Volume 10, Nomor 4, Tahun 2021, Halaman 321-327               Submitted: 15 Januari 2021 Online di : http://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jnc/ Accepted: 6 November 2021

## KARAKTERISTIK KALSIUM DARI TULANG IKAN BANDENG (Chanos chanos) YANG DIEKSTRAKSI MENGGUNAKAN LARUTAN HCl
Sri Mulyani*, Diandela Rohmeita,  Anang M. Legowo,
Departemen Pertanian, Fakultas Peternakan dan Pertanian, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Sudarto SH, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275, Indonesia
*Korespondensi : E-mail: srimulyani@lecturer.undip.ac.id

## ABSTRACT
Background: Milkfish bones are waste from the fishing industry that has not been utilized properly and has the potential to pollute the environment. Milkfish bones contain high minerals, especially calcium minerals. The high calcium content in fish bones has the potential to be used as an alternative source of calcium. However, to release the bonds of calcium and collagen, special treatment is needed. The treatment that can be done is an immersion in HCl accompanied by high temperatures. Extraction with HCl is able to break calcium and collagen bonds and increase the availability of calcium in the resulting product.
Objectives: This study aims to determine the characteristics of water content, yield, solubility in acid and water, calcium levels, and calcium whiteness from extracted milkfish bones with different concentrations of HCl.
Methods:  The  experimental  design  used  was  a  Completely  Randomized  Design  (CRD)  with  4  treatments  and  5 replications. This research consisted of 4 treatments in the form of calcium extraction with different concentrations of HCl at 85 ° C which included T 1 (0.5N), T 2 (1N), T 3 (1.5N), and T 4 (2N). The data analysis used was the Analysis of Variance (ANOVA) at the 0.05 significance level, followed by the Duncan test if there was a significant effect. Results: The analysis showed that calcium extraction with different HCl concentrations had a significant effect (P <0.05) on yield, solubility in acid and water, and degree of whiteness, while it had not significant effect on water content. The product calcium level decreases with increasing HCl concentration.
Conclusion: Calcium extraction treatment with a concentration of 0.5 N HCl gave the best results with the highest yield and calcium content, high whiteness, low water content, and good acid and water solubility.
Keyword: Calcium, HCl, Fish Bone, Milkfish

## ABSTRAK
Latar belakang : Tulang ikan bandeng merupakan limbah dari industri perikanan yang belum bisa dimanfaatkan dengan baik serta berpotensi mencemari lingkungan. Tulang ikan bandeng mengandung mineral yang tinggi, terutama mineral kalsium. Kandungan kalsium yang tinggi dalam tulang ikan berpotensi dimanfaatkan sebagai sumber kalsium alternatif. Namun  untuk  melepaskan  ikatan  kalsium  dan  kolagen  diperlukan  perlakuan  khusus.  Perlakuan  yang  dapat  dilakukan adalah perendaman dengan HCl disertai suhu yang tinggi. Ekstraksi dengan HCl mampu memutuskan ikatan kalsium dan kolagen serta meningkatkan ketersediaan kalsium dalam produk yang dihasilkan.
Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakteristik kadar air, rendemen, kelarutan dalam asam dan air, kadar kalsium  serta  derajat  putih  kalsium  dari  tulang  ikan  bandeng  yang  diekstraksi  dengan  konsentrasi  larutan  HCl  yang berbeda.
Metode : Rancangan percobaan yang digunakan adalah Rancangan Percobaan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan 5 kali ulangan. Penelitian ini terdiri dari 4 perlakuan berupa ekstraksi kalsium dengan konsentrasi HCl berbeda pada suhu 85° C yang meliputi T 1 (0,5N), T 2 (1N), T 3 (1,5N), dan T 4 (2N). Analisis data yang digunakan merupakan Analysis of Varian (ANOVA) pada taraf signifikansi 0,05 yang dilanjutkan dengan uji Duncan apabila terdapat pengaruh nyata. Hasil: Hasik penelitian menunjukkan bahwa ekstraksi kalsium dengan konsentrasi HCl berbeda memberikan pengaruh nyata  (p<0,05)  terhadap  rendemen,  kelarutan  dalam  asam  dan  air,  serta  derajat  putih,  tetapi  tidak  berpengaruh  nyata terhadap kadar air. Kadar kalsium produk turun seiring dengan bertambahnya konsentrasi HCl.
Simpulan: Perlakuan ekstraksi kalsium dengan konsentrasi HCl 0,5 N memberikan hasil terbaik dengan rendemen dan kadar kalsium tertinggi, derajat putih yang tinggi, kadar air yang rendah serta kelarutan dalam asam dan air yang baik. Kata kunci: Kalsium, HCl. Tulang Ikan, Ikan Bandeng

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara yang berbatasan  langsung  dengan  Samudera  Pasifik  dan Samudera Hindia yang merupakan habitat asli ikan bandeng, sehingga ikan bandeng banyak ditemukan dan  mudah  dibudidayakan  di  Indonesia.    Beberapa tahun tearkhir berkembang industri pengolahan ikan bandeng cabut duri. Sebagian besar industri tersebut masih  dikelola  secara home  industry ,  sehingga limbahnya  belum  dimanfaatkan  secara  optimal. Limbah yang dihasilkan berupa limbah padat seperti kotoran,  kepala  serta  tulang  ikan  biasanya  dibuang ke  lingkungan  atau  diolah  menjadi  pakan  ternak. Jumlah keseluruhan limbah padat berupa tulang dari ikan  berkisar  10  –  15  %  dari  berat  ikan  tidak termasuk  kulit. 1 Khusus  untuk  industri  bandeng cabut  duri,  akan  menghasilkan  limbah  tualng  yang lebih banyak beserta durinya. Tulang ikan terdiri dari komponen organik dan anorganik dengan komponen utamanya berupa kolagen, kalsium dan fosfor. Setiap spesies  ikan  memiliki  komposisi  tulang  ikan  yang berbeda  –  beda,  namun  komponen  utamanya  tetap sama.  Misalnya  pada  tulang  ikan  hoki  yang  terdiri dari  30,54  %  bahan  organik  yang  sebagian  besar berupa kolagen tipe I dan 69,46% bahan anorganik berupa  mineral  kalsium  (59,69%)  dan  fosfor (35,81%). 2 Berdasarkan  komposisi  tulang  ikan tersebut  diketahui  bahwa  tulang  ikan  bandeng memiliki  kandungan  mineral  kalsium  yang  tinggi. Kandungan  mineral  kalsium  yang  tinggi  dalam tulang  ikan  dapat  dimanfaatkan  sebagai  alternatif sumber  kalsium  dan  dapat  mengurangi  keberadaan limbah  tulang  ikan  bandeng  di  lingkungan  serta meningkatkan  nilai  ekonomis  dari  limbah  tulang ikan bandeng.
Kalsium  merupakan  mineral  esensial  yang diperlukan  oleh  tubuh  untuk  berbagai  proses metabolisme dan pembentukan tulang. Kekurangan kalsium pada masa pertumbuhan dapat menyebabkan  kelainan  tulang  pada  anak  –  anak, sedangkan  pada  orang  dewasa  kekurangan  kalsium dapat menyebabkan tulang kehilangan massanya dan menjadi  rapuh.  Pemenuhan  kebutuhan  kalsium harian  sangat  penting  bagi  tubuh,  dan  hanya  dapat dipenuhi melalui konsumsi pangan sumber kalsium. Sumber  kalsium  yang  banyak  dikenal  oleh masyarakat  adalah  susu  dan  produk  turunannya. Namun terdapat orang yang alergi terhadap protein susu, serta banyak masyarakat Indonesia yang tidak dapat  mengkonsumsi  produk  susu.  Tulang  ikan merupakan salah satu alternatif sumber kalsium yang baik.  Hal  tersebut  dibuktikan  dengan  beberapa penelitian yang menyebutkan bahwa ikan kecil yang dikonsumsi  beserta  tulangnya  merupakan  sumber kalsium  yang  baik  sebanding  dengan  kalsium  dari susu  skim  bagi  pertumbuhan  tikus, 3 serta  kalsium
dari  tulang  ikan  dapat  diserap  dengan  baik  oleh tubuh manusia maupun  hewan,  dan penyerapannya sebanding  dengan  suplemen  kalsium  karbonat komersial. 4 Tepung  tulang  dari  ikan  bandeng mengandung  kadar  air  5,44%,  kadar  abu  30,47%, kadar  lemak  23,06%,  protein  35,22%,  karbohidrat 5,18% dan kalsium 9,68% 5 . Kalsium dalam tulang ikan banyak ditemukan dalam bentuk kristal hidroksiapatit yang melekat  erat  dalam  jaringan  matriks  kolagen. Diperlukan  perlakuan  khusus  untuk  melepaskan ikatan antara kalsium dengan kolagen. Perendaman dalam  larutan  asam  disertai  dengan  pemanasan merupakan  salah  satu  cara  yang  dapat  digunakan untuk  melepaskan  kalsium  dari  matriks  kolagen. Terdapat  beberapa  penelitian  sebelumnya  yang membuktikan bahwa larutan asam dapat digunakan untuk  ekstraksi  kalsium  pada  tulang  ikan  bandeng diantaranya,  perebusan  tulang  ikan  dengan  larutan HCl  1  N  menghasilkan  produk  tepung  tulang  ikan bandeng  dengan  kadar  abu  yang  tinggi. 6 Ekstraksi nanokalsium  tulang ikan nila dengan larutan HCl 1 N 7 dan  ekstraksi  kalsium  dari  cangkang  krustasea dengan  konsentrasi  yang  berbeda  menghasilkan rendemen  produk  yang  berbeda. 8 Penelitian tepung kalsium  dari  tulang  ikan  bandeng  sudah  pernah dilakukan,  namun  belum  spesifik  pada  pengujian kadar kalsium, sifat kelarutan dan derajat putih serta kajian pengaruh berbagai konsentrasi asam klorida. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik  fisikokimia  kalsium  dari  tulang  ikan bandeng yang diekstraksi dengan larutan HCl pada konsentrasi yang berbeda.

## METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Agustus – Oktober 2020 di Laboratorium Kimia dan Gizi  Pangan  Fakultas  Peternakan  dan  Pertanian Universitas  Diponegoro,  Semarang.  Rancangan percobaan  yang  digunakan  dalam  percobaan  ini adalah  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  4 perlakuan  dan  5  kali  pengulangan  sehingga diperoleh  20  unit  percobaan.  Perlakuan  yang diterapkan  yaitu  ekstraksi  dengan  konsentrasi  HCl berbeda yang meliputi T 1 0,5N; T 2 1N; T 3 1,5N; T 4 2 N.  Kandungan  kalsium  dan  ikatan  silang  pada komponen  berbagai  jenis  tulang  berbeda,  sehingga perlu  dilakukan  optimasi  konsentrasi  ion  H + agar diperoleh  tepung  kalsium  dengan  yield  yang maksimal
Tulang  ikan  bandeng  dibersihkan  dari  sisa daging  yang  masih  menempel  dengan  cara  direbus selama  30  menit  kemudian  dicuci  sampai  bersih. Tulang  ikan  bandeng  yang  telah  bersih  kemudian dimasukan kedalam panci presto dan direbus dengan tekanan tinggi selama 30 menit.  Setelah itu tulang
ikan bandeng dikeringkan dalam cabinet dryer pada suhu  50°C  selama  12  jam.  Selanjutnya  tulang  ikan bandeng dikecilkan ukurannya dengan cara digiling dan disaring dengan ukuran 20 mesh.
Ekstraksi kalsium pada tulang ikan bandeng dilakukan dengan cara sebanyak 150 g bubuk kasar tulang  ikan  bandeng  dihidrolisis  dengan  HCl  1N selama 24 jam. Residu dan filtrat dipisahkan dengan cara  dekantasi.  Residu  dimasukan  ke  dalam erlenmeyer  dan  ditambahkan  larutan  HCl  pada masing  –  masing  perlakuan  dengan  perbandingan sampel  dan  larutan  1  :  3.  Selanjutnya  sampel dipanaskan  pada  suhu  85°C  selama  1  jam  dan didinginkan.  Tahap  ini  diulang  3  kali  tanpa penggantian larutan. Sampel disampel dicuci dengan akuades hingga pH sampel mendekati netral. Sampel dikeringkan  pada  suhu  50°C  selama  12  jam. Selanjutnya  dikecilkan  ukurannya  hingga  sampel menjadi tepung berukuran 250 mesh 6 .
Parameter  yang  diuji  dalam  penelitian  ini antara  lain  yaitu,  kadar  air  dengan  metode  oven, kelarutan  asam  dan  kelarutan.  Kelarutan  diukur
menggunakan metode sampel dilarutkan dalam HCl pH  2,1  dan  akuades.  Derajat  putih  dengan  metode colorimeter , rendemen dengan metode perbandingan berat  awal  dan  akhir,  dan  kadar  kalsium  dengan metode Atomic  Absorption  Spectrometer (AAS) 9 . Data hasil analisis kadar air, rendemen, derajat putih dan  kelarutan  dalam  air  serta  asam  dianalisis menggunakan  program  komputer  SPPS  dengan metode Analysis  of  Varians (ANOVA)  pada  taraf signifikansi 0,05. Jika perlakuan berpengaruh nyata terhadap  parameter  yang  diuji,  maka  dilanjutkan dengan  analisis Duncan’s  Multiple  Range  Test (DMRT). Parameter kadar kalsium dijelaskan secara deskriptif.

## HASIL
Hasil  analisis  kadar  air,  kadar  kalsium, kelarutan  dalam  air,  kelarutan  dalam  asam, rendemen dan derajat putih kalsium dari tulang ikan bandeng yang diekstraksi dengan konsentrasi larutan HCl berbeda ditunjukkan pada Tabel 1.

## Tabel 1. Karakteristik Fisikokimia Kalsium dari Tulang Ikan Bandeng Hasil Ekstraksi Larutan HCl
Parameter Perlakuan T 1 T 2 T 3 T 4 Kadar Air (%) 2,76 ± 0,43 a 2,96 ± 0,03 a 2,58 ± 0,39 a 2,78 ± 0,43 a Rendemen (%) 29,86 ± 0,97 d 23,59 ± 0,91 c 15,01 ± 0,40 b 4,83 ± 0,30 a Kelarutan Asam (%) 13,60 ± 0,55 bc 14,00 ± 0,71 c 12,40 ± 1,14 ab 11,40 ± 1,14 a Air (%) 6,56 ± 0,84 b 6,32 ± 0,88 b 4,54 ± 0,55 a 4,36 ± 0,54 a Derajat Putih (%) 89,75 ± 2,01 ab 89,98 ± 1,39 ab 91,04 ± 0,71 b 87,80 ± 2,01 a Kadar Kalsium (%) 23,99 22,43 21,32 19,92
Keterangan : *superskrip huruf kecil menujukan adanya perbedaan nyata P<0,05. Data ditampilkan sebagai nilai rata-rata dari 5 ulangan ± SD. Perlakuan ekstraksi HCl dengan konsentrasi T 1 (0,5 N), T 2 (1 N), T 3 (1,5 N) dan T 4 (2 N).

## Kadar Air
Berdasarkan  hasil  analisis  yang  diperoleh pada Tabel 1. menunjukkan bahwa kadar air kalsium dari tulang ikan bandeng berkisar 2,58 % – 2,96 %. Perlakuan  T 3 memiliki  kadar  air  terendah  sebesar 2,58  %, sedangkan  perlakuan  T 2 memiliki kadar  air tertinggi sebesar 2,96 %. Namun, perlakuan ekstraksi dengan  konsentrasi  HCl  yang  berbeda  tidak memberikan  pengaruh  nyata  terhadap  kadar  air produk.

## Rendemen
Berdasarkan Tabel 1. dapat diketahui bahwa rendemen  kalsium  dari  tulang  ikan  bandeng mengalami  penurunan  seiring  dengan  peningkatan konsentrasi  larutan  HCl  dengan  rendemen  terendah terdapat  pada  perlakuan  T 4 sebesar  4,83  %, sedangkan  rendemen  tertinggi  terdapat  pada perlakuan  T 1 sebesar  29,86%.    Perlakuan  ekstraksi dengan  konsentrasi  berbeda  memberikan  pengaruh nyata  terhadap  rendemen  kalsium  yang  dihasilkan
dengan perbedaan nyata pada setiap perlakuan yang diberikan.

## Kelarutan
Kelarutan kalsium dari tulang ikan bandeng dalam larutan asam pada pH 2 serta air dapat dilihat pada  Tabel  1.  Kelarutan  dalam  asam  tertinggi terdapat pada perlakuan T 2 sebesar 14 %, sedangkan kelarutan  dalam  asam  terendah  terdapat  pada perlakuan T 4 sebesar 11,40 %. Kelarutan kalsium dari tulang  ikan  bandeng  dalam  air  lebih  rendah dibandingkan dengan kelarutan kalsium dalam asam. Kelarutan  kalsium  dalam  air  tertinggi  terdapat  pada perlakuan T 1 sebesar 6,56% dan kelarutan dalam air terendah terdapat pada perlakuan T 4 sebesar 4,36 %. Derajat Putih
Berdasarkan Tabel 1. dapat diketahui bahwa kalsium  dari  tulang  ikan  bandeng  memiliki  derajat putih  tertinggi  pada  perlakuan  T 3 sebesar  91,04  %. Derajat putih terendah sebesar 87,80 % terdapat pada perlakuan T 4 . Perlakuan ekstraksi dengan konsentrasi HCl yang berbeda berpengaruh nyata terhadap derajat
putih  kalsium  yang  dihasilkan  dengan  perlakuan  T 1 dan T 2 tidak berbeda nyata dengan perlakuan T 3 dan T 4 ,  akan  tetapi  Perlakuan  T 3 berbeda  nyata  dengan perlakuan T 4 .

## Kadar Kalsium
Pada  Tabel  1.  dapat  dilihat  bahwa  kadar kalsium produk mengalami penurunan seiring dengan bertambahnya  konsentrasi  HCl  yang  digunakan. Kadar  kalsium  tertinggi  terdapat  pada  T 1 (23,99%), kemudian T 2 (22,43%), dan T 3 (21,32 %). Perlakuan yang menghasilkan kadar kalsium terendah terdapat pada T 4 dengan kadar kalsium 19,92%.

## PEMBAHASAN
Kadar Air Perlakuan ekstraksi kalsium dengan konsentrasi  HCl  yang  berbeda  tidak  berpengaruh nyata  terhadap  kadar  air  produk  yang  dihasilkan. Kadar  air  terendah  (2,58%)  pada  produk  terdapat pada perlakuan T 3 dengan perlakuan konsentrasi HCl 1,5N. Akan tetapi, seluruh perlakuan yang diberikan menghasilkan produk dengan kadar air yang rendah berkisar  2,58  –  2,96%.  Kadar  air  dari  produk  yang dihasilkan  lebih  rendah  jika  dibandingkan  dengan kadar  air  tepung  tulang  ikan  bandeng  yang  berkisar 14,20  –  14,62  %, 10 namun  lebih  tinggi  jika dibandingkan  dengan  kadar  air  nanokalsium  dari tulang ikan tuna sirip kuning yang berkisar 0,33%. 11 Perbedaan  nilai  kadar  air  tersebut  diduga  akibat adanya  perbedaan  teknik  pengeringan  dan  metode pembuatan produk. Ukuran produk dalam nanokalsium  cenderung  memiliki  kadar  air  yang rendah  karena  pada  saat  proses  pengeringan  luas permukaan  yang  terkena  pasa  semakin  besar, sehingga  penguapan  air  semakin  mudah.Namun demikian kadar air tepung kalsium pada penelitian ini tergolong  rendah  kurang  dari  5%.    Kadar  air  yang rendah pada produk membuat produk aman disimpan dalam  jangka  waktu  yang  lama.  Hal  tersebut dikarenakan  kadar  air  yang  rendah  dalam  bahan pangan dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme, serta membuat bahan pangan lebih mudah diaplikasikan sebagai bahan tambahan dalam berbagai produk. 12

## Rendemen
Rendemen  merupakan  parameter  yang sangat  penting  untuk  menentukan  nilai  ekonomis produk dan efektifitas dari perlakuan yang diberikan, semakin  tinggi  nilai  rendemen  produk  semakin efektif perlakuan yang diberikan. Rendemen produk yang  dihasilkan  berkisar  4,83  –  29,86  %  dengan rendemen  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  T 1 dan rendemen  terendah  terdapat  pada  perlakuan  T 4 . Rendemen dari produk mengalami penurunan seiring dengan  peningkatan  konsentrasi  HCl.  Hal  tersebut
dikarenakan  semakin  tinggi  konsentrasi  HCl  yang digunakan  untuk  ekstraksi  kalsium,  semakin  kuat kemampuan  larutan  dalam  mengekstrak  senyawa dalam  bahan  dan  semakin  banyak  senyawa  dalam bahan yang bereaksi dengan larutan untuk mencapai kesetimbangan  reaksi  akibatnya  semakin  banyak senyawa  dalam  bahan  yang  larut  dalam  larutan. Ekstraksi  dengan  larutan  asam  membuat  senyawa organik seperti protein dan lemak dalam tulang ikan bandeng  larut  dalam  larutan  dan  ikut  terbuang bersama  larutan. 6 Nilai  rendemen  produk  yang dihasilkan  lebih  rendah  jika  dibandingkan  dengan rendemen  kalsium  dari  ikan  cakalang  yang  berkisar 40%, 13 akan  tetapi  tidak  jauh  berbeda  dengan  nilai rendemen  tepung  tulang  ikan  tuna  hasil  perlakuan hidrolisis protein yang berkisar 28,85%. 14

## Kelarutan
Kelarutan  kalsium  yang  diekstraksi  dengan konsentrasi  HCl  berbeda  dalam  larutan  asam  pH  2 berkisar  antara  11,40  –  14,00  %.    Perlakuan  yang diberikan  berpengaruh  nyata  terhadap  kelarutan produk dalam asam, dengan nilai kelarutan tertinggi terdapat  pada  perlakuan  T 2 ,  namun  tidak  berbeda nyata  dengan  T 1 .  Kelarutan  produk  dalam  larutan asam  cukup  baik,  hal  ini  dikarenakan  kalsium  lebih mudah larut dalam keadaan asam. Pelarut asam akan memberikan ion H + yang akan bereaksi dengan anion dari  garam  kalsium  sehingga  garam  kalsium  dapat terpecah dan larut dalam larutan. 15 Hal tersebut juga membuat kelarutan kalsium dalam asam lebih tinggi jika  dibandingkan  kelarutan  kalsium  dalam  air. Pelarut  asam  dengan  pH  2  digunakan  sebagai indikator  untuk  mengetahui  kemudahan  kalsium diserap oleh tubuh. Namun parameter ini hanya dapat digunakan untuk memperkirakan penyerapan kalsium dalam  tubuh,  untuk  memastikannya  diperlukan analisis  bioavailabilitas  secara in  vivo .  Kelarutan kalsium dapat menentukan batas konsentrasi kalsium yang  dapat  diserap  oleh  tubuh,  karena  tubuh  tidak dapat  menyerap  garam  kalsium  seperti  kalsium fosfat. 16 Kelarutan  produk  lebih  rendah  jika dibandingkan  dengan  kelarutan  kalsium  dari  tulang ikan silver carb yang berkisar 19,27 %. 17 Perbedaan tersebut  dapat  dikarenakan  jenis  ikan yang  berbeda. Jenis ikan yang berbeda memiliki komposisi senyawa yang  berbeda  sehingga  dapat  mempengaruhi kelarutan kalsium.
Perlakuan ekstraksi kalsium dengan konsentrasi  berbeda  berpengaruh  nyata  terhadap kelarutan  produk  dalam  air.  Perlakuan  T 1 tidak berbeda nyata dengan perlakuan T 2 dan perlakuan T 3 tidak berbeda nyata dengan perlakuan T 4 , sedangkan perlakuan T 1 dan T 2 berbeda nyata dengan perlakuan T 3 dan  T 4 .  Nilai  kelarutan  dalam  air  produk  cukup rendah berkisar 4,36 – 6,56%, namun lebih tinggi jika dibandingkan  dengan  kelarutan  tepung  tulang  ikan
madidihang yang  berkisar  2,12%  dengan  perlakuan perebusan  dalam  air. 18 Ekstraksi  kalsium  dengan larutan  asam  pada  tulang  ikan  menghasilkan  lebih banyak  kalsium  yang  mudah  larut. 19 Kelarutan kalsium  dalam  air  rendah  dikarenakan  kalsium merupakan  senyawa  yang  berikatan  kuat  dengan anion yang mengandung oksigen seperti PO 4 2- , CO 3 2- , HPO 4 2- , dan OH - , hal ini mengurangi interaksi antara ion kalsium dengan molekul air. Kelarutan suatu zat dalam air ditentukan oleh struktur dan ikatan molekul dalam zat tersebut, zat dapat larut dalam air apabila zat dapat melepas ion yang cocok dengan struktur air serta  memiliki  peran  yang  mirip  atau  sama  dengan molekul air. 16 Kelarutan  kalsium  dipengaruhi  oleh  spesies ikan dikarenakan spesies ikan yang berbeda memiliki struktur  tulang  yang  berbeda.  Senyawa  dalam struktur  tulang  seperti  florid  dan  magnesium  dapat mempengaruhi kelarutan kalsium. Banyak penelitian yang  menyebutkan  bahwa  senyawa  florid  dapat menghambat kelarutan kalsium, sedangkan senyawa magnesium  dapat  meningkatkan  kelarutan  kalsium. Kelarutan  kalsium  juga  dapat  dipengaruhi  oleh keberadaan  karbonat.  Pada  produk  hidroksiapatit semakin banyak produk kehilangan karbonat selama proses pembuatan produk, semakin rendah kelarutan produk. 20 Produk  dengan  kelarutan  yang  baik  lebih mudah diaplikasikan dalam produk pangan dan lebih mudah dicerna oleh tubuh.

## Derajat Putih
Perlakuan ekstraksi kalsium dengan konsentrasi yang berbeda berpengaruh nyata terhadap nilai  derajat  putih  produk.  Perlakuan  ekstraksi kalsium dengan konsentrasi yang berbeda menghasilkan  produk  dengan  derajat  putih  yang tinggi,  hal  ini  dikarenakan  ekstraksi  dengan  larutan asam  mengurangi  senyawa  organik  seperti  lemak, protein  dan  karbohidrat  yang  terdapat  dalam  tulang ikan. Keberadaan senyawa organik dalam tulang ikan akan  memberikan  warna  kurang  putih  pada  produk yang  dihasilkan. 21 Nilai  derajat  putih  kalsium  dari tulang ikan bandeng berkisar 87,80% - 91,04% lebih tinggi  jika  dibandingkan  dengan  nilai  derajat  putih kalsium  dari  ikan  cakalang  yang  berkisar  76,37%. 13 Nilai  derajat  putih  produk  dapat  dipengaruhi  oleh metode pembuatan dan spesies ikan yang digunakan. Nilai derajat putih kalsium dari tulang ikan bandeng paling tinggi terdapat  perlakuan  T 3 , sedangkan  nilai derajat  putih  terendah  terdapat  pada  perlakuan  T 4 . Konsentrasi larutan dan suhu ekstraksi serta interaksi antara  keduanya  dapat  mempengaruhi  derajat  putih dari  produk  yang  dihasilkan. 22 Penggunaan  larutan asam  dengan  konsentrasi  yang  tinggi  dapat menyebabkan produk memiliki warna kehitaman atau melanin, dikarenakan adanya senyawa indol triptopan
dengan aldehid yang berasal dari karbohidrat dalam bahan. 7 Nilai  derajat  putih  produk  yang  tinggi mempresentasikan  tingkat  kemurnian  warna  putih yang tinggi. Produk yang memiliki warna yang putih lebih disukai sebagai bahan tambahan dalam bidang pangan.

## Kadar Kalsium
Kadar kalsium produk berkisar antar 19,92% -  23,99%  dengan  perlakuan  T1  memiliki  kadar kalsium tertinggi. Kadar kalsium produk mengalami penurunan seiring dengan bertambahnya konsentrasi HCl  yang  digunakan  untuk  ekstraksi  tulang  ikan. Ekstraksi  dengan  larutan  asam  akan  memutuskan ikatan  antara  kolagen  dan  kalsium.  Hal  tersebut membuat kalsium dapat terlepas dari matriks kolagen. Ekstraksi dengan konsentrasi asam yang tinggi dapat membuat kolagen terdestruksi dan larut dalam larutan asam. 23 Hal  tersebut  dapat  membuat  kalsium  ikut terlarut  dalam  larutan  dan  ikut  terbuang.  Ekstraksi kalsium  dengan  konsentrasi  yang  semakin  tinggi, membuat  proses  pencucian  semakin  lama  untuk mendapatkan  pH  netral,  hal  ini  dapat  membuat kalsium dalam produk ikut terbuang bersama dengan akuades.  Kadar  kalsium  produk  lebih  tinggi dibandingkan  kadar  kalsium  tepung  tulang  ikan bandeng  yang  hanya  berkisar  4%, 24 namun  hampir sama  dengan  kadar  kalsium  tepung  tulang  ikan bandeng yang diberikan perlakuan asam asetat 0,5% disertai pemanasan dengan tekanan yang tinggi yang berkisar  24,51%. 9 Hal  ini  membuktikan  bahwa perlakuan  asam  dapat  meningkatkan  keberadaan kalsium  dalam  produk.    Ekstraksi  HCl  pada  tulang ikan  bandeng  tidak  dapat  menghilangkan  seluruh senyawa  lain  dalam  tulang  ikan  seperti  senyawa organik,  sehingga  menghasilkan  produk  dengan kadar  kalsium  yang  tidak  terlalu  tinggi.  Senyawa organik  dalam  tulang  ikan  dapat  dihilangkan seluruhnya dengan perlakuan kalsinasi pada suhu 600° C selama 6 jam. 10

## SIMPULAN
Perlakuan ekstraksi kalsium dari tulang ikan bandeng dengan konsentrasi yang berbeda memberikan  karakteristik  kadar  air  yang  rendah, kelarutan dalam air dan asam yang baik, serta derajat putih dan kadar kalsium yang tinggi. Kadar kalsium produk  akan  turun  seiring  dengan  naiknya konsentrasi  HCl  yang  digunakan.  Perlakuan  terbaik pada  penelitian  ini  adalah  ekstraksi  kalsium  dengan HCl 0,5N.
Ekstraksi  kalsium  dari  tulang  ikan  bandeng dapat  dilakukan  menggunakan  pelarut  HCl  0,5  N. Untuk menindaklanjuti sifat kelarutannya yang baik pada  larutan  asam,  diperlukan  pengujian  secara  in
vitro  tentang  penyerapan  sebagai  sumber  kalsium dalam tubuh.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Spiraliga  RR,  Darmanto  YS,  Amalia  U. Karakteristik nasi analog tepung mocaf dengan penambahan  tepung  rumput  laut Gracilaria verrucosa dan  tiga  jenis  kolagen  tulang  ikan. Jurnal  Pengetahuan  dan  Bioteknologi  Hasil Pertanian. 2017; 6(1): 1 – 10.
2. Jung  WK,  Park  PJ,  Byun  HG,  Moon  SH,  Kim SK.  Preparation  of  hoki  ( Johnius  belengerii ) bone oligophosphopeptide with a high affinity to calcium bycarnivorous intestine crude proteinase. Food Chemistry.2005; 91: 333 – 340.
3. Larsen T, Thilsted SH, Kongsbak K, Hansen M. Whole  small  fish  as  a  rich  calcium  source. British Journal of Nutrition. 2000; 83 : 191–196
4. Malde  MK,  Bugel  S,  Kristensen  M,  Malde  G,
Graff IE, Pedersen JI. Calcium from salmon and cod bone is well absorbed in young healthy men: a  double  blinded  randomised  crossover  design. Nutrition and Metabolism.2010; 7(61) : 1 – 9.
5. Salitus  S,  Ilminingtyas  D,  Fatarina  E. Penambahan  tepung  tulang  Bandeng  (chanos cahnos) dalam pembuatan kerupuk sebagai hasil samping  Industri  bandeng  cabut  duri.  Serat Acitya, 2017, 6 (2) :81-92.
6. Wulandari  P,  Khusumasari  S.  Effect  of extraction methods on the nutritional characteristics of  milkfish  ( Chanos  chanos Forsskal ) bone powder. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science . 2019; 383 : 1- 5.
7. Lekahena V, Faridah DN, Syarief R, Peranginangin  R.  Karakteristik  fisikokimia nanokalsium  hasil  ekstraksi  tulang  ikan  nila menggunakan  larutan  basa  dan  asam.  Jurnal Teknologi dan Industri Pangan. 2014; 25(1): 57- 64.
8. Suptijah  P,  Losung  F,  Nugraha  R.  Isolasi  dan karakterisasi mineral crustacean sebagai sumber potensial nanokalsium. Dalam Seminar Nasional Perikanan Indonesia, Sekolah Tinggi Perikanan. 2010 Hal. 367 – 360.
9. Wang T. Preparation of milkfish bone powder by a novel bone-embrittlementing technique and used in manufacturing high calcium egg roll. Journal of Food and Nutrition Research. 2020; 8(2) : 95 – 101.
10. Imra  MF,  Akhmadi,  Abdiani  IM,  Irawati  H. Karakteristik  limbah  tulang  ikan  bandeng ( Chanos  chanos )  dari  limbah  industri  baduri Kota  Tarakan.  Jurnal  TECHNO-FISH.  2019; 3(2) : 60 – 69.
11. Prinaldi  WV,  Suptijah  P,  Uju.  Karakteristik nano-kalsium  ekstrak  tulang  ikan  tuna  sirip kuning ( Thunnus albacares ). Jurnal Pengolahan Hasil  Perikanan  Indonesia.  2018;  21(3):  385  – 395.
12. Kusumaningrum  I,  Santoso  D,  Pamungkas  BF. Pemanfaatan tulang ikan belinda sebagai tepung sumber  kalsium  dengan  metode  alkali.  Jurnal Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia.  2016; 19(2) : 148 – 155.
13. Harmain RM, Dali FA, Husain R. Nanocalcium characterization  of  cakalang  fish  bone  flour ( Katsuwonus  pelamis L).  International  Journal of Innovative Science and Research Technology. 2018; 3(10) : 306 – 308.
14. Trilaksani W, Salamah E, Nabil M. Pemanfaatan limbah  tulang  ikan  tuna  ( Thunnus sp.)  sebagai sumber  kalsium  dengan  metode  hidrolisis protein.  Buletin  Teknologi  Hasil  Perikanan. 2006; 9(2) : 34 – 45.
15. Meiron OE, Bar-David E, Afalo ED, Shechter A, Stepensky D, Berman A, Sagi A. Solubility and bioavailability of stabilized amorphous calcium carbonate.  Journal  of  Bone  and  Mineral Research. 2011; 26(2): 364 – 372.
16. Horvath AL. Solubility of structural complicated material  :  II.  Bone.  Journal  of  Physical  and Chemical Reference. 2006; 35 (4): 1653 – 1668.
17. Yin T, Du H, Zhang J, Xiong S. Preparation and characterization  of  ultrafine  fish  bone  powder. Journal  of  Aquatic  Food  Product  Technology. 2016; 25( 7 ) : 1 – 27.
18. Talib  A,  Suprayitno  E,  Hardoko  A.    Physico- chemical  properties  of  madidihang  ( Thunnus albacares Bonnaterre ) fish bone flour in Ternate,
North  Moluccas.  International  Journal  of Biosciences. 2014; 4(10) : 22 – 30.
19. Hemung BO, Sriuttha M. Effects of Tilapia Bone Calcium  on  Qualities  of  Tilapia  Sausage. Agriculture  and  Natural  Resource.  2014;  48  : 790 – 798.
20. Liu Q, Matinlinna JP, Chen Z, Ning C, Ni G, Pan H,  Darvell  BW.  Effect  of  termal  treatment  on carbonated hydroxyapatite : morphology, composition, crystal characteristics and solubility.  Ceramics  International.  2015;  41  : 6149 – 6157.
21. Hanura  AB,  Trilaksani  W,  Suptijah  P. Karakterisasi  nanohidroksiapatit  tulang  tuna Thunnus sp. sebagai sediaan biomaterial. Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis.2017; 9(2): 619 – 629.
22. Cucikodana  Y,  Supriadi  A,  Purwanto  B. Pengaruh  perbedaan  suhu  perebusan  dan konsentrasi  NaOH  terhadap  kualitas  bubuk tulang  ikan  gabus  ( Channa  striata ).  Fishtech. 2012; 1(1) : 91 – 101.
23. Santoso  C,  Surti  T,  Sumardianto.  Perbedaan penggunaan  konsentrasi  larutan  asam  sitrat dalam pembuatan gelatin tulang rawan ikan pari mondol ( Himantura
gerrardi ). Jurnal
Pengolahan  dan  Bioteknologi  Hasil  Perikanan. 2015; 4(2) : 106 – 114.
24. Pramono A, Sulaiman F, Suryana,  Milandia A. Calcination  process  on chanos  chanos  forsk (CCF)  of  milkfish bones  to  get  hydroxyapatite (HAp) as composites application. IOP Conference  Series:  Materials  Science  and Engineering. 2019; 532 : 1 – 8.