Jurnal Perikanan dan Kelautan
Volume 7 Nomor 1. Juni 2017
Halaman : 50 - 58
Pengaruh Salinitas Berbeda Terhadap Pertumbuhan dan Kandungan Karotenoid Dunaliella sp. Dalam Media Ekstrak Daun Lamtoro ( Leucaena leucocephala)
(Effect of Different Salinityon Growthand Carotenoid Content of Dunaliella sp.
In Lamtoro Leaves Extract Media (Leucaena leucocephala)
1*) Dharta Mahardani, 1) Berta Putri dan 1) Siti Hudaidah
1) Jurusan Budidaya, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung Jalan Prof. Sumantri Brojonegoro No. 1 Gedung Meneng, Bandar Lampung
*) Korespondensi : dhartamahardani3@gmail.com
Diterima : 9 Juni 2017 / Disetujui : 30 Juli 2017

## ABSTRAK
Dunaliella merupakan mikroalga hijau yang  menghasilkan  karotenoid, salah satu jenis karotenoid  yang  dihasilkan  adalah  β-karoten  yang  mampu  diakumulasi  dalam  jumlah sangat  tinggi  pada  beberapa  kondisi  stress  seperti  keterbatasan  nitrogen,  salinitas  yang tinggi dan terkena intensitas cahaya tinggi. Daun lamtoro ( Leucaena leucocephala) salah satu  bahan  alami  yang  berpotensi  sebagai  sumber  nutrisi  untuk  memenuhi  kebutuhan nutrisi Dunaliella sp.  serta  meningkatkan  pertumbuhan.  Tujuan  dari  penelitian  ini  yaitu untuk  mengetahui  pengaruh  salinitas  yang  berbeda  dalam  media  ekstrak  Daun  Lamtoro terhadap  pertumbuhan  dan  kandungan  karotenoid Dunaliella sp.  Penelitian  dilakukan  di Laboratorium  Budidaya  Perikanan,  Fakultas  Pertanian,  Universitas  Lampung  selama  8 hari  waktu  kultur.  Rancangan  penelitian  yang  digunakan  adalah  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  dengan  4  perlakuan  3  kali  ulangan.  Perlakuan  yang  digunakan  yaitu media  ekstrak  Daun  Lamtoro  dengan  salinitas  30  ppt,  35  ppt,  40  ppt  dan  45  ppt.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  penggunaan  media  ekstrak  Daun  Lamtoro  dengan salinitas  berbeda  berpengaruh  terhadap  kepadatan  sel  dan  kandungan  karotenoid Dunaliella sp.  (p<0,05).  Kepadatan  sel  tertinggi  terjadi  pada  perlakuan  salinitas  30  ppt dengan  kepadatan  sel  mencapai  5,09×10 6 sel/ml,  sedangkan  kandungan  karotenoid tertinggi dihasilkan pada perlakuan salinitas 35 ppt yaitu sebanyak 1,0668  g/ml.
Kata Kunci : Dunaliella ,  karotenoid,  kepadatan  sel,  ekstrak  daun  lamtoro, salinitas .

## ABSTRACT
Dunaliella is a green microalgae that produces carotenoids, one of the carotenoid types produced  is  β-carotene  which  accumulated  in  very  high  amounts  in  some  stressful conditions  such  as  nitrogen  limitations,  high  salinity  and  exposure  high  light  intensity. Leucaena  leucocephala  is  one  of  the  natural  ingredients  that    potential  as  a  source  of nutrition  of  Dunaliella  sp.  growth.  The  aim  of  this  study  was  to  determine  the  effect  of different  salinity  in  Lamtoro  Leaves  Extract  Media  on  growth  and  carotenoid  content Dunaliella  sp.  The  research  was  conducted  in  Aquaculture  Laboratory,  Agriculture Faculty,  Lampung  University.  The  design  of  research  was  used  completely  randomized design  with  4  treatments  and  3  repetitions.  The  treatments  used  was  Lamtoro  Leaves
extract  media  with  salinity    30  ppt,  35  ppt,  40  ppt,  and  45  ppt.  The  result  showed  that media  of  Lamtoro  Leaves  extract  with  different  salinity  gave  significant  effect  on  cell density  and  carotenoid  content  of  Dunaliella  sp.  (p<0,05).  The  results  of  this  study showed  that  the  best  cell  growth  occurred  in  the  treatment  of  salinity  30  ppt  with  cell density reached 5,09×10 6 cells/ml, while the highest carotenoid content was produced at 35 ppt salinity treatment of 1,0668  g/ml
Keywords : carotenoid, cell density, Dunaliella, lamtoro leaves extract, salinity

## PENDAHULUAN
Dunaliella sp.  Merupakan  salah  satu  jenis  fitoplankton  yang  dimanfaatkan sebagai  pakan  alami.  Mikroalga  ini  juga  dapat  digunakan  sebagai  pakan  rotifera dan  pakan Artemia pada  budidaya Artemia (Isnansetyo  dan  Kurniastuty,  1995). Kandungan  nutrisi Dunaliella sp.  yang  ditunjukkan  dalam  bahan  kering  adalah protein (57%), karbohidrat (32%) dan lemak (6%) (Bekker, 1994). Dunaliella sp. merupakan mikroalga  yang menghasilkan karotenoid,  salah satu  jenis karotenoid yang dihasilkan adalah β-karoten yang mampu diakumulasi dalam jumlah sangat tinggi  pada  beberapa  kondisi  stress  seperti  keterbatasan  nitrogen,  terkena intensitas  cahaya  tinggi  dan  salinitas  yang  tinggi  (El  Baz et  al .,  2002).  Menurut Pisal  dan  Lele  (2005),  menunjukkan  bahwa  peningkatan  salinitas  berpengaruh dalam  meningkatkan  kandungan  karotenoid Dunaliella  salina dari  2  pg/sel menjadi 5,5 pg/sel.
Daun  lamtoro  ( Leucaena  leucocephala) salah  satu  bahan  alami  yang mengandung 3,84% N, 0,20% P, 0,206% K, 1,31% Ca, 0,33% Mg (Palimbungan et al. , 2006), berpotensi sebagai sumber nutrisi untuk memenuhi kebutuhan nutrisi Dunaliella sp.  serta  meningkatkan  pertumbuhan  dan  perkembangannya  yaitu dengan  memanfaatkan  daun  lamtoro  sebagai  media  kultur  alternatif  yang memiliki unsur makro dan mikro yang dibutuhkan Dunaliella sp. Hasil penelitian Septiana (2016),  pertumbuhan Dunaliella sp. pada Media Ekstrak Daun Lamtoro sebanyak  4%  selama  kultur  memiliki  kepadatan  sel  59,25×10 6 sel/ml  dan menghasilkan karotenoid 0,9576  g/ml.
Berdasarakan  uraian  diatas  dilaksanakan  penelitian  yang  bertujuan  untuk mengetahui  pengaruh  salinitas  yang  berbeda  dalam  media  ekstrak  daun  lamtoro terhadap pertumbuhan dan kandungan karotenoid Dunaliella sp.

## METODE PENELITIAN
Penelitian dilaksanakan pada bulan Januari – Februari 2017 di Laboratorium Budidaya  Perikanan,  Jurusan  Perikanan  dan  Kelautan,  Fakultas  Pertanian, Universitas  Lampung.  Alat  yang  digunakan  selama  penelitian  antara  lain  botol kultur berukuran 500 ml, gelas ukur, pipet tetes, haemocytometer , gelas penutup, kain  kasa,  kain  satin,  kapas,  cuvet, hand  counter ,  alat  tulis,  botol  film,  cuvet, blender  dan  instalasi  aerasi.  Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  antara  lain air  laut  steril,  ekstrak  daun  lamtoro,  media  Walne,  alkohol  70%,  etanol  96%, kertas label, akuades, dietil eter, dan Dunaliella sp.

## Mikroalga Uji dan Media Kultur
Mikroalga uji yang digunakan dalam penelitian adalah mikroalga Dunaliella sp.  yang  diperoleh  dari  Balai  Besar  Perikanan  Budidaya  Air  Payau  (BBPBAP) Jepara.  Mikroalga Dunaliella sp.  dikultur  pada  media  Walne  hingga  mencapai kepadatan
sel/ml. Media kultur yang digunakan dalam penelitian berupa 350 ml  air  laut  steril  dengan  salinitas  berbeda  dan  4%  media  ekstrak  Daun  Lamtoro setiap perlakuan (Septiana, 2016). Salinitas yang digunakan  yaitu 30 ppt, 35 ppt, 40 ppt, dan 45 ppt.

## Pembuatan Ekstrak Daun Lamtoro
Tahapan  pembuatan  ekstrak  daun  lamtoro  yang  akan  dijadikan  sebagai media adalah sebagai berikut :
1. Daun lamtoro dipisahkan dari tangkai kemudian dicuci menggunakan air tawar sampai bersih.
2. Daun  lamtoro  sebanyak  100  gram  dan  500  ml  akuades  dihaluskan menggunakan blender. Kemudian, ekstrak daun lamtoro disaring menggunakan kain satin.
3. Hasil ekstrak yang telah disaring kemudian disterilisasi menggunakan autoklaf selama  15  menit,  diendapkan  selama  24  jam  hingga  terbentuk  dua  lapisan (supernatan dan endapan).
4. Ekstrak  daun  lamtoro  (supernatan)  digunakan  sesuai  volume  yang  ditentukan (14 ml).

## Rancangan Penelitian
Rancangan  penelitian  yang  digunakan  adalah  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL)  yang  terdiri  dari  4  perlakuan  dengan  masing-masing  perlakuan  3  kali ulangan.

## Penghitungan Kepadatan dan Penebaran Inokulum
Penghitungan  kepadatan  dilakukan  setiap  6  jam  sekali  untuk  mengetahui kepadatan  sel Dunaliella sp.  Kepadatan  sel  mikroalga Dunaliella sp.  dihitung menggunakan Haemocytometer dengan rumus sebagai berikut :
a. Rumus Penghitungan Kepadatan (BBPBAP Jepara, 2015)
N = × faktor pengenceran ×
Keterangan :
N = Jumlah sel mikroalga yang terhitung (sel/ml) A 1 – A 4 = Jumlah sel mikroalga pada kotak ke-1 sampai 4
4 = Jumlah kotakdalam pengamatan Dunaliella sp.
10 4 = Volume kerapatan sel kotak ( chamber )
b. Rumus Penebaran Inokulum (Chien, 1992)

## Keterangan :
V 1 =  Volume inokulum yang digunakan (ml) N 1 =  Kepadatan sel inokulum Dunaliella sp. yang terhitung (sel/ml) V 2 =  Volume media yang akan digunakan (ml) N 2 = Kepadatan sel inokulum Dunaliella sp. yang dibutuhkan (sel/ml).
Pengukuran Diameter Sel Dunaliella sp.
Pengukuran  diameter  sel Dunaliella sp.  dilakukan  setiap  6  jam  (Septiana, 2016).  Metode  pengukuran  diameter  sel  dilakukan  dengan  cara  1  ml  sampel diteteskan  pada  mikrometer  objektif  dengan  tingkat  ketelitian  0,01  mm  dengan bantuan mikroskop pada perbesaran 40× sebanyak 3 kali ulangan, kemudian hasil pengukuran diameter sel  direratakan.

## Analisis Karotenoid
Pengukuran  kandungan  pigmen  karotenoid Dunaliella sp.  dilakukan  pada awal  dan  akhir  kultur.  Total  karotenoid  dihitung  menggunakan  rumus  (Shaish et al., 1992; Prieto et al., 2011) :
Konsentrasi karotenoid (μg/ml) = 25,2 x A450
Keterangan :
25.2 = nilai konstanta pengukuran karotenoid
A450 = serapan pada panjang gelombang 450 nm

## Analisis Data
Dilakukan  pengujian  normalitas  dan  homogenitas  data  kepadatan  sel  pada fase eksponensial ( peak ), diameter sel serta kandungan karotenoid Dunaliella sp. Selanjutnya  dilakukan  uji  analisis  sidik  ragam  (ANOVA)  dengan α = 0.05. Setelah  data  diketahui  berpengaruh  nyata,  maka  analisis  data  dilanjutkan dengan uji  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT)  dengan  tingkat  kepercayaan  95%  untuk mengetahui  perbedaan  antar  perlakuan  (Steel  and  Torie,  1981).  Data  parameter lingkungan dianalisis secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Fase Pertumbuhan Dunaliella sp. Selama Kultur Pertumbuhan populasi diketahui melalui pengamatan kepadatan sel setiap  6 jam selama 192 jam waktu kultur. Fase pertumbuhan Dunaliella sp. selama kultur disajikan  pada  Gambar  1.  Kepadatan  sel  awal  yang  digunakan  selama  penelitian adalah  10 6 sel/ml.  Selama  kultur  terdapat  beberapa  fase  yaitu  fase  adaptasi,  fase eksponensial,  dan  fase  kematian.  Fase  adaptasi  perlakuan  salinitas  30  ppt  terjadi selama 54 jam  dengan kepadatan sel 2,04×10 6 sel/ml, pada perlakuan salinitas 35 ppt  terjadi  selama  72  jam  dengan  kepadatan  sel  2,31×10 6 sel/ml,  perlakuan salinitas  40  ppt  fase  adaptasi  terjadi  hingga  72  jam  dengan  kepadatan  sel 2,92×10 6 sel/ml,  pada  perlakuan  salinitas  45  ppt  terjadi  selama  72  jam  dengan kepadatan sel 2,17×10 6 sel/ml (Gambar 1).
Gambar 1. Pertumbuhan populasi Dunaliella sp. selama kultur
Fase  eksponensial  untuk  perlakuan  salinitas  30  ppt  terjadi  selama  84  jam dengan kepadatan 5,09×10 6 sel/ml, pada perlakuan salinitas 35 ppt  terjadi selama 66 jam  dengan kepadatan 4,70×10 6 sel/ml, pada perlakuan salinitas 40 ppt terjadi selama  60  jam  dengan  kepadatan    4,15×10 6 sel/ml,  pada  perlakuan  45  ppt  terjadi selama  84  jam  dengan  kepadatan  3,98×10 6 sel/ml  (Gambar  1).  Fase  eksponensial pada  kultur  mikroalga  berada  pada  kisaran  jam  ke  5-120  dimana  fase  tersebut ditandai dengan meningkatnya jumlah sel mikroalga (Muhaemin, 2005).
Fase  selanjutnya  yaitu  fase  kematian,  pada  fase  ini  perlakuan  salinitas  30 ppt  terjadi  selama  54  jam  dengan  kepadatan  sel  1,69×10 6 sel/ml,  pada  perlakuan salinitas  35  ppt  terjadi  selama  54  jam  dengan  kepadatan  sel  1,12×10 6 sel/ml, perlakuan salinitas 40 ppt fase kematian terjadi hingga 60 jam dengan kepadatan sel 1,72×10 6 sel/ml, pada perlakuan salinitas 45 ppt terjadi selama 36 jam dengan kepadatan  sel  2,17×10 6 sel/ml  (Gambar  1).  Menurut  Widianingsih  (2011), kemampuan setiap mikroalga dalam melakukan adaptasi berbeda-beda tergantung jenis dan perubahan salinitas dari habitat asalnya.
Kepadatan Sel Dunaliella sp.
Kepadatan  sel Dunaliella sp.  diketahui  melalui  perhitungan  sel  yang dilakukan setiap 6 jam selama 192 jam waktu kultur. Kepadatan sel Dunaliella sp. pada fase puncak dapat dilihat pada Gambar 2.
Hasil penelitian menunjukkan kepadatan populasi Dunaliella sp. mengalami populasi  tertinggi  masing-masing  salinitas  30  ppt  (5,09×10 6 sel/ml)  dan  35  ppt (4,70×10 6 sel/ml) pada jam 138 sedangkan salinitas 40 ppt (4,15×10 6 sel/ml)  pada jam 132 diikuti salinitas 45 ppt (3,98×10 6 sel/ml) pada jam 156 (Gambar 2). Rerata kepadatan populasi Dunaliella sp. tertinggi terjadi pada salinitas 30 ppt, kemudian diikuti  pada  salinitas  35  ppt,  40  ppt,  dan  45  ppt.  Perbedaan  kepadatan  sel Dunaliella sp. antar perlakuan tersebut dikarenakan adanya perbedaan salinitas di dalam media kultur. Berdasarkan hasil penelitian Sukmawan et  al., (2012) kadar salinitas pada media kultur berpengaruh terhadap kepadatan mikroalga.
Hasil  uji  statistik  menunjukkan  bahwa  pada  fase  puncak  salinitas berpengaruh  terhadap  kepadatan  sel Dunaliella sp.  (α=0,05).  Hasil  uji  BNT (p<0,05)  menunjukkan  bahwa  perlakuan  salinitas  30  ppt  berbeda  dengan perlakuan  salinitas  35  ppt,  40  ppt,  dan  45  ppt,  sedangkan  hanya  perlakuan salinitas 40 ppt yang tidak berbeda nyata terhadap perlakuan salinitas 45 ppt.
Diameter Sel Dunaliella sp.
Pengukuran  diameter  sel  dilakukan  pada  fase  adaptasi,  fase  eksponensial awal,  fase  eksponensial  akhir  dan  fase  kematian.  Pengukuran  diameter  sel Dunaliella sp. dilakukan setiap 6 jam selama 192 jam waktu kultur.
Hasil  penelitian  menunjukkan  rerata  diameter  sel  pada  fase  adaptasi  yaitu berkisar 2,50  m  2,63  m (Gambar 3). Kemudian pada fase eksponensial awal rerata  diameter  sel Dunaliella sp.  mengalami  penurunan  yaitu  perlakuan  30  ppt 1,92  m,  perlakuan  35  ppt  1,97  m,  perlakuan  40  ppt  2,11  m,  sedangkan perlakuan  salinitas  45  ppt  2,32  m.  Selanjutnya  rerata  diameter  pada  fase eksponensial  akhir  yaitu  perlakuan  30  ppt  2,07  m,  perlakuan  35  ppt  2,10  m, perlakuan 40 ppt 2,22  m, sedangkan perlakuan salinitas 45 ppt 2,26  m. Rerata diameter  pada  fase  kematian  berkisar  2,39  m–2,57  m  (Gambar  3).  Kepadatan tertinggi yaitu perlakuan salinitas 30 ppt memiliki diameter sel yang lebih rendah dibandingkan perlakuan lain nya pada saat fase eksponensial 1,92  m– 2,07  m, sedangkan  kepadatan  terendah  yaitu  pada  perlakuan  45  ppt  yang  memiliki diameter  sel  lebih  besar  saat  fase  eksponensial  dibandingkan  perlakuan  lain  nya yaitu 2,32  m – 2,26  m (Gambar 3).
Gambar 3. Rerata diameter sel Dunaliella sp. selama kultur (  m)
Dalam  setiap  perlakuan  pada  fase  adaptasi  dan  fase  kematian  memiliki diameter  yang  lebih  besar  dibandingkan  pada  fase  eksponensial,  hal  tersebut diduga  karena  lambatnya  proses  pembelahan  sel  yang  terjadi.  Hasil  penelitian Septiana pada tahun 2016, kepadatan sel mikroalga Dunaliella sp. tertinggi  yang dikultur  dalam  media  ekstrak  daun  lamtoro  tidak  berbanding  lurus  terhadap ukuran  diameter  sel,  selain  salinitas  yang  menjadi  faktor  pembatas  pertumbuhan sel Dunaliella sp. Menurut Pisal dan Lele (2005), konsentrasi  garam  yang tinggi dapat menyebabkan kerusakan sel dan penyusutan sel Dunaliella salina .
Hasil  uji  statistik  menunjukkan  bahwa  rerata  diameter  sel Dunaliella sp. selama kultur menunjukkan adanya pengaruh perlakuan salinitas yang digunakan terhadap diameter sel Dunaliella sp. (α=0,05).

## Kandungan Karotenoid
Dunaliella sp. merupakan salah satu mikroalga  yang mampu menghasilkan karotenoid.  Pengukuran  kandungan  karotenoid  dilakukan  pada  awal  dan  akhir kultur.  Rerata  kandungan  karotenoid  yang  dihasilkan  pada  awal  kultur  yaitu sebanyak 1,3860  g/ml. Rerata kandungan karotenoid pada akhir kultur disajikan pada Gambar 4.
Gambar 4. Kandungan karotenoid Dunaliella sp. pada akhir kultur
Hasil  penelitian  menunjukkan  kandungan  karotenoid  tertinggi  yang dihasilkan  oleh Dunaliella sp.  yaitu  pada  perlakuan  salinitas  35  ppt  yang mengakumulasi karotenoid sebanyak 1,0668  g/ml. Selanjutnya perlakuan dengan menggunakan perlakuan salinitas 30 ppt dengan kandungan  karotenoid sebanyak 1,0080  g/ml. Kandungan karotenoid pada perlakuan 40 ppt yang mengakumulasi karotenoid  sebanyak  0,7980  g/ml,  sedangkan  kandungan  karotenoid Dunaliella sp. yang dikultur dengan menggunakan perlakuan salinitas 45 ppt mengakumulasi karotenoid sebanyak 0,7056  g/ml (Gambar 4). Menurut penelitian Pisal dan Lele (2005),  peningkatan  salinitas  dapat  meningkatkan  kandungan  karotenoid mikroalga Dunaliella salina dari 2 pg/sel menjadi5,5 pg/sel.
Hasil  uji  statistik  menunjukkan  bahwa  penggunaan  media  ekstrak  Daun
Lamtoro  dengan  salinitas  berbeda  pada  kultur Dunaliella sp.  berpengaruh terhadap  kandungan  karotenoid  (α=0,05).  Hasil  BNT  (p<0,05),  menunjukkan
perlakuan  35  ppt  tidak  berbeda  nyata  terhadap  perlakuan  salinitas  30  ppt,  tetapi berbeda nyata terhadap perlakuan salinitas 40 ppt dan 45 ppt.

## Faktor Lingkungan
Faktor  lingkungan  pada  penelitian  ini  adalah  suhu,  pH,  salinitas  dan intensitas  cahaya  yang  dilakukan  setiap  hari  sekali.  Data  pengukuran  parameter lingkungan selama kultur Dunaliella sp. dapat dilihat  pada Tabel 1.
Tabel 1.Parameter lingkungan selama kultur Dunaliella sp.
Perlakuan Parameter lingkungan pH Intensitas cahaya (Lux) Suhu (ºC) 30 ppt 6-7 3375 - 4430 26 35 ppt 6-7 3730 - 4420 26 40 ppt 6-7 3380 - 4470 26 45 ppt 7 3350 - 4405 26 Optimum 6 – 9 a 1500 – 4500 b 26˚C - 30 ˚C c
Sumber:  a : Celekli and Donmez (2006); b : Facta dkk. (2006); c : Yudha (2008);

## KESIMPULAN
Penggunaan  media  ekstrak  daun  lamtoro  dengan  salinitas  berbeda berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  sel  dan  kandungan  karotenoid  mikroalga Dunaliella sp.  dengan  kepadatan  sel  tertinggi  pada  salinitas  30  ppt  (5,09×10 6 sel/ml)  dan  terendah  pada  salinitas  45  ppt  (3,98×10 6 sel/ml).  Rerata  kandungan karotenoid  tertinggi Dunaliella sp.  terjadi  pada  salinitas  35  ppt  sebanyak  1,0668  g/ml dan terendah terjadi  pada salinitas 45 ppt 0,7056 g/ml.

## DAFTAR PUSTAKA
Barrow C, Shahidi F. 2008. Marine nutraceuticals and functionl food . Boca Raton (NY) : CRC Press.
BBPBAP.  2015. Laporan  Penelitian  Tahunan  Laboratorium  Pakan  Hidup . Jepara. Jawa Tengah.
Bekker  E.W.  1994. Microalgae  Biotechnology  and  Microbiology .  USA  :
Cambridge University Press.
Celekli, A. and Donmez, G. 2006. Effect of pH, Light Intensity, Salt and Nitrogen Concentrations on Growth and β-carotene Accumulation by a New Isolate of Dunaliella sp. World  Journal  of  Microbiology  &  Biotechnology.  22 , 183–189.
Chien,  Y.  H.  1992.  Water  Quality  Requirement  and  Management  for  Marine Shrimp Cultur. Review. Water Quality Management . 144-151.
El-  Baz  FK,  Aboul-Enein  MA,  El-Baroty  GS,  Youssef  AM,  Abd  El-Baky  HH. 2002.  Accumulation  of  antioxidant  vitamins  in Dunaliella  salina . J  Biol Sci : 220-223
Facta,  M.,  Zainuri,  M.,  Sudjadi,  dan  Sakti,  P.  E.  2006.  Pengaruh  Pengaturan Intensitas Cahaya yang Berbeda terhadap Kelimpahan Dunaliella sp. dan Oksigen  Terlarut  dengan  Simulator  TRIAC  dan  Mikrokontroller AT89S52. Jurnal Ilmu Kelautan. 11 (2), 67-71.
Isnansetyo,A.  dan  Kurniastuty.  1995. Teknik  Kultur  Phytoplankton  Dan Zooplankton . Kanisius, Jakarta.
Muhaemin,  M.  2005.  Kemampuan  Pengikatan  Metaloprotein  Asam  Amino Methionin Terhadap Pb pada D. salina . Tesis . Institut Pertanian Bogor
Palimbungan,  N.,  Labatar,  R.,  dan  Hamzah,  F.  2006.Pengaruh  Ekstrak  Daun Lamtoro  sebagai  Pupuk  Organik  Cair  terhadap  Pertumbuhan  dan Produksi Tanaman Sawi.Jurnal Agrisistem.2 (2), 96-101.
Pisal,  S.D.,  and  S,  Lele.  2005. Carotenoid  from  Microalga  Dunaliella  salina . Biotechnology. Pp  476-483.
Prieto,  A.,  Canavatea,  J.  P.,  and  Garzia-Gonzalez,  M.  2011.  Assessment  of Carotenoid  Production  by Dunaliella  salina in  Different  Culture  Systems and Operation Regimes. Journal of Biotechnology . 151 , 180-185.
Septiana, I. 2016. Pertumbuhan dan Kandungan Karotenoid Mikroalga Dunaliella sp.  dalam  Media  Ekstrak  Daun  Lamtoro  ( Skripsi ).  Fakultas  Pertanian. Universitas Lampung. Lampung.
Shaish  A,  Ben-Amotz  A,  and  Avron  M.  1992. Biosynthesis  of  β-carotene  in Dunaliella . Methods Enzymol 213: 439–444.
Steel,  R.G.D.  &  J.H.  Torie.  1981. Principles  and  Procedures  of  Statistics,  a Biometrical  Approach,  Second  Edition .  McGraw-Hill  International  Book Company, Kugakusha, Tokyo, Japan. 633p.
Sukmawan, A. M.,  Antara, S. N., dan Arnata, W. I. 2012. Optimization Salinity and  Initial  pH  On  The  Biomass  Production  of Nannochloropsis  sp.  K- 4 . Jurnal  Rekayasa  dan  Manajemen  Agroindustri. Fakultas  Teknologi Pertanian, Universitas Udayana Bali. Bali.
Widianingsih.,  R.  Hartati.,  E.H.  Endrawati.,  M.  Hilal.  2011. Kajian  Kadar  Total Lipid  dan  Kepadatan  Nitzschia  sp.  yang  Dikultur  dengan  Salinitas Berbeda . Undip E-Journal 4030-8655-1.
Yudha,  A.  P.  2008.  Senyawa  Antibakteri  dari  Mikroalga Dunaliella sp.  pada Umur Panen yang Berbeda. Skripsi . Institut Pertanian Bogor. Bogor.