## Disubmit 10 Desember 2021
Diterima 24 September 2021
PENGARUH PEMBERIAN VARIASI KONSENTRASI BIOTIN TERHADAP KADAR KOLESTEROL TOTAL DAN KOLESTEROL LDL PADA TIKUS DENGAN RESIKO DISLIPIDEMIA

## THE EFFECT OF GIVING VARIANT BIOTIN CONCENTRATION ON TOTAL CHOLESTEROL AND LDL CHOLESTEROL LEVELS IN RAT WITH DYSLIPIDEMIA
Anak Agung Ayu Eka Cahyani 1 , Budi Santosa 2 , Ana Hidayati Mukaromah 3 Program Studi Magister Sains Laboratorium Medis. Universitas Muhammadiyah Semarang

## ABSTRAK
Dislipidemia dapat menyebabkan aterosklerosis sehingga risiko penyakit jantung koroner, penyakit  kardiovaskular  atau Cardiovascular  Disease (CVD)  dan  stroke  meningkat. Kolesterol LDL diketahui terlibat dalam tahapan perkembangan lesi awal aterosklerosis. Pemberian suplemen seperti penambahan biotin perlu diberikan untuk menjaga kadar lipid dalam darah. Biotin disebut juga vitamin B7 atau vitamin H yaitu vitamin larut dalam air, bertindak  sebagai  kelompok  prostetik  karboksilase  dalam  beberapa  jalur  metabolisme. Biotin  dinyatakan  vitamin  yang  aman,  asupan  dengan  kadar  300  kali  lipat  dari  normal terbukti tidak beracun. Penelitian ini dilakukan untuk melihat pengaruh pemberian variasi konsentrasi  biotin  terhadap  kadar  kolesterol  total  dan  kolesterol  LDL  pada  tikus  wistar dengan resiko dislipidemia. Tikus wistar jantan usia 8 minggu dengan berat awal 150-200 gram  diadaptasi  selama  7  hari,  diberi  pakan  standar dan  air  minum ad  libitum .  Sampel setelah adaptasi, dibagi menjadi 5 kelompok. Kelompok kontrol  negatif diberikan  pakan standar, kelompok  kontrol  positif diberikan pakan dengan diet tinggi  lemak. Kelompok perlakuan 1, 2 dan 3 diberi pakan diet tinggi lemak dan dosis biotin berturut-turut 1,232 mg/kg;  68,39  mg/kg  dan  97,72  mg/kg  selama  6  minggu.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa ada perbedaan yang signifikan pada hasil pemeriksaan kolesterol total dan kolesterol LDL dengan uji One Way ANOVA (p ≤ 0,05). Simpulan ada pengaruh pemberian variasi konsentrasi  biotin  terhadap  kadar  kolesterol  total  dan  kolesterol  LDL  pada  tikus  wistar dengan resiko dislipidemia.
Kata Kunci : Biotin, Dislipidemia, Kolesterol LDL, Kolesterol Total

## ABSTRACT
Dyslipidemia  can  cause  atherosclerosis  so  that  the  risk  of  coronary  heart  disease, cardiovascular  disease  (CVD)  and  stroke  increases.  LDL  cholesterol  involved  in  the
developmental stages of the early atherosclerosis lesions. Supplementation of biotin needs to be given to maintain lipid levels in the blood. Biotin, also called vitamin B7 or vitamin H, is a water soluble vitamin, acting as a prosthetic carboxylase group in several metabolic pathways. Biotin is declared a safe vitamin, intake with levels 300 times than normal level is  proven  to  be  non-toxic.  This  research  was  conducted  to  see  the  effect  of  varying  the concentration of biotin on total cholesterol and LDL cholesterol levels in Wistar rats with a risk of dyslipidemia. Eight-week-old male Wistar rats with an initial weight of 150-200 grams were adapted for 7 days, given standard feed and drinking water ad libitum. Samples after adaptation were divided into 5 groups. The negative control group was given standard feed, the positive control group was given feed with a high-fat diet. Treatment groups 1, 2 and 3 were given a high-fat diet and a dose of biotin 1.232 mg/kg; 68.39 mg/kg and 97.72 mg/kg over a periode of 6 weeks. The results showed that there was a significant difference in the results of total cholesterol and LDL cholesterol with the One Way ANOVA test (p ≤ 0.05).  In  conclusion,  there  is  an  effect  of  giving  biotin  variant  concentration  on  total cholesterol and LDL cholesterol levels in rat with a risk of dyslipidemia.
Keywords : Biotin, Dyslipidemia, LDL Cholesterol, Total Cholesterol.
Alamat Korespondensi   : Universitas Muhammadiyah Semarang, Indonesia Email
: ekacahyanii@gmail.com

## PENDAHULUAN
Dislipidemia merupakan kelainan metabolisme lipid akibat interaksi faktor genetik dan faktor lingkungan yang ditunjukkan dengan hasil pemeriksaan profil lipid di luar borderline . Parameter pemeriksaan profil lipid yang menjadi penanda dislipidemiaantara  lain  meningkatnya  kadar  kolesterol  total  dankolesterol  LDL ( low-density  lipoprotein) (Ontario,  2014;  Garg,  2015  &  Kwiterovich,  2010). Dislipidemia dapat menyebabkan aterosklerosis sehingga risiko penyakit jantung koroner, penyakit kardiovaskular atau Cardiovascular Disease (CVD) dan stroke meningkat (Anneke et al., 2018 &Kopin et al., 2013). Pada tahun 2016 diperkirakan 17,9 juta orang meninggal karena CVD, mewakili 31% dari total kematian global (WHO, 2017). Kolesterol LDL diketahui terlibat dalam tahapan perkembangan lesi awal  aterosklerosis  yaitu  pembentukan foam  cell (sel  busa)  (Chistiakov  et  al., 2017&Maramis et al., 2014).
Laporan  Riset  Kesehatan  Dasar  Kementerian  RI  (Riskesdas)  tahun  2018 menunjukkan  bahwa  28,8%  dari  seluruh  penduduk  di  Indonesia  memiliki  kadar kolesterol  total  meningkat  yang  diperoleh  dari  gabungan  penduduk  kategori borderline (nilai kolesterol total 200-239  mg/dl) dan tinggi (nilai kolesterol total >240  mg/dl).  Usaha-usaha  yang  dapat  dilakukan  dalam  mencegah  dislipidemia antara  lain  mengurangi  asupan  asam  lemak  jenuh,  meningkatkan  asupan  serat, mengurangi asupan karbohidrat dan alkohol, meningkatkan  aktivitas fisik sehari- hari,  mengurangi  berat  badan  berlebih  serta  menghentikan  kebiasaan  merokok (PERKI,  2013).  Satuan  Tugas  Pelayanan  Preventif  Amerika  Serikat  ( The  U.S.
Preventive Services Task Force ) menunjukkan modifikasi gaya hidup, seperti diet dan aktivitas fisik, tidak dapat mengurangi kadar lipid secara substansial.
Pemberian suplemen tambahan seperti penambahan biotin perlu diberikan untuk menjaga kadar lipid dalam darah (Asvini et al., 2016). Biotin disebut juga dengan vitamin B7 atau vitamin H yaitu vitamin larut dalam air (Depkes, 1979) yang  bertindak  sebagai  kelompok  prostetik  karboksilase  dalam  beberapa  jalur metabolisme  (Patel  et  al.,2017).  Menurut  Ardabilygazir  (2018),  biotin  adalah kofaktor enzyme karboksilase yang terlibat dalam sintesis asam lemak dan produksi energi (Ardabilygazir et al. , 2018). Food and Nutrition Board (1998) memberikan referensi  asupan  vitamin  harian  untuk  orang  dewasa  yaitu  30  ug  dan  meningkat pada ibu menyusui yaitu 35 ug. Biotin dinyatakan vitamin yang aman dan asupan dengan kadar 300 kali lipat dari normal terbukti tidak beracun (Asvini et al., 2018 &  Said,  2011). Biotin  secara  alami  dapat  ditemukan  dalam  makanan  antara  lain kacang almond, kacang-kacangan, biji-bijian, nasi beras merah, dan kuning telur (Patel et al., 2017).
Biotin mampu menurunkan kadar TG dan Very  Low  Density  Lipoprotein (VLDL) dalam plasma darah pada pasien pasien diabetes tipe 2 dan non diabetes dengan  hipertrigliseridemia  (Revilla-Monsalve  et  al.,  2006).  Kombinasi  obat Atorvastatin  dan  biotin  bagi  pasien  dislipidemia  menunjukkan  hasil  penurunan kadar kolesterol total, kolesterol LDL dan trigliserida (Asvini et al., 2018). Pasien dengan dislipidemia sekunder  yang telah mengonsumsi Atorvastatin secara rutin 20mg/hari diberikan tambahan biotin menunjukkan hasil baik pada rasio kolesterol total  :  kolesterol  HDL  ≤  3.5  pada  minggu  ke-empat  dan  ke-enam  (Asvini  et al.,2016). Biotin yang digunakan dalam bentuk tablet dengan dosis 5 mg (Asvini et al., 2018; Revilla-Monsalve et al. 2006 & Asvini et al., 2016).
Dalam Larrieta (2010) ditemukan bahwa biotin menjadi agen yang secara signifikan menurunkan kadar fosfolipid pada tikus. Biotin telah diujicobakan pada tikus sehat dengan dosis 97.7 mg/kg diet menurunkan kadar serum TG hingga 35% dan ekspresi gen lipogenik. Aguilera-Mendez (2012) melakukan analisa signaling pathways dan  mekanisme  post-transkripsi  yang  terlibat  dalam  efek hipotrigliseridemia biotin dimana konsentrasi trigliserida serum dan hati menurun setelah penelitian. Penelitian lain menggunakan tikus dengan dosis serupa diketahui dapat menurunkan kadar asal lemak bebas namun tidak berpengaruh pada lipolisis, terjadi  penurunan  sintesis  asam  lemak,  peningkatan  oksidasi  dan  penyerapannya (Boone-Villa et al., 2015 & Moreno-Méndez et al., 2019).
Pemberian  biotin  sebagai  suplemen  pada  tikus  wistar  dipertimbangkan sebagai  langkah  preventif  terhindar  dari  dislipidemia.  Diet  tinggi  lemak  yang mengandung  lemak  babi  diberikan  pada  tikus  wistar  dapat  menyebabkan peningkatan kadar kolesterol total dan LDL hingga terbentuk sel busa. Penelitian ini dilakukan untuk melihat pengaruh pemberian variasi konsentrasi biotin terhadap kadar  kolesterol  total  dan  kolesterol  LDL  pada  tikus  wistar  dengan  resiko dislipidemia.  Variasi  konsentrasi  biotin  mengacu  pada  penelitian  sebelumnya (Larrieta  et  al.,  2010;  Boone-Villa  et  al.,  2015;  Aguilera-Méndez  et  al.,  2012  & Moreno-Méndez et al., 2019) baru dapat menurunkan kadar TG hingga 35% pada mencit (Larrieta et al., 2010) sehingga penelitian ini konsentrasi biotin dinaikkan dengan harapan hasil lebih baik dengan konversi dosis hewan coba.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium  Hewan  Coba  Universitas Muhammadiyah  Semarang.  Pengukuran  kadar  kolesterol  total  dan  kolesterol LDLserum  dilakukan  di  Balai  Laboratorium  Kesehatan dan  Pengujian  Alat Kesehatan Provinsi Jawa  Tengah.  Usulan  penelitian  telah  disetujui  oleh  Komite Etik  Penelitian  Kesehatan  Fakultas  Kesehatan  Masyarakat  Universitas Muhammadiyah  Semarang  No:  382/KEPK-FKM/UNIMUS/2020.  Penelitian dilaksanakan  pada  bulan  Juli-September  tahun  2020.  Penelitian  berjenis experimental dengan Post Randomized  Controlled  Group  Design terdiri dari 1 kelompok kontrol negatif, 1 kelompok kontrol positif, 3 kelompok uji. Penentuan besar sampel menggunakan ketentuan WHO (2001), jumlah minimal sampel per kelompok  adalah  5  ekor  tikus.  Pada  setiap  kelompok  ditambah  satu  ekor  tikus sehingga didapatkan total besar sampel sebanyak 30 ekor tikus. Metode pemilihan sampel menggunakan simple random sampling dimana dilakukan secara acak tanpa melihat strata pada populasi.
Tikus wistar jantan usia 8 minggu dengan berat awal 150-200 gram diadaptasi terlebih  dahulu  selama  7  hari,  diberi  pakan  standar  dan  air  minum  ad libitum.Sampel setelah dilakukan adaptasi, dibagi menjadi 5 kelompok. Kelompok kontrol    negatif  diberikan    pakan    standar,  kelompok    kontrol    positif  diberikan pakan  dengan  diet  tinggi    lemak  dan  air  minum. Diet  tinggi  lemak  untuk  pakan dibuat  dengan  mencampurkan  1000  gram  pakan  ayam  AD  II  dengan  100gram lemak babi. Pakan yang diberikan 40 mg/hari/tikus. Biotin produksi NATROL LLC Chatsworth, USA dalam bentuk tablet 10.000 mcg, digerus, diberikan pada tikus melalui sonde lambung. Kelompok perlakuan 1 diberi pakan diet tinggi lemak dan dosis biotin sebanyak 1,232 mg/kg berat badan tikus. Kelompok perlakuan 2 diberi pakan diet tinggi lemak dan dosis biotin sebanyak 68,39 mg/kgberat badan tikus. Kelompok perlakuan 2 diberi pakan diet tinggi lemak dan dosis biotin sebanyak 97,72 mg/kg berat badan tikus. Dosis suplementasi biotin berdasarkan penelitian sebelumnya dengan konversi dari mencit – tikus, dengan penambahan variasi dosis sebesar 15% (Larrieta et al., 2010; Boone-Villa et al., 2015; Aguilera-Méndez et al., 2012 & Moreno-Méndez et al., 2019).
Pengambilan  sampel  darah  dilakukan  pada  minggu  ke-6  penelitian.  Tikus dipuasakan  selama  8-10  jam  selanjutnya  dilakukan  terminasi  dengan  anastesi menggunakan  Ketamine-xylazine  75-100  mg/Kg  dan  5–10  mg/Kg  secara intra peritoneal (IP) menggunakan metodecervical  dislocation. Darah diambil sekitar 2- 3  ml  diambil  dari  mata,  diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  kamar.  Darah selanjutnya  disentrifuge  selama  10  menit  pada  kecepatan  3000  rpm  hingga diperoleh  serum.  Pemeriksaan  kadar  kolesterol  total  dan  kolesterol  LDL  direk dilakukan menggunakan metode CHOD-PAP.
Data hasil penelitian akan dianalisa secara statistik dengan bantuan program Windows SPSS . Analisa deskriptif dilakukan untuk melihat gambaran karakteristik tikus wistar berdasarkan berat badan, hasil pemeriksaan kadarkolesterol total dan kolesterol LDL sesudah perlakuan. Analisa Bivariat dilakukan dengan uji beda one way ANOVA .

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Penelitian

## Persentase Penambahan Berat Badan Tikus Wistar
Berat badan tikus wistar ditimbang setiap minggu untuk melihat kondisi tikus dan  menentukan  dosis  biotin  yang  diberikan  setiap  tikus  sesuai  berat  badannya. Penambahan berat badan tikus dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1.
Persentase Penambahan Berat Badan Tikus Wistar Kelompok BB awal (g) BB akhir (g) Persentase Penambahan BB Kontrol Negatif 162.33 295.00 81,72 % Kontrol Positif 163.33 277.00 69,59 % Perlakuan 1 158.50 265.33 67,40 % Perlakuan 2 160.00 248.33 55,21 % Perlakuan 3 157.67 254.00 61,10 %
Berat  badan  tikus  wistar  yang  digunakan  dalam  penelitian  mengalami penambahan  jika  dilihat  dari  minggu  awal  hingga  minggu  terakhir  penelitian. Persentase  penambahan  berat  badan  pada  kelompok  kontrol  negatif  sebesar 81,72%.  Kelompok  kontrol  positif  yang  diberi  pakan  dengan  diet  tinggi  lemak mengalami penambahan berat badan sebesar 69,59%. Kelompok perlakuan 1, 2 dan 3 yang diberi pakan dengan diet tinggi lemak dan variasi konsentrasi biotin melalui sonde berturut turut sebesar 67,40%; 55,21% dan 61,10%.

## Hasil Pemeriksaan Kadar Kolesterol Total dan Kolesterol LDL
Analisis data kadar kolesterol total dan kolesterol LDL tikus wistar diawali dengan analisis secara deskriptif disajikan dalam Gambar 1.

## Gambar 1. Hasil Pemeriksaan Kadar Kolesterol Total dan Kolesterol LDL
Rata-Rata Tiap Kelompok
Gambar 1 menunjukan rata-rata hasil pemeriksaan kadar kolesterol total dan kolesterol  LDL  tikus  wistar  tiap  kelompok.  Hasil  rata-rata  kadar  kolesterol  total kelompok kontrol negatif adalah 70,62 mg/dl. Kelompok kontrol positif mengalami kenaikan kadar kolesterol total dibandingkan kontrol negatif yaitu 106,27 mg/dl. Kadar kolesterol total rata-rata kelompok perlakuan 1, 2 dan 3 berturut-turut adalah 78,40 mg/dl; 71,03 mg/dl; 69,50 mg/dl. Persentase penurunan kadar dibandingkan dengan kelompok kontrol positif yaitu sebanyak 26,2%; 33,2% dan 34,6%.
Hasil  rata-rata  kadar  LDL  kelompok  kontrol  negatif  adalah  58,65  mg/dl. Kelompok kontrol positif mengalami kenaikan kadar  LDL dibandingkan  kontrol negatif  yaitu  79,82  mg/dl.  Kadar  LDL  rata-rata  kelompok  perlakuan  1,  2  dan  3 berturut-turut adalah 77,43 mg/dl; 65,24 mg/dl; 57,51 mg/dl. Persentase penurunan kadar dibandingkan dengan kelompok kontrol positif yaitu sebanyak 2,99%; 18,3% dan 27,95%.
Analisis data dilanjutkan dengan analisis bivariat meliputi uji normalitas dan uji One  Way Anova.  Uji  normalitas  data  menggunakan  uji Saphiro-Wilk untuk mengetahui  distribusi  data  karena  jumlah  sampel  kurang  dari  50.  Hasil  uji normalitas kadar profil lipid dapat dilihat pada Tabel 2.
0 20 40 60 80 100 120 Kolesterol Total LDL Kontrol Negatif Kontrol Positif Perlakuan 1 (biotin
1,232 mg/kg)
Perlakuan 2 (biotin 68,39 mg/kg)
Perlakuan 3 (biotin
97,72 mg/kg)

## Tabel 2.

## Hasil Uji Normalitas Kadar Kolesterol Total dan Kolesterol LDL
Perlakuan Shapiro-Wilk Statistic df Sig. Kolesterol Total KN 0,989 6 0,988 KP 0,876 6 0,249 Perlakuan 1 0,809 5 0,096 Perlakuan 2 0,929 6 0,571 Perlakuan 3 0,925 6 0,540 LDL KN 0,951 6 0,749 KP 0,854 6 0,168 Perlakuan 1 0,917 5 0,508 Perlakuan 2 0,929 6 0,569 Perlakuan 3 0,834 6 0,117
Tabel  2  menunjukan  bahwa  hasil  uji  normalitas  data  menggunakan  uji Saphiro-Wilk diperoleh nilai p ≥ 0,05 maka dapat diartikan bahwa data berdistribusi normal.  Analisis  data  dilanjutkan  dengan  menghitung  secara  statistik  untuk  uji Levene’s Test (homogenitas ). Hasil uji homogenitas dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3.

## Uji Homogenitas
Uji Levene’s Test (Homogenitas) Syarat Nilai p Nilai p 1. Kolesterol Total 2. LDL ≥ 0,05 0,113 0,822
Uji  homogenitasdilakukan  untuk  mengetahui  bahwa  dua  atau  lebih kelompok  data  sampel  berasal  dari  populasi  yang  memiliki  varians  sama (homogen). Hasil yang didapatkan yaitu nilai p dari kolesterol total, kolesterol LDL berturut-turut  adalah sebesar 0,113 dan 0,822. Semua nilai p ≥ 0,05 berarti data tersebut homogen.
Analisis data dilanjutkan menggunakan uji One Way ANOVA. Hasil uji One Way ANOVA dapat dilihat pada Tabel 4.

## Tabel 4.

## Uji One Way ANOVA
Uji One Way ANOVA Syarat Nilai p Nilai p 1. Kolesterol Total 2. LDL ≤ 0,05
0,008
0,000 Uji One way ANOVA digunakan untuk menguji rerata perbedaan data antara dua kelompok atau lebih. Hasil Tabel 4 menunjukkan nilai p kolesterol total 0,008 dan kolesterol LDL 0,000  (p ≤ 0,05) maka ada pengaruh pemberian biotin terhadap kadar kolesteroltotal dan kolesterol LDL tikus wistar dengan resiko dislipidemia .

## Pembahasan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan,  diketahui  bahwa pemberian biotin dapat menurunkan kadar kolesterol secara signifikan. Penelitian Orhan (2018) mendapatkan hasil bahwa pemberian biotin pada tikus yang diberi diet tinggi lemak terbukti mampu menurunkan kadar kolesterol total. Suplementasi biotin  memberikan  efek  yang  baik  dalam  menurunkan  kadar  kolesterol  LDL. Penurunan kadar LDL juga ditemukan pada penelitian sebelumnya (Asvini et al., 2018; Orhan et al., 2019 &Geohas et al., 2007).
Suplementasi  biotin  dalam  adipose  jaringan  meningkatkan  kadar  bentuk tidak  aktif  dari asetil-KoA  karboksilase-1 dan asetil-KoA  karboksilase-2 (enzim yang dapat menurunkan sintesis asam lemak dan meningkatkan laju oksidasi asam lemak)  yang  mungkin  terlibat  dalam  penurunan  kadar  asam  lemak  bebas  serum (Boone-Villa  et  al.  2015  &  Moreno-Méndez  et  al.,  2019).  Asam  lemak  bebas berkaitan dengan kolesterol pada beberapa jalur metabolisme.
Dislipidemia sering dikaitkan dengan penyakit kardiovaskular. Kolesterol LDL  menjadi  target  utama  intervensi  terapeutik  untuk  mengurangi  risiko kardiovaskular (Garg, 2015). Suplementasi biotin  yang dapat menurunkan kadar kolesterol total dan kolesterol LDL pada tikus wistar dengan resiko dislipidemia mungkin  dapat  menjadi  salah  satu  langkah  preventif,  khususnya  dari  penyakit kardiovaskuler.

## SIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan hasil penelitian maka dapat disimpulkan bahwa  ada pengaruh pemberian variasi konsentrasi biotin terhadap kadar kolesterol total dan kolesterol LDL tikus wistar dengan resiko dislipidemia.   Kadar kolesterol total dan kolesterol LDL mengalami penurunan setelah diberikan peningkatan konsentrasi biotin. Saran dari penelitian ini adalah agar melakukan penelitian lanjutan pemberian biotin pada parameter  lain  yang  berhubungan  dengan  penyakit  kardiovaskuler  serta  uji  coba dosis sebelum diberikan ke manusia untuk mengurangi resiko dislipidemia.

## DAFTAR PUSTAKA
Aguilera-Méndez,  A.  and  Fernández-Mejía,  C.  (2012)  ‘The  hypotriglyceridemic effect  of  biotin  supplementation  involves  increased  levels  of  cGMP  and AMPK activation’, BioFactors , 38(5), pp. 387–394. doi: 10.1002/biof.1034. Anneke, R. and Sulistiyaningsih (2018) ‘Review: Terapi Herbal sebagai Alternatif Pengobatan Dislipidemia’, Farmaka , 16, pp. 213–221.
Ardabilygazir, A. et  al. (2018) ‘Effect of High-dose Biotin on Thyroid Function Tests:  Case  Report  and  Literature  Review’, Cureus ,  10(6),  pp.  1–5.  doi: 10.7759/cureus.2845.
Asvini, N., Hemavathy, G. and Vasanthira, K. (2016) ‘Combination Of Biotin With Atorvastatin  Achieves  Favourable  Total  Cholesterol :  Hdl  Ratio  In Secondary  Dyslipidemia :  A  Single  Centre  ,  Prospective  ,  Open  Label  , Parallel Group , Comparative Study .’, 6(4), pp. 34–40.
Asvini, N. and Hemavathy, P. G. (2018) ‘Effect of Biotin on the Lipid Profile – Total Cholesterol , LDL , Triglyceride , VLDL and HDL of Dyslipidemic Patients’, 2(8), pp. 12–20.
Boone-Villa,  D. et  al. (2015)  ‘Effects  of  Biotin  Supplementation  in  the  Diet  on Adipose Tissue cGMP Concentrations, AMPK Activation, Lipolysis, and Serum-Free  Fatty  Acid  Levels’, Journal  of  Medicinal  Food ,  18(10),  pp. 1150–1156. doi: 10.1089/jmf.2014.0170.
Chistiakov,  D.  A. et  al. (2017)  ‘Mechanisms  of  Foam  Cell  Formation  in Atherosclerosis’, Journal  of  Molecular  Medicine .  Journal  of  Molecular Medicine, 95(11), pp. 1153–1165. doi: 10.1007/s00109-017-1575-8.
Depkes, R. (1979) Farmakope Indonesia . Ketiga. Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Garg,  A.  (2015) Dyslipidemia;  Pathophysiology,  Evaluation  and  Management . Humana Press. doi: 10.1007/978-1-60761-424-1.
Geohas,  J. et  al. (2007)  ‘Chromium  picolinate  and  biotin  combination  reduces atherogenic  index  of  plasma  in  patients  with  type  2  diabetes  mellitus:  A placebo-controlled,  double-blinded,  randomized  clinical  trial’, American Journal of the Medical  Sciences . Elsevier Masson SAS, 333(3), pp. 145– 153. doi: 10.1097/MAJ.0b013e318031b3c9.
Kopin,  L.  and  Lowenstein,  C.  J.  (2017)  ‘[Dyslipidemia].’, American  College  of Physicians , 71(2), pp. 275–279. doi: 10.7326/aitc201712050.
Kwiterovich,  P.  O.  (2010)  ‘The  Johns  Hopkins  Textbook  of  Dyslipidemia’,
Circulation , pp. e517----. doi: 10.1161/circulationaha.110.961201.
Larrieta, E. et al. (2010) ‘Pharmacological concentrations of biotin reduce serum triglycerides and the expression of lipogenic genes’, European Journal of Pharmacology .  Elsevier  B.V.,  644(1–3),  pp.  263–268.  doi: 10.1016/j.ejphar.2010.07.009.
Maramis,  R.  and  Kaseke,  M.  (2014)  ‘Gambaran  Histologi  Aorta  Tikus  Wistar dengan Diet Lemak Babi Sirsak (Annona muricata L .)’, jurnal e-Biomedik , 2, pp. 431–435.
Moreno-Méndez,  E.,  Hernández-Vázquez,  A.  and  Fernández-Mejía,  C.  (2019) ‘Effect of biotin supplementation on fatty acid metabolic pathways in 3T3- L1 adipocytes’, BioFactors , 45(2), pp. 259–270. doi: 10.1002/biof.1480.
Ontario, H. Q. (2014) ‘Frequency of Testing for Dyslipidemia: An Evidence-Based Analysis’, Ontario health technology assessment series , 14(6), pp. 1–30.
Orhan,  C. et  al. (2019)  ‘Effect  of  supplementing  chromium  histidinate  and picolinate  complexes  along  with  biotin  on  insulin  sensitivity  and  related metabolic indices in rats fed a high-fat diet’, Food Science and Nutrition , 7(1), pp. 183–194. doi: 10.1002/fsn3.851.
Patel, D. P., Swink, S. M. and Castelo-Soccio, L. (2017) ‘A Review of the Use of Biotin for Hair Loss’, Skin Appendage Disorders , 3(3), pp. 166–169. doi: 10.1159/000462981.
PERKI  (2013) pedoman  tata  laksana  dislipidemia , PP  PERKI .  doi: 10.1136/bcr.09.2008.0970.
Revilla-Monsalve,  C. et  al. (2006)  ‘Biotin  supplementation  reduces  plasma triacylglycerol  and VLDL  in type  2 diabetic  patients  and in nondiabetic subjects  with  hypertriglyceridemia’, Biomedicine  and  Pharmacotherapy , 60(4), pp. 182–185. doi: 10.1016/j.biopha.2006.03.005.
Said,  H.  M.  (2011)  ‘Chapter  1  Biotin:  Biochemical,  Physiological  and  Clinical Aspects’, Water Soluble Vitamins, Subcellular Biochemistry , pp. 301–322. doi: 10.1007/978-94-007-2199-9.
World Health Organization (2017) Cardiovascular diseases (CVDs) , World Health Organization . Available at: https://www.who.int/news-room/fact- sheets/detail/cardiovascular-diseases-(cvds) (Accessed: 9 June 2020).