Efektifitas Produk Tepung Jamur Beauveria bassiana sebagai Larvasida Alami Larva Nyamuk Aedes aegypti Linnaeus, 1762
Effectiveness of Beauveria bassiana Powder as Larvacide to Aedes aegypti Linnaeus, 1762 Larvae
Eka Wulandari 1* , Nova Hariani 1 , Bodhi Dharma 2
Laboratorium Ekologi & Sistematika Hewan, Prodi Biologi FMIPA Universitas Mulawarman, Laboratorium Mikrobiologi & Genetika Molekuler, Prodi Biologi FMIPA Universitas Mulawarman * E-mail: darieks07@gmail.com

## ABSTRACT
Study of effectiveness of Beauveria bassiana Powder as Larvacide to Aedes aegypti larvae was conducted  on  September  2016  to  May  2017  in  Ecologi  and  Systematics  Animal  Laboratory, Faculty  of  Mathematics  and  Natural  Sciences,  University  of  Mulawarman.  This  study  aimed  to determine  the  effect  of Beauveria  bassiana powder  with  use  flour rice  media  on  differents concentration as larvacide to mortality of larvae Aedes aegypti . Stages of study include arranged experimental design (Completely Randomized Design) with concentration of 0%, 0.125%, 0.25%. 0.5%  and  0.75%,  taking  sample,  rearing  third  instar  larvae  of Aedes  aegypti and  application Beauveria  bassiana powder  in  48  hours  observation.  The  mortality  value  of  larvae  willbe presented  on  percentage  tabel  and  graph. The  result  showed,  this  product  is  capable  of  killing larvae  for  48  hours  with  the  percentage  mortality  0%,  10%,  28%,  70%  and  80%  in  each concentration. Mortality of larvae is influenced by concentration and period of exposure. Increased of  product  concentration  that  given  and  period  of  exposure  can  effected  increased  of  mortality percentage.
Keywords: mortality, Beauveria bassiana powder, Aedes aegypti larvae

## PENDAHULUAN
Demam  Berdarah  Dengue  (DBD)  adalah penyakit yang paling sering dijumpai di seluruh dunia  dengan  jumlah  kasus  pada  setiap tahunnya  meningkat. Negara-negara  di  Asia adalah  negara  yang  paling  banyak  ditemukan kasus DBD dengan jumlah penderita terbanyak yaitu  anak-anak.  Penyakit  ini  ditandai  dengan demam  tinggi,  sakit  kepala,  nyeri  otot,  tulang dan sendi hingga timbulnya bintik merah pada kulit.Penyakit  DBD  disebabkan  oleh  virus dengue  yang  menginfeksi  darah  manusia melalui  nyamuk Aedes  aegypti sebagai  vektor utama (Soedarto, 2012).
Jumlah penderita Demam Berdarah Dengue (DBD)  di  Indonesia  pada  bulan  Januari- Februari 2016 sebanyak 13.219 orang penderita dengan  jumlah  kematian  137  orang.  Proporsi penderita  terbanyak  yang  mengalami  DBD  di Indonesia ada pada golongan anak-anak usia 5- 14  tahun,  mencapai  42,72%  dan  yang  kedua pada  rentang  usia  15-44  tahun,  mencapai 34,49% (Kementerian Kesehatan RI, 2016). Pada  tahun  2014  kasus  DBD  di  Kota Samarinda  mencapai  1.117  kejadian  dengan jumlah  kematian    9  orang,  sementara  pada tahun 2015 tercatat 1.226 kasus dengan jumlah kematian  6.  Pada  tahun  2016  sampai  pada
bulan Maret tercatat 126 kasus dengan 1 orang meninggal dunia, sedangkan pada bulan Mei di tahun  yang  sama  tercatat  173  kasus  DBD (Dinas Kesehatan Kota Samarinda, 2016). Berdasarkan data laju kematian DBD 2013 di Kalimantan Timur sebesar 0,8%, maka perlu diadakan  upaya  menurunkan  laju  kematian kasus  DBD  salah  satunya  di  Kota  Samarinda. Penyakit  yang  ditularkan  oleh  nyamuk Ae.aegypti ini sampai sekarang belum ditemukan  obat/vaksinnya  sehingga  perlu upaya untuk penanggulangan dan pengendalian vektor  pembawa  DBD  dengan  cara mengendalikan  populasinya  mulai  dari  fase larva  menggunakan  pengendali  hayati  yang lebih  aman  dan  tidak  menimbulkan  dampak negatif  baik  pada  lingkungan  dan  manusia. Salah  satu  yang  digunakan  adalah  jamur entomopatogen Beuveria bassiana . B. bassiana adalah jamur entomopatogenik yang  tersebar  diseluruh  dunia. Jamur B. bassiana bersifat  kosmopolit dan  merupakan jamur  patogen  serangga  yang  memiliki  jenis inang  terbanyak  di  antara  jamur  patogen serangga lain. Inang utamanya adalah serangga dari  ordo  Lepidoptera,  Coleoptera,  Hemiptera, Diptera  dan  Hymenoptera.  Pada  beberapa tahun  terakhir,  terbukti  bahwa  jamur  ini
berpotensi  sebagai  mikrobia  pengendali organisme  melawan  hama  serangga  dan patogen tanaman (Ownley et al., 2008). Yasmin et.al., (2012),  telah  melakukan penelitian  tentang  efektifitas  tepung  jamur
B.bassiana dalam media jagung dengan waktu simpan  yang  berbeda  sebagai  larvasida Ae.aegypti . Berdasarkan  hasil  penelitian tersebut diketahui bahwa tepung jamur dengan media jagung  mampu  mematikan  larva nyamuk. Namun penelitian penggunaan tepung jamur berupa produk perbanyakan B. bassiana tahap  lanjutan  menggunakan  media  tepung beras dengan konsentrasi yang berbeda sebagai larvasida belum dilakukan. Perbanyakan  tepung  jamur  menggunakan media  beras  tersebut  telah  diproduksi  dan dipasarkan di Samarinda. Saat ini penggunaan produk  tersebut  hanya  sebatas  sebagai pengendali hayati hama tanaman pertanian. Hal inilah yang mendasari dilakukannya penelitian ini  dengan  menggunakan  perbanyakan B. bassiana sebagai larvasida alami larva nyamuk Aedes  aegypti untuk  mengetahui  pengaruhnya terhadap mortalitas larva.

## METODE
Alat Alat yang digunakan dalam penelitian adalah ovitrap berupa  ember  hitam,  gelas  plastik,  toples  besar, mikroskop,  pipet  tetes, object  glass ,  cawan  petri, kandang mencit, neraca analitik, gelas ukur, spatula, kain tile, alat tulis dan kamera.
Bahan Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah air, larva nyamuk, larutan gula, pakan larva, mencit, produk  tepung  jamur Beauveria  bassiana produksi Pemerintahan  Provinsi  Kalimantan  Timur,  kertas saring dan kertas label dan larva Ae. Aegypti. Metode Penelitian Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan  Acak Lengkap (RAL)  dengan  empat perlakuan dan satu kontrol dengan lima kali ulangan. Empat  perlakuan  ini  menggunakan  empat konsentrasi  tepung Beauveria  bassiana yang berbeda-beda yaitu, 0%; 0,125 %; 0,25%; 0,5 % dan 0,75 %.
Prosedur Kerja Pengambilan  sampel  dilapangan  menggunakan perangkap  (ovitrap)  dan  mengambil  larva  pada sumber  penampungan  air  lainnya.Perangkap diletakkan  di  tempat  gelap  seperti  di  dalam  rumah (kamar  mandi)  dan  dihalaman  rumah  (dibawah pepohonan  rimbun  dan  diantara  tanaman). Ovitrap diperiksa  secara  berkala  hingga  terdapat  telur  atau larva. Jika  terdapat  telur  ataupun  larva  nyamuk, larva tersebut diambil dan dipelihara.
Telur  atau  larva  yang  diperoleh  dari  lapangan
dimasukkan  ke  dalam  wadah  pemeliharaan  yang berisi  air. Larva  dipelihara  hingga  menjadi  pupa. Selama dipelihara, larva diberi pakan larva. Setelah menjadi  imago,  maka  imago  jantan  diberi  pakan larutan  gula  dan  imago  betina  diberikan  paparan mencit. Setelah  beberapa  hari,  kertas  saring  yang  telah dibasahi  dan  dibentuk  kerucut  dimasukkan  dalam kandang  pemeliharaan  imago  sebagai  tempat peletakkan  telur.Kertas  saring  diletakkan  pada wadah  yang  berisi  air. Telur  yang  telah  diletakkan oleh  nyamuk  betina  dimasukkan  dalam  wadah pemeliharaan larva. Telur dibiarkan hingga menetas. Setelah  menetas,  larva  dipelihara  hingga  mencapai instar  III.  Sebagian  instar  III  diambil  untuk perlakuan  dan  sebagian  lagi  digunakan  untuk pemeliharaan selanjutnya.
Pengujian menggunakan larva nyamuk instar III. Larva  ini  diletakkan  dalam  wadah  uji.Wadah  uji tersebut  diberi  konsentrasi  tepung Beauveria bassiana sebanyak  0  g;  0,125  g;  0,25  g;  0,5  g  dan 0,75 g dalam 100 mL air, sehingga ada empat wadah perlakuan dan satu wadah kontrol dengan lima kali ulangan.  Masing-masing  sebanyak  sepuluh  ekor larva  instar  III  diletakkan  dalam  wadah  uji. Kemudian  jumlah  kematian  larva  nyamuk  diamati dan dicatat dalam jangka waktu pengamatan 24 jam dan  48  jamsetelah  pengaplikasian  hingga  waktu maksimal  72  jam . Data  hasil  penelitian  berupa besarnya  kematian  (mortalitas)  larva  ditampilkan dalam bentuk tabel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Mortalitas Larva
Berdasarkan  pemberian  dosis  produk  tepung jamur Beauveria  bassiana pada  media  tepung beras  yang telah  dilakukan  pada  masing- masing hewan uji menunjukan hasil mortalitas yang berbeda-beda pada Tabel 1. Tabel 1 menunjukkan persentase mortalitas larva  nyamuk Ae.aegypti dengan  pemberian tepung jamur B. bassiana selama 24 jam dan 48 jam  pengamatan  dengan  ditemukannya kematian  larva  pada  semua  tingkat  perlakuan kecuali  pada  konsentrasi  0%.  Selama pengamatan  24  jam  dan  48  jam  pada konsentrasi 0,125% sampai dengan konsentrasi 0,75% nilai persentase mortalitas larva nyamuk semakin  meningkat.  Berdasarkan  hal tersebut dapat  diketahui  bahwa  penggunaan  produk tepung jamur tersebut mampu membunuh larva nyamuk. Selama  pengamatan  24  jam,  nilai persentase  mortalitas  terendah  senilai  4% ditunjukakan pada konsentrasi tepung jamur B. Bassiana 0,125%.  Pada  kosentrasi  tersebut jumlah  rata-rata  kematian  sebesar  0,4.  Nilai persentase  tertinggi  senilai  58% ditunjukkan pada  konsentrasi  0,75%,  sedangkan  pada
konsentrasi  0,5%  nilai  persentase  mortalitas sebesar  38%.  Pada  konsentrasi  tertinggi, jumlah  rata-rata  kematian  adalah  2,8 lebih banyak  dari  konsentrasi  0,5%  yang  hanya mampu  membunuh  dengan  rata-rata  3,8. Begitu pula pada pengamatan 48 jam, dua nilai persentase  tertinggi  tejadi  pada  konsentrasi 0,5%  dan  0,75%  dengan  masing-masing  70% dan  80%.  Dengan  demikian,  semakin  tinggi konsentrasi  yang  diberikan  berbanding  lurus dengan hasil persentase mortalitas. Tabel 1 menunjukkan persentase mortalitas larva  nyamuk
Ae.aegypti dengan  pemberian tepung  jamur B. Bassiana selama  24  jam  dan 48  jam  pengamatan  dengan  ditemukannya kematian  larva  pada  semua  tingkat  perlakuan kecuali  pada  konsentrasi  0%.  Selama pengamatan  24  jam  dan  48  jam  pada konsentrasi 0,125% sampai dengan konsentrasi 0.75% nilai persentase mortalitas larva nyamuk semakin  meningkat.  Berdasarkan  hal  tersebut dapat  diketahui  bahwa  penggunaan  produk tepung jamur tersebut mampu membunuh larva nyamuk. Selama  pengamatan  24  jam,  nilai persentase  mortalitas  terendah  senilai 4% ditunjukakan pada konsentrasi tepung jamur B.
Bassiana 0,125%.  Pada  kosentrasi  tersebut jumlah rata-rata kematian sebesar 0,4. Nilai  persentase  tertinggi  senilai  58% ditunjukkan pada konsentrasi 0,75%, sedangkan  pada  konsentrasi  0,5%  nilai persentase  mortalitas  sebesar  38%.  Pada konsentrasi tertinggi, jumlah rata-rata kematian adalah 2,8 lebih banyak dari konsentrasi 0,5% yang  hanya  mampu  membunuh  dengan  rata- rata 3,8. Begitu pula pada pengamatan 48 jam, dua  nilai  persentase  tertinggi  tejadi  pada konsentrasi  0,5%  dan  0,75%  dengan  masing- masing  70%  dan  80%.  Dengan demikian, semakin  tinggi  konsentrasi  yang  diberikan berbanding  lurus  dengan  hasil  persentase mortalitas. Berdasarkan penelitian Yasmin et al ., 2012,
selama  24  jam  pada  konsentrasi  0,5%  tepung jamur  dengan  media  jagung,  mampu membunuh  larva  dengan  jumlah rata-rata  18 dari  45  individu  sehingga  persentase mortalitasnya sebesar 39,3%. Pada konsentrasi yang  sama,  tepung  jamur  pada  media  tepung beras  hanya  mampu  membunuh  38%  dari jumlah larva yang hidup selama 24 jam. Selisih persentase mortalitas antara keduanya berkisar 1,3%.Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  tepung jamur  yang  telah  diperbanyak  dengan  media tepung  beras  tidak  mampu  membunuh  lebih banyak  larva  nyamuk  dibandingkan  dengan tepung  jamur  dengan  media  jagung.Semakin diperbanyaknya  produk  turunan  dari  jamur B. bassiana, maka semakin turun pula kemampuan jamur  tersebut  untuk  dapat  membunuh  larva nyamuk.
Selama  proses  pengujian,  larva  nyamuk masih mampu hidup selama 72 jam. Persentase kematian  hewan  uji  tertinggi  terjadi  pada  72 jam  pengamatan    dengan  nilai  tertinggi kematian sebesar 92% terjadi pada konsentrasi 0,75%.  diikuti  oleh  konsentrasi  0,5%  dengan persentase  kematian  sebesar  80%.  Berbeda halnya  pada  konsentrasi  0%,  0,125%  dan 0,25%. Pada  ketiga  konsentrasi  tersebut, kemampuan  bertahan  hidup  larva  lebih  tinggi dibandingkan dengan dua konsentrasi tertinggi. Hal  ini  ditandai  dengan  rendahnya  jumlah kematian  larva  pada  konsentrasi  0.125%  dan 0,25%  serta  tidak  mengalami  kematian  pada konsentrasi 0%.
Pengamatan uji mortalitas dilakukan selama tiga  hari  dengan  rentang  waktu  pengamatan pada 24  jam,  48  jam  dan  72  jam.  Selama rentang  waktu  tersebut  jumlah  kematian  larva semakin  bertambah  dengan  lamanya  waktu pengamatan.  Namun,  perbandingan  jumlah kematian  setiap  konsentrasi  dalam  rentang waktu  pengamatan  tidaklah  sama.  Hal  ini dikarenakan  setiap  hewan  uji  memiliki  daya tahan  hidup  yang  berbeda-beda ditunjukkan pada Gambar 1.
Tabel  1. Persentase mortalitas larva nyamuk Aedes  aegypti dengan perlakuan tepung jamur B.
Bassiana selama 24, 48 dan 72 jam No. Konsentrasi Tepung Jamur (%) Mortalitas 24 jam (%) Mortalitas 48 jam (%) 1 0% 0 0 2 0.125% 4 10 3 0.25% 16 28 4 0.5% 38 70 5 0.75% 58 80
Gambar  1. Diagram  Jumlah    Mortalitas  Larva  dengan  Perlakuan  Tepung  Jamur B. Bassiana selama 24, 48 dan 72 jam
Selama  24  jam  pengamatan,  konsentrasi terendah  hanya  mampu  membunuh  2  individu dan  29  individu  pada  konsentrasi  tertinggi. Pada  rentang  waktu  48  jam,  rata-rata  jumlah individu  yang  mati  sebanyak 5    dan  40    pada konsentrasi  terendah  dan  tertinggi.  Pada rentang waktu terlama yaitu 72 jam, kosentrasi terendah mampu membunuh  9 dan 46 individu pada  konsentrasi  tertinggi.  Jumlah  kematian berasal dari seluruh jumlah larva dari 250 larva yang  digunakan.Jumlah  kematian  larva tertinggi  terjadi  selama  72  jam  dan  terendah terjadi selama 24 jam. B.  bassiana bekerja  tidak  langsung mematikan  serangga  hama  tetapi  bersifat menghambat perkembangan serangga. Serangga yang telah melakukan kontak dengan larutan B. Bassiana akan  terhambat pertumbuhan  dan  perkembangannya  dan setelah serangga ditumbuhi dengan hifa, maka serangga akan mengalami kematian (Koswanudin & Tri,  2014). Mortalitas  larva terjadi  karena  jamur B.  bassiana mengandung zat  toksik  beauvericin.  Racun  beauvericin mengakibatkan  kerusakan    pada  organel  sel target yaitu mitokondria, retikulum endoplasma dan  membran  inti  yang  akan  menyebabkan paralisis  sel  dan  berubahnya  fungsi  midgut, tubulus Malphigi  dan  jaringan  otot.  Racun tersebut juga menyebabkan kerusakan jaringan haemocoel  secara  mekanisme  seperti  saluran pencernaan,  otot,  sistem  syaraf  dan  sistem pernapasan (Putri et al ., 2015).
B.  bassiana sendiri  bersifat  racun  kontak.
Sebagaimana  racun  kontak,  insektisida  yang diaplikasikan  dapat  menembus  kutikula serangga,  trachea  atau  kelenjar  sensorik. Mekanisme infeksi diawali dengan invasi yaitu masuknya  patogen  kedalam  tubuh  serangga inang.  Kemudian  patogen  berkembang  biak dalam  tubuh  serangga.  Invasi  mengalami akselerasi  dan  mencapai  klimaks  pada  puncak infeksi dan berakhir dengan kematian serangga (Nuryanti et. al ., 2012). Secara keseluruhan total individu yang mati sebanyak  114  dari  250  larva  yang  digunakan. Banyaknya  jumlah  individu  yang  mati dipengaruhi  oleh  konsentrasi  dan  lamanya waktu  pemaparan. Semakin tinggi  konsentrasi dan  lama  waktu  yang  dibutuhkan  untuk membunuh  larva,  semakin  banyak  pula timbulnya kematian pada larva nyamuk. Hal ini dikarenakan  jamur B.  bassiana membutuhkan waktu untuk menginfeksi larva nyamuk. Hal ini membuktikan bahwa produk tepung jamur  ini  mampu  membunuh  larva  nyamuk Ae.aegypti, walaupun  membutuhkan  waktu yang  lebih  lama  dibandingkan  mengunakan tepung jamur dengan media jagung. Walaupun tidak  seefektif  pada  tepung  jamur  dengan media  jagung,  ada  beberapa  kelebihan  dari produk  ini.Kelebihan  dari  produk  ini  adalah bentuknya  yang  padat  seperti  bubuk memudahkan dalam hal penyimpanan. Putri et al ., (2015)  menyatakan  bahwa penyimpanan dalam  bentuk  bubuk  mampu  bertahan  lama sekitar  3  bulan  dibandingkan  dalam  bentuk cair. Bubuk tepung ini pula membuatnya stabil
0 2 8 19 29 0 5 14 35 40 0 9 19 40 46 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 0 0.125 0.25 0.5 0.75 Ju m lah In di vi du Konsentrasi % Jumlah Mortalitas 24 jam 48 jam 72 jam
selama  penyimpanan  dan  mudah  untuk diaplikasikan. Selain itu kandungan karbohidrat  pada  tepung  tersebut  memberikan nutrisi bagi B. bassiana sebelum diaplikasikan. KESIMPULAN Produk tepung jamur B. bassiana menyebabkan  kematian  pada larva  nyamuk pada  48  jam  pengamatan  dengan  persentase mortalitas 0%, 10%, 28%, 70% dan 80% pada masing-masing  konsentrasi  0%,  0,125%, 0,25%, 0,5% dan 0,75% sehingga efektivitasnya  lebih  kurang  sama  dengan  jika dibandingkan  dengan  menggunakan  media tepung jagung.

## DAFTAR PUSTAKA
Dinas  Kesehatan  Kota  Samarinda.2016. Laporan  DBD  Kota  Samarinda  2016. Samarinda: Dinas Kesehatan Kota Samarinda. Kementerian  Kesehatan  RI.  2016. Demam Berdarah  Biasanya  Mulai  Meningkat  di Januari . http://depkes.go.id/article/view/150117000 03/dmam-berdarah-biasanya-mulai- meningkat-di-januari.html. Diakses 2016. Koswanudin,  D  dan  T.  E.  Wahyono.2014. Kefektifan Bioinsektisida Beauveria bassiana  terhadap  Hama  Wereng  Batang Coklat (Nilaparvata  lugens), Walang Sangit (Leptocorisa oratorius),
Pengisap  Polong
(Nezera  viridula) dan (Riptortus  linearis). Jurnal Prosiding Seminar  Nasional  Pertanian  Organik .415-
420. Nuryanti,  N.  S.  P.,  L.  Wibowo  dan  A.  Azis. 2012.  Penambahan  Beberapa  Jenis  Bahan Nutrisi  pada  Media  Perbanyakan  untuk Meningkatkan Virulensi Beauveria bassiana terhadap  Hama  Walang  Sangit. J. HPT. Tropika. 12(1): 64-70.
Ownley,  B.  H.,  M.  R.  Griffin.,  W.  E.
Klingeman., K. D. Gwinn., J. K. Moulton.,
R.  M.  Pereira.  2008. Beauveria  bassiana : Endophytic Colonization and Plant Disease Control. Journal of Invertebrate Pathologi .
98:267-270.
Putri,  M.  H.  O.,  H.  Kasmaran  dan  Melanie.
2015.  Jamur  Entomopatogen Beauveria bassiana (Balsamo,  1912)sebagai  Agen
Pengendali  Hayati  Nyamuk
Aedes  aegypti
(Linnaeus,  1762 ). Pros  Sem  Nas Masy
Biodiv Indon . 1(6):1472-1477. Sembel,  D.  T.  2009.
Entomologi  Kedokteran . Yogyakarta: Andi.
Soedarto.2012.
Demam  Berdarah  Dengue Dengue  Haemorrhagic  Fever .  Jakarta: Sagung Seto. Yasmin, Y., L. Fitri dan B. M. Bustam. 2012.
Analisis  Efektifitas  Tepung Jamur  sebagai Larvasida Aedes  aegypti. Jurnal  Natur Indonesia. 14(2):126-130.