## JURNAL ANALIS FARMASI
DETERMINATION OF FLAVONOID LEVELS IN RARU WOOD STONE (CotylelobiummelanoxylonP) WITH METHOD UV-VIS SPECTROFOTOMETRY
PENETAPAN KADAR FLAVONOID PADA KULIT BATANG KAYU RARU ( CotylelobiummelanoxylonP ) DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
Diah Astika Winahyu 1 , Agustina Retnaningsih 1 , Marisa Aprillia 2 E-mail: astika.diah@gmail.com

## ABSTRACT
Raru  (Cotylelobium  melanoxylon  Pierre)  is  one  group  of  tropical  forest  plants endemic to Indonesia from the dipterocarpaceae family. Raru is a term for a group of bark types which is added to palm juice which aims to improve the taste and alcohol content of beverages and preserve traditional palm wine drinks. Raru wood bark has active  compounds  of  flavonoids,  tannins  and  saponins  which  have  hypoglycemic activity or lower blood sugar levels. Flavonoids are polyphenol compounds which have biological activities such as antioxidants, antibacterials, anticholesterol, antihyperlipidemia,  antiviral,  antidiabetic,  anti-inflammatory,  anticancer.  This  study aims  to  determine  the  levels  of  flavonoids  found  in  raru  wood  bark  with  UV-Vis spectrophotometry method. The samples were tested qualitatively and quantitatively. In the qualitative test ethanol extract of raru bark was done using a color reaction. In quantitative  tests  using  quercetin  mother  liquor  were  analyzed  using  UV-Vis spectrophotometer  with  a  maximum  wavelength  of  438  nm.  A  linear  regression  line equation is obtained which is y = 0.0065x + 0.014 with the correlation coefficient (r) is  0.9973.  The  qualitative  results  of  the  ethanol  extract  of  the  rattan  bark  are  red which indicates the sample contains flavonoids. The results of quantitative analysis of the average level of flavonoids in ethanol extract of raru bark were 3.6922%.
Keywords:   raru bark, flavonoid, UV-Vis spectrophotometry

## ABSTRAK
Raru  ( Cotylelobium  melanoxylon Pierre)  merupakan  salah  satu  kelompok tumbuhan  hutan  tropis  endemik  Indonesia  dari  famili dipterocarpaceae .  Raru merupakan sebutan untuk kelompok jenis kulit kayu yang ditambahkan pada nira aren yang  bertujuan  untuk  meningkatkan  cita  rasa  dan  kadar  alkohol  minuman  serta mengawetkan  minuman  tradisional  tuak.  Kulit  batang  kayu  raru  memiliki  senyawa aktif  flavonoid,  tanin  dan  saponin  yang  memiliki  aktivitas  hipoglikemik  atau  penurun kadar  gula  darah.  Flavonoid  merupakan  senyawa  polifenol  yang  memiliki  aktivitas biologi  seperti    antioksidan,  antibakteri,  antikolesterol,  antihiperlipidemia,  antivirus, antidiabetes, antiradang, antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar flavonoid yang terdapat pada kulit batang kayu raru dengan metode spektrofotometri UV-Vis. Sampel diuji secara kualitatif dan kuantitatif. Pada uji kualitatif ekstrak etanol kulit  batang  kayu  raru  dilakukan  menggunakan  reaksi  warna.Pada  uji  kuantitatif menggunakan larutan induk quersetin yang dianalisis menggunakan spektrofotometer UV-Vis  dengan  didapatkan  panjang  gelombang  maksimum  438  nm.  Diperoleh persamaan garis regresi linier yaitu y = 0,0065x + 0,014 dengan koefisien korelasi (r) adalah  0,9973.  Hasil  kualitatif  pada  ekstrak  etanol  kulit  batang  kayu  raru  terbentuk warna  merah    yang  menandakan  sampel  mengandung  flavonoid.  Hasil  analisa kuantitatif kadar rata-rata flavonoid pada ekstrak etanol kulit batang kayu raru yaitu 3,6922 %.
Kata kunci:  Kulit batang kayu raru, flavonoid, spektrofotometri UV-Vis.
1) Akademi Analis Farmasi Dan Makanan Putra Indonesia Lampung
2) Akademi Analis Farmasi Dan Makanan Putra Indonesia Lampung

## PENDAHULUAN
Hutan  tropis  Indonesia  memiliki sumber  senyawa  metabolit  sekunder yang  dapat  dan  telah  digunakan sebagai  sumber  bahan  baku  obat tradisional. (9) Tanaman obat
merupakan  salah  satu  andalan  masa depan  dalam  pengembangan  agribisnis di  Indonesia.  Kualitas  produk  tanaman obat ditentukan oleh kandungan senyawa bioaktif yang merupakan hasil metabolisme  sekunder  dari  tanaman. Perlu dikembangkan inventarisasi bahan  alam  yang  berpotensi  sebagai penghasil  obat,  serta  pengetahuan tentang bahan aktif yang terdapat pada tanaman,  fungsinya,  dan  struktur kimianya. (1) Pengobatan dengan mengkonsumsi ekstrak tanaman secara langsung  berupa  air  rebusan,  jamu-
jamuan maupun berupa
kapsul herbal.Belakangan  ini  lebih  dari  80% penduduk  di  negara  berkembang tergantung pada obat tradisional terutama  yang  berasal  dari  tanaman, baik sebagai menjaga kesehatan
maupun  berupa  obat-obatan.  Pada banyak negara berkembang, penggunaan  obat  bahan  alam  disukai karena untuk menghindari efek samping dari obat bahan kimia, berikut semakin besarnya akses publik tentang informasi kesehatan. (6) Berbagai penelitian telah dilakukan untuk mengembangkan
pengobatan  secara  tradisional  yang bersumber dari tumbuh-tumbuhan yang  ada  di  sekitar  kita  baik menggunakan  daun,  batang,  kulit, akar,  biji  maupun  buah  dari  tumbuhan tersebut.  Seperti  halnya  masyarakat Tapanuli  yang  memanfaatkan  kulit batang  kayu  raru  sebagai  obat  dengan cara merebus beberapa gram kulit dan meminum  filtratnya.  Zat  aktif  yang terdapat  pada  tanaman  raru  yaitu flavonoid, saponin, dan tanin (Pasaribu, 2011).
Raru ( Cotylelobium melanoxylon Pierre) merupakan salah satu kelompok tumbuhan hutan tropis endemik Indonesia  dari  famili Dipterocarpaceae . Raru merupakan sebutan untuk kelompok  jenis  kulit  kayu  yang ditambahkan  pada  nira  aren  yang bertujuan  untuk  meningkatkan  cita
rasa  dan  kadar  alkohol  minuman. (9) Masyarakat  di  Sumatera  meyakini bahwa kulit batang kayu raru ( Cotylelobium melanoxylon Pierre)
dapat  digunakan  sebagai  salah  satu obat  antidiabetik.  Dan  pada  hasil penelitian yang dilakukan oleh Pasaribu (2009),  pada  4  jenis  pohon  tanaman raru  sebagai  tanaman  pohon  hutan yaitu
: Cotylelobium melanoxylum Pierre, Shorea bolancarpoides
Symington ,  Cotylelobium  lanceolatum craib , Cotylelobium melanoxylon Pierre , mengandung  senyawa  flavonoid  yang dapat menurunkan kadar gula darah.
Flavonoid adalah senyawa organik alami yang ada pada tumbuhan secara  umum  yang  dapat  digunakan sebagai
antioksidan,
antikanker, antiinflamasi, antialergi,
dan antihipertensi. (5) Efek antioksidan
senyawa
ini disebabkan oleh penangkapan  radikal  bebas  melalui donor  atom  hidrogen  dari  gugus hidroksil  flavonoid. (7) Flavonoid  alami juga banyak memainkan peran penting dalam pencegahan diabetes dan komplikasinya. (4) Menurut  Sarastani, (2002) kebanyakan sumber antioksidan alami
adalah tanaman yang mengandung  senyawa  fenol  yang tersebar diseluruh bagian tanaman baik di  kayu,  biji,  daun,  buah,  akar,  bunga, maupun serbuk sari.
Berdasarkan
latar belakang tersebut,  penulis  ingin  melakukan penetapan  kadar  flavonoid  pada  kulit batang kayu raru ( Cotylelobium melanoxylon Pierre)dengan  metode spektrofotometri UV-Vis.
Flavonoid mengandung  sistem  aromatis  yang terkonjugasi  dan  dapat  menunjukkan pita  serapan  kuat  pada  daerah  UV-Vis. Flavonoid  yang  bersifat  polar  dapat menyerap  gelombang  radiasi  pada daerah  UV-Vis.  Flavonoid  terdiri  dari beberapa  golongan  yang  tiap  golongan hanya berbeda pada jenis molekul pada cabang  dari  atom  C3.  Oleh  karenanya, uji  kualitatif  flavonoid  dapat  digunakan KLT  preparatif  dengan  fase  diam  polar dan spektrofotometer UV-Vis. (11) Spektrum  serapan  ultra  violet dan  serapan  tampak  merupakan  cara tunggal  yang  paling  bermanfaat  untuk mengidentifikasi  struktur  flavonoid. Metode  tersebut  juga  dapat  digunakan
untuk  melakukan  uji  secara  kuantitatif untuk  menentukan  jumlah  flavonoid yang  terdapat  dalam  ekstrak  metanol juga dilakukan dengan spetrofotometer UV-Vis  yaitu  dengan  mengukur  nilai absorbansinya.
Absorbansi sebagai analisis kuantitatif dilakukan berdasarkan Hukum Lambert-Beer. (7)

## METODOLOGI PENELITIAN Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  di Laboratorium  Universitas  Malahayati Bandar Lampung, Jalan Pramuka No.27 Kemiling  Bandar  Lampung.  Waktu penelitian  akan  dilakukan  pada  bulan Maret 2018.
Alat Spektrofotometer UV-Vis genesys 10s, Rotary Evaporator, Erlenmeyerpyrex,  Batang  pengaduk pyrex, Labu takar pyrex, Alat-alat gelas pyrex,Corong  pyrex,  Kertas  saring whatman filter papers No.41, Timbangancamry, Spot Plate sigma Bahan Kulit Batang Kayu Raru, Aquabidest,  Alumunium  klorida  (AlCl 3 ) 10%,  Etanol  p.a,  Natrium  asetat  1  M, Baku quersetin, NaOH 10%, Metanol

## Prosedur Penelitian
Populasi Populasi  yang  akan  digunakan dalam penelitian ini adalah kulit batang kayu  raru  ( Cotylelobium  melanoxylon Pierre).
Sampel Sampel  yang  diambil  adalah kulit  batang  kayu  raru  ( Cotylelobium melanoxylon Pierre)  yang  diperoleh dengan cara menguliti pohon raru yang masih hidup. (9)
Teknik Sampling
Teknik pengambilan sampel pada  penelitian  ini  adalah purposive sampling . Purposive sampling merupakan pengambilan sampel berdasarkan atas pertimbangan tertentu seperti sifat-sifat populasi, ciri- ciri  dan  jenis  populasi.  Pengambilan sampel  berdasarkan  kriteria  yaitu
dengan  menguliti  pohon  raru  yang masih berdiri. (9)

## Cara Kerja Penelitian
Pengolahan Sampel (9)
Sampel  kulit  batang  kayu  raru dikering  udarakan,  sampel  yang  telah dikeringkan lalu diserbukkan menggunakan cutter  siever /  blender dan diayak untuk menghasilkan ukuran 40-60 mesh.
Pembuatan ekstrak etanol dengan cara maserasi Timbang  50  g  serbuk  kulit batang  kayu  raru.Kemudian  masukkan ke  dalam  wadah  maserasi,  lalu diekstraksi  dengan  pelarut  etanol  p.a sebanyak  250  mL,  Wadah  maserasi ditutup dan disimpan selama 24 jam di tempat  yang  terlindung  dari  sinar matahari  langsung  sambil  sesekali diaduk,  Selanjutnya  disaring  dengan kertas  saring  dipisahkan  antara  ampas dan  filtratnya  sehingga  diperoleh ekstrak  etanol  I,  hasil  ekstraksi tersebut  diekstraksi  kembali  dengan 250 mL etanol p.a dan disimpan selama 24  jam  di  tempat  yang  terlindung  dari sinar matahari langsung sambil sesekali diaduk,  kemudian  disaring  dengan kertas  saring  dipisahkan  antara  ampas dan  filtratnya  sehingga  diperoleh ekstrak  etanol  II.Ekstrak  etanol  I  dan ektstrak  etanol  II  dicampur  dan dipekatkan menggunakan rotary evaporator sehingga diperoleh ekstrak etanol kental. Analisis Kualitatif Kandungan Flavonoid. (9) Sebanyak  1  g  sampel  ekstrak etanol    ditambah  metanol  sampai terendam  lalu  dipanaskan.  Filtrat  diuji pada
spot plate .Jika setelah ditambahkan  NaOH  10%  (b/v)  timbul warna  merah,  maka  positif  terdapat flavonoid. Analisis Kuantitatif Kandungan Flavonoid (2)
Penentuan  panjang  gelombang maksimum ( ƛ maks) quersetin:
Dipipet  sebanyak  1  mL  dari  seri konsentrasi quersetin
60 ppm,
Tambahkan  3  mL  etanol  p.a,  0,2  mL AlCl 3 ,  0,2  mL  natrium  asetat  1  M,  dan
5,6  mL  aquabides.  Baca  absorbansinya pada  interval  400-500  nm,  dicatat panjang gelombang maksimumnya.
Penetapan kurva baku quersetin Ditimbang  sebanyak  25  mg baku  standar  quersetin  dan  dilarutkan dalam  25  mL  etanol  p.a  (1000  ppm). Lalu dipipet 12,5 mL larutan stok 1000 ppm  kemudian  dicukupkan  volumenya sampai 50 mL dengan etanol p.a untuk 250 ppm, dari larutan standar quersetin  250  ppm,  kemudian  dibuat beberapa konsentrasi yaitu 20, 40, 60, 80,  100,  dan  120  ppm  kedalam  labu takar  10  mL,  dari  masing-masing konsentrasi  larutan  standar  quersetin dipipet  1  mL  kemudian  ditambahkan  3 mL  etanol  p.a;  0,2  mL  AlCl 3 ;  0,2  mL natrium  asetat  1  M;  dan  5,6  mL aquabides,  Setelah  itu  diinkubasi selama 30 menit pada suhu kamar dan diukur absorbansinya pada spektrofotometer UV-Vis
dengan panjang gelombang 438 nm.
Pembacaan absorbansi sampel Ditimbang  ekstrak  etanol  kulit batang kayu raru sebanyak 25 mg dan dilarutkan dalam 25 mL etanol p.a, dari larutan stok dipipet sebanyak 1 mL dan dicukupkan  volumenya  sampai  10  mL dengan etanol p.a,  Kemudian dipipet 1 mL  dan  ditambahkan  3  mL  etanol  p.a; 0,2  mL  AlCl 3 ;  0,2  mL  natrium  asetat  1
M;  dan  5,6  mL  aquabides,  Setelah  itu diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu kamar  dan  diukur  absorbansinya  pada spektrofotometer UV-Vis
dengan panjang  gelombang  438  nm,  Larutan sampel dibuat dalam tiga kali replikasi.

## Analisis Data
Untuk
menghitung
kadar flavonoid  yang  terdapat  pada  kulit batang  kayu  raru  dapat  dihitung  dari nilai  absorbansi  yang  diperoleh  dari  6 konsentrasi Quersetin dengan
persamaan regresi linier: y = a + bx Dimana :
y = luas kurva x = konsentrasi sampel a = intercept (perpotongan garis) b = slope (kemiringan)
Kadar  flavonoid  dalam  sampel  dapat dihitung dengan rumus :
Dimana : C  = konsentrasi sampel V  = volume sampel Fp = faktor pengenceran W = berat sampel

## HASIL Analisis Kualitatif
Analisa  kualitatif  dilakukan  sebagai analisa pendahuluan untuk mengetahui ada  atau  tidaknya  flavonoid  pada sampel.Data dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1.
Analisis Kualitatif Sampel Hasil Pengamatan  Keterangan Ekstrak Etanol Terbentuk warna merah positif (+) Analisis Kuantitatif Setelah  dilakukan  pengujian kadar  flavonoid  pada  sampel  kulit batang kayu raru ( Cotylelobium melanoxylon Pierre) dengan menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis diperoleh hasil sebagai berikut : Tabel 2. Analisis Kualitatif Sampel Hasil Pengamatan  Keterangan Ekstrak Etanol Terbentuk warna merah positif (+) Analisis Kuantitatif Setelah  dilakukan  pengujian kadar  flavonoid  pada  sampel  kulit batang kayu raru ( Cotylelobium melanoxylon Pierre) dengan menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis diperoleh hasil sebagai berikut :
λ max
Gambar 1. Kurva Panjang Gelombang Maksimum
Tabel 2. Absorbansi Larutan Standar Quersetin Standar Konsentrasi (x) ppm Absorbansi (y) 1 40 0,264 2 60 0,407 3 80 0,53 4 100 0,698 5 120 0,776
Tabel 3. Hasil Analisa Kadar Flavonoid pada Sampel Pengulangan  Absorbansi Konsentrasi Sampel (ppm) Kadar rata-rata (ppm) Kadar rata-rata (%) Standar Deviasi 1 0,039 4,5454 4,3939 4,3939 0,0459 2 0,038 4,3939 3 0,037 4,2424

## PEMBAHASAN
Sampel  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  kulit  batang  kayu raru  yang  diperoleh  dengan  cara menguliti  pohon  raru  yang  masih hidup. (9) Raru  merupakan  sebutan untuk  kelompok  jenis  kulit  kayu  yang ditambahkan  pada  nira  aren  yang bertujuan  untuk  meningkatkan  cita rasa  dan  kadar  alkohol  minuman. Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan  sebelumnya  tanaman  raru diduga  memiliki  senyawa  aktif  yaitu flavonoid,  saponin,  dan  tanin  yang memiliki  aktifitas  hipoglikemik  atau penurun kadar gula darah.
Pada  penetapan  kadar  flavonoid ini  diawali  dengan  preparasi  sampel terlebih  dahulu.  Hal  pertama  yang dilakukan  yaitu  pengeringan  sampel yang dilakukan dengan cara dianginkan atau  dikering  udarakan  pada  suhu ruang  bertujuan  agar  senyawa  aktif pada sampel tidak rusak. Sampel yang telah  kering  dihaluskan  menggunakan cutter siever sehingga diperoleh serbuk kecil  dan  halus  agar  mempermudah saat  proses  ekstraksi.  Semakin  kecil ukuran  sampel  maka  semakin  besar luas  permukaannya  dan  interaksi kontak  pelarut  dalam  ekstraksi  akan semakin besar, sehingga proses ekstraksi akan semakin efektif.
Langkah  awal  yang  dilakukan untuk  memperoleh  ekstrak  etanol adalah
metode
ekstraksi.Adapun metode  ekstraksi  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah  maserasi. Maserasi  merupakan  metode  ekstraksi dingin  yang  banyak  digunakan  dan paling sederhana, cara  pengerjaan dan peralatan  yang  digunakan  sederhana dan  mudah  diusahakan  di  antara metode  lain,  yaitu  hanya  dengan merendam  sampel  dalam  pelarut  yang sesuai.  Maserasi  pada  penelitian  ini dilakukan  dalam  dua  tahap  (2  x  24 jam)  agar  zat  aktif  yang  dikehendaki dapat  diperoleh  semuanya.  Metode maserasi  dipilih  dalam  memisahkan senyawa-senyawa  aktif  kulit  kayu  raru selain  berdasarkan  pada  efektivitas, kepraktisan,  keamanan  dan  ekonomis dalam  penggunaannya  juga  bertujuan untuk  menghindari  rusaknya  senyawa- senyawa aktif yang tidak tahan dengan panas.Ekstraksi dilakukan dengan menggunakan  etanol  p.a  dimaksudkan agar  kandungan  kimia  kulit  kayu  raru dapat  terekstrak  sempurna  karena etanol merupakan pelarut polar golongan alkohol yang mampu menarik sebagian  besar kandungan  kimia tanaman.  Flavonoid  umumnya  dalam bentuk  glikosida  yang  bersifat  polar, sehingga akan larut dalam pelarut polar
seperti etanol p.a .Rendaman pada saat maserasi  disimpan  ditempat  yang terlindung dari cahaya, hal ini dilakukan untuk mencegah reaksi yang dikatalisis  cahaya  atau  mencegah terjadinya perubahan warna.
Ekstrak etanol yang telah diperoleh  dari  hasil  rendaman  dalam dua  tahap  tersebut  didapatkan  ekstrak etanol  I  dan  ekstrak  etanol  II  yang kemudian dicampurkan dan dipekatkan menggunakan
rotary
evaporator
sampai diperoleh ekstrak
etanol kental.Evaporasi bertujuan untuk menguapkan  kembali  pelarut  yang digunakan pada saat maserasi
sehingga  didapat  ekstrak  etanol  kental dari sampel.Ekstrak kental yang dihasilkan berwarna coklat pekat.
Untuk  proses  analisis  kualitatif dilakukan  dengan  merendam  sampel dengan  metanol  lalu  dipanaskan, setelah  itu  filtrat  diuji  menggunakan spot plate dengan menambahkan NaOH 10%.  Hasil  yang  diperoleh  adalah sebelum  dan  setelah  ditambahkan NaOH  10%  yaitu  perubahan  warna yang  terjadi  pada  filtrat  berubah menjadi warna merah.
Sebelum penentuan kadar
flavonoid  total  pada  sampel  dilakukan penentuan panjang gelombang maksimum. Penentuan panjang gelombang maksimum dilakukan untuk mengetahui  λ  yang  memiliki  serapan tertinggi.Pengukuran sampel harus dilakukan  pada  panjang  gelombang maksimum  agar  kepekaannya  lebih maksimal dan meminimalkan kesalahan karena pada panjang gelombang tersebut  perubahan  absorbansi  untuk setiap  satuan  konsentrasi  adalah  yang paling besar.Pada daerah sekitar panjang gelombang maksimum, bentuk kurva  absorbansi  datar  dan  pada kondisi  tersebut  hukum  Lambert-Beer terpenuhi.Pada  pengukuran  panjang gelombang
dengan
menggunakan spektrofotometer  UV-Vis  memberikan serapan tertinggi pada panjang gelombang  438  nm.  Setelah  itu dilakukan  pembuatan  kurva  baku dengan tujuan untuk menghitung kadar flavonoid  dalam  sampel  berdasarkan serapan yang dihasilkan melalui persamaan  kurva  baku.  Pembuatan kurva baku didahului dengan
pembuatan  larutan  seri  pengenceran dari  larutan  standar  quersetin  untuk mendapatkan konsentrasi
yang diinginkan.  Pengenceran  larutan  induk quersetin  dilakukan  dengan  teliti  dan hati-hati  agar  terhindar  dari  kesalahan yang  dapat  menyebabkan  konsentrasi larutan  standar  yang  tidak  sesuai dengan yang diinginkan.
Untuk  analisis  flavonoid  total, terlebih  dahulu  dilakukan  pengukuran absorbansi  pada  larutan  standar  yang akan  digunakan  sebagai  pembanding pada  pengukuran  senyawa  flavonoid total  pada  sampel.  Warna  yang dihasilkan dari larutan standar quersetin adalah kuning.Semakin tinggi konsentrasi  yang  digunakan  semakin pekat  warna  kuning  yang  dihasilkan.
Pengukuran absorbansi dilakukan dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis dengan
panjang  gelombang  438  nm  kemudian serapan  yang  diperoleh  diplot  kedalam kurva  baku  sehingga  diperoleh  kurva baku  quersetin  dengan  persamaan kurva  baku  y  =  ax  +  b.  Kurva  baku larutan  quersetin  dibuat  lima  seri konsentrasi, yaitu 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm,  100  ppm,  dan  120  ppm.  Larutan standar tersebut
diperoleh dari pengenceran  larutan  induk  quersetin 250 ppm, yang diperoleh dari pengenceran  larutan  induk  quersetin 1000  ppm  yang  telah  tersedia  dalam bentuk  larutan.  Persamaan  regresi linier  yang  diperoleh  yaitu        y  = 0,0066x  +  0,009  dengan  koefisien korelasi  (r)  adalah  0,9954.  Dimana koefisien  korelasi  (r)  adalah  bilangan yang  digunakan  untuk  mengetahui kuat, sedang, atau lemahnya hubungan diantara  variable  yang  sedang  diteliti. Larutan  standar  senyawa  flavonoid diperoleh  hubungan  yang  linier  antara absorbansi  dengan  konsentrasi  pada pengukuran  absorbansi  dengan  nilai koefisien  korelasi  sebesar  (r)  0,9954 yang  menunjukkan  bahwa  hasil  r sangat  kuat.  Hal  ini  juga  ditunjukkan dengan  nilai  (r)  yang  mendekati  1 dengan  taraf  kepercayaan  sangat  kuat dan kurva yang terbentuk linier.
Penentuan  kadar  flavonoid  total menggunakan  metode  Chang  et  al. (2002).  Prinsip  dari  metode  AlCl 3 yaitu pembentukan  kompleks  yang  stabil
dengan C-4 gugus keto, serta pada C-3 atau  C-5  gugus  hidroksil  dari  flavon dan  flavonol.  Dalam  penambahannya,
aluminium klorida
membentuk kompleks  asam  yang  stabil  dengan gugus ortohidroksil pada cincin A- atau B- dari senyawa-senyawa flavonoid.
Gambar 3. Reaksi Pembentukan Kompleks
Flavonoid-AlCl 3 Pada pengukuran senyawa flavonoid total, larutan sampel ditambahkan AlCl 3 yang dapat membentuk kompleks, sehingga terjadi pergeseran panjang gelombang ke arah visible  (tampak)  yang  ditandai  dengan larutan menghasilkan warna yang lebih kuning.Dan penambahan natrium
asetat yang
bertujuan untuk mempertahankan  panjang  gelombang pada daerah visible (tampak).Pemilihan quersetin  sebagai  larutan  standar dikarenakan quersetin merupakan
senyawa
yang paling luas
penyebarannya  yang  terdapat  pada tumbuhan.Quersetin  dan  glikosidanya berada  dalam  jumlah  sekitar  60-75% dari  flavonoid.  Dan  juga  karena merupakan salah satu senyawa golongan flavonoid yang dapat bereaksi dengan AlCl 3 membentuk kompleks
Menurut  Dirjen  POM  (2014)
range kadar flavonoid total berdasarkan nilai absorbansinya berkisar  antara  0,2-0,8.  Dan  nilai absorbansi berturut-turut yang
didapatkan pada sampel ekstrak etanol p.a sebesar 0,039; 0,038; 0,037. Hasil yang diperoleh dari ekstrak etanol kulit batang  kayu  raru  mengandung  kadar flavonoid sebesar 4,3939 %.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian penetapan  kadar  flavonoid  pada  kulit batang kayu raru ( Cotylelobium melanoxylon Pierre)
maka dapat
disimpulkan
bahwa
sampel mengandung  flavonoid  dengan  kadar rata-rata sebesar 4,3939 %.

## SARAN
Untuk  penelitian  selanjutnya sebaiknya  dilakukan  penelitian  dengan berbagai jenis pelarut pada kulit batang kayu  raru,  diharapkan  pula  dilakukan penelitian  lanjutan  dengan  uji  analisis kuantitatif terhadap kandungan metabolit sekunder lainnya yang terkandung  dalam  kulit  batang  kayu raru  sebelum  dikembangkan  lebih lanjut  sebagai  tumbuhan  obat  alami (produk jamu) atau sebagai obat herbal terstandar.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Aksara,  R.,  Musa,  A.,  dan  Alio,  L. 2013. Identifikasi Senyawa Alkaloid dari  Ekstrak  Metanol  Kulit  Batang Mangga  (Mangifera  indica  L.).
Jurnal Entropi. 3( 1 ): 2-3.
2. Dahlia,  A.,  Yulianti,  R.,  Ahmad, A.R.  Penetapan  Kadar  Flavonoid
Total  dari  Ekstrak  Etanolik  Daun Benalu  Mangga  ( Dendrophthoe pentandra L. Miq). Jurnal Fitofarmaka Indonesia, Vol 1 No 1 . Laboratorium Farmakognosi- Fitokimia Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia.
3. Dirjen  POM. Farmakope  Indonesia Edisi IV . Jakarta: Depkes RI. 2014.
4. Jack, 2012. Synthesis of Antidiabetic  Flavonoids  and  Their Derivative .  Medical  Research  page 180.
5. Latifah,  2015.  Skripsi:  Identifiikasi Golongan  Senyawa  Flavonoid  dan Uji  Aktivitas  Antioksidan  Pada Ekstrak Rimpang Kencur (Kampferia  Galanga  L) dengan
Metode  DPPH . Universitas  Islam Negeri. Malang.
6. Maximillian.  2008. Pasar  Tanaman Obat dan Aromatik Dunia.
https://bisnisfarmasi.wordpress.co m. Diakses pada 4 Januari 2008.
7. Neldawati, Ratnawulan, dan
Gusnedi. 2013. Analisis Nilai Absorbansi dalam Penentuan Kadar
Flavonoid  untuk  Berbagai  Jenis Daun Tanaman Obat. Jurnal Phillar Of  Physics  Vol.2,  Oktober  2013. Hal 76-83.
8. Oktaria,  Y.E.  2013.  Skripsi  :  Uji Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Etanol Biji Alpukat (Persea americana  Mill.)  Terhadap  Tikus Galur  Wistar  yang  di  Induksi Aloksan . Universitas Muhammadiyah Surakarta. 9. Pasaribu,  T.G.,  2009.  Tesis:Zat Ekstraktif Kayu Raru dan Pengaruhnya  Terhadap  Penurunan Kadar  Gula  Darah  Secara  In  Vitro .
Institut Pertanian Bogor. Bogor.
10. Sarastani, D., Suwarna T.,
Soekarto,  T.,  Muchtadi,  R.  2002. Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  dan Fraksi  Ekstrak  Biji  Atung .  Jurnal Teknologi dan Industri Pangan . Vol. XIII. No. 2. 149-156.
11. Sjahid,  R.L.,  2008.  Skripsi: Isolasi dan  Identifikasi  Flavonoid  dari Daun  Dewandaru  (Eugenia  uniflora L.). Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta.