Maryana et al./Galenika Journal of Pharmacy

## PRODUKSI PROTEIN SEL TUNGGAL DARI KULTUR Rhizopus oryzae DENGAN MEDIUM LIMBAH CAIR TAHU
SINGLE-CELL PROTEIN PRODUCTION THROUGH Rhizopus oryzae CULTURE WITH THE MEDIUM OF TOFU WASTEWATER
Leny Maryana 1* , Syariful Anam 1 , Arsa Wahyu Nugrahani 1
1 Jurusan Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Tadulako, Palu, Indonesia
Received 20 Agustus 2016, Accepted 28 September 2016

## ABSTRAK
Limbah  cair  tahu  merupakan  limbah  hasil  proses  produksi  pengolahan  tahu  yang  dapat  menurunkan kualitas lingkungan apabila tidak ditangani dengan tepat. Dampak lain yang dapat ditimbulakan adalah potensi terserangnya  penyakit  seperti  diare,  penyakit  kulit,  dan  penyakit  lainnya  bagi  masyarakat  yang  memanfaatkan air sungai yang telah tercemar limbah cair tahu ini. Akan tetapi, adanya kandungan karbohidrat dan protein yang masih  tinggi  pada  limbah  ini  memungkinkan  untuk  dimanfaatkan  lebih  lanjut  sebagai  substrat  pertumbuhan mikroba  dalam  menghasilkan  Protein  Sel  Tunggal.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  waktu  inkubasi optimum dan kadar protein tertinggi Rhizopus oryzae pada  medium  limbah cair tahu  berdasarkan  perhitungan persen  kadar  protein  dan  analisis  berat  kering  sel.  Serta  mengetahui  pH  optimum  pertumbuhannya  dengan variasi  pH  pertumbuhannya  4,  5,  dan  6.  Perhitungan  dilakukan  sesuai  dengan  waktu  fermentasi  yakni  24,  48, dan 72 jam. Kadar protein total dihitung dengan menggunakan metode Kjeldahl. Hasil  penelitian menunjukkan kadar  protein  tertinggi  terdapat  pada  masa  inkubasi  ke-48  jam  dengan  persen  rata-rata  protein  yakni  0,47%, 0,47%, 0,46% dan massa sel dengan rata-rata nilai 0,77%, 0,84% dan 0,91%. Serta pH optimum pertumbuhan Rhizopus oryzae pada medium limbah cair tahu adalah pH 5.Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa limbah cair tahu potensial digunakan sebagai substrat pertumbuhan Rhizopus oryzae.
Kata kunci : Limbah cair tahu, Protein sel tunggal, Rhizopus oryzae .

## ABSTRACT
Tofu  wastewater  is  the  origination  of  tofu’s  production  process  that  can  degrade  the  quality  of  the environment if  not handled properly.  Another impact of this waste  is the potential attack that could evoke the diseases  such as diarrhea, skin  diseases,  and other  illnesses  for people who use the  stream  flow that has  been polluted by this wastewater. However, the high-carbohydrate and protein of this waste may  allow  it to be used more as a microbial growth substrate to produce a Single-cell Protein. The purpose of this study is to determine the  optimum  incubation  time  and  the  highest  protein  content  of Rhizopus  oryzae in  the  medium  of  tofu wastewater  based  on  the  calculation  of  protein  content  percentage  and  the  analysis  of  cell  dry  mass.  And  to know the optimum pH growth with the  variation  of pH growth which  is about 4, 5, and 6. The  calculation  is performed in accordance with the fermentation time at 24, 48, and 72 hours. Total protein content calculated by the Kjeldahl method.  The  results  showed  the  highest  protein  content  obtained  in  the  incubation  period  to  48 hours with an average percent of protein about 0.47%, 0.47%, 0.46% and a mass of cell with an average value of 0.77%, 0, 84% and 0.91%. The optimum pH of Rhizopus  oryzae growth  in the  medium of tofu wastewater is about 5 pH. It can be concluded that the wastewater of tofu potentially used as a growth substrate  of Rhizopus oryzae.
Keywords: Wastewater of tofu, Single-cell protein, Rhizopus oryzae .

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  penghasil tahu  dan  tempe  yang  menjadi  makanan  khas Indonesia  kaya  akan  kandungan  proteinnya karena  terbuat  dari  bahan  dasar  biji  kedelai. Sebagian  besar  produk  tahu  dihasilkan  oleh industri  skala  kecil  yang  terdapat  di  seluruh wilayah Indonesia. Namun, di sisi lain industri tahu  ini  juga  menghasilkan  limbah  cair  dan padat yang berpotensi mencemari lingkungan.
Limbah  cair  industri  pangan  terutama dari  industri  tahu  mengandung  bahan  organik yang  tinggi,  apabila  dibuang  ke  lingkungan tanpa diolah terlebih dahulu akan menimbulkan dampak negatif berupa penurunan  kualitas  lingkungan.  Limbah  cair tahu  dan  ampas  tahu  juga  mengandung protein, lemak,  vitamin, dan mineral (Ca, Mg, Fe)  sehingga  berpotensi  sebagai  medium pertumbuhan mikroorganisme (Kasmidjo, 1991 Jenie dan Rahayu, 1993; Kuswardani dan Widjajaseputra, 1998).
Menurut  Manfaati  (2010)  bahan-bahan yang  terdapat  dalam  limbah  cair  tahu  antara lain  protein  (40-60%),  karbohidrat  (25-50%) dan  lemak  (10%).  Limbah  cair  tahu  dapat dimanfaatkan  lebih  lanjut  sebagai  substrat pertumbuhan mikroba sepertI dalam pembuatan produk Protein Sel Tunggal (PST).
Protein  sel  tunggal  merupakan  produk biomassa  berkadar  protein  tinggi  yang  berasal dari  mikroba.Mikroba  penghasil  protein  sel tunggal  umumnya  tumbuh  pada  limbah  yang memiliki  unsur  karbon  dan  nitrogen  yang biasanya terdapat dalam limbah hasil industri.Komponen  utama  protein  sel  tunggal adalah  asam  amino  dan  mineral.Protein  sel tunggal  dapat  digunakan  sebagai  pengganti protein  dari  sumber  konvensional  seperti  hasil pertanian,  perikanan,  dan  peternakan.Selain itu,  protein  sel  tunggal  dapat  menghasilkan makanan  yang  sangat  bergizi  yang  disebut sebagai mycoprotein (Nigam,  1998;  Batubara, 2009).
Pembuatan protein sel tunggal menggunakan  limbah  cair  tahu  salah  satunya dimungkinkan  bisa  menggunakan  kultur  dari Rhizopus  oryzae yang  termasuk  dalam golongan  kapang.  Diketahui Rhizopus  oryzae dapat  mengurai  lemak  kompleks  menjadi trigliserida  dan  asam  amino.Selain  itu  jamur ini  juga  mampu  menghasilkan  protease.Maka dari itu peneliti mengharapkan kapang tersebut dapat memberikan keuntungan terhadap
lingkungan  dengan  hasil  optimal  dalam memproduksi protein sel tunggal.

## BAHAN DAN METODE Bahan
Akuades,  gula  pasir  (sukrosa),  biakan murni  jamur Rhizopus  oryzae ,  0,1  % KH 2 PO 4 .3H 2 O,  selenium,  asam  sulfat  pekat, NaOH  5%,  indikator  metil  merah,  asam klorida  0,1001  N,  medium Potato  Dextrose Agar (PDA).

## Waktu dan lokasi penelitian
Penelitian ini berlangsung selama kurang lebih 2 bulan, yakni dari bulan Agustus sampai bulan September 2015 di Laboratorium Agroteknologi  Fakultas  Pertanian  Universitas Tadulako.

## Cara kerja Pembuatan  Medium  Dari  Limbah  Cair Tahu
Satu  liter  sampel  limbah  cair  tahu disaring,  dan  dimasukkan  ke  dalam  beaker kemudian  dipasteurisasi  dengan  cara  limbah dipanaskan  pada  suhu  60°C  selama  30  menit, didinginkan dalam lemari  es selama 30 menit, dan  dibiarkan  pada  suhu  kamar  23°C  selama 24 jam. Proses ini dilakukan sebanyak tiga kali (Somaye  dkk,  2008).  Limbah  cair  tahu  yang telah  dipasteurisasi  kemudian  ditambahkan KH 2 PO 4 .3H 2 O 0,1%  (Kurbanoglu, 2001), dan gula  pasir  2%,  lalu  diatur  pH  dengan penambahan NaOH hingga mencapai pH 4, 5, dan  6  lalu  diautoklaf  dengan  suhu  121°C selama 15 menit (Somaye dkk, 2008).

## Proses  Fermantasi  Medium  Limbah  Cair Tahu
Pada  media  limbah  cair  tahu  steril sebanyak  150  ml  diinokulasikan  1  ose  kultur Rhizopus  oryzae  dan  diinkubasi  pada  suhu kamar  di  atas  shaker  berkecepatan  160  rpm selama  24;  48;  dan  72  jam.  Setiap  24  jam dianalisis jumlah koloni yang tumbuh menggunakan  metode  surface  plate  pada media  Potato  Dextrose  Agar  (PDA)  dihitung berat  kering  sel  dan  ditetapkan  kadar proteinnya (Somaye dkk, 2008).

## Analisis Berat Kering Sel
Cawan  porselein  dibersihkan  kemudian dimasukkan  ke  dalam  oven  pada  suhu  105°C selama  1  jam.Cawan  porselein  didinginkan dalam  desikator  selama  30  menit,  kemudian
ditimbang untuk mengetahui beratnya.Ditimbang  10  gram  medium  limbah yang  telah  terfermentasi  didalam  cawan porselein yang telah diketahui berat awalnya.Medium limbah yang telah terfermentasi  dimasukkan  kedalam  oven  suhu 105°C  sampai  beratnya  konstan.  Berat  kering sel dihitung dari selisih berat massa sel kering (yang telah dioven) – berat cawan porselein.

## Analisis Kadar Protein
Kadar  protein  sel  tunggal  dianalisis menggunakan  metode  Kjeldahl  dengan  cara sebagai berikut : sampel medium limbah yang telah terfermentasi ditimbang sebanyak 1 gram dan  dimasukkan  ke  dalam  labu  Kjeldahl  100 ml, selanjutnya ditambahkan 2 g selenium dan 10 ml asam sulfat pekat. Campuran dimasukkan  ke  dalam  Destruksi  turbosog selama  2  jam  lalu  dibiarkan  dingin  selama  30 menit,  kemudian  dimasukkan  satu  persatu  ke dalam  Destilation  vapodest  untuk  dilakukan proses  destilasi  dan  titrasi  secara  otomatis. Hasil  dari  proses  ini  akan  diketahui  volume titasi,  dan  volume  blanko.  Kadar  protein  akan dihitung  menggunakan  persamaan  sebagai berikut :
% Protein = % N x Faktor konversi
Keterangan :
% N   :     Persen Nitrogen Faktor konversi       :  Untuk campuran senyawa-senyawa protein atau yang belum diketahui komposisi unsur penyusunnya, maka  digunakan  faktor perkalian 6,25.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1.Persen kadar protein.
Tabel 2. Persen Berat Kering Sel
Pembuatan  medium  limbah  cair  tahu dilakukan  selama  4  hari  karena  masih  banyak campuran  serbuk  tahu  yang  mengendap  dan dapat  mempengaruhi  pertumbuhan  kapang Rhizopus  oryzae ,  selain  itu  sterilisasi  medium limbah  cair  tahu  sangat  penting  dilakukan untuk menghindari kontaminan akibat keberadaan  mikroorganisme  lain  yang  dapat tumbuh di dalamnya.
Jamur Rhizopus  oryzae ini  merupakan salah satu jenis jamur non patogen  yang dapat mengurai lemak kompleks menjadi trigliserida dan  asam  amino,  selain  itu  jamur  ini  juga mampu menghasilkan protease. Dalam perlakuannya,  jamur  ini  ditumbuhkan  pada medium  limbah  cair  tahu  yang  telah  diatur pHnya  yakni  pH  4,  5,  dan  6  dengan  waktu inkubasi  selama  24,  48,  dan  72  jam  pada shaker rotation. Pengadukan di atas alat shaker dilakukan karena jamur ini bersifat aerob, oleh karena itu harus cukup mendapat oksigen agar dapat  tumbuh  optimal.Selain  itu  dalam keadaan  aerob  jamur  ini  dapat  mengubah karbon,  nitrogen,  dan  mineral  sebagai  nutrisi sehingga  dapat  menghasilkan  protein  sel tunggal  (Marx,  1991)  pengadukan  juga berfungsi  untuk  menghomogenkan  sel  jamur di dalam medium. Selanjutnya medium dibagi dalam  27  erlemeyer  pada  tiap  pH  yakni,  pada pH  4  menjadi  9  erlemeyer  lalu  tiap  3 erlemeyer  mewakili  untuk  waktu  inkubasi  24, 48, dan 72 jam, hal yang sama dilakukan untuk pH  5  dan  pH  6,  kemudian  perlakuan  lainnya dengan  menumbuhkan  limbah  cair  tahu  yang telah  terfermentasi  ke  dalam  medium  Potato Dekstro Agar (PDA) untuk mengamati jumlah koloni yang tumbuh pada medium tersebut.
Pada  waktu  inkubasi  ke-24  jam  belum terjadi  perubahan  yang  signivikan  pada  tiap erlemeyer  di  tiap  pH  jika  diamati  secara organoleptik,  hal  ini  dikarenakan  pada  fase- fase  kinetika  pertumbuhan  jamur  tersebut terdapat  4  fase,  dimana  fase  pertama  adalah fase  Lag  yang  merupakan  fase  awal  sejak inokulasi  sel  pada  medium  dan  termaksud suatu  periode  adaptasi  sehingga  belum mengadakan perbanyakan sel, bahkan sebagian selnya mati dan hanya sel yang dapat beradaptasi  saja  yang  dapat  bertahan  hidup. Perubahan mulai nampak pada waktu inkubasi ke-48  dan  72  jam. Pada  waktu  inkubasi  ke-48 jam  mulai  menunjukkan  adanya  pertumbuhan jamur  dengan  munculnya  koloni  berwarna putih,  spora  berbentuk  bulat  seperti  bola-bola kapas  kecil,  dan  ini  terdapat  pada  erlenmeyer di  tiap  pH.  Hal  ini  mulai  menunjukkan  fase kedua pertumbuhan yang disebut fase Eksponensial dimana pada fase ini pembelahan mikroba sangat cepat dan konstan sehingga  sel  mikroba  mengalami  reaksi metabolisme  yang  maksimum.    Sedangkan waktu  inkubasi  ke-72  jam  koloni  berwarna putih  berangsur-angsur  menjadi  putih  keabu- abuan  dan  ukuranya  menjadi  lebih  besar.  Hal ini  menunjukkan  fase  ketiga  pertumbuhan yakni  fase  Stasioner    dimana  fase  ini kecepatan pertumbuhan adalah nol. Jumlah sel baru  sebagai  hasil  reproduksi  seimbang dengan  jumlah  sel  yang  mati,  sehingga  saat ketahanan hidup menurun lisis sel dapat terjadi dan  massa  sel  akan  menurun.  Fase  keempat pada  kinetika  pertumbuhan  mikroba  adalah fase kematian dimana fase ini jumlah sel yang hidup  makin  lama  makin  menurun  sedangkan jumlah  kematian  semakin  banyak.Sel  mati diakibatkan  oleh  penumpukan  racun  karena makin banyaknya akumulasi hasil metabolisme  yang  toksik  terhadap  sel  serta habisnya nutrisi di dalam medium.
Metode yang digunakan dalam menentukan  persen  kadar  protein  jamur Rhizopus  oryzae pada  limbah  cair  tahu  yaitu metode  Kjeldahl,  dimana  metode  ini  umum digunakan  untuk  menentukan  jumlah  nitrogen yang  dikandung  oleh  suatu  bahan  terutama untuk  penelitian  yang  lebih  mendasar  seperti untuk  mengetahui  nilai  gizi  protein  tertentu, susunan asam amino, aktifitas enzim dan lain- lain (Sudarmadji, 1989). Analisis kadar protein dengan  metode  ini  dibagi  menjadi  tiga  tahap yakni  destruksi,  destilasi,  dan  titrasi.  Pada tahap awal destruksi bertujuan untuk
melepaskan  nitrogen  dari  protein  sehingga pada akhir destruksi akan diperoleh (NH4)2SO4  dengan  cara  sampel  dipanaskan dalam  larutan  asam  sulfat  pekat  sehingga unsur karbon dan hidrogen teroksidasi menjadi H2O,  CO2,  dan  CO,  dan  unsur  nitrogen berubah  menjadi  amonium  sulfat  (Legowo, 2005).  Alat  destruksi  bekerja  berdasarkan prinsip  lemari  asam  karena  selama  proses destruksi akan dihasilkan gas SO2 yang berbau menyengat  dan  dapat  membahayakan  jika dihirup    dalam  jumlah  relatif  banyak. Sedangkan  pada  tahap  destilasi  bertujuan untuk memecah amonium sulfat atau (NH4)2SO4  menjadi  amonia,  dengan  prinsip memisahkan  cairan  berdasarkan  perbedaan titik  didih  (Legowo,  2005).  Perlakuan  akhir dalam  menentukan  persen  kada  protein  dalam penelitian  ini  adalah  proses  titrasi  dengan menggunakan  HCl  sebagai  titran  dan  metil merah  sebagai  indikator  dalam  menentukan titik  akhir  titrasi.  Indikator  metil  merah  ini dapat  membedakan  antara  larutan  asam  dan larutan  basa,  larutan  asam  yang  ditetesi  metil merah  akan  tetap  berwarna  merah  sedangkan larutan  basa  akan  berwarna  kuning.  Setelah tiap  tahap  dalam  metode  Kjeldahl  telah dilakukan  maka  prosedur  selanjutnya  yakni menghitung  jumlah  persen  kadar  protein dengan  menggunakan  faktor  konversi.  Faktor konversi  pada  penetapan  kadar  protein berbeda-beda  tergantung  dari  jenis  sampel yang  digunakan  karena  kandungan  nitrogen tiap  bahan  berbeda,  faktor  konversi  biasanya 6,25  dengan  kadar  nitrogen  dalam  protein sebesar  16%.  Semakin  besar  kandungan  atau kadar  nitrogen  dalam  bahan,  maka  akan semakin kecil faktor konversinya.
Selain  dilakukannya  metode  penentuan kadar  protein  pada  penelitian  ini  juga dilakukan  uji  persen  berat  kering  sel  yang bertujuan  untuk  melihat  waktu  keberapakah yang  menghasilkan  massa  sel  tertinggi,  selain itu  perhitungan  berat  kering  sel  biasanya digunakan juga untuk mengukur efisiensi masa inkubasi  dan  sebagai  parameter  konsumsi substrat dan produksi senyawa yang dikehendaki. Perlakuannya dengan membersihkan terlebih dahulu cawan porselein yang  akan  digunakan  dan  dimasukkan  ke dalam  oven  pada  suhu  105°C  selama  1  jam, hal  ini  bertujuan  untuk  membebas  lemakkan senyawa-senyawa  yang  terkandung  dalam cawan agar tidak mempengaruhi hasil penimbangan.  Pada  perlakukan  menimbang
sampel  dan  diletakkan  pada  oven  untuk menguapkan  kadar  airnya  bertujuan  agar didapatkan  bobot  sampel  yang  murni.  Maka dihasilkan  massa  sel  tertinggi  terdapat  pada waktu  inkubasi  ke-48  jam  dengan  rata-rata nilai 0,77% pada pH 4, 0,84% pada pH 5, dan 0,91%  pada  pH  6.  Sedangkan  untuk  jumlah koloni  yang  tumbuh  dalam  medium  PDA yakni  secara  berurutan  pH  4  16  koloni,  pH  5 67 koloni, dan pH 6 49 koloni.
Berdasarkan  hasil  analisis  penelitian yang  telah  dilakukan  terhadap  kemampuan tumbuh  jamur Rhizopus  oryzae pada  medium limbah  cair  tahu,  maka  kemungkinan  besar limbah  cair  ini  dapat  dimanfaatkan  sebagai substrat  pertumbuhan  mikroba  baik  bakteri, yeast,  maupun  kapang  karena  kandungan karbon,  nitrogen,  dan  mineral  yang  masih tinggi  (Manfaati,  2010).  Selain  itu,  mikroba penghasil  protein  sel  tunggal  umumnya tumbuh  pada  limbah  yang  mengandung karbon,  dan  nitrogen  yang  tinggi  (Nigam, 1998; Batubara, 2009).
Dari  hasil  perhitungan  persen  kadar protein  yang  tertinggi  ditemukan  pada  waktu inkubasi  ke-48  jam  dengan  rata-rata  persen kadar  protein  yaitu  sebagai  berikut  :  0,47% pada pH 4, 0,47% pada pH 5, dan 0,46% pada pH  6.  Sedangkan  pada  waktu  inkubasi  ke-72 jam  persen  kadar  protein  berangsur  menurun, hal ini disebabkan pada waktu inkubasi 48 jam terjadi  fase  dimana  mikroorganisme  tumbuh dan  membelah  pada  kecepatan  maksimum. Penambahan  jumlah  sel  baru  terjadi  dengan laju konstan dan massa yang bertambah secara eksponensial,  hal  ini  pula  yang  menjadikan persen  protein  pada  jam  ke-48  menjadi meningkat,  sedangkan  pada  waktu  inkubasi jam ke-72 terjadi fase dimana mikroorganisme yang  membelah  dan  sel  yang  mati  seimbang. Selain  itu  juga  terjadi  akumulasi  produk buangan  yang  toksik  sehingga  persen  kadar protein yang terdapat juga ikut berkurang.
Pada  hasil  uji  statistik  dengan  ANOVA terlihat  nilai  p  =  0,000  yang  menandakan paling  tidak  terdapat  perbedaan  kadar  protein yang bermakna pada tiga kelompok data. Pada uji homogeneous subsets terhadap pH optimum  pertumbuhan  jamur Rhizopus  oryzae pada  waktu  inkubasi  ke-24,  48,  dan  72 ditemukan  pada  pH  5  dimana  terdapat  tiga kolom  berbeda  yang  menandakan  terjadi perbedaan  bermakna  ditiap  waktu  inkubasi tersebut, sementara jika diamati pada tabel pH 4  dan  pH  6  waktu  inkubasi  ke-24  dan  72  jam
berada pada tabel yang sama yang menunjukkan  pada  pH  tersebut  tidak  terjadi perbedaan  bermakna  dalam  menghasilkan persen  kadar  protein.  Sementara  pada  Test homogeniti  of  variance  diketahui  nilai  p  = 0,232,  0,467,  dan  0,157,  maka  nilai  p  >  0,05 sehingga  dapat  diambil  kesimpulan  bahwa tidak  ada  perbedaan  varians  antara  kelompok data  yang  dibandingkan  atau  dengan  kata  lain varians data adalah sama.
Pertumbuhan  jamur Rhizopus  oryzae ditandai  dengan  adanya  pertambahan  jumlah sel. Peningkatan sel menyebabkan peningkatan dari  seluruh  kandungan  sel  termasuk  asam nukleat  dan  protein  yang  dinyatakan  sebagai massa  sel  (Somaye,  2008)  sehingga  berat kering  sel  berbanding  lurus  dengan  jumlah koloni.  Dengan  demikian  pemanfaatan  limbah cair  tahu  sebagai  medium  pertumbuhan mikroba  untuk  produksi  protein  sel  tunggal dapat mengurangi residu polutan di lingkungan.

## DAFTAR PUSTAKA
Batubara,  U.M.  (2009) .  Pembuatan  Pakan Ikan  dan  Protein  Sel  Tunggal  Bakteri Fotosintetik Anoksigenik dengan Memanfaatkan  Limbah  Cair  Tepung Tapioka  yang  Diuji  Pada  Ikan  Nila (Oreochormis niloticus) . Skripsi.
Departemen Biologi. USU : Medan.
Jenie,  B.S.L.,  &  Rahayu.  (1993). Penanganan Gizi  Limbah  Industri  Pangan .  Penerbit Kanisius : Yogyakarta.
Kasmidjo.  (1991). Bahan  Ajaran  Penanganan Limbah  Pertanian,  Perkebunan,  dan Industri  Pangan .  PAN Pangan  dan  Gizi
: Yogyakarta.
Kuswardani,  I.,  &  Widjajaseputra.  (1998).
Produksi Protein Sel Tunggal Phanerochaete  chrysosporium  Pada Media Limbah Cair Tahu yang Diperkaya  :  Kajian  Optimasi  Waktu Panen. Prosinding  Seminar  Nasional Teknologi Pangan dan Gizi. 604-613.
Kurbanoglu,  E.B.  (2001).  Production  of Single-cell  Protein  from  Ram  Horn Hydrolysak. Turk. J.Biol . 25, 371-377.
Legowo,  A.  (2005). Analisis  Pangan .  Badan Penerbit  Universitas  Diponegoro  : Semarang.
Manfaati,  R.  (2010). Kinetika  dan  Variabel Optimum  Fermentasi  Asam  Laktat
dengan Media Campuran Tepung Tapioka  dan  Limbah  Cair  Tahu  oleh
Rhizopus oryzae .Tesis. Magister  Teknik Kimia. UNDIP : Semarang.
Marx,  J.L.  (1991). Revolusi  Bioteknologi . Yayasan Obor Indonesia : Jakarta.
Nigam,  J.N.  (1998).  Single  Cell  Protein  from Pineapple  Cannery  Effluent. World Journal of Microbiology and
Biotechnology . 14, 693-696.
Somaye, F., Marizich., & Lale. (2008). Single- Cell  Protein  (SCP)  Production  from  Uf
Cheese When by Kluyveromyces Marxianus .  18th  National  Congres  on Food Technology. Iran. 16-18 oct.