Hubungan Antara Kadar Protein BCL-2 Dan Caspase 3 Sebagai Faktor Risiko Pada Kejadian Abortus
Herlambang 1 , Budi Handono 2 , Leri S Faried 3 , Ahmad Faried 4 ,  Hiroyuki Kuwano 4 and Firman F Wirakusumah 2
1 Department of Obstetrics and Gynecology, Jambi University, Indonesia
2 Department of Obstetrics and Gynecology, Padjadjaran University, Indonesia 3 Department of Obstetrics and Gynecology, Graduate School of Medicine, Gunma University, Gunma, Japan
4 Department of General Surgical Science, Graduate School of Medicine, Gunma University, Japan
Email corresponding author: herlambang_fkik@unja.ac.id

## ABSTRAK
Untuk  mengetahui korelasi  antara  kadar  protein  Bcl-2  dan  caspase-3  pada  kehamilan  normal  dan  abortus,  serta kekuatan kadar protein Bcl-2 dengan caspase-3 sebagai alat ukur untuk uji diagnostik. Penelitian analitik dengan menggunakan rancangan case control terhadap 38 subjek dengan abortus dan 38 subjek dengan kehamilan normal sebagai kontrol yang memenuhi kriteria inklusi. Untuk melihat keeratan hubungan antara kadar protein Bcl-2 dan caspase-3 dilakukan analisis  dengan  uji korelasi Pearson,  sedangkan untuk uji diagnostik digunakan  kurva  ROC (Receiver  Operating  Characteristics). Rerata  kadar  Bcl-2  pada  subjek  dengan  abortus  lebih  rendah  yaitu  7,263 (SB 1,71) ng/mL, sedangkan kehamilan normal 7,490 (SB 3,938) ng/mL (p=0,050). Rerata kadar caspase-3 pada subjek  abortus  lebih  tinggi  yaitu  112,74  (SB  152,73)  mg/mL,  sedangkan  kehamilan  normal  14,94  (SB  23,18) mg/mL  (p<0,001).  Tidak  terdapat  korelasi  bermakna  antara  kadar  protein  Bcl-2  dan  caspase-3  pada  kehamilan normal dan abortus walaupun terlihat kecenderungan semakin meningkat kadar protein Bcl-2 semakin tinggi kadar caspase-3  (r=0,093).  Bcl-2  mempunyai cut-off  point >6,49  mg/mL  (OR=3,58)  dan  caspase-3  mempunyai cut-off point >11,25 ng/mL (OR=28,63). Tidak terdapat korelasi bermakna antara kadar protein Bcl-2 dan caspase-3 pada kasus  abortus  (r=0,093).  Bcl-2  ( cut-off  point >6,49  ng/mL)  mempunyai  kecenderungan  abortus  3,58  kali  dan caspase-3 ( cut-off point >11,25mg/mL) mempunyai kecenderungan abortus 28,63 kali.
Kata Kunci: Abortus Inkomplit, Kehamilan Normal, Apoptosis, Caspase-3, Bcl-2

## PENDAHULUAN
Etiologi dan patofisiologi terjadinya abortus masih belum banyak diketahui. Faktor-faktor yang  diketahui  berperan  dalam  terjadinya  abortus  yaitu  kelainan  kromosom,  kelainan imunologi,  kelainan  hormonal,  infeksi  maternal.  Peningkatan  terjadinya  abortus  juga  terjadi pada kelainan uterus, diabetes melitus, hipotiroidisme, kelainan jantung, penyakit paru kronik, peningkatan indeks massa tubuh, wanita yang merokok, minum alkohol, dan lain-lain.
Abortus merupakan bentuk yang paling umum dari kematian embrio yang disebabkan oleh kegagalan  kehamilan  dini.  Mekanisme  biomolekular  yang  mendasari  kejadian  abortus  ini belum sepenuhnya dimengerti. Terdapat bukti yang menunjukkan peningkatan apoptosis pada uteroplasenta  dan  pada  organ  reproduksi  yang  berhubungan  dengan  abnormalitas  pada kehamilan. Lebih jauh, kegagalan kehamilan pada trimester pertama berhubungan erat dengan peningkatan apoptosis di sinsitiotrofoblas dibandingkan dengan kehamilan normal.
Apoptosis  merupakan  proses  yang  sangat  komplek,  yang  dikontrol  oleh  berbagai  gen, diantaranya  keluarga  Bcl-2  dan caspase cascade .  Keduanya  berperanan  dalam  regulasi
apoptosis  baik  dalam  kondisi  normal  ataupun  abnormal,  seperti  kegagalan  kehamilan. Torchinsky  dkk  dalam  penelitiannya  menyebutkan  keterlibatan  aktivator  pro-apoptosis  dapat menyebabkan  apoptosis  berlebihan  berlanjut  dengan  adanya  kematian  sel ditandai  adanya cysteinyl aspartate-specific proteinase- 3 ( caspase -3) yang akhirnya berlanjut dengan abortus.
Penelitian tentang abortus di Bagian Obstetri dan Ginekologi RS Dr Hasan Sadikin masih kurang, diantara yang telah dilakukan adalah Handono dkk yang meneliti pemberian vitamin C pada  wanita-wanita  hamil  untuk  mencegah  abortus  imminen  telah  memperlihatkan  adanya korelasi peningkatan kadar superoxid dismutase (SOD) dengan penurunan RI ASD dan kadar VCAM-1  setelah  pemberian  vitamin  C.  Wibowo  dkk.  yang  menyatakan  terdapat  hubungan penurunan kadar enzim superoksid dismutase (SOD) dan glutation peroksidase sel darah merah dengan  terjadinya  abortus  spontan.  Zulmaeta  dkk.  meneliti    kadar Vaskuler  Growth  Factor serum antara penderita abortus imminens dengan kehamilan normal.

## METODE PENELITIAN
Rancangan  penelitian  ini  menggunakan  metode  pengkajian  analitik  komparatif  dengan rancangan case  control .  Kegiatan  penelitian    ini  dilaksanakan  di  Bagian/SMF  Obstetri  dan Ginekologi  FKUP/RSHS,  RS  Cibabat  Cimahi,  RS  Slamet  Garut  dan  Universitas  Gunma, Jepang. Penelitian ini dilaksanakan dalam waktu 12 bulan.
Populasi  Terjangkau:  Semua  ibu  hamil  yang  datang  memeriksakan  kehamilannya  di poliklinik,  kamar  bersalin  Obstetri  RSUP  dr  Hasan  Sadikin  Bandung  dan  Rumah  Sakit  RS Cibabat Cimahi, RS Slamet Garut dengan kriteria inklusi: Kehamilan dengan diagnosis abortus inkomplit sebagai kelompok kasus, Usia kehamilan 10-20  minggu (Hari pertama haid teakhir), Usia ibu di bawah 35 tahun, Hamil tidak dengan bantuan obat-obatan (pemicu ovulasi), Tidak sedang  dalam  minum  obat  hormonal  atau  sejenisnya  pada  yang  normal.  Kriteria  Eksklusi: Terdapat  kelainan  uterus  dengan  pemeriksaan  dalam  dan  USG,  Kelainan  ginjal,  jantung, hipertensi,  diabetes  melitus  berdasarkan  anamnesis  dan  klinis,  Ada  tanda    keganasan    secara klinik dan USG pada ibu.
Analisis  statistik  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah : Uji  X 2 ( Chi-square ) digunakan  untuk  menguji  perbedaan  presentase  untuk  data  yang  disajikan  dalam  tabel kontingensi,  Uji  student  T  digunakan  untuk  membandingkan  dua  nilai  rata-rata  data berdistribusi  normal,  Uji  Mann-Whitney  digunakan  untuk  membandingkan  perbedaan  2  nilai tengah (median) data tidak berdistribusi normal, Spearman  Correlation Test digunakan untuk melihat  hubungan  antara  dua  variabel    numerik,  Uji  Diagnostik  digunakan  kurva  ROC ( Receiver  Operating  Characteristics )  dan  akan  didapatkan  nilai  sensitivitas,  spesifisitas  dan akurasi. Kemaknaan  berdasarkan nilai bermakna apabila p ≤ 0.05, sangat bermakna p≤ 0.01 Analisis data diolah menggunakan program SPSS for window versi 13.0 pada taraf kemaknaan 5%/derjat kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Telah dilakukan pemeriksaan kadar protein Bcl-2 dan protein Caspase-3 pada serum pasien abortus  inkomplit  (38  sampel)  dan  kehamilan  normal  sebagai  kontrol  (38  sampel)  sesuai kriteria  inklusi  dan  eksklusi  (lihat  material  dan  metode)  dengan  cara Enzyme  link  immuno- sorbent  assay (ELISA)  dan  dilakukan  secara duplicate  independent /duplo  pada  setiap pemeriksaan  protein-protein  tersebut  diatas  (semua  sampel  dapat  diperiksa).  Tidak  terjadi abortus pada kelompok kontrol yang dilakukan evaluasi sampai 20 minggu kehamilan.
Tabel  1. Karakteristik  Subjek  Penelitian  Menurut  Umur,  Paritas  dan  Umur  Kehamilan  pada Kehamilan Normal dan  Abortus.
Variabel Abortus Normal Total X 2 Nilai p Umur 2,022 0,568 Rerata (SB) 27,61(41,8) 28,82(4,56) Median 28 29,50 Rentang 19-35 19,35 <20   Tahun 2 (5,3%) 1 (2,6%) 3 (3,9%) 20-24 Tahun 4 (10,5%) 5 (13,2%) 9 (11,8%) 25-29 Tahun 18 (47,4%) 13 (34,2%) 31 (40,8%) 30-35 Tahun 14 (36,8%) 19 (50,0%) 33 (43,4%) Paritas 0,234 0,629 0 0 (0,0%) 0 (0,0%) 0 (0,0%) 1-2 26 (68,4%) 24 (63,2%) 50 (65,8%) ≥3 12 (31,6%) 14 (36,8%) 26 (34,2%) Umur kehamilan 0,290 0,990 10 minggu 9 (23,7%) 8(21,1%) 11 minggu 7(18,4%) 6(15,8%) 12 minggu 10(26,3%) 10(26,3%) 13 minggu 6(15,8%) 7(18,4%) 14 minggu 6(15,8%) 7(18,4%) Total 38 (100,0%) 38 (100,0%) 76 (100%)
Keterangan: Nilai p dihtung berdasarkan uji chi square. Bermakna bila p≤0.05  (*), sangat bermakna bila p≤0.01 (**)
Berdasarkan    Tabel  1  terlihat  bahwa  h asil  analisis  tes  x 2 pada  derajat  kepercayaan  95% menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat  hubungan  umur    dengan  kejadian  abortus  dengan    nilai p=0,568 (nilai p>0,05), tidak terdapat hubungan paritas dengan kejadian  abortus dengan  nilai p  =0,629  (nilai  p>0,05),  tidak  terdapat  hubungan  umur  kehamilan  dengan  kejadian  abortus dengan    nilai  p  =0,484  (nilai  p>0,05).  Berdasarkan  hasil  uji  statistik  tersebut  terlihat  bahwa karakteristik  subjek  penelitian  berdasarkan  umur,  paritas  dan  umur  kehamilan  antara  subjek dengan abortus dan kehamilan normal adalah homogen sehingga dapat dianalisis lebih lanjut.
Tabel 2. Perbedaan Kadar Protein Bcl-2 dan Caspase 3 pada Kehamilan Normal dan  Abortus
Kadar Kehamilan antibodi protein Abortus Normal Z MW Nilai p Bcl-2 (ng/mL) -1,938 0,050* Rerata (SB) 7,2633(1,71) 7,4903(3,938) Median 7,11 6,44 Caspase 3 (mg/mL) -5,913 <0,001** Rerata (SB) 112,74(152,73) 14,94(23,18) Median 76,5 0,67 Keterangan:  Nilai p dihtung berdasarkan uji Mann Whitney . Bermakna bila p≤0.05  (*), sangat bermakna bila p≤0.01 (**)
Tabel.  2  menunjukkan  bahwa  rerata kadar  Bcl-2 pada  subjek  penelitian  yang  mengalami abortus  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  kehamilan  normal  yaitu 7,2633 dengan  simpangan baku 1,71 ,  median 7,11  sedangkan subjek  penelitian  dengan  kehamilan  normal  yaitu 7,4903 dengan simpangan baku 3,938 , median 6,44 dan h asil analisis uji Mann Whitney pada derajat kepercayaan  95%  menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan  kadar  Bcl-2  antara    kehamilan normal dan  abortus secara bermakna dengan  nilai p =0,050 (nilai p≤0,05).
Tabel.  2  menunjukkan  bahwa  rerata kadar  caspase  3  pada subjek  penelitian  yang mengalami  abortus  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  kehamilan  normal  yaitu 112,74 dengan simpangan  baku 152,73 ,  median 76,5  sedangkan subjek  penelitian  dengan  kehamilan  normal yaitu 14,94 dengan simpangan baku 23,18 , median 0,67 dan h asil analisis Mann Whitney Test pada derajat kepercayaan 95% menunjukkan bahwa terdapat perbedaan Kadar caspase 3 antara kehamilan normal dan  abortus secara bermakna dengan  nilai p <0,001 (nilai p≤0,01).
Tabel 3. Korelasi Antara Kadar Krotein Bcl-2  dengan Caspase 3 pada Kehamilan Normal dan
Abortus Korelasi R Nilai p Kadar protein Bcl-2, dan caspase 3 0,093 0,426
Keterangan: Nilai r berdasarkan uji korelasi Spearman
Kekuatan  korelasi positif: sangat lemah:  0.00-0.1999, lemah: 0.20-0.39 sedang: 0.40-0.599, kuat:0.60-0.7999, sangat kuat: 0.80-1.000
Berdasarkan Tabel 3 terlihat bahwa hasil analisis statistik dengan korelasi Spearman pada derajat  kepercayaan  95%  menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat korelasi  bermakna  antara  kadar protein  Bcl-2  dengan  caspase  3  pada  kehamilan  normal  dan    abortus  walaupun  tetap  terlihat kecenderungan  bahwa  semakin  meningkat  kadar  protein  Bcl-2  maka  semakin  tinggi  kadar caspase 3  secara  bermakna  dengan  nilai  p=0,426  (nilai  p>0,05)  dengan  kekuatan  hubungan positf sangat lemah (r=0,093).
Tabel  4. Nilai  Sensitivitas,  Spesitivitas,  Nilai  Duga  Positif,  Nilai  Duga  Negatif  dan  Akurasi Bcl-2  Sebagai  Prediktor  Abortus  Berdasarkan Kurva  ROC  ( Receiver  Operating Characteristics ).
Bcl-2 Se Sp Nilai duga positif Nilai duga negatif Akurasi 76,3% 52,6% 61,7% 69,0% 64,5% Tidak Normal (>6,49) Normal (≤6,49)
Keterangan: *) berdasarkan kurva ROC ( Receiver Operating Characteristics )
Tabel  4.  menunjukkan  bahwa kadar  Bcl-  2  sebagai  prediktor  abortus  berdasarkan kurva ROC  ( Receiver  Operating  Characteristics )    memiliki  nilai  sensitivitas  76,3%,  spesitivitas 52,6%, nilai duga positif 61,7%, nilai duga negatif 69,0% dan akurasi 64,5%.
Tabel 5. Nilai Sensitivitas, Spesitivitas, Nilai Duga Positif, Nilai Duga Negatif dan Akurasi Caspase 3 sebagai Prediktor Abortus Berdasarkan Kurva ROC ( Receiver Operating Characteristics )
Caspase 3 Se Sp Nilai duga positif Nilai duga negatif Akurasi 92,1% 71,1% 76,1% 90,0% 82,0% Tidak Normal >11,25) Normal (≤11,25)
Keterangan: *) berdasarkan kurva ROC ( Receiver Operating Characteristics )
Tabel.  5  menunjukkan  bahwa kadar caspase -3  sebagai  prediktor  abortus  berdasarkan kurva  ROC  ( Receiver  Operating  Characteristics )    memiliki  nilai  sensitivitas  92,1%, spesitivitas 71,1%, nilai duga positif 76,1%, nilai duga negatif 90,0% dan akurasi 82,0%.
Tabel  6. Hubungan  Kadar  Protein  Bcl-2  dan  Caspase-3  pada  Nilai  Penentu  Berdasarkan Kurva ROC ( Receiver Operating Characteristics ) dengan Kejadian Abortus.
Nilai Penentu Abortus n=38 Normal n=38 X 2 Nilai p OR 95%CI Bcl-2 6,747 0,009 3,58 1,34-9,56 (>6,49) 29 (76,3%) 18 (47,4%) (≤6,29) 9 (23,7%) 20 (52,6%) caspase 3 31,722 <0,001 28,63 7,26-112,89 (>11,25) 35 (92,1%) 11 (28,9%) (≤11,25) 3 (7,9%) 27 (71,1%)

## Keterangan: *) Chi Square Test
Tabel. 6 menunjukkan pula bahwa h asil analisis Chi Square Test pada derajat kepercayaan 95% menunjukkan bahwa terdapat hubungan kadar Bcl-2 dengan kejadian abortus dengan nilai
p=0,009 (nilai p≤0,05) dan analisis keeratan menunjukkan bahwa kadar Bcl-2 >6,49 memiliki risiko kejadian abortus 3,58 kali dibandingkan dengan  kadar protein Bcl-2 ≤ 6,49.
Berdasarkan  Tabel  6  terlihat  bahwa  h asil  analisis Chi  Square  Test pada  derajat kepercayaan  95%  menunjukkan  bahwa  terdapat  hubungan  kadar caspase 3  dengan  kejadian abortus  dengan  nilai  p<0,001  (nilai  p≤0,05)  dan  analisis  keeratan  menunjukkan  bahwa  kadar caspase 3  >11,25  memiliki  risiko  kejadian  abortus  28,63  kali  dibandingkan  dengan    kadar protein caspase 3 ≤ 11,25.
Tujuh puluh enam subjek penelitian yang terdiri dari 38 kelompok abortus inkomplit dan 38  kelompok  kontrol  (kehamilan  normal).    Karakteristik  subjek  penelitian  pada  kadar  Bcl-2 dan caspase 3  harus  dibandingkan  antara  kelompok  kasus  yaitu  abortus  inkomplit,  dan kelompok kontrol  yaitu  kehamilan normal. Pada  penelitian ini, karakteristik  subjek penelitian yang dibandingkan terdiri dari umur ibu, jumlah paritas, dan umur kehamilan.
Berbagai  hasil  penelitian  mengenai  pengaruh  umur  ibu  dan  jumlah  paritas  terhadap terjadinya  abortus,  namun  secara  umum  disepakati  bahwa  usia  ibu  ≥  35  tahun  dan meningkatnya  jumlah  paritas  didapatkan  peningkatan  jumlah  abortus. 12 Pada  penelitian  ini umur  ibu  dan  jumlah  paritas  pada  kelompok  abortus  inkomplit  dan  kelompok  normal  harus disamakan.
Kejadian abortus yang terjadi pada kehamilan kurang dari 10 minggu diduga dipengaruhi oleh faktor  imunologi dan kromosom sedangkan pada kehamilan 10 minggu atau lebih banyak dipengaruhi  oleh  faktor  eksternal.  Pada  penelitian  ini,  umur  kehamilan  kelompok  abortus inkomplit dan kelompok hamil normal harus disamakan.
Setelah dilakukan analisis statistik dan matching dengan maksud memperoleh sampel yang homogen  seperti  pada  tabel  1  terhadap  kedua  kelompok  berdasarkan  karakteristik  umur  ibu, paritas,  dan  umur  kehamilan.  Dari  hasil  analisis  uji  x 2 pada  derajat  kepercayaan  95%  untuk golongan  usia  ibu  dan  umur  kehamilan  ternyata  tidak  didapatkan  hasil  yang  bermakna  (p  > 0,05),  yaitu  usia  ibu p =  0,568  dan  umur  kehamilan p =  0,990  demikian  pula  terhadap  paritas, didapatkan hasil p = 0,629 sehingga kedua kelompok tersebut layak untuk  diperbandingkan.
Setelah  karakteristik  kedua  kelompok  disamakan,  selanjutnya  dibandingkan  rerata  kadar kadar  protein  Bcl-2  dan caspase 3 protein  pada  kelompok  abortus  inkomplit  dan  kehamilan normal.
Bcl-2 adalah proto-oncogene pertama yang teridentifikasikan dapat menghambat apoptosis diberbagai macam jenis sel. Protein ini adalah proto-tipe keluarga pro- dan anti-apoptosis yang memiliki  kesamaan  struktur  homologinya  pada  ke-empat  sikuens  peptide-nya  yang  dikenal dengan  Bcl-2 homology  (BH)  domains. Kadar  dari  Bcl-2  ditemukan  menurun  pada  plasenta sitototropoblas  di  kehamilan  dengan  penyulit  pre-eklamsi  dibandingkan  dengan  yang  tidak dengan  pre-eklamsi. Savion  dan  kawan-kawan  melaporkan  penurunan  Bcl-2  berhubungan dengan apoptosis dan berakhir dengan abortus pada hewan percobaan. Bcl-2 merupakan protein
anti-apoptosis yang kuat yang dapat mencegah sel dari kematiannya dan kadarnya tetap tinggi di luar membran mitokondria. Bcl-2 juga dapat dijadikan sebagai pendeteksi dini apoptosis.
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  rerata Kadar  Bcl-2 pada  subjek  penelitian  yang  mengalami abortus  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  kehamilan  normal  yaitu 7,4903  ng/mL dengan simpangan  baku 1,71 ,  median 7,11  sedangkan subjek  penelitian  dengan  kehamilan  normal yaitu 7,4903  ng/mL dengan  simpangan  baku 3,938 ,  median 6,44 dan  h asil  analisis Mann Whitney  Test pada  derajat  kepercayaan  95%  menunjukkan  bahwa  terdapat  perbedaan  Kadar Bcl-2  antara    kehamilan  normal  dan    abortus  secara  bermakna  dengan    nilai  p  =0,050  (nilai p≤0,05).
Pada  penelitian  ini,  dengan  memakai  sampel  dari  serum  pasien  abortus  inkomplit  dan kehamilan  normal  yang  dilakukan  pemeriksaan  ELISA.  Penelitian  ini  mendapatkan kecendrungan  terjadinya  penurunan  kadar  Bcl-2  pada  pasien-pasien  abortus  dibandingkan dengan  kadarnya  pada  kehamilan  normal.  Penelitian  ini  menunjukkan  jalur  mitokondria memegang peranan pada apoptosis dalam memediasi kegagalan kehamilan yang diinduksi oleh regulasi  Bcl-2.
Caspase-3  merupakan  tahap  akhir  dari  jalur Caspase cascade dan  merupakan  eksekutor dari  kedua  jalur  diatasnya,  jalur  ekstrinsik  maupun  intrinsik.  Poly  (ADP-ribose)  polymerase (PARP)  adalah  protein  pertama  yang  teridentifikasi  sebagai  substansi  dari  kelas Caspase . PARP  mengkatalisasi  sintesis  poly  (ADP-ribose)  dari  nicotinamide  adenine  dinucleotide (NAD+) dan PARP juga mengikat pecahan rantai DNA Serta memodifikasi protein-protein di dalam inti dengan mengikat rantai poly ADP-ribose.
PARP  diaktivasi  oleh  Caspase-3,  dan  proses  ini  terjadi  sebelum  penghancuran  inti  DNA menjadi  pecahan internucleosomal yang  merupakan  karakter  dari  apoptosis. De  Falco  dan kawan-kawan  dalam  penelitiannya  menggunakan  hewan  percobaan  menunjukkan  bahwa kompartemen  sitotrofoblas  pada  trimester  pertama  terdapat  peningkatan  protein  Caspase-3 yang  dilihat  dengan  teknik  imunohistokimia,  hasil  ini  juga  didukung  oleh  Hammer  dan Huppert.  Torchinsky  dalam  penelitiannya  menyebutkan  keterlibatan  aktivator  pro-apoptosis dapat  menyebabkan  apoptosis  yang  berlebihan berlanjut  dengan  adanya  kematian  sel yang akhirnya akan berlanjut dengan abortus.
Bertoja  dkk.  melaporkan  pada  penelitiannya  membandingkan  aktivitas  caspase  3  pada kehamilan  normal  dan  abortus  dengan    masing-masing  5  sampel  pada  plasenta binatang percobaan  dengan mengunakan spectrophotometer didapatkan secara statistik tidak bermakna, meskipun didapatkan sedikit peningkatan pada abortus, data diatas  ditampilkan dengan median ± 75% quartiles dievaluasi dengan mengunakan uji non parametrik Mann-Whitney didapatkan hasil bermakna (p=0,05). Pada penelitian tersebut dilanjutkan untuk melihat fragmentasi DNA menggunakan TdT-mediated  dUTP  nick  end  labelling (TUNEL) + dengan  hasil  tampak  sel-sel plasenta  pada  pinggir  dan  tidak  bermakna  secara  statistik,  namun  apabila  data  ditampilkan dengan  median  ±  75% quartiles dievaluasi  dengan  mengunakan  uji  non  parametrik Mann- Whitney didapatkan hasil bermakna (p≤0,05).
Pada penelitian ini (tabel 2) didapatkan peningkatan  yang bermakna dari Caspase -3 pada pasien abortus dibanding dengan kehamilan normal secara statistik ( p =0,001). Didapatkan rata- rata  kadar  Caspase-3  sebesar  14,94  mg/mL  pada  kehamilan  normal  dan  112,74  mg/mL  pada pasien  abortus.  Pada  kehamilan  normal  kadar  Caspase-3  berkisar  0,00-76,0  mg/mL  dan  pada pasien  abortus  berkisar  6,50-707,75  mg/mL,  dengan  median  pada  kehamilan  normal  0,7 mg/mL dan pada pasien abortus 76,5 mg/mL.
Abortus merupakan bentuk yang paling umum dari kematian embrio yang disebabkan oleh kegagalan  kehamilan  dini. Mekanisme  biomolekular  yang  mendasari  kejadian  abortus  ini belum sepenuhnya dimengerti. Terdapat bukti yang menunjukkan peningkatan apoptosis  pada uteroplasenta  dan/atau  pada  organ  reproduksi  yang  berhubungan  dengan  abnormalitas  pada kehamilan. Lebih jauh, kegagalan kehamilan pada trimester pertama berhubungan erat dengan peningkatan apoptosis di sinsitiotrofoblas dibandingkan dengan kehamilan normal.
Apoptosis  merupakan  proses  yang  sangat  kompleks  yang  dikontrol  oleh  berbagai  gen, diantaranya  keluarga  Bcl-2  dan  caspase  cascade.  Keduanya  berperanan  dalam  regulasi apoptosis baik dalam kondisi normal ataupun abnormal, seperti kegagalan kehamilan. Proses apoptosis  diasumsikan  berkaitan  langsung  ataupun  tidak  langsung  dengan  kegagalan kehamilan, akan tetapi tidak banyak bukti  yang  mendukung teori ini, terutama pada manusia. Penelitian  ini  dirancang  untuk  meneliti  kemungkinan  peranan  dari  proses  apoptosis  secara biomolekular pada pasien-pasien dengan abortus  spontan, serta jalur dan protein  yang terlibat didalam prosesnya.
Hasil  analisis  statistik  dengan  korelasi  Spearman pada  derajat  kepercayaan  95% menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat korelasi  bermakna  antara  kadar  protein  Bcl-2  dengan caspase 3 pada kehamilan normal  dan  abortus  walaupun tetap terlihat  kecenderungan bahwa semakin meningkat kadar protein Bcl-2 maka semakin tinggi kadar caspase 3 secara bermakna dengan nilai p=0,426 (nilai p>0,05) dengan kekuatan hubungan sangat lemah (r=0,093).

## Daftar Pustaka
Affandi  B,  Widohariadi,  Adriaansz  G,  Santoso  BI,  Harijono  S,  Azhari,  et  al.  Asuhan pascakeguguran.  Dalam:  Buku  acuan  pascakeguguran.  Edisi  kedua.  Jakarta:JNPK- KR/POGI;2002.hal.1-5
Bertoja  AZ,  Zenclussen  ML,  Wollenberg  I,  Paeschke  S,  Sollwedel  A,  Gerlof  K,  et  al. Upregulation  of  Bcl-2  at  the  Foetal-Maternal  Interfase  from  Mice  Undergoing Abortion.Scandinavian Journal of Immunology.2005;61:492-502
Brill  A,  Torchinsky  A,  Carp  H,  Toder  V.  The  role  of  apoptosis  in  normal  and  abnormal embryonic development.  J Assist Repro Genet 1999;16(10):512-9.
Clark  DA,  Ding  JW,  Chaouat  G  dkk.Unexplained  Sporadic  and  Recurrent  miscarriage  in  the New  Millenium  :  a  critical  analysis  of  immune  mechanisms  and  treatments.  Hum. Reprod. update.2001,7, 501-11
Cunningham FG, MacDonald, Gant, Leveno KJ, Gilstrap LC, Hankins, et al. Abortion. Dalam: Williams Obstetrics. 21 th ed. Connecticut: Aplleton and Lange; 2001. h. 855-69
De Falco M, Fedele V, Cobellis L, Mastrogiacomo A. Leone S, Giraldi D, De Luca B, Laforgia V, De Luca A. Immunohistochemical distribution of proteins belonging to the receptor- mediated and the mitochondrial apoptotic pathways in human placenta during gestation. Cell Tissue Res 2004. 318: 599–608
DiFederico E, Genbacev O, Fisher SJ. Preeclampsia is associated with widespread apoptosis of placenta cytotrophoblasts within the uterine wall. Am J Pathol. 1999; 155: 293-301
Handono  B.  Peran  antioksidan  vitamin  C  pada  abortus  Iminens  melalui  interaksi  superoksida dismutase,  interferon  ,  interleukin  4,  vascular  cells  adhesion  molecule-1,  dan  aliran darah  arteri  spiralis  decidua.  Disertasi.  Program  Pascasarjana  Universitas  Padjadjaran. Bandung. 2008.
Heazell AEP, Crocker IP . Live and Let Die – Regulation of Villous Trophoblast Apoptosis in Normal and Abnormal Pregnancies. Placenta 2008;29:772–83
Hill  JA.  Recurrent  pregnancy  loss.  Dalam:  Creasy  RK,  Resnik  R,  editor.  Maternal-fetal medicine principle and practice. Edisi ke-5. Philadelphia: Saunders;2004. h. 579-601
Hockenbery  D,  Nuñez  G,  Milliman  C,  Schreiber  RD,  Korsmeyer  SJ.  Bcl-2  is  an  inner mitochondrial  membrane  protein  that  blocks  programmed  cell  death.Nature.1990 ;348(6299):334-6.
Karp G. Signal Transduction. In: Cell and Molecular Biology: Concepts and experiment, Ke-5.
Denvers: John Wiley, 2008; h. 653-55
Kokawa  K,  Shikone  T,  Nakano  R.  Apoptosis  in  human  chorionic  villi  and  decidua  during normal embryonic development and spontaneous abortion in the first trimester. Placenta. 1998;19(1):21-6
Lea RG, Riley SC, Antipatis C, Hannah L, Ashworth CJ, Clark DA, Critchley HOD. Cytokine and regulation of apoptosis in reproductive tissue: a review. Am J Reprod Immunol 1999; 42: 100-109
Reed JC. Foreword. Oncogene.2008;27:6192–93
Rosevear S. Bleeding in Early Pregnancy. Dalam: James DK, Steer PJ, Weiner CP, Gonik B, editors.  High  Risk  Pregnancy  Management  Options.  Edisi  kedua.  London:  WB Saunders;2000. h. 67-7
Sarah AR, Alison SC, Rebecca JS.  Interleukin 10 regulates inflamatory  cytokine synthesis  to protect  against  lipopolysaccharide-induced  abortion  and  fetal  growth  restriction  in mice.Biology of Reproduction.2007;76:738-48
Satoh  MS,  Lindahl  T.  Role  of  poly  (ADP-ribose)  formation  in  DNA  repair.  Nature.1992; 356(6367): 356-8
Savion S, Lepsky E, Orenstein H, Carp H, Shepshelovich J, Torchinsky A, et al. Apoptosis in the uterus of mice with pregnancy loss. Am J Reprod Immunol. 2002; 47:118-127
Torchinsky A, Toder V. To Die or Not to Die: the Function of the Transcription Factor NF- k B in Embryos Exposed to stress. Am J Reprod Immunol 2004; 51:138-43
Wibowo  A,  Wijayanegara  H,  Mose  JC.  Hubungan  kadar  enzim  superoksid  dismutase  dan glutation peroksidase sel darah merah dengan abortus spontan. Tesis. Bandung: Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran; 2005.
Zulmaita, Wirakusumah FF, Krisnadi SK. Perbandingan kadar Vaskuler Growth Factor serum antara  penderita  abortus  imminens  dengan  kehamilan  normal.  Bandung:  Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran; 2005