5秒ルール
2005年にはアメリカのテレビ番組『怪しい伝説』の番組中(Episode 39: "Chinese Invasion Alarm, 5 Second Rule")で、このルールが正しいかどうかの検証がなされた。
食中毒の原因であるサルモネラ菌においても5秒ルールは検証されており、対象食品のソーセージに付着する確率は、タイル上で99%以上、フローリング上で5 - 68%、カーペット上で0.5 %以下という結果が出ている。
ノーベル化学賞受賞の下村脩は床に落ちた食べ物が雑菌だらけであることを顕微鏡で息子にみせた。
アメリカのラトガーズ大学の研究チームは5秒ルールの真偽を幅広く包括的に確認し、交差汚染の原因を完全解明することを目的に、ブロック状に切ったスイカとパン、バターを塗ったパン、グミキャンディーを汚染された床(ステンレス、木材、セラミックタイル、カーペット)の表面上に12.5cmの高さから落とす実験を行った。それぞれの床は、一般的な食品病原体であるサルモネラ菌の付着能を模倣するため、エンテロバクター・アエロゲネスB199Aと呼ばれる細菌でコーティングされた。合計2,560回に及ぶ測定結果から、タイルとステンレスの伝播率が高かった一方で、カーペットに落ちた食品への細菌の伝播が最も起こりにくいことが発見された。また、水分を多く含むスイカは、床から細菌を吸い上げる効果が大きく、反対に、グミキャンディーは、最も汚染に抵抗することが発見された。