## PENGUJIAN ANTIBAKTERI

## Staphylococcus aureus DARI EKSTRAK ETANOL BUAH MENGKUDU

## ANTIBACTERIAL TESTED STAPHYLOCOCCUS AUREUS FROM ETHANOL EXTRACT OF NONI FRUIT

## RATIH ANGGRAENI
1*
1 INSTITUT KESEHATAN MEDISTRA LUBUK PAKAM, ALAMAT JL. SUDIRMAN NO. 38, PETAPAHAN, KEC. LUBUK PAKAM, KAB. DELI SERDANG, PROV. SUMATERA UTARA, 20512
*e-mail : atih20233@gmail.com DOI: 10.35451/jfm.v6i1.1926

## Abstrak
Berbagai jenis tumbuhan yang dimiliki Indonesia sudah semestinya dijaga dan dipertahankan  keberagamannya.  Banyak  jenis  tumbuhan  yang  dimanfaatkan sebagai  tanaman  pengobatan.  Ada  yang  rasanya  manis,  sepat,  asem,  dan bahkan pahit. Salah satunya adalah tanaman mengkudu. Tanaman mengkudu memiliki  buah  dengan  rasa  pahit  serta  menebarkan  bau  yang  kurang  sedap. Namun begitu, buah mengkudu memiliki kandungan sebagai antibakteri. Lebih dari satu bakteri yang terdapat di dalam tubuh manusia. Salah satunya adalah Staphylococcus  aureus yang  dapat  menginfeksi  apabila  sistem  imun  sedang rendah. Pengobatan utama infeksi bakteri menggunkaan antibiotik. Seringnya penggunaan  antibiotik  dapat  menyebabkan  resistensi.  Untuk  mengatasi resistensi  tersebut,  penelitian  dilakukan  pada  ekstrak  etanol  buah  mengkudu yang diharapkan dapat menghambat pertumbuhan bakteri tersebut . Penelitian ini  merupakan  eksperimental  menggunakan  bakteri Staphylococcus  aureus sebagai  uji  bakteri  dengan  metode  difusi  cakram.  Antibiotik  amoksisilin digunakan  sebagai  kontrol  positif.  Besarnya  diameter  zona  hambat  akan menentukan  aktivitas  antibakteri  pada  media  bakteri.  Ekstrak  etanol  buah mengkudu yang diujikan memberikan bukti dapat memperlama pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus. Konsentrasi larutan uji dibagi menjadi 3 yakni 25%, 50%, dan 75%. Ukuran diameter zona hambat masing-masing 15.67 mm, 19.7  mm,  dan  23.97  mm.  Perbedaan  konsentrasi  larutan  uji  dapat mempengaruhi diameter zona hambat pada media bakteri. Larutan uji dengan konsentrasi 75% memiliki daya hambat antibakteri terbaik, yaitu 23.97 mm.
Kata kunci : buah mengkudu, Staphylococcus aureus , antibakteri

## Abstract
The  various  types  of  plants  that  Indonesia  has  should  be  protected  and maintained  in  diversity.  Many  types  of  plants  are  used  as  medicinal  plants. Some taste sweet, astringent, sour, and even bitter. One of them is the noni plant. The noni plant has fruit that tastes bitter and gives off an unpleasant odor.  However,  noni  fruit  contains  antibacterial  properties.  More  than  one bacteria is found in the human body. One of them is Staphylococcus aureus
which can infect if the immune system is low. The main treatment for bacterial infections uses antibiotics. Frequent use of antibiotics can cause resistance. To overcome this resistance, research was carried out on ethanol extract of noni fruit which is expected to inhibit the growth of these bacteria. This research is experimental using Staphylococcus aureus bacteria as a bacterial test using the disc diffusion method. The antibiotic amoxicillin was used as a positive control. The diameter of the inhibition zone will determine the antibacterial activity of the bacterial medium. The ethanol extract of noni fruit that was tested provided evidence that it could prolong the growth of Staphylococcus aureus bacteria. The concentration of the test solution is divided into 3, namely 25%, 50% and 75%. The diameters of the inhibition zones are 15.67 mm, 19.7 mm, and 23.97 mm,  respectively.  Differences  in  the  concentration  of  the  test  solution  can affect  the  diameter  of  the  inhibition  zone  in  the  bacterial  medium.  The  test solution  with  a  concentration  of  75%  had  the  best  antibacterial  inhibition power, namely 23.97 mm.
Keywords : noni fruit, Staphyococcus aureus, antibacterial

## 1. PENDAHULUAN
Ribuan jenis tumbuhan yang tersebar  di  Indonesia  Sebagian  besar dapat  digunakan  untuk  pengobatan (Muzafri, 2019). Dari keberagaman itu, ada  beberapa  yang  terasa  pahit  juga menebarkan bau busuk. Salah  satunya adalah  mengkudu.  Memiliki  nama  latin Morinda  citrifolia ,  mengkudu  masuk dalam kelas Dicotyledonae ordo Rubiales famili Rubiaceae (Aslah, 2019). Mengkudu  tumbuh  secara  liar  di dataran rendah beriklim
tropis
(Nirawati,  2016).  Kini  sudah  banyak dibudidaya  karena  memiliki  banyak manfaat.
Beberapa
penelitian menunjukkan bahwa mengkudu memiliki  sifat  antibakteri  (Aryadi, 2014).  Daunnya  berpotensi  sebagai agen  antibakteri  untuk E.  coli dan S. typhimurium (Halimah, 2019). Buahnya sering dimanfaatkan sebagai antibakteri dan suplemen tubuh agar terhindar dari infeksi  sejumlah  bakteri  (Prakoso, 2019).  Buahnya  memiliki  aroma  busuk dan rasa yang pahit.
Staphylococcus aureus adalah salah satu jenis bakteri yang dapat menginfeksi  tubuh  manusia.  Apabila sistem  imun  sedang  rendah,  maka
bakteri  ini  dengan  mudah  dapat menginfeksi tubuh (Muzafri, 2019).
Buah  mengkudu  dapat  dijadikan alternatif  pengobatan  karena  bersifat antibakteri. Secara tradisional, mengkudu  sering  digunakan  untuk sebagai  antibakteri  (Yuwono,  2016). Penggunaan  ekstrak  etanol  buah mengkudu  diharapkan  memiliki  sifat antibakteri  yang  kuat  yang  dapat memperlama pertumbuhan bakteri tersebut.  Aktivitas  antimikroba  buah mengkudu  telah  diuji  oleh  Antara (2014) terhadap E. coli , S. typhi , dan B. cereus. Prasetyorini (2019) juga menguji  aktivitas  antibakteri  dari  daun dan  buah  mengkudu  terhadap S. epidermidis .
Berdasarkan  pengujian  yang  telah dilakukan, peneliti akan menguji ekstrak buah mengkudu terhadap
Staphylococcus aureus .

## 2. METODE
Dilakukan  secara  eksperimental dengan metode difusi cakram menggunakan Staphylococcus  aureus dan larutan uji dengan tiga konsentrasi, yaitu  25%,  50%,  dan  75%.  Aktivitas antibakteri ditentukan dengan
pengukuran  besarnya  diameter  zona bening pada media bakteri.
Pembuatan  ekstrak  etanol  buah mengkudu secara
maserasi (perendaman)  menggunakan  pelarut etanol 96%. Ditimbang serbuk simplisia sebanyak 350g dan pelarut etanol 96% 3,5L (perbandingan 1:10) dalam wadah tertutup  rapat  sempurna.  Perendaman dilakukan  selama  3  hari  sambal  terus sesekali diaduk setiap hari. Selanjutnya filtrat dimasukkan dalam rotary evaporator untuk  dipekatkan  lalu diuapkan di waterbath sampai terbentuk ekstrak kental (Windriani, 2020).
Ekstrak  kental  didapat  dilakukan pengujian  pertama  yaitu  skrining fitokimia untuk mengetahui  kandungan senyawa kimianya masuk dalam golongan yang mana.
Sebanyak  2,5g  ekstrak  dilarutkan dalam 10mL DMSO (Dimetil Sulfoksida) sebagai  larutan  uji  konsentrasi  25%. Cara  yang  sama  untuk  larutan  uji konsentrasi 50% dan 75%, sebanyak 5g dan 7,5g dilarutkan dalam 10mL DMSO.
Media  yang  digunakan  dibuat terlebih dahulu. Sebanyak 28g nutrient agar  (NA)  ditimbang  lalu  dilarutkan dalam 1L aquadet kemudian dipanaskan sambal  diadul  sampai  larutan  menjadi bening. Ditunggu dingin lalu disterilkan dalam autoklaf selama 15’ . Suhu harus stabil sebesar 121 o C (Sinaga, 2019). Agar  miring  diperlukan  untuk pertumbuhan  bakteri.  Agar  miring dibuat dengan memasukkan 3ml media NA yang sudah steril lalu ditutup kapas steril dan dimiringkan secara horizontal dan  didiamkan.  Biakan Staphylococcus aureus ditanam  di  media  tersebut  lalu dimasukkan  ke  dalam  mesin  inkubasi selama 24 jam (Sinaga, 2019).
Pembuatan  standar  kekeruhan Mac Farland 0,5  dengan  mencampurkan larutan  BaCl 2 1%  sebanyak  0,05mL dengan  larutan  H 2 SO 4 1%  sebanyak
9,95mL  lalu  dikocok  sampai  homogen dan terlihat keruh (Retnaningsih, 2019).
Suspensi  bakteri  uji  dibuat  dalam 2mL  larutan  NaCl  0,9%  lalu  dikocok sampai keruh dan disertarakan kekeruhannya  dengan  larutan Mac Farland .
Kontrol  positif  menggunakan  10mg amoksisilin  yang  dilarutkan  dalam 100mL  aquadest.  Dan  kontrol  negatif menggunakan 10mL DMSO.
Pengujian antibakteri dilakukan secara  aseptik  dengan  metode  difusi kertas  cakram.  10mL  media  NA dimasukkan ke cawan petri dengan cara dituang.  Lalu  dipipet  bakteri  uji  ke cawan petri kemudian digoyan perlahan dan  didiamkan  sampai  memadat. Selanjutnya  diambil  kertas  cakram menggunakan pinset steril dipindahkan ke konsentrasi 25%, 50%, 75%, larutan amoksisilin, dan larutan DMSO. Selanjutnya  kertas  cakram  yang  telah direndam ekstrak etanol buah mengkudu  dipindahkan  ke  media  NA yang ada bakteri ujinya, lalu dimasukkan ke alat inkubasi selama 24 jam.  Diamati  zona  bening  di  sekitar kertas  cakram  dan  diukur  diameter menggunakan  jangka  sorong  (Sinaga, 2019).

## 3. HASIL
Hasil pengujian dapat diamati dalam bentuk  gambar  dan  tabel.  Serbuk simplisia  buah  mengkudu  yang  telah dihaluskan dapat dilihat pada Gambar 1. Ekstrak kental yang dipekatkan di atas waterbath pada Gambar 2.
Gambar 1. Serbuk simplisia

## Gambar 2. Ekstrak kental
Pada  Gambar  1  terlihat  jelas  warna coklat  serbuk  simplisia.  Begitu  juga dengan  ekstrak  kental  yang  telah dipekatkan  pada  Gambar  2,  warnanya lebih gelap.
Selanjutnya  hasil  uji  bakteri  di cawan  petri  dengan  konsentrasi  25%, 50%,  dan  75%  dapat  dilihat  pada Gambar  3.  Hasil  uji  kontrol  positif  dan negatif di cawan petri pada Gambar 4.
Gambar 3. Uji bakteri
Gambar 4. Uji kontrol (+) dan (-)
Pada  Gambar  3  dapat  dilihat  dengan jelas besaran diameter konsentrasi 75% paling  luas.  Begitu  juga  untuk  kontrol positif memliki area diameter lebih luas dibandingkan area kontrol negatif.
Selanjutnya  hasil  skrining  fitokimia dapat  dilihat  di  tabel  1  dan  diameter hasil  uji  antibakteri  ekstrak  di  dalam cawan petri di tabel 2.
Tabel 1. Hasil skring fitokimia Senyawa Pereaksi Hasil Alkaloid Flavonoid Saponin
Tannin Triterpeno id/steroid Meyer Dragendorf LB Wilstater HClp – Mg HCl FeCl 3
LB - + + +
+ - +
Tabel 2. Hasil uji antibakteri ekstrak etanol buah mengkudu Perc  K(-)  K(+)  25%  50%  75%
1 2 3 0 0 0 30,9 30,7 31,2 15,9 15,4 15,7 19,4 19,9 19,8 23,7 24,0 24,2 Mean 0 31  15,7  20 24 Keterangan:
diameter >20mm: sangat kuat diameter 10-20mm: kuat diameter 5-10mm: sedang diameter 0-5mm: lemah
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  ekstrak tidak mengandung tannin, tetapi positif terhadap  alkaloid  dengan  pereaksi Dragendorf  dan  LB,  lalu  flavonoid, saponin, dan triterpenoid/steroid. Tabel 2  menunjukkan  bahwa  konsentrasi 75%  memiliki  diameter  zona  hambat terbesar  yakni  24mm,  masuk  dalam kategori  sangat  kuat.  Sedangkan ekstrak  dengan  konsentrasi  50%  dan
( Ekstrak

## 25% masuk dalam kategori kuat yakni sebesar 20mm dan 15,7mm.

## 4. PEMBAHASAN
Sifat  antibakteri  buah  mengkudu terhadap  pertumbuhan Staphylococcus aureus dibuktikan dengan cara mengidentifikasi  zona  hambat  pada media  uji  bakteri.  Ekstrak  etanol  buah mengkudu  yang  kental  dibuat  dalam tiga konsentrasi berbeda untuk besarnya  peran  perbedaan  konsentrasi terhadap  penghambatan  pertumbuhan Staphylococcus  aureus .  Pengukuran zona  hambat  menunjukkan  tingginya konsentrasi ekstrak dapat menghambat pertumbuhan
bakteri. Hasil menunjukkan  bahwa Staphylococcus aureus
berhasil dihambat oleh konsentrasi  25%,  50%,  maupun  75%. Zona  hambat  paling  baik  ditunjukkan oleh  konsentrasi  75%  dengan  kategori sangat kuat.
Besarnya daya hambat yang dihasilkan dikarenakan kandungan metabolit sekunder oleh ekstrak etanol buah  mengkudu.  Kandungan  aktifnya adalah alkaloid, flavonoid, saponin, dan triterpenoid/steroid.  Senyawa  alkaloid termasuk senyawa yang mampu mengganggu  komposisi  peptidoglikan dinding  sel Staphylococcus  aureus (Paju, 2013). Senyawa flavonoid dikenal sebagai senyawa polifenol yang berfungsi  merusak  dinding  sel  bakteri yang dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus (Wijayati, et al ., 2014). Senyawa saponin dikenal sebagai senyawa yang dapat menurunkan  tegangan  permukaan  dan akan  berbusa  apabila  dikocok  kuat dengan  air.  Kata  saponin  berasal  dari bahasa  latin  yakni  ‘sapo’  berarti  sabun karena memiliki sifat yang hampir sama dengan sabun (Wijaya, 2019). Saponin mengganggu dinding sel Staphylococcus aureus
sehingga
dinding  selnya  rusak  dan  akan  terjadi bakterilisis
(Kusumawati, 2015).
Senyawa  triterpenoid/steroid  dapat mengganggu kesensitivitasan membran lipid Staphylococcus aureus . Triterpenoid/teroid  akan  menyebabkan liposom bocor sehingga dapat berhubungan dengan
membran fosfolipid Staphylococcus  aureus yang bersifat  permeabel  terhadap  senyawa- senyawa lipofilik. Kebocoran ini menyebabkan  kapasitas  membran  sel menurun  sehingga  sel  menjadi  rapuh dan lisis (Bontjura et al . 2015).
Dari  hasil  skrining  fitokimia,  zona hambat yang muncul ini terjadi karena adanya kandungan yang dimiliki ekstrak (alkaloid,  flavonoid,  saponin,  dan triterpenoid/steroid). Metabolit sekunder  tersebut  termasuk  golongan fenol  yang  dapat  memicu  terjadinya kerusakan  ikatan  protein  atau  asam nukleat pada sel Staphylococcus aureus . Turunan fenol ini dapat menjalin interaksi  kompleks  dengan  enzim  dan lipid pada Staphylococcus aureus , juga membran  sitoplasma  selnya  melalui proses adsorpsi dengan ikatan hidrogen (Wibowo, 2013).

## 5. KESIMPULAN
Ekstrak  uji  pada  penelitian  ini memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap pertumbuhan Staphylococcus  aureus .
Perbedaan  konsetrasi  mempengaruhi luas zona hambatnya. Konsentrasi 25% menunjukkan  zona  hambat  15,7mm (kuat).  Konsentrasi  50%  menunjukkan zona hambat 20mm (kuat). Konsentrasi 75% menunjukkan zona hambat 24mm (sangat  kuat).  Kandungan  metabolit yang  dimiliki  oleh  masing-masing konsentrasi tentu saja berbeda.
Semakin tinggi persentase konsentrasi, maka  kandungan  alkaloid,  flavonoid, saponin,  dan  triterpenoid/steroid  juga semakin banyak  sehingga berpengaruh pada  antivitas  antibakterinya.  Semakin panjang  (luas)  diameter  pada  zona
bening  kertas  cakram,  maka  semakin kuat daya antibakterinya.

## DAFTAR PUSTAKA
Antara,  N.S.,  Prabanca,  V.G.,  dan Ekawati,  I.G.A.  (2014).  Aktivitas Antimikroba Ekstrak Bubuk Buah Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.) terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Patogen. Media  Ilmiah  Teknologi Pangan . 1(1): 1-9.
Aryadi,  I.G.I.P.  (2014).  Pengaruh
Ekstrak Daun Mengkudu ( Morinda citrifolia L.) terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus Sebagai  Penyebab  Abses Periodontal  secara  In  Vitro . Skripsi Fakultas Kedokteran Gigi .
Denpasar:
Universitas Mahasaraswati.
Aslah, A.P., Low W.A, Jayanto I. (2019). Aktivitas  Antibakteri  dan  Analisis KLT-Bioautografi Dari Fraksi Daun Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.). Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi-UNSRAT . 8(3): 89-99. Bontjura S. (2015). Uji Efek Antibakteri Ekstrak Daun Leilem ( Clerodendrum  minahassae L.)
Terhadap  Bakteri Streptococcus mutans . Jurnal  ilmiah  Farmasi Pharmacon . 4(4): 96-101.
Halimah, H., Suci, D.M., & Wijayanti, I.
(2019). Studi Potensi Penggunaan  Daun  Mengkudu ( Morinda  citrifolia L.)  sebagai Bahan Antibakteri Escherichia coli dan Salmonella  typhimurium . Jurnal  Ilmu  Pertanian  Indonesia (JIPI) . 24(1): 58-64.
Kusumawati,  E.,  Supriningrum,  R.,  & Rozadi,  R.  (2015).  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun.
Jurnal  Ilmiah  Manuntung .  1(1):
1-7.
Muzafri,  A.  (2019).  Uji  Aktivitas Antimikroba  Ekstrak  Andaliman
( Zanthoxylum  acanthopodium ). Jurnal Sungkai . 7(1): 122-126. Nirawati,  C.  (2016).  Uji  Daya  Hambat Ekstrak Daun Dan Buah Mengkudu  ( Morinda  citrifolia ) Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli Sebagai Penunjang Praktikum Mata Kuliah Mikrobiologi. Skripsi .  Program Studi Pendidikan Biologi. Fakultas Tarbiyah  Dan  Keguruan.  Aceh: Universitas Islam Negri Ar-Raniry Darussallam.
Paju, N., Yamlean, P. V. Y., dan Kojong, N.  (2013).  Uji  Efektivitas  Salep Ekstrak Daun Binahong ( Anredera cordifolia (Ten.)  Steenis)  pada Kelinci  (Oryctolagus  cuniculus)
yang Terinfeksi Bakteri Staphylococcus aureus .
Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi . 2(1): 9. Prakoso,  A.A.  (2019). Mengkudu –
Taksonomi,
Asal,
Sebaran,
Morfologi, Kandungan & Manfaat .
Dikutip  dari  RimbaKita.com  |
Informasi Kehutanan dan Lingkungan Hidup!. Prasetyorini, Utami, N.F., dan Sukarya, A.S. (2019). Uji Aktivitas
Antibakteri  Ekstrak  Buah  dan Daun Mengkudu Terhadap Bakteri Penyebab Jerawat ( Staphylococcus epidermidis ). Fitofarmaka Jurnal Ilmiah
Farmasi . 9(2): 123-130.
Retnaningsih,  A.,  Primadiamanti,  A., dan Febrianti, A. (2019). Uji Daya Hambat  Ekstrak  Etanol  Daun Ungu ( Graptophyllum pictum L.). Jurnal Analis Farmasi . 4(1): 1-9. Sinaga,  R.P.  (2019).  Uji  Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Batang Bayam Duri Amaranthus spinosus
L. Terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli Secara In Vitro. Skripsi . Program Studi  Sarjana  Farmasi  Fakultas Farmasi. Medan: Universitas Sumatra Utara.
Wibowo,  W.I.  (2013).  Uji  Daya Antibakteri Ekstrak Etanolik Daun
Salam  ( Syzygium  polyanthum W.) Terhadap Bakteri Streptococcus  mutans Penyebab
Karies  Gigi. Skripsi .  Yogyakarta: Universitas Sanata Dharma. Wijaya,  J.  (2019). Dampak  Biologis Saponin Terhadap Ternak .
Dikutip  dari  Dampak  Biologis Saponin  Terhadap  Ternak  - AnalisaDaily.com. Wijayati,  B.A.,  Citraningtyas,  G., Wehantouw,  F.  (2014).  Potensi Ekstrak  Etanol  Tangkai  Daun Talas  ( Colocasia  esculenta L.) Sebagai Alternatif Obat Luka Pada Kulit  Kelinci. Jurnal  Pharmacon. 3(3). Windriani,  I.  dan  Safitri,  C.I.N.H. (2020).  Aktivitas  Antibakteri Kombinasi  Ekstrak  Daun  Sirih Hijau  Dan  Buah  Asam  Jawa Terhadap
Salmonella
typhi
Secara Mikrodilusi. Jurnal. Yuwono,  S.S.  (2016). Buah  Mengkudu ( Morinda  citrifolia ).  Dikutip  dari
Buah Mengkudu ( Morinda
citrifolia ) - artikel - - Sudarminto Setyo Yuwono (ub.ac.id).