## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK POLAR DAN NON POLAR BIJI KELOR (Moringa oleifera) ASAL PULAU TIMOR NTT
Fredy Saudale 1 ,Early Boelan 1,2
1 Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Teknik, Universitas Nusa Cendana Kupang, NTT, Indonesia
2 Jurusan Pendidikan MIPA, Program Studi Pendidikan Kimia, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Katholik Widya Mandira
Kupang, NTT, Indonesia
e-mail: fredy_saudale@staf.undana.ac.id, earlygrizca@gmail.com

## Abstrak
Tumbuhan kelor (Moringa oleifera) telah digunakan dalam pengobatan tradisional. Namun demikian belum diketahui aktivitas antibakteri ekstrak biji kelor asal pulau Timor NTT pada bakteri  E.coli  dan  S.aureus.  Ekstrak  non  polar  didapatkan  dengan  metode  maserasi menggunakan  n-heksana  yang  kemudian  diidentifikasi  komponen  kimianya  dengan  GC- MS. Ekstrak polar didapatkan dengan merebus biji kelor pada suhu 70oC menggunakan akuades.  Dari  hasil  penelitian  didapatkan  bahwa kandungan  terbesar  pada  ekstrak  non- polar adalah asam oktadek-9-enoat (85,79%) yang adalah asam trans oleat dan asam-9- oktadekanoat  (12,69%),  suatu  asam  cis-oleat.  Ekstrak  polar  pada  konsentrasi  optimum 100% memberikan daya hambat yang lebih besar yaitu 5,67 mm terhadap bakteri E. coli dan 7,33 mm terhadapS. aureus dibandingkan ekstrak non-polar yang memberikan daya hambat  4,67  mm  terhadapE.  coli  dan  5,00  mm  S.  aureus.  Disimpulkan  bahwa  ekstrak polar  dan  nonpolar  biji  kelor  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  E.coli  dan  S.aureus. Perbedaan daya hambat didugakarena perbedaan pada kandungan senyawa kimianya.
Kata kunci: Ekstrak biji, Moringa oleifera, antibakteri, daya hambat

## Abstract
Moringa oleiferahas been widely used for traditional medicine. Nevertheless, antibacterial activity  of  Moringa  seed  extract  from  Timor  Island  in  E.coli  and  S.aureushas  been unknown.  Non  polar  extract  was  obtained  by  maceration  method  using  n-hexane  which was  then  identified  its  chemical  component  with  GC-MS.  Polar  extract  was  obtained  by boiling Moringa seeds at 70°C using aquades. The results showed that the largest content of  non-polar  extract  was  octadec-9-enoat  acid  (85.79%),  atrans  oleic  acid  and  9- octadecanoic  acid  (12.69%),  a  cis-oleic  acid.  Polar  extract  at  concentration  of  100% showed a larger inhibition of 5.67 mm for E. coli and 7.33 mm for S. aureus than non-polar extract; 4.67 mm inhibition for E. coli and 5.00 mm S. aureus. It was concluded that polar and  nonpolar  extract  of  Moringa  seeds  exhibits  antibacterial  activity  toward  E.coli  and S.aureus.  The  difference  in  inhibitory  activity  may  be  due  to  differences  in  the  chemical content of the extracts.
Keywords : Moringa oleifera, seed extracts, antibacterial activity

## PENDAHULUAN
Indonesia  kaya  akan  sumber  bahan alam  yang  secara  turun  temurun  telah digunakan sebagai ramuan obat tradisional, salah  satunya  adalah  tanaman  kelor (Moringa  oleifera).  Pohon  kelor  merupakan tumbuhan  perdu  yang  mampu  beradaptasi dengan kondisi alam di pulau Timor di Nusa
Tenggara  Timur  dengan  keadaan  cuaca, dan  kondisi  tanah  yang  cukup  kering. Walaupun secara lokal, masyarakat di pulau Timor  telah  memanfaatkan  daun  dari tumbuhan  ini  sebagai  bahan  makanan (sayuran),  keberadaan  tumbuhan  ini  masih belum mendapat perhatian dari masyarakat, secara  khusus  pemanfaatannya  sebagai
obat  tradisional.  Kelor  merupakan  jenis tumbuhan  yang  memiliki  banyak  manfaat dari  akar,  kulit  batang,  daun,  buah  bahkan bijinya. Berbagai manfaat tumbuhan kelor ini terus  dieksplorasi  sebagai  sumber  vitamin A,  B (1,  2, 3,  6,  7),  C,  D,  E  dan  K, sumber mineral (tembaga, besi, kalium, magnesium, mangan dan zinc), sumber protein, antioksidan, antimikroba, bahan baku pembuatan  sabun  dan  kosmetik,  sampai pada  manfaatnya  sebagai  penjernih  air (Mahmood., Mugal dan Haq, 2010).
Penelitian yang dilakukan oleh
Bukar,  Uba  dan Oyeyi (2010) menunjukkan bahwa ekstrak biji kelor mampu menghambat pertumbuhan beberapa bakteri  dan  juga  jamur.  Vieira  et  al  (2010) juga  menguji  aktivitas  antibakteri  dari ekstrak biji kelor yang kemudian dibandingkan  dengan  ekstrak  sirsak  dan didapati bahwa ekstrak biji kelor lebih efektif dalam menghambat pertumbuhan beberapa bakteri  yang  diuji  yaitu  Staphylococcus aureus,  Vibrio  cholerae  dan  Escherichia coli.Sementara  itu,  Goyal  et  al  (2007) menunjukkan  bahwa  biji  kelor  mengandung senyawa  4- (α -L-rhamnpyranosyloxy)  benzyl isothiocyanate  yang  telah  diidentifikasi memiliki aktivitas antimikroba.
Namun  demikian  sejauh  ini  belum pernah  diketahui  aktivitas  antibakteri  biji kelor asal Pulau Timor terhadap Escherichia coli  dan  Staphylococcus  aureus.  Bakteri Escherichia  coli  merupakan  bakteri  gram negatif  yang  menghasilkan  enterotoksin penyebab  diare  (Volk  dan  Wheeler,  1990). Sedangkan,  S.aureus  dikenal  sebagai bakteri  gram  positif  penyebab  infeksi  pada tenggorokan,  paru-paru  dan  sistem  saraf (Tally, 1993).  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak polar (akuades)  dan  non-polar  (n-heksana)  biji kelor  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri E.coli dan S.aureus. Berapa konsentrasi  optimum  ekstrak  akuades  dan n-heksana  biji  kelor  dalam  menghambat bakteri  E.coli  dan  S.aureus  juga  dipelajari. Selain  itu  kandungan  senyawa-senyawa kimia pada ekstrak polar dan non polar juga dianalisis  menggunakan  data  dari  GC-MS maupun literatur.

## METODE

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan  Februari  -  April  2012.  Proses ekstraksi  dikerjakan  di  Laboratorium  Kimia Fakultas  Sains  dan  Teknik  Universitas Nusa  Cendana  Kupang,  uji  aktivitas antibakteri dikerjakan di Laboratorium Mikrobiologi  Universitas  Widya  Mandira Kupang dan analisis senyawa kimia ekstrak n-heksan dilakukan di Laboratorium Organik Universitas Brawijaya Malang.

## Bahan
Dalam  penelitian  ini  bahan-bahan yang digunakan adalah: biji kelor, NaCl 0,9 %,  Nutrien  Agar,  n-  heksan,  akuades, kertas  saring,  sedangkan  organisme  yang menjadi  obyek  penelitian  adalah  bakteri Staphyllococcus  aureus dan Escherichia coli yang  telah  diisolasi  dan  disediakan  di Laboratorium
Mikrobiologi
Universitas Widya Mandira Kupang.

## Persiapan Ekstrak
Sampel yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  biji  kelor  ( Moringa oleifera L)  yang  diambil  dari  Kelurahan Penfui  (Kupang).  Biji  kelor  dibersihkan  dan dihancurkan  dengan  blender.  Serbuk  lalu diayak  dan  dikeringkan  dalam  oven  100°C selama  1  jam.  Untuk  ekstrak  non-polar, sebanyak  120  gram  serbuk  dicampur dengan  600  ml  n-heksana;  campuran digojok  dan  dibiarkan  semalaman.  Ekstrak yang didapat disaring dan filtratnya dievaporasi  pada  suhu  70°C  sampai diperoleh  ekstrak  pekat.  Kandungan  kimia pada  ekstrak  dianalisis  dengan  GC-MS.
Untuk ekstrak dengan menggunakan  akuades  dilakukan  dengan mengambil  120  gram  serbuk  biji  kelor kemudian  direbus  dalam  600  ml  akuades pada  suhu  70 o C  selama  30  menit  dan disaring  dengan  menggunakan  kertas saring dan dipisahkan lapisan supernatannya. Kemudian filtrat
dimasukkan  dalam freezer selama  96  jam (4hari).

## Uji Aktivitas Antibakteri
Media  yang  digunakan  adalah  media Nutrien  Agar  (NA).  Sebanyak  10  gram nutrient  agar  dilarutkan  dalam  500  ml
akuades  kemudian  dipanaskan  sampai mendidih sambal diaduk. Nutrien agar yang ada  kemudian  disterilisasi  dalam autoclave pada suhu 121°C selama 30 menit.
Persiapan  kuman  uji  dimulai  dengan pembuatan  lempeng  agar.  Masing-masing cawan  Nutrien  Agar  diinokulasikan  dengan biakan Staphyllococcus aureus dan Escherichia  coli dengan  teknik  agar  sebar yang  kemudian  diinkubasi  pada  suhu  37°C selama  24  jam.  Setelah  itu  kuman  hasil pembiakan  diambil  1  mata  ose  kemudian dimasukkan  ke  dalam  9  ml  NaCl  0.9% (sebagai  pengenceran  10 -1 )  dan  dilakukan seterusnya  sampai  pengenceran  10 -5 .  Dari pengenceran  10 -5 dipindahkan  1  ml  ke dalam  cawan  petri,  kemudian  dituangkan media  agar  setebal  1  cm  secara  perlahan agar merata dan dibiarkan.
Uji antibakteri dilakukan dengan metode  zona  bening.  Kertas  cakram  yang berdiameter  1  cm  dimasukkan  ke  dalam ekstrak  n-heksana  dan  akuades  dengan konsentrasi 25%, 50%, 75% dan 100% lalu dibiarkan  selama  1  jam.  Kemudian  kertas cakram yang ada diambil dan diletakkan ke dalam cawan petri yang berisi nutrient agar. Setelah  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama 24 jam.

## Pengukuran Diameter Hambatan
Ekstrak  n-heksana  dan  akuades  dari biji  marungga  yang  diuji  dalam  berbagai variasi  konsentrasi  diamati  dan  kemudian diukur  zona  beningnya.  Ekstrak  dikatakan mempunyai aktivitas jika dapat menghambat  bakteri.  Daerah  hambatan terlihat  sebagai  bagian  yang  bening  di sektiar  kertas cakram (diukur dalam millimeter).

## Teknik Analisis Data
Rancangan penelitian yang digunakan adalah  rancangan  acak  lengkap  (RAL) dengan  variasi  konsentrasi  0%,  25%,  50%, 75%  dan  100%.  Data  yang  diperoleh merupakan hasil pengamatan secara laboratorium  yang  selanjutnya  dianalisis dengan  menggunakan  statistic  parametrik ANOVA satu arah dengan tingkat kepercayaan 95%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstrak  tumbuhan  yang  diperoleh melalui  ekstraksi  dengan  pelarut  umumnya dilakukan dengan mereaksikan bahan yang akan diekstrak dengan jenis pelarut tertentu kemudian  diikuti  dengan  pemisahan  residu dengan  filtrat.  Dalam  penelitian  ini  sampel biji kelor yang diambil ekstraknya dilarutkan dengan  dua  pelarut  yaitu  akuades  dan  n- heksan secara terpisah. Sebelum dilakukan ekstraksi  sampel  biji  kelor  terlebih  dahulu dikeringkan  di  dalam  oven  pada  suhu  100 o C  selama  1  jam,  dengan  tujuan  untuk menghilangkan kadar air di dalamnya.
Menurut Markam (1975), penghalusan  jaringan  tumbuhan  harus dilakukan terlebih dahulu untuk mengekstraksi komponen aktif yang terkandung didalamnya. Oleh karena itu biji kelor  yang  telah  dikeringkan  kemudian dibuat  menjadi  serbuk  atau  bubuk  kering dengan maksud untuk memperluas permukaan, kemudian
dilakukan
pengayakan  untuk  menyeragamkan  ukuran partikel  agar  mempermudah  kontak  antara bahan dengan pelarutnya sehingga ekstraksi dapat berlangsung dengan baik.
Proses  ekstraksi  biji  kelor  dengan menggunakan  pelarut  n-heksan  dilakukan adalah  dengan  cara  maserasi.  Metode  ini dipilih  karena  sederhana.  Untuk  zat-zat yang tidak tahan panas, maserasi merupakan  metode  yang  cocok.  Proses maserasi pada penelitian ini dimulai dengan merendam  120  gram  sampel  serbuk  biji kelor  dengan  600  ml  pelarut  n-heksan selama  24  jam.  Setelah  itu  dilakukan pemisahan  antara  residu  dan  filtrat.  Filtrat yang  ada  kemudian  dievaporasi  untuk memisahkan zat aktif dengan pelarutnya.Ekstrak  n-heksana  biji  kelor yang  didapat  setelah  evaporasi  adalah  32 ml atau setara dengan 24,94 gram. Dengan demikian persen hasil (rendemen) eksrak n- heksana biji kelor adalah 26,67% (v/w) atau 20,78%  (w/w).  Sementara  itu  esktrak akuades biji kelor yang diperoleh adalah 62 ml  atau  setara  dengan  54  gram.  Dengan demikian  persen  hasil  (rendemen)  ekstrak
akuades biji kelor adalah 51,67% (v/w) atau
45% (w/w).
Gambar 1.Kromatogram ekstrak n-heksana biji kelor
Berdasarkan  hasil  analisis  dengan
GC-MS  dapat  dilihat  bahwa  ekstrak  n- heksana biji kelor mengandung 5 komponen senyawa kimia yang ditunjukkan dengan adanya 5 puncak pada kromatogram  (Gambar  1).  Terlihat  bahwa senyawa  pada  puncak  ke-2  (R t 22,590 menit)  dan  3  (R t 24,472  menit)  dengan persen area masing-masing adalah 12,69% dan  85,79%  merupakan  komponen  yang paling dominan.Spektra massa pada puncak 2 dari kromatografi gas mempunyai ion molekuler dengan nilai m/e =  264 pada waktu  retensi  22,592  menit.  Spektra  dari senyawa  ini  mempunyai  puncak  dasar
55,05 dengan persen area 12,69% (Gambar  2A).  Berdasarkan  berat  molekul dan  waktu  retensi  spektramassa  senyawa tersebut  memiiki  rumusmolekul  C 18 H 34 O 2 dengan berat molekul sebesar 282 gram/mol  dan  diduga  bahwa  senyawa tersebut adalah asam-9-oktadekanoat (Gambar  2B).  Dugaan  ini  didukung  oleh indeks  bias  kemiripan  dimana  spektra massa senyawa puncak 2 pada kromatogram  memiliki  indeks  kemiripan sebesar 93% dengan asam-9-oktadekanoat yang  diduga  merupakan  asam  oleat  dalam bentuk cis .
Gambar 2. Spektra Massa (A) dan Senyawa Referensi (B) pada Puncak ke-2 dari Kromatogram Gas ekstrak non polar
Spektra  massa  pada  puncak  3  dari kromatografi gas  mempunyai  ion  molekuler dengan  m/e  =  282  pada  waktu  retensi
24,475 menit. Spektra massa dari senyawa ini mempunyai puncak dasar 55,05 dengan persen area 85,70% (Gambar 3A).
Gambar 3. Spektra Massa (A) dan Senyawa Referensi (B) pada Puncak ke-3 dari Kromatogram Gas ekstrak non polar
Berdasarkan berat molekul dan waktu retensi  spektra  massa  senyawa  tersebut memiliki  rumus  molekul  C 18 H 34 O 2 dengan berat  molekul 282 gram dan diduga bahwa senyawa  tersebut  adalah  asam  oktadek-9- enoat  (Gambar  3B).  Dugaan  ini  didukung oleh  indeks  bias  kemiripan  dimana  spektra
massa senyawa puncak 3 pada kromatogram  memiliki  indeks  kemiripan sebesar  95%  dengan  asam  oktadek-9- enoat  yang  kemungkinan  adalah  asam oleat  dalam  bentuk  trans.  Waktu  retensi (Rt),  persen  area  dan  nama  komponen dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Waktu Retensi (Rt), Persen Area (%) dan Perkiraan Nama Senyawa Ekstrak Non Polar hasil analisis Kromatografi Gas
Puncak Waktu Retensi, Rt (menit) Persen Area (%) Senyawa 1 21,675 0,39 Metil Palmitat 2 22,590 12,69 Asam 9-oktadekanoat 3 24,472 85,79 Asam Oktadek-9-enoat 4 26,428 0,38 Gliserol-1,3-di Oktadekanoat 5 30,093 0,74 Di-(9-oktadekenoil)-gliserol
Ekstrak  akuades  dan  n-heksana  biji kelor  yang  diperoleh  dibuat  larutan  stok dengan  konsentrasi  25%,  50%,  75%  dan 100% yang kemudian dilakukan uji terhadap  bakteri  gram  negatif  ( Escherichia coli ) dan bakteri gram positif ( Staphylococcus  aureus ).  Sebagai  kontrol positif  digunakan  San  Prima  tablet  untuk E.coli ;  sedangkan  Penisilin  untuk S.aureus masing-masing  dengan  konsentrasi  10%. Kontrol  negatif  adalah  konsentrasi  0% dimana tidak dilakukan penambahan ekstrak  terhadap  bakteri  uji.  Ekstrak  polar
pada konsentrasi optimum 100% memberikan rerata daya hambat yang lebih besar  yaitu  5,67  mm  untuk  bakteri E.  coli dan  7,33  mm  untuk S.  aureus (Gambar  4 dan 6) dibandingkan ekstrak non-polar yang memberikan  rerata  daya  hambat  4,67  mm untuk E.  coli dan  5,00 mm S.  Aureus pada konsentrasi  100%  (Gambar  5  dan  7) . Luas zona  hambat  antibiotik  sebagai  kontrol positif adalah 4,33 mm terhadap E.coli dan 6,33  mm  terhadap S.aureus .Secara  umum terlihat  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi, semakin  besar  pula  daya  hambat  yang
diberikan pada pertumbuhan bakteri.
Gambar 4. Kurva hubungan antara konsentrasi ekstrak akuades terhadap luas zona hambatan  pada bakteri E. coli dan S. aureus
Gambar 5. Kurva hubungan antara konsentrasi ekstrak non polar terhadap luas zona hambatan pada bakteri E. coli dan S. aureus
Berdasarkan  penggolongan  menurut Suryawiria  (1978)  dari  peneitian  ini  dapat dikategorikan  bahwa  ekstrak  n-heksana  biji kelor  memberikan  daya  hambat  yang sedang pada konsentrasi 100%. Sementara itu  pada  konsentrasi  50%  dan  75% memberikan daya hambat yang lemah, dan pada  25%  hampir  tidak  memberikan  daya hambat. Sedangkan untuk esktrak akuades
biji  kelor  mempunyai  daya  hambat  sedang pada  konsentrasi  75%  dan  100%,  dan lemah pada 25% dan 50%. Konsentrasi 0% sama  sekali  tidak  memberikan  daya hambat. Efektifitas yang lemah dan sedang di  duga  karena  ekstrak  biji  kelor  yang digunakan  masih  merupakan  ekstrak  kasar yang kemungkinan masih terdapat kontaminan-kontaminan yang lain.
Gambar 6. Zona hambat dari uji antibakteri dari ektrak polar biji kelor konsentrasi (B) 0%, (C) 50% dan(D) 100% terhadap pertumbuhan bakteri E.coli dan S.aureus. Panel A dan E adalah antibiotika 10% sebagai kontrol positif
Gambar 7. Zona hambat dari uji antibakteri dari ektrak n-heksana biji kelor konsentrasi (B) 0%,
(C) 50% dan(D) 100% terhadap pertumbuhan bakteri E.coli dan S.aureus. Panel A dan E adalah antibiotika 10% sebagai kontrol positif
Dari hasil yang diperoleh dari penelitian  ini  didapatkan  bahwa  ekstrak  n- heksan  dan  akuades  dari  biji  kelor mempunyai kemampuan mengahmbat bakteri E.  coli dan S.  aureus .  Ekstrak akuadesmemiliki  daya  hambat  yang  lebih baik dibandingkan dengan ekstrak n-heksan. Apa  yang  menjelaskan  perbedaan  ini  masih memerlukan  penelitian  lebih  lanjut.  Namun demikian dari kajian literatur diketahui bahwa di  dalam  ekstrak  akuades  terdapat senyawa toksik  yaitu  4- (α -L-rhamnopyranosyloxy) benzyl  isothiocyanate    (Eilert et  al ., 1981).Senyawa 4- (α -L-rhamnopyrabenzyl isothiocyanate  berhasil  diisolasi  dari  biji kelor  oleh  Ragasa dkk (2012)  dan  setelah
diuji  ternyata  senyawa  ini  mempunyai  sifat toksisitas  yang  kuat  terhadap  beberapa kultur  sel  kanker  manusia.Oluduro dkk (2012)  juga  telah  berhasil  mengisolasi senyawa-senyawa  dari  ekstrak  akuades dan  metanol  biji    kelor  yang  memiliki  daya hambat  yang  tinggi  terhadap  pertumbuhan beberapa bakteri gram positif dan negatif.Adanya  senyawa-senyawa  bioaktif yang bersifat toksik dalam ekstrak polar biji kelor  inilah  kemungkinan  menyebabkan daya  hambat  ekstrak  polar  (akuades) terhadap bakteri E. coli dan S. aureus lebih besar  dibandingkan  ekstrak  non-polar  (n- heksan).
Pertumbuhan bakteri S.aureus terlihat lebih  sensitif  terhadap  ekstrak  polar  dan non  polar  biji  kelor  pada  konsentrasi  yang sama.  Menurut  Kalemba  dan  Kunicka (2003) aktivitas antibakteri tergantung pada tipe mikroorganisme, gram positif atau gram negatif,  terutama  struktur  dinding  sel maupun membrane luar. Perbedaan struktur  dinding  sel  menentukan  penetrasi dan  aktivitas  senyawa  antibakteri.  Bakteri gram  positif  cenderung  lebih  sensitif terhadap antibakteri, karena struktur dinding  sel  bakteri  gram  positif  lebih sederhana  dibandingkan  dengan  bakteri gram negatif sehingga memudahkan senyawa antibakteri untuk masuk ke dalam sel. Umumnya bakteri gram negatif mengandung  membran  luar  yang  dapat menghalangi  masuknya  molekul-molekulel besar.  Resistansi  yang  disebabkan  karena tingkat  ketebalan  dinding  sel  ini  juga  yang membuat ekstrak tanaman maupun antibiotik  menunjukkan  pengaruh  yang berbeda-beda pula.
Dari  berbagai  konsentrasi  ekstrak didapati  zona  hambat  yang  bervariasi  dan tidak berupa lingkaran yang sempurna. Hal ini  disebabkan  karena  adanya  ketebalan medium  agar  yang  tidak  seragam,  variasi difusi ekstrak tumbuhan, sensitivitas bakteri uji  terhadap  senyawa  antibakteri  dalam ekstrak, serta konsentrasi senyawa
antibakteri dalam ekstrak. Ketebalan
medium agar yang tidak seragam merupakan  hal  teknis  yang  sulit  dihindari karena pada saat penuangan Nutrient Agar ke  dalam  cawan  petri  tidak  sama  persis banyaknya. Variasi difusi ekstrak tumbuhan yang  terjadi  diakibatkan  karena  kertas cakram mempunyai komposisi yang heterogen  sehingga  zona  hambat  yang terbentuk  tidak  merata.  Sensitivitas  bakteri uji  terhadap  senyawa  antibakteri  dalam ekstrak  tumbuhan  juga  merupakan  salah satu  faktor  yang  mempengaruhi  diameter zona  hambat.  Jika  konsentrasi  bakteri  uji pada  media  tinggi,  maka  diperlukan senyawa  antibakteri  dengan  konsentrasi tinggi  pula.  Jika  konsentrasi  diantara keduanya  tidak  sebanding  maka  akan terlihat  pada  diameter  zona  hambatnya (lebar,  sempit  atau  bahkan  tidak  ada  sama sekali).
Biji  kelor telah  dilaporkan  mempunyai sifat antimikroba terhadap beberapa bakteri gram positif dan gram negatif (Anwar et al ., 2007;  Oluduro et  al .,  2012).  Biji  kelor  kaya akan komponen-komponen antimikroba yang mengandung gula sederhana, rhamnosa  dengan  sekelompok  senyawa turunan  glucosinolates  dan  isothiocyanates seperti 4- (α -L-rhamnopyranosyloxy) benzylglucosinolate
dan benzylisothiocyanates  (Fahey  et  al.,  2001; Bennet  et  al.,  2003).  Seperti  telah dijelaskan  diatas  efek  antimikroba  dari  biji kelor  nampaknya  ditentukan  oleh  adanya senyawa toksik aktif 4- (α -L- rhamnopyranosyloxy) benzyl isothiocyanate (Eilert et al., 1981).
Oluduro et al (2012) berhasil mengisolasi  senyawa  aktif  dari  ekstrak akuades  dan  metanol  biji  kelor  yang merupakan
turunan dari phenylmethanamine,  benzyl  isothiocyanate dan carbamate yang memiliki daya hambat yang tinggi terhadap beberapa bakteri gram positif dan gram negatif. Senyawa-senyawa yang berhasil diisolasi adalah 4- hydroxyphenyl acetic acid, 4-(4 ’ -O-acetyl- α - L-rhamnopyranosyloxy) benzyl isothiocyanate,  4- (β -D-glucopyranosyl-1  4- α -L-rhamnopyranosyloxyl) benzyl isothiocyanate,
4-O- α -L- rhamnopyranosyloxy-N-glucopyranosyl- 1  2-fructopyranosyloxy phenylmetanamine,  dan  O-methyl-4-(4 ’ -O- acetyl- α -L-rhamnosyloxy)-benzyl thiocarbamate.
A
(c) (d) (e) (f) (g)
(h)
Gambar 8. Senyawa yang terkandung dalam ekstrak polar biji kelor (a) 4- (α -L rhamnopyranosyloxy)-benzylglucosinolate; (b) benzylisothiocyanates; (c)4- (α -L rhamnpyranosyloxy) benzyl isothiocyanate;(d) 4-hydroxyphenyl acetic acid; (e) 4-(4 ’ -O-acetyl- α - L-rhamnosyloxy) benzil isothiocyanate; (f) 4- (β -D-glucopyranosyl-1  4- α -L- rhamnopyranosyloxyl) benzil isotiosianat; (g) 4-O- α -L-rhamnopyranosyloxy-N-glucopyranosyl- 1  2-fructopyranosyloxy phenylmetanamine; (h) O-methyl-4-(4 ’ -O-acetyl- α -L-rhamnosyloxy)- benzyl thiocarbamate.
Berdasarkan  kajian  literatur    yang ada, maka kemungkinan senyawa-senyawa bioaktif  yang  bersifat  toksik  tersebut diataslah yang menjadi faktor yang
menjelaskan mengapa daya hambat
ekstrak  polar  akuades  biji  kelor  terhadap E.coli dan S.aureus
lebih besar dibandingkan  ekstrak  heksana  yang  lebih bersifat non-polar.

## SIMPULAN
Ekstrak  polar  (akuades)  biji  kelor memberikan daya hambat yang lebih besar terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dibandingkan  dengan  ekstrak  non-polar(n- heksana).  Semakin  besar  konsentrasi esktrak  akuades  dan  n-heksana  biji  kelor maka semakin besar pula daya hambatnya terhadap  pertumbuhan  bakteri Escherichila coli dan Staphylococcus  aureus .  Ekstrak non  polar  biji  kelor  kaya  dengan  asam lemak cis dan trans oleat;
Namun  demikian  perlu  diteliti  lebih lanjut  peranan  asam-asam  lemak  tersebut dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri gram  positif  dan  negatif.  Selain  itu  perlu juga  dianalisis  kandungan  kimia  dari ekstrak  polar  dari  biji  kelor.  Pemurnian senyawa-senyawa  kimia  dari  ekstrak  polar dan  non  polar  biji  kelor  perlu  diteliti  lebih lanjut  dan  juga  perlu  dipelajari  mekanisme aktivitas  antibakterinya  dalam  menghambat pertumbuhan mikroorganisme patogenik.

## DAFTARPUSTAKA
Bukar,  A.,  Uba,  A.,  and  Oyeyi,  T.I.,  2010,
Antimikrobial  Profile  Moringa  Oleifera Lam.  Extracts  Againts  SomeFood- Borne  Microorganisms, Bayero  Journal of Pure and Applied Sciences , 3(1):43- 48.
Vieira,  G.H.F.,  Mourao,  J.A.,  Angelo,  A.M., Costa,  R.A  and  Vieira,  R.H.,  2010, Antibacterial  Effect  (in  vintro)  Of Moringa  oleifera  and  Annona  muricata Against  Garam  Positive  and  Gram Negative Bacteria, Rev.Inst.Med.Trop.Sao  Paulo,
53 (3):129-132
Goyal,  B.R.,  Agrawal,  B.B.,  Goyal,  R.K.,
dan Mehta, A.A., 2007, Phyto- pharmacology  of  Moringa  oleifera Lamk.  ó  An  overview, Natural  Product
Radiance, Vol 6(4), pp 347-353. Volk dan Wheeler, 1990, Mikrobiologi Dasar Edisi Kelima Jilid Dua , Erlangga:Jakarta .
Tally, F. P. 1993. Staphylococci: abscesses
and other diseases.
Dalam :
Schaechter,  M.  (ed.) Mechanisms  of
MicrobialDiseases .  2nd  Ed.  Williams and Wilkins, USA. h. 187-197. Suryawira, U., 1978, Mikroba Lingkungan . Edisi ke- 2, ITB: Bandung.
Eilert,  U.,  Wolters,  B.,  Nadrtedt,  A.,  1981,
The  Antibiotic  Principle  of  seeds  of Moringa oleifera and Moringa stenopetala, Planta Med, 42:55-61 Ragasa, C.Y., Levida, R.M., Don, M.J., dan Shen, C.C., 2012, Cytotoxic Isothiocyanates  from  Moringa  oleifera Lam Seeds. Phillippine Science Letters 5(1):46-52
Oluduro,  O.A.,  Idowu,  T.O.,  Aderiye,B.I., Famurewa,  O  dan  Omoboye,O.O., 2012, Evaluation of Antibacterial Potential  of  Crude  Extract  of  Moringa oleifera  seed  on  Orthopaedics  Wound Isolates and Characterization
ofPhenylmethanamine and Benzyl
Isothiocyanate  Derivatives. Research Journal of Medicinal Plant .1-12 Kalemba,  D  dan  Kunicka,  A.,  2003,
Antibacterial  and  antifungal  properties of  essential  oils, Current  Medicinal Chemistry , 10 (10): 813-829. Mahmood,  K.T.,  Mugal,  T  and  Haq,  I.U., 2010, Moringa a natural gift-A Reiview, J. Pham. Sci. & Re, Vol.2 (11), 775-781 Markam KR 1975. Isolation Techniques for Flavanoid. New York: The
Flavanoids Academic Press. Anwar,  F.,  Sajid,  Latid.,  Muhammad, Ashraf.,  dan  Anwarul,  Hassan.Gilani., 2007,  Moringa  oleifera:  A  Food  Plant with Multiple Medicinal Uses. Phytotherapy Research, 21:17-25.
Bennet,  R.N.,  Mellon,  F.A.,  Foldi,  N.,  et  al. 2003,  Profiling  glucosinolates  and phenolics in vegetative and reproductive  tissues  of  the  multi- purpose  trees  Moringa  oleifera  L (Horseradish tree) and Moringa stenopetala  L. J  Agric  Food  Chem,
51:3546-3553
Fahey,  J.W.,  Zalcmann,  A.T.,  Talalay,  P.,
2001,  The  chemical  diversity  and distribution of glucosinolates and isothiocyanates among plants, Phytochemistry, 56:5-51