## KORELASI POPULASI VIBRIO TERHADAP FAKTOR LINGKUNGAN PADA KOLAM PEMELIHARAAN LARVA UDANG VANNAMEI
( Litopenaeus vannamei ) DI SITUBONDO, INDONESIA

## VIBRIO POPULATION CORRELATION TO ENVIRONMENTAL FACTORS ON VANNAMEI (Litopenaeus vannamei) HATCHERY PONDS IN SITUBONDO, INDONESIA
Indah Puspitasari 1* , Cholifah Desi Mulyasari 1 , IGP Gede Rumayasa Yudayana 2 1 Program Studi Teknik Penanganan Patologi Perikanan, Politeknik KP Sidoarjo,
2 Program Studi Budidaya Ikan, Politeknik KP Jembrana
*E-mail: indah.p@gmail.com

## ABSTRACT
Vibrio  is  a  bacteria  that  causes  many  diseases  in  shrimp  culture.  Monitoring  of  Vibrio population  dynamics is important as  a  preventative measure  for  disease  in  vannamei shrimp  larvae. Different  water  quality  management  systems  in  each  aquaculture  pond  can  affect  the  population dynamics  of  Vibrio.  A  study  on  the  correlation  of  Vibrio  populations  with  environmental  factors  in vannamei shrimp larvae rearing ponds was conducted in March - June 2018 in Situbondo, East Java, Indonesia. The Vibrio population increases gradually with the growth of the larvae. At the larval stage of  PL6,  it  decreased  when  giving  probiotics,  then  it  rose  again  in  PL7  to  PL12.  Total  Vibrio  had  a significant positive correlation (Spearman Correlation Test, P <0.05) with water quality parameters; NH 4 (r  =  0.852),  NH 3 (r  =  0.679),  Salinity  (r  =  0.565),  and  NO 2 (r  =  0.453).  However,  it  had  a significant negative correlation with pH (r = -0.478, P <0.05) and the choreation was not significant with  temperature  (r  =  -0.02,  P>  0.05).  Of  the  20  water  samples,  it  was  calculated  that  the  average number  of  Vibrio  in  the  hatchery  was  0.15  CFU  /  mL,  still  within  the  normal  range  for  vanname shrimp hatchery activities.
Keywords : Vibrio, environmental factors, hatchery, vannamei

## ABSTRAK
Vibrio merupakan  bakteri  yang  menyebabkan  banyak  penyakit  pada  budidaya  udang. Monitoring  kelimpahan Vibrio penting  dilakukan  sebagai  tindakan  pencegahan  penyakit  pada  larva udang  vannamei..  Perbedaan  sistem  manajemen  kualitas  air  pada  setiap  kolam  budidaya  dapat berpengaruh kepada dinamika populasi Vibrio . Studi mengenai korelasi populasi Vibrio dengan faktor lingkungan pada tambak pemeliharaan larva udang vannamei telah dilakukan pada bulan Maret – Juni tahun  2018  di  Situbondo, Jawa Timur  Indonesia. Populasi Vibrio naik  secara  gradual  seiring  dengan pertumbuhan  larva.  Pada  stadia larva  PL6  mengalami  penurunan  saat  pemberian  probiotik  kemudian naik  kembali  pada  PL7  sampai  dengan  PL12.  Total Vibrio memiliki  korelasi  positif  yang  signifikan ( Spearman  Correlation  Test ,  P<0,05)  dengan  parameter  kualitas  air;  NH 4 (r=0,852),  NH 3 (r=0,679), Salinitas (r=0,565), dan NO 2 (r= 0,453). Namun memiliki korelasi negative yang signifikan dengan pH (r=-0,478,  P<0,05)  dan  koreasi  tidak  signifikan  dengan  Suhu  (r=-0,02,  P>0,05).  Dari  20  sampel  air terhitung jumlah rata-rata Vibrio pada media pembenihan adalah  0,15 CFU/mL, masih dalam rentang normal dalam kegiatan pembenihan udang vanname.
Kata kunci : Vibrio , faktor lingkungan, pemeliharaan larva, vannamei

## 1. PENDAHULUAN
Beberapa spesies Vibrio merupakan agen  penyakit  yang  sering  dijumpai  pada
budidaya udang. Vibrinosis adalah penyakit  yang  disebabkan  oleh Vibrio harveyi . Bakteri tersebut menginfeksi larva
Jurnal Chanos chanos
ISSN : 1693-6299
udang  sehingga  mengakibatkan  kematian yang  tinggi.  Salah  satu  upaya  untuk mengatasi  serangan V.  harveyi adalah sterilisasi  air  pembenihan  (Gusmawati, 2017). V. cholerae
dan V.
parahaemolyticus ,  seringkali  mencemari produk  makanan  laut  dan  terkadang menyebabkan  penyakit  pada  manusia  jika produk makanan laut tersebut tertelan (Lee et  al. , 2015). Vibrio  parahaemolyticus dan
V.  vulnificus secara  alami  merupakan bakteri  patogen  manusia  yang  biasa ditemukan  di  lingkungan  muara  tempat tiram  dibudidayakan  (Jones et  al. ,  2020). Selain  menjadi  penyebab  penyakit  pada manusia,
Vibrio
parahaemolyticus merupakan agen penyebab penyakit nekrosis  hepatopankreas  akut  (AHPND) yang  menyebabkan  kematian  masif  pada budidaya  udang  penaeid  di  seluruh  dunia. Mitigasi kerugian ekonomi yang signifikan yang  disebabkan  oleh  AHPND  terhambat oleh  kesenjangan  pengetahuan  dalam mekanisme patogenik infeksi V. parahaemolyticus pada  udang  ( Nguyen et al ., 2020).
Selain sterilisasi media air pembenihan,  salah  satu  upaya  untuk mencegah  timbulnya  penyakit Vibrio pada larva udang adalah dengan cara melakukan monitoring  kualitas  air  terkait  dengan dinamika  populasi  bakteri Vibrio pada media  pemeliharaan  larva  udang.  Setiap kegiatan budidaya dan pembenihan memiliki  kondisi  penanganan  perubahan kualitas air  yang berbeda. Oleh karena itu, tujuan  penelitian  ini  adalah  melihat kelimpahan bakteri Vibrio dan korelasinya dengan  faktor  lingkungan  di  kolam pemeliharaan  larva  di  Situbondo,  Jawa Timur,  Indonesia,  dengan  harapan  dapat memperkaya informasi mengenai kelimpahan  bakteri Vibrio pada  kegiatan pemeliharaan larva udang vannamei.
2. METODE PENELITIAN
2.1. Waktu dan Tempat
Penelitian  ini  dilakukan  selama  20 hari  pada  bulan  Juni  2018  di  kolam
pemeliharaan larva Udang Vannamei  yang bertempat  di  Desa  Kalianget,  Kecamatan Banyuglugur,  Kabupaten  Situbondo,  Jawa Timur, Indonesia.

## 2.2. Metode Pengambilan Data
Sampel Vibrio diambil  setiap  hari antara jam 5 sampai jam 7 pagi selama 20 hari  periode  pengambilan  sampel  air. Pengenceran  serial  dilakukan  terhadap sampel  air  sebelum  dilakukan  pengukuran Vibrio . Faktor lingkungan seperti pH, NH 4 , NH 3 , NO 2 , Suhu dan Salinitas juga diambil bersamaan  dengan  pengambilan  sampel Vibrio .

## 2.3. Alat dan Bahan
Pengambilan sampel Vibrio
dilakukan  menggunakan  botol  yang  telah disterilkan. Pengenceran sampel air menggunakan  larutan  Aquadest  steril. Sebanyak 0,1 ml alikuot sampel dituangkan  pada  agar  TCBS  di  dalam Laminary  Air  Flow  langsung  setelah pengambilan sampel dan diinkubasi  dalam 28-30 o C  selama  24  jam.  Colony  counter digunakan  untuk Total  Vibrio  Count (TVC).  Alat  yang  digunakan  untuk pengambilan  sampel  faktor  lingkungan adalah pH meter, test kit NH 4 -NH 3 , test kit NO 2 ,  Alkalinity  meter,  Thermometer  dan Refractometer.

## 2.4. Analisa Data
Hasil uji normalitas data menggunakan Anderson Darling Normality Test menunjukkan  data  tidak  terdistribusi normal  (P  <0,05).  Sehingga  digunakan  uji Korelasi Spearman dengan level signifikansi 5%, untuk mengetahui hubungan antara faktor lingkungan dengan jumlah  bakteri Vibrio .  Minitab  versi  2020 digunakan  untuk  semua  analisis  statistik dari data penelitian.
3. HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1. TVC ( Total Vibrio Count ) Hasil Pengukuran TVC menunjukkan peningkatan jumlah populasi Vibrio selama  pertumbuhan  larva  hingga
Post  Larvae 5  (PL-5)  dan  kemudian menurun  kembali  dan  berada  pada  nilai paling rendah pada stadia PL-6 (Gambar 1), hal  ini  disebabkan  oleh  perubahan  air, dimana  air  yang  sudah  mengandung  sisa udang dan sisa pakan diganti dengan lebih banyak  air  bersih.  Selain  itu,  pada  stadia PL-6  juga  dilakukan  pemberian  probiotik Bacillus . Seperti disebutkan oleh Kuebutornye et.al. (2019), sebagai probiotik, Bacillus memiliki  karakteristik yang  melebihi  probiotik  lain,  yaitu kemampuannya  menghasilkan  spora  dan metabolit  sekunder  yang  efektif  melawan
banyak mikroba patogen. Hal ini menyebabkan terjadinya penurunan jumlah Vibrio pada  media  air  pemeliharaan  larva setelah pengaplikasian probiotik Bacillus . Kurva  populasi Vibrio meningkat kembali  secara  bertahap  dari  PL-6  sampai PL-12 seiring dengan pertumbuhan udang. Meskipun  rata-rata  total Vibrio yang ditemukan  pada  air  pembenihan  udang adalah  0,15  CFU/mL,  masih  tergolong aman karena berada di bawah tingkat kritis Vibrio di  tempat  pembenihan  udang  (SNI 7311: 2009).
Gambar 1. Total  Vibrio  Count (TVC)  dan  panjang  larva  pada  kolam  pemeliharaan  larva vannamei di Situbondo, Indonesia.
3.2. Total Vibrio Count (TVC) terhadap Suhu dan Salinitas
Suhu rata-rata pada kolam pembenihan  udang  vannamei  dalam  studi ini  adalah  31,65 o C  dengan  rentang  antara 30-32 o C.  Kondisi  suhu  tersebut  masih dalam  batas  normal  bagi  pertumbuhan larva  vannamei,  yaitu  berkisar  28-31 o C (Purnamasari et  al. .,  2017)  dan  26-32 o C (Haliman  dan  Adijaya,  2005).  Namun, terjadi dinamika suhu pada bak pemeliharaan larva vanamei.
Suhu  terlihat  cukup  stabil  pada  awal pemeliharaan  kemudian  turun  pada  stadia
PL-6,  naik  kembali  pada  PL-8  kemudian turun  pada  PL-10  (Gambar  2).  Penurunan suhu  dari  32 o C  ke  30 o C  yang  terjadi  pada PL-6 disebabkan oleh adanya transfer bak. Air  pada  bak  baru  memiliki  salinitas  yang rendah.  Namun,  secara bertahap suhu naik terus  sampai  mencapai  33 o C  pada  PL-8, mendekati suhu maksimal pada pemeliharaan  larva  udang  vannamei  yaitu 34 o C  (Kumlu et  al., 2020).  Suhu  air  yang tinggi  dapat  menyebabkan  air  lebih  cepat menguap  dan  meningkatkan  salinitas (Gambar 2) sehingga meningkatkan populasi  bakteri  pathogen  seperti Vibrio .
0 2 4 6 8 10 12 14 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 p a n ja n g la rv a (c m ) TV C (x 1 0 3 CFU/m l) Stadia Larva TVC Panjang larva
Pergantian  air  dilakukan  pada  PL-8  untuk menurunkan  suhu  bak.  Sehingga  pada  PL- 10  suhu  air  kembali  pada  suhu  optimal
pemeliharaan udang vaname yaitu berkisar antara 28-31 ° C (Purnamasari et al. , 2017).
Gambar 2.  Dinamika  populasi Vibrio ,  salinitas  dan  suhu  pada  pembenihan  udang  vannamei di Situbondo, Indonesia.
Rata-rata salinitas pada kolam pembenihan udang vannamei adalah 30,55 ppt dengan rentang 30-32 ppt. Seperti yang terjadi  pada  suhu,  peningkatan  salinitas terjadi sejak PL-6 dan tertinggi pada PL-8. Namun, secara keseluruhan kegiatan pemeliharaan  larva,  rentang  salinitas  pada kolam  pemeliharaan  masih  dikatakan optimal  bagi  pertumbuhan  larva  udang, karena  berada  pada  rentang  28-33  ppt (Haliman, 2005).
Penelitian  sebelumnya  menunjukkan bahwa  dinamika  populasi Vibrio dapat dipengaruhi oleh faktor lingkungan seperti suhu,  salinitas  (Percival  dan  Williams, 2014) dan suspensi air (Okiyo et.al ., 2018).
Pada  hasil  pengamatan  dan  berdasarkan hasil  uji  korelasi  Spearman,  salinitas memiliki  korelasi  yang  signifikan  dengan populasi Vibrio (P<0,05)  sedangkan  suhu tidak  memiliki  korelasi  yang  signifikan (P>0,05).  Ditunjukkan  pula  pada  hasil perhitungan  uji  korelasi  Spearman , di
antara  nilai  signifikansi,  faktor  lingkungan suhu  memiliki  korelasi  positif  paling  kecil (Gambar 4).
3.3. Total Vibrio Count (TVC) terhadap NO 2 , NH 3 , NH 4 dan pH Rata-rata  NO 2 ,  NH 3 ,  NH 4 secara berturut-turut  pada  kolam  pemeliharaan larva  udang  vannamei  adalah  0,1;  0,1  dan 2,4  ppm.  Sedangkan  rata-rata  pH  pada kolam pemeliharaan larva udang vannamei adalah  8.  Secara  keseluruhan,  rentang kualitas  air  baik  NO 2 ,  NH 3 maupun  pH pada  media  pemeliharaan  larva  vannamei masih didalam rentang aman, karena masih sesuai  dengan  kondisi  yang  dibutuhkan oleh  larva  vannamei  (Tabel  1),  namun kadar  amonia  (NH 4 )  melebihi  kadar optimum  pada  akhir  masa  pemeliharaan larva (Gambar 3).
28,5 29 29,5 30 30,5 31 31,5 32 32,5 33 33,5 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 S u h u ( o C), S a li n ita s (p p t) TV C (x 1 0 3 CFU/m l) Stadia Larva TVC Salinitas Suhu
Tabel 1. Hasil pengukuran kualitas air selama penelitian.
Parameter Kualitas Air Satuan Kisaran Optimal Sumber Pustaka Suhu ° C 30-32 26-32 Haliman dan Adijaya (2005) Salinitas ppt 30-32 28-33 Haliman (2005) pH - 7,7-8,7 7,0-8,5 Elovaara (2003) NO 2 ppm 0-0,3 0,01-0,05 0,1-1,0 Adiwijaya et al . (2003) Suprapto (2005) NH 3 / NH 4 ppm 0-0,7/0-10 0,4-0,8 Clifford (1994) dalam Mangampa et al . (2009)
Gambar 3.  Dinamika populasi Vibrio NO 2 , NH 3 , NH 4 dan pH pada pemeliharaan larva udang vannamei di Situbondo, Indonesia.
Pada  sistem  pemeliharaan  larva  di bak terkontrol, terdapat beberapa parameter  kimia  air  yang  bersifat  toksin, misalnya  amonia  dan  nitrit  di  mana nilainya  seringkali  berada  pada  kisaran  di atas ambang batas. Amoniak terbentuk dari mineralisasi  bahan  organik  oleh  bakteri heterotropik,  atau  buangan  nitrogen  utama yang  dikeluarkan  oleh  hewan  akuatik  dan hasil  aktivitas  jasad  renik  dalam  proses dekomposisi  bahan  organik  yang  kaya akan nitrogen (Boyd, 1982). Senyawa nitrit diperoleh  dari  amonia  yang  diubah  oleh bakteri  autotropik Nitrosomonas sp.  Nitrit bersifat  sangat  racun  apabila  bergabung dengan  darah  karena  akan  mengoksidasi
zat besi dihemoglobin menjadi methemoglobin  dan  akan  mengurangi kemampuan  darah  untuk  berikatan  dengan oksigen  (Forteath et  al .,  1993  dalam Mahendra, 2004).
Penambahan  probiotik Bacillus sp. ke dalam media air pada stadia larva PL-6. Bacillus memodulasi  berbagai  parameter kualitas  air  termasuk  parameter  fisik (transparansi dan total padatan terlarut) dan kimia (pH, konduktivitas, kebutuhan oksigen kimia, oksigen terlarut, kebutuhan oksigen biologis, alkalinitas, fosfat, spesies nitrogen, kekerasan) parameter kualitas air, berat  logam,  tumpahan  minyak  serta pemeliharaan keseimbangan mikroba;
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 0,5 p H d a n NO 2 , NO 3 , NH 4 (p p m ) TV C (x 1 0 3 CFU/m l) Stadia Larva TVC pH NH4 NH3
NO2
karenanya  pengurangan  mikroba  patogen. Efisiensi Bacillus dalam  memodulasi kualitas  air  sangat  tergantung  pada  faktor- faktor seperti cara aplikasi, oksigen terlarut, pH,  suhu,  sumber  nutrisi,  jenis  regangan,
dan  ion  logam  (Hlordzi et  al .,  2020).  Hal ini  ditunjukkan  dengan  menurunnya  kadar pH, NO 2 NH 3 serta NH 4 pada PL6 setelah pemberian  probiotik Bacillus (Gambar  3).
Gambar 4.  Grafik Korelasi antara Total Vibrio Count dengan ; a) NH 4, b) NH 3 , c) Salinitas, d) pH,  e)  NO 2 dan  f)  Suhu  pada  pembenihan Litopeaeus  vannamei di  Situbondo ( Spearman Correlation Test , P=95%).
Bacillus juga  ditemukan  mampu mereduksi ion nitrat dan nitrit (Lalloo et al .,
2007;  Song et  al .,  2011;  Xie et  al .,  2013
dan Hura et al ., 2018), sebanyak 75% pada kadar  nitrat-nitrogen  dan  43%  untuk nitrogen  total  di  dalam  kolam  lele (Thurlow et  al .,  2019).  Toksisitas  amonia
pada akuakultur telah dilaporkan berkurang setelah perlakuan dengan Bacillus seperti pada B. subtilis (Cha et al ., 2013), B.  megaterium (Hura et  al .,  2018), dan B. amyloliquefaciens (Xie et al ., 2013).
Pengamatan  serupa  ditunjukkan  pula  pada berkurangnya Nitrogen amonia total
a.
b.
c. d. e. f.
setelah pemberian Bacillus sp. kedalam air pemeliharaan  ikan  mas,  (Samani et  al .,
2016). Spesies Bacillus menyukai  modulasi alkalinitas  dan  pH  dengan  membantu mineralisasi bahan organik yang mendorong  aktivitas  fotosintesis.  Pada kolam  pemeliharaan  larva  vanname  di Situbonto  ini,  pH  meningkat  pada  PL6 setelah  pemberian  probiotik Bacillus . Peningkatan pH juga diamati di kolam nila yang  diberi  perlakuan Bacillus (Elsabagh et  al .,  2018).  Oleh  karena  itu,  dalam kondisi  asam,  probiotik Bacillus dapat digunakan untuk meningkatkan pH sehingga  air  cocok  untuk  budidaya  ikan. Hal  sebaliknya  diamati  dalam  kasus  pH basa karena probiotik Bacillus menurunkan pH  menuju  netral  (Gomes et  al .,  2008; Nimrat et al ., 2012; Wu et al ., 2016).
Hasil Uji Korelasi Spearman menunjukkan  bahwa  NO 2 ,  NH 3 ,  NH 4 ,  dan pH  dan  memiliki  korelasi  yang  signifikan dengan  populasi Vibrio .  Di  antara  nilai signifikansi, NH4 memiliki korelasi positif paling  signifikan  dan  Suhu  memiliki korelasi  positif  paling  kecil  (Gambar  4). Sedangkan pH berhubungan negatif signifikan dengan Total Vibrio Count pada larva udang Litopenaeus vanname.

## 4. KESIMPULAN
Total Vibrio memiliki  korelasi positif  yang  signifikan  (P<0,05)  dengan parameter kualitas air; NH 4 (r=0,852), NH 3 (r=0,679), Salinitas (r=0,565), dan NO 2 (r=
0,453).  Namun  memiliki  korelasi  negative yang  signifikan  dengan  pH  (r=-0,478,
P<0,05)  dan  koreasi  tidak  signifikan dengan  Suhu  (r=-0,02,  P>0,05).  Faktor lingkungan  masih  berada  dalam  kisaran optimal  bagi  pemeliharaan  larva  vanamei, kecuali NH 4 pada akhir masa pemeliharaan larva . Probiotik Bacillus digunakan  untuk menstabilkan  kualitas  air.  Dari  20  sampel air  terhitung  jumlah  rata-rata Vibrio pada media  pembenihan  adalah  0,15  CFU/mL, masih  dalam  rentang  normal  dalam kegiatan pembenihan udang vanname.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Kami berterimakasih kepada
Politeknik Kelautan dan Perikanan Sidoarjo serta PT. Delta Windu Purnama di Situbondo  yang telah mendukung kegiatan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Adiwijaya,  D.,  Sapto,  P.R.,  Sutikno,  E., Sugeng,  R.,  dan  Subiyanto,  S.  2003. Budidaya  udang  vaname  ( Litopenaeus vannamei ) sistem tertutup yang ramah lingkungan. Departemen Kelautan dan Perikanan. Balai Besar Pengembangan Budidaya Air Payau Jepara, 29 hlm.
Cha,  J.H.,  Rahimnejad,  S.,  Yang,  S.Y.,
Kim, K.W., Lee, K.J., 2013. Evaluations of Bacillus spp. As dietary additives  on  growth  performance, innate immunity and disease resistance of olive flounder ( Paralichthys olivaceus )  against Streptococcus  iniae and  as  water  additives.  Aquaculture 402–403, 50–55.
Cobo,  M.  Sonnenholzner,  S.  Wille,  M.,
Sorgeloos, P. 2012. Ammonia tolerance  of Litopenaeus  vannamei (Boone) larvae. Aquaculture Research. 45. 10.1111/j.1365-2109.2012.03248.x. Ferreira,  N.C.,  Bonetti,  C.,  Seiffert,  W.Q. 2011. Hydrological and Water Quality Indices as management tools in marine shrimp culture. Aquaculture, 318: 425- 433
Gusmawati,  N.  2017. Vibrio  harveyi bacteria  sterilization  system  using Cobalt-60  radioisotop  for  shrimp farming. 10.
Hlordzi, V., Kuebutornye, F.K.A.,  Afriyie,
G.,  Abarike,  E.D.,  Lu,  Y.,  Chi,  S., Anokyewaa,  M.A.    2020.  The  use  of Bacillus species  in  maintenance  of water quality in aquaculture: A review, Aquaculture  Reports,  Volume  18, 2020.
Hura,  M.U.D.,  Zafar,  T.,  Borana,  K., Prasad,  J.R.,  Iqbal,  J.,  2018.  Effect  of commercial probiotic
Bacillus megaterium on  water  quality  in
composite  culture  of  major  carps.  Int. J. Curr. Agric. Sci. 8, 268–273. Jones,  J.,  Lydon,  K.,  Walton,  W.  2020. Effect of Ploidy on Vibrio parahaemolyticus and Vibrio vulnificus Levels  in  Cultured  Oysters.
Journal of Food Protection. 10.4315/JFP-20-202.
Kuebutornye,  F.K.A.,  Abarike,  E.D.,  Lu, Y.,  Hlordzi,  V.,  Sakyi,  M.E.,  Afriyie, G., Wang, Z., Li, Y., Xie, C.X., 2020. Mechanisms  and  the  role  of  probiotic Bacillus in  mitigating  fish  pathogens in aquaculture. Fish Physiol. Biochem. 1–23.
Kumlu, M., Turkmen, S., Kumlu, M. 2010. Thermal  tolerance  of Litopenaeus vannamei (Crustacea: Penaeidae) acclimated  to  four  temperatures. Journal  of  Thermal  Biology.  35.  305- 308. 10.1016/j.jtherbio.2010.06.009. Kungvankij,  P.,  Tiro  L.B.,  Pudadera, Jr., B.J.,  Potestas , Jr.,I.O.,  Corre  K.G.,
Borlongan  E.,  Talean  G.A.,  Bustilo L.F., Tech E.T., Unggui A., Chua T.E.
1985. Training Manual- Shrimp Hatchery Design, Operation  and Management. FAO. Thailand.
Lalloo, R., Moonsamy, G., Ramchuran, S.,
G  orgens,  J.,  Gardiner,  N.,  2010. Competitive  exclusion  as  a  mode  of action  of  a  novel Bacillus  cereus aquaculture biological agent.Lett. Appl. Microbiol. 50, 563–570.
Lee, J.M., Lee, W.J., Kim, M.J., Cho, Y.S., Lee, J.S., Lee, H.J., Yoon, S.W., Kim, K.S. 2015. Comparative Evaluation of the  VITEK  2  System  and  Species- specific PCR Methods for the Detection  of Vibrio Species  Isolated from Shrimp. Journal of Food Hygiene and Safety.
30. 281-288. 10.13103/JFHS.2015.30.3.281.
Mangampa,  M.,  Suwoyo,  H.S.,  dan
Rahmansyah. 2009. Dinamika kualitas air  pada  budidaya  intensif  udang vaname ( Litopenaeus vannamei ) dengan  kedalaman  air  tambak  yang
berbeda.  Forum  Inovasi  Teknologi Akuakultur 2009, 17 hlm.
Nguyen,  T.,  Andrea,  A.,  Leon,  J.A.R., Arroyo,  B.B.,  Stanislaus,  S.  2020. Metabolic responses of penaeid shrimp  to  acute  hepatopancreatic necrosis  disease  caused  by Vibrio parahaemolyticus . Aquaculture.
10.1016/j.aquaculture.2020.736174.
Nimrat,  S.,  Suksawat,  S.,  Boonthai,  T., Vuthiphandchai,  V.,  2012.  Potential Bacillus probiotics  enhance  bacterial numbers,  water  quality  and  growth during  early  development  of  white shrimp  ( Litopenaeus  vannamei ).  Vet.
Microbiol. 159, 443–450.
Okeyo,  A.  N.,  Nontongana,  N.,  Fadare,  T. O., dan Okoh, A. I. 2018. Vibrio Species  in  Wastewater Final Effluents and Receiving Watershed in South Africa: Implications for Public Health. International journal of environmental  research  and  public health , 15 (6), 1266. Percival,  S.L.,  Williams,  D.W.,  2014. Microbiology  of  Waterborne  Diseases (Second Edition)-Microbiological Aspects  and  Risks.  Academic  Press Elsevier. p 237-248.
Purnamasari,  I.,  Purnama,  D.,  Utami,  A.F. 2017.  Pertumbuhan  Udang  Vaname ( Litopenaeus  vannamei )  di  tambak intensif.  Jurnal  Enggano  Vol.  2  no.1. p58-67.
Randa,  M.A.,  Polz,  M.F.,  Lim,  E.  2004. Effects  of  temperature  and  salinity  on Vibrio  vulnificus population  dynamics as  assessed  by  quantitative  PCR.
Applied and Environmental
Microbiology. 70(9):5469-76.
Rehr,  B.  dan  Klemme,  J.H.  1986.
Metabolic role and properties of nitrite reductase  of  nitrate-monifying  marine Vibrio species.  FEMS  Microbiology
Letters. Vol.35 (2-3) p 325-328.
Samani, N.M., Jafaryan, H., Gholipour, H.,
Harsij,  M., Farhangi,  M., 2016. Effect
of different concentration of profitable Bacillus on bioremediation of common  carp  ( Cyprinus  carpio )  pond discharge.  Iran. J. Aquat.  Anim.  Heal. 2, 44–54.
Song, Z.-F., An, J., Fu, G.-H., Yang, X.-L., 2011. Isolation and characterization of an  aerobic  denitrifying Bacillus sp. YX-6  from  shrimp  culture  ponds. Aquaculture 319, 188–193.
Suprapto.  2005.  Petunjuk  teknis  budidaya
udang vannamei ( Litopenaeus vannamei ). CV Biotirta. Bandar Lampung. 25 hlm.
Thurlow,  C.M.,  Williams,  M.A.,  Carrias, A., Ran, C., Newman, M., Tweedie, J., Allison,  E.,  Jescovitch,  L.N.,  Wilson, A.E., Terhune, J.S., Liles, M.R., 2019. Bacillus  velezensis AP193  exerts probiotic  effects  in  channel  catfish ( Ictalurus  punctatus )  and  reduces aquaculture pond eutrophication.
Aquaculture 503, 347–356.
Xie, F., Zhu, T., Zhang, F., Zhou, K., Zhao,
Y.,  Li,  Z.,  2013.  Using Bacillus amyloliquefaciens for  remediation  of aquaculture water. Springerplus 2, 119.
Received : 12 Desember  2020 Reviewed : 25 Desember 2020 Accepted :  28 Desember 2020