## Identifikasi Bakteri Tahan Asam pada Sampel Sputum Menggunakan Metode Pewarnaan Kinyoun Gabbet
Identification of acid-fast bacteria in sputum samples using the kinyoun gabbet staining method
Evi Damayanti*
1 Program Studi DIV Teknologi Laboratorium Medis, Politeknik Sandi Karsa, Indonesia
DOI: https://doi.org/10.35816/jiskh.v12i1.1181 Received: 2022-12-01 / Accepted: 2023-04-04/ Published: 2023-06-01
©The Authors 2023. This is an open-access article under the CC BY 4.0 license

## ABSTRACT
Pulmonary tuberculosis is an acute and chronic infectious disease that mainly attacks the lungs, caused by rod-resistant  bacteria  (BTA)  that  are  Gram  Positive  (mycobacterium  tuberculosis).  The  diagnosis  of pulmonary tuberculosis in adults can be established by finding BTA on microscopic examination of the sputum. This study is descriptive to find mycobacterium tuberculosis germs in sputum patients with clinical diagnosis  of  tuberculosis  in  general  poly.  BTA  coloring  technique  using  Kinyoun  Gabbet  method.  The results showed that from 10 samples, 3 samples were positive (+) and 7 samples were negative. Positive BTA sputum tests are fewer than negative BTA.
Keywords : acid-fast bacteria, kinyoun gabbet sputum.

## ABSTRAK
Tuberkulosis paru adalah penyakit yang menular akut maupun kronis yang terutama menyerang paru, yang disebabakan oleh bakteri tahan asam (BTA)berbentuk batang yang bersifat Gram Positif (mycobacterium tuberculosis).  Diagnosis  tuberkulosis  paru  pada  dewasa  dapat  ditegakkan  dengan  ditemukan  BTA  pada pemeriksaan  mikroskopik  sputum.  Penelitian  ini  bersifat  deskriptif  untuk  menemukan  kuman mycobacterium  tuberculosis  pada  sputum  penderita  dengan  diagnosa  klinis  tuberkulosis  di  poli  umum. Teknik pewarnaan BTA menggunakan metode Kinyoun Gabbet. Hasil penelitian memperlihatkan dari 10 sampel  diperoleh  3  sampel  yang  positif  (+)  dan  hasil  pemeriksaan  BTA  negatif  sebanyak  7  sampel. Pemeriksaan sputum BTA positif lebih sedikit dibandingkan BTA negatif.
Kata kunci : bakteri tahan asam, kinyoun gabbet sputum.
*) Corresponding Author Nama  : Evi Damayanti Email  : evidamayanti1909@gmail.com

## Pendahuluan
Tuberkulosis adalah Penyakit yang menular akut maupun kronis yang terutama menyerang paru,  yang  disebabkan  oleh  bakteri  asam  (BTA)  yang  bersifat  batang  gram  positif (Mycobacterium Tuberculosis). Epidemiologi sumber infeksi Mycobacterium Tuberculosis yang paling sering ialah manusia yang mengeksresikan basil tuberkel dalam jumlah banyak dari saluran nafas.  Di  Indonesia,  Tuberkulosis  (TB)  masih  merupakan  masalah  besar  dan  merupakan penyebab kematian nomor tiga di Dunia [1]. Multidrug resistance (MDR) TB merupakan penyakit TB yang yang telah mengalami resistensi terhadap obat isoniazid (INH) dan rifampicin. Diagnosis TB paru pada Dewasa dapat ditegakkan dengan ditemukan BTA pada pemeriksaan sputum secara mikrosiskopis.  Etiologi  TB  paru  ialah  M.Tuberculosis  yang  berbentuk  batang.  Kuman  akan tumbuh optimal pada suhu sekitar 37° C dengan pH optimal 6,4-7. Sebagai besar kuman terdiri atas asam lemak yang menyebabkan kuman lebih tahan asam dan lebih kuat terhadap gangguan kimia dan fisik [2]. Tuberkulosis merupakan penyakit yang menjadi perhatian global. Dengan berbagai  upaya  pengendalian  yang  harus  dilakukan,  namun  tuberkulosis  diperkirakan  masih menyerang 9,6 juta orang dan menyebabkan 1,3 juta kematian pada tahun 2014, india, indonesia dan china merupakan negara dengan pederita tuberkulosis terbanyak yaitu berturut-turut 23%. 10% dan 10% dari seluruh penderita di seluruh dunia. Pada laporan tuberculosis dunia pada tahun 2017, kejadian tuberkulosis dan kasus yang dilaporkan tiga besar adalah india (25%), indonesia (16%) dan nigeria (8%) [3].
Prevalensi penduduk indonesia yang di diagnosis tuberkulosis paru oleh tenaga kesehatan tahun 2013 adalah 40% penduduk yang diobati dengan obat program hanya 44,4% dari seluruh penduduk  yang  didiaknosis  tuberculosis  oleh  tenaga  kesehatan.  Provinsi  terbanyak  yang mengobati tuberculosis dengan obat program adalah DKI jakarta (68,9%), di yogyakarta (67, 3%), jawa barat (54,2%), dan jawa tengah sebanyak (50,4%). Angka penemuan suspek tuberkulosis paru  di  Indonesia  belum  maksimal  hal  ini  terbukti  dari  33  provinsi  diindonesia  hanya  ada  7 provinsi  yang  mencapai  target  penemuan  75%  [4]. Gejala  klinis  sesorang  yang  di  seseorang ditetapkan sebagai tersangka penderita tuberkulosis paru apabila ditemukan gejala klinis utama (cardinal  symptom)  pada  dirinya.  Gejala  utama  pada  tersangka  TB  paru  antara  lain  batuk berdahak  lebih  dari  2 minggu,  batuk  berdarah, sesak  napas, nyeri dada.  Gejala  lainnya  adalah berkeringat pada malam hari, demam tidak tinggi/meriang, dan penurunan berat badan. Gejala lainnya  adalah  gejala  tambahan.  Dahak  penderita  harus  diperiksa  dengan  pemeriksaan mikroskopis  [5]. Tuberkulosis  atau  TB  paru  merupakan  penyakit  infeksi  kronis  yang  sering dikaitkan  dengan  daerah  urban,  populasi  yang  padat  dan  ventilasi  bangunan  yang  buruk. Tuberkulosis adalah penyakit yang disebabkan oleh Mycobacteriun tuberculosis [6]. Tuberculosis (TB) merupakan penyakit serius yang dihadapi dunia kesehatan. Masalah ini diperparah dengan meningkatnya kasus multi drug resistence (MDR) TB. Resistensi terjadi karena adanya mutasi pada daerah gen rpoB bakteri Mycobacterium tuberculosis [7].
Pemeriksaan  bakteriologis  untuk  menemukan  kuman  TB  mempunyai  arti  yang  sangat penting dalam menegakkan diagnosis. Bahan untuk pemeriksaan bakteriologis ini dapat berasal dari  dahak,  cairan  pleura,  bilasan  bronkus,  liquor  cerebrospinal,  bilasan  lambung,  kurasan bronkoal  veolar,  urin,  feses,  dan  jaringan  biopsy  [8].  Semua  suspek  TB  diperiksa  3  spesimen dahak dalam waktu 2 hari, yaitu Sewaktu-Pagi-Sewaktu (SPS). Diagnosis TB paru pada orang dewasa ditegakkan dengan ditemukannya kuman TB (BTA Positif). Pada program TB nasional, penemuan  BTA  melalui  pemeriksaan  sputum  mikroskopis  merupakan  diagnosis  utama. Pemeriksaan  dahak  dilakukan  dengan  mengumpulkan  3  spesimen  dahak  yang  dikumpulkan dalam dua hari kunjungan yang berurutan berupa Sewaktu- Pagi-Sewaktu (SPS). Penelitian ini bertujuan  mengidentifikasi  bakteri  tahan  asam  pada  sampel  sputum  menggunakan  metode pewarnaan kinyoun gabbet.

## Metode
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  deskriptif  bersifat  eksperimen  yaitu  menemukan kuman  Mycobacterium  Tuberculosis  dari  sampel  sputum  pederita  Tuberculosis  Penelitian  ini dilakukan pada bulan Mei sampai Juni 2023. Pengambilan sampel pada puskesmas Tamalanrea di bagian poli umum dan dilakukan pengujian sampel di Laboratorium puskesmas Tamalanrea. Alat dan bahan penelitian. Alat : botol sputum, ose/sengkelit, kaca objek (slide), spidol permanen, rak sediaan, sarung tangan, masker, stop wach, lampu spiritus, alkohol. Bahan : sputum, larutan Kinyoun Gabbet, larutan asam alkohol (HCL alkohol) larutan methyelen dan xylol. Pemeriksaan BTA  pada  penelitian  ini  menggunakan  Sampel  sputum  sebnyak  10  sampel.  Instrumen  pada penelitian  ini  adalah  objek  glaas,  cover  glass,  bunsen,  incubator,  Laminar  Air  Flow,lemari pendingin, ose, mikroskop, lidi steril, autoklaf.

## Hasil
Tabel 1.Hasil Pemeriksaan BTA pada Suspek Penderita Tuberkulosis
No. Jenis Kelamin Kode sampel Hasil Pemeriksaaan BTA 1. P Sampel A Negatif (-) 2. P Sampel B Negatif (-) 3. L Sampel C Positif (+) 4. P Sampel D Negatif (-) 5. P Sampel E Negatif (-) 6. P Sampel F Negatif (-) 7. P Sampel G Negatif (-) 8. L Sampel H Positif (+) 9. L Sampel I Positif (+) 10. P Sampel J Negatif (-)
Sumber : Data primer

## Pembahasan
Peneliti  mengungkap  bahwa  suspek  penderita  Tuberculosis  diperoleh  hasil  positif  (+) sebanyak  3  sampel.  Pada  sampel  C  (L),  Sampel  H  (L),  dan  sampel  I  (L)  diperoleh  hasil pemeriksaan  BTA  positif  salah  satu  penyebabnya  adalah  dikarenakan  ketiga  sampel  tersebut merupakan sampel dari suspek penderita Tuberculosis yang berjenis kelamin laki-laki. infeksi TB Paru memang cenderung lebih sering di derita laki-laki dibandingkan perempuan. Hal ini antara lain disebabkan karena faktor kebiasaan merokok yang dapat meningkatkan resiko infeksi TB Paru  sebanyak  2  kali. Tuberkulosis  merupakan  penyakit  infeksi  yang  disebabkan  oleh Mycobacterium  tuberculosis  yang  telah  menginfeksi  hampir  sepertiga  penduduk  dunia  [9]. Kebiasaan  merokok  akan  merusak  mekanisme  pertahanan  paru  yang  disebut  mucociliary clearance.  Bulu-bulu  getar  dan  bahan  lai  di  paru  tidak  mudah  membuang  infeksi  yang  sudah masuk karena bulu getar dan alat lain di paru rusak akibat asap rokok [10]. Selain itu, asap rokok, meningkatkan  tahanan  jalanan  nafas  (airway  resistance)  dan  menyebabakan  mudah  bocornya pembuluh  darah  di  paru-paru,  juga  akan  merusak  makrofag  yang  merupakan  sel  yang  dapat menfagosit  bakteri  patogen.  Merokok  dapat  menganggu  efektifitas  sebagain  mekanisme pertahanan  respirasi.  Hasil  dari  asap  rokok  dapat  merangsang  pembentukan  mucus  dan menurunkan  pergerakan  silia.  Dengan  demikian  terjadi  penimbunan  mukosa  dan  peningkatan resiko  pertumbuhan  bakteri  terhadap  kuman  TB  paru  sehingga  dapat  menimbulkan  infeksi. Tuberkulosis  tetap  menjadi  masalah  kesehatan  global  yang  signifikan,  mempengaruhi jutaan  orang  di  seluruh  dunia.  Pemberdayaan  masyarakat  untuk  meningkatkan pengetahuan  tentang  TB  adalah  kunci  dalam  mengatasi  tantangan  yang  dihadapi  oleh penyakit ini [11].
Pengetahuan  secara  langsung  mempengaruhi  seseorang;  Sikap  muncul  karena  adanya pengetahuan dari individu. Tuberkulosis adalah penyakit menular yang menyebabkan kematian.
Tuberkulosis ditularkan melalui udara dan dipengaruhi oleh faktor risiko yang  berperan dalam penularan, seperti sikap, pengetahuan, dan perilaku masyarakat [12]. Tuberkulosis Paru (TB Paru) merupakan penyakit infeksi yang terutama menyerang parenkim paru, agen infeksiusnya adalah mycobacterium tuberculosis. Ditularkan oleh transmisi udara melalui kegiatan berbicara, batuk, bersin,  tertawa  dan  lainnya,  melepaskan  droplet  besar  lebih  dari  100  dan  droplet  kecil  sampai lima, droplet besar menetap sementara yang kecil tertahan di udara dan terhirup oleh individu yang  rentan  [13]. Salah  satu  pemeriksaan  yang  digunakan  dalam  menemukan  Bakteri  Tahan Asam dari sputum penderita tersangka Tuberkulosis Paru yaitu pemeriksaan secara mikroskopis [14]. Perilaku merokok di rumah dengan kejadian TBC paru. Rumusan masalah dalam penelitian ini adalah Bagaimana perilaku merokok di rumah dan kejadian penyakit tuberkulosis paru sebagai sumber pembelajaran [15]. I ndonesia memiliki jumlah perokok aktif dengan prevalensi 67% laki- laki dan 2,7% wanita dan data TBC Indonesia menurut depkes RI tahun 2010 sebanyak 294.731 kasusTBC. Kebiasaan merokok merusak mekanisme pertahanan paru [16].

## Kesimpulan
Ditemukan  sampel  positif  BTA  sebanyak  3  sampel,  sampel  tersebut  merupakan sampel dari susupek penderita Tuberkulosis yang berjenis kelamin laki-laki. Infeksi TB Paru memang cenderung lebih sering di derita laki-laki dibandingkan perempuan. Hal ini antara lain disebabkan karena faktor kebiasaan merokok yang dapat meningkatkan resiko infeksi TB Paru sebanyak 2 kali.

## Daftar Pustaka
[1] K. Mar ’ iyah and Z. Zulkarnain, “ Patofisiologi penyakit infeksi tuberkulosis, ” in Prosiding Seminar Nasional Biologi , 2021, vol. 7, no. 1, pp. 88 – 92.
[2] F. U. Datta, A. N. Daki, I. Benu, A. I. R. Detha, N. D. F. K. Foeh, and N. A. Ndaong, “ Uji aktivitas antimikroba bakteri asam laktat cairan rumen terhadap pertumbuhan Salmonella enteritidis,  Bacillus  cereus,  Escherichia  coli  dan  Staphylococcus  aureus  menggunakan metode difusi sumur agar, ” J. Kaji. Vet. , pp. 66 – 85, 2019.
[3] A.  Kanchar  and  S.  Swaminathan, “ Tuberculosis  control:  WHO  perspective  and guidelines, ” Indian J. Pediatr. , vol. 86, pp. 703 – 706, 2019.
[4] R.  I.  Kemenkes, “ Kementerian  Kesehatan  RI, ” Bul.  Jendela,  Data  dan  Inf.  Kesehat. Epidemiol. Malar. di Indones. Jakarta Bhakti Husada , 2011.
[5] A. Mardiah, “ Skrining Tuberkulosis (Tb) Paru Di Kabupaten Banyumas Provinsi Jawa Tengah, ” J. Kedokt. , vol. 4, no. 1, pp. 694 – 720, 2019.
[6] F.  Ariyani,  M.  Inggriani,  and  N.  A.  Ilsan, “ Perbedaan  hasil  deteksi  pewarnaan  bakteri tahan asam dan rapid antigen pada pasien diagnosa tuberkulosis paru, ” J. Mitra Kesehat. , vol. 1, no. 2, pp. 101 – 105, 2019.
[7] Y.  Ahda,  R.  Hesty,  and  D.  H.  Putri, “ Isolasi  DNA  Genom  dan  Amplifikasi  Gen  rpoB Mycobacterium  tuberculosis  dari  Sputum  Pasien  Positif  Pewarnaan  Basil  Tahan  Asam (BTA), ” 2012.
[8] H.  Rosita, “ Ketepatan  Pemberian  Dosis  Obat  Antituberkulosis  Kategori  Satu  terhadap Konversi  Sputum  BTA  Pasien  Tuberkulosis  Paru  di  Puskesmas  Rawat  Inap  Kemiling Bandar Lampung, ” 2018.
[9] A. Sutriyawan, N. Nofianti, and R. Halim, “ Factors Related to Incidence of Tuberculosis, ” J.  Ilm.  Kesehat. ,  vol.  4,  no.  1  SE-Articles,  pp.  98 – 105,  Apr.  2022,  doi: 10.36590/jika.v4i1.228.
[10]  L. L. Riza and D. M. Sukendra, “ Hubungan Perilaku Merokok dengan Kejadian Gagal Konversi Pasien Tuberkulosis Paru di Balai Kesehatan Paru Masyarakat (BKPM) Wilayah Semarang, ” Public Heal. Perspect. J. , vol. 2, no. 1, 2017.
[11]  R. Ayu Rahmadani, A. Asliana Sainal, and S. Suprapto, “ Community Empowerment to
Increase Knowledge About Tuberculosis, ” Abdimas Polsaka , vol. 2, no. 2, pp. 117 – 123, Sep. 2023, doi: 10.35816/abdimaspolsaka.v2i2.50.
[12]  Lina  Yunita,  Rasi  Rahagia,  Fauziah  H.  Tambuala,  A.  Suyatni  Musrah,  Andi  Asliana Sainal,  and  Suprapto, “ Efektif  Pengetahuan  dan  Sikap  Masyarakat  Dalam  Upaya Pencegahan  Tuberkulosis, ” J.  Heal. ,  vol.  10,  no.  2,  pp.  186 – 193,  Jul.  2023,  doi: 10.30590/joh.v10n2.619.
[13]  N.  Arikhman, “ Hubungan  Perilaku  Merokok  dengan  Kejadian  Tuberkulosis  Paru  Pada Pasien Balai Pengobatan Penyakit Paru-Paru, ” J. Ipteks Terap. , vol. 5, no. 4, 2019.
[14]  M. Hutabarat, “ Penemuan Penderita TB dengan pemeriksaan sputum secara mikroskopis metode sentrifugasi, ” J. Kesehat. , 2015.
[15]  S. Wulandari, A. Aseptianova, and S. Hidayat, “ Perilaku Merokok di Dalam Rumah dan Kejadian Penyakit Tuberculosis Paru Sebagai Sumber Pembelajaran, ” J. Biota , vol. 4, no. 2, pp. 54 – 61, 2018.
[16]  P. M. K. Hita, T. Hariyanto, and L. Lasri, “ Hubungan Antara Konsumsi Rokok Dengan Kejadian  Penyakit  Tuberculosis  (TBC)  Di  Puskesmas  Kawangu  Kecamatan  Pandawai Kabupaten  Sumba  Timur  Provinsi  Nusa  Tenggara  Timur, ” Nurs.  News  J.  Ilm. Keperawatan , vol. 2, no. 3, 2017.