## UJI FITOPATOGENITAS, HEMOLISIS SERTA KEMAMPUAN MIKROB DALAM MELARUTKAN FOSFAT DAN KALIUM

## Test of Phytopathogenicity, Hemolysis and Microbial Ability in Solubilizing Phosphate and Potassium
Desak Ketut Tristiana Sukmadewi 1)* , Iswandi Anas 2) , Rahayu Widyastuti 2) dan Ania Citraresmini 3)
1) Program Studi Bioteknologi Tanah dan Lingkungan, Sekolah Pascasarjana IPB, Jl. Meranti Kampus IPB Dramaga, Bogor 16680
2) Departemen Ilmu Tanah dan Sumberdaya Lahan, Fakultas Pertanian IPB, Jl. Meranti Kampus IPB Dramaga, Bogor 16680
3) Badan Tenaga Nuklir Nasional, Pusat Aplikasi Isotop dan Radiasi Badan Tenaga Nuklir Nasional, Jl. Lebak Bulus Raya No. 49 Jakarta Selatan 12440

## ABSTRACT
Soil microbes have an important role in the cycle of phosphorous and potassium.  Therefore, multifunctional microbe are  required  to  have  two  or  more  functions.  Before  a  multifunctional  test  is  performed,  the  microbes  must  be  tested  and confirmed, they are not pathogenic. The purpose of this research  were to study phytopathogenicity, hemolysis and microbial ability in solubilizing phosphate and phosphate.  The research procedure consisted of  phytopathogenicity test, hemolysis test, test  of  phosphate  solubilizing  ability  on  Pikovskaya  solid  medium  and  potassium  solubilizing  ability  on  Alexandrov  solid medium. Based on the results of phytopatgonecity tests on bacteria and fungi, all isolates are non phytopathogenic. From the hemolysis test of bacterial isolate BPK 2, BPK 6 and BPK 7 caused total hemolysis. Based on hemolysis test of fungi isolate SSIO 6 caused total hemolysis, FPF E1 and JK 6 caused partial hemolysis. Isolate BPK 5 has the highest index in solubilizing potassium (1.375), while isolate BPF 9 has the highest index in solubilizing phosphate (1.533).
Keywords: Microbe, multifunctional, pathogenicity, phosphate solubilizing, potassium solubilizing

## ABSTRAK
Mikrob  tanah  memiliki  peran  penting  dalam  daur  unsur  organik,  seperti  daur  fosfat  dan  kalium.  Oleh  karena  itu diperlukan mikrob multifungsional yaitu satu mikrob memiliki dua fungsi atau lebih. Uji patogenitas sangat penting dilakukan terlebih  dahulu  sebelum  melakukan  pengujian  mikrob  multifungsional,  sehingga  aman  untuk  diaplikasikan  kedepannya. Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah    mempelajari  sifat  fitopatogenitas  dan  kemampuan  mikrob  dalam  melarutkan  fosfat  dan kalium.  Prosedur  penelitian  terdiri  dari,  uji  fitopatogenitas,  uji  hemolisis,  uji  kemampuan  melarutkan  fosfat  pada  media Pikovskaya  padat  dan  kalium  pada  media  Alexandrov  padat.  Berdasarkan  hasil  uji  fitopatogenitas  pada  bakteri  dan  fungi, semua  isolat  bersifat  non  fitopatogen.  Dari  uji  hemolisis  isolat  bakteri    BPK  2,  BPK  6  dan  BPK  7  menyebabkan  hemolisis total.  Berdasarkan  uji  hemolisis  pada  fungi  isolat  SSIO  6  menyebabkan  hemolisis  total,  FPF  E1  dan  JK  6    menyebabkan hemolisis  sebagian.  Isolat  BPK  5  memiliki  indeks  tertinggi  dalam  melarutkan  kalium  (1.375),  sedangkan  isolat  BPF  9 memiliki indeks tertinggi dalam melarutkan fosfat (1.533).
Kata kunci: Mikrob, multifungsional, patogenitas , pelarut fosfat, pelarut kalium

## PENDAHULUAN
Penggunaan  bahan  organik  yang  diperkaya dengan  mikrob  penyubur  perakaran  pada  berbagai  tanah pertanian dan tanah tercemar dapat meningkatkan aktivitas respirasi  dan  enzimatik  tanah  (Antonius et  al .,  2007). Mikrob  tanah  memiliki  peran  penting  dalam  daur  fosfor dan  kalium.  Fosfor  merupakan  unsur  hara  esensial  yang berperan  penting  dalam  fotosintesis  dan  perkembangan akar.  Ketersediaan  fosfat  dalam  tanah  jarang  melebihi 0.01%  dari  total  fosfat.  Fosfat  dalam  tanah  berada  dalam bentuk  terikat  sehingga  ketersedaan  fosfor  dalam  tanah rendah,  sehingga  petani  tetap  melakukan  pemupukan fosfat di lahan sawah walaupun sudah terdapat kandungan fosfat  yang  cukup  memadai  (Ginting et  al .,  2002).  Oleh
karena  itu  diperlukan  mikrob  pelarut  fosfat,  sehingga fosfat  dalam  bentuk  terikat  menjadi  bentuk  tersedia  bagi tanaman.  Aplikasi  mikrob  pelarut  fosfat  tersebut  pada tanaman  padi  sawah  nyata  meningkatkan  pertumbuhan tanaman  padi,  serapan  P  dan  menghemat  penggunaan pupuk  P  sintetis.  Begitu  pula  dengan  penelitian  Flatian (2017) yang menunjukkan bahwa inokulasi mikrob pelarut fosfat  dan  sumber  fosfat  mampu  meningkatkan  jumlah daun, bobot kering dan serapan P tanaman jagung.
Selain fosfat, kalium juga berperan penting dalam metabolisme  tanaman  antara  lain  terlibat  langsung  dalam beberapa  proses  fisiologis  (Farhad et  al., 2010).  Terdapat dua  aspek  yang  terlibat,  yaitu:  (1)  aspek  biofisik  yaitu kalium  berperan  dalam  pengendalian  tekanan  osmotik, turgor sel, stabilitas pH, dan pengaturan air melalui kontrol
*) Penulis Korespondensi: Telp. +6281238944528; Email. tristianasukmadewi@yahoo.com  DOI: http://dx.doi.org/10.29244/jitl.19.2.68-73
stomata,  dan  (2)  aspek  biokimia,  dimana  kalium  berperan dalam  aktivitas  enzim  pada  sintesis  karbohidrat  dan protein  serta  meningkatkan  translokasi  fotosintat  dari daun.  Kalium  (K)  adalah  makronutrien  penting  utama ketiga  untuk  pertumbuhan  tanaman.  Konsentrasi  kalium dalam  tanah  biasanya  sangat  rendah  dan  lebih  dari  90% kalium  dalam  tanah  ada  dalam  bentuk  batuan  larut  dan mineral  silikat.  Penelitian  Pratama et  al. (2016) menunjukan bahwa pengujian isolat mikrob pelarut kalium pada tanaman sorgum dapat meningkatkan tinggi tanaman, bobot  kering,  tajuk  dan  bobot  kering  akar.  Isolat  mikrob pelarut  kalium  yang  diidentifikasi  diantaranya  adalah Achromobacter xylosoxidans dan Burkolderia cepacia .
Selama  ini  formulasi  yang  dipakai  untuk membuat  pupuk  organik  biasanya  diperkaya  dengan mikrob  yaitu  menggunakan berbagai jenis  mikrob sebagai konsorsium. Di sisi lain penggunaan konsorsium memiliki beberapa  kelemahan  yaitu  terjadinya    kompetisi  terhadap tempat  tumbuh  dan  nutrisi,  antibiosis  serta  parasitisme. Kelemahan lainnya adalah penggunaan konsorsium kurang efisien  karena  memerlukan  berbagai  jenis  mikrob  unggul (Berlian et al ., 2013; Munawar dan Wijajanti, 2015). Oleh karena  itu  diperlukan  mikrob  multifungsional  yaitu  satu mikrob  yang  memiliki  dua  fungsi  atau  lebih.  Salah  satu contohnya,  satu  jenis  mikrob  yang  memiliki  kemampuan melarutkan fosfat dan kalium.
Sebelum
dilakukan
uji
kemampuan multifungsional,  mikrob-mikrob  tersebut  harus  diuji  dan dipastikan terlebih dahulu, bahwa tidak bersifat fitopatogen.  Oleh  karena  itu  perlu  dilakukan  uji patogenitas,  baik  uji  fitopatogenitas  terhadap  tanaman maupun  uji  patogenitas  terhadap  hewan  dan  manusia.  Uji fitopatogenitas  dan  patogenitas  ini  sangat  penting dilakukan agar mikrob yang diaplikasikan tidak berbahaya dan  merugikan  bagi  lingkungan  di  sekitarnya.  Selain  itu, dengan  mengetahui  sifat  fitopatogenitas  dan    patogenitas dari  mikrob  tertentu  sejak  awal,  bisa  dilakukan pencegahan,  sehingga  tidak  berdampak  buruk  ke depannya.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah    mempelajari sifat  fitopatogenitas  dan  patogen  (hemolisis)  serta kemampuan mikrob dalam melarutkan fosfat dan kalium.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi  Tanah,  Fakultas  Pertanian,  Institut  Pertanian Bogor  (IPB).  Bahan  penelitian  yang  digunakan  adalah mikrob  tanah  pelarut  fosfat  dan  kalium  koleksi Laboratorium  Bioteknologi  Tanah,  Fakultas  Pertanian, IPB.  Sebelum  digunakan,  isolat  tersebut  diremajakan terlebih  dahulu.  Isolat  bakteri  diremajakan  dalam  media nutrient  agar (NA),  sedangkan  isolat  fungi  diremajakan dalam media potato dekstrosa agar (PDA). Adapun daftar isolat yang akan digunakan disajikan pada Tabel 1.
Bahan-bahan  lain  yang  digunakan  yaitu  media Pikovskaya  (glukosa  5  g,  NaCl  0.1  g,  Ca 3 (PO 4 ) 2 2.5  g, (NH 4 ) 2 SO 4 0.25  g,  KCl  0.1  g,  MgSO 4. 7H 2 O  0.025  g, MnSO 4 0.25 g, FeSO 4 0.25 g, yeast extract 0.25 g, agar 14 g dalam 1 liter akuades), media Alexandrov (5.0 g glukosa, 0.5  g  MgSO 4 .7H 2 O,  0.1  g  CaCO 3 ,  0.006  g  FeCl 3 ,  2.0  g Ca 3 PO 4 , 3.0 g bubuk feldspar sebagai sumber kalium yang tidak larut, 20.0 g agar), media blood agar , kloramfenicol, tanaman tembakau varietas Xanthy dan benih padi varietas
Ciherang.  Adapun  alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu, syringe ukuran  1  ml,  tabung  reaksi, gelas  ukur,  erlenmeyer,  guntimg,  cawan  Petri,  penggaris, jarum ose, spatula dan dry gladsky.

## Prosedur Penelitian

## Uji Fitopatogenitas dan Hemolisis
Uji  fitopatogenitas  dan  hemolisis  dilakukan  pada 14  jenis  mikrob  (Tabel  1),  terdiri  atas  uji  hipersensitif untuk  mengetahui  potensi  patogen  pada  tanaman  dan  uji hemolisis  untuk  mengetahui  potensi  patogen  pada  hewan dan  manusia.  Uji  hipersensitif  pada  bakteri  dilakukan dengan  menyuntikkan  (tanpa  jarum)  isolat  bakteri    (±10 7 CFU  ml -1 )  menggunakan syringe volume  1  ml  ke  daun tanaman tembakau varietas Xanthy dan diamati selama 72 jam.  Disipakan  kontrol  positif  daun  tembakau  yang disuntikan  bakteri  patogen Xanthomonas sp . ,  sedangkan kontrol  negatif    daun  tembakau  yang  disuntikan  dengan aquades.  Bakteri  tersebut  berpotensi  patogen  bagi tanaman,  apabila  nekrosis  terjadi  pada  titik  suntikan, (Schaad et  al .,  2001).  Uji  fitopatogenitas  terhadap  fungi dilakukan  dengan  merendam  benih  padi  pada  media  cair yang  ditumbuhi  fungi  selama  24  jam.  Benih  lalu ditumbuhkan  pada  kapas  basah  selama  7  hari.  Disiapkan kontrol  negatif  dengan  menggunakan  benih  padi    yang direndam dengan aquades, sedangkan  kontrol postif benih padi  direndam  dengan  isolat  fungi Fusarium  solani . Diamati  persentase  tumbuh  benih  yang  direndam  dengan isolat  fungi  dibandingkan  dengan  kontrol  apabila,  yang mendapatkan perlakuan ditambahkan fungi pertumbuhannya  lambat  maka  fungi  tersebut  berpotensi sebagai  patogen  (Mahmoed et  al .,  2013).  Uji  hemolisis dilakukan  dengan  menggunakan  media blood  agar .  Zona bening  yang  terbentuk  mengelilingi  koloni  pada  media menunjukkan  bahwa  mikrob  bersifat  patogen  (Difco, 2009). Kontrol positif yang digunakan adalah adalah isolat bakteri  patogen Xanthomonas sp . dan  fungi  patogen Fusarium solani .

## Uji Kemampuan Mikrob dalam Melarutkan Fosfat dan Kalium
Pada  tahap  ini  dilakukan  pengukuran  indeks kelarutan  fosfat  dan  kalium  pada  14  mikrob.  Pengukuran indeks  kelarutan  fosfat  dilakukan  pada  media  Pikovskaya padat dengan sumber fosfat sukar larut Ca 3 PO 4 , sedangkan indeks kelarutan kalium dilakukan pada media Alexsandrov  dengan  sumber  kalium  sukar  larut  feldspar yang berasal dari Malang, Jawa Timur. Bakteri diinkubasi selama  72  jam,  sedangkan  fungi  diinkubasi  selama  120 jam, (Ines et al ., 2014). Diamati zona bening yang muncul di  sekitar  koloni  dan  dilakukan  pengukuran  indeks kelarutan fosfat dengan Persamaan 1.
....................... (1)

## Tabel 1. Daftar isolat mikrob pelarut fosfat dan kalium
No Kode Isolat Jenis Isolat Sumber Isolat Peneliti yang mengisolasi Potensi 1 BPK 1 Bakteri Lahan perkebunan (Coklat ( Theobroma cacao L.)) Deni Pratama Pelarut fosfat dan kalium 2 BPK 2 Bakteri Lahan bekas tambang emas ( Dalbergia latifolia Roxb.) Deni Pratama Pelarut fosfat dan kalium 3 BPK 5 Bakteri Lahan bekas tambang emas ( Schima wallichii (DC). Korth) Deni Pratama Pelarut fosfat dan kalium 4 BPK 6 Bakteri (Dillenia surffruticosa (Griff) Martelli) Deni Pratama Pelarut fosfat dan kalium 5 BPF 7 Bakteri Lahan perkebunan (Jati ( Tectona grandis )) Milik IPB Pelarut fosfat 6 BPF 9 Bakteri Lahan Rejo Agung Milik IPB Pelarut fosfat 7 FK I Fungi Lahan perkebunan ( Elaeis guineensis Jacq.) Deni Pratama Pelarut fosfat dan kalium 8 FK 2 Fungi Lahan perkebunan (Kopi ( Coffea arabica L.) Deni Pratama Pelarut fosfat dan kalium 9 FPF E1 Fungi Lahan perkebunan (Coklat (Cocoa theobroma L.) Kurnia Dwi Sasmitha Pelarut fosfat 10 FPF 4 Fungi Lahan gambut sejuta hektar Kalimantan Milik IPB Pelarut fosfat 11 SSIO 6 Fungi Lahan perkebunan Coklat (Cocoa theobroma L.) Kurnia Dwi Sasmitha Pelarut fosfat 12 FPF 5 Fungi Lahan gambut sejuta hektar Kalimantan Milik IPB Pelarut fosfat 13 JK 1 Fungi Kompos serasah Pasar Jumat Anggi Nico Flatian Pelarut fosfat 14 JK 6 Fungi Kompos serasah Pasar Jumat Anggi Nico Flatian Pelarut Fosfat

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Uji Fitopatogenitas
Berdasarkan  hasil uji fitopatogenitas pada bakteri didapatkan   hasil bahwa,  7 isolat  bakteri  tersebut bersifat non  patogen  (Tabel  2).    Pada  Gambar  1  terlihat  bahwa pada  kontrol  yang  disuntikkan  aquades,  daun  tetap berwarna  hijau,  begitu  pula  pada  perlakuan  yang disuntikkan  isolat  non  fitopatogen,  daun  juga  terlihat berwarna  hijau.  Daun  yang  disuntikkan  isolat  bakteri fitopatogen  terlihat  berubah  warna  menjadi  kecokelatan. Daun  yang  berubah  warna  menjadi  kecokelatan  tersebut merupakan reaksi dari hipersensitifitas. Reaksi hipersensitif  merupakan  program  kematian  sel  yang  cepat dan  terlokalisasi.  Reaksi  ini  muncul  pada  tanaman  yang terinfeksi  saat  terserang  patogen  dan  hal  tersebut merupakan  upaya  untuk  menghambat  pertumbuhan patogen. Induksi reaksi  hipersensitif dipengaruhi oleh  gen hrp  yang  umum  ditemukan  pada  bakteri  Gram  negatif patogen  tanaman,  termasuk  kelompok Xanthomonas sp. (Wahyudi et al., 2011).
Berdasarkan  hasil  uji  fitopatogenitas  pada  fungi didapatkan  hasil  bahwa  8  isolat  fungi  yang  diujikan bersifat  non  fitopatogen.  Pada  Gambar  1  terlihat  bahwa perlakuan  kontrol  yang  direndam  dengan  aquades  steril serta  isolat  non  fitopatogen  menunjukkan  persentase pertumbuhan  100%.  Pertumbuhan  hipokotil  dan  epikotil dari benih padi tersebut tumbuh lebih baik. Hipokotil pada kontrol  negatif  dan  yang  direndam  isolat  non  patogen terlihat  tumbuh  lebih  panjang  dibandingkan  dengan
kontrol positif yang direndam dengan isolat fungi patogen Fusarium solani .
Tabel 2. Hasil uji patogenitas pada bakteri dan fungi
No Jenis Isolat Uji Hipersensitif Uji Hemolisis 1 BPK 1 Non patogen Non patogen 2 BPK 2 Non patogen Patogen (Hemolisis total) 3 BPK 5 Non patogen Non patogen 4 BPK 6 Non patogen Patogen (Hemolis total) 5 BPK 7 Non patogen Patogen (Hemolisis total) 6 BPF 9 Non patogen Non patogen 7 FPK 1 Non patogen Non patogen 8 FPK 2 Non patogen Non patogen 9 FPF 4 Non patogen Non patogen 10 FPF 5 Non patogen Non patogen 11 SSIO 6 Non patogen Patogen (Hemolis total) 12 JK 1 Non patogen Non patogen 13 FPF E1 Non patogen Patogen (Hemolisis sebagian 14 JK 6 Non patogen Patogen  (Hemolisis sebagian)
Gambar 1.  Daun  tembakau  yang  disuntikkan  dengan  isolat bakteri:  A ) kontrol  negatif  ( aquadest steril),  B) kontrol positif ( Xantomonas sp. ), C) isolat BPK yang bersifat non patogen
Gambar 2.  Pertumbuhan benih padi yang direndam isolat FPF: A ) kontrol negatif ( aquadest ), B ) kontrol positif ( Fusarium solani ), C ) isolat yang bersifat non patogen
A B
C
A B C
Beberapa  penelitian  sebelumnya  menyebutkan bahwa  jika  benih  terinfeksi  cendawan  akan  mengalami penurunan  mutu  fisik  dan  fisiologis  benih.  Mutu  fisik benih  menjadi  tidak  normal,  sedangkan  penurunan  mutu fisiologis  dapat  menurunkan  viabilitas  dan  vigor  benih. Inokulasi  beberapa  isolat  cendawan  terbawa  benih  kakao hibrida  berpengaruh  nyata  terhadap  penurunan  daya berkecambah, indeks vigor, KCT-R, T50, laju pertumbuhan  kecambah  dan  tingkat  infeksi  (Baharudin et al .,  2013).  Infeksi  patogen  melalui  lenti  sel  (stomata)  dan luka  mudah terjadi, tetapi infeksi langsung patogen  masih sulit  terjadi.  Kemampuan  patogen  dalam  menginfeksi secara  langsung  terjadi  apabila  patogen  memiliki  enzim yang  dapat  masuk  ke  dalam  benih  seperti  patogen antraknosa.  Patogen  ini  mampu  menguraikan  dinding  sel inang,  sehingga  memudahkan  patogen  masuk  ke  dalam jaringan dan menginfeksi inang (Soesanto, 2006).
Berdasarkan uji hemolisis pada media blood agar (Tabel  2)  terlihat  bahwa  dari  6  isolat  bakteri,  3  isolat bakteri (BPK 2, BPK 6 dan BPK 7) bersifat patogen yang diindikasi  dengan  terjadinya  hemolisis  total  (Beta hemolisis).  Pada  media blood  agar 3  isolat  tersebut membentuk  zona  bening  yang  mendekati  transparan  di sekitar koloni (Gambar 2). Berdasarkan uji hemolisis pada fungi menunjukan dari 8 isolat fungi, 3 isolat fungi (SSIO 6,  FPF  E1  dan  JK  6)  bersifat  patogen.  Isolat  SSIO  6 menyebabkan hemolisis total, sedangkan FPF E1 dan JK 6 menyebabkan  hemolisis  sebagian  yang  diindikasikan dengan perubahan warna disekitar koloni menjadi abu-abu kehijauan.
Zona  hemolisis  terbentuk  pada  permukaan medium  agar  darah  seperti  contohnya  terbentuk  oleh Streptococcus pyogenes karena bakteri tersebut menghasilkan  produk  ekstraseluler  yang  dapat  melisiskan sel  darah  merah. Streptococcus  pyogenes golongan  A menghasilkan  suatu  produk  esktraseluler  yaitu  streptolisin S dan streptolisin O yang mengakibatkan lisis sel eritrosit. Streptolisin S adalah toksin stabil oksigen yang terdiri dari polipeptida yang menyebabkan hemolisis pada permukaan medium agar darah pada keadaan aerob (Hall dan Lyman, 2006).

## Kemampuan Mikrob dalam Melarutkan Fosfat dan Kalium
Berdasarkan  hasil  uji  kemampuan  mikrob multifungsional  dalam  melarutkan  fosfat  dan  kalium  pada media  Alexandrov  dan  Pikovskaya  padat  didapatkan  hasil dari  6  isolat  bakteri,  5  isolat  memiliki  kemampuan multifungsional  (Tabel  3).  Isolat  BPK  5  memiliki  indeks kelarutan kalium tertinggi (1.375), sedangkan isolat BPF 9 memiliki  indeks  kelarutan  fosfat  tertinggi  (1.533). Berdasarkan  hasil  uji  pada  isolat  fungi  dari  8  isolat, semuanya  mampu  melarutkan  fosfat  dan  kalium.  Isolat FPF  4  memiliki  indeks  kelarutan  fosfat  tertinggi  (1.065), sedangkan isolat FPF E1 memiliki indeks kelarutan kalium tertinggi  (1.320),  namun  isolat  ini  memiliki  sifat  patogen (Tabel 4).
Asam  oksalat,  asam  sitrat,  asam  tartarat,  asam format  dan  asam  malat  merupakan  asam-asam  organik yang  diduga  dihasilkan  dari  proses  pelarutan  K  oleh mikroorganisme  tanah  (Liu et  al .,  2006;  Sheng  dan  He, 2006;  Shanware et  al .,  2014).  Proses  pelapukan  mineral
kalium  dapat  dipercepat  karena  adanya  interaksi  dengan asam-asam  organik  yang  dihasilkan  oleh  mikrob  tanah (Archana,  2007).  Interaksi  tersebut  merupakan  proses pelapukan biokimia. Interaksi biokimia dapat terjadi dalam bentuk tarikan elektrostatik , reaksi kompleks (pengkelatan) dan coadsorption ( water and metal bridging ). Reaksi yang terjadi  antara  kalium  feldspar  (KAlSi 3 O 8 )  dengan  asam organik  menyebabkan reaksi  pertukaran ion antara  ion H + dan  ion  K + sehingga  melepas  ion  K + yang  terikat  dengan silikat.  Reaksi  antara  kalium  feldspar  sebagai  mineral primer  dengan  asam  organik  juga  membentuk  mineral kalium sekunder (Fu et al ., 2009).
Tabel 3. Indeks kelarutan fosfat dan kalium isolat bakteri
No Isolat Indeks Kelarutan Fosfat Indeks Kelarutan Kalium 1 BPK 1 1.339 1.278 2 BPK 2 1.125 1.049 3 BPK 5 1.032 1.375 4 BPK 6 1.180 1.312 5 BPF 7 1.170 - 6 BPF 9 1.533 1.089
Tabel 4. Indeks kelarutan fosfat dan kalium isolat fungi
No Isolat Indeks Kelarutan Fosfat Indeks Kelarutan Kalium 1 FPK 1 1.038 1.056 2 FPK 2 1.057 1.035 3 FPF 4 1.065 1.091 4 FPF 5 1.030 1.026 5 SSIO 6 1.061 1.039 6 JK 1 1.057 1.187 7 FPF E1 1.083 1.320 8 JK 6 1.047 1.048
Selain  pelarutan    K,  pelarutan  P  juga  diduga karena  diproduksinya  asam-asam  organik.  Berdasarkan penelitian Khan et al. (2009), mekanisme utama pelepasan P  disebabkan  produksi  asam-asam  organik  oleh  mikrob pelarut  fosfat.  Produksi  asam  organik  menyebabkan penurunan  pH  dan  selanjutnya  P  akan  dilepaskan  melalui subtitusi proton. Asam-asam organik yang dihasilkan  akan bereaksi dengan ion-ion Ca 2+ , Fe 3+ dan Al 3+ yang mengikat fosfat  menjadi  bentuk  yang  stabil    dan  fosfat  dibebaskan menjadi  bentuk  yang  tersedia  bagi  tanaman.  Penelitian Setiawati  dan  Mihardja  (2008)  melaporkan  bahwa  ada beberapa  mekanisme  mikrob  dalam  melarutkan  fosfat diantaranya adalah kompetisi anion orthofosfat, perubahan pH  yang  disebabkan  oleh  diproduksinya  asam-asam organik, pengikatan logam membentuk logam organik dan pengkelatan oleh ligan organik.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  uji  fitopatogenitas  pada  isolat bakteri  dan  fungi,  semua  isolat  bersifat  non  fitopatogen. Dari uji hemolisis isolat bakteri  BPK 2, BPK 6 dan BPK 7 bersifat  patogen  dan  menyebabkan  hemolisis  total. Berdasarkan  uji  hemolisis  pada  fungi  isolat  SSIO  6 menyebabkan  hemolisis  total,  FPF  E1  dan  JK  6 menyebabkan  hemolisis  sebagian  Isolat  BPK  5  memiliki indeks  tertinggi  dalam  melarutkan  kalium  (1.375), sedangkan  isolat  BPF  9  memiliki  kemampuan  tertinggi dalam melarutkan fosfat (1.533).

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terima  kasih  kami  sampaikan  kepada Kementerian  Riset  dan  Teknologi  (Kemenristek-DIKTI) melalui  program  beasiswa  Pendidikan  Magister  Doktor Menuju  Sarjana  Unggul  (PMDSU)  batch  II  tahun  2015 yang telah membiayai penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Antonius,  S.,  D.  Agustyani,  M.  Rahmansyah  dan  B. Martono.  2007.  Development  of  sustainable agriculture:  soil  microorganisms  enzymantic activity  of  organic  farming  on  Jabopuncur C  ch    ’s  A     T        w  h      cu  u wastes as Biofertilizier. Proceedings International
Seminar Advances in Biological Science: Contribution Towards a Better Human Prosperity; Yogyakarta, Indonesia. p. 340–341.
Archana,  D.S.  2007.  Studies  on  potassium  solubilizing bacteria [Tesis].  University  of  Agricultural Sciences. Dharwad.
Baharudin,  A.  Purwantara,  S.  Ilyas  dan  M.R.  Suhartanto.
2013.  Patogenitas  beberapa  isolat  cendawan terbawa benih  kakao hibrida. Jurnal Littri, 19: 1-
7.
Berlian,  I.,  B.  Setyawan  dan  H.  Hadi  .  2013.  Mekanisme antagonisme Trichoderma spp. terhadap beberapa patogen tular tanah. Warta Perkaretan , 32: 74-82.
Difco.  2009. Manual  Microbiological  Culture  Media  2 nd .
Mj.  Zimbro,  D.A.  Powder,  S.M.  Miller,  G.E. Wilson  and  J.A.  Jonhson  (Eds.).  Becton, Dickinson and Company, Maryland.
Farhad, I.S.M., M.N. Islam, S. Hoque and M.S.I. Bhuiyan.
2010.  Role  of  potassium  and  sulphur  on  the growth, yield, and oil content of soybean ( Glycine max L.). Ac. J. Plant Sci ., 3: 99-103.
Flatian,  A.N.  2017.  Kontribusi  P  dari  aktivitas  mikrob pelarut fosfat, fosfat alam dan SP-36 berdasarkan teknik Isotop 32 P [Tesis]. IPB. Bogor.
Fu,  Q.,  P.  Lu,  P.  Konishi,  R.  Dilmore,  H.  Xu,  W.E. Seyfried  and  C.  Zhu.  2009.  Coupled  alkali- feldspar  dissolution  and  secondary  mineral precipitation in batch systems: 1. new experiments at 2000C and 300 bars. Chem. Geol ., 258: 125-135.
Ginting,  R.C.B.,  S.  Rasti  dan  E.  Husen.  2002.  Mikrobia
Pelarut  Fosfat [Internet].  [Diunduh  16  Desember 2015]. Tersedia pada: http://balittanah.litbang.pertanian.go.id/ind/doku mentasi/buku/buku%20pupuk%20hayatipupuk%2
0organik/07mikorganisme_ginting.pdf.
Hall, K.K. and J.A. Lyman. 2006. Update review of blood culture  contamination. Clin.  Microbiol.  Rev .,  19:
788–802.
Inès,  M.,  T.  Yousra,  B.R.  Asma,  K.  Sana  and  H.
Abdennasser. 2014. Multi-traits of non- pathogenic fluorescent Pseudomonas and
evaluation  of  their  potentiel  as  biocontrol  agents . Amer. J. of Environ. Sci., 10: 199-209.
Khan,  M.S.,  A.  Zaidi  and  P.A.  Wani.  2009.  Role  of phosphate solubilizing microorganisms in sustainable  agriculture  [ulasan]. In E.  Lichtfouse et  al .  (Eds.).  Sustainable  Agriculture . Springer Science Business Media, New York. p. 551-570.
Liu, W., X. Xu, S. Wu, Q. Yang, Y. Luo and P. Christie . 2006.  Decomposition  of  silicate  minerals  by bacillus mucilaginosus in liquid culture. Environ. Geochem. Health , 28: 133-140.
Mahmoud,  S.Y.M.,  M.H.  Hosseny,  K.A.A.A.  EL-Shaikh, A.H.A. Obiadalla and Y.A. Mohamed. 2013. Seed borne Fungal pathogens associated  with common bean  ( Phaseolus  vulgaris L.)  seed  and  their impact on germination. Journal of Environ. Stud ., 11: 19-26.
Munawar,  Elfita  dan  H.  Wijajanti.  2015.  Viabilitas konsorsium bakteri penambat nitrogen dan pelarut fosfat pada media pembawa tanah gambut sebagai agen  pupuk  hayati.  Prosiding  Seminar  Nasional
Lahan Suboptimal; 2015 Oktober 8-9;
Palembang, Indonesia. Palembang.
Pratama,  D.,  I.  Anas  and  Suwarno.  2016.  Ability  of potassium-  solubilizing  microbes  to  solubilize microbes  to  solubilize  feldspar. Malays  J.  of  Soil Sci., 20: 163-175.
Schaad,  N.W.,  J.B.  Jones  and  W.  Chun.  2001. Plant Patogenic Bacteria 3 rd . American
Phytopatological Society. Minnesota.
Setiawati,  T.C.  dan  A.  Mihardja.  2008.  Identifikasi  dan bakteri  pelarut  fosfat  dan  pengaruhnya  terhadap aktivitas  Rhizoctonia  solani  pada  tanaman Kedelai. J. Tanah Trop., 13: 233-240.
Shanware,  A.S.,  S.A.  Kalkar  and  M.M.  Trivedi.  2014. Potassium  solublisers:  occurrence,  mechanism and  their  role  as  competent  biofertilizers. Intern. J. Curren Microbiol. and App. Sci., 3: 622-629.
Sheng,  X.F.  and  L.Y.  He.  2006.  Solubilization  of potassium  bearing  minerals  by  a  wild  type  strain of Bacillus  Edaphicus and  its  mutants  and increased  potassium  uptake  by  wheat. Can.  J. Microbiol., 52: 66-72.
Soesanto,  L.  2006. Penyakit  Pascapanen .  Kanisius,
Yogyakarta. p. 268.
Wahyudi,  A.T.,  S.  Meliah  dan  A.A.  Nawangsih.  2011. Xanthomonas  oryzae  pv.oryzae bakteri  penyebab hawar  daun  pada  padi:  isolasi,  karakterisasi,  dan
telaah  mutagenesis  dengan  transposon. Makara Sains , 15: 89-96.