Uji  Aktivitas  Antifungal  Ekstrak  Daun  Johar  ( Cassia  siamea lamk)  terhadap  Pertumbuhan  Fungi phytophthora palmivora

## UJI AKTIVITAS ANTIFUNGAL EKSTRAK DAUN JOHAR (Cassia siamea Lamk) TERHADAP PERTUMBUHAN FUNGI Phytophthora palmivora
Yusup Indra Putra 1) , Hasyim As’ari 2) , Tristi Indah Dwi Kurnia 3) 1,2,3 Program Studi Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas PGRI Banyuwangi email: indrayusuf594@gmail.com

## Abstrak
Phytophthora  palmivora  adalah  fungi  penyebab  busuk  buah  pada  tanaman  kakao. Kerusakan  yang  diakibatkan  oleh  fungi  ini  adalah  menurunya  hasil  panen  hingga  90%. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya pengaruh pemberian ekstrak daun tanaman johar  (Cassia  Siamea  Lamk)  terhadap  pertumbuhan  fungi  Phytophthora  palmivora.  Jenis penelitian  ini  adalah  eksperimental  laboratoris  dengan metode  RAL dengan  3  kali  ulangan dan 7 perlakuan. Hasil analisis data menunjukan adanya pengaruh antara konsentrasi ekstrak daun  tanaman  johar  (Cassia  Siamea  Lamk)  terhadap  pertumbuhan  fungi  Phytopthora palmivora dengan berbeda signifikan pada tiap-tiap konsentrasinya. Konsentrasi ekstrak daun tanaman  johar  (Cassia  Siamea  Lamk)  yang  paling  efektif  adalah  50%  dengan  rata-rata diameter zona hambat sebesar 1.34 cm.
Keywords: Phytophthora palmivora; ekstrak daun tanaman johar (Cassia Siamea Lamk)

## 1. PENDAHULUAN
Tahun  2010  Indonesia  tercatat  menjadi  salah  satu  pengekspor  biji  kakao ( Theobroma  cacao )  terbesar  ketiga  dunia. Namun  peningkatan  luasan  perkebunan ternyata tidak diimbangi dengan produktivitas biji kakao yang cenderung mengalami penurunan.  Penurunanan  tersebut  dipengaruhi  oleh  banyak  faktor  seperti  adanya infeksi penyakit yang menyebabkan busuk buah kakao  (Rubiyo, et.al 2012).
Infeksi  tersebut  disebabkan  oleh  fungi Phytophthora  palmivora (Nurfianti, et.al 2019). Umumnya pengendalian fungi yang dilakukan dengan menggunakan fungisida sintetis.  Akan  tetapi  penggunaan  fungisida  sintesis  memiliki  dampak  negatif  bagi lingkungan dan kesehatan. Berdasarkan hal tersebut, maka diperlukan suatu metode pengendalian infeksi penyakit kakao yang ramah lingkungan seperti fungisida nabati.
Fungisida  nabati  merupakan  fungisida  yang  berasal  dari  berbagai  senyawa  dari bagian  organ tamanan  yang  dapat  memiliki  aktivitas  antifungal.  Salah  satu  tanaman
Uji  Aktivitas  Antifungal  Ekstrak  Daun  Johar  ( Cassia  siamea lamk)  terhadap  Pertumbuhan  Fungi phytophthora palmivora
yang  yang  berpotensi  sebagai  fungisida  nabati  yaitu  daun  tanaman  johar  ( Cassia siamea Lamk.).
Menurut Smith (2009), tanaman johar ( Cassia siamea Lamk.) juga mengandung senyawa metabolit seperti saponin , antrakuinon, flavonoid, alkaloid, dan tannin.  Dewi, et.al (2019),  menyatakan  bahwa  kandungan  senyawa  metabolit  seperti  saponin, flavanoit, tanin dan alkaloid yang terkandung pada tanaman  dapat digunakan sebagai antifungal.  Penelitian  sebelumnya  yang  dilakukan  oleh  Purwanto,  (2018), menunjukkan bahwa ekstrak metanol daun johar ( Cassia siamea Lamk.) efektif dalam menghambat pertumbuhan jamur Saprolegnia sp Serta penelitian yang  dilakukan oleh Pine, et.al (2018), menunjukkan bahwa krim ekstrak daun johar (Cassia siamea Lamk.) memberikan penghambatan terhadap pertumbuhan fungi Candida albicans.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  efektivitas  ekstrak  daun tanaman johar dalam menghambat pertumbuhan fungi Phytophtora palmivora, selain itu,  tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  menentukan  KHM  (Konsentrasi  Hambat Minimal) ekstrak daun tanaman johar.

## 2. METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  3  kali ulangan,  untuk  proses  pengujian  dilakukan  secara in  vitro dengan  metode  sumuran. Setiap  sumuran  di  isi  dengan  ekstrak  daun  tanaman  johar . Serial  konsentrasi  yang digunakan sebesar; 10%, 20%, 30%, 40% dan 50%. Setelah didapatkan hasil dari uji sebelumnya, kemudian dilakukan pengenceran untuk menentukan Konsentrasi Hambat Minimal (KHM), serial konsentrasi yang digunakan sebesar; 10%, 12,5%, 15%, 17,5% dan 20%. Kontrol positif menggunakan ketoconazole 1% dan kontrol negatif aquades steril.
Penelitian  dilakukan  dengan  cara  mengambil  100  µl  suspensi Phytophthora Palmivora. yang  telah  dibuat  kemudian  diteteskan  pada  tabung  reaksi  yang  berisi medium yang masih cair kemudian divortek selanjutnya dituang di dalam cawan petri steril.  Lalu membuat lubang atau sumuran yang dibuat pada permukaan media yang
Uji  Aktivitas  Antifungal  Ekstrak  Daun  Johar  ( Cassia  siamea lamk)  terhadap  Pertumbuhan  Fungi phytophthora palmivora
sudah  ditaburi Phytophthora  Palmivora. sebanyak  7  lubang  dengan  menggunakan pencetak agar yang sudah disterilkan dengan diameter 0,5 cm. Isi tiap lubang dengan ekstrak daun johar dengan konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, dan menggunakan kontrol  negatif  berupa  aquades  steril,  sedangkan  kontrol  positif  menggunakan fungisida  dengan konsentrasi 0,1% kemudian inkubasi pada suhu 30 o C selama 96 jam. Setelah  diinkubasi  selama  96  jam,  pengaruh  ekstrak  daun  johar  terhadap pertumbuhan fungi Phytophthora Palmivora. dapat dilihat dengan mengukur diameter zona bening yang terbentuk di sekitar lubang sumuran yang merupakan zona hambatan dengan  menggunakan  jangka  sorong.  Pengukuran  diameter  zona  hambat  ditentukan dengan cara berikut: Diameter hambatan = d 2 – d 1
Keterangan : d 1 = diameter lubang d 2 =diameter zona bening
Data hasil penelitian kemudian dianalisis secara statistik menggunakan uji Anova pada tingkat kepercayaan 95%, kemudian dilanjutkan dengan uji Duncan.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  identifikasi  fungi Phytopthora  palmivora dengan  pengamatan  secara makroskopis didapatkan koloni fungi berwarna putih berkoloni dengan struktus seperti serabut  kapas.  Secara  mikroskopis  fungi Phytopthora  palmivora memiliki  hifa  yang tidak bersekat, tidak bercabang dan tidak berwarna atau transparan. Bentuk sporangium seperti  buah  pear  terdapat  papilla  pada  ujungnya,  dan  memiliki  miselium.  Adapun Gambar  hasil  identifikasi  fungi Phytopthora  palmivora secara  mikroskopik  dapat dilihat pada Gambar dibawah ini.
Uji  Aktivitas  Antifungal  Ekstrak  Daun  Johar  ( Cassia  siamea lamk)  terhadap  Pertumbuhan  Fungi phytophthora palmivora
Gambar 1 Hasil pengamatan secara mikroskopik fungi Phytopthora palmivora Keterangan:
A : Sporangium
B : Hifa
C : Papilla
D : Miselium
Hasil uji pengaruh ekstrak daun tanaman johar ( Cassia Siamea Lamk) terhadap pertumbuhan  fungi Phytopthora  palmivora dapat  dilihat  pada  Gambar  dan  Tabel dibawah ini.
Gambar 2 Zona hambat ekstrak daun tanaman johar terhadap pertumbuhan            fungi Phytopthora palmivora
Uji  Aktivitas  Antifungal  Ekstrak  Daun  Johar  ( Cassia  siamea lamk)  terhadap  Pertumbuhan  Fungi phytophthora palmivora
Keterangan: K+ : Ketoconazole 0,1% K-  : Aquades steril P1  : Ekstrak daun johar 10% P2  : Ekstrak daun johar 20% P3  : Ekstrak daun johar 30% P4  : Ekstrak daun johar 40% P5  : Ekstrak daun johar 50%
Tabel  1  Hasil  pengukuran  zona  hambat  ekstrak  daun  tanaman  johar  terhadap  fungi Phytopthora palmivora.
No Perlakuan U1 U2 U3 Rata- rata 1 K- 0,00 0,00 0,00 0,00 2 K+ 0,41 0,49 0,43 0,44 3 P1 0,00 0,00 0,00 0,00 4 P2 0,14 0,17 0,10 0,13 5 P3 0,46 0,41 0,39 0,42 6 P4 0,62 0,70 0,63 0,65 7 P5 1,27 1,37 1,39 1,34
Keterangan: K+ : Ketoconazole 0,1% K-  : Aquades steril P1  : Ekstrak daun johar 10% P2  : Ekstrak daun johar 20% P3  : Ekstrak daun johar 30% P4  : Ekstrak daun johar 40%
P5  : Ekstrak daun johar 50%
Berdasarkan  Tabel  1  menunjukan  bahwa  perlakuan  (P1,  P2,  P3,  P4,  dan  P5) memberikan pengaruh yang berbeda-beda pada setiap zona hambat fungi Phytopthora palmivora. Dimana  rata-rata  diameter  zona  hambat  terbesar  ditunjukan  pada konsentrasi  50%  yaitu  sebesar  1,34  cm  (13,4  mm),  hal  tersebut  menunjukkan menunjukan  zona  hambat  perlakuan  (P5)  disekitar  10-20  mm,  sehingga  dapat
Uji  Aktivitas  Antifungal  Ekstrak  Daun  Johar  ( Cassia  siamea lamk)  terhadap  Pertumbuhan  Fungi phytophthora palmivora
dikategorikan  kuat  (Ardiansyah,  2005).  Rata-rata  diameter  zona  hambat  pada perlakuan  P4  (konsentrasi  40%)  yaitu  sebesr  0,65  cm  (6,5  mm)  hal  tersebut menunjukan  bahwa  diameter  zona  hambat  berada  dikisaran  5-10  mm  yang  dapat dikategorikan sedang (Ardiansyah, 2005). Sedangkan pada perlakuan P2, P3, dan K+ didapatkan rata-rata diameter zona hambat dikisaran 0,13-0,44 cm (1,3-4,4 mm), yang dapat dinyatakan masih dibawah 5 mm, sehingga pada perlakuan-perlakuan tersebut dikategorikan memiliki zona hambat yang lemah (Ardiansyah, 2005).
Berdasarkan  hasil  analisis  ANOVA  yang  ditunjukan  dengan  nilai  signifikansi sebesar 0,000 sehingga lebih kecil dari 0,05 (P ˂ 0,05) dan F Hitung lebih besar dari F Tabel (454,885  ˃ 2,85), hal tersebut dapat diartikan bahwa perlakuan pemberian ekstrak daun tanaman  johar  ( Cassia  Siamea Lamk)  merupakan  faktor  yang  menghambat pertumbuhan fungi Phytopthora palmivora.
Berdasarkan hasil uji Duncan, zona hambat perlakuan 10%, 20%, 30%, 40%, dan 50%  berada  pada  kolom  yang  berbeda,  hal  tersebut  menunjukan  bahwa  perlakuan- perlakuan  tersebut  berbeda  nyata  atau  signifikan.  Sedangkan  K+  (kontrol  positif ketoconazole  0,1%)  berada  di  satu  kolom  dengan  perlakuan  30%  hal  tersebut menunjukkan bahwa tidak berbeda nyata atau tidak signifikan dengan perlakuan 30%, namun K+ berbeda nyata atau signifikan dengan perlakuan lainya. Berdasarkan hasil uji Duncan menunjukan  bahwa  konsentrasi  perlakuan  ekstrak  daun  tanaman  johar ( Cassia Siamea Lamk) dengan range (jarak) 10% menunjukan tingkat penghambatan terhadap  fungi Phytopthora  palmivora yang  nyata,  dengan  peningkatan  konsentrasi perlakuan akan berpengaruh terhadap peningkatan zona hambat yang terbentuk. Hal tersebut sesuai dengan pernyataan As’ari, et al (2016), bahwa peningkatan konsentrasi senyawa  antimikrobial  pada  suatu  ekstrak  tanaman,  juga  akan  diikuti  dengan peningkatan  senyawa  metabolit  yang  terlarut  didalamnya,  sehingga  memungkinkan terjadinya peningkatan zona hambat yang terbentuk pada mikroba uji.
Senyawa metabolisme yang terdapat pada  tanaman johar ( Cassia siamea Lamk) secara  mandiri  maupun  kombinasi  dapat  menghambat  pertumbuhan  sel  fungi
Uji  Aktivitas  Antifungal  Ekstrak  Daun  Johar  ( Cassia  siamea lamk)  terhadap  Pertumbuhan  Fungi phytophthora palmivora
Phytopthora  palmivor. Dimana  kandungan  senyawa  saponin  yang  terdapat  pada tanaman  johar  ( Cassia  siamea Lamk)  dapat  menurunkan  konsentrasi  permukaan dinding  sel  dan  merusak  permeabilitas  membrane  sel  fungi  (Ningrum, et  al .  2017). Sedangkan kandungan senyawa flavonoid dapat mendenaturasi protein membran yang menyebabkan  gangguan  dalam  pembentukan  sel  sehingga  merubah  komposisi komponen protein, selain itu denaturasi protein juga menyebabkan fungsi membran sel terganggu  dan  mengakibatkan  meningkatnya  permeabilitas  membran  sel  sehingga terjadi  kerusakan  sel  fungi  (Srinigsih,  2008).  Putri,  (2015)  menjelaskan  bahwa kandungan  senyawa  tannin  yang  terdapat  pada  tanaman  dapat  menghambat pertumbuhan  fungi  dengan  cara  menghambat  sintesis  khitin  yang  digunakan  untuk pembentukan  dinding  sel  dan  merusak  membran  sel  sehingga  pertumbuhan  fungi terhambat. Sedangkan kandungan senyawa alkaloid yang terkandung dalam tanaman johar ( Cassia Siamea Lamk) dapat menghambat pertumbuhan  sel fungi dengan cara terjadinya  ikatan  senyawa  alkaloid  dan  ergosterol,  yang  berdampak  terhadap pembentukan  lubang  dan  mengakibatkan  kebocoran  pada  membrane  sel  fungi (Setiabudy, et al .2008).
Hasil  uji  Konsentrasi  Hambat  Minimal  (KHM) dapat  dilihat  pada  Gambar  dan Tabel dibawah ini.
Gambar 3 hasil uji Konsentrasi Hambat Minimal (KHM).
Uji  Aktivitas  Antifungal  Ekstrak  Daun  Johar  ( Cassia  siamea lamk)  terhadap  Pertumbuhan  Fungi phytophthora palmivora
Keterangan: K+ : Ketoconazole 1% K-  : Aquades steril A1  : Ekstrak daun johar 10% A2  : Ekstrak daun johar 12,5% A3  : Ekstrak daun johar 15% A4  : Ekstrak daun johar 17,5% A5  : Ekstrak daun johar 20%
Tabel 2 Hasil uji Konsentrasi Hambat Minimal (KHM).
No perlakuan  U1 U2 U3 Rata- rata 1 K- 0,00 0,00 0,00 0,00 2 K+ 1,67 2,25 2,26 2,06 3 P1 0,00 0,00 0,00 0,00 4 P2 0,02 0,01 0,01 0,013 5 P3 0,05 0,04 0,04 0,043 6 P4 0,10 0,09 0,09 0,093 7 P5 0,15 0,12 0,13 0,133 Keterangan:
K+ : Ketoconazole 1% K-  : Aquades steril A1  : Ekstrak daun johar 10% A2  : Ekstrak daun johar 12,5% A3  : Ekstrak daun johar 15% A4  : Ekstrak daun johar 17,5% A5  : Ekstrak daun johar 20%
Berdasarkan Tabel 2 diatas menunjukan bahwa zona hambat ekstrak daun tanaman johar  ( Cassia  Siamea Lamk)  terbentuk  pada  konsentrasi  K+,  A2,  A3,  A4,  dan  A5. Konsentrasi yang memiliki zona hambat paling besar adalah 20% dengan dengan rata- rata  diameter  zona  hambat  sebesar  0,133  cm,  sedangkan  konsentrasi  yang  memiliki zona hambat terkecil adalah 12,5% dengan rata-rata dimeter zona hambat sebesar 0,013 cm. Kandungan senyawa metabolit seperti saponin, flavonoid, tanin dan alkaloid pada
Uji  Aktivitas  Antifungal  Ekstrak  Daun  Johar  ( Cassia  siamea lamk)  terhadap  Pertumbuhan  Fungi phytophthora palmivora
KHM  ekstrak  daun  tanaman  johar  ( Cassia  Siamea Lamk)  (konsentrasi  12,5%) terkandung  relatif  paling  sedikit  dan  masih  menunjukkan  penghambatan  pada  fungi Phytopthora palmivora . hal tersebut didukung dengan pernyataan (As’ari, et al,. 2016), menyatakan  bahwa  peningkatan  dan  penurunan  konsentrasi  perlakuan  berbanding dengan  kandungan  senyawa  metabolit  tanaman  yang  terlarut  didalamnya,  sehingga ketika  senyawa  metabolit  yang  terkandung  terlalu  rendah  dimungkinkan penghambatan terhadap mikroorganisme tidak terbentuk.

## 4. KESIMPULAN DAN SARAN

## 4.1 Kesimpulan
1. Terdapat perngaruh antara ekstrak daun tanaman johar ( Cassia Siamea Lamk) terhadap pertumbuhan fungi phytopthora palmivora.
2. Ekstrak daun tanaman johar ( Cassia Siamea Lamk) memperlihatkan aktivitas pada  Konsentrasi  Hambat  Minimal  (KHM)  12,5%  dengan  rata-rata  diameter zona hambat sebesar 0,013 cm.
4.2 Saran
1. Ekstrak daun tanaman johar ( Cassia Siamea Lamk) perlu dilakukan konsentrasi yang  lebih  tinggi  agar  lebih  efektif  dalam  menghambat  fungi phytopthora palmivora.
2. Perlu dilakukan penelitian lanjutan terkait senyawa metabolit yang terkandung dalam ekstrak daun tanaman johar ( Cassia Siamea Lamk) dalam menghambat fungi phytopthora palmivora.

## 5. REFERENSI
As’ari,  H.,  Kurnia,  T.  I.,  &  Nurchayati,  N.  (2016).  Aktivitas  Antimicrobial  Ekstrak
Etanol Biji Ganitri ( Elaeocarpus ). bioedukasi , 16.
Ardiansyah.  2005.  Antimikroba  dari  Tumbuhan.  (Bagian  kedua)  Available  from; http://www.beritaiptek.com (diakses pada tanggal 12 Februari 2021).
Uji  Aktivitas  Antifungal  Ekstrak  Daun  Johar  ( Cassia  siamea lamk)  terhadap  Pertumbuhan  Fungi phytophthora palmivora
Dewi,  Ni  Luh  P  S  S,  S,  Dewa  N,  S,  I  Ketut.  (2019).  Uji  Efektivitas  Ekstrak  Daun Cengkeh  ( Syzygium  Aromaticum L.)  Terhadap  Phytophthora  Palmivora Penyebab  Penyakit  Busuk  Buah  Kakao  ( Theobroma  Cacao L.). Jurnal Agroekoteknologi Tropika, 8(4) , 458-467.
Ningrum,  D.  W,  Kusrini,  D.  &  Fachriyah  E.  (2017).  Uji  Aktivitas  Antioksidan Senyawa  Flavonoid  dari  Ekstrak  Etanol  Daun  Johar  ( Cassia  siamea Lamk). Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi , 20(3), 123-129.
Nurfianti,  &  Umrah.  (2019).  Pengamatan  Gejala  Infeksi Phytophthora  palmivora Penyebab Penyakit Busuk Buah pada Kakao. Biocelebes, 13(3) , 253-261.
Pine,  Andi,  T.  D.  A.  Arief,    D.  Ika  Riski  (2018).  Potensi  Krim  Ekstrak  Daun  Johar ( Cassia  siamea Lamk)  Menghambat  Pertumbuhan  Candida  albicans. Jour.Pharm.Sci, 1(1) , 42-48.
Purwanto,  Ridwan  Y.(2018).  Uji  Aktivitas  Antijamur  Ekstrak Daun  Johar ( Cassia siamea Lamk.) terhadap  Pertumbuhan  Jamur  Patogen Saprolegnia  sp. http://digilib.uin-
suka.ac.id/34090/1/11640010%20BAB%20I_BAB%20V_DAFTAR%20PUS TAKA.pdf [27 juli 2020].
Putri AMS (2015). Efek Antifungi Ekstrak Daun Kenikir ( Cosmos caudatus Kunth .) Terhadap Pertumbuhan Candida Albicans Secara In Vitro. Skripsi. Surakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.
Rubiyo,  &  Siswanto.  (2012).  Peningkatan  Produksi  Dan  Pengembangan  Kakao (Theobroma cacao L.) di Indonesia. Buletin RISTRI, 3(1) , 33-48.
Setiabudy, & Bahary. (2008). Farmakologi dan Terapi. Jakarta: Balai Penerbit FKUI. Smith,  Y.R.A  (2009).  Determination  of  Chemical  Composition  of Senna  siamea ( Cassia leaves). Pakistan Journal of Nutrition , 119-121.
Sriningsih.  2008.  Analisa  Senyawa  Golongan  Flavonoid  Herba  Tempuyung (SonchusarvensisL):  www.indomedia.com/intisari/1999/juni/tempuyung.htm. (diakses tanggal 11 Juli 2020)