## Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan

## UJI STABILITAS BAWANG HITAM PADA BERBAGAI SUHU PENYIMPANAN TERHADAP AKTIVITAS ANTIBAKTERI

## ( STABILITY TEST OF BLACK GARLIC AT VARIOUS TEMPERATURE STORAGE AGAINST ANTIBACTERIAL ACTIVITY)
Lia Siti Halimah 1 , Eka Noneng Nawangsih 1 , Ilma Fiddiyanti 2 , Emma Mardliyah Hidayat 3 , Rina Munirah 4 , Gisda Ayu Nur Hasanawati 5 , Irena Juniar Setiawati 5
1 Departemen Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi, Jawa Barat, Indonesia
2 Departemen Radiologi Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi,
Jawa Barat, Indonesia
3 Departemen Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi,
Jawa Barat, Indonesia
4 Departemen Kulit Kelamin Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi,
Jawa Barat, Indonesia
5 Program Studi Kedokteran Umum Fakultas Kedokteran Universitas Jenderal Achmad Yani, Cimahi, Jawa Barat, Indonesia

## Email korespondensi: lia.dio28@gmail.com

## ABSTRAK
Bawang  hitam  merupakan  hasil  proses  fermentasi  bawang  putih  yang  memiliki  aktivitas antibakteri. Penurunan kualitas suatu produk pangan dapat dipengaruhi diantaranya oleh suhu dan waktu penyimpanan. Tujuan penelitian ini adalah untuk menguji stabilitas bawang hitam tunggal  pada  berbagai  suhu  penyimpanan  terhadap  aktivitas  antibakteri.  Bawang  hitam disimpan di suhu ruangan (27-28 o C) selama 90 hari, pada suhu panas (37 o C) selama 17 hari, suhu  kulkas  (5 0 C)    dan  suhu freezer (-20 0 C)  selama  90  hari.  Penelitian  ini  menggunakan bawang  hitam  tanpa  perlakuan  (kontrol  0  hari).  Penelitian  menggunakan  metode  difusi  agar Kirby-Bauer dengan  menanamkan  ekstrak  etanol  bawang  hitam  75%  pada  media Mueller Hinton  Agar yang  sudah  diinokulasi Staphylococcus  aureus dengan  tiga  kali  pengulangan (triplo).  Hasil  penelitian  menunjukan  bawang  hitam  tunggal  yang  disimpan  pada  suhu ruangan  (27-28 o C),suhu  kulkas  (5 0 C),  suhu  freezer  (-20 o C)    tidak  menunjukkan  penurunan aktivitas  antibakteri,    sedangkan  bawang  hitam  yang  disimpan  pada  suhu  panas  (37 o C) menunjukkan  penurunan  aktivitas  antibakteri  yang  signifikan.  Zona  hambat  yang  terbentuk membuktikan  bahwa  ekstrak  etanol  bawang  hitam  mengandung  senyawa  aktif allicin yang memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus. Senyawa  aktif allicin
DOI DOI
ARTIKEL PENELITIAN
terbentuk ketika bawang putih segar mengalami destruksi disebabkan allin dan enzim allinase berada didalam kompartemen sel yang berbeda. Kesimpulan dari penelitian ini adalah bawang hitam  tunggal  pada  suhu  ruangan,  suhu  kulkas),  suhu freezer tidak  mengalami  penurunan aktivitas  antibakteri,  sedangkan  pada  penyimpanan  suhu  panas  menunjukan  penurunan aktivitas antibakteri.
Kata kunci : antibakteri, bawang hitam, Staphylococcus aureus , suhu, waktu penyimpanan

## ABSTRACT
Black garlic is the result of the garlic fermentation process which has antibacterial activity. Decreasing the quality of a food product can be influenced by temperature and storage time. The  purpose  of  this  study  was  to  test  the  stability  of  single  black  garlic  at  various  storage temperatures  against  antibacterial  activity.  Black  onions  were  stored  at  room  temperature (27-28oC) for 90 days, at hot temperature (37oC) for 17 days, refrigerator temperature (50C) and freezer temperature (-200C) for 90 days. This study used black garlic without treatment (control  0  days).  The  study  used  the  Kirby-Bauer  agar  diffusion  method  by  instilling  75% black  garlic  ethanol  extract  on  Mueller  Hinton  Agar  media  that  had  been  inoculated  with Staphylococcus  aureus  with  three  repetitions  (triplo).  The  results  showed  that  single  black garlic  stored  at  room  temperature  (27-28oC),  refrigerator  temperature  (50C),  freezer temperature  (-20oC)  did  not  show  a  decrease  in  antibacterial  activity,  while  black  garlic stored at hot temperature (37oC) showed a decrease in antibacterial activity. significant. The inhibition  zone  formed  proves  that  the  ethanolic  extract  of  black  garlic  contains  the  active compound allicin which has antibacterial activity against Staphylococcus aureus. The active compound allicin is formed when fresh garlic is destroyed because allin and allinase enzymes are in different cell compartments. The conclusion of this study is that single black garlic at room  temperature,  refrigerator  temperature),  freezer  temperature  did  not  decrease antibacterial  activity,  while  at  hot  temperature  storage  showed  a  decrease  in  antibacterial activity.
Keywords: antibacterial, black garlic, Staphylococcus aureus, temperature, storage time

## PENDAHULUAN
Umur  simpan  atau shelf  life adalah rentang  waktu  yang  dimiliki  suatu  produk mulai  dari  produksi  hingga  konsumsi sebelum produk tersebut mengalami penurunan  kualitas  atau  rusak  dan  tidak layak untuk dikonsumsi. Kontrol kelembaban, pencahayaan, dan suhu merupakan  faktor  yang  paling  sering berperan dalam penurunan kualitas makanan.  Pengolahan  produk  seperti
fermentasi  dan  reaksi Maillard dapat menghasilkan  formasi  zat  antimikroba dalam  produk  makanan  tersebut.  Sampai saat ini belum banyak ditemukan penelitian tentang  uji  stabilitas  pengaruh  suhu penyimpanan  pada  produk  bawang  hitam. 1,2,3
Bawang hitam adalah produk fermentasi bawang putih yang
menghasilkan  warna  hitam  pada  produk akhir proses fermentasi. Manfaat di bidang
kesehatan  bawang  hitam  telah  lama dikembangkan  di  Jepang  dan  Korea.  Hasil akhir dari proses pembuatan bawang hitam ditujukan untuk meningkatkan aktivitas zat aktif  yang  terdapat  dalam  bawang  putih, menghilangkan  rasa  dan  aroma  khas bawang  putih,  serta  menghasilkan  rasa asam-manis  pada  bawang  hitam. 4 Bawang hitam ini mengandung asam DL- Lactic, 5- hydroxymethyl-2-furfural, adenosine,
uridine,  (1S,  3S)  –  1methyl-1,2,3,4- tetrahydro-β  carboline-3-carboxylic  acid dan 2-Acetylpyrrole yang memiliki antioksidan  tinggi.  Konsentrasi  konten alliin dalam sampel bawang hitam berkurang karena alliin dikonversi menjadi
S-allyl  sistein (SAC), S-allylmercapto- sistein , arginin ,  dan  senyawa  tidak terdefinisi lainnya ketika mengalami pemrosesan  termal.  Jumlah  SAC  dalam bawang  hitam  umumnya  memiliki  lima sampai  enam  kali  lebih  tinggi  daripada bawang putih segar dan dianggap memiliki efek menguntungkan dari bawang hitam. 5,6,7
Staphylococcus aureus bakteri berbentuk  bulat  atau  lonjong  merupakan jenis  yang  tidak  bergerak,  tidak  berspora, bakteri  gram  positif  berwarna  ungu  dan tersusun  dalam  kelompok  (seperti  buah anggur).  Menurut  penelitian  Pujiastuti  dan Palupi  menunjukan  bawang  hitam  mampu menghambat  pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli dilihat  dari
hasil uji daya hambat dari respon hambatan pertumbuhan bakteri. 89 Berdasarkan uraian di  atas,  peneliti  bermaksud  untuk  meneliti uji  stabilitas  bawang  hitam  pada  berbagai suhu  penyimpanan  seperti;  suhu  kulkas (5 o C), freezer (-20 o C), ruangan (27-28 o C), dan  panas  (37 o C  )  terhadap  aktivitas antibakteri Staphylococcus aureus. 9,10,11

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini adalah penelitian laboratorium  eksperimental  dengan  faktor perlakuan  yaitu  penyimpanan  di  berbagai suhu  untuk  menguji  daya  antibakteri bawang hitam. Penelitian ini menggunakan metode difusi Kirby Bauer. 12
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran Universitas  Jenderal  Achmad  Yani  (FK Unjani)  dan  pembuatan  ekstrak  dilakukan di  Gedung  Riset  dan  Inovasi  Institut Teknologi  Bandung  (ITB).  Penelitian dilaksanakan  bulan  Agustus    sampai dengan bulan Desember 2021.
Sampel yang digunakan adalah bawang  hitam  tunggal  yang  dibagi  ke dalam  5  kelompok,  yaitu  satu  kelompok penyimpanan pada suhu kulkas (5 o C), satu kelompok  penyimpanan  pada  suhu  freezer (-20 o C), satu kelompok penyimpanan pada suhu  ruangan  (27-28 o C),  yang  masing- masing  disimpan  selama  90  hari.  Satu kelompok  penyimpanan  pada  suhu  panas (37 o C)  disimpan  selama  17  hari  dan  satu
kelompok  tidak  diberikan  perlakuan. Pengujian  disertai  dengan  kontrol  positif, kloramfenikol dan kontrol negatif, DMSO. 13
Sebelum  dilakukan  uji  aktivitas antibakteri,  sampel  bawang  hitam  tunggal disimpan pada suhu kulkas (5 o C) dan suhu freezer (-20 o C)  selama  90  hari.  Dilakukan sampling  untuk  uji  Kirby-Bauer  sebanyak 3  kali  yaitu  pada  sampel  hari  ke-0,  ke-45 dan  ke-90.  Ekstraksi  bawang  hitam  yang disimpan  pada  suhu  ruangan  (27-28 o C) selama  90  hari  dan  suhu  37 o C  selama  17 hari dilakukan sebanyak empat kali, yaitu 1 kali ekstraksi kontrol pada 0 hari, satu kali ekstraksi pada hari kontrol ke-55, satu kali ekstraksi  pada  hari  ke-90  dari  bawang hitam  tunggal  yang  disimpan  pada  suhu ruangan  (28 o C),  dan  satu  kali  ekstraksi pada hari ke-17 dari bawang hitam tunggal yang  disimpan  pada  suhu  37 o C.  Bahan  uji lainnya yang digunakan pada penelitian ini adalah  akuades  steril,  disk  antibiotik Kloramfenikol,  bakteri Staphylococcus aureus ATCC , dan cairan  desinfektan NaCl  0,9%.  Media  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  Muller  Hinton  Agar (MHA) dan Cetrimide agar. 12
Peralatan  yang  digunakan  dalam penelitian  adalah  oven,  alumunium  foil, wadah,  cawan  petri  beserta  tutup,  bunsen, korek  api,  timbangan  digital,  tabung sentrifugal, sentrifugal, mortar, gelas ukur, spatula,  ose,  tabung  reaksi,  rak  tabung
reaksi,  pipet  tetes,  mikropipet,  pipet  agar, perforator, lemari kulkas, freezer, inkubator  (37 o C).  Alat  lainnya  dalam penelitian  ini  adalah  masker,  sarung tangan, jangka sorong, pengaduk gelas atau magnetik,  gelas  piala  250  mL,  kertas  tisu, timbangan analitik, dan termometer.

## Pengujian  Aktivitas  Antibakteri  dengan Metode Difusi Kirby Bauer
Pengujian efek antibakteri dilakukan  dengan  menggunakan  cawan petri yang diberi lubang dengan perforator berdiameter  6  mm  hingga  membentuk sebuah  sumuran  yang  berdiameter  6  mm dengan  jumlah  4  buah  pada  setiap  agar. Setiap  sumuran  tersebut  diisi  dengan ekstrak  bawang  hitam.  Selanjutnya,  agar diinkubasi  selama  24-48  jam  pada  suhu 37 o C.  Hasil  tersebut  selanjutnya  diukur menggunakan jangka sorong atau penggaris  untuk  mengukur  diameter  zona hambat  yang  berwarna  bening  yang terbentuk di sekitar sumuran. Zona hambat dapat diukur setelah di inkubasi selama 24- 48 jam. Pengukuran diameter zona hambat menggunakan jangka sorong dengan melihat zona bening atau halo di sekeliling cakram  disk.  Lalu  pencatatan  hasil  dari diameter  zona  hambat  tersebut  dilakukan. Diameter  zona  hambat  dihitung  dalam satuan  milimeter  (mm)  dan  dikategorikan berdasarkan penggolongan Davis and Stout (1971). Kategorisasi tersebut yaitu diameter  >  20  mm  artinya  daya  hambat
sangat  kuat.  diameter  10-20  mm  artinya daya  hambat  kuat.  diameter  5-10  mm artinya  daya  hambat  sedang,  diameter  <  5 mm artinya daya hambat lemah. 5,14

## Analisis Data
Data yang berhasil diperoleh dianalisis secara  univariat  dan  bivariat.  Analisis univariat adalah menghitung jumlah bakteri  dan  aktivitas  antibakteri  pada bawang hitam dari berbagai suhu penyimpanan.
Analisis
bivariat menjelaskan  pengaruh  berbagai  suhu penyimpanan  bawang  hitam  terhadap aktivitas antibakteri dengan uji T
independent (data terdistribusi normal) dan uji  Mann  Whitney  (data  tidak  terdistribusi normal).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengukuran  antibakteri  ekstrak  etanol bawang hitam tunggal terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus dilakukan  dengan  metode  difusi  Kirby Bauer.  Berikut  hasil  rerata  pengukuran zona  hambat  bakteri  pada  penyimpanan suhu  kulkas  (5oC)  yang  ditunjukan  pada Tabel  1,  dan  pada  penyimpanan  suhu freezer  (-20oC)  yang  ditunjukan  pada Tabel 2.
Tabel 1 Hasil pengukuran rerata zona hambat ekstral etanol  bawang hitam tunggal pada
penyimpanan suhu kulkas (5 o C) Sampel 0 hari 45 hari 90 hari Rerata Zona Hambat (mm) K1 KP 1 0 0 0 KN 2 0 0 0 1 7,50 8,70 14,70 2 7,60 8,43 14,77 3 7,60 8,46 14,25 1 30,22 29,87 29,20 2 30,10 30,20 30,05 3 29,35 29,75 29,62 3 0 0 0 Keterangan : K(1) : Penyimpanan Suhu Kulkas (5 o C) , KP  : Kontrol Positif
KN : Kontrol Negatif
Hasil  uji  ekstrak  bawang  hitam  75% pada  penyimpanan  suhu  kulkas  (5 o C)  hari ke-0,  ke-45  dan  ke-90  menunjukkan adanya  zona  hambat  pada  pertumbuhan Staphylococcus  aureus yang  ditandai dengan adanya  zona bening pada sebagian agar.  Zona  hambat  juga  terbentuk  pada
kontrol positif yaitu antibiotik kloramfenikol dan zona hambat yang tidak terbentuk  pada  kontrol  negatif  yaitu akuades. Zona bening menunjukkan bahwa ekstrak  etanol  bawang  hitam  tunggal mengelami  perubahan  setelah  dilakukan penyimpanan. Semakin lama waktu
penyimpanan  maka  semakin  luas  zona
hambat yang terbentuk.
Tabel 2 Hasil pengukuran rerata daya zona hambat ekstrak etanol  bawang hitam tunggal
pada penyimpanan suhu freezer (-20 o C) Sampel 0 hari 45 hari 90 hari Rerata Zona Hambat (mm) K2 KP K N 1 7,50 N/A 15,07 2 7,60 N/A 15,22 3 7,60 N/A 15,20 1 30,22 29,70 29,70 2 30,10 29,40 29,40 3 29,35 30,05 29,08 1 0 0 0 2 0 0 0 3 0 0 0 Keterangan : K(2) : Penyimpanan Suhu Freezer KP : Kontrol Positif KN : Kontrol Negatif
Hasil  uji  ekstrak  bawang  hitam tunggal  75%  pada  penyimpanan  suhu freezer (-20 o C)  hari ke-0, ke-45, dan ke-90 menunjukkan  adanya  zona  hambat  pada pertumbuhan Staphylococcus  aureus yang ditandai  dengan  adanya  zona  bening  pada sebagian agar. Zona hambat terbentuk pada kontrol positif yaitu antibiotik kloramfenikol  sedangkan  zona  hambat tidak  terbentuk  pada  kontrol  negatif  yaitu akuades.  Ekstrak  etanol  bawang  hitam tunggal  memperlihatkan  zona  bening  pada sampel    hari  ke-0  dan  hari  ke-90.  Pada sampel  hari  ke-45  tidak  dapat  diamati terbentuknya  zona  hambat.  Hal  ini disebabkan  terjadinya  kerusakan  pada sampel  disebabkan  oleh  kondisi  diluar kendali  pada  saat  pandemik  Covid  19, sehingga  laboratorium  ditutup  dan  sampel tidak langsung diujikan.
Berdasarkan  hasil  uji T-independent pada  penyimpanan  suhu  kulkas  (5 o C)
didapatkan  hasil  bermakna  karena  P<0,05 dan dapat diketahui bahwa ekstrak bawang hitam  tunggal  dengan  waktu  penyimpanan yang  berbeda  memiliki  diameter  zona hambat  yang  berbeda  pula.  Pembentukan zona  hambat  terhadap Staphylococcus aureus ditemukan  pada  ekstrak  bawang hitam  tunggal  dengan  lama  penyimpanan 90  hari  yaitu  rerata  14,56  mm.  Ekstrak bawang  hitam  tunggal  dengan  lama penyimpanan  90  hari  memiliki  daya hambat  terkuat  terhadap Staphylococcus aureus .  Hal  tersebut  disebabkan  karena komponen  aktif  pada  bawang  hitam tersebut masih tinggi sehingga kemampuan dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri yang tinggi. 6,13,15
Berdasarkan  hasil  uji T-independent pada  penyimpanan  suhu freezer (-20 o C) didapatkan  hasil  perbedaan  bermakna dengan  P<0,05.  Pada  penyimpanan  suhu ini  memperlambat  proses  metabolisme
oksidasi  sehingga  dapat  memperpanjang umur penyimpanan. 16,17,18
Kesimpulan  dari  hasil  uji  antibakteri penyimpanan  bawang  hitam  pada  suhu kulkas  (5 o C)  dan  suhu freezer (-20 o C)
selama  90  hari  tidak  terdapat  penurunan aktivitas  antibakteri.  Hasil  daya  hambat ekstrak  etanol  bawang  hitam  pada  suhu ruangan dan 37 0 C dapat dilihat pada Tabel
3 dan 4 di bawah ini.
Tabel 3 Hasil pengukuran rerata zona hambat ekstrak etanol bawang hitam tunggal pada suhu penyimpanan ruangan (27-28 o C) Rerata Zona Hambat Ekstrak Etanol Bawang Hitam Tunggal (mm) Ekstrak etanol bawang hitam tunggal Kontrol 0 Hari 5,66 Kontrol 55 Hari 5,18 90 Hari 8,44 Kontrol positif 23,15 26,3 21,12 Kontrol negatif 0 0 0
Pada  tabel  3  hasil  pengukuran  zona hambat  ekstrak  etanol  bawang  hitam tunggal  yang  disimpan  pada  suhu  ruangan (27-28 o C)  didapatkan  rerata  zona  hambat ekstrak  kontrol  55  hari  sebesar  5,18  mm
dengan  kontrol  positif  26,3  mm  dan kontrol negatif 0 mm. Pada ekstrak 90 hari didapatkan  hasil  sebesar  8,44  mm  dengan kontrol  positif  21,12  mm  dan  kontrol negatif 0 mm.
Tabel 4 Hasil pengukuran rerata zona hambat ekstrak etanol bawang hitam tunggal pada suhu penyimpanan 37 o C
Rerata Zona Hambat Ekstrak Etanol Bawang Hitam Tunggal (mm) Ekstrak etanol bawang hitam tunggal Kontrol 0 Hari 5,66 17 Hari - Kontrol positif 23,15 27,47 Kontrol negatif 0 0
Tabel 4 hasil pengukuran zona hambat ekstrak  etanol  bawang  hitam  tunggal  yang disimpan  pada  suhu  37 o C  menunjukan tidak terdapat zona hambat yang  terbentuk dengan  kontrol  positif  sebesar  27,47  mm dan kontrol negatif 0 mm.
Hasil pengukuran zona hambat ekstrak etanol bawang hitam tunggal yang disimpan  pada  suhu  ruangan  (27-28 o C) selama  55  hari  dapat  dilihat  pada  gambar 1. Hasilnya didapatkan rerata zona hambat sebesar  5,18  mm  dengan  kontrol  positif
21,12  mm  dan  kontrol  negatif  0  mm dengan perbandingan ekstrak kontrol 0 hari
dengan  rerata  zona  hambat  sebesar  5,66 mm.
Gambar 1 Rerata zona hambat ekstrak etanol bawang hitam tunggal suhu penyimpanan ruangan (27-28 o C) kontrol 55 hari terhadap Staphylococcus aureus.
Hasil pengukuran zona hambat ekstrak etanol bawang hitam tunggal yang disimpan  pada  suhu  ruangan  (27-28 o C) selama  90  hari  dapat  dilihat  pada  gambar 2.  Tabel  2  didapatkan  rerata  zona  hambat sebesar  8,44  mm  dengan  kontrol  positif 21,12  mm  dan  kontrol  negatif  0  mm, kontrol  0  hari  zona  hambat  sebesar  5,66 mm.
Perbedaan  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol bawang hitam tunggal yang disimpan  pada  suhu  ruangan  (27-28 o C) selama  90  hari  dengan  ekstrak  etanol bawang  hitam  kontrol  (0  hari)    tidak memiliki perbedaan yang bermakna secara statistik dengan p-value sebesar >0,05.
Gambar 2 Rerata zona hambat ekstrak etanol bawang hitam tunggal suhu penyimpanan ruangan (27-28 o c) 90 hari terhadap Staphylococcus aureus.
0 5 10 15 20 25 30
Suhu Penyimpanan Ruangan (27-28 C) Kontrol 55 Hari
Ekstrak Kontrol 0 hari Ekstrak Uji Kontrol Positif Kontrol Negatif 0 5 10 15 20 25 Suhu Penyimpanan Ruangan (27-28 C) 90 Hari Ekstrak Kontrol 0 Hari Ekstrak Uji Kontrol Positif
Kontrol Negatif
Hasil pengukuran zona hambat ekstrak etanol bawang hitam tunggal yang disimpan  pada  suhu  37 o C  selama  17  hari dapat  dilihat  pada  gambar  3.  Pada  gambar 3 tidak didapatkan zona hambat, sedangkan  kontrol  positif  21,12  mm, kontrol  negatif  0  mm,  ekstrak  kontrol  (0 hari) 5,66 mm.
Hasil  uji  antibakteri  menunjukkan adanya  zona  hambat  pada  pertumbuhan Staphylococcus aureus pada suhu penyimpanan  ruangan  (27-28 o C)  yang ditandai  dengan  adanya  daerah  bening pada  seluruh  agar  dengan paper  disk ekstrak  etanol  bawang  hitam  tunggal
konsentrasi  75%.  Zona  hambat  terbentuk pada  kontrol  positif  yaitu  antibiotik kloramfenikol dosis 30  g, sedangkan zona hambat tidak terbentuk pada suhu penyimpanan  37 o C  dan  kontrol  negatif dengan akuades.
Perbedaan  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol bawang hitam tunggal yang disimpan  pada  suhu  37 o C  selama  17  hari dan  ekstrak  etanol  bawang  hitam  yang belum diberi perlakuan (0 hari) didapatkan hasil p-value >0,05  yaitu  p  =  0,121.  Hasil ini  berarti  secara  statistik  tidak  ada perbedaan yang signifikan.
Gambar 3 Rerata daya zona hambat ekstrak etanol bawang hitam tunggal suhu penyimpanan 37 o C 17 hari terhadap Staphylococcus aureus.
Zona hambat yang terbentuk membuktikan bahwa ekstrak etanol bawang  hitam  memiliki  senyawa  aktif aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus  aureus. Senyawa  aktif yang  terkandung  dalam  bawang  hitam tunggal
adalah allicin.
Allicin
( diallylthiosulfate ) adalah senyawa bioaktif dari  prekursor  stabil Allin ( alkylcysteine sulfoxide ). Alliin dibentuk  dari γ -glutamil- S-alk(en)il-L-sistein. Allicin terbentuk ketika  bawang  putih  segar  mengalami destruksi atau dihancurkan karena allin dan
0 10 20 30 Suhu Penyimpanan 37 C 17 Hari Ekstrak Kontrol 0 Hari Ekstrak Uji Kontrol Positif
Kontrol Negatif
enzim allinase berada didalam
kompartemen sel yang berbeda. 11,19,20
Kesimpulan  dari  hasil  uji  antibakteri menunjukkan bahwa ekstrak etanol bawang hitam tunggal yang disimpan pada suhu  ruangan  (27-28 o C)  selama  90  hari memiliki  nilai  rerata  zona  hambat  yang sedang  dan  bawang  hitam  yang  disimpan pada  suhu  37 o C  selama  17  hari  tidak memiliki nilai zona hambat pada pertumbuhan Staphylococcus aureus.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa aktivitas antibakteri ekstrak etanol bawang hitam  tunggal  yang  disimpan  pada  suhu 37 o C  selama  17  hari  tidak  memiliki perbedaan  yang  bermakna  dengan  ekstrak bawang  hitam  tunggal  yang  belum  diberi perlakuan (kontrol 0 hari). 21
Perbedaan  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol bawang hitam tunggal yang disimpan  pada  suhu  37 o C  selama  17  hari dan ekstrak etanol bawang hitam kontrol (0 hari)  didapatkan  nilai p-value >0,05  yaitu p  =  0,121.  Dengan  kata  lain,  secara statistik tidak ada perbedaan yang signifikan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan,  maka  dapat  disimpulkan bahwa  bawang  hitam  tunggal  dapat disimpan  selama  90  hari  pada  suhu ruangan  (27-28 o C),  suhu  kulkas  (5 0 C), suhu freezer (-20 o C)  tidak  mengalami
penurunan  aktivitas  antibakteri,  sedangkan pada  penyimpanan  suhu  panas  (37 o C) selama 17 hari bawang hitam tunggal sama sekali  tidak  memiliki  aktivitas  antibakteri lagi.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Penelitian  dan  publikasi  artikel  ini tidak  didasarkan  pada  kepentingan  pihak tertentu.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terima kasih kepada Lembaga Penelitian dan Pengabdian kepada  Masyarakat  (LPPM)  Unjani  yang telah  mendukung  pendanaan  penelitian. Ucapan  terimakasih  terhadap    rekan-rekan dari  Departemen  Mikrobiologi  Fakultas Kedokteran  Universitas  Jenderal  Achmad Yani  atas  dukungan  dan  bantuan  yang  tak ternilai dalam melaksanakan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA

## 1.   Nurul  Asiah,  Laras  Cempaka  WD.
Panduan  Praktis  Pendugaan  Umur Simpan  Produk  Pangan .  Universitas Bakrie; 2018.
2.   Botas J, Fernandes Â, Barros L, Alves MJ,  Carvalho  AM,  Ferreira  ICFR.  A Comparative  Study  of  Black  and White  Allium  sativum  L.:  Nutritional composition  and  bioactive  properties. Molecules . 2019;24(11). doi:10.3390/molecules24112194
3.   Sembiring NB,  Iskandar Y.  A Review of  Component  and  Pharmacology
Activities  of  Black  Garlic. Maj  Obat Tradis . 2019;24(3):178. doi:10.22146/mot.45277 4.   Salsabila Q. Anti-Inflammatory Activity of Aged Black Garlic (Allium sativum L.). 2021;10 No1:7.
doi:https://doi.org/10.35816/jiskh.v10i 1.502
5.   Halimah  LS,  Nawangsih  EN,  Hasan
K.  Analysis  of  Antibacterial  and Antioxidant  Activities  of  a  Single Bulb  of  Garlic  Fermented  into  Black Garlic. Proc  12th  Annu  Sci  Meet  Med Fac  Univ  Jenderal  Achmad  Yani,  Int Symp  “Emergency  Prep  Disaster Response  Dur  COVID  19  Pandemic” (ASMC  2021) .  2021;37(Asmc):83-87. doi:10.2991/ahsr.k.210723.021
6.   Halimah  LS,  Hasan  K.  Differences  of Bio  (Chemical)  Characterization  of Garlic and Black garlic on Antibacterial and Antioxidant Activities. J Phys Conf Ser . 2021;1764(1). doi:10.1088/1742- 6596/1764/1/012005
7.   Moulia  MN,  Syarief  R,  Iriani  ES,
Kusumaningrum  HD,  Suyatma  NE.
Antimikroba  Ekstrak  Bawang  Putih. J
Pangan . 2018;27(1):55-66.
8.   Chang  TC,  Jang  H  Der.  Optimization of aging time for improved antioxidant activity  and  bacteriostatic  capacity  of fresh  and  black  garlic. Appl  Sci . 2021;11(5):1-16.
doi:10.3390/app11052377
9.   Astuti  DP,  Palupi  C.  Perbandingan
Efektivitas  Antibakteri  Minyak  Atsiri
Bawang  Putih  (Allium  sativum)  Dan Black Garlic Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus Dan
Escherichia  coli  Dengan  Metode Kirby-Bauer. J  Pharm  Sci  Med  Res . 2018;1(2):17.
doi:10.25273/pharmed.v1i2.2966
10.  Prihandani  SS,  Poeloengan  M,  Noor SM. Uji daya antibakteri bawang putih (allium  sativum  l.)  Terhadap  bakteri staphylococcus  aureus,  escherichia coli,  salmonella  typhimurium  dan pseudomonas aeruginosa dalam meningkatkan keamanan pangan antibacterial  activity  test  of  garlic (Allium  Sativum. Inform  Pertan . 2015;24(1):53-58.
11.  Kimura  S,  Tung  YC,  Pan  MH,  Su NW,  Lai YJ, Cheng KC. Black garlic: A  critical  review  of  its  production, bioactivity,  and  application. J  Food Drug Anal . 2017;25(1):62-70. doi:10.1016/j.jfda.2016.11.003
12.  Davis  WW,  Stout  TR. Disc  Plate Method  of  Microbiological  Antibiotic
Assay I. Factors Influencing
Variability and Error1 .; 1971.
13.  Nelwida  N,  Berliana  B,  Nurhayati  N. Kandungan Nutrisi Black Garlic Hasil Pemanasan  Dengan  Waktu  Berbeda (The Nutrient Content of Black Garlic
Heated  at  Different  Times) .  Vol  22.;
2019.
14.  Yadav  M,  Bohra  R,  Gupta  N.  In  vitro Determination  of  Antibacterial  Effect of Garlic (Allium sativum) on Staphylococcus  aureus  and  E.coli. Int J Curr Microbiol Appl Sci .
2019;8(09):498-506.
doi:10.20546/ijcmas.2019.809.060 15.  Farhana  H,  Halimah  LS,  Suwarma  B, et  al. Pengaruh  suhu  dan  waktu fermentasi  ekstrak  etanol  black  garlic (allium  sativum)  terhadap  aktivitas antibakteri  Staphylococcus  Aureus Dan Eschericia Coli .
16.  Shetty  S,  Thomas  B,  Shetty  V,
Bhandary  R,  Shetty  R.  An  in-vitro evaluation  of  the  efficacy  of  garlic extract  as  an  antimicrobial  agent  on periodontal pathogens: A microbiological  study. AYU  (An  Int  Q
J  Res  Ayurveda) .  2013;34(4):445. doi:10.4103/0974-8520.127732
17.  Lu  X,  Li  N,  Qiao  X,  Qiu  Z,  Liu  P.
Effects  of  thermal  treatment  on polysaccharide degradation during black garlic processing. LWT .
2018;95:223-229.
doi:10.1016/j.lwt.2018.04.059
18.  Safitri  D,  Halimah  LS,  Taufan  A,
Unjani FK, Mikrobiologi B, Kedokteran  F. Perbandingan  aktivitas antibakteri black garlic (allium
sativum)  dan  black  garlic  setunggal (allium sativum) .
19.  Lu  X,  Li  N,  Qiao  X,  Qiu  Z,  Liu  P.
Composition  analysis  and  antioxidant properties  of  black  garlic  extract. J Food Drug Anal . 2017;25(2):340-349. doi:10.1016/j.jfda.2016.05.011
20.  Sinta PH, Furtuna DK, Fatmaria F. Uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol 96%  umbi  bawang  suna  (allium schoenoprasum
l.) Terhadap
pertumbuhan  staphylococcus  aureus dan staphylococcus saprophyticus dengan  metode  difusi  cakram  kirby- bauer. Herb-Medicine  J .  2020;3(2):7. doi:10.30595/hmj.v3i2.6379
21.  Pujiastuti  D,  Palupi  C.  Perbandingan Efektivitas  Antibakteri  Minyak  Atsiri Bawang  Putih  (Allium  Sativum)  dan
Black Garlic terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus dan Escherichia  Coli  dengan  Metode Kirby-Bauer Comparison Antibacterial Effectiveness of
Essential  Oil  from  Garlic  (Allium sativum)  and  Black  Garlic  Againts Staphylococcus aureus
and Escherichia  coli  with  Kirby-Bauer Methods. J Pharm Sci Med Reseaarch . 2018;1(2):17-21. http://e-
journal.unipma.ac.id/index.php/pharm ed