## PEMANFAATAN PROBIOTIK BAKTERI ASAM LAKTAT DARI LIMBAH KOTORAN IKAN TERHADAP KADAR LDL DARAH AYAM BROILER STRAIN

## LOHMANN

## UTILIZATION PROBIOTIC LACTIC ACID BACTERIA FISH FROM WASTE FAECES ON LDL LEVEL BLOOD BROILER CHICKENS STRAIN LOHMANN
Astuti * , Siti Umniyati, Anna Rakhmawati dan Evy Yulianti
Jurusan Pendidikan Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Negeri Yogyakarta
*email: astuti@uny.ac.id

## Diterima 20 Januari 2016 disetujui 8 Maret 2016

## Abstrak
Penelitian ini bertujuan  untuk  mengetahui pengaruh pemberian bakteri asam laktat (BAL) dari limbah kotoran  ikan  secara  force  feeding  terhadap  kadar  LDL  darah  ayam  broiler.  Sampel  penelitian  sejumlah  40 ekor  ayam  broiler  jantan  strain  Lohmann  produksi  PT.  Multi  Breeder  Adirama  yang  berumur  1  hari  dan dibagi menjadi 4 perlakuan. Setiap perlakuan terdiri dari 10 ekor sebagai ulangan , diambil secara acak dan dipelihara  selama  42  hari.  Data  penelitian  dianalisis  variansi  dengan  rancangan  acak  lengkap  pola  searah, dilanjutkan  uji  Duncan’s  Multiple  Range  Test  (DMRT).  Probiotik  perlakuan  isolat  BAL  yang  digunakan adalah  Streptococcus  thermopillus  dalam  bentuk  freeze  drying  yang  berasal  dari  Laboratorium  Biokimia Nutrisi,  Fakultas  Peternakan  UGM.  Perlakuan  I  sebagai  kontrol  (tanpa  BAL),  perlakuan  II  jumlah  sel  BAL 10 6 CFU/ml, perlakuan III jumlah sel BAL adalah 10 7 CFU/ml dan perlakuan IV jumlah sel BAL adalah 10 8 CFU/ml.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  bakteri  asam  laktat  tidak  berpengaruh  signifikan terhadap kadar LDL darah ayam broiler.
Kata kunci: Bakteri asam laktat, LDL, Freeze drying

## Abstract
This study aims to determine the effect of lactic acid bacteria supplement from sewge force feeding fish to the LDL content of broiler chicken blood. The research samples are 40 of 1 day old broiler chicken from PT. Multi Breeder Adiram, which were divided into 4 treatments, were taken randomly and maintined for 42 days.  Data  were  analyzed  by  analysis  of  variance  using  a  completely  randomized  design  unidirectional pattern, followed by a test of Duncan's Multiple Range Test (DMRT).Probiotic Lactic Acid Bacteria Isolates treatment  (BAL)  were  used  in  this  study  is  the  bacterium  Streptococcus  thermopillus  in  the  form  of  freeze drying from the Laboratory of Nutritional Biochemistry, Faculty of Animal Husbandry, UGM. I as a control treatment (without BAL) Treatment II BAL cell count was 10 6 CFU / ml., The third treatment is the number of BAL Cells are 10 7 CFU / ml. , IV treatment BAL cell count was 10 8 CFU /ml. The results showed that there is no significant effect of BAL isolate addition on the LDL level of the broiler chicken blood.
Keywords: lactic acid bacteria, LDL, freeze drying

## Pendahuluan
BAL berperan penting dalam industri fermentasi  yogurt,  keju,  mentega,  yakult,  dan  susu asam Penelitian yang berkaitan dengan kemampuan BAL  dalam  menurunkan  kadar  kolesterol  telah banyak  dilakukan.  Grunewald  (1982)  meneliti tentang  pengaruh  pemberian  susu  skim  yang difermentasi  dengan  Lactobacillus  acidophilus
terhadap  level  serum  kolesterol,  dievaluasi  dengan menggunakan tikus sebagai hewan percobaan.
Penelitian tersebut menunjukkan bahwa setelah  4  minggu,  kadar  kolesterol  menurun  dan diduga  faktor  yang  mempengaruhi  level  kolesterol adalah  BALPada  penelitian  ini,  akan  dicobakan BAL  Streptococcus  thermophilus  pada  ayam broiler  dengan  parameter  kadar  LDL  darah  ayam
broiler.  Streptococcus  thermophilus  merupakan salah satu BAL yang mampu melakukan metabolisme dengan suhu yang lebih ekstrim (lebih panas).  Streptococcus  thermophilus  mempunyai suhu  pertumbuhan  20-53 o C  dan  optimum  pada suhu  43-45 o C.  Bakteri  ini  berbentuk  bulat/spiral, tidak berspora, gram positif dan bersifat homofermentatif,  pH  optimum  bagi  pertumbuhan adalah  6,8,  dan  bersifat  anaerob.  Bakteri  ini  tahan terhadap  keasaman  0,85-0,89%.  Asam  laktat  yang dihasilkan  merupakan  hasil  pemecahan  glukosa, fruktosa,  galaktosa,  sukrosa  dan  laktosa  (Whittier dan Webb, 1970).
Ayam  broiler  dipilih  karena  BAL  belum pernah  dicobakan  sebelumnya  pada  ayam  ini. Selain itu, ayam broiler juga merupakan ayam yang rentan  terhadap  penyakit,  sehingga  probiotik  yang diberikan  dapat  juga  berfungsi  sebagai  pengganti antibiotik  yang  biasa  diberikan  pada  ayam.  Ayam broiler  merupakan  ayam  yang  paling  cepat  bisa dipotong  dibanding  dengan  ternak  lainnya.  Ayam broiler  merupakan  ternak  yang  paling  ekonomis, memiliki kecepatan produksi yang tinggi (Bambang  Agus  Mutidjo,  2004:  8).  Di  Indonesia, ayam  broiler  merupakan  salah  satu  unggas penghasil daging yang dikenal luas di masyarakat.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  jenis  penelitian eksperimen. Penelitian dirancang dengan menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) dengan  4  variabel,  yaitu   1  kontrol  dan  3  variabel perlakuan  kadar  bakteri  asam  laktat,  masing- masing perlakuan terdiri atas 10 kali ulangan.
Variabel  penelitian.  Variabel  bebas:  variasi pemberian  dosis  bakteri  asam  laktat  sebesar  10 6 cfu/ml,  10 7 cfu/ml  dan  10 8 cfu/ml,  dengan ketentuan sebagai berikut :
R0 :    tanpa pemberian bakteri asam laktat (sebagai kontrol)
R1 :  Kelompok  yang  diberi  dosis  bakteri  asam laktat secara force feeding sebesar 10 6 cfu/ml R2 :   Kelompok yang diberi dosis bakteri asam laktat secara force feeding sebesar 10 7 cfu/ml R3 :    Kelompok yang diberi dosis bakteri asam laktat secara force feeding sebesar  10 8

## cfu/ml
Populasi  dan  sampel  penelitian.  Populasi penelitian  adalah  ayam  broiler  Strain  Lohman umur  1  hari  atau  One  Day  Old  Chick  (DOC). Sampel  penelitian  adalah  40  ekor  ayam  broiler strain  Lohman  yang  terbagi  dalam  4  perlakuan dengan  setiap  perlakuan  terdiri  dari  10  ekor sebagai ulangan dan diambil secara acak.
Alat  dan  Bahan.  Alat:  Tabung  reaksi,  hot plate,  pH  meter,  timbangan  analitik,  autoklaf, inkubator,  tabung  erlenmeyer,  sentrifuge.,  cawan petri, mikrotip, Coloni counter, waterbath, spektrofotometer.  Bahan:  Ayam  broiler  Strain Lohman  umur  1  hari  Day  Old  Chick  (DOC), ransum  pakan  ayam  yang  terdiri  dari  tepung jagung,  bekatul,  tepung  ikan,  bungkil  kedelai  dan NaCl  (merupakan  tambahan  mineral),  vitamin ayam (Vita chick), MRS Broth, aquades, HCl 1 N, NaOH  1  N,  larutan  pepton,  susu  skim  10%,  MRS agar,  sampel  darah  ayam,  kloroform,  aseton, alkohol, asetat anhidrat.
Prosedur penelitian. Tahap persiapan meliputi pembersihan  kandang,  penyemprotan  kandang dengan  desinfektan  dan  pemasangan  lampu  pada kandang.  Penyusunan  ransum  dengan  bahan  yang digunakan  adalah  tepung  jagung,  bekatul,  bungkil kedelai,  tepung  ikan  dan  mineral  mix.  Ransum penelitian  disusun  berdasarkan  hasil  perhitungan dari  tabel  komposisi  bahan  pakan  ransum berdasarkan NRC (1994) yang tertera pada Tabel 1 dan Tabel 2.

## Tabel 1. Komposisi bahan pakan dan kandungan nutrien
Bahan Pakan BK % PK % ME Kkal/kg Ca % Pav % Met % Lys % Trp % SK (%) EE (%) Jagung 88,70 8,74 3.350 0,04 0,26 0,21 0,34 0,09 2,50 4,20 Bekatul 90,59 11,44  3.020 0,05 1,48 0,22 0,58 0,11 11,50  14,10 Bungkil kedelai  90,00 49,83  2.230 0,28 0,20 0,60 2,67 0,58 6,20 5,70 Tepung ikan 89,34 61,73  2.219 2,32 1,89 2,67 6,45 1,06 2,60 7,90
Sumber: Tabel Komposisi  Pakan untuk Indonesia. Hartadi dkk (1994: 13).

## Tabel 2. Kandungan nutrien ransum penelitian
Bahan Pakan Formulasi % PK % ME Kkal/kg Ca % Pav % Met % Lys % Trp % Jagung giling 60,75 5,31 2.035,13 0,02 0,16 0,13 0,21 0,05 Bekatul 12 1,40 369,95 0,01 1,18 0,03 0,07 0,01 Bugkil kedelai 18 8,97 401,40 0,05 0,04 0,11 0,48 0,10 Tepung ikan 9 5,40 194,16 0,20 0,17 0,23 0,56 0,09 Top mix 0,25 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 Jumlah 100,00 21,08 3.000,64 0,28 0,58 0,50 1,32 0,27
Aplikasi  prebiotik.  Aplikasi  atau  pemberiam probiotik  bakteri  asam  lakat  ke  ayam  diberikan secara  force  feeding  atau  dicekokkan.  Untuk kelompok  R1    diberikan  sebesar  10 6 cfu/ml  atau setara dengan 0,001 gram/ml, untuk R2 sebesar 10 7 cfu/ml  atau  setara  dengan  0,01  gram/ml  dan  R3 sebesar R3 = 10 8 atau setara dengan  0,1 gram/ml.
Pengukuran  kadar  LDL  darah  ayam.  Metode yang  digunakan  adalah  mtode  CHOD-PAP  yang merupakan  tes  kolorimetrik  ensimatik  penuh. Reagensia  pengendap  dihangatkan  hingga  suhu antara  15 o C  hingga  25 o C  dimasukkan  ke  dalam tabung sentrifugasi untuk mendapatkan supernatan. Supernatan sebanyak 100 µ l dan larutan pereaksi 2 sebanyak 1000 µ l dimasukkan ke dalam tabung lalu dicampur  dengan  seksama.  Larutan  disentrifugasi selam  15  menit  pada  kurang  lebih  4000  rpm. Konsentrasi kolesterol dalam supernatant ditentukan dalam waktu 1 jam setelah sentrifugasi. Supernatan sebanyak 100 µl dan Larutan pereaksi 2 sebanyak  1000  µl  dicampur  dengan  seksama  lalu diinkubasi selama 10 menit pada suhu 15 o C hingga 25 o C  atau  selama  5  menit  pada  suhu  37 o C  dan diukur absorbansinya (A) terhadap larutan pereaksi.  Konsentrasi  kolesterol  dalam  supernatant ditentukan dalam waktu 1 jam setelah sentrifugasi. Supernatan sebanyak 100 µl dan Larutan pereaksi 2 sebanyak  1000  µl  dicampur  dengan  seksama  lalu diinkubasi selama 10 menit pada suhu 15 o C hingga 25 o C  atau  selama  5  menit  pada  suhu  37 o C  dan diukur absorbansinya (A) terhadap larutan pereaksi.

## Hasil dan Pembahasan
Kolesterol LDL berfungsi mentransfer kolesterol  dari  hati  ke  jaringan  tubuh.  Level kolesterol LDL yang tinggi dalam darah berhubungan  dengan  resiko  penyakit  jantung koroner. Selain itu, level kolesterol LDL yang tidak diturunkan melalui jalur normal dapat
menyebabkan kolesterol yang dibawanya terdeposit dalam pembuluh darah memicu terjadinya atherosklerosis.  Rodas  dkk  (1996)  mengemukakan bahwa  pemberian  Lactobacillus  acidophillus  dapat menurunkan  kolesterol  LDL  lebih  besar  dibanding tanpa  pemberian  bakteri  ini  dalam  diet  babi hiperkolesterol.
Hal  ini  didukung  oleh  penelitian  yang dilakukan oleh Sibel dkk (1997) yang mengemukakan  bahwa  suplementasi  yogurt  yang menguunakan L. Acidophillus pada diet tikus dapat menurunkan kolesterol serum dan kolesterol LDL.
Kolesterol  LDL  dikenal  sebagai  kolesterol jahat  karena  adanya  penumpukan  kolesterol  LDL dalam  pembuluh  darah  dapat  menyebabkan atherosklerosis. Dengan kata lain, apabila kolesterol LDL rendah, resiko terjadinya atherosklerosis rendah.
Jaspers  et  al  (1984)  mengamati  efek hipokolesterolemik  pada  hari  ke-14  sampai  21 setelah  pemberian  tablet  yang  berisi  Lactobacillus acidophilus  dan  L.  Delbrueckii  subsp.  Bulgarius pada  sukarelawan.  Penelitian  pada  subyek  tikus telah  dilakukan  oleh  Rao  et  al(1981),  Grunewald (1982),  Pulusani dan  Rao  (1983), dan  Akalin  et  al (1997).  Rao  et  al  (1981)  melaporkan  penurunan kolesterol  plasma  pad  atikus  yang  mengkonsumsi susu  fermentasi  oleh  S.  Thermophilus  Grunewald (1982)  mendapatkan  efek  yang  smaa  pada  susu fermentasi  oleh  L.  Acidophilus.  Pulusani  dan  Rao (1983)  mendapatkan  penurunan  kolesterol  plasma dan  liver  pada  tikus  yang  diberi  susu  fermentasi oleh  S.  Thermophilus,  L.Bulgaricus,    dan L.acidophilus.  Akalin  et  al  (1997)  mempelajari pengaruh  yogurt  dan  acidophilus  yogurt  terhadap kadar  kolesterol  tikus,  didapatkan  bahwa  rata-rata kadar  kolesterol  total  dan  LDL    menurun  dengan nyata pada pemberian acidophilus yogurt. Peningkatan  jumlah  Lactobacillus  dan  penurunan
fecal coliform terjadi setelah konsumsi acidophilus yogurt.
Tabel 3. Kadar LDL ayam broiler Ulangan Perlakuan R-0 R-1 R-2 R-3 1 109,69 89,11 167,12 61,44 2 96,81 128,53 140,75 124,78 3 78,01 118,92 120,85 71,43 4 149,45 117,52 108,73 68,10 5 116,50 73,57 43,68 101,05 Rerata ns 110,29 105,53 114,23 85,36
Gambar 1. Grafik Kadar LDL kolesterol
Berdasarkan hasil penelitian, kadar LDL yang tidak  berbeda  nyata  (P ≤ 0,05)  antar  perlakuan. Perlakuan  pemberian  probiotik  bakteri  asam  laktat pada  ayam  broiler  pada  LDL  hasilnya  tidak berbeda  nyata  (P  <  0,05).  LDL  yang  tertinggi dicapai pada perlakuan R-2 yaitu pemberian bakteri asam  laktat  10 7 CFU/ml  sebesar  114,23.  Terendah dicapai oleh perlakuan R-3 yaitu pemberian bakteri asam  laktat  10 8 CFU/ml  sebesar  85,36.  Hal  ini terlihat pada Gambar 1.

## Simpulan

## Perlakuan  pemberian  bakteri  asam  laktat
Streptococcus  thermophillus    tidak  berbeda  nyata (P<0.05)  terhadap  kadar  LDL  darah  ayam  broiler. Jadi pemberian bakteri asam laktat tidak mempengaruhi kadar LDL darah ayam broiler.

## Pustaka
[1]  Akalin,  A.S.,  S.  Gone  and  S.  Duzell.  2007. Influence of Yogurt And Acidophilus  Yogurt
On  Serum  Cholesterol  Levels  In  Mice.  J. Dairy Sci., 4, 12
[2] Grunewald,  K.K.  2012.  Serum  Cholesterol Levels  in  Rats  Fed  Skim  Milk  Fermented  By Lactobacillus  acidophilus.  J.  Dairy  Sci.  41, 112
[3] Haris,  Abdul. 1997.  Beternak  Ayam  Pedaging Super. Pekalongan: CV. Gunung Mas
[4] Murtidjo,  Bambang  Agus.  2004.  Pedoman Beternak  Ayam  Broiler.  Yogyakarta:  Penerbit Kanisius
[5] Rao,  D.R.,  C.B.  Chawan  and  S.R.  Pulusani. 1981.  Influence  of  Milk  and  Thermophilus Milk  on  Plasma  Cholesterol  Levels  and Hepatic  Cholesterolgenesis  in  Rats.  J.  Food Sci. 153, 218
[6]  Whittier,  E.O  and  B.H.  Webb.1970.  By Product Milk. Connecticut: The AVI Publishing Company
0 20 40 60 80 100 120 R-0 R-1 R-2 R-3 Perlakuan K a d a r L D L K o le s te ro l (m g /d l) Series 1