## ANALISIS KEBERADAAN RHODAMIN B PADA IKAN CAKALANG FUFU YANG  BEREDAR DI PASARAN KOTA MANADO
Ni Wayan Dianti 1) , Fatimawali 2) , Adithya Yudistira 3)
1). Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT 2). Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT 3). Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT

## ABSTRAK
Rhodamin  B merupakan  zat  warna  sintetik  yang  dilarang  penggunaannya  dalam  makanan  dan dinyatakan  sebagai  bahan  yang  berbahaya  menurut  Peraturan  Menteri  Kesehatan  RI  No. 722/Menkes/Per/IX/1988  karena  dapat  menyebabkan  kerusakan  hati,  ginjal  dan  limfa  diikuti perubahan  anatomi  berupa  pembesaran  organ.  Rhodamin  B  seringkali  digunakan  untuk  mewarnai suatu  produk  makanan  dan  minuman.  Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengidentifikasi  rhodamin  B pada  ikan  cakalang  fufu  yang  beredar  di  pasaran  Kota  Manado.  Sampel  ikan  cakalang fufu  diambil dari 4 pasar yang ada di Kota Manado yaitu Pasar Paal 2, Pasar Bahu, Pasar Karombasan dan Pasar Bersehati 45. Sampel diekstraksi dengan dua metode yaitu metode ekstraksi yang dilanjutkan dengan pemurnian  dan  metode  ekstraksi  dengan  menggunakan  penyerapan  benang  wol,  dilanjutkan  dengan identifikasi menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT) kemudian dideteksi dengan lampu UV 254 nm  dan  366  nm.  Pembacaan  kadar  rhodamin  B  menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa dari delapan sampel yang diperiksa dengan dua kali pengujian didapat empat  sampel  mengandung  rhodamin  B  dengan  kadar  nilai  rata-rata  rhodamin  B  pada  sampel  dari pasar  Bahu  pada  pedagang  dua  sebesar  0,054  µg/ml, pasar  Karombasan  pada  pedagang  dua  sebesar 0,184 µg/ml, pasar Bersehati 45 pada pedagang satu sebesar 0,103 µg/ml, dan pedagang dua sebesar 0,514  µg/ml.  Berdasarkan  hasil  penelitian  ini,  beberapa  ikan  cakalang  fufu  yang  beredar  di  Pasaran Kota Manado tidak aman untuk dikonsumsi.
Kata Kunci : Rhodamin B, Cakalang fufu, KLT dan Spektrofotometri UV-Vis.

## ANALYSIS OF THE PRESENCE OF RHODAMIN B IN CAKALANG FUFU IN MARKET MANADO CITY

## ABSTRACT
Rhodamin B is  a synthetic dye that was  banned  for  use in  foods and  is  certified  as a hazardous material according to Minister of  Health of  Indonesian  Republic  No. 722/Menkes/Per/IX/1988 because  it can cause liver, kidney, and spleen  damage,  and followed  by  anatomical  changes  in  the form  of  organ enlargement. Rhodamin B dye  is  often used for  a  food and beverage  products. The study was  conducted to identify  Rhodamin B on  cakalang  fufu in  the  market  of Manado city. Cakalang  fufu samples  were taken  from four markets in  the  city  of  Manado,  namely  :  the Paal 2 market, Bahu market, Karombasan market and Bersehati 45 Market. Samples were extracted by two methods,  the  method  of  extraction followed  by purification and extraction method using  wool yarn and absorption followed by identification using thin layer chromatography (TLC) and detected with UV light 254 nm and 366 nm. Rhodamin B content is read using a UV-Vis spectrophotometry. The result  showed  that  out  of  eight samples examined  with two tests,  there  are  four samples  containing Rhodamin B with higher  levels  of  the average value  of Rhodamin B in  samples,  that  is from the merchant  two  of  Bahu  Market  is  0,054 ug/ml,  at merchant  two Karombasan  market  is  0.184 ug/ml,
merchant one at Bersehati 45 Market is 0.103 ug/ml and merchant two  at Bersehati 45 is 0.514 ug/ml. Based  on these  results, some of  cakalang fufu  circulating in Manado City Markets are  not  safe for consumption.
Keywords: Rhodamin B, Cakalang fufu, TLC and UV-Vis spectrophotometry.

## PENDAHULUAN
Seiring  dengan  perkembangan  ilmu pengetahuan  dan  teknologi,  beberapa  zat pewarna  telah  mengalami perkembangan seperti  halnya  zat  pewarna  sintesis  yang  juga ikut  berkembang.  Warna  dari  suatu  produk makanan  atau  minuman  merupakan  salah  satu ciri yang penting. Warna merupakan salah satu kriteria  dasar  untuk  menentukan  kualitas makanan,  antara  lain  warna dapat  memberi petunjuk  mengenai  perubahan  kimia  dalam makanan, seperti pencoklatan (Azizahwati dkk dalam Wirasto, 2008). Warna juga merupakan salah  satu  faktor  penentu  yang  dilihat  oleh seseorang sebelum memutuskan untuk memilih suatu barang yang termasuk didalamnya  adalah  makanan  dan  minuman. Makanan  yang  memiliki  warna  cenderung lebih  menarik  untuk  dipilih  konsumen  dari pada makanan yang tidak berwarna (Hastomo, 2008).
Penggunaan  zat  pewarna  sintesis  pada makanan saat ini masih dipertanyakan keamanannya apakah telah memenuhi standar, baik  zat  pewarna  sintesis  maupun  alami  yang digunakan  dalam  industri  makanan  harus memenuhi standar nasional dan internasioanal. Zat  pewarna  yang  dilarang  digunakan  dapat mempengaruhi  kesehatan  konsumen,  seperti timbulnya  keracunan  akut,  kronis  dan  bahkan kematian.  Pada  tahap  keracunan  kronis,  dapat terjadi  gangguan  fisiologis  tubuh  seperti kerusakan  syaraf,  gangguan  organ  tubuh  dan kanker (Djarismawati dkk; 2004).
Pemerintah  Indonesia  melalui  Peraturan Menteri Kesehatan (Permenkes) No.239/Menkes/Per/V/85 menetapkan 30
lebih  zat  pewarna  berbahaya.  Rhodamin  B termasuk salah  satu  zat  pewarna  yang dinyatakan sebagai zat pewarna berbahaya dan dilarang digunakan pada produk pangan (Syah et al dalam Djarismawati dkk, 2004).
Penyalahgunaan  rhodamin  B  sebagai  zat pewarna pada makanan masih sering terjadi di lapangan  dan  diberitakan  dimedia  masa. Sebagai contoh, rhodamin B ditemukan dalam produk  krupuk,  jelli/agar-agar,  aromanis  dan minuman  (Trestiati  dalam  Budianto,  2008),
produk  cabe giling,  saos  serta  dalam  terasi (Budianto,  2008).  Masih  banyak  lagi  produk makanan  yang  menggunakan  zat  pewarna rhodamin  B  yaitu  dilihat  dari  hasil  penelitian yang  dilakukan  oleh  Eddy  Mudjajanto  dari Institut  Pertanian  Bogor  (IPB),  menemukan banyak  penggunaan  zat  pewarna  rhodamin  B pada  produk  makanan  industri  rumah  tangga seperti  kerupuk,  makanan  ringan,  terasi, arumanis, gipang, sirup, biscuit, sosis, makaroni  goreng,  minuman  ringan,  cendol, manisan,  dan  ikan  asap  (Mudjajanto  dalam Wirasto,  2008).  Beberapa  produsen  makanan dan  minuman  masih  menggunakan  zat  warna sintesis  rhodamin  B  yang  dilarang  tersebut untuk  produknya  dengan  alasan  zat  warna tersebut  memiliki  warna  yang  cerah,  praktis digunakan,  harganya  relatif  murah,  serta tersedia  dalam  kemasan  kecil di  pasaran sehingga  memungkinkan  masyarakat  umum untuk  membelinya  (Djalil dkk dalam  Wirasto, 2008 dan Budianto, 2008).
Rhodamin  B  merupakan  zat  warna sintetik  yang  umum  digunakan  sebagai pewarna  tekstil  (Merck  Index  dalam  Wirasto, 2008). Penggunaan zat pewarna ini dilarang di Eropa  mulai  tahun  1984  karena  rhodamin  B termasuk  karsinogen  yang  kuat.  Walaupun memiliki  toksisitas  yang  rendah,  namun pengkonsumsian  rhodamin  B  dalam  jumlah yang besar maupun berulang-ulang menyebabkan  sifat  kumulatif  yaitu  iritasi saluran  pernapasan,  iritasi  kulit,  iritasi  pada mata, iritasi pada saluran pencernaan, keracunan  dan  gangguan  hati  (Trestiati  dalam Wirasto,  2008  dan  Budianto,  2008)  atau bahkan  bisa  menyebabkan  timbulnya  kanker hati  (Syah et  al dalam  Djarismawati dkk, 2004).
Hasil  dari  beberapa  penelitian  telah membuktikan  bahwa  zat  pewarna  rhodamin  B berbahaya  bila  digunakan  pada  makanan, sesuai  hasil  penelitian  yang  menemukan bahwa  pada  uji  terhadap  mencit  dengan konsentrasi 150 ppm, rhodamin B menyebabkan  terjadinya  perubahan  sel  hati dari  normal  menjadi  nekrosis  dan  jaringan disekitarnya  mengalami  desintegrasi  (Pipih  & Juli  dalam  Djarismawati dkk, 2004),  dan
rhodamin B memiliki LD 50 sebesar 89,5 mg/kg jika  di  injeksi  pada  tikus  secara  intravena (Merck Index dalam Utami dan Suhendi, 2009 dan Wirasto, 2008).
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan oleh Eddy Setyo Mudjajanto di IPB yang telah membuktikan  bahwa  zat  pewarna  rhodamin  B banyak  digunakan  oleh  produsen  pada  ikan asap  (Mudjajanto  dalam  Wirasto,  2008).  Di Kota  Manado  Ikan  asap  disebut  dengan  ikan cakalang fufu.
Ikan  cakalang  fufu  adalah  ikan  cakalang yang  diawetkan  dengan  cara  diasapkan. Bentuknya  unik,  ikan  dibelah  lalu  diikatkan sedemikian  rupa  pada  sebatang  bambu  dan setelah diasap bagian badannya akan melengkung.  Cakalang  fufu  merupakan  salah satu  makanan  khas  Kota  Manado  dan  ikan cakalang  fufu  biasanya  digunakan  sebagai oleh-oleh Kota Manado (Vania, 2010).
Ikan  cakalang  fufu  mudah  dijumpai karena  banyak  tersedia  di  pasaran-pasaran Kota  Manado,  beberapa  produsen ikan cakalang  fufu  di  pasaran  menjual  ikan cakalang  fufu  dengan  penampilan  yang menarik  yaitu  permukaan  ikan  yang  berwarna merah.  Dengan  adanya  hasil  penelitian  yang telah  membuktikan  bahwa  pewarna  merah yang  digunakan  dalam  ikan  adalah  zat pewarna  rhodamin  B  seperti  penelitian  yang dilakukan oleh Eddy Setyo Mudjajanto di IPB maka penelitian ini dilakukan untuk menganalisis  keberadaan  rhodamin  B  pada ikan  cakalang  fufu  yang  beredar  di  pasaran Kota Manado.

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian  ini  menggunakan  metode deskriptif laboratorik, yaitu dengan melakukan observasi  pada  ikan  cakalang  fufu  yang dicurigai  mengandung  rhodamin  B  yang dilarang  untuk  digunakan  dan  dilanjutkan dengan melakukan analisis sampel di
Laboratorium  (Notoatmodjo,  2010  ;  Widana dan Yuningrat, 2007).
Sebagai  subyek  penelitian  adalah  A 1 : Ikan  cakalang  fufu  pada  penjual  satu  dari Pasar  Paal  2,  A 2 :  Ikan  cakalang  fufu  pada penjual  dua  dari  Pasar  Paal  2,  B 1 :  Ikan cakalang  fufu  pada  penjual  satu  dari  Pasar Bahu, B 2 : Ikan cakalang fufu pada penjual dua dari Pasar Bahu, C 1 : Ikan  cakalang fufu pada penjual satu dari Pasar Karombasan, C 2 : Ikan Cakalang  fufu  pada  penjual  dua  dari  Pasar
Karombasan,  D 1 :  Ikan  Cakalang  fufu  pada penjual  satu  dari  Pasar  Bersehati  45  dan  D 2 : Ikan  Cakalang  fufu  pada penjual  dua  dari Pasar bersehati 45.
Prinsip kerja dalam identifikasi zat warna rhodamin  B  pada  cakalang  fufu  akan menggunakan  identifikasi  secara  kromatografi lapis tipis (KLT) dan spektrofotometri UV-Vis setelah diekstraksi dan dimurnikan.
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  ialah  ikan  cakalang  fufu, aquades,  lempeng  kromatografi  lapis  tipis (KLT), dietil eter, larutan NaOH 10%, larutan NaOH  0,5%,  larutan  HCl  0,1  N,  larutan amonia 2% dalam etanol 70%, larutan amonia, larutan  n-butanol,  larutan  etil  asetat, larutan amonia  2%  (yang  dilarutkan  dalam  etanol 70%), air yang mengandung asam, benang wol dan  larutan  amonia  10%  (yang  dilarutkan dalam etanol 70%).
Adapun  Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  ialah  Erlenmeyer,  timbangan analitik, corong pisah, labu takar, gelas kimia, gelas  ukur,  pipet,  spatula,  batang  pengaduk, kertas saring Whatman No. 42, hot plate, oven, Chamber, dan Spektrofotometer UV-Vis.
Penelitian ini dilakukan melalui beberapa tahap yaitu :
Tahap  pertama,  tahap  pengambilan  dan penyiapan  sampel.  Sampel  diambil  di  empat Pasar  yang  ada  di  Kota  Manado  yaitu  Pasar Bahu,  Pasar  Karombasan,  Pasar  Bersehati  45 dan  Pasar  Paal  2,  dimana  disetiap  Pasar diambil pada dua penjual ikan cakalang fufu.
Tahap kedua, tahap ekstraksi dan pemurnian yang dilakukan dengan menggunakan dua metode yaitu : Prosedur 1, prosedur ini berdasarkan penelitian Putri tahun 2009.
a. Sebanyak  5  gram  sampel  (bagian  luar ikan cakalang fufu) ditimbang kemudian sampel dimasukkan kedalam erlenmeyer 250 ml.
b. Ditambahkan 100 ml larutan amonia 2% dalam  etanol  70%  dan  didiamkan semalam.
c. Larutan  disaring  dengan  menggunakan kertas  saring  Whatman  No.42  kedalam erlenmeyer.
d. Larutan  dipindahkan  kedalam  gelas kimia  kemudian  diuapkan  diatas  Hot Plate selama 4 jam pada suhu 65 0 C.
e. Sampel yang telah menjadi pekat selama proses  penguapan  kemudian  dilarutkan dengan 30 ml aquades dan diaduk.
f. Larutan dipisahkan dengan cara dimasukkan  kedalam  corong  pisah, kemudian  ditambahkan  6  ml  larutan NaOH 10% dan dikocok.
g. Larutan  diekstraksi  dengan  30  ml  dietil eter lalu dikocok dan didiamkan sampai membentuk  dua  lapisan  yaitu  lapisan eter  jernih  (atas)  dan  lapisan  air berwarna merah (bawah).
h. Lapisan air dibuang dengan
menggunakan  corong  pisah  sampai mendapat ekstrak eter.
i. Ekstrak  eter  dicuci  dengan  larutan NaOH 0,5% sebanyak 5 ml dengan cara dikocok dan didiamkan.
j. Larutan  akan  membentuk  dua  lapisan yaitu  lapisan  eter  jernih  (atas)  dan lapisan air berwarna kecoklatan (bawah).
k. Lapisan  air  dibuang  hingga  hanya terdapat ekstrak eter, kemudian diekstraksi tiga kali, tiap kali dengan 10 ml  asam  klorida  (HCl)  0,1  N  hingga lapisan eter tak berwarna lagi.
l. Lapisan  eter  dibuang  dan  ekstrak  asam klorida  (HCl)  ditampung  dalam  labu takar  50  ml  dan  ditambahkan  asam klorida (HCl) 0,1 N sampai tanda tera.
2.  Prosedur  2,  Prosedur  ini  berdasarkan penelitian  dari  Utami  dan  Suhendi  tahun 2009  yang  mengambil  acuan  dari  Djalil dkk tahun 2005.
a. Sebanyak  10  gram  sampel  (bagian  luar ikan cakalang fufu) dimasukkan kedalam erlenmeyar kemudian direndam  dalam  20  ml  larutan  amonia 2% (yang dilarutkan dalam etanol 70%) selama semalaman.
b. Larutan  disaring  filtratnya  dengan menggunakan  kertas  saring  whatman no.42.
c. Larutan  dipindahkan  kedalam  gelas kimia  kemudian  dipanaskan  diatas  hot plate.
d. Residu dari penguapan dilarutkan dalam 10  ml  air  yang  mengandung  asam
(larutan asam dibuat dengan
mencampurkan 10 ml air dan 5 ml asam asetat 10%). e. Benang  wol  dengan  panjang  15  cm dimasukkan  kedalam  larutan  asam  dan didihkan hingga 10 menit, pewarna akan
mewarnai benang wol, kemudian benang diangkat.
f. Benang wol dicuci dengan air.
g. Kemudian  benang  dimasukkan  kedalam larutan  basa  yaitu  10  ml  amonia  10% (yang dilarutkan dalam etanol 70%) dan didihkan.
h. Benang  wol  akan  melepaskan  pewarna, pewarna  akan  masuk  kedalam  larutan basa.
i. Larutan  basa  yang  didapat  selanjutnya akan  digunakan  sebagai  cuplikanan sampel  pada  analisis  kromatografi  lapis tipis.
Tahap  ketiga,  tahap  pembuatan  larutan baku untuk  pembuatan  linieritas  kurva kalibrasi.  Larutan  baku  rhodamin  B  dibuat dengan  konsentrasi  1000mg/L.  Dari  larutan baku  ini  dibuat  larutan  baku  antara  dengan kadar  20;  40;  80;  120  µg/ml.  Selanjutnya dibuat  dua  seri  larutan  baku  kerja  yaitu  yang pertama  dengan  konsentrasi  masing-masing 0,4;  0,8;  1,6;  2,4  µg/ml  dan  kedua  dengan konsentrasi masing-masing  0,008;  0,016;
0,032; 0,048 µg/ml. Sebagai pelarut digunakan larutan HCl 0,1 N (Putri, 2009). Tahap keempat, tahap identifikasi sampel. Identifikasi sampel menggunakan
Kromatografi  Lapis  Tipis.  Sampel  ditotolkan pada  plat  KLT  dengan  menggunakan  pipa kapiler  pada  jarak  1,5  cm  dari  bagian  bawah plat, jarak antara noda adalah 2 cm. kemudian dibiarkan  beberapa  saat  hingga  mengering. Plat  KLT  yang  telah  mengandung  cuplikan dimasukkan  kedalam  chamber  yang  lebih terdahulu  telah  dijenuhkan dengan  fase gerak berupa n-butanol : etil asetat : amonia (10:4:5) (Putri,  2009).  Dibiarkan  hingga  lempeng terelusi  sempurna,  kemudian  plat  KLT diangkat  dan  dikeringkan.  Diamati  warna secara  visual  dan  dibawah  sinar  UV,  jika secara visual noda berwarna merah jambu dan dibawah  sinar  UV  254  nm  dan  366  nm berfluoresensi  kuning  atau  orange  ,  hal  ini menunjukkan  adanya  rhodamin  B  (Ditjen POM,  2001;  Djalil dkk dalam  Utami  dan Suhendi, 2009 ; Putri, 2009).
Tahap  kelima,  Penetapan  Kadar  Zat Warna Rhodamin B. Penetapan kadar rhodamin B dilakukan dengan
spektrofotometri  cahaya  tampak  pada  panjang gelombang  400-800  nm.  Sedangkan  untuk menghitung  kadar  rhodamin  B  dalam  sampel
dihitung dengan menggunakan kurva kalibrasi dengan persamaan regresi : y = ax ± b.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pemeriksaan  Kualitatif  Rhodamin  B Pada Sampel
Berdasarkan  hasil  pemeriksaan  kualitatif rhodamin  B  pada  sampel  diperoleh  data, seperti ditunjukkan pada tabel 3 dan tabel 4.
Tabel  1.  Hasil  pemeriksaan  kulitatif  rhodamin  B pada  sampel  menggunakan  kromatografi lapis  tipis  (KLT)  yang  diuji  dengan prosedur  1  menurut  penelitian  Putri  tahun 2009.
No perlakuan visual Sinar UV Tinggi bercak Harga Rf 254 366 1. Baku pembandig rhodamine B Merah jambu kuning orange 6.8 cm 0.39 2. A 1 1 - - - - - 3.
A 1 2 - - - - -
4. A 2 1 - - - - -
5. A 2 2 - - - - -
6. B 1 1 - - - - -
7. B 1 2 - - - - -
8. B 2 1 - - Orange 6.3 cm 0.36 9. B 2 2 - - Orange 6.3 cm 0.36 10. C 1 1 - - - - - 11.
C 1 2 - - - - -
12. C 2 1 - - Orange 6.4 cm 0.37 13. C 2 2 - - Orange 6.4 cm 0.37 14. D 1 1 - - Orange 6.4 cm 0.37 15. D 1 2 - - Orange 6.5 cm 0.37 16. D 2 1 - - Orange 6.5 cm 0.37 17. D 2 2 - - Orange 6.5 cm 0.37
Dari  tabel  1 diatas  dapat  dilihat  bahwa dari  delapan  sampel  yang  telah  diuji  dengan dua kali pengujian (duplo), empat sampel (A 1, A 2, B 1, dan  C 1 )  negatif  tidak  mengadung rhodamin  B  dan  empat  sampel  (B 2, C 2, D 1 dan D 2 )  positif  mengandung  rhodamin  B,  hal  ini dapat dilihat dari adanya flourensi orange pada
KLT  yang disinari lampu UV dengan panjang gelombang 366 nm.
Tabel  2. Hasil  pemeriksaan  kualitatif  rhodamin  B pada sampel menggunakan kromatografi lapis  tipis  (KLT)  yang  diuji  dengan prosedur 2 menurut penelitian Utami dan Suhendi  tahun  2009  yang  mengambil acuan dari Djalil dkk tahun 2005.
No Perlakuan visual Sinar UV Tinggi bercak Harga Rf 254 366 1. Baku pembandig rhodamine
B Merah jambu kuning orange 6.8 cm 0.4
2. A 1 1 - - - - - 3. A 1 2 - - - - - 4. A 2 1 - - - - - 5.
A 2 2 - - - - -
6. B 1 1 - - - - - 7.
B 1 2 - - - - -
8. B 2 1 - - - - - 9. B 2 2 - - Orange 6.3 cm 0.38 10 C 1 1 - - - - - 11. C 1 2 - - - - - 12. C 2 1 - - Orange 6.4 cm 0.37 13. C 2 2 - - Orange 6.4 cm 0.37 14. D 1 1 - - Orange 6.4 cm 0.38 15. D 1 2 - - Orange 6.5 cm 0.38 16. D 2 1 - - Orange 6.5 cm 0.38 17. D 2 2 - - Orange 6.5 cm 0.38
Dari  tabel  2 diatas  dapat  dilihat  bahwa dari  delapan  sampel  yang  telah  diuji  dengan dua kali pengujian (duplo), empat sampel yaitu A 1, A 2, B 1, B 2 pada  pengujian  pertama , dan  C 1 negatif  tidak  mengadung  rhodamin  B  dan empat  sampel  yaitu  B 2 pada  pengujian  kedua , C 2, D 1 dan D 2 positif mengandung rhodamin B, hal  ini  dapat  dilihat  dari  adanya  flourensi orange  pada  KLT  yang  disinari  lampu  UV dengan panjang gelombang 366 nm.
(a) (b) (c) (d) Gambar 1. Lempeng KLT yang menunjukkan adanya rhodamine B pada sampel.
Keterangan :
(a) : A 1 1, A 1 2, A 2 1, A 2 2, B 1 1, B 1 2, B 2 1, B 2 2 prosedur 1.
(b) : C 1 1, C 1 2, C 2 1, C 2 2, D 1 1, D 1 2, D 2 1, D 2 2 prosedur 1. (c) : A 1 1, A 1 2, A 2 1, A 2 2, B 1 1, B 1 2, B 2 1, B 2 2 prosedur 2.
(d) : C 1 1, C 1 2, C 2 1, C 2 2, D 1 1, D 1 2, D 2 1, D 2 2 prosedur 2.

## Penetapan Kadar
1. Panjang  Gelomabang  Maksimum  Larutan Rhodamin B
Hasil  penentuan  panjang  gelombang maksimum  larutan  baku  rhodamin  B  dengan konsentrasi  2,4  µg/ml diukur  pada  panjang gelombang  400-800  nm,  diperoleh  panjang gelombang maksimum pada panjang gelombang 557 nm.
2. Linieritas Kurva Kalibrasi Larutan
Rhodamin B
Gambar 2. Kurva Kalibrasi Larutan Rhodamin B dengan berbagai konsentrasi secara spektrofotometri sinar  tampak  pada  panjang  gelombang  557 nm .
Dari  hasil  perhitungan  persamaan  regresi kurva kalibrasi  diatas  diperoleh  persamaan garis  y  =  0,405x - 0,004  dengan  koefisien korelasi (r) sebesar 0,989.

## 3. Kadar Rhodamin B pada Sampel
Penetapan  kadar  rhodamin  B  dilakukan dengan  menggunakan  spektrofotometer  sinar tampak  pada  panjang  gelombang  557  nm. Hasil  penetapan  kadar  rhodamin  B  pada sampel dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3. Kadar rhodamin B pada sampel.
No sampel Keteran- gan warna larutan uji perlak uan absorbans i Kadar (µg/ml) Rata- rata (µg/ml )
1. B 2 Merah muda 1 0.012 0.039 0.054 2. B 2 Merah muda 2 0.024 0.069 3 C 2 Merah muda 1 0.014 0.044 0.184 4. C 2 Merah muda 2 0.323 0.323
5. D 1 Merah muda 1 0.054 0.143 0.103 6. D 1 Merah muda 2 0.021 0.062
7. D 2 Merah muda 1 0.255 0.639 0.514 8. D 2 Merah muda 2 0.153 0.388
Dari  tabel  diatas  dapat  dilihat  bahwa kadar  rhodamin  B  dalam  ikan  cakalang  fufu cukup  besar.  Hal  ini  sangat  membahayakan para  konsumen.  Karena  semakin  besar rhodamin  B  masuk  kedalam  tubuh  maka semakin  besar  efek  toksik  yang  akan ditimbulkan.
y = 0.4059x - 0.0044 R² = 0.9894 -0.2 0 0.2 0.4 0 0.5 1
Series1
Linear (Series1)
Tujuan  penambahan  rhodamin  B  pada ikan cakalang fufu adalah untuk meningkatkan penampilan dari ikan cakalang fufu agar lebih menarik  sehingga  konsumen  lebih  tertarik untuk  membelinya.  Selain  itu  rhodamin  B praktis  digunakan,  harganya  relatif  murah, serta  tersedia  dalam kemasan  kecil  di  pasaran sehingga  memungkinkan  masyarakat  umum untuk membelinya.
Rhodamin  B  merupakan  zat  warna sintetik  yang  umum  digunakan  sebagai pewarna  tekstil  yang  dilarang  penggunaannya pada  makanan  dan  dinyatakan  sebagai  bahan yang  berbahaya  menurut  Peraturan  Menteri Kesehatan  RI  No.  722/Menkes/Per/IX/1988 tentang  zat  warna  yang  dinyatakan  berbahaya dan dilarang di Indonesia (Depkes RI, 1992).
Rhodamin  B  dilarang  digunakan  dalam produk makanan karena penggunaan rhodamin B dalam waktu lama dan jumlah yang banyak pada  manusia  dapat  menyebabkan  gangguan fungsi  hati  atau  kanker  hati  dengan  cara menumpuk  dilemak  yang  lama  kelamaan jumlahnya  terus  bertambah  didalam  tubuh.
Bila  mengkonsumsi  makanan  berwarna  yang mengandung rhodamin B, urine akan berwarna merah  atau  merah  muda  (Yulianti dkk dalam Putri,  2009;  Syah et  al dalam  Butarbutar, 2007).

## KESIMPULAN
Dari  hasil  identifikasi  kualitatif  dengan menggunakan  metode  kromatografi  lapis  tipis (KLT)  ditemukan  empat  sampel  positif mengandung  rhodamin  B  yaitu sampel  dari pasar  Bahu  pada  pedagang  dua,  pasar Karombasan  pada  pedagang  dua,  pasar Bersehati  45  pada  pedagang  satu  dan  pasar Bersehati  45  pada  pedagang  dua.  Dari  hasil identifikasi  kuantitatif  dengan  menggunakan metode  spektrofotometri  UV-Vis  didapat kadar  nilai  rata-rata  rhodamin  B  pada  sampel dari  pasar  Bahu  pada  pedagang  dua  sebesar 0,054  µg/ml,  sampel  dari  pasar  Karombasan pada  pedagang  dua  sebesar  0,184  µg/ml, sampel dari pasar Bersehati 45 pada pedagang satu  sebesar  0,103  µg/ml,  dan  sampel  dari pasar Bersehati 45 pada pedagang dua sebesar 0,514 µg/ml.

## SARAN
1. Bagi  para  konsumen  agar  lebih  waspada dan  hati-hati  dalam  memilih  ikan  cakalang fufu untuk dikonsumsi.
2. Perlu  diadakan  pengawasan  lebih  intensif oleh  petugas  kesehatan  terhadap  produsen ikan cakalang  fufu  sehingga  mereka  tidak menggunakan  zat  pewarna  rhodamin  B pada pengolahan ikan cakalang fufu.

## DAFTAR PUSTAKA
Budianto,  P.E.  2008. Analisis  Rhodamin  B Dalam Saos dan Cabe Giling Di Pasaran
Kecamatan Laweyan Kotamadya Surakarta  dengan  Metode  Kromatografi Lapis Tipis. Fakultas Farmasi Universitas  Muhammadiyah  Surakarta, Surakarta
ButarButar,  S. 2007.  Analisis  Kandungan Rodamin  B  dan  Natrium  Benzoat  Pada Cabai  Merah  (Capsicum  annum  L.)
Giling yang Dijual Dibeberapa Pasar Di Kota  Medan  Tahun  2007. Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Sumatera Utara, Medan Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia. 1992.  Direktorat  Pengawasan  Obat  dan Makanan,  Peraturan  Menteri  Kesehatan RI No. 722/Menkes/Per/IX/1988, Tentang  Bahan  Tambahan  Makanan. Edisi  II,  Jilid  II  1992.  Departemen Kesehatan RI, Jakarta
Ditjen  POM  RI.  2001.  Metode  Analisis PPOMN. Ditjen POM, Jakarta
Djarismawati, Sugiharti, Nainggolan, R. 2004. Pengetahuan  Perilaku  Pedagang  Cabe
Merah Giling dalam Penggunaan Rhodamine  B  di  Pasar  Tradisional di DKI Jakarta. Jurnal Ekologi Kesehatan.3:7-12.
Hastomo, AE. 2008. Analisis Rhodamin B dan Metanil Yellow Dalam Jelly Di Pasaran Kecamatan Jebres Kotamadya Surakarta dengan  Metode  Kromatografi  Lapis Tipis.  Fakultas  Farmasi  Universitas
Muhammadiyah Surakarta, Surakarta Notoadmojo,  S.  2010. Metode  Penelitian Kesehatan. Rineka Cipta, Jakarta Putri, W.K.A. 2009. Pemeriksaan Penyalahgunaan  Rhodamin  B  Sebagai Pewarna  Pada  Sediaan  Lipstik  Yang
Beredar  Di  pusat  Pasar  Kota  Medan. Fakultas  Farmasi  Universitas Sumatera Utara, Medan
Utami,  W  dan  Suhendi,  A.  2009.. Jurnal Analisis  Rhodamin  B  Dalam  Jajanan Pasar  Dengan  Metode  Kromatografi Lapis Tipis. Penelitian Sains & Toksikologi. 10(2): 148-155, Surakarta
Vania.  2010. Cakalang  Jagung  Manis. http://v- recipes.blogspot.com/2010/06/cakalan g-jagung-manis.html.  diakses  pada tanggal 13 Mei 2011.
Widana, G.A.B dan Yuningrat. N.W. 2007. Analisis Bahan Pewarna Berbahaya Pada Sediaan Kosmetika Di Wilayah Kecamatan Buleleng Kabupaten Buleleng. Jurusan Analis Nimia Fakultas MIPA Undiksha, Denpasar
Wirasto.  2008.  Analisis  Rhodamin  B  dan Metanil Yellow dalam Minuman Jajanan  Anak  SD  di  Kecamatan Laweyan  Kotamadya  Surakarta  dengan Metode  Kromatografi  Lapis  Tipis. Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta