## PENGARUH PEMBERIAN MADU TERHADAP GAMBARAN HITUNG LEUKOSIT PADA MENCIT YANG TERINFEKSI SALMONELLA TYPHI
Andi Muhammad Faisal Ansar 1 , Nadyah Haruna 2 , Andi Tihardimanto K 3
1,2,3 Program Studi Pendidikan Dokter UIN Alauddin Makassar Email: 1 andifaisalansar40@gmail.com

## Abstrak
Demam  tifoid  merupakan  infeksi  sistemik  yang  disebabkan  oleh Salmonella  typhi dan  madu  memiliki  aktivitas antibakteri. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui apakah terdapat perubahan jumlah hitung leukosit pada hewan coba yang  terinfeksi Salmonella  typhi setelah  pemberian  madu.  Penelitian  ini  menggunakan  24  ekor  mencit  betina  (Mus musculus)  berumur  2-3  bulan  dengan  berat  badan  20  –  30  gram  yang  diinjeksikan  bakteri Salmonella  typhi dengan pengenceran 10 3 CFU. Kemudian dibagi menjadi 4 kelompok yaitu mencit yang diberikan aquades 0,5 ml/20gBB/hari, dan  madu  dengan  dosis  0,04  ml/20gBB/hari,  0,06  ml/20gBB/hari,  dan  dosis  0,08  ml/20gBB/hari.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  setelah  pemberian  madu,  terjadi  penurunan  jumlah  hitung  leukosit  mencit  pada  mencit  yang terinfeksi Salmonella typhi dimana penurunan jumlah hitung leukosit terbanyak pada kelompok 4 yakni 7.21x10 3 / μL, diikuti kelompok 3 dengan 8.81x10 3 / μL, lalu kelompok 2 dengan 9.18.x10 3 / μL, dan kelompok 1 dengan 9.33x10 3 / μL. Pada uji t paired diperoleh nilai t > 2.068 (t= 9,958), lalu uji ANOVA didapatkan nilai p >0,05 (p=0.179) dan dilanjutkan dengan uji pengelompokkan yaitu uji LSD. Hasil yang didapatkan adalah kelompok 1, 2, 3, dan 4 secara umum terjadi penurunan  jumlah  hitung  leukosit  pada  mencit  yang  terinfeksi Salmonella  typhi tapi  tidak  signifikan  antar  kelompok. Kesimpulan penelitian ini ialah pemberian madu dapat menurunkan jumlah hitung leukosit pada mencit yang terinfeksi Salmonella typhi .
Kata Kunci : madu, leukosit, Salmonella typhi

## Pendahuluan
Demam  tifoid  merupakan  infeksi sistemik  yang  disebabkan  oleh Salmonella typhi ,  yang  biasanya  terkontaminasi  pada makanan  dan  minuman  yang  dikonsumsi. Penyakit akut ditandai oleh demam lama, sakit kepala,  mual,  tidak  nafsu  makan,  dan konstipasi  atau  kadang-kadang  diare.  Gejala seringkali  tidak  spesifik  dan  sulit  dibedakan dengan  penyakit  demam  lainnya,  namun tingkat  keparahan  klinis  bervariasi  dan  kasus yang  parah  dapat  menyebabkan  komplikasi atau bahkan kematian. Kejadian ini utamanya berhubungan dengan sanitasi yang buruk dan kurangnya minum air bersih (WHO, 2018).
Salmonella  typhi sebagai  penyebab demam tifoid harus dilemahkan atau dimatikan.  Pengobatan  konvensional  yang banyak dilakukan untuk demam tifoid  adalah
dengan pemberian antibiotik oral (Mubasyiroh, 2010), Beberapa alternatif yang mungkin dapat diberikan pada pasien demam tifoid  karena  khasiatnya  seperti  madu,  madu memiliki  aktivitas  antibakteri  dikarenakan beberapa  faktor,  seperti:  tekanan  osmotik, keasaman,  hidrogen  peroksida  (Nurheti, 2015),  zat  lain  seperti  lisozom,  asam  fenolik dan flavonoid juga terdapat dalam madu yang diketahui  dapat  menghambat  bakteri  gram positif dan gram negatif (Ali, 2013), hal inilah yang  mendorong  penelitian  mulai  diarahkan untuk  mencari  alternatif  terapi  juga  terkait meningkatkan  imunitas  dalam  mengobati demam tifoid.
Menurut Sukmawati (2008), Pengaruh Madu Lebah (Apis melifera) Terhadap Jumlah Sel  Darah  Putih  Pada  Radang  Luka  Gores Pada  Mencit  (Mus  musculus)  BALB/CF
JANTAN, menyimpulkan Madu Lebah (Apis melifera)  berpengaruh  Terhadap  penurunan Jumlah  Sel  Darah  Putih  Pada  Radang  Luka Gores Pada Mencit (Mus musculus). Sedangkan pada penelitian ini perlakuan yang diberikan ialah  madu  hutan  Apis  dorsata  dan sampel  yang  digunakan  ialah  darah  mencit yang terinfeksi Salmonella typhi .
Tujuan penelitian ini untuk mengetahui apakah terdapat perubahan jumlah hitung  leukosit  pada  hewan  coba  yang terinfeksi Salmonella typhi setelah pemberian madu.

## Bahan dan Metode
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Penelitian  Program  Studi  Pendidikan  Dokter Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar, Jl.  Sultan  Alauddin  no.  63,  Makassar, Sulawesi  Selatan.  Populasi  penelitian  ini merupakan  keseluruhan  objek  penelitian. Populasi  dari  penelitian  ini  adalah  mencit (Mus  Musculus)  betina  dan  sampel  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  ialah  serum darah mencit betina hasil perlakuan, kemudian diperiksa jumlah hitung jenis leukositnya.
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium  Program  Studi  Pendidikan Dokter  UIN  Alauddin  Makassar  selama  3 minggu.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimen  dengan  pendekatan pre  test  and post  test  with  control  group  design .  Populasi pada penelitian ini adalah mencit betina (Mus musculus),  sampel  yang  digunakan  adalah serum  darah  mencit  betina  hasil  perlakuan,
kemudian  diperiksa  hitung  jenis  leukositnya dengan  kriteria  inklusi  berjenis  kelamin betina, darah mencit positif Salmonella typhi , usia  mencit  sekitar  2-3  bulan  dengan  berat badan  antara  20-30  gram,  serta  mencit  yang akan  digunakan  darahnya  telah  melalui tahapan adaptasi. Besar sampel yang digunakan  sebanyak  24  ekor  yang  dibagi menjadi  4  kelompok  perlakuan,  yaitu kelompok  kelompok  1  merupakan  kontrol, kelompok 2 perlakuan dengan madu dosis 0,04 ml  /20gBB/hari  gr,  kelompok  3  perlakuan dengan madu dosis 0,06 ml /20gBB/hari, dan kelompok 4 perlakuan dengan madu dosis 0,08 ml /20gBB/hari. Proses penelitian ini dimulai dari adaptasi selama 1 minggu, lalu dilakukan pengelompokkan  dan  dilakukan  pengukuran leukosit  total,  lalu  mencit  diinjeksikan Salmonella  typhi 10 3 CFU,  setelah  terinfeksi dilakukan  kembali  pengukuran  leukosit, kemudian  dilakukan  pemberian madu  selama 1 minggu sesuai dengan kelompoknya masing- masing  dan  dilakukan  kembali  pengukuran leukosit.  Data  yang  didapatkan  kemudian diolah dengan menggunakan Statistical Package  Social  Science  (SPSS)  for  windows dengan  uji  normalitas  dengan  menggunakan uji Kolmogrov-smirnov. Apabila data berdistribusi normal maka akan digunakan uji t  paired  dan  jika  data  tidak  berdistribusi normal  maka  akan  digunakan  uji  wilcoxon. Apabila hasil sesuai dengan taraf signifikansi yaitu p>0,05, maka dilanjutkan dengan uji One Way  ANOVA  dan  dilanjutkan  dengan  uji lanjut pengelompokan LSD.
Hasil Penelitian
Gambar 1 menunjukan bahwa perubahan jumlah hitung leukosit berdasarkan hari  pada  setiap  kelompok  mengalami peningkatan  pada  hari  ke  7  setelah  injeksi Salmonella  typhi ,  kemudian  mengalami penurunan  pada  hari  ke  14  setelah  diberi perlakuan  madu  dengan  dosis  bertingkat. Kelompok 3 memberikan gambaran penurunan  jumlah  hitung  leukosit  paling rendah  yaitu  7,22  x1000/μL  dan  kelompok kontrol  memberikan  gambaran  penurunan jumlah hitung leukosit   dengan jumlah hitung leukosit paling tinggi yaitu 9,18 x1000/μL.
Gambar 1. Rerata perubahan leukosit berdasarkan hari
Tabel  1.  menunjukan  rerata  jumlah hitung  leukosit  mencit  sebelum  dan  setelah injeksi Salmonella  typhi dari  keseluruhan sampel. Rerata jumlah hitung leukosit sebelum diinjeksikan Salmonella  typhi yakni  8,86 x1000/μL dan setelah diinjeksikan Salmonella typhi jumlah  hitung  leukosit  menjadi  14,17 x1000/μL.  Dari  hasil  analisis  uji  t  paired diperoleh bahwa nilai absolut t hitung sebesar 7,423 dan nilai t tabel (α=0,05;df=23) sebesar
2,068, dimana nilai absolut t hitung lebih besar dari  nilai  t  tabel  (7,423  >  2,068)  sedemikian sehingga terdapat peningkatan yang signifikan pada  jumlah  hitung  leukosit  darah  mencit sebelum dan sesudah diinjeksikan Salmonella typhi . Hal tersebut sejalan dengan nilai p yang diberikan  pada  tabel  4.6,  dimana  nilai  p sebesar 0,000 lebih kecil dari taraf signifikansi 0,05  yang  menunjukan  terdapat  peningkatan yang  signifikan  pada  jumlah  hitung  leukosit mencit setelah injeksi Salmonella typhi . Tabel 1. Perbedaan rerata jumlah hitung leukosit mencit sebelum dan setelah injeksi
Salmonella typhi
Rerata Standar deviasi Nilai t Nilai p Sebelum injeksi Salmonella typhi 8,86 1,44 7,423 0,000 Setelah injeksi Salmonella typhi 14,17 2,71
Sumber: Data diolah (2020)
Tabel  2.  menunjukan  rerata  jumlah hitung  leukosit  mencit  sebelum  dan  setelah pemberian  madu  dari  keseluruhan  sampel. Rerata  jumlah  hitung  leukosit  sebelum pemberian  madu  yakni  14,17  x1000/μL  dan setelah  pemberian  madu  jumlah  hitung leukosit  menjadi  8,63  x1000/μL.  Dari  hasil analisis  uji  t  paired  diperoleh  bahwa  nilai absolut t hitung sebesar  9,958 dan nilai t tabel (α=0,05;df=23)  sebesar  2,068,  dimana  nilai absolut  t  hitung  lebih  besar  dari  nilai  t  tabel (9,958 > 2,068) sedemikian sehingga terdapat penurunan yang signifikan pada jumlah hitung leukosit  darah  mencit  sebelum  dan  sesudah pemberian madu. Hal tersebut sejalan dengan
7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Hari 0 Hari 7 Hari 14 Rerata perubahan leukosit (x1000/μL) berdasarkan hari kontrol kelompok 1
kelompok 2 kelompok 3
nilai p yang diberikan pada tabel 4.7, dimana nilai  p  sebesar  0,000  lebih  kecil  dari  taraf signifikansi  0,05  yang  menunjukan  terdapat penurunan yang signifikan pada jumlah hitung leukosit mencit setelah pemberian madu.
Tabel 2. Perbedaan rerata jumlah hitung leukosit mencit sebelum dan setelah pemberian madu
Rerata Standar deviasi Nilai t Nilai p Sebelum pemberian madu 14,17 2,17 9,958 0,000 Setelah pemberian madu 8,63 1,86
Sumber: Data diolah (2020) Pada  tabel  3, untuk  kelompok pemberian  madu  dapat  dilihat  pada  hari terakhir  perlakuan  nilai  rerata  jumlah  hitung leukosit 8,63 x1000/μL dan hari pertama 14,17 x1000/μL sehingga diketahui selisihnya -5,54.
Selisih tersebut cukup besar sehingga terdapat perbedaan  yang  signifikan  dari  rerata  hari pertama dan hari terakhir.
Untuk  kelompok  kontrol  (Tanpa pemberian madu) didapatkan rerata pada hari terakhir  penelitian  nilai  rerata  jumlah  hitung leukosit 9,33 x1000/μL dan hari pertama 15,31 x1000/μL sehingga selisihnya 5,98. Selisih ini terbilang  kecil  sehingga  tidak  teradapat perbedaan  yang  signifikan  dari  rerata  hari pertama dan hari terakhir.
Tabel 3. Selisih perbedaan rerata jumlah hitung leukosit dengan hari pertama Kelompok
t 0 t 1 t 1 – t 0 Nilai P Pemberian
Madu Tanpa Pemberian Madu 14,17 8,63 -5,54 0,000
15,31 9,33 -5,98 0,017 Sumber: Data diolah (2020) Keterangan: t 0 = jumlah hitung leukosit sebelum pemberian madu (hari pertama setelah injeksi Salmonella typhi ) t 1 = jumlah hitung leukosit setelah pemberian madu
Tabel  4.  menunjukan  rerataan  dari jumlah hitung leukosit mencit. Hasil menunjukan  bahwa  jumlah  hitung  leukosit mencit  terus  menurun  ketika  penambahan dosis  madu  juga  ditambah  sampai  perlakuan terakhir  di  kelompok  3.  Pada  perlakuan kontrol  jumlah  hitung  leukosit  tertinggi sebesar 9,33 x1000/μL.
Tabel 4. Rata-rata jumlah hitung leukosit mencit setelah perlakuan hari terakhir
Perlakuan N Rerataan (x1000/μL) Standar Deviasi Kontrol 6 9,33 1,50 Kelompok 1 6 9,18 2,88 Kelompok 2 6 8,81 0,87 Kelompok 3 6 7,21 1,12 Sumber: Data diolah (2020)
Tabel  5.  menunjukan  uji  one  way anova  jumlah  hitung  leukosit  pada  mencit. Hasil menunjukan bahwa pemberian perlakuan  berupa  kontrol,  kelompok  1, kelompok  2,  dan  kelompok  3  tidak  memiliki pengaruh yang bermakna pada jumlah hitung leukosit mencit. Hal tersebut dikarenakan nilai P  sebesar  0,179  >  0,05.  Untuk  mengetahui perbedaan  antar  perlakuan  maka  selanjutnya dilakukan uji LSD.
Tabel 5. Hasil analisis one way anova jumlah hitung leukosit mencit
Perlakuan N Rerataan (x1000/μL) Standar Deviasi Nilai P Kontrol 6 9,33 1,50 0,179 Kelompok 1 6 9,18 2,88 Kelompok 2 6 8,81 0,87
Kelompok 3 6 7,21 1,12 *uji one way anova : Nilai p < 0,05 ; terdapat perbedaan bermakna
Tabel  6.    menunjukan  hasil  uji  LSD pada jumlah hitung leukosit pada mencit. Hasil menunjukan  keseluruhan  perlakuan  tidak memiliki  perbedaan  yang  bermakna  antar perlakuan,  hal  tersebut  karena  kedua  nilai  p nilai p keseluruhan lebih besar dari 0,05 (nilai p  >0,05).  Tetapi  secara  umum  terdapat penurunan leukosit pada setiap kelompok.
Tabel 6. Hasil LSD jumlah hitung leukosit total pada mencit
Perlakuan 𝜶 = 𝟎, 𝟎𝟓 1 2 3 4 1. Kontrol - 2. Kelompok 1 0,885 - 3. Kelompok 2 0,619 0,724 - 4. Kelompok 3 0,052 0,069 0,134 -
*Uji LSD:  Nilai P < 0,05 terdapat perbedaan makna antar perlakuan

## Pembahasan
Pada  pemeriksaan  jumlah  hitung leukosit  pasien  demam  tifoid  terdapat gambaran  leukopeni  (+  3000-8000  per  mm), limfositosis relatif, monositosis, aneosinofilia dan  trombositopenia  ringan.  Terjadinya leukopenia akibat depresi sumsum tulang oleh endotoksin  dan  mediator  endogen  yang  ada. Diperkirakan  kejadian  leukopenia  25%, Namun  banyak  laporan  bahwa  dewasa  ini hitung  leukosit  kebanyakan  dalam  batas normal  atau  leukositosis  ringan.  Kejadian trombositopenia sehubungan dengan produksi yang  menurun  dan  destruksi  yang  meningkat oleh  sel-sel  RES.  Sedangkan  anemia  juga disebabkan produksi hemoglobin yang
menurun  serta  kejadian  perdarahan  intestinal yang  tak  nyata  (occult  bleeding).  Perlu  di waspadai  bila  terjadi  penurunan  hemoglobin secara akut pada minggu ke 34, yang bisanya disebabkan  oleh  perdarahan  hebat  dalam abdomen.
Tabel  1.  menunjukan  rerata  jumlah hitung  leukosit  mencit  sebelum  dan  setelah injeksi Salmonella  typhi dari  keseluruhan sampel. Rerata jumlah hitung leukosit sebelum diinjeksikan Salmonella  typhi yakni  8,86 x1000/μL dan setelah diinjeksikan Salmonella typhi jumlah  hitung  leukosit  menjadi  14,17 x1000/μL.  Dari  hasil  analisis  uji  t  paired diperoleh bahwa nilai absolut t hitung sebesar 7,423 dan nilai t tabel (α=0,05;df=23) sebesar 2,068, dimana nilai absolut t hitung lebih besar dari  nilai  t  tabel  (7,423  >  2,068)  sedemikian sehingga terdapat peningkatan yang signifikan pada  jumlah  hitung  leukosit  darah  mencit sebelum dan sesudah diinjeksikan Salmonella typhi . Hal tersebut sejalan dengan nilai p yang diberikan  pada  tabel  4.6,  dimana  nilai  p sebesar 0,000 lebih kecil dari taraf signifikansi 0,05  yang  menunjukan  terdapat  peningkatan yang  signifikan  pada  jumlah  hitung  leukosit mencit setelah injeksi Salmonella typhi .
Peningkatan  jumlah  leukosit  dalam sirkulasi merupakan tanda terjadinya peradangan dalam tubuh termasuk peradangan yang  disebabkan  oleh  infeksi  bakteri  seperti Salmonella  typhi .  Pada  pemeriksaan  hitung lekosit  total  pasien  demam  tifoid  terdapat gambaran  leukopeni  (+  3000-8000  per  mm), limfositosis relatif, monositosis, aneosinofilia
dan  trombositopenia  ringan.  Terjadinya leukopenia akibat depresi sumsum tulang oleh endotoksin  dan  mediator  endogen  yang  ada. Diperkirakan  kejadian  leukopenia  25%, Namun  banyak  laporan  bahwa  dewasa  ini hitung  leukosit  kebanyakan  dalam  batas normal atau leukositosis ringan.
Tabel  2  menunjukan  rerata  jumlah hitung  leukosit  mencit  sebelum  dan  setelah pemberian  madu  dari  keseluruhan  sampel. Rerata  jumlah  hitung  leukosit  sebelum pemberian  madu  yakni  14,17  x1000/μL  dan setelah  pemberian  madu  jumlah  hitung leukosit  menjadi  8,63  x1000/μL.  Dari  hasil analisis  uji  t  paired  diperoleh  bahwa  nilai absolut t hitung sebesar  9,958 dan nilai t tabel (α=0,05;df=23)  sebesar  2,068,  dimana  nilai absolut  t  hitung  lebih  besar  dari  nilai  t  tabel (9,958 > 2,068) sedemikian sehingga terdapat penurunan yang signifikan pada jumlah hitung leukosit  darah  mencit  sebelum  dan  sesudah pemberian madu. Hal tersebut sejalan dengan nilai  p  yang  diberikan  pada  tabel  2,  dimana nilai  p  sebesar  0,000  lebih  kecil  dari  taraf signifikansi  0,05  yang  menunjukan  terdapat penurunan yang signifikan pada jumlah hitung leukosit mencit setelah pemberian madu.
Hal  ini  sejalan  dengan  manfaat  madu sebagai  antibakteri  dan  antiinflamasi.  Madu memiliki efek antimikroba. Faktor-faktor yang membuat  madu  memiliki  fungsi  antibakteri adalah  tingkat  keasaman,  tekanan  osmotic madu, hidrogen peroksida, asam aromatik, dan fenol  (Suranto,  2007).  Nanoperoksida  juga memberikan  efek  antibakteri  pada  madu.
Komponen  fenolik  lain  dari  nektar  juga memiliki aktivitas antioksidan selain diketahui menghambat bakteri Gram-positif dan Gram- negatif (Stagos 2018).
Antiinflamasi, madu dapat mengurangi inflamasi dan edema karena mempunyai sifat antiinflamasi yang juga berasal dari flavonoid6.  Flavonoid  dapat  menjadi  zat antiinflamasi  dan  penstabil  Reactive  Oxygen Species  (ROS).  Efek  flavonoid  sebagai antioksidan secara tidak langsung mendukung efek  antiinflamasi  flavonoid.  Adanya  radikal bebas  dapat  menarik  berbagai  mediator inflamasi  dan  flavonoid  dapat  menstabilkan ROS dengan bereaksi dengan senyawa reaktif dari  radikal  sehingga  radikal  menjadi  inaktif (Waleed, 2015).
Pada  tabel  3  diatas  untuk  kelompok pemberian  madu  dapat  dilihat  pada  hari terakhir  perlakuan  nilai  rerata  jumlah  hitung leukosit 8,63 x1000/μL dan hari pertama 14,17 x1000/μL sehingga diketahui selisihnya -5,54. Selisih tersebut cukup besar sehingga terdapat perbedaan  yang  signifikan  dari  rerata  hari pertama dan hari terakhir.
Untuk  kelompok  kontrol  (Tanpa pemberian madu) didapatkan rerata pada hari terakhir  penelitian  nilai  rerata  jumlah  hitung leukosit 9,33 x1000/μL dan hari pertama 15,31 x1000/μL sehingga selisihnya 5,98. Selisih ini terbilang  kecil  sehingga  tidak  teradapat perbedaan  yang  signifikan  dari  rerata  hari pertama dan hari terakhir.
Hal ini sesuai dengan penelitian milik Irianto  (Irianto,  2014)  yang  mengatakan
gambaran  abnormal  pemeriksaan  hematologi yang sering ditemukan pada penderita demam tifoid  yaitu  penurunan  jumlah  leukosit (leukopenia)  terlihat  pada  pasien  penderita demam  tifoid  saat  2  minggu  pertama  sakit dimana jumlah leukosit berkisar antara 4.000- 6.000/mm3  dan  terjadi  penurunan  kembali pada  2  minggu  berikutnya  hingga  3.000- 5.000/mm3.  Penyebab  penurunan  jumlah leukosit  total  pada  kelompok  kontrol  lebih tinggi  dibandingkan  dengan  kelompok  yang diberikan  madu  karena  adanya  depresi  pada sumsum tulang yang dilakukan oleh endotoksin  dan  mediator  endogen  yang dimiliki  oleh Salmonella  typhi ,  selain  itu invasi dari bakteri Salmonella typhi ke organ- organ  haemopoetik  seperti  kelenjar  getah bening,  spleen,  tonsil,  sumsum  tulang belakang  yang  juga  menjadi  penyebab penekanan laju haematopoesis (Natari,
Rosinta,  2014)  Sedangkan  pada  kelompok dengan pemberian madu memiliki selisih yang lebih  sedikit  disebabkan  karena  madu memiliki kandungan anti bakteri dan antiinflamasi  sehingga  dapat  mengurangi depresi pada sumsum tulang.
Tabel  4  menunjukan  rerataan  dari jumlah hitung leukosit mencit. Hasil menunjukan  bahwa  jumlah  hitung  leukosit mencit  terus  menurun  ketika  penambahan dosis  madu  juga  ditambah  sampai  perlakuan terakhir  di  kelompok  3.  Pada  perlakuan kontrol  jumlah  hitung  leukosit  tertinggi sebesar 9,33 x1000/μL.
Tabel 5 menunjukan uji one way anova jumlah  hitung  leukosit  pada  mencit.  Hasil menunjukan  bahwa  pemberian  perlakuan berupa kontrol, kelompok 1, kelompok 2, dan kelompok  3  tidak  memiliki  pengaruh  yang bermakna  pada  jumlah  hitung  leukosit.  Hal tersebut  dikarenakan  nilai  P  sebesar  0,179  > 0,05.  Untuk  mengetahui  perbedaan  antar perlakuan  maka  selanjutnya  dilakukan  uji LSD.
Tabel  6  menunjukan  hasil  uji  LSD pada jumlah hitung leukosit pada mencit. Hasil menunjukan  keseluruhan  perlakuan  tidak memiliki  perbedaan  yang  bermakna  antar perlakuan,  hal  tersebut  karena  kedua  nilai  p nilai p keseluruhan lebih besar dari 0,05 (nilai p  >0,05).  Tetapi  secara  umum  terdapat penurunan jumlah hitung leukosit pada setiap kelompok.
Hal  ini  sejalan  dengan  manfaat  madu sebagai  antibakteri  dan  antiinflamasi.  Madu memiliki efek antimikroba. Faktor-faktor yang membuat  madu  memiliki  fungsi  antibakteri adalah  tingkat  keasaman,  tekanan  osmotic madu, hidrogen peroksida, asam aromatik, dan fenol1. Nanoperoksida juga memberikan efek antibakteri pada madu. Komponen fenolik lain dari nektar juga memiliki aktivitas antioksidan selain  diketahui  menghambat  bakteri  Gram- positif dan Gram-negatif (Stagos, 2018).
Keasaman berpengaruh pada pertumbuhan dan kelangsungan hidup bagi sel bakteri. Dengan keasaman yang tinggi, jumlah konsentrasi ion hidrogen juga akan meningkat, yang akan mengganggu gradien transmembran
proton  dari  sel  bakteri.  Kemudian,  sel  akan membawa  proton  melewati  pompa  proton yang memicu kehilangan energi dan penurunan  pH.  H+  yang  ada  akan  membuat Struktur  pada  permukaan  sel,  dinding  sel, membran  sitoplasma,  dan  periplasma terbuka dan  mempengaruhi  ikatan  ion  makromolekul yang dapat mengganggu struktur tiga dimensi dan  beberapa  fungsi.  Pada  pH  <5,  molekul yang tidak dipisahkan oleh beberapa asam bisa sangat tinggi, kemudian menjadi lipofilik yang memungkinkan  untuk  masuk  dengan  mudah melewati membran. Nilai pH yang rendah ini juga akan berpengaruh pada komponen sel lalu merusak struktur (dengan mengganggu ikatan ionik). Perubahan ini dapat membuat terganggunya transportasi nutrisi dan pembaruan energy (Ray, 2013).
Faktor  selanjutnya  adalah  madu  juga mengandung senyawa yang disebut fenol yang memiliki  sifat  antibakteri.  Senyawa  fenol  ini sangat bermacam seperti: 1,4- dihydroxybenzene,  asam  syringat,  benzyl alkohol, metil syringate, pinocembrin, terpene, dan  flavonoid.  Aktivitas  antibakteri  fenol adalah  dengan,  merusak  dan  menembus dinding  sel,  meracuni  protoplasma  sel, mengendapkan  protein  dari  sel  bakteri, mendenaturasi  enzim  dan  atau  asam  amino yang  membantu  germinasi  spora.  Komponen fenolik bermolekul besar mampu menginaktifkan  enzim  esensial  di  dalam  sel mikroba  meskipun  pada  konsentrasi  yang sangat rendah (Stagos, 2018).
Pada  salah  satu  penelitian  terkait aktivitas  antibakteri  berbagai  jenis  madu didapatkan  bahwa  madu  hutan  memiliki aktivitas antibakteri paling baik diantara yang lainnya (Hollong, 2015).
Antiinflamasi, madu dapat mengurangi inflamasi dan edema karena mempunyai sifat antiinflamasi yang juga berasal dari flavonoid6.  Flavonoid  dapat  menjadi  zat antiinflamasi  dan  penstabil  Reactive  Oxygen Species  (ROS).  Efek  flavonoid  sebagai antioksidan secara tidak langsung mendukung efek  antiinflamasi  flavonoid.  Adanya  radikal bebas  dapat  menarik  berbagai  mediator inflamasi  dan  flavonoid  dapat  menstabilkan ROS dengan bereaksi dengan senyawa reaktif dari  radikal  sehingga  radikal  menjadi  inaktif (Waleed, 2015).
Madu  dapat  menurunkan  jumlah hitung  leukosit  terutama  PMN  karena memiliki  kandungan  antioksidan  serta  zat antiinflamasi  yaitu  flavonoid,  yang  dapat menstabilkan  ROS  sehingga  radikal  bebas menjadi  inaktif  dan  menurunkan  reaksi inflamasi.  Hal  ini  dikarenakan  penurunan radikal  bebas  menyebabkan  berkurangnya aktivasi NF-κB dan mengakibatkan penurunan produksi IL-8 yang berperan dalam peningkatan leukosit sehingga jumlah leukosit total darah dapat menurun (Waleed, 2015).
Penelitian  ini  menunjukkan  hasil bahwa  terdapat  perubahan  jumlah  hitung leukosit pada mencit yang terinfeksi Salmonella  typhi yang  mana  memberikan bukti  potensi  bahwa  madu  dapat  menjadi
terapi penyakit, sebagai pembuktian kebenaran  sedikit  demi  sedikit  tentang  salah satu tanda-tanda kebesaran Allah SWT dalam bentuk madu sebagaimana terwahyukan pada surah QS An-nahl/16: 69 diatas.
Kesembuhan  datang  setelah  sebab  lahiriah dan  maknawi  terwujud  yang  disertai  dengan kehendak Allah. Sekian banyak yang berobat dengan  obat  yang  sama,  tetapi  yang  sembuh boleh  jadi  satu  atau  dua  orang  saja.  Kadang kesembuhan  seseorang  lebih  ditentukan  oleh sejauh  mana  ia mengimani  kemampuan obat tersebut sebagai media penyembuhan, kadang pula  lebih  melihat  kepada  sebab-sebab  fisik dan maknawi pasien itu sendiri. Namun tidak dapat dipungkiri bahwa madu itu merupakan obat dari berbagai macam penyakit (Hollong, 2015).

## Simpulan
Pemberian injeksi secara
intraperitoneal  sebanyak  10 3 CFU  bakteri Salmonella typhi pada mencit dapat meningkatkan  jumlah  hitung  leukosit  pada mencit yang terinfeksi Salmonella typhi, dan pemberian  madu  dapat  menurunkan  jumlah hitung  leukosit  pada  mencit  yang  terinfeksi Salmonella typhi secara signifikan.

## Daftar Pustaka
https://www.who.int/immunization/diseases/t yphoid/en/ (diakses pada 31 juli 2019) Dinkes  Sulawesi  Selatan.  Profil  Kesehatan Sulawesi Selatan 2014. Makassar 2015.
Dinkes Kota Makassar. Laporan Penanggulangan Penderita/Kematian
Penyakit Tyhpoid. Makassar 2019.
Mubasyiroh, Rofingatul. Faktor Yang
Berhubungan  Dengan  Kejadian  Diare Pada  Balita  Di  Beberapa  Iwgional Indonesia  Tahun  2007.  DEPKES:
Puslitbang Ekologi dan Status Kesehatan Litbang Depkes. 2010. Nurheti, Khasiat Madu  Untuk  Kesehatan  dan Kecantikan.
Yogyakarta: Rapha Publishing, 2015.
Ali Raeessi M, Aslani J, Raeessi N, Gharaie H, Karimi  ZAA,  Raeessi  F.  Honey  plus coffee  versus  systemic  steroid  in  the treatment  of  persistent  post-infectious cough:  A  randomised  controlled  trial. Primary Care Respiratory Journal. 2013; 22(3), 325–30.
Shihab, M Quraish. Tafsir Al-Misbah: Pesan,
Kesan  dan  Keserasian  Al-Qur’an. Volume  15.  Tangerang:  PT.  Lentera Hati, 2017.
Suranto,  Adji,  Terapi  madu.  Cet.  I;  Depok  : Penebar Swadaya, 2007.
Stagos  Dimitrios,  Nikolaos  Soulitsiotis,
Christina
Tsadila,
Stamatina Papaeconomou, Charalampos Arvanitis, Alexandros  Ntontos,  Fani  Karkanta, Soultana Adamou
Androulaki,
Konstantinos  Petrotos,    Demetrios  A. Spandidos,    Demetrios  Kouretas    And Dimitris  Mossialos.  Antibacterial  and antioxidant activity of different types of honey derived from Mount Olympus in Greece. International journal of molecular medicine 42:  726-734,  2018
Waleed K. El-Aidy, Ahmad A. Ebeid  ,Abd El-
Raouf  M.  Sallam  ,  Ibrahim  E. Muhammad    ,Ayman  T.  Abbas,  A. Kamal, Sayed Sartaj Sohrab. Evaluation of  propolis,  honey,  and  royal  jelly  in amelioration of peripheral blood leukocytes  and  lung  inﬂammation  in mouse conalbumin-induced asthma model.  Saudi  Journal  of  Biological Sciences (2015) 22,780–788
Irianto.  Mikrobiologi  Medis.  Bandung  :
Alfabeta. 2013.
Natari, N. N. L., Yasa, I. W, P. S., Lestari, W.
Karakteristik  Penderita  Demam  Tifoid dengan Hasil Pemeriksaan Darah
Lengkap dan Uji Widal di RSIA Bunda Periode  Oktober  2013-Januari  2014.
Fakultas Kedokteran
Universitas
Udayana. 2014.
Rosinta,  L.,  Suryani,  Y.  D.,  &  Nurhayati,  E.
Hubungan  Durasi  Demam  Dengan Kadar  Leukosit  pada  Penderita  Demam Tifoid  Anak  Usia  5-10  Tahun  yang Dirawat  Inap  di  Rumah  Sakit  Al-Ihsan Periode  Januari-Desember  Tahun  2014. Prosiding Pendidikan Dokter. 2014.
Ray, B. Fundamental Food Microbiologi. CRC Press: New York. Page  1996: 410-411,
402-403.
Hariyanti  LF,  Aktivitas  Antibakteri  Berbagai
Jenis  Madu  Terhadap  Antimikroba Pembusuk  (Pseudomonas  Fluorescens FNCC  0071  dan  Pseudomonas  Putida FNCC  0070).Skripsi  S1  Teknologi
Pertanian.
Fakultas
Pertanian,
Universitas  Sebelas Maret: 2010.
Hollong,  Hasbi  Ash  Shiddieqy.  Madu  Dalam Alquran (Kajian Tafsir Tahlili terhadap QS al- Nahl/16:  68-69).  Universitas  Islam  Negeri (UIN) Alauddin Makassar. 2015