アルティメット・スパイダーマン
ピーター・クイル/スター・ロード 声 - 影平隆一 / 英:クリス・コックス ガーディアンズ・オブ・ザ・ギャラクシーのリーダー。 グルート 声 - 祐仙勇 / 英:マイケル・クラーク・ダンカン→ケビン・マイケル・リチャードソン 木のような姿をした異星人で、樹木に同化することも可能。 第4シーズン(シーズン4)ではウェブ・ビアードらが乗る巨大な海賊船に加工されて登場した。 ロケット・ラクーン 声 - 多田野曜平、佐藤せつじ(第4シーズン) / 英:ビリー・ウェスト→トレバー・デュバル ノヴァの師匠である、二足歩行するアライグマ。 第4シーズン(シーズン4)ではウェブ・ビアードの部下の一人として登場した。 ドラックス・ザ・デストロイヤー(Drax the Destroyer)/アーサー・ダグラス(Arthur Douglas) 声 - 福地将章 / 英:デビッド・ゾボロフ(英語版) ガモーラ 声 - 西島麻紘 / 英:ニカ・フッターマン
声 - 倉富亮 / 英:マット・ランター
ピーターの幼馴染で大親友。ノーマン・オズボーンの一人息子。勉強が苦手で、ピーターに教えてもらっていることが多々。
第8話「ヴェノムの再来」では、ヴェノムを発見して腕時計に入れて持ち帰り、ブラックスパイダーマンとして新しいヒーローになったが暴走し、スパイダーマンによってヴェノムを剥がされた(このときの映像を見たドクター・オクトパスは正体を知ったが、ノーマンには明かさなかった)。しかし、ヴェノムは残っており、第11話「ヴェノムの襲撃」では 父親に認められたい一身でヴェノム化した。ヘリキャリア陥落時、父によってヴェノムとして強制的に変身させられた。何とか元に戻ったものの、 父親から「自分はスパイダーマンによって怪物の姿にされた」と告げられ、スパイダーマンと袂を分かった。
第34話「カーネイジ」ではピーターに取り付いた一片をハリーが家族、一心同体だと言って、ピーターの体から自らに移し、グリーンゴブリンを倒すべく共に戦った。
シー・ハルク/ジェニファー・ウォルターズ 声 - 阿川りょう / 英:エリザ・ドゥシュク ハルクのいとこであるヒロイン。 レッドハルク/サンダーボルト・ロス 声 - 松田健一郎 / 英:クランシー・ブラウン ハルクの仲間である赤い大男。怒りに比例して体温が上がる特性を持ち、これを利用して高温を発することが可能。 第75話、第76話、第77話、第78話「真のチャンピオン決定戦」では2回戦に登場。サンドマンを倒すが、ブラスターに倒される。 スカー 声 - 鈴木雄二 / 英:ベンジャミン・ディスキン ハルクの仲間である、長髪の男性。得物は刀。片言でしゃべる。
声 - / 英:ジョン・ポリト
スパイダー・ノワールおよびミスター・フィクシットらが敵対するギャング。シージ・ペリルスを手に入れ、自分たちの武器を強化していた。
地球外文明・クリー帝国がDNAを操作して生み出した超人種族の末裔による国家。トライトン以外のメンバー全員がブラックボルトの弟・マキシマスの洗脳を受け、本拠地であるアティラン(英語版)をニューヨークに墜落させようとしていた。 トライトン(英語版) 声 - 小田柿悠太 / 英:ジェームズ・アーノルド・テイラー インヒューマンズのメンバーである魚人で、シールド・アカデミーに交換留学生として編入した。マキシマスの陰謀が原因でS.H.I.E.L.D.関係者からはスパイではないかと疑われたが、スパイダーマンと協力してアティラン墜落を阻止し、インヒューマンズからの大使として認められた。 ブラックボルト(英語版) 声 - 増元拓也 / 英:フレッド・タタショア インヒューマンズの国王。囁くだけでも声が衝撃波になってしまうため、必要がない限り一言もしゃべることはない。 メデューサ(英語版) 声 - 根本圭子 / 英:メアリー・フェイバー (英語版)→ローズ・マッゴーワン インヒューマンズのメンバー。自らの長髪を自在に操る美女。 ゴーゴン(英語版) 声 - / 英:ノーラン・ノース インヒューマンズのメンバー。 カーナック(英語版) 声 - 菅原雅芳 / 英:フレッド・タタショア インヒューマンズのメンバーである武術の達人。 マクシマス(英語版) 声 - 永田昌康 / 英:ノーラン・ノース ロックジョー(英語版) テレポート能力を持つインヒューマン王家のペット。ブルドッグに似ているが頭に音叉型の角がある。
ニック・フューリーの指揮下にある怪物軍団。 フランケンシュタインズ・モンスター(英語版) 声 - / 英:ケビン・マイケル・リチャードソン ハウリング・コマンドーズのメンバーで、銃火器の扱いに長けた大男。 ウェアウルフ・バイ・ナイト 声 - / 英:ロス・リンチ 高い身体能力と嗅覚を武器とする狼男。ベジタリアンを自称する。 エリック・ブルックス/ブレイド 声 - / 英:テリー・クルーズ 吸血鬼ハンター。第3シーズン(シーズン3)以降は登場しない。 マンシング ヘドロで構成されたヒーローで、ヘドロが多ければ多いほど巨大化し、力も増す。喋ることは不可能だが、コミュニケーションをとることは可能。 インビジブルマン 透明人間。他メンバーが戦闘を行っている間、メイおばさんの自宅の警護に当たっていた。
声 - 陣谷遥 / 英:ドレイク・ベル
声 - / 英:スティーブン・ブルーム
声 - / 英:キーオン・ヤング
ハンマーヘッドの部下。シージ・ペリルスを手に入れた結果、エネルギーを吸い取って相手を石化させる能力を身に着け、今まで自分をこき使ってきたハンマーヘッドに反乱し、さらには町中のエネルギーを奪っていった。その後、スパイダーマンらに追い詰められ、シージ・ペリルスを没収された。
声 - 古賀明 / 英:マイロ・ヴィンティミリア
1930年代のアメリカ(禁酒法時代)風のモノクロの異次元世界のピーター・パーカー。彼の着るスパイダーマンスーツは軍服のようなデザインになっており、彼の世界ではその上にトレンチコートを着こみソフト帽をかぶっている。本来の世界のピーターとは異なり孤独を好み口数は少なく、ハードボイルド的な雰囲気を漂わせている。
第4シーズン(シーズン4)にも登場。シージ・ペリルスの欠片をめぐってスパイダーマンと共闘し、シージ・ペリルスの力が解放されたため、彼の世界は色がついた。
原典はコミック版『マーベルノワール(英語版)』の世界のスパイダーマン。
声 - 烏丸祐一/ 英:オデッド・フェール
生けるミイラとなったかつてのファラオ。包帯を操ることが可能で、呪術にも長けている。ハウリング・コマンドーズの一員として、ドラキュラの魔の手からアンクを護るために活動した。だが、ドラキュラ退散後にアンクを手中に収め、ハウリング・コマンドーズを利用していたことを明かした。巨大化した状態でニューヨークに来たが、ハウリング・コマンドーズとスパイダーマンらヒーローチームの協力により倒された。