## STUDY AWAL EKSTRAKSI MINYAK ESENSIAL BUNGA KAMBOJA PUTIH (Plumeria obtusa ) SEGAR:  PERBANDINGAN PENGARUH METODE EKSTRAKSI TERHADAP KOMPOSISI EKSTRAK

## A PRELIMINARY STUDY OF ESSENTIAL OIL EXTRACTION OF FRESH WHITE FRANGIPANI FLOWER (Plumeria obtusa): THE EFFECT OF EXTRACTION METHODS TO THE EXTRACT COMPOSITION
Arabella Febiola Armani dan Ratna Frida Susanti *)
Jurusan Teknik Kimia, Fakultas Teknologi Industri, Universitas Katolik Parahyangan Jln. Ciumbuleuit No. 94, Bandung, Indonesia, 40141
*Email : santi@unpar.ac.id
Makalah: Diterima 28 Oktober 2022; Diperbaiki 6 Desember 2022; Disetujui 15 Desember 2022

## ABSTRACT
White  frangipani  flowers  (Plumeria  obtusa)  are  widespread  across  many  regions  in  Indonesia  and  are frequently used as an essential component of religious ceremonies as offerings in the temples. They can be found placed at many village corners as local culture and beliefs. The used frangipani flowers caused a huge amount of flower waste. To resolve this issue, frangipani flowers can be utilized through product development to add their value,  such  as  by  producing  essential  oils.  It  has  been  reported  from  previous  studies  that  the  essential  oil  of frangipani  flowers  was  done  through  conventional  methods  which  used  toxic  chemical  solvents  or  distillation processes  with  high-temperature  conditions that  can  damage  the volatile  and  bioactive compounds  in  flowers. Thus, in this research, the processing of frangipani flowers into essential oil was done with supercritical carbon dioxide (CO 2 ) extraction. The results showed that supercritical CO 2 extraction produces a lower yield (1.27%) of essential  oil  if  compared  to  soxhlet  extraction  with  n-hexane  (4.23%),  however  supercritical  CO 2 extraction provides advantages of no residue of extraction product and more environmentally-friendly method. Furthermore, the  identification  of  bioactive  compounds  from  P.  obtusa  essential  oil  showed  that  there  were  65  compounds identified from  supercritical  CO 2 extraction  with  87%  of  compounds  with  activities  and  benefits  reported from literature, whereas essential oil from soxhlet extraction produced more compounds, 76 compounds were identified with 78% of compounds with reported activities and benefits. This confirms that supercritical CO2 extraction was more selective in extracting specific volatile compounds.
Keywords : bioactive,  carbon dioxide,  essential oil, plumeria obtuse, supercritical fluid extraction

## ABSTRAK
Bunga  kamboja  putih (Plumeria  obtusa )  tumbuh  dan  tersebar  di  seluruh  wilayah  Indonesia  dan  banyak digunakan  sebagai  salah  satu komponen  penting  untuk  upacara  peribadatan  di  pura dan  juga  diletakkan  di tiap sudut  perkampungan  sebagai  bagian  dari  tradisi  budaya  setempat.  Bunga  kamboja  usai  digunakan  seringkali berakhir sebagai limbah. Untuk mengatasi masalah tersebut, bunga kamboja dapat ditingkatkan nilai tambahnya dengan pengembangan produk, salah satunya yaitu dengan membuat minyak esensial (minyak atsiri) bunga. Dari penelitian-penelitian yang telah dilakukan sebelumnya, minyak esensial bunga kamboja dilakukan dengan metode ekstraksi konvensional yang menggunakan pelarut kimia yang berbahaya, atau dengan distilasi yang menggunakan temperatur tinggi yang dapat merusak kandungan senyawa volatil dan bioaktif dalam bunga. Oleh karena itu, pada penelitian ini dilakukan ekstraksi minyak esensial bunga kamboja dengan metode ekstraksi karbondioksida (CO 2 ) superkritik. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa metode ekstraksi CO 2 superkritik menghasilkan yield ekstrak yang lebih rendah (1,27%) dibandingkan dengan ekstraksi soxhlet menggunakan n -heksana (4,23%). Akan tetapi, ekstraksi  CO 2 superkritik  memberikan  keuntungan  lain  karena  produk  yang  dihasilkan  bebas  residu  dan  lebih ramah lingkungan. Selain itu, identifikasi senyawa pada minyak esensial bunga kamboja P. obtusa menunjukkan bahwa  ekstraksi  dengan  menggunakan  CO 2 superkritik  menghasilkan  65  senyawa  teridentifikasi,  dengan  87% sudah  dilaporkan  manfaatnya  dari  literatur.  Sedangkan  identifikasi  minyak  esensial  dari  ekstraksi soxhlet menunjukkan lebih banyak senyawa, yaitu 76 senyawa dengan 78% yang dapat teridentifikasi manfaatnya. Hal itu menunjukkan  bahwa  ekstraksi  CO 2 superkritik  lebih  spesifik  didalam  mengambil  senyawa  volatil  dari  minyak esensial.
Kata kunci : ekstraksi fluida superkritik, karbon dioksida, minyak esensial, plumeria obtusa , senyawa volatil

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara  kepulauan  yang memiliki  biodiversitas  yang  luas  dengan  jumlah
spesies  flora  mencapai  kurang  lebih 20.000  spesies, dan  40%  di  antaranya  merupakan  tumbuhan  asli Indonesia (Kusmana dan Hikmat, 2015). Dua spesies kamboja yang mudah dikenali dari bentuk bunga dan
Jurnal Teknologi Industri Pertanian 32 (3): 283-294, Desember 2022 DOI: https://doi.org/10.24961/j.tek.ind.pert.2022.32.3.283 ISSN: 0216-3160    EISSN: 2252-3901
Terakreditasi Peringkat 2 SK Dirjen Pendidikan Tinggi, Riset, dan Teknologi No. 158/E/KPT/2021 Tersedia online http://journal.ipb.ac.id/index.php/jurnaltin
*Penulis Korespondensi
daunnya  di  antaranya Plumeria  rubra dan Plumeria obtusa .  Di  Indonesia,  bunga  kamboja  dapat ditemukan di area pemakaman, sepanjang jalan raya, pekarangan  rumah,  dan  bertaburan  di  berbagai  pura atau  candi  (digunakan  sebagai  komponen  penting dalam  persembahan  pada  prosesi  ibadah).  Potensi limbah  bunga  yang  dihasilkan  cukup  besar, sedangkan  manajemen  limbah  yang  dilakukan seringkali tidak tepat sehingga pada akhirnya menjadi limbah  perairan.  Di  lain  pihak,  kebutuhan  bunga kamboja kering di dunia cukup tinggi, namun hanya sedikit  negara  yang  dapat  menyediakan,  sehingga Indonesia mengekspor sebagian besar bunga kamboja kering  ke  luar  negeri,  seperti  China  dan  daratan Eropa. Bunga kamboja kering dimanfaatkan sebagai bahan  baku  pembuatan  parfum,  kosmetik,  kerajinan dupa, teh herbal, dan lain-lain (Sundari et al ., 2016). Harga  bunga  kamboja  itu  sendiri  fluktuatif  sesuai permintaan  pasar.  Berdasarkan  data  permintaan bunga kamboja pada tahun 2010-2015 menunjukkan bahwa  permintaan  bunga  kamboja  mengalami kenaikan dari 32,3 ton hingga mencapai 95,7 ton pada tahun  2010-2013.  Hal  ini  juga mempengaruhi harga bunga yang mengalami kenaikan hingga 10 kali lipat (Rp10.000,00/kg  –  Rp100.000,00/kg).  Namun, permintaan  bunga  kamboja  mengalami  penurunan pada tahun 2014-2015 dan harga bunga turun kembali menjadi  Rp10.000,00/kg  –  Rp15.000,00/kg.  Pada tahun  2017,  berdasarkan  data  ekspor  produk hortikultura  untuk  bunga  kamboja  dan  melati, Indonesia  telah  mengekspor  1.067  ton  bunga  ke negara  Kamboja,  Vietnam,  Thailand,  China,  dan Singapura (Kementerian Pertanian Republik Indonesia, 2018). Ketersediaan yang melimpah perlu diimbangi  dengan  dengan  pengolahan  sumber  daya yang  lebih  tepat,  sehingga  akan  meningkatkan  nilai ekonominya.
Nilai tambah bunga kamboja bisa ditingkatkan dengan  mengolah  bunga  kamboja  menjadi  minyak esensial  ( essential  oil )  atau  dikenal  sebagai  minyak atsiri,  dengan  cara  ekstraksi.  Hal  itu  memberikan keuntungan  seperti  menjaga  aroma  dan  kandungan senyawa volatil di dalamnya agar tidak hilang secara signifikan, berkurangnya ukuran, ruang simpan, berat produk  sehingga  memudahkan  transportasi,  serta umur  simpan  minyak  bunga  dapat  menjadi  lebih panjang tanpa menurunkan aroma dan kandungannya Penelitian mengenai ekstraksi minyak esensial dari bunga kamboja dari berbagai genus sebelumnya sudah  pernah  dilakukan  dengan  metode  ekstraksi konvensional,  seperti  metode  ekstraksi soxhlet , metode distilasi dan metode lama seperti enfleurage . Megawati  dan  Saputra  (2012)  melakukan  ekstraksi soxhlet menggunakan  pelarut n -heksana  terhadap bunga kamboja dan ditemukan bahwa kamboja warna kuning  memberikan yield tertinggi,  komposisi minyak yang lebih banyak, aroma yang lebih harum dan  tajam,  dengan yield minyak  esensial  dengan ekstraksi soxhlet lebih  tinggi  dibandingkan  metode distilasi kukus (<0,11%). Kandungan senyawa kimia
yang ditemukan yaitu geraniol, farnesol, oktadekanol, oktadekana,  dan  nonadekana.  Wartini et  al .  (2014) melakukan  ekstraksi soxhlet bunga Plumeria  alba dengan n -heksana  dan  diperoleh  ekstrak  semi-padat ( concrete ) dengan senyawa yang teridentifikasi pada minyak  esensial  terdiri  dari  gugus  alkohol,  terpene, keton,  ester,  dan  asam.  Selain  metode  ekstraksi soxhlet ,  Goswami et  al .  (2016)  melakukan  ekstraksi minyak  esensial  dan  kandungan  senyawa  bunga P. rubra dengan  hidrodistilasi  selama  3  jam  dengan yield minyak  esensial  0,016%  dan  terdapat  31 komponen  yang  teridentifikasi  (didominasi  oleh benzyl ester dan alifatik alkana). Pitpiangchan et al . (2009) melakukan ekstraksi bunga P. obtusa dengan membandingkan  berbagai  metode  (distilasi  air, distilasi kukus, distilasi air-kukus, ekstraksi dengan n- heksana,  petroleum  eter,  dan enfleurage panas  dan dingin). Yield tertinggi  diperoleh  dari enfleurage panas  (12,24%)  dan  ekstraksi n -heksana  (0,5377%) dengan  senyawa  dominan  yang  ditemukan  yaitu benzyl salisilat dengan komposisi tertinggi diperoleh dari  metode  ekstraksi n- heksana  sebesar  44,69%. Pitpiangchan et  al .  menyimpulkan  bahwa  ekstraksi bunga kamboja dengan n- heksana merupakan metode paling sesuai pada skala pilot untuk aplikasi ekstrak di  bahan  kosmetik  dan  lebih  ekonomis.  Kelemahan metode distilasi yaitu degradasi termal senyawa yang termolabil akibat penggunaan temperatur yang cukup tinggi, hidrolisis dan solubilisasi beberapa senyawa di dalam air yang dapat mengubah profil rasa dan aroma dari  minyak  esensial  yang  diekstraksi,  memicu terbentuknya  reaksi  hidrasi  zat  kimia,  dan  perlu proses lanjutan setelah ekstraksi untuk menghilangkan air (Xu et al ., 2021). Metode ekstraksi pelarut  dapat  menyelesaikan  beberapa  kelemahan tersebut, namun adanya residu pelarut dalam ekstrak yang diperoleh menjadi titik kelemahannya (Attokaran,  2017).  Metode  distilasi  dan  ekstraksi pelarut  kurang ramah  lingkungan  dan menghasilkan polusi  tambahan  karena  menghasilkan  pelarut kontaminan yang berbahaya dan asap beracun (Xu et al ., 2021).
Metode  lain  yang  memiliki  keunggulan dibandingkan  metode  konvensional  lainnya  yaitu ekstraksi fluida superkritik. Ekstraksi fluida superkritik  merupakan  salah  satu  metode  yang digunakan  untuk  memperoleh  senyawa  bioaktif (flavonoid, minyak esensial, karotenoid, asam lemak, antioksidan,  pigmen,  aroma)  dari  bahan  baku  alam yang  lebih  ramah  lingkungan  karena  menggunakan pelarut  yang  aman  dan  tidak  meninggalkan  residu pelarut  organik,  memiliki  efisiensi  tinggi,  waktu proses yang cepat dan hemat energi (Asl et al ., 2020). Sehingga  metode  ini  cocok  untuk  mengekstrak senyawa volatil dan termolabil yang mana produknya telah  diaplikasikan  untuk  berbagai  industri  herbal, rempah,  tumbuhan  aromatik  dan  obat-obatan (Uwineza  dan  Waśkiewicz,  2020).  Ekstraksi  CO 2 superkritik  dapat  memberikan  aroma  ekstrak  yang lebih alami dan mendekati bahan baku awal, seperti
yang  ditemukan  pada  minyak  esensial  dari  kulit kabosu  ( Citrus  sphaerocarpa Tanaka)  (Suetsugu et al ., 2013), aroma dan rasa dari lada, jahe, rempah – rempah lainnya, juga aroma dari teh. CO 2 superkritik mampu  mengambil  senyawa  volatil  (seperti  aroma) lebih  baik  daripada  metode  ekstraksi  konvensional yang  menggunakan pelarut  organik  (Capuzzo et  al ., 2013).
CO 2 superkritik  digunakan  dalam  ekstraksi karena  mudah  didapatkan,  dapat  digunakan  kembali ( reusable ), ekonomis, tidak reaktif secara kimia, tidak beracun,  dapat  dipisahkan  dari  ekstrak,  memiliki temperatur  dan  tekanan  kritik  yang  relatif  rendah (31,1 ℃ ;  72,8  bar)  (Khaw et  al .,  2017)  dan  telah disetujui  oleh United  States Food  and  Drug Administration dan European Food Safety Authority sebagai pelarut yang aman dan food-grade (Ahmad et al .,  2019).  Namun,  metode  ini  juga  memiliki beberapa  kekurangan  yaitu  biaya  yang  kurang ekonomis, peralatannya cukup kompleks, membutuhkan tekanan tinggi, kurang optimal dalam mengekstraksi  senyawa  polar  (kecuali  dengan bantuan modifier ), dan  konsumsi  energi  yang  tinggi (Khawli et al ., 2019).
Densitas,  viskositas  dan  difusivitas  fluida superkritik  dapat  diatur  dengan  merubah  kondisi operasi  yang  digunakan.  Kemampuan  ekstraksi  dan solubilitas  dari  CO 2 superkritik  terhadap  suatu senyawa  di  antaranya  bergantung  pada  polaritas senyawa  tersebut  karena  sifatnya  yang  non-polar seperti  pelarut n -heksana  (Ahmad et  al .,  2019). Keduanya memiliki konstanta dielektrik yang serupa, yaitu 1,6 untuk CO 2 superkritik (Klesper, 1980) dan 1,88 untuk n -heksana (Mopsik, 1967). Densitas yang tinggi  dapat  mempengaruhi  kekuatan  pelarut  CO 2 yang  kemudian  dapat  memberikan  solubilitas  dan selektivitas  yang  tinggi  (Uwineza  &  Waśkiewicz, 2020).  Selektivitas terhadap  senyawa  target  tersebut dapat  dicapai  oleh  CO 2 superkritik  dengan memvariasikan tekanan dan/atau temperatur ekstraksi (Khaw et al ., 2017). Penggunaan tekanan tinggi dapat meningkatkan densitas pelarut dan solubilitas minyak (Perakis et  al .,  2005).  Pada  tekanan  tinggi  yang mendekati/melebihi  titik  kritik,  densitas  pelarut meningkat  drastis  dan  mempengaruhi  kekuatan pelarut  yang  menyebabkan  peningkatan  efisiensi ekstraksi  dan  mempengaruhi  komposisi  minyak menjadi  lebih  kompleks  (Petrović et  al., 2007). Peningkatan  tekanan  hingga  empat  kali  lipat  dari tekanan  kritik  fluida  superkritik,  densitas  dapat digandakan  sehingga  mendekati  densitas  cairan (sedangkan difusivitas dan viskositasnya menyerupai gas),  sehingga  selektivitas  ekstraksi  terhadap senyawa target dapat diperoleh oleh fluida superkritik dalam  jangka  waktu  yang  singkat.  CO 2 superkritik memiliki densitas pada titik kritik yang relatif tinggi (467,6  kg/m 3 )  (Span  dan  Wagner,  1996),  yang menyebabkan kekuatan pelarutnya di dekat titik kritik lebih tinggi dibandingkan fluida superkritik lain dan
rentang densitasnya mudah divariasikan (Khaw et al ., 2017).
Ekstraksi  CO2  superkritik  dapat  dilakukan pada  temperatur  rendah  karena  CO 2 memiliki temperatur  kritik  mendekati  temperatur  ruang, sehingga temperatur yang digunakan untuk mengekstraksi  senyawa–senyawa  yang  termolabil (tidak  tahan  panas  seperti  senyawa  volatil)  tidak memerlukan  nilai  yang  tinggi  (Cunha et  al .,  2018). Pada penelitian yang dilakukan Hossain et al. (2013), ditemukan  bahwa  akibat  dari  naiknya  temperatur, senyawa bioaktif dalam bahan daun Thymus vulgaris menjadi terdekomposisi.
Metode  ekstraksi  CO 2 superkritik  jarang ditemui  dan  digunakan  sebagai  metode  ekstraksi bunga kamboja dalam penelitian sebelumnya. Zhang et al . (2016) meneliti komposisi minyak esensial dari bunga kamboja P. rubra dari China, di mana ekstraksi minyak  esensial  dilakukan  dengan  metode  ekstraksi CO 2 superkritik,  namun  dengan  informasi  yang sangat  terbatas  (tidak  ada  keterangan  mengenai proses  ekstraksi  maupun  kondisi  operasi  yang dilakukan).  Dari  penelitian  tersebut  hanya  diketahui bahwa  terdapat  sekitar  31  senyawa  teridentifikasi pada  minyak  esensial  tersebut  dengan  komponen terbesar  (±)-trans-nerolidol, hexadecanoic  acid , tetradecanoic  acid , 𝛽 - linalool , octadecanoic  acid , dan  cis- linoleic  acid .  Namun,  berdasarkan  studi literatur  yang  telah  dilakukan,  belum  ditemukan adanya  penelitian  yang  mempelajari  ekstraksi  dan komposisi minyak esensial bunga kamboja (khususnya P.  obtusa )  dengan  ekstraksi  CO 2 superkritik.
Dalam  penelitian  ini,  minyak  esensial  bunga P.  obtusa dihasilkan  dengan  metode  ekstraksi  CO 2 superkritik  sebagai  komponen  kebaruan  dalam penelitian,  dan  ekstraksi soxhlet dengan n -heksana sebagai  pembanding  untuk  menilai  hasil  ekstrak minyak  esensial  yang  diperoleh  dari  kedua  metode. Rusaknya  kandungan  bioaktif  akibat  perlakuan termal  mendasari  dipilihnya  pelarut n- heksana  pada ekstraksi soxhlet ,  karena n -heksana  memiliki  titik didih  yang  rendah  (60-70 ℃ ),  sehingga  temperatur operasi  ekstraksi  tidak  terlalu  tinggi  dan  tidak merusak  kandungan  senyawa  volatil  yang  terdapat pada sampel bunga. n -Heksana dipilih juga atas dasar riset  studi  literatur  terhadap  penelitian-penelitian sebelumnya  mengenai  ekstraksi soxhlet bahan  baku bunga  kamboja,  di  antaranya  ekstraksi  bunga P. obtusa oleh Pitpiangchan et al . (2009).
Tujuan  penelitian ini  yaitu  untuk mengetahui dan  membandingkan  perolehan  ekstrak  bunga kamboja  segar  yang  diperoleh  dari  kedua  metode ekstraksi  konvensional  (ekstraksi soxhlet )  dan  non- konvensional  (ekstraksi  CO 2 superkritik)  dan  juga untuk  mengetahui  senyawa  volatil  yang  terkandung dalam  minyak  esensial  dari  kedua  metode  tersebut beserta  manfaatnya.  Bunga  segar  jatuh  dari  pohon langsung dimanfaatkan tanpa pengeringan agar dapat diketahui  pengaruh  keberadaan  kadar  air  di  dalam
bunga  kamboja  terhadap  senyawa  volatil  yang dihasilkan,  termasuk  didalamnya  kemungkinan adanya  senyawa  polar.    Selain  itu,  perlakuan  tanpa pengeringan  dapat  memberikan  alternatif  untuk menyederhanakan proses pengolahan yang dilakukan masyarakat  yang  dekat  dengan  sumber  bahan  baku, maupun  meminimasi  kerusakan  komponen  yang sensitif terhadap perlakuan panas.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  bunga  kamboja  putih  ( P.  obtusa )  segar sebagai bahan yang akan diekstraksi, karbon dioksida (CO 2, 99,8%, CV.  Sangkuriang,  Indonesia)  sebagai fluida  ekstraksi  superkritik,  dan n -heksana  (C 6 H 14 , Bratachem  ®,  Indonesia)  sebagai  pelarut  dalam ekstraksi soxhlet .
Metode Pengumpulan Bahan Baku dan Persiapan Ekstraksi
Bunga kamboja putih P. obtusa diperoleh dari area  pemakaman  di  daerah  Jawa  Barat,  Indonesia dalam keadaan segar dan kelopak yang sudah mekar. Pada  saat  pengambilan  bunga,  dipastikan  bahwa kondisi  bunga  tidak  ada  yang  layu.  Bunga  kamboja dibersihkan  dengan  cara  mengusap  kelopak  bunga menggunakan lap kering untuk membersihkan bunga dari  partikel  –  partikel  kotoran  yang  menempel. Kelopak  bunga  kamboja  dilepaskan  dari  sepalnya, kemudian kadar air bunga diukur dengan menggunakan  alat moisture  analyzer .  Lalu  kelopak bunga dipotong kecil dengan bentuk kotak ukuran 0,3 - 0,5 mm.
Beberapa parameter percobaan pada ekstraksi CO 2 superkritik  dan  ekstraksi soxhlet dengan n - heksana dijaga agar dapat sama, seperti jumlah bahan baku  (±7  gram),  waktu  ekstraksi  (3  jam), batch pengambilan bahan baku (hari yang sama) , kadar air yang tidak berbeda signifikan (86,82% dan 89,02%, seperti tercantum pada Tabel 1), konstanta dielektrik yang mirip yaitu 1.6 untuk CO 2 (Klesper, 1980) dan 1.88  untuk n -heksana  (Mopsik,  1967)  yang menunjukkan sifat pelarut non-polar.

## Ekstraksi Fluida Superkritik
Ekstraksi superkritik dilakukan pada rangkaian  alat  ekstraksi  yang  bisa  dilihat  pada Gambar  1.  Rangkaian  alat  terdiri  dari  tangki penyimpanan  CO 2 ;  tangki  penyimpanan  N 2 untuk purging ;  pompa  yang  memasok  CO 2 masuk  ke reaktor; reaktor tempat proses ekstraksi berlangsung (ekstraktor); thermocouple sebagai  sensor  untuk mengukur  termperatur  dalam  reaktor; heater untuk memanaskan  reaktor  sesuai  temperatur  yang diinginkan; Back  Pressure  Regulator (BPR)  untuk mengatur  tekanan  dalam  kolom  ekstraksi  dan menurunkan  tekanan  dari  fluida  superkritik; control
panel untuk  mengatur  temperatur  dan  mengecek profil tekanan tiap waktu; vent untuk membuang gas CO 2 keluaran ekstraktor yang dipisahkan dari ekstrak; dan  botol  sampel  untuk  menampung  ekstrak  yang diperoleh.
Sebanyak  ±7  g  potongan  kelopak  bunga kamboja  putih  segar  diekstraksi  dalam  reaktor superkritik  dengan  CO 2 selama  3  jam  pada  tekanan 300  bar,  temperatur  40 ℃ ,  laju  alir  CO 2 sebesar  21 mL/menit,  dan  juga  mode  operasi  statik-dinamik setiap 15 menit. Sampel bunga dimasukkan ke dalam wadah  sampel  yang  berada  di  dalam  reaktor superkritik,  lalu rangkaian  lainnya  dipasang.  Pompa CO 2 dinyalakan dan CO 2 dialirkan ke dalam reaktor. BPR  diatur  agar  tekanan  operasi  dalam  reaktor mencapai  300  bar.  Saat  tekanan  sudah  tercapai, dilakukan  pemanasan  reaktor  hingga  temperatur mencapai 40 ℃ . Untuk memasuki mode operasi statik, kerangan  CO 2 ke  dalam  reaktor  ditutup,  sehingga tidak  ada  CO 2 yang  mengalir  kontinu  ke  dalam reaktor.  Lalu  15  menit  kemudian  kerangan  dibuka sehingga  CO 2 kembali  mengalir  secara  kontinu  ke dalam reaktor,  yang  mana merupakan mode  operasi dinamik. Siklus tersebut diulang bergantian setiap 15 menit.  Saat  ekstraksi  berakhir,  ekstrak  yang tertampung  dalam  botol  sampel  ditimbang  untuk dihitung  perolehannya,  kemudian  disimpan  untuk analisis lebih lanjut.

## Ekstraksi Soxhlet
Potongan  kelopak  bunga  kamboja  putih dengan  jumlah  yang  sama  seperti  pada  ekstraksi fluida superkritik (±7 g) diekstraksi dengan pelarut n - heksana  sebanyak  250  mL  selama  3  jam  (12-15 siklus) pada temperatur 69 ℃ (titik didih n- heksana). Potongan  kelopak  bunga  kamboja  tersebut  dikemas dalam  kertas  saring  lalu  dimasukkan  ke  dalam thimble soxhlet ,  dimana  uap  pelarut n- heksana  dari labu penampung akan naik melalui pipa pengalir uap dan  pendingin  sehingga  mengembun  dan  menetes pada  sampel  di  dalam thimble .  Cairan  pelarut  yang menetes kemudian akan menggenang dalam thimble yang berisi sampel dan mengekstrak minyak essensial pada  bunga.  Saat  cairan  tersebut  sudah  melebihi tinggi  sifon,  cairan  akan  mengalir  jatuh  ke  labu penampung ekstrak, kemudian siklus yang sama akan terulang.  Ekstrak  yang  tertampung  dalam  labu tercampur  dengan  pelarut n -heksana,  sehingga dilakukan  tahap  pemisahan  pelarut  dengan  cara evaporasi  menggunakan rotary  vacuum  evaporator pada temperatur 69 ℃ . Evaporasi dihentikan dengan parameter tidak ada lagi pelarut yang menetes sampai 5  menit.  Ekstrak  yang  diperoleh  ditimbang  untuk dihitung yield -nya, lalu disimpan dalam botol sampel untuk analisis lebih lanjut. Dalam penelitian ini yield didefinisikan  sebagai  perbandingan  massa  ekstrak minyak esensial yang diperoleh terhadap massa bahan baku bunga awal (Persamaan 1).
Gambar 1. Skema diagram rangkaian reaktor superkritik yang digunakan pada penelitian
Yield (%) = massa ekstrak minyak esensial massa bahan baku bunga awal × 100% …………………………………….        (1)

## Karakterisasi
Kadar  air awal  bahan  baku  bunga  kamboja yang  akan  diekstraksi,  analisis  kadar  air  dilakukan dengan  menggunakan  alat moisture  analyzer (Halogen  Moisture  Analyzer  HE53,  Mettler Toledo, US).  Ekstrak  minyak  esensial  bunga  kamboja dianalisis dengan menggunakan gas chromatography - mass spectrometry (GC-MS, Agilent  7890B  (GC),  US)  dengan  kolom  Agilent 19091S-433 (US): 93,92873 DB-5MS UI, 5% phenyl methyl siloxane, dimensi 30 m x 250 𝜇 m x 0,25 𝜇 m. Tipe  detektor  yang  digunakan  yaitu Mass  Selective Detector (5977A), dan injector autosampler (Agilent, 7693A, autoinjector G4513A).  Temperatur  awal proses yang digunakan yaitu 40 ℃ dengan hold time selama  1  menit,  dan  temperatur post  run sebesar 300 ℃ . Volume injeksi yang digunakan sebesar 1 𝜇 L dan  gas carrier berupa  helium  dengan  laju  alir  1 mL/menit.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kadar  Air  dan  Perolehan  Ekstrak  Minyak Esensial Bunga Kamboja P. Obtusa
Sampel  yang  digunakan  adalah  bunga kamboja putih yang masih segar dan memiliki kadar air  yang  masih  tinggi,  seperti  terlihat  pada  Tabel  1, yaitu berkisar antara 87–89%. Berdasarkan beberapa studi penelitian, transfer massa zat terlarut dalam fasa padat  dapat  dipengaruhi  oleh  perbedaan  kadar  air. Pada  jenis  sampel  tertentu,  kandungan  air  dapat menjadi hambatan difusi CO 2 superkritik dan zat yang terekstrak pada sampel tersebut karena kandungan air pada sampel dapat bersaing dengan zat terlarut yang ingin  diekstraksi  untuk  kontak  dengan  pelarut  dan menurunkan yield ekstraksi (Uwineza dan Waśkiweicz,  2020).  Namun,  pada  studi  penelitian lain,  seperti  pada  bunga Helichrysum  italicum (Ivanovic et al ., 2011) ditemukan bahwa kandungan
air  dapat  meningkatkan  kinetika  ekstraksi  dan perolehan  ekstrak.  Air  dapat  berperan  sebagai modifier yang meningkatkan polaritas CO 2 superkritik,  membantu  proses  ekstraksi  dengan membuka  pori–pori,  mengembangkan  ( swelling ) matriks  tumbuhan,  dan  memudahkan  akses  fluida superkritik  terhadap  analit  (Yousefi et  al .,  2019). Pérez et al . (2018) mempelajari pengaruh kandungan air collet bunga  matahari  terhadap  kualitas  ekstrak minyak  yang  dihasilkan  dengan  ekstraksi soxhlet menggunakan n -heksana,  dan  ditemukan  bahwa kandungan  air  dapat  menyebabkan  perbedaan  yang signifikan  terhadap yield minyak  yang  dihasilkan. Aktivitas  air  bahan  yang  diekstraksi  meningkat seiring dengan meningkatnya kadar air, dan air yang terjerap pada matriks bahan baku dapat menyebabkan swelling dan  disrupsi  pada  struktur  sel  sehingga adsorpsi  dan  kondensasi  kapiler  dari n -heksana menjadi  lebih  baik  dan  meningkatkan  kemampuan akses pelarut terhadap minyak. Namun pada kadar air yang  lebih tinggi, air  bebas  dapat  mengisi  pori–pori dan  menghambat  penetrasi n -heksana  yang  dapat mengurangi laju ekstraksi. Selain itu, air hanya dapat larut  0,3-0,35%  di  dalam  CO 2 superkritik,  sehingga air  dalam  jumlah  berlebihan  dapat  mengurangi kemampuan  ekstraksi  CO 2 superkritik  terhadap senyawa dengan polaritas rendah, sehingga kadar air yang  cukup  disarankan  untuk  proses  ekstraksi  yang lebih baik (Yousefi et al ., 2019). Hasil yield ekstrak  minyak  esensial  bunga kamboja  menunjukkan  bahwa  metode  ekstraksi soxhlet dengan n -heksana memberikan yield ekstrak yang  lebih  tinggi  dibandingkan  ekstraksi  CO 2 superkritik (Tabel 1). Hal ini dapat disebabkan karena sifat CO 2 superkritik yang memiliki selektivitas tinggi terhadap senyawa target/spesifik saja (terutama yang bersifat non-polar atau kurang polar) (Rahmawati et al ., 2015).

## Tabel 1. Hasil ekstraksi minyak esensial bunga kamboja dengan berbagai metode ekstraksi
Metode Ekstraksi Detail Kondisi Percobaan Kadar Air Bahan (%) Yield Ekstrak (%) %-wb a %-db b
CO 2 superkritik (300 bar, 40 ℃ ) 300 bar, 40 ℃ , 3 jam 86,82 1,27 9,63 Soxhlet dengan pelarut n -heksana 3 jam 89,02 4,23 38,52 Soxhlet dengan pelarut n -heksana ( P.
obtusa ) (Pitpiangchan et al ., 2009) 1 jam TT d 0,54 c Soxhlet dengan pelarut n -heksana ( P.
alba ) (Wartini et al ., 2014) 4 jam TT d TT d TT d CO 2 superkritik P.  rubra (Zhang et al ., 2016) TT d TT d TT d TT d
a %- wet basis (persentase yield ekstrak dalam basis basah) b %- dry basis (persentase yield ekstrak dalam basis kering) c tidak ada informasi nilai yield ekstrak dinyatakan dalam basis basah atau kering d tidak tersedia informasi
Minyak esensial P. obtusa dengan ekstraksi soxhlet pada  penelitian  ini  menghasilkan yield yang lebih besar (4,23%-wb) dibandingkan yield ekstraksi soxhlet P. obtusa dari penelitian yang dilakukan oleh Pitpiangchan et al . (2009) (0,54%), seperti pada Tabel 1. Sementara itu, belum ada penelitian yang meneliti minyak  esensial P.  obtusa .  Zhang et  al .  (2016) meneliti  komposisi  minyak  esensial P.  rubra dari China dengan ekstraksi CO 2 superkritik, namun tidak ada  informasi  jelas  mengenai  kondisi  bahan  baku, proses ekstraksi, kondisi operasi yang dilakukan, dan yield yang dihasilkan. Kondisi proses ekstraksi yang dilakukan  oleh  Pitpiangchan et  al .  (2009)  dapat diamati  pada  Tabel  1,  namun  terdapat  sedikit informasi mengenai kondisi operasi ekstraksi, kondisi bahan baku yang digunakan, dan tidak ada informasi mengenai kadar air bahan baku dan efeknya terhadap yield yang dihasilkan tersebut. Sehingga perbandingan hasil penelitian terbatas.
Hasil  metode  ekstraksi  superkritik  dapat dianggap  lebih  baik  dibandingkan  dengan  ekstraksi soxhlet karena  ekstraksi  superkritik  lebih  bersih  dan ramah lingkungan, serta dapat menghasilkan ekstrak minyak  esensial  yang  lebih  murni  karena  tidak  ada residu pelarut pada ekstraknya akibat sifat CO 2 yang berubah menjadi gas pada temperatur ruang. Hal ini dapat  menguntungkan  untuk  aplikasi  pada  industri pangan dan produk alami yang umumnya menggunakan  ekstrak  yang  memiliki  senyawa  yang termolabil  dan  mudah  teroksidasi  (Herrero et  al ., 2010).  Ekstraksi soxhlet menggunakan  pelarut n - heksana dapat berbahaya untuk lingkungan, manusia, dan  hewan,  bahkan  pada  konsentrasi  yang  rendah (Perrier et  al .,  2017)  dan  perlu  adanya  tambahan proses  pemisahan  pelarut  dari  ekstrak  minyak esensial setelah proses ekstraksi dilakukan yang mana membutuhkan energi intensif (Bhargavi et al ., 2018).
Komposisi  Senyawa  Kimia  Minyak  Esensial Bunga Kamboja P. obtusa Ekstraksi fluida superkritik memiliki keuntungan  karena  dapat  mengekstraksi  senyawa yang lebih spesifik (senyawa target) dari bahan baku
dengan  perubahan  temperatur  dan  tekanan  operasi pada daerah kritik yang dapat memberikan perubahan pada  densitas  dan  solubilitas  pelarut.  Berdasarkan penelitian sebelumnya, beberapa komponen senyawa yang  teridentifikasi  pada  minyak  esensial  bunga kamboja  di  antaranya  yaitu  nerolidol,  geraniol, farnesol (golongan terpene ); senyawa organik seperti eicosane, benzyl benzoate ; dan golongan asam lemak seperti asam laurat dan methyl stearate . Komponen – komponen  tersebut  memiliki  manfaat  memberikan aroma pada parfum, produk kosmetik dan perawatan; memiliki  potensi  sebagai  antibakteri,  antimikroba, anti-serangga,  antioksidan,  dan  juga  membantu melembabkan kulit. Hal ini menjadi dasar pertimbangan senyawa yang menjadi target penelitian ekstraksi fluida superkritik ini.
Analisis GC-MS dilakukan untuk mengetahui senyawa-senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak minyak  esensial P.  obtusa pada  penelitian  ini,  baik dari  ekstraksi  CO 2 superkritik  maupun  ekstraksi soxhlet dengan n -heksana. Senyawa – senyawa yang teridentifikasi  pada  minyak  esensial P.  obtusa dari kedua metode ditemukan bersifat non-polar dan/atau kurang  polar.  Sedangkan  senyawa  polar  tidak ditemukan  pada  minyak  esensial.  Analisis  GC-MS terhadap  minyak  esensial  ekstraksi  CO 2 superkritik menghasilkan  sebanyak  65  senyawa  teridentifikasi dengan  87%  sudah  dilaporkan  manfaatnya  dari literatur,  sedangkan  ekstraksi soxhlet menghasilkan sebanyak  76  senyawa  teridentifikasi  dengan  78% yang  dapat  teridentifikasi  manfaatnya.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstraksi  CO 2 superkritik  lebih spesifik didalam mengambil senyawa ekstrak.
Hasil  kromatogram  dari  senyawa  hasil ekstraksi  bunga  kamboja  dengan  CO 2 superkritik dapat  diamati  pada  Gambar  2,  dan  kromatogram ekstraksi soxhlet dengan n -heksana  dapat  diamati pada  Gambar  3.  Namun,  dari  sekian  banyak  puncak yang  terdeteksi,  terdapat  20–26  puncak  yang memberikan  %  area  terbesar  (>1%)  yang  dapat diamati  pada  Tabel  2  dan  diketahui  bahwa  terdapat setidaknya  empat  senyawa  yang  sama  yang terkandung pada minyak esensial dari kedua metode
ekstraksi,  yaitu 9-Tricosene,  (Z)-,  Benzoic  acid,  2- hydroxy-,  phenylmethyl  ester,  Octacosane, dan Eicosane .).  Berdasarkan  Tabel  2,  beberapa  senyawa yang  hanya  teridentifikasi  pada  minyak  esensial dengan  ekstraksi  CO 2 superkritik  di  antaranya Hexatriacontane;  Squalene; Nerolidol;  dan 2,6,10- Dodecatrien-1-ol,  3,7,11-trimethyl- yang  menjadi target  di  awal  penelitian  ini  berhasil  diekstrak. Senyawa seperti nerolidol dan 2,6,10-Dodecatrien-1- ol,  3,7,11-trimethyl- berpotensi  memberikan  aroma, yang membuktikan bahwa ekstraksi CO 2 superkritik
dapat mengekstrak senyawa aroma tanpa penggunaan pelarut  kimia.  Beberapa  senyawa  lainnya,  seperti nerolidol,  geraniol  (dalam  bentuk geranyl  acetate , tidak  memiliki  gugus  alkohol), eicosane , benzyl benzoate ,  dan methyl  stearate ,  dapat  diamati  pada tabel  informasi  pendukung.  Hal  ini  membuktikan bahwa CO 2 superkritik dapat mengekstraksi senyawa target  spesifik  dengan  kondisi  operasi  tekanan  pada 300 bar dan temperatur 40 ℃ .
Gambar 2. Kromatogram GC-MS dari minyak esensial bunga kamboja dengan ekstraksi CO 2 superkritik pada 300 bar dan 40 ℃
Gambar  3.  Kromatogram  GC-MS  dari  minyak  esensial  bunga  kamboja  dengan  ekstraksi soxhlet menggunakan pelarut n -heksana
Tabel 2. Komposisi kimia minyak esensial bunga P. obtusa hasil ekstraksi CO 2 superkritik dan Soxhlet n -heksana
Nama Senyawa SC-CO 2 Soxhlet Potensi manfaat senyawa ekstrak RT (menit) % Area RT (menit) % Area Hexatriacontane 30,676 34,985 - - Antioksidan, penangkal radikal bebas (Arora dan Meena, 2017) 𝛼 -Amyrin acetate - - 27,772 13,51 Anti-inflamasi, antifungal (Okoye et al ., 2014) 2-(2-Phenoxythiinyl) imidazolo[1,2-a]pyridine - - 29,685 6,74 - 9-Tricosene, (Z)- 27,282 6,11 25,223 2,61 Pestisida untuk lalat (Carpita et al ., 2012) 2,4-Di-tert-butylphenol - - 14,745 4,84 Antioksidan, antifungal , antikanker (Varsha et al ., 2015) 5-Eicosene - - 20,054 4,57 Antibakteri, antifungal , antitumor, cytotoxic (Goyal et al ., 2020) 9-Nonadecene - - 21,922 4,35 Antimikroba, antifungal (Pauline dan Sagaya, 2016) Cyclotetracosane - - 23,639 3,94 Antifungal (Mohamad et al ., 2022) Octadecane 26,006 3,34 - - Antibakteri (Nguyen et al ., 2017) Tetracosane 27,442 3,17 - - Antioksidan (Aliyu et al ., 2018) Squalene 26,838 3,01 - - Antioksidan, emollient , memberikan kelembapan pada kulit, antitumor (Huang et al ., 2009) E-15-Heptadecenal - - 18,013 2,97 Antibakteri, antifungal (Yogeswari et al ., 2012) 1-Docosene - - 26,700 2,58 Antibakteri (Sahar dan Aida, 2018) 𝛽 -Amyrin - - 26,084 2,47 Antioksidan, anti-inflamasi, analgesik, antidepresan (Viet et al ., 2021) Hexadecane - - 15,841 2,35 Antioksidan, antibakteri (Yogeswari et al ., 2012) Benzoic acid, 2-hydroxy-, phenylmethyl ester 19,135 2,19 19,256 1,20 Antioksidan dan anti-inflamasi (Saxena dan Rao, 2021) Triacontane 29,142 2,17 - - Antibakteri, antidiabetik, antitumor (Mammen et al ., 2010) Pentacosane 24,483 2,14 - - Antioksidan dan antimikroba (Mohamed et al ., 2015) Thymol, TMS derivative 28,952 1,77 - - Antioksidan, antimalaria, antimikroba, antivirus, antifungal , anti-karsinogenik, anti-Alzheimer, anti- mutagenik (Martinez-Correa, 2017) (3 𝛼 )-12-Oleanen-3-yl acetate - - 26,845 1,76 Antitumor (Wen et al ., 2018), Anti-inflamasi (Okoye et al ., 2014) Heneicosane, 3-methyl- 28,223 1,73 - - - Nerolidol 20,385 1,70 - - Antioksidan, anti-inflamasi, antimikroba, antiparasit, anti-malaria (Chan et al ., 2016), aroma pada produk wewangian, kosmetik, sabun, deterjen (Padalia et al ., 2015) Cyclooctacosane - - 28,208 1,70 - Cetene - - 15,768 1,66 - Phthalic acid, di(2-propylpentyl)ester - - 24,762 1,55 Anti-inflamasi, antimikroba (Osuntokun dan Ogunleye, 2017) Hexadecanoic acid, phenylmethyl ester - - 25,170 1,48 - Octasiloxane, 1,1,3,3,5,5,7,7,9,9,11,11,13,13,15,15- hexadecamethyl- 30,232 1,48 - - Antimikroba (Falowo et al ., 2017) 2,6,10-Dodecatrien-1-ol, 3,7,11-trimethyl- (Farnesol) 17,319 1,29 - - Anti-inflamasi, antioksidan, antikanker, meningkatkan aroma produk parfum dan kosmetik (Ku & Lin, 2015), antivirus dan antibakteri (Ivanova et al ., 2022) Pentacosane-6,8-dione 26,679 1,26 - - - 4H-1,2,4-triazole-3,5-diamine, N3-(4-fluorophenyl)- N5-methyl- 26,506 1,25 - - - Octacosane 22,841 1,22 26,005 1,36 Antioksidan, anti-inflamasi, antimikroba (Kaplan dan Çelikoglu, 2020) Heneicosane 21,061 1,16 - - Antimikroba (Otieno, 2016) Hexahydropyridine, 1-methyl-4-[4,5- dihydroxyphenyl]- 28,332 1,16 - - - Benzo[h]quinoline, 2,4-dimethyl 27,991 1,15 - - - Hexadecanoic acid, methyl ester - - 19,405 1,14 Antioksidan, anti-inflamasi, menghambat produksi aktivitas asam urat, untuk memproduksi sabun dan kosmetik, nematisida (pestisida terhadap cacing parasit), anti-depresan (Rahman et al ., 2014) Eicosane 26,725 1,13 20,109 1,10 Antimikroba, anti-inflamasi (Chuah et al ., 2018)
Beberapa  senyawa  yang  teridentifikasi  pada minyak esensial ekstraksi CO 2 superkritik  memiliki manfaat  sebagai  antioksidan  dan  anti-inflamasi seperti octadecane, tetracosane, squalene, octacosane; anti-bakteri, antifungal, dan antimikroba ( tetracosane, thymol, heneicosane , nerolidol, octacosane,
eicosane ); anticancer ( benzo[h]quinoline,  2,4-dimethyl );  adapun  yang memiliki manfaat pada bidang aroma dan wewangian untuk parfum dan berbagai produk perawatan, seperti asam benzoat, nerolidol, farnesol; dan sebagai bahan untuk  kebutuhan  produksi  pestisida  seperti 9- Tricosene, (Z)- . Senyawa – senyawa lainnya yang teridentifikasi  pada  ekstraksi soxhlet memiliki manfaat  yang  sama  seperti  pada  minyak  esensial ekstraksi CO 2 superkritik, di antaranya yaitu sebagai antioksidan (𝛼 -Amyrin acetate, 2,4-Di-tert- butylphenol, E-15-Heptadecenal, 𝛽 -Amyrin, Hexadecane,  Hexadecanoic  acid  methyl  ester ); antibakteri dan antifungal ( 2,4-Di-tert-butylphenol, 5- Eicosene,  9-Nonadecene,  Cyclotetracosane,  E-15-
Heptadecenal, 1-Docosene,
Hexadecane,
Cyclooctacosane, Phthalic acid, di(2- propylpentyl)ester, Hexadecanoic acid methyl ester ); anti-inflamasi ( E-15-Heptadecenal, 𝛽 -Amyrin, Hexadecane ); aroma pada parfum dan produk-produk kosmetik  kecantikan  dan  kebersihan  ( Hexadecanoic acid  methyl  ester dan Benzoic  acid,  2-hydroxy-, phenylmethyl ester ); melembabkan kulit pada produk kecantikan  ( 1-Docosene dan Hexadecanoic  acid methyl  ester );  produk  kebersihan  khususnya  pada produk  sabun-sabunan  ( Cetene ),  bahan  untuk membuat pestisida ( Hexadecane, Hexadecanoic acid methyl  ester ,  dan  juga  sebagai  antikanker  ( E-15- Heptadecenal ).
Dibandingkan  dengan  hasil  penelitian  lain, minyak esensial P. obtusa hasil ekstraksi soxhlet dari penelitian  ini  menunjukkan  senyawa  teridentifikasi lebih banyak yaitu sebanyak 76 senyawa dengan yield yang  lebih  besar  yaitu  4,23%-wb.  Penelitian  yang dilakukan  oleh  Pitpiangchan et  al .  (2009)  dengan ekstraksi Soxhlet menggunakan n -heksana  pada kamboja  jenis P.  obtusa teridentifikasi  hanya sebanyak  17  senyawa  pada  minyak  esensial  yang dihasilkan  dengan yield sebesar  0,54%.  Beberapa senyawa yang teridentifikasi pada penelitian tersebut dapat ditemukan pula pada penelitian ini, seperti 2,4- Di-tert-butylphenol , farnesol , dan eicosane . Sedangkan  pada  penelitian  Zhang et  al .  (2016), minyak esensial bunga P. rubra dengan ekstraksi CO 2 superkritik  menghasilkan  sekitar  31  senyawa teridentifikasi  dengan  komponen  terbesar  (±)-trans- nerolidol,  asam  heksadekanoat,  asam  tetradekanoat, 𝛽 - linalool , asam oktadekanoat, dan cis-asam linoleat. Beberapa  senyawa  yang  teridentifikasi  dapat ditemukan juga pada minyak esensial P. obtusa dari penelitian  ini,  di  antaranya  nerolidol,  farnesol, squalene , heneicosane , nonadecane , dan hexadecenoic acid . Sebagai catatan, ekstraksi bunga
kamboja  genus P.  obtusa dengan  fluida  superkritik belum pernah dilakukan sebelumnya.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Ekstraksi senyawa volatil dan minyak esensial bunga  kamboja  putih (P.  obtusa )  dengan  kadar  air yang  tinggi  (89,02%)  menghasilkan  perolehan ekstrak yang lebih tinggi (4,23%-wb) dengan metode ekstraksi soxhlet menggunakan  pelarut n -heksana. Hal  ini  karena  ekstraksi  CO 2 superkritik  dapat mengekstrak  senyawa  target  spesifik  dengan mengatur kondisi tekanan (300 bar) dan temperaturnya  (40 ℃ ).  Metode  ekstraksi  superkritik dengan  CO 2 memberikan  keuntungan  metode  yang lebih  bersih  dan ramah lingkungan, dan  juga  aroma ekstrak  minyak  esensial  yang  lebih  alami  dan mendekati  bahan  baku  bunga  kamboja  awal  tanpa penggunaan pelarut n -heksana yang lebih berbahaya. Dengan  variabel  waktu  ekstraksi  dan  jumlah  bahan baku  yang  sama,  ekstraksi  CO 2 superkritik menghasilkan  senyawa  volatil  yang  juga  ditemukan dalam  ekstrak  minyak  esensial  dengan  ekstraksi soxhlet , yaitu eicosane, methyl stearate , dan farnesol. Beberapa  senyawa  lainnya  hanya  ditemukan  pada ekstrak  CO 2 superkritik,  seperti squalene,  benzyl benzoate,  hexatriacontane ,  nerolidol,  dan geranyl benzoate .
Saran Penelitian lebih lanjut ekstraksi CO 2 superkritik terhadap bunga P.obtusa perlu dilakukan untuk  membandingkan  pengaruh  variasi  kondisi operasi  seperti  temperatur,  tekanan,  dan  waktu ekstraksi,  dan  juga  pengaruh  penggunaan modifier dalam  proses  ekstraksi  terhadap  perolehan  minyak esensial  dan  target  senyawa  volatil  spesifik  yang dapat terekstrak.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad T, Masoodi FA, Rather AS, Wani SM, Gull A.  2019.  Supercritical  Fluid  Extraction:  A Review. Journal  of  Biological  and  Chemical Chronicles. 5(1): 114–122.
Aliyu  M,  Atiku  MK,  Abdullahi  N,  Imam  AA,
Kankara  IA.  2018.  Evaluation  of in  vitro antioxidant potentials of Nymphaea lotus and Nymphaea pubescens seed oils. International Journal of Biochemistry Research & Review . 24(1): 1-8.
Arora  S  dan  Meena  S.  2017.  GC-MS  profiling  of
Ceropegia  bulbosa Roxb.  var. bulbosa ,  an endangered plant from Thar Desert, Rajasthan. Pharma Innovation Journal . 6(11): 568-573. Asl PJ, Niazmand R, dan Yahyavi F. 2020. Extraction of phytosterols and tocopherols from rapeseed oil waste by supercritical CO 2 plus co-solvent:
A  comparison  with  conventional  solvent extraction. Heliyon . 6(3): 1-8. Attokaran  M.  2017. Natural  Food  Flavors  and Colorants. 2 nd ed.  Chicago:  John  Wiley  & Sons, Ltd.
Bhargavi  G,  Rao  PN,  dan  Renganathan  S.  2018. Review on the extraction methods of crude oil from  all  generation  biofuels  in  last  few decades. IOP  Conference  Series:  Materials Science and Engineering . 330(1): 012024. Bihani T. 2021. Plumeria rubra L.: A review on its ethnopharmacological, morphological, phytochemical, pharmacological,
and toxicological
studies.
Journal of
Ethnopharmacology . 264: 1-23.
Bihani T, Tandel P, dan Wadekar J. 2021. Plumeria obtusa L.:  A  systematic  review  of  its traditional uses, morphology, phytochemistry, and pharmacology. Phytomedicine Plus . 1: 1- 14.
Capuzzo  A,  Maffei  ME,  dan  Occhipinti  A.  2013. Supercritical  fluid  extraction  of  plant  flavors and fragrances. Molecules . 18(6): 7194-7238. Carpita A, Canale A, Raffaelli A, Saba A, Benelli G, Raspi  A.  2012.  (Z)-9-tricosene  identidied  in rectal gland extracts of Bactocera oleae males:
First  evidence  of  a  male-produced  female attractant in olive fruit
fly.
Naturwissenschaften . 99(1): 77-81. Chan  WK,  Tan  LTH,  Chan  KG,  Lee  LH,  Goh  BH. 2016. Nerolidol: A sesquiterpene alcohol with multi-faceted  pharmacological  and  biological activities. Molecules . 21(5): 529.
Chuah  XQ,   Okechukwu  PN, Amini  F,   Teo  SS. 2018.  Eicosane,  pentadecane,  and  palmitic acid:  the  effects  in In  Vitro Wound  Healing Studies. Asian  Pacific  Journal  of  Tropical Biomedicine , 8(10):  490-499.
Cunha  VMB,  Silva  MP,  Costa  WA,  Oliveira  MS, Bezerra  FWF,  Melo  AC,  Pinto  RHH, Machado  NT,  Araujo  ME,  Carvalho  Jr.  RN. 2018.  Carbon  dioxide  use  in  high-pressure extraction processes. Di dalam Karamé I (ed.), Carbon Dioxide Chemistry,  Capture, and Oil Recovery . London: IntechOpen. P211-240. Falowo  AB,  Muchenje  V,  Hugo  A,  Aiyegoro  OA, Fayemi  PO.  2017.  Antioxidant  activitie  of Moringa oleifera L. and Bidens Pilosa L. leaf extracts and their effects on oxidative stability of  ground  raw  beef  during  refrigeration storage. CyTA – Journal of Food . 15(2): 249- 256.
Goswami  P,  Chauhan  A,  Verma  RS,  Padalia  RC. 2016. Chemical constituents of floral volatiles of Plumeria  rubra L.  from  India. Medicinal and Aromatic Plants . S3: 1-5.
Goyal  MR,  Suleria  HA,  dan  Harikrishnan  R.  2020. The Role of Phytoconstituents in Health Care: Biocompounds in Medicinal Plants .
Burlington: Apple Academic Press Inc.
Herrero  M,  Mendiola  JA,  Cifuentes  A,  Ibáñez  E. 2010.  Supercritical  fluid  extraction:  recent advances  and  applications. Journal  of Chromatography A . 1217(16): 2495-2511. Hossain MA,  Al-Mijizy  ZH,  Al-Rashadi  KK,  Weli AM, Al-Riyami Q. 2013. Effect of temperature  and  extraction  process  on antioxidant  activity  of  various  leaves  crude extracts  of Thymus  vulgaris . Journal  of Coastal Life Medicine . 1(2): 118-122.
Huang  ZR,  Lin  YK,  Fang  JY.  2009.  Biological  and pharmacological  activities  of  squalene  and related compounds: Potential uses in cosmetic dermatology. Molecules . 14(1): 540-554.
Ivanova  A,  Ivanova  K,  Fiandra  L,  Mantecca  P,
Catelani  T,  Natan  M,  Banin  E,  Jacobi  G, Tzanov  T.  2022.  Antibacterial,  antibiofilm, and antiviral farnesol-containing nanoparticles prevent Staphylococcus  aureus from  drug resistance development. International Journal of Molecular Sciences . 23(14): 7527.
Ivanovic  J, Ristic M, dan Skala D. 2011. Supercritical CO 2 extraction  of Helichrysum  italicum : Influence of CO 2 density and moisture content of  plant  material. Journal  of  Supercritical Fluids . 57: 129-136.
Kaplan  A  dan  Çelikoglu  U.  2020.  Evaluation  of phytochemical constituents in the whole plant parts  of  hexane  extract  of  some  traditional medicinal plants by GC-MS analysis. Middle East Journal of Science . 6(2): 57-67.
Kementerian Pertanian Republik Indonesia. “Ekspor Buah, Sayuran, dan Bunga Indonesia Tembus 29 Negara”. Kementerian Pertanian Republik Indonnesia , 20 Maret 2018, https://www.pertanian.go.id/home/?show=ne ws&act=view&id=1967 .  Diakses  pada  26 September 2022.
Khaw KY, Parat MO, Shaw PN, Falconer JR. 2017.
Solvent  supercritical  fluid  technologies  to extract  bioactive  compounds  from  natural sources: A review. Molecules . 22(7): 1186.
Khawli FA, Ferrer E, Berrada H, Barba FJ, Pateiro M, Domínguez  R,  Lorenzo  JM,  Gullón  P, Kousoulaki  K.  2019.  Innovative  green technologies of intensification for valorization of  seafood  and  their  by-products. Marine Drugs . 17(12): 689-710.
Klesper E. 1980. Chromatography with Supercritical Fluids.  Di  dalam  Schneider  GM  (ed.),
Extraction with Supercritical Gases . Weinheim: Verlag Chemie.
Ku CM dan Lin JY. 2015. Farnesol, a sesquiterpene alcohol  in  herbal  plants,  exerts  anti- inflammatory  and  antiallergic  effects  on ovalbumin-sensitized and -challenged asthmatic mice. Evidence-based
Complementary  and  Alternative  Medicine .1:
1-12.
Kusmana  C  dan  Hikmat  A.  2015.  Keanekaragaman hayati flora di Indonesia. Jurnal Pengelolaan
Sumberdaya Alam dan Lingkungan . 5(2): 187- 198.
Mammen D, Daniel M, dan Sane RT. 2010. Seasonal and  geographical  variations  in  chemical constituents of Leptadenia reticulate . International  Journal  of  Pharmaceutical Sciences Review and Research . 4(2): 111-116.
Martinez-Correa  HA,  Paula  JT,  Kayano  ACAV, Queiroga  CL,  Magalhães  PM,  Costa  FTM, Cabral FA. 2017. Composition and antimalarial  activity  of  extracts  of Curcuma longa L.  obtained  by  a  combination  of extraction  processes  using  supercritical  CO2, ethanol  and  water  as  solvents. Journal  of Supercritical Fluids . 119: 122-129.
Megawati dan Saputra SWD. 2012. Minyak atsiri dari bunga kamboja kuning, putih, dan merah dari ekstraksi  dengan  n-heksana. Jurnal  Bahan Alam Terbarukan . 1(1): 25-31.
Mohamad  OAA,  Liu  YH,  Huang  Y,  Li  L,  Ma  JB, Egamberdieva  D,  Gao  L,  Fang  BZ,  Hatab  S, Jiang  HC,  Li  WJ.  2022.  The  metabolic potential of endophytic Actinobacteria associated  with  medicinal  plant Thymus roseus as a plant-growth stimulator. Microorganisms . 10, 1802: 1-18.
Mohamed  AA,  Ali  SI,  Darwesh  OM,  El-Hallouty SM, Sameeh MY. 2015. Chemical compositions, potential cytotoxic and antimicrobial  activities  of Nitraria  retusa methanolic extract sub-fractions.
International  Journal  of  Toxicological  and Pharmacological Research . 7(4): 204-212. Mopsik FI. 1967. Dielectric constant of n-hexane as a function of temperature, pressure, and density. Journal of Research of the National Bureau of Standards . Section A, Physics and Chemistry , 71A(4): 287-292.
Nguyen  HT,  Ho  DV,  Vo  HQ,  Le  AT,  Nguyen  HM,
Kodama  T,  Ito  T,  Morita  H,  Raal  A.  2017.
Antibacterial activities of chemical constituents from the aerial parts of Hedyotis pilulifera . Pharmaceutical  Biology .  55(1): 787-791.
Okoye NN, Ajaghaku DL, Okeke HN, Ilodigwe EE, Nworu  CS,  Okoye  FB.  2014.  Beta-Amyrin and  alpha-Amyrin  acetate  isolated  from  the stem bark of Alstonia boonei display profound anti-inflammatory  activity. Pharmaceutical biology , 52(11): 1-9.
Osuntokun OT dan Ogunleye AJ. 2017. Prospects of essential  oils  in  drug  discovery. Advances  in Cytology & Pathology . 2(1): 17-19.
Otieno,  A.  J.  2016.  Antimicrobial  Activity  and Phytochemical Profiles of Warbugia Ugandensis  Sprague  (Canellaceace)  Extracts from Different Populations across the Kenyan
Rift Valley. Ph.D. Thesis Kenyatta University, Nairobi, Kenya.
Padalia  RC,  Verma  RS,  Chauhan  A,  Chanotiya  CS. 2015.  The  essential  oil  composition  of Melaleuca leucadendra L. grown in India: A novel source of ( E )-nerolidol. Industrial Crops and Products . 69: 224-227.
Pauline FMA dan Sagaya GR. 2016. Phytochemical screening  and  GC-MS  analysis  in  ethanolic leaf  extracts  of Ageratum  conyzoides (L.). World  Journal  of  Pharmaceutical  Research . 5(7): 1019-1029.
Perakis C, Louli V, Magoulas K. 2005. Supercritical fluid extraction of black pepper oil. Journal of Food Engineering . 71(4): 386-393.
Pérez  EE,  Baülmer  ER,  Crapiste  GH,  Carelli  AA. 2018. Effect of sunflower collets moisture on extraction  yield  and  oil  quality. European Journal  of  Lipid  Science  and  Technology . 121(2): 1-12.
Perrier A, Delsart C, Boussetta N, Grimi N, Citeau M, Vorobiev  E.  2017.  Effect  of  ultrasound  and green  solvents  addition  on  the  oil  extraction efficiency  from  rapeseed  flakes. Ultrasonics Sonochemistry . 39: 58-65.
Petrović  L,  Lepojević  Z,  Sovilj  V,  Adamović  D,
Tešvić  V.  2007.  An  investigation  of  CO 2 extraction  of  marigold  ( Calendula  officinalis L.). Journal of the Serbian Chemical Society . 72(4): 407-413.
Pieczykolan A, Pietrzak W, Rój E, Nowak R. 2019.
Effects  of  supercritical  carbon  dioxide extraction  (SC-CO 2 )  on  the  content  of tiliroside in the extracts from Tilia L. flowers. Open Chemistry . 17(1): 302-312.
Pitpiangchan  P,  Dilokkunanant  U,  Sukkatta  U, Vajrodaya  S,  Haruethaitanasan  V,  Punjee  P, Rukthaworn  P.  2009.  Comparative  study  of scented  compound  extraction  from Plumeria obtusa L. Kasetsart  Journal  (Natural Science) . 43: 189-196.
Rahman  MM,  Ahmad  SH,  Mohamed  MTM,  Ab Rahman MZ. 2014. Antimicrobial compounds from leaf extracts of Jatropha curcas , Psidium guajava ,  and Andrographis  paniculata . Scientific World Journal 635240.
Rahmawati A, Pang D, Ju YH, Soetaredjo FE, Ki OL
&  Ismadji  S.  2015.  Supercritical  CO 2 extraction of phytochemical compounds from Mimosa  pudica Linn. Chemical  Engineering Communications . 202(8): 1011-1017. Sahar  WMH  dan  Aida  HS.  2018.  GC/MS identification  and  applications  of  bioactive seaweed extracts from Mediterranean coast of Egypt. The  Egypt  Journal  of  Aquatic Research . 22(5): 1-21.
Saxena  S  dan  Rao  PB.  2021.  Pharmacological  and phytochemical assessment of Anagallis arvensis L.  leaf  extracts. Asian  Journal  of Chemistry . 33(8): 1831-1841.
Span R dan Wagner W. 1996. A new equation of state for  carbon  dioxide  covering  the  fluid  region from the triple-point temperature to 1100 K at pressures up to 800 MPa. Journal of Physical and  Chemical  Reference  Data. 25(6):1509– 1596.
Suetsugu  T,  Tanaka  M,  Iwai  H,  Matsubara  T, Kawamoto Y, Saito C, Sasaki Y, Hoshino M, Quitain  AT,  Sasaki  M,  Sakamoto  J,  Goto  M. 2013. Supercritical CO2 extraction of essential oil  from  Kabosu  ( Citrus  sphaerocarpa Tanaka) peel. Flavour . 2(18): 1-8.
Sundari E, Brata NT, Alimi MY. 2016. Pola perilaku nitor  bunga  kamboja  di  area  pemakaman sebagai  upaya  meningkatkan  kondisi  sosial ekonomi  (studi  kasus  di  Kabupaten  Cilacap). Solidarity . 5(2): 134-142.
Uwineza  PA  dan  Waśkiewicz  A.  2020.  Recent advances  in  supercritical  fluid  extraction  of natural  bioactive  compounds  from  natural plant materials. Molecules . 25(17): 3847. Varsha KK, Devendra L, Shilpa G, Priya S, Pandey A,  Nampoothiri  KM.  2015.  2,4-Di-tert-butyl phenol as the antifungal, antioxidant bioactive purified from a newly isolated Lactococcus sp. International  Journal  of  Food  Microbiology . 211: 44-50.
Viet TD, Xuan TD, Anh LH. 2021. 𝛼 -Amyrin and 𝛽 - Amyrin isolated from Celastrus hindsii leaves and  their  antioxidant,  anti-xanthine  oxidase, and  anti-tyrosinase  potentials. Molecules . 26(23): 7248.
Wartini  NM,  Putra  GPG,  Ina  PT.  2014.  Chemical composition  of  essential  oil  of  cendana frangipani  flower  ( Plumeria  alba )  with  re- extraction using ethanol solvents.
Agroindustrial Journal . 3(2): 158-162.
Wen  S,  Gu  D,  Zeng  H.  2018.  Antitumor  effects  of beta-amyrin  in  Hep-G2  liver  carcinoma  cells are  mediated  via  apoptosis  induction,  cell cycle  disruption  and  activation  of  JNK  and P38  signalling  pathways. Journal  of  the Balkan Union of Oncology . 23(4): 965-970. Xu L, Zhan X, Zeng Z, Chen R, Li H, Xie T, Wang S. 2021.  Recent  advances  on  supercritical  fluid extraction  of  essential  oils. International Journal  of  Pharmacy  and  Pharmacology . 10(1): 1-16.
Yogeswari  S,  Ramalakshmi  S,  Neelavathy  R,
Muthumary  J.  2012.  Identification  and comparative  studies  of  different  volatile fractions  from Monochaetia  kansensis by GCMS. Global  Journal  of  Pharmacology . 6(2): 65-71.
Yousefi M, Rahimi-Nasrabadi M, Pourmortazavi SM, Wysokowski  M,  Jesiorowski  T,  Ehrlich  H, Mirsadeghi  S.  2019.  Supercritical  fluid extraction  of  essential  oils. Trends  in Analytical Chemistry . 118: 182-193.
Zhang  S,  Dong  J,  Cheng  H.  2016.  Essential  oil composition of the flowers of Plumeria rubra cv. acutifolia from  China. Chemistry  of Natural Compounds . 52 (1): 154.