## Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan
PENGARUH PEMBERIAN AKUT KACANG TANAH BAMBARA (Vigna subterranea) TERHADAP MORTALITAS, BOBOT BADAN, GEJALA TOKSISITAS,
DAN BOBOT ORGAN MENCIT BALB-C BETINA: Kajian Uji Toksisitas Akut (EFFECT OF BAMBARA GROUNDNUT (Vigna subterranea) ACUTE
ADMINISTRATION ON MORTALITY, BODY WEIGHT, TOXICITY SYMPTOMS, AND ORGAN WEIGHTS) FEMALE BALB-C MICE: Acute Toxicity Test Study)
Rimonta F.Gunanegara 1 , Euis Reni Yuslianti 2 , Khoiruddin Anshori 3 , Sunarti 4
1 Program Doktoral, Fakultas Kedokteran, Kesehatan Masyarakat dan Keperawatan, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, Indonesia
2 Departemen Biologi Oral and Biomedik, Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jenderal Ahmad Yani, Cimahi , Jawa Barat, Indonesia
3 Bagian Endokrinologi dan Infertilitas Reproduksi, Departemen Obstetri dan Ginekologi, Fakultas Kedokteran, Kesehatan Masyarakat dan Keperawatan, Universitas Gadjah Mada -
Dr. RS Sardjito, Yogyakarta, Indonesia
4 Departemen Biokimia Fakultas Kedokteran Kesehatan Masyarakat dan Keperawatan Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, Indonesia
Email korespondensi : gunanegara@gmail.com

## ABSTRAK
Kacang  tanah  Bambara  ( Vigna  subterranea  (L.)  Verdc ),  tanaman  dari  Afrika  yang  kurang dimanfaatkan di Indonesia memiliki potensi untuk berkontribusi pada peningkatan ketahanan pangan  dan  gizi,  sambil  memberikan  solusi  untuk  kelestarian  lingkungan  dan  pemerataan ketersediaan dan keterjangkauan pangan. Bukti ilmiah untuk potensinya dipelajari secara luas tetapi  studi  sistemik  masih  kurang.  Penting  untuk  mempelajari  dampak  konsumsi  legum terhadap kesehatan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian akut kacang tanah Bambara terhadap mortalitas, bobot badan, gejala keracunan, seta bobot organ jantung, hati, paru, pankreas, lambung, usus, ginjal, otak, limpa, ovarium, dan uterus pada mencit betina BALB-c.  Metode  penelitian  adalah  penelitian  toksisitas  oral  akut  dengan  sedikit  modifikasi berdasarkan metode BPOM 2022. Kacang tanah Bambara diberikan secara oral kepada 15 ekor mencit  terdiri  dari  kelompok  dosis  300mg/kgBB,  dosis  2000mg/kgBB  dengan  dibandingkan dengan  kontrol  yang  diberikan  akuades.  Perhitungan  dosis  ini  mengacu  pada  pedoman  uji toksisitas  PERKA  BPOM  No.  10  Tahun  2022.  Hewan  diamati  mortalitas,  perubahan  bobot badan,  gejala  toksisitas,  dan  bobot  organ  relatif  selama  14  hari  berikutnya.  Hasil  penelitian menunjukkan  tidak  adanya  gejala  toksisitas  pada  mencit  betina  BALB-c  .  Kacang  tanah Bambara tidak menunjukkan tanda-tanda abnormal atau kematian dan perubahan berat badan.
Gunanegara, RF: Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan (2023); 6(3): 295-306
DOI:
DOI ARTIKEL PENELITIAN 10.35990/mk.v6n3.p295-306
Analisis  nekropsi  kasar  tidak  mengungkapkan  perubahan  organ.  Kesimpulannya,  pemberian kacang tanah bambara secara akut aman dan praktis tidak toksik pada mencit betina BALB-c.
Kata kunci: kacang tanah bambara, mencit betina, toksisitas

## ABSTRACT
Bambara groundnut (Vigna subterranea (L.) Verdc.), an underutilized African legume, has the potential to contribute to improved food and nutrition security, while  providing solutions for environmental  sustainability  and  equity  in  food  availability  and  affordability.  Scientific evidence for its efficacy is widely studied, but systemic studies are still lacking. It is important to study the impact of legume consumption on health. The objective of this research is to observe the effect of acute administration of Bambara groundnut on mortality, body weight, symptoms of toxicity, and organ weights of heart, liver, lung, pancreas, stomach, intestine, kidney, brain, spleen, ovary and uterus BALB-c female mices. The research method was an acute oral toxicity study with minor modification. Bambara groundnut were administered orally at 300 and 2000 mg  kg-1  with  only  one  administration  at the  beginning  of  the  reseach  period. Animals  were observed for mortality, body weight changes, toxicity symptoms, and relative organ weight for the next 14 days. The results showed there were no toxicity symptoms in BALB-c female mices. Bambara groundnut did not exhibit any abnormal signs or deaths and body weight. The gross necropsy analysis did not reveal changes of the organs. In conclusion, acute administration of bambara groundnut is safe and practically non-toxic to BALB-c female mices.
Keywords: Bambara groundnut, female mices, toxicity.

## PENDAHULUAN
Kacang  tanah  Bambara  ( Vigna subterranea )  adalah  tanaman  berasal  dari Afrika  yang  kurang  dimanfaatkan  di Indonesia. Kacang tanah Bambara dinyatakan  sebagai  salah  satu  "tanaman untuk  milenium  baru" 1,2 ,  karena  memiliki kandungan  64,4%  karbohidrat,  23,6% protein,  6,5%  lemak,  dan  5,5%  serat  serta kaya  akan  mineral. 3 Tanaman  ini  juga mempunyai kemampuan untuk memperbaiki nitrogen, dan mampu tumbuh di  bawah  kondisi  lingkungan  yang  tidak subur seperti tanah di daerah kekeringan. 2–5
Tanaman  kacang  tanah  Bambara  kurang dimanfaatkan karena kurangnya
pengetahuan  dan  upaya  komersialisasi  di tingkat petani masyarakat. 1
Malnutrisi energi protein merupakan  salah  satu  masalah  gizi  yang paling  banyak  ditemukan  di  negara berkembang. 6,7 Alasan  kekurangan  energi dan protein disebabkan oleh banyak faktor, termasuk  tingginya  biaya  protein  dari sumber  hewani  dan  susu.  Asupan  protein makanan  yang  tidak  memadai  terkait  erat dengan  tengkes  (stunting)  pada  anak. 8
Kacang  tanah  bambara  dianggap  sebagai alternatif  pengganti  kedelai  yang  terbukti memiliki  efek  antioksidan  dan  bermanfaat bagi penderita sindrom metabolik. 9
Tengkes (stunting) pada masa kanak-kanak
dapat menyebabkan masalah langsung dan jangka  panjang  termasuk  peningkatan morbiditas dan mortalitas, gangguan perkembangan anak, kapasitas belajar, dan juga dapat meningkatkan risiko infeksi dan penyakit tidak menular saat dewasa. 10 Pola makan  berbahan  dasar  tumbuhan  dan kacang-kacangan dapat meningkatkan asupan  protein  pada  populasi  yang  rentan ini. 11 Kacang tanah kaya akan protein, serat, karbohidrat  kompleks,  dan  mikro  nutrisi esensial  yang  dibutuhkan  untuk  mengatasi masalah tengkes (stunting). 12,13
Banyak penelitian yang membuktikan  bahwa  pola  makan  nabati berpengaruh  positif  terhadap  obesitas  dan penurunan  berat  badan.  Jenis  kelamin merupakan  faktor  risiko  penting  untuk perkembangan  obesitas.  Jenis  kelamin perempuan dikaitkan dengan dua kali risiko kelebihan  berat  badan  atau  mengalami obesitas. 14 Pola  makan  nabati  harus dianggap sebagai pilihan yang layak untuk pengobatan  dan  pencegahan  kelebihan berat  badan  dan  obesitas. 12,13,15 Kajian pemberian akut kacang tanah Bambara pada mencit  BALB-c  sesuai  pedoman  BPOM belum dilakukan. Walaupun kacang Bambara  secara  tradisional  sudah  banyak dikonsumsi oleh masyarakat luas, tetapi uji toksisitas  pada  hewan  uji  tetap  harus dilakukan  sebagai  salah  satu  bukti  dukung terhadap keamanan kacang Bambara. Oleh karena  itu,  penelitian  ini  bertujuan  untuk
mengamati  pengaruh  pemberian  akut  (14 hari)  kacang  tanah  Bambara  pada  mencit BALB-c betina. Pengamatan yang dilakukan  meliputi  pengaruh  terhadap tingkah laku, berat badan dan cara kematian serta  berat  organ  relatif  setelah  pemberian sampel  kacang  tanah  Bambara  dosis tunggal.

## BAHAN DAN METODE

## Rancangan Penelitian
Jenis  penelitian  adalah  penelitian deskriptif  dengan  rancangan  penelitian yang digunakan adalah penelitian eksperimen  untuk  mengetahui  pengaruh pemberian  akut  kacang  tanah  Bambara terhadap  mortalitas,  bobot  badan,  gejala keracunan,  dan  bobot  organ  pada  mencit betina BALB-c
Penelitian dilakukan di Laboratorium Farmakologi
Fakultas Kedokteran,  Kesehatan  Masyarakat,  dan Keperawatan  Universitas  Gadjah  Mada yang  dilaksanakan  pada  bulan  Mei  hingga Juni 2023. Penelitian ini telah mendapatkan persetujuan  etik  yang  diperoleh  dari  tim Komite  Etik  Penelitian  Kedokteran  dan Kesehatan, Fakultas Kedokteran,
Kesehatan  Masyarakat  dan  Keperawatan Universitas  Gadjah  Mada,  Yogyakarta, Indonesia No. KE/FK/0913/EC/2022. Aspek etika penelitian didasarkan pada tiga prinsip  Russel  dan  Burch  dalam  Panduan untuk  perawatan  dan  penggunaan  hewan laboratorium,  yaitu  reduksi,  penggantian,
dan penyempurnaan sehingga hanya menggunakan  lima  ekor  mencit  dalam setiap kelompok.

## Persiapan Sampel
Sampel  kacang  tanah  Bambara diperoleh  dari  Pusat  Penelitian  Kacang tanah Tanah Bambara, Gresik, Jawa Timur, Indonesia.  Sampel  diolah  dengan  dibuat dalam bentuk simplisia kering serbuk.

## Prosedur Penelitian
Pada awal penelitian, setiap  mencit berumur enam minggu dan beratnya antara 30  sampai  40g.  Mencit  sebelumnya diadaptasi  dalam  kandang  laboratorium selama tujuh hari pada kondisi lingkungan (suhu 22±3 o C, kelembaban relatif 30-70%, dengan siklus gelap/terang 12 jam), dengan teknik  pemeliharaan  yang  sama  dan pengawasan  ketat  yang  dilakukan  selama adaptasi mengacu pada pedoman percobaan  uji  toksisitas  in  vivo  BPOM tahun 2014. Sampel penelitian meliputi  15 ekor mencit betina BALB-c yang memenuhi  kriteria  inklusi  dan  eksklusi untuk  pengujian  toksisitas  akut.  Uji pendahuluan dalam penentuan dosis diawali dengan dosis 300mg/kgBB
kemudian ditingkatkan menjadi 2000mg/kgBB  di  setiap  kelompok  dosis. Perhitungan  dosis  ini  mengacu  pada pedoman uji toksisitas PERKA BPOM No. 10  Tahun  2022.  Pada  uji  pendahuluan dengan  dosis  300mg/kg tidak ditemukan tanda  toksisitas  kemudian  dilanjutkan  ke
dosis 2000mg/kgBB. Formulasi sediaan uji utama adalah 2000mg/kgBB dengan rentang  waktu  dari  pukul  07.00  sampai dengan  pukul  08.00.  Formulasi  ini  dibuat dalam  bentuk  serbuk  dan  diberikan  secara oral  dengan  sonde.  Selanjutnya  pengujian ini  diamati  selama  14  hari  oleh  dua  orang pengamat.

## Tes Administrasi Akut
Analisis mortalitas dilakukan dengan  pengamatan  hewan  coba  terhadap gejala  toksik  yang  muncul  diperiksa  ada atau  tidak  adanya  mencit  betina  BALB-c yang mati setiap hari sampai hari ke-14.

## Analisis Bobot Badan
Bobot badan masing-masing mencit BALB-c  diperiksa  dan  dicatat  setiap  hari hingga  hari  ke-14.  Data  rerata  perubahan bobot badan kemudian dibuat dalam bentuk tabel  untuk  melihat  pengaruh  zat  uji terhadap  perkembangan  bobot  badan sampel.

## Analisis Gejala Toksisitas
Perilaku mencit diamati selama dua menit sebelum distribusi zat uji. Efek yang diamati  meliputi  aktivitas  lokomotor, aktivitas motorik, fenomena Straub, piloereksi,  ptosis,  refleks  kornea,  refleks pineal,  lakrimasi,  vasodilatasi,  katalepsi, tremor,  vokalisasi,  air liur,  perilaku  tubuh, buang air besar, dan buang air kecil. Setelah pemberian  akut,  efeknya  diamati  pada menit  ke-0,  ke-30,  ke-60,  ke-120  dan  ke- 240. Efek yang diamati meliputi
pengamatan  farmakologi  terhadap  saraf pusat, saraf otonom, pernapasan, pencernaan, dan sistem ekskresi.
Bobot  Organ  Relatif/Relative  Organ
Weight (ROW):
Pada  hasil  semua  sampel  pada  saat terminasi dilakukan pengamatan makroskopis  apabila  organ  dalam  seperti hati, limpa,  paru, jantung,  ginjal,  ovarium, dan rahim telah diangkat. Organ ini diamati tanda-tanda abnormal dan diamati lesi yang disebabkan  oleh  pemberian  makan  kacang tanah  Bambara. 16 Kemudian  dilakukan pembedahan  organ,  pembersihan  lemak, lalu penimbangan.
Bobot organ relatif/ Relative Organ Weight ( ROW )  masing-masing  organ kemudian  dihitung  menurut  persamaan  di bawah ini: 17
ROW = 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑒 𝑜𝑟𝑔𝑎𝑛 𝑤𝑒𝑖𝑔ℎ𝑡 (𝑔) 𝑏𝑜𝑑𝑦 𝑤𝑒𝑖𝑔ℎ𝑡 𝑏𝑒𝑓𝑜𝑟𝑒 𝑡𝑒𝑟𝑚𝑖𝑛𝑎𝑡𝑖𝑜𝑛 × 100

## Analisis Histopatologi
Uterus  dan  ovarium  yang  telah diangkat kemudian dilakukan pemeriksaan histopatologi  untuk  menemukan  kelainan abnormal  yang  terjadi  akibat  pemberian kacang tanah tanah Bambara.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengamatan  selama  empat  belas hari  perlakuan  menunjukkan  tidak  ada mencit  betina  BALB-c  yang  mati  atau mortalitas  0%.  Pada  pengamatan  bobot badan  mencit  betina  BALB-c  yang  diberi dosis bahan uji  dosis 300 mg/kgBB, 2.000 mg/kgBB,  dan  kontrol  ditunjukkan  pada Tabel 1.
Tabel 1 Data pengamatan berat badan mencit betina galur BALB-c yang diberi bahan uji dosis 300 mg/kgBB, 2.000 mg/kgBB, dan kontrol yang diberikan Akuades
Kelompok Perlakuan Berat (gram) Rerata  Standar Deviasi Hari 1 Hari-7 Hari-14 Dosis 300 mg/kgBB 30  1,02 37,43  1,03 38,2  1,02 Dosis 2000 mg/kgBB 39,5  3,54 40  1,41 41,6  3,22 Kontrol 34  1,05 41,78  1,04 40,68  1,06 Tabel 1 menampilkan hasil
pengamatan berat badan mencit betina galur BALB-c  yang  diberi  bahan  uji  dosis  300 mg/kgBB  dan  kontrol.  Pertambahan  berat badan  mencit  yang  mendapat  sediaan  uji dengan  dosis  300mg/kgBB  sebanding dengan mencit yang tidak mendapat sediaan
uji  (kontrol).  Berat  badan  mencit  yang mendapat  zat  uji  pada  uji  utama  (2000 mg/kgBB ) setara dengan mencit yang tidak mendapat  zat  uji  (kontrol)  seperti  terlihat pada Tabel 1.
Hasil  pengamatan  pada  gejala toksisitas didapatkan tidak ada tanda-tanda
toksisitas  pada  kulit,  bulu,  mata,  selaput lendir, sistem pernapasan, sistem saraf tepi, sistem  saraf  pusat,  aktivitas  somatomotor, dan perilaku serta tidak diamati tremor, air liur  abnormal,  gerakan  usus  abnormal, kelemahan,  dan  tidur  atau  koma  pada  tes pendahuluan  dengan  dosis  300  mg/kgBB dan  pada  tes  utama  dengan  dosis  2000 mg/kgBB.  Efek  toksik  untuk  setiap  dosis didapatkan  tidak  ada  efek  toksik  yang ditemukan  pada  dosis  uji  dalam  waktu  24 jam setelah pengobatan pada uji pendahuluan  dengan  dosis  300  mg/kgBB dan pada uji utama, dengan 2000 mg/kgBB hingga 14 hari setelah paparan.
Hasil  pengamatan  bobot  organ relatif/ Relative  Organ  weight  (ROW) didapatkan hasil pemeriksaan makro patologi  yaitu  berupa  pemeriksaan  organ dalam  (jantung,  hati,  paru,  pankreas, lambung, usus, ginjal, otak, limpa, ovarium, dan  rahim).  Hasil  pengamatan  secara makroskopis  patologi  tidak  ditemukan tanda-tanda  kelainan  pada  kelompok  dosis 300 mg/kgBB dan 2000 mg/kgBB dibandingkan  kelompok  kontrol.  Berikut hasil pemeriksaan berat organ relatif terlihat pada Tabel 2.
Tabel 2 Berat organ mencit putih betina BALB-c yang diberi bahan uji dosis 300 mg/kgBB,

## 2.000 mg/kgBB, dan kontrol yang diberikan Akuades
Kelompok Berat Organ Relatif (g/g) Rerata  Standar Deviasi Jant ung Hati Paru- paru Pank reas Perut Usus Otak Limp a Ginjal Ovariu m  dan rahim Kanan  Kiri Dosis  300 mg/kgBB 0,14  0,00 2,07  0,00 0,24  0.001 0,18  0,001 0,40  0,00 0,34  0,001 0,39  0,00 0,20  0,00 0,25  0,00 0,28  0,00 0,51  0,00 Dosis 2.000mg/ kgBB 0,17  0,05 2,49  0,45 0,29  0,06 0,15  0,03 0,54  0,07 0,33  0,12 0,39  0,09 0,20  0,03 0,31  0,06 0,28  0,07 0,41  0,12 Kontrol 0,15  0,05 1,87  0,06 0,17  0,03 0,25  0,07 0,43  0,12 0,22  0,09 0,43  0,03 0,13  0,06 0,20  0,00 0,22  0,07 0,46  0,16
Tidak  ada  perbedaan  berat  organ antara  kelompok  yang  diberi  perlakuan maupun yang tidak diberi bahan uji utama 2000  mg/kgBB.  Perhitungan  berat  organ juga  dilakukan  dengan  membagi  berat organ  dengan  berat  badan  (berat  organ relatif  (gram/gram).  Berat  badan  relatif
setara  antara  mencit  kontrol  dan  mencit yang  mendapat  dosis  2000  mg/kgBB. Tidak ditemukan perbedaan berat organ/berat  organ  (g/g)  antara  kelompok yang  diberi  perlakuan  dan  tidak  diberi perlakuan  bahan  uji  (kontrol)  pada  uji utama.  Pada  pemeriksaan  histopatologi
uterus  dan  ovarium  tidak  ada  perbedaan antara kontrol dan yang diberi ekstrak.
Beberapa  faktor  penyebab  gizi buruk  pada  anak  adalah  pemberian makanan  pendamping  Air  Susu  Ibu  (ASI) yang kurang memadai. Pemberian makanan pendamping  ASI  yang  tepat  sejak  usia  6 bulan  dan  pemberian  ASI  sampai  usia minimal  2  tahun,  dianggap  sebagai  pola pemberian  makan  yang  terbaik  untuk pertumbuhan  dan  perkembangan  anak. Sebuah  penelitian  menyatakan  bahwa  kue kacang  hijau  dianggap  efektif  sebagai makanan  pendamping  dalam  mengurangi kejadian  stunting. 13 Kacang  tanah,  biji- bijian,  dan  kacang-kacangan  dianggap sebagai  makanan  padat  nutrisi.  Kacang tanah  memiliki  manfaat  yang  memodulasi proses biologis dengan memerangi obesitas, termasuk  termogenesis,  akumulasi  lemak viseral, dan rasa kenyang. Rutin mengonsumsi legum tidak akan mempengaruhi pertumbuhan sehingga tidak mengakibatkan kegemukan atau obesitas. 18
Kajian pemberian akut sangat penting untuk memastikan  dampak  konsumsi  kacang tanah Bambara terhadap kesehatan
manusia. Kacang tanah Bambara merupakan  kacang-kacangan  yang  kurang dimanfaatkan  yang  dapat  memberikan kontribusi  positif  bagi  ketahanan  pangan dan  gizi  di  tingkat  regional  dan  global, khususnya  di  negara-negara  berkembang tropis  yang  tanaman  tersebut  saat  ini
ditanam. 1 Hewan  uji  berumur  5-6  minggu karena  umumnya  hewan  pada  usia  muda lebih  sensitif  terhadap  obat.  Pengujian menggunakan  mencit  betina  adalah  untuk mengetahui  perbedaan  gejala  toksik  yang terjadi  pada  masing-masing  hewan  uji, waktu  timbulnya  gejala  toksik  dan  lama terjadinya toksik. 19
Hasil penelitian menunjukkan bahwa  pemberian  tepung  kacang  tanah Bambara  secara  oral  pada  mencit  betina selama  14  hari  tidak  menyebabkan kematian.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa pemberian  kacang  tanah  Bambara  dosis tunggal  hingga  dosis  maksimum  dapat diberikan  secara  oral.  Secara  teknis  pada hewan  uji  (2000  mg/kgBB),  atau  sekitar 200 kali, dosis yang biasa digunakan pada manusia tidak menyebabkan kematian pada hewan percobaan. Dengan demikian, kami tidak  dapat  menentukan  LD50  dari penelitian,  yaitu  nilai  LD50  akan  lebih besar dari 2000 mg/kgBB. Menurut kriteria, hasil  ini  memiliki  signifikansi  toksikologi. Hal  ini  dimaksudkan  agar  sifat  toksisitas akut  kacang  tanah  Bambara  tidak  bersifat toksisitas bahan uji. Kacang tanah Bambara pada  dosis  tertinggi  tidak  menyebabkan efek  toksik  yang  dikategorikan  NOAEL ( No Observed Adverse Effects Level ). 19
Pemberian  dosis  kacang  tanah Bambara  secara  oral  tidak  menyebabkan abnormal atau mengubah keadaan perilaku atau fisiologis mencit. Pengamatan adanya
gejala  toksik  pada  organ  dan  sistem dipengaruhi  oleh  dosis.  Gejala  toksik ditandai  dengan  perubahan  perilaku  pada hewan uji. Gejala toksik pada sistem saraf pusat  diamati  pada  sedasi,  kejang,  dan tremor.  Gejala  toksik  pada  sistem  saraf sensorik  diamati  pada  refleks  kornea, refleks pineal, fleksi, dan haffner.
Pengamatan  sistem  saraf  otonom  diamati pada air liur, lakrimasi, dan buang air kecil. Pengamatan  sistem  neuromuskuler  dan aktivitas  motorik  diamati  pada  fenomena Straub.  Pengamatan  sistem  pencernaan diamati  pada  saat  buang  air  besar.  Ptosis merupakan  gejala  yang  terjadi  pada  mata dan organ piloereksi merupakan gejala pada organ kulit.
Hasil  dari  penelitian  menunjukkan bahwa  pemberian  kacang  tanah  Bambara secara  oral  tidak  menyebabkan  kelainan atau perubahan pada perilaku atau keadaan fisiologis mencit pada uji akut. Pengamatan dilakukan  pada  T0,  T30,  T60,  T120,  dan T240  menit  dengan  durasi  selama  2  menit untuk  setiap  titik  waktu  kecuali  untuk menggantung, pembentukan kembali, refleks  kornea,  refleks  pineal,  fleksi,  dan haffner.  Pengamatan  secara  umum  terlihat tidak mempengaruhi refleks kornea, refleks pineal,  fleksi,  dan  haffner  pada  hewan  uji betina. Artinya kacang tanah Bambara tidak memengaruhi sistem saraf pusat. Pemberian dosis  kacang  tanah  Bambara  pada  mencit dibandingkan  kontrol  tidak  menimbulkan
gejala  dibandingkan  kontrol  defekasi. Pemberian  dosis  pada  mencit  betina menunjukkan tidak adanya gejala berkemih dibandingkan  dengan  kontrol.  Artinya kacang tanah Bambara tidak menimbulkan gejala pada sistem pencernaan dan ekskresi.
Setelah 14 hari pengamatan, hewan uji  dari  masing-masing  kelompok  dibedah lebih lanjut. Pembedahan meliputi pemeriksaan  jantung,  paru,  hati,  ginjal, limpa dan organ reproduksi yaitu observasi ovarium  dan  uterus.  Penimbangan  organ dilakukan; hal ini dilakukan untuk mengetahui efek toksik sediaan uji kacang tanah Bambara terhadap sistem organ pada hewan  uji.  Efek  toksik  yang  ditimbulkan pada  organ  pada  hewan  uji  biasanya ditandai  dengan  perubahan  warna,  ukuran dan bentuk. Pertambahan berat organ relatif mencit  betina  dianggap  normal.  Tidak  ada perbedaan  yang  dapat  diamati  antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan dalam  hal  berat  organ  relatif  (Tabel  2). Organ pada mencit betina yang diberi dosis kacang  tanah  Bambara  pada  semua  dosis tidak  ditemukan  perubahan  warna,  ukuran dan bentuk dibandingkan dengan kelompok kontrol.  Artinya  kacang  tanah  Bambara tidak memiliki efek toksik pada organ vital, terutama pada hati dan ginjal sebagai target utama  efek  toksik.  Organ  mencit  betina yang  diberi  dosis  kacang  tanah  Bambara pada semua dosis tidak ditemukan perubahan  warna,  ukuran  dan  bentuk
dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol. Organ  pada  mencit  betina  yaitu  jantung, ginjal, paru, hati, limpa, rahim, dan ovarium tidak  mengalami  perubahan  (normal)  dan tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna  dibandingkan  dengan  kelompok kontrol pada pemberian sediaan uji tepung halus  Kacang  Tanah  Bambara  pada  setiap taraf  dosis.  Efek  toksik  suatu  zat  dapat berbeda  antara  mencit  jantan  dan  betina, karena kami ingin mengetahui pengaruhnya pada  organ  reproduksi  wanita,  kami melakukannya pada mencit betina dewasa. 20
Hasil penelitian menunjukkan bahwa hingga dosis 2000 mg/kgBB Kacang Tanah  Bambara  tidak  menimbulkan  efek toksik  dan  tidak  menyebabkan  kematian selama  14  hari  pengamatan.  Hal  ini menunjukkan bahwa Kacang tanah Bambara  sampai  dosis  2000  mg/kgBB aman  digunakan  sesuai  dengan  batas  uji keamanan yang dikeluarkan BPOM. Berdasarkan  hasil  tersebut  juga  dapat diketahui  derajat  toksisitas  tepung  halus Kacang  Tanah  Bambara  sebagai  bahan praktis tidak beracun.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  tidak terdapat  mencit  betina  BALB-c  yang  mati setelah  pemberian  kacang  tanah  Bambara secara  oral.  Kacang  tanah  Bambara memiliki  efek  positif  pada  berat  badan,
tidak  memiliki  gejala  keracunan  pada aktivitas  fisik  atau  perilaku  lainnya  dan tidak  ada  perubahan  signifikan  pada  berat organ  relatif.  Nilai  LD50  kacang  tanah Bambara  lebih  besar  dari  2000  mg/kgBB menunjukkan  keamanannya.  Studi  lebih lanjut diperlukan untuk menentukan bahwa kacang tanah Bambara dapat di standardisasi  sebagai  tingkat  farmasi  dan aman  dapat  diterapkan  untuk  suplemen makanan manusia.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Penulis   menyatakan   bahwa   tidak ada konflik kepentingan pada semua pihak yang terkait dalam penelitian ini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada Pusat Penelitian Kacang Tanah Bambara, Gresik, Indonesia  yang  telah  memberikan  sampel Kacang  Tanah  Bambara,  Laboratorium Farmakologi
Fakultas Kedokteran,
Kesehatan  Masyarakat  dan  Keperawatan Universitas  Gadjah  Mada  yang  membantu penelitian penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Azman Halimi R, Barkla BJ, Mayes S, King  GJ.  The  potential  of  the underutilized pulse bambara groundnut (Vigna  subterranea  (L.)  Verdc.)  for nutritional  food  security.  Journal  of Food Composition and Analysis. 2019 Apr 1;77:47–59.
2.  Tan  XL,  Azam-Ali  S,  Goh  E  Von,
Mustafa  M,  Chai  HH,  Ho  WK,  et  al. Bambara Groundnut: An Underutilized Leguminous  Crop  for  Global  Food Security  and  Nutrition.  Front  Nutr. 2020 Dec 10;7.
3.  Mayes  S,  Ho  WK,  Chai  HH,  Gao  X, Kundy AC, Mateva KI, et al. Bambara groundnut:  an  exemplar  underutilised legume  for  resilience  under  climate change.  Planta  [Internet].  2019  Sep  1 [cited  2023  Aug  3];250(3):803–20.
Available from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3126 7230/
4.  Paliwal  R,  Abberton  M,  Faloye  B,
Olaniyi  O.  Developing  the  role  of legumes in West Africa under climate change. Curr Opin Plant Biol [Internet]. 2020 Aug 1 [cited 2023 Aug 3];56:242–58. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3261
6362/
5.  Paliwal  R,  Abberton  M,  Faloye  B,
Olaniyi  O.  Developing  the  role  of legumes in West Africa under climate change.  Curr  Opin  Plant  Biol.  2020
Aug;56:242–58.
6.  Kuku-Shittu O, Onabanjo O, Fadare O, Oyeyemi  MA.  Child  malnutrition  in Nigeria:  Evidence  from  Kwara  State: 2016;
7.  Wulandari RD, Laksono AD, Kusrini I,
Tahangnacca  M.  The  Targets  for
Stunting Prevention Policies in Papua, Indonesia: What Mothers’ Characteristics Matter? Nutrients [Internet]. 2022 Feb 1 [cited 2023 Aug 3];14(3). Available from:
/pmc/articles/PMC8839542/
8.  Maulidiana AR, Sutjiati E. Low Intake of  Essential  Amino  Acids  and  Other Risk Factors of Stunting among Under- Five  Children  in  Malang  City,  East Java,
Indonesia. https://doi.org/104081/jphr20212161 [Internet]. 2022 Apr 27 [cited 2023 Jul 18];10(2). Available from:
https://journals.sagepub.com/doi/full/1 0.4081/jphr.2021.2161
9.  Prasetyastuti, Ghozali DS. The Effects of  Soyferment-Tempeh  on  Lipid Profile,  Retinol-Binding  Protein  4 (RBP4),  and  Phosphoenolpyruvate
Carboxykinase (PEPCK) Gene
Expression  in  Type  2  Diabetic  Mice. Indonesian  Journal  of  Pharmacy [Internet]. 2021 May 11 [cited 2023 Jul 18];32(2):193–200.  Available  from: https://journal.ugm.ac.id/v3/IJP/article /view/1354
10.  Stewart  CP,  Iannotti  L,  Dewey  KG, Michaelsen KF, Onyango AW.
Contextualising
complementary
feeding  in  a  broader  framework  for stunting prevention. Matern Child Nutr [Internet].  2013  Sep  [cited  2023  Jul
18];9 Suppl 2(Suppl 2):27–45.
Available from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2407 4316/
11.  Utilization  of  Bambara  Groundnut
Flour  Blends  in  Bread  Production [Internet].  [cited  2023  Jun  24].
Available
from: https://www.medwelljournals.com/full text/?doi=jftech.2009.111.114 12.   Turner-McGrievy  G,  Mandes  T,
Crimarco  A.  A  plant-based  diet  for overweight and obesity prevention and treatment. J Geriatr Cardiol [Internet]. 2017  [cited  2023  Jul  25];14(5):369. Available from: /pmc/articles/PMC5466943/
13.  Nasution  Z,  Nurhayati  I,  Mahdiyah.
The  Effectiveness  of  Counseling  and Mung  Bean  (Vigna  radiata  L)  Premix Cookies  as  Complementary  Food  to Prevent Stunting. Curr Nutr  Food Sci. 2022 Jun 28;19(3):317–23.
14.  Kapoor  N,  Arora  S,  Kalra  S.  Gender Disparities  in  People  Living  with Obesity  -  An  Unchartered  Territory.  J Midlife  Health  [Internet].  2021  [cited 2023  Jul  25];12(2):103.  Available from: /pmc/articles/PMC8409720/ 15. Marrone G, Guerriero C, Palazzetti D,
Lido P, Marolla A, Di Daniele F, et al. Vegan  Diet  Health  Benefits  in Metabolic Syndrome. Nutrients [Internet]. 2021 Mar 1 [cited 2023 Aug 3];13(3):1–24. Available from:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3380 1269/
16. Gadhi CA, Lakmichi H, Bakhtaoui FZ, Ezoubeiri A, El Jahiri Y, El Mansouri A,  et  al.  Toxicity  Profile  of  the Aqueous  Ethanol  Root  Extract  of Corrigiola telephiifolia Pourr. (Caryophyllaceae)  in  Rodents.  Evid Based  Complement  Alternat  Med [Internet].  2011  [cited  2023  Jul 18];2011. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2095
3424/
17.  Samat  S,  Enchang  FK,  Razak  AA,
Hussein FN, Ismail WIW. Adulterated honey consumption can induce obesity, increase  blood  glucose  level  and demonstrate  toxicity  effects.  Sains Malays  [Internet].  2018  Feb  1  [cited 2023  Jul  18];47(2):353–65.  Available from:
https://www.researchgate.net/publicati on/324153161_Adulterated_honey_co nsumption_can_induce_obesity_increa se_blood_glucose_level_and_demonst rate_toxicity_effects
18. Türkmen H, Sivrikaya SK. The dietary habits and life satisfaction according to the  food  groups  consumed  by  young people. Progress in Nutrition [Internet]. 2020  Dec  21  [cited  2023  Jul 18];22(4):e2020053–e2020053.
Available from: https://www.mattioli1885journals.com
/index.php/progressinnutrition/article/ view/8199
19.  Peraturan  BPOM  No.  7  Tahun  2014
Tentang  Pedoman  Uji  Toksisitas Nonklinik  Secara  In  Vivo  [Internet]. [cited  2023  Jul  18].  Available  from: https://peraturan.go.id/id/peraturan- bpom-no-7-tahun-2014
20. Puspitasari I, Susidarti RA,
Nurrochmad A, Pridiyanto, Utami DA,
Febrian  P,  et  al.  Acute  and  Sub- Chronic  Toxicity  Study  of  1-(2,  5- Dihidroxyphenil)-3- Pyridine-2-Il- Propenone  In  Adult  Female  Mice. Indonesian  Journal  of  Pharmacy [Internet].  2021  Apr  1  [cited  2023  Jul 18];32(2):150–7. Available from:
https://jurnal.ugm.ac.id/v3/IJP/article/
view/1258