250 Potensi Penangkapan Radikal Bebas Diniatik
POTENSI PENANGKAPAN RADIKAL BEBAS HASIL HIDROLISIS EKSTRAK ETANOL DAUN KEPEL (Stelechocarpus burahol, (Bl.) Hook f. & Th.)

## DENGAN METODE DPPH

## POTENTIAL OF FREE RADICALS SCAVENGING
OF Stelechocarpus burahol , (Bl.) Hook f. & Th. LEAVES IN

## ETHANOL EXTRACT BY DPPH METHOD

## Diniatik
Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Purwokerto E-mail: diniatik@yahoo.com

## ABSTRAK
Tanaman  kepel  secara  empiris  digunakan  sebagai  diuretik  dan  pencegahan peradangan  ginjal.  Daunnya  mengandung  polifenol  dan  flavonoid,  sedangkan daging buah, biji, dan akar mengandung saponin, flavonoid dan polifenol. Dalam penelitian  ini  dilakukan  deteksi  kandungan  flavonoid  dalam  daun  kepel  dan potensi  radikal  bebas  secara  kualitatif.  Simplisia  daun  kepel  diekstraksi menggunakan  metode  maserasi  dengan  penyari  etanol  sebagai  solven,  kemudian diuapkan  hingga  menjadi  ekstrak  kental.  Sebagian  ekstrak  etanol  daun  kepel dihidrolisis dengan menggunakan HCl 2N selama 30 menit, kemudian difraksinasi dengan eter. Ekstrak etanol, fraksi eter, dan fraksi air asam diidentifikasi golongan senyawanya  menggunakan  kromatografi  lapis  tipis  dengan  fase  diam  silika  F 254 dan  dua  macam  fase  gerak  BAW  ( n -butanol:  asam  asetat:  air  =  3:1:1)  dan kloroform:  metanol  (8:2).  Hasil  kromatogram  menunjukkan  bahwa  bercak golongan  senyawa  flavonoid  dalam  fraksi  eter  dan  air  asam  dari  hasil  hidrolisis ekstrak  etanol  daun  kepel  mempunyai  potensi  sebagai  penangkap  radikal  bebas difenilpikrilhidrazil (DPPH).
Kata kunci : Stelechocarpus burahol , DPPH, radikal bebas

## ABSTRACT
Stelechocarpus  burahol ,  (Bl.)  Hook  f.  &  Th. is  used  as  a  medicinal  plant  as diuretic  and  prevention  of  kidney  inflammation.  The  leaves  contain  polyphenols and  flavonoids,  while  the  fruit,  seeds  and  roots  of  burahol  contain  saponins, flavonoids and polyphenols. In this study the detection of flavonoid content in the leaves  of  burahol and its  potential as free radicals  scavenging  qualitatively.  The powder  of  burahol  leaves  were  extracted  by  maceration  method  using  ethanol solvent,  then  made  into  a  thick  extract.  Ethanol  extracts  of  burahol  leaves  were hydrolyzed  with  2N  HCl  for  30  min,  then  were  fractionated  with  ether.  Ether fraction,  acidic  water  and  ethanol  extracts  were  separated  by  thin-layer
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 250-260
chromatography  with  F 254 silica  stationary  phase  and  two-phase  systems,  there were  BAW  (n-butanol:  acetic  acid:  water  =  3:1:1)  and  chloroform:  methanol (8:2).  The  result  of  this  research  indicating  there  are  spots  that  show  there  are flavonoids  and  has  potential  as  a  scavenger  diphenylpikrilhidrazil  free  radical (DPPH).

## Keywords: Stelechocarpus burahol, DPPH, radical scavenger

## PENDAHULUAN
Tanaman  kepel  belum  digunakan  secara  maksimal  oleh  masyarakat Banyumas  tapi  sudah  termasuk  tanaman  yang  dimanfaatkan  secara  optimal  di klinik  Hortus  Medikus,  Balitbangkes  Kementrian  Kesehatan,  Tawangmangu. Dengan  kondisi  geografis  Banyumas  yang  cukup  khas,  yaitu  curah  hujan  cukup tinggi  dan  termasuk  wilayah  yang  dekat  pegunungan  Slamet  dengan  ketinggian 2500  dpl  yang  sama  dengan  kondisi  di  Tawangmangu,  maka  tanaman  ini berpotensi untuk dikembangkan di Banyumas.
Tanaman kepel adalah salah satu tanaman yang dimanfaatkan sebagai obat, yaitu  untuk  diuretik  dan  pencegahan  radang  ginjal.  Ekstrak  etanol  dan  ekstrak heksan daun kepel memiliki potensi sebagai penurun kadar asam urat darah, efek hiperurikemia  ekstrak  etanol  maupun  heksana  setara  dengan  allopurinol (Purwatiningsih  dkk.,  2013).  Infusa  daun  kepel  mampu  menurunkan  kadar  asam urat dalam darah tikus (Susilowati, 2000) dan dalam ayam (Hening, 2002). Fraksi larut  dan  tidak  larut  petroleum  eter  daun  kepel  dapat  menyebabkan  penurunan kadar  asam  urat  darah  ayam  hiperurikemia  dan  hasil  identifikasi  secara  kimiawi fraksi  aktif  menunjukkan  adanya  kandungan  flavonoid  (Sutomo,  2003).  Deteksi kandungan  fraksi  etanol  infusa  daun  kepel  yang  dilakukan  Hidayati  (2004) menunjukkan  adanya  flavonoid.  Senyawa  flavonoid  ini  diduga  mempunyai aktivitas  sebagai  penangkap  radikal  bebas,  dengan  demikian  perlu  dilakukan analisis  kualitatif  penangkapan  radikal  bebas  dengan  menggunakan  DPPH (diphenilpikrilhidrazil),  suatu  radikal  bebas  yang  sering  digunakan  untuk  uji penangkapan radikal bebas.
Senyawa  flavonoid  dapat  dideteksi  secara  kualitatif  dengan  menggunakan metode  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT).  Deteksi  flavonoid  dalam  hal  ini  dapat dilakukan  terhadap  ekstrak  etanol  dan  fraksi-fraksi  organik  dari  ekstrak  tersebut.
252 Potensi Penangkapan Radikal Bebas Diniatik
Hasil  dari  deteksi  tersebut  dilanjutkan  potensi  penangkap  radikal  bebas  DPPH secara  kualitatif.  Dengan  demikian  penelitian  ini  sangat  penting  sebagai  dasar penelitian  lebih  lanjut  tentang  tanaman  kepel  yang  merupakan  tanaman  asli Indonesia dan telah turun temurun digunakan sebagai penurun asam urat. Dengan dilakukan penelitian ini maka ke depan senyawa flavonoid dalam bentuk aglikon dapat diketemukan dan mekanisme sebagai penurun asam urat dapat diperoleh.

## METODE PENELITIAN
Peralatan  yang digunakan adalah alat-alat gelas pada umumnya, maserator, timbangan  analitik,  kromatografi  lapis  tipis.  Bahan  yang  digunakan  adalah  daun kepel, etanol teknis; untuk KLT adalah berbagai fase gerak n-butanol -asam asetat glasial-air  (4:1:5,v/v),  asam  asetat  15%,  kloroform  :  metanol  (8:2),  deteksi amoniak, DPPH (Sigma Aldrich).
Jalannya Penelitian
A. Determinasi Tanaman
Tahap  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi  Farmasi  Fakultas  Farmasi Universitas Gadjah Mada.
B. Pengumpulan dan Pengeringan  Bahan
Bahan  yang  diambil  adalah  daun  kepel.  Bahan  dicuci  dengan  air  yang mengalir  untuk  menghilangkan  kotoran  yang  menempel,  kemudian  dikeringkan dengan  lemari  pengering.  Simplisia  herba  pegagan  kemudian  diserbuk menggunakan blender.
C. Pembuatan Ekstrak
Serbuk  diekstraksi  dengan  teknik  maserasi  selama  2  hari, etanol  70%,  24 jam  maserasi  pertama  dengan  satu  bagian  serbuk  simplisia  dan  sepuluh  bagian penyari, dilanjutkan maserasi kedua selama 24 jam dengan satu bagian serbuk dan empat  bagian  penyari.  Maserat  diuapkan  penyarinya  hingga  diperoleh  ekstrak kental etanol 70%.
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 250-260

## D. Fraksinasi
Masing-masing ekstrak dilakukan fraksinasi dengan menggunakan heksana, kloroform,  etil  asetat  dan  sisa  pelarut.  Masing  masing  fraksi  merupakan  larutan sampel yang akan dilakukan uji KLT.
E. Hidrolisis
Ekstrak  etanol  dilakukan  hidrolisis  dengan  menggunakan  HCl  p  kemudian difraksinasi  dengan  eter,  untuk  memperoleh  hasil  hidrolisis  aglikon  flavonoid. Masing-masing fraksi merupakan larutan sampel yang akan dilakukan uji KLT.
F. Analisis Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Uji KLT dengan:
Sistem 1:
fase gerak : n -butanol -asam asetat glasial-air (4:1:5,v/v), asam asetat 15%. fase diam : selulosa deteksi : sinar UV 366 dan sinar UV 254 larutan sampel : semua fraksi
Sistem 2: fase gerak : heksana : etil asetat (7:3) fase diam : silica F 254
deteksi : sinar UV 366 dan sinar UV 254 larutan sampel : semua fraksi
G. Uji Kualitatif Penangkapan Radikal Bebas
Hasil  dari  KLT  dilakukan  penyemprotan  dengan  menggunakan  DPPH 0,01%. Pada bercak yang berwarna kuning dengan dasar ungu (ungu adalah warna dari pereaksi DPPH) maka senyawa tersebut berpotensi sebagai penangkap radikal bebas.
H. Pengolahan dan Analisa Data
Dilakukan analisa terhadap kromatogram yang terbentuk, warna-warna yang terbentuk setelah diuapi uap amoniak pada hasil kromatogram akan diidentifikasi dengan  dicocokkan  pada  buku  Markham  (1988).  Pada  bercak  setelah  disemprot DPPH,  terbentuk  berwarna  kuning  dengan  dasar  ungu,  maka  senyawa  tersebut berpotensi sebagai penangkap radikal bebas.
Diniatik

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tanaman  kepel  ( Stelechocarpus  burahol, (Bl.)  Hook  f.  &  Th.) (famili Annonaceae)  yang  digunakan  dalam  penelitian  dideterminasi  di  Laboratorium Biologi  Fakultas  Farmasi,  Universitas  Gadjah  Mada.  Tujuan  determinasi  adalah memastikan  bahwa  tanaman  yang  diteliti  adalah  benar  tanaman  kepel, menghindari  kesalahan  dalam  pengumpulan  bahan  utama  penelitian.  Hasil determinasi  menyatakan  bahwa  spesimen  tumbuhan  tersebut  adalah  benar.  Hasil determinasi tersebut berdasarkan buku Flora of Java Vol II (Backer and Van Den Brink, 1965). Gambar tanaman kepel terlihat pada Gambar 1.

## Gambar 1. Tanaman Kepel

## A. Pembuatan Ekstrak Etanol 70%
Daun kepel yang digunakan dalam penelitian ini diperoleh dari Yogyakarta. Metode  penyarian  yang  digunakan  adalah  maserasi,  yaitu  merendam  serbuk simplisia  dengan  cairan  penyari.  Pada  penelitian  ini  200  g  serbuk  simplisia dimasukkan  dalam  maserator  kemudian  direndam  dengan  cairan  penyari  (1:10) selama  24  jam  agar  terjadi  pembasahan,  dengan  tujuan  agar  serbuk  simplisia mengembang. Setelah itu  disaring dan dimaserasi  ulang (1:4), kemudian maserat dikumpulkan dan diuapkan hingga menjadi ekstrak kental.
Pada  penelitian  ini  penyari  yang  digunakan  yaitu  etanol  70%.  Hal  ini dilakukan  karena  berdasar  penelitian  Sunarni  (2007)  kandungan  utamanya  yang bersifat  antioksidan  adalah  flavonoid.  Penyari  etanol  70%  dapat  menarik senyawa-senyawa  relatif  polar  seperti  senyawa  fenol,  flavonoid,  saponin  dan senyawa polar lain yang terkandung dalam daun dan kulit batang manggis . Dipilih
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 250-260
etanol  70%  karena  lebih  selektif,  tidak  beracun,  netral,  absorpsi  baik,  dapat mencegah  pertumbuhan  kapang  dan  kuman,  panas  yang  diperlukan  untuk pemekatan lebih sedikit. Sari yang diperoleh diuapkan di atas penangas air hingga konsistensi  kental.  Penguapan  dilakukan  untuk  menghilangkan  larutan  penyari agar  tidak  mempengaruhi  uji  aktivitas  antioksidan  setelah  didapatkan  ekstrak kental  dengan  rata-rata  rendemen  18,21%,  yaitu  dari  100  g  serbuk  simplisia diperoleh 18,21 g ekstrak kental.
B. Analisis Kromatografi Lapis Tipis
Ekstrak  yang  diperoleh,  difraksinasi  dengan  heksana,  kloroform  dan  etil asetat,  sehingga  diperoleh  fraksi  heksana,  kloroform,  etil  asetat  dan  air  sisa. Masing  masing  fraksi  dilakukan  pemisahan  dengan  metode  KLT  dengan  fase diam  silika  gel  F 254 dengan  fase  gerak  heksana  etil  asetat  7:3  dan  selulosa  yang dieluasi dengan fase gerak asam asetat 15%.
(A) (B)
(C) (D)
Gambar 2 .  Fraksi n -heksana, kloroform, etil asetat dan air sisa dilihat
(A) fase diam silika F 254 dan fase gerak kloroform : etanol (7:3)  di  sinar  UV  254.  ( B) fase  diam  selulosa  dan  fase gerak  asam  asetat  15%  di  sinar  UV  254.  ( C) fase  diam silika F254 dan fase gerak kloroform : etanol (7:3) di sinar
UV 366. ( D) fase diam selulosa dan fase gerak asam asetat
15% di sinar UV 366.
Pada  Gambar 2  dapat  dilihat  bahwa dengan menggunakan  fase diam  silika F 254 dan  dielusi  dengan  heksana:  etil  asetat  dengan  perbandingan  7:3,  terdapat peredaman pada pengamatan di UV 254 nm yang berada pada titik penotolan, hal
Diniatik
ini menunjukkan senyawa yang mempunyai gugus kromofor tidak terelusi dengan fase  gerak  tersebut,  dengan  konsentrasi  terbesar  adalah  pada  sisa  air.  Pada  fase diam  selulosa  dan  fase  gerak  asam  asetat  15%  dapat  dilihat  bahwa  pada  ekstrak kloroform dan etil asetat terdapat bercak yang berpendar biru pada titik penotolan, diduga  senyawa  ini  adalah  aglikon  nonpolar,  sedangkan  pada  sisa  air  terdapat bercak berpendar ungu dan kuning yang diduga adalah glikosida.
(A) (B)
Gambar 3 . Fraksi etil asetat, n -butanol dan sisa air dengan fase gerak BAW ( n -butanol: asam asetat: air = 4:1:5) fase
atas dilihat (A) fase diam selulosa di sinar UV 366.
(B) fase diam silika F 254 di sinar UV 366.
Pada Gambar 3 ekstrak etanol daun kepel difraksinasi dengan menggunakan etil asetat, n -butanol. Pada kromatogram fase diam selulosa dan fase gerak BAW ( n -butanol: asam asetat: air = 4:1:5) fase atas, dilihat pada sinar UV 366. Dengan sistem  kromatografi  untuk  mengetahui  kandungan  flavonoid  ini,  dapat  dilihat bahwa  pada  fraksi  etil  asetat, n -butanol  dan  air  sisa,  banyak  mengandung flavonoid  yang  masing-masing  jenisnya  berbeda,  dengan  melihat  fluoresensi dominan berturut-turut kuning, ungu dan biru.
C. Analisis Kandungan Kimia Hasil Hidrolisis Ekstrak
Gambar 4 merupakan hasil kromatografi lapis tipis dari hasil hidrolisis HCl dari  ekstrak  etanol  70%  daun  kepel.  Ekstrak  yang  diperoleh,  dihidrolisis  dengan HCl  25%  pada  pH  2-3,  kemudian  difraksinasi  dengan  eter,  sehingga  diperoleh
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 250-260
fraksi  eter  dan  air  sisa.  Masing  masing  fraksi  dilakukan  KLT  dengan  fase  diam silika gel F 254 dan selulosa yang dielusi dengan fase gerak BAW ( n -butanol: asam asetat:air  =  4:1:5)  fase  atas.  Pada  Gambar  4  dapat  dilihat  bahwa  hasil  hidrolisis dari ekstrak etanol, fase  nonpolar seperti  glikon akan masuk dalam eter dan fase polar  seperti  glikon  masuk  dalam  air  asam.  Hal  itu  tampak  banyak  bercak  pada fase eter pada kromatogram tersebut yang terelusi cenderung di atas, dan pada air asam terdapat bercak  yang cenderung di bawah. Hal tersebut karena dengan fase diam selulosa maka senyawa relatif nonpolar akan cenderung terpartisi pada fase gerak beralkohol (BAW=4:1:5).
Gambar 4. Kromatogram  hasil  hidrolisis  ekstrak  etanol  dalam eter  dan  sisa  air  dengan  fase  gerak  BAW n -butanol: asam  asetat:air  =  4:1:5)  fase  atas  dilihat  di  sinar  UV 366.
Ekstrak  etanol  daun  kepel  dihidrolisis  agar  senyawa  glikosida  terpisah menjadi  glikon  dan  aglikon.  Aglikon  flavonoid  adalah  salah  satu  golongan senyawa yang akan dikonfirmasi keberadaannya, karena pada penelitian terdahulu dilaporkan  adanya  saponin,  flavonoid  dan  polifenol  (Hutapea,  1994;  Sutomo, 2003; Hidayati, 2004).  Diniatik dkk. (2017) melaporkan adanya aglikon flavonol yaitu  kaempferol  dalam  fraksi  etil  asetat  hasil  hidrolisis  ekstrak  etanol  yang mampu  menghambat  enzim  xantin  oksidase.  Keberadaan  aglikon  flavonoid  dan potensinya  sebagai  penangkap  radikal  bebas  perlu  dilakukan  penelitian,  karena flavonoid  yang  tidak  terikat  gula  (aglikon  flavonoid)  lebih  mudah  berpotensi sebagai penangkap radikal bebas. Penelitian ini juga melaporkan adanya flavonoid
258 Potensi Penangkapan Radikal Bebas Diniatik
dalam  daun  kepel. Flavonoid  memiliki  aktivitas  antioksidan  karena  memiliki gugus-gugus  yang  berpotensi  kuat  sebagai  penangkap  radikal  bebas.  Menurut Pokorny dkk. (2001),  gugus orto dihidroksi pada posisi  3’ dan 4’ cincin B  pada flavonoid berpengaruh kuat sebagai antioksidan penangkap radikal bebas.
(A) (B)
(C) (D) Gambar 5 . Kromatogram hasil hidrolisis estrak etanol dalam eter dan sisa  air  dengan  dilihat  di  sinar  UV  366 (A) fase  gerak BAW  ( n -butanol:  asam  asetat:air  =  3:1:1) (B) fase  gerak kloroform  :  metanol  (8:2)  dan  disemprot  dengan  DPPH dilihat  di  sinar  tampak (C) fase  gerak  BAW  ( n -butanol: asam  asetat:air  =  3:1:1) (D) fase  gerak  kloroform  : metanol (8:2)
Pada  Gambar  5 menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  dan  hasil  hidrolisis ekstrak etanol yang diambil dengan eter mempunyai aktivitas sebagai antioksidan karena mampu menghambat radikal bebas DPPH dengan ditandai secara spontan membuat DPPH (difenilpikrilhidrazil) yang berwarna ungu menjadi difenilpikrilhidrazin  yang  berwarna  kuning.    Diniatik  dkk.  (2015)  melaporkan bahwa  di  dalam  fraksi  etil  asetat  dari  ektrak  etanol  yang  telah  dihidrolisis mempunyai  kandungan  flavonoid  total  yang  secara  signifikan  lebih  tinggi dibanding  pada  fraksi  kloroform  dan  ekstrak  etanol  (Tabel  I).  Kadar  flavonoid
Media Farmasi Vol. 13 No. 2 September 2016 : 250-260
total  yang  tinggi  pada  hasil  hidrolisis  ekstrak  etanol  mempunyai  aktivitas penangkapan radikal bebas yang tinggi.
Tabel I . Kadar flavonoid total fraksi etil asetat, fraksi kloroform dan ekstrak etanol daun kepel relatif terhadap pembanding rutin
Bobot (mg) Absorbansi Kadar (mg/mL) Kadar flavonoid total (%b/b) Ekstrak 100,1 0,640 0,204 10,2 100,2 0,621 0,198 9,9 100,3 0,581 0,186 93 Rata-rata 9,8 Fraksi etil asetat 10,1 0,304 0,0855 85,50 10,0 0,247 0,0656 65,61 10,1 0,272 0,0743 74,33 Rata-rata 74,14 Fraksi kloroform 30,1 0,270 0,736 3,07 30,0 0,271 0,740 3,08 30,3 0,285 0,789 3,29 Rata-rata 3,15

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian maka dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun  kepel  dan  fraksi-fraksi  organik  dari  ekstrak  etanol  mengandung    golongan senyawa  flavonoid.  Senyawa  yang  terdapat  pada  ekstrak  etanol,  fraksi  eter  dari hasil hidrolisis ekstrak etanol mempunyai potensi penangkap radikal bebas DPPH.

## DAFTAR PUSTAKA
Backer,  C.A.  dan  Bakhuizen  van  den  Brink,  R.B.C.,  1963, Flora  of  Java:
Spermatophytes only, Netherlands, Vol. I, pp. 3-51, 100-102.
Diniatik, Pramono, S., Riyanto, S., 2015, Penentuan Kadar Flavonoid Total Fraksi Etil  Asetat  dan  Fraksi  Kloroform  Hasil  Hidrolisis  Ekstrak  Etanolik  Daun Kepel  ( Stelechocarpus  burahol (Bl.)  Hook  F.  &  Th.)  dengan  Metode Spektrofotometri menggunakan Rutin sebagai Pembanding, Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi , 3 (1), 54-60.
260 Potensi Penangkapan Radikal Bebas Diniatik
Diniatik,  Pramono,  S.,  Riyanto,  S.,  2017,  Kaempferol  from Stelechocarpus burahol ,  (Bl.)  Hook  F.  &  Th.  Leaves  and  Xanthine  Oxidase  Inhibition Activity, Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research , 10 (4): 322-328.
Hening,  T.H.M.,  2002,  Efek  Infusa  Daun  Kepel  pada  Kadar  Asam  Urat  dalam Serum Hati Ayam, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Hidayati,  2004,  Uji  Daya  Melarutkan  Fraksi  Air  dan  Fraksi  Etanol  Infusa  Daun Kepel  ( Stelecocharpus  burahol ,  Hook)  terhadap  Batu  Ginjal  Kalsium secara In Vitro , Skripsi , Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta.
Hutapea, J.R., 1994, Inventaris Tanaman Obat Indonesia , Pulitbang DEPKES RI. Markham,  K.R,  1988, Cara  Mengidentifikasi  Flavonoid ,  diterjemahkan  oleh Kosasih Padmawinata, Bandung, ITB, 1, 10, 12, 38, 39, 48.
Pokorny, J., Yanislhieva, N., and Gordon, M., 2001, Antioxidant in Food , Marcell Dekker.
Purwatiningsih dan Nurlaila, 2013, One-day Oral Treatment Effect of the Ethanol Extract of Kepel [ Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook f. & Th.] Leaves on the  Body  Weight  and  Organ  of  Sprague-Dawley  Rats, IJPI  Journal  on Pharmacology and Toxicology , ISSN 2229-6859.
Sunarni,  2007,  Flavonoid  antioksidan  penangkap  radikal  dari  daun  kepel ( Stelechocarpus  burahol (Bl.)  Hook  f.  &  Th.), Majalah  Farmasi Indonesia , 18 (3): 111–116.
Susilowati,  I.,  2000,  Uji  Aktivitas  Infusa  Daun  Kepel  sebagai  Penurun  Kadar Asam  Urat  dalam  Darah, Skripsi ,  Fakultas  Farmasi,  Universitas  Ahmad Dahlan, Yogyakarta.
Sutomo, 2003, Penurunan Asam  Urat  Darah Ayam Jantan Braille hipersuremina oleh Fraksi Ekstrak Metanol Daun Kepel, Tesis , Pascasarjana, Prodi Ilmu Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.