## PENGARUH EKSTRAK DAUN JERUJU (Acanthus ilicifolius) TERHADAP PENURUNAN KADAR LDL DARAH PADA TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) JANTAN GALUR WISTAR DIABETES YANG DIINDUKSI ALOKSAN
The Effectivity of Jeruju Leaves Extract (Acanthus ilicifolius) on Decreasing LDL-Cholesterol of Alloxan-Induced Diabetic Male Wistar Rats (Rattus norvegicus)
Anggita Saraswati, Irmawati M. Dikman, Retno Budiarti
Fakultas Kedokteran, Universitas Hang Tuah Surabaya
Email: anggitasaraswati7@gmail.com

## ABSTRACT
Background : DM is a chronic disease that has long-term complications. Alloxan is a fast  way  to  produce  experimental  diabetic  (hyperglycemic)  in  animal  experiments related to elevated LDL. Jeruju (Acanthus ilicifolius) is a low-growth herbaceous plant that  easily  grows  containing  secondary  metabolites  such  as  Alkaloids,  Saponins, Flavonoids, Terpenoids, and Phenols.
Objective  :  To  determine  the  effect  of  jeruju  leaf  extract  on  the  decrease  in  blood levels of LDL of male Wistar rat (Rattus norvegicus) induced Alloxan.
Methods  :  This  research  is  an  experimental  laboratory  type  with  Post  Test  Only Control Group Design. The sample using 24 rats, which were divided into 3 groups: negative  control  group  (K-)  were  given  standard  feed;  positive  control  group  (K  +) induced  alloxan  120  mg/kgBW  on  1 st day;  the  treatment  group  (P)  induced  alloxan 120 mg/kgBW on 1 st day and was given jeruju leaf extract 67.2 mg/kgBW on 5 th -14 th day. The 15 th day a blood sample was taken to determine LDL levels.
Result  :  The  results  of  One-Way  ANOVA  test  showed  an  insignificant  mean difference (p = 0.270) in LDL level of K- ( = 9.75 mg/dl) and the K+ ( = 11.38 mg/dl ). Insignificant mean difference (p = 0.270) in P ( = 9 mg/dl) with blood LDL levels in the K+ ( = 11.38 mg/dl) and the K- ( = 9, 75 mg/dl).
Conclusion : Giving  alloxan  can  increase  blood  levels  of  LDL  and administration  of  jeruju  leaf  extract  can  reduce  blood  levels  of  LDL  in  experimental animals but not statistically significant.
Keywords: Alloxan, LDL, Acanthus ilicifolius.

## ABSTRAK
Latar  Belakang :  DM  merupakan  penyakit  kronis  yang  memiliki  komplikasi  jangka panjang.  Aloksan  merupakan  cara  cepat  untuk  menghasilkan  kondisi  diabetik eksperimental  (hiperglikemik)  pada  binatang  percobaan  yang  terkait  peningkatan LDL.  Tanaman  jeruju  ( Acanthus  ilicifolius )  merupakan  tanaman  herba  rendah  yang mudah tumbuh mengandung senyawa-senyawa metabolit sekunder seperti Alkaloid, Saponin, Flavonoid, Terpenoid, dan Fenol.
Tujuan : Untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun jeruju terhadap penurunan kadar LDL darah tikus putih ( Rattus norvegicus ) jantan galur Wistar yang diinduksi aloksan. Metode :  Penelitian  ini  termasuk  jenis  eksperimental  laboratoris  dengan  rancangan Post  Test  Only  Control  Group  Design .  Sampel  sebanyak  24 ekor tikus,  yang  dibagi menjadi  3  kelompok  :  kelompok  kontrol negatif  (K-)  diberi  pakan  standar;  kelompok kontrol positif (K+) diinduksi aloksan 120mg/kgBB hari ke-1; kelompok perlakuan (P) diinduksi aloksan 120 mg/kgBB hari ke-1 dan ekstrak daun jeruju 67,2 mg/kgBB hari ke-5-14.  Hari  ke-15  dilakukan  pengambilan  sampel  darah  untuk  penentuan  kadar LDL darah.
Hasil :  Hasil  uji  One-Way  ANOVA,  menunjukkan  perbedaan  rerata  yang  tidak signifikan (p = 0,270) pada kadar LDL darah kelompok kontrol negatif ( = 9,75 mg/dl) dengan  kelompok  kontrol  positif  ( =  11,38  mg/dl).  Perbedaan  rerata  yang  tidak signifikan (p = 0,270) pada kelompok perlakuan ( = 9 mg/dl) dengan kadar LDL darah kelompok  kontrol  positif  ( =  11,38  mg/dl)  dan  kelompok  kontrol  negatif  ( =  9,75 mg/dl).
Kesimpulan : Pemberian aloksan dapat meningkatkan kadar LDL darah hewan coba dan pemberian ekstrak daun jeruju dapat menurunkan kadar LDL darah hewan coba namun tidak signifikan secara statistik.
Kata kunci : DM, Aloksan, LDL, Acanthus ilicifolius

## PENDAHULUAN
Diabetes  adalah  penyakit  kronis  yang  memerlukan  perawatan  medis  dan edukasi  manajemen  diri  pasien  yang  berkelanjutan,  dukungan  untuk  mencegah komplikasi  akut  serta  untuk  mengurangi  risiko  komplikasi  jangka  panjang  (ADA,
2015).  Jumlah  penderita  diabetes  di  Indonesia  pada  tahun  2017  mencapai  sekitar
10,3  juta  yang  mana  merupakan  peringkat  ke-6  di  dunia  dengan  rentang  usia penderita diabetes sekitar 20-79 tahun. Di kawasan Pasifik Barat, Indonesia berada pada  urutan  ke-2  dengan  jumlah  penderita  diabetes  berkisar  10,6  juta  orang  pada rentang usia 18-99 tahun (IDF, 2017).
DM  merupakan  suatu  kelompok  penyakit  metabolik  dengan  karakteristik hiperglikemia yang  terjadi  karena  kelainan  sekresi  insulin,  kerja  insulin  atau
kedua-duanya  (PERKENI,  2015).  Insulin  adalah  suatu  polipeptida  yang mengandung dua rantai asam amino yang dihubungkan oleh dua jembatan disulfide.
DM  yang  tidak  terkontrol  dapat  meningkatkan  risiko  terjadinya  komplikasi  vascular.
Pada komplikasi makrovaskular berupa penyakit jantung  coroner (PJK), stroke, dan penyakit  pembuluh  darah  perifer.  Banyak  hal  yang  dapat  berperan  dalam  kejadian PJK, salah satunya adalah dislipidemia (Hanum, 2013).
Dislipidemia  adalah  kelainan  metabolisme  lipid  yang  ditandai  dengan peningkatan atau penurunan fraksi lipid dalam plasma. Terjadinya hiperkolesterolemia  pada  DM  diakibatkan  oleh  overproduksi  VLDL  yang  dapat meningkatkan produksi IDL dan LDL, dan berkurangnya afinitas reseptor LDL. Hal ini menyebabkan  penurunan clearance LDL  dan  VLDL remnant ,  dan  menyebabkan peningkatan  konsentrasi  LDL  (Hanum,  2013).  Hiperlipidemia  merupakan  suatu keadaaan  terjadinya  peningkatan  kolesterol  dan  trigliserida  diatas  batas  normal.
Peningkatan  kolesterol  serum  yang  terjadi,  terutama  mencerminkan  peningkatan kolesterol Low Density Lipoprotein (LDL) (Susiwati, et al. , 2018).
Aloksan merupakan bahan kimia yang digunakan untuk menginduksi diabetes pada  binatang  percobaan.  Pemberian  aloksan  adalah  cara  yang  cepat  untuk menghasilkan  kondisi  diabetik  eksperimental  (hiperglikemik)  pada  binatang percobaan.  Aloksan  dapat  menyebabkan  Diabetes  Melitus  tergantung  insulin  pada binatang  tersebut  (aloksan  diabetes)  dengan  karakteristik  mirip  dengan  Diabetes
Melitus  tipe  1  pada  manusia.Aloksan  dapat  diberikan  secara  intravena, intraperitoneal,  atau  subkutan  pada  binatang  percobaan.  Aloksan  bersifat  toksik selektif  terhadap  sel  beta  pankreas  yang  memproduksi  insulin  karena terakumulasinya  aloksan  secara  khusus  melalui  transporter  glukosa  yaitu  GLUT2 (Yuriska F., 2009).
Aksi  toksik  aloksan  pada  sel  beta  diinisiasi  oleh  radikal  bebas  yang  dibentuk oleh reaksi redoks. Aloksan dan produk reduksinya, asam dialurik, membentuk siklus redoks dengan formasi  radikal  superoksida.  Aksi  radikal bebas dengan  rangsangan
tinggi meningkatkan konsentrasi kalsium sitosol yg menyebabkan destruksi cepat sel beta  pankreas.  Karena  rusaknya  sel  beta  pankreas  maka  insulin  tidak  terbentuk sehingga kadar glukosa darah meningkat (Yuriska F., 2009). Kurangnya insulin pada diabetes  juga  diketahui  berkaitan  dengan  peningkatan  sintesis  kolesterol  yang mungkin  disebabkan  oleh  meningkatnya  aktivitas  HMG-KoA  reduktase  serta produksi  dan  sekresi  partikel  VLDL,  yang  pada  gilirannya  menyebabkan  kadar trigliserida plasma meningkat (Winarsi, et al. , 2013). Menurut Harrison (2018) bahwa peningkatan produksi glukosa dan trigliserida dan sekresi very low-density lipoprotein
(VLDL)  terkait  dengan  penurunan  kolesterol high-density  lipoprotein (HDL)  dan peningkatan low-density lipoprotein (LDL).
Jeruju  ( Acanthus  ilicifolius )  merupakan  tanaman  herba  rendah,  terjurai dipermukaan tanah, kuat, agak berkayu, ketinggiannya bisa mencapai 2 meter (Noor et al. , 2012). Tumbuhan A. ilicifolius dapat sebagai tumbuhan hias karena keindahan bunganya, juga diketahui sebagai tumbuhan obat. (Irawanto, et al. , 2015). Tanaman jeruju  ( Acanthus  ilicifolius )  mengandung  senyawa-senyawa  metabolit  sekunder seperti  Alkaloid,  Saponin,  Flavonoid,  Terpenoid,  dan  Fenol  (Ernianingsih, et  al. ,
2014).  Menurut  Nurfitri, et  al. (2018)  dalam  penelitiannya  menunjukkan  bahwa ekstrak  metanol  daun  dan  buah  jeruju,  serta  taurin  menurunkan  kadar  kolesterol secara  signifikan  pada  mencit  jantan  yang  diinduksi  aloksan.  Sedangkan  menurut Anggraeni (2017) dalam penelitiannya menunjukkan bahwa flavonoid pada tanaman jati  belanda  berpotensi  sebagai  penghambat  biosintesis  kolesterol  berdasarkan mekanisme  penghambatan  aktivitas  HMG-KoA  reduktase  secara  in  vitro  dimana akan  mempengaruhi  penurunan  kadar  LDL  dalam  darah.  Oleh  karena  itu,  peneliti akan melakukan penelitian dengan judul “Pengaruh Ekstrak Daun Jeruju ( Acanthus
ilicifolius )  terhadap  Penurunan  Kadar  LDL  Darah  pada  Tikus  Putih  ( Rattus norvegicus ) Jantan Galur Wistar yang Diinduksi Aloksan”.

## TUJUAN PENELITIAN

## Tujuan umum penelitian
Untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun jeruju ( Acanthus ilicifolius ) terhadap profil lemak  darah  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan  galur  Wistar  yang  diinduksi aloksan.

## METODE PENELITIAN

## Desain Pehelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  laboratorium  dengan menggunakan  metode post  test  only  control  group  design .  Dalam  penelitian  ini digunakan 3 kelompok tikus :
Kelompok 1  :  Kelompok  kontrol  negatif,  yaitu  kelompok  tikus  yang  diberikan  diet standar
Kelompok 2  : Kelompok kontrol positif, yaitu kelompok tikus yang mendapatkan diet
standar  dan induksi aloksan
Kelompok 3  :  Kelompok  perlakuan,  yaitu  kelompok  tikus  yang  mendapatkan  diet standar induksi aloksan dan ekstrak daun jeruju

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas
Hang Tuah Surabaya dalam waktu kurang lebih bulan April 2019 hingga November 2019.

## Persiapan Hewan Coba
Seluruh  hewan  coba,  yaitu  tlkus  putih  jantan  galur  Wistar  diadakan  penyesuaian terhadap  lingkungannya  selama  7  hari  dan  dijaga  kondisinya.  Tikus  ditempatkan pada bak plastik dengan ukuran 40 x 30 cm yang diberi sekam, masing-masing bak berisi 2 sampai 4 ekor tikus. Kandang ditempatkan pada ruangan yang cukup udara dan  cahaya  agar  ticak  lembab,  jauh  dari  kebisingan,  dan  fidak  terpapar  matahari secara langsung

## Pembuatan Ekstrak Daun Jeruju
Pembuatan  ekstrak  daun  jeruju  ( Acanthus  ilicifolius) dilakukan  di  Laboratorium
Biokimia  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Hang  Tuah  Surabaya  dengan  metode pembuatan  ekstrak  menurut  Handayani  (2018)  dan  Nurfitri et  al. (2018)  sebagai berikut :
1. Daun jeruju diambil sekitar 5 kg dan dibersihkan dengan air bersih
2. Daun  jeruju  dipotong  menjadi  ukuran  kecil-kecil,  kemudian  dikeringkan
dengan cara  diangin-anginkan  tanpa  sinar  matahari,  kemudian  diserbukkan dan siap untuk diekstraksi
3. Simplisia  daun  daruju  ( Acanthus  ilicifolius )  ditimbang  dan  dimasukkan kedalam wadah maserasi, kemudian ditambahkan pelarut dengan
perbandingan 1:10
4. Prosedur  ekstraksi  dilakukan  dengan  merendam  sampel  dengan  n-Heksan,  etil asetat dan etanol secara berurutan
5. Dilakukan  maserasi  selama  3  x  24  jam,  dimana  hasil  maserasi  kemudian disaring  dengan kertas saring sehingga dihasilkan ekstrak cair dan residu
6. Proses  maserasi  dilakukan  2  kali,  kemudian  ekstrak  cair  yang  diperoleh kemudian dipekatkan  dengan  alat  Rotary  Vacum  Evaporator  pada  suhu
50 0 C hingga diperoleh ekstrak kental n-Heksan, etil asetat dan etanol
Untuk  dosis  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  ekstrak  daun  jeruju
67,2  mg/KgBB  yang  dilarutkan  dengan  menggunakan  CMC-Na  1%  kemudian diberikan secara sonde (Nurfitri et al. ,2018).

## Pembuatan Aloksan
Dosis aloksan yang akan diberikan pada hewan coba dalam penelitian ini yaitu tikus  putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan  galur  Wistar.  Hewan  tersebut  dipuasakan
semalam,  kemudian  diinduksi  dengan  aloksan  monohidrat  dengan  dosis  120-125 mg/kgBB  yang  dilarutkan  ke  dalam  larutan  fisiologis  yaitu  NaCl  0,9%  kemudian diberikan secara intraperitoneal (Winarsi et al. , 2013).

## Tahap perlakuan
Setelah  melalui  masa  adaptasi  selama  seminggu,  semua  tikus  putih  jantan galur  Wistar  dibagi  secara  acak  membentuk  3  kelompok  yaitu,  kelompok  kontrol negatif,  kelompok  kontrol  positif  dan  kelompok  perlakuan.  Setelah  itu  dilakukan penimbangan dan pencatatan berat badan semua tikus di seluruh kelompok.
1. Kelompok kontrol negatif. Mulai hari pertama diberi diet standar.
2. Kelompok  kontrol  positif.  Tikus  mendapatkan  diet  standar  dan  mendapatkan injeksi  aloksan  monohidrat  120mg/KgBB  pada  hari  ke  1  tanpa  ekstrak  daun jeruju 67,2 mg/KgBB.
3. Kelompok  perlakuan.  Tikus  mendapatkan  diet  standar  dan  mendapatkan injeksi  aloksan  monohidrat  120mg/KgBB  pada  hari  ke  1  dan  mulai  hari  ke  5 diberikan  ekstrak  daun  jeruju  67,2  mg/KgBB  dengan  volume  pemberian  2 ml/148 grBB dengan cara disonde peroral sehari sampai hari ke-14.
Selama  perawatan  tikus  bahan  yang  digunakan  ialah  :  pakan  tikus  berupa pellet yang berasal dari pellet unggas dan diberikan secar ad libitum , air minum, dan sekam  padi  sebagai  alas.  Pada  hari  ke-15,  pemeriksaan  kadar  LDL  darah  pada semua  kelompok  tersebut  setelah  tikus  dipuasakan  selama  ±  6-8  jam  (Nurfitri et al. ,2018).

## Pengambilan Sampel Darah
Pengambilan  sampel  darah  tikus  dengan  metode cardiac  puncture atau pengambilan  darah  melalui  jantung.  Awalnya  tikus  dipuasakan  selama  12  jam  dan hanya diberi minum, kemudian cara anastesi tikus adalah sebagai berikut :
1. Tikus  yang  akan  diambil  darahnya  diinjeksi  dengan  ketamin  HCL  0,1/100 grBB tikus secara intra muskuler
2. Tikus ditunggu sampai kehillangan kesadaran
Langkah  selanjutnya  yaitu  cara  pengambilan  darah  tikus  yang  digunakan sebagai sampel penelitian ini adalah sebagai berikut :

## a.i.1. Dilakukan pembedahan pada bagian thorax tikus untuk mencari jantung tikus dengan menggunakan scalpel atau gunting bedah
a.i.2. Darah  tikus  diambil  secara  maksimal  dengan  menggunakan  spuit  3cc  yang ditusukkan ke jantung tikus secara tegak lurus lalu tarik piston secara hati hati
a.i.3. Darah  yang  telah  diambil  dimasukkan  kedalam  tabung  yang  tanpa antikoagulan
a.i.4. Serum mulai terpisahkan setelah sekitar 1 jam dalam suhu ruangan
a.i.5. Untuk  mendapatkan  serum,  tabung  kemudian  disentrifugasi  dengan  serum separator 10 menit pada 1200g (3450rpm)
a.i.6. Supernatant  serum (serum  yang  berada  di  permukaan)  kemudlan  dlambil dengan menggunakan pipet, dan diletakkan di tabung lainnya
a.i.7. Kemudian dilakukan sentrifugasi selama 12 menit pada 1200g
a.i.8. Supernatan  dari  hasil  sentrifugasi  kedua  diambil  dengan  menggunakan  pipet dan dilakukan pemeriksaan LDL darah.

## Cara pemeriksaan kadar LDL darah
Perhitungan  kadar  LDL  darah  tikus  dilakukan  dengan  pemeriksaan  kolesterol- LDL  direct  melalui  pemeriksaan  serum  darah  tikus  yang  diambil  secara  intrakardial pada Laboratorium Biokimia Universitas Hang Tuah Surabaya dengan menggunakan reagen  cobas  Integra  LDL  cholesterol  Plus  generation  (LDL-c)  merek  Noche  yang berisi  sistem  reagen  diagnostik  invitro  yang  dirancang  gunakan  pada  sistem  Cobas (Cobas Integra 400 Plus).
Intensitas  warna  biru  yang  terbentuk  dari  pewarna  quinoneimine  berbanding lurus  dengan  konsentrasi  kolesterol-LDL.  Hal  ini  ditentukan  dengan  mengukur peningkatan absorbansi secara photometrik pada panjang gelombang 583 nm.

## Cara Analisis Data
Data yang diperoleh dalam penelitian ini diolah dengan melakukan perhitungan rerata  (mean)  dan  standar deviasi  variabel  kadar LDL  darah.  Selanjutnya  dilakukan uji  normalitas  menggunakan  uji  Shapiro-Wilk.  Bila  data  berdistribusi  normal,  maka dapat  dilanjutkan  dengan  uji  homogenitas.  Kemudian  data  yang  diperoleh  telah berdistribusi normal dan homogen selanjutnya dilakukan uji One-way Anova.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1 Nilai  rerata  dan  standar  deviasi  hasil  pemeriksaaan  kadar  LDL  darah kelompok hewan coba yang diberi pakan standar, kelompok hewan coba yang diinduksi aloksan, kelompok hewan coba yang diinduksi  aloksan dan diberi ekstrak daun jeruju ( Acanthus ilicifolius ) Kelompok Rerata (mg/dl) Standar Deviasi Kontrol Negatif 9,75 2,375 Kontrol Positif 11,38 2,669 Perlakuan 9,00 3,546 Keterangan :
1. Kelompok kontrol negatif : hewan coba diberi pakan standar
2. Kelompok kontrol positif : hewan coba diinduksi aloksan
3. Kelompok perlakuan : hewan coba diinduksi aloksan dan diberi ekstrak daun jeruju ( Acanthus ilicifolius )
Gambar 1 Diagram  batang  rerata  kadar  LDL  darah  kelompok  hewan  coba  yang diberi  pakan  standar,  kelompok  hewan  coba  yang  diinduksi  aloksan, kelompok  hewan  coba  yang  diinduksi  aloksan  dan  diberi  ekstrak  daun jeruju ( Acanthus ilicifolius )
Berdasarkan Tabel 1 dan Gambar 1, rerata kadar LDL darah kelompok kontrol negatif  9,75  mg/dl,  kelompok  kontrol  positif  11,38  mg/dl,  kelompok  perlakuan  9,00 mg/dl. Selanjutnya akan dilakukan uji normalitas pada data.
Tabel 2 Hasil  uji  normalitas  kadar  LDL  darah  kelompok  hewan  coba  yang  diberi pakan  standar,  kelompok  hewan  coba  yang  diinduksi  aloksan,  kelompok hewan  coba  yang  diinduksi  aloksan  dan  diberi  ekstrak  daun  jeruju ( Acanthus ilicifolius )
Tests of Normality Kelompok Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk Statistic df Sig. Statistic df Sig. LDL Kelompok Kontrol Negatif 0,203 8 0,200* 0,902 8  0,301 Kelompok Kontrol Positif 0,188 8 0,200* 0,904 8  0,314 Kelompok Perlakuan 0,236 8 0,200* 0,896 8  0,267
*. This is a lower bound of the true significance.
a. Lilliefors Significance Correction
Keterangan pengujian Shaphiro – Wilk adalah :
1. Jika signifikasi p > 0,05 maka distribusi data normal, H0 diterima.
2. Jika signifikasi p < 0,05 maka distribusi data tidak normal, H0 ditolak.
Berdasarkan  Tabel  2  dapat  diperoleh  nilai  signifikansi  dari  kelompok  kontrol negatif  sebesar  p  =  0,301  (p  >  0,05),  nilai  signifikansi  dari  kelompok  kontrol  positif sebesar p = 0,314 (p > 0,05), dan nilai signifikansi kelompok perlakuan sebesar p = 0,267 (p > 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa data kadar LDL darah semua kelompok berdistribusi normal.
Tabel 3 Hasil uji homogenitas varians kadar LDL  darah kelompok hewan coba yang diberi pakan standar, kelompok hewan coba yang diinduksi aloksan, kelompok hewan coba yang diinduksi aloksan dan diberi ekstrak daun jeruju ( Acanthus ilicifolius )

## Test of Homogeneity of Variances
Levene Statistic df1 df2 Sig. LDL Based on Mean 1,339 2 21 0,284 Based on Median 0,403 2 21 0,674 Based on Median and with adjusted df 0,403 2 13.657 0,676 Based on trimmed mean 1,339 2 21 0,284

## Keterangan :
1. Jika signifikasi p > 0,05 maka varian data homogen, H0 diterima.
2. Jika signifikasi p < 0,05 maka varian data tidak  homogen, H0 ditolak.
Berdasarkan Tabel 3 dapat diperoleh nilai signifikansi p = 0,284 (p > 0,05). Hal ini  menunjukkan  bahwa  data  kadar  LDL  darah  semua  kelompok  memiliki  varians data yang homogen. Maka uji statistik penelitian ini menggunakan One-way Anova.
Tabel 4 Hasil  uji  One-Way  ANOVA  kadar  LDL  darah  kelompok  hewan  coba yang diberi pakan standar, kelompok hewan coba yang diinduksi aloksan kelompok hewan coba yang diinduksi aloksan dan diberi ekstrak daun jeruju ( Acanthus ilicifolius )
ANOVA LDL Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between Groups 23,583 2 11,792 1,396 0,270 Within Groups 177,375 21 8,446 Total 200,958 23 Keterangan: 1.  H0 : Pemberian ekstrak daun jeruju ( Acanthus ilicifolius) tidak dapat menurunkan kadar LDL darah tikus putih  jantan  galur  Wistar ( Rattus norvegicus )  yang diinduksi aloksan. 2.  H1
:  Pemberian    ekstrak    daun    jeruju    ( Acanthus    ilicifolius) dapat menurunkan    kadar  LDL  darah  tikus  putih    jantan    galur    Wistar  ( Rattus norvegicus )  yang diinduksi aloksan.
Berdasarkan  Tabel  4  dapat  diperoleh  nilai  signifikansi  p  =  0,270.  Oleh  karena nilai p > 0.05, maka dapat diambil kesimpulan bahwa H0 diterima dan H1 ditolak. Hal ini menunjukkan bahwa “tidak terdapat pengaruh yang signifikan” rerata kadar LDL darah kelompok hewan coba yang diberi pakan standar, kelompok hewan coba yang diinduksi  aloksan,  kelompok  hewan  coba  yang  diinduksi  aloksan  dan  diberi  ekstrak daun  jeruju  ( Acanthus  ilicifolius ).  Oleh  karena  uji  One-Way  Anova  tidak  signifikan,
maka tidak perlu dilanjutkan dengan uji post hoc.
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan,  perbedaan  rerata  kadar
LDL  darah  pada  kelompok  hewan  coba  yang  diinduksi  aloksan  yaitu  11,38  mg/dl lebih  besar dibandingkan rerata kadar LDL pada kelompok hewan coba yang diberi pakan standar yaitu 9,75 mg/di dengan hasil yang tidak signifikan secara statistik (p =  0,270).  Hal  ini menunjukan bahwa  pemberian  aloksan  dapat  meningkatkan  kadar LDL namun tidak signifikan secara statistik. Menurut Yuriska F. (2009), peningkatan
LDL  dapat  terjadi  karena  aksi  sitotoksik  aloksan  dimediasi  oleh  radikal  bebas.  Aksi toksik  aloksan  pada  sel  β  diinisiasi  oleh  radikal  bebas  yang  dibentuk  oleh  reaksi redoks.  Aloksan  dan  produk  reduksinya,  asam  dialurik,  membentuk  siklus  redoks dengan  formasi  radikal  superoksida.  Radikal  ini  mengalami  dismutasi  menjadi hidrogen  peroksida.  Radikal  hidroksil  dengan  kereaktifan  yang  tinggi  dibentuk  oleh reaksi  Fenton.  Aksi  radikal  bebas  dengan  rangsangan  tinggi  meningkatkan konsentrasi kalsium sitosol yang menyebabkan destruksi cepat s el β.
Menurut (Winarsi et al. ,  2013), mekanisme kerja aloksan karena radikal bebas yang  dapat  merusak  sel  β pankreas  penghasil  insulin.  Insulin  berperan mendorong glukosa  masuk  ke  dalam  sel  untuk  melakukan  metabolisme,  tetapi  karena  sel  β mengalami  gangguan  maka  proses  metabolisme  tidak  terjadi,  melainkan  banyak tertumpuk  di  darah.  Pada  kelompok  yang  diinduksi  aloksan  selain  meningkatnya
kadar  glukosa  darah  diikuti  pula  dengan  peningkatan  kadar  kolesterol.  Kurangnya insulin pada diabetes juga diketahui berkaitan dengan peningkatan sintesis kolesterol khususnya  LDL  yang  mungkin  disebabkan  oleh  meningkatnya  aktivitas  HMG  KoA reduktase.  Resistensi  insulin  pada  diabetik  dapat  meningkatkan  penyerapan  asam lemak dari hati, yang kemudian dikeluarkan melalui lipolisis jaringan adiposa, sintesis trigliserida  intrahepatik,  serta  produksi  dan  sekresi  partikel  VLDL,  yang  pada gilirannya  menyebabkan  kadar  trigliserida  plasma  meningkat.  Menurut  Peningkatan
VLDL  yang  terbentuk  akan  dikonversi  menjadi  IDL  yang  kemudian  dikonversi menjadi LDL.
Terjadinya  hiperkolesterolemia  pada  DM  diakibatkan  oleh  overproduksi  VLDL yang dapat meningkatkan produksi IDL dan LDL, dan berkurangnya afinitas reseptor LDL.  Hal  ini  menyebabkan  penurunan clearance LDL  dan  VLDL remnant ,  dan menyebabkan  peningkatan  konsentrasi  LDL  (Hanum,  2013).  Hiperlipidemia merupakan  suatu  keadaaan  terjadinya  peningkatan  kolesterol dan  trigliserida  diatas batas  normal.  Peningkatan  kolesterol  serum  yang  terjadi,  terutama  mencerminkan peningkatan kolesterol Low Density Lipoprotein (LDL) (Susiwati, et al. , 2018).
Perbedaan rerata kadar LDL darah pada kelompok hewan coba yang diinduksi aloksan dan  diberi  ekstrak  daun  jeruju  ( Acanthus  ilicifolius )  yaitu 9  mg/dl  lebih  kecil dibandingkan  rerata  kadar LDL  pada  kelompok  hewan  coba  yang  diinduksi aloksan yaitu  11,38  mg/dl  dan  rerata  kadar  LDL  pada  kelompok  hewan  coba  yang  diberi pakan standar yaitu 9,75 mg/di dengan hasil yang tidak signifikan secara statistik (p =  0,270).  Hal  ini  menunjukan  bahwa  pemberian  ekstrak  daun  jeruju  ( Acanthus ilicifolius ) dengan 9,5894 mg/142,7 grBB yang dilarutkan ke dalam CMC-Na 1%  dan kemudian  diberikan  secara  disonde  peroral dengan  volume 1 ml  ke  masing-masing tikus  dapat  menurunkan  kadar  LDL  namun  tidak  signifikan  secara  statistik.
Penurunan  kadar  LDL  darah  terjadi  karena  kandungan  antioksidan  di  dalam  jeruju ( Acanthus  ilicifolius ).  Berdasarkan  penelitian  baik  in  vivo  maupun  in  vitro menunjukkan  bahwa  flavonoid  dapat  menghambat  enzim  HMG-KoA  reduktase sehingga  sintesis  kolesterol  menurun  mengakibatkan  kadar  kolesterol  darah menurun (Prahastuti et al ., 2011).
Tanaman jeruju ( Acanthus ilicifolius ) mengandung senyawa-senyawa metabolit sekunder seperti Alkaloid, Saponin, Flavonoid, Terpenoid, dan Fenol (Ernianingsih et al. ,  2014).  Adapun  kandungan  nutrisi  pada  daun A.  ilicifolius L  (kadar  air  72.32  %,
kadar  abu  5.03  %,  kadar  lemak  0.58  %,  protein  43.83  %,  kadar  serat  44.72  %, antioksidan  76.63  μg/ml)  (Siagian,  2018),  Di  bidang  farmasi  dan  medis,  flavonoid berfungsi  sebagai  antimikroba,  antivirus,  antioksidan,  antihipertensi,  merangsang pembentukan  estrogen  dan  mengobati  gangguan  fungsi  hati  (Robinson,  1995;
Latifah et al. , 2015). Kandungan senyawa kimia dalam A. ilicifolius berfungsi sebagai: neuralgia,  analgesik,  antiinflamasi,  antioksidan,  antifertilitas,  hepatoprotektif, antitumor,  antileukemia,  antikanker,  antimikroba,  antivirus  dan  antijamur  juga  dapat sebagai insektisida alami (Irawanto, et al. , 2015).
Senyawa-senyawa  yang  terkandung  di  tanaman  jeruju  ( Acanthus  ilicifolius)
dapat  digunakan  sebagai  sumber  antioksidan.  Dimana  antioksidan  tersebut  dapat menghambat  pembentukkan  radikal  bebas  sehingga  dapat  mengurangi  terjadinya stress  oksidatif  (Nurfitri et  al. ,  2018).  Menurut  Anggraeni  (2017),  senyawa  flavonoid dapat  menghambat  sintesis  kolesterol  dengan  menghambat  aktivitas  HMG-KoA reduktase.  HMG-KoA  reduktase  yang  dihambat  akan  menurunkan  mevalonat  yang berhubungan  dengan  penurunan  kadar  LDL  dalam  darah.  Menurut  Ranti et  al.
(2013),  flavonoid  dapat  meningkatkan  densitas  dari  reseptor  LDL  di  liver  dan mengikat apolipoprotein B yang dapat menurunkan LDL dalam darah.

## KESIMPULAN DAN SARAN
1. Pemberian  aloksan  dengan  dosis  16,464  mg/137,2  grBB  yang  dilarutkan  ke
dalam  NaCl  0.9%  dapat  meningkatkan  rerata  kadar  LDL  darah  tikus  putih
( Rattus norvegicus ) jantan galur Wistar namun tidak signifikan secara statistik.
2. Pemberian  ekstrak  daun  jeruju  ( Acanthus  ilicifolius )  dengan  dosis  9,5894
mg/142,7  grBB  yang  dilarutkan  ke  dalam  CMC-Na  1%  dan  diberikan  setiap hari  selama  10  hari  dapat  menurunkan  rerata  kadar  LDL  darah  tikus  putih ( Rattus norvegicus ) jantan galur Wistar namun tidak signifikan secara statistik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Irmawati M. Dikman, dr.,M.Kes, Dr. Retno Budiarti, dr., M.Kes, dan Eka Poerwanto S.
T, dr. Sp. KFR selaku dosen pembimbing dan penguji skripsi.

## DAFTAR PUSTAKA
ADA (American Diabetes Association) 2015, 'Diabetes Care ' The Journal of  Clinical and Applied Research and Education , vol. 38, no. 1, pp. S1 –S12. Anggraeni, K. 2017, Inhibisi HMG-KoA Reduktase oleh Campuran Ekstrak Flavonoid Berbasis  Daun  Jati  Belanda  (Guazuma  ulmifolia)  In  Vitro ,  skripsi,  Departemen Biokimia,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Institut  Pertanian Bogor.
Ernianingsih,  S.  W.,  Mukarlina  and  Rizalinda  2014,  ‘Etnofarmakologi  Tumbuhan Mangrove Achantus  ilicifolius  L. , Acrostichum  speciosum  L. dan Xylocarpus rumphii Mabb.  Di  Desa  Sungai  Tekong  Kecamatan  Sungai  Kakap  Kabupaten Kubu Raya’ Protobiant , vol. 3, no. 2, p. 256.
Handayani,  S.,  Najib,  A., Wati,  N.  P.  2018,  ‘Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun Daruju    dengan  Metode  Peredaman  Radikal  Bebas  1,1-Diphenyil-2- Picrylhidrazil (DPPH)’ Jurnal Fitofarmaka Indonesia , vol. 5, no. 2, pp. 300. Hanum,  N.  N.  2013, Hubungan  Kadar  Glukosa  Darah  Puasa  dengan  Profil  Lipid pada  Pasien  Diabetes  Melitus  tipe  2  di  Rumah  Sakit  Umum  Daerah  Cilegon periode Januari-April 2013 , skripsi, Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan,  Universitas  Islam  Negeri  Syarif  Hidayatullah Jakarta.
Harrison  2018, Harrison’s  Principles  Of  Internal  Medicine ,  20 th edn,  Edited  by  J.  L. Jameson et al., McGraw-Hill Education.
IDF  2017,  ‘IDF  Diabetes  Atlas  Eighth  Edition’ Internasional  Diabetes  Federation ,  p. 155.
Irawanto, R., Ariyanti, E. E. and Hendrian, R. 2015, ‘Jeruju ( Acanthus ilicifolius ): Biji, Perkecambahan dan Poten sinya’ ResearchGate , vol. 1, no. 5, p. 1014.
Latifah, E., Pribadi, P. and Sukmarani, D. 2015, Potensi Tumbuhan Mangrove Daun Jeruju (Acanthus Ilicifolius) sebagai Obat Antidiabetes , thesis, Universitas Muhammadiyah Magelang.
Noor,  Y.  R.,  Khazali,  M.  and  Suryadiputra,  I.  N.  N.  2012, Panduan  Pengenalan MANGROVE di Indonesia , 3 rd edn, Edited by Y. R. Noor, M. Khazali, and I. N. N. Suryadiputra, Bogor.
Nurfitri, W. A., Widiastuti, E. L. and Cahyani, E. N. 2018, Efek Ekstrak Metanol Daun Jeruju (Acanthus ilicifolius L .) serta Buah Jeruju dan Taurin Dalam Menurunkan Kadar  Glukosa  Darah  dan  Kolesterol  Serta  Fertilitas  Mencit  Jantan  (Mus musculus) yang Diinduksi Aloksan , skripsi, Universitas Lampung. PERKENI  2015, Konsensus  Pengelolaan  dan  Pencegahan  Diabetes  Melitus  Tipe  2 di  Indonesia  2015 ,  1 st edn,  Edited  by  S.  A.  Soelistijo  et  al,  Pengurus  Besar Perkumpulan Endokrinologi Indonesia (PB PERKENI).
Prahastuti, S., Tjahjani, S. and Hartini, E. 2011, ‘Efek Infusa Daun Salam ( Syzygium polyanthum (Wight)  Walp)  terhadap  Penurunan  Kadar  Kolesterol  Total  Darah Tikus  Model  Dislipidemia  Galur Wistar’ Jurnal  Medika  Planta ,  vol.  1,  no.  4,  p. 31.
Ranti, G. C., Fatimawali and Wehantouw, F. 2013, ‘Uji Efektivitas Ekstrak Flavonoid dan  Steroid  Dari  Gedi  ( Abelmoschus  manihot )  sebagai  Anti  Obesitas  dan Hipolipidemik pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar’ Pharmacon , vol. 2,  no.  2, p. 37.
Susiwati, Sunita, R. and Farizal, J. 2018, ‘Analisis Kolesterol Low Density Lipoprotein (LDL) pada Pengkonsumsi Produk Minuman Herbal “X” Kota Bengkulu Tahun 2017’, vol. 6, no. 2, p. 96.
Winarsi, H. et al. 2013, ‘Ekstrak Daun Kapulaga Menurunkan Indeks Atherogenik dan Kadar Gula Darah Tikus Diabetes Induksi Alloxan’ Jurusan Ilmu Gizi, p. 277. Yuriska  F.,  A.  2009, Efek  Aloksan  terhadap  Kadar  Glukosa  Darah  Tikus  Wistar , skripsi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro Semarang.