## PENGGUNAAN METODE HPCL PADA ANALISIS JAMU DEPOT YANG MENGANDUNG ANTALGIN
The Use of the HPCL Method in the analysis of medicinal herbs available at the herbal medicine depot Containing Antalgin
Rifda Husna Arifah 1*) , Desy Ayu Irma Permatasari 1) , Kusumaningtyas Siwi Artini 1)
1) Universitas Duta Bangsa Surakarta, Surakarta, Indonesia E-mail: rifdahusnaarifah@gmail.com

## ABSTRAK
Penyalahgunaan  penambahan  BKO  ke  dalam  sediaan  herbal  sering  diidentikkan  untuk penanganan  penyakit  seperti  rematik,  pereda  nyeri,  dan  afrodisiak.  Salah  satu  herbal  yang biasa  digunakan  untuk  meredakan  nyeri  adalah  herbal  pegal  linu  untuk  mengurangi  nyeri, meredakan  nyeri  otot,  kelelahan,  nyeri  otot  dan  tulang,  memperlancar  peredaran  darah, memperkuat  daya  tahan  tubuh,  serta  meredakan  nyeri  di  seluruh  tubuh  Identifikasi penambahan  BKO  dapat  dilakukan  dengan  HPLC  ( High  Performance  Liquid Chromatography )  dengan  teknik  identifikasi,  pemisahan,  dan  kuantifikasi  komponen  dalam suatu  campuran  yang  sangat  cocok  digunakan  untuk  senyawa  yang  tidak  mudah  menguap, tidak stabil secara termal dan mempunyai berat molekul yang besar. Pemisahan analit tersebut dilakukan berdasarkan kepolarannya, alatnya terdiri dari kolom sebagai fase diamdan larutan tertentu  sebagai  fase  geraknya.  Analisis  kadar  antalgin  dapat  menggunakan  metode High Performance Liquid Chromatography (HPLC), yaitu dengan menggunakan fase gerak berupa metanol p.a dan aquabides dengan perbandingan 75 : 25, fase diam dengan kolom C18 serta dengan volume injeksi sebanyak 20 µL pada konsentrasi 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm, dan  100  ppm.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  keunggulan  penggunaan metode  HPLC  dalam  menganalisis  kadar  antalgin  dalam  suatu  sediaan  jamu.  Hasil  yang diperoleh  yaitu  adanya  kandungan  antalgin  pada  sediaan  jamu  dengan  persentase  14,87  %. Kadar  tersebut  sangat  tidak  diperbolehkan  terkandung  dalam  sediaan  jamu  dan  telah pasal 196 Undang-undang Nomor 36 Tahun 2009.
Kata kunci: efektivitas HPLC, jamu pegal linu, kadar antalgin, kolom c18

## ABSTRACT
Misuse  of  the  addition  of  BKO  into  herbal  preparations  is  often  identified  for  the treatment of diseases such as rheumatism, pain relievers, and aphrodisiacs. One of the herbs commonly  used  to  relieve  pain  is  an  aching  rheumatic  herb  to  reduce  pain,  relieve  muscle pain,  fatigue,  muscle,  and  bone  pain,  improve  blood  circulation,  strengthen  the  immune system,  and  relieve  pain  throughout  the  body  Identification  of  the  addition  of  BKO  can  be done  with  HPLC  (High-Performance  Liquid  Chromatography)  with  the  technique  of identifying,  separating  and  quantifying  components  in  a  mixture  which  is  very  suitable  for compounds that are non-volatile, thermally unstable and have a large molecular weight. The separation of the analytes is carried out based on their polarity, the apparatus consists of a column  as  the  stationary  phase  and  a  certain  solution  as  the  mobile  phase.  Analysis  of
antalgin  levels  can  use  the  High-Performance  Liquid  Chromatography  (HPLC)  method, namely using the mobile phase in the form of methanol p.a and aquabidest with a ratio of 75: 25,  the  stationary  phase  with  a  C18  column  and  with  an  injection  volume  of  20  µL  at  a concentration of 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm, and 100 ppm. The purpose of this study was to determine the advantages of using the HPLC method in analyzing antalgin levels in a herbal preparation. The results obtained were the presence of antalgin in herbal preparations with  a  percentage  of  14.87%.  These  levels  are  not  allowed  to  be  contained  in  herbal preparations and are following Article 196 of Law Number 36 of 2009.
Keywords: antalgin levels, column c18, effectiveness of HPLC, herbal pain relief

## PENDAHULUAN
Mengobati pegal linu, bahan kimia obat antalgin yang merupakan salah satu senyawa yang banyak  digunakan  dalam  pengobatan  sering  ditambahkan  pada  obat  tradisional  atau  herbal. Sudah  menjadi  rahasia  umum  bahwa  antalgin  bertindak  sebagai  analgesik,  yang  meredakan nyeri,  dan  antipiretik,  yang  menurunkan  demam.  Antalgin  dapat  menyebabkan  berbagai masalah kesehatan jika  digunakan dengan dosis  yang tidak terpantau dengan baik,  termasuk pendarahan  di  perut,  jantung  berdebar,  dan  kerusakan  hati.  Peraturan  Menteri  Kesehatan Republik  Indonesia  No  .007  Tahun  2012  Tentang  Registrasi  Obat  Tradisional,  bahwa  obat tradisional  dilarang  mengandung  bahan-bahan  yang  berbahaya  bagi  tubuh  manusia  (Sony, 2015).
Metode  analisis  obat  yang  sedang  direkomendasikan  oleh  Farmakope  yaitu  Teknik Kromatografi,  metode  HPLC  merupakan  teknik  kromatografi  cair  (LC)  yang  digunakan sebagai  pemisahan  berbagai  komponen  dalam  suatu  campuran.  HPLC  juga  merupakan  cara identifikasi dan kuantifikasi senyawa dalam proses pengembangan obat (Annissa et al., 2019).
Pada  penelitian  terdahulu  oleh  Umi  Hanifah  dkk,  Penetapan  Kadar  Antalgin  dan Deksametason  Natrium  Fosfat  dalam  Jamu  Pegal  Linu  yang  Beredar  di  Kabupaten Pekalongan dengan Metode High Performance Liquid Chromatography (HPLC), bahwa hasil kadar  sampel  dengan  metode High  Performance  Liquid  Chromatography (HPLC)  dalam perkemasan  (7  gram)  adalah  6,649±0,275;  8,874±0,240;  9,678±0,268;  4,006±0,318; 2,501±0,032;  8,006±0,070  dan  3,039±0,029  mg/g  mengandung  antalgin  dan  dapat disimpulkan  bahwa  masih  banyak  sediaan  jamu  yang  mengandung  cemaran  antalgin  dan metode HPLC dapat dengan baik menganalisis kandungan yang ada di dalamnya (Hanifah et al., 2021).
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  menentukan  apakah  metode  HPLC  lebih unggul  atau  tidak  dari  pendekatan  lain  dalam  menilai  kadar  antalgin  dalam  sediaan  Jamu Depot. Manfaat dari penelitian ini berupa informasi dan pengalaman yang dapat dimanfaatkan dalam  kehidupan  sehari-hari.  Akibatnya,  individu  akan  dapat  mengkonsumsi  berbagai  obat herbal, terutama sakit dan nyeri herbal, dengan lebih hati-hati.
Sampel  jamu  pegal  linu  didapatkan  dari  beberapa  depot  jamu  di  daerah  X.  Terdapat  tiga merk  jamu  pegal  linu  dan  ada  satu  merk  yang  mengandung  antalgin  cukup  besar.  Antalgin dalam jamu pegal linu tersebut dapat diketahui dengan canggihnya instrumen yang digunakan dalam menganalisis.

## METODE
Penelitian  ini  dilakukan  mulai  bulan  Mei  2022  di  Laboratorium  Farmasi  Universitas Duta  Bangsa  Surakarta  dan  Laboratorium  Terpadu  Universitas  Islam  Indonesia  Yogyakarta. Penelitian yang dilakukan merupakan jenis penelitian eksperimental. Sampel jamu pegal linu
dilakukan  pengujian  kandungan  Antalgin  dengan  menggunakan  metode  HPLC  ( High Performance Liquid Chromatography.

## BAHAN DAN ALAT Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  seperangkat  alat  gelas,  timbangan  analitik (FUJITSU),  pH  meter  (ATC),  sinar  ultaviolet  254  nm  (Guang  Hao),  HPLC  (High Performance  Liquid  Chromatography)  fase  terbalik  dengan  detektor  UV  (Shimadzu)  LC-20 AD,  injektor  manual  (Shimadzu),  kolom  C18  (Shimadzu),  spektrofotometer  UV-Vis (Shimadzu 1280), syringe, kertas sans No. 41 (Whatman), membran penyaring nylon 0,45 µm dan 0,22 µm (Lokal), Digital Ultrasonic Cleaner (Biobes) dan mikropipet (Scilogex).

## Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu: sampel sediaan jamu pegal linu dari depot  jamu  (Ba,  Bi,  G,  Mon,  MD,  Kkb,  JG,  SM,  dan  U),  baku  pembanding  antalgin (metamphiron  baku  murni),  silika  gel  F254,  amonia  teknis,  metanol  p.a,  kloroform,  toluen, aseton, FeCl 3 5 %, HCl encer, metanol pro HPLC p.a, dan aquabides.

## PROSEDUR KERJA Pengambilan Sampel
Sampel  diambil  dari  salah  satu  Depot  Jamu  yang  beredar  di  daerah  Kabupaten  Boyolali Jawa Tengah. Jamu yang dipilih yaitu jamu serbuk yang difungsikan sebagai jamu pegal linu. Sampel diambil sebanyak 9 (sembilan) jenis antara lain: Ba, Bi, G, Mon, MD, Kkb, JG, SM, dan U.

## Uji Organoleptis
Organoleptis adalah sebuah uji bahan makanan berdasarkan  kesukaan dan keinginan pada suatu  produk.  Uji  organoleptis  biasa  disebut  juga  uji  indera  atau  uji  sensori  merupakan  cara pengujian  dengan  menggunakan  indera  manusia  sebagai  alat  utama  untuk  pengukuran  daya penerimaan  terhadap  produk.  Indera  yang  dipakai  dalam  uji  organoleptis  adalah  indera penglihat/mata,  indra  penciuman/hidung,  indera  pengecap/lidah,  indera  peraba/tangan. Kemampuan  alat  indera  inilah  yang  akan  menjadi  kesan  yang  nantinya  akan  menjadi penilaian  terhadap  produk  yang  diuji  sesuai  dengan  sensor  atau  rangsangan  yang  diterima oleh  indera.Kemampuan  indera  dalam  menilai  meliputi  kemampuan  mendeteksi,  mengenali, membedakan,  membandingkan,  dan  kemampuan  menilai  suka  atau  tidak  suka  (Gusnadi, 2021).
Uji organoleptis dilakukan dengan mengamati warna, bau, rasa, dan bentuk dari beberapa sampel jamu pegal linu. Hasil uji organoleptis dicatat dalam bentuk tabel.
1. Pembuatan Larutan Sampel
Masing-masing 7 gram sampel dilarutkan dengan 70 mL amonia, larutan sampel dan filtrat diuapkan  hingga  habis,  hasil  penguapan  ditambahkan  metanol  (sehingga  terbentuk  larutan metanol yang mengandung antalgin) (Hanifah et al., 2021).
2. Uji Reaksi Warna
Masing-masing  filtrat  dari sampel diambil sebanyak 3 mL lalu ditambahkan 1-2 mL HCl encer yang dilakukan di  lemari asam, penambahan HCl encer ini untuk pembentukan garam pada sampel yang mengandung antalgin. Kemudian ditambahkan larutan FeCl 3 5 % sebanyak 1  mL  sehingga  terdapat  perubahan  menjadi  warna  biru  yang  hal  itu  dapat  menunjukkan adanya kandungan antalgin dalam filtrat (Indriyani, 2016).

## 3. Pembuatan Larutan Baku Antalgin
Ditimbang  sebanyak  0,2  gram  antalgin  dilarutkan  dalam  metanol,  lalu  larutan  disaring (Hanifah et al., 2021).
4. Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Pengujian  kandungan  Antalgin  yaitu  dengan  menggunakan  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT)  yaitu  larutan  hasil  preparasi  sampel  yang  telah  disaring  dan  baku  pembanding ditotolkan  secara  terpisah  pada  plat  KLT.  Identifikasi  KLT  menggunakan  larutan  campuran antara  kloroform  :  aseton  :  toluen  dengan  perbandingan  65  :  25  :  10  sebagai  fase  gerak (Supartiningsih, 2019).  Masukkan plat pada chamber yang telah terlebih dahulu  dijenuhkan. Penampakan  bercak  hasil  rambatan  dilihat  menggunakan  sinar  ultraviolet  dengan  panjang gelombang 254 nm, dihitung nilai Rf noda yang terbentuk (Hanifah et al., 2021).
Faktor-faktor  yang  mempengaruhi  nilai  Rf  antara  lain  struktur  kimia  senyawa  yang dipisahkan, polaritas fase diam, tebal dan kerataan permukaan fase diam, polaritas fase gerak, kejenuhan  bejana  kromatografi,  jumlah  cuplikan  yang  digunakan,  suhu  dan  kesetimbangan. Jamu  pegal  linu yang positif mengandung antalgin dilihat dari nilai  Rf, sampel ini memiliki nilai Rf yang sama dengan standar antalgin yaitu 0,78. Hasil nilai Rf tersebut didapat dengan menggunakan  eluen  yang  dibuat  dengan  campuran  etil  asetat  dengan  asam  asetat  glasial (24:1)  (Fatimah,  2017).  Etil  asetat  bersifat  semi  polar  dan  asam  asetat  glasial  bersifat  polar, sehingga  eluen  tersebut  bersifat  semi  polar.  Senyawa  polar  hanya  akan  larut  pada  pelarut polar  seperti  etanol,  metanol,  butanol  dan  air.  Senyawa  non-polar  hanya  dapat  larut  pada pelarut non-polar, seperti eter, kloroform dan n-heksana (Leksono, 2018).
Hasil selisih nilai Rf dinyatakan positif jika ≤ 0,05 dan dinyatakan negatif jika selisih nilai Rf ˃ 0,05 dari nilai Rf pembanding (Oktaviantari, 2019).
5. Analisis Antalgin dalam Sampel
a. Pembuatan Larutan sampel
Masing-masing 7 gram sampel dilarutkan dengan 70 mL amonia, larutan sampel dan filtrat diuapkan  hingga  habis,  hasil  penguapan  ditambahkan  metanol  (sehingga  terbentuk  larutan metanol  yang  mengandung  antalgin),  kemudian  diuapkan  kembali  hingga  terbentuk  kristal (Hanifah et al., 2021).
b. Pembuatan Fase Gerak
Pelarut yang digunakan untuk fase gerak pada penelitian ini adalah campuran metanol dan aquabides (75 : 25). Fase gerak disonikator selama 15 menit (Hanifah et al., 2021). c. Pembuatan Larutan Baku Kerja
Baku pembanding antalgin ditimbang seksama sejumlah 10 mg, dimasukkan kedalam labu takar 10 mL,  kemudian dilarutkan dengan fase gerak sampai tanda batas  sehingga diperoleh konsentrasi 1000 µg/mL (Hanifah et al., 2021).
d. Penentuan Panjang Gelombang Maksimal
Optimasi  panjang  gelombang  menggunakan  spektrofotometer  Uv-  Vis.  Larutan  baku konsentrasi  20  µg/mL,  discanning  pada  panjang  gelombang  200-400  nm.  Pengukuran  atau penentuan  panjang  gelombang  maksimum  (yang  menghasilkan  absorbansi  paling  besar  atau paling  tinggi)  suatu  larutan  baku  dapat  menggunakan  Spektrofotometer  atau  juga  bisa langsung menggunakan HPLC (Hanifah et al., 2021).
d. Pembuatan Kurva Baku
Konsentarasi  1000  µg/mL  diencerkan  menjadi  konsentrasi  20,  40,60,  80,  dan  100  µg/mL sebanyak 5 mL. Dengan rumus pengenceran, sebagai berikut : V 1 .M 1 = V 2 .M 2, Dengan : V 1 : Volume  larutan  sebelum  pengenceran  M 1 :  Konsentrasi  larutan  sebelum  pengenceran  V 2 : Volume larutan setelah pengenceran, M 2 : Konsentrasi larutan setelah pengenceran larutan di sonikator selama 5 menit. Larutan sampel diinjeksikan sebanyak 20 μL ke HPLC dengan laju alir 1,0 mL/menit pada panjang gelombang 282 nm untuk antalgin. Panjang gelombang yang
digunakan yaitu panjang gelombang maksimum yang didapat dari pengukuran. Jadi, panjang gelombang antalgin yang didapat adalah 282 nm tersebut (Hanifah et al., 2021).
e. Penetapan Kadar
Larutan  sampel  disaring  dengan  kertas  saring,  kemudian  di  sonikasi  selama  5  menit. Larutan  sampel  diinjeksikan  sebanyak  20  μL  ke  HPLC  dengan  laju  alir  1,0  mL/menit  pada panjang gelombang 282 nm untuk penetapan kadar antalgin (Hanifah et al., 2021).
Dalam mengetahui adanya kandungan antalgin dalam suatu sediaan jamu pegal linu perlu dilakukan  beberapa  preparasi  sampel,  mulai  dari  uji  organoleptis,  uji  kualitatif  berupa  uji reaksi  warna,  uji  dengan  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT),  dan  juga  dilakukan  proses pengkristalan.  Dilakukan  dengan  menggunakan  sampel  jamu  pegal  linu  sejumlah  3  sampel. Sehingga menghasilkan data positif dari tiga sampel jamu pegal linu. Kemudian hasil positif dari  jamu  pegal  linu tersebut  dapat  dilakukan  uji  kuantitatif  berupa  penetapan  kadar  antagin dengan menggunakan metode HPLC.
Baku standar dengan konsentarasi 1000 µg/mL diencerkan menjadi konsentrasi 20, 40, 60, 80,  dan  100  µg/mL  sebanyak  5  mL.  Larutan  disonikator  selama  5  menit.  Kemudian diinjeksikan  sebanyak  20  μL  ke  alat  HPLC  dengan  laju  alir  1,0  mL/menit  pada  panjang gelombang  maksimum  282  nm.  Panjang  gelombang  yang  digunakan  yaitu  panjang gelombang maksimum yang didapat dari pengukuran (Hanifah et al., 2021).
Larutan sampel disaring menggunakan kertas saring, kemudian disonikasi selama 5 menit. Larutan  sampel  diinjeksikan  sebanyak  20  μL  ke  HPLC  dengan  laju  alir  1,0  mL/menit  pada panjang gelombang 282 nm untuk penetapan kadar antalgin (Hanifah et al., 2021).
Kadar Antalgin dapat dihitung dengan mengunakan persamaan regresi linier yang didapat pada linearitas, yaitu dengan menggunakan rumus y = ax + b. Luas area yang didapat tiap-tiap sampel dimasukkan dalam y untuk mengetahui nilai x (Vuqohan, 2017).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
HPLC  adalah  pengembangan  terkini  dari  kromatografi  cair  kolom  klasik  pada  kolom, detektor yang lebih sensitif dan peka serta kemajuan teknologi pada pompa bertekanan tinggi yang menyebabkan HPLC menjadi suatu metode dengan sistem pemisahan zat yang cepat dan efisien (Rosydiati, 2019).
Sampel  yang  telah  dilakukan  proses  preparasi  sampel  dan  pengujian  kualitatif  untuk mengetahui  positif  atau  tidaknya  sampel  jamu  pegal  linu,  kemudian  hasil  positif  dari  tiga sampel tersebut dilakukan uji kuantitatif dengan menggunakan HPLC.
Dalam  uji  kuantitatif  akan  mendapatkan  hasil  yang  menunjukkan  adanya  kandungan cemaran  antalgin  dalam  sampel.  Hasil  tersebut  berupa  kromatogram  dan  luas  area  dari terbentuknya  puncak.  Setelah  mengetahui  hasil  dari  kromatogram  akan  dilakukan penghitungan kadar.
Gambar 1. Kromatogram Sampel C Positif Antalgin
Dari  kromatogram  di  atas  dapat  dihitung  kadar  antalgin  dengan  mengunakan  persamaan regresi linier yang didapat pada linearitas, yaitu dengan menggunakan rumus y = ax + b. Luas area yang didapat tiap-tiap sampel dimasukkan dalam y untuk mengetahui nilai x. Kemudian dihitung kadar dengan menggunakan rumus:
% Kadar Sampel =
Dengan: X = Kadar sementara ( ) FP = Faktor Pengenceran (mL) M = Massa Sampel (mg) (Vuqohan, 2017).
Sehingga menghasilkan data sebagai berikut: Prinsip kerja KCKT atau lebih dikenal HPLC ( High Performance Liquid Chromatography ) adalah  pemisahan  komponen  analit  berdasarkan  kepolarannya,  setiap  komponen  senyawa yang  keluar  akan  terdeteksi  dengan  detektor  dan  direkam  dalam  bentuk  kromatogram. Dimana  jumlah  peak  menyatakan  jumlah  komponen,  sedangkan  luas peak menyatakan konsentrasi komponen dalam senyawa (Zainal, 2019).
Tabel 1. Hasil Pengujian pada Baku Antalgin No. Konsentrasi (ppm) Luas Area Waktu Retensi (tR) 1 20 145630 3,715 2 40 264065 3,722 3 60 406031 3,712 4 80 532755 3,707 5 100 669445 3,698 Rata-Rata 403585 3,710
Tabel 2.  Pengujian dan perhitungan kadar
Berdasarkan  hasil  dari  pengujian  dan  perhitungan  kadar  didapatkan  hasil  positif  pada sampel C yaitu 14,87 %. Kadar tersebut jelas menunjukkan adanya kandungan antalgin dalam sampel  jamu  pegal  linu  yang  seharusnya  tidak  diperbolehkan  terdapat  kandungan Bahan Kimia  Obat  (BKO)  di  dalam  jamu  seperti  halnya  tindakan  produsen  dan  pihak-pihak  yang mengedarkan  produk  obat  tradisional  dengan  menambah  BKO  telah  melanggar    pasal 196 Undang-undang Nomor 36 Tahun 2009 tentang Kesehatan (BAPPENAS, 2020) .
Pemilihan metode HPLC tepat dan dapat diketahui dengan jelas hasil positif dengan dapat menunjukkan persentase kadar antalgin  dalam suatu  sampel. Hal  itu karena HPLC memiliki kelebihan  dan  menjadi  pilihan  terbaik  dalam  analisis  dan  proses  pemisahan  analit.  Analisis dengan  HPLC  memiliki  beberapa  keunggulan  antara  lain  waktu  analisis  relatif  singkat, volume sampel yang digunakan sedikit,  dapat  menganalisis senyawa organik  dan anorganik, serta kolom (Ardianingsih dalam (Hanifah et al., 2021)
yang  dapat  digunakan  kembaliDari  segi  manfaat,  pemanfaatan  HPLC  telah  dirasakan karena  banyaknya  manfaat  yang  didapat  seiring  dengan  pemanfaatan  HPLC.  Prosedur pengujian  yang  telah  dilakukan  menunjukkan  bahwa  penggunaan  HPLC  dapat  dilihat  hanya membutuhkan waktu yang singkat dan juga dapat menghasilkan selektivitas, sensitivitas, dan rentang  dinamis  analisis  HPLC,  menghasilkan  kromatogram  puncak  yang  ideal  dan  akurat,
No. Sampel Hasil
Persentase (%) 1 A Negatif - 2 B Negatif - 3 C Positif 14,87
menggunakan  lebih  sedikit  pelarut,  dan  menganalisis  lebih  banyak  produk  dengan  sumber daya  yang  sudah  tersedia.  Hal  ini  juga  memungkinkan  bagi  HPLC  untuk  meningkatkan throughput  sampel,  yang  memungkinkan  untuk  membuat  lebih  banyak  materi  yang  secara konsisten  memenuhi  atau  melebihi  kriteria  produk.  Hal  ini  dapat  mengakibatkan  hilangnya variabilitas,  batch  yang  gagal,  atau  kebutuhan  untuk  pengerjaan  ulang  material.  Sehingga dapat menjamin kualitas produk akhir, termasuk pengujian rilis final (Annissa et al., 2019).
Hasil kadar yang didapatkan dari pengujian dengan metode HPLC sudah tidak diragukan lagi karena dapat menunjukkan persentase yang akurat. Hasil 14,87 % merupakan bukan hasil yang kecil, namun besar dalam konteks cemaran Bahan Kimia Obat dalam suatu sediaan jamu pegal linu.

## KESIMPULAN
Penggunaan  HPLC  pada  penelitian  ini  sangat  berperan  besar  terutama  pada  hasil  yang didapat..  Dapat  diketahui  keunggulan  dari  instrumen  tersebut,  beberapa  diantaranya  yaitu HPLC  hanya  memerlukan  waktu  yang  singkat  juga  dapat  menghasilkan  selektivitas, sensitivitas,  dan  rentang  dinamis  analisis  LC,  menghasilkan  puncak  kromatogram  yang idealdan  akurat,  dalam  penggunaan  pelarut  menjadi  lebih  sedikit,  serta  lebih  banyak  produk dianalisis dengan sumber daya yang ada.

## DAFTAR PUSTAKA
Annissa,  S.,  Musfiroh,  I.,  &  Indriati,  L.  (2019).  Perbandingan  Metode  Analisis  Instrumen HPLC dan UHPLC : Article Review. Farmaka , 17 (3), 189–197.
BAPPENAS, R. I. (2020). Undang Undang Republik Indonesia Nomor . Fatimah. (2017). Analisis Antalgin dalam Jamu Pegal Linu yang Dijual di Pasar Beringharjo Yogyakarta. Journal Of Health , 4 (1), 29. https://doi.org/10.30590/Vol4-No1-p29-34 Gusnadi, D. (2021). Uji Organoleptik dan Daya Terima pada Produk Mousse Berbasis Tapai Singkong sebagai Komoditi UMKMdi Kabupaten Bandung. Jurnal Inovasi Penelitian , 1 (10), 1–208.
Hanifah, U., Slamet,  S., Wirasti, W., Rahmasari,  K. S., &  Farmasi,  P. S.  (2021). Penetapan Kadar  Antalgin  dan  Deksametason  Natrium  Fosfat  dalam  Jamu  Pegal  Linu  yang Beredar  di  Kabupaten  Pekalongan  dengan  Metode  High  Performance  Liquid Chromatography (HPLC) . Indriyani, L. (2016). Identifikasi dan Penepatan Kadar Antalgin dalam Jamu Pegal . Leksono.  (2018).  Jenis  Pelarut  Metanol  dan  n-heksana  terhadap  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak Rumput Laut Gelidium Sp. Dari Pantai Drini Gunungkidul–Yogyakarta. Jurnal Kelautan Tropis , 21 (1), 9. https://doi.org/10.14710/Jkt.v21i1.2236
Oktaviantari. (2019). Identifikasi Hidrokuinon dalam Sabun Pemutih Pembersih Wajah pada Tiga Klinik Kecantikan di Bandar Lampung dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis dan Spektrofotometri Uv-Vis. Jurnal Analis Farmasi , 4 (2), 91–97.
Rosydiati.  (2019).  Karakterisasi  Puncak  Kromatogram  dalam  High  Performance  Liquid Chromatography (HPLC) terhadap Perbedaan  Fase Gerak, Laju  Alir, dan Penambahan Asam dalam Analisis Indole Acetic Acid (IAA. Kandaga , 1 (2), 65–73.
Sony.  (2015).  Identifikasi  Bahan  Kimia  Obat  dalam  Jamu  Pegal  Linu  yang  Dijual  di  Pasar Bandar. Jurnal Wiyata , 2 (2), 188–192.
Vuqohan.  (2017). Validasi  Metode  Penetapan  Kadar  Asam  Retinoat  Menggunakan Kromatografi  Cair  Kinerja  Tinggi  serta  Aplikasinya  dalam  Sediaan  Krim  Malam. Skripsi . Universitas Wahid Hasyim.
Zainal.  (2019).  Penetapan  Kurva  Standar  Senyawa  Tetra  Hidroxy  Ethyl  Disulphate  (Thes) dalam Plasma Marmut (Cavia Porcellus) Menggunakan KCKT. Majalah Farmasi Dan Farmakologi , 22 (3), 90–92. https://doi.org/10.20956/Mff.v22i3.5828