## AKTIVITAS ANTIOKSIDAN RAMUAN TRADISIONAL MADURA “SUBUR KANDUNGAN”

## Ruri Siti Resmisari
Jurusan Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang
Email: ruri_resmisari@gmail.com

## ABSTRACK
Traditional  medicine  "Subur  Kandungan"  is  a  medicine  that  is  widely  used  and produced in Madura. The problem to develop Madura’s herb is raw material that hasn’t the standardized medicine used for Madura’s traditional medicine, because that raw materials are mostly purchased from traditional markets. This led to the standardization of Madura’s traditional medicine is difficult to do. This condition causes didn’t known active compounds contained in the Madura’s medicine. This study  was  conducted  to  determine  the  content  of  phytochemical  compounds  from ethanol  extract  medicine  "Subur  Kandungan"  as  well  as  antioxidant  activity. Based  on  the  results,  it  was  concluded  that  the  class  of  chemical  compounds contained in the Madura’s traditional medicine "Subur Kandungan" are classified as  a  flavonoids  and  alkaloids,  while  the  antioxidant  activity  of  extracts  of  the medicine " Subur Kandungan " are expressed in IC 50 was at 90.19 ppm classified as a strong antioxidant.
Keywords:  Madura’s  traditional  medicine  “Subur  Kandungan”,  Phytochemical, Antioxidant Activity

## PENDAHULUAN
Obat  tradisional  atau  lebih  dikenal sebagai jamu secara umum masih digunakan  oleh  masyarakat  Indonesia sebagai  salah  satu  metode  alternatif  dalam menolong  diri  sendiri  terhadap  keluhan kesehatan atau sebagai cara untuk menjaga kesehatan.  Data  Riset  Kesehatan  Dasar 2010 menunjukkan bahwa 56% masyarakat Indonesia  pernah  mengkonsumsi  jamu dan untuk  provinsi  Jawa  Timur  mencapai 71,84%.
Tingginya  tingkat  konsumsi  jamu dikarenakan ramuan tradisional ini memiliki  manfaat  yang  secara  langsung dirasakan  oleh  pengkonsumsinya,    dimana sebagian  besar  (95,60%)  pengguna  jamu menyatakan  bahwa  ramuan  ini  mampu meningkatkan  daya  tahan  dan  perawatan tubuh (Armas, 1995).
Wanita  merupakan  pengguna  jamu yang dominan, menurut Armas (1995) dari total  pengguna  jamu,  61,87  %  adalah
wanita. Hal  ini menyebabkan produk jamu yang paling banyak di pasaran dikhususkan untuk  wanita  (Handayani  dan  Kristanti 2011).  Keluhan  kesehatan  reproduksi diduga menjadi penyebab tingginya permintaan  jamu  untuk  wanita.  Hasil penelitian  Handayani  menyebutkan  bahwa 19  produsen  jamu  di  4  kabupaten  di  pulau Madura  (Bangkalan,  Sampang,  Pamekasan dan  Sumenep)  didominasi  oleh  jamu kesehatan wanita.
Pada  tahun  2012  jumlah  industri obat  tradisional  yang  terdapat  di  Jawa Timur sebanyak  9 unit,  sedangkan industri kecil  obat  tradisional  sebanyak  258  unit (BPOM  Jatim,  2012).  Menurut  Handayani (2003)  pulau  madura  merupakan  daerah yang  memiliki  jumlah  industri  kecil  obat tradisional.  Hal ini dikarenakan daerah ini memiliki  kebiasaan  meminum  jamu  untuk menjaga  stamina  tubuh,  utamanya  adalah menjaga  kesehatan  reproduksi.    Hasil penelitian  yang  dilakukan  oleh  Handayani
(2003)  menyatakan  bahwa  ramuan  madura untuk  kesehatan  reproduksi  memiliki khasiat  yang  lebih  baik  jika  dibandingkan dengan ramuan jawa, tetapi ramuan madura memiliki  rasa  yang  lebih  pahit  jika dibandingkan dengan ramuan jawa.
Ramuan tradisional “Subur Kandungn”  merupakan  salah  satu  ramuan yang  banyak  di  gunakan  di  Madura (Handayani,  2003).  Permasalahan  dalam melakukan  pengembangan  ramuan  madura adalah  belum  terstandarisasinya  bahan baku  yang  digunakan  untuk  ramuan madura,  karena  bahan  baku  tersebut sebagian besar dibeli dari pasar tradisional. Hal  ini  menyebabkan  standarisasi  ramuan madura  sulit  untuk  dilakukan.  Disamping itu,  dosis  yang  digunakan  untuk  setiap bungkus juga belum terstandarisasi dengan baik, hal ini menyebabkan tidak diketahuinya  kandungan  senyawa  aktif yang  terdapat  dalam  ramuan  madura tersebut.
Berdasarkan  pada  permasalahan diatas,  maka  tujuan  dari  penelitian  ini adalah  mengetahui  kandungan  senyawa fitokimia  dari  ekstrak  etanol  ramuan “Subur Kandungan” serta aktivitas antioksidannya.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Bahan yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah Curcuma  zedoaria , Kaempferia galanga L , Foeniculum vulgare Mill, Centella  Asiatica ,  n-heksana p.a,  kloroform  p.a,    etanol,  aquades, metanol,  larutan HCl 2 %, larutan metanol 50  %,  logam  Mg,  larutan  FeCl 3 ,  larutan gelatin, reagen Dragendrofff, reagen Meyer,  pereaksi  Lieberman  Burchard, latutan  H 2 SO 4 pekat,  larutan  formaldehid 3%, larutan DPPH dan BHT.
Pembuatan Ramuan.
Sampel  tanaman  rizoma Curcuma zedoaria , rizoma Kaempferia  galanga L , biji Foeniculum vulgare Mill  dan  daun Centella Asiatica dicuci bersih,
dikeringanginkan. Selanjutnya sampel dipotong  kecil-kecil  dengan  gunting  atau pisau  dan  dikeringkan  dengan  oven  pada suhu  30  –  37 o C  selama  1  –  2  jam. Kemudian sampel kering dihaluskan dengan blender sampai menjadi serbuk dan diayak  dengan  ayakan  60  mesh.  Ramuan “Kandungan Subur” dibuat dengan mencampurkan  4  macam  bahan  tanaman dengan  komposisi  masing-masing  25%. Kemudian  ramuan  tersebut  digunakan sebagai sampel proses ekstraksi.

## Proses Ekstraksi
Metode  ekstraksi  yang  digunakan adalah  metode  maserasi  dengan  pelarut etanol  seperti  yang  dilakukan  oleh  Rita (2008)  dengan  sedikit  modifikasi.  Serbuk ramuan  “Kandungan  Subur”  ditimbang sebanyak  60  g,  lalu  diekstraksi  dengan perendaman menggunakan 300 mL pelarut etanol  selama  24  jam,  kemudian  dishaker selama  3  jam,  selanjutnya  disaring  dan ampas  yang  diperoleh  dimaserasi  kembali dengan  pelarut  yang  sama  dan  dilakukan sebanyak  3  kali  pengulangan  sampai filtratnya berwarna bening. Hasil penyaringan  dilakukan  evaporasi  dengan rotary  evaporator ,  pada  suhu  40 o C  selama 30  menit.  Hasil  dari  proses  evaporasi kemudian  disimpan  pada  suhu  4 o C  untuk selanjutnya dilakukan uji fitokimia.

## Uji Fitokimia
Uji  Alkaloid  (Harbone,  1987). Ekstrak ramuan  “Subur  Kandungan” diambil  sebanyak  2  mg  dan  dimasukkan dalam tabung reaksi, ditambah 0,5 mL HCl 2  %  dan  larutan  dibagi  dalam  dua  tabung. Tabung  I  ditambahkan  0,5  mL reagen Dragendorff ,  tabung  II  ditambahkan  0,5 mL reagen  Meyer .  Jika  tabung  I  terbentuk endapan  jingga  dan  pada  tabung  II terbentuk endapan kekuning-kuningan,
menunjukkan adanya alkaloid. Uji  Flavonoid  (Indrayani  dkk., 2006). Ekstrak ramuan “Subur
Kandungan”  diambil  sebanyak  2  mg dimasukkan dalam tabung reaksi kemudian dilarutkan  dalam  1  –  2  mL  metanol  panas
50 %. Setelah itu ditambah logam Mg dan 0,5  mL  HCl  pekat.  Larutan  berwarna merah atau jingga yang terbentuk, menunjukkan adanya flavonoid.
Uji  Triterpenoid  dan  Steroid (Indrayani, 2006). Ekstrak ramuan “Subur Kandungan”  diambil  sebanyak  2  mg dimasukkan dalam tabung reaksi, dilarutkan  dalam  0,5  mL  kloroform  lalu ditambah  dengan  0,5  mL  asam  asetat anhidrat. Campuran ini selanjutnya ditambah  dengan  1  –  2  mL  H 2 SO 4 pekat melalui  dinding  tabung  tersebut.  Jika  hasil yang  diperoleh    berupa  cincin  kecoklatan atau  violet  pada  perbatasan  dua  pelarut menunjukkan adanya triterpenoid, sedangkan  jika  terbentuk  warna  hijau kebiruan menunjukkan adanya steroid.
Uji  Saponin  (Halimah,  2010) Ekstrak ramuan  “Subur  Kandungan” diambil sebanyak 2 mg  dimasukkan dalam tabung  reaksi  ditambah  air  (1:1)  sambil dikocok selama 1 menit, apabila menimbulkan  busa  ditambahkan  2  tetes HCl  1  N  dan  dibiarkan  selama  10  menit, bila  busa  yang  terbentuk  bisa  tetap  stabil maka ekstrak positif mengandung saponin.
Uji Tanin (Indrayani dkk., 2006). Ekstrak ramuan  “Subur  Kandungan” sebanyak  2  mg  dimasukkan  kedalam tabung  reaksi,  kemudian  ditambahkan dengan  2-3  tetes  larutan  FeCl 3 1  %.  Jika larutan menghasilkan warna hijau kehitaman  atau  biru  tinta,  maka  bahan tersebut mengandung tanin.
Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak
ramuan
“Subur
Kandungan”  dilarutkan  dalam  etanol dengan konsentrasi 50, 60, 70, 80, 90, 100 ppm.  Larutan  antioksidan  sintetik  BHT digunakan  sebagai  pembanding  dengan konsentrasi  2,  4,  6,  8  ppm.  Larutan  DPPH dibuat  dengan  melarutkan  kristal  DPPH dalam  pelarut  etanol  dengan  konsentrasi  2 mM.  Proses  pembuatan  larutan  DPPH  2 mM  dilakukan  dalam  kondisi  suhu  rendah dan  terlindung  dari  cahaya  matahari. Sebanyak 0,5 ml larutan uji atau pembanding  direaksikan  dengan  1  ml
larutan  DPPH  2  mM  dalam  tabung  reaksi. Kemudian larutan  diinkubasi pada suhu 37 °C  selama  30  menit,  kemudian  diukur absorbansinya dengan menggunakan spektrofotometri  UV-VIS  pada  panjang gelombang  517  nm.  Aktivitas  antioksidan dari  setiap  sampel  ekstrak  ramuan  “Subur Kandungan”    dan  antioksidan  pembanding BHT dinyatakan dengan persen inhibisi (% aktivitas antioksidan), yang dihitung dengan rumus sebagai berikut:
% 𝑖𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖
= (𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 − 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑙𝑒) 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜
× 100%
Nilai  konsentrasi  sampel  (ekstrak  ramuan “Subur  Kandungan  atau  antioksidan pembanding  BHT)  dan  persen  inhibisinya diplot pada sumbu x dan y pada persamaan regresi  linear.  Persamaan  regresi  linear yang diperoleh dalam bentuk persamaan y =  a  +  bx ,  digunakan  untuk  mencari  nilai IC 50 (inhibitor  concentration  50%) dari setiap  sampel  dengan  menyatakan  nilai  y sebesar 50 dan nilai x yang akan diperoleh sebagai  IC 50. .  Nilai  IC 50 merupakan besarnya  konsentrasi  larutan  sampel  yang dibutuhkan  untuk  mereduksi  radikal  bebas DPPH sebesar 50%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji Fitokimia Ramuan “Subur Kandungan”. Pengujian fitokimia dilakukan untuk  mengetahui  senyawa  aktif  yang terkandung  ramuan  “Subur  Kandungan”. Hasil  pengujian  fitokimia  dapat  dilihat pada Tabel1.
Tabel  1.  Hasil  Uji  Fitokimia  ramuan “Subur Kandungan”
Penapisan fitokimia Hasil Flavonoid Positif (++) Alkaloid Positif (++) Saponin Negatif (-) Tanin Negatif (-)
Berdasarkan  pada  hasil  pengujian fitokimia (Tabel 1) didapatkan hasil bahwa senyawa  yang  terdapat  pada  ramuan “Subur  Kandungan”  ialah  flavonoid  dan alkaloid.    Jamu  subur  kandungan  terdiri dari 4  (spesies)  yaitu Kaempferia  galanga, Centella  asiatica,  Curcuma  domestica dan Foeniculi  dulcis. Kaempheria  galangal . Spesies Kaempferia  yang digunakan masih satu family Zingiberaceae, seperti jahe dan kunyit  yang  terlebih  dulu  diketahui mempunyai aktivitas antibakteri dan antifungi (Hutapea, 1991).

## Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ramuan “Subur Kandungan”
Senyawa      antioksidan      dalam suatu      bahan      dapat      diketahui      dengan melakukan uji aktivitas antioksidan. Pengujian aktivitas antioksidan pada ekstrak  Ramuan  “Subur  Kandungan” dilakukan  menggunakan  metode  DPPH. DPPH ( diphenylpicrylhydrazyl ) adalah suatu  radikal  bebas  stabil    yang  dapat bereaksi  dengan  radikal  lain  membentuk senyawa  yang  lebih  stabil.  Selain  itu, DPPH  juga  dapat  bereaksi  dengan  atom hidrogen  membentuk  DPPH  tereduksi ( diphenylpicrylhydrazyl ) yang stabil (Molyneux, 2004).
Suatu  senyawa  dapat  dikatakan memiliki  aktivitas  antioksidan  apabila senyawa  tersebut  mampu  mendonorkan atom  hidrogennya  pada  radikal  DPPH, yang        ditandai        dengan        perubahan warna    ungu    menjadi    kuning    pucat (Molyneux,  2004).  Berdasarkan  hasil penelitian,  perubahan  warna  ini  hanya tampak  pada  larutan  BHT  yang  diberi larutan DPPH 1 mM dan diinkubasi selama 30 menit pada suhu 37 o C, sedangkan pada larutan  ekstrak    ramuan  “  Subur Kandungan”  yang  telah  diberi  perlakuan sama tidak terlalu menunjukkan perubahan warna  yang  mencolok.      Hal  ini  diduga karena  kemampuan  senyawa  aktif  dalam ekstrak  ramuan “Subur  Kandungan”  yang diuji  adalah  rendah  dalam  mereduksi radikal DPPH sebanyak 50% (IC 50 ).
Hasil  Uji  aktivitas  antioksidan (persen  inhibisi)  BHT  dapat  dilihat  pada Tabel 2. Hasil pengujian aktivitas antioksidan  menunjukkan  BHT  memiliki nilai  IC 50 sebesar  4,88  ppm.  Semakin kecil  nilai  IC 50 maka  semakin  tinggi aktivitas antioksidannya. Persentase penghambatan  tinggi  dan  nilai  IC 50 yang rendah  membuktikan  bahwa  BHT  bersifat sebagai  antioksidan  yang  kuat.  BHT  itu sendiri  merupakan  antioksidan  sintetik. Antioksidan sintetik ini biasa dicampurkan ke  dalam    bahan    pangan    karena    efektif menghambat  aktivitas  radikal  bebas  dan bersifat sinergis dengan antioksidan lainnya.  Namun  penggunaan  antioksidan sintetik    dapat    menyebabkan    keracunan pada    dosis    tertentu.    Kadar    maksimum BHT dalam bahan pangan adalah 200 ppm (Ketaren, 1986).
Tabel  2.  Hasil  Uji  aktivitas  antioksidan BHT Konsen trasi (ppm) Rerata nilai absorbansi Kontrol Aktivitas Antioksidan (% inhibisi) 2 0,907 1,052 13,81 4 0,801 1,052 23,86 6 0,217 1,052 79,40 8 0,111 1,052 89,45
Berdasarkan  pada  Tabel  2  terlihat bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  BHT aktivitas  antioksidan  juga  semakin  tinggi, hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Azka  (2010)  dimana peningkatan konsentrasi BHT akan meningkatkan  persen  inhibisi  yang  berarti bahwa berbanding lurus dengan peningkatan aktiitas antioksidannya.
Pengujian aktivitas antioksidan BHT menghasilkan  hubungan  konsentrasi  BHT yang  digunakan  dengan  persen  inhibisinya yang dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar  1.  Grafik  hubungan  konsentrasi BHT dengan persen inhibisinya
Gambar  1  menunjukkan  bahwa BHT  memiliki  persen  penghambatan radikal bebas tertinggi pada konsentrasi 8 ppm,  yaitu  sebesar  89,45%  dengan  nilai IC 50 sebesar  4,88  ppm.  Nilai  IC 50 BHT ini  tidak  jauh  berbeda  dengan  nilai  yang diperoleh  Hanani  dkk.  (2005)  dalam penelitiannya sebesar 3,81 ppm. Aktivitas  antioksidan  dapat  dikatakan tinggi bila nilai IC 50 yang diperoleh kecil Persentase penghambatan tinggi dan nilai IC 50 yang  kecil  membuktikan  bahwa BHT  bersifat  antioksidan  yang  sangat kuat (<50 ppm) menurut klasifikasi Blois (1958) dalam Molyneux (2004).
Tabel  3.  Hasil  Uji  aktivitas  antioksidan ramuan “Subur Kandungan”
Konse ntrasi (ppm) Rerata  Kontrol Aktivitas Antioksidan (% inhibisi) 50 0,679 0,764 11,04 60 0,571 0,764 25,19 70 0,495 0,764 35,22 80 0,515 0,764 32,52 90 0,361 0,764 52,68 100 0,309 0,764 59,49
Hasil  Uji  Aktivitas  Antioksidan ramuan  “  Subur  Kandungan”  (Tabel  3) menunjukkan  bahwa  pada  konsentrasi sebesar  50  ppm  menunjukkan  hasil persen  inhibisi  sebesar  11,04%  hal  ini berarti  bahwa  ekstrak  ramuan  “Subur Kandungan”  telah  mampu  mendegradasi
DPPH sebesar 11,04%. Konsentrasi yang paling efektif untuk mendegradasi DPPH adalah  100  ppm  ekstrak  ramuan  “Subur Kandungan”.
Gambar  2.    Grafik  hubungan  konsentrasi ekstrak ramuan “ Subur Kandungan  ”  dengan  persen inhibisinya Untuk menentukan nilai IC 50 ekstrak  ramuan  “Subur  Kandungan” dilakukan  ploting  nilai  konsentrasi  ekstrak ramuan “Subur Kandungan” dengan persen inhibisinya.  Berdasarkan  pada  Gambar  2 terlihat bahwa fungsi regresi dari hubungan tersebut  adalah  Y=  0,92x  –  38,98  dengan nilai  R 2 sebesar  0,936  yang  berarti  bahwa model  tersebut  adalah  valid.  Berdasarkan pada  model  tersebut  kemudian  ditentukan nilai  IC 50 dengan  memasukkan  nilai  50 pada  nilai  Y,  sehingga  didapatkan  nilai  X sebesar  90,19.  Nilai  X  merupakan  nilai konsentrasi  dari  ekstrak  ramuan  “Subur Kandungan”  dengan  satuan  ppm.  Oleh karena  itu  dapat  disimpulkan  bahwa  nilai IC 50 ramuan  “Subur  Kandungan”  sebesar 90,19 ppm.
Blois  (1958) dalam Molyneux (2004)  menjelaskan  bahwa,  suatu  senyawa dapat  dikatakan  sebagai  antioksidan  sangat kuat  apabila  nilai  IC 50 kurang  dari  0,05 mg/ml, kuat apabila nilai IC 50 antara 0,05- 0,10  mg/ml,  sedang  apabila  nilai  IC 50 berkisar antara 0,10-0,15 mg/ml dan lemah apabila nilai IC 50 berkisar antara 0,15-0,20 mg/ml.    Menurut    klasifikasi    ini,    ekstrak ramuan  “Subur  Kandungan”    tergolong dalam sumber antioksidan yang kuat karena kurang  dari  100  ppm.    Namun  aktivitas antioksidan  ini  jauh  berbeda  dengan
antioksidan  sintetik  BHT  karena  ekstrak ramuan “Subur
Kandungan” yang digunakan  pada  pengujian  masih  berupa ekstrak  kasar  ( crude ).  Ekstrak  kasar  bukan merupakan  senyawa  murni,  tetapi  masih mengandung  senyawa-senyawa  lain  yang kemungkinan  tidak  mempunyai  aktivitas antioksidan.
Pada umumnya
senyawa antioksidan  yang  diisolasi  dari  sumber alami  berasal  dari  tumbuhan.  Senyawa  ini umumnya  adalah  senyawa  fenolik  atau polifenolik  yang  dapat  berupa  golongan flavonoid,  turunan  asam  sinamat,  kumarin dan  tokoferol  (Pratt  dan  Hudson  1990). Komponen  flavonoid  hasil  pengujian terdapat pada ekstrak kasar ramuan “Subur Kandungan”.  Peran  flavonoid    sebagai antioksidan    ini    terbukti    dari    hasil penelitian    Ayoola et    al. (2008)  yang menunjukkan  bahwa  seluruh  komponen flavonoid  yang  diisolasi  dari  tumbuhan C. papaya,  M.  indica,  V.  amygdalina, dan P. guajava memiliki aktivitas antioksidan.
Ekstrak  kasar  ramuan  “Kandungan Subur” memiliki aktivitas antioksidan yang diduga  mengandung  komponen  alkaloid. Alkaloid  diketahui    memiliki    aktivitas antioksidan.    Ayoola et    al. (2008) menunjukkan  bahwa C.  papayadan dan V. amygdalina mengandung komponen alkaloid yang memiliki berpotensi memiliki  aktivitas  antioksidan.  Setiap pelarut  yang  berbeda  sifat  kepolarannya melarutkan  komponen-komponen  bioaktif yang berbeda. Suratmo (2009) menyatakan bahwa      golongan      senyawa-senyawa fenolat,  flavonoid,  dan  alkaloid  berpotensi sebagai antioksidan yang merupakan senyawa-senyawa    polar.    Senyawa- senyawa    polar    tersebut    akan    terekstrak pada    fraksi  ekstrak  etanol  karena  etanol pelarut yang polar.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  pada  hasil  penelitian yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan    bahwa  golongan  senyawa kimia  yang  terdapat  didalam  ramuan tradisional  madura    “Subur  Kandungan”
adalah  golongan  flavonoid  dan  golongan alkaloid,  sedangkan  aktivitas  antioksidan ekstrak ramuan “Subur  Kandungan ”  yang dinyatakan  dalam  IC 50 adalah  sebesar 90,19 ppm yang tergolong sebagai antioksidan kuat.

## DAFTAR PUSTAKA
Ayoola,  G.  A.,  Coker  H.  A.  B.,  Adepoju- Bello  A.  A,  Obeweya  K,  Ezennia E.  C.,  Atangbayila  T.  O.,  and Coker HAB. 2008. Phytochemical screening and antioxidant activities of some selected medicinal  plants  used  for  malaria therapy  in  Southwestern  Nigeria.
J. Phar Res . 7(3):1019-1024 Armas,  E.  J.  1995.  Learning  Together.  A woman’s  Story.  In:  Learning about Sexuality. A Practical
Beginning. Editor: Sondra Zeidenstein  and  Kristen  Moore. New York, The Population Council  International  Women’s
Health Coalition. P. 33–44 Azka,  A.  2010.  Aktivitas  Antioksidan  dan Komponen Bioaktif Pada
Semanggi  Air (Marsilea  crenata) . Skripsi. Institut Pertanian Bogor.
(Badan  Penelitian  dan  Kesehatan).  2010.
Riset  Kesehatan  Dasar  2010 . Departemen Kesehatan. Jakarta.
Hanani  E,  Mun’im  A,  dan  Sekarini,  R.
2005. Identifikasi senyawa
antioksidan dalam spons Callyspongia sp.  dari  Kepulauan Seribu. Majalah Ilmu Kefarmasian 2(3):127-133 Handayani,  L.  2003.  Membedah  Rahasia Ramuan Madura. Jakarta, Agromedia Pustaka Handayani L., L., Kristiana. 2011. Pemanfaatan Jamu Untuk Gangguan  Kesehatan  Reproduksi Wanita, Analisis Lanjut Data Riset Kesehatan  Dasar    Tahun  2010. Buletin Penelitian Sistem
Kesehatan  –  Vol.  14  No.  3  Juli  :
301–309
Harborne,  J.  B.  1987. Metode  Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan . Padmawinata K, Soedira I, penerjemah.  Bandung:  Penerbit Institut Teknologi Bandung. Terjemahan  dari:  Phytochemical methods Halimah,  N.  2010.  Uji  Fitokimia  dan  Uji Toksisitas Ekstrak Tanaman Anting-Anting  ( Acalypha  indica
Linn.) Terhadap  Larva  Udang Artemia  salina  Leach.    Skripsi Diterbitkan. Malang: Fakultas
Sains  dan  Teknologi  Universitas
Islam  Negeri  Maulana  Malik Ibrahim Malang. Hutapea,  J.  R.  1991.  Inventaris  Tanaman Obat Indonesia III. Litbang
Departemen Kesehatan RI. Jakarta Indriyani,  L.,  Soepjipto,  H.,  dan  Sihasaie, L.  2006.  Skrining  Fitokimia  dan Uji  Toksisitas  EEkstrak  Daun Pecut Kuda (Stachytarpheta jamaicensis  L.  Vahl) Terhadap Larva Udang Artemia salina
Leach.  Berk.  Panael.  Hayati :  12 (57-61). Ketaren,    S.  1986. Pengantar  Teknologi
Minyak  dan  Lemak  Pangan .
Jakarta: UI Press Molyneux,  P. 2004. The use of stable free
radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioksidan activity. Songklanakarin  J  Sci Technol . 26(2):211-219
Pratt,  D.  E  and  Hudson  B.  J.  F.  1990.
Natural Antioxidant Not Exploited
Comercially .  Di  dalam:  BJF Hudson. Food Antioxidant . London: Elvisier Applied Science.
Suratmo. 2009. Potensi ekstrak daun sirih merah ( Piper crocatum ) sebagai antioksidan. http://fisika.brawijaya.ac.id/bss- ub/PDF%20FILES/BSS_205_1.pd f .  Tanggal Akses 29 Desember