UJI EFEKTIVITAS ANTIHIPERGLIKEMIA INFUSA ALGA LAUT COKLAT ( Sargassum hystrix ) PADA MENCIT JANTAN DENGAN METODE TOLERANSI GLUKOSA
Submitted : 16 Oktober 2021 Edited : 6 Desember 2021 Accepted : 13 Desember 2021
Agung Giri Samudra 1 , Nurfijrin Ramadhani 1 , Cyntia Dwi Utami 1 , Nori Wirahmi 2 , Fathnur Sani K 3
1 S1 Farmasi Universitas Bengkulu
2 D3 Farmasi Universitas Bengkulu
3 S1 Farmasi Universitas Jambi Email : agunggirisamudra@unib.ac.id

## ABSTRACT
One type of metabolic disease that is always experiencing an increase in sufferers every year in countries around the world is diabetes mellitus. Sargassum hystrix marine algae are the types that are found and quite abundant in Indonesia. This study aims to prove the hypoglycemic effect of Sargassum hystrix infusion in male white mice. The study was conducted using the oral glucose test method in the positive control group (I) given glibenclamide 0.52mg / 20gramBB; group (II) is a negative control given CMC Na 0.5%; group (III) infusion of Sargassum hystrix with  a  concentration  of  2.5%  with  a  volume  of  0.2  mL  /  20gram  BW;  group  (IV)  infusion  of Sargassum hystrix with a concentration of 5% by volume of 0.2 mL / 20gram BW. The results were  analyzed  using  One  Way  Anova  which  was  then  followed  by  Duncan's  test.  The  results showed  that  Sargassum  hystrix  infusion  had  an  antihyperglycemic  effect  (p  <0.05)  when compared  with  negative  controls.  Sargassum  hystrix  5%  infusion    is  the  best  dose  with  the antihyperglycemic effect statistically the same as the antihyperglycemic effect of glibenclamide.
Keywords : Sargassum hystrix, infusion, antihyperglycemic.

## PENDAHULUAN
Prevalensi  diabetes  melitus  (DM) semakin  meningkat  dan  jumlah  penderita DM  di  dunia  diperkirakan  meningkat  dari 171 juta pada tahun 2000 menjadi 366 juta pada tahun 2030. Salah satu jenis penyakit metabolik yang selalu mengalami peningkatan  penderita  setiap  tahun  di negara-negara  seluruh  dunia  adalah diabetes  mellitus.  Indonesia  menempati urutan  ketiga  di  dunia  untuk  jumlah penderita  diabetes  melitus (1) .  Saat  ini masyarakat  mulai  beralihnya  ke  obat tradisional  didukung  dengan  banyaknya jenis tanaman obat berkhasiat di Indonesia baik  itu  di  daratan  maupun  di  lautan.
Indonesia  merupakan  Negara  kepulauan yang memiliki lebih kurang 70% laut yang kaya  dengan  berbagai  jenis  sumber tanaman  yang  memiliki  khasiat  sebagai obat (2) .
Salah  satunya  adalah  alga  laut banyak dimanfaatkan dalam dunia
kedokteran dan farmasi antara lain sebagai bahan  obat,  makanan, dan  minuman.  Alga laut  jenis Sargassum sp  merupakan  jenis- jenis  yang  banyak  ditemukan  dan  cukup melimpah  di  Indonesia (3) .  Polifenol  dari alga laut dapat digunakan sebagai kosmetik dan  mempunyai  efek  farmakologi  sebagai antioksidan,  perlindungan  dari  radiasi, antibiotik, antiinflamasi, antialergi,
antibakterial  dan  antidiabetes (3) .  Ekstrak etanol Sargassum  pallidum mempunyai aktivitas  sebagai  antioksidan.  Fenol  dari Palmaria,  Ascophyllum dan Alaria dapat menghambat  aktivitas  α-amilase  dan  α- glukosidase (4) .
Penelitian yang telah dilakukan oleh Samudra  dkk,  pada  alga  laut Sargassum hystrix polisakarida dan polifenol memiliki kemampuan sebagai antidiabetes. Berdasarkan penelitian yang telah
dilakukan  uji  in-vitro  bahwa  alginat  dan polifenol  dari Sargassum sp  mempunyai kemampuan  dalam  menghambat  aktifitas enzim alfa-amilase dengan nilai IC 50 15,75 and  11,26  mg/mL  dibandingkan  akarbose 10,71  mg/mL,  polifenol  juga  mampu menghambat aktivitas enzim alfa- glukosidase dengan nilai IC 50 9,57 mg/mL dibandingkan akarbose 6,66 mg/mL (5,6) . Uji in-vivo  yang  telah  dilakukan  bahwa polifenol Sargassum sp  mempunyai  daya menurunkan  kadar  glukosa  darah  24% dengan  dosis  125  mg/kg  BB  mencit dibandingkan  akarbose  27%  dengan  dosis 6,5mg/Kg  BB  mencit (7) .  Ekstrak  terbaik yang  dapat  menurunkan  kadar  glukosa darah pada  mencit  yang  diinduksi aloksan adalah ekstrak polifenol (8) .
Dengan  adanya  beberapa  penelitian yang  telah  dilakukan  di  atas,  belum menemukan  hasil  penelitian  berupa  infusa dari Sargassum  hystrix yang  digunakan sebagai antihiperglikemia. Dengan
mengubah metode penyarian menggunakan infusa  yang  juga  bersifat  polar,  lebih murah,  dan  mudah  dilakukan  sehingga nantinya setelah uji keamanan klinis dapat digunakan  oleh  masyarakat  sebagai  agen herbal penurun  glukosa darah.

## METODOLOGI PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat
Alat yang digunakan dalam
penelitian  ini  adalah  timbangan  analitik
(joil),  panci  infus,  termometer,  pemanas (kompor),  beker  glass  (pyrex),  batang pengaduk,  kain  flanel,  corong  kaca, glukometer  set  (easy  touch),  jarum  suntik oral.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah Sargassum  hystrix , aquadest, sukrosa, glibenklamid, Na CMC.

## Pembuatan Infusa
Sargassum  hystrix diiris  kecil-kecil, dihaluskan dengan diblender, setelah halus ditimbang  2,5;    5  gram  kemudian ditambahkan  aquadest  masing-masing  100 ml,  lalu  dipanaskan  dengan  penangas  air selama 15 menit terhitung mulai suhu 90 o C sambil  sesekali  diaduk.  Diserkai  selagi panas melalui kain flanel hingga diperoleh infusa.

## Uji Antihiperglikemia
Mencit  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  sebanyak  20  ekor  yang terbagi  dalam  4  kelompok  uji.  Masing– masing kelompok terdiri dari 5 ekor mencit. Mencit  putih  jantan  yang  masing-masing telah  ditimbang  dan  dikelompokkan, dipuasakan  makan  selama  16  jam. Pengambilan darah awal dilakukan sebelum  mencit  diberi  perlakuan  yang diambil  darah  melalui  vena  lateralis  ekor mencit  (T0).  Setelah  itu  mencit  diberikan perlakuan  per  oral.  Kelompok  (I)  kontrol positif  diberikan  glibenklamid  0,52mg/20 gramBB; kelompok (II) merupakan kontrol negatif diberikan CMC Na 0,5%; kelompok (III)  infus Sargassum  hystrix konsentrasi 2,5% dengan volume pemberian 0,2 mL/20 gram BB; kelompok (IV) infus Sargassum hystrix konsentrasi  5%  volume  pemberian 0,2  mL/20gram  BB.  Setelah  15  menit pemberian larutan uji selanjutnya diberikan Sukrosa 195 mg/20 gramBB secara peroral. Pengamatan  dilakukan  setelah  pemberian
sukrosa, pada menit ke-30, 60, 90, dan 120. Sampel  darah  diambil  dari  ekor  mencit dengan  menusukkan  jarum  pada  bagian ekor hewan uji, kemudian darah diteteskan pada  strip  glukometer  dan  dimasukkan dalam glukometer untuk dibaca kadar gula darahnya (9) .

## 𝑃𝑒𝑟𝑠𝑒𝑛𝑡𝑎𝑠𝑒 𝑃𝑒𝑛𝑢𝑟𝑢𝑛𝑎𝑛 𝐺𝑙𝑢𝑘𝑜𝑠𝑎 𝑑𝑎𝑟𝑎ℎ
= 𝐴𝑈𝐶 𝐺𝐿𝐾–  𝐴𝑈𝐶 𝐺𝐿𝑈
𝐴𝑈𝐶 𝐺𝐿𝐾 𝑥 100%
Keterangan: AUC  GLK=  nilai  AUC  glukosa  darah kelompok negatif;  AUC GLU = nilai AUC glukosa darah kelompok uji

## Analisa Data
Data  yang  diperoleh  dianalisis dengan  menggunakan  uji  statistic  Anova satu arah dengan program SPSS .Kemudian dilanjutkan dengan uji LSD dengan tingkat kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada penelitian ini dilakukan dengan
metode toleransi glukosa. Sebelum perlakuan masing-masing mencit
dipuasakan  selama  kurang  lebih  18  jam dengan  tetap  diberikan  minum.  Puasa dilakukan untuk memperoleh kadar glukosa awal yang tidak dipengaruhi oleh makanan. Hewan  percobaan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  mencit  putih  jantan, berumur 2-3 bulan dengan berat sekitar 20- 40 gram.
Pengujian
efektivitas
Antihiperglikemia,  pemberiaan  sediaan dilakukan  15  menit  sebelum  diberikan beban  induksi  glukosa.  Hal  ini  bertujuan untuk melihat mekanisme kerja dari infusa Alga  coklat Sargassum  hystrix dalam memberikan efek penurunan kadar glukosa
darah.  Pengukuran    kadar  glukosa  darah dilakukan  setelah    pemberian  beban glukosa  pada menit ke-30,60,90, dan 120. Pengukuran dilakukan dengan
menggunakan  alat  ukur  glukosa  darah Glukometer Easy Touch GCU.
Sargassum  sp.  mengandung  alkaloid, fenol  dan  triterpenoid.  Sargassum  sp. memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  kuat pada  ekstrak  etil  asetat.  ekstrak  Sargassum sp.  dapat  dijadikan  sumber  antioksidan (10) . Kandungan  dari  alga  laut Sargassum sp diantaranya  polisakarida  (alginat),  protein, peptida,  asam  amino,  lipid,  mineral,  dan beberapa vitamin (3) . Hasil kadar glukosa setiap kelompok dalam dilihat pada Gambar 1.
Pada  kelompok kontrol positif diberikan glibenklamid 0,52 mg/20 gramBB dapat  menurunkan  kadar  glukosa  dalam darah  paling  rendah  dibandingkan  dengan kelompok  lainnya,  selanjutnya  diikuti berturut-turut    kelompok  infusa  5%  0,2 mL/20 gram BB; 2,5% 0,2 mL/20 gram BB dan  kelompok  negatif  CMC  Na  0,5%0,2 mL/20  gram  BB.  Glibenklamid  digunakan Sebagai  kontrol  positif  adalah  merupakan obat  antidiabetik  oral  golongan  sulfonilurea generasi kedua. Glibenklamid memiliki efek hipoglikemik  yang  kuat  dengan  dosis  yang rendah (11) . Glibenklamid memiliki mekanisme  kerja  dengan  cara  berikatan dengan  reseptornya  di  pankreas  yang menyebabkan  kanal  kalium  tertutup    dan selanjutnya terjadi depolarisasi yang menyebabkan  kanal  kalium  terbuka,  ion kalium yang masuk kedalam granula insulin untuk  melepaskan  insulin  sehingga  dapat menurunkan kadar glukosa darah. Nilai Area Under  Curve  ( AUC)  dan  persentase penurunan kadar glukosa darah dapat dilihat pada tabel 1.
Gambar 1. Kadar glukosa darah
Tabel 1. Nilai AUC dan persentase penurunan kadar glukosa darah Kelompok AUC Persentase Penurunan Kadar Glukosa Kontrol (-) 16413 ± 2605.75 b - Kontrol (+) 10039.5 ± 3333.69 a 38.83% Infusa 2,5% 13066.5 ± 3484.50 a,b 20.38 % Infusa 5% 12006 ± 3018.08 a 26.85%
Keterangan:
Nilai  AUC  yang  tertera  berupa  purata  ±  SEM  (n=3).  tanda  notasi  huruf  menunjukan  adanya perbedaan signifikan (p<0,05).
Nilai AUC nilai terendah ke tertinggi berturut turut yaitu kelompok kontrol positif, infusa 5%, infusa 2,5% dan kontrol negatif. Nilai  AUC  pada  uji  antihiperglikemia menyatakan semakin besar nilai AUC maka semakin kecil kemampuan
dalam menurunkan  efek  glukosa  dalam  darah  dan semakin kecil nilai AUC maka semakin besar kemampuan dalam menurunkan efek glukosa dalam  darah.    Nilai  persentase  penurunan kadar  glukosa    tertinggi  ke  terendah  yaitu kelompok  kontrol  positif,  infusa  5%,  infusa 2,5%. Pada kelompok Infusa 5% mempunyai daya    antihiperglikemia  tidak  berbeda signifikan (p>0,05) dengan kelompok kontrol positif  menggambarkan  bahwa  kemampuan infusa 5% dalam menurunkan kadar glukosa darah  menyerupai  kemampuan  kelompok kontrol  positif.Efek  antihiperglikemik  yang diberikan  oleh  infusa Sargassum  hystrix didukung  dengan  adanya  hasil  penelitian terdahulu yang menyatakan bahwa
Sargassum hystrix  mengandung  senyawa kimia  fenolik (12,13) .  Senyawa  fenol    dan flavonoid    memiliki    kontribusi  linier terhadap    aktivitas    anti diabetes, sehingga semakin    tinggi    kadarnya    maka  semakin baik  pula  antidiabetnya.  Fenolik    dan flavonoid  mempunyai  efek antidiabetes atau antihiperglikemik  dimungkinkan  dengan beberapa  mekanisme  yaitu  menghambat absorbsi glukosa, merangsang sekresi insulin atau bertindak   seperti   insulin   dan   dapat mengatur kerja enzim-enzim yang berperanan  pada  metabolisme  karbohidrat. Salah    satu    senyawa    flavonoid    adalah kuersetin  yang  dikenal sebagai  antidiabetes. Kuersetin sebagai bagian flavonoid berpotensi sebagai inhibitor transport glukosa pada  usus  halus  yang  bertanggung jawab terhadap  absorbsi  glukosa  pada  usus halus sehingga   dapat   menurunkan   kadar glukosa darah (14) .  Fenolik    dapat  bertindak  sebagai antioksidan  yang  berperan  penting  dalam
ka da r gl uk os a da ra h (m g/ dL ) waktu (menit) Kontrol Negatif Kontrol Positif Infusa 2,5 % Infusa 5%
menangkal  radikal  bebas  yang  merupakan salah  satu  senyawa  yang  dapat  berperan menghambat  pemicu  munculnya  stresss oksidatif  pada  penderita  diabetes  mellitus. Adapun mekanisme kerjanya adalah membantu  perbaikan  sel-sel  beta  pulau langerhans dalam melindungi sel-sel pankreas dari radikal bebas (6) .
Sehingga dari hasil penelitian ini dapat memperlihatkan  bahwa Sargassum    hystrix merupakan  salah  satu  jenis  tanaman  obat yang  dapat  dikembangkan  menjadi  obat alternatif  sebagai  penurun  kadar  glukosa darah dengan  cara  menghambat  penyerapan glukosa  post  prandial.  Infusa Sargassum hystrix memiliki  efek  dalam  menurunkan kadar gula dalam darah.

## SIMPULAN
Infusa Sargassum  hystrix memiliki efek sebagai agen antihiperglikemik (p<0,05) dengan dosis infusa yaitu 5% 0,2mL/20 BB.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih kepada Fakultas Matematika  Dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Bengkulu yang telah
memberikan  bantuan  dana  PNBP  UNIB terhadap  penelitian  mandat  S1  Farmasi Tahun 2020.

## DAFTAR PUSTAKA
1. International Diabetes Federation.
(2018), IDF Diabetes Atlas 8th ed..
2. Alam,  S.,  Khan,  Z.  I.,  Mustafa,  G., Kumar, M., Islam, F., Bhatnagar, A., &
Ahmad, F. J. (2012). Development and evaluation of thymoquinone- encapsulated  chitosan  nanoparticles  for nose-to-brain targeting: a pharmacoscintigraphic study. International journal of nanomedicine , 7 , 5705
3. Holdt,  S.L.,  and  Kraan,  S.  (2011). Bioactive  compounds  in  seaweed: functional  food  applications  and
legislation.
Journal of Applied Phycology. 23: 543–597 4. Nwosu,  F.,  Morris,  J.,  Victoria,  A.L., Stewart, D., Heather, A.R., Gordon, J.M. (2011),  Anti-proliferative  and  potential anti-diabetic  effects  of  phenolicrich extracts from edible marine algae, Food Chemistry, 126:1006–1012.
5. Samudra, A. G., Dewi, B., Nugroho, A. E., Husni, A.. (2015). Aktivitas inhibisi α-Amilase ekstrak alginat dan senyawa polifenol  dari  Sargassum  hystrix. In Prosiding  Seminar  Nasional  and Workshop"  Perkembangan  Terkini Sains Farmasi Dan Klinik 5 (pp. 6-7).
6. Samudra,  A.  G.  (2017).  Uji  Efek Antihiperglikemik  Air  Seduhan  Serbuk
Biji  Kebiul  (Caesalpinia  bonduc  (L) Roxb)  Pada  Mencit  Jantan  Yang
Terbebani  Glukosa. Jurnal  Ilmiah  Ibnu Sina , 2 (2), 214-224.
7. Samudra, A. G., Sani, K. F., & Husni, A. (2017).  In  vitro  α-glucosidase  and  in vivo  of  anti-hyperglycemia  activity extract  of  alginate  from  the  brown marine algae Sargassum hystrix. Journal of Pharmacy Research , 11 (8), 927.
8. Samudra, A. G., Sani, F., & Chintama,
M. (2018). Uji Perbandingan Efektivitas Antidiabetes  Ekstrak  Polisakarida  Dan Senyawa Polifenol Alga Coklat (Sargassum  Sp.)  Pada  Mencit  Yang Diinduksi Aloksan. Jurnal Ilmiah Manuntung , 4 (1), 48-52
9. Gunjal,  A.,  Walunj,  M.,  Aghera,  H., Nariya,  M.,  &  Goyal,  M.  R.  (2016). Hypoglycemic  and  anti-hyperglycemic activity  of  Triphalādi  granules  in mice. Ancient science of life , 35 (4), 207
10. Gazali, M., Nurjanah, N., & Zamani, N. P.  (2018).  Eksplorasi  senyawa  bioaktif alga  cokelat  Sargassum  sp.  Agardh sebagai  antioksidan  dari  Pesisir  Barat Aceh. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 21 (1), 167-178.
11. Jumain, J., Asmawati, A., Farid, F. T., & Riskah,  R.  (2019).  Efek  Sari  Buah Kersen  (Muntingia  Calabura  L.) Terhadap Penurunan Kadar Gula Darah Mencit (Mus Musculus). Media Farmasi , 15 (2), 156-162.
12. Sedjati,  S.,  Supriyantini,  E.,  Ridlo,  A., Soenardjo,  N.,  &  Santi,  V.  Y.  (2018).
Kandungan Pigmen, Total Fenolik Dan Aktivitas Antioksidan Sargassum sp. Jurnal Kelautan Tropis , 21 (2), 137- 144.
13. Husni, A., Pratiwi, T., Samudra, A. G.,
&  Nugroho,  A.  E.  (2018).  In  vitro antidiabetic  activity  of  Sargassum hystrix  and  Eucheuma  denticulatum from Yogyakarta Beach of Indonesia. Proceedings  of  the  Pakistan Academy  of  Sciences:  B.  Life  and
Environmental Sciences , 55 (3), 1-8
14. Megawati, M., Fajriah, S., Supriadi, E.,
&  Widiyarti,  G.  (2021).  Kandungan Fenolik  dan  Flavonoid  Total  Daun Macaranga  hispida  (Blume)  Mull.  Arg sebagai Kandidat Obat Antidiabetes. Jurnal Kefarmasian Indonesia , 11 (1), 1-7. https://doi.org/10.22435/jki.v11i1.284