## Jurnal Sains dan Teknologi
Volume 12 Number 2, Tahun 2023, pp. 367-375 P-ISSN: 2303-3142 E-ISSN: 2548-8570 Open Access: https://doi.org/10.23887/jstundiksha.v12i2.55313

## A R T I C L E   I N F O
Article history: Received December 14, 2022 Revised December 21, 2022 Accepted June 03, 2023 Available online July 25, 2023
Kata Kunci: GC-MS, Minyak Trikatu, Suhu digesti, Waktu digesti, VCO
Keywords: GC-MS,  Temperature  of  digestion, Time of digestion, Trikatu oil, VCO
This is an open access article under the CC BY-SA license.
Copyright © 2023 by Author. Published by Universitas Pendidikan Ganesha.

## Fitokimia  Minyak  Trikatu  yang  Diproduksi  dengan  Variasi Suhu  dan Waktu Digesti secara GC-MS  ( Gas Chromatography Mass Spectrometry )
Dewa Ayu Ika Pramitha 1 *, Agung Ari Chandra Wibawa 2 , Putu Era Sandhi Kusuma Yuda 3
1,2 Universitas Mahasaraswati Denpasar, Denpasar, Indonesia

## A B S T R A K
Kasa  adalah  kondisi  klinis  yang  didefinisikan  dengan  jelas  seperti  batuk,  dan patofisiologisnya terkait erat dengan mekanisme refleks batuk dalam pengobatan modern. Trikatu adalah ramuan yang mengandung tiga bahan herbal dengan rasa pedas, yaitu  maricha (black  papper), Peepli (long  pepper), dan  Sunthi  (Ginger). Komposisi dari Trikatu terbukti efektif dalam pengobatan Kasa. Perawatan khas dalam  mengatasi  gejala  bronkitis  akut,  seperti  pneumonia  dan  asma,  terbukti tidak  efektif,  dan  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  Amerika  Serikat menyarankan  untuk  tidak  menggunakan  obat  batuk  dan  pilek  pada  anak  di bawah enam tahun. Pengobatan alternatif perlu dilakukan. Oleh karena itu, pada penelitian  ini  formula  sediaan  Trikatu  ditransformasikan  ke  dalam  pengobatan Kasa  berupa  minyak  herbal  menggunakan  VCO,  rimpang  jahe  merah  (Zingiber officinale Roxb.),  buah  kering  cabai  jawa  (Piper  retrofractum),  dan  buah  kering merica  hitam  (Piper  nigrum  Linn).  Formula  minyak  Trikatu  menggunakan metode digesti dengan variasi suhu dan waktu. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui kandungan senyawa minyak Trikatu terbentuk akibat variasi suhu dan waktu digesti dengan GC-MS. Senyawa  bioaktif utama yang dihasilkan pada minyak Trikatu dengan variasi suhu dan waktu digesti yaitu octanoic acid, n- decanoic  acid,  caryophyllene,  α -curcumene,  dodecanoic  acid,  zingerone, tetradecanoic  acid,  n- hexadecanoic  acid,  α -Monolaurin,  oleic  acid,  dan  piperine. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  suhu  dan  waktu  digesti  berpengaruh terhadap keberadaan senyawa dalam pembuatan minyak Trikatu. Semakin lama waktu  digesti  yang  digunakan  dalam  pembuatan  minyak  Trikatu,  maka kandungan asam lemak tak jenuh dan jenuh akan semakin meningkat.

## A B S T R A C T
Kasa is clinical condition as clearly defined as cough, and its pathophysiology is closely related to the mechanism of the cough reflex in modern medicine Trikatu is a concoction that contains three herbal ingredients with a spicy taste, namely maricha (black pepper), Peepli (long pepper), and Sunthi (Ginger). The composition of Trikatu is proven to be effective in the treatment of Kasa. Typical treatments for treating the symptoms of acute bronchitis, such as pneumonia and asthma, have  proven  ineffective,  and  the  US  Food  and  Drug  Administration  advises  against  using  cough  and  cold  medicines  in children under six years of age. Alternative medicine needs to be done. Therefore, in this study the Trikatu preparation formula  was  transformed  into  a  Kasa  treatment  in  the  form  of  herbal  oil  using  VCO,  red  ginger  rhizome  (Zingiber officinale Roxb.), dried fruit of Javanese chili (Piper retrofractum), and dried fruit of black pepper (Piper nigrum Linn). The Trikatu oil formula uses the digestion method with variations in temperature and time. The purpose of this study was to determine the content of Trikatu oil compounds formed due to variations in temperature and digestion time by GC-MS. The main bioactive compounds produced in Trikatu oil with variations in temperature and digestion time are octanoic acid, n- decanoic acid, caryophyllene, α -curcumene, dodecanoic acid, zingerone, tetradecanoic acid, n-hexadecanoic acid, α -Monolaurin,  oleic  acid,  and  piperine.  The  results showed  that  temperature  and  digestion  time  affect  the presence  of compounds in producing trikatu oil. Unsaturated and saturated fatty acid increase with the time.

## 1. PENDAHULUAN
Kasa merupakan  kondisi  klinis  yang  terlihat  jelas  seperti  batuk  dan  patofisiologisnya  persis berkorelasi  dengan  mekanisme  refleks  batuk  dalam  ilmu  kedokteran  kontemporer (Chaudhary  et  al., 2015) .  Pengobatan  Kasa  (penyakit  batuk)  berdasarkan  Ayurveda  dapat  menggunakan  seluruh  bagian tanaman segar Solanum surrattense Berm., buah kering Terminalia chebula Retz., Rimpang kering Zingiber officinale Roxb. (Jahe Merah), buah kering Piper nigrum Linn. (Merica hitam), buah kering Piper longum Linn. (Cabe Jawa), kulit batang Cinnamomum zylencum Blume., daun Cinnamomum tamala Nees. & Eberm.,
buah kering Elleteria cardmomum Maton. (kapulaga sebrang), benang sari nagasari ( Mesua ferrea Linn.), gula merah, dan madu yang diformulasikan menjadi Vyaghri haritaki avaleha (Chaudhary et al., 2015; Ram & Baghel, 2015) . Selain itu, dalam pengobatan penyakit bronchitis dapat menggunakan formulasi rimpang jahe  merah  ( Zingiber  officinale Roxb.),  buah  kering  cabe  jawa  ( Piper  longum Linn.),  dan  buah  kering merica hitam ( Piper nigrum Linn.) dengan perbandingan yang sama yang dikonsumsi secara oral (Dash & Ramaswamy, 2005) . Formulasi ini dinamakan dengan Trikatu (Kaushik et al., 2018) . Trikatu merupakan salah satu formulasi dalam Ayurveda yang memiliki makna “ tri ” dalam Bahasa sansekerta adalah tiga, dan “ katu ”  adalah acrids atau  rasa  pedas.  Sehingga,  trikatu  adalah  formulasi  dari  tiga  bahan  herbal  yang memiliki rasa pedas, yaitu maricha ( black papper ), Peepli ( long pepper ), dan Sunthi ( Ginger ) (Kaushik et al.,  2018).  Komposisi  dari  trikatu  terbukti  efektif  dalam  pengobatan Kasa (Ram  &  Baghel,  2015) . Kandungan  kimia  yang  terdapat  dalam  trikatu  dalam  bentuk  serbuk  adalah  6-shogaol,  6-gingerol,  dan piperin (Sharma et al., 2015) . Kadar piperin dalam formulasi trikatu serbuk adalah sekitar 0,056%(b/b) sampai dengan 0,074%(b/b) (Thakur et al., 2012) . Buah merica hitam ( Piper nigrum Linn.) yang terdapat dalam  formulasi  trikatu  memiliki  aktivitas  antidiare,  mengatasi  gangguan  pernafasan  termasuk  flu, demam,  asma,  mengobati  bronchitis,  gastritis,  rematik,  dan  sebagai  agen  antivirus (Ahmad  et  al.,  2012; Febriyanti,  Iswarin,  &  Susanti,  2018) .  M inyak  atsiri  daun  lada  mengandung  6  senyawa  utama  yaitu  δ - Elemen, Spatulenol, γ - Elemen, β - Selinen, β -Elemen, dan Kariofilen. Selain itu, buah merica hitam memiliki kandungan alkaloid (piperine dan Chavicine), flavonoid, amida, minyak atsiri (sabinene, pinene, linalool, limonene,  dan  phellandrene) (Mulyati  et  al.,  2015) .  Yang  bertanggung  jawab  pada  rasa  pedas  yang terdapat di merica hitam adalah senyawa piperine (Kaushik et al., 2018) . Buah cabai jawa juga salah satu bahan yang digunakan dalam formulasi trikatu yang mengandung zat pedas piperine, kavisin (isomer piperin), piperidin, piperitin, piperanin, piperilin, asarinin, pellitorine, isobutyl deka-trans-2-trans-4-dienamida, saponin, polifenol, minyak atsiri (piperonal, eugenol, kariofilen, bisabolene,  pentadekana),  asam  palmitat,  asam  tetrahydropiperine,  1-undesilenil-3,  4-metilen  dioksi benzena, dan sesamin (Warsiati et al., 2010) . Piperin, kavisin, piperidin, isobutildek-trans-2-4-dienamida termasuk  golongan  alkaloid.  Sedangkan  minyak  atsiri  merupakan  golongan  terpenoid.  Kandungan  dari piperin sekitar 2% dan minyak atsiri sekitar 1% (Ruhnayat et al., 2016) . Minyak atsiri buah cabai jawa terdiri  dari 3  komponen  utama  yaitu  β - caryophyllene  (17%),  pentadecane  (17,8%)  dan  β -  bisabolene (11,2%) (Evizal, 2013) . Selain itu, Jahe banyak mengandung konstituen aktif, seperti senyawa fenolik dan terpene (Mao et al., 2019; Prasad & Tyagi, 2015) . Senyawa fenolik dalam jahe terutama adalah gingerol, shogaol, dan paradol. Pada jahe segar, gingerol merupakan polifenol utama, seperti 6-gingerol, 8-gingerol, dan 10-gingerol. Dengan perlakuan panas atau penyimpanan lama, gingerol dapat diubah menjadi shogaol yang sesuai. Setelah hidrogenasi, shogaol dapat diubah menjadi paradol (Mao et al., 2019; Stoner, 2013) . Senyawa  fenolik  lain  yang  terdapat  dalam  jahe,  seperti  quercetin,  zingerone,  gingerenone-A,  dan  6- dehydrogingerdione (Ji et al., 2017; Mao et al., 2019; Schadich et al., 2016) . Selain itu, terdapat beberapa komponen  terpene  dalam  jahe  seperti  β - bisabolene,  α - curcumene,  zingiberene,  α - farnesene,  dan  β - sesquiphellandrene, yang dianggap sebagai konstituen utama minyak atsiri jahe (Mao et al., 2019; Yeh et al., 2014) . Terapi khas untuk mengelola gejala bronkitis akut seperti pneumonia dan asma telah terbukti tidak  efektif,  dan  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  Amerika  Serikat  merekomendasikan  untuk  tidak menggunakan obat batuk dan pilek pada anak di bawah enam tahun (Albert, 2010) . Pengobatan alternatif perlu  dilakukan. Oleh  karena itu, penelitian ini  memodifikasi formula sediaan Trikatu  pada pengobatan Kasa dalam bentuk minyak herbal menggunakan VCO ( Virgin Coconut Oil ) sebagai basis minyak, rimpang jahe  merah  ( Zingiber  officinale Roxb.),  buah  kering  cabai  jawa  ( Piper  retrofractum )  yang  merupakan spesies lain dari long pepper yang berasal dari jawa, dan buah kering merica hitam ( Piper nigrum Linn). Formulasi  minyak  trikatu  menggunakan  metode  digesti  dengan  variasi  waktu  dan  suhu  digesti.  Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui kandungan senyawa yang dimiliki dari minyak trikatu hasil produksi variasi suhu dan waktu digesti secara GC-MS.

## 2. METODE
Alat  dan  bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  gelas  beaker,  corong,  labu  takar, Sonikasi GT-Sonic model VGT-1730QTD, GCMS Agilent dengan GC type 7890B dan MSD type 5977B ,  GCMS 5977B Data Analysis, VCO merek X, Cabai Jawa ( Piper retrofractum ), Merica hitam ( Piper nigrum Linn.), Jahe  merah  ( Zingiber  officinale Roxb.)  yang  diperoleh  dari  Merapi  Farmas  Herbal,  ethanol (Merck).Pembuatan  minyak  Trikatu  dilakukan  dengan  cara  diblender  masing-masing  buah  cabai  jawa kering,  merica  hitam  kering,  dan  jahe  merah  kering  hingga  menjadi  serbuk  kasar,  kemudian  masing- masing diayak dengan  ayakan 40 mesh  kemudian masing-masing serbuk cabai jawa, merica hitam, dan jahe  merah  dicampur  dengan  perbandingan  yang  sama  (1:1:1).  Campuran  ini  dinamakan  Trikatu. Selanjutnya, campuran Trikatu  diformulasikan dengan  VCO  menggunakan perbandingan 1:10 (1  bagian
serbuk  Trikatu  dalam  10  bagian  VCO).  Selanjutnya  dilakukan  proses  digesti  dengan  gambaran  seperti yang  ditunjukkan  pada Gambar  1 .  Setelah  proses  digesti  selesai,  sediaan  dimaserasi  selama  24  jam. Maserat disaring menggunakan kertas saring Whatman No. 1.
Gambar 1. Gambaran Pembuatan Sampel
Keterangan:
P1A : Serbuk Trikatu dalam VCO dipanaskan dengan suhu 40°C selama 1 jam P1B : Serbuk Trikatu dalam VCO dipanaskan dengan suhu 40°C selama 4 jam P1C : Serbuk Trikatu dalam VCO dipanaskan dengan suhu 40°C selama 8 jam P2A : Serbuk Trikatu dalam VCO dipanaskan dengan suhu 60°C selama 1 jam P2B : Serbuk Trikatu dalam VCO dipanaskan dengan suhu 60°C selama 4 jam P2C : Serbuk Trikatu dalam VCO dipanaskan dengan suhu 60°C selama 8 jam
Sampel  yang  telah  disaring  selanjutnya  dipipet  masing-masing sebanyak  50  μL sampel, dimasukkan  kedalam  labu  ukur  10  mL,  kemudian  dilarutkan  dengan  etanol  sampai  tanda  batas. Selanjutnya  disonikasi  selama  15  menit  dan  disaring  dengan  kertas  saring  Whatman  No.1.  Setelah  itu sampel uji dimasukkan ke dalam botol vial dan ditutup rapat. Analisis fitokimia dilakukan dengan GCMS. Sampel dianalisis menggunakan GC-MS ( Gas Chromatography Mass Spectrometry ) dengan merek Agilent Technologies, GC type 8860B dengan detektor MS type 5977B dan kolom kapiler ( capillary column ) HP- 5MS UI (30 m x 0,250 mm, ketebalan lapisan film 0,25 μm). Gas pembawa yang digunakan yaitu helium dengan kecepatan alir 1,0 mL/menit dengan  tipe injeksi splitless serta tekanan kepala kolom yaitu 8,81 psi. Volume injeksi adalah  1 μL dengan temperatur injektor diatur pada 250 º C. Suhu kolom dijaga pada 70 º C  ditahan  selama  2  menit,  kemudian  ditingkatkan  hingga  180 º C  dengan  kenaikan  20 º C/menit  lalu ditahan selama 3 menit, selanjutnya ditingkatkan kembali hingga 250 º C dengan kenaikan 20 º C/menit dan ditahan  selama  16  menit,  sehingga  waktu  yang  diperlukan  untuk  analisis  sampel  adalah  30  menit. Kromatografi yang dihasilkan dianalisis dengan aplikasi GCMS 5977B Data Analysis untuk mendapatkan waktu  retensi,  luas  area  dan  spektrum  dari  masing-masing  puncak  pemisahan  senyawa.  Spektrum senyawa  yang  diperoleh  dibandingkan  dengan  spektrum  dari  referensi  perpustakaan  spectral  massa NIST17.LIB  ( Library National  Institute  of  Standards  and  Technology  17 ).  Luas  area  senyawa  yang didapatkan,  dianalisis  menggunakan Microsoft  excel .  Pengaruh  suhu  dan  waktu  digesti  terhadap banyaknya senyawa yang terkandung dibuat dalam bentuk Grafik.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Kromatogram  yang  dihasilkan  pada  VCO  dan  minyak  trikatu  dengan  variasi  suhu  dan  waktu digesti menggunakan GCMS memberikan gambaran pemisahan yang baik untuk puncak senyawa utama penyusun  VCO  dan  trikatu.  Masih  terdapat  puncak  senyawa  yang  memiliki  intensitas  rendah  dengan pemisahan yang kurang baik pada waktu retensi yang berhimpitan seperti pada Gambar 2 .
Serbuk Trikatu 30 gram Kelompok I P1A P1B P1C Kelompok II P2A P2B P3C
Gambar 2. Kromatogram VCO dan Minyak Trikatu dengan GCMS
Keberadaan  senyawa  bioaktif  utama  yang  dihasilkan  pada  minyak  trikatu  dengan  variasi  suhu dan waktu digesti terlihat pada Tabel 1 , yaitu octanoic acid (asam stearat), n-decanoic acid (asam kaprat), caryophyllene, α -curcumene, dodecanoic acid (asam laurat), zingerone, tetradecanoic acid (asam miristat), n-hexadecanoic acid (asam palmitat), α -Monolaurin, oleic acid, dan piperine dengan waktu retensi secara berturut-turut  6,624;  7,639;  8,274;  8,697;  9,378;  10,590;  11,781;  13,519;  14,473;  14,766;  dan  27,695 menit.  Senyawa-senyawa  aktif  lain  yang  dimiliki  oleh  trikatu  hadir  pada  minyak  trikatu,  diantaranya adalah  senyawa  germacrene  D  (8,803  menit)  hadir  pada  minyak  trikatu  yang  diproduksi  dengan  suhu digesti 40°C selama 1 jam dan 4 jam, serta suhu digesti 60°C selama 1 jam. Senyawa zingiberene (8,804 menit) hadir pada minyak trikatu dengan suhu digesti 40°C selama 8 jam, serta suhu digesti 60°C selama 4 dan 8 jam. Senyawa .beta.-Bisabolene (8,936 menit) terdeteksi pada minyak trikatu dengan suhu digesti 40°C selama 1 jam, serta suhu 60°C selama 4 dan 8 jam. Senyawa beta-Sesquiphellandrene (9,106 menit) tidak hadir pada minyak trikatu dengan suhu 40°C selama 4 jam. Senyawa 6-Shogaol (16,124 menit) tidak terdapat  pada  minyak  trikatu  dengan  suhu  40°C  selama  1  dan  8  jam,  sedangkan  senyawa  Piperanine (20,645 menit)  hanya terdapat pada minyak trikatu dengan suhu digesti 40°C selama 1 dan 8 jam.
Tabel 1. Senyawa dalam VCO dan Minyak Trikatu Variasi Suhu dan Waktu Digesti
Senyawa Wakt u reten si (mnt ) Luas Area VCO P1A P1B P1C P2A P2B P2C Octanoic acid  6,264 151132 50 296674 250 260801 498 437570 441 217332 099 292538 221 426594 463 n-Decanoic acid 7,639 959218 5 889895 45 807564 60 141064 706 650904 80 890361 06 133300 059 Caryophylle ne 8,274 ND 423611 86 332203 84 348919 35 297880 37 351569 42 331780 73 α - curcumene 8,697 ND 122449 72 911710 1 100581 26 849184 1 992790 1 109705 59 Germacrene D 8,803 ND 169674 33 448376 7 ND 539562 8 ND ND Zingiberene 8,804 ND ND ND 653988 7 ND 132465 65 170874 95 .beta.- Bisabolene 8,936 ND 989560 0 ND ND ND 798164 2 890558
7
VCO P1A P1B P1C P2A P2B P2C
Senyawa Wakt u reten si (mnt ) Luas Area VCO P1A P1B P1C P2A P2B P2C beta- Sesquiphell andrene 9,106 ND 791722 5 ND 492405 7 604697 8 550349 7 766759 8 Dodecanoic acid 9,378 103282 735 402162 526 364598 324 651119 969 315346 897 438078 879 623673 296 Zingerone 10,59 0 ND 146880 99 106038 87 123979 22 131529 48 117027 49 162380 82 Tetradecanoi c acid 11,78 1 257044 42 136404 569 134940 974 229247 207 994238 88 154088 852 229932 461 n- Hexadecanoi c acid 13,51 9 230177 79 602896 30 458010 21 732809 93 382575 25 686973 85 103157 961 α - Monolaurin 14,47 3 102949 06 776637 21 685401 87 135096 946 621050 32 970402 47 127180 689 Oleic Acid 14,76 6 953811 8 563703 14 293456 20 711455 68 352351 06 680826 12 109814 546 6-Shogaol 16,12 4 ND ND 158826 11 ND 142563 74 222773 54 275293 28 piperanine 20.64 5 ND 149186 10 ND 152812 39 ND ND ND Piperine 27,69 5 ND 202971 522 167092 607 189543 699 170180 957 169612 943 213193 461
Tingkat keberadaan senyawa utama yang terdapat dalam minyak trikatu dengan variasi suhu dan waktu  digesti  terlihat  pada Gambar  3 ,  yaitu  senyawa  caryophyllene,  dan α -curcumene  lebih  tinggi  jika minyak  trikatu  diproduksi  dengan  suhu  40°C  selama  1  jam.  Namun,  senyawa  zingerone  dan  piperine terekstrasi dalam VCO lebih tinggi dengan suhu 60°C selama 8 jam. Senyawa utama penyusun VCO yaitu asam  stearate,  asam  kaprat,  asam  laurat,  asam  miristat,  asam  palmitat,  α -Monolaurin,  dan  asam  oleat semakin  meningkat  pada  VCO  setelah  ditambahkan  bahan  trikatu  dibandingkan  dalam  VCO  sebelum ditambahkan rempah. Pada minyak trikatu yang diproduksi pada suhu 40°C selama 8 jam menghasilkan senyawa asam stearat, kaprat, laurat, miristat, dan α -Monolaurin yang lebih  tinggi. Sedangkan senyawa asam  palmitat  dan  oleat  terekstrak  lebih  banyak  pada  minyak  trikatu  dengan  suhu  60°C  selama  8  jam. Struktur Senyawa yang terkandung dalam minyak trikatu disajikan pada Gambar 4 .
Gambar 3. Grafik Senyawa Utama dalam Minyak Trikatu Variasi Suhu dan Waktu Digesti
0 100000000 200000000 300000000 400000000 500000000 600000000 700000000 VCO P1A P1B P1C
P2A P2B P2C
Octanoic acid (asam kaprilat) n-Decanoic acid (asam kaprat) Caryophyllene
α -curcumene Germacrene D Zingiberene .beta.-Bisabolene beta-Sesquiphellandrene Dodecanoic acid (asam laurat) Zingerone Tetradecanoic acid (asam miristat) n-Hexadecanoic acid (asam palmitat)
α -Monolaurin Oleic Acid 6-Shogaol
Piperanine Piperine
Gambar 4. Struktur Senyawa yang Terkandung dalam Minyak Trikatu

## Pembahasan
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa penambahan rempah trikatu (cabai jawa, merica hitam, dan jahe merah) meningkatnya asam lemak jenuh pada VCO yang dalam hal ini digunakan sebagai basis pembuatan minyak trikatu. Bertambahnya kandungan asam lemak jenuh dikarenakan bahan baku trikatu yaitu  cabai  jawa  memiliki  kandungan  9-octadecanoic  acid,  asam  oleat (Wang,  Fan,  Zhong,  Luo,  &  Hao, 2022) , sedangkan pada jahe memiliki kandungan asam lemak seperti  lauric acid, myrystic acid, linolenic acid,  capric  acid,  stearic  acid,  lingoceric  acid,  and  caprylic  acid (Oforma,  Udourioh,  &  Ojinnaka,  2020) . Sehingga,  kandungan  asam  lemak  jenuh  pada  produk  minyak  trikatu  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan asam  lemak  jenuh  yang  terdapat  dalam  VCO  murni.  Asam  laurat  merupakan  kandungan  utama  yang dimiliki oleh VCO dan kandungan tertinggi yang dimiliki oleh minyak trikatu terutama pada suhu digesti 40°C selama 8 jam. Adanya asam laurat yang bertambah dapat memberikan aktivitas antibakteri tertinggi pada minyak trikatu yang diproduksi dengan suhu digesti 40°C selama 8 jam. Pada suhu dan waktu yang sama,  senyawa  α -Monolaurin  juga  ditemukan.  Senyawa  ini  mampu  sebagai  antibakteri  namun  hanya
hanya efektif terhadap bakteri patogen, bukan untuk bakteri probiotik yang menguntungkan (Abbas et al., 2017;  Silalahi  et  al.,  2018) .  Kandungan  senyawa  dalam  minyak  trikatu  dipengaruhi  oleh  proses pemanasan.  Suhu  tinggi  dan  pemanasan  yang  lama  meningkatkan  reaksi  hidrolisis,  sehingga  reaksi sekunder negatif menjadi dominan (Pramitha & Karta, 2021) . Reaksi hidrolisis ikatan ester terjadi karena adanya uap air dengan melepaskan asam lemak bebas rantai panjang. Selain itu, reaksi oksidasi juga dapat terjadi  dengan  adanya  air  yang  menyebabkan  terbentuknya  asam  lemak  trans.  Reaksi  polimerisasi  pun dapat  terjadi  karena  proses  pemanasan  yang  tinggi (Tian,  2013) .  Proses  suhu  tinggi  menyebabkan konversi  asam  lemak  tak  jenuh  cis  menjadi  posisi  trans,  dan  peningkatan  jumlah  asam  lemak  trans sebanding dengan penurunan asam lemak tak jenuh cis (asam oleat) (Sartika, 2008) . Pada penelitian ini tidak terjadi perubahan posisi asam lemak tak jenuh cis menjadi trans, namun terjadi peningkatan jumlah asam lemak tak jenuh. Hasil penelitian menunjukkan bahwa semakin lama waktu digesti, maka semakin tinggi kandungan asam lemak tak jenuh yang diperoleh pada minyak trikatu dengan suhu digesti 40 dan 60°C. Hal yang sama juga terjadi pada kandungan asam lemak tak jenuh dalam minyak trikatu.
Suhu dan waktu digesti pada penelitian ini mempengaruhi keberadaan beberapa senyawa dalam minyak trikatu seperti germacrene D, zingiberene, .beta.-Bisabolene, beta-Sesquiphellandrene, 6-shogaol, dan  piperanine.  Senyawa-senyawa  ini  ditemukan  pada  jahe  merah (Oforma  et  al.,  2020) ,  merica  hitam (Dosoky  et al., 2019;  Liu, Song, & Hu, 2007) , dan cabai jawa (Wang et al., 2022) . Tabel 1 menunjukkan bahwa senyawa-senyawa tersebut tidak terdeteksi pada beberapa suhu dan waktu digesti minyak trikatu. Selain itu,  senyawa caryophyllene, dan α -curcumene lebih  tinggi jika minyak trikatu  diproduksi dengan suhu  40°C  selama  1  jam.  Namun,  senyawa  zingerone  dan  piperine  terekstrasi  dalam  VCO  lebih  tinggi dengan suhu 60°C selama 8 jam. Hal ini menunjukkan bahwa, VCO dapat mengekstraksi sebagian senyawa yang terkandung dalam serbuk trikatu (cabai jawa, merica hitam dan jahe merah).  Caryophyllene dalam lada hitam tidak diekstraksi pada saat ekstraksi suhu  tinggi (Lee & Ko, 2021) . Pernyataan ini didukung oleh  penelitian  yang  menyatakan  bahwa  semakin  tinggi  minyak  atsiri  pada  lada  hitam  maka  semakin rendah rendemen ekstraksi caryophyllene yang dihasilkan (Maschietti, 2011) . Dengan demikian, semakin rendah temperatur yang digunakan dalam proses ekstraksi, semakin tinggi caryophyllene yang dihasilkan. Senyawa piperine merupakan komponen bioaktif tertinggi yang dihasilkan pada minyak Trikatu dengan  VCO.  Senyawa  piperine  berasal  dari  buah  cabai  jawa  dan  merica  hitam.  Selain  itu,  senyawa- senyawa  seperti  caryophyllene,  germacrene  D,  dan  piperanine  juga  berasal  dari  buah  cabai  jawa  dan merica  hitam.  Buah  cabai  jawa  mengandung  zat  pedas  piperine,  kavisin  (isomer  piperin),  piperidin, piperitin,  piperanin,  piperilin,  asarinin,  pellitorine,  isobutyl  deka-trans-2-trans-4-dienamida,  saponin, polifenol,  minyak  atsiri  (piperonal,  eugenol,  kariofilen,  bisabolene,  pentadekana),  asam  palmitat,  asam tetrahydropiperine, 1-undesilenil-3, 4-metilen dioksi benzena, dan sesamin (Warsiati et al., 2010) . Piperin, kavisin, piperidin, isobutildek-trans-2-4- dienamida termasuk golongan alkaloid. Sedangkan minyak atsiri merupakan  golongan  terpenoid.  Kandungan  dari  piperin  sekitar  2%  dan  minyak  atsiri  sekitar  1 % (Ruhnayat  et  al.,  2016) .  Minyak  atsiri  buah  cabai  jawa  terdiri  dari 3  komponen  utama  yaitu  β - caryophyllene  (17%),  pentadecane  (17,8%)  dan  β -  bisabolene  (11,2%) (Evizal,  2013). Buah  cabai  jawa ( Piper  retrofractum Vahl.)  mempunyai  khasiat  sebagai  antipiretik,  peluruh  air  seni,  peluruh  keringat, pereda  kejang,  dan  mengatasi  gangguan  pencernaan.  Buah  cabai  jawa  memiliki  banyak  aktivitas farmakologis  antara  lain  mengatasi  gangguan  kardiovaskuler,  anti  amuba  ( Entamoeba  histolytica ), antimikroba  (beberapa  bakteri  patogen  seperti Salmonella  thypi , Escherichia  coli,  Pseudomonas aeruginosa ), antiulcer ,  antidiabetes,  analgesik  (induksi  asam  asetat),  antiinflamasi  (induksi  Karagenan), efek  terhadap  saluran  pernafasan  dan  preventif  terhadap  gangguan  hati (Mun’im,  2011) .  Selain  itu, beberapa penelitian telah dilakukan dan menemukan efek farmakologi lainnya dari buah cabai jawa yaitu sebagai  antioksidan,  anti  proliferasi, antiphotoaging dan  anti  obesitas (Salleh  &  Farediah,  2020) .  Buah merica hitam ( Piper nigrum Linn.) memiliki aktivitas antidiare, mengatasi gangguan pernafasan termasuk flu, demam, asma, mengobati bronchitis, gastritis, rematik, dan sebagai agen antivirus (Ahmad et al., 2012; Febriyanti  et  al.,  2018) .  M inyak  atsiri  daun  lada  mengandung  6  senyawa  utama  yaitu  δ -Elemen, Spatulenol,  γ - Elemen,  β - Selinen,  β -Elemen,  dan  Kariofilen (Mulyati  et  al.,  2015) .  Selain  itu,  buah  merica hitam memiliki kandungan alkaloid (piperine dan Chavicine), flavonoid, amida, minyak atsiri (sabinene, pinene, linalool, limonene, dan phellandrene). Yang bertanggung jawab pada rasa pedas yang terdapat di merica  hitam  adalah  senyawa  piperine (Kaushik,  Jain,  Khan,  &  Rai,  2018) .  Senyawa α -curcumene, zingiberene, β -bisabolene, β -sesquiphellandrene, zingerone, dan 6-Shogaol berasal dari Jahe merah. Jahe banyak  mengandung  konstituen  aktif,  seperti  senyawa  fenolik  dan  terpene (Mao  et  al.,  2019;  Prasad  & Tyagi, 2015) . Senyawa fenolik dalam jahe terutama adalah gingerol, shogaol, dan paradol. Pada jahe segar, gingerol  merupakan  polifenol  utama,  seperti  6-gingerol,  8-gingerol,  dan  10-gingerol.  Dengan  perlakuan panas atau penyimpanan lama, gingerol dapat diubah menjadi shogaol yang sesuai. Setelah hidrogenasi, shogaol dapat diubah menjadi paradol (Mao et al., 2019; Stoner, 2013). Senyawa fenolik lain yang terdapat dalam jahe, seperti quercetin, zingerone, gingerenone-A, dan 6-dehydrogingerdione (Ji et al., 2017; Mao et
al.,  2019;  Schadich  et  al.,  2016) .  Selain  itu,  terdapat  beberapa  komponen  terpene  dalam  jahe  seperti  β - bisabolene,  α - curcumene,  zingiberene,  α - farnesene,  dan  β -sesquiphellandrene,  yang  dianggap  sebagai konstituen utama minyak atsiri jahe (Mao et al., 2019; Yeh et al., 2014) .

## 4. SIMPULAN
Senyawa    bioaktif  utama  yang  dihasilkan  pada  minyak  trikatu  dengan  variasi  suhu  dan  waktu digesti  yaitu octanoic  acid (asam  stearat), n-decanoic  acid (asam  kaprat), caryophyllene, α -curcumene, dodecanoic acid (asam laurat), zingerone, tetradecanoic acid (asam miristat), n-hexadecanoic acid (asam palmitat), α -Monolaurin,  oleic  acid,  dan  piperine .  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  penambahan rempah  dapat  meningkatkan  kandungan  asam  lemak  jenuh  pada  VCO  yang  dalam  hal  ini  digunakan sebagai  basis  pembuatan  minyak  trikatu.  Semakin  lama  waktu  digesti  yang  digunakan  dalam  proses pembuatan minyak trikatu, maka kandungan asam lemak tak jenuh dan jenuh akan semakin meningkat. Suhu dan waktu digesti juga mempengaruhi keberadaan beberapa senyawa dalam minyak trikatu seperti germacrene D, zingiberene, .beta.-Bisabolene, beta-Sesquiphellandrene, 6-shogaol, dan piperanine karena tidak  terdeteksi  pada  beberapa  suhu  dan  waktu  digesti  minyak  trikatu.  Penelitian  terkait  potensi bioaktivitas dari senyawa yang dihasilkan pada minyak trikatu perlu ditentukan untuk dapat memberikan informasi lebih mendalam terkait penggunaan produk minyak trikatu.

## 5. UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  kepada  Universitas  Mahasaraswati  Denpasar  yang  telah  memberikan  dana penelitian  dalam  bentuk  Hibah  Internal  Universitas  Mahasaraswati  Denpasar,  sehingga  penelitian  ini dapat terlaksana. Tentu saja peneliti mengucapkan terima kasih pula kepada Fakultas Farmasi Universitas Mahasaraswati Denpasar yang telah memberikan fasilitas penelitian yaitu laboratorium dengan alat-alat yang lengkap. Serta terima kasih kepada Tenaga laboratorium yaitu ibu apt. Vallina Rahmadinha, S.Farm. yang telah membantu peneliti dalam melakukan analisis.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
Abbas, A. A., Ernest, B. A., Akeh, M., Upla, P., & Tuluma, T. K. (2017). Antimicrobial Activity of Coconut Oil and its Derivative (Lauric Acid) on Some Selected Clinical Isolates. International Journal of Medical Science and Clinical Inventions , 4(8), 3173 – 3177. https://doi.org/10.18535/ijmsci/v4i8.12 . Ahmad, N., Fazal, H., Abbasi, B. H., Farooq, S., Ali, M., & Khan, M. A. (2012). Biological role of Piper nigrum L.  (Black  pepper):  A  review. Asian  Pacific  Journal  of  Tropical  Biomedicine ,  2(3),  S1945 – S1953. https://doi.org/10.1016/S2221-1691(12)60524-3
Albert, R. H. (2010). Diagnosis and Treatment of Acute Bronchitis. American Academy of Family Physicians , 82(11). https://www.aafp.org/pubs/afp/issues/2010/1201/p1345.html . Chaudhary, S. A., Patel, K. S., Kori, V. S., Rajagopala, S., Harisha, C. R., & Shukla, V. J. (2015). Comparative pharmacognostical  and  pharmaceutical  evaluation  of  Vyaghri  haritaki  avaleha  -  an  ayurvedic formulation. Indian  Journal  of  Pharmaceutical  and  Biological  Research ,  3(02),  07 – 12. https://doi.org/10.30750/IJPBR.3.2.2 .
Dash, V., & Ramaswamy, S. (2005). Ayurveda, the Science of Traditional Indian Medicine. Lustre Press.
Dosoky,  N. S.,  Satyal, P., Barata, L. M., da Silva, J. K. R.,  & Setzer, W. N. (2019). Volatiles of black pepper fruits (Piper nigrum L.). Molecules , 24(23) . https://doi.org/10.3390/molecules24234244 . Evizal,  R.  (2013).  Status  fitofarmaka  dan  perkembangan  agroteknologi  cabe  jawa  (Piper  Retrofractum Vahl.). Jurnal Agrotropika , 18(1), 34-40. http://dx.doi.org/10.23960/ja.v18i1.4293 .
Febriyanti,  A.  P.,  Iswarin,  S.  J.,  &  Susanti,  S.  (2018).  Penetapan  Kadar  Piperin  Dalam  Ekstrak  Buah  Lada Hitam  (Piper  Nigrum  Linn.)  Menggunakan  Liquid  Chromatography  Tandem  Mass  Spectrometry (LC – MS/MS). Jurnal Ilmiah Farmasi Farmasyifa , 1(2), 69 – 79.
https://doi.org/10.29313/jiff.v1i2.3160  .
Ji, K., Fang, L., Zhao, H., Li, Q., Shi, Y., Xu, C., … Liu, Q. (2017). Ginger Oleoresin Alleviated γ -Ray Irradiation- Induced Reactive Oxygen Species via the Nrf2 Protective Response in Human Mesenchymal Stem Cells. Oxidative Medicine and Cellular Longevity , 2017. https://doi.org/10.1155/2017/1480294.
Kaushik, R., Jain, J., Khan, A. D., Khan, D., & Rai, P. (2018). Trikatu-A combination of three bioavailability enhancers. Article in International Journal of Green Pharmacy , 12(3), 437. https://doi.org/10.22377/IJGP.V12I03.2002 . Lee, H. Y., &  Ko, M. J. (2021). Thermal decomposition and oxidation of β -caryophyllene in black pepper during  subcritical  water  extraction. Food  Science  and  Biotechnology ,  30(12),  1527 – 1533. https://doi.org/10.1007/S10068-021-00983-Z/TABLES/1 .
Liu, L., Song, G., & Hu, Y. (2007). GC-MS analysis of the essential oils of Piper nigrum L. and Piper longum L. Chromatographia , 66(9 – 10), 785 – 790. https://doi.org/10.1365/s10337-007-0408-2.
Mao, Q. Q., Xu, X. Y., Cao, S. Y., Gan, R. Y., Corke, H., Beta, T., & Li, H. bin. (2019). Bioactive compounds and bioactivities  of  ginger  (zingiber  officinale  roscoe). Foods .  MDPI  Multidisciplinary  Digital Publishing Institute. https://doi.org/10.3390/foods8060185 . Maschietti,  M.  (2011).  High-pressure  gas – liquid  equilibrium  of  the  system  carbon  dioxide –β - caryophyllene  at  50  and  70°C. The  Journal  of  Supercritical  Fluids ,  59,  8 – 13. https://doi.org/10.1016/j.supflu.2011.07.020.
Mulyati,  S.,  Jayuska,  A.,  &  Ardiningsih,  P.  (2015).  Aktivitas  Minyak  Atsiri  Daun  Lada  (Piper  Nigrum  L.) Terhadap  Rayap  Coptotermes  sp. Jurnal  Kimia  Khatulistiwa ,  4(3),  100 – 106.  from https://jurnal.untan.ac.id/index.php/jkkmipa/article/view/11890.
Mun’im, A. (2011). Fitoterapi dasar . (E. Hanani,Ed.). Dian Rakyat.
Oforma, C. C., Udourioh, G. A., & Ojinnaka, C. M. (2020). Characterization of Essential Oils and Fatty Acids Composition  of  Stored  Ginger  (Zingiber  officinale  Roscoe). Journal  of  Applied  Sciences  and Environmental Management , 23(12), 2231. https://doi.org/10.4314/jasem.v23i12.22.
Pramitha,  D.  A.  I.,  &  Karta,  I.  W.  (2021).  Analysis  of  Fatty  Acids  in  Virgin  Coconut  Oil  Frying  at  Various
Temperatures. Jurnal Sains Dan Teknologi , 104 – 111. https://doi.org/10.23887/jstundiksha.v10i1.34452.
Prasad,  S.,  &  Tyagi,  A.  K.  (2015).  Ginger  and  its  constituents:  Role  in  prevention  and  treatment  of gastrointestinal cancer. Gastroenterology Research and Practice . https://doi.org/10.1155/2015/142979 . Ram,  J.,  &  Baghel,  M.  (2015).  Clinical  efficacy  of  Vyaghriharitaki  Avaleha  in  the  management  of  chronic bronchitis. AYU  (An  International  Quarterly  Journal  of  Research  in  Ayurveda) ,  36(1),  50. https://doi.org/10.4103/0974-8520.169009.
Ruhnayat, A., Muljati, R. S., Haryudin, W., Penelitian, B., Obat, T., & Aromatik, D. (2016). Respon Tanaman Cabe  Jawa  Produktif  Terhadap  Pemupukan  Di  Sumenep  Madura. Buletin  Penelitian  Tanaman Rempah Dan Obat , 22(2), 136 – 146. https://doi.org/10.21082/bullittro.v22n2.2011.%p. Salleh, W. M. N. H. W., & Farediah, A. (2020). Phytopharmacological investigations of Piper retrofractum Vahl. - a review. Agriculturae Conspectus Scientificus , 85(3), 193 – 202.
Sartika,  R.  A.  D.  (2008).  Pengaruh  Asam  Lemak  Jenuh,  Tidak  Jenuh  dan  Asam  Lemak  Trans  terhadap
Kesehatan. Kesmas: National Public Health Journal , 2(4), 154.
https://doi.org/10.21109/kesmas.v2i4.258. Schadich,  E.,  Hlaváč,  J.,  Volná,  T.,  Varanasi,  L.,  Hajdúch,  M.,  &  Džubák,  P.  (2016).  Effects  of  Ginger Phenylpropanoids  and  Quercetin  on  Nrf2-ARE  Pathway  in  Human  BJ  Fibroblasts  and  HaCaT Keratinocytes. BioMed Research International . https://doi.org/10.1155/2016/2173275.
Sharma, V.,  Hem,  K., Singh,  N., Gautam, D.  (2015). Phytochemistry And  Pharmacology Of Trikatu. Indian Journal of Agriculture and Allied Sciences , 1(4).
https://www.researchgate.net/publication/289308132.
Silalahi, J., Karo, L. K., Sinaga, S. M., & Silalahi, C. Y. E. (2018). Composition of Fatty Acid and Identification of Lauric Acid Position in Coconut and Palm Kernel Oils. Indonesian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research (IDJPCR) , 01(2), 1 – 08. https://doi.org/10.32734/idjpcr.v1i2.605.
Stoner,  G.  D.  (2013).  Ginger:  Is  it  Ready  for  Prime  Time? Cancer  Prevention  Research ,  6(4),  257 – 262. https://doi.org/10.1158/1940-6207.CAPR-13-0055. Thakur,  M.,  Porwal,  P.,  Pal,  P.,  Shukla,  K.,  &  Mahajan,  S.  C.  (2012).  Development  of  standardization  of trikatu churna: A spectrophotometric approach. Int. J. of Pharm. & Life Sci. (IJPLS) , 3(12), 2254 – 2258. Tian,  X.  (2013). Chemical  factors  affecting  degradation  processes  of  vegetable  oils  during  frying .  New Brunswick. https://doi.org/10.7282/T39S1P2C .
Wang,  J.,  Fan,  R.,  Zhong,  Y.,  Luo,  H.,  &  Hao,  C.  (2022).  Effects  of  Cabya  (Piper  retrofractum  Vahl.)  Fruit Developmental Stage on VOCs. Foods , 11(16). https://doi.org/10.3390/foods11162528 .
Warsiati, Wijiasih, Febriani, A., & Rizka, A. K. W. (2010). Acuan Sediaan Herbal (1st ed., Vol. 5).  Jakarta: Deputi Bidang Pengawas Obat Tradisional, Kosmetik dan Produk Komplemen, Badan POM RI. Yeh,  H.  yu,  Chuang,  C.  hung,  Chen,  H.  chun,  Wan,  C.  jen,  Chen,  T.  liang,  &  Lin,  L.  yun.  (2014).  Bioactive components analysis of two various gingers (Zingiber officinale Roscoe) and antioxidant effect of ginger extracts. LWT - Food Science and Technology , 55(1), 329 – 334. https://doi.org/10.1016/J.LWT.2013.08.003.