Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446

## IDENTIFIKASI SILDENAFIL SITRAT DALAM KOPI BUBUK DAN PRODUK OLAHANNYA YANG BEREDAR DI KOTA PALU MENGGUNAKAN METODE SOLID PHASE EXTRACTION (SPE) KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT) DAN SPEKTROFOTODENSITOMETRI
[Identification Of Sildenafil Citrate in Coffee Powder And Its Processed Products Circulating In Palu City Using Solid Phase Extraction (SPE) Method Thin Layer Chromatography (TLC) And Spectrophotodensitometry]
Erfan Septian Mbealo 1)* , Qabul Dinanta Utama 2) 1) Prodi Tekhnologi Pangan Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Terbuka
2) Prodi Ilmu dan Teknologi Pangan Fakultas Teknologi Pangan dan Agroindustri, Universitas Mataram *Penulis Korespondensi, Email: septianmbealo26@gmail.com
Diterima 11 November 2022/Disetujui 16 Desember 2022

## ABSTRACT
Coffee is a kind of beverage made from roasted and ground coffee beans. In the Regulation of the Head of  POM No. 21 of 2016 concerning food categories, and Regulation of the Minister of Industry of the Republic of Indonesia number 03/M-IND/PER/1/2016, instant coffee (pure without being mixing with other ingredients) including decaffeinated instant coffee either in retail packaging or in bulk form is required to meet the Standard National Indonesia (SNI) 2983 : 2014. As one of the food products, coffee must safe from any  chemical  substances  that  can  be  harmful  to  human  health.  One  of  the  chemical  substances  that commonly add to instant coffee was sildenafil. This research is non-experimental descriptive of 20 samples of coffee circulating in the city of Palu which was carried out using thin layer chromatography (TLC)-solid phase extraction (SPE) and spectrophotodensitometry methods. The analysis of the results carried out is a qualitative  analysis  of  the  chemical  content  of  the  sildenafil  type  of  drug  contained  in  coffee  products circulating in the city of Palu. Of the 20 samples tested, 3 test samples were declared positive where the retention factor (Rf) value of the test solution spot was the same as the Rf value of the standard solution spot. and spiked sample solution. Testing with Spectrophotodensitometry provides a spectrum profile and maximum absorption wavelength of the test solution spots are the same as the standard solution spots and spiked sample solutions

## Keywords: coffee, sildenafil, Silica gel 60 F254, spectrophotodensitometry, TLC

## ABSTRAK
Kopi merupakan salah satu minuman yang berasal dari biji kopi yang telah disangrai dan dihaluskan. Dalam Peraturan Kepala Badan POM No. 21 tahun 2016 tentang kategori pangan, dan Peraturan Menteri Perindustrian RI nomor 03/M-IND/PER/1/2016, kopi instan (murni tanpa dicampur bahan lain) termasuk kopi instan  dekafein  baik  dalam  kemasan  ritel  atau  bentuk  curah  diwajibkan  memenuhi  Standar  Nasional Indonesia (SNI) 2983 : 2014. Sebagai salah satu produk pangan, kopi instan harus aman dari berebagai jensi zat kimia yang membahayakn  bagi Kesehatan. Salah satu zat kimia yang sering ditambahkan adalah sildenafil. Penelitian ini bersifat non-eksperimental deskriptif terhadap 20 sampel kopi yang beredar dikota Palu  yang  dilakukan  dengan  metode  kromatografi  lapis  tipis  (KLT)- solid  phase  extraction  (SPE)  dan spektrofotodensitometri. Analisis hasil yang dilakukan adalah analisis kualitatif terhadap kandungan bahan kimia obat jenis sildenafil yang terkandung di dalam produk kopi yang beredar dikota Palu. Dari ke 20 sampel yang  diuji  3  sampel  uji  dinyatakan  positif  dimana  nilai retention  factor  (Rf)  dari  bercak  larutan  uji  sama dengan nilai Rf bercak larutan baku dan larutan spiked sampel. Pengujian dengan Spektrofotodensitometri memberikan  profil  spektrum  dan  panjang  gelombang  serapan  maksimum  dari  bercak  larutan  uji  sama dengan bercak larutan baku dan larutan spiked sampel
Kata Kunci: KLT, kopi instan, sildenafil, Silika gel 60 F254, Spektrofotodensitometri , SPE.
Copyright © 2022 by Authors, published by Pro Food (Jurnal Ilmu dan Teknologi Pangan) This is an open access article distributed under the CC BY-SA 4.0 License https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446

## PENDAHULUAN
Kopi  sebagai  salah  satu  komoditas pangan  yang  memegang  peranan  penting dalam  perekonomian  Indonesia  (Utama  dkk, 2022).  Sebagai  salah  produk  pangan,  kopi harus bebas dari beberapa zat-zat kimia yang memiliki  efek  samping  berbahaya  bagi kesehatan manusia (Badan Pengawas Obat dan Makanan, 2016). Salah satu kasus yang saat ini sering  ditemukan  pada  produk  kopi  adalah penambahan  Bahan  Kimia  Obat  (BKO). Penggunaan  Bahan  Kimia  Obat  (BKO)  di  luar batas  dan  aturan  yang  benar  dapat membahayakan  kesehatan  (Kurnia  Setiawan dkk.,  2017).  Salah  satu  BKO  yang  sering ditambahkan  pada  produk  kopi  adalah sildenafil.
Sildenafil  sitrat  digunakan  untuk mengobati  disfungsi  ereksi  pada  pria (Rahandika  Fridayangga  &  Kongres,  2022). Selain  itu,  sildenafil  digunakan  untuk meningkatkan  kemampuan  berolahraga  pada orang  dewasa  dengan  hipertensi  arteri pulmonal  (PAH;  tekanan  darah  tinggi  di pembuluh yang membawa darah ke paru-paru, menyebabkan  sesak  napas,  pusing,  dan kelelahan).  Sildenafil  mengobati  PAH  dengan merelaksasi pembuluh darah di paru-paru agar darah  mengalir  dengan  mudah.  Sildenafil termasuk  dalam  kelas  obat  yang  disebut phosphodiesterase  (PDE)  inhibitor.  Sildenafil dapat  menimbulkan  reaksi  yang  lebih  serius seperti  kejang,  denyut  jantung  tidak  teratur, pandangan kabur atau buta mendadak, hingga kematian  jika  digunakan  tidak  sesuai  dengan dosis  (Rahandika  Fridayangga  &  Kongres, 2022).
Semakin maraknya kasus penambahan BKO ke dalam produk kopi sehingga dianggap penting melakukan penelitian lebih lanjut untuk mengidentifikasi  sildenafil  sitrat  pada  produk kopi.  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  bertujuan untuk  mengidentifikasi  sildenafil  sitrat  pada produk kopi bubuk dan olahannya yang beredar di  Kota  Palu  dengan  metode Solid  Phase Extraction (SPE) Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan Spektrofotodensitometri.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Sampel  yang  diuji  berupa  20  produk kopi yang terdiri dari produk kopi bubuk, kopi instant,  kopi  stamina  pria  yang  dipilih  secara acak  di  Kota  Palu.  Bahan-bahan  kimia  yang digunakan  antara  lain  sildenafil  sitrat  (Baku pembanding  BPOM),  kloroform  p.a  (Merck, Germany),  NaOH,  metanol  p.a  (Merck, Germany), etil asetat (Merck, Germany), Silika gel  60  GF 254 (Merck,  Germany),  asetonitril (Merck, Germany), amonia (Merck, Germany), aseton (Merck, Germany), diethyl ether (Merck, Germany)  kertas  Whatman  no.1  (Merck, Germany).
Alat yang digunakan pada penelitian ini antara  lain TLC  scanner (Camag,  Swiss), TLC visualizer (Camag, Swiss), automatic developing  chamber (Camag,  Swiss), Camag linomat 5 (Camag, Swiss), solid phase extaction (Camag, Swiss), sentrifuge , cartridge SPE C18 (Oasis),  alat gelas  (pyrex),  timbangan analitik (Sartorius) ultrasonik,
Hei-VAP
rotary evaporator (Heidolph).

## Metode
Penelitian ini berpedoman pada analisis Badan  POM  nomor  66/PA/11,  45/OT/13, 29/OTPK/17 dan metode analisis BPOM nomor 31/OTPK/17 Identifikasi Sildenafil Sitrat Dalam Kopi Bubuk Dan Produk Olahannya Secara Solid Phase Extraction (SPE) Kromatografi Lapis Tipis (KLT)  dan  Spektrofotodensitometri,  adapun beberapa metode tersebut merupakan metode yang  merujuk  pada  identifikasi  bahan  kimia obat  sildenafil.  Metode  penelitian  diawali dengan  penyiapan  sampel,  preparasi  sampel dilanjutkan dengan identifikasi sampel menggunakan metode KLT dan spketrofotodensitometri  terhadap  BKO  yang dilaporkan  Badan  POM  RI  terkandung  dalam produk kopi yaitu sildenafil sitrat.

## Analisis sildenafil sitrat
Sildenafil sitrat dipisahkan dari sampel dan  diidentifikasi  secara  Kromatografi  Lapis Tipis  (KLT)  berdasarkan  perbedaan  polaritas
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
dan  kelarutan  serta  dikonfirmasi  secara Spektrofotodensitometri

## Persiapan Sampel
Sejumlah  10  mg  sampel  uji  sildenafil sitrat  yang  memenuhi  persyaratan  baku pembanding  farmakope  Indonesia  (BPFI) dimasukan  kedalam  erlenmeyer  100  mL  dan dilarutkan  dalam  30  mL  etil  asetat.  Kemudian campuran  disonikasi  selama  30  menit, disentrifugasi  4000  rpm  selama  10  menit, disaring  dengan  kertas  saring  Whatman  no.1 kedalam  corong  pisah  250  mL.  Selanjutnya, ulangi  perlakuan  tersebut  diatas  dimulai  dari penambahan  30  mL  etil  asetat  kedalam elenmeyer  100  mL.  Filtrat  digabungkan  dan diekstraksi tiga kali, setiap kali dengan 50 mL larutan basa pH 9. Ektrak etil asetat diuapkan dengan  penguap  vakum  pada  suhu  80 o C sampai  kering,  sisa  penguapan  dilarutkan dengan metanol. Preparasi dilakukan duplo.

## Identifikasi sampel dengan metode SPE
Prosedur Analisis A. Spike sampel:
Sejumlah sampel ditambahkan  campuran  lebih  kurang  10 mg  sildenafil  sitrat  BPFI  kemudian dilakukan seperti sampel uji.
B. Larutan baku: Ditimbang sejumlah 10 mg sildenafil sitrat BPFI dimasukan ke  dalam labu ukur 25 mL dilarutkan dan diencerkan dengan metanol sampai tanda.
C. Larutan  uji  dan  larutan spiked  sample dilakukan pemisahan dengan SPE dengan kondisi sebagai berikut :
 Kolom: Cartridge SPE C18
 Pelarut  kondisioning:  2,0  mL  air;  2,0 mL metanol
 Larutan  pencuci:  1,0  Metanol  5%; Metanol 60%
 Larutan pengelusi: Metanol
1) Dilakukan  pengkondisian  cartridge SPE C18 berturut-turut menggunakan 2,0  mL  air  dan  2,0  mL  metanol (cartridge tidak boleh sampai kering), dibiarkan  menetes  perlahan  tanpa bantuan vacuum manifold.
2) Larutan uji dan larutan spiked sample sebanyak  100  μL  dimasukkan  ke
dalam  masing-masing  cartridge  SPE C18  secara  terpisah,  dibiarkan menetes  perlahan  (±  15  tetes  per menit)  dengan  bantuan  vacuum manifold.
3) Cartridge  SPE  C18  dicuci  dengan  1,0 mL  metanol  5%  dilanjutkan  1,0  mL metanol  60%.  Penetesan  dibantu dengan vacuum manifold.
4) Masing-masing cartridge dieluasi dengan  2,0  mL  metanol,  ditampung dalam tabung reaksi.
Identifikasi  sampel  dengan  metode  KLT dan spektrofotodensitometri

## Prosedur Analisis
1. Larutan uji, spike sampel dan larutan baku ditotolkan  secara  terpisah  diatas  silika  gel 60  GF 254 sebanyak  50  µl  dengan  Camag linomat 5 dan dilakukan kromatografi lapis tipis dengan kondisi sebagai berikut:
 Fase diam: Silika gel 60 GF 254
 Fase  gerak:  1.  Etilasetat  :  asetonitril  : amonia 25% (85 :10 : 5)  (Eluen 1)
2. Aseton : kloroform : eter (40 : 35 : 25) (Eluen 2)
 Jarak rambat:  7.5cm (automatic developing chamber); 15 cm (manual)
 Penampakan  bercak:  Radiasi  254  nm sildenafil memadamkan fluoresensi.
2. Lempeng  KLT  hasil  eluasi  dilakukan pemindaian dengan sebagai berikut :
 Slit dimensions: 4.00 x 0.30 mm, Micro
 Scanning speed : 20 mm/s
 Data resolution: 100 μm/step
 Lamp : D2
 Wavelength : 200 – 400 nm Profil  spektrum  dan  panjang  gelombang serapan maksimum direkam
3. Interpretasi Hasil :
 Kromatografi  lapis  tipis  :  Hasil  uji dinyatakan negatif jika nilai Rf dari bercak larutan uji berbeda dengan nilai Rf bercak larutan baku dan larutan spiked sampel.
 Spektrofotodensitometri :Hasil uji dinyatakan negatif jika profil spektrum dan panjang  gelombang  serapan  maksimum dari bercak larutan uji tidak sama dengan
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
bercak  larutan  baku  dan  larutan  spiked sampel.
1) Persyaratan  sampel  uji  tidak  boleh mengandung sildenafil sitrat.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Solid Phase

## Extraction
(SPE)
merupakan  metode  ekstraksi  fase  padat  yang dapat  digunakan  untuk  analisis,  pemisahan, purifikasi sampel dalam bidang industri farmasi,
maupun analisis toksikologi dan makanan. SPE memiliki  keunggulan  yaitu  proses  ekstraksi menjadi lebih sempurna, pemisahan analit dari matriks  menjadi  lebih  efisien,  mengurangi pelarut  organik  yang  digunakan.  Untuk meningkatkan  sensitivitas  dan  selektivitas dalam  analisis  sampel,  metode  SPE  dapat digabungkan  dengan  metode  lain  seperti Kromatografi lapis tipis, spektofotodensitometri,  Spektrofotometer  UV-
Vis, dan HPLC.
Tabel 1. Nilai Rf sampel, spike dan baku sildenafil menggunakan 2 eluen
No Kode sampel Nilai Rf sampel  Nilai Rf sampel + baku Nilai Rf Baku Pembanding Sildenafil sitrat Eluen 1 Eluen 2 Eluen 1 Eluen 2 Eluen 1 Eluen 2 1 01 0.53 0.73 0.53 0.72 0.44 0,27 - 2 02 0.52 0.73 0.53 0.73 0.44 0.27 - 3 03 0.52 0.60 0.52 0.60 0.44 0.27 - 4 04 0.45 0.46 0.45 0.46 0.45 0.46 + 5 05 0.52 0.45 0.52 0.45 0.45 0.46 - 6 06 0.51 0.44 0.51 0.44 0.45 0.46 - 7 07 0.40 0.19 0.40 0.19 0.40 0.19 + 8 08 0.49 0.53 0.49 0.53 0.40 0.19 - 9 09 0.49 0.53 0.49 0.53 0.40 0.19 - 10 10 0.48 0.56 0.48 0.56 0.39 0.26 - 11 11 0.39 0.26 0.39 0.26 0.39 0.26 + 12 12 0.48 0.55 0.48 0.56 0.48 0.26 - 13 13 0.62 0.31 0.53 0.31 0.36 0.26 - 14 14 0.53 0.42 0.53 0.42 0.36 0.26 - 15 15 0.52 0.32 0.52 0.32 0.36 0.26 - 16 16 0.51 0.48 0.51 0.48 0.42 0.27 - 17 17 0.51 0.48 0.51 0.48 0.41 0.27 - 18 18 0.51 0.47 0.51 0.47 0.39 0.27 - 19 19 0.59 0.53 0.59 0.53 0.48 0.30 - 20 20 0.60 0.54 0.60 0.54 0.48 0.30 -
SPE (Solid Phase Extraction) merupakan salah satu variasi dari teknik analisis yang tersedia untuk  memperbaiki  kesenjangan  yang  ada antara  sampel  dengan  tahap-tahap  analisis. Filtrasi,  homogenisasi,  presipitasi,  reaksi kimia,  pertukaran  pelarut,  konsentrasi, penghapusan  matrix,  solubilisasi  merupakan komponen  yang  dapat  digunakan  secara tunggal  atau  kombinasi  untuk  mendapatkan sampel  dengan  bentuk  yang  kompatibel dengan  alat  analisis  yang  diperlukan
(Simpson,  2000).  Dalam  teknik  SPE  (Solid phase Extraction), biasanya terdapat beberapa reagen yang dapat sebagai matriks seperti garam, reagen derivatisasi, dan pelarut sehingga  diperlukan  prosedur washing dan elutio n  untuk  menghilangkan  kelebihan reagen  yang  sering  menjadi  matriks  atau pengganggu
dalam mendeteksi analit(Corporation Restek, 2022). Keuntungan utama dari SPE adalah penggunaannya  yang mudah,  waktu  cepat  dan  umunya  hanya
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
dibutuhkan  pelarut  ekstraksi  dengan  volume yang kecil (Thurman & Mills, 1998)
Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  atau Thin  Layer  Chromatography (TLC)  adalah suatu  teknik  kromatografi  yang  sederhana yang  biasanya  digunakan  untuk  identifikasi senyawa-senyawa organik (Rohmah dan Rini, 2020).  Pada  dasarnya  KLT  melibatkan  dua perubahan  yaitu  fase  diam  dan  sifat  gerak. Fase  diam  dapat  berupa  serbuk  halus  yang berfungsi  sebagai  permukaan  penyerap (kromatografi  cair-padat)  atau  berfungsi sebagai  penyangga  untuk  lapisan  zat  cair (kromatografi cair-cair) (Pusat Pengembangan
Metode  Analisis  Obat  dan  Makanan,  2011). Prinsip  kerja  dari  KLT  yaitu  campuran  yang akan dipisahkan dilarutkan dalam pelarut yang sesuai.  Penotolan  dilakukan  memakai  pipa kapiler.  Pelarut  dibiarkan  menguap  atau dihilangkan  dengan  bantuan  aliran  udara kering. Lapisan kemudian dimasukan ke dalam bejana  yang  berisi  pelarut  yang  dalamnya sekitar satu cm yang akan bertindak sebagai fase  gerak.  Lalu  bejana  ditutup  ketat  dan pelarut  dibiarkan  sekitar  10-15  menit.  Titik tempat campuran yang ditotolkan pada ujung
Tabel 2 : nilai Rf sampel, spike dan baku sildenafil kode 04,07 dan 11 menggunakan 2 eluen
No Kode sampel Nilai Rf sampel Nilai Rf sampel + baku Nilai Rf Baku Pembanding Sildenafil sitrat Eluen 1 Eluen 2 Eluen 1 Eluen 2 Eluen 1 Eluen 2 1 04 0.43 0.19 0.43 0.19 0.43 0.19 + 2 07 0.43 0.19 0.43 0.19 0.43 0.19 + 3 11 0.42 0.19 0. 43 0.19 0.43 0.19 +
Gambar 1. Hasil eluasi sampel kode 04, 07 dan 11 dibandingkan dengan spike dan baku sildenafil sitrat
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Gambar 2.  Hasil Eluasi sampel kode 04, 07 dan 11 dibandingkan dengan spike dan baku sildenafil sitrat
pelat atau lembaran disebut titik awal dan cara menempatkan  cuplikan  disebut  penotolan. Garis depan pelarut ialah bagian atas fase gerak atau pelarut ketika bergerak melalui lapisan dan setelah  pengembangan  selesai,  merupakan tinggi maksimum yang dicapai pelarut (Rohmah dan Rini, 2020).
Spketrofotodensitometri  adalah  metode analisis  instrumental yang  berdasarkan
interaksi radiasi elektro magnetik dengan analit yang  merupakan  noda  pada  KLT,  alat  ini dilengkapi  dengan  spektrofotometer  yang mempunyai  pancaran  sinar  yang  panjang gelombang  diatur  dari  200  -  700  nm  (Kurnia Setiawan
dkk., 2017). Pada
spektrofotodensitometri juga dilakukan penentuan transmisi pada panjang gelombang maksimal (Nur Patria Tjahjani, 2021).
Gambar 3.  Profil Scan Position sampel, spike sampel kode 04, 07,11 dan baku sildenafil pada instrumen Camag TLC 4
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Gambar 4. Hasil scanning sampel, spike sampel kode 04,07,11 dan baku sildenafil eluen Etilasetat : asetonitril : Amonia 25%
Penelitian  dilakukan  terhadap  20  sampel kopi yang disampling secara acak di area Kota Palu  dipreparasi  dengan  metode  ekstraksi menggunakan  etil  asetat  dilanjutkan  dengan ekstaksi menggunakan SPE dimana penggunaan  metode  SPE  bertujuan  untuk mengeliminasi  analit-analit  pengganggu  yang masih lolos melalui ekstraksi dengan etil asetat (Pusat  Pengembangan  Metode  Analisis  Obat dan Makanan, 2013), identifikasi hasil ekstaksi dilakukan dengan kromatografi lapis tipis (KLT)
yang dapat memisahkan komponen-komponen berdasarkan perbedaan tingkat interaksi dalam 2 fasa material pemisah (Pusat Pengembangan Metode  Analisis  Obat  dan  Makanan,  2017). Penelitian  ini  menggunakan  fase  diam  berupa silika  gel F254 yang  memiliki  sifat  relatif  polar, mengandung  silika  dengan  gipsum  sebagai agen  pengikat,  dan  indikator  fluoresen  yang dapat  berfluorosensi.  Pembentukan  warna dapat diamati di bawah sinar UV.
Gambar 5. Profil Spektrum sampel kopi nomor 04, 07 dan sampel nomor 11 dengan eluen Etilasetat : asetonitril : Amonia 25%
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Gambar 6.  Profil 2 dimensi sampel,spike sampel nomor 04, 07, 11dan baku sildenafil sitrat dengan eluen Etilasetat : asetonitril : Amonia 25%
Hasil  ekstraksi  melalui  SPE  ditotolkan  ke atas lempeng silika silika gel F254 dengan urutan sampel,  spike  dan  baku  pembanding  dengan menggunakan  perangkat Camag  linomat  5 masing  masing  sebanyak  sesuai  dengan langkah kerja pada metode analisis Badan POM nomor 66/PA/11, selanjutnya lempeng silika gel
F254 dielusi dengan 2 fase gerak yaitu etilasetat :  asetonitril  :  amonia  25%  dengan perbandingan 85:10:5 dan aseton : kloroform : eter  dengan  perbandingan  40:35:25,  elusi sampel  dilakukan  dengan  menggunakan  alat
camag  automatic  developing  chamber .  Pada tahap  elusi  fase  gerak  yang  bersifat  nonpolar akan menahan senyawa yang polar di fasa diam (silika  gel)  yang  bersifat  polar  dan  akan membawa senyawa yang kurang polar naik ke atas  (Rohmah  dan  Rini,  2020).  Penelitian dengan  metode  KLT  ini  dilakukan  dengan membandingkan  antara  nilai  Rf  sampel terhadap  Rf  spike  dan  Rf  Baku  dengan menggunakan Camag  Visualizer dapat  dilihat pada Tabel 1.
Gambar 7.  Hasil scanning sampel, spike sampel kode 04,07,11 dan baku sildenafil eluen Aseton : Kloroform : eter
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Gambar 8. Profil Spektrum sampel kopi nomor 04, 07 dan sampel nomor 11 dengan eluen Aseton : Kloroform : eter
Hasil  identifikasi  dengan  menggunakan Metode KLT yang diamati dan dihitung nilai Rf- nya  terlihat  adanya  3  sampel  yang  terindikasi positif yaitu sampel nomor 04, 07 dan 11 hal ini ditandai  dengan  nilai  Rf  sampel  sama  denga nilai  Rf  pada  spike  dan  baku  sehingga  perlu dilakukan  uji  kembali  terhadap  sampel  nomor 04, 07 dan 11 yang terindikasi positif tersebut, identifikasi  terhadap  ketiga  nomor  sampel tersebut tersaji pada Tabel 2.
Dari  pengulangan  identifikasi  terhadap sampel  nomor  04,  07  dan  11  menggunakan eluen etilasetat : asetonitril : amonia 25% (85 :10 : 5) terlihat bahwa noda sampel, noda spike dan noda baku memiliki Rf yang mirip, dan jika diamati  menggunakan Camag  Visualizer pada panjang  gelombang  254  nm  terlihat  bahwa noda dari sampel spike dan baku memadamkan fluoresensi seperti terlihat pada Gambar 1.
Gambar 9.  Profil 2 dimensi kandungan sildenafil pada sampel kopi nomor 04, 07 dan sampel nomor 11 dengan eluen aseton : Kloroform : eter
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Pada  pengulangan  identifikasi  terhadap sampel  nomor  04,  07  dan  11  menggunakan eluen kedua yaitu aseton : kloroform : eter (40 :  35  :  25)  terlihat  bahwa  noda  sampel,  noda spike  dan  noda  baku  memiliki  Rf  yang  mirip, dan  jika  diamati  menggunakan Camag Visualizer pada  panjang  gelombang  254  nm terlihat bahwa noda dari sampel spike dan baku memadamkan fluoresensi seperti terlihat pada Gambar 2.
Untuk  menegaskan  hasil  identifikasi menggunakan  KLT,  dilanjutan  penetapan  Rf dan serapan maksimum menggunakan instrumen Camag TLC 4 . Pelat KLT yang telah ditetapkan  nilai  Rf-nya  menggunakan Camag Visualizer dimasukan  kedalam Camag  TLC  4
untuk
diukur serapan gelombang maksimumnya  (Pusat  Pengembangan  Metode Analisis Obat dan Makanan, 2017), penetapan nilai Rf dan serapan maksimum noda pada pelat KLT  menggunakan Camag  TLC  4 dengan perlakuan Slit  dimensions :4.00  x  0.30 mm micro ; Scanning  speed :  20  mm/s; data resolution :  100  μm/step;  lamp:  D2; wavelength: 20 – 400 nm. Urutan scan position dilakukan dengan urutan seperti pada Gambar
3.
Penetapan  panjang  gelombang  sampel kode  04,  07  ,11,  spike  sampel  dan  baku sildenafil sitrat pada lempeng KLT dengan eluen etilasetat  :  asetonitril  :  amonia  25% memberikan hasil serapan gelombang maksimum  antara  301-  305  nm  dan  nilai  Rf berkisar antara 55 – 56 seperti pada Gambar 4.
Dari  hasil scanning  menggunakan Camag TLC 4 terhadap sampel, spike sampel kode 04, 07,  11  dan  baku  sildenafil  eluen  etilasetat  : asetonitril  :  amonia  25%  menghasilkan spektrum seperti pada Gambar 5.
Serapan maksimum noda pada pelat KLT menggunakan Camag TLC 4 dengan perlakuan Slit  dimensions :4.00  x  0.30 mm  Micro ; Scanning  speed :  20  mm/s; Data  resolution : 100 μm/step; Lamp: D2; Wavelength: 20 – 400 nm dengan eluen  eluen Etilasetat : asetonitril : Amonia  25%  menghasilkan  profil  2  dimensi pada Gambar 6.
Selain  penetapan retention factor (Rf) dan serapan gelombang  maksimum pada lempeng
KLT  yang  dieluasi  menggunakan  eluen etilasetat : asetonitril : amonia 25% penetapan juga dilakukan pada lempeng KLT dengan eluen aseton : kloroform : eter
Pada  penetapan  panjang  gelombang sampel  dan  nilai  Rf  kode  sampel  04,  07  ,11, spike  sampel  dan  baku  sildenafil  sitrat  pada lempeng KLT dengan eluen Aseton : Kloroform :  eter.  dihasilkan  serapan  gelombang maksimum  antara  304-  306  nm  dengan  nilai retenton factor berkisar antara 24– 30 seperti pada Gambar 7.
Dari  hasil scanning  menggunakan Camag TLC 4 terhadap sampel, spike sampel kode 04, 07, 11, dan baku sildenafil aseton :  kloroform : eter dihasilkan spektrum serapan maksimum seperti pada Gambar 8.
Serapan  maksimum  noda  pada  Lempeng  KLT menggunakan Camag TLC 4 dengan perlakuan Slit  dimensions :4.00  x  0.30 mm  Micro ; Scanning  speed :  20  mm/s; Data  resolution : 100 μm/step; Lamp: D2; Wavelength: 20 – 400 nm dengan eluen  eluen Etilasetat : asetonitril : Amonia  25%  menghasilkan  profil  2  dimensi pada Gambar 9.
Identifikasi kandungan bahan kimia Obat (BKO)  terhadap  20  sampel  kopi  dengan menggunakan metode analisis BPOM 66/PA/11, metode  analisis  BPOM  45/OT/13,  metode analisis BPOM 29/OTPK/17 dan metode analisis BPOM  nomor  31/OTPK/17.  Pada  metode tersebut  dilakukan  2  tahap  preparasi  sampel yaitu  dengan  menggunakan  etil  asetat  (Pusat Pengembangan  Metode  Analisis  Obat  dan Makanan, 2017) dilanjutkan dengan menggunakan  SPE  (Pusat  Pengembangan Metode  Analisis  Obat  dan  Makanan,  2013), penggunaan SPE bertujuan untuk mengeliminasi  analit  pengganggu  pada lempeng  KLT  (Simpson,  2000).  Penggunaan SPE  memperlihatkan  berkurangnya  noda pengganggu  pada  lempeng  KLT  sehingga sampel  dapat  dianalisis  dengan  sempurna. Pada identifikasi BKO sildenafil sitrat digunakan dua eluen yaitu etilasetat : asetonitril : amonia 25% dan aseton : kloroform : eter. Penggunaan dua  eluen  tersebut  menghasilkan  pemisahan noda yang cukup sempurna pada jarak rambat
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
7,5  cm  dengan  menggunakan  instrumen

## Automatic Developing Chamber .
Dari identifikasi yang dilakukan terhadap 20 sampel  kopi di  ditemukan 3 sampel positif mengandung  sildenafil  sitrat  yaitu  sampel nomor  04,  07,  dan  nomor  11.  Identifikasi kandungan sildenafil sitrat dalam ke 20 sampel kopi  tersebut  diawali  dengan  tahap Sceening dilanjutkan dengan identifikasi terhadap sampel yang  memilki  nilai retention  factor (Rf)  sama dengan  nilai  Rf  baku  sildenafil  sitrat  serta serapan  gelombang  maksimum  menggunakan instrumen Spektrofotodensitometri Camag TLC. Penetapan  panjang  gelombang  sampel kode  04,  07,  11,  spike  sampel,  dan  baku sildenafil sitrat pada lempeng KLT dengan eluen etilasetat  :  asetonitril  :  amonia  25% memberikan hasil serapan gelombang maksimum  antara  301-  305  nm  dan  nilai  Rf berkisar antara 55 – 56 (Gambar 4), sedangkan penetapan panjang gelombang sampel dan nilai Rf kode sampel 04, 07, 11, spike sampel, dan baku sildenafil sitrat pada lempeng KLT dengan eluen  aseton  :  kloroform  :  eter  dihasilkan serapan gelombang maksimum antara 304- 306 nm  nm  dengan  nilai retention  factor berkisar antara 24– 30 (Gambar 7). Dari hasil scanning menggunakan Camag TLC 4 terhadap sampel, spike  sampel  kode  04,  07,  11  dan  baku sildenafil dihasilkan spektrum serapan maksimum sampel, spike sampel sama dengan spektrum baku sildenafil  (Gambar 5&8), selain itu  juga  Profil  2  dimensi  sampel,spike  sampel nomor  04,  07,  11  menunjukan  puncak gelombang  yang  sama  dengan  puncak gelombang pada baku sildenafil sitrat (Gambar 6 & 9)

## KESIMPULAN DAN SARAN
Dari  identifikasi yang dilakukan terhadap 20 sampel  kopi di  ditemukan 3 sampel positif mengandung  sildenafil  sitrat  yaitu  sampel nomor  04,07  dan  nomor  11.  Dari  data-data penelitian yang telah dilakukan menujukan nilai retention factor (Rf) sampel pada lempeng KLT dan  densitometri  sama  dengan  Rf  baku sildenafil  sitrat,  spektrum  serapan  gelombang
maksimum  sampel  juga  identik  dengan spektrum serapan gelombang maksimum baku sildenafil  sitrat  sehingga  dapat  disimpulkan bahwa  sampel kode 04, 07,  dan sampel kode 11  mengadung  sildenafil  sitrat.  Dari  data penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat disimpulkan  bahwa  penambahan  Bahan  Kimia Obat  (BKO)  sildenafil  sitrat  kedalam  produk kopi bubuk juga terjadi di Kota Palu.

## DAFTAR PUSTAKA
Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  (2011).
Metode  analisis  nomor  66/PA/11  : Identifikasi  sildenafil  sitrat,  Tadalafil sitrat  dan  vardenafil  klorida  dalam  kopi bubuk dan produk olahannya secara Thin layer  Cromatography(TLC)  dan  Liquid Chromatography  Mass  Spectrometry (LC-MS) . Jakarta, Badan Pengawas Obat dan Makanan.,
Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  (2013). Metode  analisis  nomor  29/OTPK/17 Identifikasi sildenafil sitrat, tadalafil dan vardenafil  hidroklorida  dalam  obat tradisional  dan  suplemen  kesehatan sediaan  cair  secara  kromatografi  lapis tipis, spektrofotodensitometri dan kromatografi cair kinerja tinggi detektor photo diode array(PDA). Jakarta, Badan Pengawas Obat dan Makanan Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  (2013).
Metode  analisis  nomor  45/OT/13  : Identifikasi  Dan  Penetapan  Kadar Norasetildenafil,Vardenafil Hidroklorida,Sildenafil
Sitrat, Thiosildenafil, Thiodimetil Sildenafil, dan tadalafil  dalam  obat  tradisional  sediaan padat  melalui  pemisahan  dengan  SPE secara  LC-MS/MS.  Jakarta,  Badan Pengawas Obat dan Makanan.
Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  (2016). Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia nomor 21  Tahun  2016  Tentang  Kategori Pangan. Jakarta, Badan Pengawas Obat dan Makanan
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  (2017). Metode  analisis  nomor  31/OTPK/17: Identifikasi  Sildenafil  Sitrat,  Tadalafil, Vardenafil,  Hidroklorida,  Thiosildenafil, Aminotadalafil,Norasetildenafil,Thiodime tilsildenafil,Hidroksihomosildeafil, Hidroksithiohomosildenafil,  Propoksifenil Hidroksihomosildenafil, Metil Testoteron, Dan  Yohimbin  Hidroklorida  Dalam  Obat Tradisional  Dan  Suplemen  Kesehatan Sediaan  Padat  Dan  Cair  Secara
Kromatografi Lapis Tipis Dan Spektrofotodensitometri. Jakarta, Badan
Pengawas Obat dan Makanan
Corporation, Restek (2022). The Fundamentals of  Solid  Phase  Extraction  (SPE )  Restek
Corporation Dachriyanus, Meri Susanti.(2019) Kromatografi cair kerja Tingg i. Lembaga Pengembangan Teknologi Informasi dan Komunikasi Universitas Andalas
Husna,F. Ranawulan. Mita,S.
(2020).
Identifikasi  Bahan  Kimia  Obat  Dalam Obat  Tradisional  Stamina  Pria  Dengan Metode  Kromatografi  Lapis  Tipis. Farmaka (18) 2
Jamilatur Rohmah & Chylen Setiyo Rini (2020) Buku  ajar  kimia  analisis .  Universitas muhammadiyah sidoarjo
K,Simpson,  M  Wells,  Martha  J.  Nigel  J.  K. (2000). Introduction  to  Solid-Phase Extraction  The  Sample  Preparation Problem Solid-Phase Extraction . Taylor & Francis Group LLC
Kementerian  Perindustrian  Republik  Indonesia
(2016) Pemberlakuan  Standar  Nasional Indonesia  (SNI)  Kopi  Instan  Secara Wajib .  Jakarta  Menteri  Perindustrian Republik Indonesia
Kulsum, I. Suryana, S. Soni, D. (2022) Review: Moleculary  Imprinted  Polymer  Solid Phase  Extraction  (MIP-SPE)  untuk Pengujian  Glibenklamid  dalam  Cairan Biologis. Jurnal Sains dan Kesehatan 4(2) 205-2013
Kurnia  S,  Henry,  Marcella  K,  Neysa  S,  Emil (2018). Validasi Metode Identifikasi
Sildenafil Sitrat, Tadalafil dan
Fenilbutazon  dalam  Jamu  Obat  Kuat Secara  Kromatografi  Lapis  Tipis- Densitometr i.  journal  of  pharmacy science and practice , 7(1) 1 - 7
Nugroho,  Agung  (2017). Buku  Ajar  Teknologi Bahan  Alam .  Lambung  Mangkurat University Press
Nur Patria Tjahjani, (2021) Analisis Perbedaan Kadar Kafein Pada Kopi Bubuk Hitam dan Kopi  Bubuk  Putih  Instan  Secara Spektrofotometri UV-Vis . Cendikia jurnal Pharmacy 5(1), 52-62 Rahmatia,  T.  (2016) Metode  SPE  (Solid  Phase Extraction)  Sebagai  Alternatif  Terbaru Dalam Analisis Dan Pemurnian Senyawa Obat .  Farmaka  Suplemen,14(2),151- 171. Reni Septiani, (2021) Validasi Metode Identifikasi Kafein, Parasetamol, Sildenafil Sitrat, Tadalafil dan Vardenafil
HCl  Secara  Simultan  Dalam  Obat Tradisional  Stamina  Pria  dengan Kromatografi  Lapis  Tipis-Densitometri . 1(1), 1-7. Savitri, Asri. Megantara, Sandra (2019). Metode KLT-Densitometri  Sebagai  Penetapan Kadar  Bahan  Aktif  Sediaan  Farmasi. Farmaka 17(2),1-14 Simpson,  Nigel  J.  K.  (2000). Solid-phase extraction  :  principles,  techniques,  and applications . Marcel Dekker, Inc. Standar  Nasional  Indonesia  (2014). SNI 2983:2014-Kopi  Instan .  Jakarta.  Badan Standarisasi Nasional
Utama, Q. D., Zainuri, Z., Paramartha, D. N. A., Widyasari,  R.,  &  Aini,  N.  (2022). Dekafeinasi  Kopi  Robusta  (Coffea Canephora)  Lombok  Menggunakan  Sari Labu  Siam  (Sechium  edule).  Pro  Food, 8(1),
77–87. https://doi.org/10.29303/profood.v8i1.2
53 Waris, R. Kadir, A. Akbar, C (2013). Identifikasi Dan  Penetapan  Kadar  Sildenafil  Sitrat Pada Jamu Kuat Lelaki Yang Beredar Di
Versi Online: http://www.profood.unram.ac.id/index.php/profood e-ISSN: 2443-3446
Kota Makassar . Jurnal As-Syifaa 05(01), 95-102