## UJI  DAYA HAMBAT PERASAN BAWANG PUTIH (Allium sativum L) TERHADAP PERTUMBUHAN Aspergillus niger
Hafifah 1) , Tuty Widyanti 1) , Darmawaty Rauf 1) , Mujahidah Basarang 1)
1) Prodi DIII Teknologi Laboratorium Medis, Politeknik Kesehatan Muhammadiyah Makassar Alamat Korespondensi: hafifa.lahiya@gmail.com

## Abstrak
Bawang  putih  (Allium  sativum  L)  merupakan  salah  satu  tanaman  obat  yang  sering  digunakan  oleh masyarakat. Kandungan senyawa kimia  yang dimiliki bawang putih berupa allicin, polifenol, ajoene, flavonoid, dan saponin yang berfungsi sebagai antimikroba dan antifungi. Salah satu jenis jamur yang bersifat  patogen  adalah  Aspergillus  niger.  Jamur  ini  menyebabkan  aspergillosis  pada  manusia  yaitu penyakit  saluran  pernafasan,  hati,  ginjal,  sistem  saraf,  otot,  kulit,  dan  organ  genital.  Penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan perasan bawang putih (Allium sativum L) dalam menghambat pertumbuhan  Aspergillus  niger  dan  untuk  mengetahui  konsentrasi  perasan  bawang  putih  (Allium sativum  L)  yang  efektif  dalam  menghambat  pertumbuhan  Aspergillus  niger.  Penelitian  ini  dilakukan secara eksperimen laboratorium menggunakan metode difusi paper disc. Sampel penelitian ini adalah perasan bawang putih (Allium sativum L) yang dibuat dalam bentuk 4 konsentrasi yaitu 100%, 80%,60% dan 40%. Dari penelitian yang telah dilakukan hasil yang diperoleh untuk sampel perasan bawang putih dari  masing-masing  konsentrasi  100%,  80%,  60%,  dan  40%  didapatkan  rata-rata  hasil  pengukuran diameter zona bening yaitu 43,5 mm, 36,1 mm, 35,3 mm, 28,3 mm. Berdasarkan dari hasil tersebut maka dapat disimpulkan bahwa perasan bawang putih dapat menghambat pertumbuhan Aspergillus niger.
Kata Kunci: Uji daya hambat, Perasan bawang putih (Allium sativum L), Aspergillus niger

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang sangat kaya akan tanaman obat. Penggunaan tumbuh-tumbuhan sebagai pengobatan tradisional  saat  ini  mulai  meningkat peminatnya.  Hal  ini  disebabkan  karena dengan  pengobatan  tradisional  lebih  murah dan  mengingat  Indonesia  memiliki  potensi tumbuhan  obat  yang  tinggi  sehingga  tidak sulit  didapatkan.  Salah  satu  tanaman  obat yang  sering  digunakan  masyarakat  adalah bawang  putih  yang  berkhasiat  sebagai antimikroba, antifungi, antitrombotik, hipolipidemik,  antiarthritis,  hipoglikemik,
dan juga  memiliki antivitas sebagai antitumor  (Hanum,  2011).  Bawang  putih memiliki  kandungan  senyawa  kimia  yaitu allicin,  polifenol,  ajoene,  flavonoid,  dan saponin (Sukma, 2016).
Senyawa allicin dan flavonoid bersifat merusak membran sel jamur sehingga terjadi
permeabilitas  sel  yang  mengakibatkan terhambatnya pertumbuhan sel atau matinya sel  dan  polifenol  dapat  mendanuturasi protein sel jamur (Pelczar dan Chan 1988).
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Rizqina Bintari, et al (2017) tentang  uji  aktivitas  antifungi  perasan bawang  putih (Allium  sativum L)  terhadap Candida albiancas. Bahwa perasan bawang putih ( Allium sativum L) dengan konsentrasi 25%,  50%,  dan  75%  dapat  menghambat pertumbuhan  jamur Candida  albiancas dengan besar diameter zona hambat rata-rata 1,61 mm, 13,57 mm, dan 3,16 mm.
Terdapat berbagai macam jamur yang bersifat  patogen  salah  satunya  adalah Aspergillus niger yang merupakan salah satu jenis  spesies Aspergillus  sp yang  dapat menyebabkan  aspergillosis  pada  manusia yaitu  penyakit  saluran  pernafasan,  hati,
ginjal,  sistem  saraf,  otot,  kulit,  dan  organ genital (Ghautan et al. 2011). Aspergillus sp adalah salah satu jamur yang dapat menghasilkan mikotoksin. Salah satunya adalah aflatoksin, yaitu jenis toksin yang  bersifat  karsiogenik  dan  hepatotoksik. Manusia  dapat  terpapar  oleh  aflatoksin dengan  mengonsumsi  secara  terus  menerus makanan  yang  terkontaminasi  oleh  toksin hasil dari pertumbuhan jamur Aspergillus sp (Nani, 2010).
Berdasarkan  uraian  di  atas  maka peneliti tertarik untuk melakukan penelitian ini  untuk  mengetahui  uji  daya  hambat perasan  bawang  putih  ( Allium  sativum L ) terhadap  pertumbuhan Aspergillus  niger sehingga  diharapkan  bawang  putih  dapat menjadi obat herbal alami dalam pengobatan dan  pencegahan  berbagai  penyakit  akibat jamur Aspergillus niger.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini adalah tabung reaksi, breaker glass, pisau, lumpang,  alu,  sendok  tanduk,  corong  steril, hot  plate,  erlenmeyer,  batang  pengaduk, bunsen,  timbangan  analitik,  labu  ukur, autoklaf,  inkubator,  jangka  sorong,  labu ukur,  lemari  es,  ose,  rak  tabung,  pipet volume, pinset, kain kasa streil,  kapas, dan oven.
Bahan yang digunakan pada
penelitian  ini  adalah  bawang  putih  ( Allium sativum  L), jamur Aspergillus  niger,
akuades,  media  Sabaround  Dextrose  Agar
(SDA), paper disc , antibiotik chloromphenicol , kontrol positif ketoconazole dan aluminium foil.
Prosedur Kerja Sterilisasi alat
Diterilisasikan alat dengan cara dicuci semua  alat  menggunakan  sabun  kemudian dibilas  dengan  air  bersih  setelah  itu dibiarkan hinga mengering kemudian sterilkan  dalam  oven  pada  suhu  121⁰C selama 12 menit.

## Persiapan sampel
Bawang putih dipisahkan dari kulitnya terlebih dahulu, kemudian ditimbang  sebanyak  250  gr  menggunakan timbangan  analitik.  Sampel  bawang  putih dicuci  menggunakan  akuades,  kemudian ditumbuk  bawang  putih  hingga  halus menggunakan  lumpang  dan  alu. Setelah  itu dilakukan pemerasan dengan kain kasa steril dan  dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer. Pembuatan  medium  Sabaround  Dextrose Agar (SDA)
Media SDA ditimbang sebanyak 9,75 gram  kemudian  ditambahkan  akuades sebanyak 150 ml selanjutnya  dimasukkan ke dalam Erlenmeyer kemudian di homogenkan menggunakan batang pengaduk dan bantuan pemanasan. Proses pemanasan menggunakan  hot  plate  tidak  boleh  sampai mendidih  untuk  menghindari  terbentuknya Kristal  pada  dinding  Erlenmeyer.  Media kemudian  ditutup  dengan  aluminium  foil setelah  itu  disterilisasikan  dengan  autoklaf salama  15  menit  pada  suhu  121⁰C. Selanjutnya  ditambahkan  larutan  antibiotik chloramphenicol sebanyak 1,5 ml. kemudian dituang  kedalam  cawan  petri  steril  dengan cara  aseptic  hingga  membeku  pada  suhu kamar dengan posisi cawan petri dibalik. Pembuatan larutan kontrol (+) dan kontrol (-)
Kontrol  positif  menggunakan  obat ketoconazole dengan pembuatan konsentrasi 2%  dibuat  dengan  cara  ditimbang  0,3  g ketoconazole kemudian  dilarutkan  dengan akuades  steril  sebanyak  1  ml  dan  kontrol negatif menggunakan akuades steril sebanyak  1  ml.  Setelah  pembuatan  larutan kontrol positif dan kontrol negatif paper disc di rendam selama 15 menit.
Pembuatan perasan bawang putih Perasan bawang putih ( Allium sativum  L)  dipipet  sebanyak  10  ml dimasukkan ke dalam cawan petri yang telah diberi  label  konsentrasi  100%  berisi paper
disc steril. Paper  disc direndam  selama  15 menit.
Sampel perasan bawang putih ( Allium sativum L) dipipet sebanyak 8 ml setelah itu dimasukkan  kedalam  labu  ukur  (10  mL) kemudian tambahkan aquades sampai tanda batas.  Perasan  bawang  putih  konsentrasi 80%  yang  telah  dihomogenkan  dituang  ke dalam  cawan  petri  yang  berisi paper  disc steril. Paper disc direndam selama 15 menit. Sampel perasan bawang putih ( Allium sativum L) dipipet sebanyak 6 ml setelah itu dimasukkan  kedalam  labu  ukur  (10  mL) kemudian tambahkan aquades sampai tanda batas.  Perasan  bawang  putih  konsentrasi 60%  yang  telah  dihomogenkan  dituang  ke dalam  cawan  petri  yang  berisi paper  disc steril. Paper disc direndam selama 15 menit. Sampel perasan bawang putih ( Allium sativum L) dipipet sebanyak 4 ml setelah itu dimasukkan  kedalam  labu  ukur  (10  mL) kemudian tambahkan aquades sampai tanda batas.  Perasan  bawang  putih  konsentrasi 40%  yang  telah  dihomogenkan  dituang  ke dalam  cawan  petri  yang  berisi paper  disc steril. Paper disc direndam selama 15 menit. Pengujian daya hambat menggunakan metode difusi
Biakan  jamur Aspergillus  niger
diambil  satu  ujung  ose  steril  kemudian diikunolasikan atau digoreskan pada medium  SDA  kemudian  diletakkan  Paper disk yang  telah  direndam  pada  setiap konsentrasi  (100%,  80%,  60%,  dan  40%). Dan juga kontrol positif dan kontrol negatif di  atas  permukaan  media  selanjutnya diinkubasi selama 1x 24 jam pada suhu 30⁰C kemudian dilakukan pengamatan dengan ada atau tidak zona hambat (wilayah jernih) yang terbentuk disekitar kertas cakram paper disk (kuswiyanto, 2015).
Pengukuran zona hambat
Pengukuran zona hambat ini
dilakukan  dengan  cara  mengambil  garis horizontal  pada  zona  bening  disekitar  disk menggunakan jangka sorong.

## Interpretasi hasil
Nilai diameter zona hambatan dianalisa  secara  deskriptif  berdasarkan kategori  respon  hambat.  Zona  hambat perasan bawang putih dibandingkan dengan zona  hambat  kontrol  positif  ( Ketoconazole ) dengan nilai sebagai berikut: Resisten : ≤ 20 mm Intermediet : 21-27 mm Sensitif : ≥ 28 mm (CLSI, 2014).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  penelitian  tentang  uji daya  hambat  perasan  bawang  putih  ( Allium sativum L ) terhadap pertumbuhan Aspergilllus  niger pada  penelitian  ini menggunakan  metode  paper  disk  dengan kultur  swab.  Terdapat  empat  kelompok perlakuan  dengan  konsentrasi  perasan bawang  putih  ( Alium  sativum L)  yang berbeda yaitu: 100%, 80%, 60%, 40% serta dua kelompok kontrol yaitu kontrol posistif yang  menggunakan  ketonkonazole  dan kontrol negatif menggunakan akuades steril. Hasil yang diperoleh dapat dilihat di tabel 1. Tabel  1.  Zona  Hambat  Perasan  Bawang Putih (Allium sativum L) terhadap Pertumbuhan Aspergillus niger Perlakuan Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm) Interpretasi Hasil Konsentrasi 100% 43,5 Menghambat Konsentrasi 80% 36,1 Menghambat Konsentrasi 60% 35,3 Menghambat Konsentrasi 40% 28,3 Menghambat Kontrol positif 26,8 Menghambat Kontrol negatif 0 Tidak terbentuk zona hambat
Dari  penelitian  yang  telah  dilakukan, didapatkan  hasil  bahwa  dari  tiga  kali pengulangan didpatkan pada masing-masing konsentrasi  rata-rata  hasil  pengukuran diameter  zona  hambat  untuk  konsentrasi 100%  sebesar  43,5  mm,  konsentrasi  80% sebesar  36,1  mm,  konsentrasi  60%  sebesar 35,3 mm, dan pada konsentrasi 40% sebesar 28,3 mm.

## Gambar 1. Zona Hambat
Berdasarkan  dari  interpretasi  hasil menurut  CLSI,  2014  tersebut  maka  dapat disimpulkan  bahwa  hasil  >  18  mm  artinya semuanya bersifat sensitif terhadap pertumbuhan Aspergillus  niger. Diameter zona  hambatan  dianalisis  secara  deskriptif berdasarkan  kategori  respon  hambat  yaitu Resisten  <12  mm,  Intermediet,  13-17  mm, dan sensitif >18 mm.
Hasil yang diperoleh ini sesuai dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Rizqina Bintari, et.,  al. (2017)  tentang  uji  aktivitas antifungi  perasan  bawang  putih (Allium sativum L)  terhadap Candida  albiancas.
Bahwa  perasan  bawang  putih  ( Allium sativum L)  dengan  konsentrasi  25%,  50%, dan  75%  dapat  menghambat  pertumbuhan jamur Candida  albiancas dengan  besar diameter  zona  hambat  rata-rata  1,61  mm, 13,57 mm, dan 3,16 mm.
Adanya  zona  bening  yang  terbentuk pada  skitar paper  disc yang  menunjukan bahwa  perasan  bawang  putih  ( Allium
sativum L) dapat menghambat pertumbuhan Aspergillus niger itu dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor antara lain volume konsentrasi  perasan        yang      tepat,  waktu perendaman paper disk yang tepat. Selain itu adanya  kemampuan  perasan  bawang  putih ( Allium  sativum L)  dalam  menghambat pertumbuhan Aspergillus  niger disebabkan oleh adanya kandungan senyawa kimia yaitu senyawa  allicin  dan  flavonoid  bersifat merusak membran sel jamur sehingga terjadi permeabilitas  sel  yang  mengakibatkan terhambatnya pertumbuhan sel atau matinya sel  dan  polifenol  dapat  mendanuturasi protein sel  jamur (Pelczar dan Chan 1988). Kerusakan sel jamur ini yang kemudian akan menghambat pertumbuhan Aspergillus niger. Pada  penelitian  ini  menggunakan kontrol  positif  berupa  ketonkonazole  dan kontrol  negatif  berupa  aquades.  Kedua kontrol  ini  digunakan  sebagai  indikator bahwa penelitian yang telah dilakukan sudah menggunakan  prosedur  sesuai  standar  yang telah  ditentukan,  untuk  kontrol  positif menunjukkan hasil pada bagian sekitar disk akan terbentuk zona bening yang mengindikasikan berfungsi antibiotik sebagai  menghambat  pertumbuhan  jamur dan  kontrol  negatif  menunjukan  hasil  pada bagian  sekitar  disk  tidak  terbentuk  zona bening karena aquades tidak memiliki faktor penghambat  jamur.  Hal  ini  sudah  sesuai dengan  hasil  pengukuran  diameter  zona bening pada kontrol negatif adalah 0 mm dan kontrol positif, rata-rata adalah 26,8 mm.
Terbentuknya  zona  bening  pada kontrol posistif karena antibiotik
ketonkonazole  ini  memiliki  mekanisme menghambat jamur dengan cara mengganggu sintesis ergestero yang merupakan komponen penting dari membran jamur. Selain penggunaan antibiotik
Ketonkonazole  di  gunakan  juga  antibiotik Cholorompenicol
antibiotik yang
ditambahkan  pada  media  SDA  yang
berfungsi    untuk  mencegah  pertumbuhan bakteri (Rahmawati, et al 2019 ) . Dari kemampuan tersebut menunjukan  bahwa  bawang  putih  ( Allium sativum L) dapat dijadikan sebagai
pengobatan  alternatif.  Selain  menghemat biaya  pengobatan,  bawang  putih  juga  lebih aman dan tidak memiliki efek samping yang berbahaya sebagaimana antibiotik buatan.

## KESIMPULAN
Sesuai  dengan  hasil  penelitian  yang telah  dilakukan,  maka  dapat  disimpulkan bahwa  perasan  bawang  putih  ( Allium sativum L) mampu mengambat pertumbuhan Aspergillus  niger .  Perasan  bawang  putih ( Allium  sativum L) pada konsentrasi  100%, 80%,60%,  40%  efektif  dalam  menghambat pertumbuhan Aspergillus niger .

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  dengan menggunakan  jamur  yang  berbeda,  metode yang  berbeda,  dan  jumlah  sampel  yang banyak.
DAFTAR PUSTAKA Afzal, Savrat, et al . (2013). “Factors Behind
Brand Switching In Cellular Networks”, International  Journal  Of Asian Social    Science 3: (2)
Borlinghaus  J.,  Frank  A.,  Martin  CHG,
Ifeany  DN  Alan  JS  (2014 ).    Allicin: Chemistry and   Biological Properties Molicules 2014,19125 912618 Clinical  And  Laboratory  Standard  Intuitute
(CLSI), 2014. Performance Standards For  Antimicrobial  Suscepbtibility Testeing;Ggg Twenty-Fourt Informational  Suplements:  M100- S24, Clinical And Laboratory Standards Intitute, Pennsylvania. Gautam, A.K., R. Bhaduria. 2012 . Characterizatian of Aspergillus species associated with commerciallynstoreed triphala powder.  African  journal  Biotechnol 11 (104): 16814-16823. Ghautam,  A.K.,  Sharma  S,  Avasthi  S, Bhaduria R, 2011. Deversity,
Pathogenecity,  and  Toxikology  of A.niger: an improtant spoilage fungi. Jiwaji university gwalior.
Hanum,  M.  (2011).    Jamu  Ala  Kraton Sebagai  Warisan  Turun  Teumurun Penerbit Andi: Yogyakarta Hanani,  S.  2013. Uji  Efektivitas  Larutan Bawang  Putih  Sebagai  Insektisida Nabati  Untuk  Membunuh  Larva Nyamuk Aedes Aegty. Skripsi,Gorontalo  :  universitas  negri gorontalo.
Hakim,  L.  (2019).  Buku  pintar  tumbuhan . PT. Elex Media. Jakarta.
Kuswiyanto.  2015.    Buku  Ajar  Analis Kesehatan . Buku  kedokteran  EGC. Jakarta Majewski,  M.  (2014).      Allium  sativum: facts  and  myths  regarding  human health.    Roczniki  Państwowego Zakładu   Higieny, 65(1).
Nani, R. 2010. Bahan    Ajar    Mikrobiologi Pangan. Penerbit          FTUN.
Yogyakarta
Prapti,  U.  (2008).  Buku  Pintar  Tanaman
Obat.    PT.  Agromenia  Pustaka.
Jakarta.
Pelczar,  M.J.,  Chan,  E.C.S.,  1998,  Dasar- dasar Mikrobiologi . UI Press. Jakarta.
Rahmawati, R. 2012. Kemampuan   Bawang Putih      Tunggal  (Bawang  lanang). Yogyakarta: Pustaka Baru press.
Refai  M,  El-Yazid  Ha,  Hassan  Atef  2014. Monograph  On  Aspergillus  And Aspergillosis  Ini  Man,  Animals,  And Birds.    AGuide      Fpr  Classification And    Identification    Of     Aspergilli, Disease  Caused  By  Them,  Diagnosis And Treatement ; 2014.
Sukma, D. 2016.  Sehat Tanpa Obat Bawang Merah dan Bawang Putih . Yogyakarta: Rapha Publishing Srikandi, F. 1992. Mikrobiologi Pangan   I. Gramedia   Pustaka     Utama. Jakarta. Syaifurrisal, A., (2014. Pengaruh Penyimpanan      Pakan  Udang Komersial Dengan Penmabahan Volume  Air  Berbeda      Pertumbuhan Jamur   Dan    Kandungan    Protein Kasar,  Skrip      Fakultas Perikanan Dan Kelauatan Universitas  Air Langga Surabaya .
Siswandono dan soekardjo, B., 2000, Kimia Medinisial, Edisi  2,  228-232,  234, 239,  Airlangga  Univesity  Press, Surabaya.
Wangge,  E.S.A.,  D.N.  Suprapta,G.N.A. Wirya.2012 .  Isolasi  dan  identifikasi jamur  penghasil  mitoksin  pada  biji kakao  kering  yang  dihasilkan  di flores.  J.Agric.  Sci.  and  Biotechnol 1910 ; 39