## INDONESIA

## Evaluasi Dan Modifikasi Analisis Boron secara Spektrofotometri UV-Vis Menggunakan Kurkumin yang Terdistilasi Ester Borat
Risna E. Y. Adu* 1 , Roto-Roto 2 dan Agus Kuncaka 2
1 Program Studi Kimia, Universitas Timor, Kefamenanu, Indonesia
2 Program Studi Kimia, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, Indonesia
*alamat email korespondensi : adoe.risna@yahoo.com

## Abstrak
Evaluasi dan modifikasi terhadap metode analisis boron secara Spektrofotometri UV-Vis menggunakan kurkumin telah dilakukan untuk menetapakn metode yang akurat dan presisi pada penentuan kadar boron dalam sampel makanan. Modifikasi didasarkan pada reaksi boron  dengan  kurkumin  membentuk  kompleks  rubrokurkumin  dengan  mengevaluasi sejumlah variable yaitu waktu pembentukan kompleks, rasio asam oksalat /kurkumin, jenis pelarut kurkumin, serta rasio volume etanol/asam borat.  Metode yang telah ditetapkan digunakan untuk analisis boron di dalam sampel mie. Dari hasil evaluasi diperoleh waktu kestabilan kompleks pada menit ke-20, rasio asam oksalat/kurkumin 15:1, jenis pelarut etil asetat serta rasio volume etanol 5:1 terhadap massa asam borat. Metode hasil evaluasi dan  modifikasi  telah  divalidasi  dan  memenuhi  kriteria  akurat  dan  presisi  dengan  nilai persen perolehan kembali berkisar 96,09-104,92% dan nilai presisi intraday dan interday pada  kisaran  0,44–1,50%.  Metode  tersebut  telah  digunakan  untuk  menentukan  konten boron dalam mie A, B, dan C dan diperoleh nilai secara berturut-turut sebesar 0,74; 1,04 dan 1,08 mg kg -1 . Metode analisis boron hasil modifikasi memiliki nilai presisi dan akurasi yang  baik  sehingga  dapat  digunakan  untuk  menentukan  konten  boron  dalam  sampel makanan lainnya.
Kata Kunci: boron, kurkumin, ester borat, distilasi, Spektrofotometri UV-Vis

## I. PENDAHULUAN
Boron  merupakan  unsur  yang  memiliki peranan  penting  bagi  makhluk  hidup.  Boron berperan  dalam  metabolisme  mineral  dan
hormon,  perkembangan  tulang  sehat,  reaksi enzim  dan  pemeliharaan  membran  sel (Bakirdere,  Orenay,  &  Korkmaz,  2010). Boron  menunjukkan  fungsi  sebagai  elemen

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
esensial  bagi  organisme  pada  konsentrasi rendah tetapi menjadi toksik pada konsentrasi tinggi (> 9,6 mg/kg berat badan/hari). Boron bermanfaat  untuk  pembentukan  komposisi tulang  dengan  mengatur  hormon  yang mendukung  pertumbuhan  tulang,  asupan boron dalam diet juga dapat mengurangi risiko kanker  paru-paru  dan  payudara  pada  wanita (Cui  dkk.,  2004;  Mahabir  dkk.,  2008).  Efek menguntungkan boron tersebut dapat diperoleh pada asupan kurang dari 3 mg/hari
(Pizzorno, 2015). Manusia dapat mengkonsumsi 1–7 mg boron yang terkandung  dalam  sayuran,  buah-buahan, kacang-kacangan,  dan  produk  lainnya  setiap hari.  Asupan  boron  yang  berlebihan  akan diserap  melalui  saluran  pencernaan  dan berada dalam tubuh sebagai asam borat yang dapat  menghambat  sintesis  protein  (Uluisik, Karakaya, & Koc, 2018).
Boron  tidak  ditemukan  sebagai  unsur bebas  di  alam  tetapi  umumnya  ditemukan dalam bentuk asam borat, boraks, dan bentuk kompleks  lainnya.  Asam  borat  dan  boraks bersifat toksik terhadap sel dengan nilai total dosis mematikan adalah 3-6 gr untuk bayi dan 15-20  gr  untuk  orang  dewasa  (Abdulamir  & Heng,  2010).  Karena  itu  senyawa  boron seperti  asam  borat  dan  boraks  dilarang penggunaannya  sebagai  bahan  tambahan pangan.  Meskipun  demikian  asam  borat  dan boraks  masih  sering  ditambahkan  ke  dalam
produk pangan untuk mengontrol gelatinisasi pati, mempertahankan warna, tekstur dan rasa suatu makanan (Pratiwi dkk. , 2020; Amit dkk. , 2020). Salah satu produk pangan yang dalam pembuatannya  sering  menggunakan  asam borat dan boraks adalah mie (Reubun, 2021). Penambahan  bahan  tambahan  tersebut  untuk menghasilkan  tekstur  yang  lebih  kenyal  dan lebih awet.
Untuk  menjamin  keamanan  pangan  bagi masyarakat  dibutuhkan  sistem  kontrol  dalam analisis  kadar  boron  pada  sampel mie  secara berkala  untuk  membatasi  peredaran  produk yang  mengandung  bahan additive terlarang tersebut.  Ketersediaan  metode  analisis  yang sensitif dan akurat merupakan faktor pendukung penting dalam sistem pengawasan terhadap keberadaan asam borat dan turunannya dalam produk pangan.
Spektrofotometri  UV-Vis  merupakan  salah satu  metode  analisis  yang  digunakan  secara luas  dalam  penentuan  kandungan  boron  dan senyawa  turunannya  karena  lebih  sensitif, akurat dan efisien pada analisis rutin (Ma dkk. , 2011). Analisis boron secara spektrofotometri didasarkan  pada  reaksi  spesifik  antara  boron dengan reagen yang memiliki gugus kromofor membentuk kompleks berwarna. Beberapa zat warna  organik  yang  paling  sering  digunakan adalah  azometin-H,  asam  karminat  dan kurkumin.  Azometin-H  bereaksi  dengan boron  dalam  larutan  dengan  pH  7,5

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
membentuk  kompleks  berwarna  kuning  dan merupakan reagen analisis boron yang paling sensitif tetapi kurang selektif karena azometin-H sensitif terhadap beberapa logam sehingga terjadi interferensi yang menurunkan  kestabilan  kompleks  boron- azometin (Sarkar dkk. , 2014). Analisis boron menggunakan  reagen  asam  karminat  tidak praktis  karena  membutuhkan  medium  asam sulfat  pekat  dalam  pembentukan  kompleks berwarna biru (Floquet dkk. , 2016). Kurkumin merupakan zat warna organik yang digunakan secara luas dalam analisis boron karena lebih sensitif, membentuk komplek boron- kurkumin yang lebih stabil (Setyawati, 2020) serta memberikan persen perolehan yang lebih baik untuk analisis asam borat dalam sampel makanan (Siti-Mizura dkk. , 1991).
Analisis boron menggunakan pengompleks  kurkumin  dapat  dilakukan melalui  dua  cara  yaitu  melalui  pembentukan kompleks  rubrokurkumin  dan  rososyanin menghasilkan  larutan  berwarna  merah  yang dapat  diukur  pada  panjang  gelombang  ~550 nm  (Wanninger dkk. ,  2015)(Ncttwrlandr, 1968).  Reaksi  antara  boron  dan  kurkumin  di dalam  campuran  asam  asetat-asam  sulfat membentuk kompleks rososianin yang bermuatan, sedangkan reaksi antara boron dan kurkumin  dengan  adanya  penambahan  asam oksalat membentuk kompleks rubrokurkumin. Analisis  boron  dalam  makanan  secara
spektrofotometri melalui pembentukan kompleks  rososianin  telah  banyak  dilakukan dengan akurasi yang bervariasi (Suseno, 2019; Setianingsih & Kresnadipayana, 2018; Anngela dkk. , 2021). Telah dilaporkan bahwa kompleks rososianin lebih mudah mengalami hidrolisis  karena  ketidaksesuaian  pelarut,  pH dan  suhu  (John dkk. ,  2018).  Kompleks rubrokurkumin dinyatakan memiliki keunggulan  dalam  penentuan  boron  karena pembentukan  warna  merah  yang  lebih  cepat dan  stabil  serta  merupakan  suatu  kompleks netral  (John,  2016;  Thangavel dkk. ,  2004). Penentuan  boron  secara  Spektrofotometri UV-Vis  melalui  pembentukan  kompleks rubrokurkumin dalam berbagai macam matriks sampel (air, bubuk boron, uranil nitrat dan uranium oksida) telah dilakukan (Thangavel,  Dhavile,  Dash,  &  Chaurasia, 2004),  sedangkan  analisis  boron  di  dalam sampel makanan melalui pembentukan kompleks  rubrokurkumin  masih  terbatas karena  komponen  matriks  organik  yang kompleks  sehingga  membutuhkan  tahapan pemisahan  melalui  distilasi  ester  borat.  Ester borat  yang  dihasilkan  dari  reaksi  asam  borat dan alkohol memiliki tekanan uap yang tinggi pada suhu ruang sehingga dapat terdistilasi ke dalam  larutan  alkohol-kurkumin  membentuk kompleks rubrokurkumin yang dapat dianalisis  dengan  Spektrofotometer  UV-Vis (Adu, 2021). Pembentukan kompleks

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
rubrokurkumin  tersebut  dipengaruhi  oleh sejumlah variabel seperti waktu pembentukan kompleks, rasio asam oksalat /kurkumin, jenis pelarut kurkumin, dan rasio volume etanol/asam  borat.  Oleh  karena  itu  pada penelitian ini dilakukan evaluasi dan modifikasi terhadap variabel-variabel tersebut untuk  menetapkan  suatu  metode  analisis boron  yang  akurat  dan  presisi  pada  sampel makanan  melalui  pembentukan  kompleks rubrokurkumin.

## II. METODE PENELITIAN

## 2.1  Bahan dan Alat
Bahan-bahan  yang  digunakan  antara lain  kurkumin,  etanol  dan  asam  oksalat  (Pro Analisis, Merck) digunakan sebagai pengompleks. Asam borat digunakan sebagai larutan standar. Aseton (Pro Analisis, Merck) digunakan  sebagai  pelarut  pada  analisis menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Etanol, metanol dan etil  asetat (Pro Analisis, Merck)  digunakan  sebagai  alternatif  pelarut untuk  kurkumin.  Asam  sulfat  sebagai  katalis asam  untuk  esterifikasi  asam  borat.  Produk makanan yang dibeli dari supermarket berupa mie (jenis A, B dan C), sosis (merk A, B dan C), bakso (merk A, B dan C) dan tahu (jenis A, B dan C). Peralatan yang digunakan yaitu peralatan  gelas, chamber distilasi  dari  teflon yang  terdiri  dari chamber bagian  dalam  dan
chamber bagian luar, neraca analitik (Mettler Toledo  ME204E),  Spektrofotometer  UV-Vis (Spectronic 200), water bath, pH meter, oven, termometer, dan mortar.

## 2.2 Prosedur
2.2.1 Persiapan  sampel  dan  pembuatan larutan
Pengambilan  sampel  mie  dilakukan secara  acak  pada  beberapa  supermarket  di sekitar  Jalan  Kaliurang  Kota  Yogyakarta. Sampel  yang  telah  diperoleh  dihaluskan menggunakan  mortar.  Larutan  kurkumin sebagai  reagen  disiapkan  melalui  pelarutan kurkumin  0,04  g  dan  asam  oksalat  0,6  g  ke dalam pelarut etanol:air (3:1).
2.2.2 Penentuan panjang gelombang kompleks boron-kurkumin
Sebanyak 100 mg asam borat dilarutkan dalam  0,5  mL  etanol  lalu  dituang  ke  dalam chamber distilasi dalam. Di chamber luar diisi dengan larutan kurkumin 10 mL dan disimpan selama  24  jam. Chamber dalam  diambil, sedangkan  larutan  kurkumin  diuapkan  di dalam water  bath pada  suhu  ~80 o C  hingga membentuk  ekstrak  pekat.  Ekstrak  pekat tersebut  dipindahkan  ke  dalam  labu  takar  25 mL  lalu  ditambahkan  aseton  hingga  tanda batas. Absorbansi larutan ditentukan menggunakan Spektrofotometer UV-Vis pada rentang  panjang  gelombang  450-650  nm

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
setelah  10  menit.  Panjang  gelombang maksimum  kurkumin  dalam  aseton  sebagai blanko ditentukan dengan melarutkan kurkumin  0,01  g  dalam  10  mL  aseton kemudian pengukuran dilakukan pada rentang panjang gelombang 380-480 nm.

## 2.2.3 Optimasi waktu kestabilan kompleks
Asam borat sebanyak 100 mg didistilasi secara  isothermal.  Hasil  distilasi  berupa ekstrak pekat dipindahkan ke dalam labu takar 25 mL lalu diencerkan dengan aseton hingga tanda  batas.  Absorbansi  larutan  dianalisis menggunakan Spektrofotometer UV-Vis pada panjang  gelombang  maksimum  setelah  10 menit.

## 2.2.4 Optimasi rasio massa asam oksalat: kurkumin
Larutan  kurkumin  dengan  rasio  massa asam oksalat-kurkumin 5:1 disiapkan dengan cara  melarutkan  0,02  g  kurkumin  dan  0,1  g asam oksalat di dalam 20 mL campuran etanol air (3:1). Sebanyak 10 mL dari larutan tersebut diisi dalam tabung distilasi bagian luar. Asam borat  sebanyak  100  mg  dimasukan  ke  dalam chamber distilasi bagian dalam dan ditambahkan  etanol  0,5  mL  kemudian diletakan dalam chamber distilasi bagian luar.
Chamber luar ditutup dan disimpan selama 24 jam,  kemudian chamber dalam  dikeluarkan, sedangkan  larutan  kurkumin  diuapkan  di
dalam water  bath pada  suhu  ~80 o C  hingga membentuk  ekstrak  pekat.  Ekstrak  pekat tersebut  dipindahkan  ke  dalam  labu  takar  25 mL  lalu  ditambahkan  aseton  hingga  tanda batas. Absorbansi larutan dianalisis menggunakan Spektrofotometer UV-Vis pada rentang  panjang  gelombang  maksimum setelah  10  menit.  Prosedur  yang  sama dilakukan  terhadap  larutan  kurkumin  dengan rasio asam oksalat-kurkumin 10:1, 15:1, 20:1 dan 25:1.

## 2.2.5 Optimasi jenis pelarut kurkumin
Sebanyak  0,04  g  kurkumin  dan  asam oksalat  0,6  g  dilarutkan  ke  dalam  campuran pelarut  etanol:  air  3:1,  dilanjutkan  dengan prosedur  yang  sama  seperti  sebelumnya. Prosedur yang sama diulangi dengan mengganti  pelarut  etanol:air  dengan  masing- masing  pelarut  aseton:air  (3:1),  metanol:air (3:1) dan etil asetat:air (3:1).

## 2.2.6 Optimasi rasio etanol:asam borat
Ke dalam etanol 0,1 mL dilarutkan 100 mg  asam  borat  kemudian  larutan  dituang  ke dalam chamber distilasi  dalam.  Selanjutnya diproses sesuai prosedur sebelumnya. Variasi rasio etanol:asam borat yang dievaluasi adalah 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1 dan 7:1.
III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
3.1  Panjang  gelombang  kurkumin  dan

## kompleks boron
Panjang gelombang maksimum kurkumin  dalam  aseton  ditentukan  pada rentang  panjang  gelombang  300-650  nm. Berdasarkan  hasil  yang  ditampilkan  pada Gambar  1,  kompleks  boron-kurkumin  yang terbentuk memberikan nilai absorbansi
terbesar  pada  panjang  gelombang  555  nm (Setyawati,  2020;  Ma dkk. ,  2011  dan  Qin, 2013).  Pengukuran  absorbansi  kurkumin dalam  aseton  menunjukkan  bahwa  panjang gelombang  maksimum  kurkumin  adalah  419 nm(Van Nong dkk. , 2016; Sofyan dkk. , 2018).
Gambar 1. Spektra UV-Vis kurkumin dan kompleks boron-kurkumin
3.2   Kestabilan kompleks boron-
kurkumin
Kestabilan  warna  kompleks  boron- kurkumin  terhadap  perubahan  waktu  diukur setiap  10  menit  selama  2  jam.  Hasil pengukuran  ditampilkan  pada  Gambar  2. Kompleks  boron-kurkumin  cenderung  stabil hingga  menit  ke  20  pada  jam  pertama, kemudian  mengalami  penurunan  pada  menit ke  30  hingga  menit  ke  120  meskipun  tidak
signifikan  akibat  hidrolisis  kompleks  boron- kurkumin  karena  kelembaban.  Kompleks rubrokurkumin  merupakan  kompleks  netral yang  menyebabkan  kompleks  ini  mudah terhidrolisis  oleh  air  dan  alkohol.  Empat ikatan kovalen pada atom boron yang kurang stabil menyebabkan kompleks boron- kurkumin  mudah  mengalami  dekomposisi dalam  waktu  yang  relatif  singkat.  Dengan demikian  analisis  harus  dilakukan  setelah  10
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 350 400 450 500 550 600 650 Abs or b an si Panjang Gelombang (nm) Kurkumin 5 ppm Boron Kurkumin 3 ppm Boron kurkumin 5 ppm

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
menit pembentukan kompleks boron- kurkumin.
Gambar 2 . Kestabilan kompleks boron-kurkumin terhadap perubahan waktu
Kompleks  rubrokurkumin  merupakan  suatu ester spiroborat yang terbentuk melalui reaksi kondensasi  antara  asam  borat,  asam  oksalat dan kurkumin (rasio 1:1:1) dengan mekanisme  yang  diprediksikan  seperti  pada Gambar  3.  Pembentukan  rubrokurkumin diawali  dengan  kondensasi  asam  oksalat dan asam  borat  membentuk  kompleks  boro- oksalat,  yang  kemudian  membentuk  ikatan kovalen  dengan  kurkumin  menghasilkan suatu kompleks netral.
3.3  Evaluasi Rasio Massa asam

## oksalat:kurkumin
Pengaruh  asam  oksalat  terhadap  serapan kompleks  boron-kurkumin  dipelajari  dengan
melakukan variasi massa asam oksalat/kurkumin  pada  rasio  5:1,  10:1,  15:1, 20:1 dan 25:1. Hasil pengukuran ditunjukkan pada Gambar 4.
Rasio  massa  asam  oksalat/kurkumin memiliki pengaruh terhadap serapan kompleks  boron-kurkumin.  Nilai  absorbansi kompleks  boron-kurkumin  untuk  rasio  asam oksalat/kurkumin  5:1,  10:1,  15:1,  20:1  dan 25:1  adalah  0,233;  0,348;  0,474;  0,505  dan 0,535.  Semakin  tinggi  rasio  massa,  semakin tinggi  serapan  kompleks  boron-kurkumin. Absorbansi optimum kompleks boron- kurkumin  diperoleh  pada  rasio  15:1.  Rasio massa  asam  oksalat/kurkumin  yang  lebih
0.2 0.22 0.24 0.26 0.28 0.3 0.32 0.34 0.36 0 20 40 60 80 100 120 Abs or b an si
Waktu (menit)

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
tinggi dari 15:1 memberikan kenaikan serapan kompleks boron-kurkumin yang tidak signifikan.
Gambar 3 . Prediksi mekanisme reaksi pembentukan kompleks rubrokurkumin

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
Gambar 4 . Pengaruh rasio asam oksalat/kurkumin terhadap kompleks boron-kurkumin
Asam  oksalat  merupakan  senyawa  diol dengan gugus hidroksil yang terikat pada atom karbon  yang  berdekatan  sehingga  bereaksi secara  cepat  dalam  larutan  berair  (Anjana dkk., 2019). Reaksi asam oksalat dengan asam borat  membentuk  intermediet  boro-oksalat yang  optimum  pada  rasio  15:1.  Berdasarkan mekanisme  reaksi  pembentukan  kompleks rubrokurkumin  pada  Gambar  3,  diketahui bahwa  reaksi  boron,  kurkumin  dan  asam oksalat  berlangsung  dengan  rasio  reaktan 1:1:1,  namun  data  pada  penelitian  ini menunjukkan  bahwa  reaksi  optimum  terjadi pada penggunaan asam oksalat yang berlebih. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  masih  terjadi reaksi lanjutan pada kompleks rubrokurkumin dengan boro-oksalat.
Rasio asam oksalat/kurkumin  yang  lebih  besar  dari  15:1 menyebabkan intermediet boro-oksalat sangat terintangi sehingga laju pembentukan
kompleks  dengan  kurkumin  menjadi  lambat. Penggunaan  asam  oksalat  diketahui  sangat efektif  dalam  meningkatkan  sensitivitas metode kurkumin. Naftel (1939) mempelajari pengaruh  konsentrasi  asam  oksalat  terhadap intensitas  warna  larutan  kompleks  boron- kurkumin  dengan  menggunakan  konsentrasi kurkumin  1%  dan  variasi  konsentrasi  asam oksalat 5, 10, 20 dan 40%. Penggunaan asam oksalat  20%  menghasilkan  intensitas  yang lebih  baik,  sedangkan  asam  oksalat  dengan konsentrasi yang lebih tinggi (40%) memberikan  kenaikan  intensitas  yang  relatif sedikit.

## 3.4   Jenis pelarut kurkumin
Pemilihan  jenis  pelarut  yang  paling tepat  untuk  kurkumin  didasarkan  pada perbedaan  tingkat  kepolaran  masing-masing pelarut.  Jenis  pelarut  yang  dipilih  sebagai
0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 5:1 10:1 15:1 20:1 25:1 A bs or ban si Rasio Massa Asam Oksalat/Kurkumin

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
pelarut  kurkumin  yaitu  metanol,  etanol,  etil asetat  dan  aseton.    Adanya  pengaruh  jenis pelarut kurkumin terhadap absorbansi kompleks  kurkumin  dapat  dilihat  pada Gambar 5.
Pemakaian pelarut
etil asetat
memberikan  nilai  absorbansi  kompleks boron-kurkumin tertinggi dibandingkan dengan  aseton,  etanol  dan  metanol.  Data  ini menunjukkan  bahwa  semakin  rendah  tingkat kepolaran  pelarut  kurkumin  yang  digunakan, semakin  tinggi  nilai  absorbansi  kompleks boron-kurkumin yang diperoleh. Adapun nilai konstanta  dielektrik  untuk  metanol,  etanol, aseton  dan  etil  asetat  secara  berturut-turut adalah  30,  30,  21  dan  6.  Nilai ini  digunakan untuk  menentukan  tingkat  kepolaran  pelarut kurkumin  (Moldoveanu  &  David,  2013). Berdasarkan nilai konstanta dielektrik tersebut, etil asetat memiliki kepolaran paling rendah.  Sebagaimana  telah  diketahui  bahwa kurkumin merupakan senyawa polifenol yang bersifat hidrofobik (Priyadarsini, 2014; Zhang dkk. ,  2019;  Lee dkk. ,  2013)  sehingga kurkumin  akan  memiliki  kelarutan  paling tinggi di dalam pelarut etil asetat berdasarkan prinsip like dissolved like .
Gambar 5. Pengaruh jenis pelarut terhadap serapan kompleks boron-kurkumin

## 3.5   Rasio etanol-asam borat
Pengaruh  rasio  etanol:  asam  borat terhadap  pembentukan  kompleks  boron- kurkumin  dikaji  dengan  menggunakan  rasio 1:1,  2:1,  3:1,  4:1,  5:1,  6:1  dan  7:1.    Hasil pengujian ditampilkan pada Gambar 6.
Gambar 6. Pengaruh rasio etanol/asam borat terhadap serapan kompleks boron-kurkumin
Rasio  volume  etanol  terhadap  massa  asam borat  memiliki  pengaruh  terhadap  nilai absorbansi kompleks boron-kurkumin. Perbandingan  volume  etanol  terhadap  massa asam  borat  menghasilkan  nilai  absorbansi
0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 Etanol Aseton Etil Asetat Metanol A b so rb an si Jenis Pelarut 0,2 0,3 0,4 0,5 1:1 2:1 3:1 4:1 5:1 6:1 7:1 A b so rb an si Rasio Volume Etanol/Massa Asam Borat

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
tertinggi pada rasio 5:1. Penurunan absorbansi terjadi pada rasio etanol-asam borat yang lebih tinggi  dari  5:1.  Berdasarkan  mekanisme reaksinya, esterifikasi asam borat merupakan reaksi  reversibel,  dengan  demikian  untuk memperoleh rendemen yang tinggi kesetimbangan harus digeser ke arah etil borat dengan  menambahkan  etanol  secara  berlebih (Levent, Budak, Pamukoğlu, & Gönen, 2016). Peningkatan  volume  etanol  yang  berlebihan menyebabkan rintangan sterik pada zat antara semakin meningkat. Hal ini menyebabkan laju pembentukan  etil  borat  menjadi  lambat sehingga berakibat pada berkurangnya rendemen ester yang dihasilkan.

## 3.6  Validasi Metode
Hasil evaluasi metode kurkumin dalam penentuan konsentrasi boron melalui distilasi
ester  borat  divalidasi  untuk  menetapkan kelayakan penggunaannya. Parameter validasi yang  diuji  yaitu  ketepatan  dan  ketelitian. Ketepatan  atau  akurasi  diukur  dalam  bentuk persen perolehan kembali (% recovery ) yang dianalisis menggunakan metode penambahan baku  ( standard  addition  method ).  Persen perolehan  kembali  disajikan  pada  Gambar  7. Persen perolehan kembali pada sampel sosis, bakso dan mie berkisar antara 96,09-104,92%. Nilai % perolehan kembali pada ketiga sampel dapat  diterima  karena  memenuhi  kriteria persen perolehan kembali, sebagaimana telah dilaporkan  bahwa  untuk 0,001 < [A] ≤ 0,1 (%) dalam matriks sampel, maka rentang persen  perolehan  kembali  adalah  90  -107% (Harmita, 2004).
Gambar 7. Persen perolehan kembali pada sampel makanan
90 92 94 96 98 100 102 104 106 Sosis Bakso Tahu P er ol eh an K em b al i (% ) Jenis Produk Makanan A B C

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
Ketelitian  metode  analisis  boron  dengan Spektrofotometer UV-Vis menggunakan kurkumin  yang  terdistilasi  asam  borat dinyatakan sebagai keterulangan ( repeatability ) dan diukur sebagai simpangan baku  relatif  (RSD).  Pengujian  dilakukan
dengan  mengukur  3  konsentrasi  berbeda dengan 3 kali pengulangan yang dilakukan di hari  yang  sama  ( intraday )  maupun  di  hari yang  berbeda  ( interday ).  Hasil  analisis ditunjukkan dalam Tabel 1 dan 2.

## Tabel 1. Presisi Intraday
[B] (mg/L) A Rerata SD % RSD 1,8 0,3717 0,0050 1,33 3,6 0,5619 0,0070 1,24 4,8 0,6494 0,0064 0,97 Tabel 2. Presisi Interday [B] (mg/L) A Rerata SD % RSD 1,8 0,3824 0,0017 0,44 3,6 0,5769 0,0087 1,50 4,8 0,6796 0,0100 1,47 Metode analisis boron menggunakan kurkumin  memiliki  nilai  RSD  pada  presisi intraday dan interday pada  kisaran  0,44–
1,50%.  Nilai  presisi intraday  dan  interday menunjukkan  bahwa  metode  analisis  boron menggunakan kurkumin memiliki keterulangan yang baik dan memenuhi kriteria presisi,  sebagaimana  telah  dinyatakan  bahwa apabila  suatu  metode  analisis  memberikan nilai  %  RSD  ≤  2%  maka  metode  tersebut memenuhi  kriteria  seksama  (Harmita,  2004; González dkk. ,  2010).    Nilai  RSD  tersebut juga  memenuhi  tingkat  presisi  menurut American  Preveternary  Medical  Association (APVMA)  (2004)  yaitu  tingkat  presisi  (y) yang dapat diterima untuk jumlah komponen
terukur  dalam  sampel  (x)  dengan  nilai  x  ≤ 0,1% adalah ≤ 20%.
Modifikasi  minor  terhadap  metode analisis  boron  secara  Spektrofotometri  UV- Vis menggunakan kurkumin yang terdistilasi ester  borat  memenuhi  parameter-parameter seperti linearitas, ketepatan dan ketelitian. Hal ini  menunjukkan  bahwa  metode  analisis tersebut  memiliki  validitas  dan  reliabilitas yang cukup baik. Oleh karena itu metode ini dapat digunakan secara umum dalam analisis boron pada sampel mie.

## 3.7 Analisis sampel mie
Sampel mie yang digunakan dalam penelitian ini merupakan jenis sampel mie yang berbeda

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
yang diperoleh dari pasar tradisional di Kota Yogyakarta.  Sampel  mie  yang  digunakan yaitu Mie A, Mie B dan Mie C. Hasil analisis konsentrasi  boron  dalam  masing-masing sampel mie dapat dilihat pada Gambar 8.
Gambar 8. Konsentrasi boron dalam sampel mie
Berdasarkan hasil analisis diperoleh konsentrasi  boron  untuk  masing-masing sampel mie A, B, dan C secara berturut-turut adalah  0,74;  1,04  dan  1,08  mg  kg -1 .  Nilai konsentrasi boron pada sampel mie menunjukkan  bahwa  asam  borat  dan  boraks digunakan  sebagai  bahan  tambahan  pangan pada  sampel  mie  dalam  konsentrasi  yang sangat  kecil  dan  masih  berada  pada  batas aman untuk dikonsumsi oleh manusia dengan mempertimbangkan  konten  boron  natural pada bahan makanan.

## IV. KESIMPULAN
Evaluasi  dan  modifikasi  terhadap metode kurkumin untuk analisis boron secara
Spektrofotometri  UV-Vis  telah  dilakukan. Kondisi  optimum  dari  hasil  evaluasi  yaitu panjang gelombang boron-kurkumin 555 nm, waktu  kestabilan  kompleks  20  menit,  rasio asam oksalat/kurkumin 15:1, jenis pelarut etil asetat  serta rasio  volume etanol  5:1 terhadap massa  asam  borat.  Metode  kurkumin  telah divalidasi  dan  memenuhi  kriteria  akurat  dan presisi serta telah digunakan untuk menentukan  konten  boron  dalam  masing- masing  sampel  mie  A,  B,  dan  C  secara berturut-turut  adalah  0,74;  1,04  dan  1,08  mg kg -1 .  Metode  analisis  boron  hasil  modifikasi dapat  digunakan  untuk  menentukan  konten boron dalam sampel makanan lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Adu,  R.  E.  Y.  (2021).  A  Simple  Analyte
Volatilization in Polytetrafluoro- ethylene (PTFE) Vessel for
Spectrophotometric  Determination  of Boron. Jurnal Akademika Kimia , (2). Anjana, S., Joseph, J., John, J., Balachandran,
S.,  Kumar,  T.  R.  S.,  &  Abraham,  A.
(2019).  Novel  flourescent  spiroborate esters: Potential therapeutic agents in in vitro cancer models. Molecular Biology Reports , 46 (1), 727–740. https://doi.org/10.1007/s11033-018-
4529-5
Abdulamir, A.S. & Heng, L.Y. 2010. Risk and Health Effect of Boric Acid.
0,0 0,5 1,0 1,5 A B C K on se n tr as i B or on (m g k g -1 ) Sampel mie

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
Amit,  Z.,  Abdul  Rahamn,  M.H.L.,  Ahmad Rifen,  N.N.N.,  Abdul  Muti,  N.H.  & Ling, Ji.H. 2020. Contents of Boric Acid in  Noodles  and  Processed  Foods. Borneo  Journal  of  Resource  Science and Technology , 10(1): 70–78.
Anngela,  O.,  Muadifah,  A.  &  Nugraha,  D.P.
2021. Validasi Metode Penetapan Kadar
Boraks pada Kerupuk Puli Menggunakan  Spektrofotometer  UV- Vis:  Validation  of  Methods  of  Borax Concentrations  Determination  in  Puli Crackers Using a UV-Vis
Spectrophotometer. Jurnal  Sains  dan Kesehatan , 3(4): 375–381.
Bakirdere,  S.,  Orenay,  S.,  &  Korkmaz,  M.
(2010).  Effect  of  Boron  on  Human Health. The  Open  Mineral  Processing
Journal , 3 (1), 54–59. https://doi.org/10.2174/1874841401003
010054
Cui, Y., Winton, M., Zhang, Z.-F., Rainey, C., Marshall, J., De Kernion, J., & Eckhert, C.  (2004).  Dietary  boron  intake  and prostate cancer risk. Oncology Reports .
https://doi.org/10.3892/or.11.4.887
González,  A.G.,  Herrador,  M.Á.  &  Asuero, A.G. 2010. Intra-laboratory assessment of  method  accuracy  (trueness  and precision) by using validation standards. Talanta , 82(5): 1995–1998.
Harmita,  H.  2004.  Petunjuk  Pelaksanaan
Validasi Metode Dan Cara Perhitungannya. Majalah Ilmu
Kefarmasian , 1(3): 117–135.
John,  J.  2016.  Kinetic  Analysis  Of  Thermal Decomposition  Of  Rubrocurcumin. Acta Ciencia Indica , (2).
John,  J.,  Rugmini,  S.D.  &  Nair,  B.S.  2018.
Kinetics and Mechanism of the Thermal and Hydrolytic Decomposition Reaction  of  Rosocyanin:  Thermal  And Hydrolytic Decomposition Reaction Of Rosocyanin. International  Journal  of Chemical Kinetics , 50(3): 164–177.
Lee, W.-H., Loo, C.-Y., Bebawy, M., Luk, F.,
Mason,  R.  &  Rohanizadeh,  R.  2013. Curcumin  and  its  Derivatives:  Their Application in Neuropharmacology and Neuroscience  in  the  21st  Century. Current  Neuropharmacology ,  11(4): 338–378.
Levent, S., Budak, A., Pamukoğlu, M. Y., &
Gönen,  M.  (2016).  Extraction  of  boric acid from tincal mineral by supercritical ethanol. The  Journal  of  Supercritical
Fluids , 109 , 67–73. https://doi.org/10.1016/j.supflu.2015.10
.023
Ma,  L.,  Zhang,  Z.  &  Li,  Q.  2011. Spectrophotometric  determination  of boron based on charge transfer reaction. Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy , 79(3):

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
599–602.
Mahabir,  S.,  Spitz,  M.  R.,  Barrera,  S.  L., Dong,  Y.  Q.,  Eastham,  C.,  &  Forman, M.  R.  (2008).  Dietary  Boron  and Hormone Replacement Therapy as Risk Factors  for  Lung  Cancer  in  Women. American  Journal  of  Epidemiology ,
167 (9), 1070–1080.
https://doi.org/10.1093/aje/kwn021
Moldoveanu,  S.  C.,  &  David,  V.  (2013).
Mobile Phases and Their Properties. In Essentials in Modern HPLC
Separations (pp.  363–447).  Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-0-12- 385013-3.00007-0 Naftel, J.A. 1939. Colorimetric Microdetermination of Boron.
Industrial  &  Engineering  Chemistry Analytical Edition , 11(7): 407–409.
Ncttwrlandr, T. (1968). Are shown in Fig. 43 , 475–486.
Pizzorno,  L.  2015.  Nothing  Boring  About Boron. Integrative Medicine , 14(4).
Pratiwi,  Y.S.,  Prasetyowati,  I.,  Hidayati, M.N.,  Antika,  R.B.,  Oktafiani,  L.D.A., Damat,  D.,  Shoukat,  N.  &  Ahmed,  K. 2020.  Review  article:  The  effect  of borax  as  a  food  additive  on  energy metabolism. Annals of Tropical Medicine  and  Public  Health ,  23(08).
Tersedia di https://www.journal.atmph- specialissues.org/uploads/179/7630_pd
f.pdf [Diakses 10 Februari 2023].
Priyadarsini,  K.  2014.  The  Chemistry  of
Curcumin: From Extraction to Therapeutic  Agent. Molecules ,  19(12): 20091–20112.
Qin,  Y.  2013.  Determination  of  Boron  in
Water Samples by the
Spectrophotometric  Curcumin  Method. Advanced  Materials  Research ,  807– 809: 323–326.
Reubun,  Y.  T.  A.  (2021). Analisis  Boraks pada  Mie  Basah  dan  Mie  Kering  di Bekasi Utara dan Bekasi Timur dengan Spektrofotometri UV-Vis .
Sarkar,  D.,  Sheikh,  A.A.,  Batabyal,  K.  &
Mandal,  B.  2014.  Boron  Estimation  in Soil,  Plant,  and  Water  Samples  using
Spectrophotometric
Methods.
Communications  in  Soil  Science  and Plant Analysis , 45(11): 1538–1550.
Setianingsih,  D.A.  &  Kresnadipayana,  D.
2018.  Penentuan  Kadar  Boraks  pada Karak  Berkode  Registrasi  dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis.
Biomedika , 11(2): 103–108.
Setyawati,  A.  2020.  Analysis  Methods Verification  of  Boron  in  River  Water Using  the  Uv-Vis  Spectrophotometer with Curcumin Complex as Alternative Practical Educations. International Journal of Chemistry Education Research , 3(2). Tersedia di

## Risna Erni Yati Adu, dkk., Akta Kimia Indonesia 8(1), 2023, 31-46
https://103.55.139.53/IJCER/article/vie w/14254 [Diakses 6 Januari 2023].
Siti-Mizura,  S.,  Tee,  E.S. &  Ooi,  H.E.  1991.
Determination  of  boric  acid  in  foods: Comparative  study  of  three  methods. Journal  of  the  Science  of  Food  and Agriculture , 55(2): 261–268.
Sofyan,  N.,  Situmorang,  F.W.,  Ridhova,  A., Yuwono,  A.H.  &  Udhiarto,  A.  2018.
Visible light absorption and
photosensitizing characteristics of natural  yellow  3  extracted  from Curcuma  Longa L.  for  Dye-Sensitized solar cell. IOP Conference Series: Earth and  Environmental  Science ,  105:
012073.
Suseno,  D.  2019.  Analisis  Kualitatif  dan
Kuantitatif  Kandungan  Boraks  Pada
Bakso  Menggunakan  Kertas  Turmerik, FT – IR Spektrometer dan
Spektrofotometer  Uv  -Vis. Indonesia Journal of Halal , 2(1): 1.
Thangavel,  S.,  Dhavile,  S.  M.,  Dash,  K.,  &
Chaurasia, S. C. (2004). Spectrophotometric  determination  of
boron in complex matrices by isothermal  distillation  of  borate  ester into curcumin . 502 , 265–270.
https://doi.org/10.1016/j.aca.2003.10.0
03
Uluisik, I., Karakaya, H. C., & Koc, A. (2018).
The  importance  of  boron  in  biological
systems. Journal  of  Trace  Elements  in Medicine  and  Biology , 45 ,  156–162. https://doi.org/10.1016/j.jtemb.2017.10 .008
Van  Nong,  H.,  Hung,  L.X.,  Thang,  P.N., Chinh, V.D., Vu, L.V., Dung, P.T., Van Trung, T. & Nga, P.T. 2016. Fabrication and vibration characterization of curcumin  extracted  from  turmeric (Curcuma  longa)  rhizomes  of  the northern  Vietnam. SpringerPlus ,  5(1):
1147.
Wanninger,  S.,  Lorenz,  V.,  Subhan,  A.  & Edelmann, F.T. 2015. Metal complexes of  curcumin  –  synthetic  strategies, structures  and  medicinal  applications. Chemical  Society  Reviews ,  44(15):
4986–5002.
Zhang, Y., Li, W., Liu, D., Ge, Y., Zhao, M., Zhu, X., Li, W., Wang, L., Zheng, T. & Li,  J.  2019.  Oral  Curcumin  via Hydrophobic  Porous  Silicon  Carrier:
Preparation, Characterization, and Toxicological Evaluation In Vivo. ACS Applied Materials & Interfaces , 11(35): 31661–31670.