## AKTIVITAS DIURETIK DAN SKRINING FITOKIMIA EKSTRAK ETANOL BIJI PEPAYA (Carica papaya L.) PADA TIKUS PUTIH
JANTAN GALUR WISTAR ( Rattus norvegicus )
Isnania 1) , Fatimawali 1) , dan Frenly Wehantouw 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Papaya  ( Carica  papaya L.)  is  one  of  the  most  important  fruit  plant  in  the  fulfillment  of calcium and source of vitamins A and C. This research aimed to examine diuretics effecct in male  rats  and  identification  of  chemical  contents  in  the  ethanol  extract  of  papaya  seed.  As much  15  test  animals  were  divided  into  5  groups,  that  is  negative  control  (0,5%  CMC suspension), positive control (suspension  furosemide 5,04 mg  /  kgBB),  dose of extract  0,03 g/kgBB dose of extract  0,06 g/kgBB, and dose of extract 0,12 g/KgBB. The test is done by measuring  of  diuretics  effect  the  urine  volume  incurred  for  6  hours.  Data  obtained  were analyzed  with  SPSS  ver.20,  one  way  ANOVA  test  and  advanced  test  that  is Duncan test. Statistical  analysis  showed  a  significant  difference  (α  <0.05)  between  the  negative  control and  positive  control  and  dose  of  extract.  Phytochemical  screening  results  obtained  are alcaloids and saponins, but is efficacious as of diuretics is an alcaloid. Based on these results we can conclude the ethanol extract of papaya seeds have a diuretic effect in male  white rats wistar strain and identified the active compounds contained alcaloids and saponins.
Key words : papaya seeds, diuretic effect, Rattus norvegicus , phytochemical screening.

## ABSTRAK
Pepaya ( Carica papaya L.) merupakan salah satu tanaman buah  yang sangat  penting dalam pemenuhan  kalsium  dan  sumber  vitamin  A  dan  C.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji efek  diuretik  pada  tikus  jantan  dan  identifikasi  kandungan  kimia  pada  ekstrak  etanol  biji pepaya.Sebanyak  15  ekor  hewan  uji  dibagi  menjadi  5  kelompok  perlakuan,  yaitu  kontrol negatif  (suspensi  CMC  0,5%),  kontrol  positif  (suspensi  furosemid  5,04  mg/KgBB),  ekstrak dosis  0,03  g/KgBB,  ekstrak  dosis  0,06  g/KgBB,  dan  ekstrak  dosis  0,12  g/KgBB.  Pengujian efek diuretik dilakukan dengan mengukur volume urin yang dikeluarkan selama 6 jam. Data yang diperoleh dianalisis dengan SPSS ver.20, uji one way ANOVA dan uji lanjutan yaitu uji Duncan .Analisis  statistik  menunjukkan  terdapat  perbedaan  signifikan  (α  <  0,05)  antara kontrol negatif dan kontrol positif serta dosis ekstrak. Hasil skrining fitokimia yang diperoleh adalah  senyawa  alkaloid  dan  saponin,  namun  yang  berkhasiat  sebagai  diuretik  adalah alkaloid.  Berdasarkan  hasil  tersebut  dapat  disimpulkan  ekstrak  etanol  biji  pepaya  memiliki efek  diuretik  pada  tikus  putih  jantan  galur  wistar  dan  senyawa  aktif  yang  diidentifikasi terdapat senyawa alkaloid dan saponin.
Kata kunci : biji pepaya, efek diuretik, Rattus norvegicus , Skrining fitokimia

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara yang terkenal akan  kekayaan  sumber  daya  alam  yang melimpah.  Kekayaan  sumber  daya  alam yang  dimiliki  tersebut  kemudian  banyak dimanfaatkan  oleh  masyarakat  untuk kebutuhan  hidup  sehari-hari  diantaranya sebagai  tanaman  obat.  Menurut  Nakasone (1998),  dan  Villegas  (1992)  menyatakan bahwa  karpaina  yang  terkandung  dalam daun  pepaya  berguna  untuk  mengurangi gangguan jantung, obat  anti amoeba, serta biji  buah  pepaya  dapat  digunakan  sebagai obat peluruh kencing (diuretik).
Tumbuhan  pepaya   belum  diketahui secara detail kandungan metabolit sekundernya,  maka  perlu  dilakukan  uji fitokimia  pada  biji  pepaya  ( Carica papaya L.)   untuk  mengetahui  senyawa metabolit  sekundernya,  sehingga  dapat diketahui  potensi  tumbuhan  tersebut. Menurut Harborne (1984)
guna memperoleh informasi lebih awal mengenai  kandungan  senyawa  metabolit sekunder  dapat  diidentifikasi  dengan metode fitokimia

## METODOLOGI PENELITIAN Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  ialah  Biji  pepaya  ( Carica papaya L.),  furosemid,  CMC  ( Carboxy Methyl  Cellulosse )  0,5%,  akuades,  etanol 70%, kloroform ( Merck ), ammonia ( Merck ),  asam  sulfat  ( Merck ),  pereaksi mayer ( Merck ), asam klorida ( Merck ), besi klorida ( Merck ), serbuk magnesium ( Merck ), asetat anhidrat( Merck ).
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  ialah  kandang  hewan  uji, kandang  metabolik,  sarung  tangan,  tempat makan  dan  minum  hewan  uji,  alat-alat gelas
( Pyrex ), rotary
evaporator ( steroglass 3000),  oven,  pipet, pisau,  ayakan, disposable  syringe 1  dan  5 mL,  NGT  ( Nasogastric  Tube )  No.  5, blender( Laboratory blender ), kertas saring, timbangan, masker, wadah penampung urin, tabung reaksi dan raknya.

## Pengambilan Sampel
Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah  biji  pepaya  bangkok  yang  berasal dari  Desa  laikit,  Kecamatan  Dimembe, Kabupaten  Minahasa  Utara,  pada  bulan Maret 2014.

## Identifikasi Tanaman
Identifikasi tanaman dilakukan di Laboratorium Taksonomi Tumbuhan Program Studi Biologi Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Sam Ratulangi, Manado.

## Pembuatan Simplisia Biji pepaya
Biji  pepaya  dipisahkan  dari  kulit  dan daging buahnya, dicuci bersih di bawah air mengalir,  ditiriskan  dan  ditimbang  berat basahnya  sebanyak  1000  g,  kemudian dikering  anginkan  selama  2  minggu  dan pengeringan dilanjutkan dengan menggunakan  oven  pada  suhu  oven  40 0 C hingga kadar airnya berkurang, selanjutnya ditimbang  berat  keringnya.  Sebanyak  250 g  sampel  biji  pepaya  kering  dihaluskan dengan  blender,  kemudian  diayak.  Hasil ayakan  yang  telah  halus  disimpan  dalam wadah  plastik  yang  tertutup  rapat  untuk dipakai pada perlakuan selanjutnya.

## Pembuatan Ekstrak Biji Pepaya
Pada  penelitian  ini  sampel  biji  pepaya diekstraksi  menggunakan  pelarut  etanol 70%. Pembuatan ekstrak dilakukan dengan metode  maserasi,  yaitu  sebanyak  250  g serbuk biji pepaya yang diperoleh dimasukkan  ke  dalam  beaker  gelas kemudian ditambahkan pelarut etanol 70% sebanyak  1250  mL,  ditutup  dan  dibiarkan terendam  selama  3  hari  terlindung  dari cahaya (setiap hari digojok).
Ekstrak kemudian disaring dengan menggunakan  kertas  saring  sehingga didapat  maserat  (Filtrat  I)  dan  residunya diremaserasi  dengan  etanol  70%  sebanyak 750  mL  menggunakan  prosedur  yang sama,  maserasi  dilakukan  selama  2  hari sampai  diperoleh  maserat  yang  jernih (Filtrat  II).  Selanjutnya  semua  maserat etanol  digabungkan  (Filtrat  I  +  Filtrat  II)
dan  diuapkan  dengan  menggunakan  alat penguap
Rotary evaporator pada temperatur 40 0 C sampai volumenya menjadi  ¼  dari  volume  awal  dan dilanjutkan  dengan  pengeringan  dengan menggunakan waterbath pada  suhu  40 0 C sehingga menghasilkan ekstrak kental.

## Pembuatan Suspensi
Larutan  suspensi  yang  dibuat  terdiri  atas: suspensi Carboxy Methyl Cellulose (CMC) 0,5%,  Furosemide  dosis  5,04  mg/kgBB dan  ekstrak  etanol  biji  pepaya  dosis  0,030 g/KgBB;  0,061  g/KgBB;  dan  0,122 g/KgBB.

## Pembuatan Suspensi Furosemid
Dosis penggunaan furosemide pada manusia  dewasa  adalah  40  mg,  jika dikonversikan pada tikus dengan berat 200 g  ialah  1,008  mg/200  gBB,  maka  dosis furosemide  untuk  tikus  adalah  5,04 mg/KgBB.  Banyaknya  serbuk  furosemid yang akan digunakan dihitung berdasarkan berat  badan  dari  masing-masing  tikus, kemudian  dilarutkan  dalam  larutan  CMC 0,5%  dan  diinduksikan  pada  masing- masing tikus.
Furosemide  sebanyak  20  tablet  digerus sampai  halus,  lalu  ditimbang  sesuai dengan  yang dibutuhkan yaitu 0,2 g untuk dilarukan  dalam  10  mL  CMC  0,5% sebagai  suspensi  furosemide  yang  akan diberikan kepada hewan uji sesuai dengan berat masing-masing tikus.

## Pembuatan Suspensi CMC 0,5%
Sebanyak  0,5  g  CMC  dileburkan  dalam lumpang  yang  berisi  10  mL  akuades  yang telah  dipanaskan,  lalu  dicampur  dan digerus  sampai  homogen.  Setelah  itu, suspensi CMC dipindahkan ke dalam labu ukur  100  mL.  Volumenya  dicukupkan dengan akuades hingga 100 mL.
Pembuatan  Suspensi  Ekstrak  Etanol Biji  Pepaya  Dosis  0,030  g/KgBB;  0,06 g/KgBB; dan 0,12 g/KgBB Dosis  yang  diberikan  pada  tikus  mengacu pada  dosis  pemakaian  biji  pepaya  secara
tradisional. Secara tradisional dosis pemakaian  biji  pepaya  pada  manusia dewasa  (50  kg)  ialah  20  g/hari.  Konversi biji  pepaya  basah  ke  ekstrak  kental  ialah 0,061 g. Dengan faktor konversi dosis dari manusia  (70  kg)  ke  tikus  (200  g)  ialah 0,018,  maka  dosis  yang  akan  diberikan kepada  tikus  0,061  g/KgBB.  Dalam percobaan  ini  digunakan  dosis  ekstrak yang bervariasi yaitu:
KP 1 = 0,5 x 0,061 g/KgBB =
0,030 g/KgBB KP 2 = 1 x 0,061 g/KgBB
=
0,061 g/KgBB KP 3 = 2 x 0,061 g/KgBB = 0,122 g/KgBB Banyaknya ekstrak kental biji pepaya yang digunakan  dihitung  berdasarkan  berat badan dari masing-masing tikus, kemudian dilarutkan  dengan  larutkan  suspensi  CMC 0,5%  dan  diberikan  secara  oral  pada masing-masing tikus.

## Prosedur Uji Efek Diuretik Penyiapan Hewan Uji
Hewan  uji  yang  akan  digunakan  dalam penelitian ini ialah tikus putih jantan galur wistar  sebanyak  15  ekor.  Mula-mula semua  tikus  dibagi  dalam  5  kelompok perlakuan,  setiap  kelompok  terdiri  dari  3 ekor tikus yang berada pada 1 kandang dan diadaptasi  selama  7  hari,  kemudian dipindahkan pada kandang uji diuretik dan diadaptasi selama 3 jam sebelum perlakuan.

## Pemberian Suspensi CMC 0,5%
Suspensi CMC 0,5% diberikan secara oral pada  tikus  putih  jantan  galur  wistar berdasarkan  berat  badan  masing-masing tikus,  suspensi  CMC  0,5%  digunakan sebagai kontrol negatif.

## Pemberian Suspensi Furosemid
Suspensi  furosemid  diberikan  secara  oral pada  tikus  putih  jantan  galur  wistar berdasarkan  berat  badan  masing-masing tikus, suspensi furosemid digunakan sebagai kontrol positif.
Pemberian Suspensi Ekstrak Etanol Biji Pepaya
Pada  penelitian  ini  dosis  biji  pepaya  yang digunakan  berdasarkan  dosis  yang  telah dikonversikan  dari  dosis  manusia  secara empiris  yaitu  20  g.  Konversi  dosis  dari manusia  ke  tikus  (200  g)  adalah  0,018. Jadi, dosis yang akan diberikan pada tikus adalah  0,061  g/KgBB.  Volume  suspensi ekstrak  etanol  biji  pepaya  yang  akan diberikan  pada  tikus  disesuaikan  dengan berat badan masing-masing tikus.
Pemberian  suspensi  ekstrak  etanol  biji pepaya  pada  tikus  dilakukan  dengan menggunakan disposable syringe berujung NGT ( Nasogastric Tube ). Langkah pertama,  tikus  dikeluarkan  dari  kandang dengan  cara  mengangkatnya  dari  pangkal ekor, kemudian letakkan tangan dipunggung/tubuh tikus, dengan posisi jari telunjuk  dan  ibu  jari  dibagian  leher  tikus, dan  jari  lainnya  menahan  tangan  dan  kaki tikus. Selanjutnya,  tarik  bagian  leher tikus dengan  ibu  jari  dan  telunjuk  agar  mulut tikus  terbuka,  kemudian  selang  NGT dimasukkan  secara  perlahan-lahan  dan suspensi  ekstrak  biji  pepaya  dimasukkan dengan cara menekan disposable syringe .

## Pengukuran Volume Urin
Tikus  yang  akan  diuji  dipindahkan kedalam  kandang  modifikasi  yang  telah terdapat wadah penampung urin. Pengambilan  urin  tikus  dilakukan  setelah perlakuan pada jam ke- 1, 2, 3, 4, 5, dan 6. Urin  yang  tertampung  pada  wadah penampungan urin diambil dengan menggunakan disposable  syringe dan kemudian dicatat volumenya selama waktu pengamatan.

## Uji Fitokimia (Harborne, 1987) Uji Alkaloid
Ekstrak  diambil  2  g  dan  ditambahkan  1 mL  kloroform  dan  5  mL  ammonia  10  %, lalu ditambahkan 10 tetes asam sulfat 2  N untuk
memperjelas
pemisahan terbentuknya  2  fase  yang  berbeda.  Fase bagian atas diambil, kemudian ditambahkan  reagen  Mayer.  Keberadaan
alkaloid  dalam  sampel  ditandai  dengan terbentuknya endapan merah.

## Uji Flavonoid
Ekstrak  diambil  2  g  dan  ditambahkan serbuk  magnesium  secukupnya  untuk mengoksidasi  sampel.  Ditambahkan  10 tetes  asam  klorida  5  N.  Keberadaan flavonoid  ditandai  dengan  terbentuknya warna hitam kemerahan pada larutan.

## Uji Tanin
Ekstrak  diambil  2  g  dan  ditambahkan dengan 10 mL air panas, kemudian ditetesi menggunakan besi (III) klorida, keberadaan  tanin  dalam  sampel  di  tandai dengan timbulnya warna hijau kehitaman.

## Uji Saponin
Ekstrak  diambil  2  g  dan  ditambahkan dengan 10 mL akuades kemudian dikocok kuat  selama  kurang  lebih  1  menit. Selanjutnya  didiamkan  selama  10  menit dan diamati buih atau busa yang terbentuk. Keberadaan senyawa saponin dalam sampel  ditandai  dengan  terbentuknya  buih yang stabil selama 10 menit dengan tinggi 3 cm.

## Uji Steroid
Ekstrak  diambil  2  g  dan  ditambahkan dengan  1  mL  kloroform.  Setelah  itu campuran  dikocok.  Masing-masing  asetat anhidrat dan asam sulfat pekat sebanyak 2 tetes  ditambahkan  pada  filtrat,  perubahan warna  merah  pada  larutan  pertama  kali kemudian  berubah  menjadi  biru  dan  hijau menunjukkan reaksi positif.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan menggunakan  program  statistika  metode SPSS  ver.  20.  Beda  nyata  antar  perlakuan diuji  dengan one  way ANOVA  ( Analysis Of  Varians ),  dan  dilanjutkan  dengan  uji duncan .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Pembuatan Ekstrak Biji Pepaya ( Carica papaya L)
Serbuk  biji pepaya yang  diperoleh sebanyak  250  g  diekstraksi  menggunakan metode maserasi. Proses maserasi dilakukan  selama  3  hari  dan  remaserasi selama  2  hari.  Hasil  maserat  (Filtrat  I  + Filtrat  II)  kemudian  diuapkan  dengan menggunakan vacuum  evaporator pada suhu 40 0 C sampai diperoleh ekstrak kental sebanyak 24,6 g.

## Hasil Pengukuran Volume Urin
Untuk  melihat  adanya  perubahan  volume urin  secara  keseluruhan  selama  waktu pengamatan  maka  dapat  dilihat  pada  data
volume urin  kumulatif pada Tabel  2. Data volume  urin  kumulatif  menggambarkan kenaikan  volume  urin  secara  keseluruhan selama  waktu  pengamatan  6  jam.  Pada Tabel  3  diketahui  bahwa  pada  perlakuan dengan  suspensi  CMC  0,5%  (Kontrol negatif)  sebanyak  0,54  mL,  suspensi furosemid  (kontrol  positif)  sebanyak  1,37 mL, suspensi ekstrak dosis 1 menghasilkan rerata volume selama 6 jam sebanyak 1,47 mL,  suspensi  ekstrak  dosis  2  sebanyak 1,87  mL,  dan  suspensi  ekstrak  dosis  3 sebanyak 3,69 mL.

## Tabel 2. Data rerata volume urin kumulatif tiap waktu pengamatan
Perlakuan Volume urin tiap jam – (mL) 1 2 3 4 5 6 I 0,25 0,26 0,36 0,53 0,54 0,54 II 0,3 0,7 1,26 1,34 1,37 1,37 III 0,39 0,86 0,86 1,47 1,47 1,47 IV 1,35 1,35 1,64 1,79 1,79 1,87 V 1,35 2,13 2,57 2,57 3,36 3,69

## Keterangan:
I = Kontrol negatif (suspensi CMC 0,5%), II = Kontrol positif  (Suspensi Furosemid), III = Ekstrak dosis 1, IV = Ekstrak dosis 2, V = Ekstrak dosis 3
Untuk  mempermudah  pengamatan,  rerata hasil urin kumulatif tiap waktu pengamatan pada masing-masing kelompok dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Grafik rerata volume urin kumulatif tiap waktu pengamatan
Pada kelompok perlakuan suspensi furosemid  (kontrol  positif)  menunjukkan rerata  volume  urin  kumulatif  lebih  sedikit dibandingkan  dengan  kelompok  dosis ekstrak. Hal ini karena furosemid memiliki efek kerjanya cepat dan dalam waktu yang
singkat  (Lukmanto,  2003).  Awal  kerja terjadi  dalam  0,5-1  jam  setelah  pemberian oral,  dengan  masa  kerja  yang  relatif pendek kurang lebih 6-8 jam. Kadar darah maksimal  dicapai  0,5-2  jam  setelah pemberian  oral,  dengan  waktu  paruh
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 1 2 3 4 5 6 Vo lum e (m L ) Waktu (jam) Kontrol Negatif Kontrol Positif Ekstrak dosis 1 Ekstrak dosis 2
Ekstrak dosis 3
biologis  kurang  lebih  2  jam  (Siswandono, 1995). Pemberian dosis ekstrak 1, 2, dan 3 mengalami  peningkatan  volume  urin  yang disebabkan  karena  adanya  kandungan alkaloid yang berperan dalam meningkatkan  volume  urin  ( diuresis ).
Alkaloid  bekerja  langsung  pada  tubulus dengan  cara  meningkatkan  ekskresi  Na + dan  Cl - .  Dengan  meningkatnya  ekskresi Na + juga  akan  meningkatkan  ekskresi  air dan  menyebabkan  volume  urin  bertambah (Nessa,  2013).  Selain  itu  penelitian  lain juga  menyatakan  bahwa  efek  diuretik
dapat dihasilkan dari stimulasi aliran darah regional  atau  penghambatan  vasopresin atau dengan melalui penghambatan reabsorpsi tubuler  air dan anion  (Chandra, 2011).

## Analisis Data
Untuk mengetahui dan menganalisis apakah  ada  perbedaan  yang  nyata  maka dilakukan  uji one  way ANOVA  ( Analysis of  varians ).  Hasil  dari  pengujian  ANOVA dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil ANOVA ( Analysis of varians )
Dari hasil uji ANOVA dapat dilihat bahwa nilai  F hitung (23,529)  lebih  besar  dari  F tabel (3,48) dengan taraf nyata 0,5%. Penarikan kesimpulan  dapat  diambil  apabila  nilai F hitung lebih  besar  dari  F tabel .  Dengan demikian,  H 1 diterima  yaitu  ada  efek
diuretik  dari  ekstrak  etanol  biji  pepaya ( Carica papaya L.) pada tikus putih jantan galur wistar ( Rattus norvegicus ). Dari hasil ANOVA  kemudian  digunakan  Uji  lanjut yaitu menggunakan Duncan .
Tabel 4. Hasil Uji Duncan
ANOVA Volume
Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups (Combined) 16,418 4 4,104  23,529  ,000 Linear Term Contrast 13,899 1 13,899  79,679  ,000 Deviation 2,519 3 ,840 4,813  ,025 Within Groups 1,744  10 ,174 Total 18,162  14 Volume Perlakuan N Subset for alpha = 0.05
1 2 3
Duncan a
Negatif 3 ,5433 Positif 3 1,3700 Dosis ekstrak 1 3 1,4733 Dosis ekstrak 2 3 1,8700 Dosis ekstrak 3 3 3,6967 Sig. 1,000 ,192 1,000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
Pada  uji  Duncan  menunjukkan  bahwa kontrol  negatif  menunjukkan  perbedaan yang  nyata  terhadap  kontrol  positif  dan berbagai  variasi  dosis  ekstrak  biji  pepaya. Perbedaan yang signifikan ini dapat dilihat dari  rata-rata  kumulatif  volume  urin  yang diperoleh.  Hal  ini  karena  CMC  sebagai kontrol negatif tidak berada dalam 1 subset yang  sama  dengan  kontrol  positif  dan variasi dosis ekstrak biji pepaya. Perbedaan ini menunjukkan bahwa pemberian  suspensi  CMC  0,5%  sebagai kontrol  negatif  tidak  memiliki  efek  yang sama  untuk  dapat  meningkatkan  volume urin sebagai proses diuresis .
Uji duncan pada furosemid sebagai kontrol positif    menunjukkan  tidak  ada  perbedaan dengan ekstrak dosis 1 dan ekstrak dosis 2 dibandingkan  dengan  CMC  0,5%  sebagai kontrol  negatif  dan  ekstrak  dosis  3. Penunjukkan  tidak  ada  perbedaan  ini,
karena  dari  data  volume  urin  kumulatif baik furosemid, ekstrak dosis 1 dan dosis 2 hampir sama sehingga ketiga perlakuan ini berada  dalam  1  subset.  Pada  uji duncan ekstrak  dosis  3  menunjukkan  perbedaan nyata  atau  signifikan  dengan  kontrol perlakuan lainnya, dengan nilai persen (%) peningkatan  sebanyak  3,6967  sehingga ekstrak  dosis  3  ini  hanya  berada  dalam  1 subset dengan kontrol lainnya.

## Skrining Fitokimia
Pada penelitian ini pengujiannya dilakukan dengan  cara  mengambil  sedikit  sampel dari ekstrak hasil maserasi, lalu ditambahkan reagen sesuai dengan senyawa yang akan diidentifikasi. Hasil uji fitokimia  pada  ekstrak  etanol  biji  pepaya ( Carica  papaya L.)  dapat  dilihat  pada Tabel 5 berikut ini:
Tabel 8. Hasil uji fitokimia pada ekstrak biji pepaya ( Carica papaya L.) Pemeriksaan Hasil Pengujian Perubahan warna Alkaloid + Terbentuk endapan merah (Reagen Mayer) Flavonoid - Tidak terjadi perubahan warna hitam kemerahan Tanin - Tidak terjadi perubahan warna hijau kehitaman Saponin + Terbentuk buih stabil selama 10 menit, dengan tinggi 2 cm Steroid - Tidak terjadi perubahan warna biru dan hijau
Keterangan : + :  Terdapat dalam sampel         - :   Tidak terdapat dalam sampel
Penambahan  dengan  kloroform  yang bertujuan untuk mengambil atau melarutkan senyawa yang ada di dalamnya dan kemudian ditambahkan dengan ammonia.kemudian,  untuk  penambahan asam  sulfat  2  N  yang  bertujuan  untuk mengikat  kembali  alkaloid  menjadi  garam alkaloid  agar  dapat  bereaksi  dengan pereaksi-pereaksi  logam  yang  spesifik untuk alkaloid yang menghasilkan kompleks  garam  anorganik  yang  tidak larut  sehingga  terpisah  dengan  metabolit sekunder lainnya. Penambahan asam sulfat 2  N  ini  mengakibatkan  larutan  terbentuk menjadi  2  fase  karena  adanya  perbedaan tingkat  kepolaran  antara  fase  ammonia yang  polar  dan  kloroform  yang  relatif kurang  polar.  Garam  alkaloid  akan  larut
pada lapisan atas (fasa ammonia), sedangkan  lapisan  kloroform  berada  pada lapisan bawah karena memiliki massa jenis yang  lebih  besar.  Setelah  terbentuk  2 lapisan  hanya  pada  lapisan  asam  sulfat yang  diambil  yang  dimasukkan  dalam tabung  reaksi  dan  ditambahkan  pereaksi mayer  yang  bertujuan  untuk  mendeteksi alkaloid, dimana pereaksi ini akan berikatan  dengan  alkaloid  melalui  ikatan koordinasi  antara  atom  N  alkaloid  dengan Hg pereaksi mayer sehingga menghasilkan senyawa kompleks merkuri yang non polar yang mengendap berwarna merah.
Pada  pengujian  saponin  dalam  ekstrak etanol  biji  pepaya  ( Carica  papaya L), menunjukkan  hasil  positif  setelah  dilakukan penambahan 10 mL akuades kedalamnya.Hasil
tersebut  menunjukkan  bukti  positif  karena terdapat  busa  yang  bertahan  selama  10  menit dan  saponin  mudah  larut  dalam  air  dan  tidak larut dalam eter. Arcuri dalam Makang (2005), saponin memiliki gugus glikosil yang berfungsi  sebagai  gugus  polar  dan  gugus terpenoid atau steroid sebagai gugus nonpolar. Senyawa  yang  memiliki  gugus  polar  dan nonpolar  bersifat  aktif  permukaan  sehingga saat  dikocok  dengan  air,  saponin  dapat membentuk  misel.  Pada  struktur  misel,  gugus polar  menghadap  keluar  sedangkan  gugus nonpolarnya  menghadap  kedalam.  Keadaan inilah yang tampak seperti busa.

## PENUTUP Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  maka disimpulkan  bahwa  ekstrak  biji  pepaya ( Carica papaya L.) memiliki efek diuretik terhadap  tikus  putih  jantan  galur  wistar ( Rattus  norvegicus )  dengan  efek  yang terbaik  ditunjukkan  pada  dosis  0,122 g/KgBB.
Hasil identifikasi skrining fitokimia menujukkan ekstrak biji pepaya mengandung senyawa alkaloid dan saponin.  Senyawa  aktif  yang  berkhasiat sebagai diuresis adalah alkaloid.
Saran
a. Dapat dilakukan penelitian lanjutan tentang formulasi dan menguji efek diuretik  dari  biji  pepaya  ( Carica papaya L).
b. Perlu  dilakukan  pengujian  dan identifikasi  senyawa  aktif  alkaloid golongan lain yang berperan
sebagai diuretik pada  ekstrak  biji pepaya ( Carica papaya L).

## DAFTAR PUSTAKA
Harborne, J.B. 1984. Phytochemical Method. Chapman  and  Hall  ltd. London.
Lukmanto,  H.  2003. Informasi  Akurat Produk  Farmasi  di  Indonesia .  Edisi  II.
Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta.
Makang,  V.M.  2005. Analisis  Fitokimia Tumbuhan obat di Kabupaten
Minahasa  Utara .  FMIPA  Unsrat.
Manado. Nakasone, HY., Paull, RE. 1998. Tropical fruit . CAB International,
Wallingford.
Nessa. 2013. Efek Diuretik dan Daya Larut Batu  Ginjal  dari  Ekstrak  Etanol Rambut  Jagung  ( Zea  mays L.).
Fakultas Farmasi, Universitas
Andalas. Padang.
Reddy,  C.K.  2011. Evaluation  of  Diuretic Activity  of  Aqueous  and  Ethanolic Extracts  of  Lawsonia  inermis  leaves in  rats .  Pelagia  Research  Library ISSN : 2249-7412. India. Siswandono.,  Bambang,  S.  1995. Kimia Medisinal . Airlangga University Press. Surabaya.
Villegas, V.N. 1992. Carica papaya L. Di dalam  Verheij  EWM  dan  Corone RE,  editor  Plant  Resources  of South-East  Asia:  Edible  Fruits  and Nuts  No.2.  PROSEA  Foundation. Bogor. Hlm.108-112.