## ANALISIS TOKSISITAS LIMBAH CAIR BATIK TULIS
DAN BIOCONCENTRATION FACTOR  IKAN SEPAT
(TRICHOGASTER TRICOPTERUS)
Naniek Ratni Juliardi  AR 1 , Nur Andini 2 , dan Yuliatin AS 3
Program Studi Teknik Lingkungan, Universitas Pembangunan Nasional Veteran Jawa Timur E-mail: naniktlupn@yahoo.com

## ABSTRAK
Logam  kromium  merupakan  logam  berat  yang  berasal  dari  proses  pewarnaan batik  yang  bersifat  toksik  dan  dapat  mencemari  lingkungan  apabila  melebihi ambang batas yang ditentukan. Penelitian ini menggunakan metode uji toksisitas akut  dengan  mengamati  jumlah  kematian  biota  uji  selama  96  jam  (4  hari)  dan dicari  nilai  LC 50 .  Biota  uji  yang  digunakan  adalah  ikan  sepat (Trichogaster tricopterus) .  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  tingkat  responsif  ikan sepat  terhadap  limbah  cair  batik  tulis  dan  kadar  zat  toksik  kromium  (Cr)  yang terkandung  dalam  biota  uji.  Pengujian  pada  penelitian  ini  menggunakan  variasi toksikan pada uji toksisitas akut dengan kadar 0%, 0,6%, 0,12%, 0,18%, 0,24%, 0,3%.  Parameter  yang  dianalisa  adalah  suhu,  pH,  DO  dan  kromium  (Cr).  Hasil dari  penelitian  didapatkan  nilai  LC 50 ikan  sepat    untuk  limbah  cair  batik  tulis adalah  0,186%.  Pada  kadar  ikan  sepat  0,6%  nilai  BCF  adalah  0,002  mg/l  dan pada  kadar  3,0%  adalah  0,028.  Terlihat  sisik  ikan  yang  terkelupas  dan  insang mengalami iritasi kemudian mengeluarkan lendir akibat kandungan logam berat.
Kata kunci: limbah cair batik tulis, uji toksisitas akut (LC 50 ), ikan sepat

## ABSTRACT
Chromium  was  poisonous and  contaminating the  environment if  more than  to  a prescribed limit. This study used acute toxicity check to observed the number of biota  mortality  for  96  hours  (  four  days)  and  determined  LC 50 .  This  study  used batik’s  liquid  waste  from  several  industries  and  gourami  (Trichogaster tricopterus)  This  study  was  aimed  to  found  out  the  responsive  level  of Trichogaster  tricopterus  for  liquid  waste  and  to  determined  the  effect  of chromium level inside of sample. This study used variety of toxic substances level, such as, 0%; 0,6%; 0,12%; 0,18%; 0,24%; 0,3%. Temperature, acidity, dissolve oxygen, and chromium level were analyzed for this study. The results showed that LC 50 value  for  Trichogaster  tricopterus  against  batik  liquid  waste  was  0,186%. Bioconcentration  factor for  toxic  substances level  0,6%  was  0,002  mg/l  and for 3,0%  was  0,028  mg/l.  The  scale  were  peel  off  and  the  gills  were  irritation,  it produced mucus as the effect of chromium.
Keywords:  acute  toxicity  test  (LC 50 ),  homemade  batik’s  liquid  waste, Trichogaster tricopterus

## PENDAHULUAN
Industri  di  Indonesia  berkembang  pesat  baik itu industri modern maupun industri konvensional.  Industri  banyak  menghasilkan limbah yang dapat menyebabkan pencemaran. Salah satu industri konvensional yang sedang berkembang yaitu industri batik. Data  tahun  2012  menyebutkan  jumlah industri  batik  48.300  unit  usaha  skala  kecil, menengah dan skala besar. Sebanyak 17 unit usaha  dengan  penyerapan  tenaga  kerja sebanyak 797.351 orang (Kementerian Perindustrian, 2015).
Batik  Tulis  merupakan  salah  satu  kerajinan batik  yang  masih  bertahan  sejak  muncul untuk  pertama  kali  pada  abad  ke  -  17. Kerajinan  batik  ini  semakin  menggeliat seiring dengan semakin banyaknya permintaan  terhadap  batik.  Salah  satu provinsi  yang  memiliki  sentra  industri  batik yang  tinggi  yaitu  Jawa  Timur.  Daerah  yang menjadi sentra industri batik di Provinsi Jawa Timur  salah  satunya  berada  di  Kabubaten Bangkalan  tepatnya  di  Kecamatan  Tanjung Bumi,  yang  menjadi  ciri  khas  dari  daerah tersebut  adalah  batik  tulis  yang  banyak digemari oleh masyarakat.
Berdasarkan  data  hasil  observasi  terdapat  27 industri  batik  tulis  rumahan  dan  belum  ada industri  batik  tulis  yang  mengelola  dan mengolah limbahnya. Limbah cair batik tulis langsung  dibuang  ke  saluran  drainase  yang bermuara  pada  sungai  sekitar.  Industri  batik tulis tersebut menghasilkan limbah cair yang dihasilkan paling banyak dari proses pewarnaan dan pelorodan batik. Zat-zat yang terdapat  pada  limbah  cair  batik  tulis  dapat berupa  padatan  tersuspensi,  bahan  kimia maupun  zat  organik  dan  mengandung  logam berat  kromium  (Cr)  (Ayu,  2014).  Logam kromium  merupakan  logam  berat  yang berasal  dari  proses  pewarnaan  batik  yang bersifat toksik dan dapat mencemari lingkungan  apabila  melebihi  ambang  batas yang ditentukan.
Limbah  cair  yang  dibuang  ke  lingkungan harus  memenuhi  standar  baku  mutu  limbah cair  agar  tidak  menimbulkan  permasalahan bagi  lingkungan.  Berdasarkan  hal  tersebut maka  perlu  dilakukan  penelitian  terhadap limbah  cair  yang  dihasilkan  oleh  industri rumahan  batik  tulis  yang  dapat  dilakukan pada organisme perairan yang hidup di aliran sungai  sekitar.  Berdasarkan  penelitian  yang pernah  dilakukan,  perlu  dilakukan  uji toksisitas  akut  untuk  mengetahui  nilai  LC 50 - 96  jam terhadap ikan air tawar.  LC 50 -96  jam merupakan singkatan dari Lethal Concentration 50%, untuk mengetahui konsentrasi  toksikan  yang  menyebabkan terjadinya kematian (lethal) pada 50% hewan uji  dalam  suatu  waktu  tertentu  (Idris,  2013). Hasil penelitian Adam (2016), terdapat kadar krom  (Cr)  yang  melampaui  ambang  batas pada  limbah  cair  batik  tulis  Njetis  Sidoarjo yaitu  1,48  mg/l  ,  nilai  tersebut  melampaui baku mutu limbah cair industri tekstil yaitu 1 mg/l sesuai dengan Peraturan Gubernur Jawa Timur  Nomor    72  tahun  2013.  Serta diperoleh  hasil  LC 50 ikan  mujair  terhadap limbah cair batik tulis sebesar 0,43 (toksisitas sedang).
Ikan sepat (Trichogaster trichopterus), merupakan  ikan  yang  hidup  di  aliran  sungai sekitar  pembuangan  limbah  cair  batik  tulis dan  dikonsumsi  oleh  masyarakat.  Ikan  sepat (Trichogaster trichopterus) termasuk kedalam ikan pemakan zooplankton. Penggunaan  ikan  sepat  sebagai  indikator dikarenakan memenuhi syarat dari sifat dasar spesies  monitor  berdasarkan  Rand  and Petrocelli (1995) diantaranya  tersedia mudah dan dalam jumlah yang banyak, representatif bagi  ekosistem  yang  akan  terkena  efek  zat, mudah  dipelihara  dan  dikultur  dalam laboratorium.
Toksisitas  pada  ikan  merupakan  serangkaian sistem  yang  melibatkan  proses  fisika,  kimia, biologis.  Proses  toksis  akan  menghasilkan racun yang dapat diserap oleh ikan (di Giulio and Hinton,  2008),  sehingga  uji  toksisitas
digunakan  untuk  menentukan  status  limbah cair  batik  tulis  apakah  toksik  terhadap  ikan sepat  yang  merupakan  jenis  ikan  yang  hidup di sungai yang merupakan salah satu saluran buangan limbah cair batik tulis. Pengaruh zat kimia  pada  limbah  cair  batik  tulis  pada  ikan dapat  di  lihat  dari  kelangsungan  hidup, struktur  histologis  bagian  tubuh  yang  peka terhadap  zat  kimia  tersebut  serta  keberadaan lingkungan  krom  (Cr)  dalam  daging  ikan. Oleh  karena  itu  penelitian  ini  dilakukan untuk  mengetahui  keadaan  lingkungan  air industri  batik  tulis  dengan  menggunakan biota  uji  sebagai  parameter  yang  mewakili lingkungan  air  disekitar  industri  batik  tulis. Dengan  adanya  uji  toksisitas  limbah  cair batik  tulis,  diharapkan  dapat  memperoleh gambaran  umum  tentang  tingkat  bahaya limbah  cair  industri  batik  tulis  terhadap badan  air  penerima  terutama  terhadap  biota- biota akuatik yang hidup didalamnya.

## METODE PENELITIAN Limbah Cair Batik Tulis
Toksikan yang digunakan dalam uji toksisitas akut  adalah  limbah  cair  batik  tulis  yang berasal  dari  industri-industri  batik  tulis rumahan  di  Kecamatan  Tanjung  Bumi Bangkalan.

## Biota Uji
Biota  uji  yang  di  gunakan  dalam  penelitian ini  adalah  ikan  sepat.  Pemilihan  biota  uji berdasarkan  kriteria  biota  uji  yang  harus  di penuhi.  Berdasarkan  OECD  dan  USEPA, biota  uji  yang  di  gunakan  dapat  mewakili lingkungan  dari  perairan  tersebut, agar  dapat memperkirakan  jumlah  polutan  yang  masuk ke  dalam  lingkungan  tersebut  (APHA,2005). Berdasarkan standart USEPA hewan uji yang di  gunakan  adalah  ikan  dengan  berat  1  gram yang dimana berukuran 5-7cm.

## Aklimatisasi
Waktu  aklimatisasi  dilakukan  selama  3  hari menggunakan  air  pengencer  yaitu  air sambungan  PDAM  di  Laboratorium  Riset Teknik  Lingkungan  UPN  “Veteran”  Jawa
Timur agar pengencer yang digunakan bebas dari  pencemar.  Pada  waktu  aklimatisasi digunakan  wadah  dengan  diameter  11,5  cm dan  tinggi  10,5  cm.  Dalam  reaktor  ini dimasukan  biota  uji  berjumlah  400  ekor  dan dibagi  kedalam  3  reaktor.  Pengamatan dilakukan setiap 24 jam selama 3 hari dengan mengukur  dan  mencatat  nilai  suhu,  pH,  DO dan  kematian  ikan  pada  masing-masing reaktor.

## Range finding test
Range  finding  test merupakan  tahapan  yang bertujuan untuk mencari prakiraan konsentrasi terkecil toksikan air limbah yang dapat menyebabkan kematian 100% biota uji mati  dalam  pemaparan    96  jam.  Parameter yang  diamati  adalah  suhu,  pH,  DO,  krom (Cr) dan dilakukan pengamatan atas kematian biota ujinya setiap hari. Pengamatan parameter  krom  (Cr)  dilakukan  diakhir penelitian.  Pada  tiap  bak  uji  dimasukkan  10 ekor  biota  uji  untuk  masing-masing  kadar toksikan.  Dibutuhkan  volume  total  air  untuk setiap  bak  uji  sebanyak  10  liter  dengan perbandingan 1 gram ikan per 1 liter air. Bak uji yang digunakan berdiameter  11,5 cm dan
tinggi 10,5 cm.
Gambar-  1: Desain  bak  uji  waktu range  finding test

## Uji toksisitas akut
Tujuan  pada  tahapan  tes  ini  adalah  untuk menentukan  kadar  toksikan  yang  dimana dapat  memberikan  kematian  50%  terhadap
biota  uji  dalam  waktu  yang  relatif  singkat. Dilakukan  pengulangan  sebanyak  tiga  kali pada  tahapan  ini  masing-masing  variasi toksikan.  Kadar  toksikan  didapat  dari  data range finding test.
Perhitungan LC 50 Nilai  LC 50 merupakan  nilai  dimana  pada kadar  toksikan  tersebut  terdapat  50%  biota uji  dalam    penelitian    mengalami  kematian. Nilai LC 50 ini diperlakukan dalam menganalisa  dan  pembahasan  dari  penelitian ini. Metode yang digunakan dalam menentukan  nilai  LC 50 ini  menggunakan metode Lithfield-Wilcoxon

## HASIL DAN PEMBAHASAN Aklimatisasi
Tabel- 1: Waktu aklimatisasi
Dari  data  diatas  selama  adaptasi berlangsung untuk suhu masih dalam kondisi normal pada ketiga reaktor. Untuk pH meski mengalami  kenaikan  dan  penurunan  dapat dianggap baik dikarenakan pH yang ada pada akuarium  memenuhi  untuk  kelangsungan hidup  ikan  yaitu  dalam  kisaran  6-9  Ghufran dan  Kordi,  2004).  Menurut  Samsundari (2013)  ,nilai  pH  pada  akuarium  yang  tinggi dikarenakan  air  mudah  tercampur  dengan mineral  dan  kotoran  yang  berada  di dalamnya. Untuk kadar oksigen terlarut pada reaktor tiap harinya mengalami kenaikan dan penurunan  sesuai  keadaan  suhu  dan  beban organik  pada  air.  Biota  uji  ikan  sepat  dapat bertahan    hidup  dengan  nilai  DO  5  -  6  mg/l dan suhu berkisar 23°-30°C.
Kematian  biota  uji  pada  tahap  aklimatisasi dikarenakan  biota  uji    stress  tidak  bisa menyesuaikan diri terhadap lingkungan yang baru, kondisi ini terjadi kurang dari 10% dari jumlah  populasi  biota  uji  untuk  tahap aklimatisasi.  Berdasar  OECD  (2004),  biota uji  tersebut  dan  air  pengencer  dapat digunakan pada uji toksisitas.

## Range Finding Test
Range  finding  test  adalah  tahapan  yang bertujuan untuk mencari prakiraan konsentrasi terkecil toksikan air limbah yang dapat menyebabkan kematian 100% terhadap biota uji dari jumlah populasi biota uji.  Pada tahap range  finding  test ini  biota  uji dipaparkan  dengan  limbah  industri  batik. tahap  awal  yang  dilakukan  pada  percobaan range  finding  test  ini  adalah  menyiapkan larutan  limbah  dengan  variasi  konsentrasi 0%,  1%,  2%,  3%,  4%,  5%.  Kadar  variasi tersebut akan diencerkan dengan air pengencer  yaitu  air  PDAM  di  Laboratorium Riset  Teknik  Lingkungan  UPN  “Veteran” Jawa  Timur.  Tiap  reaktor variasi  konsentrasi di  isi  biota  uji  sebanyak  masing-masing  10 biota  uji.  Biota  uji  dipaparkan  dengan toksikan  selama  4  hari,  amati  dan  catat kematian ikan sepat setiap 24 jam. Parameter yang  dianalisa  adalah  suhu,  pH,  DO  dan kandungan  krom  (Cr)  pada  masing-masing reaktor  dan  di  cek  setiap  24  jam.  Setelah  itu menentukan konsentrasi terkecil yang menyebabkan kematian ikan sepat 100% dan hasil  range  tersebut  yang  digunakan  dalam uji toksisitas akut.

## Uji Toksisitas Akut
Karakteristik limbah cair batik tulis diperiksa untuk mengidentifikasi parameter zat pencemar yang terkandung dalam limbah cair batik  tulis.  Limbah  cair  batik  tulis  yang dianalisa  adalah  air  murni  tanpa  pengencer. Hasil dari uji laboratorium terhadap karakteristik  limbah  cair  batik  tulis  dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel-2: Karakteristik limbah cair batik tulis
Kadar  toksikan  yang  dipakai  adalah  0,6%, 0,12%, 0,18%, 0,24%,  3%. limbah cair batik tulis  yang  telah  diencerkan  terlihat  lebih bening dibanding saat range finding test yang berwarna  merang  kecoklatan  dan  lengket. Reaksi ikan saat dimasukkan ke bak uji yang diberi  kadar  toksikan  terlihat  berenang dengan tenang, tidak ada tanda-tanda stress.
Gambar-2: Hubungan  kadar  toksikan  (%)  dengan waktu Acute tocicity test (hari) terhadap suhu ( 0 C).
Dari  grafik  diatas  bisa  kita  ketahui  bahwa suhu  pada  air  mengalami  perubahan  baik penurunan  maupun  kenaikan  namun  tidak terlalu  signifikan.  Perubahan  ini  mungkin disebabkan  oleh  beberapa  faktor  diantaranya yaitu : waktu dalam suatu hari, aliran air dan kedalaman  air  serta  bisa  juga  karena penurunan kelarutan gas dalam air. Nybakken  (1988)  menjelaskan  bahwa  suhu merupakan  salah  satu  faktor  yang  sangat penting  dalam  mengatur  proses  kehidupan dan  penyebaran  organisme.  Hujan  yang terjadi  pada  malam  hari  ketiga  diperkirakan mempengaruhi  penurunan  suhu  pada  pagi hari  ketiga.  Pada  kadar  kematian  ikan  sepat tersebut  tidak  di  pengaruhi  oleh  suhu dikarenakan  suhu  pada  reaktor  tidak  begitu fluktuatif  atau  dalam  kisaran  yang  sama. Kaidah  umum  menyebutkan  bahwa  reaksi
kimia dan biologi air (proses fisiologis) akan meningkat  2  kali  lipat  pada  kenaikan  suhu 100°C,  selain  itu  suhu  juga  berpengaruh terhadap penyebaran dan komposisi organisme.
Gambar-  3: Hubungan  kadar  toksikan  (%) dengan  waktu Acute  tocicity  test (hari)  terhadap pH
pH  mengalami  peningkatan  pada  kadar  0%, dan  2,4%  dan.  Untuk  pH  yang  mengalami penurunan  hal  ini  bisa  terjadi  akibat  reaktor yang  berisikan  ikan  mengeluarkan  lendir yang  bersifat  asam  sebegai  bentuk  adaptasi mereka  sedangkan  pH  yang  naik  bisa  terjadi karena  memang  limbah  cair  batik  tulis  yang bersifat  basa  dan  bahan  organik  yang  tinggi. Ikan  sepat  memproduksi  asam  dari  hasil metabolisme  menyebabkan  penurunan  pH, karena  peningkatan  produksi  asam  oleh  ikan sepat  akan  terakumulasi  terus  menerus  di dalam reaktor dapat menyebabkan daya racun dari  amoniak  dan  nitrit.  Hasil  penelitian  pH yang  telah  diamati  masih  memenuhi  syarat sebagai  kelangsungan  hidup  biota  uji  ikan sepat  yaitu  6-9  mg/l.  Tinggi  maupun rendahnya  nilai  pH  di  pengaruhi  oleh beberapa  faktor  diantaranya  yaitu  :  proses dekomposisi  pada  bahan  organik  yang  ada pada  air,  kadar  gas-gas  yang  ada  pada  air, suhu  air,  dan  juga  sinar  matahari.  Dampak yang  ditimbulkan  apabila  terjadi  perubahan pH air yaitu: ikan mudah terserang penyakit, metabolisme  ikan  terganggu,  pertumbuhan ikan  tidak  berkembang  dengan  baik.  pH  air yang  baik  untuk  kehidupan  ikan  yaitu diantara  6-9  apabila  melebihi  angka  9  maka air tersebut tidak layak dan tidak sesuai untuk
lingkungan hidup ikan. Hasil pengukuran DO dapat dilihat pada gambar 4.
Berdasarkan  grafik  4  setiap  hari  kandungan DO mengalami kenaikan dan penurunan, DO mengalami penurunan dikarenakan kandungan  organik  dalam  air  selain  itu  juga disebabkan  aktifitas  ikan  yang  mengurangi oksigen dalam air, namun masih omemenuhi kadar DO optimum dalam air yaitu 5-6 mg/l.
Gambar-  4: Hubungan  kadar  toksikan  (%) dengan  waktu acute  tocicity  test (hari)  terhadap DO (mg/L)
Perhitungan LC 50 Perhitungan  nilai  LC 50 dilakukan  dengan metode lithfield  wilcoxon .  Berdasarkan perhitungan LC 50 -96 jam didapatkan  1,86%

## Penyerapan Timbal dalam biota uji
Pada  akhir  penelitian  dilakukan  analisa kandungan  logam  timbal  dalam  biota  ikan sepat.  Metode  pengukuran  menggunakan metode AAS. Hasil analisa dapat dilihat pada tabel 3.

## Tabel -3: Akumulasi Logam Berat timbal
Dari  tabel  3  dapat  dilihat  bahwa  biota  uji dalam  penelitian  mengandung  logam  berat timbal. Meskipun timbal yang terserap dalam tubuh  biota  uji  relatif  kecil,  namun  sejumlah timbal  yang  kecil  tersebut  semakin  lama dapat  merusak  jaringan  tubuh  biota  uji. Semakin  besar  nilai  BCF  yang  didapatkan
menandakan bahwa semakin besar zat toksik yang  terakumulasi  dalam  biota  uji  tersebut. Semakin  besar  zat  toksik  yang  terakumulasi didalam  biota  uji  menandakan  bahwa toksikan tersebut semakin toksik.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dan pembahasan yang  telah  dilakukan  didapatkan  beberapa kesimpulan sebagai berikut :
1. Nilai  LC 50 limbah  cair  batik  tulis terhadap  ikan  sepat  didapat  nilai  1,86% dan  termasuk  dalam  kategori  sangat toksik.
2. Pada kadar konsentrasi limbah cair batik tulis  0,6%  didapatkan  nilai  krom  (Cr) pada  ikan  sepat  sebesar  0,002  mg/l  , sedangkan pada kadar konsentrasi limbah  cair  batik  tulis  3%  didapatkan nilai  krom  (Cr)  pada  ikan  sepat  sebesar 0,028 mg/l.
3. Bioconcentration  Factor (BCF)  adalah perbandingan  konsentrasi  zat  toksik yang  terkandung  dalam  tubuh  biota  uji terhadap  konsentrasi  zat  toksik  yang terkandung dalam media uji. Pada kadar konsentrasi  0,6%    nilai  BCF  ikan  sepat adalah  0,043  mg/l  dan  pada  kadar konsentrasi  3%  nilai  BCF  ikan  sepat adalah 0,128 mg/l.
4. Semakin  tinggi  konsentrasi  limbah  cair batik tulis yang dimasukkan makan nilai BCF nya akan semakin tinggi.
5. Setelah  terpapar  toksikan  ikan  sepat berenang  keatas  permukaan  dan  tidak beraturan  ,  memiliki  warna  sisik  agak memudar,  sirip  ikan  sepat  banyak  yang sobek,  warna  mata  menjadi  keputih- putihan,  dan  warna  kulit  perutnya berubah menjadi putih kemerah- merahan.

## DAFTAR PUSTAKA
Afrianto,  E.  dan  E.  Liviawaty.  2005, Pakan Ikan, Kanisius, Yogyakarta.
Anonim,Batik,http://id.wikipedia.org/wiki/Ba tik,  diakses  pada  27  September  2017,
10:39. Anonim,IkanSepat,http://id.wikipedia.org/wi ki/Ikansepat, diakses pada 27 September 2017, 15:11. Anonim, Uji Toksisitas Lingkungan,
http://id.wikipedia.org/wiki/Ikansepat, diakses  pada  30  September  2017, 06:21. APHA, AWWA, WPCF. 2005, Toxicity Test Method for Aquatic Organism Standard  Method  for  the  Examination of Water and Waste Water , Wasington DC  sixteen  edition,  American  public helth association, pp : 689-729.
Ariens, J. E. dkk. 1986, Pengantar
Toksikologi  Umum,  Gajah  Mada University, Press, Yogyakarta. Ayu  Meiga  Sari.  2014,  Pengaruh  Cekaman Kromium  Pada  Limbah  Cair  Batik Terhadap Pertumbuhan Eichornia crassipes dan Salvinia molesta, Jurusan  Biologi,  Fakultas  Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas  Negeri  Surabaya.  Lentera Bio Vol. 3 No. 1, Oktober 2017.
Boyd,C.E., 1991, Water Quality and Aeration inShrimp Farming, Aurbun University,
Alabama,  Birmingham  Publishing  Co. Birmingham, Alabama Dheorono, A. 2016, Uji Toksisitas Akut Pada Air Limbah Industri Batik Menggunakan Bioindikator Oreochromis mossambicus dan Oreochromis niloticus , Surabaya.
Di  Giulio  RT,  Hinton  DE.  2008,  The Toxicology  of  Fishes,  Taylor  & Francis Group: 1101.
Diniyati,  W.  2012,  Karakteristik  Air  Sumur di Sekitar Aliran Limbah Cair Industri Kerajinan  Batik  di  Desa  Kliwonan Kecamatan Masaran Kabupaten Sragen,  Universitas  Muhammadiyah Surakarta. Effendi,  H.  2003.  Telaah  Kualitas  Air  bagi Pengelolaan Sumber Daya dan
Lingkungan Perairan, Cetakan Kelima,Yogjakarta: Kanisius. Harmita.  2006,  Buku  Ajar  Analisis  Hayati, 42, Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Husni,  Hayatul  dan  Esmiralda.  2012,  Uji Toksisitas  Limbah  Cair  Industri  Tahu Terhadap Ikan Mas (Cyptinous carpio) ,  Studi  Kasus  Limbah  Industri Tahu  “Super”    Padang,  Jurnal
Universitas Andalas, hal 1-13.
Idris,  M.  2013,  Bahan  Ajar  Ekotoksikologi Perairan,  Program  Studi  Manajemen
Sumberdaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Haluoleo, Kendari. Idris,  M.,  Emiyarti.,  Sabilu,  K.  2013, Penuntun  Praktikum  Ekotoksikologi Perairan, Tim Pengajar Ekotoksikologi
Jurusan  Perikanan,  Fakultas  Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Haluoleo, Kendari. Kasam,  A.  Yulianto  dan  Rahmayanti,  A.E, 2009,  Penurunan  COD  dan  Warna Pada  Limbah  Cair  Industri  Batik dengan Menggunakan Aerobic
Roughing  Filter  Aliran  Horizontal,
Logika, 6 (1): 27-31.
Kendran  A.A.S.  2013,  Toksisitas  Ekstrak Daun  Sirih  Merah  pada  Tikus  Putih Penderita  Diabetes  Melitus, Jurnal Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.
Keputusan  Gubernur  jawa  timur  no.  72 Tahun  2013  Tentang  Baku  Mutu Limbah  Cair  Bagi    Industri  atau Kegiatan  Usaha  Lainya    di  Jawa Timur.
Loomis,  T.  A.  1978,  Toksikologi  dasar,
Terjemahan  oleh  Dunatus,  1A  Edisi ketiga,  Yogyakarta,  IKIP  Semarang Press.
Mangkoediharjo,  S.  1999,  Ekotoksikologi Keteknikan,  Teknik  Lingkungan  ITS, Surabaya.
M. Ghufran, H  Kordi  K. 2007 ,  Pengelolaan Kualitas Air Dalam Budidaya Perairan, Jakarta.
Mustofa,  N.P.  2010,  Kerusakan  jaringan insang  ikan  nila  akibat  deterjen,
Jurusan  Perikanan  Fakultas  perikanan dan kelautan Universitas Diponegoro.
Nybakken,  J.  W.  1988,  Biologi  Laut,  Suatu Pendekatan Ekologis. Jakarta: Gramedia. OECD. 2014, Detailed Review Paper on Fish
Screening  Assays  for  the  Detetion  of
Endocrinr  Active  Subtances ,  No.47. ENV/JM/MONO. 2004, pp : 18-170. Ortanez,  A.  K  .2008,  Trichogaster  sp,  http:// www. fishbase. org/ Summary/ Species
Summary.  Php  (diakses  tanggal  12
April 2018) Pratiwi Eira Hartini. 2014, Pengaruh
Toksisitas  Akut  Air  lindi  Terhadap
Ikan Mas (Cyptinous Carpio) , Fakultas Perikanan  Dan  kelautan,  Univeristas Airlangga. Rand GM, PetrocelliSR. 1985, Fundamentals
of  Aquatic  Toxicology  Methods  and
Application, Washington DC(US), Hemisphere Publishing Coorporation. Saedah,  Ueis.  2015,  Gema  Industri  Kecil, Jakarta,  Direktorat  Jendral  Industri Kecil Menengah.
Samsundari,  S  dan  Adhy W,  2013  ,  Analisis Penerapan  Biofilter  Dalam  Sistem Resirkulasi  Terhadap  Mutu  Kualitas Air  Budidaya  Ikan  Sidat  (Angulilla Bicolor).  UniversitasMuhammadiyah Malang. Samudro,  G.,  dan Sarwoko ,  M.  2009,
Ekotoksikologi Teknosfer, Guna Widya.
Sudiarta,  I.W.  dan  D.A.  Yulihastuti.  2010,
Biosorpsi  Kromium  pada  Serat  Sabut
Kelapa  Hijau (Cocos  nucifera) ,  Jurnal Kimia, 4 (2): 158-266. Suhendra.  2009,  Pengolahan  Limbah  Cair Industri Batik. Tahir,  I.  2012, Prinsip  Umum  Toksikologi
Perairan , Universitas Brawijaya. Malang.
USEPA.  2012, Methods  for  meansuring  the
Acute Toxicity of Effluent and Receiving  Waters  to  Freshwater  and Marine Organism,. 5th Edition, October 2002, EPA- 821-R-02-12-U.S, Enviromental Protection Agency,Washington, D.C, Surabaya. Zennoveld, N. Huisman, E.A. 1991, Budidaya Ikan , Gramedia, Jakarta