https://doi.org/10.22487/kovalen.2021.v7.i1.15437

## Penentuan Aktivitas Antioksidan dan Kandungan Flavonoid Total
Ekstrak Daun Papasan (Coccinia grandis L .) Berdasarkan Perbedaan Pelarut Polar
[Determination of Antioxidant Activity and Total Flavonoid Contents Extract of Papasan Leaves (Coccinia grandis L.) Based on The Differences Polar
Solvents]
Meliani Sari, Rani Nareza Ulfa, Mauritz Pandapotan Marpaung * , Purnama
Fakultas Farmasi, Universitas Kader Bangsa, Palembang
Abstract. Papasan  leaves  have  several  properties,  including  antihyperglycemic,  diabetes,  antipyretic  and antioxidant.  Minor  metabolite  compounds  that  have  the  potential  as  antioxidants  from  this  plant  are  flavonoids, alkaloids, saponins, and tannins. This study's purpose to determine the antioxidant activity and the flavonoid total contents of Papasan ( Coccinia grandis L.) leaf extract based on the differences in polar solvents. The polar solvents used were ethanol, methanol, and water. Extraction used by maceration and dekokta. The antioxidant activity and the  flavonoid  total  contents  were  established  by  UV-Vis  spectrophotometry  according  to  the  decrease  in absorbance  at  a  maximum  wavelength  of  515  nm  by  the  DPPH  (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)  method. Determination of antioxidant activity and the flavonoid total contents were excluded on quercetin comparisons. The values of  IC 50 and the flavonoid total contents in the ethanol extract respectively were 287.92 ppm and 49.825 mg QE/g while the IC 50 values and total flavonoid levels in the extract of methanol were 73.29 ppm and 50.415 mg QE/g. In the extract of the water, the value of IC 50 was 39.80 ppm and the total flavonoid contents were 50.415 mg QE/g. The conclusions of these studies were that the most antioxidant activity was found in water extract, while water and methanol extract had the same and highest levels of total flavonoids .
Keywords : Antioxidant, flavonoid, papasan leaves
Abstrak . Daun Papasan memiliki beberapa khasiat antara lain sebagai antihiperglikemia, diabetes, antipiretik dan antioksidan. Senyawa dari metabolit sekunder yang berpotensi sebagai antioksidan dari tanaman ini antara lain flavonoid,  saponin,  alkaloid  dan  tanin.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  menentukan  aktivitas  antioksidan  dan  kadar flavonoid  total  ekstrak  daun  Papasan  ( Coccinia  grandis L.)  berdasarkan  perbedaan  pelarut  polar.  Pelarut  polar yang digunakan yaitu etanol, metanol dan air. Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi dan dekokta. Aktivitas antioksidan  dan  kandungan  flavonoid  total  ditentukan  secara  spektrofotometri  UV-Vis  berdasarkan  penurunan absorbansi pada panjang gelombang maksimum 515 nm dengan menggunakan metode 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH). Penentuan aktivitas antioksidan dan kandungan flavonoid total dilakukan terhadap pembanding kuersetin. Nilai IC 50 dan kandungan flavonoid total pada ekstrak etanol masing-masing adalah 287,92 ppm dan 49,825 mg QE/g sedangkan nilai IC 50 dan kandungan flavonoid total pada ekstrak metanol berturut-turut adalah 73,29 ppm dan 50,415 mg QE/g. Pada ekstrak air, nilai IC 50 sebesar 39,80 ppm dan kandungan flavonoid total adalah 50,415 mg  QE/g.  Kesimpulan  penelitian  ini  adalah  aktivitas  antioksidan  tertinggi  terdapat  pada  ekstrak  air  sedangkan ekstrak metanol dan air memiliki kandungan flavonoid total yang sama dan tertinggi.
Kata kunci : Antioksidan, flavonoid, daun papasan
Diterima:  13 Januari 2021, Disetujui: 8 April 2021
Sitasi:  Sari, M., Ulfa, R.N., Marpaung, M.P., & Purnama. (2021). Penentuan Aktivitas Antioksidan dan Kandungan Flavonoid Total Ekstrak Daun Papasan ( Coccinia grandis L.) Berdasarkan Perbedaan Pelarut Polar. KOVALEN: Jurnal Riset KImia , 7(1): 30-41.
https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/kovalen
*  Corresponding author E-mail : mauritzchem@gmail.com (hp: 081272231665)

## Sari et al.

## LATAR BELAKANG
Radikal bebas adalah produk normal dari proses  metabolisme  tubuh  atau  dapat  pula terbentuk  di  luar  tubuh.  Senyawa  yang mempunyai  berat  molekul  kecil  tetapi  mampu menghambat  kerusakan  sel  akibat  radikal bebas  dengan  cara  memberikan  elektron disebut  antioksidan  (Purwandari et  al .,  2018).
Sumber-sumber antioksidan berupa antioksidan sintetik maupun antioksidan alami. Penggunaan antioksidan sintetik mulai dibatasi karena  antioksidan  sintetik  seperti  BHT ( Butylated  Hydroxy  Toluena) terbukti  bersifat karsinogenik  dan  dapat  meracuni  hewan percobaan. Maka dari itu, industri makanan dan obat-obatan  menggunakan    antioksidan  alami (Wahyuningsih, 2013).
Senyawa  antioksidan  alami  tumbuhan yaitu  senyawa  fenolik  atau  polifenolik  yaitu berupa  golongan  flavonoid,  turunan  asam sinamat, tokoferol, asam-asam organik polifungsional, dan kumarin. Flavonoid memiliki kemampuan  sebagai  antiradikal  bebas  dan pereduksi radikal bebas (Pietta, 2000).
Flavonoid  ditemukan  dalam  tumbuh- tumbuhan di alam adalah senyawa fenol yang terbesar  yang  merupakan  zat  warna  merah, biru, dan ungu, dan sebagian zat warna kuning yang (Arukwe et al ., 2012). Flavonoid berfungsi sebagai  penurun  kandungan  gula  darah, sebagai  stimulan  pada  jantung,  diuretik, antijamur,  antibakteri,  antiinflamasi,  antitumor, antialergi, pencegah osteoporosis, dan pencegah  penyakit  kardiovaskuler  dengan menurunkan  laju  oksidasi  lemak  serta  dapat menurunkan  kolesterol  yang  tinggi  pada manusia (Nurjanah et al ., 2011).
Untuk memperoleh senyawa aktif berupa flavonoid dan aktivitasnya sebagai antioksidan dari  bahan  alam  diperlukan  jenis  pelarut  yang
sesuai  dalam ekstraksi. Hal  ini sesuai  dengan prinsip like  dissolves  like yaitu  pengambilan senyawa  aktif  dalam  tumbuhan  dilakukan melalui  ekstraksi  pelarut  yaitu  suatu  pelarut akan  cenderung  melarutkan  senyawa  yang memiliki tingkat kepolaran yang sama. Pelarut polar  akan  melarutkan  senyawa  polar  dan sebaliknya (Arifianti et al ., 2014). Pelarut polar yang  biasanya dapat digunakan  dalam ekstraksi berupa etanol, metanol, dan air.
Salah  satu  tanaman  yang  berpotensi memiliki  aktivitas  antioksidan  adalah  tanaman Papasan  ( Coccinia  grandis L).  Pada  bagian tanaman ini seperti akar, dan buah mempunyai berbagai  khasiat  seperti  antihiperglikemia, antidiabetes,  analgesik,  antipiretik,  mengobati penyakiit  kulit,  dan  infeksi  saluran  kemih. Sedangkan bagian daun memiliki sifat sebagai antioksidan,  antidabetes,  dan  juga  digunakan untuk mengobati penyakit gonore, hipolipidemik,  penyakit  kulit,  infeksi  pada saluran  kemih,  infeksi  malaria  dan  kencing nanah (Pekamwar et al ., 2013). Selain itu, daun ini  juga  memiliki  khasiat  sebagai  antimikroba, antihiperlipidemia, antitusif dan antiulcer (Aggarwal et al ., 2011).
Pada hasil penelitian sebelumnya, kombinasi ekstrak daun papasan dengan buah belimbing  wuluh  dalam  pelarut  air  memiliki kandungan  flavonoid  total  sebesar  134,91  ± 2,63  mg  QE/g  (Ate et  al .,  2019).  Pada kombinasi ekstrak daun papasan dengan daun sembung  dalam  pelarut  air  memiliki  aktivitas antioksidan  (IC 50 )  sebesar  5,21  ±  1,75  mg/mL (Atikawati et  al .,  2019).  Pada  buah  Papasan mengandung  kadar  flavonoid  dan  aktivitas antioksidan  dalam  pelarut  metanol  masing- masing sebesar 82,8 ± 7,8 mg QE/g dan 6,12 µg/mL  (Kondhare  &  Lade,  2017).  Sementara itu,  penetapan  kadar  flavonoid  dan  aktivitas

## Sari et al.
antioksidan  ekstrak  daun  papasan  tanpa kombinasi  dalam  pelarut  metanol,  air  dan etanol belum diuraikan secara utuh sebelumnya.
Penggunaan pelarut polar seperti etanol, metanol  dan  air  dalam  penelitian  ini  bertujuan untuk  memperoleh  kandungan  flavonoid  dan aktivitas antioksidan tertinggi dari ekstrak daun papasan  sehingga  mendapatkan  pelarut  yang tepat  untuk  menyari  senyawa-senyawa  aktif tersebut secara optimal.

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Bahan-bahan  yang  digunakan  berupa daun Coccinia  grandis L.,  akuades  (Dira
Sonita),  metanol  p.a  (Merck),  etanol  p.a (Merck), 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)
(Sigma-aldrich), kuersetin (Sigma-aldrich),
Aluminium  (III)  klorida  2%,  asam  asetat,  HCl, NaOH 10%, dan serbuk magnesium.
Alat  yang  digunakan  antara  lain  botol maserasi, pisau, neraca analitik ( A&D company limited ), spatula, kertas saring no 1 (Whatmann), ayakan mesh 60, kuvet ( Spectra
Cuvette ),  tabung  reaksi  ( Pyre x),  vial,  corong ( Herma ),  pipet  volume  ( Iwak i),  gelas  ukur ( Herma ), gelas kimia ( Pyre x), rotary evaporator ( SHZ-D ),  labu  ukur  ( Herma ),  plat  tetes, penangas  air  ( Memmert ),  dan  spektrofometer UV-Vis ( Shimadzu UVmini-1240 ).

## Prosedur Penelitian

## Determinasi sampel
Determinasi tumbuhan Papasan diperoleh  dari  daerah  Prabumulih,  Sumatera Selatan dilakukan di Laboratorium Biologi, STI Pertanian Sriwigama, Palembang.

## Pembuatan simplisia daun Papasan
Daun Papasan segar yang telah dipetik, dicuci  bersih,  dirajang  dan  disortasi  basah.
Kemudian  disortasi  kering  dan  dihaluskan. Selanjutnya untuk memperoleh simplisia diayak  dengan  mesh  60  dan  ditimbang  bobot simplisia yang dihasilkan.

## Pembuatan  ekstrak  etanol  dan  metanol daun Papasan
200  g  simplisia  dilarutkan  masing- masing  pelarut  metanol  dan  etanol  ke  dalam botol maserasi sampai seluruh  sampel terendam  dalam  kurun  waktu  3  hari.  Sampel disimpan  di  tempat  terlindung  dari  cahaya matahari  langsung  sambil  dikocok  sesekali. Lalu diremaserasi sebanyak 2 kali selam 3 hari. Filtrat  diperoleh  lalu  diuapkan  dengan  alat rotary  evaporator pada  suhu  50 0 C  dan dipekatkan  di  atas waterbath. Setelah  itu dilakukan  penimbangan  ekstrak  kental  dan dihitung persentase rendemen yang dihasilkan.

## Pembuatan ekstrak air daun Papasan
200  g  simplisia  diekstraksi  melalui metode  dekokta  dengan  menambahkan  air hingga  2000  mL.  Selanjutnya  dipanaskan dalam waterbath selama  30  menit  yang terhitung setelah suhu dalam gelas kimia telah mencapai 90 o C (Rizkayanti et al ., 2017).

## Uji fitokimia ekstrak daun Papasan
1.  Uji alkaloid
Ekstrak  ditambahkan  dengan  5  mL asam klorida  2N  ke  dalam  2  tabung  reaksi (Simaremare,  2014).  Tabung  reaksi  yang pertama  ditambahkan  3  tetes  pereaksi Mayer  memberikan  endapan  putih  hingga kekuningan.  Tabung  reaksi  yang  kedua ditambahkan  2  tetes  pereaksi  Dragendorff memberikan  endapan  jingga.  Jika  terjadi endapan atau kekeruhan pada dua percobaan  tersebut maka  terdapat alkaloid pada ekstrak
2.  Uji flavonoid
Ketiga fraksi masing-masing

## Sari et al.
dimasukkan  ke  dalam  3  tabung  reaksi sebanyak 1 mL. Tabung reaksi yang pertama direaksikan  dengan  2-4  tetes  asam  klorida pekat  dan  serbuk  magnesium.  Adanya flavonoid pada ekstrak ditandai dengan warna merah. Pada tabung yang kedua ditambahkan  asam  klorida  pekat  beberapa tetes,  dipanaskan  selama  15  menit  di  atas
waterbath . Terbentuknya warna jingga
menunjukkan terdapat flavonoid. Pada tabung yang ketiga ditambahkan larutan NaOH 10% beberapa tetes. Warna kemerahan menunjukkan terdapat flavonoid pada ekstrak (Zirconia et al ., 2015).
3.  Uji tanin
1 g ekstrak ditambahkan dengan 10 mL air  panas.  Kemudian  ditetesi  besi  (III) klorida.  Adanya  warna  hijau  kehitaman menunjukkan  ekstrak  mengandung  tanin (Farah et al ., 2019).
4.  Uji saponin
1 g ekstrak ditambahkan dengan 10 mL akuades. Lalu dikocok kuat selama kurang lebih  1  menit  dan  didiamkan  selama  10 menit. Terdapat buih stabil selama 10 menit dengan  tinggi  3  cm  menunjukkan  ekstrak mengandung saponin (Farah et al ., 2019).
5.  Uji steroid/triterpenoid
1 g sampel ditambahkan dengan 2 mL kloroform  lalu  dikocok.  Filtrat  ditambahkan asetat  anhidrat  dan  asam  sulfat  pekat masing-masing  sebanyak  2  tetes.  Adanya steroid menunjukkan warna biru atau hijau. Sedangkan adanya triterpenoid menunjukkan  warna  merah  atau  ungu (Farah et al ., 2019).

## Pembuatan larutan DPPH 40 ppm
4  mg  kristal  DPPH  dilarutkan  dengan metanol  hingga  100  mL  ke  dalam  labu  ukur (Farah et al ., 2019).

## Penentuan  panjang  gelombang  maksimum DPPH
2  mL  larutan  DPPH  40  ppm  dalam tabung  reaksi  ditambahkan  sebanyak  2  mL metanol,  dikocok  hingga  homogen.  Lalu dimasukkan  ke  dalam  kuvet  sebanyak  3  mL dan diukur pada panjang gelombang maksimum 515 nm (Farah et al ., 2019).

## Pembuatan larutan standar kuersetin
10  mg  kuersetin  dilarutkan  dengan metanol  sampai  100  mL  ke  dalam  labu  ukur sehingga diperoleh konsentrasi larutan standar kuersetin  100  ppm.  Lalu  dibuat  variasi konsentrasi yaitu 20; 40; 60; 80; dan 100 ppm dengan masing-masing larutan standar dipipet 5;  10;  15;  20;  dan  25  mL.  Lalu  ditambahkan dengan  metanol  hingga  25  mL  (Farah et  al .,
2019).
Pembuatan larutan ekstrak daun Papasan
10  mg  ekstrak  etanol  daun  Papasan dilarutkan  dengan  metanol  hingga  100  mL dalam labu ukur sehingga diperoleh konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  Papasan  100 ppm.  Lalu  dibuat  variasi  konsentrasi  yaitu  20; 40;  60;  80;  dan  100  ppm  dengan  masing- masing  larutan  standar  dipipet  5;  10;  15;  20; dan  25  mL.  Lalu  tambahkan  dengan  metanol hingga 25 mL (Farah et al ., 2019).
Uji antioksidan larutan standar kuersetin
2 mL larutan standar kuersetin dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi.  Lalu ditambahkan  DPPH  40  ppm  sebanyak  2  mL, diinkubasi dalam ruang gelap selama 30 menit. Pengukuran absorbansi diukur dengan spektrofotometer UV-Vis dan dibuat kurva baku larutan standar kuersetin (Farah et al ., 2019).
Uji antioksidan ekstrak daun Papasan
1.  Uji  kualitatif  antioksidan  ekstrak  Daun Papasan
Sebanyak  10  mg  masing-masing ekstrak  ditambahkan  DPPH  40  ppm

## Sari et al.
sebanyak  5  tetes  dan  diamati  perubahan warna  larutan.  Adanya  perubahan  warna larutan  dari  warna  ungu  menjadi  warna kuning  menunjukkan  adanya  aktivitas antioksidan (Farah et al ., 2019).
2.  Uji  kuantitatif  antioksidan  ekstrak  daun Papasan
Larutan  ekstrak  dengan  berbagai variasi  konsentrasi  dipipet  sebanyak  2  mL dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan  larutan  DPPH  40  ppm sebanyak  2  mL.  Kemudian  dihomogenkan dan  diinkubasi  dalam  ruang  gelap  selama 30  menit.  Kemudian  diukur  serapannya (Farah et al ., 2019).
Uji  kuantitatif  flavonoid  ekstrak  daun Papasan
1.  Penetapan  panjang  gelombang  maksimum kuersetin
Sebanyak  1  mL  larutan  kuersetin  100 ppm direaksikan dengan 1 mL AlCl 3 2% dan ditambahkan  8  mL  asam  asetat  5%  ke dalam tabung reaksi dan dilakukan
pembacaan pada
rentang panjang gelombang 200-450 nm (Ipandi et al ., 2016).
2.  Penetapan operating time kuersetin
1  mL  larutan  kuersetin  100  ppm direaksikan  dengan  AlCl 3 2%  sebanyak  1 mL  dan  asam  asetat  5%  sebanyak  8  mL. Absorbansi diukur dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang maksimum  yang  telah  diperoleh  dengan interval  waktu  2  menit  sampai  diperoleh absorbansi yang stabil (Ipandi et al ., 2016).
3.  Penentuan kurva kalibrasi
Larutan kuersetin dibuat dengan variasi konsentrasi  20; 40; 60; 80; dan 100 ppm lalu didiamkan selama waktu operating time kemudian dibaca absorbansinya pada panjang  gelombang  maksimum  (Tulandi et
al ., 2015).
4.  Pengukuran  kandungan  flavanoid  total ekstrak daun Papasan
10 mg ekstrak dilarutkan dalam 100 mL pelarut sehingga diperoleh konsentrasi 100 ppm.  Lalu  pipet  1  mL  larutan  kemudian ditambahkan  1  mL  larutan  AlCl 3 2%  dan  8 mL  asam  asetat  5%.  Sampel  didiamkan selama  waktu operating  time .  Absorbansi diukur  dengan  spektrofotometer  UV-Vis pada  panjang  gelombang  maksimum  yang diperoleh.  Untuk  setiap  analisis  sampel dibuat  dalam  tiga  replikasi  dan  diperoleh nilai rata-rata absorbansi.

## Analisis data
Persentase  inhibisi  didapat  dari  nilai serapan  larutan  DPPH  sebelum  dan  sesudah penambahan ekstrak untuk memperoleh persamaan  regresi  dengan  menghitung  nilai IC 50 dengan rumus :
% Inhibisi= A kontrol-A sampel A kontrol ×100 ............. (1)
Keterangan: A kontrol  = Absorbansi tanpa sampel A sampel = Absorbansi sampel

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi tumbuhan diperlukan diawal sebelum  melakukan  ekstraksi  terhadap  daun Papasan untuk memperoleh informasi mengenai  identitas  tanaman  dan  menghindari kesalahan  dalam  penggunaan  bagian  dari tanaman uji yang digunakan. Hasil determinasi melalui  kajian  pustaka  menunjukkan  jenis tanaman  uji  yang  digunakan  adalah Coccinia grandis L.
Pada  pembuatan  simplisia  dilakukan proses  pencucian,  perajangan,  pengeringan dan  penghalusan  bahan.  Hal  ini  dilakukan untuk  menghilangkan  kotoran  berupa  benda asing,  mengurangi  kandungan  air  yang  dapat mempengaruhi hasil ekstraksi dan

## Sari et al.
mempermudah  terjadinya  kontak  dengan sampel  dan  berdifusi  lebih  banyak  ke  dalam partikel  sampel  sehingga  proses  penyerapan menjadi lebih maksimal karena ukuran partikel yang  semakin  kecil  akan  memperluas  daya pelarutan sehingga pelarutan komponen dapat lebih merata (Wahyuningsih, 2015).
Simplisia  daun  papasan  diekstraksi dalam  pelarut  etanol  dan  metanol  dengan metode  maserasi  yang  merupakan  metode penyarian tanpa pemanasan dengan merendam  serbuk  simplisia  dalam  suatu pelarut organik yang sesuai pada suhu ruangan (Marjoni,  2016).  Metode  ekstraksi  ini  memiliki berbagai kelebihan diantaranya adalah pengoperasian  yang  sederhana,  relatif  murah dan  dapat  digunakan  pada  sampel  yang bersifat termolabil. Sedangkan ekstrak air daun papasan  diekstraksi  dengan  metode  dekokta melalui  pemanasan  yang  bertujuan  untuk menarik simplisia nabati dengan air pada suhu 90°C  selama  30  menit.  Pemilihan  metode dekokta  dikarenakan  pelarut  air  mempunyai beberapa kelemahan yaitu dapat menyebabkan
reaksi
fermentatif
(mengakibatkan  perusakan  bahan  aktif  lebih cepat),  pembekakan  sel,  larutannya  mudah terkontaminasi dan merupakan media pertumbuhan  yang  baik  bagi  mikroorganisme yang  dapat  merusak  ekstrak  yang  dihasilkan (Kholifah, 2015).
Hasil  ekstraksi  simplisia  daun  Papasan yang berupa ekstrak kental dilakukan penentuan nilai rendemen ekstrak. Rendemen merupakan rasio berat ekstrak yang dihasilkan dengan berat serbuk simplisia yang diekstraksi. Nilai  rendemen  menunjukkan  banyaknya kandungan senyawa aktif yang tersari di dalam pelarut.  Semakin  besar  nilai  rendemen,  maka senyawa  aktif  yang  tersari  dalam  pelarut
semakin banyak (Santoso et al ., 2020).
Pada  Tabel  1  menunjukkan  persentase rendemen  tertinggi  terdapat  pada  ekstrak dalam  pelarut  metanol  dan  air  yaitu  8,20% sedangkan  yang  terendah  terdapat  pada ekstrak  etanol  sebesar  5,40%.  Hal  ini menggambarkan  perbedaan  pelarut  dengan tingkat kepolaran yang berbeda mempengaruhi rendemen yang dihasilkan. Tingginya rendemen  ekstrak  dalam  pelarut  metanol  dan air  menunjukkan  metanol  dan  air  mampu mengekstrak  senyawa-senyawa  aktif  dalam ekstrak  dengan  sifat  kepolaran  yang  mirip dengan  pelarut  metanol  dan  air.  Berdasarkan tingkat kepolaran, air merupakan pelarut paling polar.  Hal  ini  didasarkan  pada  tetapan dielektrikum.  Semakin  besar  nilai  tetapan dielektrikum,  maka  semakin  polar  suatu pelarut. Nilai tetapan dielektrikum pada pelarut air,  metanol  dan  etanol  masing-masing  yaitu 80; 33; dan 24 (Verdiana et al ., 2018).
Tabel 1. Rendemen ekstrak daun Papasan
Jenis Ekstrak Bobot (gram) Rendemen Ekstrak Simplisia Metanol 16,4 200 8,20 % Etanol 10,8 200 5,40% Air 16,4 200 8,20% Pada hasil
skrining fitokimia menunjukkan  ekstrak  dalam  pelarut  etanol mengandung  senyawa  alkaloid,  flavonoid, saponin, tanin, dan steroid sedangkan ekstrak dalam  pelarut  metanol  dan  air  memiliki kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang sama  yaitu  flavonoid,  alkaloid,  saponin,  tanin, dan  triterpenoid  (Tabel  2).  Pada  penelitian sebelumnya,  ekstrak  daun  Papasan  dalam pelarut metanol mengandung senyawa metabolit  sekunder  berupa  glikosida,  fenol, alkaloid,  flavonoid,  tanin  dan  triterpenoid (Aggarwal et  al .,  2011).  Dalam  pelarut  etanol,

## Sari et al.
hasil  ekstraksi  daun  Papasan  mengandung senyawa  aktif  berupa  alkaloid,  glikosida  dan saponin  (Hossain et  al .,  2014).  Adanya perbedaan  kandungan  senyawa  aktif  yang dihasilkan  dari  jenis  tanaman  yang  sama dipengaruhi  beberapa  faktor  diantaranya  gen, suhu, kelembaban, cahaya, pH, letak geografis dan kandungan unsur hara dalam tanah (Salim et  al .,  2016).  Selain  itu,  perbedaan  pelarut dalam ekstraksi juga mempengaruhi kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang dihasilkan.  Pelarut  metanol  dapat  menyari senyawa-senyawa  aktif  yang  bersifat  polar seperti flavonoid, tanin, saponin, dan terpenoid (Verdiana et al ., 2018). Etanol yang merupakan pelarut  organik  dapat  menarik  senyawa- senyawa  aktif  yang  kurang  polar  hingga  polar seperti  alkaloid,    tanin,  saponin,  steroid, glikosida dan flavonoid ( Sa’adah &
Nurhasnawati,  2015).  Pada  pelarut  air  dapat melarutkan  senyawa  alkaloid  dan  glikosida (Widyawati et  al .,  2014).    Selain  itu,  air  juga dapat  menarik  senyawa  berupa  saponin  dan fenolik lainnya seperti flavonoid (Ginting et al .,
2015).
Pada  uji  kualitatif  aktivitas  antioksidan, dengan  penambahan  DPPH (2,2-Diphenyl-1- picrylhydrazyl) terhadap ketiga ekstrak menunjukkan  perubahan  warna  ungu  menjadi kuning. Hal ini memperlihatkan ekstrak etanol, metanol, dan air mempunyai aktivitas antioksidan.  DPPH  merupakan  radikal  stabil berwarna  ungu  gelap  yang  mengandung nitrogen  organik.  Setelah  bereaksi  dengan senyawa  antioksidan,  warna  larutan  DPPH akan  berkurang  dan  berubah  menjadi  kuning (Wahyuningsih,  2013).  Hasil  ini  menunjukkan kesesuaian  pada  hasil  penelitian  sebelumnya secara kualitatif, bahwa ekstrak daun Coccinia grandis mempunyai aktivitas antioksidan
(Pavithra et  al .,  2017).  Metode  reaksi  dengan radikal  bebas  (DPPH)  memiliki  beberapa kelebihan  diantaranya  merupakan  metode sederhana,  mudah  dilakukan,  cepat  dan sensitif,  memerlukan  sedikit  sampel  dalam pengujian dan stabil dalam kondisi penyimpanan yang baik meskipun dalam waktu yang lama (Deshpande et al ., 2011).
Tabel 2. Skrining fitokimia ekstrak daun Papasan Senyawa Ekstrak Etanol metanol air Flavonoid + + + Alkaloid + + + Saponin + + + Tanin + + + Steroid + - - Triterpenoid - + +
Keterangan: +: terdapat metabolit sekunder -: tidak terdapat metabolit sekunder
Uji  kuantitatif  aktivitas  antioksidan  dari larutan  standar  kuersetin  dan  ketiga  ekstrak daun  Papasan  diukur  serapan  pada  panjang gelombang  maksimun  515  nm.  Penggunaan kuersetin  sebagai  larutan  standar  dalam menentukan  aktivitas  antioksidan  karena merupakan  senyawa  flavonoid  yang  memiliki aktivitas  biologis  seperti  antivirus,  antibakteri, antiinflamasi, antikanker dan antioksidan  yang sangat kuat (Widyasari et al ., 2019).
Gambar 1. Kurva baku larutan kuersetin pada penentuan aktivitas antioksidan
y = 0.1603x + 49.362 R² = 0.9927 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 0 50 100 150 % In h ib isi Konsentrasi (ppm)

## Sari et al.
Hasil  pengujian  aktivitas  antioksidan kuersetin  yang  diperoleh  dari  persentase inhibisi  terhadap  konsentrasi  memberikan kurva baku dengan persamaan regresi  yaitu  y = 0,1603x + 49,362 (Gambar 1). Untuk Ekstrak etanol menunjukkan persamaan regresi yaitu y =  0,1522x  +  6,1771,  ekstrak  metanol menunjukkan  persamaan  regresi  yaitu  y  =
0,5831x + 7,2625 dan ekstrak air memberikan persamaan regresi yaitu y = 0,5938x + 26,362 (Gambar 2). Dari persamaan tersebut diperoleh nilai  IC 50 ( Inhibition  Concentration )  yaitu konsentrasi bahan uji yang dapat menghambat aktivitas radikal bebas sebesar 50% (Julizan et al ., 2019).
Gambar 2. Kurva baku ekstrak metanol, etanol, dan air daun  Papasan dalam menentukan aktivitas antioksidan.
Pada  larutan  uji,  nilai  IC 50 untuk  larutan standar kuersetin sebesar 3,98 ppm tergolong antioksidan  sangat  kuat,  ekstrak  etanol sebesar  287,92  ppm  tergolong  antioksidan sangat  lemah,  ekstrak  metanol  sebesar  73,29 ppm termasuk antioksidan kuat, dan ekstrak air sebesar 39,8 ppm termasuk antioksidan sangat kuat  (Tabel  3).  Nilai  IC 50 <50  ppm  tergolong antioksidan sangat kuat, 50-100 ppm antioksidan  kuat,  100-150  ppm  antioksidan sedang,  150-200  ppm  tergolong  antioksidan lemah  dan  >200  ppm  tergolong  antioksidan sangat lemah (Rahman et al ., 2014). Nilai IC 50 suatu  bahan  uji  berbanding  terbalik  dengan aktivitas  antioksidan.  Semakin  kecil  nilai  IC 50 maka semakin kuat aktivitas antioksidan.
Pada  Tabel  3  dari  ketiga  esktrak menunjukkan  ekstrak  daun  papasan  dalam pelarut  air  memiliki  aktivitas  antioksidan
terkuat. Hal ini disebabkan banyaknya zat aktif yang tersari ditandai dengan tingginya rendemen yang dihasilkan. Hal ini menunjukkan  pelarut  air  menarik  senyawa- senyawa  aktif  yang  sebagian  besar  bersifat sangat polar sebagai antioksidan pada ekstrak. Ekstrak  etanol  memiliki  aktivitas  antioksidan yang sangat lemah disebabkan oleh sedikitnya zat  aktif  yang  tersari  dan  terkandung  di dalamnya  yaitu  dapat  dilihat  dari  persentase rendemen  yang  paling  rendah  (Tabel  1).  Nilai rendemen yang tinggi memperlihatkan banyaknya  komponen  senyawa  aktif  yang tersari  di  dalam  suatu  pelarut  (Farah et  al .,
2019).
Aktivitas  antioksidan  suatu  senyawa merupakan senyawa fenolik yang memiliki gugus hidroksil.  Senyawa  metabolit  sekunder  sebagai antioksidan diantaranya adalah flavonoid,
y = 0.1522x + 6.1771
R² = 0.9881 y = 0.5831x + 7.2625 R² = 0.999 y = 0.5938x + 26.362 R² = 0.9957 0.00 10.00 20.00 30.00 40.00 50.00 60.00 70.00 80.00 90.00 100.00 0 50 100 150 % Inhi bis i Konsentrasi (ppm) Ekstrak Etanol Ekstrak Metanol Ekstrak Air
Linear (Ekstrak Etanol)
Linear (Ekstrak Metanol) Linear (Ekstrak Air)
Sari et al.
alkaloid,  saponin,  dan  tanin  (Lisi et  al .,  2017;
Dalimunthe et  al .,  2018;  Nafiu  &  Ashafa,  2017). Senyawa-senyawa tersebut mendonorkan elektron  bebas  pada  atom  oksigen  di  dalam gugus  hidroksil  atau  atom  hidrogen  yang  dapat mereduksi  reaktivitas  senyawa  radikal  bebas menjadi stabil (Lantah et al ., 2017).
Tabel 3. Nilai IC 50 kuersetin dan ekstrak daun Papasan Sampel IC 50 Keterangan Kuersetin 3,98 ppm Sangat kuat Ekstrak etanol 287,92 ppm Sangat lemah Ekstrak metanol 73,29 ppm Kuat Ekstrak air 39,80 ppm Sangat kuat Penentuan  kandungan  flavonoid  dari
larutan  standar  kuersetin  dan  ekstrak  daun Papasan dilakukan pengukuran serapan dengan  menggunakan  spektrofotometer  UV- Vis.  Dari  hasil  pengukuran  serapan  larutan kuersetin  diperoleh  kurva  baku  dengan persamaan regresi yaitu y = 0,0183x + 0,3278 dengan nilai R 2 sebesar 0,9963 (Gambar 3).
Gambar 3. Kurva  baku  kuersetin  pada penentuan kadar flavonoid
Berdasarkan  persamaan  regresi  yang diperoleh  dari  larutan  baku  kuersetin  tersebut memberikan  kandungan  flavonoid  total  ekstrak daun  papasan  dalam  pelarut  etanol  adalah 49,825 mg QE/g sedangkan ekstrak metanol dan estrak air memiliki kandungan flavonoid total yang sama dan tertinggi yaitu 50,415 mg QE/g (Tabel 4).    Penggunaan  kuersetin  sebagai  larutan
standar  dalam  menentukan  kadar  flavonoid karena merupakan salah satu  turunan senyawa flavonoid dari golongan flavonol yang memiliki 2 gugus fungsi yaitu pada posisi atom C-4 berupa gugus karbonil (-CO-) dan gugus hidroksil (-OH) yang berada pada posisi atom C-3 atau C-5 yang bertetangga dari flavon dan flavonol (Lindawati & Ma’ruf, 2020).
Ekstrak  daun  papasan  dalam  pelarut metanol  dan  air  memiliki  kandungan  flavonoid yang  sama  dan  tertinggi  sedangkan  dalam pelarut  etanol  memiliki  kandungan  flavonoid terendah. Hal ini menunjukkan senyawa flavonoid pada  ekstrak  daun  papasan  memiliki  sifat kepolaran  yang  sama  dengan  metanol  dan  air. Flavonoid  merupakan  senyawa  fenolik  yang bersifat polar yang dapat larut dalam pelarut polar juga seperti metanol, air dan etanol (Gazali et al .,
2019).  Kandungan  flavonoid  ekstrak  dalam pelarut  etanol  paling  rendah  karena  etanol merupakan pelarut organik yang dapat melarutkan  senyawa  dengan  berbagai  tingkat kepolaran  yaitu  nonpolar,  semipolar  dan  polar sehingga tidak semua senyawa aktif yang tersari dalam  pelarut  etanol  mengandung  senyawa flavonoid  dan  turunannya.  Hal  ini  disebabkan etanol  memiliki  gugus  hidroksil  yang  dapat membentuk  ikatan  hydrogen  sehingga  dapat menarik  senyawa  bersifat  polar  dan  gugus karbon  berupa  etil  (CH 3 -CH 2 -)  yang  dapat menarik  senyawa  aktif  yang  bersifat  semipolar dan nonpolar.
Flavonoid yang pada umumnya ditemukan di bagian akar, buah, batang, kulit luar batang dan daun  tumbuhan  memiliki  berbagai  bioaktivitas dan  manfaat  bagi  kesehatan  seperti  antibakteri, antivirus,  antiradang,  antialergi,  antikanker, antioksidan, antiinflamasi, pelindung struktur sel, mencegah osteoporosis ,  dan  sebagai  antibiotik
(Ahmad et al ., 2015).
y = 0.0183x + 0.3278
R² = 0.9963 0 0.5 1 1.5 2 2.5 0 20 40 60 80 100 120 A bs orba ns i Konsentrasi (ppm)
Sari et al.

## Tabel 4. Kadar flavonoid total ekstrak daun Papasan
Untuk  mengetahui  adanya  perbedaan antara kandungan flavonoid terhadap perbedaan pelarut polar dilakukan uji statistika melalui  analisis Kruskall  Wallis .  Hasil  analisis menunjukkan nilai P yang diperoleh lebih besar dari  P Value (0,05).  Hal  ini  menunjukkan  Ho diterima  atau  tidak  adanya  perbedaan  yang signifikan  antara  kandungan  flavonoid  ekstrak terhadap perbedaan jenis pelarut polar.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  daun  Papasan ( Coccinia grandis L.) dalam pelarut air memiliki aktivitas  antioksidan  sangat  kuat  dengan  nilai IC 50 sebesar  39,80  ppm.  Kadar  Flavonoid tertinggi  ekstrak  daun  papasan  terdapat  pada pelarut  air  sama  dengan  pelarut  metanol sebesar  50,415  mg  QE/g.  Diperlukan isolasi senyawa aktif golongan flavonoid pada ekstrak daun  Papasan  ( Coccinia  grandis L.)  yang berperan sebagai antioksidan.

## DAFTAR PUSTAKA
Aggarwal  Ashish,  S.,  Suralkar  Ujwala,  R., Chaudhari  Sugandha,  G.,  Deshpande, S.  V.,  Garud  Aniket,  A.,  &  Talele Sandeep,  G.  (2011).  Analgesic  and
antipyretic  activity  of  methanolic  extract of  Coccinia  grandis  L.  Leaves  in experimental animals. Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences , 2 (4), 175 –182.
Ahmad, A. R., Juwita, J., Ratulangi, S. A. D., & Malik,  A.  (2015).  Penetapan  Kadar Fenolik  dan  Flavonoid  Total  Ekstrak Metanol  Buah  dan  Daun  Patikala (Etlingera elatior (Jack) R.M.SM).
Pharmaceutical Sciences and Research ,
2 (1), 1 –10. https://doi.org/10.7454/psr.v2i1.3481 Arifianti,  L.,  Oktarina,  R.  D.,  &  Kusumawati,  I. (2014). Pengaruh Jenis Pelarut
Pengektraksi. E-Journal Planta Husada ,
2 (1), 3 –6.
Arukwe,  U.,  Amadi,  B.  A.,  Duru,  M.  K.  C., Agomuo, E. N., Adindu, E. A., Odika, P. C., Lele, K. C., Egejuru, L., & Anudike, J. (2012). Chemical composition of Persea americana  leaf,  fruit  and  seed. Ijrras , 11 (2), 346 –349.
Ate,  O.  T.,  Wisnu,  I.  M.,  Putra,  A.,  Ayu,  I.  G., Kusumawati,  W.,  &  Wayan,  N.  (2019). Analisis  Kadar  Total  Flavonoid  dan Fenolik dari Ekstrak Air Kombinasi Daun Papasan ( Coccinia grandis L ) dan Buah Belimbing  Wuluh  (  Averrhoa  blimbi  L  ). Jurnal Media Sains 3 (2): 57- 62 P- Issn : 2549-7413  E- Issn :  2620-3847  ,  Vol  No
3 , 57 –62.
Atikawati, Kusumawati, I. G. A. W., Putra, I. M. W.  A.,  &  Yogeswara,  I.  B.  A.  (2019). Aktivitas
Antioksidan dan Penghambatan  Enzim  α  -amilase Ekstrak  Air  Kombinasi  Daun  Papasan  ( Sampel Abseorbansi Sampel Konsentrasi (ppm) Kandungan Flavonoid Total (mg QE/g) Rata-rata Kandungan Flavonoid Ekstrak Etanol 2,1281 98,37 49,185 49,825 mg QE/g 2,1730 100,83 50,415 2,1730 100,83 50,415 Ekstrak Metanol 2,1730 100,83 50,415 50,415 mg QE/g 2,1730 100,83 50,415 2,1730 100,83 50,415 Ekstrak Aquades 2,1730 100,83 50,415 50,415 mg QE/g 2,1730 100,83 50,415 2,1730 100,83 50,415
Sari et al.
Coccinia  grandis  [  L  .])  dan  Daun Sembung ( Blumea balsamifera [ L .] DC ). Journal Media Sains, 3 (2), 49 –56.
Dalimunthe, A., Hasibuan, P. A. Z., Silalahi, J., Sinaga,  S.  F.,  &  Satria,  D.  (2018). Antioxidant activity of alkaloid compounds  from  litsea  cubeba  lour. Oriental  Journal  of  Chemistry , 34 (2), 1149 –1152. https://doi.org/10.13005/ojc/340270
Deshpande,  S.  V.,  Patil,  M.  J.,  Parmar,  K.  K., Daswadkar,  S.  C.,  &  Khodade  R.B. (2011). A study on antioxidant activity of fruit extracts of Coccinia grandis L. Voigt. International  Journal  of  Drug  Research and Technology , 1 (1), 69 –72. http://ijdrt.com/index.php/drug-research- and-technology/article/view/107/a-study- on-antioxidant-activity-of-fruit-extracts- of-coccinia-grandis-l.voigt
Farah,  J.,  Yuliar,  &  Marpaung,  M.  P.  (2019).
Ekstrak etil asetat daun jambu biji merah
(Psidium guajava L.) sebagai antioksidan  secara  in  vitro. JFL :  Jurnal Farmasi Lampung , 8 (2), 78 –86. https://doi.org/10.37090/jfl.v8i2.143
Gazali, M., Nafus, H., Nurjnah, & Zuriat. (2019).
Eksplorasi  senyawa  bioaktif  ekstrak daun  Nipah  (  Nypa  fruticans  Wurmb  ) asal pesisir Aceh Barat sebagai antioksidan  (  Nypa  Fruticans  Wurmb  ). Jphpi , 22 (1), 155 –163.
Ginting,  A.  F.,  Suryanto,  E.,  &  Momuat,  L.  I. (2015).  Aktivitas  antioksidan  ekstrak  air dan  etanol  dari  empelur  batang  Sagu Baruk  (Arenga  microcarpha). Chemistry Progress , 8 (2), 48 –54. https://doi.org/10.35799/cp.8.2.2015.13
265
Hossain,  S.  A.,  Uddin,  S.  N.,  Salim,  M.  A.,  & Haque,  R.  (2014).  Phytochemical  and Pharmacological  Screening  of  Coccinia grandis  Linn. Journal  of  Scientific  and Innovative Research , 3 (1), 65 –71. http://www.jsirjournal.com/Vol3_Issue1_ 011.pdf
Ipandi, I., Triyasmono, L., & Prayitno, B. (2016). Penentuan  Kadar  Flavonoid  Total  dan Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Daun  Kajajahi  (  Leucosyke  capitellata Wedd .). Pharmascience , 3 (1), 93 –100. Julizan,  N.,  Maemunah,  S.,  Dwiyanti,  D.,  & Anshori, J. Al. (2019). Validasi Penentuan Aktifitas Antioksidan Dengan
Metode Dpph. Kandaga – Media Publikasi  Ilmiah  Jabatan  Fungsional
Tenaga  Kependidikan , 1 (1),  41 –45. https://doi.org/10.24198/kandaga.v1i1.2 1473 Kondhare, D., & Lade, H. (2017). Phytochemical  profile, aldose reductase inhibitory,  and  antioxidant  activities  of Indian  traditional  medicinal  Coccinia grandis (L.) fruit extract. 3 Biotech , 7 (6), 1 –10. https://doi.org/10.1007/s13205- 017-1013-1
Lantah,  P.  L.,  Montolalu,  L.  A.,  &  Reo,  A.  R. (2017). Kandungan fitokimia dan aktivitas  antioksidan  ekstrak  metanol rumput  laut  Kappaphycus  alvarezii.
Media  Teknologi  Hasil  Perikanan , 5 (3),
167 –172. https://doi.org/10.35800/mthp.5.3.2017.
16785
Lindawati,  N.  Y.,  &  Ma’ruf,  S.  H.  (2020). Penetapan  kadar  total  flavonoid  ekstrak etanol kacang merah (Phaseolus vulgaris  L.)  secara  spektrofotometri visibel. Jurnal  Ilmiah  Manuntung , 6 (1),
83 –91. https://doi.org/10.51352/jim.v6i1.312
Lisi,  A.  K.  F.,  Runtuwene,  M.  R.  J.,  &
Wewengkang,  D.  S.  (2017).  Aktivitas ekstrak  metanol  dari  daun  Soyogik (Saurauia Bracteosa DC.). PHARMACON  Jurnal  Ilmiah  Farmasi- UNSRAT , 6 (1), 53 –61.
https://doi.org/10.35799/jis.17.1.2017.15 614
Marjoni,  M.  R.  (2016). Dasar-dasar  fitokimia untuk  diploma  III  farmasi .  Trans  Info Media.
Nafiu,  M.  O.,  &  Ashafa,  A.  O.  T.  (2017). Antioxidant  and  inhibitory  effects  of saponin extracts from Dianthus basuticus  Burt  Davy  on  key  enzymes implicated  intype  2  diabetes  in  vitro.
Pharmacognosy Magazine , 13 (52), S76- 582.
https://doi.org/10.4103/pm.pm_583_16
Nurjanah,  Izzati,  L.,  &  Abdullah,  A.  (2011). Aktivitas  Antioksidan  dan  Komponen Bioaktif  Kerang  Pisau  (Solen  spp). Ilmu Kelautan , 16 (3), 119 –124.
https://doi.org/10.14710/ik.ijms.16.3.119 -124
Pavithra, M. K. S., Vijayakumar, L., Anjana, M., Archana,  R.,  Abharna,  M.,  Gayatri,  A., Priyadharshini,  G.,  Sivaranjani,  E.,  & Sumitha,  C.  (2017).  Phytochemical  and antioxidant  potential  of  fruit  and  leaf extracts of Coccinia grandis.
Sari et al.
International Journal of Current Advanced  Research , 6 (5),  3802 –3805. https://doi.org/http://dx.doi.org/10.24327 /ijcar.2017.3805.0371
Pekamwar,  S.  S.,  Kalyankar, T. M., &  Kokate, S.  S.  (2013).  Pharmacological  activities of  Coccinia  grandis:  Review. Journal  of Applied  Pharmaceutical  Science , 3 (5), 114 –119. https://doi.org/10.7324/JAPS.2013.3522
Pietta,  G.  (2000).  Flavonoids  as  Antioxidants. Journal  of  Natural  Products , 63 (7), 1035 –1042.
Purwandari,  R.,  Subagiyo,  S.,  &  Wibowo,  T. (2018). Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun  Jambu  Biji. Walisongo  Journal  of
Chemistry , 1 (2), 66 –71. https://doi.org/10.21580/wjc.v2i2.3104
Rahman, N., Bahriul, P., & Diah, A. (2014). Uji
Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun
Salam  (Syzygium  Polyanthum)  Dengan
Menggunanakan 1,1-Difenil-2- Pikrilhidrazil. Jurnal  Akademika  Kimia , 3 (3), 143 –149.
Rizkayanti,  R.,  Diah,  A.  W.  M.,  &  Jura,  M.  R. (2017). Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak
Air  dan  Ekstrak  Etanol  Daun  Kelor (Moringa Oleifera LAM). Jurnal Akademika Kimia , 6 (2), 125. https://doi.org/10.22487/j24775185.201 7.v6.i2.9244
Sa’adah,  H.,  &  Nurhasnawati,  H.  (2015). Perbandingan  pelarut  etanol  dan  air pada  pembuatan  ekstrak  umbi  bwang tiwai  (Eleutherine  americana  Merr) menggunakan  metode  maserasi. Jurnal Ilmiah Manuntung , 1 (2), 141 –153. https://core.ac.uk/download/pdf/297199 347.pdf
Salim,  M.,  Yahya,  Sitorus,  H.,  Ni’mah,  T.,  & Marini.  (2016).  Hubungan  Kandungan
Hara  Tanah  dengan  Produksi  Senyawa
Metabolit  Sekunder  pada  Tanaman Duku  (Lansium  domesticum  Corr  var Duku)
dan Potensinya sebagai
Larvasida. Jurnal Vektor Penyakit , 10 (1), 11 –18. http://ejournal.litbang.kemkes.go.id/inde x.php/vektorp/article/viewFile/6252/4785
Santoso,  U.,  Utari,  M.,  &  Marpaung,  M.  P. (2020). Aktivitas antibakteri dan antijamur  ekstrak  batang  akar  kuning  ( Fibraurea  chloroleuca  Miers  )  terhadap Escherichia coli , Staphylococcus aureus dan Candida albicans . 20 (2), 194 –208.
Simaremare,  E.  S.  (2014).  Skrining  Fitokimia Ekstrak  Etanol  Daun  Gatal  (Laportea decumana  (Roxb.)  Wedd). Pharmacy , 11 (1), 98 –107.
Tulandi, G. P., Sudewi, S., & Lolo, W. A. (2015).
Validasi Metode Analisis Untuk Penetapan  Kadar  Parasetamol  Dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri Ultraviolet. PHARMACONJurnal  Ilmiah Farmasi-UNSRAT , 4 (4).
Verdiana, M., Widarta, I. W. R., & Permana, I.
D. G. M. (2018). Pengaruh Jenis Pelarut Pada Ekstraksi Menggunakan Gelombang Ultrasonik Terhadap Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Buah Lemon  (Citrus  limon  (Linn.)  Burm  F.). Jurnal  Ilmu  Dan  Teknologi  Pangan (ITEPA) , 7 (4), 213. https://doi.org/10.24843/itepa.2018.v07.i 04.p08 Wahyuningsih, T. (2013). Perbandingan Aktivitas  Antioksidan  Minyak  Atsiri  dan Ekstrak  Etanol  Daun  Gelam  Tikus (Melaleuca leucadendra var. minor (Sm.) Duthie)  Menggunakan  Metode  DPPH. Journal  of  Chemical  Information  and
Modeling , 53 (9), 1689 –1699.
https://doi.org/10.1017/CBO978110741
5324.004
Wahyuningsih, T. (2015). Perbandingan Aktivitas  Antioksidan  Minyak  Atsiri  dan Ekstrak  Etanol  Daun  Gelam  Tikus (Melaleuca leucadendra var. minor (Sm.) Duthie) Menggunakan Metode DPPH .
Widyasari,  E.  M.,  Sriyani,  M.  E.,  Daruwati,  I., Halimah,  I.,  &  Nuraeni,  W.  (2019). Karakteristik fisiko-kimia senyawa bertanda 99mTc-Kuersetin. Jurnal Sains Dan  Teknologi  Nuklir  Indonesia , 20 (1),
9 –18. https://doi.org/https://doi.org/10.17146/js tni.2019.1.1.4108
Widyawati, P. S., Budianta, T. D. W., Kusuma, F. A., & Wijaya, E. L. (2014). Difference of  solvent  polarity  to  phytochemical content  and  antioxidant  activity  of Pluchea  indicia  less  leaves  extracts. International Journal  of Pharmacognosy and Phytochemical Research , 6 (4), 850 – 855.
Zirconia, A., Kurniasih, N., & Amalia, V. (2015).
Identifikasi  Senyawa  Flavonoid  Dari Daun Kembang Bulan (Tithonia Diversifolia)  Dengan  Metode  Pereaksi Geser. Al-Kimiya , 2 (1), 10 –11.