トランスフェクション
導入された遺伝子を実際に細胞及びその娘細胞のゲノムに残したい場合は、安定トランスフェクションが実施なければならない。そのために、特定の毒素に対する耐性など細胞に選択可能な利点を与える、マーカー遺伝子が同時に導入される。トランスフェクトされた細胞のいくつか(ごく少数)は、偶然に外来遺伝物質をゲノムに組み込んでいる。 その後、毒素を細胞培養に添加すると、ゲノムにマーカー遺伝子が組み込まれた少数の細胞のみが増殖でき、他の細胞は死滅する。この選択的ストレス(選択圧)をしばらくかけた後、安定したトランスフェクションを行った細胞のみが残り、さらに培養することができる。 安定トランスフェクションに使用される試薬は以下の通り。
G418、ネオマイシン耐性遺伝子の生産物により中和
ピューロマイシン
フレオマイシンD1
ハイグロマイシンB
ブラストサイジンS