## MICHELIA ALBA FLOWER OIL COMPONENTS AS TYROSINASE INHIBITORS: IN SILICO STUDY
Paundra Rizky Pratama 1 , Felysia Isman 1 , Cici Muarifah 1 , Wahida Annisa Ermadayanti 2 , Arif Fadlan 2**
1 Departemen Material dan Metalurgi, Fakuultas Teknologi Industri dan Rekayasa Sistem, Institut Teknologi Sepuluh Nopember, Jl. Teknik Kimia Kecamatan Sukolilo, Kota Surabaya, Jawa Timur - Indonesia
2 Departemen Kimia, Fakultas SAINS, Institut Teknologi Sepuluh Nopember, Jl. Teknik Kimia Kecamatan Sukolilo, Kota Surabaya, Jawa Timur - Indonesia
E-mail: ** afadlan@chem.its.ac.id
Received: 26 Agustus 2021. Accepted: 19 November 2022. Published: 31 Desember 2022 DOI: 10.30870/educhemia.v7i1.12259
Abstract: Melanin  is  generally  known  as  a  protector  of  human  skin  against  radiation. However,  the  excessive  production  of  melanin  induces  hyperpigmentation  and  other  skin disorders. Arbutin, kojic acid, and hydroquinone have been used as inhibitors for tyrosinase which involves the synthesis of melanin through melanogenesis, but they show adverse effects. This article reports the potential of methyl 2-methylbutyrate, β-pinene, limonene, 1,8-cineole, linalool,  α-terpineol,  geraniol,  and  β-phenyl  ethylalcohol  contained  in  the  essential  oils  of Michelia  alba  as  tyrosinase  inhibitors  by  in  silico  study.  The  experiments  were  conducted through  molecular  docking  against  a  human  tyrosinase  protein  target  (1BUG)  followed  by absorption, distribution, metabolism, excretion, and toxicity (ADMET) prediction. Geraniol, β-phenyl  ethyl  alcohol,  α-terpineol,  and  limonene  yielded  better  docking  scores  than hydroquinone. These four compounds and 1,8-cineole and β-pinene, showed lower docking scores than kojic acid. The compounds interacted with 1BUG through hydrogen bonding, Van der Walls, alkyl/π-alkyl interactions, and π-π stacking. ADMET analysis indicated that they were potential candidates for oral drugs.
Keywords: Tyrosinase; Michelia alba; Molecular docking; ADMET
Abstrak: Melanin  secara  umum  berfungsi  melindungi  kulit  dari  paparan  sinar  matahari. Namun,  produksi  melanin  yang  berlebihan  dapat  menyebabkan  hiperpigmentasi  atau penggelapan  warna  kulit  dan  kelainan  pigmentasi  yang  lain.  Arbutin,  asam  kojat,  dan hidroquinon  telah  digunakan  sebagai  inhibitor  enzim  tirosinase  yang  berperan  dalam melanogenesis  untuk  menghasilkan  melanin,  tetapi  ketiganya  menunjukkan  efek  yang merugikan.  Penelitian  ini  melaporkan  potensi  metil  2-metilbutirat,  β-pinen,  limonen,  1,8- cineol, linalool, α-terpineol, geraniol, dan β-fenil etilalkohol dalam minyak atsiri bunga M. alba sebagai inhibitor enzim tirosinase melalui studi in silico . Penelitian dilakukan melalui penambatan  molekular  ( molecular  docking )  senyawa-senyawa  tersebut  terhadap  protein human  tyrosinase dengan  kode  1BUG  yang  dilanjutkan  dengan  prediksi  penyerapan, distribusi,  metabolism,  ekskresi,  dan  toksisitas  (ADMET).  Geraniol,  β-fenil  etilalkohol,  α- terpineol,  dan  limonen  menghasilkan  skor  penambatan  yang  lebih  baik  dari  hidrokuinon. Keempat  senyawa  tersebut  beserta  1,8-cineol  dan  β-pinen  memiliki  skor  penambatan  yang lebih  baik  dari  asam  kojat.  Delapan  senyawa  tersebut  berinteraksi  dengan  1BUG  melalui
ikatan hidrogen, interaksi Van der Walls, interaksi alkil/π-alkil, dan π- π stacking . Analisis ADMET menunjukkan bahwa kedelapan senyawa berpotensi sebagai kandidat obat oral.
Kata kunci: Tirosinase; Michelia alba; Penambatan molekular; ADMET

## PENDAHULUAN
Melanin adalah pigmen kuning-coklat hingga  kehitaman  yang  mewarnai  kulit, mata,  dan  rambut  manusia.  Melanin dihasilkan  oleh  sel  melanosit  melalui proses  melanogenesis  yang  berfungsi melindungi  kulit  dari  paparan  sinar matahari  dengan  menyerap  radiasi ultraviolet  dan  menangkal  radikal  bebas yang  terbentuk  (Zolghadri dkk. 2019).
Namun  demikian,  produksi  melanin secara  berlebihan  dapat  menyebabkan hiperpigmentasi  atau  penggelapan  warna kulit. Akumulasi melanin secara berlebihan  juga  dapat  menginduksi kelainan pigmentasi seperti melasma dan munculnya bintik hitam (Qian dkk. 2020).
Tirosinase  (polifenoloksidase,  PPO, EC  1.14.18.1),  enzim  monoksigenase yang  mengandung  tembaga,  merupakan enzim yang berperan dalam pembentukan melanin melalui melanogenesis.
Tirosinase  terdistribusi  merata  pada jamur, tanaman tingkat tinggi, hewan, dan terlibat dalam dua tahap awal biosintesis melanin. Tahap pertama berupa hidroksilasi  L-tirosina  menjadi  3,4- dihidroksifenilalanina  (L-DOPA)  yang dilanjutkan  dengan  oksidasi  L-DOPA
menjadi  dopaquinona  pada  tahap  kedua. Dopaquinona  selanjutnya  secara  spontan mengalami polarisasi spontan membentuk melanin (Uchida dkk. 2014). Pembentukan  melanin  dapat  dihambat dengan  memblokir  sintesis  tirosinase, menurunkan  transfer  tirosinase,  dan menggunakan inhibitor untuk menghambat aktivitas tirosinase
(Himawan & Ratu 2016).
Sejumlah  inhibitor  tirosinase  yang potensial  dengan  struktur  beragam  dapat ditemukan dari bahan alam maupun hasil sintesis.  Inhibitor  tirosinase  seperti arbutin, asam kojat, dan hidroquinon telah digunakan  sebagai  pemutih  atau  agen hiperpigmentasi  karena  kemampuannya untuk menekan produksi melanin. Namun demikian, hidrokuinon menunjukkan efek sitotoksik  terhadap  sel  melanosit  dan keratinosit sedangkan asam kojat diketahui  dapat  menyebabkan  dermatitis pada  kulit  manusia  pada  konsentrasi tinggi.  Inhibitor  tirosinase  yang  lainnya berupa  arbutin,  asam  askorbat,  asam thioctat N -asetil  glukosamin,  asam gentisat, metil gentisat, tunicamycina, D- pantethein- S -sulfonate dan ekstrak kedelai  dianggap  tidak  memuaskan
(Capeti dkk. 2021).  Penelitian  dalam rangka pencarian inhibitor tirosinase yang lebih baik dengan efek samping minimal terus  dilakukan,  salah  satunya  inhibitor yang  berasal  dari  tanaman  atau  bahan alam lainnya.
Bahan  alam  dilaporkan  berpotensi dalam mengatasi hiperpigmentasi dengan efektifitas  dan  tingkat  keamanan  yang tinggi  (Zhao  dkk.  2020).  Cempaka  putih ( Michelia alba ) anggota keluarga tanaman berbunga  Magnoliaceae  secara  empiris diketahui  memberikan  efek  awet  muda pada kulit. M. alba diketahui mengandung berbagai  senyawa  aktif  potensial  yang terdapat dalam ekstrak dan minyak atsiri serta  menunjukkan  bioaktivitas  yang beragam  (Chiang dkk. 2012).  Pengujian ekstrak tanaman M. alba pada sel human foreskin fibroblasts (Hs68) menunjukkan terjadinya  pemulihan  sintesis  kolagen total  yang  direduksi  oleh  UVB  (Chiang dkk. 2012).
Senyawa (-)- N - formylanonaina  yang  terkandung  dalam M. alba juga dilaporkan dapat menghambat  ekspresi  enzim  tirosinase secara  efektif  (Wang dkk. 2010).
Berdasarkan  hal  tersebut,  artikel  ini melaporkan  potensi  senyawa-senyawa yang  terkandung  dalam  minyak  atsiri bunga M.  alba sebagai  inhibitor  enzim tirosinase  melalui  studi in  silico .
Penelitian dilakukan melalui penambatan
molekular  ( molecular  docking )  yang dilanjutkan  dengan  prediksi  penyerapan, distribusi,  metabolism,  ekskresi,  dan toksisitas  (ADMET)  untuk  mengungkap deskriptor  fisikokimia,  sifat  mirip  obat dan toksisitas senyawa-senyawa tersebut.

## METODE
Studi in  silico dilakukan  dengan Lenovo  Legion-520  Intel®  Core™  i7- 7700HQ  CPU@2.80GHz  RAM  8.00GB NVIDIA  GeForce  GTX  1050  Ti  4GB sistem operasi Windows 10 64-bit.

## Penambatan molekular
Simulasi penambatan dilakukan untuk mengelusidasi  interaksi  antara  suatu senyawa  dengan  sisi  aktif  suatu  reseptor target. Studi penambatan dalam penelitian ini dilakukan pada delapan senyawa kimia dalam minyak atsiri bunga M. alba berupa metil  2-metilbutirat,  β-pinen,  limonen, 1,8-cineol, linalool, α-terpineol, geraniol, dan β-fenil etilalkohol yang diperoleh dari literatur  (Ueyama dkk. 1992)  terhadap protein human  tyrosinase .  Penambatan molekular  dilakukan  melalui  perangkat online  MCULE  (Kiss dkk. 2012)  dengan kontrol berupa asam kojat dan hidrokuinon  (Sari dkk. 2019,  Chen dkk. 2015).  Proses  penambatan  dilakukan dengan  preparasi  ligan  melalui  konversi ligan masukan dalam format the simplified
molecular  input  line  entry  specification
(SMILES)  atau the  IUPAC  international chemical identifier (InChI) yang diperoleh dari database PubChem  National  Center for
Biotechnology
Information (https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/) menjadi format 2D mol dengan perangkat
Indigo  yang  tertanam  dalam  MCULE melalui canonical SMILES.  File  dalam format canonical SMILES  juga  dibuat dari file 2D mol untuk memastikan bahwa file canonical SMILES  yang  diperoleh identik. File masukan ligan dalam bentuk InChI juga dikonversi menjadi file 2D mol dengan  OpenBabel  dalam  MCULE  dan selanjutnya  standar  InChI  ligan  juga dibuat dari 2D mol yang diperoleh untuk autentikasi file InChI masukan. Preparasi dilanjutkan  dengan  pembentukan  file format  3D  mol  dari  2D  mol  dengan OpenBabel  atau  ChemAxon  dalam MCULE, konversi ligan 3D mol menjadi format  PDBQT  dengan  AutoDockTools (parameter bawaan/ default ) dalam MCULE.  Struktur  kristal  protein human tyrosinase (identitas PDB 1BUG resolusi
2,70  Å)  diperoleh  dari data  base protein
(https://www.rscb.org)  dan  disiapkan dengan perangkat PyMOL. Protein target 1BUG  yang  telah  dipreparasi  melalui penghapusan molekul air dan ligan alami N -feniltiourea (URS) selanjutnya diunggah kedalam MCULE. Penambatan
molekular  selanjutnya  dilakukan  dalam MCULE dengan pusat koordinat X 23,129 Å, Y 101,558 Å, Z 2,507 Å. Perhitungan hasil  penambatan  molekular  dilakukan dengan  AutoDock  Vina  dalam  MCULE dengan parameter default yang menghasilkan empat pose terbaik.

## Prediksi ADMET dan sifat mirip obat
Delapan senyawa dalam minyak atsiri bunga M. alba dipelajari lebih lanjut untuk prediksi  ADMET  dan  sifat  mirip  obat. Analisis  dilakukan  dengan  SwissADME (Daina dkk. 2017) dan admetSAR (Yang dkk. 2019) untuk mengungkap deskriptor fisikokimia, sifat mirip obat dan toksisitas. Analisis  yang  dilakukan  menghasilkan data  berat  molekul,  akseptor  ikatan hidrogen ( H-bond acceptor , HBA), donor ikatan  hidrogen  ( H-bond  donor ,  HBD),
MLogP, rotatable  bonds , topological polar  surface  area (TPSA),  WLOGP (lipofilisitas), blood brain barrier (BBB), dan sifat mirip obat Lipinski dan Veber.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Penambatan molekular
Studi in  silico yang  meliputi penapisan virtual ( virtual screening ) saat ini  digunakan  secara  intensif  untuk mempelajari  proses  biologi  melalui simulasi  komputer  karena  cepat  dan terjangkau  (Lionta dkk. 2014).  Studi  ini
juga  mampu  mengidentifikasi  dan melakukan optimasi pendahuluan terhadap  sifat  aktif  suatu  senyawa. Perkembangan  teknik  komputasi  yang lebih  baik  menjadikan  studi in  silico sebagai alternatif yang efektif dengan efek positif pada proses penemuan obat ( drug discovery ) (Franca dkk. 2013). Hasil studi ini  selanjutnya  dikonfirmasi  melalui percobaan  secara in  vitro dan in  vivo (Maia dkk. 2020).
Penambatan  molekular  ( molecular docking )  adalah  penapisan  virtual  yang berguna  dalam  prediksi  geometri  dan interaksi protein dalam kompleks dengan suatu  senyawa  kecil  yang  disebut  ligan. Oleh  karena  itu,  penambatan  molekular dapat  digunakan  untuk  memperkirakan interaksi  suatu  senyawa  aktif  dengan reseptor target (March-Vila dkk. 2017).
Penambatan molekular delapan senyawa  dalam  minyak  atsiri  bunga M. alba (metil  2-metilbutirat,  β-pinen, limonen, 1,8-cineol, linalool, α-terpineol, geraniol,  β-fenil  etilalkohol)  terhadap enzim oksidoreduktase ( human tyrosinase , identitas PDB 1BUG) dilakukan  untuk  investigasi  interaksi ikatan  dan  eksplorasi  mode  ikatan  yang terjadi.  Penambatan  juga  dilakukan dengan  kontrol  berupa  asam  kojat  dan hidroquinon. Penambatan dilakukan dengan  MCULE  yang  merupakan  suatu
perangkat  online  dengan  dukungan beberapa  perangkat  lunak  yang  tertanam didalamnya.  Delapan  senyawa  minyak atsiri bunga M. alba beserta kontrol asam kojat  dan  hidrokuinon  diunggah  dalam format  file  SMILES  atau  InChI  yang dilanjutkan  dengan  konversi  menjadi format 2D dan 3D dengan bantuan Indigo dan OpenBabel/ChemAxon yang tertanam  dalam  MCULE.  File  dalam format PDBQT selanjutnya diperoleh dari konformasi  3D  dengan  AutoDockTools dalam MCULE (Kiss dkk. 2012). Kristal enzim oksidoreduktase human tyrosinase dengan identitas PDB 1BUG pada resolusi 2,70  Å  yang  diperoleh  dari data  base protein (https://www.rscb.org) selanjutnya  disiapkan  dengan  perangkat PyMOL melalui penghapusan molekul air dan  ligan  alami  URS  dan  diunggah kedalam MCULE. Sebelum penambatan, molekul  air  dan  ligan  alami  dihilangkan dari  kristal  1BUG  dan  MCULE menambahkan  muatan  Gasteiger  dan atom-atom hidrogen polar secara otomatis pada  kristal  1BUG  dengan  bantuan AutoDockTools  yang  tertanam  (Morris dkk. 2009). Proses penambatan molekular dilakukan pada koordinat X 23,129 Å, Y 101,558  Å,  Z  2,507  Å  dan  hasil penambatan  dihitung  dengan  AutoDock Vina  dalam  MCULE  dengan  parameter bawaan  yang  menghasilkan  empat pose
terbaik.  Hasil  penambatan  diurutkan berdasarkan energi ikatan minimum pada kristal  1BUG.  Penambatan  molekular dalam  MCULE  dilakukan  dengan
perangkat AutoDock Vina yang tertanam di  dalamnya  untuk  akselerasi  proses penambatan (Trott & Olson 2009).
Tabel 1. Skor Penambatan dan Interaksi Senyawa dalam Minyak Atsiri M. alba dengan 1BUG
Senyawa Skor docking (kkal/mol) Interaksi Ikatan hidrogen Van der Walls Alkil/π-alkil (π- π stacking) Metil 2- metilbutirat -3,7 - Met-258, Gly-259, Asn-260 Arg-245, His-244, Ile-241, Phe-261 β-Pinena -4,2 - Asn-260, Tyr-262, Asn-93, Asp-17, Cys-92, Gln-107 Pro-19, Phe-261 Limonen -4,7 - Tyr-262, Asn-260, Asn-93, Pro-20, Leu-18, Asp-17, Cys-92, Gln-107 Phe-261, Pro-19 1,8-Cineol -4,2 - Cys-92, Asp-17, Tyr-262, Asn-93, Asn-260, Leu-18 Pro-19 Linalool -4,1 Asn-93 Gly-259, Asn-260, Tyr-262, Cys-92, Gln-107 Pro-19 α-Terpineol -4,7 Cys-92 Gln-107, Asp-17, Tyr-262, Leu-18, Asn-93, Asn-260, Asn-254 Pro-19, Phe-261 Geraniol -5,0 Asp-17 Met-258, Gly-259, Asn-260, His-244, Asn-93, Pro-19, Gln-107, Tyr-262 Phe-261, Ile-241, Arg-245 β-feniletilalkohol -4,8 Gly-259 Arg-245, His-240, His-88, Phe-270, Asn-260, Met-258 Ile-241, Ala-264 (Phe-261, His-244) Asam kojat -4,1 Asp-17 Gly-259, Asn-260, Tyr-262, Pro-19, Cys-92, Gln-107 (Phe-261) Hidroquinon -4,6 - Arg-245, Gly-259, Met-258, Asn-260, Ala-264, His-88, Phe-270, His-240, His-274 Ile-241 (Phe-261, His-244)
Penambatan  metil  2-metilbutirat,  β- pinen,  limonen,  1,8-cineol,  linalool,  α- terpineol,  geraniol,  β-fenil  etilalkohol terhadap human  tyrosinase dengan identitas  PDB  1BUG  menghasilkan  skor penambatan  sebagaimana  dapat  dilihat pada  Tabel  1.  Energi  ikatan  yang dilaporkan dalam bentuk skor penambatan menentukan kekuatan interaksi senyawa- senyawa  tersebut  dengan  protein.  Nilai skor  penambatan  yang  semakin  negatif
menyatakan  semakin  kuat  interaksi  yang terjadi  dan  menggambarkan  penambatan yang  lebih  baik  (Dallakyan  &  Olson 2015).  Nilai  skor  penambatan  berturut- turut sebesar -5,0; -4,8; -4,7; -4,7; -4,2; - 4,2; -4,1; -3,7 kkal/mol yang sesuai untuk geraniol,  β-fenil  etilalkohol,  α-terpineol, limonen, 1,8-cineol, β-pinen, linalool, dan metil  2-metilbutirat.  Kontrol  asam  kojat dan  hidroquinon  memberikan  skor penambatan  sebesar  -4,1  kkal/mol  dan  -
4,6 kkal/mol. Geraniol, β-fenil etilalkohol, α-terpineol,  dan  limonen  memiliki  skor penambatan  yang  lebih  baik  dari hidrokuinon, sedangkan skor penambatan keempat  senyawa  tersebut  beserta  1,8-
cineol  dan  β-pinen  lebih  baik  dari  asam kojat. Hasil ini menyatakan bahwa enam senyawa  dalam  minyak  atsiri  bunga M. alba berpotensi  sebagai  inhibitor  enzim tirosinase.
a
b c
Gambar 1. Visualisasi 2D Interaksi 1BUG dengan geraniol ( a ), β-fenil etilalkohol ( b ), dan α-terpineol ( c )
Hasil penambatan selanjutnya divisualisasi  untuk  menentukan  interaksi dan  mode  ikatan  seluruh  senyawa terhadap  makromolekul  1BUG.  Tabel  1 menunjukkan  bahwa  interaksi  delapan senyawa  dalam  minyak  atsiri  bunga M. alba dengan 1BUG terjadi melalui ikatan hidrogen,  interaksi  Van  der  Walls, interaksi  alkil/π-alkil,  dan  π-  π stacking .
Geraniol,  β-fenil  etilalkohol,  dan  α- terpineol  dengan  skor  penambatan  yang lebih  baik  dari  hidroquinon  masing- masing  berinteraksi  dengan  residu  asam aspartat-17,  glisina-259,  dan  sisteina-92 melalui  ikatan  hidrogen  (Gambar  1). Interaksi  Van  der  Walls  terjadi  antara geraniol,  β-fenil  etilalkohol,  α-terpineol, dan  limonen  dengan  residu  metionina- 258, glisina-259, asparagina-260, histidina-244,  asparagina-93,  prolina-19, glutamina-107,  tirosina-262,  arginina- 245, histidina-240, histidina-88, fenilalanina-270, asparagina-260, metionina-258,  glutamina-107,  asam aspartat-17,  tirosina-262,  leusina-18, prolina-20, dan sisteina-92 dalam 1BUG. Interaksi  alkil/π-alkil  antara  geraniol,  β- fenil etilalkohol, α-terpineol, dan limonen melibatkan residu fenilalanina-261, isoleusina-241,  arginina-245,  alanine- 264,  dan  prolina-19  dalam  1BUG. Geraniol dengan skor penambatan terkecil (-5,0  kkal/mol)  dan  kontrol  asam  kojat
memperlihatkan  adanya  interaksi  dengan residu  asam  aspartat-17  melalui  ikatan hidrogen.  Geraniol,  asam  kojat  dan hidroquinon  juga  berinteraksi  dengan residu  fenilalanina-261  dalam  1BUG melalui  interaksi  alkil/π-alkil  dan  π-  π stacking . Lebih lanjut, β-fenil etilalkohol dan  hidroquinon  masing-masing  dengan skor  penambatan  -4,8  kkal/mol  dan  -4,6 kkal/mol  memberikan  interaksi  alkil/π- alkil  dan  π-π stacking dengan  residu isoleusin-241, fenilalanina-261, dan histidina-244. Berdasarkan hal ini, residu asam aspartat-17, fenilalanina-261, isoleusina-241,  dan  histidina-244  diduga berperan penting dalam interaksi senyawa dengan makromolekul 1BUG.

## Prediksi ADMET dan sifat mirip obat
Hasil  prediksi  ADMET  metil  2- metilbutirat, β-pinen, limonen, 1,8-cineol, linalool,  α-terpineol,  geraniol,  β-fenil etilalkohol  dengan  SwissADME  dan admetSAR  dapat  dilihat  pada  Tabel  2. Hasil  prediksi  memperlihatkan  bahwa seluruh  senyawa  berpotensi  sebagai kandidat obat oral. Semua senyawa tidak menunjukkan pelanggaran terhadap aturan  Lipinski  dimana  semua  senyawa memiliki berat molekul (BM) kurang dari 500  Dalton,  donor  ikatan  hidrogen  ( H- bond donor , HBD) kurang dari 5, akseptor ikatan hidrogen ( hydrogen bond acceptor ,
HBA) kurang dari 10, dan nilai koefisien partisi oktanol/air (MLogP) kurang dari 5 (Lipinski  2000).  Selanjutnya,  semua senyawa  juga  tidak  melanggar  aturan Veber karena memiliki ikatan yang dapat diputar  ( rotatable  bonds )  kurang  dari  10 dan area permukaan topologi ( topological surface area , TPSA) kurang dari 140 Å 2 .
Aturan  Lipinski  telah  menjadi  pedoman umum  dalam  studi  penemuan  senyawa obat baru. Lipinski merumuskan
hubungan antara parameter
farmakokinetika  dan  sifat  fisikokimia untuk  suatu  kandidat  obat  oral,  salah satunya  adalah  sifat  mirip  obat.  Lipinski menyatakan  bahwa  obat  oral  yang  baik seharusnya tidak melanggar lebih dari satu kriteria  berikut:  1)  berat  molekul  <  500
Dalton,  2)  koefisien  partisi  oktanol/air logP < 5, 3) donor ikatan hidrogen < 5, 4) akseptor  ikatan  hidrogen  <  10  (Lipinski dkk. 1997).  Suatu  senyawa  akan menunjukkan penyerapan atau permeabilitas yang baik apabila memenuhi  seluruh  kriteria  tersebut  dan maksimal  hanya  melanggar  satu  kriteria. Veber  dan  kawan-kawan  lebih  lanjut mendalami  upaya  peningkatan  prediksi sifat  mirip  obat  dalam  aturan  Lipinski melalui jumlah ikatan yang dapat diputar dan  area  permukaan  polar  (Veber dkk. 2002). Tabel 2 menyatakan bahwa seluruh senyawa  berpotensi  sangat  sebagai  obat oral  karena  tidak  melanggar  aturan Lipinski dan Veber.
Tabel 2. Hasil Prediksi ADMET Senyawa dalam Minyak Atsiri M. alb a
Senyawa BM HBA  HBD  MLogP  DLL  RB  TPSA  DLV  WLOGP  BBB Metil 2- metilbutirat 116,16 2 0 1,27 Ya 3 26,3 Ya 1,21 Ya β-Pinena 136,23 0 0 4,29 Ya 0 0,00 Ya 3,00 Ya Limonen 136,23 0 0 3,27 Ya 1 0,00 Ya 3,31 Ya 1,8-Cineol 154,25 1 0 2,45 Ya 0 9,23 Ya 2,74 Ya Linalool 154,25 1 1 2,59 Ya 4 20,23 Ya 2,67 Ya α-Terpineol 154,25 1 1 2,30 Ya 1 20,23 Ya 2,50 Ya Geraniol 154,25 1 1 2,59 Ya 4 20,23 Ya 2,67 Ya β-feniletilalkohol 122,16 1 1 1,87 Ya 2 37,23 Ya 1,22 Ya
BM = berat molekul, HBA = akseptor ikatan hidrogen, HBD = donor ikatan hidrogen, MLogP = koefisien partisi oktanol/air, DLL = drug likeness Lipinski, RB = ikatan yang dapat diputar, TPSA = topological polar surface area , DLL = drug likeness Veber, WLOGP = lipofilisitas, BBB = blood brain barrier
Tabel  2  juga  menginformasikan bahwa semua senyawa memiliki peluang besar  untuk  masuk  dalam  sistem  syaraf pusat  dan  melintasi  sawar  darah  otak ( blood  brain  barrier ,  BBB).  Hal  ini
karena  seluruh  senyawa  memiliki  nilai TPSA  yang  cukup  (<79  Å 2 )  dan  relatif lipofilik (WLOGP = 0,4-6,0) (Daina dan Zoete  2016).  Parameter  BBB  dapat dipandang  sebagai  penutup  otak  melalui
penghalang  fisik  dan  biokimia  yang mengandung  aktivitas  enzimatik  dan efluks aktif. Akibatnya, BBB berperilaku sebagai penghalang paling penting dalam sistem  syaraf  pusat  dan  sistem  sirkulasi (Daina  dan  Zoete  2016).  Kemampuan melintasi  sawar  darah  otak  mendukung potensi seluruh senyawa sebagai kandidat obat  oral  dan  dalam  aplikasinya  sebagai inhibitor enzim tirosinase.

## KESIMPULAN
Studi in silico penambatan molekular delapan  senyawa  kimia  dalam  minyak atsiri  bunga M.  alba berupa  metil  2- metilbutirat, β-pinen, limonen, 1,8-cineol, linalool, α-terpineol, geraniol, dan β-fenil etilalkohol  telah  dilakukan  pada  protein human  tyrosinase dengan  identitas  PDB 1BUG.  Geraniol,  β-fenil  etilalkohol,  α- terpineol,  dan  limonen  memiliki  skor
penambatan berturut-turut sebesar -5,0; - 4,8;  -4,7;  -4,7  kkal/mol  yang  lebih  baik dari hidrokuinon dengan skor penambatan sebesar -4,6 kkal/mol. Keempat senyawa tersebut  beserta  1,8-cineol  dan  β-pinen memiliki skor penambatan yang lebih baik dari  asam  kojat  (-4,1  kkal/mol).
Visualisasi hasil penambatan menunjukkan  bahwa  delapan  senyawa berinteraksi dengan 1BUG melalui ikatan hidrogen,  interaksi  Van  der  Walls, interaksi  alkil/π-alkil,  dan  π-  π stacking . Prediksi  ADMET  menyatakan  bahwa seluruh  senyawa  berpotensi  sebagai kandidat  obat  oral  karena  memenuhi semua  kriteria  Lipinski  dan  Veber. Minyak  atsiri  dari  bunga M.  alba selanjutnya  dapat  digunakan  sebagai inhibitor  enzim  tirosinase  dan  berpotensi sebagai agen hiperpigmentasi alami.

## DAFTAR RUJUKAN
Zolghadri,  S.,  Bahrami,  A.,  Khan,  M.  T.
H., Munoz-Munoz, J., Garcia-Molina, F., Garcia-Canovas, F., & Saboury, A.
A.  2019,  A  Comprehensive  Review on  tyrosinase  inhibitors.  Journal  of Enzyme  Inhibition  and  Medicinal Chemistry,  vol.  34,  no.  1,  hh:  279- 309.
Qian,  W.,  Liu,  W.,  Zhu,  D.,  Cao,  Y.,
Tang., A., Gong, G., & Su, H. 2020,
Natural  Skin-whitening  Compounds for  the  treatment  of  melanogenesis (Review). Experimental and
Therapeutic  Medicine,  vol.  20,  hh:
173-185.
Uchida,  R.,  Ishikawa,  s.,  &  Tomoda,  H.
2014,  inhibition  of  Tyrosinase Activity  and  Melanine  Pigmentation by2-Hydroxytyrosol. Acta
Pharmaceutica Sinica B, vol 4, no. 2, hh: 141-145.
Himawan, H. C., Ratu, A. P., & Miani, M. 2016,  Uji  Aktivitas  Ekstrak  Etanol
70%  dan  Etil  Asetat  Daun  Sukun
(Artocarpus  altilis  Park.)  Fosberg sebagai  Inhibitor  Tirosinase.  Jurnal Farmamedika, vol. 1, no. 2, hh: 64-70.
Capeti,  F.,  Tacchini,  M.,  Marengo,  A.,
Cagliero.,  Bicchi,  C.,  Rubiolo,  P.,  &
Sgorgini,  B.  2021,  Citral-containing Essential Oils as Potential Tyrosinase Inhibitors: A Bio-guided
Fractionation  Approach.  Plants,  vol.
10, no. 969, hh: 1-14. Zhao,N.,  Su,  X.,  Wang,  Y.,  Chen,  J.,  & Zhuang,  W.  2020,  Traditional Chinese Herbal Medicine for Whitening. Natural Product
Communications, vol. 15, no. 2, hh: 1-
12.
Chiang, H. -M., Chen, H. -C., Lin, T. -J.,
Shih,  I-C.,  &  Wen,  K.  -C.  2012,
Michelia  Alba  Extract  Attenuates UVB-induced  Expression  of  Matrix Metalloproteinased  via  MAP  Kinase Pathway in Human Dermal
Fibroblast.  Food  and  Chemical Toxicology, vol. 50, hh: 4260-4269.
Wang, H. -M., Chen, C. -Y., Chen, C. -Y.,
Ho, M. -L., Chou, Y. -T., Chang, H. - C., Lee, C. -H., Wang, C. -Z., & Chu,
I-M.  2010,  (-)-N-Formylanonaine
from Michelia Alba as A Humantyrosinase Inhbitor and Antioxidant, Bioorganic & Medicinal
Chemistry, vol. 18, hh: 5241-5247.
Ueyama,  Y.,  Hashimoto,  S.,  Nii,  H.,  &
Furukawa,  K.  1992,  The  Chemical Composition  of  the  Flower  Oil  and the  Leaf  Oil  of  Michelia  Alba  D.C. Journal of essential oil Research, vol.
4, no. 1, hh: 15-23.
Kiss, R., Sandor, M., & Szalal, F. A. 2012, http://Mcule.com:  A  Public  Web Service  for  Drug  Discovery.  Journal of Cheminformatics, vol. 4, hh: P17.
Sari,  S.,  Barut,  B.,  Ozel,  A.,  Kuruuzum- Uz,  A.,  &  Sohretoglu,  D.  2019, Tyrosinase and α-Glucosidase Inhibitory  Potential  of  Compounds Isolated  from  Quercus  Coccifera Bark:  In  Vitro  and  In  Silico Perspectives.  Bioorganic  Chemistry, vol. 86, hh: 296-304.
Chen,  W.  -C.,  Tseng,  T.  -S.,  Hsiao,  N.  - W., Lin, Y. -L., Wen, Z. -H., Tsai, C.
-C., Lee, Y. -C., Lin, H. -H., & Tsai,
K.  -C.  2015,  Discovery  of  Highly Potent  Tyrosinase  Inhibitor,  t1,  with
Significant Anti-Melanogenesis Ability  by  Zebrafish  in  Vivo  Assay and Computational Molecular
Modeling.  Scientific  Reports,  vol.  5,
hh: 7995.
Daina,  A.,  Michielin,  O.,  &  Zoete,  V.
2016. SwissADME: A Free Web Tool to  Evaluate  Pharmacokinetics,  Drug- Likeness  and  Medicinal  Chemistry Friendliness  of  Small  Molecules.
Scientific  Reports,  vol.  7,  no.  1,  hh: 42717.
Yang, H., Lou, C., Sun, L., Li, J., Cai, Y.,
Wang, Z., Li, W., Liu, G., & Tang, Y. 2019.  AdmetSAR  2.0:  Web-service for  Prediction  and  Optimization  of Chemical ADMET Properties.
Bioinformatics,  vol.  35,  no.  6,  hh:
1067-1069. Lionta, E., Spyrou, G., Vassilatis, D. K., &  Cournia,  Z.  2014,  Structure-based Virtual Screening for Drug Discovery:  Principles,  Applications and Recent Advances. Current Topics
in  Medicinal  Chemistry,  vol.  14,  no. 16, hh: 1923–1938.
França,  T.  C.  C.,  Guimarães,  A.  P.,
Cortopassi, W. A., Oliveira, A. A., & Ramalho, T. C. 2013, Applications of Docking  and  Molecular  Dynamic Studies on the Search for New Drugs Against  the  Biological  Warfare Agents  Bacillus  anthracis  and Yersinia  pestis.  Current  Computer-
Aided Drug Design, vol. 9, no. 4, hh: 507–517.
Maia, E. H. B., Assis, L. C., de Oliveira,
T. A., da Silva, A. M., & Taranto, A.
G.  2020,  Structure-Based  Virtual Screening: From Classical to
Artificial  Intelligence.  Frontiers  in Chemistry, vol. 8, hh: 343.
March-Vila,  E.,  Pinzi,  L.,  Sturm,  N.,
Tinivella, A., Engkvist, O., Chen, H.,
&  Rastelli,  G.  2017,  On  the Integration  of  In  Silico  Drug  Design Methods  for  Drug  Repurposing.
Frontiers in Pharmacology, vol. 8, hh:
1–7.
Morris, G. M., Huey, R., Lindstrom, W.,
Sanner,  M.  F.,  Belew,  R.  K., Goodsell, D. S., & Olson, A. J. 2009, AutoDock4  and  AutoDockTools4: Automated  docking  with  selective receptor  flexibility.  Journal  of Computational  Chemistry,  vol.  30, no. 16, hh: 2785–2791.
Trott, O. & Olson, A. J. 2009, AutoDock Vina:  Improving  the  Speed  and
Accuracy  of  Docking  With  A  New Scoring Function, Efficient Optimization,  and  Multithreading.
Journal of Computational Chemistry, vol. 31, no. 2, hh: 455–461.
Dallakyan, S. & Olson, A. J. 2015, Small- Molecule  Library  Screening  by Docking  with  PyRx  in Chemical Biology:  Methods  in  Molecular Biology , vol. 1263, J. E. Hempel, C. H.  Williams,  and  C.  C.  Hong,  Eds.
New York, NY: Springer New York, hh: 243.
Lipinski, C. A. 2000, Drug-like Properties and the Causes of Poor Solubility and
Poor Permeability. Journal of Pharmacological  and  Toxicological Methods, vol. 44, no. 1, hh: 235–249.
Lipinski, C. A., Lombardo, F., Dominy, B.
W.,  &  Feeney,  P.  J.  1997, Experimental  and  computational approaches to estimate solubility and
permeability  in  drug  discovery  and development  settings.  Advanced Drug  Delivery  Reviews,  vol.  23 (SUPPL.), hh: 3–25.
Veber, D. F., Johnson, S. R., Cheng, H.- Y.,  Smith,  B.  R.,  Ward,  K.  W.,  & Kopple,  K.  D.  2002,  Molecular Properties  That  Influence  the  Oral Bioavailability  of  Drug  Candidates. Journal of Medicinal Chemistry, vol. 45, no. 12, hh: 2615–2623.