単鎖可変領域フラグメント
単鎖可変領域フラグメントは、完全な抗体分子に見られる定常Fc領域を持たないため、共通の結合部位(プロテインGなど)を使用して抗体を精製することはできない。プロテインLはκ軽鎖(カッパ軽鎖)の可変領域と相互作用するため、これらのフラグメントはプロテインL(英語版)を使用して精製または固定化することがよくある。より一般的には、scFv分子のC末端に6つのヒスチジンタグを組み込み、固定化金属アフィニティークロマトグラフィー(IMAC)を使用してそれらを精製する。ヒトVH3ドメインを含む一部のscFvも、プロテインA(英語版)によって捕捉される。
単鎖可変領域フラグメント(たんさかへんりょういきフラグメント、英: single-chain variable fragment、scFv)は、免疫グロブリンの重鎖(VH)および軽鎖(VL)の可変領域を、10~25アミノ酸程度の短いリンカーペプチドで繋いだ融合タンパク質である。したがって、実際には抗体フラグメント(英語版)ではない。リンカーは通常、柔軟性のためにグリシンを、また溶解性のためにセリンまたはスレオニンを多く含み、VHのN末端とVLのC末端をつないだり、またはその逆の場合もある。このタンパク質は、定常領域の除去とリンカーの導入にもかかわらず、元の免疫グロブリンの特異性を保持している。右の画像は、通常、この修正によって特異性が変化しないことを示している。
これらの分子は、ファージディスプレイを容易にするために作成された。ファージディスプレイは、抗原結合ドメイン(英語版)を単一のペプチドとして発現することが非常に便利である。別の方法として、ハイブリドーマに由来するサブクローン化された重鎖および軽鎖からscFvを直接作成することもできる。scFvには、フローサイトメトリー、免疫組織化学、人工的T細胞受容体(キメラ抗原受容体)の抗原結合ドメインなど、多くの用途がある。
哺乳類の細胞培養で作られることが多いモノクローナル抗体とは異なり、scFvは大腸菌などの細菌の細胞培養で作られることが多い。