## Ethanolic Extract of The Graptophyllum Pictum Griff Leaves to Male White Rat
Setya Enti Rikomah 1) , Gina Lestrari 1) , Juwita Winanti 1)
1) Akademi Farmasi Yayasan Al-Fatah Bengkulu

## Email: setyaentirikomah@gmail.com

## Abstract
Utilization of plants as traditional medicinal are still always be  used by people in Indonesian. Especially in rural areas that  still rich with variety of plants. Plants  of black pudding leaves (Graptophyllum pictum Griff) are one that efficacious for treating various  of  diseases.  The  content  of    flavonoid    in  the  black  pudding  leaves  have antipyretic  effect,  analgesic  and  anti-inflammatory.  This  research  aims  to  find    out whether the black pudding leaves have  antipyretic effect or not. This research  used the induction  method    of  vaccineDPT-Hb  0.022  /  20  gr  a  white  rat  as  stimulant  fever. Positive control with paracetamol 1.3 mg / 20 gram a white rat, negative control with Na CMC 0.5 ml / 20 grams a white rat, first extract test of black pudding leaves  0.8 mg / 20 gram a white rat, second extract test of  black pudding leaves 1.6 / 20 gram a white rat, and third extract test  of black pudding leaves 3.2 / 20 gram a white rat. The results of research showed that ethanol extract of black pudding leaves if it’s looked from    statistic  result  of  SPSS  16  program  ,  it  doesn’t    show  out  of  any  effect  as antipyretic effect because  the significant value  is P> 0.05.

## Keywords: Antipyretic, DPT vaccine Hb, (Graptophyllum pictum)

## ABSTRAK
Pemanfaatan  tumbuhan  sebagai  obat  tradisional  masih  selalu  digunakan masyarakat  di  Indonesia.    terutama  di  daerah  pedesaan  yang  masih  kaya  dengan keanekaragaman tumbuhannya. Tanaman daun puding hitam ( Graptophyllum pictum Griff )  merupakan  salah  satu  tanaman  yang  berkhasiat  untuk  mengobati  berbagai penyakit. Kandungan flavonoid yang terdapat pada daun puding hitam memiliki efek antipiretik,  analgetik  dan  antiinflamasi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui apakah  daun  pudding  hitam  memiliki  efek  antipiretik  atau  tidak.  Penelitian  ini menggunakan  metode  induksi  vaksin  DPT  Hb  0,022/20  gr  BB  mencit  sebagai perangsang demam. Kontrol positif dengan parasetamol 1,3 mg/20 gram BB mencit, kontrol negatif dengan Na CMC  0,5 ml/20 gram BB mencit, perlakuan uji 1 ekstrak daun puding hitam 0,8  mg/20 gram BB mencit, perlakuan uji 2 ekstrak  daun puding hitam 1,6/20 gram BB mencit, dan  perlakuan uji 3 ekstrak  daun puding hitam 3,2 /20 gram BB mencit. Hasil penelitian menunjukan bahwa Ekstrak etanol daun puding hitam jika dilihat dari hasil statistik program SPSS 16 tidak dapat memberikan efek sebagai antipiretik karena nilai signifikan P>0,05.
Kata kunci : Antipiretik, Vaksin DPT Hb,  ( Grapthophyllum pictum )

## PENDAHULUAN
Demam atau pireksia merupakan gejala dari suatu penyakit. Penyakit infeksi seperti demam berdarah, tifus, malaria, peradangan hati, dan penyakit infeksi lain merupakan contoh penyakit yang sering mempunyai gejala demam. Dampak negatif demam antara lain dehidrasi,  kekurangan oksigen, kerusakan saraf,  rasa tidak nyaman  seperti sakit kepala, nafsu makan menurun (anoreksia), lemas, dan nyeri otot. Untuk mengurangi dampak  negatif  ini  maka  demam  perlu  diobati  dengan  antipiretik.  Antipiretik  atau analgetik  non  opioid  merupakan  salah  satu  obat  yang  secara  luas  paling  banyak digunakan (Ermawati,2010).
Tanaman obat tradisional adalah bahan atau ramuan bahan alam yang berasal dari tumbuhan yang secara turun-temurun telah digunakan untuk pengobatan berdasarkan pengalaman (Nursiyah, 2013). Pemanfaatan tumbuhan sebagai obat tradisional masih selalu digunakan masyarakat di Indonesia terutama di daerah pedesaan yang masih kaya dengan keanekaragaman tumbuhannya. Ada beberapa manfaat yang dapat diambil dari penggunaan  obat  tradisional,  diantaranya  harganya  yang  murah,  terkait  dengan kemudahan  dalam  mendapatkan  bahan  baku,  bahkan  tanaman  obat  dapat  ditanam sendiri di halaman rumah, efek samping yang ditimbulkan obat tradisional relatif kecil, sehingga  aman  digunakan  (Ermawati,2010).  Tanaman  daun  puding  hitam ( Graptophyllum pictum Griff L ) merupakan salah satu tanaman yang berkhasiat untuk mengobati  berbagai  penyakit.Tanaman  ini  mempunyai  kandungan  kimia  antara  lain alkaloid non toksik, flavonoid, glikosid, steroid, saponin, tanin, kalsium oksalat, asam formiat,  dan  lemak.  Dengan  berbagai  kandungan  kimiawinya  ini,  daun  ungu mempunyai sifat sebagai antiinflamasi, peluruh air seni, mempercepat pemasakan bisul, pencahar  ringan,  pelembut  kulit  kaki,  melunakkan  feses  dan  mengempiskan  wasir (Tukiran dkk, 2014).
Kandungan  flavonoid  yang  terdapat  pada  daun  puding  hitam  memiliki  berbagai macam  bioaktivitas.  Bioaktivitas  yang  ditunjukkan  antara  lain  efek  antipiretik, analgetik  dan  antiinflamasi.  Flavonoid  bekerja  sebagai  inhibitor cyclooxygenase (COX). Cyclooxygenase (COX)  berfungsi  memicu  pembentukan  prostaglandin. Prostaglandin berperan dalam proses inflamasi dan peningkatan suhu tubuh. Apabila prostaglandin  tidak  dihambat  maka  terjadi  peningkatan  suhu  tubuh  yang  akan mengakibatkan demam (Kalay, s dkk, 2014).

## METODE PENELITIAN

## Alat Dan Bahan
Spuit tumpul, spuit injeksi oral (0,1-1 ml), tissue, handscoon, masker, beaker glass, erlenmeyer, stopwatch, kertas saring, corong, gelas ukur, pipet tetes, timbangan analitik, corong pisah, rotary evaporator, thermometer, botol bejana gelap, daun puding hitam  ( Graptophyllum  pictum  Griff ),  etanol  70  %,  aquadest,  vaksin  DPT-Hb, Parasetamol.

## Pembuatan Ekstrak
Daun puding hitam diperoleh dari  jalan Bhayangkara No 10 Padang Harapan Kota Bengkulu. dan telah dideterminasi di Laboratorium Biologi UNIB. Simplisia daun puding hitam dikeringkan  dan diekstraksi dengan cairan penyari etanol 70% dengan cara maserasi dengan pengadukan dan didiamkan selama 5 hari Kemudian disaring dan pelarut  diuapkan  dengan rotary  evaporator sampai  diperoleh  ekstrak  kental  daun puding hitam.
Uji Flavonoid
sebanyak ± 1 mL dicampur dengan 3 mL etanol 70%, lalu dikocok, dipanaskan, dan dikocok lagi kemudian disaring. Filtrat yang diperoleh, kemudian ditambah Mg 0,1
g dan 2 tetes HCl pekat. Terbentuknya warna merah pada lapisan etanol menunjukkan adanya flavonoid.

## Penyiapan Bahan Suspensi Na-CMC 1% (b/v)
Ditimbang 1 g Na-CMC dimasukkan sedikit demi sedikit ke dalam mortir yang berisi  50  ml  akuades  panas  (suhu  70 0 C)  dan  didiamkan  selama  30  menit  hingga diperoleh massa yang transparan, diaduk lalu diencerkan dengan aquades hingga 100 ml, (Ibrahim,N dkk, 2014).

## Penyiapan Suspensi Parasetamol
Tablet parasetamol 500 mg ditimbang, kemudian digerus dan ditimbang serbuk sebanyak  28,6  mg.  Kemudian  dimasukkan  dalam  mortir  dan  ditambahkan  dengan suspensi  Na-CMC  sedikit  demi  sedikit  sambil  digerus  hingga  homogen,  lalu dimasukkan dalam labu ukur 10 ml. Kemudian volumenya dicukupkan hingga 10ml dengan suspensi Na CMC .

## Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol daun puding hitam
Ditimbang ekstrak etanol sebanyak 16 mg, 32 mg, dan 64 mg  dalam cawan porselin.  Kemudian  masing-masing  ekstrak  ditambahkan  suspensi  Na-CMC  sedikit demi sedikit sambil digerus hingga homogen. Lalu  ekstrak dicampur dan dicukupkan volumenya hingga 10 ml dengan suspensi Na CMC.

## Evaluasi Efek Antipiretik
1. Sebanyak 25 ekor hewan uji dibagi menjadi 5 kelompok (masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor mencit), sebelum dilakukan pengujian hewan dipuasakan selama 18 jam tetapi tetap diberi minum
2. Dilakukan  pengukuran  suhu  rektal  yaitu  dengan  cara  memasukkan  termometer digital ± 2 cm ke dalam rektal tikus untuk mengetahui suhu awal sebelum induksi (suhu standar).
3. Semua  hewan  uji  diinduksi  demam  dengan  vaksin  DPT-Hb  0.022ml/20  gr  BB mencit  secara intra muskular.
4. 2 jam setelah pemberian penginduksi, dilakukan pengukuran kembali pada rektal mencit
5. Jika terjadi peningkatan  suhu tubuh  lebih dari  atau sama dengan 0,6 o C dari suhu awal maka mencit dikatakan demam.
6. Kemudian tiap kelompok diberikan dosis secara oral sebagai berikut :
7. Kelompok  I sebagai kontrol negatif diberi suspensi Na-CMC 1%.
a. Kelompk II  sebagai kontrol positif diberi suspensi parasetamol 1,3 mg/20gr BB mencit
b. Kelompok III diberi suspensi kombinasi ekstrak etanol daun puding hitam 0.8 mg/  20gr BB mencit
c. Kelompok IV diberi suspensi kombinasi ekstrak etanol daun puding hitam 1.6 mg/ 20gr BB mencit
d. Kelompok V diberi suspensi kombinasi ekstrak etanol daun puding hitam 3.2 mg/ kg BB mencit
8. Dilakukan pengukuran kembali selama 3 jam dengan interval waktu tiap 30 menit selama 180 menit.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Identifikasi Tumbuhan dan Pembuatan Ekstrak
Identifikasi  tumbuhan  yang  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi  Universitas Bengkulu  (UNIB)  menunjukkan  bahwa  daun  puding  hitam  merupakan  spesies Graptophyllum  pictum  griff. Hasil  penapisan  fitokimia  menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol daun puding hitam positif mengandung flavonoid.

## Hasil Penelitian Antipiretik
Hasil penelitian  yang telah didapat, dihitung nilai AUC nya, berikut ini nilai AUC dari 5 kelompok perlakuan tersebut:
Tabel II. Nilai AUC suhu rectal mencit
Penelitian  ini  menggunakan  tanaman  daun  puding  hitam  ( Graptophyllum pictum ). Sampel yang digunakan diambil di Jl Bhayangkara No 10 padang harapan kota Bengkulu.  Proses  ekstraksi  yang  digunakan  adalah  dengan  cara  maserasi.  Cairan penyari yang digunakan adalah etanol 70% karena flavanoid dapat tertarik dengan baik menggunakan etanol 70%  (Harborne, 1987).
Hewan uji  yang digunakan adalah mencit putih jantan ( Mus musculus ) karena untuk menghindari pengaruh hormonal yang kemungkinan dapat mempengaruhi hasil penelitian.  Sebelum  perlakuan  mencit  diadaptasikan  selama  dua  minggu  untuk menghindari mencit stres dikarenakan perubahan lingkungan dan dipuasakan selama 8 jam  untuk  menghindari  adanya  pengaruh  makanan  terhadap  absorpsi  obat.  Karena proses absorbsi obat dapat berkerja baik dalam keadaan lambung kosong.
Terdapat lima kelompok perlakuan, pemberian Na CMC  pada kontrol negatif, Pemberian parasetamol 1,3mg/20 gr BB pada kontrol positif, Pemberian ekstrak daun puding hitam dengan dosis 0,8 mg/20 gr BB pada kelompok dosis 1, Pemberian ekstrak daun  puding  hitam  dengan  dosis  1,6  mg/20  gr  BB  pada  kelompok  dosis  2  dan
Pemberian ekstrak daun puding hitam dengan dosis 3,2 mg/20 gr BB pada kelompok dosis 3. Metode pengujian antipiretiknya dengan  induksi vaksin DPT-Hb, yaitu dengan memberikan respon demam  pada mencit. Perlakuan dimulai dengan  pemberian obat atau ekstrak secara oral setelah 2 jam disuntikkan vaksin DPT-Hb secara intramuskular, kemudian dilakukan pengamatan  setiap 30  menit selama  3 jam.
Hasil  pengukuran  suhu  badan  mencit  setiap  30  menit  menjelaskan  bahwa penurunan suhu rektal mencit setelah diinduksi dengan vaksin DPT-Hb terlihat bahwa kontrol  negatif  menurunkan  suhu  paling  kecil,  sedangkan  pada  perlakuan  dosis  2 hampir sama dengan perlakuan kontrol positif (parasetamol). Ini menunjukkan bahwa parasetamol sebagai pembanding mampu menurunkan suhu badan yang demam begitu juga  dengan  kontrol  perlakuan  ekstrak.  Mekanisme  kerja  menurunkan  demam  yaitu menghambat  pengikatan  pirogen  dengan  reseptor  didalam  nukleus preoptik hipothalamus anterior , sehingga tidak terjadi peningkatan prostaglandin melalui siklus enzim  siklooksigenase  yang  berakibat  pada  penghambatan  kerja  pirogen  di hypothalamus (Lisdayanti, 2008).
Peneliti menggunakan analisa data dengan SPSS 16 untuk mendukung hasil yang di dapat. Pengujian ini diawali dengan uji normalitas dan didapatkan hasil signifikan p> 0,05 sehingga Ho diterima yang artinya kelima kelompok perlakuan yang diambil terdistribusi normal. Kemudian dilanjutkan dengan uji homogenitas diperoleh nilai P> 0,05 yang  menunjukan bahwa data homogen sehingga data bisa diolah dengan anova satu arah karena syarat dari uji anova satu arah adalah data harus terdistribusi normal.
Data diuji Anova, didapat nilai signifikan = 0,00 (sig <0,05) yang berarti terdapat perbedaan yang bermakna antara kelima kelompok. Uji lanjut yang digunakan adalahuji LSD  ( Least  significant  different )  dan  Duncan.  Uji  LSD  digunakan  untuk  melihat apakah setiap perlakuan yang dilakukan memiliki perbedaan yang bermakna atau tidak
bermakna dan juga untuk melihat perlakuan mana yang memberikan efek paling kecil dan efek yang paling besar, (Kalay,s dkk, 2014)
Data statistik yang didapat menunjukkan bahwa kontrol negatif (larutan CMC) menunjukkan  adanya  perbedaan  bermakna  dengan  kontrol  positif  dimana  nilai signifikan<0,05.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  kontrol  positif  terbukti  mampu menurunkan suhu rektal mencit. Masing-masing kontrol uji dosis 1, dosis 2,dan dosis 3 dibandingkan dengan kontrol negatif tidak ada perbedaan signifikan antar dosis. Ini berarti dari kelompok tersebut tidak terdapat perbedaan efek antipiretik yang signifikan. Hal ini bisa dikarenakan daun puding hitam tidak hanya mengandung flavonoid saja yang  mempunyai  efek  antipiretik,  tetapi  juga  mengandung  zat-zat  lain  (saponin, alkaloid,  dan  sebagainya)  yang  mungkin  bisa  mengganggu  mengganggu  interaksi flavonoid dengan reseptornya. Selain itu bisa disebabkan dosis yang digunakan terlalu kecil atau jumlah flavonoid yang terkandung dalam daun puding hitam sedikit.
Hasil dari Uji Duncan, menunjukan bahwa perlakuan kontrol positif adalah yang terbaik atau berefek menurunkan suhu tubuh pada mencit, sedangkan dosis 1, 2, 3, tidak memiliki efek antipiretik.

## Kesimpulan
Ekstrak  etanol  daun  puding  hitam  dilihat  dari  hasil  statistik  tidak  dapat memberikan efek sebagai antipiretik karena nilai signifikan P>0,05.

## REFERENSI
Ermawati, E.F., 2010, Efek Antipiretik Ekstrak Daun Pare (Momordica CharantiaL) Pada  Tikus  Putih  Jantan , skripsi, Fakultas  Kedokteran,  Universitas  Sebelas Maret, Surakarta.
Ibrahim,N.,  Yusriadi,  Ihwan.,  2014, Uji  Efek  Antipiretik  Kombinasi  Ekstrak  Etanol Herba Sambiloto (Andrographis Paniculata Burm.F.Nees.) Dan ekstrak Etanol Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa Bilimbi L.) Pada Tikus Putih Jantan (Rattus Norvegicus), ISSN : 2338-0950.
Kalay, S., Bodhi, W., dan Yamlean, P., 2014, Uji Efek Antipiretik Ekstrak Etanol Daun Prasman  (Eupatorium  Triplinerve  Vahl.)  pada  Tikus  Jantan  Galur  Wistar (Rattus Norvegicus L.) yang di induksi Vaksin Dpt Hb, ISSN 2302 – 2493.
Lisdayanti  ,2008, Uji  Daya  Antipiretik  Ekstrak  Daun  Belimbing  Wuluh  (Averrhoa Bilimbi L.) Terhadap Penurunan Suhu Rektal Mencit (Mus Musculus) Betina, skrips i, Fakultas Sains Dan Teknologi Universitas Islam Negeri Malang. Moot, C.L., Bodhi,W., Mongi, J., 2013, Uji iEfek Antipiretik Infusa Daun Sesewanua (Clerodendron Squamatum Vahl) terhadap kelinci jantan yang diinduksi Vaksin DPT Hb, ISSN 2302-2493. Ningsih,  R.B.,  2008, Uji  Aktivitas  Antipiretik  Infusa  Rimpang  Lengkuas  (  Alpinia Galanga L) Pada Kelinci Putih Jantan Galur New Zealand , skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta.
Nursiyah,    2013, Studi  Deskriptif  Tanaman  Obat  Tradisional  Yang  Di  Gunakan
Orangtua  untuk  Kesehatan  Anak  usia  Dini  di  Gugus  Melati  Kecamatan Kalikajar  Kabupaten  Wonosobo , Skripsi, Fakultas  Ilmu  Pendidikan, Universitas Negeri Semarang, Semarang.
Presiden  RI.  2009, Undang-Undang  Republik  Indonesia,    Nomor  36  Tahun  2009, tentang Kesehatan , Jakarta, Presiden Republik Indonesia. Perwita, F.A., 2011, Teknologi Ekstraksi Daun Ungu (Graptophyllum Pictum) dalam Etanol  70  %  dengan  Metode  Perkolasi , Program  Diploma  III Fakultas Pertanian, Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Suwertayasa,  M.P.,  Bodhi,W.,  Edy,  H.J.,  2013, Uji  Efek  Antipiretik  Ekstrak  Etanol Daun Tembelekan (Lantana Camara L) pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar,
ISSN: 2302-2493.
Tahani, N.A., 2013, Laporan Teknik Instrumentasi Laboratorium Biosistem (Hewan Coba ), Fakultas Sains Dan Teknologi, Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim, Malang.
Tukiran, Suyatno, dan Hidayati, N.,2014, Skrining Fitokimia Pada Beberapa Ekstrak dari  Tumbuhan  Bugenvil  (Bougainvillea  Glabra),  Bunga  Sepatu  (Hibiscus Rosa-Sinensis L.), dan Daun Ungu (Graptophylum Pictum Griff ),
ISBN : 978- 602-0951-00-3.
Voigt,  Rudolf.  1994, Buku  Pembelajaran  Teknologi  Farmasi, diterjemahkan  dari Bahasa Inggris Oleh Soendani, UGM PRESS, Jogjakarta.
Yosiva,  L.  S., Perbandingan  Efektivitas  Analgetik  Ekstrak  Daun  Pepaya  (Carica Papaya L.) dan Ekstrak Batang Brotowali (Tinospora Crispa (L.) Miers) Pada Mencit Jantan (Mus Musculus ) , Akademi Farmasi Alfatah,  Bengkulu.