DNAワクチン接種
効果的なワクチンは、特定の病原体に対して適切な免疫反応を誘発する必要がある。 DNAワクチンは、T細胞の助けをTh1またはTh2プロファイルに向けて極性化し、必要に応じてCTLまたは抗体を生成することができる。これは、発現される抗原の形態(すなわち、細胞内対分泌)、送達の方法および経路、または用量を変更することによって達成することができる。また、免疫調節分子、すなわちサイトカイン、リンホカインまたは共刺激分子をコードするプラスミドDNAの同時投与によって達成することができる。これらの「遺伝子アジュバント」は、次のように投与する。
1つは免疫原をコードし、もう1つはサイトカインをコードする2つのプラスミドの混合物
スペーサー領域で分離された単一のバイシストロンまたはポリシストロンベクター
プラスミドにコードされたキメラ、または融合タンパク質
一般に、炎症誘発剤(さまざまなインターロイキン、腫瘍壊死因子、GM-CSFなど)とTh2誘導サイトカインの同時投与は抗体反応を増加させる。一方、炎症誘発剤とTh1誘導性サイトカインは、体液性応答を低下させ、細胞毒性応答を増加させる (ウイルス防御においてより重要)。 B7-1、B7-2、CD40Lなどの共刺激分子が使用されることがあります。
この概念は、IL-10をコードするpDNAの局所投与に適用された。B7-1(APC上のリガンド)をコードするプラスミドは、腫瘍モデルの免疫応答を正常に増強した。GM-CSFをコードするプラスミドとP.yoeliiのスポロゾイト周囲タンパク質(PyCSP)を混合すると、その後の予防接種に対する防御が強化された(プラスミドにコードされたPyCSPだけでは強化されない)。
生理食塩水の注射は通常、骨格筋の筋肉(IM)または皮下(ID)で行われ、細胞外の空間にDNAを送達します。これは、1)エレクトロポレーションによって; 2)ブピバカインなどの筋毒素で筋線維を一時的に損傷することによって支援することができる。または3)生理食塩水またはショ糖の高張液を使用する。この方法に対する免疫反応は、針の種類、針の位置合わせ、注射の速度、注射の量、筋肉の種類、およびレシピエントの年齢、性別、生理学的状態などの要因によって影響を受ける可能性がある。
遺伝子銃による送達は、加速剤として圧縮ヘリウムを使用して、金またはタングステンの微粒子に吸収されたプラスミドDNA(pDNA)を弾道的に加速する。
組換えアルファウイルスベースのベクターは、DNAワクチン接種効率を改善するために使用されてきた。目的の抗原をコードする遺伝子がアルファウイルスレプリコンに挿入され、構造遺伝子が置き換えられるが、非構造レプリカーゼ遺伝子はそのまま残る。シンドビスウイルスとセムリキ森林ウイルスは、組換えアルファウイルスレプリコンの構築に使用されてきた。従来のDNAワクチン接種とは異なり、アルファウイルスベクターはトランスフェクトされた細胞を死滅させ、一過性に発現する。ワクチンの挿入に加えて、アルファウイルスレプリカーゼ遺伝子が発現する。アルファウイルスレプリコンがどのように免疫応答を引き起こすかは明らかではないが、このベクターによって発現される高レベルのタンパク質、レプリコン誘導サイトカイン応答、または樹状細胞による抗原の取り込みで増強につながるレプリコン誘導アポトーシスが原因である可能性がある。