ワリオの森
キノピオ このゲームの主人公およびプレイヤーが操作するキャラクター。アクションゲームの操作キャラクターとして登場するのは『スーパーマリオUSA』(1988年)に続き2作目。
ワリオ 今回の事件の元凶。ラウンドゲームのデモシーンでは森から出て行くようキノピオに脅しをかけ、ラウンドゲームのBゲームやVS COMの終盤にはボスキャラクターとしても登場する。本来ワリオの帽子とシャツは黄色、ズボンは紫色だが、ファミコン版では帽子はズボンと同じ紫色に、シャツは乳白色に変更された。Aゲームで末尾が9のラウンドをクリアするかBゲームでボスを倒すたびワリオはどんどん大きくなっていくが、実は風船で膨らませただけである。エンディングでは大きくなりすぎて破裂してしまう。このゲームでワリオの唯一のファミコンゲームの出演となった。
妖精 キノピオを助ける森の住人。爆弾を作り出すことはできるがそれを使ってワリオと戦うことはできない。
ドドリゲス ワリオの手下としてモンスターをばら撒くカラス。『夢工場ドキドキパニック』(1987年)および『スーパーマリオUSA』に登場した敵キャラクター。
キャサリン 自分を女の子と思い込んでいるピンク色の恐竜。『夢工場ドキドキパニック』および『スーパーマリオUSA』に登場した敵キャラクター。このゲームでは爆弾タイムの画面端でキノピオを応援するが、ゲームのストーリーには一切関わらない。サテラビュー版では爆笑問題の田中または『BS-X』の女の子に変更された。
ドッスン 四角く巨大な石のお化け。普段はゲームフィールドの上に留まっているが、ワリオに体当たりされると落下しゲームフィールドを圧迫、キノピオを苦しめる。
2014年1月29日に日本でファミコン版がWii Uのバーチャルコンソール対応ソフトとして配信された。
各種ファミコン版ゲームがプレイ可能なNintendo Switch Onlineの加入者向けソフトで、2018年12月12日に本作が追加された。