Aktivitas Larvasida Ekstrak Etanol Daun Ceremai (Phyllanthus acidus ) Terhadap Larva Culex quinquefasciatus Instar III/IV
The Larvacidal Activity of Ethanol Extracts of Phyllanthus acidus Leaves on The Culex quinquefasciatus Instar III/IV Larvae
Afifatun Hasanah 1 , Bagus Hermansyah 2 , Cholis Abrori 3
1 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran Universitas Jember
2 Laboratorium Parasitologi, Fakultas Kedokteran Universitas Jember
3 Laboratorium Farmakologi, Fakultas Kedokteran Universitas Jember Alamat email korespondensi afifatunhasanah@yahoo.com

## ABSTRAK
Culex quinquefasciatus merupakan salah satu vektor penyakit filariasis yang disebabkan oleh infeksi cacing filaria. Cara penularannya  melalui gigitan nyamuk  yang mengandung cacing filaria .  Untuk mengatasi masalah dalam hal membasmi larva nyamuk yaitu dengan cara mencari bahan hayati yang aman untuk manusia dan lingkungan, salah satunya  dengan  daun  ceremai  ( Phyllanthus  acidus ). Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  apakah  ekstrak etanol daun ceremai memiliki aktivitas larvasida terhadap larva Culex quinquefasciatus instar III/IV dan mengetahui lethal concentration 50 (LC 50 ) ekstrak etanol daun ceremai terhadap larva Culex quinquefasciatus instar III/IV dalam 24  jam.  Penelitian  ini  menggunakan  metode true  experimental dengan  rancangan post  test  only  controlled  grup design dengan  1  kelompok  kontrol  positif  ( Temephos ),  1  kelompok  kontrol  negatif  (Aquades  dan  DMSO),  dan  5 kelompok  perlakuan  (ekstrak  0,0625%;  0,125%;  0,25%;  0,5%;  dan  1%)  masing-masing  20  ekor  larva Culex quinquefasciatus instar III/IV. Hasil uji regresi inverse untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun ceremai terhadap kematian  larva Culex  quinquefasciatus diperoleh  hasil  R 2 =  0909  yang  berarti  pengaruh  ekstrak  daun  ceremai terhadap  jumlah  kematian  larva Culex  quinquefasciatus sebesar  90,9%.  Hasil  uji  probit  didapatkan  hasil  LC 50 sebesar 0,189% dengan interval kepercayaan 95% (0,142%-0,233%).
Kata kunci : ekstrak etanol daun ceremai, filariasis, larva Culex quinquefasciatus

## ABSTRACT
Culex  quinquefasciatus  was  one  of  a  vector  of  filariasis  disease  caused  by  filarial  worm  infection.  Mode  of transmission  was  through  mosquito  bites  that  contain  filaria  worm.  To  overcome  the  problem  in  terms  of eradicating the mosquito larvae  was by searching for safe biological materials for humans and the environment, one  of  them  was  Phyllanthus  acidus  leaves.  The  purposes  of  this  research  were  to  know  whether  the  ethanol extract  of Phyllanthus acidus leaves have larvicidal activity on Culex quinquefasciatus instar  III / IV larvae and to know  the  lethal  concentration  50  (LC 50 )  ethanol  extract  of  Phyllanthus  acidus  leaves  on  Culex  quinquefasciatus instar III / IV larvae within 24 hours. This study used true experimental method with post test only controlled group design with 1 positive control group (Temephos), 1 negative control group (Aquades and DMSO), and 5 treatment groups (0.0625%; 0.125%; 0.25%, 0.5% and 1% extract) respectively 20 Culex quinquefasciatus instar III/IV larvae. The  result  of  regression  test  of  inverse  to  know  the  effect  of  leaf  extract  of  ceremai  to  the  death  of  Culex quinquefasciatus  larvae  obtained  R 2 =0909  which  was  mean  the  effect  of  ethanol  extract  of  Phyllanthus  acidus leaves  to  the  number  of  the  death  of  Culex  quinquefasciatus  larvae  equal  to  90.9%.  The  result  of  probit  test obtained LC 50 result of 0.189% with 95% confidence interval (0.142% -0.233%).
Keywords: ethanol extract of Phyllanthus acidus leaves, filariasis, Culex quinquefasciatus larvae

## Pendahuluan
Culex quinquefasciatus merupakan salah satu vektor penyakit  filariasis  atau  biasa  disebut  kaki  gajah. Filariasis  merupakan  penyakit  menular  kronis  yang disebabkan  oleh  cacing  filaria Wuchereria  bancrofti, Brugia  malayi dan Brugia  timori yang  menular melalui gigitan nyamuk mengandung cacing filaria di dalam  tubuhnya. Culex  quinquefasciatus menyukai tempat-tempat  pembuangan  limbah  rumah  tangga sehingga    perlu  penanggulangan  penyakit  yang disebabkan oleh parasit ini.
Berdasarkan  Dinas  Kesehatan  Provinsi  dan  hasil survei di Indonesia, jumlah penderita filariasis tahun 2010-2016 mengalami peningkatan setiap tahunnya. Pada  tahun  2016,  kasus  filariasis  menurun  menjadi 13.009  dibandingkan  tahun  2015  dan  2014.  Lima provinsi dengan kasus  filariasis tertinggi pada  tahun 2016  yaitu  Nusa  Tenggara  Timur  (2.864),  Aceh (2.372),    Papua  Barat  (1.244),  Papua  (1.184)  dan Jawa Barat (955) (Kemenkes RI, 2016). Jumlah kasus filariasis di  Jawa Timur sampai tahun 2012 sebanyak 341  kasus  tersebar  di  32  kabupaten  pada  180 kecamatan  dan  259  desa.  Kasus  filariasis  terbanyak di  Kabupaten  Lamongan  56  kasus,  Kabupaten Malang 37 kasus dan Kabupaten Ponorogo 29 kasus (Dinkes  Jatim,  2013).  Jumlah  kasus  filariasis Kabupaten  Jember  tahun  2013  sebanyak  3  kasus  di wilayah  Puskesmas  Tempurejo,  Sumberbaru  dan Sumberjambe.  Walaupun  hanya  sejumlah  3  kasus namun  penyakit  ini  dapat  menyebabkan  kecacatan seumur hidup (Dinkes Jember, 2014).
Cara membasmi larva nyamuk salah satunya dengan mencari bahan hayati yang aman untuk manusia dan lingkungan.  Salah  satu  tanaman  yang  dapat digunakan  sebagai  larvasida  yaitu  daun  ceremai ( Phyllanthus  acidus )  yang  mempunyai  beberapa kandungan kimia yaitu saponin, flavonoid, tanin dan polifenol (Dalimartha, 1999). Senyawa-senyawa yang terdapat  dalam  ekstrak  daun  ceremai  mempunyai efek larvasida terhadap larva Aedes aegypti (Pratiwi dkk., 2013) dan larva Anopheles aconitus (Nirmawati, 2010).    Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  pengaruh  ekstrak  etanol  daun  ceremai ( Phyllanthus  acidus )  terhadap  kematian  nyamuk Culex quinquefasciatus .

## Metode Penelitian
Penelitian ini menggunakan metode true experimental dengan  rancangan post  test  only controlled group design . Sampel menggunakan larva
Culex quinquefasciatus instar III/IV yang dibagi dalam 7  kelompok  yaitu,  1  kontrol  positif  ( Temephos ),  1 kontrol  negatif  (Aquades  dan  DMSO),  dan  5 kelompok  perlakuan  (ekstrak  0,0625%,  0,125%, 0,25%, 0,5%, dan 1%) yang masing-masing kelompok diulang  sebanyak  4  kali.  Jumlah  sampel  larva Culex quinquefasciatus pada  masing-masing  kelompok adalah 20 ekor. Setelah 24 jam perlakuan, dilakukan observasi jumlah kematian larva Culex quinquefasciatus .  Kemudian  dilakukan  analisis  data dengan  uji  normalitas Shapiro-wilk ,  uji  regresi inverse dan uji probit.

## Hasil Penelitian
Setelah  perlakuan  selama  24  jam,  jumlah  kematian larva Culex quinquefasciatus masing-masing kelompok dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel  1  Jumlah  kematian  larva Ae.  aegypti setelah  24  jam perlakuan pada penelitian
Kelompok Perlakuan Rata- Rata±SD Persen Larva Mati (%) KP Temephos 1% 20 100% KN Aquades+DMSO 0 0% P1 Ekstrak 0,0625% 2±0,816 15% P2 Ekstrak 0,125% 9,75±1,708 48,75% P3 Ekstrak 0,25% 14±2,160 70% P4 Ekstrak 0,5% 17,5±1,291 87,5% P5 Ekstrak 1% 20 100%
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  pada  kontrol positif  yang  diberikan Temephos 1%  didapatkan jumlah  kematian  larva Culex  quinquefasciatus sebesar  100%  sedangkan  pada  kontrol  negatif  yang diberikan  aquades  dan  DMSO  tidak  didapatkan adanya  larva  yang  mati.  Pada  kelompok  perlakuan yang  diberi  ekstrak  etanol  daun  ceremai  dengan konsentrasi  0,0625%,  0,125%,  0,25%,  0,5%  dan  1% didapatkan jumlah kematian larva Culex quinquefasciatus yang  berbeda-beda  pada  tiap konsentrasi  pada  kelompok  perlakuan.  Grafik presentase  kematian    larva Culex  quinquefasciatus selama  24  jam  setelah  diberikan  perlakuan  dapat dilihat pada Gambar 1 berikut.
15 70 100 87,5 48.75 0 20 40 60 80 100 120 0,0625% 0,125% 0,25% 0,5% 1% Konsentrasi J u m la h K e m a ti a n L a r v a
Gambar 1. Persentase kematian larva Culex
quinquefasciatus
Analisis data dilakukan pada data hasil penelitian ini pada  kelompok  perlakuan  yang  diberikan  ekstrak etanol  daun  ceremai  dan  selanjutnya  dianalisis menggunakan  Software  SPSS  23 . Analisis  data pertama  yang  dilakukan  adalah  uji  normalitas menggunakan Shapiro-Wilk untuk  mengetahui distribusi  sebaran  data  penelitian.  Pada  P1,  P2,  P3, dan  P4  didapatkan  nilai  P>0.05,  yang  menunjukkan bahwa  distribusi  sebaran  data  normal.  Sedangkan pada  kelompok  perlakuan  P5,  yaitu  kelompok perlakuan  yang  diberikan  ekstrak  etanol  daun ceremai dengan konsentrasi 1% hasilnya tidak keluar dikarenakan hasil yang sama yang disebabkan semua larva mati (Dahlan, 2011). Hasil uji normalitas dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Tes normalitas Shapiro-Wilk
Konsentrasi Shapiro-Wilk Statistic df Sig. Kematian larva P1 (0.0625%) .950 4 .714 P2 (0.125%) .971 4 .850 P3 (0.25%) .927 4 .577 P4 (0.5%) .993 4 .972
a. Lilliefors Significance Correction b. Kematian_larva is constant when Konsentrasi = 1%. It has been omitted.
Analisis data kedua yang dilakukan adalah uji regresi inverse  untuk  mengetahui  pengaruh  konsentrasi ekstrak daun ceremai terhadap kematian larva Culex quinquefasciatus yang  didapatkan  hasil  persamaan inverse  dengan  R 2 =0,909  yang  menyatakan  bahwa pengaruh  konsentrasi  ekstrak  daun  ceremai terhadap  kematian  larva Culex  quinquefasciatus sebesar 90,9%. Berdasarkan grafik yang paling sesuai adalah  persamaan  regresi  inverse  dengan  y=18.55- 0.99x -1 .  Hasil  uji  regresi  inverse  dapat  dilihat  pada Gambar 2.
Gambar 2. Hasil persamaan uji regresi inverse
Analisis  data  selanjutnya  analisis  probit  untuk mengetahui  konsentrasi  ekstrak  daun  ceremai  yang dapat  membunuh  larva Culex  quinquefasciatus sebesar  50%.  Hasil  analisis  probit  didapatkan  nilai LC 50 sebesar  0,189%  dengan  tingkat  kepercayaan 95%  (0,142-0,233).  Hasil  uji  analisis Probit dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil uji analisis Probit Estimate Lower Bound Upper Bound .300 .073 -.002 .122 .350 .103 .038 .150 .400 .133 .075 .177 .450 .161 .110 .205 .500 .189 .142 .233 .550 .217 .173 .264 .600 .246 .202 .297

## Pembahasan
Hasil  penelitian  ini  untuk  menghitung  jumlah kematian  larva Culex  quinquefasciatus yang  telah diberikan  perlakuan  pada  masing-masing  kelompok selama  24  jam.  Pada  kelompok  kontrol  positif diberikan temephos 1%  (abate),  kelompok  kontrol negatif diberikan aquades dan DMSO dan kelompok perlakuan  yang  diberikan  ekstrak  etanol  daun ceremai  ( Phyllanthus  acidus )  dengan  konsentrasi 0,0625%, 0,125%, 0,25%, 0,5% dan 1%.
Pada  penelitian  ini,  untuk  membuat  larutan  yang sempurna  yaitu  ekstrak  daun  ceremai  dilarutkan dalam DMSO  menggunakan magnetic stirrer supaya dalam  pembuatan  larutannya  tidak  ada  yang menggumpal.  Dalam  pembuatan  larutan  yang  baik harus  homogen  dalam  pencampurannya  agar hasilnya  baik.  Apabila  dalam  pembuatan  larutannya sudah  tidak  larut  maka  nanti  akan  mempengaruhi dalam proses pembuatan larutan lainnya.
Pada  kelompok  kontrol  positif  diberikan  perlakuan temephos 1%  (abate).  Setelah  diberikan  perlakuan selama  24  jam,  didapatkan  hasil  bahwa Temephos dapat  membunuh  larva Culex  quinquefasciatus sebesar  100%. Temephos 1%  memiliki  kandungan organosfosfat  yang  dapat  menimbulkan  kematian larva. Temephos 1%  adalah  salah  satu  golongan pestisida  senyawa  phosphat  organik  yang  memiliki cara kerja dengan menghambat enzim cholineterase, sehingga  menyebabkan  gangguan  pada  aktivitas saraf karena tertimbunnya acetylcholine  pada ujung saraf (Perumalsam, 2009).
Pada  kelompok  kontrol  negatif  diberikan  aquades dan  DMSO.  Setelah  diberikan  perlakuan  selama  24 jam,  tidak  terdapat  larva Culex  quinquefasciatus yang  mati.  Pemberian  aquades  dan  DMSO  tidak memberikan  efek  apapun  terhadap  larva Culex quinquefasciatus. Dibuktikan  dengan  tidak  adanya kematian larva yang diberikan aquades dan DMSO.
Pada  kelompok  perlakuan  yang  diberikan  ekstrak etanol  daun  ceremai.  Setelah  diberikan  perlakuan ekstrak  etanol  daun  ceremai  selama  24  jam, terdapat  larva Culex  quinquefasciatus yang  mati sehingga  membutikan  bahwa  ekstrak  etanol  daun ceremai  memiliki  aktivitas  larvasida  terhadap  larva Culex  quinquefasciatus instar  III/IV . Daun  ceremai memiliki  kandungan  kimia flavonoid,  tanin,  saponin dan polifenol (Dalimartha,  1999) yang  dapat membunuh larva Culex quinquefasciatus.
Flavonoid  bekerja  sebagai  inhibitor  pernapasan. Flavonoid  memiliki  cara  kerja  dengan  memasuki tubuh  larva  melalui  sistem  pernapasan  yang kemudian  akan  menimbulkan  gangguan  pada  saraf serta  kerusakan  pada  alat  pernapasan  dan mengakibatkan  larva  tidak  bisa  bernapas.  Akibat masuknya  senyawa  flavonoid  melalui siphon , mengakibatkan  kerusakan  pada siphon sehingga larva  harus  mensejajarkan  posisinya  dengan permukaan  air  untuk  mempermudah  dalam  proses pengambilan oksigen (Puzi dkk., 2015).
Tanin bersifat mengganggu dalam proses pencernaan  karena  kemampuan  tanin  dalam mengganggu  proses  penggunaan  protein  di  dalam saluran  pencernaan  dan  juga  menyebabkan pertumbuhan  larva  menjadi  terganggu.  Kepahitan tanin  membuat  larva  memberikan  penolakan terhadap  makanan  dan  berujung  pada  rasa  lapar serta kematian (Hopkins dkk., 2004).
Saponin  memiliki  aktivitas  larvasida.  Saponin  yang masuk  dalam  larva  dapat  menurunkan  tegangan pada  permukaan  selaput  mukosa  traktus  digestivus larva  sehingga  dinding  traktus  digestivus  menjadi korosif. Apabila saponin masuk ke dalam tubuh larva maka sistem pencernaannya akan terganggu (Hayani dkk.,  2004).  Polifenol  adalah  senyawa  yang mempunyai  sifat  sebagai  inhibitor  pencernaan (Atmowidi, 2003). Apabila polifenol masuk ke dalam tubuh serangga, maka zat tersebut akan menurunkan kemampuan serangga dalam mencerna makanan (Nursal, dkk., 2003).
Berdasarkan  hasil  pengamatan  penelitian  ini,  gejala yang dapat dilihat pada larva Culex quinquefasciatus yang  mengalami  kontak  dengan  ekstrak,  yaitu  larva membersihkan  badannya  dengan  menggunakan mulut,  menggulung  badannya  dan  bergerak  naik turun  dengan  sangat  cepat.  Mortalitas  larva Culex quinquefasciatus menunjukkan  adanya  tanda-tanda seperti  larva  tidak  bergerak  ketika  diberi  sentuhan, tubuh  larva  berwarna  putih  atau  kuning  pucat, bentuk  tubuh  memanjang  dan  kaku  (Kaihena  dkk., 2011).
Hasil  regresi  inverse  dari  pengaruh  ekstrak  daun ceremai  adalah  sebesar  90,9%  pada  penelitian  ini. Peneliti  lain  yang  menggunakan  ekstrak  daun ceremai  terhadap  larva Anopheles  aconitus dengan hasil  regresi  linier  didapatkan  sebesar  99,4%  Yang membuktikan  bahwa  pengaruh  ekstrak  daun ceremai terhadap kematian larva Anopheles aconitus (Nirmawati, 2010) . Adapun penelitian lain menggunakan ekstrak daun rambutan yang memiliki kandungan senyawa saponin dan tanin memberikan pengaruh  ekstrak  terhadap  kematian  larva Culex quinquefasciatus dengan  hasil  uji  regresi  linier sebesar 76,8% (Lestari dkk., 2014). Pada peneliti lain yang  menggunakan  ekstrak  kulit  pisang  raja  diduga memiliki kandungan senyawa flavonoid dan saponin memberikan  pengaruh  ekstrak  terhadap  mortalitas larva Aedes aegypti didapatkan hasil uji regresi linier sebesar 97,4% (Jamal dkk., 2016). Hal ini dibuktikan bahwa  pada  kandungan  senyawa  yang  terdapat didalam daun ceremai memiliki aktivitas larvasida.
Pada  penelitian  ini  diperoleh  hasil  LC 50 sebesar 0,189%.  LC 50 adalah  konsentrasi  ekstrak  yang menyebabkan kematian larva Culex quinquefasciatus sebesar  50%.  Pada  konsentrasi Temephos yang dianjurkan  oleh  Kementerian  Kesehatan  yaitu 10gr/100liter atau 1 ppm yang dikonversikan dalam persen sebesar 0,0001% (Fuadzy, 2013). Penggunaan abate dengan konsentrasi 0,0001% dapat mematikan 100 persen  larva Culex quinquefasciatus lebih  cepat  dibandingkan  dengan  ekstrak  daun ceremai.  Hal  ini  terjadi  karena  dalam  penggunaan bahan  kimia  dapat  membahayakan  lingkungan maupun  manusia  apabila  digunakan  tidak  sesuai yang  diberikan  sedangkan  bahan  alami  yang  aman digunakan  bagi  lingkungan  maupun  manusia.  Oleh karea  itu,  ekstrak  daun  ceremai  memiliki  efek  yang lebih rendah dibandingkan abate (Betriyon, 2013).

## Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilaksanakan, dapat  diambil  kesimpulan  berikut.  Ekstrak  etanol daun ceremai ( Phyllanthus acidus ) memiliki aktivitas larvasida  terhadap  larva Culex  quinquefasciatus Instar  III/IV.  LC 50 ekstrak  etanol  daun  ceremai ( Phyllanthus
acidus ) untuk larva
Culex quinquefasciatus adalah konsentrasi sebesar 0,189%.

## Saran
Perlu  penelitian  lebih  lanjut  mengenai  penggunaan ekstrak  daun  ceremai  menjadi  produk  yang  lebih praktis sehingga dapat diterapkan kepada masyarakat.  Selain  itu,  perlu  penelitian  lebih  lanjut tentang kandungan kimia yang terdapat dalam daun ceremai  yang  mempunyai  peranan  besar  terhadap larvasida  dan  mengenai  uji  toksisitas  untuk mengetahui  pengaruh  ekstrak  daun  ceremai terhadap stadium lainnya.

## Daftar Pustaka
Atmowidi,  T.  2003. Mengapa  ditemukan  Anomali Keragaman  pada  Serangga. Makalah  Falsafah Sains,  13  November  2003,  Bogor:  Institut Pertanian  Bogor. http://rudyct.com/PPS702- ipb/07134/atmowidi.htm .  [Diakses  tanggal  9 Maret 2010].
Betriyon,  Yahya.  2013.  Potensi  Serbuk  Daun  Sirih ( Piper  betle,  Linn. )  Sebagai  Larvasida  Nyamuk
Aedes aegypti. Fokus Utama.
Dahlan, M. S. 2011. Statistika untuk Kedokteran dan Kesehatan .  Edisi  5.  Jakarta:  Penerbit  Salemba Medika.
Dalimartha,  S.  1999. Atlas  Tumbuhan  Obat Indonesia .  Jilid  I.  Trubus  Agriwidya.  Anggota IKAPI.  Jakarta:  PT.  Pustaka  Pembangunan Swadaya Nusantara.
Dinas  Kesehatan  Provinsi  Jawa  Timur.  2013. Profil Kesehatan  Jawa  Timur  Tahun  2012 .  Dinkes Jatim.
Fuadzy, H., D. N. Hodijah, A. Jajang dan M. Widawati. 2015.  Kerentanan  Larva Aedes  aegypti terhadap  Temefos  di  Tiga  Kelurahan  Endemis Demam  Berdarah  Dengue  Kota  Sukabumi .  Bul.
Penelit. Kesehat. 4(1). 41-46.
Hayani,  E.  dan  T.  Fatimah.  2004.  Identifikasi Komponen  Kimia  dalam  Biji  Mengkudu ( Morindacitrifolia ). Prosiding Temu Teknis Nasional  Tenaga Fungsional  Pertanian  Tahun
2004 .
Jamal,  S.  A.  N.,  A.  Sulisawaty  dan  Azriful.  2016.
Efektivitas  Larvasida  Ekstrak  Kulit  Pisang  Raja ( Musa  paradisiaca var.  Raja)  terhadap  Larva
Aedes sp. Instar III. Higiene. 2(2).
Kaihena,  M.,  V.  Lalihatu,  dan  M.  Nindatu.  2011. Efektivitas    Ekstrak  Etanol  Daun  Sirih  ( Piper betle L.)  terhadap  Mortalitas  Larva  Nyamuk
Anopheles  sp dan Culex  sp.  Moluccca  Medica. 4(1): 88-105.
Kementerian  Kesehatan  RI.  2016. Profil  Kesehatan Indonesia 2015. Jakarta: Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. Lestari,  D.,  A.  Nuryati,  dan  S.  Nuryani.  2014. Penggunaan  Berbagai  Konsentrasi  Ekstrak Ethanol Daun Rambutan ( Nephelium lappaceum  L .)  terhadap  Mortalitas  Larva Culex quinquefasciatus. Jurnal Teknologi Laboratorium. 3(1): 46-51 .
Nirmawati,  K.  2010.  Efek  Ekstrak  Daun  Ceremai ( Phyllanthus  acidus [L.]  Skeels)  terhadap Kematian  Larva Anopheles  aconitus in  Vitro.
Skripsi. Tidak dipublikasikan. Surakarta: Universitas Sebelas Maret.
Nisa,  K.,  O,  Firdaus.,  Ahmadi,  Hariani.  2015.  Uji aktivitas  Ekstrak  Biji  dan  Daun  Mengkudu ( Morinda  Citrifolia  L.) Sebagai  Larvasida Aedes sp. 2(2): 43-48.
Nursal,  P.  N.  2003.  Indeks  Nutrisi  Larva  Instar  V Heliothis Armigera Hubner pada Makanan yang Mengandung  Ekstrak  Kulit  Batang  Bakau
( Rhizopora  Mucronata  Lamk .)  dan  Temperatur yang Berbeda . http://library.usu.ac.id/download/fmipa/biolog i-nursal.pdf .  [Diakses  tanggal  12  November 2009].
Perumalsam,  H.  2009.  Larvicidal  Activity  of
Compounds Isolated from Asarum Heterotropoides  Against Culex  pipiens  pallens, Aedes aegypti , and Ochlerotatus togoi (Diptera: Culicidae). Journal  of  Medical  Entomology . 46(6): 1420-1423.
Puzi,  W.  S.,  Y.  Lukmayani,  dan  U.  A.  Dasuki.  2015. Isolasi  dan  Identifikasi  Senyawa  Flavonoid  dari Daun  Tumbuhan  Sirih  Merah  ( Piper  crocatum Ruiz&Pav). Prosiding Penelitian SpeSIA . Unisba.
Pratiwi,  C.  Y.,  T.  Haryono,  dan  S.  Y.  Rahayu.  2013. Efektivitas  Ekstrak  Daun  Ceremai (Phyllanthus acidus) terhadap  Mortalitas  Larva Aedes aegypti. Lentera Bio. 2(3): 197–201.