ロマノフスキー染色
1890年に、ロシアの内科医ドミトリー・レオニドビッチ・ロマノフスキー(Dmitri Leonidovich Romanowsky)が、「熟成した」メチレンブルーとエオシンの混合液で原虫の細胞質は青色、核は紫赤色に染め分けることができることを発表した。これはメチレンブルーの長期の貯蔵中に生成したアズールBにより核が紫色に染まったものであり、純度の高いメチレンブルーを使用した場合は再現できなかった。
1891年に、ドイツの医師、エルンスト・マラホフスキー(Ernst Malachowski)が、ロマノフスキーとは独立に、メチレンブルーにホウ砂を加えて(アルカリ化)ポリクローム・メチレンブルーとすることにより、再現性の高いロマノフスキー現象が得られることを発表した。(なお、ロマノフスキーとマラホフスキーのどちらがロマノフスキー現象の第一発見者か、という点については議論があるが、出版年月日から言えば、ロマノフスキー現象を先に報告したのはロマノフスキーである。マラホフスキーは自分の発見をさらに追求しなかった一方で、ロマノフスキーは自分の染色法を利用してマラリア原虫に関する研究を発表して大きな反響を得た。)
ロマノフスキー自身が興味を持っていたのはマラリア原虫であったが、今日、医療現場で利用されるような血液塗抹標本の染色像を初めて得たのはロマノフスキーであり、 ロマノフスキーの発表は血液塗抹標本の染色の研究を大いに刺激し、ロマノフスキーの業績は、ロマノフスキー染色として知られるようになった。 ロマノフスキーの方法は、メチレンブルーの熟成にかかわる再現性のなさと、毎回染色液の調整を必要とする手技の煩雑性があり、 ロマノフスキー染色の改良法として多数の染色法が開発され、血液細胞の精緻な形態学の出発点となった。
ギムザ染色((英)Giemsa stain)は、アズールII(アズールIIとは、アズールB(アズールI)とメチレンブルーを等量混合したもの)とエオシンYを用いる。 溶媒として、50 %メタノールと50 %グリセロールを使用して、試薬の安定性を改善している。 (ちなみに、ギムザ染色でメチレンブルーを使用するのは、アズールBに不純物として混じっているアズールAにより細胞質が灰色を帯びるのを補正する目的である。)
核内構造の描出は良好であり、血液細胞検査(末梢血塗抹検査・骨髄)はギムザ染色単独でも十分可能であるが、細胞質顆粒の描出がやや不良であるので、メイ・グリュンワルド染色と併用することが多い。
マラリア原虫など血液中の病原体の検出はギムザ染色が標準的な方法である。
病理細胞診においては、造血系疾患関連以外にも、脳脊髄液、胸水・腹水などの穿刺液検査、尿、穿刺吸引細胞診、などの細胞の観察に用いられる。
ギムザ染色は染色体の観察にも用いられる。G分染法は、染色体のトリプシン処理後にギムザ染色を行うもので、染色体に濃淡の縞模様(Gバンド)が見える。 濃く染まる部分はDNAにアデニンやチミンが多い領域、淡く染まる部分は、グアニンやシトシンが多い領域である。
Gバンドを観察することにより、染色体の同定や異常の検出を行うことができる。