Majalah Farmaseutik Vol. 15 No. 2: 43-58
ISSN-p : 1410-590x ISSN-e : 2614-0063
Pembuatan  Sediaan  Tabir  Surya  Ekstrak  Etanol  Buah Mahkota  Dewa  ( Phaleria  macrocarpa ),  Aktivitas  Inhibisi Fotodegradasi Tirosin dan Kandungan Fenolik Totalnya
Formulation of Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa) Fruit Extract Sunscreen, Inhibition  Activity  of  Tyrosine  Photodegradation  and  its  Total  Phenolic Compounds
Tatang  Irianti 1* ,  T.N.  Saifullah  Sulaiman 1 ,  Nanang  Fakhrudin 1 ,  Siluh  Astuti 1 ,  Nita Testikawati 1 , Sofa Farida 2 , Jovanita Fara Addina 1 , Sari Rosiati Nur Khasanah 1 1 Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada
2 Balai  Besar  Penelitian  dan  Pengembangan  Tanaman  Obat  Tradisional,  Badan  Penelitian  dan Pengembangan Kesehatan
Corresponding author: Tatang Irianti: Email: intanti@ugm.ac.id Submitted: 04-04-2019 Revised: 12-06-2019 Accepted: 12-06-2019

## ABSTRAK
Senyawa fenolik mempunyai potensi sebagai fotoprotektor, sehingga mampu melindungi kulit dari  kerusakan  oksidatif  terutama  menyerap  Ultra  Violet  dari  pancaran  sinar  matahari.  Ekstrak etanolik  buah  masak  mahkota  dewa  [Phaleria  macrocarpa  (Scheff)  Boerl.]  mengandung  senyawa fenolik  dan  memiliki  peranan  sebagai  fotoprotektor.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui efektivitas ekstrak etanolik buah mahkota dewa sebagai fotoprotektor dalam sediaan tabir surya dan oksibenson  sebagai  pembanding.  Aktivitas  fotoprotektor  ditentukan  dari  tingkat  fotodegradasi tirosin dan kadar fenolik totalnya, kemudian penelitian ini dilakukan dengan 8 formula; formula 1 sebagai kontrol negatif (basis); formula 2 sebagai kontrol positif (basis dan oksibenson); formula 3, formula  4,  dan  formula  5  mengandung  ekstrak  etanolik  buah  mahkota  dewa  dengan  berbagai konsentrasi; formula 6, formula 7, dan formula 8 mengandung oksibenson dan ekstrak etanolik buah mahkota  dewa  dengan  berbagai  konsentrasi.  Penentuan  kemampuan  fotoproteksi  berdasarkan persen  transmisi  eritema  dan  persen  transmisi  pigmentasi.  Uji  inhibisi  fotodegradasi  dilakukan dengan menggunakan enam kelompok komposisi tirosin dan Rhetoflam. Uji penentuan kadar fenolik total dilakukan menggunakan metode Follin-Ciocalteu. Hasil pengukuran diintrapolasikan ke dalam kurva baku asam galat. Ekstrak etanolik buah mahkota dewa dalam sediaan tabir surya memberikan nilai Te sebesar 17,86-37,01 % dan nilai Tp sebesar 12,07-22,64 %. Efektivitas fotoproteksi ekstrak etanolik buah mahkota dewa lebih kecil dibandingkan oksibenson yang memiliki nilai Te sebesar 1,15.10-5 % dan Tp sebesar 0,67 %. Kombinasi ekstrak etanolik buah mahkota dewa dan oksibenson memberikan nilai Te sebesar 0,17-0,52 % dan nilai Tp sebesar 2,10-4,48 %. Sedangkan kandungan fenolik  total  ekstrak  buah  mahkota  dewa  adalah  sebesar  8,29  ±  0,27  %  dengan  aktivitas penghambatan fotodegradasi tirosin 1,58 kali lebih besar dibandingkan dengan vitamin C pada kadar yang sama, yaitu 0,15%. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanolik buah  mahkota dewa dapat dimanfaatkan sebagai bahan 4aktif fotoprotektor dalam sediaan kosmetik.
Kata kunci: Mahkota Dewa, Fotorproteksi, Fotodegradasi, Tabir Surya

## ABSTRACT
The  phenolic  compounds  play  an  important  role  for  photoprotector  on  the  skin  against sunlight or ultra violet light. Mahkota dewa [ Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.] fruit contains phenolic  compounds  and   has   potential   as  a  photoprotector.  Sunscreen  lotion  or  cream  can  be decreased  the intensity of UV radiation reaching the skin and then   the risk   of sun-induced skin cancer  is  smaller.   The  present  study  attempt  to  develop  possessing  broad  spectrum  of  anti-UV radiation effectiveness with reduced concentration of chemical UV-filters. Sunscreen formulation of mahkota dewa extract were compared to oxybenson and determined the photodegradation activity of tyrosine. Furthermore, the total phenolic concentration is analyzed as the active compound in the photoprotector.  The  effectiveness  of  formulation  was  evaluated  using  the  percent  of  erythema
transmission (Te) and pigmentation  transmission (Tp).  The sunscreen creams were prepared using 8 different composition F1 up to F8; formula 1 as negative control (base); formula 2 as a positive control (base and oxybenson); formula 3, formula 4, and formula 5 contained ethanolic extract of mahkota  dewa  fruit  with  various  concentrations;  formula  6,  formula  7,  and  formula  8  contained oxybenson and ethanolic extract of mahkota dewa fruit with various concentrations. Determination of  photoprotector  ability  based  on  percent  transmission  of  erythema  and  percent  pigmentation transmission. The photodegradation inhibition test was carried out using six groups of tyrosine and Rhetoflam  compositions.  The  investigation  of  total  phenolic  level  test  was  carried  out  using  the Follin-Ciocalteu method. The measurement results are intrapolated into the standard curve of gallic acid. The ethanolic extract mahkota dewa fruit in sunscreen preparations gave a Te value of 17.86- 37.01% and a TP value of 12.07-22.64%. The effectiveness of photoprotection of the ethanolic extract is smaller than oxybenson which has a Te value of 1.15.10-5% and Tp of 0.67%. The combination of ethanolic  extract  and  oxybenson  gave  Te  values  of  0.17-0.52%  and  Tp  values  were  2.10-4.48%. Whereas the total phenolic content of mahkota dewa fruit extract was 8.29 ± 0.27% with inhibition of tyrosine photodegradation activity 1.58 times greater than vitamin C at the same level, which is 0.15%.  This  shows  that  mahkota  dewa  ethanolic  extract  can  be  used  as  an  active  ingredient  of photoprotector in cosmetic preparations.
Keywords : Mahkota Dewa, Photoprotection, Photodegradation, Sun Protection
PENDAHULUAN Indonesia  merupakan  daerah  tropis dengan intensitas paparan sinar matahari yang tinggi,  seperti  UV  A  dan  UV  B.  Hal  ini  dapat menimbulkan  pengaruh  buruk  bagi  kulit, termasuk  kanker  kulit.  Cahaya  matahari merupakan  energi  dalam  bentuk  gelombang elektromagnetik.  Energi  foton  dari  cahaya matahari  dapat  menimbulkan  perubahan fotokimia  sehingga  dapat  menyebabkan perubahan  metabolisme  pada  makhluk  hidup (Koechevar et  al. ,  1993)  dan  berakibat  pada perubahan metabolisme, kerusakan sel, mutasi sel bahkan kematian sel (Koechevar et al. , 1993). Radiasi sinar matahari dapat memicu timbulnya radikal  bebas  reaktif  dan  mudah  bereaksi dengan  jaringan  sehingga  dapat  menimbulkan kerusakan  oksidatif  terutama  pada  jaringan kulit (Halliwel, B. & Gutteridge, 1999). Efek lain dari  sinar  matahari  adalah  terjadinya sunburn (kulit  terbakar),  kulit  kemerahan,  bahkan terjadi  kerusakan  oksidatif  apabila  terjadi paparan  secara  terus-menerus  (Wasitatmadja, S., 1997).
Senyawa  fenolik  dalam  tumbuhan mempunyai aktivitas antioksidan (Svobodova et al. ,  2003)  dan  juga  dapat  digunakan  sebagai fotoprotektor untuk melindungi jaringan tubuh dari  kerusakan  akibat  paparan  sinar  matahari (Halliwel,  B.  &  Gutteridge,  1999).  Senyawa antioksidan  dapat  mengurangi  reaksi  oksidasi yang ditimbulkan oleh beragam agen oksidatif. Vitamin C, vitamin E, dan flavonoid merupakan beberapa  antioksidan  penting  dan  banyak
digunakan dalam sediaan kosmetik (Barel et al., 2001).
Adanya berbagai macam dampak negatif akibat  paparan  sinar  matahari  berlebih menyebabkan kita perlu menggunakan fotoprotektor  untuk  melindungi  kulit  dari kerusakan akibat radiasi matahari. Fotoprotektor adalah suatu agen atau senyawa yang dapat melindungi kulit  dari  pengaruh  buruk  cahaya  matahari, seperti  terbakar  surya,  eritema,  kerusakan  sel, mutasi  sel  atau  kematian  sel.  Idealnya fotoprotektor  dikatakan  baik  apabila  tidak hanya mencegah eritema tetapi juga mencegah kanker dan kerusakan kulit.
Salah  satu  fotoprotektor  alami  berupa golongan  senyawa  fenolik  khususnya  senyawa flavonoid  dimana  banyak  terdapat  dalam tumbuhan  dan  berfungsi  untuk  melindungi jaringan  tumbuhan  terhadap  kerusakan  akibat radiasi sinar matahari (Halliwel, B. & Gutteridge, 1999).  Mahkota  dewa  mengandung  senyawa fenolik  berupa  flavonoid  dengan  kemampuan sebagai antioksidan serta sebagai fotoprotektor (Zin et  al. ,  2004).  Senyawa  fenolik  dalam tanaman ini memiliki ikatan rangkap terkonjugasi  sehingga  mampu  menyerap  sinar UV.
Efek buruk dari paparan sinar matahari dapat  dicegah,  salah  satunya  dengan  cara menggunakan  tabir  surya.  Tabir  surya merupakan  suatu  sediaan  kosmetik  dan berfungsi  sebagai  pelindung  tambahan  bagi tubuh     terhadap      paparan    sinar     matahari
berlebih (Wilkinson, J. B., & Moore, 1982). Tabir surya  dengan  kombinasi  oksibenson  dapat berperan  baik  sebagai  anti-UV  A.  Oksibenson dapat  menyerap  UV  A  dengan  baik  sebagai proteksi, pada cakupan panjang gelombang 320- 360 nm dan konsentrasi umum yang digunakan adalah  2-6%  b/b  (Shaath,  1990).  Kemampuan mahkota dewa sebagai agen penyerap sinar UV dan penangkal
radikal bebas dapat dimanfaatkan  sebagai  komponen  utama  dalam pembuatan tabir surya. Sediaan kosmetik untuk tabir  surya  dapat  berupa  salep  atau  sediaan semipadat  digunakan  untuk  pemakaian  pada kulit atau membran mukosa (Sulaiman, T.N.S., & Kuswahyuning, 2008).
Pigmentasi  pada  kulit  terjadi  akibat adanya proses sintesis melanin, sintesis melanin terpicu  oleh  adanya  sinar  matahari  karena melanin  merupakan  agen  perlindungan  tubuh alami terhadap paparan sinar matahari. Pigmen melanin  dapat  ditemukan  di  bagian  tubuh manusia  maupun  hewan,  berfungsi  sebagai fotoprotektor untuk mengurangi jumlah bahaya  radiasi  UV  pada  kulit.  Pigmen  melanin dianggap sebagai turunan dari tirosin, tersusun dari  asam  amino  dan  digunakan  sel  untuk sintesis  protein.  Kemampuan  mahkota  dewa sebagai  agen  penyerap  UV  dan  penangkal radikal  bebas  dapat  diproyeksikan  dalam perhitungan besarnya aktivitas inhibisi (penghambatan)  forodegradasi  dari  tirosin dibandingkan dengan vitamin C.
Sifat antioksidan pada tanaman mahkota dewa  terdapat  pada  senyawa  flavonoid  dan polifenol (Zin et al. , 2004). Penambahan ekstrak etanolik  mahkota  dewa  diharapkan  dapat menurunkan  %  transmisi  eritema  dan  % transmisi pigmentasi sediaan  tabir surya serta dapat digunakan sebagai fotoprotektor. Penentuan  kadar  fenolik  total  dan  aktivitas inhibisi  fotodegradasi  tirosin  diharapkan memberikan  nilai  yang  baik  dalam  kaitannya sebagai fotoprotektor.

## METODOLOGI
Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah:  buah  mahkota  dewa,  tirosin  (Wako Pure),  oksibenson  (atas  jasa  PT.  Vitapharm), asam stearat (Brataco), setil alkohol (Brataco), span 60 (Brataco), tween 60 (Brataco), larutan sorbitol (Brataco), metil paraben (Brataco), dan propil  paraben  (Brataco),  aquades  (General Lab), isopropanol (p.a. E.Merck) dan etanol (p.a.
E.Merck),  etanol  70%  (teknis,  General  Lab), lempeng  KLT  siliks  gel  GF 254 (E.Merck),  rutin trihydrate  (Fluka  Biochemika),  ketoprofen topikal merk Rhetoflam® 25 mg (Kimia Farma), vitamin C (E. Merck), HgSO 4 (E. Merck) H 2 SO 4 (E.
Merck),  NaNO 2 (E.  Merck),  NaOH  (E.  Merck), reagen  Folin-Ciocalteu  (E.  Merck),  Na 2 CO 3 (E. Merck), dan C 2 H 5 OH (E. Merck).

## Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah: cawan porselen, kertas pH, alat uji daya lekat, alat uji daya sebar,  viscotester (Rion VT- 04),  sentrifuge  (Hettich),  spektrofotometer (Hitachi  U-2800),  neraca  analitik  (Ohoaus), waterbath (memmert), stopwatch , vortex (Maxi Mix  Plus TM ),    spektrofotometer  (Genesys-10), panci infusa, stopwatch (Nokia® 3330), vortex  (Maxi  Mix  Plus  TM),  mikropipet (Trasferpette®),  spektrofotometer  (Genesys- 10), lampu merkuri (Sankyo Denki 20 watt), dan waterbath (Memmert®  GmbH  +  Co.  KG), kompor listrik (Robusta®), yellow tip , blue tip , dan seperangkat alat gelas.

## Jalannya Penelitian
Determinasi Tanaman Dilakukan  oleh  Bagian  Biologi  Farmasi, Fakultas  Farmasi  Universitas  Gadjah  Mada Yogyakarta,  menyatakan  kebenaran  tanaman mahkota  dewa  ( Phaleria  macrocarpa (Scheff.) Boerl).
Ekstraksi Simplisia Buah Mahkota Dewa
Sebanyak  600  gram  serbuk  buah mahkota  dewa  dimaserasi  dengan  cara direndam
dalam bejana
maserator menggunakan 4,5 L  etanol  70%  selama  4  hari dengan sesekali dilakukan pengadukan. Maserat dipisahkan  dari  serbuk  dengan  penyaringan menggunakan  kain  flannel,  kemudian  maserat diuapkan diatas penangas air hingga diperoleh ekstrak  kental  buah  mahkota  dewa.  Ekstrak kental  yang  diperoleh  ditimbang  dan  dihitung randemennya.  Sedangkan,  ekstrak  air  buah mahkota  dewa  didapatkan  dengan  metode infundasi.
Penetapan Kadar Fenolik Total Penetapan  kadar  fenolik  total  ekstrak buah mahkota dewa dilakukan dengan metode Folin-Ciocalteu.  Untuk  kurva  dibuat  larutan induk    (Li)    asam   galat    dengan    konsentrasi
1 mg/ml dalam etanol. Sebanyak 10; 20; 30; 40; 50;  60;  dan  70  μl  Li  dimasukkan  dalam  labu takar  10  ml,  ditambah  dengan  0,4  ml  reagen Folin-Ciocalteu,  dan  dibiarkan  selama  5-8 menit.  Selanjutnya  larutan  ini  ditambah dengan Na 2 CO 3 7 % sebanyak 4 ml dan ditambah aquadest  sampai  batas  tanda.  Setelah  2  jam, absorbansinya dibaca
pada panjang gelombang 750 nm. Dilakukan juga pembacaan blangko  yang  terdiri  atas  aqua  bidestilata dan reagen
Folin-Ciocalteu.
Penentuan kandungan  fenolik  total  samp el,  diambil  75  μl ekstrak buah mahkota dewa 1% dan dilanjutkan sebagaimana  perlakuan  pada  pembuatan kurva  baku.  Pengukuran  dilakukan  replikasi sebanyak enam kali.

## Uji Pendahuluan
Pembuatan Formula Fase  air  terdiri  dari  larutan  sorbitol 70%,  Tween  60,  dan  ekstrak  buah  mahkota dewa. Fase minyak terdiri dari asam stearat, setil  alkohol, dan Span 60. Panaskan  fase  air dan  fase  minyak  hingga  suhu  80 o C.  Fase air  ditambahkan  ke  dalam  fase  minyak sedikit demi sedikit sambil diaduk. Campuran  dimasukkan  ke  dalam  campuran metilparaben  dan  propilparaben  yang  telah digerus  didalam  mortir sambil terus diaduk. Air  ditambahkan  sedikit  demi  sedikit  sambil diaduk  ke  dalam  campuran  sampai  formula mencapai  100%.  Formula  yang  digunakan untuk membuat basis (Tabel I).
Uji Mutu Fisik Pendahuluan Uji  mutu  fisik  meliputi  pengamatan penampilan sediaan krim yang dibuat, warna,
bau,  viskositas,  fase  distribusi,  pH,  dan tekstur.
Daya Sebar Basis Sebanyak 0,5 gram basis diletakkan di tengah  alat  (kaca  bulat).  Kaca  penutup ditimbang, kemudian diletakkan di atas basis, dibiarkan  selama  1  menit.  Diameter penyebaran  basis  diukur  dengan  mengambil panjang  rata-rata  diameter  dari  beberapa sisi.  Beban  tambahan  seberat  50  gram diletakkan di atas basis, didiamkan selama  1  menit  dan  dicatat  diameter penyebaran  basis.  Percobaan  diteruskan tiap  kali  dengan  penambahan  beban seberat  50  gram  dan  dicatat  diameter penyebaran basis selama 1 menit.
Uji Daya Lekat Basis Sejumlah basis diletakkan di atas gelas objek  yang  telah  ditentukan  luasnya.  Gelas objek  yang  lain  diletakkan  di  atas  basis tersebut  dan  ditekan  dengan  beban  1  kg selama  5  menit.  Gelas  objek  dipasang  pada alat uji, lepaskan beban seberat 80 gram dan dicatat  waktu  hingga  kedua  gelas  objek terlepas.
Uji Volume Pemisahan dengan Sentrifugasi Basis  dimasukkan  dalam  tabung sentrifuge  berskala  sampai  skala  tertentu kemudian  diputar  dalam  sentrifuge  pada kecepatan 1000 rpm. Volume pemisahan yang terjadi  dicatat  tiap  selang  waktu  5  menit sampai menit yang ke-30. Percobaan diulangi untuk  tiap  kecepatan  pemutaran  2000  rpm dan 3000 rpm.
Tabel I. Formula Basis Emulsi Menggunakan Surfaktan Non-ionik Menurut Lachman et al., 1994 dengan Beberapa Pengembangan Komponen F1(%) F2(%) F3(%) F4(%) Asam stearate 14 14 14 14 Setil alcohol 1 1 1 1 Span 60 2 1,5 3,5 0 Tween 60 1,5 2 0 3,5 Larutan sorbitol 70% 3 3 3 3 Metilparaben 0,1 0,1 0,1 0,1 Propilparaben 0,05 0,05 0,05 0,05 Ekstrak mahkota dewa 6 6 6 6 Aquadest ad 100 ad 100 ad 100 ad 100
𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑒𝑚𝑢𝑙𝑠𝑖 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑚𝑒𝑚𝑖𝑠𝑎ℎ 𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑒𝑚𝑢𝑙𝑠𝑖 𝑘𝑒𝑠𝑒𝑙𝑢𝑟𝑢ℎ𝑎𝑛
× 100% (1)
Uji Volume Pemisahan dengan Sedimentasi Basis  dimasukkan  ke  dalam  2  tabung reaksi berskala sampai skala tertentu. Tabung reaksi berskala berisi basis disimpan masing- masing  pada  suhu  50 o C  dan  suhu  kamar. Volume  pemisahan  basis  pada  suhu  50 o C dicatat  tiap  selang  waktu  5  menit  sampai menit  ke-30.  Volume  pemisahan  basis  pada suhu kamar dicatat tiap dua hari sekali sampai hari ke-40. Volume pemisahan dapat dihitung dengan
menggunakan rumus pada persamaan (1).
Formulasi dan Analisis Sediaan Tabir Surya
Formulasi Sediaan Tabir Surya
Dari  uji  pendahuluan  yang  telah dilakukan,  dipilih  satu  formula  basis  yang mempunyai
sifat
paling memenuhi persyaratan untuk dibuat sediaan tabir surya. Sediaan  tabir  surya  dibuat  dalam  8  formula baru dengan komponen (Tabel II).
Penetapan Mutu Fisik Sediaan Mutu fisik sediaan tabir surya meliputi organoleptis  (bentuk,  warna,  bau,  dan tekstur),  pH,  dan  viskositas.  Tujuan  dari penetapan  mutu  fisik  sediaan  adalah  untuk mengetahui  kelayakan  penggunaan  sediaan tabir surya.
Penetapan  Persen  Transmisi  Eritema  (%Te) dan Transmisi Pigmentasi (%Tp)
Ditentukan  secara  spektrofotometri dengan  pelarut  isopropanol  pada  rentang panjang  gelombang  292,5-372,5  nm.  Nilai transmisi eritema dihitung dengan mengalikan nilai transmisi (T) dengan faktor
efektivitas  eritema  (Fe)  seperti terlihat pada persamaan (Cumpelik, 1972).
Nilai  transmisi  pigmentasi  dihitung dengan  cara  mengalikan  nilai  transmisi  (T) dengan  faktor  efektivitas  pigmentasi  (Fp) sepertsi  terlihat  pada  persamaan  (Cumpelik, 1972).
%𝑻𝒓𝒂𝒏𝒔𝒎𝒊𝒔𝒊 𝑬𝒓𝒊𝒕𝒆𝒎𝒂 = ∑ 𝑻 × 𝑭𝒆 ∑ 𝑭𝒆 %𝑻𝒓𝒂𝒏𝒔𝒎𝒊𝒔𝒊 𝑷𝒊𝒈𝒎𝒆𝒏𝒕𝒂𝒔𝒊 = ∑ 𝑻  × 𝑭𝒑
∑ 𝑭𝒑
Uji Aktivitas Fotodegradasi Tirosin Kurva  baku  tirosin  dilakukan  dengan membuat  berbagai  seri  kadar  larutan  tirosin dari  larutan  induk  tirosin  0,05%  meliputi konsentrasi  0,075;  0,100;  0,125;  0,150;  0,175; 0,200;  0,225;  0,250;0,275  mg/ml,  kemudian dilakukan  pengukuran  absorbansi  tirosin menggunakan  metode  Millon.  Pengaruh  lama penyinaran terhadap fotodegradasi oleh tirosin dan  rhetoflam  dilakukan  dalam  tabung  dan detail  penambahan  serta  lamanya  penyinaran (Tabel III).
Setelah  itu,  masing-masing  kelompok (beserta  blangko)  dimasukkan  ke  dalam  kotak penyinaran yang berukuran 73,5 x 48 x 26,5 cm dan  dilakukan  penyinaran.  Di  dalam  kotak dilengkapi  1  buah  lampu  UV  C  20  watt.  Jarak antara tabung dengan lampu 10 cm. Kemudian tirosin
sisa ditetapkan absorbansinya.
Komposisi  bahan  dalam  tabung  perlakuan untuk  uji  pengaruh  ekstrak  dan  vitamin  C terhadap fotodegradasi tirosin (Tabel IV). Tirosin sisa diukur menggunakan metode Millon.  Larutan  uji  yang  telah  disinari  diambil dan dimasukkan dalam tabung reaksi sebanyak 1 ml. Kemudian, ditambahkan larutan NaOH 1,2 N  sebanyak  1  ml  dan  diinkubasi  dalam waterbath selama 1 jam dengan suhu 60 o C.

## Tabel II. Formula Sediaan Tabir Surya
Formula Basis Oksibenson Ekstrak Formula 1 + - - Formula 2 + 6% - Formula 3 + - 4% Formula 4 + - 6% Formula 5 + - 8% Formula 6 + 6% 4% Formula 7 + 6% 6% Formula 8 + 6% 8%
Setelah 1 jam, ditambahkan 1,5 ml HgSO 4 15  %  dalam  H 2 SO 4 5N dan 1 ml NaNO 2 0,2 %, kemudian  divortex.  Setelah  23  menit,  diukur absorbansi  larutan  dengan    spektrofotometer pada operating   time dan panjang gelombang maksimum.
Analisis Data Data  analisis  spektrofotometri  berupa persen  transmisi  eritema  dan  persen transmisi  pigmentasi  sediaan  tabir  surya. Data ini menunjukkan pengaruh penambahan ekstrak etanol buah mahkota dewa ke dalam sediaan  tabir  surya.  Data  persen  transmisi eritema
dan
pigmentasi dianalisis nonparametrik  menggunakan  uji  Kruskal- Wallis, dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney untuk  mengetahui  perbedaan  nilai  persen transmisi  eritema  dan  persen  transmisi pigmentasi  tiap  formula  menggunakan program SPSS ( Statistical Product and Service Solution ) for windows versi 15. Kadar fenolik total  ekivalen  asam  galat  (EAG)  diukur menggunakan  metode  Folin-Ciocalteu  dan aktivitas penghambatan fotodegradasi tirosin dibandingkan  dengan  vitamin  C  pada  kadar yang sama yaitu 0,15%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Proses Ekstraksi Simplisis  yang  diekstrak  sebanyak  600 gram  menghasilkan  ekstrak  kental  sebanyak 75,87 gram. Jumlah rendemen yang didapat dari hasil perhitungan sebanyak 12,65%.

## Kadar Fenolik Total
Pembuatan  kurva  baku  asam  galat dengan seri kadar (9 kadar, 0,1005 s/d 0,9045 mg/100 ml) terhadap absorbansi pada panjang gelombang  750  nm.  Dari  data  diperoleh persamaan regresi y = 1,146x – 0,037 (x = kadar asam  galat  dalam  mg/100  ml  dan  y  = Absorbansi) dan nilai koefisien korelasinya 0,99 (rhitung) yang lebih besar dari r table untuk n = 9; P = 0,95 sebesar 0,666, sehingga persamaan kurva  baku  diatas  dapat  digunakan  untuk menghitung  kadar  fenolik  total  dalam  ekstrak mahkota dewa pada penelitian ini (Gambar 1).
Kandungan  senyawa  fenolik  total diekspresikan  dengan  %  b/b  ekivalen  asam galat  (EAG)  karena  beum  diketahui  struktur kimianya  dalam  ekstrak.  Hasil  kandungan senyawa  fenolik  total  dari  ekstrak  buah mahkota dewa (Tabel V).

## Uji Pendahuluan Formulasi

## Uji Mutu Fisik
Perbedaan  viskositas  pada  tiap  formula disebabkan karena perbedaan konsentrasi Span 60  dan  Tween  60  sebagai  emulgator. Penggunaan  Span  60  dikombinasikan  dengan Tween  60  dalam  berbagai  konsentrasi  dapat menghasilkan  emulsi  atau  krim  minyak  dalam air (M/A) atau air dalam minyak (A/M) dengan berbagai konsistensi (Lawrence, 2005). Formula  1  menggunakan  Span  60  2%  dan Tween  60  1,5%  menghasilkan  sediaan  dengan viskositas  105  poise.  Formula  2  menggunakan Span 60 1,5%  dan  Tween  60 2%  menghasilkan
Tabel III. Komposisi Bahan dalam Tiap Tabung Perlakuan pada Uji Pengaruh Lama Penyinaran
Terhadap Fotodegradasi Tirosin Kelompok Perlakuan Isi Bahan dalam Tabung Lama Penyinaran (menit) Tirosin 0,05% (ml) Rhetoflam 1% (µl) Aquadest (ml) P 0 2,0 600 ad 5 0 B 0 - 600 ad 5 P 1 2,0 600 ad 5 60 B 1 - 600 ad 5 P 2 2,0 600 ad 5 120 B 2 - 600 ad 5 P 3 2,0 600 ad 5 180 B 3 - 600 ad 5 P 4 2,0 600 ad 5 40 B 4 - 600 ad 5 P 5 2,0 600 ad 5 300 B 5
- 600 ad 5
sediaan dengan viskositas 130 poise. Formula 3 menggunakan  Span  60  3,5%  menghasilkan sediaan  dengan  viskositas  885  poise  dan formula  4  menggunakan  Tween  60  3,5% menghasilkan   sediaan   dengan   viskositas   40
poise. Sediaan krim berwarna krem muda dan krem  karena  adanya  penambahan  ekstrak etanolik  buah  mahkota  dewa  yang  berwarna coklat  kehitaman.  Hasil  uji  mutu  fisik pendahuluan (Tabel VI).
Gambar 1. Kurva Baku Asam Galat
Tabel IV. Komposisi Bahan dalam Tiap Tabung Perlakuan pada Uji Pengaruh Ekstrak dan Vitamin C terhadap Fotodegradasi Tirosin Kelompok Perlakuan Isi Bahan dalam Tabung Tirosin 0,05% (ml) Rhetoflam 1% (µl) Ekstrak Air Buah Mahkota Dewa 0,15% (µl) Vitamin C 0,15% (µl) Aquadest (ml) P 0 2,0 - - - ad 5 B 0 - - - - ad 5 P 1 2,0 600 - - ad 5 B 1 - 600 - - ad 5 P 2 2,0 600 - - ad 5 B 2 - 600 - - ad 5 P 3 2,0 600 100 - ad 5 B 3 - 600 100 - ad 5 P 4 2,0 600 - - ad 5 B 4 - 600 - - ad 5 P 5 2,0 600 - 100 ad 5 B 5 - 600 - 100 ad 5 Tabel V. Kadar Fenolik Total Ekstrak yang Dihitung sebagai % b/b EAG Replikasi Absorbansi M. Dewa Kadar (% b/b EAG) 1 0.42 8.28 2 0.41 8.26 3 0.44 8.71 4 0.40 7.91 5 0.41 8.26 6 0.42 8.35 𝑋̅ 8.29 𝑋̅ ± LE 8.29 ± 0,27 CV (%)
3.08
0,118 0,225 0,282 0,388 0,5200,571 0,815 0,888 1,037 y = 1,1466x - 0,0379 R² = 0,9811 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 Absorban si
Kadar (mg/mL)

## Uji Daya Sebar
Daya sebar paling tinggi dimiliki formula 4,  sedangkan  daya  sebar  paling  rendah  pada formula  1  (Gambar  2).  Pada  pemberian  beban pertama  sebesar  55  gram,  formula  4  mampu menyebar  dengan  diameter  4,03  cm  dan  pada pemberian  beban  maksimal 405  gram formula mampu  menyebar  sampai  diameter  6,13  cm. Formula 1 menyebar sampai diameter 2,33 cm pada  pemberian  beban  55  gram  dan  sebesar diameter  3,53  cm  pada  pemberian  beban  405 gram.  Kemampuan  daya  sebar  formula    dan formula  3  hampir  sama  dengan  formula  1. Formula  4  memiliki  kemampuan  daya  sebar berbeda dari ketiga formula tersebut. Semakin besar  tahannya  berarti  semakin  sulit  sediaan untuk  mengalir  sehingga  daya  sebar  sediaan semakin  kecil.  Hal  ini  terjadi  pada  penelitian, dimana  formula  4  yang  memiliki  viskositas paling  kecil  dapat  memberikan  kemampuan daya sebar yang paling besar.

## Uji Daya Lekat
Pada  Tabel  VII  dapat  dilihat  daya  lekat terbesar  dimiliki  formula  1  selama  0,92  detik dan daya lekat  terkecil pada formula 4 selama 0,49  detik.  Kemampuan  daya  lekat  berkaitan dengan  densitas  dan  secara  tidak  langsung berhubungan dengan viskositas. Semakin besar densitas  berarti  semakin  banyak  ikatan  antar molekul  menyebabkan  daya  lekat  meningkat, sementara  semakin  besar,  semakin  tinggi densitas  juga  menyebabkan  meningkatnya viskositas.  Dengan  kata  lain,  viskositas menyebabkan kemampuan daya lekat meningkat.  Hasil  uji  daya  lekat  di  atas  tidak
terlalu sesuai dengan teori karena uji daya lekat dilakukan  sesaat  setelah  sediaan  krim  selesai dibuat  sehingga  diduga  struktur  emulsi  belum terbentuk  sempurna  akibatnya  ikatan  antar molekul juga belum terbentuk.

## Persen Pemisahan dengan Sentrifugasi
Persen pemisahan secara tidak langsung menunjukkan stabilitas basis terhadap perlakuan  fisik  yang  diberikan.  Semakin  besar persen pemisahan berarti basis semakin mudah rusak  oleh  perlakuan,  hal  ini  menunjukkan bahwa basis semakin tidak stabil.
Berdasarkan  Gambar  3,  4  dan  5 menunjukkan  bahwa  formula  2  memiliki kecenderungan memberikan persen pemisahan paling  kecil,  formula  1  memberikan  persen pemisahan  lebih  besar  dari  formula  2,  dan formula 3 memberikan persen pemisahan lebih besar  dari  formula  1.  Akan  tetapi  secara keseluruhan baik formula 1, formula 2, maupun formula  3  memberikan  persen  pemisahan hampir sama. Persen pemisahan pada formula 4 menunjukkan  angka  paling  tinggi  bahkan mencapai  100%,  jauh  berbeda  dari  nilai  yang dihasilkan formula 1, 2, dan 3.
Hasil uji pemisahan deperti di atas dapat terjadi karena ada kaitannya dengan viskositas sediaan. Kecepatan pemisahan fase berbanding terbalik  dengan  viskositas.  Semakin  tinggi viskositas  krim,  kecepatan  pemisahan  akan semakin lamat dan krim semakin stabil (Rieger, M.  M.,  1986).  Hal  ini  terjadi  pada  penelitian dimana  formula  2  yang  memiliki  viskositas paling  tinggi  cenderung  memiliki  persen pemisahan  paling  kecil.  Seakin  menurun  nilai
Tabel VI. Hasil Uji Mutu Fisik Pendahuluan Karakter Sediaan Formula 1 Formula 2 Formula3 Formula 4 Warna Krem Krem Krem Muda Krem Bau Khas Mahkota Dewa Khas Mahkota Dewa Khas Mahkota Dewa Khas Mahkota Dewa Tekstur Lembut Lembut Lembut Lembut pH 5 5 5 4 Viskositas 105 poise 130 poise 85 poise 40 poise Tabel VII. Hasil Uji Daya Lekat Formula Waktu Lekat (detik) 1 0,92 ± 0,35 2 0,70 ± 0,29 3 0,55 ± 0,12 4 0,49 ± 0,03
viskositas  sediaan  seperti  pada  formula  2  dan formula  3,  juga  menyebabkan  peningkatan persen  pemisahan,  dan  persen  pemisahan terbesar  terjadi  pada  formula  4  dimana memiliki viskositas paling rendah.
Uji  Persen  Pemisahan  dengan  Sedimentasi Suhu 50 o C Uji  persen  pemisahan  pada  suhu  50 o C merupakan salah satu uji stabilitas emulsi pada penyimpanan dipercepat.
Penyimpanan  pada  suhu  relatif  lebih tinggi menyebabkanpenurunan viskositas berdasarkan sifat emulsi yang akan mempengaruhi kestabilan fisika emulsi. Pada  suhu  50 o
C  menunjukkan  bahwa keempat  formula  tidak  mengendap  sampai pengukuran  menit  ke-30  seperti  yang  terlihat pada Tabel VIII. Hal ini berarti keempat formula stabil terhadap suhu 50 o C. Seperti  kebanyakan  emulsi,  keempat formula sediaan menunjukkan kestabilan pada suhu  50 o C  atau  suhu  kurang  dari  55 o C.  Efek normal dari umur suatu emulsi pada temperatur yang  dinaikkan  adalah  percepatan  laju penggumpalan atau pembentukan krim, dan ini disertai dengan perubahan viskositas. Kebanyakan  emulsi  menjadi  lebih  encer  bila temperatur  dinaikkan  dan  lebih  kental  bila dibiarkan  pada  temperatur  kamar  (Rieger,  M. M., 1986).
Suhu Kamar Hasil pengamatan menunjukkan formula paling stabil adalah formula 3. Pada pengamatan hari  ke-2,  4,  dan  6  formula  3  menunjukkan persen  pemisahan  sebesar  2,14%,  selanjutnya pada  pengamatan  hari  ke-8  sampai  ke-40 persen  pemisahan  bertahan  hanya  sebesar 3,57%  yang  ditunjukkan  dengan  kurva  linier pada grafik Gambar 6.
Pada  grafik  Gambar  6  dapat  dilihat formula yang paling tidak stabil adalah formula 4.  Pengamatan  hari  pertama  menunjukkan persen  pemisahan  formula  4  sebesar  0%  atau tidak  terjadi  kerusakan.  Namun  pada pengamatan  selanjutnya  persen  pemisahan formula  4  terus  meningkat  hingga  mencapai 12,86%  pada  hari  ke-40  dimana  memiliki
Gambar 2. Grafik Hasil Uji Daya Sebar
Gambar 3. Histogram Hasil Uji Pemisahan dengan Sentrifugasi 1000 rpm Gambar 4. Histogram Hasil Uji Pemisahan dengan Sentrifugasi 3000 rpm Gambar 5. Histogram Hasil Uji Pemisahan dengan Sentrifugasi 2000 rpm
persen  pemisahan  terbesar  dari  keempat formula.
Berdasarkan  hasil  uji  persen  pemisahan dengan  sedimentasi  pada  suhu  kamar menunjukkan bahwa semakin
banyak konsentrasi Span 60 dalam sediaan memberikan  persen  pemisahan  makin  kecil. Formula  3  dengan  konsentrasi  Span  60  3,5% memberikan  persen  pemisahan  paling  kecil. Selanjutnya  persen  pemisahan  meningkat berturut-turut pada formula
1 yang mengandung Span 60 sebanyak 2%, formula 2
yang mengandung Span 60 sebanyak 1,5%, dan formula 4 yang tidak mengandung Span 60.
Menurut Lawrence (2005), Span 60 dapat meningkatkan  kemampuan  pengikatan  air sehingga pada emulsi minyak dalam air seperti sediaan di atas, adanya Span 60  menyebabkan air  sebagai  medium  dispers  tarikat  lebih  kuat pada surfaktan, akibatnya emulsi menjadi stabil.

## Formulasi Sediaan Tabir Surya
Penentuan Formula Sediaan Penampilan fisik dari formula 1, formula 2, formula 3, dan formula 4 dan hasil uji mutu fisiknya dapat diterima sebagai sediaan emulsi meliputi tekstur lembut, warna krem, bau khas mahkota dewa, viskositas antara 40-130 poise, pH  antara  4-5.  Hal  ini  berarti  berdasarkan  uji mutu  fisik  pendahuluan,  keempat  formula memenuhi kriteria sebagai sediaan krim.
Hasil  uji  daya  sebar  keempat  formula menunjukkan  bahwa  dapat  diterima,  bahkan daya sebar formula 1, formula 2, dan formula 3 hampir sama. Kemampuan daya lekat basis dari keempat formula berkisar anara 0,49  detik  sampai  0,92  detik,  memiliki  daya lekat baik dan dapat diterima sehingga keempat formula dapat dipertimbangkan untuk formulasi lebih lanjut.
Perlakuan  sentrifugasi  pada  kecepatan 1000  rpm,  2000  rpm,  dan  3000  rpm  dalam waktu  5-15  menit  memberikan  hasil  uji pemisahan  pada  formula  1,  formula  2,  dan formula  3  dengan  persen  pemisahan  hampir sama dan masih dapat diterima sebagai sediaan stabil,  yaitu  berkisar  antara  1,11%  sampai 11,11%.  Formula  4  memberikan  persen pemisahan cukup besar antara 33,33% - 100%, artinya formula 4 tidak stabil terhadap tekanan mekanik  akibat  sentrifugasi  sehingga  praktis tidak dipertimbangkan untuk digunakan dalam formulasi lebih lanjut.
Pada  uji  pemisahan  dengan  sedimentasi pada     suhu    50° C,    keempat    formula    tidak
Gambar 6. Grafik Persen Pemisahan dengan Sedimentasi pada Suhu Kamar
Gambar 7. Formula Sediaan Tabir Surya Keterangan : 1: Formula 1 5 : Formula 5 2: Formula 2 6 : Formula 6 3: Formula 3 7 : Formula 7 4: Formula 4 8 : Formula
Tabel  VIII. Hasil Uji Persen Pemisahan dengan Sedimentasi pada Suhu 50 o C Waktu (menit) Persen Pemisahan Formula 1 Formula 2 Formula 3 Formula 4 5 Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah 10 Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah 15 Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah 20 Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah 25 Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah 30 Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah Tidak Memisah
memisah. Artinya keempat formula stabil pada  suhu  50°  C.  Uji  pemisahan  dengan sedimentasi dalam suhu kamar yang dilakukan selama           40 hari dengan waktupengamatan tiap 2 hari sekali menunjukkan bahwa formula 3 paling  stabil  karena  memberikan  persen pemisahan paling kecil, bahkan cenderung tidak memisah  setelah  hari  ke-8  sehingga  formula  3 dipilih  untuk  digunakan  dalam  formulasi sediaan krim selanjutnya.
Berdasarkan  semua  uji  pendahuluan yang  telah  dilakukan  menunjukkan  bahwa formula  3  paling  memenuhi  syarat  untuk digunakan  dalam  pembuatan  sediaan  tabir surya.  Formula  3  memiliki  hasil  uji  mutu  fisik baik,  daya  sebar  basis  baik,  daya  lekat    basis baik,  dan  memiliki  stabilitas  paling  tinggi  di antara keempat formula. Pada tahap selanjutnya, formula 3 digunakan sebagai basis untuk  pembuatan  8  jenis  sediaan  tabir  surya baru.

## Hasil Uji Mutu Fisik Sediaan
Mutu  fisik  sediaan  tabir  surya  meliputi organoleptis (bentuk, warna, bau, dan tekstur), pH, dan viskositas. Tujuan dari penetapan mutu fisik  sediaan  adalah  untuk  mengetahui kelayakan  penggunaan  sediaan  tabir  surya. Hasil uji mutu fisik sediaan tabir surya (Tabel IX dan Gambar 7).

## Analisis secara Spektrofotometri
Hasil  Perhitungan  %Transmisi  Eritema (%Te) Data hasil perhitungan persen transmisi eritema  dari  8  formula  dengan  5  replikasi  di analisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov untuk mengetahui  apakah  data  terdistribusi  normal atau  tidak.  Hasil  analisis  menunjukkan  data hasil  perhitungan  persen  transmisi  eritema tidak  terdistribusi  normal  dengan  signifikansi 0,014  (α  <  0,05)  dengan  tingkat  kepercayaan 95% (p = 0,05). Sampel yang  tidak  terdistribusi

## Tabel  IXa. Hasil Uji Mutu Fisik Sediaan Tabir Surya
Karakteristik Fisika F1 F2 F3 F4 Bentuk Krim Krim Krim Krim Warna Putih Putih Tulang Coklat Pucat Coklat Muda Bau Berbau Tidak Berbau Khas Mahkota Dewa Khas Mahkota Dewa Tekstur Lembut Lembut Lembut Lembut Viskositas (poise) 47-48 70-80 120-130 120-130 pH 5 6 5 5 Tabel  IXb. Hasil Uji Mutu Fisik Sediaan Tabir Surya Karakteristik Fisika F5 F6 F7 F8 Bentuk Krim Krim Krim Krim Warna Coklat Susu Coklat Pucat Coklat Muda Coklat Susu Bau Khas Mahkota Dewa Khas Mahkota Dewa Khas Mahkota Dewa Khas Mahkota Dewa Tekstur Lembut Lembut Lembut Lembut Viskositas (poise) 100 130 130 90 pH 5 5 5 5
normal  selanjutnya  dianalisis  non-parametik dengan  uji  Kruskal-Wallis  untuk  menegtahui apakah  sampel  berbeda  bermakna  antar kelompok, kemudian
dianalisis
lagi menggunakan  uji  Mann-Whitney  untuk  persen transmisi eritema dimana menunjukkan bahwa formula  4  tidak  berbeda  secara  bermakna dengan  formula  5,  formula  6  tidak  berbeda secara  berbeda  secara  bermakna  dengan formula 7, dan formula 6 tidak berbeda secara bermakna dengan formula 8.
Berdasarkan  Tabel  X,  dapat  dilihat bahwa  formula  1  dimana  hanya  berisi  basis mempunyai  transmisi  eritema  99,21  ±  0,25%. Hal  ini  berarti  sebagian  besar  sinar  UV  B  saat mengenai  sediaan  diteruskan  (tidak  diserap). Semakin besar %Te artinya semakin besar sinar UV B dapat diteruskan, sehingga kemungkinan menimbulkan eritema juga semakin besar. Oleh karena  itu  dapat  dikatakan  basis  tabir  surya belum
memiliki
kemampuan sebagai fotoprotektor  UV    karena  tidak  mampu melindungi kulit dari sinar UV.
Pada formula 3, formula 4, dan formula 5 dengan  penambahan  ekstrak  buah  mahkota dewa, %Te mengalami penurunan 0,18-0,37 kali dibandingkan  formula  1,  menunjukkan  bahwa penambahan  ekstrak  etanolik  buah  mahkota dewa dapat meningkatkan kemampuan menghambat radiasi sinar UV B adalah 62,99 – 82,14%. Namun demikian penambahan ekstrak etanolik  buah  mahkota  dewa  belum  mampu memberikan perlindungan terhadap sinar UV B karena  memiliki  %Te  >  18%  padahal kemampuan  tabir  surya  dianggap  baik  jika memiliki  %Te  1-18%  (Cumpelik,  1972).  Jika dibandingkan  dengan  formula  2,  penambahan
oksibenson pada sediaan tabir surya memberikan  transmisi  eritema  1,15.10 -5 ± 1,45.10 -5 %, artinya sediaan dengan oksibenson mampu menyerap sebagian besar sinar UV. Nilai ini  lebih  kecil  dibandingkan  %Te  dimana terdapat  penambahan  ekstrak  etanolik  buah mahkota dewa pada konsentrasi hampir sama. Artinya  ekfektivitas  fotoproteksi  sediaan  tabir surya  mengandung  oksibenson  lebih  tinggi dibandingkan  efektivitas  fotoproteksi  sediaan tabir  surya  dengan  ekstrak  etanolik  buah mahkota  dewa.  Oksibenson  merupakan  salah satu  zat  aktif  fotoprotektor  dan  sering digunakan  dalam  sediaan  tabir  surya. Kemampuan fotoproteksi ekstak etanolik buah mahkota  dewa  lebih  rendah  dari  oksibenson karena  dalam  ekstrak  terdapat  bermacam- macam  senyawa,  tidak  hanya  senyawa  dalam kaitannya  sebagai  fotoprotektor  tetapi  juga senyawa  lain  termasuk  zat  ballast  sehingga kadar  senyawa  fotoprotektor  dalam  ekstrak kecil  dan  belum  mampu  memberikan perlindungan yang sama dengan oksibenson. Pada formula 6, formula 7, dan formula 8 menunjukkan  bahwa  ketika  dikombinasikan dengan  oksibenson,  penambahan  ekstrak etanolik  buah  mahkota  dewa  pada  sediaan dapat  memberikan  transmisi  eritema  0,17- 1,52%.  Hal  ini  berarti  sediaan  memiliki kemampuan
memberikan
perlindungan terhadap  sinar  UV  B  (Cumpelik,  1972). Kombinasi  oksibenson  dan  ekstrak  ini memberikan  transmisi  eritema  lebih  besar daripada sediaan yang hanya diberi oksibenson. Hal ini diduga ada kaitannya dengan pengaruh interaksi  oksibenson  terhadap  komponen tertentu  dalam ekstrak  etanolik buah  mahkota
Tabel X. Pengaruh Penambahan Ekstrak Etanolik Buah Mahkota Dewa dan Oksibenson dalam Sediaan Tabir Surya terhadap %Te
Formula Tansmisi Eritema (%) Jumlah Komponen yang ditambahkan (%) Oksibenson Ekstrak 1 99,21 ± 0,25 - - 2 1,15.10 -5 ± 1,45.10 -5 6 - 3 37,01 ± 7,59 - 4 4 17,86 ± 1,42 - 6 5 20,29 ± 1,93 - 8 6 0,52 ± 0,27 6 4 7 0,42 ± 0,07 6 6 8 0,17 ± 0,14 6 8
dewa sehingga dapat menurunkan aktivitasnya sebagai fotoprotektor.
Hasil  Perhitungan  %Transmisi  Pigmentasi (%Tp) Data hasil perhitungan persen transmisi pigmentasi dari 8 formula dengan 5 replikasi di analisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov untuk mengetahui  apakah  data  terdistribusi  normal atau  tidak.  Hasil  analisis  menunjukkan  data hasil  perhitungan  persen  transmisi  pigmentasi tidak  terdistribusi  normal  dengan  signifikan 0,034  (α  <  0,05)  dengan  tingkat  kepercayaan 95% (p = 0,05).
Sampel  tidak  terdistribusi  normal selanjutnya dianalisis nonparametik dengan uji Kruskal-Wallis  untuk  mengetahui  apakah sampel  berbeda  bermakna  antar  kelompok, kemudian  dianalisis  lagi  menggunakan  uji Mann-Whitney  untuk  mengetahui  kelompok yang  berbeda  makna.  Hasil  uji  Mann-Whitney untuk  persen  transmisi  pigmentasi  hampir sama  dengan  persen  eritema,  formula  4  tidak berbeda secara bermakna dengan formula 5 dan formula  6  tidak  berbeda  secara  bermakna dengan formula 7.
Berdasarkan  Tabel  XI  dapat  dilihat bahwa  formula  1  dimana  hanya  berupa  basis memberikan  transmisi  pigmentasi  49,69  ± 0,06%.  Semakin  besar  %Tp  artinya  semakin besar  sinar  UV  A  dapat  diteruskan,  sehingga kemungkinan  menimbulkan  pigmentasi  juga semakin  besar.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa basis  sediaan  tabir  surya  mampu  menyerap
sebagian  sinar  UV  A  yang  menyebabkan pigmentasi pada kulit.
Pada formula 3, formula 4, dan formula 5 dengan  penambahan  ekstrak  etanolik  buah mahkota  dewa,  %Tp  mengalami  penurunan 0,24-0,46  kali  dibandingkan  formula  1, menunjukkan  bahwa  penambahan  ekstrak etanolik buah mahkota dewa dapat meningkatkan
kemampuan menghambat radiasi  sinar  UV  A.  Penambahan  ekstrak etanolik buah mahkota dewa pada sediaan tabir surya
dianggap mampu
memberikan perlindungan  terhadap  sinar  UV  A  karena memiliki %Tp 3-86% (Cumpelik, 1972). Penambahan oksibenson pada formula 2 memberikan  transmisi  pigmentasi  0,67  ± 0,10%,  menunjukkan  bahwa  oksibenson mampu  menyerap  sebagian  besar  sinar  UV  A. Nilai  ini  lebih  kecil  dibandigkan  %Tp  yang disebabkan  oleh  penambahan  ekstrak  etanolik buah  mahkota  dewa  pada  konsentrasi  hampir sama.  Artinya  efektivitas  fotoproteksi  sediaan tabir  surya  dengan  oksibenson  lebih  tinggi dibandingkan  efektivitas  fotoproteksi  sediaan tabir  surya  dengan  ekstrak  etanolik  buah makota dewa.
Transmisi pigmentasi pada formula 6, 7, dan  8  adalah  2,10-3,95%  ketika  oksibenson dikombinasikan  dengan  penambahan  ekstrak etanolik  buah  mahkota  dewa.  Hal  ini  berarti sediaan  memiliki  kemampuan  memberikan perlindungan  terhadap  sinar  UV  A  (Cumpelik, 1972).  Kombinasi  oksibenson  dan  ekstrak  ini memberikan  transmisi  pigmentasi  lebih  besar
Tabel XI. Pengaruh Penambahan Ekstrak Etanolik Buah Mahkota Dewa dan Oksibenson dalam Sediaan Tabir Surya terhadap %Tp
Formula Transmisi Pigmentasi (%) Jumlah Komponen yang Ditambahkan (%) Oksibenson Ekstrak 1 49,69 ± 0,06 - - 2 0,67 ± 0,10 6 - 3 22,64 ± 4,16 - 4 4 12,07 ± 0,90 - 6 5 13,87 ± 1,18 - 8 6 3,95 ± 0,80 6 4 7 4,48 ± 0,46 6 6 8 2,10 ± 0,61 6 8
daripada sediaan dengan kandungan oksibenson saja. Artinya
oksibenson memberikan efektivitas proteksi terhadap sinar UV  A  lebih  tinggi  dibandingkan  kombinasi oksibenson  dan  ekstrak.  Hal  ini  diduga  bahwa ada  kaitannya  dengan  pengaruh  interaksi
oksibenson terhadap komponen tertentu dalam ekstrak  etanolik  buah  mahkota  dewa  sehingga dapat  menurunkan  aktivitasnya  sebagai fotoprotektor.  Akan  tetapi  belum  diketahui komponen apa yang dapat berinteraksi dengan oksibenson tersebut.
Gambar 8. Kurva Baku Tirosin
Gambar 9. Kurva Hubungan Lama Penyinaran Lampu UV terhadap Absorbansi Tirosin

## Sisa
Tabel XII. Absorbansi tirosin sisa pada masing-masing kelompok perlakuan setelah penyinaran 4 jam diukur pada λ 492 nm Replikasi Absorbansi perlakuan P1 P2 P3 P4 1 0,586 0,540 0,592 0,573 2 0,580 0,545 0,590 0,565 3 0,586 0,544 0,593 0,575 4 0,581 0,543 0,592 0,585 5 0,579 0,537 0,595 0,575 6 0,578 0,536 0,594 0,568 Rerata 0,582 0,541 0,593 0,574 Standar Deviasi 0,004 0,004 0,002 0,007 Standar Deviasi Relatif (%) 0,602 0,696 0,30
1,207
0,25 0,302 0,3740,413 0,488 0,549 0,617 0,676 0,75 y = 2,496x + 0,0542 R² = 0,9978 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0 0,1 0,2 0,3 Absorbansi Kadar mg/mL Absorbansi Tirosin Sisa 0,700 0,680 0,660 0,640 0,620 0,600 0,580 0,560 0,540 Tanpa Penambahan Ketoprofen Dengan Penambahan 0 2 4 6 Lama Pejanan (Jam)
Pengaruh  Lama  Penyinaran  Fotodegradasi Tirosin Sembilan kadar tirosin terhadap absorbansinya dibuat kurva baku dan dihitung linearitasnya (Gambar 8). Persamaannya adalah y  =  2,496x  +  0,0542  dengan  nilai  koefisien korelasinya (r hitung = 0,9978). Pengaruh lama penyinaran (0, 60, 120, 180, 240 dan 300 menit) terhadap  fotodegradasi  tirosin  menunjukkan bahwa  nilai  absorbansi  terkecil  ditunjukkan pada pejanan lampu UV selama 4 jam (Gambar 9).  Karena  nilai  absorban  berbanding  lurus dengan  kadar  tirosin  sisa  maka  ini  berarti fotodegradasi  tirosin  optimal  pada  penyinaran selama 4 jam. Dengan demikian pejanan selama 4  jam  dijadikan  dasar  pemejanan  lampu  UV selanjutnya dalam penelitian ini.
Aktivitas  Inhibisi  Fotodegradasi  Tirosin Ekstrak Buah Mahkota Dewa
Hasil  pengukuran  absorbansi  tirosin pada berbagai kelompok perlakuan  (Tabel XII) dan hasil analisis statistik menunjukkan bahwa ekstrak  air  buah  mahkota  dewa  mampu menghambat  secara  signifikan  fotodegradasi tirosin  yang  diinduksi  ketoprofen.  Aktivitas inhibisi ekstrak dibandingkan dengan vitamin C memiliki  nilai  sebesar  1,58.  Aktivitas  inhibisi ekstrak dibandingkan dengan vitamin C: Ekstrak air Buah Mahkota Dewa
= 𝑃3−𝑃2 𝑃6−𝑃2 = 0,593−0,541 0,574−0,541 = 0,523 0,033 = 1,58
Ekstrak  air  dari  buah  mahkota  dewa menunjukkan adanya aktivitas inhibisi fotodegradasi  tirosin  dalam  kaitannya  dengan aktivitas fotoproteksi. Ekstrak tersebut mampu menghambat  fotodegradasi  tirosin  terhadap sinar UV pada nilai inhibisi sebesar 1,58.
Ekstrak  etanol  dan  ekstrak  air  buah mahkota  dewa  sama-sama  menggunakan pelarut polar, tetapi dalam formulasi sediaan  tabir  surya  digunakan  ekstrak  etanol buah  mahkota  dewa.  Hal  ini  disebabkan  oleh kekhawatiran  tumbuhnya  jamur  atau  mikroba yang lain apabila dalam formulasi sediaan tabir surya  digunakan  ekstrak  air  buah  mahkota dewa.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan,  ekstrak  buah  mahkota  dewa  dapat meningkatkan
kemampuan
fotoproteksi sediaan  tabir  surya  dengan  penurunan  %Te
0,18-0,37  kali  dan  penurunan  %Tp  0,24-0,46 kali.  Nilai  %Te  ekstrak  etanolik  buah  mahkota dewa dalam sediaan tabir surya sebesar 17,86- 37,01%  dan  nilai  %Tp  sebesar  12,07-22,64%. Nilai ini lebih besar dibandingkan dengan nilai %Te  dan  %Tp  oksibenson  yaitu    1,15.10 -5 % (%Te) dan 0,67% (%Tp). Sedangkan kandungan fenolik  total  ekstrak  air  buah  mahkota  dewa adalah  8,29  ±  0,27%  dengan  aktivitas penghambatan  fotodegradasi  tirosin  1,58  kali lebih  besar  dibandingkan  dengan  vitamin  C pada  kadar  sama,  yaitu  0,15%.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  buah  mahkota dewa  dapat  dimanfaatkan  sebagai  bahan  aktif fotoprotektor dalam sediaan kosmetik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kami  mengucapkan  terimakasih  kepada Frau  Prof.  Dr.  Ulrike  Holzgrabe  dan  Deutscher Akademischer AustauschDienst (DAAD) Jerman yang  telah  mendanai  dan  memberi  fasilitas beberapa
instrumen. Selanjutnya juga diucapkan  terimakasih  kepada  Dekan  Fakultas Farmasi  dan  Ibu  Kepala  Departemen  Kimia Farmasi,  UGM  atas  bantuan  serta  kemudahan yang diberikan pada penelitian kami.

## DAFTAR PUSTAKA
Barel,  A.  O.  dkk.  (2001). Handbook  of  Cosmetic Science  and  Technology .  New  York: Marcel Dekker, Inc. Cumpelik,  B.  M.  (1972). Analytical  Prosedures and  Evaluation  of  Sunscreen .  ,  J.Soc.  Cos. Chem.
Halliwel, B. dan Gutteridge, J. M. C. (1999). Free Radical  in  Biology  and  Medicine .  New York: Oxford Unyversity Press. Koechevar, N.E., Pathak, M.A., and Pairish, J. A. . (1993). Photophysics,  Photochemistry, and Photobiology
(4th  Ed).  New  York:  Mc  Graw-Hill,  Book-Co. Barel,  A.  O.  dkk.  (2001). Handbook  of Cosmetic  Science  and  Technology .  New York: Marcel Dekker, Inc. Cumpelik,  B.  M.  (1972). Analytical  Prosedures and  Evaluation  of  Sunscreen .  ,  J.Soc.  Cos. Chem.
Halliwel, B. dan Gutteridge, J. M. C. (1999). Free Radical  in  Biology  and  Medicine .  New York: Oxford University Press.
Koechevar, N.E., Pathak, M.A., and Pairish, J. A. .
(1993). Photophysics,  Photochemistry, and Photobiology (4th Ed). New York: Mc Graw-Hill, Book-Co.
Lawrence, M. J. (2005). Sorbitan Esters (Sorbitan Fatty Acid Esters) . London:
Pharmaceutical Press.
Rieger, M. M., E. (1986). Emulsion . Philadelphia: Lea and Febiger 600 Washington Square. Shaath NA (1990). The Chemistry of Sunscreens .
In: N.J. Lowe and N.A. Shaath (Eds.). Sunscreens : Development, Evaluation, and Regulatory Aspects. New York: Marcel Dekker, Inc.
Sulaiman, T.N.S., dan Kuswahyuning, R.  (2008). Teknologi dan Formulasi Sediaan Semipadat . Yogyakarta: Pustaka Laboratorium Teknologi Farmasi Fakultas  Farmasi  Universitas  Gadjah Mada. Svobodova, A., J. Psotova., D. W. (2003). Natural Phenolics in the Prevention of UV-Induced Skin Damage . Biomed. Wasitatmadja,  S.,  M.  (1997).
Penuntun  Ilmu
Kosmetik  Medik .  Jakarta:  Universitas Indonesia Press.
Wilkinson,  J.  B.,  and  Moore,  R.  J.  (1982). The Principles  and  Practice  of  Modern Cosmetic . London: Leonard Hill Book.
Zin,  Z.M.,  Hamid,  A.A.,  Osman,  A.,  dan  Saari,  N. (2004). Antioxidative Activities of Chromatographic  Fractions  Obtained from Root, Fruit, and Leaf of Mengkudu  (Morinda  citrifolia  L.) .  Food Chem .