Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Karet  Kebo  ( Ficus  elastica ) dengan  Metode  Peredaman  Radikal  Bebas  DPPH  ( 1,1-Diphenyl-2- Picrylhydrazil )
( Antioxidant  Assay  of  Ficus  elastica  Leaf  Extract  with  DPPH ( 1,1-diphenyl-2- phycrilhydrazyl ) Free Radical Scavenging Method )
Selpida Handayani 1 , Ida Kurniawati 1 , Faradiba Abdul Rasyid 1*
1* Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia, Makassar, Indonesia. E-mail: faradiba.faradiba@umi.ac.id
Article Info: Received: 18 Februari 2020 in revised form: 10 Maret 2020 Accepted: 14 Maret 2020 Available Online: 15 Maret 2020

## ABSTRACT
Ficus  elastica leaf  is  one  of  the  Ficus  species  assumed  to  be  rich  in polyphenols  so  that  it  can  act  as  an  antioxidant.  The  research  aimed  to determine  the  antioxidant  activity  and  IC 50 value  of  methanol  and  water extracts  of  rubber  leaf.  In  this  research,  the  extraction  was  conducted  by maceration using methanol and obtained the yield value of 7,03%, while the infundation  using  water obtained the  yield value of 2,82%. The antioxidant activity  test  was  conducted  by  DPPH  ( 1,1-diphenyl-2-phycrilhydrazyl )  free radical  scavenging    using  a  quercetin  as  comparator.  The  qualitative  tests were conducted by TLC method using dicloromethane:methanol eluent with a ratio of 99:1 for methanol extracts, and a ratio of 95:5 for  water extracts, where all extracts of both methanol and water positively contain antioxidants characterized by the formation of yellow spots with a purple background on TLC  plates.  The  results  of  the  quantitative  test  showed  that  the  methanol extract had medium antioxidant activity with an IC 50 value of 78,39 µg/mL, and  water extract had an inactive antioxidant activity  with  an IC 50 value of 319,11  µg/mL.  Meanwhile,  quercetin  was  classified  as  a  very  strong antioxidant with an IC 50 value of 7,62 µg/mL.
Keywords : Antioxidants Ficus elastica Leaf 1,1-diphenyl-2-phycrilhydrazyl
Corresponding Author: Faradiba Abdul Rasyid Jurusan Farmasi
Fakultas Farmasi Universitas Muslim Indonesia Makassar Indonesia
90231 email: faradiba.faradiba@umi.ac.id
Copyright © 2019 JFG-UNTAD
This open access article is distributed under a Creative Commons Attribution (CC-BY-NC-SA) 4.0 International license.
How to cite (APA 6 th Style):
Handayani,  S.,  Kurniawati,  I.,  Rasyid,  F.  A.  (2020).  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Karet  Kebo (Ficus  elastica) dengan  Metode  Peredaman  Radikal  Bebas  DPPH  ( 1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazil ). Jurnal  Farmasi  Galenika  :Galenika Journal of Pharmacy (e-Journal), 6 (1), 141-150. doi:10.22487/j24428744.2020.v6.i1.15022
Jurnal Farmasi Galenika ( Galenika Journal of Pharmacy ) (e-Journal) 2020; 6(1): 141 – 150 ISSN : 2442-8744 (electronic); 2442-7284 (printed) Journal Homepage: https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/Galenika DOI: 10.22487/j24428744.2020.v6.i1.15022

## ABSTRAK
Daun karet kebo ( Ficus elastica ) merupakan salah satu spesies Ficus yang diduga kaya akan senyawa polifenol sehingga  dapat  beraktivitas  sebagai  antioksidan.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  mengetahui  aktivitas  antioksidan dan  nilai  IC 50 dari  ekstrak  metanol  dan  air  daun  karet  kebo( Ficus  elastica ).  Pada  penelitian  ini,  ekstraksi dilakukan  dengan  menggunakan  metode  maserasi  dengan  pelarut  metanol  dan  diperoleh  %  rendamen  sebesar 7,03%,  sementara  metode  infundasi  dengan  pelarut  air  diperoleh  rendamen  sebesar  2,82%.  Uji  aktivitas antioksidan  dilakukan  dengan  metode  peredaman  radikal  bebas 1,1-Diphenyl-2-Phycrilhydrazyl dengan menggunakan pembanding kuersetin. Uji kualitatif dilakukan dengan menggunakan metode KLT dengan eluen diklorometan:metanol  dengan  perbandingan  99:1  untuk  ekstrak  metanol,  dan  perbandingan  95:5  untuk  ekstrak air,  dimana  semua  ekstrak  baik  metanol  maupun  air  positif  mengandung  antioksidan  yang  ditandai  dengan terbentuknya bercak kuning berlatar belakang ungu pada lempeng KLT. Dari hasil uji kuantitatif, diperoleh nilai IC 50 ekstrak metanol 78,39 µg/mL dengan aktivitas antioksidan sedang, dan nilai IC 50 ekstrak air 319,11 µg/mL yang  menunjukkan  tidak  aktif  sebagai  antioksidan.  Sedangkan  kuersetin  memiliki  nilai  IC 50 7,62  µg/mL  yang tergolong antioksidan sangat kuat.
Kata Kunci : Antioksidan, Daun karet kebo, Ficus elastica , 1,1-diphenyl-2-phycrilhydrazyl .

## PENDAHULUAN
Radikal  bebas  adalah  suatu  molekul  yang  memiliki  satu  atau  lebih  elektron  bebas  atau  tidak berpasangan,  sehingga  radikal  bebas  bersifat  tidak  stabil.  Karena  sifatnya  yang  tidak  stabil,  radikal bebas  bersifat  sangat  reaktif  dan  dapat  mengikat  molekul-molekul  atau  senyawa  disekitarnya  untuk pemperoleh  pasangan  elektron  dan  mencapai  kestabilan.  Radikal  bebas  dapat  terbentuk  dalam  tubuh serta  berlangsung  secara  terus  menerus  sehingga  dapat  menyebabkan  timbulnya  berbagai  penyakit. Antioksidan  dapat  menetralkan  radikal  bebas  melalui  donor  elektron  sehingga  radikal  bebas  lebih stabil  dan  tidak  reaktif  (Huselan et  al., 2015).  Senyawa-senyawa  yang  bersifat  antioksidan  dapat diperoleh  dari  berbagai  sumber,  salah  satunya  adalah  antioksidan  alami  yang  dapat  diperoleh  dari tanaman.
Ficus  merupakan  spesies  yang  kaya  akan  senyawa  polifenol,  seperti  flavonoid  yang  bersifat antioksidan  kuat  yang  dapat  membantu  dalam  pencegahan  dan  pengobatan  berbagai  penyakit  yang disebabkan karena stress oksidatif (Sirisha et al. , 2010).
Gambar 1. Pohon dan Daun Karet kebo ( Ficus elastica )
Karet  kebo ( Ficus  elastica ) merupakan  tanaman  yang  berasal  dari  India.  Tanaman  ini  biasa dipelihara  sebagai  tanaman  hias  maupun  tumbuh  sebagai  tanaman  liar,  dan  dapat  ditemukan  sampai ketinggian 500 m dpl. Pohon Karet kebo ( Ficus elastica ) seperti pada gambar 1 mempunyai tinggi 8 sampai 40 m, pada batangnya terdapat akar udara yang menggantung, dan getahnya berwarna putih. Daun  tunggal  dan  berbentuk  memanjang.  Bertangkai  panjang  dan  daunnya  tersebar  dengan  pucuk daun di ujung tangkai tergulung dilapisi seludang tipis berwarna merah (Dalimartha, 2008). Menurut
beberapa  literatur,  ekstrak  daun Ficus  elastica dapat  dimanfaatkan  sebagai  pengobatan  disentri, antiemetik, hipotensi, alergi dan infeksi kulit, anemia neurodegeneratif, penyakit hati dan sebagai agen diuretik (Saeed et al ., 2017).
Berdasarkan penelitian Iqbal (2018), minyak esensial akar Karet kebo ( Ficus elastica ) menunjukkan peningkatan persen aktivitas antioksidan seiring dengan penambahan konsentrasi. Untuk itu dilakukan uji  aktivitas  antioksidan  pada  ekstrak  metanol  dan  ekstrak  air  daun  karet  kebo ( Ficus  elastica ) , dimana metode yang digunakan adalah analisis  DPPH yang diukur dengan spektrofotometri UV-Vis. Pembanding yang digunakan adalah Kuersetin.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah alat maserasi dan infundasi, alat-alat gelas laboratorium (Pyrex ), camber, lampu  UV  256  nm  dan  366  nm,  mikro  pipet  ( Dragon  Lab ),  rotavapor  ( IKA®  RV  05BASIC ), spektrofotometer  UV-Vis  ( Thermo  Scientific )  dan  timbangan  analitik  ( Carat  series ).  Bahan-bahan yang  digunakan  adalah  aquadest,  Diklorometana,  DPPH  ( 1,1-Diphenyl-2-Picrylhidrazil) ,  kuersetin, lempeng silika gel F254, metanol, pereaksi skrining fitokimia.
Metode
Ekstraksi

## Maserasi
Simplisia  daun  karet  kebo ( Ficus  elastica ) yang  telah  diserbukkan,  ditimbang  sebanyak 100  gram lalu  di  masukkan  dalam  bejana  maserasi  dan  ditambahkan  dengan  800  mL  metanol.  Ekstraksi dilakukan selama 1 x 24 jam kemudian disaring. Residu kemudian remaserasi sebanyak 2 kali dengan pelarut  metanol  yang  baru.  Filtrat  selanjutnya  diuapkan  dengan Rotary  Vacum  Evaporator sehingga diperoleh ekstrak kental.

## Infundasi
Infusa  daun  karet  kebo ( Ficus  elastica ) dibuat  dengan  cara  memanaskan  50  gram  serbuk  simplisia kedalam air sebanyak 500 mL dan dipanaskan dalam waktu 15 menit menggunakan penangas air pada suhu  90 o C  sambil  sekali-kali  diaduk.  Setelah  itu,  infusa  disaring  selagi  panas  dengan  menggunakan kain flannel. Selanjutnya dihilangkan kandungan airnya dengan Freeze dry .

## Skrining fitokimia
Prosedur skrining fitokimia menurut Harborne (1987) adalah sebagai berikut:

## Uji Alkaloid
Larutan  uji  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi  kemudian  ditambahkan  dengan  HCl  2N.  Tabung pertama  ditambahkan  pereaksi  mayer  dan  tabung  kedua  pereaksi  dragendorf.  Positif  jika  terbentuk endapan putih pada tabung pertama dan endapan jingga di tabung kedua.

## Uji Flavonoid
Larutan eksrak metanol dan air yang telah dilarutkan dimasukkan ke 2 tabung reaksi, kemudian tabung pertama ditetesi dengan NaOH 10%. Apabila terjadi perubahan warna kuning, hijau, coklat atau merah artinya  sampel  positif  mengandung  flavonoid.  Selanjutnya  tabung  kedua  di  tambahkan  serbuk Mg+HCl pekat, mengandung flavonoid jika terbentuk buih dan terjadi perubahan warna kuning, jingga atau merah.

## Uji Tanin
Larutan uji dimasukkan ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan beberapa tetes larutan FeCl 3 . Positif Tanin jika terbentuk warna hijau/biru kehitaman.

## Uji Saponin
Sebanyak 1 mL larutan uji dimasukkan dalam tabung reaksi dan ditambahkan 10 mL aquades panas. Campuran  dikocok  sampai  muncul  buih  dan  didiamkan  selama  1  menit.  Selanjutnya  ditambahkan dengan  2  tetes  HCl  2  N  dan  dikocok  lagi  sampai  terbentuk  buih.  Adanya  senyawa  saponin  ditandai dengan terbentuknya buih yang stabil selama 10 menit dengan tinggi 3 cm.

## Uji Triterpenoid/Steroid
Larutan ekstak metanol dan ekstrak air dimasukkan kedalam tabung, kemudian ditambahkan pereaksi CH 3 COOH  a.h  dan  H 2 SO 4 melalui  dinding  tabung.  Apabila  terbentuk  cincin  kecoklatan/violet, menunjukkan  sampel  positif  mengandung  triterpenoid,  dan  terbentuknya  cincin  biru  kehijauan menunjukkan positif adanya steroid.

## Uji Kualitatif Aktivitas Antioksidan
Metode  pengujian  aktivitas  antioksidan  mengacu  pada  penelitian  Wahdaningsih,  (2011)  dimana pengujian dilakukan dengan cara melarutkan ekstrak metanol dan air daun karet kebo ( Ficus elastica ) dengan  pelarut  metanol. Kemudian  ditotolkan pada  lempeng  silika  gel  F 254 dan dielusi  dengan  eluen Diklorometana:Metanol perbandingan 95:5 untuk ekstrak metanol dan 99:1 untuk ekstrak air. Setelah dielusi lempeng  diangin-anginkan  lalu  diamati di  UV 254  nm  dan  366  nm,  kemudian  lempeng  KLT disemprot dengan larutan DPPH 0,2%. Sampel positif memiliki aktivitas sebagai antioksidan apabila terbentuk bercak kuning pada lempeng.

## Uji Kuantitatif Aktivitas Antioksidan

## Pembuatan Larutan stok DPPH
Serbuk  DPPH  ditimbang  sebanyak  3  mg.  Dilarutkan  pada  metanol  p.a  100  mL  (30  ppm)  kemudian dihomogenkan.

## Penentuan Panjang Gelombang Maksimal DPPH
Larutan  stok  DPPH  konsentrasi  30  ppm  dipipet  sebanyak  4  mL.  Kemudian  pengukuran  panjang gelombang  maksimal  dilakukan  dengan  mengukur  absorbansi  larutan  DPPH  pada  spektrofotometer dengan panjang gelombang 500-525 nm

## Pembuatan Stok Larutan Pembanding
Larutan  stok  pembanding  dibuat  pada  konsentrasi  100  ppm.  Serbuk  kuersetin  ditimbang  1  mg dilarutkan  dengan  metanol  kemudian  dihomogenkan  dalam  labu  ukur  10  mL  dan  cukupkan volumenya. Dibuat seri konsentrasi 2 ppm, 4 ppm, 6 ppm, 8 ppm, dan 10 ppm.

## Pengukuran Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Karet Kebo (Ficus elastica)
Ekstrak metanol dan air masing-masing ditimbang sebanyak 10 mg dan dimasukkan larutkan dengan metanol  p.a  kedalam  labu  ukur  10  mL  kemudian  dicukupkan  volumenya  dan  dihomogenkan  (1000 ppm). Kemudian lakukan pengenceran sehingga diperoleh seri konsentrasi 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80  ppm,  dan  100  ppm.  Selanjutnya  uji  kuantitatif  dilakukan  dengan  memipet  masing-masing konsentrasi  larutan  sebanyak  0,5  mL  dengan  pipet  mikro  dan  masukan  ke  dalam  vial,  kemudian
tambahkan 3,5 mL larutan DPPH. Campuran dihomogenkan dan diinkubasi selama 30 menit, serapan diukur  dengan  spektrofotometer  UV-Vis  pada  panjang  gelombang  maksimal  516  nm.  Aktivitas antioksidan sampel ditentukan oleh besarnya hambatan serapan radikal DPPH melalui perhitungan % inhibisi menggunakan rumus:
Keterangan :
= Absorbansi DPPH pada panjang gelombang maksimum.
= Absorbansi larutan sampel uji ditambah larutan DPPH
= Absorbansi larutan sampel uji tanpa DPPH
Selanjutnya  hasil  pengukuran  dimasukkan  ke  dalam  persamaan  regresi  dengan  konsentrasi  ekstrak sebagai sumbu X (absis) dan nilai % inhibisi sebagai sumbu Y, dimana untuk menghitung Nilai IC 50 nilai Y (% inhibisi) sebesar 50%.
Dari persamaan persamaan garis, dapat dihitung nilai IC 50 dengan rumus:
IC 50 =
Dimana :   y = % inhibisi (50) a = Intercept (Perpotongan garis di sumbu y) b = Slope (kemiringan) x = Konsentrasi

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada tahap ekstraksi, metode yang digunakan terdiri dari metode maserasi dan infundasi. Pada metode maserasi, pelarut yang digunakan yakni pelarut metanol. Tujuan digunakannya pelarut metanol karena harganya yang relatif terjangkau, metanol memiliki tetapan dielektrik yang lebih rendah daripada air. Menurut  Agustina  (2017), semakin  tinggi  tetapan  dielektrik  maka  tingkat  kepolaran  pelarut  semakin besar  juga  sehingga  dapat  melarutkan  semua  zat,  baik  yang  bersifat  polar  maupun  semipolar. Pemilihan  metode  maserasi  dalam  ektraksi  karena  tidak  memerlukan  peralatan  khusus  dan  cocok untuk mengekstraksi sampel yang bersifat lunak seperti daun.
Selain  di  gunakan  metode  maserasi,  ekstraksi  juga  dilakukan  dengan  metode  infundasi.  Metode  ini cocok  untuk  sampel  daun  dan  tehnik  perebusan  seperti  ekstraksi  infundasi  banyak  dilakukan  oleh masyarakat untuk  mengolah tanaman obat secara tradisional (Saifuddin, 2014). Selain itu, pelarut air bersifat tidak toksik, serta lebih polar dibandingkan metanol. Jumlah ekstrak dan persen rendamen dari kedua metode ekstraksi tersebut dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 1. Jumlah ekstrak dan persen rendamen ekstrak metanol dan ekstrak air daun karet kebo ( Ficus elastica ).
Sampel Jenis Pelarut Berat Sampel (g) Berat ekstrak (g) Rendamen ekstrak (%) Daun Karet kebo (Ficus elastica) Metanol 100 7,03145 7,03 Air 50 1,4108 2,82
Dari  hasil  ekstraksi  maserasi,  maserat  diuapkan  dengan Rotary  vacum  evaporator dan  infusa  di keringkan  dengan freeze  dryer .  Jumlah  ekstrak  metanol  yang  diperoleh  lebih  banyak  dibandingkan ekstrak  air jika  dilihat  dari  persen  rendamen.  Pada  ekstrak  metanol persen  rendamen  yang  diperoleh 7,03% sementara ekstrak air 2,82 %. Hal ini menunjukan bahwa pelarut metanol lebih banyak menarik senyawa kimia dibandingkan pelarut air. Pada struktur kimia  metanol memiliki dua sisi yakni gugus hidroksil  ( - OH)  yang  bersifat  polar  polar  dan  gugus  metil  (CH 3 )  yang  bersifat  non  polar,  sehingga metanol dapat melarutkan beberapa metabolit yang non polar (Aziz et al., 2014).
Setelah  di  peroleh  masing-masing  ekstrak,  di  lakukan  uji  skrining  untuk  mengetahui  komponen senyawa kimia yang ikut tertarik pada saat dilakukan ekstraksi. Pengujian dilakukan dengan uji tabung
Tabel 2. Hasil uji skrining fitokimia ekstrak daun karet kebo ( Ficus elastica ).
Golongan Senyawa Pereaksi Reaksi Positif Hasil pengamatan ekstrak Metanol Air Alkaloid Mayer endapan Putih - - Dragendorf endapan Jingga - - Fenol/Tanin FeCl 3 Hijau/biru kehitaman + + Flavonoid NaOH Warna jingga kemerahan + + Serbuk Mg + HCl Pekat Warna kuning, jingga/merah + + Saponin Aquadest panas + HCl 2 N Buih (pengocokan) Buih yang stabil + + Triterpenoid atau steroid CH 3 COOH a.h + H 2 SO 4 Cicin kecoklatan /violet (triterpenoid) atau hijau kebiruan (steroid) - -
Pada  pengujian  skrining,  alkaloid  diidentifikasi  dengan  penambahan  HCl  terlebih  dahulu.  Alkaloid merupakan metabolit sekunder yang bersifat basa dalam larut dalam bentuk garamnya, sehingga perlu di  tambahkan  asam  terlebih  dahulu.  Selanjutnya  digunakan  pereaksi  mayer  dan  dragendorf,  dimana pada pereaksi mayer reaksi positif akan ditunjukan dengan terbentuknya endapan berwarna putih sedangkan pada pereaksi dragendorf akan terbentuk endapan jingga. Alkaloid memiliki atom nitrogen yang memiliki pasangan elektron bebas, sehingga dapat membentuk ikatan kovalen koordinasi dengan ion K + dari pereaksi kalium tetraiodomerkurat(II) (Mayer) dan kalium tetraiodobismutat (Dragendorf) membentuk kalium-alkaloid (Dayanti & Suyatno, 2012).
Tanin  merupakan  senyawa  polifenol  yang  memiki  banyak  gugus  benzen  dan  hidroksil.  Pada  uji skrining dengan penambahan FeCl 3 fenol atau tanin akan bereaksi dengan perubahan warna hijau atau biru  kehitaman.  Hal  ini  terjadi  karena  terbentuknya  ikatan  kovalen  koordinasi  antara  ion  besi  (III) dengan gugus hidroksil (Suryanita, 2019). Flavonoid merupakan senyawa polar yang memiliki banyak gugus  hidroksil.  Pada  identifikasinya  digunakan  serbuk  Mg+HCl  pekat  yang  akan  membentuk gelembung-gelembung  H 2 .  Penambahan  HCl  pekat,  akan  menghidrolisi  flavonoid  glikosida  menjadi bentuk  aglikonnya  yang  kemudian  membentuk  kompleks  dengan  Mg  sehingga  menghasilkan perubahan warna merah, kuning atau jingga (Suryanita, 2019).
Selain itu, flavonoid dapat diidentifikasi dengan menggunakan larutan NaOH yang akan memberikan reaksi  dengan  perubahan warna jingga  kemerahan. Flavonoid  memiliki  gugus  o-hidroksi  bebas  yang dengan  NaOH  akan  membentuk  senyawa  kuinoid  yang  berwarna  jingga  kemerahan  (Mulyani  & Laksana, 2011).
Saponin  merupakan  senyawa  yang  bersifat  polar  sehingga  larut  dengan  air.  Saponin  juga  memiliki gugus  non  polar  yaitu  terpenoid/steroid.  Senyawa  yang  memiliki  gugus  polar  dan  non  polar  dapat
bersifat aktif permukaan sehingga dengan pengocokan menggunakan air, akan membentuk misel dan larutan  koloidal  yang  akan  tampak  seperti  buih  (Sangi et  al., 2012). Dengan  penambahan  HCl  buih akan stabil selama 5 sampai 10 menit. Pada pengujian triterpenoid atau steroid, digunakan CH 3 COOH a.h dan H 2 SO 4 . Reaksi positif triterpenoid akan menghasilkan cincin kecoklatan atau violet dan cincin hijau  kebiruan  jika  positif  mengandung  steroid.  Hal  ini  terjadi  karena  adanya  pembentukan  ikatan rangkap CH 3 COOH a.h dan H 2 SO 4 dengan sampel (Sangi et al., 2012).
Setelah  dilakukan  skrining  fitokimia,  dilanjutkan  dengan  uji  kualitatif  pada  masing-masing  ekstrak metanol dan ekatrak air daun karet kebo ( Ficus elastica ) . Pada pengujian ini, ekstrak di totolkan pada lempeng  KLT  kemudian  dielusi.  Selanjutnya  diangin-anginkan  dan  permukaan  lempeng  disemprot dengan  larutan  DPPH  0,2  %.  Apabila  terjadi  perubahan  warna  kuning  pada  noda  di  permukaan lempeng  dengan  latarbelakang  ungu,  maka  ekstrak  positif  memiliki  aktivitas  sebagai  antioksidan. Adapun hasil dari uji kualitatif aktifitas antioksidan pada ekstrak metanol dan ekstrak air daun karet kebo, ( Ficus elastica ) dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 3. Hasil uji kualitatif aktivitas antioksidan ekstrak daun karet kebo ( Ficus elastica ).
Sampel Eluen Hasil ekstrak metanol Diklorometana : Metanol (99:1) positif antioksidan ekstrak air Diklorometana : Metanol (95:5) positif antioksidan
(1a) (1b) (1c) (2a) (2b) (2c)
Gambar 1. Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) silika gel F 254 ekstrak metanol dan ekstrak air daun karet kebo ( Ficus elastica )
Keterangan :
(1a) Ekstrak metanol pada UV 366 nm,
(1b) Ekstrak metanol pada UV 254 nm
(1c) Ekstrak metanol setelah disemprot DPPH 0,2 %
(2a) Ekstrak air pada UV 366 nm,
(2b) Ekstrak air pada UV 254 nm (2c) Ekstrak air setelah di semprot DPPH 0,2 %
Pada  uji  kuantitatif,  dilakukan  penentuan  panjang  gelombang  larutan  DPPH  terlebih  dahulu,  dimana diperoleh panjang gelombang maksimal pada 516 nm. Larutan campuran yang akan diukur di inkubasi terlebih  dahulu  sehingga  sampel  dan  DPPH  dapat  bereaksi  secara  sempurna.  Adanya  aktivitas antioksidan  pada  sampel  ditunjukan  dengan  terjadinya  perubahan  warna  larutan  dari  warna  ungu menjadi lebih pudar (kuning). Hal ini disebabkan karena adanya donasi atom hidrogen dari senyawa
antioksidan ke senyawa radikal DPPH sehingga DPPH tereduksi menjadi DPPH-H. Adapun hasil dari pengukuran kuantitatif aktivitas antioksidan dapat dilihat pada tabel berikut
Tabel 4. Hasil pengukuran absorbansi, persentase inhibisi, dan nilai IC 50 dari ekstrak daun karet kebo ( Ficus elastica ) dan pembanding Kuersetin.
Larutan Uji [ ] (ppm) Abs. Sampel + DPPH % inhibisi IC 50 (µg/mL) Ekstrak Metanol 20 40 60 80 100 0,722 0,631 0,532 0,443 0,326 15,47 26,9 38,69 49,88 63,92 78,39 Ekstrak Air 20 40 60 80 100 0,731 0,709 0,691 0,675 0,659 12,97 15,59 17,73 20,35 22,97 319,11 Kuersetin 2 4 6 8 10 0,629 0,552 0,486 0,407 0,331 25,11 34,28 42,14 51,54 60,83 7,62
Gambar 2. Kurva ekstrak metanol
Gambar 3. Kurva ekstrak air

## Gambar 4. Kurva pembanding kuersetin
Menurut Phongpaichit dalam Syarif et al (2016) suatu senyawa dikatakan sebagai antioksidan sangat kuat apabila memiliki nilai IC 50 < l0 µg/mL, antioksidan kuat apabila nilai IC 50 antara 10-50 µg/mL, sedang  apabila  nilai  IC 50 berkisar  antara  50-100  µg/mL,  lemah  apabila  nilai  IC 50 antara  100-250 µg/mL dan tidak aktif apabila IC 50 diatas 250 µg/mL (Syarif et al., 2016). Berdasarkan hasil penelitian ekstrak daun karet kebo ( Ficus elastica ), ekstrak metanol memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC 50 78,39  µg/mL  dengan  kekuatan  antioksidan  sedang,  sementara  ekstrak  air  tergolong  tidak  aktif yang  memiliki  nilai  IC 50 319,11  µg/mL.  Dimana  dalam  penelitian  ini  hasil  pengukuran  untuk pembanding kuersetin, memiliki nilai IC 50 sebesar 7,62 µg/mL dan tergolong antioksidan sangat kuat.
Lemahnya  aktivitas  antioksidan  pada  ekstrak  daun  karet  kebo ( Ficus  elastica ) dibandingkan kuersetin,  dapat  disebabkan  karena  kandungan  pada  ekstrak  masih  dalam  bentuk  senyawa  kompleks (tidak  murni)  sedangkan  kuersetin  merupakan  senyawa  yang  murni.  Selain itu,  lemahnya  ekstrak  air dibandingkan ekstrak metanol, dapat disebabkan karena senyawa kimia yang tertarik dalam pelarut air masih berikatan dengan gugus glikosida dimana senyawa glikosida merupakan senyawa yang sifatnya sangat  polar.  Menurut  Fukumoto  dan  Mazza  dalam  Ridho et  al (2013),  semakin  banyak  gugus hidroksil dalam  suatu  ekstrak,  maka  aktivitas  antioksidan  akan semakin  meningkat.  Namun  aktivitas antioksidan akan menurun dengan adanya gugus glikosida.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa ekstrak daun karet kebo ( Ficus elastica )  berpotensi  sebagai  antioksidan,  dimana  ekstrak  metanol  daun  karet  kebo  ( Ficus  elastica ) tergolong antioksidan sedang dengan nilai IC 50 sebesar 78,39 µg/mL dan ekstrak air daun karet kebo ( Ficus  elastica )  tergolong  tidak  aktif  sebagai  antioksidan  dengan  IC 50 sebesar  319,11  µg/mL. Sedangkan pembanding kuersetin merupakan antioksidan sangat kuat dengan nilai IC 50 7,62 µg/mL.

## DAFTAR PUSTAKA
Agustina, E. (2017). Uji Aktivitas Senyawa Antioksidan dari Ekstrak Daun Tiin ( Ficus Carica Linn) dengan Pelarut Air, Metanol dan Campuran Metanol-Air. K lorofil, 1(1) , 38-47.
Aziz, T., Febrizky, S.,  Mario, A. D. (2014). Pengaruh Jenis Pelarut Terhadap Persen Yield Alkaloid Dari Daun Salam India ( Murraya koenigi ). Jurnal Teknik Kimia , 2(20), 1-6.
Dalimartha, S. (2008). Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 5. Depok: Pustaka Bunda.
Dayanti,  R.  &  Suyatno.  (2012).  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Metanol  Bagian  Batang  Tumbuhan Paku Nephrolepis radicans (Burm.) Kuhn. Unesa Journal of Chemistry, 1 (1), 86-92.
Harborne,  JB.  (1987). Metode  Fitokimia.  Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis  Tumbuhan. Terjemahan Padmawinata K dan Soediro. I. Bandung: Penerbit ITB.
Huselan,  Y,  M,  Runtuwene,  M,  R,  J,  &  Wewengkang,  D,  S.  (2015).  Aktivitas  antioksidan  Ekstrak Etanol,  Etil  Asetat,  dan  n-Heksan  dari  Daun  Sesewanua  ( Clerodendron  squamatum Vahl.). Pharmacon Jurnal Imiah Farmasi, 4(3), 155-163.
Iqbal, Z . (2018). Essential Oil from The Aerial Roots of Ficus elastica and Their Antioxidant Activity. Int. J. Adv. Res, 6(1), 137-140.
Mulyani,  S.  &  Laksana,  T.  (2011).  Analisis  Flavonoid  dan  Tanin  dengan  Metoda  Mikroskopi- Mikrokimiawi. Majalah Obat Tradisional, 16 (3), 109 – 114.
Ridho, E. A., Sari, R., & Wahdaningsih, S. (2013). Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Buah Lakum dengan Metode DPPH ( 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil ), (Undergraduate Thesis). Universitas Tanjungpura, Pontianak.
Saeed, A., Iqbal, Z., Gulzar, Z., Hai, Z., Akram, M., Liaqat, L., ... & Khalil, H. I. (2017). GC-FID and Physicochemical  Studies  of  Oil  From  The  Leaves  of Ficus  elastica Linn. World  Journal  of Pharmaceutical Research, 6 (1), 47-53.
Saifudin,  A.  (2014). Senyawa  Alam  Metabolit  Sekunder  Teknik  Pemisahan  dan  Pemurnian . Yogyakarta: Deepublish.
Sangi, M., S., Momuat, L., I. & Kumaunang, M. (2012). Uji Toksisitas dan Skrining Fitokimia Tepung Gabah Pelepah Aren (Arenga pinnata) . Jurnal Ilmiah Sains, 12(2), 127-134.
Sirisha,  N,  Sreenivasulu,  M,  Sangeeta,  K,  &  Chetty,  C,  M.  (2010).  Antioxidant  Properties  of  Ficus Species A Review. Int.J. Pharm Tech Res , 2(4), 2174-2182.
Suryanita.  (2019).  Identifikasi  Senyawa  Kimia  dan  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol  Kulit Jeruk Bali ( Citrus maxima Merr.). Majalah Farmasi dan Farmakologi, 23 (1), 16-20.
Syarif,  R.  A.,  Muhajir,  M.,  Ahmad,  A.  R.,  Malik,  A.  (2016).  Identifikasi  Golongan  Senyawa Antioksidan  dengan  menggunakan  Metode  Peredaman  Radikal  DPPH  Ekstrak  Etanol  Daun Cordia  myxa  L.  Jurnal  Fitofarmaka  Indonesia , 2( 1),  83-89.  Spektrometri. Analit:  Analytical and Environmental Chemistry, 3 (1), 38-46.
Wahdaningsih,  S.,  Setyowati  E.  P.,  Wahyuono,  S.  (2011).  Aktivitas  Penangkap  Radikal  Bebas  dari Batang Pakis ( Alsophila glauca J. Sm). Majalah Obat Tradisional, 16 (3), 156 – 160.