Efek Pemberian Ekstrak Etanol Daun Alpukat ( Persea Americana Mill) Terhadap Penyembuhan Luka Bakar  Pada Kelinci ( Oryctolagus Cunicullus ) .
The Effect Of Giving Alpukat Leaves (Persea Americana Mill)Ethanol Extract On Current Wound Healing In Rabbit (Oryctolagus Cunicullus) .
Wahyu Tri Pamungkas 1, Siwi hastuti 2, Sri Saptuti Wahyuningsih 3 1,2,3 Politeknik Kesehatan Bhakti Mulia, Sukoharjo wahyupamungkas073@gmail.com , siwihastutiapt@gmail.com , saptutiwahyu@gmail.com https://doi.org/10.55181/ijms.v9i1.348
Abstract : Burns are injuries caused by direct body contact with hot objects or exposed to fire. Burns not only cause skin damage, but can also affect the body's systems. Avocado leaf (Persea americana Mill)  is  a  medicinal  plant  known  to  contain  compounds  that  play  a  role  in  wound  healing,  such  as flavonoids, saponins, tannins and alkaloids. This study aims to determine the ethanol extract of avocado leaves has an effect on healing burns in rabbits. Avocado leaf extract was prepared by maceration using 70%  ethanol  as  a  solvent.  The  wound  healing  test  in  rabbits  were  divided  into  5  treatment  groups, namely the positive control group which was given lavertan ointment, the negative control group was given  yellow  vaseline,  and  3  test  groups  were  given  ethanol  extract  of  avocado  leaves  with  a concentration  of  5%,  10%  and  20%.  Making  burns  using  a  heated  iron  plate  was  then  given  to  the rabbit's back for 5 treatments. Rabbits were observed every day for one week with statistical analysis One Way ANOVA test. The ethanol extract of avocado leaves with a concentration of 5% 10% and 20% had the effect of wound healing 5% = (11, 27 ± 0.16)%, 10% = (12.62 ± 0.14)%, and 20% = (19.86 ± 0.14)%, which means that the ethanol extract of avocado leaves has positive results on wound healing in rabbits. Avocado leaf ethanol extract can be used to heal burns in rabbits. Keywords: Burns, Avocado Leaf, Ethanol Extract, (Persea americana Mill), Oryctolagus cunicullus
Abstrak : Luka bakar adalah cedera yang disebabkan oleh kontak langsung tubuh dengan benda – benda yang panas atau kena api. Luka bakar  tidak hanya mengakibatkan kerusakan kulit, tetapi juga dapat  mempengaruhi  sistem  tubuh.  Daun  alpukat  ( Persea  americana Mill ) merupakan  salah  satu tanaman obat yang diketahui mengandung senyawa – senyawa yang berperan dalam penyembuhan luka  seperti flavonoid,  saponin, tanin  dan  alkaloid.  Penelitian ini  bertujuan  untuk mengetahui  ekstrak etanol  daun  alpukat  berpengaruh  terhadap  terhadap  penyembuhan  luka  bakar  pada  kelinci.  Ekstrak daun alpukat dibuat dengan maserasi menggunakan pelarut etanol 70%. Uji penyembuhan luka pada kelinci  yang  dibagi  dalam  5  kelompok  perlakuan  yaitu  kelompok  kontrol  positif   yang  diberikan  salep levertan, kontrol negatif diberikan vaselin kuning, dan 3 kelompok uji yang diberikan ekstrak etanol daun alpukat dengan konsentrasi 5%, 10% dan 20%. Pembuatan luka bakar menggunakan plat besi yang dipanaskan kemudian diberikan  pada punggung kelinci masing – masing kelinci 5 perlakuan. Kelinci diamati  tiap  hari  selama  satu minggu    dengan  analisis  statistik  uji One Way  ANOVA. Ekstrak  etanol daun alpukat konsentrasi 5%,10% dan 20% memiliki pengaruh penyembuhan masing-masing sebesar 5%  (11,  27±0,16)%,  10%  (12,62±0,14)%,  dan  20%  (19,86±0,14)%,  yang  berarti  ekstrak  etanol  daun alpukat  memiliki  hasil  positif  terhadap  penyembuhan  luka  pada  kelinci.  Ekstrak  etanol  daun  alpukat dapat digunakan sebagai penyembuhan luka bakar pada kelinci.
Kata kunci : Luka Bakar, Ekstrak Etanol, Daun Alpukat, Persea americana Mill, Oryctolagus cuniculus.

## I.  PENDAHULUAN
Kulit  merupakan  bagian  tubuh  yang menutupi dan melindungi permukaan tubuh dan berssambung  dengan  selaput  lender  yang melapisi  rongga-rongga  dan  lubang-lubang masuk (Pearce, 2008). Luka bakar merupakan suatu  trauma  atau  kerusakan  jaringan  tubuh yang  disebabkan  oleh  perubahan  suhu  yang tinggi,  sengatan  listrik,  ledakan    maupun terkena bahan kimia dengan rentang keparahan  mulai  dari  luka  superfisial  yang menyangkut  kerusakan  epidermis  sampai  luka
bakar yanga mengenai seluiruh ketebalan kulit dimana selua elemen kulit mengalami kehancuran  (Morison,  2004).  Luka  bakar  juga dapat  berdampak  terhadap  fisik,  fisiologi  dan psikologi bagi penderita.
Penanganan  luka  bakar  yang  cepat  dan tepat  tentu  tidak  akan  menimbulkan  infeksi. Moist  Exposed  Burn  Ointment (MEBO), hidrogel, silver sulfadiazine, levertran dan lain- lain merupakan obat medis yang seringdigunakan. Kemudian  menggunakan antibiotik  sebagai  obat  luka  bakar,  namun
penggunaan  secara  terus  menerus  dapat menimbulkan  resistensiobatdan  juga  efek samping (Morison, 2004)). Untuk itu diperlukan alternatif  lain  untuk  mengobati  dan  mencegah efek  samping.  Pengobatan  menggunakan tanaman  obat  atau  herbal  memiliki  kelebihan yaitu  tidak  menimbulkan  efek  samping  yang terlalu  tinggi  jika  dibandingkan  dengan  obat medis Kumar, 2010).
Menurut Soni dan Singhai (2012),  saponin, tanin, sterol dan polifenol memiliki kemampuan dalampenyembuhan  luka  bakar.  Saponin mempunyai kemampuan sebagai pembersihsehingga efektif untuk
Meyembuhkan  luka  terbuka,  sedangkan  tanin dapatdigunakan sebagai pencegahan terhadap infeksi  luka  karena  mempunyai  dayaantiseptik dan  obat  luka  bakar.  Flavonoid,  saponin  dan tanin  juga  bersifat  sebagai  antioksidan, proangiogenesis  dan  dapat  meningkatkan pasokanoksigen dan menutrisi pada kulit yang terluka (Harborne, 2006).
Flavonoid  merupakan  senyawa  turunan fenol sederhana pada tumbuhan yang berperan dalam  memberikan  pigmen  pada  tumbuhan. Pada  umumnya  terdapat  dalam  tanaman, terikat  pada  gula  sebagai  suatu  glikosida. Sebagai  pigmen  bunga,  flavonoid  berperan dalam menarikburung dan serangga penyerbuk bunga  (Robinson,  1995).  Dalam  proses penyembuhan  luka  bakar  flavonoid  berperan sebagai  antiinflamasi  melalui  penghambatan siklooksigenase  dan  lipooksigenase  sehingga menyebabkan  terjadi  pembatasan  jumlah selinflamasi  yang  bermigrasi  ke  jaringan perlukaan,  akibatnya  fase  inflamasi  akan berlangsung  lebih  singkat  Flavonoid  berperan sebagai  antioksidan  kuat  pada  jaringan granuloma sehingga mampu melindungi daerah sekitar  luka  dari  radikal  bebas  yang  dapat menghambat penyembuhan luka melalui penghancuran  lemak,  protein,  kolagen,  asam proteoglikan  dan  hyaluronic  (Soni  &  Singhai, 2012).
Keberadaan saponin sangat mudah ditandai  dengan  pembentukan  larutan  koloidal dengan air yang apabila dikocok menimbulkan buih yang stabil. Saponin memiliki kemampuan sebagai  pembersih  dan  antiseptik  yang berfungsi membunuh atau mencegah pertumbuhan  mikroorganisme  yang  biasa timbul pada luka sehingga luka tidak mengalami infeksi yang berat (Robinson, 1995). Pada kulit yang  mengalami  cedera  berupa  luka,saponin berguna untuk memacu pembentukan kolagen, yaitu  suatu  protein  struktur  yang  berperan dalam  proses  penyembuhan  luka  (Harborne, 2006).
Tanin secara kimia dikelompokkan menjadi dua  golongan  yaitu  tanin  terkondensasi  dan
tanin  terhidrolisis.  Tanin  terkondensasi  atau flavolan  secara  biosintesis  dapat  dianggap terbentuk  dengan  cara  kondensasikatekin tunggal  yang  membentuk  senyawa  dimer  dan kemudian  oligomer  yang  lebih  tinggi.  Tanin terhidrolisis  mengandung  ikatan  ester  yang dapat  terhidrolisis  jika  dididihkan  dalam  asam klorida  encer.  Tanin  dapat  digunakan  sebagai pencegahan  terhadap  infeksi  luka  karena mempunyai daya antiseptic dan obat luka bakar (Harborne, 2006).

## II. METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  yaitu  dengan  melakukan  uji aktivitas  ekstrak  etanol  daun  alpukat  terhadap luka  bakar  pada  kelinci.  Daun  alpukat  diambil dari daerah Sukoharjo. Daun yang diambil yaitu daun yang sudah tua berwarna hijau tua. Daun alpukat dicuci bersih, kemudian dipotong kecil- kecil,  dikeringkan  dengan  cara  dioven  dengan suhu 50ºC selama satu hari. Daun alpukat yang sudah  kering  dari  oven  diblender  dan  dibuat menjadi serbuk halus (Dirjen POM, 1985). Menurut  Dirjen  POM  (1986)  pembuatan ekstrak  dapat  dilakukan  dengan  metode remaserasi  dengan  menggunakan  penyari etanol 70% dengan perbandingan (1:5). Serbuk simplisia  daun  alpukat  ditimbang  200  gram dimasukkan  bekker  glass,  ditambah  dengan etanol  70%  sebanyak  500  ml.  Rendaman diaduk  selama  enam  jam  dan  didiamkan selama  18  jam.  Saring  dengan  kain  flanel, dilakukan  remaserasi  dengan  etanol  70% sebanyak  500 ml. Sari  didiamkan  selama  satu hari,  diserkai  dengan  kain  flanel,  ditampung dalam bekker  glass .  Sari  dituang  kedalam cawan  porselen  yang  telah  ditara.  Diuapkan diatas waterbath sampai ekstrak kental. Ekstrak kental  dimasukkan  kedalam  eksikator  untuk menghilangkan etanol. Ekstrak kental ditimbang  dan  dihitung  rendemen.  Ekstrak etanol  dibuat  tiga  seri  konsentrasi  yaitu berturut-turut  5,  10  dan  20  %  menggunakan pelarut vaselin kuning.
Pengujian  aktifitas  daya  penyembuhan luka  bakar  ekstrak  etanol    daun  alpukat dilakukan terhadap kelinci. Pengamatan efektifitas ketiga konsentrasi dari ekstrak etanol daun  alpukat  untuk  penyembuhan  luka  bakar pada  tiga  kelinci  dilakukan  selama  tujuh  hari dimana setiap kelinci masing-masing mendapat lima perlakuan.
Hewan  uji  kelinci  yang  mempunyai variabilitas  yang  sama  disiapkan  untuk  uji percobaan. Kelinci didiamkan dikandang selama satu minggu, diberi makan dan minum agar beradaptasi dan tidak stres. Kelinci dicukur bulu  punggungnya  menggunakan  silet  yang tajam. Setiap kelinci diberi luka bakar sebanyak
lima luka bakar menggunakan plat besi dengan panjang dua cm dan kedalaman dua mm. Luka pada  kelinci  diberi  perlakuan  dengan  diolesi kontrol  positif  (salep  levertran),  kontrol  negatif (vaselin  kuning),  ekstrak  etanol  daun  alpukat konsentrasi berturut-turut 5, 10 dan 20%. Setiap luka diolesi dua kali sehari (pagi dan sore). Luka diamati  dan  diukur  panjang  luka  kering  setiap hari selama tujuh hari.
Pengamatam hasil dilakukan terhadap
1.  Rendemen
𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑏𝑜𝑏𝑜𝑡 𝑠𝑖𝑚𝑝𝑙𝑖𝑠𝑖𝑎 𝑎𝑤𝑎𝑙 x 100%
2.  Organoleptis  meliputi:  bentuk,  warna,  bau, dan rasa
3.  Analisis data Panjang  luka  dihitung  dari  selisih  panjang luka  awal  dan  setelah  pemberian  dengan menggunakan rumus :
P u = P 0 – P 1
Keterangan : P u = Panjang luka P 0 =  Panjang  luka  bakar  awal  sebelum perlakuan P 1 =  Panjang  luka  bakar  kering  setelah perlakuan Nilai AUC ( Area Under Curve ) didapatkan dari data panjang luka perhitungan nilai AUC dengan
menggunakan metode Trapezoid yaitu:
𝐴𝑈𝐶 𝑡𝑛−1 𝑡𝑛 = 𝑝𝑡𝑛+ 𝑝𝑡 𝑛−1 2 (t n – t n – 1 )
Keterangan : Pt n – 1 = rata-rata panjang luka pada t n - 1 Pt n = rata-rata panjang luka pada t n
Nilai AUC digunakan untuk menentukan persentase  daya  penyembuhan  luka  dari beberapa perlakuan, kemudian
dibandingkan  pada  perlakuan  (Mutschler,
1986). Persentase daya penyembuhan luka dihitung dengan menggunakan rumus :
% DPL = 𝐴𝑈𝐶𝑘− 𝐴𝑈𝐶𝑝 𝐴𝑈𝐶𝑘 𝑋 100%
Keterangan :
% DPL = Persentase daya penyembuhan
AUCk  = AUC rata - rata kontrol negatif AUCp   = AUC untuk tiap-tiap perlakuan
4.  Analisis Statistik
Pada  penelitian  ini,  hasil  %  DPL  pada kelinci diolah dengan SPSS 21.00 for windows . Data  dianalisis  terlelih  dahulu  dengan  Uji Normalitas  dan  Uji  Homogenitas.  Pengolahan data  secara  statistik Kolmogrov-Smirnov  Test dan Test of Homogeneity of Variance . Jika nilai p  (sig.)  >  0,05  maka  data  berdistribusi  normal dan homogen selanjutnya dilakukan Uji ANOVA untuk  melihat  pengaruh  pemberian  dari
perlakuan.  Untuk  mengetahui  lebih  lanjut adanya  perbedaan  antar  kelompok  dilakukan Uji Post Hoc Test.

## III. HASIL
Berdasarkan hasil penelitian, pengamatan dan pengolahan  dari  hasil  pembuatan  ekstrak etanol  daun  alpukat  diperoleh  hasil  sebagai berikut:
1.  Rendemen Hasil  maserasi  serbuk  daun  alpukat sebanyak  200g  dengan  etanol  70%  sebanyak 1000 ml diperoleh rendemen 11,25 % b/b.
2.  Organoleptis Hasil  organoleptis  dari  sediaan  ekstrak
etanol daun alpukat adalah Bentuk : ekstrak kental Warna : hitam kehijauan Bau : aromatik 3.  Analisis data Pengamatan panjang luka kering digunakan  untuk  menghitung  selisih  panjang luka.  Selisih  Panjang luka  ini  digunakan  untuk menghitung  nilai  AUC.  Nilai  AUC  untuk menghitung  persentase  daya  penyembuhan luka  (%DPL).  Hasil  nilai  AUC  dan  %DPL ditunjukkan pada table 1.
Tabel 1. Nilai rerata AUC dan % DPLekstrak etanol daun alpukat ( Persea americana Mill) pada luka kelinci
Sediaan Uji Rerata AUC± SEM Rerata DPL ± SEM (%) Kontrol Negatif Konsentrasi 5% Konsentrasi 10% Konsentrasi 20% Kontrol Positif 9,9±0,95 8,78±0,14 8,65±0,15 7,93±0,18 7,95±0,16 - 11,27±0,16 12,62±0,14 19,86±0,14 19,69±0,02

## 4.  Analisis Statistik
Hasil %DPL kemudian dianalisis dengan statistik  perangkat  lunak SPSS  16.0  for windows yang valid dengan uji OneWay Anova dengan taraf kepercayaan 95% dan selanjutnya diuji  dengan  LSD (Least  Significant  Different ). Berdasarkan hasil perhitungan dari SPSS 22.0
for windows dapat diperoleh data menggunakan  uji One  Way  Anova dan Post Hoc Test.
a.  Uji Normalitas
Panjang luka bakar  pada kelinci selama tujuh hari dilakukan pengujian dengan menggunakan One Sample Kolmogorov- Smirnov Test terlebih dahulu terhadap normalitas data.
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  kelompok perlakuan  dan  hasil  daya  penyembuhan  luka memiliki sebaran data yang terdistribusi normal. Hal  ini  terlihat  dari  hasil  ujii  normalitas  data variabel (%) DPL, diketahui nilai p(0.200)>0.05 maka  H 0 diterima  sehingga  data  (%)  DPL
berdistribusi  normal.  Artinya  simpangan  baku sampel  pada  tiap  kelompok  tersebut  berada disekitar  simpangan  baku  populasi,  yang artinya terdistribusi normal.
Tabel  2. Hasil  uji  normalitas  data  panjang luka bakar pada kelinci
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test (%) DPL N 12 Normal Parameters a ,b Mean 15,8670024 Std. Deviation 4,43681221 Most Extreme Differences Absolute ,190 Positive ,151 Negative -,190 Test Statistic ,190 Asymp. Sig. (2-tailed) ,200 c,d
b.  Uji Homogenitas Langkah  selanjutnya  setelah  dilakukan uji  normalitas  data  adalah  dilakukannya  uji homogenitas  data  yang  hasilnya  terlihat pada table 3.
Tabel  3. Hasil  uji  homogenitas  data panjang luka bakar pada kelinci
Levene Statistic df1 df2 Sig. 3,199 3 8 0,84 Tahap  selanjutnya  adalah  melakukan uji  homogenitas  yang  berfungsi  untuk mengetahui keseragaman data yang dianalisis.  Hasil  uji  homogenitas  data  (%) DPL  diketahui  nilai  p(0.84)>0.05  maka  H 0
diterima.
Tabel 4 menunjukkan hasil uji homogenitas  yaitu  data  yang  dianalisis bersifat  homogen  atau  seragam  sehingga pengujian data dapat diteruskan menggunakan analisis One Way Anova. c.  Uji One Way Anova Tabel 4. Hasil uji One Way Anova Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 186,609 3 62,203 16,627 .001 Within Groups 29,929 8 3,741 Total 216,538 11
Tabel  4  menunjukkan  bahwa  adanya pengaruh  ekstrak  etanol  daun    alpukat terhadap  penyembuhan  luka  bakar  pada kelinci.  Hal  ini  berdasarkan  hasil  uji One Way  Anova (%)  DPL,  diketahui  nilai  p (<0.000)<0.05  maka  H 0 ditolak  sehingga ada  perbedaan  (%)  DPL  antar  formulasi. Hal  ini  mengacu  pada  hipotesis  H 0 =  tidak ada  perbedaan  antara  perlakuan,  H 1 =  ada perbedaan  yang  nyata  antar  perlakuan. Jika nilai p (Sig)<0.05, maka H 1 diterima, H 0 ditolak, begitu pula sebaliknya.
Berdasarkan  hasil  analisis One  Way Anova pada  tabel  4  menunjukkan  bahwa terdapat perbedaan yang bermakna. Langkah selanjutnya adalah melakukan uji analisis Post  HocTest dengan  LSD.
Analisis  ini  berfungsi  untuk  menguji pasangan  variabel  mana  yang  membuat perbedaan tersebut signifikan.
d. Post Hoc Test dengan Uji LSD
Tabel  5. Hasil  uji post  hoc  test dengan  uji LSD Perlakuan Sig Keterangan Kontrol (+) vs Konsentrasi 5% Kontrol (+) vs Konsentrasi 10% Kontrol (+) vs Konsentrasi 20% Ekstrak 1 vs Konsentrasi 10% Ekstrak 1 vs Konsentrasi 20% Ekstrak 2 vs Konsentrasi 20% 0.01 0.02 9.18 0.03 0.01 0.02 Ada perbedaan Ada perbedaan Tidak ada perbedaan Ada perbedaan Ada perbedaan Ada perbedaan
Analisis Post Hoc Test bertujuan untuk mengetahui perbedaan pada setiap perlakuan.  Sediaan  uji  yang  digunakan adalah  ekstrak  daun  alpukat  5%,  10%, 20%.  Tabel  5  menunjukkan  bahwa  hasil Post  Hoc  Test menunjukkan  tidak  ada perbedaan  (%)  DPL  antara  control  + dengan formula 3 (20%).

## IV.  PEMBAHASAN
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji efektifitas ekstrak etanol daun alpukat ( Persea Americana Mill)  terhadap  luka  bakar  yang diujicobakan kepada kelinci. Alpukat selama ini dikenal  sebagai  buah      atau    sebagai    bahan untuk  membuat  minuman jus. Buah ini banyak digunakan  untuk  gizi  kesehatan,  daun,  kulit, batang,  dan  bijinya  dapat  digunakan  sebagai obat.  Daun  alpukat  memiliki  banyak  manfaat sebagai obat diantaranya sebagai vitamin tubuh , radang  usus,  diare,  bisul,  dan luka (Dirjen POM, 2001)
Penelitian  literatur  review  yang  dilakukan oleh  Wijaya  (2020)  menunjukkan  bahwa  daun alpukat  memiliki  aktifitas  antibakteri  dan antioksidan  karena  mengandung  senyawa bioaktif yaitu flavonoid, alkaloid, terpenoid, dan tannin  yang  dapat  bekerja  sebagai  antibakteri dan  merangsang  pertumbuhan  sel  pada  luka. Kandungan flavonoid berguna untuk melancarkan  peredaran    darah,    terutama untuk  mencegah  tersumbatnya  saluran  darah, mengurangi  kadar  kolesterol  dan  penimbunan lemak pada dinding pembuluh darah, membantu    mengurangi    rasa    sakit, pendarahan,  penyembuhan  luka  dan  lebam, serta    bertindak    sebagai    antioksidan  untuk menyingkirkan radikal bebas.
Kandungan  alkoloid  pada  daun  alpukat dapat    mengubah    susunan  rantai  DNA    pada
inti    sel    bakteri.  Aktifitas  antibakteri  tersebut dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  dan menyebabkan  kematian  sel  bakteri  sehingga dapat  mencegah  terjadinya  infeksi  pada  luka. Menurut  Anggorowati  (2016)  daun  alpukat mengandung zat aktif yang memiliki mekanisme  untuk  menghambat  bakteri  yaitu flavonoid,  alkaloid,  tannin  dan  quersetin. Yunikasari  dan  Murdiyah  (2016)  melaporkan bahwa  daun  alpukat  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus
epidermidis, sedangkan Sudrajat dan Setiawan melaporkan adanya daya hambat daun alpukat terhadap bakteri Escherichia coli.
Pembuatan  ekstrak  etanol  daun  alpukat ( Persea  Americna Mill)  pada  penelitian  ini menggunakan metode maserasi. Langkah awal dalam  pembuatan  ekstrak  ini  adalah  dengan mengumpulan  bahan  daun  alpukat  yang diambil  di  Desa  Pranan,Polokato,  Sukoharjo dan dipilih daun yang sudah tua berwarna hijau agak gelap. Selanjutnya daun alpukat dibersihkan  kemudian  dipotong  kecil –  kecil, dikeringkan dengan cara di oven dengan suhu 50 0 C  selama  3-5  hari    kemudian  dihaluskan dengan  cara  diblender  sampai  berbentuk serbuk yang bertujuan untuk memperbesar luas simplisia,  sehingga  kontak  antara  pelarut   dan sampel semakin besar.
Proses penyarian dilakukan dengan metode maserasi. Maserasi merupakan metode ekstraksi  cara  dingin  yang  banyak  digunakan karena  metode  yang  sederhana,  mudah  dan tanpa  melalui  proses  pemanasan,  sehingga dapat  meminimalisir  kerusakan  komponen  zat aktif dari simplisia. Penyarian dilakukan dengan merencam  serbuk  simplisia  dalam  larutan penyari  yang  sesuai.Pada  penelitian  ini digunakan  etanol  70%  sebagai  cairan  penyari yang  dimaksudkan  untuk melarutkan  senyawa kimia  dalam  daun  alpukat.  Etanol  merupakan pelarut  polar  yang  dapat  melarutkan  hamper semua metabolit sekunder yang terdapat pada simplisia.  Senyawa  flavonoid  umumnya  dalam bentuk  glikosida  yang  bersifat  polar  sehingga pelarut yang digunakan dalam penyarian harus bersifat polar.
Ekstrak  etanol  daun  alpukat  ( Persea Americana Mill)yang  telah  jadi  harus  diuji sebelum  dapat  digunakan  untuk  penelitian. Pengujian  ekstraketanol  daun  alpukat  ( Persea Americana Mill)meliputi uji organoleptis dengan melakukan  pengamatan  pada  bentuk,  warna, dan  bau.  Hasil  uji  organoleptis  ekstrak  daun alpukat  berbentuk  ekstrak  kental,  berawarna hijau  kehitaman  dan  berbau  aromatik.  Hasil rendemen  diperoleh  hasil  maserasi  serbuk daun  alpukat  sebanyak  200  g  dengan  etanol 70%  sebanyak  1000  ml  diperoleh  rendemen sebanyak 11,25 % 𝑏 𝑏 ⁄ .
Pengujian  efektifitas  ekstrak  etanol  daun alpukat  ( Persea  Americana Mill)dengan  cara pembuatan  luka  bakar  pada  hewan  ujii  yaitu kelinci.  Luka  bakar  adalah  jenis  luka  yang disebabkan  oleh  panas  atau  api.  Luka  dibuat dengan kedalaman kurang lebih 2 mm dengan panjang  luka  2  cm.  Kelinci  yang  digunakan dalam  percobaan  ini  adalah  3  ekor  dengan masing-masing  kelinci  diberikan  5  luka  bakar. Setiap luka bakar mendapatkan perlakuan yang berbeda.  Kelima  luka  bakar    tersebut  satu persatu  akan  diolesi  dengan  ekstrak  etanol daun alpukat dengan masing-masing konsentrasi  5%,  10%  dan  20,salep  lavertran dan  vaselin  kuning.  Pengamatan  dilakukan dengan  mengukur  panjang  penutupan  luka bakar  yang  diamati  setiap  pagi  yang  diukur menggunakan  penggaris  selama  7  hari berturut-turut.
Gambar 1. Nilai AUC tiap perlakuan sediaan uji terhadap kelinci
Hasil perhitungan daya penyembuhan luka (DPL)  pada  tabel  2  menunjukkan  rata-rata persentase  DPL  pada  ekstrak  etanol  daun alpukat  5%  adalah  (11.27±0,16)%,  ekstrak daun alpukat 10% adalah (12,.62 ± 0,14)%, dan ekstrak etanol daun alpukat 20% adalah (19,86 ±  0,14)%.  Ekstrak  etanol  daun  alpukat  20% memiliki  persentase  daya  penyembuhan  luka paling  tinggi,  yaitu  21,71%  jika  dibandingkan dengan  persentase  salep  lavertan  yaitu 22,76%. Untuk mengetahui perbedaan signifikansi konsentrasi dari ekstrak etanol daun alpukat  maka  hipotesisnya  diuji  dengan menggunakan  uji One  Way  Anova dengan terlebih  dahulu  dilakukan  uji  normalitas  dan homogenitas.
Pada  tabel  2  menunjukkan  hasil  uji normalitas dengan
Kolmogorov-Smirnov menunjukkan  bahwa  kelompok  perlakuan  dan
0 0.5 1 1.5 2 2.5 1 2 3 4 5 6 7 AUC Hari Ke- Nilai Rata -Rata AUC Tiap Perlakuan Kontrol (+) Formula 2 (10%)
Konsetrasi 10%
hasil daya penyembuhanluka memiliki sebaran data  yang  terdistribusi  normal.  Tabel  4 menunjukkan  bahwa  data  yang  dianalisis memiliki  data  yang  homogen.  Berdasarkan hasil uji normalitas dan homogenitas data yang telah  dilakukan,  maka  data  penelitian  telah memenuhi persyaratan untuk dilakukan uji One Way Anova .
Tabel  4  merupakan  hasil  analisis  data penelitian menggunakan One Way Anova . Hasil analisis  menunjukkan  bahwa  tiap  variabel memiliki  perbedaan  yang  signifikan.  Nilai aktifitas  pada  formula  3  dengan  konsentrasi 20% mendekat ke arah persentase aktifitas dari kontrol  positif,  dalam  hal  ini  salep  lavertran. Hasil  penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa semakin tinggi dosis ekstrak etanoldaun alpukat maka  semakin  banyak  kandungan  zat  aktif pada  sediaan  ekstrak  sehingga  kemampuan daya penyembuhan luka juga semakin meningkat. Berdasarkan Tabel 6, hasil analisis data  dengan Post  Hoc  Test menunjukkan bahwa  salep  lavertan  dengan  ekstrak  daun alpukat semua konsentrasi memiliki perbedaan. Hanya  uji  kontrol  (positif)  dengan  formula  3 (20%)  yang  menunjukkan  tidak  adanya perbedaan.
Hasil analisis menunjukkan bahwa ekstrak etanol  daun  alpukat  dengan  konsentrasi  5%, 10% dan 20% yang efektif terhadap penutupan luka  bakar  yaitu  ekstrak  etanol  daun  alpukat dengan konsentrasi 20% yang berarti semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak  maka  akan  dapat mempercepat  penutupan  luka  bakar  pada kelinci.  Ekstrak  etanol  daun  alpukat  tersebut terbukti efektif untuk mempercepat penyembuhan  luka,  sebagaimana  kandungan senyawa  yang  terdapat  pada  daun  alpukat berupa flavonoid, saponin, tannin, dan alkaloid yang berkhasiat dalam penyembuhan luka. Hal ini sesuai dengan penelitian Penelitian selanjutnya dapat dilakukan dengan
membandingkan atau mengkolaborasikan sediaan  ekstrak  etanol  daun  alpukat  dengan bahan  lainnya  sehingga  mendapatkan  hasil yang lebih efektif dalam menyembuhkan luka.
Menurut  Wijaya  (2020)  hasail  literatur reviewnya  yang  membuktikan  bahwa  pada ekstrak  etanol  daun  alpukat  mengandung flavonoid,  alkaloid  dan  fenol  yang  memiliki aktivitas  antibakteri  pada Bacillus  subtilis, Escherichia  coli,  Pseudomonas  aeruginosa, Salmonella  thypi,  Staphylococcus  aureus, Staphylococcus epidermis, Streptococcus mutans dan Vibrio sp, candida albican sehingga mampu  mengobati  diare,  demam  tipoid,  bisul, dan  mempercepat  penyembuhan  luka.  Hal  ini menunjukkan daun alpukat potensial digunakan sebagai  bahan  obat  alami  baru  yang  dapat
digunakan  untuk  mempercepat  penyembuhan luka.

## V.  SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  formulasi ekstrak etanol daun alpukat  ( Persea americana Mill)  dalam  penyembuhan  luka  bakar  kelinci menunjukkan bahwa:
1.  Ekstrak  etanol  daun  alpukat  mempunyai pengaruh    terhadap  penyembuhan  luka bakar pada kelinci .
2.  Ekstrak  etanol  daun  alpukat  konsentrasi  5 %,  10%,  dan  20%  memiliki  persen penyembuhan  luka  bakar  sebesar  (11,27  ± 0,16)%, (12,62 ± 0,14)%,(19,86 ± 0,14) %.

## VI. DAFTAR PUSTAKA
Anggorowati,  D.A.  2016.  Fraksi  dau    alpukat (Persea Americana Mill) sebagai minuman the herbal yang kaya antioksidan. Inovatif Industri. 6(1):1-7
Dirjen POM. 1985. Cara Pembuatan Simplisia.
Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
_________.  1986. Sediaan  Galenik .  Jakarta  : Departemen Kesehatan Republik
Indonesia.
_________.  2001. Inventaris  Tanaman  Obat Indonesia  (1)  Jilid  11. Jakarta  : Departemen Kesehatan Republik Indonesia
Harborne,  J.B.  2006. Metode  Fitokimia: Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis. Tumbuhan  ed  4 .  Diterjemahkan  oleh Kosasih Padmawinata & Iwang Soediro. ITB. Bandung
Kumar, A.; Lingadurai, S.; Jain, A.; Barman, N. R.,  2010. Erythrina variegata Linn:  A review  on  morphology,  phytochemistry, and pharmacological aspects. Pharmacognosy Review , 4 (8): 147-152 Morison, M.J. 2004. Manajemen Luka . Diterjemahkan  oleh  Tyasmono.  EGC. Jakarta Mutschler, 1986. Dinamika Obat.
Diterjemahkan  oleh  Widianto,M.Bdan
Ranti,  E.S.,  edisi  V,  Penerbit  ITB,
Bandung.
Pearce, E.C. 2008. Anatomi dan Fisiologi untuk paramedic. PT. Gramedia. Jakarta.
Robinson,  T..  1995. Kandungan  Organik
Tumbuhan Tinggi, Edisi VI , Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata. ITB. Bandung
Soni, H and Singhai AK. 2021. A recent update of  botanisals  for  wound  healing  activity. Int. Res. J. of Pharmacy . 3(7): 1-7
Sudradjat,  A  dan  Setiawan,  A.  2016.  Daya hambat  rebusan  Daun  Alpukat  (Persea Americana  Mill)  terhadap  pertumbuhan bakteri  Escherichia  coli.  J.  Sains.  7(13): 1-9
Wijaya, I. 2020. Potensi Daun Alpukat (Persea Americana  Mill)  Sebagai  Antibakteri. J. Ilmiah  Kesehatan  Sandi  Husada .  9(2): 695-701
Yunikasari,  D.W.  dan  Murdiyah,  S.  2016.  Uji
Daya  Hambat  ekstrak  etanol  Daun Alpukat (Persea Americana Mill) terhadap pertumbuhan bakteri
Staphylococcus  epidermidis. Prosiding 106-112