone (zona hambat) yang diperoleh kemudian diukur dengan jangka sorong  hasil  pengukuran  kemudian  dibandingkan  dengan  tabel  CLSI (Clinical  Laboratory  Standars  Insitute)  untuk  menentuan  antibiotik  yang digunakan sensitif, intermediate dan resisten (Said, 2014).

## Uji aktivitas antibakteri
Uji daya hambat ekstrak etanol dan akuades dengan konsentrasi 10; 20; 30; 40;  50  dan  100%  b/v  dengan  metode  yang  digunakan  yaitu  difusi  paper disk.  Bakteri  ditanam  pada  media  MHA  di  cawan  petri.  Cawan  petri diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Percobaan direplikasi sebanyak 3  kali.  Diameter  zona  bening  yang  didapatkan  selanjutnya  diukur  dengan jangka sorong menggunakan rumus (Kristanti, 2014):
Keterangan: R = Diameter zona hambat (mm) p = Diameter zona hambat terpanjang (mm) q = Diameter zona hambat terpendek (mm)
Tabel 1.  Kriteria diameter zona hambat (Surjowardojo et al., 2015)
Besaran Diameter Kekuatan Hambatan ≥ 21 mm Sangat kuat 11-20 mm Kuat 6-10 mm Sedang ≤ 5 mm Lemah Analisia data
Uji  aktivitas  antibakteri  diulang  sebanyak  3  kali  replikasi.  Diameter  zona hambat  dinyatakan  dalam  rata-rata replikasi  ±  standar deviasi  (SD). Hasil pengujian  dianalisis  dengan  one  way  Anova  pada  taraf  kepercayaan  95% dengan  program  spss  versi  16  jika  data  tidak  terdistribusi  dengan  normal maka analisis dilakukan dengan uji Kruskal wallis.

## HASIL

## Ekstraksi
Daun  ganitri  (Elaeocarpus  ganitrus  Roxb.)  yang  digunakan  merupakan daun  yang  segar  dan  berwarna  hijau.  Daun  yang  telah  dicuci  bersih kemudian  dijemur  secara  tidak  langsung  terhadap  matahari.  Hal  ini dilakukan  untuk  menghindari  pemanasan  berlebih  terhadap  daun  ganitri (Elaeocarpus  ganitrus  Roxb.).  Metode  maserasi  dipilih  untuk  ekstraksi serbuk  simplisia  daun  ganitri  (Elaeocarpus  ganitrus  Roxb.)  karena  metode yang  sederhana  dan  mampu  mengekstraksi  bahan-bahan  yang  tidak  tahan terhadap  pemanasan  seperti  daun.  Pelarut  yang  digunakan  adalah  metanol 70%  dan  akuades  karena  kedua  pelarut  ini  bersifat  polar  sehingga diharapkan  dapat  menarik  senyawa  aktif  di  dalam  daun  ganitri.    Maserat dikentalkan  dengan  rotary  evaporator.  Ekstrak  yang  diperoleh  ditimbang dan dihitung nilai rendemennya. Hasil yang didapatkan tersaji pada tabel 2.
Tabel 2.  Hasil ekstraksi
Parameter Metanol Akuades Berat Simplisia (gr) 200 200 Berat Ekstrak (gr) 63.59 46.75 Rendemen (%) 31.79 23.38

## Pemeriksaa fitokimia
Ekstrak  metanol  dan  akuades  daun  ganitri  positif  mengandung  senyawa fenol  dengan  timbulnya  warna  hijau  kehitaman.  Senyawa  flavonoid  positif terkandung  pada  ekstrak  metanol  dan  akuades  dengan  timbulnya  warna kuning dan warna kuning akan memudar setelah ditetesi dengan HCL  pekat pada  uji  pereaksi  basa.  Pada  pengujian  wilstater  menunjukan  hasil  positif yang  ditandai  dengan    timbulnya  perubahan  warna  setelah  ditambahkan dengan logam magnesium menjadi orange.
Tabel 3. Hasil skrining fitokimia
Uji Fitokimia Ekstrak Keterangan Metanol   Akuades Fenol + + Hijau kehitaman Flavonoid 1. Pereaksi basa + + Kuning 2. Wilstater + + Orange Tanin + + Biru kehitaman Saponin + + Timbul busa Triterpenoid + + Cincin kecoklatan Steroid - - - Glikosida + + Hijau Alkaloid - - -
Tanin  positif  terkandung  pada  ekstrak  metanol  dan  akuades  daun  ganitri yang  ditandai  dengan  timbulnya  warna  hitam.  Pengujian  saponin  yang dilakukan  membuktikan  bahwa  ekstrak  metanol  dan  akuades  positif mengandung  senyawa  saponin  dengan  timbulnya  busa  selama  10  menit setelah  penggojogan.  Pemeriksaan  triterpenoid  dan steroid  ekstrak  metanol dan  akuades  positif  mengandung  senyawa  tritepenoid  yang  dibuktikan dengan timbulnya cincin kecoklatan pada perbatasan larutan sementara pada pengujian steroid tidak timbul warna biru kehijauan.
Pemeriksaan  glikosida  yang  dilakukan  dengan  penambahkan  sebanyak  10 tetes  asam  sulfat  pekat  dengan  timbulnya  warna  hijau  yang  menandakan ekstrak  positif  senyawa  glikosida.  Sementara  pada  pemeriksaan  alkaloid tidak  terbentuknya  endapan  warna  putih  atau  kuning  pada  pereaksi  meyer, pada  pereaksi  dragendrof  tidak  timbul  warna  jingga  dan  pada  pereaksi wagner tidak terdapat warna coklat.

## Identifikasi senyawa kromatografi lapis tipis
Identifikasi  KLT  didapatkan  Rf  dengan  nilai  sebesar  0.89  noda  1  dan 0,98 noda  2  pada  ekstrak  metanol  dengan  perbandingan  kuarsetin  dengan  nilai 0.98  dan  asam  tanat  0.95,pada  ekstrak  kuades  dengan  nilaiRf  sebesar  0.88 pada  noda1  dan  0.91  pada  noda  2  dengan  pembanding  kuarsetin  0.96  dan asam  tanat  0.91  dari  hasil  perhitungan  nilai  Rf  yang  mendekati  dengan pembandingnya  maka  ekstrak  metanol  dan  akuades  positif  mengandung senyawa  flavonoid  dan  tanin.  Plat  kromatogram  disemprot  dengan  FeCl 3
menunjukan  warna  hitam  sehingga  disimpulkan  bahwa  ekstrak  positif mengandung senyawa fenol.
Gambar  1.  Visualisasi  plat  kromatogram  lapis  tipis  ekstrak  metanol,  dan  akuades pada  panjang  gelombang  254  nm  (a),  365  nm  dan  perekasi  semprot FeCl 3 (b). (i) kuarsetin (ii) asam tanat (iii) akuades (iv) metanol.

## Uji sensitivitas antibiotik
Hasil uji sensitivitas antibiotik terhadap bakteri Streptococcus mutans dapat dilihat  pada  gambar  2  dan  tabel  4.  Uji  sensitivitas  pada  penelitian  ini menggunakan  tiga  antibiotik  yaitu  amoksisilin,  siprofloksasi,  dan kloramfenikol.  Prinsip dari uji sensitivitas terhadap antibiotik adalah suatu kemampuan antibiotik dalam menghambat pertumbuhan bakteri Streptococus mutans secara in  vitro, sehingga dapat  dipilih sebagai kontrol positif  pada  penelitian  ini.  Pengujian  sensitivitas  antibiotik  ini  di  bawah kondisi standar yang  berpedoman  pada  Clinical  and Laboratory Standards Institute (CLSI) (Soleha, 2015).
Gambar 2. Uji sensitivitas antibiotik amoksisilin (A), kloramfenikol (Ci), siprofloksasin (Ca)  yang  digunakan  untuk  menentukan  sensitivitas  antibiotik  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans.
(a) (c) ( (b) i    ii   iii      iv           i    ii    iii       iv            i     ii    iii   iv
Tabel 4. Hasil Uji Sensitivitas Senyawa Standar diameter zona hambat (mm) Diameter zona hambat (mm) Keterangan S I R Amoksisilln ≥16 - - 20.72 Sensitif Siprofloksasin - -- - 11.54 Resisten Kloramfenikol ≥21 18-20 ≤15 11.08 Resisten
Berdasarkan  tabel  4  menunjukan  bahwa  antibiotik  amoxicillin  mampu menghambat    pertumbuhan  bakteri  Streptococcus  mutans  dengan  diameter zona  hambat  sebesar  20.72  mm  yang  dikategorikan  sensitif  dan  pada pengujian  menggunakan  antibiotik  ciprofloxacin  didapatkan  nilai  diameter hambatan  sebesar  11.54  mm  dan  pada  senyawa  kloramfenikol  didapatkan diameter  zona  hambat  sebesar  11.08  mm.  Menurut  tabel  CLSI  yang digunakan  bahwa  antibiotik  siprofloksasin  dan  kloramfenikol  dinyatakan resisten dalam menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji aktivitas antibakteri diperoleh bahwa ekstrak metanol dan akuades daun ganitri memiliki potensi yang dapat digunakan sebagai antibakteri.  Ekstrak metanol  dan  akuades  daun  ganitri  (Elaeocarpus  ganitrus  Roxb) menggunakan  seri  konsentrasi  10;  20;  30;  40;  50  dan  100%.  Hasil  uji aktivitas antibakteri ekstrak metanol dan akuades ditunjukkan pada gambar 3 dan 4. Gambar 3 menunjukkan bahwa ekstrak metanol dan akuades daun ganitri  mempunyai  aktivitas  antibakteri  terhadap  Streptococcus  mutans dengan  terbentuknya  diameter zona  hambat  (clear  zone)  setelah  diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.
i Ii
Gambar  3. Uji aktivitas  antibakteri (i) ekstrak metanol dan (ii)  ekstrak  akuades    1. Konsentrasi  10%,  2.  Konsentrasi  20%,  3.  Konsentrasi  30%,  4. Konsentrasi 40%, 5. Konsentrasi 50%, 6. Konsentrasi 100%
+ - 10 20 30 40 50 10 0 + - 10 20 30 40 50 10 0 0 10 20 30 Konsentrasi (%) D ia m e te r z o n a h a m b a t (m m ) Ekstrak metanol Ekstrak air
Gambar 4. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak metanol dan akuades daun ganitri (Elaeocarpus ganitrus Roxb) terhadap bakteri Streptococcus mutans
Berdasarkan hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak metanol dan akuades pada gambar  4  menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol  memiliki  aktivitas antibakteri lebih baik daripada ekstrak akuades pada tiap konsentrasi. Pada gambar 4 juga menunjukkan bahwa pada konsentrasi 10%  ekstrak akuades menunjukkan    aktivitas  antibakteri  dengan  kategori  kuat  sebesar 15,74±3,11. Sedangkan konsentrasi maksimal daya hambat ekstrak metanol adalah  100%  dengan  diameter  zona  hambat  sebesar  17,86mm±3,10.  Hasil uji  daya  hambat  terhadap  bakteri  Streptococcus  mutans  ekstak  metanol apabila  dibandingkan  dengan    kontrol  positif,  ekstrak  metanol  memiliki diameter  zona  hambat  lebih  kecil.    Diamater  zona  hambat  kontrol  positif sebesar 20,72mm ±6,45.

## PEMBAHASAN
Ekstrak metanol dan akuades memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Streptococcus  mutans  dengan  terbentuknya  diameter  zona  hambatan. Ekstrak  metanol  dan  akuades  daun  ganitri  memiliki  nilai  signifikansi sebesar 0.003 ≤ 0.05 yang artinya ekstrak metanol dan akuades dengan seri konsentrasi  yang  digunakan  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  dalam menghambat pertumbuhan bakteri streptococcus mutans.
Pandey  (2016),  mengungkapakan  bahwa  daun  ekstrak  daun  ganitri mengandung  senyawa  aktif  berupa  flavonoid,  tanin,  saponin,  triterpenoid, steroid  dan  alkaloid.  Hal  ini  berbeda  dengan  hasil  skrining  fitokimia  yang telah  dilakukan  dengan  hasil  bahwa  ekstrak  daun  ganitri  mengandung senyawa  aktif  berupa  fenol,  saponin,  flavonoid,  glikosida  dan  triterpenoid. Pandey  (2015),  menjelaskan  bahwa  kandungan  senyawa  aktif  daun  ganitri dipengaruhi oleh beberapa faktor yaitu lingkungan, iklim, fakorgenetik, dan faktor stres lingkungan (logam berat, elicator, sinar UV).
Diameter zona hambat  yang terbentuk  memiliki  ukuran  yang berbeda-beda dan cenderung semakin besar diameter zona hambat yang diperoleh seiring dengan  semakin  tinggi  konsentrasi  yang  digunakan.  Pada  beberapa konsentrasi terdapat diameter zona hambat yang cenderung turun. Diameter zona hambat terbesar terdapat pada ekstrak metanol pada konsentrasi 100% dengan  nilai sebesar 17.68 mm ± 3.10.  Madigan  et al. dalam  Lingga et al. (2016),  mengungkapkan  bahwa  diameter  zona  hambat  yang  terbentuk
dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  yaitu  jumlah  antibakteri  yang  diteteskan ke  paper  disk,  daya  larut  antibakteri  ke  media,  koefisien  difusi,  dan efektifitas antibakteri yang digunakan.
Parekh  dalam  Angelica  (2013),  mengungkapkan  bahwa  suatu  ekstrak dikatakan  memiliki  potensi  sebagai  antibakteri  dengan  terbentuknya  clear zone sebesar 1.4 cm atau lebih.

## SIMPULAN
Ekstrak metanol memiliki daya hambat bakteri lebih baik daripada ekstrak akuades daun ganitri ( Elaeocarpus ganitrus Roxb). Ekstrak metanol pada konsentrasi  10%  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  dengan  kategori  kuat. Konsentrasi  maksimal  daya  hambat  antibakteri  ekstrak  metanol  sebesar 100%.

## REFERENSI
Angelica,  N.  (2013).  Aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  dan  kulit batang  kayu  manis  (Cinnamomum  burmannii  (Nees  &  Th.  Nees)) Terhadap  Escherichia  coli  dan  Staphylococcus  aureus.  Calyptra : Jurnal Ilmiah Mahasiswa Universitas Surabaya, 2(2), 1–8.
As’ari,  H.,  Kurnia,  T.  I.  D.,  &  Nurchayati,  N.  (2016).  Aktivitas Antimicrobial  Ekstrak  Etanol  Biji  Ganitri  (Elaeocarpus  sphaericus schum.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Patogen.  Bioedukasi, XIV(2), 14–18.
Astarina,  N.  W.  G.,  Astuti,  K.  W.,  &  Warditiani,  N.  K.  (2013).  Skrining Fitokimia  Ekstrak  Metanol  Rimpang  Bangle  (Zingiber  purpureum Roxb.). Jurnal Farmasi Udayana, 2(4).
Diniatik.  (2015).  Penentuan  Kadar  Flavonoid  Total  Ekstrak  Etanolik  Daun Kepel  (Stelechorpus  burahol  (Bl.) Hook f.  &  Th.)  Dengan Metode Spektrofotometri. Kartika-Jurnal Ilmiah Farmasi, II(1), 1–5. Handayani,  F.,  &  dkk.  (2018).  Formulasi  Dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri Streptococcus  mutans  Dari  Sediaan  Mouthwash  Ekstrak  Daun Jambu Biji (Psidium guajava L.). Jurnal Sains Dan Kesehatan, 1(8), 74–84. https://doi.org/10.25026/jsk.v1i8.62 Jayashree,  I.,  Geetha,  D.  H.,  &  Rajeswari,  M.  (2016).  Evaluation  of  Anti- Microbial  Activity  of  Elaeocarpus  tuberculatus  Roxb  .  American- Eurasian  J.  Agric.  &  Environ.  Sci,  16(11),  1726–1731. https://doi.org/10.5829/idosi.aejaes.2016.1726.1731 Kasuma, N., Fajrin, F. N., Aldi, Y., & Fitri, H. (2016). Pengaruh obat kumur ekstrak  morinda  citrifolia  l.  sebagai  antigingivitis.  Dentika  Dental Jounal, 19(2), 102–109. https://doi.org/10.32734 Kementerian Kesehatan RI. (2018). Hasil Utama Riskesdas 2018. Hal 96. Kristanti,  Karenia  Ully  Imaculata.  (2014).  Uji  Aktivitas  Antibakteri  dari Ekstrak  Tanaman  Suruhan  (Peperomia  pellucida  L.)  Terhadap Pertumbuhan  bakteri  Escherichia  coli  dan  Bacillus  cereus  Secara In-Vitro Serta Kaitannya Dengan Pembelajaran Biologi SMA Kelas X. Skripsi. Universitas Sanata Dharma.
Kumalasari, M. L. F., & Andiarna, F. (2020). Uji Fitokimia Ekstrak Etanol Daun  Kemangi  (Ocimum  basilicum  L).  Indonesian  Journal  for Health Sciences, 4(1), 39–44.
Kumar, G., Logananthan, K., & Rao, K. B. (2011). Antimicrobial activity of
Elaeocarpus  ganitrus  Roxb  (  Elaeocarpaceae  ):  An  in  vitro  Bio Technology  Antimicrobial  activity  of  Elaeocarpus  ganitrus  Roxb (  Elaeocarpaceae  ):  An  in  vitro  study.  Elixir  Bio  Technologi, 40(2014), 5384–5387.
Lingga, A. R., Pato, U., & Rosi, E. (2016). Uji Antibakteri Ekstrak Batang Kecombrang  (Nicolaia  speciosa  Horan)  Terhadap  Staphylococcus aureus  dan  Escherichia  coli.  JOM  Faperta,  3(1),  99–102. https://doi.org/10.13581/j.cnki.rdm.20161021.001
Muhammad,  A.,  Nurulita,    nunuk  aris,  &  Budiman,  A.  (2017).  Uji Sensitivitas  Antibiotik  Terhadap  Bakteri  Penyebab  Infeksi  Saluran Kemih  Pada  Pasien  Rawat  Inap  di  RSUD.  Prof.  Dr  Margono
Soekarjo Purwokerto. Pharmacy, 14(02), 247–263. https://doi.org/10.30595/pharmacy.v14i2.1684
Ningsih,  S.  U.,  Restuastuti,  T.,  &  Endriani,  R.  (2016).  Gambaran pengetahuan  dan  Sikap  menyikat  Gigi  pada  Siswa-Siswi  Dalam mencegah Karies di SDN 005 Bukit Kapur dumai. Jom FK, 3(2), 1– 11.
Novita, W. (2016). Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Daun Sirih (Piper betle L)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Streptococcus  mutans  Secara Invitro. JMJ, 4(2), 140–155.
Pandey,  A.,  Misra,  P.,  &  Trivedi,  P.  (2015).  Constitutive  Espression  of
Arabidopsis  MYB  Transcription  Factor,  AtMYB11,  in  Tobacco Modulates Flavonoid  Biosynthesis in  Favor  o  Flavonol Accumulation. Plant Cell Reports, 34, 1515–1528. https://doi.org/10.1007/s00299-015-1803-z Pandey, K., Singh, M., Pandey, B., Upadhyaya, A., & Pande, K. K. (2016). Preliminary phytochemical screening and antimicrobial activities of plant  extract  of  Elaeocarpus  ganitrus  Roxb  .  International  Journal Of Bioassays, 5(9), 4885–4889. https://doi.org/10.21746/ijbio.2016.09.0019
Rachman,  A.,  Wardatun,  S.,  &  Weandarlina,  I.  Y.  (2015).  Isolasi  dan Identifikasi  Senyawa  Saponin  Ekstrak  Metanol  Daun  Binahong (Anredera  cordifolia  (Ten).  Steenis).  Journal  Online  Mahasiswa (JOM) Bidang Farmasi, 1(1), 1–6.
Ramayanti, S., & Purnakarya, I. (2013). Peran Makanan terhadap Kejadian Karies  Gigi.  Jurnal  Kesehatan  Masyarakat,  7(2),  89–93. https://doi.org/https://doi.org/10.24893/jkma.v7i2.114 Said, A. (2014). Analisis pola kuman dan hasil kepekaan anti mikroba pada otitis media supuratif kronik di RSUP Dr. Wahidin Sudirohusododan RS Daya Makasar tahun 2013. Tesis. Universitas Hasanudin Makassar.
Simaremare,  E.  S.  (2014).  Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Daun  Gatal (Laportea  decumana  (Roxb.)  Wedd).  Pharmacy,  11(01),  98–107. https://doi.org/10.30595/pji.v11i1.855 Soleha,  T. U. (2015). Uji Kepekaan Terhadap  Antibiotik.  Juke Unila, 5(9), 120.
Surjowardojo, P., Susilorini,  tri eko, & Sirait,  gabriel ruth batsyeba. (2015). Daya  Hambat  Dekok  Kulit  Apel  Manalagi  (Malus  sylvestrs  Mill.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Pseudomonas sp. Penyebab Mastitis Pada Sapi  Perah. Ternak  Tropika, 16(2),  40–48. https://doi.org/10.21776/ub.jtapro.2015.016.02.6 Talukdar,  N.,  Dutta,  A.,  Chakraborty,  R.,  &  Das,  K.  (2017).  Screening  Of Phytochemicals,  Antioxidant  And  Inhibitory  Effect  On  Alpha- Amylase  By  Ethanolic  Extract  Of  Elaeocarpus  ganitrus  (BARK). International  Journal  of  Pharmaceutical  Sciences  And  Research,
8(12), 5270–5275. https://doi.org/10.13040/IJPSR.0975-
8232.8(12).5270-75
Tripathi,  Y.  C.,  Shukla,  P.,  &  Tewari,  D.  (2015).  Phytochemical  Evalution And  Antihyperglycemic  Effects  of  Elaeocarpus  ganitrus  Roxb (Rudraksha)  In  Streptozotocin  Induced  Diabetes.  International Journal of Pharmaceutical Sciences, 7(1), 281–283.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terimakasih  disampaikan  kepada  Lembaga  Penelitian  dan Pengabdian  Masyarakat  Sekolah  Tinggi  Ilmu  Kesehatan  Muhammadiyah Gombong yang telah memberikan dukungan dana bagi penelitian ini

## KONTRIBUSI PENULIS
NZWK  merancang  penelitian  ini  dan  berkontribusi  dalam  pengumpulan data  serta  menyetujui  versi  akhir  naskah.  WR  berkontribusi  dalam pengumpulan  data  dan  analisis  statistik;  dan  semua  penulis  berkontribusi pada interpretasi data.
Akses  Terbuka  Artikel  ini  dilisensikan  di  bawah Creative  Commons  Lisensi  Internasional  Attribution  4.0,  yang memungkinkan  penggunaan,  berbagi,  adaptasi,  distribusi,  dan reproduksi  dalam  media  atau  format  apa  pun,  selama  Anda memberikan  kredit  yang  sesuai  kepada  penulis  asli  dan  sumbernya, memberikan  tautan  ke  lisensi  Creative  Commons,  dan  menerangkan jika  perubahan  telah  dilakukan.  Gambar  atau  materi  pihak  ketiga lainnya  dalam  artikel  ini  termasuk  dalam  lisensi  Creative  Commons artikel, kecuali dinyatakan sebaliknya dalam batas kredit untuk materi tersebut.  Jika  materi  tidak  termasuk  dalam  lisensi Creative  Commons artikel  dan  penggunaan  yang  Anda  maksudkan  tidak  diizinkan  oleh peraturan  perundang-undangan  atau  melebihi  penggunaan  yang diizinkan, Anda harus mendapatkan izin langsung dari pemegang hak cipta. Untuk melihat salinan lisensi ini, kunjungi https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/deed.id .
.