## EFEKTIVITAS EKSTRAK Padina australis SEBAGAI
ANTIBAKTERI Escherichia coli PENYEBAB DIARE
Tri Saptari Haryani 1 , Bina Lohita Sari 2 ,Triastinurmiatiningsih 3
1,3) Program Studi Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pakuan
2) Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Pakuan Email : trisaptari@gmail.com

## ABSTRAK
Organisme laut merupakan sumber senyawa obat yang berpotensi besar, tetapi sampai saat ini masih belum dimanfaatkan secara maksimal.  Penelitian efektivitas  ekstrak Padina australis (P.  australis) sebagai anti bakteri Escherichia  coli (E.  coli) dilakukan untuk mengetahui konsentrasi tertinggi dan  senyawa  aktif  yang  terkandung  di  dalam  ekstrak sebagai antibakteri E. coli penyebab diare.Tahap  pertama  dalam  penelitian adalah mengekstraksi P. australis dengan  metode  maserasi, uji fitokimia ekstrak secara kualitatif, uji efektivitas ekstrak P. australis terhadap bakteri E. coli menggunakan metode Kirby Bauer dengan konsentrasi  40%,  60%,  80%, 100%, kemudian  menidentifikasi  kandungan senyawa ekstrak  menggunakan metode GC-MS.  Indikator  efektivitas  ekstrak diketahui  dari  lebar daerah  hambat  bakteri uji,  semakin  lebar daerah hambat  maka  senyawa  aktif  dalam  ekstrak efektif menghambat bahkan mematikan pertumbuhan bakteri E. coli. Hasil yang didapat dari pengukuran lebar daerah hambat ekstrak Padina australis pada semua perlakuan menunjukkan bahwa perlakuan dengan konsentrasi 100% membentuk daerah hambat paling lebar,  yaitu sebesar  14,37  mm;  sehingga dapat dikatakan bahwa perlakuan dengan konsentrasi  100%  merupakan konsentrasi  paling  efektif dari ekstrak P. australis dalam menghambat pertumbuhan bakteri E. coli.  Hasil uji fitokimia ekstrak diperoleh golongan senyawa  alkaloid,  tannin dan  steroid/triterpenoid.  Identifikasi senyawa aktif menggunakan GC-MS,  diperoleh kandungan senyawa phytol  yang  mempunyai kemampuan sebagai anti bakteri.
Kata Kunci : P. australis, antibakteri, E. coli, GC-MS

## PENDAHULUAN
Kesehatan merupakan hal  yang  selalu didambakan setiap  orang  agar  dapat hidup sejahtera dan produktif. Biaya kesehatan yang  semakin mahal menyebabkan dalam pengobatannya manusia berusaha mencari obat yang bersifat ekonomis dan relatif lebih aman bila dibandingkan dengan obat sintetis. Kecenderungan eksplorasi khasiat tanaman daratan sangat besar dibandingkan dengan tanaman  air  padahal beberapa tanaman  air juga memiliki kandungan bahan aktif  yang baik untuk kesehatan,  salah satunya adalah rumput laut (seaweed). Organisme laut merupakan sumber senyawa obat  yang berpotensi besar dengan struktur kimia yang
beranekaragam,  tetapi sumber bahan obat dari laut masih belum  dimanfaatkan secara maksimal. Menurut Rasyid  A.  (2004), beberapa jenis rumput laut  di  Indonesia dapat digunakan sebagai obat,  akan tetapi saat ini mengalami kendala karena penelitian mengenai eksplorasi dan pengolahannya belum berkembang,  maka pemanfaatannya sampai saat ini sangat terbatas.  Menurut Wibowo (2001), rumput laut jenis
Codiumedule (Chlorophyta)  dan Sargassum polycystum (Phaeophyta)  memiliki aktivitas antibakter bagi E. coli pada konsentrasi ekstrak rumput laut sebesar 10 – 50%. Hasil penelitian Triastinurmiatiningsih dan  Tri Saptari Haryani  (2008)  menunjukkan bahwa
Padina australis, mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Escherichia coli. Padina australis termasuk kedalam rumput laut yang memiliki ukuran besar dan mudah dilihat dengan mata biasa,  bentuknya  seperti  kipas, dalam  perkembangbiakannya  bagian  talus sering  terkoyak  ada  dalam  bentuk cluster (kelompok). P. australis mempunyai  tubuh buah  yang  terdiri  dari hold-fast (seperti akar), stipe (seperti batang), blade (seperti daun)  (Trono Jr  and  Ganzone-Fortes,  1988). Budiarti  (1997)  menyatakan bahwa  55% anak-anak dan bayi penderita diare  di Indonesia  terinfeksi oleh  EPEC,  antara  lain Escherichia  coli,  Salmonela dan Shigella. Penyakit diare yang disebabkan oleh bakteri, diperkirakan  25%  oleh  bakteri Escherichia coli, 10% Salmonella non  tifoid,  5-10% Campylobacter,  1-5% Shigella dan  1-5% Vibrio  cholera. Bakteri E. coli merupakan bakteri yang hidup dalam saluran pencernaan manusia,  oleh karena itu E.. coli selalu ada dalam tinja. Berdasarkan  penelitian  yang telah dilakukan terhadap khasiat bahan alam, perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui  efektivitas  dan  kandungan P. australis sebagai antibakteri E. coli penyebab  diare sebagai  alternatif  obat sintetik sehingga diharapkan
dapat mengantisipasi penyebaran penyakit diare.

## METODE PENELITIAN Bahan
Bahan  yang  digunakan  berupa  rumput laut P. australis sebanyak 20 Kg  yang diperoleh dari Pantai Bayah, Banten. Bakteri. E. coli yang  digunakan  sebagai  bakteri  uji merupakan strain  murni  dan  diperoleh  dari Laboratorium Bakteriologi,  Balai  Veteriner, Bogor;  media  Nutrient  Agar  dan  Nutrient Broth untuk peremajaan bakteri dan pengujian  efektivitas  ekstrak P. australis; amoksisilin, etanol 96%.

## Cara Kerja Ekstraksi Padina australis
Sampel P. australis dicuci hingga bersih,  kemudian  dipotong-potong ukuran  ± 1 cm,dan dikeringkan dalam oven pada suhu 50 0 C  sampai berat kering konstan. Setelah
kering, sampel  digrinder  sehingga diperoleh bubuk kering. Sampel sebanyak 100  gram dimaserasi dengan menggunakan pelarut etanol  96% sebanyak  1000  ml selama  3x24 jam  agar  massa  bioaktif  dapat  keluar  dari thallusnya  yang  padat. Hasil maserasi disaring menggunakan kertas saring
Whattmann  42 dan bantuan vacuum  flask, filtrat ditampung dalam erlenmeyer. Ekstrak dievaporasi menggunakan  evaporator  pada suhu  50 ˚C  sampai tidak terjadi lagi pengembunan pelarut pada kondensor. Persiapan Inokulum Bakteri E. coli Inokulum E.  coli dibuat  dengan populasi  10 5 - 10 6 cfu/ml.  Stok  kultur E.coli murni  di  erichment  dengan  menggunakan  2 ml  TSB,  dan  diinkubasi  selama  120  menit dalam  inkubator  suhu  30 - 35 ˚C.  Kemudian dilakukan  dekantasi/  pencucian  dengan menggunakan  larutan  BPS  pH  7.2  terhadap bakteri  tersebut  (dengan  deret  tabung), sampai di dapat kekeruhannya setara dengan kekeruhan Mac Farland III (deret 10 9 ). Hasil dari  kesetaraan  dengan  standar  Mac  Farland tersebut  dipipet  1  ml  dan  dimasukkan  ke dalam 9 ml BPS pH 7.2 (sebagai deret 10 8 ), kemudian  lakukan  deret  selanjutnya  sampai didapat populasi 10 6 atau 10 5 cfu/ml.

## Pengujian Efektivitas Ekstrak Padina
australis Pengujian efektivitas  ekstrak Padina australis sebagai antibakteri E. coli menggunakan  uji  difusi  menurut  Kirby- Bauer dengan metode oles (Lay, 1994). Pada media dioleskan satu  ose  bakteri E. coli, kemudian kertas cakram yang telah mengandung  ekstrak P. australis diletakkan pada media dan ditekan agar ekstrak meresap pada  media  dengan  baik. Pembacaan  hasil dilakukan  setelah  inkubasi  pada  suhu  35 0 C selama  18-24  jam  dengan  cara  mengukur diameter  daerah  hambatan  (zona  bening) disekitar  kertas  cakram  menggunakan  kertas milimeter  atau  penggaris. Perlakuan  yang digunakan dalam pengujian ini yaitu ekstrak dengan  konsentrasi  40%,  60%,  80%  dan 100% (b/v), sedang kontrol positif digunakan amoksisilin. Analisis  data  menggunakan Rancangan  Acak  Lengkap  yang  dilanjutkan
dengan  uji  acak  Berganda  Duncan dengan taraf kepercayaan 95%.
Uji Fitokimia Uji fitokimia bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya kandungan metabolit  yang  terekstrak  dari sampel P. australis, meliputi :

## a. Uji Alkaloid
Sebanyak ± 0,3 gram sampel ditambah 10 mL etanol dan 10 mL aquadest kemudian disaring. Filtrat hasil penyaringan
ditambahkan  beberapa  tetes  H 2 SO 4 2  M, kemudian  dikocok  sehingga  terbentuk  dua lapisan.  Lapisan asam  (tidak  berwarna) dipipet  ke  dalam  tabung reaksi  dan ditambahkan  reaksi  Mayer,  Dragendorf  dan Wagner. Jika terdapat endapan putih dengan pereaksi  Mayer,  endapan  merah  jingga dengan  pereaksi  Dragendorf  dan  endapan coklat  dengan  pereaksi  Wagner  maka senyawa alkaloid terdapat di sampel tersebut (Harborne, 1987).
b. Uji Flavonoid
Sebanyak ± 0,1 gram sampel dilarutkan  dalam 100  ml  etanol,  kemudian dididihkan  selama  5  menit  lalu  disaring. Sebanyak  5  ml  filtratnya  ditambahkan  0,10 mg  serbuk  Mg,  1  ml  HCl pekat  dan  1  ml amil alkohol lalu dikocok kuat-kuat. Adanya flavonoid  ditunjukkan  dengan  terbentuknya warna  merah,  kuning  atau  jingga  pada lapisan amil alcohol (Harborne, 1987).

## c. Uji Triterpenoid
Sebanyak 2  ml asam  asetat  anhidrat ditambahkan pada 1 mL ektrak etanol dan 2 mL asam sulfat  pekat. Adanya  steroid ditandai dengan perubahan warna dari violet menjadi biru atau hijau (Edeoga,et al. 2005).

## d. Uji Saponin (uji busa)
Sebanyak  dua  gram sampel  dilarutkan menggunakan  20  ml  etanol  70%. Didihkan menggunakan penangas air, kemudian
disaring menggunakan kertas saring. Campurkan  10  mL  filtrat  dengan  5  mL aquadest  dan  kocok  hingga  terbentuk  busa
stabil.  Tambahkan  olive  oil  dan  kocok dengan  keras, adanya  saponin  ditandai dengan terbentuknya  emulsi  yang  stabil (Edeoga,et al. 2005). e. Uji Fenol Hidrokuinon
Sebanyak  1  gram  sampel  dilarutkan dalam 20 mL etanol 70% dan yang ke dua 1 gram sampel di ekstrak menggunakan 20 mL aqudest.  Filtrat  yang dihasilkan  diambil sebanyak  1  mL kemudian  ditambahkan  2 tetes  larutan  FeCl 3 5%.  Reaksi  positif ditunjukan  dengan  terbentuknya  warna  hijau atau hijau biru (Edeoga,et al. 2005).

## f. Uji Tanin
Sebanyak ± 0,1 gram sampel diekstrak menggunakan  menggunakan  pelarut  etanol. Filtrat  yang  didapat  kemudian  ditambahkan beberapa  tetes  FeCl 3 1%. Adanya  senyawa tanin  ditunjukan  dengan terbentuknya  warna hjau, biru atau ungu (Harborne, 1987).
Identifikasi Senyawa Aktif Ekstrak Menggunakan GC-MS Analisis  GC-MS  dilakukan  terhadap hasil ekstrak yang positif menunjukkan daya antibakteri  terhadap E. coli. Sebelum dilakukan identifikasi senyawa aktif ekstrak, terlebih dahulu dilakukan pengujian fitokimia  untuk  mengetahui  penggolongan senyawa  yang  terkandung  dalam  ekstrak P.
australis. Analisis GC-MS dilakukan berdasarkan  metode  Putra  (2007),  gas pembawa  yang  digunakan  adalah  helium dengan  laju  aliran  diatur  sebagai  berikut: suhu  injektor  320 0 C,  suhu  awal  oven  70 0 C. Laju  kenaikan  suhu  10 0 C/menit,  dan  suhu akhir  oven  310 0 C. Identifikasi  senyawa dilakukan  dengan  bantuan  perangkat  lunak PC. Parameter  yang  digunakan  adalah parameter  kuantitatif,  yaitu  data  yang diperoleh  dari  hasil  pengukuran  diameter daerah  hambatan  yang  terlihat  disekitar kertas cakram (mm).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi Padina australis
Hasil  ekstraksi P.  australis dengan menggunakan  pelarut  etanol  96%,  diperoleh ekstrak cair berwarna hijau pekat (hijau tua),
kemudian setelah dievaporasi dengan menggunakan rotary  evaporator diperoleh larutan  ekstrak  berwarna  hijau  bening (Gambar 1).

## Gambar 1. Hasil Ekstraksi P. australis
Keterangan: A.Sebelum Dievaporasi dan B. Setelah Dievaporasi Hasil  maserasi  sebanyak  250  gram simplisia P. australis dengan  pelarut  etanol 96%  diperoleh  ekstrak  cair  berwarna  hijau pekat  (hijau  tua),  dan  setelah  dipekatkan diperoleh  ekstrak  kental  berwarna  hijau kekuningan  bening  sebesar  37,5  gram (rendemen  ekstrak  sebesar  15%). Pelarut etanol  96%  mempunyai  polaritas  yang tinggi, sehingga mampu melarutkan senyawa
aktif  dalam  simplisia P. australis lebih banyak  dibandingkan  jika  menggunakan pelarut lainnya. Selain itu, etanol mempunyai titik  didih  yang  rendah  dan  cenderung  aman apabila  digunakan  sebagai  pelarut.  Hal  ini sesuai  dengan  pendapat  Paturau  (1982), bahwa  etanol  96%  dapat  melarutkan  dengan sempurna  untuk  senyawa  resin,  lemak, karbohidrat  dan  senyawa  organik  lainnya. Hasil ekstrak kental mengindikasikan bahwa ekstrak P. australis mengandung  komponen senyawa aktif yang larut dalam pelarut polar. Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat  Nurhayati dkk. (2009), bahwa nilai rendemen dari hasil maserasi  suatu  bahan  menunjukkan  adanya komponen  bioaktif  yang  terkandung  dalam bahan tersebut.

## Hasil Uji Fitokimia
Uji fitokimia kualitatif bertujuan untuk mengetahui  kandungan  senyawa  metabolit sekunder  yang  terkandung  dari  sampel Padina  australis Hasil  uji  fitokimia  dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak P. australis
Keterangan: +
: kurang pekat
++ : sedang +++ : pekat
Tabel  1 menunjukkan  bahwa filtrat Padina australis menggunakan  pereaksi etanol 96%  menunjukkan  adanya  alkaloid dengan kisaran kurang pekat pada pengujian menggunakan pereaksi Mayer, pekat menggunakan pereaksi Wagner dan
Dragendorf. Filtrat  alkaloid  pada pengujian menggunakan  pereaksi  Mayer  hasilnya kurang  pekat,  dikarenakan  hal  sensitivitas terhadap  gugus  alkaloid  yang  berbeda. Kandungan flavonoid  pada  filtrat Padina australis menggunakan pelarut etanol
Identifikasi Senyawa Parameter Hasil Reaksi Alkaloid Mayer Endapan Putih + Wagner Endapan Coklat +++ Dragendrof Endapan Merah +++ Flavonoid Kuning +++ Triterpenoid Biru dan Hijau +++ Saponin Terdapat Busa ++ Fenol Hidrokuinon Hijau ++ Tanin Hijau +++
menunjukan adanya flavonoid dengan kisaran pekat.
Triterpenoid P. australis dengan menggunakan  pelarut  etanol menunjukkan adanya  kisaran  pekat, sedangkan senyawa saponin  terdapat pada  kisaran  sedang. Saponin  tampak  jelas  ketika  adanya  busa pada saat filtrat dipanaskan. Fenol hidrokuinon pada  kisaran  sedang  dengan menggunakan  pelarut  etanol,  tanin pada filtrat P. australis memiliki  senyawa  yang pekat.    Menurut pendapat Basmal (1999), bahwa  senyawa  tanin,  dan  triterpenoid merupakan suatu senyawa metabolit sekunder  yang  dapat  dijumpai  pada  jenis- jenis  rumput  laut  dan  mempunyai  aktivitas sebagai antibakteri. Pendapat Fitriyani
(2012),  yang  mengemukakan  bahwa  dalam ekstrak  rumput  laut  terdeteksi  senyawa  aktif golongan  alkaloid,  tanin,  dan  triterpenoid yang mempunyai aktivitas sebagai antibakteri.
Uji  Effektivitas  Ekstrak Padina  australis terhadap Antibakteri E.coli
Pengujian efektivitas ekstrak P.
australis terhadap antibakteri E. coli dilakukan  dengan  mengukur  lebar  zona hambat  pada  variasi  konsentrasi  rendemen ekstrak  berturut-turut  60%,  80%,  dan  100% dihasilkan  rata-rata  zona  hambat  terbesar pada  konsentrasi  rendemen  ekstrak  100% yaitu  sebesar  14,37  mm,  sedang  rata-rata zona hambat terkecil diperoleh pada perlakuan  konsentrasi  60%  yaitu  sebesar 2,25  mm.  Hasil  pengukuran  zona  hambat ekstrak Padina australis selengkapnya dapat dilihat  pada  Tabel  2  dan  Gambar  di  bawah ini.
Tabel 2. Rata-Rata Zona Hambat Ekstrak P. australis Terhadap Bakteri E. coli
Zona hambat ekstrak P. australis (mm) Amoksisilin (kontrol positif) 60% 80% 100% 2,25 a 6,75 b 14,37 c 2,0 a
Keterangan: huruf  yang  berbeda  pada  kolom  yang
berbeda menunjukkan perbedaan sangat  nyata  pada  taraf  kepercayaan 95% (Hartanto, 2007).
Lebar  zona  hambat  yang  terbentuk  ini dipengaruhi  oleh  konsentrasi  bahan  aktif yang  terkandung  dalam  ekstrak P. australis, sensitivitas  bakteri E. coli terhadap  ekstrak, serta  kecepatan  difusi  bahan  aktif  yang terdapat  dalam  ekstrak  terhadap  medium agar. Selain  itu,  kondisi  lingkungan  media bakteri uji yaitu suhu, waktu inkubasi, umur bakteri  juga  mempengaruhi  lebar  zona hambat  yang  terbentuk  pada  tiap  perlakuan konsentrasi  ekstrak.  Hal  ini  sesuai  dengan pendapat  Rajendra  (2011)  bahwa  senyawa tanin  yang  terkandung  dalam  rumput  laut dapat menyebabkan denaturasi dan koagulasi protein sel bakteri, sehingga akan menyebabkan kematian sel bakteri. Hadioetomo  (1993),  menyatakan  bahwa waktu inkubasi, umur dan jumlah sel bakteri berpengaruh terhadap pengujian daya hambat  suatu  bahan  sebagai  antibakteri. Sementara Dwijoseputro (1987), menyatakan bahwa  tingkat  efektifitas  suatu  bahan menggunakan metode Kirby Bauer dikatakan sensitif  jika  terbentuk  zona  hambat  (daerah bening)  di  sekeliling  kertas  cakram. Hasil pengukuran  zona  hambat  yang  terbentuk pada  tiap  perlakuan,  diperoleh  zona  hambat terluas  sebesar  14,37  mm  pada  konsentrasi ekstrak 100%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa perlakuan  dengan  konsentrasi  100%,  setelah diinkubasi  pada  suhu  kamar  selama  18-24 jam, ternyata pada daerah zona hambat tidak menunjukkan adanya pertumbuhan bakteri.
A
Gambar 2. A) Zona Hambat Ekstrak 60% (2,25mm); B) Zona Hambat Ekstrak 80%
(6,75 mm); C) Zona Hambat Ekstrak 100% (14,37 mm) Identifikasi Senyawa Aktif Ekstrak Padina australis Data yang diperoleh dari hasil pengukuran lebar daerah hambat dari ekstrak P. australis,  kemudian  dianalisis  senyawa kimia  yang  terkandung  dalam  ekstrak menggunakan  metode  GC-MS.  Dari  hasil identifikasi senyawa aktif ekstrak P. australis,  diduga terdapat  15 senyawa  yang selengkapnya tersaji dalam Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Identifikasi Ekstrak Etanol 96% Ekstrak Padina australis
No Nama Senyawa Waktu Retensi (menit) % area Kelimpahan Berat Molekul Struktur 1 Etil benzen 4,003 3,72 92 106,08 2 p-ksilen 4,046 10,04 97 106,08 3 Stirena 4,206 1,83 95 104,06 4 Mesitilena 4.762 0.43 92 120,09 5 1,2,4- Trimetilbenzen 4.762 0.43 91 120,09 6 Sikloheptaksilo ksan 9.248 0.99 93 518,13
B C
7 Asam Tetradekanoat 11.128 0.98 98 242,22 8 Neofitadiena 11.962 2.13 99 278,30 9 Fitol 11.962 2.13 91 296,31 10 Asam 9- Heksadekenoat 12.421 1.6 99 268,24 11 Asam 9- Oktadekenoat 13.767 4.65 99 296,27 12 Metil 7- oktadekenoat 13.799 1.29 99 296,27 13 Asam Heptadekanoat 13.916 1.55 98 298,29 14 Asam Stearat 13.916 1.55 96 298,29 15 1,3,5,7,9,11,15- Hexadekametil -oktasiloksan 15.198 1.39 91 578,17 Data yang diperoleh dari hasil
pengukuran lebar daerah hambat dari ekstrak
P. australis, kemudian diidentifikasi senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam ekstrak menggunakan metode GC-MS. Hasil uji aktivitas GC-MS terhadap ekstrak Padina australis  menghasilkan  15  senyawa  yang positif memiliki aktivitas
sebagai anatibakteri yaitu golongan terpenoid, steroid, alkaloid dan fenolik. Hasil ini sesuai dengan  pernyataan  (Grayson,  2000;  Liem et al,  2006)  bahwa  dalam  alga  coklat terkandung  senyawa  fenolik  dan  senyawa golongan  terpenoid  yang  memiliki  aktivitas sebagai  antibakteri,  yaitu  monoterpenoid, diterpenoid, triterpenoid, dan senyawa phytol.  Berdasarkan  hasil  uji  fitokimia diperoleh  senyawa  golongan  triterpenoid, saponin,  tannin,  dan  senyawa  fenolik.
Demikian  pula  dari  hasil  uji  GC-MS menunjukkan  adanya  kelimpahan  golongan triterpenoid  yaitu  senyawa  phytol  yang diduga mempunyai aktivitas sebagai antibakteri. Hal ini sesuai dengan pernyataan Bhattacharya (2013), bahwa phytol merupakan  golongan  senyawa  diterpenoid
dan  triterpenoid  yang  umumnya  dijumpai dalam rumput  laut dan mempunyai aktivitas

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Kesimpulan  yang  didapat  dari  penelitian  ini yaitu; 1. Hasil maserasi Padina australis diperoleh  ekstrak  cair  berwarna  hijau tua,  dan  dari  hasil rotavapor  diperoleh ekstrak  kental berwarna  hijau  bening sebanyak  37,5  gram  dan rendemen sebesar 15%. 2. Konsentrasi ekstrak paling efektif menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia  coli  yaitu  ekstrak  dengan konsentrasi  100%,  dengan  diameter daerah  hambat  yang  diperoleh  sebesar 14,37 mm
3. Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  diperoleh senyawa golongan triterpenoid, alkaloid, tannin, dan senyawa fenolik.
4. Hasil identifikasi senyawa aktif menggunakan metode GC-MS diperoleh 17 senyawa yang diantaranya terkandung senyawa golongan
diterpenoid dan triterpenoid yaitu senyawa  fitol,  yang  diduga  memiliki aktivitas sebagai antibakteri.

## Saran
Hasil  penelitian  disarankan  perlunya dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  untuk pembuatan  sediaan  dalam  bentuk  tablet maupun  sirup  sehingga  akan  memberi kemudahan dan kepraktisan dalam penggunaan ekstrak Padina australis.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada :
1. Direktorat Penelitian  dan  Pengabdian kepada Masyarakat, Direktorat JenderalPendidikan Tinggi, Kementerian Pendidikan dan Kebudayaan 2. Ketua  Lembaga  Penelitian,  Universitas
Pakuan
3. Dekan  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu
Pengetahuan  Alam,  Universitas  Pakuan
Bogor.
4. Para  anggota  peneliti  dan  teknisi  yang telah membantu selama penelitian berlangsung, 5. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan  satu  persatu, yang  telah membantu  dan  memberikan  dukungan selama  pelaksanaan  hingga  penyusunan laporan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Anief,  M.  2000. Farmaseutika.  Universitas Gadjah  Mada,  Yogyakarta,  hal:  92- 99.
Basmal,  JJT.  Murtini  dan  Yunizal.  1999. Teknologi  Ekstraksi  Alginat  dari Rumput laut Coklat. Badan penelitian dan Pengembangan Pertanian. Jakarta. Budiarti.  1997. Pelekatan pada  Sel  Hep-2 dan Keragaman Serotipe O Escherichia  coli Enteropatogenik isolat  Indonesia.  J.  Berkala  Ilmu Kedokteran 29 : 105-110
Depkes  RI.,  1995. Farmakope  Indonesia
edisi IV. Bakti Husada. Departemen
Kesehatan  Republik  Indonesia,  hal: 1-10; 18. Dwijoseputro. 1987. dasar-dasar Mikrobiologi. Universitas Brawidjaya, Djambatan, Malang. Edeoga,  HO,.  DE.  Okwu  and  BO  Maebre. 2005. Phytochemical  Constituen  of
Some  Nigerian  Medical  Plant.  Afr
Journal of Biotechnologi 4:685-688 Fitriany,  P.  2012. Kandungan  Fenol, Senyawa Fitokimia, Aktivitas Antioksidan  Rumput  Laut Padina australis. Bogor. Departemen Teknologi  Hasil  Perairan,  Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor. Hadioetomo,  Ratna  Siri.  1993. Mikrobiologi dasar  dalam  Praktek, Teknik  dan Prosedur  Dasar  Laboratorium. PT Gramesia, Pustaka Utama, jakarta. Harborne, 1987. Metode Fitokimia, Penuntun cara Modern Menganalisis Tumbuhan, ITB, Bandung. Jawetz.,  J.L.  Melnick,  E.A.  Adelberg,  G.F. Brooks,  J.S.  Butel,  L.N.  Ornston. 1995. Mikrobiologi  Kedokteran,
edisi  20.  University  of  California, san Francisco. Lay,  B.  W.  &  S.  Hastowo.,  1992. Mikrobiologi. CV. Raja Wali.
Jakarta. 88-94.
Moerhario,  H.  L.  &  Kurniawati,  A.  1994.
Mikroba  Penyebab  Diare.  Jurnal PAMKI, ed Desember. 18-24 Nurhayati T.D, Aryani, dan Nurjanah. 2009.
Kajian Awal Potensi Ekstrak. Jurnal
Kelautan Nasional 2: hal. 43-51
Paturau,  J.M.  1982. By  Product  of  cane
Sugar  Indostri,  Elsiever  Scientific Publishing Co, Amsterdam Windholz Putra,  I.N.K.  2007. Studi  Daya  Antimikroba Ekstrak Beberapa Bahan Tumbuhan Pengawet  Nira  terhadap  Mikroba Perusak  Nira  Serta  Kandungan Senyawa Aktifnya. Disertasi. Program  pascasarjana  Universitas Brawijaya, Malang.
Rajendra,  C.E.,  Gopal  S.,  Mahaboob  Ali., Yashoda  S.V.,  Manjula  M.  2011.
Phytocemical screening  of  the Rhizome  of  Kaempferia  galanga. Internasional Journal of Pharmacognosy  and  Phytocemical Research 2011:3 (3): 61-63 Rasyid,  A.  2004.  Berbagai  Manfaat  Algae.
Jurnal Oseana XXIX (3) ; 9 – 15. Robinson,  T.1995. Kandungan  Organik Tumbuhan  Rendah  dan  Tinggi. Terjemahan    Padmawinata,  K. Institut Teknologi Bandung. Bandung. Triastinurmiatiningsih dan Tri Saptari Haryani. 2008. Potensi Rumput Laut di Pantai Bayah, Kabupaten Lebak, Banten Sebagai Anti Bakteri Escherichia coli. Jurnal Matematika,  Sains  dan  Teknologi, Volume 9, no 1, hal 37-43.
Trono  Jr.,  G.C.  dan  Ganzon-Fortes.  1988. Phillippine Seaweds. National Book Store,  Lnc. Phillippine Wibowo,  S.T.  2001. Potensi  Jenis-jenis
Rumput  Laut  dari  Pantai  Sayang Heulang- Pameungpeuk, Garut Sebagai Antibakter Escherichia coli. Jurusan Biologi, IPB, Bogor.