EKSTRAKSI LIKOPEN DARI BUAH TOMAT ( Lycopersicum Esculentum ) MENGGUNAKAN PELARUT TUNGGAL DENGAN METODE KRISTALISASI ANTISOLVENT
Sola Fide Gavra Tarigan*, Deviana C.S. Sinaga, Zuhrina Masyithah Departemen Teknik Kimia, FakultasTeknik, Universitas Sumatera Utara,
Jl. Almamater Kampus USU Medan 20155, Indonesia
*Email: fidegavra@gmail.com

## Abstrak
Tujuan dilakukan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh perbandingan umpan dan pelarut  (f/s),  jenis  antisolvent  dan  jenis  pelarut  terhadap  ekstraksi  likopen  dari  buah  tomat ( Lycopersicum  esculentum )  menggunakan  pelarut  tunggal  dengan  metode  kristalisasi antisolvent.  Pelarut  yang  digunakan  adalah  heksana  dan  etil  asetat  serta  digunakan  metanol dan  etanol  sebagai  antisolvent.  Dilakukan  penghalusan  buah  tomat  kemudian  diekstraksi. Kemudian  ekstrak  yang  diperoleh  ditambahkan  antisolvent.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  semakin  besar  perbandingan  umpan  dan  pelarut  maka  kadar  likopen  yang  diperoleh akan  semakin  besar.  Pada  perbandingan  umpan  dan  pelarut  1:4,5  dengan  pelarut  heksana diperoleh  kadar  total  likopen  paling  tinggi  yaitu  2,7  mg/150  ml  dan  2,2  mg/150  ml. Sedangkan  pada  perbandingan  umpan  dan  pelarut  1:4,5  dengan  pelarut  etil  asetat  diperoleh kadar total likopen paling tinggi yaitu 3,2 mg/150 ml dan 2,8 mg/150 ml. Dengan penggunaan metanol  sebagai  antisolvent  kadar  likopen  yang  diperoleh  lebih  besar.  Dengan  penggunaan pelarut etil asetat kadar  likopen yang diperoleh lebih besar.
Kata kunci : antisolvent, ekstraksi cair-cair, likopen, tomat

## Abstract
This research was aimed to study the effect of feed and solvent ratio (f/s), antisolvent variety and  solvent  variety  to  the  extraction  of  lycopene  from  tomato  (Lycopersicum  esculentum)by using single solvent and antisolvent crystalization method. The solvent that used was hexane and ethyl acetate and also methanol and ethanol as the antisolvent. Tomatoes was milled and then  extracted.  Antisolvent  then  added  to  the  extract  which  was  obtained.  The  results  show that  the  more  feed  and  solvent  ratio  (f/s)  the  more  lycopene  obtained.  At  the  ratio  of  1:4,5 with  hexane  as  the  solvent  obtained  the  highest  lycopene  yield  were  2,7  mg/150  ml  and  2,2 mg/150 ml. Whereas at the ratio of 1:4,5 with ethyl acetate as the solvent obtained the highest lycopene yield were 3,2 mg/150 ml dan 2,8 mg/150 ml. By using methanol as an antisolvent, much lycopene would be obtained. By using ethyl acetate as a solvent, much lycopene would be obtained.
Keywords : antisolvent, liquid-liquid extraction, lycopene, tomato

## Pendahuluan
Tomat  dan  produk  tomat  kaya  sumber vitamin C dan A, likopen, β - karoten, lutein, lektin,  dan  berbagai  senyawa  fenolik  seperti flavonoid  dan  asam  fenolat.  Tomat  kaya akan  folat,  kalium,  serat,  dan  protein,  tetapi rendah  lemak  dan  kalori,  serta  bebas kolesterol.  Buah  tomat  setelah  matang sempurna  akan  cepat  menjadi  rusak/busuk yakni  setelah  3-4  hari  penyimpanan  pada suhu kamar sehingga tanpa adanya penanganan khusus umur simpan buah tomat relatif  singkat/pendek  [21].  Sintesis  pigmen pada tomat berkaitan dengan proses pematangan,  dan  warna  merah  pada  buah merupakan  hasil  dari  akumulasi  likopen.
Selama  periode  pematangan,  komposisi likopen pada buah meningkat tajam [23].
Dari penelitian sebelumnya, dapat disimpulkan  bahwa  ekstraksi  likopen  dari buah  tomat  ( Lycopersicum  esculentum) menggunakan metode kristalisasi antisolvent menghasilkan  rendemen  likopen  yang  lebih tinggi dibandingkan dengan metode ekstraksi  cair-cair  ataupun  dengan  metode lain. Selain dari pada itu, di Indonesia masih jarang digunakan metode kristalisasi antisolvent untuk mengekstraksi likopen dari buah  tomat  untuk  menghasilkan  rendemen ekstrak  yang  lebih  tinggi  dan  juga  masih kurangnya  penggunaan  buah  tomat  yang telah  lewat  matang.  Oleh  sebab  itu
digunakan  buah  tomat  yang  telah  lewat matang  dalam  penelitian  ini  dengan  metode kristalisasi  antisolvent  untuk  memperoleh kandungan ekstrak likopen yang tinggi.
Teori Pematangan tomat ditandai oleh pelunakan  buah,  degradasi  klorofil  dan peningkatan  laju  respirasi,  produksi  etilen, serta sintesis asam, gula dan likopen [5,15].
Tabel  1.  Kandungan  Nutrisi  Buah  Tomat dalam 100 gram Buah Tomat [11]
Nutrisi Satuan Kadar per 100 gram tomat Vitamin C mg 22,8 Vitamin B-6 mg 0,079 Folat μg 13 Vitamin A IU 489 Likopen μg 3.041 β-karoten μg 293 Lutein μg 94 Vitamin E mg 0,56 Vitamin K μg 2,8 Likopen adalah karotenoid dengan rumus
C 40 H 56 dan memiliki berat molekul 536,85 g / mol. Rumus strukturnya adalah:
Gambar 1. Rumus Struktur Likopen [4]
Tingkat  likopen  buah  tomat  ditentukan dari  potensi  genetik  jenisnya  dan  kondisi lingkungan,  terutama  suhu  dan  cahaya. Selama  periode  pematangan,  komposisi likopen  pada  buah  meningkat  tajam  [23]. Struktur  terkonjugasi  membuat  likopen antioksidan yang sangat efektif dan mungkin juga  bertanggung  jawab  untuk  perannya dalam pencegahan kanker jenis tertentu [18].
Ekstraksi  cair-cair  adalah  aplikasi  dari kelarutan parsial untuk pemisahan campuran cair  dari  dua  atau  lebih  komponen.  Proses ekstraksi  cair-cair  diterapkan,  secara  umum untuk pemisahan campuran yang tidak dapat dilakukan oleh distilasi untuk satu atau lebih alasan:
a) Suhu distilasi yang terlalu tinggi.
b) Volatilitas  relatif  terlalu  kecil  atau adanya azeotrop.
c) Pemisahan berdasarkan volatilitas tidak memuaskan [19].
Ada  banyak  variasi  campuran  ekstraksi yang digunakan untuk  mengekstrak likopen.
Tujuan  dari  ekstraksi  adalah  memisahkan likopen dari komponen larut air dari likopen yang berisi bahan makanan [6].
Sebuah larutan untuk dapat dikristalisasi harus  berada  pada  kondisi  sangat  jenuh. Sebuah  larutan  di  mana  konsentrasi  zat terlarut  melebihi  keseimbangan  (jenuh), konsentrasi  zat  terlarut  pada  temperatur tertentu  dikenal  sebagai  larutan  jenuh.  Ada empat  metode  utama  untuk  menghasilkan larutan sangat jenuh adalah sebagai berikut :
 Perubahan suhu (terutama pendinginan)
 Penguapan pelarut
 Reaksi kimia, dan
 Mengubah  komposisi  pelarut  (misalnya dengan penggaraman)
Kristalisasi  dari  larutan  dapat  dianggap sebagai  proses  dua  langkah.  Langkah pertama
adalah pemisahan fasa
(pembentukan) dari kristal baru. Yang kedua adalah  pertumbuhan  kristal  ini  menjadi ukuran  yang  lebih  besar.  Kedua  proses dikenal  sebagai  nukleasi  dan  pertumbuhan kristal.  Analisis  proses  kristalisasi  industri membutuhkan  pengetahuan  baik  nukleasi maupun pertumbuhan kristal [1].

## Metodologi Penelitian
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini adalah jus tomat matang, etanol, metanol, heksana, dan etil asetat. Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi labu leher tiga, refluks kondensor, statif dan klem,
termometer,  neraca  analitik,  labu  leher  tiga, corong pemisah, blender , hot plate , magnetic  stirrer dan Fourier  Transform Infrared Spectroscopy (FTIR).

## Persiapan Bahan Baku
Buah  tomat  dicuci  dengan  air  keran beberapa kali hingga bersih. Kemudian buah tomat  dipotong  -  potong  lalu  dihaluskan menggunakan blender .  Buah  tomat  yang telah  dihaluskan  kemudian  disimpan  di dalam chiller hingga digunakan.

## Ekstraksi
Diukur 150 ml sampel kemudian sampel diekstraksi  selama  3  jam  dengan  pelarut heksana
dengan perbandingan
umpan:pelarut  (1:2)  pada  temperatur  65 o C. Ekstrak  dan  rafinat  yang  diperoleh  dicuci dengan aquadest kemudian  dimasukkan  ke dalam  corong  pemisah  untuk  memisahkan ekstrak  dan  rafinat.  Ekstrak  dicuci  dengan aquadest sambil diguncang untuk memisahkan  ekstrak  dengan  pengotor- pengotornya.  Setelah  terbentuk  2  lapisan,
ambil semua lapisan atas (nonpolar) kemudian tampung ke dalam beaker glass .

## Kristalisasi dengan Antisolvent
Semua  lapisan  atas  (nonpolar)  yang ditampung ke dalam beaker glass ditambahkan  100  ml  metanol  sebagai antisolvent  kemudian  didiamkan  beberapa jam  hingga  terbentuk  kristal.  Kristal  yang terbentuk  kemudian  disaring  menggunakan kertas  saring  Whattman  No.1  setelah  itu ditimbang massa kristal yang diperoleh.

## Hasil
Karakterisasi  FTIR  ( Fourier  Transform Infra  Red )  Hasil  Ekstraksi  Likopen  dari Buah Tomat dengan Penambahan Antisolvent
Karakterisasi  FTIR  ( Fourier  Transform
Infra  Red )  hasil  ekstraksi  likopen  dari  buah tomat dengan penambahan antisolvent dilakukan  untuk  mengidentifikasi  gugus fungsi  dari  senyawa  likopen.  Karakteristik FTIR  dari  hasil  ekstraksi  likopen  dari  buah tomat dengan penambahan antisolvent dapat dilihat pada Gambar 1 di bawah ini.
Gambar  2.  Karakterisasi  FTIR  ( Fourier Transform Infra Red ) Hasil Ekstraksi Likopen dari  Buah  Tomat  dengan  Penambahan Antisolvent
Data  spektrum  likopen  standar  yang dianalisis dengan mencermati puncak serapan  gelombang  yang  diperlihatkan puncak  serapan  pada  daerah  bilangan gelombang  sebagai  berikut  :  956,72  cm -1 ; 1.373,36 cm -1 ; 1.456,30 cm -1 ; 1.647,26 cm -1 ; 1.743,71 cm -1 ; 2.879,82 cm -1 ; 2.910,68 cm -1 ; 3.392,90  cm -1 .  Spektrum  dianalisis  dengan mencermati puncak serapan gelombang yang diperlihatkan  data  spektrum  puncak  serapan pada  bilangan  gelombang  sebagai  berikut  :
bilangan
gelombang
956,72 cm -1
menunjukkan  gugus  R-CH=CH-R  pada rantai likopen. Bilangan gelombang 1.373,36  cm -1 menunjukkan  gugus  -CH 3 -
pada  rantai  likopen.  Bilangan  gelombang 1.456,30  cm -1 menunjukkan  vibrasi  bending dari  -CH 2 -  pada  rantai  likopen.  Bilangan gelombang 1.647,26 cm -1 dan 1.743,71 cm -1 menunjukkan adanya ikatan C=C pada rantai likopen.  Bilangan  gelombang  2.879,82  cm -1 dan 2.910,68  cm -1 menunjukkan gugus C-H pada  rantai  likopen.  Bilangan  gelombang 3.392,90  cm -1 kemungkinan gugus O-H dari uap air yang terikat pada likopen [2].
Maka  dari  hasil  analisa  FTIR  ini  dapat disimpulkan  bahwa  likopen  yang  dihasilkan memiliki gugus-gugus yang diharapkan.
Pengaruh  Perbandingan  Umpan  dan Pelarut (F/S) Heksana dan Jenis Antisolvent Terhadap Ekstraksi Likopen Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan,  pengaruh  perbandingan  umpan dan  pelarut  (F/S)  heksana  dan  jenis antisolvent  terhadap  ekstraksi  likopen  dapat dilihat pada gambar berikut.
Gambar  3.  Pengaruh  Perbandingan  Umpan dan  Pelarut  (F/S)  Heksana  dan  Jenis Antisolvent terhadap Ekstraksi Likopen
Pada  Gambar  3  dapat  dilihat  bahwa semakin  besar  perbandingan  umpan  dan pelarut  (F/S)  heksana  yang  digunakan  maka kadar  total  likopen  yang  diperoleh  semakin meningkat  pula.  Pada  perbandingan  umpan dan  pelarut  1:4,5  diperoleh  kadar  total likopen  paling  tinggi  baik  pada  antisolvent metanol  maupun  pada  etanol  yaitu  2,7 mg/150  ml  dan  2,2  mg/150  ml.  Hal  ini sesuai  dengan  teori  bahwa  jumlah  likopen semakin meningkat dengan semakin besarnya  volume  pelarut  [17].  Namun rendemen  likopen  yang  terekstrak  pada tomat  masih  sedikit,  dimana  kandungan likopen  dalam  buah  tomat  adalah  3.041 μg/100 gram buah tomat [11].
Rasio  umpan  dan  pelarut  yang  tinggi menghasilkan  ekstrak  dalam  jumlah  besar, hal  ini  sesuai  dengan  prinsip  perpindahan massa dimana driving force untuk 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 1:2 1:2,5 1:3 1:3,5 1:4 1:4,5 Ka d a r to ta l li k o p en (m g /1 5 0 m l) Perbandingan Umpan dan Pelarut (F/S, v/v) antisolvent metanol antisolvent etanol
perpindahan massa adalah gradien konsentrasi  antara  umpan  dengan  pelarut. Rasio  umpan  dan  pelarut  yang  tinggi  dapat mendukung peningkatan gradien konsentrasi,  yang  menghasilkan  kenaikan laju  difusi  yang  menyebabkan  ekstraksi lebih  optimal  oleh  pelarut  [8,13].  Hal  ini sejalan  dengan  Zhang et  al .  [16]  yang menyatakan  bahwa  kesempatan  komponen bio-aktif  untuk  melakukan  kontak  dengan solvent  pengekstraksi  semakin  meningkat seiring dengan meningkatnya jumlah solvent pengekstrasi dan tidak akan berlanjut hingga tercapainya  kesetimbangan.  Partikel  dengan volatilitas  yang  lebih  tinggi  mendorong sistem  untuk  mencapai  keadaan  lewat  jenuh jauh  lebih  cepat,  sehingga  menurunkan ukuran partikel [20].
Gambar  4.  Hasil  Analisa  HPLC  Ekstraksi Likopen  dari  Buah  Tomat  Menggunakan Pelarut (A) Heksana dan (B) Etil Asetat [10]
Pada Gambar 4 dapat dilihat bahwa nilai absorbansi  likopen  hasil  ekstraksi  likopen menggunakan  pelarut  heksana  lebih  rendah bila dibandingkan dengan ekstraksi menggunakan  pelarut  etil  asetat.  Maka  dari penelitian  yang  telah  dilakukan,  dapat disimpulkan  bahwa  hasil  penelitian  telah sesuai dengan teori.
Banyak  metode  kristalisasi  yang  telah digunakan  pada  industri  farmasi,  salah satunya adalah
kristalisasi dengan antisolvent. Pada kristalisasi dengan antisolvent,  pelarut  kedua  yang  dikenal sebagai antisolvent ditambahkan pada pelarut utama, sehingga menyebabkan pengurangan  kelarutan  zat  terlarut  pada pelarut utama dan menciptakan driving force lewat  jenuh.  Perbedaan  jenis  antisolvent mempengaruhi  ukuran  kristal  dan  distribusi kristal.  Kondisi  lewat  jenuh  dan  komposisi pelarut  juga  merupakan  faktor  penting  yang mempengaruhi  bentuk  dan  sifat  kristal. Kelarutan terjadi maksimum dengan penggunaan metanol sebagai antisolvent dan semakin  berkurang  dengan  bertambahnya rantai  pada  alkohol.  Dengan  penambahan alkohol,  semakin  tinggi  tingkat  kepolaran maka  kristal  akan  semakin  berlapis-lapis dibandingkan dengan alkohol dengan tingkat kepolaran  rendah.  Dengan  penambahan
metanol,  kristal  yang  terbentuk  akan berbentuk  seperti  plat,  sedangkan  dengan penambahan  alkohol  lain,  kristal  akan seperti  jarum  dengan  serpihan-serpihan. Metanol dan etanol menghasilkan
pembentukan kristal yang cepat [12].
Gambar 5. Morfologi Kristal dengan Penambahan  Antisolvent  (a)  Metanol  dan  (b)
Etanol [12]
Metanol  sebagai  antisolvent  memiliki koefisien  partisi  yang  lebih  tinggi  daripada etanol dimana koefisien partisi berhubungan dengan  daya  pelarutan  karetenoid  dan trigliserida  [10].  Maka  dari  penelitian  yang telah  dilakukan,  dapat  disimpulkan  bahwa hasil penelitian telah sesuai dengan teori.
Pengaruh  Perbandingan  Umpan  dan Pelarut  (F/S)  Etil  Asetat  dan  Jenis Antisolvent Terhadap Ekstraksi Likopen Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan,  pengaruh  perbandingan  umpan dan  pelarut  (F/S)  etil  asetat  dan  jenis antisolvent  terhadap  ekstraksi  dapat  dilihat pada gambar berikut.
Gambar  6.  Pengaruh  Perbandingan  Umpan dan  Pelarut  (F/S)  Etil  Asetat  dan  Jenis Antisolvent terhadap Ekstraksi Likopen
Pada  Gambar  6  dapat  dilihat  bahwa semakin  besar  perbandingan  umpan  dan pelarut  (F/S)  etil  asetat  yang  digunakan maka  kadar  total  likopen  yang  diperoleh semakin  meningkat.  Pada  perbandingan umpan  dan  pelarut  1:4,5  diperoleh  kadar total  likopen  paling  tinggi  baik  pada
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 1:2 1:2,5 1:3 1:3,5 1:4 1:4,5 Ka d a r to ta l li k o p en (m g /1 5 0 m l) Perbandingan Umpan dan Pelarut (F/S, v/v) antisolvent metanol antisolvent etanol (a) (b)
antisolvent  metanol  maupun  pada  etanol yaitu 3,2 mg/150 ml dan 2,8 mg/150 ml. Hal ini  sesuai  dengan  teori  bahwa  jumlah likopen semakin meningkat dengan semakin besarnya volume pelarut [17].
Kelarutan antioksidan dan laju perpindahan  massa  bervariasi  tergantung dengan  polaritas  pelarut  dan  jumlah  zat organik yang digunakan. Kelarutan komponen  bioaktif  kedalam  pelarut  adalah proses  fisis,  kesempatan  komponen  bioaktif untuk  berkontak  dengan  pelarut  meningkat jika  perbandingan  umpan  dan  pelarut semakin  besar  yang  akan  menyebabkan  laju ekstraksi  semakin  besar  [7].  Etil  asetat sebagai  pelarut  yang  bersifat  polar  sangat efektif  untuk  mengekstraksi  antioksidan [22].  Setelah  dilakukan  percobaan  dengan pelarut  yang  berbeda,  etil  asetat  memiliki efisiensi ekstraksi yang terbaik. Hasil HPLC menunjukkan  bahwa  terdapat  peak  tajam untuk likopen, yang mengindikasikan bahwa tidak  ada  komponen  atau  kontaminan  lain yang  terdapat  pada  ekstrak.  Dimana  pelarut organik  lain  juga  mengekstrak  komponen lain  selain  likopen.  Etil  asetat  juga  lebih disukai karena harganya yang murah, tingkat toksisitasnya  yang  rendah  dan  baunya  yang tidak  menusuk  [14].  Maka  dari  penelitian yang  telah  dilakukan,  dapat  disimpulkan bahwa  hasil  penelitian  telah  sesuai  dengan teori.
Kristalisasi  antisolvent  adalah  metode pemisahan  dan  pemurnian  yang  merupakan cara  yang  efektif  untuk  menghasilkan partikel  berukuran  nano  [3].  Penggunaan antisolvent pada proses kristalisasi mengurangi  kelarutan  zat  terlarut  pada larutan dan menyebabkan terjadinya kristalisasi secara cepat. Paremeter kristalisasi sangat mempengaruhi mekanisme  pembentukan  partikel,  ukuran kristal,  dan  distribusinya  [9].  Maka  dari penelitian  yang  telah  dilakukan,  dapat disimpulkan  bahwa  hasil  penelitian  telah sesuai dengan teori.

## Kesimpulan
Adapun  kesimpulan  yang  diperoleh  dari penelitian ini adalah semakin besar perbandingan umpan dan pelarut maka kadar likopen  yang  diperoleh  akan  semakin  besar karena  bahwa  jumlah  likopen  semakin meningkat dengan semakin besarnya volume pelarut. Rasio umpan dan pelarut yang tinggi dapat  mendukung  peningkatan  gradien konsentrasi,  yang  menghasilkan  kenaikan laju  difusi  yang  menyebabkan  ekstraksi
lebih optimal oleh pelarut. Dengan penggunaan  antisolvent  metanol,  kadar likopen  yang  diperoleh  semakin  besar dibandingkan  dengan  penggunaan  etanol sebagai  antisolvent  karena  metanol  sebagai antisolvent  memiliki  koefisien  partisi  yang lebih tinggi daripada etanol dimana koefisien  partisi  berhubungan  dengan  daya pelarutan  karetenoid  dan  trigliserida.  Dan dengan penggunaan pelarut etil asetat, kadar likopen  yang  diperoleh  semakin  besar dibandingkan  dengan  penggunaan  heksana sebagai pelarut.

## Daftar Pustaka
[1]  Bibliotek, Crystallization, www. sundoc.  bibliothek.de,  2002,  diakses pada 16 Mei 2014.
[2]  D.L.  Pavia,  G.M.  Lampman,  dan  Kriz, G.S., Introduction To Spectroscopy : A Guide for Students of Organic Chemistry, Singapore, p.102, 2001.
[3]  D.  Xia,  P.  Quan,  H.  Piao,  S.  Sun,  Y. Yin,  dan  F.  Cui,  Preparation  of  Stable Nitrendipine  Nanosuspensions  Using
the Precipitation–Ultrasonication Method for Enhancement of
Dissolution  and  Oral  Bioavailability, European  Journal  of  Pharmaceutical Sciences, Vol.40, hal 325-334, 2010.
[4]  Efsa,  Safety  of  Lycopene  Cold  Water Dispersible  Products  from  Blakeslea trispora,  The  EFSA  Journal,  Vol.  893, hal 1-15, 2008.
[5]  Francisco Artes, Francisco Garcia, Jose Marquina,  Antonio  Cano,  dan  J.  Pablo
Fernandez Trujillo, Physiological Responses  of  Tomato  Fruit  to  Cyclic Intermittent Temperature Regimes, Postharvest  Biology  and  Technology, Vol.14, hal 283-296, 1998.
[6]  Jannat  M.  Roldan-Gutierrez  dan  Maria Dolores  Luque  de  Castro,  Lycopene: The  Need  for  Better  Methods  for Characterization  and  Determination,
Trends in Analytical Chemistry,
Vol.26, hal 163-170, 2007.
[7]  J.  Xi,  Caffeine  Extraction  from  Green Tea  Leaves  Assisted  by  High  Pressure Processing, Journal of Food
Engineering,  Vol.94,  hal  105-109,
2009.
[8]  M.A. Al-Farsi dan Chang Y.L,
Optimization  of  Phenolics  and  Dietary Fibre  Extraction  from  Date  Seeds, Food Chemistry, Vol.108, hal 977-985, 2007.
[9]  M. W. Park dan S. D. Yeo, Antisolvent Crystallization  of  Roxithromycin  and the  Effect  of  Ultrasound,  Separation Science  and  Technology,  Vol.45,  hal 1402-1410, 2010.
[10]  Myong-Kyun  Roh,  Min-Hee  Jeon,  Jin- Nam  Moon,  Woi-Sook  Moon,  Sun- Mee Park, dan Jae-Suk Choi, A Simple Method For The Isolation Of Lycopene
From Lycopersicon Esculentum,
Botanical  Sciences,  Vol.91,  hal  187-
192, 2013.
[11]  Nutrient Data Laboratory, ARS, USDA National  Food  and  Nutrient  Analysis Program Wave, Beltsville MD, 2001.
[12]  Pornsak  Sriamornsak  dan  Kanokporn Burapapadh,
Characterization of Recrystallized Itraconazole Prepared by Cooling and Anti-Solvent Crystallization, Asian Journal of Pharmaceutical Sciences, hal 1-9, 2015.
[13]  P.W.Tan,  C.P.Tan  dan  Ho,C.  W, Antioxidant Properties: Effect of Solid- to-Solvent Ratio on Antioxidant Compounds  and  Capacities  of  Pegaga ( Centella Asiatica ),  International Food
Research Journal, Vol.18, hal 553-558, 2011. [14]  Saima Haroon,  Extraction of Lycopene from Tomato Paste and its Immobilization for Controlled Release, The University of Waikato, 2014. [15]  Santi  R.  Bhowmik  dan  Jung  C.  Pan,
Shelf  Life  of  Mature  Green  Tomatoes Stored  in  Controlled  Atmosphere  and High  Humidity,  Journal  of  Food Science, Vol.57, hal 948-953, 1992.
[16]  S.Q.Zhang,  H.M.Bi  dan  C.J.  Liu, Extraction  of  Bio-Active  Components
from  Rhodiola  Sachalinensis  under Ultrahigh Hydrostatic Pressure, Separation and Purification Technology,  Vol.57,  hal  277-282, 2007.
[17]  SR  Kumar,  Sundar  SS,  Afandi  A  dan
Rahman  S,  Optimization  of  Lycopene From  Malaysian  All  Sesason  Coloured Fleshy  Fruits,  International  Journal  of Biology,
Pharmacy  an  Allied  Sciences  (IJBPAS), Vol.2, hal 1455-1467, 2013.
[18]  T.  Anguelova  dan  J.  Warthsen, Lycopene Stability in Tomato Powders, Journal  of  Food  Science,  Vol.65,  hal 67-70, 2000.
[19]  Thomas W. Pratt, Liquid-Liquid Extraction,  Journal  of  The  American
Oil Chemists  Society,  Vol.30, hal 497- 505, 1953.
[20]  Tu  LS,  Dehghani  F  dan  Foster  NR,
Micronisation  and  Microencapsulation of  Pharmaceuticals  Using  a  Carbon
Dioxide Antisolvent, Powder Technology,  Vol.126,  hal  134–149, 2002. [21]  Victor  R.  Preedy  dan  Ronald  R. Watson, Tomatoes and Tomato Products,  Science  Publishers,  Enfield, USA, 2008.
[22]  W.  Peschel,  Sanchez-Rabaneda  F.,  Dn W. Plescher A., Gartzia I., Jimenez D., Lamuela-Raventos  R.,  Buxaderas  S., Condina  C,  An  Industrial  Approach  in the  Search  of  Natural  Antioxidants from  Vegetable  and  Fruit  Wastes,
Food  Chem,  Vol.97,    hal  137-150, 2006. [23]  Yvon Dumas, Mario Dadomo, Giuseppe Di Lucca dan Pascal Groiler, Effects  of  Environmental  Factors  and Agricultural Techniques on Antioxidant  Content  of  Tomatoes, Journal  of  the  Science  of  Food  and
Agriculture, Vol.83, hal 369-382, 2003.