## JURNAL KIMIA MULAWARMAN
Vol 21, No. 1, November 2023 pp. 01-07 https://jurnal.kimia.fmipa.unmul.ac.id/index.php/JKM P-ISSN 1693-5616 E-ISSN 2476-9258

## Antioxidants  And  Total  Phenolics  From  Plants  Of The Malvaceae Family
Yefrida a* , Silvia Detri Susanti a , Refilda a
a Departement of Chemistry, FMIPA, Univesitas Andalas, Indonesia * Corresponding Author: yefrida@sci.unand.ac.id

## ABSTRACT
The use of plants as a source of medicine has been increasing lately. The plants used  generally  have  bioactivities  such  as  anti-bacterial,  antioxidant,  and others.  Plants  that  contain  antioxidants  are  widely  used  because  of  their ability to capture free radicals so that they can protect the body from various diseases.  One of the plants that is often used is plants from the Malvaceae family. In this study, the antioxidant and total phenolic contents of five types of  plants  were  determined.  These  plants  were  extracted  by  infundation method  and  analyzed  using  MPM  (Modified  Phenanthroline  Method)  and Folin-Ciocalteu methods. The highest antioxidant and total phenolic contents were found in kapok randu and waru leaves.
This is an open-access article under the CC – BY-SA license.
Article History
Received 2023-02-12
Revised 2023-04-26 Accepted 2023-05-10

## Keywords
Family Malvaceae Antioxidant
Phenolic MPM

## 1. Pendahuluan
Senyawa yang tidak stabil dan bersifat reaktif disebut sebagai radikal bebas. Asap rokok, polusi, sinar UV merupakan sebagian penyebab timbulnya senyawa ini. Tubuh yang terpapar senyawa ini akan menimbulkan efek yang merugikan seperti timbulnya berbagai jenis penyakit. Oleh  karena  itu  tubuh  memerlukan  zat  atau  senyawa  yang  dapat  melindunginya  dari  efek radikal bebas. Senyawa dengan efek ini disebut antioksidan [1].
Antioksidan dapat memblokir reaksi oksidasi dari spesies oksigen reaktif atau menetralkan radikal bebas [2]. Oksigen reaktif dapat memicu reaksi oksidasi dalam tubuh manusia sehingga menyebabkan penyakit aterosklerosis, kanker dan penyakit lainnya [3]. Antioksidan ada yang diekstrak dari tumbuh-tumbuhan dan ada pula yang disintesis di laboratorium. Antioksidan alami  lebih  aman  untuk  digunakan.  Penggunaan  antioksidan  sintetis  yang  berlebihan  dapat membahayakan kesehatan karena bersifat karsinogenik. Hal ini menyebabkan banyak peneliti yang  melakukan  penelitian  untuk  mendapatkan  tumbuhan  yang  mempunyai  kandungan antioksidan [2]. Tumbuhan famili Malvaceae mencakup 82 marga dan sekitar 1500 spesies [4]. Sekitar  250  spesies  tumbuhan  ini  telah  digunakan  masyarakat  sebagai  tanaman  obat  [5]. Sebagian besar tumbuhan ini mengandung senyawa fenolik yang bersifat antioksidan [6].
Pengolahan  tumbuhan  menjadi  obat-obatan  herbal  oleh  masyarakat,  biasanya  dilakukan dengan penyeduhan atau perebusan [7]. Metode ekstraksi dengan cara perebusan ini disebut metode infus. Metode infus dilakukan dengan menggunakan air sebagai pelarut. Air dipanaskan hingga suhu 90°C kemudian sampel tumbuhan dimasukkan dan dilakukan perebusan selama 15 menit, sambil diaduk sesekali lalu  disaring selagi panas [8]. Ekstrak  yang didapatkan ini diharapkan mengandung senyawa fenolik yang bersifat antioksidan.
Metode MPM merupakan metode penentuan antioksidan yang merupakan modifikasi dari metode FRAP ( Ferric Reducing Antioxant Power ), dengan cara mengganti senwa pengompleks yang digunakan. Mekanisme penentuan dengan metode ini didasarkan pada reaksi besi (III)
dengan antioksidan yang menghasilkan besi (II). Besi(II) yang terbentuk akan bereaksi dengan 1,10-orthophenanthroline dan menghasilkan ion kompleks berwarna merah-oranye [3].
Gambar 1. Kompleks 1,10-Fenantrolin dengan Fe 2+
Pada penelitian ini ditentukan antioksidan dan fenolik total dari infus 5 jenis daun tanaman famili  Malvaceae.  Hasil  penelitian  ini  diharapkan  dapat  menambah  informasi  tentang antioksidan dan fenolik total dari tanaman yang termasuk famili Malvaceae.

## 2. Metodologi

## 2.1. Alat
Spektrofotometer  UV-Vis  (Shimadzu),  oven  (Memmert), hotplate (IKA  C-MAG),  neraca analitik (KERN), desikator, termometer dan peralatan gelas laboratorium.

## 2.2. Bahan
Lima  jenis  tanaman  obat  dari  famili Malvaceae yaitu  daun  bunga  kembang  sepatu,  daun pulutan, daun waru, daun kapas/kapuk randu dan daun gedi, akuades, metanol p.a (Merck), asam  askorbat  (Merck),  1,10-fenantrolin  klorida  monohidrat  (Sigma),  FeCl 3 .6H 2 O  (Merck), Na 2 CO 3 (Merck), reagen Folin-Ciocalteu (Sigma) dan asam galat (Merck).

## 2.3. Prosedur Penelitian

## Sampel
Sampel daun bunga kembang sepatu, daun pulutan, daun kapas/kapuk randu  diambil di daerah Binuang, Kampung Dalam, daun waru di daerah Balai Baru dan daun gedi diambil di daerah  Kapalo  Koto,  Padang.  Masing-masing  sampel  diambil  pada  bagian  daun  yang  masih segar dengan kondisi warna yang hampir sama.

## Identifikasi Sampel
Identifikasi sampel tanaman obat yang digunakan dilakukan di Laboratorium Herbarium, Universitas Andalas, Padang.

## Preparasi Sampel
Sampel segar dibersihkan dan dicuci dengan air mengalir lalu ditiriskan. Sampel bersih ini kemudian dipotong kecil-kecil.

## Kadar Air
Ditentukan dengan metode gravimetri. Cawan porselen dikeringkan pada suhu 105˚C selama 30 menit, lalu  dimasukkan ke dalam desikator selama 15 menit, lalu ditimbang. Selanjutnya sampel segar ditimbang dalam cawan porselen lalu dioven selama 3 jam pada suhu 105˚C dan didinginkan  di  dalam  desikator  lalu  ditimbang.  Pengovenan  diulangi  selama  1  jam  sampai didapatkan berat konstan [9].

## Ekstraksi Sampel
Sampel  segar  ditimbang  sebanyak  ±  2,5  g  ditambahkan  akuades  sebanyak  100  mL. Dipanaskan selama 15 menit sampai suhu mencapai 90˚C dengan sesekali diaduk, disaring dan dicukupkan  dengan  akuades  panas  sampai  volume  100  mL  sehingga  didapatkan  ekstrak sampel. Pembuatan ekstrak sampel dilakukan secara triplo [1].

## Antioksidan Total
Kurva kalibrasi standar dibuat dengan menggunakan larutan asam askorbat dengan deret konsentrasi 0,050 - 0,175 mM. Prosedur penentuannya sesuai dengan Yefrida et al [3].

## Fenolik Total
Kurva  kalibrasi  standar  dibuat  dengan  menggunakan  larutan  asam  galat  dengan  deret konsentrasi 40 - 240 mg/L. Prosedur penentuannya sesuai dengan Yefrida et al [3].

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1. Identifikasi Sampel
Hasil  identifikasi  sampel  tertera  dalam  surat  dengan  nomor  313/K-ID/ANDA/IX/2020. Hasilnya dicantumkan pada Tabel 1 di bawah ini.
Tabel 1. Hasil identifikasi sampel No Famili Spesies Nama lokal 1. Malvaceae Hibiscus rosa-sinensis L. Bunga kembang sepatu 2. Malvaceae Urena lobata L. Pulutan 3. Malvaceae Hibiscus tiliaceus L. Waru 4. Malvaceae Ceiba pentandra (L.) Gaerth. Kapuk randu/kapas 5. Malvaceae Abelmoschus manihot (L.) Medik. Daun gedi

## 3.2. Kadar Air
Penentuan kadar air ini dilakukan untuk mengetahui berat kering masing-masing sampel yang selanjutnya akan digunakan untuk menghitung kandungan antioksidan total dan fenolik total dari setiap sampel. Hasil uji yang telah dilakukan dicantumkan pada Tabel 2 .
Tabel 2. Kadar Air No Sampel Kadar Air (%) ± SD 1. Daun bunga kembang sepatu 78,63 ± 0,50 2. Daun gedi 78,30 ± 0,71 3. Daun waru 70,36 ± 0,17 4. Daun kapuk randu 68,16 ± 0,30 5. Daun pulutan 64,99 ± 0,22
Berdasarkan  hasil  pengujian  didapatkan  persentase  kadar  air  yang  berbeda-beda  untuk setiap  sampel.  Kadar  air  terbesar  terdapat  pada  sampel  daun  bunga  kembang  sepatu  yaitu sebesar 78,63 ± 0,50% dan kadar air terkecil pada sampel daun pulutan sebesar 64,99 ± 0,22%. Semakin tinggi persentase kadar air menyatakan semakin banyak kandungan air yang terdapat pada  sampel  tersebut.  Besarnya  perbedaan  kadar  air  yang  diperoleh  pada  penelitian  ini disebabkan  selain  karena  jenis  tumbuhannya  berbeda,  juga  dapat  dipengaruhi  oleh  faktor lingkungan seperti iklim dan kondisi tanah.

## 3.3. Antioksidan Total
Kandungan antioksidan total dilakukan dengan menggunakan metode MPM. Metode MPM menggunakan akuades sebagai pelarut.  Antioksidan akan mereduksi ion Fe 3+ yang berasal dari larutan  FeCl 3 menjadi  ion  Fe 2+ ,  dimana  ion  Fe 2+ akan  bereaksi  dengan  1,10  fenantrolin membentuk  ion  kompleks  Fe-fenantrolin  yang  berwarna  merah  jingga  [3].  Semakin  besar kandungan antioksidan dalam sampel, semakin banyak ion Fe 3+ yang tereduksi dan kompleks Fe-fenantrolin yang terbentuk juga semakin banyak, sehingga warna yang dihasilkan semakin pekat, serta nilai absorban yang didapatkan juga semakin besar. Kurva standar asam askorbat ditunjukan  pada Gambar  1  didapatkan  persamaan regresi y  = 7,3886x – 0,195 dengan  R 2 = 0,9981.

## Gambar 1. Kurva Kalibrasi Standar Asam Askorbat
Pada Gambar 1 menunjukkan bahwa konsentrasi larutan asam askorbat sebanding dengan nilai absorban,  Hal  ini sesuai  dengan Hukum  Lambert  Beer. Dari  kurva ini akan didapatkan persamaan regresi yang akan digunakan untuk menentukan konsentrasi antioksidan masing- masing sampel.
Penentuan  kandungan  antioksidan  total  dilakukan  pada  sampel  daun  bunga  kembang sepatu,  daun  pulutan,  daun  waru,  daun  kapas/kapuk  randu  dan  daun  gedi.  Ekstrak  sampel diperoleh dengan cara infundasi yaitu perebusan sampel menggunakan pelarut akuades  untuk mendapatkan zat aktif yang bersifat polar seperti polifenol dan flavonoid yang bersifat sebagai antioksidan. Hasil uji kandungan antioksidan total dari masing-masing sampel ditunjukan pada Tabel 3 berikut.
Tabel 3. Antioksidan Total No Sampel Antioksidan total (mg AA/g DW) ± SD 1. Daun kapuk randu 31,57 ± 1,55 2. Daun pulutan 24,43 ± 0,07 3. Daun waru 14,64 ± 0,41 4. Daun kembang sepatu 6,87 ± 0,17 5. Daun gedi 4,83 ± 0,36
Berdasarkan Tabel 3 didapatkan nilai antioksidan yang berbeda-beda untuk setiap sampel. Kandungan antioksidan tertinggi terdapat pada sampel daun kapuk randu sebesar 31,57 ± 1,55 mg AA/g DW, sedangkan kandungan antioksidan terkecil pada sampel daun gedi yaitu sebesar 4,83 ± 0,36 mg AA/g DW. Besarnya kandungan antioksidan yang terdapat dalam setiap sampel menyatakan  kemampuannya  dalam  menghambat  radikal  bebas.  Semakin  besar  kandungan antioksidan semakin banyak radikal bebas yang dapat dihambat.
Penelitian  sebelumnya  oleh  Fauziah  dkk.  menyatakan  aktivitas  antioksidan  daun  kapuk randu  yang  diekstrak  dengan  pelarut  etanol  dengan  metode  DPPH  menghasilkan  nilai  IC 50 sebesar 59,296 ppm [10]. Penelitian oleh Pined dkk mendapatkan kandungan antioksidan daun gedi yang diekstrak secara maserasi dan infundasi menggunakan etanol 70% dan 96% nilai IC 50 sebesar 575 ppm [11]. Taroreh et al  menentukan kandungan antioksidan daun gedi dengan metode DPPH diperoleh nilai IC 50 sebesar 42,83 µg/mL dan dengan metode pengkelatan ion besi sebesar 48,07% pada konsentrasi 150 µg/mL [12]. Berdasarkan penelitian Noberston dkk, diperoleh aktivitas antioksidan daun gedi dengan nilai IC 50 sebesar 0,17 mg/mL [2]. Sedangkan dari  penelitian Dewantara dkk, ekstrak etanol daun gedi mempunyai nilai IC 50 sebesar 31,29 ppm [13].  Perbedaan  besarnya  kandungan  antioksidan  yang  diperoleh  disebabkan  karena
y = 7,3886x - 0,195 R² = 0,9981 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 0 0.05 0.1 0.15 0.2 A b sor b an
Konsentrasi Larutan Standar Asam Askorbat (mM)
beberapa faktor seperti tempat tumbuh sampel, metode ekstraksi dan pelarut ataupun metode penentuan kandungan antioksidan yang digunakan.

## 3.4. Fenolik Total
Fenolik total dalam sampel ditentukan dengan metode Folin-Ciocalteu [6]. Senyawa fenolik akan  dioksidasi  oleh  reagen  Folin-Ciocalteu  menjadi  ion  fenolat  yang  berlangsung  dalam suasana basa dengan penambahan natrium karbonat. Sedangkan pereaksi ini tidak stabil pada kondisi  basa  sehingga  gugus  fenol  hidroksil  akan  mereduksi  kompleks  fosfotungstat- fosfomolibdat sehingga membentuk kompleks molibdenum yang berwarna biru dan menyerap pada 750 nm. Warna  biru  yang terbentuk sebanding dengan  kandungan  fenolik total  dalam sampel. Asam galat yang merupakan suatu asam sederhana yang bersifat murni dan stabil [14]. Kurva kalibrasi standar asam galat ditunjukkan pada Gambar 2 berikut ini.
Gambar 2. Kurva kalibrasi Standar Asam Galat
Berdasarkan kurva pada Gambar 2 di atas diperoleh persamaan regresi y = 0,0045x – 0,0701 dengan R 2 = 0,9949. Nilai koefisien determinasi (R 2 ) yang mendekati 1 menyatakan semakin besar linieritas antara konsentrasi dengan nilai absorban. Persamaan regresi yang didapatkan digunakan untuk menentukan kandungan fenolik total sampel.
Kandungan  fenolik  total  ditentukan  pada  sampel  yang  diekstrak  secara  infusa menggunakan pelarut akuades. Hasil uji kandungan fenolik total pada masing-masing sampel ditunjukkan pada Tabel 4 di bawah ini.
Tabel 4. Kandungan Fenolik Total No Sampel Fenolik total (mg GAE/g DW) ± SD 1. Daun waru 38,78 ± 0,30 2. Daun kapuk randu 25,22 ± 2,71 3. Daun kembang sepatu 17,62 ± 2,81 4. Daun gedi 11,47 ± 1,40 5. Daun pulutan 7,68 ± 0,71
Senyawa fenolik berpotensi sebagai antioksidan, semakin besar kandungan senyawa fenolik pada  suatu  sampel  semakin  besar  pula  aktivitas  antioksidan  dari  dari  sampel  tersebut. Berdasarkan Tabel  4 diperoleh  kandungan  fenolik  total  terbesar  pada  sampel  daun  waru sebesar 38,78 ± 0,30 mg GAE/g DW dan kandungan fenolik total terkecil yaitu pada sampel daun pulutan sebesar 7,68 ± 0,71 mg GAE/g DW. Besarnya kandungan fenolik total setiap sampel berbeda-beda, hal tersebut disebabkan karena senyawa yang terdapat didalam masing-masing sampel juga berbeda. Penelitian sebelumnya oleh Taroreh, dkk. (2015) didapatkan nilai fenolik total dari daun gedi sebesar 10,67 mg GAE/g ekstrak [12]. Sedangkan pada penelitian Suoth, dkk. (2013) ekstrak pekat daun gedi dengan pelarut akuades mengandung total fenol sebesar
y = 0,0045x - 0,0701 R² = 0,9949 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 0 100 200 300 A bs orba n
Konsentrasi Larutan Standar Asam Galat (mg/L)
1003,5 mg/kg ekstrak [15]. Perbedaan kadar fenolik yang didapatkan dari penelitian ini dengan lainnya,  kemungkinan  disebabkan  karena  beberapa  faktor  seperti  tempat  dan  kondisi tumbuhnya sampel, metode ekstraksi serta pelarut yang digunakan

## 4. Conclusion
Kandungan  antioksidan  dan  fenolik  total  pada  infusa  kelima  jenis  tumbuhan  famili Malvaceae  yang  didapatkan  nilainya  berbeda-beda.  Kandungan  antioksidan  total  terbesar didapatkan  pada  infusa  daun  kapuk  randu  sedangkan  kandungan  fenolik  total  terbesar didapatkan pada infusa daun waru

## References
[1] N.  N.  Yuliani  And  D.  P.  Dienina,  “Uji  Aktivitas  Antioksidan  Infusa  Daun  Kelor  ( Moringa oleifera, Lamk ) Dengan Metode  1,1- Diphenyl-2- Picrylhydrazyl (DPPH)”, J. Info  Kesehat. , Vol. 13, No. 2, pp. 1060 – 1082, 2015.
[2] R. Nobertson, N. P. Indah., Y. S. Kenta, “ Uji Aktivitas antioksidan Ekstrak Etanol Daun Gedi Merah  ( Abelmoschus manihot L.)  Palu Sulawesi Tengah ”, Farmakologika  Jurnal  Farmasi , Vol. 15, No. 1, pp 63-71, 2018.
[3] Yefrida,  H.  Suyani,  A.  Alif,  M.  Efdi,  H.  Aziz, “ Modification  of  Phenantrholine  Method  to Determine Antioxidant Content in Tropical Fruits Methanolic Extract ,” Research Journal of Chemistry and Environment , Vol. 22, No. 4, 2018.
[4] S. Surahmaida, A. Rachmawati, and E. Handayani, “Kandungan Senyawa Kimia Daun Waru (hibiscus tiliaceus) di Kawasan Lingkar timur sidoarjo,” Journal of Pharmacy and Science , vol. 5, no. 2, pp. 39 – 42, 2020. doi: 10.53342/pharmasci.v5i2.167
[5] R. Hardiana, Rudiyansyah, T. A. Zaharah, “ Aktivitas Antioksidan Senyawa Golongan Fenol dari Beberapa Jenis Tumbuhan Famili Malvaceae, ” Jurnal Kimia Khatulistiwa , vol. 1, no.1, pp. 8-13, 2012.
[6] M. Silalahi, “ Hibiscus rosa-sinensis L. dan Bioaktivitasnya ,” Journal EduMatSains , vol. 3 no. 2, pp. 133-146, 2019.
[7] I.  P.  Dewi,  H.  G.  Sakoikoi,  Verawaty, “ Uji  Aktivitas  Antioksidan  Infusa  Daun  Kersen ( Muntingia  calabura L.)  dengan  Menggunakan  Metode  DPPH  (1,1- diphenyl -2- picrylhydrazyl ) ,” Journal Akademi Farmasi Prayoga , vol. 5 no. 1, pp. 49-57, 2020.
[8] Z. Khafidhoh, S. S. Dewi, A. I swara, “ Efektivitas Infusa Kulit Jeruk Purut ( Citrus hystrix DC.) terhadap  Pertumbuhan Candida  albicans Penyebab  Sariawan  secara in  vitro ,” The  2 nd University Research Colloquium , pp. 31-57, 2015.
[9] D.  Saprudin,  C.  A.  Palupi,  and  E.  Rohaeti,  “Evaluasi  Pemberian  unsur  Hara  Besi  Pada Kandungan asam amino Dan Mineral Dalam Biji Jagung,” Jurnal Kimia Riset , vol. 4, no. 1, p. 49-61, 2019. doi: 10.20473/jkr.v4i1.11774
[10] S. Fauziah, N. P. Sari, “ Uji Aktivitas Antioksidan dan Penetapan Kadar Flavonoid Total dari Ekstrak  Etanol  70%  Daun  Kapuk  Randu  ( Ceiba  pentandra (L.)  Geartn)  dengan  Metode DPPH ,” ISTA Online Technology Journal , vol. 01 no. 01, pp. 10-16, 2020
[11] A. T. D.  Pine, G. Alam, F. Attamimi, “ Standarisasi Mutu Ekstrak Daun Gedi ( Abelmoschus manihot (L.) Medik) dan Uji Efek Antioksidan dengan Metode DPPH ,” Jurnal Farmasi UIN Alauddin , vol. 3 no. 3, pp. 111-128, 2015.
[12] M.  Taroreh,  S.  Raharjo,  P.  Hastuti,  and  A.  Murdiati,  “Antioxidative  activities  of  various fractions  of  Gedi’s  leaf  extracts  (Abelmoschus  Manihot  L.  Medik),” Agriculture  and Agricultural Science Procedia , vol. 9, pp. 271 – 278, 2016. doi: 10.1016/j.aaspro.2016.02.112
[13] I. K. G. D. Dewantara,., I. W. G. Gunawan, I. N. W irajana, “ Uji Potensi Ekstrak Etanol Daun Gedi  ( Abelmoschus  manihot L.)  terhadap  Aktivitas  Antioksidan  dan  Penurunan  Kadar Glukosa darah Tikus Putih Galur Wistar yang Diinduksi Aloksan ,” Indonesian E-Journal of Applied Chemistry , vol. 5 no. 2, pp. 94-101, 2017.
[14] Y.  Yamin,  R.  Hamsidi,  N.  Nasria,  and  S.  Sabarudin,  “Karakterisasi  Dan  Uji  Aktivitas antioksidan serta Penetapan Kadar fenolik total ekstrak etanol kulit Batang Kapuk Randu (Ceiba Petandra L. Gaertn),” Pharmauho: Jurnal Farmasi, Sains, dan Kesehatan , vol. 4, no. 2, pp. 46 – 49, 2019. doi: 10.33772/pharmauho.v4i2.6277
[15] E. South, H. Kaempe, A. Tampi, “ Evaluasi Kandungan Total Polifenol dan Isolasi Senyawa Flavonoid pada Daun Gedi Merah ( Abelmoschus manihot L.) ,” Chem. Prog. , vol. 6, no. 2, 2013.