アレッサンドロ・デ・メディチ
マルゲリータ・ダズブルゴとの間に子供はなかった。マルゲリータは夫の死後1539年にパルマ公オッターヴィオ・ファルネーゼと再婚した。
3人の庶子が確認されており、ジュリオ・デ・メディチ(英語版)(1533年頃 - 1598年)、ジュリア・デ・メディチ(英語版)(1535年頃 - 1588年頃)、ポルツィア・デ・メディチ(英語版)(1538年 - 1565年)がいた。息子ジュリオは父の暗殺直後では後継者候補に上がったが却下され、コジモ1世が後継者となった。フィレンツェ公にはなれなかったが、1562年に誕生した聖ステファノ騎士団(英語版)の初代提督に就任、1563年にバルバリア海賊相手に戦った。