Pengaruh Cahaya Terhadap Produksi Fukosantin Chaetoceros calcitrans (Paulsen) Takano 1968 (Bacillariophyceae: Chaetocerotaceae)
Sri Sedjati 1,2 * , Endang Supriyantini 1 , Ali Ridlo 1 , Ervia Yudiati 1 dan Linggar Dirgantara Prasetyo 1
1 Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH. Kampus UNDIP Tembalang, Semarang 50275
2 Marine Science Techno Park Jl. Undip, Desa Teluk Awur, Tahunan, Jepara, Jawa Tengah 59427 Email : sedjati69@gmail.com

## Abstract

## The Effect of Light on the Fucoxanthin Product of Chaetoceros calcitrans (Paulsen) Takano 1968
(Bacillariophyceae; Chaetocerotaceae)
Fucoxanthin is a pigment of the carotenoid group that can be used in the food and human health. The demand for natural carotenoid in the global market is quite high for food nutrition, food colorant, medicine, and cosmetic. Chaetoceros calcitrans included sea diatom rich in carotenoid, mainly  fucoxanthin.  This  research  aim    is  to  optimize  C.  calcitrans  cultivation  using  different  light intensity  treatment  to  create  high  fucoxanthin  quantity.  Light  intensity  treatment  consisted  of  4 levels : 1.000, 1.500, 2.000, and 2.500 lx with 2 replications. The culture process was done in medium- scale (60 L) for 14 days, enriched with diatom’s fertilizer, vitamin B, silica at  temperature  25-27 o C, salinity  32-33‰,  pH  8-8,5,  and  DO  7-9 mg/g .  Biomass  and  pigments  were  harvested  in  stationer phase,  two  days  after  the  peak  of  logarithmic  growth.  Pigments  analysis  used  Spektrofotometry method, absorbance values  were  measured  in wavelengths 445, 632, 649, 663, 665, and 696 nm. The results showed that light intensity treatment was not significant in biomass weight (p=0,06), but it is very significant to cells density (p=0,01) and fucoxanthin production (p=0,01).  In conclusion, the light intensity  of  2.500 lx was effective to  obtain the highest fucoxanthin   at the amount of 10,13 ±1,62  mg  dw  with  productivity  at    0,17±0,03 mg/g culture  media.  The  increase  of  light  intensity correlated  positively  with  the  increase  of  fucoxanthin  production  with  regression  equation    y  = 0,006x-4,938  (r  =  0,96).  The  increase  in  light  intensity  reaching  2500  lx  in  Chaetoceros  calcitrans culture is proven can accelerate fucoxanthin biosynthesis, therefore the method can be applied to increase its  production.
Keywords : Light intensity; production; stationer phase; fucoxanthin

## Abstrak
Fukosantin merupakan salah satu karotenoid yang bermanfaat dalam bidang pangan dan kesehatan  manusia.  Permintaan  karotenoid  alami  di  pasar  global  besar  sekali  untuk  berbagai kegunaan  dalam  bidang  nutrisi  makanan,  pewarna  makanan,  obat-obatan,  dan  kosmetik. Chaetoceros  calcitrans termasuk  diatom  laut  yang  kaya  karotenoid,  terutama  fukosantin. Penelitian ini bertujuan untuk mengoptimasi kultur C . calcitrans dengan menggunakan perlakuan intensitas cahaya berbeda agar memproduksi fukosantin yang tinggi. Perlakuan intensitas cahaya terdiri dari 4 taraf : 1.000, 1.500, 2.000, dan 2.500 lx dengan 2 kali ulangan.  Kultur dilakukan dalam skala medium (60 L) selama 14 hari, diperkaya dengan pupuk diatom, vitamin B, silikat pada suhu 25-27 o C, salinitas 32-33‰, pH 8-8,5, dan DO 7-9 mg/g.   Pemanenan biomassa dilakukan saat fase stasioner,  yaitu  2  hari  setelah  puncak  logaritmik.    Analisis  pigmen  menggunakan  metode Spektrofotometri, nilai absorbansi diukur pada panjang gelombang 445, 632, 649, 663, 665, dan 696
nm.  Hasil penelitian membuktikan bahwa perlakuan intensitas cahaya tidak berpengaruh nyata (p=0,06)  terhadap  berat  biomassa,  tetapi  sangat  berpengaruh  nyata  terhadap  kepadatan  sel (p=0,01)  dan  produksi  fukosantin  (p=0,01).  Pemberian  intensitas  cahaya  2.500  lx  menghasilkan produksi  fukosantin  tertinggi,  yaitu  sebesar  10,13  ±1,62  mg  dw  dengan  produktivitas  sebesar 0,17±0,03  mg/g  media  kultur.  Kenaikan  intensitas  cahaya  berkorelasi  positif  dengan  kenaikan produksi fukosantin dengan persamaan regresi  y = 0,006x - 4,938 (r = 0,96).  Peningkatan intensitas cahaya  sampai  2500  lx    pada  kultur Chaetoceros  calcitrans terbukti  dapat  memacu  biosintesis fukosantin, sehingga metode tersebut  bisa diaplikasikan untuk menaiknya produksinya.
Kata kunci : intensitas cahaya; produksi; fase stasioner; fukosantin

## PENDAHULUAN
Mikroalgae merupakan sumber
potensial  penghasil  nutrisi  yang  mudah diperbaharui karena pertumbuhannya cepat.  Nutrisi  ini  bisa  berbasis  sebagai suplemen  dalam  bentuk  biomassa  maupun ekstrak  murni  yang  mengandung  asam lemak  omega-3  dan  karotenoid  (Barkia  dan Saari, 2019). Fukosantin adalah salah satu dari anggota  keluarga  karotenoid.    Fukosantin banyak  diteliti  dan  dieksplorasi  karena memiliki beragam fungsi fisiologis dan biologis dalam  bidang  kesehatan,  yaitu  sebagai  : antikanker  (Kumar et  al .,  2013),  antiradang (Heo et  al .,  2010),  antiobesitas  dan  diabetes (Maeda et al ., 2009), antibakteri (Renhoran et al .,  2017),  maupun  antioksidan  (Nursid et  al ., 2012;  Foo et  al .,  2017;  Azizan et  al .,  2018). Fukosantin  adalah  salah  satu  pigmen  utama karotenoid  laut,  banyak  ditemukan  pada makroalgae  maupun  mikroalgae.    Diatom adalah  salah  satu  mikroalga    kaya karotenoid, keistimewanya adalah kandungan fukosantinnya yang tinggi (Kim et al .,  2012;  Wang et  al .,  2018).  Menurut Petrushkina et  al .,  2017,  diatom  merupakan sumber fukosantin potensial.  Kandungannya bisa  mencapai  lebih  dari  21.67  mg/g  (berat kering/ dry  weight ),  sehingga  menjadi  daya tarik untuk dikembangkan secara intensif.
Kultur C.  calcitrans bisa  dilakukan  di dalam  sebuah  fotobioreaktor  yang  diatur kondisi  medianya,  meliputi  :  suhu,  intensitas cahaya  dan  penambahan  nutrien  (N,  P,  Si, dan  vitamin  B)  (Krichnavaruk et  al., 2005). Toleransi  suhu  bisa  berada  pada  20 0 -30 0 C dan  salinitas  25-35‰  (Raghavan  dan Haridevi,  2008).  Intensitas  pencahayaaan juga  beragam  kisarannya,  40-200  μmol foton/m 2 /s . Intensitas  cahaya  yang  tinggi dapat  meningkatkan  pertumbuhan  dan
biomassanya  (Zhang et  a l.,  2017).  Metabolit yang teridentifikasi dalam ekstraknya meliputi : 11 macam asam amino, 1 kolesterol, 6 asam lemak,  2  gula,  6  karotenoid  (fukosantin, astasantin,  kantasantin,  lutein,  zeasantin, violasantin) dan 2 klorofil (a dan c 1 )(Azizan et al ., 2018).
Optimalisasi  kondisi  lingkungan  adalah suatu cara untuk meningkatkan produktivitas bimassa  dan  metabolit  sel  mikroalgae. Parameter  yang  berpengaruh  meliputi  :  pH, temperatur, cahaya, karbon dioksida, salinitas,  dan  nutrien  (Gatamaneni et  al ., 2018).  Intensitas  cahaya  merupakan  salah satu faktor penentu kehidupannya.  Intensitas cahaya biasa diukur dalam berbagai satuan: lux, foot-candles , maupun μmol m 2 /s . Masing- masing  bisa  saling  dikonversikan  dengan cara  mengalikannya  dengan  faktor  koreksi, sesuai  jenis  cahayanya.    Cara  konversi intensitas  cahaya  putih  dari  lampu  ( cool white fluorescent ) dari lux  ke μmol  m 2 /s yaitu mengalikannya  dengan  bilangan  0,0165 (Cycloptics,  2019).  Beberapa  penelitian sudah  dilakukan  dalam  budidaya C. calcitrans menggunakan  intensitas  cahaya yang  bervariasi.  Mulai  dari  intensitas  paling rendah, 16-40 μmol m 2 /s atau 969,70-2.424,24 lx  (Kotako  dan  Powtongsook,  2006),  80-240 μmol m 2 /s atau 4.848,49-14.545,45 lx (Akbarnejad et al ., 2017), 150 μmol m 2 /s atau 9.090,91 lx  (Foo et al ., 2015; Foo et al .,  2017), bahkan sampai 500 μmol m 2 /s atau 30.303,03 lx  (Raghavan  &  Haridevi,  2008).    Kesemua perlakuan  dapat  ditoleransi  dan  mikroalga dapat  tumbuh,  namun  respon  fisiologis  dan biokimia  berbeda-beda  (kepadatan  sel, biomasssa, dan metabolitnya.
Saat  ini,  optimalisasi  kultur C.  calsitrans digunakan  untuk  meningkatkan  produksi biomassa  yang  kaya  lipid  sebagai  pakan larva  udang/ikan  (Hemaiswarya et  al .,  2011;
Chilmawati  and  Suminto,  2016),  atau  bahan baku  biodiesel  (Kwangdinata et  al .,  2014; Pemanfaatan C . calsitrans sebagai  sumber fucosantin belum banyak dilakukan. Beberapa  genus  diatom  sudah  diteliti sebagai  sumber  fukosantin. Phaeodactylum sp.  bisa  menghasilkan  15,42-16,51  mg/g  dw ketika  dikultur  dengan  intensitas  cahaya 2.500  lx  (Kim et  al .,  2012). Chaetoceros calsitrans juga  termasuk  salah  satu  diatom yang biasa dibudidayakan. Chaetoceros sp. mampu  tumbuh  optimum  pada  pemberian cahaya  1000  lux,  mencapai  kepadatan  sel maksimum pada 7 hari  (Pal et al ., 2013) dan produksi  fukosantin  akan  meningkat  pada saat  memasuki  fase  stasioner  (Wang et  al ., 2018). Hasil penelitian sebelumnya mengungkapkan  bahwa  dalam  ekstrak metanol C.  calcitrans (hasil  kultur  pada  150 μmol    m 2 /s)  terkandung  karotenoid  sebesar 4,46  ±  0,36  mg/g  dw,  dan  2,08  ±  0,03  mg/g dw  berupa  fukosantin  (Foo et  al .,  2015), bahkan karotenoid bisa mencapai 6,13 ± 0,25 mg/g  dw,  dan  5,13  ±  0,19  mg/g  dw  berupa fukosantin  (Azizan et  al .,  2018).    Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengoptimasi    kultur C. calcitrans dengan  perlakuan  pemberian intensitas  cahaya  yang  berbeda  untuk meningkatkan produksi fukosantin.

## MATERI DAN METODE
Penanaman mikroalga dilakukan menggunakan akuarium 50 cm x 50 cm x  50 cm  berisi media kultur 60 liter. Masing-masing akuarium  diletakkan  pada  tempat  bersekat untuk mengatur intensitas cahaya. Perlakuan intensitasnya  (lux):  1000,  1500,  2000,  2500 dengan  2  kali  ulangan.  Desain  penelitian menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL).  Periode  pencahayaan  menggunakan 12  jam  terang  :  12  jam  gelap.  Sumber cahaya  menggunakan  lampu  TL  ( Tube Lamp ) 18 watt  (Philip; 59 V; 1015 lm) dan 20 watt  (  General  Electric;  50  V;  870  lm). Ketepatan  pengukuran  intensitas  cahaya diatur  berdasar  jarak  lampu  yang  terpasang di  atas  akuarium  dan  dipastikan  dengan instrumen  luxmeter.    Perhitungan  intensitas cahaya berdasar rumus Schiler (1992).
Kualitas  air  dijaga  agar  mikroalga dapat  tumbuh  dengan  normal.    Suhu  diatur pada kisaran 25-27 o C, salinitas 32-33‰, pH 8- 8,5, dan DO 7-9 mg/g. Setiap akuarium kultur
diberi  2  aerator  di  bagian  tengah,  dipasang dengan  posisi  menggantung    2  cm  dari dasarnya.  Nutrien  yang  ditambahkan  terdiri dari    3  macam,  pupuk  diatom  (komposisi: NaH 2 PO 4 5  g  +  KNO 3 75  g  +  Na 2 EDTA  5  g  + FeCl 3 3,15  g  dalam  1L  akuades),  vitamin (komposisi: B 1 100 mg dan B 12 5 mg dalam 1 L akuades),  dan  silikat  30  g/L.  Masing-masing diberikan  dengan  takaran  1  mL/L  media kultur  (BPBAP,  2017).    Setelah  media  kultur siap,  dilakukan  proses  inokulasi.  Kepadatan awal  3  x  10 6 sel/mL  dan  lama  kultur  14  hari (Sureshkumar et  al .,  2014;  Foo et  al .,  2015). Penghitungan  kepadatan  sel  menggunakan haemocytometer setiap  24  jam  (jam  09.00 WIB).  Pemanenan  menggunakan  metode flokulasi  dengan  penambahan  aluminium sulfat  (Al 2 (SO 4 ) 3 ),  dosisnya  0,2  g/L.  Biomassa diendapkan  selama  12  jam  dan  disaring menggunakan  kain  dengan meshsize 400 mikron  (Hidayati et  al .,  2015).  Sampel dikeringkan pada suhu ±40 0 C selama 24 jam. Klorofil  a  dan  fukosantin  diekstraksi menggunakan  etanol  p.a  (Merck)  berdasar metode  maserasi.  Sebanyak 0,1 g biomassa kering  dimaserasi  dengan  10  mL  pelarut (1:100  b/v)  pada  suhu  kamar  selama  24  jam dalam kondisi gelap. Filtrat dipisahkan setelah proses  sentrifugasi  3000  rpm  selama  5  menit dan
dilakukan
penyaringan dengan
Whatman no. 42.
Penentuan  konsentrasi  pigmen  (klorofil a dan fukosantin) berdasar metode Spektrofotometri menggunakan Spektrofotometer  UV-Vis  (Optima  SP.3000 Plus).  Absorbansi  diukur  pada  panjang gelombang  445,  632,  649,  663,  665,  dan  696 nm.    Penghitungan  kadar  klorofil  a  menurut Ritchie  (2008)  dan  fukosantin  menurut  Wang et al ., (2018).
Data  dianalis  menggunakan  Anova satu arah dengan selang kepercayaan 95 %. Jika  berbeda  nyata,  dilanjutkan  dengan  uji BNT.  Besar  pengaruh  variabel  perbedaan intensitas cahaya terhadap produksi fukosantin  diestimasi  menggunakan  regresi linier.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pemanenen  mikroalga  dilakukan  pada saat  fase  stasioner,  yaitu  2  hari  setelah puncak  fase  eksponensial.  Masing-masing perlakuan  intensitas  cahaya  menghasilkan
respon puncak pertumbuhan yang berbeda. Peningkatan
intensitas
menyebabkan kemunduran tercapainya puncak kepadatan sel,  sehingga  waktu  panennya  lebih  lama. Efek  positifnya,  meskipun  waktu  panennya relatif  lama,  tetapi  kepadatannya  juga  lebih tinggi (terlihat dalam Gambar 1). Kepadatan tertinggi  dicapai  pada  akuarium  yang  diberi intensitas  cahaya  2.500  lx,  yaitu  mencapai 54,00±4,00 x 10 5 sel/mL dengan lama kultur 12 hari.
Perbedaan
pemberian intensitas cahaya berpengaruh nyata terhadap kepadatan sel (p=0,01).
Tekanan peningkatan/penurunan intensitas  cahaya  tidak  akan  menghasilkan respon  fisiologis  dan  biokimia  yang  sama terhadap spesies mikroalga berbeda. Chaetoceros  calcitrans termasuk  yang mudah beradaptasi dan memberikan respon positif  pada  kondisi    intensitas  cahaya  tinggi (Zhang et  al .,  2017).    Respon  peningkatan intensitas  cahaya  sampai  2.500  lx  tidak ditanggapi dengan kenaikan berat biomassanya,  tetapi    dengan  peningkatan produksi  pigmennya,  baik  klorofil  a  maupun fukosantinnya.    Seperti  diketahui,  fungsi pigmen terutama karotenoid, adalah sebagai  pelindung  sel  saat  terkena  cahaya dengan  intensitas  tinggi.      Intensitas  cahaya berpengaruh nyata terhadap kadar klorofil a (p=0,00)  dan  fukosantin  (p=0,01),  sekaligus produksi  maupun  produktivitas  fukosantin (p=0.01) yang diperoleh dari total biomassanya  (seperti  tersaji  pada  Gambar  2 dan 3).
Fukosantin  adalah  karotenoid  polar, terdapat  beberpa  gugus  fungsi  dalam struktur  kimianya,  berupa  :  alkohol,  alkana, alkena,  ester,  metil,  dan  alkena  aromatik (Renhoran et  al .,  2017).  Etanol  merupakan pelarut  terbaik  untuk  mengekstrak  fukosantin dan bisa dilakukan  pada suhu ruang (Kim et al .,  2012).  Pelarut  lain  juga  biasa  digunakan, yaitu:  metanol,  aseton,  kloroform  dalam bentuk murni maupun dengan penambahan akuades.  Potensi  antioksidannya  berkorelasi positif  terhadap  kadar  karotenoidnya,  yang didominasi oleh fikosantin (Foo et al ., 2017). Karotenoid dari C. calcitrans
berkorelasi kuat terhadap aktivitas penangkalan  radikal  bebas  2,2- diphenyl-1- picrylhydrazyl (DPPH)  dan  penghambatan nitrat oksida (NO).  Produksi senyawa NO oleh sel makhluk hidup dipicu oleh oksidative stress (Azizan et  al .,  2018). Keunggulan  pigmen tersebut    menjadi  alasan  penting  untuk memanfaatkannya  sebagai  nutrisi  pangan sumber antioksidan alamiah.
Pengaruh  intensitas  cahaya  terhadap produksi fukosantin C. calcitrans pada kisaran 1.000-2.500  lx  sangat  signifikan  (p=0,01). Korelasi positif antara 2 variabel tersebut juga sangat  tinggi  (r=0,96).  Produksi  fukosantin ternyata  juga  berhubungan  erat  dengan kadar  klorofil  a  mikroalga  (r=0,81).  Kenaikan kadar  klorofil C.  calcitrans seiring  dengan kenaikan kadar fukosantin. Berdasar argumentasi  Azizan et  al .  (2018),  pigmen fotosintesis  dalam  diatom  terbagi  menjadi  2 kategori,  klorofil  dan  karotenoid.    Senyawa
Gambar 1 .  Pengaruh Perlakuan Intensitas Cahaya Terhadap Kepadatan Sel C. calcitrans (α = 0,05)
0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 70,00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 1.000 1.500 2.000 2.500 Kep a da ta n ( x 10 5 sel/ mL) La ma Ku ltu r ( h a ri) Intensitas Cahaya (lx) Masa Panen Kepadatan bc b ab a
Gambar 2 .  Pengaruh Perlakuan Intensitas Cahaya Terhadap Biomassa dan Kadar Pigmen C. calcitrans (α = 0,05)
Gambar 3 .  Pengaruh Perlakuan Intensitas Cahaya Terhadap Produksi dan Produktivitas Fukosantin C. calcitrans (α = 0,05)
(a)                                                                       (b) Gambar 4 . Korelasi  Intensitas Cahaya (a) dan Kadar Klorofil a (b) Terhadap Produksi   Fukosantin C. calcitrans .
yang  berperan  dalam  biosintesisnya  adalah geranyl-geranyl  diphosphate (GPP)  yang diderivasi menjadi geranyl-geranyl
pyrophosphate (GGPP).    Senyawa    GGPP bisa  digunakan  untuk  biosintesis  klorofil  dan karotenoid  berupa  likopen.    Selanjutnya,
0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 1.000 1.500 2.000 2.500 Intensitas Cahaya (lux) Ka da r Pi gm en ( mg /g dw ) Be ra t Bi oma ss a ( g D W ) Biomassa Klorofil a Fukosantin a 0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,00 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00 12,00 14,00 1.000 1.500 2.000 2.500
B e rat ( mg) /L me di a K u ltu r
Be rat ( mg dw ) Intenitas Cahaya (lx) Produksi Fukosantin Produktivitas Fukosantin y = 0,006x - 4,938 r = 0,96 0,00 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00 12,00 0 1.000 2.000 3.000 Produ ksi l F u kosa nt in ( mg) Intensitas Cahaya (lx) y = 9,336x - 3,478 r = 0,81 0,00 2,00 4,00 6,00 8,00 10,00 12,00 0,00 0,50 1,00 1,50 2,00 Produ ksi F u kosa nt in (mg) Kadar Klorofil a (mg g -1 dw) d c b ab c b a c bc ab a
likopen  dipakai  untuk  biosintesis  fukosantin oleh C . calcitrans .    Perkusor  GPP  sendiri adalah  asam  piruvat  dan  asetil  ko-a, senyawa  antara  dalam  reaksi  glikolisis.  Asam piruvat dan asetil ko-a adalah perkusor yang banyak  terlibat  dalam    biosintesis  metabolit primer  dan  sekunder.    Berdasar  asumsi tersebut,  glukosa  hasil  fotosintesis  dalam penelitian  ini  lebih  banyak  digunakan  untuk biosintesis  fukosantin  dibanding  pembentuk- an biomassanya.
Klorofil berperan dalam proses fotosintesis  yang  akan  menghasilkan  glukosa (C 6 H 12 O 6 ).  Glukosa  akan  digunakan  oleh berbagai  jalur  biosintesis,  baik  metabolisme primer berupa penyusunan biomassa (karbohidrat, protein,
lipid) maupun
metabolisme sekunder, termasuk pembentukan  pigmen.  Kadar  klorofil  a  dan fukosantin  pada C.  calcitrans yang  dikultur menggunakan  intensitas  cahaya  2.500  lx adalah  yang  tertinggi  di  antara  yang  lain, dapat diasumsikan bahwa fotosintesis berjalan paling baik.  Fungsi klorofil a (dibantu c sebagai pigmen asesoris) adalah menangkap  energi  matahari  berupa  foton, menggunakannya untuk energi reaksi terang (fotolisis).  Hasil reaksi terang berupa senyawa kaya energi (ATP dan NADPH) nantinya akan dipakai  untuk  menggerakkan  reaksi  gelap (siklus Calvin), yaitu memfiksasi (asimilasi) CO 2 menjadi glukosa. Saat fase stasioner, glukosa tidak  digunakan  untuk  peningkatan  produksi metabolit primer, terbukti tidak ada peningkatan berat biomassanya.
Peningkatan terjadi pada kadar pigmen, baik klorofil a maupun fukosantinnya.
Hasil penelitian ini membuktikan, bahwa peningkatan  intensitas  cahaya    bisa menaikkan  produksi  fukosantin.  Pemberian intensitas  cahaya  2.500  lx  menghasilkan produksi  fukosantin  tertinggi,  yaitu  sebesar 10,13  ±1,62  mg  dw  dengan  produktivitas sebesar 0,17±0,03 mg/L media kultur.  Produksi lebih  rendah  dihasilkan  oleh  kultur  dengan intensitas  2.000  lx,  disusul  1.500  lx  dan terendah  pada  1.000  lx,  secara  berurutan menghasilkan  7,31±2,19  ,  3,65±0,21  dan 1,32±0,20 mg dw.  Penelitian ini menghasilkan kadar  fukosantin  tertinggi  sebesar  0,17  mg/g dw  (  pada  2.500    lx  atau  41,25  μmol  m 2 /s), masih    lebih  rendah  dari  penelitian sebelumnya.    Foo et  al .  (2015)  mengkultur pada  150  μmol    m 2 /s,    kadar  fukosantinnya
sebesar  2,08  ±  0,03  mg/g  dw,  bahkan    hasil kultur  dari  Azizan et  al .    (2018)  mengandung 5,13 ± 0,19 mg/g dw  fukosantin.  Peningkatan intensitas  cahaya  masih  bisa  ditingkatkan guna  memacu  produksi  fukosantin.  Berdasar penelitian  Raghavan  &  Haridevi  (2008), C. calcitrans masih  mampu  hidup  pada intensitas cahaya sampai 500 μmol m 2 /s atau 30.303,03 lx.

## KESIMPULAN
Peningkatan  intensitas  cahaya  sampai 2.500  lx  pada  kultur C.  calcitrans skala medium (60 L) dapat meningkatkan produksi fukosantinnya.    Perlakuan  intensitas  cahaya tidak  berpengaruh  nyata  terhadap  berat biomassa (p=0,06), tetapi sangat berpengaruh nyata terhadap kepadatan sel (p=0,01), kadar klorofil (p=0,00), dan produksi fukosantin  (p=0,01).  Pemberian  intensitas cahaya  2.500  lx  menghasilkan  produksi fukosantin tertinggi,  yaitu  sebesar  10,13  ±1,62 mg  dw  dengan  produktivitas  sebesar 0,17±0,03  mg/g  media  kultur.    Kenaikan intensitas  cahaya  berkorelasi  positif  dengan kenaikan produksi fukosantin dengan persamaan  regresi    y  =  0,006x  -  4,938  (r  = 0,96).

## DAFTAR PUSTAKA
Akbarnejad, M., H. R. Islami., M. J. Babeli., M.S. Mehrgan,  &  Y.  Filizadeh  .  2017.  Effect  of Light and Nitrogen Concentration on the Growth  and  Lipid  Content  of  Marine Diatom  , Chaetoceros  calcitrans , Iranian J.    Fish.  Sci. ,  2017:1-9.  doi:  10.22092/ijfs. 2018.117035
Azizan,  A.,  Safwan,  M.,  Bustamam,  A., Maulidiani,  M.,  Shaari,  K.,.  Ismail,  I.S., Nagao,  N.  &  Abas,  F.  2018.  Metabolite Profiling  of  the  Microalgal  Diatom Chaetoceros  calcitrans and  Correlation with  Antioxidant  and  Nitric  Oxide Inhibitory  Activities. Mar.  Drugs, 16(154): 1-19.  doi: 10.3390/md16050 154
Barkia,  I.,  &  Saari,  N.  2019.  Microalgae  for High-Value  Products  Towards  Human Health  and  Nutrition, Mar.  Drugs , 17(304):1–29. doi: 10.3390/md17050304 Balai  Perikanan  Budidaya  Air  Payau  (BPBAP) Situbondo.  2017.  Petunjuk  teknis  Produksi phytoplankton. Dirjen Kelautan Perikanan
Budidaya, Kementrian Kelautan Perikanan, Jakarta.
Chilmawati, D. & Suminto. 2016.  The Effect of Different  Diet  of  Phytoplankton  Cells  on Growth  Performance  of  Copepod, Oithona sp. in Semi-Mass Culture. Aqua.
Proc.,
7:39–45. doi: 10.1016/j.aq pro.2016.07.005.
Cycloptics.  2019.  PPFD  Conversion  Guide. https://www.cycloptics.com/sites/default /files/Greenbeams%20PPFD%20Conversio n%20Tables_0.pdf  (diakses  pada  8  Agst 2019).
Foo,  S.C.,  Yusoff,  F.M.,  Ismail,  M.,  Basri,  M., Mun,  N.  &  Khong,  H.  2015.    Efficient Solvent  Extraction  of  Antioxidant-Rich
Extract from a Tropical Diatom,
Chaetoceros calcitrans (Paulsen) Takano 1968. Asian  Pacific  J.  Trop.  Biomed. , 5(10):834–840. doi: 10.1016/
j.apjtb.2015.06.003
Foo, S.C., Yusoff, F.M., Ismail, M., Basri, M., Yau,
S.K.,  Khong,  N.M.H.,  Chan,  K.W.  & Ebrahimi, M. 2017. Antioxidant Capacities of  Fucoxanthin-Producing  Algae  as Influenced  by  Their  Carotenoid  and Phenolic  Contents. J.  Biotechnol., 241: 175-183. doi: 10.10 16/j.jbiotec.2016.11.026
Gatamaneni,  G.L.,  Orsat,  V.  &  Lefsrud,  M.
2018.    Factors  Affecting  Growth  of Various  Microalgal  Species. Environ.  Eng. Sci. 35(10):1037-1048.
Hemaiswarya,  S.,  Raja,  R.,  Kumar,  R.R.,
Ganesan,  V.,  &  Anbazhagan,  C.  2011. Microalgae:  A  Sustainable  Feed  Source for  Aquaculture. World  J.  Microbiol. Biotechnol., 27(8):1737–1746. Heo,  S.J.,  Yoon,  W.J.,  Kim,  K.N.,  Ahn,  G.N.,
Kang,  S.M.,  Kang,  D.H.,  Affan,  A.,  Oh  C.,
Jung,  W.K.  &  Jeon,  Y.J.  2010.  Evaluation of Anti-inflammatory Effect of Fucoxanthin Isolated from Brown Algae in Lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 Macrophages. Food Chem. Toxicol. , 48:2045–2051. Hidayati, S., Nawansih, O. & Febiana, V. 2015. Teknik Pemanenan Mikroalga
Nannochloropsis  sp.  yang  dikultur  dalam media  limbah  cair  karet  remah  dengan Flokulan  Alumunium  Sulfat. J.  Teknol. Industri Hasil Pertanian , 20(2):1 –7.
Hu,  J.,  Nagarajan,  D.,  Zhang,  Q.,  Chang,  J.S.
& Lee, D.J. 2018. Heterotrophic
Cultivation  of  Microalgae  for  Pigment Production:  A  Review. Biotechnol.  Adv., 36(1):54–67.
Kim,  S.M.,  Jung,  Y.  &  Kwon,  O.    2012.    A
Potential Commercial Source of Fucoxanthin Extracted from the Microalga Phaeodactylum tricornutum a Potential Commercial Source of Fucoxanthin Extracted from the
Microalga Phaeodactylum  tricornutum . Appl.  Biochem. Biotechnol .,  166:1843– 1855. doi: 10.10 07/s12010-012-9602-2
Krichnavaruk,
S., Loataweesup, W., Powtongsook,  S.  &  Pavasant,  P.    2005. Effect of Light and Nitrogen
Concentration  on  the  Growth  and  Lipid Content of Marine Diatom, Chaetoceros calcitrans. Chem. Eng. J., 105:91-98.
Kumar,  S.R.,  Hosokawa,  M.  &  Miyashita,  K.. 2013.  Fucoxanthin: A Marine Carotenoid Exerting Anti-Cancer Effects by  Affecting Multiple Mechanisms. Mar. Drugs , 11:5130–5147. doi : 10.3390/md11125130 Kwangdinata,  R.,  Raya,  I.  &  Zakir,  M..  2014. Production  of  Biodiesel  from  Lipid  of Phytoplankton Chaetoceros  calcitrans hrough    Ultrasonic  Method. Sci.  World  J., 2014:1-5.
Maeda, H., Hosokawa, M. & Sashima, T. 2017. Anti-obesity  and  Anti-diabetic  Effects  of Fucoxanthin  on  Diet-induced  Obesity Conditions in a Murine Model. Mar. Drugs ,
2:897-902 doi: 10.3892/mmr Nursid,  M.,  Wikanta,  T.  &  Susilowati,  R.    2014. Aktivitas  Antioksidan,  Sitotoksisitas  dan Kandungan  Fukosantin  Ekstrak  Rumput Laut  Coklat  dari  Pantai  Binuangeun, Banten. J. Pascapan.  Bioteknol.  Kel. Perikan. ,  8(1):73-84.  doi:  10.15578/jpbkp. v8i1.55
Pal,  S.W.,  Singh,  N.K.  &  Azam,  K.  2013. Oceanography  and  Marine  Research Evaluation  of  Relationship  between  Light Intensity (Lu ) and Growth of Chaetoceros  muelleri , Oceanograp., 1(3):1–4. doi: 10.4172/2332-2632.100 0111 Raghavan,  G.  &  Haridevi,  C.K.  2008.  Growth and  Proximate  Composition  of  the Chaetoceros calcitrans f . pumilus Under Different  Temperature  ,  Salinity  and Carbon  Dioxide  Levels. Aquaculture
Research , 39: 1053–1058.
doi: 10.1111/j.1365-2109.2008.01964.x Renhoran, W., Noviendri, D., Setyaningsih, I. &
Uju. 2017. Ekstraksi
dan
Purifikasi Fukosantin  dari Sargassum sp.  sebagai Anti-Acne. J.  Pengolahan  Hasil  Perikan. Ind. ,  20(2):370-379.  doi  :  10.17844/jphpi. v20i2.18105
Ritchie, R.J. 2008. Total Chlorophylls in Natural
Assemblages of Photosynthetic
Organisms Using Acetone , Methanol , or Ethanol  Solvents. Photosynthetica ,    46
(1):115-126. doi: 10.1007/s11099-008-0019- 7
Schiler,  M.  1992.  Simplified  Design  of  Building Lighting,  John  Wiley  and  Sons  inc.  New York.
Sirin,  S.,  Clavero,  E.  &  Salvado,  J.  2015. Efficient  Harvesting  of Chaetoceros calcitrans for  Biodiesel  Production. Environ. Technol., 36(15):1902–1912 Sureshkumar,  S.,  Jasmin.  B.,  Rahiman,  K.M.M.
&  Mohammed,  A.A.H.  2014.    Growth
Enhancement of Microalgae Chaetoceros calcitrans and
Nannochloropsis  oculata Using  Selected Bacterial  Strains. Int.  J.  Curr.  Microbiol. App. Sci. , 3(4): 352-359.
Wang,  L.,  Fan,  Y.,  Parsons,  R.L.  ,  Hu,  G.  & Zhang,  P.  2018.  A  Rapid  Method  for  the Determination  of  Fucoxanthin  in  Diatom. Mar.  Drugs, 16(33):1–13.  doi:  10.3390/md 16010033
Ye,  Z.W.,  Jiang,  J.G.  &  Wu,  G.H.    2008.
Biosynthesis and Regulation of
Carotenoids in Dunaliella: Progresses and Prospects. Biotechnolog. Adv. , 26(4): 352– 360.  doi:  10.1016/j.biotechadv.  2008.03. 004
Zhang, R., Kong, Z.,  Chen, S., Ran, Z., Ye, M.,
Xu, J., Zhoub, C., Liaoa, K., Cao, J. & Yan, X.    2017.  The  Comparative  Study  for Physiological and Biochemical Mechanisms of Thalassiosira pseudonana and Chaetoceros  calcitrans in  Response to  Di  fferent  Light  Intensities. Algal Res. , 27: 89–98. doi: 10.1016/j.algal.2017.08.0 26