Accepted : 26/07/2020

## JURNAL PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN IPA
Vol. 11, No. 2 (2020) h. 230-242
http://jurnal.untan.ac.id/index.php/PMP
CHITOSAN INHIBITION TEST AGAINST E. coli AND DIGESTIBILITY OF THE RATION IN THE IN-VITRO METHOD
Eli Sahara, Sofia Sandi, Fitra Yosi Staf Pengajar Universitas Sriwijaya E-mail: elisahara.unsri@gmail.com
DOI : dx.doi.org/10.26418/jpmipa.v11i2.37996

## Abstract
Diarrhea  and  vomiting  are  often  caused  by  E  coli  bacteria.  E  coli bacteria  has  a  strain  of  Shigatoxigenic  Escherichia  coli  (STEC), producing  Shiga  poisons  or  poisons  such  as  Shiga  (verotoxin)  which are harmful and pollute nature. This strain of the E coli bacterium has a detrimental effect because it excludes one or both types of Shiga Like Toxin -1 (Stx -1) and Shiga Like Toxin-2 (Stx-2) toxins. This bacterial infection has the potential as a zoonotic agent because it has been found in feces and sheep meat, feces and beef meat, chicken feces and human feces. If this bacterial colony inceases in the digestive tract of poultry it will  disturb  the  productivity  of  the  livestock.    Therefore  it  must  be watched out and studied more deeply. The objectives of the study are 1) to see the inhibitory power of chitosan on the growth and development of E coli bacteria in vitro 2) the test of digestibility of dry matter (BK) and crude protein (PK) ration in vitro. The treatments given in this test are: R0 =  control  (without  chitosan), R1  = 0.5% chitosan, R2 = 1% chitosan, R3 = 1.5% chitosan, R4 = 2% chitosan, R5 = 2.5% chitosan. The parameters measured were 1) inhibition of chitosan against E. coli growth based on clear zone diameter 2) digestibility of dry matter (BK) and  crude  protein  (PK)  ration  in  vitro.  The  results  showed  that  the higher  level  of  chitosan  administration  showed  greater  inhibition, which was indicated by the greater diameter of the clear zone caused. The provision of 2.5% chitosan shows medium inhibition that is has a range  of  10-14  mm.  The  addition  of  a  dose  of  1.5%  chitosan  in  the ration was able to increase the digestibility of dry matter by 7.86% and the  digestibility  of  crude  protein  11.20%  higher  than  the  control treatment  (without  chitosan).  The  conclusion  of  this  study  is  that chitosan can inhibit the growth of E coli and improve the digestibility of dry matter (BK) and crude protein (PK) for the better.
Keywords: Chitosan, inhibiting ability, E coli, digestibility, in vitro
Vol. 11, No. 2 (2020) h. 230-242

## Abstrak
Penyakit  diare  dan  muntah-muntah  sering  disebabkan  oleh  bakteri E coli .    Bakteri E  coli memiliki  strain Shigatoxigenic  Escherichia  coli (STEC),  menghasilkan  racun  Shiga  atau    racun  seperti  Shiga (verotoxin) yang  berbahaya dan mencemari  alam. Strain dari bakteri
E coli ini mempunyai efek merugikan karena mengeluarkan salah satu atau kedua jenis toxin Shiga Like Toxin -1 (Stx -1) maupun Shiga Like Toxin-2 (Stx-2).  Infeksi bakteri ini berpotensi sebagai agen zoonosis karena sudah pernah ditemukan pada feses dan daging domba, feses dan daging sapi serta feses ayam dan feses manusia.  Jika koloni bakteri ini tinggi  dalam  saluran  pencernaan  unggas  akan  mengganggu produktivitas  ternak  tersebut.    Oleh  sebab  itu  harus  diwaspadai  dan dikaji  lebih  mendalam.  Tujuan  penelitian  adalah  1)  melihat  daya hambat kitosan terhadap pertumbuhan dan perkembangan bakteri E coli secara in  vitro 2)  menguji  kecernaan  bahan  kering  (BK)  dan  protein kasar  (PK)  ransum  secara in  vitro .  Perlakuan  yang  diberikan  dalam
pengujian ini adalah: R0 = kontrol (tanpa kitosan), R1 = 0,5% kitosan, R2  =  1  %  kitosan,  R3  =  1,5%  kitosan, R4  =  2%  kitosan,  R5  =  2,5% kitosan.      Parameter  yang  diukur  adalah  1)  daya  hambat  kitosan terhadap  pertumbuhan E.  coli berdasarkan  diameter  zona  bening  ( in vitro ) 2) kecernaan bahan kering (BK) dan protein kasar (PK) ransum
secara in  vitro .  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi level pemberian kitosan menunjukkan daya hambat yang semakin besar yang  ditandai  oleh  semakin  besarnya  diameter  zona  bening  yang ditimbulkan.  Pemberian  2,5%  kitosan  menunjukkan  daya  hambat sedang  yaitu  memiliki  range  10  -  14  mm.  Penambahan  dosis  1,5% kitosan dalam ransum, mampu meningkatkan kecernaan bahan kering 7,86% dan kecernaan protein kasar 11,20% lebih tinggi dari perlakuan kontrol (tanpa kitosan). Kesimpulan penelitian ini adalah bahwa kitosan mampu menghambat pertumbuhan E coli dan meningkatkan kecernaan bahan kering (BK) serta protein kasar (PK) menjadi lebih baik.
Kata kunci: Kitosan, daya hambat, E. coli , kecernaan ransum, in vitro
Faktor mikro keberhasilan usaha  ternak  unggas  yang  perlu diperhatikan adalah masalah pencegahan dan pengendalian penyakit. Pengendalian penyakit dimulai  dari  menjaga  pakan  dari cemaran  kuman,  menjaga  kualitas pakan  dan  meningkatkan  daya  tahan tubuh.  Awal  mula  sumber  cemaran kuman  adalah  lewat  pakan  dan  air minum. Salah satu kuman yang hidup
di alam dan sering mencemari air dan tanah adalah bakteri Escherichia coli . Bakteri E coli juga hidup dalam usus manusia  dan  hewan  (Melliawati, 2009).  Tapi,  ada  satu  jenis  bakteri E coli yang  sangat  berbahaya  jika mencemari  tubuh  yaitu Escherichia coli O157:H7.    Jenis  bakteri E  coli yang berbahaya tersebut adalah strain STEC  atau  shiga  toxin  produksi bakteri E  coli yang  menyebabkan
diare, demam dan muntah. Suardana, et al. (2010) menjelaskan bahwa telah ditemukan  shiga  like toxin dari
Eschericia coli O157: H7 pada feses sapi,  feses  ayam,  daging  sapi,  dan feses manusia yang mengindikasikan keberadaan  bakteri  tersebut  sebagai agen zoonosis yang sangat membahayakan dan mengancam kehidupan.  Bakteri E  coli jenis  ini juga  banyak  hidup  di  alam  seperti tanah  dan  air  kotor.  Sutiknowati (2016)  menegaskan bahwa E. coli di alam  terbuka  hidup  di  dalam  tanah. Jika  terjadi  pencemaran  (umumnya pencemar  organik  yang  ditandai dengan  BOD  tinggi),  tanah  menjadi media  pertumbuhan  yang  baik  untuk bakteri ini dan menyebabkan peningkatan konsentrasi E. coli dalam tanah.  Pencemaran  lewat  air  juga sering  terjadi  karena  air  merupakan media kehidupan bakteri E coli . Hal ini juga diungkapkan oleh Zikra, et al.
(2018)  bahwa  penelitian  pada  depot air minum didapatkan hasil penelitian 9/9  terdapat  cemaran  mikroba  yaitu
1,0  x  10 2 .  Pada  Kecamatan  Bungus Padang ditemukan 3/5 sampel terdapat bakteri Escherichia coli .
Upaya  yang  bisa  dilakukan
untuk menghindari kuman ini adalah menjaga kebersihan dan sanitasi serta membentengi lingkungan ternak seperti  air  minum  dan  pakan  dari cemaran  kuman  tersebut.  Kitosan adalah  salah  satu  zat  yang  bersifat sebagai anti mikroorganisme
(Winiati,  et  al.,  2016).  Kitosan  juga dikenal sebagai serat hewan yang bisa berperan  sebagai  prebiotik  bagi ternak  unggas.  Fachri  &  Sartika (2012)  menyatakan  bahwa  kitosan merupakan  serat  makanan  yang terdapat  pada  tempurung  udang  dan kepiting,  terutama  terdiri  dari  kitin
yang  sangat  bermanfaat  bagi  tubuh manusia.    Jika kitosan dicampurkan ke  dalam  pakan  atau  air  minum diharapkan  akan  menjaga  tubuh ternak  dari  paparan  kuman  serta meningkatkan  daya  imun  ternak tersebut.  Kecuali  itu  kitosan  yang merupakan  serat  hewan  ini  akan menstimulasi pertumbuhan dan perkembangan mikroba yang bersifat menguntungkan dalam saluran pencernaan untuk tumbuh dan berkembang, sehingga kondisi
saluran  pencernaan  unggas  menjadi kondusif  dan  sehat.  Salah  satu  jenis bakteri  menguntungkan  yang  hidup dalam  saluran  pencernaan  unggas adalah  bakteri  asam  laktat  (BAL). Menurut  Afriyanti,  et  al.  (2019) bahwa  bakteri  asam  laktat  (BAL) yang hidup dalam saluran pencernaan akan  menghasilkan  produksi  asam laktat  dan short  chain  fatty  acid (SCFH)  yang  akan  menurunkan  pH saluran  pencernaan  menjadi  asam. Penurunan  pH  saluran  pencernaan akan  memaksimalkan  bakteri  gram positif  dan  menurunkan  bakteri merugikan  sehingga  nutrisi  pakan akan terserap maksimal. Hasil massa protein  daging  yang  didapatkan dengan  pemberian  sinbiotik  3ml/100 gram  ransum  adalah  232,15  gram yang nyata lebih tinggi dari perlakuan tanpa  pemberian  sinbiotik  yaitu 130,58 gram.  Artinya potensi bakteri menguntungkan  yang  hidup  dalam saluran pencernaan nyata mempengaruhi tingkat retensi protein dalam tubuh ternak unggas. Selanjutnya Krismaputri, et al. (2016) juga  menyatakan  bahwa  penurunan pH  akibat  produksi  SCFH  dapat meningkatkan
bakteri
menguntungkan  dan  menurunkan bakteri  merugikan  sehingga  dapat
menjaga  kondisi  mikroflora  dalam saluran  pencernaan.    Populasi  BAL yang tergolong ke dalam jenis bakteri menguntungkan tersebut akan menghasilkan  enzim-enzim  untuk membantu  proses  pencernaan  dalam saluran  pencernaan.      Hal  ini  sesuai dengan pernyataan Krismiyanto, et al. (2014)  bahwa  populasi  BAL  akan menghasilkan  banyak  enzim  yang mampu  mendegradasi  polisakarida menjadi bentuk monomer  yang lebih sederhana.    Hal  seperti  ini  lah  yang akan menyebabkan kecernaan ransum menjadi lebih baik.
Hasil analisa kitosan oleh CV biokitosan  Indonesia  tahun  2015
(Tabel 1), menyatakan bahwa kitosan adalah non E coli dan non Salmonella . Artinya kitosan mempunyai kekuatan untuk menghambat pertumbuhan dan perkembangan    bakteri E  coli dan Salmonella .  Sofyan,  et  al.  (2008) melaporkan bahwa penambahan kitosan  1%  dalam  tepung  cacing tanah  (TCT)  mampu  menghambat pertumbuhan E  coli dan  cenderung memperbaiki retensi protein dari TCT yang  dikonsumsi  ayam  broiler. Sahara (2017) sudah melaporkan juga bahwa ransum yang dicampur dengan kitosan  memiliki  daya  simpan  yang lebih  lama  14,47  %    dibanding dengan yang tidak dicampur kitosan. Hal  ini  disebabkan  karena  kitosan mampu menekan pertumbuhan mikroba.  Berdasarkan  hal  tersebut maka  kekuatan  dosis  kitosan  yang optimal dalam menghambat pertumbuhan E coli serta pengaruhnya terhadap tingkat
kecernaan  ransum  sangat  perlu dibuktikan.

## MATERI DAN METODE
Pengujian  Aktivitas  Antimikroba Metode  Difusi  Agar  (Uji  Daya Hambat  Kitosan  terhadap  E  coli) (Brocks, et al., 2006)
Penelitian  tahap  ini  adalah untuk  membuktikan  daya  hambat kitosan  terhadap E  coli dalam  media agar. Kitosan yang digunakan adalah kitosan  murni  dari  Laboratorium Teknologi  Pengolahan  Perikanan Institut  Pertanian  Bogor.  Kitosan murni dalam berbagai level dilarutkan dalam asam asetat 2%.
Dosis  kitosan  yang  diujikan bertingkat,  adalah  lanjutan  dosis kitosan yang digunakan Sofyan, et al.
(2008)  dengan  dosis  terendah  0,5% sampai yang tertinggi 2,5%. Perlakuan  yang  diberikan  dalam pengujian ini adalah:
1.   R0 = antibiotik sebagai kontrol
2.   R1 = 0,5% kitosan
3.   R2 = 1 % kitosan
4.   R3 = 1,5% kitosan
5.   R4 = 2% kitosan
5.   R5 = 2,5% kitosan
Sebanyak 20 µl larutan kitosan dimasukkan ke dalam
sumuran  pada  media  NA  yang  telah diinokulasikan  bakteri E  coli yang ditanam  secara pour  plate dengan kepekatan 0,5 McFarland . Selanjutnya diinkubasi selama 24 jam pada  suhu  37 0 C.  Zona  hambat (bening)  yang  terbentuk  pada  media uji  diukur  menggunakan  jangka sorong.  Variabel  yang  diukur  adalah diameter  zona  hambat  (bening)  yang terbentuk pada masing-masing lubang sumuran dengan satuan mm.
Vol. 11, No. 2 (2020) h. 230-242
Pembuatan Ransum untuk Pengujian  Kecernaan  secara  In Vitro Pada  pengujian  kecernaan ransum  secara in  vitro diperlukan pembuatan  ransum  terlebih  dahulu yang  disesuaikan  dengan  susunan ransum  unggas  petelur  periode layer yang akan diujikan nantinya ke ternak unggas  pada  saat  uji in  vivo .    Uji biologis  ke  ternak  ayam  ( in  vivo ) adalah merupakan tahapan penelitian lanjutan  (pada  penelitian  tahap  II). Ransum  percobaan  yang  digunakan adalah  disusun  dengan  kandungan Protein 16,63% dan Energi Metabolis 2853,8  kkal/kg.  Bahan  baku  yang
digunakan untuk ransum basal adalah jagung  50%,  dedak  padi  20%, konsentrat  30%.  Kitosan  digunakan sebagai  perlakuan  dengan  dosis bertingkat. Tahapan pengujian kecernaan  ransum  secara in  vitro ini adalah  untuk  menguji  kecernaan ransum yang terbaik dengan pemberian  level  kitosan  bertingkat. Kitosan yang digunakan untuk penelitian  adalah  kitosan  murni, diperoleh dari Laboratorium Teknologi Pengolahan Perikanan IPB yang  sudah  mempunyai  sertifikat HACCP No. 24/PP/HACCP/PK/1/2010 (Tabel 1) Tabel 1.  Hasil Analisa Kitosan Items Specification Results Method Appearance White or Yellow Pale Yellow Odor Odorless Complies Solution 99% Min. 99% UP 6% Soln.in HCl 1,0% Moisture Content 12,0% Max 8,5% Infrared Moisture Meter Ash Content 1,0% Max 0,4% Ashing Method Protein Content  1,0% Max. 0,5% Lowry Methode De-Acetylation (DAC) 70% Min. 87,5% PVSK Viscocity 50 cps Max. 20 cps 0,5% Soln. In Acid Transparency 30 cm Min. 39 cm Transparency meter (JIS K) pH (5% dispersion) 6,5 - 7,5 7,1 pH meter As 0,2 ppm Max. Complies ICP Pb 1,0 ppm Max. Complies ICP E-Coli Negative Negative Flat Disk Method Salmonella Negative Negative Flat Disk Method Particale size Crushed 70 mesh Mesh Method
Keterangan:  Certificate  of  Analysis  Chitosan  (CV  Bio  Chitosan  Indonesia)  th.
2015 Susunan perlakuannya adalah; R0 = RB + 0,5% kitosan, R1 = RB + 1% kitosan, R2 = RB + 1,5% kitosan R3  =  RB  +  2%  kitosan,  R4  =  RB  + 2,5%  kitosan.  Sebelum  ditambahkan kitosan untuk masing-masing perlakuan,  maka  ransum  basal  yang sudah dibuat terlebih dahulu
ditentukan  kandungan  bahan  kering (BK)  dan  protein  kasar  (PK)  dengan menggunakan analisis proksimat.
Kecernaan bahan kering (BK) dan kecernaan  Protein  Kasar  (PK) ransum  in  vitro  mengikuti  metode Parson (1991) yang sudah dimodifikasi Pembuatan Larutan Pepsin Larutkan 6,1 ml HCL dengan 1  liter  aquades.  Siapkan  1  liter aquades  lalu  tambahkan  0,2gram pepsin, kemudian homogenkan.
Larutan  HCL  yang  telah  dibuat, dipanaskan di atas hot plate pada suhu 42 0 –  45 0 C  lalu  tambahkan  larutan pepsin  yang  telah  dibuat  tadi  dan homogenkan hingga larut.

## Uji In Vitro
Timbang 5 gram ransum yang sudah  diketahui  kandungan  bahan kering  dan  protein  kasar,  kemudian tambahkan  kitosan  sesuai  dosis perlakuan  dan  dimasukkan  ke  dalam botol vial.  Tambahkan 100 ml larutan pepsin  yang  sudah  dihangatkan dengan suhu 42 0 C – 45 0 C.  Kemudian botol vial dimasukkan ke dalam water sheker  bath selama  16  jam.    Setelah
16 jam keluarkan botol vial dari water shaker  bath lalu  biarkan  selama  15 menit  hingga  residunya  mengendap. Saring  supernatan  perlahan-lahan menggunakan  kertas  saring  yang sudah  ditimbang,  lalu  bilas  botol dengan aseton. Residu yang diperoleh selanjutnya dianalisa kandungan bahan  kering  (BK)  dan  protein kasarnya (PK) menggunakan analisis proksimat  untuk  mendapatkan  data persentase daya cerna dari kitosan.

## Analisis Data
Data kandungan bahan kering (BK)  dan  protein  kasar  (PK)  yang didapat dari analisis proksimat (Metode Wende, 1865 dalam Tillman,  et  al.  (1991)  ditabulasi  dan dibaca  secara  deskriptif  (Prabowo  & Heriyanto, 2013).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kitosan mempunyai sifat sebagai  antimikroba.  (Tabel  2). Diameter zona bening dari uji tantang kitosan dengan E coli secara in vitro menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi level penambahan kitosan menunjukkan  diameter  zona  bening yang semakin besar.
Gambar 1.  Uji daya hambat kitosan dengan E coli secara in vitro
peningkatan kecernaan
Vol. 11, No. 2 (2020) h. 230-242
Tabel 2.  Daya hambat kitosan terhadap Eschericia coli No Perlakuan Diameter Zona Bening (mm) Bakteri Gram (-) Escherichia coli* 1 R  0%kitosan (antibiotic) 20 2 R  0,5% kitosan 11 3 R 1% kitosan 12 4 R 1,5% kitosan 12,5 5 R 2% kitosan 13,5 6 R 2,5% kitosan 14 Keterangan:1) *Diameter cakram 6 mm 2)  Hasil uji laboratorium Teknologi Hasil Pertanian Unsri Th.
2019
Berdasarkan  hasil  Tabel  2, terlihat  bahwa  semakin  tinggi  dosis kitosan  menunjukkan  diameter  zona bening  yang semakin besar.  Artinya kitosan mampu menghambat pertumbuhan E  coli .    Damayanti, et
al. (2016) menyatakan bahwa diameter zona hambat larutan kitosan 2%  terhadap  bakteri E  coli adalah 11,67  mm  lebih  tinggi  dibanding Bacillus  subtillis 1,67  mm  dan
Staphilococcus  aureus 9,17  mm.
Kekuatan daya hambat kitosan terhadap bakteri E coli pada penelitian  ini  termasuk  kategori sedang (zona hambat 10-14 mm).  Hal ini sesuai dengan pernyataan Nazri, et al. (2011) dalam Djohari, et al. (2019) bahwa  diameter  daya  hambat  yang beraktivitas kuat (15-20 mm), diameter daya hambat yang beraktivitas  sedang  (10-14  mm)  dan diameter daya hambat yang
beraktivitas  lemah  (<  9  mm).      Pada uji  lain,  kekuatan  daya  hambat kitosan  sebagai  antimikroba  juga sudah  terbukti  dari  laporan  Sahara (2017)  bahwa  uji  tantang  kitosan terhadap Salmonella dengan  dosis
2,5%  kitosan  menunjukkan  diameter zona  bening  16,63  mm  (termasuk beraktivitas  kuat).    Mekanisme  daya hambat  kitosan  diungkapkan  oleh Suherman,  et  al.  (2018)  bahwa molekul kitosan mempunyai kemampuan untuk berinteraksi dengan senyawa pada permukaan sel bakteri kemudian teradsorbsi membentuk  semacam  layer  atau lapisan  yang  menghambat  saluran transportasi sel sehingga sel mengalami  kekurangan  substansi  un tuk berkembang biak
dan mengakibatkan  matinya  sel  bakteri.
Hal  ini  membuktikan  bahwa  kitosan mempunyai  sifat  antibakteri  dan mempunyai  kekuatan  daya  hambat terhadap perkembangan bakteri patogen  seperti  bakteri E  coli dan Salmonela . Pengaruh Kitosan dalam Ransum  terhadap  Kecernaan Bahan Kering (BK) dan Kecernaan  Protein  (PK)  secara In Vitro Keterangan : R0 = antibiotic (tanpa kitosan sebagai kontrol)
R1 = 0,5% kitosan R2 = 1 % kitosan R3 = 1,5% kitosan R4 = 2% kitosan R5 = 2,5% kitosan
Vol. 11, No. 2 (2020) h. 230-242
Kitosan  tergolong  ke  dalam serat hewan yang sukar dicerna secara langsung  dalam  saluran  pencernaan ayam.    Hal  ini  disebabkan,  unggas termasuk  jenis  ternak  yang  lebih sedikit  mempunyai  bakteri  pencerna serat  dalam  saluran  pencernaannya, jika dibandingkan dengan ruminansia.  Jenis  bakteri  yang hidup dalam  saluran  pencernaan  ayam adalah bakteri (predomina), fungi dan protozoa  (Albazaz  &  Bal,  2014). Febriyossa et  al (2013)  melaporkan hasil penelitiannya tentang komposisi koloni  bakteri  yang  hidup  dalam pencernaan  ayam  broiler  pedaging yaitu bakteri pemfermentasi (57 x 10 7 cfu/g),  bakteri  amilolitik  (118  x  10 7 cfu/g),  bakteri  selulolitik  (57  x  10 7 cfu/g)  dan  bakteri  proteolitik  (52  x 10 7 cfu/g).    Mikroflora  utama (predominan)  yang  hidup  dalam saluran pencernaan ini membutuhkan nutrien untuk tumbuh dan berkembang.  Berdasarkan  sifat  dan wujudnya,  kitosan  merupakan  solusi yang cocok sebagai makanan mikroflora utama karena selain tidak toxic juga  bersifat  biokompatibel (Rizki,  et  al.,  2019).        Menurut Kurniasih, et al. (2011) bahwa kitosan merupakan poli (2-deoksi-2- asetilamin-2-glukosa)  dan  poli  (2- deoksi-2-aminoglukosa) yang
berikatan  secara  (1-4)  β-glikosidik. Berdasarkan  strukturnya  ini,  kitosan lebih  cenderung  berperan  sebagai substrat  dari  bakteri  yang  bersifat menguntungkan.    Hal  ini  senada dengan  pernyataan  Wijaya,  et  al.
(2017)  bahwa  prebiotik  berfungsi menyediakan substrat untuk probiotik,  sehingga  probiotik  dapat berkembang  secara  optimal.    Serat kasar yang tidak dapat dicerna dalam usus halus akan difermentasi probiotik  menjadi  asam-asam  rantai pendek mudah terbang, yang menyebabkan  pH  menjadi  rendah. Sementara  itu  keadaan  asam  dalam saluran pencernaan akan menghambat  pertumbuhan  bakteri patogen  dan  meningkatkan  fungsi enzim  protease  (Gabriela,  2010). Enzim protease yang meningkat akan meningkatkan kecernaan protein ransum sehingga absorbsi asam-asam amino sebagai bentuk paling sederhana  dari  protein  akan  lebih gampang  diserap  dalam  usus  halus. Selain itu, Pratiwi (2014) menyatakan bahwa  kitosan  mampu  menstimulasi pertumbuhan  dengan  merangsang enzim  tertentu  (sintesa  fitoaleksin, kitinase,  pectinnase,  glucanase  dan lignin).  Jika  kuantitas  enzim-enzim ini  meningkat  jumlahnya  dalam saluran  pencernaan,  maka  diprediksi kecernaan  ransum  akan  menjadi meningkat  sehingga  lebih  mudah diserap  tubuh.    Berdasarkan  hal tersebut, peningkatan kecernaan protein  sebagai  nutrien  utama  yang sangat dibutuhkan ternak unggas akan mampu  meningkatkan  produktivitas ternak ayam. Kecernaan ransum yang dicampur kitosan dengan level bertingkat secara in vitro dapat dilihat pada Tabel 3.
Vol. 11, No. 2 (2020) h. 230-242
Tabel 3.  Nilai kecernaan bahan kering (BK) dan protein kasar (PK) ransum
secara in vitro Perlakuan Kitosan Kecernaan BK (%) Kecernaan PK (%) R0% 77,294 75,880 R0,5% 81,915 83,798 R1% 83,109 83,857 R1,5% 83,369 84,379 R2% 80,760 82,413 R2,5% 80,255 77,769 Keterangan : BK = Bahan Kering PK = Protein Kasar Berdasarkan  Tabel  3  terlihat bahwa  nilai  kecernaan  ransum  baik bahan  kering  maupun  protein  kasar meningkat  dibanding  ransum  tanpa pemberian kitosan. Hal ini membuktikan  bahwa  ada  hubungan antara  kecernaan  ransum  dengan pemberian  kitosan.  Kitosan  dapat menstimulasi  pertumbuhan  karena manpu  menghasilkan  enzim  tertentu seperti  sintesa  fitoaleksin,  kitinase, pectinnase,  glucanase  dan  lignin (Pratiwi, 2014). Kitosan mengandung  enzim  lisosim  dan gugus  aminopolisakarida  yang  dapat menghambat  pertumbuhan  mikroba (Katatny, et al., 2000 disitasi Pebriani, et  al.,  2012).    Pernyataan  ini dipertegas oleh Triyanto, et al. (2014) bahwa  penambahan  zat  antimikroba serta jenis pakan akan mempengaruhi kecernaan bahan organik ransum.
Sitepu, et al. (2012)
menyatakan  bahwa  semakin  tinggi nilai kecernaan bahan kering ransum menggambarkan  bahwa  kualitasnya baik  sehingga  mudah  dicerna  dan diserap  oleh  unggas.    Selanjutnya Rambet,  et  al.  (2016)  menyatakan bahwa  banyaknya  kandungan  bahan kering  yang  dicerna  berhubungan dengan banyaknya kandungan nutrien
yang  terserap.    Jika  nilai  kecernaan bahan kering meningkat akan memberikan gambaran terhadap peningkatan  nilai  kecernaan  nutrien utama  dalam  tubuh  seperti  halnya protein.    Hal  ini  sesuai  dengan pernyataan Murni, et al. (2012) bahwa sebahagian  besar  komponen  bahan kering  terdiri  dari  komponen  bahan organik.
Protein, lemak dan karbohidrat  adalah  nutrien  yang tergolong  ke  dalam  bahan  organik.
Menurut  Haryanto  (2012)  bahwa energi  dapat  berasal  dari  berbagai sumber bahan organik pakan, termasuk  serat,  karbohidrat,  lemak dan  protein.          Penambahan  kitosan 1,5%  dalam  ransum  menunjukkan nilai  kecernaan  bahan  kering  dan protein  kasar  terbesar  dibanding semua  perlakuan.    Nilai  kecernaan bahan  kering  dan  protein  kasar dengan  penambahan  dosis  1,5% dalam  ransum  pada  penelitian  ini secara berturut-turut adalah 83,369% dan 84,379%.  Nilai kecernaan bahan kering  dan  protein  kasar  ini  adalah 7,9%  dan  11,2%  lebih  tinggi  dari kontrol.    Nilai  kecernaan  tersebut menunjukkan,  bahwa  ransum  yang digunakan  termasuk  dalam  kualitas tinggi sesuai dengan pernyataan Reid
(1973)  dalam  Abun  (2007),  bahwa ada  3  kategori  kualitas  bahan  pakan berdasarkan  tingkat  daya  cernanya, yaitu:  nilai  kecernaan  pada  kisaran 50-60%  adalah  berkualitas  rendah, antara 60-70% berkualitas sedang dan di atas 70% berkualitas tinggi.
Peran kitosan sebenarnya lebih  cenderung  sebagai  prebiotik, yaitu berperan sebagai makanan bagi bakteri  bersifat  baik  yang  hidup dalam  saluran  pencernaan  ayam. Oleh  sebab  itu,  diprediksi  jumlah bakteri  utama  (predominan)  yang hidup dalam saluran pencernaan akan semakin  tumbuh  dan  berkembang.
Artinya bahwa jumlah bakteri pemfermentasi,  bakteri  amilolitik, bakteri selulolitik dan bakteri proteolitik  Febriyossa,  et  al.  (2013) akan tumbuh dan berkembang dalam saluran pencernaan unggas. Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  juga mempertegas pernyataan bahwa potensi  kitosan  sebagai  prebiotik merupakan substrat atau nutrisi untuk probiotik  agar  dapat  menjalankan kinerjanya dengan baik serta sebagai pakan tambahan untuk meningkatkan keseimbangan  mikroba  di  dalam saluran  pencernaan.    Prebiotik  dapat menjadi  sumber  energi  dan  atau nutrien terbatas lainnya bagi mukosa usus  dan  substrat  untuk  fermentasi bakteri cecal dalam  menghasilkan vitamin  dan  antioksidan  yang  dapat menguntungkan  (Mountzouris et  al .,
2010).      Jika  kehidupan  mikroflora utama dalam usus meningkat jumlahnya maka, berpotensi meningkatkan  jumlah  enzim-enzim pencernaan  seperti  protease  yang sangat  berguna  untuk  mencerna protein.    Kondisi  ini  sudah  cukup memberi gambaran terhadap
peningkatan  kecernaan  bahan  kering
dan  protein  yang  dibutuhkan  untuk meningkatkan  produktivitas  ternak tersebut.

## KESIMPULAN
1. Dosis  kitosan  berbanding  lurus dengan  kekuatan  daya  hambat; yaitu semakin tinggi dosis kitosan maka  diameter  zona  bening  yang ditimbulkan  juga  semakin  besar, Dosis  2,5%  kitosan  mempunyai kekuatan  sedang  (10-14  mm) dalam  daya  hambat  terhadap E coli .
2. Penambahan  dosis  1,5%  kitosan dalam ransum, mampu meningkatkan  kecernaan  bahan kering  7,86%  dan  kecernaan protein  kasar  11,20%  lebih  tinggi dari  perlakuan  kontrol  (tanpa kitosan)

## Ucapan Terimakasih
Terimakasih kepada kementrian riset teknologi
pendidikan tinggi Universitas  Sriwijaya  atas  bantuan dana dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKAN
Abun.  (2007). Pengukuran  Nilai Kecernaan Ransum Yang Mengandung  Limbah  Udang Windu  Produk  Fermentasi  pada Ayam  Broiler .    Makalah  llmiah. Jurusan  Nutrisi  dan  Makanan Ternak Fakultas Peternakan Universitas Padjajaran Jatinangor Afriyanti,  R.,  Mangisah,  I.,  & Yunianto,  V.  D.  (2019).    Nilai Kecernaan Nutrien Broiler Akibat Penambahan Lactobacillus sp . dalam Ransum yang Mengandung Mikropartikel Cangkang  Telur. Jurnal  sain
Vol. 11, No. 2 (2020) h. 230-242
Peternakan  Indonesia ,  14(2), 215-221.
Albazaz, R. I., & E. B. B. Bal. (2014). Microflora  of  Digestive  Tract  in Poultry. KSU  Doga  Bil  Derg ,
17(1), 39-42.
Brocks,  L.,  Harigan,  W.  F.,  &  Jones, F.  (2006). Laboratory  Methods in  Food  Microorganism .  San Diego: Academic Press.
Damayanti,  W.,  Rochima,  E.,  & Hasan,  Z.  (2016).  Aplikasi
Kitosan sebagai Antibakteri pada
Filet  Patin Selama Penyimpanan pada  Suhu  Rendah. JPHPI ,
19(3), 321-328.
Djohari,  M.,  Hasti,  S.,  &  Lestari,  R. (2019).    Identifikasi  dan  Uji
Aktivitas  Daya  Hambat  Ekstrak Etanol Biji Pinang ( Areca catechu  L. )  terhadap  Isolat Bakteri  Gusi. Jurnal  Penelitian Farmasi Indonesia , 7(2), 61-69.
Fachri,  A.  R.,  &  Sartika,  A.  (2012). Pemanfaatan Limbah Kulit Udang  dan  Limbah  Kulit  Ari Singkong  Sebagai  Bahan  Baku Pembuatan Plastik Biodegradable. Jurnal  Teknik Kimia, 3(18), 1-9.
Febriyossa, A., Nurmiati., & Periadnadi.  (2013).  Potensi  dan Karakterisasi Bakteri Alami Pencernaan Ayam Broiler Pedaging ( Gallus gallus domesticus  L )  Sebagai  Kandidat
Probiotik Pakan Ayam Broiler. J. Bio. UA , 2(3), 201-206.
Gabriela,  C.  R.  (2010).    Effect  of  a Sinbiotic Feed Additive Suplementation  on  Laying  Hens Performance and Eggs Quality. J. Veterinary, 53, 89-93.
Haryanto,  B.  (2012).  Perkembangan
Penelitian  Nutrisi  Ruminansia. Wartazoa , 22(4), 169-177.
Indonesia,  CV  Bio  Chitosan.  (2015). Certificate of Analysis Chitosan. In  Chitosan  Fish  Collagen.
Kimia  Indonesia. Retrieved Mei 1, 2020, from www.biochitosanindonesia.com Kurniasih,  M.,  &  Kartika,  D.  (2011). Aktivitas  Anti  Bakteri  Kitosan Terhadap  Bakteri S  aureus .
Molekul , 4(1), 1-5.
Krismaputri,  M.  E.,  Suthama,  N.,  & Sukamto, Y. B. (2016). Pemberian Soybean Oligosaccharides dari  Ekstrak Bungkilm  Kedelai  terhadap  pH Usus, Populasi E coli dan PBBH pada  Broiler. Agromedia ,  12(2),
20-25.
Krismiyanto,  L.,  Suthama,  N.,  &
Wahyuni, H. I. (2014).  Feeding
Effect  of  Inulin  Derived  from Dahlia  variabilis Tuber  on
Intestinal  Microbes  in  Starter
Period  of  Crossbred  Native Chickens. J  Indonesian  Trop . Anim. Agric , 39 (4), 217-223.
Melliawati, R., (2009). Eschericia coli dalam  Kehidupan  Manusia. Bio Trends , 4(1), 10-14.
Murni,  R.,  &  Okrisandi,  Y.  (2012).
Pemanfaatan  Kulit  Buah  Kakao
Vol. 11, No. 2 (2020) h. 230-242
yang Difermentasi dengan Kapang Phanerochaete chrysosporium sebagai Pengganti Hijauan dalam Ransum Ternak Kambing. Jurnal Peternakan, 2(1), 6-10.
Parsons, C. M. (1991). Use of Pepsin
Digestibility,  Multyenzyme  pH change  and  Protein  Solubility Assays To Predict in Vivo Protein Quality of Feedstuffs. In Digestion  in  Vitro  (MF  Fuller, editor). Slough:  Commonwealth Agricultural Bureaux International. Pebriani,  R.  H.,  Rilda,  Y.,  & Zulhadjri. (2012). Modifikasi Komposisi Kitosan pada Proses  Sintesis  Komposit Ti-
O2  Kitosan. Jurnal  Kimia Unand , 1(1), 40-47.
Prabowo,  A.,  &  Heriyanto.  (2013). Analisis Pemanfaatan Buku Elektronik ( E-Book ) oleh Pemustaka di Perpustakaan SMA Negeri 1 Semarang. Jurnal  Ilmu Perpustakaan, 2(2), 1-9. Pratiwi, R. (2014). Manfaat Kitin dan Kitosan Bagi Kehidupan Manusia. Oseana , 39 (1), 35-43. Rambet, F., Umboh, J. F., Tulung, Y. L. R., & Kowel, Y. H. S. (2016). Kecernaan  Protein  dan  Energi Ransum Broiler yang Menggunakan  Tepung  Maggot ( Hermetia illucens ) sebagai Pengganti  Tepung  Ikan. Jurnal Zootek , 36(1), 13-22.
Rizki, S. M., Drastinawati &
Yusnimar.  (2019).  Pendekatan
Shrinking  Core  Model  (SCM) pada  Reaksi  Deasetilasi  Kitin Menjadi  Kitosan  dari  Limbah Cangkang Kepiting. Jom FTEKNIK , 6(1), 1-6. Sahara, E. (2017). Kajian Keunggulan Kitosan Sebagai Protecting Agent  dalam  Ransum  untuk Produktivitas dan Kualitas Telur Itik Tegal. Disertasi. Ilmu Peternakan. Universitas Padjadjaran Sitepu, S. R. N., Supratman, H. R., & Abun. (2012). Pengaruh Imbangan  Energi  dan  Protein Ransum  terhadap  Kecernaan bahan  Kering  dan  Protein  Kasar pada  Ayam  Broiler.  Disertasi. Universitas Padjadjaran. Bandung. Sofyan,  A.,  Damayanti,  E.,  & Julendra,  H.  (2008).  Aktivitas
Antibakteri  dan  Retensi  Protein Tepung  Cacing  Tepung  Tanah ( Lumbricus  rubellus )  sebagai Pakan  Imbuhan  Dengan  Taraf Penambahan  Kitosan. JITV, 13(3), 182-188.
Suherman, B., Latif, M., & Dewi, S. T.
R. (2018). Potensi Kitosan Kulit Udang  Vannemei  (Litopenaeus vannamei)  sebagai  Anti  bakteri terhadap Staphylococus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, Propionibacterium agnes,  dan  Escherichia  coli dengan  Metode    Difusi  Cakram
Kertas. Media  Farmasi ,  14(1),
116-127.
Sutiknowati, L. I. (2016). Bioindikator  Pencemar,  Bakteri
Vol. 11, No. 2 (2020) h. 230-242
Escherichia  coli . Oseana ,  41(4),
63-71.
Tillman, A. D., Hartadi, H., Reksohadiprodjo, S., Prawirokusumo, S., & Lebdosukojo,  S.  (1991). Ilmu Makanan Ternak Dasar. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Triyanto.,  Yunianto,  V.  D.,  & Sukamto,  B.  (2014).  Pengaruh Penggunaan Ekstrak Daun Beluntas  ( Pluchea  indeca  less ) sebagai Pengganti Klorin terhadap Kecernaan bahan Organik  dan  Retensi  Nitrogen Ayam Broiler. Animal Agriculture  Journal ,  3(2),  341- 352.
Suardana,  I.  W.,  Artama,  W.  T., Asmara,  W.,  &  Daryanto,  B.  S.
(2010).  Identifikasi  Escherichia coli  O157:H7serta  Deteksi  Gen Shiga  Like  Toxin  1  dan  2  Asal Feses  Hewan, Daging  dan Feses Manusia. Jurnal Veteriner, 11(4), 264-270. Wijaya. Y., Suprijatna, E., & Kismiati, S.  (2017).    Penggunaan  Limbah Industri Jamu  dan Bakteri  Asam Laktat ( Lactobacillus sp .) Sebagai  Sinbiotik  Untuk  Aditif Pakan Terhadap Kualitas Interior Telur Ayam Ras Petelur. Jurnal
Peternakan Indonesia , 19(2), 47-
54.
Winiati, W., Kasipah, C., Septiani W.,
Novrini, E., & Yulina, R. (2016).
Aplikasi  Kitosan  Sebagai  Zat Anti Bakteri pada Kain Poliester - Selulosa dengan cara Perendaman. Arena Tekstil ,
81(1), 1-10. Zikra,  W.,  Amir,  A.,  &  Putra  A.  E. (2018). Identifikasi Bakteri Escherichia coli ( E coli ) pada Air Minum  di  Rumah  Makan  dan Cafe  di  Kelurahan  Jati  serta  Jati
Baru Kota Padang. Jurnal Kesehatan  Andalas ,  7(2),  212-
216.