## ALCHEMY : JOURNAL OF CHEMISTRY

## Artikel Penelitian
Terapi Infusa Pekat Buah Pare ( Momordica charantia L.) terhadap Kadar Glukosa Darah dan SOD pada Ginjal Tikus DM Tipe 1
Nuraeni Uswatun Hasanah, Hafidatul Hasanah, Himmatul Baroroh *
Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim, Malang, Indonesia, 65144
INFO ARTIKEL ABSTRAK Riwayat Artikel Direvisi 11 November 2018 Diterima 22 Desember 2018
Tersedia online 30 Desember 2018
* Email penulis korespondensi: himmatul.b@gmail.com
Bitter melon ( Momordica charantia L.) is one of the Cucurbitaceae families which is  useful  as  traditional  antidiabetic  medicine.  Diabetes  mellitus  (DM)  is  an autoimmune disease indicated by increasing blood sugar levels. The aim of this study  to  determine  the  effect  of  concentrated  infusions  therapy  of  bitter  melon fruit  on  blood  glucose  levels  and  SOD  activity  in  three  diabetic  levels  (low, medium,  acute)  in  DM  Type  1  of  rat  kidney.  The  doses  of  therapy  used were 0.15, 0.30, 0.45, 0.60, 0.80 and 1 mL/200 g body weight (BW). Blood sugar level was  measured  using  enzymatic  (glucose  oxidase)  method  and  SOD  activity using NBT (Nitroblue tetrazolium) test. The results showed that the concentrated infusions therapy of bitter melon fruit was able to decrease blood glucose levels and increase the SOD activity of DM 1 in the rat kidney. The average ability of the therapy to reduce DM in low, medium, and acute level was 87.21, 84.5 and 55,56%, respectively. In 0.3 mL/200 g Bw dose, concentrated infusions therapy of bitter melon fruit reduced blood sugar level to all diabetes levels. The average value of  concentrated infusions therapy of bitter  melon fruit in increasing SOD activity was 144.76%.
Keywords:  Diabetes mellitus, infuse, SOD (superoxide dismutase), bitter melon fruit (Momordica charantia L.)
Buah  pare  ( Momordica  charantia L.)  merupakan  salah  satu  keluarga Cucurbitaceae yang  bermanfaat  sebagai  obat  tradisional,  salah  satunya  untuk antidiabetes.  Diabetes  mellitus  (DM)  merupakan  salah  satu  penyakit  autoimun yang  ditandai  dengan  meningkatnya  kadar  gula  darah  (KGD).  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  terapi  infusa  pekat  buah  pare  terhadap kadar glukosa darah dan SOD pada tiga tingkat diabetes yaitu ringan, sedang dan  akut  pada  ginjal  tikus  DM  tipe  1.  Dosis  yang  digunakan yakni  0,15;  0,30; 0,45;  0,60;  0,80;  dan  1  mL/200  g  BB.  KGD  diiukur  dengan  metode  enzimatik (glukosa  oksidase)  dan  aktivitas  SOD  diukur  dengan  uji  NBT  ( Nitroblue tetrazolium ).  Hasil  penelitian  menunjukkan  terapi  infusa  pekat  buah  pare berpengaruh terhadap penurunan kadar glukosa darah dan peningkatan kadar SOD  pada  ginjal  tikus  DM  1.  Kemampuan  rata-rata  terapi  dalam  menurunkan DM  tingkat  ringan,  sedang,  dan  akut  masing-masing sebesar  87,21;  84,5  dan 55,56%.  Pada  dosis  0,3  mL/200  g  BB,  terapi  infusa  pekat  buah  pare  mampu menurunkan  KGD  terhadap  seluruh  tingkat  DM.  Kemampuan  rata-rata  infusa pekat buah pare dalam meningkatkan kadar SOD sebesar 144,76%.
Kata Kunci: Diabetes mellitus, infusa, SOD (superoksida dismutase), buah pare ( Momordica charantia L.)

## 1. Pendahuluan
Diabetes  mellitus  (DM)  adalah  penyakit  yang  ditandai  oleh  gula  darah  yang  tinggi  karena  adanya  gangguan produksi sekresi insulin atau resistensi insulin. Penyakit ini sangat penting untuk diperhatikan karena jumlah penderitanya semakin meningkat  setiap  tahunnya.  Saat  ini  diduga  secara  global  jumlah  penderita  diabetes  adalah  200  juta  [1].  DM merupakan penyakit kronis yang  dapat menimbulkan komplikasi,  diantaranya  nefropatik  diabetik  yaitu  gangguan ginjal akibat  tingginya  Kadar  Gula  Darah  (KGD)  dalam  tubuh.  Nefropatik  diabetik  ini  menjadi  penyebab  utama  gagal  ginjal terminal [2]. Oleh karena itu, penting untuk menjaga KGD penderita DM pada tingkat normal untuk mencegah terjadinya gagal ginjal. Salah satu penyebab gagal ginjal adalah terjadinya stres oksidatif.
Stres  oksidatif  terjadi  karena  adanya  jumlah  radikal  bebas  di  dalam  tubuh  yang  melebihi  kapasitas  tubuh  untuk menetralkannya.  Sementara,  KGD  yang  konstan  tinggi  dalam  tubuh  merupakan  pemicu  terbentuknya  radikal  bebas dalam  jumlah  yang  besar  dan  terus-menerus.  Mekanisme  pertahanan  tubuh  dalam  mengatasi  radikal  bebas  ini melibatkan  salah  satunya  enzim  superoksida  dismutase  (SOD)  [3].  Radikal  bebas  merupakan  senyawa  yang  dapat berada tersebar di seluruh organ tubuh, demikian juga SOD, merupakan enzim yang akan diproduksi oleh tubuh dimana terdapat sejumlah radikal bebas untuk dinetralkan.
SOD merupakan salah satu antioksidan endogen yang berperan penting dalam mengkatalisis radikal bebas anion superoksida  (O 2 ˙ )  menjadi  hidrogen  peroksida  (H 2 O 2 )  dan  molekul  oksigen  [4].  Terapi  untuk  menurunkan  KGD  pada penderita  DM  biasanya  dengan  menggunakan  suntikan  insulin  dan  obat  antidiabetes  oral  lain.  Akan  tetapi,  terapi  ini memiliki efek samping seperti sakit kepala, pusing dan mual. Selain itu, terapi ini juga membutuhkan biaya yang mahal karena harus  diberikan  suntikan insulin secara kontinyu.  Oleh karena itu,  diperlukan  suatu  pengobatan alternatif  yang harganya relatif murah dan khasiatnya tidak berbeda jauh dengan obat sintetik untuk terapi yang bersifat kontinyu. Salah satu alternatif pengobatan tersebut adalah penggunaan obat herbal dari buah pare ( Momordica charantia L.) [5].
Buah  pare  mengandung  senyawa  kimia  yang  berkhasiat  dalam  pengobatan  diantaranya  saponin,  flavonoid, polifenol,  alkaloid,  charantin,  polipeptida-p  dan  tannin  [6].  Salah  satu  khasiat  buah  pare  yang  telah  diketahui  secara tradisional adalah dapat menurunkan KGD. Khasiat antihiperglikemik ini sering diidentikkan dengan rasa pahit pada buah pare  [7].  Beberapa  penelitian  yang  telah  dilakukan  menunjukkan  adanya  aktivitas  antihiperglikemik  buah  pare  [8,  9]. Pratama [9] meneliti tentang terapi decokta buah pare untuk menurunkan KGD tikus DM. Hasilnya menunjukkan bahwa dosis 10 mL/200 g BB decokta buah pare tidak mampu menurunan KGD secara signifikan, pada dosis tersebut ekstrak decokta hanya memiliki kemampuan 1/3 dari Obat Hiperglikemia Oral (OHO) glibenklamid.  Kekurangefektifan terapi ini dimungkinkan terkait dengan kadar esktrak yang tidak mencukupi.
Pada penelitian ini akan dipelajari kemampuan terapi ekstrak infusa pekat buah pare dalam penurunkan. KGD dan peningkatan aktivitas SOD pada ginjal tikus DM tipe 1 akibat induksi aloksan. Penelitian ini menggunakan metode infusa untuk  mengekstrak  buah  pare. Infusa  adalah  sediaan  yang  dibuat  dengan  mengekstraksi  sampel  nabati  (simplisia) dengan  air  pada  suhu  90 ° C  selama  15  menit  [10].  Metode  infusa  ini  merupakan  metode  yang  sederhana  dengan menggunakan  air  sebagai  pelarutnya.  Pelarut  ini  lebih  aman  dan  harganya  terjangkau  sehingga  semua  kalangan masyarakat dapat menggunakannya.

## 2. Bahan dan Metode

## 2.1. Bahan
Bahan yang digunakan terdiri atas buah pare lokal dengan umur buah 2,5 bulan setelah tanam yang dibuat dalam sediaan serbuk kering (simplisia), tikus putih ( Rattus norvegicus ) strain wistar jantan umur 2-3 bulan dengan berat ± 200 g, aloksan ( alloxan monohydrate ), NaCl 0,9%, alkohol, gluko strip DR , larutan standar SOD (konsentrasi 5, 10, 20, 40, 80, 160 U/mL), larutan PBS, xantin, XOD (xantin oksidase), NBT ( Nitroblue tetrazolium ) dan akuades.

## 2.2. Pembuatan Infusa Pekat Buah Pare
Metode pembuatan infusa mengikuti standart dalam Farmakope Indonesia [10]. Infusa diberikan setiap hari selama 14 hari dalam keadaan segar. Infusa pekat dibuat dengan memasukkan 30 gram simplisia buah pare dalam 100 mL air dan dipanaskan dalam panci infusa. Panci dipanaskan di dalam penangas air selama 15 menit dihitung mulai suhu di dalam panci mencapai 90ºC, sambil sesekali diaduk. Penyaringan dilakukan selagi panas menggunakan kertas saring, setelah disaring ditambahkan air hingga volumenya 100 mL.

## 2.3. Persiapan Hewan Coba
Penelitian ini menggunakan hewan coba tikus putih strain wistar jantan umur 2 bulan dengan berat badan awal 100- 130  gram.  Kondisi  tikus  dalam  keadaan  sehat  yang  ditandai  oleh  gerakan  aktif.  Sebelum  perlakuan,  tikus  dipelihara
dalam kandang  berukuran  20x30x40  cm  yang  diberi  alas  serbuk  kayu  dan  anyaman  kawat  sebagai  penutup  atas kandang. Pemberian makan dan minum dilakukan setiap hari secara ad libitum selama 7 hari .

## 2.4. Persiapan Tikus Diabetes Mellitus Hewan Coba
Tikus  dikondisikan  diabetes  dengan  menginjeksikan  aloksan  pada  daerah  interperitonialnya  dengan  dosis  32 mL/200  g  BB  aloksan.  Dosis  aloksan  tersebut  mampu  membuat  tikus  diabetes  dengan  cepat  tanpa  menyebabkan kematian  [11].  Jumlah  tikus  yang  digunakan  adalah  32  ekor  sebagai  sampel.  Empat  ekor  tikus  diperlakukan  sebagai kelompok normal (KN) tanpa injeksi aloksan dan tanpa terapi.  Empat ekor tikus diperlakukan sebagai kelompok positif DM  tanpa  terapi  (KP).  Sisa  tikus  sejumlah  24  ekor  diperlakukan  sebagai  kelompok  terapi.  Mula-mula  tikus  kelompok terapi  dikondisikan  menderita  DM  melalui  induksi  aloksan.  Tikus  terapi  yang  telah  positif  DM  akan  dikelompokkan menjadi  3  kelompok  terapi  (KT),  yaitu  Kelompok Terapi  dengan  tingkat  DM  ringan (DM  ringan)  dengan  KGD  180-270 mg/dL,  Kelompok Terapi  dengan  tingkat  DM  sedang  (DM sedang)  dengan  KGD  271-359 mg/dL  dan Kelompok Terapi dengan tingkat DM akut (DM akut) dengan KGD 360-600 mg/dL.

## 2.5. Terapi Tikus SM dengan Infusa Buah Pare
Terapi  untuk  tikus  yang  positif  DM  dengan  infusa  pekat  buah  pare  pada  kelompok  terapi  dilakukan  secara  oral (sonde) dengan dosis 0,15 mL/200 g BB; 0,30 mL/200 g BB; 0,45 mL/200 g BB; 0,60 mL/200 g BB; 0,80 mL/200 g BB; 1 mL/200  g  BB.  Pemberian  ekstrak  dilakukan  setiap  hari  selama  14  hari  berturut-turut.  Terapi  tidak  dilakukan  pada kelompok tikus kontrol positif.

## 2.6. Pengukuran Kadar Glukosa Darah
Pengukuran  kadar  glukosa  darah  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  enzimatik ( glukosa  oksidase ) menggunakan glukometer. Pengambilan sampel darah dilakukan dengan cara tikus diletakkan pada sungkup, ekor tikus dipegang,  diurut,  dan  diberi  alkohol.  Kemudian,  ujung  ekor  dipotong  sedikit  sampai  darah  keluar,  darah  diambil,  dan diteteskan pada  strip  glukotest. Hasil  pengukuran  kadar  glukosa  darah yang terbaca  pada  glukometer  dicatat sebagai data.

## 2.7. Uji Aktivitas SOD

## 2.7.1 Pengambilan Organ Ginjal
Tikus  dimatikan terlebih  dahulu  dengan  cara  dislokasi  leher.  Skalpel  dan  alat  bedah  disiapkan  untuk  membantu mengambil  organ ginjal.  Setelah  mati,  tikus  diletakkan pada  papan fiksasi  dan  ditata  pada  posisi  ventral  diatas.  Ginjal diambil dan dicuci. Setelah itu, disimpan dalam wadah tertutup dan dingin dengan suhu -70ºC (diletakkan dalam freezer ) untuk analisis selanjutnya.

## 2.7.2 Analisis Aktivitas Enzim SOD
Pengukuran  aktivitas  enzim  SOD  menggunakan  metode  NBT.  Larutan  standart  superoksida  dismutase  dengan konsentrasi  larutan 5,  10,  20,  40,  80,  160  U/mL digunakan untuk  membuat kurva standar. Dimasukkan larutan xantin sebanyak 100 µL dalam tabung mikro 2 mL, ditambahkan xantin oksidase 100 µL, 100 µL NBT, 1600 µL PBS pH 7,4 dan 100 µL sampel ginjal yang setelah dihaluskan. Selanjutnya, campuran divortex selama 10 detik dengan kecepatan 2600 rpm,  kemudian  diinkubasi  selama  30  menit dalam  inkubator  suhu  30ºC.  Setelah  itu,  larutan dalam tabung  mikro disentrifugasi  selama  10  menit  pada  kecepatan  3500  rpm,  diambil  supernatannya  dan  dimasukkan  kuvet,  lalu  diukur absorbansinya menggunakan spektofotometer pada panjang gelombang 580 nm. Blanko yang digunakan adalah larutan PBS pH 7,4.

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1. Ekstraksi Infusa Buah Pare
Penelitian  ini  menggunakan  metode  infusa  yaitu  sediaan  yang  dibuat  dengan  mengektraksi  simplisia  dengan  air pada suhu 90 º C selama 15 menit. Akan tetapi jumlah simplisia yang digunakan tiga kali lebih besar dari standar metode pembuatan infusa dalam Farmakope Indonesia [10], yaitu sebanyak 30 gram simplisia. Infusa yang dihasilkan merupakan infusa pekat dengan karakteristik fisik berupa cairan kental berwarna kuning kecoklatan.

## 3.2. Pengaruh Ekstrak Infusa Pekat Buah Pare terhadap KGD Tikus DM Tipe 1
Pengukuran KGD dilakukan dengan metode enzimatik (glukosa oksidase) menggunakan glukometer. Pengambilan sampel darah diambil pada ujung ekor tikus. Hasil penghitungan KGD yang terbaca pada glucometer diperlihatkan pada Gambar 1 .
Gambar  1. Nilai  Kadar  Glukosa  Darah  (KDG)  tikus  pada  hari  ke-0,  1,  dan  15.  KN  =  Kelompok  kontrol  normal  tanpa perlakuan, KP = Kelompok kontrol positif DM, H-0 = KGD sebelum diinduksi aloksan, H-1 = KGD sesudah diinduksi aloksan, H-15 = KGD sesudah terapi.
Gambar 1 menunjukan KGD tikus yang sebelum (H-0) dan sesudah (H-1) diinduksi aloksan serta KGD tikus setelah diterapi  infusa  pekat  buah  pare  (H-15)  selama  14  hari.  KGD seluruh tikus  pada H-0 yaitu  dibawah  200  mg/dL.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  keadaan  tikus  masih  dalam  keadaan  normal.  Pada  hari  ke-1  tikus  yang  diinduksi  aloksan mengalami peningkatan KGD. Aloksan menyebabkan tikus mengalami kenaikan KGD > 200 mg/dL, hal ini menunjukkan bahwa tikus sudah mengalami diabetes. Peningkatan KGD ini disebabkan oleh induksi aloksan yang telah merusak sel β- Langerhans pankreas sehingga insulin tidak dapat diproduksi untuk menurunkan KGD.
Tikus pada kontrol normal (KN) memiliki kadar glukosa darah yang stabil dibawah 200 mg/dL sejak H-0 sampai H- 15 percobaan.  Tikus  pada  kontrol  positif  (KP)  mengalami  peningkatan  KGD selama  percobaan.  Adapun  kontrol  terapi mengalami perubahan penurunan yang signifikan untuk seluruh kelompok perlakuan pada seluruh dosis terapi.
Gambar 2. KGD tikus yang diterapi infusa buah pare pada dosis yang diterapkan pada keadaan DM sebelum terapi (H-1) dan sesudah terapi (H-15). KT 1 = dosis 0,15 mL, KT 2 = dosis 0,3 mL, KT 3 = dosis 0,45 mL, KT 4 = dosis 0,6 mL, KT 5 = dosis 0,8 mL, KT 6 = dosis 1 mL.
Pada kelompok terapi dengan diabetes ringan (DM ringan) ekstrak infusa pekat buah pare dapat menurunkan KGD rata-rata  sebesar  87,21%,  pada  kelompok  terapi  dengan  diabetes  sedang  (DM  sedang)  sebesar  84,5%  dan  pada kelompok  terapi  dengan  diabetes  akut  (DM  akut)  sebesar  55,56%.  Pada  diabetes  ringan  (DM  ringan)  didapat  nilai
kemampuan  penurunan  kadar  glukosa  darah dari  terapi  infusa yang  tinggi  dikarenakan dalam  kondisi  diabetes  ringan kadar glukosa darah mudah diturunkan sedangkan pada diabetes akut (DM akut) nilainya rendah diduga terkait dengan proses metabolisme di tubuh tikus yang rendah yang ditunjukkan oleh keadaan fisik tikus yang sangat lemah sehingga kadar glukosa darah sulit untuk diturunkan.
Pengamatan  lebih  dalam  pada  penurunan  KGD  untuk  setiap  variasi  dosis  menunjukkan  bahwa  variasi  dosis ternyata memberikan tingkat penurunan KGD yang beragam pada tikus DM tipe 1. Akan tetapi, hasil yang cukup menarik terlihat  pada  dosis  0,3  mL/200  g  BB. Gambar  2 menunjukkan  bahwa  dosis  0,3  ml/200  g  BB  memiliki  kemampuan menurunkan kadar glukosa darah untuk tingkat diabetes ringan (DM ringan), sedang (DM sedang) dan akut (DM akut) sehingga  mencapai  tingkat  kadar  glukosa  darah normal  yaitu  dibawah  200  mg/dL  setelah  14  hari  terapi.  Hal  ini  tidak diamati pada terapi dengan dosis yang lain.
Penurunan KGD diduga karena adanya senyawa aktif yang terdapat dalam buah pare yang berpotensi menurunkan kadar glukosa dalam darah tikus. Menurut Yuda, dkk [8], senyawa yang terdapat dalam buah pare ( Momordica charantia L . ) meliputi flavonoid, polipeptida-p, polifenol, saponin, tanin, dan alkaloid. Kandungan senyawa aktif dalam buah pare berperan  sebagai  antioksidan  yang  mampu  menangkal  adanya  radikal  bebas  dalam  tubuh,  salah  satunya  adalah polipeptida-p. Polipeptida-p ini memiliki aktifitas hampir sama dengan insulin yaitu menstimulasi pengeluaran insulin pada pankreas. Senyawa ini diduga juga memiliki aktivitas sebagai penurunan kadar glukosa darah.

## 3.2. Aktivitas Superoxide Dismutase (SOD) pada Ginjal Tikus DM Tipe 1
Aktivitas  enzim  SOD  dianalisis  dalam  organ  ginjal  dikarenakan  hiperglikemia  berhubungan  dengan  kerusakan jangka  panjang  dan  kegagalan  organ-organ  terutama  mata,  ginjal,  saraf,  jantung  dan  pembuluh  darah  [12].  Menurut Wresdiyati  [4],  keadaan  stres  oksidatif  menimbulkan  penurunan  aktivitas  SOD  pada  ginjal.  Stres  oksidatif  yang  dipicu oleh keadaan hiperglikemik lanjut salah satunya menyebabkan nefropati. Nefropati diabetik adalah penyakit ginjal akibat penyakit DM  dan  merupakan  penyebab  gagal  ginjal  [13].  Kerusakan ginjal  akibat  stres  oksidatif  tersebut  dapat  diatasi dengan beberapa mekanisme pertahanan di ginjal, salah satunya melalui aktivitas enzim SOD [14].
Pengukuran  aktivitas  enzim  SOD  pada  ginjal  tikus  putih  dilakukan  secara  tidak  langsung  menggunakan  metode NBT menggunakan spektrofotometer visibel secara kuantitatif. Prinsip  pengukuran aktivitas enzim SOD adalah reduksi senyawa NBT oleh ion superoksida hasil reaksi senyawa xatin dan XOD. Pengukuran rata-rata aktivitas SOD ginjal tikus kontrol negatif (KN) yakni tikus dalam keadaan sehat menunjukkan nilai sebesar 3,4 U/mL. Aktivitas SOD pada tikus DM yang telah diterapi menunjukkan peningkatan. Sedangkan pada tikus kontrol positif DM tanpa terapi (KP), aktivitas SOD menurun menjadi 0,59 U/mL, hal ini diduga terkait dengan kadar glukosa darah yang meningkat.
Aktivitas SOD tikus sehat (KN) merupakan nilai acuan aktivitas SOD dalam keadaan normal, nilai aktivitas SOD ini terkait dengan kondisi metabolisme tubuh yang sehat dengan kadar radikal bebas normal. Ketika radikal bebas dalam tubuh  meningkat,  aktivitas  SOD  dalam  tubuh  juga  meningkat  untuk  menangkal  radikal  bebas  sehingga  terjadi keseimbangan  antara  antioksidan  dan  radikal  bebas. Hal  ini tercermin  pada  pengukuran  aktivitas SOD  pada tikus DM yang diterapi dimana terjadi peningkatan aktivitas SOD melebih nilainya pada tikus normal. Hal ini juga mengkonfirmasi bahwa pada tikus DM yang diterapi terdapat jumlah radikal bebas yang meningkat dari keadaan tikus sehat, akan tetapi terapi infusa pekat buah pare berhasil menjaga aktivitas SOD yang sesuai dengan yang dibutuhkan oleh kondisi tubuh.
Gambar 3 . Grafik hubungan KGD dengan aktivitas SOD pada tikus dengan tingkat DM yang berbeda.
Aktivitas  SOD  yang  terukur  pada  tikus  menderita  DM  (KP)  terjadi  penurunan.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  tubuh tidak mampu menyediakan jumlah aktivitas  enzim SOD yang mencukupi untuk menetralkan jumlah radikal bebas yang meningkat akibat KGD yang tinggi. Pada beberapa penelitian menunjukkan bahwa aktivitas enzim SOD menurun ketika tubuh mengalami peningkatan kadar glukosa darah [4, 15, 16]. Grafik hubungan antara aktivitas SOD dan kadar glukosa darah  dapat  di  lihat  pada Gambar  3 .  Hasil  perhitungan  deskriptif  menunjukkan  bahwa  aktivitas  SOD  ginjal  tikus  DM dengan terapi infusa pekat buah pare naik sebesar 144,76% dari keadaan tikus DM tanpa terapi.
Pengamatan lebih dalam terhadap pengaruh variasi dosis terapi pada aktivitas SOD tampak pada Gambar 4 . Hasil uji  normalitas  data  aktivitas  SOD  menghasilkan  nilai  p>0,05,  dapat  disimpulkan  bahwa  data  berdistribusi  normal. Pengujian One Way Anova pada data aktivitas SOD tikus DM dan yang diterapi didapatkan nilai p (Sig.) kurang dari 0,05 (0,001<0,05)  dan  nilai  F  hitung>  F  tabel  (5,59>2,66).  Hasil  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan  artinya  terdapat pengaruh pemberian ekstrak infusa pekat buah pare terhadap aktivitas SOD ginjal tikus putih DM.
Gambar 4. Aktivitas SOD tikus yang diterapi infusa buah pare sesudah terapi (H-15). KN = kontrol normal, KP = kontrol positif, KT 1 = dosis 0,15 mL, KT 2 = dosis 0,3 mL, KT 3 = dosis 0,45 mL, KT 4 = dosis 0,6 mL, KT 5 = dosis 0,8 mL, KT 6 = dosis 1 mL.
Setelah  uji  ANOVA,  dilakukan  uji  lanjut.  Uji  lanjut  bertujuan  untuk  menguji  perbedaan  antar  perlakuan  dari  hasil penelitian. Pada penelitian ini digunakan uji BNT atau uji LSD menggunakan SPSS. Uji LSD ini dijadikan acuan dalam menentukan apakah rata-rata beberapa perlakuan dalam hal ini adalah variasi dosis terapi berbeda secara statistik atau tidak.  Untuk  menghitung  nilai  LSD,  digunakan  data  dari  uji  ANOVA  yang  telah  dilakukan  sebelumnya.  Hasil  yang diperoleh  menunjukkan  bahwa  variasi  dosis  0,3  mL/200  g  BB  merupakan  satu-satunya  dosis  yang  berbeda  secara signifikan terhadap kontrol positif.
Berdasarkan hasil penelitian ini, ternyata dosis 0,3 mL/200 g BB infusa pekat buah pare menghasilkan efek terapi terbaik dibandingkan dosis yang lain, baik ditinjau dari kemampuan penurunan kadar glukosa darah maupun peningkatan aktivitas SOD. Pada dasarnya dosis 0,3 mL/200 g BB infusa pekat buah pare adalah dosis yang setara dengan dosis yang  digunakan  untuk  terapi  DM  menggunakan  obat  glibenklamid  [9].  Sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  terapi  DM menggunakan infusa pekat buah pare memiliki kemampuan penurunan kadar glukosa darah yang setara dengan terapi obat medis standar.
4 . Kesimpulan
Terapi  ekstrak  infusa  pekat  buah  pare  berpengaruh terhadap  penurunan kadar  glukosa  darah dengan  pemulihan seluruh  tingkat  diabetes  mencapai  KGD  normal  pada  dosis  0,3  mL/200  g  BB  dan kemampuan  penurunan  kadar  SOD ginjal tikus diabetes mellitus sebesar 144,76%.

## Ucapan Terima Kasih
Penulis mengucapkan terima kasih kepada seluruh pihak Penelitian Kompetitif Mahasiswa Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim Malang atas bantuan dana penelitian.

## Daft ar Pustaka
[1] World  Health  Organization,  “Definition,  Diagnosis  and  Classification  of  Diabetes  Mellitus  and  its  Complications: Report  of  a WHO  Consultation.  Part  1,  Diagnosis  and  Classification  of Diabetes  Mellitus,”  Geneva:  World Health Organization, 1999. [Online]. Tersedia: https://apps.who.int/iris/handle/10665/66040. [Diakses 14 Februari 2018].
[2] H. Permana, “Komplikasi Kronik dan Penyakit Penyerta pada Diabetes,” Hasan Sadikin Hospital, Bandung, 2009. [Online]. Tersedia: http://pustaka.unpad.ac.id/wp-content/uploads/2009/09/kompilasi_kronik_dan_penyakit_penyerta _pada_diabetesi.pdf. [Diakses 2 Agustus 2018].
[3] D. Priantono, W. Mulyawan, N.S. Hardiany, & S.I. Wanandi, “Pengaruh Induksi Hipoksia Hipobarik Intermiten pada Aktivitas  Spesifik Manganese  Superoxide  Dismutase dan  Kadar  Malondialdehyde  Ginjal  Tikus,” eJournal Kedokteran Indonesia , vol. 1, no. 3, pp. 208-215, 2013.
[4] T.  Wresdiyati,  M.    Astawan,  &  V.D.  Nurwati,  “Level  Antioksidan  Superoksida  Dismutase  (SOD)  Menurun  pada Jaringan Ginjal Tikus Hiperkolesterolemia: Suatu Kajian Imunohistokimia,” Jurnal Sain Veteriner , vol. 24, no. 2, pp. 168-176, 2006.
[5] P.L. Larasati, “Efek Penurunan Kadar Glukosa Darah Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Alpukat ( Persea americana Mill)  dan  Buah  Oyong  ( Luffa  acutangula (L.)  Roxb)  pada  Mencit  Putih  Jantan  yang  Dibebani  Glukosa,”  Skripsi, Fakultas Matematika Dan ILmu Pengetahuan Alam, Universitas Indonesia, Depok, 2012.
[6] T. Subahar, “ Khasiat dan Manfaat Pare: Si Pahit Pembasmi Penyakit ,” Jakarta: Agro Media Pustaka, 2004.
[7] S.  Darmawati,  &  S.S.  Dewi,  “Efek  Ekstrak  Buah  Pare  ( Momordica  charantia, L)  terhadap  Zona  Hambatan Pertumbuhan Salmonella  typhi Penyebab  Salmonellosis,” Jurnal  Ilmu  Kesehatan  Pengembangan  Ilmu-Ilmu Kesehatan, vol. 1, no. 1, pp.  2008.
[8] I.K.A.  Yuda, M.S.  Athara,  &  A.A.G.O.  Dharmayudha,  “Identifikasi  Golongan  Senyawa  Kimia  Ekstrak  Etanol  Buah Pare  ( Momordica  charantia )  dan  Pengaruhnya  terhadap  Penurunan  Kadar  Glukosa  Darah  Tikus  Putih  Jantan ( Rattus novergicus ) yang Diinduksi Aloksan,” Buletin Veteriner Udayana , vol. 5, no. 2, pp. 87-95, 2013.
[9] F.T. Pratama, “Pengaruh Decocta Buah Pare ( Momordica charantia L.) terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah Tikus Wistar yang Diberi Beban Glukosa,” Skripsi , Program Pendidikan Sarjana Kedokteran Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang, 2011.
[10] Kementerian Kesehatan RI, “ Farmakope Indonesia Edisi V ,” Jakarta: Kementerian Kesehatan Republik Indonesia, 2014.
[11] S.P. Sari, Azizahwati, & D.A. Ratimanjari, “Pengaruh Pembelian Infusa Herbal Sambiloto ( Andrographis paniculata Ness) terhadap Glibenklamid dalam Menurunkan Kadar Glukosa Darah Tikus Putih Jantan yang Dibuat Diabetes,” Pharmaceutical Sciences and Research , vol. 9, no. 1, pp. 1-11, 2011.
[12] American Diabetes Association (ADA), “Standards of Medical Care in Diabetes – 2012,” Diabetes Care , vol. 35, no.1, pp. S11-S63, 2012.
[13] Murnah,  &  K.S.  Indranila,  “Pengaruh  Ekstrak  Etanol  Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L)  terhadap  Diabetik  Nefropati pada Tikus Spraque Dawley yang Diinduksi Streptozotocin (STZ),” Diponegoro Journal of Nutrition and Health , vol. 2, no. 1, pp. 1-15, 2014.
[14] Y.  Ding,  Y.  Li,  M.C.  Zimmeman  &  H.D.  Schultz,  “Elevated  Mitochondrial  Superoxide  Contributes  to  Enhanced Chemoreflex  in  Heart  Failure  Rabbits,” American  Journal  of  Physiology-Regulatory,  Integrative  and  Comparative Physiology , vol. 298, no.2, pp. R303-R311, 2010.
[15] B. Lukiati, A. Aulani, & W. Darmanto, “Profil Distribusi INOS dan Kadar NO Pankreas Tikus Diabetes Mellitus Hasil Induksi MLD-STZ Pasca Pemberian Ekstrak Etanol Temu Giring ( Curcuma heyneana ), Jurnal Kedokteran Hewan , vol. 6, no. 2, pp. 120-124, 2012.
[16] C. Retnaningsih, Darmono, B. Widianarko, & S.F. Muis, “Peningkatan Aktivitas Superoksida Dismutase pada Tikus Hiperglikemi dengan Asupan Tempe Koro Benguk ( Mucuna pruriens L.),” Jurnal Agritech , vol. 33, no. 2, pp. 154-161, 2013.