## Abstrak
Jerawat  merupakan  penyakit  inflamasi  kronis  pada  kulit,  yang  diperparah  oleh  infeksi bakteri  seperti Propionibacterium  acnes dan Staphylococcus  epidermidis .    Banyaknya kasus  resistensi  bakteri  menyebabkan  perlunya  antibakteri  alternatif,  antara  lain  dari tumbuhan  kapuk  ( Ceiba  pentandra L.).  Penelitian  ini  bertujuan  memperoleh  sediaan krim  dengan  bahan  aktif  ekstrak  etanol  daun  kapuk  yang  efektif  terhadap  bakteri penyebab  jerawat  dan  stabil  dalam  penyimpanan.  Penelitian  dilakukan  melalui  tahap determinasi tumbuhan dan penyiapan simplisia, ekstraksi simplisia, penapisan fitokimia ekstrak, pengujian aktivitas antibakteri ekstrak, penentuan Konsentrasi Hambat Tumbuh Minimum  (KHTM)  ekstrak,  orientasi  basis  krim,  formulasi  dan  pengujian  kualitas  fisik sediaan krim, pengujian  aktivitas antibakteri sediaan krim selama penyimpanan  dan uji banding  aktivitas  antibakteri  sediaan  krim  terhadap  basis  dan  ekstrak.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  kapuk  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap S.  epidermidis ATTC  12228  dan P.  acnes isolat  klinik  dengan  KHTM  sebesar  0,125% dan  0,078%  b/v.  Sediaan  krim  diformulasi  menggunakan  basis  F02  dengan penambahan ekstrak sebesar dua, tiga dan empat kali KHTM.  Formula 1 (krim dengan 2x  KHTM  ekstrak)    merupakan  sediaan  krim  dengan  kualitas  fisik  terbaik,  karena tampilan  organoleptis,  pH  dan  viskositasnya  stabil  selama  30  hari  pada  suhu  kamar serta tidak mengalami pemisahan fase selama satu tahun. Formula 3 (krim dengan 4x KHTM  ekstrak)  merupakan  sediaan  krim  dengan aktivitas antibakteri  terbaik,  terutama terhadap P.  acnes isolat  klinik.  Dari  hasil  penelitian  ini  diperoleh  formula  krim  dengan kandungan ekstrak etanol daun kapuk yang efektif  terhadap bakteri penyebab jerawat dan stabil selama penyimpanan.
Kata kunci: Jerawat, KHTM, Propionibacterium acnes , Staphylococcus epidermidis

## Pendahuluan
Jerawat ( acne vulgaris ) merupakan penyakit inflamasi kronis pada kulit yang umumnya terjadi  pada  remaja,  namun  tidak  jarang  berlanjut  sampai  dewasa.  Jerawat  dapat mengganggu penampilan dan menurunkan kualitas hidup pasien, karena menyebabkan kecemasan, depresi,  bahkan bunuh diri 1 . Beberapa bakteri dapat memperburuk kondisi jerawat,  diantaranya Propionibacterium  acnes ( P.  acnes )  dan Staphylococcus epidermidis ( S. epidermidis ) 2 .
Majalah Farmasetika, 6 (2) 2021, 138-151 https://doi.org/10.24198/mfarmasetika.v6i2.33092
Artikel Penelitian
Formulasi dan Pengujian Aktivitas Antibakteri Krim Ekstrak Etanol Daun Kapuk ( Ceiba pentandra L.)
e-ISSN : 2686-2506
Tiana Milanda *,1 , Richie Agusta Iwan Chandra 2 , Alam Jenuin Dwipratama 1
1 Departemen Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran, Jawa Barat, Indonesia
2 Departemen Farmasetika dan Teknologi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran, Jawa Barat, Indonesia *E-mail: tiana.milanda@unpad.ac.id
(Submit 15/4/2021, Revisi 11/5/2021, Diterima 16/5/2021, Terbit 25/5/2021)
P.  acnes merupakan  bakteri batang  Gram  negatif,  yang  merupakan  flora  normal  pada kulit. Bakteri ini berubah menjadi patogen, jika berkembang biak secara anaerob dalam pori  dan  folikel  kulit  dengan  menggunakan  sebum  trigliserida  sebagai  nutrisinya 3 . S. epidermidis merupakan bakteri kokus Gram positif yang bersifat anaerob fakultatif serta menyebabkan infeksi superfisial pada kelenjar sebaseus 2 .
Antibiotika  oral  atau  senyawa  keratolitikum  sering  digunakan  untuk  mengurangi hiperkeratinisasi,  kolonisasi  bakteri,  produksi  sebum  dan  inflamasi  pada  jerawat 4 . Antibiotika  oral,  seperti    golongan  tetrasiklin,  trimetoprim-sulfametoksazol  serta makrolida  cukup    efektif  untuk  mengobati  jerawat 5 .  Namun  penggunaan  antibiotik secara  rutin  sering  menyebabkan  efek  samping,  seperti  gangguan mood ,  kulit  kering, iritasi kulit dan resistensi antibiotik 6 . Penelitian terdahulu menunjukkan adanya berbagai galur P.  acnes dan S.  epidermidis yang  resisten  terhadap  azitromisin,  eritromisin, penisilin-G,  tetrasiklin,  klindamisin,  amikasin,  trimetoprim-sulfametoksazol  dan rifampisin 2 .  Banyaknya  galur  resisten  tersebut  menyebabkan  perlunya  pencarian antibiotik alternatif, antara lain dari  berbagai tumbuhan 7 .
Kapuk ( Ceiba pentandra L.) adalah tumbuhan tingkat tinggi yang banyak ditemukan di hutan  hujan  tropis.  Ekstrak  daun  dan  kulit  batang  tumbuhan  ini  digunakan  secara tradisional  untuk    mengobati  malaria,  diabetes  melitus,  gonore,  sifilis,  infeksi  saluran cerna,  asma  dan  penyembuhan  luka 8 .  Ekstrak  air  dan  etanol  daun  kapuk  diketahui memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli, Pseudomonas aeruginosa dan Klebsiella pneumoniae 8,9 . Penelitian lainnya menunjukkan  aktivitas  antibakteri  berbagai  ekstrak  batang  dan  daun  kapuk  terhadap Mycobacterium  fortuitum ATCC  684, Mycobacterium  smegmatis ATCC  19420  dan Mycobacterium abcessus ATCC 19240 10 . Daun kapuk diketahui mengandung berbagai senyawa  alkaloid,  flavonoid,  glikosida,  protein,  karbohidrat,  gula  tereduksi,  aglikon steroidal, tanin, saponin, vitamin A, vitamin E, saponin, poliuronoid,  polifenol, tanin dan plobatanin 8 .
Sampai  saat  ini,  belum  ada  penelitian  mengenai  aktivitas  antibakteri  daun  kapuk terhadap P.  acnes dan S.  epidermidis .  Pada  penelitian ini  dilakukan  formulasi  sediaan krim yang mengandung ekstrak etanol daun kapuk dan pengujian aktivitasnya terhadap kedua bakteri tersebut. Sediaan krim dipilih, karena memberi kelembaban dan memiliki waktu  kontak  yang  lebih  lama  dengan  kulit,  sehingga    senyawa  antibakteri  yang terkandung di dalamnya dapat memberikan aktivitas yang lebih baik. Viscolam AT 100P, yang merupakan salah satu polimer golongan poliakrilat, dipilih sebagai  pengental dan emulgator.  Dari  hasil  penelitian  ini  diharapkan  diperoleh  formula  krim  dengan kandungan  ekstrak  daun  kapuk  yang  efektif  mengatasi  jerawat  dan  stabil  dalam penyimpanan.

## Metode

## Alat
Alat  yang  digunakan  berupa  neraca  analitik  (Mettler  Toledo  AL204,  Switzerland), maserator, rotary  evaporator (Buchi  Rotavapor  R-300,  Switzerland),  penangas  air (Memmert,  Jerman),  inkubator  (Sakura  IF-4,  Jepang),  mikropipet  volume  10-100  µL (Biohit  Proline,  Finlandia),  mikropipet  volume  100-1000  µL  (Socorex  Acura  825, Switzerland),  mikropipet adjustable  8-channel 50-300  µL  (Eppendorf,  Jerman),  tip mikropipet  biru  dan  kuning,  96- well  microtiter  plates (Iwaki,  Jepang),  oven  (Memmert 400-800, Jerman), lemari pendingin,  pH meter 744 (Methorm AG, USA), Programable Viscometer Brookfield DV II+ Pro (Brookfiled, USA), mikrosentrifugator (Sigma, Jerman) dan  alat-alat  yang  umum  digunakan  di  Laboratorium  Farmasi  Bahan  Alam, Laboratorium Mikrobiologi serta Laboratorium Farmasetika.

## Bahan
Daun  kapuk  segar  diperoleh  dari  Indramayu,  Jawa  Barat.  Bakteri  uji S.  epidermidis ATTC  12228  diperoleh  dari  Laboratorium  Diagnostik  PT.  Biofarma,  Bandung,  Jawa Barat  dan P.  acnes isolat  klinik  dari  Laboratorium  Mikrobiologi,  Universitas  Jendral Ahmad  Yani,  Cimahi,  Jawa  Barat.  Medium  yang  digunakan  berupa Mueller  Hinton Agar/MHA (Oxoid) dan Mueller Hinton Broth/MHB (Oxoid).
Bahan  kimia  lain  yang  digunakan  terdiri  dari  etanol  95%  (Bratachem),  natrium  klorida (Merck),  kloroform  (Merck),  amonia  (Merck),  amil  alkohol  (Merck),  eter  (Merck),  asam klorida  (Merck),  asam  sulfat  (Merck),  pereaksi  Mayer  (Bratachem),  pereaksi Dragendorff  (Bratachem),  pereaksi  Liebermann-Burchard  (Bratachem),  serbuk magnesium  (Bratachem),  kalium  hidroksida  (Merck),  larutan  standar  Mc  Farland  0,5, besi  (III)  klorida  (Merck),  gelatin  (Bratachem),  vanilin  (Bratachem),  dimetil sulfoksida/DMSO  (Merck),  natrium  viscolam  AT  100P  (Nardev),  propilenglikol (Bratachem), metil paraben (Bratachem), propil paraben (Bratachem) dan air suling.

## Prosedur Rinci

## 1. Determinasi Tumbuhan dan Penyiapan Simplisia
Beberapa  bagian  tumbuhan  kapuk  dideterminasi  di  Laboratorium  Taksonomi Tumbuhan,  Jurusan  Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam, Universitas Padjadjaran, Sumedang, Jawa Barat. Daun kapuk segar disortasi, dicuci dengan air mengalir dan dirajang sampai halus.

## 2. Ekstraksi Simplisia
Daun  kapuk  diekstraksi  menggunakan  metode  maserasi 11 .  Sebanyak  200  g rajangan daun kapuk direndam dalam 1 L etanol 95% selama 3 x 24 jam. Setiap 24 jam ekstrak ditampung,  lalu pelarut diganti dengan pelarut baru dalam jumlah sama. Pelarut  diuapkan  menggunakan rotary evaporator pada  suhu 40 o C,  lalu  dipekatkan di  atas  penangas  air  pada  suhu  60 o C.  Ekstrak  kental  daun  kapuk  diamati  secara organoleptis, lalu ditentukan rendemennya.

## 3. Penyiapan Suspensi Bakteri Uji
S. epidermidis ATTC 12228 dan P. acnes isolat klinik ditumbuhkan pada MHA, lalu diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  18-24  jam.  Kedua  biakan  disuspensikan  dalam larutan  natrium  klorida  fisiologis.  Kekeruhan  suspensi  bakteri  disesuaikan  dengan kekeruhan larutan standar McFarland 0,5, yang setara dengan 1,5 x 10 8 CFU/mL 13 .

## 4. Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun kapuk ditentukan melalui metode difusi agar dengan  teknik  perforasi 13 .  Ekstrak  dilarutkan  dalam  DMSO  2%  v/v  untuk menghasilkan berbagai konsentrasi.
Sebanyak  20  µL  suspensi  bakteri  dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri,  lalu ditambahkan 20 mL MHA yang masih cair.  Cawan digoyang perlahan, lalu medium dibiarkan  memadat  pada  suhu  kamar.  Medium  dilubangi  menggunakan  perforator berdiamater  6  mm,  lalu    dimasukkan  50  µL  larutan  ekstrak.    Sebagai  kontrol, disiapkan cawan petri berisi MHA (kontrol negatif), MHA yang diinokulasi bakteri uji (kontrol positif) serta MHA yang diinokulasi DMSO 2% v/v (kontrol pelarut). Seluruh cawan diinkubasi pada suhu 37 o C selama 18-24 jam. Daerah hambat yang terbetuk di sekitar lubang, diukur menggunakan jangka sorong.

## 5. Penentuan KHTM Ekstrak
KHTM  ekstrak  etanol daun  kapuk ditentukan  dengan  metode  mikrodilusi 13 .  Larutan stok  ekstrak  disiapkan  dalam  dua  konsentrasi  yang  masih  mempunyai  aktivitas bakteri.  Suspensi  bakteri  uji  diencerkan  20  kali  dengan  larutan  natrium  klorida fisiologis, sehingga diperoleh inokulum yang setara dengan 5x10 6 CFU/mL
Kolom pertama sampai dua belas pada microplate diisi dengan 100 𝜇 L MHB. Kolom kedua  dan    ketiga  diisi  dengan  100 𝜇 L  larutan  stok  ekstrak,  lalu  campuran dihomogenkan  dengan  cara pipetting .      Pengenceran  bertingkat  dilakukan  dengan memipet  100  µL  dari  kolom  ketiga    ke  kolom  keempat,  lalu  selanjutnya  sampai kolom  ke  sebelas.  Sebanyak  100  µL  dari  kolom  kedua  dan  kesebelas  dibuang. Dengan  cara  ini,  maka  kolom  ketiga  berisi  larutan  ekstrak  dengan  konsentrasi tertinggi,  sedang  kolom  kesebelas  berisi  larutan  ekstrak  dengan  konsentrasi terendah.
Sebanyak 10 𝜇 L suspensi bakteri uji ditambahkan pada kolom ketiga sampai kolom ke  dua  belas.    Kolom  pertama  berfungsi  sebagai  kontrol  negatif,  kolom  kedua sebagai  kontrol  ekstrak,  sedangkan  kolom  kedua  belas  sebagai  kontrol  positif. Microplate ditutup  menggunakan  plastik  selofan,  lalu  diinkubasi  selama  18-24  jam pada  suhu  37 0 C.  Konsentrasi  terkecil  ekstrak  teraktif  yang  tetap  bening  (tidak  ada pertumbuhan bakteri) ditetapkan sebagai nilai KHTM.

## 6. Orientasi Basis Krim
Tiga  basis  krim  (F0 1 ,  F0 2 dan  F0 3 )  diformulasi  dengan  variasi  konsentrasi  natrium viscolam AT 100P (Tabel 1).  Air suling ditambahkan pada natrium viscolam AT 100P, lalu  ditambahkan  sedikit  demi  sedikit  propilenglikol,  metil  paraben  dan  propil paraben.  Campuran  diaduk  menggunakan mechanical  stirrer sampai  terbentuk emulsi minyak dalam air. Ketiga basis disimpan pada suhu kamar selama 7 hari, lalu diamati  perubahan  bentuk,  konsistensi,  warna,  dan  bau  setiap  hari  selama  satu minggu.  Basis  yang paling baik digunakan  sebagai basis  krim  untuk  formulasi  krim antijerawat dengan ekstrak kapuk.

## Tabel 1. Formula Basis Krim
7. Formulasi dan Pengujian Kualitas Fisik Sediaan Krim
Tiga  sediaan  krim  diformulasi  menggunakan  basis  terpilih  dengan  variasi penambahan ekstrak sebanyak 2, 3, dan 4 kali KHTM. Terhadap basis krim formula F0 2, ditambahkan ekstrak dengan konsentrasi: F1 (2 kali KHTM), F2 (3 kali KHTM) dan  F  3  (4  kali  KHTM).  Ekstrak  dilarutkan  dalam  beberapa  tetes  etanol  sebagai pelarut,  yang  telah  dicampur  dengan  propilen  glikol  sebagai cosovent .  Basis  krim terpilih  ditambahkan  sedikit  demi  sedikit  ke  campuran  tersebut,  sambil  diaduk menggunakan mechanical stirrer sampai terbentuk massa yang homogen. Sediaan krim dievaluasi selama 30 hari pada suhu kamar meliputi 15 : a.  Pengamatan Organoleptis
Pengamatan  organoleptis  dilakukan  terhadap  perubahan  bentuk,  tekstur,  warna dan bau krim pada hari ke-1, 3, 7, selanjutnya setiap minggu selama 30 hari.
b.  Pengamatan Perubahan pH
Sebanyak 1 g krim dilarutkan dalam 10 mL air suling, lalu  pH larutan diukur tiga kali  menggunakan  pH  meter.  Pengukuran  dilakukan  pada  hari  ke-1,  3,  7,  dan selanjutnya setiap minggu selama 30 hari.
c.   Pengamatan Perubahan Viskositas
Sebanyak 2 g krim ditempatkan dalam wadah pengujian. Pengukuran viskositas dilakukan  menggunakan  spindle  S-64  dengan  kecepatan  20  rpm.  Pengukuran dilakukan sebanyak tiga kali pada hari ke-1, 3, 7, dan selanjutnya setiap minggu selama 30 hari.
Komponen F0 1 (% b/v) F0 2 (% b/v) F0 3 (% b/v) Natrium viscolam AT 100P 5 10 15 Propilenglikol 10 10 10 Metil paraben 0,3 0,3 0,3 Propil paraben 0,6 0,6 0,6 Air suling sampai 100 100 100

## d.  Pengamatan Pemisahan Emulsi
Sebanyak  1  g  krim  disentrifugasi pada    kecepatan  2.500,  3.000  dan  3.750  rpm selama 5 jam di suhu kamar.  Pengamatan dilakukan terhadap pemisahan  fasa air dan fasa minyak.

## 8. Pengujian Aktivitas Antibakteri Sediaan Krim Selama Penyimpanan
Penentuan  aktivitas  antibakteri  dilakukan  terhadap  F1,  F2    dan  F3  pada  hari  ke-1, ke-14  dan  ke-30  melalui  metode  difusi  agar  dengan  teknik  perforasi 13 .    Diameter hambat yang terbentuk diukur menggunakan jangka sorong.
9. Uji Banding Aktivitas Antibakteri Sediaan Krim terhadap Basis dan Ekstrak Aktivitas  antibakteri  ketiga  sediaan  krim  dibandingkan  terhadap  basis  dan  ekstrak menggunakan metode difusi agar dengan teknik perforasi 13 . Diameter hambat yang terbentuk diukur menggunakan jangka sorong.

## Hasil

## Hasil Determinasi Tumbuhan dan Penyiapan Simplisia
Hasil determinasi menunjukkan bahwa tumbuhan yang digunakan adalah kapuk ( Ceiba pentandra L.)  dari  keluarga  Bombacaceae,  ordo  Malvales,  kelas  Magnoliopsida  dan divisi Magnoliopsida.

## Hasil Ekstraksi Simplisia
Dari ekstraksi 200 g simplisia daun kapuk, diperoleh ekstrak kental berwarna hijau tua, berbau khas dan berasa pahit, dengan rendemen ekstrak sebesar 9,135% b/v.

## Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  adalah  50,  40,  30,  20,  dan  10  %  b/v.    Dari  hasil pengujian    diketahui  bahwa  ekstrak  etanol  daun  kapuk  memiliki  aktivitas  terhadap S. epidermidis ATTC 12228 dan P. acnes isolat klinik sampai konsentrasi 10 % b/v.

## Hasil Penentuan KHTM Ekstrak
Konsentrasi  larutan  stok  ekstrak  yang  digunakan  adalah  8  dan  10%  b/v.  Nilai  KHTM ekstrak  etanol  daun  kapuk  terhadap S.  epidermidis ATTC  12228  dan P.  acnes isolat klinik  berturut-turut  sebesar  0,125  dan  0,078  %  b/v    (Tabel  2).  KHTM  ekstrak  yang digunakan dalam formulasi sediaan krim adalah 0,125 % b/v, karena pada konsentrasi tersebut ekstrak masih mempunyai aktivitas terhadap kedua bakteri uji.

## Tabel 2. Hasil penentuan KHTM Ekstrak terhadap Bakteri Uji
Keterangan : + = ada pertumbuhan koloni - = tidak ada pertumbuhan koloni

## Hasil Orientasi Basis Krim
Dari hasil pengamatan organoleptis, diketahui bahwa ketiga basis krim tidak mengalami perubahan bentuk, konsistensi, warna dan bau selama 7 hari pada suhu kamar (Tabel 3).    F0 2 dengan  konsentrasi  natrium  viscolam  AT100P  10%  b/v  dipilih  sebagai  basis untuk  penelitian  selanjutnya,    karena  konsistensi  lebih  baik  dari  kedua  basis  lainnya. F0 1 mempunyai bentuk terlalu berair, sedangkan F0 3 terlalu berminyak.
Larutan stok ekstrak (% b/v) Pengenceran larutan stok ekstrak (% b/v) Pertumbuhan S. epidermidis ATCC 12228 P. acnes isolat klinik
10
5,000 - - 2,500 - - 1,250 - - 0,625 - - 0,313 - - 0,156 - - 0,078 + - 0,039 + + 0,020 + +
8
4,000 - - 2,000 - - 1,000 - - 0,500 - - 0,250 - - 0,125 - - 0,063 + + 0,031 + + 0,016 + +
Tabel 3. Hasil Pengamatan Organoleptis Basis Krim Selama 7 Hari
Keterangan : K+       : agak kental K++    : kental K+++   : lebih kental -          : tidak berbau

## Hasil Formulasi dan Pengujian Kualitas Fisik Basis dan Sediaan Krim
Dari  proses  formulasi,  dihasilkan  sediaan  krim  F1,  F2  dan  F3.  Semua  formula  dibuat dengan menggunakan Viscolam AT100P, yang merupakan polimer golongan poliakrilat dengan fungsi sebagai pengental. Polimer ini dapat digunakan sebagai emulgator/emulsifier  untuk  senyawa  lipofilik  dalam  jumlah  kecil.  Pada  penelitian  ini, formulasi  krim  menggunakan  senyawa  aktif  berupa  ekstrak  tanaman  yang  memiliki kelarutan  yang  rendah  dalam  air,  sehingga  penggunaan  viscolam  sebagai  basis  krim sangat  menguntungkan,  karena  berfungsi  sebagai  pengental,  sekaligus  emulsifier. Propilen  glikol,  selain  dimaksudkan  sebagai  humektan,  juga  digunakan  sebagai pengencer  ekstrak  pada  saat  awal  pembuatan.  Penggunaan  pengawet  metil  paraben- propil  paraben  dengan  jumlah  total  0,9  merupakan  hasil  optimasi,  karena  bahan  aktif dari bahan alam memiliki resiko lebih besar untuk ditumbuhi mikroba.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  formula  krim  memiliki  karateristik  organoleptis yang  berbeda.  Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak,  maka  kekentalan  dan  intensitas warna  krim  semakin  meningkat.  Basis  dan  ketiga  krim tidak  mengalami  perubahan bentuk,  konsistensi,  warna  dan  bau  selama  penyimpanan  30  hari  pada  suhu  kamar (Tabel 4).
Formula  Karakteristik Perubahan pada hari ke- 1 2 3 4 5 6 7 F0 1 Konsistensi K+ K+ K+ K+ K+ K+ K+ Warna Putih Putih Putih Putih Putih Putih Putih Bau - - - - - - - FO 2 Konsistensi K++ K++
K++ K++ K++ K++ K++ Warna Putih Putih Putih Putih Putih Putih Putih Bau - - - - - - - FO 3 Konsistensi K+++ K+++
K+++ K+++ K+++ K+++ K+++ Warna Putih Putih Putih Putih Putih Putih Putih Bau - - - - - - -
Tabel 4. Hasil Pengamatan Organoleptis Sediaan Krim Selama 30 Hari
Keterangan: -   : tidak ada perubahan
Dari  data perubahan  pH,   diketahui  bahwa  pH  basis dan  sediaan  krim berkisar  antara 4,0-8,0 selama penyimpanan 30 hari (Gambar 1). Data perubahan pH dianalisis secara statistik menggunakan desain blok lengkap, dengan taraf kepercayaan sebesar 95% (α =  0,05%).  Hipotesis  nol  (H 0 )  menunjukkan  tidak  ada  perbedaan  pH  yang  nyata  antar sediaan  krim,  sedangkan  hipotesis  satu  (H 1 )  menunjukkan  ada  perbedaan  pH  yang nyata antar formula sediaan krim. H 0 akan ditolak, bila F hitung ≥ F tabel . Dari hasil analisis statistik,  H 0 ditolak,  karena  F hitung (140,851)  >  F tabel (2,75).  Dengan  diterimanya  H 1 , maka  dilakukan  uji  lanjutan  berupa  Uji  Tuckey.  Dari  uji  ini    didapatkan  bahwa  F1 (Formula 1) merupakan sediaan krim dengan perubahan pH terbaik.
Gambar 1. Perubahan pH basis dan sediaan krim selama 30 hari
Formula Karakteristik Perubahan  pada hari ke- 1 3 7 14 21 30 F1 Konsistensi - - - - - - Warna - - - - - - Bau - - - - - - F2 Konsistensi - - - - - - Warna - - - - - - Bau - - - - - - F3 Konsistensi - - - - - - Warna - - - - - - Bau - - - - - - 6.2 6.4 6.6 6.8 7 7.2 7.4 7.6 7.8 8 1 3 7 14 21 30 pH Hari penyimpanan Basis Formula 1 Formula 2 Formula 3
Dari  data    perubahan  viskositas,  diketahui  bahwa  viskositas  basis  dan  ketiga  sediaan krim  mengalami  sedikit  penurunan  selama  penyimpanan  30  hari  (Gambar  2).    Data perubahan  viskositas  dianalisis  secara  statistik  menggunakan  desain  blok  lengkap, dengan  taraf  kepercayaan  sebesar  95% (α = 0,05%). Hipotesis nol (H 0 )  menunjukkan tidak  ada  perbedaan  tinggi  busa  yang  nyata  antar  formula  sediaan  krim,  sedang hipotesis  satu  (H 1 )  menunjukkan  adanya  perbedaan  tinggi    yang  nyata  antar  formula sediaan krim. H 0 akan ditolak, bila F hitung ≥ F tabel . Dari analisis statistik, diketahui bahwa H 0 ditolak,  karena  F hitung (48,357)  >  F tabel (2,75).  Dengan  diterimanya  H 1 ,  maka dilakukan uji lanjutan berupa Uji Tuckey. Dari uji ini  didapatkan bahwa F1 merupakan sediaan krim dengan perubahan viskositas terbaik.
Gambar 2. Perubahan viskositas basis dan sediaan krim selama 30 hari
Dari  data  pemisahan  emulsi  ketiga  sediaan  krim  tidak  mengalami  pemisahan  fase, setelah  disentrifugasi  pada  kecepatan  3.750  rpm,  sehingga  dinyatakan  stabil  selama satu  tahun.  Hasil  pengujian  kualitas  fisik  sediaan  krim  menunjukkan  bahwa  F1 merupakan sediaan krim dengan perubahan organoleptis, pH dan viskositas terbaik dan stabil selama satu tahun.

## Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri Sediaan Krim Selama Penyimpanan
Dari  penentuan  aktivitas,  diketahui  bahwa  aktivitas  antibakteri  ketiga  sediaan  krim cenderung stabil selama penyimpanan 30 hari (Tabel 5).
Tabel 5 . Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri Sediaan Krim terhadap Bakteri Uji Selama 30 Hari
0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 1 3 7 14 21 30 Vi sk o si ta s (c P s) Hari penyimpanan Basis Formula 1 Formula 2 Formula 3
Formula Diameter hambat (cm) terhadap S. epidermidis ATCC 12228 P. acnes isolat klinik Hari-ke1 Hari ke- 14 Hari ke-30 Hari-ke1 Hari ke- 14 Hari ke-30 1 1,66 1,67 1,66 1,87 1,86 1,86 2 1,84 1,82 1,83 1,92 1,93 1,92 3 1,90 1,90 1,92 2,06 2,05 2,05

## Hasil Uji Banding Aktivitas Antibakteri Sediaan Krim terhadap Basis dan Ekstrak
Dari  hasil  uji  banding,    diketahui  bahwa  basis  krim  tidak  menunjukkan  aktivitas antibakteri.  Aktivitas  antibakteri  Formula  1,  Formula  2  dan  Formula  3  terhadap S. epidermidis ATTC 12228  dan P. acnes isolat klinik lebih besar dibandingkan ekstraknya (Tabel 6)
Tabel 6 . Hasil Uji Banding Aktivitas Antibakteri Basis, Sediaan Krim dan Ekstrak terhadap Bakteri Uji

## Pembahasan
Daun kapuk segar diekstraksi dengan metode maserasi, karena metode ini mudah dan tidak  memerlukan  suhu  tinggi,  sehingga  tidak  merusak  senyawa-senyawa  termolabil. Etanol  95%  digunakan  sebagai  penyari,  karena  simplisia  berupa  daun  segar  dengan kandungan air yang tinggi 12 .
Dari  hasil  uji  aktivitas  antibakteri,  diketahui  bahwa  ekstrak  masih  memiliki  aktivitas terhadap kedua bakteri uji sampai konsentrasi 10% b/v, sehingga  digunakan kosentrasi larutan  stok  sebesar  8  dan  10  %  b/v  untuk  penentuan  KHTM.  Nilai  KHTM  ekstrak terhadap P.  acnes isolat  klinik  lebih  kecil  dibandingkan S.  epidermidis ATTC  12228 . Hal  ini  menunjukkan  bahwa    ekstrak  etanol  daun  kapuk  memiliki  aktivitas  lebih  besar terhadap P. acnes dibandingkan S. epidermidis ATTC 12228.
Aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  kapuk  diduga  berasal  dari  berbagai  senyawa bioaktifnya,  yaitu  senyawa  alkaloid,  polifenol,  tanin,  flavonoid,  saponin,  steroid  dan kuinon.  Hal  ini  sesuai  dengan  penelitian  terdahulu  bahwa  ekstrak  air  dan  etanol  daun kapuk  mengandung  senyawa  polifenol,  tanin,  saponin,  gula  tereduksi,  poliuronoid  dan plobatanin 11 . Penelitian lainnya menunjukkan berbagai ekstrak batang dan daun kapuk mengandung  senyawa  alkaloid,  tanin,  flavonoid,  saponin,  steroid  aglikon,  glikosida, protein, karbohidrat, gula tereduksi, vitamin A dan vitamin E 8 .
Bahan uji Diameter hambat (cm) terhadap S. epidermidis ATCC 12228 P. acnes isolat klinik Basis F0 2 - - Formula 1 1,66 1,87 Formula 2 1,81 1,92 Formula 3 1,90 2,06 Ekstrak 1,12 1,15 1,16 1,19 1,21 1,24
Alkaloid,  flavonoid  dan  steroid  yang  diisolasi  dari  tumbuhan  diketahui  mempunyai aktivitas  antimikroba  terhadap  organisme  patogen.  Ketiga  golongan  senyawa  ini    juga berfungsi  sebagai  antioksidan,  antidiare,  anti  inflamasi  dan  penghambat  enzim 16-27 . Tanin  umumnya  memiliki  aktivitas  antimikroba  yang  kuat  terhadap  ragi,  jamur  dan bakteri.  Tanin  juga  dapat  mengendapkan  protein,  menginaktivasi  adhesin  dan  protein transpor  sel  serta  berikatan  dengan    logam  dan  makromolekul  lainnya,  sehingga mikroorganisme akan kekurangan senyawa tersebut 28 .
Berdasarkan analisis statistik diketahui bahwa pH semua sediaan krim berubah selama masa  penyimpanan,  namun      masih  memenuhi  persyaratan  pH  sediaan  topikal,  yaitu 4,0-8,0 29 .  Viskositas semua sediaan krim berubah selama masa penyimpanan, namun masih  memenuhi  persyaratan  viskositas  sediaan  topikal  (4000-40.000  cPs) 29 . Penurunan  pH  disebabkan  adanya  senyawa  aktif  dari  ekstrak  yang  bersifat  asam, sehingga  berpengaruh pada Viscolam AT100P. Polimer ini  merupakan golongan akrilat yang memiliki sifat dipengaruhi oleh pH lingkungannya.
Sesuai  teori,    sediaan  krim  yang  tidak  mengalami  pemisahan  fase,  setelah disentrifugasi  pada  kecepatan  3.750  rpm  selama  5  jam,  dapat  diasumsikan  stabil selama satu tahun 30 .
Pengujian  aktivitas  antibakteri  sediaan  krim  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas antibakterinya    selama  penyimpanan  30  hari.  F3  yang  memiliki  aktivitas  terbaik terhadap P.  acnes isolat  klinik  dibandingkan  terhadap S.  epidermidis ATTC  12228. Diameter hambat sediaan krim meningkat seiring dengan jumlah penambahan ekstrak. Dari hasil uji   banding diketahui  bahwa  ada   peningkatan aktivitas  ketiga  sediaan  krim dibanding  ekstraknya,  padahal  basisnya  tidak  memiliki  aktivitas.  Peningkatan  aktivitas ini diduga berasal dari interaksi ekstrak dengan salah satu komponen dalam basis krim, yang menyebabkan peningkatan aktivitas antibakterinya.

## Kesimpulan .
Dari  penelitian  ini  diperoleh  kesimpulan  bahwa  Formula  1(krim  dengan  2x  KHTM ekstrak)    merupakan  sediaan  krim dengan  kualitas  fisik  terbaik,  karena  tampilan organoleptis, pH  dan  viskositasnya  stabil  selama  30  hari pada  suhu  kamar  serta  tidak mengalami  pemisahan  fase  selama  satu  tahun.  Formula  3  (krim  dengan  4x  KHTM ekstrak)  merupakan  sediaan  krim dengan  aktivitas  antibakteri  terbaik,  terutama terhadap P. acnes isolat klinik.

## Daftar Pustaka
1. Dunn LK, O’Neill JL, Feldman SR. Acne in adolescents: Quality of life, self- esteem, mood, and psychological disorders. Dermatol Online J. 2011;17(1):1.
2. Esmail A, Hassan MG, Amer MM, Abdelrahman S, Hamed AM, Abd-raboh HA, et al. Antimicrobial  activity  of  certain  natural-based  plant  oils  against  the  antibiotic- resistant acne bacteria. Saudi Journal of Biological Sciences. 2020;27:448-55.
3. Dréno  B,  Pécastaings  S,  Corvec  S,  Veraldi  S,  Khammari  A,  Roques  C.
Cutibacterium acnes ( Propionibacterium acnes ) and acne vulgaris: a brief look at the latest updates. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2018;32(S2):5-14.
4. Zaenglein  AL,  Pathy  AL,  Schlosser  BJ,  Alikhan  A,  Baldwin  HE,  Berson  DS,  et  al. Guidelines  of  care  for  the  management  of  acne  vulgaris.  J  Am  Acad  Dermatol. 2016;74:945 –73.
5. Farrah  G,  Tan  E.  The  use  of  oral  antibiotics  in  treating  acne  vulgaris:  a  new approach. Dermatol. Ther. 2016;29(5):377-84.
6. Eichenfield  L.  Evolving  perspective  on  the  etiology  and  pathogenesis  of  acne vulgaris. J Drugs Dermatol. 2015;14:263 –68.
7. Neamsuvan  O,  Kama  A,  Salaemae  A,  Leesen  S,  Waedueramae  N.  A  survey  of herbal formulas for skin diseases from Thailand’s three southern border provinces. J Herb Med. 2015;5:190 –8.
8. Njokuocha RC, Ewinike AE. Antibacterial and phytochemical properties of crude leaf extract  of Moringa  oleifera Lam., Pterocarpus  santalinoides L’Herit  DC  and Ceiba pentandra L. on some clinical bacteria isolates in Nigeria. Journal of Complementary and Alternative Medical Research. 2020;10(4):1-15.
9. Anosike  CA,  Ogili  OB,  Nwankwo  ON,  Eze  EA.  Phytochemical  screening  and antimicrobial activity of the petroleum ether, methanol and ethanol extracts of Ceiba pentandra stem bark. Journal of Medicinal Plants Research. 2012;6(46):5743-47. 10. Lawal  TO,  Mbanu  AE,  Adeniyi  BA.  Inhibitory  activities  of Ceiba  pentandra (L.) Gaertn.  and Cordia  sbestena Linn.  on  selected  rapidly  growing  mycobacteria. African Journal of Microbiology Research. 2014;8(24):2387 – 92.
11. Asare  P,  Oseni  LA.  Comparative  evaluation  of Ceiba  pentandra ethanolic  extract, stem bark extract and the combination thereof for in vitro bacterial growth inhibition. J Nat Sci Res. 2012; 2(5); 44-50.
12. Milanda T, Kusuma ASW, Shanmuganathan K. Antibacterial activity of malacca fruit ( Phyllanthus  emblica L.)  ethanolic  extract  and  fraction  againts Bacillus  cereus FNCC0057  and Shigella  dysentriae ATCC13313.  Asian  J  Pharm  Clin  Res. 2017;Special Issue (May):8-10.
13. Balouiri  M,  Sadiki  M,  Ibnsouda  SK,  Methods  for  in  vitro  evaluating  antimicrobial activity: a review. J Pharm Anal. 2016;6(2):71-9.
14. Departemen Kesehatan RI. Formularium
Nasional.
Edisi Kedua. Jakarta:Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1978.
15. Navindgikar  N,  Kamalapurkar  KA,  Chavan  PS,  Formulation  and  evaluation  of multipurpose  herbal  cream.  International  Journal  of  Current  Pharmaceutical Research. 2020;12(3);25-30.
16. Ahmad  A,  Kaleem  M,  Ahmed  Z,  Shafiq  H.  Therapeutic  potential  of  flavonoids  and their  mechanism  of  action  against  microbial  and  viral  infections —A  review.  Food Research International. 2015;77:221 –235.
17. Cushnie  TPT,  Cushnie  B,  Lamb  AJ.  Alkaloids:  An  overview  of  their  antibacterial, antibiotic-enhancing and antivirulence activities. International Journal of Antimicrobial Agents. 2014;44:377 –86.
18. Hryniewicka A, Malinowska M, Hauschild T, Pieczul K, Morzycki JW. Synthesis and antimicrobial  properties  of  steroid-based  imidazolium  salts.  The  Journal  of  Steroid Biochemistry and Molecular Biology. 2019;189:65 –72.
19. Okpo  SO,  Ching  FP,  Ekeleme  IC.  Evaluation  of  the  anti-diarrhoeal  activity  of  the aqueous  extract  from  leaves  of Pterocarpus  santalinoides .  Research  Journal  of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. 2011;2(3):590 – 597.
20. Emencheta  SC,  Enweani  IB,  Oli  AN,  Okezie  UM,  Attama  AA.  Evaluation  of antimicrobial  activities  of  fractions  of  plant  parts  of Pterocarpus  santalinoides . Biotechnology Journal International. 2019;23(3):1-11.
21. Odeh IC, Tor-Anyiin TA. Phytochemical and antimicrobial evaluation of leaf-extracts of Pterocarpus santalinoides . European Journal of Medicinal Plants. 2014;4(1):105- 115.
22. Osuntokun  OT,  Ajayi  Ayodele  O,  Adeoye  MI,  Odufunwa  AE.  Assessment  of antimicrobial and phytochemical properties of crude leaf and bark extracts of Ceiba pentandra on selected clinical isolates found in Nigerian teaching hospital. Journal of Bacteriology and Mycology Open Access. 2017;4(1):17 ‒23.
23. Obi CF, Nzeakor TA, Okpala MI, Ezeha IO, Nwobi LG, Omeje MO, Ezeokonkwo RC.
Evaluation  of  antitrypanosomal  activity  of Pterocarpus  santalinoides L’H'erit  ex  DC hydroethanol  leaf  extract  in  rats  experimentally  infected  with Trypanosoma  brucei . Journal of Ethnopharmacology, 2019;243:112085.
24. Odeh  IC,  Tor-Anyiin  TA,  Igoli  JO,  Anyam  JV.  In  vitro  antimicrobial  properties  of friedelan-3-one  from Pterocarpus  santalinoides L’Herit,  ex  Dc.  African  Journal  of Biotechnology. 2016;15(14):531-538.
25. Osuagwu  GGE,  Akomas  CB.  Antimicrobial  activity  of  leaves  of  three  species  of Nigerian Pterocarpus (Jacq). International Journal of Medicinal and Aromatic Plants. 2013;3(2):178 – 183.
26. Vanhauteghem  D,  Janssens  GPJ,  Lauwaerts  A,  Sys  S,  Boyen  F,  Cox  E,  et  al. Exposure  to  the  proton  scavenger  glycine  under  alkaline  conditions  induces Escherichia coli viability loss. PLoS ONE, 2013;8(3):603-28.
27. Chelliah R, Ramakrishnan S, Antony U. Nutritional quality of Moringa oleifera for its bioactivity  and  antibacterial  properties.  International  Food  Research  Journal. 2017;24(2):825-833.
28. Zhu C, Lei M, Andargie M, Zeng J, Li J. Antifungal activity and mechanism of action of  tannic  acid  against Penicillium  digitatum .  Physiological  and  Molecular  Plant Pathology, 2019;107:46 – 50.
29. Aulton  M.  Pharmaceutics:  The  science  of  dosage  form  design.  Edirberd,  London: Curchill Livingstone. 1988.
30. Lachman  L,  Lieberman  HA,  Kanig  JL.  Teori  dan  Praktek  Farmasi  Industri.  Jilid  II. Edisi Ketiga. Penerjemah: Siti Suyatmi. Jakarta:UI-Press. 1994.
©  2021  di  penulis.  Majalah  Farmasetika  (ISSN  :  2686-2506)  berlisensi  dibawah Creative Commons  Attribution  4.0  International ( CC  BY  4.0).  Majalah  Farmasetika  menerima  karya ilmiah di bidang farmasetika di alamat http://jurnal.unpad.ac.id/farmasetika/ .