## Jurnal MAKILA
Vol. 17 (2) 2023: 238-250
Jurnal Penelitian Kehutanan https://ojs3.unpatti.ac.id/index.php/makila

## KETERGANTUNGAN SEMAI JOHAR ( Cassia siamea LAMK) TERHADAP FUNGI MIKORIZA ARBUSKULA PADA MEDIA TAILING TAMBANG EMAS
( The  Dependence  of  Johar  (Cassia  siamea  LAMK)  Seedlings  to  Arbuscular  Mychorriza Fungi on Gold Mine Tailings Media )

## Luluk Setyaningsih
Fakultas Kehutanan, Universitas Nusa Bangsa, Jl. Baru Km 4, Tanah Sareal, Bogor, 16162. Indonesia
Informasi Artikel:

## ABSTRACT
Submission  :  26 Oktober 2023 Accepted :  20 November 2023 Publish :  21 November 2023 *Penulis Korespondensi :
Luluk Setyaningsih
Fakultas Kehutanan, Universitas Nusa Bangsa, Jl. Baru Km 4, Tanah Sareal, Bogor, 16162. Indonesia e-mail: luluk.setya03@gmail.com Telp: +62 812-1379-5053
Makila 17 (2) 2023: 238-250
DOI: 10.30598/makila.v17i2.11010
Tailings  are  the  wastes  resulting  from  mining  activities  in  the amalgamation  of  mine  ore  from  the  ground,  with  extreme characteristics such as a sand-dominated texture, high Pb heavy metal content,  very  low  availability  of  carbon  and  macro  nutrients. Consequently, the plants may not able to grow well in the tailings. The application  of  Arbuscular  Mycorrhyza  Fungi  (AMF)  is  expected  to increase  the  ability  of  forest  plant  seedlings  to  grow  and  develop  in tailings  media.  The  research  was  carried  out  in  a  greenhouse  using johar (Cassia siamea Lamk) seedlings which were inoculated with AMF inoculum: Glomus manihotis, Glomus etunicatum, and mix inoculan (mycofer), and planted in tailings media collected from Pongkor gold mine for 8 weeks. Johar seedlings were able to grow in tailings media and AMF colonization to the seedlings was observed. The compatibility of  multi-species  inoculum,  mycofer,  is  higher  than  single  AMF inoculum. The height, diameter and biomass growth of johar seedlings in  tailings  media  significantly  (p<0.05)  increased  with  AMF inoculation.  Johar  seedlings  have  a  high  dependence  on  AMF,  on tailings media, undicated by value of MIE > 50%, suggesting that the AMF application to johar is very necessary for revegetation activities in tailings media.
KEY WORDS: Arbuscular Mycorhiza Fungi, Johar, MIE, Tailing

## ABSTRAK
Tailing  merupakan  salah  satu  limbah  hasil  kegiatan pertambangan  dalam  amalgamasi  bijih  tambang  dari  tanah, dengan karakter yang ekstrim seperti tekstur didominasi pasir, kandungan logam berat Pb tinggi, ketersediaan karbon dan hara makro sangat rendah, sehingga tumbuhan tidak dapat tumbuh dengan  baik  pada  tailing.  Aplikasi  Fungi  Mikoriza  Arbuskula (FMA)  diharapkan  dapat  meningkatkan  kemampuan  semai tanaman  hutan  untuk  tumbuh  dan  berkembang  pada  media tailing.  Penelitian dilakukan di rumah kaca menggunakan semai johar  yang  diinokulasi  FMA: Glomus  manihotis,  Glomus etunicatum ,  dan  inokulum  multi  jenis,  mycofer,  dan  ditanam
Ketergantungan Semai Johar (Cassia siamea LAMK) Terhadap Fungi Mikoriza Arbuskula Pada Media Tailing Tambang Emas
pada  media  tailing  asal  tambang  emas  Pongkor  selama  8 minggu.    Semai  johar  dapat  tumbuh  pada  media  tailing  dan dapat  berkolonisasi  dengan  FMA.  Kompatibilitas  inokulum multi  jenis,  mycofer,  lebih  tinggi  dibanding  inokulum  FMA tunggal. Pertumbuhan tinggi, diameter dan biomasa semai johar pada media tailing secara signifikan (p<0.05) meningkat dengan inokulasi AMF.  Semai johar mempunyai ketergantungan tinggi terhadap FMA, Mycorrhiza Infection Effect (MIE) > 50%, pada media tailing.  Dengan demikian aplikasi AMF pada johar sangat diperlukan untuk  kegiatan revegetasi pada media tailing.
KATA KUNCI: Fungi Mikoriza Arbuskula, Johar, MIE, Tailing

## PENDAHULUAN
Tailing adalah bahan  padat berupa butiran halus (biasanya berukuran 0,001-0,6 mm) yang tersisa dari hasil amalgamasi logam mulia dan mineral dari bijih tambang. Sifat bijih tambang dan metode pengolahan bahan tambang, berpengaruh terhadap sifat fisik dan kimia tailing (Australian Gov.,  2016).  Karakter  tekstur  dan  strukturnya  cukup  ekstrim,  begitu  juga  kandungan  kimianya. Setyaningsih et  al. (2020)  melaporkan  bahwa  tailing  hasil  sisa  penambangan  emas  di  Pongkor, teksturnya  didominasi  pasir  (50%),  debu  (33.7%)  dengan  liat  hanya  16%,  kandungan  bahan organiknya  sangat  rendah  (0.47%),  pH  netral  (7.1),  serta  kandungan  unsur  hara  makro  (N,  P,  K) sangat rendah.
Kondisi  yang  ekstrim  tersebut,  menyebabkan  kegiatan  revegetasi  pada  area  bertailing mempunyai tantangan besar.  Perbaikan sifat kimia, biologi dan fisik tailing mutlak dilakukan guna memastikan tanaman hutan mampu tumbuh di atasnya. Pemilihan jenis tanaman revegetasi yang mampu beradaptasi dengan kondisi ekstrim, didukung aplikasi fungi simbiotik, dan peningkatan kandungan  organik  lahan,  menjadi  alternatif  yang  dapat  dipertimbangkan  untuk  meningkatkan keberhasilan revegetasi pada lahan bertailing.
Johar  adalah  salah  satu  pohon  cepat  tumbuh  dari  kelompok  Leguminosae  yang  diketahui tumbuh di daerah kering tropika, dengan perakaran lapang, mempunyai biji yang bersifat ortodoks (Data Base Worldagroforestry, 2023). Johar seringkali ditanam sebagai tanaman tepi, atau sela atau dalam  sistem  agroforestri  sebagai  penaung  tanamaan  perkebunan  kopi,  teh,  kakao.  Johar  juga dilaporkan  mampu  memperbaiki  tanah  dengan  menjadikan  daunnya  sebagai  kompos,  dan bersimbiosis  dengan  ektomikoriza  (Orwa et  al .,  2009).  Pernah  dilaporkan  juga,  johar  ditanam  di wilayah yang terdegradasi dan kering untuk rehabilitasi hutan dan dalam rangka reklamasi wilayah yang ditambang (Shyam Lal, 1991; Sandoval & Rondriguez, 2013).  Dengan karakter johar tersebut, johar berpotensi digunakan sebagai tanaman rehabilitasi lahan pasca tambang, walaupun demikian kemampuan hidupnya pada lahan tailing perlu diinvestigasi.
Fungi mikoriza arbuskula (FMA) merupakan salah satu cendawan yang mampu membentuk simbiosis saling menguntungkan antara cendawan dengan akar tanaman, yang dapat meningkatkan kapasitas dalam menyerap unsur hara dan air (Brundrett et al., 1996; Begum et al ., 2019).  Terbukti bahwa inokulasi FMA dapat meningkatkan konsentrasi berbagai unsur hara makro dan unsur hara mikro  secara  signifikan,  yang  mengarah  pada  peningkatan  produksi  fotosintat  dan  karenanya meningkatkan akumulasi biomassa (Chen et al ., 2017). Jamur mikoriza arbuskula (FMA) dilaporkan mampu meningkatkan penyerapan P dan K pada tanah-tanah marginal, meningkatkan nilai Ca/Mg yang  tidak  seimbang  (Amir et  al .,  2021;  Crossay et  al .,  2019),  meningkatkan  pertumbuhan  semai trembesi (Setyaningsih et al ., 2020), serta meningkatkan toleransi tanaman terhadap toksisitas logam (Khade & Adholeya, 2007; Crossay et al., 2019).
Namun infektifitas dan efektifitas FMA sangat dipengaruhi oleh jenis tanaman inang, jenis FMA  dan  lingkungan  sehingga  diduga  akan  berpengaruh  pula  terhadap  pertumbuhan  dan kemampuan remediasi tanaman inangnya. Oleh karenanya diperlukan suatu penelitian yang dapat memastikan  adanya  kompatibilitas  antara  FMA  yang  dijadikan  target  dengan  tanaman  yang direncanakan  digunakan  untuk  kegiatan  revegetasi  pada  lahan  tailing.    Penelitian  ini  ditujukan untuk mengetahui kompatibilitas FMA terhadap semai johar pada media tailing tambang emas.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Lokasi
Penelitian  dilaksanakan  di  rumah  kaca  Laboratorium  Silvikultur  Fakultas  Kehutanan Universitas Nusa Bangsa, dan di Laboratorium Biotek Hutan Pusat Penelitian Sumberdaya Hayati dan Bioteknologi (PPSHB) IPB dalam waktu 5 bulan .

## Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan adalah inoculum FMA multi jenis koleksi Laboratorium Biotek Hutan  PPSHB  IPB,  mycofer  (campuran Glomus  manihotis INDO-1, Glomus  etunicatum NPI  126, Gigaspora  margarita , Acaulospora  tuberculata INDO-2),  inokulum  FMA  tunggal  hasil  budidaya  ( G. manihotis,  G.  etunicatum ),  biji  johar,  zeolit,  tailing  tambang  emas  Pongkor,  kompos,  ethanol  50%,
KOH 2.5%, HCL 10%, H 2 O 2 2.5%, glyserin 50%, Trypan blue 0.02%, PVLG, Melzer’s reagen, aquades, bayclean.
Alat-alat yang digunakan diantaranya: mikroskop dissecting , mikroskop stereo , saringan spora 275 mμ , 125 mμ, dan 45 mμ, pinset spora, cawan petri, gelas ukur, kaca objek dan cover glass , pipet, botol vial, scapel, gunting  kecil, cawan petri, saringan dan gelas beker,  timbangan analitik, gelas plastik, bak kecambah, label, polybag (15x20 cm), oven, autoclave , kamera, termometer suhu ruang, alat tulis .
Ketergantungan Semai Johar (Cassia siamea LAMK) Terhadap Fungi Mikoriza Arbuskula Pada Media Tailing Tambang Emas

## Penyiapan Media
Terdapat 3 kombinasi media tanam yang digunakan, yaitu tailing murni (T0), tailing campur kompos  3:1  v/v  (T1),  dan  tailing  campur  tanah  dan  kompos  4:2:1  v/v/v  (T2).    Sterilisasi  dari mikroorganisme dilakukan terhadap media tanam dengan pemanasan pada tekanan 1 atm selama 2 jam.   Media yang telah disterilisasi selanjutnya dimasukkan kedalam polybag .

## Penyemaian
Tanaman  pohon  yang  disemaikan  adalah  johar  ( Cassia  siamea ).  Benih  johar  yang  telah disterilisasi dikecambahkan pada media zeolite selama 2 minggu, dan dipindahkan pada polybag berisi media perlakuan (T0, T1, T2) .

## Inokulan dan Inokulasi FMA
Inokulan  FMA  dipropagasi  secara bioassay (Brundrett et  al., 1996)  dengan  tanaman  inang sorgum  ( Sorghum  bicolor ) pada  media  zeolit  selama  3  bulan.  Inokulan  multi  jenis,  mycofer,  dan inokulan  spora  tunggal  jenis Glomus  manihotis dan Glomus  etunicatum diberikan sebanyak  10  gr inokulan (setara dengan kandungan 50 – 100 spora FMA) per semai di polybag .

## Pemeliharaan
Semai disiram setiap hari hingga kapasitas lapang dan  dijaga dari kemungkinan terserang hama  penyakit,  walaupun  tidak  akan  diberi  fungisida  maupun  pestisida  jika  terserang  hama penyakit .

## Pengamatan
Pertumbuhan  semai  berupa  pertambahan  tinggi  dan  diameter  diamati  selama  8  minggu setelah tanam (8 MST), dan biomassa semai diamati pada akhir  minggu ke 8 . Kolonisasi FMA pada akar semai  diamati pada minggu ke 8 setelah tanam  melalui pewarnaan akar menggunakan metode dasar yang dikembangkan oleh Brundrett et al . (1996) dengan beberapa modifikasi .

## Analisa Data
Data  yang  dianalisis  meliputi  data  pertumbuhan  diameter  dan  tinggi  semai,  persentase kolonisasi FMA terhadap akar semai, dan tingkat ketergantungan semai terhadap FMA
Pertumbuhan semai (Setyaningsih et al., 2018a):
 Tumbuh = Ukuran tumbuh akhir – Ukuran tumbuh awal .......................................... (1)
Kolonisasi FMA pada akar (Brundrett et al. , 1996):
Kolonisasi = Σ bidang pandang akar yang bermikoriza
Σ bidang pandang akar yang diamati 𝑥 100% .................................................. (2)

## Ketergantungan semai terhadap mikoriza
Didasarkan  atas mycorrhizae  inoculation  effect (MIE)  menggunakan  persamaan  Bagyaraj (Bagyaraj, 1992)
MIE = [(Biomasa kering semai diinokulasi–Biomasa kering semai tidak diinokulasi)/Biomasa kering semai diinokulasi] x 100 % .............................. (3)

## Rancangan Percobaan
Percobaan  dilakukan  dengan  rancangan  acak  factorial  dengan  3  taraf  jenis  media:  Tailing Murni  (T0),  Tailing+Kompos (T1),  Tailing+Kompos+Tanah  (T2),  dan  4  taraf  Perlakuan  Mikoriza: Tanpa  Mikoriza  (M0), Glomus  manihotis (M1), Glomus  etunicatum (M2),  Mycofer  (M3),  dengan ulangan minimal 3 unit. Seluruh data diolah menggunakan bantuan program Microsoft Excel and SPSS  16,  dan  untuk  mengetahui  keragaman  dan  perbandingan  antar  perlakuan  menggunakan analisis DMRT .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Persentase Hidup, Pertambahan Tinggi dan Diameter Semai Johar
Dalam pengamatan selama 8 minggu setelah tanam, semai johar yang ditanam pada berbagai media,  tailing  murni  (T0)  maupun  campuran  (T1,  T2)  dengan  aplikasi  fungi  mikoriza  arbuskula (FMA),  menunjukan  adanya  persentase  hidup  100  persen,  walaupun  tingkat  pertumbuhan  pada berbagai perlakuan yang diberikan beragam. Hasil pengukuran  tinggi dan diameter semai johar hingga umur 8 minggu setelah tanam, dapat dilihat pada Gambar 1 .  Secara umum, media tailing yang dicampur dengan tanah dan kompos (T2), memberikan pertumbuhan yang lebih baik secara signifikan (p<0,05) dibandingkan kedua media lainnya, tailing murni (T0) dan campuran tailing dan kompos  (T1),  dengan  rata-rata      pertambahan  tinggi  mencapai  5,84  cm  dalam  waktu  8  minggu setelah tanam. Pertambahan tinggi terendah, 1,71 cm, dijumpai pada semai johar yang ditanam pada tailing murni dan tanpa bermikoriza (T0M0).  Semai johar yang mendapat inokulasi FMA, baik jenis Glomus etunicatum (M1), Glomus manihotis dan Mycofer (M3) juga menunjukkan pertambahan tinggi lebih baik secara signifikan (p<0,05), 33%, dibanding semai tanpa FMA (M0).
Gambar 1. Pertambahan tinggi semai Johar umur 8 minggu pada media tailing dengan aplikasi FMA.  T0= tailing murni, T1= tailing + kompos (3:1 v/v), T2= tailing+tanah+kompos (4:2:1 v/v/v), M0= tanpa FMA, M1= G. etunicatum , M2= G. manihotis , M3= Mycofer
Pertambahan diameter semai johar dalam 8 minggu setelah tanam yang terbesar mencapai 10 mm (T2M1) dan terkecil mencapai 5,8 mm (T0M3) ( Gambar 2 ). Semai johar pada media tailing murni (T0)  mengalami  pertumbuhan  diameter  terkecil,  rata-rata  6,3  mm,  berbeda  secara  signifikan (p<0,05), dengan yang ditanam pada media lainnya (T1 dan T2).  Aplikasi FMA, inokulum tunggal
Ketergantungan Semai Johar (Cassia siamea LAMK) Terhadap Fungi Mikoriza Arbuskula Pada Media Tailing Tambang Emas
Glomus etunicatum (M1), dapat meningkatkan pertumbuhan diameter semai johar 6% (8,2 mm) dari pada  semai  tanpa  FMA  (M0),  dan  bahkan  mencapai  10  mm  yang  diaplikasikan  pada  media campuran  tailing+tanah+kompos  (T2M1).  Namun  aplikasi  inoculum  FMA  lainnya  tidak memberikan perbedaan signifikan (p<0,05).

## Gambar  2.
Pertambahan diameter semai Johar umur 8 minggu pada media tailing dengan aplikasi FMA. T0= tailing murni, T1= tailing+kompos (3:1 v/v), T2= tailing+tanah+kompos (4:2:1 v/v/v), -M0= tanpa FMA, M1= G. etunicatum , M2= G. manihotis , M3= mycofer

## Kolonisasi FMA pada Semai Johar
Kolonisasi  mikoriza  pada  semai  johar  meningkat  signifikan  (p<0.05)  dengan  aplikasi G. etunicatum (M1)  sebesar  4 kali    (kolonisasi  22.9%),   aplikasi G.  manihotis (M2)  sebesar  8  kali  lipat (kolonisasi 44,6%), dan sebesar 15 kali (77.5%) dengan aplikasi Mycofer dibandingkan dengan johar yang tidak diinokulasi mikoriza (M0) dengan kolonisasi hanya 5,3% ( Tabel 1 ).  Kolonisasi FMA pada media  tanam  campuran  tailing+tanah+kompos  (T3)  terlihat  paling  kecil  (24%)  secara  signifikan (p<0,05) dibandingkan dengan kolonisasi yang terjadi pada semai yang ditanam pada media tailing murni (T0) (44.5%) dan campuran tailing+kompos (T1) (44.1%). Kolonisasi terbesar ditemukan pada semai johar yang diinokulasi mycofer dan ditanam pada media tailing murni (T0M3) sebesar 93,3%. Sebaran kolonisasi FMA terhadap semai johar dapat dilihat pada Gambar 3 .
Tabel 1 . Kolonisasi FMA pada semai johar umur 8 minggu yang ditanam pada berbagai media tailing
Perlakuan Kolonisasi (%) Tailing murni (T0) 44,5 ± 3,60 c* Tailing + kompos (T1) 44,1 ± 4,11 c Tailing + tanah + kompos (T2) 24,6 ± 3,01 b Tanpa FMA (M0) 5,3 ± 0,80 a G. etunicatum (M1) 22,9 ± 1,51 b G. manihotis (M2) 44,6 ± 3,22 c Mycofer (M3) 77,5 ± 3,51 d
Keterangan  *:  Angka  kolonisasi  ±  standar  deviasi  yang  diikuti  huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama menunjukan tidak terdapat perbedaan secara signifikan atas perlakuan yang berbeda pada tingkat kesalahan 5% (p<0,05) berdasarkan uji DMRT
0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0 M0 M1 M2 M3 M0 M1 M2 M3 M0 M1 M2 M3 T0 T1 T2 △ D ia m et er (m m )
244
Gambar 3. Sebaran kolonisasi FMA pada akar semai Johar umur 8 minggu pada media tailing. T0= tailing murni, T1= tailing+kompos (3:1 v/v), T2 = tailing+tanah+kompos (4:2:1 v/v/v), -M0= tanpa FMA, M1= G. etunicatum , M2= G. manihotis , M3= mycofer

## Biomasa Semai Johar
Semai  johar  umur  8  minggu  yang  ditanam  pada  tailing  murni  (T0)  mempunyai  biomasa paling  kecil  (0,9  gr),  yang  berbeda  signifikan  dengan  biomas  semai  yang  ditanam  pada  media tailing+kompos (T1), maupun dengan media campuran tailing+tanah+kompos (T2), sebesar 1,7 gr. Aplikasi inoculum FMA multi jenis, mycofer (M3), menyebabkan peningkatan biomasa semai johar (2,3  gr)  signifikan  (p<0,05)  terhadap  semai  tanpa  FMA  maupun  yang  mendapat  aplikasi  FMA tunggal, G.  etunicatum (1.2  gr)  dan G.  manihotis (1,2  gr).    Semai  johar  yang  ditanam  pada  media campuran tailing+kompos dan diinokulasi FMA mycofer, menunjukkan biomasa terbesar (4,2 gr), dan  lebih  besar  secara  signifikan  (p<0,05)  dibandingkan  perlakuan  lainnya.  Sedangkan  biomasa terkecil (0.6 gr) dijumpai pada semai johar yang ditanam pada media tailing murni tanpa aplikasi FMA. Sebaran besaran biomasa semai johar dapat dilihat pada Tabel 2 .
Tabel 2 . Biomasa semai johar umur 8 minggu setelah tanam pada media tailing dengan aplikasi FMA
Perlakuan Biomasa Media Mikoriza (gr) Tailing murni Tanpa FMA 0,561 ± 0,26 a* G. etunicatum 0,983 ± 0,29 b G. manihotis 1,091 ± 0,64 b Mycofer 0,943 ± 0,25 a Tailing + kompos Tanpa FMA 0,886 ± 0,35 a G. etunicatum 0,969 ± 0,48 b G. manihotis 0,833 ± 0,37 a Mycofer 4,246 ± 0,90 e Tailing + tanah + kompos Tanpa FMA 1,911 ± 0,59 c G. etunicatum 1,556 ± 0,68 c G. manihotis 1,530 ± 0,36 c Mycofer 1,790 ± 0,61 c Tailing 0,895 ± 0,42 a Tailing + kompos 1,733 ± 1,57 c Tailing + tanah + kompos 1,697 ± 0,56 c
Ketergantungan Semai Johar (Cassia siamea LAMK) Terhadap Fungi Mikoriza Arbuskula Pada Media Tailing
Tambang Emas
Tanpa FMA 1,120 ± 0,71 c G. etunicatum 1,169 ± 0,56 c G. manihotis 1,151 ± 0,54 c Mycofer 2,326 ± 1,56 d
Keterangan  *:  Angka  biomasai  ±  standar  deviasi      yang  diikuti  huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama menunjukan tidak terdapat perbedaan secara signifikan atas perlakuan yang berbeda pada tingkat kesalahan 5% (p<0,05) berdasarkan uji DMRT

## Ketergantungan Semai Johar terhadap FMA
Nilai  MIE  ( mycorrhizal  infection  effect )  yang  menggambarkan  tingkat  ketergantungan  johar terhadap mikoriza bervariasi, bernilai negatif atau tidak ada ketergantungan bahkan berefek buruk, hingga bernilai positif atau terdapat ketergantungan dan berefek baik.   Secara umum, semai johar umur 8 minggu, mempunya ketergantungan terhadap FMA.  Semai johar yang ditanam pada tailing murni (T0) mempunyai ketergantungan terhadap semua jenis inokulum, G. etunicatum (MIE 42,9%), G. manihotis (MIE 48,6%), dan Mycofer (MIE 40,5%).  Namun untuk semai johar yang ditanam pada media lengkap, campuran tailing+tanah+kompos (T2), tampak tidak mempunyai ketergantungan terhadap FMA, yang ditandai dengan nilai  MIE negatif (– 24,9 – 6,8%) Sebaran nilai ketergantungan semai johar terhadap FMA dapat dilihat pada Tabel 3 .  Performa pertumbuhan semai johar umur 8 minggu pada media tailing dengan aplikasi FMA, dapat dilihat pada Gambar 4.
Tabel 3 . Ketergantungan semai johar terhadap FMA (MIE) pada media tailing umur 8 minggu setelah tanam Perlakuan MIE Media Mikoriza (%) Tailing murni Tanpa FMA G. etunicatum 42,9 ± 2,52 b* G. manihotis 48,6 ± 5,56 b Mycofer 40,5 ± 2,54 b Tailing + kompos Tanpa FMA G. etunicatum 8,6 ± 7,42 a G. manihotis -6,3 ± 7,82 a Mycofer 79,1 ± 7,02 b Tailing + tanah + kompos Tanpa FMA G. etunicatum -22,8 ± 3,57 a G. manihotis -24,9 ± 3,41 a Mycofer -6,8 ± 3,54 a Tailing murni Tailing + kompos Tailing + tanah + kompos Tanpa FMA G. etunicatum 4,3 ± 5,59 a G. manihotis 2,8 ± 6,12 a Mycofer 51,9 ± 4,61 b
Keterangan  *:  Angka  MIE  ±  standar  deviasi      yang  diikuti  huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama menunjukkan tidak terdapat perbedaan secara signifikan atas perlakuan yang berbeda pada tingkat kesalahan 5% (p<0,05) berdasarkan uji DMRT
Gambar 4. Penampakan pertumbuhan semai johar ( Cassia siamea ) pada berbagai media tanam dengan aplikasi mikoriza umur 8 minggu setelah tanam . T0= tailing murni, T1= tailing + kompos (3:1 v/v), T2= tailing+tanah+kompos (4:2:1 v/v/v), M0= Tanpa FMA, M1= G. etunicatum , M2= G. manihotis , M3= mycofer.
Selama  pengamatan  8  minggu,  semai  johar  diketahui  mampu  tumbuh  pada  media  tailing, bahkan pada media tailing murni, yang diketahui mempunyai tingkat keasaman yang cenderung basa,  tekstur  didominasi  pasir  atau  debu,  seringkali  tergenang,  juga  hampir  tidak  mengandung bahan organik.   Hal ini menunjukan, bahwa johar tidak hanya mampu tumbuh  pula pada lahan kritis dan tidak subur (Suharnantono, 2011), namun  dapat tumbuh lahan yang mempunyai sifat fisik  dan  kimia  ekstrim.    Dengan  demikian,  johar  dapat  menjadi  salah  satu  tanaman  hutan  yang berpotensi  sebagai  tanaman  untuk  keperluan  reklamasi  lahan  tailing.    Kemampuan  pohon Leguminosae untuk tumbuh di lahan tailing, pernah pula dilaporkan oleh Setyaningsih et al. (2020), yaitu trembesi ( Samanea saman ).  Selain itu beberapa jenis semai tanaman hutan dan  rumput pernah dilaporkan  juga  mampu  tumbuh  pada  lahan  tailing,  seperti    jabon  ( Anthocephalus  cadamba ) (Setyaningsih et al ., 2018a), dan rumput tifa (Setyaningsih et al ., 2018b).
Pencampuran  tailing  dengan  kompos  dan  tanah,  telah  meningkatkan  scara  signifikan pertumbuhan tinggi dan biomasa semai johar, mencapai 83%, dan 89% dibandingkan dengan yang ditanam pada media tailing murni.  Kondisi tersebut sangat berkaitan dengan  adanya perbaikan sifat kimia dan fisik media tailing.  Aplikasi kompos yang merupakan bahan organik diduga telah berperan  memperbaiki  sifat  fisik,  kimia  dan  biologi  tailing  sebagai  media  tanam.  Penambahan kompos pada tailing pernah dilaporkan Setyaningsih (2012) meningkatkan kandungan C organik tailing, dari 0,2% menjadi 1,1%, menurunkan pH  dari cenderung basa ke normal, meningkatkan kandungan hara makro (N, P, K, Mg, Ca) rendah hingga sangat tinggi (masing-masing 0.1%, 255 ppm, 107 ppm, 1.75 cmol/kg, 16.92 cmol/kg). Perbaikan sifat fisik dan kimia tailing, memperbaiki kemampuan media menyerap air sebagai media transfer unsur yang tersedia,  juga menstimulasi aktifitas mikroba simbiotik, sehingga dapat meningkatkan pertumbuhan semai (Widodo & Kusuma , 2018).
Ketergantungan Semai Johar (Cassia siamea LAMK) Terhadap Fungi Mikoriza Arbuskula Pada Media Tailing Tambang Emas
Aplikasi FMA telah pula meningkatkan pertumbuhan semai johar pada media tailing, baik pertambahan  tinggi,  diameter  dan  biomasanya.    Peningkatan  biomasa  semai  johar  tertinggi, mencapai 112%, dengan aplikasi Mycofer. Peningkatan yang sama pernah dilaporkan Setyaningsih et al . (2018a) terhadap biomasa akar dan pucuk semai jabon ( Anthocephalus cadamba ) umur 12 minggu pada  media  tailing.  Perbaikan  nutrisi  juga  dilaporkan  terjadi  pada    semai Metrosideros  laurifolia (Myrtaceae), Alphitonia  neocaledonica (Rhamnaceae),  dan Tetraria  comosa (Cyperaceae)  yang diinokulasi FMA, yang menunjukkan efek positif seperti nutrisi mineral yang lebih baik, terutama untuk kalium (K) dan kalsium dan nilai kalsium/magnesium (Ca/Mg) yang lebih tinggi (Amir et al., 2021). Hal ini berkaitan dengan peran FMA yang bersimbiosis dengan akar dapat memperoleh unsur hara penting dari tanaman inang dan sebagai imbalannya memberikan unsur hara mineral, misalnya  N,  P,  K,  Ca,  Zn,  dan  S.  AMF  menghasilkan  struktur  jamur  seperti  arbuskula,  yang membantu pertukaran mineral anorganik serta senyawa karbon dan fosfor (Prasad et al ., 2017),  yang secara signifikan meningkat pada sistem akar dan pucuk (Al-Hmoud & Al-Momany, 2017).
Seluruh jenis FMA yang diaplikasikan dapat berkolonisasi dengan semai johar, pada semua media  penanaman.    Namun  kolonisasi  FMA  pada  media  campuran  tailing+tanah+kompos  (T2) adalah 2 kali lipat lebih kecil dari kolonisasi yang terjadi pada media tailing murni (25-94%) dan campuran  tailing+kompos  (44%).    Kondisi  yang  sama  pernah  dilaporkan  terjadi  pada  semai Metrosideros  laurifolia yang  tercukupi  P  dengan  pemupukan,  menyebabkan  efek  positif  FMA terhadap  pertumbuhan  dan  nutrisi  mineral  menjadi  berkurang,  walaupun  kolonisasinya  tidak berkurang (Amir et al ., 2021).  Hal ini selaras dengan dugaan bahwa pada media/lahan yang telah subur, sangat mungkin FMA tidak bekerja maksimal, dikarenakan kebutuhan nutrisi tanaman telah dicukupi oleh media, atau tanaman tidak mengeluarkan energi tinggi dalam beradaptasi terhadap kondisi lingkungan (Bini & Maleci, 2014; Amir et al ., 2021).
Inokulum  mycofer  mampu  berkolonisasi  dengan  semai  johar,  77.5%,  lebih  besar  secara signifikan,  dibandingkan kolonisasi oleh inokulum tunggal.  Hal ini dapat diduga, bahwa inokulum dengan  multi  jenis  FMA,  lebih  efektif  dalam  berkolonisasi  dengan  akar  semai  johar.    Walaupun beberapa laporan menyatakan bahwa jenis FMA berkolonisasi secara spesifik, seperti kompatibilitas G.  manihotis dengan  semai Anthocephalus  cadamba (Setyaningsih et  al., 2018a),  dan G.  etunicatum dengan Typha angustifolia (Setyaningsih et al ., 2018b), namun tampaknya inokulum Mycofer dengan 4 jenis FMA didalamnya (G. etunicatum, G. manihotis, Gigaspora margarita dan Acaulospora sp. ), diduga memberikan potensi lebih tinggi untuk terjadinya kolonisasi pada semai johar. Kondisi demikian mengindikasikan  bahwa  setaip  jenis  mikoriza  mempunyai  sifat  kolonisasi  dan  pengaruh  yang spesifik  terhadap jenis tanaman tertentu pada kondisi rizhosphere  yang tertentu pula.  Sehingga untuk mendapatkan hasil maksimal dan efisien, maka perlu memperhatikan kespesifikan kolonisasi dan pengaruh tersebut.
Besarnya  kolonisasi  yang  terjadi  berbanding  positif  dengan  biomasa  semai  johar,  semakin bertambah  kolonisasinya,  biomasa  semai  semakin  meningkat,  dengan  membentuk  pola
eksponensial  dengan  persamaan  y=9,4232e 0,0099x ,  (R²  =  0,7581).    Namun  demikian  besarnya kolonisasi  tidak  selalu  berbanding  lurus  dengan  pertambahan  diameter,  yang  membentuk hubungan power dengan persamaan y= 3,6998x 0,1274 , (R² = 0,5082), maupun terhadap pertambahan tinggi semai johar yang membentuk hubungan polimonial dengan persamaan y= -0,4847x 2 + 2,4386x + 77,442, (R² = 0,9328) ( Gambar 5 ).  Kondisi ini memberikan penjelasan bahwa besarnya kolonisasi patut  dipertimbangkan  guna  mengindikasikan  besarnya  pengaruh  FMA  terhadap  pertumbuhan, khususnya  biomasa  semai  johar,  namun  tidak  serta  merta  menggambarkan  pertumbuhan  yang sama untuk variabel pertumbuhan lainnya, diameter dan tinggi.
(a) (b) (c)
Gambar 5 . Hubungan tingkat kolonisasi FMA terhadap pertambahan diameter (a), pertambahan tinggi (b), dan biomasa (c) semai johar umur 8 minggu setelah tanam pada media tailing
Peningkatan  biomasa  yang  signifikan  pada  tanaman  yang  diinokulasi  mikoriza,  sekaligus mengindikasikan  adanya  ketergantungan  johar  tersebut  terhadap  mikoriza,  dengan  nilai ketergantungan MIE 8 – 51%. Peningkatan biomasa semai tanaman hutan dengan aplikasi inokulum FMA tunggal dan multi jenis FMA pernah pula dilaporkan meningkatkan pertumbuhan trembesi ( Samanea  saman )  pada  media  tailing  (Setyaningsih et  al .,  2020).  Kondisi  ini  semakin  menguatkan perlunya aplikasi FMA untuk penanaman semai tanaman hutan pada media tailing

## KESIMPULAN
FMA dari inokulum tunggal dan dari inokulum multi jenis dapat berkolonisasi dengan akar semai Johar, dengan kolonisasi terbesar terjadi pada media tailing murni. Seluruh jenis FMA dapat meningkatkan  pertumbuhan  semai  johar  umur  8  minggu,  namun  aplikasi  inokulum  Mycofer
Ketergantungan Semai Johar (Cassia siamea LAMK) Terhadap Fungi Mikoriza Arbuskula Pada Media Tailing Tambang Emas
memberikan  peningkatan  terbesar  terhadap  biomasa  dan  tinggi  semai.  Semai  johar  mempunyai ketergantungan pada FMA dalam pertumbuhannya pada media tailing.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih  yang  sebesar-besarnya  kepada  PT  ANTAM  Tbk.  UBPE  Pongkor  yang  telah mengizinkan penggunaan tailing yang diproduksinya, juga kepada Laboratorium Biotek Hutan atas izinnya  untuk  menggunakan  isolate  FMA  dan  memperbanyaknya.  Ucapan  terimakasih  juga disampaikan  kepada  Kementerian  Pendidikan  dan  Kebudayaan  Nasional  RI,  Direktorat  Jenderal Pendidikan Tinggi dan Ristek atas dukungan dana hibah Penelitian Stranas.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Hmoud, G., Al-Momany, A. 2017. Effect of Four Mycorrhizal Products on Squash Plant Growth and Its Effect on Physiological Plant Elements. Adv. Crop. Sci. Tech. 5, 260. doi: 10.4172/2329- 8863.1000260
Amir, H., Simon Gensous,  Yvon Cavaloc, Laurent Wantiez. 2021. Phosphorus Fertilization of  An Ultramafic  Soil  Reduced  Effects  of  Arbuscular  Mycorrhizal  Fungi  but  not  Mycorrhizal Colonization. Journal  of  Soil  Science  and  Plant  Nutrition ,  2021,  21,  pp.3544  -  3554. ff10.1007/s42729-021-00626-6ff. ffhal-03582001f. https://doi.org/10.1007/s42729-021-00626-6
Australian  Government.  2016.  Pengelolaan  Tailing:  Praktik  Kerja  Unggulan  dalam  Program Pembangunan Berkesinambungan
untuk Industri Pertambangan. P 1-128.
https://www.industry.gov.au/sites/default/files/2019-04/lpsdp-tailings-management- handbook-indonesian.pdf. (Kamis, 16 November 2023: 10.47 WIB)
Bagyaraj DJ. 1992. Vesicular-Arbuscular Mycorrhiza: Aplication in Agriculture. Pp 359-373. In: Method in Mycrobiology Volume 24, Technicques for The Study of Mycorrhiza.  (Eds. Norris, J.R, D.J. Read, and A.K. Varma).  Academic Press.  Boston.
Begum,  N,  Cheng  Qin,  Muhammad  Abass  Ahanger,  Sajjad  Raza,  Muhammad  Ishfaq  Khan, Muhammad Ashraf, Nadeem Ahmed, Lixin Zhang.  2019.  Role of Arbuscular  Mycorrhizal Fungi in Plant Growth Regulation: Implications in Abiotic Stress Tolerance.  REVIEW article. Front. Plant Sci., Sec. Plant
Abiotic Stress Volume 10 – 2019. https://doi.org/10.3389/fpls.2019.01068
Bini C, Maleci L. 2014. The « serpentine syndrome » (H. Jenny, 1980): A Proxy for Soil Remediation. Environ Qual 15:1–13
Brundrett M, Bougher N, Dell B, Grove T, Maljczuk N.  1996.  Working with Mycorrhizas in Forestry and Agriculture. ACIAR Monograph Series. Canbera
Chen, S., Zhao, H., Zou, C., Li, Y., Chen, Y., Wang, Z. 2017. Combined Inoculation with Multiple Arbuscular  Mycorrhizal  Fungi  Improves  Growth,  Nutrient  Uptake  and  Photosynthesis  in Cucumber Seedlings. Front. Microbiol. 8, 25–16. doi: 10.3389/fmicb.2017.02516
Crossay T, Majorel C, Redecker D, Gensous S, Medevielle V, Durrieu G, Cavaloc Y, Amir H. 2019. Is a  Mixture  of  Arbuscular  Mycorrhizal  Fungi  Better  for  Plant  Growth  than  Single-species Inoculants? Mycorrhiza 29:325–339. https://doi.org/10.1007/ s00572-019-00898-y
Data Base World Agroforestry . 2023 . Cassia singueana Del . Tree Species . Tree Functional Attribute & Ecological Data Base. (Online)
(Http://Db.Worldagroforestry.Org//Species/Properties/Cassia_Singueana)  diakses  15 Oktober 2023
Khade  S.W.,  Adholeya  A.  2007.  Feasible  bioremediation  through  Arbuscular  Mycorrhizal  Fungi Imparting  Heavy  Metal  Tolerance:  A  Retrospective. Bioremediat  J 11:33–43. https://doi.org/10.1080/10889 860601185855
Orwa C, Mutua A, Kindt R, Jamnadass R, Simons A. 2009. Agroforestry Database: A Tree Reference and  Selection  Guide  Version  4.0.  World  Agroforestry  Centre,  Kenya.  (Online). (https://www.worldagroforestry.org/output/agroforestree-database  accessed  on  07-10- 2023.) diakses 7 Oktober 2023
Prasad, R., Bhola, D., Akdi, K., Cruz, C., Sairam, K. V. S. S., Tuteja, N., et al . 2017. Introduction to mycorrhiza: Historical  Development,” in Mycorrhiza. Eds. Varma, A., Prasad, R., Tuteja, N. (Cham: Springer), 1–7. doi: 10.1007/978-3-319-53064-2_1
Sandoval,
JR., P
A Rodríguez. 2013.
Senna siamea (yellow cassia). https://www.cabidigitallibrary.org/doi/10.1079/cabicompendium.11462. CABI
Compendium
Setyaningsih, L. 2012. Adaptabilitas Semai Tanaman  Hutan  terhadap Timbal pada Media Tailing dengan  Aplikasi  Kompos  Aktif  dan  Fungi  Mikoriza  Arbuskula.  Disetasi  INSTITUT PERTANIAN BOGOR.
Setyaningsih,  L.,  Y.  Setiadi,  D.  Sopandie,  S.  Wilarso.    2012.    Organic  Acid  Characteristics  and Tolerance of Sengon ( Paraserianthes falcataria L. Nielsen) to Lead. JMHT Vol. XVIII, (3): 177-183. EISSN: 2089-2063. DOI: 0.7226/jtfm.18.2.177
Setyaningsih, L., Y. Setiadi, S. W. Budi, H. Hamim and D. Sopandie.  2017. Lead Accumulation by Jabon Seedling ( Anthocephalus cadamba ) on Tailing Media with Application of Compost and Arbuscular  Mycorrhizal  Fungi.  IOP  Conf.  Series: Earth  and  Environmental  Science 58  (2017) 012053.  IOP Publishing doi:10.1088/1755-1315/58/1/012053
Setyaningsih, L., Y. Setiadi, S. W. Budi, H. Hamim, D. Sopandie. 2018a. Jabon (Anthocapalus cadamba Roxb ), Potency  for  Remediating  Lead  (Pb0  Toxicity  under  Nutrient  Culture  Condition . BIOTROPIKA. Vol. 25 No. 1, 2018: 64 – 71. DOI: 10.11598/btb.2018.25.1.712
Setyaningsih, L., A. S. Wulandari, H. Hamim.  2018b. Growth of Typha Grass ( Typha angustifolia ) on Gold-Mine  Tailings  with  Application  of  Arbuscular  Mycorrhiza  Fungi. BIODIVERSITAS Volume 19, Number 2, March 2018 Pages: 504-509 ISSN: 1412-033X E-ISSN: 2085-4722 DOI: 10.13057/biodiv/d190218
Setyaningsih,  L,  F.  A.  Dikdayatama,  A.  S.  Wulandari.  2020.  Arbuscular  Mycorrhizal  Fungi  and Rhizobium Enhance The Growth of Samanea saman (Trembesi) Planted on Gold-Mine Tailings in Pongkor, West Java, Indonesia. BIODIVERSITAS .  Volume 21, Number 2, February 2020
Pages: 611-616.  ISSN: 1412-033X E-ISSN: 2085-4722. DOI: 10.13057/biodiv/d210224
Shyam Lal, 1991. Reclamation of Bauxite Waste through Afforestation. Indian Forester , 117(6):454.
Suharnantono,  H.  2011.  Monitoring  dan  Evaluasi  Jenis  Tanaman  Rimba  Eksotik  di  KPH  Kendal.
Perhutani.
https://www.academia.edu/6547775/MONITORING_and_EVALUASI_JENIS_TANAMA N_RIMBA_EKSOTIK. Kamis, 16 November 2023, Jam 14.44 WIB.
Widodo,  K.  H.,  dan  Z.  Kusuma.    2018.  Pengaruh  Kompos  terhadap  Sifat  Fisik  Tanah  dan Pertumbuhan Tanaman Jagung di Inceptisol. Jurnal Tanah dan Sumberdaya Lahan Vol 5 No 2: 959-967, 2018 e-ISSN:2549-9793