EISSN: 2407-7690 https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jmr
Profil Metabolit Ekstrak Etanol Enhalus acoroides (L.F.) Royle,1839 dari Nusa Tenggara Timur
Mahmiah 1* , Nor Sa ’adah 1 , Heronima Natalia Sunur 2 , Nani Wijayanti 2 1 Program Studi Oseanologi, Fakultas Teknik dan Ilmu Kelautan, Universitas Hang Tuah
2 Program Studi Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Hang Tuah Jl. Arif Rahman Hakim 150 Surabaya, JawaTimur 60111 Indonesia Correponding author, email: mahmiah@hangtuah.ac.id
ABSTRAK: Balauring, Nusa Tenggara Timur, merupakan salah satu wilayah yang berada di bagian Timur  Indonesia  yang  terdapat  banyak  ekosistem  lamun  salah  satu  jenisnya  adalah  Enhalus acoroides.  Pengembangan  potensi  lamun  jenis  ini  oleh  masyarakat  masih  kurang  dimanfaatkan hanya  sebagai  sampah  laut  di  perairan.  Secara  kemotaksonomi,  daun  tanaman  lamun  Enhalus acoroides  mengandung  senyawa  bioaktif  yang  berpotensi  untuk  dijadikan  alternatif  pengobatan. Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengidentifikasi  kandungan  senyawa  bioaktif  daun  tanaman  lamun Enhalus acoroides dari Balauring Nusa Tenggara Timur. Adapun metode ekstraksi maserasi dengan pelarut  etanol  96%,  parameter  standardisasi  non  spesifik,  skrining  fitokimia,  dan  analisis  FTIR (Fourier  Transform  InfraRed)  dan  GC/MS.  Hasil  penelitian  menunjukkan Enhalus  acoroides  dari keluarga Hydrocharitaceae memiliki nilai kadar air, susut pengeringan dan kadar abu berturut-turut sebesar 6%, 12,9280% dan 14,7173%. Hasil identifikasi senyawa metabolit sekunder ekstrak etanol 96% Enhalus acoroides didapatkan gugus ikatan senyawa seperti gugus -OH atau - NH (ⱱ 3329.958 dan  3252.176  cm -1 ),  - CH  (ⱱ  2921.204  dan  2851.486  cm -1 ),  - C=O  (ⱱ  1641.169  cm -1 ),  - C=C  (ⱱ 1517.243 cm -1 ). Hasil GC/MS menunjukkan adanya 9 senyawa yang didominasi golongan alkaloid, flavonoid, terpenoid, dan polifenol.
Kata kunci: Balauring; lamun; fitokimia; FTIR-ATR; GC/MS
Metabolite Profile of Ethanol Extract Enhalus acoroides (L.F.) Royle,1839 from East Nusa Tenggara
ABSTRACT: Balauring, East Nusa Tenggara, is one of the areas in eastern Indonesia with many seagrass ecosystems, one of which is Enhalus acoroides. The community's potential development of this type of seagrass is still underutilized, serving only as marine debris in the waters. According to chemotaxonomic analysis, the leaves of the seagrass plant Enhalus acoroides contain bioactive compounds  that  have  the  potential  to  be  used  as  alternative  treatments.  Research  objective:  to identify the content of bioactive compounds in the leaves of the seagrass plant Enhalus acoroides from  Balauring,  East  Nusa  Tenggara.  Methods:  maceration  extraction  method  with  96%  ethanol solvent,  non-specific  standardization  parameters,  phytochemical  screening,  and  FTIR  (Fourier Transform  InfraRed)  and  GC/MS  analysis.  Results:  Enhalus  acoroides,  a  member  of  the Hydrocharitaceae  family,  had  moisture  content,  drying  loss,  and  ash  content  values  of  6%, 12.9280%,  and  14.7173%,  respectively.  Secondary  metabolites  of  Enhalus  acoroides  96  percent ethanol extract were identified as-OH or-NH groups (3329,958 and 3252.176 cm-1),-CH (2921,204 and  2851,486  cm-1),-C=O  (1641,169  cm-1),  and-C=C  (1517,243  cm-1).  The  GC/MS  results revealed 9 compounds that were dominated by alkaloids, flavonoids, terpenoids, and polyphenols.

## Keywords: Balauring; seagrass; phytochemical; FTIR-ATR; GC/MS

## PENDAHULUAN
Balauring, Nusa Tenggara Timur, merupakan salah satu wilayah yang berada di bagian Timur Indonesia  yang  terdapat  ekosistem  lamun  salah  satu  jenisnya  adalah Enhalus  acoroides. Belum
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 151-160
banyak  penelitian  mengenai  tanaman  lamun  yang  dilakukan  pada  daerah  tersebut.  Berdasarkan pengamatan di desa Balauring bahwa hamparan lamun yang luas digunakan sebagai tempat huni berbagai jenis biota laut, seperti bintang laut, teripang, ganggang laut, dan berbagai jenis ikan serta sebagai  sumber  makanan  terutama  oleh  populasi  pesisir  (Arkham et  al. ,  2015),  tetapi  hal  ini membuat para nelayan kesulitan dalam mencari ikan di laut, sehingga nelayan banyak membuang lamun  di  hamparan  pantai  atau  laut.  Secara  tradisional,  lamun  telah  digunakan  untuk  tujuan pengobatan (Arlyza, 2008).
Beberapa penelitian tentang kandungan senyawa tanaman lamun yang dilakukan antara lain penelitian  Paputungan et  al. (2017)  dengan  menggunakan  metode  ekstraksi  maserasi  dan  uji fitokimia didapatkan senyawa golongan alkaloid, flavonoid, saponin, triterpenoid, steroid, tannin dan fenol dari ekstrak etanol 96%. Penelitian Dewi et al. (2012) menemukan kandungan gula pereduksi dan  flavonoid  pada  ekstrak  n-heksan  dan  methanol  lamun Enhalus  acoroides dengan  metode ekstraksi dan uji fitokimia. Pada daerah maritim Asia, ekstrak daun lamun digunakan sebagai agen kuratif  berbagai  penyakit  seperti  antibiotika,  antihelmintik,  batuk,  antipiretik,  antitumor,  antidiare, penyembuhan luka, pengobatan batu empedu dan gondok (Umamaheswari et al. , 2009).
Karakteristik setiap tanaman lamun berbeda tergantung dari jenis dan faktor ekologisnya. Hal tersebut,  mendorong  peneliti  untuk  mengkaji mengenai  senyawa  bioaktif  atau  senyawa  metabolit sekunder  dari  tanaman  lamun Enhalus  acoroides yang  ada  di  Balauring,  Nusa  Tenggara  Timur . Penelitian ini meliputi preparasi sampel, determinasi, uji kadar air, uji susut pengeringan, uji kadar abu, proses ekstraksi menggunakan etanol 96%, skrining fitokimia, analisis FTIR ( Fourier Transform Infra Red ) dan GC/MS.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  dilakukan  pada  bulan  April  s/d  Oktober  2021  di  Laboratorium  Kimia  Universitas Hang  Tuah.  Bahan  utama  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  meliputi  sampel  tumbuhan  lamun yang dikoleksi dari desa Balauring, Pulau Lembata, Nusa Tenggara Timur. Determinasi dilakukan di Departemen Biologi, Fakultas Sain dan Teknologi, Universitas Airlangga. Alat dan bahan kimia yang  digunakan  meliputi  timbangan  analitik,  krus,  penjepit  besi, blender toples  kaca,  penyaring, rotary  evaporator, alat  gelas  untuk  skrining  fitokimia,  seperangkat  alat spektrometer  FTIR-ATR Agilent  Cary 630  dan GC/MS  Agilent  19091S-433. Bahan  kimia  yang  digunakan  adalah  pelarut etanol 96%, pereaksi wagner, larutan dragendrof , larutan mayer, larutan HCl pekat dan serbuk Mg, larutan FeCl 3 , larutan anhidrat asetat dan larutan H 2 SO 4. Prosedur  kerja  meliputi  tahapan  preparasi  sampel;  standardisasi;  ekstrak  non  spesifik (penetapan  susut  kering,  kadar  air,  dan  kadar  abu);  ekstraksi  bahan  aktif;  skrining  fitokimia;  dan profil metabolit menggunakan metode FTIR-ATR dan GC/MS.
Sampel  yang  digunakan  yaitu  sampel  daun  lamun Enhalus  acoroides yang  diperoleh  dari daerah Balauring Flores, Nusa Tenggara Timur. Sampel sebanyak 500 g dicuci bersih dengan air mengalir untuk menghilangkan kotoran, epifit dan pasir lalu dipotong-potong,  dikeringkan dengan cara  diangin-anginkan  selama  1  minggu.  Simplisia  daun  lamun Enhalus  acoroides dibuat  serbuk dengan cara digiling lalu di ayak menggunakan pengayak lalu ditimbang berat serbuknya.
Penetapan susut kering : Pengukuran sisa zat setelah pengeringan pada temperatur 105  C selama  30  menit  atau  sampai  berat  konstan,  yang  dinyatakan  sebagai  nilai  prosen. Kadar  Abu: Bahan dipanaskan pada temperatur 800⁰C selama 5 jam, dimana senyawa organik dan turunannya terdestruksi dan menguap,  sehingga tinggal unsur mineral dan anorganik. Kadar Air: Penetapan kadar air dilakukan dengan menggunakan alat InfraRed Moisture Balance F- 1A pada suhu 110⁰C. (1)  Ekstraksi  :  Serbuk  daun  lamun Enhalus  acoroides diekstraksi  dengan  menggunakan  metode maserasi sebanyak 3 kali selama 2 x 24 jam pada suhu kamar dengan menggunakan pelarut etanol 96% (1:5). Pelarut organik diuapkan dengan menggunakan rotavapor sampai diperoleh ekstrak cair lalu  dimasukkan  ke  oven  suhu  40˚C  sampai  pelarutnya  kering.  Setelah  pelarut  kering,  ekstrak ditimbang beratnya dan disimpan di desikator sampai akan digunakan untuk pengujian. (2) Skrining fitokimia:    Skrining  fitokimia  terhadap  ekstrak  etanol E.  acoroides meliputi  uji  alkaloid,  flavonoid, saponin,  tanin,  terpenoid,  steroid,  dan  polifenol  menggunakan  reagen-reagen  spesifik  sesuai
dengan golongan senyawa yang diuji (Harborne, 1987 dalam Aulia et al , 2014). (3) Analisis FTIR- ATR : Ekstrak dianalisis dengan menggunakan spektrofotometer Agilent Cary 630 FTIR-ATR yang dilengkapi  dengan  Microlab  PC  perangkat  lunak  dengan  unit  pengambilan  sampel  ATR  dengan resolusi  8  cm -1 dan  jangkauan  pemindaian  4000  cm -1 hingga  650  cm -1 ( Bolade et  al., 2018).  (4) Analisis  GC-MS: Ekstrak  dianalisis  dengan  menggunakan  kromatografi  gas-  spektroskopi  massa (GC/MS) Agilent  19091S-433  menggunakan  gas  Helium  sebagai  fasa  gerak.  Kolom  kapiler  yang digunakan adalah diameter 250 um, laju alir 1,0 mL/min, tekanan 10,46 psi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Senyawa metabolit sekunder merupakan senyawa bioaktif yang berpotensi memiliki berbagai aktivitas  seperti  antioksidan,  antikanker,  antilarvasida,  antidiabetik,  dll.  Kebanyakan  senyawa metabolit sekunder yang dimanfaatkan di bidang kesehatan masih bersumber dari tumbuhan darat. Eksplorasi dan pengembangan bahan aktif yang bersumber dari laut belum banyak mendapatkan perhatian,  sehingga  potensi  pengembangan  masih  perlu  dilakukan.  Senyawa  metabolit  sekunder seperti golongan alkaloid,  terpenoid, steroid, flavonoid,  polifenol, tannin, dan saponin mempunyai gugus aktif yang berpotensi dikembangkan di bidang farmasi, kesehatan, perikanan, pertanian, dll. Kandungan  metabolit  sekunder  yang  dimiliki  tumbuhan  atau  hewan  sangat  dipengaruhi  oleh parameter lingkungan, salinitas, cuaca ekstrim, dan lokasi tumbuh.
E. acoroides yang diperoleh dari Balauring NTT merupakan salah satu tumbuhan lamun yang secara  etnobotani  pemanfaatannya  sangat  kurang  bahkan  dibiarkan  menjadi  sampah  laut.  Pada penelitian ini dilakukan uji parameter standardisasi non spesifik yang meliputi kadar abu, kadar air dan susut pengeringan simplisia (Tabel 1). Uji ini diperlukan sebagai informasi keamanan ekstrak sesuai dengan Depkes RI (2000) terkait standardisasi simplisia dan ekstrak tumbuhan yang akan digunakan sebagai alternatif bahan aktif obat.
Tabel 1 . Parameter Non Spesifik Simplisia Daun Lamun E. acoroides
Jenis Parameter Metode Hasil Persyaratan Umum Kadar Air IRM 6% <10% (Depkes RI, 2000) Susut Pengeringan Gravimetri 12,9280% <10% (Depkes RI, 2000) Kadar Abu Pemijaran 14,7173% <10% (Depkes RI, 2000) Tabel 2 Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Etanol 96% Enhalus acoroides Uji Fitokimia Replikasi Reaksi Positif 1 2 3
Alkaloid
a. Dragendrof + + + Endapan Merah atau Jingga b. Mayer + + + Endapan Coklat Flavonoid + + + Larutan Berwarna Merah Saponin + + + Membentuk Buih yang Stabil  3 cm Tanin - - - Endapan Putih Terpenoid + + + Terbentuk Larutan Berwarna Merah Steroid + + + Larutan Bewarna Hijau Kebiruan Polifenol + + + Larutan Berwarna Hijau Kehitaman
Keterangan :  (+) = Reaksi Positif
(-) = Reaksi Negatif
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 151-160
Tinggi  rendahnya  nilai  kadar  air,  susut  pengeringan  dan  kadar  abu  dari  tumbuhan  lamun Enhalus acoroides dapat dipengaruhi oleh musim, sampel lamun Enhalus acoroides yang digunakan tersebut diambil pada bulan Desember, dimana pada musim dingin nilai nutrisi lamun lebih rendah dibandingkan dengan musim semi dan musim panas. Selain itu bioakumulasi logam berat dominan pada daun dan batang lamun, karena masuknya logam berat ke lamun, jaringan penyimpanan zat dan  karakteristik  lamun  yang  terendam  sepenuhnya  dalam  air,  sehingga  dapat  mempengaruhi besarnya  penentuan  kadar  abu  pada  tanaman  lamun,  hal  ini  dapat  dipengaruhi  oleh  habitat  dan lingkungan perairan dimana lamun tersebut tumbuh yaitu dengan tingkat ketersediaan nutrisi serta musim (Zamani et al., 2018 dan Rumiantin, 2011). Ekstraksi daun lamun E. acoroides sebanyak 500 g dimaserasi menggunakan pelarut etanol 96%  pada  suhu  kamar  selama  3  x  24  jam.  Hasil  ekstrak  yang  diperoleh  berbentuk  pasta  dan berwarna  hijau  tua.  Bobot  total  rendemen  bernilai  43,2083  g  dan  nilai  rendemen  total  sebesar 8,6416%. Penentuan profil metabolit menggunakan uji skrining fitokimia, analisis FTIR dan GC/MS untuk  mengidentifikasi  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  dalam  ekstrak  etanol  lamun E. acoroides dari Balauring, NTT.  Skrining fitokimia merupakan metode yang spesifik menggunakan reagen yang khas dalam penentuan kandungan metabolit sekunder ekstrak tumbuhan. Identifikasi kandungan senyawa metabolit sekunder dari tanaman lamun E. acoroides melalui proses skrining fitokimia. Hasil dari uji skrining fitokimia ditunjukkan Tabel 2.
Profil metabolit sekunder dari ekstrak E. acoroides dianalisis dengan spektroskopi FTIR-ATR dan GC/MS. Analisis ini digunakan untuk melihat gugus fungsi potensial yang terdapat pada ekstrak dan golongan senyawa yang terdapat dalam ekstrak lamun tersebut. Ekstrak etanol yang diperoleh dilakukan analisis FTIR untuk mengetahui gugus fungsi yang terkandung dalam ekstrak. Hasil FTIR ditunjukkan  pada  Tabel  3.  GC/MS  merupakan  salah  satu  instrumen  yang  digunakan  dalam menentukan  profil  metabolit  senyawa  bahan  alam.  Kromatogram  hasil  analisis  GC/MS  ekstrak etanol E. acoroides ditunjukkan pada Tabel 4.
Hasil skrining fitokimia pada Tabel 2 menunjukkan bahwa ekstrak mengandung hampir semua metabolit sekunder selain tannin yaitu alkaloid, flavonoid, terpenoid, polifenol, saponin, dan steroid. Profil metabolit dari ekstrak lamun E. acoroides ditunjukkan dari spektrum FTIR melalui identifikasi gugus fungsi dan kromatogram GC/MS ekstrak. Interpretasi hasil FTIR pada Gambar 1 dan Tabel 2 menunjukkan adanya gugus- gugus spesifik seperti gugus hidroksil (-OH), amina (-NH), -CH alifatis, dan aromatis pada daerah gugus fungsi dan sidik jari. Hasil GC/MS (Tabel 3) menunjukkan adanya 9 senyawa yang didominasi golongan alkaloid, flavonoid, terpenoid, dan polifenol.
Tabel 3 Interpretasi Spektrum FTIR Ekstrak Etanol 96% Enhalus acoroides Daerah Bilangan Gelombang (cm -1 ) Bilangan Gelombang Pembanding (cm -1 ) Gugus Fungsi Intensitas Keterangan I 3329.958 3400-3200 O-H (Alkohol) C=C-CH 2 -OH S O-H Stretch 3400-2400 Asam Karboksilat R-C(O)-OH S O-H Stretch 3500-3100 Amide R-C(O)-NH 2 S N-H Stretch 3252.176 3400-3200 O-H (Alkohol) C=C-CH 2 -OH S O-H Stretch 3400-2400 Asam Karboksilat R-C(O)-OH S O-H Stretch 3500-3100 Amida R-C(O)-NH 2 S N-H Stretch 2921.204 3000-2850 Alkana K C-H Stretch 3400-2400 Asam Karboksilat R-C(O)-OH S O-H Stretch 2851.486 3000-2850 Alkana K C-H Stretch 3400-2400 Asam Karboksilat R-C(O)-OH S O-H Stretch 2900-2800 Aldehid Hidrogen (-CHO) L C-H Stretch III 1641.169 1680-1600 Alkena S-L C=C Stretch 1640-1550 Amina dan Amida K N-H Bend 1700-1640 Amida K C=O Stretch 1517.243 1600-1450 Eter K C=C IV 1457.418 1600-1450 Eter K C=C Konjugasi 1047.847 1260-1000 Alkohol dan Fenol K C-O Stretch 1300-1000 Eter K C-O Stretch 1300-900 Anhidrida K C-O Stretch 1350-1000 Amina S-K C-N Stretch
Keterangan: K=Kuat, S=Sedang, L=Lemah
Alkaloid  merupakan  golongan  senyawa  organik  terbanyak  ditemukan  dialam  dan  hampir seluruh senyawa alkaloid berada pada tanaman. Senyawa alkaloid mengandung paling sedikit satu atom  nitrogen  bersifat  basa,  dan  merupakan  bagian  dari  cincin  heterosiklik.  Berdasarkan  cincin heterosiklik  nitrogen  merupakan  bagian  dari  struktur molekul  maka  alkaloid  dapat  diklasifikasikan menjadi alkaloid pirolidin, alkaloid piperidin, alkaloid isokuinolin, alkaloid kuinolin dan alkaloid indol (Sovia, 2006). Dari data spektrum FTIR (Gambar 1) memperlihatkan adanya gugus -NH khas dari senyawa  alkaloid  pada  bilangan  gelombang  3329.958  dan  3252.176  cm -1 .  Pada  kromatogram GC/MS  terlihat  pada  puncak  no.  5  s/d  7  yang  merupakan  golongan  alkaloid  indol.  Hasil  skrining fitokimia menggunakan reagen Dragendrof dan Mayer pada Gambar 2 dan 3 membuktikan bahwa pada ekstrak lamun ini mengandung senyawa alkaloid.
Gugus  C-H  alifatik  muncul  pada  daerah  bilangan  gelombang  2921.204  dan  2851.486  cm -1 dengan  intensitas  tajam  dan  kuat.  Pita  serapan  pada  bilangan  gelombang  1517.243,  tajam
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 151-160
menunjukkan adanya regangan C=C yang diperkuat dengan munculnya pita serapan pada daerah sidik  jari  pada  bilangan  gelombang  1457.418  cm -1 yang  memperkuat  adanya  gugus  fungsi  C=C. Alkaloid  memiliki  banyak  aktivitas  farmakologi  seperti  efek  antihipertensi  (banyak  pada  indol alkaloid), efek antiaritmia (quinidin, spareien), aktivitas antimalaria (kina), dan aktivitas antikanker (banyak  pada indol dimer, vincristin, vinblastin) (Saxena et al., 2013).
Flavonoid merupakan senyawa fenol yang mengandung dua cincin aromatik dengan gugus hidroksil  lebih  dari  satu,  dimana  senyawa  fenol  dengan  gugus  hidroksil  semakin  banyak  maka semakin mudah ikut tertarik dalam pelarut bersifat polar (Ergin et al., 2014). Sampel ekstrak etanol lamun Enhalus  acoroides cendrung  bereaksi  dengan  pereaksi  pada  kondisi  basa  dibandingkan dengan suasana asam (Sari, 2013).
Pada interpretasi spektrum FTIR terdapat regangan ikatan rangkap seperti C=O pada daerah 1641.169 cm -1 , yang tersubstitusi dari senyawa amida tersier yang dapat menunjukkan ikatan C=O pada daerah sekitar 1680-1630 cm -1 (Pavia et al., 2008), yang ditugaskan untuk getaran peregangan C=O pada senyawa karbonil yang mungkin ditandai dengan adanya kandungan senyawa flavanoid dalam campuran kompleks O (Sim et al., 2004). Dugaan ini diperkuat dengan munculnya serapan pada bilangan gelombang 1047.847 cm -1 yang merupakan serapan untuk gugus fungsi C-O (eter). Pita  serapan  pada  bilangan  gelombang  1517.243  cm -1 menunjukkan  adanya  vibrasi  ulur  C=C aromatik.  Dari  data  spektrum  FTIR  juga  memperlihatkan  bahwa  senyawa  yang  diperoleh menunjukkan  serapan  pada  bilangan  gelombang  3329.958  dan  3252.176  cm -1 dengan  serapan lebar  dan  intesitas  sedang  yang  diduga  serapan  uluran  dari  gugus  -OH  (Pavia et  al., 2008). Flavonoid  memiliki  aktivitas  antiinflamasi,  penghambat  enzim,  aktivitas  antimikroba,  aktivitas estrogenik,  aktivitas  antialergi,  aktivitas  antioksidan,  aktivitas  vaskular  dan  aktivitas  sitotoksik antitumor (Saxena et al., 2013).
Tabel 4. Interpretasi kromatogram GC/MS ekstrak etanol E. acoroides
Puncak Waktu Retensi (RT) % Area Nama Senyawa Interpretasi golongan senyawa 1 2,684 0,71 1-Diethoxy-3-methylbutane $$ Isova leraldehyde diethyl acetal $$ Isov aleraldehyde terpenoid 2 8,250 0,45 Benzene,  1,2-dimethoxy-4-(2-propen 41083 000093-15-2 97yl)- polifenol 3 19,395 3,12 Benzene,  1-phenyl-4-(2-cyano-2-phe 162781 027869-56-3 53 nylethenyl) flavonoid 4 22,222 53,88 Phenyl-N-methylindole $$ Indole Alkaloid 5 22,290 1,55 N-Methyldeacetylcolchicine  $$  Benz 222417 000477-30-5 66 O[A]Heptalen-9(5h)-One Alkaloid 6 23,095 28,98 Phenyl-5-methylindole $$ Indole Alkaloid 7 23,510 5,84 2,4,6(1H,3H,5H)-Pyrimidinetrione Alkaloid 8 24,025 7,70 1,3-dimethyl-4-azaphenanthrene Polifenol 9 24,574 4,082 2-(E-4,4-Dicyano-3-N-Methylanilino 202010 000000-00-0 46 -1,3-Butadiene-1-Yl)-4-(Methoxycar Bonyl)-1,2,3-Triazole Alkaloid
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 151-160
Gambar 2. Reaksi Alkaloid dengan Reagen Mayer
Gambar 3. Reaksi Alkaloid dengan Reagen Dragendrof
Spektrum  FTIR  ekstrak  etanol  96%  lamun Enhalus  acoroides yang  diduga  mengandung senyawa  saponin  memperlihatkan  serapan  yang  pada  bilangan  gelombang  2921.204  cm -1 dan 2851.486 cm -1 yang menunjukkan adanya vibrasi ulur C-H alifatik (Pavia et al., 2008) dimana untuk vibrasi  ulur  gugus  metil  (-CH 3 ),  dan  dalam  spektrum  tersebut  diduga  adanya  gugus  -OH,  yang memiliki  puncak  lebar  dengan  intensitas  sedang  pada  panjang  gelombang  antara  bilangan gelombang  3329.958  dan  3252.176  cm -1 (Pavia et  al., 2008).  Berdasarkan  literatur  yang  didapat struktur golongan saponin memiliki gugus –OH di dalamnya, hasil penelitian ini mirip dengan hasil penelitian  yang  dilakukan  oleh  Bintoro et  al.  ( 2017)  saponin  mampu  membunuh  protozoa  dan moluska,  sebagai  antioksidan,  mengurangi  pencernaan  protein  serta  penyerapan  vitamin  dan mineral dalam usus, bertindak sebagai antijamur dan antivirus.
Hasil  identifikasi  terpenoid  terhadap  ekstrak  etanol  96% Enhalus  acoroides menghasilkan positif terbentuknya larutan berwarna merah. Senyawa terpenoid pada umumnya larut dalam lemak dan terdapat pada sitoplasma sel pada tanaman (Harborne, 1987 dalam Aulia et al., 2014) sehingga memungkinkan  senyawa  terpenoid  larut  dalam  pelarut  organik  seperti  etanol.  Spektrum  IR  yang dihasilkan  menunjukan  adanya  pita  serapan  gugus  fungsi  C-H  alifatik  pada  bilang  gelombang 2921.204  dan  2851.486  cm -1 vibrasi  ulur  C-H sp 3 (Pavia et  al., 2008).  Pada  spektrum  FTIR, menunjukkan keberadaan gugus aromatis yaitu ditunjukkan dengan muncul spektrum khas senyawa aromatis C=C pada bilangan gelombang 1517.243 cm -1 , yang diperkuat pada daerah sidik jari yaitu pada  bilangan  gelombang  1457.418  cm -1 .  Bilangan  gelombang  tersebut  menunjukkan  bahwa senyawa  pada  ekstrak  etanol  96% Enhalus  acoroides merupakan  senyawa  alifatik  dan  adanya pelebaran  puncak  dari  data  spektrum  FTIR  memperlihatkan  bahwa  senyawa  yang  diperoleh menunjukkan serapan pada bilangan gelombang 3329.958 dan 3252.176 cm -1 dengan intesitas kuat yang diduga serapan uluran dari gugus O-H. Adanya terpenoid terlihat dari kromatogram GC/MS pada puncak no. 1 dengan komposisi sebesar 0,73 %.
Reaksi positif pada senyawa steroid dibuktikan dengan terbentuknya larutan berwarna hijau kebiruan pada ekstrak etanol 96% Enhalus acoroides. Senyawa steroid termasuk dalam senyawa triterpenoid yang biasa digunakan untuk obat jantung (Doughari, 2012), sehingga dapat larut dalam pelarut organik seperti etanol. Adanya senyawa steroid ditunjukkan dari data interpretasi spektrum FTIR yang memperlihatkan adanya serapan gugus C-H muncul pada bilangan gelombang 2921.204 dan 2851.486 cm -1 . Sifat khas C-H alifatik ditandai dengan adanya serapan pada daerah bilangan gelombang  3000-2850  cm -1 (Pavia,  2013).  Dari  data  spektrum  FTIR  memperlihatkan  bahwa senyawa yang diperoleh menunjukkan serapan pada bilangan gelombang 3329.958 dan 3252.176 cm -1 dengan serapan lebar dan intesitas kuat yang diduga serapan uluran dari gugus O-H. Spektrum FTIR  juga  memperlihatkan  serapan  pada  daerah  1517.243  cm -1 yang  mengidentifikasi  adanya serapan senyawa alkena (C=C) yang diduga merupakan gugus ikatan rangkap yang dimiliki oleh
K 2 [HgI 4 ]
K[HgI 4 ] - K[BiI 4 ] [BiI 4 ]
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 151-160
senyawa karbonil pada golongan senyawa steroid yang diperkuat pada daerah sidik jari yaitu pada bilangan  gelombang  1457.418  cm -1 .  Senyawa  steroid  banyak  digunakan  dalam  bahan  dasar pembuatan obat untuk meningkatkan stamina tubuh (Sari, 2013).
Reaksi positif pada senyawa polifenol dibuktikan dengan terbentuknya larutan berwarna hijau kehitaman  pada  ekstrak  etanol  96% Enhalus  acoroides setelah  ditambahkan  pereaksi  FeCl 3 . Perubahan warna terjadi disebabkan karena reaksi FeCl 3 yaitu Fe 3+ dengan gugus hidroksil pada senyawa polifenol menjadi Fe 2+ sehingga terbentuk Fe(OH) 2 yang menunjukkan adanya senyawa polifenol (Khotimah, 2016). Polifenol adalah komponen kimia yang muncul sebagai pigmen warna pada  buah  suatu  tanaman.  Senyawa  polifenol  banyak  disintesis  dari  fenilalanin  melalui  aksi phenylalanine ammonia lyase (PAL).  Data  spektrum  FTIR memperlihatkan  bahwa senyawa  yang diperoleh  menunjukkan  serapan  pada  bilangan  gelombang  3329.958  dan  3252.176  cm -1 dengan serapan lebar dan intesitas kuat yang diduga serapan uluran dari gugus O-H (Pavia et al., 2008). Interpretasi spektrum FTIR juga memperlihatkan serapan pada bilangan gelombang 2921.204 cm -1 dan  2851.486  cm -1 yang  menunjukkan  adanya  regangan  ikatan  C –H  dengan  tipe  hibridisasi sp 3 untuk atom C-nya.  Puncak selanjutnya di bilangan 1517.243 cm -1 yang menunjukkan adanya vibrasi skeletal  atom  C  berikatan  rangkap  dua  yang  kemungkinan  besar  milik  gugus  aromatis.  Puncak spektra untuk gugus aromatis (C=C) alifatik ada di bilangan gelombang rata-rata sekitar 1600-1450 cm -1 Karakteristik  ketidakjenuhan  C=C  aromatis  sebesar  1,5  kali  C=C  alifatik  karena  pengaruh konjugasi  tiga  buah  ikatan  rangkap  dua  dalam  enam  atom  karbon  siklik.  Keberadaan  senyawa fenolik semakin dipertegas oleh spektra di daerah sidik jari pada bilangan gelombang 1457.418 cm - 1 juga merupakan representasi regangan C=C cincin aromatis yang mengalami resonansi. Polifenol berperan  dalam  pertahanan  tanaman  terhadap  patogen  sehingga  dapat  digunakan  untuk mengendalikan infeksi patogen pada manusia. Selain itu senyawa fenolik dapat digunakan sebagai nutraceuticals , antioksidan, antikanker, dan mencegah penyakit jantung lebih parah serta terkadang merupakan agen antiinflamasi (Doughari, 2012).
Tanaman  lamun Enhalus  acoroides dari  Balauring  NTT mengandung  senyawa  golongan alkaloid,  flavonoid,  saponin,  terpenoid,  steroid  dan  polifenol  berdasarkan  hasil  analisis  kualitatif skrining fitokimia, FTIR, dan GC/MS. Senyawa serupa ditemukan juga oleh Paputungan et al Willya et al . (2017) yaitu senyawa alkaloid, flavonoid, saponin, triterpenoid, steroid, tanin dan fenol yang terkandung  pada  ekstrak  etanol  tanaman  lamun Enhalus  acoroides yang  diteliti  pada  daerah Manado. Hasil penelitian tidak menunjukkan adanya senyawa golongan tanin pada skrining fitokimia karena adamya perbedaan habitat pertumbuhan lamun yang diperoleh yang membuat berbedanya kandungan  senyawa,  nutrisi  dan  bioakumulasi  logam  berat  yang  dipengaruhi  oleh  faktor  musim, pengendapan  dan  pencemaran  lingkungan  laut (Rumiantin,  2011,  Kaya,  2017  dan  Zamani et  al., 2018).

## KESIMPULAN
Profil  metabolit  sekunder Enhalus  acoroides dari  keluarga  Hydrocharitaceae  memiliki  nilai kadar air, susut pengeringan dan kadar abu berturut-turut sebesar 6%, 12,9280% dan 14,7173%. Hasil  identifikasi  senyawa  metabolit  sekunder  ekstrak  etanol  96% Enhalus  acoroides didapatkan gugus  ikatan  senyawa  seperti  gugus  -OH  atau  - NH  (ⱱ  3329.958  dan  3252.176  cm -1 ),  - CH  (ⱱ 2921.204  dan  2851.486  cm -1 ),  - C=O  (ⱱ  1641.169  cm -1 ),  - C=C  (ⱱ  1517.243  cm -1 ).  Hasil  GC/MS menunjukkan  adanya  9  senyawa  yang  didominasi  golongan  alkaloid,  flavonoid,  terpenoid,  dan polifenol. Hasil penelitian ini dapat dikembangkan lebih lanjut untuk mencari senyawa potensial yang bermanfaat sebagai antivirus, antibakteri, antioksidan, dll. Secara invitro dan invivo.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  mengucapkan terima  kasih  kepada  LPPM  Universitas  Hang  Tuah  pada  pendanaan Penelitian  Internal  sesuai  dengan  Surat  Perjanjian  Pelaksanaan  Penelitian  nomor  : B/015/UHT.C2/IV/2021 tanggal 13 April 2021.

## DAFTAR PUSTAKA
Arkham, M.N., Adrianto, L.,  & Wardiatno, Y. 2015. Konektivitas SIstem Sosial-Ekologi Lamundan Perikanan Skala Kecil di Desa Malang Rapat dan Desa Berakit, Kabupaten Bintan, Kepulauan Riau. Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis, 7(2): 434-451
Arlyza,  I.S.  2008.  Ekstrak  Lamun  Sebagai  Sumber  Alternatif  Antibakteri  Penghambat  Bakteri Pembentuk Biofilm. Jurnal Oseaonologi dan Limnologi, 34 (2): 207-225 Aulia, S.D., Setyaningrum, E., & Kurniawan, B. 2014, Efektivitas Ekstrak Buah Mahkota Dewa Merah (Phaleria macrocarpa (Scheff.)Boerl) sebagai Ovisida. Jurnal dari Universitas Lampung , 3(1): 150-156
Bintoro, A., Ibrahim, A.M., & Situmeang, B., 2017, Analisis dan Identifikasi Senyawa Saponin dari Daun Bidara (Zhizipus mauritania L.) Banten. Jurnal Itekimia, 2(1):90-92 Dewi, C.S.U., Soedharma, D., & Kawaroe, M., 2012 , Komponen Fitokimia and Toksisitas Senyawa Bioaktif  dari  Lamun  Enhalus  acoroides dan Thalassia  hemprichii dari  Pulau  Pramuka , DKI Jakart. Jurnal Teknologi Perikanan dan Kelautan, 3(2):29-34. DOI: 10.24319/jtpk.3.23-27 Departemen  Kesehatan  RI,  2000,  Parameter  Standar  Umum  Untuk  Ekstrak  Tumbuhan  Obat,
Jakarta:  Direktorat  Jendral  Pengawasan  Obat  dan  Makanan  Direktorat  Pengawasan  Obat Tradisional:3,9,10,13-32
Doughari, J.H., 2012. Phytochemicals: extraction methods, basic structures and mode of action as potential chemotherapeutic agents (pp. 1-33). Rijeka, Croatia: INTECH Open Access Publisher. Ergina,  E.,  Nuryanti,  S.  &  Pursitasari,  I.D.  2014,  Uji  Kualitatif  Senyawa  Metabolit  Sekunder  Pada Daun  Palado  (Agave  Angustifolia)  Yang  Diekstraksi  Dengan  Pelarut  Air  Dan  Etanol. Jurnal Akademi Kimia, 3(3):165-172 Kaya, A.O.W. 2017. Komponen Zat Gizi Lamun Enhalus acoroides Asal Kabupaten Sopiori Provinsi Papua, Papua, Kementrian Perindustrian Republik Indonesia : 18 Khotimah, K. 2016, Skrining Fitokimia dan Identifikasi Metabolit Sekunder Senyawa Karpain pada Ekstrak  Metanol  daun  Carica  pubescens  Lenne  &  K.  Koch  dengan  LC/MS,  Malang,  Skripsi, Universitas Islam Negeri Malang
Bolade,  O.P.,  Akinsiku,  A.A.,  Adeyemi,  A.O.,  Williams,  A.B.  &  Benson,  N.U.  2018.  Dateset  on Phytochemical  screening,  FTIR  and  GC-MS  Characterisation  of  Azadiracta  indica  and Cymbopogon citratus as Reducing and Stabilising Agnets of Nanoparticles Synthesis . Data in Brief , 20:917-926. DOI:  10.1016/j.dib.2018.08.133 .
Paputungan, W.A., Rotinsulu, H., & Yamlean, P.V.Y. 2017, Standardisasi Parameter Spesifik dan Uji Aktivitas Antikanker Terhadap Sel Kanker Kolon (Widr) dari Ekstrak Etanol Lamun (Enhalus acoroides), Manado. Jurnal Ilmiah Farmasi , 6(3): 189-199
Pavia, D.L., Lampman, G.M., Kriz, G.S., & Vyvyan, J.R., 2008, Introduction to Organic Laboratory Techniques fourth edition, United State, Brooks Cole/Thomson
Pavia, D.L., Lampman, G.M., Kriz, G.S., & Vyvyan, J.R., 2013, Introduction to Organic Laboratory Techniques fifth edition, United State, Brooks Cole/Thomson
Rumiantin,  R.O.,  2011.  Kandungan  Fenol,  Komponen  Fitokimia  dan  Aktivitas  Antioksidan  Lamun Enhalus acoroides. Skripsi. IPB
Sari, D.W.S. 2013. Potensi Lamun Enhalus acoroides dan Thalassia hemprichii dari Perairan Pulau Pramuka  Kepulauan  Seribu  sebagai  Antioksidan  dan  Aktivitasnya  dalam  Menghambat Pembentukan Peroksida, Tesis. Universitas Padjadjaran
Saxena, M., Saxena, J., Nema, R., Singh, D. & Gupta, A. 2013. 2013, Phytochemistry of Medicinal Plant, Journal of Pharmcognocy and Phytochemistry 1(6):168-182. Sim,  C.O.,  Hamdan,  M.R.,  Ismail,  Z.,  &  Ahmad, M.N.,  2004, Assessment  of  Herbal  Medicines  by Chemometrics – Assisted Interpretation of FTIR Spectra , Malaysia. Journal of Analytica Chimica Acta, 1(1):14-28
Umamaheswari,  R.  Thirumaran,  G.  &  Anantharaman,  2009.  Potential  Antibacterial  Activities  of Seagresses From Vellar Estuary; Southeast Coast of India. Advances In Biological Research, 3 (3-4):140-143
Zamani,  N.P.,  Pratono,  T.,  Arman,  A.,  Ariesta,  D.S.,  &  Wahab,  I.,  2018, Concentration  of  Heavy Metals on Roots, Stem and Leaves of Enhalus acoroides, in Tunda Island, Banten Bay, Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis 10 (3) :769-784