Ajeng Retno setiawati, Shirly Gunawan (2023) Uji Fitokimia, Kapasitas Total Antioksidan, Bslt Serta Kadar Total Fenolik pada Ekstrak Daun Meniran (Phyllanthus Niruri L.), (8) 6, http://dx.doi.org/10.36418/syntax- literate.v6i6
E-ISSN: 2548-1398 Published by: Ridwan Institute
Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia p–ISSN: 2541-0849 e- ISSN: 2548-1398 Vol. 8, No. 6, Juni 2023
UJI FITOKIMIA, KAPASITAS TOTAL ANTIOKSIDAN, BSLT SERTA KADAR TOTAL  FENOLIK  PADA  EKSTRAK  DAUN  MENIRAN  (PHYLLANTHUS NIRURI L.)

## Ajeng Retno Setiawati, Shirly Gunawan
Fakultas Kedokteran Universitas Tarumanagara Jakarta Email: ajeng.405190107@stu.untar.ac.id, shirlyg@fk.untar.ac.id

## Abstrak
Masyarakat  Indonesia  percaya  dengan  tradisi  turun  temurun  dari  khasiat mengkonsumsi  obat  herbal.  Daun  meniran  merupakan  tumbuhan  yang  banyak ditemui  di  Negara  Indonesia.  Daun  meniran  mengandung  Flavonoid  dan  Alkaloid yang  mampu  merangsang  sistem  imun,  serta  antioksidan  yang  mampu  menangkal ROS.  Antioksidan  dapat  menetralisasi  efek  yang  disebabkan  oleh  stres  oksidatif (keadaan  di  mana  terdapat  ketidakseimbangan  antara  oksidan  dan  antioksidan). Senyawa  antioksidan  dapat  mencegah  penyakit  degeneratif  yang  diakibatkan  oleh stress  oksidatif.  Karena  senyawa  antioksidan  dapat  menghambat  proses  oksidasi, maka dilakukan pemeriksaan menggunakan daun meniran untuk mengetahui khasiat dari  tanaman  ini.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  kandungan  senyawa fitokimia, kapasitas antioksidan, kadar fenolik total serta toksisitas pada ekstrak daun meniran.  Ekstrak  daun  meniran  dibuat  dengan  metode  maserasi  menggunakan pelarut  metanol,  uji  fitokimia  menggunakan  metode  harnborne,  uji  kapasitas antioksidan  total  dengan  metode  blois  menggunakan  DPPH,  uji  fenolik  dengan metode  singleton,  uji  toksisitas  menggunakan  metode  BSLT.  Pada  uji  fitokimia didapatkan ekstrak daun meniran mengandung alkaloid, flavonoid, kardioglikosida, glikosida, saponin, kumarin, fenolik, kuinon, betasianin, steroid, terpenoid, dan tanin. Di  dapatkan  ekstrak  daun  meniran  memiliki  kapasitas  total  antioksidan  (IC50  = 29.157 µg/mL), kadar fenolik total (10.295 µg/mL) dan tingkat toksisitas (LC50 = 170,308  μg/mL)  yang  mana  memiliki  sifat  sitotoksik  (LC50  ≤  1000  ppm)  dan termasuk kategori toksik sedang (100 ppm ≤ LC50 ≤ 1000 ppm). Dapat disimpulkan bahwa  ekstrak  daun  meniran  memiliki  potensi  sebagai  antioksidan  dengan  efek antimitosis.
Kata kunci : Phyllanthus Niruri L; DPPH, BSLT; Skrin.

## Abstract
Indonesians believe in a tradition passed from generation to generation about the properties of herbal medicine. Meniran leaf is one of the ber grown in Asia and found in many parts of Indonesia. It contains flavonoids and alkaloid able to stimulate the immune  system  and  antioxidants  to  combat  ROS.  Antioxidant  can  neutralize  the effects caused by oxidative stress (a conndition where the is an imbbalance between
oxidants  and  antioxidants  in  the  body).  Antioxidants  can  prevent  degenerative diseases  and  malignancies  caused  by  prolonged  oxidative  stress.  Because  of  its ability to prevent oxidation, this study uses meniran leaves to further investigate its uses.  This  study  aims  to  look  into  meniran  leaves’  phytochemical  constituents, antioxidant capacity, and toxicity. Meniran leaves extract was made by maseration using  methanol,  phytochemical  screening  used  Harborne’s  method,  antioxidant capacity used Blois’ DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil) method, total phenolic content used Singleton’s method, and toxicity with BSLT. Phytochemical screening of  meniran  leaf  extract  determined  that  it  contains  alkaloids,  flavonoids, cardioglycosides, glycosides, saponins, coumarins, phenolics, quinones, betacyanins,  steroids,  terpenoids,  and  tannins.  Its  antoxidant  capacity  ((IC50 =81.585µg/mL),  total  phenolic  content  (10,295µg/mL),  total  alkaloid  content (13.788 µg/mL), and toxicity (LC50 =170.308 μg/mL) which can be considered to have a cytotoxic effect and categorized as moderate (100 ppm ≤ LC50 ≤ 1000 ppm). In  summary,  meniran  leaf  extract  has  the  potential  to  be  an  antioxidant  with  an antimitotic effect.

## Keywords: Phyllanthus niruri l; DPPH; BSLT; Phytochemical screenin

## Pendahuluan
Indonesia  merupakan  negara  kepulauan  terbesar  di  dunia.  yang  memiliki  hutan tropis dengan keanekaragaman hayatinya yang berperan penting dalam menjaga stabilitas ekosistem global (K. L. Hidup & Indonesia, 2016). Data Status Lingkungan hidup dan Kehutanan  2020  menunjukkan  Indonesia  merupakan  rumah  bagi  11%  seluruh  jenis tumbuhan di dunia (I. K. N. L. Hidup, 2009). Dari sekitar 30.000 spesies tumbuhan yang ada di kepulauan Indonesia, diperkirakan 9.600 spesies adalah tumbuhan obat, tetapi baru sekitar  300  spesies  yang  dimanfaatkan  sebagai  bahan  obat  tradisional  (Kardinan  & Kusuma,  2004). Obat  herbal  tradisional  telah  diterima  secara  luas  di  hampir  seluruh negara  di  dunia.  Menurut  WHO,  negara-negara  di  Afrika,  Asia  dan  Amerika  Latin menggunakan  obat  herbal  sebagai  pelengkap  pengobatan  primer.  Bahkan  di  Afrika, sebanyak  80  persen  dari  populasi  menggunakan  obat  herbal  untuk  pengobatan  primer (WHO,  2020).  Khasiat  obat  di  dalam  suatu  tanaman  berasal  dari  suatu  senyawa  kimia non-nutrien, yaitu senyawa fitokimia (Asaduzzaman & Asao, 2018).
Fitokimia  mempunyai  peran  salah  satunya  yaitu  sebagai  antioksidan  untuk mengatasi stres oksidatif (Sari & Mahastya, 2022). Stres oksidatif dapat timbul karena ketidakseimbangan  antara  radikal  bebas  dengan  antioksidan  di  dalam  tubuh  akibat kurangnya antioksidan atau meningkatnya radikal bebas seperti reactive oxygen species (ROS), reactive nitrogen species (RNS), dan reactive sulfur species (RSS) (Aziz et al., 2019);(Engwa,  2018). 7 Radikal  bebas  memiliki  elektron  tidak  berpasangan  sehingga mudah bereaksi dengan molekul lain di dalam tubuh. Namun jika jumlahnya berlebihan, dapat  menyebabkan  kerusakan  sel  yang  akan  menyebabkan  percepatan  penuaan  dan penyakit degenerative (Aziz et al., 2019);(Engwa, 2018).
Meniran  (Phyllanthus  Niruni  L.)  merupakan  tanaman  liar  yang tersebar  di  benua Afrika,  Australia,  Asia  termasuk  Indonesia.  Di  beberapa  daerah  di  Indonesia,  meniran
dikenal  dengan  nama  na’me  tano,  sidukung  anak,  dudukung  anak,  baket  sikolop (Sumatera); meniran ijo, meniran merah, memeniran (Jawa); bolobungo, sidukung anak (Sulawesi);  serta  gosau  ma  dungi,  gosau  ma  dungi  roriha,  belalang  babiji  (Maluku) (Kardinan & Kusuma, 2004).
Daun Meniran telah dikenal sebagai obat tradisional dengan khasiat yang luar biasa. Secara  klinis,  ektrak  meniran  telah  terbukti  bersifat  imunostimulan.  Meniran mengandung  beberapa  senyawa  fitokimia  diantaranya  flavonoid  yang  mampu merangsang  sistem  imun  tubuh  manusia  agar  bekerja  lebih  optimal,  sehingga  dapat melawan penyakit infeksi kronis dan infeksi viral (Kosnayani et al., 2021).
Selain itu meniran diduga mengandung saponin, polifenol, filatin, hipofilantin, yang diduga  dapat  meningkatkan  aktivitas  antioksidannya  (Kardinan  &  Kusuma,  2004). Berdasarkan data tersebut, maka penulis bermaksud untuk melakukan penelitian berupa pengujian  terhadap  aktivitas  antioksidan  ekstrak  meniran,  meliputi  penentuan  kadar metabolit sekunder, uji kapasitas total antioksidan, uji toksisitas serta analisis sidik jari.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  yang  bersifat  in  vitro  dan bioassay.  Uji  in  vitro  yang  dilakukan  ini  terdiri  dari  uji  fitokimia,  uji  kapasitas  total antioksidan,  uji  fenolik  total,  serta  uji  bioassay  berupa  uji  toksisitas.  Penelitian  akan dilaksanakan di Fakultas Kedokteran, Universitas Tarumanagara. Laboratorium Biokimia dan  Biologi  Molekuler.  Penelitian  akan  dilaksanakan  dari  November  2021  hingga mei 2022. Sampel yang digunakan yaitu, daun meniran.

## Hasil dan Pembahasan

## Uji Fitokimia
Hasil pemeriksaan fitokimia dalam Daun meniran didapatkan alkaloid, flavonoid, kardioglikosida,  glikosida,  saponin,  kumarin,  fenolik,  kuinon,  betasianin,  steroid, terpenoid, dan tanin. (Tabel 1).

## Tabel 1 Hasil Fitokimia Ekstrak Daun Meniran
Fitokimia Metode/Reagen Ekstrak Daun Meniran Alkaloid Mayer-Wagner + Flavonoid NaOH + Kardioglikosida Keller-Kiliani + Glikosida Modified Borntrager + Saponin Penyabunan + Kumarin NaOH+Chloroform + Fenolik Folin Ciocalteau + Kuinon H2SO4 + Antosianin NaOH + Betasianin NaOH + Steroid Liebermann-Burchard + Terpenoid Liebermann-Burchard + Tanin Ferric-Chloride +
Keterangan: (+) = Mengandung golongan senyawa (-) = Tidak mengandung golongan senyawa

## Uji Kapasitas Antioksidan Daun Meniran dengan DPPH
Nilai IC50 ekstrak Daun Meniran yang didapatkan pada uji kapasitas total antioksidan yaitu, sebesar 29.157 µg/mL (Tabel 2).

## Tabel 2 Hitung Persentase Inhibisi dan IC50 Berdasarkan Konsentrasi Sampel
Konsentrasi %Inhibisi (%) IC50 (µg/mL) 25 43.200 50 65.860 75 72.360 29.157 100 86.560 125 93.810

## Uji Fenolik Total
Pada penelitian uji fenolik total ini dilakukan pengenceran 1:1, sehingga kadar fenolik ekstrak Daun Meniran yang didapatkan adalah 10.295 µg/m (Tabel 3).

## Tabel 3 Nilai Absoebansi dan kadar Fenolik Ekstrak Daun Meniran
Tabung Absorbansi Kadar Fenolik (µg/mL) Rerata Kadar Fenolik (µg/mL) Kadar Fenolik (µg/mL) I 0.235 536.71 514.79 10.295 II 0.203 492.87

## Uji Toksisitas Menggunakan BSLT
LC50 yang didapatkan pada uji toksisitas dengan BSLT sebesar 170,308 µg/mL (table 4).
Tabel 4 Konsentrasi, Log Kosentrasi, % Kematian, dan LC50 Ekstrak Daun Meniran.
Konsentrasi (µg/mL) Log Konsentrasi %Kematian LC50 (μg/mL) 100 2 14.29 170,308 150 2,18 34.09 200 2,3 60.47 250 2,4 82.61

## PEMBAHASAN

## Uji Fitokimia
Penelitian ini terdiri dari 13 kandungan fitokimia pada ekstrak daun meniran dari hasil penelitian didapatkan bahwa ekstrak daun meniran mengandung fitokimia seperti alkaloid,  flavonoid,  kardioglikosida,  glikosida,  saponin,  kumarin,  fenolik,  kuinon, betasianin, stereoid, terpenoid, dan tanin.
Dalam penelitian Kosnayani (2021), pada uji kualitatif flavonoid pada ekstrak daun meniran  terdapat  kandungan  flavonoid,  menurut  Harrizul  Rivai  (2013)  senyawa  kimia yang  terkandung  dalam  daun  meniran  terdiri  dari  alkaloid,  glikosida,  fenolik,  tanin, kumarin  dan  saponin  dan  menurut  penelitian  Risma  Marisi  Tambunan  (2019) terdapat kandungan senyawa kuinon, stereoid dan terpenoid.

## Uji Kapasitas Antioksidan dengan DPPH
Prinsip pengujian kapasitas antioksidan dalam penelitian ini menggunakan metode DPPH.  Dimana  pada  pengujian  ini  digunakan  ekstrak  daun  meniran  dan  standar pembanding vitamin C atau asam askorbat untuk mendapatkan hasil kapasitas antioksidan dengan  menghitung  IC50.  Pemilihan  pada  metode  ini  dikarenakan  efektif  dalam mengevaluasi  aktivitas  senyawa  flavonoid  dan  fenol  dalam  menangkap  radikal  bebas, sebagai aktivitas antioksidan non-enzimatik.
Dimana pada penelitian ini digunakan untuk mengukur aktivitas antioksidan pada ekstrak daun meniran. Semakin kecil nilai IC50, maka semakin kuat senyawa uji tersebut sebagai  penangkap  radikal  DPPH,  menurut  penelitian  Kosnayani  et  al8,  Inhibition concentration  (IC50)  menggambarkan  konsentrasi  sampel  yang  dibutuhkan  untuk menghambat 50% aktivitas DPPH. Pada kurva ekstrak daun meniran dan kurva standar asam askorbat didapatkan nilai R2 = 0,9988 dan R2 = 0,9563.
Hasil penelitian ini didapatkan IC50 daun meniran 29.157 µg/mL dan asam askorbat 5,4  µg/mL,  sehingga  hasil  dari  asam  karbonat  lebih  kuat,  meskipun  begitu  untuk hasil dari ekstrak daun meniran juga masih tergolong kuat. Hasil dari pernyataan ini diperkuat dengan andanya metode pengeringan daun meniran tanpa terkena paparan sinar matahari langsung dan disimpan pada suhu ruangan.
Menurut  penelitian  Kosnayani  et  al8,  nilai  IC50  pada  ekstrak  daun  meniran  dan asam  askorbat  didapatkan  18,48  ±  3,59  µg/mL.  Sehingga  Hal  ini  menunjukkan  bahwa hasil penelitian Kosnayani et al8 termasuk dalam kategori antioksidan yang kuat, Dalam buku karya Agus kardinan3 dikatakan kandungan yang terdapat pada daun meniran teruji dan  terbukti  berperan  sebagai  immunostimulan  yang  dapat  meningkatkan  kekebalan tubuh, serta khasiat secara empiris dan klinis pada daun meniran dapat berfungsi sebagai antibakteri atau antibiotik anti radang serta antivirus.

## Uji Kadar Fenolik Total
Penelitian  Uji  fenolik  ini  menggunakan  standar  tanin  untuk  mendapatkan  kadar fenolik pada ekstrak daun meniran. Pada penelitian ini terdapat hasil kurva standar tanin yang  memiliki  R2=  0,9727.  Didapatkan  rata-rata  kadar  fenolik  ekstrak  daun  meniran sebesar 10.295 µg/mL. Menurut penelitian Kumar (2022), didapatkan hasil pada rata-rata kadar  fenolik  115.32  dengan  standar  deviasi  1.79  mg  GAE/g,  kemungkinan  dari ketidaksesuaian  hasil  penelitian  ini  disebabkan  karena  standar  yang  digunakan  oleh penelitian Kumar et al11 menggunakan standar yang berbeda yaitu Asam galat.

## Uji Toksisitas (BSLT)
Prinsip pengujian pada BSLT merupakan uji toksisitas pada ekstrak daun meniran. Salah satu metode awal dari uji sitotoksik adalah Brine Shrimp Lethality Test (BSLT), BSLT merupakan salah satu metode yang banyak digunakan untuk pencarian antikanker baru yang berasal dari tanaman. Pada uji toksisitas dalam penelitian ini didapatkan nilai R2 = 0,9697 sehingga persamaan garis linear yang dibuat memiliki tingkat keakuratan yang dapat dipercaya.
Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  daun  meniran,  maka  semakin  tinggi  tingkat kematian  larva  artemia  salina.  Berdasarkan  persamaan  garis  linear  pada  kurva  dicari konsentrasi sampel yang dapat membunuh 50% larva artemia salina dalam waktu 24 jam observasi yaitu LC50. Nilai LC50 yang didapatkan pada ekstrak daun meniran 170,308 μg/mL.
Menurut hasil penelitian Fitria susilowati (2017) Senyawa aktif yang yang dimiliki daya bioaktivitas tinggi diketahui berdasarkan nilai Lethal Concentration 50% (LC 50), yaitu  suatu  nilai  yang  menunjukan  konsentrasi  zat  toksik  yang  dapat  menyebabkan kematian  hewan  uji  sampai  50%.  Suatu  senyawa  dikategorikan  sangat  toksik  jika memiliki nilai LC50 kurang dari 30 ppm, dikategorikan toksik jika memiliki nilai LC50 30-1000 ppm, dan dikategorikan tidak toksik jika memiliki harga LC50 di atas 1000 ppm. Semakin  kecil  nilai  LC50 maka  semakin  toksik  suatu  senyawa  dan  berpotensi  sebagai antikanker.
Hasil  dari  penelitian  ini  mendapatkan  LC50  170.308  yang  berarti  ekstrak  daun meniran  masuk  dalam  kategori  toksik.  Menurut  penelitian  D  Andrianto  (2017), didapatkan LC50 473.26 to 908,98 mikrogram dimana hasilnya dalam kategori toksik. Dan  menurut  penelitian  Desi  Kusumawati  (2018), terhadap  kayu  ceremai  (Phyllanthus acidus  L)  menyatakan  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  semakin  tingginya  angka kematian larva. Dimana didapatkan nilai LC50 pada 275.035 mg/ml yang berarti masuk dalam kategori toksik.

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan  penelitian  ini  yang  berjudul  Uji  Fitokimia, Kapasitas  Total  Antioksidan,  BSLT  serta  Kadar  Total  Fenolik  pada  Ekstrak  Daun Meniran (Phyllanthus niruri L.), dapat disimpulkan: (a) Kandungan yang terdapat pada fitokimia  alkaloid,  flavonoid,  kardioglikosida,  glikosida,  saponin,  kumarin,  fenolik, kuinon,  betasianin,  steroid,  terpenoid,  dan  tanin.  (b)  Kapasitas  total  antioksidan  yang dimiliki daun meniran dalam IC50 sebesar 29,157 µg/mL, termasuk kategori antioksidan yang kuat. (c) Kadar fenolik total yang dimiliki daun meniran sebesar 10.295 µg/mL. (d) Tingkat  toksisitas  yang  dimiliki  daun  meniran  dalam  LC50  sebesar  170,308  μg/mL, termasuk kategori toksisitas sedang.

## BIBLIOGRAFI
Andrianto, D., Widianti, W., & Bintang, M. (2017). Antioxidant and cytotoxic activity of
Phyllanthus acidus fruit extracts. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science , 58 (1), 12022.
Asaduzzaman, M., & Asao, T. (2018). Introductory chapter: phytochemicals and disease prevention. Phytochemicals-Source of Antioxidants and Role in Disease Prevention , 1–5.
Aziz, M. A., Diab, A. S., & Mohammed, A. A. (2019). Antioxidant categories and mode of action . IntechOpen London, UK.
Engwa, G. A. (2018). Free radicals and the role of plant phytochemicals as antioxidants against oxidative stress-related diseases. Phytochemicals: Source of Antioxidants and Role in Disease Prevention. BoD–Books on Demand , 7 , 49–74.
Hidup, I. K. N. L. (2009). Status Lingkungan Hidup Indonesia. (No Title) .
Hidup, K. L., & Indonesia, K. R. (2016). Peraturan Menteri Lingkungan Hidup RI Nomor 56  Tahun  2016.  Tentang  Tata  Cara  Dan  Persyaratan  Teknis  Pengelolaan  Limbah Bahan  Berbahaya  dan  Beracun  dari  Fasilitas  Pelayanan  Kesehatan .  Jakarta: Kementerian Lingkungan Hidup dan Kehutanan RI.
Kardinan, I. A., & Kusuma, F. R. (2004). Meniran penambah daya tahan tubuh alami . AgroMedia.
Kosnayani,  A.  S.,  Badriah,  L.,  Hidayat,  A.  K.,  &  Rizal,  M.  E.  A.  (2021). Profil  Dan Analisis Aktivitas Antioksidan Dalam Ekstrak Air Meniran Yang Dikeringkan Dengan Metode Yang Berbeda . https://doi.org/10.20473/mgi.v16i2.150-155
Kumar,  S.  R.,  Chozhan,  K.,  &  Murugesh,  K.  A.  (2022).  Determination  of  Bioactive compounds in the leaf extract of Phyllanthus niruri, Emblica officinalis and Psoralea corylifolia. Journal of Ayurvedic and Herbal Medicine , 8 (1), 11–13.
Kusumawati,  D.  (2018).  UJI  TOKSISITAS  EKSTRAK  ETANOL  KAYU  CEREMAI (Phyllanthus  acidus  L)  TERHADAP  LARVA  UDANG  Artemia  salina  DENGAN METODE  BRINE  SHRIMP  LETHALITY  TEST  (BST). Pharmed:  Journal  of Pharmaceutical Science and Medical Research , 1 (1), 21–25.
https://doi.org/10.25273/pharmed.v1i1.2267
Rivai,  H.,  Septika,  R.,  &  Boestari,  A.  (2013).  Karakterisasi  ekstrak  herba  meniran (Phyllanthus niruri Linn) dengan analisa fluoresensi. Jurnal Farmasi Higea , 5 (2), 15– 23.
Sari,  N.  P.  E.  F.,  &  Mahastya,  I.  W.  C.  (2022).  Terapi  Antioksidan  Sebagai Nefroprotektor. Essence , 20 (2), 81–86.
Susilowati,  F.  (2017).  Uji  brine  shrimp  lethality  test  (Bslt)  ekstrak  etil  asetat  Spons calthropella  SP.  asal  zona  intertidal  Pantai  Krakal  Gunung  Kidul  Yogyakarta. Pharmasipha: Pharmaceutical Journal of Islamic Pharmacy , 1 (1), 1–5.
Tambunan, R. M., Swandiny, G. F., & Zaidan, S. (2019). Uji Aktivitas Antioksidan dari Ekstrak Etanol 70% Herba Meniran (Phyllanthus niruri L.) Terstandar. Jurnal Ilmu Kefarmasian , 12 (2), 60–64. https://doi.org/10.37277/sfj.v12i2.444
WHO. (2020). Tailoring malaria interventions in the COVID-19 response . 34.

## Copyright holder:
Ajeng Retno setiawati, Shirly Gunawan (2023)

## First publication right:
Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia
This article is licensed under: