JiiP Volume 5 Nomor 1: 27-37, Juni 2019 Jurnal Ilmu dan Industri Peternakan pISSN 2355-0732, eISSN 2716-2222 http://journal.uin-alauddin.ac.id/index.php/jiip/index DOI https://doi.org/10.24252/jiip.v5i1.11101

## Ketahanan Bakteri Asam Laktat Asal Saluran Pencernaan Broiler Terhadap pH dan Garam Empedu
Resilience of Lactic Acid Bacteria from Broiler Gastrointestinum on pH and Bile Salt
Dian Setyawati Mansur*, Muhammad Nur Hidayat, Irmawaty Jurusan Ilmu Peternakan Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Alauddin, Makassar *Korespondensi Email: diansetyawatim@gmail.com

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  ketahanan  bakteri  asam  laktat terhadap  pH  dan  garam  empedu.  Metode  penelitian  dengan  menggunakan media  MRSA  ( Man  Ragosa  Sharpe  Agar )  dan  MRSB  ( Man  Ragosa  Sharpe  Broth ) untuk  menumbuhkan  bakteri,  yaitu  dengan  melakukan  penginkubasian  pada suhu  37 0 C  terhadap  tiap-tiap  perlakukan  yang  di  berikan.  Untuk  perhitungan jumlah  koloninya,  dilakukan  dengan  menggunakan  koloni  kounter.  Hasil  dari penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  pertumbuhan  isolat  bakteri  terhadap ketahanan pH mampu tumbuh pada medium yang telah di inkubasikan selama 48  jam.  Pada  pH  2,5  dengan  jumlah  bakteri  sebanyak  4,77  unit  log  (CFU/ml), pada pH 3 dengan jumlah bakteri 6,98 unit log (CFU/ml), pH 5  dengan jumlah bakteri  8,97  unit  log  (CFU/ml) dan  pH  7  dengan  jumlah  bakteri  7,90  unit  log (CFU/ml).  Sedangkan  pada  garam  empedu  isolat  bakteri  asam  laktat  juga mampu  tumbuh  pada medium  yang  telah  diinkubasikan  selama    48  jam.  Pada garam  empedu  1%  jumlah  bakterinya  sebanyak  7,84  unit  log  (CFU/ml), konsentrsi  garam  empedu  5%  jumlah  bakterinya  6,32  unit  log  (CFU/ml)  dan tanpa  garam  empedu  (kontrol)  jumlah  bakterinya  sebanyak  9,3  unit  log (CFU/ml)
Kata kunci : Bakteri Asam Laktat, pH,  Garam Empedu, MRSA dan MRSB.

## ABSTRACT
This study aims to determine the resistance of lactic acid bacteria to pH and bile salts. Research method using MRSA and MRSB media to grow bacteria, namely by incubating at 37 0 C for each treatment given. For the calculation of the number of colonies, it is done using a colony counter. The results of this study indicate that the growth of bacterial isolates against pH resistance can grow on incubated medium for 48 hours. At pH 2.5 with the number of bacteria was 4.77 units log (CFU/ml),  at  pH  3  with  the number  of  bacteria 6.98 units  log (CFU/ml),  pH  5 with  the  number  of  bacteria  8.97  units  log  (CFU/ml) and  pH  7  with  bacterial counts of 7.90 log units (CFU/ml). While the bile salts isolate lactic acid bacteria are also able to grow on medium that has been incubated for 48 hours. In 1% bile salts the number of bacteria is 7.84 units log (CFU/ml), the concentration of bile salt is 5% the number of bacteria is 6.32 units log (CFU/ml) and in the treatment without bile salt (control) the number of bacteria is 9, 3 log units (CFU/ml).
Keywords : Lactic Acid Bacteria, pH, Bile Salt, MRSA and MRSB.

## PENDAHULUAN
Kesadaran  masyarakat  akan  pentingnya  kesehatan  saat  ini  semakin  meningkat, sehingga  menimbulkan  implikasi  yang  luas  dalam  memilih  bahan  makanan  untuk kelangsungan  hidup.  Hal  tersebut  mendorong  berkembangnya  riset-riset  mengenai makanan dan minuman yang mempunyai efek menyehatkan, termasuk pangan fungsional yang berasal  dari  ternak. Bioproduk atau makanan yang mengandung probiotik tergolong kedalam  pangan  fungsional  karena  selain  mengenyangkan,  berpotensi  pula  meningkatkan fungsi  fisiologis  usus  dengan  memodifikasi  mikroflora  usus.  Makanan  yang  mengandung probiotik  selain  mempunyai  nilai  nutrisi  yang  baik,  dianggap  pula  memberi  manfaat kesehatan dan terapeutik serta bisa dijadikan sebagai  pengganti  antibiotik untuk menekan pertumbuhan bakteri pathogen.
Bakteri asam laktat merupakan jenis bakteri yang mampu menghasilkan asam laktat, hydrogen  peroksida,  antimikroba  dan  hasil  metabolisme  lain  yang  memberikan  pengaruh positif bagi tubuh. Bakteri asam laktat diisolasi untuk menghasilkan antimikroba yang dapat digunakan  sebagai  probiotik.  Bakteri  ini  berbentuk  batang  atau  kokus  yang  mempunyai karatkeristik gram positif, tidak membentuk spora, tidak motil, tidak membentuk pigmen, katalase dan asam laktat sebagai senyawa utama hasil fermentasi karbohidrat.Secara umum bakteri  ini  menghendaki  senyawa  nutrisi  yang  kompak  dan  pertumbuhannya  distimulasi oleh suasana anaerob dan mikroaerofil (Kuswanto dan Sudarmadji, 1989).
Probiotik  merupakan  suplemen  pangan  yang  berasal  dari  mikroba  hidup  yang menguntungkan kesehatan inangnya dengan cara memperbaiki komposisi mikrobiota usus. Bakteri  asam  laktat,  khususnya  yang  bersifat  sebagai  prebiotik,  banyak digunakan  sebagai suplemen  pangan  dengan  berbagai  manfaat  bagi  kesehatan.  Bakteri  ini,  khususnya  dari golongan Lactobacillus dan Bifidobacteria memiliki  banyak  efek  positif  seperti  aktivitas antimikroba, aktivitas antikolesterol, efek stimulasi system imun, meningkatkan penyerapan laktosa oleh tubuh, mencegah diare serta aktivitas antimutagenik  sehingga dapat mencegah penyakit kanker khususnya kanker usus (Susanti dkk., 2007).
Bakteri  probiotik  merupakan  mikroorganisme  non  patogen,  yang  jika  di  konsumsi memberikan pengaruh positif terhadap fisiologi dan kesehatan inangnya, Senyawa-senyawa racun  yang  dihasilkan  dari  metabolisme  protein  dan  lemak,  serta  hasil  pemecahan  enzim tertentu  menjadi  semakin  berkurang bila  bakteri  probiotik  mulai  menjalankan  peranannya dalam meningkatkan kesehatan.Probiotik merupakan salah satu alternatif pakan tambahan
pada  ternak  yang  sehat  dan  aman  bagi  lingkungan.  Selain  itu  mikroba  prebiotik  mampu memproduksi  substansi  berguna,  dapat  menurunkan  populasi  mikroba  patogen, meningkatkan kesehatan dan daya imunitas ternak (Sjofjan, 2003).
Ada  beberapa  karateristik  yang  harus  dipertimbangkan  untuk  menentukan  apakah suatu  mikroba  berpotensi  untuk  menjadi  kultur  probiotik.  Diantaranya  adalah  ketahanan terhadap  asam  dan  garam  empedu,  sebab  untuk  dapat  bertahan  dan  tumbuh  didalam saluran pencernaan, kultur probiotik harus melewati beberapa rintangan seperti keasaman lambung yang tinggi dan sekresi garam empedu pada usus yang dapat berpengaruh buruk pada  kultur  mikroba.  Disamping  itu  bakteri  tersebut  juga  harus  mampu  bersaing  dengan bakteri enterik patogen dalam saluran pencernaan (Purwohadisantoso, 2008).

## MATERI DAN METODE
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  alcohol  70%,  aluminium  foil, aquades, BPW, garam empedu, HCl 100%, isolate bakteri asam laktat, kapas, karet, medium selektif MRSA (Man Ragosa Sharpe  Agar) , medium selektif MRSB (Man RagosaSharpe  Broth) , kapas, plastik dan tissu.

## Prosedur kerja
Prosedur kerja yang akan dilakukan pada penelitian ini adalah sebagai berikut :

## 1. Tahap Persiapan
1.1 Sterilisasi Alat dan Medium
a. Alat-alat  gelas  berupa  tabung  reaksi  dan  cawan  petri  disterilkan  dengan sterilisasi panas basah pada autoklaf. Sterilisasi ini dilakukan selama 15 menit dalam temperatur 121 0 C dan tekanan 2 atm.
b. Jarum  ose  disterilkan  dengan  sterilisasi  panas  kering  dalam nyala  api  bunsen sampai merah membara.
c. Medium dan alat non-gelas yang digunakan terlebih dahulu disterilkan dengan sterilisasi  panas  basah  yaitu  dengan  menggunakan  autoklaf.  Sterilisasi  ini dilakukan selama 15 menit dalam temperatur 121 0 C dan tekanan 2 atm.
1.2 Pembuatan Medium MRSA dan MRSB
a. MRSA
Sebanyak  34,1  gram  medium  MRSA  dilarutkan  ke  dalam  500  ml  aquades. Kemudian  dipanaskan  sambil  diaduk  sampai  homogen.  Lalu  mulut  masing-
masing  Erlenmeyer  ditutup  dengan  menggunakan  aluminium  foil  lalu disterilkan dalam autoklaf dengan suhu 121 0 C selama 15 menit.
b. MRSB
Sebanyak  32,6  gram  medium  MRSB  dilarutkan  ke  dalam  500  ml  akuades. Kemudian  dipanaskan  sambil  diaduk  sampai  homogen.  Lalu  mulut  masing- masing  Erlenmeyer  ditutup  dengan  menggunakan  aluminium  foil  lalu disterilkan  dalam  autoklaf  dengan  suhu  121 0 C  selama  15  menit.  Selanjutnya larutan dibagi ke dalam 55 buah tabung reaksi masing-masing sebanyak 9 ml.

## 1.3 Pembuatan BPW
Sebanyak  12,5  gram  medium  BPW  dilarutkan  ke  dalam  650  ml  aquades kemudian  dipanaskan  sambil  diaduk  sampai  homogeny.  Lalu  mulut  masing- masing Erlenmeyer ditutup menggunakan aluminium foil lalu disterilkan dalam autoklaf dengan suhu 121 0 C selama 15 menit.

## 2. Tahap Pelaksanaan

## 1.1 Pengujian  Ketahanan Terhadap pH
Sebelum  dilakukan  pengujian,  kultur  sebelumnya  diremajakan  dengan  cara mengambil  1  ml  kemudian  di  tanam  pada  medium  MRSB  lalu  diinkubasikan selama  24  jam.  Selanjutnya  mengambil  4  tabung  reaksi  yang  berisi  9  ml  MRSB, yang  telah  ditambahkan  HCl  100%  untuk  mendapatkan  pH  yang  diinginkan. Lalu  mengambil  masing-masing  1  ml  isolat  bakteri  asam  laktat  kemudian  di masukkan ke dalam 4 tabung yang berisi 9 ml MRSB dan selanjutnya di inkubasi pada suhu 37 0 C selama 48 jam.
1.2 Pengujian Ketahanan Terhadap Garam Empedu
Sebelum  dilakukan  pengujian,  kultur  sebelumnya  diremajakan  dengan  cara mengambil  1  mL  kemudian  di  tanam  pada  medium  MRSB  lalu  diinkubasikan selama  24  jam.  Selanjutnya  mengambil  4  tabung  reaksi  yang berisi  9  mL  MRSB yang  telah  ditambahkan  garam  empedu  1%  dan  5%.  Lalu  mengambil  masing- masing 1 mL isolat bakteri asam laktat kemudian di masukkan ke dalam 4 tabung yang berisi 9 mL MRSB kemudian di inkubasi pada suhu 37 0 C selama 48 jam.
1.3 Seleksi Media Agar
a. Memipet sebanyak 1 ml sampel
b. Memasukkan ke dalam cawan petri yang berisi 20 ml MRSA
c. Menghomogenkan dengan kecepatan sedang selama 1-2 menit
d. Menginkubasikan pada temperature 37 0 C selama 48 jam
1.4 Pewarnaan Gram
a. Mengambil  isolat  pada  medium  MRSA  menggunakan  ose  kemudian diletakkan pada objek glass lalu difiksasi.
b. Memberi kristal violet sebanyak 2 tetes kemudian didiamkan selama 1 menit, lalu dibilas menggunakan akuades.
c. Memberi  lugol  sebanyak  2  tetes  kemudian  didiamkan  selama  1  menit,  lalu dibilas menggunakan akuades.
d. Memberi alkohol 95% sebanyak 2 tetes kemudian didiamkan selama 1 menit, lalu dibilas menggunakan akuades.
e. Memberi safranin sebanyak 2 tetes kemudian didiamkan selama 1 menit, lalu dibilas menggunakan akuades.
f. Memberi imersion oil, lalu diamatai di bawah mikroskop dengan perbesaran 100X
1.5 Perhitungan Jumlah Bakteri yang Tumbuh
Ketahanan isolate bakteri asam laktat terhadap pH dan garam empedu  dihitung berdasarkan selisih unit log jumlah koloni yang tumbuh setelah 48 jam pada pH 2.5, pH 3, pH 5, pH 7 serta pada garam empedu 1% dan 5 % terhadap unit log jumlah koloni.
Rumus perhitungan jumlah mikroba:

## Analisis Data
Analisis  data yang digunakan dalam penelitian ini  adalah analisis deskriptif antara lain  dengan  melihat  hasil  uji  probiotik  (suhu)  isolat  bakteri  asam  laktat  asal  saluran pencernaan broiler. Isolasi bakteri dimana seluruh data diperoleh dari seluruh pengamatan (positif  atau  negatif)  yang  ditunjukkan  pada  beberapa  indikator  uji  yang  telah  dilakukan yakni, pengumpulan data dan pengamatan secara langsung dan dengan cara dokumentasi untuk dijadikan hasil bukti penelitian.
Populasi BAL (CFU/mL) = Jumlah koloni X Pengenceran

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengamatan Morfologi Pewarnaan Gram Menggunakan Mikroskop
Berdasarkan  hasil  pewarnaan  Gram  isolat  bakteri  yang  diuji  dalam  penelitian  ini memiliki  bentuk  batang  dan  bersifat  Gram    positif.  Hal  ini  ditandai  dengan  terbentuknya warna  ungu  pada  sel  bakteri  yang  menandakan  termasuk  Gram  positif,  sedangkan  Gram negatif  ditandai  dengan  terbentuknya  warna  merah  pada  sel  bakteri.  Bakteri  Gram  positif dapat  mempertahankan  warna  ungu  disebabkan  ketika  ditetesi  alkohol  95%  dinding  sel mengalami  dehidrasi  sehingga  menyebabkan  ukuran  pori-pori  sel  menjadi  kecil  dan  daya permetabilitasnya berkurang sehingga zat pewarna kristal violet tidak dapat keluar dari sel dan  sel  akan  tetap  berwarna  ungu.  Pemberian  pewarna  tandingan  berupa  safranin  yang berwarna  merah  tidak  akan  berpengaruh  karena  tidak  masuk  ke  dalam  dinding  sel. Sebaliknya bakteri Gram negatif tidak mampu mempertahankan warna kristal violet karena pada  saat  dibilas  dengan  alkohol  95%,  lipid  dari  dinding  sel  terekstrasi,  pori-pori  sel mengembang sehingga zat pewarna kristal violet keluar dari sel dan membuat sel jadi tidak berwarna.
Prinsip pewarnaan Gram adalah kemampuan dinding sel mengikat zat warna dasar (Kristal  violet)  setelah  pencucian  dengan  alkohol  95%.  Keadaan  ini  berhubungan  dengan komposisi  senyawa  penyusun  dinding  sel.  Pada  bakteri  Gram  positif  mengandung peptidoglikan  lebih  banyak  dan  lemak  lebih  sedikit  dibandingkan  bakteri  Gram  negatif (Syulasmi dkk., 2005).
Berdasarkan  pengujian  fermentasi  gula  yang  dilakukan  sebelumnya  isolat  yang digunakan  adalah  jenis  bakteri Lactobacillus sp.  Menurut  Ray  (2001),  menyatakan  bahwa Lactobacillus sp. memiliki ciri-ciri yaitu selnya berbentuk batang dengan ukuran dan bentuk yang  sangat  seragam,  beberapa  bias  sangat  panjang  dan  beberapa  lainnya  bersifat  batang bulat.

## Pengujian Isolat Bakteri Asam Laktat Terhadap Keasaman (pH)
Berdasarkan  hasil  penelitian  dengan  melakukan  uji  isolat  bakteri  terhadap  kadar keasaman. Hasil pengujian tersebut dapat di lihat bahwa pada 24-48 jam isolat bakteri asam laktat menunjukkan pertumbuhan pada semua media yang di ujikan, yaitu pH 2.5, pH 3 dan pH 5.
Gambar  2.  Grafik  Pertumbuhan  Koloni  Bakteri  Asam  Laktat terhadap Kadar Keasaman (pH)
Berdasarkan  Uji  probiotik  terhadap  ketahanan  asam  (pH)  dilakukan  dengan menggunakan  medium  MRSB  yang  ditambahkan  HCl  100  N  untuk  mendapatkan  pH  2.5, pH  3  dan  pH  5.  Pengujian  dilakukan  dengan  menumbuhkan  isolat  bakteri  asam  laktat tersebut  pada  media  yang  telah  di  buat  selama  48  jam  di  dalam  inkubator  bersuhu  37 0 C. Hasil  dari  pengujian  tersebut  dapat  di  lihat  bahwa  pada  48  jam  isolat  bakteri  asam  laktat menunjukkan  pertumbuhan  pada  pH  2.5,  pH  3  dan  pH  5  yang  dapat  di  lihat  dari  warna media yang berubah menjadi keruh dan terdapat endapan.
Berdasarkan perhitungan unit Log terhadap ketahanan asam (pH) dilakukan dengan menggunakan medium MRSA dengan metode yang digunakan, yaitu cawan tuang dengan menambahkan  masing-masing  1  ml  isolat  bakteri  asam  laktat  bedasarkan  pH  perlakuan yaitu pH 2.5, pH 3, pH 5 dan pH 7 sebagai kontrol lalu menambahan 20 ml MRSA kedalam cawan lalu di homogenkan. Pengujian dilakukan dengan menumbuhkan isolat bakteri asam laktat  tersebut  pada  media  yang  telah  di  buat  selama  48  jam  di  dalam  inkubator  bersuhu 37 0 C.  Hasil  dari  pengujian  tersebut  dapat  di  lihat  bahwa  pada  48  jam  isolat  bakteri  asam laktat menunjukkan pertumbuhan pada masing-masing cawan. Pada pH 2,5 jumlah bakteri sebanyak 4,77 unit log (CFU/ml), pH 3 jumlah bakteri sebanyak 6.98 unit log (CFU/ml), pH 5 jumlah bakteri sebanyak 8.97 unit log (CFU/ml), pH 7 jumlah bakteri sebanyak 7.90 unit log (CFU/ml).
Pengaruh  pH  terhadap  pertumbuhan  bakteri  ini  dapat  di  lihat  dari  adanya pertumbuhan pada tiap-tiap perlakukan pH, yaitu dilihat dari jumlah selisih unit log. Secara umum,  isolate  bakteri  asam  laktat  pada  pH  2.5  pertumbuhan  jumlah  koloni  yang  paling
4,77 6,98 8,97 7,9 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 pH 2.5 pH 3 pH 5 pH  7 Pe rt um buha n Uni t Log (c fu/m l) Perlakuan Uji
sedikit yaitu 4.77 unit log (CFU/ml), pada pH 3 mengalami peningkatan jumlah koloni yaitu sekitar  6.98  unit  log  (CFU/ml),  pertumbuhan  koloni  paling  optimum  terdapat  pada  pH  5 yaitu  sebanyak  8.97  unit  log  (CFU/ml).  sedangkan  pada  pH  7  terjadi  penurunan,  yaitu sekitar 7.90 unit log (CFU/ml). Menurut Jacobsen et al ., (1999), semua bakteri yang berhasil bertahan pada kondisi pH dinyatakan bersifat tahan atau resisten terhadap asam.
Pertumbuhan paling optimum terlihat pada pH 5 yang memiliki ketahanan terhadap pH  asam  yang  lebih  baik  di  banding  dengan  isolat  pada  pH  lainnya  yang  di  tunjukkan dengan  pertumbuhan  yang  paling  banyak  yaitu  8.97  unit  log  (CFU/ml).  namun    semua isolate mampu hidup pada pH 2.5, pH 3 pH 5 dan pH 7 sehingga masih terdapat sel yang lolos  hidup  pada  saat  melewati  lambung  dan  usus  halus  bila  di  berikan  bersama-sama dengan  pakan,  karena  pH  saluran  pencernaan  lambung  berkisar  2,5  dan  pH  usus  halus berkisar 3-5.
Berdasarkan  hasil  pengujian  isolat  bakteri  probiotik  mampu  tumbuh  pada  pH  2,5 dan usus halus 3-5. Hal ini membuktikan isolat BAL tersebut mampu untuk melewati asam lambung  sehingga  dapat  dimanfaatkan  sebagai  bakteri  probiotik.  pH  medium  biakan mempengaruhi kecepatan pertumbuhan, untuk pertumbuhan bakteri juga terdapat rentang pH  dan  pH  optimal.  Meskipun  medium  pada  awalnya  dikondisikan  dengan  pH  yang dibutuhkan  untuk  pertumbuhan,  tetapi  secara  bertahap  pertumbuhan  akan  dibatasi  oleh produk metabolit yang dihasilkan oleh mikroorganisme tersebut (Djide dan Wahyudi, 2008).

## Pengujian Isolat Bakteri Asam Laktat Terhadap Garam Empedu
Berdasarkan Uji probiotik terhadap garam empedu dilakukan dengan menggunakan medium MRSB yang ditambahkan garam empedu 1% dan 5%. Pengujian dilakukan dengan menumbuhkan isolat bakteri asam laktat tersebut pada media yang telah di buat selama 48 jam  di  dalam  inkubator  bersuhu  37 0 C.  Hasil  dari  pengujian  tersebut  dapat  dilihat  bahwa pada 48 jam, isolat bakteri asam laktat menunjukkan pertumbuhan pada garam empedu 1% dan 5% yang ditandai warna media yang berubah menjadi keruh dan terdapat endapan.
Berdasarkan  perhitungan  unit  Log  terhadap  garam  empedu  dilakukan  dengan menggunakan  medium  MRSA  dengan  metode  cawan  tuang,  menunjukkan  bahwa  pada inkubasi 48 jam, isolat bakteri asam laktat menunjukkan pertumbuhan pada masing-masing cawan. Pada garam empedu 1% jumlah bakterinya sebanyak 7.84 unit log (cfu/ml), garam
empedu 5% jumlah bakterinya sebanyak 6.32 unit log (cfu/ml), sedangkan pada perlakuan tanpa garam empedu (kontrol) jumlah bakterinya sebanyak 9.3 unit log (cfu/ml).
Gambar  4.  Grafik  Pertumbuhan  Koloni  Bakteri  Asam  Laktat terhadap Kadar Garam Emepdu
Hasil  pengujian  ketahanan  isolat  terhadap  konsetrasi  garam  empedu  1% memperlihatkan pertumbuhan bakterinya lebih banyak di  bandingkan dengan konsentrasi 5%. Banyaknya pertumbuhan pada konsentrasi 1% ini di sebabkan karena konsetrasi garam empedunya  tidak  terlalu  tinggi.  Sedangkan  pada  konsentrsi  5%  mengalami  penurunan karena  garam  empedu  yang  di  berikan  terlalu  banyak.  Semakin  tinggi  konsentrasi  garam empedu,  maka  jumlah  sel  mikroba  yang  mati  juga  akan  meningkat.  Hal  ini  disebabkan peningkatan  aktivitas  enzim  intraseluler  dari  bakteri  terhadap  garam  empedu,  sehingga meningkatkan  permeabilitas  membrane  sel  (Wijayanto,  2009).  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Menurut  Zavaglia et  al .,  (1998),  yang  menyatakan  konsentrasi  gram  empedu  3% merupakan  konsentrasi  yang  cukup  tinggi  untuk  menyeleksi  galur  yang  resisten  terhadap garam empedu.
Mikroba yang berhasil hidup setelah ditumbuhkan dalam MRSA yang ditambah 1% dan  5%  garam  empedu,  dinyatakan  bersifat  tahan  terhadap  garam  empedu.  Hal  ini mengindikasikan  bahwa  isolat  bakteri  asam  laktat  dari  saluran  pencernaan  broiler  ini berpotensi  untuk  dikembangkan  sebagai  probiotik.  Menurut  Hidayat et  al., (2018),  bahwa kemampuan bakteri untuk dapat bertahan pada kondisi garam empedu yang diuji secara in
9,3 7,84 6,32 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 kontrol 0% garam empedu 1% garam empedu 5% Pe rt u m b u h a n U n it L o g (CF U /m l) Perlakuan Uji
vitro dapat  dikatakan  memiliki  kemampuan  untuk  melewati  bagian  saluran  pencernaan, khususnya pada bagian duodenum pada unggas.
Mekanisme  penghambatan  garam  empedu  terhadap  pertumbuhan  bakteri disebabkan  karena  garam  empedu  memiliki  struktuk  amphipatik  sehingga  mampu melarutkan atau memecah semua substansi sel yang mengandung lipid. Dinding sel bakteri dan  membran sel  bakteri  mengandung lipid sehingga masuknya garam empedu ke dalam dinding  sel  dan  membran  sel  akan  menyebabkan  dinding  sel  dan  membran  sel  menjadi rusak  dan  kehilangan  fungsinya  sebagai  pelindung  bakteri  dan  filter.  Apabila  bakteri mengalami  kerusakan  atau  kehilangan  fungsi  pada  dinding  selnya,  maka  akan mengakibatkan  bakteri  cenderung  tidak  mampu  bertahan  terhadap  tekanan  osmotik sehingga menyebabkan terjadinya lisis atau pengeluaran isi sel yang berakibat kematian sel (Hill, 1995; Mourad and Eddine, 2006).

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan hasil penelitian diperoleh bahwa isolat bakteri asam laktat asal saluran pencernaan  broiler  itu  dapat  di  manfaatkan  sebagai  probiotik.  Bakteri  tersebut  mampu tumbuh  pada  kondisi  pH  dan  konsentrasi  garam  empedu  yang  berbeda.  Bedasarkan  hal tersebut,  maka  bakteri  asam  laktat  yang  di  peroleh  dari  saluran  pencernaan  broiler  yang paling  baik  manfaatkan  sebagai  kandidat  probiotik  yaitu  pada  pH  5,  karena  pada  pH  ini bakteri  paling  optimum  tumbuh  yaitu  sebanyak  8.97  unit  log  (CFU/ml).  Sedangkan  pada garam  empedu  itu  paling  optimum  di  konsentrasi  1%  yaitu  sebanyak  7.84  unit  log (CFU/ml).

## DAFTAR PUSTAKA
Djide,  M.  N.,  dan  Wahyudin  E.  2008.  Isolasi  bakteri  asam  laktat  dari  air  susu  ibu,  dan potensinya  dalam  menurunkan  kadar  kolesterol  secara  in  vitro. Majalah  Farmasi  dan Farmakologi.
Hidayat,  M.N.,  Malaka,  R.,  Agustina,  L.,  and  Pakiding,  W.  2018. International  Journal  of Scientific & Engineering Research 9 (2), 1787-1794. Hill, M. J. 2006. Role of Gut Bacteria in Human Toxicology and Pharmacology . Taylor, New York. Jacobsen, C. N., Nielsen, V.R., Hayford, A.E., Moller, P.L., Michaelsen, K.F., Erregard, A.P., B. Sandstrom, B., Tvede, M.,  and Jakobsen, M. 1999. Screening of probiotic activities of forty  seven  strains  of Lactobacillus spp.  by  in  vitro  techniques  and  evaluation  of  the colonization  ability  of  five  selected  strains  in  human. Journal  Applied  Environmental Microbiology , 65 (11), 4949-4956. Kuswanto,  R.  K.,  dan  Sudarmadji,  S.  1989. Mikrobiologi  Pangan .  Universitas  Gajah  Mada, Yogyakarta.
Purwohadisantoso  K.  2008.  Isolasi  bakteri  asam  laktat  dari  sayur  kubis  yang  memiliki kemampuan  penghambatan  terhadap  bakteri  patogen. Skripsi .  Fakultas  Teknologi Pertanian. Universitas Brawijaya Malang.
Ray B. 2001. Fundamental Food Microbiology . Ed-2. CRC Press, New York. Sjofjan,  O.  2003.  Kajian  probiotik  AB  ( Aspergillu ssp.  dan Bacillus ssp.)  sebagai  imbuhan ransum  dan  implikasi  efeknya  terhadap  mikroflora  usus  serta  penampilan  produksi ayam petelur. Disertasi .Program Pascasarjana. Universitas Padjadjaran,Bandung. Susanti,  I.,  Retno,  W  K.,  dan  Fatim  I.  2007.  Uji  sifat  probiotik  bakteri  asam  laktat  sebagai kandidat bahan pangan fungsional. Jurnal Teknologi dan Industri Pangan, 13 (2). Syulasmi,  A.,  Hamdiyati,  Y.,  dan  Kusnadi.  2005. Petunjuk  Praktikum  Mikrobiologi .  Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Wijayanto  U.  2009.  Analisis  in  vitro  toleransi  isolat  bakteri  asam  laktat  asal  daging  sapi terhadap  pH  lambung,  pH  usus  dan  garam  empedu  sebagai  kandidat  probiotik. Skripsi . Fakultas Peternakan. Institut Pertanian Bogor, Bogor. Zavaglia, A. G., G. Kociubinski., G., and Antoni G. D. 1998. Isolation and characterization of Bifidobacterium strains for probiotic formulation. Journal Food Protection, 61 (7), 865-873.