Nafis,A.,  Bara,  B,  A.,  Farhani,  D.,  Maharani,  D.,  Prasetyo,  F.,  Mukti,  G,  I.,  Sa’diyyah,  N.,    (2022) Analisis Senyawa Dolutegravir dalam Berbagai Sampel Biologis, Syntax Idea, 4 (4) , https://doi.org/10.36418/syntax-idea.v4i4.1837 E-ISSN: 2684-883X Published by: Ridwan Institute
Syntax Idea: p–ISSN: 2684-6853 e-ISSN: 2684-883X Vol.4, No.4, April 2022

## ANALISIS  SENYAWA  DOLUTEGRAVIR  DALAM  BERBAGAI  SAMPEL BIOLOGIS
Alya Nafis, Bismar Al Bara, Deviana Farhani, Dhavina Maharani, Fajar Prasetyo, Galih Ibnu Mukti, Nur Sa’diyyah
Universitas Singaperbangsa Karawang Jawa Barat, Indonesia Email: 1910631210025@student.unsika.ac.id, 1910631210026@student.unsika.ac.id, 1910631210027@student.unsika.ac.id, 1910631210028@student.unsika.ac.id, 1910631210006@student.unsika.ac.id, 1910631210037@student.unsika.ac.id, 1910631210013@student.unsika.ac.id

## Abstrak
Bioanalisis merupakan analisis kimia yang digunakan untuk menetapkan kadar zat- zat  xenobiotic  serta  zat  biotik  dalam  sistem  biologi.  Dalam  dunia  farmasi bioanalisis  berperan  dalam  pengembangan  obat  baru,  terapi  drug  monitoring,  dan juga bioekivalensi. Penelitian bioanalisis yang akan dibahas pada jurnal ini adalah mengenai  analisis  dolutegravir  dalam  sampel  urin,  air  liur  (saliva),  dan  plasma darah.  Teknik  yang  digunakan  dapat  mendeteksi  kandungan  dolutegravir  dalam urin,  liur,  dan  juga  plasma  darah.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengamati  keberadaan  dolutegravir  menggunakan  berbagai  macam  metode  dalam berbagai  sampel  biologis,  yakni  plasma  darah,  saliva,  dan juga  urin.  Metode  yang digunakan  dalam  pembuatan  review  artikel  ini  adalah  pengumpulan  literature  dari sumber  jurnal  yang  ada  yang  berkaitan  dengan  analisis  dolutegravir  pada  sampel biologis  yang  bersumber  dari  google,  google  scholar,  dan  e-book  dengan menggunakan  kata  kunci  “dolutegravir”,  “bioanalisis”,  “darah”,  “urin”,  dan “saliva”  dalam  pencarian  literatur.  Penelusuran  lebih  lanjut  dapat  dilihat  secara manual  pada  penulisan  daftar  pustaka.  Hasil  yang  didapatkan  bahwa  metode  yang digunakan  dalam  analisis  sampel  plasma darah  dan  saliva  sudah  bisa  memberikan hasil yang akurat. Namun metode yang digunakan pada sampel urin belum akurat sehingga  perlu  adanya metode  lain  yang dilakukan  untuk mendapatkan  hasil  yang akurat.
Kata kunci : bioanalisis; dolutegravir ; plasma darah; urin; saliva

## Abstract
Bioanalysis  is  a  chemical  analysis  used  to  determine  the  levels  of  xenobiotic substances  and  biotic  substances  in  biological  systems.  In  the  pharmaceutical world, bioanalysis plays a role in the development of new drugs, monitoring drug therapy, and also bioequivalence. The bioanalytic research that will be discussed in this journal is about the analysis of dolutegravir in urine, saliva (saliva), and blood plasma samples. The technique used can detect the content of dolutegravir in urine, saliva, and blood plasma. The purpose of this study was to observe the presence of dolutegravir  using  various  methods  in  various  biological  samples,  namely  blood
plasma,  saliva,  and  urine.  The  method  used  in  making  this  article  review  is  the collection  of  literature  from  existing  journal  sources  relating  to  the  analysis  of dolutegravir  on  biological  samples  sourced  from  google,  google  scholar,  and  e- books  using  the  keywords  "dolutegravir",  "bioanalysis",  "blood  ”,  “urine”,  and “saliva” in a literature search. Further search can be seen manually in writing a bibliography.  The  results  showed  that  the  method  used  in  the  analysis  of  blood plasma  and  saliva  samples  was  able  to  provide  accurate  results.  However,  the method used in urine samples is not yet accurate, so other methods are needed to get accurate results.

## Keywords: bioanalysis; dolutegravir; blood plasma; urine; saliva

## Pendahuluan
Bioanalisis  merupakan  analisis  kimia  yang  digunakan  untuk  menetapkan  kadar zat-zat  xenobiotic  serta  zat  biotik  dalam  sistem  biologi.  Teknik-teknik  yang  biasa dilakukan dalam bioanalisis adalah LC UV/FL, LC  – MS, GC – MS, serta LC MS/MS (Grégoire  et  al.,  2014) .  Sebelum  melakukan  penelitian  biasanya  dilakukan  preparasi pada  sampel.  Teknik  yang  biasa  digunakan  dalam  preparasi  sampel  adalah  teknik pengenceran matriks, pengendapan protein (Bennetto-Hood, Tabolt, Savina, & Acosta, 2014), ultrafiltrasi, ekstraksi cair-cair, dan ekstraksi fase padat.
Dalam dunia farmasi bioanalisis berperan dalam pengembangan obat baru, terapi drug  monitoring,  dan  juga  bioekivalensi.  Sampel  yang  digunakan  dalam  bioanalisis berasal  dari  matriks  biologi,  seperti  darah,  air  liur,  rambut,  kulit,  urin,  tinja,  dan  lain sebagainya.
Penelitian bioanalisis yang akan dibahas pada jurnal ini adalah mengenai analisis dolutegravir dalam sampel urin, air liur (saliva), dan plasma darah.
Dolutegravir  merupakan  obat  golongan  antiretrovirus  (ART)  yang  biasa digunakan  dalam  terapi  obat  untuk  penyakit  HIV.  Pada  saat  HIV  menular,  DNA  HIV akan  dipadukan  dengan  DNA  sel  induk.  Pemaduan  antara  DNA  HIV  dan  DNA  sel induk  dibantu  oleh  enzim  integrase.  Obat  dolutegravir  bekerja  sebagain  integrase inhibitor  yang  mana  akan  menghambat  proses  pemaduan  antara  DNA  HIV  dan  sel induk.  Obat  ini  tidak  memberikan  efek  samping,  namun  jika  muncul  biasanya  efek samping  yang  terjadi  adalah  mual,  sakit  kepala,  dan  diare.  Dolutegravir  digunakan untuk  penderita  HIV  yang  sudah  mengalami  resisten  oleh  obat  golongan  ARV. Dolutegravir merupakan obat baru sehingga potensi resisten yang terjadi sangat minim.

## Metode Penelitian
Metode yang digunakan dalam pembuatan review artikel ini adalah pengumpulan literature dari sumber jurnal yang ada yang berkaitan dengan analisis dolutegravir pada sampel  biologis  yang  bersumber  dari  google,  google  scholar,  dan  e-book  dengan menggunakan  kata  kunci  “dolutegravir”,  “bioanalisis”,  “darah”,  “urin”,  dan  “saliva” dalam  pencarian  literatur.  Penelusuran  lebih  lanjut  dapat  dilihat  secara  manual  pada penulisan daftar pustaka.

## Hasil dan Pembahasan
1. Bioanalisis Dolutegravir pada Sampel Plasma Darah
Dalam  menganalisis  kadar  dolutegravir  juga  dapat  dilakukan  dengan menggunakan sampel plasma darah, seperti yang dilakukan oleh (Bennetto-Hood et al.,  2014) , (Grégoire  et  al.,  2014) dan (Yagura,  Watanabe,  Nakauchi,  &  Watanabe,
2017).
Menurut (Bennetto-Hood et al., 2014) melakukan analisis dolutegravir dengan menggunakan  sampel  plasma  darah  pada  pasien  sebanyak  20µL  yang  dipreparasi dengan  pengendapan  protein  sederhana  menggunakan  asetonitril.  Pengendapan dilakukan  dengan  menggunakan  pelarut  organik  yaitu  asetonitril  sebanyak  120µL kemudian dilakukan pengocokan dengan rotary shaker selama 2 menit pada 1500rpm dan  endapan  diendapkan  dengan  mensentrifugasi  selama  5  menit  pada  5000rpm. Pengenceran sampel dilakukan dengan menambahkan supernatant ke 120µL 1mg/ml EDTA  dalam  asam  format  0.1%  sebelum  diinjeksikan  ke  HPLC-MS/MS  untuk analisis.  Kromatografi  dilakukan menggunakan  kolom  dengan  ukuran  2.1  mm  ×  50 mm pada fase terbalik menggunakan pelarut 60:40 asetonitril/air yang mengandung 0.1%  asam  format.  Deteksi  analit  dan  internal  standar  dilakukan  dengan  HPLC- MS/MS.
Hal serupa juga dilakukan oleh (Grégoire et al., 2014) yang melakukan analisis kadar  dolutegravir  pada  sampel  plasma  darah  pasien  HIV  menggunakan kromatografi  cair  tandem-spektrometri  massa  atau  liquid  chromatography-tandem mass  spectrometry  (LC-MS/MS).  Preparasi  sampel  dilakukan  dengan  cara pengendapan  protein  darah  pasien  HIV  yang  telah  dicampur  dengan  antikoagulan berupa  K3EDTA  menggunakan  sentrifugasi  dengan  kecepatan  1800  g  selama  10 menit  pada  suhu  4°C.  Kemudian,  plasma  darah  diambil  sebanyak  100  µL  dan dicampur  dengan  200  µL  reagent  perpitasi  yang  terdiri  dari  campuran  metanol  dan seng  sulfat  0,2  M  dengan  perbandingan  80/20  (v/v)  termasuk  standar  internalnya yaitu  dolutegravir-¹³Cd5  sebanyak  0,4  mg/L.  Selanjutnya,  campuran  divortex  dan disentrifugasi  kembali  selama  15  menit  dengan  kecepatan  13.000  g  dan  suhu  4°C. Lalu, supernatan sampel diambil sebanyak 25 µL untuk disuntikkan ke dalam sistem kromatografi.  Kromatografi  dilakukan  menggunakan  campuran  90%  eluen  A  yang terdiri dari (100% air, 10 mM amonium asetat, 0,1% asam asetat) serta 10% eluen B yang  terdiri  dari  (100%  asetonitril)  untuk  pengikatan  dolutegravir.  Selanjutnya, supernatan  sampel  bersama  eluen  C  yang  terdiri  dari  (66%  asetonitril:34%  air,  10 mM  amonium  asetat,  0,1%  asam  asetat)  disuntikan  ke  dalam  kolom  HPLC  fenil- heksil - deteksi  spektrometri  massa  tandem  dengan  pompa  isokratik  untuk mempermudah pemisahan dalam proses analisis.
Sedangkan  Hiroki  Yagura,  dkk  menganalisis  kadar  dolutegravir  di  dalam plasma  darah  pada  162  pasien  yang  terinfeksi  HIV  dan  di  bawah  pengobatan  anti- retroviral(ARV)  termasuk  DTG  (dolutegravir).  Analisis  dilakukan  dengan mengisolasi analit  dengan  cara  mensentrifugasi  sampel  plasma  sebanyak  2mL  pada 3000rpm selama 2menit, dan dilakukan pengujian konsentrasi menggunakan LC-MS.
Berdasarkan  pemaparan  yang  telah  dijabarkan  dapat  diketahui  bahwa  analisis dolutegravir  dalam  sampel  plasma  darah  dapat  dilakukan  dengan  preparasi  sampel berupa pengendapan protein sederhana dan dianalisis menggunakan beberapa metode seperti  kromatografi  cair  tandem-spektrometri  massa  (HPLC-MS/MS)  serta kromatografi cair - spektrometri massa (LC-MS).

## 2. Bioanalisis Dolutegravir pada Sampel Urin
Analisis  Dolutegravir  juga  dapat  dilakukan  menggunakan  sampel  urin, penelitian  ini  telah  dilakukan  oleh  Shabnam  Allahverdiyeva,  dkk  pada  tahun  2021 menggunakan  metode  analisis  Voltametri  dengan  Voltametri  siklik  (CV)  untuk menyelidiki  perilaku  redoks  Dolutegravir  dalam  buffer  BR  pada  pH  10,0  dan Voltametri  Stripping  Adsorptif  Gelombang  Persegi  (SW-AdSV)  dalam  buffer  BR kisaran  pH  2,0-12,0  untuk  mengevaluasi  kinerja  analitis  dan  kepraktisan  metode tersebut.
Analisis  Dolutegravir  yang  dilakukan  oleh  Shabnam  Allahverdiyeva,  dkk menggunakan  sampel  urin  manusia  yang  terbebas  dari  obat-obatan  dengan  kondisi perut  yang  kosong  dan  diambil  satu  hari  sebelum  percobaan.  Sampel  urin  yang digunakan sebanyak 5,0 mL dan disentrifugasi dengan 5 mL larutan Dolutegravir (1 mg/mL),  hasil  sentrifugasi  selanjutnya  divortex  selama  1  menit.  Volume  campuran sebanyak  100  mL  dipindahkan  kedalam  sel  voltametri  yang  mengandung  10  mL buffer BR pada pH 10,0. Penambahan berturut-turut larutan Dolutegravir dilakukan dengan  mikropipet  ke  sel  voltametri,  dan  voltamogram  stripping  dicatat  setelah setiap  penambahan.  Prosedur  ini  juga  diterapkan  pada  sampel  urin  yang  bebas Dolutegravir untuk mendapatkan blanko.
Sensitivitas  pengujian  tersebut  masih  belum  cukup  untuk  mendeteksi konsentrasi  Dolutegravir  dalam  sampel  urin  dari  pasien  yang  terinfeksi  HIV. Penelitian lanjut harus dilakukan dengan menggunakan teknik yang berbeda, seperti kromatografi dan spektrometri massa.
Analisis  Dolutegravir  menggunakan  sampel  urin  juga  dilakukan  oleh  Stephen Castellino,  dkk  pada  tahun  2013  menggunakan  metode  HPLC  untuk  menentukan farmakokinetik,  metabolisme,  dan  ekskresi  dolutegravir  setelah  pemberian  oral tunggal  [14C]dolutegravir  sebagai  formulasi  suspensi  untuk  subjek  manusia  yang sehat.
Subjek  pria  dewasa  sehat  dan  tidak  merokok  berusia  30  hingga  55  tahun  dan berat  badan  lebih  dari  50  kg  dengan  indeks  massa  tubuh  18,5  hingga  31  kg/m2 memenuhi  syarat  untuk  berpartisipasi  dalam  penelitian  ini.  Setelah  puasa  semalam setidaknya 10 jam, subjek menerima dosis oral tunggal [14C]dolutegravir pada 20,9 - 0,1  mg  mengandung  80  -  0,4  -Ci  (0,96 mSv)  radioaktivitas  sebagai  suspensi  dalam hypromellose,  sodium  laural  sulfate,  dan  air  steril  untuk  injeksi,  segera  diikuti dengan pembilasan air, dengan total volume pemberian 240 ml . Setiap radioaktivitas yang diperoleh dari botol dosis dikurangi dari dosis yang dihitung.
Urine dikumpulkan predosis dan pada 0 sampai 6, 6 sampai 12, dan 12 sampai 24 jam dan pada interval 24 jam sampai kriteria debit terpenuhi. Urine disimpan pada suhu  2  hingga  8°C  selama  pengumpulan  dan  dikumpulkan  selama  interval pengumpulan, dan kemudian sebagian dibekukan pada suhu 20°C atau lebih dingin. urin  (dalam  rangkap  tiga)  radioaktivitas  sampel  ditentukan  dengan  penghitungan kilau  cair  (LSC).  Bagian  dari  setiap  sampel  dicampur  dengan  koktail  kilau  Ultima Gold XR dan dianalisis radioaktivitasnya menggunakan penghitung kilau cair Model 2900TR  (Packard  Instrument  Co.,  Meriden,  CT)  selama  setidaknya  5  menit  atau 100.000  hitungan.  .Sampel  urin  yang  dikumpulkan  dari  setiap  subjek  adalah disentrifugasi,  dan  sebagian  dianalisis  dengan  menggunakan  HPLC  dengan  deteksi radiokimia.  Profil  radiokimia  urin  dihasilkan  dengan  menggunakan  Agilent (PaloAlto,  CA)  1200  sistem  HPLC.  Puncak  radiokromatografi  dipisahkan  setelah injeksi  ke  Simetri  C18kolom  (100  kali  4,6  mm;  3,5  -m;  Waters  Associates)  pada 40°C dan dielusi dalam kondisi gradien dengan fase gerak yang terdiri dari 2 pelarut: pelarut  A,  0,1%  amonium  asetat  dalam  air;  dan  pelarut  B,  0,1%  amonium  asetat dalam asetonitril. Metode HPLC yang dijelaskan di atas untuk profil radiokimia juga diterapkan pada analisis metabolit.

## 3. Bioanalisis Dolutegravir pada Sampel Saliva
Untuk  menganalisis  konsentrasi  obat  Dolutegravir  melalui  metode  LC/MS pada sampel air liur. Dikumpulkan saliva dari pasien yang terinfeksi HIV. Diberikan regimen  yang  mengandung  50  mg  DTG  setiap  hari  selama  lebih  dari  satu  bulan. Sampel  dikumpulkan  dalam  waktu  1  jam  dan  disimpan  pada  suhu  -20°C  sebelum penggunaan.
Sampel  saliva  dicampur  dengan  DTG-d5  (23,8  ng/mL)  sebagai  internal standar,  kemudian  dicampur  dengan  asetonitril  1:1  untuk  mengendapkan  protein yang  terkandung  pada  sampel.  Selanjutnya  sampel  disentrifugasi  dengan  kecepatan 12.000  rpm  selama  3  menit  pada  suhu  25°C  untuk  menghilangan  bahan  yang terendap.
Untuk  menentukan  konsentrasi  DTG  dapat  menggunakan  metode  LC-MS dengan  DTG-d5  sebagai  standar  internalnya.  Analit  yang  didapat  nantinya dipisahkan  secara  isokratis  pada  fase  terbalik  di  kolom  berukuran  1,5  x  50  mm. Analit dideteksi menggunakan mode ionisasi elektrospray positif dengan pemantauan reaksi  ganda  (MRM).  Kemudian  kurva  kalibrasi  dipersiapkan  dengan  saliva  yang mengandung DTG dalam kisaran 0,5-100 ng/mL.
Validasi  metode  kuantifikasi  DTG  dalam  sampel  saliva  memberikan  nilai LLOQ  0,5  ng/mL  yang  sesuai  dengan  kriteria.  Pada  kurva  kalibrasi  linear  dalam kisaran  0,5-100  ng/mL  didapatkan  presisi  <14,4%  dan  akurasi  +  14,7%.  Kriteria penerimaan  akurasi  yakni  +  15%,  kecuali  pada  LLOQ  yakni  dalam  +  20%  dapat diterima,  sementara  kriteria  penerimaan  presisi  adalah  CV  <15%,  kecuali  pada LLOQ  yakni  CV  <20%.  Standar  yang  tidak  memenuhi  kriteria  ini  dikeluarkan  dari perhitungan kurva.
Pada penelitian lain analisis Dolutegravir dalam air liur dilakukan dengan cara pengambilan  sampel  air  liur  dari  subjek  yang  dirawat  di  UNC  CTRC  setidaknya  2 jam sebelum pemberian dosis DTG 50 mg  pada hari ke 1 dan pada hari ke 7. Cairan mukosa  rektal  dikumpulkan  sendiri  sebelum  pemberian  dosis  dan  pada  dua  poin waktu per subjek di hari ke 1 dan tiga poin waktu per subjek di hari ke 7 dan 8 (baik 1, 3, 6, 12, 18, atau 24 jam pasca dosis). RF dikumpulkan sendiri oleh subjek yang mengikuti  instruksi  melalui  penyisipan  swab  Dacron  sekitar  1-2  inci  ke  dalam rektum selama 1-2 menit.
Kuantifikasi  konsentrasi  obat  di  semua  matriks  diselesaikan  dengan menggunakan  metode  LC-MS  /  MS  yang  divalidasi  oleh  UNC  Center  for  AIDS Research  Clinical  Pharmacology  and  Analytical  Chemistry  Core.  Air  liur  manusia digunakan sebagai matriks pengganti untuk analisis RF. Standar kalibrasi dan sampel QC  disiapkan  dengan  menambahkan  human  air  liur,  diperkaya  pada  berbagai konsentrasi  dengan  DTG,  ke  penyeka  bersih  untuk  meniru  komposisi  sampel penelitian. DTG awalnya diekstraksi dari penyeka dengan 2 mL asetonitril. Sebagian dari  ekstrak  tersebut  kemudian  dicampur  dengan  DTG-IS.  Mengikuti  pusaran  dan langkah sentrifugasi, sampel dipindahkan ke pelat 96-sumur untuk analisis LC-MS / MS.  Tiga  puluh  mikroliter  Air  liur  dicampur  dengan  600  L  asetonitril  yang mengandung standar internal. Mengikuti vortex dan langkah sentrifugasi, supernatan diencerkan  dengan  metanol  50:50:air  sebelum  untuk  analisis  LC-MS/MS.  DTG dielusi  dari  Varian  (Agilent)  Pursuit  Diphenyl  (2,1  ×  50  mm,  ukuran  partikel  3  m) kolom  analitik.  Data  dikumpulkan  menggunakan  Sciex  Analyst  Perangkat  Lunak Kromatografi  pada  spektrometer  massa  triple  quadrupole  AB  Sciex  API-5000  (AB Sciex,  Kota  Asuh,  CA).  Kurva  kalibrasi  diperoleh  dengan  menggunakan 1/konsentrasi²  regresi  linier  tertimbang  analit:  rasio  area  puncak  standar  internal. Sampel  di  atas  rentang  kalibrasi  0,075  hingga  75  ng  DTG  per  swab  diencerkan  20 kali lipat dan dianalisis ulang. Semua kalibrator dan kontrol kualitas sampel berada dalam  15%  dari  nilai  nominal  untuk  kedua  dalam-hari  dan  antara-hari berjalan.Ketepatan  dalam-hari  dan  antara-hari  adalah  <15%.  Pemulihan  DTG  dan internalnya standar yang terlihat dengan metodologi ini adalah >90%.
Analisis nonkompartemen dilakukan dengan menggunakan Phoenix WinNonlin v6.3 (Certara LP; St. Louis, MO). Waktu aktual digunakan dalam semua analisis PK. Area di bawah kurva konsentrasi-waktu dari 0 hingga 24 jam (AUC0-24 jam) dihitung menggunakan aturan trapesium dengan interpolasi linear up/log down. Karena konsentrasi DTG dalam beberapa sampel RF berada di bawah batas deteksi (BLD),  AUC  komposit  untuk  RF  pada  PK1  dihitung  menggunakan  konsentrasi median pada setiap titik waktu. Karena RT dari dua subjek dikumpulkan pada setiap titik  waktu  setelah  pemberian  dosis  tunggal  dan  ganda,  profil  komposit  digunakan untuk  analisis  PK.  Korelasi  Peringkat  Spearman  antara  RF  dan  RT  dihitung menggunakan  SAS  9.3  (SAS  Institute  Inc;  Cary,  NC).  Parameter  PK  dipisahkan berdasarkan hari dan matriks.
Dalam  RF,  konsentrasi  puncak  17,0  ng  /  usap  terjadi  sekitar  24  jam  setelah dosis  tunggal.  AUC  0-24jadalah  91,9  ng  *  jam  /  usap.  Tidak  ada  fase  eliminasi terminal  yang  diamati.  Dalam  profil  komposit  dosis  ganda,  konsentrasi  puncak median  (IQR)  26,5  (8,0  -  289)  ng  /  mL  terjadi  pada  RF  pada  jam  12,1  (6,1-12,1). Median  (IQR)  RF  AUC0-24jadalah  300,0  (73,6  -  3160)  ng  *  jam  /  usap  dan  fase eliminasi terminal hanya dapat diukur untuk 3 subjek. Tidak ada korelasi yang dapat dideteksi (Spearman rho = 0,43, p = 0,17) antara konsentrasi RF dan konsentrasi RT yang  dikumpulkan  dalam  jendela  1  jam di  Hari  7  dan  8.  Paparan  RF  relatif  rendah dibandingkan  RT  dengan  RF:  RT  AUC0-24jrasio  0,018  dan  0,047  setelah  dosis tunggal dan berulang.

## Kesimpulan
Analisis  senyawa  dolutegravir  pada  beberapa  sampel  biologis  dapat  dilakukan dengan menggunakan beberapa metode yang berbeda dengan tingkat keberhasilan yang berbeda.  Pada  sampel  plasma  darah  dapat  dilakukan  analisis  dengan  menggunakan HPLC-MS/MS  dan  LC/MS  dengan  hasil  yang  cukup  akurat,  sensitif  dan  presisi.  Pada sampel  urin  analisis  dilakukan  dengan  menggunakan  Voltametri  Siklik  dengan  hasil yang  belum  cukup  sensitifitasnya  sehingga  perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut menggunakan  metode  yang  lain,  metode  yang  lain  juga  dapat  dilakukan  dengan menggunakan  metode  HPLC  dengan  hasil  yang  jauh  lebih  akurat.  Pada  sampel  saliva analisis  dilakukan  menggunakan  metode  LC-MS/MS  dengan  pendeteksian  analit menggunakan  mode  ionisasi  electrospray  positif  melalui  pemantauan  reaksi  ganda dengan hasil yang cukup akurat.

## BIBLIOGRAFI
Brown KC, Patterson KB, Malone SA, et al. Single and multiple dose pharmacokinetics of  maraviroc  in  saliva,  semen,  and  rectal  tissue  of  healthy  HIV-negative  men.  J Infect Dis. 2011; 203(10):1484–90. [PubMed: 21502084]. Google Scholar
Bruzzese Eugenia, et al. Dolutegravir-based anti-retroviral therapy is effective and safe in HIV–infected paediatric patients. Italian Journal of Pediatrics. 2018; 44(37):1-
5. Google Scholar
Bennetto-Hood, Chantelle, Tabolt, Glenn, Savina, Paul, & Acosta, Edward P. (2014). A sensitive  HPLC–MS/MS  method  for  the  determination  of  dolutegravir  in  human plasma. Journal of Chromatography B , 945 , 225–232. Google Scholar
Benjamin N G., Kristine B Patterson, Heather MA Prince, Craig Sykes, Jessica L., dll. Dolutegravir  Pharmacokinetics  in  the  Genital  Tract  and  Colorectum  of  HIV Negative  Men  After  Single  and  Multiple  Dosing.  J  Acquir  Immune  Defic  Syndr. 2013 September 1; 64(1): 39–44. Google Scholar
Castellino, S., Moss, L., Wagner, D., Borland, J., Song, I., Chen, S., ... & Savina, P. M.
(2013). Metabolism, excretion, and mass balance of the HIV-1 integrase inhibitor dolutegravir  in  humans.  Antimicrobial  agents  and  chemotherapy,  57(8),  3536- 3546. Google Scholar
Eron  JJ,  Clotet  B,  Durant  J,  Katlama  C,  Kumar  P,  Lazzarin  A,  PoizotMartin  I, Richmond  G,  Soriano  V,  Ait-Khaled  M,  Fugiwara  T,  Huang  J,  Min  S,  Vavro  C, Yeo J. 2013. Safety and efficacy of dolutegravir in treatment-experienced subjects with  raltegravir-resistant  HIV  type  1  infection:  24-week  results  of  the  VIKING study. J. Infect. Dis. Google Scholar
Grégoire,  M.,  Deslandes,  G.,  Renaud,  C.,  Bouquié,  R.,  Allavena,  C.,  Raffi,  F.,  Jolliet, P., & Dailly, E. (2014). A liquid chromatography–tandem mass spectrometry assay for  quantification  of  rilpivirine  and  dolutegravir  in  human  plasma. Journal  of Chromatography B , 971 , 1–9. Google Scholar
K.  Tsuchiya,  M.  Ohuchi,  N.  Yamane,  H.  Aikawa,  H.  Gatanaga,  S.  Oka,  A.  Hamada, High-performance  liquid  chromatography–tandem  mass  spectrometry  for simultaneous  determination  of  raltegravir,  dolutegravir  and  elvitegravir concentrations  in  huma  plasma  and  cerebrospinal  fluid  samples,  Biomed. Chromatogr. 32 (2018), e4058. Google Scholar
M  Aouri,  A  Calmy,  B  Hirschel,  A  Telenti,  T  Buclin,  M  Cavassini,  A  Rauch,  LA Decosterd. A validated assay by liquid chromatography-tandem mass spectrometry for  the  simultaneous  quantification  of  elvitegravir  and  rilpivirine  in  HIV  positive patients. J Mass Spectrom. 48(2013)616-625. Google Scholar
M.  Cabrol,  F.  Dubois-Galopin,  E.  Chatelut,  P.  Delobel,  P.  Gandia,  Determination  of dolutegravir’s  unbound  fraction  in  human  plasma  using  validated  equilibrium dialysis  and  LC-MS/MS  methods,  Clin.  Chim.  Acta  479  (2018)  56–65. Google Scholar
M  Shibata,  M  Takahashi,  M  Yoshino,  T  Kuwahara,  T  Nomura,  Y  Yokomaku,  W Sugiura.  Development  and  application  of  a  simple  LC-MS  method  for  the determination  of  plasma  rilpivirine  (TMC-278)  concentrations.  J  Med  Invest. 60(2013)35-40. Google Scholar
L  Burugula,  NR  Pilli,  A  Makula,  DS  Lodagala,  R  Kandhagatla.  Liquid chromatographytandem  mass  spectrometric  assay  for  the  non-nucleoside  reverse transcriptase  inhibitor  rilpivirine  in  human  plasma.  Biomed  Chromatogr. 27(2013)172-178. Google Scholar
Raffi  F,  Rachlis  A,  Stellbrink  HJ,  et  al.  Once-daily  dolutegravir  versus  raltegravir  in antiretroviral-naive  adults  with  HIV-1  infection:  48 week  results  from  the randomised,  double-blind,  non-inferiority  SPRING-2  study.  Lancet.  2013; 381(9868):735–43. [PubMed: 23306000]. Google Scholar
Reese  MJ,  Savina  PM,  Generaux  GT,  Tracey  H,  Humphreys  JE,  Kanaoka  E, Webster LO, Harmon KA, Clarke JD Polli JW. 2013. In vitro investigations into the roles of  drug  transporters  and  metabolizing  enzymes  in  the  disposition  and  drug interactions  of  dolutegravir,  a  HIV  integrase  inhibitor.  Drug  Metab.  Dispos. 41:353–361. Google Scholar
Shabnam, A., dkk. 2021. First report for the electrochemical investigation of a new HIV integrase  inhibitor  dolutegravir:  Its  voltammetric  determination  intablet  dosage forms  and  human  urine  using  a  boron-doped  diamond  electrode.  Elsevier:  1-7 Google Scholar
Song I, Borland J, Chen S, et al. Effect of food on the pharmacokinetics of the integrase inhibitor  dolutegravir.  Antimicrob  Agents  Chemother.  2012;  56(3):1627–9. [PubMed: 22183173]. Google Scholar
Yagura,  Hiroki,  Watanabe,  Dai,  Nakauchi,  Takao,  &  Watanabe,  D.  (2017).  Effect  of dolutegravir plasma concentration on central nervous system side effects. Abstract CROI , 3 , 7. Google Scholar

## Copyright holder:
Alya Nafis, Bismar Al Bara, Deviana Farhani, Dhavina Maharani, Fajar Prasetyo, Galih Ibnu Mukti, Nur Sa’diyyah (2022)
First publication right:

## Syntax Idea
This article is licensed under: