Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Krim Anti Jerawat Ekstrak Etanol Terpurifikasi Daun Sirih ( Piper betle L.) dengan Basis Vanishing Cream Terhadap Propionibacterium acne
Nuralifah * , Fery Indradewi Armadany, Parawansah, Aulif Pratiwi
Fakultas Farmasi Universitas Halu Oleo, Kampus Hijau Bumi Tridharma Anduonohu Jl. H. E. A. Mokodompit Kendari 93232
E-mail: nuralifahapt11@gmail.com

## Abstrak
Jerawat merupakan gangguan pada kulit yang ditandai dengan adanya peradangan yang disertai penyumbatan pada saluran kelenjar minyak dalam kulit yang disebabkan oleh bakteri Propionibacterium acne . Salah satu tanaman obat yang dapat dimanfaatkan sebagai obat jerawat adalah daun sirih. Daun sirih diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Ekstrak dipurifikasi dari klorofilnya dengan metode ekstraksi cair-cair menggunakan pelarut n -heksan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antibakteri terhadap ekstrak etanol daun sirih terpurifikasi dan sediaan krim dengan basis vanishing cream terhadap bakteri P. acne dengan metode sumuran. Uji stabilitas fisik sediaan krim meliputi pemeriksaan organoleptis, homogenitas, daya sebar, viskositas, pH,  dan  tipe  krim  m/a.    Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  sirih  terpurifikasi  dengan  konsentrasi  0,5% memiliki daya hambat yang lemah, 1% memiliki daya hambat yang sedang, 1,5% dan 2% memiliki daya hambat pertumbuhan P. acne yang kuat. Konsentrasi ekstrak dalam pembuatan krim antijerawat dengan basis vanishing cream sebesar 0,5% memiliki daya hambat  yang  lemah,  1%  dan 1,5%  memiliki  daya  hambat  yang  sedang,  2%  memiliki  daya  hambat  yang  kuat  sedangkan  kontrol positif (asam retinoat) yang digunakan memiliki daya hambat yang kuat terhadap pertumbuhan P . acne . Krim antijerawat dengan basis vanishing cream dengan konsentrasi ekstrak 2% memiliki aktivitas antibakteri yang paling baik terhadap P. acne.
Kata kunci: Anti jerawat, daun sirih, krim m/a, Propionibacterium , antibakteri

## 1. Pendahuluan
Kulit  merupakan  organ  terluar  penyusun  tubuh manusia  yang  terletak  paling  luar  dan  menutupi  seluruh permukaan  tubuh.  Letak  paling  luar  menyebabkan  kulit yang  pertama  kali  menerima  rangsangan seperti rangsangan  sentuhan,  rasa  sakit,  maupun  pengaruh  buruk dari  luar.  Hal-hal  tersebut  menyebabkan  kulit  rentan terkena penyakit [5].
Salah satu masalah kulit wajah yang sering dijumpai, yaitu  timbulnya  jerawat.  Munculnya  jerawat  sangat mengganggu  penampilan  seseorang  sehingga  akan  segera mencari  solusi  untuk  menghilangkan  jerawat.  Salah satunya penggunaan antibiotik sebagai solusi untuk jerawat yang beberapa dekade ini masih banyak diresepkan. Akan tetapi  penggunaan  antibiotik  sebagai  pilihan  pertama penyembuhan  jerawat  harus  ditinjau  kembali  untuk membatasi  perkembangan  resistensi  antibiotik.  Saat  ini mulai  banyak  yang  memilih back  to  nature dalam pengobatan jerawat karena efek samping lebih ringan dari pengobatan secara medis [4].
Jerawat  atau acne  vulgaris adalah  kelainan  berupa peradangan  pada  lapisan polisebaseus yang  disertai penyumbatan  dan  penimbunan  bahan  keratin  yang  dipicu oleh  bakteri Propionibacterium  acne , Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus aureus [5]. Bakteri utama penyebab  jerawat  adalah Propionibacterium  acne ,  karena
peningkatan  aktivitas  androgen  pada  masa  pubertas memicu  pertumbuhan  kelenjar  minyak  sebaceous  dan peningkatan  produksi  sebum.  Sebum  terdiri  dari  gliserida yang  dapat  dikonversi  menjadi  asam  lemak  bebas  dan gliserol  oleh  lipase  yang  diproduksi  oleh  bakteri Propionibacterium acne . Asam lemak bebas tersebut dapat mengiritasi dinding folikular dan menyebabkan peningkatan  perombakan  sel  dan  inflamasi  [12]. Pengobatan jerawat biasanya dilakukan dengan pemberian antibiotik dan bahan-bahan kimia seperti sulfur, resorsinol, asam  salisilat,  benzoil  peroksida,  asam  azelat,  tetrasiklin, eritromisin dan klindamisin.  Namun, obat-obatan tersebut juga  memiliki  efek  samping  seperti  resistensi  terhadap antibiotik dan iritasi kulit [5].
Bentuk  sediaan  kosmetik  yang  sering  digunakan untuk perawatan kulit adalah bentuk sediaan krim (3). Krim adalah sediaan setengah padat yang mengandung air tidak kurang dari 60% dan dimaksudkan untuk pemakaian luar. Selain itu, krim merupakan bentuk sediaan topikal dengan bentuk  setengah  padat  yang  cocok  untuk  pengobatan jerawat. Penggunaan krim lebih disukai karena krim lebih mudah menyebar dengan rata dan lebih mudah dibersihkan dan dicuci [1].
Vanishing cream merupakan basis krim tipe minyak dalam  air  yang  biasanya  mengandung  bahan  pembasah
seperti  trietanolamine  maupun  kalium,  ammonium  dan natrium hidroksida yang dicampurkan dengan asam stearat bebas  untuk  membentuk  emulsi.  Basis  yang  dapat  dicuci dengan air seperti Vanishing cream akan membentuk suatu lapisan tipis yang semipermeabel setelah air menguap pada tempat yang digunakan [7]. Basis krim ( vanishing cream ) disukai  pada  penggunaan  sehari-hari  karena  memiliki keuntungan yaitu memberikan efek dingin pada kulit, tidak berminyak  serta  memiliki  kemampuan  penyebaran  yang baik, sehingga sediaan krim dengan basis vanishing cream sangat cocok untuk kulit berjerawat [8].
Pembuatan  sediaan  kosmetik  untuk  perawatan  kulit wajah dapat menggunakan produk bahan alam sebagai zat aktifnya yang berasal dari ekstrak tumbuhan yang memiliki aktivitas  antimikroba  yang  sangat  membantu  dalam penyembuhan.  Salah  satu  tanaman  yang  memiliki kemampuan  sebagai  antibakteri  adalah  sirih  ( Piper  betle L.)  [6].  Daun  sirih  dimanfaatkan  sebagai  obat  tradisional untuk mengobati sariawan, batuk, astringent, antiseptik dan antijerawat,  yang  digunakan  dengan  cara  menghaluskan ataupun merebus daun sirih untuk mengobati bagian yang diperlukan (9).
Ekstrak yang diperoleh dari proses ekstraksi simplisia tanaman obat dengan menggunakan pelarut organik atau air seringkali  mengandung  senyawa  yang  tidak  diinginkan seperti  zat  warna  (pigmen),  karbohidrat,  lilin,  resin  dan sejenisnya.  Keberadaan  senyawa  tersebut  seringkali merugikan pada kestabilan dan mengurangi kadar senyawa aktif  di  dalam  ekstrak  sehingga  harus  dihilangkan. Purifikasi ekstrak diharapkan dapat meningkatkan khasiat ekstrak  disamping  memperkecil  jumlah  dosisnya.  Selain itu,  purifikasi  ekstrak bertujuan  menghilangkan  senyawa- senyawa  pengganggu  namun  tetap  mempertahankan senyawa aktifnya [13].
Kandungan kimia yang diduga terdapat dalam ekstrak terpurifikasi  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri  yaitu kandungan  kimia  yang  bersifat  polar  seperti  flavonoid, tanin, dan polifenol. Tanin merupakan polifenol yang larut dalam  air.  Mekanisme  antibakteri  tanin  antara  lain menghambat  enzim  ekstraseluler  mikroba,  menggantikan substrat yang dibutuhkan pada pertumbuhan mikroba, atau bekerja  langsung  pada  metabolisme  dengan  cara menghambat fosforilasi oksidasi. Flavonoid juga memiliki sifat  antibakteri  karena  dapat menyebabkan  terganggunya fungsi dinding sel bakteri melalui mekanisme pembentukan kompleks  dengan  protein  ekstraseluler.  Selain  kandungan kimia  tersebut,  daun  sirih  mengandung  juga  kavikol  dan kavibetol,  turunan  dari  fenol  yang  mempunyai  aktivitas antibakteri dengan cara mendenaturasi protein sel sehingga mengakibatkan terbunuhnya mikroorganisme [14].
Sirih ( Piper betle L.) merupakan tumbuhan yang telah lama  digunakan  dalam  pengobatan  dan  telah  terbukti memiliki aktivitas sebagai antibakteri. Ekstrak etanol daun sirih  memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri  terhadap P. acne dan Staphylococcus  aureus multiresisten  dengan KBM  (Kadar  Bunuh  Minimum)  masing-masing  sebesar 0,25% b/v dan 0,5% b/v [10].

## 2. Bahan dan Metode

## 2.1 Preparasi dan Ekstraksi
Sampel  daun  sirih  ( Piper  betle L.)  diperoleh  dari Kecamatan Watopute Kabupaten Muna Provinsi Sulawesi Tenggara. Sampel daun sirih yang sudah tua dikumpulkan, disortasi  basah,  selanjutnya  dicuci  dengan  air  mengalir sampai  bersih,  ditiriskan,  dikeringkan  di  bawah  sinar matahari  dan  ditutupi  kain  hitam,  disortasi  kering,  lalu diserbukkan.  Maserasi  dilakukan  terhadap  500  g  serbuk menggunakan 3,5 L etanol (1:7)  selama 3x24 jam. Filtrat diperoleh  melalui  penyaringan  dan  dipekatkan  dengan rotary  evaporator dengan  suhu  30°C.  Ekstrak  kasar  lalu dipurifikasi  dilakukan  dengan  melarutkan  ekstrak  kental menggunakan  etanol,  kemudian  dimasukkan  kedalam corong  pisah  dan  ditambahkan n -heksana  dengan perbandingan  pelarut  1:1,  diekstraksi  sampai  lapisan  n- heksana  terlihat  bening.  Ekstrak  terpurifikasi  yang diperoleh  berbentuk  ekstrak  yang  lebih  kental  berwarna coklat.

## 2.2 Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui kandungan  metabolit  sekunder  antara  lain  alkaloid, saponin, tannin, dan flavonoid dengan prosedur yang telah ditetapkan [14, 15].

## 2.3 Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Terpurifikasi
Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih dapat dilakukan  dengan  cara  memasukkan  media  agar  darah ( Blood Agar Base) ke dalam  cawan petri sebanyak 10 ml dan  dibiarkan  hingga  memadat  sebagai  lapisan  dasar, setelah  memadat  dimasukkan  lima  pencadang  secara aseptis  ke  dalam  cawan  Petri.  Sebanyak  1  mL  suspensi bakteri dicampurkan dengan 15 mL media agar darah semi padat,  dan  dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri  sampai memadat.  Setelah  memadat  alat  pencadang  pada  media diangkat  secara  aseptis  hingga  membentuk  lima  sumuran pada  media.  Pengujian  dilakukan  dengan  menimbang masing-masing  ekstrak  daun  sirih  dengan  berbagai konsentrasi kemudian dilarutkan menggunakan DMSO 1% sebanyak  1  mL  hingga  larut,  kemudian  diambil  masing- masing  sebanyak  20  μL  dan  dimasukkan  dalam  lubang sumuran  dengan  berbagai  konsentrasi,  dan  menggunakan DMSO  1%  sebagai  kontrol  negatif.  Media  bakteri  yang sudah  ditetesi  bahan  antibakteri  dimasukkan  ke  dalam candle jar , kemudian diinkubasi pada suhu 35-37 o C selama 24  jam.  Diameter  zona  hambatan  yang  terbentuk  diukur menggunakan mistar untuk menentukan aktivitas antibakteri.  Zona  hambatan  diukur  dengan  mistar  dengan cara mengurangi diameter zona bening keseluruhan dengan diameter sumuran. Pengujian dilakukan 3 kali pengulangan [17].
2.4 Formulasi krim
Tabel 1. Formula krim antijerawat
No Bahan Formula Krim (% b/b) F0 FI FII FIII FIV 1 Ekstrak daun sirih - 0,5 1 1,5 2 2 Asam stearat 12 12 12 12 12 3 Setil Alkohol 2 2 2 2 2 4 Gliserin 8 8 8 8 8 5 Trietanolamin 3 3 3 3 3 6 Metil paraben 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 7 Propil paraben 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 8 Rose Oil 3 tts 3 tts 3 tts 3 tts 3 tts 9 Akuades ad 100 ad 100 ad 100 ad 100 ad 100

## 2.5 Uji Stabilitas Fisik (Cycling Test)
Uji stabilitas fisik dapat dilakukan dengan menyimpan  sampel  pada  suhu  40 o C  selama  24  jam  lalu dipindahkan  kedalam oven  yang bersuhu 40 0 C  selama 24 jam,  waktu  selama  penyimpanan  dua  suhu  tersebut dianggap  satu  siklus.  Uji  stabilitas  dilakukan  sebanyak  6 siklus kemudian diamati ada tidaknya pemisahan fase yang terjadi  pada  sediaan.  Uji  stabilitas  fisik  meliputi pengamatan  organoleptis,  uji  homogenitas,  uji  viskositas, uji daya sebar, uji pH [18], dan uji tipe krim [19].

## 2.6 Uji Aktivitas Krim Terhadap Propionibacterium acne
Uji aktivitas antibakteri terhadap sediaan krim dapat dilakukan  dengan  cara  memasukkan  media  agar  darah kedalam cawan petri sebanyak 10 mL dan dibiarkan hingga memadat sebagai lapisan dasar. Sebanyak enam pencadang dimasukkan  secara  aseptis  ke  dalam  cawan  petri, ditambahkan 1 mL suspensi bakteri ke dalam 15 mL media agar  darah  dan  dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri  secara aseptis  sebagai  lapisan  semi  solidnya  sampai  memadat. Kemudian  dilakukan  pengujian  dengan  cara  menimbang masing-masing  sebanyak  1  g  sediaan  krim  F0  (kontrol negatif),  F1,  F2,  F3,  dan  F4,  serta  sediaan  X  (Kontrol positif) dimasukkan dalam lubang sumuran.  Media bakteri yang sudah ditetesi bahan antibakteri dimasukkan ke dalam candle jar , kemudian diinkubasi pada suhu 35-37 o C selama 24  jam.  Diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  diukur menggunakan  mikrometer  untuk  menentukan  aktivitas antibakteri [17].

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1 Ekstraksi dan Purifikasi Ekstrak
Serbuk  simplisia  daun  sirih  dari  Kabupaten  Muna diekstraksi  menggunakan  etanol  96%.  Hasil  ekstraksi disaring  kemudian  dipekatkan  dengan rotary  vacuum evaporator pada  suhu  30°C  sehingga  diperoleh  ekstrak etanol sebanyak 72,4 g (14,48%). Ekstrak kental kemudian dipurifikasi  agar  terbebas  dari  komponen  zat ballast . Ekstrak  dari  proses  ekstraksi  simplisia  dengan  pelarut organik  atau  air,  seringkali  mengandung  senyawa  yang
tidak diinginkan seperti zat  warna ( pigment ), karbohidrat, lilin, resin dan sejenisnya menjadikan ketidakstabilan sifat ﬁsika  ekstrak  saat  diformulasikan.  Keberadaan  senyawa atau  zat  tersebut  lebih  banyak  merugikan  pada  kestabilan dan  mengurangi  kadar  senyawa  aktif  di  dalam  ekstrak sehingga  harus  dihilangkan  [2].  Hasil  purifikasi  ekstrak sebanyak 20 g (4%).

## 3.2 Skrining Fitokimia
Tabel 2. Hasil uji skrining fitokimia Jenis Senyawa Parameter Positif Hasil Saponin Terbentuk busa stabil selama 15 menit Terbentuk busa stabil (Positif) Flavonoid Terjadi perubahan warna kuning tua /merah/ merah-kebiruan/jingga Perubahan warna kuning tua (Positif) Tanin Terbentuk warna biru/biru kehitaman/ hijau kehitaman atau hitam pekat Perubahan warna hijau kehitaman (Positif) Alkaloid Terjadi perubahan warna endapan putih hingga kekuningan Perubahan warna endapan putih (Positif)
.
Senyawa yang terkandung dalam daun sirih meliputi alkaloid, saponin, tannin, dan flavonoid. Mekanisme kerja flavonoid sebagai antimikroba dapat dibagi menjadi 3 yaitu menghambat  sintesis  asam  nukleat,  menghambat  fungsi membran  sel  dan  menghambat  metabolisme  energi. Mekanisme  antibakteri  flavonoid  menghambat  sintesis asam nukleat adalah cincin A dan B yang memegang peran penting dalam proses ikatan hidrogen dengan menghambat pembentukan  DNA  dan  RNA.  Flavonoid  menyebabkan terjadinya  kerusakan  permeabilitas  dinding  sel  bakteri, mikrosom,  dan  lisosom.  Senyawa  alkaloid  memiliki mekanisme  penghambatan  dengan  cara  mengganggu komponen  penyusun  peptidoglikan  pada  sel  bakteri, sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk  secara  utuh dan  menyebabkan  kematian  sel  tersebut.  Tanin  diketahui mempunyai  aktifitas  antiinflamasi,  astringen,  antidiare, diuretik  dan  antiseptik.  Sedangkan  aktivitas  farmakologi saponin  yang  telah  dilaporkan  antara  lain  sebagai antiinflamasi, antibiotik, antifungi, antivirus, hepatoprotektor serta antiulcer.

## 3.3 Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Terpurifikasi
Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  terpurifikasi daun sirih terhadap P. acne dilakukan dengan melihat zona bening  yang  terbentuk  disekitar  lubang  yang  merupakan zona  hambat  pertumbuhan  bakteri.  Zona  bening  yang terlihat dengan masing-masing variasi konsentrasi ekstrak yaitu  0,5%,  1%,  1,5%,  dan  2%  di  sekeliling  lubang membuktikan bahwa ekstrak etanol terpurifikasi daun sirih memiliki  sifat  antibakteri  terhadap P.  acne .  Konsentrasi 0,5%  merupakan  kadar  bunuh  minimum  (KBM)  [14]. Kontrol  negatif  yang  digunakan  yaitu  DMSO  karena DMSO  banyak  digunakan  sebagai  pelarut  ekstrak  dan diharapkan tidak memiliki aktivitas.
Ekstrak etanol terbukti dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  Propionibacterium  acne  dengan terbentuknya  zona  bening  di  sekeliling  lubang.  Zona bening  yang  dibentuk  merupakan  zona  hambat  bagi pertumbuhan  bakteri.  Hal  ini  terjadi  karena  adanya aktivitas antibakteri pada ekstrak etanol terpurifikasi daun sirih.  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol terpurifikasi daun sirih ( Piper Betle L.) dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak Sampel Rata-rata diameter zona hambat (mm) Kategori Ekstrak 0.5 % 2,33 Lemah Ekstrak 1 % 7,5 Sedang Ekstrak 1.5 % 13,25 Kuat Ekstrak 2 % 17,33 Kuat Kontrol (-) 0 Tidak Ada
Tabel  uji  aktivitas  memperlihatkan  ekstrak  etanol terpurifikasi daun sirih konsentrasi 0,5% memiliki tingkat penghambatan terhadap bakteri P. acne yang dikategorikan lemah,  konsentrasi  1%  tingkat  penghambatan  termasuk kategori sedang,  serta konsentrasi 1,5% dan 2% termasuk kategori kuat.

## 3.4 Uji Stabilitas Fisik
Pengujian stabilitas sediaan krim ekstrak etanol daun sirih  diantaranya  uji  organoleptis,  uji  homogenitas,  uji viskositas, uji daya sebar, uji pH, dan uji tipe krim untuk mengetahui  kestabilan  dan  keamanan  dari  sediaan  krim dengan basis vanishing cream yang dihasilkan.

## Uji Organoleptis
Pengamatan organoleptis dilakukan terhadap perubahan-perubahan konsistensi, warna, dan bau sediaan krim.  Hasil  pengamatan  organoleptis  dapat  dilihat  pada Tabel 4.

## Tabel 4. Hasil Uji Organoleptik
Formula Sebelum Cycling Test Sesudah Cycling Test Tekstur Warna Aroma  Tekstur  Warna Aroma F0 semi padat Putih Rose oil semi padat Putih Rose oil F1 semi padat coklat kekuningan Rose oil semi padat coklat kekuningan Rose oil F2 semi padat coklat kekuningan Rose oil semi padat coklat kekuningan Rose oil F3
semi padat coklat tua Rose oil semi padat coklat tua Rose
oil
F4
semi padat coklat tua
Rose oil semi padat coklat tua Rose oil Keterangan: F0  = Basis vanishing cream krim F1  = Krim dengan konsentrasi ekstrak 0,5% F2  = Krim dengan konsentrasi ekstrak 1% F3  = Krim dengan konsentrasi ekstrak 1,5% F4  = Krim dengan konsentrasi ekstrak 2%
Hasil pengamatan organoleptis sediaan krim sebelum cycling test memiliki konsistensi semi padat, warna sediaan yaitu  F0  berwarna  putih,  F1  dan  F2  berwarna  coklat
kekuningan,  F3  dan  F4  berwarna  coklat  tua,  dengan  bau khas rose  oil .  Uji  organoleptis  sesudah cycling  test menunjukkan tidak terjadi perubahan baik pada konsistensi, warna, dan bau. Dapat dikatakan bahwa krim ekstrak  daun  sirih  stabil  secara  fisik  selama  proses penyimpanan dipercepat ( cycling test ).

## Uji Organoleptis
Pemeriksaan  homogenitas  dilakukan  dengan  kaca objek.  Pengujian  dilakukan  dengan  cara  mengoleskan sejumlah krim pada permukaan objek glass untuk melihat homogenitas  campuran  dari  bahan-bahan  serta  zat  aktif yang  digunakan  dalam  formulasi  keim.  Hasil  pengujian homogenitas dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5.  Hasil Pengujian Homogenitas
Formula Sebelum Cycling Test  Sesudah Cycling Test F0 Homogen Homogen F1 Homogen Homogen F2 Homogen Homogen F3 Homogen Homogen F4 Homogen Homogen Keterangan: F0  = Basis vanishing cream krim F1  = Krim dengan konsentrasi ekstrak 0,5%
F2  = Krim dengan konsentrasi ekstrak 1% F3  = Krim dengan konsentrasi ekstrak 1,5% F4  = Krim dengan konsentrasi ekstrak 2%
Hasil  yang  diperoleh  sebelum  dan  sesudah cycling test menunjukkan susunan yang homogen dan tidak terlihat butiran  kasar.  Krim  pada  penelitian  kali  ini  memenuhi syarat karena homogen dan tidak ditemukan partikel kasar.

## Uji Viskositas
Viskositas  merupakan  gambaran  dari  tahanan  suatu benda cair untuk mengalir. Sifat ini sangat penting dalam formulasi  sediaan  cair  dan  semipadat  karena  sifat  ini menentukan sifat dari sediaan dalam hal campuran dan sifat alirnya,  baik  pada  saat  diproduksi,  dimasukkan  ke  dalam kemasan,  serta  sifat-sifat  penting  pada  saat  pemakaian, seperti konsistensi, daya sebar, dan kelembaban. Hasil uji viskositas sediaan krim dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Hasil uji viskositas
Viskositas akan meningkat seiring dengan peningkatan konsentrasi ekstrak baik sebelum dan setelah cycling test dilakukan. Ekstrak yang ditambahkan kedalam basis krim berupa ekstrak  kental, sehingga  semakin besar konsentrasi ekstrak, maka viskositasnya meningkat.
Selain ekstrak, setil alkohol juga mampu meningkatkan viskositas sediaan. Meningkatnya viskositas dapat menyebabkan sifat dan stabilitas krim semakin baik sehingga krim dapat melekat pada kulit lebih lama.  Dalam beberapa  siklus  selama cycling  test ,  formula  krim ditempatkan  pada  suhu  40  C  yang  memungkinkan terbentuknya  uap  air  selama cycling  test .  Dengan terbentuknya  uap  air  menunjukkan  bahwa  air  dalam sediaan  mengalami  penguapan  sehingga  kadar  air  dalam sediaan menjadi berkurang. Berkurangnya kadar air dalam sediaan akan menunjukkan peningkatan viskositas, namun viskositas  masih  memenuhi  nilai  viskositas  yang diinginkan, yaitu 50 - 200 dPa.

## Uji Daya Sebar
Uji  daya  sebar  dilakukan  untuk  mengetahui  daya sebar yang dapat ditempuh sediaan krim yang dibuat. Hasil uji daya sebar sediaan krim dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2. Hasil uji daya sebar
Daya  sebar  dipengaruhi  oleh  viskositas  sediaan. Semakin tinggi viskositas krim maka tahanan yang dimiliki pun  semakin  besar  sehingga  krim  semakin  sukar  untuk mengalir  dan  daya  menyebarnya  menjadi  semakin  kecil. Hal  ini  sesuai  dengan  hasil  yang  diperoleh  bahwa,  nilai viskositas berbanding terbalik dengan daya sebar.

## Uji pH Sediaan
Uji pH merupakan parameter fisikokimia yang harus diuji  pada  sediaan  topikal,  karena  pH  mempengaruhi efektivitas, stabilitas, dan  kenyamanan pengguna sediaan. Sediaan  bersifat  basa  (tidak  termasuk  dalam  rentang  pH kulit  (4-7)  akan  mengakibatkan  kulit  terasa  licin,  cepat kering,  serta  dapat  mempengaruhi  elastistas  kulit,  namun apabila sediaan bersifat asam dengan rentang pH di bawah rentang  pH  kulit  akan  mengakibatkan  mudah  mengalami iritasi.
Gambar 3. Hasil uji pH
Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa pH sediaan krim  dengan  konsentrasi  0%  (basis)  yang  tidak mengandung ekstrak etanol daun sirih tetap baik sebelum cycling  test maupun  sesudah cycling  test sehingga  dapat dikatakan tidak ada reaksi  yang terjadi pada bahan-bahan tambahan. Sediaan krim yang mengandung ekstrak etanol daun  sirih  sebelum cycling  test menunjukkan  perubahan nilai  pH  setelah  ditambahkan  ekstrak.  Semakin  besar konsentrasi  ekstrak  yang  ditambahkan  maka  pH  sediaan yang  diperoleh  semakin  asam  sehingga  mempengaruhi nilai pH sediaan krim.  Sedangkan setelah cycling test pH sediaan  mengalami  penurunan,  hal  ini  kemungkinan disebabkan  karena  adanya  pengaruh  hidrolisis  dari senyawa  yang  dikandung  ekstrak  pada  sediaan  krim, semakin  sedikit  OH - dalam  suatu  sediaan  maka  nilai  pH sediaan  akan  cenderung  turun.  Meskipun  mengalami perubahan, nilai pH masih masuk dalam rentang yang ideal bagi kulit. Nilai pH sediaan yang ideal harus sesuai dengan pH kulit yaitu 4,5-7,0.

## Uji Tipe Krim m/a
Krim  adalah  bentuk  sediaan  setengah  padat  berupa emulsi  yang  mengandung  satu  atau  lebih  bahan  obat terlarut  atau  terdispersi  dalam  bahan  dasar  yang  sesuai. Krim  terdiri  dari  emulsi  minyak  dalam  air  atau  disperse mikrokristal  asam  lemak  atau  alkohol  berantai  panjang dalam air, yang dapat dicuci dengan air dan lebih ditujukan untuk  pemakaian  kosmetika  dan  estetika.  Hasil  yang diperoleh bahwa krim tipe minyak dalam air baik sebelum dan  sesudah cycling  test ,  jika  dilarutkan  dengan menggunakan  air  terjadi  kestabilan  dimana  air  akan terdispersi  dalam  media,  tetapi  jika  dilarutkan  dengan minyak krim akan pecah dimana air dan minyak tidak akan tercampur satu sama lain. Minyak dalam air dapat dengan mudah dilarutkan menggunakan pelarut air, sebaliknya tipe krim air dalam minyak dapat larut dengan cairan minyak. Hasil  yang  diperoleh  krim  dengan  basis vanishing  cream ekstrak  terpurifikasi  daun  sirih  baik  sebelum cycling  test maupun  sesudah cycling  test memiliki  tipe  krim  minyak dalam air.

## 3.5 Uji aktivitas krim terhadap Propionibacterium acne
Uji  aktivitas  krim  dengan  basis vanishing  cream terhadap Propionibacterium  acne dilakukan  dengan metode  sumur  (difusi  agar)  yang  didasarkan  pada kemampuan senyawa-senyawa antibakteri yang diuji untuk menghasilkan  diameter  zona  penghambatan  di  sekeliling sumur uji terhadap bakteri yang digunakan sebagai penguji. Pengujian  aktivitas  antibakteri  sediaan  dilakukan  pada masing-masing formula dimana F0 sebagai kontrol negatif, F1,  F2,  F3  dan  F4  serta  sediaan  krim  yang  mengandung asam  retinoat  sebagai  kontrol  positif.  Formula  F0 merupakan  formula  tanpa  ekstrak  diharapkan  tidak terbentuk  zona  bening  sehingga  dapat  dinyatakan  bahwa bahan  tambahan  formulasi  tidak  mempunyai  aktivitas antibakteri tetapi  mempengaruhi aktivitas ekstrak, terlihat bahwa  bahan  tambahan  mempengaruhi  aktivitas  karena pada konsentrasi yang sama zona hambat yang dihasilkan
pada  sediaan  lebih  kecil  dibandingkan  dengan  ekstrak, karena  sediaan  krim  menghambat  pelepasan  kandungan senyawa aktif dari ekstrak untuk berdifusi kedalam media, sehingga  ekstrak  yang  terkandung  dalam  sediaan  tidak terlepas sempurna dalam media. Sehingga aktivitas sediaan yang  dihasilkan  lebih  rendah  dibandingkan  aktivitas ekstrak.  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  krim  ekstrak  daun sirih dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Hasil uji aktivitas krim Ekstrak Daun Sirih
Perlakuan Rata-rata diameter zona hambat (mm) Kategori Krim F0 (K-) 0 Tidak ada Krim F1 1,41 Lemah Krim F2 5,33 Sedang Krim F3 9,58 Sedang Krim F4 13 Kuat Kontrol (+) 17,75 Kuat Keterangan: Kontrol (K+)  = Krim Asam Retinoat Krim F0 (K-)   = Formula tanpa ekstrak Krim F1 = Formula konsentrasi ekstrak 0.5% Krim F2 = Formula konsentrasi ekstrak 1% Krim F3 = Formula konsentrasi ekstrak 1.5%
Krim F4 = Formula konsentrasi ekstrak 2%
Uji aktivitas antibakteri sediaan diperoleh hasil yaitu pada krim F1 dan F2 memiliki daya hambat pertumbuhan yang  sedang  dengan  diameter  zona  bening  6,25  mm  dan 10,41  mm.  Sedangkan  F3  dan  F4  memiliki  daya  hambat pertumbuhan  yang  kuat  dengan  diameter  zona  bening berturut-turut yaitu 14,33 mm dan 16,41 mm,  serta kontrol positif  memiliki  daya  hambat  pertumbuhan  yang  kuat dengan  diameter  zona  bening  19,75  mm.  Sedangkan  F0 tidak memiliki daya hambat pertumbuhannya yang berarti F0  (kontrol  negatif)  tidak  mempengaruhi  daya  hambat pertumbuhan  ekstrak  setelah  diformulasi  menjadi  sediaan krim

## 4. Kesimpulan
Sediaan krim ekstrak terpurifikasi daun sirih dengan konsentrasi  0,5%,  1%,  1,5%,  dan  2%  memiliki  aktivitas antijerawat dengan nilai daya hambat masing-masing zona hambat 1,41 mm; 5,33 mm; 9,58 mm; dan 13 mm terhadap bakteri P. acne . Formula sediaan krim ekstrak terpurifikasi daun sirih stabil secara fisik selama penyimpanan ditinjau dari pengamatan organoleptis, homogenitas, pH, viskositas, daya sebar, dan tipe krim m/a.

## Daftar Pustaka
1. Atmoko  AD,  Anom  P.  Formulasi  Bentuk  Sediaan  Krim Ekstrak Daun Sirih ( Piper Betle Linn) Hasil Isolasi Metode Maserasi  Etanol  90%, Indonesian  Journal  on  Medical Science, 2014, 1(2) .
2. Awwalita F. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Total dan Ekstrak Etanol Terpurifikasi Daun Binahong (Anredera cordifolia  (Ten.)  Steenis)  terhadap  Staphylococcus  aureus Resisten , Skripsi , Universitas Negeri Jember, 2016.
3. Fitriansyah  SN,  Dolih  G.  Formulasi  Dan  Evaluasi  Fisik Sediaan  Krim  Pelembab Dimethylsilanol  Hyaluronate
Dengan Penambahan Basis Nano Dan Fase Minyak Kelapa Murni, Indonesian  Journal  of  Pharmaceutical  Science  and Technology , 2014, 3(1) .
4. Ismiyati  N,  Trilestari.  Pengembangan  Formulasi  Masker Ekstrak Air Daun Alpukat ( Persea Americana Mill) Sebagai Antibakteri Staphylococcus  Aureus Untuk  Pengobatan Jerawat , Medula , 2014, 2(1) .
5. Kumesan YAN, Paulina VYY, Hamidah SS. Formulasi Dan Uji  Aktivitas  Gel  Antijerawat  Ekstrak  Umbi  Bakung ( Crinum  Asiaticum L.)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus Aureus Secara In Vitro , Jurnal Ilmiah Farmasi , 2013, 2(2) . 6. Kursia  S,  Julianri  SL,  Burhanuddin  T,  Asril  B,  Rahim, Nursamsiar.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etilasetat Daun  Sirih  Hijau  ( Piper  betle L.)  terhadap  Bakteri Staphylococcus epidermidis , Indonesian Journal  of Pharmaceutical Science and Technology , 2016, 3(2) .
7. Lachman  L,  Herbert  AL,  Joseph  LK. Teori  dan  Praktek Farmasi Industri, 3 rd Ed, Jakarta: UI Press, 1994.
8. Lucyani  N.  Uji  Efektivitas  Antibakteri  Sediaan  Krim  Tipe m/a Dari Minyak Atsiri Kulit Buah Jeruk Pontianak ( Citrus Nobilis Lour. Var. Microcarpa) Terhadap Isolat Propionibacterium  acnes Secara In  vitro , Naskah  Pubikasi Universitas Tanjungpura , Pontianak, 2014.
9. Noventi  W,  Novita  C.  Potensi  Ekstrak  Daun  Sirih  Hijau ( Piper  betle L.)  Sebagai  Alternatif  Terapi Acne  vulgaris , Majority , 2016, 5(1) .
10. Putri ZF. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirih (Piper  betle  L.)  Terhadap  Propionibacterium  acne  dan Staphylococcus aureus Multiresisten , Skripsi, UNS, 2010.
11. Rivai H, Putri EN, Humaira F. Pembuatan dan Karakterisasi Ekstrak  Kering  Daun  Sirih  Hijau  (Piper  betle  L.), Higea , 2014, 6(2) .
12. Sukandar  EY,  Retnosari  A,  Sigit  JI,  Adnyana  IK,  Setiadi, AP, Anggadireja A. ISO Farmakoterapi 2. Jakarta: Penerbit ISFI, 2011.
13. Warditiani NK, Larasanty, LPF, Widjaja INK, Juniari NPM, Nugroho  AE,  Pramono  S.  Identifikasi  Kandungan  Kimia Ekstrak  Terpurifikasi  Herba  Sambiloto, Jurnal  Farmasi Udayana , 2014, 3(1) ; 22-25.
14. Widyaningtias  NMR,  Yustiantara  PS,  Paramita  NLPV.  Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Terpurifikasi Daun sirih hijau ( Piper betle L.) Terhadap Bakteri Propionibacterium acnes . Jurnal Farmasi Udayana , 2014, 3(1) ; 50-53.
15. Harborne  JB.  Metode  Fitokimia:  Penuntun  Cara  Modern Menganalisis  Tumbuhan.  Terjemahan  Padmawinata  K  dan Soediro I. Bandung: Penerbit ITB, 1987
16. Nuralifah N, Jabbar A, Parawansah P, Iko RA. Uji Toksisitas Akut  Ekstrak  Etanol  Daun  Notika  (Archboldiodendron calosercium  (Kobuski))  Terhadap  Larva  Artemia  salina Leach dengan Menggunakan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Pharmauho , 2018, 4(2) ;1-5
17. Rahmi HA, Cahyanto T, Sujarwo T, Lestari RI. Uji Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Daun  Beluntas  ( Pluchea  indica (L.) Less.)  Terhadap Propionibacterium  acnes Penyebab Jerawat, JURNAL ISTEK , 2015, 9(1)
18. Wijayanti  NPAD,  Astuti  KW,  Prasetia  IGNJA,  Darayanthi MYD, Nesa PNPD, Wedarini LDS, Adhiningrat DNP. Profil Stabilitas  Fisika  Kimiamasker  Gel Peel-Off Ekstrak  Kulit Buah  Manggis  ( Garcinia  Mangostana  L.) ,  Skripsi, Universitas Udayana, 2015.
19. Shovyana  HH,  Zulkarnain  AK.  Physical  Stability  and Activity  of  Cream  W/O  Etanolic  Fruit  Extract  of  Mahkota Dewa  ( Phaleria  macrocarpha (Scheff.)  Boerl,)  as  a sunscreen. Traditional Medicine Journal , 2013, 18(2)