Research Article

## UNPAD

## ANTI-INFLAMMATORY AND ANALGESIC ACTIVITY OF RETICULATED PYTHON FAT OIL IN VIVO EVALUATION
Dina A. Febriani 1 , Hajrah *1 , Niken Indriyanti 1 1Pharmacology Department, Faculty of Pharmacy, Mulawarman University, Samarinda, Indonesia
Submitted 05 June 2024; Revised 04 July 2024; Accepted 04 July 2024; Published 31 July 2024 *Corresponding author: hajrah@farmasi.unmul.ac.id
Abstract Empirically,  python  fat  oil  ( Malayopython reticulatus )  is  used  by  local  people  in  Miau  Baru, Kongbeng, East Kalimantan to treat swelling and inflammation. This study aims to determine physical characteristics, anti-inflammatory, and analgesic activity of python fat oil. Methods used to determine physical characteristic are organoleptic, density, viscosity, pH, and refractive index tests. For anti- inflammatory and analgesic tests, albino wistar rats and balb/c mice used as experimental animal and were divided into 6 groups consisting of a normal group, a positive group, a negative group, and 3 test groups, each with concentrations of 5%, 10%, and 15%. Methods used for this test are paw edema, induced with carrageenan 1%, and hot plate method. Results obtained are snake oil has a yellow-orange color, unique odor, bland taste, density of 0.870 g/mL, viscosity of 2.2 Pa.s, pH of 4.1, and refractive index of 1.463. Percent edema formed due to carrageenan induction in test groups of 5% concentration is 0.33%, 10% concentration is 0.43%, and 15% concentration is 0.25%. Percent of increased survival time in test groups of 5% concentration is 4.44%, 10% concentration is 3.87%, and 15% concentration is 3.11%. Conclusion is snake oil has anti-inflammatory and analgesic activity.
Keywords: Analgesic, Anti-Inflammatory, In Vivo, Python Fat Oil, Reticulated python

## UJI IN VIVO AKTIVITAS ANTIINFLAMASI DAN ANALGESIK MINYAK ULAR SANCA KEMBANG
Abstrak Secara empiris, minyak ular sanca kembang ( Malayopython reticulatus ) digunakan oleh Masyarakat Miau Baru, Kecamatan Kongbeng, Kalimantan Timur untuk mengobati bengkak dan nyeri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakteristik fisik, aktivitas antiinflamasi, dan analgesik dari minyak ular sanca kembang. Metode yang digunakan dalam menentukan karakteristik fisik adalah uji organoleptik, bobot jenis, viskositas, pH, dan indeks bias. Pengujian antiinflamasi dan analgesik digunakan tikus putih galur wistar dan mencit galur balb/c sebagai hewan uji dan dibagi kedalam 6 kelompok, yaitu kelompok normal, kelompok kontrol potisif, kelompok kontrol negatif, dan 3 kelompok uji, masing- masing  dengan  konsentrasi  5%,  10%,  dan  15%.  Metode  yang  digunakan  adalah paw edema yang diinduksi karagenan 1% dan metode hot plate . Hasil yang didapatkan adalah minyak ular bewarna kuning-orange, berbau khas, berasa hambar, memiliki bobot jenis 0,870 g/mL, viskositas 2,2 Pa.s, pH 4,1, dan indeks bias 1,463. Persen edema yang terbentuk akibat induksi karagenan pada kelompok uji konsentrasi 5% sebesar 0,33%, konsentrasi 10% sebesar 0,43%, dan konsentrasi 15% sebesar 0,25%. Persen peningkatan waktu bertahan pada kelompok uji konsentrasi 5% sebesar 4,44%, konsentrasi 10% sebesar 3,87%, dan konsentrasi 15% sebesar 3,11%. Kesimpulannya adalah minyak ular sanca kembang memiliki aktivitas antiinflamasi dan analgesik.
Kata Kunci: Analgesik, Antiinflamasi, In Vivo, Minyak Ular Sanca Kembang, Ular Sanca Kembang

## 1.  Pendahuluan
Penyakit  inflamasi  atau  radang  serta rasa nyeri sering sekali ditemui dalam keadaan sehari-hari.  Inflamasi  merupakan  suatu respons alami tubuh untuk melawan serangan dari  zat  asing  seperti  mikroorganisme, jaringan yang rusak, serta antigen agar dapat berfungsi  kembali  seperti  keadaan  semula (normal). Tanda-tanda yang akan dialami jika mengalami inflamasi adalah timbulnya warna kemerahan  (rubor),  panas  (kalor),  bengkak (tumor), serta rasa nyeri (dolor).1 Nyeri  adalah  suatu  kondisi  atau peristiwa  tidak  nyaman  yang  diderita  oleh seseorang  sehingga  menimbulkan  rasa  sakit yang disebabkan oleh adanya jaringan tubuh yang mengalami kerusakan. Nyeri inflamasi merupakan nyeri yang terjadi akibat adanya trauma jaringan nyeri serta adanya inflamasi yang  mengaktivasi  silent  nociceptor. Nociceptor memiliki fungsi sebagai penerima rangsangan nyeri.2 Terdapat beberapa pengobatan yang  dapat  digunakan  dalam  mengobati pembengkakan  serta  rasa  nyeri  baik pengobatan  sintesis  maupun  pengobatan tradisional.  Pengobatan  tradisional  yang sering  digunakan  oleh  masyarakat  adalah minyak  gosok.  Salah  satu  masyarakat  yang masih  menggunakan  pengobatan  tradisional dalam  mengobati  pembengkakan  dan  nyeri adalah  masyarakat  dari  desa  Miau  Baru, Kecamatan  Kongbeng,  Provinsi  Kalimantan Timur. Secara  empiris,  masyarakat  di  desa Miau  Baru,  Kecamatan  Kongbeng,  Provinsi Kalimantan  Timur  memanfaatkan  lemak ular  sanca  kembang  untuk  mengobati  luka, bengkak,  dan  nyeri  dengan  cara  membuat minyak  gosok  dari  lemak  ular  tersebut. Masyarakat  setempat  mendapatkan  minyak ini dengan cara mengambil lemak yang berada di  bawah  permukaan  kulit  dari  ular  sanca kembang  tersebut  kemudian  dibersihkan dan  diletakkan  ke  dalam  wadah,  lalu  lemak tersebut dijemur untuk mendapatkan minyak. Penggunaan  dari  minyak  ini  dalam  1  hari bergantung  kepada  tingkat  keparahan  dan besarnya bengkak yang diderita. Penggunaan empiris  ini  juga  dikonfirmasi  oleh
masyarakat  Desa  Taman  Bogo,  Kecamatan Purbolinggo,  Kabupaten  Lampung  Timur dimana  masyarakat  pada  desa  tersebut  juga menggunakan ular sanca kembang ini sebagai obat  alternatif  untuk  menyembuhkan  luka, sakit  tulang,  sendi  sakit,  sesak  nafas,  obat kudis.3  Masyarakat  pada  Desa  Setunggul, Kecamatan  Silat  Hilir,  Kabupaten  Kapuas Hulu juga menggunakan ular sanca kembang ini  sebagai  pengobatan  alternatif  dalam mengobati luka, gatal, korengan, dan alergi.4 Meskipun secara empiris minyak ular sanca kembang  dipercayai  memiliki  aktivitas antiinflamasi  dan  analgesik,  masih  belum ada penelitian yang membuktikan hubungan antara minyak ular sanca kembang ini dalam mengurangi pembengkakan dan rasa nyeri.

## 2.  Metode
2.1.  Alat Piknometer  10mL  (Pyrex),  pH  meter ATC-009,  timbangan  digital OneMed EHA701,
viskometer
Rion VT-06,
refraktometer Atago, pletismometer air raksa, GCMS Agilent 7890A, hot plate digital Stuart SD160, alat-alat gelas (Herma), dan labu ukur 10 mL (Herma).
2.2.  Bahan Vaseline  flavum  (PT.  Brataco), karagenan  lambda  (Cina),  NaCl  fisiologis ( Merck Millipore Corporation ), Flamar ® gel (Sanbe),  alkohol  swab  ( OneMed ),  dan  kasa ( OneMed ), perekat ( Ultrafix OneMed ). Minyak  ular  sanca  kembang  diambil dari  produsen  minyak  ular  sanca  kembang di  desa  Miau  Baru,  Kecamatan  Kongbeng, Kutai Timur yang bernama Ibu Inuq Juk. Mencit jantan galur Balb/c berusia 8-12 minggu  dan  tikus  jantan  galur  Wistar  yang berusia  12-14  minggu.  Hewan  uji  diperoleh dari  UD.  Wistar  Peternakan  Hewan  Uji Yogyakarta.  Berat  badan  hewan  uji  yang digunakan  untuk  mencit  berada  di  rentang 20  -  30  gram,  sedangkan  tikus  dengan berat  200-300  gram.  Sebelum  pengujian, hewan  diaklimatisasi  selama  7  hari  dan  di tempatkan di dalam ruangan dengan 12 jam siklus  gelap-terang.  Ukuran  kandang  yang digunakan  hewan  uji  sebesar  52  ×  36,5  ×
15  cm  dan  setiap  kandang  berisi  5  ekor hewan uji. Pemberian pakan pada hewan uji mencit sebanyak 5g perhari dan untuk tikus sebanyak  200g  perhari.  Pemberian  minum dilakukan  secara ad libitum .  Penggantian sekam dilakukan setiap 3-4 hari sekali dalam 1  pekan.  Penelitian  ini  telah  mendapatkan persetujuan  etik  untuk  menggunakan hewan  uji  dengan  nomor  izin  etik  No.182/ KEPK-FFUNMUL/EC/EXE/12/2023. Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium  Riset dan  Pengembangan  FARMAKA  TROPIS Universitas Mulawarman.
2.3.  Prosedur 2.3.1. Pengujian Karakteristik Fisik dan Kandungan Kimia Minyak Ular Sanca Kembang Pengujian karakteristik fisik dilakukan dengan  menentukan  pH,  bobot  jenis, kekentalan,  indeks  bias,  serta  organoleptik berupa  warna,  rasa,  dan  aroma  dari  minyak ular sanca kembang. Pengujian pH dilakukan menggunakan  pH  meter,  pengujian  bobot jenis  dilakukan  menggunakan  piknometer, pengujian kekentalan menggunakan viskometer  rion,  pengujian  indeks  bias dilakukan  menggunakan  refraktometer. Pengujian  dilakukan  tiga  kali  replikasi  dan dihitung nilai rata-rata hasil yang diperoleh. Pengujian kandungan kimia dilakukan dengan menggunakan  alat  GC-MS  Agilent  7890A dengan detektor MS Agilent 5977B GC/MS.
2.3.2. 2.3.2.  Pengujian Aktivitas Antiinflamasi  Minyak  Ular  Sanca Kembang Pengujian  antiinflamasi  dilakukan menggunakan  metode  paw  edema. 5 Pada pengujian  ini,  hewan  uji  dibagi  menjadi  6 kelompok yang terdiri dari 5 ekor tikus putih jantan dengan cara menginduksi telapak kaki tikus dengan menggunakan karagenan lambda secara subplantar. Hewan uji dikelompokkan menjadi 6 kelompok yaitu kelompok normal, kelompok negatif, kelompok kontrol positif, dan  kelompok  kontrol  uji  konsentrasi  5%, konsentrasi 10%, dan konsentrasi 15%. Variasi konsentrasi dilakukan dengan mencampurkan vaseline  flavum  dengan  minyak  ular  sanca
kembang.  Kelompok  pertama  adalah kelompok kontrol normal yang tidak diberikan perlakuan,  kelompok  kedua  adalah  kontrol negatif  yang  diberikan  vaselin,  kelompok ketiga adalah kontrol positif berupa natrium diklofenak (Flamar® gel), dan tiga kelompok lainnya adalah kelompok uji yang diberikan minyak  ular  sanca  dengan  konsentrasi  5%, 10%, dan 15% secara topikal di telapak kaki yang udem karena diinduksi oleh karagenan lambda.  Plestismometer  digunakan  untuk mengamati terbentuknya edema. Pengamatan dilakukan  dilakukan  tiap  1  jam  dari  jam  ke 0  hingga  jam  ke-7.  Pengukuran  Kemudian hasil yang diperoleh akan dihitung persen rata -rata  inhibisi  edema  yang  selanjutnya  akan dilakukan analisis statistik menggunakan One way ANOVA.

## 2.3.3. Pengujian Aktivitas Analgesik Minyak
Ular Sanca Kembang Pengujian  analgesik  dilakukan  dengan menggunakan  metode hot plate pada  suhu 55℃. 6 Pada pengujian ini, hewan uji dibagi menjadi 6 kelompok yang terdiri dari 3 ekor mencit  jantan.  Hewan  uji  dikelompokkan menjadi 6 kelompok yaitu kelompok normal, kelompok negatif, kelompok kontrol positif, dan  kelompok  kontrol  uji  konsentrasi  5%, konsentrasi  10%,  dan  konsentrasi  15%. Selanjutnya,  mencit  diletakkan  diatas  hot plate  sebagai  waktu  ke-0  sebelum  diberi perlakuan.  Kemudian,  kaki  mencit  diperban menggunakan  kasa  dan  diikat  dengan  kuat agar mencit tidak mudah untuk melepas kain kasa tersebut. Setelah dibalutkan kasa sediaan obat dan sediaan uji dibiarkan meresap kurang lebih  1  menit.  Lalu,  dilakukan  pengukuran waktu  yang  dibutuhkan  oleh  tikus  untuk bereaksi terhadap panas (tikus menjilat kaki belakang)  pada  menit  ke  30,  60,  90,  120, dan 180 setelah pemberian. Kemudian hasil yang diperoleh akan dihitung persen rata-rata peningkatan waktu bertahan yang selanjutnya akan dilakukan analisis statistik menggunakan One way ANOVA.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
3.1.  Karakteristik  Fisik  dan  Kandungan Kimia Minyak Ular Sanca Kembang
Pengamatan  karakteristik  fisik  dan kimia  dilakukan  setelah  mendapatkan minyak  ular  sanca  kembang  dari  produsen minyak  ular  sanca  kembang  di  desa  Miau Baru,  Kecamatan  Kongbeng,  Kutai  Timur. Karakteristik fisik yang diamati berupa warna, rasa, aroma, berat jenis, pH, kekentalan, dan indeks bias.
Hasil  yang  diperoleh  berdasarkan pengujian  yang  telah  dilakukan  adalah minyak ular sanca kembang memiliki warna kuning-orange,  berwarna  kuning-orange, berbau khas, memiliki rasa hambar, memiliki bobot jenis sebesar 0,870 g/mL, pH sebesar 4,1,  viskositas  sebesar  2,2  Pa.s,  dan  indeks bias  sebesar  1,463.  Warna  minyak  yang diperoleh  dari  penelitian  ini  menandakan bahwa  minyak  ular  sanca  kembang  belum teroksidasi.  Jika  minyak  sudah  teroksidasi, warna minyak tersebut akan berubah menjadi coklat  kegelapan.  Warna  kuning  yang diperoleh  dari  minyak  ini  dapat  menjadi salah satu ciri khas yang dimiliki oleh asam lemak tidak jenuh. Minyak hewani biasanya menghasilkan  bau  yang  amis.  Hal  ini  dapat disebabkan  oleh  adanya  interaksi  interaksi antara  trimetil  amin  oksida  dengan  ikatan rangkap  dari  asam  lemak  tak  jenuh. 7 Berat jenis  minyak  ular  sebesar  0,870  g/mL. Indeks  bias  dari  minyak  ini  adalah  1,463, parameter ini diuji untuk mengetahui kualitas dari  suatu  minyak. 8 pH  minyak  ular  yang didapatkan dari pengujian adalah 4,1. Hal ini menunjukkan  bahwa  minyak  ular  termasuk kedalam golongan asam lemah. 9 Kekentalan dari  minyak  ular  ini  adalah  2,2  Pa.s.  Nilai viskositas mempengaruhi difusi dari minyak kedalam kulit. Semakin besar nilai viskositas, maka  semakin  sulit  bahan  tersebut  untuk
mengalir  sehingga  menyebabkan  sulitnya minyak tersebut terabsorbsi kedalam kulit. 10 Hasil  analisis  kandungan  kimia  dari minyak  ular  sanca  kembang  menggunakan GC-MS,  teridentifikasi  8  senyawa  yang terkandung  pada  pada  sampel  yang  dapat dilihat pada Tabel 1.
Beberapa  senyawa  yang  terkandung di  dalam  minyak  ular  ( Malayopython reticulatus )  yang  memiliki  peran  sebagai antiinflamasi  dan  analgesik  adalah  asam linoleat, asam palmitoleat, asam petroselinat, asam  oleat,  dan  asam  eikosenoat.  Asam linoleate  berperan  dalam  menurunkan aktivitas COX-2 sehingga dapat mengurangi produksi  prostaglandin  dan  sitokin. 11 Asam palmitoleat  dan  asam  petroselinat  berperan dengan  cara  menghambat  metabolisme  dari asam  arakidonat. 12,13 Asam  oleat  berperan dengan  cara  berikatan  dengan  reseptor glukokortikoid untuk menghambat masuknya leukosit ke daerah jaringan yang mengalami cedera. 14 Selain  itu,  asam  eikosenoat  juga berperan dengan menurunkan aktivitas COX- 2. 15 Nyeri merupakan salah satu manifestasi dari inflamasi. Oleh sebab itu, kandungan yang terdapat  pada  minyak  ular  sanca  kembang dapat  berperan  sebagai  antiinflamasi  dan analgesik.
3.2.  Uji  Aktivitas  Antiinflamasi  Metode Paw Edema Radang dapat terjadi akibat adanya agen penginduksi yang dapat merangsang mediator inflamasi.  Terdapat  tiga  fase  pembentukan edema yang dihasilkan dari karagenan. Fase pertama berlangsung selama 90 menit dimana terjadinya pelepasan histamin dan serotonin. Fase  kedua  terjadi  pada  1,5  hingga  2,5  jam
% Senyawa 53.38 Asam Petroselinat 22.61 Asam Palmitat 12.19 Asam Stearat 6.66 Asam Linoleat 2.78 Asam Oleat 1.10 Asam Palmitoleat 0.72 Asam (Z)-11-eikosenoat 0.57 Asam Miristat
Tabel 1. Kandungan Kimia Minyak Ular Sanca Kembang
yang  menyebabkan  terjadinya  pelepasan bradikinin.  Fase  terakhir  terjadi  pelepasan prostaglandin pada jam ke-3 setelah induksi. 16
Obat antiinflamasi umumnya diberikan untuk menghambat  pelepasan  mediator  inflamasi sehingga  mengurangi  peradangan  dan pembengkakan  yang  terjadi.  Minyak  sanca ular kembang dipercaya secara turun menurun oleh masyarakat memiliki kemampuan untuk meredakan kondisi radang dan hasil pengujian aktivitas antiinflamasi dari minyak ini dapat dilihat pada tabel 2.
Perhitungan aktivitas antiinflamasi pada penelitian ini dilakukan dengan menggunakan rumus sebagai berikut :
Dimana, V0 = Volume telapak kaki hewan awal sebe- lum diberi perlakuan V t = Volume telapak kaki hewan pada setiap pengamatan setelah diberi perlakuan
Data  yang  diperoleh  menunjukkan bahwa  pada  konsentrasi  5%,  persen pembentukan  edema  yang  terbentuk  adalah 0,33%.  Pada  konsentrasi  10%,  persen edema  yang  terbentuk  adalah  0,43%,  pada konsentrasi  15%,  persen  edema  yang
A B C D E F G H
Gambar 1. Kandungan  Minyak  Ular  Sanca  Kembang  (a) Asam  miristat  (b) Asam  palmitoleat  (c) Asam palmitat (d) Asam linoleat (e) Asam petroselinat (f) Asam oleat (g) Asam stearat (h) Asam (Z)-11-eikosenoat
Kelompok Perlakuan % Pembentukan edema % Rata- rata inhibisi 0 jam 1 jam 2 jam 3 jam 4 jam 5 jam 6 jam 7 jam Konsentrasi 5% 0,00 0,35 0,44 0,52 0,49 0,36 0,29 0,19 0,33 Konsentrasi 10% 0,00 0,37 0,52 0,66 0,58 0,52 0,41 0,38 0,43 Konsentrasi 15% 0,00 0,23 0,45 0,49 0,32 0,22 0,19 0,14 0,25 Kontrol Negatif 0,00 0,27 0,51 0,65 0,77 0,87 0,84 0,78 0,59 Kontrol Positif 0,00 0,36 0,51 0,62 0,68 0,57 0,51 0,45 0,46 Kontrol Normal 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00

## Tabel 2. Persentase Pembentukan Edema Telapak Kaki Tikus
terbentuk  adalah  0,25%.  Hasil  ini  dapat menunjukkan  bahwa  minyak  ular  sanca kembang  memiliki  aktivitas  antiinflamasi dan  lebih  efektif  jika  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  positif.  Berdasarkan  data tersebut  dapat  diketahui  bahwa  minyak ular  sanca  kembang  lebih  efektif  digunakan pada  konsentrasi  15%.  Pada  Konsentrasi 10%  memiliki  aktivitas  yang  lebih  kecil dibandingkan  dengan  kelompok  uji  5%, 15%.  Hal  ini  dikarenakan  kemungkinan pada  kelompok  uji  konsentrasi  10%,  hewan mengalami  stress  saat  dilakukan  pengujian. Hal ini yang mungkin memicu aktivasi sistem imun bawaan pada hewan coba yang akhirnya menyebabkan produksi sitokin yang berlebih. Sitokin  yang  diproduksi  dapat  bersifat proinflamasi  dan  antiinflamasi.  Akibatnya sediaan  yang  diberikan  tidak  menunjukkan efek terapi yang diharapkan. 18
Data  yang  diperoleh  selanjutnya dilakukan pengujian statistik. Data yang  diperoleh  dilakukan  pengujian pendistribusian  data  terlebih  dahulu  dan data  yang  diperoleh  terdistribusi  secara normal  (p>0,05).  Selanjutnya  data  tersebut dilanjutkan  dengan  menggunakan  ANOVA. Berdasarkan data ANOVA, diperoleh bahwa pada  jam  ke  1  hingga  jam  ke-7  pengujian menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan antar kelompok perlakuan (p<0,05) sehingga dapat diketahui bahwa minyak ular
sanca  kembang  memiliki  aktivitas  sebagai antiinflamasi.
Efektivitas dari masing-masing kelompok  uji  dapat  dibuktikan  dengan melakukan  uji  lanjutan  ANOVA  dengan menggunakan Tukey.  Berdasarkan  analisisis yang telah dilakukan pada jam ke-7 dengan melakukan  perbandingan  antara  kelompok uji  dan  kelompok  kontrol  positif  (p>0,05). Diperoleh nilai kelompok uji 5% (sig=0,874), kelompok uji 10% (sig=0,874), kelompok uji 15%  (sig=0,964),  jika  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  positif.  Berdasarkan data  yang  diperoleh  dapat  diketahui  bahwa ketiga kelompok uji memiliki aktivitas yang melebihi  kelompok  kontrol  positif  yang digunakan dalam pengujian.
3.3.  Uji  Aktivitas  Analgesik  metode Hot Plate
Dimana, W0 = waktu bertahan hewan sebagai waktu awal sebelum diberi perlakuan W t = waktu bertahan pada setiap pengamatan setelah diberi perlakuan
Nyeri  yang  diperoleh  distimulasi  dari pemberian  rangsangan  panas  oleh hot plate dengan menggunakan suhu 55℃. Pemilihan
Gambar 2. Grafik Persentase Kenaikan Volume Edema Telapak Kaki Tikus
suhu  55℃  pada  pengujian  ini  dikarenakan pada  suhu  tersebut  dapat  menyebabkan kerusakan  jaringan. 19 Berdasarkan  data yang  diperoleh  dapat  diketahui  bahwa  pada konsentrasi  5%,  persen  peningkatan  waktu bertahan yang diperoleh adalah 4,44%, pada konsentrasi  10%  persen  peningkatan  waktu bertahan sebesar 3,87%, dan pada konsentrasi 15%  persen  peningkatan  waktu  bertahan sebesar  3,11%.  Berdasarkan  pengujian analgesik menggunakan metode hot plate yang didapatkan  juga  diketahui  bahwa  semakin tinggi  konsentrasi  maka  semakin  menurun aktivitas  analgesik  yang  diperoleh.  Hal  ini kemungkinan  dapat  diakibatkan  tingginya konsentrasi  minyak  sehingga  menyebabkan sulit untuk berdifusi kedalam kulit. 20 Volume pori, ukuran pori, serta luas permukaan dapat mempengaruhi adsorpsi dari minyak kedalam kulit. 21 Data  yang  diperoleh  selanjutnya dilakukan  pengujian  statistik.  Data  yang
diperoleh dilakukan pengujian pendistribusian data terlebih dahulu dan data yang diperoleh terdistribusi  secara  normal  (p>0,05). Selanjutnya data tersebut dilanjutkan dengan menggunakan  ANOVA.  Berdasarkan  data ANOVA,  pengujian  menunjukkan  bahwa terdapat  perbedaan  yang  signifikan  antar kelompok perlakuan (p<0,05) sehingga dapat diketahui bahwa minyak ular sanca kembang memiliki aktivitas sebagai analgesik. Efektivitas dari masing-masing kelompok  uji  dapat  dibuktikan  dengan melakukan  uji  lanjutan  ANOVA  dengan menggunakan Tukey.  Berdasarkan  analisisis yang telah dilakukan pada menit ke-180 dengan melakukan  perbandingan  antara  kelompok uji  dan  kelompok  kontrol  positif  (p>0,05). Diperoleh nilai kelompok uji 5% (sig=0,959), kelompok uji 10% (sig=0,973), kelompok uji 15%  (sig=0,297),  jika  dibandingkan  dengan kelompok  kontrol  positif.  Berdasarkan  data yang diperoleh dapat diketahui bahwa ketiga
Kelompok Perlakuan %Peningkatan Waktu Bertahan % Rata-rata 0 menit 30 menit 60 menit 90 menit 120 menit 180 menit Konsentrasi 5% 0,00 3,84 4,54 4,87 7,08 6,34 4,44 Konsentrasi 10% 0,00 3,10 4,19 4,63 6,11 5,20 3,87 Konsentrasi 15% 0,00 2,55 2,95 3,77 5,47 3,91 3,11 Kontrol Negatif 0,00 0,01 0,00 0,05 0,08 0,08 0,04 Kontrol Positif 0,00 2,31 3,98 4,45 5,71 4,55 3,50 Kontrol Normal 0,00 0,01 0,02 0,08 0,07 0,08 0,04

## Tabel 3. Persentasi Peningkatan Waktu Bertahan Mencit Pada Hot Plate
Gambar 3. Grafik Persentasi Peningkatan Waktu Bertahan Mencit Pada Hot Plate
kelompok  uji  menunjukkan  aktivitas  yang melebihi  kelompok  kontrol  positif  yang digunakan dalam pengujian.
4.  Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan,  dapat  diketahui  bahwa  minyak ular  sanca  kembang  memiliki  aktivitas sebagai  antiinflamasi  dan  analgesik  dengan menghitung persen pembentukan edema dan persentasi  ketahanan  hewan  terhadap hot plate .
Referensi 1.  Safitri A, Roosdiana A. Biokimia Bahan Alam Analisis  dan  Fungsi.  Media  Nusa Creative: Malang, 2020.
2.  Setyawati M. Electronical Games Untuk Mengatasi  Nyeri  Perawatan  Luka  Pada Anak  Post  Operasi.  UNY  PRESS: Yogyakarta, 2020.
3.  Pariyanto,  Santoso,  Hidayat  T,  Darwin C. Pemanfaatan Hewan Reptilia Sebagai Obat Tradisional Oleh Masyarakat Desa Taman  Bogo  Kecamatan  Purbolinggo Kabupaten  Lampung  Timur.  SETAWAR ABDIMAS. 2021;1:15–18.
4.  Krisyanto  RD,  Ardian  H,  Anwari  MS. Kajian  Etnozoologi  Untuk  Pengobatan Suku  Dayaksebaruk  Di  Desa  Setunggul Kecamatan Silat Hilir Kabupaten Kapuas Hulu. J Hutan Lestari. 2019;7:1282–1289.
5.  Winda  Suwandi  D,  Puspita  T,  Nuari DA,  Hamdani  S.  Aktivitas  Analgetika dan  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  dan Fraksi  Daun  Jambu  Mawar  (Syzygium jambos  L.)  Secara  In  Vivo.  J  Sains  dan Kesehat.2021;3:218–226.
6.  Lestari  DAD.  Uji  Efek  Analgesik Infus  Daun  Mahkota  Dewa  (Phaleria macrocarpa)  pada  Mencit  Jantan  (Mus musculus  L.).  Acta  Holistica  Pharm. 2021;3:39–44.
7.  Siswati T, Sa’diyah, A., K. AP, Rismaya R,  Sulistiana  D,  Mardiyah  U,  Kristanto B  et  al.  Kimia  Analisis  Bahan  Pangan. PT. Global Eksekutif Teknologi: Padang. 2022.
8.  Taufik  M,  Ardilla  D,  Tarigan  DM, Thamrin  M,  Razali  M,  Afritario  MI.
Studi Awal: Analisis Sifat Fisika Lemak Babi Hasil Ekstraksi Pada Produk Pangan Olahan. Agrintech  J Teknol  Pangan  dan Has Pertan. 2018;1:79–85.
9.  Mukhtar HM, Kshirsagar SS, Naseer A. Pharmaceutical  Organic  Chemistry  -  I. Thakur Publication: Lucknow, 2021.
10. Manurung  LS,  Sudrajad  H.  Design  and Build Up the Stirrer Viscometer. J Geliga Sains J Pendidik Fis. 2018;6:98.
11. Silva JR, Burger B, Kühl CMC, Candreva T, dos Anjos MBP, Rodrigues HG. Wound healing  and  omega-6  fatty  acids:  From inflammation to repair. Mediators Inflamm. 2018. doi:10.1155/2018/2503950.
12. Weimann  E,  Silva  MBB,  Murata  GM, Bortolon  JR,  Dermargos  A,  Curi  R  et al. Topical  anti-inflammatory  activity  of palmitoleic acid improves wound healing. PLoS One. 2018;13:1–10.
13. Saini RK, Assefa AD, Keum YS. Spices in  the  apiaceae  family  represent  the healthiest fatty acid profile: A systematic comparison  of  34  widely  used  spices and herbs. Foods. 2021;10. doi:10.3390/ foods10040854.
14. Pegoraro  NS,  Camponogara  C,  Cruz L,  Oliveira  SM.  Oleic  acid  exhibits an expressive anti-inflammatory effect  in  croton  oil-induced  irritant contact dermatitis without the occurrence  of  toxicological  effects  in mice.  J  Ethnopharmacol.  2021;267. doi:10.1016/j.jep.2020.113486.
15. Pereira  DM,  Correia-da-Silva  G, Valentão  P,  Teixeira  N,  Andrade  PB. Anti-inflammatory  effect  of  unsaturated fatty  acids  and  ergosta-7,22-dien-3-ol from  Marthasterias  glacialis:  Prevention of  CHOP-mediated  ER-stress  and  NF- κB  activation.  PLoS  One.  2014;9. doi:10.1371/journal.pone.0088341.
16. Dermiati  T,  Kamal A,  Tibe  F, Anggi  V. Uji  Antiinflamasi  Ekstrak  Etanol  Kulit Batang  Ceremai  (Phyllanthus  Acidus L.Skell)  Terhadap  Edema  Kaki  Tikus. Farmakol J Farm. 2018;15:1–8.
17. Purnamasari  R,  Santi,  D.  R.  Fisiologi Hewan.  Program  Studi  Arsitektur  UIN Sunan Ampel: Surabaya, 2017.
18. Rosyanti L, Usman RD, Hadi I, Syahrianti S.  Kajian  Teoritis  Hubungan  antara Depresi dengan Sistem Neuroimun. Heal Inf J Penelit. 2017;9:78–97.
19. Octavianus  S,  Fatimawali,  Lolo  WA. Uji  Efek  Analgetik  Ekstrak  Etanol Daun  Pepaya  (Carica  Papaya  L)  Pada Mencit  Putih  Jantan  (Mus  Mucculus). Pharmacon. 2014;3:87–92.
20. Afandi  A.  Anatomi  dan  Fisiologis Pada  Tubuh  Manusia.  Uwais  Inspirasi Indonesia: Ponorogo. 2018.
21. Mustaqin  H.  Kajian  Pemanfaatan Adsorben  Ramah  Lingkungan  Pada Adorpsi  Logam  Berat  Berbahaya  Serta Optimasi. Syiah Kuala University Press:
Banda Aceh, 2023.