UJI ANTIOKSIDAN ( E )-1-(4-KLOROFENIL)-3-P-TOLILPROP-2-EN-1-ON DAN ( E )-1-(4-KLOROFENIL)-3-(4-ISOPROPILFENIL)PROP-2-EN-1-ON ANTIOXIDANT TEST (E)-1-(4-CHLOROPHENIL)-3-P-TOLILPROP-2-EN-1-ON AND (E)-1-(4-CHLOROPHENYL)-3-(4-ISOPROPILPHENL)PROP-2 -EN-1-ON
Eti Meirina Brahmana 1* , Dahlia 2 , Rena Lestari 3 , Jismi Mubarrak 4 , Ria Karno 5 , Arief Anthonius Purnama 6
1,2,3,4,5,6 Program Studi Pendidikan Biologi, , Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Pasir Pengaraian, Pasir Pengaraian, Indonesia
*Email: etimeirinabrahmana@upp.ac.id
Diterima: 27 Februari 2022. Disetujui: 25 Maret 2022. Dipublikasikan: 23 April 2022
Abstrak: Penelitian ini bertujuan untuk  menguji aktivitas antioksidan ( E )-1-(4-klorofenil)-3-p-tolilprop-2-en-1-on (C1)  dan  ( E )-1-(4-klorofenil)-3-(4-isopropilfenil)prop-2-en-1-on  (C2).  Penelitian    ini  bermanfaat  sebagai  langkah awal  dalam  pencarian  alternatif  senyawa  antioksidan  dan  antibiotik  baru  dari  senyawa  kalkon.  Pengujian bioaktivitas  antioksidan  dilakukan  dengan  metode  DPPH.  DPPH  merupakan  metode  yang  cepat,  sederhana,  dan tidak  membutuhkan  biaya  tinggi  dalam  menentukan  kemampuan  antioksidan  menggunakan  radikal  bebas  2,2- diphenyl-1-picrylhydrazil (DPPH). Metode ini sering digunakan untuk menguji senyawa yang berperan sebagai free radical scavengers atau donor hidrogen dan mengevaluasi aktivitas antioksidannya, serta mengkuantifikasi jumlah kompleks radikal-antioksidan  yang terbentuk. Bioaktivitas antioksidan  senyawa  kalkon ( E )-1-(4-klorofenil)-3-p- tolilprop-2-en-1-on  memiliki  nilai  IC50  533,9000  ppm  dan  senyawa    kalkon  ( E )-1-(4-klorofenil)-3-(4- isopropilfenil)prop-2-en-1-on  memiliki  nilai  IC50  718,9054  ppm.  Kemampuan  senyawa  kalkon  ( E )-1-(4- klorofenil)-3-p-tolilprop-2-en-1-on dan ( E )-1-(4-klorofenil)-3-(4-isopropilfenil)prop-2-en-1-on tergolong antioksidan lemah.
Kata Kunci: Antioksidan, DPPH, Kalkon
Abstract: This study aimed to test the antioxidant activity of (E)-1-(4-chlorophenyl)-3-p-tolilprop-2-en-1-on (C1) and (E)-1-(4-chlorophenyl)-3- (4-isopropylphenyl)prop-2-en-1-on (C2). This research is useful as a first step in the search  for  alternative  antioxidant  compounds  and  new  antibiotics  from  chalcone  compounds.  The  antioxidant bioactivity test was carried out using the DPPH method. DPPH is a method that is fast, simple, and does not require high  costs  in  determining  antioxidant  capacity  using  the  free  radical  2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil  (DPPH).  This method is often used to test compounds that act as free radical scavengers or hydrogen donors and evaluate their antioxidant  activity,  as  well  as  quantify  the  number  of  antioxidant-radical  complexes  formed.  The  antioxidant bioactivity of chalcone compounds (E)-1-(4-chlorophenyl)-3-p-tolilprop-2-en-1-on has an IC50 value of 533.9000 ppm and chalcone compounds (E)-1-(4-chlorophenyl) -3-(4-isopropylphenyl)prop-2-en-1-on has an IC50 value of 718.9054 ppm. The ability of chalcone compounds (E)-1-(4-chlorophenyl)-3-p-tolylprop-2-en-1-one and (E)-1-(4- chlorophenyl)-3-(4-isopropylphenyl)prop- 2-en-1-on is classified as a weak antioxidant.
Keywords : Antioxidant, DPPH, Chalcone

## PENDAHULUAN
Antioksidan  adalah  senyawa  atau  zat  yang dapat    menghambat,    menunda,    mencegah    atau memperlambat      reaksi    oksidasi    meskipun    dalam kosentrasi    yang    kecil.    Oksidasi    adalah    reaksi kimia    yang    dapat    menghasilkan    radikal    bebas sehingga memicu reaksi berantai (chain reaction) [1]. Radikal bebas merupakan salah satu faktor penyebab kanker  dan  penyakit  degeneratif  lain.  Penyakit kanker    dan    penyakit  degeneratif    lainnya    dapat diredam    apabila    tubuh  memiliki    penangkapan radikal  bebas  [2].
Peranan  antioksidan  sangat  penting    dalam menetralkan    dan    menghancurkan  radikal    bebas yang  dapat  menyebabkan kerusakan  sel  dan  juga merusak    biomolekul,  seperti    DNA,    protein,    dan
lipoprotein   di   dalam  tubuh    yang   akhirnya   dapat memicu    terjadinya  penyakit    degeneratif,    seperti kanker,  jantung, artritis,  katarak,  diabetes  dan  hati [3].
Radikal  bebas  terdiri  dari  Reactive  Oxigen Species (ROS), Radical Nitrogen Species (RNS), dan radikal  lainnya.  ROS  atau  radikal  oksigen seperti O2•-,    OH•,    ROO•,    H 2 O 2 ,    dan    1O 2 .    RNS mencakup  NO•,  -OONO,  dan  -OONO 2 .  Ada  juga radikal    lain    misalnya    radikal    thiil    (RS•)  [4]. Untuk    menghindari    hal  tersebut,    dibutuhkan antioksidan    tambahan    dari  luar    atau    antioksidan eksogen.    Radikal    bebas  dapat    ditangkap menggunakan    penangkapan  radikal    bebas    2,2’- difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH).
Antioksidan    sebagai    donor    proton  terhadap radikal    bebas    DPPH    sehingga    DPPH  akan tereduksi    menjadi    stabil,    dan    warnanya  berubah dari    warna    ungu    menjadi    warna    kuning  yang dapat  diukur  persen  penangkapan  radikal bebasnya pada    panjang    gelombang    517    nm  [5].  Pada Penelitian  ini  sampel  yang  digunakan  adalah senyawa  analog  kalkon  yaitu  senyawa  ( E )-1-(4- klorofenil)-3-p-tolilprop-2-en-1-on  dan  ( E )-1-(4- klorofenil)-3-(4-isopropilfenil) prop-2-en-1-on. Peneliti  tertarik  menggunakan  sampel  tersebut karena  berdasarkan  beberapa  literature  ditemukan bahwa  kalkon  memiliki  sifat  farmakologi  yang bervariasi,  dimana  kalkon  merupakan  salah  satu metabolit  sekunder  yang  sangat  menarik  karena memiliki  beragam  aktivitas  biologis  seperti antimikroba, antijamur, anestesi, antikanker, antimalaria,    antioksidan,    antitumor,    dan    anti- inflamasi [6].
Peneliti  berkeinginan  untuk  melakukan  uji antioksidan terhadap senyawa analog kalkon tersebut dengan  metode  DPPH.  DPPH  merupakan  metode yang cepat, sederhana, dan tidak membutuhkan biaya tinggi  dalam  menentukan  kemampuan  antioksidan menggunakan radikal bebas 2,2-diphenyl-1- picrylhydrazil (DPPH). Metode ini sering digunakan untuk  menguji  senyawa  yang  berperan  sebagai free radical  scavengers atau  donor  hidrogen  dan mengevaluasi aktivitas antioksidannya, serta mengkuantifikasi jumlah kompleks radikal- antioksidan yang terbentuk.
Senyawa kalkon ( E )-1-(4-klorofenil)-3-p- tolilprop-2-en-1-on [7] dan ( E )-1-(4-klorofenil)-3-(4- isopropilfenil)prop-2-en-1-on  [8]  sudah  pernah disintesis oleh peneliti dan diuji toksisitasnya dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT), namun senyawa tersebut sangat sedikit dan perlu di sintesis kembali  untuk  melanjutkan  uji  antioksidannya. Senyawa  kalkon  dapat  disintesis  melalui  kondesasi Claisen-Schmidt dari  suatu  aldehid  dan  keton aromatik dengan katalis asam maupun basa [9]. Katalis  basa  yang  umum  digunakan  adalah NaOH  [6]  dan  KOH  [10].  Sintesis  kalkon  pada penelitian  ini  menggunakan  metode Microwave Assisted  Organic  Synthesis (MAOS)  yaitu  kalkon disintesis  dengan  bantuan  teknologi  radiasi gelombang  mikro. Kelebihan dari metode ini adalah waktu  retensi  yang  singkat,  produk  yang  murni  dan rendemen  yang  tinggi  [11].  Penelitian  ini  juga merupakan langkah awal dalam pencarian antioksidan.

## METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat
Penelitian ini akan dilaksanakan selama 1 tahun yaitu  tahun  2021-2022.  Sintesis  senyawa  di Laboratorium  Biologi  Universitas  Pasir  Pengaraian, perekaman UV, HPLC dan uji antioksidan dilakukan di  Laboratorium  FMIPA  UR,  dan  analisis  produk melalui spektroskopi IR, MS, 1 H-NMR dilakukan di ITB-Bandung.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  adalah  peralatan destilasi, alat penentu titik leleh Fisher Johns melting point apparatus (SMP 11-Stuart ® ), lampu ultraviolet 254/366  nm  (Camag ® ),  timbangan  analitik,  alat Spektrofotometer  UV-Vis  (Genesys  10S ® ),  HPLC (UFLC  Prominance-Shimamdzu ® ,  detector  SPD 20AD),  spektrofotometer  FTIR  (Shimadzu,  IR Prestige-21),  spektrofotometer  MS  Water  LCT Premier  XE,  spektrometer  NMR  (AGILENT  500 MHz),  oven microwave Samsung  ME  109  F, inkubator,  Vortex  ( Stuart  Scientific ),  autoclave, corong Buchner (Desaga),  mikropipet  50-200  µL (Socorex),  serta  alat-alat  gelas  dan  non  gelas  yang lazim digunakan di Laboratorium.
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah  yaitu  4- metibenzaldehid  (Merck),  4-isopropilbenzaldehid (Merck) 4-kloroasetofenon (Merck), natrium hidroksida  (Merck),  kalium  hidroksida  (Merck), asam  klorida  (Merck),  indikator  universal  (Merck), plat KLT GF 254 , n -heksan, etil asetat, metanol, etanol absolut,  aquades, deionized  water ,  ninhidrin,  DPPH
( 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl ).

## Prosedur Kerj a

## Sintesis Senyawa Kalkon
Sebanyak 5 mmol Keton/4-kloroasetofenon (C1 dan  C2)  (Merck)  dan  etanol  absolut  (5  mL)  di masukkan  ke  dalam  erlenmeyer  dan  ditambahkan tetes demi tetes KOH 6 N (2 mL). Campuran tersebut diaduk  selama  5  menit,  lalu  5  mmol  Aldehid  /4- metibenzaldehid  (C1)/4-isopropilbenzaldehid  (C2) (Merck) dimasukkan ke dalam campuran. Campuran diiradiasi dengan menggunakan microwave selama 2- 5 menit, dengan interval waktu 30 detik. Campuran  dibiarkan  selama  20  jam  untuk memaksimalkan  hasil  reaksi  (endapan)  yang diperoleh.  Sebanyak  15  mL  aquades  dingin ditambahkan  ke  dalam  campuran  dan  pH  campuran dinetralkan  dengan  HCl.  Endapan  yang  terbentuk kemudian  disaring  dengan  corong  Buchner,  dicuci dengan n -heksan dingin, dan divakum hingga kering. Tahapan reaksi diamati dengan KLT.
Produk  yang  diperoleh  diuji  kemurniannya dengan  uji  KLT,  titik  leleh,  dan  analisis  HPLC. Produk  murni  yang  diperoleh  kemudian  ditentukan strukturnya  dengan  spektrofotometer  UV,  IR,  MS dan spektroskopi 1 H-NMR.

## Uji Antioksidan
Tiga  buah  tabung  reaksi  masing-masing ditambahkan  dengan  larutan  DPPH  dan  air deionisasi,  larutan  rutin  25  µg/mL,  dan  larutan sampel  5  mg/mL  sebanyak  1,0  mL,  kemudian ditambahkan  dengan  metanol  p.a  sebanyak  3  mL. Laruran tersebut kemudian divortex  selama 30 detik dan  didiamkan  selama  30  menit.  Setelah  30  menit, warna  larutan  diamati  (pengulangan  dilakukan sebanyak 3 kali).
Tiga  buah  labu  ukur  5  mL  masing-masing ditambahkan dengan larutan DPPH dan larutan rutin
5,  15,  dan  25  µg/mL  sebanyak  1,0  mL  kemudian ditambah  dengan  metanol  p.a  hingga  tanda  batas. Larutan  divortex  selama  30  detik  dan  dibaca serapannya  dengan  menggunakan  spektrofotometer visibel pada panjang gelombang 517 nm tiap 5 menit selama  1  jam  (pengulangan  dilakukan  sebanyak  3 kali).
Tiga  buah  labu  ukur  10  mL  masing-masing ditambah  larutan  DPPH  sebanyak  0,5;  1,0;  dan  1,5 mL,  kemudian  ditambah  dengan  metanol  p.a  hingga tanda  batas,  sehingga  diperoleh  konsentrasi  DPPH sebesar  0,020;  0,040;  dan  0,060  mM.  Larutan dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi  dan  divortex selama 30 detik, lalu didiamkan selama OT. Larutan diukur serapannya pada panjang gelombang 400-600 nm.
Larutan DPPH sebnayak 2,0 mL dimasukkan ke dalam  labu  ukur  10  mL  dan  ditambah  dengan metanol  p.a  hingga  tanda  batas.  Setelah  OT,  larutan dibaca serapannya dengan menggunakan spektrofotometer  visibel  pada  panjang  gelombang maksimum (pengulangan dilakukan sebanyak 3 kali). Larutan  ini  digunakan  sebagai  larutan  kontrol  untuk menguji larutan pembanding dan uji.
Larutan DPPH sebanyak 2,0 mL dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL dan ditambah dengan 2  mL larutan  pembanding  dan  larutan  uji  pada  berbagai seri  konsentrasi  yang  telah  dibuat,  kemudian ditambah  dengan  metanol  p.a  hingga  tanda  batas. Larutan  di  vortex  selama  30  detik,  lalu  didiamkan selama  OT.  Setelah  OT,  larutan  dibaca  serapannya dengan  menggunakan  spektrofotometer  visibel  pada panjang gelombang maksimum  (pengulangan dilakukan sebanyak 3 kali).
Berdasarkan hasil diatas dihitung nilai % IC dan IC 50 .  Aktivitas  penangkapan  radikal  DPPH  (% IC ) dihitung berdasarkan rumus:
Absorbansi kontrol- Absorbansi uji x 100% Absorbansi larutan kontrol
Data  aktivitas  tersebut  dianalisis  dan  dihitung nilai IC 50 menggunakan  persamaan  regresi  linear dengan  sumbu  x  adalah  konsentrasi  larutan  uji maupun  pembanding,  sedangkan  sumbu  y  adalah % IC (Thangaraj, 2016).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Sintesis Senyawa Kalkon
Hasil  sintesis  senyawa  kalkon  ( E )-1-(4 klorofenil)-3-p-tolilprop-2-en-1-on  diperoleh  berupa kristal  berwarna  kuning  dengan  berat  1,1204  g (87,51%).  Jarak  leleh:  156-157 0 C.  Hasil  pengujian menggunakan  KLT  didapat  harga  Rf:  0,78  dengan sistem eluen n -heksana: etil asetat (9:1). Pemeriksaan kromatrogram HPLC menunjukan dua puncak t R : 15 dan  16  menit  pada  panjang  gelombang  211  nm  dan menunjukkan satu puncak t R : 16 menit pada panjang gelombang 320 nm.
Pemeriksaan spekrum UV-Vis diperoleh λ maks pada panjang gelombang 327 nm dengan absorbansi 0,649. Pada pemeriksaan spektrum IR (KBr) terdapat vibrasi ikatan pada bilangan gelombang 812 cm -1 (C- Cl), 1512  cm -1 (C=C dari benzena), 1598 cm -1 (C=O dari  keton),  2916  cm -1 (-CH 3 ),  3028  cm -1 (C-H  dari benzena)  dan  3487  cm -1 ( Overtone dari  C=O).  Dari pemeriksaan  spektrum 1 H-NMR  (CDCl 3 ,  500  MHz) terdapat  7  sinyal  yang  setara  dengan  13  atom  H. Sinyal-sinyal tersebut pada geser kimia δ H 8,18 ppm (d: 8,5; 1H); 7,89  ppm (d:  16; 1H);  7,80 ppm (d: 8; 1H);  7,74  ppm  (d:  16;  1H);  7,64  ppm  (d:  8,5;  1H); 7,29  ppm  (d:  8;  1H);  2,36  ppm  (s;  3H).  Spektrum massa  (HR-MS) m/z :  256,0648  dengan  formula C 16 H 13 OCl. Hasil  sintesis  senyawa  kalkon  ( E )-1-(4 klorofenil)-3-(4-isopropilfenil)prop-2-en-1-on diperoleh  berupa  kristal  berwarna  kuning  dengan berat 0,9216 g (64,90%). Jarak leleh: 77-78 0 C. Hasil pengujian menggunakan KLT didapat harga Rf: 0,88 dengan  sistem  eluen n -heksana  :  etil  asetat  (9:1). Pemeriksaan  kromatrogram  HPLC  menunjukan  satu puncak  t R :  14  menit  pada  panjang  gelombang  211 dan 320 nm. Pemeriksaan spekrum UV-Vis diperoleh λ  maks  pada  panjang  gelombang  327  nm  dengan absorbansi 0,908.
Pemeriksaan spektrum IR (KBr) terdapat vibrasi ikatan  pada  bilangan  gelombang  817  cm -1 (C-Cl),
1512 cm -1 (C=C dari benzena), 1604 cm -1 (C=O dari keton),  2866  cm -1 (asimetri  dari  -CH 3 ),  2962  cm -1 (simetri  dari  -CH 3 ),  dan  3448  cm -1 ( Overtone dari C=O). Dari pemeriksaan spektrum 1 H-NMR (CDCl 3 , 500  MHz)  terdapat  8  sinyal  yang  setara  dengan  17 atom  H.  sinyal-sinyal  tersebut  pada  geser  kimia  δ H 7,96  ppm  (d:  8;  1H);  7,81  ppm  (d:  15,5;  1H);  7,58 ppm (d: 8; 1H); 7,48 ppm (d: 8,25; 1H); 7,44 ppm (d: 15,5; 1H); 7,29 ppm (d: 8; 1H); 2,95 ppm (sep; 1H); 1,27 ppm (d; 7; 6H). Spektrum massa (HR-MS) m/z :
284,0970 dengan formula C 18 H 17 OCl .

## Bioaktivitas Antioksidan
Antioksidan  merupakan  senyawa  yang  dapat mencegah bahaya yang dapat ditimbulkan dari reaksi oksidasi.  Senyawa  ini  dapat  berfungsi  untuk menghambat  kemungkinan  terjadinya  penyakit degeneratif  dan  penuaan.  Dalam  keadaan  normal radikal  bebas  yang  diproduksi  didalam  tubuh  akan dinetralisir oleh antioksidan yang ada didalam tubuh. Bila  kadar  radikal  bebas  terlalu  tinggi  maka kemampuan dari antioksidan endogen tidak memadai untuk  menetralisir  radikal  bebas  sehingga  terjadi keadaan  yang  tidak  seimbang  antara  radikal  bebas dengan  antioksidan  yang  menyebabkan  terjadinya peningkatan  kebocoran  elektron  dari  mitochondria yang akan menjadi ROS (Reactive Oxygen Species) yang disebut dengan stres oksidatif [13].
Mekanisme  yang  paling  umum  terjadi  dimana radikal bebas dapat melawan pertahanan antioksidan, radikal  bebas  tersebut  akan  menyerang  komponen biokimia  di  dalam  tubuh  dan  membentuk hydroperoksida. Dalam bentuk patofisiologis
tersebut,  sel  akan  mulai  memproduksi  radikal  bebas dalam  jumlah  banyak,  dikarenakan  stres  eksogen (unsur  kimia,  fisik  dan  biologi)  dan  atau  aktivitas metaboliknya  (khususnya  pada  membran  plasma, mitokondria,  retikulum  endoplasma,  dan  sitosol), sitosol  diantaranya  terdapat  radikal  hidroksil  (HOH) yang  berbahaya,  merupakan  salah  satu  reaktive oxygen  species  (ROS)  yang  paling  berbahaya. Radikal  hidroksil  dapat  menyarang  setiap  macam molekul  (termasuk  karbohidrat,  lemak,  asam  amino, peptide,  protein,  nukleotid,  asam  nukleat  dan  lain- lain).  Akibat  dari  proses  ini,  setiap  molekul  akan kehilangan  satu  elektron  dan  kemudian  menjadi radikal [14].
Radikal  bebas  adalah  suatu  molekul  atau  atom yang  mempunyai  satu  atau  lebih  elektron  tidak berpasangan.  Radikal  dapat  berasal  dari  atom hydrogen,  molekul  oksigen,  atau  ion  logam  transisi. Senyawa  radikal  bebas  sangat  reaktif  dan  berusaha mencari  pasangan  elektron  agar  menjadi  stabil. Radikal dapat terbentuk secara endogen dan eksogen. Radikal  endogen  terbentuk  dalam  tubuh  melalui proses  metabolisme  normal  di  dalam  tubuh. Sedangkan  radikal  eksogen  berasal  dari  bahan pencemar  yang  masuk  ke  dalam  tubuh  melalui pernafasan, pencernaan, dan penyerapan kulit [15].
(a) (b)
Gambar 1. Kurva regresi linear senyawa kalkon ( E )-1-(4 klorofenil)-3-p-tolilprop-2-en-1-on (a) dan ( E )-1-(4 klorofenil)-3-(4-isopropilfenil)prop-2-en-1-on (b)
Metode  absorbansi  radikal  DPPH  merupakan metode  yang  sederhana,  mudah,  dan  menggunakan sampel  dalam  jumlah  yang  sedikit  dengan  waktu yang  singkat  [16].  Pengukuran  aktivitas  antioksidan sampel  dilakukan  pada  panjang  gelombang  517  nm yang  merupakan  panjang  gelombang  maksimum DPPH,  dengan  konsentrasi  DPPH  50  μM.  Adanya aktivitas  antioksidan  dari  sampel  mengakibatkan perubahan  warna  pada  larutan  DPPH  dalam  etanol yang  semula  berwarna  violet  pekat  menjadi  kuning pucat [17].
Metode DPPH merupakan pengukuran penangkal  radikal  bebas  sintetik  dalam  pelarut organik  pada  suhu  kamar  oleh  suatu  senyawa  yang mempunyai aktivitas antioksidan. Proses penangkalan  radikal  bebas  ini  melalui  mekanisme
pengambilan atom hidrogen dari senyawa antioksidan  oleh  radikal  bebas  sehingga  radikal bebas  menangkap  satu  elektron  dari  antioksidan. Metode  ini  juga  merupakan  pengujian  aktivitas antioksidan  yang  paling  cocok  bagi  pelarut  etanol dan metanol [18].
Berdasarkan  persamaan  regresi  linear  pada gambar  1  (a  dan  b),  hubungan  antara  konsentrasi senyawa  kalkon  ( E )-1-(4  klorofenil)-3-p-tolilprop-2- en-1-on
dan ( E )-1-(4 klorofenil)-3-(4-
isopropilfenil)prop-2-en-1-on  terhadap  persentase inhibissi,  diperoleh  nilai  IC50 senyawa    kalkon ( E )- 1-(4-klorofenil)-3-p-tolilprop-2-en-1-on  (a)  sebesar 533,9000  ppm  dan  senyawa    kalkon  ( E )-1-(4- klorofenil)-3-(4-isopropilfenil)  prop-2-en-1-on  (b) sebesar    718,9054  ppm.  Kemampuan  senyawa
kalkon  ( E )-1-(4-klorofenil)-3-p-tolilprop-2-en-1-on dan  ( E )-1-(4-klorofenil)-3-(4-isopropilfenil)  prop-2- en-1-on tergolong antioksidan [12].

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  analisis  dan perhitungan maka produk hasil penelitian merupakan senyawa  target  dalam  penelitian,  yaitu  senyawa kalkon  ( E )-1-(4-klorofenil)-3-p-tolilprop-2-en-1-on dan  ( E )-1-(4-klorofenil)-3-(4-isopropilfenil)prop-2- en-1-on  berdasarkan  hasil  analisis  spektrofotometer UV, IR, MS dan spektroskopi 1 H-NMR. Bioaktivitas antioksidan  senyawa  kalkon ( E )-1- (4-klorofenil)-3-p-tolilprop-2-en-1-on  memiliki  nilai IC50  533,9000  ppm  dan  senyawa    kalkon  ( E )-1-(4- klorofenil)-3-(4-isopropilfenil)prop-2-en-1-on memiliki nilai IC50 718,9054 ppm.
Kemampuan senyawa kalkon ( E )-1-(4- klorofenil)-3-p-tolilprop-2  en-1-on  dan  ( E )-1-(4- klorofenil)-3-(4-isopropilfenil) prop-2-en-1-on tergolong antioksidan lemah (12).

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Salamah,  N.,  Erlinda,  W.  (2015).  Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Daun Kelengkeng ( Euphoria  longan ( L )  Steud.)  dengan  Metode Penangkapan Radikal 2,2’-Difenil-1- Pikrilhidrazil. Pharmaciana, 5 (1), 25-34.
[2] Ridlo,  A,  Rini,  P.,  Koesoemadji.,  Endang  S., Nirwani, S. (2017). Aktivitas Antioksidan Daun Mangrove Rhizopora  mucronata . Buletin Oseanografi Marina , 6 (2), 110-116.
[3] Werdhasari,  Asri.  (2014).  Peran  Antioksidan Bagi  Kesehatan. Jurnal  Biotek  Medisiana Indonesia , 3(2), 59-68.
[4] Uppu, R.  M.,  Murthy,  S. N., Pryor, W. A.  dan Parinandi,  N.  L.  (2010). Free  Radicals  and Antioxidant  Protocols .  Humana  Press.  New York, 51-55.
[5] Syukriah,  N.  A.  R.,  Liza,  M.  S.,  Harisun,  Y.
Dan  Fadzillah,  A.  A.  M.  (2014).  Effect  of Solvent  Extraction  on  Antioxidant  and Antibacterial Activities From Quercus infectoria (Manjakani). International  Food Research Journal, 21(3), 1067-1073.
[6] Choudhary,  A.  N.  dan  Juyal,  V.  (2011). Synthesis  of  chalcone  and  their  derivates  as antimicrobial  agents. International  journal  of pharmacy  and  pharmaceutical  Sciences, 3(3), 125-128.
[7] Brahmana, E. M. (2016). Sintesis Senyawa ( E )- 1-(4-klorofenil)-3-p-tolilprop-2-en-1-on dan Uji Toksisitasnya. Proceeding  Seminar  Nasional Pendidikan dan Saintek 2016 .
[8] 8.Brahmana,  E.  M.  (2016).  Sintesis  Senyawa
Kalkon ( E )-1-(4-klorofenil)-3-(4- isopropilfenil)prop-2-en-1-on
dan Uji
Toksisitasnya. Proceeding  Seminar  Kimia  dan Pendidikan Kimia 2016 .
[9] Jayapal,  M. R., Prasad, K.  S. dan  Sreedhar, N. Y.  (2010).  Synthesis  and  Characterization  of 2,6-Dihydroxy  Substituted  Chalcones  Using PEG-400  as  a  Recyclable  Solvent. Journal  of Pharmaceutical  Science  and  Research, 2(8), 450-458.
[10] Tiwari,  B.,  Pratapwar,  A.  S.,  Tapas,  A.  R., Butle, S. R. dan Vatkar, B. S. (2010). Synthesis and  Antimicrobial  Activity  of  Some  Chalcone Derivatives . International Journal of ChemTech Research, 1(2), 499-503.
[11] Vaismaa,  M.  (2009).  Development  of  benign synthesis  of  some  terminal  a-hydroxy  ketones and  aldehiydes. Disertasi .  Faculty  of  Science University of Oulu.
[12] Jacoeb,    A.    M.,    S.    Purwaningsih,    Rinto. (2011).  Anatomi,    Komponen    Bioaktif    dan Aktivitas  Antioksidan    Daun    Mangrove    Api- api  (Avicennia  marina).  Jurnal  Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia, 14(2), 143-152.
[13] Barhe,  T.  A.  dan  Tchouya,  G.R.  (2014). Comparative Study  of the Antioxidant  Activity of  the  Total  Polyphenols  Extracted  from Hibiscus  Sabdariffa L .,  Glycine  max L Merr. , Yellow  Tea  and  Red  Wine  through  Reaction with  DPPH  Free  Radical. Arabian  Journal  of Chemistry, 9, 1-8.
[14] Demirel,  Z.,  Yilmaz-Koz,  F.,  Karabay- Yavasoglu,  U.,  Ozdemir,  G.,  dan  Sukatar,  A. (2009). Antimicrobial and Antioxidant Activity of Brown Algae from the Aegean Sea, J. Serb. Chem. Soc, 74 (6), 619-628.
[15] Nadhiya,  K.  Dan  Vijayalakshmi,  K.  (2014). Evaluation of Total Phenol, Flavonoid Contents And Invitro Antioxidant Activity Of Benincasa Hispida  Frui  T  Extracts. International  Journal of  Pharmaceutical,  Chemical  And  Biological Sciences, 4(2), 332-338.
[16] Thangaraj,  P.  (2016). Pharmacological  Assays of  Plant-Based  Natural  Product .  Springer International Publishing. Switzerland, 58-61.
[17] Amin,  S.  (2015).  Uji  Antioksidan  Umbi Bawang  Lanang  (Allium  sativum)  Terhadap
Radikal Bebas DPPH (1,1-Difenil-2-
Pikrihidrazil). Jurnal  Kesehatan  Bakti  Tunas Husada , 13 (1).
[18] Bahriul. P, Nurdin.  R,  Anang. W.M.D. (2014).
Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun  Salam  (Syzygium  polyanthum)  Dengan Menggunakan 1,1-Difenil-2-
Pikrilhidrazil, J. Akad. Kim, 3 (3), 143-149.