J.  Agrotek    Tropika.    ISSN  2337-4993 Vol.  3,    No. 2:  211  –  215,    Mei  2015
PENGARUH FRAKSI EKSTRAK  DAUN TAGETES ( Tagetes  erecta )

## TERHADAP  PERTUMBUHAN  DAN  SPORULASI Colletotrichum  capsici

## SECARA IN  VITRO
M Wahyu Satryawibowo, Efri  & Titik Nur Aeny
Jurusan Agroteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung Jl. Soemantri Brodjonegoro No.1 Bandar Lampung 35145

## ABSTRAK
Pada umumnya pengendalian penyakit antraknosa dilakukan dengan menggunakan fungisida kimia sintetik yang selalu menimbulkan dampak negatif. Salah satu alternatif pengendalian yang ramah lingkungan untuk mengendalikan penyakit tanaman adalah menggunakan fungisida nabati.  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektivitas fraksi ekstrak daun tagetes sebagai fungisida nabati dalam menekan pertumbuhan dan sporulasi patogen antraknosa pada cabai yaitu C. capsici secara in vitro. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Penyakit Tanaman, Fakultas Pertanian, Universitas Lampung pada bulan Juni sampai dengan September 2014.  Rancangan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah rancangan acak lengkap (RAL).  Percobaan terdiridari enam perlakuan dan lima ulangan.  Perlakuan adalah tanpa menggunakan ekstrak (P1), perlakuan dengan fungisida propineb (P2), fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut air (P3), fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut metanol (P4), fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut etil asetat (P5), fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut n-hexana (P6).  Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut metanol berpotensi sebagai fungisida nabati lebih baik dibandingkan dengan fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut air dan pelarut etil asetat walaupun pengaruhnya  tidak  sebaik fungisida  propineb  terhadap penghambatan  pertumbuhan dan  sporulasi C.  capsici secara in vitro .
Kata kunci:  Cabai, C. capsici, fungisida nabati, tagetes, .

## PENDAHULUAN
Cabai  merupakan  salah  satu  jenis  tanaman sayuran yang memiliki nilai ekonomis tinggi dan cocok dibudidayakan di Indonesia yang beriklim tropik.  Buah cabai  di  sebagian  besar  wilayah  Indonesia  digunakan untuk  konsumsi  dalam  keperluan  rumah  tangga  dan sebagian lainnya diekspor dalam bentuk olahan seperti saus, kering, tepung, dan lainnya (BPTP Lampung, 2008).
Gangguan hama  dan  penyakit  merupakan salah satu faktor utama penyebab rendahnya produksi cabai di Indonesia.  Salah satu penyakit penting pada tanaman cabai  adalah  penyakit  antraknosa  yang  salah  satu patogennya  adalah  jamur Colletotrichum  capsici L. (Semangun,  2007).    Penyakit  antraknosa  mampu menurunkan  hasil  produksi  pada  tanaman  cabai mencapai 75% (Kusandriani dan Permadi, 1996 dalam Syukur et al., 2009).
Salah  satu  alternatif  pengendalian  yang  ramah lingkungan  untuk  mengendalikan  penyakit  tanaman adalah menggunakan fungisida nabati.  Tanaman jarak ( Ricinus  communis )  memiliki  kandungan  bahan  aktif seperti saponin,  flavonoid,dan  alkaloid yang  dapat digunakan sebagai fungisida nabati  (Asmaliyah et al. ,
2010).    Tanaman  tagetes  merupakan  tanaman  yang diketahui  banyak  mengandung  senyawa  kimia  seperti saponin,  flavonoid, Pepeirton, dan terhtienil noida (Asmaliyah et al. , 2010).  Oleh sebab itu, perlu dilakukan pengujian pada tanaman tagetes sebagai fungisida nabati untuk  menekan  pertumbuhan  dan  sporulasi  jamur C. capsici secara in vitro .  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  efektivitas  fraksi  ekstrak  daun  tagetes sebagai fungisida nabati dalam menekan pertumbuhan dan sporulasi patogen antraknosa pada cabai yaitu jamur C.  capsici secara in  vitro.

## BAHAN  DAN  METODE
Penelitian  telah  dilakukan  di  Laboratorium Penyakit  Tanaman  Fakultas  Pertanian  Universitas Lampung, dimulai dari bulan Juni 2014 sampai dengan September 2014. Bahan-bahan yang digunakan dalam percobaan  ini  ada lah  daun  taget es,  biakan Colletotrichum capsici, air steril, methanol teknis, etil asetat  teknis,  n-hexana  teknis,  klorok  1  %,  fungisida berbahan  aktif  propineb  70%,  arang  aktif,  aquades, surfaktan, dan media PSA ( Potato succrose agar ). Alat yang  digunakan  diantaranya  alat  fraksinasi  sederhana
(Gambar  1a),  mistar,  gelas  ukur, handpomp, cawan petri, labu erlenmeyer, autoklaf, alumunium foil , plastik tahan  panas,  tisu,  nampan  plastik,  plastik  wrap, mikropipet, bunsen, cutter, pinset, ose, haemocytometer , mikroskop  majemuk,  kaca  preparat,  bor  gabus,  dan drugalski.
Percobaan  terdapat  enam  perlakuan  dan  lima ulangan.    Perlakuan  terdiri  dari  kontrol/  tanpa menggunakan ekstrak (P1), perlakuan dengan fungisida propineb  (P2),  fraksi  ekstrak  daun  tegetes  dengan pelarut  air  (P3),  fraksi  ekstrak  daun  tagetes  dengan pelarut metanol (P4), fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut  etil  asetat  (P5),  fraksi  ekstrak  daun  tagetes dengan pelarut n-hexana (P6).  Perlakuan P2, P3, P4, P5,  dan  P6  digunakan  dengan  konsentrasi  1000  ppm dan fungisida yang digunakan mengandung bahan aktif propineb  dengan  dosis  1  g  l -1 .    Percobaan  disusun menggunakan rancangan acak lengkap (RAL), dan data hasil pengamatan dianalisis dengan sidik ragam (Anova).
Peubah yang diamati pada percobaan ini adalah diameter  koloni jamur   dan  kerapatan  spora jamur C. capsici. Diameter koloni jamur merupakan indikasi dari pertumbuhan  jamur  sedangkan  kerapatan  spora merupakan  indikasi  dari  sporulasi  pada  jamur. Pengukuran pengamatan diameter koloni dilakukan pada hari  ke 2  sampai hari  ke  9  setelah  inokulasi.   Ukuran diameter  ja mur  mer upakan  rata-ra ta  diameter pengukuran dari empat arah yang berbeda (Gambar 1b). Kerapatan  spora  dihitung  langsung  menggunakan haemocytometer. Biakan  jamur  digenangi  dengan aqua des  unt uk  mengambil  spora  dan  dikeruk menggunakan drugalski hingga  semua  spora  pada
bagian  atas  permukaan  media  terlepas.    Spora  jamur yang  telah  tercampur  dengan  aquades  dimasukkan kedalam  tabung  reaksi  sampai  sebanyak  10  ml (didapatkan  suspensi).    Kemudian  suspensi  diaduk sampai  homogen  dengan  menggunakan rotamixer . Setelah  suspensi  homogen  diambil  sebanyak  1  ml kemudian diletakkan di ata s permukaan Haemocytometer untuk  diamati  kerapatan  spora. Kotak pengamatan yang digunakan adalah kotak sedang. Penghitungan  kerapatan  spora  dilakukan  pada  9  hsi (terakhir pengamatan). Kerapatan spora dapat dihitung dengan rumus berikut (Gabriel dan Riyanto, 1989 dalam Herlinda et al. , 2006) :
Keterangan:
0.25    =  Konstanta  (faktor  koreksi  penggunaan  kotak sampel  skala  kecil pada haemocytometer ).
S       = Kerapatan spora per ml suspensi
t          =  Jumlah  total  spora  dalam  kotak  sampel  pada haemocytometer yang  diamati
n        =  Jumlah  kotak  sampel  (kotak  sedang)  pada hamemocytometer yang  diamati

## HASIL  DAN  PEMBAHASAN
Berdasarkan hasil analisis ragam perlakuan pada ekstrak  daun  tagetes,  berpengaruh  nyata  terhadap pertumbuhan  dan  sporulasi Colletotrichum  capsici
Gambar 1. (a) Alat Fraksinasi Sederhana. Efri, 2014 Komunikasi pribadi. (b) Pengukuran diameter koloni dengan empat arah yang berbeda. a1 = arah satu, a2 = arah dua, a3 = arah tiga, a4 = arah empat.
secara in  vitro. Berdasarkan  hasil  uji  lanjut  Duncan (Tabel 1), pengaruh fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut air, fraksi  ekstrak daun tagetes dengan pelarut metanol, dan fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut etil  asetat  terhadap  diameter  koloni  jamur C.  capsici menunjukkan  perbedaan  yang  nyata  terhadap  kontrol dan  fungisida  propineb  secara  konsisten  pada  2  hsi sampai 9 hsi.  Fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut air, fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut metanol, dan fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut etil asetat berpotensi  sebagai  fungisida  nabati  karena  diameter koloni pada ketiga perlakuan tersebut lebih kecil daripada kontrol walaupun tidak dapat menyamai pengaruh dari fungisida propineb.  Diantara fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut air, fraksi  ekstrak daun tagetes dengan
pelarut metanol, dan fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut  etil  asetat,  pada  fraksi  ekstrak  daun  tagetes dengan pelarut metanol merupakan fraksi ekstrak yang memiliki  pengaruh  paling  baik  dan  dapat  digunakan sebagai fungisida nabati.  Sebaliknya pada fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut n-hexana menunjukkan hasil yang  tidak  konsisten  mulai  dari  2  hsi  sampai  9  hsi sehingga fraksi ini dianggap kurang berpotensi sebagai fungisida nabati.
Selanjutnya berdasarkan hasil uji Duncan (Tabel 2)  pengaruh  fungisida  propineb,  fraksi  ekstrak  daun tagetes dengan pelarut air, fraksi  ekstrak  daun tagetes dengan  pelarut  metanol,  fraksi  ekstrak  daun  tagetes dengan pelarut etil asetat, dan fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut  n-hexana terhadap  kerapatan spora C.
Tabel 1. Pengaruh fraksi ekstrak daun tagetes terhadap diameter koloni C. capsici secara in vitro
Perlakuan Rata-rata diameter (cm) pertumbuhan C. capsici pada hari ke (hsi) 2 3 4 5 6 7 8 9 ............................................................cm.................................................... P1 1,290a  2,030a 2,765a  3,415a 4,030a  4,740a  5,325a 5,980a P2 0,000e  0,000d  0,000e  0,000d  0,000d  0,000f 0,000f 0,000f P3 1,030c  1,240c 1,605d  1,985c 2,360c  2,655d  3,015d  3,300d P4 0,880d  1,190c 1,465d  1,795c 2,095c  2,365e  2,610e 2,890e P5 1,165b  1,640b  2,220c  2,910b  3,400b  3,870c  4,355c 4,825c P6 1,360a  1,890a 2,525b  3,320a 3,930a  4,470b  5,045b  5,535b Pr (>F) 0,0001  0,0001  0,0001  0,0001  0,0001  0,0001  0,0001  0,0001
Keterangan : Pr < 0.01 = Sangat nyata, hsi = hari setelah inkubasi, angka yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata setelah diuji dengan Uji Duncan pada taraf 5%.  P1 = kontrol, P2 = fungisida propineb, P3 = tagetes dengan pelarut air, P4 = tagetes dengan pelarut metanol,  P5  =  tagetes  dengan  pelarut  etil  asetat,  dan  P6  =  tagetes  dengan  pelarut  n- hexana.
Tabel 2. Pengaruh  fraksi ekstrak daun tagetes terhadap kerapatan spora C. capsici secara in vitro pada 9 hsi. Perlakuan Kerapatan Spora C. capsici (x 10 5 ) P1 65,07a P2 0,00d P3 6,40c P4 4,69c P5 24,00b P6 7,47bc Pr (>F) 0,0001
Keterangan:  Pr  <  0.01  =  Sangat  nyata,  angka  yang  diikuti  huruf  yang  sama  tidak  berbeda  nyata setelah diuji dengan Uji Duncan pada taraf 5%. Pemberian huruf pada data merupakan hasil transformasi (Lampiran Tabel 27). P1 = kontrol, P2 = fungisida propineb, P3 = tagetes dengan pelarut air , P4 = tagetes dengan pelarut metanol, P5 = tagetes dengan pelarut etil asetat, dan P6 = tagetes dengan pelarut n-hexana.
capsici berbeda  nyata  dengan  kontrol.    fraksi  ekstrak daun  tagetes  dengan  pelarut  air,  fraksi  ekstrak  daun tagetes  dengan  pelarut  metanol,  fraksi  ekstrak  daun tagetes  dengan  pelarut  etil  asetat,  dan  fraksi  ekstrak daun  tagetes  dengan  pelarut  n-hexana  berpotensi sebagai  fungisida  nabati  karena  dapat  menekan kerapatan  spora  walaupun  tidak  dapat  menyamai pengaruh  fungisida  propineb.    Dari  keempat  fraksi ekstrak  uji  fraksi  ekstrak  daun  tagetes dengan  pelarut air, fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut metanol, fraksi  ekstrak  daun  tagetes  dengan  pelarut  etil  asetat, dan fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut n-hexana, fraksi  ekstrak  daun  tagetes  dengan  pelarut  metanol memiliki potensi yang paling baik sebagai fungisida nabati dalam menekan  kerapatan spora.
Penghambatan  diameter  koloni C.  capsici pada fraksi  ekstrak  dengan  pelarut  metanol  diduga  karena adanya  senyawa  aktif  anti  jamur  seperti alkaloid, flavonoid, dan poliasetilen .    Senyawa-senyawa  aktif tersebut memiliki sifat tertentu yang dapat terlarut pada pelarut  polar  seperti  pelarut  metanol.    Seperti  yang dikemukakan oleh Nurjanah et al. (2011), ekstrak kasar
metanol kerang pisau mengandung komponen bioaktif berupa  komponen alkaloid,  steroid,  dan  flavonoid . Pada  kelompok  senyawa  aktif  seperti poliasetilen merupakan senyawa yang bersifat semi polar (Wikanta et al., 2012).  Selain itu, Sangi (2008) mengemukakan Saponin memiliki  gugus steroid dan triterpenoid sebagai  gugus  nonpolar,  serta  memiliki glikosil yang berfungsi  sebagai  gugus  polar.    Karena  itu  saponin memiliki kemungkinan dapat larut pada pelarut metanol. Metanol  merupakan  pelarut  yang  bersifat  universal sehingga mampu mengikat senyawa aktif pada tanaman yang bersifat polar dan non polar (Houghton dan Raman 1998 dalam Susanti et al., 2012).
Mekanisme kerja bahan aktif pada ekstrak daun tagetes terhadap pertumbuhan dan sporulasi C. capsici pada setiap perlakuan dilakukan pendugaan  berdasarkan ratio panjang diameter koloni perlakuan ekstrak tanaman dengan kontrol dan kerapatan spora perlakuan ekstrak tanaman  dengan  kontrol.    Semakin  kecil  ratio  maka pengaruh perlakuan terhadap pertumbuhan diameter atau kerapatan spora semakin besar (Tabel 3).
Tabel 3. Pendugaan mekanisme kerja bahan aktif ekstrak tanaman uji
Mekanisme Kerja Kriteria Fungistatik Jika rasio diameter koloni semakin kecil dan sebanding dengan ratio kerapatan spora Fungitoksik Jika rasio diameter koloni dan kerapatan spora mendekati nol Anti Sporulan Jika rasio kerapatan spora lebih kecil dari diameter koloni Sumber: Efri, 2015 (Komunikasi pribadi) Tabel 4. Persentase diameter koloni dan kerapatan spora C. capsici pada berbagai fraksi ekstrak daun  tagetes Perlakuan Persentase diameter koloni (%) Persentase kerapatan spora (%) Mekanisme kerja bahan aktif tanaman P1 100 100 P2 0 0 Fungitoksik P3 55,18 9,83 Fungistatik P4 48,32 7,20 Fungistatik P5 80,60 36,88 Fungistatik P6 92,47 11,47 Anti Sporulan
Keterangan:  % = proporsi pertumbuhan/kerapatan spora dibandingkan dengan kontrol. P1 = kontrol,
P2 = fungisida propineb, P3 = tagetes dengan pelarut air, P4 = tagetes dengan pelarut metanol, P5 = tagetes dengan pelarut etil asetat, dan P6 = tagetes dengan pelarut n- hexana.
Pada ekstrak daun tagetes terhadap pertumbuhan dan perkembangan C. capsici memiliki mekanisme kerja bahan aktif yang berbeda antar perlakuan.  Perlakuan kontrol  merupakan  kontrol  sebagai  pembanding penentuan  mekanisme  kerja  bahan  aktif  fungisida terhadap perlakuan fungisida propioneb, fraksi ekstrak daun  tagetes  dengan  pelarut  air,  fraksi  ekstrak  daun tagetes  dengan  pelarut  metanol,  fraksi  ekstrak  daun tagetes  dengan  pelarut  etil  asetat,  dan  fraksi  ekstrak daun  tagetes  dengan  pelarut  n-hexana.    Fungisida propineb  memiliki  kriteria  ratio  diameter  koloni  dan kerapatan spora mendekati nilai nol.  Dengan demikian bahan aktif fungisida propineb memiliki mekanisme kerja fungitoksik.  Fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut air, fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut metanol, dan fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut etil asetat memiliki kriteria ratio diameter koloni sebanding dengan kerapatan  spora C.  capsici. Dengan  demikian  bahan aktif fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut air, fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut metanol, dan fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut etil asetat memiliki mekanisme  kerja  fungistatik.    Fraksi  ekstrak  daun tagetes dengan pelarut n-hexana memiliki kriteria ratio kerapatan  spora  lebih  kecil  dari  diameter  koloni C. capsici. Dengan  demikian  bahan  aktif  fraksi  ekstrak daun  tagetes  memiliki  mekanisme  kerja  anti  sporulan (Tabel 4).

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut air, pelarut metanol, dan pelarut etil asetat dapat menekan pertumbuhan dan sporulasi C. capsici secara in vitro . Fraksi ekstrak daun tagetes dengan pelarut metanol merupakan fraksi paling efektif diantara fraksi yang lain walaupun keefektifannya tidak sama dengan fungisida propineb dalam menekan pertumbuhan dan sporulasi C. capsici secara in vitro.

## DAFTAR  PUSTAKA
Asmaliyah,  H., E.  E. Wati  H., S.  Utami,  K. Mulyadi, Yudhistira,  &  F.  W.  Sari.  2010.  Pengenalan Tumbuhan  Penghasil  Pestisida  Nabati  dan Pemanfaatannya  Secara  Tradisional.  BPPK.
Pusat Penelitian dan Pengembangan Produktivitas
Hutan.  Palembang.
BPTP  Lampung.  2008.  Teknologi  Budidaya  Cabai Merah.  Balai  Pengkajian  Teknologi  Pertanian. Bandar Lampung.
Herlinda, S., M. D. Utama, Y. Pujiastuti, & Suwandi. 2006. Kerapatan Dan Viabilitas Spora Beauveria bassi ana (Bals.)  Akibat  Subkultur   Dan Pengayaan Media, Serta Virulensinya Terhadap Larva Plutella xylostella (Linn.) J. HPT Tropika 6 (2) : 70-78
Nurjanah,  L.  Izzati,  & A. Abdullah.  2011.  Aktivitas Antioksidan  dan  Komponen  Bioaktif  Kerang Pisau ( Solen spp). Ilmu Kelautan. 16 (3) : 119- 124
Sangi,  M.,  M.R.J.  Runtuwene,  H.E.I.  Simbala,  & V.M.A.  Makang.  2008.  Analisis  Fitokimia Tumbuhan Obat di  kabupaten Minahasa Utara. Chem. Prog. 1(1):47-53.
Semangun,  H.  2007. Penyakit-Penyakit  Tanaman Hortikultura  di  Indonesia. Gadjah  Mada University Press. Yogyakarta. Hlm 52-57
Susanti, A.D., D. Ardiana, G. Gumelar P., & Y. Bening G. 2012. Polaritas Pelarut sebagai Pertimbangan dalamPemilihan Pelarut Untuk Ekstraksi Minyak Bekatul dariBekatul Varietas Ketan ( Oriza sativa glatinosa ). Simposium  Nasional  RAPI  XI  FT UMS. Universitas  Sebelas  Maret  Surakarta. Surakarta.
Syukur, M., S. Sujiprihati, J. Koswarah, & Widodo. 2009. Pewarisan Ketahanan  Cabai ( Capsicum annum
L)  terhadap  Antraknosa  yang  disebabkan  oleh Colletotrichum  acutatum.  Bul.  Agron. 35  (2)  : 112-117
Wika nta,  T.,   D.  Gusmita,  L.  Rahayu,  &  E.
Marraskuranto. 2012. Kajian Awal Bioaktivitas Ekstrak  Etanol  dan  Fraksinya  dari  Spons Callyspongia sp.  Terhadap  Sel  Lestari  Tumor HeLa. JPB  Perikanan. 7 (1)  : 1-10