Juni 2022, Vol. 9 No. 1: 23 – 32
pISSN : 2355-9942, eISSN:2656-792X
Terakreditasi Nasional, Dirjen Pendidikan Tinggi, Riset, dan Teknologi
Kementerian Pendidikan, Kebudayaan, Riset dan Teknologi RI
S.K. No. 105/E/KPT/2022 Received: 11 Juni 2021, Accepted: 11 Juni 2022
Published online: 30 Juni 2022 Doi: https://doi.org/10.35508/nukleus.v9i1.4393 https://ejurnal.undana.ac.id/index.php/nukleus/article/view/4393
PENGARUH SUBTITUSI SARI BUAH SEMANGKA (Citrullus lanatus) DALAM PENGENCER SITRAT- KUNING TELUR TERHADAP KUALITAS SPERMATOZOA SAPI BALI
(Effect of watermelon juice supplementation in citrate - egg yolk extender on spermatozoa quality of bali bulls)
Maria M. Bria * , Wilmientje M. Nalley, Johny N. Kihe, Thomas M. Hine Program Studi Peternakan, Fakultas Peternakan, Kelautan, dan Perikanan, Universitas Nusa Cendana Jln. Adisucipto, Penfui, Kupang, Nusa Tenggara Timur, Indonesia 850001
* Correspondent author, email : merybria0529@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk menguji pengaruh penambahan sari buah semangka (SBS) dalam pengencer sitrat- kuning  telur  (S-KT)  terhadap  kualitas  spermatozoa  sapi  bali.  Semen  ditampung  dua  kali  seminggu menggunakan  metode  vagina  buatan  dari  3  ekor  sapi  bali  jantan  dengan  kondisi  tubuh  dan  organ  reproduksi yang  normal.  Semen  yang  memiliki  motilitas  >  70%,  konsentrasi  >1000  x  106/mL  dan  abnormal  ≤  20  % diencerkan dengan: S-KT 100% (P0), S-KT - 25% SBS (P1), S-KT - 50% SBS (P2), (S-KT  - 75% SBS (P3), SBS  100%  (P4)  dan  selanjutnya  disimpan  didalam  lemari  pendinginan  pada  suhu  3-5oC.  Evaluasi  terhadap motilitas,  viabilitas  dan  abnormalitas  spermatozoa  dilakukan  setiap  24  jam.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  spermatozoa  yang  diencerkan  dengan  S-KT  yang  disuplementasi  dengan  SBS  75%  (P3)  mempunyai kualitas  lebih  tinggi  (P<0,05)  dibandingkan  dengan  ketiga  perlakuan  lainnya,  yaitu  dengan  motilitas  40,53%, viabilitas  47,35%,  dan  abnormalitas  4,21%  dengan  lama  penyimpanan  selama  6  hari.  Disimpulkan  bahwa penambahan  SBS  kedalam  pengencer  S-KT  dapat  mempertahankan  kualitas  spermatozoa  sapi  bali  dengan konsentrasi SBS terbaik adalah 75%.
Kata-kata kunci: sitrat, kuning telur, sari buah semangka, spermatozoa, sapi bali

## ABSTRACT
This study aims to determine the effect of adding watermelon juice (WJ) into citrate-egg yolk (C-EY) diluents on the spermatozoa quality of bali catlle. Semen was collected twice a week using an artificial vaginal method of  three  bali  bulls  with  normal  body  condition  and  reproductive  organs.  Semen  that  has  motility  >  70%, concentration  >1000  x  106  and  abnormalities  ≤  20  %  was  used  in  this  study.  Semen  then  divided  into  five treatments: C-EY 100% (T0), C-EY-25% WJ (T1), C-EY-50% WJ (T2), C-EY-75% WJ (T3), WJ 100% (T4) and then stored in a refrigerator at temperature 3-5oC. The quality of spermatozoa was evaluated every 24 hours for  sperm  motility,  viability,  and  abnormalities.  The  results  showed  that  spermatozoa  diluted  with  S-KT supplemented with 75% WJ (T3) had a higher quality (P<0,05) compared  to the other treatments, with motility 40,53 %, viability 47,35%, and abnormalities 4,21% on the 6th day of preservation. It was concluded that the addition  of  WJ  to  C-EY  diluent  was  able  to  maintain  the  quality  of  bali  bull  spermatozoa,  with  the  best  SBS concentration is 75%.
Keywords: citrate, egg yolk, watermelon juice, spermatozoa, bali catlle

## PENDAHULUAN
Sapi  bali  adalah  salah  satu  sapi  lokal Indonesia  yang  memberikan  kontribusi  dalam penyediaan  daging  untuk  memenuhi  kebutuhan protein hewani, mempunyai keunggulan diantaranya  memiliki  tingkat  fertilitas  yang tinggi, mampu beradaptasi dengan baik terhadap lingkungan yang baru, memiliki daging
berkualitas  baik  dengan  kadar  lemak  yang rendah  serta  memiliki  produksi  karkas  yang tinggi (Handiwirawan dan Subandriyo, 2004).
Salah  satu  upaya  yang  dapat  dilakukan untuk  meningkatkan  populasi  ternak  sapi  bali adalah dengan menerapkan teknologi reproduksi yaitu  inseminasi  buatan  (IB).  Diharapkan
melalui  teknologi  IB  mampu  mengoptimalkan penggunaan  semen  karena  semen  dari  seekor penjantan  unggul  dapat  digunakan  untuk mengawini  lebih  banyak  betina  (Rizal  dan Herdis, 2008).
Keberhasilan program IB sangat tergantung pada kualitas semen yang digunakan baik  semen  cair  maupun  semen  beku.  Semen cair  mengalami  penurunan  kualitas  selama penyimpanan  yang  disebabkan  oleh  aktivitas metabolisme  sehingga  dapat  mengakibatkan kerusakan  bahkan  kematian,  akibat  kehabisan energi.
Kerusakan  spermatozoa  terutama  terjadi pada  bagian  membran  diakibatkan  oleh  adanya reactive  oxygen  species  (ROS)  atau  stress oksidatif.  Stress  oksidatif  merupakan  penyebab utama kerusakan spermatozoa sehingga menghambat proses fosforilasi. Oksidasi fosforilasi yang terganggu menyebabkan peningkatan  ROS    dalam  sel  dan  dapat mengoksidasi lipid, protein dan DNA. Membran plasma  spermatozoa  memiliki  fosfolipid  kadar yang  tinggi  menyebabkan  spermatozoa  sangat rentan  terhadap  ROS    (Sanoeka  dan  Kurpisz, 2004).
Menghambat  terjadinya  kerusakan  sel selama penyimpanan, perlu penambahan antioksidan  yang  dapat  menghambat  reaksi peroksidasi  lipid,  sehingga  mengikat  senyawa radikal bebas.
Likopen  atau  yang  sering  disebut  sebagai α-carotene  adalah  suatu  karotenoid  pigmen merah  terang  yang  banyak  ditemukan  dalam buah tomat dan buah-buahan lain yang berwarna merah  (Mu’nisa,  2012).  Likopen  adalah senyawa  antioksida  yang  dapat  melawan kerusakan oleh radikal bebas pada sel-sel tubuh. Senyawa  antioksidan  likopen  memiliki  peranan dalam melindungi spermatozoa dengan mencegah  kerusakan  pada  membran  plasma yang disebabkan oleh ROS. Beberapa penelitian sebelumnya  bahwa  menambahkan  vitamin  C dan β-karoten dalam pengencer dapat meningkatkan  kualitas  spermatozoa  selama penyimpanan  (Rizal,  2005;  Coles,  2007;  Savitri et al ., 2014; Siahan et al ., 2012).
Pengencer  sitrat  kuning  telur  merupakan pengencer  yang  lazim  digunakan  sebagai pengencer  semen  sapi,  karena  mengandung lecitin  dan  lippoprotein  yang  dapat  digunakan sebagai  bahan  penyangga  (buffer)  semen  dan mencegah terjadinya coldshock akibat penurunan  temperatur  yang  mendadak  (Trias, 2001).  Pengencer  ini  dapat  digunakan  pada beberapa  jenis  ternak  selama  penyimpanan spermatozoa yaitu pada sapi ongole (Pubiandara et  al .,2016),  pada  sapi  aceh  (Wahyuni et  al ., 2018),  sapi  bali  (Nabilla,  2017),  kambing  PE (Siregar dan Hamdan, 2004).

## METODE PENELITIAN

## Materi penelitian
Semen  segar  diperoleh  dari  tiga  ekor ternak  sapi  bali,  ternak  dipelihara  dalam kandang  individu  yang  dilengkapi  dengan tempat  pakan  dan  minum.  Pakan  hijauan diberikan  10%  sesuai  berat  badan  ternak  serta penambahan  konsentrat  0,5  kg/ekor/hari  dan air minum.

## Metode penelitian
Pembuatan pengencer perlakuan Pembuatan  sari  buah  semangka,  yaitu buah  semangka  yang  akan  digunakan  dibuat dengan memisahkan bagian kulit dan isi daging merah  buahnya,  kemudian  daging  buah  merah diblender  tanpa  penambahan  air  setelah  itu disentrifuse selama 15 menit dengan 35 rpm.
Penyiapan  kuning  telur  yaitu  bersihkan telur  dengan  alkohol  70%  dan  biarkan  kering. Pecahkan  kulit  telur  dibagian  lancipnya/sudut yang  runcing  kemudian  tuangkan  semua  putih telur  dan  pisahkan  dari  kuning  telur.  Kuning telur  yang  masih  terbungkus  dengan  selaput vitelinnya  diletakan  diatas  kertas  saring, sehingga semua putih telur dapat terserap habis. Pecahkan selaput vitelinnya, kemudian masukkan  kuning  telur  kedalam  gelas  ukur  dan siap digunakan.
Pengencer  sitrat  terdiri  dari  natrium  sitrat 2,9  mg,  dilarutkan  dalam  100  mL  aquabidest hingga  homogen.  Pengencer  perlakuan  terdiri dari 80 mL larutan sitrat, dan 20 ml kuning telur, selanjutnya  tambahkan  penicillin 1000 (IU)  dan 1  mg  streptomycin  homogenkan,  kemudian dibagi kedalam lima perlakuanTabel 1.

## Tabel 1. Komposisi pengencer perlakuan
Bahan pengencer P0 P1 P2 P3 P4 Sitrar - KT 100 75 50 25 0 Sari buah semangka 0 25 50 75 100 Jumlah (ml) 100 100 100 100 100

## Penampungan dan evaluasi semen
Penampungan semen menggunakan metode  vagina  buatan,  semen  segar  yang diperoleh dilakukan evaluasi secara makroskopis meliputi  (volume,  warna,  konsistensi  dan  pH) dan  evaluasi  secara  mikroskopis  meliputi (gerakan massa, motilitas, konsentrasi, viabilitas dan abnormalitas). Secara makroskopis: penilaian  terhadap  volume  semen  dapat  dibaca secara  langsung,  dengan  melihat  pada  tabung penampung  berskala.  Konsistensi  atau  derajat kekentalan dapat diketahui dengan cara memiringkan  tabung  yang  berisi  semen  secara perlahan-lahan sambil melihat gerakan perpindahan  semen  ke  posisi  semula.  Jika pergerakan  semen  dalam  tabung  gerakannya lambat maka semen memiliki konsistensi kental, dan  jika  gerakannya  agak  cepat  maka  semen memiliki konsistensi sedang, sedangkan gerakannya  sangat  cepat  maka  semen  memiliki konsistensi  encer.  Derajat  keasaman  semen dapat  diketahui  dengan  cara  meneteskan  semen diatas  kertas  indikator  pH  berskala  1-14. Perubahan  warna  pada  kertas  pH  tersebut disesuaikan  dengan  standar  warna  pada  kertas indikator pH.
Penilaian  semen  secara  mikroskopis meliputi gerakan massa spermatozoa dikategorikan  dalam  tiga  golongan,  yaitu gerakan  cepat  berpindah,  awan  tebal  dan  gelap, celah  antara  gumpalan  awan  satu  dengan  yang lainnya  sedikit  atau  rapat  (+++),  gerakan  cepat, terbentuk  awan tetapi  agak  terang  gumpalannya (++),  dan  terlihat  gerakan  sperma  sendiri,  tidak ada gumpalan awan (+).
Motilitas  spermatozoa  ditentukan  melalui pengamatan  spermatozoa  di  bawah  mikroskop cahaya  dengan  pembesaran  lensa  objektif 40×10. Penilaian terhadap persentase spermatozoa  motil  adalah  spermatozoa  yang bergerak  progresif  ditentukan  secara  subjektif pada  sepuluh  lapang  pandang  yang  berbeda, nilai  yang  diberikan  berkisaran  antara  0%  dan 100% dengan skala 5%.
Konsentrasi  spermatozoa  me-nunjukkan jumlah  sel  spermatozoa  tiap  satuan  volume semen  dengan  cara  diamati  dibawah  mikroskop
dengan pembesaran 40×10. Konsentrasi spermatozoa  dihitung  dengan  menggunakan haemocytometer.
Perhitungan konsentrasi: Konsentrasi spermatozoa  =  X  ×  volume  spermatozoa  ×  10 6 sperma/ml.  X  =  Jumlah  spermatozoa  hasil perhitungan.
Viabilitas  spermatozoa  dilakukan  dengan menggunakan  pewarnaan  differensial  eosin- nigrosin,  spermatozoa  hidup  ditandai  dengan spermatozoa  tidak  menyerap  warna  merah (bening  atau  putih),  sedangkan  spermatozoa mati akan terlihat penyerapan warna merah ungu dari  eosin-negrosin.  Pengamatan  dilakukan menggunakan  mikroskop  dengan  pembesaran 40×10,  hitung  spermatozoa  dengan  total  200 spermatozoa atau pada 10 lapang pandang yang berbeda.  Pehitungan  nilai  viabilitas  sesuai rumus:  Vibilitas  =  (∑  sperma  hidup)/(Total spermatozoa) x 100 %.
Abnormalitas  spermatozoa  sama  dengan evaluasi  viabilitas  dapat  diketahui  dengan  cara semen diwarnai dengan melihat bentuk morfologi  spermatozoa  yang  tidak  normal  baik abnormalitas primer maupun sekunder. Abnormalitas  =  (∑  sperma  abnormal)/(total spermatozoa) x 100 %.

## Pengenceran dan Penyimpanan Semen
Semen  yang  digunakan  harus  memiliki motilitas  >  70%,  konsentrasi  >  800×106,  dan abnormalitas  <  15%  (Johnson et  al .,  2000). Selanjutnya diencerkan dengan pengencer perlakuan (Tabel 1), disimpan pada suhu 3-50C. Evaluasi  motilitas,  viabilitas  dan  abnormalitas dilakukan setiap 24 jam.

## Desain penelitian dan analisis data
Penelitian dirancang menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL),  5  perlakuan dan  5  ulangan.  Variabel  yang  diamati  dalam penelitian  adalah:  motilitas,  viabilitas  dan abnormalitas spermatozoa.
Analisis  ragam  dilanjutkan  dengan  Uji Duncan  (Steel  dan  Torrie,  1990).  Analisis menggunakan  paket  Software  SPSS  17.0  for Windows.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Evaluasi Semen Segar
Hasil  pengamatan  semen  segar  setelah penampungan  selama  penelitian  dapat  dilihat pada  Tabel  2.  Dari  hasil  penampungan  semen segar sapi bali (Tabel 2) diperoleh bahwa rataan volume  semen  4,62±0,67  ml,  hasil  ini  hampir sama  dengan  laporan  Prastowo et  al .  (2018) 4,83±1,40  ml,  namun  lebih  rendah  dari  laporan Anwar et al . (2014) dimana volume semen sapi bali  mencapai  6,30±3,32  ml,  Sunarti et  al . (2016)  dengan  volume  5,5  ±  0,53.  Perbedaan volume  semen  sapi  dapat  dipengaruhi  oleh berbagai  faktor,  yaitu  bangsa,  umur,  suhu,
pakan,  ukuran  badan  dan  testis,  frekuensi penampungan,  lingkungan  dan  kondisi  dari ternak  itu  sendiri.  Menurut  Fuerst–waltl et al .(2006)  bahwa  interval  penampungan  semen pejantan sapi yang baik dilakukan yaitu 3-5 hari untuk  menjaga  kualitas  semen  yang  dihasilkan dan tetap menjaga kuantitas produksi. Perbedaan volume  semen  yang  diperoleh  dari  beberapa peneliti,  Garner  and  Hafez  (2000)  melaporkan bahwa  volume  semen  sapi  setiap  penampungan memiliki  variasi  antara  1  sampai  15  ml  atau  5 sampai 8 ml per ejakulasi.
Tabel 2. Hasil pengamatan karakteristik semen segar sapi bali
Karakteristik semen Rerata ± standar devisiasi Volume (mL) 4,62 ± 0,67 Warna Krem Konsistensi Sedang pH 6,46 ± 0,13 Gerakan Massa sperma +++ Konsentrasi sperma (x 10 6 sel/mL) 1518 ± 98,33 Motilitas sperma (%) 79,0  ± 2,23 Viabilitas sperma (%) 86,11 ± 3,12 Abnormalitas sperma (%) 2,75 ± 0,43
Hasil  pemeriksaan  warna  semen  segar sapi  bali  adalah  krem,  warna  semen  ini  normal sesuai  pendapat  Feradis  (2010)  dan  Nursyam (2007) bahwa semen sapi normal berwarna putih susu  atau  krem  keputihandan  keruh.  Hasil  ini sebanding  dengan  laporan  Nabilla et  al .  (2018) dengan warna semen yaitu putih susu krem pada ternak  sapi  bali  umur  prokduktif  dan  non produktif,  Sunarti et  al .  (2016)  dengan  warna semen  putih  krem.  Derajat  kekeruhannya tergantung  pada  konsentrasi  spermatozoa.  Kira- kira  kurang  dari  10%  semen  sapi  yang  normal menghasilkan warna kekuningan yang disebabkan  oleh  riboflavin  yang  dibawa  oleh satu  gen  autosom  resesif  dan  tidak  mempunyai pengaruh  terhadap  fertilitas.  Semen  sapi mempunyai  volume  tinggi  tetapi  konsentrasi spermanya  rendah  sehingga  memperlihatkan warna krem atau putih susu.
Hasil  pemeriksaan  konsistensi  semen segar  adalah  sedang,  hal  ini  sama  dengan penelitian Nabilla et al . (2018) pada ternak sapi bali  dengan  konsistensi  semen  adalah  sedang. Menurut Suyadi et al . (2012) menyatakan bahwa warna,  konsistensi  dan  konsentrasi  spermatozoa mempunyai  hubungan  erat  satu  sama  lain,
artinya  jika  semen  semakin  encer  maka konsentrasi  spermatozoa  semakin  rendah  dan warnanya  semakin  pucat.  Konsentrasi  semen segar  dalam  penelitian  ini  sebanyak  1518  ± 98,33  juta/ml,  hasil  penelitian  ini  lebih  tinggi dari  hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Ishak (2012)  pada  sapi  bali  dengan  konsentrasi spermatozoa semen segar sebesar 1309,3 ± 21,4 juta/ml,  akan  tetapi  hasil  ini  lebih  tinggi  dari penelitian  Sunarti et  al .  (2016)  pada  sapi  bali dengan  nilai  konsentrasi  1185,57±392  juta/ml, sesuai  dengan  pendapat  Feradis  (2010)  yang menyatakan  bahwa  konsistensi  semen  sapi dikatakan kental apabila mempunyai konsentrasi 1.000 juta sampai 2000 juta sel spermatozoa per ml.
Derajat  keasaman  memegang  peranan penting  karena  dapat  mempengaruhi  viabilitas spermatozoa.  Derajat  keasaman  semen  segar sapi bali diperoleh 6,46 ± 0,13, hasil ini hampir sama  dengan  laporan  Prastowo  (2018)  dengan pH 6,51±0,12  pada kelompok umur  ternak sapi bali  yang  berbeda,  beberapa  hasil  penelitian lainnya  menyatakan  pH  semen  yang  berbeda- beda  tetapi  masih  dalam  kisaran  yang  normal, seperti  Butar-Butar  (2009)  menyatakan  bahwa
semen  segar  mempunyai  pH  antara  6,4-7,8, Nursyam  (2007)  melaporkan  bahwa  pH  semen antara  6,8-6,7,  Ratnawati et  al .  (2008) memperoleh  nilai  pHsemen  segar  sebesar  6,5. Perbedaan  ini  didukung  oleh  Feradis  (2010) yang  mengatakan  bahwa  setiap  bangsa  sapi mempunyai nilai pH semen segar yang berbeda- beda.
Hasil  pemeriksaan  gerakan  massa  semen segar  sapi  bali  yang  diperoleh  memiliki  nilai +++,  hasil  inilebih  tinggi  dari  laporan  Anwar (2014)  pada  sapi  bali  dengan  nilai  ++,Fadilah (2016)pada  sapi  bali  dengan  nilai  ++.  Hal  ini menunjukan  bahwa  semen  segar  memiliki gerakan  aktif.  Menurut  Arifiantini et  al .  (2006) menyatakan  bahwa  gerakan  massa  pada  sapi lokal  lainya  seperti  sapi  bali  diperoleh  rataan sebesar  2,7  setara  dengan  (++/+++)  yang disebabkan  karena  kondisi  ternak  maupun lingkungan. Garner and Hafez, (2016) menyatakan bahwa perbedaan gerakan massa ini disebabkan  oleh  perbedaan  bangsa,  umur, kematangan sperma dan plasma semen.
Rataan  nilai  motilitas  spermatozoa  sapi bali  yang  diperoleh  adalah  79,0±2,23  dengan kisaran75-80% yang menunjukan bahwa spermatozoa  bergerak  progresif  dan  didukung dengan adanya pergerakan, hasil ini lebih tinggi dari  laporan  Anwar et  al .  (2014)  pada  ternak sapi  bali  dengan  nilai  motilitas  sebesar 62,50±5,00.Ratnawati et  al .  (2008)  melaporkan
bahwa motilitas spermatozoa sapi bali mencapai 88,7%, menurut Garner and Hafez (2000)motilitas spermatozoa sapi berkisar antara 40-75%.
Rataan  persentase  viabilitas  spermatozoa semen  segar  yang  diperoleh  sebesar  86,11±3,12 hasil  ini  tidak  jauh  berbeda  dengan  pendapat Rizal  (2009)  yang  diperoleh  dari  aspirasi epididimis  dengan  nilai  viabilitas  spermatozoa sapi  bali  sebesar  86,75  %,  akan  tetapi  yang dilaporkan  oleh    Fadilah  (2016)  pada  sapi  bali lebih rendah dengan nilai 77,74 ± 4,34. Viablitas spermatozoa  untuk  pembuatan  semen  yang diencerkan  atau  semen  beku  minimal  memiliki 60%  -75%  spermatozoa  hidup  (Garner  and Hafez, 2000).
Persentase abnormal sperma yang diperoleh dalam penelitian ini adalah 2,75±0,43%  nilai  ini  berada  dalam  kisaran normal  sesuai  pernyataan  Garner  dan  Hafezz (2000) dimana sperma abnornal tidak lebih 20%.

## Pengaruh  Perlakuan  terhadap  Motilitas Spermatozoa
Motilitas adalah daya gerak spermatozoa yang dapat dijadikan sebagai acuan dalam  penilaian  kualitas  spermatozoa  untuk inseminasi  buatan  (Bintara,  2011).  Rataan  nilai motilitas spermatozoa dalam pengencer perlakuan  selama  pengamatan  disajikan  pada Tabel 3.
Tabel 3. Rataan persentase motilitas spermatozoa sapi bali
Hari ke Perlakuan(%) P0 P1 P2 P3 P4 0 79,22±2,14 a 79,32±2,18 a 79,31±2,25 a 79,41±2,22 a 79,26±2,19 a 1 70,35±3,36 ab 70,32±3,28 ab 71,61±2,57 ab 74,55±2,77 a 69,52±3,46 b 2 59,86±3,44 b 61,49±4,65 b 64,16±1,50 b 68,87±2,24 a 59,97±2,71 b 3 47,71±5,18 c 51,95±5,80 bc 55,00±1,11 b 61,27±1,84 a 48,93±2,89 c 4 39,81±0,70 c 40,56±1,0 c 44,40±1,33 b 54,06±2,51 a 39,82±2,05 c 5 29,46±0,60 c 31,07±0,97 c 37,33±1,89 b 47,10±2,64 a 31,31±2,31 c 6 20,42±2,27 c 22,65±1,12 c 29,06±2,87 b 40,53±1,29 a 21,93±2,14 c
Superscript yang berbeda pada baris yang sama menunjukan perbedaan yang signifikan (P<0,05)
Berdasarkan  hasil  analisis  statistika motilitas spermatozoa sapi bali pada pengamatan  pasca  pengenceran  (H0)  untuk setiap perlakuan mempunyai nilai motilitas yang sama besar(P>0,05). Padahari kedua penyimpanan  persentase  motilitas  spermatozoa pada  perlakuan  kontrol,  P1,  P2  dan  P4secara tidak  nyata  (P>0,05) lebih rendah  dibandingkan dengan  perlakuan  P3.  Hari  ketiga  penyimpanan spermatozoa  pada  perlakuan  P2  dan  P3  secara
nyata lebih tinggi dibandingkan dengan perlakuan kontrol, P1 dan P4. Penyimpanan hari keempat  untuk  perlakuanP1  (SKT-SBS  25%) dan  P2  (SKT-SBS  50%)  menghasilkan  nilai rataan motilitas sebesar 40,56±1,0 dan 44,40±1,33. Perlakuan P3 pada hari ke-4 sampai hari  ke-6  menunjukkan  bahwa  penambahan SKT-SBS  75%  memberikan  hasil  yang  lebih baik dalam mempertahankan motilitas spermatozoa dengan rataan motilitas
54,06±2,51,  47,10±2,64,  dan  40,53±1,29.Nilai motilitas  spermatozoa  40%  didapat  dalam perlakuan  P1  pada  hari  keempat  dan    P3  pada hari keenam penyimpanan.
Tingginya motilitas spermatozoa dikarenakan  kandungan  karbohidrat  pada  sari buah semangka yang  merupakan gula pereduksi yaitu  glukosa  dan  fruktosa  yang  berfungsi sebagai  sumber  energi  bagi  spermatozoa. Pergerakan  spermatozoa  sangat  erat  kaitannya dengan  energi  yang  dibutuhkan  (Yohana et  al ., 2014  ).  Senyawa  antioksidan  seperti  likopen, vitamin  C  dan  vitamin  Asangat  bermanfaat untuk menangkal atau melindungi sel spermatozoa  terhadap  serangan  radikal  bebas yang produksinya selama penyimpanan. Proteksi oleh antioksidan tersebut sangat nyata berkontribusi  terhadap  peningkatan  motilitas spermatozoa.
Dari aspek motilitas spermatozoa menunjukkan  bahwa  perlakuan  kontrol,  P1,  P2 masih layak digunakan untuk kegiatan inseminasi buatan (IB) pada hari ketiga dan hari keempat  penyimpanan  karena  masih  memiliki persentase motilitas antara 40-45%, namun tidak layak  digunakan  pada  hari  kelima  sampai  hari keenam  karena  nilai  motilitas  spermatozoa sudah  menurun  dibawah  standar  IB  yaitu  40%. Hal  tersebut  dapat  dijelaskan  bahwa  semakin lama  masa  penyimpanan  maka  persentase motilitas  individu  semakin  menurun  karena sumber  energi  yang  tersedia  sudah  berkurang dan kemungkinan terjadi penumpukan sisa hasil metobolisme yang biasa disebut asam laktat.
Hasil  pada  penambahan  SKT-sari  buah semangka  75%  (P3)lebih  tinggi  dari  dilaporkan Andrianto  (2016)  pada  ternak  domba  dengan nilai motilitashanya 26,75% setelah penyimpanan hari kelima dalam pengencer sitrat dan  sari  buah  semangka.  Demikian  juga  hasil menurut  Syahputra  (2019)  melaporkan  bahwa pemberian  jus  semangka  selama  30  hari terhadap tikus wistar yang dipaparai Monosodium  Glutamat  (MSG)  pada  kelompok kontrol positif (KP) yang diberi perlakuan MSG dengan  dosis  10  mg/gr  BB  dan  jus  semangka 100%memberikan  efek  paling  baik  terhadap motilitas  spermatozoa  tikus  wistar  dengan  nilai motilitas yang bergerak 56,14±8,59%. Penggunaan  SKT-sari  buah  semangka  dalam penelitian  ini  memberikan  hasil  yang  lebih tinggi dari beberapa peneliti yang menggunakan pengencer  alternatif  yang  memiliki  kandungan antioksidan vitamin C. Sabile (2016) penambahan  ekstrak  buah  mengkudu  dalam
pengencer  andromed  dapat  mempertahankan motilitas  spermatozoa  sapi  bali  dengan  nilai sebesar 45,12%selama empat hari penyimpanan. (Parera et  al .,  2009)  melaporkan  penambahan pengencer  Tris  kuning  telur  70%  +  sari  wortel 30% mampu mempertahankan motilitas spermatozoa epididimis sapi bali pada penyimpanan  hari  keempat  dengan  nilai  rataan motilitas  45,00±0,00.  Marawali et  al .  (2019) melaporkanpenambahan filtrat jambu biji dalam pengencer  air  kelapa-kuning  telur  (AKKT  20% +  FJB  0,09%)  dapat  mempertahankan  nilai motilitas  spermatozoa  sapi  bali  selama  tiga  hari penyimpanan  dengan  nilai  rataan  53,40±2,30 hasil  tersebut  lebih  rendah  dalam  penelitian  ini dengan  nilai  rataan  61,27±1,84.  Hal  ini dikarenakan  ekstrak  buah  mengkudu  (Morinda citrifolia  Linn),  sari  worteldan  filtrat  jambu  biji mengandung banyak antioksidan vitamin C yang berfungsi  menangkal  radikal  bebas  penyebab menurunannya  motilitas  spermatozoa  selama penyimpanan.
Adanya  perbedaan  hasil  yang  diperoleh dari berbagai hasil penelitian mungkin disebabkan  oleh  beberapa  faktor  yakni  suhu, waktu  penelitian,  jenis  bahan  pengencer  yang digunakan dan lingkungan.

## Pengaruh  Perlakuan  terhadap  Viabilitas Spermatozoa
Nilaiviabilitas  spermatozoa  merupakan indikator  untuk  menilai  kualitas  pengenceran semen.  Semakin  tinggi  nilai  viabilitas  semen maka  semakin  baik  kualitas  semen  tersebut (Rizal  dan  Herdis,  2008).  Viabilitas  sapi  bali hasil penelitan dapat dilihat pada Tabel 4.
Persentase  viabilitas  spermatozoa  setelah diencerkan  menggunakan  SKT-SBS  pada  HO untuk  semua  perlakuan  memliiliki  nilai  yang sama  besar  (P>0,05).  Viabilitas  spermatozoa sapi  bali  pada  penyimpanan  hari  pertama  untuk lima  kelompok  perlakuan  dengan  nilai  tertinggi pada  perlakuan  P3  diikuti  dengan  P2,  P1  dan perlakuan  kontrol.  Berdasarkan  hasil  analisis statistika penyimpanan hari pertama menunjukkan  perbedaan  yang  tidak  nyata (P>0,05)  pada  perlakuan  kontrol,  P1,  dan  P2 namun  secara  nyata  pada  P3.  Penyimpanan viabilitas  hari  kedua  sampai  hari  keenam  pada perlakuan kontrol dan T1 menunjukkan perbedaan  yang  tidak  nyata  (P>0,05),  akan tetapi  nilai  viabilitas  P1  untuk  hari  ketigatidak berbeda nyata dengan perlakuan kontrol maupun P2 tetapi berbeda secara nyata dengan P3. Pada hari  hari  kedua,  keempat  sampai  hari  keenam
perlakuan P2 dan P3 secara nyata (P<0,05) lebih tinggi  dibandingkan  dengan  perlakuan  kontrol dan P1.
Viabilitas  spermatozoa  sapi  bali  pada penelitian  ini  sampai  hari  kelima  penyimpanan lebih  tinggi  dibandingkan  hasil  penelitian sebelumya  yang  dilaporkan  oleh  Andrianto (2006)pada  ternak  domba  memiliki  nilai
viabilitas  spermatozoa  sebesar  32,25±1,29%. Marawali et  al .,  (2019)  melaporkan  persentase viabilitas  spermatozoa  sapi  bali  sampai  hari ketiga  penyimpanan  dengan  penambahan  filtrat jambu  biji  0,9%  kedalam  pengencer  air  kelapa kuning  telur  memiliki  hasil  56,97±1,69%  jauh lebih  rendah  dari  hasil  yang  diperoleh  dalam penelitian ini 68,39±1,78 %.
Tabel 4. Rataan persentase viabilitas spermatozoa sapi bali
Hari ke- Perlakuan(%) P0 P1 P2 P3 P4 0 86,29±3,11 a 86,32±3,26 a 86,38±3,24 a 86,10±3,31 a 86,38±3,23 a 1 74,08±3,44 b 75,18±3,22 b 76,32±2,15 b 80,61±2,20 a 73,40±3,17 b 2 63,69±3,74 c 64,66±3,11 c 68,78±1,67 b 75,15±2,67 a 64,17±2,88 c 3 53,77±3,31 c 58,16±6,73 bc 60,28±1,30 b 68,39±1,78 a 53,47±3,08 c 4 44,01±0,98 c 44,85±1,53 c 49,62±1,65 b 60,26±2,40 a 44,59±3,34 c 5 33,76±8,28 c 35,15±1,48 c 41,50±3,44 b 54,05±2,42 a 36,12±3,38 c 6 24,71±2,39 c 27,07±1,51 c 33,23±2,78 b 47,35±1,55 a 26,16±2,28 c
Pengaruh  Perlakuan  terhadap  Abnormalitas Spermatozoa
Abnormalitas merupakan salah satu indikator dalam menentukan kualitas spermatozoa. Karena struktur sel yang abnormal dapat meyebabkan gangguan dan hambatan pada saat  fertilisasi  (Afiati et  al .,  2015).  Berdasarkan hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  nilai abnormal selama penyimpanan terjadi peningkatan dari hari ke-0 sampai hari ke-6. Hal ini  menunjukkan  bahwa  penambahan  SKT-SBS tidak memberikan peranan selama penyimpanan. Namun  hasil  analisis  statistik  menunjukkan bahwa  pada  penyimpanan  H0,  H1,  H2  dan  H5
memberikan  pengaruh  yang  tidak  nyata  untuk semua  perlakuan  (P>0,05)  dan  secara  nyata (P<0,05)  pada  penyimpanan  H3,  H4  dan  H6. Perbedaan  nilai  abnormalitas ini  mungkin  dapat terjadi karena ketidak hati-hatian dalam pembuatan  atau  tekanan  pada  saat  pembuatan preparat.  Toelihere  (1993)  menyatakan  bahwa abnormalitas  spermatozoa  dapat  terjadi  karena tekanan yang keras, pemanasan yang berlebihan, pendinginan yang cepat dan kontaminasi dengan air,  urin  atau  kuman  dan  bahan  antiseptik. Kualitas  spermatozoa  masih  dikatakan  dalam kategori  baik  karena  persentase  abnormalitas dibawah 20%.
Tabel 5. Rataan persentase abnormalitas spermatozoa sapi bali
Hari ke- Perlakuan(%) P0 P1 P2 P3 P4 0 2,89±0,36 a 2,72±0,61 a 2,65±0,42 a 2,72±0,49 a 2,86±0,55 a 1 3,25±0,44 a 2,98±0,56 a 3,03±0,46 a 3,09±0,33 a 3,24±0,47 a 2 3,41±0,45 a 3,35±0,49 a 3,28±0,47 a 3,24±0,32 a 3,48±0,42 a 3 3,68±0,33 ab 3,45±0,18 b 3,59±0,10 ab 3,46±0,25 b 3,85±0,20 a 4 3,91±0,41 ab 3,93±0,33 ab 3,85±0,23 ab 3,59±0,26 b 4,06±0,20 a 5 4,40±0,32 a 4,24±0,30 a 4,25±0,48 a 3,99±0,27 a 4,34±0,30 a 6 4,77±0,50 a 4,52±0,36 ab 4,49±0,39 ab 4,21±0,09 b 4,87±0,41 a
Superscript yang berbeda pada baris yang sama menunjukan perbedaan yang signifikan (p<0,05)
Antioksidan  merupakan  zat  yang  mampu memperlambat  atau  mencegah  proses  oksidasi. Antioksidan berperan dalam membantu melindungi  struktur  sel  terutama  membran  sel dari  kerusakan  akibat  adanya  radikal  bebas. Prinsip  kerja  dari  antioksidan  dapat  dibagi menjadi  tiga  yaitu,  1)  primer:  mencegah
pembentukan  radikal  bebas  baru  dengan memutus  reaksi  berantai  dan  mengubahnya menjadi  produk  yang  lebih  stabil,  2)  sekunder: menangkap  senyawa  radikal  dan  mencegah terjadinya  reaksi  berantai,  dan  3)  tersier: memperbaiki  kerusakan  sel  dan  jaringan  yang disebabkan oleh radikal bebas.
Proses oksidasi dapat dihambat/ diperlambat  oleh  antioksidan.  Proses  oksidasi merupakan peristiwa alami yang terjadi di alam dan  dapat terjadi dimana-mana  tak  terkecuali  di dalam  tubuh.  Apabila  terjadi  reaksi  oksidasi dimana  menghasilkan  radikal  bebas  (OH-) sebagai  hasil  sampingannya  maka  tanpa  adanya antioksidan,  radikal  bebas  ini  akan  menyerang molekul-molekul  lain  disekitarnya  yang  pada akhirnya  akan  membentuk  reaksi  berantai  yang sangat  membahayakan.  Berbeda  halnya  apabila terdapat  antioksidan,  maka  radikal  bebas tersebut akan segera bereaksi dengan antioksidan membentuk molekul yang stabil dan tidak  berbahaya  sehingga  reaksi  pun  berhenti sampai disini (Halliwell dan Gutteridge, 2007).
Baker (2016) menyatakan bahwa modifikasi protein dan karbohidrat berhubungan secara  langsung  maupun  tidak  langsung  dengan motilitas  dan  fertilitas  spermatozoa.  Hasil penelitian ini membuktikan bahwa motilitas dan viabilitas spermatozoa tertinggi dicapai pada P3. Selain  sebagai  sumber  energi,  karbohidrat terutama  fruktosa  memiliki  peran  ganda  yaitu sebagai sumber energi dan berperan juga sebagai krioprotekan  ekstraseluler  bagi  spermatozoa terhadap cold shok pada suhu 3-5℃ (Arifiantini et  al .,  2009;  Yulnawati  dan  Herdis,  2009). Namun protein juga berperan sebagai komponen penyusun sel terutama membran plasma (Shen et al., 2013).

## SIMPULAN
Subtitusi  sari  buah  semangka  ke  dalam pengencer  sitrat-kuning  telur  (SKT)  dapat mempertahankan motilitas, viabilitas dan menurunkan  tingkat  abnormalitas  spermatozoa sapi  bali.    Level  substitusi  sari  buah  semangka terbaik adalah 75%.

## DAFTAR PUSTAKA
Afiati  F,  Yulnawati,  Riyadi  M,  Arifiantini  RI. 2015.  Abnormarlitas  spermatozoa  domba dengan  frekuensi  penampungan  berbeda. Prosiding. Seminar  Nasional  Masyarakat Biodiversitas Indonesia 1(4): 930-934.
Andrianto F. 2016. Pengaruh sari kulit dan buah
semangka merah (Citrullus lanatus)
sebagai bahan pengencer terhadap motilitas  dan  viabilitas  spermatozoa domba. Skripsi .    Fakultas  Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Surabaya.
Anwar  P,  Ondho  YS,  Samsudewa  D.  2014.
Pengaruh  pengencer  ekstrak  air  tebu dengan penambahan kuning telur terhadap kualitas  spermatozoa  sapi  bali. Jurnal Peternakan 11(2): 48-58.
Arifiantini  RI,  Wresdiyati  T,  Retnani  EF.  2006.
Pengujian  morfologi  spermatozoa  sapi bali (Bos sondaicus) Menggunakan
Pewarnaan  “  Williams”. J.  Indon.  Trop. Anim. Agric. 31(2): 105-110.
Arifiantini RI, Purwantara B, Yusuf TL, Sajuthi D.  2009.  Peranan  fruktosa,  rafinosa,  dan trehalosa pada kriopreservasi semen kuda.
Media Peternakan 32(3): 171-178.
Baker MA.  2016. Proteomics of post- translational  modifications of  mammalian spermatozoa. Cell  Tissue  Res .  363(1): 279-287.
Bintara S. 2011. Rasio X:Y dan kualitas sperma pada  kambing  kacang  dan  peranakan ettawa. Sains Peternakaan 9(2): 65-71. Butar-Butar  E.  2009.  Efektifitas  frekuensi exercise  terhadap  peningkatan  kualitas semen  sapi  simmental. http://repository. usu.ac.id/bitstream/1/09E00898.pdf .
Diakses pada tanggal 3 september 2020.
Coles  KE.  2007.  Investigation  into  the antioxidant  capacity  of  L-arginine  and  L- citrulline  in  relation  to  their  vascular protective properties. Dissertation. Cardiff University,  United Kingdom
Fadilah  ZN,  Isnaini  N,  Ihsan  MN.  2016. Kualitas  semen  cair  sapi  bali  selama penyimpanan  suhu  ruang  menggunakan pengencer skim milk dengan penambahan fltrat  kecambah  kacang  hijau. Jurnal Ternak Tropika 17(1): 22-30.
Feradis.  2010.  Bioteknologi  Reproduksi  pada
Ternak. Alfabeta. Bandung.
Fuerst-Waltl  B,  Schwarzenbacher  H,  Solkner  J, Perner  C.  2006.  Effects  of  age  and environmental factors on semen production  andsemen  quality  of  Austrian Simmental  bull. Animal  Reproduction Science 95(1-2): 27-37.
Garner  DL,  Hafez  ESE.  Spermatozoa  and Seminal Plasma. In: E. S. E. Hafez. (Ed),
Reproduction  in  Farm  Animals,  Lea  & Febiger, Philadelphia, 1993, pp. 165-187. Handiwirawan E, Subandriyo. 2004. Potensi dan keragaman  sumberdaya  genetik  sapi  bali.
Wartazoa 14(3): 107-114.
Halliwell  B,  Gutteridge  JMC.  2007.  Free Radicals in Biology and Medicine, 4th ed. Clarendon, Oxford. 76-77.
Ishak ABL. Identifikasi keragaman gen fsh sub- unit beta gen fsh reseptor dan gen gh pada sapi  bali  jantan  sebagai  penanda  kualitas sperma. Tesis .  Sekolah  Pascasarjana Institut Pertanian Bogor
Johnson  JT,  Lennox  JA,  Ujong  UP,  Odey  MO, Fila  WO,  Edem  PN,  Dasofunjo  K.  2013.
Comparative  vitamins  content  of  pulp, seed  and  rind  of  fresh  and  dried watermelon (Citrullus
lanatus).
International  Journal  of  Science  and Technology 2(1): 99-103.
Johnson,  LA,  Weitze  KF,  Fiser  P,  Maxwell
WMC.  2000.  Storage  of  boar  semen. Animal  Reproduction    Science 62(2000): 143-172.
Marawali  A,  Muhammad  MS,  Jalaludin.  2019. Efektivitas  suplementasi  filtrat  jambu  biji dalam  pengencer  air  kelapa-  kuning  telur terhadap  kualitas  semen  cair  sapi  bali. Jurnal Veteriner 20(1): 20-29.
Mu’nisa A. 2012. Analisis kadar likopen dan uji aktivitas  antioksidan  pada  tomat  asal Sulawesi Selatan. Jurnal Bionature 13(1): 62-66.
Nursyam.  2007.  Perkembangan  iptek  bidang reproduksi  ternak  untuk  meningkatkan produktivitas
ternak. http//:www. unlam.ac.id./journal/pdf_file. Diakses tanggal 19 Oktober 2019.
Nabilla  A,  Arifiantini  RI,  Purwantara  B.  2018.
Kualitas  semen  segar  sapi  bali  umur produktif dan
non-produktif serta
penentuan konsentrasi krioprotektan dalam pengencer Tris kuning telur. Jurnal Veteriner 19(2): 242-250.
Nabilla  A  .  2017.  Kualitas  semen  sapi  bali  dan kriopreservasinya  dalam  pengencer  Tris dan sitrat kuning telur. Tesis.
Sekolah Pascasarjana IPB, Bogor
Parera  F,  Prihatiny  Z,  Souhoka  DF,  Rizal  M.
2009.  Pemanfaatan  sari  wortel  sebagai pengencer alternatif spermatozoa epididimis sapi bali. J. Indon. Trop. Anim.
Agric. 34 (1): 50-56.
Prastowo S, Dharmawan P, Nugroho T, Bachtiar
A,  Lutojo,  Pramono  A.  2018.  Kualitas
semen  segar  sapi  bali  (Bos  javanicus) pada  kelompok  umur  yang  berbeda. Jurnal Ilmu Ternak 18(1): 1-7.
Pubiandara  S,  Suharyati  S,  Hartono  M.  2016. Pengaruh  penambahan  dosis  rafinosa dalam  pengencer  sitrat  kuning  telur terhadap  motilitas,  persentase  hidup  dan abnormalitas  spermatozoa  sapi  ongole. Jurnal  Ilmiah  Peternakan  Terpadu 4(4): 292-299.
Rizal  M.  2009.  Daya  hidup  spermatozoa epididimis  sapi  bali  yang  dipreservasi pada  suhu  3-50C  dalam  pengencer  tris dengan  konsentrasi  laktosa  yang  berbeda.
JITV 14(2): 142-149.
Rizal  M,  Herdis.  2008.  Inseminasi  Buatan  pada Domba. PT. Rineka Cipta. Jakarta Rizal  M.  2005.  Efektifitas  berbagai  konsentrasi β-Karoten  terhadap  kualitas  semen  beku domba   garut. Animal  Production 7(1): 6-13.
Sabile  S,  Toleng  AL  ,  Yusuf  M,  Firmiaty  S,
Idrus  M,  Zulkharnaim,  Nasriyanto.  2016.
Pengaruh  penambahan  ekstrak  buah mengkudu  (Morinda  citrifolia  Linn) dalam pengencer terhadapmotilitas spermatozoa  pada  semen  cair  sapi  bali. Jurnal Aves 10(2): 10-15.
Sanocka  D,    Kurpisz  M.  Reactive  oxygen species and sperm cells. 2004. Reproductive  Biology  and  Endocrinology
2{ 1-7
Savitri  FK,  Suharyati  S,  Siswanto.  2014.
Kualitas  semen  beku  sapi  bali  dengan penambahan  berbagai  dosis  vitamin  C pada  bahan  pengencer  skim  kuning  telur. J.  Ilmiah  Peternakan  Terpadu 2(3):  30- 36.
Shen  H-H,  Lithgow  T,  Martin  LL.  2013.
Reconstitutionof membran proteins
intomodel membrans: seeking
better ways toretain protein activities. Int.
J. Mol. Sci. 14: 1589-1607.
Siregar TN, Hamdan. 2004. Evaluasi daya tahan hidup  spermatozoa  kambing  peranakan ettawah dalam beberapa pengencer sederhana. Jurnal  Sain  Veteriner 22(2):
60-64.
Siahaan  EA,  Laksmi  DNDI,  Bebas  W.  2012. Efektivitas penambahan   berbagai konsentrasi  β  karoten  terhadap  motilitas dan daya hidup spermatozoa sapi bali post thawing. Indonesia  Medicus  Veterinus 1(2): 239-251.
Steel  RGD,  Torrie  JH.  1990.  Prinsip  dan
Prosedur  Statistika.  Suatu  Pendekatan Biometrik. Alih Bahasa Bambang
Sumantri.  PT.  Gramedia  Pustaka  Utama,
Jakarta.
Sunarti,  Saili  T,  Nafiu  LO.  2016.  Karakteristik spermatozoa sapi balisetelah sexing menggunakan  metode  kolom  albumin dengan  lama  waktu  sexing  yang  berbeda. JITRO 3(1): 65-76.
Suyadi,  Rachmawati  A,  Iswanto  N.  2012. Pengaruh  α-tocopherol  yang  berbeda dalam pengencer dasar tris aminomethane kuning  telur  terhadap  kualitas  semen kambing  boer  yang  disimpan  pada  suhu
5oC. Jurnal  Ilmiah  Ilmu  Peternakan
22(3): 1-8.
Syahputra TMR, Ichwan M, Sufitni. 2019. Efek jus  semangka  terhadap  jumlah  dan motilitas  Spermatozoa  tikus  wistar  yang dipapari  MSG.  Fakultas  Kedokteran. Universitas  Sumatera  Utara,  Indonesia. Heathcare: Jurnal Kesehatan 8 (2): 43-50. Toelihere  MR.  1993.  Insemnasi  Buatan  pada Ternak.  Cetakan  3.  Penerbit  Angkasa.
Bandung.
Trias PAH. 2001. Kualitas sperma danpengaruh bahan  pengencer  terhadap  dayahidup spermatozoa domba lokal. Buletin Pertanian dan Peternakan 2(3):14-20.