## POTENSI PEMANFAATAN KITOSAN TERMODIFIKASI ASAP CAIR SEBAGAI BAHAN EDIBLE COATING ANTI MIKROBA UNTUK PENGAWETAN DAGING

## POTENTIAL UTILIZATION OF LIQUID SMOKE MODIFIED CHITOSAN AS AN ANTIMICROBIAL EDIBLE COATING FOR MEAT PRESERVATION
M. Hanafiah, M. Faisal, Izarul Machdar
Program Studi Magister, Jurusan Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Syiah Kuala, Jl. Syech A Rauf no. 7 Darussalam, Banda Aceh, Aceh 23111, Indonesia
Email: mfaisal@unsyiah.ac.id

## Abstrak
Penelitian  ini  merupakan  kajian  awal  pemanfaatan  kitosan  yang  dimodifikasi  dengan  asap  cair  untuk menghasilkan  bahan edible  coating yang  dapat  digunakan  sebagai  pengawet  daging  sapi.  Senyawa kitosan  diperoleh  dari  limbah  kulit  udang,  sedangkan  asap  cair  dihasilkan  dari  pirolisis  cangkang kelapa sawit pada suhu 340 o C. Larutan edible coating dengan berbagai konsentrasi dibuat dengan cara melarutkan kitosan (1-1,5%) kedalam asap cair 3%, yang selanjutnya diaplikasikan sebagai pengawet daging.  Sampel  daging  yang  sudah  dicelupkan edible  coating selama  15  menit,  kemudian  disimpan didalam  lemari  pendingin  dan  diamati  penurunan  daya  tahannya  setiap  24  jam  selama  8  hari.  Hasil pengujian asap cair menggunakan Gas Chromatography - Mass Spectrometry ( GC-MS ) menunjukkan bahwa  asap  cair  mengandung  senyawa  fenol  dan  asam  asetat  yang  memiliki  sifat  antimokrobial.  Uji ketahanan  daging  dilakukan  dengan  menganalisa  aroma,  tekstur  dan  warna  daging.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa daging sapi yang telah dilapisi larutan kitosan–asap cair dapat bertahan hingga 7 hari.  Konsentrasi  kitosan  mempengaruhi  daya  tahan  daging,  semakin  besar  konsentrasi  kitosan  maka daya  tahan  daging  semakin  baik.  Konsentrasi  optimum  diperoleh  pada  1  %  kitosan,  padakondsi tersebut daging masih memiliki aroma, tekstur dan warna yang dapat diterima hingga waktu 6 hari. Hal ini menunjukkan bahwa asap cair-kitosan dapat digunakan sebagai bahan edible coating .
Kata kunci : asap cair, kitosan, edible coatin g, pengawet daging

## Abstract
This  research  is  a  preliminary  study  of  the  utilization  of  chitosan  modified  with  liquid  smoke  to produce  edible  coating  material  that  can  be  used  as  a  preservative  of  beef.  Chitosan  compounds obtained from shrimp  shell waste, while liquid smoke  produced  from  pyrolysis  of  palm  shells  at  a temperature of 340 o C. Edible coating solution with various concentrations  was made by dissolving chitosan  (1-1.5%)  into  3%  liquid  smoke,  which  was  then  applied  as  a  meat  preservative.  Meat samples  that  have  been  dipped  edible  coating  for  15  minutes,  then  stored  in  the  refrigerator  and observed decreased endurance every 24 hours for 8 days. Analysis results of Gas Chromatography- Mass Spectrometry (GC-MS) showed that liquid smoke contains phenol and acetic  acid compounds that have antimocrobial properties. Meat endurance test was done by analyzing the aroma, texture and color of meat. The results showed that the beef that has been coated liquid chitosan solution can last  up  to  7  days.  Chitosan  concentration  affects  the  endurance  of  meat,  the  greater  the  chitosan concentration,  the  better  the  meat  endurance.  The  optimum  concentration  was  obtained  at  1%  of chitosan, the meat still has an acceptable aroma, texture and color for up to 6 days. This suggests that chitosan-liquid smoke can be used as an edible coating material.
Keywords :  liquid smoke, chitosan, edible coating, meat preservative

## Pendahuluan
Indonesia  merupakan  merupakan  salah  satu negara  agragris  yang  memiliki  kekayaan  dari sumber daya alam yang cukup melimpah. Dengan luas  lahan  yang  besar,  sektor  pertanian  dapat dikembangkan  untuk  mensejahterakan  kehidupan
masyarakat.  Pembangunan  disektor  pertanian, selain  membawa  dampak  yang  sangat  positif  bagi kesejahteraan masyarakat Indonesia, juga mempengaruhi jumlah limbah biomassa dari hasil- hasil  pertanian  dan  perkebunan.  Peningkatan produksi pertanian akan sebanding dengan limbah
hasil  pertanian  yang  dihasilkan.  Hingga  saat  ini potensi berbagai limbah biomassa pertanian belum dimanfaatkan  dengan  baik,  padahal  Indonesia adalah  negara  agraris  yang  memiliki  banyak biomassa pertanian. Salah satu industri terbesar di Indonesia  adalah  kelapa  sawit  yang  menghasilkan banyak  limbah  biomassa  seperti  cangkang  sawit, pelepah dan tandan kosong yang  belum termanfaatkan dengan baik. Baru sekitar 40% dari cangkang sawit digunakan untuk energi, sedangkan  pelepah  dan  tanda  kosong  biasanya disebarkan  di  kebun  sawit,  sehingga  dapat melepaskan  emisi  gas  rumah  kaca.  Salah  satu metode  untuk  memanfaatkan  potensi  limbah biomassa kelapa sawit di Indonesia adalah dengan cara  mempirolisis  limbah  tersebut  sehingga menghasilkan  produk  asap  cair  yang  dapat digunakan  sebagai  pengawet  nabati.  Beberapa penelitian  menunjukkan  bahwa  senyawa  asap  cair mengandung  senyawa  yang  bersifat  antibakteri dan antioksidan [7,11,12].
Bahan  nabati  lain  yang  dapat  dimanfaatkan sebagai pengawet adalah kitosan, yang merupakan kopolimer D-glucosamine dan N-acetyl-D- glucosamine,  yang  diperoleh  dari  proses  alkali atau deasetilasi dari kitin. Gugus asetil mempengaruhi  interaksi  ion  dalam  kitosan. Semakin  banyak  gugus  asetil  yang  hilang  dari kitosan,  maka  interaksi  antar  ion  dan  ikatan hidrogen  dari  kitosan  akan  semakin  kuat  [23]. Dalam perkembangannya, kitosan biasanya dicampurkan  dengan  asam  asetat  sebagai  pelarut untuk  menghasilkan edible  coating .  Disisi  lain, asap  cair  yang  mengandung  senyawa  asam  juga berpotensi menggantikan asam asetat yang selama ini digunakan.
Namun  demikian  hingga  saat  ini  penelitian yang  mendalam  tentang  uji  efektifitas  asap  cair  – kitosan  sebagai  bahan  pengawet  alami  belum dilakukan. Sehingga diperlukan inovasi baru untuk menghasilkan  asap  cair-kitosan  yang  sesuai digunakan  sebagai  bahan  pengawet  daging. Pemanfaatkan  limbah  dan  bahan  organik  produk samping sebagai pengawet alami akan menghasilkan nilai tambah ekonomis dan peningkatan  nilai  sosial  budaya.  Pengendalian umur  simpan  produk  dengan  metode  ini  juga dapat  menjaga  keseimbangan  ekosistem  dan berdampak  pada  faktor  kesehatan  dan  kualitas produk  pangan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengkaji pemanfaatan asap cair yang dikombinasikan  dengan  kitosan  sebagai  pengawet alami daging sapi pada penyimpanan suhu dingin.

## Teori
Asap  cair  merupakan  cairan  kondensat  uap asap  hasil  pirolisis  bahan  kayu  yang  mengandung senyawa  penyusun  utama  seperti  asam,  fenol  dan karbonil  [5].  Senyawa  asap  cair  ini  mengandung senyawa-senyawa yang berfungsi sebagai antibakteri,  anti  jamur  dan  senyawa  antioksidan [1,2,4,20,21], sehingga dapat menjadi bahan alami dalam  pengawetan  makanan.  Beberapa  penelitian sebelumnya  menunjukkan  bahwa  asap  cair  dapat digunakan  untuk  mengawetkan  tahu  [10],  bakso dan ikan [7,13].
Disisi  lain,  kitosan  juga  merupakan  bahan pengawet alami yang saat ini sedang dikembangkan.  Kitosan  dari  kulit  udang  dapat digunakan  untuk  mengawetkan  beberapa  bahan makanan  seperti  daging  sapi  dan  ayam  [6,22]. Kitosan merupakan turunan yang paling sederhana dari  senyawa  kitin.  Kitosan  sudah  banyak diaplikasikan oleh industri dalam  berbagai bidang. Hal  ini  dikarenakan  adanya  gugus  amino  pada posisi C 2 dan gugus hidroksil primer dan sekunder pada  posisi  C 3 dan  C 6 .  Kitosan  memiliki  sifat kimia  linier  polyamine  (poly  D-glucosamine), gugus amino yang reaktif dan gugus hidroksi yang reaktif  [23]. Senyawa  kitosan  tidak  beracun  dan merupakan  poli,  biopolimer  kationik  yang  dapat dan  mudah  didegradasi  secara  alami  [9]. Kitosan dapat diperoleh dari limbah perikanan seperti dari kulit udang dan kepiting. Kombinasi asap cair dan kitosan  diharapkan  dapat  memberikan  pengaruh yang lebih baik terhadap daya tahan pangan.

## Metodologi Penelitian
Reaktor  pirolisis  dengan  kapasitas  5  kg/hari didesain dengan menggunakan bahan stainles steel sehingga  produk  asap  cair  yang  dihasilkan  bebas dari  kandungan  logam  lain.  Reaktor  dilengkapi dengan  alat  pengontrol  temperatur  yang  dapat beroperasi  hingga  suhu  500 o C.  Sampel  yang berupa  limbah  cangkang  dimasukkan  kedalam reaktor  selama  5-8  jam  dan  dipirolisis  pada temperatur 340 o C. Asap yang keluar dikondensasikan supaya menjadi asap cair dengan menggunakan  distilasi  yang  terbuat  dari  bahan stainles  steel.  Asap  cair  yang  didapatkan merupakan  grade  3.  Selanjutnya  asap  cair dimurnikan dengan cara destilasi pada  temperatur 190 o C.  Proses  pembuatan  asap  cair  yang  lebih detail  dapat  dilihat  pada  penelitian  sebelumnya [11,14].  Senyawa  atau  Komponen  kimia  yang terdapat  dalam  asap  cair  akan  diidentifikasi dengan menggunakan GC-MS berdasarkan metode  yang  dikembangkan  oleh  modifikasi Guillen and Ibargoitia [15,16].
Kitosan  yang  digunakan  adalah  kitosan komersial  yang  berasal  dari  dari  kulit  udang (Kitosan  Pharmaceutial Medical  Grade ,  CV. ChiMultiguna).  Kemampuan  asap  cair-kitosan sebagai  pengawet  alami  diuji  pada  daging  sapi . Larutan  asap  cair  3%  ditambahkan  kitosan sebanyak  0,5;1  dan  1,5    gram  kitosan,  kemudian dilarutkan  dalam  100  ml  aquadest.    Daging  sapi kemudian  dicelupkan  kedalam  masing  masing konsentrasi asap cair-kitosan selama 15 menit, lalu disimpan  di  lemari  pendingin.  Pengamatan dilakukan  setiap  24  jam  selama  8  hari.  Parameter yang  diamati  untuk  melihat  ketahanan  daging adalah aroma, tekstur dan warna daging.

## Hasil dan Pembahasan

## Pengujian komposisi asap cair dengan GC-MS
Asap  cair  adalah  suatu  larutan  yang  berisi senyawa-senyawa  organik  teroksidasi,  seperti kelompok keton, aldehida, phenol, and asam-asam karboksilat yang diperoleh dari proses kondensasi uap  hasil  proses  pirolisis  (pembakaran  tanpa oksigen)  tanaman  atau  kayu  pada  suhu  sekitar 400 o C (Soldera 2008). Menurut  Prananta  (2009), cangkang  kelapa  sawit  mengandung  lignin (29,4%), hemiselulosa (27,7%), selulosa (26,6%), air  (8,0%),  komponen  ekstraktif  (4,2%),  abu (0,6%).  Faisal  dkk.  [11]  mengatakan  proses pirolisis  selulosa  menghasilkan  senyawa  asam asetat  dan  senyawa  karbonil  seperti  asetaldehid, glikosal  dan  akreolin.  Sedangkan  proses  pirolisis lignin akan menghasilkan senyawa fenol, guaiakol, siringol bersama dengan homolog dan derivatnya. Jumlah  dan  macam  senyawa  yang  terkandung didalam  asap  cair  sangat  tergantung  pada  suhu pirolisis  dan  bahan  baku  [14]).  Data  analisa komposisi  asap  cair  pada  temperatur  340 o C setelah  proses  distilasi  ditunjukkan  pada  Tabel  1. Awhu  dkk.  [2]  juga  mengatakan  kandungan senyawa fenol dapat membunuh bakteri pembusuk yang  mendegradasi  protein  menjadi  asam-asam amino,  sehingga  tidak  menimbulkan  bau  busuk. Asap  cair  juga  memiliki  sifat  bakteristatis  yang tinggi  sehingga  menyebabkan  bakteri  tidak berkembang biak, dan bersifat fungisidal  sehingga jamur tidak dapat tumbuh.
Tabel  1.  Kandungan  kimia  asap  cair  hasil pirolisis cangkang kelapa sawit pada suhu 340 o R.Time (min) Kons. (%) Nama 2,885 0,25 Cyclopropane, 1,1-dibromo-2- chloro-2-fluoro- (CAS) 1,1- Dibromo-2-Chloro 5,417 10,89 Acetic acid (CAS) Ethylic acid 5,638 5,57 Acetic acid (CAS) Ethylic acid 5,800 0,23 Acetic acid, Anhydride with Formic acid 5,878 2,21 2-Propanone,  1-hydroxy-  (CAS) Acetol 6,335 1,19 Acetic acid (CAS) Ethylic acid 6,417 1,15 Acetic acid (CAS) Ethylic acid 7,715 3,47 Acetic acid (CAS) Ethylic acid 8,603 6,26 Acetic acid (CAS) Ethylic acid 9,046 3,12 Acetic acid (CAS) Ethylic acid 9,421 3,01 Acetic acid (CAS) Ethylic acid 9.866 4.40 Acetic acid (CAS) Ethylic acid 11,092 0,59 2-Acetyl Furan 11,375 0,36 2(3H)-Furanone,  dihydro-  (CAS) Butyrolactone 11,993 0,43 2,3-Dimethylcyclohexanol 12,307 14,91 Carbamic  acid,  phenyl  ester  (CAS) Phenyl carbamate 12,678 17,77 Carbamic  acid,  phenyl  ester  (CAS) Phenyl carbamate 13,561 6,37 Phenol, 2-methoxy- (CAS) Guaiacol 14,422 1,22 Phenol,  2,4-dimethyl-  (CAS)  2,4- Xylenol 14,779 1,86 2-Methoxy-4-methylphenol 15,681 0,35 Phenol,  4-ethyl-2-methoxy-  (CAS) p-Ethylguaiacol 16,851 0,36 Phenol,  2,6-dimethoxy-  (CAS)  2,6- Dimethoxyphenol
Hasil  Analisis  Aroma,  Tekstur,  dan  Warna daging

## Aroma
Penggunaan kitosan dengan konsentrasi 0,5-1,5% digunakan untuk merendam daging sapi selama 15 menit dan disimpan pada refrigerator 4-7 o C. Hasil pengamatan  aroma  ditunjukkan  pada  Tabel  2, dapat  dilihat  bahwa  daging  sapi  yang  direndam
dengan  berbagai  konsentrasi  kitosan  memberikan efek  perubahan  aroma  yang  berbeda  terhadap waktu  penyimpanannya.  Penambahan  kitosan dengan konsentrasi yang tinggi dalam perendaman dapat  memperlambat  aroma  bau  pada  daging. Daging  yang  direndam  dengan  kitosan  1,5%  dan 1%  memiliki  aroma  yang  masih  enak  selama waktu  penyimpanan  7  hari.  Sedangkan  daging yang  direndam  dengan  kitosan  0,5%  memiliki aroma yang masih enak selama waktu penyimpanan  6  hari.  Setelah  penyimpanan  lebih dari  7  hari,  daging  sudah  mulai  mengeluarkan aroma yang kurang sedap.
Tabel  2.  Pengamatan  aroma  daging  sapi dengan berbagai konsentrasi kitosan
Konsentrasi Kitosan Aroma Daging Sapi Waktu Penyimpanan (Hari) 0  1  2  3  4  5  6  7  8 0% 5  5  5  5  5  5  5  4  3 0,5% 5  5  5  5  5  5  5  4  4 1% 5  5  5  5  5  5  5  5  4 1,5% 5  5  5  5  5  5  5  5  4 Keterangan: 1=Sangat  bau,  2=Bau,  3=Sedang,
4=Sedikit bau, dan 5= Tidak bau

## Tekstur
Pengujian tekstur dilakukan dengan menggunakan  tangan.  Uji  ini  bertujuan  untuk merasakan tekstur suatu produk makanan. Tabel 3 menunjukkan  bahwa  tekstur  daging  sapi  yang paling baik yaitu pada daging dengan perendaman kitosan  dengan  konsentrasi  1,5%,  tekstur  daging masih  keras  selama  penyimpanan  6  hari.  Hasil pengamatan  menunjukkan  bahwa  pada  waktu penyimpanan  8  hari  sudah  mulai  sedikit  keras menuju lembek. Sedangkan konsentrasi perendaman  0,5  dan  1%  menggunakan  kitosan, tekstur  daging  sapi  mulai  berubah  pada  waktu penyimpanan  selama  5  hari.  Menurunnya  nilai tekstur  daging  sapi  disebabkan  oleh  pertumbuhan mikroorganisme  yang  terdapat  dalam  daging  sapi selama  penyimpanan  [18].  Pembusukan  pada daging  ditandai  dengan  semakin  kecilnya  angka nilai  pengamatan  uji  tekstur.  Pembusukan  dan kerusakan  daging  terjadi  akibat  mikroorganisme yang  merusak  struktur  daging  sehingga  menjadi lunak dan berair [17].
Tabel  3.  Pengamatan  tekstur  daging  sapi dengan berbagai konsentrasi kitosan Konsentrasi Kitosan Tekstur Daging Sapi Waktu Penyimpanan (Hari) 0  1 2 3  4 5 6  7  8 0% 5  5 5 5  5 4 4  3  2 0,5% 5  5 5 5  5 5 4  3  3 1% 5  5 5 5  5 5 4  3  3 1,5% 5  5 5 5  5 5 5  4  3 Keterangan: 1=Sangat  lembek,  2=Lembek, 3=Sedikit keras, 4=Agak keras, dan 5= Keras

## Warna
Hasil  pengamatan  warna  pada  Tabel  1.3 menunjukkan  bahwa  daging  sapi  yang  direndam dengan  berbagai  konsentrasi  kitosan  memberikan efek perubahan warna yang  berbeda  setiap  waktu penyimpanannya.  Hasil  pengamatan  warna  pada berbagai  konsentrasi  menunjukkan  warna  yang sama  pada  penyimpanan  0  hingga  3  hari,  yaitu masih  berwarna  merah  darah.  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  Jo  dkk.[3]  yang  menyatakan bahwa dengan penambahan kitosan,  panel  sensori tidak  mendeteksi  adanya  perbedaan  warna  yang ditimbulkan.  Penelitian  Bostan  dan  Mahan  [8] juga  menyatakan  bahwa  pemberian  kitosan (0,25%;  0,5%;  dan  1%)  tidak  menimbulkan perubahan  sensori  yang  tidak  diinginkan,  bahkan sampel  dengan  perlakuan  memiliki  warna  yang lebih cerah daripada kontrol.
Dari  tabel  4  dapat  dilihat  kondisi  warna terbaik  yaitu  daging  sapi  dengan  perendaman kitosan  1,5%,  yaitu  warna  merah  darah  dapat bertahan  selama  7  hari  penyimpanan.  Pada  hari ke-8  daging  sapi  sudah  berubah  menjadi  warna merah  pucat.  Sedangkan  daging  sapi  dengan perendaman  kitosan  0,5  dan  1%  kitosan  daging sapi mengalami perubahan pada hari ke-6 dan ke- 7  dari  merah  darah  menjadi  merah  pucat.  Daging sapi  tanpa  kitosan  (0%)  sudah  mengalami perubahan  warna  pada  hari  ke-4  menjadi  warna merah  pucat.  Warna  daging  merah  cerah  akan berubah menjadi hijau, coklat atau keabuan akibat senyawa  oksidasi  (seperti  peroksida)  atau  adanya H 2 S yang dihasilkan bakteri.  Hasil yang diperoleh dari  penelitian  ini  lebih  baik  dari  penelitian sebelumnya [19]  dimana daging bertahan dalam 4 hari  masa  penyimpanan  pada  konsentrasi  kitosan 3% (menggunakan pelarut asam asetat).
Tabel  4.  Pengamatan  warna  daging  sapi dengan berbagai konsentrasi kitosan Konsentrasi Kitosan Warna Daging Sapi Waktu Penyimpanan (Hari) 0  1 2 3  4 5 6  7  8 0% 5  5 5 5  4 4 3  2  2 0,5% 5  5 5 5  5 5 4  4  3 1% 5  5 5 5  5 5 5  4  4 1,5% 5  5 5 5  5 5 5  5  4

## Kesimpulan
Hasil  penelitian  menunjukkankan edible  coating asap  cair  dari  cangkang  kelapa  sawit  yang dimodifikasi  kitotan  mampu  menjadi  alternatif pengawet daging sapi. Semakin tinggi konsentrasi kitosan  dalam  asap  cair  maka  daya  tahan  daging akan  semakin  lama.  Daging  sapi  yang  diawetkan dengan edible  coating dengan  konsentrasi kitosan  1%  dapat  bertahan  hingga  6  hari.  Pada kondisi ini, daging masih layak dikonsumsi karena aroma, rasa dan teksturnya masih baik. Sedangkan pada  hari  ke  8  kondisi  daging  sudah  mulai  tidak baik untuk konsumsi.

## Ucapan Terima Kasih
Penulis  mengucapkan  terimakasih  kepada Direktorat  Riset  dan  Pengabdian  Masyarakat,
Direktorat Jenderal Penguatan Riset dan Pengembangan, Kementrian Riset, Teknologi, dan pendidikan  Tinggi  atas  hibah  dan  bantuan  dana yang diberikan.

## Daftar Pustaka
[1] A. Gani, H. Husni, A. Baihaqi and M. Faisal, Potential  development  of  liquid  smoke  from oil  palm  solid  waste  as  biofungicides, International Journal of Science and Engineering, 7, (2014) 65-69.
[2] A.  Awhu,  R.  Paindoman,  dan  P.  Coniwati, Pengaruh  variable  waktu  dan  temperatur terhadap  pembuatan  asap  cair  dari  limbah kayu pelawan ( Cynometra Cauliflora ), Jurnal Teknik Kimia , 19, (2013)1-8.
[3] C.  Jo,  J.W.  Lee,  K.H.  Lee,  M.W.  Byun, Quality  properties  of  pork  sausage  prepared with  water-soluble  chitosan  oligomer,  Meat Science 59, (2001) 369-375.
[4] D.I. Ariestya, F. Swastawati, and E. Susanto, Antimicrobial  activity  of  microencapsulation liquid  smoke  on  tilapia  [ Oreochromis
Niloticus (Linnaeus, 1758) ] meat for
preservatives in cold storage (±5 C°), Aquatic Procedia, 7, (2016) 19-27.
[5] I.  Zuraida  and  S.  Budijanto,  Antibacterial activity  of  coconut  shell  liquid  smoke  (CS- LS)  and  its  application  on  fish  ball preservation.  International  Food  Research Journal, 18, (2011) 405-410.
[6] F.  Shahidi,  J.K.,V  Arachchi,  and  Y.J.  Jeon, Food aplication of chitin and chitosan, Trends in  Food  Science  and  Technology,  10  (1999)
37-51.
[7] J. Prananta, Pemanfaatan sabut dan tempurung  kelapa  Sawit  untuk  pembuatan asap  cair  sebagai  pengawet  makanan  alami, http://www.scribd.com/doc/4142857
[8] K.  Bostan,  and  F.I.  Mahan,  Microbiological quality  and  shelf-life  of  sausage  treated  with chitosan,  Journal  of  Faculty  Veterinary Medicine, İstanbul Üniversity, 37 (2011) 117- 126.
[9] K.  Kofuji,  C.J.  Qian,  Y.  Murata  and  S. Kawashima, Preparation of chitosan microparticles  by  water-in-vegetable  oil emulsion  coalescence  technique,  Journal  of Reactive and Functional Polymers, 65, (2005) 77-83.
[10] L.  Ginayati,  M.  Faisal,  dan  Suhendrayatna, Pemanfaatan asap cair dari pirolisis cangkang kelapa  sawit  sebagai  pengawet  alami  tahu, Jurnal Teknik Kimia USU, 4, (2015) 7-11.
[11] M.  Faisal,  T.  Chamzurni,  and  H.  Daimon,  A study  on  the  effectiveness    of    liquid  smoke produced from palm kernel shells in inhibiting black  pod  disease  in  cacao  fruit  in  vitro, International  Journal  of  GEOMATE,  14, (2018) 36-41.
[12] M. Faisal, A. Gani, Husni, A. Baihaqi, and H. Daimon,  Pyrolysis  of  oil  palm  kernel  shell into  liquid  smoke  and  its  application  to control anthracnose disease on chili ( Capsicum annum L. ). Journal of Engineering and  Applied    Sciences,  11,  (2016)  2583- 2587.
[13] M.  Faisal,  and  A.  Gani,  The  effectiveness  of liquid  smoke  produced  from  palm  kernel shells  pyrolysis  as  a  natural  preservative  in fish ball. International Journal of GEOMATE, 15(47), (2018) 145-150.
[14] M. Faisal, A. Gani, Husni, and H. Daimon, A Preliminary  study  of  the  itilization  of  liquid smoke  from  palm  kernel  shells  for  organic mouthwash. International Journal of GEOMATE, 13, (2017) 116-120.
[15] M.D.  Guillen  and  M.L.  Ibargoitia,  Influence of the moisture content on the composition of the  liquid  smoke  produced  in  the  pyrolysis process  of  fagus  sylvatica  L.  wood,  Journal of  Agricultural,  and  Food  Chemistry,  47,
(1999) 4126-4136.
[16] M.D.  Guillen  and  M.L.  Ibargoitia,  New components  with  potential  antioxidant  and organoleptic  properties,  detected for  the  first time  in  liquid  smoke  flavoring  preparations, Journal  of  Agricultural  and  Food  Chemistry,
46, (1998) 1276-1285.
[17] R.S.  Harjanti,  Kitosan  dari  limbah  udang sebagai  bahan pengawet  ayam  goreng, Jurnal Rekayasa Proses, 8, (2014) 12-18.
[18] R.A.  Soegiarto,  Doctoral  Thesis,  Universitas Atma Jaya, Yogyakarta, 2013.
[19] R. Rahardyani, Skripsi, Departemen Teknologi  Hasil  Perairan,  Institut  Pertanian Bogor, 2011.
[20] S.  Saloko,  P.  Darmadji,  B.  Setiaji,  and  Y. Pranoto,  Antioxidative  and  antimicrobial activities  of  liquid  smoke  nanocapsules  using chitosan  and  maltodextrin  and  its  application on tuna fish preservation, Food Bioscience, 7,
(2014) 71-79
[21] Widawati, Lina, and B. Budiyanto,
Pembuatan  asap  cair  tandan  kosong  kelapa sawit  untuk  pengawet  dan  flavouring  ikan pindang  kembung  ( Rastrelliger  Sp. ),  Jurnal Agroteknologi, 8(1), (2014) 15-28.
[22] W.  Zahiruddin.,  A.C.  Erungan  dan  I. Wiraswanti,  Pemanfaatan  karagenan  dan kitosan  dalam  pembuatan  bakso  ikan  kurisi
( Nemipterus
nematophorus ) pada
penyimpanan  suhu  dingin  dan  beku, Bulletin Teknologi Hasil Perikanan, XI(1), (2008) 40-
52.
[23] Z.X.  Tang,  L.  Shi  ,  J.Qian,    Neutral  lipase from  aqueous  solutions  on  chitosan  nano particles.  Journal  Biochemical  Engineering, 34 (2007) 217-223.