P-ISSN: 2579-4752, E-ISSN: 2620-7397
1 Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar Korespondensi:  Jurusan  Akuakultur,  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan,  Universitas  Teuku  Umar, Kampus UTU Meulaboh, Alue Peunyareng 23615, Telp: +62 8116804788, email: sufaldiansyah@utu.ac.id

## PEMBERIAN EKSTRAK DAUN Tagetes erecta L DENGAN DOSIS BERBEDA SEBAGAI ANTI JAMUR Saprolegnia sp. PADA PENETASAN TELUR IKAN TAWES (Barbonymus gonionotus)
Tagetes erecta L LEAF EXTRACT WITH DIFFERENT DOSES AS Saprolegnia sp. ANTIFUNGALS IN Barbonymus gonionotus EGG HATCHING
Sufal Diansyah 1 , T. Amarullah 2 , Shela Rahmita 3 , Sukardi 3
1 Program Studi Akuakultur, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar, Aceh Barat 2 Program Studi Sumberdaya Akuatik, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar
3 Program Studi Perikanan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar, Aceh Barat Korespondensi: sufaldiansyah@utu.ac.id

## ABSTRAK
Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  konsentrasi  yang  tepat  dan  keefektifan  ekstrak Tagetes erecta L dalam pengendalian infeksi jamur Saprolegnia sp . Penelitian ini dilaksanakan selama tiga bulan. Ekstraksi dilaksanakan di Laboratorium Teknologi Hasil Pertanian (THP) Fakultas Pertanian Universitas Syiah Kuala dan Uji Fitokimia dilaksanakan di Laboratorium Fakultas Matematika dan Ilmu  Pengetahuan  Alam  (MIPA),  uji  In-  Vivo  dilaksanakan  di  Balai  Benih  Ikan  Krueng  Batee Kabupaten  Aceh  Barat  Daya.  Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL), masing-  masing  dengan  tiga  taraf  perlakuan  dan  tiga  kali  ulangan.  Perlakuan  yang  digunakan adalah  perendaman  ekstrak Tagetes  erecta L.  dengan  konsentrasi  berbeda,  yakni  konsentrasi  45 ppm (P1), konsentrasi 50 ppm (P2), konsentrasi 55 ppm (P3). Parameter yang diamati meliputi Uji Fitokimia  daun Tagetes  erecta L.,  daya  tetas telur,  dan  parameter  kualitas  air. Hasil uji  fitokimia menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  tahi  ayam  ( Tagetes  erecta L)  mengandung  beberapa  senyawa bioaktif  yang  meliputi;  alkaloid,  steroid,  tanin,  dan  fenolik.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa daya  tetas  telur  ikan  tawes  yang  diberikan  ektrak  daun Tagetes  erecta L  menunjukkan  tingkat penetasan yang berbeda-beda yaitu 95% (P1), 96,67% (P2), dan 97,66 (P3). Hal ini menunjukkan bahwa semua perlakuan memiliki daya tetas diatas 90 persen, yang mengindikasikan bahwa dosis yang diberikan berada pada kisaran optimal.
Kata kunci : Barbonymus gonionotus , daya tetas telur, infeksi jamur, senyawa bioaktif.

## ABSTRACT
This research was carried out for three months. The extraction was carried out at the Laboratory of Agricultural  Product  Technology  Faculty  of  Agriculture,  Syiah  Kuala  University  and  the Phytochemical Test was carried out in the Laboratory of the Faculty of Mathematics and Natural Sciences  (MIPA),  the  In-Vivo  test  was  carried  out  in  Hatchery  Krueng  Batee,  Aceh  Barat  Daya District. This  study  used  a  Completely  Randomized  Design,  each  with three treatment  levels  and three  replications.  The  treatment  used  was  immersion  of Tagetes  erecta L  extract  with  different concentrations, ie concentration of 45 ppm (P1), concentration of 50 ppm (P2), concentration of 55 ppm (P3). Parameters observed included phytochemical test of Tagetes erecta L leaf, hatchability of eggs, and water quality parameters. Phytochemical test results showed that Tagetes erecta L leaf extract  contains  several  bioactive  compounds  which  include;  alkaloids,  steroids,  tannins,  and phenolics.  The  results  showed  that  the  hatchability  of  the  eggs  given  by Tagetes  erecta L  leaf extract showed different hatching rates of 95% (P1), 96.67% (P2), and 97.66 (P3). This shows that
all  treatments  have  hatchability  above  90  percent,  which  indicates  that  the  dose  given  is  in  the optimal range.
Keywords: Barbonymus gonionotus , hatchability of eggs, fungal infections, bioactive compounds.

## PENDAHULUAN
Ikan Tawes ( Barbonymus gonionotus ) merupakan salah satu jenis ikan air tawar yang mempunyai nilai  ekonomis di daerah Aceh. Ikan jenis ini sudah dibudidayakan  oleh  masyarakat  Aceh,  hal tersebut  dikarenakan  ikan  Tawes  digemari oleh masyarakat. Sebagai bahan pangan, ikan Tawes  memiliki  tekstur  daging  yang  kenyal dan  sedikit  lemak  menyerupai  daging  ikan mas,  di  samping itu harga ikan Tawes dapat terjangkau oleh masyarakat.
Salah satu faktor penentu dalam bisnis budidaya ikan adalah ketersediaan benih ikan yang  berkualitas.  Pembenihan  ikan  tawes sering  menghadapi  kendala,  diantaranya adalah  serangan  jamur  pada  telur  ikan  saat fase  penetasan.  Jenis  jamur  yang  sering menyerang telur ikan tawes adalah Saprolegnia  sp .  Ciri-ciri  telur  ikan  yang terserang  jamur Saprolegnia sp.  dipenuhi benang-benang  putih  seperti  kapas  yang tumbuh pada telur ikan (Widya et al ., 2014)
Penanggulangan infeksi jamur pada saat penetasan  telur  umumnya  menggunakan antibiotik  dan  senyawa  sintetik  lainnya. Penggunaan  antibiotik  saat  ini  sudah  dilarang karena  dapat  menimbulkan  efek  resisten  pada jamur  dan  bakteri  pathogen  yang  terdapat  di dalam  media  penetasan  serta  mengakibatkan pencemaran lingkungan. Solusi untuk mengatasi  masalah  tersebut,  maka  perlu adanya  bahan  alternatif  yang  lebih  aman  dan dapat  mengendalikan  penyakit  akibat  jamur Saprolegnia  sp .  Salah  satu  bahan  yang  dapat digunakan  adalah  penggunaan  tanaman  yang bersifat  anti  jamur.  Penggunaan  tanaman sebagai  obat  memiliki  beberapa    keuntungan yaitu    bahan    alami    pengganti    antibiotik, ramah terhadap lingkungan, tidak menyebabkan  resistensi  pada  ikan,  mudah
diperoleh dan harganya ekonomis (Permatasari, et.al ., 2013).
Bahan-bahan  alami  yang  telah  banyak digunakan sebagai anti jamur pada telur  ikan antara  lain  daun  kelor,  daun  pepaya (Septiani, et.al., 2016),  minyak astiri (2007) dan  lain  sebagainya.  Beruntung,  Indonesia sebagai  negara  agraris  yang  memiliki  iklim tropis  memiliki  kekayaan  alam  yang  luar biasa,  beragam  jenis  tanaman  terdapat  di negara ini sehingga masih banyak sekali jenis tanaman  berkhasiat  obat  lainnya  yang  belum tergali  potensinya  secara  maksimal.  Salah satunya  adalah  tanaman  yang  sudah  sangat akrab  dengan  kehidupan  masyarakat  Aceh, daun bunga tahi ayam (Tagetes erecta L).
Tanaman ini mudah didapat dan dikenal mengandung  khasiat  obat. Tagetes  erecta  L biasa  digunakan  untuk  mengobati  sakit  perut pada  manusia,  dan  penyakit  lainnya.  Namun, penggunaan tanaman Tagetes erecta L sebagai bahan  pengendalian  jamur saprolegnia  sp pada  telur  ikan  belum  dilakukan.  Menurut Chivde  (2011)  Daun  bunga  tahi  ayam memiliki kandungan kimia sebagai anti jamur yaitu beberapa Flavonoid seperti Kuersetagenin , Tagettin , Kaemferol dan Kaemferitin .

## METODE PENELITIAN

## Rancangan percobaan
Penelitian ini menggunakan rancangan  acak  lengkap,  masing-  masing dengan  tiga  taraf  perlakuan  pemberian ekstrak  daun Tagetes  erecta L  dengan  dosis berbeda dan masing-masing perlakuan diulang  sebanyak  tiga  kali.  Dosis  yang digunakan  adalah  45  ppm  (P1),  50  ppm (P2), dan 55 ppm (P3).
Prosedur penelitian Pembuatan ekstrak daun Tagetes erecta L Daun Tagetes    erecta    L yang digunakan  dicuci  bersih  dan  dikering anginkan    selama  tiga  hari.  Setelah  kering Daun Tagetes  erecta    L dihaluskan  sampai menjadi  serbuk.  Serbuk  daun Tagetes  erecta
L ditimbang  sebanyak  500  gram  dan ditambahkan  sedikit  demi  sedikit  pelarut methanol  p.a  sebanyak  4  liter  hingga seluruhnya  terendam  sambil  diaduk,  dengan lama  perendaman  48  jam.  Larutan  hasil ekstraksi  disaring  dengan  kertas  Whatman No.1  dan  hasilnya  dimasukkan  ke  dalam botol  tertutup  untuk  selanjutnya  dievaporasi. Ekstrak  daun  yang  diperoleh  dipekatkan dengan  menggunakan rotary  evaporator pada suhu  58-60 ⁰ C hingga diperoleh larutan  yang  kental.  Ekstrak  daun Tagetes erecta  L disimpan  dalam freezer sampai digunakan.

## Uji Fitokimia Tagetes erecta L
Uji fitokimia Tagetes erecta L merupakan uji yang dilakukan untuk mengetahui      senyawa-senyawa  kimia  yang terdapat  didalamnya.  Tahapan  pengujian saponin,  flavonoid,  alkaloid  dan  fenolik dilakukan  berdasarkan  metode  Harborne (1998)  dan  pengujian  glikosida    berdasarkan metode Medika Indonesia tahun 1995.
Simplisia sebanyak 10 gram dimasukan  kedalam  labu    erlemeyer    yang berisi  pelarut  methanol  100  ml  kemudian diaduk dan direndam selama 24 jam.
a.  Pengujian golongan saponin
Setelah  24  jam  ampas  dari  proses maserasi   diambil    dengan    spatula  sebanyak 0,5  gram  dan  dimasukkan  kedalam  tabung reaksi  dan  ditambahkan  10  ml  aquades. Tabung  reaksi  dikocok  hingga  muncul  buih. Ekstrak  diberi  1  tetes  HCl,  bila  buih terbentuk  ±  10    menit  maka  positif  terdapat senyawa saponin.
b.  Pengujian golongan flavonoid
Ekstrak sampel diambil 1 ml dimasukkan kedalam tabung reaksi kemudian ditambah  FeCl3  1%  jika  terjadi  perubahan warna  menjadi  merah  jingga  maka  positif terdapat senyawa flavonoid.
c.  Pengujian golongan alkaloid
Ekstrak sampel diambil 4 ml dimasukkan  masing-masing  1  ml  kedalam  4 tabung  reaksi.  Tabung  pertama  ditambah  2 tetes  pereaksi  Bouchardat,  apabila  terbentuk endapan  berwarna  cokelat  sampai  hitam maka  sample  positif  alkaloid.  Tabung  kedua ditambah  2  tetes  pereaksi  Dragendroff, apabila terbentuk endapan berwarna merah/jingga  maka  sample  posistif  alkaloid. Tabung  ketiga  ditambah  2  tetes  pereaksi Wagner, apabila terbentuk endapan berwarna cokelat maka sample positif alkaloid.
d.  Pengujian golongan fenolik
Ekstrak sampel diambil 1 ml dimasukan  kedalam  tabung  reaksi  kemudian ditambah  FeCl3   1%  jika  terjadi  perubahan warna  menjadi  hitam  maka  positif terdapat senyawa fenolik.

## Uji In Vivo
1.  Persiapan Wadah
Wadah pemeliharaan digunakan adalah viber  glass  volume  1000  ml  sebanyak sembilan  unit,  Semua  wadah  penelitian sebelum  digunakan  terlebih  dahulu  di sucihamakan dengan cara dicuci dan dijemur.

## 2.  Pembuatan Larutan Uji
Bahan ekstrak Tagetes erecta L diukur dengan kebutuhan setiap perlakuan yaitu : 45 ppm,  50  ppm,  55  ppm.  Setelah  larutan ekstrak Tagetes  erecta  L didapat  melalui dosis, kemudian digunakan terhadap perendaman  telur  untuk  mengetahui  daya tetas  telur  dari  serangan  jamur Saprolegnia sp.

## 3.  Penanganan Telur
Sampel    yang    digunakan    dalam    penelitian ini    adalah    telur    ikan    Tawes (Puntius javanicus) yang diperoleh dari hasil pemijahan  semi  buatan  di  BBI  Krueng  Batee Kecamatan  Kuala  Batee  Kabupaten  Aceh Barat  Daya.  Telur  sehat  yang  telah  terbuahi diambil  sebanyak  100  butir  untuk  setiap wadah  dan  25  butir  telur  yang  telah terinfeksi  jamur.  Sebanyak  25  butir  telur yang  telah  terinfeksi  jamur  dimasukkan  ke dalam  masing-masing  wadah  (toples)  yang berisi  100  butir  telur  sehat  dan  dipasang aerator.  Telur  sehat  dibiarkan  terendam selama  1  jam  sampai  terinfeksi  jamur.  Telur sehat  yang  telah  terinfeksi  jamur  langsung dipindahkan  ke  dalam  masing-masing  wadah yang  telah  diberi  larutan  ekstrak Tagetes erecta sesuai  konsentrasi  yang  ditentukan untuk  setiap  perlakuan.  Perendaman  dalam larutan ekstrak daun Tagetes erecta dilakukan sampai telur menetas.

## Parameter Uji
Parameter yang diamati pada penelitian ini adalah daya  tetas telur, kondisi perkembangan telur, parameter kualitas air.
1. Daya tetas telur Setelah penetasan terjadi maka
dilakukan pengamatan untuk mengetahui daya tetas  telur  atau hatching  rate .  Upaya  ini bertujuan  untuk  mengetahui  jumlah  telur yang    menetas    dari    jumlah    telur    yang dihasilkan.    Pada    saat    telur    sudah  menetas semua,  larva  dihitung  kemudian  dilakukan perhitungan  mencari  hatching  rate  dengan menggunakan rumus menurut Effendie (1997). 𝐻𝑅 = 𝐽𝑢𝑛𝑙𝑎ℎ 𝑡𝑒𝑙𝑢𝑟 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑚𝑒𝑛𝑒𝑡𝑎𝑠 𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑡𝑒𝑙𝑢𝑟 𝑥 100%

## 2. Kondisi perkembangan telur
Kondisi perkembangan telur ikan Tawes  diamati  mulai  dari  awal  pembuahan atau setelah terbuahi oleh sperma hingga telur menetas.
Pengamatan dilakukan
menggunakan  alat  bantu  mikroskop  digital selang  waktu  per  satu  jam,  kemudian perkembangan telur
difoto sebagai dokumentasi.  Telur  yang  telah  diamati dikembalikan lagi ke dalam wadah.
3. Parameter kualitas air
Pengukuran  kualitas  air  dilakukan  dari awal sampai akhir proses penetasan telur ikan tawes, yang meliputi suhu, pH, dan kandungan oksigen terlarut (DO).

## Analisis Data
Data  hasil  pengamatan  dihitung  untuk mendapatkan    parameter  biologi  yaitu  nilai daya  tetas  telur  dan  daya  hambat.  Data  hasil perhitungan ditabulasi dan dianalisis menggunakan  program  Microsoft  Excel  2013 dan  SPSS  16.0.  Data    parameter  biologi dianalisis dengan analisis ragam (Anova) pada selang  kepercayaan  95  %.  Analisis  ini digunakan untuk menentukan apakah perlakuan berpengaruh nyata terhadap parameter biologi. Apabila berpengaruh nyata dilakukan  uji  lanjut  Tukey  pada  selang kepercayaan 95% untuk menentukan perbedaan antar perlakuan. Kondisi perkembangan telur dan parameter kualitas air dianalisis  secara  deskriptif  dengan  penyajian gambar atau tabel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil
Senyawa  Kimia  Daun  Tanaman  Tahi  Ayam ( Tagetes erecta L)
Hasil uji fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak  daun  tahi  ayam  ( Tagetes  erecta L) mengandung  beberapa  senyawa  bioaktif  yang meliputi;  alkaloid,  steroid,  tanin,  dan  fenolik (Tabel  1).  Masing-masing  senyawa  tersebut memiliki manfaat dan fungsi yang berbeda.
Daya Tetas Telur
Hasil  penelitian  daya  tetas  telur  ikan tawes  yang  diberikan  ektrak  daun Tagetes erecta L menunjukkan tingkat penetasan yang
berbeda-beda  yaitu  (Gambar  1).  Hal  ini menunjukkan bahwa semua perlakuan memiliki  daya  tetas  diatas  90  persen,  yng mengindikasikan  bahwa  dosis  yang  diberikan berada pada kisaran optimal.
Gambar  1.  Daya  tetas  telur  ikan  tawes  yang diberikan  ekstrak  Tagetes    erecta  L  dengan  dosis yang berbeda
Kondisi perkembangan Telur Proses pembentukan embriogenesis ikan  tawes  berlangsung  selama  260  menit setelah  pemijahan,  kemudian  berkembang menjadi  beberapa  fase.  Proses  perkembangan telur  ikan    (embriogenesis)    terdiri    dari    6 fase    yaitu    fase  cleavage,  morula,    blastula, gastrula, organogenesis dan fase larva.

## Kualitas Air
Parameter kualitas air yang diukur pada penelitian  ini  meliputi,  suhu,  pH  dan  DO. Data  kualitas  air  selama  penelitian  berada pada  kisaran  optimal  untuk  proses  penetasan ikan tawes.
Tabel 1. Hasil uji fitokimia ektrak daun tahi ayam ( Tagetes erecta L). Kandunga n Kimia Reagen Sampel Segar Tagetes erecta L Hasil Alkaloid Mayer + Endapan Coklat Wagner + Endapan Merah Dragendorff + Endapan Putih Steroid Uji Liebermann + Warna Hijau Terpenoid Uji Liebermann - Warna Merah Saponin Pengocokan - Berbusa Flavonoid 0,5 g Mg dan HCl + Warna Merah Tanin MgCl3 + Coklat Kehitaman Fenolik MgCl3 + Coklat Kehitaman

## Pembahasan
Telur ikan merupakan senyawa organik bening  yang  dihasilkan  oleh  induk  betina berupa  butiran-butiran  kecil  berbentuk  bulat dan membutuhkan proses pembuahan (fertilisasi). Pada    Telur    ikan    diketahui relatif  sensitif  terhadap serangan  organisme biotik    yang  terdapat  di  dalam  air  salah satunya  serangan  jamur.  Secara  alamiah, jamur  ini  akan  menyerang  telur-telur  yang tidak  terbuahi.  Meskipun  demikian,  tidak menutup  kemungkinan  jamur  ini  akan menyerang  telur-  telur  yang  terbuahi.  Hal  ini sesuai  dengan  pernyataan  Bowo  (2014)  yaitu secara  umum,    hampir  semua  telur    jenis ikan  rentan  terhadap  serangan  jamur.  Spora jamur Saprolegnia  sp. Akan  menyerang  kulit telur  ikan  dengan  adhesi  dan  penetrasi.  Pada telur  ikan  tawes  yang  terserang  jamur  akan memperlihatkan tanda-tanda di sekeliling telur terdapat  benang-benang      halus      seperti kapas.      Kabata      (1985)      dalam      Bowo (2014)  menyatakan  bahwa  pada  awalnya jamur  akan  menyerang  telur  ikan  tidak
93 94 95 96 97 98 P1 P2 P3 Daya Tetas Telur ( % )
Daya Tetas Telur
berbahaya,  tapi  bila  serangannya  tidak dihentikan  maka  jamur  akan  menyebar pada telur  yang  lain  dan  telur  tersebut  akan  mati. dan  perkembangan  jamur Saprolegnia  Sp terjadi  karena  adanya  lapisan  minyak  yang terdapat  pada  telur  dan  akan  menyebar  pada telur  yang  hidup.  Akibatnya  telur  akan terinfeksi jamur yang akhirnya akan mengalami  kematian  karena  respisari  telur terganggu  oleh  miselium  jamur  (Tang,  1999 dalam Almufrodi, 2012).
Telur  yang  terinfeksi Saprolegnia  sp . Tidak dapat berkembang dengan  baik menjadi embrio  karena terjadinya  penyerapan glukoprotein telur oleh hifa jamur Saprolegnia sp .  Hal ini sesuai deangan pendapat Espeland dan Hansen (2004)  yang  menyatakan  bahwa kandungan  kimia  pada  telur   yang  terbuahi menarik  jamur  sehingga  jamur  bergerak secara  kemotoksis  positif.  Mengakibatkan jamur  semakin  mendekat  dan  akhirnya menempel  pada  telur.  Menurut  Woynarovich dan Horvath (1980) dalam Lingga (2012), saat jamur  semakin  mendekat  dan  kemudian menempel  pada  telur,  kandungan  gluprotein akan  dihisap  melalui  benang-benang  halus pada  jamur  yang  disebut  hifa,  sehingga  kulit telur  akan  melemah  dan  kekakuan  telur menghilang,  Akibatnya  telur  akan  mengkerut dan akhirnya mati.
Daya  tetas  telur  ikan  tawes  yang diberi perlakuan  ekstrak Tagetes  erecta  L adalah berkisar  95-97,66%.  Ekstrak daun bunga tahi ayam  memberikan  perlindungan  yang  efektif terhadap  infeksi  jamur Saprolegnia  sp yang terdapat  di  dalam  wadah  uji  coba.  Hasil penelitian ini menunjukkan perlakuan ekstrak Tagetes  erecta  L atau  daun  bunga tahi  ayam.  hasilnya  lebih  baik  dari  pada kontrol, sehingga ekstrak daun tahi ayam bisa digunakan  untuk  meningkatkan  daya  tetas telur  ikan  tawes.  Hasil  ini  menunjukkan perlakuan Tagetes erecta L efektif membasmi jamur Saprolegnia  Sp pada  penetasan  telur ikan tawes.
Parameter kualitas air s e l a m a
p e n e l i t i a n   b e r k i s a r   a n t a r a   2 5 , 8   - 29,1 ˚C untuk suhu dan DO air berkisar antara
4,1-4,8  mg/L,  nilai  tersebut  dinilai  masih sesuai  dengan  kisaran  nilai  kualitas  air  yang baik  untuk  penetasan  telur  ikan  tawes.  Air yang  digunakan  adalah  air  yang  mengalir langsung dari daerah pegunungan yang ada di daerah  Aceh  Barat  Daya  sehingga  kondisi  ini sangat baik dalam hal budidaya ikan terutama dalam hal penanganan telur ikan.

## KESIMPULAN
Pemberian  ekstrak Tagetes  erecta L sangat  efektif  dalam  pengendalian  infeksi jamur Saprolegnia sp . pada  proses  penetasan telur ikan tawes (Puntius javanicus).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih kepada Kemenristekdikti yang telah mendanai penelitian ini. Kegiatan penelitian ini berjalan dengan  baik  dan  lancar  atas  peran  LPPM UTU.

## DAFTAR PUSTAKA
Afrensi,   2007.   Pengaruh   Minyak   Astiri Kemangi      (Ocimum      basilicumforma citratum  Back)  Terhadap  Infestasi
Larva Lalat Hijau (Chrysomya megacephala) Pada Ikan Mas (Cyprinus arpio). [Skripsi]. Diakses di http://journal.ipb.ac.id/index.php /jai/article/view/4077/2804
BPTO,  2008. Buku  Pintar  Tanaman  Obat: 431  jenis  tanaman  penggempur  aneka penyakit . Penerbit AgroMedia.  Jakarta Ciptanto,  S.,  2010. Top  10  Ikan  Air  Tawar . Lily Publisher. Yogyakarta Chivde.B.2011. In-Vitro  Antioxydant  Activity Studies  on  the  Flowers  of  Tagetes erecta L (Compositae)
Karwani,  G  dan  Siddhraj,  S.S.  2015.  Tagetes
erecta  plant:  Review  with  significant pharmacological activities. Bhupal Nobles’ College of Pharmacy, Udaipur, Rajasthan,  313  001,  India. World
Journal  of  Pharmaceutical  Sciences. ISSN : 2321-3310
Kottelat,  1993. Freshwater  fishes  of  western
Indonesia and Sulawesi . Periplus edition, hongkong. P. 66 Meyer,  F.P.  1991. Aquaculture  diasese  and health  management .  J.  amin.  4201-
4208 Noga,      E.J.      1996. Fish      Disease. Diagnosis      and      Treatment . Department      of  Companion  Animal  &
Special Species Medicine. North Caroline State University. hlm. 2325 Permatasari,  G.  A.  A,  I.  N.  K  Besung  .  H Mahatmi,  2013  Daya  Hambat  Perasan Daun  Sirsak  Terhadap  Peetumbuhan Bakteri Escherichia coli . Jurnal
Indonesia  Medicus  Veterinus.  2013 2(2) : 162 – 169 Rahmaningsih,  S.  2011.  Pengaruh  Ekstrak Sidawayah  dengan  Konsentrasi  yang Berbeda  untuk  Mengatasi  Infeksi Bakteri Aeromonas  hydrophyla pada Ikan  Nila  ( Oreochromis  niloticus ). Jurnal Ilmu Perikanan dan Sumberdaya Perairan Santoso,   B.   dan   T.S.   Wikatma.   2001.
Petunjuk   Praktis   Budidaya   Tawes .
Yogyakarta: Penerbit Kanisius Susanto, H. 2000. Budidaya Ikan Koi . Penebar Swadaya. Jakarta Syamsuhidayat.  1991. Inventarisasi  Tanaman
Obat Indonesia,
edisi kedua, Departemen  Kesehatan  RI, Jakarta. Vandenberg.G.2008. Evaluation of Antifungal    Activity    of CHCx Formulation Against
Saprolegnia paracitica Research  Report.
Widya,  D.  R.,  D.  Suryanto,  Desrita.  2014. Aktivitas antimikroba biji teratai
( Nymphaea  pubescens L.)  terhadap bakteri Aeromonas
hydrophilla,
Streptococus  agalactiae, dan  jamur Saprolegnia sp.  Jurnal  Mikrobiologi. 2(1):7-17
Witjaksono.      2009. Kinerja  Produksi Pendederan  Lele  Sangkuriang  Clarias sp. Melalui Penerapan Teknologi Ketinggian  Media  Air  15  Cm,  20  Cm, 25  Cm,  dan  30  Cm .  Institut  Pertanian Bogor, Bogor.