## UJI FITOKIMIA DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK ETANOL DAUN SOYOGIK (Saurauia bracteosa DC)
Miranty H. Kadji 1 , Max R.J. Runtuwene 2 , Gayatri Citraningtyas 1
1 Program Studi Farmasi, FMIPA UNSRAT Manado
2 Program Studi Kimia, FMIPA UNSRAT Manado

## ABSTRACT
Soyogik  (Saurauia  bracteosa  DC)  is  a  plant  in  Actinidiaceae  Families  which  is endemic  in  Indonesia,  commonly  found  in  Java  and  Bali.  The  aims  of  this  research  are  to identify  the  active  compounds  and  determine  the  antioxidant  activity  of  the  leaf  extract Soyogik.  Soyogik  leaves  extracted  by  maceration    and  soxhlet  using  70%  ethanol  as  a solvent.  The  tests  included  quantitative  test  of  antioxidant  activity  by  DPPH  method,  and phytochemical  test.  The  results  show  that  maceration  and  soxhlet  extract  are  contained phenolic compounds, steroids, flavonoids, and saponins. Both types of extract have powerful antioxidant  activity  as  showed  on  the  IC50  values  obtained.  IC50  value  of  maceration    and soxhlet extract are 38,01 ppm and  28,18 ppm, respectively. Key word : phytochemical test, antioxidant, Saurauia bracteosa DC.

## ABSTRAK
Soyogik  (Saurauia  bracteosa  DC)  adalah  tanaman  dalam  Famili  Actinidiaceae  yang merupakan  endemik  Indonesia,  kebanyakan  tanaman  ini  tersebar  di  Pulau  Jawa  dan  Bali. Tujuan  penelitian  adalah  mengidentifikasi  senyawa  aktif  serta  mengetahui  aktivitas antioksidan  dari  ekstrak  etanol  daun  Soyogik.  Daun  Soyogik  diekstrak  dengan  metode maserasi  dan  soxhlet  dengan  pelarut  etanol  70%.  Pengujian  yang  dilakukan  meliputi pengujian  aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH,  dan  uji  fitokimia.  Hasil  penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun Soyogik dengan metode maserasi dan soxhlet mengandung senyawa  fenolik,  steroid,  flavonoid,  dan  saponin.  Kedua  jenis  ekstrak  memiliki  aktivitas antioksidan sangat kuat yang terlihat dari nilai  IC50 yang diperoleh. Nilai IC50 dari ekstrak maserasi sebesar 38,01 ppm, dan ekstrak soxhlet 28,18 ppm. Kata kunci : Uji fitokimia, antioksidan, Saurauia bracteosa DC.

## PENDAHULUAN
Adanya  radikal  bebas  di  dalam tubuh  manusia  berperan  dalam  patologi dari  berbagai  penyakit  degeneratif  yakni kanker,  aterosklerosis,  rematik,  jantung koroner,  katarak,  dan  penyakit  degenerasi saraf  seperti  parkinson  (Silalahi,  2006). Radikal  bebas  dapat  ditangkal  atau diredam  dengan  pemberian  antioksidan atau  dengan  mengkonsumsi  antioksidan (Halliwell, 2007).
Antioksidan merupakan bahan atau senyawa  yang  dapat  menghambat  atau mencegah terjadinya oksidasi pada substrat  yang  mudah  teroksidasi  dan  telah banyak  dimanfaatkan  oleh  masyarakat. Adanya  kekhawatiran  akan  kemungkinan efek  samping  yang  belum  diketahui  dari antioksidan sintetik menyebabkan antioksidan  alami  menjadi  alternatif  yang sangat  potensial  untuk  dikembangkan (Winarsi, 2007).
Soyogik  (Saurauia  bracteosa  DC) adalah tanaman dalam Famili
Actinidiaceae  yang  merupakan  endemik Indonesia, kebanyakan tanaman ini tersebar  di  Pulau  Jawa  dan  Bali  (Anonim, 2013).  Akan  tetapi  data-data  ilmiah  yang mendukung  khasiat  dari  Soyogik  tersebut belum diketahui. Sehingga perlu dilakukan pengkajian  mengenai  senyawa  aktif  yang terkandung di dalamnya. Senyawa- senyawa aktif tersebut diharapkan memiliki aktivitas sebagai antioksidan.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada bulan  Maret  2013  di  Laboratorium Farmakognosi
dan Fitokimia,
Laboratorium  Advance  dan  Laboratorium jurusan  Biologi  F-MIPA  Universitas  Sam Ratulangi.
Jenis Penelitian Penelitian  ini  dilakukan  dengan menggunakan metode eksperimen laboratorium.
Alat Alat yang digunakan adalah blender,  timbangan  analitik,  alat  soxhlet,
aluminium  foil,  kertas  saring  Whatman No. 42, spektrofotometer UV-Vis, spatula, tabung  reaksi,  labu  ukur,  pipet  tetes, corong  pisah,  waterbath,  inkubator,  gelas ukur, erlenmeyer, beaker glass

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  adalah  daun Soyogik (Saurauia bracteosa DC) yang di ambil  di  desa  Silian  kecamatan  Tombatu, Manado  ,  etanol  70%,  larutan  H 2 SO 4 pekat,  pereaksi  Mayer  dan  Dragendrof, kloroform,  ammonia,  HCl  pekat,  FeCl 3 1%,  serbuk  Mg,  asam  asetat  anhidrida, kristal 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH). Prosedur Kerja

## Preparasi Bahan Baku
Daun  Soyogik  yang  telah  dipetik, dicuci, dikeringkan diudara terbuka, dipotong kecil-kecil, kemudian di keringangin  kan  selama  20  hari.  Setelah kering  daun  dihaluskan  dengan  blender sampai berbentuk serbuk.

## Maserasi
Sampel  sebanyak  25  g  yang  telah dihaluskan,  dimaserasi  dengan  pelarut etanol  70%  sebanyak  200  ml  selama  7 hari.  Larutan  ekstraksi  tersebut  disaring dengan  kertas  saring  sehingga  diperoleh filtrat  dan  residu.  Filtrat  yang  diperoleh dievaporasi menggunakan evaporator pada suhu 50 o C, kemudian di waterbath sampai diperoleh ekstrak pekat.

## Soxhlet
Sampel  sebanyak  25  g  yang  telah dihaluskan,  dibungkus  dengan  kertas saring dan dimasukkan ke dalam ekstraktor soxhlet.
Etanol 70%
dimasukkan ke dalam labu alas bulat.Ekstraksi  dilakukan  sekitar  8  jam hingga  cairan  tidak  berwarna.  Ekstrak yang  didapat  dievaporasi  menggunakan evaporator  pada  suhu  50 o C,  kemudian  di waterbath sampai diperoleh ekstrak pekat. Uji Fitokimia (Harborne, 1996).

## Identifikasi Alkaloid
50  mg  ekstrak  ditambahkan  2  ml kloroform dan 2 ml ammonia lalu disaring. Filtrat  ditambahkan  3-5  tetes  H 2 SO 4 pekat lalu dikocok hingga terbentuk dua lapisan. Fraksi asam diambil.
Kemudian
ditambahkan reagen Mayer
dan Dragendroff  masing-masing  4-5  tetes. Apabila  terbentuk  endapan  menunjukkan bahwa sampel tersebut mengandung alkaloid, dengan pereaksi Mayer
memberikan  endapan  berwarna  putih,  dan pereaksi Dragendroff
memberikan endapan berwarna merah jingga.
Identifikasi Flavonoid 50  mg  ekstrak  ditambahkan  dengan 100 ml air panas, didihkan selama 5 menit, kemudian  disaring.  Filtrat  sebanyak  5  ml ditambahkan 0,05 mg serbuk Mg dan 1 ml HCl  pekat,  kemudian  dikocok  kuat-kuat. Uji positif
ditunjukkan dengan
terbentuknya  warna  merah,  kuning  atau jingga.
Identifikasi Steroid/Triterpenoid
50 mg ekstrak ditambahkan CH 3 COOH  glacial  sebanyak  10  tetes  dan H 2 SO 4 pekat  sebanyak  2  tetes.  Larutan dikocok  perlahan  dan  dibiarkan  selama beberapa  menit.  Steroid  memberikan warna biru atau hijau, sedangkan triterpenoid memberikan warna merah atau ungu.
Identifikasi Saponin 50  mg  ekstrak  ditambahkan  10  ml air  sambil  dikocok  selama  1  menit,  lalu ditambahkan  2  tetes  HCl  1  N.  Bila  busa yang  terbentuk  tetap  stabil  ±  7  menit, maka ekstrak positif mengandung saponin. Identifikasi Fenolik
50 mg ekstrak ditambahkan 10 tetes FeCl 3 1%.  Ekstrak  positif  mengandung fenol  apabila  menghasilkan  warna  hijau, merah, ungu, biru atau hitam pekat.
Uji Aktivitas Antioksidan dengan
Metode DPPH Pengujian aktivitas antioksidan menggunakan
metode perendaman terhadap  radikal  bebas  1,1  difenil  -2- pikrilhidrazil (DPPH) menurut
Simanjuntak  et  al.,  (2011).  Ditimbang  20 mg ekstrak di timbang kemudian dilarutkan  dalam  20  ml  etanol  hingga homogen (konsentrasi 1000 ppm). Masing- masing  ekstrak  di  buat  dalam  berbagai konsentrasi  yaitu  25  ppm,  50  ppm,  100 ppm,  150  ppm  dan  200  ppm.  Larutan
blanko  dibuat  dengan  mencampurkan  0,5 ml  etanol  dengan  1,5  ml  larutan  DPPH  1 mM dalam tabung reaksi, kocok homogen.
Larutan  uji  yang  telah  dibuat, masing-masing  di  ambil  sebanyak  0,5  ml dan  direaksikan  dengan  1,5  ml  larutan DPPH 1 mM. Campuran tersebut diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  30 menit,  kemudian  diukur  absorbansinya menggunakan  spektrofotometri  UV-Vis pada  panjang  gelombang  517  nm. Setelah absorbansi  didapat,  besarnya  persentase pengikatan  radikal  bebas  (persen  inhibisi) dihitung dengan rumus berikut :
% 100%
Nilai  IC 50 merupakan  konsentrasi  dimana ekstrak  dapat  menangkap  radikal  bebas sebesar  50%  yang  diperoleh  dengan memakai persamaan regresi linear  y  = a + bx.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Dari hasil penelitian pada Lampiran 1 memperlihatkan bahwa ekstraksi cara soxhlet menghasilkan rendemen  yang  lebih  besar  jika  di bandingkan  dengan  maserasi.  Hal  ini disebabkan karena dengan adanya perlakuan  panas  dapat  meningkatkan kemampuan  pelarut  untuk  mengekstraksi senyawa-senyawa  yang  tidak  larut  di dalam kondisi suhu kamar, serta terjadinya penarikan  senyawa  yang  lebih  maksimal oleh pelarut yang selalu bersirkulasi dalam proses  kontak  dengan  simplisia    sehingga memberikan peningkatan rendemen.
Hasil  pengukuran  %  inhibisi  pada Lampiran    3  menunjukkan  bahwa  ekstrak maserasi  mengalami  peningkatan  pada konsentrasi  25-200  ppm.  Pada  ekstrak maserasi  dengan  konsentarsi  200  ppm memiliki  %  inhibisi  yang  paling  tinggi yaitu  sebesar  91,69  ppm.  Peningkatan  % inhibisi pada ekstrak maserasi menandakan  bahwa konsentrasi  ekstrak yang ditambahkan mempengaruhi kemampuan  ekstrak  dalam  merendam radikal  bebas.  Hasil  ini  didukung  oleh
penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh Hanani  et  al.,  (2005)  yang  menyatakan bahwa  persentase  penghambatan  (persen inhibisi)  terhadap  aktivitas  radikal  bebas akan  ikut  meningkat  seiring  dengan meningkatnya konsentrasi.
Hasil pengukuran % inhibisi ekstrak soxhlet menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan mengalami peningkatan pada konsentrasi 25-150 ppm, dengan  %  inhibisi  lebih  kuat  sedikit dibandingkan  ekstrak  maserasi.  Namun pada ekstrak soxhlet mengalami penurunan % inhibisi pada konsentrasi 200 ppm. Penurunan % inhibisi di mungkinkan karena  senyawa  antioksian  tidak  optimal dalam menstabilkan radikal bebas. Kemungkinan yang terjadi adalah senyawa telah  bersifat  prooksidan.  Hal  ini  sesuai dengan yang di kemukakan Gordon (1990) yang menyatakan bahwa besar konsentrasi antioksidan yang  ditambahkan  dapat berpengaruh  pada  laju  oksidasi.  Pada konsentrasi  tinggi,  aktivitas  antioksidan grup fenolik sering lenyap bahkan antioksidan  tersebut  menjadi  prooksidan. Pengaruh  jumlah  konsentrasi  pada  laju oksidasi tergantung pada struktur antioksidan, kondisi dan sampel yang akan diuji.
Secara  spesifik,  suatu  senyawa dikatakan sebagai antioksidan  yang sangat kuat  bila  nilai IC 50 <  50  ppm,  kuat  bila nilai IC 50 bernilai 50-100 ppm, sedang bila nilai IC 50 bernilai 100-150 ppm, dan lemah bila nilai IC 50 bernilai 151-200 ppm (Blois, 2005).  Menurut  klasifikasi  ini,  kedua ekstrak    memiliki  aktivitas  antioksidan yang  sangat  kuat,  karena  nilai IC 50 -nya lebih kecil dari 50 ppm.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini, dapat  diambil  kesimpulan  bahwa  senyawa aktif  yang  terdapat  dalam  ekstrak  etanol daun  Soyogik  berdasarkan  uji  fitokimia yaitu  senyawa  fenolik,  steroid,  flavonoid, dan  saponin  dalam  kedua  jenis  ekstrak yaitu  maserasi  dan  soxhlet.  Dari  hasil  uji aktivitas  antioksidan  menunjukkan  bahwa
kedua  jenis  ekstrak  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  tergolong  sangat  kuat, karena  nilai  IC 50 –  nya  lebih  kecil  dari  50 ppm yaitu 38,01 ppm dan 28,18 ppm.

## Saran
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  mengenai  pemurnian  terhadap isolasi  senyawa  murni  dari  ekstrak  daun Soyogik serta pengujian aktivitas antioksidan  ekstrak  murni  tersebut  dengan metode dan konsentrasi yang lain

## DAFTAR PUSTAKA
Blois MS. 2005. Antioxidant determination by the use of stable free  radical.  Nature  181:1191-
1200.
Gordon,  M.H.  1990.  The  mechanism  of antioxidants  action  in  vitro.  Di dalam  B.J.F.  Hudson,  editor.  Food Antioxidants. Elsevier Applied Science, London.
Hanani  E,  Mun’im  B,  Sekarini  R.  2005. Identifikasi  senyawa  antioksidan dalam  spons  Callispongia  sp  dari Kepulauan  Seribu.  Majalah  Ilmu Kefarmasian 2(3):127-133.
Halliwell  B.  2007.  Dietary  polyphenols: good,  bad,  or  indifferent  for  your health.  J.  Cardiovascular  Research 73:341–347.
Harbone  JB.  1996.  Metode  Fitokimia:
Penentuan Cara Modern Menganalisa Tumbuhan. Terjemahan  Kosasih  Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: ITB. Silalahi, J. 2006. Makanan

## Fungsional.Kanisius. Jogjakarta
Simanjuntak,  P.  Sari  B,H.  Rurianti,  W. 2011, Uji Toksisitas serta Aktivitas Antioksidan
dan Antibakteri Ekstrak  Air  Kulit  Kayu  Massoi ( Cryptocarpa massoy (Lauraceae)).

## FMIPA UNPAK
Winarsi,  H.  2007.  Antioksidan  Alami  dan Radikal Bebas. Kanisius, Yogyakarta.

## LAMPIRAN

## Lampiran 1.  Hasil ekstraksi
No Ekstraksi Berat simplisia (g) Volume (ml) Ekstrak kental (g) Rendemen (%) Warna 1 Maserasi 25 200 1,59 6,36 Hijau kehitaman 2 Soxhlet 25 200 1,98 7,92 Coklat kemerahan Lampiran 2. Hasil uji fitokimia pada ekstrak daun Soyogik Golongan Senyawa Ekstrak Maserasi Ekstrak Soxhlet Alkaloid - - - - Fenolik + + Flavonoid + + Steroid + + Triterpenoid - - Saponin + +
Lampiran 3. Hasil pengukuran % inhibisi ekstrak daun Soyogik
Filename: 3 Directory: D:\jurnal pharmacon\pharmacon ed 4\terbit Template: C:\Documents and Settings\User\Application Data\Microsoft\Templates\Normal.dotm Title: Subject:
Author:
user Keywords: Comments: Creation Date: 4/20/2013 5:18:00 PM Change Number: 10 Last Saved On: 4/30/2013 10:55:00 AM Last Saved By: User Total Editing Time: 197 Minutes Last Printed On: 4/30/2013 10:56:00 AM As of Last Complete Printing Number of Pages:  5 Number of Words:  1,852 (approx.) Number of Characters:
10,563 (approx.)