## 38 VOLUME 12 NOMOR 1 JUNI 2016
PENGARUH EKSTRAK BUAH TERONG BELANDA ( SOLANUM BETACEUM ) SEBAGAI ANTIOKSIDAN TERHADAP KADAR MALONDIALDEHIDA PADA TIKUS PUTIH ( RATTUS NOVERGICUS ) YANG DIINDUKSI CCL 4
Aji  Masbintoro 1 ,  Sulistyo  Mulyo  Agustini 2 ,  Thontowi  Djauhari  NS 3
Fakultas  Kedokteran,  Universitas  Muhammadiyah  Malang Jl.  Bendungan  Sutami  188  A  Malang,  65145
Email  :  masbintoroaji@gmail.com

## ABSTRAK
Keadaan stres oksidatif  dapat memicu peroksidasi lipid yang menghasilkan MDA sebagai indikator. Ekstrak terong belanda sebagai antioksidan dapat meredam dampak radikal bebas dan menurunkan kadar MDA. Metode Penelitian True Experiment dengan post test only group design yang terdiri 5 kelompok secara acak, masing-masing kelompok terdiri dari 5 hewan coba dan diberikan perlakuan selama 9 hari. Kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif, perlakuan 1 (100 mg/ kg/BB), 2 (200 mg/kg/BB) dan 3 (300 mg/kg/BB). Kelompok perlakuan 1,2 dan 3 diberi induksi CCl 4 pada hari ke 9. Hasil uji One Way Anova didapatkan nilai signifikansi (0,002) kurang dari p (0,05), yang berarti ada perbedaan yang bermakna antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan. Hal ini dikarenakan terong belanda memiliki kandungan fenol, flavonoid, antosianin dan karotenoidyang cukup tinggi yang dapat menghambat proses stres oksidatif. Ekstrak terong belanda sebagai antioksidan dapat menurunkan kadar MDA darah  tikus yang diinduksi CCl 4
Kata kunci : Stres oksidatif, ekstrak terong belanda, MDA darah

## ABSTRACT
Oxidative stress induces the peroxidation of  lipid, which produces MDA as an indicator. Extract tamarillo as an antioxidant can reduce the effects of  free radicals and MDA levels. Research method in this experiment is True Experiment with Post Test-Only Group Design  that  consists  5  random  groups.  Each  of  the  group  consists  of  5  experimental  animals  and  are  given  a  treatment  for  9  days.  The negative  control  group  without  any  treatments,  the positive control  group,  treatment  1  (100  mg/kg/bw),  2  (200  mg/kg/bw)  and  3  (300 mg/kg/bw). The treatment groups of  1, 2 and 3 were administered the induction of  CCI4 on the 9th day. The result of  One Way Anova showed  the  significant  value  (0,002)  which  is  lower  than  p-value  (0,05).  It  means  that  there  is  significant  difference  between  control  and treatment group. This is because Tamarillo contains high enough phenol, flavonoids, anthocyanins and carotenoids that can inhibit oxidative stress  process.  Tamarillo  extract  as  an  antioxidant  can  reduce  MDA  levels  in  the  blood  of   male  white  mice  induced  by  CCI4.
Key  Words  : Oxidative  Stress,  extract  Tamarillo,  MDA  of   blood

## PENDAHULUAN
MDA merupakan salah satu penanda stres oksidatif yang reliabel berdasarkan hasil  penelitian BOSS ( Biomarker Oxidative Stress Study ) tahun 2002 (Donne  et  al.,  2006) .  MDA  merupakan  salah  satu biomarker  yang  paling  baik  dan  dapat  diandalkan sebagai pendeteksi stress oksidatif (lipid peroksidase) dan digunakan selama bertahun-tahun (Grotto et.al, 2009) . Stres  oksidatif  merupakan  suatu  keadaan dimana  jumlah  radikal  bebas  dalam  tubuh  lebih tinggi  dari  jumlah  antioksidan.  Stress  oksidatif menginduksi peroksidasi membran lipid yang dapat menimbulkan perubahan struktur biologis membran sel (Atiqah, 2014) . Karbontetraklorida (CCl 4 ) merupakan bahan yang  sangat  reaktif  yang  dapat  menyebabkan gangguan  membran intraseluler dan  kerusakan sel (Repotto, 2012) . Pemberian CCl 4 dapat menyebabkan peningkatan pembentukan peroksidasi lipid sehingga terbentuk  produk  akhir  yaitu  MDA  dalam  darah (Ahmed, 2013) . Antioksidan  secara  alami  bisa  didapatkan dari makanan dan tumbuhan. Senyawa antioksidan adalah  suatu  inhibitor  yang  digunakan  untuk menghambat autooksidasi (Sayuti, 2015) . Tumbuhan obat  dipertimbangkan  karena  efektifitasnya  dan keamanan  dalam  penggunaanya.  Tumbuhan  obat yang  mengandung  banyak  antioksidan  flavonoid, fenolik dapat mencegah proses oksidasi. Antioksidan juga  telah  digunakan  untuk  mencegah  proses peroksidasi  lipid (Kaur,  2014) . Terong  belanda  di  Indonesia  dikenal dengan  nama  terong  menen  dan  banyak  dijumpai di  Sumatra  Utara (Asvita,  2016) .  Ekstrak  etanol terong  belanda  memiliki  kandungan  phenolic  dan flavonoid. Ekstrak etanol terong belanda memiliki aktivitas  antioksidan  terbesar  dibandingkan  tomat cherry kuning, tomat cherry merah dan buah tomat (Atiqah,2014) .

## METODE
Jenis Penelitian Penelitian  ini  menggunakan  rancangan penelitian eksperimental dengan Post Test Omly Control Group  Design dengan  tujuan  mengetahui  pengaruh ekstrak  terong  belanda  terhadap  kadar malondialdehida  darah  tikus  putih  yang  diinduksi CCl 4 .  Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium
Biomedik  Fakultas  Kedokteran  Universitas Muhammadiyah  Malang. Pembuatan  Ekstrak  Terong  Belanda Buah  terong  belanda  (Solanum  betaceum)  dicuci bersih, kemudian dipotong-potong dan dikeringkan menggunakan  oven.  Terong  belanda  yang  telah kering kemudian  diblender hingga menjadi  serbuk halus. Serbuk ini selanjutnya direndam dengan larutan etanol  70%  selama  3  x  24  jam.  Filtrat  hasil perendaman kemudian dikumpulkan dan selanjutnya dilakukan  evaporasi  menggunakan rotary  vacuum evaporator untuk  mendapatkan  ekstrak  murni  dari buah  terong  belanda.
Pemberian  Ekstrak, Perlakuan  dan Pemeriksaan Tikus terlebih dahulu diaklimatisasi selama 7 hari  untuk  penyesuaian  dengan  lingkungan  baru. Hewan  coba  dibagi  menjadi  5  kelompok,  yaitu kelompok K (+), kelompok K(-), dan 3 kelompok perlakuan (P1, P2, dan P3). Kelompok P1, P2 dan P3 masing-masing diberikan ekstrak terong belanda sebanyak  100  mg/kgBB,  200  mg/kgBBdan  300 mg/kgBB  selama  8  hari.  Selanjutnya  seluruh kelompok  diinduksi  dengan  CCl 4 secara intraperitonial sebanyak 500mg/kgBB pada hari ke sembilan  kecuali  kelompok  kontrol  negatif. Jaringan  darah  tikus  diambil  pada  hari  ke  9 dengan cara pembedahan. Darah yang telah diambil kemudian  diukur  kadar  MDA  nya  menggunakan metode TBARS ( Thiobarbituric Acid Reactive Substance ) (Kim, 2015) .
Perhitungan  Kadar  MDA  Darah Kadar  MDA  darah  tikus  dihitung menggunakan  metode  TBARS.  Mula-mula  1  ml plasma  darah  ditambahkan  dengan  10%  TCA. Setelah  itu  disentrifus  dengan  kecepatan  3000rpm selama  15  menit.  Kemudian  larutan  TBA  0,65% dicampurkan  dalam  HCl  0,25  N.  Setlah  itu dicampurkan  dan  dipanaskan  dengan  suhu  95 0 C menggunakan  waterbath.  Setelah  dingin ditambahkan  dengan  n-butanol.  Kemudian disentrifus  kembali  dengan  kecepatan  3000rpm selama 3 menit dan diambil supernatannya. Setelah itu dilakukan pengukuran dengan spektrofotometer UV  dengan  panjang  gelombang  542  nm (Kim, 2015) .

## 40 VOLUME 12 NOMOR 1 JUNI 2016

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Rata-rata  hasil  pengukuran  MDA  dalam plasma  tikus  disajikan  pada  tabel  1.
Tabel  1.  Rata-rata  kadar  MDA  plasma  tikus Berdasarkan tabel 1 dapat diketahui bahwa nilai rata-rata kadar MDA darah tikus normal (K- )  adalah  sebesar  6,04  nmol/ml.  Sedangkan  pada perlakuan  tikus  dengan  induksi  CCl 4 (K+)  nilai rata-rata  kadar  MDAnya  sebesar  9,52  nmol/ml. Pada  perlakuan  1  (P1)  dengan  100  mg/kgBB dosis  ekstrak  buah  terong  belanda,  nilai  kadar MDA  dalam  darah  tikus  mengalami  penurunan menjadi 8,75 nmol/ml. Kemudian pada perlakuan 2 (P2) dengan 200 mg/kgBB dosis ekstrak terong belanda,  nilai  rata-  rata  MDA  darah  tikus  adalah sebesar  7,61  nmol/ml  dan  pada  perlakuan  ketiga (P3) dengan 300mg/kgBB dosis ekstrak nilai rata- rata  kadar  MDA  yaitu  sebesar  6,76  nmol/ml. Hasil uji analisis statistik One Way ANOVA menunjukkan signifikansi (P) sebesar 0.000. Nilai P < 0.05. Hal ini  mengindikasikan adanya pengaruh yang  bermakna  antara  pemberian  ekstrak  buah terong  belanda   ( Solanum betaceum )  terhadap  kadar MDA  dalam  darah  tikus  yang  diinduksi  CCl 4 . Hasil uji Post Hoc Multiple Comparisons dengan metode Bonferroni menunjukkan adanya perbedaan yang  nyata  (P<0.05)  antar  perlakuan  seperti  yang terlihat  pada  tabel  2. Tabel  2  Hasil  Uji Bonferroni rata-rata  kadar  MDA darah
Keterangan:  Notasi  yang  berbeda  menunjukkan perbedaan  yang  signifikan Tabel  diatas  menunjukkan  bahwa pemberian  dosis  ekstrak  terong  belanda  sebesar 100  mg/kgBB  tidak  berbeda  secara  nyata  dengan kontrol  positif  (tanpa  pemberian  ekstrak). Sedangkan dosis 100 mg/kgBB juga tidak berbeda secara nyata dengan perlakuan dosis 200mg/kgBB. Begitu  pula  dengan  dosis  200  mg/kgBB  yang berbeda secara nyata dengan kontrol positif namun tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  300  mg/ kgBB.  Kemudian  perlakuan  dosis  300mg/kgBB berbeda  secara  nyata  dengan  perlakuan  kontrol positif. Berdasarkan hasil uji Bonferroni ini, diketahui bahwa  dosis  ekstrak  sebanyak  200  mg/kgBB  dan 300  mg/kgBB  dapat  menurunkan  kadar  MDA dalam  darah  tikus  yang  diinduksi  CCl 4 secara bermakna.
Hasil  uji  one  way  anova  dan  bonferroni didukung oleh penelitian Oktarini (2014) mengenai uji  antioksidan  biji  terong  belanda  terhadap  kadar MDA darah menunjukkan hasil uji One Way Anova nya didapatkan nilai signifikansi p<0,05 antara kontrol dan  perlakuan  (dosis  ekstrak  biji  terong  belanda 200  mg/kgBB  dan  vitamin  E  100  mg/kgBB). Sedangkan  dalam  uji  benferroni  dibandingkan dengan  penelitian  Oktarini  (2014)  memiliki  nilai dosis  yang  sama  yaitu  200  mg/kgBB.  Perbedaan penelitian  ini  dengan  Oktarini  (2014)  yaitu  dalam penelitian  ini  menggunakanekstrak  keseluruhan terong  belanda,  sedangkan  Oktarini  (2014)  hanya menggunakan  ekstrak  biji  terong  belanda.  Namun penggunaan  ekstrak  secara  keseluruhan  terong belanda  didukung  oleh  Hassan  (2013)  bahwa kandungan  flavonoid  terong  belanda  lebih  tinggi berada dalam kulit terong belanda dari pada didalam daging  buah.  Sedangkan  kandungan  antocianin berada  dalam  kedua-duanya  yaitu  dalam  kulit  dan daging  buah.  Kandungan  karotenoid  lebih  tinggi ada di daging buah. Oleh karena itu peneliti dalam hal  ini  mengambil  ekstrak  terong  belanda  secara keseluruhan.
Tabel  uji  korelasi Pearson antara  dosis ekstrak  terong  belanda  dan  hasil  MDA  darah menunjukkan  nilai  sig  (2-tailed)  +  0.000,  p<0.001 dengan  nilai  r  (-0.776).  Hal  ini  menunjukkan  nilai Pearson  correlation sangat  bermakna  dan  arahnya negatif (-), yaitu semakin besar dosis ekstrak buah terong belanda menyebabkan semakin rendah hasil MDA dalam darah tikus. Hasil interpretasi nilai ini
Kelompok Perlakuan N Rata-rata ± SD dosis 300 mg/kgBB (P3) 5 8,75 a dosis 200 mg/kgBB 5 7,61 ab dosis 100 mg/kgBB (P2) 5 6,76 bc Kontrol positif 5 9,52 c Kelomp ok Ulangan Rata- rata 1 2 3 4 5 K- 5,46 6,11 6,41 5,54 6,70 6,04 P1 9,07 8,69 7,78 8,40 9,80 8,75 P2 6,41 7,89 8,13 8,29 7,32 7,61 P3 6,43 5,79 6,68 6,54 8,40 6,76 K+ 10,42 9,59 7,38 9,96 10,26 9,52
sejalan dengan hasil penelitian Atiqah (2014) bahwa kekuatan  aktifitas  penangkalan  radikal  bebas  oleh terong  belanda  dengan  nilai  EC50  sebesar  44,25.
Penurunan  kadar  MDA  pada  perlakuan dosis 200 mg/kgBB dan 300 mg/kgBB dikarenakan ekstrak buah terong belanda mengandung beberapa senyawa  yang  diketahui  bersifat  antioksidan.  Hasil penelitian Hassan et al., (2013) menyebutkan bahwa buah S.  betaceum memiliki  kandungan  fenol, flavonoid, antosianin dan karotenoid yang memiliki aktivitas antioksidan.  Antioksidan  bereaksi dengan radikal bebas dengan cara mengurangi konsentrasi oksigen,  mencegah  pembentukan  singlet  oksigen yang  reaktif,  mencegah  inisiasi  rantai  pertama  dan menangkap  radikal  primer,  memutus  rantai hidroperoksida  dan  mendekomposisi  produk- produk primer radikal menjadi senyawa non radikal (Astuti,  2014) .
Uji  regresi  digunakan  untuk  mengetahui besar  pengaruh  antara  dosis  ekstrak  buah  terong belanda terhadap kadar MDA tikus dengan induksi CCl 4 . Berdasarkan hasil uji regresi pada tabel diatas, dapat diketahui nilai signifikansi = 0.000 (lampiran 4), yang berarti P<0.05 sehingga uji regresi dikatakan signifikan.  Koefisien  determinasi  didapatkan Adjusted R 2 = 0.580 yang menyatakan nilai pengaruh dari  pemberian  ekstrak  buah  terong  belanda ( Solanum betaceum) terhadap kadar MDA tikus sebesar 58%,  sedangkan  sisanya  sebesar  42%  disebabkan oleh faktor-faktor lain yang mempengaruhi seperti antioksidan  primer, reduced  glutathione (GSH),  dan katalase yang berperan langsung dalam menghambat radikal  bebas (Hwang  et  al.,  2011) .

## KESIMPULAN
Ekstrak  buah  terong  belanda  ( Solanum betaceum )  berpengaruh  dapat  menurunkan  kadar malondialdehida  (MDA)  darah  tikus  putih  jantan ( Rattus norvegicus ) strain wistar yang diinduksi karbon tetraklorida  (CCl 4 ).CCl 4 dapat  meningkatkan  kadar MDA  dengan  6,04  nmol/ml  menjadi  9,52  nmol/ ml.Dosis  efektif  ekstrak  buah  terong  belanda ( Solanum  betaceum )  sebesar  200  mg/kgBB.

## DAFTAR  PUSTAKA
Ahmed, Hanaa, Helal Abu El Zahab, Gamia Alswiai, 2013,Purification  of  antioxidant  protein isolated  from Peganum  harmala and  its
protective  effect  against  CCl, Turk  J  Biol (2013)  37:  39-48.
Asvita,  Silvia  Mara,  Berawi,  Khairun  Nisa,  2016. Efektivitas  ektrak  terong  belanda  untuk menurunkan  kadar  glukosa  dan  kolesterol darah  pada  pasien  obesitas. Majority. vol  5 (1),102.
Atiqah,  Noor,  Maisarah,  A.  M.,  dan  Asmah  R, 2014,Comparison  of  antioxidant  properties of  tamarillo  ( Cyphomandra  betacea ),cherry tomato  ( Solanum  lycopersicum var. cerasiform ) and tomato ( Lyopersicon esculentum ), International Food  Research  Journal ,  21  (6):  2355-2362.
Donne,  Isabella  Danne,  Ranieri  Rossi,  Roberto Colombo,  Daniela  Giustarini,  dan  Aldo Mizani,  2006,  Biomarker  of  Oxidative Damage  in  Human  Disease, J.  Clinc.  Chem ,
52(4):  601-623.
Grotto,  D.,  G.  R.  Barcelos,  J.  Valentini,  L.  M. Antunes, J. P. Angeli and S. C. Garcia, 2009, Low  Level  of  Methilmercury  Induce  DNA Damage  in  Rats:  Protective  Effets  of Selenium, Arch  Toxicol ,  83:  249-5.
Hasan  SHA  &  Bakar  MFA,  2013.  Antioxidative and  Anticholinesterase  Activity  of Cypomandra betaceae Fruits . Kota Kinabalu, Sabah, Malaysia, Hindawi Publishing Corporation The Scientic World Journal Volume 2013,Article ID  278071.
Kaur,  S.,  dan  Mondal,  P.  2014.  Study  of   Total Phenolic and Flavonoid Content, Antioxidant Activity,  and  Antimicrobial  Properties  of Medicinal  Plants ,Journal  of   Microbiology  and Experimentation 1  (1)  :  1-6.
Kim,  Dong  Hyun,  Seung  Jun  Kwack,  Kyung  Sik Yoon,  Jin  Shil  Choi,  dan  Byung  Mu  Lee, 2015,  A  Superior  Oxidative  Biomarker Compared  to  Malondialdehyde  and Carbonyl  Content  Induced  by  Carbon Tetrachloride in Rats , Journal of  Toxicology and Environmental Health, 1-12.
Oktarini,  Ni  Wayan,  Ni  Made  Puspawati  dan    I Made Dira , 2014, Aktivitas flavanoid Ekstrak Biji Terong Belanda ( Solanum betaceum ) dalam Menghambat Reaksi Peroksidasi Lemak pada Plasma  Darah  Tikus  Wistar ,Jurnal  Penelitian Fakultas  MIPA, Universitas  Udayana.

## 42 VOLUME 12 NOMOR 1 JUNI 2016
Repetto,  Marisa  2012.  Lipid  Peroxidation.  Croatia
.  InTech.  ISBN  978-953-51-0716-3.
Sayuti,  Kusuma,  Yenrina,  Rina.  2015. Antioksidan alami dan sintetik . Padang. Andalas university press.  ISBN  978-602-8821-97-1.