Versi Online: http://journal.ipb.ac.id/index.php/jtip DOI: 10.6066/jtip.2016.27.1.1 Hasil Penelitian

## PERAN FISIOLOGIS  SARI  KEDELAI HITAM  DIPERKAYA  MIKROENKAPSULAN MINYAK  SAWIT MENTAH  PADA  PENDERITA  DIABETES  MELITUS TIPE-2
[Physiological Roles of Black Soybean Milk Enriched with Microencapsulated Crude Palm Oil in Diabetes Type-2 Patients]
Reno Irwanto 1) *, Dede Robiatul Adawiyah 2) , dan Fransiska Rungkat Zakaria 2)
1) Program Studi Ilmu Pangan, Sekolah Pasca Sarjana, Institut Pertanian Bogor, Bogor
2) Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Bogor
Diterima 05 April 2016 / Disetujui 30 Mei 2016

## ABSTRACT
Diab etes mellitus type-2 (DM-2) is a disease characterized b y high level of b lood glucose which may result in complications of other diseases. Currently, the  disease prevalence  of DM-2 has b een  increasing. Appropriate  diet  patterns  can  b e  a  solution for DM-2 control. Black soyb ean milk (BSM) enriched with microencapsulated crude palm oil (CPO) is an example. The ob jective of the study was to determine the effectiveness of BSM containing microencapsulated CPO in controlling and improving the condition of DM- 2 patients. The intervention consist 2 group with 15 people DM-2 was given BSM 240 mL containing 0.4 g microencapsulated CPO daily for 28 days, while a control group with 11 people DM-2 without intervention product.  Data  were  analyzed  using  software  SPSS  15.0  with  student- t  test  at  significant  level  α=5%. Medicines  prescrib ed  to  all  volunteer  were  not  terminated  during  the  intervention  period.  The microencapsulated  CPO  usedin  this  study  has  a  moisture  content  of  1.77±0.15%,  solub ility  value  of 65.39±2.71%, and total carotene of 295.24±7.40 ppm while BSM has protein content of 2.76±0.13%, fat 1.17±0.06%, ash 0.12±0.08%, moisture 94.69±0.04%, and carb ohydrate (b y difference) 1.27±0.10%. The consumption  of BSM containing microencapsulated CPO showed insignificant effects on  Fasting Blood Glucose  (FBG)  levels  (P>0.05),  b ut  significantly  reduced  cyclooxygenase  2  levels  (P<0.05)  and  MDA levels (P<0.05). The control group showed insignificant differences for FBG (P>0.05), cyclooxygenase 2 (P<0.05),  and  MDA  level  (P>0.05).  The  significant  changes  indicated  that BSM containing microenca- psulated CPO has against DM-2 disease.
Keywords : b lack soyb ean milk, diab etes mellitus type-2, microencapsulated MSMn

## ABSTRAK
1
Diabetes  melitus  tipe-2  (DM-2)  ialah  kondisi  kadar  glukosa  dalam  darah  yang  tinggi   dan  akan berimplikasi pada komplikasi timbulnya penyakit lain. Saat ini, angka prevalensi penderita DM-2 semakin meningkat. Pola diet yang tepat dapat menjadi solusi terapi DM-2; salah satunya adalah minuman sari kedelai hitam (SKH) yang diperkaya mikroenkapsulan minyak sawit mentah (MSMn). Tujuan penelitian adalah mengetahui peran fungsional SKH yang diperkaya mikroenkapsulan MSMn dalam mengontrol dan memperbaiki kondisi penyakit DM-2. Penelitian ini dilakukan selama 28 hari dengan partisipasi 15 relawan yang  diberi  SKH  sebanyak  240  mL  +  0,4  g  mikroenkapsulan   MSMn  sebagai  grup  perlakuan dan 11 relawan sebagai grup kontrol tanpa diberikan apapun. Data dianalisis menggunakan software SPSS 15.0 dengan  uji t-student pada  taraf  nyata  α=5%.  Obat-obatan  yang  digunakan  oleh  semua  relawan tidak berubah selama periode intervensi. Produk yang diintervensi berupa mikroenkapsulan MSMn memiliki kadar  air  1,77±0,15%,  kelarutan  65,39±2,71%  dan  total  karoten  295,24±7,40  ppm  sedangkan  SKH memiliki  kadar  protein  2,76±0,13%,  kadar  lemak  1,17±0,06%,  kadar  abu  0,12±0,08%,  kadar  air 94,69±0,04%  dan  kadar  karbohidrat b y  difference 1,27±0,10%.  Konsumsi  SKH  yang  mengandung mikroenkapsulan MSMn tidak memberi pengaruh terhadap kadar GDP ( P >0,05) tetapi menurunkan secara nyata kadar siklooksigenase 2 ( P <0,05) dan MDA  ( P <0,05). Relawan grup kontrol menunjukkan hasil yang tidak signifikan (taraf 5%) untuk penurunan GDP ( P >0,05) dan peningkatan kadar MDA ( P >0,05), namun memberikan  pengaruh  signifikan  terhadap  penurunan  siklooksigenase  2  ( P <0,05).  Perubahan  nilai parameter uji yang teramati menunjukkan bahwa minuman SKH yang mengandung mikroenkapsulan MSMn  memiliki peran funsional terhadap penyakit DM tipe -2.
Kata kunci: diabetes melitus tipe-2, mikroenkapsulan MSMn, sari kedelai hitam
*Penulis Korespondensi: E-mail:  ireno@outlook.com

## PENDAHULUAN
Diabetes  melitus  (DM)  merupakan  penyakit kronis  yang  terjadi  akibat  tubuh  tidak  dapat  meng- hasilkan  hormon  insulin  dalam  jumlah  yang  cukup atau  tidak  dapat  memanfaatkan  insulin  yang  ada dalam  tubuh  dengan  baik.  Salah  satu  jenis  DM adalah  DM  tipe-2  (DM-2).  DM-2  terjadi  karena  tubuh tidak  mampu  merespon  insulin  walaupun  tubuh dapat  menghasilkan  insulin;  yang  lebih  dikenal dengan  kondisi  insulin  resisten.  Penderita  DM-2 pada  umumnya  memiliki  tingkat  stres  oksidatif  yang tinggi  didalam  tubuhnya  sehingga  berdampak  pada kerusakan  atau  komplikasi  penyakit  lainnya  (IDF, 2013).  Indikator  yang  paling  umum  bagi  penderita DM  adalah  dengan  mengukur  tingkat  kadar  glukosa darah,  enzim  siklooksigenase  (COX-2),  dan  mola- naldehida karena berhubungan dengan  tingkat komplikasi  dan  keparahan  penyakit  DM-2.  Semakin tinggi  jumlah  radikal  bebas  di  dalam  tubuh,  maka semakin  besar  kemungkinan  terjadi  inflamasi,  yang diukur  melalui  penentuan  kadar  COX-2.  Demikian pula  dasar  pemikiran  pengukuran  kadar  senyawa malonaldehida  yang  bersifat  toksik  yang  terbentuk dalam  tubuh  penderita  DM-2.  Tingkat  stres  oksidatif dapat  dikontrol  dengan  mengonsumsi  makanan yang  memiliki  nilai  indek  glikemik  (IG)  rendah  serta mengandung senyawa antioksidan, komponen bioaktif,  dan  serat pangan  (Biglari et al . , 2008).
Kedelai  hitam  merupakan  salah  satu  bahan pangan  yang  dapat  berperan  penting  dalam  me- nurunkan tingkat keparahan DM-2. Sejumlah penelitian  telah  mengungkapkan  kelebihan  kedelai hitam yaitu dari kulitnya yang mengandung antosianin  dan  tidak  dimiliki  oleh  kedelai  kuning pada  umumnya.  Selain  itu  kandungan  biji  kedelai hitam  sendiri  memiliki  senyawa  fitokimianya  seperti antosianin,  isoflavon,  dan  saponin  (Kim et  al., 2006; Slavin et  al., 2013).  Hasil  penelitian  Powell et  al. (2002),  menyatakan  nilai  IG  sari  kedelai  adalah  31, termasuk  dalam  kategori  bahan  pangan  dengan  nilai IG  rendah  sehingga  baik  untuk  penderita  DM-2.  Hal tersebut  menjadikan  minuman  sari  kedelai  hitam dengan  kandungan  IG  yang  rendah,  senyawa bioaktif,  dan  serat  pangan  sebagai  minuman  yang dapat  menurunkan  risiko  DM-2.  Selain  kedelai hitam,  minyak  sawit  mentah  (MSMn)  diketahui  kaya akan  sumber  antioksidan;  yaitu  karotenoid,  took- ferol,  tokotrienol,  fitosterol,  senyawa  fenolik,  dan senyawa  fitonutrien  lainnya  yang  baik  bagi  tubuh (Boateng  dan  Lee,  2013).  Karotenoid  merupakan pigmen  yang  mudah  teroksidasi  (Chen et  al., 2014). Selain  itu,  flavor  MSMn  murni  memberikan  palata- bilitas  dan  tingkat  penerimaan  sensoris  rendah. Salah  satu  usaha  penanganan  hal  tersebut  adalah dengan  teknik  mikroenkapsulasi  (Dubey et  al., 2009).  Penelitian  mikroenkapsulasi  MSMn  dengan berbagai  metode  pengeringan,  meliputi spray,  drum ,
dan tray  drying yang  telah  dilakukan  oleh  Wulandari et  al .  (2014)  menunjukkan  total  karoten  tertinggi dihasilkan  dari  metode tray  drying, yaitu  230  ppm. Urutan  berikutnya  diikuti  oleh  metode spray  drying (160  ppm),  dan  total  karoten  paling  rendah  diperoleh dari  metode drum  drying (sekitar  78  ppm).  Namun, metode spray  drying menghasilkan  mikroenkapsulan yang  lebih  homogen  dan  tingkat  kelarutan  yang lebih  baik  dibandingkan  metode  lainnya.  Dengan demikian,  penelitian  ini  menerapkan  metode spray drying dalam  pembuatan  mikroenkapsulan  MSMn. Diharapkan  minuman  SKH  yang  diperkaya  mikro- enkapsulan MSMn mampu menurunkan  risiko keparahan  dan  mengontrol  penyakit  DM-2.  Tujuan penelitian  ini  adalah  mempelajari  peran  fungsional SKH  yang  mengandung  mikroenkapsulan  MSMn dalam  menurunkan  kadar  glukosa  darah  puasa, kadar  enzim  siklooksigenase,  dan  kadar  malonal- dehida  pada  pasien  DM-2.

## BAHAN  DAN METODE

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  kedelai  hitam  varietas  Cikuray  yang  didapat- kan  dari  petani  binaan  Institut  Pertanian  Bogor  di Palembang  dan  MSMn dari  PT  SMART.

## Pembuatan SKH
Pembuatan  SKH  diawali  dengan  persiapan kedelai  hitam  yang  telah  disortasi.  Kedelai  hitam direndam  air  mentah  selama  12  jam  dengan  per- bandingan  kedelai  hitam  :  air  sebesar 1:3  (bk/v). Kemudian  kedelai  hitam  dicuci  lalu  ditiriskan  dan digiling  bersama  kulitnya  dengan  penambahan  air panas  bersuhu  80°C  pada  rasio  1:8  (bk/v).  Selanjut- nya  dilakukan  penyaringan  dengan  kain  saring  80 mesh dan  hasil  tersebut  dipindahkan  ke  alat  pas - teurisasi  (Sankyo,  Japan)  pada  suhu  85°C  selama 15  menit  hingga  didapatkan  SKH.  Pengujian  prok- simat  dilakukan  SKH  berdasarkan  metode  AOAC, 2005.

## Pembuatan mikroenkapsulan MSMn
Pencampuran  maltodektrin  dan  isolat  protein kedelai  sebelum  air  hangat  (50-60°C)  ditambahkan. Setelah itu campuran dihomogenisasi dengan homogenizer (Armfield  L4R,  Inggris)  pada  kecepa- tan  1.100  rpm  selama  1  menit  lalu  MSMn  dimasuk- kan  dan  dihomogenisasi  kembali  pada  kecepatan 1.200  rpm  selama  3  menit  hingga  didapatkan  emulsi MSMn.  Langkah  berikutnya  yaitu  pembuatan  mikro- enkapsulan  menggunakan  alat spray  dryer (Buchi 190,  Switzerland)  pada  suhu inlet 180°C  dan outlet 80°C.  Kadar  air,  kelarutan,  dan  total  karoten  dari mikroenkapsulan  ditentukan.

## Pemilihan relawan dan intervensi produk
Tahap  ini  meliputi  penyusunan  kuisioner  dan kriteria  inklusi  ataupun  eklusi  untuk  menentukan status  dan  kondisi  relawan  DM-2.  Kriteria  inklusi yang  digunakan  antara  lain  penderita  DM-2  dengan kadar  glukosa  darah  puasa  kapiler  >110  mg/dL (ADA,  2010),  usia  relawan  25-70  tahun,  tidak menderita  gangren  dan  penyakit  kronis  (berdasar- kan  hasil  pemeriksaan),  tidak  sedang  hamil,  ber- sedia  mengonsumsi  produk  selama  masa  intervensi (28  hari),  bersedia  ikut  serta  dalam  penelitian dengan  menandatangani  lembar informed  consent . Kriteria  eklusi  adalah  bukan  penderita  DM-2,  usia diluar  batas  yang  ditetapkan,  mengalami  gangren dan  penyakit  kronis,  sedang  hamil,  tidak  bersedia mengonsumsi  produk,  dan  tidak  bersedia  ikut penelitian  dengan  tidak  menanda  tangani informed consent .  Selanjutnya  pengurusan ethical  clearance hingga  didapatkan  persetujuan  dengan  No:  576/III/ LPPM-PM.10.05/07/2014  dari  Universitas  Atmajaya Jakarta  Setelah  memperoleh  persetujuan ethical clearance ,  maka  survei  relawan  dapat  dilaksanakan. Penentuan jumlah relawan minimal dilakukan dengan  menggunakan minimum  sample  size  for estimating  difference  mean  between  groups (Lame- show et  al., 1997).  Relawan  yang  diperoleh  pada tahap  awal  seleksi  berdasarkan  data  pasien  DM-2 dari  Klinik  dr.  Katili  Darmaga,  Bogor  sebanyak  34 orang  dibagi  dalam  2  kelompok,  yaitu  kelompok perlakuan  dan  kelompok  kontrol.  Semua  relawan yang  terpilih  mendapatkan  sosialisasi  pengetahuan mengenai program, produk, informasi terkait diabetes,  pola  makan  hidup  sehat.  Relawan  diminta untuk  menandatangani Informed  Consent serta dilakukan  pengecekan  kadar  glukosa  darah  awal, penimbangan  berat  badan,  pengukuran  tekanan darah,  dan  pengambilan  darah.  Intervensi  relawan dilaksanakan  selama  28  hari.  Selama  proses intervensi  berlangsung  total  jumlah  relawan  yang tersisa  adalah  26  orang,  15  orang  pada  kelompok perlakuan  dan  11  orang  pada  kelompok  kontrol. Kelompok  perlakuan  diintervensi  dengan  240  mL minuman  SKH  yang  mengandung  0,4  g  mikro- enkapsulan  MSMn,  sedangkan  grup  kontrol  tidak mendapatkan  produk  intervensi.  Relawan  tetap menggunakan  obat-obatan  yang  sedang  dijalani  dan juga dilakukan food recall untuk  mengetahui konsumsi  makanan  relawan  selama  masa  intervensi produk  berlangsung  (28  hari).  Produk  segar  diantar setiap  hari  ke  rumah  relawan  sambil  memastikan relawan  mengonsumsinya.

## Analisis  karotenoid
Total  karotenoid  dihitung  dengan  menggunakan metode  PORIM  (2005), sebanyak  0,1  g  mikro- enkapsulan  MSMn  dilarutkan  dalam  heksana  dan volume  akhir  dibuat  25  mL  menggunakan  labu  takar hingga  tanda  tera,  lalu  dihomogenkan.  Absorbansi
sampel  diukur  menggunakan  spektrofotometer  UV- Vis  (Spectrophotometer  U-2900  Hitachi,  Japan) pada  panjang  gelombang  446  nm.  Pengenceran dilakukan  apabila  absorbansi  yang  diperoleh  nilai- nya  lebih  dari  0-700  dan  digunakan  metanol  sebagai blanko.

## Uji kelarutan dalam air (AOAC, 2005)
Kelarutan  MSMn  ditentukan  dengan  meng- gunakan  metode  AOAC  (2005),  kelarutan  diketahui dengan  membandingkan  berat  kertas  saring  akhir dengan  berat  kertas  saring  awal  dan  berat  sampel. Sebanyak  1  g  mikroenkapsulan  MSMn  (a)  dilarutkan dalam  20  mL  akuades  kemudian  disaring  dengan kertas  saring  Whatman  No.  42.  Sebelum  digunakan, kertas  saring  dikeringkan  dalam  oven  (Memmert, Jerman)  pada  suhu  105°C  selama  30  menit  dan ditimbang  (b).  Setelah  penyaringan,  kertas  saring dikeringkan  kembali  dalam  oven  selama  1  jam  pada suhu  105°C.  Setelah  itu,  kertas  saring  didinginkan  di dalam  desikator  kemudian  ditimbang  sampai  ter- capai  bobot  tetap (c).
e arutan da a  a r ( % ) = ( 1 c  b 100 % a 100 a ) 100%

## Analisis  kadar glukosa darah puasa (GDP)
Kadar  glukosa  darah  ditentukan  menggunakan alat  tes  uji  glukosa  darah  ( One  Touch ,  USA).  Darah diambil  dari  jari  setelah  dibersihkan  dengan  alkohol, lalu  dipijat  atau  diurut  perlahan-lahan,  kemudian bagian  ujung  jari  ditusuk  dengan  jarum  ( lancet ). Tetesan  darah  ditempelkan  pada glucometer  strip ( One  Touch ,  USA).  Kadar  glukosa  darah  terukur pada  alat  setelah  5  detik,  dinyatakan  dalam  mg/dL. Pengukuran  dilakukan  setiap  minggu  dan  pada tahap  awal  seleksi relawan.

## Analisis  enzim siklooksigenase  (COX-2)
Enzim siklooksigenase dianalisis menurut metode  Zakaria et  al. (2014),  sebanyak  100  µL plasma  yang  telah  diencerkan  dengan carbonate- bicarbonate  buffer (Sigma  Aldrich,  Jerman)  dan reagent  COX-2  (Genetex,  USA)  yang  telah  diencer- kan  sebelumnya  pada  proporsi  1:700  lalu  dimasuk- kan  ke  dalam  lempeng  mikro  96  sumur  (Nunc maxisorp  F96)  kemudian  diinkubasi  pada  suhu  4°C selama  24  jam  untuk  melepaskan  enzim  siklo- oksigenase  ini  dari  ikatannya  dalam  membran  inti. Cairan  dalam  lempeng  mikro  kemudian  dibuang  dan lempeng  mikro  96  sumurnya  dicuci  dengan  larutan PBST (Sigma  Aldrich,  Jerman),  yaitu  larutan Polybutadiene-styrene  (PBS)  mengandung  0,05% tween  20,  sebanyak  250  µL/sumur,  dibiarkan  1 menit  dan  larutan  pencuci  dibuang.  Pencucian dilakukan  sebanyak  3  kali.  Selanjutnya  ditambahkan 100  µL  sari  skim  5%  pada  setiap  sumur  dan
diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  1  jam.  Cairan dalam  lempeng  mikro  kemudian  dibuang  dan  dicuci dengan  PBST  sebanyak  3  kali.  Setelah  itu, ke dalam setiap  sumur  lempeng  mikro  tambahkan  100  µL antibodi  primer  (antibodi  monoklonal  anti  COX-2 1:500.000)  lalu  diinkubasi  kembali  pada  suhu  37°C selama  1  jam.  Cairan  dalam  lempeng  mikro  kemu- dian  dibuang  dan  dicuci  dengan  PBST  sebanyak  3 kali.  Sebanyak  100  µL  (1:6.000)  antibodi  sekunder [HRP  anti  kelinci  terkonjugasi  antibodi  poliklonal tikus  (Genetex,  USA)]  kemudian  ditambahkan  dan diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama  1  jam.  Cairan dalam  lempeng  mikro  kemudian  dibuang  dan  dicuci dengan  PBST  sebanyak  3  kali.  Kemudian  ditambah- kan  50  µL  substrat  Tetra  Methyl  Benzidine  (TMB) (Sigma  Aldrich,  Jerman)  yang  dilakukan  di  dalam ruang  gelap  dan  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama 15  menit.  Selanjutnya,  ditambahkan  50  µL  H 2 SO 4 0,1  N  (Merck,  Jerman)  sebagai  larutan  stop.  Waktu inkubasi  dimulai  setelah  penambahan  setiap  larutan pada  sumur  terakhir.  Intensitas  warna  yang  ter- bentuk  dapat  dibaca  dengan benchmark   microplate reader (Bio  rad,  US)  pada  panjang  gelombang  450 nm.

## Analisis  kadar malonaldehida
Kadar  malonaldehida  diukur  dengan  meng- gunakan  metode  modifikasi  dari  Singh et  al. (2002), larutan  induk  50  nmol/mL tetraetoxy  propane (Sigma Aldrich,  Jerman)  dibuat  menjadi  larutan  kerja dengan  deret  konsentrasi  sebagai  berikut:  0,0;  2,0; 4,0;  6,0;  8,0;  10,0;  12,0;  14,0;  16,0;  18,0;  dan  20,0 n o / L.  Sebanya   375  μL   arutan  standar  atau plasma  darah  pada  masing-masing  tabung  mikro sentrifus  ditambah  dengan  1,5  mL  larutan  HCl  0,25 N  (Merck,  Jerman)  yang  mengandung  15%  trichloro- acetic  acid  (Merck,  Jerman),  0,38%  thiobarbituric acid  (Sigma  Aldrich,  Jerman),  dan  0,5%  butylated hydroxytoluene (Sigma Aldrich, Jerman) dan dikocok.  Campuran  dipanaskan  dalam  penangas  air (Memmert,  Jerman)  pada  suhu  80°C  selama  1  jam. Setelah dingin, campuran disentrifus pada kecepatan  3.500  rpm  selama  10  menit  pada  suhu 4°C.  Supernatan  jernih  diambil  dan  absorbansi sampel  diukur  menggunakan benchmark   mik roplate reader (Bio  rad,  US)  pada  panjang  gelombang  540 nm.  Data  absorbansi  diplotkan  ke  kurva  standar TEP  (Sigma  Aldrich,  Singapura)  untuk  menghitung kadar  MDA plasma.

## Analisis  data
Semua  data  hasil  pengujian  yang  didapatkan dikumpulkan dan  diolah  dengan  menggunakan analisis  statistik  berupa  aplikasi  perangkat  lunak SPSS  15.0.  Analisis  data  yang  dikerjakan  berupa  uji t-student independen  dan  dependent  yang  sebelum- nya  dilakukan  uji  normalitas  persebaran  data,  bila persebaran  data  tidak  normal  dilakukan  pengujian
secara  non  parametrik  dengan  uji  Mann  Whitney (α=0,05).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil  analisis mikroenkapsulan  MSMn dan SKH
Sebelum  dilakukan  intervensi,  mikroenkapsulan MSMn  dianalisis  terlebih  dahulu.  Mikroenkapsulan MSMn  memiliki  nilai  kadar  air  1,77±0,15%.  Nilai  ini lebih rendah jika dibandingkan dengan hasil penelitian  yang  dilaporkan  oleh  Umesha et  al. (2013)  dengan  menggunakan  teknik spray  drying, yaitu  sebesar  2,1-3,2%.  Ahn et  al. (2008)  meneliti mikroenkapsulasi campuran ekstrak  jeruk  dan rosemary menggunakan  metode spray  drying juga melaporkan  kadar  air  lebih  tinggi,  yaitu  3,61±0,02%. Jika  dibandingkan  kadar  air  untuk  syarat  mutu produk  kering  seperti  sari  bubuk  (BSN,  1999)  dan kopi  instan  (BSN,  1992)  pada  nilai  4,0%,  maka  nilai yang  didapatkan  tersebut  telah  memenuhi  syarat mutu  produk  bubuk  kering.  Selain  kadar  air,  analisis nilai  kelarutan  juga  dilakukan  dan  diperoleh  nilai 65,39±2,71%. Analisis total karoten penting dilakukan  pada  mikroenkapsulan  MSMn.  Nilai  yang didapatkan  dari  analisis  total  karoten  tersebut adalah  295,24±7,40  ppm.  Nilai  total  karoten  yang didapatkan  ini  lebih  tinggi  bila  dibandingkan  dengan hasil  yang  dilaporkan  oleh  Rahman  (2015),  yaitu berkisar  50,71-116,34  ppm.  Wulandari et  al. (2015) juga  melaporkan  bahwa  pada  pembuatan  mikro- enkapsulan  minyak  sawit  menggunakan  metode  pe- ngeringan  lapis  tipis  dengan  bahan  penyalut  berupa maltodekstrin, carboxy  methyl  cellulose (CMC)  dan gelatin  diperoleh  total karoten  sebesar  200,16  ppm.
Analisis mikroenkapsulan MSMn  dilakukan untuk  mengetahui  profil  mikroenkapsulan  yang  di- hasilkan.  Sebelum  intervensi  SKH  terhadap  relawan, analisis  proksimat  SKH  dilakukan  untuk  mengetahui komposisinya  dan  diperoleh  data  bahwa  kadar proteinnya  adalah  2,76±0,13%,  kadar  lemak  1,17± 0,06%,  kadar  abu  0,12±0,08%,  kadar  air  94,69± 0,04%,  dan  kadar  karbohidrat by  difference 1,27± 0,10%.  Jika  dibandingkan  dengan  syarat  mutu  sari kedelai  menurut  BSN  (1995),  nilai  kadar  protein yang  ditetapkan  adalah  2,00%  dan  kadar  lemak 1,00%,  maka  SKH  yang  dibuat  telah  melampaui  nilai standar  SNI  sari kedelai.

## Kadar gula darah puasa (GDP)
Intervensi  diet  minuman  SKH  yang  mengan- dung  mikroenkapsulan  MSMn  terhadap  penderita DM-2  berdasarkan  uji t-student berpasangan  pada taraf  nyata  5%  ( P >0,05)  tidak  memberikan  pengaruh secara  signifikan  terhadap  kadar  GDP  (Gambar  1). Sebagai  pembanding  digunakan  data  pada  grup kontrol  mengahsilkan  kecenderungan  yang  sama ( P >0,05)  (Gambar  2).
119 157 280 122 119 126 115 112 288 394 212 98 128 261 103 108 95 110 105 239 143 184 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 R1 R2 R3 R4
R5 R6 R7 R8 R9 R10 R11
Ka d a r G u la D a ra h (m g /d L ) Relawan Sebelum Setelah 292 232 90 222 400 345 121 224 327 314 241 213 173 276 175 188 270 132 175 242 278 299 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 RC1 RC2 RC3
RC4 RC5 RC6 RC7 RC8 RC9 RC10 RC11
Ka d a r G u la D a ra h (m g /d L ) Relawan Sebelum Setelah
Gambar  1.  Nilai  kadar  glukosa  darah  puasa  (mg/dL)  relawan  pada  grup  yang  diitervensi  SKH  mengandung Mikroenkapsulan  MSMn pada  hari  ke-0  dan  hari  ke-28
Gambar  2.    Nilai kadar  glukosa darah  puasa  (mg/dL)  relawan  grup  kontrol pada  hari  ke-0 dan  hari  ke-28
Minuman  SKH  merupakan  minuman  yang memiliki  nilai  indeks  glikemik  rendah,  serat,  selain itu  juga  memiliki  kandungan  senyawa  bioaktif  yang tinggi  seperti  golongan  antioksidan,  antosianin,  dan isoflavon  (Mueller et  al., 2012;  Martino et  al., 2011). Perubahan  kadar  GDP  relawan  yang  diintervensi diduga  karena  minuman  tersebut  memiliki  nilai  IG yang  rendah,  serat  dan  kandungan  lainnya  yang dapat memberikan energi yang cukup  untuk menunda  rasa  lapar.  Produk  dengan  IG  rendah  dan serat  mampu  memberikan  rasa  kenyang  tanpa meningkatkan  glukosa  dalam  darah  dan  dapat memperbaiki  sensitivitas  insulin  (Riccardi et  al., 2008).  Serat  dapat  menurunkan  jumlah  karbohidrat yang  dapat  dicerna,  selain  itu  serat  juga  dapat  me- nurunkan  tingkat  hormon  pencernaan.  Serat  kedelai mengandung  pektin,  galaktomanan,  dan  arabino- galaktan  yang  memiliki  viskositas  yang  tinggi. Komponen  serat  ini  dapat  memperlambat  laju pencernaan  dan  penyerapan  glukosa  (Verschoyle et al., 2007).  Pengaruh  dari  serat  kedelai  menjadi penyebab  penurunan  laju  pencernaan  yang  ber- akibat pada perlambatan penyerapan glukosa dengan  membatasi  laju  difusi  intraluminal  glukosa dengan  penyerapan  permukaan.  Produk  minuman ataupun  makanan  yang  tinggi  serat  dapat  menunda rasa  lapar  sehingga  memberikan  kesempatan  bagi
hormon  insulin  dalam  tubuh  untuk  memproses makanan  yang  tinggi  glukosa  (Bilous  dan  Donelly, 2015).  Selain  serat,  komponen  senyawa  bioaktif juga berperan besar dalam menurunkan  dan mengontrol penyakit  DM-2.  Komponen  bioaktif tersebut  dapat  menurunkan  tingkat  stres  oksidatif dan  mencegah  terjadinya  komplikasi  mikro-  maupun makro-vaskular  pada  penderita  DM-2  (Franz,  2012).
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilaporkan oleh  Sedaghat et  al. (2015),  relawan  DM-2  yang diberi  intervensi  kedelai  sebanyak  30  g  pada  pagi dan  sore  selama  8  minggu  menunjukkan  penurunan GDP  secara  signifikan  dari  165,50±51,00  mg/dL menjadi  148,20±49,00  mg/dL.  Hasil  GDP  ini  ber- beda  dengan  hasil  penelitian  dimana  nilai  GDP relawan  yang  intervensi  produk  tidak  menunjukkan penurunan  signifikan  dari  185,82±95,50  menjadi 143,09±58,93  mg/dL . Hal  ini  terjadi  diduga  relawan yang  diintervensi  dengan  produk  tidak  dikontrol  pola diet  selama  masa  intervensinya.  Pada  relawan kontrol,  Sedaghat et  al. (2015),  melaporkan  terjadi peningkatan  kadar  GDP  secara  signifikan  dari 161,70±41,20  mg/dL  menjadi  167,50±42,30  mg/dL pada  grup  kontrol.  Temuan  ini  juga  berbeda  dari temuan  pada  grup  kontrol  pada  penelitian  ini  yang secara kontras tidak  berbeda  signifikan  (dari 255,00±93,33  mg/dL  menjadi  220,00±55,50  mg/dL).
1,02 0,94 1,00 1,10 0,74
1,01 0,92 0,91 0,90 0,96 0,91 0,85 0,72 0,90 0,77 0,61 0,77 0,76 0,76 0,73 0,63 0,68 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 R1 R2 R3 R4
R5 R6 R7 R8 R9 R10 R11 N il a i O D En zi m C O X -2 Relawan Sebelum Setelah 0,68 0,69 0,83 0,78 0,81 0,81
0,80
0,92
0,76
0,63 0,59 0,72 0,69 0,72 0,71 0,74
0,70 0,81 0,72
0,64 0,58 0,56 0.00 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 RC1 RC2 RC3
RC4 RC5 RC6 RC7 RC8 RC9 RC10 RC11
N il a i O D En zi m C O X -2 Relawan Sebelum Setelah
Lebih  lanjut,  Chang et  al .  (2008)  melakukan intervensi  terhadap  relawan  dengan  memberikan total  konsumsi  kedelai  setara  69  g  yang  dibagi dalam  3  kali  konsumsi  sehari  berupa  suplemen selama  4  minggu  dan  hasilnya  menunjukkan  terjadi penurunan  GDP  relawan  pada  grup  yang  diinter- vensi  secara  signifikan  dari  169,70±23,00  mg/dL menjadi  109,90±7,70  mg/dL.  Begitupun  kadar  GDP relawan  kontrol  menunjukkan  penurunan  secara signifikan  berdasarkan  hasil  temuan  Chang et  al. (2008)  dari  183,00±14,70  mg/dL  menjadi  173,00± 9,80  mg/dL.  Apabila  dibandingkan  hasil  penelitian yang  dilakukan  dengan  hasil  temuan  sedaghat et  al. (2015)  dan  Chang et  al. (2008)  terlihat  bahwa relawan  yang  dintervensi  dengan  produk  selama  28 hari  tidak  mengalami  penurunan  yang  signifikan.  Hal ini  diduga  karena  masa  intervensi  yang  lebih pendek,  pola  diet  yang  tidak  diatur  dan  jumlah pemberian  produk  yang  perlu  untuk  ditingkatkan.

## Kadar enzim COX-2
Hiperglikemia  berkaitan  dengan  peningkatan produksi  senyawa  radikal  bebas.  Jumlah  senyawa radikal bebas tinggi dapat memicu ketidak- seimbangan  dalam  tubuh,  yaitu  yang  dikontrol  oleh sistem  homeostasis.  Inflamasi  adalah  salah  satu kondisi  yang  dapat  menganggu  homeostasis  ter- sebut  (Bilous  dan  Donelly,  2015).  Reaksi  inflamasi
merusak  sel  sehingga  meningkatkan  kadar  enzim COX-2  (Aid  dan  Bosetti,  2011).  Menurut  Bagi et  al. (2006),  COX-2  memegang  peran  penting  dalam biosintesis  prostaglandin  selama  inflamasi  yang menyebabkan  peningkatan  keparahan  penyakit  DM- 2.  Nilai  OD  enzim  COX-2  yang  tinggi  menunjukkan tingkat  seyawa  radikal  bebas  yang  tinggi,  sebagai indikasi terjadi inflamasi dalam tubuh. Hasil penelitian  yang  telah  dilakukan  terhadap  relawan yang  diintervensi  dengan  produk  minuman  SKH mengandung  mikroenkapsulan  MSMn  menunjuk- kan  penurunan  nilai  OD  COX-2  secara  signifikan pada  taraf  5%  (Gambar  3)  berdasarkan  uji t-student berpasangan  ( P <0,05).  Penurunan  nilai  OD  COX-2 grup  yang  diintervensi  produk  mengindikasikan terjadi  penurunan  tingkat  inflamasi.  Hal  ini  diduga karena  kandungan  senyawa  bioaktif  pada  SKH  yang diujikan sepert   β-karoten,  isoflavon  dan  antosianin dapat  meredam  proses  inflamasi  (Messina,  2010; Kim et  al., 2013).  Begitupun  dengan,  nilai  OD  enzim COX-2  pada  grup  kontrol  (Gambar  4)  yang  juga berbeda  signifikan  pada  taraf  5%  ( P <0,05)  ber- dasarkan  uji t-student berpasangan.  Hal  tersebut dapat  disebabkan  karena  adanya  edukasi  pola makan  dan  hidup  sehat  serta  mungkin  waktu intervensi  yang  perlu  diperpanjang  untuk  melihat hasil yang  lebih  nyata.
Gambar  3.  Nilai  OD  enzim  COX-2  relawan  grup  intervensi  SKH  +  Mikroenkapsulan  MSMn  pada  hari  ke-0 dan  hari  ke-28
Gambar  4.    Nilai OD enzim COX-2  relawan  grup  kontrol  pada  hari  ke-0  dan hari  ke-28
6,19 4,87 4,41 4,27 4,82
5,42 4,25
5,59
4,16 4,98
3,99 6,04 5,84 4,56 3,77 5,29 5,75 5,15 5,22
4,10 4.,82
6,50 0 1 2 3 4 5 6 7 8 RC1 RC2 RC3
RC4 RC5 RC6 RC7 RC8 RC9 RC10 RC11
Ko n s e n tra s i M
D A (n m o l/ m l) Relawan Sebelum Setelah

## Kadar malonaldehid (MDA)
Malonaldehid  merupakan  senyawa  yang  sangat toksik  sebagai  produk  yang  terbentuk  dari  oksidasi lipid  dan  dapat  juga  dari  prostaglandin  dan  sintesis tromboksan  (Winarsi,  2007).  Beberapa  penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi MDA tinggi berhubungan  dengan  tingkat  keparahan  DM-2  (Bose dan  Agrawal,  2007).  Relawan  DM-2  cenderung memiliki  senyawa  radikal  bebas  yang  tinggi  dalam tubuh.  Hasil  penelitian  yang  menunjukkan  penuru- nan  nilai  MDA  relawan  mengindikasikan  ada  per- baikan  akibat  intervensi  perlakuan  dengan  penuru- nan  senyawa  radikal.  Berdasarkan  hasil  penelitian yang  telah  dilakukan,  kadar  MDA  relawan  DM-2 yang  diintervensi  dengan  produk  SKH  mengandung mikroenkapsulan  MSMn  (Gambar  5)  mengalami penurunan  signifikan  pada  taraf  nyata  5%  ( P <0,05) berdasarkan  uji t-student berpasangan  dari  5,19± 0,59  nmol/mL  menjadi  4,47±0,71  nmol/mL.  Sebalik - nya,  hasil  pengujian  kadar  MDA  grup  kontrol (Gambar  6)  tidak  berbeda  signifikan  ( P >0,05)  dari 4,81±0,69  nmol/mL  menjadi  5,18±0,83  nmol/mL. Penurunan  kadar  MDA  pada  grup  yang  diintervensi
produk  diduga  atas  kontribusi  senyawa  bioaktif dalam  produk  baik  berupa  enzim,  vitamin,  dan senyawa  lain  yang  dimiliki  oleh  produk  tersebut sa nya  β-karoten,  antosianin,  dan  isoflavon (Winarsi, 2007).
Hasil  penelitian  ini  mendukung  hipotesis  bahwa produk  minuman  SKH  yang  mengandung  mikro- enkapsulan  MSMn  dapat  menurunkan  kadar  MDA. Astuti et  al. (2009)  melaporkan  penurunan  yang signifikan  terhadap  kadar  MDA  tikus  yang  diin- tervensi  selama  2  bulan  dengan  isoflavon  dan tepung  kedelai.  Eszy et  al. (2014)  juga  melaporkan hal  yang  sama  yaitu  penurunan  signifikan  kadar MDA  pada  tikus  yang  diintevensi  dengan  pemberian diet  tinggi  MSMn  dari  2,49±0,50  nmol/mL  menjadi 3,15±0,24  nmol/mL. Chang et  al. (2008),  melapor- kan  perbedaan  yang  tidak  signifikan  pada  kadar MDA  relawan  yang  diintervensi  dengan  suplemen kedelai  26,04±7,60  nmol/mL  dengan  kelompok  kon- trol  27,20±3,60  nmol/mL.  Adanya  perbedaan  hasil intervensi  terhadap  kadar  MDA  dapat  disebabkan oleh  beberapa  faktor  antara  lain  lamanya  masa intervensi  dan  bentuk  bahan  intervensi.
Gambar  5.  Nilai  konsentrasi  MDA  relawan  grup  intervensi  SKH  mengandung  Mikroenkapsulan  MSMn  pada hari  ke-0  dan  hari  ke-28
Gambar  6. Nilai konsentrasi  MDA  relawan  pada  grup  kontrol  pada  hari  ke-0  dan  hari  ke-28
4,82 4,69 6,12
5,29 5,81
4,56 5,57 5,55 6,10 5,31 4,60 3,99 4,78 5,04 4,36 5,37 3,46 4,67 4,32
5,07
4,47
3,46 0 1 2 3 4 5 6 7 R1 R2 R3 R4
R5 R6 R7 R8 R9 R10 R11
Ko n s e n tra s i M D A (n m o l/ m l) Relawan Sebelum Setelah

## KESIMPULAN
Mikroenkapsulan  MSMn  memiliki  kadar  air 1,77±0,15%, kelarutan 65,39±2,71% dan total karoten  295,24±7,40  ppm . Minuman  SKH  mengan- dung  mikroenkapsulan  MSMn  memiliki  peran  fung- sional dalam  mengendalikan  dan  memperbaiki kondisi  penyakit  DM-2  secara  nyata  berdasarkan  uji statistik t-student berpasangan  pada  taraf  nyata  5% berdasarkan  hasil  analisis  parameter  kadar  malonal- dehida,  dan  kadar  siklooksigenase.  Namun  perlu dilakukan  pengujian  dari  masa  intervensi  yang  lebih panjang  untuk  melihat  pengaruh  yang  lebih  nyata pada  produk  yang  sama,  dan  peningkatan  jumlah produk  yang  diintervensi,  serta  diperlukan  pengon- trolan  diet relawan.

## UCAPAN  TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  atas  dana bantuan  pendidikan  BPPDN  dari  DIKTI  tahun  2013 dan  dukungan  dana  penelitian  dari  IPB  dan  PT. Kreasi Inovasi  Prosana  atas  nama  Prof.Dr.Ir. Fransiska  Rungkat  Zakaria,  M.Sc.

## DAFTAR PUSTAKA
[ADA] American Diabetes Association. 2010.
Diagnosis and classification of diabetes mellitus.  Diabetes  Care  33:  S62-S69.  DOI: 10.2337/dc10-S062.
Ahn  JH,  Kim  YP,  Seo  EM,  Choi  YK,  Kim  HS.  2008.
Antioxidant  effect  of  natural  plant  extracts  on the  microencapsulated  high  oleic  sunflower  oil. J  Food  Eng  84:  327-334.  DOI:  10.1016/j.jfood eng.2007.05.029.
Aid  S,  Bosetti  F.  2011.  Targeting  cyclooxygenases -1 and -2 in neuroinflammation: therapeutic implications. Biochimie 93: 46 –51.  DOI: 10.1016/j.biochi.2010.09.009.
Astuti  S,  Muchtadi  D,  Astawan  M,  Purwantara  B,
Wresdiyati T. 2009. Pengaruh pemberian tepung  kedelai  kaya  isoflavon  terhadap  kadar malonaldehid (MDA), aktivitas superoksida dismutase  (SOD)  testis  dan  profil  Cu,  Zn-SOD tubuli  seminiferi  testis  tikus  jantan.  J  Teknol Industri  Pangan  20: 129-134.
[AOAC]  Association  of  Official  Analytical  Chemists.
2005.  Official  method  of  analysis.  16th  Edition. Chapter  12,  2-41.  Microchemical  Methods. Association  of  Official  Analytical  Chemistry International,  Gaithersburg.
Bagi  Z,  Erdei  N,  Papp  Z,  Edes  I,  Koller  A.  2006.  Up- regulation  of  vascular  cyclooxygenase-2  in diabetes  mellitus.  Pharmacological  Reports Pharmacological  Rep  58:  52-56.
Biglari  F,  Alkarkhi  AFM,  Easa  AM.  2008. Antioxidant activity  and  phenolic  content  of  various  date palm  ( Phoenix  dactylifera )  fruits  from  Iran.
Food  Chem  107:  1636-1641.  DOI:  10.1016/ j.foodchem.2007.10.033.
Bilous  R,  Donelly  R.  2015.  Buku  Pegangan Diabetes.  Yudha  EK,  penerjemah;  Bariid  NB, editor.  Jakarta  (ID):  Ed  ke-4.  46-65.  Penerbit Bumi  Mustika.  Terjemahan  dari:  Handbook  of Diabetes.
Boateng  CO,  Lee  KT.  2013.  Sustainable  utilization of  oil  palm  wastes  for  bioactive  phytochemicals for  the  benefit  of  the  oil  palm  and  nutraceutical industries.  Phytochem  Rev  12:  173 –190.  DOI:
10.1007/s11101-013-9270-z.
Bose  KSC,  Agrawal  BK.  2007.  Effect  of  short  term supplementation  of  tomatoes  on  antioxidant enzymes  and  lipid  peroxidation  in  type –II diabetes.  Indian  J  Clin  Biochem  22:  95-98.  DOI: 10.1007/BF02912889.
[BSN]  Badan  Standarisasi  Nasional.  1999.  SNI  Sari Bubuk  (SNI  01-2970-1999).  Jakarta.
[BSN]  Badan  Standarisasi  Nasional.  1995.  SNI  Sari Kedelai  (SNI  01-2983-1995).  Jakarta.
[BSN]  Badan  Standarisasi  Nasional.  1992.  SNI  Kopi Instan  (SNI  01-2983-1995).  Jakarta.
Chang  JH,  Kim  MS,  Kim  TW,  Lee  SS.  2008.  Effects of  soybean  supplementation  on  blood  glucose, plasma  lipid  levels,  and  erythrocyte  antioxidant enzyme  activity  in  type-2  diabetes  mellitus patients.  Nutr  Res  Practice  2:  152-157.  DOI: 10.4162/nrp.2008.2.3.152.
Chen  L,  Bai  G,  Yang  R,  Zang  J,  Zhou  T,  Zhao  G. 2014.  Encapsulation  of  b-carotene  within  ferritin nanocages  greatly  increases  its  water-solubility and  thermal  stability.  Food  Chem  149:  307-312. DOI:  10.1016/j.foodchem.2013.10.115.
Dubey  R,  Shami  TC,  Rao  KUB.  2009.  Microencap- sulation  technologi  and  aplications.  Defence  Sci J 59:  82-95.
Eszy  MS,  Sastri  S,  Masri  M.  2014.  Pengaruh pemberian  diet  tinggi  minyak  sawit  terhadap kadar  malondialdehid  darah  tikus  wistar.  J Kesehatan  Andalas  3: 409-414.
Franz  MJ.  2012.  Medical  Nutrition  Theraphy  for Diabetes  Mellitus  and  Hypoglycemia  of  Nondia- betic  Origin.  In:  Mahan  LK,  Stump  SE,  Editors. rause’s  Food  and  the  Nutr t on  Care  Process 13th Edition. Philadelphia: WB Saunders Company.  675-710.
[IDF]  International  Diabetes  Federation.  2013.  IDF Diabetes  atlas.  Sixth  edition . http://www.idf.org /diabetesatlas  [20 Oktober  2014].
Kim  K,  Lim  KM,  Shin  HJ,  Seo  DB,  Noh  YJ,  Kang  S, Chung  HY,  Shin  S,  Chung  JH,  Bae  ON.  2013.
Inhibitory  effects  of  black  soybean  on  platelet activation mediated through its active component  of  adenosine.  Thrombosis  Res  131: 254-261.  DOI  10.1016/j.thromres.2013.01.002.
Kim  SL,  Berhow  MA,  Kim  JT,  Chi  HY,  Lee  SJ, Chung  IM.  2006.  Evaluation  of  soyasaponin, isoflavone, protein, lipid, and free sugar accumulation  in  developing  soybean  seeds.  J Agr  Food  Chem  54:  10003-10010.  DOI:  10.10 21/jf062275p.
Lameshow  S,  Hosmer  J,  Klar  J,  Lwanga  SK.  1997.
Besar  Sampel  dalam  Penelitian  Kesehatan. Yogyakarta.  46-55.  Gajah  Mada  University Press.
Martino  HSD,  Cardoso  LM,  Ribeiro  SMR,  Dantas MIS,  Piovesan  ND,  Mejia  ED.  2011.  Nutritional and  Bioactive  Compounds  of  Soybean:  Benefits on  Human  Health.  Chapter  21.  465-489. InTech.  Rijeka,  Croatia.  DOI:  10.5772/17575.
Messina  M.  2010.  Soybean  isoflavone  exposure does  not  have  feminizing  effects  on  men:  a critical  examination  of  the  clinical  evidence. Fertil  Steril  93:  2095-2104.  DOI:  10.1016/j. fertnstert.2010.03.002.
Mueller  NT,  Odegaard  AO,  Gross  MD,  Koh  WP,  Yu MC,  Yuan  JM,  Pereira  MA.  2012.  Soy  intake and  risk  of  type-2  diabetes  mellitus  in  Chinese Singaporeans.  Eur  J  Nutr  51:  1033-1040.  DOI: 10.1007/s00394-011-0276-2.
[PORIM]  Palm  Oil  Research  Institute  of  Malaysia. 2005.  Test  Methods  for  Palm  Oil  and  Palm  Oil Products. Kuala  Lumpur,  Malaysia.
Powell  KF,  Holt  SHA,  Miller  JCB.  2002.  International table  of  glycemic  index  and  glycemic  load values.  Am J Clin  Nurt  76: 5-56.
Rahman  H.  2015.  Peningkatan  Skala  Produksi Mikroenkapsulan  Minyak  Sawit  Merah  dan Aplikasinya  pada  Beberapa  Produk  Pangan [Skripsi].  Bogor:  Fakultas  Teknologi  pertanian, Institut Pertanian  Bogor.
Riccardi  G,  Rivellese  AA,  Giacco  R.  2008.  Role  of glycemic  index  and  glycemic  load  in  the healthy state,  in  prediabetes,  and  in  diabetes.  Am J Clin Nurt  87: 269S-274S.
Sedaghat  A,  Shahbazian  H,  Haidari  F,  Payami  SP, Jahanshahi  A,  Latifi  SM.  2015.  The  effect  of  soy nuts  on  glycemic  control,  lipid  profile  and insulin-resistance  in  type-2  diabetic  patients.  J Endocrine  Met  Disease  5:  1-7.  DOI:  10.4236/ ojemd.2015.51001.
Singh  RP,  Murthy,  KNC,  Jayaprakasha.  2002. Studies  on  antioxidant  activity  of  pomegranate ( Punica  granatum )  peel  and  seed  extracts  using in vitro  models. J  Agr Food  Chem  50: 81 –86.
Slavin  M,  Lu  Y,  Kaplan  N,  Yu  L.  2013.  Effects  of baking  on  cyanidin-3-glucoside  content  and antioxidant  properties  of  black  and  yellow  soy- bean  crackers.  Food  Chem  141:  1166-1174. DOI:  10.1016/j.foodchem.2013.04.039.
Umesha  SS,  Monahar  B,  Naidu  KA.  2013.  Micro- encapsulation  of  a ‐ linolenic  acid ‐ rich  garden cress  seed  oil:  physical  characteristics  and oxidative  stability.  Eur  J  Lipid  Sci  Tech  115: 1475-1482.  DOI:  10.1002/ejlt.201300181.
Verschoyle  RD,  Greaves  P,  Cai  H,  Edwards  RE,
Steward  WP,  Gescher  AJ.  2007.  Evaluation  of the  cancer  chemopreventive  efficacy  of  rice bran  in  genetic  mouse  models  of  breast, prostate  and  intestinal  carcinogenesis.  Brit  J Cancer 96: 248-254. DOI: 10.1038/sj.bjc. 6603539.
Winarsi  H.  2007.  Antioksidan  Alami  dan  Radikal Bebas.  Ed  ke-2,  26-50.  Kanisnus  Yogyakarta: Kanisius.
Wulandari  N,  Adawiyah  DR,  Pramuhadi  G.  2014. Drying  process  of  microencapsulated  red  palm oil.  Seafast  Center.  https://seafast.ipb.ac.id/ publication/presentation/fpr-o1.2-nur-wulandari. pdf.  [18 Oktober  2016].
Wulandari  N,  Muchtadi  TR,  Irene  R.  2015.  Palm  oil microencapsulation  by  coacervation,  thin  layer drying,  and  silica  dioxide  absorption  technique. World  J  Eng  Technol  3:  26-30.  DOI:  10.4236/ wjet.2015.33B005.
Zakaria  FR,  Azni  IN,  Syamsir  E,  Amalia KM, Yamani C. 2014. Pengaruh konsumsi minuman beroksigen  terhadap  inflamsi  dan  kapasitas antioksidan  penderita  paru  obstruktif  kronik (PPOK).  J  Teknol  Industri  Pangan  25:  31-38. DOI:  10.6066/jtip.2014.25.1.31.