エイリアン アイソレーション
声 - ハリー・ディーン・スタントン
機関士。一人で行動していた所をエイリアンの成体に奇襲されて死亡したため、オリジンミッションでは遺体と生前の音声記録として声が登場する。原典ではエイリアンに拉致されて行方不明となり、ディレクターズカット版で頭部を除きエッグに変貌させられた。
特にエイリアンは、ダクトや視界外のどこからでも出現し、場合によっては自身が滞在している部屋へダクトから降りてくる場合や、ドアロックを解錠後に目の前に現れる場合もありこちらの不意を突かれやすい。こちらを視界にとらえると猛スピードで接近し、一度でも接触すると一撃で殺されてしまう。また、非常に強力であることから撃退手段や回避方法はあっても、戦って勝てる相手ではない。
対人ないしワーキングジョーに効果はあるリボルバーなど、その程度の武器でエイリアン相手にはまったく怯むことはなく、火炎放射器でのみエイリアンを怯ませることができるものの、何度か使用しているとエイリアンは学習してしまい、最終的に火炎にも怯むことさえしなくなる。
そのため、姿を隠したり歩きで不意な音を出さないようにしつつ、同時に誘導するための音や動体センサーなどを駆使しながら、エイリアンから距離を取るよう逃げ回りつつ、接近された場合には物陰やロッカーに隠れたり、スモーク爆弾で煙の中を移動するなどして、いかに遭遇せず探索できるかが重要である。
また、エイリアンは主人公だけではなく暴徒たちも襲うことから、暴徒に囲まれてしまった場合や弾薬が枯渇してしまっている場合には、音を出してエイリアンを誘き出し、エイリアンに暴徒たちを襲わせて倒してしまうこともできる。
宇宙船ノストロモ号が消息を絶ってから15年後の2137年......。ノストロモ号乗員エレン・リプリーの娘のアマンダは、母が行方不明となった星系に赴任して、宇宙船などのエンジニアとして働きながら生き別れになった母親を探していた。
ある日、アマンダのもとへ「ノストロモ号のフライトレコーダーを回収した」との連絡が入り、男性型アンドロイドのサミュエルズからの要請もあって、アマンダたちフライトレコーダー回収チームは宇宙ステーションへと向かう。
声 - トム・スケリット
船長。オリジンミッションの主人公の一人。映画では単身でエイリアンを船外に追放しようとしたが、ダクト内でエイリアンに奇襲・拉致されてしまう。ディレクターズカット版でその後下半身をエッグに変貌させられた。
声 - デイブ・B・ミッチェル
医療兼科学主任。その正体はウェイランド・ユタニ社の密命を帯びたアンドロイド。映画第一作でゲーム本編のワーキングジョーと同様に、エイリアンの標本の保護・回収を最優先するため、真相を知ったエレンを始末しようとするが、パーカーとランバートによって倒された。エイリアンを「完全生物」と評した。
アネシドラ号のクルーの一人。マーロウ、フォスター夫妻と共に惑星LV-426の調査に同行した。セヴァストポリ密入港後、本編の前日談となるwebコミックにて、フォスターの死による精神的ショックからステーション内の病院に入院した後、昏睡状態のままフェイスハガーに襲われ、顔に貼り付かれてしまった。
声 - アンソニー・ハウウェル
ウェイランド・ユタニ社製の男性型アンドロイド。アマンダにセヴァストポリへの同行を持ちかけた。
アポロへの強制介入でワーキングジョーの暴走を止めさせようとするが失敗し、辛うじてアポロ本体のある中枢部へ向かうシャトルを可動させたものの、それと引き換えに機能停止に追い込まれてしまう(アマンダはそれを「死」と表現していた)。
映画に登場したアッシュとは違い、最後までアマンダのために尽力し、リカルドからも「アンドロイドにしてはいい奴だった」とその最期を惜しまれていた。