รายการท้าพิสูจน์ มีพิธีกรดำเนินรายการอยู่สองประเภท คือ พิธีกรหลักหรือพิธีกรในสตูดิโอ และพิธีกรภาคสนาม โดยนับตั้งแต่เทปแรก มีบุคคลที่มีชื่อเสียงทางการแสดงมาเป็นพิธีกรให้กับรายการจำนวนหลายท่าน อาทิ