## KUALITAS MIKROBIOLOGI DAGING AYAM BROILER DENGAN PEMBERIAN PROBIOTIK EFFECTIVE MICROORGANISME-4 (EM-4) PADA PAKAN

## (Microbiological Quality on Broiler Meat with Addition of Probiotic Effective Microorganism-4 (EM-4) in feed)
Andi Mutmainna a* , Handayani Indah Susanti a ,Suci Ananda a , Rismawati a , Weny Dwi Ningtyas b
a Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar, Indonesia
b Universitas Sulawesi Barat, Indonesia
* Penuliskorespondensi Email: andi.mutmainna@uin-alauddin.ac.id

## ABSTRACT
This study was conducted to determine the effect of probiotic lactic acid bacteria on the Total Plate Count Test in broiler meat. Treatment on broiler was carried out for 35 days with addition of probiotic Effective Microorganisms-4  (EM-4).  The  treatment  group  was  distributed  in  four  groups  of  experimental  feed formulation. The feed in formulated in P0 not using probiotics, P1 using probiotics of 1 ml/liter of drinking water, P2 using probiotics of 1.5 ml/liter of drinking water and P3 using probiotics of 2 ml/liter of drinking water. Based on the results of the Analysis of Variance (ANOVA) showed p<0.05, which means the data has  a  significant  difference  to  Total  Plate  Count  Test  with  the  level  of  microbial  contamination  in  the treatment of adding EM-4 to feed and not exceed the SNI limit.
Keywords: Total plate count, broiler meat, probiotic, effective microorganisms-4, feed

## ABSTRAK
Obat-obatan  bersumber  dari  tumbuhan  karena  memiliki  efek  samping  yang  kurang  merugikan. Sementara  itu,  penggunaannya  mampu  meminimalkan  resistensi  terhadap  antibiotik.  Oleh  karena  itu, perlu  dicari  agen  antibakteri  dari  senyawa  bioaktif  sebagai  produk  metabolit  sekunder  dari  biodiversitas alam.Penelitian  ini  untuk  mengetahui  pengaruh  penambahan  probiotik  terhadap  uji  total  palate  count (TPC) pada daging Ayam Broiler. Melakukan pemeliharaan selama 35 hari dengan memberikan probiotik Effective  microorganisme-4  (EM-4).  Pda  penelitian  ini  menggunakan  4  perlakuan  yang  berbeda diantaranya P0 tidak menggunakan probiotik, P1 menggunakan sebanyak 1ml/liter dalam air minum, P2 sebanyak  1,5  ml/liter  air  minum,  dan  P3  sebanyak  2  ml/liter  air  minum.  Berdasarkan  Hasil  yang didapatkan menunjukkan p<0,05 yang artinya data mempunyai perbedaan yang nyata terhadap Uji Total Plate  Count  dengan  tingkat  cemaran  mikroba  pada  perlakuan  penambahan  EM-4  tidak  melebihi  batas SNI pada kualitas daging ayam Broiler terhadap perlakuan kontrol.
Kata kunci : Total plate count (TPC), Daging broiler, probiotik, effective microorganisme-4 (EM-4)
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 22 (1): 52-59, 2023.

## PENDAHULUAN
Probiotik sebagai alternatif yang
mungkin  untuk  menggantikan  antibiotik  di industri
perunggasan, memberikan beberapa  manfaat  pada  ayam  kinerja pertumbuhan dan kesehatan, seperti peningkatan  pertambahan  bobot  badan, rasio konversi pakan, respon imun, ketahanan  terhadap  infeksi  bakteri,  dan regulasi  mikroflora  usus.  Secara  khusus, bakteri  pembentuk  spora,  seperti Bacillus sp. termasuk Bacillus  subtilis,  Bacillus clausii,  Bacillus  cereus,  Bacillus  coagulans, dan Bacillus licheniformis . Pembentuk spora bakteri tersebut memiliki berbagai keunggulan, seperti stabilitas panas, aktivasi pada kondisi pH rendah di lambung, dan  ketersediaan  penyimpanan  pada  suhu kamar,  dibandingkan  terhadap  bakteri  yang tidak  membentuk  spora  .Penambahan probiotik  memiliki tekstur yang lebih lembek dan  lembut,  warna  yang  lebih  gelap sehingga tidak terlalu mempengaruhi warna dari  pakan  komersil  serta  mengeluarkan aroma  wangi  yang  disebabkan  proses perombakkan  oleh  starter  probiotik  EM4 yang  ditambahkan  pada  proses  fermentasi yang  menyebabkan  daun  kelor  fermentasi pada level 6% Rataan TPC lebih tinggi.(Mutmainna dkk.,2022).
Tingkat  perkembangnya  penggunaan probiotik di indonesia belum meningkat, tapi sudah  mulai  dikembangkan  dan  telah diproduksi  berupa  media  kutur  berbentuk cairan yang dapat disimpan lebih lama yaitu EM-4 ( Effective Microorganisms-4 ). EM-4 ini mterkandung 90% dari bakteri Lactobacillus sp (bakteri penghasil asam laktat), EM-4 ini merupakan  tambahan  pada  pakan  untuk mengoptimalkan pemanfaatan zat-zat makanan  karena  terdapatnya  bakteri  yang mencerna  selulose,pati,  gula,  protein,  dan lemak.
Tingginya  permintaan  dari  konsumen terhadap  kebutuhan  daging  unggas  yang tentunya  kualitas  mikrobiologinya  tidak melebihi dari standar pertumbahan cemaran mikroba patogen, sehingga perlunya
daging  unggas  yang  terdapat  probiotiknya sebagai  daging  unggas  yang  berkualitas yang dapat mencegah pertumbuhan patogen  dan    manajemen  produksi  yang lebih    efisien  akan  menjadi  lebih  terajmin. Selain  produk  daging  yang  khas,  produk daging  unggas  yang  terdapat  kandungan probiotiknya  berkaitan  dengan  dampak lingkungan  dan  masalah  kesejahteraan hewan  yang  rentang  penyakit.  Tanpa antimikroba  atau  perawatan  kimia,  metode penambahan suplementasi probiotik diperlukan  untuk  meningkatkan  efisiensi pertumbuhan, kualitas daging, dan keamanan pangan.
Penggunaan  probiotik  telah  terbukti berdampak  pada  populasi  mikroba  saluran pencernaan  (GIT),  meningkatkan  degradasi bahan pakan, memperoleh sifat imunostimulator,  dan  patogen  bawaan pakan yang diproduksi
secara konvensional. Meskipun penggunaan probiotik  bervariasi,tapi    telah  terbukti menguntungkan  sistem  produksi  unggas alternatif  melalui  berbagai  mekanisme. Namun,  respons  tiap  unggas  masih  agak tidak  terduga  dan  identifikasi  probiotik spesifik  terus  dilakukan.  Ulasan  ini  akan menggambarkan  peran  penting  probiotik untuk membatasi kolonisasi patogen bawaan pakan, mencegah beberapa penyakit umum yang dapat membahayakan kualitas  daging  unggas  dan  meminimalkan pertumbuhan  cemaran  mikroba  patogrn pada  daging  ayam  Broiler.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh probiotik  terhadap  kualitas  mikrobiologi yaitu  dengan  uji  TPC  ( Total  Plate  Count ) pada daging Ayam Broiler.

## BAHAN DAN METODE

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  yaitu  ayam broiler,  pakan  BR-1,  air  minum,  probiotik EM4, lampu, pemanas ruangan kandang,litter  atau  alas  kandang,sekam padi,kertas roll, akuades, Plate count agar
Tabel 1. Kandungan Nutrien pakan No. Nutrien BR I BR 2 1. Air Maks. 12 % Maks. 12 % 2. Protein kasar Min. 21 % Min. 19 % 3. Lemak kasar 3-7 % 3-8 % 4. Serat kasar Maks. 5 % Maks. 5 % 5. Abu Maks. 7 % Maks. 7 % 6. Kalsium 0,9-1,1 % 0,9-1,1 % 7. Fosfor 0,6-0,9 % 0,6-0,9 % 8. Koksidiostat + + 9. Antibiotika + +
Sumber: PT. Japfa Comfeed Indonesia, Tbk.
(PCA), Buffer  Pepton  Water (BPW),  Buffer, spritus, alkohol, tisu, alminium foil.

## Preparasi Bahan
Melakukan persiapan sebelum pemeliharaan  ayam  Broiler,  Melakukan pemeliharaan  selama  35  hari.sebelumnya dilakukan sanitasi kandang, sanitasi dilakukan  1  minggu  dan  1  hari  sebelum DOC  ( Day  Old  Chicken )  datang.  Sebelum DOC  dimasukkan  kedalam  unit  percobaan, terlebih  dahulu  DOC  Memasukkan  dalam kandang Brooding selama  7  hari,  dengan memberikan  gasolek  dan  lampu  DOC merasa  hangat  meskipun  terpisah  dengan induknya.  Menggunakan  litter  atau  alas kandang  yaitu  sekam  padi  dengan  tebal  8- 10  cm  yang  kemudian  dilapisi  dengan kertas roll. Jenis pakan yang diberikan yaitu pakan  BR-1.  Setelah  masa  Brooding, sebanyak 36 ekor ayam broiler dimasukkan kedalam  kandang  yang  memiliki  12  unit percobaan  dengan  luas  unit  kandang  yang digunakan,  yakni  80  x  80  cm  dengan  tinggi 60 cm masing-masing unit percobaan terdiri dari  3  ekor  ayam  broiler.  Perlakuan diberikan  pada  ayam  sejak  umur  8  hari sampai  panen.  Melengkapi  lampu  pijar sebanyak 1 buah di setiap unit percobaan.
Pakan  dan  air  minum  diberikan  secara adlibitum.    Pakan  tersebut  diberikan  pada setiap  hari  dan  mencampurkan  probiotik EM4  dengan  air  minumnya  dengan  tingkat pemberian  1  ml,  1,5  ml,  dan  2  ml  dalam  1 liter  air  minumnya,  mulai  dari  umur  8 sampai  umur  25  hari.  Adapun  kandungan nutrisi  dari  pakan  tersebut  tercantum  pada Tabel 1.

## Total Plate Count (TPC)
Tahap isolasi bakteri dengan melakukan pengenceran  secara  bertingkat  dengan melakukan  inokulasi  1  ml  suspensi  dari setiap pengenceran kemudian memasukkan ke  dalam  cawan  petri  yang  berisi  media PCA  ( Plate  Count  Agar )  secara  duplo dengan  menggunakan  metode  agar  tuang. Media  PCA  dituang  sebanyak  20  ml  lalu dihomogenkan  dengan  cara  menggerakkan cawan  sesuai  nomor  8.  Kemudian  media PCA  dibiarkan  sampai  memadat  dan melakukan  inkubasi  pada  suhu  37  °c selama ± 24 jam dengan posisi cawan petri dibalik.Menghitung  jumlah mikroba dengan menggunakan colony  counter .  Kemudian menganalisa data untuk mendapatkan layak tidaknya  sampel  untuk  dikonsumsi  atau dipasarkan.

## Pengukuran pH
Pengukuran pH menggunakan pH meter yang  dikalibrasi  dengan larutan  buffer  pH  4 dan 7 sebelum digunakan.Kemudian elektroda  yang  telah  dibilas  dengan  air akuades  dicelupkan  ke dalam sampel.  Nilai yang  dibaca  adalah  nilai  saat  pH  meter telah stabil (AOAC 2019).

## Metode Penelitian
Rancangan  Penelitian  yang  digunakan rancangan  Acak  lengkap  (RAL)  yang  terdiri dari  4  perlakuan  dan  3  ulangan,  setiap ulangan  terdiri  dari  3  ekor  ayam  broiler sehinggah  terdapat  36  ternak  percobaan. Perlakuan  yang  diberikan  menurut  Iksan  et al.,  (2020),  yang  berpendapat  bahwa  dosis dengan  penggunaan  EM-4  pada  ayam broiler yaitu 1,0 ml sampai 2,0 ml: 1 liter air
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 22 (1): 52-59, 2023.
Tabel 2. Uji Total Plate Count Perlakuan Uji TPC (Cfu/ml) P0 1.7±0,25 CFU/ml (1, 7 x10 6 ) a P1 12 ±0,66 CFU/ml (12 x10 5 ) b P2 0,8 ±0,01CFU/ml (8 x 10 5 ) b P3 0,4±0,01 CFU/ml (4x 10 5 ) b
Keterangan: Keterangan: superskrip yang berbeda menunjukkan perbedaan yang signifikan P<0.05
Gambar 1. Nilai pH
putih.  Djaya  dan  Hidayat  (2013),  juga menyatakan bahwa dosis dengan menggunakan  probiotik  dari  1  cc  -  2  cc dalam  1  liter  air  minum  dapat  berpengaruh terhadap  pertambahan  bobot  badan  ayam broiler.Adapun perlakuannya, yaitu:
P0 = ransum tanpa probiotik (Kontrol) P1  =  Ransum  +  EM4  1  ml/  1  Liter  air minum/hari
P2  =  Ransum  +  EM4  1,5  ml/  1  Liter  air minum/hari
P3  =  Ransum  +  EM4  2  ml/  1  Liter  air minum/hari

## Analisis Statistik
Adapun  data  yang  diperoleh  dengan menggunakan  analisis  Varians  (ANOVA), dengan  aplikasi  SPSS  16  berdasarkan rancangan acak lengkap (RAL) jika
perlakuan berpengaruh nyata akan dilanjutkan  dengan  uji  BNT  (beda  nyata terkecil).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengamatan dengan perlakuan pemberian  dosis  EM-4  pada  pakan  ayam Broiler dengan mengamati kualitas mikrobiologi  daging  yaitu  Uji Total  Plate Count dapat  dilihat  pada  tabel  2.  ahwa adanya  pengaruh  penambahan  banyaknya probiotik  pada  ransum  dengan  Uji Total Plate  Count disetiap  perlakuan,  karena dengan memberikan probiotik terdapat efek menguntungkan seperti
mengurangi pertumbuhan  cemaran  mikroba  patogen yang  dapat  memproduksi  toksin,  dengan menstimulasi enzim
Berdasarkan  Tabel  2.  Penambahan probiotik sebagai antimikroba, sehingga
4.8 5 5.2 5.4 5.6 5.8 6 6.2 6.4 po P1 P2 P3 Nil ai pH Perlakuan Uji pH
Tabel 3. Efektivitas penggunaan Probiotik Jenis Probiotik Hasil Referensi Lactobacillus acidophilus dan Bacillus subtilis Bifidobacterium dan lactobacilli di ileum, berpotensi memindahkan Bakteri asam laktat ke sekum tapi hal ini dipengaruhi oleh jumlah pemberian probiotik (Forte et al., 2016). Pediococcus Acidilactici MA18/5M Probiotik dari Pediococcus Acidilactici MA18/5M memiliki pengaruh yang menguntungkan terhadap performa pertumbuhan kedua ayam broiler dan ayam petelur. Barbe et al. (2018) Enterococcus faecium NCIMB 11181 Dampak positif pada morfologi, populasi mikroba, penyerapan nutrisi, kapasitas antioksidan, apoptosis, dan respons imun, pada akhirnya baik untuk Kesehatan dan produksi ayam pedaging Wu et al., 2019 Enterococcus faecium, Pediococcus acidilactici, Lactobacillus salivarius , dan Lactobacillus reuteri Probiotik yang diberikan kepada unggas untuk meningkatkan komsumsi pakan Ghareeb et al., 2012), Lactobacillus acidophilus, Lactobacillu sbifidus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus casei pemanfaatan probiotik dalam industri perunggasan telah dipandang sebagai alternatif terhadap antibiotik untuk kesehatan usus Vandana et al., 2013 ( Lactobacillus plantarum PZ01, Lactoba cillus salivarius JM32 and Pediococcus acidilactici JH231) Sifat imunomodulator bakteri asam laktat diuji secara in vitro untuk menentukan kemampuannya bertahan pada kondisi asam (pH 2,5) dan garam empedu (0,1 hingga 1,0%), dapat mengurangi 6 patogen, dan melekat pada sel Caco-2 (Feng et al., 2016). probiotic (Miaclost) bahwa suplementasi 0,160, 0,175, dan 0,190 g/L untuk ayam pedaging yang dipelihara secara komersial, meningkatkan asupan pakan, berat badan gain, rasio penggunan pakan, dan morfologi usus. Aziz, N. H., Z. Khidhir, Z. O. Hama, and N. Mustafa. 2020
Bacillus -based probiotics ( B. licheniformis and B. subtilis ) Probiotik dapat digunakan dalam pakan ayam pedaging untuk meningkatkan produksi daging ayam dengan biaya pemeliharaan yang lebih ekonomi dan meminimalkan resistensi antimikroba yang terkait dengan pemeliharaan ayam pedaging dengan meningkatkan keamanan pangan.
Arief, 2021
Sumber: Literatur review penggunaan probiotik
dapat meningkatkan status kesehatan inangnya, yang dapat mempengaruhi kualitas  pada  daging.Menurut  pendapat bahwa  Shi et  al .  (2019)  menyatakan antibiotik dapat digantikan oleh produk yang terbukti    dapat  mengurangi  pertumbuhan mikroba  seperti  enzim,  asam  organik  dan anorganik, prebiotik, sinbiotik, herbal
,minyak esensial termasuk sebagai antimikroba.
Berdasarkan  Tabel  2  tingkat  cemaran mikroba pada perlakuan penambahan EM-4
sesuai  batas  SNI  7388:2009  terkait  batas maksimum cemaran mikroba dalam pangan bahwa  adapun  batas Total  Plate  Count (TPC) pada daging ayam broiler yaitu 1x10 6 CFU/g.  efek  yang  diberikan  pada  EM-4 yaitu  adanya  kandungan  probiotik  yang menenpel  pada  saluran  pencernaan  pada usus  ayam  broiler  sehingga  meminimlakan bakteri  patogen  pada  kualitas  daging  ayam broiler.  Hal  ini  sesuai  pendapat  McNaught dan  Gunawan et  al .,  (2019)  menyatakan bahwa  beberapa  manfaat  pemeberian
Jurnal Teknologi Pangan dan Gizi Journal of Food Technology and Nutrition Vol 22 (1): 52-59, 2023.
probiotik dapat mempertahankan keseimbangan
mikroflora saluran pencernaan,  dapat  menghambat  mikroba patogen.  Selain  itu  bahwa  probiotik  adalah terdiri  dari  beberapa  bakteri  asam  laktat yang  meneyebabkan    pH  nya  berada  di tingkat asam sehingga dapat meminimalkan pertumbuhan  bakteri  patogen  di  pH  asam  . Menurut  Mikulski et  al. (2019)  bahwa  salah satu efek yang menguntungkan terkait sifat- sifat  probiotik  yaitu  asam  laktat  dan produksi  enzim  yang  dapat  mengurangi pertumbuhan  patogen,  dan  menutrisi  usus. Sedangkan  menurut  Mutmainna et  al . (2022)  bahwa  faktor  yang  menyebabkan terhambatnyapertumbuhan  mikroorganisme yaitu  asam dari  bakteri  asam laktat  dengan mekanisme kerja merusak membran mikroorganisme.
Hasil Analisis daging ayam Broiler yang terdapat  pada  Gambar  1  menunjukkan bahwa  nilai  pH  nyata  dipengaruhi  oleh penambahan  probiotik  (p<0.01).  Pengaruh perlakuan pemberian probiotik pada P1 dan P2,  P3  terjadi  penurunan  nilai  pH  daging ayam Broiler.
Penurunan nilai pH disebabkan oleh pertumbuhan
mikroorganisme  semakin  meningkat  pada pakan.hal  ini  sesuai  pendapat  Abdalhai et al .  (2014)  yang  menyatakan  bahwa  slah satu  yang  menyebabkan  pertumbuhan mikroorganisme yaitu karakteristik fiskokimia  produk,  seperti  pH.  Berdasarkan gambar  1  menunjukkan  nilai  pH  berada pada kisaran normal daging yang mempunyai  kisaran  normal  yaitu  ph  antara 5,96-6,07  (Van  Laack et  al .,  2000  dalam Irmayani et al. , 2019). Proses prubahan pH karena  proses  pemotongan,  hewan  akan kehilangan suplai oksigen pada saat hewan mengeluarkan  darah,  sehingga  proses metabolisme sel berubah menjadi metabolisme  aerobik  menjadi  anerobik. Sedangkan  pendapat  Mutmainna  et  al.
(2021) bahwa pH berkaitan dengan peningkatam  kandungan  asam  laktat  yang berasal  dari  akumulasi  asam  dari  bakteri asam laktat.
Jadi berdasarkan Tabel 2, bahwa beberapa manfaat  penggunaan  probiotik  untuk  pakan unggas  dengan  menambahkan  probiotik pada  pakan.  hal  ini  sesuai  pendapat Mikulski et al . (2012) bahwa probiotik dapat mempertahankan dan meningkatkan komposisi nutrisi pada pakan. Menurut hasil penelitian  Mikulski et  al .    (2012)  bahwa dapat meningkatkan performa ayam dengan penambahan      PA  MA18/5M  pada  100 mg/kg  (1  x  10 9 CFU/kg  pakan)  ke  dalam pakan  komersial  (2.700  kkal  ME/kg  dan 17,5% CP).
Probiotik  meningkatkan  asupan  pakan dengan  produktivas  yang  baik  sehingga dengan  itu  bisa  menggunakan  pakan  yang dengan  biaya  yang  lebih  rendah.  Pendapat yang  sama  dengan  Upadhaya et  al .  (2019) bahwa  pemberian  probiotik  pada  pakan dapat meningkatkan proktivitas pada unggas  dan  biaya  pakan  yang  lebih ekonomis.  selain  itu  meminimalkan  terjadi penyakit,  hal  ini  sesuai  pendapat  Callaway et  al .,  2012).  bahwa  probiotik  dapat meningkatkan pertumbuhan yang lebih baik, meminimalkan  penyakit  hewan.  Selain  itu pendapat Dalam beberapa penelitian, kualitas  daging  dari  ayam  yang  diberi probiotik telah dievaluasi untuk memastikan sifat  alami  dan  sehat.  Beberapa  di antaranya  penelitian  melaporkan  bahwa suplemen  probiotik  diet  untuk  ayam  dapat meningkatkan atribut kualitas daging, seperti  sebagai  kapasitas  menahan  air (WHC), kelembutan, lipid stabilitas oksidasi, sifat  sensorik,  dan  mikroba  keamanan (Yang et  al .,  2010).  Suplementasi  pakan dengan Bacillus  subtilis memberikan  efek positif  pada  produktivitas,  merangsang sistem  kekebalan  tubuh,  dan  meningkatkan kapasitas  antioksidan  dalam  pemeliharaan unggas (Lee et al., 2011).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  pemberian probiotik  EM4  berpengaruh  nyata  terhadap Uji Total  Plate  Count (TPC)  dengan  tingkat cemaran  mikroba  tidak  melebihi  batas  SNI pada  kualitas  daging  broiler.  Sehingga
menghasilkan  daging  yang  berkualitas  dari segi  nutrisi  dan  tidak  toksin.  Daging  broiler memiliki kandungan probiotik yang mempunyai  manfaat  kesehatan  bagi  yang mengkonsumsinya.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdalhai,  M.  H.,  Bashari,  M.,  Lagnika,  C., He,  Q.,  &  Sun,  X.  (2014).  Effect  of ultrasound  treatment  prior  to  vacuum and  modified  atmosphere  packaging  on microbial  and  physical  characteristics  of fresh  beef. J  Food  &  Nutr  Resh.  2 (6), 312- 320. doi:10.12691/jfnr-2-6-8
Arif,  M.,  Akteruzzaman,  M.,  Islam,  S.  S.,
Das,  B.  C.,  Siddique,  M.  P.,  &  Kabir,  S. L.  (2021).  Dietary  supplementation  of Bacillus-based  probiotics  on  the  growth performance,  gut  morphology,  intestinal microbiota and immune response in low biosecurity  broiler  chickens. Veterinary and Animal Science , 14 , 100216.
Aziz,  N.  H.,  Khidhir,  Z.  K.,  Hama,  Z.  O.,  &
Mustafa,  N.  A.  (2020).  Influence  of probiotic  (Miaclost)  supplementation  on carcass yield, chemical composition and meat  quality  of  broiler  chick. Journal  of Animal and Poultry Production , 11 (1), 9-
12. doi: 10.21608/jappmu.2020.77767
Barbe, F., Demey, V., & Chevaux, E. (2018, September). A Multi-Analysis Evaluating the  Effect  of Pediococcus  acidilactici MA18/5M  on  Performances  of  Broiler Chickens  and  Laying  Hens. In  XVth Europe  Poultry  Conference .  Dubrovnik, Croatia.
Callaway, T. R., Edrington, T. S., Harvey, R. B.,  Anderson,  R.  C.,  &  Nisbet,  D.  J. (2012).  Prebiotics  in  food  animals,  a potential to reduce foodborne pathogens and  disease. Rom.  Biotechnol.  Lett. 17 (6), 7808-7816.
Mikulski,  D.,  Jankowski,  J.,  Mikulska,  M.,  & Demey,  V.  (2020).  Effects  of  dietary probiotic (Pediococcus acidilactici) supplementation on productive
performance,  egg  quality,  and  body composition  in  laying  hens  fed  diets varying in energy density. Poultry
science , 99 (4), 2275-2285.
https://doi.org/10.1016/j.psj.2019.11.046
Djaya,  M.  S.,  &  Hidayat,  M.  I.  (2013).
Penampilan Ayam Pedaging Yang Diberi Probiotik (EM-4) Sebagai Pengganti  Antibiotik. Polhasains:  jurnal sains dan terapan Politeknik Hasnur. , 1 (2), 1-7.
Edward, R. A., Fleet, G. H., & Woottoon, M.
(1978). Foodcommodity science. Buckle,  K.  A..,  Edward,  R.  A.,  Fleet,  G. H.,  &  Woottoon,  M.  (Eds.).  Watson Ferguson and Co.
Feng,  J.,  Wang,  L.,  Zhou,  L.,  Yang,  X.,  & Zhao, X. (2016). Using in vitro immunomodulatory  properties  of  lactic acid  bacteria  for  selection  of  probiotics against  Salmonella  infection  in  broiler chicks. PLoS  One , 11 (1),  1-14.  doi: 10.1371/journal.pone.0147630
Forte, C., Acuti, G., Manuali, E., Proietti,  P. C.,  Pavone,  S.,  Trabalza-Marinucci,  M., Moscati,  L.,  Onofri,  A.,  Lorenzetti,  C.,  & Franciosini,  M.  (2016).  Effects  of  two different probiotics on microflora,
morphology,  and  morphometry  of  gut  in organic laying hens. Poultry Science, 95(11), 2528-2535. doi.org/10.3382/ps/pew164. Ghareeb, K., Awad, W. A., Mohnl, M., Porta, R., Biarnes, M., Böhm, J., & Schatzmayr,  G.  (2012).  Evaluating  the efficacy  of  an  avian-specific  probiotic  to reduce the colonization ofCampylobacter jejuni in broiler chickens. Poultry  science , 91 (8),  1825- 1832. https://doi.org/10.3382/ps.2012- 02168
Iksan,  M.,  Aka,  R.,  &  Tasse,  A.  M.  (2020). Pengaruh  Pemberian  Larutan  (Effective Mikroorganisme  -4)  dalam  Air  Minum terhadap  Bobot  Potong,  Persentase Karkas,  Giblet  dan  Lemak  Abdominal Ayam  Broiler. Jurnal  Ilmiah  Peternakan Halu Oleo, 2 (3), 305 –312.
Kim, H. W., Yan, F. F., Hu, J. Y., Cheng, H.
W.,  &  Kim,  Y.  H.  B.  (2016).  Effects  of probiotics  feeding  on  meat  quality  of chicken breast during postmortem storage. Poultry  science , 95 (6),  1457- 1464. doi:10.3382/ps/pew055.
Lee, K. W., Li, G., Lillehoj, H. S., Lee, S. H., Jang,  S.  I.,  Babu,  U.  S.,  &  Siragusa,  G. R.  (2011).  Bacillus  subtilis-based  direct- fed  microbials  augment  macrophage function in broiler chickens. Research in Veterinary Science , 91 (3), 87-91.
McNaught,  C.  E.,  &  MacFie,  J.  (2000). Probiotics  in  clinical  practice:  a  critical review of the evidence. Nutrition research , 21 (1-2), 343-353.
Mikulski,  D.  1.,  Jankowski,  J.,  Naczmanski,
J.,  Mikulska,  M.,  &  Demey,  V.  (2012). Effects of dietary probiotic (Pediococcus acidilactici) supplementation on performance,  nutrient  digestibility,  egg traits,  egg  yolk  cholesterol,  and  fatty acid  profile  in  laying  hens. Poultry science , 91 (10), 2691-2700.
Mutmainna,  A.,  Arief,  I.I.,  &  C.  Budiman. 2021.  The  growth  and  production  of antimicrobial compounds from Lactobacillus  plantarum IIA-1A5  on cheese  whey  medium.  Journal  of  the Indonesian  Tropical  Animal  Agriculture 46(2):173-184.
DOI: 10.14710/jitaa.46.2.173- 184.
Mutmainna Andi,  Muhammad  Arsan  Jamili,
Muhammad  Nur  Hidayat,  Suci Ananda A,  Sri  Wahyu  Ningsih.  2022.  Kualitas mikrobiologi  daging  ayam  kampung linus yang diberi subtitusi pakan tepung daun kelor ( Moringa oleifera L.). J. Sains dan  Teknologi  Pangan  Vol.  7,  No.  6,  P. 5641-5651.
Shi,  Z.,  Rothrock  Jr,  M.  J.,  &  Ricke,  S.  C. (2019).  Applications  of  microbiome
analyses  in  alternative  poultry  broiler production
systems. Frontiers in veterinary science , 6 , 157. doi:
10.3389/fvets.2019.00157
Standar  Nasional  Indonesia.  2009.  Mutu Karkas  dan  Daging  Ayam.  Badan Standardisasi Nasional. Jakarta.
Upadhaya,  S.  D.,  Hossiendoust,  A.,  &  Kim,
I.  H.  (2016).  Probiotics  in  Salmonella- challenged Hy-Line brown layers. Poultry science , 95 (8), 1894- 1897. doi.org/10.3382/ps/pew106
Upadhaya, S. D., Rudeaux, F., & Kim, I. H.
(2019).  Effects  of  inclusion  of  Bacillus subtilis  (Gallipro)  to  energy-and  protein- reduced  diet  on  growth  performance, nutrient  digestibility,  and  meat  quality and  gas  emission  in  broilers. Poultry science , 98 (5), 2169-2178. Vandana,  R.,  Brijesh,  Y.,  &   Lakhani,  G.  P. (2013).  Applications  of  probiotic  and prebiotic  in  animals  production:  A review. Environ. Ecol , 31 , 873-876. Wu,  Y.,  Zhen,  W.,  Geng,  Y.,  Wang,  Z.,  & Guo,  Y.  (2019).  Pretreatment  with probiotic  Enterococcus  faecium  NCIMB 11181  ameliorates  necrotic  enteritis- induced intestinal barrier injury in broiler chickens. Scientific  reports , 9 (1),  1-17. doi: 10.1038/s41598-019- 46578-x
Yang,  X.,  Zhang,  B.,  Guo,  Y.,  Jiao,  P.,  &
Long,  F.  (2010).  Effects  of  dietary  lipids andClostridium butyricum on fat deposition  and  meat  quality  of  broiler chickens. Poultry  Science , 89 (2),  254- 260.