## UJI KUALITATIF  DAN KUANTITATIF  EKSTRAK
Sargassum sp. DAN Gracilaria sp. SEBAGAI INHIBITOR BIO-KOROSI PADA BAJA KARBON
Isriyanti  Affifah 1 ,  Fida Madayanti  Warganegara 2 , Bunbun Bundjali 3
1 Jurusan Pendidik an Kimia, Fak ultas Keguruan dan Ilmu Pendidik an, Universitas Sultan Ageng Tirtayasa, Jl. Raya Ciwaru No. 25 Serang-Banten, Indonesia
2 Laboratorium Biok imia, Program Studi Kimia, Institut Tek nologi Bandung, Bandung, Indonesia
3 Laboratorium Kimia Fisik a dan Material, Program Studi Kimia, Institut Tek nologi Band ung, Bandung, Indonesia
E-mail  : isriyantiaffifah@gmail.co m
Abstract: Corrosion  is  a  process  of  metal  oxidation  by  air  or  electrolyte  which  the  air  or electrolyte will be reduced, so that the process of corrosion is an electrochemical process. In the  previous  study  is  known  that  corrosion  caused  by  microorganisms  oxidizing  iron (Thiobacillus  ferooxidans)  has  a  significant  role  towards  the  economic  losses  for  industry. Biofilm  on  metal  surface  caused  by  microorganism  can  alter  the  electrochemical characteristics of the metal surface and can induce the occurrence of corrosion. To overcome these  problems,  extraction  of  Sargassum  sp.  and  Gracilaria  sp.  that  is  suspected  as  an antimicrobial  agent  is  used  in  this  study.  Yield  of  exctraction  macroalgal  using  methanol- chloroform (1:1) as solvent was 44,5% for Sargassum sp and 36,5% for Gracilaria sp. Those extract was tested to inhibit the growth of  Thiobacillus ferooxidans qualitatively (visible) and quantitatively  (weight-loss  method).  Through the growth curve is known that T. ferooxidans was  able  to  grow  until  day  7  and  had  a stationary phase on day 8. Analysis of  weight-loss method  is  performed  using  a  coupon with a surface area of  3,6 cm 2 . The analysis showed that  extract  of    Gracilaria  have  antibacterial  activity  against  the  growth  of  T.  ferooxidans 29.3% more effective then commercial biocide.
Keyword : anti corrosion; bioactivity;  macroalgae; T. ferooxidans
Abstrak: Korosi  atau  perkaratan  logam  merupakan  proses  oksidasi  suatu  logam  dengan udara atau elektrolit.  Udara atau elektrolit tersebut akan mengalami reduksi, sehingga proses korosi  merupakan  proses  elektrokimia.  Pada  penelitian  sebelumnya  diketahui  bahwa  korosi yang  disebabkan  mikroorganisme  pengoksidasi  besi  ( Thiobacillus  ferooxidans) memiliki peranan  yang  cukup  signifikan  terhadap  kerugian  ekonomi  bagi  industri.  Lapisan  biofilm yang  dihasilkan  mikroorganisme  pada  permukaan  logam  dapat  mengubah  karakteristik elektrokimia  permukaan  logam  tersebut  dan  dapat  menginduksi  terjadinya  korosi.  Untuk mengatasi  masalah  tersebut,  pada  penelitian  ini  dilakukan  ekstraksi Sargassum sp. dan Gracilaria  sp. yang  diduga  efektif  menginhibisi  pertumbuhan  mikroba  pengoksidasi  besi ( Thibacillus  ferooxidans) yang  biasanya  terdapat  di  bangunan bawah laut. Hasil ekstraksi Sargassum sp. dan Gracilaria  sp. menggunakan  pelarut  metanol-kloroform  (1:1) memberikan yield terhadap  berat  basah  sebesar  44,5%  dan  36,5%.  Ekstrak  tersebut  diuji bioaktivitasnya  terhadap  pertumbuhan T.  ferooxidans secara  kualitatif  (kasat  mata)  dan kuantitatif  (metode weight-loss ). Melalui kurva pertumbuhan diketahui  bahwa T. ferooxidans
mampu  tumbuh  sampai  hari  ke-7  dan  mengalami  fasa  stasioner  pada  hari  ke-8.  Analisis metode weight-loss dilakukan menggunakan coupon dengan luas permukaan 3,6 cm 2 . Hasil analisis  menunjukkan  bahwa ekstrak Gracilaria sp mampu menginhibisi 29,3% lebih efektif daripada biocide komersial.
Kata kunci : anti korosi; bioaktivitas; makroalga; T. ferooxidans

## PENDAHULUAN
Korosi adalah kerusakan logam akibat berinteraksi dengan lingkungannya.  Korosi  atau  perkaratan logam  merupakan  proses  oksidasi  logam dengan  udara  atau  elektrolit  lainnya, dimana udara atau elektrolit akan mengami  reduksi,  sehingga  proses  korosi merupakan  proses  elektrokimia  (Akhadi 2000).  Korosi  dapat  terjadi  oleh  air  yang mengandung  garam,  karena  logam  akan bereaksi secara elektrokimia dalam larutan  garam  (elektrolit).  Proses  korosi logam dalam larutan akuatik (mengandung air) merupakan reaksi elektrokimia yang meliputi proses perpindahan massa dan perpindahan muatan.  Bila  suatu  logam  dicelupkan dalam  larutan  elektrolit,  terjadi  dua  lokasi yang  disebut  anoda  dan  katoda.  Pada anoda  terjadi  reaksi  oksidasi  dan  pada katoda terjadi  reaksi  reduksi.
Faktor  yang  berpengaruh  terhadap korosi  dapat  dibedakan  menjadi  dua, yaitu  yang  berasal  dari  bahan  itu  sendiri dan  dari  lingkungan.  Faktor  dari  bahan meliputi kemurnian bahan, struktur
bahan, bentuk kristal, unsur-unsur kelumit  yang  ada  dalam  bahan,  teknik pencampuran bahan dan sebagainya. Faktor  dari  lingkungan  meliputi  beberapa faktor,  yaitu  gas  terlarut,  temperatur,  pH, bakteri,  dan  padatan terlarut.
Korosi  yang  terjadi  pada  logam berbeda-beda  bergantung  pada  faktor penyebab  terjadinya  korosi  tersebut.  Ada beberapa  tipe  korosi  yang  terjadi  pada logam  (Halimatuddahliana  2003), yaitu:

## 1. Uniform Corrosion
Korosi  pada  permukaan  logam  yang berbentuk  pengikisan  permukaan  logam secara  merata  sehingga  ketebalan  logam berkurang sebagai akibat permukaan terkonversi  oleh  produk karat.

## 2. Pitting Corrosion
Korosi  yang  berbentuk  lubang-lubang pada  permukaan  logam  karena  hancurnya film  dari  proteksi  logam  yang  disebabkan oleh  laju  korosi  yang  berbeda  antara  satu tempat  dengan  tempat  yang  lainnya  pada permukaan  logam  tersebut.

## 3.  Stress Corrosion Cracking
Korosi  berbentuk  retak-retak  yang  tidak mudah  dilihat,  terbentuk  di  permukaan
logam sampai bagian dalam  logam.
Korosi  tipe  ini  banyak  terjadi  pada  logam yang mendapat tekanan. Hal ini disebabkan  oleh  kombinasi  dari  tegangan tarik dan lingkungan yang korosif sehingga  struktur  logam  melemah.

## 4.  Errosion Corrosion
Korosi  yang  terjadi  akibat  terhambatnya pembentukan film pelindung yang disebabkan  oleh  kecepatan  alir  fluida yang  tinggi,  misalnya  abrasi  pasir,

## 5.  Galvanic Corrosion
Korosi  yang  terjadi  karena  terdapat hubungan antara dua logam yang disambung dan terdapat perbedaan potensial  antara  keduanya.

## 6.  Crevice Corrosion
Korosi  yang  terjadi  di  sela-sela  gasket, sambungan  bertindih,  sekrup-sekrup  atau kelingan  yang  terbentuk  oleh  kotoran- kotoran  endapan  atau  timbul  dari  produk- produk karat.

## 7.  Selective Leaching
Korosi  ini  berhubungan  dengan  lepasnya suatu  elemen  dari  campuran  logam.
Inhibitor  korosi  adalah  zat  yang  bila ditambahkan  ke  dalam  suatu  lingkungan, secara  sinambung  atau  berkala,  dapat menurunkan laju korosi logam.
Pemakaian  inhibitor  korosi  adalah  salah satu  upaya  untuk  mencegah  korosi.  Ada
berbagai  jenis  inhibitor  yang  dikenal,  dan diklasifikasikan berdasarkan bahan dasarnya,  reaksi  yang  dihambat,  serta mekanisme  inhibisinya  (Priandani  2001). Inhibitor  menurut  bahan  dasarnya:
 Inhibitor Organik: Menghambat korosi dengan cara teradsorpsi kimiawi pada permukaan logam, melalui ikatan logam-heteroatom. Inhibitor ini terbuat dari bahan organik.  Contohnya  adalah  :  gugus amin,  tio,  fosfo,  dan  eter.  Gugus  amin biasa  dipakai  di sistem  boiler.
 Inhibitor  Anorganik: Inhibitor  yang terbuat dari mineral-mineral yang tidak  mengadung  unsur  karbon  dalam senyawanya (bahan anorganik).
Material  dasar  dari  inhibitor  inorganic ini  adalah  nitrit,  kromat,  silikat  dan posfat.
Inhibitor  menurut  reaksi  yang  dihambat:
 Inhibitor  katodik
Inhibitor  katodik  menghambat  reaksi reduksi. Molekul organik netral teradsorpsi di permukaan logam, sehingga mengurangi akses ion hidrogen menuju permukaan elektroda. Dengan berkurangnya akses  ion  hidrogen  yang  menuju permukaan  elektroda,  maka hydrogen overvoltage akan meningkat, sehingga  menghambat  reaksi  evolusi hidrogen  yang  berakibat   menurunkan
laju korosi. Inhibitor katodik dibedakan  menjadi  inhibitor  racun, inhibitor presipitasi katodik, dan oxygen scavenger .
 Inhibitor  Anodik
Inhibitor Anodik adalah inhibitor yang  menghambat  reaksi  oksidasi. Inhibitor ini biasanya membentuk lapisan  pasif  pada  permukaan  logam agar  logam  tersebut  tidak  teroksidasi.
 Inhibitor  campuran
Campuran  dari  inhibitor  katodik  dan anodik.
Adapun  mekanisme  kerja  inhibitor dapat dibedakan  sebagai  berikut:
(1) Inhibitor  teradsorpsi  pada  permukaan logam  dan  membentuk  suatu  lapisan tipis dengan ketebalan beberapa molekul    inhibitor.  Lapisan  ini  tidak dapat  dilihat  oleh  mata  biasa,  namun dapat menghambat penyerangan lingkungan  terhadap  logamnya.
(2) Melalui  pengaruh  lingkungan    (misal pH)  menyebabkan  inhibitor  dapat mengendap dan selanjutnya teradsopsi  pada  permukaan  logam serta  melidunginya  terhadap  korosi. Endapan  yang  terjadi  cukup  banyak, sehingga  lapisan  yang  terjadi  dapat teramati  oleh  mata.
(3) Inhibitor lebih dulu mengkorosi logamnya,    dan  menghasilkan  suatu zat  kimia  yang  kemudian  melalui
peristiwa  adsorpsi  dari  produk  korosi tersebut  membentuk  suatu  lapisan pasif  pada permukaan  logam.
(4) Inhibitor menghilangkan komponen yang  agresif  dari  lingkungannya.
Korosi  merupakan  suatu  fenomena alam  yang  tidak  dapat  dihindari.  Masalah ini  akan  terus  terjadi,  baik  pada  bangunan di  darat  maupun  di  laut.  Pada  penelitian sebelumnya  diketahui  bahwa  70%  korosi yang  terjadi  pada  pipa  di  laut  adalah akibat  pertumbuhan  mikroba  (Bazes,  A dkk.  2009).  Mikroba  tersebut  merupakan mikroba pereduksi sulfat dan pengoksidasi  besi  yang  menempel  dan tumbuh  pada  bangunan  di  bawah  laut  dan memproduksi  asam  (Priandani  2001). Aktivitas mikroorganisme dapat menginduksi terjadinya korosi dan menyebabkan  kerugian  ekonomi  serius bagi  industri  (Li,  Songmei  dkk.  2008). Saat mikroorganisme mengadsorpsi permukaan material, polimer ekstraseluler yang disekresikan oleh bakteri (seperti polisakarida ekstraseluler)  akan  menyebabkan  bakteri tersebut  dan  hasil  metabolitnya  berikatan dengan  substrat  dan  membentuk  lapisan biofilm  (Li,  Songmei  dkk.  2008).  Lapisan biofilm  yang  dihasilkan  mikroorganisme pada  permukaan  logam  dapat  mengubah karakteristik elektrokimia permukaan logam  tersebut  dan  dapat  menginduksi
terjadinya korosi. Untuk mengatasi masalah  tersebut,  telah  dilakukan  studi mengenai senyawa antibakteri yang berasal  dari  logam  berat, booster  biocide dan  inhibitor  anorganik  untuk  mencegah biokorosi  tersebut.  Namun,  antibakteri tersebut  memiliki  toksisitas  yang  tinggi sehingga  tidak  ramah  lingkungan  (Bazes A dkk. 2009).
Makroalga atau dalam bahasa Indonesia  sering  disebut  rumput  laut, merupakan gangang multiseluler yang termasuk  divisi    Thallophyta.  Berbeda dengan  tanaman  tingkat  tinggi,  akar, batang  dan  daun  pada  rumput  laut memiliki fungsi yang sama. Bentuk rumput  laut  beragam,  ada  yang  bulat, pipih,    tabung  atau  seperti  ranting  dahan. Habitat  makroalga  antara  lain  laut,  air payau,  tanah,  dan tambak.
Rumput  laut  berperan  penting  dalam ekosistemnya karena kemampuannya berfotosintesis. Selain mengandung klorofil, rumput laut mengandung beberapa  pigmen  lain  seperti  pigmen merah, cokelat,  dan  biru  kehijauan.
Berdasarkan  pigmen  yang  dikandungnya, alga atau ganggang dikelompokkan menjadi empat kelas, yaitu Rhodophyceae (alga merah), Phaeophyceae (alga
cokelat),
Chlorophyceae (alga hijau), dan Cyanophyceae  (alga  biru-hijau).
Keragaman jenis makroalga dan kandungan biokimianya bervariasi tergantung dari jenis  spesies,  lokasi geografis, musim, dan temperatur (Manivannan  dkk.  2008).  Kandungan biokimia  antara  lain  karbohidrat,    protein, lipid  bervariasi  tergantung  jenis  spesies, letak  geografis,  dan  cuaca  (Nelson  dkk. 2002).
Rumput  laut  merupakan  salah  satu sumber  devisa  negara  dan  pendapatan bagi masyarakat pesisir. Selama  ini rumput  laut  dimanfaatkan  untuk  berbagai keperluan  antara  lain  untuk  makanan (salad, agar-agar), pertanian (pupuk, makanan hewan, hidroponik, 14 akuaponik),  serta  bahan  baku  di  bidang kesehatan,  medis,  dan  kosmetik  (Lee  dkk. 2008).  Selain  itu,  pada  dekade  terakhir  ini telah  dilakukan  beberapa  studi  mengenai kemampuan  ekstrak  makroalga  sebagai anti  bakteri,  anti  jamur,  anti  inflamasi  dan anti oksidan. Penelitian terbaru menunjukkan bahwa makroalga dari genus Sargassum  sp. memiliki  aktivitas sebagai  anti  biofouling  (Bazes,  A  dkk, 2009).  Hal  ini  merupakan  suatu  nilai istimewa  bagi  makroalga  itu  sendiri  di bidang  industri  farmasi  dan  kedokteran. Namun,  pemanfaatan  rumput  laut  di Indonesia masih belum  optimal  dan masih  terbatas  pada  industri  makanan. Untuk itu perlu  dilakukannya  usaha
pemanfaatan ekstrak  rumput  laut  di berbagai  bidang  mengingat  melimpahnya ketersediaan  rumput  laut  di  Indonesia.
Oleh  karena  itu,  pada  penelitian  ini dilakukan stud i mengenai senyawa antibakteri ramah lingkungan dalam makroalga ( Sargassum sp. dan Gracilaria sp. )  yang  diduga  efektif menginhibisi pertumbuhan mikroba pengoksidasi  besi  yang  biasanya  terdapat di pipa  bawah  laut.

## METODE
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium  Biokimia  Program  Studi Kimia Institut
Teknologi Bandung.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  rumput  laut Sargassum  sp. dan Gracilaria sp. yang  diperoleh  dari  Pantai Sayang  Heulang  Pameungpeuk  Garut, kultur Thiobacillus  ferooxidans yang diperoleh  dari  laboratorium  Mikrobiologi ITB  dan  bahan  kimia  yang  diperoleh  dari gudang  bahan  Program  Studi  Kimia  ITB. Peralatan yang digunakan dalam penelitian  ini  diperoleh  dari  gudang  alat Laboratorium  Biokimia  ITB.

## Ekstraksi makroalga
Ekstraksi rumput laut dilakukan menggunakan soxhlet dengan pelarut
kloroform  p.a  (Merck)  dan  metanol  p.a (Merck)  dengan  perbandingan  1:1.  Proses
ini  diawali  dengan  ekstraksi  rumput  laut secara  fisik  (maserasi)  dengan  pelarut metanol.  Ekstraksi  menggunakan  soxhlet dilakukan  selama  4  jam  sampai  semua minyak terekstrak. Selanjutnya ditambahkan  MgSO4  anhidrat  (Merck) untuk  menarik  sisa  air  yang  ada  dalam ekstrak lipid. Pelarut diuapkan menggunakan  alat  destilasi  pada  suhu pelarut.  Semua  ekstrak  yang  dihasilkan disimpan  pada suhu  -20°C.
Kultivasi Bakteri Thiobacillus ferrooxidans Bakteri Thiobacillus ferrooxidans diperoleh dari koleksi Laboratorium Mikrobiologi  SITH  ITB  dalam  bentuk cair.  Bakteri  ini  lalu  diremajakan  dengan komposisi  media  :  K 2 HPO 4 0,04%; MgSO 4 7H 2 O  0,04%;  (NH 4 ) 2 SO 4 0,04%, FeSO 4 7H 2 O  3,34%,  H 2 SO 4 2M  0,4% (agar  3%  untuk  media  padat)  dalam pelarut aquades. Media di adjust menggunakan  NaOH  2M  sampai  pH  2,5- 3.  Bakteri  ini  tumbuh  optimal  dalam keadaan  gelap  (tidak  terkena  cahaya) dalam  waktu  3  hari,  ditandai  dengan berubahnya  warna  media  menjadi  warna jingga  pekat.

## Uji Kualitatif Ekstrak Makroalga
Uji  kualitatif  dilakukan  pada  media padat  dalam  cawan  petri  dengan  paku
sebagai  sumber  besi.  Sebanyak  10µL bakteri  di spread ke  dalam  media  padat cawan  petri  yang  sudah  mengandung masing-masing  10µL  ekstrak  alga  dalam berbagai  fraksi.  Pengamatan  dilakukan secara  kasat  mata  terhadap  banyaknya korosi  yang  terdapat  pada  paku  besi tersebut.

## Uji  Kuantitatif  Ekstrak  Makroalga dan Penentuan Laju Inhibisi Korosi
Uji  kuantitatif  dilakukan  pada  media cair  dengan  menggunakan coupon besi dengan  luas  permukaan  3,6  cm 2 .  Pada awalnya  ditentukan  nilai  dosis  optimum untuk menginhibisi pertumbuhan T.
ferooxidans melalui  variasi  konsentrasi ekstrak  pada  selang  waktu  yang  sama. Selanjutnya dengan dosis tersebut, ditentukan  laju  inhibisi  korosi  dengan variasi hari. Laju inhibisi ekstrak makroalga  terhadap  korosi  pada coupon ditentukan  melalui  metode  pengurangan berat sampel  ( weight loss ).

## HASIL  DAN PEMBAHASAN

## Kelimpahan Rumput Laut
Sampel  rumput  laut  diambil  dari pantai  Sayang  Heulang,  Pameungpeuk Garut  mewakili  dua  kelas  makroalga yaitu Gracilaria  sp. .  (Rhodophyta)  dan Sargassum  sp. .  (Phaeophyta).  Sampel diambil  di  pagi  hari  pada  kedalaman  20-
50  cm  dari  permukaan  laut  dengan kondisi  cuaca  mendung,  suhu  air  laut  ± 26°C  dan  pH  6.  Pada  saat  sampling, kelimpahan Sargassum  sp. lebih  banyak dibandingkan dengan kelimpahan Gracilaria  sp. .  Hal  ini  dikarenakan  di pantai Sayang Heulang ini terdapat terumbu  karang  dengan  jumlah  yang banyak sebagai tempat tumbuhnya Sargassum  sp. ,  sedangkan Gracilaria  sp. menggunakan pasir sebagai dasar tumbuhnya yang jumlahnya relatif sedikit.

## Ekstraksi Sargassum sp. dan Gracillaria sp.
Ekstraksi makroalga dilakukan
dengan  menggunakan  pelarut  kloroform methanol yang memiliki tingkat kepolaran  yang  sesuai  dengan  tingkat kepolaran  asam  palmitat  (Gambar  1) yang  diduga  memiliki  aktivitas  anti  bio- korosi  (Bazes,  dkk,. 2009).
O HO
Gambar  1. Struktur Asam Palmitat
Hasil  ekstraksi  soxhlet  menunjukkan adanya  dua  fasa  baik  pada Sargassum sp. maupun Gracilaria sp (Tabel  1) .
Tabel  1. Yield  Ekstraksi  Makroalga Terhadap
Berat Basah % (w/w) Makroalga Yield  (% ) Hasil ekstraksi soxhlet Yield (% ) Hasil Destilasi Fasa Metanol Fasa Klorofom Fasa Metanol Fasa Air Gracilaria sp.
70 25 5 36,5
Sargassum sp. 15 82 3 44,5 Kultivasi Bakteri Thiobacillus ferrooxidans Bakteri Thiobacillus ferrooxidans
merupakan bakteri asidofilik obligat,
sehingga  selama  proses  kultivasi,  bakteri ini ditumbuhkan dalam media yang memiliki nilai pH 2,5-3. Bakteri Thiobacillus  ferrooxidans memperoleh sumber  nitrogen  dari  ammonium  sulfat yang  ditambahkan  sebanyak  0,04%  ke dalam  media  dan  sumber  energi  dari FeSO 4 7H 2 O  (Lazaroff  1962).  Waktu optimal  pertumbuhannya  adalah  72  jam dengan  aerasi  yang  cukup  baik.  Selama pertumbuhannya,  bakteri  ini  diinkubasi pada shaker suhu ruang dengan kecepatan  150  rpm  dan  ditutupi  kantong plastik  warna  hitam  untuk  mencegah adanya  adanya  cahaya  yang  masuk.
Pertumbuhan
Thiobacillus
ferrooxidans pada  media  cair  ditandai dengan berubahnya warna medium menjadi  kuning  karat  (Hazra  dkk.  2004). Hal ini dikarenakan bakteri ini
mendapatkan  energinya  melalui  oksidasi Fe 2+ menjadi  Fe 3+ (Gambar  2).  Melalui kultivasi pada media padat, dapat diketahui  bahwa  koloni  tunggal  dari T. ferooxidans membentuk  koloni  satu  sama lain  dan berwarna  putih  bening.
Gambar  2 Hasil Kultivasi Thiobacillus ferrooxidans pada Media Cair.  Blanko  media (kiri),  media  + T. ferooxidans (kanan)
Berikut adalah gambar hasil peremajaan Thiobacillus ferrooxidans pada  media  padat  cawan  petri  (Gambar 3).
Gambar  3. Hasil Kultivasi Thiobacillus ferrooxidans pada Media Padat
Masa  hidup T.  ferooxidans dapat diketahui  dengan  cara  membuat  kurva pertumbuhan T. ferooxidans yang diinkubasi  pada  shaker  suhu  ruang  150
rpm  dengan  mengukur  nilai Optical
Density  (OD) pada  panjang  gelombang 600  nm.  Melalui  kurva  tersebut  dapat diketahui bahwa T. ferooxidans mengalami  fasa  lag  selama  tiga  hari sedangkan  fasa  log  berlangsung  sampai hari  ke-7.  Fasa  saturated  berlangsung singkat  yaitu  pada  hari  ke-8  &  9.  Bakteri ini  mulai  mengalami  kematian  sel  pada hari ke-10. Berikut adalah kurva pertumbuhan T. ferooxidans (Gambar  4).
Gambar  4. Kurva Pertumbuhan Thiobacillus ferrooxidans
Uji  Kualitatif  dan  Kuantitatif  Ekstrak Makroalga Terhadap Bakteri T. ferooxidans
Uji  kualitatif  dilakukan  pada  media padat  yang  berisi  paku  dengan  enam kondisi berbeda berdasarkan variasi ekstrak  yang  diperoleh.  (Gambar  5). Media  tanpa  ekstrak  digunakan  sebagai blanko  sedangkan  methanol  digunakan sebagai  kontrol.
Melalui hasil uji kualitatif dapat diketahui  bahwa  fasa  metanol  dari  kedua
ekstrak  memiliki  daya  inhibisi  yang  lebih besar  daripada  fasa  kloroform.  Hal  ini dilihat dari jumlah korosi yang ditimbulkan  pada  paku  dalam  media tersebut. Media yang mengandung ekstrak  dalam  fasa  metanol  memberikan efek  korosif  yang  lebih  rendah  daripada media  dengan  ekstrak  fasa kloroform.
A B C D E
F
Gambar  5. Uji  Kualitatif  pada media padat. (A)
media  + bakteri + paku, (B)  media  + bakteri + paku+ methanol, (C)  media  + bakteri + paku + ekstrak Sargassum fasa methanol, (D) media  + bakteri + paku + ekstrak Sargassum fasa k loroform, (E)  media  + bakteri  + paku + ekstrak Gracilaria fasa k loroform, (F) media  + bakteri  + paku + ekstrak Gracilaria fasa metanol
Pada  penelitian  sebelumnya,  metanol dilaporkan  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap  bakteri  tertentu  (Selvin  dkk. 2004).  Oleh  karena  itu,  pada  uji  ini dilakukan  pula  uji  media  +  metanol  yang berfungsi sebagai kontrol. Namun, ternyata  korosi  yang  ditimbulkan  pada media  dengan  metanol  lebih  banyak
daripada  korosi  yang  ditimbulkan  pada kedua  ekstrak  dalam  fasa  metanol.  Hal ini menunjukkan bahwa ada suatu senyawa  lain  dalam  ekstrak  fasa  metanol yang  mampu  menginhibisi  pertumbuhan bakteri Thiobacillus ferooxidans sehingga korosi yang ditimbulkannya lebih  sedikit.
Selanjutnya  dilakukan  uji  kuantitatif pada  media  cair  dengan  fraksi  aktif tersebut.  Uji  dilakukan  dengan  5  kondisi berbeda. (Gambar  6).
Hari pertama Hari k elima Gambar  6. Uji  Kuantitatif Thiobacillus ferrooxidans dalam Media Padat
1.Media+coupon, 2.Media+coupon+T. ferooxidans, 3. Media+coupon+T. ferooxidans+ek strak  Gracilaria, 4.
Media+coupon+T. ferooxidans+ek strak
Sargassum, 5.Media+coupon+T. ferooxidans+Biocide
Pada  kondisi  pertama,  dilakukan  uji pada  media  yang  hanya  berisi coupon.
Hal ini dilakukan untuk mengetahui
pengaruh  lingkungan  (media)  terhadap korosi yang ditimbulkan, mengingat bahwa  media  yang  digunakan  merupakan media  asam  yang  memiliki  pH  ~2,5  -  3. Pada  kondisi  ini  tentu  ada  sebagian  kecil dari coupon yang  terkorosi  sehingga kondisi  ini  digunakan  sebagai  faktor koreksi  dalam  penelitian  ini.  Kondisi kedua  adalah  media  berisi T.  ferooxidans dan coupon yang  berperan  sebagai kontrol sehingga dapat diketahui besarnya  korosi  yang  ditimbulkan  oleh bakteri  pengoksidasi  tersebut,  sedangkan kondisi ketiga dan keempat adalah kondisi  media  yang  berisi T.  ferooxidans, coupon dan  ekstrak  makroalga.  Kondisi kelima  adalah  kondisi  dimana  ekstrak makroalga digantikan oleh biocide komersial. Biocide ini  digunakan  sebagai pembanding efektivitas dari ekstrak makroalga tersebut sebagai inhibitor biokorosi. Hasil pengamatan menunjukkan  bahwa  pada  hari  pertama, diketahui  bahwa  media  tanpa  ekstrak berwarna  kuning  jingga  sedangkan  media lainnya  berwarna  kuning  pucat  sama dengan  warna  blanko  (media  + coupon ). Hal  ini  mengindikasikan  bahwa  bakteri T. ferooxidans memberikan efek yang signifikan terhadap terjadinya proses korosi  pada  tahap  awal.  Bakteri T. ferooxidans ini memperoleh energi
melalui  reaksi  oksidasi  Fe 2+ menjadi
Fe 3+ .
Reaksi  yang  terjadi  adalah  sebagai berikut.
Anoda : Fe + 2e -  Fe 2+
Katoda : 2H + + 2e -  H 2 Reaksi  yang  dikatalisis T. ferooxidans : 4Fe 2+ + 2e -  4Fe 3+ 4H + + O 2 + 4e -  2H 2 O
Fe 3+ + 3H 2 O  Fe(OH) 3 + 3H +
Reaksi  metabolisme T. ferooxidans : 4ADP +  4ADP  4 ATP 4ADP + O 2 + 4H +  2H 2 O + 4ADP + 4ADP + + H  4ADP + H +
Pada hari ke-5 semua media menunjukkan  warna  kuning  jingga  yang menunjukkan  telah  terjadi  proses  korosi pada  semua  media.  Untuk  mengetahui
pengaruh penambahan
ekstrak
Sargassum sp. dan Gracilaria sp. terhadap korosi yang ditimbulkan, dilakukan  uji  kuantitatif  dalam  media  cair melalui  metode weight-loss .  Data  hasil pengamatan  setelah  lima  hari  disajikan pada Tabel  2.
Tabel  2  menjelaskan  bahwa  kedua ekstrak  makroalga  dengan  konsentrasi 100  µL  dalam  10  ml  media  memberikan efek inhibisi yang cukup signifikan dibanding  dengan  konsentrasi  10  µL.  Hal ini  dilihat  dari  pengurangan  berat  yang
lebih  kecil  dibandingkan  dengan  media tanpa  ekstrak.
Tabel  2. Hasil  Pengamatan Uji  Kuantitatif setelah 5 hari
Sampel Pengurangan Berat coupon (g) Media + coupon (lingkungan) 0,0103 Media+ T. ferooxidans + coupon 0,0122 Media+ T. ferooxidans + coupon + ekstrak Gracillaria sp. 10µL 0,0112
Media+ T. ferooxidans + coupon + ekstrak Gracillaria sp. 100µL 0,00845
Media+ T. ferooxidans + coupon
+ ekstrak Sargassum sp. 10µL
0,0535
Media+ T. ferooxidans + coupon
+ ekstrak Sargassum sp. 100µL
0,0110
Media+ T. ferooxidans + coupon
+ Biocide 10µL 0,0093
Efisiensi inhibisi ditentukan melalui perhitungan  sebagai  berikut.
k g0 = laju korosi tanpa inhibitor (mg/m 2 hari) k g = laju korosi dengan inhibitor (mg/m 2 hari)
Melalui perhitungan di atas, diketahui  bahwa  efisiensi  inhibisi  ekstrak Gracilaria  sp 10µL  dan  100  µL  dalam 10 ml  media  berturut-turut  adalah  8,  2%  dan 30,  74%.  Sedangkan  ekstrak Sargassum sp 10µL  dan  100  µL  berturut-turut  adalah -338,  52%  dan  9,  84%. Biocide 10µL memberikan efisiensi inhibisi sebesar
23,77%.  Ekstrak Gracilaria  sp memiliki nilai  inhibisi  yang  lebih  besar  daripada ekstrak Sargassum  sp pada  konsentrasi yang  sama.  Namun,  dengan  konsentrasi
10  kali  lipatnya,  ekstrak Gracilaria  sp mampu  menginhibisi  29,3%  lebih  efektif daripada biocide komersial.  Dari  hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa penambahan konsentrasi ekstrak makroalga dapat meningkatkan laju inhibisi.
Korosi yang terjadi merupakan pitting  corrosion, yaitu  korosi  yang berbentuk lubang-lubang pada permukaan  logam  karena  hancurnya  film dari  proteksi  logam. Hal  ini  terlihat  dari adanya  lubang-lubang  kecil  pada coupon yang  terkorosi  (Gambar  7).
Gambar  7. Permukaan  Logam  yang terkorosi
Dilihat  dari  mekanisme  inhibisinya, ekstrak makroalga Sargassum sp menginhibisi  dengan  membentuk  lapisan pasif  di  permukaan  logam.  Hal  ini  terlihat dari adanya  suatu  lapisan  berwarna merah bata keemasan pada logam
tersebut yang susah dihilangkan menggunakan cairan  penghapus  karat setelah  diinkubasi.  Lapisan  pasif  tersebut dapat  melindungi  logam  dari  serangan lingkungan yang dapat menyebabkan korosi. Namun kelemahannya, logam mengalami korosi terlebih dahulu sebelum  terbentuk  lapisan  pasif  tersebut, sehingga terdapat pengurangan berat yang  cukup  memberikan  pengaruh  pada kerugiaan ekonomi akibat korosi. Namun,  pada  ekstrak  Gracilaria  sp,  tidak terdapat  lapisan  pasif  berwarna  merah keunguan tersebut. Kemungkinan mekanisme inhibisi pada ekstrak Gracilaria sp, adalah melalui
pembentukan  suatu  lapisan  tipis  tak  kasat mata  dengan  ketebalan  beberapa  molekul inhibitor.

## KESIMPULAN
Ekstrak  makroalga Gracilaria  sp. dan Sargassum  sp. memiliki  potensi  sebagai agen  anti  korosi  yang  disebabkan  oleh pertumbuhan  bakteri T.  ferooxidans  .
Dilihat dari mekanisme inhibisinya, ekstrak makroalga Sargassum sp menginhibisi  dengan  membentuk  lapisan pasif  di  permukaan  logam,  sedangkan mekanisme inhibisi pada ekstrak Gracilaria sp. melalui pembentukan suatu  lapisan  tipis  tak kasat mata.

## DAFTAR  RUJUKAN
Akhadi,  M.  2000,  Korosi  pada  Alat
Elektronika. Elektro Indonesia , Tahun  VI, no. 32, hh.32.
Bazes,  A.,  Silkina,  A.,  Douzenel,  P.,  Fay,
F.,  Kervarec,  N.,  Morin,  D.,  Berge, JP., Bourgougnon,
N. 2009,
Investigation of the antifouling
constituents  from  the  brown  alga Sargassum muticum (Yendo) Fensholt, Journal of Applied Phycology, vol.  21,  no.  4,  hh.  395-
403.
Cetrullo,  S.,  Tantini,  B.,  Flamigni,  F.,
Pazzini,  C.,  Facchini,  A.,  Stefanelli, C.,  Caldarera,  CM.,  Pignatti,  C.
2012, Antiapoptotic and Antiautophagic Effects of
Eicosapentaenoic  Acid  in  Cardiac Myoblasts  Exposed  to Palmitic Acid. Nutrients, vol.  4, hh.  78-90 .
Dalimunthe,  Indra  S.  2004, Kimia  dari Inhibitor Korosi , Program  Studi
Teknik  Kimia,  Universitas  Sumatera
Utara .
Halimatuddahliana 2003, Pencegahan
Korosi  Dan  Scale  Pada  Proses Produksi  Minyak  Bumi ,  Program
Studi Teknik Kimia, Universitas Sumatera  Utara
Hazra,  F.,  dan  Widyati,  E.  2004,.
Isolation, Carriers Selection and
Inoculum Formulation of
Thiobacillus  sp.p .  Jurnal  Tanah  dan Lingkungan, vol.  9, no. 2, hh.  71-76.
Indriani,  H,  dan  E.  Suminarsih  2004,
Rumput  Laut ,  PT.  Penebar  Swadaya, Bogor,  IPTEKnet,  Sentra  Informasi IPTEK, BPPT,  Jakarta.
Isa,  I.  2004,  Bioleaching  of  Heavy  Metals from  Sediments  Using  Thiobacillus ferrooxidans ,  JBP, vol.  6,  no.  2,  hh. 59-62.
Lazaroff,  N.  1962, Sulfate  Requirement For  Iron  Oxidation  By  Thiobacillus ferrooxidans, British Columbia Research  Council, hh.  78-83 .
Lee,  B.  2008,  Seaweed  Potential  as  a marine vegetable and other Opportunities, RIRDC  Publication no.08/009, ISSN 1440-6845, hh.3-19. Li,  Songmei.,  Zhang,  Yuanyuang.,  Liu, Jianhua.,  Yu,  Mei.  2008,  Corrosion Behavior  of  Steel  A3  Influenced  by Thiobacillus Ferooxidans, Acta Physico-Chimica  Sinica, vol.  24,  no.
9, hh.  1553-1557.
Liu,  Jianhua.,  Liang,  Xin.,  Li,  Songmei.
2007,  Corrosion  Behavior  of  Steel A3 Exposed
to Thiobacillus Ferooxidans, Journal Material
Science  and  Technology, vol.  24,  no.
5, hh.  766-770.
Manivannan,
K., Thirumaran, G., Karthikai,  G.E.,  Hemalatha,  A.  and Anantharaman, P. 2008, Biochemical Composition
of Seaweeds  from  Mandapam  Coastal Regions  along  Southeast  Coast  of India, American-Eurasian  Journal of Botany, vol.  1, no. 2, hh.  32-37.
Nelson,  M.,  Phleger,  C.  F.,  Nichols,  P.D.,
2002, Seasonal  Lipid  Composition  in
Macroalgae of the Northeastern
Pacific  Ocean, Botanica  Marina vol.
45, hh.  58-65.
Nowaczyk,  K.,  Juszczak,  A.,  Domka,  F., Siepaket,  J.  1998,  The  Use  of Thiobacillus Ferrooxidans Bacteria in the Process of Chalcopyrite
Leaching, Polish Journal of
Environmental  Studies, vol. 7, No. 5, hh.  307-312. Priandani,  M.  2001, Studi  Pengaruh
Inhibitor Formaldehid Terhadap
Korosi  Baja  Karbon  ASTM  A  283 oleh  Bakteri  Pereduksi  Sulfat  (SRB) di  dalam  Air  Laut , Master  Thesis ,
Program  Khusus  Rekayasa  Korosi,
Program Studi Rekayasa Pertambangan, Institut Teknologi
Bandung.
Pronk,  J.T.,  Bruyn,  C  De.,  Bos,  P.,  and
Kuenen, J.G. 1992, Anaerobic
Growth  of  Thiobacillus  ferrooxidans,
Applied And
Environmental Microbiology, vol.  58,  no.  7,  hh.
2227-2230.
Rawling,  DE  and  Kusano,  T.  1994, Molecular  Genetics  of  Thiobacillus ferrooxidan, Microbiological Reviews, vol.  58, no. 1, hh.  39-55.
Purwadi,  Stevani  O.  2012, Karakterisasi Komponen  Rumput  Laut  Gracilaria sp . Tesis,  Program  Studi  Kimia.  ITB. Selvin, J and Lipton,  A.P.  2004. Antifouling  activity  of  bioactive substances extracted from Holothuria scabra. Hydrobiologia 513, hh.  251-253.
Tsuyoshisugio,.  Domatsu,  C.,  Tano,  T.,
Imai,  K.  1984,  Role  of  Ferrous  Ions in Synthetic Cobaltous Sulfide Leaching of Thiobacillus
ferrooxidans, American  Society  for Microbiology, vol.  48, no. 3, hh. 461- 467.
Wiraswati,  Hesti  L.  2011, Isolasi  dan Identifikasi  Lipid  dari  Rumput  Laut untuk  Produksi  Biodiesel ,  Tesis,
Program  Studi  Kimia,  ITB.