................................. ~ .............. ..
Perbandingan Aktivitas Antibakteri 4-Metilpiperazin-N-Karbonil Ampisilin dengan Ampisilin Terhadap Micrococcus luteus dan Escherichia coli
Andreyanus Eko Pudjianto(a)*, Martha Ervina(a), Catherine Caroline(a),
Bambang Soekardjo(a), Kuncoro Foe(a)
'·'Faculty of Pharmacy, Widya  Mandala Catholic University Surabaya, Indonesia
Piperasilin  memiliki  aktivitas  antimikroba  tapi  tidak  diabsorpsi  pada  saluran  cerna.  Untuk  itu,  dilakukan modifikasi  struktur untuk  meningkatkan  absorpsi  piperasilin  tapi  tetap  menjaga  aktivitas antimikroba  yang dimiliki.  Senyawa  4-metilpiperazin-N-karbonil  ampisilin  merupakan  produk  reaksi  antara  ampisilin  dengan 4-metilpiperazin  dengan  metode  Schotten  Baumann.  Penelitlan  ini  bertujuan  untuk  membandingkan aktivitas antibakteri 4-metilpiperazin-N-karbonil ampisilin dan amplsllln. Ujl  perbandingan aktivitas antibakteri dilakukan  dengan  metode  difusi  cakram  kertas  Kirby-Bauer  pada  media  agar  Mueller-Hinton  yang  telah diinokulasi  bakteri  Micrococcus  luteus  dan  Escherichia  coli.  Berdasarkan  hasil  pengamatan  pada  orientasi, terhadap  Micrococcus  luteus  digunakankonsentrasi  0,5  ppm  baik  ampisilin  maupun  4-metilpiperazin-N- karbonil  ampisilin  dan  konsentrasi  500 ppm  terhadap  Escherichia  coli untuk  memperoleh  Daerah  Hambat Pertumbuhan  (DHP)  yang  teramati.  Hasil  percobaan  menunjukkan  bahwa  senyawa  4-metilpiperazin-N- karbonil  ampisilln  memberikan  aktivitas  antibakteri  yang  lebih  keeil  dibanding!<an  dengan  ampisilin, ditunJukkan  dengan  DHP  yang  lebih  kecil  dibanding  ampisilin  baik  pada  Micrococcus  luteus  maupun Escherichia coli.
Kata  kunci: 4-metilpiperazin-N-karbonil ampisilin, ampisilin, difusi cakram kertas Kirby-Bauer, Daerah Hambat Pertumbuhan. .
Comparative Antibacterial Activity of 4-Methylpiperazin-N-Carbonyl Ampicillin and Ampicillin against Micrococcus luteus and Escherichia coli
Piperacillin  has  antimicrobial  action  but it is  not absorbed from  gastrointestinal  tract  Therefore,  it needs structure modification to  increase its absorption while keeping its antimicrobial action. The 4-methylpiperazin~ N-carbonyl  ampicillin  was  the  product  of  reaction  between  ampicillin  and  4-methylpiperazin-N-carbonyl chloride using Schotten Baumann method. The aim of this research  was  to compare the antibacterial activity between 4-methylpiperazin-N-carbonyl ampicillin and ampicillin.  The  comparison  test of antibacterial activity was  done with  Kirby-Bauer disk diffusion susceptibility method on Mueller-Hinton  agar which had been inoc- ulated  with  Micrococcus  luteus  and  Escherichia  coli.  Based on orientation  studies,  concentration of 4- methylpiperazin-N-carbonyl ampicillin and ampiCillin were 0.5 ppm against Micrococcus luteus and 500 ppm against Escherichia collin order to get visible zone of inhibition.  The results showed that 4-methylpiperazin-N- carbonyl ampicillin had lower antibacterial activity than ampicillin which  was  showed by its zone of inhibition which was  lower compared to ampicillin in inoculated agar media of Micrococcus luteus and Escherichia coli.
Keywords:  4-methylpiperazin-N-carbony/  ampicillin,  ampiCillin,  Kirby-Bauer  disk  diffusion  method,  zone of inhibition.
*Corresponding  author:  Faculty  of  Pharmacy,  Widya  Mandala  Catholic  University  Surabaya, JI. Dinoyo  42-44,
Surabaya, Indonesia, Phone  (+62)81805935598, E-mail: andreyanus@gmail.com
i
GAMBAR  1. Struktur  4-metilpiperazin-N-karbonil  ampisilin (atas)  dan piperasilin (bawah).
suspensi  bakteri.  Sebanyak  3-5  koloni  bakteri diambil dengan  menggunakan kawat ose kemudi- an dieelupkan ke dalam media  MHB 3  mI.  Media MHB  diinkubasi  35±2oC  selama  ±1  jam  hingga mencapai  kekeruhan  larutan 112 Me  Farland I.
Setelah  diinkubasi,  suspensi  bakteri  disetarakan dengan  menggunakan  larutan  stan dar 112  Me Farland I dengan eara visual.

## Tahapan Penelitian
Metode  penelitian  ini  menggunakan  metode eksperimental, senyawa hasil sintesis 4- metilpiperazin-N-karbonil  ampisilin  diuji  untuk menentukan  aktivitas  antibakteri  dengan  metode difusi  eakram  kertas  Kirby  Bauer  terhadap  dua bakteri  yaitu MiC1·ococcus  luteus  dan  Escherichia coli  dibandingkan  dengan  ampisilin  anhidrat.
Aktivitas  antibakteri  tiap  zat  diamati  dari besamya  Daerah  Hambat  Pertumbuhan  (DRP) yang teIjadi setelah 18 jam waktu inkubasi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  pemeriksaan  bakteri  menunjukkan koloni-koloni  bakteri  merupakan  kultur  murni yang  dapat  digunakan  untuk  membandingkan aktivitas  antibakteri  senyawa  4-metilpiperazin-N- karbonil  ampisilin  dengan  ampisilin  anhidrat. Konsentrasi standar yang digunakan pada Escherichia coli  yang  direkomendasikan Clinirol  cmd La1xJratary
Standards  Institute  (CLSI)  sebesar  10  Ilg  per eakram (Wilder et al., 2007)  Berdasarkan hasil uji orientasi,  konsentrasi  yang  digunakan  pada Micrococcus  luteus  sebesar  0,5  ppm  untuk memperoleh  DHP  yang  teramati pada  media MHA.
Hasil pengamatan replikasi  en am kali pada ampisilin anhidrat memberikan  DHP terhadap Micrococcus luteus sebesar 24,49± 0,98 mm pada konsentrasi  0,50  ppm  dan  terhadap Escherichia coli  sebesar  19,22±0,51  mm  pada  konsentrasi 525,90  ppm.  Sedangkan  pada  senyawa  hasil sintesis  4 -metilpiperazin -N-karbonil  ampisilin tidak memberikan  DHP terukur pada konsentrasi yang  sarna  dengan  ampisilin  anhidrat.  Hasil pengamatan DHP dapat dilihat pada Gambar 2.
Pada  saat  konsentrasi  4-metilpiperazin-N- karbonil  ampisilin  ditingkatkan  menjadi  599,70; 699,65;  899,55;  hingga  999,50  ppm  memberikan DHP sebesar 8,65; 10,30; 11,45;  12,35  mm secara berturut-turut  pada  pengamatan  DHP  terhadap Escherichia  coli.  Pada  Micrococcus  luteus,  dengan konsentrasi  19,99;  49,98;  99,95  ppm  berturut- turut  menghasilkan  DHP  sebesar  24,60;  27,58; 36,46 mm.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  pada  4- metilpiperazin-N-karbonil  ampisilin  DHP  yang teIjadi  pada  saat  konsentrasi  ditingkatkan menunjukan  eincin  p-Iaktam  pad a  senyawa 4- metilpiperazin-N-karbonil  ampisilin  masih  aktif. Namun  aktivitas  antibakteri  4-metilpiperazin-N- karbonil  ampisilin  lebih  rendah  dari  ampisilin anhidrat  sehingga  potensi  antibakteri  senyawa 4- metilpiperazin-N-karbonil  ampisilin  tidak  Iebih besar  dari  ampisilin  anhidrat.  Hasil  penentuan kadar  senyawa  aktif  4-metilpiperazin-N-karbonil ampisilin  "diperoleh  86,76%±4,97%  dan  ampisilin anhidrat 95,63%±4A3% dengan  menggunakan metode iodometri.
Jika dilihat dari pengamatan 4- metiIpiperazin -N-karbonil  ampisilin  dibandingkan piperasilin terdapat penghilangan gugus hidrofilik seperti  dua gugus  atom  oksigen  dan gugus  metil, kemungkinan senyawa 4-metiIpiperazin-N-karOOnil ampisilin  tidak  memiliki  DHP  pada  bakteri Micrococcus  luteus  dan  Escherichia  coli  karena senyawa  tersebut  diduga  tergolong  senyawa pengikat  p-Iaktamase  seperti  tazobaktam,  yaitu senyawa  yang  memiliki  cinein  p-Iaktam namun tidak aktif sebagai antibiotika. Untuk
Perbanding a n Akt i vitas Antibakteri  U1etilpipNazin.,v-Karbonil Ampisilin dengan Ampisilin T erhadap Micrococcus luteus dan Escherichia coli
_ _ -
_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 1
GAM BAR  2. HasH  pengamatan  DHP dengan ampisi l in  a n hidrat (A) dan  4-metil-piperazin-N-karbon i l a mp isil in (8) dengan konsentras i masing-masing 0,5  ppm pada Micrococcus lufeus ( I ) dan 5 00  ppm  pada Esch e ri ch ia co/i(II) .
men y im p llik a n b a h wa Se n ) ' a'\a t e r seb u t m e rll pak a n se n ya,, ' a  pe n g ik a t p- I a k ta m ase  pe rlll dil a kll k a n llji pe ndllklln g l a inn )'a se p e rti p e mb a n din g an de n g an sta n da r pe n g h a mbat enzi m p - I a kt a m ase  ya n g b e illm dil a k llka n  dalam p e n e l iti a n i n i,
KESIMPUL AN
Se n ya w a  4 -m et ilp ipe lli zi n- N-kmoo nil a m p i s ilin m e miliki akti v i tas  a ntib a kt e ri  p ad a M i c r ococC /l s
OAF TAR PUSTAK A
OJ mbr igdcso(t,  :l007, C h c mBi o l)r ' aw U l tr'H , 11.0 cd., www .c illl1bl · i dgcso ft .co m .
i s tiunt oro V II  d n n Gnn V II S, 1 999, P c nisilin , S c ful o sp o l'in , dun A ntibi otik  Bctalaktam I. .. ainnyu , dalum: SG Guni!-o'\':l l ,-l (cd.),  Fu r mnkologi dan Tcr~lpi, cd.  4, .J~lkurtu, him . 622, 027, 630.
)' I nrt in do l c, 200 9, Th e  Co mpl ete Dr ' u g R c f c l "C n cc , in: SC S w ee tma n (cd.), 36 th cd, C h icago , PhurmClcculical ProhS.
//lt e /l s d a n Esc h e ri c h ia co li dan akt i vita s a ntib a kt e ri se n yaw a  4 - m e tilpip e r az in - N- karbon il ampi s ilin t i dal; l e bih b esa r dad ampi s ilin.

## UCAPAN TERIMA KASIH
P e n e li t i  m e n g ll c ap ka n  t e rim a ka s ih k e pada LPPM U ni ve r s ita s Kat o lik W id y a  Manda l a ya n g t e l a h m e nd a n a i p e n e litian ini  dalam p r og r a m  LPPM  R ese ar c h Proj e ct .
)'Io r ri!>on RT n n d  Boyd  RN , 1987, O "g.mic  C h e mistl'y, Boston, In c. A ll y n ::r n d  Buco n . Wik l e r ~ I A, ('ocke r ' ill fR, Cra i g \VA , D udl ey ~ I N , H ec ht GM, lIindlcr .J I ~ I. ow DE,  Sheehan D.J, Tc n on: r F C, Turnidg c J D, Wienslcin ~IP, Zimmer  BL, ferraro i\ I J  :.md Swe n so n  J i\ I, 200 7, P c r ' f O I ' man cc  S tandul'(l s f O I' Antim i c r' o hial Su sce ptihilit y T e sting j S c v e nt ee nth  Informational Suppl e m e nt , in: C linical  and  I..uborator\' Sta n da rd s I nstit u te (cd.), Pen n sy l \'ania, C I .5I, 32. .