Uji In-vitro Pengendalian Hayati oleh Trichoderma spp. terhadap Ganoderma yang Menyerang Sengon
In-vitro Test of Biological Control by Trichoderma spp. Toward Ganoderma that attacked Sengon
Elis Nina Herliyana 1 , Ratna Jamilah 1 , Darmono Taniwiryono 2 dan Muhammad Alam Firmansyah
1 Departemen Silvikultur Fakultas Kehutanan, IPB
2 Balai Penelitian Bioteknologi Perkebunan Indonesia * Corresponding author: E-mail : elisherliana@yahoo.com; elishe@ipb.ac.id

## ABSTRACT
Ganoderma  infection,  red  root-rot  fungi  or  basal  stem  rot  disease  is  becoming  more  prevalent  and  causing  significant loss  in  sengon  (Falcataria  moluccana)  in  Indonesia.  Trichoderma  spp. is  the  alternative  choice  in  the  biological  control  of Ganoderma  sp  The  objectives  of  the  research  were  to  study  the  potential  of  biological  agents  antagonism  Trichoderma harzianum and Trichoderma pseudoconingii against Ganoderma that attacked  Sengon with  in vitro method. Antagonism test of Trichoderma  spp  with  co-culture  method  modification  to  five  Ganoderma  isolates  on  PDA  medium  was  conducted  in  Forest Pathology Laboratory, IPB, Bogor. The potential biological agents for protecting Ganoderma spp. on sengon were T. harzianum strain  DT38  and  T.  pseudoconingii  DT39.  The  research  results  showed  that  the  Trichoderma  spp.  inhibit  growth  of  five Ganoderma isolates that were attacked sengon tree from Lampung (Ganoderma L12, L6, L3) and Kalimantan Selatan (K2, dan K1) between 11,7 – 48,8%.
Keywords:  Biological  Control,  Falcataria  moluccana,  Ganoderma  sp.,  Trichoderma  harzianum,  Trichoderma pseudokoningii ,

## PENDAHULUAN
Peran  Hutan  Tanaman  Industri  (HTI)  sebagai penyediaan bahan baku kayu di Indonesia kini semakin meningkat.  Bagian  terbesar  kayu  dari  HTI  luar  Jawa adalah  untuk  kayu  pulp  yang  didominasi  oleh Acacia mangium,  Acacia  crassicarpa , Eucalyptus  pellita, Eucalyptus  urophylla dan Falcataria  moluccana (sengon)  (Rimbawanto  2008). Saat  ini,  sengon merupakan  salah pohon  yang  banyak  dikembangkan pada program pembangunan hutan, baik  hutan tanaman maupun  hutan  rakyat  di  Indonesia.  Pohon  sengon mempunyai  pertumbuhan  yang  cepat  dan  kegunaan kayunya  yang  beragam  diantaranya  untuk  bahan konstruksi di bawah atap, mebel sederhana, peti kemas, dan  papan  sambung.  Sengon  juga  mempunyai  manfaat yang  cukup  besar  dalam  upaya  rehabilitasi  lahan  kritis, maka pemerintah, melalui Departemen Kehutanan, telah lama mencanangkan program ‘sengonisasi’ (Atmosuseno  1998).  HTI  tersebut  umumnya  dilakukan secara  monokultur  dan  seringkali  dihubungkan  dengan peningkatan  resiko  serangan  hama  penyakit,  terutama bila  benihnya  berasal  dari  induk  pohon  yang  secara genetik keragamannya rendah atau berkerabat (Rimbawanto 2008).
Serangan  penyakit busuk akar yang disebabkan oleh jamur Ganoderma spp . pada  tanaman  sengon  telah banyak  dilaporkan  (Solomon et  al .  1993;  Basset  dan Peters  2003;  Widyastuti  2007;  Herliyana et  al .  2012). Serangan Ganoderma sp . di  lapangan  sulit  di  deteksi
karena  gejalanya  mirip  dengan  gejala  kekeringan. Meskipun  tanaman  sudah  menunjukkan  gejala  sakit, namun  terkadang  tubuh  buah Ganoderma spp . belum terbentuk. Dan di lain pihak, pada tanaman yang tampak sehat ditemukan tubuh buah Ganoderma spp . di pangkal batangnya (Bassett dan peters 2003).
Jamur  pelapuk  kayu  dan  penyebab  penyakit  pada pohon  hutan  sebagian  besar  berasal  dari  beberapa spesies Ganoderma sp.. Ganoderma sp.    merupakan jamur  tingkat  tinggi  yang  tergolong  dalam  kelas Basidiomycetes ordo Polyporanceae family Ganodermataceae. Ganoderma sp.  mempunyai  daerah penyebaran tempat tumbuh yang cukup luas dan dikenal sebagai  penyebab  penyakit  akar  pada  banyak  jenis tanaman  berkayu.  Di  hutan  alam,  jamur  ini  cenderung menyerang pohon-pohon tua atau yang telah mengalami penurunan  pertumbuhan,  dan  juga  dapat  menyebabkan pembusukan  kayu  yang  sudah  mati.  Pada  HTI  dan perkebunan jamur ini telah dilaporkan  menjadi patogen akar  yang  potensial  dan  telah  banyak  menyerang beberapa  jenis  tanaman  (Semangun  2000).  Pada  tahun 2009  sampai  2011,  tubuh  buah Ganoderma ditemukan pada  beberapa  pohon  sengon  di  daerah  Lampung  dan Kalimantan  Selatan.  Di  Lampung,  selain  itu  juga ditemukan  pada  jengkol,  nangka,  alpukat  dan  kihiang. Di  Kalimantan  juga  ditemukan  pada  pohon  lainnya (Herliyana et al. 2009, tidak dipublikasikan).
Infeksi  patogen  pada  tanaman  umumnya  lebih mudah  terjadi  melalui  luka  dan  lentisel,  yang  sering ditemukan  pada  bagian  leher  akar  yang  pecah,  dan  ini

## JURNAL SILVIKULTUR TROPIKA
Vol. 04 No. 3 Desember 2013, Hal. 190 – 195 ISSN: 2086-8227
merupakan  tempat  yang  baik  bagi  infeksi  jamur. Patogen  kemudian  menyebar  ke  bagian  yang  lebih dalam  dari  akar.  Serangan  akan  lebih  tinggi  ditemukan pada  tanaman  hasil  okulasi  dibandingkan  dengan tanaman  hasil  biji.    Hal  ini  disebabkan  pada  tanaman hasil  okulasi  ada  bagian-bagian  luka,  sehingga memudahkan Ganoderma sp. untuk mengadakan infeksi (Sinulingga  1989).  Infeksi  atau  penularan  penyakit  ini terjadi  melalui  kontak  akar  tanaman  sehat  dengan sumber infeksi di dalam tanah seperti potongan akar dan batang  yang  mengandung  koloni  patogen  (Widyastuti 2007; Herliyana et al . 2012, Herliyana 2012). Pengendalian  hayati  menggunakan  agen  antagonis dengan satu kali pemakaian dapat menekan pertumbuhan  dan  perkembangan  patogen  untuk  jangka waktu  yang  relatif  panjang  tanpa  menimbulkan pencemaran  lingkungan  (Baker  dan  Cook  1974; Achmad et  al. 2009).  Pengendalian  hayati  merupakan pengendalian  penyakit  yang  ramah  lingkungan  karena bersifat tidak membahayakan kehidupan makhluk hidup dan  lingkungan.  Pengendalian Ganoderma sp.  secara hayati  dapat  dilakukan  dengan  cara  pemanfaatan mikroorganisme  atau  agens  antagonis Trichodema sp. merupakan  pilihan  alernatif  yang  dapat  meminimalkan gangguan  terhadap  keseimbangan  biologis  disamping menurunkan  biaya pengendalian. Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui potensi Trichoderma spp. sebagai agen pengendalian Ganoderma sp. secara hayati.
Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui potensi  atau  efektifitas  agens  antagonis Trichoderma spp.  dalam  menghambat  pertumbuhan Ganoderma sp. yang  menyerang  sengon  yang  berasal  dari  Kalimantan Selatan  dan  Lampung.  Penelitian  ini  diharapkan  dapat memberikan informasi yang berkaitan dengan kemampuan  isolat Trichoderma sp.  sebagai  agen antagonis  terhadap Ganoderma sp..  Hasil  penelitian diharapkan dapat diaplikasikan dalam budidaya sengon, sehngga  untuk  perkembangan  selanjutnya  dapat meningkatkan kualitas dari tanaman sengon.

## BAHAN DAN METODE

## Waltu dan Tempat
Kegiatan  uji  antagonis Trichoderma spp.  terhadap Ganoderma sp. dilaksanakan di Laboratorium Pathologi Hutan  IPB  dan  Laboratorium  Balai  Penelitian Bioteknologi Perkebunan Indonesia,  Bogor.

## Bahan dan Alat
Bahan dan alat yang digunakan dalam penelitian ini antara  lain,  media  PDA  Steril,  isolat  patogen Ganoderma sp.  yang  menyerang  sengon  di  Kalimantan Selatan  (K1  dan  K2),  isolat Ganoderma sp.  yang menyerang  sengon  di,  di  Lampung  (L12,  L3,  dan  L6) (Gambar  1) ,  isolat  agens  antagonis Trichoderma harzianum (T38) dan Trichoderma pseudokoningii (T39)  koleksi  Dr  Ir  Darmono  Taniwiryono
(Gambar  2) ,  cawan  Petri, autoclave ,  dan laminar  air flow .
Gambar  1  Isolat Ganoderma sp.  yang  menyerang sengon di Kalimantan Selatan (K1 dan K2), isolat Ganoderma sp.  yang  menyerang sengon di, di Lampung (L12, L3, dan L6).
Gambar  2  Isolat Trichoderma harzianum (T38)  dan Trichoderma pseudokoningii (T39).

## Metode Penelitian

## Metode Uji Antagonis
Uji  antagonisme  dalam  penelitian  ini  dilakukan dengan cara metode biakan ganda dengan perbandingan 1 : 1 secara in-vitro dalam  satu cawan konfrontasi atau modifikasi co-culture  method (Johnson  1957  dalam Widyastuti  2007).  Koloni  patogen Ganoderma sp. diinokulasikan dalam cawan konfrontasi terlebih dahulu sebelum memasukan koloni cendawan antagonis dengan masa  inkubasi  selama  3  sampai  5  hari  sehingga  isolat patogen Ganoderma sp.  berukuran  cukup  besar. Kemudian isolat antagonis Trichoderma sp. ditumbuhkan  pada  cawan  konfrontasi  pada  sisi  yang berlawanan dengan jarak 4 cm dari koloni fungi patogen (Gambar  3).  Jari-jari  koloni  dari  kedua  isolat  diukur panjangnya  setiap 24 jam sampai hari  kelima semenjak kedua  isolat  disatukan.  Kemudian  setelah  hari  kelima dilakukan  pengamatan  zona  penghambatan  dan  persen penghambatan.
Zona  penghambatan  adalah  panjang  wilayah  dalam cawan  konfrontasi  yang  tidak  ditumbuhi  oleh  kedua isolat  yang  saling  antagonis.  Pengukuran  dilakukan dengan  cara  mengukur  panjang  dari  zona  kosong tersebut.  Persentase  Penghambatan  dihitung  dengan rumus yang dipakai  Rohana (1998) :
K 1 L1 2 L 3 L 6 K 2 T38 T39
Gambar  3  Pola  Penempatan  isolat Ganoderma sp.  dan Trichoderma sp. pada  cawan konfrontasi.
Kelima isolat Ganoderma sp. (L12, L6, L3, K2, dan K1)  ditanamkan  dalam  cawan  konfrontasi  bersama dengan isolat Trichoderma sp. (T38 dan T39). Masing- masing  perlakuan  memiliki  tiga  ulangan.  Perlakuan yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  dijelaskan  pada Tabel 1.

## Tabel 1  Jenis perlakuan uji antagonis
Perlakuan Keterangan L12 x T38 Isolat Ganoderma Sp L12 ditanamkan bersama Isolat Trichoderma sp. T38 L12 x T39 Isolat Ganoderma Sp L12 ditanamkan bersama Isolat Trichoderma sp. T39 L6 x T38 Isolat Ganoderma Sp L6 ditanamkan bersama Isolat Trichoderma sp. T38 L6 x T39 Isolat Ganoderma Sp L6 ditanamkan bersama Isolat Trichoderma sp. T39 L3 x T38 Isolat Ganoderma Sp L3 ditanamkan bersama Isolat Trichoderma sp. T38 L3 x T39 Isolat Ganoderma Sp L3 ditanamkan bersama Isolat Trichoderma sp. T39
K1 x T38 Isolat Ganoderma Sp K1 ditanamkan bersama Isolat Trichoderma sp. T38
K1 x T39 Isolat Ganoderma Sp K1 ditanamkan bersama Isolat Trichoderma sp. T39 K2 x T38 Isolat Ganoderma Sp K2 ditanamkan bersama Isolat Trichoderma sp. T38 K2 x T39 Isolat Ganoderma Sp K2 ditanamkan bersama Isolat Trichoderma sp. T39

## Analisis Statistik
Variabel  yang  diamati  dalam  penelitian  ini  adalah persen  penghambatan.  Penelitian  ini  menggunakan analisis  statistik  dengan  model  RAL  (Rancangan  Acak Lengkap)  dua  faktor.  Faktor  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  faktor  jenis  isolat Ganoderma sp. dan  faktor  jenis  isolat Trichoderma sp..  Faktor  jenis isolat Ganoderma sp. terdiri dari isolat L12, L6, L3, K2, dan  K1.  Faktor jenis  isolat Trichoderma sp.  terdiri dari isolat  T38  dan  T39.  Pengolahan  data  menggunakan software SAS 9.
Pengolahan data dimulai dengan analisis sidik ragam dengan  tingkat  kepercayaan  95%,  apabila  blok  atau
faktor  berbeda  nyata,  pengolahan  data  dilanjutkan dengan  uji  lanjut.  Uji  lanjut  digunakan  untuk membandingkan  perlakuan  mana  yang  paling  baik dalam percobaan. Pengujian lanjut ini menggunakan uji Duncan  karena  uji  inilah  yang  paling  sering  digunakan dalam  pengujian  lanjut  analisis  sidik  ragam.  Analisis Statistik  bertujuan  untuk  melihat  pengaruh  dari  masing masing  isolat Ganoderma sp.  dan Trichoderma sp. terhadap variabel persen penghambatan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kedua  cendawan  agens  antagonis  isolat
Trichoderma T38 dan T39 mempunyai pertumbuhan  diameter  koloni  rata-rata  lebih  cepat dibanding  kelima  isolat  patogen Ganoderma pada media  PDA. Trichoderma T38  dan  T39  dapat memenuhi  permukaan  cawan  Petri  berukuran diameter 9 cm dalam waktu lebih kurang 4 (empat) hari inkubasi. Pertumbuhan diameter koloni isolat- isolat Ganoderma dari  yang  paling  cepat  ke  yang paling  lambat  berturut-turut  adalah Ganoderma K2, L12, K1, L3 and L6. Isolat-isolat Ganoderma dapat memenuhi permukaan cawan Petri berukuran diameter 9 cm dalam waktu lebih dari 8 (delapan) hari inkubasi (Gambar 4).
Gambar  4  Pertumbuhan  diameter  koloni  dua  isolat cendawan
antagonis
Trichoderma dibanding  dengan  lima  isolat  patogen
Ganoderma pada media PDA.
Perlakuan kontrol koloni Ganoderma sp. menunjukan  pertumbuhan  jari-jari  koloni  patogen  yang lebih lambat dibandingkan pertumbuhan jari-jari koloni Trichoderma sp.. Setelah dilakukan pengujian pada satu cawan  konfrontasi,  hasil  pengamatan  visual  uji antagonisme Trichoderma sp.  dengan Ganoderma sp. memperlihatkan  bahwa  pertumbuhan  jari-jari  koloni Ganoderma sp.  ke  arah  titik  tengah  cawan  konfrontasi lebih  lambat  dibanding  pertumbuhan  jari-jari  koloni Trichoderma sp..  Purwantisari  dan  Hastuti  (2009) menyatakan  bahwa Trichoderma sp.  merupakan  jenis yang  potensial  untuk  pengendalian  penyakit  secara hayati.  Hasil  penelitian  yang  dilakukan  mendukung pendapat  tersebut,  dimana Trichoderma sp.  T38  dan
r1-r2 PP = --------  x  100%
r1 Keterangan: PP = Persentase Penghambatan r1 = Jari-jari 1 isolat r2 = Jari-jari 2 isolat Keterangan P = isolat Patogen A = isolat antagonis t = titik tengah cawan Petri r1 = radius 1
pertumbuhan  isolat P
r2  = radius 2 pertumbuhan isolat A r 1 r 2 r 1 r 2 r1 r2 P A
T39  mampu  menghambat  pertumbuhan  koloni  patogen Ganoderma spp.  berdasarkan  hasil  uji in-vitro pada PDA  (Gambar  5).  Cendawan  yang  tumbuh  cepat mampu  berkompetisi  mengungguli  dalam  penguasaan ruang  dan  nutrisi  pada  akhirnya  bisa  menekan pertumbuhan  cendawan  lawannya.  Kompetisi  tersebut dalam  memperoleh  nitrogen  dan karbon (Harman et al. 2008).
Gambar 5  Pengamatan  visual  uji  antagonisme  hari  ke  5 inkubasi.  Gambar  atas  kiri  dan  kanan: Patogen  L3 x antagonis T38 dan  patogen K2 x antagonis T39. Gambar  bawah  kiri  dan  kanan:  Patogen  K2  x antagonis T38 dan patogen L3 x antagonis T39.
Dari  kedua  jenis  jamur  antagonis  yang  diuji, Trichoderma sp.  T39  memiliki  potensi  antagonistik yang  kuat  dibandingkan  dengan Trichoderma sp.  T38. Isolat Ganoderma sp.  L12  dan  L6  merupakan  isolat yang pertumbuhannya paling terhambat dibanding isolat yang lain (Gambar 6) (Tabel 2).
Gambar 6  Persen penghambatan secara in-vitro pertumbuhan  ke-lima  isolat Ganoderma oleh Trichoderma T38 and T39 pada media PDA.
Tabel 2  Hasil  uji  Duncan  pengaruh  jenis  isolat
Trichoderma sp. terhadap
persen
penghambatan Jenis isolat Trichoderma sp. Rata-rata persen penghambatan (%) T39 32.6 a T38 27.4 a
Keterangan:  Huruf  yang  sama  dibelakang  angka  menunjukkan pengaruh  yang  tidak  berbeda  nyata  pada  tingkat kepercayaan 95%.
Berdasarkan hasil penelitian yang didapatkan, faktor yang  lebih  mempengaruhi  daya  penghambatan  adalah faktor  jenis  isolat Ganoderma sp.  (Tabel  3  dan  4). Perbedaan  daya  hambat  menggambarkan  perbedaan kemampuan dari masing-masing isolat untuk menghambat  pertumbuhan  mikrooganisme  pesaing. Perbedaan  ini  diduga  dipengaruhi  oleh  jenis,  jumlah, dan kualitas dari antibiotik atau zat lain yang dihasilkan Trichoderma sp.  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan Ganoderma sp..  Adanya  penghambatan  terhadap pertumbuhan  diameter  koloni  patogen Ganoderma sp. diduga  karena  adanya  enzim  dan  senyawa  metabolit yang  terdapat  pada  fungi  antagonis Trichoderma sp. yang  mampu  merusak  dinding  sel  patogen Ganoderma sp.  sehingga  menyebabkan  pertumbuhan  diameter koloni patogen  menjadi lambat. Menurut Harman et al. (2008), Trichoderma spp.  mempunyai  mekanisme pengendalian utama sebagai mikoparasit atau memarasit miselium  cendawan  lain  dengan  menembus  dinding  sel dan masuk ke dalam sel untuk mengambil  zat makanan dari dalam sel sehingga cendawan akan mati.
Tabel 3 Rekapitulasi  hasil  sidik  ragam  terhadap variabel yang diamati Variabel Isolat Ganoderma sp. (G) Isolat Trichoderma sp. (T) G*T Persen peng- hambatan * tn tn Keterangan  :  ***=  Berbeda  nyata  pada  taraf  uji  0,01;  **=  Berbeda nyata  pada  taraf uji  0,05;  *= Berbeda  nyata  pada taraf uji 0,1;  tn= Tidak berbeda nyata
Tabel 4  Hasil  uji  Duncan  pengaruh  jenis  isolat Ganoderma sp. terhadap persen penghambatan Jenis isolat Ganoderma sp. Rata-rata persen penghambatan (%) L6 39.6 a L12 38.1 a L3 30.4 ab K2 29.4 ab K1 12.4 b
Keterangan:  Huruf  yang  sama  dibelakang  angka  menunjukkan pengaruh  yang  tidak  berbeda  nyata  pada  tingkat kepercayaan 95%. L3 x T38 K2 x T39 K2 x T38 L3 x T39
Terbentuknya  zona  penghambatan  antar  organisme pada  media  padat  merupakan  indikasi  bekerjanya mekanisme antibiosis. Bekerjanya mekanisme antibiosis dikuatkan  oleh  tertekannya  pertumbuhan  cendawan patogen  pada  media  padat.  Harman et  al. (2008) melaporkan  juga  bahwa Trichoderma spp.  dapat menghasilkan  antibiotik  seperti  alametichin,  paracelsin, trichotoksin  yang  dapat  menghancurkan  sel  cendawan melalui  pengrusakan  terhadap  permeabilitas  membran sel,  serta  menghasilkan  enzim  khitinase  yang  dapat menyebabkan  lisis  dinding  sel  serta  dapat  melakukan interfensi  hifa.    Pada  penelitian  ini  tidak  ditemukannya zona  penghambatan,  hal  ini  dapat  disebabkan  karena media  yang  digunakan  adalah  PDA.  PDA  dapat menetralisir pengaruh
metabolit
penghambat pertumbuhan  patogen  (Achmad  1991).  Tetapi  dapat juga  disebabkan  tidak  terjadinya  mekanisme  antibiosis, dan Trichoderma sp.  diduga  tidak  menghambat pertumbuhan  koloni Ganoderma sp.  setelah  terjadi kontak hifa.
Menurut  Smith  dan  Moss  (1985),  beberapa  anggota genus Trichoderma sp. menghasilkan toksin ( mycotoxin) yaitu trichodermin. Toksin  ini  dihasilkan oleh  cendawan,  bila  berada  atau  hidup  pada  tanaman hidup,  bahan  yang  mengurai,  dan  produk-produk  yang disimpan  di  gudang.  Selain  itu,  adanya  aktifitas metabolik  hifa  yang  tinggi  pada  bahan  organik  dapat juga  menyerang  dan  menghancurkan  propagul  patogen yang ada disekitarnya (Lewis dan Papavizas 1984).
Lambatnya  pertumbuhan  diameter  koloni  patogen Ganoderma sp.  pada  perlakuan  pemberian  fungi antagonis Trichoderma sp.  diduga  karena  telah  terjadi reaksi  antara  senyawa  toksik  dari  fungi  antagonis Trichoderma sp  terhadap  patogen Ganoderma sp. Trichoderma sp.  adalah  suatu  jenis  yang  baik  sebagai pengendali hayati karena terdapat di mana-mana, mudah diisolasi  dan  dibiakkan,  tumbuh  dengan  cepat  pada beberapa  macam  substrat,  mempengaruhi  patogen tanaman, jarang bersifat patogenik pada tanaman tingkat tinggi,  bereaksi  sebagai  mikroparasit,  bersaing  dengan baik  dalam  hal  makanan,  tempat  dan  menghasilkan antibiotik (Wells  1988).  Anggraeni  (2004)  menyatakan bahwa Trichoderma sp.  dapat  digunakan  sebagai  agen biokontrol melawan beberapa cendawan petogenik tular tanah. Selama Trichoderma sp. tumbuh aktif menghasilkan  sejumlah  besar  enzim  ekstra  selular  ß (1.3)  glukonase,  dan  kitinase,  yang  dapat  melarutkan dinding sel patogen (Lewis dan Papavizas 1984).

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Dari  kedua  jenis  jamur  antagonis  yang  diuji Trichoderma sp. T39  memiliki  potensi  antagonistik yang lebih kuat dibanding Trichoderma sp. T38 dengan kemampuan  menghambat  pertumbuhan  jamur  patogen dengan  persentase  penghambatan  lebih  tinggi  pada isolat Ganoderma sp.  L12  dan  L6.  Uji  antagonis  pada media PDA ini tidak diperoleh zona penghambatan.
Saran
Pengamatan mikroskopis disarankan dilakukan juga. Penelitian  ini  bisa  dilanjutkan  dengan  penelitian lanjutan yaitu berupa pembuatan formula dan aplikasinya di lapangan.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penelitian  ini  merupakan  bagian  dari  penelitian kami  yang  didanai  KKP3T  Badan  Litbang  Pertanian tahun  2009.  Penulis  ingin  mengucapkan  terimakasih kepada  semua  pihak  yang  tidak  dapat  disebut  satu persatu, yang telah membantu dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmad  S.  1991.  Kemampuan Rhizopogon sp.  untuk Perlindungan  Hayati  terhadap  Penyebab  Penyakit Lodoh pada Pinus merkusii [Tesis]. Bogor: Program Pascasarjana, IPB.
Achmad,  S.  Hadi,  S.  Harran,  E.  Gumbira  Sa’id,  B.
Satiawihardja, M. Kosim Kardin. 2009.
Pengendalian  Hayati  Penyakit  Lodoh  Pada  Semai
Pinus  Merkusii :  Potensi  Antagonistik In-vitro Trichoderma harzianum DAN Trichoderma pseudokoningii .  Jurnal Litbang Tanaman.
Anggraeni I. 2004. Identifikasi dan Patogenitas Penyakit Akar  pada Acacia  mangium Willd. Buletin Penelitian Hutan . 645: 61-73.
Atmosuseno  BS.  1998.  Budi  Daya,  Kegunaan,  dan Prospek Sengon. Jakarta : Penebar Swadaya.
Baker  KF,  Cook  RJ.  1974.  Biology  Control  of  Plant Pathogens. San Fransisco: W.H. Freeman and Co.
Basset K, Peters. 2003. Ganoderma: A Significant Root Pathogen.  Arborilogical  Services  Inc.  Publication. http://www.arborilogical.com/articles/ganoderma.ht m. [6 Februari 2010].
Harman GE, Björkman T, Ondik K, Shoresh M.   2008. Trichoderma spp.  for  Biocontrol.    Changing paradigms  on  the  mode  of  action  and  uses  of Trichoderma spp.  for  biocontrol.    Research Information.
Cornell University, USA. DOI:10.1564/19feb00.
Herliyana EN, Taniwiryono D, Minarsih H, Firmansyah MA,  Sukamto  S.    2009.    Pengembangan  Teknik Perlindungan  Tanaman  Sengon  Sebagai  Pelindung Tanaman Kopi dan Kakao dari Serangan Ganoderma spp..    Laporan  Akhir  KKP3T.  IPB  dan Badan Litbang Pertanian. 73 halaman.
Herliyana EN, Taniwiryono D, Minarsih H.  2012. Root diseases Ganoderma sp. on the Sengon in West and East  Java .    Journal  of  Tropical  Forest  Management 18 (2):94-99.  DOI:10.7226/jtfm.18.2.94.
Herliyana EN.  2012. Early  Report of Red Root Rot of Ganoderma sp.  on Agathis sp.  (Damar)  in  Mount Walat  Education  Forest,  Sukabumi,  West  Java. Jurnal Silvikultur Tropika 3(2): 102-107.
Lewis  JA,  Papavizas  GC.  1983.  Production  of Clamidospores  and  Conidia  by Trichoderma  sp .  In Liquid and Solid Growth Media. J. Soil Biology and Biochemistry , 15 (4): 351-357.
Purwantisari  S,  Hastuti  RB.  2009.  Uji  Antagonisme Jamur  Patogen  Phytophthora  infestans  Penyebab Penyakit  Busuk  Daun  dan  Umbi  Tanaman  Kentang Dengan  Menggunakan Trichoderma spp.  Isolat Lokal. J. BIOMA 11(1): 24-32.
Rimbawanto  A.  2008.  Pemuliaan  tanaman  dan ketahanan  penyakit  pada  sengon.  Yogyakarta:  Balai Besar  Penelitian  Bioteknologi  dan  Pemuliaan Tanaman Hutan.
Rohana  I.  1998.  Efektifitas  Penggunaan Trichoderma harzianum dan Fungisida Mankozeb untuk Pengendalian Rhizoctonia solani Penyebab Penyakit Lodoh  pada  Acacia  mangium  [Skripsi].  Fakultas Kehutanan IPB, Bogor.
Semangun  H.  2000. Penyakit-Penyakit  Tanaman Perkebunan  Indonesia .  Yogyakarta:  Gajah  Mada Univ Press.
Sinulingga,  W.  1989. Pengendalian  Biologi  Penyakit Cendawan  Akar  Putih pada Tanaman  Karet .    Pusat Penelitian Perkebunan Sei. Putih, Galang. Hal. 1-7.
Smith  JE,  Moss  MO.  1985.  Mycotoxin,  Formation Analysis and Significant. John Willey and Sons, inc. New York.
Solomon, JD, Leininger TD, Wilson AD, Anderson RL, Thompson  LC,  McCracken  FI.  1993.  Ash  Pests: A Guide  to  Major  Insect,  Diseases,  Air  Pollution Injury and Chemical Injury . Gen. Tech. Rep. SO-96. New  Orleans,  LA:  U.S. Department  of  Agriculture, Forest Service , Southern Forest Experiment Station . 45p.
Widyastuti  SM.  2007. Peran  Trichoderma  spp.  Dalam Revitalisasi  Kehutanan  di  Indonesia .  Yogyakarta: Gajah Mada University Press, 255p.
Wells  HD.  1998. Trichoderma as  A  Biocontrol  Agent. dalam Biocontrol  of  Plant  Disease ,  Vol  1.  Mukerji KG,  Garg  KL  (ed.).  CRC  Press,  Inc.  Boca  Raton, Florida. 72-79.