Jurnal Pharmascience, Vol 3, No. 1, Februari 2016, hal: 83 - 92 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.ppjpu.unlam.ac.id/

## Research Article

## Kandungan Total Fenolik, Total Flavonoid, dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Buah Mengkudu ( Morinda citrifolia L.)
*Khoerul Anwar, Liling Triyasmono
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA Universitas Lambung Mangkurat *Email: khoerul.anwar@unlam.ac.id

## ABSTRAK
Buah  mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.)  merupakan  salah  satu  tanaman mempunyai  khasiat  meningkatkan  daya  tahan  tubuh,  menurunkan  tekanan  darah, menurunkan  glukosa  darah,  dan  sebagai  antibakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk menentukan kandungan total fenolik, total flavonoid, dan aktivitas antioksidan ekstrak etanol  buah  mengkudu.  Serbuk  kering  buah  mengkudu  dimaserasi  menggunakan etanol  70%.    Analisis  kualitatif  fenolik  dan  flavonoid  dilakukan  dengan  kromatografi lapis tipis (KLT). Penetapan kadar total fenolik menggunakan pereaksi Folin-ciocalteau dengan  pembanding  pirogalol.  Kadar  total  flavonoid  ditetapkan  dengan  pembanding rutin  menggunakan  pereaksi  FeCl 3 .  Aktivitas  antioksidan  ditentukan  dengan  uji penangkapan  radikal  2,2-difenil-1-pikrilhidrazil  (DPPH).  Hasil  analisis  kualitatif menunjukkan  adanya  kandungan  senyawa  fenolik  dan  flavonoid.  Kadar  total  fenolik pada ekstrak etanol buah mengkudu sebesar 14,44+0,82 mg ekivalen  pirogalol  (PE)/g ekstrak,  sedangkan  kadar  total  flavonoid  sebesar  5,69+0,21    mg  ekivalen  rutin  (RE)/g ekstrak.  Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH  menunjukkan IC 50 ekstrak etanol buah mengkudu sebesar 104,73+4,56  µg/mL. Kata kunci: Morinda citrifolia , total fenolik, total flavonoid, antioksidan

## ABSTRACT
Noni  ( Morinda  citrifolia L.)  is  one  of  the  plants  have  properties  to  increase endurance, lower blood pressure, lowering blood glucose, and as an antibacterial. The aim  of  this  study  is  to  determine  the  total  phenolic  content,  total  flavonoids  and antioxidant  activity  of  ethanol  extract  of  noni.  Dry  powder  of  noni  fruit  macerated using 70% ethanol.  Qualitative analysis of total  phenolic and total  flavonoid was done by  thin  layer  chromatography  (TLC).  Total  phenolic  assay  used  Folin-ciocalteau reagent  by  pyrogallol  as  comparison.  Levels  of  total  flavonoids  determined  by comparison to the rutin use of FeCl 3 reagent. The antioxidant activity was determined by 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). The results of the qualitative analysis showed that  it  contains  phenolic  compounds  and  flavonoids.  Total  phenolic  content  of  the ethanol extract of noni at 14.44+0.82 mg pyrogallol equivalent (PE) / g extract, while the total  flavonoid  content  of  5.69+0.21  mg  equivalent  routine  (RE)  /  g  extract.  The  test
results of antioxidant activity with DPPH method showed IC50 ethanol extract of noni of 104.73+4.56 µg / mL.
Key words: Morinda citrifolia, total phenolic, total flavonoids, antioxidant

## I. PENDAHULUAN
Banyak  bahan  pangan  yang  dapat menjadi sumber antioksidan alami, misalnya  rempah-rempah,  teh,  coklat, dedaunan, biji-bijian, sayur-sayuran, enzim  dan  protein.  Sumber  antioksidan alami  didominasi  oleh  tumbuhan  dan umumnya mengandung senyawa flavonoid dan fenolik yang tersebar di seluruh bagian tumbuhan.  Duenas et  al .  (2009) menyatakan  bahwa  senyawa  ksanton  serta turunan  flavonoid  (kuersetin  dan  katekin) yang  dihasilkan  oleh  tumbuhan  memiliki kemampuan  menghambat  kerja  radikal bebas.  Peranan  antioksidan  sangat  penting dalam  meredam  efek  radikal  bebas  yang berkaitan  erat  dengan  penghambatan terjadinya  penyakit  degeneratif  seperti diabetes  mellitus  (DM),  tekanan  darah tinggi, penyakit jantung koroner, arteriosklerosis, kanker, dan gejala penuaan.
Radikal  bebas  yang  dihasilkan secara  terus  menerus  selama  proses metabolisme  normal,  dianggap  sebagai penyebab  terjadinya  kerusakan  fungsi  sel- sel  tubuh  yang  akhirnya  menjadi  pemicu timbulnya  penyakit  degeneratif.  Reaksi radikal bebas secara umum dapat dihambat oleh  antioksidan  tertentu  baik  alami
maupun  sintetis.  Masalah-masalah  ini berkaitan  dengan  kemampuan  antioksidan untuk bekerja sebagai inhibitor (penghambat)  reaksi  oksidasi  oleh  radikal bebas  reaktif  yang  menjadi  salah  satu pencetus penyakit-penyakit di atas (Kuncahyo  dan  Sunardi,  2007;  Juniarti et al ., 2009). Penderita diabetes memerlukan  asupan  antioksidan  dalam jumlah  besar  karena  peningkatan  radikal bebas akibat hiperglikemia.
Mengkudu  ( Morinda  citrifolia L.) adalah  salah  satu  tanaman  yang  banyak dimanfaatkan  sebagai  obat  tradisional untuk berbagai macam penyakit. Beberapa penelitian  melaporkan  tentang  khasiat mengkudu  baik  biji,  buah,  daun  dan  kulit akarnya antara lain sebagai antidislipidemia  (Saf-ur et  al .,  2010), antioksidan (Brett et al ., 2011), menyembuhkan luka akibat diabetes (Nayak et  al .,  2007),  hepatoprotektor (Mian-Ying et  al .,  2008),  menghambat aktivitas Angiotensin  Converting  Enzim
(ACE) (Yamaguchi et al ., 2002), analgetik
(Basar et  al .,  2010),  hipoglikemi  (Kamiya et al ., 2008), antiinflamasi dan kemopreventif  kanker  (Akihisa et  al .,
2007).  Aktivitas  tersebut  diperkirakan salah  satunya  karena  adanya  aktivias
antioksidan  dalam  mengkudu  dengan kandungan flavonoid dan senyawa fenoliknya (Rao dan Subramanian, 2009).
Penelitian  ini  dilakukan pada ekstrak  etanol  buah  mengkudu.  Tujuan penelitian ini adalah menentukan kandungan  total  flavonoid,  total  fenolik, dan  aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak etanol buah mengkudu. Manfaat penelitian ini diharapkan dapat mendukung penggunaan mengkudu dan pengembangannya  sebagai  antidiabetes dengan aktivitas antioksidannya.

## II. BAHAN DAN METODE

## A. Bahan
Bahan  yang  digunakan,  yaitu  buah mengkudu, etanol 96% (Brataco), pirogalol  (Sigma-Aldrich),  reagen  Folin- Ciocalteu,  Na 2 CO 3 1M  (Merck),  rutin (Sigma-Aldrich),  AlCl 3 10%  (Merck),
kalium  asetat  1  M  (Merck),  metanol  p.a (Merck),  standar  andrografolid  (Sigma- Aldrich),  standar  skopoletin  (Sigma- Aldrich),  plat  silika  gel  60  F 254 (Merck) 2,2-diphenyl-1-picrylhidrazyl    (DPPH) (Sigma-Aldrich,)  aquadest  (Brataco),  dan kertas saring.

## B. Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Buah Mengkudu
Buah  mengkudu  dicuci  bersih  di bawah  air  mengalir,  diiris    tipis-tipis dengan  ketebalan  sekitar  5-7  mm,  dan
dikeringanginkan. Sebelum diserbuk, simplisia  herba  sambiloto  dikeringkan dengan  oven  selama  2  jam.  Setelah simplisia  kering,  yang  ditandai  dengan mudahnya  simplisia  tersebut  dipatahkan, diserbuk  dengan    mesin  penyerbuk    dan diayak  dengan  ayakan  nomer  20.  Serbuk buah  mengkudu  dimaserasi  dengan  etanol 70%,  selama  24  jam.  Maserat  dipisahkan dengan  penyaringan  menggunakan  kain flanel.  Residu  yang  tersisa  dimaserasi kembali  sebanyak  2  kali.  Seluruh  filtrat yang diperoleh dikumpulkan dan dienapkan selama 24 jam. Kemudian filtrat disaring  kembali,  dan  filtrat  diuapkan sehingga  didapat  ekstrak  kental  buah mengkudu (BPOM RI, 2010). Penghitungan  rendemen  dan  pemeriksaan organoleptik  dilakukan  terhadap  ekstrak kental yang didapat.

## C. Analisis  Kualitatif  Dan  Kuantitatif Fenolik Total
Analisis  kualitatif  fenolik  total ekstrak  etanol  buah  mengkudu  dilakukan dengan  metode  kromatografi  lapis  tipis (KLT).  Fase  diam  yang  digunakan  adalah silica  gel  60  F 254 dan  fase  gerak  n- butanol:asam  asetat  glasial:akuades  (3:1:1 v/v/v). Sebagai zat pembanding digunakan standar  rutin  0,5%  dalam  metanol.  Plat KLT disemprot dengan FeCl 3 10% sebagai penampak  bercak.  Hasil  elusi  diamati
secara visibel,  dibawah lampu UV 254 nm dan 366 nm.
Penetapan  kadar  fenolik  total dilakukan  menggunakan  pereaksi  Folin- Ciocalteu berdasarkan metode Singleton et al .  (1999).  Sebanyak  1,0  mL  sampel ditambahkan  dengan  5,0  mL  pereaksi Folin-Ciocalteu  yang  telah  diencerkan dengan air (1:10 v/v) dan 4,0 mL Na 2 CO 3 1M.  Setelah  diinkubasi  selama  60  menit kemudian  diukur  absorbansinya  pada panjang  gelombang  746,5  nm.  Sebagai standar,  dibuat  kurva  baku  pirogalol dengan  seri  konsentrasi  0,010;  0,020; 0,030;  0,040;  0,050  dan  0,060  mg/mL. Kadar  fenolik  total  dinyatakan  dalam  mg pirogalol ekuivalen (PE)/g ekstrak.

## D. Analisis  Kualitatif  Dan  Kuantitatif Flavonoid Total
Analisis  kualitatif  flavonoid  total ekstrak  etanol  buah  mengkudu  dilakukan dengan  metode  kromatografi  lapis  tipis (KLT).  Fase  diam  yang  digunakan  adalah silica  gel  60  F 254 dan  fase  gerak  n- butanol:asam  asetat  glasial:akuades  (3:1:1 v/v/v). Sebagai zat pembanding digunakan standar  rutin  0,5%  dalam  metanol.  Plat KLT kemudian disemprot dengan sitroborat sebagai penampak bercak. Hasil elusi  diamati  secara  visibel,    dibawah lampu UV 254 nm dan 366 nm.
Penetapan  kadar  flavonoid  total ditentukan  dengan  metode  Chang et  al .
(2002). Sebanyak 0,5 mL sampel ditambahkan  dengan  1,5  mL  metanol; 0,1  mL  AlCl 3 10%;  0,1  mL  kalium  asetat 1  M;  dan  2,8  mL  akuades.  Setelah diinkubasi  selama  5  menit  kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang  411,5  nm.  Sebagai  standar, dibuat  kurva  baku  rutin  dengan  seri konsentrasi  0,050;  0,100;  0,150;  0,200; 0,250  dan  0,300  mg/mL.  Kadar  flavonoid total dinyatakan dalam mg rutin ekuivalen (RE)/g ekstrak.

## E. Penentuan  Aktivitas  Antioksidan Dengan Metode DPPH
Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan spektrofotometri menggunakan  metode    DPPH  (Sugiat et  al .,    2010).  Ekstrak  dilarutkan  dalam metanol  sehingga  didapat  seri  konsentrasi 50, 100, 200, 300, dan 400 ppm. Sebanyak 1,0  mL  sampel  ekstrak  ditambahkan dengan  1,0  mL  larutan  DPPH  (100  ppm) dan metanol 4,0 mL, kemudian dihomogenkan mennggunakan vortex. Campuran larutan ini diinkubasi selama 30 menit  pada  suhu  37°C  dan  terlindung  dari cahaya matahari. Kemudian absorbansinya diukur  pada  panjang  gelombang  517  nm. Standar rutin digunakan sebagai pembanding dengan konsentrasi 5; 7,5; 10; 12,5  dan  15  ppm.  Persen  daya  hambat dihitung dengan rumus:
% Daya Hambat = [1-(A sampel/A kontrol] x 100

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Buah  mengkudu  yang  digunakan adalah  buah  masak  yang  kulit  buahnya masih keras dan belum lembek.
Pembuatan  ekstrak  dilakukan  dengan metode  maserasi  menggunakan  pelarut etanol  70%.  Maserasi  merupakan  metode ekstraksi  yang  cara  pengerjaan  dan peralatannya  sederhana  sehingga  mudah dilakukan. Serbuk buah mengkudu dimaserasi  selama  24  jam  sambil  sesekali diaduk.  Ketika  direndam,  akan  terjadi kontak  antara  dengan  larutan  penyari  dan serbuk  sehingga  zat  aktif  di  dalam  serbuk simplisia akan ditarik ke dalam pelarut.
Rendemen merupakan
perbandingan berat ekstrak yang dihasilkan  dengan  berat  serbuk  simplisia yang  digunakan  (Depkes  RI,  2000). Semakin  tinggi  rendemen,  semakin  besar pula  ekstrak  yang  dapat  dihasilkan  dari suatu  serbuk    simplisia.  Ekstrak  etanol buah  mengkudu  mempunyai  rendemen sebesar  19,49%.  Angka  ini  memenuhi persyaratan dari Farmakope Herbal Indonesia,    yaitu  tidak  kurang  dari  10,9% untuk  ekstrak  kental  buah  mengkudu (Depkes RI, 2008).
Pemeriksaan organoleptik merupakan  pemeriksaan  yang  dilakukan dengan  menggunakan  panca  indera  untuk mendeskripsikan  bentuk,  warna,  bau,  dan rasa  ekstrak  yang  diperoleh.  Tujuan pemeriksaan  ini  adalah  untuk  identifikasi
awal ekstrak secara sederhana. Organoleptik merupakan parameter spesifik  dari  suatu  ekstrak  (Depkes  RI, 2000).  Ekstrak  etanol  buah  mengkudu berbentuk  kental  padat,  warna  coklat  tua, bau  khas,  dan  rasanya  getir.  Hasil pemeriksaan ekstrak etanol buah mengkudu  sesuai  seperti  yang  tercantum pada Farmakope Herbal Indonesia (Depkes RI, 2008). Mengkudu mempunyai bau  khas  yang  akan  semakin  kuat  seiring matangnya  buah.  Bau  tersebut  disebabkan kandungan  asam  butirat  yang  meningkat (McClatchey,  2002).  Bau  khas  buah mengkudu tersebut sama ketika mengkudu dalam  bentuk  simplisia  maupun  ekstrak kental..
Analisis  kualitatif  senyawa  fenolik di  dalam  ekstrak  etanol  buah  mengkudu dilakukan menggunakan  KLT dengan fase gerak butanol-asam asetat glasial-air (3:1:1 v/v/v)  dan  fase  diam  silika  gel  60  F 254 . Ekstrak  etanol  buah  mengkudu  ditotolkan saja  di  plat  KLT  dan  tidak  dielusi. Penampak  bercak  yang  digunakan  yaitu pereaksi semprot FeCl 3 1%. Hasil KLT uji kualitatif  senyawa  fenolik  dapat  dilihat pada  Gambar  1.  Senyawa  fenolik  apabila disemprot  dengan  FeCl 3 akan memberikan warna hijau, merah ungu, biru, kelabu atau hitam (Harborne,  1996;  Malbaša et  al .,
2004).  Dari  hasil  KLT,  diketahui  bahwa terdapat  kandungan  senyawa  fenolik dalam  ekstrak  etanol  buah  mengkudu,
dimana  warna  bercak  dari  coklat  muda menjadi kelabu.
Gambar  1 .  Hasil  analisis  kualitatif  senyawa fenolik ekstrak etanol buah
mengkudu. KLT menggunakan fase
diam  silika  gel  60  F 254 ,  fase  gerak butanol-asam asetat glasial-air (3:1:1  v/v/v)  dan  jarak  elusi  8  cm, (A) standar rutin, (B) ekstrak etanol buah mengkudu
tanpa
pengembangan.  Pengamatan  (1) pada
sinar visibel tanpa penyemprotan FeCl 3 , (2) pada sinar visibel setelah penyemprotan FeCl 3
Kandungan total fenolik ditetapkan menggunakan reagen Folin-Ciocalteu berdasarkan  metode  Singleton  (1999).
Senyawa  fenolik  akan  bereaksi  dengan reagen Folin-Ciocalteu membentuk kompleks  berwarna  biru  dengan  intensitas warna  yang  sebanding  dengan  kadar senyawa  fenolik  yang  ada.  Absorbansi diukur pada panjang gelombang 746,5 nm. Pirogalol yang merupakan senyawa
dengan 3 gugus hidroksi fenolik digunakan sebagai  standar,  sehingga  kadar  total fenolik ditetapkan sebagai miligram ekivalen pirogalol. Kandungan total fenolik dalam ekstrak etanol buah mengkudu sebesar 14,44+0,82 mg
ekivalen pirogalol (PE)/g ekstrak.
Analisis kualitatif senyawa flavonoid  pada  ekstrak  etanol  buah mengkudu  menggunakan  KLT  dengan sistem  fase  gerak  butanol-asam  asetat glasial-air  (3:1:1  v/v/v),  fase  diam  silika gel  60  F 254 dan  rutin  sebagai  standar. Penampak  bercak  yang  digunakan  yaitu uap  NH 3 dan  sitroborat.  Hasil  KLT menunjukkan  adanya  senyawa  flavonoid (Gambar 2).
Gambar  2. Analisis  kualitatif  flavonoid  ekstrak etanol buah mengkudu. KLT menggunakan fase diam silika gel 60 F 254 , fase gerak n-butanol:asam asetat glasial:air  (3:1:1  v/v/v),  (A)  standar rutin,  (B)  ekstrak  etanol  buah mengkudu.  Pengamatan  di  bawah UV 366,  (1) sebelum penyemprotan, (2) uap NH 3, (3) disemprot sitroborat
Plat KLT  yang diuapi NH 3 dengan pengamatan  di  bawah  lampu  UV  366  nm memberikan  fluoresensi  dengan  warna kuning  kehijauan  dan  kuning  redup  yang menunjukkan  adanya  flavonol  (Markham, 1988).  Plat  hasil  elusi  yang  disemprot sitroborat  dan  dipanaskan  selama  5  menit pada  suhu  110°  C,  pada  pengamatan dengan sinar UV 366 nm akan memberikan  warna  fluoresensi  kuning yang menandakan adanya flavonoid (Wagner et al., 2013)
Gambar  3. Reaksi  pembentukan  kompleks  AlCl 3 dan flavonoid (Markham, 1988)
Kandungan total flavonoid ditetapkan  menggunakan  reagen  AlCl 3 berdasarkan  metode  Chang et  al . (2002).
AlCl 3 akan  bereaksi  dengan  gugus  keto pada C4 dan  gugus  OH   pada C3  atau C5 pada  senyawa  flavon  atau  flavonol membentuk senyawa kompleks yang stabil berwarna kuning. Reaksi flavonoid dengan AlCl 3 dapat dilihat pada Gambar  3. Kadar total  flavonoid  ekstrak  etanol  buah mengkudu,  yaitu  sebesar  5,69+0,21  mg ekivalen rutin (RE)/g ekstrak.
Antioksidan  merupakan  senyawa pemberi  elektron  (elektron  donor)  yang berperan  dalam  menghambat  oksidasi yang diperantarai oksigen. Senyawa antioksidan  dapat  mencegah  pengaruh buruk  yang  disebabkan  oleh  senyawa radikal bebas sehingga memegang peranan penting  dalam  pertahanan  tubuh  terhadap penyakit (Percival, 1998). Pada percobaan ini  uji  aktivitas  antiradikal  menggunakan metode
DPPH (1,1 -diphenyl- 2 -
picrylehydrazyl ). Metode
DPPH
merupakan suatu  metoda kolorimetri  yang efektif  dan  cepat  untuk  memperkirakan aktivitas  antiradikal.  Saat  larutan  DPPH dicampurkan  dengan  substansi  yang  dapat memberikan hidrogen radikal, akan menyebabkan  terjadinya  bentuk  tereduksi dengan  perubahan  warna  violet  menjadi kuning (Molyneux, 2003). Aktivitas antioksidan  dinyatakan  dengan IC 50 yaitu konsentrasi yang dibutuhkan untuk menghasilkan  penurunan  aktivitas  DPPH sebesar 50%. Semakin kecil IC 50 , semakin kuat aktivitas antioksidannya. Dari perhitungan  didapatkan  nilai IC 50 rutin sebagai  pembanding  sebesar  10,56+0,42 µg/mL  dan IC 50 ekstrak  etanol  buah mengkudu  sebesar  104,73+4,56    µg/mL. Berdasarkan  tingkat  kekuatan  antioksidan, rutin  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang sangat  kuat  ( IC 50 < 50  µg/mL  )  sedangkan ekstrak  etanol  buah  mengkudu  memiliki
aktivitas antioksidan sedang ( IC 50 101-250 µg/mL) (Jun et al ., 2003).
Aktivitas antioksidan ekstrak
etanol  buah  mengkudu  salah  satunya karena  adanya  kandungan  flavonoid  dan senyawa  fenolik  (Rao  dan  Subramanian, 2009).  Flavonoid  merupakan  kelompok terbesar  dari  senyawa  fenolik.  Sebagai antioksidan, senyawa ini mampu menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi  kekurangan  elektron  yang dimiliki  radikal  bebas,  dan  menghambat terjadinya reaksi berantai dari pembentukan  radikal  bebas.  Skopoletin yang  merupakan  senyawa  fenolik  pada buah mengkudu terbukti mampu menurunkan tekanan darah dengan merelaksasi  otot  polos  vaskular  sehingga tekanan  darah  arteri  menurun  dan  tekanan darah  juga  menurun  (Suidah,  2011)  selain itu juga  mengontrol level serotonin dalam tubuh (Levand dan Larson, 1979).
Beberapa  penelitian  telah  dilakukan  untuk melihat hubungan antara kandungan fenol, flavonoid,  dan  aktivitas  antioksidan.  Hasil penelitian  Kao et  al. (2007)  menunjukkan bahwa  kandungan  fenol  dan  flavonoid dalam blackberry berbanding lurus dengan aktivitas  antioksidan.  Sementara  Khamsah et al . (2006) dalam penelitiannya menyatakan  bahwa  aktivitas  antioksidan tidak  hanya  bergantung  pada  kandungan total  fenol  tetapi  juga  dipengaruhi  oleh senyawa  lain,  seperti  asam  ursolat,  asam
betulinat,  dan  asam  oleat  yang  terdapat dalam Orthosiphon stamineus.

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat disimpulkan bahwa kandungan total fenolik dalam ekstrak etanol buah mengkudu sebesar 14,44+0,82 mg ekivalen  pirogalol  (PE)/g  ekstrak,  kadar total  flavonoid  ekstrak  etanol  buah mengkudu  sebesar  5,69+0,21  mg  ekivalen rutin  (RE)/g  ekstrak,  dan IC 50 ekstrak etanol buah mengkudu sebesar 104,73+4,56 µ g/mL.  Berdasarkan  tingkat kekuatan  antioksidan,  ekstrak  etanol  buah mengkudu  memiliki  aktivitas  antioksidan sedang ( IC 50 101-250 µg/mL).

## DAFTAR PUSTAKA
Anhwange,  B.  A.,  Ugye,  T.  J.  &  Akihisa, T.,  Matsumoto,  K.,  Tokuda,  H., Yasukawa, K., Seino, K., Nakamoto,  K., et  al .  2007.  Anti- inflamatory  and  Potential  Cancer Chemopreventive  Constituent  of The  Fruits  of  Morinda  citrifolia (Noni). Journal of Natural Products , 70: 754–757. Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  RI. 2010. Monografi Ekstrak Tumbuhan  Obat  Indonesia .  Badan Pengawas  Obat  dan  Makanan Republik Indonesia, Jakarta.
Basar,  S.,  Uhlenhut,  K.,  Hogger,  P.,
Shcone,  F.,  and  Westendorf,  J. 2010. Analgesic and Antiiflamatory Activity of Morinda citrifolia L. (noni). Fruits. Phytotheraphy  Research ,  24:  38– 42.
Brett,  J.W.,  Jarakae,  J.,  Afa,  K..,  and
Shixin,  D.  2011.  Toxicity  and Antioxidant Test of Morinda
citrifolia  (noni)  Seed  Extract.
Journal  of  Food  Science  And Technology , 3: 303–307.
Chang,  C.  C.,  Yang,  M.  H.,  Wen,  H.  M., and  Chern,  J.  C.  2002.  Estimation of  Total  Flavonoid  Content  in Propolis  by  Two  Complementary Colorimetric  Methods. Journal  of Food and Drug Analysis , 10:  178– 182.
Departemen Kesehatan RI. 2000. Parameter  Standar  Umum  Ekstrak Tumbuhan Obat . Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Departemen Kesehatan RI. 2008. Farmakope  Herbal  Indonesia ,  1st
ed. Departemen
Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta. Duenas  M,  Manzano  SO,  Paramas  AG, and  Buelga  SC.  2009,  Antioxidant evaluation of O-methylated metabolites of catechins, epicatechin, and quersetin. Journal of  Pharmaceutical  and  Biomedical Analysis.
Harborne  JB.  1996. Metode  Fitokimia: Penentuan Cara Modern Menganalisa Tumbuhan . Terjemahan  Kosasih  Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: ITB.
Jun,  M.H.Y.,  J.,  Fong,  X.,  Wan,  C.S., Yang, C.T., and Ho. 2003.
Camparison of Antioxidant Activities  of  Isoflavones  Form
Kudzu  Root  ( Puerarua  labata O). Journal  Food  Science  Institute  of Technologist . 68: 2117-2122.
Juniarti,  Osmeli,  D.,  dan  Yuhernita.  2009. Kandungan  Senyawa  Kimia,  Uji
Toksisitas (BSLT) dan Antioksidan (1,1-diphenyl-2-pikrilhydrazyl) dari  Ekstrak  Daun  Saga. Makara Sains, 13: 50-54.
Kamiya,  K.,  Hamabe,  W.,  Harada,  S., Murakami,  R.,  Tokuyama,  S.,  and Satake, T. 2008. Chemical Constituent  of  Morinda  citrifolia Roots Exhibit Hypoglycemic Effects  in  Streptozotuzin-induced
Diabetic Mice. Bio Pharm Bull , 31: 935–938.
Kao,  M.S.,  Woods,  F.M.,  Dozier,  W.A.,
Ebel, R.C., Nesbitt, M., Jee, J., and Fields,  D.  2007.  Phenolic  Content and  Antioxidant  Capacities  of Alabama-Grown Thornless
Blackberries. International Journal of Fruit Science , 7:33-46.
Khamsah  SM,  Akowah  G,  and  Zhari  I.
2006.  Antioxidant  Activity  and Phenolic  Content  of Orthosiphon stamineus Benth  from  Different Geofraphical  Origin. Journal  of Sustainable  Science  Management ,
1:14-20.
Kuncahyo,  I.  dan  Sunardi.  2007.  Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Belimbing Wuluh ( Averrhoa bilimbi , L.) terhadap 1,1-Diphenyl- 2-Picrylhidrazyl  (DPPH).  Seminar Nasional Teknologi, Yogyakarta.
Levand,  O.  and  Larson,  H.O.  1979.  Some Chemical  Constituent  of  Morinda citrifolia. Planta  Medica ,  36:  186– 187.
Malbaša, R.V., Lončar, E.S., and Kolarov,
L.A.  2004.  TLC  Analysis  of  Some
Phenolic Compounds in Kombucha Beverage. Acta Periodica Technologica , 35: 199–205. Markham,  K.R.  1988, Techniques  of Flavoniods
Identification , diterjemahkan  oleh  Padmawinata,
K., Bandung: ITB.
McClatchey,  W.  2002.  From  Polynesian Healers  to  Health  Food  Stores: Changing  Perspectives  of Morinda citrifolia (Rubiaceae). Integrative Cancer Therapies , 1: 110–120.
Mian-Ying,  W.,  Diane,  N.,  Gary,  A., Jarakae,  J.,  and  Brett,  W.  2008. Liver Protective Effects of Morinda citrifolia  (Noni). Plant  Foods  for
Human Nutrition , 63: 59–63.
Molyneux,  P.  2003.  The  use  of  the  stable free radikal diphenylpicrylhydrazyl (DPPH)  for  estimating  antioxidant
activity. Journal Science of Technology , 26: 211-219. Nayak,  B.S.,  Isitor,  G.N.,  Maxwell,  A.,
Bhogadi,  V.,  and  Ramdath,  D.D. 2007.  Wound-healing  Activity  of Morinda  citrifolia  Fruit  Juice  on
Diabetes-induced  Rats. J  Wound Care , 16: 83–86.
Percival,  M.  1998. Antioxidant ,  Advanced Notrition Publication, Inc.
Rao,  U.S.M.  and  Subramanian,  S.  2009.
Biochemical Evaluation of Antihyperglycemic and Antioxidative  Effects  of Morinda citrifolia Fruit  Extract  Studied  in Streptozotocin-Induced Diabetic Rats. Medicinal Chemistry Research , 18: 433–446.
Saf-ur,  R..  M.,  Aziz,  N.,  and  Gilani,  A.H. 2010.  Studies  on  antidyslipidemic effects of Morinda citrifolia (Noni) fruit,  leaves  and  root  extracts. Lipids  in  Health  and  Disease ,  9:
88.
Singleton, V.L., Orthofer, R., and
Lamuela-Raventós,  R.M.  1999.
Analysis  of  Total  Phenols  and Other  Oxidation  Substrates  and Antioxidants  by  Means  of  Folin- Ciocalteu  Reagent. Methods  in
Enzymology , 299: 152–178.
Sugiat,  D.,  Hanani,  E.,  dan  Mun’im,  A.
2010.  Aktivitas  Antioksidan  dan Penetapan  Kadar  Fenol  Total Ekstrak  Metanol  Dedak  Beberapa Varietas  Padi  ( Oryza  Sativa L.). Majalah  Ilmu  Kefarmasian ,  8:  24-
33.
Suidah,  H.  2011.  Pengaruh  Mengkudu
Terhadap Penurunan Tekanan
Darah pada Penderita Hipertensi di
Desa  Wedoroklurak  Kecamatan Candi  Kabupaten  Sidoarjo. Jurnal Keperawatan , 01(1).
Wagner, H., Bladt, S., and Zgainski, E.M.
2013. Plant Drug Analysis: A Thin
Layer Chromatography Atlas . Springer  Science & Business
Media.
Yamaguchi,  S.,  Ohnishi,  J.,  Sogawa,  M., Maru,  I.,  Ohta,  Y.,  and  Tsukada,
Y. 2002. Inhibition of Angiotensin
I  Converting  Enzyme  by  Noni (Morinda  citrifolia)  Juice. Nippon Shokuhin  Kagaku  Kogaku  Kaishi ,
49: 624–627.