蒲生定秀
永正5年(1508年)、蒲生高郷の子として誕生(『近江蒲生郡志』所収の「蒲生系図」には「真清(高郷)之四男」とある)。はじめ藤十郎と称し、のち六角定頼の一字を与えられ、定秀と名乗った。
高郷は蒲生氏の分家で、本家の家督は定秀の従兄弟・蒲生秀紀が継いでいたが、秀紀が幕府寄りであったのに対し、高郷・定秀は主君・六角定頼の信任を受けていたため、その後ろ盾を得た。また六角家中有数の重臣である馬淵氏から正室を迎え、六角家中での地位を固めた。
大永2年(1522年)に音羽城の蒲生秀紀を攻撃し、大永3年(1523年)3月に8カ月に及ぶ籠城戦の末に秀紀を降服させ、六角定頼の仲裁で秀紀から定秀に蒲生家の家督を譲る事で和睦が成立し、蒲生家の家督を相続した。また、当時の蒲生氏の居城であった音羽城はこの時に定頼によって破却されている。その後、秀紀を毒殺した。その後、天文年間前半に日野城(中野城)を築き居城とした。
定秀は定頼の家臣として享禄3年(1530年)の京都出陣や享禄4年(1531年)の浅井亮政との戦いなどでは29の首級を挙げるなど(蓑浦の戦い)、定頼の主要な合戦の大半に参加し、大いに武功を挙げた。
天文3年(1534年)、豊楽門院藤原藤子を経由して任官奏請し、後奈良天皇より勅許があり、左兵衛太夫に任じられた。