## Pemberian Vitamin C sebagai Antioksidan terhadap Fragilitas Osmotik Eritrosit pada ß Thalassemia Mayor

## Ricki Rajagukguk, M. Sholeh Kosim, Moedrik Tamam
Latar  belakang  : Vitamin  C  berperan  sebagai  antioksidan  untuk melawan  peroksidasi membran  fosfolipid  yang  disebabkan  oleh stres oksidatif sehingga diharapkan dapat memperbaiki fragilitas osmotic  mendekati  rentang  normal.  Pemeriksaan  fragilitas osmotik   eritrosit dulu sejarahnya dilakukan untuk uji tapis beta thalassemia mayor.  Tranfusi darah masih merupakan pengobatan utama untuk menanggulangi anemia pada thalassemia pada saat ini. Pemberian tranfusi berulang menyebabkan penimbunan besi yang  berlebihan  yang  selanjutnya  mengakibatkan  kerusakan oksidatif.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  membuktikan  apakah pemberian  vitamin  C  dapat  memperbaiki  fragilitas  osmotik eritrosit pada pasien β thalassemia.
Metode : Desain penelitian Double blind Randomized Control trial pada pasien β thalassemia mayor  yang memenuhi criteria inklusi. Subjek diambil dengan cara consecutive sampling dibagi menjadi 2 kelompok. Kelompok I (kelompok perlakuan) diberikan vitamin C sebanyak 100 mg , Kelompok II (kelompok control) diberi plasebo setiap  hari  selama  1  bulan.  Randomisasi  perlakuan  dilakukan dengan  blok  alokasi.  Fragilitas  osmotik  eritrosit  diperiksa  di Instalasi  Laboratorium  RSUP  Dr.Kariadi.  Analisis  statistik  dengan 2 Uji X  . Hasil : Subjek 50 orang; Kelompok I : 25 orang, Kelompok II : 25 orang. Kelompok I didapatkan rerata kadar Hb sebelum perlakuan 5,81  ±  1,032,  sesudah  perlakuan  6,65  ±  0,741,  dengan  nilai p =0,000.  Rerata  fragilitas  osmotik  eritrosit  sebelum  perlakuan 30,75  ±  5,685,  sesudah  perlakuan  38,19  ±  6,977,  dengan  nilai p =0,000.  Kelompok  II  didapatkan  rerata  kadar  Hb  sebelum perlakuan 5,84 ± 1,287, sesudah perlakuan 5,701 ± 1,150, dengan nilai p =0,591.  Rerata  fragilitas  osmotik  eritrosit  sebelum perlakuan  35,25  ±  7,089,  sesudah  perlakuan  29,15  ±  9,043, dengan nilai p =0,004.
Simpulan  : Pemberian  vitamin  C  dapat  memperbaiki  fragilitas osmotik  eritrosit  pada  pasien  β  thalassemia  selama  1  bulan . Pemberian vitamin C pada pasien β thalassemia mayor sebaiknya diberikan lebih dari 1 bulan dengan dosis yang ditambah.
Kata  kunci  : fragilitas  osmotik  eritrosit,  β  thalassemia  mayor, vitamin C

## Departemen IKA Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro/RSUP Dr. Kariadi Semarang

## Abstrak
Background : Vitamin C acts as an antioxidant against membrane phospholipid  peroxidation  induced  by  oxidative  stress  that  is expected to improve the osmotic fragility approaching the normal range.  Erythrocyte  osmotic  fragility  examination  first  history  of screening  tests  performed  for  beta  thalassemia  major.  Blood transfusion is still the primary treatment for overcoming anemia in thalassemia  at  this  time.  Giving  repeated  transfusions  cause excessive  iron  accumulation  which  in  turn  lead  to  oxidative damage. The objective of this study was to determine Vitamin C supplementation could improve the erythrocyte osmotic fragility in major β thalassemia patients.
Methods : Design of study was Double blind Randomized Control trial   in major β thalassemia patients who fulfilled the inclusion criteria. Subjects were taken by consecutive sampling , divided in to 2 groups. Group I (treatment group) was given vitamin C 100 mg daily and Group II (control group) was given placebo daily during 1  month.  Randomization  of  treatment  was  done  by  block allocation.  Erythrocyte  osmotic  fragility  was  examined  in Laboratory of Dr. Kariadi Hospital. Statistical analysis used was Chi square test.
Results  : Subject  were  50  children,  consist  of  Group  I  :  25  and Group II : 25 children. Group I was found : mean of Hb level before treatment   5.81 ± 1.032, after treatment   6.65 ± 0.741, p =0.000. Mean of erythrocyte osmotic fragility before treatment was  30.75 ± 5.685, after treatment was  38.19 ± 6.977, p =0.000. Group II was found  mean  Hb  level  before  treatment  5.84  ±  1.287,  after treatment 5.701 ± 1.150, p =0.591. Mean of erythrocyte osmotic fragility  before  treatment  35.25  ±  7.089,  after  treatment  was 29.15 ± 9.043, with p =0.004 Conclusion  : Vitamin  C  supplementation  during  1  month  could improved the erythrocyte osmotic fragility in major β  thalassemia patients. Vitamin C supplementation may given more longer than 1 month with additional doses .
Keywords : erythrocyte  osmotic fragility, β thalassemia, vitamin C

## Abstract
The effect of vitamin C as antioxidant to erythrocyte osmotic fragility in in major ß thalassemia

## Original Article
Med Hosp 2014; vol 2 (2) : 98-104

## Medica Hospitalia

## PENDAHULUAN
Salah satu ciri kelainan thalassemia adalah destruksi sel darah merah yang lebih cepat daripada sel darah merah normal.  Kelainan  sel  darah  merah  pada  thalassemia disebabkan  oleh  gangguan  sistesis  rantai  alfa  dan  beta 1 pada hemoglobin.  Produksi rantai beta globin pada beta thalassemia  mayor  menurun  dalam  jumlah  besar. Penurunan  produksi  beta  globin  menyebabkan peningkatan  jumlah  rantai  alfa  globin  yang  kemudian menyebabkan  kerusakan  oksidatif  seluler  pada  pasien thalassemia  ß  mayor.  Hal  ini  kemudian  menyebabkan fragilitas  osmotik  dari  sel  darah  merah  rendah dibandingkan sel darah merah normal. Sel darah merah thalassemia  lebih  resisten  terhadap  lisis  pada  larutan hipotonis.  Hal  ini  menunjukkan  penurunan  dari
2 fragilitas  osmotik.   Untuk  mempertahankan  hidupnya, penderita  thalassemia  ß  mayor  memerlukan  transfusi darah yang teratur. Akan tetapi transfusi darah berulang dapat menimbulkan efek samping berupa penumpukan
3 besi dalam jaringan-jaringan.
Thalassemia ß mayor, selain terjadi penumpukan besi intrasel, juga terjadi peningkatan jumlah kompleks
4 besi  berberat  molekul  rendah.   Logam  transisi,  seperti besi,  dalam  lingkungan  intraseritrosit  yang  kaya  akan oksigen dapat mengakibatkan toksisitas oksigen melalui pembentukan  radikal  bebas  yang  dapat  merusak berbagai komponen sel antara lain membran. Sel eritrosit memiliki membran sel berlapis ganda yang tersusun atas 50% lipid dan 50% protein, oleh karenanya sel membran eritrosit ini rentan terhadap kerusakan yang ditimbulkan oleh  radikal  bebas.  Salah  satu  produk  oksidasi  lipid membran  adalah  malondialdehid  (MDA)  yang  dapat menggambarkan  adanya  beban  oksidatif  sehingga
5 diperlukan antioksidan yang tinggi.
Eitan Fibach et al membuktikan bahwa kadar besi bebas  secara  ekstraselular  ( labile  plasma  iron ,  LPI)  dan intraselular (labile  iron  pool ,  LIP)  banyak  diidentifikasi sebagai  penyebab  stres  oksidatif  pada  sel  darah  pasien thalassemia dengan cara memacu pembentukan radikal oksigen. Hal ini menjadi dasar dalam pemberian terapi seperti  antioksidan  dan chelating  agent pada  penderita 6 thalassemia ß mayor.
Kelebihan besi intrasel dalam jumlah besar dapat berperan sebagai katalis dalam proses peroksidasi lipid membran. Kerusakan peroksidatif protein membran sel darah merah dibuktikan dengan terjadinya ikatan lintas silang pada beberapa protein membran sel darah merah. Kerusakan peroksidatif membran sel darah merah akibat dari  aktivitas  oksidan  tersebut  memperburuk  fragilitas
7 eritrosit  penderita  thalassemia.   Antioksidan didefinisikan sebagai senyawa yang dalam jumlah kecil dapat  menunda  atau  menghambat  kerusakan  oksidatif suatu  molekul  sasaran.  Antioksidan  dapat  melindungi molekul,  sel,  dan  jaringan  sasaran  dengan  cara memusnahkan Reactive Oxygen Species (ROS) baik secara
enzimatik  maupun  dengan  reaksi  kimia  langsung, mengurangi  pembentukan  ROS  dan  mengikat  ion-ion logam  yang  terlibat  dalam  pembentukan  spesies  yang 7 reaktif.
Vitamin C sebagai salah satu antioksidan, bekerja sebagai donor elektron, dengan cara memindahkan satu elektron ke senyawa logam Cu. Selain itu, vitamin C juga dapat  menyumbangkan  elektron  ke  dalam  reaksi biokimia  intraseluler  dan  ekstraseluler.  Vitamin  C mampu  menghilangkan  senyawa  oksigen  reaktif  di dalam  sel  netrofil,  monosit,  protein  lensa,  dan  retina. Vitamin ini juga dapat bereaksi dengan Fe-ferritin. Diluar sel, vitamin C mampu menghilangkan senyawa oksigen reaktif,  mencegah  terjadinya  LDL  teroksidasi, mentransfer elektron ke dalam tokoferol teroksidasi dan 8 mengabsorpsi  logam  dalam  saluran  pencernaan. Konsentrasi vitamin C pada anak dengan stres oksidatif lebih rendah dibandingkan dengan kadar vitamin C pada 9 anak  normal . Menurut  McGregor  and  Biesalski 10 kenaikan kadar plasma vitamin.    Setelah 6 bulan terapi dengan menggunakan beberapa vitamin yang berfungsi sebagai antioksidan, pasien-pasien dengan ß thalassemia menunjukkan  peningkatan  yang  signifikan  terhadap beberapa  parameter  non  enzimatik  dari  aktivitas antioksidan  jika  dibandingkan  dengan  sebelum dilakukan  perlakuan.  Penelitian  tersebut  menunjukkan bahwa pemberian suplementasi vitamin C memberikan manfaat pada pasien-pasien beta thalassemia. Selain itu penelitian  ini  juga  menyimpulkan  bahwa  tidak terdapatnya  kontraindikasi  pada  pemberian  vitamin  c dosis  rendah  pada  pasien-pasien  beta  thalassemia dengan  defisiensi  vitamin  C.  Terdapatnya  penurunan MDA  yang  signifikan  setelah  pemberian  beberapa 11 vitamin dengan fungsi antioksidan . Pemeriksaan  fragilitas  osmotik  eritrosit  satu tabung,  sejarahnya  dulu  digunakan  sebagai  tes skrining/uji tapis untuk penderita thalassemia ß mayor Uji  fragilitas  osmotik  eritrosit  dilakukan  untuk mengukur  kemampuan  eritrosit  menahan  terjadinya hemolisis  dalam  larutan  yang  hipotonis.  Eritrosit dilarutkan  dalam  larutan  salin  dengan  berbagai konsentrasi. Jika terjadi hemolisis pada larutan salin yang sedikit  hipotonis,  keadaan  ini  dinamakan  peningkatan fragilitas  eritrosit  (=penurunan  resistensi/daya  tahan eritrosit), dan apabila hemolisis terjadi pada larutan salin yang  sangat  hipotonis,  keadaan  ini  mengindikasikan penurunan  fragilitas  osmotik  (=peningkatan  resistensi 12,13 eritrosit).
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  membuktikan apakah  pemberian  vitamin  C  dapat  memperbaiki fragilitas  osmotik  eritrosit  pada  pasien  thalassemia  ß mayor sehingga pada akhirnya akan memperbaiki kadar hemoglobin  pasien  dan  menjarangkan  frekuensi transfusi. Test fragilitas osmotik eritrosit  pada penelitian ini  hanya  digunakan  untuk  konfirmasi  secara  ilmiah bukan untuk uji tapis/skrining.

## METODE
Desain penelitian menggunakan double blind randomized control  trial pada  pasien  β  thalassemia  mayor  yang memenuhi kriteria inklusi : penderita thalassemia mayor yang mendapat transfusi berulang (10 – 20 kali transfusi), Umur  2 – 14  tahun,  tidak  menderita  penyakit  kelainan hematologi lain, tidak menderita gizi buruk, tidak gagal ginjal,  tidak  menggunakan  suplemen  antioksidan  atau herbal. Subjek diambil dengan cara consecutive samplin g dibagi  menjadi  2  kelompok.  Randomisasi  perlakuan dilakukan dengan blok alokasi. Kelompok I (kelompok perlakuan) diberikan vitamin C sebanyak 2x100 mg/hari, Kelompok II (kelompok kontrol) diberi plasebo dua kali setiap  hari  selama  1  bulan.  Fragilitas  osmotik  eritrosit diperiksa  di  Instalasi  Laboratorium  RSUP Dr.  Kariadi 2 Semarang. Analisis statistik dengan Uji X  .

## HASIL
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental dengan  desain Double  blind  Randomized  Control  Trial (RCT) yang melibatkan subjek sebanyak 50 kasus β  thalassemia  mayor  yang  memenuhi  kriteria  inklusi. Pengambilan subjek berdasar consecutive sampling , urutan dia  datang.  Sedangkan  perlakuan  randomisasi berdasarkan blok alokasi. Kelompok I terdiri dari 25 subjek yang mendapat perlakuan diberi suplementasi vitamin C sebanyak 100mg/perhari, 2 kali perhari selama 1 bulan. Kelompok II terdiri dari   25 subjek yang diberi placebo  tiap  hari  selama  1  bulan.  Karakteristik demografis subjek dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1 menunjukkan bahwa di antara 2 kelompok tidak terdapat perbedaan bermakna tentang karakteristik demografis  subyek.  Sedangkan  manifestasi  klinis  yang biasa ditemukan pada pasien thalassemia mayor, dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 3 menunjukkan bahwa terdapat perbedaan yang  bermakna  tentang  kadar  Hb,  Ht  dan  fragilitas osmotic eritrosit pada Kelompok I sebelum dan sesudah perlakuan yaitu sesudah pemberian vitamin C selama 1 bulan.
Tabel  4  menunjukkan  bahwa  bahwa  tidak terdapat perbedaan yang bermakna tentang kadar Hb, Ht dan fragilitas osmotic eritrosit pada Kelompok II sebelum dan sesudah perlakuan yaitu sesudah pemberian vitamin C selama 1 bulan.
Tabel 5 menunjukkan bahwa delta (selisih) kadar Hb, Ht dan Fragilitas osmotik kedua kelompok berbeda secara bermakna.
Tabel  6  menunjukkan  bahwa  asupan  vitamin  C, Status Infeksi dan Status Gizi bukan merupakan faktor perancu  sehingga  analisis  multivariate  tidak  perlu dilakukan.

## PEMBAHASAN
Subyek  penelitian  ini  sebanyak  50  anak  dengan β  thalassemia mayor, pada kelompok perlakuan 88% pasien  berusia lebih dari 5 tahun,  dan  hanya  3%  yang berusia kurang dari 5 tahun, sedangkan pada kelompok kontrol tidak ada perbedaan signifikan yaitu 76% pasien berusia lebih dari 5 tahun dan 24 persen berusia kurang dari 5 tahun. Sebuah penelitian dari Mannan A dkk pada
1 2 Keterangan :  Fisher's Exact Test,  Pearson TABEL 1 Karakteristik demografis subjek Umur Variabel < 5 tahun > 5 tahun Jenis kelamin
Laki-laki Perempuan Status Gizi Buruk Kurang Normal
OR 0,432 0,254
CI 95% Bawah Atas 0,095 0,170 1,966
1,612
Kelompok II n %
24,0
76,0 60,0
40,0 16,0
48,0 36,0
6
19 15
10 4 12 9
Kelompok I
3 22 11 14
5
11 9 n % 12,0 88,0 44,0 56,0 20,0 44,0 36,0 p 1 0,463 2 0,258 2 0,926

## TABEL 2 Karakteristik manifestasi klinik Subyek
Facies Coley
Variabel
Ya Tidak
Pucat
Ya Tidak Hepatomegali Ya
Tidak
Pembesaran OR CI 95% Bawah Atas
Kelompok II n % Kelompok I 17 8 22
3
8 17 n % 68,0 32,0 88,0 12,0 32,0
68,0
p Lien
Ya Tidak Spelenektomi Ya Tidak 18 7
2 23 72,0 28,0 8,0 92,0 64,0
36,0
92,0
8,0 20,0 80,0
64,0
36,0
4,0
96,0 16 9 23 2 5 20 16 9
1 24 2 0,675 1 1,000 2 0,333 2 0,544 1
1,000 1,195 0,638 0,1882 1,446 2,087 0,370 0,097 0,518 0,438 0,177 3,858 4,188 6,845 4,781 24,615
tahun  2013  mengenai  pendekatan  demografik  dari pasien-pasien  thalassemia  termasuk  pasien  beta thalassemia mayor, didapatkan bahwa 100 persen pasien dengan  bukti  adanya  beta  thalassemia  mayor,  berusia kurang  dari  10  tahun.  Frekuensi  yang  tinggi  pada  usia lebih  dari  5  tahun,  terkait  dengan  mulai  perlunya 14 transfusi darah pada pasien thalassemia beta mayor.
Moedrik  Tamam  dkk  dalam  penelitiannya mengenai  hubungan  mutasi  gen  dan  manifestasi  klinis pasien  thallasemia,  rerata  umur  pertama  kali  transfusi darah  adalah  3,7  ±  3,01  tahun,  dengan  rerata  frekuensi transfusi adalah 6,67 ± 5,41 kali per tahun. Hal ini berarti untuk dapat mencapai lebih dari 20 kali transfusi, maka rata-rata usia anak sekitar 6,7 ± 6,01 tahun atau di atas 15 usia 5 tahun.
J e n i s   k e l a m i n   b a i k   d a l a m   k e l o m p o k perlakuanmaupun  dalam  kelompok  kontrol  tidak terdapat perbedaan yang signifikan, dengan presentase terbanyak  adalah  perempuan.  Hal  ini  berbeda  dengan karakteristik demografi yang didapatkan oleh Mannan A dkk yang dilakukan di Bangladesh. Meski tidak terdapat perbedaan  yang  signifikan,  namun  pada  region  yang mereka  teliti,  laki-laki  lebih  banyak  menderita  beta 14 thalassemia dibandingkan perempuan.
Namun  Moedrik  Tamam  dkk  yang  meneliti  di regio  yang  sama  dengan  penelitian  ini,  meski  tidak signifikan,  mendapatkan  karakteristik  jenis  kelamin 15 yang sama pada pasien beta thalassemia yaitu wanita. Status gizi yang merupakan salah satu variabel perancu dalam  penelitian  ini,  didapatkan  perbedaan  status  gizi yang  tidak  signifikan  di  kedua  kelompok.  Status  gizi terbanyak  pada  subjek  penelitian  adalah  gizi  kurang. 44% pada kelompok perlakuan dan 48% pada kelompok kontrol.  Phurita  Thongkijpreecha  dkk,  dalam penelitiannya  terhadap  status  gizi  pasien  thalassemia intermedia  mendapatkan  bahwa  status  gizi  terbanyak 16 adalah malnutrisi sedang yaitu sebesar 40%.
Asupan  makanan  memegang  peranan  penting dalam menentukan status gizi pada pasien thalassemia. Dilaporkan  bahwa  pasien  thalassemia  membutuhkan lebih banyak asupan energi dibandingkan anak normal. Namun, Tanphaichitr dkk pada tahun 1995 menemukan bahwa justru asupan energi pasien thalassemia di negara berkembang  rendah  dan  hanya  mencukupi  65%
17 kebutuhan  energi.   Meskipun  hasil  dari  pengukuran antropometri  menandakan  adanya  gangguan pertumbuhan,  namun  sulit  untuk  disimpulkan  bahwa penyebab dari malnutrisi pada pasien thalassemia akibat
1 2

## Keterangan :  Fisher's Exact Test,  Pearson
Pemberian Vitamin C sebagai Antioksidan terhadap Fragilitas Osmotik Eritrosit pada ß Thalassemia Mayor
1 2 Keterangan :  Independent t test,  Mann Whitney test

## TABEL 6
Selisih Hb, Ht dan Fragilitas osmotik pada dua kelompok
Selisih Hb Variabel
Selisih Ht
Selisih Fragilitas osmotik Kelompok II -0,38 + 3,877 -6,10 + 9,467 Kelompok I
2,13 + 2,788
7,44 + 5,729 p
0,83 + 0,743 -0,13 + 1,216
1 0,012 2 0,000 1 0,001
dari asupan yang kurang. Beberapa faktor dapat menjadi penyebab,  seperti  eritropoesis  yang  tidak  efektif sehingga terjadi anemia yang kronis, hiperkatabolik, dan
18 disfungsi hormonal.
Karakteristik  manifestasi  klinis  pada  kedua kelompok  perlakuan  dan  kontrol,  tidak  didapatkan perbedaan  yang  bermakna.  Didapatkan  splenomegali 72% pada kelompok perlakuan dan 64% pada kelompok kontrol. Limpa yang besar merupakan wadah pool dari darah sehingga akan lebih mudah mengalami destruksi dan  menambah  volume  plasma  sehingga  kebutuhan akan  transfusi  darah  akan  cenderung  meningkat. Indikasi  splenektomi  ialah  limpa  yang  terlalu  besar sehingga  membatasi  gerak  penderita  sehingga menimbulkan peningkatan tekanan intraabdominal dan bahaya  terjadinya  ruptur,  hipersplenisme  ditandai dengan  peningkatan  kebutuhan  transfusi  darah  atau kebutuhan  suspensi  eritrosit/ Packed  Red  Cell /PRC melebihi 250 mg/kgbb dalam satu tahun. Didapatkan 3 subjek  yang  telah  dilakukan  splenektomi,  yaitu  2  pada kelompok perlakuan dan 1 pada kelompok kontrol.
Kadar  Hemoglobin  sebelum  perlakuan  pada kelompok  perlakuan  adalah  5,81  ±  1,032  dan  pada kelompok kontrol 5,84 ± 1,287. Syed Riaz Mehdi dkk yang meneliti  status  hemoglobin  pasien  thalasemia mengatakan  bahwa  pada  usia  7–13  tahun,  kadar  Hb
antara 7–13 memiliki porsi terbesar, disusul dengan Hb di bawah  7.  Semakin  bertambah  umur  pasien,  semakin rendah  kadar  hemoglobin  pasien  akibat  dari  semakin besarnya  stres  oksidatif  yang  kemudian  semakin memperburuk  fragilitas  osmotik  pasien,  sehingga 19 pecahnya sel darah merah semakin cepat.
Terdapat kenaikan yang signifikan dari fragilitas osmotik eritrosit ke arah rentang normal pada kelompok perlakuan  yang  mendapat  vitamin  C  100 mg  per  hari. Ikatan silang dari membran eritrosit menjadi lebih kaku pada pasien thalassemia dibandingkan dengan normal. Setelah pemberian vitamin C 100 mg per hari selama 6 bulan dan 12 bulan, pasien dengan β thalassemia major memberikan  peningkatan  yang  signifikan  terhadap parameter  nonenzimatik  dibandingkan  sebelum diberikan terapi. Namun parameter tersebut tidak dapat menjadi  normal  akibat  besarnya  stres  oksidatif  yang 12 terjadi  pada  pasien  thalassemia  mayor.   Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  Thasinas et  al .  Yang  menyimpulkan bahwa, setelah pemberian 3 bulan vitamin C dan vitamin E, memberikan  peningkatan  namun  tidak  dapat menormalkan. Pada penelitian ini, diberikan vitamin C selama  1  bulan  dengan  dosis  100  mg  per  hari,  dan didapatkan  pada  kelompok  perlakuan  peningkatan fragilitas  osmotik  yang  signifikan,  namun  tidak  dapat hingga  menormalkan.  Pada  kelompok  kontrol  yang
1 2 Keterangan :  Paired t test ,  Wilcoxon test

## TABEL 5
Kadar Hb, Ht dan Fragilitas osmotik
Kelompok I (Perlakuan) sebelum dan sesudah perlakuan
Variabel Pre Hb 5,81 + 1,032 Post 6,65 + 0,741 Ht 17,96 + 2,855 20,12 + 2,404 p
1 0,000 2 0,001 Fragilitas osmotik eritrostik 30,75 + 5,685 38,19 + 6,977 1 0,000 1 2 Keterangan :  Paired t test ,  Wilcoxon test

## TABEL 4
KKadar Hb, Ht dan Fragilitas osmotik Kelompok II (Kontrol) sebelum dan sesudah perlakuan
Variabel Pre Hb 5,84 + 1,287 Post 5,701 + 1,150 Ht 18,25 + 4,011 17,87 + 3,755 p 1 0,591
2 0,798 Fragilitas osmotik eritrostik 35,25 + 7,089 29,15 + 9,043 1 0,004
Medica Hospitalia | Vol. 2, No. 2, Mei 2014
diberikan placebo, terdapat penurunan fragilitas osmotik eritrosit yang signifikan. Peningkatan fragilitas osmotik eritrosit,  yang  merupakan  bukti  dari  berkurangnya akibat  dari  stres  oksidatif  pada  membran  sel  eritrosit, kemudian  akan  meningkatkan  kadar  Hb  oleh  karena pecahnya  eritrosit  yang  melewati  kapiler  akibat kekakuan  membran  eritrosit  menjadi  menurun  dan meningkatkan  Hb.  Pada  kelompok  perlakuan  terjadi kenaikan hemoglobin yang signifikan, sedangkan pada kelompok  kontrol  didapatkan  penurunan  hemoglobin 20 namun tidak signifikan.
Penelitian  yang  dilakukan  tentang  efek  vitamin antioksidan  pada  Hemoglobin  dan  eritrosit  pada  Beta thalassemia  homozgot  menyebutkan  bahwa  pasien diberikan  vitamin  E,  C  dan  A  selama  12  bulan.  Nilai rerata hemolisis pada anak β thalassemia mayor  sebelum pengobatan lebih nilai dari kelompok kontrol, sedangkan anak dengan β thalassemia mayor sesudah pengobatan lebih rendah dari sebelum pengobatan. Hasil dari analisis spekrtrofotometrik multikomponen menunjukkan hasil terjadi  penurunan  prosentase  Met  Hb  dan  HbCO bersamaan  dengan  kenaikan  bermakna  prosentase  HB O2  pada  darah  penderita  β  thalassemia  sesudah pengobatan dengan vitamin antioksidan, bila dibanding dengan  sebelum  pengobatan.  Hasil  akhir  penelitian tersebut  adalah bahwa pengobatan pasien β thalassemia dengan  vitamin  antioksidan  mengurangi  hemolisis  sel darah merah dan meningkatkan kadar Hb penderita. Di samping  itu  juga  pemberian  vitamin  antioksidan menurunkan kadar Hb inaktip (HbCO and MetHb) dan meningkatkan konsentrasi   Hb aktip (HbO2) dan tidak
12 adapengaruh terhadap rerata denaturasi alkalin Hb.
Keterbatasan  dalam  penelitian  ini  tidak melakukan pemeriksaan kadar vitamin C sebelum dan sesudah perlakuan.

## SIMPULAN
Pemberian  vitamin  C  dapat  memperbaiki  fragilitas osmotik eritrosit pada pasien β thalassemia selama 1 bulan. Disarankan pemberian vitamin C pada pasien β thalassemia mayor sebaiknya diberikan lebih dari 1 bulan dengan dosis yang ditambah.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Cao A, Galanello R. Beta-thalassemia. Genetics in medicine : official journal of the American College of Medical Genetics. 2010;12(2):61–76. Epub 2010/01/26.
2. Kattamis C, Efremov G, Pootrakul S. Effectiveness of one tube osmotic fragility screening in detecting b-thalassaemia trait. J Med Genet 1981;18:266–70
3. Sankaran  VG,  Nathan  DG.  Thalassemia:  an  overview  of  50 years  of  clinical  research.  Hematology/oncology  clinics  of North America. 2010;24(6):1005–20. Epub 2010/11/16.
4. Cappellini MD, Bejaoui M, Agaoglu L, Canatan D, Capra M, Cohen  A,  et  al.  Iron  chelation  with  deferasirox  in  adult  and pediatric patients with thalassemia major: efficacy and safety during  5  years'  follow-up.  Blood.  2011;118(4):884–93.  Epub 2011/06/02.
5. Cakmak A, Soker M, Koc A, Aksoy N. Prolidase activity and oxidative status in patients with thalassemia major. Journal of clinical laboratory analysis. 2010;24(1):6-11. Epub 2010/01/21
6. Fibach E, Rachmilewitz EA. The role of antioxidants and iron chelators  in  the  treatment  of  oxidative  stress  in  thalassemia. Annals of the New York Academy of Sciences. 2010;1202:10-6. Epub 2010/08/18.
1 2
Keterangan :  Fisher's Exact Test,  Pearson Chi Square

## TABEL 6
Faktor perancu Asupan vitamin C
Variabel Kurang Tidak
Status infeksi
Ya Tidak Status Gizi Buruk Kurang Normal
OR
1,000 3,273 CI 95% Bawah Atas 0,315 0,317 3,174 33,837 Kelompok II n %
64,0
36,0 4,0
960,0
16,0 48,0 36,0
16
9
1 24
4
12
9 Kelompok I
16
9
3 22
16 11 9
n % 64,0 36,0 12,0 88,0 20,0 44,0 36,0 p 2 1,000 1 0,609 2 0,926
Pemberian Vitamin C sebagai Antioksidan terhadap Fragilitas Osmotik Eritrosit pada ß Thalassemia Mayor
7. Vasileiadis  I,  Roditis  P,  Dimopoulos  S,  Ladis  V,  Pangalis  G, Aessopos  A,  et  al.  Impaired  oxygen  kinetics  in  beta- thalassaemia  major  patients.  Acta  Physiol  (Oxf). 2009;196(3):357–63. Epub 2008/12/02.
8. Levine  M,  Conry-Cantilena  C,  Wang  Y,  Welch  RW,  Washko PW, Dhariwal KR, et al. Vitamin C pharmacokinetics in healthy volunteers:  evidence  for  a  recommended  dietary  allowance. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 1996;93(8):3704–9. Epub 1996/04/16.
9. Schorah CJ, Downing C, Piripitsi A, Gallivan L, Al-Hazaa AH, Sanderson  MJ,  et  al.  Total  vitamin  C,  ascorbic  acid,  and dehydroascorbic acid concentrations in plasma of critically ill patients.  American  J  Clin  Nutr.  1996;63(5):760–5.  Epub 1996/05/01
11. Dissayabutra  T,  Tosukhowong  P,  Seksan  P.  The  benefits  of vitamin C and vitamin E in children with beta-thalassemia with high  oxidative  stress.  Journal  of  the  Medical  Association  of Thailand = Chotmaihet thangphaet. 2005;88 Suppl 4:S317–21. Epub 2006/04/21.
12. Attia MMA,. Sayed  AM , Ibrahim   FA Mohammed   AS,  EL- Alfy  MS.  .Effect of Antioxidant vitamins on some Hemoglobin properties and erythrocytes in homozygous Beta thalassemia . Romanian J. Biophys  :  2011 ;(21), 1 : 116.
13. Khalid  U.  Osmotic  Fragility  of  Erythrocytes.  Medscpae referrence. (Internet) (Cited September 22, 2013). Available in : http://emedicine.medscape.com/article/2085814-overview.
14. A.  Mannan,  J.  Kawser,  A.M.A.  Ahmed,  Mohd.  Omar  Faruk Sikder, M.J. Islam and M.A. Chowdhury, 2013. A Demographic Approach for Understanding the Prevalence of β Thalassemia Patterns  and  Other  Hemoglobinopathies:  Selective  Study  in Chittagong City Perspective. Asian Journal of Biological Sciences ,
6: 124–130.
15. Tamam M, Hadisaputro S, Sutaryo S, Setianingsih I, Astuti R, Soemantri  Ag.  Hubungan  antara  tipe  mutasi  gen  globin  dan manifestasi  klinis  penderita  talasemia.  Jurnal  Kedokteran Brawijaya, Vol. 26, Februari 2010.
16. Thongkijpreecha  P,  Kangsadalampai  O,  Pongtanakul  B, Meksawan K. Nutritional Status in Patients with Thalassemia Intermedia. Journal of Hematology and Transfusion Medicine. July–September 2011;21:3.
17. Tanphaichitr  V,  Visuthi  B,  Tanphaichitr  V.  Causes  of inadequate protein-energy status in thalassemic children. Asia Pacific J Clin Nutr 1995;4:133–5.
18. Soliman AT, El-Matary W, Fattah MMA, et al. The effect of high- calorie  diet  on  nutritional  parameters  of  children  with  β thalassaemia major. Clin Nutr 2004;23:1153–8.
19. Mehdi  SR,  Dahmash  BAA.  A  comparative  study  of hematological  parameters  of  α  and  β  thalassemias  in  a  high prevalence  zone:  Saudi  Arabia.  Indian  J  Hum  Genet.  2011 Sep–Dec; 17(3): 207–211.
20. Thasina D.,Piyaratna T,  Panya S, The benefits of vitamin C and vitamin E in children with ß-thalassemia with high oxidative stress, J. Med. Assoc. Thai ., 2005, 88, 48.