SENYAWA TRITERPENOID DARI EKSTRAK N -HEKSANA DAUN KELOR ( Moringa oleifera Lamk.) DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI TERHADAP
Staphylococcus aureus Dan Escherichia coli
Triterpenoid Compound From n -Hexane Extract of Kelor Leaves ( Moringa oleifera Lamk.) And Antibacterial Activity Test Against Staphylococus aureus and Escherichia coli
Yuszda Salimi 1 , Nurhayati Bialangi 1 , Widysusanti Abdulkadir 2 , Boima Situmeang 3*
1 Department of Chemistry, Faculty of Mathematic and Natural Science, Gorontalo State University
2 Department of Pharmacy, Faculty of Sport and Natural Healty, Gorontalo State University
3 Department of Chemistry, Sekolah Tinggi Analis Kimia Cilegon, Banten
*Corresponding author, e-mail: boimatumeang@gmail.com
Received: Jan. 2019 Published: Jul. 2019

## ABSTRACT
Kelor  plant  (Moringa  oleifera  Lamk)  is  a  natural  nutrient  source  plant  in  the  tropics.  Moringa  oleifera  Lamk leaves  are  widely  reported  as  natural  antioxidants  and  anitbacterial.  The  purpose  of  this  study  was  to  isolate triterpenoid  compound  from  n-hexane  extract  of  kelor  leaves.  The  sample  extraction  was  performed  by maceration  method  using  methanol  as  a  solvent.  Fractionation  used n -hexana  and  etil  asetat  as  a  solvent.  The separation  and  purification  of  the  compound  was  carried  out  by  column  chromatography  method  followed  by stain pattern analysis with thin layer chromatography (TLC). Characterization and elucidation of pure compound structures  using  IR, 1 H-NMR, 12 C-NMR,  HSQC,  HMBC,  and 1 H- 1 H  COSY,  and  compared  with  various literatures.  Based  on  the  result  of  structural  elucidation,  the  pure  isolate  obtained  is  a  pentacyclic  triterpenoid group  compound  with  the  molecular  formula  C 30 H 50 O  and  the  name  of  3-hydroxy,  20  (29)  -en,  lupenol.  The triterpenoid compound of 3-hidroxy, 20 (29)  -en, lupenol is the first isolated and reported from leaves of kelor plant.
Keywords : Kelor, triterpenoid , Esherichia coli, Staphylococcus aureus.

## PENDAHULUAN
Indonesia memiliki sumber daya alam yang berlimpah  dan  mengandung  jutaan  senyawa kimia.  Senyawa  kimia  berpotensi  mengobati penyakit dan ada yang berpotensi sebagai racun. Tumbuhan  dapat  berpotensi  sebagai  pengobatan penyakit karena mengandung senyawa metabolit sekunder.  Seiring  dengan  kemajuan  ilmu pengetahuan  dan  teknologi  dalam  bidang  kimia organik terbukti bahwa tumbuh-tumbuhan tertentu  mengandung  senyawa  kimia  yang penting bagi kesehatan manusia (Situmeang dkk, 2018).
Salah  satu  contoh  tumbuhan  yang  biasanya digunakan sebagai pengobatan tradisional adalah tumbuhan kelor. Masyarakat Indonesia khususnya  masyarakat  pedesaan  telah  lama memanfaatkan kelor baik sebagai obat tradisional,  sebagai  sayuran,  maupun  makanan ternak.  Keberadaan  tumbuhan  kelor  sangat
mudah  didapatkan  di  seluruh  wilayah  Indonesia tidak  terkecuali  di  daerah  Gorontalo.  Salah  satu bagian tumbuhan kelor yang banyak dikonsumsi dan  memiliki  banyak  manfaat  adalah  bagian daun (Madrona dkk., 2015; Isnan dan Nurhaedah, 2017).
Penelitian  tentang  daun  kelor  dilaporkan Chukwuebuka, (2015) menunjukkan bahwa hasil skrining  fitokimia  dari  daun  kelor  mengandung senyawa  metabolit  sekunder  di  antaranya terpenoid,  flavonoid,  alkaloid,  steroid,  tanin, saponin,  dan  antrakuinon. Selain  itu,  Salimi  dkk (2017),  dari  hasil  penapisan  fitokimia  ekstrak metanol  dan  fraksi n -heksana  daun  kelor mengandung  senyawa  triterpenoid,  flavonoid, dan  steroid.  Marcus  dan  Nwineewii,  (2015) melaporkan hasil data Infra red (IR) menunjukkan  ekstrak n -heksana  mengandung terpenoid. Hasil penelitian tersebut membuktikan  bahwa  daun  kelor  mengandung
senyawa  metabolit  sekunder  dan  salah  satunya adalah senyawa triterpenoid.
Gambar 1 Senyawa 3-hidroksi, 20 (29) -en, lupenol
Penelitian  yang  dilaporkan Napolean dkk,
(2009) daun kelor berpotensi sebagai antimikroba,  antikolesterol,  antiinflamatori  dari fraksi organik. Selain itu, Siddhuraju dan Becker, (2003)  dari  hasil  uji  aktivitas  penangkapan radikal 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH) fraksi n-heksana dan  fraksi  etil  asetat  membuktikan bahwa  aktivitas  penangkapan  radikal  bebas cukup  tinggi  pada  fraksi  yang  non  polar  (fraksi n -heksana).  Sejalan  dengan  penelitian  tersebut Agboke  dan  Attama (2016)  melaporkan  bahwa ekstrak  n-heksana  moringa  oleifera  dapat menghambat Staphylococcus Aureus . Berdasarkan  hasil  penelusuran  pustaka,  belum ada  penelitian  yang  melaporkan  kandungan senyawa kimia dari fraksi n -heksana daun kelor. Berdasarkan  penelitian  fraksi n -heksana  daun kelor maka perlu dilakukan isolasi senyawa aktif antimikroba  fraksi n -heksana  dan  uji  aktivitas terhadap  bakteri Staphilococus  aureus dan Escherichia coli.

## METODOLOGI

## Alat
Peralatan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  meliputi:  maserator,  evaporator,  pipa  kapiler untuk  KLT,  kolom  kromatografi,  kapas  lidi, jangka  sorong, autoclave dan laminar  air  flow . Pemantauan pemisahan dan pemurnian  senyawa dilakukan dengan kromatografi lapis tipis (KLT) dengan lampu detektor UV  λ 254 dan 365 nm. Karakterisasi  senyawa  murni  menggunakan  alat spektrofotometer  meliputi  spektrometer  infra merah  (IR), 1 H-NMR, 13 C-NMR, 1 H- 1 H  COSY,
HSQC,  dan  HMBC  di  Laboratorium  Kimia FMIPA Institut Teknologi Bandung.

## Bahan
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah  sampel  daun  tumbuhan  kelor  yang diambil  dari  Desa  Barakati,  kecamatan  Batudaa, Gorontalo.  Bahan  kimia  yang  digunakan  terdiri dari n -heksana  (redes),  etil  asetat  (redes), metanol (redes), metanol (p.a), etanol (p.a), silika gel G60 untuk kromatografi kolom dan silika gel GF 254 untuk kromatografi lapis tipis, H 2 SO 4 10% (v/v)  dalam  etanol,  TLC  ODS  RP-18, nutrient broth ,  bacto  agar, amoxicillin 100  ppm, ciprofloxacin 100 ppm, dan akuades.

## Prosedur Kerja Persiapan Sampel dan Ekstraksi
Sampel  daun  kelor  segar  sebanyak  4600  g diangin-anginkan  dan  diperoleh  berat  kering 1000  g.  Daun  kelor  kering  dirajang  sampai menjadi  serbuk  kasar.  Dari  hasil  perhitungan rendemen,  diperoleh  rendemen  serbuk  kasar daun  kelor  21,  74%.  Sampel  kemudian dimaserasi menggunakan metanol dengan volume  5  L.  Proses  maserasi  dilakukan  selama 3x24 jam dan penyaringan dilakukan setiap 1x24 jam.  Maserat  total  yang  diperoleh  di  evaporasi menggunakan vacum  rotary  evaporator pada suhu 40°C. Hasil evaporasi adalah ekstrak kental metanol  sebanyak  167,69  g.  Rendemen  ekstrak kental metanol sebesar 16,77 %.
Ekstrak kental metanol difraksinasi menggunakan  metode  partisi  cair-cair.  Ekstrak kental metanol sebanyak 100 g disuspensi dalam campuran air : metanol (2:1) dan dipartisi secara bertahap  dengan n- heksana dan  etil  asetat.  Dari tahap  fraksinasi  diperoleh  fraksi n- heksana berwarna  hijau  kehitaman  dan  fraksi  etil  asetat berwarna  coklat  tua.  Kedua  fraksi  tersebut dievaporasi  pada  suhu  40°C  dan  diperoleh ekstrak n -heksana dan ekstrak etil asetat. Ekstrak pekat etil asetat diperoleh sebanyak 10,87 g dan ekstrak n-heksana sebanyak 21,15 g.

## Isolasi Senyawa Triterpenoid
Ekstrak  pekat n -heksana  sebanyak  21,15  g dipisahkan komponen senyawa kimia penyusunnya menggunakan metode kromatografi cair  kolom  terbuka  dengan  fasa  diam  silika  gel G60  (70-230  mesh),  dengan  fase  gerak menggunakan  kombinasi  pelarut n- heksana  dan
etil  asetat,  secara  gradien,  10%  dihasilkan  11 fraksi yaitu fraksi 1A-1K.
Total volume pelarut  per fraksi adalah 120 mL  yang  ditampung  pada  erlenmeyer  250  mL. Setelah  keseluruhan  fraksi  (1A-1K)  diuapkan pelarutnya  dengan  rotary  evaporator  dilakukan analisis  pemisahan  pola  nodanya  dengan
kromatografi  lapis  tipis  (KLT)  menggunakan kombinasi  eluen n- heksana/etil  asetat  dengan perbandingan  (7:3).  Selanjutnya  fraksi  1E dilakukan  pemisahan  lebih  lanjut  dengan kromatografi  cair  kolom  terbuka  menggunakan fasa  diam  silica  gel,  eluen n -heksana  dan  etil asetat bergradien 2%.
500 750 1000 1250 1500 1750 2000 2250 2500 2750 3000 3250 3500 3750 4000 4250 4500 1/cm 90 97,5 105 112,5 120 127,5 135 142,5 150 157,5 165 %T 29 27 ,1 0 28 70 ,2 0 23 59 ,0 4 23 26 ,2 5 16 87 ,7 9 14 56 ,3 2 13 77 ,2 3 10 40 ,6 4 67 8, 97 S-2-B-IR Per sen tan sm itan (%) Bilangan gelombang (cm -1 )
Gambar 2. Spekrum Inframerah (IR) Isolat dalam lempeng KBr
Gambar 3. Spektrum 1 H-NMR Isolat (500 MHz, CDCl 3 )
Gambar 4. Spektrum 13 C-NMR Isolat (125 MHz, CDCl 3 )
Gambar 5. Spektrum HSQC Isolat
Dari  hasil  pemisahan  diperoleh  30  fraksi yaitu  fraksi  1E01-1E22.  Terhadap  keseluruhan fraksi  dilakukan  pemekatan  dan  dianalisis pemisahan  pola  nodanya  dengan  menggunakan kromatografi lapis tipis. Fraksi 1E11-14 memiliki  pola  noda  dan  nilai  Rf  yang  sama sehingga dilakukan penggabungan untuk dimurnikan  selanjutnya.  Pemisahan  selanjutnya dilakukan  secara  isokratik  dengan  pelarut n - heksana  dan  etil  asetat  perbandingan  (8,5:1,5). Total  volume  yang  ditampung  sebanyak  10  mL. Terhadap  keseluruhan  tampungan  dilakukan analisis  pola  noda  dengan  KLT.  Fraksi  1E11-10 sampai  1E11-21  menunjukkan  dua  pola  noda, sehingga dilakukan pemurnian kembali menggunakan kromatografi kolom secara isokratik dengan pelarut n -heksana dan etil asetat perbandingan (9:1).
Total  volume  setiap  tampungan  adalah  5 mL. Terhadap keseluruhan tampungan dilakukan analisis pola noda dengan KLT. Fraksi 1E11-10- 35  sampai  1E11-10-51  menunjukkan    pola  noda
tunggal  berwarna  pink.  Selanjutnya  dilakukan KLT  dengan  berbagai  kombinasi  pelarut  (fasa normal  dan  fasa  terbalik)  untuk  menguji kemurniannya.  Total  massa  yang  diperoleh sebanyak  6,01  mg.  Selanjutnya  terhadap  isolat murni dilakukan karakterisasi dengan spektrofotometer  UV,  infra  merah  (IR), 1 H-
NMR, 13 C-NMR, 1 H- 1 H  COSY,  HSQC,  dan HMBC.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Senyawa  murni  hasil  isolasi  diuji  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri  patogen S.  aureus dan E. coli dengan metode Kirby-Bauer . Kontrol positif  antibiotik amoxicillin dengan  konsentrasi 100  ppm  dan  pelarut  metanol  sebagai  kontrol negatif.  Masing-masing  sejumlah  satu  ose bakteri  ( S.  aureus dan E.  coli )  dari  stok diinokulasi  ke  dalam  erlenmeyer  steril  yang berisi  media  cair nutrient  broth kemudian diinkubasi selama 18 jam pada temperatur 37 °C. Sebanyak  50  μL  suspensi  bakteri  yang  telah diremajakan diolesikan ke atas permukaan cawan petri yang berisi media padat (NB + bacto agar) menggunakan  kapas  lidi.  Sampel  dengan  variasi konsentrasi  beserta  kontrol  positif  dan  kontrol negatif ditetesi pada paper disk sebanyak 15 μL. Selanjutnya, paper  disk diletakkan  di  atas media padat, diinkubasi pada suhu 37 °C selama
18  jam,  dan  diamati  pertumbuhan  bakteri.  Zona inhibisi  diukur  menggunakan  jangka  sorong dengan  skala  millimeter  (Singh  dan  Pandeya, 2011).
Gambar 6. Spektrum HMBC Isolat

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Karakterisasi Senyawa
Isolat  murni  yang  diperoleh  berupa  kristal putih  yang  larut  sempurna  dalam  etil  asetat  dan kloroform. Hasil pengukuran dengan spektroskopi UV isolat tidak berpendar pada UV λ 254 dan 365 nm. Hal ini menunjukkan bahwa
isolat  tidak  memiliki  karbon  terkonjugasi  yang merupakan  salah  satu  ciri  khas  senyawa triterpenoid  (Abdullah  dkk.,  2013).  Selanjutnya dilakukan  pengukuran  spektrum  inframerah
untuk  mengetahui  gugus  fungsi  yang  terdapat dalam isolat. Spektrum IR isolat pada Gambar 2 (KBr) menunjukkan  serapan gugus O-H (3431,0 cm -1 )  diikuti  dengan  serapan  pada  bilangan gelombang  1061,2  cm -1 yang  merupakan regangan  ulur  dari  gugus  C-OH.  Pada  bilangan gelombang  2977,17  cm -1 terdapat  regangan  ulur
gugus  C-H  alifatik  diikuti  dengan  serapan  pada 1458,70    cm -1 yang  merupakan  tekukan  C-H pada  1370,33  cm -1 yang  merupakan  regang geminal dimetil  (Martins  dkk.,  2013;  Situmeang
Tabel 1 . Data NMR (500 MHz untuk 1 H-NMR dan 125 MHz untuk 13 C-NMR).
Posisi C 13 C-NMR  C (ppm)
HSQC 1 H-NMR  H (Int., mult., J=Hz) HMBC 1 H→ 13 C 1 40,1 CH 2 1,19 (1H; s) & 1,43 (1H; m) C-5 2 28,2 CH 2 1,65 (2H; m) - 3 79,1 CH 3,19 (1H; dd) C-23, 4 40,9 Cq - - 5 55,5 CH 0,83 (1H; s) - 6 19,5 CH 2 1,42 (1H; m) & 1,57 (1H; m) C-8, 10 7 35,7 CH 2 1,55 (2H; m) C-5 8 43,1 Cq - - 9 50,4 CH 1,38 (1H; m) C-11 10 38,2 Cq - - 11 26,9 CH 2 1,62 (2H; m) - 12 28,8 CH 2 1,65 (2H; m) - 13 41,0 CH 0,75 (1H; m) C-18, 19, 27 14 39,0 Cq - - 15 30,0 CH 2 1,22 (2H; m) - 16 38,9 CH 2 1,3 (1H; m) & 1,9 (1H; m) - 17 48,4 Cq - - 18 48,7 CH 0,96 (1H; m) C-19, 20 19 48,1 CH 2,41 (1H; m) C-18, 20, 29, 30 20 151,1 Cq - - 21 34,8 CH 2 0,79 (1H; s) & 2,3 (1H; dt) - 22 35,9 CH 2 1,48 (2H; m) C-17, 22 23 14,5 CH 3 0,95 (3H; s) C-3, 4 24 15,5 CH 3 0,98 (3H; s) C-3, 5 25 18,5 CH 3 0,83 (3H; s) C-1 26 16,2 CH 3 0,75 (3H; s) C-8 27 18,2 CH 3 1,00 (3H; s) C-13, 15 28 29,8 CH 3 1,00 (2H; s) - 29 109,5 CH 2 4,6 (1H; J=2.55; d); 4,5 (1H; q) C-19, 20, 30 30 21,1 CH 3 1,02 (3H; s) C-20
dkk,  2018).  Spekrum 1 H-NMR  (Gambar  3) menunjukkan  resonansi  untuk  proton  olefinik pada  pergeseran  δ  4,68  dan  4,56  ppm  (2H). Proton  hidroksil  pada  δ  3,19  ppm  (1H;  dd,  J  = 11,0;  3,9  Hz)  menunjukkan  posisi  aksial  dan orientasi  α.  Terdapat  tujuh  metil  singlet  pada  δ 0,75;  0,83;  0,95;  0,98;  1,00;  1,00  dan  1,02  (3H) ppm  menunjukkan  bahwa  isolat  merupakan golongan senyawa triterpenoid pentasiklik (Prakash  dan  Prakash,  2012;  Situmeang  dkk, 2018).    Tumpukan  sinyal  pada  rentang  δ:  0,96- 2,40  ppm  diduga  merupakan  pergeseran  kimia untuk  proton  yang  terikat  pada  rantai  karbon triterpenoid (Prakash dan Prakash, 2012).
Spektrum 13 C-NMR  isolate  pada  Gambar  4 memperlihatkan adanya tiga puluh sinyal karbon yang  terdiri  dari  28  atom  karbon  sp3,  dua  atom karbon  olifenik  C=C  sp2.  Pada  pergeseran  79,1 ppm  merupakan  pergeseran  yang  khas  terhadap karbon  yang  teroksigenasi  pada  senyawa triterpenoid.  Pergeseran  kimia  di  bawah  δ  79,1 ppm menunjukkan atom karbon sp3 alifatik yang dapat  berupa  rantai  lurus  ataupun  siklik  yang diduga  berasal  dari  rantai  alifatik  golongan triterpenoid  pentasiklik  (Prakash  dan  Prakash, 2012).
Hasil pengukuran spektrum HSQC
menunjukkan  bahwa  isolat  memiliki  tiga  puluh sinyal karbon yang terdiri dari tujuh atom karbon metil  pada  δ 14,7;  15,5;  16,2;  18,2;  18,5;  21,1 dan  29,8  ppm.  Enam  sinyal  metin  yang  terdiri dari metin sp 3 pada δ 41,0; 48,7; 48,1; 50,4; 55,5 dan 79,2 ppm. Sebelas atom karbon metilen pada δ 19,5;  26,9;  28,2;  28,8; 30,0;  34,8;  35,7;  35,9; 38,9;  40,1  dan  109,5  ppm.  Jumlah  atom  karbon kuartener  sebanyak  enam,  lima  diantaranya merupakan karbon kuartener sp 3 pada pergeseran δ 40,9; 43,1; 38,2; 39,0; dan 48,4 ppm dan satu diantaranya  karbon  kuartener sp 2 pada δ  151,1 ppm. Adanya sinyal  karbon metilen dan karbon kuartener sp 2 pada pergesaran δ 109,5 dan 151,1 ppm  menunjukkan  bahwa  isolat  memiliki  satu ikatan  rangkap  dan  juga  merupakan  ciri  khas
ikatan  rangkap  yang  terdapat  pada  senyawa triterpenoid lupenol pada nomor 20 dan 29.
Adanya  sinyal  metilen  sp2  pada  pergesaran δ 109,5 ppm menunjukkan bahwa ikatan rangkap merupakan  terminal  double  bond  bukan  internal double  bond.  Ikatan  rangkap  ini  memberikan sumbangan  satu  derajat  ketidakjenuhan.  Hasil pengukuran  HSQC  (Gambar  5)  menunjukkan dugaan  rumus  molekul  isolat  adalah  C30H50O. Dari  dugaan  rumus  molekul  tersebut,  diperoleh nilai  double  bond  equivalen  (DBE)  sebesar  6. Dugaan isolat merupakan triterpenoid pentasiklik memberikan  sumbangan  derajat  ketidakjenuhan sebesar  lima.  Sumbangan  dari  terminal  double bond sebesar satu.
Hasil  pengukuran  spektrum  HMBC  pada Gambar 6 menunjukkan bahwa proton H-13 (δH 0,75  ppm)  berkorelasi  dengan  C-12  (δC  28,1 ppm),  H-26  (δH  0,75  ppm)  memiliki  korelasi dengan  C-10  (δC  38,9  ppm),  H-23  (δH  0,95 ppm)  memiliki  korelasi  dengan  C-24  (δC  16,2 ppm), dan H-28 (δH 1,0 ppm) memiliki korelasi dengan C-15 (δC 30,9 ppm). Posisi gugus fungsi alkohol dapat ditentukan melalui korelasi HMBC antara  karbon  dan  proton  yaitu  H-23  (δH  0,95 ppm)  dengan  C-3  (δC  79,1  ppm).  Selanjutnya
posisi  gugus  fungsi  C=C sp 2  dapat  ditentukan melalui  korelasi  yaitu  H-30  (δH  1,02  ppm) berkorelasi  dengan  C-20  (δC  151,1  ppm). Adanya korelasi ( 3 J ) dari proton milik karbon C- 23  (δ 15,5  ppm)  dengan  karbon  C-24  (δ 16,2 ppm)  dan  sebaliknya  menyarankan  posisi geminal dimetil (Silva  dkk.,  2012;  Babalola  dan Shode, 2013; Chudzik dkk., 2015).
Spektrum  H-H  COSY  digunakan  untuk mengetahui  proton-proton  yang  berkorelasi dengan  jarak  tiga  ikatan.  Pada  spektrum 1 H- 1 H COSY dapat diamati bahwa H-13 (δH 0,75 ppm) berkorelasi  dengan  H-18  (δH  0,96  ppm),  H-15 (δH  1,2  ppm)  berkorelasi  dengan  H-27  (δH  1,0 ppm),  dan  H-2  (δH  1,65  ppm)  berkorelasi dengan  H-3  (3,19  ppm).  Data  hasil  pengukuran spectrum NMR isolate ditunjukkan pada Tabel 1. Setelah dilakukan analisis terhadap spektrum 1 H
Tabel 2. Hasil uji aktivitas antibakteri senyawa lupenol
sampel Konsentrasi Zona hambat (mm) E. coli S. aureus Lupenol 100 μg/mL 5,4 8 amoxicillin 100 μg/mL 12.9 td ciprofloxacin 100 μg/mL td 13 metanol 96 % 0 0
NMR,  karbon 13 C  NMR, HSQC, 1 H- 1 H  COSY, dan  HMBC  serta  perbandingan  dengan  berbagai senyawa referensi, maka isolate diduga merupakan  senyawa  triterpenoid  pentasiklik yaitu  3-hydroxy,  20  (29)  -en,  lupenol  (Gambar 1).
Karakteristik  yang  khas  dari  senyawa  ini yaitu  adanya  gem  dimetil  dan  satu  ikatan rangkap pada karbon nomor 20 (29). Gugus gem dimetil  tersebut  terletak  pada  karbon  nomor  23 dan  24  dan  adanya  terminal double  bound pada karbon  nomor  20  dan  metilen  sp 2 pada  karbon nomor  29.  Senyawa  ini  mempunyai  rumus molekul C 30 H 50 O dengan jumlah derajat ketidakjenuhan  sebanyak  enam.  Nama  IUPAC dari  senyawa  ini  adalah  3-hidroksi,  20(29)-en lupenol  (Ayotollahi et  al .,  2011;  Babalola  & Shode, 2013; Chudzik et al ., 2015).
Berdasarkan  penelusuran  pustaka,  senyawa 3-hidroksi,  20(29)-en  lupenol  sudah  banyak diisolasi  dari  tumbuhan  dan  berasal  dari  jalur biosintesis  asam  mevalonat.  Senyawa  lupenol terbukti sebagai antiurolitiatik sebagaimana yang telah  dilaporkan  Abdullah et  al .,  (2013). Penelitian  Li et  al ,  (2018)  melaporkan  senyawa lupenol  sebagai  agen  kemopreventif,  memiliki aktivitas  antibakteri  dan  antiinflamasi.  Senyawa triterpenoid 3-hidroksi, 20(29)-en lupenol merupakan pertama kali diisolasi dari  ekstrak n - heksana daun kelor .

## Aktivitas Antibakteri Senyawa Lupenol
Hasil uji antibakteri terhadap bakteri E. coli dan S. aureus senyawa lupenol ditunjukkan pada Tabel  2.  Senyawa  lupenol  memiliki  aktivitas antibakteri  yang  kuat  terhadap  bakteri S.  aureus dan E.  coli walaupun  tidak  melampui  zona hambat  senyawa  standar  amoxicillin  dan ciprofloxacin .  Senyawa  lupenol  memiliki  nilai zona  hambat  yang  lebih  tinggi  terhadap  bakteri S. aureus dibandingkan dengan E. coli .

## KESIMPULAN
Dari sampel daun kelor sebanyak 1 kg telah diisolasi senyawa lupenol dari ekstrak n -heksana sebanyak  6,01  mg.  Berdasarkan  hasil  elusidasi struktur, isolat  murni  yang  diperoleh  merupakan senyawa golongan triterpenoid pentasiklik dengan  rumus  molekul  C 30 H 50 O  dan  nama  3- hidroksi,  20(29)-en,  lupenol.  Senyawa  lupenol memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap E.  coli dan S.  aureus yang  tergolong  sedang.  Senyawa
triterpenoid pentasiklik lupenol merupakan yang pertama kali diisolasi dari daun kelor.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terimakasih  kepada DRPM  Kementerian  Riset  Teknologi  dan Pendidikan Tinggi atas hibah Penelitian Terapan Unggulan  Perguruan  Tinggi  tahun  2018  dan  Dr. Elvira  atas  pengukuran  spektrum  NMR  di Laboratorium  NMR  Institut  Teknologi  Bandung (ITB).

## DAFTAR PUSTAKA
Abdullah,  S.M.,  Musa,  A.M.,  Abdullah,  M.I, Sule,  M.,  Sany,  Y.M.,  2013,  Isolation  of lupenol from the Steam Bark of Lonchocarpus  sericeus , Sch.  Acad,  J.
Brosci ., 1(1), 18-21.
Agboke,  A.A.,  and  Attama,  A.A.,  2016, Bioactive  Components  and  Antibacterial Activities  of n -Hexane  Extract  of Moringa Oleifera Root  Bark  on  Clinical  Isolates  of
Methicilin Resistant Staphylococcus Aureus, Int.  J.  Curr. Res.  Chem.  Pharm. Sci ., 3(3), 1-9.
Ayotollahi,  A.M.,  Ghanadian,  M.,  Afsaridove, S.,  Abdella,  O.M.,  Murzai,  M.,  Aiskan,  G., 2011,  Pentacyclic  Triterpenes  in  Euphorbia Microsciadia  with  their  T-Cell  Profiration Activity, Irian J.Pharmac , 10, 287-294.
Babalola,  I.,  and  Shode,  F.,  2013,  A  Potential Pentacyclic Triterpens Natural Product, J. of Pharmacognosy  and  phytochemistry .,  2(2), 214-222.
Chukweubuka,  E.,  2015, Moringa  oleifera “The Mother’s  Best  Friend”, Int.  J.  of  Nutrition and Food Sciences ., 4(6), 624-630.
Chudzik,  M.,  Korzonek,  I.S,  Kroe,  W.,  2015,
Triterpenes as Potentially Cytotoxic Compounds, Molecules , 20, 1610-1625. Fitriana,  W.D.,  Fatmawati,  S.,  Ersam  T.,  2015, Uji  aktivitas  antioksidan  terhadap  DDPH dan  ABTS  dari  fraksi-fraksi  daun  kelor (Moringa oleifera) , Jurnal Prosiding Simposium Nasional Inovasi dan
Pembelajaran  Sains  2015 (SNIPS  2015)  8 dan 9 Juni 2015, Bandung.
Isnan,  W.,  dan  Nurhaedah  M.,  2017,  Ragam manfaat  Tanaman  Kelor  ( Moringa  olivera lamk ), Info Teknis EBONI , 14 (1): 62-75.
Li,  X.J.,  Zou,  Q.P.,  Wang,  X.,  Kim,  K.W.,  Lu, M.F., Ko, S.K., Yook, C.S., Kim, .YC., Liu, X.Q.,  2018,  Lupane  Triterpenes  from  the Leaves  of Acanthopanax  gracilistylus , Molecules , 23, 87-93.
Marcus,  A.C.,  and  Nwineewii,  J.D.,  2015, Studies  on  the  Crude  Extract  of Moringa oleifera Leaves for Preliminary
Identification  of  some  Phytochemicals  and Organic  Functions, J.  of  Applied  Chem., 8 (2), 1-5
Martins, D., Carrion, L.L., Ramos, D.F., Salome, K.S.,  Silva,  P.A.,  2013,  Triterpenes  and Antimicrobial  of Durorra  macopyhlla Huber ( Rubiaceae ), J. Biomed., 7, 10155/605831.
Napolean,  p.,  Anitha,  J.,  Renitta,  E.,  2009,
Isolation,  Analysis  and  Identification  of Phytochemicals  of  Antimicrobial  Activity of Moringa  oleifera Lam, J. Current. biotika , 3(1), 33-39.
Prakash,  C.V.,  and  Prakash,  I.,  2012,  Isolation and  Structural  Characterization  of  Lupane Triterpenes  from Polypodium vulgare , Res.
J. Pharm ., 1(1), 23-27.
Salimi, Y.K., Bialangi, N., Saiman., 2017, Isolasi dan Identifikasi Senyawa Metabolit
Sekunder  Ekstrak  Metanol  Daun  Kelor (Moringa  Oleifera Lamk ), J.  Akademika , 6(2), 5-11. Siddhuraju, P., and Becker, K., 2003,
Antioxidant  Properties  of  Various  Solvent Extracts  of  Total  Phenolic  Constituents from  three  Different  Agro-Climatic  Origins of Drumstick Tree (Moringa oleifera Lam.) , J. Agric. Food Chem., 15, 2144–2155. Silva,  D.L.,  David,  J.,  Silva,  L.,  Santos,  R.,
David,  J.,  Lima,  L.,  Reis,  P.,  Fontane,  R., 2012,  Bioactive  Oleanoat,  Lupinee  and Ursane Triterpenoid Acid Derivates,
Molecules , 17, 12197-12205.
Singh,  G.  S.  and  Pandeya,  S.  N.  2011.  Natural Product in Discovery of Potential and Safer Antibacterial  Agent, Natural Product  in Medicinal  Chemistry .  63-101:  978-81-308- 0448-4.
Situmeang,  B.,  Suparman,  A.R.,  Kadarusman, M.,  Herlina,  T.,  2018,  Isolasi  senyawa
Triterpen  dari    Ekstrak  Etil  Asetat Tumbuhan Pirdot ( Sauauria vulkani Kurth.), J. Kimia Valensi , 4 (2), 92-97.