(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (2), 33-38
Pengaruh Daya Hambat Sediaan Salep Ekstrak Daun Katuk ( Sauropus androgynus L.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus
Adrianz Mario Tethool 1 , Selvana S. Tulandi 2* , Hetty V. Tulandi 1 , Vlagia I. Paat 1 , Nerni O. Potalangi 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
2 Program Studi Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon *Penulis Korespondensi; selvanatulandi20@gmail.com Diterima: 28 Juli 2021; Disetujui : 24 Septermber 2021

## ABSTRAK
Indonesia  adalah  salah  satu  negara  yang  mempunyai  tingkat  keanekaragaman  hayati  yang  tinggi, Salah  satunya  adalah  daun  katuk.  Penelitian  sebelumnya  Simbolon  (2011)  tentang    karakterisasi simplisia  dan  skrining  fitokimia.  Hasil  skrining  diperoleh  senyawa  alkaloida,  flovonoid,  tanin, glikosida,  dan  steroida.  Disamping  itu,  daun  katuk  mempunyai  aktivitas  sebagai  antimikroba terhadap  bakteri  Stapylococcus  aureus  yang  merupakan  salah  satu  penyebab  terjadinya  luka borok/kronis. Staphylococcus  aureus merupakan  flora  normal  pada  kulit  manusia,  oleh  sebab  itu untuk  penanganannya  yang    rasional,  penggunaan  antibakteri  secara  topikal  lebih  efektif.  Contoh sediaan yang digunakan secara topikal adalah salep, gel dan krim.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  apakah  sediaan  salep  ekstrak  daun  katuk  dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus atau tidak. Metode yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  metode  eksperimental  laboratorium  dengan  menggunakan  Rancangan  Acak Lengkap (RAL). Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa sediaan salep ekstrak daun katuk dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus yang ditandai dengan adanya zona bening yang terbentuk disekitar sumuran.
Kata Kunci : Salep, ekstrak, katuk, Staphylococcus aureus .

## ABSTRACT
Indonesia is one of the countries that have high level biodiversity. One of them is katuk leaf. Previous research  Simbolon  (2011)  about  characterization  of  simplicia  and  phytochemical  screening. Screening  result  obtained  compounds  alkaloida,  flavonoids,  tannins,  glycosides  and  steroids.  In addition, katuk leaf have activity as an antimicrobial against Staphylococcus aureus bacteria which is one of the causes of ulcers / chronic wounds. Staphylococcus aureus is a normal flora of human skin, therefore for rational treatment, topical antibacterial use is more effective. Examples of topical preparations are ointment, gels and creams.
The purpose of this study to determine whether the preparation of katuk leaf extract can inhibit the growth  of  Staphylococcus  aureus  bacteria  or  not.  The  method  used  in  this research  is  laboratory experimental method using Randomized Complete Design (RAL). The results of this study indicate that the preparation of katuk leaf extract can inhibit the growth of Staphyloccocus aureus bacteria characterized by clear zone formed around the wells.
Keywords : Ointment, extract, katuk, staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Indonesia adalah salah satu negara yang mempunyai  tingkat  keanekaragaman  hayati yang tinggi, potensi sumber daya tumbuhan yang ada  merupakan  suatu  aset  dengan  nilai keunggulan  komparatif.  Ini  dapat  dijadikan sebagai  modal  dasar  dalam  upaya  pemanfaatan
dan pengembangannya untuk  menjadi komoditi yang kompetitif.
Tanaman  katuk  yang  telah  diketahui masyarakat  adalah  untuk  melancarkan  air  susu ibu  (ASI),  yaitu  dengan  cara  mengkonsumsi daun katuk sebagai sayuran [4]. Selain itu, daun katuk  diyakini  memiliki  manfaat  mengatasi
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (2), 33-38
sembelit  dan  dapat  mengatasi  infeksi  yang diakibatkan  oleh  bakteri  Gram  positif  karena didalam daun katuk tersebut diduga mengandung
antibakteri yang
dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif [5].
Penelitian sebelumnya Simbolon (2011) tentang    karakterisasi  simplisia  dan  skrining fitokimia  serta  uji  aktivitas  ekstrak  etanol  daun tumbuhan katuk ( Sauropus androgynus L). Hasil skrining diperoleh senyawa alkaloida, flovonoid, tanin,  glikosida,  dan  steroida.  Disamping  itu, daun  katuk  mempunyai  aktivitas  sebagai antimikroba  terhadap  bakteri  Stapylococcus aureus  yang  merupakan  salah  satu  penyebab terjadinya luka borok/kronis. Senyawa flavonoid berfungsi sebagai antibakteri, dan antiinflamasi, sedangkan  tanin  berfungsi  sebagai  astringen yang dapat menciutkan pori-pori kulit membentuk  jaringan  baru  dan  juga  sebagai antibakteri [4][6][7].
Staphylococcus aureus adalah salah satu bakteri  penyebab  infeksi  piogenik  pada  kulit. Infeksi  yang  disebabkan  oleh  Staphylococcus aureus  antara  lain  bisul,  jerawat,  dan  infeksi luka. Pada  bisul  atau abses,  seperti  jerawat  dan borok, lipase Staphylococcus aureus melepaskan  asam-asam  lemak  dari  lipid  dan menyebabkan iritasi jaringan [3].
Staphylococcus aureus merupakan flora normal pada kulit manusia, oleh sebab itu untuk penanganannya  yang    rasional,  penggunaan antibakteri  secara  topikal  lebih  efektif.  Contoh sediaan  yang  digunakan  secara  topikal  adalah salep,  gel  dan  krim.    Penelitian  sebelumnya Fatimah dkk., (2014) tentang Efektifitas ekstrak daun  katuk  ( Sauropus  androgynus L)  dalam menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus  secara  in  vitro  telah terbukti  bahwa  ekstrak  daun  katuk  dapat menghambat
pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
Berdasarkan  latar  belakang  diatas, saya sebagai  peneliti  tertarik    melakukan  penelitian untuk  mengetahui apakah sediaan salep  ekstrak daun  katuk  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .

## METODE PENELITIAN
Penelitian ini dilaksanakan di laboratorium  terpadu  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas  Kristen Indonesia  Tomohon  dan  di  laboratorium mikrobiologi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu
Pengetahuan  Alam  Universitas  Sam  Ratulangi Manado.  pada  bulan  Mei  sampai  September 2017.
Jenis penelitian ini merupakan penelitian  experimental  yang  dilakukan  di laboratorium. Rancangan percobaan ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan menggunakan  4  perlakuan  dan  masing-masing diulang sebanyak 3 kali, yaitu:
P1 : Sediaan salep ekstrak daun katuk 30% P2 : Sediaan salep ekstrak daun katuk 40% P3 : Sediaan salep ekstrak daun katuk 60% P4 : Kontrol negatif, basis salep vaselin.
Selain  perlakuan  maka  faktor  lain berupa  keadaan  lingkungan  atau  tempat percobaan  dapat  diatur  sehingga  memenuhi asumsi homogenitas [8].
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  antara  lain  gelas  ukur,  Erlenmeyer, timbangan  analitik,  autoklaf,  tabung  reaksi, inkubator,  cawan  petri,  jangka  sorong,  bunsen, mikro  pipet,  jarum  ose,  batang  pengaduk, corong,  rotary  evaporator,  kertas  saring,  LAF, pH meter, lubang tips.
Bahan-bahan yang digunakan antara lain daun  katuk,  etanol  96%,  vaselin  putih,  nutrient agar, nutrient broth, biakan murni staphylococcus
aureus , DMSO
(dimetilsulfoksida), aquades, alkohol 70%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## 1. Hasil Pengolahan Sampel
Sampel  daun  katuk  yang  di  ambil  dan telah  di  pisahkan  dari  batang  kemudian  dicuci bersih dan ditiriskan  berjumlah 5 kg. Setelah itu sampel  daun  katuk  dibuat  simplisia  dengan dikering anginkan selama  ± 1 bulan. Simplisia yang di hasilkan seberat 1 kg.

## 2. Hasil Pembuatan Ekstrak Daun Katuk
Simplisia  daun  katuk  seberat  1  kg dimaserasi  menggunakan  etanol  96%  sebanyak 18 liter dengan dua kali pengulangan perendaman.  Hasil  maserasi  di  pekatkan menggunakan rotary evaporator dan menghasilkan ekstrak kental daun katuk sebesar 57,25  gram.  Ekstrak  kental  yang  didapat  lalu diformulasikan  menjadi  sediaan  salep  dengan berbagai  konsentrasi  dan  kemudian  diuji aktivitas antibakterinya terhadap bakteri Staphylococcus aureus .
3. Hasil Evaluasi Salep
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (2), 33-38
a. Hasil Uji Organoleptis Pengujian organoleptis dilakukan dengan  cara  melakukan  pengamatan  terhadap
bentuk,  warna,  dan  bau  salep  tersebut.  Hasil pengamatan  terhadap  salep  ekstrak  daun  katuk dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil uji organoleptis sediaan salep ekstrak daun katuk
Salep Bentuk Warna Bau Salep ektrak daun katuk 30% Setengah padat Hijau kehitaman Bau khas ekstrak daun katuk Salep ekstrak daun katuk 40% Setengah padat Hijau kehitaman Bau khas ekstrak daun katuk Salep ekstrak daun katuk 60% Setengah padat Hijau kehitaman Bau khas ekstrak daun katuk b. Hasil Uji Homogenitas
Pengamatan  homogenitas  sediaan  salep ekstrak  daun  katuk  dilakukan  terhdap  tiga formula  :  FI  (Formula  mengandung  30% ekstrak),  FII  (Formula  mengandung  40% ekstrak)  dan  FIII  (Formula  mengandung  60% ekstrak)  dilakukan  dengan  cara  mengoleskan sejumlah  tertentu  sediaan  pada  sekeping  kaca transparan.  Hasil  pemeriksaan  homogenitas
menunjukkan bahwa seluruh sediaan salep tidak memperlihatkan  adanya  butir-butir  kasar  pada saat sediaan dioleskan pada kaca transparan. Hal ini  menunjukkan  bahwa  sediaan  yang  dibuat mempunyai susunan yang homogen [1].
c. Hasil Uji pH
Hasil  pengujian  nilai  pH  sediaan  salep ekstrak daun katuk dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil pengujian pH Sediaan salep pH Salep ekstrak daun katuk 30% 4,81 Salep ekstrak daun katuk 40% 4,85 Salep ekstrak daun katuk 60% 5,92
Hasil  pengujian  pH  sediaan  salep ekstrak  daun  katuk  berada  diantara  pH  4,81- 5,92.  Hal  ini  sesuai  dengan  yang  diharapkan, yaitu  pH  berada  pada  rentang  pH  normal  kulit yaitu antara 4,5-7.
d. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Salep Ekstrak  Daun  Katuk  ( Sauropus  androgynus L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus Metode yang digunakan pada penelitian ini  adalah  metode  difusi  cara  sumuran  dengan menggunakan  lubang  tips  untuk  membuat lubang  sumuran  pada  media  nutrient  agar. Setelah lubang terbentuk kemudian dimasukkan larutan  uji  sediaan  yang  telah  dibuat  dengan masing-masing konsentrasi. Alasan penggunaan metode  difusi  cara  sumuran  yaitu  larutan  uji sediaan yang telah dibuat dari salep ekstrak daun katuk  langsung  dimasukkan  disetiap  lubang maka efek untuk menghambat bakteri lebih kuat. Pada metode sumuran terjadi proses osmolaritas dari konsentrasi ekstrak pada sediaan salep.
A B C
D
Gambar 1. Pembentukan zona bening ulangan 1 (Dokumentasi pribadi, 2017).
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (2), 33-38
A B C
D
Gambar 2. Pembentukan zona bening ulangan 2 (Dokumentasi pribadi, 2017). A B C
D
Gambar 2. Pembentukan zona bening ulangan 3 (Dokumentasi pribadi, 2017). Keterangan : A : Kontrol negatif B : Pembentukan zona bening sediaan salep ekstrak 30% C : Pembentukan zona bening sediaan salep ekstrak 40% D : Pembentukan zona bening sediaan salep ekstrak 60% Hasil uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa sediaan salep ekstrak daun katuk  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus .  Hal  ini  terlihat  jelas dengan  adanya  zona  bening  yang  timbul  di sekitar sumuran. Secara kasat mata hasil masing- masing  ulangan  menunjukkan  perbedaan  yang tidak  terlalu  besar,  untuk  itu  diperlukan perhitungan rata-rata diameter zona bening agar dapat  mengetahui  selisih  antar  perlakuan.  Hasil perhitungan  diameter  zona  bening  dapat  dilihat pada tabel 3 berikut :
Tabel  3.  Hasil  perhitungan  rata-rata  uji  aktivitas  antibakteri  sediaan  salep  ekstrak  daun  katuk terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus
Sediaan Diameter daerah hambat (mm) Rata-rata diameter daerah hambat (mm) 1 2 3 B - - - - F1 6.5 7.5 7.5 7.16 F2 8 8 8 8 F3 8.5 9 9.10 8.86 Keterangan : B : Kontrol negatif F 1   : Formula mengandung 30% ekstrak daun katuk
F 2    : Formula mengandung 40% ekstrak daun
katuk
F 3    : Formula mengandung 60% ekstrak daun katuk
Hasil  perhitungan  yang  ditunjukkan pada  tabel  4,  menunjukkan  diameter  daerah hambat masing-masing konsentrasi adalah 30% = 7.16 mm, 40% = 8 mm, dan 60% sebesar 8.86
mm.  Konsentrasi  30%,  40%  dan  60%  dari sediaan  salep  ekstrak  daun  katuk  ( Sauropus androgynus L)  memiliki  efektivitas  yang berbeda-beda  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus yang  dapat  diamati berdasarkan pengukuran zona hambat pertumbuhan  bakteri  pada  media  nutrien  agar. Nilai  rata-rata  diameter  daerah  hambat  tersebut menujukkan  bahwa  adanya  perubahan  yang terjadi terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus .  Zona  hambat  yang ditunjukkan  berasal  dari  kemampuan  ekstrak. Pelarut  tidak  memberikan  pengaruh  terhadap
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (2), 33-38
zona  hambat  yang  terbentuk,  ditunjukkan dengan  nilai  kontrol  negatif  yang  seluruhnya bernilai nol.
Kemampuan sediaan salep ekstrak daun katuk ( Sauropus androgynus L) dalam menghambat pertumbuhan
bakteri Staphylococcus  aureus sendiri  tidak  lepas  dari kandungan  senyawa  yang  terkandung  didalam daun  katuk.  Keberadaan  metabolit  sekunder menjadi  faktor  penting  melalui  mekanismenya terhadap  bakteri.  Hasil  skrining  diperoleh senyawa  alkaloida,  flovonoid,  tanin,  glikosida, dan  steroida.  Diketahui  senyawa  yang  bekerja sebagai  antibakteri  adalah  alkaloid,  flavonoid dan tanin.

## 4. Analisis Data
a. Uji Homogenitas Varian
Berdasarkan  hasil  uji  Homogenitas
Varians menunjukkan nilai p = 0,003 (p < 0,05) yang berarti bahwa varians populasi zona bening (daerah hambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus ) tidak homogen.
Tabel 4. Hasil uji homogenitas varian zona bening Levene Statistic df1 df2 Sig. 10,929 3 8 0,003
Berdasarkan  uji  homogenitas  varians diatas  yang  tidak  memenuhi  syarat  maka penggunaan  Analisis  Varians  (Anova)  tidak tepat.  Maka  digunakanlah  pengujian  Kruskal- Wallis  (tidak  memerlukan  syarat  homogenitas varians).
b. Uji Kruskal-Wallis
Berdasarkan  analisis  Kruskal  Wallis dapat diketahui bahwa nilai p = 0,013 (p < 0,05) artinya  ada  pengaruh  signifikan  konsentrasi sediaan salep ekstrak daun katuk 30%, 40%, dan 60% terhadap pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus . Tabel 5. Hasil analisis uji Kruskal-Wallis Zona Bening Chi-Square 10,722 Df 3 Asymp. Sig. ,013 c. Uji Lanjut Tukey
Uji  ini  digunakan  untuk  melihat perbandingan  antar  pasangan  konsentrasi  salep ekstrak daun katuk yang  mempunyai beda rata-
rata  terhadap daya hambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .
Tabel  6.  Hasil  uji  perbandingan  menggunakan uji tukey Perlakuan N Subset for alpha = 0.05 1 2 3 Ktrl - 3 0,0000 SEDK 30% 3 7,1667 SEDK 40% 3 8,0000 SEDK 60% 3 8,8667 Sig. 1,000 ,059 1,000
Berdasarkan  Uji  Tukey,  terlihat  bahwa pasangan  kontrol  (-)  dengan  nilai  konsentrasi 30%, 40% dan 60% mempunyai nilai p value = 0,000 (p<0,05), menunjukkan adanya perbedaan signifikan. Hasil uji perbandingan  menunjukkan bahwa salep ekstrak daun katuk konsentrasi 30% dan 40%  memberikan  efek  yang sama terhadap penghambatan pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus . Sedangkan salep ekstrak daun katuk 60% memberikan efek yang berbeda dengan konsentrasi lainnya terhadap
penghambatan pertumbuhan
bakteri
Staphylococcus.
Menurut  hasil  yang  ditunjukkan  secara statistik  dapat  dikatakan  bahmwa  konsentrasi sediaan  salep  60%  memiliki  kemampuan penghambatan  yang  lebih  besar  dibandingkan dengan sediaan salep konsentrasi 30% dan 40%. Peneliti merumuskan bahwa banyaknya konsentrasi  ekstrak  mempengaruhi  kemampuan daya menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus ,  dimana  daerah  zona bening yang terbentuk lebih besar pada sediaan salep  ekstrak  daun  katuk  konsentrasi  60% dibandingkan  dengan  30%  dan  40%.  Hal  ini dapat dikatakan bahwa ekstrak daun katuk yang telah  dibuat  dalam  bentuk  sediaan  salep memiliki pengaruh dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil yang diperoleh, maka dapat  disimpulkan  bahwa  sediaan  salep  ekstrak daun katuk memiliki pengaruh dalam menghambat
pertumbuhan
bakteri Staphylococcus  aureus .  Sediaan  salep  ekstrak daun  katuk  konsentrasi  60%  memiliki  aktivitas antibakteri  yang  lebih  besar  dibandingkan sediaan  salep  ekstrak  daun  katuk  konsentrasi 30% dan 40%.
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2021, 4 (2), 33-38

## DAFTAR PUSTAKA
1. Ditjen    POM.    (1979).    Farmakope Indonesia.    Edisi    Ketiga.    Jakarta: Depkes  RI. Halaman 9.
2. Fatimah  S.,  Yuliana  P.,  Aris  M.,  2014, Efektifitas Ekstrak Daun Katuk
( Sauropus  androgynus L.)  Dalam
Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus  aureus Secara  in Vitro.  Jurnal.  STIkes  Guna  Bangsa, Yogyakarta.
3. Gould, D. & Brooker, C., 2003, Mikrobiologi Terapan  untuk  Perawat,  83,  Jakarta, EGC.
4. Rukmana,  H.R.  dan  Harahap  I.M.  2003. Katuk,  Potensi  dan  Manfaatnya. Yogyakarta: Kanisius. Hal. 19-20.
5. Santoso,  H.B.  2008.  Ragam  dan  Khasiat Tanaman  Obat.  Jakarta  :  Agromedia Pustaka. Cetakan I.
6. Simbolon,  N.  2011.  Karakterisasi  Simplisia dan  Skrining  Fitokimia  serta  Uji Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Daun  Tumbuhan  Katuk  ( Sauropus androgynus Merr.).  Skripsi.  Fakultas Farmasi. USU. Medan.
7. Simon,  K.,  dan  Kerry,  B.  2000. Principles and Practice of Phytotheraphy . Modern Herbal Medicine. New York: Churchill livingstone. Hal. 32, 69.
8. Tapehe, Y. 2011. Statistika dan Perancangan Percobaan. Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.