Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol 70% Bunga Telang ( Clitoria ternatea L) dari Daerah Sleman dengan Metode DPPH
Antioxidant Activity Test of 70% Ethanol Extract of Telang Flower ( Clitoria ternatea L) from Sleman Area with DPPH Method

## Disa Andriani*,  Lusia Murtisiwi
Departement of  Natural Pharmaceutical  Technology and Drug Synthesis , Pharmacy  Undergraduate Study Program,  SekolahTinggi Ilmu  Kesehatan Nasional, Solo-Baki  Kwarasan Street, Grogol,  Sukoharjo,  Central Java, 57552,  Indonesia *Email: disa.andrianisanyoto@gmail.com
Received:  20 November  2019;  Accepted: 23  Juni 2020;  Published: 30 Juni 2020

## Abstrak
Bunga telang ( Clitoria ternatea L. ) mengandung senyawa fenolik yang dapat berperan sebagai antioksidan dengan mendonorkan hidrogen sehingga menstabilkan kekurangan elektron pada radikal  bebas. Penelitian ini  bertujuan untuk mengetahui potensi antioksidan ekstrak etanol bunga telang dengan melihat  nilai  IC 50 . Bunga telang diekstraksi  dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol 70%.  Potensi antioksidan ditetapkan  dengan  metode  DPPH  (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)  dengan pembanding vitamin  C  yang sudah terbukti memiliki  potensi radikal  bebas yang sangat poten. Hasil penelitian menunjukkan nilai IC 50 ekstrak etanol bunga telang adalah 41,36  ± 1,191  μg/mL,  berdasarkan nilai  tersebut ekstrak bunga telang dari daerah Sleman termasuk kategori sangat poten sehingga dapat dikembangkan sebagai salah satu sumber antioksidan dari bahan alam.
Kata  kunci : Ekstrak bunga telang, antioksidan, DPPH,  IC 50

## Abstract
Telang flower (Clitoria ternatea L.) contains phenolic compounds which can act as antioxidants by donating hydrogen so as to stabilize the lack of electrons in free radicals. This study aims to determine the antioxidant potential of telang flower ethanol extract by look ing at the IC 50 value. Telang flowers were extracted by maceration method using 70% ethanol solvent. The potential for antioxidants was determined by the DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) method with a comparison of vitamin C which had been shown  to have the potential of free radicals which were very potent. The results showed the IC 50 value of telang flower ethanol extract was 41.36 ± 1.191 μg / mL, based on that value the telang flower extract from the Sleman area was in the very potent category so that it could be developed as a source of antioxidants from natural ingredients. Keywords : telang flower extract, antioxidant, DPPH, IC 50

## PENDAHULUAN
Dalam  beberapa tahun  terakhir,  sejumla h besar  bukti  telah  berkembang  mendukung peran  kunci  dari  radikal  bebas  dalam  banyak reaksi seluler. Radikal bebas dapat mengoksidasi  asam  nukleat,  protein,  lipid sehingga  menginisiasi  terjadinya  degenerasi dan  kerusakan  sel.  Tubuh  dapat  terpapar radikal  bebas  melalui faktor  lingkungan seperti  polusi,  intensitas  sinar  UV  yang berlebih,  suhu,  bahan  kimia,  dan  kekurangan gizi.  Jika jumlah  radikal  bebas berlebih,  maka dapat terjadi ketidakseimbangan antara molekul  radikal  bebas  dengan  antioksidan
endogen.  Saat  jumlah  radikal  bebas melebihi kapasitas  tubuh  untuk  menetralkannya,  maka terbentuk  stres  oksidatif.  Stres  oksidatif  yang berlangsung lama dapat menyebabkan terjadinya kerusakan sel dan  jaringan. Kerusakan  sel  dan  jaringan  ini  dapat memicu munculnya penyakit-penyakit degenaratif (Susantiningsih,  2015).  Berbagai  penyakit degeneratif  tersebut  adalah  kardiovaskula r, kerusakan  retina,  katarak,  hepatitis,  artritis reumatoid,  stroke,  asma,  diabetes  melitus, imunodepresi,  kanker,  hiperoksia,  dermatitis, penuaan  dini  (Phaniendra  and Jestadi,  2015)
Antioksidan  merupakan  setiap  zat  yang apabila dalam konsentrasi rendah dibandingkan  substrat  yang  teroksidasi  dapat secara  signifikan  menunda  atau  mengha mbat oksidasi substrat tersebut. Mekanisme antioksidan  digolongkan  menjadi  2  yaitu Elektron  Transfer  (ET) dan Hidrogen  Elektron Transfer  (HET).  Elektron  Transfer  (ET) berdasarkan  reaksi  reduksi  dan  oksidasi dengan  mengukur  kapasitas  antioksidan  yang ditandai terjadinya perubahan warna, sedangkan  Hidrogen  Elektron  Transfer  (HET) digunakan untuk mengukur kemampuan antioksidan  dalam  menghambat  radikal  bebas dengan  donor  atom  hidrogen  (Apak, et  al ., 2013).  Peran  fisiologis  antioksidan  adalah untuk  mencegah  kerusakan  komponen  seluler yang  timbul  sebagai  konsekuensi  dari  reaksi kimia yang melibatkan radikal bebas (Werdhasari,  2014).
Bunga  Telang  tidak  hanya  dimanfaatka n sebagai  tanaman  hias  tetapi  juga  sebagai  obat tradisional (Purba,  2020).  Bunga  telang ( Clitoria  ternatea L. )  diketahui  mengand ung flavonoid, antosianin, flavonol glikosida, kaempferol  glikosida,  quersetin  glikosida, mirisetin  glikosida  (Kazuma, et al ., 2013), 3- O-(2"-O-alfarhamnosil-6"-O-malonyl)-beta- glukosda, 3-O-(6"-O-alfa-rhamnosil-6"- O - malonil)-betaglukosida  dan  3-O-(2",6"-di-O- alfarhamnosil)-beta-glukosida kaemferol, quersetin  dan  mirisetin  diisolasi  dari  kelopak bunga.  Delfinidin  glikosida,  3-O-b-glukosida, 3-O(2"-O-a-rhamnosil)-b-glukosida,  3-O-(2"- O-a-rhamnosil-6"-O-malonil)-b- glukosidadelfinidin,  dan  delapan  antosianin (ternatin  C1,  C2,  C3,  C4,  C5  dan  D3,  serta preternatin  A3  dan  C4)  juga  diisolasi  dari bunga  telang  (Kogawa, et al ., 2006; Terahara, et  al .,  1998).  Selain  itu  bunga  telang  juga mengandung  terpenoid,  tannin  dan  steroid (Gupta,  2010). Menurut  Duta and Ray (2014), senyawa  fenolik  berkorelasi  positif  dengan aktivitas antioksidan, sehingga polifeno l kemungkinan merupakan senyawa yang memberikan  potensi  aktivitas  antiradikal  dari bunga  telang.  Berdasarkan  hasil  penelit ian Andriani  dan  Murtisiwi  (2018)  terdahulu,
didapatkan  kadar  fenolik  total  ekstrak  etanol bunga  telang  sebesar  19,43  ±  1,621  GAE (mg/g  sampel).  Penelitian Anisa  (2019) menunjukkan  uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak bunga  telang  dari  daerah  Bogor  dengan menggunakan  pelarut  etanol  96% tidak  poten sebagai  antioksidan.  Berdasarkan  penelit ian Sholekah (2017) menunjukkan bahwa kandungan  fitokimia  hasil  dari  metabolit sekunder  seperti  flavonoid  dan  beta  karoten dari  suatu  tanaman  akan  berbeda pada  setiap wilayah  dipengaruhi  oleh  faktor  lingkungan seperti  cahaya,  suhu,  pH,  ketinggian  tempat, dan temperatur.
Selain  itu,  konsentrasi  etanol berpengaruh terhadap rendemen,  total fenol,  total  flavono id dan  aktivitas  penghambat  radikal  DPPH dengan  kandungan  tertinggi  terdapat  pada ekstrak  etanol  70%  (Suhendra, et al. ,  2019). Hal  ini  mendasari  perlu  dilakukannya  uji aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  bunga telang  ( Clitoria  ternatea  L. )  dengan  pelarut etanol  70%  dan  berasal  dari  sumber  lain dengan ketinggian berbeda  yaitu dari Kecamatan  Kalasan,  Kabupaten  Sleman, Daerah Istimewa Yogyakarta. Melalui penelitian  ini  diharapkan  dapat meningka tkan pemanfaatan bunga telang dari  daerah Sleman,  Daerah  Istimewa  Yogyakarta  sebagai sumber  antioksidan  alami.

## METODE PENELITIAN Alat
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini meliputi  alat-alat  gelas  yang  lazim  digunakan di laboratorium;  mikropipet;  spektrofotometer UV-Vis  (UV Mini  SHIMADZU).
Bahan Bunga telang yang diperoleh dari Kelurahan Purwomartani, Kecamatan Kalasan, Kabupaten Sleman,  Daerah Istimewa Yogyakarta;  DPPH  (Sigma,  Chem.Co,  ); etanol p.a. (E.Merck);  dan  vitamin  C  (Sigma Co.).
Ekstraksi
Bunga  telang  ( Clitoria  ternatea L)  yang telah  dikeringkan  sampai  kadar airnya  kurang dari  10  %,  dibuat  serbuk  yang  melewati
ayakan  mesh  -20  +  30.  Ekstraksi  simplis ia dilakukan dengan metode maserasi berdasarkan  Farmakope  Herbal  Indonesia (Departemen  Kesehatan  RI,  2008)  yang dimodifikasi.  Maserasi  simplisia  bunga  telang yang  dilakukan  berdasarkan  Andriani  dan Murtisiwi  (2018).

## Uji  aktivitas antioksidan  (metode DPPH)
Aktivitas  antiradikal  dalam  ekstrak etanol bunga  telang  ditentukan  dengan  metode DPPH  sesuai  yang  dilakukan  Widhihast ut i (2011).

## Pembuatan  larutan  pereaksi DPPH
Sebanyak  15,77  mg  DPPH  ditimba ng seksama  kemudian  dilarutkan  dengan  etanol p.a sampai  tepat 100,0 mL, sehingga  diperoleh konsentrasi  0,4  mM.  Larutan  DPPH  ini disimpan dalam wadah yang dilapisi alumunium  foil  di almari  es.
Penentuan  panjang  gelombang  maksimum (  maks )
Sebanyak  0,7  mL  DPPH  ditempatkan dalam  labu  takar 5,0 mL,  ditambah  etanol p.a sampai  tanda,  diukur  absorbansinya  pada panjang  gelombang  450-545  nm  terhadap blangko  5,0  mL  etanol p.a ,  diplotkan  harga absorbansi  maksimum.
Pembuatan  larutan  stok  ekstrak  etanol bunga  telang
Sampel  ekstrak  etanol  bunga  telang ditimbang  10,00 mg,  ditambah  pelarut  etanol p.a ,  divorteks  sampai  homogen,  dimasukkan dalam labu takar  10,0  mL, sehingga didapatkan  larutan  dengan  konsentrasi  0,1 %. Pembuatan  larutan  stok vitamin  C
Vitamin  C ditimbang  10,00 mg,  ditambah pelarut, divorteks sampai homogen, dimasukkan  ke  dalam  labu  takar  10,0  mL, ditambah  pelarut  sampai  tanda,  didapatkan larutan  dengan  konsentrasi  0,1 %.
Penentuan  IC 50 ekstrak  etanol  bunga telang
Sejumlah  larutan  stok  ekstrak  etanol bunga  telang  serta vitamin  C dengan  lima  seri konsentrasi  yaitu  10,  20,  30,  40,  dan  50 μg/mL,  ditempatkan  dalam  labu  takar 5,0 mL. Sampel  selanjutnya  ditambah  dengan  0,7 mL DPPH  0,4  mM  dan  ditambah  etanol  hingga
tanda. Campuran  tersebut divorteks  selama  30 detik  dan  diinkubasi selama  30  menit. Absorbansi  sampel  diukur  terhadap  blangko yang  terdiri  dari  sejumlah  larutan  stok  dalam etanol  pada  λmaks.  Selain  itu,  dibandingkan dengan  kontrol  Vitamin  C  dengan  berbagai seri  konsentrasi  yaitu  1,25,  2,5,  5,  10,  20 μg/mL  dan  0,7  mL  DPPH  0,4  mM  dalam etanol p.a .  hingga  tanda.  Kemudian  dihitung %  aktivitas  antiradikal.  Pembuatan  kurva regresi  linier  antara  konsentrasi  melawan  % aktivitas antiradikal sehingga didapatkan persamaan  regresi  linier  untuk  menentukan konsentrasi  sampel  pada  aktivitas  50%.  Uji aktivitas  antiradikal  direplikasi  sebanyak  tiga kali.  Setiap  sekali  uji,  pembuatan  stok  dan pengenceran  sampel  juga direplikasi  sebanyak tiga  kali.

## Analisis
Penentuan  aktivitas  antiradikal  dilakukan dengan  perhitungan inhibitory  concentration (IC 50 ).  Nilai  IC 50 merupakan  konsentrasi ekstrak  dan  vitamin  C  yang  memberikan  % aktivitas  antiradikal  sebesar  50%  dibanding kontrol  melalui  suatu  persamaan  garis  regresi linier  antara  kadar  terhadap  %  penangkapan radikal  (Widhihastuti,  2011).
% aktivitas antiradikal = (abs. kontrol − abs. sampel) abs.  kontrol x100%
Hasil  perhitungan  dimasukkan  ke  dalam persamaan regresi  Y  =  bX+a  dengan konsentrasi  ekstrak  (ppm)  sebagai  absis (sumbu  X)  dan  nilai  % inhibisi  (antioksidan) sebagai  ordinat  (sumbu  Y).  Nilai  IC 50 dari perhitungan  pada saat % inhibisi  sebesar 50%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses  ekstraksi  simplisia  bunga  telang ini menggunakan teknik  maserasi yang merupakan  teknik  penyarian  zat  aktif  dengan perendaman  menggunakan  pelarut  polar  atau non  polar  selama  periode  waktu  tertentu sesuai  dengan  aturan  dalam  buku  resmi kefarmasian.  Penggunaan  etanol  70%  teknis sebagai pelarut dalam ekstraksi pada penelitian ini dikarenakan etanol 70%
mempunyai  daya penetrasi  yang  baik pada sisi hidrofil  dan lipofil,  sehingga  dapat menembus membran  sel,  masuk  ke  dalam  sel  dan berinteraksi  dengan  metabolit  di  dalam  sel. Etanol  70%  juga  mampu  menyari  senyawa- senyawa  yang  diperlukan  untuk  uji  aktivitas bunga telang yaitu fenolik, flavano id, alkaloid,  terpenoid,  dan  steroid  (Saifudin, 2014).
Aktivitas antioksidan ekstrak  etanol bunga  telang  secara  kuantitatif  ditentukan dengan metode DPPH  (1,1-diphenyl- 2- picrylhydrazyl), yaitu berdasarkan kemampuan  ekstrak  etanol  bunga  telang dalam  mereduksi  atau  menangkap  radikal DPPH.  Kemampuan  ekstrak  etanol  bunga telang  dan  pembanding  vitamin  C  dapat dilihat  dari  berkurangnya  intensitas  warna ungu dari larutan DPPH  yang telah ditambahkan  dalam  sampel  dan  pembanding. Berkurangnya  intensitas  warna  larutan  DPPH tersebut  dapat  menunjukkan  bahwa  terjadi reaksi  antara atom  hidrogen  yang  dilepas  oleh bahan  uji  dengan  molekul  radikal  DPPH sehingga  terbentuk  senyawa  1,1-difenil- 2- pikrilhidrazin  yang  berwarna kuning.  Semakin besar  konsentrasi  bahan  uji,  warna  kuning yang dihasilkan akan semakin kuat (Molyneux,  2004).
Pengurangan intensitas warna  ungu larutan  DPPH  ini  secara  kuantitatif  dapat dihitung  dari berkurangnya  absorbansi  larutan tersebut.  Semakin  besar konsentrasi  bahan  uji maka  absorbansi  yang  terbaca  semakin  kecil, yang  berarti  aktivitas bahan  uji  dalam menangkap  radikal  DPPH  semakin  besar. Absorbansi yang terukur merupakan absorbansi  sisa  DPPH  yangtidak  bereaksi dengan  larutan  uji  (Molyneux,  2004).
Uji  aktivitas  antiradikal  dengan  metode DPPH  dilakukan  pada  panjang  gelombang 517,6  nm  dengan  waktu  inkubasi  30  menit. Penentuan  aktivitas  antiradikal dilakukan melalui  perhitungan inhibitory  concentration (IC 50 ).  Nilai  IC 50 adalah  konsentrasi  ekstrak dan  standar  yang  memberikan  %  aktivitas antiradikal  sebesar  50%  dibanding  kontrol melalui  suatu  persamaan  garis  regresi  linier antara  kadar terhadap  % penangkapan  radikal (Mailandari,  2012). Semakin  besar nilai  IC 50, semakin  kecil  aktivitas  antioksidannya  dan sebaliknya  semakin  kecil  nilai  IC 50 , semakin besar pula  aktivitas  antioksidannya.
Secara spesifik,  suatu  senyawa  dikatakan sebagai  antioksidan  sangat  kuat jika  nilai  IC 50 kurang  dari 50 µg/ml,  kuat untuk  IC 50 bernilai 50-100 µg/ml,  sedang  jika  IC 50 bernilai  151- 200µg/ml (Molyneux, 2004).  Hasil uji aktivitas  antioksidan  menunjukkan  nilai  IC 50 ekstrak  bunga  telang sebesar  41,36  ± 1,191µg/mL  dan nilai  IC 50 Vitamin  C sebesar 6,25  ±  0,414µg/mL  (Tabel  1).  Hal  ini menunjukkan bahwa sampel memilik i aktivitas antioksidan yang sangat kuat sedangkan  untuk  vitamin  C memberikan  nilai IC 50 sebesar  6,25µg/ml  yang  termasuk  dalam kategori  sangat  kuat.
Hasil  penelitian  ekstrak  bunga  telang memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  sangat kuat  ini  kemungkinan  karena  kandungan fenolik  di  dalamnya.  Mekanisme  antioksidan senyawa  fenolik  adalah  berdasarkan  reaksi reduksi  oksidasi,  di  mana  senyawa  fenolik akan  berperan  sebagai agen pereduksi sehingga  akan  dapat mereduksi  radikal  bebas (reaktif)  yang  terbentuk  menjadi  spesies  yang tidak  reaktif  lagi.  Reaksi  antara  radikal  DPPH dengan  senyawa  fenolik  dalam  bunga  telang
Tabel 1. Hasil Penentuan IC 50 Li ma Ekstrak Her ba dan Vitamin C
Ekstrak nilai  IC 50 (µg/mL) Rata-rata (µg/mL)  ±SD Kategori antioksidan (Reynertson,2007) Rep 1 Rep 2 Rep 3 Bunga telang 40,01 42,25 41,83 41,36  ± 1,191 Sangat aktif Vitamin  C 5,78 6,44 6,543 6,25  ± 0,414 Sangat aktif
sebagai  senyawa  penangkap  radikal  dapat dilihat  pada gambar  1.
Fenolik  dalam  ekstrak  etanol  bunga telang  akan  melepaskan  H·  yang  merupakan salah  satu  radikal  bebas.  H·  akan  berikatan dengan  radikal  DPPH  membentuk  senyawa baru  yaitu  difenil  pikrilhidrazin  yang  stabil. Senyawa  fenolik  yang  terkandung  dalam ekstrak etanol bunga telang sebagai penangkap  radikal  bebas yang  kehilangan  H· akan  menjadi  radikal  baru  yang  relatif  lebih stabil  dan  tidak  berbahaya  bagi  tubuh  karena adanya  efek  resonansi  intiaromatik,  sehingga radikal  bebas  tidak  terbentuk  dan  dapat mencegah  maupun  memperbaiki  kerusakan jaringan  yang  merupakan  efek  dari  serangan radikal  bebas. Senyawa  fenolik  memilik i bentuk gugus kimia heterogen yang mengandung  gugus  fenol  (gugus  hidroksil fungsional  dalam  cincin  aromatik)  dalam struktur  dasarnya.  Selain  itu,  senyawa  fenolik mampu meningkatkan aktivitas enzim antioksidan  dan  menginduksi  sintesis  protein antioksidan  (Walter  and Marchesan,  2011).
Hasil  penelitian ini  berbeda  dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Anisa  (2019) yang  menyebutkan  ekstrak  etanol  bunga telang  tidak  poten sebagai  antioksidan.  Hal  ini kemungkinan  disebabkan  karena  perbedaan
ketinggian  tempat  tumbuh  dan juga perbedaan konsentrasi  etanol  yang  digunakan  sebagai cairan penyari. Berdasarkan penelit ian Sholekah (2017) menyebutkan bahwa kandungan  fitokimia  hasil  dari  metabolit sekunder  seperti  flavonoid  dan  beta  karoten dari  suatu  tanaman  akan  berbeda pada  setiap wilayah  dipengaruhi  oleh faktor lingkungan  di antaranya  cahaya,  suhu,  pH,  ketinggian tempat,  serta temperatur.
Selain  itu  hal  lain  yang  berpengaruh terhadap total flavonoid dan aktivitas antioksidan  adalah  konsentrasi  etanol  yang digunakan.  Pada  penelitian  Anisa  (2019), pelarut  yang  digunakan  adalah  etanol  96%, pada  penelitian  ini  pelarut  yang  digunakan adalah  etanol  70%.  Penelitian  Suhendra,  dkk (2019)  menyebutkan bahwa  konsentrasi pelarut  etanol  berpengaruh  sangat  nyata terhadap rendemen,  total fenol,  total  flavono id dan  aktivitas  penghambat  radikal  DPPH ekstrak, dengan  kandungan  tertinggi  diperoleh pada etanol  konsentrasi  70%.

## KESIMPULAN
Nilai  IC 50 ekstrak  bunga  telang  ( Clitoria ternatea L)  sebesar  41,36  ±  1,191  μg/mL, termasuk  kategori  sangat  poten  sebagai antioksidan.

## Daftar Pustaka
Andriani,  D.  and  Murtisiwi,  L.,  2018. Penetapan  Kadar  Fenolik  Total  Ekstrak  Etanol  Bunga Telang  ( Clitoria  ternatea L.)  dengan  Spektrofotometri  UV  Vis. Cendekia  Journal  of Pharmacy , 2 (1):  32-38.
Gambar  1. Reaksi Antara  Radikal  DPPH  dengan  Senyawa  Fenolik dalam  Bunga Telang
Anisa,  N., 2019. Potensi  Ekstrak  Bunga  Telang  ( Clitoria  Ternatea ) Sebagai  Antioksidan  dan Inhibitor  Tirosinase, Skripsi , Institut  Pertanian  Bogor,  Bogor.
Apak, R., Gorinstein,  S., Böhm,  V, Schaich,  K.M., Özyürek,  M., and Güçlü,  K., 2013. Methods of  Measurement  and  Evaluation  of  Natural  Antioxidant  Capacity/  Activity  (IUPAC Technical  Report). Pure and Applied Chemistry , Vol.  85 (5):  957–998.
Departemen  Kesehatan  RI. 2008. Farmakope Herbal Indonesia Edisi I . Jakarta,  174.
Dutta,  S.  &  Ray,  S.,  2014  Evaluation  of  Antioxidant  Potentials  of  Leaf  Aqueous  and Methanolic  Extracts  of  Calophyllum  inophyllum  in  Relation  to  Total  Phenol  and Flavonoid  Contents. International Journal of Pharma and Bio Sciences ,  5(3), 441-450.
Gupta,  G.K.,  Jagbir,  C., and  Manisha,  B.,  2010.  Clitoria  ternatea  (L.):  Old  and  new  aspects. Journal of Pharmacy Research ,  3(11), 2610-2614.
Kazuma,  K., Noda, K., and  Suzuki,  M., 2013. Flavonoid  composition  related  to petal  color  in different  lines  of  Clitoria  ternatea. Phytochemistry , 64 (1133-1139).
Kogawa  K, Kazuma  K, Kato N, Noda N  and  Suzuki  M.,  2006. Biosynthesis  of  malonylated flavonoid  glycosides  on  the  basis  of  malonyltransferase  activity  in  the  petals  of Clitoria ternatea . Journal of Plant Physiology , 2(6), 374-379.
Mailandari,  M.,  2012.  Uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak  daun  Garcinia  kydia  roxb.  dengan metode  DPPH  dan  identifikasi  senyawa  kimia  fraksi  yang  aktif. Skripsi. Univers itas Indonesia.
Molyneux,  P., 2004.  The  use  of  the  stable  free  radikal  diphenyl  picrylhydrazyl  (DPPH)  for estimating  antioxidant  activity. Journal Science of Technology, 26 (2):  211-219.
Phaniendra,  A.,  and  Jestadi,  D,B.,  2015. Free  Radicals :  Properties  ,  Sources  , Targets  , and Their  Implication  in  Various  Diseases. Indian  Journal of Clinical  Biochemistry ,  Vol.  30 (1):  11–26
Purba,  E,C.,  2020.  Kembang  Telang  ( Clitoria  ternatea L.):  Pemanfaatan  dan  Bioaktivitas. EduMatSains , 4 (2), 111-124
Saifudin,  A., 2014. Senyawa Alam Metabolit Sekunder: Teori, Konsep, dan Teknik Pemurnian. Yogyakarta:  Depublish  Publisher.
Sholekah,  F., 2017. Perbedaan  Ketinggian  Tempat  Terhadap  Kandungan  Flavonoid  Dan  Beta Karoten  Buah  Karika  ( Carica  Pubescens ) Daerah  Dieng  Wonosobo. Prosiding ,  Seminar Nasional  Pendidikan  Biologi  dan Biologi.
Suhendra,  C.P., Widarta,  I.W.R., and Wiadnyani,  A.A.I.S., 2019. Pengaruh  Konsentrasi  Etanol Terhadap  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Rimpang  Ilalang  ( Imperata  Cylindrica (L) Beauv.)  Pada Ekstraksi  Menggunakan  Gelombang  Ultrasonik. Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan , Vol.  8, No.1, 27-35.
Susantiningsih,  T., 2015. Obesitas  dan Stres Oksidatif. Jurnal Kedokteran Unila , Vol  5, No. 9
Terahara,  N., Toki,  K., Saito,  N., Honda,  T.,  Matsui,  T.,  and   Osajima,  Y., 1998.  Eight  new anthocyanins,  ternatins  C1-C5 and  D3  and  preternatins  A3  and  C4 from  young Clitoria ternatea flowers. J Nat Prod , 61(11), 1361-1367.
Walter,  M., and Marchesan,  E.. 2011. Phenolic  Compounds  and Antioxidant  Activity  of  Rice. Brazilian  Archives of Biology  and Technology , Vol.  54 (2):  371–77.
Werdhasari,  A., 2014. Peran Antioksidan  Bagi  Kesehatan. Jurnal Biotek Medisiana Indonesia , Vol.  3, No. 2, 59-68
Widhihastuti,  E.,  2011.  Pengukuran  Aktivitas  Antioksidan  dengan  Metode  DPPH  serta Korelasinya  dengan  Kadar Fenolik  Pada Lima  Jenis  Herba Bahan  Obat Alam  Indonesia . Skripsi. Universitas  Muhammadiyah  Surakarta,  Surakarta.