## POTENSI ANTIMIKOSIS BEBERAPA TUMBUHAN OBAT INDONESIA

## Dewi Kusrini, Khairul Anam, Bambang Cahyono

## Laboratorium Kimia Organik Jurusan Kimia FMIPA Universitas Diponegoro

## ABSTRAK
Telah ditelaah potensi antimikosis tumbuhan Annona squamosa L (srikaya), Phylantus Acidus (L)  Skeels  (ceremai),  and  Phaleria  Macrocarpa  [Scheff]  Boerl.  (mahkota  dewa)  terhadap  mikosis Candida  Albicans.  Ekstrak  etanol  srikaya  mempunyai  aktivitas  tertinggi,  setara  dengan  aktivitas 11.566,11 μg ketokenazol, dan ekstra etanol mahkota dewa setara dengan 2.344,46 g ketokenazol. Kata kunci: Annona Squamosa L, Phylantus Acidus (L) Skeels, Phaleria Macrocarpa [Scheff] Boerl

## POTENCY OF ANTIMICOSIS FROM SOME INDONESIAN MEDICINAL PLANTS

## ABSTRACK
Potency  of  antimicosis  of  Annona  squamosa  L,  Phylantus  Acidus  (L)  Skeels,  and  Phaleria Macrocarpa [Scheff] Boerl. Plants have been analyzed to Candida Albicans. Ethyl alcohol extract of Annona Squamosa have highest activity, equivalent with activity 11.566,11 μg ketokenazol, and ethyl alcohol Phaleria Macrocarpa [Scheff]. Boerl equivalent with 2.344,46 g ketokenazol.
Keywords: Annona Squamosa L, Phylantus Acidus (L) Skeels, Phaleria Macrocarpa [Scheff] Boerl

## PENDAHULUAN
Fungi merupakan salah satu jenis mikroba yang banyak ditemukan di Indonesia. Fungi ini selain bermanfaat  di  alam  sebagai  pengurai  bahan organik,  berperan  dalam  proses  peragian makanan,  dan  produksi  antibiotik,  sebagian diantaranya  diketahui  bersifat  patogen  bagi tumbuhan.  Fungi  penyebab  penyakit  infeksi dikenal  sebagai  mikosis.  Beberapa  contoh mikosis diantaranya, Candida penyebab kandidiasis, Aspergillus penyebab  aspergilosis, trichhophyton , epidermophyton dan Microsporum penyebab dermatomikosis (Bulmer, 1979, Dalimartha, 1999).
Kerusakan  lingkungan  hidup  menurut  UNEP (sebuah  lembaga  PBB  yang  bergerak  dalam bidang  lingkungan  hidup)  merupakan  pemicu timbulnya  patogen.  Kemunculan  patogen  ini mendorong  timbulnya  wabah  penyakit  infeksi dan  menuntut  ketersediaan  obat-obatan  untuk
mengatasinya.  Sementara  itu  obat-obatan  yang tersedia  relatif  sedikit. Amfosterisin B  yang sebenarnya bermanfaat untuk  mikosis sistemik, mempunyai efek samping menyebabkan kerusakan  ginjal. Nistatin yang  merupakan antifungi  topikal  tidak  dapat  memberikan sistemik.  Sementara  itu  bebrapa  obat antibiotik telah diproduksi hingga beberapa generasi. Oleh karena itu upaya pencarian obat baru senantiasa menarik untuk dilakukan.
Tumbuhan  obat  Indonesia  seperti Annona squamosa L  (srikaya), Philantus  acidus (L) Skeels  (ceremai),  dan Phaleria  macrocarpa [Scheff] Boerl (mahkota dewa) secara tradisional  terbukti  dapat  menyembuhkan berbagai penyakit infeksi seperti TBC, disentri, antraks dan berbagai penyakit kulit (Dalimartha., 1999;  Dalimartha,  2003;  Goun dkk ,  .2003).
Namun  informasi/justifikasi  ilmiah  terhadap bioaktivitas  ini  belum  pernah  dilaporkan.  Oleh
karena  itu  perlu  ditelaah  potensi  dan  aktivitas Annona squamosa L (srikaya), Philantus acidus (L) Skeels (ceremai), dan Phaleria macrocarpa [Scheff] Boerl (mahkota dewa) terhadap mikosis
Candida  albicans .  Serta  menentukan  golongan kimia  komponen  penyusun  ekstrak  aktifnya. Telaah  ini  bermanfaat  untuk  memberikan verifikasi  ilmiah  atas  penggunaan  tumbuhan tersebut dalam pengobatan tradisional.

## METODA PENELITIAN
Bahan yang digunakan berupa daun srikaya dan kulit  batang  ceremai  yang  diperoleh  dari Kelurahan Rongtengah, Sampang Madura, serta daun  mahkota  dewa  diperoleh  dari  sekitar Ungaran,  semarang  pada  bulan  Juli  2005. Mikosis  uji  berupa Candida  albicans diperoleh dari PT. Biofarma, Bandung.

## Penyiapan Material Uji
Material  uji  disortir,  dikeringkan  dan  digiling sehingga menjadi serbuk simplisia. Selanjutnya diektraksi menggunakan pelarut etanol 95% dan diklorometan. Kedua ekstrak dipekatkan dengan menggunakan rotarivaporator.

## Penetapan Kadar Air
Kadar  air  ditentukan  dengan  metode  destilasi, sesuai  dengan  prosedur  dalam  Farmakope Indonesia IV (Watimena dkk , 1991).

## Penyiapan Media Pertumbuhan
Media  pertumbuhan  yang  digunakan  yaitu Nutrient  Agar dan Nutrient  Broth  Sabouraud Dextrose Agar (SDA) .
Cara  pembuatan  SDA  dengan  melarutkan  65 gram serbuk SDA ke dalam 1 liter air suling dan didihkan  selama  satu  menit  hingga  semua melarut.  Sterilisasi  dilakukan  dalam  autoklaf
pada  suhu  121 o C selama  15  menit  (Power.  and McCuen, 1988).

## Sabouraud Dextrose Broth (SDB)
Cara  pembuatan  SDB  dengan  melarutkan  7,5 gram serbuk SDB ke dalam 250 ml air suling dan dididihkan  selama  satu  menit  hingga  semua melarut.  Sterilisasi  dilakukan  dalam  autoklaf pada  suhu  121 o C selama  15  menit  (Power.  and McCuen, 1988).

## Penyiapan Mikroba Uji
Candida  albicans diinokulasikan  dalam  media pertumbuhan SDA dan diinkubasikan pada suhu 24 o C  selama  satu  sampai  dua  hari.  Tiap  akhir periode  inkubasi,  fungi  uji, Candida  albicans , dibuat suspensi persediannya dalam larutan SDB steril.  Suspensi  fungi  diukur  kekeruhannya dengan  spektrofotometer,  pada  λ=530  nm  dan transmitannya diatur sehingga didapat T = 25 %, dengan larutan SDB sebagai blanko (Watimena dkk , 1991).

## Pengujian Aktivitas Antimikosis
Pengujian  aktivitas  antimikosis  ekstrak  etanol dan  ekstrak  diklorometana  dilakukan  dengan metode difusi agar dengan menggunakan cakram kertas  sebagai  pencadang.  Suspensi Candida albicans sebanyak 100 μL dicampur ke dalam 10 mL  SDA  di  cawan  Petri.  Cakram  kertas diletakkan  diatas  media  padat  tersebut  dan ditetesi  ekstrak  uji  10  %  b/v  sebanyak  10  μL. Prainkubasi  dilakukan  selama  30  menit  pada suhu kamar, selanjutnya diinkubasi selama satu sampai  dua  hari  pada  suhu  24 o C.  Diameter hambat  pertumbuhan  mikroba  uji  untuk  tiap ekstrak  diukur  dan  pelarut  ekstrak  digunakan sebagai pembanding (Watimena dkk , 1991).

## Penapisan Fitokimia
Penapisan fitokimia bahan meliputi pemeriksaan kualitatif  senyawa  golongan  alkaloid,  tanin, saponin,  kuinon,  flavonoid,  dan  steroid, triterpenoid (Dalimartha, 2003).

## Penetapan  Kesetaraan  Kekuatan  Aktivitas Terhadap Antibiotik Pembanding
Antibiotik pembanding diencerkan dalam suatu seri  konsentrasi  dan  diuji  aktivitasnya  terhadap mikroba  uji.  Cara  pengujian  sama  dengan  cara pengujian  aktivitasnya  antibakteri  terhadap ekstrak. Hasil pengujian dibuat suatu persamaan garis  antara  diameter  hambat  pertumbuhan mikroba  terhadap  log  konsetrasi  antibiotik pembanding.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Untuk  menelaah  potensi  antimikosis  tumbuhan obat  Indonesia: Annona  squamosa L  (srikaya),
Phyllantus  acidus (L)  Skeels  (Ceremai),  dan
Phaleria  macrocarpa (Scheff) Boerl (mahkota dewa)  maka  disortasi  untuk  menghilangkan kotoran  atau  kontaminan,  seperti  tanah,  debu atau  jamur.  Proses  selanjutnya  dilakukan perajangan dan pengeringan. Tujuan dari proses ini  untuk  menghilangkan  air  dari  simplisia  dan memperluas  permukaan  sel,  sehingga  dapat menyempurnakan proses ekstrasi setelah dikeringkan,  herba  tersebut  dihaluskan  untuk dijadikan serbuk  simplasi dan  ditentukan  kadar airnya.  Berdasarkan  penentuan  kadar  air menggunakan  metode  destilasi  diperoleh  nilai 8,2 %; 6,8 % dan 8,0 % berturut-turut untuk daun srikaya, kulit batang ceremai dan daun mahkota dewa.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  simplisia kering  ini  memenuhi  ketentuan  Farmakope Indonesia VI (1995), yakni maksimal 10 %.
Ekstrasi  simplisia  dilakukan  dengan  cara maserasi dengan menggunakan pelarut etanol 95 %  dan  diklorometana.  Sedangkan  pemekatan ekstrak dilakukan dengan menggunakan rotarivaporator.
Pengujian aktivitas antimikosis terhadap ekstrak tumbuhan  tersebut  menggunakan  mikosis/fungi uji Candida  albicans .  Pemilihan  mikosis  uji berdasarkan  mikosis  atau  fungi  yang  banyak menyebabkan  infeksi  atau  gangguan  kesehatan pada masyarakat.
Beradasarkan  hasil  pengujian  menunjukkan bahwa  semua  ekstra  mempunyai  aktivitas antimikosis (Tabel 1). Hal ini ditunjukkan oleh adanya zona hambatan pada area kertas cakram uji.
Tabel 1. Hasil Pengujian Antimikosis Ekstrak
Tumbuhan (10 % b/v) Terhadap Candida Albicans Jenis Tanaman Ekstrak Diameter Hambatan (mm) Mahkota Dewa Etanol 14,7 + 1,3 Diklorometana 12,8 + 2,1 Ceremai Etanol 13,6 + 2,2 Diklorometana 10,7 + 3,1 Srikaya Etanol 15,6 + 3,1 Diklorometana 12,6 + 1,2
Ekstrak  etanol  dari  semua  jenis  ekstrak tumbuhan  mempunyai  kemampuan  membunuh mikosis  lebih  kuat,  hal  ini  ditunjukkan  dengan nilai diameter hambatannya (mm) yang rata-rata lebih  besar  daripada  ekstrak  diklorometana. Nilai  hambatan  terbesar  dimiliki  ekstrak  etanol srikaya  yaitu  sebesar  15,6  +  3,1  mm  disusul ekstrak  etanol  mahkota  dewa  (14,7  +  1,3  mm) dan  ekstrak  etanol  ceremai  (13,6  +  2,2  mm). perbedaan  nilai  diameter  hambatan  ini  diduga
karena perbedaan kandungan ekstrak baik secara kualitatif maupun kuantitatif.
Berdasarkan  penapisan  fitokimia  diketahui bahwa  ekstrak  etanol  srikaya,  ceremai  dan mahkota dewa mempunyai kandungan senyawa kimia seperti diuraikan pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil Penapisan Fitokimia Ekstrak
Etanol Tumbuhan Obat Jenis Ekstrak Etanol Golongan Senyawa
Kimia
Fl a v o n o id A lk a lo id Ku in o n S a p o n in T a n in S te ro id /T er p en o id
Srikaya + + - + + + Ceremai + - - + + + Mahkota dewa + + - + + +
Keterangan :
+  =  Menunjukkan  bahwa  ekstrak  memberikan  hasil positif
-  =  Menunjukkan  bahwa  ekstrak  memberikan  hasil negatif
Kandungan  jenis  senyawa  kimia  dalam  ketiga ekstrak  tumbuhan  tersebut  relatif  sama,  yakni mengandung  alkaloid,  flaonoid,  tanin,  saponin dan steroid/terpenoid, sedangkan ekstrak etanol ceremai tidak mengandung alkoloid.
Potensi  fungisida  ekstrak  etanol  relatif  besar terhadap  mikosis  uji.  Potensi  terbesar  dimiliki oleh  ekstrak  etanol  srikaya,  disusul  mahkota dewa dan ceremai. Untuk menelaah lebih lanjut potensi  antimikosis  ini  maka  perlu  dipelajari kesetaraan aktivitasnya dengan antibiotik pembanding.
Gambar 1. Kurva Linier Standar Potensi Ketokenazol Terhadap Candida Albicans
Tabel 3 . Kesetaraan 1000 μg Ekstrak Terhadap
Antibiotik Pembanding Ketokenazol Jenis Ekstrak Etanol Kesetaraan Terhadap Ketokenazol μg Mahkota Dewa 2.344,46 Ceremai 333,36 Srikaya 11.565,11
Pada  penataan  kesetaraan  ekstrak  dengan ketokenazol  menghasilkan  nilai  yang  beragam (Tabel  3).  Nilai  terbesar  dimiliki  oleh  ekstrak etanol  srikaya,  setara  dengan  11.566,11  μg ketokenazol.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  srikaya  mempunyai  aktivitas sangat  besar,  lebih  dari  sepuluh  kali  aktivitas ketokenasol.  Demikian  pula  ekstrak  etanol mahkota  dewa  mempunyai  kesetaraan  sebesar 2.344,46  g  ketokenasol.  Mengingat  ekstrak tersusun  dari  berbagai  macam  senyawa  kimia, maka  komponen  kimia  aktif  yang  terkandung didalamnya akan mempunyai kekuatan aktivitas antimikosis  yang  lebih  besar  lagi.  Oleh  karena itu  tanaman  srikaya  dan  mahkota  dewa mempunyai potensi sangat besar untuk dikembangkan  dalam  pengobatan  mengatasi berbagai  penyakit  yang  disebabkan  oleh Candida albicans .
2,00 4,00 6,00 8,00 10,00 14,00 12,00 0,00 0,00 0,50 1,00 1,50 -0,50 -1,00 -1,50 -2,00 -2,50 y = 1,2985 x + 10,324 R  = 0,6648 2 D ia m e te r h a m b a t (m m ) Log konsentrasi  (ug/cakram )

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan:
1. Semua ekstrak etanol dan ekstrak diklorometan Annona squamosa L (srikaya),
Phyllantus acidus (L) Skeels (ceremai), dan
Phaleria macrocarpa  Scheff  Boerl
(mahkota dewa) bersifat fungisida terhadap
Candida albicans .
2. Ekstrak  etanol Annona  squamosa L (srikaya), Phyllantus  acidus (L)  Skeels
(ceremai) dan Phalaria macrocarpa
(Scheff) Boerl (mahkota dewa) mempunyai kekuatan  fungisida  lebih  besar  dari  ekstrak diklorometana.
3. Kesetaraan  aktivitas  antimikosis  terhadap Candida albicans terbesar terhadap antibiotik pembanding, dimiliki oleh ekstrak etanol Srikaya setara 11.565,11  g
ketokenazol  dan  ekstrak  Mahkota  dewa setara dengan 2.344,46  g ketokenazol.

## DAFTAR PUSTAKA
Bulmer,  G.S.,  1979, Introduction  to  Medical Mycology , Year Book Medical Publisher, Chicago
Dalimartha  S.,  1999, Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia ,  Jilid  1,  Trubus  Agriwidya, Jakarta
Dalimartha  S.,  2003, Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia ,  Jilid  1,  Trubus  Agriwidya,
Jakarta
Goun. E. Cunningham G., Chu, D., Nguyen, C., Miles,  D.,  2003, Antibacterial  and Antifungal Actovity of Indonesia
Ethnomedical  Plants ,  Fitoterapia,  74, 592-6.
Watimena,  J.R.R.,  Sugiarso,  N.C.,  Widianto, M.B., Sukandar, E.Y., Soemarji, AA., dan Setiadi,  A.R.,  1991, Farmakodonamika dan  terapi  antibiotik ,  Gadjah  Mada University Press, Yogyakarta.