シニスター・シックス
ニューヨーク市長のノーマン・オズボーンを恨み復讐を企むドクター・オクトパスとミスター・ネガティブが中心となり、ノーマン失脚のための計画を立案した。
ミスター・ネガティブ、エレクトロ、ライノ、スコーピオン、ヴァルチャーは「ラフト」に収監されていたが、ドクター・オクトパスの計画により脱獄に成功した。またその際、ドクター・オクトパスが改良を施した装備もそれぞれ貰っている。
しかし、エレクトロとヴァルチャーはオズコープ発電所でスパイダーマンとの戦いに敗れ、ライノとスコーピオンも港での戦いで敗れた。その後、ミスター・ネガティブはオズコープ本社襲撃の際に倒され、ドクター・オクトパスもノーマンの拉致には成功するが最終的に倒されて、メンバー全員が逮捕された。
『スパイダーマン』第14話、第15話に登場。
本作のスピンオフ映画として、シニスター・シックスを主人公とした映画が計画されていたが、断念された。
ポストクレジットにて、グスタフ・フィアーズが「オズコープの技術を使った悪党軍団を結成する」と発言し、アレクセイをライノとし、登場予定であったヴィランのスーツのみ映される。
登場予定だったメンバー
ライノ、ヴァルチャー、ドクター・オクトパス、グリーンゴブリン、グスタフ・フィアーズ
1995年に登場。Sinister SevenのイニシャルもS・Sである。リーダーはホブゴブリン。1997年にホブゴブリンは死亡。
ホブゴブリン(ジェイソン・マッキンデイルJr.)
ミステリオ(クエンティン・ベック)
エレクトロ
ヴァルチャー
ビートル(エイブナー・ジェンキンス)
スコーピア
ショッカー