## PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK C URCUMA LONGA DENGAN TINGKAT TOKSISITAS PARASETAMOL PADA GASTER, HEPAR DAN RENAL MENCIT JANTAN GALUR SWISS
Cindy Tamara Widagdo, Pingkan Naibaho, Tejo Jayadi, Sulanto Saleh Danu Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Duta Wanaca
Korespondensi: jeremytejo1@yahoo.com

## ABSTRAK
Latar Belakang: Curcuma longa dikatakan memiliki aktifitas hepatoprotektor, renoprotektor  dan  antiinflamasi  terhadap  dosis  toksik  parasetamol.  Mengingat pemakaian  jangka  pendek  dan  jangka  panjang,  dan  prevalensi  toksisitas  overdosis parasetamol semakin meningkat, perlu diteliti  apakah Curcuma longa memproteksi kerusakan lambung, hepar dan renal sehingga dapat bersinergi dengan pengobatan overdosis parasetamol.
Metode  Penelitian: Penelitian  ini  adalah  eksperimental  murni  dengan rancangan  acak  lengkap  ( completely  randomized  design ),  menggunakan  36  ekor mencit  jantan  galur  swiss.  Dibagi  6  kelompok  yaitu  kontrol  negatif,  kontrol  sham, kontrol  positif,  perlakuan  satu,  dua  dan  tiga.  Tiga  dosis  ekstrak Curcuma  longa terpurifikasi  etil  asetat  65  mg/kgBB,  487mg/kgBB  dan  1040mg/kgBB  diberikan selama  14  hari,  dilanjutkan  dosis  tosik  parasetamol  520  mg/kgBB  selama  7  hari. Pemeriksaan  serum  SGOT,  SGPT,  ureum,  kreatinin  dan  histopatologi  lambung, hepar,  renal  untuk  menilai  apakah  ekstrak Curcuma  longa dapat  memberikan proteksi  kerusakan  lambung,  hepar  dan  renal  dari  akibat  pemberian  parasetamol dosis toksik.
Hasil  dan  Diskusi: Hasil  pemeriksaan  SGOT  (p  =  0,233),  SGPT  (p  =  0,004), ureum (p = 0,19), kreatinin (p = 0,009) dan histopatologi lambung (p = 0,00), hepar (p  =  0,00),  dan  renal  (p  =  0,00)  menunjukkan  ekstrak Curcuma  longa terpurifikasi etil asetat memberikan efek toksik yang simultan dengan dosis toksik parasetamol. Efek  toksik  ini  dapat  dijelaskan  karena  bioaviabilitas  curcumin  dalam  ekstrak Curcuma longa rendah sehingga pengaruh terhadap dosis toksik parasetamol dalam hepatosit  diragukan,  meningkatkan  efek  sitotoksisitas,  dan  menurunkan  ekskresi metabolit toksik parasetamol.
Kesimpulan: Ekstrak Curcuma  longa tidak  memproteksi  toksisitas  terhadap gaster, hepar dan renal dari pemberian parasetamol dosis toksis pada mencit galur Swiss.
Kata  Kunci: ekstrak Curcuma  longa terpurifikasi  etil  asetat,  parasetamol, gaster, hepar, renal, SGOT, SGPT, ureum, kreatinin
THE EFFECT OF CURCUMA LONGA EXTRACT PRETREATMENT WITH TOXIC DOSE OF PARACETAMOL IN GASTER, HEPAR AND RENAL OF MALE MICE STRAIN SWISS
Cindy Tamara Widagdo, Pingkan Naibaho, Tejo Jayadi, Sulanto Saleh Danu Medical Faculty of Duta Wacana Christian University
Corespondence: jeremytejo1@yahoo.com

## ABSTRACT
Background :  Hepatoprotector,  nephroprotector  and  antiinflamasion  of Curcuma  longa  extract  against  toxic  dose of paracetamol  is questionable.  The use of short  term  and  long  term  of  paracetamol,  and  the  rise  of  toxicity  prevalence  of  toxic dose of paracetamol, is necesery to study whether Curcuma longa have gaster, hepar and renal protection against toxic dose of paracetamol.
Methode :  This  research  is  a  true  experimental  study  with  a  completely randomized  design,  use  36  mice  strain  swiss.  Subjects  were  divided  into  6  groups, negative  control,  sham  control,  positive  control,  treatment  1,2,  and  3.  Three  dose  of Curcuma  longa  extract  purified  with  etil  asetat  65  mg/  kg  BW,  487mg/  kg  BW  dan 1040mg/ kg BW for 14 days, and then toxic dose of paracetamol 520 mg/ kg BW for 7days.  Examination  of  SGOT,  SGPT,  ureum,  creatinine  serum  and  gaster,  liver  and renal histopathology to asses protection property of Curcuma longa extract.
Result  and  Discussion :  The  result  of  serum  of  SGOT  (p  =  0,233),  SGPT  (p  = 0,004), ureum (p = 0,19), creatinine (p = 0,009) and histopathology of gaster (p = 0,00), liver (p = 0,00), and renal (p = 0,00) showed that purified etil asetat of Curcuma longa extract have simultaneous toxic property with toxic dose of paracetamol. This toxic can explain because bioaviability  of  curcuminoid  in Curcuma  longa extract  is low, so  the influence  to  toxic  dose  of  parasetamol  in  hepatocyte  is  doubtful,  can  rise  cytotoxic effect and lowering toxic metabolit of paracetamol excretion.
Conclusion :  Curcuma  longa  extract  does  not  protect  against  gastric  toxicity, hepatic  toxicity,  nephrotoxicity  induced  by  toxic  dose  of  paracetamol  in  mice  strain Swiss.
Keywords : Etil acetate purified of Curcuma longa extract, paracetamol, gaster, liver, renal, SGOT, SGPT, ureum, creatinine

## PENDAHULUAN
Curcuma longa (kunyit) mengan- dung  curcumin  (diferuloylmethane) sekitar  60%,  desmethoxycurcumin, monodemethoxycurcumin,
bisdemethoxycurcumin,
dihydrocurcumin  dan  cyclocurcumin. Curcumin merupakan komponen pewarna  kuning  dan  terdiri  dari curcumin  I  sebesar  94%,  curcumin  II sebesar  6%  dan  curcumin  III  sebesar 0,3%. Serbuk Curcuma longa
meningkatkan  sekresi  musin  pada hewan  coba  kelinci  oleh  karena  itu, Curcuma  longa berperan  sebagai substansi  yang  memproteksi  agen iritan,  memberikan  efek  proteksi terhadap agen penyebab ulkus misalnya  fenilbutason,  memblokade ulkus gaster diinduksi oleh
indometasin,  etanol  dan  stress  pada hewan  coba  tikus.  Pada  penelitian yang  dilakukan  di  Jepang, Curcuma longa merupakan hepatoprotektif terhadap  CCl4  ( Carbon  tetrachloride ).
Curcuma
longa juga sebagai nefroprotektif yang merestorasi kerusakan fungsi renal akibat adriamycin. 1 Kerusakan renal akibat parasetamol membahayakan jiwa penderita  oleh  karena  itu,  antidotum atau  obat  untuk  tatalaksananya menjadi penting. Meskipun A cetylcysteine (NAC),  suatu  prekursor GSH
( Glutathione ), memproteksi
hepatotoksisitas  parasetamol,  tidak memproteksi  kerusakan  renal  karena parasetamol. Pemberian curcumin meningkatkan  level  GSH  dan  GSH-Px ( phospoholipid hydroperoxide glutathione  peroxidase ),  aktivitas  CAT ( Catalase ) dan SOD ( Superoxide dismutase ) pada jaringan renal. Kemampuan  curcumin  menurunkan kerusakan  membran  berhubungan dengan pengikatan agen-agen penginisiasi  peroksida  lipid. Curcumin dapat
mencegah nefrotoksisitas karena  parasetamol  bergantung  pada kemampuannya mengeliminasi radikal
hidroksil,  radikal  superoksida,  NO ( Nitric oxide ), menghambat  pembuatan radikal superoksida. 2 Curcuma longa adalah  herbal  kaya polifenol  telah  lama  digunakan  di India dalam pengobatan Ayurveda dan di  Cina  dalam traditional  Chinese medicine ,  sebagai  obat  tradisional menunjukkan aktivitas antikarsinogenik, antimikrobial, antioksidan,  antiinflamasi.  Selain  itu juga menunjukkan aktifitas hepatoprotektor, nefroprotektor.
Curcumin yang  terkandung  dalam Curcuma longa sangat aman meskipun diberikan  dalam  dosis  besar  pada hewan  coba. 3 Berdasarkan  uraian  di atas,  peneliti  bertujuan  meneliti  efek protektif curcumin yang  terkandung dalam Curcuma longa pada kerusakan gaster,  hepar,  dan  renal  akibat pemberian parasetamol dosis tinggi.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  dengan menggunakan  jenis  metode  penelitian eksperimental
murni dengan
rancangan  acak  lengkap  ( completely randomized  design )  dikelompokkan secara random acak lengkap. Populasi penelitian ini adalah 36 mencit  jantan galur  Swiss  yang  diperoleh  dari  UPHP UGM  dengan  kriteria  inklusi,  adalah berumur  2-3  bulan  dengan  berat badan 25-30 gram.
Aklimatisasi hewan coba berlangsung  selama  14  hari,  yaitu untuk  membiasakan  mencit  hidup dalam lingkungan dan perlakuan yang baru, serta untuk membatasi pengaruh lingkungan dalam percobaan.  Setiap  hari  mencit  diberi makan dan minum secukupnya disertai  dengan  pengamatan  umum, yaitu  mencit  yang  tampak  sakit  tidak diikutsertakan dalam penelitian.
Kriteria ekslusi, adalah aktifitas berkurang,  lebih  banyak  diam,  serta bulu berdiri. Dilakukan pula pemeriksaan bobot setiap 2 hari.
Setelah  diaklimatisasi,  hewan coba  dialokasikan  secara  acak  ke dalam kelompok perlakuan. Dibuat 36 gulungan  kertas,  setiap  gulungan kertas ditulis nomor perlakuan A1, A2, A3 … F5, F6.
Pada  penelitian  ini  digunakan tiga  kontrol  yaitu  kontrol  positif pemberian  parasetamol  13  mg/25 gramBB selama 7 hari tanpa pemberian  ekstrak Curcuma  longa ,
kontrol  negatif  hanya  diet  ad  libitum selama 21 hari, kontrol sham diberikan  ekstrak  kurkuma  longa  12 mg/25 gramBB selama 14 hari. Ada 3 perlakuan  diberikan  ekstrak Curcuma longa 2  mg/25  gram  BB,  12  mg/25 gram  BB,  26  mg/25  gramBB  selama 14  hari  dan  pada  hari  ke  15  masing- masing  diberikan  parasetamol  13 mg/25  gram  BB  selama  7  hari.
Pemberian parasetamol pada penelitian yang dilakukan oleh
Santoso  selama  7  hari  dengan  dosis 500 mg/kgBB/Hari. 4 Untuk blinding ,  laboran  yang membantu  penelitian  di  Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu IV – UGM tidak mengetahui obat parasetamol  dan  ekstrak Curcuma longa yang digunakan dalam perlakuan. Peneliti memberi
parasetamol  diberi  kode  larutan  A, ekstrak Curcuma longa dosis 2 mg/25 gramBB  diberi  kode  larutan  B,  12 mg/25 gramBB  diberi kode larutan  C, 26  mgBB/25  gramBB  diberi  kode larutan D.
Curcuma longa diekstraksi dengan cara maserasi memakai pelarut  etanol  dan  dipurifikasi  etil asetat.  Kadar  curcuminoid  dihitung dengan kolumkromatografi. Pembuatan  ekstrak Curcuma  longa dan sirup parasetamol, serta penghitungan kadar curcuminoid, dilakukan  di  LPPT  I  UGM.  Pemberian ekstrak Curcuma  longa dan  sirup parasetamol  diberikan  peroral  dengan sonde.
Setelah mendapatkan perlakuan, mencit dikorbankan
dengan cara inhalasi eter. Darah yang diambil dari pembuluh darah retroorbital.
Pembuatan preparat histopatologi  gaster,  hepar,  dan  renal dengan  pewarnaan  H&E  dilakukan  di Bagian  Patologi  Anatomi  Fakultas Kedokteran  UGM.  Preparat  dianalisis dengan metode blinding oleh peneliti. Pengukuran kadar SGOT, SGPT, ureum, kreatinin serum dilakukan  di  LPPT  1  UGM  dengan menggunakan  metode  standar.  Nilai SGOT,  SGPT,  ureum,  dan  kreatinin dihitung  secara  kuantitatif  dengan skala  ratio.  Penelitian  ini  mengukur tingkat kerusakan dan proteksi gaster, hepar, dan renal berdasarkan parameter morfologi. Penilaian histomorfologi  kerusakan  lambung karena  NSAID  menjadi  tiga  skala, yaitu:  nilai  1)  Epitel  superfisial  intak, lamina  propria udem, struktur kapiler kongesti  dan  dilatasi,  ekstravasasi eritrosit  dan  bekuan  fibrin  sedikit, nilai  2)  Erosi  fokal  tersebar  multiple +1, nilai 3) Hilangnya epitel superfisial, adanya materi proteinase pada permukaan epitelium, perdarahan difus  dalam  lamina  propria,  nekrosis iskemia transmural +2. 5 Kriteria morfologi kerusakan hepar diklasifikasikan sebagai berikut: derajat  0)  Histologi  normal,  derajat  1) Kongesti minimal dan nekrosis hepatosit  tunggal,  terbatas  pada daerah  sekitar  vena  sentrilobuler; umumnya  lobulus  tidak  terkena, derajat  2)  Kongesti  sedang  dan perdarahan  pada  daerah  sekitar  vena sentrilobuler dan meluas ke dalam sel- sel  midzona,  sebagian  besar  lobulus rusak. Daerah dengan nekrosis terbatas  pada  sel-  sel  liver  di  sekitar vena  sentrilobuler,  derajat  3)  Daerah kongesti  dan  perdarahan  luas  dalam sentrilobuler  dan  daerah  midzona hepar.  Nekrosis  koagulativa  tampak jelas  melibatkan  seluruh  hepatosit dalam  zona  sentrilobuler;  banyak didapatkan  daerah bridging  necrosis antara  zona  sentrilobuler. 6 Kriteria kelainan morfologi renal dari
Houghton et  al .  (1978),  membagi  lesi menjadi: 0) normal, 1) daerah degenerasi granulo-vakuoler pada epitel fokal dan debris granuler dalam lumen  tubuler,  dengan  atau  tanpa adanya  deskuamasi  sel  epitel  tubuler dalam fokus  kecil (< 1% dari populasi tubulus  mengalami  deskuamasi),  2) nekrosis epitel
tubuler dan deskuamasi  mudah  terlihat  tetapi kurang  dari  50%  tubulus  kortikal,  3) lebih  dari  50%  tubulus  proksimal menunjukkan
deskuamasi dan nekrosis  tetapi  tubulus  masih  mudah dilihat,  4)  nekrosis  tubulus  proksimal hampir semua atau semua. 2 Unit  eksperimental  penelitian ini adalah:  kandang no. 1 = kelompok kontrol  negatif;  kandang  no.  2  = kelompok  kontrol  sham;  kandang  no. 3 = kelompok kontrol positif; kandang no.  4  =  kelompok  perlakuan  satu; kandang  no.  5  =  kelompok  perlakuan dua;  kandang  no.  6  =  kelompok perlakuan tiga.
Dalam penelitian ini akan dicari nilai  rata-rata  dan  simpangan  baku dari  variabel  kuantitatif  bila  data berdistribusi  normal  dan  dianalisa dengan menggunakan metode Analisis of  Variance (Anova).  Apabila  analisis ANOVA menunjukkan
ekstrak
Curcuma  longa memberikan  pengaruh yang nyata (p < 0,05) terhadap respon pengamatan,  maka  perlu  dilanjutkan dengan  uji post  hoc LSD.    Pada  data semikuantitatif akan diuji beda menggunakan uji statistik nonparametrik Kruskal-Wallis  Anova by  Rank ,  jika  dengan  uji  tersebut didapatkan perbedaan yang bermakna (p < 0,05) maka dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney .

## HASIL DAN DISKUSI
Hasil  uji Kruskal-Wallis pada nilai  SGOT  (p  =  0,0233),  SGPT  (p  = 0,004), ureum (p = 0,19), kreatinin (p = 0,009),  dan  histologi  lambung  (p  = 0,000), hepar (p = 0,00), dan renal (p = 0,00).  Berdasarkan  hasil  tersebut,
analisis  akan  dilanjutkan  dengan  uji Mann-Whitney . Pemberian ekstrak Curcuma longa pada kelompok kontrol negatif dan kontrol sham menunjukkan  perbedaan  kadar  SGOT (p  =  0,037),  SGPT  (p  =  0,055),  ureum (p = 0,810), kreatinin (p = 0,677), dan morfologi  lambung  (p  =  1),  hepar  (p  = 1),  dan  renal  (p  =  1).  Hal  ini menunjukkan bahwa ekstrak Curcuma longa tidak  menimbulkan  dampak toksik  untuk  lambung,  hepar,  dan renal.  Pada  kelompok  kontrol  positif, parasetamol dosis 520 mg/kgBB tidak menimbulkan  kenaikan  serum  SGOT (p  =  0,423),  SGPT  (p  =  0,873),  ureum (p = 0,336), dan kreatinin (p = 0,677), sedangkan pada pemeriksaan histopatologi parasetamol menimbulkan  kerusakan  morfologi pada  lambung  (p  =  0,19),  hepar  (p  = 0,001),  dan  renal  (p  =  0,002).  Pada kelompok perlakuan, pemberian ekstrak Curcuma  longa menunjukkan efek peningkatan serum SGOT
kelompok  perlakuan  1  (p  =  0,584), perlakuan  2  (p  =  0,465),  perlakuan  3 (p  =  0,715)  dibandingkan  kelompok kontrol  positif.  Level  SGPT  serum sedikit  meningkat  pada  kelompok perlakuan  1  (p  =  0,068),  perlakuan  2 (p  =  0,144),  dan  menurun  pada perlakuan  3  (p  =  0,017)  dibandingkan kelompok kontrol positif. Pada pemeriksaan histopatologi hepar menunjukkan  kerusakan  lebih  berat pada  kelompok  perlakuan  1  (p  = 0,056),  perlakuan  2  (p  =  0,005), perlakuan  3  (p  =  0,034)  dibandingkan kontrol positif. Fungsi ginjal menunjukkan perbaikan yang signifikan pada perlakuan 3 dibandingkan  kontrol  positif.  Kadar ureum serum antara kelompok kontrol positif  dengan  perlakuan  1  (p  =  1), perlakuan 2 (p = 0,36), perlakuan 3: (p =  0,043),  dan  kreatinin  serum kelompok  kontrol  positif  dengan perlakuan  1  (p  =  0,056),  perlakuan  2 (p = 0,04), perlakuan 3 (p = 0,056). Hal ini  berlawanan  dengan  pemeriksaan histopatologi pada renal yang Berkala Ilmiah Kedokteran Duta Wacana 113
menunjukkan  kerusakan  lebih  berat pada kelompok perlakuan
dibandingkan  kontrol  positif.  Pada morfologi  lambung  pemberian  ekstrak Curcuma  longa tidak  menunjukkan kerusakan  morfologi  yang  lebih  berat dibandingkan kelompok kontrol positif dalam  berbagai  derajat  pada  semua kelompok perlakuan.
Penelitian ini mendapatkan bukti  bahwa  efek  pemberian  ekstrak Curcuma longa
meningkatkan hepatotoksisitas  dan  nefrotoksisitas akibat  parasetamol.  Hasil  ini  tidak sesuai  dengan  teori  yang  menjadi dasar  penelitian  ini.  Studi  literatur metabolisme parasetamol dan ekskresinya,  efek  toksik  parasetamol pada  hepar,  renal,  dan  lambung,  dan dampak  negatif  dan  interaksi  obat ekstrak Curcuma  longa ,  menelaah kembali metode penelitian akan menjadi pokok pembahasan.
Parasetamol  dalam  rentang dosis  terapi,  dimetabolisme  oleh hepatosit  melalui  tiga  mekanisme yaitu  52-57%  melalui  mekanisme glucuronidation dikatalisasi oleh enzim UGTs (UDP-glucuronosyltransferase) menjadi APAP (acetyl-para- aminophenol) -gluc ,  30-44%  melalui mekanisme
sulfation
oleh sulfotransferases menjadi APAP sulfate (APAP-SO 4 ),  kedua  metabolit  tersebut terbentuk  di  hepatosit  diekskresikan melalui
urin. Sebagian kecil parasetamol,  5-10%  dimetabolisme menjadi  metabolit  aktif N-acetyl-p- benzoquinoneimine (NAPQI)  oleh  enzim sitokrom P450 mikrosomal hati diekskresikan melalui urin dan kurang dari  5%  diekskresikan  dalam  bentuk tidak berubah. 7,8 Sitokrom utama yang mengoksidasi parasetamol menyebabkan  bioaktivasi  metabolit parasetamol  adalah  CYP2E1,  CYP1A2,
CYP2A6  dan  CYP3A4. Cytochrome P450  yang  paling  berperan  dalam metabolisme parasetamol adalah CYP2E1,  yang  terdapat  juga  dalam jaringan  ekstrahepatik  yaitu  mukosa
nasal,  epitel  olfaktorius,  paru-  paru dan  ginjal. 9,10 NAPQI  didetoksifikasi oleh cysteine  containing  tripeptide gluthatione (GSH) menjadi 3- (glutathion-S-yl)-APAP,  dikenal  sebagai metabolit non toksis. 10,11 Acetaminophen-glutathione conjugate (APAP-GSH) yang terbentuk berlebihan pada  intoksikasi  parasetamol,  dapat menyebabkan  deplesi  GSH.  Ada  tiga mekanisme terjadinya toksisitas karena  deplesi  GSH,  pertama  terjadi karena  aktivasi  metabolit  parasetamol dengan  membentuk  ikatan  kovalen dari  metabolit  reaktifnya  NAPQI  pada gugus  residu cysteine protein-  protein hepatik  membentuk acetaminophen- protein  adduct ,  kedua  agen  oksidatif NAPQI  bereaksi  dengan  berbagai macam  senyawa  menginduksi  stress oksidatif, ketiga mekanisme
peroksidatif. 10,11 Sebagian besar metabolit reaktif parasetamol  berikatan  melalui  reaksi NAPQI dengan protein-protein cysteinyl sulfhydryl (-SH) groups menghasilkan 3-(cystein-S-yl)APAP(3- Cys-A)-protein  adduct ,  atau  (APAP- CYS) acetaminophen-cysteine dalam hepatosit.
11,12,13 APAP-CYS adducts dideteksi dalam mitokondria, membran plasma, dan sitosol hepatosit. 12 Penelitian imunohistokimia  pada protein  adduct ini,  menunjukkan  ada  hubungan antara  cedera  seluler  dengan  dosis dan  waktu. 11,14,15 Kerusakan  hepatosit oleh protein adduct ini  bersifat progresif,  ditemukan  pada  daerah sentrilobuler  yang  meluas  ke  daerah perilobuler.  Hubungan  proses  dari pembentukan protein  adduct sampai terjadi  regenerasi  hepatosit,  yaitu protein adduct ditemukan  secara imunohistokimiawi  sesaat  sebelum terjadi nekrosis sentrilobuler. 11,16 Lokasi protein  adduct dalam  zona lobuler  menurun  seiring  dengan progresivitas  toksisitas,  didapatkan drug-protein  binding dalam  hepatosit pada  dosis  subhepatotoksik  dan sebelum  deplesi glutathione  hepatic
total,  bukti  secara  imunohistokimiawi drug  binding dalam  inti  sel, protein adduct didapatkan  dalam  hepatosit yang  aktif  metabolismenya  dan  aktif membelah dan dalam macrophage like cells dalam  proses  regenerasi  liver. 11 Drug  binding  proteins tersebut  adalah protein  kelompok cysteine . 16 Protein adduct ini  diketahui  tidak  berdampak langsung  terhadap  nekrosis  hepatosit, tetapi  melalui  mekanisme  interaksi dengan  protein-  protein  sitosolik, mitokondria  dan  nukleus. 16,17 Ketika hepatosit  mengalami  lisis, protein adduct ,  SGOT,  dan  SGPT  dilepaskan ke dalam
pembuluh darah. Konsentrasi protein  adduct dalam serum berhubungan dengan toksisitas, tetapi dalam dosis terapeutik juga dapat terdeteksi. 14,15 NAPQI merupakan agen pengoksidasi  yang  dapat  menginduksi stress  oksidatif,  melalui  akumulasi dan  peningkatan  produksi reactive oxigen species (ROS) yang mengakibatkan  kerusakan  oksidatif,
penurunan  fungsi-fungsi  mitokondria, kekacauan  hemostasis  kalsium  dan keseimbangan
redox , kemudian kematian sel akhirnya cedera liver dan kegagalan liver. 7,18 Nekrosis menyebabkan  bocornya  enzim-  enzim sitosolik  hepatik  yaitu  SGOT  dan SGPT ke dalam serum, mengindikasikan  adanya  destabilisasi dari membran sel hepatosit. 14,19 Metabolisme  parasetamol  oleh glutathione (GSH)  menjadi  metabolit non  toksik  yaitu  APAP-GSH,  dapat menginduksi  kerusakan  mitokondria melalui  mekanisme  stress  oksidatif sehingga  produksi  spesies  oksigen reaktif meningkat. 7 APAP-GSH menurunkan enzim glutathione reductase . 20 Enzim Glutathione Reductase (GR) berperan dalam pemeliharaan rasio reduced glutathione (GSH)/ glutathione disulphide (GSSG),  dengan  memakai Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate (NADPH)  mereduksi  GSSG menjadi  2  GSH. 21 Selama  stress
oksidatif  rasio  GSH/GSSG  menurun. Penurunan  rasio  GSH/GSSG  dapat disebabkan  oleh  oksidasi  GSH  oleh NAPQI. 16 Stres  oksidatif  biasanya disertai oleh peroksidasi lipid, di mana NAPQI melalui reduksi NADPH
mereduksi  oksigen  menjadi  anion radikal  superoksida  (O 2- ).  Superoksida ini akhirnya juga mereduksi peroksida hidrogen  (H 2 O 2 )  membentuk  radikal bebas  hidroksil  (OH ˙ ),  saat  bereaksi dengan  lipid  menginisiasi  peroksidasi lipid. 16 Peroksidasi  lipid  menyebabkan steatosis,  berlanjut  hepatitis  kronik akhirnya sirosis. 22
Acetaminophen-cysteine adduct
(APAP-CYS) mempotensiasi cedera renal  dengan  mendeplesi  GSH  renal, dengan  meningkatkan  katabolisme GSH oleh enzim γ-glutamyl transpeptidase (γ-GT),  enzim  yang banyak terdapat dalam tubulus proksimal renal. Deplesi GSH mempengaruhi detoksifikasi APAP intrarenal  atau  metabolit  aktifnya NAPQI. 23 NAPQI akan berikatan dengan protein seluler akan menginisiasi peroksidasi lipid. 24
Metabolit parasetamol yang dihasilkan oleh  hepatosit  yaitu acetaminophen GSH  conjugate menimbulkan  efek nefrotoksisitas.
24,25 Didapatkan hubungan bermakna antara bioaktifasi  metabolit  parasetamol  dan nefrotoksisitas  dengan  jenis  kelamin, dimana pemberian dosis besar parasetamol menyebabkan
nefrotoksisitas  hanya  terjadi  pada mencit jantan. Hal ini dapat dijelaskan karena bioaktivitas parasetamol dalam renal oleh CYP2E1 adalah testosterone dependent ,  dan  hasil  biotransformasi tersebut adalah NAPQI. 26,27 N- deacetylase  mengoksidasi  N-acetyl-p- animophenol atau
parasetamol menjadi  p-aminophenol  (PAP)  suatu metabolit  utama  parasetamol  dalam urin.  PAP  mengalami  autooksidasi menjadi  p-benzoquinone  (PBQI)  suatu metabolit sangat reaktif.
PBQI berikatan  dengan  GSH  menimbulkan efek  sitotoksik  merusak  tubulus
Berkala Ilmiah Kedokteran Duta Wacana 115
proksimal  renal.  PAP  juga  berdifusi dengan  cara  transport  pasif  ke  dalam sel tubulus menimbulkan efek nefrotoksik. 27 Pemberian  parasetamol dosis toksik akut menunjukkan cedera seluler primer pada tubulus proksimal dan  penurunan  bermakna  filtrasi glomerulus.  Ada  sedikit  bukti  bahwa pemberian  parasetamol  dosis  ambang batas  nefrotoksisitas,  menunjukkan menunjukkan  gambaran  yang  sama dengan  penyakit  ginjal  kronik  dan nefropati analgesik.
Parasetamol bekerja sentral dan sebagai inhibitor sintesis prostaglandin (PG) oleh cyclooxygenase (COX)-1 dan COX-2, di mana  inhibisi  parasetamol  terhadap produksi prostaglandin dalam otak 10 kali lebih sensitif dibandingkan dalam lien. Pada perifer, parasetamol inhibitor  lemah  enzim  COX-1  dan
COX-2,  tetapi  ada  bukti  kuat  bahwa parasetamol merupakan inhibitor selektif  COX-2  sehingga  parasetamol sendiri tidak menimbulkan efek toksik pada lambung. 28 Curcuma  longa mengandung beberapa  curcuminoid  pigmen  yaitu: curcumin,  demetoxicurcumin,  dan bisdemetoxicurcumin.  Efek  protektif ekstrak Curcuma  longa terhadap cedera  hepatotoksisitas  parasetamol melalui berbagai mekanisme. Mekanisme  hepatoproteksi  melalui ikatan  langsung  dengan  metabolit toksik parasetamol, menurunkan metabolit parasetamol. Pemberian jangka panjang ekstrak Curcuma longa meningkatkan  GSH  hepatik  dan meningkatkan  aktivitas Glutathione S- Transferase yang meningkatkan ekskresi metabolit  aktif parasetamol. 29 Curcumin
mencegah peroksidasi lipid. 30 Pemberian  curcumin  pada tikus
ditreatmen parasetamol
menunjukkan  peningkatan  level  GSH, dan  GSH-Px,  aktivitas  CAT,  dan  SOD jaringan renal. 2 Pada  penelitian  ini,  pemberian ekstrak Curcuma  longa 65  mg/kgBB,
487mg/kgBB, dan 1040mg/kgBB
selama  14  hari  yang  dilanjutkan dengan  paparan  parasetamol  dosis toksik  520mgr/kgBB  selama  7  hari menunjukkan efek toksik yang simultan  pada  hepar  dan  renal.  Efek toksik  tersebut  dapat  diterangkan melalui  penyataan  yang  ditulis  dalam beberapa  jurnal  penelitian.  Curcumin memiliki bioaviabilitas rendah, sehingga  kadarnya  dalam  hepatosit sangat rendah, dan diragukan efektifitas dalam mempengaruhi metabolisme obat- obatan. 31 Curcumin inhibitor sangat kuat untuk
P4501A1/1A2,  inhibitor  kurang  kuat P450  2B1/  2B2,  dan  inhibitor  sangat lemah untuk P450 2E1 pada hepatosit invitro,  tetapi  penurunan  cytochrome p450  tersebut  tidak  diketahui  apakah meningkatkan  efek  interaksi  dari obat. 31,32
Bioaviabilitas curcumin rendah,  implikasinya  adalah  inhibisi enzim CPY dalam hepar tidak bermakna. Curcumin memiliki aktifitas  antioksidan  kuat  mencegah peroksidasi  lipid  tetapi  tidak  dapat mencegah  turunnya  level  GSH  dan LDH-leakege
yang menunjukkan sitotoksisitas  hepatosit  yang  diinduksi parasetamol. 33 Penelitian oleh Oetari et al . 1996, menunjukkan bahwa curcumin merupakan inhibitor Glutathione S-Transferase (GST) hepatosit,  hal  ini  berbeda  dengan penelitian yang dikerjakan oleh Kalantari et  al ,  2007. 29,32 Penurunan GST  akan  menyebabkan  ekskresi metabolit toksik parasetamol menurun.  Selain  itu  curcuminoid merupakan  inhibitor  kuat  CYP3A4 pada sel intestinal. 31,34 Inhibisi CYP3A4  dalam  sel-sel  epitel  intestinal pada pemberian obat secara bersamaan  (co-administration  drugs) dapat meningkatkan konsentrasi plasma  dari  obat-  obatan,  dengan hasil potensi meningkatkan reaksi efek samping  obat,  termasuk  yang  fatal. 31 Curcumin  juga  dapat  menginhibisi metabolisme normal parasetamol meskipun secara in vitro  pada sel-sel mukosa intestinal. 34 Curcumin
meningkatkan  secara  bermakna  efek sitotoksisitas  bila  diberikan  bersama dengan  parasetamol  pada  sel-sel intestinal.  Metabolit  non  toksik  APAP-
GSH terbentuk berlebihan pada pemberian  parasetamol  dosis  toksik akan  mendeplesi  enzim glutathione reduktase , menyebabkan stress oksidatif yang dapat merusak mitokondria. GSH berikatan dengan p-
benzoquinone (PBQI)  menimbulkan efek  sitotoksik  pada  sel-sel  tubulus ginjal,  dan p-aminophenol (PAP)  dapat berdifus  ke  dalam  sel  epitel  tubulus ginjal yang menimbulkan nefrotoksisitas. 27 Penelitian  ini  menggunakan ekstrak Curcuma  longa yang  dibuat pada tahun 2013 di LPPT 1 UGM dan disimpan  dalam  lemari  pendingin  di Laboratorium  Mikrobiologi  FK  UKDW. Penyimpanan  yang  benar  mencegah tumbuhnya  jamur  aspergilus  yang memproduksi aflatoksin, hal ini dibuktikan  dari  kelompok  kontrol sham  yang  menunjukkan  tidak  ada perbedaan serum SGOT, SGPT, ureum, kreatinin maupun histopatologi hepar dan renal, dibandingkan dengan kontrol negatif.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan  penelitian  ini  adalah:
1)  ekstrak Curcuma  longa tidak memproteksi  mukosa  gaster  mencit yang
telah mendapat
ingesti parasetamol  dosis  tinggi,  2)  ekstrak Curcuma  longa menimbulkan  efek toksik  pada  hepar  mencit  yang  telah medapat  ingesti  parasetamol  dosis tinggi,  3)  ekstrak Curcuma  longa menimbulkan  efek  toksik  pada  renal mencit  yang  telah  mendapat  ingesti parasetamol dosis tinggi.
Peneliti
memberikan saran: dilakukan  penelitian  tentang  efek Curcuma  longa dalam  sintesis  enzim cytochrome  P450  oleh  hepatosit  dan sel-sel  intestinal,  meneliti  dampak inhibisi  atau  stimulasi  cytochrome P450  pada  metabolism  parasetamol,
dilakukan  penelitian  efek Curcuma longa jangka panjang dalam meningkatkan atau menurunkan kadar  GSH,  dilakukan  penelitian sitotoksisitas Curcuma  longa terhadap hepatosit  dan  epitel  tubulus  ginjal yang telah diinkubasi parasetamol.

## ISSN : 2460-9684
DAFTAR PUSTAKA 1. Shrishail D, Handral HK, Ravichandra  H,  Tulsianand  G, Shruthi SD. Review Article. Turmeric: Nature’s Precious Medicine. Asian Journal Of Pharmaceutical and Clinical Research; 2013, 6 (3): 10-16. 2. Cekmen  M,  Ilbey  YO,  Ozbek  E, Simsek  A,  Somay  A,  Ersoz  C. Curcumin  prevents  oxidative  renal damage induced by acetaminophen in  rats.  Food  and  Chemical Toxicology; 2009, 47: 1480-84.
3. Singh S, Jamal F, Agarwal R, Singh RK. Hepatoprotective Role of Curcumin  against  Acetaminophen induced toxicity in rats. International  Research  Journal  of Biological  Sciences;  2013,  2  (12): 42-9. 4. Santoso AH, Astawan M, Wresdiyati.  Potensi  Ekstrak  Ikan Gabus  ( Channa  striata )  sebagai Stabilisator  Albumin,  SGOT  dan SGPT Tikus yang Diinduksi dengan Parasetamol Dosis Toksis [Publikasi  Tesis].  Bogor.  Institut Pertanian Bogor. 6 hal.
5. Soylu  A,  Dolapcioglu  C,  Dolay  K, Ciltas  A,  Yasar  N,  Kalayci  M  et al.Endoscopicand  histopathological evaluation of acute gastric injury in high-dose acetaminophen and nonsteroidal anti-inflammatory drug ingestion with suicidal intent.
World  Journal  of  Gastroenterology;
2008, 14 (43): 6704-10. 6. Blazka  ME,  Elwell  MR,  Holladay SD, Wilson RE, Luster MI.
Histophatology  of  Acetaminophen- Induced  Liver  Changes:  Role  of Interleukin 1α and Tumor Necrosis
7. Rousar  T,  Nydlova  E,  Cesla  P, Stankova  P,  Kucera  O,  Parik  P, Cervinkova Z. Purified Acetaminophen-Glutathione Cunjugate  Is  Able  To  Induce Oxidative  Stress  in  Rat  Liver Mitochondria. Physiologycal Research;  2012,  61  (Supple.  2): S103-109. 8. Mazaleuskaya Kiudmila L, Sangkuhl Katrin, Thorn Caroline F, FitzGerald  Garret  A,  Altman  Russ B,  Klein  Teri  E.  “PharmGKB summary: pathways of acetaminophen  metabolism  at  the therapeutic  versus  toxic  doses” Pharmacogenetics  and  genomics
2015.
9. Lin  JH,  Lu  AYH.  Inhibition  and Induction  of  CytochromeP450  and the  Clinical  Implications.  Clinical Pharmacokinetic; 1998, 35(5): 361- 90.
10. James  LP,  Mayeux  PR,  Hinson  JA.
Acetaminophen-Induced Hepatotoxicity.  Drug  Metabolism
And  Disposisition;  2003,  31  (12): 1499-1506.
11. Roberts DW, Bucci TJ, Benson RW, Warbritton AR, McRae TA, Pumford NR, Hinson JA. Immunohistochemical  Localization and  Quantification  of  the  3- (Cystein-S-yl)-acetaminophen
Protein  Adduct  in  Acetaminophen Hepatotoxicity.  American  Journal of Pathology; 1991, 138 (2): 359-71.
12. Pumford  NR,  Hinson  JA,  Benson RW. Immunoblot Analysis of Protein  Containing  3-(Cystein-S-yl) acetaminophen  Adducts  in  Serum and  Subcellular  Liver  Fractions from  Acetaminophen-Treated  Mice. Toxicology and Applied Pharmacology; 1990, 104: 521-32. 13. Heard  KJ,  Green  JL,  James  LP, Judge  BS,  Zolot  L,  Rhyee  S,  Dart RC. Acetaminophen-cysteine adducts  during  therapeutic  dosing and  following  overdose.  BioMed
Central Gastroenterology; 2011, 11:
20.
14. James  LP,  Letzig  L,  Simpson  PM, Capparelli  E,  Roberts  DW,  Hinson JA, Davern TJ, Lee WM. Pharmacokinetics of Acetaminophen-Protein  Adducts  in Adults with Acetaminophen Overdose  and  Acute  Liver  Failure. Drug  Metabolism  and  Disposition; 2009, 37 (8): 1779-1784.
15. MgGill  MR,  Lebofsky  M,  Norris HRK, Slawson MH, Bajt  ML, Xie Y, Williams  CD,  Wilkins  DG,  Rollins DE,  Jaeschke  H.  Plasma  and  Liver Acetaminophen-Protein Adduct Levels in Mice after Acetaminophen Treatment: Dose-Response, Mechanisms, and Clinical Implications.  Toxicology  Applied Pharmacology;  2013,  269(3):  240- 249. 16. Bessems  JGM,  Vermeulen  NPE. Paracetamol (Acetaminophen)- Induced  Toxicity:  Molecular  and Biochemical Mechanisms, Analogues and Protective Approaches.  Critical  Reviews  in Toxicology; 2001, 31(1): 55-138. 17. Jaeschke  H,  Bajt  ML.  Intercellular Signaling Mechanism of Acetaminophen-Induced Liver Death. Toxicological Sciences;2006, 89(1): 31-41. 18. Weis  M,  Kass  GEN,  Orrenius  S, Moldeus P. N-Acetyl-p- benzoquinone  Imine  Induces  Ca +2 ,
1991 19. Arnaiz  SL,  Liesuy  S,  Cutrin  JC, Boveris Acute Acetaminophen Mouse Liver. Free Medicine;  1995, 19 (3): 303-310. 20. Nydlova  E,  Vrbova  M,  Cesla  P, Jankovicova  B,  Ventura  K,  Rousar T.  Comparison  of  inhibitory  effects between acetaminophen-
glutathione  conjugate  and  reduced glutathione  in  human  glutathione reductase.  Journal  of  Applied
Factor  α.  Toxicology  Pathology; 1996, 24 (2): 181-89.
A.  Oxidative Stress by Administration in Radical  Biology  & Toxicology; 2013, DOI 10.1002/jat.2914.
ISSN : 2460-9684
[VOLUME : 01 – NOMOR 02 – FEBRUARI 2016]
21. Noctor  G,  Gomez  L,  Vanacker  H, Foyer  CH.  Interaction  between biosynthesis, compartmentation and  transport  in  the  control  of glutathione homeostasis and signaling.  Journal  of  Experimental Botany; 2002, 5(372): 1283-1304. 22. Li  S,  Tan  HY,  Wang  N,  Zhang  ZJ, Lao L, Wong CW, Feng Y. The Role of Oxidative Stress and Antioxidants  in  Liver  Diseases. International  Journal  of  Molecular Sciences; 2015, 16: 26087-124.
23. Stern  ST,  Bruno  MK,  Horton  RA, Hill  DW,  Roberts  JC,  Cohen  SD. Contribution  of  acetaminophen- cysteine to acetaminophen nephrotoxicity II. Possible involvement of the γ-glutamyl cycle. Toxicology and Applied Pharmacology; 2004, 202: 160-71. 24. Li C, Liu J, Saavedra JE, Keefer LK, Waalkes  MP.  The  nitric  oxide donor, V-PYRR)/NO, protects against acetaminophen-induced nephrotoxicity in mice.  Toxicology; 2003, 189: 173-80. 25. Hart  SGE,  Wyand  DS,  Khairallah EA,  Cohen  SD.  Acetaminophen Nephrotoxixity  in  the  CD-1  Mouse. II.  Protection  by  Probenecid  and AT-125  without  Diminution  of Renal  Covalent  Binding.  Toxicology and  Applied  Pharmacology;  1996, 136: 161- 69.
26. Blantz  RC.  Acetaminophen:  Acute and  Chronic  Effect  on  Renal Function.  American  Journal  of Kidney  Diseases;  1996,  28(1):  S3-
S6. 27. Sciskalska M, Sliwinska-Mosson M, Podawacz M, Sajewicz W, Milnerowicz  H.  Mechanism  of interaction of the N-acetyl-p- aminophenol  metabolites  in  terms of nephrotoxicity. Drug and
Chemical  Toxicology;  DOI:  2014, 10.3109/0148545.2014.928722.
28. Hinz  B,  Cheremina  O,  Brune  K. Acetaminophen  (paracetamol)  is  a selective cyclooxygenase-2 inhibitor in  man.  Federation  of  American Societies  for  Experimental  Biology Journal; 2008, 22(2): 383-90. 29. Kalantari H, Khorsandi LS, Taherimobarakeh M. The Protective Effect  of  The  Curcuma  Longa Extract on Acetaminophen-Induced Hepatotoxicity in Mice. Jundishapur  Journal  Of  Natural Pharmaceutical  Products;  2007, 2(1): 7-12. 30. Paolinelli  ST,  Reen  R,  Moraes- Santos T. Curcuma longa ingestion protects in vitro hepatocyte membrane  peroxidation.  Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences; 2006, 42 (3): 429-35. 31. Appiah-Opong  R,  Commandeur JNM,  van  Vugt-Lussenberg  B,
Vermeulen  NPE.  Inhibition  of human  recombinant  cytochrome P450s  by  curcumin  and  curcumin decomposition products. Toxicology; 2007, 235: 83-91. 32. Oetari S, Sudibyo M, Commandeur JNM, Samhoedi R, Vermeulen NPE. Effect  of  Curcumin  on  Cytocrome P450 and Gluthatione S- Transferase  Activities  in  Rat  Liver. Biochemical  Pharmacology;  51995, 1: 39-45.
33. Donatus  IA,  Sardjoko,  Vermeulen NPE.  Cytotoxic  &  Cytoprotective Activities of Curcumin. Biochemical Pharmacology; 1990, 39 (12): 1869- 75.
34. Volak  LP,  Ghirmai  S,  Casman  JR, Court  MH.  Curcuminoids  inhibit multiple  human  cytochromes  P450
(CYP), UDP- (UGT), and enzymes, relatively inhibitor.  Drug Disposition;  2008, 38(8): 1594-1605. glucuronosyltransferase sulfotransferase  (SULT) while  piperine  is  a selective CYP3A4 Metabolism  and