伊集院光 深夜の馬鹿力
現在の『JUNK』枠全体のプロデューサー。当番組としては6代目。『JUNK』では『おぎやはぎのメガネびいき』のディレクターも務めている。2012年3月末の登場早々に伊集院から「座敷わらし」とイジられ、同4月から現職に就任。
普段は「青びょうたん」「脱げたサンダル」などと形容される、無口でおとなしい人物。恋人が麦芽の小出真保であることが発覚して以来(現在は破局)、彼女に対しては「ドS」「ベッドヤクザ」であるなど裏表がある性格が知られるようになる。ADとしては人数分のアイスを購入しろと言われ、人数分同じアイスを買ってくるという。『日曜日の秘密基地』『アンタッチャブルのシカゴマンゴ』のADも担当していた。2010年3月に「なにか探しの旅」に出るため降板。
当番組は基本的に伊集院のトークだけで進められるが、ナレーターやスペシャルウィーク、ポッドキャストでは伊集院以外にもレギュラー的に出演する者がいる。
若手芸人(通常の放送では主にポッドキャストを担当、番組のアルバイトを兼任している者もいる) 桐畑トール(コンビ「熊本キリン」→ピン→コンビ「ほたるゲンジ」) 田代32 ヒットマン - 現在は解散。メンバーの河野かずお・林田竜次、各自で芸能活動を続けている。 サードメン - 現在は解散、メンバーの浜ロンが芸能活動を続けている。 アンタッチャブル - 2003年M-1グランプリ決勝に進出しブレイクするまでは、最も出演回数の多い若手であった) オテンキ - 2011年のポッドキャストにおける録り下ろし復活以降。
構成作家(放送中の「笑い声」のほか、コーナーの「平成ハレンチ学園」渡辺校長役を担当。なお、伊集院は構成作家という語と使わず、「構成」あるいは「構成スタッフ」と言う) 渡辺雅史 - 元々さば味噌煮というペンネームではがき職人をしていたが、ニッポン放送の前で幾度となく出待ちを繰り返した結果、伊集院にスカウトされた。本番組は2019年9月30日の回で引退。
TBSアナウンサー - 番組のナレーターが主だが、出演することもある。番組内では「局アナなのでギャラが必要ないのが強み」と強調している。
過去 下町兄弟作曲の初回テーマ曲 1995年10月10日(第1回)のみ。 「やっと戻ってきてくれたこの男......」で始まるラップ。 Yo! suke Ito vs. 下町兄弟「ビールVS.ウーロン茶」 1995年10月24日(第3回) - 1997年4月22日(第81回)で使用。 ケミカル・ブラザーズ「In Dust We Trust」 1997年5月6日(第83回) - 1999年4月20日(第184回)で使用。 AD柳沢まこと作曲の番組オリジナルテーマ曲(初代) 1999年4月27日(第185回) - 1999年7月20日(第197回)の間は暫定テーマとしてウケ狙いで適当な曲が使われていた。1999年7月27日(第198回)からオリジナル曲の試作版が数バージョン試された後、正式版が1999年9月7日(第204回) - 2000年3月28日(第233回)で使用。前奏の部分が長く「しゃべりづらい」(トーク入りしにくい)という伊集院のコメントにより、正式版も途中から短縮されている。
現在 AD(使用開始当時)柳沢まこと作曲の番組オリジナルテーマ曲(2代目) 2000年4月4日(第234回)から使用。