## Screening and Characterization of Chitinolytic Bacteria from Shrimp Waste

## Penapisan dan Karakterisasi Bakteri Kitinolitik dari Limbah Udang
Nikmah Ridha Batubara 1 , Dwi Suryanto 1 , Erman Munir 1 , Rahmiati 2 ( *) 1 Universitas Sumatera Utara, Jl. Bioteknologi, Padang Bulan, Kec. Medan Baru, Kota Medan, Sumatera Utara 20222, Indonesia
2 Universitas Medan Area, Jl. Kolam No.1, Tj. Rejo, Kec. Medan Sunggal, Kota Medan, Sumatera Utara 20112, Indonesia
*Corresponding author: amirahmiati0405@gmail.com
Diterima 21 September 2022 dan disetujui 29 Oktober 2022

## Abstrak
Udang menghasilkan limbah seperti kulit dan bagian kepala udang. Limbah tersebut mudah busuk dan  menimbulkan  aroma  tidak  sedap.  Proses  degradasi  limbah  udang  berlangsung  dengan menghasilkan enzim-enzim pendegradasi oleh bakteri pembusuk. Kandungan kitin pada limbah udang  akan  merangsang  munculnya  bakteri  penghasil  enzim  kitinase.  Kitin  merupakan homopolimer linear yang  terdiri dari monomer N-asetil-D-glukosamin dengan ikatan glikosidik β - (1,4). Kitin diketahui bersifat biodegradable , biocompatible dan tidak toksik. Hal ini  menjadi alasan turunan kitin banyak digunakan dalam bidang industri dan biomedik. Oleh karena itu kitin dan turunannya  memiliki  nilai  ekonomi  yang  besar.  Penelitian  dilaksanakan  secara  deskriptif kuantitatif  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Universitas  Sumatera  Utara.  Diperoleh  sebanyak  10 isolat  bakteri  kitinolitik  asal  limbah  udang  dengan  karakteristik  morfologi  yang  bervariasi. Kesepuluh isolat bakteri tersebut adalah NR02, NR03, NR04, NR05, NR06, NR07, NR08, NR09, NR10, NR11 dan PU01. ilai indeks kitinolitik IK > 2 dihasilkan oleh 4 isolat bakteri yaitu; NR02, NR07,  NR09  dan  PU01.  Nilai  IK  terendah  dihasilkan  oleh  NR08  dengan  nilai  0,01.  Bakteri kitinolitik  yang  diperoleh  memiliki  karakter  yang  berbeda-beda  dan  sangat  besar  kemungkinan mereka berasal dari jenis yang berbeda pula.
Kata Kunci : Bakteri, Kitin, Kitinolitik, Limbah Udang

## Abstract
Shrimp  produce  waste  such  as  shrimp  shells  and  heads.  The  waste  is  perishable  and  gives  off  an unpleasant  odor.  Shrimp  waste  degradation  process  takes  place  by  producing  degrading  enzymes  by spoilage bacteria. The content of chitin in shrimp waste will stimulate the emergence of chitinase enzyme- producing bacteria. Chitin is a linear homopolymer consisting of N-acetyl-D-glucosamine monomer with -(1,4) glycosidic bonds. Chitin is known to be biodegradable, biocompatible and non-toxic. This is the reason chitin derivatives are widely used in the industrial and biomedical fields. Therefore, chitin and its derivatives have great economic value. The research was carried out in a quantitative descriptive manner at  the  Microbiology  Laboratory,  University  of  North  Sumatra.  There  were  10  isolates  of  chitinolytic bacteria from shrimp waste with varying morphological characteristics. The ten bacterial isolates were NR02, NR03, NR04, NR05, NR06, NR07, NR08, NR09, NR10, NR11 and PU01. Chitinolytic index CI value > 2 was produced by 4 bacterial isolates, namely; NR02, NR07, NR09 and PU01. The lowest IK value was generated by NR08 with a value of 0.01. The chitinolytic bacteria obtained have different characters and it is very likely that they come from different types
Keywords: Bacteria, Chitin, Chitinolytic,  Shrimps waste.
Jurnal Pembelajaran dan Biologi Nukleus is Licensed Under a CC BY SA Creative Commons Attribution-Share a like 4.0 International License . https://doi.org/10.36987/jpbn.v8i3.3251

## PENDAHULUAN
Udang menjadi komoditas andalan dalam industri perikanan. Hal tersebut mendorong Indonesia  menjadi  salah  satu  negara  produsen  udang. Kementerian  Kelautan  dan Perikanan (2020) menyatakan bahwa, pada tahun 2020 nilai produksi budidaya udang di Indonesia  mencapai  Rp54,95  miliar  dengan  volume  880.638  ton.  Berdasarkan  data tersebut, produksi budidaya udang naik 3,02% dari tahun sebelumnya. Dari segi volume, produksi  budidaya  udang  pada  tahun  2020  mengalami  pertumbuhan  2,35%  jika dibandingkan tahun 2019.
Dalam  proses  pengolahan  atau  ekspor  udang,  akan  dihasilkan  limbah  seperti kulit, kaki, ekor dan kepala udang. Persentase limbah yang dihasilkan sebesar 60% – 70% dari total massa udang tersebut. Limbah yang dihasilkan gampang membusuk (Azhar et al. ,  2010) . Hal  ini  terjadi  karena  limbah  udang  mengandung senyawa  organik  seperti protein, lemak, kalsium karbonat, kitin, pigmen, abu dan lainnya (Rinaudo, 2012) . Jika tidak dimanfaatkan senyawa organik tersebut akan terbuang sia – sia.
Kelompok crustacea merupakan  penghasil  kitin  terbesar  dibandingkan  dengan beberapa  organisme penghasil  kitin  lainnya,  misalnya serangga,  nematoda,  jamur  dan tumbuhan (Soeka  &  Triana,  2016). Monomer  kitin  akan  dimanfaatkan  oleh mikrooganisme  seperti  bakteri  sebagai  sumber  nutirsi.  Monomer  kitin  diketahui  kaya akan  sumber  karbon  dan  nitrogen (Donderski  &  Brzezinska,  2003). Oleh  sebab  itu, banyaknya limbah udang yang dihasilkan akan berbanding lurus dengan mikroorganisme pendegradasi limbah tersebut.
Bakteri merupakan salah satu mikrooganisme yang mampu medegradasi limbah udang  dengan  menghasilkan  enzim  kitinase.  Bakteri  tersebut  dikenal  dengan  sebutan bakteri  kitinolitik.  Bakteri  kitinolitik  dapat  diisolasi  dari  berbagai  sumber,  antara  lain rizosfer, filosfer, tanah atau dari lingkungan perairan. Laut, danau, kolam dan tambak udang diketahui potensial digunakan sebagai sumber isolat ( Ilmi, 2007; Suryanto, 2011; Asril, 2011; Dewi, 2011; Fauziah & Herdyastuti, 2013).
Selain  bakteri,  kelompok  aktinomisetes  dan  jamur  juga  diketahui  mampu mendegradasi  kitin  dan  digunakan  sebagai  sumber  nutrisinya.  Bakteri  yang  mampu menghasilkan kitinase yaitu genus Bacillus ( B. pumilus, B. firmus, B. cereus ) Streptomyces hygroscopicus,  Streptomyces  griceus,  Serattia  marcescens,  Vibrio spp., Flavobacterium sp. Alcaligenes  denitrificans , Actinomycetes , Pseudomonas  stutzeri,  Escherechia  coli dan  genus Sanguibacter (Ilmi, 2007; Herdyastuti et al ., 2009; Muharni & Widjajanti, 2011; Priya et al ., 2011; Dwi et al ., 2011).
Kitin  merupakan  senyawa  polisakarida  yang  terdiri  dari  ikatan  dengan  rumus molekul linear β -1,4 N-asetil-D-glukosamina . Kitin dapat diproduksi secara kimiawi dan enzimatis.  Produksi  kitin  secara  kimiawi  dilakukan  melalui  proses  hidrolisis menggunakan  asam  pekat  seperti  HCl.  Proses  tersebut  kurang  ramah  lingkungan  dan produk kitin yang dihasilkan sedikit (10 – 60%). Metode sintesis kitin secara enzimatis
menggunakan  enzim  kitinase  diketahui  lebih  ramah  lingkungan  dan  produk  yang dihasilkan juga lebih besar (Soeka & Triana, 2016).
Kitin  termasuk  salah  satu  polimer  yang  memiliki  kelimpahan  besar  di  alam. Mikroorganisme penghasil kitin khusunya bakteri belum banyak dieksplorasi, baik dari segi  jumlah,  kelimpahan  dan  fungsi  enzim  yang  dihasilkannya.  Mikrob  kitinolitik menarik untuk diteliti dan diisolasi karena kemampuannya menghidrolisis kitim menjadi kitosan  yang  memiliki  banyak  manfaat,  antara  lain  pada  bidang  kesehatan,  industri, bioteknologi dan agen biokontrol. Hal tersebut menjadi faktor utama dalam penelitian ini.

## METODE
Penelitian dilaksanakan dengan metode deskriptif di Laboratorium Mikrobiologi FMIPA USU.  Prosedur  penelitian  dilaksanakan  secara in  vitro dengan  beberapa  tahapan penelitian  yaitu  isolasi  bakteri  kitinolitik,  karakerisasi  morfologi  bakteri  kitinolitik, pengukuran  indeks  kitinolitik,  uji  kualitatif  enzim  glukanase  dan  uji  aktivitas  enzim protease kualitatif.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan antara lain botol sampel, cawan Petri, tabung reaksi, ose, spatula, hockey stick, pipet serologi, pro pipet, autoklaf, inkubator, jangka sorong, pH meter, vortex, mikroskop Carl Zeiss Micro-Imaging GmbH 37081 Germany. Sampel terdiri atas tiga sumber, yaitu limbah udang segar yang berasal dari pabrik pengolahan udang, limbah udang yang dibiarkan selama 3 hari dan tanah bekas pembuangan limbah udang, media  garam  minimum  kitin  (MGMK), nutrien  broth (NB), nutrien  agar (NA),  media CMC, media oat, alkohol 70% dan akuades.

## Isolasi Bakteri Kitinolitik dari Sampel
Sebanyak satu gram sampel diinokulasikan ke dalam 10 ml media NB. Kemudian diinkubasi pada suhu 29 ◦ C selama 24 jam. Suspensi bakteri sebanyak 1 ml dimasukkan ke  dalam  10  ml  akuades  steril  dan  dilakukan  pengenceran  bertingkat  sampai  10 -3 . Suspensi diinokulasikan pada media NA dan diinkubasi pada suhu 29 ◦ C. Kultur yang tumbuh dikarakterisasi dan ditumbuhkan pada media MGMK. Isolat yang membentuk zona bening pada media MGMK diambil untuk dimurnikan. Zona bening menunjukkan bahwa bakteri tersebut mampu menghasilkan kitinase.

## Pengukuran Indeks Kitinolitik
Pengukuran  indeks  kitinolitik  dilakukan  dengan  cara  menginokulasiakan  1  ml suspensi bakteri dengan kerapatan 10 8 sel. Kemudian cakram yang sudah berisi suspensi bakteri diinokulasikan ke bagian tengah media MGMK. Biakan diinkubasi selama 7 hari pada  suhu  29 ◦ C.  Diameter  zona  bening  yang  terbentuk  diukur  dengan  menggunakan jangka  sorong.  Indeks  kitinolitik  diperoleh  dengan  menghitung  selisih  diameter  zona bening  di  sekitar  koloni  dengan  diameter  koloni  kemudian  dibagi  dengan  diameter koloni.

## Uji Kualitatif Enzim Glukanase
Uji kualitatif enzim glukanase diukur dengan cara menginokulasikan 1 ose biakan bakteri ke media CMC dan media oat. Biakan diinkubasi selama 5 hari pada suhu 29 ◦ C. Untuk  media  CMC,  setelah  5  hari  inkubasi,  biakan  diteteskan  congo  red  sampai memenuhi  seluruh  pemukaan  media.  Biakan  dibiarkan  selama  30  menit  dan  dibilas dengan  akuades.  Diukur  diameter  zona  bening  yang  terbentuk  dengan  menggunakan jangka sorong.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Isolat Bakteri Kitinolitik
Isolat bakteri kitinolitik dari limbah udang diperoleh dengan melakukan metode cawan sebar menggunakan media nutrient agar (NA). Dari hasil isolasi diperoleh 55 isolat bakteri. 10 isolat diantaranya merupakan bakteri kitinolitik potensial. Detail karakterisasi dan morfologi bakteri kitinolitik diinformasikan pada tabel 1.
Tabel 1. Karakteristik Morfologi Isolat Bakteri Kitinolitik
Kode Isolat Morfologi Koloni Bakteri Bentuk Tepi  Elevasi Warna NR 02 Irregular Rata  Rata Krem NR 03 Irregular Rata  Rata Krem bening NR 04 Irregular Rata  Rata Krem NR 05 Circular Rata  Menonjol Krem pekat NR 06 Circular Rata  Menonjol Krem NR 07 Circular Rata  Berbukit Krem bening NR 08 Circular Rata  Cembung Krem NR 09 Irregular Rata  Berkawah Krem bening NR 11 Irregular Rata  Berbukit Putih kekuningan Tepi krem bening PU 01 Circular Rata  Cembung Kuning
Berdasarkan karakterisasi morfologi diperoleh 2 bakteri berbentuk batang Gram positif, 2 bakteri berbentuk batang Gram negatif, 3 bakteri berbentuk bulat Gram positif dan 3 bakteri berbentuk bulat Gram negatif (lihat gambar 1.).
Gambar 1 . Pewarnaan Gram bakteri kitinolitik (a) isolat NR02; (b) isolat NR09 dan (c) isolat NR04 dengan perbesaran 100x
Tabel 2. Karakteristik Fisiologis Isolat Bakteri Kitinolitik
Isolat Motilitas TSIA Sitrat Gelatin Gram Bentuk bakteri NR 02 Pedang + + + + Batang NR 03 Pedang + + + + Batang NR 04 Pedang + + + + Bulat NR 05 Titik + + + - Bulat NR 06 Titik + + + - Bulat NR 07 Pedang - + - - Batang NR 08 Pedang + + + - Bulat NR 09 Pedang + + + - Batang NR 11 Menghasilkan sulfur + + + + Bulat PU 01 Jonjot + menghasilkan sulfur + + - + Bulat
Uji aktivitas enzim kitinase kualitatif dilakukan pada media MGMK. Pada media yang  mengandung  kitin,  bakteri  kitinolitik  akan  menghasilkan  zona  bening  di  sekitar koloni seperti yang dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Pembentukan zona bening di sekitar koloni bakteri kitinolitik setelah inkubasi selama 7 hari pada MGMK dengan suhu 29 O C
Semakin besar kemampuan bakteri  kitinolitik dalam mendegradasi kitin, maka zona  bening  yang  dihasilkan  akan  semakin  besar.  Protease  merupakan  enzim  yang mampu  memecah  ikatan  peptida  pada  protein.  Isolat  bakteri  kitinolitik  juga  diketahui mampu menghasilkan enzim protease. Hal ini dibuktikan dengan adanya zona bening di sekitar koloni bakteri pada media uji. Indeks kitinolitik dan proteolitik 10 isolat bakteri kitinolitik dapat dilihat pada tabel 3.
Uji kualitatif kemampuan isolat bakteri kitinolitik menghasilkan enzim glukanase dilakukan  dengan  menggunakan  media Carboxymethyl Cellulase (CMC)  dan media  oat. Hasil uji aktivitas enzim glukanase kualitatif 10 isolat bakteri potensial dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 3. Indeks kitinolitik 10 isolat bakteri potensial pada MGMK
Kode Isolat Indeks Kitinolitik Indeks Proteolitik NR 02 2,67 0,55 NR 03 1,75 1,09 NR 04 0,06 0,27 NR 05 0,78 0,26 NR 06 1,42 0,13 NR 07 2,90 1,46 NR 08 0,01 0,25 NR 09 2,16 0,32 NR 11 0,07 0,38 PU 01 2,90 0,00 Tabel 4. Diameter zona bening 10 isolat bakteri potensial pada media CMC dan Oat Kode Isolat Zona Bening (mm)* Zona Bening (mm)** NR 02 23,0 5,12 NR 03 38,0 6,75 NR 04 7,0 2,15 NR 05 15,0 10,0 NR 06 0,0 11,5 NR 07 19,0 15,0 NR 08 38,0 6,0 NR 09 43,0 20,0 NR 11 39,0 4,2 PU 01 7,0 4,05 Keterangan: * (Media Oat); ** (Media CMC)

## Pembahasan
Bakteri  kitinolitik  potensial  yang  diperoleh  memiliki  karakter  yang  bervariasi. Kandungan senyawa organik yang tinggi pada limbah udang, menjadikan limbah tersebut sebagai habitat mikroorganisme yang memanfaatkannya sebagai sumber nutrisi. Bakteri akan menghasilkan enzim untuk memecah senyawa yang kompleks agar lebih mudah diserap oleh selnya.
Sepuluh isolat bakteri kitinolitik yang diperoleh memiliki bentuk koloni circular dan  irregular,  dengan  tepian  koloni  flat  (rata).  Karakteristik  makrokopis  isolat  yang diperoleh menjadi landasan untuk melakukan identifikasi. Hal ini sejalan dengan hasil penelitian Setia & Suharjono (2015) yang menyatakan bahwa terdapat 18 isolat bakteri kitinolitik  dari  limbah  udang  dengan  karakteristik  yang  bervariasi.  Dua  isolat  bakteri kitinolitik unggul memiliki karakter koloni berbeda. Isolat PBK 2 berbentuk coccibacil dan Gram negatif, sedangkan isolat SA 1.2 memiliki sel yang berbentuk batang dan Gram positif.
Fitri & Yasmin (2011) menyatakan bahwa beberapa spesies bakteri yang mampu menghasilkan enzim kitinase antara lain Bacillus papandayan , Bacillus thuringiensis , Vibrio
harveyi dan Aeromonas sp. Menurut Rostinawati (2008) enzim kitinase yang diproduksi oleh bakteri kitinolitik dari perairan beperan dalam proses penguraian kitin yang berasal dari cangkang udang, kepiting, cumi–cumi dan organisme perairan lainnya. Karakteristik dari  bakteri  kitinolitik  dapat  diketahui  dengan  melakukan  pengamatan  morfologi sehingga akan memudahkan proses identifikasi jenis bakteri kitinolitik tersebut.
Dari Tabel 3. dapat dilihat nilai indeks kitinolitik IK > 2 dihasilkan oleh 4 isolat bakteri yaitu; NR02, NR07, NR09 dan PU01. Nilai IK terendah dihasilkan oleh NR08 dengan nilai 0,01. Bakteri kitinolitik yang diperoleh memiliki karakter yang berbeda-beda dan sangat besar kemungkinan mereka berasal dari jenis yang berbeda pula. Setiap bakteri memiliki  kemampuan  yang  berbeda  dalam  memanfaatkan  nutrisi  yang  ada.  Bahkan bakteri yang berasal dari spesies yang sama pun belum tentu memiliki kemampuan yang sama apabila diisolasi dari tempat yang berbeda. Sebagaimana penelitian yang dilakukan oleh Chandler et al., (2011) yang mendapatkan perbedaan aktivitas dan produksi kitinase oleh  spesies Fransiella yang  berasal  dari  wilayah  yang  berbeda  dan  subspesies  yang berbeda pula. Dua belas isolat yang digunakannya semuanya memiliki perbedaan dalam aktivitas dan produksi kitinase. Gen penyandi kitinase yang terdapat pada bakteri-bakteri tersebut juga berbeda, yaitu chiA, chiB, chiC dan chiD .
Hasil penelitian menunjukkan bahwa dari semua bakteri kitinolitik asal limbah udang  mampu  mendegradasi  protein  kecuali  isolat  PU01.  Indeks  proteolitik  tertinggi ditunjukkan oleh bakteri NR07 dengan nilai sebesar 1,46. Tingginya kandungan protein pada  limbah  udang  mengakibatkan  banyak  pula  bakteri  proteolitik  yang  dapat  hidup. Protease merupakan enzim yang berperan dalam pemutusan ikatan peptida pada protein. Dewasa  ini,  pemanfaatan  protease  semakin  luas,  tidak  hanya  berperan  dalam  proses metabolisme sel. Protease juga dimanfaatkan dalam industri. Protease merupakan enzim skala industri dengan tingkat penjualan hingga 60% dari total penjualan enzim di dunia. Penggunaan  enzim  protease  antara lain  pada  industri  produksi  detergen,  penyamakan kulit dan bahan tambahan pangan (Sembiring et al., 2021).
Diameter zona bening tertinggi pada media oat dan CMC ditunjukkan oleh isolat NR09 masing-masing sebesar 43 mm dan 20 mm. Diameter terendah pada media oat ditunjukkan  oleh  isolat  NR06  dan  pada  media  CMC  oleh  isolat  NR04.  Hal  ini menunjukkan bahwa NR09 mampu memecah polimer karbohidrat yang terdapat pada media,  yaitu  selulosa  dan  glukan.  Isolat  NR09  menghasilkan  enzim  glukanase  untuk memecah selulosa menjadi monomer sehingga dapat dimanfaatkan sebagai nutrisinya.
Media carboxymethyl  cellulose (CMC)  yang  memiliki  ikatan  selulosa  dapat  larut ( amorf ), akan mendorong pertumbuhan koloni lebih cepat. Hal ini terjadi karena koloni bakteri akan menghasilkan lebih banyak enzim ekso- β -1,4-glukanase dibandingkan endo- β - 1,4-glukanase .  Jumlah  enzim ekso- β -1,4-glukanase yang  dihasilkan  akan  mempengaruhi kecepatan  hidrolisis  selulosa.  Hal  ini  terjadi  karena,  enzim ekso- β -1,4-glukanase mengkatalis produksi selobiosa, yang akan dihidrolisis menjadi glukosa. Selulosa yang terdapat  pada  media  ini  akan  menginduksi  terbentuknya  enzim  selulase.  Selulase merupakan enzim ekstraseluler yang terdiri atas kompleks endo- β -1,4-glukanase , kompleks - β -1,4-glukanase dan  selobiase.  Tidak  ditemukannya  aktivitas  enzim  selulase  pada beberapa isolat bakteri, diasumsikan karena kecilnya aktivitas enzim ekso-1,4- β -glukanase pada  isolat  tersebut.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  semakin  besar  zona  bening  yang
terbentuk pada media uji semakin banyak enzim glukanase yang dihasilkan oleh bakteri tersebut (Meryandini et al., 2009). Oat  mengandung  1,8-7,9% β -glukan  yang  sangat  memungkinkan  untuk menginduksi  gen  penyandi  glukanase  bakteri  ketika  ditumbuhkan  pada  media  yang mengandung β -glukan.  Penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh Celestino et  al. ,  (2006) menggunakan 1,3- β -1,4 glukan yang diambil dari Barley untuk menguji aktivitas enzim 1,3-1,4- β -glukanase. Dari beberapa sumber karbon yang digunakannya hanya β -glukan dari Barley yang mampu dihirolisis oleh enzim β -glukanase dari Rhizopus microsporus .

## KESIMPULAN
Adapun  kesimpulan  dari  penelitian  ini  adalah  diperoleh  10  isolat  bakteri kitinolitik penghasil enzim kitinase dari limbah udang. Nilai indeks kitinolitik terbesar ditunjukkan oleh isolat NR07 dan PU01 sebesar 2,90. Nilai indeks proteolitik terbesar ditunjukkan oleh isolate NR07 sebesar 1,46.

## DAFTAR PUSTAKA
Asril,  M.  (2011).  Kemampuan  Bakteri  Tanah  dalam  Menghambat  Pertumbuhan Ganoderma  boninense dan Fusarium  oxysporum secara In  Vitro dan  Uji Penghambatan  Penyakit  Layu  Fusarium  pada  Benih  Cabai  Merah .  Skripsi . Universitas Sumatera Utara.
Azhar,  M.,  Efendi,  J.,  Sofyeni,  E.,  Lesi,  R.  F.,  &  Novalina,  S.  (2010).  Pengaruh konsentrasi NaOH dan KOH terhadap derajat deasetilasi kitin dari limbah kulit udang. Eksakta , 1 (11), 1 – 8.
Chandler,  J.  C.,  Molins,  C.  R.,  Petersen,  J.  M.,  &  Belisle,  J.  T.  (2011).  Differential chitinase  activity  and  production  within  Francisella  species,  subspecies,  and subpopulations. Journal of bacteriology , 193 (13), 3265-3275.
Celestino, K. R. S., Cunha, R. B., & Felix, C. R. (2006). Characterization of a β -glucanase produced  by  Rhizopus  microsporus  var.  microsporus,  and  its  potential  for application in the brewing industry. BMC biochemistry , 7 (1), 1-9.
Dewi,  R.  R.  (2011).  Pengendalian  Saprolegnia  sp.  pada  Telur  Gurami  (Osphronemus gouramy)  Menggunakan  Isolat  Bakteri  Kitinolitik .  Tesis .  Universitas  Sumatera Utara. 88 halaman.
Donderski, W., & Brzezinska, M. S. (2003). The utilization of N-acetyloglucosamine and chitin  as  sources  of  carbon  and  nitrogen  by  planktonic and  benthic bacteria  in Lake Jeziorak. Polish Journal of Environmental Studies , 12 (6), 685-692.
Fauziah & Herdyastuti, N. (2013). Uji Aktivitas Bakteri Kitinolitik dari Tambak Udang di Lamongan dan Sidoarjo. Journal of Chemistry, 2 (1), 36-39.
Fitri,  L.,  &  Yasmin,  Y.  (2011).  Isolasi  dan  pengamatan  morfologi  koloni  bakteri kitinolitik. Jurnal Ilmiah Pendidikan Biologi , 3 (2), 20-25.
Herdyastuti,  N.,  Raharjo,  T.  J.,  Mudasir,  M.,  &  Matsjeh,  S.  (2009).  Chitinase  and chitinolytic microorganism: Isolation, characterization and potential. Indonesian Journal of Chemistry , 9 (1), 37-47.
Ilmi, M., (2007). Isolasi dan Karakterisasi Enzim Kitinolitik dari Bakteri Asal Limbah Pengolahan Udang. Tesis . Universitas Indonesia. 75 halaman
Kementerian  Kelautan  dan  Perikanan.  2020.  Statistik  Impor  Hasil  Perikanan  2011 ( Import Statistics of Fishery Products 2020 ).
Rinaudo,  M.  (2012).  Physical  properties  of  chitosan  and  derivatives  in  sol  and  gel states. Chitosan-based  systems  for  biopharmaceuticals:  delivery,  targeting  and  polymer therapeutics , Wiley Library, 23-44. https://doi.org/10.1002/9781119962977.ch2
Meryandini, A., Widosari, W., Maranatha, B., Sunarti, T. C., Rachmania, N., & Satria, H. (2010). Isolasi bakteri selulolitik dan karakterisasi enzimnya. Makara Journal of Science, 12 (2), 88-92.
Muharni,  M.,  &  Widjajanti,  H.  (2011).  Skrining  bakteri  kitinolitik  antagonis  terhadap pertumbuhan  jamur  akar  putih  (Rigidoporus  lignosus)  dari  rizosfir  tanaman karet. Jurnal Penelitian Sains , 14 (1), 112-119.
Priya, C. S., Jagannathan, N., & Kalaichelvan, P. T. (2011). Production of chitinase by Streptomyces  hygroscopicus  VMCH2  by  optimisation  of  cultural conditions. International Journal of Pharma and Bio Sciences , 2 (2), 56-63.
Rostinawati, T. (2008). Skrining dan identifikasi bakteri penghasil enzim kitinase dari air laut di perairan Pantai Pondok Bali. Penelitian Mandiri , 7 (3), 22-25.
Sembiring, S. C., Warouw, V., Wullur, S., Bara, R. A., Salaki, M. S., & Ginting, E. L.
(2021).  Isolation  and  Screening  the  Symbiont  Bacteria  of  the  Sponge Dragmacidon  sp  from  Manado  Bay,  North  Sulawesi  that  Producing  Chitinase and Protease. Jurnal Ilmiah Platax , 9 (1), 123-131.
Setia, I. N., & Suharjono, S. (2015). Diversitas dan Uji Potensi Bakteri Kitinolitik dari Limbah Udang. Biotropika: Journal of Tropical Biology , 3 (2), 95-98.
Soeka, Y. S., & Triana, E. (2016). Pemanfaatan limbah kulit udang untuk menghasilkan enzim  kitinase  dari  Streptomyces  macrosporeus  InaCC  A454. Jurnal  Kimia Terapan Indonesia , 18 (01), 91-101.
Suryanto,  D.,  Irawati,  N.,  &  Munir,  E.  (2011).  Isolation  and  characterization  of chitinolytic  bacteria  and  their  potential  to  inhibit  plant  pathogenic fungi. Microbiology Indonesia , 5 (3), 8-18.
Dwi, S., Rizky, H. W., Edy, B. M. S., & Erman, M. (2012). A possibility of chitinolytic bacteria  utilization  to  control  basal  stems  disease  caused  by  Ganoderma
boninense in oil palm seedling. African Journal of Microbiology Research , 6 (9), 2053- 2059.
How To Cite This Article, with APA style :
Batubara,  NR.,  Suryanto,  D.,  Munir  E.,  &  Rahmiati.    (2022).  Screening  and Characterization  of  Chitinolytic  Bacteria  from  Shrimp  Waste. Jurnal Pembelajaran dan Biologi Nukleus , 8(3), 744-753. https://doi.org/10.36987/jpbn.v8i3.3251