## ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL 70% DAUN SYZYGIUM POLYANTHUM (WIGHT) (SALAM) SECARA INVITRO
EM Sutrisna 1,2 , Ika Trisharyanti, Rima Munawaroh, Suprapto 2
1 Bagian Farmakologi fakultas kedokteran & Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta
2 Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Email: Em.Sutrisna@ums.ac.id dan em_sutrisna@yahoo.com

## ABSTRAK
Radikal bebas merupakan satu faktor kontributor terjadinya penyakit degenerative. Antioksidan merupakan senyawa  yang  menghambat  efek  radikal  bebas  tersebut.  Pada  penelitian  sebelumnya,  ekstrak  methanol  daun Daun salam mempunyai efek antioksidan. Penelitian ini bertujuan menguji efek antioksidan ekstrak ethanol 70% daun salam (Syzygium polyanthum (Wight)). Metode yang digunakan adalah uji invitro dengan metode DPPH (Diphenyl picrylhydrazyl). Ekstrak dilarutkan dalam ethanol, kemudian dibuat dalam seri konsentrasi 10, 30, 50 dan 70 ug/mL. Masing-masing seri sebanyak 10 ml. Dalam masing-masing larutan tersebut ditambahkan 1 ml larutan DPPH 1 mM. larutan kemudian diinkubasi pada suhu 37°C selama 30 menit. Panjang gelombang yang digunakan adalah 515 nm.  Metanol dan DPPH 1mM digunakan sebagai blanko.Untuk pembanding digunakan butylated hydroxytoluene (BHT) konsentrasi 2, 4, 6, 8 ug/mL. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak ethanol 70% daun salam mempunyai efek antioksidan dengan IC 50 27,80 ug/mL
Kata kunci: daun salam ( Syzygium polyanthum (Wight) , antioksidan, IC 50

## ABSTRACT
Free  radicals  are  a  contributing  factor  to  the  occurrence  of  degenerative  diseases  .  Antioxidants  are compounds  that  inhibit  the  effects  of  free  radicals  .  In  a  previous  study  ,  the  methanol  extract  of    Bay  leaves have antioxidant effects . This study aims to examine the antioxidant effects of 70% ethanol extract of leaves of Salam (Syzygium polyanthum (Wight) ). . The method used is in vitro test with DPPH ((Diphenyl picrylhydrazyl). The extract was dissolved in ethanol and prepared in various concentrations , namely 10 , 30 , 50 and 70 ug / mL respectively in 10 ml each concentration . Into each solution was added 1 ml of 1 mM DPPH solution and incubated at 37 ° C for 30 min , then measured at a wavelength of 515 nm. DPPH and  methanol  1mM as a blank and butylated hydroxytoluene/BHT with concentration of 2 , 4 , 6 , 8 ug / mL used as a comparator. The results showed that 70 % ethanolic extract of Bay leaves have antioxidant effects with IC 50 of 27.80 ug / mL.
Key words: Bay leaves, antioxidant, IC 50

## Pendahuluan
Salah  satu  faktor  penyebab  penyakit degeneratif  adalah  paparan  radikal  bebas  yang berlangsung  lama  (Reamcle  &  Reusens,  2004). Radikal  bebas  tersebut  mengandung  electron bebas  yang  menyebabkan  sifat  radikal  bebas yang sangat reaktif. Senyawa ini dikelompokkan dalam reactive oxiegenes species (ROS). Terdapat banyak tipe ROS antara lain: nitric oxide radical,
hypochlorite radical, hydroxyl radical, Superoxide anion radical, hydrogen peroxide, singlet oxygen, maupun lipid peroxides (Percival, 1998; Valco et al .,  2007).  Beberapa  penyakit  yang  dipengaruhi efek  radikal  bebas  antara  lain:  DM,  hipertensi, dislipidemia  dan  lain-lain.  Efek-efek  tersebut dapat dikurangi dengan antioksidan.
Tanaman  yang  diduga  memiliki  efek antioksidan  adalah  daun  Salam.  Daun  Salam
secara  tradisional  digunakan  di  masyarakat sebagai  antidiare,  mengobati  rematik  dan  lain- lain.  Beberapa  penelitian  yang  telah  dilakukan menunjukkan  bahwa  daun  salam  memilki  efek menurunkan  glukosa,  LDL  dan  menaikkan  HDL (Sumona&Wulan 2009; Aljamal 2010), anti fungi, antibakteri, induksi apoptosis (Amin et al ., 2008) dan rhematik , gastritis, hipertensi dan antioksidan (Har & Ismail, 2012 & Kaurinovic et al ., 2010). Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui  efek antioksidan dari ekstrak etanol 70% daun Salam.

## Material Dan Metode
Material:  Daun  salam,  DPPH,  etanol  70%, Methanol, BHT
Methode:
1.  Pembuatan ekstrak etanol 70% Daun Salam Daun  salam  dipotong  kecil-kecil, lalu  dimasukkan  ke  dalam  oven  dengan suhu  30-50 ° C.  Tujuannya  adalah  untuk menghilangkan  kadar  airnya.    Simplisia yang sudah kering kemudian dihaluskan dan diayak dengan ukuran 45 mesh.  Sebanyak 500 g simplisia kemudian direndam dalam etanol  70%  dengan  perbandingan  1:7. Setelah 4 hari, fi ltrat dituang dalam cawan I. Residu direndam lagi dengan etanol  70
%  dengan  perbandingan  residu  dengan penyari  1:4.  Filtrat  dituang  dalam  cawan
yang  berisi fi ltrat  I.  Kemudian  diuapkan dangan vacuum evaporator selama 24 jam 2.  Uji antioksidan dengan DPPH
Metodhe  uji  mengikuti  metode  oleh Garcia  et  al.,  2012  dengan  menggunakan DPPH.  Ekstrak  dilarutkan  dalam  metanol dan  dibuat  dalam  seri  konsentrasi  yaitu 10, 30, 50 dan 70 ppm.Masing-masing seri sebanyak  10  ml.    Dalam  masing-masing larutan  ditambahkan  1  ml  larutan  DPPH 1  mM  dan  diinkubasi  pada  suhu  37°C selama 30 menit. Panjang gelombang yang digunakan  untuk  pengukuran  adalah  515 nm.    Metanol  dan  DPPH  1mM  digunakan sebagai  blanko.  Untuk  pembanding digunakan  BHT  (konsentrasi  2,  4,  6,  8 ppm).  Perhitungan  persen  penghambatan DPPH digunakan rumus sebagai berikut: (A blanko – A sampel)/A blanko    x 100%
Selanjutnya  dibuat  gra fi k  antara konsentrasi  sampel  (x)  dengan  persen penghambatan  (y).  Nilai  IC 50 dihitung berdasarkan rumus persamaan regresi

## Hasil dan Pembahasan
Setelah dilakukan uji invitro dengan metode DPPH  dengan  replikasi  2  kali,  didapatkan  rata- rata antiradikal sebagai berikut:
Tabel 1. Hasil rata-rata antiradikal (%) replikasi I
Konsentrasi Absorbansi Absorbansi antiradikal (%) Rata-rata anti radikal (%) Sampel Kontrol DPPH Sampel -Kontrol 0,0008 0,480 0,469 0,043 0,533 0,437
0,426
18,01 20,08 19,05 ± 1,46 0,0016 0,410 0,406 0,0705 0,3395 0,3355 36,30 37,05 36,68  ± 0,53 0,0024 0,262 0,263 0,048 0,214 0,215 59,85 59,66 59,76  ± 0,13 0,0032 0,327 0,327 0,052 0,275 0,275 48,41 48,41 48,41 0,004 0,265 0,259 0,059 0,206 0,200 61,35 62,48 61,92 ± 0,80

## Tabel 2. Hasil rata-rata antiradikal (%) replikasi II
Konsentrasi Absorbansi Absorbansi antiradikal (%) Rata-rata antiradikal (%) Sampel Kontrol DPPH Sampel -Kontrol 0,0008 0,326 0,315 0,0425 0,477 0,2835 0,2725 40,57 42,87 41,72  ± 1,63 0,0016 0,315 0,310 0,046 0,269 0,264 43,61 44,65 44,13 ± 0,74 0,0024 0,311 0,307 0,0495 0,2615 0,2575 45,18 46,02 45,60  ± 0,60 0,0032 0,269 0,266 0,056 0,213 0,210 55,35 55,97 55,66  ± 0,44 0,004 0,271 0,273 0,055 0,216 0,218 54,72 54,30 54,51 ± 0,30 Tabel 3. perhitungan regresi linier Regresi linier IC 50 (µg/mL) Y =  15,92 + 12.183,75x 28,0 Y = 37,19 + 4.638,75x 27,6 Rata-rata IC 50 27,80

## Pembahasan
Pada  penelitian  sebelumnya  didapatkan bahwa  ekstrak  methanol  daun  salam  memiliki aktivitas  antioksidan  ringan  dengan  IC 50 98,85 µg/mL  (Har  &Ismail,  2012).  Pada  penelitian  ini ekstrak  ethanol  70%  daun  salam  memberikan hasil  IC 50 sebesar  27,80  µg/mL.  Hal  ini  berarti efek  antioksidan  dari    ekstrak  etanol  70%  lebih kuat dari ekstrak methanol.
Oksidan  menyebabkan  kerusakan  DNA, protein  dan  lipid.  Oksidan  ini  merupakan kontributor  besar  penyakit  degeneratif  yang berkaitan  dengan  usia  seperti  kanker,  penyakit kardiovascular,  kerusakan  otak  maupun  katarak. Antioksidan  menghambat  kerusakan  ini  dan mengurangi resiko terjadinya penyakit degeneratif (Ames et  al .,  1993;  Khalaf et  al .,  2008). Kandungan  kimia  dalam  ekstrak  ethanol  daun salam  diperkirakan  mengandung  phenolic  dan Flavonoid (Othman et al , 2014).]

## Simpulan
Ekstrak ethanol 70% daun salam mempunyai efek antioksidan dengan IC 50 27,80 µg/mL

## Daftar Pustaka
Amin A, Malik A & handayani V, Efek antidiare ekstrak etanol herba Permot (Passi fl ora Foetida L).
Fakultas Farmasi. UMI. Makasar
Ames  BN,  Shigenaga  MK,  and  T  M  Hagen,  1993, Oxidants, antioxidants, and the degenerative diseases of aging. Proc Natl Acad Sci U S A ; 90(17): 7915–7922
Haque,  MM,  2004,  Inventory  and  documentation  of Medicinal plants in Bangladesh
Har  W  &  Ismail  Is,  2012,  Antioxidant  activity,  total Phenolic  and  total fl avonoid  of  Syzygium polyanthum (Wight) Walp leaves. Int J Med. Arom Plants 2(2): 219-228
Kaurinovic  B,  Popovic  M  &  Vlaisavljevic,  2010.
Invitro  and  invivo  effect  of  Laurus  Nobilis L. Leaf extract. Molecules.15. 3378-3390
Khalaf, N.A.,. Shakiya,  A., , AL-Othman, EL-Agbar, Z., , Farah, H., 2008, Antioxidant Activity of Some Common Plants, Turk J Biol 32 (2008)
51-55
Othman  A,Mukhtar  NJ,  Ismail,  NS  and  Chang  SK, 2014,Phenolics, fl avonoids  content  and antioxidant activities of 4 Malaysian herbal plants, International Food Research Journal 21(2): 759-766
Percival, M.M 1998, Antioxidants, NUT031 1/96 Rev. 10/98
Reamcle,  C  &  Reusens,  B  .,  2004,  Functional  food, aging,  and  degenerative  disease, www.

## Woodhead-publishing. Com
Sumono  A  &  Wulan  A,  2009,  Kemampuan  air rebusan daun salam (Eugena polyantha W) dalam  menurunkan  jumlah  koloni  bakteri
Streptococus sp .Majalah Farmasi Indonesia, 20(3): 112-117
Valko,  M.,  Leibfritz,D.,    Moncol,J.,    Cronin,Mtd,
Mazur,M.,  &Telser ,  J.,  2007, Free  radicals
and  antioxidants  in  normal  physiological functions  and  human  disease, The
International  Journal  of  Biochemistry  & Cell Biology 39 , 44–84