How to cite: Juniarty. E., Legiran & Kemas Yusuf Effendi (2021) Hubungan Polimorfisme Gen GAS6 +1332 C/T dengan Kejadian  Preeklamsia. Syntax  Literate:  Jurnal  Ilmiah  Indonesia,  6 (12). http://dx.doi.org/10.36418/  Syntax- Literate.v6i12.5152 E-ISSN:
2548-1398 Published by: Ridwan Institute
Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia p–ISSN: 2541-0849 e-ISSN: 2548-1398 Vol. 6, No. 12, Desember 2021

## HUBUNGAN  POLIMORFISME  GEN  GAS6  +1332  C/T  DENGAN  KEJADIAN PREEKLAMSIA

## Eka Juniarty, Legiran, Kemas Yusuf Effendi
Universitas Sriwijaya (UNSRI) Palembang Sumatera Selatan, Indonesia Email: ekajuniarty9@gmail.com, legiran@yahoo.com, yusufspog@yahoo.com

## Abstrak
Preeklamsia  adalah  penyakit  hipertensi  pada  kehamilan  yang  menyulitkan  2-8% dari  semua  kehamilan.  Di  Indonesia  peningkatan  preeklamsia  sekitar  15%  -  25%, dari  peningkatan  risiko  yang  sering  terjadi  yaitu  riwayat  hipertensi  kronis, preeklamsia, diabetes  milletus ,  ginjal  kronis  dan  hioperlasentosis.  Sekitar  30% kematian  ibu  di  Indonesia  pada  tahun  2010  disebabkan  oleh  hipertensi  dalam kehamilan  (HDK)  dan  infeksi.  Ini  adalah  salah  satu  komplikasi  kebidanan  yang paling  banyak  berkontribusi  pada  morbiditas  dan  mortalitas  ibu  dan  perinatal  di seluruh dunia. Beberapa penelitian telah menunjukkan bahwa adanya peran genetik untuk terjadinya preeklamsia. Salah satunya ada pada gen GAS6 yang terlokalisasi pada  kromosom  13q34.  Beberapa  penelitian  telah  menunjukkan  bahwa  adanya peran  genetik  untuk  terjadinya  preeklamsia.  Salah  satunya  ada  pada  gen GAS6 yang  terlokalisasi  pada  kromosom  13q34.Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  hubungan  polimorfisme  Gen  GAS6  +1332  C/Tdengan  kejadian preeklamsia. Penelitian ini merupakan penelitian case kontrol yang bertujuan untuk melihat hubungan kejadian preeklamsia dengan polimorfisme Gen GAS6 pada ibu hamil dengan preeklamsia yang dibandingkandengan kehamilan normal. Sebanyak 88 responden dilibatkan dalam penelitian ini, pengumpulan sampel dilakukan pada bulan  Februari-Juli  2020,  dengan  jumlah  sampel  masing-masing  sebanyak  44 sampel  kasus  dan  44  sampel  kontrol  yang  telah  memenuhi  kriteria  inklusi. Hasil penelitian dan simpulan menunjukkan distribusi sosiodemografi dari 44 responden pada  penelitian  ini  pada  kelompok  usia  resiko  rendah  dan  paritas  risiko  rendah rentan  terjadinya  preeklamsia  dan  riwayat  keluarga  mempunyai  hubungan  yang bermakna antara terhadap kejadian preeklamsia.Terdapat hubungan yang bermakna antara  polimorfisme  genotipe  gen GAS6 +1332  C/T  dengan  kejadian  preeklamsia didapatkan  hasil p-value 0,03  dan  terdapat  hubungan  yang  bermakna  antara polimorfisme alel gen GAS6 +1332 C/T dengan kejadian preeklamsia, didapatkan hasil p-value 0.00.
Kata Kunci : polimorfisme; Gen GAS6 +1332 C/T; preeklamsia

## Abstract
In  Indonesia,  the  increase  of  preeclampsia  is  around  15%  -  25%,  from  the increased  risk  that  often  occurs,  namely  a  history  of  chronic  hypertension, preeclampsia,  diabetes  milletus,  chronic  kidney  disease  and  hioperlasentosis. Approximately  30%  of  maternal  deaths  in  Indonesia  in  2010  were  caused  by
hypertension  in  pregnancy  (HDK)  and  infection.  Preeclampsia  is  a  hypertensive disease  of  pregnancy  that  complicates  2-8%  of  all  pregnancies.  It  is  one  of  the obstetric  complications  that  contribute  most  to  maternal  and  perinatal  morbidity and mortality worldwide. Several studies have shown that there is a genetic role for the  development  of  preeclampsia.  One  of  them  is  in  the  GAS6  gene  which  is localized on chromosome 13q34. Several studies have shown that there is a genetic role for the development of preeclampsia. One of them is the GAS6 gene which is localized  on  chromosome  13q34.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the relationship  of  the  GAS6  +1332  C/T  gene  polymorphisms  with  the  incidence  of preeclampsia. This method this study is a case control study that aims to determine the  relationship  between  the  incidence  of  preeclampsia  and  the  GAS6  gene polymorphism  in  pregnant  women  with  preeclampsia  compared  to  normal pregnancies.  A  total  of  88  respondents  were  involved  in  this  study,  the  sample collection  was  carried  out  in  February-July  2020,  with  44  sample  cases  and  44 control  samples  that  met  the inclusion criteria. The  results  and  conclusions  show the  sociodemographic  distribution  of  44  respondents  in  this  study  in  the  low  risk and low risk parity age groups who are prone to preeclampsia and family history has  a  significant  relationship  between  the  incidence  of  preeclampsia.  There  is  a significant relationship between polymorphisms of the GAS6 +1332 gene genotype. C/T  with  the  incidence  of  preeclampsia  obtained  a  p-value  of  0.03  and  there  was significant relationship between the polymorphism of the GAS6 +1332 C / T allele gene and the incidence of preeclampsia, the p-value was 0.00.

## Keywords: polymorphism; GAS6 gene +1332 C / T; preeclampsia
Received: 2021-11-20; Accepted: 2021-12-05; Published: 2021-12-20

## Pendahuluan
Preeklamsia adalah penyakit hipertensi pada kehamilan yang menyulitkan 2-8% dari semua kehamilan. Ini adalah salah satu komplikasi kebidanan yang paling banyak berkontribusi  pada  morbiditas  dan  mortalitas  ibu  dan  perinatal  di  seluruh  dunia. Meskipun mekanisme yang mendasari patogenesis  preeklamsia masih belum diketahui, disfungsi  endotel  vaskular,  aktivasi  platelet,  proses  inflamasi  dan  koagulopatik  yang saling  terkait  dianggap  bertanggung  jawab  atas  patogenesis  preeklamsia (Ozakpinar  et al., 2016) .
Di seluruh dunia, preeklamsia adalah yang paling umum dari berbagai gangguan hipertensi  kehamilan,  mempengaruhi  sekitar  2-10%  wanita  hamil.  Lebih  dari  4  juta wanita di seluruh dunia mengalami gangguan ini setiap tahun, dan diperkirakan 50.000- 76.000  wanita  dan  500.000  bayi  meninggal  akibat  kondisi  ini  setiap  tahun.  Padahal, preeklamsia adalah penyebab utama morbiditas dan mortalitas janin dan menyebabkan 15-20% kematian ibu di seluruh dunia (Raghupathy, 2013) .
Angka  kejadian  preeklamsia  di  Indonesia  berkisar  antara  3-10%  dari  seluruh kehamilan.  Di  RSUP  Dr.  Sardjito,  angka  kematian  ibu  karena  preeklamsia-eklamsia adalah  sebesar  34,09%.  Menurut  laporan  di  beberapa  rumah  sakit  di  Indonesia, preeklamsia telah menggeser pendarahan dan infeksi sebagai penyebab utama kematian
ibu (Hadiati, 2017) . Di provinsi Sumatera Selatan jumlah kematian ibu maternal sampai dengan bulan Desember 2017 mencapai 107 kasus. Hipertensi dalam kehamilan berada diurutan  kedua  penyebab  kematian  ibu  sebanyak  35  kasus (Dinkes  Provinsi  Sumatera Selatan, 2017) .
Beberapa  penelitian  telah  menunjukkan  bahwa  adanya  peran  genetik  untuk terjadinya  preeklamsia.  Salah  satunya  ada  pada  gen GAS6 yang  terlokalisasi  pada kromosom  13q34.  Penelitian (Muñoz  et  al.,  2004) , GAS6  Single  Nucleotide Polymorphisms (SNPs)  diidentifikasi  telah  mengeksplorasi  hubungan  antara  varian genetik GAS6 dan  berbagai  kondisi  penyakit.  Baru-baru  ini,  satu  studi  telah menunjukkan  bahwa  ada  hubungan  antara  SNP  834  +  7G  /  A  di  intron  8  (rs8191974) dan preeklamsia pada populasi Turki (82 kasus dan 68 kontrol). Ini adalah satu-satunya studi  tentang  hubungan  antara  polimorfisme  834  +  7G/A  pada  gen GAS6 dan preeklamsia.  Penelitian  lebih  lanjut  dalam  kelompok  etnis  lain  diperlukan  untuk memverifikasi  kemungkinan  hubungan  polimorfisme  dengan  preeklamsia.  Selain  itu, situs SNP tambahan mungkin juga menjadi faktor predisposisi potensial dari gangguan ini,  karena  preeklamsia  adalah  penyakit  yang  kompleks  dan  mungkin  terkait  dengan polimorfisme  nukleotida  tunggal  berkerumun  dalam  gen  atau  gen  yang  terkait  secara fungsional (Ye et al., 2017) .
Gen GrowthArrest  Speciﬁc -6 GAS6 diidentifikasi  sebagai  anggota  keluarga protein  yang  tergantung  vitamin  K  yang  memiliki  42%  kesamaan  struktural  dengan protein  S,  protein  antikoagulan  yang  bergantung  vitamin  K.  4,5  diekspresikan  di sebagian besar organ termasuk rahim, ovarium, ginjal, dan jantung. 4 GAS6 adalah ligan dari keluarga reseptor TAM tirosin kinase, yang terdiri dari 3 anggota: Tyro3, Axl, dan Mer,  6  dan  memiliki  afinitas  tertinggi  dengan  Axl.  Pengikatan  dengan  reseptor menginduksi  dimerisasi  dan  aktivasi  kinase  berikutnya,  yang  mengaktifkan  molekul pensinyalan intrinsik untuk mengerahkan berbagai fungsi biologis (Zhao et al., 2016) . GAS6 adalah  anggota  dari  keluarga  protein  yang  tergantung  vitamin  K. GAS6 mengerahkan  aksi  biologisnya  dengan  mengikat  ketiga  reseptor  tirosin  kinase  dari keluarga  TAM  (Tyro-3  /  Axl  /  Mer).  Telah  ditunjukkan  bahwa  GAS6  memainkan banyak peran dalam patofisiologi gangguan autoimun, inflamasi dan metabolisme, dan aterosklerosis. GAS6 memainkan  peran  penting  dalam  pemeliharaan  homeostasis vaskular dan seluler. GAS6 memberikan efek anti inflamasi pada sel endotel (EC) yang beristirahat  dan  berkurang  ketika  EC  diaktifkan  oleh  stimulasi  pro-inflamasi.  Temuan ini  sama  dengan  hasil  yang  menunjukkan  bahwa GAS6 memicu  aktivasi  EC  dalam menanggapi  rangsangan  inflamasi  in  vitro  dan  in  vivo  dengan  cara  meningkatkan interaksi antar trombosit, EC dan leukosit selama inflamasi. Dan juga, telah dilaporkan bahwa  kadar  serum  pada  Gen GAS6 berkorelasi  terbalik  dengan  penanda  inflamasi seperti tumor necrosis factor a (TNFa), interleukin 6 (IL-6) dan, penanda disfungsi EC termasuk  molekul  adhesi  sel  vaskuler  1  (VCAM-1))  pada  penderita  diabetes.  Diakui bahwa  pada  pasien  Preeklamsia,  peningkatan  produksi  sitokin  dan  molekul  adhesi berhubungan  dengan  peradangan  sistemik.Oleh  karena  itu,  kami  berhipotesis  bahwa GAS6 dapat berkontribusi pada pengembangan preeklamsia (Ozakpinar et al., 2016) .
Penelitian yang telah dilakukan oleh (Ye et al., 2017) menyatakan bahwagenotipe TT dari GAS6 + 1332 C/ T memberikan risiko preeklamsia berat (OR = 0,597, interval kepercayaan 95% 0,416-0,855; p = 0,01). Peradangan dan disfungsi endotel pada pasien dengan PE mungkin bertanggung jawab atas tingkat GAS6 yang lebih rendah. Berbagai sitokin inflamasi dan penanda aktivasi endotel ditemukan terlibat dalam patogenesis PE. Secara  kolektif,  penelitian  terbaru  oleh  Kuo et  al .  mengungkapkan  bahwa  penanda inflamasi berkorelasi terbalik dengan kadar GAS6 pada wanita (Ozakpinar et al., 2016) .
Beberapa  penelitian  yang  telah  dilakukan  mengenai  preeklamsia  menunjukan bahwa GAS6 dapat berkontribusi pada pengembangan preeklamsia, sehingga penelitian ini dilakukan untuk memperoleh kemungkinan adanya peranan polimorfisme gen GAS6 + 1332 C/T dengan kejadian preeklamsia.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  analitik  dengan  desain Case-Control .  Studi Case-Control adalah salah satu studi analitik yang digunakan untuk mengetahui faktor resiko yang diduga memiliki hubungan erat dengan penyakit. Pada studi kasus kontrol dilakukan  identifikasi  subyek  (kasus)  yang  telah  terkena  penyakit  (efek),  kemudian  di telusur secara retrospektif ada atau tidaknya faktor risiko yang diduga berperan.
Data  diperoleh  dengan  melihat  catatan  rekam    medik  dan  sampel  darah  subyek penelitian  bekerjasama  dengan  Unit  Instalasi  Kebidanan  Rumah  Sakit  Umum  Daerah Kota  Prabumulih  dan  Poli  Kebidanan  Puskesmas  Pembina  Palembang.  Pemeriksaan PCR-RFLP  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi  Molekuler  Fakultas  Kedokteran Universitas Sriwijaya Palembang.
Data  ditampilkan  secara  deskriptif  dalam  bentuk  narasi,  tabel  frekuensi  dan persentase.  Untuk  mengetahui  hubungan  polimorfisme  gen GAS6 dengan  preeklamsia menggunakan  uji  X 2 ( Chi-Square ). Odds  Ratio (OR)  dengan  batas  kepercayaan  95% dan α = 0,05. Jika ditemukan: OR=1, tidak ada faktor risiko, OR>1, merupakan faktor risiko OR<1, merupakan faktor preventif atau pencegah.  Semua data dianalisis dengan menggunakan  program SPSS 20.00 for  Windows untuk  menilai  distribusi,  frekuensi genotip dan alel gen GAS6 pada kelompok kasus dan kelompok kontrol.

## Hasil dan Pembahasan
A. Hasil Penelitian
Penelitian  ini  telah  dilakukan  pada  bulan  Februari  s/d  Agustus  2020.  Jumlah sampel  dalam  penelitian ini  direncanakan  44  sampel  (preeklamsia)  pada  kelompok kasus  dan  44  kelompok  kontrol  (normotensif)  dan  di  lakukan  pemeriksaan  di Laboratorium  Biologi  Bioteknologi  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Sriwijaya Palembang.  Peneliti  telah  melaksanakan  prosedur  uji  laboratorium  mengacu  pada jurnal (Ye et al., 2017) , menggunakan forward primer: 5′- TACTGTGGCTACTCAGCTGTGC-3′ dan reverse primer 5′-
GTGAACGTGGTGTGAACACC-3′ dan enzim  restriksi Nla III  dengan  metode PCR RFLP sebanyak 3 kali pengulangan, dimana hanya didapatkan hasil genotif CC
sebanyak  10  responden,  TT  sebanyak  6  responden  dan  CT  sebanyak  9  responden pada  kelompok  kasus,  sedangkan  pada  kelompok  kontrol  pada  TT  hanya  5 responden,  hal  ini  terjadi  karena  tidak  teramplifikasi  DNA  pada  gen  ini.  Sehingga hanya  25  sampel  yang  dapat  dianalisis  dan  tidak  memenuhi  jumlah  sampel  yang diperhitungkan  yakni  44  kasus  dan  44  kontrol. Karakteristik  sosiodemografi responden yang diteliti yaitu usia, paritas, dan riwayat keluarga.
Penelitian  ini,  jumlah  ibu  hamil  dengan  preeklamsia  (kasus)  yang  terbanyak pada  kelompok  ibu  hamil  dengan  usia  risiko  rendah  yaitu  29  responden  (49,2%), sedangkan  jumlah  ibu  hamil  tidak  preeklamsia  (kontrol)  yang  terbanyak  pada kelompok  ibu  hamil  dengan  usia  risiko  rendah  yaitu  30  responden  (50,8%). Kejadian  preeklamsia  (kasus)  yang  terbanyak  pada  ibu  hamil  yang  memiliki kelompok  paritas  risiko  rendah  yaitu  36  responden  (52,9%),  sedangkan  Ibu  hamil tidak  preeklamsia  (kontrol)  yang  terbanyak  pada  kelompok  yang  memeiliki  pada paritas  rendah  yaitu  32  responden  (47,1%).  Jumlah  ibu  hamil  dengan  preeklamsia yang  terbanyak  pada  kelompok  ibu  hamil  tidak  ada  riwayat  kelurga  yaitu  32 responden (43,8%), sedangan ibu hamil tidak preeklamsia (kontrol) yang terbanyak pada kelompok ibu hamil tidak ada riwayat keluarga 41 responden (56,2%).

## Tabel 1

## Analisis Univariat Distribusi Frekuensi berdasarkan Umur, Paritas, dan Riwayat
Keluarga Variabel Kasus Kontrol Total n % n % Usia Risiko Tinggi 15  51,7  14  48,3 29 (33%) Risiko Rendah 29  49,2  30  50,8 59 (67%) Paritas Risiko Tinggi 8 40.0  12  60,0  20 (22,7%) Risiko Rendah 36  52,9  32  47,1  68 (77,3%) Riwayat Keluarga Ada 12  80,0 3 20,0 15 (17 %) Tidak Ada 32  43,8  41  56,2 73 (83%)
Ket. Usia: Risiko Tinggi ≥ 35 tahun, risiko rendah <35 tahun; Paritas: Risiko tinggi 1  atau >3,  risiko  rendah  2  dan  3;  Riwayat  Keluarga:  ada  dan  tidak  adanya  riwayat  preeklamsia dalam keluarga
Tabel 2 Analisis Bivariat Hubungan Karakteristik Ibu dengan Kejadian Preeklamsia Variabel Kasus Kontrol OR CI (95%) Nilai p value Usia Risiko Tinggi 15 (51,7%) 14 (48,3%) 1,108 0,455-2,647 1,00 Risiko Rendah 29 (49,2%)  30 (50,8%) Paritas Risiko Tinggi 8 (40%) 12 (60 %) 0,593 0,215-1,633 0,44 Risiko Rendah 36 (52,9%)  32 (47,1%) Riwayat Keluarga Ada 12 (80%) 3 (20%) 5,125  1,333-19,71 0,02
Total (N) 44(100%) 44 (100%)
Ket. Usia: Risiko Tinggi ≥ 35 tahun, risiko rendah <35 tahun; Paritas: Risiko tinggi 1  atau >3,  risiko  rendah  2  dan  3;  Riwayat  Keluarga:  ada  dan  tidak  adanya  riwayat  preeklamsia dalam keluarga
Rentang umur subjek dari usia 19 – 44 tahun tampak perbedaan sebaran pada kelompok  kasus  dan  kontrol.  Hasil  uji  statistik Chi-square terlihat  tidak  terdapat hubungan bermakna antara proporsi jumlah subjek pada kelompok usia dengan nilai p 1,00 > α = 0,05.
Dari hasil kelompok paritas risiko tinggi dan risiko rendah terdapat subjek dari primipara,  multipara  dan  grande  multipara,  tampak  perbedaan  sebaran  pada kelompok  kasus  dan  kontrol.  Secara  statistik Chi-square terlihat  tidak  terdapat hubungan  bermakna  antara  proporsi  jumlah  subjek  pada  kelompok  paritas  dengan nilai p 0,44 > α = 0,05.
Hasil kelompok riwayat keluarga pada kasus dan kontrol. Secara statistik Chi- square terlihat  terdapat  hubungan  bermakna  antara  proporsi  jumlah  subjek  pada kelompok  riwayat  keluarga  dengan  nilai p-value 0,02  >  α  =  0,05  dan  dari  analisis keeratan  hubungan  menunjukkan  nilai Odd  Ratio (OR)  5,125  karena  OR>1  dapat diartikan  riwayat  keluarga  merupakan  faktor  risiko  dengan  kejadian  Preeklamsia, sehingga  dapat  diinterprestasikan  bahwa  responden  yang  ada  riwayat  keluarga mempunyai  peluang  5,125  kali  mengalami  kejadian  preeklamsia  dibandingkan responden yang tidak ada riwayat keluarga.

## Tabel 3

## Analisis Mutivariat Hubungan Karakteristik Ibu dengan Kejadian Preeklamsia
Variabel B p value OR 95% CI Usia -0,10 0,84  0,91 0,35-2,36 Paritas -0,24 0,66  0,80 0,27-2,29 Riwayat Keluarga 1.59 0,02  4,89  1,23-19,45 Constant -2,35 0,24  0,09 Log-Likelihood = 114,895   G = 7,099 p value = 0,05
Hasil analisis regresi logistik karakteristik ibu yang terdiri 3 variabel dari usia, paritas  dan  riwayat  keluarga  didapat  1  variabel  yang  bermakna  secara  statistik hubungannya  dengan  kejadian  preeklamsia,  kemudian  untuk  mengetahui  variabel mana  yang  paling  besar  pengaruhnya  terhadap  kejadian  preeklamsia  dapat  dilihat dari Exp  (B) yang  terdapat  dalam  output SPSS  terlampir.  dimana  riwayat  keluarga OR :  4,89  (95%  CI:  1,23-19,45) p  value =  0,02  memberikan  interprestasi  bahwa responden  yang  ada  riwayat  keluarga  mempunyai  kecenderungan  6  kali  untuk mengalami  kejadiaan  preeklamsia  dibandingkan  responden  tidak  ada  riwayat keluarga.  Artinya  dalam  hal  ini  variabel  riwayat  keluarga  mempengaruhi  kejadian preeklamsia pada ibu hamil.
1. Elektroforesis Produk PCR gen GAS6 +1332 C/T
Setelah  dilakukan  ekstraksi/isolasi  DNA  sampel  darah  kemudian dilanjutkan  dengan  pemeriksaan Polymerase  Chain  Reaction (PCR)  gen GAS6 +1332 C/T menggunakan primer Forward 5’- GCCCGTTTCTGCCGTAGAG-3’ dan primer Reverse 5’-
CTTGCTTTCAGCGTATGCC-3’ (Ye et al., 2017) .
Produk  hasil  PCR  berupa  amplikon  selanjutnya  dievaluasi  dengan  cara elektroforesis, dan kemudian dilakukan visualisasi. Hasil PCR gen GAS6 +1332 C/T terlihat pada 358 bp seperti pada gambar berikut ini:
Gambar 1
Visualisasi Elektroforesus hasil Ekstraksi/isolasi DNA dan PCRgen GAS6 + 1332 C/T terlihat pada posisi 358 bp.
2. RFLP Menggunakan Enzim NlaIII pada Gen GAS6 1332 C/T
Setelah  tahap  PCR  dilakukan  maka  dilanjutkan  dengan Restriction Fragment  Length  Polymorphism (RFLP)  yaitu  tahap  restriksi  menggunakan enzim NlaIII (Gambar  1).  Polimorfisme  gen GAS6 +  1332  C/Takan tervisualisasi  dengan  menggunakan  sinar  UV,  terlihat  tiga  variasi  genotip  hasil pemotongan enzim restriksi NlaIII terhadap produk ekstraksi, yaitu:
a. Gambaran  3  pita  yaitu  pada  285bp,  211bp,  dan  73/74bp  berarti  amplikon yang direstriksi oleh enzim NlaIII menunjukkan genotipe CT ( Heterozigot ).
b. Gambaran 2 pita yaitu 211bp dan 73/74bp berarti amplikon yang direstriksi oleh enzim NlaIII menunjukkan genotipe CC (wildtype).
c. Gambaran  1  pita  yaitu  358bp  berarti  pada  amplikon  yang  direstriksi  oleh enzim NlaIII menunjukkan genotipe TT (Homoziot).

## Gambar 2 Hasil Visualisasi Polimorfisme Gen GAS6 C/T

## 3. Analisa Hubungan Polimorfisme Genotipe gen GAS6 dengan+1332 C/T kejadian preeklamsia
Setelah  semua  subjek  penelitian  menjalani  proses  isolasi  DNA,  PCR  dan RFLP,  maka  didapatkan  analisa  hubungan  polimorfisme  genotipe  gen GAS6 +1332 C/Tseperti yang ditampilkan pada tabel berikut ini:
Tabel 4

## Analisis Hubungan Polimorfisme Genotipe Gen GAS6+1332 C/T dengan kejadian
Preeklamsia Variabel Genotipe Kelompok Subyek Penelitian Nilai p value OR Kasus Kontrol CC ( wild type ) 10 (100%) 0 (0%) TT (Homozygote Mutan) 6 (54,5%) 5 (45,5%) 0,01* - CT (Heterozygote Mutan) 9 (100%) 0 (0%) CC + CT 19 (100%) 0 (0%) 1,83 TT 6 (54,5%) 5 (45,5%) 0,03**  1,069-3,144 * Fisher’s Exact Test
** Chi-Square Test p ≤ 0,05
Tabel 4 diatas menerangkan bahwa distribusi frekuensi genotif GAS6 1332 C/T dengan kejadian preeklamsia bahwa kelompok kasus diperoleh hasil CC + CT  sebanyak  19  responden  (100%)  dan  TT  sebanyak  6  responden  (54,5%) sedangkan  pada  kelompok  kontrol  diperoleh  hasil  CC  +  CT  sebanyak  0 responden dan TT sebanyak 5 responden (54,5%).
Dari  hasil  analisis chi  square didapatkan  nilai p  value 0,03,  yang  artinya terdapat hubungan antara genotif GAS6 1332 C/T dengan kejadian Preeklamsia dan  dari  analisis  keeratan  hubungan  menunjukkan  nilai Odd  Ratio (OR)  1,83 karena  OR>1  dapat  diartikan  genotif GAS6 1332  C/T  merupakan  faktor  risiko dengan  kejadian  Preeklamsia,  sehingga  dapat  diinterprestasikan  bahwa  kasus dengan  genotif GAS6 1332  C/T  mempunyai  peluang  1,83  kali  mengalami kejadian preeklamsia dibandingkan kasus tidak dengan genotif GAS6 1332 C/T.
Polimorfisme  gen GAS6 +  1332  C/T  pada  genotip  TT  merupakan  faktor protektif  terhadap  kejadian  preeklamsia,  hal  ini  sesuai  dengan  premis  yang menyatakan  genotip  TT  pada  +  1332  C/T  mungkin  terkait  dengan  penurunan risiko preeklamsia (Ye et al., 2017) .
4. Hubungan Frekuensi Alel Pada Polimorfisme gen GAS6 1332 C/T Dengan Kejadian Preeklamsia
Tabel 5 Hubungan Frekuensi Alel Pada Polimorfisme gen GAS6 1332 C/T Dengan Kejadian Preeklamsia Alel Kelompok Subyek Penelitian Nilai p value OR Kasus Kontrol C 29 (100%) 0 (0%) 0,00 1,48 T 21 (67,7%) 10 (32,2%) 1,158-1,882 Total 50 (83,3%) 10 (16,7%) Chi-Square Test p ≤ 0,005
Dari  hasil  tabel  di  atas  didapatkan  pada  kelompok  kasus  terdapat  alel  C sebanyak  29  responden  (100%)  dan  pada  kelompok  kontrol  sebanyak  0 responden  (0%).  Pada  kelompok  kasus  alel  T  sebanyak  21  responden  (67,7%), sedangkan  untuk  kelompok  kontrol  didapatkan  hasil  alel  T  sebanyak  10 responden (32,2%).
Berdasarkan  hasil  Uji Chi-Square diperoleh p  value 0,00,  yang  artinya terdapat  hubungan  yang  bermakna  antara  alel  gen GAS6 C/T  dengan  kejadian Preeklamsia  dan  dari analisis  keeratan  hubungan  menunjukkan  nilai Odd  Ratio (OR) 1,48 karena OR>1, dapat diartikan alel C merupakan faktor risiko dengan kejadian  Preeklamsia,  sehingga  dapat  diinterprestasikan  bahwa  kasus  dengan alel  T  mempunyai  peluang  1,48  kali  mengalami  kejadian  preeklamsia dibandingkan kasus tidak dengan alel T.

## B. Pembahasan
1. Distribusi Subjek Penelitian Berdasarkan
Usia  yang  teridentifikasi  dari  88  subjek  sebagian  besar  termasuk  dalam kategori usia resiko tinggi (> 35 tahun) pada kelompok kasus  51,7%, dan pada kelompok  kontrol  48,3%,  sedangkan  kategori  usia  risiko  rendah  (≤  35  tahun) pada  kasus  sebesar  49,2%  dan  pada  kontrol  sebesar  50,8%.  Berdasarkan  uji statistik Chi  Square diperoleh  nilai p 1,00,  hal  ini  menunjukan  tidak  terdapat hubungan yang signifikan antara usia dengan kejadian preeklamsia.
Preeklamsia  adalah  kelainan  yang  disebabkan  karena  faktor  plasenta dengan  anomali  yang  terjadi  pada  lokal  dan  berdampak  sistemik  dengan ancaman  morbiditas  pada  janin  dan  ibu.  Keadaan  patologis  ini  bermanifestasi pada  pertengahan  sampai  akhir  usia  kehamilan.  Hipotesis  saat  ini  yang  dianut secara luas, mengenai etiologi preeklamsia difokuskan pada maladaptasi respon imum  dan  invasi  trofoblas  yang  tidak  sempurna.  Penelitian  ini  tidak  sejalan
dengan  pernyataan  Pribadi,  2019  yang  menyatakan  berdasarakan  beberapa laporan  penelitian  bahwa  wanita  usia  ≥  35  tahun  berisiko  tinggi  untuk mengalami  preeklamsia,  sementara  pada  penemuannya  dalam  penelitian  ini ditemukan kasus yang terjadi pada wanita usia < 35 tahun.
Paritas  juga  sebagai  variabel  bebas  yang  teridentifikasi  dari  kelompok kasus yang dikategorikan dalam kelompok risiko tinggi pada kasus sebesar 40%, dan  pada  kontrol  60%,  sedangkan  pada  kelompok  risiko  rendah  pada  kasus sebesar  52,9%  dan  pada  kontrol  sebesar 47,1%.  Hasil  penelitian  ini  didapatkan dengan  hasil  uji Chi  Square di  dapatkan  nilai p 0,44  yang  berarti  tidak  ada hubungan yang bermakna antara paritas dengan kejadian preeklamsia.
Penelitian  ini  sejalan  dengan (Pratiwi  &  Wantonoro,  2015) dengan  hasil tidak  ada  hubungan  yang  bermakna  antara  hubungan  paritas  dengan  kejadian preeklamsia,  terdapat  hasil  statistik  nilai p  value 0,204,  dan  dari  kelompok primipara yang lebih berisiko terhadap preeklamsia.
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  peneliti  tentang  riwayat  keluarga  pada kasus  dikategorikan  ada  riwayat  keluarga  sebesar  80%  dan  pada  kontrol  20%, sedangkan  dengan  kategori  tidak  ada  riwayat  keluarga  pada  kasus  sebesar 43,8%,  dan  pada  kontrol  56,2%.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ada  hubungan antara  riwayat  keluarga  dengan  kejadian  preeklamsia  berdasarkan  hasil  uji statistik chi-square didapatkan  nilai p-value 0,023  dari  analisis  keeratan hubungan  menunjukkan  nilai Odd  Ratio (OR)  5,125,  karena  OR>1  dapat diartikan  riwayat  keluarga  merupakan  faktor  risiko  dengan  kejadian Preeklamsia,  sehingga  dapat  diinterprestasikan  bahwa  responden  yang  ada riwayat  keluarga  mempunyai  peluang  5,125  kali  mengalami  kejadian preeklamsia dibandingkan responden yang tidak ada riwayat keluarga.
Hasil uji analisis regresi logistik juga membutikan bahwa riwayat keluarga secara  statistik  hubungannya  dengan  kejadian  preeklamsia,  dengan OR :  4,89 (95% CI: 1,23-19,45) p value = 0,02 memberikan interprestasi bahwa responden yang  ada  riwayat  keluarga  mempunyai  kecenderungan  6  kali  untuk  mengalami kejadiaan  preeklamsia  dibandingkan  responden  tidak  ada  riwayat  keluarga.
Artinya  dalam  hal  ini  variabel  riwayat  keluarga  mempengaruhi  kejadian preeklamsia pada ibu hamil.
Penelitian  ini  sejalan  dengan  Pribadi  (2019)  bahwa  riwayat  hipertensi dalam  keluarga  dengan  kejadian  preeklamsia  merupakan  kelainan  yang kompleks,  yang  terlihat  diwariskan  dalam  pola  keluarga.  Preeklamsia  yang terjadi  pada  seorang  ibu  hamil  merupakan  faktor  risiko  pada  kehamilan  anak perempuannya kelak.
2. Hubungan  frekuensi  Pada  Polimorfisme  Genotipe  dan  Alel  Gen  GAS6 +1332 C/T dengan   kejadian Preeklamsia
Dari hasil uji Chi Square didapatkan untuk genotipe gen GAS6 +1332 C/T nilai p value 0,03, artinya ada hubungan yang bermakna antara genotip gen GAS6 terhadap  kejadian  Preeklamsia  dari  analisis  keeratan  hubungan  menunjukkan
nilai Odd Ratio (OR) 1,83 karena OR>1 dapat diartikan genotif GAS6 1332 C/T merupakan  faktor  risiko  dengan  kejadian  Preeklamsia,  sehingga  dapat diinterprestasikan  bahwa  kasus  dengan  genotif GAS6 1332  C/T  mempunyai peluang  1,83  kali  mengalami  kejadian  preeklamsia  dibandingkan  kasus  tidak dengan  genotif GAS6 1332  C/T.  Polimorfisme  gen GAS6 +  1332  C/T  pada genotip  TT  merupakan  faktor  protektif  terhadap  kejadian  preeklamsia,  hal  ini sesuai  dengan  premis  yang menyatakan genotip  TT  pada  +  1332  C/T  mungkin terkait dengan penurunan risiko preeklamsia (Ye et al., 2017) .
Preeklamsia adalah penyakit hipertensi pada kehamilan yang menyulitkan 2-8%  dari  semua  kehamilan.  Ini  adalah  salah  satu  komplikasi  kebidanan  yang paling banyak berkontribusi pada morbiditas dan mortalitas ibu dan perinatal di seluruh  dunia.  Meskipun  mekanisme  yang  mendasari  patogenesis preeklamsia masih  belum  diketahui,  disfungsi  endotel  vaskular,  aktivasi  platelet,  proses inflamasi dan koagulopatik yang saling terkait dianggap bertanggung jawab atas patogenesis preeklamsia (Ozakpinar et al., 2016) .
Gen GAS6 terlokalisasi  pada  kromosom  13q34.  Dalam  penelitian sebelumnya,  delapan GAS6 single  nucleotide  polymorphisms (SNPs) diidentifikasi.  Studi  sebelumnya  telah  mengeksplorasi  hubungan  antara  varian genetik GAS6 dan  berbagai  kondisi  penyakit.  Baru-baru  ini,  satu  studi  telah menunjukkan  bahwa  ada  hubungan  antara  SNP  834  +  7G  /  A  di  intron  8 (rs8191974) dan preeklamsia pada populasi Turki (82 kasus dan 68 kontrol). Ini adalah  satu-satunya  studi  tentang  hubungan  antara  polimorfisme  834  +  7G  /  A pada  gen GAS6 dan  preeklamsia.  Penelitian  lebih  lanjut  dalam  kelompok  etnis lain  diperlukan  untuk  memverifikasi  kemungkinan  hubungan  polimorfisme dengan  preeklamsia.  Selain  itu,  situs  SNP  tambahan  mungkin  juga  menjadi faktor  predisposisi  potensial  dari  gangguan  ini,  karena  preeklampsia  adalah penyakit  yang  kompleks  dan  mungkin  terkait  dengan  polimorfisme  nukleotida tunggal berkerumun dalam gen atau gen yang terkait secara fungsional (Hsieh et al., 2015) .
Penelitian  ini  sejalan  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh (Ye  et  al.,
2017) ,  yang  menyatakan  bahwa  ada  hubungan  yang  bermakna  antara polimorfisme  gen GAS6 1332  C/T  dengan  kejadian  Preeklamsia,  dengan  nilai p value 0,00, Odds Ratio (OR) 1.26 dan 95% Confidence Interval (CI) 0,92-1,72 dengan  hasil  frekuensi  genotip  CC  (18,5%),  TC  (49,7%)  dan  TT  (31,8%). Sedangkan  pada  Alel  gen  GAS6  +1332  C/T  hasil  Uji Chi-Square diperoleh P value 0,789, Odd Ratio (OR) 0,673 dan 95% Confidence Interval dengan batas atas dan bawah pada Lower 0,271 dan Upper 2,298, yang artinya tidak terdapat hubungan  yang  bermakna  antara  alel  gen GAS6 C/T  dengan  kejadian Preeklamsia.
Beberapa penelitian telah menunjukkan bahwa adanya peran genetik untuk terjadinya  preeklamsia.  Salah  satunya  ada  pada  gen GAS6 yang  terlokalisasi pada  kromosom  13q34.  Dalam  penelitian (Muñoz  et  al.,  2004) , GAS6  Single
Nucleotide Polymorphisms (SNPs) diidentifikasi telah mengeksplorasi hubungan antara varian genetik GAS6 dan berbagai kondisi penyakit.
Frekuensi  alel  C  lebih  tinggi  dari  alel  T  pada  kelompok  kasus dibandingkan  dengan  kelomppok  kontrol.  Alel  T  bertindak  sebagai  alel pelindung dan mengurangi risiko terjadinya preeklamsia, sedangkan untuk alel C bertindak  sebagai  alel  berisiko  tinggi  dan  dikaitkan  dengan  peningkatan  risiko terjadinya  Preeklamsia. Jadi  berdasarkan  hasil  penelitian  yang  peneliti  dapat hasil  dominan  baik  pada  kasus  preeklamsia  dan  kontrol  preeklamsia  hasil genotype TT.
3. Beberapa Hasil Penelitian tentang Polimorfisme gen GAS6 +1332 C/T Disini  penelitian  akan  menceritakan  hasil  penelitian  berdasarkan  jurnal,
refrensi yang peneliti dapat, sebagai berikut:
Tabel 6 Beberapa Hasil Penelitian tentang Polimorfisme gen GAS6 +1332 C/T Penelitian  Populasi p value Hasil (Ye et al., 2017) China p-value 0,03 OR: 0,271 95% CI : 0,077-0,953 39 kasus 39 kontrol Terdapat  hubungan  yang  bermakna  antara polimorfisme  gen  GAS6  +1332  C/T  dengan kejadian Preeklamsia. (Ozakpinar et al., 2016) Turkey p-value 0,01 OR: 3,80 95% CI : 1,330-3,371 150 wanita Terdapat  hubungan  yang  bermakna  Pada  Gen GAS6 dengan kejadian preeklamsia

## Kesimpulan
Dari hasil penelitian ini, maka dapat disimpulkan, hasil distribusi sosiodemografi dari  44  responden  pada  penelitian  ini  pada  kelompok  usia  risiko  rendah  dan  paritas risiko rendah rentan terjadinya preeklamsia dan riwayat keluarga mempunyai hubungan yang  bermakna  antara  terhadap  kejadian  preeklamsia.  2). Terdapat  hubungan  yang bermakna  antara  polimorfisme  genotipe  gen GAS6 +1332  C/T  dengan  kejadian preeklamsia  didapatkan  hasil p-value 0,03.  3).  Terdapat  hubungan  yang  bermakna antara polimorfisme alel gen GAS6 +1332 C/T dengan kejadian preeklamsia didapatkan hasil p-value 0,00.

## BIBLIOGRAFI
Dinkes  Provinsi  Sumatera  Selatan.  (2017). Jumlah  Kematian  Ibu  Maternal  Sampai Dengan Bulan Desember 2017 .
Hadiati,  Diah  Rumekti.  (2017). Terapi  Preeklamsia  Perlu  Dikembangkan  untuk Menekan Angka Kematian Ibu .
Hsieh,  Chang  Hsun,  Chung,  Ren  Hua,  Lee,  Wen  Jane,  Lin,  Ming  Wei,  Chuang,  Lee Ming,  Quertermous,  Thomas,  Assimes,  Themistocles,  Hung,  Yi  Jen,  &  Yu,  Ya Wen.  (2015).  Effect  of common  genetic variants  of  growth  arrest-specific  6  gene on insulin resistance, obesity and type 2 diabetes in an Asian population. PloS One ,
10 (8), e0135681. Google Scholar
Muñoz,  Xavier,  Sumoy,  Lauro,  Ramírez‐Lorca,  Reposo,  Villar,  José,  Frutos,  Pablo García  de,  &  Sala,  Núria.  (2004).  Human  vitamin  K‐dependent  GAS6:  Gene structure,  allelic  variation,  and  association  with  stroke. Human  Mutation , 23 (5), 506–512. Google Scholar
Ozakpinar,  Ozlem  Bingol,  Sahin,  Sadık,  Verimli,  Nihan,  Simsek,  Gulhayat  Golbasi, Maurer,  Anne  Marie,  Eroglu,  Mustafa,  Tetik,  Sermin,  &  Uras,  Fikriye.  (2016). Association  between  the  growth  arrest-specific  6  (Gas6)  gene  polymorphism  c. 834+  7G>  A  and  preeclampsia. The  Journal  of  Maternal-Fetal  &  Neonatal Medicine , 29 (7), 1149–1153. Google Scholar
Pratiwi,  Ika,  &  Wantonoro,  Wantonoro.  (2015). Hubungan  Paritas  dengan  Kejadian Preeklampsia pada Ibu Hamil di RSUD Wonosari . STIKES’Aisyiyah Yogyakarta. Google Scholar
Raghupathy,  Raj.  (2013).  Cytokines  as  key  players  in  the  pathophysiology  of preeclampsia. Medical  Principles  and  Practice , 22 (Suppl.  1),  8–19. Google Scholar
Ye,  Liyan,  Guan,  Linbo,  Fan,  Ping,  Liu,  Xinghui,  Liu,  Rui,  Chen,  Jinxin,  Zhu,  Yue, Wei, Xing, Liu, Yu, & Bai, Huai. (2017). Association study between GAS6 gene polymorphisms and risk of preeclampsia in Chinese population. European Journal of  Obstetrics  &  Gynecology  and  Reproductive  Biology , 211 ,  122–126. Google Scholar
Zhao, Yi fan, Xu, Da chun, Zhu, Guo fu, Zhu, Meng yun, Tang, Kai, Li, Wei ming, & Xu,  Ya  wei.  (2016).  Growth  Arrest–Specific  6  Exacerbates  Pressure  Overload– Induced Cardiac Hypertrophy. Hypertension , 67 (1), 118–129. Google Scholar

## Copyright holder:
Eka Juniarty, Legiran, Kemas Yusuf Effendy (2021)
First publication right: Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia
This article is licensed under: