アンジェーロ
ティスベの明るく照明された庭で、仮面をつけた招待客たちが楽しんでいた。彼らが散っていった後、洞窟にいるロドルフォとその共犯者たちがアンジェーロについて文句を言っている。招待客たちが戻ってくる。ガレオファはロドルフォのことを知っており、その夜彼の愛人であるカタリーナに会うのを手助けする。
ティスベが現れる。ティスベはロドルフォの愛を手に入れるためならライバルたちを殺すのも厭わないほど、彼に惚れていた。一方、ロドルフォはカタリーナだけを愛していると話し立ち去る。 ガレオファが再び現れ、ティスベに毒と睡眠薬を渡す。彼はティスベにロドルフォが今晩別の女性に会うと告げる。
アンジェーロが挨拶がわりの舟歌の曲に合わせ現れる。ティスベがガレオファへ注意を向けていることにアンジェーロが嫉妬するので、気をそらすために、ティスベは彼女が子供の頃、彼女の母親が絞首刑から救われた時のことを話す。ヴェネツィアの貴族の娘が、ティスベの母親を許すよう懇願したのだ。ティスベの母親は感謝の印としてその娘に自分の十字架を贈った。ティスベは今までずっとその娘を探し続けているのだ。
序曲
ティスベの物語(第1幕)
バルカローレ(舟歌)(第1幕)
ロドルフォの歌(第2幕)