## UJI EFEK TONIK EKSTRAK ETANOL HERBA PEGAGAN (Centella asiatica (L). Urb) PADA MENCIT JANTAN BALB/C
Rini Prastiwi 1 , R.Tjahyadi 2 , Chusun 3
1) Universitas Muhammadiyah Prof.DR. Hamka
2,3) Akademi Farmasi Bhumi Husada Jakarta Email : khanzapras@gmail.com

## ABSTRAK
Pegagan  ( Centella  asiatica (L).  Urb)  dikenal  secara  empiris  sebagai  obat tradisional untuk mempercepat aktivitas syaraf, meningkatkan daya ingat,dan  tonik untuk organ tubuh (hati,  ginjal,  otak).  Efek  tonik  dapat  ditentukan  dengan  menggunakan  metode natatory exhaustion melalui  pengamatan  efek  stimulansia  suatu  obat  pada  hewan  uji.  Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek tonik ekstrak etanol herba pegagan pada mencit jantan (Balb/C) dan menentukan dosis efektif yang menunjukkan kemampuan mencit untuk mempertahankan  diri  ketika  direnangkan.  Penelitian  ini  menggunakan  lima  kelompok  uji, tiap  kelompok  terdiri  atas  lima  mencit  jantan.  Kelompok  kontrol  positif,  kontrol  negatif, kelompok  dosis  I,  II  dan  III  ekstrak  etanol  herba  pegagan  diberikan  masing-masing  kafein 100 mg/kgBB, CMC 0,5%, 50 mg/kg BB, 100 mg/kg BB, dan 150 mg/kg BB secara peroral. Pengujian efek tonik dengan metode natatory exhaustion ditunjukkan dengan bertambahnya waktu  kemampuan  mencit  untuk  mempertahankan  diri  ketika  direnangkan.  Pertambahan waktu  tersebut  menunjukkan  peningkatan  daya  tahan  mencit.  Dosis  terbaik  yang  dapat digunakan sebagai tonik adalah 100 mg/kg BB.
Kata kunci : Pegagan , herba, tonik, natatory exhaustion
THE TONIC EFFECT OF ETHANOL EXTRACT PEGAGAN HERBS (Centella asiatica (L). Urb) IN MALE BALB/C MICE

## ABSTRACT
Pegagan ( Centella asiatica (L). Urb) known empiricallay  as traditional medicine  for accelerating  nervous  activity,  improving  memory,  and  tonic  to  vital  organs  (liver,  kidneys, brain).  Tonic  effect  can  be  determined  using natatory  exhaustion method  of  stimulantia effect  observation  a  drug  on  animal  test.  The  aim  of  this  research  is  to  observe  the  tonic activity of ehanol extract pegagan herb in male mice (Bulb/C) and determined effective dose that shows the ability of mice to defend when swimmed. This research used five groups test, each group are five mice. The positive control group, negative control,  does I, II, II groups pegagan herb etanol extract were treated with caffein 100 mg/kg BW 0.5% CMC, 50 mg/kg BW,  100  mg/kg  BW,  and  150  mg/kg  BW  gave  orally.  The  tonic  effect  test used natatory exhaustion method  indicate  with increasing  time  of  mice  ability  to  defend  when  swimmed. Added of time showed increase durability of mice. The best dose  that can be used as a tonic is 100 mg/kg BW.
Key words : Centella asiatica (L). Urb., Herbs, tonic, natatory exhaustion

## PENDAHULUAN
Sebagai  warisan  nenek  moyang, tanaman  obat  sudah  dikenal  dan  digunakan oleh  masyarakat  Indonesia  yang  dikenal dengan  nama  obat  tradisional.  Peranan  obat tradisional  masih  terasa  kuat  sebagai pendamping dalam perkembangan kedokteran  modern  sekarang  ini.  Sampai sekarang masih banyak obat tradisional yang belum  pernah  dinilai  secara  ilmiah  baik mengenai
efektifitasnya maupun keamanannya.
Melalui  penelitian,  pengkajian,  dan budidaya, tanaman obat herba dapat ditingkatkan  untuk  bisa  dimanfaatkan  dalam upaya kesehatan tubuh.  Banyak khasiat dari obat  tradisional  yang  memiliki  efek  tonik bagi  tubuh  diantaranya  adalah  pegagan (Centella  asiatica (L).  Urb ) .    Tanaman  ini secara  empiris  digunakan  sebagai  tonikum (Sing et  al., 2010;  Bhavna  &  Khatri,  2011). Kandungan utama pegagan yaitu asiatikosida dengan gugus trisakarida terikat pada aglikon asam  asiatik.  Asiatikosida  dan  madekasol suatu triterpen saponin dimana sapogeninnya bermanfaat  untuk  pengobatan.  Senyawa  lain yaitu  brahmosida  dan  brahminosida  yang dapat  berkhasiat  sebagai  uterorelaksan. Isothankunisid  dan  thankunisid  digunakan sebagai  antifertilitas  yang  diujikan  pada mencit (Tiwari, et al . 2011).
Penelitian tentang pemanfaatan pegagan  dapat  menjadi  referensi  bagi masyarakat  dalam  menjaga  kesehatan  dan dapat  digunakan  sebagai  data  ilmiah  yang melandasi penggunaan herba pegagan sebagai tonikum. Efek tonik yaitu efek  yang dapat  memacu  perbaikan  sel-ssel  tonus  otot. Metode  yang  digunakan  untuk  mengetahui efek  obat terutama  dalam  penurunan  kontrol syaraf  pusat  adalah natatory  exhaustion (Sambodo, 2009).
Berdasarkan hal tersebut, maka perlu dilakukan penelitian tentang efek tonik herba pegagan dengan metode natatory exhaustion sehingga dalam penggunaan oleh masyarakat dapat dipertanggung jawabkan secara ilmiah.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan Mei sampai
September 2013 di Laboratorium Farmakologi dan Farmakognosi  Akademi  Farmasi  Bhumi Husada Jakarta.

## Bahan
Herba  pegagan  ( Centella  asiatica (L.) Urb.)  berupa  simplisia  yang  diambil  dari Balai  Besar  Penelitian  dan  Pengembangan Tanaman  Obat  dan  Obat  Tradisional, Tawangmangu,  Jawa  Tengah,  mencit  jantan Balb/C.

## Alat
Moisture balance , wadah renang (akuarium) berukuran 50x30x25 cm, timbangan dan sonde lambung.

## Cara Kerja Pembuatan Ekstrak
Serbuk herba pegagan sebanyak 200 g, direndam dalam 2 liter etanol 96% selama 3 hari  dikocok  sekali-kali,  kemudian  disaring dengan  kain  batis.  Proses  diulangi  3  kali dengan  pelarut  yang  sama.  Filtrat  digabung dan  dipekatkan  dengan waterbath sampai dihasilkan ekstrak kental.

## Penapisan Fitokimia
Dilakukan  pengujian   terhadap alkaloid,  flavonoid,  triterpenoid  dan  saponin pada ekstrak kental herba pegagan.

## Prosedur Pengujian
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah mencit jantan Balb/C sejumlah 25 ekor, berat badan  23-35  gram,  umur  8  minggu. Ditimbang dan dibagi menjadi lima kelompok.  Setelah  itu,  setiap  mencit  diberi perlakuan  secara  oral  dengan  sediaan  uji. Pembagian  kelompoknya  adalah,  kontrol positif  yaitu  kafein  100  mg/kgBB  ,  kontrol negatif yaitu hanya diberikan CMC Na 0,5%, perlakuan  1  adalah  dosis  ekstrak  50 mg/kgBB,  perlakuan  2  adalah  dosis  ekstrak 100 mg/kgBB, dan perlakuan 3 adalah dosis ekstrak  150  mg/kgBB.    Metode  yang digunakan  adalah natatory  exhaustion,
merupakan  metode skrining  farmakologi yang  dilakukan  untuk  mengetahui  efek  obat yang bekerja pada koordinasi gerak, terutama penurunan kontrol syaraf pusat . Uji ini  dilakukan  terhadap  mencit  dengan menggunakan wadah renang dengan ketinggian  air  18  cm,  suhu  20±0,5  C  dan pemberian gelombang buatan yang dihasilkan  dari  sebuah  pompa  udara, peralatan  tambahan  yang  digunakan  harus berada  di  luar  daerah  renang,  agar  tidak mempengaruhi  aktivitas  renang  (Turner, 1965) .

## Pengamatan Waktu Renang
Waktu  renang  sebelum  perlakuan adalah  lama  waktu  renang  dari  hewan  uji sebelum  mendapat  perlakuan  dosis  uji. Dihitung  mulai  dari  memasukkan  hewan  uji ke  dalam  akuarium    hingga  timbul  tanda lelah yang  ditandai  dengan  hewan  uji membiarkan kepalanya di bawah permukaan air  selama  tujuh  detik.  Kemudian  hewan  uji diangkat  dari  wadah  renang  dan  dicatat waktunya.  Hewan  uji  diistirahatkan  selama 30 menit, setelah itu diberi perlakuan sediaan peroral.  Setelah  30  menit,  hewan  uji direnangkan  kembali  dan  dicatat  waktu lelahnya.  Parameter  lelah  adalah  hewan  uji tidak menggerakkan kakinya untuk berenang,  tubuh  mencit  tegak  lurus  dengan
permukaan  air,  ekor  tidak  bergerak  dan membiarkan  kepalanya  berada  di  bawah permukaan  air  selama  7  detik.  Penambahan daya  tahan  atau  efek  tonikum  adalah  selisih antara  waktu  renang  sesudah  perlakuan  dan waktu  renang  sebelum  perlakuan . Data  efek tonikum  adalah  penambahan  daya  tahan yang  diperoleh  dari  selisih  waktu  renang pada  hewan  uji  setelah  perlakuan  dan sebelum perlakuan .

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi dan Penapisan Fitokimia
Rendemen  yang  diperoleh  dari  hasil maserasi  yaitu,  ekstrak  kental etanol  sebesar 11,08  %.  Hasil  uji  fitokimia  ekstrak menunjukkan  adanya  senyawa  alkaloid, triterpenoid  dan  saponin  (Tabel  1).  Alkaloid hydrocotylin  (C 22 H 35 NO 8 )  diisolasi  dari pegagan  kering.  Saponin  ditemukan  di seluruh bagian tanaman yaitu centellasaponin  B,  C,  dan  D  (Matsuda, et al .2001). Senyawa triterpenoid pada pegagan yaitu asiatikosida,
centellosida, madekasosida dan asam asiatik (Randriamampionona et al ., 2007). Flavonoid  pada  daun  pegagan  merupakan senyawa minor seperti 3-glikosilkuersetin, 3- glukosilkaempferol dan 7-glikosilkaempferol (Jamil, Qudsia & Mehboobus, 2007).

## Tabel 1. Identifikasi kandungan kimia
W aktu Renang
Waktu  daya  tahan  renang  mencit jantan  pada  dosis  50  mg/kg  BB,  100  mg/kg BB  dan  150  mg/kg  BB  dapat  dilihat  pada Gambar  1.  Hasil  daya  tahan  renang  yang paling  besar  adalah  kelompok  dosis  100
mg/kg  BB.  Uji  statistik  menggunakan metoda ANOVA menunjukkan ada perbedaan  yang    bermakna  pada  daya  tahan renang dari  5 kelompok perlakuan (p<0,05). Hasil uji perbandingan berganda menunjukkan adanya perbedaan yang
No. Kandungan Kimia Pereaksi Hasil Kesimpulan 1 Alkaloid Reagen Dragendorff Endapan coklat kemerahan + 2. Flavonoid Serbuk Mg dalam amil alkohol Amil  alkohol  tidak berwarna -
3.
4. Saponin Triterpenoid Dikocok kuat dengan air panas Liebermann-Bouchard Buih  yang  stabil selama 10 menit Warna merah + +
bermakna  antara  kelompok  kontrol  negatif dengan  kelompok kontrol positif, kelompok dosis 50 mg/kg BB dan kelompok dosis 150 mg/kg BB (p>0,05). Tidak terdapat perbedaan  yang  bermakna  antara  kelompok kontrol  positif    dengan  Kelompok  Dosis  1 dan Kelompok Dosis 3 (p<0.05).
Gambar 1. Gambar Rataan Daya Tahan Renang Tiap Kelompok Perlakuan Keterangan: A=Kelompok Kontrol Positif, B=Kelompok kontrol Negatif, C=Kelompok Dosis 1 (50 mg/kg BB), D=Kelompok Dosis 2 (100 mg/kg BB), E=Kelompok Dosis 3 (150 mg/kg BB)
Metode Natatory Exhaustion
digunakan  untuk  mengetahui  efek  obat  yang bekerja  pada  koordinasi  gerak  terutama kontrol syaraf pusat. Efek stimulan dipengaruhi  oleh  kondisi  fisik  hewan  uji untuk  meningkatkan  aktivitas.  Peningkatan aktivitas  terlihat  dari  peningkatan  kerja secara  langsung  berupa  penambahan  waktu lelah  hewan  uji  selama  direnangkan  dalam tangki berisi air (Turner, 1965).
Saponin  diduga  memberikan  efek tonik  pada  penelitian  ini  karena  pegagan mengandung senyawa utama saponin dengan asam  triterpen  dalam  bentuk  ester  dari  gula. Asam  triterpen  yaitu  asam  asiatik,  asam madekasik  dan  asiatikosida  merupakan senyawa yang paling penting untuk pengobatan  dan  vaskularisasi.  Asiatikosida berkhasiat  sebagai  anksiolitik,  antiinflamasi, antioksidan,  dan  antiulcer  (Kimura et  al ., 2008; Liang et  al .,  2008).  Struktur asiatikosida seperti pada Gambar 2.
Tiga  gugus  trisakarida  yang  terikat pada  aglikon  asam  asiatik  mengandung gugus  OH.  Aktivitas  antioksidan  melalui penangkapan radikal bebas yang berhubungan  dengan  energi  disosiasi  pada gugus  OH.  Kemampuan  menangkal  radikal bebas berhubungan dengan aktivitas kelarutannya.  Melalui  model  liposom  yang terdiri dari bagian lipofil dan hidrofil, gugus gula  yang  bersifat  polar,  akan  berada  dalam
fase  air.  Karena  radikal  oksigen  reaktif  juga dihasilkan  dalam  fase  air,  maka  radikal- radikal tersebut akan ditangkap oleh molekul antioksidan  yang  bersifat  polar  dan  berada dalam  fase  air.  Sehingga  oksidasi  pada bagian  lemak  akan  berkurang  (Zhu,  J.  M. Wu  and  Z.  S.  Jia.  2005).  Semakin  kuat aktivitas  antioksidan,  maka  semakin  besar kemampuan  menstimulasi  susunan  syaraf pusat.  Pada  hewan  percobaan,  kemampuan menstimulasi susunan syaraf pusat berhubungan  dengan  bertambahnya  aktivitas lokomotor (Nikajoo, 2009). Aktivitas lokomotor  merupakan  aktivitas  gerak  yang dapat menstimulasi syaraf pada otak (Tiwari, et  al .  2010).  Tonik  dapat  digunakan  untuk menstimulasi sistem syaraf pusat (Mutschler, E.,  1986).  Tanaman  obat  yang  mempunyai efek tonik tonik disebut tonikum.
Gambar 2. Struktur Asiatikosida

## SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Ekstrak herba pegagan ( Centella asiatica (L).  Urb)  pada  dosis  50  mg,  dosis 100  mg,  dan  dosis  150  mg  memiliki  potensi sebagai tonikum.
Ekstrak herba pegagan ( Centella asiatica (L). Urb) dengan pelarut etanol 96% pada  dosis  100  mg  memiliki  efek  tonikum yang  paling  efektif,  diukur  dari  daya  tahan renang pada Natatory Exhaustion .

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut untuk  efektifitas  dan  potensi  saponin  dalam herba pegagan.  Juga perlu  dilakukan penelitian  yang  serupa  dengan  metode Natatory Exhaustion dengan metode ekstraksi, variasi dosis dan pelarut lainnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Bhavna, D., and Khatri, Jyoti. 2011. Centella asiatica : The Elixir of life.
International  Jurnal  of  Research  in Ayurveda & Pharmacy. 2 (2): 431-438. Jamil,  S.S.,  Qudsia,  N.  and  Mehboobus,  S. 2007. Centella  asiatica (Linn.)  Urban A  Review. Natural  Product  Radiance . 6 (2): 158-170.
Kimura,  Y.,  Sumiyoshi,  M.,  Samukawa  K., Satake,  N.,  Sakanaka,  M.  2008. Facilitating  action  of  asiaticoside  at low doses on burn wound repair and its mechanism. Eur  J Pharmacol. 3:415- 423.
Liang, X., Yan, N. H., Si W. C., Wen, J. W., Xu,  N.,  Cui,  S.,  Liu,  X.H.,  Zhang,  H., Yue, N.L., Liu, S., Yang, M., Dong, Y. 2008.  Antidepressant-like  effect  of asiaticoside  in  mice. Pharmacology Biochemistry  and  Behavior .  3:  444- 449.
Matsuda,  H.,  Morikawa,  T.,  Ueda,  H.  and Yoshikawa, M. 2001. Medicinal
Foodstuffs
.XXVII. Saponin
constituents of Gotu Kola (2): Structures  of  new  Ursane-  And
Olemane-Type Triterpene
Oligoglycosides,  Centellasaponins  B,
C,  and  D,  from Centella  asiatica
cultivated  in  Sri  Lanka, Chem  Pharm Bull (Tokyo). 49 (10):1368-1371. Mutschler,  E.,  1986. Dinamika  Obat , diterjemahkan  oleh  Widianto,  M.B., dan  Ranti,  A.S.,  Edisi  Kelima,  157  - 158. Bandung: Penerbit ITB.
Nikajoo,  L.T.  2009.  Central  nervous  system depressant  activity  of  alcohol  and aqueous  root  extracts  of Pergularia daemia (Forsk.)  Chiov, Pharmacolog online . 1. 119-124.
Randriamampionona, D., Diallo, B., Rakotoniriana,F.,Rabemanantsoa,  C., Cheuk,  K.,  Corbisier,  A.M.,  Mahillon, J.,  Ratsimamanga,  S.,  El  Jaziri  M. 2007.  Comparative  analysis  of  active constituents in Centella asiatica samples  from  Madagascar:  application for ex  situ conservation  and  clonal propagation. Fitoterapia . 7-8: 482-489. Rastogi,  R.P.  and  Mehrotra,  B.N.  1960.
Compedium  of  Indian  Medicinal Plants. Central Drug Institute Lucknow and Publication and Information
Directorate, CSIR, New Delhi: 96
Sambodo, N.W. 2009. Uji Efek Tonik Madu Rambutan  Pada  Mencit  Putih  Jantan Dengan  Metode Natatory  Exhaustion . Skripsi  Universitas  Muhammadiyah Surakarta.
Singh, S., Gautam, A., Sharma, A. and Batra,
A. 2010. Centella asiatica (L.): A plant with  immense  medicinal  potential  but threatened. International  Journal  of Pharmaceutical  Sciences  Review  and Research. 4(2): 9-17.
Tiwari, R.K., Chanda, M.D., B. Murli and A. Agarwal. 2010. HPLC method validation  for  simultaneous  estimation of  madecassoside,  asiaticoside  and asiatic  acid  in Centella  asiatica . J. Chem. Pharm. Res. 2 (3): 223-229. Turner,  R.,A,  1965, Screening  Methods  in Pharmacology ,  Volume  II,  Academic Press, New York and London: 76-78.
Zhu,  X.Y.,  J.  M.  Wu  and  Z.  S.  Jia.  2005. Composition and antioxidative activity of  polysaccharide  from  Bergamot. Chem,  J.  Chinese  U. 26  (7):  1264- 1267.