Peran Cholecalciferol Terhadap Perbaikan Resistensi Insulin
Pada Mencit Model Diabetes
The role of Cholecalciferol in the Improvement of Insulin Resistance in Diabetic Mice Model
Elly Nurus Sakinah
Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Jember
Jalan Kalimantan No. 37 Kampus Tegalboto, Jember, Indonesia 68121
e-mail korespondensi: ellyns.fk@unej.ac.id

## Abstrak
Resistensi insulin merupakan prediktor penting dalam kejadian diabetes melitus. Defisiensi vitamin D merupakan salah  satu  faktor  risiko  terjadinya  resistensi  insulin,  serta  terdapat  hubungan  antara  hipovitaminosis  vitamin  D dengan  terjadinya  diabetes  mellitus. Cholecalciferol merupakan  salah  satu  bentuk  vitamin  D3.  Kadar  HOMA-IR merupakan salah satu parameter terjadinya resistensi insulin. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan bahwa pemberian cholecalcifero l dapat memperbaiki kondisi resistensi insulin pada mencit model diabetes. Penelitian ini menggunakan  20  ekor  mencit  yang  dibagi  menjadi  5  kelompok  yaitu  kelompok  kontrol  negative  (STZ+propilen glikol), kontrol positif (STZ+metformin), P1 (STZ+c holealcifero l dosis 25 ng), P2 (STZ+ cholealciferol dosis 50 ng), P3 (STZ+ cholealcifero l  dosis  100  ng).  Mencit  diberikan  injeksi  STZ  dosis  150  mg/KgBB  untuk  mendapatkan  kondisi hiperglikemia.  Pemberian cholecalciferol selama  14  hari.  Hasil  perhitungan  didapatkan  rata-rata  kadar  HOMA-IR setelah perlakuan adalah kelompok  kontrol negative  (2,32), kontrol positif (0,825), P1 (0,975), P2  (0,5), P3 (0,3). Rata-rata  kadar  HOMA-B  setelah  perlakuan  adalah  kelompok  kontrol  negative  (2,76),  kontrol  positif  (11,92),  P1 (18,4),  P2  (10,88),  P3  (35,35).  Hasil  analisis  statistik  menggunakan  uji  Kruskall  wallis  didapatkan  p<0,005. Kesimpulan penelitian ini adalah pemberian cholecalciferol dapat memperbaiki resistensi insulin dengan parameter HOMA-IR dan HOMA B pada mencit model diabetes.
Kata Kunci : cholecalciferol, HOMA-IR, HOMA-B, streptozotocin

## Abstract
Insulin resistance is an important predictor of the incidence of diabetes mellitus. Vitamin D deficiency is one of the risk  factors  for  insulin  resistance,  and  there  is  a  relationship  between  hypovitaminosis  vitamin  D  with  the prevalence  of  diabetes  mellitus.  Cholecalciferol  is  one  form  of  vitamin  D3.  HOMA-IR  levels  are  one  of  the parameters of insulin resistance. This study aims to prove that administration of cholecalciferol can improve insulin resistance  conditions  in  diabetic  mice  model.  This  study  used  20  mice  divided  into  5  groups  negative control(STZ+propilen  glycol),  positive  control  (STZ+metformin),  P1( STZ+cholealciferol  25ng),  P2(STZ+cholealciferol 50ng), P3(STZ+cholealciferol 100ng). Mice given STZ dose 150mg / KgBB intraperitoneal  to obtain hyperglycemia conditions.  Administration  of  cholecalciferol  for  14  days.  The  result  obtained  average  HOMA-IR  level  after treatment  is  negative  control(2,32),  positive  control  (0,825),  P1( 0,975),  P2(0,5),  P3(0,3). The  result  obtained average  HOMA-B  level  after  treatment  is  negative  control (2,76),  positive  control  (11,92),  P1  (18,4),  P2(10,88), P3(35,35). The result of statistical analysis using Kruskall wallis test obtained p <0,005. The conclusion of this study is that administration of cholecalciferol may improve insulin resistance in diabetic model mice.
Keyword : cholecalciferol, HOMA-IR, HOMA-B, streptozotocin

## Pendahuluan
Resistensi  insulin  memegang  peran  penting  dalam patofisiologi  terjadinya  diabetes  mellitus.  Resistensi insulin  ditandai  dengan  ketidakmampuan  organ target  seperti  hepar,  otot  dan  sel  lemak  merespons efek insulin, sehingga organ target gagal mengambil glukosa  dalam  darah  menyebabkan  terjadinya hiperglikemia.  Penyebab  resistensi  insulin  terjadi karena  beberapa  faktor  diantaranya  adalah  faktor usia,  obesitas,  rendahya  aktifitas  fisik,  perubahan hormonal dan tingginya intake karbohidrat (Roosheroe et al ., 2012.).  Vitamin D juga memegang peranan  dalam  terjadinya  resistensi  insulin. Hipovitaminosis  vitamin  D  sering  terjadi  pada  usia tua.  Prevalensi  pasien  tua  yang  memiliki  kadar vitamin  D  yang  rendah  sebesar  35,1%,  sedangkan prevalensi  pasien  tua  yang  mengalami  resistensi insulin sebesar 40% (Setiati et al ., 2007). Perubahan jaringan  lemak viscera  intra  abdomen dan  jaringan hepar menjadi penyebab terjadinya resistensi insulin pada  orang  tua.  Konsentrasi  vitamin  D  dalam  darah pada  pasien  diabetes  mellitus  lebih  rendah dibandingkan  dengan  orang  normal.  Terdapat hubungan  antara  hipovitaminosis  vitamin  D  dengan fungsi sel beta, sehingga orang dengan hipovitaminosis  vitamin  D  berisiko  terjadi  resistensi insulin (Chiu et al ., 2004)
Cholecalciferol merupakan salah satu bentuk vitamin D3.  Vitamin  D3  diketahui  memiliki  fungsi  dalam meregulasi  homeostasis  kalsium  dan  terbukti  dapat meningkatkan sintesis insulin oleh sel beta pankreas (Pittas et  al. ,  2007).  Pemberian cholecalciferol per oral  selama  14  hari  terbukti  dapat  menurunkan kadar glukosa darah tikus yang diinduksi streptozotosin  (Santos et  al. ,  2005).  Pemberian cholecalciferol per oral selama 14 hari terbukti dapat meningkatkan  translokasi  GLUT4  otot  rangka  pada tikus yang diinduksi streptozotocin (Sakinah, 2013)
Resistensi  insulin  dapat  diukur  dengan  berbagai macam  metode,  dapat  secara  langsung  dengan menggunakan tes supresi insulin dan hyperinsulinemic  euglycemic  glucose  clamping , maupun  pengukuran  secara  tidak  langsung  dengan menggunakan  tes  toleransi  glukosa  intravena,  tes toleransi  glukosa  oral,  tes  toleransi  makanan,  dan homeostasis  model  of  assessment-IR (HOMA).
Metode  HOMA  IR  merupakan  metode  yang  paling sering  dilakukan  karena  mudah  dilakukan  serta dapat  memperkirakan  estimasi  sensitivitas  insulin dari  konsentrasi  glukosa  puasa  dan  kadar  insulin plasma  puasa.  Hubungan  antara  kadar  glukosa  dan
kadar insulin saat kondisi basal tersebut menggambarkan  keseimbangan  antara  sekresi insulin dan efek penggunaan glukosa di organ target seperti  hepar.  Model  HOMA  IR  dapat  digunakan untuk  mengukur  resistensi  insulin  pada  manusia maupun  tikus  dan  mencit  (Mather,  2009; Esteghamati et al., 2010).

## Metode Penelitian

## Bahan Penelitian
Hewan  coba:    mencit  ( Mus  musculus )  strain  swiss Webster    (Balb/c)  yang  memenuhi  kriteria  inklusi dengan  pakan  pellet  serta  air  suling  karena  lebih stabil dan untuk mengontrol perubahan pH pada air minum.
Bahan kimia : vitamin D yaitu cholecalciferol , STZ dari sigma  Aldrich,  metformin,  rat  ELISA  insulin  kit  merk elabscience , propylene glycol, larutan dapar sitrat.
Pembuatan larutan cholecalciferol
Cholecalciferol ditimbang  sekitar  1  mg  kemudian dilarutkan  dalam  100  mL propylene  glycol .  Larutan ini  merupakan  larutan  baku  primer  yang  akan diencerkan sesuai dosis yang akan diberikan kepada mencit seperti pada lampiran.
Volume  pemberian cholecalciferol ,  metformin  dan propylene  glycol tidak  boleh  melebihi  batas  volume lambung  mencit.  Volume  lambung  mencit  ±  1  mL, setelah  dikurangi  makanan  dan  minuman  maka sebaiknya  volume  bahan  perlakuan  yang  disonde tidak  melebihi  0,5  mL.  Pada  penelitian  ini  volume bahan  perlakuan  yang  disonde  adalah  0,3  mL. Cholecalciferol diberikan sekali sehari selama 14 hari secara  per  oral.  Pengambilan  rentang  dosis  ini berdasar  pada  indeks  terapi  vitamin  D  pada  hewan coba  mencit.  Dosis  50  ng  merupakan  dosis  aman yang  tidak  menyebabkan  hiperkalsemia  dan kalsifikasi  jaringan  pada  hewan  coba  mencit  (Vieth, 2006). Setiap hari kondisi mencit dipantau, dilakukan penimbangan berat badan setiap minggu.

## Hewan coba model diabetes
Aklimatisasi  hewan  coba  selama  1  minggu  di Laboratorium  Farmakologi  FK  Unair  agar  terbiasa hidup  dalam  lingkungan  yang  baru.  Hewan  coba
ditempatkan  pada  lingkungan  yang  nyaman,  tidak gaduh,  suhu  ruangan  27 0 C,  ditempatkan  dalam kandang  yang  bersih,  beralas  sekam,  satu  kandang satu mencit,  siklus 12 jam terang dan 12 jam gelap, diberikan  pakan  pellet  dan  minum  air  suling.  Jika terdapat  mencit  yang  sakit  atau  mati  dikeluarkan dari penelitian.
Setelah  aklimatisasi,  pada  hari  pertama  mencit diinjeksi  STZ  150  mg/kgBB  yang  dilarutkan  dalam dapar  sitrat  dengan  konsentrasi  22,5  mg/  mL  dan disuntikkan secara intraperitoneal. Mencit dipuasakan  terlebih  dahulu  selama  4  jam  sebelum injeksi STZ untuk mencegah aspirasi dan mengosongkan  lambung.  Puasa  mencit  dilakukan dengan  cara  tidak  diberi  pakan  dan  kandang dikosongkan  dari  sekam.  Pada  malam  pertama setelah  injeksi  STZ  mencit  diberi  larutan  dekstrosa 10%  untuk  menghindari sudden  hypoglycemic  post injection .  Dua  hari  setelah  induksi  STZ,  mencit dipuasakan  selama  6  jam,  kemudian  diambil  darah dari  ekor  mencit  untuk  diukur  kadar  glukosa  darah puasanya menggunakan alat easy touch glucose test. Mencit  dinyatakan  mengalami  hiperglikemia  jika kadar  glukosa  darah  antara  180-500  mg/dL  (Etuk, 2010).  Setelah  mengalami  hiperglikemia,  mencit dibagi  menjadi  5  kelompok  yaitu  K(-)  merupakan mencit  yang  diinduksi  STZ  dan  diberikan propylene glycol ,  K(+)  merupakan  mencit  yang  diinduksi  STZ dan  diberikan  metformin,  P1  merupakan  mencit yang diinduksi STZ dan diberikan cholecalciferol dosis 1  (25  ng),  P2  merupakan  mencit  yang  diinduksi  STZ dan  diberikan cholecalcifero l  dosis  2  (50ng),  dan  P3 merupakan mencit yang diinduksi STZ dan diberikan cholecalciferol dosis 3 (100ng).

## Pengukuran kadar insulin puasa
Sebanyak 100 µL standard atau sampel ditambahkan pada  tiap  sumuran,  kemudian  diinkubasi  selama  90 menit  pada  suhu  37 0 C.  Setelah  itu  cairan  dibuang dan  ditambahkan  dengan  100µL biotinylated detection Ab dan diinkubasi selama 1 jam pada suhu 37 0 C kemudian dicuci sebanyak tiga kali, selanjutnya ditambahkan  100µL  HRP conjugate dan  diinkubasi selama  30  menit    pada  suhu  37 0 C,  kemudian  dicuci sebanyak  5  kali.  Sebanyak  90µL  reagen  substrat ditambahkan  dan  diinkubasi  selama  15  menit    pada suhu  37 0 C.  Lalu  ditambahkan  stop  solution  50µL, kemudian dibaca pada panjang gelombang 450nm.
Pengukuran kadar HOMA-IR
Kadar HOMA-IR diukur dengan menggunakan rumus berikut:

## HOMA-IR =  Ins  x GDP
405 Ket: Ins : Kadar Insulin Puasa (uU/mL) GDP : Kadar Glukosa Darah Puasa (mg/dL)

## Pengukuran HOMA-B
Kadar  HOMA-B  diukur  dengan  menggunakan  rumus berikut
HOMA-B = (360 x kadar insulin puasa (uU/mL)) (kadar GDP(mg/dL) – 63)

## Analisis statistik
Pada  penelitian  ini  data  terdistribusi  normal (p>0,05)  namun  tidak  homogen  (p<0,05),  sehingga analisis  statistik  menggunakan  uji  Kruskall-wallis. Dari  hasil  uji  Kruskall-wallis  didapatkan  p<0,05. Sehingga daat dsimpulkan bahwa terdapat perbedaan  kadar  HOMA-IR  pada  minimal  dua kelompok.

## Hasil Penelitian

## Hewan coba model diabetes
Penelitian ini menggunakan metode injeksi STZ dosis 150mg/kgBB untuk mendapatkan model hewan coba hiperglikemia.  Rata-rata  kadar  glukosa  darah  puasa hewan  coba  sebelum  dan  sesudah  perlakuan disajikan dalam Tabel 1.
Tabel 1. Rata-rata Kadar Glukosa darah puasa sebelum dan sesudah perlakuan Kelompok   Kadar GDP awal (mg/dL) Kadar GDP post STZ (mg/dL) Kadar GDP akhir (mg/dL) K(-) 85,25 387,5 387,75 P1 130,5 382,5 145,25 P2 84,75 364,5 123 P3 105,25 321 82,5 K(+) 97,25 345,25 153,25
Dari Tabel 1 diketahui bahwa rata-rata kadar glukosa darah  puasa  awal  seluruh  mencit  dalam  batas normal  yaitu  kurang  dari  180  mg/dL.  S etelah diinjeksi  dengan  STZ  semua  mencit  mengalami hiperglikemia  dengan  kadar  glukosa  darah  antara
180-500mg/dL dengan rata-rata kadar glukosa darah puasa
setelah
induksi STZ adalah 374,57±73,90mg/dL.  Hiperglikemia  yang  bermakna terjadi  dua  hari  setelah  injeksi  STZ.  Setelah perlakuan pemberian cholecalciferol per oral selama 14 hari terjadi penurunan kadar glukosa darah puasa pada kelompok perlakuan, sedangkan pada kelompok kontrol negatif kadar glukosa darah puasa masih tetap tinggi di atas 180 mg/dL.

## Pengukuran kadar insulin puasa dan HOMA-IR
Hasil  pengukuran  kadar  insulin  puasa  dan  hasil perhitungan kadar HOMA-IR disajikan dalam Tabel 2 dan Tabel 2 sebagai berikut.
Tabel  2.  Rata-rata  kadar  GDP  akhir,  kadar  insulin  puasa dan HOMA-IR
Kelompok   Kadar GDP akhir (mg/dL) Kadar insulin puasa (uU/mL) HOMA-IR K(-) 387,75 2,45 2,32 P1 145,25 2,64 0,975 P2 123 1,62 0,5 P3 82,5 1,58 0,3 K(+) 153,25 2,28 0,825
Dari  Tabel  2  diketahui  bahwa  pada  kelompok  K(-) memiliki  nilai  insulin  tinggi  namun  kadar  glukosa darah  puasanya  juga  tinggi.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  insulin  yang  disekresikan  oleh  sel  beta pankreas belum  mampu  menurunkan kadar glukosa darah  puasa,  yang  berarti  bahwa  terjadi  kondisi resistensi insulin. Kondisi resistensi insulin ditentukan  dengan  parameter  kadar  HOMA-IR. Semakin  tinggi  kadar  HOMA-IR  menunjukkan tingginya resitensi insulin. Kadar HOMA-IR kelompok kontrol  negatif  memiliki  nilai  tertinggi  menunjukkan bahwa  kelompok  kontrol  negatif  mengalami resistensi  insulin.  Kadar  HOMA-IR  kelompok perlakuan lebih rendah dibanding dengan K(-). Hasil analisis  statistik  Kruskal  wallis  didapatkan  nilai p=0,003  (p<0,05).  Hal  ini  menunjukkan  terdapat pengaruh cholecalciferol terhadap  penurunan  kadar HOMA-IR  jika  dibandingkan  dengan  kelompok kontrol.  Grafik  rata-rata  kadar  HOMA-IR  tiap kelompok disajikan dalam Gambar 1 berikut.
Gambar1. Grafik rata-rata kadar HOMA-IR kelompok perlakuan

## Pengukuran kadar HOMA-B
Kadar  HOMA-B  merupakan  parameter  kekuatan  sel beta  pankreas  dalam  mensekresi  insulin,  semakin tinggi  nilai  kadar  HOMA-B  menunjukkan  bahwa kekuatan  sel  beta  semakin  baik.  Pada  penelitian  ini didapatkan  kadar  HOMA-B  kelompok  K(-)  memiliki nilai terendah, hal ini menunjukkan bahwa kekuatan sel beta pankreas  dalam mensekresi insulin rendah. Nilai HOMA-B tertinggi terdapat pada  kelompok  P3. Kadar  HOMA-B  disajikan  dalam  Gambar  2  sebagai berikut.

## Gambar  2.  Grafik  rata-rata  kadar  HOMA-B kelompok perlakuan

## Pembahasan
Pada  penelitian  ini,  hewan  coba  yang  diberikan injeksi  STZ  150mg/kgBB  intraperitoneal  dosis
tunggal,  pada  semua  kelompok  telah  mengalami h i p e r g l ik e m i a   yaitu  kadar  glukosa  darah  telah antara  180-500mg/dl  lebih  tinggi  secara  bermakna dari kadar glukosa darah awal. Hal ini sesuai dengna penelitian  Sobrevilla et  al. ,  2011,  yang  menunjukkan bahwa dosis  tunggal 150mg/kgBB  dan  menunjukkan hasil hiperglikemia pada hari kedua dan ketujuh serta bertahan hingga 8 minggu, sehingga waktu sampai dengan 8 minggu ini dapat digunakan untuk uji suatu bahan yang diduga  memiliki  efek  hipoglikemik.  Pemilihan  STZ  ini tidak  berdasar  kemampuan  STZ  untuk  menginduksi jenis diabetes tertentu, tetapi lebih digunakan untuk mempelajari  patogenesis  diabetes  melitus,  sebagai alat untuk menguji respons suatu obat (Chatzigeorgiou,  2009).  Kondisi  mencit  pada  fase  ini adalah  fase Non  Insulin  Requirement (NIR)  dengan alasan  kelompok  kontrol  hiperglikemia  dapat  tetap hidup sampai hari ke-14 dan kelompok yang diterapi dengan  obat  metformin  dapat  berespon  dengan baik,  walaupun  tanpa  diberikan  insulin  (Yamazaki et al .,  2009).  STZ  merupakan  donor  NO  dalam  dosis besar,  NO  dapat  menyebabkan  destruksi  sel  beta pankreas, menyebabkan  fragmentasi  DNA  melalui alkilasi  DNA  sehingga  terjadi  perubahan  DNA  sel beta  pankreas.  STZ  memberikan  penghambatan pada  siklus  krebs  sehingga  menurunkan  konsumsi oksigen mitokondria. Efek ini secara kuat membatasi produksi  ATP  mitokondria  dan  menyebabkan pengurangan  ATP  dalam  sel  beta  pankreas  dan menyebabkan  kondisi  hiperglikemia  (Szkudelski, 2001; Lenzen, 2008).
Pemberian cholecalciferol selama  14  hari  dapat menurunkan  kadar  HOMA-IR  dan  dapat  menaikkan kadar HOMA-B dibandingkan dengan kelompok K(-). Hal  ini  menunjukkan  bahwa cholecalciferol dapat memperbaiki resistensi insulin. Hasil tersebut sesuai dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Hurst et  al. , 2013,  bahwa  suplementasi  vitamin  D  dapat memperbaiki  resistensi  insulin. Cholecalciferol memiliki  efek  positif  terhadap signaling insulin disebabkan  oleh  regulasi  kalsium  intraseluler. Homeostasis  Ca 2+ terganggu  pada  pasien  diabetes (Alvarez et  al., 2010).  Keseimbangan  kalsium  sitosol diperlukan  untuk  menstimulasi  translokasi  GLUT4 yang diperlukan untuk meng- uptake glukosa menuju organ target. Cholecalciferol akan  berikatan dengan reseptornya  dan  menghasilkan  efek  genomik  dan efek non genomik. Efek genomik cholecalciferol (D3) pada  otot  rangka  karena  adanya  ikatan  antara cholecalciferol (D3) dengan VDR pada otot rangka di nukleus. Ikatan ini akan mengaktifkan trasnkripsi gen mRNA  dan  sintesis  protein  de  novo  yang  akan
meningkatkan  kalmodulin  yang  merupakan  protein pengikat Ca 2+ (Ceglia et al. , 2012).
Efek non genomik cholecalcifero l didapat dari ikatan cholecalciferol dengan  reseptor  vitamin  D  di membran.  Ikatan  ini  akan  memberikan  efek  lebih cepat  dibanding  efek  genomik. Cholecalciferol akan meningkatkan  Ca 2+ sitosol  melalui  keluarnya  Ca 2+ dari  reticulum  sarkoplasma. Cholecalciferol akan mengaktifkan jalur signal transduksi phosphoinositol-3-kinase (PI3K). PI3K akan mengaktifkan  fosfolipase  C  (PLC)  selanjutnya membentuk  diasil  gliserol  (DAG)  dan  inositol- trifosfat  (IP3).  IP3  inilah  yang  akan  mengeluarkan Ca 2+ dari retikulum sarkoplasma. Hal ini menyebabkan  peningkatan  konsentrasi  Ca 2+ sitosol. Ca 2+ sitosol  yang  tinggi  ini  dibutuhkan  untuk translokasi  GLUT4  melalui  aktivasi  AMPK.  Ca 2  + akan mengaktivasi  AMPK  melalui  CaMK  kinase  (CaMKK). Homeostasis  Ca 2+ terganggu  pada  pasien  diabetes. Cholecalciferol  memiliki  efek  positif  terhadap signaling insulin  dikarenakan  regulasi  kalsium intraseluler  tersebut.  Jalur  ini  tidak  tergantung insulin, sehingga dapat menjadi jalur alternatif untuk meningkatkan translokasi GLUT4 dan dapat memperbaiki  resistensi  insulin  (Girgis et  al. ,  2013). Hal ini juga sesuai dengan penelitian Sakinah, 2013, bahwa cholecalciferol dapat meningkatkan translokasi GLUT4 di otot rangka mencit hiperglikemia.

## Kesimpulan
Pemberian cholecalciferol dapat  memperbaiki resistensi  insulin  melalui  parameter  HOMA  IR  dan HOMA B pada mencit model diabetes.

## Daftar Pustaka
Alvarez  JA,  Ashraf  A.  2009.  Role  of  Vitamin  D  in Insulin  Secretion  and  Insulin  Sensitivity  for Glucose Homeostasis. International Journal of Endocrinology , Article ID 351385
Chatzigeorgeu A, Halapas A, Kalafatakis K, Kamper E.
2009. The Use of Animal Models in the Study of Diabetes Mellitus. in vivo. 23: 245-258.
Chiu    KC,  Chu  A,  Liang  V.  Go  W, et  al .  2004. Hypovitaminosis  D  is  associated  with  insulin resistance  and ␤ cell  dysfunction  1 – 3. Am  J Clin Nutr . 79 : 820 – 825.
Etuk EU. 2010. Animals models for studying diabetes
mellitus. Agric. Biol. J. N. Am . 1(2): 130-134.
Esteghamati A, Ashraf H, Khalilzadeh O, Zandieh A et al.,  2010.  Optimal  cut-off  of  homeostasis model  assessment  of  insulin  resistance (HOMA-IR)  for  the  diagnosis  of  metabolic syndrome:  third  national  surveillance  of  risk factors of non- communicable diseases in Iran (SuRFNCD-2007). Nutrition  &  Metabolism , 7:26
Girgis CM.  2013. The Roles of Vitamin D in Skeletal Muscle:  Form,  Function,  and  Metabolism.
Endocrine Reviews . 34 : 33 – 83.
Hurst  P,  Stonehouse  W,  Coad  J.  2013.  Vitamin  D supplementation reduces insulin resistance in South  Asian  women  living  in  New  Zealand who  are  insulin  resistant  and  vitamin  D deficient  -  a  randomised,  placebo-controlled trial. British Journal of Nutrition . 103 (04): 549
Lenzen  S.  2008.  The  mechanisms  of  alloxan-  and streptozotocin-induced diabetes. Diabetologia . 51:216 – 226.
Mather  K.  2009.  Surrogate  measures  of  insulin resistance:  of  rats,  mice,  and  men. Am  J Physiol Endocrinol Metab . 296: 398 – 399.
Roosheroe  AG,  Setiati  S,  Istanti  R.  2012.  Insulin Resistance as One of Indicators for Metabolic Syndrome  and  Its  Associated  Factors  in Indonesian Elderly. Acta Med Indones-Indones
J Intern Med .  44 (3).
Santos RS, Vianna LM. 2005. Effect of cholecalciferol supplementation  on  blood  glucose  in  an experimental  model  of  type  2  diabetes mellitus  in  spontaneously  hypertensive  rats and  Wistar  rats. Clinica  Chimica  Acta .  358: 146 – 150.
Sakinah  EN.  2013.  Pharmacodynamics  Study  of Cholecalciferol to GLUT4 Protein Translocation in muscle fiber of hyperglycemia  mice  which  inducted  by streptozotocin. Folia  Medica  Indonesiana.
49 (3 ).
Setiati  S,  Oemardi  M,  Sutrisna  B.  2007.  The  role  of ultraviolet-B  from  sun  exposure  on  vitamin D3  and  parathyroid  hormone  level  in  elderly women in Indonesia. Asian J Gerontol Geriatr Asian  Journal  of  Gerontology  &  Geriatrics . 2(2): 126 – 132.
Sobrevilla  J,  Boone  VV,  Aguillar  C,  roman  RR  et  al.
2011. Effect of Varying Dose and Administration  of  Streptozotocin  on  Blood sugar  in  Male  CD1  Mice. Proc.  West. Pharmacol. Soc. 54: 5-9.
Szkudelski  T.  2001.  The  Mechanism  of  Alloxan  and Streptozotocin  Action  in  B  Cells  of  the  Rat Pancreas. Physiol. Res. 50: 536-546.