Potensi Antioksidan Ekstrak dan Fraksi Daun Eceng Gondok ( Eichhornia crassipes (Mart.) Solms) yang Berasal dari Salah Satu Rawa di Palembang, Indonesia

## Mauizatul Hasanah, Muhamad Rizkyah. A.P., dan Kiki Amelia
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi (STIFI) Bhakti Pertiwi Palembang, Jl. Ariodillah III No.22A Palembang, Sumatera Selatan
Intisari: Potensi  antioksidan  dari  ekstrak  dan  fraksi  daun  eceng  gondok  ( Eichhornia  crassipes (Mart.)  Solms) yang berasal dari salah satu rawa di Palembang, Indonesia, telah diketahui. Sampel segar eceng gondok dipe- roleh dari rawa di Seduduk Putih, Palembang. Ekstraksi dilakukan terhadap 1000 g daun segar menggunakan pelarut etanol. Ekstrak kental kemudian difraksinasi menggunakan pelarut dengan berbagai tingkat kepolaran (n-heksan, etil asetat, air). Uji fitokimia dilakukan terhadap ekstrak dan fraksi yang diperoleh. Potensia antioksi- dan diketahui dengan menguji aktifitas ekstrak dan fraksi dalam menghambat radikal bebas difenilpikrilhidrazil (DPPH), dengan pengamatan absorbansinya pada alat Spektrofotometri UV-Vis. Hasil rendemen ekstrak kental diperoleh 2,68 %(b/b), sedangkan rendemen masing – masing fraksi berturut – turut untuk tiap pelarut adalah 30,94 %b/b (pelarut air), 39,65 %b/b (pelarut etil asetat), 5,80 %b/b (pelarut n-heksan). Hasil uji fitokimia terha- dap fraksi, senyawa kimia yang terlarut di fraksi air dan etil asetat adalah golongan flavonoid, fenolik dan sa- ponin,  sedangkan  n-heksan  melarutkan  steroid.  Hasil  uji  antioksidan  menunjukkan  bahwa  kekuatan  potensi antioksidan dari ekstrak total etanol sebesar 164 µg/ml, fraksi air sebesar 367,70 µg/ml, fraksi etil asetat sebesar 104,40 µg/ml, fraksi n-heksan  sebesar 611,51 µg/ml. Kesimpulan, fraksi etil asetat memiliki potensi yang paling tinggi sebagai antioksidan.
Kata kunci: eceng gondok, Eichhornia crassipes (Mart.) Solms, ekstrak, fraksi
Abstract: The research was designed to evaluate the potential of antioxidant of ethanol extract and its frac- tions (heksan fraction, ethyl acetate fraction, and water fraction) from fresh waterhyacinth ( Eichhornia crassipes (Mart.) Solms) leaf by the diphenyilpcrylhidrazyl (DPPH) radical scavenging activity assay. 1000 g sample fresh leaf were prepared using maceration method and ethanol as solvent, produced 20.68 g extract ethanol. The result of phytochemical screened, extract ethanol was contained flavonoid, phenolic, saponin and steroid. Phy- tochemical  screened  of  ethyl  acetate  fraction  and  water  fraction  were  flavonoid  and  phenolic,  and  heksan fraction was contained steroids. Antioxidant potential of extract ethanol, heksan fraction, ethyl acetate fraction and water fraction were showed from the value of %inhibition from each sample and IC 50 as the value of ability of the sample as antioxidant. The research showed that IC 50 of extract ethanol, heksan fraction, ethyl acetate fraction and water fraction were 164 µg/ml, 611.51 µg/ml, 104.40 µg/ml and 367.70 µg/ml. the best antioxidant potential was from ethyl acetate fraction that was 104.4 pµg/ml.
Keywords: Waterhyacinth, Eichhornia crassipes (Mart.) Solms, extract, fraction
Email: mauizatulhasanah@gmail.com

## 1 PENDAHULUAN
adikal  bebas  dipicu  dari  zat  –  zat  yang  dikon- sumsi  manusia  melalui  makanan,  minuman,
pernafasan dan radiasi ultraviolet melalui kulit. Keti- ka  radikal  bebas  dihasilkan  melalui  sistem  tubuh manusia,  ia  dapat  menyebabkan  kerusakan  yang kadang  dapat  mengakibatkan  berbagai  penyakit hingga  kematian  dalam  waktu  singkat.  Beberapa penelitian  melaporkan  bahwa  asupan  antioksidan yang  tepat,  dapat  membantu  penyerapan  radikal bebas  di  dalam  tubuh  manusia,  sehingga  mening- katkan  kualitas  kesehatan,  serta  menurunkan  risiko berbagai  penyakit  seperti  kanker,  serta  membantu
melindungi  kulit  dari  paparan  sinar  matahati,  dan penuaan dini pada kulit (Shindi dkk, 2013).
Antioksidan  bisa  diperoleh  dari  bahan  alam,  ta- naman yang banyak terdapat di Indonesia, dan ber- potensi sebagai antioksidan alami salah satunya ada- lah  eceng  gondok  ( Eichhornia  crassipes (Mart.) Solms . ).  Daun,  batang  dan  akar  tumbuhan  eceng gondok  yang  diekstrak  dengan  pelarut  polar  yaitu air dan metanol memiliki kandungan  fenolik, flavo- nid dan tanin (Edi, 2010). Ekstrak etanol dari eceng gondok  segar  ( Eichhornia  crassipes (Mart.)  Solms . ) dilaporkan baik sebagai antioksidan, dari penelitian uji ekstrak dalam mereduksi Fe 3+ menjadi Fe 2+ dan uji penghambatan difenilpikrilhidrazil (P. Lalitha dan Jayanthi, 2012).
R
Penelitian ini dilakukan untuk melakukan uji an- tioksidan dari daun eceng gondok ( Eichhornia cras- sipes (Mart.) Solms) pada ekstrak etanol dan berba- gai fraksi dari pelarut dengan berbagai tingkat kepo- laran,  dengan  proses  pengerjaan  dan  mudah  dan sederhana,  sehingga  diketahui  potensi  antioksidan dari daun eceng gondok, dan pelarut yang mengha- silkan fraksi dengan antioksida terbaik.

## 2 METODE PENELITIAN

## Alat
Alat maserator, corong pisah, seperangkat alat desti- lasi  vakum, rotary  evaporator ,  alat-alat  gelas,  Spek- trofotometri UV-Vis.

## Bahan
Daun  segar  eceng  gondok  ( Eichhornia  cras- sipes (Mart.) Solms),etanol (teknis), etil asetat teknis, n-heksan  teknis,  metanol  PA,  vitamin  C,  aquadest dan pereaksi difenilpikrilhidrazil (DPPH).

## Sampel
Daun  segar  eceng  gondok  ( Eichhornia  cras- sipes (Mart.) Solms) diambil (Gambar 1) di salah satu rawa di Seduduk Putih, Palembang, Sumatera Sela- tan,  dideterminasi  di  Herbarium  Jurusan  Biologi Universitas Andalas, Padang, Sumatera Barat.
Gambar 1. Sampel penelitian di salah satu rawa di Sedu- duk Putih, Palembang

## Prosedur Penelitian
Preparasi Sampel Daun  eceng  gondok  ( Eichhornia  crassipes (Mart.) Solms)  segar  dirajang,  dikeringkan,  dihaluskan hingga menjadi sampel serbuk, ditimbang 1000 g.

## Pembuatan Ekstrak Kental
Ekstrak  kental  diperoleh  dengan  mengekstraksi 1000 g serbuk sampel yang telah dipersiapkan sebe- lumnya, dengan metode perendaman atau masera- si,  selama  3  x  5  hari,  menggunakan  pelarut  etanol,
pada  suhu  ruangan.  Maserat,  berupa  ekstrak  cair yang  didapat,  kemudian  dipisahkan  dari  pelarut dengan mendestilasi pelarut, lalu dipekatkan hingga diperoleh ekstrak kental dengan alat rotary evapora- tor .
Fraksinasi Ekstrak dengan Pelarut Berdasarkan Kepo- laran
Ekstrak  kental  difraksinasi  menggunakan  pelarut dengan berbagai tingkat kepolaran, dengan terlebih dahulu  melarutkannya  dengan  pelarut  polar  aqua- dest 300 mL, lalu dilakukan fraksinasi di dalam alat corong pisah menggunakan pelarut dengan kepola- ran rendah yaitu  sebanyak 200 mL n-heksan, dipe- roleh  fraksi  cair  n-heksan  dan  fraksi  cair  air.  Fraksi air  difraksinasi  lagi  menggunakan  pelarut  semi- polar,  200  mL  etil  asetat,  diperoleh  fraksi  cair  etil- asetat  dan  fraksi  air.  Fraksi  cair  air,  fraksi  cair  etil- asetat  dan  fraksi  cair  n-heksan,  masing  –  masing kemudian  dipisahkan  dari  pelarutnya  dan  dikental- kan  menjadi  fraksi  air,  fraksi  etil-asetat,  fraksi  n- heksan.

## Uji Potensi Antioksidan
Uji  potensi  antioksidan  dilakukan  dengan  metode standar,  dengan  mereaksikan  sampel  antioksidan dan radikal bebas (pereaksi DPPH).

## Larutan Sampel
Larutan  sampel  dibuat  dari  ekstrak  total,  fraksi  air, fraksi  etil-asetat,  fraksi  n-heksan,  yang  dilarutkan  di dalam metanol menjadi larutan dengan seri konsen- trasi  250  µg/mL,  200µg/mL,  150µg/mL,  100µg/mL dan 50µg/mL.

## Pereaksi DPPH dan Pembanding Vitamin C
Pereaksi DPPH disiapkan dari 5mg DPPH dilarutkan dengan metanol hingga 250mL, menjadi konsentra- si 0,05 mM. Vitamin C sediaan antioksidan yang di- gunakan sebagai pembanding dilarutkan dalam me- tanol menjadi seri konsentrasi (µg/mL) : 25, 20, 15, 10 dan 5.

## Penentuan Serapan DPPH Sebelum Reaksi
Pereaksi  DPPH  0,05  mM,  ditentukan  serapannya sebelum direaksikan dengan sampel. Serapan diten- tukan  menggunakan  alat  Spektrofotometri  UV-Vis pada  panjang  gelombang  maksimum  yang  telah diperiksa pada 518 nm.

## Penentuan Serapan DPPH Setelah Reaksi
Serapan  DPPH  setelah  reaksi  ditentukan  dengan terlebih  dahulu  mereaksikan  3,8  mL  DPPH  dengan 0,2  mL  sampel  dan  pembanding  yang  telah  diper- siapkan sebelumnya. DPPH dan sampel direaksikan
di  wadah  gelap  pada  tempat  terlindung  cahaya, selama 30 menit. Serapan diukur dengan spektrofo- tometri  UV-VIS  pada  panjang gelombang serapan maksimum  DPPH.  Pengujian  aktivitas  antioksidan dilakukan  sebanyak  tiga  kali  pengulangan  untuk masing-masing konsentrasi larutan sampel.

## Penentuan Potensi Antioksidan
Potensi  antioksidan  diketahui  tingkat  kekuatannya dari nilai persen penghambatan radikal bebas DPPH pada konsentrasi sampel 50%, yang dikenal sebagai IC 50 yang  diperoleh  dari  kurva  nilai  penghambatan DPPH  terhadap  variasi  konsentrasi  sampel.  Nilai penghambatan  radikal  bebas  (%inhibisi)  diperoleh dengan  ((serapan  DPPH  sebelum  reaksi  –  serapan DPPH  setelah  reaksi)/serapan  DPPH  sebelum  reak- si)) yang dikalikan 100%.

## 3 HASIL DAN PEMBAHASAN
Sebelum  ekstraksi  dilakukan  dalam  penelitian  ini terlebih  dahulu  dilakukan  uji  pendahuluan  atau dengan  nama  lain  uji  fitokimia.  Uji  fitokimia  yang dilakukan antara lain adalah uji kandungan alkaloid, flavonoid,  fenolik,  saponin,  steroid  dan  terpenoid. Hasil  uji  fitokimia  dari  sampel  daun  eceng  gon- dok( Eichhornia crassipes (Mart.) Solms)menunjukkan bahwa  daun  eceng  gondok  segar  positif  mengan- dung senyawa flavonoid, fenolik, saponin.
Hasil  uji  fitokimia  pada  ekstrak  total  etanol  me- nunjukkan  positif  mengandung  senyawa  flavonoid, fenolik, saponin dan steroid . Untuk fraksi etil asetat hasil  uji  fitokimiannya  menunjukkan  positif  men- gandung  senyawa  flavonoid,  fenolik,  dan  saponin. Sedangkan  pada  fraksi  n–heksan  mengandung  se- nyawa steroid.
Proses  maserasi  pada  ekstraksi  sampel  daun eceng gondok   ( Eichhornia crassipes (Mart.)  Solms) sebanyak  1000  g  didapatkan  ekstrak  kental  seba- nyak  20,68  gram,  dengan  persen  rendemen  dari ekstrak  daun  eceng  gondok  ( Eichhornia  cras- sipes (Mart.) Solms) sebesar 2,068 % b/b. Selanjutnya ekstrak kental daun eceng gondok ( Eichhornia cras- sipes (Mart.)  Solms)di  fraksinasi  dengan  mengguna- kan  pelarut  n-heksan  (non  polar),  etil  asetat  (semi polar)  dan  air  (polar),  tujuan  dari  fraksinasi  ialah untuk  mengelompokkan  senyawa  kimia  berdasar- kan  kepolarannya  barulah  selanjutnya  masing- masing  fraksi  dikentalkan  menggunakan  alat rotary evaporator sehingga  didapat  fraksi  kental  dari  mas- ing-masingnya.
Pengujian  efek  antioksidan  dilakukan  menggu- nakan  DPPH  (1,1–difenil-2-pikrilhidrazil)  dengana- latSpektrofotometri  UV  –  Vis.  Aktivitas  antioksidan
terhadap  pereaksi  DPPH  ditunjukkan  oleh  hamba- tan serapan radikal DPPH pada panjang gelombang 518  nm.  Sebelum  pengujian  sampel  uji  yang  telah ditambahkan  preaksi  DPPH,  sampel  uji  didiamkan terlebih dahulu selama 30 menit ditempat gelap dan terlindung dari cahaya matahari karena  DPPH  san- gat mudah teroksidasi. Pemilihan waktu 30 menit ini dengan  alasan  bahwa  pada  waktu  tersebut  penga- matan  absorbansi  sudah  cukup  untuk  memberikan kesempatan terjadinya reaksi (Molyneux, 2003).
Pereaksi  DPPH  berwarna  ungu  pekat,  apabila terjadi  proses  reduksi  antara  DPPH  dan  sampel  uji maka  akan  terjadi  perubahan  warna  preaksi  DPPH menjadi  warna  ungu  pudar  sampai  kuning  hal  ini berarti  sampel  uji  memiliki  aktivitas  penangkap  ra- dikal bebas (Molyneux, 2003).
Setelah  pengukuran  didapat  data  adsorbansi kemudian dihitung persen inhibisinya. Persen inhibi- si  adalah  kemampuan  suatu  sampel  untuk  meng- hambat  aktivitas  radikal  bebas  yang  berhubungan dengan  konsentrasi  suatu  sampel.  Persen  inhibisi didapatkan  dari  perbedaan  serapan  antara  adsor- bansi  kontrol  negatif  dengan  adsorbansi  sampel yang diukur dengan spektrofotometri UV-Vis (Moly- neux, 2003).
Pengukuran aktivitas antioksidan dari ekstrak to- tal  daun  eceng  gondok  ( eichornia  crassipes) ini  di- buat pada beberapa konsentrasi yaitu 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200 ppm dan 250 ppm, diperoleh % inhibisi  untuk  sampel  dan  pembanding  Vitamin  C seperti dijelaskan pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil perhitungan % Inhibisi dari sampel dan pembanding berbagai konsentrasi SampelUji Konsentrasi (ppm) % Inhibisi (%) Ekstrak total etanol 250 65,28 200 54,84 150 44,13 100 41,30 50 34,41 Fraksi Air 250 38,34 200 35,16 150 28,96 100 23,35 50 20,11 Fraksi Etil Asetat 250 74,07 200 66,58 150 63,12 100 47,69 50 39,18 Fraksi N-Heksan 250 38,02 200 36,53 150 34,91 100 33,18 50 31,79
Vitamin C 250 29,01 200 25,16 150 20,89 100 17,69 50 12,46
Hasil perhitungan persen inhibisi masing-masing hasil  ekstraksi  kemudian  dihitung  IC 50 .  Untuk  me- nentukan  IC 50 dari  ekstrak  eceng  gondok  hasil  ek- straksi secara maserasi dari beberapa fraksi air, frak- si  etil  asetat  dan  fraksi  n-heksan  dengan  memasuk- kan nilai hasil perhitungan kedalam persamaan lini- er  dengan  konsentrasi  (ppm)  sebagai  absis  (X)  dan nilai  persentase  inhibisi  sebagai  ordinat  (Y).  Nilai IC 50 dari perhitungan pada saat persen inhibisi sebe- sar 50% dengan persamaan y = ax + b, ditunjukkan perbedaannya  antara  sampel  dan  pembanding  pa- da  grafik  Gambar  2,  Nilai  IC 50 ekstrak  daun  eceng gondok  dengan  ekstraksi  secara  maserasi  terhadap ekstrak total, fraksi air, fraksi etil asetat dan fraksi n- heksan dijelaskan pada Tabel 2.
Gambar 2. Kurva % inhibisi pada berbagai konsentrasi sampel ekstrak, fraksi dan pembanding Vitamin C Tabel 2. Hasil perhitungan IC 50 sampel dan pembanding Sampel Nilai IC 50 (ppm) Ekstrak etanol 164 Fraksi Air 367,70 Fraksi Etil ase- tat 104,40 Fraksi N- hek- san 611,51 Vitamin C 50,71
Aktivitas antioksidan fraksi etil asetat daun eceng gondok  disebabkan  karena  adanya  kandungan  go- longan  senyawa  flavonoid  dan  fenolik  yang  terde- teksi  positif  berdasarkan  uji  fitokimia.  Senyawa  fla- vonoid  memiliki  aktivitas  yang  sangat  beragam  na- mun  pada  umumnya  bersifat  sebagai  antioksidan (Djamal, 2010). Flavonoid berperan sebagai antiok-
sidan disebabkan oleh kemampuan flavonoid men- donasikan  atom  hidrogen  yang  dimilikinya(Redha, 2010).
Fraksi  etil  asetat  yang  bersifat  semipolar  juga mengandung lebih banyak komponen  senyawa  an- tioksidan  seperti  isoflavon.  Padafraksi  air  danfraksi n-heksanmempunyaiaktivitasantioksidan  yang  me- milikinilai IC 50 sebesar367,70 ppm dan 611,51 ppm. Aktivitasantioksidanpadaekstrak  total  diketahui  da- rinilai IC 50 sebesar 164 ppm lebihrendahdarifraksieti- lasetat.

## 4 SIMPULAN
Hasil  uji fitokimia dari  daun eceng gondok  dan  ek- strak  total  etanol  ( eichornia  crassipes) menunjukan bahwa  pada  daun  eceng  gondok  mengandung  se- nyawa flavanoid, fenolik, saponin dan steroid. Hasil uji fitokimia  darifraksi air dan fraksi etilasetat sama- sama mengandung senyawa flavonoid, fenolik, dan- saponin.Sedangkan  pada  fraksi  n-heksan  mengan- dung senyawa steroid.
Aktivitas antioksidan ekstrak kental etanol, fraksi air,  fraksi  etil  asetat,  fraksi  n-heksan  daun  eceng gondok berturu-turut adalah 164 ppm, 367,70 ppm, 104,40 ppm, 611,51 ppm.
Aktivitas  antioksidan  yang  tertinggi  dari  ekstrak daun  eceng  gondok (eichornia  crassipes) terdapat pada  fraksi  etil  asetat  dengan  nilai  IC 50 sebesar 104,40 ppm.
REFERENSI _____________________________
[1] Djamal, Rusdi. 2010. Kimia bahan alam: Prinsip – prin- sip dasar isolasi dan identifikasi. Padang: Universitas Bai- turahmah.
[2] Molyneux, P. 2003. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxi- dant activity . Songklanakarin J. Sci. Technol , 26, 211- 219.
[3] P. Lalitha, T. and Jayanthi, P. 2012. Study of antioxidant activity of ethanolic extract of fresh Eichhornia crassipes (Mart.) Solms. Der pharmacia sinica , 3(2), 271 – 277.
[4] Redha, Abdi. 2010. Flavonoid: Struktur, sifat antioksida- tif dan peranannya dalam sistem biologis . Jurnal Belian , 9(2), 196-202.
[5] Sindhi, V., Gupta. V., Sharma, K., Bhatnagar, S., Kuma- ri, R., and Dhaka, N. 2013. Potential applications of an- tioxidants, a review. Journal of pharmacy research , 7, 828 – 835. _______________________________________
0 10 20 30 40 50 60 70 80 0 100 200 300 % Inhi bi si (%) Konsentrasi (ppm) Ekstrak total etanol
Fraksi air Fraksi etil asetat Fraksi n- heksan Vitamin C