## UJI EFEK EKSTRAK ETANOL RIMPANG TEMULAWAK
(Curcuma xanthorrhiza Roxb. ) TERHADAP PENURUNAN
KADAR ASAM URAT TIKUS WISTAR YANG DIINDUKSI POTASIUM OKSONAT

## SECARA IN VIVO
Annik Megawati, Sofa Yuliana Program Studi S 1 Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Cendekia Utama Kudus,
Email : annikmegawati33@gmail.com , shofayln9@gmail.com

## ABSTRAK
Asam  urat  merupakan  senyawa  kimia  hasil  akhir  dari pemecahan  purin  atau  produk  sisa dalam  tubuh  yang  merupakan  hasil  katabolisme  purin  yang  dibantu  oleh  enzim guanase dan xanthin  oksidase. Rimpang  temulawak  merupakan  salah  satu  jenis  tumbuhan  yang biasa  digunakan  sebagai  obat  tradisional  untuk  mengobati  penyakit  asam  urat.  Tujuan dari  penelitian  ini  adalah  mengetahui  efek  dan  dosis  optimum  ekstrak  etanol  rimpang temulawak  terhadap  penurunan  kadar  asam  urat  tikus  wistar  yang  diinduksi  potasium oksonat  secara in  vivo. Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  dengan rancangan pre test and post test control group design , sampel yang digunakan yaitu tikus jantan galur wistar yang berjumlah 36 tikus dan dibagi menjadi 6 kelompok terdiri dari 6 tikus,  yaitu  kelompok  normal,  kelompok  negatif,  kelompok  positif,  kelompok  ekstrak etanol  rimpang  temulawak  dosis  50  mg/kgBB,  kelompok  ekstrak  etanol  rimpang temulawak  dosis  100  mg/kgBB,  kelompok  ekstrak  etanol  rimpang  temulawak  dosis  200 mg/kgBB,  data  diperoleh  dari  hasil  pengukuran  setelah  dipuasakan  18  jam,  setelah diinduksi potasium oksonat dan setelah perlakuan. Data yang diperoleh kemudian diolah menggunakan  SPSS  dengan  metode one  way  ANOVA kemudian  dilanjut  dengan  uji  Pos Hoc  LSD. Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa ekstrak  etanol  rimpang  temulawak dapat  menurunkan  kadar  asam  urat  secara  signifikan.  Data  yang  diperoleh  dari  uji  LSD menunjukkan  nilai  signifikan  kelompok  dosis  50  mg/kgBB  dan  kelompok  dosis  200 mg/kgBB  (p<0,05)  yang  berarti  ada  perbedaan  yang  signifikan  antar  kelompok, sedangkan  pada  kelompok  dosis  100  mg/kgBB  (p>0,05),  menunjukkan  tidak  ada perbedaan yang signifikan antar kelompok. Pemberian ekstrak etanol rimpang temulawak mampu  menurunkan  kadar  asam  urat  dengan  persentase  penurunan  kadar  asam  urat secara  berturut-turut  sebesar  19.53%,  28.80%,  dan  43.04%  dan  ekstrak  etanol  rimpang temulawak  dengan  dosis  200  mg/kgBB  memiliki  kemampuan  paling  optimal  dalam menurunkan kadar asam urat dibandingkan dengan dosis 50 mg/kgBB dan 100 mg/kgBB. Kata Kunci : Asam Urat, Curcuma xanthorrhiza Roxb., Potasium Oksonat.

## ABSTRACT
Uric  acid  is  a  chemical  compound  resulted from  the  breaking  of  purine  or  bodily  waste which  comes  from  purine  catabolism  helped  by  guanase  and  xanthin  oxidase  enzymes. Temulawak rhizome is a type of plant traditionally used as uric acid medication. The aim of this study was to determine the effect and optimum dose of temulawak rhizome ethanol extract on the decrease of potassium oxonate induced wistar acid uric acid levels in vivo. This was an experimental research with pre-test and post-test control group design. The sample  itself  were  36  male  wistar  rats  divided  into  6 groups,  each  group  consisted  of  6 rats. The  groupings  were:  normal,  positive,  negative, 50  mg/kg  per  body  weight  extract dosage,  100  mg/kg  per  body  weight  extract  dosage,  and  200  mg/kg  per  body  weight
extract  dosage.  Data  was  gathered  from  measuring  after  there  was  no  food  in  their system  for  18  hours,  after  induced  with  potassium  oxonate,  and  post-treatment.  The resulting  data  was  then  processed  using  SPSS  with  both  one  way  Anova  and  Post-Hoc LSD. The  results  obtained showed  that the  ethanol   extract  of  temulawak  rhizome  could significantly  reduce  uric  acid  levels.  The  LSD  test  results  obtained  a  significant  group value of the 50 mg/kgBB and 200 mg/kgBB (p<0,05) dose group which meant there were significant  differences  between  groups,  while  in  the  dose  group  100  mg/kgBB  (p>0,05), showed  no  there  were  significant  differences  between  groups.  Administration  of  ethanol extract of ginger rhizome can reduce uric acid levels with  a precentage decrease in uric acid  levels  in  a  row  of  19.53%,  28.80%,  43.04%    and  ethanol  extract  of  temulawak rhizome  at  a  dose  of  200  mg/kgBB  has  the  most  optimal  ability  in  reducing  uric  acid levels compared to doses of 50 mg/kgBB and 100 mg/kgBB. Keywords : Uric Acid, Curcuma xanthorrhiza Roxb., Potassium Oxonate.

## LATAR BELAKANG
Asam urat merupakan senyawa kimia hasil akhir dari pemecahan purin atau produk  sisa  dalam  tubuh  yang  merupakan  hasil  katabolisme  purin  yang  dibantu oleh  enzim  guanase  dan  xanthin  oksidase (Sinaga  dkk.,  2014).  Asam  urat  yang berlebihan  tidak  akan  termetabolisme  seluruhnya  di  dalam  tubuh,  maka  akan terjadi  peningkatan  kadar  asam  urat  dalam  darah  yang  disebut  hiperurisemia, hiperurisemia yang berlanjut dapat berkembang menjadi gout yaitu penyakit yang menyerang sendi (Suhendi dkk., 2011).
Prevelensi penyakit asam urat yang terjadi di  Indonesia pada usia di bawah 34  tahun  sebesar  32%  dan  diatas  umur  34  tahun  sebesar  68%.  Jumlah  penderita asam  urat  dari  waktu  ke  waktu  cenderung  meningkat  dan  ada  kecenderungan diderita pada usia yang semakin muda yaitu usia produktif, jika penyakit ini tidak segera  ditangani  nantinya  akan  berdampak  pada  penurunan  produktivitas  kerja (Sholihah, 2014).
Pengobatan  asam  urat  telah  dilakukan  dengan  berbagai  cara,  biasanya  di atasi  dengan  memberikan  obat-obat  sintetis.  Jika  mengkonsumsi  obat  sintesis yang  berjangka  lama,  maka  dapat  menimbulkan  efek  samping  seperti  alergi, menggigil,  leukopenia,  diare,  demam,  gagal  ginjal  dan  hati,  dan  gangguan pencernaan (Liu et al ., 2008).
Dari  berbagai  efek  samping  yang  ditimbulkan  dari  obat  sintetis,  alternatif lain  yang  bisa  digunakan  untuk  pengobatan  penyakit  asam  urat  yaitu  dengan menggunakan  bahan  herbal  pilihan  sebagai  pengobatan  tradisional  yang cenderung  lebih  aman,  karena  memiliki  efek  samping  yang  relatif  kecil,  mudah didapatkan  dan  harganya  relatif  murah  dibandingkan  dengan  obat  sintetis,  selain itu sudah terbukti secara empiris lebih aman digunakan dalam penggunaan jangka waktu yang panjang (Ernawati & Susanti, 2014).
Salah  satu  jenis  tumbuhan  yang  bisa  digunakan  sebagai  obat  tradisional seperti  rimpang  temulawak  ( Curcuma  xanthorrhiza Roxb.)  Hasil  pengujian skrining  fitokimia  diperoleh  bahwa  didalam  rimpang  temulawak  terdapat beberapa senyawa yaitu flavonoid, alkaloid, glikosida, dan triterpennoid. Senyawa yang  diduga  bertanggung  jawab  dalam  menghambat  kerja  enzim  Xanthine Oxidase  sehingga  dapat  menghambat  pembentukan  asam  urat  dalam  tubuh  yaitu flavonoid (Cos et al., 1998). Berdasarkan uraian dari latar belakang tersebut, maka dilakukan penelitian terhadap rimpang temulawak ( Curcuma xanthorrhiza Roxb.) untuk  penurunan  kadar  asam  urat  tikus  wistar  yang  diinduksi  potasium  oksonat secara in vivo .

## BAHAN DAN METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  dengan  rancangan pre test and post  test  control  group  design .  Pengukuran  kadar  asam  urat  dilakukan sebanyak  3  kali,  yaitu:  T 0 pada  waktu  sebelum  diinduksi  potasium  oksonat,  T 1 pada waktu setelah diinduksi potasium oksonat, dan T 2 pada waktu setelah diberi perlakuan .
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  sebagai  berikut:  kandang tikus  lengkap,  timbangan  analitik,  timbangan  hewan,  batang  pengaduk,  corong kaca, gelas ukur, tabung reaksi, pipet tetes, rak tabung reaksi, erlenmeyer, rotary evaporator , waterbath, kertas saring, blender, gunting, sonde lambung, spuid, alat tes  strip  asam  urat (EasyTouch). Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini
adalah rimpang temulawak, potasium oksonat, etanol 96%, aquadest, allopurinol, Carboxy Metyl Cellulosium Natrium (CMC Na).
Determinasi  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  memastikan  keaslian  tanaman yang  akan  digunakan.  Determinasi  dilakukan  di  Laboratorium  Ekologi  &  Bio Sistematik  Departemen  Biologi  Universitas  Diponegoro,  Semarang.  Rimpang temulawak  ( Curcuma  xanthorrhiza Roxb.)  diambil  dari  Jepara,  Jawa  Tengah dicuci  sampai  bersih  dan  dirajang  menjadi  potongan-potongan  halus,  kemudian dikeringkan  dengan  cara  diangin-anginkan  selama  1-2  minggu.  Setelah  rimpang temulawak sudah kering diblender hingga halus dan diayak dengan ayakan  no 40 mesh. Serbuk  rimpang  temulawak  kemudian  dimaserasi  menggunakan  pelarut etanol  96%,  diaduk  kemudian  tutup  rapat  dan  diamkan  selama  24  jam  ditempat yang  terhindar  dari  sinar  matahari  dengan  dilakukan  remaserasi  sebanyak  3  kali. Maserat  yang  didapat  lalu  disaring  dengan  kain  flanel.  Filtrat  hasil  remaserasi kemudian  ditampung  dalam  beakerglass  kemudian  diuapkan  dengan rotary evaporator dengan suhu  40°C dan dilanjutkan dengan pengeringan menggunakan waterbath hingga didapatkan ekstrak kental.
Pada  penelitian  ini  dilakukan  pengujian  skrining  fitokimia  uji  Flavonoid yaitu  sebanyak 20 mg sampel ditambahkan ± 2 tetes larutan NaOH, bila bereaksi positif  akan  menghasilkan  larutan  berwarna  kuning  intens,  jingga  sampai kemerahan.
Uji  Alkaloid,  sebanyak  20  mg  sampel  ditambahkan  dengan  2  ml  HCL  dan dikocok, setelah itu larutan sebanyak 1 ml direaksikan dengan pereaksi dragendrof dan  mayer  masing-masing  1  tetes.  Bila  sampel  dikatakan  positif  akan  terbentuk endapan  merah  pada  pereaksi  dragendrof  dan  endapan  kuning  pada  pereaksi mayer.
Uji Triterpenoid, sebanyak 20  mg sampel ditambahkan dengan asam asetat sampai ekstrak terendam, lalu dibiarkan kurang lebih 15 menit kemudian ambil 6 tetes  larutan  ditambahkan  dengan  ±  2-3  tetes  H 2 SO 4 pekat.  Bila  sampel  positif mengandung  senyawa  triterpenoid  ditandai  dengan  terbentuknya  warna  jingga, ungu dan cincin kecoklatan.
Pembuatan  suspensi  CMC  Na  0,5%  yaitu  CMC  Na  sebanyak  500  mg dimasukkan  ke  dalam  mortir  yang  berisi  10  ml  aquadest  hangat.  Aduk  sampai mengembang  kemudian  dihaluskan  sampai  homogen.  Setelah  itu  diencerkan dengan  aquadest  sampai  volume  larutan  total  100  mL.  Dosis  potasium  yang digunakan  didasarkan  pada  dosis  potasium  mencit  yaitu  250  mg/kgBB  (Zhao et al ., 2006). Maka perhitungan dosis potasium oksonat untuk mencit 20 gram = 250 mg/1000  gram×  20  gram  =  5  mg/20  gram.  Jadi  dosis  potasium  oksonat  yang digunakan  untuk  membuat  asam  urat  pada tikus  dengan  berat  badan  sebesar  200 gram  yaitu  5  mg  ×  7,0  =  35  mg/200  gram  (7,0  adalah  konversi  dosis  mencit  ke tikus)  (Stevani,  2016).  Dosis  allopurinol  pada  manusia  dewasa  adalah  100  mg. Takaran konversi dosis allopurinol untuk manusia dengan berat badan 70 kg pada tikus  dengan  berat  200  gram    yaitu  100  mg  ×  0,018  =  1,8  mg/kgBB.  (kemudian ditambahkan  suspensi  CMC  0,5%  sampai  volume  yang  ditetapkan  adalah  1  ml). Dosis  ekstrak  rimpang  temulawak  yang  diberikan  secara  oral  adalah  yaitu  50 mg/kgBB, 100 mg/kgBB, dan 200 mg/kgBB.
Pengujian  kadar  asam  urat  yaitu  sebanyak  36  ekor  tikus  wistar  dibagi menjadi  6  kelompok,  masing-masing  kelompok  terdiri  dari  6  ekor  tikus.  Hewan uji  diaklimatisasi  selama  2  minggu  sebelum  perlakuan  kemudian  tiap  tikus
ditimbang untuk  mengetahui  berat badan tikus. Sebelum pengukuran kadar asam urat,  tikus  dipuasakan  terlebih  dahulu  selama  18  jam  (tetap  diberi  minum),  agar kadar  asam  urat  darah  tikus  tetap  stabil.  Setelah  dipuasakan  sampel  darah  dari ekor  tikus  diambil  untuk  menentukan  kadar  gula  darah  awal  sebelum  perlakuan ( pre  test ).  Selanjutnya  pada  kelompok  negatif,  positif  dan  uji  ekstrak  diinduksi potasium oksonat selama 2 hari untuk membuat asam urat pada tikus. Setelah hari 2  pemberian  potasium  oksonat,  diberikan  perlakuan  pada  masing-masing kelompok tikus: kelompok 1 yaitu kelompok normal, kelompok II yaitu kelompok positif  diberi  allopurinol  1,8  mg/KgBB,  kelompok  III  yaitu  kelompok  negatif diberi  CMC  Na  0,5%,  dan  pada  kelompok  IV,  V,  VI  yaitu  pemberian  ekstrak dengan dosis masing-masing 50 mg/KgBB, 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB.
Analisis  data  pada  penelitian  ini  diolah  dengan  menggunakan  SPSS  16.0.
Data  yang  diperoleh  di  uji  normalitas  dengan  uji Shapiro-Wilk dan  uji homogenitas  dengan Test  of  Homogenity  of  Variance .  Data  dapat  dikatakan normal dan homogen apabila nilai signifikan > 0.05. Jika data sudah terdistribusi normal dan homogen, maka selanjutnya dilakukan analisis one way ANOVA untuk melihat adanya perbedaan kadar asam urat antar kelompok perlakuan dengan nilai signifikan anova < 0.05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
1. Determinasi Tanaman
Hasil  uji  determinasi  rimpang  temulawak  yang  diambil  dari  Jepara,  Jawa Tengah menunjukkan bahwa bagian tanaman yang digunakan dalam penelitian ini benar merupakan rimpang temulawak (Curcuma xanthorrhiza Roxb. ) .

## 2. Pengeringan dan Pembuatan Serbuk Rimpang Temulawak
Hasil  pengeringan  dan  pembuatan  serbuk  rimpang  temulawak  disajikan pada tabel 1.
Tabel 1.  Penyusutan Simplisia
Bahan Basah Simplisia Kering Serbuk Susut Pengeringan 3,5 kg 550 gram 500 gram 84,29%

## 3. Pembuatan Ekstrak Rimpang Temulawak
Hasil rendemen ekstrak rimpang temulawak disajikan pada tabel 2. Tabel 2.  Hasil Rendemen Ekstrak Etanol Rimpang Temulawak Serbuk Temulawak Ekstrak Rendemen 200 gram 39,44 gram 19,72 %

## 4. Hasil Identifikasi Kandungan
Berdasarkan  pemeriksaan  identifikasi  kandungan  ekstrak  etanol  rimpang temulawak  terdapat  golongan  senyawa  flavonoid,  alkaloid,  triterpenoid.  Hasil identifikasi kandungan disajikan pada tabel 3.

## Tabel 3.  Hasil Identifikasi Kandungan Ekstrak Etanol Rimpang Temulawak
Senyawa Reaksi Kimia Hasil Kesimpulan Flavonoid Larutan NaOH Jingga Kemerahan Positif Ada Flavonoid Alkaloid HCL + pereaksi dragendrof dan mayer Endapan Kuning Positif Ada Alkaloid Triterpenoid Asam Asetat + H 2 S0 4 pekat Cincin Kecoklatan Positif Ada Triterpenoid

## 5. Hasil Pengukuran Kadar Asam Urat Darah
Pengukuran kadar asam urat darah dilakukan sebanyak 3 kali, yaitu sebelum diinduksi  (T o ),  sesudah  diinduksi  (T 1 ),  dan  setelah  perlakuan  (T 2 ).  Data rata-rata hasil pengukuran kadar asam urat disajikan pada tabel 4 dan gambar 1.
Tabel 4.  Rata-Rata Kadar Asam Urat Sebelum dan Sesudah Perlakuan
Kelompok Rata-Rata Kadar Asam Urat (mg/dl) T 0 T 1 T 2 Kelompok Normal 3,67 4,15 3,92 Kelompok Negatif 3,75 6,3 6,65 Kelompok Positif 4,03 6,18 4,18 Kelompok 1 Dosis 50 mg/kgBB 3,72 6,27 5,03 Kelompok 2 Dosis 100 mg/kgBB 3,9 6,38 4,53 Kelompok 3 Dosis 200 mg/kgBB 4 7,33 4,15
Keterangan : T 0 : Kadar asam urat sebelum induksi potasium oksonat T 1 : Kadar asam urat setelah induksi potasium oksonat T 2 : Kadar asam urat setelah perlakuan
Gambar 1. Grafik Rata-Rata Kadar Asam Urat Darah Tikus
2 4 6 8 10 T0 T1 T2 K ad ar A sam U r at (m g/ d L) Waktu Pemeriksaan Kadar Asam Urat Grafik Penurunan  Kadar Asam Urat Kelompok Normal Kelompok Negatif Kelompok Positif Kelompok Dosis 50 mg/kgBB
Kelompok Dosis 100 mg/kgBB Kelompok Dosis 200 mg/kgBB
Keterangan : T 0 : Kadar asam urat sebelum induksi potasium oksonat T 1 : Kadar asam urat setelah induksi potasium oksonat T 2 : Kadar asam urat setelah perlakuan

## Pembahasan
1. Determinasi Tanaman
Determinasi tanaman dilakukan di Laboratorium Ekologi dan Biosistematik Departemen  Biologi  Universitas  Diponegoro.  Determinasi  dari  suatu  tanaman bertujuan  untuk  mengetahui  kebenaran  identitas  tanaman  yang  diteliti  sehingga kesalahan  dalam  pemilihan  tanaman  atau  pengumpulan  bahan  yang  akan  diteliti dapat  dihindari.  Rimpang  temulawak  diambil  dari  Jepara,  Jawa  Tengah  yang memiliki  nama  latin Curcuma  xanthorrhiza Roxb.  dengan  spesifikasi  terna berbatang semu dengan tinggi  hingga  lebih dari 1  m. Rimpang terbentuk dengan sempurna dan bercabang kuat, berukuran besar, bercabang-cabang, dan berwarna coklat kemerahan, kuning tua atau berwarna hijau gelap. Tiap tunas dari rimpang membentuk  daun  2-9  helai  dengan  bentuk  bundar  memanjang  sampai  bangun lanset.  Daging  rimpangnya  berwarna  jingga  tua  atau  kecoklatan,  beraroma  tajam yang  menyengat  dan  rasanya  pahit.  Dari  hasil  determinasi  tersebut  diperoleh kepastian bahwa tanaman yang digunakan pada penelitian ini yaitu benar tanaman Curcuma xanthorrhiza Roxb.

## 2. Pengeringan dan Pembuatan Serbuk
Rimpang  temulawak  sebanyak  3,5  kg  dicuci  sampai  bersih  untuk menghilangkan  kotoran  yang  menempel,  kemudian  dirajang  dan  dikeringkan dengan cara diangin-anginkan tanpa terkena sinar  matahari  langsung.  Perajangan pada  rimpang  temulawak  bertujuan  agar  mempermudah  dalam  proses pengeringan. Setelah itu, diperoleh simplisia kering sebanyak 550 gram, dalam hal ini  mengalami  penyusutan  yang  mana  hilangnya  kadar  air  pada  bahan  simplisia basah.  Pada  penelitian  sebelumnya  menurut  Salamah,  Rozak,  &  Abror,  2017, Simplisia  kering  diserbuk  hingga  halus  dengan  menggunakan  blender,  yang bertujuan untuk memperkecil ukuran partikel  simplisia  sehingga luas permukaan partikel menjadi lebih besar sehingga cairan penyari yang akan mudah melarutkan senyawa  aktif  dari  simplisia  tersebut.  Setelah  diserbuk  simplisia  selanjutnya diayak  dengan  menggunakan  ayakan  no  40  mesh  sehingga  diperoleh  serbuk sebanyak 500 gram.

## 3. Pembuatan Ekstrak Etanol Rimpang Temulawak
Rimpang  temulawak  diekstraksi  terlebih  dahulu  dengan  menggunakan metode  maserasi.  Maserasi  bertujuan  untuk  menarik  zat-zat  atau  senyawa  aktif yang  terdapat  dalam  tanaman  yang  tidak  tahan  terhadap  pemanasan.  Menurut Rakanita dkk., 2017, Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia selama  3x24  jam  dengan  sesekali    diaduk,  hal  ini  bertujuan  untuk  menghasilkan penarikan  senyawa  yang  lebih  sempurna  sehingga  semua  senyawa  dapat terekstraksi  seluruhnya.  Pengadukan  bertujuan  agar  pelarut  bisa  berulang-ulang masuk  ke  dalam  sampel  dan  diharapkan  terjadi  keseimbangan  konsentrasi  bahan ekstraksi  yang  lebih  cepat  ke  dalam  pelarut.  Berdasarkan  penelitian  sebelumnya menurut  Huliselan,  Runtuwene,  &  Wewengkang,  2015  Remaserasi  diperlukan untuk  mengganti  larutan  yang  sudah  jenuh  diganti  dengan  pelarut  yang  baru
sehingga  semua  senyawa  kimia  yang  terkandung  pada  tumbuhan  tersebut  dapat ditarik secara optimal. Remaserasi dilakukan sampai larutan jernih, setelah larutan jernih  ekstrak  diuapkan  dengan rotary  evaporator pada  suhu  40°C  sampai menjadi  endapan  yang  tidak  terlalu  kental  dan  dilanjutkan  dengan  pengeringan menggunakan  waterbath  sampai  menjadi  ekstrak  kental.  Sehingga  diperoleh ekstrak kental sebanyak 39,44 gram dan menghasilkan rendemen 19,72 %.

## 4. Hasil Identifikasi Kandungan
Identifikasi  kandungan  dilakukan  untuk  mengetahui  senyawa  yang terdapat dalam  ekstrak  rimpang  temulawak,  identifikasi  kandungan  tersebut  dengan menggunakan  metode  tabung.  Hasil  skrining  fitokimia  dari  ekstrak  rimpang temulawak pada tabel 3 menunjukkan hasil positif (+) pada uji flavonoid, alkaloid dan triterpenoid.
Pada  uji  flavonoid  ditandai  dengan  terbentuknya  warna  jingga  kemerahan. Hal tersebut menunjukkan bahwa ekstrak etanol rimpang temulawak mengandung flavonoid.  Karena  sampel  +  NaOH  akan  membentuk  asetofenon  yang  berwarna kemerahan.  Flavonoid  termasuk  dalam  golongan  senyawa  fenol  yang  memiliki banyak  gugus – OH  sehingga  sifatnya  polar.  Golongan  senyawa  ini  mudah terekstrak  dalam  pelarut  etanol  yang  juga  memiliki  sifat  polar  Karena  adanya gugus  hidroksil,  sehingga  dapat  terbentuk  ikatan  hidrogen  (Ikalinus,  Widyastuti, & Setiasih, 2015).
Pada  uji  alkaloid  hasilnya  positif  alkaloid  pada  uji  mayer  ditandai  dengan adanya  endapan  kuning.  Pada  uji  alkaloid  dengan  pereaksi  mayer,  diperkirakan nitrogen  pada  alkaloid  akan  bereaksi  dengan  ion  logam  K + dari  kalium tetraiodomerkurat  (II)  membentuk  kompleks  kalium-alkaloid  yang  mengendap (Ikalinus, Widyastuti, & Setiasih, 2015).
Pada  uji  triterpenoid  hasilnya  positif  yaitu  ditandai  dengan  terbentuknya warna  jingga  dan  cincin  kecoklatan.  Prinsip  reaksi  dalam  mekanisme  reaksi  uji triterpenoid  merupakan  kondensasi  atau  pelepasan  H 2 O  dan  penggabungan dengan  karbokation.  Reaksi  ini  diawali  dengan  proses  asetilasi  gugus  hidroksil menggunakan  asam  asetat  anhidrida.  Gugus  asetil  yang  merupakan  gugus  pergi yang  baik  akan  lepas,  sehingga  terbentuk  ikatan  rangkap.  Selanjutnya  terjadi pelepasan  gugus  hidrogen  beserta  elektronnya,  mengakibatkan  ikatan  rangkap berpindah. Senyawa ini mengalami resonansi yang bertindak sebagai karbokation sehingga  serangan  karbokation  dapat  menyebabkan  adisi  elektrofilik  diikuti pelepasan  hidrogen.  Kemudian  gugus  hidrogen  beserta  elektronnya  dilepas, akibatnya  senyawa  mengalami  perpanjangan  konjugasi  yang  memperlihatkan dengan munculnya cincin kecoklatan (Nugrahani, Andayani, & Hakim, 2016).

## 5. Hasil Pengukuran Kadar Asam Urat
Pengukuran kadar asam urat darah dilakukan sebanyak 3 kali, yaitu sebelum diinduksi  (T o ),  sesudah  diinduksi  (T 1 ),  dan  setelah  perlakuan  (T 2 ).  Data  rata-rata pengukuran kadar asam urat dan grafik rata-rata kadar asam urat darah tikus dapat dilihat pada tabel 4 dan gambar 1.
Dalam penelitian  sampel  yang digunakan  adalah  36 ekor tikus  putih  jantan galur wistar  yang dibagi  menjadi 6 kelompok perlakuan  yaitu kelompok normal, kelompok  negatif,  kelompok  positif,  kelompok  dosis  50  mg/kgBB,  kelompok
dosis  100  mg/kgBB,  dan  kelompok  dosis  200  mg/kgBB  yang  masing-masing kelompok terdiri dari 6 ekor tikus.
Pada  tabel  4  dan  gambar  1  menunjukkan  bahwa  kelompok  negatif,  positif, kelompok  1,  kelompok  2  dan  kelompok  3  terjadi  peningkatan  kadar  asam  urat yang signifikan pada T 1 . Menurut Mazzali et al ., 2001 Terjadinya kenaikan kadar asam  urat  pada  tikus  disebabkan  oleh  pemberian  induksi  potasium  oksonat  yang dimana potasium oksonat biasanya digunakan sebagai penginduksi hiperurisemia, karena  potasium  oksonat  telah  bekerja  menghambat  enzim  urikase  yang mengubah  asam  urat  menjadi  alantoin  sehingga  kadar  asam  urat  didalam  darah tikus meningkat.
Dari  hasil  pengukuran  kadar  asam  urat  menunjukkan  bahwa  ketiga kelompok dosis 50 mg/kgBB, 100 mg/kgBB dan 200 mg/kgBB dari ekstrak etanol rimpang  temulawak  dapat  memberikan  efek  menurunkan  kadar  asam  urat  pada tikus. Penurunan kadar asam urat yang paling signifikan terjadi pada kelompok 3 yaitu  pada  kelompok  dosis  200  mg/kgBB, terjadinya  penurunan  kadar  asam  urat yang  signifikan  pada  kelompok  dosis  200  mg/kgBB  dikarenakan  pada  dosis tersebut  lebih  banyak  senyawa  flavonoid  yang  terkandung  didalam  rimpang temulawak  tersebut.  Menurut  Lallo  dkk.,  2018  Flavonoid  yang  terkandung  pada rimpang  temulawak  bekerja  dengan  menghambat  kerja xantin  oksidase sehingga dapat  menurunkan  produksi  asam  urat.  Senyawa  flavonoid  juga  mempunyai aktifitas sebagai antioksidan yang dapat menghambat kerja radikal bebas sehingga kerusakan sel terhambat. Menurut Cos et al ., 1998 Jenis flavonoid yang berperan dalam mekanisme penghambatan enzim xantin oxidase yaitu flavon dan flavonol. Adanya  senyawa  yang  lain  selain  flavonoid  yang  terkandung  didalam  rimpang temulawak kemungkinan juga dapat berperan dalam menurunkan kadar asam urat. (Tarigan, Bahri, & Saragih, 2012).
Data yang diperoleh dari hasil penelitian selanjutnya diuji untuk mengetahui normalitas dan homogenitasnya  menggunakan aplikasi pengolah data yaitu SPSS 16.0. Hasil uji normalitas data dengan uji Shapiro-Wilk menunjukkan bahwa nilai p  >  0.05  yang  berarti  bahwa  data  sudah  terdistribusi  normal.  Setelah  data terdistribusi  normal  selanjutnya  diuji  homogenitasnya  didapatkan  hasil  nilai signifikan  0.256  >  0.05  yang  berarti  data  sudah  homogen  dan  layak  untuk  diuji dengan uji one way ANOVA.
Berdasarkan  hasil  uji One  Way  ANOVA didapatkan  nilai  signifikan  yang dimana  0.00  <  0.05,  yang  berarti  hasil  ini  menunjukkan  ada  perbedaan  yang signifikan antar perlakuan kelompok. Dengan  adanya perbedaan antar kelompok, maka data diolah kembali dengan uji lanjutan yaitu uji Post Hoc LSD . Hasil yang diperoleh  dari  uji Post  Hoc  LSD menunjukkan  kelompok  perlakuan  dosis  100 mg/kgBB  dan  kontrol  positif  memiliki  nilai  signifikan  p  >  0.05,  yang  berarti ekstrak etanol rimpang temulawak memiliki kemampuan untuk menurunkan kadar asam  urat  yang  sama  dengan  allopurinol.  Sedangkan  pada  kelompok  dosis  50 mg/kgBB,  200  mg/kgBB  dan  kontrol  negatif  memiliki  perbedaan  yang  nyata dengan  kelompok  normal  dikarenakan  nilai  signifikan  p  <  0.05.  Adanya perbedaan  dikarenakan  pada  kontrol  negatif  hanya  diberikan  CMC  0,5  %  yang bersifat  netral  sehingga  kadar  asam  urat  tidak  mengalami  penurunan,  sedangkan pada  dosis  50  mg/kgBB  dan  200  mg/kgBB  dapat  menurunkan  kadar  asam  urat namun tidak memiliki nilai yang signifikan.

## SIMPULAN DAN SARAN Simpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat  disimpulkan  sebagai berikut :
1. Pemberian ekstrak etanol rimpang temulawak mampu menurunkan kadar asam urat dengan persentase penurunan kadar asam urat secara berturut-turut sebesar 19.53%, 28.80%, dan 43.04%.
2. Ekstrak  etanol  rimpang  temulawak  dengan  dosis  200  mg/kgBB  memiliki kemampuan  paling  optimal  dalam  menurunkan  kadar  asam  urat  dibandingkan dengan dosis 50 mg/kgBB dan 100 mg/kgBB.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  mengenai  uji  toksisitas  terhadap ekstrak etanol rimpang temulawak sebagai antihiperurisemia.

## DAFTAR PUSTAKA
Cos,  P.,  Ying,  L.,  Calomme,  M.,  Hu,  J.  P.,  Cimanga,  K.,  Poel,  V.B.,  Pieters,  L. Vlientinck,  A.J  and  Berghe,  D.V  (1998).  Structure-Activity  Relationship and  Classification  of  Flavonoids  as  Inhibitors  of  Xanthine  Oxidase  and Superoxide Scavengers. Journal of Natural Products , Vol 61, 71 – 76. Ernawati, & Susanti, H. (2014). Penghambatan Aktivitas Xanthine Oxidase Oleh Ekstrak  Etanol  Sarang  Semut  (Myrmecodia  Tuberosa  (Non  Jack)  Bl.) Secara In Vitro. Pharmaçiana , 4 .
Ikalinus,  R.,  Widyastuti,  S.  K.,  &  Setiasih,  N.  L.  E.  (2015).  Skrining  Fitokimia Ekstrak Etanol Kulit Batang Kelor ( Moringa oleifera ). Indonesia Medicus Veterinus , 4(1), 71-79.
Lallo,  S.,  Mirwan,  M., Palino,  A.,  Nursamsiar,  &  Hardianti,  B.  (2018).  Aktifitas Ekstrak  Jahe  Merah  Dalam  Menurunkan  Asam  Urat  Pada  Kelinci  Serta Isolasi  Dan  Identifikasi    Senyawa  Bioaktifnya. Jurnal  Fitofarmaka Indonesia,5 , 271-278.
Liu, X., Chen, R., Shang, Y., Jiao, B., & Huang, C. (2008). Lithospermic Acid As A  Novel  Xanthine  Oxidase  Inhibitor  Has  Anti-Inflammatory  And Hypouricemic Effects In Rats. Chemico-Biological Interactions , 137 – 142. Mazzali, M., Kanellis, J., Han, L., Feng, L., Yang, X. L., Chen, Q., Richard, J. J. (2001). Hyperuricemia Induces A Primary Renal Arteriolopathy In Rats By A Blood Pressure-Independent Mechanism. Division of Nephrology, Baylor College of Medicine, Houston, Texas.
Nugrahani,  R.,  Andayani  Y.,  &  Hakim,  A.  (2016).  Skrining  Fitokimia  Dari Ekstrak Buah Buncis ( Phaseolus vulgaris L) Dalam Sediaan Serbuk. Jurnal Penelitian Pendidikan IPA (JPPIPA) , 2(1). Sholihah, F. M. (2014). Diagnosis And Treatment Gout Arthritis. J Majority , 3 . Sinaga,  A.  F.,  Bodhi,  W.,  &  Lolo,  W.  A.  (2014).  Uji  Efek  Ekstrak Etanol  Daun Salam  (Syzygium  Polyanthum  (Wight.)  Walp)  Terhadap  Penurunan  Kadar Asam  Urat  Tikus  Putih  Jantan  Galur  Wistar  (Rattus  Novergicus  L.)  Yang Diinduksi  Potasium  Oksonat. PHARMACON    Jurnal  Ilmiah  Farmasi –
UNSRAT , 3 .
Stevani, H. (2016). Praktikum Farmakologi (Jakarta Selatan).
Suhendi,  A.,  Nurcahyanti,  Muhtadi,  &  Sutrisna,  E.  (2011).  Aktivitas antihiperurisemia  ekstrak  air  jinten  hitam  (Coleus  ambonicus  Lour)  pada mencit  jantan  galur  balb-c  dan  standardisasinya. Majalah  Farmasi Indonesia,22 .
Tarigan,  I.  M.,  Bahri,  S.,  &  Saragih,  A.  (2012).  Aktivitas  Antihiperurisemia Ekstrak  Etanol  Herba  Suruhan    (Peperomia  pellucida  (L.)  Kunth)  Pada Mencit Jantan. Journal of Pharmaceutics and Pharmacology , 1 .
Zhao, X., Zhu, J. X., Mo, S. F., Pan, Y., & Kong, L. D. (2006). Effects Of Cassia Oil On Serum And Hepatic Uric Acid Levels In Oxonate-Induced Mice And Xanthine Dehydrogenase And Xanthine Oxidase Activities In Mouse Liver. Journal of Ethnopharmacology , 357 – 365