## Deteksi Asam Mefenamat pada Jamu Pegel Linu yang beredar di Wilayah Pekalongan

## Detection of Mefenamic Acid in ‘Jamu Pegel Linu’ distributed in Pekalongan Region
Siska Rusmalina 1 , Kharismatul Khasanah 1* , Denny Kurniawan Nugroho 2
1 Universitas Pekalongan, Jl. Sriwijaya No. 3 Kota Pekalongan, Indonesia
2 Mahasiswa Program Studi D-3 Farmasi Universitas Pekalongan, Jl. Sriwijaya No. 3 Kota Pekalongan, Indonesia *Email: khaskharisma@gmail.com
Received: 3 Februari 2020; Accepted: 1 Juli 2020; Published: 7 Juli 2020

## Abstrak
Jamu pegal linu merupakan salah satu jamu yang banyak digemari masyarakat di Indonesia dan sering kali oleh oknum produsen jamu ditambahkan bahan kimia obat (BKO) supaya efek terapi yang dihasilkan lebih efektif. Salah satu BKO yang ditambahkan yaitu asam mefenamat. Adanya kandungan  asam mefenamat yang  ditambahkan  dapat  menimbulkan  efek  samping  membahayakan  seperti  kejang  bahkan  bisa menyebabkan koma. Penelitian ini bertujuan untuk mendeteksi kandungan BKO asam mefenamat di dalam sediaan jamu pegel linu yang beredar di wilayah Pekalongan. Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif dengan Pengambilan sampel secara purposive sampling. Sampel yang digunakan adalah semua jamu pegal linu kemasan serbuk yang beredar di wilayah Pekalongan yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi. Metode analisis yang digunakan adalah metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dengan fase gerak berupa etil asetat:metanol:ammonia (80:10:10). Deteksi bercak dilakukan di bawah sinar UV pada λ 254 nm. Hasil bercak yang diperoleh dibandingkan dengan baku pembanding. Untuk memastikan hasil yang diperoleh dilakukan  konfirmasi  menggunakan  metode  reaksi  warna.    Hasil  pengujian  terhadap  27  sampel  dengan metode KLT diperoleh ada 3 (tiga) sampel jamu memberikan hasil positif ditunjukkan dengan kesamaan nilai Rf dengan baku pembanding. Hasil yang diperoleh dilakukan pengujian kualitatif dengan pereaksi warna untuk memperkuat hasil.
Kata kunci : asam mefenamat, kromatografi lapis tipis (KLT), jamu pegel linu

## Abstract
Jamu Pegel Linu is one of the most popular herbs in Indonesia and oftenly the producers added medicinal chemicals  (BKO)  so  that  the  resulting  therapeutic  effect  is  more  effective.  One  of  the  BKO  added  is mefenamic acid. The added content of mefenamic acid can cause harmful side effects such as seizures and can even cause coma. This study aimed to detect the BKO content of mefenamic acid in Jamu Pegel Linu distributed  in  Pekalongan  region.  This  research  was  a  descriptive  study  with  purposive  sampling.  The sample used was all Jamu pegel linu that were distributing in Pekalongan region that were included the inclusion and exclusion criteria. The analytical method used is Thin Layer Chromatography (TLC) with a mobile phase in the form of ethyl acetate: methanol: ammonia (80:10:10). Spotting detection was carried out  under  UV  light  at  λ  254  nm.  The  results  of  the  spots  obtained  were  compared  with  a  comparison standard. To ensure the results obtained are confirmed using the color reaction method.  The results of testing  of  27  samples  by  TLC  method  obtained  there  are  3  (three)  samples  of  herbal  medicine  giving positive results indicated by the similarity of Rf values with comparative standards. The results obtained were tested qualitatively with color reagents to strengthen the results.
Keywords: mefenamic acid, thin layer chromatography (TLC), Jamu Pegel Linu

## PENDAHULUAN
Jamu  pegal  linu  merupakan  salah  satu obat  tradisional  yang  banyak  dikonsumsi masyarakat  Indonesia  (Riyanti  dkk,  2013).
Penduduk  Indonesia  sebagian  besar  bermata pencaharian  dengan  mengandalkan  tenaga fisik,  sehingga  berdampak  timbulnya  pegal dan  linu  pada  tubuh  setelah  bekerja.  Untuk
mengurangi efek tersebut masyarakat mengkonsumsi  jamu  pegal  linu  yang merupakan obat tradisional dari Indonesia.
Jamu  sangat  aman  di  konsumsi  oleh masyarakat  jika  diproduksi  dan  digunakan dengan  tepat.  Namun,  seringkali  beberapa oknum  produsen  jamu  menambahkan  BKO ke  dalam  jamu  agar  efeknya  lebih  cepat berkhasiat.  Penambahan  BKO  tersebut bertentangan  dengan  aturan  Permenkes  No. 007  Tahun  2012  tentang  Registrasi  Obat Tradisional  pasal 7 menyatakan bahwa Obat tradisional dilarang mengandung bahan kimia obat  yang  merupakan  hasil  isolasi  atau sintetik berkhasiat obat. Salah satu BKO yang ditambahkan pada jamu pegel linu yaitu asam mefenamat.  BKO  ini  sering  ditambahkan pada jamu pegal linu karena mempunyai efek analgesik atau dapat mengurangi/ menghilangkan  rasa  nyeri.  Oleh  karena  itu, efek  BKO  tersebut  sesuai  dengan  khasiat jamu  pegel  linu  untuk  menghilangkan  pegal dan linu pada badan.
Penambahan
BKO tersebut meningkatkan  aktivitas  dari  obat  sehingga masyarakat  gemar  untuk  mengkonsumsinya. Penggunaan  asam  mefenamat  yang  tidak terkontrol  dapat  menyebabkan  risiko  bahaya yang  secara  umum  adalah  risiko  gangguan kesehatan  serius,  terutama  pada  lambung, jantung,  ginjal,  hati  dan  bisa  berujung kematian  (Sidoretno  dkk,  2018).  Beberapa efek merugikan penambahan asam mefenamat  yang  lain  berdasarkan  Public Warning/Peringatan  BPOM  RI  No.  KH. 00.01.43.2397  tanggal  4  Juni  2009  adalah diare,  ruam  kulit,  trombositopenia,  anemia hemolitik,  kejang,  dan  tukak  lambung. Menurut Pharmaceutical Press (2009), penggunaan asam mefenamat yang berlebihan  akan  berkaitan  dengan  toksisitas pada  sistem  saraf  pusat  (Central  Nervous Systems)  seperti  kejang  ataupun  koma, sehingga penambahan asam mefenamat pada jamu pegal linu perlu dilakukan pengawasan dengan  baik  oleh  pihak  pemerintah  maupun swasta.
Asam  mefenamat  pada  jamu  pegel  linu dapat  di  deteksi  menggunakan  metode Kromatografi  lapis  tipis  (KLT).  Metode  ini digunakan  karena  tingkat  selektifitas  yang tinggi,  tidak  memerlukan  peralatan  canggih dan  sederhana.  Prinsip  analisa  metode  ini yaitu pemisahan senyawa berdasarkan tingkat kepolaran  sehingga  dapat  digunakan  untuk mengindentifikasi  senyawa-senyawa  yang memiliki kepolaran yang hampir sama. Untuk memperkuat  hasil  dilakukan  deteksi  secara kualitatif  menggunakan  pereaksi  warna. Pereaksi  yang  digunakan  yaitu  FeCl3, Vitallin-morin dan Fenolftalein (PP).
Di wilayah Pekalongan tingkat peredaran dan  konsumsi  jamu  pegel  linu  cukup  tinggi, sehingga beberapa oknon produsen memanfaatkan  kondisi  tersebut  dengan memalsukan produk jamu dengan ditambahkan BKO. Pada Pasaran sering kali di  jumpai  beberapa  produk  jamu  yang memiliki  kemasan  yang  berbeda  dengan merek aslinya, sehingga dalam penelitian ini juga  dilakukan  Uji  deskriptif  yang  meliputi kemasan,  ijin  edar,  keseragaman  bobot  dan organoleptis.  Berdasarkan  uraian  tersebut diperlukan  pengawasan  oleh  berbagai  pihak untuk membantu pemerintah, agar masyarakat  terhindar  dari  bahaya  konsumsi jamu  pegel  linu  yang  mengandung  asam mefenamat.  Tujuan  Penelitian  ini  dilakukan untuk  mendeteksi  kandungan  BKO  Asam mefenamat  didalam  sediaan  jamu  pegel  linu yang beredar di wilayah Pekalongan.

## METODE PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah chamber/bejana  kromatografi  20  x  20  cm (CAMAG®), lampu UV 254 (Argatama Lab), neraca  analitik  (Shimadzu®),  water  bath (Memmert®).
Bahan  yang  digunakan  adalah  akuades (PT. Brataco), ammonia (PT. Brataco), asam mefenamat  (Baoji  Tianxin  Pharmaceutical), aseton  (PT.  Brataco),  etanol  (PT.  Brataco), etil asetat (PT. Brataco), FeCl3 (PT. Brataco), Fenolftalein  (Merck®),  KOH  (PT.  Brataco),
metanol  (PT.  Brataco),  silika  gel  F254 (Merck®), dan jamu pegel linu yang beredar di Wilayah Pekalongan.

## Pengambilan sampel
Dua puluh tujuh sampel jamu pegel linu yang beredar di Wilayah Pekalongan di ambil menggunakan  Teknik  Purposive  sampling. Pengambilan sampel dilakukan pada warung jamu, depot jamu seduh, dan toko jamu yang tersebar di Wilayah Pekalongan.

## Uji deskriptif

## Kemasan
Dilakukan  dengan  melihat  kelengkapan informasi yang ada di produk meliputi nama jamu/  nama  dagang,  komposisi,  bentuk sediaan,  berat  bersih  (isi),  dosis  pemakaian, khasiat, kadaluwarsa, nomor ijin edar, nomor kode produksi, logo jamu, dan nama industri yang membuat.

## Ijin edar
Dilakukan  pengecekan  nomor  ijin  edar yang  tertera  pada  kemasan  jamu  di  halaman web
Badan POM RI
(https://cekbpom.pom.go.id).

## Keseragaman bobot
Dilakukan  dengan  melakukan  dengan cara menimbang satu per satu kemasan jamu sesuai dengan peraturan BPOM No. 12 Tahun 2014  mengenai  persyaratan  mutu  obat tradisional.

## Organoleptis
Dilakukan  dengan  melihat  kesesuaian keadaan  fisik  produk  jamu  yang  diproduksi dengan  keadaan  fisik  produk  jamu  tersebut secara  umum  meliputi  bentuk,  bau,  rasa  dan warna.

## Preparasi sampel
Prosedur  preparasi  sampel  dilakukan menggunakan metode preparasi sampel yang dikembangkan oleh Hayun dan Karina (2016) yang  telah  dimodifikasi,  sebagai  berikut: ditimbang 500 mg sampel serbuk jamu pegal linu  kemudian  dimaserasi  dengan  etanol  10 mL  selama  10  menit.  Setelah  itu  disaring, filtrat  yang  diperoleh  di  uji  secara  KLT  dan pereaksi warna.
Prosedur analisis kualitatif asam mefenamat menggunakan KLT
Hasil  preparasi  sampel  ditotolkan  pada plat silica gel F254 kemudian di elusi dengan fase gerak etil asetat:metanol:amonia (80:10:10). Hasil elusi diamati dibawah sinar UV  254  nm.  Nilai  rf  dari  sampel dibandingkan dengan nilai rf baku pembanding asam mefenamat.
Prosedur analisis kualitatif asam mefenamat dengan pereaksi warna
Pengujian  Reaksi  dengan  Fenolftalein (PP), 1 mL sampel direaksikan dengan 1 tetes larutan  PP.  Hasil  diamati  dan  dicatat, kemudian ditambahkan 3-5 tetes 0,1 N KOH dalam etanol. Dilakukan pengamatan terhadap hasil reaksi.
Pengujian  Reaksi  dengan  FeCl3,  1  mL sampel  direaksikan  dengan  1  tetes  larutan FeCl3 10%. Dilakukan pengamatan terhadap hasil reaksi.
Reaksi  dengan  Vitali-Morin,  5  tetes sampel  direaksikan  dengan  0,5  mL  HNO3 pekat  dalam  cawan  porselen.  Kemudian keringkan  diatas  water  bath.  Setelah  kering ditambah  dengan  5  mL  aseton  dan ditambahkan kurang lebih 1 mL 0,1 N KOH dalam etanol sampai timbul warna. Dilakukan pengamatan terhadap hasil reaksi.
Pada  uji  dengan  pereaksi  warna,  hasil dibandingkan dengan baku pembanding asam mefenamat. Jika sampel dan baku pembanding  memberikan  hasil  yang  sama, maka sampel dikatakan positif.

## Analisis data
Analisa data dilakukan dengan beberapa tahapan.  Pertama  analisis  data  secara deskriptif meliputi karakteristik kemasan, izin edar,  keseragaman  bobot,  dan  organoleptis. Data  disajikan  dalam  bentuk  persentase grafik. Kedua, analisis deteksi KLT dilakukan dengan  mengamati  bercak  yang  dihasilkan dibawah sinar UV 254 nm. Kemudian, bercak yang diperoleh diberi tanda dan di hitung nilai Rf  (Retardation  factor).  Nilai  Rf  yang diperoleh dibandingkan dengan nilai Rf baku pembanding (kontrol positif). Faktor retardasi solut (Rf) didefinisikan sebagai berikut:
Rf =     Jarak yang ditempuh solut Jarak yang ditempuh fase gerak
Ketiga,  dilakukan  analisa  terhadap pereaksi  warna  untuk  memperkuat  hasil Analisa KLT, dilihat perubahan warna sampel dibandingkan dengan baku.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Jamu merupakan obat tradisional Indonesia yang dibuat dari bahan alami secara turun-temurun berdasarkan pengalaman. Produk  jamu  yang  dijual  dipasaran  ada beberapa macam, salah satu yang disukai oleh masyarakat adalah jamu pegal linu. Menurut Wahyuni dan Sujono (2004), jamu pegal linu merupakan salah satu produk obat tradisional yang banyak diminati oleh masyarakat karena memiliki  kegunaan  untuk  menghilangkan pegal linu, nyeri otot dan tulang, memperlancar  peredaran  darah,  memperkuat daya  tahan  tubuh  dan  menghilangkan  sakit seluruh badan. Menurut Katno (2008) dalam Ahmad  (2012)  terdapat  beberapa  kelebihan tanaman obat dan obat tradisional dibandingkan dengan obat-obat modern yaitu efek sampingnya relatif kecil jika digunakan secara tepat.
Asam mefenamat memiliki efek menghilangkan nyeri atau inflamasi. Berdasarkan Drug  Information  Handbook , dosis  asam  mefenamat  yang  biasa  diberikan sebagai obat anti nyeri adalah 500 mg diawal kemudian  250  mg  tiap  4  jam  bila  perlu  dan maksimal 1 minggu. Biasanya jamu pegel linu ditambahkan asam mefenamat karena efeknya  menghilangkan  anti  nyeri.  Menurut Gitawati  pada  tahun  2013,  40%  pengguna jamu  pegel  linu  mempunyai  kecenderungan untuk  terus  mengkonsumsi  jamu  pegel  linu secara  teratur  dalam  rentang  waktu  yang lama.  Penggunaan  asam  mefenamat  yang kurang  tepat  dapat  menimbulkan  efek samping  merugikan,  berdasarkan  Public Warning/Peringatan  BPOM  RI  No.  KH. 00.01.43.2397  tanggal  4  Juni  2009  adalah diare,  ruam  kulit,  trombositopenia,  anemia hemolitik, kejang, dan tukak lambung.
Untuk  mengetahui  adanya  kandungan asam  mefenamat  dalam  sampel  jamu  pegel linu,  dilakukan  identifikasi  kandungan  asam
mefenamat menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Metode ini digunakan  secara  luas  dalam  identifikasi senyawa  obat  dan  metode  yang  selektif, akurat,  cepat  dan  sederhana  (Gandjar  & Rohman,  2007).  Untuk  memastikan  hasil identifikasi  sampel  dilakukan  uji  tambahkan dengan mereaksikan sampel dengan pereaksi warna  yaitu  pereaksi  FeCl3,  pereaksi  Fenol Ftalein (PP) dan pereaksi Vitalin Morin.
Dalam menyari kandungan asam mefenamat  pada  jamu  pegel  linu  dilakukan proses  ektraksi  padat-cair  dengan  metode maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  70%. Penggunaan  pelarut  etanol  sebagai  cairan penyari  karena  absorbsinya  baik  serta  zat pengganggu  yang  larut  terbatas  (Pine  et  al, 2011).
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mendeteksi adanya kandungan asam mefenamat  yang  ditambahkan  pada  produk jamu pegel linu. Pada penelitian ini diperoleh sampel sejumlah 27 sampel yang didapatkan dari kedai dan toko jamu yang menjual jamu pegel  linu  di  wilayah  Pekalongan.  Sampel yang diperoleh diberi kode abjad dari A – AA, dan  dilakukan  pemeriksaan  kemasan  yang meliputi nama jamu/ nama dagang, komposisi, bentuk sediaan, berat bersih (isi), dosis  pemakaian,  khasiat,  kadaluwarsa, nomor  ijin  edar,  nomor  kode  produksi,  logo jamu,  dan  nama  industri  yang  membuat. Tujuan  dilakukan  pemeriksaan  ini  untuk mengetahui  kesesuaian  kemasan  produk dengan  persyaratan  yang  harus  dicantumkan pada kemasan menurut BPOM.
Proses pengambilan sampel pada penelitian  ini  dilakukan  pada  tanggal  6-7 Februari 2019 di wilayah Pekalongan. Proses pengambilan  sampel  dilakukan  dengan  cara mengambil  sampel  yang  memenuhi  kriteria inklusi, yaitu jamu pegal linu bentuk sediaan serbuk  atau  pil,  yang  mempunyai  ijin  edar yang  terdaftar  ataupun  tidak  di  Badan Pengawas  Obat  dan  Makanan  Republik Indonesia (Badan POM RI).
Hasil pemeriksaan kemasan menunjukkan  22,22%  dari  27  sampel  tidak
mencantumkan  persyaratan  secara  lengkap yaitu  berat  bersih,  tanggal  kadaluarsa  dan kode produksi. Pertama, sampel dengan kode G, H, L, M, dan S tidak mencantumkan berat bersih. Kedua, sampel dengan kode P dan W tidak  mencantumkan  tanggal  kadaluarsa produk jamu. Terakhir, sampel kode G, H, P, Q,  W,  dan  X  tidak  mencantumkan  kode produksinya.
Pemeriksaan kemasan selanjutnya dilakukan  pengujian  ijin  edar.  Uji  ini dilakukan untuk menetapkan apakah ijin edar yang  terdapat  pada  kemasan  terdaftar  pada Badan  POM  RI,  nomor  ijin  edar  tidak terdaftar  pada  Badan  POM  RI,  atau menggunakan ijin edar dari produk jamu lain. Proses  pengujian  ini  dilakukan  dengan  cara pengecekan  nomer  ijin  edar  yang  tercantum pada kemasan jamu pada halaman web Badan POM  RI  (https://cekbpom.pom.go.id).  Hasil dari  pengujian  ijin  edar  pada  Gambar  1 menunjukkan 37% sampel tidak memiliki ijin edar, dan 63% sampel terdaftar pada BPOM. Sampel  jamu  yang  tidak  memiliki  ijin  edar dari  BPOM,  termasuk  pada  kategori  produk ilegal  yang  beredar  di  pasaran.  Hal  ini dikarenakan  produk-produk  tersebut  beredar tanpa pengawasan atau ijin dari BPOM selaku badan pengawas resmi dari pemerintah.
Gambar 1. Hasil pengujian ijin edar sampel
Bentuk  sediaan  jamu  yang  ditemukan secara  umum  berbentuk  serbuk.  Meski demikian, bentuk sediaan jamu yang beredar juga  terdapat  dalam  bentuk  yang  berbeda, yaitu kombinasi bentuk serbuk dan pil seperti pada  sampel  dengan  kode  I  dan  K.  Hal  ini terjadi karena sediaan jamu tersebut melakukan  proses  penjualan  dengan  sistem
paket jamu sehingga bentuk dari sediaan jamu yang ada berbeda-beda bentuknya.
Sebelum  dilakukan  pengujian  dilakukan uji keseragaman bobot untuk masing-masing sampel dengan cara menimbang satu per satu kemasan  jamu  sesuai  dengan  peraturan BPOM  No.  12  Tahun  2014  mengenai persyaratan mutu obat tradisional. Keseragaman  bobot  untuk  serbuk  simplisia memiliki syarat, dari 10 kemasan primer tidak lebih  dari  2  kemasan  yang  masing-masing bobot isinya menyimpang dari kurang lebih 5 %  untuk  bobot  rata-rata  serbuk  lebih  dari  6 gram, dan tidak satu kemasan pun yang bobot isinya  menyimpang dua  kali lipat  dari bobot rata-rata  serbuk.  Hasil  penyimpangan  bobot yang  diperoleh  menunjukan  bahwa  sampel jamu  memenuhi  persyaratan  keseragaman bobot,  kecuali  sampel  dengan  kode  B,  D,  E dan  F  menyimpang  lebih  dari  5  %.  Hal  ini tentu  saja  bertentangan  dengan  KepMenKes RI  No.661/MENKES/SK/VII/1994  tentang Persyaratan  Obat  Tradisional,  dimana  pada peraturan tersebut sediaan serbuk jamu  yang diproduksi diharapkan mempunyai keseragaman  bobot.  Keseragaman  bobot digunakan  untuk  menetapkan  keseragaman dosis yang dapat memberikan efek terapi. Jika tidak  terdapat  bobot  netto  maka  tidak  ada jaminan  keseragaman  dosis  dalam  sedian jamu tersebut.
Pemeriksaan  selanjutnya  adalah  uji organoleptis untuk melihat kesesuaian keadaan  fisik  produk  jamu  yang  diproduksi dengan  keadaan  fisik  produk  jamu  tersebut secara  umum.  Hasil  uji  ini  dapat  juga digunakan  untuk  orientasi  awal  terhadap bahan tambahan lain yang ditambahkan selain bahan jamu pada produk jamu. Pengujian ini secara  umum  bersifat  subjektif  atau  hasil pengujian  yang  ada  dapat  bervariasi  antara satu  orang  dengan  yang  lainnya.  Perbedaan yang ada tersebut lebih dikarenakan pengalaman  ataupun  tingkat  sensitivitas indera  yang  dimiliki  tiap-tiap  orang  yang saling  berbeda.  Meskipun  hasil  pengujian organoleptis  bersifat  subjektif,  namun  hasil yang diperoleh dapat dipertanggungjawabkan
Terdaftar Tidak terdaftar 17 10
kebenarannya. Sampel yang terdapat campuran  BKO  secara  organoleptis  dapat dilihat secara fisik bentuk serbuk produk yang berbeda. Hasil pengujian organoleptis meliputi  warna,  bentuk,  bau  dan  rasa  dapat dilihat  pada  masing-masing  Gambar  2. Berdasarkan hasil organoleptis yang dilakukan,  dapat  disimpulkan  bahwa  sampel dengan  kode  J  memiliki  warna,  bentuk,  bau dan  rasa  yang  berbeda  dengan  sampel  yang lain terdapat serbuk abu-abu berbentuk granul sehingga  dapat  dicurigai  adanya  campuran BKO dalam sampel tersebut.
Pada  penelitian  ini  dilakukan  pengujian Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  untuk mengetahui adanya kandungan asam mefenamat  pada  sampel.  KLT  merupakan metode  yang  paling  baik  untuk  memisahkan komponen  kimia  yang  bercampur  dalam sampel  (Wonorahardjo,  2016).  Fase  gerak yang digunakan untuk deteksi asam mefenamat pada jamu adalah etil asetat:metanol:amonia (80:10:10). Komposisi fase  gerak  ini  sebelumnya  telah  digunakan
oleh  Rusnaeni  dkk  (2016).  Pemilihan  fase gerak  tersebut  dikarenakan  asam  mefenamat merupakan  senyawa  non  polar  sehingga digunakan pelarut etil asetat yang mempunyai kesamaan  sifat  ( like  disolves  like ).  Menurut Gandjar  dan  Rohman  (2016),  penambahan asam etanoat atau amonia dapat meningkatkan solut-solut yang bersifat asam dan basa, sehingga amonia ditambahkan pada komposisi fase gerak. Selain itu, penambahan sedikit  pelarut  yang  bersifat  polar  ke  dalam pelarut non polar dapat meningkatkan nilai Rf secara  signifikan  sehingga  ditambahkan metanol.  Penggunaan  fase  gerak  yang berbeda  polaritas  ini  bertujuan  menahan gerakan  dari  elusi  yang  terjadi  sehingga pemisahan dapat menghasilkan resolusi yang baik dengan nilai rentang Rf 0,2-0,8.
Fase  diam  yang  telah  dielusi,  diamati bercaknya dibawah sinar UV 254, kemudian dihitung  nilai  Rfnya.  Hasil  Pengujian  KLT salah satu sampel yaitu Sampel J dapat dilihat pada Gambar 3. Pengujian dilakukan replikasi dan  repetisi  pada  sampel  sejumlah  3  kali
Gambar 2. Hasil Organoleptis warna (A), bentuk (B), bau (C) dan rasa (D) dari sampel jamu pegal linu
untuk memastikan hasil yang diperoleh.  Hasil perhitungan nilai Rf dapat dilihat pada Tabel 1. Nilai Rf dari seluruh sampel yang diperoleh dibandingkan dengan nilai Rf kontrol positif. Berdasarkan  hasil  tersebut,  dinyatakan  tiga sampel positif mengandung asam mefenamat dengan kode sampel J, O dan Y.
Untuk mempertegas hasil yang diperoleh dilakukan pengujian sampel terhadap pereaksi  warna  PP,  FeCl 3 dan  Vitali  Morin. Pengujian reaksi dengan PP dilakukan untuk mengetahui perkiraan derajat keasaman (pH) pada  sampel.  Pereaksi  PP  akan  membentuk larutan  tidak  berwarna  dalam  suasana  asam dan  berubah  warna  menjadi  warna  merah bilamana  derajat  keasaman  pada  larutan dalam suasana basa kuat atau pada range pH
8,3  sampai  10,0  (DepKes  RI,  1979).  Hasil pengujian dapat dilihat pada Gambar 4  yang menunjukkan  perubahan  warna  merah  pada baku  pembanding  dan  sampel  Y  sedangkan pada  kontrok  negatif  berwarna  kuning  dan sampel X berwarna kuning pucat.
Pengujian  reaksi  dengan  FeCl 3 ,  secara umum  sampel  yang  bereaksi  dengan  FeCl 3 akan  menghasilkan  perubahan  warna  larutan menjadi warna ungu karena membentuk suatu senyawa  ikatan  komplek  yang  memiliki warna ungu (Auterhoff dan Kofar, 1987). Hal ini  dikarenakan  atom  Fe  pada  FeCl 3 akan berikatan  dengan  atom oksigen  pada senyawa–senyawa dengan golongan fenol (F. Raschig-Ludwigshafer dalam Thesis Polakow, 1916). Hasil pengujian dapat dilihat
Keterangan: (1) Kontrol Negatif, (2) Kontrol Positif, (3) Sampel J Replikasi 1 Repetisi 1, (4) Sampel J Replikasi 1 Repetisi 2, (5) Sampel J Replikasi 1 Repetisi 3, (6) Sampel J Replikasi 2 Repetisi 1, (7) Sampel J Replikasi 2 Repetisi 2, (8) Sampel J Replikasi 2 Repetisi 3, (9) Sampel J Replikasi 3 Repetisi 1, (10) Sampel J Replikasi 3 Repetisi 2, dan (11) Sampel J Replikasi 3 Repetisi 3
Gambar 3. Hasil pengujian KLT Sampel J
Tabel 1. Hasil Perhitungan Nilai Rf No Kode Sampel Rf Baku Pembanding Rf Sampel Keterangan Hasil Bercak 1 Bercak 2 1 J 0,32 0,33 - Positif 2 L 2,20 1,69 6,22 Negatif 3 O 2,3 2,3 2,6 Positif 4 P 2,3 6 - negatif 5 X 1,95 2,95 - negatif 6 Y 1,95 1,91 - positif
pada Gambar 5 yang menunjukkan perubahan warna ungu kehitaman pada baku pembanding  dan  sampel  sedangkan  pada kontrok  negatif  berwarna  kuning  pucat. Perubahan  warna  tersebut  menunjukkan bahwa sampel O mengandung asam mefenamat.
Pengujian  reaksi  dengan  Vitali-Morin, sampel  akan  mengalami  perubahan  warna larutan  menjadi  warna  merah  tua.  Hasil pengujian dapat dilihat pada Gambar 6  yang menunjukkan  perubahan  warna  merah  tua pada  baku  pembanding  dan  sampel  J sedangkan  pada  kontrol  negatif  berwarna
Keterangan: (-) = Kontrol Negatif, (+) = Kontrol Positif, X = Sampel X, Y = Sampel Y, dan 1-3 = Replikasi 1-3
Gambar 4. Hasil pengujian PP sampel Y
Keterangan: (-) = Kontrol Negatif, (+) = Kontrol Positif, O = Sampel O, P = Sampel P, dan 1-3 = Replikasi 1-3
Gambar 5. Hasil pengujian FeCl 3 Sampel O dan P
Keterangan: (1) Kontrol Negatif, (2) Kontrol Positif, (3) Sampel J Replikasi 1, (4) Sampel J Replikasi 2, dan (5) Sampel J Replikasi 3
Gambar 6. Hasil pengujian Vitali-Morin sampel J
kuning.  Hal  tersebut  menunjukkan  bahwa sampel J mengandung asam mefenamat.
Kesimpulan akhir hasil pengujian reaksi warna dapat dilihat pada Tabel 2. Berdasarkan hasil pengujian reaksi warna dapat disimpulkan bahwa sampel dengan kode J, O dan Y positif mengandung asam mefenamat.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  maka  dapat  disimpulkan  bahwa
dari 27 sampel jamu pegel linu yang diujikan terdapat  3  sampel  yang  diidentifikasi  positif mengandung asam mefenamat.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih  kepada  Fakultas  Farmasi dan
UPT laboratorium
Universitas Pekalongan yang telah memfasilitasi penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Gandjar, I.G., & Rohman, A. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada
Pine,  A.T.,  Alam,  G.,  Attamin,  F.  2011.  Standarisasi  mutu  dan  ekstrak  daun  Gedi (Abelmoschus  manihot  L)  Medik)  dan  uji  efek  antioksidan  dengan  metode  DPPH. Makassar, Universitas Hasanuddin.
Ahmad,  F.A.,  2012,  Analisis  Penggunaan  Jamu  untuk  Pengobatan  Pada  Pasien  di  Klinik Saintifikasi Jamu Hortus Medicus Tawangmangu Tahun 2012, Tesis, 11, Program Pasca Sarjana  Ilmu  Kesehatan  Masyarakat,  Fakultas  Kesehatan  Masyarakat,  Universitas Indonesia, Depok.
Auterhoff, H., Kovar, K., 1987, Identifikasi Obat, 32, 98, Penerbit ITB, Bandung.
BPOM  R.I.,  2006,  Bahaya  Bahan  Kimia  Obat  (BKO)  Yang  Dibubuhkan  Kedalam  Obat Tradisional
(Jamu), available at: https://www.pom.go.id/new/view/more/berita/144/BAHAYA-BAHAN-KIMIA-OBAT-- BKO--YANG-DIBUBUHKAN-KEDALAM-OBAT-TRADISIONAL--JAMU-.html, 19/11/2019, 20:00:09 WIB.
BPOM R.I., 2009, Public Warning/Peringatan No. KH.00.01.1.43.2397 tanggal  4 Juni  2009 tentang Obat Tradisional dan Suplemen Makanan Mengandung Bahan Kimia Obat, Balai Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia, Jakarta.
DepKes  R.I.,  1979,  Farmakope  Indonesia,  Edisi  III,  675,  Departemen  Kesehatan  Republik Indonesia, Jakarta.
Gandjar,  I.G.,  Rohman,  A.,  2016,  Kimia  Farmasi  Analisis,  1,  353-361,  Pustaka  Pelajar, Yogyakarta.
Tabel 2. Pengujian Reaksi Warna No Kode Sampel Uji Hasil PP+KOH FeCl 3 Vitali Morin 1 J (+) Merah muda (+) Ungu (+) Merah Positif 2 O (+) Merah muda (+) Ungu (+) Merah Positif 3 Y (+) Merah muda (+) Ungu (+) Merah Positif
Gitawati, R., 2013, Analisis Adulterasi Jamu Pegal Linu yang Diperoleh Dari Pasar Di Jakarta dan Sekitarnya, 269-274, Buletin Penelitian Sistem Kesehatan, Vol. 16 (3).
Hayun,  Karina,  M.A.,  2016  Pengembangan  dan  Validasi  Metode  KLT-Densitometri  untuk Analisis secara simultan Parasetamol, Asam Mefenamat dan Ibuprofen dalam Jamu ”Pegal Linu”, 152, Jurnal Sains Farmasi & Klinis, Vol. 2 (2).
MenKes R.I., 1994, Persyaratan Obat Tradisional, 4, Menteri Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Polakow, A. H., 1916, Studies In Qualitative Organic Analysis, Thesis, 6, College of Liberal Arts and Sciences, University of Illinois, Illinois.
Pharmaceutical Press, 2009, Martindale The Complete Drug Reference, 80, 36th edition, RFS Publication, China.
Riyanti,  S.,  Sutardi,  O.I.,  Ratnawati,  J.,  2013,  Pemantauan  Kualitas  Jamu  Pegal  Linu  Yang Beredar Di Kota Cimahi, 45-48, Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi, 1 (1).
Rusnaeni, Sinaga D.I., Lanuru F., Payungallo, I.M., 2016, Identifikasi Asam Mefenamat dalam Jamu Rematik Yang Beredar di Distrik Heram Kota Jayapura, Papua, 84-91, Pharmacy, Vol. 13 (1).
Sidoretno, W.M., Rz, I.O., 2018, Edukasi Bahaya Bahan Kimia Obat Yang Terdapat Di Dalam Obat Tradisional, 41, Jurnal Pengabdian Masyarakat, Vol. 1 (2).
Wahyuni, A.S., Sujono, T.A., 2004, Studi Aktivitas Daya Analgetik Jamu Pegal Linu, 21-32, Jurnal Penelitian Sains&Teknologi, Vol. 5 (1).
Wonorahardjo, S., 2016, Metode-Metode Pemisahan Kimia Sebuah Pengantar, 103, 127, 186, PT. Indeks, Jakarta.