## E-Booklet Teknik Pipetting Mikropipet
Ria Ika Maharani (1), Ibnul Mubarok (2), Danang Subarkah Hadikawuryan(3)
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Malang
ria.ika@mail.unnes.ac.id (1) ibnulmubarok@mail.unnes.ac.id (2), danangsh@mail.unnes.ac.id (3)

## ABSTRAK
Peralatan  laboratorium  yang  sangat  sering  dipakai  adalah  alat  volumetrik.  Alat  volumetrik  dengan  ukuran mikro  membutuhkan  ketelitian  tinggi  dan  keterampilan  khusus  dalam  penggunaanya.  Untuk  itu  diperlukan sebuah  panduan  dalam  mengoperasikannya  sehingga  hasil  pengukuran  memiliki  presisi  dan  akurasi  tinggi. Penelitian  ini  dirancang  dengan  tujuan  mendapatkan  E-Booklet  dengan  visualisasi  dalam  pengoperasaian mikropippet  sebagai  alat  volumetrik.  Model  penelitian  dan  pengembangan  E-booklet  ini  dilakukan  dengan Model  Pengembangan  4-D  yang  memiliki  empat  tahap  proses,  yaitu  Define,  Design,  Development,  dan Disseminate. Tahapan akhir dilakukan uji coba hasil melalui uji validitas dan uji kelayakan.  Hasil penelitian diperoleh  “E-booklet  Teknik  Pipetting”  dengan  hasil  validasi  tim  ahli  sebesar  86,46%  dari  segi  materi, bahasa dan  media. Uji kelayakan  yang diperoleh dari responden  mahasiswa  mendapat hasil 87,55%. Kedua hasil uji tersebut masuk kedalam kategori sangat valid, sehingga dapat disimpulkan bahwa “E-booklet Teknik Pipetting” dapat digunakan sebagai salah satu referensi pengoperasian mikropipet.
Kata Kunci : Mikropipet, Pipetting, Laboratorium, E-booklet, Keterampilan

## Abstract
The  most  frequently  used  laboratory  equipment  is  volumetric  equipment.  Volumetric  tools  with  micro  size require  high  accuracy  and  special  skills  in  their  use.  For  that  we  need  a  guide  in  operating  it  so  that  the measurement results have high precision and accuracy. This research was designed with the aim of obtaining an  E-Booklet  with  visualization  in  the  operation  of  the  micropippet  as  a  volumetric  tool.  The  research  and development  model  of  this  E-booklet  is  carried  out  using  the  4-D  Development  Model  which  has  four process stages, namely Define, Design, Development, and Dissemination. The final stage is to test the results through validity and feasibility tests. The results of the study obtained the “E-booklet Teknik Pipetting” with the validation results of the expert team of 86.46% in terms of material, language and media. The feasibility test  obtained  from  student  respondents  obtained  a  result  of  87.55%.  The  two  test  results  fall  into  the  very valid  category,  so  it  can  be  concluded  that  “E-booklet  Teknik  Pipetting”  can  be  used  as  a  reference  for micropipette operation.
KeyWord : Micropipette, Pipetting, Laboratory, E-booklet, Skills
.

## I. PENDAHULUAN

## 1. Latar Belakang
Kualitas  hasil  pengujian  dari  sebuah  laboratorium  terletak  pada  akurasi  dan  presisi  data yang  dihasilkan.  Faktor  penentu  paling  krusial  terletak  pada  peralatan  yang  terkalibrasi serta  tersertifikasi  (Lorafice,  2009)  dan  keterampilan  sumber  daya  manusia  dalam mengoperasikan  peralatan.  Terampil  tidak  bisa  didapat  secara  instan  namun  memerlukan basic  pengetahuan,  panduan  pengerjaan  dan  latihan  rutin.  Oleh  karena  ini  kompentensi sumber  daya  manusia  diperlukan  dalam  mendukung Good  Laboratory  Practice  (GLP) dalam  mendapatkan  hasil  data  valid.  Aturan  GLP  memberikan  rambu  untuk  praktik  yang baik dan membantu dalam melakukan pekerjaan mereka agar sesuai dengan rencana  yang telah  ditetapkan  sebelumnya  dan  prosedur  standar  (WHO,  2008).  Tujuan  utama  prinsip GLP dapat menghasilkan data pengujian yang andal, menghindari pengujian berulang, serta menghemat waktu (Annisa, 2022). Proses pengujian di laboratorium tidak lepas dengan alat volumetrik  untuk  mengukur  volume  suatu  cairan  secara  teliti.  Alat  volumetrik  dibagi menjadi  dua  berdasarkan  pada  fungsinya  yaitu  sebagai  tempat mewadahi  ( to contain )  dan memindahkan  ( to  deliver )  (Alaudin  dan  Kristanti,  2018).  Salah  satu  alat  yang  masuk kategori memindahkan adalah pipet, peralatan yang diperlukan untuk memenuhi kebutuhan yang kompleks dan sering digunakan di laboratorium kesehatan, kimia, biologi, farmasi dan genetika  untuk  mengukur  dan  mentransfer  volume  cairan  yang  akurat  sesuai  spesifikasi (Krishnan et.al ,  2019).  Ukuran  cairan  yang  dipindahkan  dibawah  1  mililiter  yaitu mikroliter, sehingga pipet ini disebut  mikropipet. Penggunaan mikropipet memiliki presisi yang  lebih  tinggi  dibandingkan  pipet  sahli  untuk  pengambilan  ukuran  yang  kecil (Hidayatussalihin  dkk,  2018).  Pipetting  merupakan  sebuah  kegiatan  mengukur  dan mentransfer volume ukuran kecil dari cair dalam kisaran mikroliter dan mililiter. Aktivitas pipetting  paling  penting  yang  harus  dikuasi  saat  beraktivitas  di  laboratorium  termasuk biologi  molekuler  (Miller  and  Sass,  2004).  Memahami  dasar  praktik  pemipetan  yang  baik penting  untuk  keberhasilan  dan  reproduktifitas  eksperimen.  Tidak  peduli  seberapa  presisi sebuah  pipet,  keahlian  dan  pengetahuan  pengguna  pada  akhirnya  menentukan  keakuratan dan keandalan hasil. Teknik pipetting tidak berubah dari waktu ke waktu masih mengikuti prinsip  instrumentasi  yang  sama,  hanya  saja  kompleksitas  pengujian,  protokol  dan  jumlah sampel  yang  dianalisis  mengalami  peningkatan  yang  signifikan.  Penekanan  yang  menjadi penting  terletak  pada  kompetensi  dari  penggunanya,  bagaimana  cara  memegang,  angel pengambilan,  kecepatan  dan  ritme  penyedotan  cairan,  kedalam  pengambilan  cairan, prewetting dan  proses  penekanan  (Maharani  dkk,  2022).  Mengetahui  bagaimana menggunakan  pemberhentian  pertama  dan  kedua  secara  benar  pada  mikropipet  (Sanders, 2012)  dan  terdapat  posisi  istirahat  (titik maksimum)  (Ismail  dkk,  2020).  Pemilihan  teknik pengeluaran  cairan  (Ewald,  2015)  dan  pemilihan  tip  (Teya,  2022)  berdampak  signifikan pada  hasil  analisis.  Trend  saat  ini  yang  sedang  berkembang  adalah  penawaran  pelatihan dalam  rangka  mendapatkan  kompetensi  dari  penggoperasi  mikropippet,  sebab  seluruh laboratorium  yang  berkerja  dengan  volume  cairan  mikroliter  dan  pengujian  multibagian kompleks,  termasuk  protokol  pengeceran  seri  dan  pengujian polymerase  chain  reaction (PCR),  tergantung  pada  keakuratan  satu  mikroliter.  Simpangan  satu  mikroliter  saja  akan sangat  merugikan,  sebab  jumlah  mikroliter  lebih  sensitif  terhadap  variasi  volume  dan variabilitas pengoperasi dapat mengubah hasil penelitian secara signifikan. Di laboratorium klinik yang memiliki peran penting dalam diagnosis dan keputusan pengobatan kedokteran klinis  diperlukan  keterampilan  teknis  terkait  dengan  pemipetan  (Tandu et.al ,  2016),  jadi teknik  pipetting  memegang  peran  penting.  Pengetahuan  basic  teknik  pemipetan  menjadi wajib  bagi  para  calon  pengoperasi  mikropipet,  sebagai  modal  skill terjun  di  laboratorium. Kondisi  saat  ini  yang  ada  di  laboratorium  biologi  molekuler  hanya  ada  instruksi  kerja penggunaan mikropippet secara general.

## 2. Perumusan Masalah
Dari  latarbelakang  tersebut  dapat  dirumuskan  permasalahan  yaitu  belum  adanya  buku panduan  khusus,  simpel  dan  fleksibel  untuk  mengoperasikan  mikropipet  dengan  teknik pipetting yang baik dan benar.
3. Tujuan Penelitian
Tujuan  yang  ingin  dicapai  yaitu  menyusun  buku  panduan  dalam  bentuk E-booklet teknik pipetting mikropipet dan melakukan uji validasi dan kelayakan  pada E-booklet yang akan dibuat.
4. Manfaat Penelitian
Manfaat yang didapat dari penelitian ini adalah diperolehnya media pembelajaran berbasis sensorik  auditori  dan  visual  untuk  meningkatkan  pengetahuan  dan  keterampilan  dalam pengoperasian mikropipet dengan teknik yang baik dan benar.

## II. METODE
Model  penyusunan  dan  pengembangan  yang  dipakai  pada  penelitian  ini  diadaptasi  dari model  4D  yaitu define,  design,  development, dan disseminate .  Tahapan  yang  ada  dalam prosedur  penelitian  ini  disesuaikan  dengan  langkah-langkah  pengembangan  4D  menurut Mulyatiningsih,  2011.  Uji  coba  produk  terdiri  atas  dua  tahap  yaitu  uji  validitas  dan  uji kelayakan.  Uji  validitas  dilakukan  pada  tiga  aspek  yang  dinilai  oleh  ahli.  Aspek  yang dinilai oleh ahli meliputi validitas materi, validitas bahasa, dan validitas media. Sedangkan uji  kelayakan  modul  dilakukan  kepada  responden  yaitu  mahasiswa  Jurusan  Biologi Universitas Negeri Semarang.
Teknik pengumpulan data yang digunakan menggunakan metode:
a. Angket:  angket  digunakan  untuk  memperoleh    data  respon  ahli  media,  ahli  materi, dan  ahli  bahasa  terhadap E-Booklet yang  dikembangkan.  Angket  kedua  adalah angket untuk uji kelayakan yang dibagikan kepada mahasiswa.
b. Wawancara:  dilakukan  kepada  mahasiswa  secara  langsung  maupun  daring  yang digunakan untuk mendukung data.
Teknik analisis data yang digunakan dalam penelitian ini adalah analisis data statistik deskriptif  persentase  (Suijono,  2011).  Validitas  produk  hasil  penelitian  dinilai  oleh validator yang ahli media, materi dan bahasa. Data penilaian validitas media, materi dan bahasa pada E-Booklet dihitung persentase perolehan skor dengan rumus sebagai berikut (Arikunto, 2010).
Keterangan : P : angka persentase pada penilai f   : frekuensi (jumlah skor yang diperoleh) N  : Number of Cases (jumlah skor maksimal)
Persentase  data  dari  instrumen  penilaian  validitas  tampilan  media,  materi  dan  bahasa kemudian dikonversikan ke dalam kriteria yang disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1 . Kriteria validitas media, materi dan bahasa pada E-Booklet
Interval persentase skor Kriteria 25% < P ≤ 44% Tidak valid 45% ≤ P ≤ 63% Cukup valid 64% ≤ P ≤ 81% Valid 82% ≤ P ≤ 100% Sangat valid
Kelayakan  produk  hasil  penelitian  diperoleh  dari  angket  respon  dihitung  persentase perolehan skor dengan rumus sebagai berikut (Arikunto, 2010).
Keterangan : P : angka persentase pada penilai f   : frekuensi (jumlah skor yang diperoleh) N  : Number of Cases (jumlah skor maksimal) Persentase  data  dari  instrumen  penilaian  kelayakan  produk  yaitu E-Booklet kemudian dikonversikan kedalam kriteria yang disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2 . Kriteria Kelayakan E-Booklet Interval persentase skor Kriteria 25% < P ≤ 44% Tidak layak 45% ≤ P ≤ 63% Cukup layak 64% ≤ P ≤ 81% Layak 82% ≤ P ≤ 100% Sangat layak

## III. HASIL PENELITIAN
Keterampilan  akan  lebih  mudah  untuk  dipahami  jika  rangsangan  diberikan  secara audiovisual.  Pemilihan E-booklet dikarenakan  berkembangnya  teknologi  yang menyediakan  dukungan  komponen  seperti  gambar,  audio  maupun  video  sehingga  lebih praktis,  efisien  dan  efektif.  Penelitian-penelitian  terdahulu  telah  banyak  membuktikan penyajian  modul  atau  bahan  ajar  elektonik  lebih  efektif  dalam  pembelajaran  (Dewi  & Lestari,  2020;  Dwijanti,  2019;  Herawati  &  Muhtadi,  2018;  Komang  &  Agustin,  2018). Media E-booklet menjadi  saran  yang  tepat  dalam  memberikan  sarana  dalam  pemahaman mengenai sebuah proses pengoperasian alat-alat laboratorium yang harus presisi dan akurat dalam  pengunaannya.  Tersaji  dalam  bentuk  audiovisual  yang  bisa  diulang-ulang  dalam pembelajarannya,  sehingga  proses  transfer  pengetahuan  bisa  lebih  baik.  Jumlah  halaman yang  hanya  sedikit  akan  memberikan  daya  tarik  minat  membaca  disertai  video  yang terhubung dari kanal youtube.  Akses untuk membuka E-booklet ini pun bisa dari apa dan dimana saja, dimana saat ini smartphone telah menjadi satu bagian dalam keseharian yang tidak dapat ditinggalkan. E-booklet yang dibuat disajikan dalam 10 halaman dengan desain mengacu  pada  format  yang  dikemukakan  oleh  Prastowo,  2011.  Desain  yang  dibuat memuat  halaman  pengesahan,  kata  penghantar,  informasi  inti  dan  daftar  pustaka,  dengan outline tersaji dalam tabel 3.
Tabel 3 . Outline E-booklet Teknik Pipetting No  Bagian Awal Bagian Isi Bagian Akhir 1 Cover Pengenalan Mikropipet Daftar Pustaka 2 Kata Penghantar  Perawatan Mikropipet 3 Daftar Isi Penggunaan Mikropipet 4 Pengecekan Akurasi Miropipet 5 Pengecekan Validasi Mikropipet 6 Ergonomik Penggunaan Mikropipet
Bagian  isi  membuat  tentang  inti  dibuatnya  E-booklet  yaitu  informasi  berupa  pemahaman mikropipet  mengenai  jenis  dan  bagian-bagian,  perawatan,  penggunaan,  penyimpanan, mengetahui  akurasi  dan  presisi  sampai  dengan  ergonomik  saat  pengoperasian.  Desain halaman judul dari E-booklet dapat dilihat pada gambar 1.

## Gambar 1 . Halaman judul E-booklet Teknik Pipetting
Inti dari E-booklet ini dibuat menjadi bagian-bagian tersendiri dengan tujuan memberikan kemudahan  dalam  pemahaman  dan  fokus  pada  inti  informasi  yang  ingin  disampaikan. Bagian  pertama  berisikan  mengenai  pengenalan  mikropipet  meliputi  jenis,  bagian  dan fungsi  masing-masing  bagian,  tersaji  pada  gambar  2.  Video  yang  telah  dibuat  diungah  di kanal  youtube  dan  dihubungkan  dengan E-booklet sehingga  dengan  sekali  klik  akan langsung terputar.
Gambar 2 . Halaman Pengenalan Mikropipet dan Bagian-Bagian Mikropipet Bagian  kedua  diberikan  informasi  mengenai  perawatan  eksterior  dari  mikropipet, dengan tujuan  kotoran  atau  sisa  yang  tertempel  dapat  hilang  dan  mengurangi  resiko  kontaminasi dalam  penggunaan  berikutnya.  Pembersihan  dan  pemeriksaan  dilakukan  secara  teratur dengan  memperhatikan  frekuensi  pemakaian,  jumlah  pengguna  mikropipet,  agresivitas cairan  yang  akan  dipipet  dan  batas  kesalahan  yang  dpat  diterima  oleh  pengguna (Eppendorf,  2021).  Informasi  dan  proses  perawatan  tersaji  dalam  halaman  pegenalan perawatan  mikropipet  rutin  pada  gambar  3.  Pemberian  informasi  hanya  untuk  perawatan eksterior sebab untuk interior diperlukan keterampilan khusus dalam pembongkarannya.
Gambar 3 . Halaman Pengenalan Perawatan Mikropipet Rutin Video  yang  paling  lama  durasinya  ada  pada  bagian  penggunaan  mikropipet  sebab  pada bagian ini diharapakan dapat memberikan informasi mendetail bagiaman mengoperasikan mikropipet dengan biak dan benar. Implementasi pemahaman bagian ini akan berpengaruh pada  akurasi,  presisi  dan long-life alat.  Selain itu  juga  untuk  mengurangi  kesalahan  yang berulang  menyebabkan  terbuangnya  waktu  dan  reagen  (Procop  et.al,  2014).  Halaman selajutnya  menyajikan  halaman  penggunaan  mikropipet  gambar  4,  disini  terdapat  video penggunaan  mikropipet  yang  dijabarkan  kedalam  langkah-langkah  penggunaan  yaitu langkah  pertama  meliputi  pemilihan  mikropipet  dan  tipnya,  cara  memegang  yang  benar, pengenalan first stop dan second stop , serta pemasangan tip pada sharf mikropipet.

## IV. KESIMPULAN
Dari hasil penelitian dapat diperoleh kesimpulan sebagai berikut : Hasil  penelitian  diperoleh E-booklet  teknik  pipetting dengan  menggunggulkan  penyajian secara  audiovisual.  Dimana  setelah  dilakukan  uji  validasi  oleh  tim  ahli  diperoleh persentase  hasil  86,46%  dari  segi  materi,  bahasa  dan  media  yang  digunakan  pada E- booklet .  Sedangkan  untuk  uji  kelayakan  yang  menggunakan  responden  mahasiswa diperoleh persentase hasil 87,55%. Dari persentase tersebut keduanya memperoleh kriteria sangat  valid  sebagai  media  penyampaian  teknik  pengoperasian  mikropipet.  Kedepannya untuk dibuat beberapa E-booklet peralatan laboratorium lainnya, sehingga kerugian karena alat rusak dan ketidak akurasi hasil dapat diminimalkan.

## DAFTAR PUSTAKA
Alaudin, M dan Kristanti, I. (2018). Kalibrasi Peralalatan Gelas Volumetrik: Pengujian dan Faktor-faktor  yang  Mempengaruhi  Ketidakpastian.  SNKPK  Jurusan  Kimia  FMIPA UNNES. Semarang: UNNES Press.
Annisa,  V.  (2022).  Good  Laboratory  Practice  (GLP)  in  The  European  Union.  Indonesian journal of pharmaceitical education. Vol.2 No 1. 2022. ISSN Online: 2775-3670.
Arikunto, S. (2010). Prosedur Penelitian: Suatu Pendekatan Praktik. Jakarta: Rineka Cipta. pp. 268-272.
Ewald,  K.  (2015).  Impact  of  pipetting  techniques  on  precision  and  accuracy.  Userguide Eppendorf No. 20. Germany: Eppendorf Ag.
Dewi, M. S. A. and N. A. P. Lestari. (2020). “E-Modul Interaktif Berbasis Proyek terhadap Hasil  Belajar  Siswa,”  J.  Imiah  Pendidik. dan  Pembelajaran,  vol.  4,  no.  3,  pp.  433– 441.
Dwijayani,  N.  M.  (2019).  Development  of  circle  learning  media  to  improve  student learning outcomes. Journal of Physics: Conference Series, 1321(2), 171–187.
Herawati,  N.  S.,  &  Muhtadi,  A.  (2018).  Pengembangan  modul  elektronik  (e-modul) interaktif  pada  mata  pelajaran  Kimia  kelas  XI  SMA.  Jurnal  Inovasi  Teknologi Pendidikan, 5(2), 180–191. .
Hidayatussalihin,  Nurhayati,  E.  dan  Suwandi,  E.  (2018).  Perbedaan  presisi  pemipetan sampel  menggunakan  pipet  sahli  dan  mikropipet  pada  pemeriksaan  hemoglobin metode cyanmethemoglobin. Jurnal Laboratorium khatulistiwa 2 (1) hlm. 21-25.
Ismail,  Z  dkk.  (2020).  Evaluasi  Ketidakpastian  Pengukuran  Pada  Kalibrasi  Mikropipet. Instrumentasi Vo. 44 No. 1.
Eppendorf.  2021.  A  guide  to  expert  pipetting:  The  Science  of  Pipetting  to  Perfection. Germany. www.eppendorf.com
Lorafice,  S.  (2009).Traceability  and  uncertainty  analysis  in  volume  measurements. Measurement 42, 1510–1515.
WHO. (2008). Good laboratory practice training manual for the trainee: a tool for training and  promoting  good  laboratory  practice  (GLP).  Edisi  2.  ISBN  978  92  4  154757  4. Switzerland:  UNICEF/UNDP/World  Bank/World  Health  Organization  Special Programme for Research and Training in Tropical Diseases.
Komang  Redy  Winatha,  N.,  Suharsono,  &  Agustin,  K.  (2018).  Pengembangan  E-Modul Interaktif  Berbasis  PROYEK  MATA  PELAJARAN  SIMULASI  DIGITAL.  Jurnal Pendidikan Teknologi Dan Kejuruan, 4(2), 188–199.
Krishnan, K.U etc. (2019). Calibration of Micropipettes through Gravimetric Solution and its Beneficial Impact on Research. Biotecknology: An indian journal Vol. 15 Iss 4.
Kyle  Lyman,  Daniel  Fisher,  Ye  Han  and  Dane  M.  Chetkovich.  A  novel  method  for reducing human pipetting errors. Journal of Medical Laboratory and Diagnosis. Vol. 6(6), September 2015 pp. 36-40. ISSN 2141-2618. 2015.
Maharani,  R.I,  Mustikaningtyas,  D  dan  Solichin.  (2022).  Instrumen  Penilaian Keterampilan Praktik di Laboratorium Biologi Molekuler. BEST Journal Vol. 5 No.2 Hal 31-36.
Miller,  J  and  Sass,  M.E.  (2004).  Micropipetting:  An  Important  Laboratory  Skill  for Molecular Biology. The American Biology Teacher 66(4):291-296.
Mulyatiningsih,  E.  (2011).  Riset  Terapan  Bidang  Pendidikan  dan  Teknik.  Yogyakarta: UNY Press. pp. 67-72.
Prastowo,  A.  Metode  penelitian  kualitatif  dalam  perspektif  rancangan  penelitian. Jogjakarta: Ar-Ruzz Media. 2011.
Procop  GW,  Yerian  LM,  Wyllie  R,  Harrison  AM,  Kottke-Marchant  K.  Duplicate Laboratory  Test  Reduction  Using  a  Clinical  Decision  Support  Tool.  Am.  J.  Clin. Pathol. 141:718-723. 2014.
Accepted Date Revised Date Decided Date Accepted to Publish 18 Agustus  2023 15 September 2023 21 September 2023 Ya