Jurnal Pharmascience, Vol. 04 , No.02, Oktober 2017, hal: 155 - 166 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/

## Research Article

## Pengembangan Formula dan Karakterisasi Nanoemulsi Ekstrak Kombinasi Daun Teh dan Mangkokan Yang Diinkorporasikan ke dalam Spray Sebagai Penumbuh Rambut
*Garnadi Jafar , Ira Adiyati, R.Faishal Farras Kartanagara
Sekolah Tinggi Farmasi Bandung, Jl. Soekarno Hatta No.754 Bandung *Email : garnadi.jafar@stfb.ac.id

## ABSTRAK
Lebih  dari  90%,  rambut  rontok  diakibatkan  oleh  alopesia  androgenetik, Purwantini  Indah  et  al.  mengatakan  bahwa  daun  teh  dan  mangkokan  memiliki aktivitas  sebagai  penumbuh  rambut  yang  setara  dengan  hair  tonic,  nanoemulsi memiliki  ukuran  <100nm  sehingga  memiliki  penetrasi  dan  stabilitas  yang  lebih  baik, sediaan topikal dengan teknik semprot/spray lebih disukai dibanding salep/gel. Tujuan :  penelitian  ini  untuk  mengetahui  keefektifan  natural  produk  dari  ekstrak  kombinasi daun  teh  dan  mangkokan  yang  dikembangkan  menjadi  sediaan  dan  mengetahui stabilitas dari sediaan tersebut.    Penelitian diawali proses ekstraksi kemudian skrining fitokimia dan dibuat 12 formula nanoemulsi dengan variasi ko-surfaktan (Plantacare® dan PEG 400).Formula nanoemulsi terpilih dipilih berdasarkan evaluasi  organoleptik. Formula terpilih dikarakterisasi dengan pengujian freeze and thaw, uji sentrifugasi dan uji TEM. Evaluasi sediaan nanoemulspray meliputi pengujian organoleptik,  pH, daya sebar    dan  stabilitas  suhu  ruang  selama  penyimpanan  28  hari,serta  melakukan  uji aktivitas  pertumbuhan  rambut  yang  dilakukan  terhadap  kelinci.  Nanoemulsi  dengan kosurfaktan  PEG  400®  24%  merupakan  formula  terpilih.  Pada  pengujian  freeze  and thaw  nanoemulsi  tetap  stabil  hingga  siklus  5.  Nanoemulsi  terpilih  diinkorporasi  ke dalam  basis  spray  terpilih  yaitu  F3  (etanol  60%),  hasil  uji  morfologi  dan  ukuran partikel menggunakan alat TEM menunjukan ukuran globul <50nm.Hasil uji aktivitas pertumbuhan rambut, sediaan nanoemulspray F3 menumbuhkan rambut sepanjang 13 mm sedangkan kontrol positif (regrow forte ®)11 mm pada hari ke-18.
Kata kunci: Rambut Rontok, ekstrak kombinasi daun teh-mangkokan, Nanoemulspray.

## ABSTRACT
More than 90%, hair loss caused by alopesia androgenetic, Purwantini Indah et al. said that tea and mangkokan leaf have the same activity like hair tonic. The purpose of this study is to determine the effectiveness of natural products from  extract combination from tea  leaves  and  mangkokan  that  developed  into  hair  growth  product  and  see  the  stability. The research was started from extraction and then phytochemical screening and made 12
nanoemulsion  formulas  with  different  co-surfactant  variations  (Plantacare®  and  PEG 400).  The  selection  of  the  best  nanoemulsion  formulas  is  selected  based  on  organoleptic characterization.  The  optimum  nanoemulation  formula  was  characterized  by  freeze  and thaw testing, centrifugation test and TEM test. Characterization of nanoemulspray product included organoleptic testing, pH, scattering and stability on room temperature during 28 day  storage,  and  than  tested  hair  growth  activity  to  the  rabbits  hair.  Nanoemulsion  with PEG  400®  24%  co-surfactant  was  selected  formula.  In  the  freeze  and  thaw  nanoemulsi test were stable until 5 cycle. The selected nanoemulsion was incorporated into the selected spray base F3 (60% ethanol), morphological test and particle size using TEM tool showed globul  have  <50nm  test  of  hair  growth  activity  on  rabbit,  Nanoemulspray  product  has better  actitivity  than  positive  controls  (regrow  forte®)  resulted  in  hair  growth,rabbit  hair grew 13 mm while the positive control grew hair 11 mm on the 18th day.
Keywords  :  Hair,  Hair  Loss,  tea-mangkokan  leaf  combination  extract,  Nanoemultion, Spray

## I. PENDAHULUAN
Rambut  rontok  (hair  loss)  adalah suatu  kelainan  di  mana  jumlah  rambut lebih  sedikit  atau  terlepas  lebih  banyak dari  normal  dengan  atau  tanpa  penipisan yang  tampak,  Menurut  Paus  R  et  al., normalnya rambut kepala terlepas sebanyak 80–120 helai/hari, dan dikatakan tidak normal jika melebihi dari normalnya, rambut  rontok  dapat  terjadi  melalui mekanisme  kerontokan/efluvium  (telogen efluvium,  anagen  efluvium),  patahnya batang rambut yang rusak, serta kebotakan/alopesia  (sikatrik  dan  non sikatrik).
Di Amerika Serikat kejadian rambut rontok menimpa 50 juta orang dan 20  juta  di  antaranya  adalah  wanita  (Swce W et  al ,2000.)  dan  lebih  dari  90%  dan berdasarkan kepustakaan, alopesia androgenetik  (AGA)  yang  terjadi  pada sebagian besar pria dan sekitar 30% wanita
selama  hidupnya.  (Kartiika  Pramitha et al ,2015),dalam penelitian Stough D menunjukkan  bahwa  hampir  30%  kasus terjadi pada laki-laki kulit putih berusia 30 tahun,  50%  pada  usia  50  tahun  dan  80% pada usia 70 tahun (Stough D et al. 2005).
Kondisi  ini  dapat  menimbulkan efek baik psikis maupun psikologis kepada pasien.  Efek  psikis  akibat  kebotakan menyebabkan  hilangnya  fungsi  rambut sebagai  proteksi  terhadap  panas,  dingin dan  trauma,  Sedangkan  secara  psikologis dapat mempengaruhi kepercayaan diri dan persepsi terhadap diri pasien.
Pengobatan trend masa kini terhadap alopesia secara modern diantaranya  adalah  transplantasi  rambut dengan menggunakan alat micrograft laser technology,  transplantasi  didasarkan  pada prinsip  dominasi  donor,  selain  itu  juga pengobatan  dengan  menggunakan  radiasi gelombang  inframerah  dan  sinar  uv,  yang
selain  mengggunakan  biaya  yang  mahal tentunya akan menghasilkan efek samping yang lebih besar.
Selain  itu  juga  banyak  produk sintetis  dipasaran  yang  beredar  dalam mengatasi  masalah  rambut  rontok  seperti minoxidil  dan  finasterid  telah  banyak digunakan,  pada  penggunannya  bahan tersebut  memiliki  efek  samping  berupa iritasi lokal, eritema dan kulit kering.
Data farmakokinetik dari penggunaan minoxidil secara topikal  yaitu diabsorpsi  sedikit  sekali  sekitar  1,4%  dari dosis  total  yang  akan  ikut  dalam  sirkulasi sistemik, maka dari itu diperlukan alternatif  dengan  penggunaan  bahan  alam atau “natural  product” akan  lebih  aman dan  banyak  diminati  oleh  masyarakat terkini.
Menurut penelitian  yang dilakukan oleh Kwon OS et al 2007. bahwa daun teh memiliki  mekanisme  penumbuh  rambut dari epigalocatecin-3-gallat (EGCG) dengan  cara  menstimulasi  proliferasi  sel dan  efek  anti-apoptosis  pada  papilla  sel, dan  ekstrak  daun  mangkokan  diketahui mengandung  protein,  vitamin  A,  vitamin B1,  vitamin  C,  dan  alkaloid  yang  diduga berperan  dalam  aktivitas  pertumbuhan rambut,  meskipun  mekanisme  aktivitas terhadap pertumbuhan rambut tidak diketahui (Benaarji et al. ).
Berdasarkan  penelitian  yang  telah dilakukan  oleh  Indah  Purwantini et  al .
daun  teh (Camellia  sinensis  l.) dan  daun mangkokan (Nothopanax  scutellarium ) terbukti memiliki aktivitas sebagai penumbuh rambut yang setara dengan hair tonic  yang  beredar  dipasaran  dan  juga ekstrak kombinasinya lebih efektif dibandingkan dengan ekstrak tunggalnya,dan  hasil  data  AGD  (Average Growth  Daily  gain)  dari  hasil  penelitian didapatkan  panjang  rambut  pada  kelinci yaitu  dengan  menggunakan  ekstrak  daun teh  menumbuhkan  rambut  sepanjang  = 0,86  cm, ekstrak  daun  mangkokan menumbuhkan  rambut  sepanjang  =  0,85 cm  dan  ekstrak  kombinasi  dari  kedua ekstrak  tersebut  dengan  perbandingan (2:1) menghasilkan panjang rambut sebesar = 1,21 cm.
Penggunaan  ekstrak  kombinasi  ini memerlukan  sistem  penghantaran  yang baik,  guna  mencapai  efek  yang  optimum salah satu metode yaitu dengan memperkecil ukuran partikel, salah satunya  adalah  dengan  pembentukan nanoemulsi. Nanoemulsi mempunyai beberapa  kelebihan  yaitu  stabil  secara termodinamik,  relatif  transparan  atau translucent  dan  memiliki  perpanjangan lama  pengendapan  disebabkan  karena resultan  gaya  kebawah  akibat  gravitasi sudah berkurang, hal ini disebabkan massa tiap partikel dan peningkatan luas permukaan total yang signifikan menghasilkan  interaksi  tolak  menolak
antar  partikel  yang  besar  dan  muncul fenomena  gerak  brown  (Gupta  dan Kompella,2006)., mempunyai tingkat solubilisasi  yang  tinggi  sehingga  dapat meningkatkan  penetrasi  obat  ke  dalam kulit,  selain  itu  kelebihan  lain  dari nanoemulsi  yaitu  adanya  peningkatan afinitas  dari  sistem  karena  peningkatan luas  permukaan  kontak  pada  jumlah  yang sama (Kawashima,2000) untuk itu pengobatan alopecia dipilih sediaan dengan  rute  pemberian  secara  topikal pemberian sediaan secara topikal memiliki keuntungan,  yaitu  mencegah  first-pass metabolism  dan    efek  samping  sistemik minimal.
Teknik semprot atau spray memiliki  keuntungan  dalam  dosis  dimana dengan teknik ini memungkinkan zat aktif yang  akan  dihantarkan  ke  kulit  secara langsung, daya sebar  yang luas, dan dapat diberikan  secara  merata,  tidak  mudah terkontaminasi dan juga mengurangi iritasi yang  biasanya  disebabkan  secara  mekanik seperti penggunaan ujung jari  . Spray  merupakan  suatu  kabut  (halus)  dari partikel  halus  yang  keluar  dari  suatu kemasan  logam/kaleng/botol  pada  saat tombol kemasan ditekan, semprotan haruslah  cukup  bertenaga,  yang  apabila diarahkan  ke  daerah  kepala  dari  jarak sekitar  25  cm,  partikel  haruslah  mencapai rambut.  (Agus  Goeswin,2015.),  salah  satu komponen  yang  berpengaruh  pada  spray
adalah  rheologi,  rheologi  haruslah  tinggi sehingga dapat disemprotkan menggunakan  alat  semprot.  Menurut Jauregui  K.M.G,2009 sediaan  topikal dengan  teknik  semprot  atau  spray  lebih disukai  dibanding  salep  atau  gel,  terutama untuk  pengobatan  alopecia  pada  derivat kulit yaitu rambut.

## II. METODE PENELITIAN

## A. Alat dan Bahan

## Bahan
Ekstrak  kombinasi  daun  teh  dan daun  mangkokan,beberapa  bahan  untuk penapisan  fitokimia,beberapa  konsentrasi etanol,  surfaktan  yaitu  CremophorRH40 dan  beberapa  jenis  ko-surfaktan  yaitu PEG400 dan Plantacare® ,Minyak Zaitun, Aquades, Propilenglikol, PEG40HCO, DMDM Hyndantion, Asam sitrat, TEA.

## Alat
Peralatan  yang  digunakan  untuk ekstraksi  dan  skrining  fitokimia  yaitu  alat alat  kaca,dan Rotary  evaporator, alat untuk  sediaan  farmasi  sentrifuga,  botol sprayer,  magnetic  stirrer,  hot  plate, timbangan  digital  pH  meter  yaitu mettler toledo .  Alat  untuk  uji  TEM  (TEM  JEOL JEM  1400), hair  growth pasaran  yaitu
Regrou Forte®.
B. Tahapan / Jalannya Penelitian
Daun  teh ( Camellia  sinensis) dan Mangkokan  ( Polyscias  scutellaria) di dapatkan  di  kebun  tanaman  obat  Balitro,
Bogor,  Jawa  Barat  lalu  di  diteminasi  di Fakultas  MIPA  UNPAD,  yang  kemudian hasil ekstrak dilakukan penapisan fitokimia yang dilakukan di LIPI, Bogor.kemudian optimasi nanoemulsi dilakukan dengan memvariasikan konsentrasi ko-surfaktan (Plantacare® dan PEG400)  dengan  formula  seperti  pada tabel I.
Pada formulasi nanoemulsi terpilih, ditambahkan zat aktif dalam hal ini ekstrak kombinasi  daun  teh  dan  daun  mangkokan dengan  penambahan  dosis  5x  nya  (tabel II).
Karakterisasi  nanoemulsi  ekstrak kombinasi  daun  teh  dan  mangkokan dilakukan  dengan  cara  mengamati  secara fisik,  pengujian  sentrifugasi,  stabilitas suhu  ruang  dan  stabilitas  dipercepat (Freeze  Thaw) selama  beberapa  siklus, tahap berikutnya adalah mengukur morfologi formula tersebut berupa bentuk dan  ukuran  globulnya  menggunakan  alat TEM ( Transmission Electron Microscope ) di Jurusan kimia MIPA Universitas Gadjah Mada.Setelah  mendapatkan  satu  formula terbaik  nanoemulsi  ekstrak  kombinasi daun teh dan mangkokan kemudian dibuat formula  sediaan  spray.  Formulasi  sediaan dibuat  lima  variasi  konsentrasi  pelarut etanol (tabel III).
Masing-masing  fasa  dicampurkan hingga  homogen.Dicampurkan  bagian  B
menggunakan  magnetik  stirer,  kemudian dimasukan  bagian  A  kedalam  bagian  B hingga  homogen.  Kemudian  ditambahkan aquadest  hingga  volume  akhir  100  ml, setelah  itu  dilakukan  evaluasi  yang meliputi  uji  organoleptis,  pH  dan  daya sebar,  untuk  mengetahui  efektivitas  dari sediaan nanoemulspray  Untuk mengetahui keefektifan  sediaan,  maka  dilakukan  uji terhadap  hewan  percobaan  yaitu  kelinci yang  mengacu  pada  metode  Tanaka et  al (1980)  ,  yaitu  2  punggung  kelinci dibersihkan  dari  rambut  dengan  cara dicukur  hingga  bersih,  dimana  sebelum dilakukan pengolesan/penyemprotan, punggung kelinci yang telah dibagi dielosi terlebih  dahulu  oleh  etanol  70  %  sebagai antiseptik  lalu    untuk  hewan  uji  pertama dibagi  menjadi  3  bagian  yang  masing- masing berbentuk segi empat 5x 5 cm lalu diolesi/disemprot dengan kontrol pembanding  yaitu  nanoemulsi,basis  spray terpilih  dan  nanoemulsi  dengan  ekstrak kombinasi  dan  hewan  uji  ke  dua  dibagi menjadi  dua  bagian  sebagai  sediaan  uji dan  kontrol  +  dengan  cara  yang  sama hanya saja diolesi/disemprot dengan nanoemulspray  dan  produk  pasaran  yaitu Regrou Forte® , lalu dilakukan pengamatan  selama  18  hari  dengan  cara menghitung  panjang  rambut  yang  tumbuh sebanyak  3  hari  sekali  ,dihitung  pada  hari ke-3,6,9,12,15,18

## Tabel I. Formula Nanoemulsi
Tabel II. Formulasi Nanoemulsi yang Mengandung Ekstrak
Tabel III. Formula Nanoemulspray

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi daun teh dan mangkokan menggunakan  metode  maserasi  dengan etanol  70%  menghasilkan  berat  ekstrak daun  teh  sebesar  103,5  gram  dengan rendemen  20,6  %  dan  untuk  daun mangkokan  menghasilkan  berat  sebesar 211,2 gram dengan rendemen 21,12 % lalu hasi  dari  penapisan  fitokimia  yang merupakan  uji  secara  kualitatif,  beberapa senyawa  yang  terkandung  dalam  daun  teh ( Camellia sinensis) dan mangkokan ( Polyscias  scutellaria) yaitu  alkaloid, saponin,  tanin,  flavonoid  dan  glikosida ,sedangkan  senyawa  fenolik  dan  steroid terdapat  hanya  di  daun  mangkokan  saja dan senyawa triterpenoid berada pada daun teh  senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam daun teh dan daun mangkokan merupakan senyawa  golongan  flavonoid,  teh  hijau mengandung  senyawa  polifenol  yaitu flavonoid  beserta  turunanannya  yaitu flavanol,  flavandiol  dan  asam  fenolat (Sandeep, 2012).sedangkan jenis flavonoid yang terkandung didalam daun mangkokan adalah flavonol seperti kuersetin, kaemfrol dan miristin,dan flavon seperti luteolin dan apigenin,senyawa  tersebut  aktif  dalam merangsang pertumbuhan rambut (Dalimartha,1999)  hasil  dari  penapisan fitokimia menunjukan bahwa kedua ekstrak tersebut positif mengandung senyawa flavonoid yang merupakan senyawa aktif. Optimasi nanoemulsi
dilakukan dengan mencampurkan Surfaktan  (Cremophor  RH  40),  ko- surfaktan  (PEG400  dan  Plantacare®) dalam  fasa  air  lalu  ditambahkan  Olive  oil dan  diaduk  dengan magnetic  sterrer pada kecepatan,suhu  dan  lama  pengadukan tertentu  yang  optimum  hingga  terbentuk nanoemulsi  yang  stabil  dan  jernih.  Untuk mencapai  hasil  yang  optimum  dengan menggunakan  ko-        surfaktan  PEG400 dibutuhkan  suhu  50ºC  dengan  kecepatan pengadukan 750 rpm,waktu yang optimum 30 menit, sedangkan plantacare® membutuhkan  suhu  75  ºC,  kecepatan pengadukan  700  rpm  dan  waktu  yang sama yaitu 30 menit.
Dari 12 formula nanoemulsi kemudian  dipilih  5  formula  nanoemulsi berdasarkan  pengamatan  fisik,  yaitu  (F4 ,F5,F9,F10  dan  F11)  dengan  PEG  400 ,konsentasi  24%,  26%,  28%  (F9,  F10, F11)  dan  plantacare®  dengan  konsentrasi 16%, 20% (F4,  F5), Selanjutnya dari lima formula nanoemulsi tersebut dipilih kembali  menjadi  3  formula  berdasarkan pengamatan  organoleptis  selama  14  hari, yaitu plantacare® dengan konsentrasi 20% (F5),  dan  PEG  400  dengan  konsentrasi 24%  dan  26%  (F9,  F10),dari  3  formula kemudian  ditambahkan  ekstrak  kombinasi daun  teh  dan  mangkokan  sebanyak  5x dosisnya  dengan  0,25  gram  1x  dosisnya dan  perbandingan  daun  teh  2:1  daun mangkokan  hasilnya    formula  yang  tetap
menghasilkan  nanoemulsi  yang  stabil  dan tetap  transparan  adalah  formula  9  dengan ko-surfaktan  PEG400  (24%).Nanoemulsi ekstrak kombinasi daun teh dan mangkokan  kemudian  di  karakterisasi dengan  beberapa  pengujian  diantaranya Uji
stabilitas dipercepat ( freeze thaw) menghasilkan  hasil  yang  tetap  stabil hingga  siklus  ke  5  dan  uji  sentriifugasi tetap  menghasilkan  hasil  yang    stabil dengan  tidak  adanya  pemisahan  2  fase ,lalu  kemudian  uji  morfologi  dan  ukuran globul  dengan  menggunakan  alat  TEM (Transmission  Electron  Microscope) yaitu JEOL  JEM-1400 menunjukan  sediaan nanoemulsi  ekstrak  kombinasi  daun  teh dan  mangkokan  memiliki  ukuran  globul sebesar < 50 nm.
Gambar 1 Hasil Uji Morfologi Langkah selanjutnya mengoptimasi basis  spray  dengan  variasi  etanol  yang berbeda,  basis  spray  terpilih  yaitu  F3 (etanol 60%),  F4 (etanol 70%), F5 (etanol 80%)  berdasarkan  hasil  statistik,  lalu dilakukan  inkorporasi  menjadi  sediaan nanoemulspray,  nanoemulsi  yang  telah ditambahkan zat aktif, lalu diformulasikan
dengan  cara  mencampurkan  nanoemulsi sebanyak  18ml  pada  basis  spray  dengan magnetik  streer setelah  itu  dilakukan kembali  evaluasi  pH  dan  daya  sebar  dan uji  aktivitas  pertumbuhan  rambut  pada hewan percobaan yaitu kelinci.
Gambar 2 Sediaan Nanoemulspray Berdasarkan hasil pengamatan organoleptis selama 28 hari yakni hari ke- 1,3,5,7,14,21  dan  28  hari  ,pada  hari  ke  21 dan  28  terdapat  perubahan  homogenitas secara  fisik,  perubahan  ini  dikarenakan konsentrasi  etanol  yang  semakin  tinggi menyebabkan kestabilan nanoemulsi terganggu  dan  menyebabkan  lisisnya minyak  sehingga  sediaan  dengan  formula F4 dan F5 tidak dipilih untuk uji aktivitas.
Berdasarkan  analisis  menggunakan statistik  metode  ANOVA  menunjukkan bahwa terdapat perbedaan sangat signifikan  pada  ketiga  formula  yang ditandai  dengan  nilai  sig  =  0,000  (sig  < 0,05).Hal  tersebut  menunjukkan  adanya pengaruh  konsentrasi  etanol  yang  berbeda pada  masing-masing  formula  terhadap  uji evaluasi pH.

## Tabel IV. Hasil Evaluasi Organoleptis
Gambar 4. Hasil Uji Evaluasi Daya Sebar
Tabel V. Hasil Uji Pertumbuhan Rambut
Berdasarkan  analisis  menggunakan statistik  metode  ANOVA  menunjukkan bahwa tidak terdapat  perbedaan signifikan pada  ketiga  formula  yang  ditandai  dengan nilai sig = 0,063 (sig > 0,05). Pada F3 (sig =  0,648),  F4  (sig  =  0,027),  dan  F5  (sig  =
0,074)  tidak  terdapat  perbedaan  yang sangat  signifikan  (sig  >  0,05)  pada  masa penyimpanan  selama  28  hari  pada  suhu ruang  ketiga  formula  nanoemulspray tersebut dinyatakan stabil.
Hasil pengujian pertumbuhan rambut  dari  hari  ke  -3,5,9,12,15,18 menunjukan  bahwa  pertumbuhan  rambut antara  sediaan  nanoemulspray  dengan sediaan hairgrowth di  pasaran  dengan  zat aktif sintetik yaitu minoxidil menghasilkan hasil  pertumbuhan  rambut  yang  berbeda, maka dapat dikatakan sediaan nanoemulspray  aktivitasnya  lebih  baik dibandingkan  dengan hairgrowth yang berada  di  pasaran,  dan  kontrol  lainnya sebagai  pembanding  tidak  mengahasilkan pertumbuhan  rambut  sebaik  dari  kontrol positif,  hal  ini  menunjukan  bahwa  basis spray, nanoemulsi, dan nanoemulsi ekstrak tidak  memberikan  efek  pertumbuhan rambut  yang  setara  dengan hairgrowth di pasaran.

## IV. KESIMPULAN
Hasil  Uji  aktivitas  pertumbuhan rambut  yang  telah  dilakukan  menunjukan bahwa sediaan nanoemulsi ekstrak kombinasi  daun  teh  dan  mangkokan memiliki  aktivitas  yang  lebih  baik  dari kontrol  positif  yang  berada  di  pasaran yaitu regrow forte®.

## Daftar Pustaka
Dalimartha, S. 1999.Atlas Tumbuhan Obat Indonesia.
Jilid I. Trubus Agriwidya.  Anggota  IKAPI.  PT. Pustaka PembangunanSwadaya Nusantara. Jakarta.
Gupta,  R.B  and  Kompella,  U.B,  2006,
Nanoparticle  technology  of  drug
delivery ,  Tylor  &  Francis  Grup, New York, pp.4-6,13-16.
Gupta,  P.  K.,  Pandit,  J.  K.,  Kumar,  A.,
Swaroop,P.,  &  Gupta,S.  2010. Pharmaceutical nanotechnology novel  nanoemulsion–high  energy emulsification preparation,evaluation and application. The Pharma Research , 1 (3), 117 138.
Goeswin,  A.  2015. Sediaan  Kosmetik. penerbit  :  ITB  press  ;  Bandung; hal. 358-362.
Kwon,  O.  S.,  Han,  J.  H.,  Yoo,  H.  G., Chung,  J.  H.,  Cho,  K.  H.,  Eun,H. C.,  &  Kim,  K.  H.  (2007).  Human hair  growth  enhancement  in  vitro by  green  tea  epigallocatechin-3- gallate(EGCG). Phytomedicine , 14 (
7), 551-555.
Paus  R,  Olsen  EA,  Messenger  AG.  Hair
growth disorders. In: Wolff K,Goldsmith LA, Katz SI, Gilchrest  BA,  Paller  AS,  Leffell DJ,editors.Fitzpatrick’s dermatology in general medicine.7th  ed.  USA:  McGraw- Hills Company; 2008. p. 753–77. Purwantini,  I.  2017.  Kombinasi  Daun Teh Dan Mangkokan Sebagai Penumbuh  Rambut  Combination
Ofteh  And  Mangkokan  Leaves Extract  Topromote  Hair  Growth . https://www.google.com/url?sa=t& rct=j&q=&esrc=s&source=web&c d=2&ved=0ahUKEwirncTy1aTXA hUJT48KHdOMAdkQFggwMAE &url=http%3A%2F%2Fmfile.narot ama.ac.id%2Ffiles%2FUmum%2F JURNAL%2520UGM%2FKombin asi%2520Daun%2520Teh%2520D an%2520Mangkokan%2520Sebaga i%2520Penumbuh%2520Rambut.p df&usg=AOvVaw3T4W9nudssqV 7IRMDxbNFD (diakses 2017)
Sandeep  K.,  Nisha  S.,  Shweta.,  Archana.
2012.   Green Tea Polyphenols :  Versatile  Cosmetic  Ingredient, International  Journal Of Advanced Research In
Pharmaceutical  &  BioSciences.  1 (3) : 348-362.
Stough,  D.,  Stenn,  K.,  Haber,  R.,  Parsley, W. M., Vogel, J. E.,Whiting, D. A., & Washenik,K.(2005,October).Psych ological effect,pathophysiology, and  management  of  androgenetic alopecia  in  men.  In Mayo  Clinic Proceedings (Vol.  80,  No.  10,  pp. 1316-1322). Elsevier.