## GAMBARAN HISTOPATOLOGI RADANG EKSTRAK DAUN JINTAN (COLEUS AMBONICUS) TERHADAP INDUKSI URIC ACID DAN OXONIC ACID PADA
TIKUS PUTIH WISTAR (RATTUS NORVEGICUS)
Rondius Solfaine
Laboratorium Patologi Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Wijaya Kusuma Surabaya

## ABSTRAK
Tujuan penelitian ini adalah menganalisis daya anti radang ekstrak daun jintan ( coleus amboinicus ) yang diinduksi nephropathy akut. Ekstrak daun jintan diperoleh dari daun jintan ( Coleus  amboinicus )  segar  yang  diekstraksi  dengan  metode  maserasi  etanol  96  %  dan dianalisis  secara  kualitatif    dengan  metode  kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  untuk mengidentifikasi  senyawa  aktif  yang  terkandung  di  dalamnya.  Aktivitas  ekstrak  daun  jintan sebagai  anti  radang  dilakukan  dengan  pemberian  secara  intraperitoneal  ekstrak  daun  jintan ( Coleus amboinicus ) pada tikus putih galur Wistar terhadap induksi granuloma fibrosis pada tubulus  ginjal  yang  diinduksi  dengan  senyawa Oxonic  Acid dan Uric  Acid (OA  &  UA). Pembentukan granuloma  fibrosis diidentifikasi  sebagai  nephropahty  akut  dengan  teknik sediaan histopatologi pengecatan Haematoxilin & Eosin (HE). Hasil penelitian menunjukkan bahwa  ekstrak  daun  Jintan  (coleus  ambonicus)  mempunyai  kandungan  kualitatif  kumarin, saponin, minyak atsiri dan polifenol dengan teknik Kromatografi lapis Tipis (KLT). Induksi intra  peritoneal Oxonic  Acid dan Uric  Acid menyebabkan  perubahan  makroskopis  berupa deposisi  kristal  urea    intraperitoneal  dan  keradangan  pada  sendi  metatarsal.  Secara histopatologis  induksi  OA  &  UA  menimbulkan  nephropathy  akut  yang  ditandai  dengan adanya  lesi  degenerasi,  keradangan  dan  nekrosis  pada  tubulus  dan  glomerulus  ginjal  pada kelompok perlakuan. Pemberian ekstrak daun Jintan pada kelompok perlakuan menghambat terjadinya  pembentukan  nephropathy  akut  secara  nyata  (P<0.05)  dibandingkan  kontrol  dan kelompok induksi.
Kata Kunci : Ekstrak daun jintan ( Coleus amboinicus ), nephropathy ,Oxonic Acid , Uric Acid .), Haematoxilin & Eosin (HE).

## BAB I. PENDAHULUAN
Penyakit  gagal  ginjal  akut  merupakan  salah  satu  penyebab  penyakit  gagal  ginjal permanen yang disebabkan keracunan, iskemia, sepsis pasca operasi, kemoterapi, pemakaian obat-obatan  dalam  jangka  lama  dan  deposisi  kristal  urea  dalam  tubulus  ginjal  Pada penimbunan  kristal  urea  merupakaan  penyebab  utama  dalam  penyakit  gout  artritis  (GA) (Terkeltaub et  al ,  2004  dan  Ejaz et  al ,2009).  Penyakit  ini  terkait  dengan  konsentrasi Monosodium  Urea  darah  yang  tinggi  (hiperuresemia)  sangat  berisiko  mengalami  penyakit ginjal akut maupun kronis. Pada penderita dengan kegagalan ginjal akut (nephropathy akut) yang diakibatkan oleh adanya penimbunan urea secara berlebih yang membentuk kristal urea dalam tubulus ginjal. Kegagalan ginjal ini disebabkan adanya sumbatan atau obstruksi kristal asam  urat  dalam tubulus  ginjal,  hal  tersebut  dapat  terjadi pada pasien  yang mengalami  gout arthritis (Kim et al , 2000).
Pengendapan  kristal  urea  di  persendian  akan  menyebabkan  keradangan  akut  yang bersifat  kambuhan.  Apabila  tidak  diobati  maka  dapat  menimbulkan  keradangan  kronis (arthropathy gout kronis), deposisi kristal urea berbentuk tophi (tophi gout) dan menyebabkan kerusakan  struktural  persendian.  Pada  kasus  yang  melanjut  berupa  polyarthritis  yang  kronis maka akan mempengaruhi jaringan lain, seperti ginjal (nefropati asam urat dan nefrolitiasis), juxta-artikular, gangguan jantung dan jaringan subkutan. Pada kejadian GA akut gejala yang mudah diamati berupa rasa sakit pada persendiaan  yang bersifat  mengganggu dan membuat penderita  malas  bergerak  sehingga  membutuhkan  pengobatan  yang  cepat  untuk mengendalikan rasa nyeri dan peradangan (Silva et al , 2010).
Prevalensi gout (GA) tercatat cukup tinggi dewasa ini, penyakit ini diketahui sebagai penyebab  paling  utama  keradangan  sendi  di  negara-negara  industri.  Kejadian  penyakit  GA
tersebut  berkaitan  dengan  umur,  kebiasaan  diet,  peningkatan  konsumsi  makanan,  obesitas, konsumsi alkohol dan penggunaan obat yang dapat meningkatkan kadar asam urea darah atau monosodium urea (MSU) (Primatesta et al , 2011). Prevalensi gout arthritis terjadi pada usia yang lebih muda, sekitar 32% pada pria berusia kurang dari 34 tahun. Prevalensi gout arthritis di  Bandungan  Jawa  Tengah  pada  kelompok  usia  15-45  tahun  sebesar  0,8%;  meliputi  pria 1,7% dan wanita 0,05%. Di Minahasa (2003), proporsi kejadian gout arthritis sebesar 29,2% dan  pada  etnik  tertentu  di  Ujung  Pandang  sekitar  50%.  Penderita  rata-rata  telah  menderita gout 6,5 tahun atau lebih setelah keadaan menjadi lebih parah (Kodim,2010).
Salah  satu  tumbuhan  herbal  yang  sudah  lama  dikenal  masyarakat  adalah  tanaman Jintan ( Coleus amboinicus ), dikenal masyarakat sebagai pohon Bangun-bangun, mempunyai lama  hidup  sekitar  3-10  tahun.  Tumbuhan  ini  banyak  terdapat  di  Afrika  Tropis,  Asia, Australia  dan  telah  lama  digunakan  secara  tradisional  sebagai  makanan,  aditif  pakan  ternak dan  terutama  sebagai  obat  berbagai  macam  penyakit  (Anonim,  2011).  Menurut  penelitian komposisi kimia dari jintan ( Plectranthus  Amboinicus )  dalam bentuk  ekstrak air  terdiri atas Δ-3-carene,  γ-terpinene,  kamper  dan  carvacrol  Selama  ini  masyarakat  menggunakan  secara tradisional  rebusan  daun  jintan  ( Plectranthus  Amboinicus )  untuk  pengobatan  asma,  batuk, perut  kembung,  demam  tinggi,  luka  atau  borok,  sakit  kepala,  epilepsi  dan  sariawan  (Ming Chang et al , 2010).
Penggunaan  obat  berbahan  alami  banyak  menjadi  pilihan  masyarakat  dewasa  ini. Bahan tanaman obat digunakan secara tradisional sebagai jamu, baik dipakai secara tunggal ataupun secara kombinasi untuk pengobatan berbagai penyakit.  Dengan mempertimbangkan khasiat,  efek  samping  dan  keterjangkauan  harga  sediaan,  maka  obat  berbahan  alam  sangat tepat  untuk  dikembangkan  sebagai  obat  alami  modern  (obat  herbal  terstandar).  Kajian mengenai tanaman tradisional yang mempunyai efek farmakologis sudah sampai pada tingkat molekuler.
Penyakit  kegagalan  ginjal  yang  terkait  dengan  timbunan  monosodium  urea  yang terjadi secara kronis. Pada saat tubuh mengalami hiperuresemia akan menyebabkan penyakit pirai  (gout)  dan  berlanjut  menjadi    gagal  ginjal  (nepropathy).Pada  prinsipnya  pengobatan gout  dengan  tiga  jenis  terapi,  yaitu  pilihan  pertama  dengan  obat  anti  inflamasi  non  steroid, yang kedua pengobatan  dengan steroid dan ketiga dengan obat  oral  kolkisin  (Cronstein and Terkeltaub,  2006,  Varughese  and  Varghese,  2006).  Penggunaan  obat-obat  antiinflamasi mempunyai kelemahan dalam penggunaan jangka panjang dapat merusak ginjal dan hati dan hanya  penyembuhan  terhadap  gejala  (terapi  simtomatik).  Pengobatan  penyakit  autoimun artritis  yang  sedang  dikembangkan  dewasa  ini  berbasis  anti  sitokin  yaitu  terhadap  blokade kemokin  (Haringman  and  Tak,  2004),  inhibisi  pelepasan  IL-1β  (So  et  al,  2007)    dan penghambatan  pelepasan  TNF-α  (Leandro,  2009.,  Verweij,  2009.,  Inoue  et  al,  2009). Pengobatan tersebut  bersifat simtomatik sedangkan untuk penghilang penyebab utama belum dapat  distandarkan  (Kertia  et  al,  2005).  Obat  pilihan  pertama  penyakit  GA  saat  ini  adalah obat  non  steroid  anti  inflamasi  seperti  indometasin.  Mekanisme  kerja  obat  non  steroid antiinflamasi  dengan  memblokade  pembentukan  leukotrien  dan  prostaglandin  dalam  proses inflamasi (Steinmeyer, 2000).
Penelitian ini bertujuan menganalisis daya antiradang daun Jintan ( Coleus ambonicus ) terhadap  induksi  nephropathy  akut  pada  tikus  putih.  Sejauh  ini,  penelitian  menggunakan ekstrak  daun  jintan  sebagai  anti  penghambatan  neutrofil,  anti  radang  dan  antioksidan  sudah pernah  dilakukan,  sedangkan  penelitian  untuk  mengkaji  efek  daun  jintan  terhadap  induksi nephropathy  akut  belum  pernah  dilakukan,  penelitian  ini  sebagai  pengembangan  penelitian sejenis.

## BAB III. METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  murni  yang  dilakukan  di laboratorium dengan menggunakan tikus putih sebagai hewan percobaan.. Desain penelitian adalah Randomized Posttest Control Group Design dengan pemberian secara Single Blind.

## Pengadaan Bahan Uji
Daun  jintan  diperoleh  dari  pasar  tanaman  dan  bunga  Bratang  Surabaya.  Daun  jintan dibuat  menjadi  ekstrak  dengan  etanol  96  %  seperti  yang  tercantum  pada  Farmakope Indonesia,  (1972),  cit.  Silitonga,  (1993).  Daun  dicuci  terlebih  dahulu,  kemudian  diangin- anginkan  selama  satu  malam.  Daun  segar  ini  ditimbang,  kemudian  diiris  tipis-tipis, dipanaskan, disaring dan diukur volumenya. Dosis ekstrak daun jintan untuk tikus ditentukan berdasar konsumsi harian manusia yaitu 210 g/70 Kg BB, kemudian dikonversikan ke tikus. Konversi  dosis  dilakukan  dengan  melihat  tabel  konversi,  yaitu  ditentukan  pada  berat  badan manusia 70 . Kg dan tikus 200 . g yaitu 19 g/Kg BB tikus (Marganingsih, 2005).

## Uji  Aktivitas Ekstrak Daun Jintan
Dua  puluh  lima  ekor  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  galur  Wistar  umur  2  -  3  bulan dengan berat  badan rata-rata 200 gram  diadaptasi selama 1 bulan,  diberi makan dan minum ad libitum . Selanjutnya tikus dibagi menjadi 3 kelompok masing-masing terdiri dari 6  ekor.
Setiap  kelompok  dipelihara  dalam  2  kandang  terpisah.  Delapan  belas  ekor  tikus  dibagi menjadi  3  kelompok  sebagai  berikut:  (1)  Kelompok  kontrol  dengan  placebo  (2)  Kelompok perlakuan  dengan  induksi  nephropathy  akut;(3)  Kelompok  perlakuan  dengan  induksi nephropathy akut diberikan ekstrak daun jintan (C. amboinicus) dosis tinggi (64 mg/kg BB). Pembuatan Nephropathy akut pada tikus dengan cara diinduksi secara intra peritoneal oxonic acid (OA) 2 % dan Uric Acid 1.5 % selama 15 hari. Tikus dieutanasia pada hari ke-25.

## Analisis Fitokimia
Metode  yang  dipakai  untuk  mengidentifikasi  senyawa  aktif  dalam  daun  jintan  dengan teknik analisis Kromatografi lapis tipis (KLT)
Berikut ini bagan alir penelitian :
Uji KLT

## Prosedur Penelitian

## 1. Penelitian Pendahuluan
Penelitian  pendahuluan  diawali  dengan  pembuatan  bahan  uji,  penentuan  dosis,  uji aktivitas  daun  Jintan  di  Fakultas  Kedokteran  Hewan  Universitas  Wijaya  Kusuma  Surabaya daun  jintan  yang  dipakai  pada  penelitian  ini  adalah  yang  sudah  dikenal  masyarakat  sebagai daun bangun-bangun.
Sediaan Ekstrak Daun Jintan ( coleus amboinicus ) Analisis perlakuan Identifikasi daun jintan
Uji Aktivitas Kontrol: plasebo Perlakuan I:   OA& UA Perlakuan II : OA&UA dan ekstrak daun jintan
OA

## 2. Penelitian Utama
Penelitian  inti  dilakukan  dengan  pemberian  sediaan  ekstrak  daun  jintan ( Coleus amboinicus ) selama 7 hari kepada kelompok perlakuan.

## Bahan dan Alat Penelitian
Bahan dan alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah :
1. Daun Jintan ( Plectranthus amboinicus )
2. Tikus putih ( Rattus norvegicus)
3. Alat pembuatan ekstrak infus

## 4. Oxonic Acid dan Uric Acid

## Teknik Analisis Data
Setelah semua data terkumpul dan diolah baik secara manual untuk dianalisis secara deskriptif, yaitu dengan menggambarkan masing-masing variabel dalam bentuk tabulasi dan gambaran histopatologi.  Untuk mengetahui tingkat signifikansi adanya perbedaan kelompok kontrol  dan  perlakuan  sebelum  maupun  sesudah  perlakuan  dilakukan  uji  t  sampel berpasangan ( paired t-test ).

## IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  analisis  kandungan  aktif  daun  Jintan  ( Coleus  ambonicus )  dengan  metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT) diperoleh kandungan fraksi relatif daun jintan seperti dalam tabel berikut ini.
Tabel. 1 Senyawa relatif yang terkandung dalam ekstrak daun Jintan dengan KLT
NAMA SENYAWA. PEMBANDING &DETEKSI HASIL Kumarin Rutin /Sitroborat Positif (+) Saponin Saponin /L-B Positif (+) Polifenol Asam Galat/ FeCl3 Positif (+) Minyak Atsiri/terpen Tymol/ Anisaldehid Positif (+)
Berikut  ini  gambar  hasil  identifikasi  senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak  daun  Jintan dengan teknik Kromatografi lapis Tipis (KLT)
Gambar  1.  Hasil  identifikasi  kandungan  kualitatif  ekstrak  daun  Jintan  dengan  teknik  KLT ditemukan positif Saponin, Polifenol, Minyak atsiri dan kumarin
Hasil  induksi  Oxonic  acid  1.5  %  dan  Uric  acid  2  %    secara  gejaja  klinis  pada  hewan  tikus seperti dalam tabel berikut dibawah ini:
Tabel  2. Perubahan patologi  anatomi  kelompok tikus  perlakuan  yang diinduksi  Oxonic acid 1.5 % dan Uric acid 2 % .
Kontrol Perlakuan I Perlakuan II Timbunan Kristal Urea Negatif Positif Positif Radang sendi Metacarpal Negatif Positif Positif
Berikut ini gambar patologi anatomi tikus yang diinduksi Oxonic acid 1.5 % dan Uric acid 2 %  pada kelompok perlakuan.
Gambar 2. Adanya penimbunan kristal urea intra peritoneal dan keradangan pada sendi metatarsal kelompok tikus perlakuan yang diinduksi Oxonic acid 1.5 % dan Uric acid 2 % .
Tabel  3.  Jumlah  perubahan  histopatologi  ginjal  seluruh  kelompok  tikus  yang  diinduksi dengan Oxonic acid 1.5 % dan Uric acid 2 % . Kontrol Perlakuan 1 Perlakuan 2 DEGENERASI  Negatif (1/6) Positif (6/6) Positif (2/6) RADANG Negatif (0/6) Positif (6/6) Positif (1/6) NEKROSIS Negatif (0/6) Positif (6/6) Positif (1/6)
Tabel  4.  Persentase  jumlah  Radang,  Nekrosis  dan  Degenerasi  pada  kelompok  kontrol  dan perlakuan
KELOMPOK n PERUBAHAN Radang Nekrosis Degenerasi kontrol P1 P2 6
6 6
0
100
16.7 0 100 16.7 16,67 100 33.3
Dari  uji  efek  anti  radang  diperoleh  hasil  gambaran  histopatologi  sampel  organ  yang  di induksi Oxonic acid 1.5 % dan Uric acid 2 % .
Gambar 3. Gambaran histopatologi  adanya keradangan, nekrosis dan degenerasi pada tubulus dan glomerulus ginjal tikus perlakuan yang diinduksi Oxonic Acid dan Uric acid.
Monosodium  Urea  (MSU)  merupakan  hasil  akhir  dari  metabolisme  purin,  suatu produk  sisa  yang  tidak  mempunyai  peran  fisiologi  Asam  urat  yang  terbentuk  setiap  hari dibuang  melalui  saluran  pencernaan  atau  ginjal.  Pada  kondisi  patofisiologis  dapat  terjadi peningkatan  kadar  asam  urat  dalam  darah  melewati  batas  normal  yang  disebut  dengan hiperurisemia  (Hawkins  &  Rahn,  2005).  Penelitian  lain  menyebutkan  bahwa  hiperurisemia menyebabkan  hipertrofi  glomerolus  yang  diinduksi  asam  urea  (Nakagawa et  al ,  2003).
Pembentukan  asam  urat  terjadi  melalui  jalur  oksidasi  hipoxanthin  dan  guanin  menjadi xanthin  yang  dikatalisis  oleh  enzim xanthin  oksidase dan guanase .  Kemudian  xanthin  akan teroksidasi  menjadi  asam  urat  dalam  reaksi  selanjutnya  yang  dikatalisis  oleh  enzim xanthin oksidase (Murray et al , 1999).
Berdasarkan  hasil  uji  statistik  pengaruh  ekstrak  daun  Jintan  ( Coleus  amboinicus Lour) terhadap  gambaran  histopatologi  ginjal  akibat  induksi uric  acid dan oxonic  acid pada  tikus  ( rattus norwegicus )  menunjukan  perbedaan  yang  signifikan  antara  kelompok  kontrol  (K)  dengan  perlakuan (P1 dan P2) berupa infiltrasi sel radang, degenerasi, dan nekrosis. Hal tersebut menunjukkan induksi Uric  acid dan Oxonic  acid dapat  mempengaruhi  kerusakan  pada  ginjal.  Hal  tersebut  sesuai  dengan penelitian induksi Uric  acid 1%  serta Oxonic  acid 1,5%  selama  35  hari  berturut-turut menunjukkan adanya deposisi kristal asam urat,  lesi granulomatosa, inflamasi, serta fibrosis ginjal  pada  pemeriksaan  histopatologi  ginjal  (Goo  Kim et  al ,  2000).  Serangan  akut  terjadi karena  endapan  urat,  yang  jarum-jarum  kristalnya  merusak  sel  dengan  menimbulkan  nyeri yang  hebat  (Tierney et  al .,  2004).    Kristal-kristal  urat  akan  memicu  respon  fagositik  oleh leukosit,  sehingga  leukosit  memakan  kristal-kristal  urat  dan  memicu  proses  peradangan (Price dan Wilson, 2005). Penelitian lainnya menyebutkan induksi Uric acid dan Oxonic acid pada  ginjal  memperlihatkan  adanya  inflamasi  sel  epitel,  nekrosis  dan  apoptosis,  dan penumpahan  sel  epitel  ke  dalam  lumen  tubulus  (Liu et  al ,  2008).  Menurut  Price  &  Wilson (1995),  kematian  sel  yang  disebabkan  oleh  nekrosis  tubulus  dapat  ditandai  dengan
menyusutnya  inti  sel  atau  ketidakaktifan  inti  sel  tubulus.  Inti  sel  tubulus  yang  tidak  aktif dengan pewarnaan Hematoksilin Eosin akan terlihat lebih padat dan gelap bila dibandingkan dengan  inti  sel  tubulus  yang  normal.  Menurut  penelitian  Muniroh  dkk.  (2011)  pemberian ekstrak  daun  jintan  dapat  menurunkan  konsentrasi  Monosodium  Urea  (MSU)  pada  tikus putih.

## BAB V. SIMPULAN DAN SARAN

## Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang di peroleh dapat disimpulkan bahwa :
1. Induksi Uric  acid 1%  dan Oxonic  acid 1,5%  pada  tikus  putih  galur  wistar dapat menyebabkan nekrosis, degenerasi, dan infiltrasi sel radang  tubulus dan glomerulus ginjal pada kelompok perlakuan.
2. Pemberian  ekstrak  daun  Jintan  dosis  64  Gr/Kg  BB  berbeda  secara  nyata terhadap gambaran histopatologi pembentukan nephropathy akut dibandingkan kelompok perlakuan induksi OA&UA.

## Saran
Dilakukan penelitian lebih  lanjut  bagaimana  pengaruh seluler induksi  asam  urea dan pengaruhnya terhadap organ hati pada hewan percobaan.

## Daftar Pustaka
Anonim.  2011.  Tanaman  Obat  Indonesia;  Daun  Jintan.  Tersedia  di  www.jintan.lipi.go.id. Diakses tanggal 15 Juli 2011
Cronstein  BN  and  Terkeltaub  R.,  2006,  The  Inflamatorypocess  of  gout  and  its  treatment,
Arthritis research & Therapy.8(1):1-7
Hawkins  D.W.,  Rahn  D.W.,  2005. Gout  and  Hyperuricemia,  Pharmacotherapy,  A Pathophysiological  Approach , McGraw-Hill
Inoue A., Matsumoto I., Tanaka Y., Iwanami K., Kanamori A., Ochiai N., Goto D., Ito S and Sumida T., 2009, Tumor Necrosis Factor induced adiposed-related protein expression in experimental arthritis and in rheumatoid artritis, Arthritis research & Therapy.11:R118.
Kertia  N,  Sudarsono,  Imono  AD,  Mufrod,  Catur  E,  Rahardjo  P,  Asdie  AH.  Pengaruh pemberian kombinasi minyak atsiri temulawak dan ekstrak kunyit dibandingkan dengan piroksikam  terhadap  angka  leukosit  cairan  sendi  penderita  osteoartritis  lutut. Majalah Farmasi Indonesia 2005; 16(3): 155-161.
Kim  YG,  huang  XR.,  Suga  SI.,  Mazzali  M.,  Tang  D.,  Metz  C.,  Bucala  R.,  Kivlighn  S., Johson  RJ.,  and  Lan  HY.,  Involvement  of  macrophage  migration  Inhibitory  factor (MIF) in experimental Uric Acid nephropathy, J.Mol Med. 6(10):837-848.
Kodim  N,  2010,  Faktor  Risiko  Kejadian  Arthritis  Gout  pada  Pasien  Rawat  Jalan  di  Rumah Sakit  Dr.  Wahidin  Sudirohusodo,  Makassar, J.Ked.Medika,  Edisi  No  07  Vol  XXXVI  – 2010
Leandro  J.M.,  2009,  Anti-tumour  Necrosis  Factor  Theraphy  and  B  cell  in  Rheumatoid Arthritis, Arthritis research & Therapy.11:128.
Marganingsih  C.S  dan  Hertiani  T,  2005,  Kandungan  Senyawa  Kimia  dan  Efek  Ekstrak  Air Daun  Bangun-bangun  ( Coleus  amboinicus ,L.)  Pada  Aktivitas  Fagositosis  Netrofil TikusPutih ( Rattus norvegicus), Majalah Farmasi Indonesia, 16 (3), 141 – 148, 2005
Ming Chang, J., Cheng, M.C., Hung, LM., Chung, YS and Wu, RY. 2010. Potensial Use of Plecthranthus  amboinicus  in  Treatment  of  Rheumatoid  Arthritis. J.Evid.Based comp.Alter.Med. 7 (1) : 115
Murray,  R.K.,  Darly,  K,G.,  Peter,  A.M.,  Victor,  W.R.  (1999). Biokimia  harper .  (edisi  24). Jakarta : EGC.
Nakagawa  T,  Mazzali  M,  Kang  D-H,  Kanellis  J,  Watanabe  S,  Sanchez-Lozada  LG, Rodriguez-Iturbe  B,  Herrera-Acosta  J,  Johnson  RJ.  2003. Hyperuricemia  Causes Glomerular Hypertrophy in the Rat. American Journal of Nephrology 2003, Vol. 23, No. 1
Primatesta,  Paola 1 ,  Estel  Plana, 2 and  Dietrich  Rothenbacher2011  Gout  treatment  and comorbidities:  a  retrospective  cohort  study  in  a  large  US  managed  care  population Musculoskelet Disord.; 12: 103
Price  A,  dan  Wilson,  L. Patofisiologi .  Buku  2,  Edisi  4.  Penerbit  Buku  Kedokteran  EGC. Jakarta.
Silva L, Miguel ED, Peiteado D.,  Villalba A., Mola M., Pinto J., Ventura FS.,  2010, Compliance in Gout Patients, Acta Reumatol port. 2010;35:466-474
So  A,  De  Smedt  T,  Revas  S  and  Tschopp  J.,  2007,  A  Pilot  Study  of  IL-1  Inhibition  by Anakinra in Acute Gout, Arthritis research & Therapy.9(28):1-6
Steinmeyer, Jurgen, 2000, Pharmacological Basis for The Therapy of Pain and Inflammation With Nonsteroidal Anti-Inflammatory Drugs, Arthritis research 2:379-385
Verwwij Cornelis L., 2009, Predicting The Future of Anti Tumour Necrosis Factor Therapy., Arthritis research & Therapy.11:115.
Varughese  GI  and  Varghese  AI.,  2006,  Colchicine  in  Acute  Gout  Arthritis  :  The  Optimum Dose, Arthritis research & Therapy.8(405):1