Dr.MARIO & 細菌撲滅
本作はニンテンドーWi-Fiコネクションを利用したオンライン対戦に対応し、遠くに離れたプレイヤーと対戦ができる。また、対戦相手が本ソフトを購入していなくても、WiiConnect24を利用して「フレンドタイセン限定版 Dr.MARIO」をプレゼント(無料)することで対戦することができる。Wiiリモコン横持ちによる操作に加え、Wiiリモコン+ヌンチャク、クラシックコントローラー、ニンテンドーゲームキューブ用コントローラーにも対応している。
「Dr.MARIO」と「Dr.LUIGI」の1人用モードでは、特効薬なしでステージをクリアする従来通りのステージクリア型の「スタンダード」、特効薬を使用してゲームオーバーになるまで続く「エンドレス」、コンピュータと対戦する「VSCOM」(特効薬あり・なしを選択可能)、特効薬を使用してお題をクリアしながらルールを学べる「おためしギャクテン!特効薬」の4種類から選択できる。