## EVALUATION OF ANTIDIARRHEAL POTENTIAL OF INDIGENOUS Lactobacillus sp IN PURPLE SWEET POTATO EXTRACT YOGURT
Intan Niken Tari, Catur Budi Handayani 1
1 Program Studi Teknologi Hasil Pertanian Universitas Veteran, Bantara, Sukoharjo
Email: intanniken@gmail.com

## ABSTRACT
The objective of this study was to evaluate the anti-diarrheal properties of Lactic Acid Bacteria (LAB) in yogurt  which  was  supplemented  with  purple  sweet  potato  qualitatively  and  quantitatively  for  one  week  of storage.  The  treatment  was  followed  as:  S0  =  Control  (commercial  culture  as  Lactobacillus  bulgaricus  (Lb) Streptococcus thermophilus (St), S1 = probiotic culture Lactobacillus plantarum commercial + Dad 13, namely St: Lb: Dad 13 = 1: 1: 0.5, S2 = + probiotic culture Lactobacillus plantarum commercial Mut7, namely St: Lb: Mut7 = 1: 1: 0.5, S3 = + commercial probiotic cultures Lactobacillus acidophilus SNP-2, namely St: Lb: SNP-2 = 1: 1: 0.5. The results showed that the antidiarrheal activity qualitatively indigenous Lactobacillus sp ATCC 35281  against  EPEC  occurred  on  treatment  Y1  (yogurt  with  probiotic  Lactobacillus  plantarum  Dad  13  and supplementation  of  purple  sweet  potato  extract)  with  inhibition  zone  diameters  of  12,  8  mm.  Antidiarrheal activity of Lactobacillus plantarum quantitatively indigenous sp ATCC 35281 against EPEC largest storage for one  week,  also  occurred  in  the  treatment  of  Y1  (yogurt  with  probiotics  Llactobacillus Dad  plantarum 13 and supplementation of purple sweet potato extract) with the ability to decrease the number of colonies EPEC ATCC 35281 by 5 log cycles (from 1.05 initially. 107 CFU / ml to 8.5. 102 CFU / ml).
Keywords: Yogurt, Purple Sweet Potato Extract, anti-diarrheal, Lactobacillus sp Indigenous

## ABSTRAK
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  tujuan  melihat  trend  sifat  anti  diare  baik  secara  kualitatif  maupun secara  kuantitatif  dari      BAL  pada  yogurt  dengan  suplementasi  ubi  jalar  ungu  selama  satu  minggu penyimpanan. Adapun perlakuan tersebut sebagai berikut : S0= Kontrol ( berupa kultur komersial St dan Lb, S1= Kultur komersial + probiotik Lactobacillus plantarum Dad 13, yaitu St :  Lb : Dad 13= 1:1:0.5, S2= Kultur komersial + probiotik  Lactobacillus plantarum Mut7, yaitu St : Lb : Mut7 = 1:1:0.5, S3= Kultur komersial+ probiotik Lactobacillus acidophilus SNP-2 yaitu St : Lb : SNP-2 = 1:1:0.5. Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktifitas antidiare secara kualitatif  lactobacillus sp indigenous terhadap EPEC  ATCC  35281  terbesar terjadi pada  perlakuan  Y1  (yogurt  dengan  probiotik    lactobacillus  plantarum  Dad  13  dan    suplementasi  ekstrak  ubi jalar ungu)  dengan diameter zona hambat sebesar 12, 8 mm.  Aktifitas antidiare secara kuantitatif lactobacillus plantarum sp indigenous terhadap EPEC  ATCC 35281   selama  1minggu penyimpanan  terbesar, juga terjadi pada  perlakuan  Y1  (yogurt  dengan  probiotik  Llactobacillus  plantarum  Dad  13  dan    suplementasi  ekstrak  ubi jalar ungu)  dengan kemampuan penurunan jumlah koloni EPEC ATCC 35281  sebesar 5 log cycle (dari mula- mula 1,05. 10 7 CFU/ml menjadi 8,5. 10 2 CFU/ml)
Kata kunci: yogurt, ekstrak ubi jalar ungu, anti diare, Lactobacillus sp Indigenous

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  saluran  pencernaan masih  merupakan  salah  satu  masalah  utama di  Indonesia.  Penyakit  infeksi  saluran pencernaan yang sering menyerang penduduk ini  tergolong  penyakit  menular  maupun penyakit  karena  keracunan  makanan,  seperti diare.  Di  Kabupaten  Sukoharjo  data  angka kesakitan  diare  pada  2  tahun  terakhir menunjukkan peningkatan cukup nyata, yaitu lebih  dari  1500  anak  usia  Sekolah  Dasar
menderita  penyakit  diare  selama  periode tahun 2011/2012 (Anonim a,b , 2012) menjadi 1800  anak  usia  Sekolah  Dasar  menderita penyakit  diare  selama  periode  tahun 2012/2013 (Anonim c,d , 2013).
Kelompok E. coli yang dikenal sebagai penyebab diare dikenal sebagai Enteropatogenic Escherichia coli (EPEC) dan Enterotoxin Escherichia  coli (ETEC). Disebutkan  oleh  Acheson  (1999),  bahwa Enteripatogenic Escherichia  coli (EPEC) umumnya  menyebabkan  diare  pada  anak-
anak.  Kelompok    bakteri  ini  menyebabkan diare  melalui  interaksi  fisik  dengan  sel epitelium pada dinding usus halus. Kelompok bakteri  ini  menempel  dan  menyebabkan pengaruh  beracun  lipopolisakarida  dinding sel  (endotoksin)  dan  menyebabkan  luka  sel epitelium  dinding      usus  halus,  sehingga dinding  usus  mengalami  peradangan  dan kehilangan cairan.
Upaya  pencegahan  infeksi  oleh E.  coli yang  bersifat  pathogen  dapat  dilakukan dengan  cara  menekan  pertumbuhan E.coli . Pertumbuhan E. coli pada saluran pencernaan dapat  ditekan  jika  terdapat  keseimbangan mikrobiota dalam saluran pencernaan. Untuk mempertahankan  keseimbangan  mikrobiota di  dalam  saluran  pencernaan  diperlukan pengaturan  diet  yang  mengandung  prebiotik, probiotik  atau  kombinasi  keduanya  yang disebut sinbiotik.
Konsumsi  yogurt  dengan  suplementasi prebiotik  seperti  ubi  jalar  ungu  ditengarai memberi manfaat besar bagi kesehatan tubuh. Oligosakarida  pada  ubi  jalar    sebagian  besar terdiri dari rafinosa dan stakhiosa  yang tidak dapat dicerna, namun  akan difermentasi oleh bakteri-bakteri  yang  terdapat  dalam  usus besar  dan  selanjutnya  akan  mengubah komposisi bakteri usus yang menguntungkan ( Lactobacillus  sp dan Bifidobacterium ), dengan  cara  meningkatkan  viabilitas  atau kemampuan  hidup  dalam  sistem  pencernaan (Wardani,  2003).  Selain  itu  menurut  Wang (2009),  prebiotik  dapat  memperbaiki  efek perlindungan  usus  besar    terhadap  berbagai mikroorganisme pathogen usus .
Menurut  Parvez dkk., (2006)  bakteri probiotik  bermanfaat  meningkatkan  sistem kekebalan  tubuh  dan  mempunyai  efek kesehatan,  seperti  mengurangi  kejadian lactose intolerance , mencegah hipertensi, dan mempunyai  efek  terapeutik  melawan  diare. Mekanisme  probiotik  dalam  mengatur mikroflora  saluran  pencernaan  antara  lain akibat  adanya  kompetisi  dengan  mikroflora usus.  Produksi  senyawa  antibakteri  seperti bakteriosin  untuk  mengontrol  pertumbuhan mikroflora  lainnya,  produksi  senyawa  asaml aktat  dan  asam-asam  lainnya  sehingga  pH turun    dan  mengatur  aktiviats  enzim. (Commane dkk., 2005)
Menurut  Codex  persyaratan  jumlah  sel hidup  probiotik  dalam  susu  fermentasi minimal10 7 CFU/g (Anonymous,
2008),
diharapkan  dapat  mengantisipasi  penurunan jumlah  sel  selama  melewati  lingkungan ekstrem di pencernaan (Shah, 2000).
Astawan  (2009)  berpendapat  bahwa, bakteri asam laktat yang terdapat pada yogurt komersial  yaitu Streptococcus  thermophillus dan Lactobacillus  bulgricus belum  cukup menjaga  saluran  pencernaan,  sehingga  ke dalamnya perlu ditambahkan bakteri probiotik.. Sedangkan beberapa bakteri asam laktat  yang  telah  berhasil  diisolasi  (isolat indigenous )  dan  mempunyai  sifat  probiotik antara lain : Lactobacillus plantarum Dad 13 yang  diisolasi  dari  susu  fermentasi  kerbau (dadih), Lactobacillus plantarum Mut 7 yang diisolasi  dari  makanan  fermentasi  ketela (gatot) serta Lactobacillus acidophillus SNP- 2  yang  disolasi  dari  feses  bayi  yang mengkonsumsi  asi.    Keuntungan  dari kombinasi prebiotik dan probiotik (sinbiotik) adalah  meningkatkan  daya  tahan  mikroflora saluran pencernaan, sehingga tubuh mendapat manfaat yang lebih sempurna dari kombinasi ini.
Penelitian pendahuluan terhadap pengaruh  kultur indigenous Lactobacillus plantarum dalam pembuatan yogurt ubi ungu telah  dapat  dilakukan,  dengan    hasil  tingkat keasaman  11.956  mgrek/  100g  bahan,  pH
4.378 dan total padatan 13.593% Niken Tari (2012),  namun  belum  diketahui  pengaruh antidiarenya. Penelitian terhadap penggunaan ubi ungu sebagai prebiotik lokal dan Lactobacillus plantarum  Dad  13, Lactobacillus  plantarum Mut  7,  maupun Lactobacillus  acidophillus SNP-2    sebagai probiotik  lokal  perlu  dilakukan  .  Penelitian ini diharapkan dapat memperkaya pemanfaatan produk lokal untuk menciptakan produk pangan dengan bentuk berbeda seperti yogurt  dengan  substitusi  ekstrak  ubi  ungu menggunakan starter indigenous Lactobacillus plantarum sp, yang mempunyai kemampuan sebagai antidiare.
Tujuan  Penelitian  ini  adalah    :  (1) Mengetahui      pengaruh  jenis  kultur  starter lactobacillus  plantarum  sp indigenous pada yogurt  dengan  suplementasiekstrak  ubi  jalar ungu  terhadap  potensi  antidiare  secara
kualitatif    (2).  Mengetahui      pengaruh    jenis kultur    starter lactobacillus    plantarum    sp indigenous pada    yogurt    dengan suplementasi ekstrak ubi jalar ungu terhadap potensi  antidiare  secara  kuantitatif  selama  1 minggu penyimpanan

## METODE PENELITIAN Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  terdiri  dari  ubi jalar  ungu  ( Ipomoea  batatas L)  yang diperoleh  dari  pasar  lokal  daerah  Sukoharjo, kultur  bakteri  asam  laktat  koleksi  FNCC (Food  and  Nutrition  Culture Collection) dari PAU  Pangan  dan  Gizi  UGM  Yogyakarta berbentuk agar tegak, terdiri dari Streptococcus thermophillus FNCC 0040 dan
Lactobacillus  bulgaricus FNCC  0041,  serta kultur  bakteri  asam  laktat indigenous yang mempunyai sifat probiotik seperti Lactobacillus  plantarum Dad  13,  dan Lactobacillus  plantarum Mut  7  dan
Lactobacillus plantarum SNP-2.
Untuk  pemeliharaan  kultur  bakteri  asam laktat,  digunakan  media MRS (de  Mann Rogossa  Sharp)  Agar/Broth.  Bahan-bahan kimia  penunjang  pembuatan  prebiotik  ubi jalar  ungu  melalui  fermentasi  laktat seperti,sukrosa,  skim  serta  bahan  kimia penunjang  lain  seperti  alkohol        70  %, spiritus,  dan  aquades  diperoleh  dari  Lab. Biologi-Kimia  dan  Mikrobiologi    Fakultas Pertanian Univet Bantara Sukoharjo.

## Tahapan penelitian
Persiapan-persiapan  yang  diperlukan pada penelitian ini antara lain :
Pembuatan starter
Menyiapkan  5  ml  medium  MRS  broth steril  sebanyak  6  tabung,  kemudian  masing- masing  tabung  diinokulasi  dengan  biakan tegak Lactobacillus  bulgaricus FNCC  0041. Streptococcus  thermophilus FNCC  0040, Lactobacillus  plantarum Dad  13 dan Lactobacillus  plantarum Mut  7 dan
Lactobacillus  plantarum  SNP-2. Kemudian kesemua  isolat  diinkubasi  pada  suhu  36 o C selama 24 jam. Untuk membuat kultur starter, masing-masing  0.1  ml  biakan  tersebut
kemudian diinokulasikan ke dalam 5 ml susu skim  steril. Diinkubasi 43 o C selama 7-8 jam atau 36 o C selama 24 jam.

## Pembuatan ekstraki ubi jalar ungu
Pembuatan  ekstrak  ubi  jalar  ungu mengacu  pada  penelitian  pendahuluan  yang telah  dilakukan  sebelumnya  oleh  Niken  Tari (2011) yaitu ubi jalar dipotong kecil (ukuran 5  x  5  cm).  Ubi  jalar  kemudian  diblanching pada suhu 100 o C selama  2-3menit kemudian diekstrak menggunakan juicer,  didiamkan 30 menit  kemudian diambil filtratnya. Filtrat ini merupakan  ekstrak  ubi  jalar  ungu  yang  siap digunakan untuk membuat yogurt.

## Pembuatan  yogurt  dengan    suplementasi ekstrak ubi jalar ungu
Susu  segar,  susu  skim  (5%  b/v)  dan ekstrak  ubi  jalar  ungu  (10%  v/v) dipasteurisasi  pada  suhu75 o C  selama  15 menit,  kemudian  didinginkan  sampai  suhu 40-45 o C
selanjutnya, diinokulasi
menggunakan Streptococcus  thermophillus dan Lactobacillus  bulgaricus serta tambahan baketri probiotik indigenous dengan perbandingan  1  :0,5:0,5  yang  dilakukan secara  aseptis  pada  suhu  43-45 o C,  sebanyak 2,5  %  (v/v),  kemudian  dikocok  hingga homogen.  Susu  dan  ekstrak  ubi  jalar  ungu yang  telah  diinokulasi  dengan  starter tadi,dimasukkan  ke  dalam  botol-botol  steril dan  diinkubasi  pada  suhu  40 o C  selama  17 jam,  hingga  dihasilkan  yogurt  dengan suplementasi ekstrak ubi jalar ungu

## Rancangan Percobaan
Penelitian ini dilakukan dengan rancangan  acak  lengkap  pola  searah  (RAL), dengan  4  macam  perlakuan  yaitu  jenis  BAL dan masing-masing perlakuan diulang 3 kali. Adapun  perlakuan  tersebut  sebagai  berikut  : S0= Kontrol ( berupa kultur komersial St dan Lb,  S1=  Kultur  komersial  +  probiotik  Dad 13,  yaitu  St  :    Lb  :  Dad  13=  1:1:0.5,  S2= Kultur komersial + probiotik Mut7, yaitu St : Lb : Mut7 = 1:1:0.5, S3= Kultur komersial+ probiotik  SNP-2  yaitu  St  :  Lb  :  SNP-2  = 1:1:0.5

## Parameter Pengujian
Parameter  pengujian  yang  dilakukan terdiri atas : (1) uji aktivitas anti diare secara kualitatif    dan    (2)  uji  aktivitas  anti  diare secara kuantitatif selama 1minggu penyimpanan.
Uji  aktivitas  anti  diare  secara  kualitatif selama 1 minggu  penyimpanan
Bakteri  pathogen  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  adalah Escherichia  coli enteropathogenic (EPEC). Prosedur pengujiannya  dilakukan  dengan  metode difusi  agar.  Satu  ose  kultur E.coli diinokulasikan  dalam  media  NB  (Nutrient Broth) 20 ml dan diinkubasi  30 o C selama 24 jam.  Bakteri E.coli kemudian diinokulasikan sebanyak 25µl ke dalam NA (Nutrient Agar), kemudian divortek. Setelah tercampur merata kemudian  dituang  ke  dalam  petridish  steril secara pour  plate dan  dibiarkan  mengeras. Media  NA  yang  telah  mengeras  kemudian dibuat sumuran dengan alat bor steril pada ¼ bagian  tengah  cawan  petri.  Sumuran  yang telah  dibuat  pada  media  NA  diisi  dengan yogurt sesuai perlakuan.
Kemudian diinkubasi  37 o C  selama  24  jam.  Diameter zona  bening  yang  terbentuk  sekitar  sumuran diukur sebagai zona penghambatan Lactobacillus    sp terhadap  bakteri E.  coli enteropathogenik.  Uji  aktivitas  antidiare secara kualitatif ini dilakukan pada minggu
ke  0  dan  minggu  ke  1  setelah  penyimpanan yogurt
Uji  aktivitas anti  diare secara kuantitatif selama 1 minggu  penyimpanan
Aktivitas  antidiare  BAL  terhadap patogen E.coli enteropatogenik  secara kuantitatif  dengan  metode  kontak  langsung. Sebanyak 0,1ml (1%) kultur bakteri pathogen dimasukkan  ke  dalam  10  ml  produk  untuk mengetahui  jumlah E.coli awal  (jam  ke  0), maka  dilakukan platting dengan  media spesifik  EMBA  pada  tingkat  pengenceran produk 10 -6 ,10 -7 dan 10 -8 kemudian dilakukan inkubasi 37 o C selama 24-48 jam.
Sementara  itu,  untuk  mengetahui seberapa  besar  penghambatan  formula yogurt,  maka  bakteri E.  coli (1%) dikontakkan  dengan  masing-masing  formula yogurt  selama  ±  2  jam.  Penentuan  lama waktu  kontak  tersebut  merupakan  waktu bakteri E. coli berada pada fase log (Quigley, 2008).
Setelah itu, jumlah bakteri E.coli akhir dapat  diketahui  dengan  melakukan platting masing-masing formula yang telah ditarungkan  dengan E.coli pada  media EMBA dan diinkubasi pada suhu37 o C selama 24  jam.Efek  penghambatan  masing-masing formula  yogurt  dapat  diketahui  dengan mengurangi  jumlah  E. coli awal  dan E.coli akhir.
Gambar 1. Diagram alir alur penelitian

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji aktivitas anti diare secara kualitatif selama 1 minggu  penyimpanan
Aktifitas  anti  diare  BAL    probiotik indigenous yang  ditambahkan  pada  yogurt dengan  suplementasi  ekstrak  ubi  jalar  ungu dilakukan uji pendahuluan dengan mengamati  zona  hambat  antibakteri  atau antidiare yang dihasilkan terhadap pertumbuhan bakteri Enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) ATCC 35218. Hasil uji  daya  hambat  antidiare  BAL  probiotik indigenous yang  ditambahkan  pada  yogurt dengan  suplementasi  ekstrak  ubi  jalar  ungu terhadap  EPEC  ATCC  35218  dapat  dilihat pada Tabel 2 dan Gambar 3.
Tabel  1  dan  Gambar  2  menunjukkan zona penghambatan antimikrobia (antidiarea)  BAL indigenous pada  yogurt dengan  suplementasi  ekstrak  ubi  jalar  ungu terhadap  EPEC ATCC 35218.
Tabel  1. Hasil  Uji  Daya  Hambat Antimikrobia  BAL Indigenous pada  Yogurt dengan Suplementasi Ekstrak Ubi Jalar Ungu terhadap EPEC ATCC 35218 Perlakuan Diameter Zona Hambat (mm) Y0 12,0 Y1 12.8 Y2 12,3 Y3 12, 5 Pada  Gambar  3  tersebut  dapat  dilihat bahwa  perlakuan  Y1  yaitu  yogurt  dengan suplementasi    ekstrak  ubi  jalar  ungu  dengan
penambahan probiotik
Lactobacilus
plantarum Dad  13  yang  berasal  dari  dadih menunjukkan  zona  hambat  paling  besar sebesar 12, 8 mm diikuti Y3 (yogurt dengan suplementasi  ekstrak  ubi  jalar  ungu  dengan penambahan
probiotik Lactobacilus acidophilus SNP2  yang  berasal  dari  feses bayi  ASI),  Y2  (yogurt  dengan  suplementasi ekstrak  ubi  jalar  ungu  dengan  penambahan probiotik Lactobacilus plantarum Mut7 yang berasal  dari  growol)  dan  Y0  (yogurt  dengan suplementasi  ekstrak  ubi  jalar  ungu  tanpa penambahan probiotik) masing-masing dengan  diameter  zona  hambat  =  12,5  mm, 12,3 mm dan 12,0 mm.
Menurut Davis dan Stout (1971) dalam Maunatin  dkk.(2012)    aktivitas  antibakteri suatu bakteri ditentukan berdasarkan diameter  zona  hambat  bakteri  tersebut terhadap  bakteri  indikator  yang  umumnya berupa bakteri pathogen, dengan kisaran > 20 mm=  sangat  kuat,  10-20  mm  =  kuat,  5-10 mm = sedang dan < 5 mm = lemah. Dari data di atas, ternyata bakteri  probiotik indigenous yang  ditambahkan    pada  yogurt  dengan sulementasi ekstrak ubi jalar ungu mempunyai  zona  penghambatan  rata-rata kuat (12,0-12,8 mm).
Menurut  Ray  (1996),  sensitivitas  suatu bakteri  indikator  yang  umumnya  berupa bakteri pathogen terhadap substrat antimikrobia  dipengaruhi  oleh  lapisan peptidoglikan  yang  menyusun  dinding  sel. Peptidoglikan bakteri Gram negatif hanya 1- 2% dari berat kering sel dibandingkan dengan peptidoglikan  Bakteri  Gram  positif  yang mencapai  20%  berat  kering  sel.  Namun
Gambar  2. Pengukuran  Aktivitas  Antidiare  Bakteri  Pro-biotik Indigenous yang Ditambahkan pada Yogut Ekstrak Ubi Jalar Ungu secara Kualitatif (Berdasarkan Diameter Zona Hambat) selama 1 Minggu  Penyimpanan (Ket:   Yo= 12,0 mm, Y1= 12,8 mm, Y2 = 12,3 mm dan Y3 = 12,5 mm
karena  bakteri  Gram  Negatif  mempunyai membran luar yang  tersusun atas lipoprotein sebesar  30%,  fosfolipid  40-45%  dan  protein 40-45%  maka  bakteri  Gram  negatif  lebih mampu  bertahan    terhadap  lingkungan  luar seperti  senyawa  antibakteri.    EPEC  ATCC 35218  merupakan  bakteri  pathogen  Gram negatif    yang    mempunyai  lapisan peptidoglikan  tipis  namun  relatif    tahan terhadap kerusakan mekanis terhadap senyawa  antimikrobia  BAL,  sehingga  rata- rata    daya  hambat  dari  BAL indigenous yang  ditambahkan  pada  yogurt  dengan suplementasi  ekstrak  ubi  jalar  ungu mempunyai  diameter  antara  12,0-12,8  mm dengan kategori kuat.
Uji    Aktivitas  Anti    Diare  Secara Kuantitatif Selama 1 Minggu Penyimpanan Kemampuan  anti  diare  Bakteri  Asam
Laktat  yang  terdapat  pada  yogurt  dengan suplementasi ekstrak ubi jalar ungu dilakukan dengan  mempertarungkan  antara  Bakteri Asam  Laktat  yang  terdapat  pada  yogurt dengan  suplementasi  ekstrak  ubi  jalar  ungu pada berbagai perlakuan dengan Enteropathogenic Escherichia  coli (EPEC) ATCC  35218,  menggunakan  media  TBX sebagai  media  selektif  pertumbuhan E.coli Pengamatan  dilakukan  dengan  mengamati trend penurunan total E.coli selama 0 dan 1 minggu penyimpanan.
Gambar  3. Jumlah    EPEC    ATCC    35218 (CFU/ml) Selama 1 minggu Penyimpanan Aktifitas  antidiare  BAL  yogurt  dengan suplementasi  ekstrak ubi jalar ungu, dihitung sebagai  pengurangan  jumlah E.  coli mula- mula  (CFU/ml)  terhadap  jumlah E.coli setelah  ditarungkan  dengan  BAL  yang  ada pada  masing-masing  perlakuan  yogurt
dengan  suplementasi  ekstrak  ubi  jalar  ungu selama  1  minggu  penyimpanan  (CFU/ml). Pengujian  antidiare  menggunakan    EPEC (Enteropathogenic Escherichia  coli ATCC 35218)  dikarenakan  bakteri  ini  sering menginfeksi  timbulnya  penyakit yang menyerang  saluran  pencernaan  baik  pada manusia  maupun  hewan  serta  sensitif terhadap  antimikrobia  (antidiare)  yang dihasilkan  BAL  .  Pada  Gambar  3.  terlihat bahwa  jumlah  koloni E.coli mula-mula selama  1  minggu  penyimpanan  rata-rata  10 7 CFU/ml.
Pada  Gambar  3  dapat  dilihat    bahwa saat  awal  penyimpanan  yaitu  minggu  ke  0 atau 4 jam pertama setelah Enteropathogenic Escherichia coli ATCC 35218 dipertarungkan  dengan  BAL indigenous yang  ada  pada  yogurt  dengan  penambahan ekstrak ubi jalar ungu, jumlah
Enteropathogenic Escherichia  coli ATCC 35218  rata-rata  mengalami  penurunan  2  log cycle  atau  10 5 CFU/  ml    pada  semua perlakuan baik pada Y0, Y1, Y2 maupun Y3. Pada  Gambar  4  juga  dapat  dilihat  bahwa setelah  1  minggu  penyimpanan,  jumlah Enteropathogenic Escherichia  coli ATCC 35218 menurun 3 log cycle yaitu menjadi 10 4 CFU/ml  dan  6,25.  10 4 CFU/ml  ,  masing- masing    setelah  ditarungkan  dengan  BAL yang  ada  pada  yogurt  dengan  penambahan ekstrak  ubi  jalar  ungu  pada  perlakuan  Y0, (yogurt dengan penambahan ekstrak ubi jalar ungu tanpa probiotik) dan Y3 (yogurt dengan penambahan  ekstrak  ubi  jalar  ungu  dan penambahan probiotik Lactobaciluus acidophilus SNP2  yang  berasal  dari  feses bayi  yang  menkonsumsi  ASI).  Jumlah Enteropathogenic Escherichia  coli ATCC 35218  mengalami  penurunan  paling  besar sebanyak    5  log cycle yaitu  menjadi  8,5.10 2 CFU/ml setelah dipertarungkan dengan BAL pada perlakuan Y1 (yogurt dengan suplementasi  ekstrak  ubi  jalar  ungu  dan penambahan probiotik Lactobacilus plantarum Dad  13  yang  berasal  dari  dadih), sedangkan jumlah E.coli
mengalami penurunan paling kecil ketika dipertarungkan dengan  BAL  pada  yogurt  dengan  perlakuan Y2 (yogurt dengan suplementasi  ekstrak ubi jalar  ungu  dengan  penambahan  probiotik
Gambar  4.  Jumlah    EPEC    ATCC    35218 (CFU/ml)  setelah  dipertarungkan  dengan Lactobacilus  plantarum  sp indigenous pada Yogurt  yang  disuplementasi  Ubi  Jalar  Ungu selama 1 Minggu Penyimpanan .
Kemampuan  mikrobia  probiotik  BAL indigenous pada  perlakuan  Y1,Y2  maupun Y3  dalam  menekan  pertumbuhan  bakteri pathogen    EPEC  ATCC  35218  disebabkan karena  kemampuannya  untuk  memproduksi senyawa  antimikrobia  sebagai  metabolit primer  seperti  asam  laktat  dan  asam  asetat, hidrogen peroksida dan dengan menghasilkan bakteriosin yang merupakan senyawa protein yang  menunjukkan  aktivitas  antibakteri terhadap bakteri sejenis. Akumulasi senyawa tersebut  di  dalam  sel  terjadi  karena  BAL probiotik  tersebut  tidak  menghasilkan  enzim katalase (Salminen dan Wright, 1993).

## KESIMPULAN
Dari Hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa  :  (1).Aktivitas  antimikrobia  atau antidiare BAL indigenous yang ditambahkan pada  yogurt  dengan  suplementasi  ekstrakubi jalar ungu, secara kualitatif dapat diamati dari besarnya  zona  hambat  (clear  zone)  yang dihasilkan  terhadap  bakteri  indikator  EPEC ATCC  35218.  (2).Besarnya  zona  hambat BAL indigenous yang  ditambahkan  pada yogurt  dengan  suplementasi  ekstrakubi  jalar ungu berturut-turut adalah Y1, Y3,Y2 dan Y0 masing-masing dengan diameter zona hambat sebesar  12,8  mm,  12,  5  mm,12,3  mm  dan 12,0 mm (3). Selama 1 minggu penyimpanan, aktivitas  antidiare  BAL indigenous yang
ditambahkan pada yogurt dengan suplementasi  ekstrak  ubi  jalar  ungu  mampu menurunkan  EPEC  ATCC  35218  sebesar  5 log cycle pada perlakuan Y1, diikuti Y3 dan Y0 sebesar 3 log cycle dan Y 2 sebesar 2 log cycle.

## DAFTAR PUSTAKA
Acheson,  D.  1999. Escherichia  coli .  Food Quality. Vol. 51 N0. 10: 44-46 Andriani,MAM  dan  LU  Khasanah.  2009. Kajian  Karaktristik  Fisiko  Kimia  dan Sensori  Yogurt  dengan  Penambahan Ekstrak Ubi Jalar (Ipomoea batatas  L). Artikel  Ilmiah  Penelitian  Universitas Sebelas Maret . Surakarta Anonim.  2012.  Laporan  Tahunan  Angka Kesakitan  Diare  Rumah  Sakit  Umum
Sukoharjo. Sukoharjo.
____________.  Laporan  Tahunan  Angka Kesakitan  Diare  Rumah  Sakit  Umum
Anonim.  2013.  Laporan  Tahunan  Angka Kesakitan  Diare  Rumah  Sakit  Umum
Sukoharjo. Sukoharjo.
____________.  Laporan  Tahunan  Angka Kesakitan  Diare  Rumah  Sakit  Umum
Anonim. 1989. Microbes in the Intestine; Our Lifelong  Partners.  Yakult  Honsa,  Co. Ltd. Tokyo. Anonymous. 2008 http :// www.codexalimentarius.com/codex stan 243-2003
Astawan,  M  dan  Andreas  Leomitro  Kasih. 2008. Khasiat  Warna-warni  Makanan .
PT Gramedia Pustaka Utama. Jakarta Commane  D,  R  Hughes,  C.  Shortt,  I. Rowland. 2005. The Potensial Mechanisms Involved In The Anticarcinogenic Action Of Probiotics. Mutation Research 591 : 276-289 Maunatin,  Anik  dan  Khanifa.  2012.  Uji Potensi Probiotik Lactobacillus plantarum  Secara  In-Vitro. Alchemy

## Vol 2 No.1: 26-34
Niken  Tari,  A.  I..Catur  Budi  Handayani, Ahimsa  Kandi  Sariri.  2012. Pengaruh Kultur  Indigenous    Lactobacillus  sp
dalam Pembuatan Yogurt Ubi  Ungu  : Kajian  Tingkat  Keasaman,  pH  dan Total  Padatannya. Jurnal  Teknologi Hasil Pertanian UNS.ISSN : 1979-0309
Vol No1 Maret 2012 Parvez    S.,  Malik,  K.A.,  Ah  Kang,S  and Kim,H.Y.  2006.  Probiotics  and  Their Fermented Food Products are Beneficial for Health. Review article.J . Appl. Microbio. 100 : 1171-1185 Ray, B. 1996. Fundamental Food Microbiology .  CRC  Press.Boca  Raton New York London,Tokyo
Salminen  S, Von  Wright A, dan Ouwehand A.  2004. Lactic  acid  Bacteria .New York: marcel Dekker,Inc
Wardani,  H.E.    2003.  Pengaruh  Kombinasi Oligosakarida  dengan Lactobacillus  s p terhadap  Fraksi  Lipid  Serum  Tikus Hiperkolesterolemia. Abstrak Penelitian Pusat Kesehatan Lingkungan.  Universitas  Diponegoro Semarang