MODIFIKASI ELEKTRODA PASTA KARBON DENGAN ETER MAHKOTA (DIBENZO-18-CROWN-6) UNTUK ANALISIS ASAM ASKORBAT SECARA VOLTAMETRI PULSA DIFERENSIAL
(MODIFICATION OF CARBON PASTE ELECTRODE WITH CROWN ETHER (DIBENZO-18-CROWN-6) FOR ASCORBIC ACID ANALYSIS USING DIFFERENTIAL PULSE VOLTAMMETRY METHOD)
Irdhawati * , Manuntun Manurung, dan Anisha Maulinasari
Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana Jl. By Pass Ngurah Rai Jimbaran Bali 80361 Indonesia Telp. +62-361-701964 Ext. 255
*e-mail: irdhawati@unud.ac.id
Received 4 February 2015, Accepted 8 June2015, Published 01 September 2015

## ABSTRAK
Pada  penelitian  ini  telah  dibuat  elektroda  pasta  karbon  yang  dimodifikasi  eter mahkota  untuk analisis  asam  askorbat,  menggunakan  metode  voltametri. Parameter  yang diamati  meliputi  optimasi  komposisi  eter  mahkota  dalam  pasta  karbon,  optimasi  pH larutan,  rentang  konsentrasi  linear  dan  limit  deteksi  pengukuran,  keberulangan  (presisi), dan  penentuan persen  perolehan  kembali  (akurasi).  Elektroda  pasta  karbon  termodifikasi eter  mahkota  pada  kondisi  pengukuran  optimum  digunakan  untuk  menentukan  kadar sampel  yang  mengandung  vitamin  C  yang  beredar  di  pasaran.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi eter mahkota optimum adalah 0,6 % dari berat grafit dan pH  larutan  optimum  pada  pH  4.  Rentang  konsentrasi  linear  diperoleh  dari  2 - 200  μM, dengan  limit  deteksi  1,243 μM,  persen  perolehan  kembali  sebesar  101,31 %,  dan keberulangan  hasil  pengukuran  yang  baik  yang  ditunjukkan  oleh  nilai  HorRat  lebih  kecil dari  2.  Analisis  4  macam  sampel  vitamin  C  yang  beredar  di  pasaran  memberikan kesesuaian hasil antara 94 - 100 %.
Kata  kunci:  asam  askorbat,  elektroda  pasta  karbon,  eter  mahkota,  voltametri  pulsa diferensial

## ABSTRACT
In this research, the modified carbon paste electrode with crown ether (dibenzo-18- crown-6)  has  been prepared,  for  determination  of  ascorbic  acid.  Some  of parameters observed were optimization  of  crown  ether  composition  in  carbon  paste,  pH  of  solution, linear concentration range, limit of detection, reproducibility, and recovery. The optimum performance  of  the  prepared  electrode was  applied  for determination of commercialsampleswhich contain of ascorbic  acid.  The  result  of  this  research  showsthat the optimum composition of crown ether in carbon paste is 0.6 % at pH 4. Linear range of concentration obtained is from 2 - 200 μM . The detection limit and percentage of recovery are  1.243 μM  and  101 .31 %,  respectively.  The  modified  electrode  has  HorRat  value  less than 2, it indicates a  good  reproducibility.  Analysis  of  4  commercial samples which
contain of ascorbic  acid were  in  agreement  with  the  content  listed in the  label  with  the suitability of 94 - 100 %.
Keywords: ascorbic  acid,  carbon  paste  electrode,  crown  ether, differential  pulse voltammeter

## PENDAHULUAN
Asam  askorbat (AA) atau  vitamin  C  merupakan vitamin  yang  larut  dalam air  dan dibutuhkan  pada  proses  metabolisme, biosintesis  kolagen,  karnitin,  dan  berbagai neurotransmitter.  Banyaknya  manfaat  AA  untuk  tubuh  manusia  dengan  jumlah  tertentu menuntut adanya suatu analisis kuantitatif terhadap kontrol kualitas AA. Berbagai metode telah dilakukan untuk analisis kuantitatif AA, misalnya spektrofotometri (Aydogmus et al., 2002),  FIA  (Flow  Injection  Analysis)  (Grudpan et  al.,  1999),  titrasi  iodometri  (Harvey, 2000),  fluorometri  (Perez et  al.,  2001),  HPLC  (Kutnink et  al., 1987),  dan  GC/MS (Deutsch, 2002). Metode-metode  tersebut memerlukan waktu  yang  cukup  lama dan instrumennya  cukup  mahal,  walaupun  memiliki  sensitivitas  yang  baik.  Berdasarkan  hal tersebut  diperlukan  adanya  metode  alternatif  yang  memudahkan  untuk  identifikasi  AA, antara  lain dengan  menggunakan  metode  voltametri.  Voltametri  merupakan  salah  satu metode  elektroanalisis  yang  digunakan  untuk  mengetahui  informasi  elektrokimia  dari analit  dengan  cara  memberikan  potensial  sehingga  dapat  diketahui  hubungan  antara  arus yang  dihasilkan  terhadap  potensial  yang  diberikan. Keuntungan  dari  metode  ini diantaranya adalah kecepatan analisis, instrumentasi sederhana, dan murah (Wang, 1994).
Analisis  terhadap AA dengan teknik voltametri memerlukan elektroda kerja. Salah satu  elektroda  kerja yang sering digunakan  yaitu  elektroda  pasta  karbon.  Elektroda  ini memiliki beberapa kelebihan diantaranya kisaran potensial  yang lebar, arus dasar  rendah, murah  dan  cocok  untuk  berbagai  sensor  dan  aplikasi  deteksi. Kinerja  elektroda  pasta karbon dapat ditingkatkan dengan cara dimodifikasi secara kimia. Modifikasi secara kimia digunakan  untuk melindungi  dari  gangguan  oleh  ion  lainnya,  sehingga memiliki  respon elektroda yang stabil  (Wang,  1994).  Beberapa  elektroda  pasta  karbon untuk  analisis  AA yang  telah  dimodifikasi  secara  kimia sepertielektroda  pasta  karbon  termodifikasi cobalt phthalocyanine dengan limit deteksi 3,6904 µM (Wring et al., 1990).
Modifier yang sering digunakan pada elektroda pasta karbon adalah suatu senyawa pengompleks,  antara  lain eter  mahkota  (crown ether). Eter  mahkota  dapat  membentuk kompleks  dengan  sejumlah  kation  termasuk  ion  logam  alkali sepeti  kalium  dan  natrium, dan  juga NH 4 + . Eter  mahkota  dapat  mengikat  logam  dan  kation  amonium  organik,  jika
suatu molekul/ion masuk ke dalam rongga makrosiklik. Beberapa penulis telah melaporkan bahwa eter mahkota mengandung oksigen yang mampu membentuk kompleks dengan ion logam transisi, meskipun ikatannya lemah, namun digunakan dalam pembuatan elektroda selektif  ion.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ada  korelasi  antara  jari-jari  kavitas (cavity) dengan jari-jari kation logam alkali dan alkali tanah (Lamb et al., 1979).
Arus  puncak  dalam  analisis  senyawa  elektroaktif  dipengaruhi  oleh  pH  larutan analit. AA merupakan senyawa hidroksil yang bersifat asam dengan pKa 1 = 4,17 dan pKa 2 = 11,5. Hal  ini  disebabkan  AA  memiliki  ikatan  rangkap  terkonjugasi  dan  bentuk resonansinya  sebagai  anion  terdeprotonasi  yang  sangat  stabil.  Sensivitas  yang  tinggi  dari AA  akan  terjadi  pada  pH  disekitar  nilai  pKa-nya.  Tetapi  dengan  adanya  modifikasi elektroda pasta karbon menyebabkan terjadinya pergeseran potensial puncak oksidasi AA (Raoof et  al., 2007). Oleh  karena  itu,  optimasi pH  larutandiperlukan  dalam  penelitian  ini untuk mendapatkan kondisi optimum oksidasi elektrokatalitik dari AA.
Pada penelitian ini akan dilakukan pembuatan elektroda pasta karbon termodifikasi eter  mahkota  untuk  analisis  kuantitatif  AA secara differential pulse voltammetry (DPV). Elektroda  pasta  karbon  termodifikasi  dibuat  dengan  mencampurkan  grafit,  paraffin cair, dan eter mahkota (dibenzo-18-Crown-6). Grafit digunakan sebagai bahan elektroda karena mempunyai  daya  hantar listrik  yang  baik,  bersifat  inert, dan  memiliki  rentang  potensial yang lebar. Parafin cair digunakan  sebagai  pengikat  karena  dalam  pengukuran  tidak  ikut bereaksi  (inert)  dan stabil  dalam  campuran  (Svancara et  al.,  2002). Penggunaan  eter mahkota  yang sebelumnya  hanya  digunakan sebagai modifier dalam analisis logam alkalidan  ion  logam  transisi,  diharapkan  dapat  digunakan  sebagai modifier untuk  analisis senyawa organik seperti asam askorbat. Sifat semi polar yang dimiliki dibenzo-18-Crown- 6  merupakan  senyawa  yang  baik  untuk  antarfase  pada  permukaan  elektroda, diharapkan dapat menjerat/mengikat  AA.  Elektroda  ini diharapkan memiliki nilai limit  deteksi  yang rendah.

## METODE PENELITIAN
Bahan-bahan  yang  digunakan dalam  penelitian  ini adalah asam  askorbat  (Wako), dibenzo-18- crown-6 (Wako), serbuk  grafit  (Wako),  parafin cair (Wako),  KCl  (Merck), larutan  asam  asetat (Merck),  asam  borat (Merck),  dan  asam  fosfat (Merck),  K 3 Fe(CN) 6 (Merck) , K 4 Fe(CN) 6 (Merck),  dan  air  suling. Adapun  peralatan  yang  digunakan diantaranya: potensiostat (Ingsens  1030), adaptor DC  12  V, elektroda  Ag/AgCl  (KCl  0,1 M)  sebagai  elektroda  pembanding,  elektroda  platina  sebagai  elektroda  pembantu,
seperangkat  pHmeter digital (Mother  tool  PH-230SD),  neraca  analitik (Shimadzu), pengaduk magnetik (Thermoline), pipet mikro 100 - 1000 uL (Socorex), pipet mikro 10 - 100 uL (Biohit), pipet mikro 0,5 - 10 uL (Biohit), kawat tembaga, tabung elektroda mikro (Pyrex), dan peralatan gelas yang umum digunakan.

## Pembuatan buffer Britton-Robinson 0,1 M
Pembuatan  larutan  buffer  Britton  Robinson 0,1  M dilakukan dengan mencampur masing-masing 0,025 mol asam borat, asam asetat, dan asam ortofosfat dilarutkan dengan akuades dalam labu 250 mL. Campuran larutan dibuat dengan pH 2 - 12 dengan pengatur pH menggunakan larutan NaOH 0,1 M.

## Pembuatan Elektroda Kerja

## Gambar 1. Konstruksi elektroda pasta karbon.
Kawat  tembaga  (Cu)  dengan  selubung  plastik  berdiameter  1  mm  dipotong sepanjang 5 cm. Kawat tembaga ini dimasukkan ke dalam elektroda yang terbuat dari kaca dan  disisakan  sedikit  ruang  untuk  tempat  pasta  pada bagian  bawah  ± 5  mm kemudian direkatkan.  Elektroda  pasta  karbon  dibuat  dengan  menyiapkan  100  mg    grafit  dan  35  µL parafin cair, sedangkan eter mahkota komposisinya dibuat dengan variasi 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 1,2;  dan 1,4 %  dari  berat  grafit. Karbon  grafit,  liquid  parafin,  dan  eter  mahkota ditempatkan dalam mortar  kemudian  digerus sampai  terbentuk  pasta karbon  yang homogen. Pasta karbon yang terbentuk kemudian ditekan secara manual ke dalam lubang di  bagian  bawah  elektroda. Selanjutnya  elektroda  digosok pada  kertas  timbang  sampai permukaannya  halus  dan  rata. Konstruksi  elektroda  pasta  karbon  ditunjukkan  pada Gambar 1.

## Penentuan Komposisi Optimum Modifier Eter Mahkota
Penentuan komposisi modifier yang paling optimum dalam analisis asam askorbat dilakukan  dengan  metode  DPV  dengan  elektroda  pasta  karbon  yang  dimodifikasi digunakan  sebagai  elektroda  kerja  (W). Elektroda  pasta  karbon  yang  termodifikasi
dibenzo-18-crown-6 dimasukkan  ke  dalam  sel  voltametri  yang  berisi  5  mL  larutan  asam askorbat 1 mM dalam larutan KCl 0,1 M lalu dilakukan pengukuran arus pada potensial - 200 mV  sampai  800  mV dengan kecepatan scan 0,1  V/detik. Arus  puncak  voltamogram dihubungkan  terhadap  komposisi  dibenzo-18-crown-6 untuk  mengetahui komposisi dibenzo-18-crown-6 yang menghasilkan arus optimum.

## Penentuan  pH  Optimum  Analisis  Asam  Askorbat  dengan  Elektroda  Pasta  Karbon Termodifikasi Eter Mahkota
Penentuan pH  optimum  dalam  analisis  asam  askorbat  dengan  elektroda  pasta karbon dengan  komposisi modifier optimum dilakukan  dengan membuat 10 mL  larutan induk asam askorbat 10 mM. Larutan buffer Britton-Robinson dibuat dengan pH bervariasi dari 2-12. Sebanyak 5 mL larutan uji berupa AA 1 mM dalam larutan buffer dengan pH 2, 3,  4,  5,  6,  7,  8,  9,  10,  11,  dan  12. Larutan  uji  dimasukkan  ke  dalam  sel  voltametri. Pengukuran  dilakukan  dengan  metode DPV. Elektroda  yang  digunakan  adalah  elektroda Ag/AgCl sebagai elektroda pembanding, platina (Pt) sebagai pembantu dan elektroda pasta karbon dengan modifier optimum sebagai elektroda kerja.

## Penentuan Rentang Konsentrasi Linear dan Limit Deteksi
Pengukuran  rentang  konsentrasi  linear  dan  limit  deteksi  dilakukan dengan menggunakan  metode  DPV.  Pengukuran rentang  konsentrasi linier  diamati  dengan mengukur arus larutan asam askorbat dalam rentang konsentrasi 2, 5, 10, 20, 50, 100, dan 200 µM pada kondisi pH optimum dan komposisi elektroda pasta karbon dengan modifier optimum. Data voltamogram  larutan  standar  asam  askorbat  diolah  untuk  mendapatkan persamaan garis regresi linier.
Konsentrasi  asam  askorbat  sampel  diperoleh  dengan  mencari  rata-rata   x dan standar deviasi (SD) dihitung dengan persamaan (1) dan persamaan (2).
n x x i  
(1)
dan
  1 n x xi SD 2     (2)
Limit  deteksi  pengukuran  sebagai  konsentrasi  terkecil  yang  masih  memberikan sinyal  analit yang  dapat  terukur  oleh  instrumen  dapat  ditentukan  dengan  persamaan berikut.
      b S 3 LD dan x - x n x 2 n y ˆ - y S δ 2 i 2 i 2 i δ         (3)
Keterangan:
b = slope

## Penentuan Keberulangan Elektroda
Keberulangan pengukuran  dilakukan  dengan  mengukur  arus  puncak  larutan AA 1 mM  sebanyak  10  kali pada  kondisi  pH  optimum dan komposisi elektroda  pasta  karbon dengan modifier optimum. Presisi  dalam  hal  keberulangan  diukur  dengan  menghitung relative  standard  deviation (RSD R )  atau  simpangan  baku  relatif  dari  beberapa  ulangan dengan menggunakan persamaan (4).
100% x SD SD R   R (4)
Nilai    presisi    pengukuran  dihitung    dari    hasil    bagi    nilai  RSD    dengan    nilai konsentrasi rata-rata dari  10  kali  pengulangan  pengukuran menggunakan nilai Horwitz (PRSD R ) yang dihitung dengan persamaan (5).
LogC) (0,5 (1 R 2 PRSD    (5)
Keterangan:
C : konsentrasi
Nilai HorRat dihitung menggunakan persamaan berikut (6) (AOAC, 2004).
R R PRSD RSD HorRat  (6)

## Penentuan Persen Perolehan Kembali
Larutan asam askorbat yang konsentrasinya telah diketahui dan berada pada daerah kurva  kalibrasi  standar  asam  askorbat diukur  untuk mengetahui  nilai persen  perolehan kembali. Perbandingan  konsentrasi  yang  diperoleh  dari  hasil  pengukuran  dengan konsentrasi sebenarnya memberikan nilai persen perolehan kembali. Nilai yang mendekati 100 % menunjukkan akurasi pengukuran yang baik.

## Analisis Asam Askorbat pada Sampel
Analisis  AA  dilakukan  pada  sampel  obat  dan  minuman  yang  dijual  di  pasaran. Sampel obat yang digunakan dalam  penelitian  ini  adalah Sampel komersial A, B, C, dan D. Pengukuran    kadar    sampel  dihitung  dengan  membuat  kurva  adisi  standar    yaitu    plot
antara arus  yang dihasilkan terhadap konsentrasi larutan standar yang ditambahkan. Nilai yang mendekati 100 % menunjukkan akurasi pengukuran yang baik.

## PEMBAHASAN

## Penentuan Komposisi Optimum Modifier Eter Mahkota
Senyawa yang digunakan untuk modifikasi elektroda pasta karbon adalah dibenzo- 18-crown-6  (eter  mahkota). Dibenzo-18-crown-6merupakan  salah  satu  jenis eter  mahkota secara  umum  yang  dapat  menyerap  ion  logam  golongan  I  utama  seperti  K + dan  Na + . Dibenzo-18-crown-6  sebagai    modifier    elektroda    pasta    karbon    memberikan    pengaruh terhadap  voltamogram AA  disebabkan  adanya  dua  benzena  yang  akan  mengurangi kepolaran  dari  eter  mahkota  sehingga  memudahkan tersolvasi dalam  parafin.  Pengaruh penambahan modifier dipelajari dengan membandingkan voltamogram dari elektroda pasta karbon  tanpa  dan  termodifikasi  dibenzo-18-crown-6. Komposisi dibenzo-18-crown-6 dibuat dengan variasi 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 1,2; dan 1,4 % dari berat grafit yang digunakan dalam pembuatan  elektroda  pasta  karbon.  Larutan  uji  yang  digunakan  dalam pengukuran adalah AA  dengan  konsentrasi  1 mM  dalam  larutan  KCl  0,1  mM.  Hasil  pengukuran ditunjukkan pada Gambar 2.
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 A ru s /  Potensial / V Blank 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4
Gambar 2. Voltamogram DPV AA dengan elektroda  pasta  karbon tanpa dan
termodifikasi dibenzo-18-crown-6.
Plot  antara  komposisi dibenzo-18-crown-6 ether dalam  elektroda  pasta  karbon dengan arus puncak yang dihasilkan terdapat pada Gambar 3.
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 6 7 8 9 10 11 12 13 Ar u s P u n ca k ( u A ) Komposisi Crown Ether / %
Gambar 3. Plot hubungan antara variasi komposisi dibenzo-18-crown-6 dengan arus puncak.
Gambar 3 menunjukkan  bahwa  elektroda  pasta  karbon  tanpa  modifikasi  dibenzo- 18-crown-6  memberikan  arus puncak  yang  lebih  rendah  dalam pengukuran  larutan  yang mengandung  AA 1  mM  yaitu 6,346 µA,  sedangkan  pada  voltamogram  elektroda  pasta karbon  termodifikasi dibenzo-18-crown-6 sebesar 0,6 %  memberikan  respon  arus  puncak paling tinggi terhadap larutan  yang mengandung AA 1 mM, yaitu 12,461 µA.
O O O O O O KCl O O O O O O K +
Gambar 4. Reaksi dibenzo-18-crown-6 dengan larutan KCl.
Gambar 4 menunjukkan bahwa dibenzo-18-crown-6 mampu  membentuk kompleks dengan  AA yang  disebabkan  adanya  kation  K + yang  berasal  dari  larutan  KCl.  Adanya interaksi  ion  dipol  kation  K + dalam  rongga dibenzo-18-crown-6 membentuk  ikatan  ion yang  bersifat  lemah  dengan  ion  AA. AA  teradsorpsi pada  permukaan  elektroda  dan memberikan respon    arus    puncak  dengan  potensial  154  mV  vs Ag/AgCl  (KCl 0,1  M). Puncak arus pada pengukuran merupakan arus yang timbul pada proses oksidasi AA.
Peningkatan  arus  puncak  terjadi  akibat  peningkatan  jumlah  transfer  elektron  dari AA  yang  dimediasi  oleh dibenzo-18-crown-6.  Penurunan  arus  puncak  pada  konsentrasi dibenzo-18-crown-6 lebih  dari  0,6 %  disebabkan makin  tinggi  konsentrasi  dibenzo-18- crown-6  akan  menutupi  grafit  sehingga  konduktivitasnya menurun  (Balal et  al.,  2009).
Penurunan  ini  juga  bisa  disebabkan  karena  berkurangnya  jumlah  grafit  di  permukaan elektroda  dengan  penyisipan dibenzo-18-crown-6.  Keberadaan dibenzo-18-crown-6 akan merenggangkan  jarak  antara  partikel  grafit  sebagai  penghantar  elektron.  Efektivitas elektrokatalitik  tidak  hanya  dipengaruhi  oleh  luas  permukaan  elektroda,  tetapi  juga  jarak antar  partikel  konduktor.  Laju  transfer  elektron  menurun  akibat  merenggangnya  jarak partikel konduktor (Adekunle, 2010). Penurunan arus puncak di bawah 0,6 % disebabkan sedikitnya jumlah dibenzo-18-crown-6-K + , sehingga kompleks yang terbentuk dengan ion AA sedikit dan menghasilkan arus puncak yang rendah.
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 A rus /  A Potensial / V 0% 0,6%
Gambar 5. Perbandingan voltamogram DPV EPK tanpa dan dengan dibenzo-18-crown-6.
Gambar 5 menunjukkan bahwa elektroda dengan komposisi termodifikasi dibenzo- 18-crown-6 sebesar 0,6 % memiliki potensial puncak 154 mV dengan arus puncak 12,461 µA, sedangkan elektroda tanpa modifikasi memiliki potensial puncak 288 mV dengan arus puncak  6,346 µA. Potensial  puncak  elektroda termodifikasi  dibenzo-18-crown-6 sebesar 0,6 % bergeser  ke  kiri  dibandingkan  dengan  elektroda  tanpa  modifikasi.  Hal  ini menunjukkan dibenzo-18-crown-6 berfungsi  sebagai  media  transfer  elektron  yang  dapat menurunkan  potensial  oksidasi  AA.  Elektroda  termodifikasi memberikan  respon  arus puncak  yang  lebih  tinggi  bila  dibandingkan  elektroda tanpa  termodifikasi.  Hal  ini menunjukkan bahwa  elektroda termodifikasi dibenzo-18-crown-6 sebesar 0,6 % memiliki sensitivitas  yang  tinggi  untuk  analisis  AA. Dengan  demikian, elektroda    pasta  karbon termodifikasi termodifikasi menghasilkan sensitivitas yang lebih tinggi dibandingkan tanpa modifikasi untuk analisis AA secara DPV.

## Penentuan pH Optimum Pengukuran
Elektroda  pasta  karbon  termodifikasi  dibenzo-18- crown-6 sebesar 0,6 % digunakan  untuk menentukan  kondisi  optimum analisis  AA.  Pengukuran  AA  dilakukan dengan metode DPV. Kondisi pH berpengaruh terhadap pembentukan kompleks antara AA dengan dibenzo-18-crown-6. Pada kondisi  pH  yang  tepat  diharapkan  semakin  banyak kompleks  yang    terjadi    pada    permukaan    elektroda    sehingga  akan  menghasilkan  arus puncak yang tinggi pada saat pengukuran.
O O O O O O O O O O O O Na + NaOH
Gambar 6. Reaksi dibenzo-18-crown-6 dengan NaOH dari Buffer.
Gambar 6 menunjukkan bahwa ion Na + yang berasal dari larutan buffer berinteraksi dengan dibenzo-18-crown-6 yang  akan  membentuk  kompleks  positif  membentuk  ikatan ion lemah terhadap ion AA. Hasil pengukuran ditunjukkan pada Gambar 7.
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 -2 0 2 4 6 8 10 12 14 16 A rus /  A Potensial / V pH2 pH3 pH4 pH5 pH6 pH7 pH8 pH9 pH10 pH11 pH12
Gambar 7. Voltamogram DPV AA dengan variasi pH larutan.
2 4 6 8 10 12 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Ar us punc ak /  A pH

## Gambar 8. Plot hubungan antara pH dengan arus puncak
Gambar  8  menunjukkan  bahwa arus  puncak  anodik  meningkat  dari  pH  2  menuju pH  4. Hal  ini  disebabkan  pada  pH 2  dan  3 kesetimbangan  dari  reaksi  akan  berpindah  ke arah kiri sehingga AA dalam bentuk molekul lebih banyak dari pada bentuk ionnya.Terlalu banyaknya H + pada  larutan  akan  mempengaruhi  pergerakan  kecepatan  transfer  ion sehingga tidak dapat menghasilkan arus yang optimum. Penurunan arus puncak di atas pH 4  disebabkan karena banyaknya  ion  OH - sehingga  bersaing  dengan  ion  AA  pada  larutan. Arus  puncak  optimum  diperoleh  pada  pH  4  karena  pada  kondisi  pH  yang  asam  tersebut AA berada  dalam bentuk  ion  bebasnya,  sehingga gugus-gugus  karboksilat  yang berinteraksi  dengan  ion  kompleks  positif dibenzo-18- crown-6-Na + pada    permukaan elektroda  membentuk  kompleks  dengan  dibenzo-18- crown-6. Pada kondisi pH optimum ini  analisis  AA  secara  DPV  menggunakan  elektroda  pasta  karbon  termodifikasi  dibenzo- 18- crown-6 memberikan arus puncak pada daerah potensial 214 mV vs Ag/AgCl (KCl 0,1 M), dengan arus puncak 15,108 µA.

## Daerah Konsentrasi Linear
Linearitas  adalah  kemampuan  metode  analisis menghasilkan respon  yang  secara langsung  proporsional  terhadap  konsentrasi  analit.  Linearitas  AA  ditentukan  dengan membuat deret larutan standar AA dengan konsentrasi 2, 5, 10, 20, 50, 100, dan 200 µM dalam  kondisi  optimum. Gambar  9  menunjukkan  semakin  tinggi  konsentrasi  semakin tinggi arus puncak yang dihasilkan.
-0.2 0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2  5 
10 
20  50  100  200  A rus /  A Potensial / V
Gambar 9. Voltamogram DPV pengukuran rentang konsentrasi linear dengan DPV
-50 0 50 100 150 200 0 2 4 6 8 10 A rus punc ak /  A Konsentrasi standar /  M Equation
y = a + b*x Adj. R-Squar 0.99986 Value Standard Error -- Intercept 1.0250 0.01693 -- Slope 0.0408 1.94537E-4

## Gambar 10. Plot hubungan konsentrasi dengan arus puncak.
Pada  Gambar 10 terlihat  rentang  linear  dari  konsentrasi 2-200  µM  AA  yang memberikan  intersep  sebesar 1,0251 dan  slope  sebesar 0,0408 sehingga  diperoleh persamaan  linear  y= 1,0251+0,0408x.  Pembuatan  kurva  linear  ini  bertujuan  untuk mengetahui daerah rentang kerja yang baik dari kelinearan standar dalam pengukuran AA. Rentang konsentrasi ini memiliki kolerasi  yang linear antara konsentrasi AA dengan arus yang dihasilkan, dengan nilai R 2 sebesar 0,99986. Hal ini didasarkan pada pendapat  Fisher
(1974)  yang  menyebutkan  bahwa  tingkat hubungan  nilai  korelasi  R  dengan rentang 0,80-1,0 memiliki  hubungan kelinearan yang sangat kuat.

## Limit Deteksi
Limit  deteksi  yang  diperoleh  dari  rentang  konsentrasi  linear  2-200  µM  yaitu sebesar 1,24 µM.  Ini  berarti  bahwa  AA  pada  konsentrasi  tersebut  masih  dapat  dibedakan dengan  blanko. Limit  deteksi  yang  diperoleh  lebih  rendah  jika  dibandingkan  dengan elektroda  pasta  karbon  dimodifikasi  secara  yaitu elektroda  pasta  karbon  termodifikasi cobalt  phthalocyanine dengan limit deteksi 3,6904 µM (Wring et al., 1990).

## Keberulangan Elektroda
Keberulangan  elektroda  pasta  karbon  termodifikasi  dibenzo-18- crown-6  dalam analisis  AA ditentukan  dengan  melakukan pengukuran  berulang  sebanyak  10  kali  secara terhadap  larutan  AA 1  mM  pada kondisi    optimum. Pengukuran dilakukan secara berulang  menggunakan 10  buah elektroda termodifikasi  yang  berbeda dengan kondisi larutan    dan    pengukuran  menggunakan  metode  DPV.  Hal  ini  dilakukan  untuk  melihat kestabilan  arus  puncak  yang  dihasilkan. Voltamogram  arus  puncak  hasil  pengukuran ditunjukkan pada Gambar 11.
-0,2 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 0 5 10 15 20 25 A rus /  A Potensial / V 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Gambar 11. Voltamogram DPV keberulangan EPK termodifikasi dibenzo-18- crown-6.
Berdasarkan  pengukuran  keberulangan  seperti  yang  ditunjukkan  pada  Gambar  11 dapat  dilihat  bahwa  teknik  pengukuran  memberikan  hasil  yang  hampir  sama.  Kestabilan sinyal  dan  ketelitian  analitik  dari  teknik  pengukuran  ini  dapat  dilihat  dari  standar  deviasi
yang diperoleh. Nilai RSD R yang diperoleh sebesar 0,42 % sedangkan PRSD R sebesar 5,66 %.  Dari  hasil  tersebut nilai  HorRat  yang  diperoleh  sebesar  0,0742 tampak  bahwa nilai HorRat hasil pengukuran  dengan metode ini lebih  kecil dari 2.

## Perolehan Kembali
Penentuan perolehan kembali bertujuan untuk mengetahui keakuratan hasil analisis. Penentuan  nilai  persen  perolehan  kembali  dilakukan  dengan  mengukur  larutan  standar yang  telah  diketahui  konsentrasinya  dan  berada  pada  rentang  konsentrasi  dari  kurva kalibrasi  yang  dimiliki. Perolehan  kembali  ditentukan  dengan  mengukur  larutan  standar AA  100 µM  dengan  ulangan  sebanyak  3  kali.  Kurva  kalibrasi  larutan  standar  yang digunakan  adalah  kurva  pada  Gambar 10 dengan  persamaan  regresi  linear  yaitu  y= 1,02505+0,0408x dan nilai R 2 = 0,99986. Pada  persamaan  tersebut  dapat  dihitung  kadar AA dari    larutan    standar AA100 µM    dengan    memasukkan    nilai    arus    ke    dalam persamaan  regresi.  Perolehan  kembali  juga  dapat  dihitung  dengan  membagi konsentrasi hasil pengukuran dengan kadar standar yang sudah diketahui dikalikan 100 %. Hasil yang diperoleh  dari perolehan  kembali  larutan  standar AA dengan    konsentrasi AA 100 µM adalah 101,31 % dan hasil pengukuran pada Tabel 1.

## Tabel 1. Hasil pengukuran arus puncak larutan standar AA 100 µM
Pengulangan Arus Puncak (µM) Perolehan kembali (%) 1 5,183 101,91 2 5,159 101,32 3 5,134 100,71
Perolehan  kembali  yang  baik  untuk  larutan  dengan  konsentrasi 100 µM  adalah  pada rentang 80-110 % yang dijelaskan dalam AOAC (1998). Jadi hasil yang diperoleh dengan metode ini sangat akurat.

## Analisis Sampel
Analisis sampel ditentukan dengan mengukur kadar AA pada sampel yang dijual di pasaran. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah sampel AA berupa tablet dan minuman. Pengukuran  dilakukan  sesuai  dengan  kondisi  optimum  yang  diperoleh  pada tahapan penelitian sebelumnya. Pengukuran kadar sampel dihitung dengan membuat kurva adisi standar yang ditambahkan yaitu plot antara arus yang dihasilkan terhadap konsentrasi
larutan standar. Kesesuaian hasil dapat dihitung dengan membagi kadar hasil pengukuran dengan kadar dalam label dikalikan 100 %.
-50 0 50 100 150 200 -0.5 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 Hemaviton C1000 Xon-Ce Enervon C Orange Water A rus punc ak /  A Konsentrasi /  A
Gambar 12. Plot hubungan konsentrasi dengan arus puncak sampel.
Pengukuran    terhadap  sampel  AA  yaitu  sampel A, B,  C,  dan D dilakukan  dengan metode voltametri    pulsa    diferensial. Hasil    pengukuran  kadar  AA  pada  sampel  obat pasaran dapat dilihat pada Tabel 2. Dari persen kesesuaian yang diperoleh masing-masing sampel mendekati kadar pada label sampel.
Tabel 2. Pengukuran hasil perolehan kembali sampel AA dengan standar adisi
Sampel Konsentrasi pada Label (µM) Konsentrasi Hasil Pengukuran (µM) Kesesuaian Hasil (%) A 50 48 96 B 50 49 98 C 50 47 94 D 50 50 100

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil dari penelitian dan pembahasan di atas, maka dapat ditarik suatu simpulan bahwa komposisi  elektroda  pasta  karbon  termodifikasi  yang  terbaik  adalah komposisi  dengan dibenzo-18-Crown-6  sebesar  0,6 %  dari  berat grafit dalam  buffer Britton-Robinson  pH  4. Rentang konsentrasi  linear  pengukuran AA menggunakan elektroda pasta karbon termodifikasi dibenzo-18-crown-6 adalah pada rentang konsentrasi
2-200  µM dan  limit  deteksi sebesar 1,243 µM. Elektroda  pasta  karbon  termodifikasi dibenzo-18-Crown-6 memiliki  keberulangan  yang  baik  (reprodusibel)  dalam  analisis AA secara DPV dengan nilai persen RSD R yang diperoleh sebesar 0,42 % sedangkan PRSD R sebesar 1,41 %. Persen  perolehan  kembali  yang  dimiliki  EPK  termodifikasi  dibenzo-18- Crown-6 secara  DPV sangat  baik  yaitu sebesar  101,31 %. Analisis  AA  pada  sampel produk  di  pasaran  yang  mengandung  AA  dengan  menggunakan  EPK  termodifikasi dibenzo-18-Crown-6 secara DPV menghasilkan persen kesesuaian masing-masing sebesar A 96 %; B 98 %; C 94 %; dan D 100 %.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  menyampaikan  terima  kasih  kepada  Dirjen  Dikti  atas  Hibah  Penelitian Fundamental dengan nomor kontrak 175A.6/UN14.2/PNL.01.03.00/2013.

## DAFTAR PUSTAKA
Adekunle,  A.  S.,  2010, Electrochemical  and  Electrocatalytic  Properties  of  Carbon Monotubes Integrated with Selective Metal and  Metal Oxide Nanoparticle, Ph. D. Thesis, University of Pretoria, Pretoria .
AOAC (Association of Official Analytical Chemist), 2004, Definitions  and  Calculations of    Horrat  Values    from Intralaboratory Data, AOAC  International,  MD, Gaithersburg.
AOAC (Association  of  Official  Analytical  Chemist), 1998, Peer-Verified  Methods Program Manual Policies and Procedures, AOAC International, MD, Gaithersburg Aydogmus, Z.,  Muge,  S.  C., and Ustun, M.O.,  2002,  Determination  of  Ascorbic  Acid  in Vegetables  by  Derivative  Spectrophotometry, Journal  of  the  Turkish  Chemical Society, vol. 26, pp. 697 – 704.
Balal, K., Mohammad, H., Baharer, B., Ali, B., Maryam, H., and Morgan, Z., 2009, Zeolite Nanoparticle modified Carbon Paste Electrode as  Biosensor  for  Determination  of Dopamine and Tryptophan, Journal of the Chinese Chemical Society, vol. 56, pp. 789-796.
Deutsch.  C. J.,2002,  Ascorbic  Acid  and  Dehydroascorbic  Acid  Interconversion  without Net Oxidation or Reduction, Analytical Biochemistry, vol. 247, no. 1, pp. 58-62.
Fisher,  R.  A.  and  Yates,  F.,  1974, Statistical  Tables  for  Biological,  Agricultural,  and

## Medical Research, Hafner, New York
Grudpan, K., Kamfoo, K., and Jakmunee,J., 1999, Flow Injection of Spectrophotometric or Conductometric Determination  of  Ascorbic  Acid  in  a  Vitamin  C  Tablet  using Permanganate or Ammonia, Talanta, vol. 49, no. 5, pp. 1023 – 1026.
Harvey, D., 2000, Modern Analytical Chemistry, The McGraw-Hill Companies Inc., New York.
Kutnink,  M.  A.,  and  Omaye,  S.  T.,  1987,  Determination  of  Ascorbic  Acid,  Erythorbic Acid, and Uric Acid in Cured Meats by High Performance Liquid Chromatography, Journal of Food Science, vol. 52, no. 1, pp. 53-56.
Lamb,  J.  D.,  Izatt,  R.  M.,  Christensen,  J.  J.,  and  Eatough,  D.  J.,  1979, Coordination Chemistry of Macrocyclic Compounds, Plenum, New York.
Raoof,  J.B.,  Ojani,  R.,  and  Beitollahi,  H.,  2007,  Electrocatalytic    Determination    of Ascorbic    Acid    at    Chemically  Modified    Carbon    Paste    Electrode  with    2,7-bis (Ferrocenyl  ethynyl)  Fluoren-9-one, International  Journal  of  Electrochemical Science, vol. 2, pp. 534 – 548.
Svancara,  I.,  Ogorevc,    B.,    Hocevar,    S.B.,    and    Vytras,    K.,    2002,    Perspectives    of Carbon  Paste  Electrodes  in  Stripping  Potentiometry, Analytical Sciences, vol. 18, pp. 95-100.
Perez, R. T., Martínez, L.C., Tomás,  V., and Fenol,  J.,2001,  Fluorimetric Determination of Total Ascoric Acid by a Stopped-flow Mixing Technique, Analyst, vol. 126, no. 8, pp. 1436-1439.
Wang, J., 1994, Analytical Electrochemistry, VCH Publisher, New York.
Wring, Stephen A., Hart, J. P., andBirch, B. J., 1990, Voltammetric Behaviour of Ascorbic Acid  at  a Graphite-Epoxy  Composite  Electrode  Chemically  Modified  with  Cobalt Phthalocyanine and its Amperometric Determination in Multivitamin Preparations, Analytica Chimica Acta, vol. 229, pp. 63-70.