## PERUBAHAN KADAR AIR BAHAN DAUN JERUK PURUT TERHADAP EKSTRAK DAUN
Aji Hendra Sarosa*, Luthfi Kurnia Dewi, Devia Ellya Asyikaputri, Hilmy Rayhan, Vivi Nurhadianty, Wa Ode Cakra Nirwan, Safrina Hapsari, Ardian Indra Bayu
Departemen Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Brawijaya Jl. M.T. Haryono 167, Malang 65145 Indonesia, 0341-587710 *Penulis korespondensi: aji.hs88@ub.ac.id

## Abstrak
Perlakuan awal tanaman, terutama kadar air mempengaruhi hasil ekstrak minyak atsiri, salah satunya pada minyak daun jeuk purut. Metode vacuum drying pada pengeringan daun jeruk purut dengan kadar air 15% menghasilkan rendemen tertinggi yaitu 1,222% dan kadar sitronelal 64,31%. Pengeringan daun pedada dengan oven pada suhu 50℃ menghasilkan rendemen tertinggi  yaitu 28,79%. Penelitian ini  menggunakan daun jeruk purut yang divariasi kadar air (60-70%; 30-40%; 10-20%) menggunakan oven vacuum pada suhu 50℃; tekanan ±12,3 Kpa. Proses ekstraksi secara soxhletasi dengan solven methanol, n-heksan, dan etil asetat, serta menggunakan metode destilasi dengan uap air. Hasil ekstrak diukur rendemen dan pengujian GC-MS. Hasil  perhitungan  diuji  ANOVA  untuk  mengetahui  perbedaan  hasil  perlakuan.  Rendemen  tertinggi  ekstrak daun  jeruk  purut  pada  kadar  air  60-70%  dengan  pelarut  metanol  yaitu  58,63%.  Rendemen  tertinggi  pada kadar  air  30-40%  dengan  pelarut  etil-asetat  sebanyak  30,99%,  dan  kadar  air  10-20%  dengan  pelarut  n- heksana  sebanyak  27,41%.  Rendemen  tertinggi  pada  distilasi  uap  yaitu  pada  kadar  air  10-20%  sebanyak 1,1833%.  Hasil  analisis  ANOVA  yaitu  terdapat  perbedaan  yang  nyata  antar  variabel  kadar  air  dan  pada interaksi antara jenis pelarut dan kadar air, tetapi tidak terdapat perbedaan yang nyata antar variabel jenis pelarut. ANOVA untuk metode distilasi uap yaitu terdapat perbedaan yang nyata antar variabel kadar air.
Kata kunci: kadar air; komponen; pengeringan; rendemen

## CHANGES WATER CONTENT OF KAFFIR LIME LEAF MATERIAL ON LEAF EXTRACT

## Abstract
The initial treatment of plants, especially the water content, influences the yield of essential oil extracts, such as in kaffir lime leaf oil. The vacuum drying method for kaffir lime leaves with a water content of 15% resulted in the highest yield of 1.222% and a citronellal content of 64.31%. Drying the bitter leaf in an oven at 50°C produced the highest yield of 28.79%. This research used kaffir lime leaves with varying water content (60-70%, 30-40%, 10-20%) using a vacuum oven at 50°C and a pressure at 12.3 Kpa. The extraction process was carried out using Soxhlet extraction with methanol, n-hexane, and ethyl acetate solvents, as well as steam distillation. The extract yields were measured, and GC-MS testing was performed. The results were subjected to ANOVA to determine treatment differences. The highest yield of kaffir lime leaf extract was at a water content of 60-70% using methanol as the solvent, with a yield of 58.63%. The highest yield at a water content of 30- 40% with ethyl acetate as  the solvent  was 30.99%, and at  a water content of  10-20% with  n-hexane as the solvent, it was 27.41%. The highest yield from steam distillation was at a water content of 10-20%, with a yield of 1.1833%The ANOVA analysis showed significant differences among moisture content variables and in the interaction between solvent type and moisture content, but no significant differences were found among solvent types. For the steam distillation method, there were significant differences among moisture content variables.
Keywords: water content; component; drying; yield
Aji Hendra Sarosa, Luthfi Kurnia Dewi, Devia Ellyna Asyikaputri, Hilmy Rayhan, Vivi Nurhadianty, Wa Ode Cakra Nirwan, Safrina Hapsari, Ardian Indra Bayu: Perubahan kadar air bahan daun jeruk purut terhadap ekstrak daun

## PENDAHULUAN
Tanaman  jeruk  purut  ( Citrus  hystrix )  adalah tanaman  yang  kaya  akan  senyawa  aktif  seperti polifenol,  saponin,  alkaloid,  flavonoid,  tannin, glikosida,  kumarin,  phytol,  pinene,  asam  fenolat, limonoid,  gliserolipid,  minyak  atsiri  dan  tokoferol (Dilla  Dertyasasa  and  Anindito  Sri  Tunjung,  2017). Salah  satu  bagian  tanaman  yang  bermanfaat  adalah daun  jeruk  purut  yang  dapat  digunakan  sebagai antioksidan,  antikanker,  antivirus  herpes,  aktivitas antiinflamasi,  insektisida,  aromaterapi  dan  berbagai produk  kosmetik  serta  kecantikan  (Pattarachotanant and  Tencomnao,  2020).  Salah  satu  senyawa  aktif yang  terkandung  dalam  daun  jeruk  purut  yaitu sitronelal  yang  dimanfaatkan  sebagai  zat  pewangi yang  bernilai  tinggi,  obat  pencuci  mulut,  dan  pasta gigi (Febrina, 2019). Secara umum, Senyawa volatile ekstrak daun jeruk purut adalah sitronelal, sitronelol, linalool, geraniol (Warsito, 2018). Selain itu, terdapat senyawa  aktif  lain  seperti  phytol  sebagai  obat  pada penderita leukemia sehingga dapat digunakan sebagai kemoterapi  potensial  dengan  efek  samping  rendah. Senyawa  phytol  dapat  terekstrak  pada  pelarut  etil- asetat  dan  menghasilkan  daya  hambat  yang  lebih tinggi (Anuchapreeda et al., 2020).
Salah satu metode untuk mengisolasi senyawa aktif  yang  diinginkan  adalah  ekstraksi.  Metode ekstraksi  yang  dapat  digunakan  yaitu  soxhletasi karena  metode  ini  dapat  menghasilkan  rendemen yang  lebih  tinggi  dibandingkan  metode  ekstraksi konvensional lainnya (Suresh et al., 2021). Ekstraksi Soxhlet  dipengaruhi  oleh  kadar  air  pada  bahan  dan jenis pelarut yang digunakan. Berdasarkan penelitian Azian et al.,  (2014) menunjukkan bahwa daun yang belum  mengalami  pengeringan  akan  menghasilkan rendemen  rendah  karena  luas  permukaan  pori  yang kecil untuk keluarnya ekstrak, sehingga senyawa aktif tetap terlindungi di dalam sel dan tertahan selama fase internal  diffusion.  Pengeringan  dapat  meningkatkan konsentrasi senyawa aktif dalam daun dibandingkan dengan daun segar. Bahan kering dengan ukuran pori yang lebih luas akan memberikan lebih banyak ruang bagi pelarut untuk menembus sel dan mengumpulkan metabolit sekunder.
Pengeringan  bahan  baku  sebelum  diekstraksi mempengaruhi kandungan kimia dari bahan tersebut (Burdock,  2016).  Penelitian  yang  terdahulu,  metode vacuum  drying pada  pengeringan  daun  jeruk  purut dengan  kadar  air  15%  menghasilkan  rendemen tertinggi  yaitu  1,222%  dan  kadar  sitronelal  64,31% (Gomarjoyo,  2015).  Pengeringan  daun  pedada dengan oven pada suhu 50℃ menghasilkan rendemen tertinggi  yaitu  28,79%  (Wade,  2013).  Bahan  kering dengan ukuran pori yang lebih luas akan memberikan lebih banyak ruang bagi pelarut untuk menembus sel dan  mengumpulkan  metabolit  sekunder  (Lyklema, 2005).    Namun,  menurut  (Suresh  et  al.,  2021) pengeringan dengan menggunakan suhu tinggi dapat
merusak  kelenjar  pada  daun  jeruk  purut  sehingga menyebabkan  senyawa  aktif  mengalami  penguapan. Isolasi  dengan  berbagai  metode  pelarut  digunakan untuk  mengidentifikasi  masing-masing  perbedaan aktivitas  biologis  masing-masing  senyawa  aktif  dan menentukan  senyawa  yang  muncul  untuk  tujuan isolasi senyawa potensi tertentu (Dilla Dertyasasa and Anindito  Sri  Tunjung,  2017).  Optimalisasi  ekstrak senyawa  aktif  dapat  dilakukan  dengan  memperhati- kan kadar air pada bahan dan jenis pelarut ekstraksi untuk  menghasilkan  rendemen  dan  kualitas  ekstrak daun jeruk purut yang tinggi.
Metode  pengeringan  yang  berbeda  dapat menghasilkan komposisi senyawa aktif yang berbeda pula.  Pada  penelitian  ini  akan  menggunakan  jenis pengeringan vacuum  dryer dengan  menggunakan oven  vacuum untuk  mengurangi  resiko  kerusakan karena  suhu  tinggi,  tidak  mengalami  oksidasi  saat pengeringan  berlangsung,  dan  memiliki  suhu  yang lebih  rendah  dibandingkan  dengan  jenis  pengering lain  (Biksono,  2016).  Berdasarkan  penelitian  yang dilakukan oleh Alfania & Adisti (2018) menyatakan bahwa metode vacuum dryer pada pengeringan daun jeruk  purut  dengan  kadar  air  15%  menghasilkan rendemen tertinggi yaitu 1,222%. Pengeringan daun pedada  dengan  oven  pada  suhu  50℃  menghasilkan rendemen tertinggi yaitu 28,79% (Samosir, Tafzi and Indriyani, 2018).
Kualitas ekstrak daun jeruk purut dapat dinilai berdasarkan  profil  kromatografi  yang  menunjukkan keberadaan  senyawa  aktif  dengan  menggunakan analisa Gas  Chromatography-Mass  Spectrometry (GC-MS)  (Haiyee  and  Winitkitcharoen,  2012). Dengan  menggunakan  metode  GC-MS  maka  dapat mendeteksi  kandungan  yang  terdapat  pada  ekstrak hasil  ekstraksi  daun  jeruk  purut.  Oleh  karena  itu, penelitian ini akan mengkaji terkait pengaruh variasi kadar air yang terkandung dalam daun jeruk purut dan jenis  pelarut  ekstraksi  yang  digunakan  agar menghasilkan  rendemen  dan  identifikasi  berbagai senyawa aktif untuk menentukan potensi tertentu.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  adalah  Daun  jeruk purut  yang  berasal  dari  Balai  Penelitian  Tanaman Jeruk  dan  Buah  Subtropika  (Balitjestro),  Punten, Kota Batu, Malang, Jawa Timur. Pelarut atau solvent yang  digunakan  adalah  n-hexan  96%  PT  Brataco, Metanol 96% Merck, Etil-asetat 96% PT. Brataco.

## Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  rangkaian  ekstraksi  Soxhlet,  alat  gelas laboratorium, oven vacuum , moisture balance , neraca analitik, rotary evaporator , GC-MS. Rangkaian Alat ekstraksi  Soxhlet  ditunjukkan  pada Error!  R eference source not found. .
Keterangan : 1. Solvent 2. Labu alas bulat 3. Saluran uap destilasi 4. Tudung bahan 5. Tempat material padat (kelongsong) 6. Sifon atas 7. Saluran sifon keluar 8. Penyambung 9. Kondensor 10. Saluran air pendingin keluar 11. Saluran air pendingin masuk 12. Statif 13. Jacket Mantle
Gambar 1 . Rangkaian alat uji potensiostat

## Pengukuran kadar air awal pada daun jeruk
Daun  jeruk  purut  yang  telah  dipilih  akan dibersihkan  dan  diukur  kadar  air  awal  tanpa pengeringan menggunakan alat moisture balance .

## Perlakukan awal daun jeruk purut
Daun  jeruk  purut  yang  telah  dipilih  dan diukur  kadar  air  awal  akan  dikeringkan  dengan menggunakan oven  vacuum .  Terdapat  beberapa variasi  kadar  air  yang  digunakan  yaitu  70-60%;  40- 30%;  20-10%,  sehingga  rata-rata  lama  pengeringan yang  digunakan  untuk  mencapai  kadar  air  berturut- turut adalah 0 menit, 178 menit, dan 332 menit. Daun jeruk  purut  yang  telah  dikeringkan  akan  ditimbang kembali  dan  dilakukan  pengujian  dengan moisture balance untuk  memastikan  kadar  air  bahan  telah sesuai  variabel.  Daun  jeruk  purut  yang  memiliki kadar  air  sesuai  variabel  akan  dilakukan  proses pengecilan ukuran dengan melakukan pemblenderan selama 5 menit.

## Ekstraksi soxhlet daun jeruk purut
Daun  jeruk  purut  yang  telah  mengalami proses  pengecilan  ukuran  akan  dilakukan  proses ekstraksi dengan suhu 90℃ selama 10 siklus dengan menggunakan  pelarut  metanol  sebanyak  250  mL sehingga menghasilkan ekstrak daun jeruk purut dan solvent.  Prosedur  ini  diulang  dengan  menggunakan solvent etil asetat dan n-heksana. Pemisahan ekstrak dan  solvent  dilakukan  dengan  penguapan  solvent menggunakan rotary  evaporator dengan  suhu  40℃ dengan  tekanan  337  mbar  sehingga  menghasilkan ekstrak  daun  jeruk  purut.  Suhu rotary  evaporator untuk pelarut etil asetat adalah 40℃ dengan tekanan 240 mbar, sedangkan, untuk n-heksana suhu rotary
evaporator adalah 40℃ dengan tekanan 360 mbar.

## Distilasi Uap Daun Jeruk Purut
Daun  jeruk  purut  yang  telah  mengalami proses  pengecilan  ukuran  akan  dilakukan  proses distilasi uap dengan suhu 100℃ selama 6 Jam dengan menggunakan  aquades  sebanyak  2  L.  Alat  distilasi uap dirangkaikan dengan jacket mantle . Selama 6 jam akan  terbentuk  2  fasa  yaitu  air  dan  minyak  yang dipisahkan  dengan  separator  flask.  Minyak  daun jeruk  purut  selanjutnya  akan  di  dehidrasi  untuk mengurangi  air  yang  tersisa  dengan  Natrium  Sulfat Anhidrat.  Sehingga,  air  akan  menggumpal  bersama Na 2 SO 4 .10H 2 O  dan  dilakukan  filtrasi  dengan  kertas saring.

## Perhitungan rendeman ekstrak daun jeruk purut
Tahap awal yang dilakukan pada perhitungan rendemen  ekstrak  daun  jeruk  purut  adalah menimbang  banyaknya  ekstrak  yang  dihasilkan  dari proses  ekstraksi  Soxhlet.  Rendemen  dinyatakan dalam  persentase  berat  kering  yaitu  ekstrak  yang dihasilkan per berat simplisia kering yang diekstraksi menggunakan rumus pada persamaan (1) (Achmad et al., 2018).
𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛 = 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑑𝑎𝑢𝑛 𝑗𝑒𝑟𝑢𝑘 𝑝𝑢𝑟𝑢𝑡 𝑚𝑎𝑠𝑠𝑎 𝑑𝑎𝑢𝑛 𝑥 (1−%𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑎𝑖𝑟) 𝑥100% (1)

## Analisis senyawa aktif ekstrak daun jeruk purut
Analisis  senyawa  aktif  pada  ekstrak  daun jeruk purut dapat dilakukan dilakukan menggunakan Gas  Chromatography-Mass  Spectophotometry (GC- MS).  Kondisi  operasi  GC-MS  untuk  ekstrak  daun jeruk  purut  dengan  menggunakan  pelarut  n-heksana yaitu dengan dimensi kolom 30 m x 250 μm x 0,25 μm;  laju  alir  1  mL/min;  rentang  temperature  80°C- 300°C;  gas  pembawa  He; run  time 54  menit;  dan library NIST. Kondisi operasi GC-MS untuk ekstrak daun  jeruk  purut  dengan  menggunakan  pelarut metanol  dan  etil-asetat  yaitu  dengan  dimensi  kolom 30  m  x  250  μm  x  0,25  μm;  laju  alir  1,02  mL/min; rentang temperatur 60°C—325°C; gas pembawa He; runtime 64 menit; dan library NIST.

## Analisis data secara ANOVA
Analisis data secara ANOVA dilakukan pada data rendemen yang telah didapatkan dengan metode twoway ANOVA  (ANOVA  dua  arah)  untuk mengidentifikasi pengaruh signifikan dari dua faktor yang sedang diteliti terhadap variabel rendemen dan mengidentifikasi interaksi antara kedua faktor kadar air dan jenis pelarutnya. ANOVA oneway (ANOVA satu arah) untuk mengidentifikasi kadar air terhadap rendemen pada distilasi uap (Montgomery, 2017).
Aji Hendra Sarosa, Luthfi Kurnia Dewi, Devia Ellyna Asyikaputri, Hilmy Rayhan, Vivi Nurhadianty, Wa Ode Cakra Nirwan, Safrina Hapsari, Ardian Indra Bayu: Perubahan kadar air bahan daun jeruk purut terhadap ekstrak daun

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh variasi kadar air dan jenis pelarut pada ekstraksi dan distilasi daun jeruk purut terhadap rendemen
Distilasi uap adalah metode isolasi zat organik yang  tidak  larut  dalam  air  dengan  cara  mengalirkan uap  air  dengan  prinsip  penurunan  titik  didih campuran.  Prinsip  dari  distilasi  uap  adalah mendistilasi  senyawa  di  bawah  titik  didih  masing- masing  senyawa  campuran  (Asfiyah,  2020).  Proses ekstraksi  dengan  menggunakan  metode  distilasi uap menghasilkan  minyak  daun  jeruk  purut  yang dinyatakan  dalam  rendemen. Pretreatment bahan sebelum proses distilasi seperti pengeringan menjadi salah  satu  faktor  yang  mempengaruhi  rendemen minyak dari daun jeruk purut (Ketaren, 1986).
Tujuan  dari  pengeringan  adalah  mengurangi kadar  air  dalam  bahan  baku.  Kadar  air  yang  tinggi dapat mengganggu proses penguapan senyawa volatil sehingga  waktu  yang  dibutuhkan  saat  distilasi  akan lebih  lama,  sedangkan  kadar  air  yang  rendah  akan mempermudah  proses  difusi  senyawa  volatil  karena pelarut  lebih  mudah  menembus  sel  sehingga  dapat mengumpulkan metabolit sekunder. Namun, kadar air pada  bahan  juga  tidak  boleh  hilang  karena  proses difusi minyak akan terganggu tanpa bantuan uap air sebagai media pembawa (Ketaren, 1986).
Pengaruh variasi kadar air terhadap rendemen distilasi  uap  daun  jeruk  purut  ditunjukkan  pada Gambar  2.  Pada  Gambar  2  menunjukkan  bahwa semakin  tinggi  kadar  air pada daun maka rendemen minyak  daun  jeruk  purut  semakin  mengalami penurunan yang cukup konstan. Rendemen tertinggi didapatkan  pada  variabel  kadar  air  10-20%  yaitu sebesar  1,1833%.  Rendemen  terendah  didapatkan pada kadar air 60-70% yaitu sebesar 0,333%. Hal ini terjadi  karena  kandungan  air  pada  daun  jeruk  purut dapat  mempengaruhi  rendemen  yang  dihasilkan melalui distilasi.
Gambar  2 .  Grafik  pengaruh  variasi  kadar  air terhadap  rendemen  distilasi  uap  daun jeruk purut
Daun segar masih banyak mengandung air dan getah  yang  berada  pada  permukaan  sehingga menyebabkan  daun  pada  labu  distilasi  mengalami kepadatan  bahan  yang  tinggi.  Dimana  kepadatan bahan yang terlalu tinggi menyebabkan terbentuknya jalur  uap  atau  disebut channeling yang  mengurangi efisiensi  penyulingan  karena  mengurangi  kontak antara  uap  dengan  daun  yang  akan  disuling  (Anon., 1948;  Dewi  et  al.,  2023).  Daun  dengan  kadar  air rendah  akan  membuat  daun  lebih  kaku  dan  keras sehingga  terbentuk  jalur  uap.  Hal  ini  ditunjukkan pada kadar air 10-20% memiliki rendemen tertinggi sebesar 1,1833%.
Mekanisme  distilasi  melibatkan  pendidihan larutan  untuk  menghasilkan  uap  yang  kemudian dialirkan  melalui  bahan  tanaman  yang  mengandung senyawa  volatil  yang  akan  di  ekstrak.  Uap menyebabkan  senyawa  volatil  menguap  dan  uap tersebut  kemudian  dikondensasi  dan  dikumpulkan sebagai cairan yang terpisah. Apabila kadar air dalam bahan  baku  tinggi,  penguapan  senyawa  volatil  pada saat  penyulingan  dapat  terganggu  oleh  adanya  air, sehingga  diperlukan  waktu  penyulingan  yang  lebih lama.  Namun,  apabila  kadar  air  dalam  bahan  baku rendah,  proses  penyulingan  minyak  juga  akan terganggu  karena  minyak  tidak  dapat  berdifusi dengan mudah tanpa bantuan uap air sebagai  media pembawa (Anon., 1948).
Hasil  analisis  ANOVA  satu  arah  pada rendemen  minyak  daun  jeruk  purut  dengan  distilasi menunjukkan  bahwa  kadar  air  yang  berbeda menghasilkan  nilai  F hitung lebih  besar  daripada  F tabel (31,5523>9,5521) sehingga dapat disimpulkan bahwa H 0 ditolak atau terdapat perbedaan yang nyata antara rata-rata  hitung  dari  kadar  air  terhadap  rendemen (Montgomery, 2017).
Perbedaan  kadar  air  pada  bahan  mem- pengaruhi rendemen yang ditunjukkan pada Gambar 3.  Rendemen  tertinggi  sebesar  58,63%  ±13,54 didapatkan  pada  variabel  kadar  air  60-70%  dengan pelarut  metanol.  Sedangkan,  rendemen  terendah sebesar 15,71% ±2,21 didapatkan pada variabel kadar air  10-20%  dengan  pelarut  metanol.  Metanol merupakan  pelarut  yang  mudah  masuk  kedalam  sel melewati  dinding  sel  bahan,  sehingga  metabolit sekunder  yang  terdapat  dalam  sitoplasma  akan terlarut dalam pelarut dan senyawa akan terekstraksi sempurna.  Pelarut  metanol  merupakan  pelarut  polar dimana  senyawa  aktif  yang  bersifat  polar  yaitu flavonoid dan alkaloid. Senyawa aktif flavonoid dan alkaloid  pada  pengeringan  berlebih  mengalami perubahan struktur sehingga menghasil-kan rendemen  yang  lebih  rendah  karena  hanya  sedikit senyawa  aktif  yang  terekstrak  (Wayan  et  al.,  2017). Oleh  karena  itu,  terdapat  rendemen  terendah  pada kadar air 10-20% dengan pelarut metanol.
Gambar 3 . Grafik pengaruh variasi kadar air bahan dan  jenis  pelarut  terhadap  rendemen ekstrak daun jeruk purut
Kadar  air  dalam  bahan  tinggi  maka  senyawa aktif akan sulit berdifusi sesuai dengan Fick’s Law. Mekanisme ekstraksi padat-cair yaitu zat terlarut dari matriks  tanaman  (padat)  melibatkan  difusi  pelarut (cair)  ke  dalam  matriks  melalui  film  layer  stagnan. Fenomena  perpindahan  zat  terlarut  dalam  matriks tanaman  ke  pelarut  karena  adanya  perbedaan konsentrasi  zat  terlarut  yang  dijelaskan  dengan fenomena difusi internal dan difusi eksternal. Difusi internal  dipengaruhi  oleh  konsentrasi  zat  terlarut, waktu ekstraksi dan luas permukaan. Difusi eksternal melibatkan  perpindahan  zat  terlarut  melewati  film layer  stagnan  yang  mengelilingi  matriks  padat  yang dipengaruhi oleh luas permukaan, konsentrasi solute di  sekitar lapisan stagnant  film , massa jenis pelarut, densitas  pelarut,  volume  pelarut,  dan  massa  matriks padat.  Selain  itu,  juga  terdapat  faktor  kerusakan struktur daun yaitu adanya kerusakan capilary force pada  daun  yang  mengakibatkan  senyawa  aktif terlepas  dari  sel  seiring  lama  pengeringan  (Azian, Anisa  and  Iwai,  2014).  Oleh  karena  itu,  rendemen pada  kadar  air  30-40%  dan  10-20%  pada  pelarut metanol dan etil asetat terjadi penurunan.
Rendemen  tertinggi  pada  kadar  air  30-40% adalah pelarut  etil-asetat sebesar 30,99%. Etil  asetat merupakan  pelarut  semi-polar  sehingga  menarik senyawa  yang  bersifat  polar  maupun  nonpolar (Warni,  Marliah  and  Erida,  2021).  Rendemen terendah  pada  kadar  air  60-70%  dengan  pelarut  n- heksana sebesar 40,15%±4,85. Hal ini menunjukkan bahwa  banyak  senyawa  aktif  yang  terekstrak  maka rendemen yang dihasilkan semakin tinggi.
Rendemen tertinggi  pada kadar air bahan 10- 20% adalah pelarut n-heksana sebanyak 27,41%±7,813.  Hal  ini  diduga  karena  air  bersifat polar karena memiliki konstanta dielektrik dan indeks polaritas  yang  tinggi  sehingga  dapat  mengikat senyawa  aktif  yang  bersifat  polar.  Air  dan  senyawa polar  akan  membentuk  ikatan  hidrogen  yang  kuat.
Oleh  karena  itu,  kadar  air  rendah  akibat  proses pengeringan  daun  menyebabkan  penguapan  air  dan senyawa polar. Senyawa non-polar bersifat hidrofobik dan tidak terikat pada air karena memiliki kepolaran  yang  berbeda  sehingga  lebih  tidak mengalami penguapan selama pengeringan (Lyklema, 2005).
Hasil  analisis  ANOVA  dua  arah  pada rendemen  ekstrak  daun  jeruk  purut  menunjukkan bahwa  jenis  pelarut  yang  berbeda  menunjukkan bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  yang  nyata  antara rata-rata hitung dari jenis pelarut terhadap rendemen (α  >  0,05).  Hasil  analisis  juga  menunjukkan  bahwa jenis  kadar  air  yang  berbeda  menunjukkan  bahwa terdapat perbedaan yang nyata antara rata-rata hitung dari kategori kadar air terhadap rendemen (α < 0,05). Analisis  interaksi  antara  kadar  air  dan  jenis  pelarut yaitu terdapat beda nyata yang signifikan (α < 0,05) (Montgomery, 2017).

## Pengaruh  variasi  kadar  air  bahan  dan  jenis pelarut pada ekstraksi daun jeruk purut terhadap senyawa aktif
Ekstrak  daun  jeruk  purut  didapatkan  melalui ekstraksi Soxhlet yang dipengaruhi oleh jenis pelarut yang  digunakan  dan  kadar  air  pada  bahan.  Isolasi senyawa  aktif  dalam  bahan  dipengaruhi  oleh  sifat kelarutan  senyawa  tersebut  dalam  pelarut  yang digunakan.  Selain  itu,  kadar  air  pada  bahan  juga mempengaruhi  proses  difusi  senyawa  aktif  yang diinginkan.  Pengaruh  variasi  kadar  air  dan  jenis pelarut  terhadap  komposisi  senyawa  aktif  pada ekstraksi daun jeruk purut dapat dilihat pada Tabel 1.
Senyawa  aktif  yang  memiliki  gugus  fungsi alkohol yaitu Carbitol , dan 1-Decanol . Senyawa aktif yang memiliki gugus fungsi ester yaitu Pentadecanoic,  Cetyl  Glycidyl  Ether,  Heptan-3-γL Butyrate,  n-Butyl  Lactate,  dan  n-Hexyl  acetate . Senyawa  aktif  yang  memiliki  gugus  fungsi  asam karboksilat yaitu Hydroxy-citronellal . Senyawa aktif yang  memiliki  gugus  fungsi  alkena  yaitu 1- Tetradecene .  Senyawa  aktif  yang  memiliki  gugus fungsi  alkil  halida  yaitu Dicyclohexylamine, dan Phenethylamine.
Senyawa  aktif  yang  memiliki  gugus  fungsi aldehid yaitu sitronelal, sitronelol, dan phytol . Gugus fungsi alkohol memiliki titik didih yang tinggi, hal ini menunjukkan  bahwa  ikatan  hidrogen  yang  kuat  dan memerlukan energi yang besar pula untuk memutus- kan interaksi molekul tersebut. Komponen 1-Decanol dan Carbitol memiliki  gugus  fungsi  alkohol  serta larut dalam alkohol sehingga dapat menjadi senyawa aktif  tertinggi  pada  pelarut  metanol  dan  etil-asetat (Burdock,  2016).  Berdasarkan  Tabel  1,  komposisi senyawa aktif 1-Decanol pada kadar air 60-70% dan 10-20%  sebesar  35,12%  dan  75,4%.  Pada  kadar  air 60-70%  dengan  pelarut  etil-asetat  menghasilkan 1- Decanol sebanyak  1,09%.  Komposisi  tertinggi Carbitol  berada  pada  kadar  air  6070%  yaitu  25,9%.
Aji Hendra Sarosa, Luthfi Kurnia Dewi, Devia Ellyna Asyikaputri, Hilmy Rayhan, Vivi Nurhadianty, Wa Ode Cakra Nirwan, Safrina Hapsari, Ardian Indra Bayu: Perubahan kadar air bahan daun jeruk purut terhadap ekstrak daun
Senyawa  aktif 1-Decanol dan Carbitol membentuk ikatan  hidrogen  yang  kuat  dan  sulit  dipisahkan dengan  pelarutnya  sehingga  selalu  terdeteksi  pada ketiga variasi kadar air (Gomarjoyo, 2015).
Alkena  dan  ester  memiliki  sifat  volatil  pada suhu  yang  lebih  rendah  daripada  alkohol  karena memiliki  ikatan  hidrogen  yang  lebih  lemah dibandingkan  dengan  alcohol  (Wade,  2013).  Gugus fungsi 1-Tetradecane tergolong  dalam  gugus  fungsi alkena  dan Heptan-3-γL  Butyrate tergolong  dalam gugus fungsi ester. 1-Tetradecane memiliki kelarutan pada pelarut alkohol sehingga hanya terdeteksi pada pelarut  metanol  pada  kadar  air  30-40%  (Burdock, 2016). Heptan-3-γL Butyrate terdeteksi pada pelarut metanol  dan  n-heksana  karena  memiliki  kelarutan pada pelarut alkohol dan non polar. Komposisi pada pengeringan  kadar  air  30-40%  memiliki  hasil  yang tinggi  karena  ester  bersifat  volatile  sehingga  terjadi penurunan pada kadar air 10-20%.
Asam  karboksilat  merupakan  gugus  fungsi yang  bersifat  larut  dalam  pelarut  polar.  Namun, semakin  panjang  rantai  karbon  maka  kelarutannya dalam pelarut polar akan semakin berkurang. Ketika rantai  karbon  lebih  dari  10  atom  maka  gugus  asam karboksilat  hampir  tidak  larut  dalam  pelarut  polar (Wade  and  Simek,  2016). Hydroxycitronellal atau C 10 H 20 O 2 termasuk  ke  dalam  gugus  fungsi  asam
karboksilat memiliki sifat larut pada alkohol. Namun, rantai karbon yang panjang menyebabkan kelarutan- nya  pada  pelarut  metanol  cenderung  menghasilkan komposisi rendah yaitu antara 1-2% dan pelarut etil asetat yaitu mencapai 6% (Burdock, 2016). Etil-asetat merupakan pelarut semi-polar yang dapat digunakan untuk mengekstrak senyawa aktif polar maupun non polar (Warni, Marliah and Erida, 2021)
N-heksana  memiliki  sifat  non-polar,  tetapi memiliki interaksi molekul yang rendah karena tidak adanya ikatan hidrogen (Petrucci H., 1992). Senyawa aktif sitronelal terdeteksi juga pada pelarut n-heksana memiliki  sifat  kelarutannya  pada  pelarut  non-polar. Namun, sitronelal hanya terdeteksi pada kadar air 60- 70% yaitu sebanyak 25,85% dan tidak muncul pada kadar air yang lain. Hal ini dikarenakan tidak adanya ikatan kuat antara n-heksana dengan sitronelal. Ikatan hidrogen  yang  lemah  antara  pelarut  dan  senyawa yang terekstrak menjadi mudah dipisahkan sehingga sitronelal  mudah  mengalami  penguapan  ketika capillary  force daun  sudah  mengalami  kerusakan struktur  daun  (Gomarjoyo,  2015).  Etil-asetat merupakan  pelarut  semi-polar  yang  dapat  meng- ekstrak  senyawa  aktif  polar  maupun  non  polar (Warni,  Marliah  and  Erida,  2021).  Oleh  karena  itu, sitronelal juga terdeteksi pada pelarut etil-asetat pada kadar air 30-40%.
Tabel 1 . Komposisi Senyawa Aktif Ekstrak Daun Jeruk Purut Nama Senyawa Aktif Komposisi (%) Metanol Etil Asetat N-Heksana Distilasi Uap 60- 70% 30- 40% 10- 20% 60- 70% 30- 40% 10- 20% 60- 70% 30- 40% 10- 20% 60- 70% 30- 40% 10- 20% Carbitol - - - 26,9  2,83  3,02 - - - - - - Pentadecanoic - - - 9,59  2,56  2,9 - - - - - - Cetyl Glycidyl Ether - - - 6,88  0,67 - - - - - - - Hydroxy- citronellal 1,67  2,62  1,33  6,22 - - - - - - - - 1-Tetradecene - 23,97 - - - - - - - - - - 1-Decanol 35,12  18,44  75,4  1,09 - - - - - - - - Dicyclohexylami ne 8,03  11,61  7,61 - - - - - - - - - Heptan-3-γL Butyrate 32,96 - - - - - 27,31  41,45  30,95 - - - Sitronelal - - - - 36,36  31,64  25,85 - - 63,11  73,98  74,16 n-Butyl Lactate - - - - 11,29  7,93 - - - - - - Sitronelol - - - - 7,3 7,61 - - - - - - Phytol - - - 0,44  5,98  6,49 - - - - - - n-hexyl acetate - - - - - - 24,29  40,41  30,37 - - - Phenethylamine - - - - - - - - 5,54 - Senyawa aktif lain 22,22  43,36  15,7  48,9  33,01  40,41  22,55  18,14  33,14  36,89  26,02  25,84
Sitronelal  adalah  senyawa  mayor  dalam minyak  atsiri  daun  jeruk  purut  memiliki  titik  didih 201-207˚C,  mudah  larut  terhadap  air  dan  non  polar (Burdock, 2016). Uap yang dihasilkan pada distilasi uap akan mengisolasi minyak yang berada pada daun dan  tidak  merusak  senyawa  aktif  tersebut  karena bahan  yang  disuling  tidak  mudah  mengalami overheating (Anon., 1948). Metode ekstraksi soxhlet menggunakan  prinsip like dissolve  like berdasarkan sifat  kepolarannya.    Oleh  karena  itu,  komposisi senyawa sitronelal pada kadar air 10-20% lebih tinggi pada  metode  distilasi  uap  dibandingkan  dengan ekstraksi Soxhlet.
Komposisi dicyclohexylamine mengalami kenaikan  pada  kadar  air  30-40%  dan  mengalami penurunan pada kadar air 10-20% (Wade and Simek, 2016). Dicyclohexylamine merupakan  komponen dengan gugus fungsi alkil-halida yang terekstrak pada pelarut metanol karena memiliki sifat kepolaran yang sama.

## SIMPULAN
Kadar  air  dan  jenis  pelarut  berpengaruh terhadap rendemen dan senyawa aktif hasil ekstraksi. Rendemen  tertinggi  pada  ekstrak  daun  jeruk  purut yang diperoleh pada kadar air 60-70% yaitu dengan pelarut  metanol  sebanyak  58,63%.  Rendemen tertinggi pada kadar air 30-40% yaitu dengan pelarut etil-asetat  sebanyak 30,99%, dan pada kadar air  10- 20% rendemen tertinggi didapatkan dengan pelarut n- heksana sebanyak 27,41%. Rendemen tertinggi pada distilasi  uap  yaitu  pada  kadar  air  10-20%  sebanyak 1,1833%.  Isolasi  senyawa  aktif 1-Decanol dan  1- Tetradecene lebih efektif menggunakan jenis pelarut metanol. Isolasi senyawa aktif carbitol dan sitronelal lebih  efektif  menggunakan  jenis  pelarut  etil-asetat. Isolasi  senyawa  aktif  heptan-3-γL  butyrate  lebih efektif  menggunakan  jenis  pelarut  n-heksana. Sitronelal tertinggi dengan metode distilasi uap yaitu pada  kadar  air  10-20%  sebanyak  74,158%.  Hasil analisis ANOVA yaitu terdapat perbedaan yang nyata antar variabel kadar air dan tidak terdapat perbedaan yang  nyata  antar  variabel  jenis  pelarut.  Sedangkan, pada  interaksi  kedua  terdapat  perbedaan  nyata  pada interaksi  antara  jenis  pelarut  dan  kadar  air.  Hasil analisis ANOVA metode distilasi uap yaitu terdapat perbedaan yang nyata antar variabel kadar air.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  kepada  Badan  Penelitian  dan Pengabdian  Kepada  Masyarakat  Fakultas  Teknik Universitas  Brawijaya  (FT-UB),  melalui  DIPA  FT- UB, yang telah mendukung pendanaan penelitian ini
dan  kepada  seluruh  pihak  yang  terlibat  sehingga penelitian dapat terlaksana.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmad,  H.N.,  Rana,  H.E.,  Fadilla,  I.,  Fajar,  A., Manurung,  R.  and  Abduh,  M.Y.,  2018. Determination  of  yield  and  chemical composition of eucalyptus oil from different species and locations in Indonesia.
Biological and Natural Resources
Engineering Journal , 01(01).
Alfania,  S.T.  and  Adisti,  A.K.,  2018. Pengaruh Variasi  Metode  Pengeringan  Daun  Jeruk Purut  Terhadap  Rendemen  dan  Komposisi Minyak  Atsiri  Hasil  Penyulingan  Uap . Universitas Brawijaya.
Anon. 1948. The essential oils. By Ernest Guenther. Vol.  I.  D.  Van  Nostrand  Company,  Inc., New  York,  1948.  xvi  +  427pp.  55 illustrations. 15 × 23.5cm. Price, $6. Journal of the American Pharmaceutical Association (Scientific  ed.) ,  37(5).  https://doi.org/10. 1002 /jps.3030370518. Anuchapreeda, S., Chueahongthong, F., Viriyaadhammaa, N., Panyajai, P., Anzawa, R.,  Tima,  S.,  Ampasavate,  C.,  Saiai,  A., Rungrojsakul,  M.,  Usuki,  T.  and  Okonogi, S., 2020. Antileukemic cell proliferation of active  compounds  from  kaffir  lime  (Citrus hystrix) leaves. Molecules , 25(6). https://doi.org/10.3390/molecules25061300
Asfiyah,  S.,  2020.  Modifikasi  deanstark  upaya efisiensi proses distilasi uap minyak biji pala dalam praktikum kimia organik. Indonesian Journal  of  Laboratory ,  2(1).  https://doi.org /10.22146/ijl.v2i1.54161.
Azian,  M.N.,  Anisa,  A.N.I.  and  Iwai,  Y.,  2014.
Mechanisms of Ginger Bioactive
Compounds  Extract  Using  Soxhlet  and Accelerated Water Extraction. International Journal  of  Chemical,  Molecular,  Nuclear, Materials  and  Metallurgical  Engineering , 8(5). Biksono, D., 2016. Teknik Pengeringan Dasar. 2020 . Burdock, G.A., 2016. Fenaroli’s handbook of flavor ingredients, sixth edition . Fenaroli’s handbook of flavor ingredients, sixth edition . Dewi, L.K., Cahyani, C., Wardani, N.P. and Sella, H.,
2023.  Pengaruh  Kerapatan  Unggun  Bahan pada Distilasi Uap terhadap Rendemen dan Komposisi Minyak Jeruk Purut. TEKNOTAN , 17(1).
https://doi.org/
10.24198/jt. vol17n1.8.
Aji Hendra Sarosa, Luthfi Kurnia Dewi, Devia Ellyna Asyikaputri, Hilmy Rayhan, Vivi Nurhadianty, Wa Ode Cakra Nirwan, Safrina Hapsari, Ardian Indra Bayu: Perubahan kadar air bahan daun jeruk purut terhadap ekstrak daun
Dilla  Dertyasasa,  E.  and  Anindito  Sri  Tunjung,  W., 2017.  Volatile  Organic  Compounds  of Kaffir  Lime  (Citrus  hystrix  DC.)  Leaves Fractions  and  their  Potency  as  Traditional Medicine. Biosciences, Biotechnology Research Asia , 14(4). https://doi.org/10.13005/bbra/2566.
Febrina,  D.,  2019.  Pengaruh  Perbedaan  Perlakuan Pendahuluan  Terhadap  Rendemen  Minyak Atsiri  Daun  Jeruk  Purut. Viva  Medika:
Jurnal Kesehatan, Kebidanan dan Keperawatan , 11(02).
https://doi.org/10.35960/vm.v11i02.471.
Gomarjoyo,  H.,  2015.  Pengaruh  jenis  pelarut terhadap  rendemen  minyak  sereh  wangi (cymbopogon      winterianus). ekuilibium , 14(2).
https://doi.org/10.20961/ekuilibrium.v14i2. 2048.
Haiyee,  Z.A.  and  Winitkitcharoen,  C.,  2012. Extraction  of  volatile  oil  from  kaffir  lime leaves  (citrus  hystrix)  using  pressurised liquid  extraction. International  Journal  of Food,  Nutrition  &  Public  Health ,  [online]
5(1), pp.1–10.
Available at:
<http://www.worldsustainable.org>.
Ketaren, S., 1986. Pengantar Teknologi Minyak dan Lemak  Pangan . Universitas  Indonesia Press , . Lyklema,  J.,  2005. Fundamentals  of  Interface  and Colloid  Science,  Vol  IV:  Particulate Colloids . Fundamentals  of  Interface  and Colloid  Science,  Vol  Iv:  Particulate Colloids , . Montgomery, D.C., 2017. Montgomery: Design and Analysis of Experiments . John Willy & Sons . Pattarachotanant, N. and Tencomnao, T., 2020. Citrus hystrix extracts protect human neuronal cells against  high  glucose-induced  senescence. Pharmaceuticals ,  13(10).  https://doi.org
/10.3390/ph13100283.
Petrucci  H.,  R.,  1992. Kimia  Dasar  Prinsip  dan Terapan Modern Jilid 1 . Koleksi Buku UPT Perpustakaan Universitas Negeri Malang , . Samosir,  P.E.,  Tafzi,  F.  and  Indriyani,  2018. Pengarauh  Metode  Pengeringaan  Dain Pedada (Sonneratia caseolaris) untuk Membuat  Minuman  fungsional  sebagai Sumber Antioksidan. PROSIDING Seminar Nasional  Fakultas  Pertanian  Universitas Jambi tahun 2018 , 1(1).
Suresh,  A.,  Velusamy,  S.,  Ayyasamy,  S.  and Rathinasamy,  M.,  2021. Techniques  for essential oil extraction from kaffir lime and its  application  in  health  care  products—A review . Flavour  and  Fragrance  Journal , https://doi.org/10.1002/ffj.3626.
Wade, L.G., 2013. Organic chemistry . Pearson. Wade,  L.G.  and  Simek,  J.W.,  2016. Organic Chemistry . Pearson Education .
Warni,  J.,  Marliah,  A.  and  Erida,  G.,  2021.  Uji aktivitas bioherbisida ekstrak etil asetat teki (Cyperus rotundus L.)
terhadap pertumbuhan gulma bayam duri (Amaranthus  spinosus  L.). Jurnal  Ilmiah Mahasiswa Pertanian , 6(November). Warsito,  W.,  2018. Derivatisasi  Sitronelal .  1st  ed.
[online]  Malang:  UB  Press.  Available  at: <https://books.google.co.id/books?id=YSiJ DwAAQBAJ&printsec=frontcover&source =gbs_ge_summary_r&cad=0#v=onepage& q&f=false> [Accessed 12 April 2023].
Wayan, N., Yuliantari, A., Rai, W., Dan I, W., Gede,
D.  and  Permana,  M.,  2017.  Pengaruh  Suhu dan  Waktu  Ekstraksi  Terhadap  Kandungan Flavonoid  dan  Aktivitas  Antioksidan  Daun Sirsak (Annona muricata L.) Menggunakan Ultrasonik. Media Ilmiah Teknologi Pangan , 4(1).