## DAUN
KAYU PUTIH ( Melaleuca leucadendra
L) SEBAGAI PENGENDALI  LARVA Aedes  aegypti DALAM  UPAYA  PENCEGAHAN DEMAM BERDARAH DENGUE (DBD) DI KOTA AMBON
Martha Kaihena 1) , Abdul M. Ukratalo 2) ,1*, 2 Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pattimura, Ambon
1* Corresponding Author e-mail: athakai1105@icloud.com
Informasi
Abstrak.
Kata kunci . Aedes aegypti, daun kayu putih, demam berdarah dengue Demam  Berdarah  Dengue  merupakan  penyakit  yang  sampai  saat  ini  belum ditemukan  obat  atau  vaksinnya  sehingga  dilakukan  upaya  pencegahannya adalah dengan memutus rantai penularan penyakit yaitu dengan mengeradikasi vektornya. Masyarakat Pulau Buru, Provinsi Maluku menggunakan daun kayu putih  untuk  menghusir  nyamuk.  Dalam  penggunaannya,  daun  kayu  putih dibakar  dan  khasiatnya  dapat  mematikan  nyamuk.  Daun  kayu  putih mengandung  minyak  atsiri  yang  potensial  dikembangkan  sebagai  larvasida alami pencegah berkembangbiaknya nyamuk A. aegypti . Tujuan dari penelitian ini  adalah  mengetahui  potensi  ekstrak  etanol  daun  kayu  putih  ( Melaleuca leucadendron L)  dalam  membunuh  larva  nyamuk A.  aegypti .  Penelitian  ini dilaksanakan  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  5 perlakuan  dan  3  kali  ulangan.  Tiga  ratus  larva  nyamuk  instar  III  dimasukan pada masing-masing wadah yang berisi ekstrak etanol herba meniran (EEHM) dengan  konsentrasi  yang  sudah  ditentukan.  Tiap  wadah  diisi  20  larva. Pengamatan aktivitas larvasida ekstrak etanol herba meniran dilakukan setiap 2 jam sekali selama 24 jam. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun kayu putih mampu membunuh larva nyamuk Aedes aegypti dengan dosis efektif ekstrak etanol kulit batang kedondong dalam membunuh larva nyamuk Aedes  aegypti adalah  20  g/mL.Nilai  LC 50 ekstrak  etanol  daun  kayu  putih sebesar 5,091 dengan batas bawah 1,904 dan batas atas 7,007. Sedangkan nilai LC 90 ekstrak  etanol  daun  kayu  putih  sebesar  12,599%  dengan  batas  bawah 9,980 dan batas atas 20,091.
Received: 10 Maret 2021 Accepted: 12 Mei 2021 © 2021 Jurusan Biologi FMIPA Unpatti, IAIFI Cab. Ambon

## A. PENDAHULUAN
Masalah  kesehatan  telah  menjadi  kebutuhan  pokok  bagi  masyarakat.  Meningkatnya taraf  hidup  masyarakat,  membuat  tuntutan  masyarakat  terhadap  mutu  kesehatan  juga meningkat  (Wijaya,  2009).  Dewasa  ini  berbagai  penyakit  tropis  ditularkan  oleh  nyamuk. Penyakit malaria misalnya ditularkan oleh nyamuk Anopeles dan demam berdarah ditularkan oleh  nyamuk Aedes  aegypti (Moerid et  al. ,  2013).  Nyamuk Aedes  aegypti dapat  ditemukan hampir di seluruh provinsi di Indonesia karena nyamuk ini sangat mudah beradaptasi dengan lingkungan  sekitarnya  (Minanri et  al. ,  2013).  Nyamuk Aedes  aegypti umumnya  memiliki habitat  di  lingkungan  perumahan,  di  mana  terdapat  banyak  genangan  air  bersih  dalam  bak mandi  ataupun  tempayan  (Susilawati  dan  Hermansyah,  2015).  Pengendalian  nyamuk Aedes aegypti merupakan  upaya  primer  untuk  mencegah  penularan  DBD  baik  pengendalian terhadap  nyamuk  dewasa  maupun  larvanya.  Pengendalian  bertujuan  untuk  memutus    rantai penularan vector baik secara kimia dengan penyemprotan insektisida, penggunaan abate dan temephos, sedangkan secara biologi menggunakan predator ataupun bakteri, dan juga secara fisik dengan menerapkan manajemen lingkungan bersih (Susilawati dan Hermansyah, 2015).
Penggunaan  insektisida  yang  berulang  telah  menimbulkan  masalah  baru  yaitu timbulnya  resistensi  vektor  dan  pencemaran  lingkungan  (Sukowati,  2010).  Metode pengendalian  vektor  yang  paling  efektif  adalah  dengan  membunuh  larvanya.  Sehubungan dengan hal tersebut, maka perlu dilakukan usaha untuk mendapatkan larvasida alternatif yaitu menggunakan  larvasida  nabati  dari  tanaman  yang  mempunyai  kandungan  beracun  terhadap serangga pada stadium larva (Isnawati et al. , 2015).
Masyarakat  Pulau  Buru,  Provinsi  Maluku  menggunakan  daun  kayu  putih  untuk menghusir  nyamuk.  Dalam  penggunaannya,  daun  kayu  putih  dibakar  dan  khasiatnya  dapat mematikan  nyamuk.  Daun  kayu  putih  mengandung  minyak  atsiri  yang  potensial dikembangkan  sebagai  larvasida  alami  pencegah  berkembangbiaknya  nyamuk A.  aegypti . Hasil penelitian Cheng et  al. (2008) menunjukan bahwa minyak  atsiri dari jenis Eucalyptus camaldulensis dan E.  Urophyilla bersifat  larvasida  terhadap A.  aegypti dengan  nilai  LC 50 berturut-turut  31  dan  96  µg/mL.  Selain  itu,  minyak  atsiri  daun  sirih  (Piper  betle)  bersifat larvasida terhadap A. aegypti dengan LC 50 309.03 µg/mL (Parwata et al . 2011).
Minyak atsiri selalu mengambang di permukaan air (bobot jenisnya lebih rendah dari air) sehingga efektif sebagai larvasida jentik nyamuk, karena larva nyamuk hidup di air dan memiliki  perilaku  mendekat  atau  menggantung  pada  permukaan  air  untuk  bernapas (Campbell et al. 2004). Minyak kayu putih mengandung seyawa kimia seperti sineol dan α- terpinene.  Akan  tetapi  penelusuran  pustaka  menunjukkan  belum  dilakukan  penelitian pengujian aktivitas larvasida kayu putih asal Indonesia terhadap larva A. aegypti . Tujuan dari penelitian  ini  adalah  mengetahui  potensi  ekstrak  etanol  daun  kayu  putih  ( Melaleuca leucadendron L) dalam membunuh larva nyamuk A. aegypti

## B. METODE PENELITIAN
Rancangan  Penelitian .  Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimen  laboratorik. Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  lima  perlakuan  dan tiga kali ulangan. Adapun pembagian kelompok dalam penelitian ini adalah:
K (-) : Hanya diberi Aquades
K (+) : Abate 1% P1 : Ekstrak ethanol daun kayu  putih (EEDKP) konsentrasi 5 g/L.
P2 : EEDKP konsentrasi 10g/L. P3 : EEDKP konsentrasi 20 g/L.
Alat  dan  Bahan .  Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu,  neraca  analitik, pipet, gelas ukur 1000cc, nampan plastik, 15 wadah plastik (sebagai kontainer), beker glass, kain  (sebagai  pelindung  agar  nyamuk  yang  menjadi  dewasa  tidak  terbang  keluar),  blender, batang pengaduk kaca, ekstraktor (Peralatan Maserasi), evaporator, kertas label, pisau. Bahan yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  :  Etanol,  abate,  daun  kayu  putih,  air  bersih  atau aquadest ; alumunium foil, antiseptic, masker, sarung tangan, larva Aedes aegypti, Fish food untuk makanan larva.
Pengambilan  Sampel. Sampel  daun  kayu  putih  sebanyak  10  kg  diambil  dari  kota piru.  Sampel  kemudian  dibawah  ke  laboratorium  untuk  dikering  anginkan  diruang  lab. Setelah kering, daun dihaluskan menggunakan blender sehingga diperoleh serbuk daun kayu putih sebanyak 767 g.
Ekstraksi. Serbuk daun kayu putih diambil 300 gram dan dimaserasi dengan pelarut etanol  70%  sebanyak  500  ml  selama  tiga  hari.  Setelah  lima  tiga  ekstrak  di  saring, terbentuklah ekstrak etanolik kemudian dipekatkan sampai jadi ekstrak kental.  Ekstrak kental selanjutnya  dihilangkan  pelarutnya  dengan  rotary  drier  dan  water  bath  sehingga  diperoleh ekstrak cair daun kayu putih (Depkes RI, 2000).
Penyiapan  Larva  Nyamuk. Telur Aedes  aegypti di  peroleh  dari  Laboratorium Pengendalian  Penyakit  Bersumber  Binatang  (P2B2)  Badan  Penelitian  dan  Pengembangan Kesehatan  (Balitbangkes)  Banjarnegara.  Telur Aedes  aegypti, ditetaskan  dalam  nampan plastik berisi air bersih ±1000cc. Larva yang telah menetas diberi makan fish food setiap hari. Larva  -  larva  tersebut  dipelihara  sampai  stadium  III,  kurang  lebih  selama  4  hari,  kemudian digunakan untuk penelitian.
Pengujian Aktifitas Larvasida. Pengujian larvasida menggunakan metode Atta dkk , (2001)  terhadap  larva  nyamuk A.  aegypti .  Sebanyak  20  ekor  larva  nyamuk A.  aegypti dipindahkan  dari  wadah  penampung  ke  dalam  gelas  piala  yang  berisi  ekstrak  (sesuai konsentrasi), dan pengamatan dilakukan selama 24 jam dengan waktu pengamatan 0, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22 dan 24 jam. Perhitungan waktu dimulai setelah pemasukkan larva ke dalam gelas piala.
Pengamatan alur hidup  yaitu larva uji diberikan ekstrak mampu bertahan hidup pada jangka  waktu  tertentu  namun  tidak  dapat  mencapai  tahap  selanjutnya.  Efek  kematian dimaksud yaitu larva uji mengalami mortalitas akibat adanya aktivitas ekstrak larvasida yang diberikan.
Pengumpulan  Data. Data  yang  dikumpulkan  adalah  dengan  menghitung  jumlah larva  yang  mati  pada  setiap  kontainer.  Penghitungan  larva  yang  mati  dilakukan  selama pengamatan, dicatat didalam bentuk tabel. Larva yang mati merupakan larva yang tenggelam ke dasar kontainer, tidak bergerak, meninggalkan larva lain yang dapat bergerak dengan jelas dan tidak berespon terhadap rangsang.
Penentuan  nilai  LC 50 dan  LC 90. Data  kematian  larva  yang  diperoleh  diolah  dan dianalisis probit data kematian larva dengan software SPSS 17 (Finney, 1971).
Analisis  Data. Data  hasil  pengamatan  akan  dianalisis  dengan Analysis  Of  Variance (ANOVA)  menggunakan  program  SPSS  16,00.  Apabila  terdapat  perbedaan  yang  signifikan maka  akan  dilakukan  uji  lanjut  dengan  menggunakan  Uji  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT)  pada taraf kepercayaan 0,05%

## C. HASIL DAN PEMBAHASAN

## Mortalitas Larva Nyamuk Aedes aegypti
Hasil  pengamatan  dan  perhitungan  terhadap  mortalitas  larva  nyamuk Aedes  aegypti pada kelompok kontrol normal, kontrol negatif, EEDKP konsentrasi 5%, 10% dan 20% dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Rata-rata mortalitas larva nyamuk Aedes aegypti per tiap perlakuan
Waktu Pengamatan (Jam) Mortalitas Larva nyamuk Aedes aegypti per tiap perlakuan K(-) K(+) P1 P2 P3 0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 2 0,00 20,00 0,67 0,67 2,33 4 0,00 20,00 2,33 6,67 9,00 6 0,00 20,00 3,67 7,67 14,00 8 0,00 20,00 13,33 16,67 18,33 10 0,00 20,00 17,67 17,67 19,67 12 0,00 20,00 19,00 18,33 20,00 14 0,00 20,00 19,00 18,33 20,00 16 0,00 20,00 19,67 19,00 20,00 18 0,00 20,00 20,00 19,67 20,00 20 0,00 20,00 20,00 19,67 20,00 22 0,00 20,00 20,00 20,00 20,00 24 0,00 20,00 20,00 20,00 20,00 Total ± SD 0,00±0,00 a 18,46±05,40 b 13,49±8,25 c 14,18±7,44 d 15,64±7,12 e
Keterangan :  Superskrip  dengan  huruf  yang  sama  tidak  berbeda  nyata  (P  >  0,05).  K(-):  Tanpa  pemberian ekstrak,  K(+):  Diberi  abate  1%  (Kontrol  +),  P1:  Diberi  EEDKP  konsentrasi  5  g/L,  P2:  Diberi EEDKP konsentrasi 10 g/L, P3: Diberi EEDKP konsentrasi 20 g/L.
Berdasarkan  hasil  pada  Tabel  1  menunjukkan  bahwa  pada  kelompok  kontrol  negatif (K-) tidak terjadi mortalitas larva nyamuk Aedes aegypti (0,00±0,00) . Pada kelompok kontrol positif (diber abate1%) rata-rata mortalitas larva nyamuk Aedes aegypti sebesar 18,46±05,40, rata-rata  mortalitas  larva  nyamuk Aedes  aegypti pada  EEDKP  konsentrasi  5%  sebesar 13,49±8,25, pada kelompok EEDKP konsentrasi 10% terjadi mortalitas larva nyamuk Aedes aegypti sebesar  14,18±7,44  dan  rata-rata  mortalitas  larva  nyamuk Aedes  aegypti pada EEDKP  konsentrasi    sebesar  15,64±7,12.  Hasil  pada  Tabel  1  dapat  dilihat  lebih  jelas  pada Gambar 1.
Gambar 1. Grafik rata-rata mortalitas larva nyamuk Aedes aegypti
Berdasarkan  hasil Analysis  Of  Variance (ANOVA)  dua  jalur  dengan  menggunakan program SPSS 16,0 (Lampiran 2) menunjukkan bahwa nilai F hitung sebesar 327,904 dengan probabilitas  F  sebesar  0,000  (p<0,05),  yang  berarti  bahwa  EEDKP  berpengaruh  terhadap mortalitas  larva  nyamuk Aedes  aegypti. Hasil  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT)  menunjukkan bahwa  pada  semua  kelompok  perlakuan  (K-,  K+,  P1,  P2  dan  P3)  yang  diberikan  berbeda nyata  antara  tiap  konsentrasinya.  Hasil  ANOVA  juga  menunjukkan  bahwa  nilai  F  hitung
sebesar 462,484 dengan dengan nilai probabilitas sebesar 0,000(p<0,005), yang berarti bahwa lama waktu pengamatan juga berpengaruh terhadap rata – rata mortalitas larva nyamuk Aedes aegypti .
Terjadinya  kematian  larva Aedes  aegypti pada  berbagai  konsentrasi  EEDKP disebabkan oleh banyaknya senyawa aktif yang kontak langsung dengan larva Aedes aegypti pada  media.  Semakin  tinggi  konsentrasi  maka  senyawa  aktif  yang  diterima  larva Aedes aegypti juga semakin banyak pula. Senyawa aktif yang terkandung dalam ekstrak etanol daun kayu putih yaitu minyak atsiri, saponin, flavonoid, dan tannin.
Hasil  penelitian  Cheng et  al. (2008)  menunjukan  bahwa  minyak  atsiri  dari  jenis Eucalyptus  camaldulensis dan E.  Urophyilla bersifat  larvasida  terhadap A.  aegypti dengan nilai  LC 50 berturut-turut  31 dan 96 µg/mL. Selain  itu, minyak atsiri daun sirih  (Piper betle) bersifat larvasida terhadap A. aegypti dengan LC 50 309.03 µg/mL (Parwata et al . 2011).
Pada  penelitian  yang  dilakukan  Utami  (2010),  ekstrak  daun  bintaro  yang  diuji memberikan  respon  positif  terhadap  flavonoid,  steroid,  saponin,  dan  tanin.  Flavonoid mempunyai  efek  toksik,  antimikrob/sebagai  pelindung  tanaman  dari  pathogen  dan antifeedant.  Senyawa  flavonoid  yang  terkandung  dalam  ekstrak  daun  kayu  putih  diduga merupakan  racun  pernapasan  sehingga  menyebabkan  larva  tidak  dapat  bernapas  karena kerusakan sistem pernapasan dan akhirnya menyebabkan kematian larva.Senyawa flavonoid juga  merupakan  senyawa  pertahanan  tumbuhan  yang  dapat  bersifat  menghambat  makan serangga dan juga bersifat toksik. Cara kerja senyawa saponin dan flavonoid tersebut adalah sebagai stomach  poisoning atau  racun  perut  yang  dapat  mengakibatkan  gangguan  sistem pencernaan larva Aedes aegypti, sehingga larva gagal tumbuh dan akhirnya mati (Haditomo, 2010).  Posisi  tubuh  larva  yang  berubah  dari  normal  disebabkan  oleh  senyawa  flavonoid akibat  cara  masuknya  melalui siphon sehingga  mengakibatkan  kerusakan  sehingga  larva harus mensejajarkan posisinya dengan permukaan air untuk mempermudah dalam mengambil oksigen.
Saponin  merupakan  senyawa  aktif  permukaan  yang  kuat  menimbulkan  busa  jika dikocok dalam air (bersifat sebagai sabun) dan pada konsentrasi rendah sering menyebabkan hemolisis  sel  darah  merah.  Saponin  juga  dapat  menurunkan  produktivitas  kerja  enzim pencernaan  dan  penyerapan  makanan  (Harborne,  1987).    Selain  itu,  saponin  merupakan stomach poisoning atau racun perut bagi larva Aedes aegypti. Mekanisme dari saponin yaitu dapat  menurunkan  tegangan  permukaan  selaput  mukosa  traktus  digestivus  larva  sehingga dinding  traktus  digestivus  menjadi  korosif.  Tannin  dapat  menurunkan  kemampuan mencernakan  sari-sari  makanan  dan  memiliki  kemampuan  untuk  bereaksi  dengan    protein dan  mengendapkannya  menimbulkan  masalah  pada  penyiapan  enzim  atau  protein  lain  dari beberapa  tumbuhan.  Senyawa  atau  unsur  yang  bersifat  toksik  atau  racun  walaupun  dalam konsentrasi  rendah  apabila  masuk  ke  dalam  tubuh  larva  Aedes  aegypti  akan  menimbulkan reaksi kimia dalam proses metabolisme tubuh yang dapat menyebabkan kematian.
Menurut Sutanto dkk (2008) tingkat toksisitas larvasida untuk membunuh larva sangat bergantung pada bentuk larvasida, cara masuk senyawa ke dalam tubuh larva, konsentrasi dan jumlah  senyawa  dalam  tubuh  larva  serta  ukuran,  susunan  tubuh,  stadium  dan  habitat  larva. Larvasida masuk ke dalam tubuh larva melalui 3 cara, yaitu melalui permukaan tubuh (racun kontak),  melalui  mulut  dan  saluran  pencernaan  (racun  perut),  dan  melalui  sistem  respirasi
(racun  pernafasan).  Penetrasi  senyawa  toksik  ke  dalam  tubuh  serangga  melalui  epikutikula serangga yang terdiri dari lipoprotein terkonjugasi (protein dan lemak terpisah) yaitu bahan- bahan  lipid  atau  lilin  tersebar  tapi  tidak  membentuk  lapisan  sehingga  lapisan  ini  mudah ditembus  oleh  senyawa,  kemudian  masuk  ke  dalam  jaringan  di  bawah  integumen  menuju organ sasaran.
Nilai LC 50 dan LC 90
Hasil  analisis  probit  (Lampiran  3)  terhadap  nilai  LC 50 dan  LC 90 dapat  dilihat  pada Tabel 2.
Tabel 2. Nilai LC 50 dan LC 90 EEDKP
Probability 95% Confidence Limits for Waktu Pengamatan Estimate Lower Bound Upper Bound 50 5,091 1,904 7,007 90 12,599 9,980 20,091
Hasil  pada  Tabel  2  menunjukkan  bahwa  nilai  LC 50 EEDKP  sebesar  5,091  dengan batas  bawah  1,904  dan  batas  atas  7,007.  Hal  ini  berarti  bahwa  pada  konsentrasi  5,091% EEDKP  dapat  membunuh 50% larva nyamuk Aedes aegypti. Sedangkan  nilai  LC 90 EEDKP sebesar 12,599% dengan batas bawah 9,980 dan batas atas 20,091, yang berarti bahwa pada konsentrasi 12,599% EEDKP mampu membunuh 90% larva nyamuk Aedes aegypti . Nilai  LC 50 dan  LC 90 yang  diperoleh  dalam  penelitian  ini  sesuai  dengan  hasil pengamatan  mortalitas  larva  nyamuk Aedes  aegypti dimana  pada  konsentrasi  5%  mampu membunuh  larva  nyamuk  sebesar  13,49  individu  sedangkan  pada  konsentrasi  20%  mampu membunuh 15,64 individu.

## D. KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah diperoleh, maka dapat disimpulkan bahwa:
1. Ekstrak etanol daun kayu putih mampu membunuh larva nyamuk Aedes aegypti dengan dosis  efektif  ekstrak  etanol  kulit  batang  kedondong  dalam  membunuh  larva  nyamuk Aedes aegypti adalah 20 g/mL.
2. Nilai LC 50 ekstrak etanol daun kayu putih sebesar 5,091 dengan batas bawah 1,904 dan batas atas 7,007. Sedangkan nilai LC 90 ekstrak etanol daun kayu putih sebesar 12,599% dengan batas bawah 9,980 dan batas atas 20,091.

## Saran
1. Ekstrak  etanol  daun  kayu  putih  dapat  digunakan  sebagai  obat  larvasida  pengendali DBD .
2. Perlu  di  lakukan  penelitian  lebih  lanjut  mengenai  uji  aktivitas  larvasida  ekstrak  daun kayu putih terhadap larva nyamuk Aedes aegypti tetapi dengan waktu yang lama.

## E. DAFTAR PUSTAKA
Campbell  N.A,  J.B.  Recce  and  L.G.  Mitchell.    2004.    Biologi.      Manalu  W,  penerjemah; Safitri A, editor.  Jakarta: Erlangga.  Terjemahan dari:  Biology.
Cheng S.S, C.G. Huang , Y.J. Chen , J.J. Yu,  W.J. Chen and S.T. Chang  .  2008.  Chemical compositions  and  larvicidal  activities  of  leaf  essential  oils  from  two  eucalyptus species.  Biores. Technol. 100:452–456
Depkes RI. 2010. Penemuan Tatalaksana dan Penderita Demam Berdarah Dengue. Jakarta : Dirjen P2L.
Evi N. 2005. Insektisida Nabati Untuk Rumah Tangga. Info Kesehatan Masyarakat Fakultas Kesehatan Masyarakat USU, Medan, 9(1).
Hadi U.K  dan F.X. Koesharto. 2006. Nyamuk. Di dalam: H.S. Sigit dan K.H. Upik, Editor. Hama  Permukiman  Indonesia:  Pengendalian,  Biologi  dan  Pengendalian.  UKPHP FKH. IPB. Bogor. hal 23-51, 52-72.
Isnawati  R,  Murni  dan  Nelfita.  2015.  Uji  Daya  Bunuh  Ekstrak  Daun Nerium  oleander L. Terhadap  Larva  Nyamuk Aedes  aegypti dan Culex  quinquefasciatus .  Jurnal  Vektor Penyakit, 9(2): 59-64.
Gunawan D dan S. Mulyani. 2004. Ilmu Obat Alam.Penebar Swadaya : Jakarta. Lutony T.L. 1994. Produksi dan Perdagangan Minyak Atsiri. Penebar Swadaya. Jakarta. Moerid  M.S,  R.E.P.  Mangindaan  dan  F.  Losung.  2013.  Uji  Aktivitas  Larvasida  Nyamuk Aedes aegypti Dari Beberapa Ekstrak Ascidia. Jurnal Pesisir dan Laut Tropis 1(1).
Minarni E, T. Armansyah dan M. Hanafiah. 2013. Daya Larvasida Ekstrak Etil Asetat Daun Kemuning ( Murraya paniculata (L) Jack) Terhadap  Larva Nyamuk  Aedes aegypti. Jurnal Medikal Veterinaria. ISSN: 0853-1943. 7(1).
Parwata  I.M.O.A,  S.R.  Santi,  I.M.  Sulaksana  dan  I.A.A.  Widiarthini.  2011.  Aktivitas larvasida  minyak  atsiri  pada  daun  sirih  ( Piper  betle Linn)  terhadap  larva  nyamuk Aedes aegypti. Jurnal Kimia. 5(1): 88-93.
Soedarto.  2012.  Demam  Berdarah  Dengue-  Dengue  Haemoohagic  fever.  Jakarta:    Sagung Seto.
Sukowati S. 2010. Masalah Vektor Demam Berdarah Dengue (DBD) dan Pengendaliannya di Indonesia. Bul Jendela Epidemiol. 2:5-87.
Susilawati  dan  Hermansyah.  2015.  Aktivitas  Larvasida  Ekstrak  Metanol  Buah  Pare ( Momordica charantia L.) Terhadap Larva Aedes aegypti . Molekul, 10(1) : 33 – 37. Taufik  I  dan  Yosmaniar.  2010.  Pencemaran  Pestisida  pada  Lahan  Perikanan  Di  Daerah Karawang  -  Jawa  Barat.  Prosiding  Seminar  Nasional  Limnologi  V.  Balai  Riset Perikanan Budidaya Air Tawar. Bogor.