Aktivitas Analgetik Ekstrak Etanol Daun Sligi ( Phyllanthus Buxifolius Muell . Arg ) terhadap Mencit Galur Balb/C
(Analgesic Activity Of Ethanol Extract Seligi Leaves ( Phyllanthus Buxifolius Muell . Arg) to Mice Balb/C)
Siwi Hastuti 1 , Inna Ayu Safitri 2
Prodi Farmasi Poltekkes Bhakti Mulia siwihastutiapt@gmail.com
Abstract: Sligi  (Phyllanthus  buxifolius  Muell.  Arg)  is  native  to  Indonesia,  which  has  long been traditionally used as a medicine  society dislocated joint pain and sligi  leaves steeping water is used  to  treat  rheumatism.  Not  many  scientific  studies  conducted  on  this  plant.  This  reseaarch present to investigate the analgesic activity of ethanol extract of sligi leaves to male mice  strain Balb  /  c  using  acetic  acid  induce  writhing.  Research  methods  using  chemical  stimuli  done  by observing  the  number  of  stretching  of  hind  limb  induce  by  the  injection  of  acetic  acid.  The number  of  mice  were  used  to  determine  the  movement  of  an  analgesic  activity  of    aethanol extract  of  sligi  leaves.  Data  were  tested  by  Kolmogorov  Smirnov  normality,  when  the  normal data  one  way  ANOVA  followed.  Doses  of  aethanol  extract  of  leaves  sligi  used  to  test  the analgesics activity in mice was 250 mg / kg, 500 mg / kg and 1000 mg / kg given orally. Positive control used was aspirin dose 55 mg / kg. As the solvent is coconut oil. Aethanol extract of sligi leaves  in  250,  500  and  1000  mg  /  kg  have  analgesic  activity,  respectively  for  (18.38  ±  0.81), (26.47  ±  0.19)  and  (55.64  ±  0.16)%.  While  aspirin  dose  55  mg  /  kg  have  analgesic  greater power that is (80.88 ± 0.13)%. Statistical analysis, the data were normally distributed and have analgesic power significantly different for each treatment.The ethanol extract of sligi leaves have analgesic activity against strains of male mice balb / c acetic acid induced. This study opens the opportunity  for  the  development  of  the  aethanol  extract  of  the  sligi  leaves  as  a  source  of compounds with analgesic activity.
Key word: analgesic, Phyllanthus buxifolius, Sligi, chemical response, writhing response
Abstrak: Sligi    (Phyllanthus  buxifolius  Muell.  Arg)  merupakan  tanaman  asli  Indonesia  yang sejak lama secara tradisional digunakan masyarakat sebagai obat nyeri pada sendi terkilir dan air  seduhan  daun  sligi  digunakan  untuk  mengobati  rematik.  Belum  banyak  penelitian  ilmiah yang dilakukan terhadap tanaman ini. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui daya analgetik ekstrak etanol daun sligi  dapat mempunyai terhadap mencit jantan galur balb/c yang diinduksi asam asetat. Metode penelitian  menggunakan metode rangsang kimia yang  dilakukan dengan mengamati jumlah geliat mencit setelah diinduksi asam asetat secara peritoneal. Jumlah geliat mencit  digunakan  untuk  mengetahui  daya  analgetik  ekstrak  etanol  daun  sligi.  Data  penelitian diuji normalitasnya dengan uji Kolmogorov smirnov, apabila data normal dilanjutkan uji ANOVA satu jalan. Dosis ekstrak etanol daun sligi yang digunakan untuk uji daya analgetik pada mencit adalah  250  mg/kgBB,  500  mg/kgBB  dan  1000  mg/kgBB  yang  diberikan  secara  oral.  Kontrol positif  yang  digunakan  adalah  asetosal  dosis  55  mg/kgBB.  Sebagai  pelarut  adalah  mimyak kelapa.Estrak  etanol  daun  sligi  dosis  250,500  dan  1000  mg/kgBB  memiliki  daya  analgetik berturut-turut sebesar (18,38 ± 0,81), (26,47 ± 0,19) dan (55,64 ± 0,16)%.  Sedangkan asetosal dosis  55  mg/kgBB  mempunyai  daya  analgetik  lebih  besar  yaitu  (80,88  ±  0,13)%.  Analisis statistik,  data  terdistribusi  normal  dan  mempunyai  daya  analgetik  yang  berbeda  secara signifikan untuk setiap perlakuan. Ekstrak etanol daun sligi mempunyai daya analgetik terhadap mencit  jantan  galur  balb/c  yang  diinduksi  asam  asetat.  Penelitian  ini  membuka  peluang untuk pengembangan ekstrak etanol daun sligi sebagai sumber senyawa dengan aktivitas analgetik. Kata kunci : Analgetik, Phyllanthus buxifolius, Sligi, rangsang kimia, geliat mencit

## I. PENDAHULUAN
Nyeri  adalah  suatu  pengalaman sensorik dan emosional yang tidak menyenangkan  yang  berhubungan  dengan adanya  kerusakan  jaringan  baik  yang bersifat  aktual  ataupun  potensial.  Antara kerusakan jaringan sebagai sumber rangsang  nyeri,  sampai  dirasakan  sebagai persepsi  nyeri,  terdapat  suatu  rangkaian proses  elektro  fisiologik  yang  secara kolektif  disebut nociception (Strong  dkk.,
2002).
Nyeri dan inflamasi (radang) merupakan  respon  patologis  dari  tubuh karena  adanya  pengaruh  cedera,  infeksi kuman  atau  senyawa  asing  yang  masuk dalam  tubuh.  Peradangan  akut  ditandai rubor, kalor, dolor, tumor dan fungsio laesa.
Peradangan  kronis  melibatkan  peran  sel darah  putih  terutama  sel  mononuklear (monosit,  makrofag  dan  limfosit)  (Nugroho, 2012).
Analgetik  yang  diberikan  kepada penderita  untuk  mengurangi  rasa  nyeri yang  dapat  ditimbulkan  oleh  berbagai rangsang  mekanis,  kimia  dan  fisis.  Rasa nyeri  tersebut  terjadi  akibat  terlepasnya mediator-mediator
nyeri
(misalnya bradikinin, prostaglandin) dari jaringan yang rusak yang kemudian merangsang reseptor nyeri  di  ujung  syaraf  perifer  ataupun  di tempat lain, lalu diteruskan ke pusat nyeri di korteks serebri oleh syaraf sensoris melalui sumsum tulang belakang dan talamus (Tjay dan Rahardja, 2002).
Mekanisme kerja sebagai analgetik dengan cara menghambat secara langsung dan selektif enzim-enzim pada sistem saraf pusat yang mengkatalisis biosintesis prostaglandin, seperti siklooksigenase sehingga dapat mencegah stimulasi
reseptor nyeri oleh mediator nyeri (Tjay dan Rahardja, 2002). Mekanisme penghambatan
siklooksigenase,  obat  AINS  ada  yang bersifat  selektif  COX-1,  selektif  COX-2 dan nonselektif  COX.  Obat  AINS  yang  selektif terhadap  COX-1  adalah  ketorolak  dan suprofen. Obat yang selektif terhadap COX- 2 adalah celecoxib, meloxicam dan refecoxib dan obat AINS yang nonselective adalah  indometasin,  asetosal,  piroksikam, sulindak  dan  diklofenak  (Nugroho,  2012). AINS yang menghambat enzim COX-1 dan COX-2  disebut  AINS nonselective yang mengakibatkan  terjadinya  tukak  lambung akibat penghambatan pembentukan prostaglandin  yang  dibutuhkan  oleh  tubuh untuk  proteksi  mukosa  lambung  (Ikawati, 2008). Analgetik merupakan suatu senyawa yang pada dosis tertentu meringankan  atau  menekan  rasa  nyeri tanpa  memiliki  kerja  anestesi.  Analgetika menurut  mekanisme  kerjanya  dibedakan menjadi  analgetika  berkhasiat  kuat  yang bekerja pada pusat dan analgetika berkhasiat  lemah  (sampai  sedang)  yang bekerja  terutama  pada  perifer  dengan  sifat antipiretika dan sebagian besar mempunyai sifat antiinflamasi dan antireumatik
(Mutschler, 1991). Analgetik lemah disebut juga analgetik perifer karena tidak
mempengaruhi  sistem  saraf  pusat,  tidak menurunkan kesadaran serta tidak
menimbulkan  ketergantungan.  Beberapa analgetik  perifer  memiliki  kerja  antipiretik yang  dapat  menurunkan  suhu  badan  pada keadaan demam. Analgetik lemah misalnya asetosal,  parasetamol,  antipirin,  asam mefenamat  dan  lain  sebagainya  (Tjay  dan Rahardja, 2002). Penelitian analgetik dan antiinflamasi  pada  genus Phyllanthus telah banyak  disitasi.  Fraksi  larut  kloroform  dari ekstrak methanol Phyllanthus niruri mampu menghambat  geliat  mencit  yang  diinduksi asam  asetat  (Obidike  dkk,  2010),  ekstrak etanol Phyllanthus niruri mempunyai aktivitas  antioksidan  dengan  menghambat aktivitas penangkapan radikal bebas DPPH dan  menghambat  perkembangan  mediator inflamasi yaitu menghambat produksi radikal  nitrit  oksida,  menghambat tumor necrosis factor ( TNF )- alpha dan  interleukin (IL)-6.
Phyllanthus amarus pada  ekstrak air  menghambat  udem  telapak  kaki  tikus yang  diinduksi  karagenin  dan  menghambat tail emmersion duration pada  tikus  yang diinduksi  formalin  (Iranloye  dkk,  2011), ekstrak  heksana  dan  lignan  mampu menghambat  telapak  kaki  tikus  yang diinduksi  karagenin  (Kassuya  dkk,  2005) lignan niranthin mampu menghambat formasi  udem  telapak  kaki  tikus  yang diinduksi platelet activating factor ( PAF ), ekstrak  terstandarisasi Phyllanthus amarus secara  in  vivo  maupun  in  vitro  mampu menghambat endotoxin - induced nitric
oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase (COX-2)  dan  produksi  sitokin  (Kiemer  dkk, 2003).
Penelitian  terhadap  spesies  dari marga  Phyllantus  sudah  banyak  dilakukan, tetapi penelitian terhadap spesies Phyllanthus buxifolius belum banyak dilakukan, sehingga perlu dilakukan penelitian terhadap spesies ini.

## II. METODE
Pembuatan  simplisia. Daun  sligi  yang berwarna hijau tua dipanen, disortasi, dicuci dengan air bersih, kemudian dikeringkan di dalam  oven  suhu  50ºC  sampai  kering. Setelah  kering,  daun  diserbuk  dengan mesin  penyerbuk  lalu  disimpan  ditempat yang kering dan tertutup.
Penyarian . Serbuk daun sligi sebanyak 400 g  diremaserasi  dengan  etanol  (1:5),  lalu disaring  dengan  corong  Buchner.  Filtrat diuapkan  dengan  rotary  evaporator  lalu diangin-anginkan  hingga  etanol  menguap
dan  diperoleh  ekstrak  yang  kental.  Ekstrak disimpan  dalam  wadah  tertutup  rapat  dan kering.
Pengujian  analgetik .  Sebelum  dilakukan  uji analgetik,  dilakukan  uji  pendahuluan  untuk menentukan  dosis  induksi  asam  asetat, selang waktu indukasi asam asetat dengan pemberian  sediaan  uji  serta  rentang  dosis sediaan ekstrak etanol daun sligi. Hewan uji yang digunakan adalah mencit jantan galur balb/c umur 6-8  minggu bobot 20-30 gram.
Sebelum digunakan hewan uji diaklimatisasi  dalam  kandang  selama  satu minggu.  Sehari  sebelum  perlakuan  mencit harus  dipuasakan  dengan  hanya  diberi  air minum ad libitum .  Mencit  ditimbang  dan dikelompokkan  secara  acak  menjadi  lima kelompok  masing-masing  kelompok  terdiri lima ekor mencit. Kelompok I adalah kontrol negatif  (minyak  kelapa  25  ml/kg  BB  po). Kelompok II adalah kontrol positif  asetosal dosis  55  mg/kg  BB  po).  Kelompok  III,  IV dan  V  adalah  kelompok  dosis    1000,  500, 250  mg/kg  BB  po).  Semua  mencit diperlakukan  dengan  diberi  sediaan  sesuai kelompoknya  masing-masing  secara  oral. Sesuai  uji  pendahuluan  selang  waktu pemberian  indukasi  asam  asetat  dengan pemberian  sediaan  uji,  kemudian  mencit disuntik  asam  asetat  glasial  dosis  300 mg/kg  BB  secara  intra  peritoneal.  Geliat diamati dan dihitung jumlahnya tiap 5 menit selama satu jam.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A.Penyarian .
Pada remaserasi daun sligi dengan etanol menghasilkan ekstrak kental berwarna  hijau  tua  dengan  rendemen sebesar 19,77 % b/b.
B.Aktivitas analgetik
Aktivitas analgetik ekstrak etil asetat daun sligi dilakukan terhadap mencit jantan  galur  balb/c  menggunakan  metode rangsang  kimia  dengan  induksi  asam asetat  secara  intra  peritoneal.  Metode rangsang  kimia  dengan  induksi  asam asetat  ini  digunakan  untuk  mendapatkan efek  analgetik  dari  suatu  sediaan  untuk rangsangan perifer.
Efek  yang  ditimbulkan  karena induksi  asam  asetat  berupa    jumlah  geliat mencit  yang  diinduksi  asam  asetat  secara perotoneal.  Profil  geliat  mencit  pemberian ekstrak  etanol  konsentrasi  1000  mg/kgBB setelah  dinduksi  asam  asetat  ditunjukkann pada  gambar  1.  Geliat  diamati  segera
setelah  mencit  diinduksi  asam  asetat  dan dicatat jumlahnya setiap lima  menit selama satu  jam.  Jumlah  geliat  akan  semakin meningkat  sampai  pada  menit  ke-15 sampai  ke-25  setelah  memit  ke-25  jumlah geliat  akan  mengalami  penurunan.  Jadi rata-rata  jumlah  geliat  tertinggi  pada  menit ke-15  sampai  meit  ke-25  berarti  dapat dikatakan bahwa asam asetat akan menimbulkan  efek  maksimal  pada  menit ke-15  sampai  ke-25.    Jumlah  kumulatif geliat  semakin  berkurang  seiring  dengan naiknya  dosis  sediaan  ekstrak  etanol  daun sligi  yaitu  berturut-turut  250,  500  dan  1000 mg/kgBB  tetapi  jumlah  geliat  paling  sedikit terjadi  pada  perlakuan  dengan  kontrol positif  yaitu  pada  asetosal  dosis  55 mg/kgBB.

## Gambar 1. Profil geliat mencit setelah pemberian induksi asam asetat
Sediaan  uji  yang  menunjukkan  jumlah geliat  semakin  besar  berarti  mempunyai daya  analgetik  yang  semakin  kecil,  karena analgetik  mampu  menurunkan  rasa  sakit pada  mencit  yang  diinduksi    asam  asetat sehingga geliat yang merupakan manifestasi rasa sakit akan berkurang. Pada tabel 1 dan Gambar 2 menunjukkan perbandingan % daya analgetik  dari  senyawa  uji  terhadap  mencit yang  diinduksi  asam  asetat.  Ekstrak  etanol daun  sligi  memiliki  aktivitas  daya  analgetik pada  dosis  250  mg/kgBB,  500  mg/kg  BB dan  1000  mg/kgBB  terhadap  mencit  yang diinduksi  asam  asetat  berturut-turut  adalah (18,38 ± 0,81), (26,47 ± 0,19) dan (55,64 ± 0,16)%. Ekstrak sligi memiliki daya analgetik  masih  lebih  kecil  daripada asetosal  pada  dosis  55  mg/kgBB  yaitu (80,88 ± 0,13)%.
0 1 2 3 4 5 6 7 8 5' 20' 35' 50' ju m la h g el ia t mencit 1 mencit 2 mencit 3 mencit 4 mencit 5
Tabel 1. Jumlah kumulatif geliat mencit dan % daya analgetik N o Kelompok perlakuan Kumulat if Geliat (Mean± SEM) %DA (Mea n ± SEM) 1 Kontrol negatif (Minyak kelapa 25 ml/kgBB) 84 ± 0,05 0 2 Asetosal 55 mg/kg 16 ± 0,56 80,88 ± 0,13 3 Ekstrak etanol sligi 1000mg/kgBB 36 ± 0,20 55,64 ± 0,16 4 Ekstrak etanol sligi 500 mg/kgBB 60 ± 0,07 26,47 ± 0,19 5 Ekstrak etanol sligi 250 mg/kgBB 67 ± 0,18 18,38 ± 0,81 Gambar 2. Daya analgetik sediaan uji terhadap mencit yang diinduksi asam asetat Uji  normalitas  data  dengan  uji  one sample Kolmogorov Smirnov test
menunjukkan  bahwa  data  terdidtribusi normal  karena  nilai  signifikansi  lebih  besar 0,05.  Langkah  selanjutnya  data  di  uji menggunakan  uji  Test  of    Homogeneity  of Variances,  yaitu  diperoleh  hasil  nilai signifikasi  lebih  besar  dari  0,05  maka  data yang  diperoleh    mempunyai  varian  yang homogen. Kemudian dilakukan uji  one way ANOVA,  berdasarkan  hasil  uji  one  way ANOVA,  nilai  probablilitas  yang  tercantum pada  kolom  signifikasi,  0,000  <  0,05  maka H0    ditolak,  ada  perbedaan  yang  signifikan antara  persen  daya  analgetik  daun  seligi,
selanjutnya  dilakukan  uji  Post  Hoc  Tests (LSD)  diperoleh  hasil  signifikasi  0,000  < 0,05.
Analisis  statistik,  data  terdistribusi normal  dan  mempunyai  daya  analgetik yang  berbeda  secara  signifikan  untuk setiap perlakuan. Berdasarkan hasil statistik  persentase  daya  analgetik  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun sligi  mempunyai  daya  analgetik  pada mencit  yang  diinduksi  asam  asetat  yang berbeda  secara  signifikan  terhadap  kontrol pelarut.  Hal  ini  didukung  oleh  banyak penelitian  terdahulu  yang  banyak  meneliti tumbuhan obat yang mengandung flavonoid yang mempunyai efek analgetik. Ekstrak etanol daun sligi mempunyai daya analgetik terhadap mencit jantan  galur  balb/c  yang  diinduksi  asam asetat.  Penelitian  ini  membuka  peluang untuk  pengembangan  ekstrak  etanol  daun sligi  sebagai  sumber  senyawa  dengan aktivitas analgetik.

## IV. SIMPULAN
1.  Uji  daya  analgetik  pada  mencit  dapat dilakukan  dengan  metode  rangsang kimia  menggunakan  induksi  asam asetat untuk mendapatkan efek analgetik perifer. 2.  Ekstrak etanol daun sligi dosis 250, 500 dan 1000 mg/kgBB, menunjukkan daya analgetik  pada  mencit  jantan  galur balb/c  yang  diinduksi  asam  asetat berturut-turut  adalah  (18,38  ±  0,81),
(26,47 ± 0,19) dan (55,64 ± 0,16)%.%.

## DAFTAR PUSTAKA
Chouhan  H,S.  dan  Singh,  S.K.,  2011, Phytochemical analysis, antioxidant and  antiinflammatory  activities  of Phyllanthus simplex, J. Ethnopharmacol , 137(3), 1337-44. Dang,  G.  K.,  Parekar,  R.R,  Kamat,  S.K., Scindia,  A.M.,  Rege,  N.N.,  2011, Antiinflammatory activity of Phyllanthus emblica, Plumbago zeylanica  and  Cyperus  rotundus  in acute  model  of  inflammation, J. Phytother. Res ., 25(6), 904-8
Ikawati,  Z.,  2008. Pengantar  Farmakologi Molekuler . Yogyakarta: Gadjah
Mada University Press.
Iranloye, B.O., Owoyele, V.B., Kelani, O.R. dan Olaleye, S.B., 2011, Analgesic activity of aquoeus leaf extract of
0 20 40 60 80 100 D ay a an al ge ti k (% ) Dosis sediaan (mg/kgBB) % DA
Phyllanthus amarus, Afr. J. Med. Sci ., 40(1) , 47-50. Kassuya CA, Leite DF, de Melo LV, Rehder VL  dan  Calixto  JB.  2005.  Anti- inflammatory properties of extracts, fractions  and  lignans  isolated  from Phyllanthus  amarus. Planta  med . 71(8) , 721-6 Kiemer AK, Hartung T, Huber C dan Vollmar AM. 2003. Phyllanthus amarus has anti-inflammatory potential by inhibition of iNOS, COX-2, and cytokines via the NF- kappaB pathway. J. Hepatol . 38(3) , 289-97 Mutschler,  E.,  1991. Dinamika  Obat:
Farmakologi dan Toksikologi . Bandung: Penerbit ITB. Nugroho,  A.  E.,  2012. Farmakologi  obat- obat  penting  dalam  pembelajaran ilmu  farmasi  dan  dunia  kesehatan . Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Obidike, I. C., Salawu, O. A., Ndukuba, M., Okoli,  C.  O.  dan  Osunkwo,  U.  A., 2010,  The  antiinflammatory  and antinociceptive  properties  of  the chloroform fraction
from
Phyllanthus  niruri  is  mediated  via the  peripheral  nervous  system.  J.
Diet Suppl., 7(4), 341-50. Strong,  J.,  Anita,  M.,  Anthony,  W.,  Baxter, G.,  dan  Wall,  P.,  2002. Pain:  A Textbook  for  Therapist .  London: Elsevier Science limited. Tjay,  T.  H.,  dan  Rahardja,  K.,  2002. obat- obat  penting,  khasiat,  penggunaan dan  efek  samping .  Jakarta:  Elex Media Komputindo.