PENGIKATAN AFLATOKSIN B1 DENGAN HASIL EKSTRAKSI UMBI ILES- ILES ( Amorpophallus oncophylus ) SECARA INVITRO
Nentin Surtini 1) ,  Nia Yuliani 2) *, Agus Susanto 1)
1) Program Studi Kimia FMIPA Universitas Nusa Bangsa Bogor
2) Program Studi Biologi FMIPA Universitas Nusa Bangsa Bogor Jl. KH. Soleh Iskandar KM 4 Cimanggu Tanah Sareal Bogor 16166 *email : niayuliani88@yahoo.co.id

## ABSTRACT

## Aflatoksin B1 Binding with Tubers of Iles-Iles (Amorpophallus oncophylus) Extract on Invitro
Animal feed plays an important role in determining livestock productivity and food security for humans. Animal feed produced by the animal feed industry is still corn-soya based, its raw material composition is dominated by  soybean  and  corn  meal,  which  is  easily  contaminated  with  aflatoxin.  Aflatoxin  compounds  known  to  cause disruption to both animals and humans, because it is carcinogenic. Some aflatoxin binding methods have been using glucomannan containing yeast product (GYP), hydrated sodium calcium aluminosilicate (HSCAS), zeolite, bentonite, kaolin, and activated carbon, and this method is imported so the price is quite expensive. This study aims to test the ability of extracted iles-iles as a binder of aflatoxin B1 in feed in vitro. The results showed that iles-iles extract can bind aflatoxin well like glucomannan from Mycosorb although the binding of Aflatoxin by Amorphophalus extract is less  bound  than  the  binder  of  Mycosorb.  Giving  extracts  weighing  41.25;  82.1  and  102.75  mg  have  the  aflatoxin binding  ability  with  a  3.88-axis  increase  in  succession;  6.25  and  5.97  ppb  or  as  high  as  9.86;  15.8;  15.2%.  The binding of aflatoxin with glucomannan from the mycosorb product was able to absorb 27.10% aflatoxin in 41.25 mg binder weight and decrease in binder material 82.1 mg (19.63%) and 102.75 mg (23.97% ).
Keywords: Aflatokin B1, iles-iles tubers, glucomannan

## ABSTRAK
Pakan  ternak  memiliki  peran  penting  karena  menentukan  produktivitas  ternak  maupun  keamanan  pangan bagi  manusia. Pakan ternak  yang  diproduksi  oleh industri pakan ternak  masih berbasis corn-soya , komposisi bahan bakunya  didominasi  oleh  bungkil  kedelai  dan  jagung,  yang  mudah  terkontaminasi  aflatoksin.  Senyawa  aflatoksin diketahui dapat menimbulkan gangguan baik pada hewan maupun manusia,  karena bersifat karsinogenik.  Beberapa metode pengikatan aflatoksin selama ini menggunakan glucomannan containing yeast product (GYP) (Mycosorb®), hydrated  sodium  calcium  aluminosilicate (HSCAS),  Zeolit,  bentonit,  kaolin,  dan  karbon  aktif  dan  metode  ini bahannya  berasal  dari  import  sehingga  harganya  cukup  mahal.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  kemampuan hasil ekstraksi iles-iles sebagai pengikat aflatoksin B1 dalam pakan secara in vitro.  Hasil  penelitian didapat bahwa ekstrak  iles-iles  dapat  mengikat  aflatoksin  dengan  baik  seperti  glukomanan  dari    Mycosorb  walaupun  pengikatan Aflatoksin  oleh  ekstrak  Amorphophalus  lebih  sedikit  terikatnya  dibandingkan  dengan  pengikat  dari  Mycosorb. Pemberian  ekstrak  dengan  berat  41,25  ;  82,1  dan  102,75  mg  memiliki    kemampuan  mengikat    aflatoksin  dengan kecenderungan  meningkat secara berturut turut 3,88; 6,25 dan 5,97 ppb atau sebesar 9,86; 15,8; 15,2%. Pengikatan aflatoksin dengan glukomannan dari produk mycosorb mampu menyerap 27,10% aflatoksin pada penggunaan bahan berat pengikat 41,25 mg dan menurun pada bahan berat bahan pengikat 82,1 mg (19,63%) dan 102,75 mg (23,97%).
Kata kunci : Aflatokin B1, umbi iles-iles, glukomanan

## PENDAHULUAN
Pakan ternak memiliki peran penting  karena  menentukan  produktivitas ternak  maupun  keamanan  pangan  bagi manusia.  Pakan  yang  berkualitas  akan
memberikan  produk  ternak  yang  berkualitas pula  seperti  telur,  susu,  daging  dan  wool. Sampai  saat  ini  industri-industri  pakan ternak  masih  berbasis  c orn-soya .  Yang artinya  jagung  dan  kedelai  sebagai  bahan baku  utama,  Jagung  merupakan  bahan  baku
pakan  sebagai  sumber  energi  dan  bungkil kedelai  sebagai  sumber  protein.  Jagung menjadi  sumber  energi  karena  kandungan karbohidrat/pati yang tinggi di dalam jagung (64%), selain itu dengan  proses  gelatinisasi pati, jagung dapat sebagai bahan perekat dari bahan  pakan  dalam  proses pelleting pada industri pabrik pakan (Syarief et al. , 2003). Jagung  merupakan  salah  satu  biji- bijian yang mudah terserang jamur penghasil aflatoksin,  sehingga  mudah  terkontaminasi aflatoksin. Selain di jagung, aflatoksin dapat ditemukan  pada  bahan  baku  pakan  lainnya seperti  kacang  tanah,  bungkil  kelapa,  biji kapuk, bungkil kedelai, bekatul dan sebagainya. Senyawa  aflatoksin  diketahui  dapat menimbulkan  gangguan  baik  pada  hewan maupun manusia,
karena bersifat
karsinogenik,  sebagaimana  telah  ditetapkan oleh International  Agency  Research  on Cancer (IARC)  pada  tahun  1988  bahwa aflatoksin  merupakan  bahan  karsinogenik klas I (Bahri et al. , 1994).
Di  Indonesia  batas  maksimal  kadar aflatoksin,  berdasarkan  Standar  Nasional Indonesia  (SNI  01-3929-2006)  pada  ransum pakan  ayam  ras  petelur    batas  maksimal adalah  50  ppb,  untuk layer  starter /anak  dan layer grower /dewasa batas maksimal adalah 60  ppb  pada layer /masa  bertelur.  Pada ransum  ayam  ras  pedaging/ broiler  starter batas  maksimal  50  ppb,  dan  60  ppb  pada broiler  finisher ,  pada  ransum  babi  batas maksimalnya  50  ppb,    pada  pakan  puyuh
batas maksimalnya 40 ppb,  pada itik 20 ppb dan  pada  ransum  konsentrat  sapi  perah  dan sapi potong 200 ppb.
Menekan  aflatoksin  dengan  metode dekontaminasi  bahan  baku  pakan  dalam pelaksanaannya  kurang praktis, tidak efisien dan  membutuhkan  biaya  yang  tinggi.  Oleh karena  itu  metode  pengikatan  aflatoksin dalam  saluran  pencernaan,  supaya  tidak terserap  dalam  tubuh  ternak  merupakan metode yang lebih efektif, praktis dan biaya lebih  rendah.  Bahan  pengikat  yang  dipakai selama ini antara lain glucomannan containing jamur product (GYP) (Mycosorb ® ), hydrated  sodium  calcium aluminosilicate (HSCAS),  Zeolit,  bentonit, kaolin,  dan  karbon  aktif,  merupakan  bahan import serta harganya cukup mahal. Tanaman iles-iles merupakan tanaman berumbi yang mengandung glukomannan  (60%  dalam  bahan  kering). Glukomannan merupakan bahan alam dengan  struktur  kimia  sebagai  polimer karbohidrat merupakan pengikat yang potensial.  Glukomannan  yang  berasal  dari tanaman iles-iles belum diujicobakan sebagai bahan pengikat aflatoksin. Penelitian ini bertujuan untuk melihat  kemampuan  hasil  ekstraksi  iles-iles sebagai pengikat aflatoksin B1 dalam pakan secara  invitro  dan  menentukan  dosis pengikatan  aflatoksin  yang  tepat  dalam ransum  pakan  yang  secara  efektif  mampu melindungi ternak dari serangan aflatoksin
Gambar 1. Tanaman Iles-iles (a) dan umbi iles-iles (b)
(b) (a)

## BAHAN DAN METODE

## Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan adalah  aquades,  aluminium  foil,  etanol, standar  aflatoksin  B1,  larutan  konjugat aflatoksin,  plate  yang  telah  dilapisi  antibodi aflatoksin  B1,  subtrat  (K-Blue)  dan stoping solution atau larutan penghenti reaksi, Umbi Iles-iles.  Alat  yang  digunakan  adalah timbangan  analitik,  penggiling  sampel, ayakan, shaker ,  sentrifus,  kompor  listrik, gelas  piala,  blender,  erlenmeyer  2000  ml, gelas ukur 1.000 ml, kain penyaring,  batang pengaduk,  oven, . Instrumen analisis ELISA Reader  multiscan  Ex, multichanel  pipet , pipet  tip  100  µl,  kain  penyerap, plate untuk pencampuran, plate reservoir , lemari pendingin. Metode 1. Ekstraksi  Glukomannan  dari  umbi
iles-iles Umbi  iles-iles  dikupas  kulitnya dengan menggunakan pisau untuk
dipisahkan bagian kulitnya dan daging buah. Daging buah diiris-iris dengan ketebalan 0,5 cm,  irisan  tersebut  diratakan  di  atas  loyang alumunium,  untuk  dikeringkan  di  dalam oven  dengan  suhu  80°C  selama  8  jam. Setelah    kering,  irisan  umbi  tersebut didinginkan  sampai  mencapai  suhu  kamar, kemudian  bahan  digiling  untuk  membuat tepung iles-iles dengan menggunakan
blender dan disaring dengan ayakan berukuran 100 mesh. Tepung iles-iles tersebut dimasukkan ke dalam gelas piala yang berisi air dengan perbandingan 30 ml/gr kemudian dipanaskan  menggunakan  pemanas  listrik dengan suhu 45 o C dengan pengadukan tetap selama 1 jam. Bahan akan   menjadi  gel  dan didiamkan  pada  suhu  ruang,  kemudian ditambahkan alkohol 96% dengan perbandingan 1:2, kemudian diaduk kembali,
bahan disaring dengan
menggunakan  kain  saring,  setelah  itu  bahan diratakan  pada  kertas  alumunium  foil, kemudian dimasukkan kedalam oven dengan suhu  60 o C  selama  48  jam  sampai  bahan menjadi  kering.  Bahan  hasil  pengeringan tersebut  di  giling  dengan  blender  untuk membuat tepung glukomannan.
2. Uji Invitro
Pengujian  invitro  untuk  menguji kemampuan pengikatan glukomannan terhadap  aflatoksin  menggunakan  metode
Lemke et  al .  (2001).  Metode  yang digunakan  adalah  metoda simply-water . Prosedur  metode  simply  water  hanya  satu tahap menggunakan pelarut aquabides dalam suhu  39°C  selama  2  jam.  Disiapkan  pelarut A  yang  mengandung  aflatoksin  B1  0,821 µg/ml.  Perbandingan  aflatoksin  B1  dengan bahan yang diuji kemampuan ikatnya sekitar 1:500.000  (b/b),  perbandingan  ini  diambil berdasarkan representasi
kandungan
aflatoksin B1 di lapangan. a.  Penyiapan contoh Berat  bahan  pengikat  yang  akan diuji adalah 41,25; 82,1; 102,75mg dimasukan  dalam  tabung  inkubasi  (100  ml), kemudian masukan 0,2 ml larutan  A dan 40 ml  air  deionized.  Ketika  menambah  larutan sambil  digoyang  dengan  hati-hati  selama  5 menit  setiap  15  menit.  Pengujian  dilakukan duplo  untuk  setiap  pengujian.  Kontrol sampel  dibuat  dengan  menggunakan  pelarut A  dan  air  deionized  tanpa  diberi  bahan adsorben  mikotoksin.  Pada  akhir  inkubasi larutan  di  sentrifuse  (3500xg  selama  15 menit  pada  suhu  4°C)  supernatant  diambil dengan  pipet  sebanyak  kurang  30  ml  untuk dianalisa dengan ELISA Reader . Kemampuan  mengikat  dari  bahan  adsorben diperoleh dengan menghitung selisih kandungan  aflatoksin  sebelum  dan  sesudah diberi adsorben dan dilakukan inkubasi.
b.  Pembacaan dengan ELISA
Mikroplate  (lubang  sumur)  yang sudah  dilapisi  dengan  antibodi  disiapkan, semua  kit  aflatoksin  B1  dikeluarkan  dari lemari es dan dibiarkan sampai sama dengan suhu kamar, pelarut sebagai blanko dimasukkan  pada  satu  sumur,  satu  sumur untuk  kontrol  yg  hanya  berisi  enzim konjugat,  kemudian  dikalibrasi  standar aflatoksin  B1  dengan  cara    memasukkan standar  aflatoksin  B1  sebanyak  5  lubang sumur  dengan  berlainan  konsentrasi  yaitu  0 ppb,  5  ppb,  10  ppb,  20  ppb  dan  40  ppb, larutan standar dipipet sebanyak 50 µl untuk setiap  konsentrasi  yang  berlainan  pada masing-  masing  sumur  yang  berbeda. Sampel  dimasukkan  sebanyak  50  µl  pada masing-masing  sumur  yang  berbeda  pula,
larutan konjugat 50 µl  dimasukkan ke setiap lubang  sumur,  kemudian  dimasukan  anti- aflatoksin  larutan  antibodi  sebanyak  50  µl  , digoyang-  goyang dan diinkubasi  selama 30 menit.
Setelah  diinkubasi  semua  larutan yang  ada  di  sumur  mikroplat  dibuang dengan  cara  dibalikan  serentak,dikeringkan diatas  kertas  tissu  bersih  sampai  semua larutan  di  dalam  sumur  mikroplat  terbuang, larutan buffer pencuci di masukan ke lubang sumur.    Pencucian  dilakukan  beberapa  kali, setelah  bersih    ditambahkan  100  µl  larutan substrat/cromogen  dan  diinkubasi  di  ruang gelap  selama  15  menit.  Larutan  penghenti reaksi  sebanyak  100  µl  dipipet  ke  dalam well,  dan  dilanjutkan  pembacaan  dengan ELISA reader pada panjang gelombang 450 nm . Pembacaan dengan ELISA reader tidak boleh lebih dari 15 menit sejak penambahan stop solution.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## 1. Ekstraksi  Glukomannan  dari  Umbi Iles-Iles
Hasil  dari  ekstraksi  umbi  iles-iles diperoleh rata-rata hasil rendemennya adalah
74,1% seperti terlihat pada Tabel 1
.
2. Uji In Vitro

## Penyiapan contoh
Hasil  perhitungan  berat  contoh bahan  pengikat  baik  itu bahan  pengikat ekstrak A.  oncophyllus dan  glukomannan dari  Mycosorb,  agar  dapat  dibandingkan maka perbandingan beratnya disamakan dan didapat  hasil  masing-masing  berat  dengan perbandingan seperti terlihat pada Tabel 2.

## 3. Pengujian ELISA
Hasil  pembacaan  standar  dengan ELISA  diperoleh  nilai optical  density ,  yang selanjutnya  diolah  menjadi  persen  inhibisi, sebagaimana pada Tabel 3.

## 4. Kadar Aflatoksin Terikat
Berdasarkan  kurva  kalibrasi  maka diperoleh persamaan garis lurus  Y= -1,874x +  89,63.  Berdasarkan  persamaan  garis  lurus tersebut  dapat  diperoleh  data  konsentrasi
aflatoksin  yang  terdapat  pada  larutan supernatan  dari  cairan  invitro  yang  diuji, sebagaimana  ditampilkan  pada  Tabel  4  di bawah  ini.  Setiap  sampel  diuji  pada  berat bahan  pengikat  41,25  mg  (1),  82,1  mg  (2) dan  102,75  (3)  secara  duplo  (A  dan  B). Setelah diperoleh data konsentrasi aflatoksin pada  larutan  supernatan  maka  konsentrasi tersebut dikurangi dengan konsentrasi aflatoksin  pada  kontrol  (tanpa  bahan pengikat) maka diperoleh konsentrasi aflatoksin  yang  terikat  oleh  bahan  pengikat. Kemampuan  pengikatan  dengan  bahan pengikat ekstrak Amorpophalus dapat dilihat pada Tabel 5.
Ekstrak  Amorphophalus  mampu mengikat  aflatoksin  dan    pemberian  ekstrak Amorphophalus  dengan  berat  41,25  ;  82,1 dan 102,75 mg mampu mengikat  aflatoksin dan  memiliki  kecenderungan  meningkat secara berturut turut 3,88; 6,25 dan 5,97 ppb atau  sebesar  9,86;  15,8;  15,2%.  Pemberian ekstrak  Amorphophalus  41,25  ;  82,1  dan 102,75  mg  pada  pengujian  invitro  ditambah aflatoksin  B1  0,821µg/ml  sebanyak  0,2  ml artinya perbandingan bobot aflatoksin dengan  bobot  ekstrak  Amorpophalus  adalah 1:  (  251.218,  500.000  dan  625.761). Perbandingan berat aflatoksin dengan bahan pengikat  dari  ekstrak  glukomanannan  masih memiliki kecenderungan naik dalam kemampuan  mengikat  aflatoksin,  hal  ini memiliki  peluang  penambahan  berat  bahan pengikat  masih  bisa  ditambah  untuk meningkatkan  daya  pengikatan  terhadap aflatoksin.  Kandungan  aflatoksin  pada larutan supernatan uji  in vitro dengan bahan pengikat glukomannan dari produk mycosorb  dapat  dilihat  pada  Tabel  6.
Larutan  supernatan  merupakan  larutan bagian atas hasil sentrifuse. larutan supernatant  yang  mengandung  aflatoksin yang  tidak  terikat  oleh  bahan  pengikat karena  aflatoksin  yang  terikat  oleh  bahan pengikat  terdapat  pada  bagian  bawah  yang mengendap bersama bahan pengikat.
Berdasarkan data
konsentrasi aflatoksin  pada  larutan  supernatan    maka dapat  diketahui  konsentrasi  aflatoksin  yang terikat,  Untuk  menghitung  konsentrasi aflatoksin  yang  terikat    yakni  dengan mengurangi  konsentrasi    aflatoksin  pada kontrol  (tanpa  bahan  pengikat)  dengan
konsentrasi  pada  larutan  supernatannya. Hasil  penghitungan  konsentrasi  aflatoksin terikat  oleh  mycosorb  dapat  dilihat  pada
Tabel 7.
Pengikatan aflatoksin dengan glukomannan dari produk mycosorb mampu menyerap 27,10% aflatoksin pada penggunaan  bahan  berat  pengikat  41,25  mg (1:251.218)  dan  menurun  yakni  19,63% pada  bahan  pengikat  82,1  mg  (1:500.000) dan  naik  lagi  kemampuan  mengikatnya 23,97% pada  bahan  pengikat  102,75  mg  (1:
625.761). Kondisi naik turunnya kemampuan pengikatan aflatoksin ini kemungkinan  karena  tidak  homogennya produk  mycosorb,  selain  itu  kemungkinan bahan  untuk  pembuatan  produk  mycosorb merupakan campuran.
Pengikatan Aflatoksin  oleh  ekstrak  Amorphophalus lebih sedikit terikatnya dibandingkan dengan pengikat  dari  Mycosorb,  tetapi  dari  Tabel  6 juga  dapat  dilihat  ada  kecenderungan pengikatan yang meningkat dengan ditambahkan jumlah berat ekstrak
glukomannan dari Amorphophalus.

## 5. Kemampuan pengikatan terhadap aflatoksin
Hasil  ekstraksi  umbi A.  oncophilus mampu  mengikat  aflatoksin,  sebagaimana produk mycosorb, sebagaimana telah disampaikan  dalam  Tabel  7  dan  Tabel  9
Kemampuan daya  ikat antara hasil ekstraksi dengan  produk  jadi  Mycosorb  dapat  dilihat pada Gambar 7.
Dari  grafik  batang  di  atas  terlihat kemampuan  pengikatan  mycosorb  lebih banyak dibandingkan hasil ekstraksi A.oncophyllus pada  semua  berat  pengikat yakni  41,25  82,1  dan  102,75  mg.  Untuk selisih  pengikatan  antara  mycosorb  dengan hasil  ekstraksi A.  oncophyllus paling  tinggi pada  berat  bahan  pengikat  41,25  mg  yakni sebesar 7,24% ( mycosorb 27,1% sedangkan hasil ekstraksi A.oncophyllus 9,86%). Persentase  pengikatan  aflatoksin  dengan berat  pengikat  41,25  mg  untuk  mycosorb merupakan nilai paling tinggi diantara ketiga berat  pengikat,  sedangkan  untuk  hasil ekstraksi A.  oncophyllus paling  rendah. Persentase  pengikatan  paling  tinggi  untuk hasil  ekstraksi A.  oncophyllus terdapat  pada bobot pengikat  82,1%.
Selisih kemampuan pengikatan antara  mycosorb  dengan  hasil  ekstraksi A.
oncophyllus paling kecil terdapat pada berat bahan  pengikat  82,1  mg  yakni  sebesar 3,83%  (mycosorb  19,63%  sedangkan  hasil ekstraksi A.oncophyllus 15,8%).  Hal  ini menunjukan  bahwa  kemampuan  pengikatan aflatoksin  pada  berat  bahan  pengikat  82,1% hampir  sama  antara  mycosorb  dengan
A.oncophyllus.
Tabel 1. Hasil rendemen ekstraksi umbi Amorpophalus oncophyllus
No Berat tepung A. oncophyllus sebelum di ekstraksi (gram) Berat hasil ekstraksi (gram) Persentase Rendemen (%) 1 33,3 25,1 75,4 2 33,3 24,4 73,3 3 33,3 24,4 73,9 4 33,3 24,6 74,5 5 33,3 25,0 75,0 6 33,3 24,2 72,7 Rata-rata 74,1 Tabel 2. Perhitungan perbandingan bahan pengikat dengan aflatoksin Berat bahan pengikat Kode Sampel Perbandingan ekstrak iles-iles bahan pengikat dengan aflatoksin 41,25 mg 1 1 : 251.218 82,1 mg 2 1 : 500.000 102, 75 mg 3 1 : 625.761
Gambar 2. Pengikatan Aflatoksin oleh A. oncophyllus dengan Mycosorb
Tabel 3. Standar Aflatoksin , Optical Density dan Persen Inhibisi Standar Aflatoksin (ppb) Optical density % inhibisi 0 1,559 100 5 1,352 86,722 10 0,96 61,578 20 0,531 34,060 40 0,393 25,208
Tabel 4. Hasil Konsentrasi Aflatoksin dalam Larutan Supernatan pada Uji Invitro dengan Bahan Pengikat Amorphophaluss oncophylus Sampel Berat bahan pengikat (mg) Optical Density % inhibisi Konsentrasi Aflatoksin pada supernatan (ppb) Rata-Rata (ppb) Standar deviasi 1A Am 41,25 0,36 23,09 35,51 35,51 0,00 1B Am 41,25 0,36 23,09 35,51 2A Am 82,1 0,425 27,26 33,28 33,14 0,19 2B Am 82,1 0,433 27,77 33,01 3A Am 102,75 0,413 26,49 33,69 33,42 0,39 3B Am 102,75 0,429 27,52 33,14 C1 kontrol 0,27 17,32 38,59 39,39 C2  kontrol 0,223 14,30 40,20
Am: Amorpophalus                             Huruf A&B sampel menunjukan sampel ulangan (duplo)
Tabel 5. Konsentrasi Aflatoksin yang Terikat oleh Ekstrak Amorpophalus oncophylus Sampel Berat bahan Konsentrasi aflatoksin Konsentrasi aflatoksin Persentase Aflatoksin Rata-rata (%)
pengikat (mg) dalam supernatan (ppb) yang terikat (ppb) yang terikat (%) 1A Am 41,25 35,51 3,88 9,86 9,86 1B Am 41,25 35,51 3,88 9,86 2A Am 82,1 33,28 6,11 15,51 15,8 2B Am 82,1 33,01 6,38 16,20 3A Am 102,75 33,69 5,70 14,47 15,2 3B Am 102,75 33,14 6,25 15,86 C1 kontrol 38,59 C2 kontrol 40,20 Am : Amorpophalus oncophilus Huruf A&B sampel menunjukan sampel ulangan (duplo)
Tabel  6.  Hasil  Konsentrasi  Aflatoksin  dalam  Larutan  Supernatan  pada  Uji  In  vitro  dengan
Bahan Pengikat Mycosorb® Sampel Berat bahan pengikat (mg) Optical Density % inhibisi Konsentrasi Aflatoksin pada supernatan (ppb) Rata- Rata (ppb) Standar deviasi 1A Ms 41,25 0,449 28,80 32,46 29,23 4,57 1B Ms 41,25 0,638 40,92 25,99 2A Ms 82,1 0,428 27,45 33,18 32,17 1,43 2B Ms 82,1 0,487 31,24 31,16 3A Ms 102,75 0,494 31,69 30,92 30,46 0,65 3B Ms 102,75 0,521 33,42 30,00 C1kontrol 0,27 17,32 38,59 39,39 C2 kontrol 0,223 14,30 40,20 Ms : Mycosorb Huruf A&B sampel menunjukan sampel ulangan (duplo) Tabel 7. Konsentrasi Aflatoksin yang Terikat oleh Mycosorb® Sampel Berat bahan pengikat (mg) Konsentrasi aflatoksin dalam supernatan (ppb) Konsentrasi aflatoksin yang terikat (ppb) Persentase Aflatoksin yang terikat (%) Rata-rata (%) 1A Ms 41,25 32,46 7,44 18,89 27,10 1B Ms 41,25 25,99 13,91 35,31 2A Ms 82,1 33,18 6,72 17,06 19,63 2B Ms 82,1 31,16 8,74 22,19 3A Ms 102,75 30,92 8,98 22,80 23,97 3B Ms 102,75 30,00 9,90 25,15 C1 kontrol 38,59 C2 kontrol 40,20 Ms : Mycosorb Huruf A&B sampel menunjukan sampel ulangan (duplo)

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  pembacaan nilai serapan dan kandungan aflatoksin dari contoh  sampel  yang  di  bandingkan  maka dapat  dipastikan  bahwa  glukomannan  dari bahan  ekstrak  iles-iles  dapat  mengikat aflatoksin  dengan  baik  seperti  glukomanan dari    Mycosorb.  Pemberian  ekstrak  dengan berat  41,25  ;  82,1  dan  102,75  mg kemampuan mengikat dari aflatoksin memiliki  kecenderungan  meningkat  secara berturut  turut  3,88;  6,25  dan  5,97  ppb  atau sebesar  9,86;  15,8;  15,2%.  Pengikatan aflatoksin dengan glukomannan dari produk mycosorb mampu menyerap 27,10% aflatoksin  pada  penggunaan  bahan  berat pengikat  41,25  mg  dan  menurun  pada bahan  berat  bahan  pengikat  82,1  mg (19,63%) dan 102,75 mg (23,97%).

## DAFTAR PUSTAKA
Arifin  M.A.  2001. Pengeringan  Kripik Umbi  Iles  –  iles  Secara  Mekanik untuk meningkatkan Mutu Kripik Iles
–  iles. Thesis.  Teknologi  Pasca Panen. IPB.
Bahri,  S.,  Yuningsih,  R.  Maryam,  dan P.Zahari.  1994. Cemaran  aflatoksin pada pakan  ayam  yang  diperiksa  di laboratoriumtoksikologi Balitvet tahun  1991-1998 . Penyakit  Hewan 26(47): 39-42. Burgess,  G.W.  1995. Prinsip  dasar  ELISA dan variasi konfigurasinya, Teknologi  ELISA  dalam  diagnosis dan  penelitian .  G.W.  Burgess  (Ed) Wayan  T.  Ariana  (terjemahan). Gajah Mada University Press. Yogyakarta. Hlm. 506. Cardona  T.D.1989. Aflatoxin  Research  on Grain  In  Asia  its  Problems  and PossibleSolution. Di  dalam:  R.L.
Semple,  A.S  Frio,  P.A.  Hicks  and
J.V. Lozare, editor. Mycotoxin Prevention  and  kontrol  in  Food
Grains.  Proceedimgs  of  Assistance for  The  Training  Course.  Bangkok, 31 Juli – 12 August 1989. Thailand : Collaborative of UNDP/FAO, REGNET  and  The  Asean  Grain Postharvest Programme.
Denli  M,  Okan  F.  2006.  Efficacy  of different  adsorbents  in  reducing  the toxic  effects  of  aflatoxin  B1  in Broiler diets. S. Afri. J. Anim. Sci.36: 224-228.
Diener  UL,  Davis  N,.  1969. Aflatoxin Formation  by  Aspergillus  flavus.
Goldblatt  LA  editor.Di  dalam: Rachmawati.2003.  Aflatoksin  dan Pengembangan ELISA Kit. Pelatihan  Metode  Elisa  Untuk Mendeteksi Aflatoksin Pada Pakan; Bogor 25-26 Jun 2003. New York : Academic Press. Dwiyono  K.  2004. Fenologi  Pembungaan dan  Pembuahan  Tanaman  Iles-Iles (Amorphophallus  muelleri  Blume ) [disertasi]. Bogor Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Gallo A, Masoero  F. 2010. In  vitro models to evaluate the capacity of different sequestering agents to adsorb
aflatoxins. Italian Journal of animal science 9:e21:109-116.
Galvano  A,  Piva  A,  Ritieni  A,  Galvano  G.
2000. Dietary Strategies to Counteract the Effects of Mycotoxin:  A  Review. J  Food Protec 64: 120-131.
Girish CK, Devegowda G. 2006. Efficacy of Glucomannan-Containing Jamur
Product (Mycosorb ® ) and Hydrated Sodium  Calcium  Aluminosilicate  in Preventing  the  Individual  and Combined Toxicity of Aflatoxin and T-2  Toxin  in  Commercial  Broilers . J. Anim. Sci . 19: 877-883.
Jansen PCM, Van der  wilk C, Hetterscheid
WLA. 1996. Amorphophallus
Blume  ex.  Decaisne.  In.M.  Flach and  F.  Rumawas  (Eds).  PROSEA : Plant Resources of South-East Asia No.9  Plant Yielding  non-seed Carbohydrates. Backhuys Publishers, Leiden 45-50. Lemke,  S.L.,  Ottinger,  S.E.,  Mayura,  K., Ake,  C.L.,  Pimpukdee,  K.,  Wang, N., Phillips, T.D., 2001. Development  of  a  multi-tiered approach to the in vitro prescreening of clay based enterosorbents. J.  Anim.  Feed.  Sci. Tech . 93:17-29.
Li B, Xie B, Kennedy JF. 2006. Studies on the  Molekuler  Chain  Morphology of Konjac Glucomannan. Carbohydrate  Polymers 64:  510-
515.
Lillehoj  EB.1986.  The  aflatoxin  in  maize problem:  the  historical  perspective. Di  dalam: Aflatoxin  in  Maize. Proceedings  of    The  Workshop ;  El
Batan,  7-11  Apr  1986.  Mexico: CIMMYT. hlm 13-32 . Marianne F. 1987. Mycotoxin in Foodgrains in Some Asian Countries.  Proceedings  of    join FAO/WHO/UNEP Conference  on Mycotoxins . Bangkok, 28 September  –  3  Oktober  1987. Thailand: Collaborative of UNDP/FAO, Regnet and The Asian Grain Postharvest Programme.
Philips  T.D.,  Afriyie-Gyawu  E,  Wang JS,William  J,  Huebner  H,  Ankrah N.A.,  Ofori-Adjei  D,  Jolly  P, Johnson  N,  Taylor  J,  Marroquin- Cardona,  A  Xu  L,  Tang  L,  Wang JS. 2008. Reducing human exposure to aflatoxin in through the use  of  clay:  review.  Food  Addit. Contam. 25:134-135. Pitt J.I. 1989. An Introduction to Mycotoxins . Di dalam: R.L. Semple,  A.S  Frio,  P.A.  Hicks  and J.V.  Lozare,  editor.  Mycotoxin
Prevention  and  kontrol  in  Food Grains.  Proceedimgs  of  Assistance for  The  Training  Course.  Bangkok,
31 Juli – 12 August 1989. Thailand :  Collaborative  of  UNDP/FAO, REGNET  and  The  Asean  Grain
Postharvest Programme.
Schlegel  HG.  1994. Mikrobiologi  Umum . Ed ke-6. Baskoro Tedjo, Penerjemah; Wattimena  JR,editor. Yogyakarta  :  Gadjah  Mada  Press. Terjemahan  dari  :  Allgemeine Mikrobiologie. Shetty,P.H, Jesperson, L., 2006. Saccharomyces cereviseae and lactic  acid  bacteria  as  potential mycotoxin  decontaminating  agents.
Trend  in  food  Sci.  Technol. 17,  48- 55.
Standar  Nasional  Indonesia  2006. Pakan Ayam  Ras  Petelur  (Layer)    01- 3929-2006 butir 5.1. Badan Standarisasi Nasional, Jakarta. Standar  Nasional  Indonesia  2006. Pakan Anak  Ayam  Ras  Pedaging  (Broiler Starter)    01-3930-2006  butir  5. Badan Standarisasi Nasional, Jakarta
Steel G.D R , James TH. 1995 . Prinsip dan Prosedur  Statitika .  Edisi  kedua, Bambang  Sumantri,  penerjemah  ; jakarta  :  Gramedia  Pustaka  Utama.
Terjemahan  dari  : Principles  And Procedures Of Statistics.
Syarief.R,  Ega  L,  Nurwitri  CC.  2003. Mikotoksin  Bahan  pangan.Bogor
:IPB  Press  dengan  Sekolah  Pasca Sarjana IPB.
Wang  RJ,  Fui  SX,  Miao  CH,  Feng  DY.
2006. Effects of Different Mycotoxin adsorbents on Performance,  meat  Characteristics and  Blood  Profiles  of  Avian Broilers  fed  mold  contaminated corn.  Asian-Aust. J.  Anim.Sci 19:72-79.
Weiss  EF.  2000 .  Thwarting  Cancer  before It
Strikes. http://www.jhu.
edu/~jhumag/0400web/48.html.  [1
Oktober 2006].
Wilson C. 2008 Microbial Food Contamination.CRC Press. Florida Whistler and Richard. 1970. Hemicelluloses,  dalam  Pigmen,  W. D.  The  Carbohydrates,  Chemistry &  Biochemistry  2nd  ed.  Vol.2 , Academic Press. Ney York.