Volume 3, Nomor 2, 2016                                                                  http://utu.ac.id/index.php/jurnal.html ISSN: 2355-5572
NETRALISASI MINYAK HATI IKAN CUCUT PISANG ( Charcarinus falciformis ) MENGGUNAKAN NaOH
NEUTRALIZATION OF SILKY SHARK OIL ( Charcarinus falciformis ) WITH NaOH
Nabila Ukhty 1 , Anhar Rozi 2
1 Jurusan Perikanan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Teuku Umar, Meulaboh.
2 Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor, Bogor Korespondensi: nabilaukhty@utu.ac.id

## Abstract
The shark has a yield  by-product from its  liver up to 20% of its body weight, 50% of the total fish oil found on the liver. The aimed of this study was  to determine heavy metal content, fatty acid profilel, and parameter of oxidation after neutralization. The  method  of    heavy  metal  test  for  silky  shark  oil  stated  on  the  SNI  and  fatty  acid analysis referred to AOAC. Neutralization  used NaOH 18°Be temperature (40, 50, 60, 70, and 80°C). The result of oil neutralization with NaOH had heavy metal content meet to  IFOS  (0.1  ppm),  fatty  acid  of  SFA  was  19.58%  ,  MUFA  was  19.26  %,  and  PUFA was  41.58  %.  The  oxidation  result  of  silky  shark  liver  oil  neutralization  indicated  the best treatment at 50°C with peroxide value (PV), p-Anisidine value (p-AV), percentage of  free  fatty  acid  (%  FFA),  acid  value  (AV),  and  total  oxidation  (TOTOX)  were 72,49±0,27  mEq/kg,  8,57±0,46  mEq/kg,  0,28±0,00%,  0,56±0,00  mg  KOH/kg, 13,57±1,01 mEq/kg respectively.
Keywords: fatty acid, neutralization, quality of oil, silky shark

## I. Pendahuluan
Industri perikanan merupakan bidang usaha yang sangat luas dengan multi proses, yang  memiliki  permasalahan  produk  samping  ( by-product ). By-product ini  memiliki potensi  untuk  diolah  menjadi  suatu  produk  yang  memiliki manfaat.  Industri  perikanan yang  salah  satunya  memiliki  hasil  samping  adalah  industri  pengasinan  ikan  cucut, dimana  pengolahan  ini  memiliki  hasil  samping  berupa  hati.  Hati  Ikan  cucut  memiliki rendemen  mencapai  20%  dari  berat  tubuhnya  (Navarro et  al. 2000),  50%  dari  jumlah minyak  ikan  cucut terdapat  pada  bagian hati  (Kjerstad et  al. 2003).  Asam  lemak  yang terkandung dalam hati ikan cucut meliputi asam lemak jenuh dan asam emak tak jenuh. Asam lemak tak jenuh meliputi asam oleat 25,20%, asam linoleat 2,30%, asam linolenat 0,40%,  asam  stearidonat  1,40%,  asam  gondorat  9,20%, asam arachidonat  3,10%, EPA 9,20%, asam erukat 6,60%, DPA 3,40% dan DHA 7,30% (Edward 1976).
Carcharinus  falciformis atau Silky Shark hidup di daerah pantai kedalaman 18 m sampai laut dalam (200 m). Spesies cucut ini merupakan jenis tangkapan target di dalam industri  perikanan  hiu  di  daerah  tropis  maupun  sub  tropis  dan  merupakan  hasil tangkapan  sampingan  yang  besar  dari  kapal longline tuna  dan purseine (Bonfil et  al. 2009). Carcharinus  falciformis atau Silky Shark bukan merupakan jenis ikan hiu yang dilindungi karena jenis ini masih sangat banyak di perairan.
Produksi  minyak  ikan  meliputi  proses  ekstraksi  dan  pemurnian.  Ekstraksi  yang banyak  digunakan  adalah  ekstraksi  basah  ( wet-rendering )  yang  meliputi  pemasakan ikan dengan uap air panas ( steam ) untuk merusak struktur sel dan pengepresan terhadap minyak  yang  telah  dipanaskan  (Suseno  dan  Saraswati  2015).  Damongilala  (2008) mengekstraksi minyak hati cucut botol dengan sistem pemanasan. Produksi minyak ikan dari hasil samping industri ikan sudah banyak dilakukan, yakni pada ikan tuna (Suseno 2015), sardin dan sidat (Suseno et al. 2014).
Netralisasi  merupakan  proses  pemisahan  asam  lemak  bebas  dari  minyak  kasar. Pemisahan  tersebut  dilakukan  dengan  mereaksikan  asam  lemak  bebas  dengan  basa sehingga  membentuk  sabun  (Hernandez  dan  Rathbone  2002).  Basa  yang  biasa digunakan  ialah  kaustik  soda,  karena  harganya  murah  dan  lebih  efisien.  Perbedaan konsentrasi basa berpengaruh terhadap kandungan asam lemak bebas. Semakin banyak jumlah  basa  yang  ditambahkan,  semakin  besar  jumlah  asam  lemak  bebas  yang tersabunkan  (Abdillah  2008).  Konsentrasi  larutan  basa  untuk  netralisasi  dinyatkan dengan  derajat Baume (°Be).  Minyak  dengan  asam  lemak  bebas  kecil  biasanya menggunakan  larutan  basa  yang  lebih  rendah  (8-12°Be),  sedangkan  minyak  dengan asam  lemak  bebas  lebih  tinggi  digunakan  larutan  basa  hingga  20°Be.  Larutan  basa diatas 20°Be biasanya digunakan untuk minyak dengan asam lemak bebas lebih dari 6% (Bernardini 1983).
Penelitian  sebelumnya  melaporkan  bahwa by-product pengolahan  ikan  cucut berpotensial  sebagai  sumber  minyak  ikan  yang  kaya  akan  omega-3  dan  squalen (Undjung  2005;  Damongilala  2008).  Setiono  (2002)  melakukan  netralisasi menggunakan  NaOH  terhadap  minyak  cucut  botol  dengan  kosentrasi  NaOH  terbaik pada  18°Be  menghasilkan  asam  lemak  bebas  sebesar  0,37%.  Feryana et  al. (2014) melakukan  netralisasi  terhadap  minyak  ikan  makerel  dengan  kosentrasi  NaOH  terbaik pada  24°Be  menghasilkan  nilai  FFA  (2,16%),  PV  (5,60  mEq/kg),  anisidin  (14,31 mEq/kg), AV (4,30 mg KOH/kg), dan TOTOX (25,53 mEq/kg). Penelitian ini bertujuan menentukan  kandungan  logam  berat,  profil  asam  lemak  hati  cucut  pisang,  dan parameter oksidasinya setelah dinetralisasi menggunakan NaOH.

## II. Metode Penelitian

## 2.1. Bahan dan Alat
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  meliputi  hati  cucut  pisang, etanol  96%, indikator  phenolphthalein  (indikator  PP),  KOH  (Merck)  0,1  N,  kloroform (Merck),  asam  asetat  glasial  (Merck),  larutan  KI  jenuh,  akuades,  pati  1%,  Na 2 S 2 0 3 (Merck)  0.01  N,  isooktan  (Merck),  reagen  anisidin  (Aldrich  chemistry),  n-heksana (Merck), NaOH (Merck), dan asam lemak standar dari Supelco TM 37 Componen FAME Mix (Bellefonte, USA).
Alat-alat  yang  digunakan  untuk  penentuan  sifat,  ekstraksi  dan  analisis  kualitas minyak  adalah alumunium  foil, stop  watch ,  timbangan digital  (Veritas  dengan  berat maksimal  250  g),  buret  (Iwaki  pyrex),  alat-alat  gelas  (Iwaki  pyrex),  kompor  listrik 600W  (Maspion),  perangkat  kromatogafi  gas  (SHIMADZU  GC  2010  plus  AFA  PC
Jurnal Perikanan Tropis Available online at: Volume 3, Nomor 2, 2016                                                                  http://utu.ac.id/index.php/jurnal.html ISSN: 2355-5572
dengan jenis kolom berupa cyanopropyl methyl sil / capillary column ), sentrifugasi (PLC series), heating  drying  oven (model  DHG-9053A), stirrer (CORNING  PC-4200), waterbath (Julabo  U3),  spektrofotometer  UV-Vis  2500  (LaboMed),  dan  pipet  mikro (Gilson).

## 2.2. Analisis logam berat Cd, Pb, Hg, Ni dan As (BSN 2009)
Analisis dilakukan menggunakan 1 gram contoh, kemudian dimasukkan ke dalam labu  destruksi  100  mL,  ditambah  15  mL  HNO 3 pekat  dan  5  mL  HClO 4 ,  kemudian didiamkan 24 jam. Sampel didestruksi hingga jernih, didinginkan, ditambah 10-20 mL air  bebas  ion,  dipanaskan  ±10  menit,  diangkat,  dan  dinginkan.  Larutan  tersebut dipindahkan ke dalam labu takar 100 mL (labu dekstruksi dibilas dengan air bebas ion dan  dimasukkan  ke  dalam  labu  takar).  Larutan  ditambah  air  sampai  batas  tanda  tera, kemudian dikocok dan disaring dengan kertas saring Whatman no.4. Sampel dipreparasi dan dianalisis sesuai dengan pengujian logam berat (Cd, Pb, Hg, Ni,  As) pada analisis air (APHA 3110 untuk logam Cd, Pb, dan Ni; metode 3114 untuk As; dan metode 3112 untuk  Hg).  Filtrat  dianalisis  menggunakan Atomic  Absorption  Spectroscopy (AAS). Analisis kandungan logam dapat dihitung dengan persamaan berikut:
Kadar logam (ppm) = Konsentrasi logam dari kurva rendah (µg/mL) x V pelarutan

## Bobot sampel
2.3.  Analisis  profil  asam  lemak  menggunakan Gas  Chromatography (AOAC  2005 No. metode 969.33)
Metode  analisis  yang  digunakan  menggunakan  prinsip  mengubah  asam  lemak menjadi turunannya,  yaitu metil ester sehingga dapat terdeteksi oleh alat kromatografi. Hasil  analisis  akan  ditunjukkan  melalui  beberapa  puncak  pada  waktu  retensi  tertentu sesuai  dengan  karakter  masing-masing  asam  lemak  dan  dibandingkan  dengan  standar. Lemak diekstraksi dari bahan terlebih dahulu sebelum melakukan injeksi metil ester lalu metilasi dilakukan sehingga terbentuk metil ester dari masing-masing asam lemak yang didapat.

## 2.4.  Pembentukan metil ester
Asam-asam  lemak  diubah  menjadi  ester-ester  metil  atau  alkil  yang  lainnya sebelum disuntikkan ke dalam kromatografi gas.  Metilasi dilakukan dengan merefluks lemak  di  atas  penangas  air  dengan  pereaksi  berturut-turut  NaOH-metanol  0,5  N,  BF3 dan  n-heksana.  Sebanyak  0,02  g  minyak  dari  sampel  dimasukkan  ke  dalam  tabung reaksi  dan  ditambah  5  mL  NaOH-metanol  0,5  N  lalu  dipanaskan  dalam  penangas  air selama 20 menit pada suhu 80ºC kemudian didinginkan. BF3 sebanyak 5 mL ditambah ke  dalam  tabung  lalu  dipanaskan  kembali  menggunakan waterbath dengan  suhu  80ºC selama 20 menit dan didinginkan. NaCl jenuh ditambah 2 mL dan dikocok,  selanjutnya ditambah  5  mL  heksana,  kemudian  dikocok.  Larutan  heksana  di  bagian  atas dipindahkan  dengan  bantuan  pipet  tetes  ke  dalam  tabung  reaksi.  1  μL  sampel  lemak
diinjeksikan ke dalam gas chromatography . Asam lemak akan diidentifikasi oleh flame ionization  detector (FID)  atau  detektor  ionisasi  nyala,  respon  yang  ada  akan  tercatat melalui kromatogram (peak).

## 2.5. Idenfikasi asam lemak
Identifikasi  asam  lemak  dilakukan  dengan  menginjeksikan  metil  ester  pada  alat kromatografi  gas  Shimadzu  GC  2010  Plus.  Gas  yang  digunakan  sebagai  fase  gerak adalah  gas  nitrogen  dengan  laju  alir  30  mL/menit  dan  sebagai  gas  pembakar  adalah hidrogen  dan  oksigen,  kolom  yang  digunakan  adalah capilary  column merk  Quadrex dengan diameter dalam 0,25 mm.
a) Kolom : Cyanopropil methyl sil ( capilary column ) b) Dimensi kolom : P = 60 m, Ø dalam = 0,25 mm, 0,25 μm film Thickness c) Laju alir N2 : 30 mL/menit d) Laju alir H2 : 40 mL/menit e) Laju alir udara : 400 mL/menit f) Suhu injektor : 220ºC g) Suhu detektor : 240ºC h) Inject volume : 1 μL
2.6.  Analisis  asam  lemak  bebas/ free  fatty  acid (FFA)  (AOCS  1998  No.  Metode Ca 5a-40)
Minyak  10  g  ditambah  25  mL  alkohol  95%  netral  (Erlenmeyer  200  mL), dipanaskan dalam penangas air selama 10 menit, ditambah indikator PP sebanyak 2 mL. Campuran  minyak  tersebut  dititrasi  dengan  KOH  0,1  N  hingga  timbul  warna  merah muda  yang  tidak  hilang  dalam  10  detik.  Persentase  FFA  dihitung  berdasarkan persamaan berikut:
%FFA= A x N x M
10G
Keterangan:
A : Jumlah titrasi KOH (mL) N : Normalitas KOH G : Gram sampel M : Bobot molekul asam lemak dominan (asam oleat : 282,5)

## 2.7. Analisis Nilai Peroksida (PV) (AOCS 1998)
Nilai  peroksida  dianalisis  dengan  metode  AOCS  Cd-8b-90  yaitu  menentukan bilangan  peroksida  menggunakan  prinsip  titrasi  iodin  yang  dilepaskan  dari  senyawa potassium  iodida  oleh  peroksida  menggunakan  standar  larutan  tiosulfat  sebagai  titran dan larutan pati sebagai indikator. Metode ini mendeteksi semua zat yang mengoksidasi potassium  iodida  dalam  kondisi  asam.  Sampel  ditimbang  sebanyak  5  g  dimasukkan dalam  labu  erlenmeyer  ukuran  250  mL,  ditambah  30  mL  larutan  asam  asetat  dan kloroform  dengan  perbandingan  3:2,  kemudian  ditambah  0,5  mL  larutan  potassium
Jurnal Perikanan Tropis Available online at: Volume 3, Nomor 2, 2016                                                                  http://utu.ac.id/index.php/jurnal.html ISSN: 2355-5572
iodide  (KI),  larutan  kemudian  dikocok  dengan  hati-hati  agar  tercampur,  kemudian ditambah  30  mL  akuades.  Tahap  selanjutnya  larutan  dititrasi  dengan  0,01  N  sodium tiosulfate (Na 2 S 2 O 3 ) hingga larutan berubah warna menjadi kuning, setelah itu ditambah 0,5  mL  larutan  indikator  kanji  1%  yang  akan  mengubah  warna  larutan  menjadi  biru, titrasi  dilanjutkan  bersamaan  dengan  terus  mengocok  larutan  hingga  berubah  warna menjadi  biru  muda  yang  menandakan  pelepasan  iodine  dari  lapisan  kloroform,  titrasi dilanjutkan  dengan  hati-hati  hingga  warna  biru  pada  larutan  hilang.  Perhitungan  nilai peroksida dilakukan dengan persamaan berikut:
Nilai peroksida = S x M x 1000 Berat sampel (g)
Keterangan: S : Jumlah sodium tiosulfate (mL)
M : Konsentrasi sodium tiosulfate (0,01 N)
2.8. Analisis nilai anisidin/ anisidine value (p-AV) (Watson 1994)
Larutan  uji  1  dibuat  dengan  cara  1  gram  sampel  dilarutkan  ke  dalam  25  mL trimethylpentane .  Larutan  uji  2  dibuat  dengan  cara  1  mL  larutan anisidin (2,5  g/L) ditambah  ke  dalam  5  mL  larutan  uji  1,  dikocok  dan  dihindarkan  dari  cahaya.  Larutan referensi dibuat dengan cara 1 mL larutan anisidin (2,5 g/L) ditambah ke dalam 5 mL larutan trimethylpentane , dikocok dan dihindarkan dari cahaya. Nilai absorbansi larutan uji  1  diukur  pada  panjang  gelombang  350  nm,  larutan  uji  2  diukur  pada  panjang gelombang  350  nm  tepat  10  menit  setelah  menyiapkan  larutan  dengan  menggunakan larutan referensi sebagai kompensasi. Nilai anisidin dihitung dengan persamaan berikut:
Nilai anisidin = 25 X ( 1 , 2 A2-A1 )
m Keterangan:
A1 : Absorbansi larutan uji 1
A2 : Absorbansi larutan uji 2
m : Gram sampel yang digunakan pada larutan uji 1

## 2.9.  Analisis nilai total oksidasi (TOTOX) (Perrin 1996)
Nilai  total  oksidasi  didapat  dengan  menjumlahkan  nilai  2PV  dengan  p-AV. Peroxide  value (PV)  adalah  nilai  peroksida  dan anisidin  value (p-AV)  adalah  nilai anisidin.
Total oksidasi = 2PV + p-AV

## 2.10. Analisis Bilangan Asam (AV) (AOCS 1998)
Nilai keasaman dianalisis berdasarkan metode AOCS Ca 5a-40. Penentuan derajat keasaman  dilakukan  dengan  cara  titrasi  KOH  terhadap  sampel,  yang  menggunakan prinsip  jumlah  KOH  yang  diperlukan  (mg)  untuk  menetralkan  1  g  lemak.  Persamaan untuk mendapatkan derajat kejernihan (mg KOH/mL lemak) adalah:
Derajat keasaman = V x N x K 10G
Keterangan:
N : Konsentrasi KOH (mg/mL) V : Volume KOH untuk titrasi (mL) K : Berat molekul KOH (56,1) G : Berat sampel (g)

## 2.11. Pengukuran viskositas (O'Brien 2009)
Viskositas diukur menggunakan alat brookfield viscometer . Sampel sebanyak 100 mL ditempatkan ke dalam gelas piala 100 mL. Spindle 2 dan speed 30 rpm digunakan untuk melakukan pengukuran viskositas. Pengukuran dilakukan  selama 2 menit hingga memperoleh pembacaan jarum pada posisi  yang stabil. Rotor berputar dan jarum akan bergerak  sampai memperoleh  viskositas  sampel.  Pembacaan  nilai  viskositas  dilakukan setelah jarum stabil. Skala yang terbaca menunjukkan kekentalan sampel yang diperiksa dengan satuan cP (centiPoise).
Brookfield  viscometer merupakan  salah  satu  viskometer  yang  menggunakan gasing  atau  kumparan  yang  dicelupkan  ke  dalam  zat  uji.  Kumparan  ( spindle )  tersedia untuk rentang kekentalan tertentu dan dilengkapi dengan kecepatan rotasi yang berbeda. Prinsip  kerja  dari  viskometer  ini  adalah  semakin  kuat  putaran  semakin  tinggi viskositasnya sehingga hambatan semakin besar. Gaya gesek antara permukaan spindle dengan cairan akan menentukan tingkat viskositas cairan.

## 2.12.  Analisis Data (Walpole dan Ronald 1995)
Analisis  statistik  yang  digunakan  yaitu  RAL  (Rancangan  acak  lengkap)  pada evaluasi kualitas minyak hati cucut. Analisis data dilakukan dengan Analysis of Variant (ANOVA)  pada  selang  kepercayaan  95%  (α  =  0,05).  Perlakuan  yang  berpengaruh terhadap respon, selanjutnya diuji lanjut Duncan , dengan rumus sebagai berikut :
Y ij = μ + α i + Σ ij
Keterangan: μ = Rataan umum
Y ij = Respon pengaruh perlakuan pada taraf i ulangan ke-j
Σ ij = Galat  ke-i, ulangan ke-j α i = Pengaruh perlakuan pada taraf ke-i
III. Hasil dan Pembahasan

## 3.1. Residu Logam Berat
Residu logam berat yang terdapat pada minyak hati ikan cucut pisang yang sudah dinetralisasi  dengan  menggunakan  NaOH  masih  dalam  ambang  batas  yang  ditetapkan IFOS (2011). Logam berat merupakan bahan yang berbahaya yakni apabila terkonsumsi melebihi ambang batasnya karena dapat merusak atau menurunkan fungsi sistem syaraf
Jurnal Perikanan Tropis Available online at: Volume 3, Nomor 2, 2016                                                                  http://utu.ac.id/index.php/jurnal.html ISSN: 2355-5572
pusat, merusak  komposisi darah, paru-paru, ginjal dan organ vital lainnya (Rochyatun dan  Rozak  2007).  Residu  logam  berat  pada  hati  ikan  cucut  pisang  ditunjukkan  pada Tabel 1.
Tabel 1 Residu logam berat minyak hati cucut pisang ( Charcharinus falciformis ) Logam berat ppm IFOS Timbal (Pb) Kadnium (Cd) Merkuri (Hg) Arsen (As) Nikel (Ni) < 0,005
0,08 < 0,005 < 0,005 < 0,005 ≤ 0,1

## 3.2. Profil Asam Lemak
Uji asam lemak minyak yang telah dinetralkan menggunakan NaOH menghasilkan 27 asam lemak, minyak ikan tersebut tergolong dalam asam lemak jenuh/ Saturated Fatty Acid (SFA)  sebanyak  11  jenis  dan  memperoleh  19,58%  dari  total  asam  lemak  yang terindentifikasi,  asam  palmitat  mendominasi  dari  SFA  tersebut.  Asam  lemak  tak  jenuh tunggal/ Mono Unsaturated Fatty Acid (MUFA) yang teridentifikasi berjumlah 6 jenis dan asam  oleat  mendominasi  MUFA  dan  memperoleh  19,26%  dari  total  asam  lemak  yang teridentifikasi.  Asam  lemak  tak  jenuh  jamak/ Poly  Unsaturated  Fatty  Acid (PUFA) sebanyak  10  jenis  dan  DHA  mendominasi  PUFA.  Total  PUFA  yang  teridentifikasi berjumlah 41,58%.
Huli et  al (2014)  melakukan  penelitian  mengenai  komposisi  asam  lemak  minyak ikan  swangi,  metode  Bligh  &  Dyer  menghasilkan  asam  lemak  sebesar  68,08%,  metode sokhlet sebesar 61,63%, dan metode wet rendering sebesar 62,64%. Pratama et al. (2011) menyatakan  bahwa  asam  lemak  akan  berbeda  antar  spesies  ikan  dan  ketetersediaan makanan juga mempengaruhi.  Hasil penilitian menunjukkan  persentase total asam lemak ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel  2  Persentase  profil  asam  lemak  minyak  hati  cucut  pisang  ( Charcharinus falciformis ) Nama asam lemak Struktur Persentase Asam laurat C12:0 0.06 Asam tridekanoat C13:0 - Asam miristat C14:0 1.23 Asam pentadekanoat C15:0 0.17 Asam palmitat C16:0 14.81 Asam heptadekanoat C17:0 0.43 Asam stearat C18:0 1.89 Asam arakidat C20:0 0.87 Asam heneikosanat C21:0 0.02
Asam behenat C22:0 0.04 Asam tricosanoat C23:0 0.02 Asam lignoserat C24:0 0.03 Total SFA 19.58 Asam miristoleat C14:1 0.04 Asam palmitat C16:1 0.22 Asam cis-10-heptadecanoat C17:1 - Asam Elaidat C18:1n-9t 0.09 Asam oleat C18:1n-9c 18.21 Asam cis-11-eicosenoat C20:1 0.64 Asam erukat C22:1n-9 - Asam Nervonat C24:1 0.03 Total MUFA 19.26 Asam linoleat C18:2n6c 8.36 Asam cis-11, 14- eicosedienoat C20:2 0.50 Asam cis-13, 16- docosadienoat C22:2 0.03 Asam γ-linolenat C18:3n-6 0.19 Asam linolenat C18:3n-3 7.65 Asam cis-8, 11, 14- eicosetrienoat C20:3n-6 0.48 Asam cis-11,14,17- eicosetrienoat C20:3n-3 0.54 Asam arachidonat C20:4n-6 1.05 Asam eicosapentaenoat (EPA) C20:5n-3 4.81 Asam docosahesaenoat (DHA) C22:6n-3 17.97 Total PUFA 41.58 Total asam lemak teridentifikasi 80.24 Tidak teridentifikasi 19.58

## 3.3. Netralisasi Minyak dengan NaOH
Netralisasi minyak menggunakan NaOH 18°Be antara suhu 40°C dan 50°C tidak berbeda  nyata,  kedua  suhu  ekstraksi  menghasilkan  kualitas  minyak  yang  sudah memenuhi  standar  IFOS.  Setiono  (2002)  melakukan  netralisasi  terhadap  minyak  ikan cucut botol menggunakan NaOH dengan konsentrasi terbaik pada 18°Be menghasilkan asam lemak bebas sebesar 0,37%. Feryana et al. (2014) melakukan netralisasi terhadap minyak ikan makerel dengan kosentrasi NaOH  pada 24°Be menghasilkan  minyak ikan
Jurnal Perikanan Tropis Available online at: Volume 3, Nomor 2, 2016                                                                  http://utu.ac.id/index.php/jurnal.html ISSN: 2355-5572
dengan  nilai  FFA  sebesar  2,16%,  PV  sebesar  5,60  mEq/kg,  anisidin  sebesar  14,31 mEq/kg, AV sebesar 4,30 mg KOH/kg, dan TOTOX sebesar 25,53 mEq/kg.
Konsentrasi larutan basa untuk netralisasi dinyatkan dengan derajat Baume (°Be). Minyak dengan asam lemak bebas kecil biasanya menggunakan larutan basa yang lebih rendah (8-12°Be), sedangkan minyak dengan asam lemak bebas lebih tinggi digunakan larutan  basa  hingga  20°Be.  Larutan  basa  diatas  20°Be  biasanya  digunakan  untuk minyak dengan asam lemak bebas lebih dari 6% (Bernardini 1983). Minyak yang telah di netralkan menggunakan NaOH ditunjukkan pada Gambar 1.

## Gambar 1 Minyak hasil netralisasi dengan menggunakan NaOH
3.4. Parameter Oksidasi
3.4.1. Nilai Peroksida (PV),  Nilai p-Anisidin (p-AV) , dan Nilai TOTOX
Nilai peroksida terendah didapatkan pada suhu 50°C sedangkan nilai tertinggi pada suhu 80°C. Nilai p-anisidin terendah didapatkan pada suhu 40°C, sedangkan nilai tertinggi pada  suhu  80°C.  Nilai  total  oksidasi  terbaik  yang  didapatkan  pada  penelitian  ini  pada suhu  50°C  dan  merupakan  nilai  terendah  dibandingkan  dengan  perlakuan  suhu  lain, sedangkan nilai terbesar didapatkan pada suhu 80°C.
Kerusakan  minyak  ikan  disebabkan  oleh  cahaya,  panas,  peroksida  lemak,  logam berat,  hemoglobin,  mioglobin,  klorofil  dan  enzim  lipooksidase  (Ketaren  2008).  Nilai oksidasi sangat penting sebagai indikator mutu darin minyak tersebut, semakin rendah nilai oksidasi maka kualitas minyak akan semakin baik. International Fish Oil Standard (IFOS) menetapkan nilai bilangan peroksida < 3,75 meq/kg sebagai standar minyak kategori layak konsumsi.
Analisis nilai peroksida terhadap minyak netral dilakukan untuk menentukan jumlah hidroperoksida  pada  minyak  yang  merupakan  hasil  proses  oksidasi  primer  (Aidos et  al . 2002). Aidos et al. (2001) menyatakan bahwa nilai peroksida sangat tergantung pada suhu, semakin rendah suhu pada saat ekstraksi minyak maka semakin baik kualitas minyak ikan. Nilai peroksida ditunjukkan pada Tabel 3.
Tabel 3 Analisis nilai peroksida minyak hati cucut pisang ( Charcharinus falciformis ) Perlakuan Suhu Nilai peroksida (mEq/kg) Nilai p-Anisidin (mEq/kg) Nilai TOTOX (mEq/Kg) 40°C 2,66 ±0,00 a 8,31±0,42 a 13,64±0,04 a 50°C 2,49 ±0,27 a 8,57±0,46 a 13,57±1,01 a 60°C 4,27±0,05 b 11,33±0,83 b 19,87±0,95 b 70°C 4,98±0,44 c 13,23±0,29 c 23,20±1,18 c 80°C 8,49±0,25 d 16,48±0,05 d 33,46±0,55 d
Keterangan  :  Huruf superscript yang  berbeda  pada  kolom  yang  sama  menunjukkan  adanya  perbedaan nyata (p<0,05)
Analisis  p-anisidin  dilakukan  untuk  mengetahui  oksidasi  sekunder  yang  terjadi pada  minyak  yang  dicirikan  oleh  degradasi  lemak  yang  diinisiasi  oleh  hidroperoksida, sehingga menghasilkan produk samping karbonil yang bersifat non-volatile (Aidos et al. 2002).  Aldehid  didalam  minyak  dan  reagen  p-anisidine  bereaksi  dalam  kondisi  asam dan  ekspresi  warna  pada  minyak  sangat  tergantung  kepada  jumlah  aldehid  dan strukturnya  (O’Brien  2009).  Minyak  dengan  kualitas  baik  harus  memiliki  nilai  p- anisidin ≤15 mEq/kg (BPOM-RI dan IFOS). Nilai p-anisidin ditunjukkan pada Tabel 3.
Total  oksidasi  merupakan  penjumlahan  x  2  nilai  peroksida  dan  p-anisidin (Perrin  1996).  Nilai  TOTOX  untuk  minyak  layak  konsumsi  berkisar  antara  10-60 mEq/kg (Bimbo 1998). IFOS menyatakan minyak layak konsumsi harus memiliki nilai TOTOX dibawah 20 mEq/kg. Nilai total oksidasi ditunjukan pada Tabel 3.

## 3.4.2 Persentase Asam Lemak Bebas (%FFA)
Persentase asam lemak bebas dimana perlakuan suhu 40ºC dan 50ºC memberikan nilai  terbaik,  sedangkan  nilai  tertinggi  didapatkan  pada  suhu  80°C.  FFA  merupakan produk  dari  reaksi  hidrolisis  triasilgliserida  yang  berkaitan  erat  dengan  proses penyimpanan.  Sathivel et  al. (2003)  menyatakan  nilai  FFA  sangat  berkaitan  dengan jumlah alkali yang akan digunakan pada proses pemurnian.
Minyak  yang  memiliki  persentase  asam  lemak  bebas  yang  tinggi  akan  memiliki aroma dan rasa yang kurang baik (Sathivel et al. 2003). Parameter oksidasi primer dan sekunder  berhubungan  erat  dengan  warna,  bau,  rasa  dan  pengotor  lain  dalam  minyak ikan (Suseno et al. 2012). Nilai persentase asam lemak bebas ditunjukkan pada Tabel 4.

## 3.4.3 Bilangan Asam (AV)
Nilai bilangan asam terendah pada suhu 40ºC dan 50°C, sedangkan nilai tertinggi didapatkan pada suhu 80°C. Nilai bilangan asam berkaitan erat dengan jumlah   KOH yang  digunakan  untuk  menetralkan  1  g  minyak.  Bilangan  asam  sangat  mempunyai hubungan  dengan  nilai  asam  lemak  bebas  (FFA).  Bilangan  asam  didapatkan  dengan perkalian  konstanta  1,99  dengan  nilai  asam  lemak  bebas  (FFA).  Meningkatnya ketengikan minyak adalah karena perubahan triasilgliserida (TAG) menjadi asam lemak bebas dan gliserol. Nilai bilangan asam ditunjukkan pada Tabel 4.
Jurnal Perikanan Tropis Available online at: Volume 3, Nomor 2, 2016                                                                  http://utu.ac.id/index.php/jurnal.html ISSN: 2355-5572
Tabel 4 Persentase asam lemak bebas (FFA) dan bilangan asam (AV) minyak hati cucut pisang ( Charcharinus falciformis ) Perlakuan suhu Asam lemak bebas (%FFA) Bilangan asam (mg KOH/Kg) 40°C 0,28±0,00 a 0,56±0,00 a 50°C 0,28±0,00 a 0,56±0,00 a 60°C 0,48±0,06 b 0,96±0,12 b 70°C 0,67±0,00 c 1,34±0,01 c 80°C 0,70±0,00 c 1,40±0,00 c
Keterangan : Huruf superscript yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan adanya perbedaan nyata (p<0,05).
Kualitas asam lemak bebas, kadar air, warna, nilai p-anisidin, dan nilai peroksida minyak  ikan  sangat  menentukan  harga  minyak  ikan  tersebut  di  pasaran  (European Comission 2006). Bilangan asam merupakan parameter yang penting untuk menentukan keberadaan  nilai  FFA  dan  komponen  asam  non-lemak  lainnya.  Bilangan  asam  sangat tergantung  pada  komposisi  minyak,  metode  ekstraksi,  dan  kesegaran  bahan  mentah (Aidos et al. 2002).

## IV. Kesimpulan
Residu logam berat berada dalam ambang batas yang ditetapkan oleh IFOS. Profil asam  lemak  meliputi  SFA  sebesar  19,58%  %,  MUFA  sebesar  19,26%,  dan  PUFA sebesar  41,58%.  Perlakuan  suhu  50°C  merupakan  perlakuan  terbaik  berdasarkan  uji parameter  oksidasi.  Perlakuan  suhu  50°C  menghasilkan  nilai  peroksida  (PV)  sebesar 2,49±0,27  mEq/kg;  nilai  p-Anisidin  (p-AV)  sebesar  8,57±0,46  mEq/kg;  nilai  total oksidasi (TOTOX) sebesar 13,57±1,01 mEq/kg; persentase asam lemak bebas (%FFA) sebesar 0,28±0,00% dan bilangan asam (AV) sebesar 0,56±0,00 mg KOH/kg.

## Daftar pustaka
Abdillah, M. H. 2008. Pemurnian minyak dari limbah pengolahan ikan. [skripsi]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor.
Aidos  I., van-der-Padt A.,  Boom R. M &  Luten J. B. 2002. Seasonal changes in crude and  lipid  composition  of  herring  fillets,  by-products  and  respective  produced oils. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50: 4589-4599.
[AOAC] Association of Official Analytical Chemist. 2005. Official Method of Analysis of the Association of Official Analytical of Chemist . Arlington: The Association of Analytical Chemist, Inc.
[AOCS]  American  Oil  Chemists  Society.  1998. Official  Methods  and  Recommended Practices of the American Oil Chemists’ Society . Champaign: AOCS Press.
Bernardini E. 1983. Vegetable Oils an Fats Processing. Italy (IT): Intertamps House.
Bimbo A. P. 1998. Guidelines for characterizing food-grade fish oil. Inform , 9: 473-483.
Volume 3, Nomor 2, 2016 ISSN: 2355-5572
Bonfil R., Amorim A., Anderson C., Arauz R., Baum J., Clarke S. C., Graham R. T., Gonzalez M., Jolón M., Kyne P. M., Mancini P., Márquez F., Ruíz C. & Smith W. 2009. Carcharhinus falciformis . The IUCN Red List of Threatened Species.
[BSN] Badan Standardisasi Nasional. 2009. Tentang Batas Maksimum Cemaran Logam Berat dalam Pangan. SNI 7387:2009. Jakarta: Badan Standarisasi Nasional.
Damongilala L. J. 2008. Kandungan asam lemak tak jenuh minyak hati ikan cucut botol ( Centrophorus sp.)  yang  diekstraksi  dengan  cara  pemanasan. Jurnal  Ilmiah Sains . 2(8): 249-253.
[EC]  European  Commission.  2006.  Commission  regulation  (EC)  No  1199/2006 amending  regulation  (EC)  No  466/2001  setting  maximum  levels  for  certain contaminants in food stuffs as regards dioxins and dioxin-like PCBs. Off. J. EU, L32/34.
Edward H. G. Jr. 1976. Fatty Acid Composition . Di dalam Stansby ME. Fish Oils, Their Chemistry,  Technology,  Stability,  Nutritional,  Properties,  and  Uses .  Westport Connecticut (US): The AVI Publishing Company, Inc.
Feryana  I.  W.  K.,  Suseno  S.  H.  &  Nurjanah.  2014.  Pemurnian  minyak  ikan  makerel hasil  samping  penepungan  dengan  netralisasi  alkali. Jurnal  Pengolahan  Hasil Perikanan Indonesia. 17: 207-214.
Hernandez E. & Rathbone S. 2002. Refining of glyseride oils by treatment with silicate solutions and filtration. US Patent 6: 448-453.
Huli  L.  O.,  Suseno  S.  H.  &  Santoso  J.  2014.  Kualitas  minyak  ikan  dari  kulit  ikan swangi. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia. 17 (3): 233-242.
[IFOS]  International  Fish  Oils  Standard.  2011. Fish  Oil  Purity  Standards . http://www.omegavia.com/best-fish-oil-supplement-3/ [26 Maret 2016].
Ketaren  S.  2008. Pengantar  Teknologi  Minyak  dan  Lemak  Pangan .  Bogor  (ID):  Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi, Institut Pertanian Bogor.
Kjerstad M.,  Fosse  I. &  Willemsem H. 2003. Utilization of deep–sea sharks at Hatton Bank  in  the  North  Atlantic. Journal  of  Northwest  Atlantic  Fisheries  Science . (31): 333–338.
Navarro G., Pacheco R., Vallejo B., Ramirez J. & Bolaños A. 2000. Lipid composition of  the  liver  oil  of  shark  species  from  the  Caribbean  and  Gulf  of  California waters. Journal of Food Composition and Analysis . 13: 791-798.
O’Brien  R.  D.  2009. Fats  and  oils:  Formulating  and  processing  for  application ,  3 rd edition , London (UK): CRC press.
Perrin J.  L. 1996. Determination of Alteration. In: Karleskind A, Wolff JP. (Eds.) Oils and Fats, Manual vol. 2 . France (FR): Lavoisier Publishing.
Pratama  R.  I.,  Awaludin  M.  Y.  &  Ishmayan  S.  2011.  Komposisi  asam  lemak  ikan tongkol,  layur,  dan  tenggiri  dari  Pameungpeuk,  Garut. Jurnal  Akuatika. 2(2): 107-115.
Jurnal Perikanan Tropis Available online at: Volume 3, Nomor 2, 2016                                                                  http://utu.ac.id/index.php/jurnal.html ISSN: 2355-5572
Rochyatun  E.  &  Rozak  A.  2007.  Pemantauan  kadar  logam  berat  dalam  sedimen  di perairan teluk Jakarta. Jurnal Makara, Sains . 11: 28-36.
Sathivel  S.,  Prinyawiwatkul  W.,  King  J.  M.,  Grimm  C.  C.  &  Lloyd  S.  2003.  Oil production  from  catfish  viscera. Journal  of  American  Oil  Chemistry  Society. 80(4): 277–382.
Setiono  E.  H.  2002.  Pemurnian  minyak  kasar  hati  ikan  cucut  ( crude  shark  liver  oil ) dengan  metode  netralisasi  dan  pemucatan  [skripsi].  Bogor:  Institut  Pertanian Bogor.
Suseno  S.H.  &  Saraswati.  2015. Teknologi  Industri  Minyak  Ikan .  Bogor  (ID)  :  IPB Press.
Suseno S.H., Syari C., Zakiyah E.R., Jacoeb A. M., Izaki A.Y., Saraswati & Hayati S. 2014.  Low  temperature  extraction  and  quality  of  oil  from  spotted  sardinella ( Amblygaster srim ) and goldstrip sardinella ( Sardinella gibbosa ). World Journal of Fish and Marine Sciences. 6(5): 435-440.
Suseno S. H. 2014. Fatty acid profiles of tropical eel ( Anguila sp.) by-products. Advance Journal of Food Science and Technology. 6(6): 802-806.
Suseno S. H. 2015. Proximate, fatty acid, amino acid and mineral composition of tuna ( Thunnus sp.)  by-product  from  West  Sumatra  Povince,  Indonesia. Pakistan Journal of Nutrition. 14(1): 62-66.
Undjung  D.  2005.  Continous  production  of  pure  squalene  by  using  column chomatography. Indo. J. Chem . 5(3): 251-254.
Walpole  &  Ronald  E.  1995. Pengantar  Statistika .  Edisi  ke-3.  Bandung  (ID):  Institut Teknologi Bandung.
Watson  CA.  1994. Official  and  standardized  methods  of  analysis  (Third  Ed.) . Cambridge (UK): The Royal Society of Chemistry.