## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20

## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Kangkung Air
Ipomoea aquatica Forsk Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus
Vivit A. Baura 1 *, Douglas N. Pareta 1 , Selvana S. Tulandi 2 , Sonny D. Untu 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
2 Program Studi Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
*Penulis Korespondensi  : vivitandrinibaura@gmail.com Diterima tanggal : 2 Februrai 2021; Disetujui tanggal : 25 April  2021

## ABSTRAK
Daun kangkung air Ipomoea aquatica , merupakan salah satu jenis tumbuhan yang dikonsumsi oleh masyarakat Indonesia sebagai sayuran. Selain itu kangkung air juga digunakan sebagai obat tradisional. Daun kangkung air Ipomoea aquatica Forsk mengandung senyawa antibakteri seperti Flavanoid, Tanin, Triterpenoid, Alkaloid dan Saponin.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  kangkung  air terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus .  Sampel  diekstrak  menggunakan  etanol,  ekstrak  yang diperoleh  dibuat  konsentrasi 2µg/10µL,  4µg/10µL,  dan  6µg/10µL  untuk  diuji  aktivitas antibakteri Staphylococcus aureus .
Hasil penelitian penelitian menunjukkan bahwa ekstrak Kangkung Air (Ipomoea aquatica Forsk) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi 20%, 40%, dan 60% dengan rata-rata diameter zona hambat 12.66, 13.33, dan 16.33 mm dengan kategori daya hambat kuat.
Kata Kunci : Ipomoea aquatic, Staphylococcus aureus , antibakteri .

## ABSTRACT
The leaves of Ipomoea aquatica are a type of plant that is consumed by Indonesians as a vegetable. In addition, water spinach is also used as traditional medicine. Ipomoea aquatica Forsk leaves contain  antibacterial  compounds  such  as  flavonoids,  tannins,  triterpenoids,  alkaloids  and saponins.
This study aims to determine the antibacterial activity of Ipomoea aquatica leaves extract against Staphylococcus aureus bacteria. The sample was extracted using ethanol, the extract obtained was made  with  a  concentration  of  2µg  /  10µL,  4µg  /  10µL,  and  6µg  /  10µL  to  be  tested  for  the antibacterial activity of Staphylococcus aureus .
The  results  showed  that  the  extract  of  Ipomoea  aquatica  Forsk  could  inhibit  the  growth  of Staphylococcus  aureus bacteria  at  concentrations  of  20%,  40%,  and  60%  with  an  average diameter  of  the  inhibition  zones  12.66,  13.33,  and  16.33  mm  with  the  category  of  strong inhibition.
Key word : Ipomoea aquatic Staphylococcus aureus , antibacteria .

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20

## PENDAHULUAN
Penyakit Infeksi merupakan salah satu masalah  besar  yang  sering  terjadi  saat  ini. Penyakit  infeksi  bisa  menyebabkan  kematian bagi  manusia,  dan  di  Indonesia  sebagai  salah satu  negara  berkembang,  penyakit  infeksi sering  menjadi  masalah.  Ada  banyak  jenis penyakit  infeksi  diantaranya:  peradangan, diare, demam berdarah dan demam tifoid.
Penyebab  penyakit  infeksi  salah
satunya disebabkan oleh bakteri.
Staphylococcus  aureus. Bakteri  tersebut ditemukan  hidup  di  kulit,  saluran  pernapasan, dan  saluran  pencernaan. 1 ,  menyatakan  bahwa S.  aureus biasanya  hidup  berdampingan dengan  inangnya  namun, S.  aureus dapat menjadi bakteri patogen jika sampai masuk ke jaringan bawah kulit.
Kebutuhan  akan  antibakteri  sangat besar  sebagai  pengobatan  penyakit-penyakit infeksi 2 .  Akan  tetapi  penggunaan  antibiotik yang  berlebihan  dan  pemberian  antibiotik dalam  jangka  waktu  yang  lama  dapat menyebabkan  resistensi  pada  bakteri.  Hal tersebut  dapat  memberikan  efek  samping dalam penggunaanya dan menyebabkan antibiotik menjadi tidak efektif.
Penelitian  tentang  sumber  senyawa aktif sebagai antibakteri yang berasal dari alam terus  dilakukan. 3–13 .  Daun  kangkung  air (Ipomoea  aquatica Forsk ) dikonsumsi  oleh masyarakat sebagai sayuran dan juga digunakan  sebagai  obat  tradisional.  Secara empiris masyarakat Maluku Utara, terutama di Desa  Akekolano  Kecamatan  Oba  Utara, menggunakan  daun  kangkung  air  sebagai bahan  penyembuh  bisul  Akar  tumbuhan kangkung  air  dilaporkan  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap Streptococcus  mutans 14 . Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui aktivitas  daun  kangkung  air  sebagai  anti bakteri terhadap Staphylococcus aureus.

## METODE PENELITIAN Tempat  dan Waktu Penelitian
Penelitian  dilakukan  di  laboratorium Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Universitas Kristen Indonesia Tomohon dan  Universitas  Sam  Ratulangi  Manado. Waktu  pelaksanaan  penelitian  dilakukan  pada bulan Agustus-September 2020.

## Alat dan Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  antara lain  daun Ipomoea  aquatica Forsk,  bakteri Staphylococcus aureus (ATCC 25923)
diperoleh  dari  laboratorium  Mikrobiologi UNSRAT, etanol 70% sebagai pelarut, Nutrien
Agar,  Larutan Mc.  Farland ,  N a Cl  0,9%, aquadest  sebagai  kontrol  negatif,  pereaksi mayer,  pereaksi  dragendorf,  pereaksi  wagner, HCL pekat, Mg, FeCl 1%, asam asetat glasilat, asam sulfat pekat.
Peralatan  yang  digunakan  terdiri  dari oven,  timbangan  analitik,  kertas  saring,  gelas beaker , rotary evaporator eyela (Yamato RE- 201), inkubator, kawat ose, pembakar bunsen, penggaris,  cawan  petri,  autoklaf,  gelas  ukur, tabung  reaksi, Laminar  Air  Flow ,  kuvet, vortex,  pinset, magnetic  stirrer, mikropipet, spatula, dan kertas cakram.
P enelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  laboratorium,  menggunakan  5 perlakuan dengan 3 kali pengulangan.
Berikut konsentrasi ekstrak, dan kontrol negatif yang digunakan yakni:
P1 = Ekstrak daun kangkung air konsentrasi 20% P2 = Ekstrak daun kangkung air konsentrasi 40% P3 = Ekstrak daun kangkung air konsentrasi 60% P4 = Kontrol negatif menggunakan aquadest P5=  Kontrol  Positif  menggunakan  amoksisilin 50µg/50µ

## Prosedur  Kerja  Penyiapan  Sampel  dan Pembuatan Ekstrak

## Pengambilan Sampel Daun Kangkung Air
Daun  kangkung  air  yang  digunakan berwarna hijau masih segar yang diperoleh dari Kota Tomohon, Jalan Kalutai Provinsi

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20
Sulawesi Utara. Selanjutnya sampel yang telah diambil dicuci bersih dengan air mengalir dan ditiriskan, kemudian dipotong-potong menjadi bagian-bagian  yang  lebih  kecil.  Kemudian sampel di timbang sebanyak 500 gram.

## Pembuatan Ekstrak Daun Kangkung Air
Daun  kangkung  air  yang  sudah ditimbang kemudian diekstraksi dengan metode  maserasi  dalam  toples  kaca  dengan menggunakan pelarut etanol 70% sebanyak 1 L dan dibiarkan selama 24 jam. Kemudian filtrat dipisahkan,  sampel  kemudian  diremaserasi sebanyak  2  kali.  Ketiga  filtrat  kemudian dicampurkan  untuk  memperoleh  filtrat  total, selanjutnya  filtrat  yang  diperoleh  dipekatkan menggunakan rotary  evaporator pada  suhu 40 0 C  hingga  memperoleh  ekstrak  kental. Ekstrak  dituang  lalu  dimasukan  dalam  botol vial  kemudian  ditimbang  dan  disimpan sebelum untuk digunakan pengujian.

## Prosedur Skrining Fitokimia 15

## Uji alkaloid
Ekstrak sebanyak 50-100 mg ditambahkan kloroform secukupnya,
selanjutnya  ditambahkan  10  mL  amoniak  dan 10  mL  kloroform.  Kemudian  larutan  disaring ke dalam tabung reaksi dan filtrat ditambahkan 10 tetes H 2 SO 4 2N. Campuran dikocok dengan teratur,  dibiarkan  beberapa  menit  sampai terbentuk  2  lapisan.  Lapisan  atas  dipindahkan ke  dalam  tiga  tabung  reaksi  masing-masing sebanyak  1  mL.  Kemudian  masing-masing tabung  tersebut  ditambahkan  beberapa  tetes pereaksi  Mayer,  Wagner  dan  Dragendorff. Apabila terbentuk endapan menunjukan bahwa sampel tersebut mengandung alkaloid, dengan pereaksi  Mayer  memberikan  endapan  putih, dengan pereaksi Wagner memberikan endapan berwarna  coklat  dan  pereaksi  Dragendorff memberikan endapan berwarna jingga.

## Uji Triterpenoid dan Steroid
Ekstrak sebanyak 50-100 mg
ditambahkan asam asetat glasial sampai semua
sampel  terendam,  dibiarkan  selama  15  menit kemudian 6 tetes larutan dipindahkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 2-3 tetes asam sulfat  pekat.  Adanya  triterpenoid  ditunjukkan dengan  terjadinya  warna  merah,  jingga  atau ungu,  sedangkan  steroida  ditunjukkan  dengan terbentuknya warna biru.

## Uji tanin
Ekstrak  sebanyak  50  mg  ditambah etanol  sampai  sampel  terendam  semuanya. Kemudian ditambahkan 2-3 tetes larutan FeC 3 1%. Hasil positif ditunjukkan dengan
terbentuknya warna hitam kebiruan atau hijau.

## Uji flavonoid
Ekstrak  sebanyak  50  mg  diekstrak dengan  5  mL  etanol  dan  dipanaskan  selama lima menit di dalam tabung reaksi. Selanjutnya ditambah beberapa tetes HCL pekat. Kemudian ditambahkan  0,2  g  bubuk  Mg.  Hasil  positif ditunjukkan  dengan  timbulnya  warna  merah tua selama 3 menit.

## Uji saponin
Ekstrak sebanyak 50 mg dimasukkan ke dalam  tabung  reaksi,  kemudian  ditambahkan aquadest  hingga  seluruh  sampel  terendam, dididihkan  selama  2-3  menit,  dan  selanjutnya didinginkan,  kemudian  dikocok  kuat-kuat. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya buih yang stabil.

## Sterilisasi Alat
Sterilisasi  alat  dilakukan  sebelum semua  peralatan  di  gunakan,  dibungkus peralatan  dengan  aluminium  foil  kemudian dimasukkan kedalam autoklaf untuk sterilisasi dengan suhu 121 0 C selama 15 menit.

## Pembuatan Media-Media untuk Bakteri Uji
Pembuatan  Media  Dasar  dan  Media Pembenihan
Nutrient  Agar  diambil  sebanyak  5,6  g dilarutkan dalam 200 mL aquadest menggunakan erlenmeyer. kemudian, media

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20
dihomogenkan  dengan  stirer  diatas  penangas air  sampai  mendidih.  Media  yang  telah dihomogenkan tersebut disterilkan pada autoclaf dengan suhu 121 0 C selama 15 menit, kemudian didinginkan sampai suhu  ± 45-500 C.  Media  dasar  dan  media  pembenihan digunakan untuk pembuatan media pengujian 16 .

## Regenerasi Bakteri
Bakteri S.  aureus yang  akan  diuji, sebelumnya  harus  diregenerasikan  terlebih dahulu. Media NA dituangkan kedalam tabung reaksi, kemudian diletakan pada posisi miring dan  didiamkan  hingga  agar  memadat.  Setelah itu, menggoreskan biakan dari stok bakteri ke agar  miring  nutrien  agar.  Kultur  bakteri  pada tiap-tiap agar miring diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 24 jam 16 .
Pembuatan  Standar  Kekeruhan  Larutan (Larutan Mc.Farland)
Sebanyak  99,5  mL  Larutan  H 2 SO 4 0,36 dicampurkan  dengan  larutan  B a Cl 2 .  2H 2 O 1,175%  sebanyak  0,5  mL  dalam  erlenmeyer. Selanjutnya  dikocok  hingga  terbentuk  larutan yang  keruh.  Kekeruhan  ini  digunakan  untuk standar kekeruhan suspensi bakteri uji 17 .

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Suspensi bakteri dilakukan dengan cara bakteri  uji  yang telah diregenerasi  diambil
aquadest  kemudian  dilakukan  pengenceran, yang terdiri dari 3 serial konsentrasi yaitu 20%, 40%, 60%. Seri Konsentrasi yang sudah dibuat kemudian di vortex agar ekstrak terlarut dengan baik. Untuk kontrol negatif digunakan aquades. Kontrol positif digunakan amoksisilin 50 mg.
Media  Nutrient  Agar  sebanyak  15  mL dituangkan  ke  pada  tiap-tiap  cawan  petri  lalu dibiarkan  memadat,  setelah  itu  dimasukan  1 mL  suspensi  bakteri Staphylococcus  aureus yang sudah dicampurkan pada media pembenihan NA Kemudian disebarkan-biakan agar  suspensi  terserap  merata  pada  media bakteri serta  didiamkan  selama  10  menit  agar suspensi  terserap  pada  media.  Cawan  petri tersebut  diletakan  kertas  cakram  dengan menggunakan pinset steril yang telah direndam dalam  aquades  sebagai  kontrol  negatif  serta kertas  cakram  yang  sudah  direndam  pada konsentrasi  uji.  Selanjutnya  semua  media diinkubasi kedalam inkubator, inkubasi dilakukan  pada  suhu  37 0 C  selama  24  jam.
Keesokan  harinya  diukur  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  dengan  menggunakan penggaris.  Zona  hambat  yang  terbentuk menunjukan  tingkat  kepekaan  bakteri  uji terhadap bahan antibakteri tersebut. Pengujian dilakukan sebanyak 3 kali.

## Cara Perhitungan Zona Hambat
Rumus perhitungan diameter zona hambat 18 :
menggunakan jarum ose lalu disuspensikan ke dalam tabung reaksi berisi 5 mL larutan NaCl
𝑑 = A+B 2 ………….(1) steril 0,9%. Suspensi yang terbentuk disetarakan  kekeruhannya  dengan  standar larutan Mc  farland No.  0,5  yaitu  1,5 × 10 8 CFU/mL 16 .

## Prosedur Uji Antibakteri
Pengujian  antibakteri  ekstrak  daun kangkung  air  ( Ipomoea  aquatica Forsk)  pada pertumbuhan  bakteri S.  aureus menggunakan metode difusi dengan kertas cakram berdiameter  6  mm.  Ekstrak  kental  ditimbang sebanyak 1 g kemudian dilarutkan dalam 1 mL
Keterangan : d = diameter zona hambat A = diameter vertikal
B = diameter horisontal
Ketentuan  kriteria  aktivitas  daya hambat yang dikemukaan oleh David dan Stout (1971) dalam Rita  (2010),  zona  hambat  yang terbentuk ≥ 20 mm dianggap memiliki aktivitas daya  hambat  sangat  kuat  10-20  mm, dinyatakan  memiliki  aktivitas  daya  hambat kuat  5-10  mm,  dinyatakan  memiliki  aktivitas

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20
daya hambat sedang dan ≤ 5 mm, dinyatakan memiliki aktivitas daya hambat lemah. 19

## Analisa Data
Hasil  pengamatan  serta  pengukuran ditabulasikan  dalam  tabel  pengujian  aktivitas antibakteri ekstrak daun kangkung air terhadap S. aureus , kemudian dianalisis dengan statistik dengan  Anova  ( Analysis  of  Variant )  dengan tingkat kepercayaan 95% dan apabila terdapat perbedaan antar perlakuan maka akan dilanjutkan dengan uji Tuckey.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pembuatan Ekstrak Daun Kangkung Air
Sebanyak  500  gram  simpilia  segar yang  sudah  ditimbang,  diekstraksi  dengan metode  maserasi.  Maserasi  menggunakan pelarut  etanol  70%  sebanyak  3  L  dengan sebanyak 2 kali remaserasi, metode ini dipilih karena  maserasi  merupakan  cara  sederhana serta  mudah  dengan  proses  yaitu  perendaman sampel  menggunakan  pelarut  organik  pada temperatur  ruangan.  Pada  proses  ekstraksi maserasi       tidak       dipanaskan       sehingga
pengaduk. Pengadukan bertujuan untuk mempercepat  kontak  antara  sampel  dan pelarut.  Warna  ekstrak  yang  dihasilkan  oleh maserasi  hari  1  mengelurkan  warna  hijau kehitaman,  di  hari  2  warna  yang  dihasilkan yaitu hijau kehitaman tetapi tidak sepekat hari pertama sementara pada hari yang ke 3 warna yang dikeluarkan ialah warna hijau kehitaman tetapi  lebih  terang  dari  pada  hasil  maserasi hari-hari  sebelumnya.  Perbedaan  warna  yang dihasilkan dipengaruhi oleh konsentrasi senyawa  kimia  di  tanaman  yang  mulai berkurang dari hari ke hari.
Dari  proses  maserasi  didapatkan  filtrat 1,  filtrat  2  dan  filtrat  3,  ketiga  fitrat  tersebut berwarna  hijau  kehitaman  selanjutnya  filtrat disatukan  sehingga  didapat  filtrat  total, selanjutnya filtrat dipekatkan untuk menghilangkan pelarutnya menggunakan rotary  evaporator dengan  suhu  40ºC  karena penggunaan suhu yang tinggi bisa menyebabkan kerusakan atau penurunan kadar fenolik  yang  terkandung  pada  sampel 20 . Ekstrak  kental  yang  dihasilkan  ditimbang kemudian nilai % rendemen dihitung menggunakan  rumus  berikut  : %  rendemen  = Bobot ekstrak kental
menghindari  rusaknya  kandungan  senyawa kimia pada tumbuhan serta  memungkinkan
Bobot simplisia  yang diekstraksi x 100%
banyak  senyawa  terektraksi.  Menggunakan Pelarut  etanol  karena  etanol  dapat  menarik senyawa-senyawa  kimia  yang  bersifat  polar maupun nonpolar.
Dilakukan  maserasi  selama  3  hari, dengan  mengaduk  menggunakan  batang
Nilai  %  rendemen  ekstrak  dapat  dilihat  pada
Tabel 1.  Ekstrak  kental  tersebut  kemudian digunakan dalam pengujian selanjutnya.
Tabel 1. Hasil Rendemen Ekstrak Daun Kangkung Air
Ekstrak Etanol Daun Kangkung Air 500 20,7 4,14% Nama Simplisia Bobot Simplisia (gr) Bobot Ekstrak Rendemen Ekstrak (gr) (%)

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20

## Skrining Fitokimia
Tabel 2. Skrining Fitokimia Daun Kangkung Air
SKRINING FITOKIMIA HASIL WARNA SEBELUM PERUBAHAN WARNA (1) (2) (3) (4) Alkaloid + Hijau Terbentuk endapan putih (Pereaksi Mayer), coklat (Pereaksi Wagner) dan jingga (Pereksi Dragendorf) Tanin + Hijau Hijau Triterpenoid + Hijau Ada terbentuk warna merah Steroid - Hijau Tidak terbentuk warna hijau kebiruan Saponin + Hijau Terbentuk Gelembung/buih Flavonoid + Hijau Merah
Ket : (+) : menunjukan adanya senyawa yang diuji, (-) : menunjukan senyawa yang diuji tidak ada

## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Kangkung Air
Pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol daun  kangkung  air  dilakukan  pada  bakteri S. aureus. Uji aktivitas antibakteri dengan tujuan melihat kemampuan dari berbagai konsentrasi ekstrak daun kangkung air untuk dapat melihat
aktivitas pertumbuhan bakteri S. aureus . Hasil pengukuran aktivitas antibakteri daun kangkung  air  pada  bakteri S.  aureus ,
ditunjukkan pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Pengujian Antibakteri
20% (2µg/10µL) 12.66 mm 40% (4µg/10µL) 13.33 mm 60% (6µg/10µL) 16.33 mm Kontrol Positif Amoksisilin 25.33 mm Kontrol Negatif Aquades 0 mm Nilai Zona Hambat Bakteri S.aureus Konsentrasi Rata-Rata Diameter (mm) (1) (2)

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20
Data hasil pengukuran aktivitas antibakteri ekstrak daun kangkung air terhadap bakteri S. aureus pada tabel 3 di atas menunjukan bahwa masing-masing konsentrasi dari ekstrak daun kangkung air yang digunakan memiliki aktivitas antibakteri. Dimana setiap konsentrasi memiliki diameter yang berbeda yang dapat dilihat secara berturut-turut yaitu konsentrasi 20%, 40%, dan 60% dapat membentuk zona hambat pada media padat. Berdasarkan hasil pengukuran dapat dilihat Konsentrasi 20% sampai 60% semakin besar konsentrasi nilai zona hambat semakin besar.
Berdasarkan  tabel  3  menunjukan konsentrasi  20%  memiliki  nilai  rata-rata diameter terbentuk 12.66 mm, konsentrasi 40% nilai  rata-rata  diameter  terbentuk  13.33  mm dan  konsentrasi  60%  nilai  rata-rata  diameter 16.33.  Sedangkan  kontrol  positif  amoksisilin 50µg/50µL  dengan  nilai  rata-rata  diameter 25.33 mm. Kontrol negatif aquadest nilai rata- rata diameter 0 mm atau tidak terbentuk zona hambat pada media.
Hal ini berarti bahwa berdasarkan tabel di  atas  penulis  berasumsi  bahwa  ekstrak kangkung memiliki aktivitas sebagai antibakteri. Perbedaan konsentrasi berdasarkan nilai konsentrasi ternyata berbeda. Konsentrasi 20%(2µg/10µL)  nilai  rata-rata  12.66  mm, 40%(4µg/10µL)  nilai  rata-rata  13.33  mm  dan 60%6µg/10µL) nilai rata-rata16.33.
Dilihat  dari  konsentrasi  ini  memiliki nilai rata-rata yg berbeda, untuk kontrol positif amoksisilin  digunakan  50µg/50µL  nilai  rata- rata  diameter  25.33  mm.  Tetapi  jika  nilai konsentrasi  dari  penelitian  ini  ditingkatkan, maka  menunjukan  nilai  konsentrasi  ekstrak lebih jauh membentuk zona hambat yang lebih besar  dari  amoksisilin. 21 mengatakan, tingginya  suatu  konsentrasi  ekstrak  yang diberikan  maka  zona  hambat  yang  dihasilkan pun semakin besar.
Setelah  dilakukan  skrining  fitokimia diketahui  daun  kangkung  air  memiliki kandungan  flavonoid,  alkaloid,  dan  tanin, saponin, triterpenoid, dimana senyawa- senyawa  tersebut  memiliki  aktivitas  sebagai antibakteri.
Mekanisme saponin sebagai antibakteri dengan  menyebabkan  kebocoran  protein  dan
enzim dari dalam sel bakteri 22 . Senyawa tanin memiliki aktivitas antibakteri yang berhubungan  bersama  kemampuanya  yaitu menginaktifkan  adhesin  sel  mikroba  serta menginaktifkan  enzim,  dan  mengganggu transport  protein  pada  lapisan  dalam  sel 17 . Alkaloid memiliki aktivitas sebagai antibakteri dengan  cara  menghambat  sintesis  dinding  sel yang dapat menyebabkan lisis pada sel dan sel akan mati 23 .
Flavonoid  diketahui  memiliki  sifat antibakteri  dimana  mekanisme  kerjanya  yaitu membuat  senyawa  kompleks  bersama  protein ekstraseluler  boleh  terlarut  sehingga  dapat merusak  membran  sel  bakteri  serta  diikuti bersama  keluarnya  senyawa  intraseluler 24 . Triterpenoid bekerja sebagai antibakteri dengan  bereaksi  bersama  protein  trans membran  pada  membran  luar  dinding  sel bakteri, terbentuknya ikatan poliper yang kuat dapat mengakibatkan rusaknya porin 25 .
Mekanisme kerja dari amoksisilin yaitu dengan menghambat biosintesis dari mukopeptida  dinding  sel  bakteri  saat  bakteri bermultiplikasi 26 .  Hasil  pengukuran  diameter zona  hambat  menunjukan  ekstrak  daun kangkung  air  memiliki  daya  hambat  kuat terhadap bakteri S. aureus dengan konsentrasi 20% , 40%, dan 60%.
Daya  hambat  yang  dihasilkan  untuk tiap-tiap  konsentrasi  menunjukan  seberapa besar  pengaruh  konsentrasi  terhadap  bakteri tersebut.  Namun  selain  faktor  konsentrasi, janis  bahan  antimikroba  yang  dihasilkan  pula menentukan kemampuan penghambatan pertumbuhan  suatu  bakteri.  Hal  ini  boleh terjadi  karena  terdapat  perbedaan  kecepatan difusi  senyawa  antibakteri  pada  media  agar. Pada  penelitian  ini,  aktivitas  antibakteri  daun Ipomoea aquatica Forsk diduga karena adanya kandungan senyawa-senyawa yang berkhasiat, seperti  alkaloid,  flavonoid,  tanin,  saponin, triterpenoid.
Berdasarkan  penelitian  konsentrasi 20%,  40%,  dan  60%  ekstrak  etanol  daun kangkung  air  merupakan  konsentrasi  efektif dalam  menghambat pertumbuhan S.  aureus ,

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20
terlihat  dari  besarnya  diameter  zona  hambat yang  terbentuk.  Konsentrasi  efektif  adalah konsentrasi yang daya antibakterinya dikategorikan  kuat  untuk  membentuk  zona hambat terbesar. 27

## Hasil Analisis Statistik
Data  hasil  uji  aktivitas  antibakteri  pada bakteri S.  aureus dianalisis  secara  statistik dengan  menggunakan One  Way  Anova untuk melihat  apakah  data  tersebut  homogen  atau tidak. Tabel 4.Uji Homogenitas Varians Test of Homogeneity of Variances Daya Hambat Ektrak Levene Statistic df1 df2 Sig. 3,573 3 8 ,066 Tabel  4  diatas  menampilkan  hasil  uji homogenitas varians. Hasil pengujian ditemukan bahwa F hitung = 3,573 dengan sig. = 0,066. Oleh karena nilai sig. > 0,05 maka dapat
disimpulkan  bahwa  varians  antar  kelompok bersifat  homogen  sehingga  dapat  dilakukan penggujian dengan menggunakan ANOVA.
Tabel 5. Uji Varians Data ANOVA Daya Hambat Ektrak Sum of Squares Df Mean Square F Sig. Between Groups 334,000 3 111,333 70,316 ,000 Within Groups 12,667 8 1,583 Total 346,667 11 Tabel 6. Uji Analisia Post-Hoc Multiple Comparisons Dependent Variable: Daya Hambat Ektrak Tukey HSD 95% Confidence Interval Mean Difference Upper (I)  Perlakuan  (J) Perlakuan (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Bound Kon. 20% Kon. 40% -1,6667 1,0274 ,419 -4,957 1,623 Kon. 60% -4,6667 * 1,0274 ,008 -7,957 -1,377 Kntrl + -13,6667 * 1,0274 ,000 -16,957 -10,377 Kon. 40% Kon. 20% 1,6667 1,0274 ,419 -1,623 4,957 Kon. 60% -3,0000 1,0274 ,074 -6,290 ,290 Kntrl + -12,0000 * 1,0274 ,000 -15,290 -8,710 Kon. 60% Kon. 20% 4,6667 * 1,0274 ,008 1,377 7,957 Kon. 40% 3,0000 1,0274 ,074 -,290 6,290 Kntrl + -9,0000 * 1,0274 ,000 -12,290 -5,710 Kntrl + Kon. 20% 13,6667 * 1,0274 ,000 10,377 16,957 Kon. 40% 12,0000 * 1,0274 ,000 8,710 15,290 Kon. 60% 9,0000 * 1,0274 ,000 5,710 12,290
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20
Tabel  5  menunjukkan  hasil  uji  beda rata-rata  secara  keseluruhan.  Pada  tabel tersebut diperoleh F hitung sebesar 70,316 dengan sig . = 0,000. Oleh karena nilai sig .< 0,05 maka Ho  ditolak  sehingga  dapat  disimpulkan  nilai rata-rata  antar  kelompok  perlakuan  ekstrak etanol  daun  kangkung  air  adalah  berbeda bermakna.  Untuk  mengetahui  kelompok perlakuan  mana  yang  memiliki  perbedaan bermakna tersebut, maka selanjutya dilakukan analisis uji lanjut. Uji lanjut Tukey menunjukkan  diameter  zona  hambat  bakteri
Staphylococcus  aureus untuk  Konsentrasi Ekstrak 20% tidak memiliki perbedaan dengan
Konsentrasi  40%,  tetapi  berbeda  signifikan dengan  Konsentrasi  60%  dan  Kontrol  Positif. Konsentrasi  40%,  tidak  memiliki  perbedaan dengan  konsentrasi  20%  dan juga  dengan konsentrasi  60%,  tetapi  berbeda  signifikan dengan  Kontrol  Positif.  Konsentrasi  60% berbeda  signifikan  dengan  Konsentrasi20% dan dengan Kontrol Posifit serta tidak memiliki perbedaan  Konsentrasi  40%.  Kontrol  Positif memiliki  perbedaan  signifikan  dengan semua konsentrasi  baik  20%,  40%,  maupun  60%, sebagaimana ditunjukkan pada Tabel 7.

## Tabel 7. Subset Homogen
Daya Hambat Ektrak Tukey HSD a Perlakuan N 1 Subset for alpha = 0.05 2 3 Kon. 20% 3 11,667 Kon. 40% 3 13,333 13,333 Kon. 60% 3 16,333 Kntrl + 3 25,333 Sig. ,419 ,074 1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
Berdasarkan  Tabel  7  di  atas,  dapat  dilihat bahwa terdapat  3 subset kelompok  perlakuan, yaitu  Konsentrasi  20%  dengan  Konsentrasi 40% berada pada subset yang sama ( subset 1). Konsentrasi  40%  dengan  Konsentrasi  60% berada  pada subset yang  sama  (subset  2)  dan Kontrol  Positif  pada Subset 3.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  perlakuan  konsentrasi 40%  dan  60%  lebih  baik  dalam  memberikan efek  daya  hambat  dibandingkan  dengan Konsentrasi 20%, walaupun bila dibandingkan dengan  perlakuan  Kontrol  Positif,  efek  daya hambatnya tidak lebih tinggi.
Setelah  dilakukan  penelitian  ini,  maka dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun kangkung  air  memiliki  aktivitas  antibakteri pada  bakteri S.aureus .  Dengan  demikian hipotesis awal  yang  menyatakan  bahwa  daun
Kangkung  Air  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap S.aureus terbukti benar.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  diperoleh, maka  dapat  disimpulkan  bahwa  ketiga perlakuan  konsentrasi,  baik  20%,  40%  dan 60%  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap bakteri S. aureus dengan kategori daya hambat kuat, dimana konsentrasi 40% (13,33 mm) dan 60%  (16,33  mm)  lebih  baik  dibandingkan dengan  konsentrasi  20%  (12,66  mm).  Hasil skrining fitokimia kandungan senyawa metabolit  sekunder  dari  ekstrak  etanol  daun kangkung  air,  juga  memiliki  kandungan alkaloid,  tanin,  triterpenoid,  saponin  dan flavonoid.

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20

## DAFTAR PUSTAKA
(1) Murray,  R.  K.;  Granner,  D.  K.;
Rodwell,  V.  W. Biokimia  Harper  (27 Ed.) ;  Buku  Kedokteran  EGC:  Jakarta, 2009. (2) Utami, E. R. Antibiotika Resistensi Dan Rasionalitas  Terapi. Sainstis 2012 , 1 (1), 38–124.
(3) Maarisit,  W.;  Tangiono,  D.  H.; Pinontoan, R.; Minelko, M.; Tombuku, J. L.; Jan, T. T. ANTIANGIOGENESIS AND ANTIBACTERIAL ACTIVITIES FROM AN INDONESIAN  MARINE-DERIVED FUNGUS  Dactylaria  Sp. 2013 , 24 (2), 100–106. (4) Maarisit,  W.;  Lawani,  M.  Chemical Investigation and Antimicrobial Activity  of  Medicinal  Plant Toddalia Asiatica Lam. Indones. J. Chem. 2020 , 20 (5), 1025–1031. https://doi.org/10.22146/ijc.46643. (5) Maarisit, W.; Ueda, K. ANTIMICROBIAL  METABOLITES FROM A MARINE-DERIVED FUNGUS. Indonesian  J.  Pharm 2013 , 24 (3), 163–169.
(6) Maarisit, W.; Abdjul, D. B.; Yamazaki,
H.; Kato, H.; Rotinsulu, H.;
Wewengkang,  D.  S.;  Sumilat,  D.  A.; Kapojos, M. M.; Ukai, K.; Namikoshi,
M. Anti-Mycobacterial Alkaloids, Cyclic 3-Alkyl Pyridinium Dimers, from the  Indonesian Marine  Sponge Haliclona Sp. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2017 , 27 (15), 3503–
3506.
https://doi.org/10.1016/j.bmcl.2017.05. 067. (7) Julianti;  Maarisit,  W.;  Potalangi,  N.; Kanter,  J.  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Umbi Bawang Dayak Eleutherine palmifolia L. Merr. Terhadap Bakteri Klebsiella pneumoniae. Jurnal  Biofarmasetikal Tropis 2020 , 3 (1), 159–165.
(8) Kurama, G. M.; Maarisit, W.; Karundeng, E. Z.; Potalangi, N. O. Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun Benalu Langsat (Dendropthoe sp) Terhadap  Bakteri Klebsiella
Pneumoniae. Biofarmasetikal    tropis 2020 , 3 (2), 27–33. (9) Liling, V. V.; Lengkey, Y. K.; Sambou,
C.  N.;  Palandi,  R.  R.  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Kulit  Buah Pepaya  Carica  papaya  L.  Terhadap Bakteri Penyebab Jerawat Propionibacterium acnes. Biofarmasetikal  Tropis 2020 , 3 (1), 112–121. (10) Maarisit, W.; Marstella, M.; Tan Tjie, J. Aktivitas  Antibakteri  Dan  Antimitotik Dari Fungi Yang Bersimbiosis Dengan
Spons. Jurnal Farmasi Indonesia 2012 ,
6 (2), 99–107.
(11) Mawea,  F.;  Maarisit,  W.;  Datu,  O.;
Potalangi, N. Efektivitas Ekstrak Daun
Cempedak  Artocarpus  integer  Sebagai Antibakteri. Jurnal  Biofarmasetikal Tropis 2019 , 2 (1), 115–122. (12) Tampongangoy,  D.;  Maarisit,  W.; Ginting, A. R.; Tumbel, S.; Tulandi, S. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Kayu Kapur Melanolepis multiglandulosa Terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus  dan  Bakteri Escherichia coli. Jurnal Biofarmasetikal  Tropis 2019 , 2 (1),
107–1148. (13) Untu, S. D. Aktivitas Antibakteri Kulit Batang  Santigi  Pemphis  acidula  Forst Terhadap  Staphylococcus  aureus  dan Pseudomonas aeruginosa. Jurnal Biofarmasetikal Tropis 2019 , 2 (2), 61– 68. (14) Fajrina,  A.;  Jubahar,  J.;  Hardiana,  N. UJI  AKTIVITAS  FRAKSI  DARI EKSTRAK AKAR KANGKUNG (Ipomoea Aquatica Forssk.) TERHADAP BAKTERI Streptococcus Mutans. Jurnal Farmasi Higea 2017 , 9 (2), 150–148.
(15) Sangi,  M.;  Runtuwene,  M.  R.  J.; Simbala,  H.  E.  I.;  Makang,  V.  M.  A.
Analisis  Fitokimia  Tumbuhan  Obat  Di Kabupaten  Minahasa  Utara. Chemistry
Progress 1 , 47–53. (16) Puasa, N. S.; Fatmawati; Wiyono, W. I. UjI  Aktivitas  Ekstrak Rimpang Lengkuas Merah ( Alpinia Purpurata K. Schum)  Terhadap  Bakteri  Klebsiella Pneumonia  Isolat  Urin  Pada  Penderita

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (1), 10-20
Infeksi Saluran Kemih. Jurnal Pharmacon 2019 , 8 (4), 982–990. (17) Ngajow, M.; Abidjulu, J.; Kamu, V. S. Pengaruh Antibakteri Ekstrak Kulit Batang Matoa (Pometia pinnata) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus secara  In  vitro. JM 2013 , 2 (2),  128– 132. https://doi.org/10.35799/jm.2.2.2013.3 121. (18) Tethol,  A.  M.  Pengaruh  Daya  Hambat Sediaan  Salep  Ekstrak  Daun  Katuk (Sauropus  Androgynus  L.)  Terhadap Pertumbuhan  Bakteri  (Staphylococcus Aureus). Skripsi, Program Studi Farmasi Fakultas Matematika Dan Ilmu Pengetahuan  Alam  Universitas  Kristen Indonesia Tomohon., Tomohon, 2017. (19) Rita,  W.  S.  Isolasi  Identifikasi  Dan Ujiaktivitas Antibakteri Senyawa Golongan  Triterpenoid  Pada  Rimpang Temu Putih (Curcuma Zedoaria (Berg) Roscoe). Jurnal Kimia 2010 , 4 , 20–26.
(20) Aryati,  D.  L.;  Pratiwi,  E.  Aktivitas
Antioksidan  Ekstrak  Kelopak  Bunga Rosela  (H.  sabdariffa  L.)  Merah  Pada Berbagai  Suhu  Pemanasan. Jurnal Teknologi Pangan dan Hasil Pertanian 2020 , 15 (1), 1–9.
(21) Ajizah,  A.  Sensitivitas  Salmonella Thypimurium  Terhadap  Ekstrak  Daun Psidium Guajava L. Bioscientiae 2004 ,
1 (1), 8–31.
(22) Madduluri, S.; Rao, K. B.; Sitaram, B.
IN VITRO EVALUATION OF ANTIBACTERIAL  ACTIVITY  OF FIVE  INDIGENOUS PLANTS EXTRACT AGAINST FIVE BACTERIAL      PATHOGENS      OF HUMAN. Int J Pharm Pharm Sci 2013 ,
5 (4), 679–684.
(23) Nikham;  Basjir, T.  E.  Uji Bahan  Baku Antibakteri  DariBuah  Mahkota  Dewa (Phaleria  Macrocarpa(Scheff)  Boerl.)
Hasil  Iradiasi  Gamma  Dan  Antibiotik Terhadap  Bakteri  Patogen. Prosiding Pertemuan  Ilmiah  Ilmu  Pengetahuan dan Teknologi Bahan 2012 , 168–174.
(24) Darmawati, A. A. S. K.; Bawa, I. G. A. G.; Suirta, I. W. Isolasi Dan Identifikasi Senyawa  Golongan  Flavonoid  Pada Daun Nangka (Artocarpus Heterophyllus  Lmk)  Dan  Aktivitas Antibakteri Terhadap Bakteri Staphylococcus  Aureus. Jurnal  Kimia 2015 , 9 (2), 203–210.
(25) Budifaka,  M.  J.  Profil  Fitokimia Aktivitas Antibakteri Tanaman Obat Di
Sulawesi  Tenggara  Terhadap  Bakteri Salmonella  Typhi  YCTC.  Skripsi, Universitas Halu Oleo, Kendari, 2014. (26) Kaur,  S.  P.;  Rao,  R.;  Nanda,  S. AMOXICILLIN: A BROAD SPECTRUM ANTIBIOTIC. International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical  Sciences 2011 , 3 (3), 30–37. (27) Rastina; Sudarwanto, M.; Wientarsih, I. Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun Kari (Murrayakoenigii) Terhadap Staphylococcus  Aureus,  Escherichia
Coli,  Dan  Pseudomonas  Sp. Jurnal Kedokteran Hewan 9 (2), 185–188.