# Korespondensi:  Balai  Besar  Riset  Budidaya  Laut  dan Penyuluhan  Perikanan.  Jl.  Br.  Gondol  Ds.  Penyabangan Kec.  Gerokgak  Kab.  Buleleng,  Kotak  Pos  140,  Singaraja, Bali  81155,  Indonesia Tel.:  +62  362  92272 E-mail:  marzuqi_rim@yahoo.co.id
Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/ma
PERFORMA  PERTUMBUHAN  DAN  NILAI  KECERNAAN    PAKAN  PADA  YUWANA KERAPU HIBRID “CANTIK” (Epinephelus fuscoguttatus x Epinephelus polyphekadion) DENGAN  PEMBERIAN  BAKTERI  PROBIOTIK  DAN/ATAU  ENZIM  PAPAIN  DALAM  PAKAN
Muhammad  Marzuqi # , Haryanti, Ni  Wayan Widya Astuti, Nyoman  Adiasmara  Giri,   dan Ketut  Mahardika
Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan Jl. Br. Gondol Ds. Penyabangan Kec. Gerokgak Kab. Buleleng, Kotak Pos 140, Singaraja, Bali 81155
(Naskah diterima: 24 Juni 2019; Revisi final: 7 Mei 2020; Disetujui publikasi: 8 Mei 2020)

## ABSTRAK
Probiotik telah banyak digunakan untuk memperbaiki kualitas lingkungan perairan dalam kegiatan budidaya. Selain itu probiotik juga dapat digunakan dalam pakan ikan. Tujuan penelitian adalah mengetahui efektivitas pemanfaatan probiotik dan enzim papain dalam pakan terhadap pertumbuhan dan nilai kecernaan pakan untuk ikan kerapu hibrid “cantik”. Perlakuan  berupa penggunaan probiotik dalam pakan yaitu (pakan A) probiotik  dalam pakan, (pakan B) tanpa probiotik dan tanpa enzim dalam pakan (kontrol), (pakan C) enzim dalam pakan dan (pakan D) kombinasi probiotik dan enzim dalam pakan. Hewan uji berupa benih  ikan kerapu hibrid  dengan ukuran bobot rata rata awal 7,30± 0,60 g. Ikan dipelihara dalam bak polikarbonat bervolume 300  liter yang  telah dilengkapi  dengan aerasi  dan sistem  air mengalir  dengan kepadatan  50 ekor/bak.  Benih ikan diberi pakan percobaan secara satiasi dengan frekuensi pemberian dua kali sehari. Percobaan dirancang dengan rancangan acak lengkap, terdiri atas empat perlakuan pakan dan tiga ulangan. Pengamatan pertumbuhan dilakukan setiap 1 minggu dengan menimbang bobot ikan. Pengamatan meliputi performa  pertumbuhan,  nilai  kecernaan  pakan  pada  ikan  kerapu.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa penggunaan  bakteri  probiotik  pada  pakan  ikan  kerapu  berpengaruh  terhadap  performa  pertumbuhan (pertambahan  bobot),  efisiensi  pakan  (p<0.05).  Pertambahan  bobot  tertinggi  terjadi  pada  ikan  kerapu hibrid  yang  diberi  perlakuan  pakan  dengan  bakteri  probiotik  (237±0,04%)  diikuti  pakan  dengan  enzim (204±0,09%), sedangkan ikan yang diberi pakan dengan kombinasi bakteri  probiotik dan enzim diperoleh pertambahan bobot lebih rendah dari pakan kontrol masing masing 118±0,03% dan 192±0,20% dan nilai kecernaan  pakan  sebesar  79,91-84,24%.
KATA KUNCI: probiotik; enzim; pakan buatan; kerapu hibrid cantik
ABSTRACT: Growth performance and feed nutrient digestibility of hybrid grouper (Epinephelus fuscoguttatus x Epinephelus polyphekadion) fed with  diets supplemented with probiotic bacteria and papain enzyme. By: Muhammad Marzuqi, Haryanti, Ni Wayan Widya Astuti, Nyoman Adiasmara Giri, and Ketut Mahardika
Probiotics have been widely used to improve water quality in fish farms. Probiotics are also utilized in fish feed as food supplements. This research was aimed to investigate the efficacy of probiotics and papain enzyme on the growth and nutrient digestibility of hybrid grouper “Cantik”. The experiment was arranged in a Completely Randomized Design consisting of four feed treatments and three replications: diet A, a diet supplemented with probiotic; diet B(control), a diet without supplementation of probiotic and enzyme; diet C, a diet supplemented with enzyme; and diet D, a diet supplemented with probiotic and enzyme. The test fish were hybrid grouper fish fry with an initial average body weight of 7.30 ± 0.60 g. The fish fry were reared  in 300 liter volume polycarbonate tanks equipped with aeration and a flowthrough water system at a density of 50 fish/tank. The fish fry were fed with the diets two times a day by satiation for 56 days. The fish growth performance was observed weekly by recording their weight gain, nutrient digestibility, and survival rate. The results showed that the application of probiotic bacteria in the feed had statistically significant
effects on the specific growth rate (SGR), weight gain, feed efficiency, and the rate of feed intake (p <0.05). The highest specific growth rate was observed in the fry group treated with the diet containing probiotic ((237±0.04%) followed by the enzyme-supplementing diet (204±0.09%) and the control diet(192±0.20%). The fish group fed with a combination of probiotic and enzyme had the lowest specific growth rate of 118±0.03%  and  protein digestibility coefficient   of 79.91-84.24  %.

## KEYWORDS: probiotics; enzymes; feed; hybrid grouper
Chiu  (2010)  menyatakan  bahwa  pemberian  bakteri probiotik jenis Saccharomyces cerevisiae pada pakan ikan kerapu lumpur (Epinephelus coioides) pada tingkat yang berbeda memberikan pengaruh yang nyata terhadap sintasan  yaitu  sebesar  56,6%  dibandingkan  dengan kontrol yang mempunyai nilai sebesar 20% selama 144 jam setelah uji tantang. Hasil penelitian yang lain juga menunjukkan bahwa aplikasi penggunaan probiotik, prebiotik  dan  simbiotik  dalam    pakan  adanya kesinergisan antara  Bacillus subtilis dengan prebiotik fruktooligosakarida  (FOS)  memberikan  efek  yang menguntungkan  dengan  adanya  peningkatan pertumbuhan, sintasan, respon imun, dan resistensi penyakit pada yuwana ikan Larimichthys crocea (Ai et al., 2011).
Selain  bakteri  probiotik  dalam  pakan  perlu  juga mengetahui penggunaan enzim papain dalam pakan. Papain  merupakan  enzim  protease  yang  mampu menghidrolisis  protein  menjadi  peptide  atau  asam amino  (Suhartono,  2005),  Enzim  papain  dapat dihasilkan dari buah, batang, ataupun daun pepaya. Enzim  papain  diharapkan  membantu  proses pemecahan  senyawa  protein  sehingga  lebih  mudah dicerna oleh ikan. Pada penelitian Khati et al. (2015) melaporkan bahwa penggunaan enzim papain dapat membantu mencerna faktor anti nutrisi alam pakan yang berasal dari bahan bahan nabati menjadi protein yang  sederhana  sehingga  dapat  diserap  ikan  dan membantu pertumbuhan. Selanjutnya Khati et al. (2015) dalam Fatchurochman et al. (2017) melaporkan bahwa penambahan enzim papain sebesar 10 g pada pakan buatan pada ikan rohu dapat menghasilkan nilai laju pertumbuhan  spesifik  3,35%;  rasio  konversi  pakan 2,05;  dan  protein  efisiensi  rasio  2,30%  yang  paling baik dibandingkan kontrol yaitu nilai laju pertumbuhan spesifik 2,83%; rasio konversi pakan 2,8; dan protein efisiensi  rasio 0,55%.  Penelitian  ini bertujuan  untuk mengetahui efektivitas pemanfaatan bakteri probiotik dan enzim papain dalam pakan terhadap pertumbuhan dan nilai kecernaan pakan pada yuwana ikan kerapu hibrid cantik.

## BAHAN DAN METODE

## Pakan Uji
Percobaan dilakukan di Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan (BBRBLPP), Gondol-Bali

## PENDAHULUAN
Ikan kerapu hibrid “cantik”merupakan spesies hasil perkawinan  silang,  antara  induk  kerapu  macan, Epinephellus  fuscoguttatus  betina  dan  induk  jantan kerapu batik Epinephellus polyphekadion melalui proses penyilangan antara telur kerapu macan dengan sperma kerapu  batik  (James  et  al.,  1999).  Ikan  kerapu  ini termasuk  jenis  ikan  karnivora  yang  merupakan unggulan  dalam  pengembangan  budidaya  ikan  laut karena  mempunyai  nilai  ekonomis  penting  dan pertumbuhan yang baik. Pada budidaya ikan laut secara intensif, penyediaan pakan merupakan hal yang sangat besar peranannya sebagai penentu pertumbuhan dan biaya  produksi.  Penelitian  pakan  buatan  pada komoditas ikan laut terutama ikan kerapu, sebagian besar  masih  berupa  pemanfaatan  berbagai  macam sumber  protein,  kebutuhan  nutrien  baik  makro maupun mikro dan teknik pemberian pakan. Beberapa jenis  ikan  kerapu  membutuhkan  pakan  dengan kandungan protein yang cukup tinggi berkisar antara 47,8-60,0% dan bervariasi  menurut spesiesnya (Giri, 1998; Giri et al., 2002). Ikan kerapu sunu, Plectropomus leopardus membutuhkan protein sebesar 48% (Marzuqi et al., 2006). Sedangkan kebutuhan lemak pada yuwana ikan  kerapu  bebek  9%-12%.  Untuk  meningkatkan efisiensi  pakan  dan  mengoptimalkan  pertumbuhan ikan  perlu  pemberian  formula  pakan  yang  sesuai terhadap ikan yang dibudidaya.
Salah satu  cara untuk mendapatkan pakan yang sesuai maka formula pakan harus disesuaikan dengan kondisi  saluran  pencernaan  ikan  sehingga  dapat meningkatkan    kecernaan  dan  penyerapan  nutrien pakan.  Penggunaan  aplikasi  bakteri  probiotik  dan enzim  papain  atau substitusi  bakteri  dengan  enzim papain dalam pakan belum banyak dilakukan untuk larva maupun  yuwana  ikan  kerapu.  Dengan  adanya penambahan nutrien dalam pakan ini, diharapkan dapat meningkatkan efektivitas probiotik dan enzim papain dalam meningkatkan pertumbuhan maupun imunitas ikan,  sehingga  dapat  diaplikasikan  pada  kegiatan budidaya laut.
Pada penelitian Nayak (2010) melaporkan bahwa probiotik  banyak  dilakukan  untuk  peningkatan produksi  akuakultur  sebagai  suplemen  makanan, peningkatan  resistensi  terhadap  penyakit,  dan peningkatan  kinerja  pertumbuhan.  Hasil  penelitian
mulai Mei sampai dengan Oktober 2015. Percobaan dirancang dengan Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang terdiri  atas  empat  perlakuan  dan  tiga  ulangan. Perlakuan  pada  percobaan  ini  adalah  (pakan  A) probiotik dalam pakan, (pakan B) tanpa probiotik dan tanpa enzim papain dalam pakan (kontrol), (pakan C) enzim papain dalam pakan dan (pakan D) kombinasi probiotik dan enzim papain dalam pakan. Jenis bakteri probiotik dan enzim yang digunakan untuk perlakuan adalah Bacillus cereus dan enzim papain komersial. Dosis bakteri probiotik Bacillus cereus dengan kepadatan 10 8 CFU/mL  dan  enzim  papain  dengan  dosis  0,25  g/Kg pakan, sedangkan pada perlakuan kombinasi bakteri probiotik  diberikan  10 4 CFU/mL  dan  enzim  papain diberikan  pada  dosis  0,125  g/kg.  Pakan  perlakuan diformulasi dari beberapa bahan baku berupa tepung ikan, tepung kedelai, tepung hati cumi, tepung rebon, dektrin, minyak ikan, perekat CMC, dan mikronutrien (vitamin mix, mineral mix). Bahan pakan uji ditimbang sesuai  dengan  formula  pada  Tabel  1.  Bahan-bahan tersebut  dimasukkan  ke  dalam  wadah  plastik  dan diaduk hingga merata, kemudian vitamin mix dan min- eral mix yang sudah ditimbang dimasukkan ke dalam beaker glass lalu dicampur sedikit demi sedikit dengan bahan-bahan sebelumnya. Minyak ikan sebagai sumber lemak  dimasukkan  ke  dalam  ember  dan  dilakukan pengadukan hingga merata (homogen). Setelah semua bahan tercampur rata, bakteri probiotik serta enzim papain perlakuan dilarutkan sesuai perlakuan dalam air sebanyak ± 30%. Selanjutnya dicampur ke bahan
pakan dan diaduk secara merata hingga membentuk adonan, kemudian dicetak dalam alat pencetak pakan (merk Royal) berukuran 2,1 mm dan 3,1 mm. Pakan yang sudah dikering dibungkus dengan plastik yang diberi kode perlakuan dan disimpan dalam kulkas pada suhu lebih kurang 4 o C.

## Hewan  Uji  dan  Wadah  Pemeliharaan
Ikan  uji  yang  digunakan  merupakan  hasil pembenihan kerapu hibrid dengan ukuran bobot rata rata 7,30±0,60 g ditebar dengan kepadatan 50 ekor per  bak.  Wadah  pemeliharaan  ikan  berupa  bak polikarbonat  bervolume  300  liter  yang  dilengkapi dengan sistem air mengalir dan aerasi sebagai sumber oksigen. Ikan diberi pakan percobaan secara satiasi dengan frekuensi pemberian dua kali sehari pada pukul 08.00 dan 15.00 WITA. Jumlah pakan yang diberikan dihitung  setiap  hari  dan  sisa  pakan  dalam  bak pemeliharaan  dikumpulkan  yang  selanjutnya dikeringkan dalam oven untuk menghitung efisiensi pakan.  Penyiponan  dilakukan  setiap  hari  untuk membuang  kotoran  yang  mengendap  di  dasar  bak. Setiap minggu dilakukan pengukuran bobot tubuh ikan. Parameter  yang  diamati  adalah  laju  pertumbuhan spesifik  (LPS),  pertambahan  bobot  (%),  sintasan  (S) (%),  efisiensi  pakan  (EP),  dan  nilai  kecernaan  pakan ikan kerapu hibrid. Selain itu dilakukan pengukuran kualitas  air  meliputi  suhu,  oksigen  terlarut,  pH, salinitas,  amonia,  nitrit,  dan  fosfat  sebagai  data dukung selama uji pakan dilakukan.
Tabel 1. Komposisi pakan percobaan (% bahan kering) Table 1. Composition of the test diets (% dry matter)
A Probiotik Probiotic B Kontrol Control C Papain enzim Enzyme papain D Probiotik + enzim papain Probiotic + Enzyme papain Tepung ikan (Fish meal) 48.8 48.8 48.8 48.8 Tepung hati cumi (Squid liver  meal) 10.0 10.0 10.0 10.0 Tepung rebon (Krill meal) 3.0 3.0 3.0 3.0 Tepung kedelai (Soybean meal) 10.0 10.0 10.0 10.0 Dekstrin (Dextrine) 17.1 17.1 17.1 17.1 Minyak ikan (Fish oil) 4.6 4.6 4.6 4.6 Vitamin mix 2.0 2.0 2.0 2.0 Mineral mix 3.0 3.0 3.0 3.0 CMC (Carboxyl methylcellulose) 1.5 1.5 1.5 1.5 Total 100.0 100.0 100.0 100.0 Komposisi proksimat pakan percobaan Proximate composition of the test diets  (% DM) Protein (Protein) 43.7 43.0 42.4 42.2 Lemak (Lipid) 11.4 11.0 11.7 11.5 Abu (Ash) 15.5 15.3 15.8 14.9 Serat (Fibre) 14.7 15.5 14.9 14.2 BETN 14.7 15.2 15.2 17.2 Bahan Ingredients
Pakan (Diets ) (%)
Laju pertumbuhan spesifik dihitung mengunakan rumus Takeuchi (1988):
di mana: LPS : Laju Pertumbuhan Spesifik (%) Wo : Bobot ikan pada awal penelitian (g) Wt : Bobot ikan pada akhir penelitian (g) t : Waktu (hari)
Sintasan menurut Effendie (1997) dihitung dengan rumus:
di mana:
S : Sintasan (%)
Nt : Jumlah ikan pada akhir penelitian No : Jumlah ikan pada awal penelitian
Efisiensi  pemberian  pakan  (EP)  dihitung  dengan menggunakan rumus sebagai berikut (NRC 1993):
di mana: EP : Efisiensi pemberian pakan (%) Wt : Biomassa ikan pada akhir penelitian (g) Wo : Biomassa ikan pada awal penelitian (g) D : Biomassa ikan yang mati selama penelitian (g)
F : Jumlah pakan yang konsumsi selama penelitian (g)

## Uji  Kecernaan  Pakan
Uji kecernaan untuk empat formula pakan dilakukan secara tidak langsung dengan menambahkan indikator kromium  oksida  (Cr 2 O 3 )  sebanyak  1%  pada  masing masing  pakan  (Takeuchi,  1988).  Untuk  menentukan nilai  kecernaan  pakan  digunakan  empat  bak polikarbonat 300 L yang dilengkapi dengan sistem air mengalir dan aerasi sebagai sumber oksigen.  Benih ikan  kerapu  hibrid  dengan  bobot  rata  rata  25  g dipelihara dengan kepadatan 20 ekor/bak. Benih ikan diadaptasikan dengan pakan percobaan selama satu minggu  sebelum  dilakukan  pengumpulan  feses. Selanjutnya benih ikan diberi pakan sampai kenyang, kemudian sisa  pakan yang tidak  termakan dishipon sampai  bersih.  Selanjutnya  ikan  ditunggu  hingga mengeluarkan feses. Feses yang mengendap di dasar bak dikumpulkan segera dengan menggunakan pipet atau selang. Feses yang telah dikumpulkan setiap hari langsung dikeringkan dalam oven (70°C) dan disimpan dalam  freezer  sampai  diperoleh  jumlah  yang  cukup untuk analisa. Konsentrasi kromium dalam pakan dan feses dianalisis berdasarkan prosedur Takeuchi (1988).
Koefisien  kecernaan  pakan  dihitung  dengan  rumus sebagai berikut:
di mana:
ADC : Apparent digestibility coeficient (koefisien kecernaan) dari bahan kering atau protein kasar, MD dan MF: berturut-turut adalah kadar kromium dalam pakan dan feses,
AD dan AF : berturut-turut adalah kadar protein dalam pakan dan feses.
Komposisi  proksimat  pakan  penelitian  dianalisa di  Laboratorium  Nutrisi  dan  Pakan  berdasarkan metode AOAC (1990) dan Takeuchi (1988). Kadar air ditentukan  dengan  metode  gravimetri,  kandungan protein  ditentukan  dengan  metode  Kjeldahl,  kadar lemak dengan metode ekstraksi menggunakan chlo- roform-methanol  dan  gravimetri, kadar  abu  dengan metode gravimetri setelah pembakaran bahan dalam tanur pada suhu 550°C. Serat kasar ditentukan dengan gravimetri setelah contoh bahan dimasak pada larutan asam  dan  basa.  Karbohidrat  (BETN)  dihitung berdasarkan formula:
{100 – (kadar air+kadar protein+kadar lemak+ kadar abu+kadar serat kasar)}

## Analisis  Statistik
Data  dianalisis  secara  statistik  dengan menggunakan  analisis keragaman  (ANOVA).  Apabila dari  daftar  sidik  ragam  diketahui  bahwa  perlakuan menunjukkan pengaruh berbeda nyata (P<0,05), maka untuk membandingkan nilai antar perlakuan dilanjutkan dengan  Uji  Beda  Nyata  Terkecil  (BNT).  Analisis  data menggunakan  software  IMB  SPSS  20  for  windows. Untuk  data  dalam  bentuk  persentase,  sebelum dianalisis  ragam  (ANOVA)  ditransformasi  ke  akar kuadrat (Bluman, 2012).

## HASIL DAN BAHASAN
Pola pertumbuhan ikan kerapu hibrid cantik  untuk masing masing perlakuan selama pemeliharaan 56 hari disajikan pada Gambar 1.
Dari Gambar  1 diperoleh pola  laju pertumbuhan ikan kerapu hibrid  yang diberi pakan buatan  dengan pemberian probiotik, pakan dengan pemberian enzim papain,  dan  pakan  kontrol,  selama  56  hari pemeliharaan memberikan pertumbuhan yang tinggi, namun pada pakan buatan yang mengandung subsitusi bakteri  probiotik  dan  enzim  papain  mengalami penurunan laju pertumbuhan yang drastis, penurunan pertumbuhan  terjadi  mulai  pada  minggu  keempat, pertumbuhannya  jauh  lebih  kecil  dan  lebih  lambat dibanding dengan perlakuan yang lainya sampai akhir
  100% x t Wo In Wt In LPS   100% x No Nt S    100% x F Wo D Wt EP              AD x MF AF x MD 1 x 100 % ADC
penelitian.  Hal  ini  diduga  karena  enzim  proteolitik pada  papain  dan  berbagai  enzim  yang  dihasilkan probiotik  menyebabkan  gangguan  pada  saluran pencernaan dan proses metabolisma ikan.
Dari hasil penelitian ini diperoleh  laju pertumbuhan spesifik, efisiensi pakan, sintasan dan nilai kecernaan pakan.  pada  ikan  kerapu  hibrid  yang  diberi  pakan dengan kandungan bakteri probiotik, enzim papain, substitusi  probiotik dan  enzim  papain  serta   pakan kontrol disajikan pada Tabel 2
Hasil analisis statistik terhadap laju pertumbuhan spesifik menunjukkan bahwa pemberian pakan dengan pemberian probiotik, enzim papain dan pakan kontrol menghasilkan laju  pertumbuhan spesifik  yang tidak berbeda nyata (P>0,05), namun berbeda nyata dengan pakan  yang  diberi  kombinasi    probiotik  dan  enzim papain  (P<0,05).  Nilai  pertumbuhan  spesifik  ikan kerapu hybrid pada pakan yang mengandung bakteri probiotik memberikan pertumbuhan yang lebih cepat dibandingkan  perlakuan  lainnya  yaitu  2,16±0,02 (pakan A), sedangkan ikan yang diberikan pakan dengan
Gambar 1. Pola  pertumbuhan  ikan  kerapu  hibrid  ‘cantik”  (Epinephelus  fuscoguttatus  x  Epinephelus polyphekadion) yang diberi pakan uji selama 56 hari.
Figure 1. The  growth  pattern  of  hybride  grouper”cantik”  (Epinephelus  fuscoguttatus  x  Epinephelus polyphekadion)  fed with the test diets for 56 days.
1) Nilai pada lajur yang diikuti dengan huruf yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata Values  in  the  column  with  the  same  latter  are  not  significantly  different  (P>0.05)
Tabel 2. Keragaan pertumbuhan benih kerapu hibrid “cantik” selama penelitian Table 2. The growth performance of hybrid grouper “cantik” juveniles during the experiment 0 5 10 15 20 25 30 0 7 14 21 28 35 42 49 56 Pe rt u m b u h an ( G ro w h) ( g ) Waktu (hari) / Time (days) Diet A Diet B Diet C Diet D Pakan A (Probiotik)
Diet A (Probiotic)
Pakan B (Tanpa probiotik dan enzim papain)
Diet  B  (Without  probiotic  and  papain  enzyme)
Pakan C (Enzim papain) Diet  C  (Papain  enzyme)
Pakan D (Probiotik+ enzim papain)
Diet  D  (Probiotic+  papain  enzyme)
A
B C D Rata-rata bobot awal (g) Average Initial body weight (g) Rata-rata bobot akhir (g)
Average final body weight (g) Pertambahan berat (%) Weight gain(%) Laju Pertumbuhan Harian (%) Specific growth rate (%)
Efisiensi pakan (%) Feed efficency (%) Laju konsumsi pakan (g/ekor) Feed comsumption rate (g/pcs) 1.19±0.01 a 1.11±0.03 b 1.04±0.03 bc 1.08±0.04 b Sintasan (Survival rate ) (%) 86±2.7 a 80±2.3 a 70±4.3 ab 44±8.5 c Kecernaan protein pakan Feed protein digestibility(%) Pakan percobaan (Test  diet ) 7.30±0.56 7.30±0.57 7.30±0.60 7.30±0.60 15.88±0.19 d 237±0.04 a 192±0.20 b 204±0.09 b 118±0.03 c 84.24 a
80.16 b
80.73 b 79.91 c
Parameter (Parameters )
2.16±0.02 a 1.91±0.12 b 1.98±0.05 c 0.71±0.42 b 62±0.02 a 52±0.03 b 60±0.01 c 36±0.05 d
24.40±0.29 a 21.30±1.44 b 22.16±0.66 c
kandungan enzim papain sebesar 1,98±0,05 (pakan C) dan  kontrol  (pakan kontrol) sebesar 1,91±0,12 serta pakan yang  mengandung kombinasi probiotik dan  enzim  papain  (pakan  D)  menghasilkan pertumbuahan yang paling rendah yaitu 0,71±0,42. Pertumbuhan  pada  ikan  sangat  erat  hubungannya adanya peran aktif bakteri probiotik dan enzim pada saluran  pencernaan.  Hal  ini  didukung  penelitian Watson et al. (2008) bahwa probiotik mampu berperan sebagai imunostimulan, meningkatkan rasio konversi pakan, mempunyai daya hambat pertumbuhan bakteri patogen, menghasilkan antibiotik, serta peningkatan kualitas air. Di samping itu bakteri probiotik pada usus akan  meningkatkan  sekresi  enzim  proteolitik (kecernaan  pakan)  dalam  saluran  pencernaan merombak protein menjadi asam amino sehingga lebih cepat  diserap  oleh  usus.  Hal  ini  sesuai  dengan penelitian   Gatesoupe  (1999)  dalam  Mulyadi  (2011) bahwa aktivitas bakteri dalam pencernaan akan berubah dengan cepat apabila ada mikroba yang masuk melalui pakan atau air yang menyebabkan terjadinya perubahan keseimbangan  bakteri  yang  sudah  ada  dalam  usus (saluran pencernaan) dengan bakteri yang masuk. Hal ini menyebabkan saluran pencernaan ikan menjadi lebih baik  dalam  mencerna  dan  menyerap  nutrisi  pakan sehingga  perrtumbuhan ikan  kerapu hibrid  menjadi lebih  optimal.  Probiotik  dalam  pakan  mempunyai kandungan  bakteri  Bacillus  cereus  yang  bersifat menguntungkan ikan untuk meningkatkan daya cerna penyerapan  nutrisi  dalam  pakan  sehingga memengaruhi pertumbuhan ikan. Hal itu juga didukung oleh  Arief,  et  al.,  (2014)  dan  Mulyadi  (2014)  yang menerangkan  bahwa  pemberian  probiotik  memiliki pengaruh kecepatan penyerapan makanan dalam saluran pencernaan.
Penelitian lainnya tentang probiotik dalam pakan ikan telah diujicobakan pada beberapa spesies ikan. Putri  et  al.  (2012)  melaporkan  bahwa  pemberian probiotik komersial yang berisi Lactobacillus sp., Acti- nomycetes sp., Streptomycetes, dan ragi sebesar 15 mL/ kg pakan ikan nila (Oreochromis niloticus) memberikan hasil terbaik terhadap laju pertumbuhan harian sebesar 2,76%  dan  rasio  konversi  pakan  sebesar  1,48; sedangkan berdasarkan hasil analisis regresi untuk laju pertumbuhan  optimum  sebesar  31,11%  dan  rasio konversi pakan optimum sebesar 2,32 diperoleh pada konsentrasi sebesar 15,44 mL/kg pakan dan 13,1 mL/ Kg pakan. Sedangkan Azhar (2013) melaporkan bahwa perlakuan  pakan  probiotik  jenis  Bacillus  (NP5), prebiotik (oligosakarida) dan sinbiotik pada pakan ikan kerapu  bebek  (Cromileptes  altivelis)  secara  signifikan meningkatkan  laju  pertumbuhan  harian  dan  rasio konversi pakan (FCR) dibandingkan dengan kontrol. Hasil ini juga didukung oleh Arief et al., (2014) yang menemukan bahwa pemberian probiotik yang berbeda
pada  pakan  komersial  berpengaruh  terhadap  laju pertumbuhan dan efisiensi pakan ikan lele Sangkuriang (Clarias  sp.).  Selain  itu,  Chiu  (2010)  melaporkan pemberian bakteri probiotik pada pakan ikan kerapu lumpur  pada  tingkat  yang  berbeda  memberikan pengaruh yang signifikan yakni sebesar 56,6%. Ai et al.  (2011)  bahwa  kesinergisan  antara  kombinasi pemberian  probiotik  yang  berupa  Bacillus  subtilis dengan  prebiotic  fruktooligosakarida  (FOS) menghasilkan nilai kumulatif mortalitas yang rendah pada ikan Larimichthys crocea dan tingkat pertumbuhan yang lebih tinggi.
Pada  penelitian  ini  pemberian  pakan  dengan kandungan  enzim  papain  juga  memberikan  respon yang baik terhadap nilai pertumbuhan spesifik yaitu sebesar 1,98±0,05. Hal ini menunjukkan bahwa pakan yang diberikan dengan penambahan enzim 0,25 g/kg pakan papain mampu meningkatkan pertumbuhan ikan kerapu hibrid  “cantik”. Hal ini  menunjukkan bahwa enzym papain yang ditambahkan dalam pakan telah mampu menghidrolisis protein yang terkandung dalam pakan  menjadi  asam  amino  sehingga  lebih  mudah dicerna dan dapat dimanfaatkan untuk pertumbuhan secara  optimal.  Papain  merupakan  enzim  protease yang diperoleh dari getah daun dan buah Carica pa- paya  Linné  (Pinto  et  al.,  2007).  Enzim  tersebut digunakan  untuk  pemecahan  atau  penguraian  yang sempurna ikatan peptida dalam protein sehingga pro- tein terurai menjadi asam amino karena papain mampu mengkatalis reaksi  hidrolisis suatu  substrat (Amalia et al., 2013).
Hasil  analisis  statistik  terhadap  efisiensi  pakan menunjukkan bahwa pemberian pakan pada masing- masing  perlakuan    menunjukkan  pengaruh  yang berbeda  (P<0,05).  Efisiensi  pakan  rata  rata  yang diperoleh pada penelitian ini berkisar 36%-62%. Pakan dengan  kandungan  probiotik  dan  enzim  papain memiliki nilai efisiensi pakan yang tidak berbeda yaitu masing  masing 62±0,02%  (pakan  A) dan  60±0,01% (pakan C), namun berbeda nyata dengan pakan yang mengandung  substitusi  bakteri  probiotik  dengan enzim papain (pakan D) sebesar 36±0,05% dan pakan B (kontrol) sebesar 52±0,03%. Hal ini menunjukkan bahwa bakteri probiotik dan enzim papain dalam pakan memiliki efisiensi pakan yang cukup baik untuk ikan kerapu hibrid, sehingga proses penyerapan pakan yang mengandung perlakuan tersebut dapat efektif diserap untuk meningkatkan bobot ikan. Nilai efisiensi pakan tersebut berada pada kisaran yang baik, karena menurut Craig dan Helfrig (2002) dalam Ahmadi et al. (2012) bahwa  pakan  dikatakan  baik  apabila  nilai  efisiensi pakan lebih  dari 50%  atau bahkan  mendekati 100%. Pada  perlakuan  substitusi  probiotik  dan  enzym  pa- pain dan pakan kontrol menunjukkan efisiensi pakan
yang  rendah,  hal  ini  disebabkan  oleh  kurangnya penyerapan pakan sehingga penyerapan energi untuk pertumbuhan ikan juga kurang sempurna. Faktor yang mempengaruhi  nilai  efisiensi  pakan  adalah  jenis sumber  nutrisi  dan  jumlah  dari  masing-masing komponen sumber nutrisi dalam pakan. Semakin tinggi nilai efisiensi pakan maka respon ikan terhadap pakan tersebut  semakin  baik  yang  ditujukkan  dengan pertumbuhan ikan yang cepat (Hariadi et al., 2005).
Data sintasan  ikan kerapu hibrid “cantik” untuk masing masing perlakuan selama  56 hari pemeliharaan disajikan pada Tabel 2. Hasil analisis statistik terhadap sintasan menunjukkan bahwa pemberian pakan pada masing-masing perlakuan menunjukkan pengaruh yang berbeda nyata (P<0,05). Pada Tabel 2 menunjukkan sintasan  tertinggi  terjadi  pada  pakan  dengan kandungan  probiotik  (pakan  A)  86%,  diikuti  pakan kontrol (pakan B) 80%,  enzim papain (pakan C) 70%, dan kombinasi probiotik dan enzim papain (pakan D) adalah 44%. Hal ini menunjukkan bahwa pakan dengan kombinasi probiotik dan enzim papain yang digunakan memiliki  efek  negatif  terhadap  kondisi  tubuh  ikan. Ikan  yang  diberi  pakan  tersebut  cenderung  berada dalam  kondisi  kurang  sehat,  selama  pemeliharaan timbul penyakit, dan sampai 56% ikan mati sehingga selanjutnya tidak disarankan menggunakan kombinasi tersebut.  Hal  tersebut  diduga  karena  enzim  papain yang bersifat proteolitik dan enzim proteolitik yang dihasilkan  oleh  probiotik  saling  menguatkan  tidak hanya menguraikan protein pada pakan, tetapi juga meguraikan protein pada dinding usus ikan, sehingga metabolisma ikan terganggu dan untuk ikan kerapu yang fisiknya lebih lemah dan  mengalami kematian.
Hasil  analisis  statistik  terhadap  menunjukkan bahwa pemberian pakan dengan pemberian probiotik, enzim papain dan pakan kontrol diperoleh perbedaan
nyata (P<0,05) terhadap daya cerna protein pada ikan kerapu hibrid “cantik” (Tabel 2). Pada Tabel 2 terlihat bahwa  daya  cerna  protein  tertinggi  didapat  pada perlakuan  penambahan  bakteri  probiotik  (pakan  A) yaitu sebesar 84,24%. nilai daya cerna protein menurun menjadi 80,73% (pakan C); 80,16% (pakan B); dan 79,91% (pakan D). Hal ini didukung oleh  Afrianto & Liviawaty (2005) meyatakan bahwa pada prinsipnya, daya cerna ikan terhadap pakan buatan yang diberikan tergantung pada  tingkat  penerimaan  ikan  dan  enzim  yang dimilikinya.  Menurut  Kitamikado  &  Tachino  (1960) dalam Laining et al. (2003), aktivitas amilolitik pada ikan rainbow trout muda cukup tinggi dan meningkat sampai pada  titik puncaknya dengan ukuran  100 g, dan kemudian menurun pada ikan yang lebih besar. Hal  serupa  terjadi  pada  aktivitas  enzim  proteolitik (Morishita et al., 1964 dan Stroganov & Bizinova, 1969 dalam  Hepher  (1988).  Fujaya  (2004)  menambahkan bahwa aktivitas enzim dipengaruhi oleh konsentrasi enzim dan substrat, suhu, pH, serta inhibitor. Dalam penelitian ini digunakan jumlah substrat yang berupa nutrien dengan jumlah berbeda, oleh karena itu nilai kecernaan  yang  menurun  diduga  disebabkan  oleh jumlah nilai kadar nutrien pada komposisi pakan. Selain itu  dipengaruhi  oleh  tingkat  penerimaan  ikan  dan enzim yang dimilikinya, penurunan nilai kecernaan juga dipengaruhi  oleh  nilai kadar  komponen  nonprotein yang diberikan pada tiap perlakuan. Menurut Hasting (1969) dan Choubert (1983) dalam Usman et al. (2003), kecernaan protein dipengaruhi oleh beberapa faktor antara lain sumber protein, ukuran partikel, perlakuan sebelum  dan  setelah  pembuatan  pakan,  jenis  dan ukuran  ikan,  jumlah  konsumsi  pakan,  suhu,  dan komponen nonprotein dalam pakan.
Data  pengukuran  kualitas  air  selama  penelitian dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Kisaran parameter kualitas air selama penelitian Table 3. Range of water quality during the experiment
A B C D Ammoniak Ammonia  (mg/L) < 0.0147 < 0.0147 < 0.0188 < 0.0147 Nitrit Nitrite  (mg/L) 0.0056 0.0056 0.0056 0.0056 Fosfat Phosphate  (mg/L) < 0.0054 - 0.0076 < 0.0054 - 0.0185 < 0.0054 - 0.0119 < 0.0054 - 0.0076 Suhu Temperature  ( o C) DO Dissolved Oxygen  (mg/L) Salinitas (Salinity ) 35.0 35.0 35.0 35.0 pH 8.4 8.4 8.4 8.4 25.1 25.1 24.9 25.1 5.9 - 6.1 5.8 - 6.3 5.9 - 6.2 5.7 - 6.1 Parameter Pakan percobaan (Test diet )
Dari hasil pengamatan terhadap kualitas air selama pemeliharaan terlihat bahwa kondisi kualitas air me- dia layak untuk kegiatan budidaya. Tidak ada faktor pembatas  yang  menyebabkan  ikan  berada  dalam kondisi yang tidak baik.

## KESIMPULAN
Pertambahan  bobot  tertinggi  terjadi  pada  ikan kerapu  hibrid  “cantik”  yang  diberi  pakan  dengan kandungan probiotik Bacillus cereus dengan kepadatan 10 8 CFU/mL menghasilkan pertambahan bobot sebesar 237±0,04%,  sedangkan  pakan  kontrol  sebesar 192±0,20%.  Pakan  dengan  kandungan  kombinasi probiotik  dan  enzim  papain  memberikan  dampak negatif dengan sintasan yang rendah sebesar 44%  untuk ikan kerapu hibrid cantik.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih disampaikan kepada teknisi laboratorium Nutrisi dan Pengembangan Pakan pada Balai  Besar  Riset  Perikanan  Budidaya  Laut  dan Penyuluhan  Perikanan (Bapak  Sumardi dan   Bapak  I Gusti Adi Kuruniawan) yang telah membantu selama pelaksanaan penelitian ini.

## DAFTAR  ACUAN
Afrianto,  E.  &  Liviawaty,  E.  (2005).  Pakan  Ikan.
Kanisius. Yogyakarta, 145 hlm.
Ahmadi,  H.,  Iskandar,  &  Kurniawati,  N.  (2012).
Pemberian  probiotik  dalam  pakan  terhadap pertumbuhan lele sangkuriang (Clarias gariepinus) pada pendederan II. Jurnal Perikanan dan Kelautan, 3(4), 99-107.
Ai, Q., Xu, H., Mai, K., Xu, W., Wang, J., & Zhang, W. (2011). Effects of dietary supplementation of Ba- cillus subtilis and fructooligosaccharide on growth performance,  survival,  non-specific  immune  re- sponse  and  disease  resistance  of  juvenile  large yellow  croaker,  Larimichthys  crocea.  Aquaculture, 317, 155-161.
Amalia, R., Subandiyono, & Arini, E. (2013). Pengaruh Penggunaan Papain Terhadap Tingkat Pemanfaatan Protein  Pakan  dan  Pertumbuhan  Lele  Dumbo (Clarias gariepinus). Jurnal Teknologi dan Manajemen Akuakultur, 2(1), 136-143.
AOAC  (Association  of  Official  Analytical  Chemists). (1990). Official methods of analysis, 12th edition. Association of Official Analytical Chemists, Wash- ington, D.C., 1141 pp.
Arief, M., Fitriani N., & Subekti, S. (2014). Pengaruh pemberian  probiotik  berbeda  pada  pakan komersial  terhadap  pertumbuhan  dan  efisiensi
pakan  ikan  lele  sangkuriang  (Clarias  sp.).  Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan, 6(1), 201-210.
Azhar,  F. (2013).  Pengaruh  pemberian probiotik  dan prebiotik terhadap performan yuwana ikan kerapu bebek  (Cromileptes  altivelis).  Buletin  Veteriner Udayana, 6(1), 2085-2495.
Bluman,  A.G.  (2012).  Elementary  statistic:  Step  by Step  Aproach.  8th  Ed.  America:  McGraw-Hill,  p. 45-208.
Chiu, C.H., Cheng, C.H., Gua, W.R., Guu, Y.K., & Cheng, W. (2010). Dietary administration of the probiotic, Saccharomyces cerevisiae P13, enhanced the growth, innate immune responses, and disease resistance of the grouper, Epinephelus coioides. Fish & Shellfish Immunology, 29, 1053-1059.
Effendie,  M.I.  (1997).  Biologi  Perikanan.  Cetakan Pertama. Yogyakarta: Yayasan Pustaka Nusantara, 163 hlm.
Fujaya, Y. (2004). Fisiologi Ikan Dasar Pengembangan Teknik Perikanan. Rineka Cipta. Jakarta, 179 hlm.
Fatchurochman,  V.,  Rachmawati,  D.,  &  Hutabarat,  J.
(2017).  Pengaruh  kombinasi  pemberian  enzim papain pada pakan buatan dan probiotik pada me- dia pemeliharaan terhadap efisiensi pemanfaatan pakan, pertumbuhan dan kelulushidupan ikan bawal air tawar (Colossoma macropomum). Journal of Aquac- ulture Management and Technology, 6(3), 30-39.
Giri, N.A. (1998). Aspek nutrisi pada pembenihan ikan kerapu.  Prosiding  Seminar  Teknologi  Perikanan Pantai,  Denpasar  6-7  Agustus  1998.  Pusat Penelitian  dan  Pengembangan  Perikanan bekerjasama dengan Japan International Coopera- tion Agency, hlm. 44-51.
Giri, N.A., Suwirya, K., & Marzuqi, M. (2002).  Effect of dietary protein and energy on growth of juve- nile humpback grouper (Cromileptes altivelis).  In- donesian Fisheries Research Journal, 8, 5-9.
Hariadi, B. Haryono, A.,  & Susilo, U. (2005). Evaluasi Efisiensi  Pakan  dan  Efisiensi  Protein  pada  Ikan Karper Rumput (Ctenoharyngodon idella Val.) yang diberi Pakan dengan Kadar Karbohidrat dan Energi yang Berbeda. LIPI. Ichtyos, Vol.4, No. 2, Juli 2005, hlm. 87-92.
Hepher,  B. (1988). Nutrition of pond fishes. New York: Cambridge University Press. Great Britain, 388 pp.
James, C.M., Al-Thobaiti, S.A., Rasem, B.M. & Carlos, M.H.  (1999).  Potential  of  grouper  Hybrid (Epinephelus  fuscoguttatus  x  Epinephelus polyphekadion)  for aquaculture. Aquacult. Eur. Mag., 24, 5-37
Laining, A., Kabangnga, N., & Usman. (2003). Pengaruh protein  pakan  yang  berbeda  terhadap  koefisien kecernaan  nutrien  serta  performansi  biologis kerapu macan, Ephinemphelus fuscoguttatus dalam keramba jaring apung. Jurnal Penelitian Perikanan, 9(2), 29-34.
Khati, A., Danish, M. Mehta, K.S. & Pandey, N.N. (2015). Estimation  of  Growth  Parameters  in  Fingerlings of Labeo rohita Fed with Exogenous Nutrizyme in Tarai Region of Uttarakhand, India. African Journal of Agricultural Research., 10(30), 3000-3007.
Marzuqi,  M.,  Giri,  N.A.,    Suwirya  K,  &  Sagala,  S.I.
(2006).  Kebutuhan  protein  optimal  dan  nilai kecernaan nutrien pakan untuk benih ikan kerapu sunu (P. leopardus). Prosiding Masyarakat Akuakultur Indonesia, hlm. 1-8.
Mulyadi,    A.E.    (2011).  Pengaruh  pemberian  probiotik pada  pakan  komersil  terhadap  laju  pertumbuhan benih  ikan  patin  siam  (Pangasius  hypophthalmus). Skripsi.  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan. Unpad, Jatinangor, 107 hlm.
Mulyadi. (2014). Pengaruh pemberian probiotik dalam pakan terhadap tingkat pemanfaatan protein dan pertumbuhan  benih ikan  lele  (Clarias  batrachus). Jurnal  Aquaculture  Management  and  Techonology, 2(3), 132-136.
Nayak, S.K. (2010). Probiotics and Immunity: A Fish Perspective. Review. Fish anda Shellfish Immunologi, 29, 2-14.
NRC (National Research  Council), Subcommittee on Warm Fish Nutrition. (1993). Nutrient requirement
of  Fishes.  Washington,  D.C.:  National  Academy Pr., 78 pp.
Pinto,  C.A.S.O.,  Green,  D.,  Baby,  A.R.,  Ruas,  G.W., Kaneko,  T.M.,  Marana  S.R,  &  Velasco,  M.V.R. (2007). Determination of Papain Activity in Topi- cal  Dosage  Forms:  Single  Laboratory  Validation Assay.  Latin  American  Journal  of  Pharmacy,  26(5), 771-775.
Putri, F.S., Hasan, Z., & Haetami, K. (2012). Pengaruh pemberian  bakteri  probiotik  pada  pellet  yang mengandung  kauaudra  (Calliandra  calothyrsus) terhadap pertumbuhan benihikan nila (Oreochromis niloticus). Jurnal Perikanan dan Kelautan, 3(4), 283- 291.
Suhartono, M.T. (2005). Protease. Bogor: Pusat Antar Universitas Bioteknologi IPB, 76 hlm.
Takeuchi, T. (1988). Laboratory work-chemical evalu- ation  of  dietary  nutrient.  In  Watanabe,  T.  (Ed.). Fish Nutrition and Mariculture. JICA Kanagawa In- ternational  Fisheries  Training  Centre.  Tokyo,  p. 179-233.
Usman, Palinggi, N.P., & Giri, N.A. (2003). Pemanfaatan beberapa jenis karbohidart bagi pertumbuhan dan efisiensi  pakan  yuwana  ikan  kerapu  bebek (Cromileptes altivelis). Jurnal Penelitian Perikanan In- donesia, 9(2), 21-28.
Watson, A.K., Kaspar, H., Lategan, M.J., & Gibson, L.
(2008). Probiotics in aquaculture: The need prin- ciples  and  mechanisms  of  action  and  screening processes. Aquaculture, 274, 1-14.