Jurnal Peternakan Terapan (PETERPAN) Vol. 4 (2):38—44
eISSN Online : 2721-2599 https://jurnal.polinela.ac.id/index.php/PETERPAN/index

## Efektifitas  Penambahan  Curd  Kefir  terhadap  Mutu  Sabun  dan  Daya Hambat  Pertumbuhan  Escherichia  coli  pada  Sabun  Alami  Berbahan Dasar Tallow
The  Effectiveness  of  Kefir  Curd  Addition  on  Soap  Quality  and  Growth Inhibition of Escherichia coli in Tallow-Based Natural Soap
D T Marya * , A Sofiana, dan N A Usman
Jurusan Peternakan, Politeknik Negeri Lampung, Jl. Soekarno Hatta No.10, Rajabasa, Bandar Lampung, 35144
* E-mail: dinatrimarya@polinela.ac.id
Abstract: The ban on using triclosan as an antiseptic in bath soap in various countries has given  rise  to  new  ideas  to  apply  natural  ingredients  as  an  alternative.  Curd  kefir,  as  a natural ingredient, can be used as an alternative antiseptic. In this study, the manufacturing of tallow-based soap has been developed by adding kefir curd as an antiseptic to improve the soap's  quality  and  inhibit  the  growth  of  Escherichia  coli.  The  research  method  used  was laboratory  experimental  and  analyzed  descriptively.  The  soap  quality  test  showed  that  the higher the kefir curd concentration added, the softer the soap characteristics. The inhibition test results on the growth of Escherichia coli bacteria showed that adding and increasing the concentration of kefir curd in tallow soap could increase the inhibition ability.
Keywords: Curd kefir, Escherichia coli, natural soap, triclosan, tallow.
Diterima: 4 November 2022 , disetujui 20 Desember 2022

## PENDAHULUAN
Secara  tidak  sadar  tangan  seringkali  menjadi  bagian  dari  rantai  penularan  penyakit.  Oleh  karena  itu, kampanye  untuk  lebih  sering  mencuci  tangan  tidak  dapat  dilepaskan  dari  gerakan  hidup  sehat.  Maraknya himbauan  untuk  terus  menjaga  kebersihan  tangan  dapat  dilihat  dari  tersedianya  tempat  mencuci  tangan ataupun handsanitizer di  berbagai  fasilitas  umum  maupun  pusat  perbelanjaan.  Namun  disisi  lain,  mencuci tangan  terlalu  sering  juga  dapat  menyebabkan  dampak  negatif  bagi  kesehatan  kulit,  seperti  iritasi,  kulit menjadi kering dan kehilangan kelembapan.
Salah  satu  penyakit  yang  sering  terjadi  dari  tercemarnya  makanan  akibat  tangan  yang  kotor  adalah infeksi  gastrointestinal,  dimana  salah  satu  indikatornya  adalah  bakteri Escherichia  coli .  Produk  sabun antiseptik  diklaim  memiliki  kemampuan  yang  lebih  kuat  dalam  menghambat  mikroorganisme  patogen dibandingkan sabun biasa. Umumnya pada sabun antiseptik ditambahkan beberapa zat aktif, seperti triclosan dan triclocarban .  Beberapa  negara  di  Eropa  telah  melarang  penggunaan triclosan dalam  sabun,  pencuci tangan  atau handsanitizer yang  dijual  secara  bebas  di  pasaran.  Amerika  Serikat  juga  baru-baru  ini mengeluarkan  larangan  penggunaan  kandungan triclosan dalam  berbagai  produk.  Indonesia  sendiri memperbolehkan  penggunaan triclosan tidak  lebih  dari  0,3%  (Marhamah et  al. ,  2019).    Auliani  (2013) menyatakan bahwa, bahan triclosan yang biasa digunakan dalam sabun antiseptik telah dikaitkan dengan isu- isu kesehatan termasuk resistensi antibiotik, alergi, dan gangguan pada sistem hormon mamalia. Berdasarkan
hal-hal  tersebut  maka  dibutuhkan  bahan  alternatif  yang  tidak  hanya  mampu  meningkatkan  kemampuan sabun dalam menghambat mikroorganisme patogen tetapi juga  mampu merawat kesehatan dan kelembapan kulit.
Beberapa  laporan  telah  menyebutkan  manfaat  kefir  bagi  kesehatan  kulit  yang  disebabkan  oleh senyawa  bioaktif  yang  terkandung  di  dalamnya  yang  diketahui  memiliki  kemampuan  dalam mempertahankan kelembapan kulit serta merawat kesehatan kulit (John dan Deeseenthum, 2015). Susu yang difermentasi menjadi produk kefir memiliki potensi untuk digunakan sebagai sumber agen antibakteri alami (Wulansari et al. , 2018).
Mutu  sabun  dipengaruhi  oleh  komponen-komponen  asam  lemak  yang  terkandung  dalam  lemak ataupun minyak yang digunakan sebagai bahan baku dalam proses pembuatannya (Sari et al. , 2010). Tallow adalah lemak hewani yang merupakah produk samping dari industri pengolahan daging, yang tersedia dalam jumlah  melimpah  dan  masih  minim  ketermanfaatannya. Tallow dapat  dipisahkan  dengan  cara rendering untuk  kemudan  diolah  menjadi  lemak  yang  siap  digunakan  untuk  pembuatan  sabun. Tallow mengandung sejumlah  asam-asam  lemak  yang  mendukung  fungsi  perlindungan  kulit,  meningkatkan  kelembapan  dan mencegah  kekeringan.  Pembuatan  sabun  berbahan  dasar tallow yang  dikombinasikan  dengan curd  kefir belum  dikembangkan  dan  dipublikasikan.  Oleh  karena  itu  dalam  studi  ini,  akan  diamati  efektifitas penambahan curd kefir terhadap karakteristik mutu sabun dan daya hambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli pada sabun alami berbahan dasar tallow .

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Penelitian ini menggunaakan  bahan  baku  NaOH  dan lemak,  yang  merupakan  kombinasi  antara curd kefir dan lemak (campuran tallow sapi dan minyak nabati dengan komposisi tertentu). NaOH dalam bentuk butiran  padat  (kualitas  teknis)  dibeli  dari  PT.  Brataco  Bandar  Lampung. Tallow sapi  diperoleh  dari  pasar tradisional  Rajabasa  Bandar  Lampung. Curd  kefir diperoleh  melalui  fermentasi  susu  kambing.  Minyak kelapa (Barco), minyak sawit goreng (Tropical), dan minyak kedelai (Mazola) dibeli dari toko swalayan di sekitar Bandar Lampung.
Peralatan yang digunakan pada penelitian ini terdiri dari mixer (Philip), pH meter, gelas ukur, tabung reaksi, vortex , neraca analitik, moisture analyzer , nutrien agar (NA) dan biakan bakteri Escherichia coli .

## Preparasi Tallow
Tallow diperoleh dengan cara mencairkan lemak sapi pada 90 o C selama 1 hingga 2 jam. Lemak yang telah mencair kemudian dipisahkan dari kotoran melalui penyaringan. Lemak yang telah bersih akan menjadi padat setelah mengalami pendinginan hingga suhu ruangan.

## Preparasi Curd Kefir
10% grain kefir ditambahkan pada susu kambing yang sebelumnya telah dipasteurisasi melalui metode high temperature short time (HTST) dan selanjutnya diinkubasi selama 48 jam. Curd kemudian dipisahkan dari whey kefir menggunakan kain kasa bersih, lalu ditiriskan.

## Pembuatan Sabun
Sabun  padat  diproduksi  dengan  menggunakan  metode cold  process yang  telah  dimodifikasi. Curd kefir dimasukkan  setelah  bahan-bahan  lainnya  homogen  dan  mendekati trace .  Setelah  mencapai trace , adonan dicetak dan didiamkan selama 24 jam (sampai menjadi padat dan keras) kemudian dikeluarkan dari cetakan.  Sabun  yang  dihasilkan  disimpan  di  rak  terbuka  pada  suhu  ruang  dan  disimpan  selama  2  minggu
untuk  kemudian  dilakukan  analisis.  Formulasi  dan  komposisi  bahan  pembuatan  sabun  dapat  dilihat  pada Tabel  1.  Dalam  pembuatan  sabun  pada  setiap  formulasi,  digunakan  larutan  NaOH  30%  dengan  cara melarutkan  NaOH  padat  ke  dalam  akuades.  Rasio  lemak  dan  larutan  NaOH  pada  setiap  formulasi  adalah 2.33.
Tabel 1. Formulasi Sabun Padat Berbahan Dasar Tallow Komponen F0 F1 F2 F3 Tallow sapi (%) 50 52 52 52 Minyak kelapa (%) 12 12 12 12 Minyak sawit (%) 6 6 6 6 Minyak kedelai (%) 32 30 30 30 Total (%) 100 100 100 100 Curd kefir (%) 0 2 4 6

## Karakterisasi Mutu Sabun

## Bilangan penyabunan
Sampel  sabun  ditimbang  sebanyak  2  g  kemudian  dicampurkan  dengan  25  ml  larutan  KOH  0,5  N. Campuran  direfluks  selama  30  menit  kemudian  didinginkan  dan  ditambahkan  indikator  phenolptalein. Campuran dititrasi dengan HCl 0.1 N dan volume larutan HCl yang terpakai dicatat. Titrasi blanko dilakukan dengan  prosedur  yang  sama.  Bilangan  penyabunan  kemudian  dihitung  dengan  persamaan  menggunakan persamaan 1 (Sukeksi et al. , 2017).
P = Cl × (V b – V a ) × TF × W (1)
P  =  bilangan  penyabunan; V b =  volume titrasi blanko  (mL);  P =  bilangan  penyabunan  V b =  volume titrasi blanko  (mL);  V a =  volume  titrasi  (mL);  Cl  =  koefisien  konversi  konsentrasi  (28,05);  TF  =  faktor  reagen (1,006); dan W = berat sampel (g).

## Bilangan iodin
Penentuan bilangan iodin dilakukan dengan menggunakan metode Wijs. Sampel ditimbang sekitar 0,5 – 0,4 g, kemudian dimasukkan kedalam erlenmeyer tertutup. Sebanyak 10 mL klorofom dan 30 mL larutan iod  kemudian  ditambahkan  ke  dalam  sampel.  Larutan  disimpan  selama  30  menit  di  tempat  gelap. Selanjutnya  ditambahkan  10  mL  KI  15  %  dan  100  mL  aquadest.  Larutan  dititrasi  dengan  Na 2 S 2 O 3 0,1  N sampai  warna  kekuning-kuningan.  Tambahkan  1-2  mL  indicator  amilum  lalu  dilanjutkan  titrasi  sampai warna  kuning  hilang.  Hal  yang  sam  dilakukan  pada  larutan  blanko.  Catat  volume  Na 2 S 2 O 3 0,1  N  yang digunakan untuk titrasi dan dihitung bilangan iodin sesuai persamaan (2):
Bilangan iodin = [(B – S) × N × 12,69]/W (2)
B = volume blanko (mL); S = volume sampel (mL); W = berat sampel (g).

## Nilai iodine number saponification (INS)
INS  diperoleh  dari  suatu  faktor  yang  dinyatakan  sebagai  nilai  hasil  pengurangan  angka  penyabunan (SAP) terhadap bilangan iodin (Retnowati et al. , 2013).

## Uji hambat bakteri
Pengujian daya hambat terhadap bakteri dilakukan dengan metode difusi cakram menggunakan media nutrien  agar  (NA).  Media  nutrien  agar  dibuat  dengan  cara  melarutkan  20  g  media  kedalam  1  L  aquades kemudian  dipanaskan  sambil diaduk  kemudian  dimasukkan  kedalam  autoclave  selama 15 menit pada  suhu ±121°C. Selanjutnya, media dituang kedalam cawan petri. Sebanyak 0,1 mL koloni bakteri disebarkan pada media  NA.  Disk  cakram  yang  telah  dimasukkan  kedalam  sampel  kemudian  diletakkan  pada  media  dan disimpan  kedalam  inkubator  pada  35°C  secara  terbalik  dan  ditunggu  selama  ±24  jam.  Hasil  zona  bening diantara  disk  cakram  diukur  diameternya  sebagai  zona  hambat  sampel  terhadap  bakteri  (Wulansari  dan Wijayanti, 2020).

## Analisis statistik
Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah  metode  eksperimental  laboratorium  dengan  menggunakan analisis deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Karakteristik Mutu Sabun
Bilangan  penyabunan didefinisikan  sebagai  jumlah  (mg)  NaOH  yang  dibutuhkan  untuk menyabunkan  minyak  atau  lemak.  Angka  bilangan  penyabunan  yang  tinggi  menunjukkan  semakin  banyak NaOH yang digunakan, semakin sedikit jumlah NaOH yang tidak  bereaksi sehingga kadar alkali bebas yang dihasilkan  juga  rendah.  Nilai  bilangan  penyabunan  pada  sabun tallow tanpa  penambahan curd  kefir dan dengan  penambahan  2%,  4%  dan  6%  menunjukkan  angka  yang  tidak  berbeda.  Hal  ini  disebabkan  karena pada  tiap  perlakuan  menggunakan  formulasi  dengan  jumlah  NaOH  yang  sama  pada  setiap  perlakuan sehingga  tidak  mempengaruhi  angka  penyabunan.  Bilangan  penyabunan  pada  penelitian  ini  sesuai  dengan standar SNI 06-3532-1994 untuk bilangan penyabunan yaitu 196-206 (BSN, 1994).

## Tabel 2. Karakteristik Mutu Sabun
Parameter 0 2 4 6 Bilangan penyabunan (mg NaOH/g) 205 205 205 205 Bilangan iodin (g Iod/100g) 65 66 66 67 INS 140 139 139 138
Bilangan  iodin  didefinisikan  sebagai  banyaknya  (gram) iod yang  mampu  diserap  oleh  100  g  lemak atau  minyak. Angka  bilangan  iod dapat  menunjukkan  derajat  ketidakjenuhan  dari  minyak  atau  lemak. Semakin  tinggi  angka  bilangan  iodin  maka  akan  semakin  lunak  karakteristik  sabun  yang  dihasilkan.  Pada Tabel  2  dapat  dilihat  bahwa  terdapat  perbedaan  angka  iodin  antara  sabun tallow tanpa  penambahan kefir dengan  sabun tallow dengan  penambahan kefir berbagai  konsentrasi.  Sabun tallow dengan  penambahan persentase curd  kefir tertinggi  memiliki  angka  bilangan  iod  tertinggi  sedangkan  sabun tallow tanpa penambahan curd kefir memiliki angka bilangan iod terendah.
Penurunan  angka  bilangan  iodin  dapat  dipengaruhi  oleh  tingkat  hidrolisis  yang  terjadi  pada  bahan baku selama penyimpanan sehingga ikatan rangkap ada yang putus, selain itu proses hidrolisis dapat terjadi karena keterlibatan air dalam bahan baku. Curd kefir yang ditambahkan memiliki banyak komponen bukan lemak  seperti protein  3,5%,  abu  0,6%,  laktosa  4,5%,  lemak  1,5%  dan  air  dengan  nilai  pH  4,6 sehingga berpengaruh pada tingkat hidrolisis dan angka iodin yang dihasilkan.
Nilai iodine number saponification (INS) dapat menggambarkan mutu sabun berupa tingkat kekerasan dan  kemampuan  membentuk  busa.  Semakin  tinggi  angka  INS  maka  semakin  keras  tekstur  sabun  yang dihasilkan  dan  sebaliknya.  INS  dinyatakan  sebagai  nilai  pengurangan  angka  penyabunan  (SAP)  terhadap bilangan iodin. Nilai INS untuk campuran minyak ataupun lemak sebagai bahan baku sabun berkisar antara 15-250  (Retnowati et  al .,  2013).  Sifat  sabun  yang  dihasilkan  tergantung  pada  jenis  asam  lemak  yang digunakan  (Febriyenti et  al. ,  2014).  Untuk  mendapatkan  mutu  sabun  dengan  tekstur  yang  lebih  baik  maka dalam  penelitian  ini  dilakukan  formulasi  sabun menggunakan  tambahan kombinasi minyak  nabati  (minyak kelapa,  minyak  sawit  dan  minyak  kedelai).  Berbanding  terbalik  dengan  angka  bilangan  iodin,  angka  INS pada  penelitian  ini  menunjukkan  nilai  yang  semakin  rendah  seiring  dengan  meningkatnya  persentase curd kefir .  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  sabun tallow dengan  penambahan curd  kefir tertinggi  memiliki  tekstur yang lebih lunak dibanding sabun lainnya. Hal ini serupa  dengan penelitian  (Retnowati et al. , 2013), yaitu penambahan  asam sitrat  (pH  4)  sebanyak  2%  dapat menurunkan  pH  sabun  dari  10,2  menjadi  9,8 dan  juga menurunkan  tingkat  kekerasan  sabun.  Pada  penelitian  ini  penambahan curd  kefir pH  4  mampu mempengaruhi  angka  bilangan  iodin  dan  INS  sehingga  tekstur  sabun  semakin  lunak  seiring  dengan penambahan dan peningkatan konsentari curd kefir .

## Uji Daya Hambat
Pada  Tabel  3  dapat  dilihat  bahwa  sabun  padat  berbasis tallow tanpa  penambahan kefir memiliki kemampuan dalam menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli. Hal ini ditandai dengan terbentuknya zona hambat (bening) di sekitar disk, zona hambat ini diukur diameternya dalam satuan milimeter (Gambar 1). Sabun bersifat ampifilik, yaitu pada bagian kepalanya memiliki gugus hidrofilik (polar), sedangkan pada bagian  ekornya  memiliki  gugus  hidrofobik  (nonpolar)  (Nurhadi,  2012).  Gugus  hidrofobik  akan  mengikat molekul lemak dalam hal ini dinding sel bakteri yang kemudian akan ditarik oleh gugus hidrofilik yang dapat larut di dalam air.
Tabel 3. Uji Hambat Pertumbuhan Escherichia coli pada Sabun Berbasis Tallow pada Tiap Formulasi Formula Rata-rata diameter daya hambat (mm) F0 7,48±0,07 F1 15,33±0,04 F2 16,73±0,02 F3 19,13±0,05
Kemampuan  hambat  meningkat  seiring  dengan  penambahan  persentase curd  kefir .  Hal  ini membuktikan  bahwa  penambahan curd  kefir dalam  sabun  dapat  meningkatkan  daya  hambat  pertumbuhan bakteri Echerichia  coli. Makin  tinggi  konsentrasi  curd,  maka  makin  luas  diameter  zona  hambat  yang terbentuk. Menurut Davis dan Stout (1971), kriteria kekuatan daya antibakteri sebagai berikut: diameter zona hambat 5 mm atau kurang dikategorikan lemah, zona hambat 5- 10 mm dikategorikan sedang, zona hambat 10-20  mm  dikategorikan  kuat  dan  zona  hambat  20  mm  atau  lebih  dikategorikan  sangat  kuat.  Berdasarkan kriteria  kemampuan  daya hambat  tersebut, maka  sabun  padat  berbasis tallow tanpa  penambahan curd  kefir termasuk  kriteria  zona  hambat  sedang,  dan  sabun kefir yang  diberi  tambahan curd  kefir pada  berbagai konsentrasi memiliki kriteria zona hambat kuat terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli.
Salah  satu  senyawa  antibakteri  yang  dihasilkan  oleh  mikrobia  yang  ada  didalam kefir adalah bakteriosin  (Rantono  dan  Jusnita,  2020).  Senyawa  antibakteri  yang  terkandung  didalam  kefir  memberikan aktivitas  maksimum  dalam  menghambat  bakteri,  hal  ini  diduga  karena  sifat  hidrofilik  dari  sabun menyebabkan  senyawa  antimikroba  mampu  berdifusi  dalam  medium  agar  yang  bersifat  polar,  sedangkan
sifat  lipofilik  sabun  akan  membantu  penetrasi  senyawa  antibakteri  ke  dalam  membran  sel  yang  bersifat lipofilik (Febriyenti et al. , 2014).
Gambar 1. Uji hambat bakteri Escherichia coli pada sabun padat berbasis tallow pada empat formulasi.

## KESIMPULAN
Sabun  padat  berbasis tallow dengan  penambahan curd  kefir dapat  meningkatkan  karakteristik  mutu sabun dan daya hambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli.

## DAFTAR PUSTAKA
Auliani,  P.  A.,  2013. FDA:  Sabun  Antiseptik  Tak  Ampuh  Bunuh  Kuman. https://health.kompas.com [12 October 2022].
Badan  Standarisasi  Nasional  [BSN].  1994. SNI  06-3532-1994. Jakarta.  Badan  Standarisasi  Nasional. http://sispk.bsn.go.id [17 March 2022].
Davis,  W.  W.  dan  Stout,  T.  R.,  1971.  Disc  plate  method  of  microbiological  antibiotic  assay:  I.  Factors influencing variability and error. Applied Microbiology, 22(4): 659-665.
Febriyenti,  Sari,  L.  I.  dan  Nofita,  R.,  2014.  Formulasi  sabun  transparan  minyak  Ylang-Ylang  dan  uji efektivitas terhadap bakteri penyebab jerawat. Jurnal Sains Farmasi & Klinis, 1(1): 61-71.
John, S. M. dan Deeseenthum, S., 2015. Properties and benefits of kefir -A review. Songklanakarin Journal of Science and Technology, 37(3): 275-282.
Marhamah, Ujiani, S., dan Tuntun, M., 2019. Kemampuan sabun antiseptik cair yang mengandung Triclosan yang  terdaftar  di  BPOM  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli . Jurnal Kesehatan, 10(1): 17-24.
Nurhadi,  S.  C.,  2012.  Pembuatan  Sabun  Mandi  Gel  Alami  dengan  Bahan  Aktif  Mikroalga  Chlorella pyrenoidosa  Beyerinck  dan  Minyak  Atsiri  Lavandula  latifolia  Chaix. Skripsi. Malang:  Universitas Ma Chung.
Rantono,  S.  dan  Jusnita,  N.,  2020.  Uji  aktivitas  antibakteri  kefir  susu  kambing  terhadap  bakteri
Propionibacterium acnes . Indonesia Natural Research Pharmaceutical Journal, 5(2): 20-30.
Retnowati, D. S., Kumoro, A. C., Ratnawati, dan Budiyati, C. S., 2013. Pembuatan dan karakterisasi sabun susu dengan proses dingin. Jurnal Rekayasa Proses, 7(2): 46-51.
Sari, T. I., Herdiana, E., dan Amelia, T., 2010. Pembuatan VCO dengan metode enzimatis dan konversinya menjadi sabun padat transparan. Jurnal Teknik Kimia, 17(3): 50-58.
Sukeksi, L., Sidabutar, A. J., dan Sitorus, C., 2017. Pembuatan sabun dengan menggunakan kulit buah kapuk ( Ceiba petandra ) sebagai sumber alkali. Jurnal Teknik Kimia USU, 6(3): 8-13.
Wulansari, P. D., Rahayu, N., dan Ardigurnita, F., 2018. The Potential of concentrate of fermented milk for natural antibacterial. Bulletin of Animal Science, 42(3): 238-243.
Wulansari, P. D. dan Wijayanti, D., 2020. Karakteristik fisik, kimia dan mikrobiologi sabun susu kambing. Jurnal Pangan dan Agroindustri, 8(3): 145-153.