横浜市営バス滝頭営業所
保土ケ谷営業所との共同運行路線である。間門発は始発1本のみ運行される。詳しくは横浜市営バス保土ヶ谷営業所#101系統の項を参照されたい。
2006年3月27日: 桜木町駅 - 根岸台運行便(E)を廃止
2008年4月14日: 深夜バス362系統を根岸駅 - 磯子駅間運行に変更、汐見台団地内を廻る運行は廃止
2009年6月1日: 333系統雨の日臨時便市電保存館 - 根岸駅を新設
2012年5月14日: 333系統雨の日臨時便市電保存館 - 根岸駅を廃止
21系統は、市街中心部から柏葉・山元・根岸台地区を経て根岸駅・滝頭営業所裏の市電保存館前まで至る当営業所の主要系統である。旧横浜市電から転用された麦田トンネルを通過したあと柏葉通り・横浜駅根岸道路を経て丘へ上がり、不動坂にて急坂を登降坂するなどアップダウンの多い経路を辿る。系統名は「根岸台線」であるが旅客案内ではほとんど使用されない。ほぼ全便が桜木町駅 - 市電保存館の通し運行であるが、数便のみ根岸駅 - 市電保存館の入出庫便が運行される。麦田町 - 市電保存館間は273系統(「急行」ふれあいバス)が並行して運行されている。かつては同じく横浜駅根岸道路を運行する103系統と同様に根岸台折返便が存在したが現在は運行されていない。また子系統として地蔵坂を経由する旧55系統や長者町1丁目経由の旧22系統が存在したがいずれも廃止されている。
横浜市営バスでは1994年からミニバス路線の運行を開始し、1995年度には同年発売された日野・リエッセを保土ケ谷営業所を皮切りに導入開始、同年度後半にはそれまで日野自動車製車両の配置がなかった滝頭営業所にも新製配置された。以来2005年度(2006年式)までリエッセはまとまった数が配置された。
また1996年度から2008年度にかけて、当営業所ではCNG充填施設が稼働しており、それに伴い新製配置されたCNGバスも大半が日産ディーゼル製車両であった。当初はいすゞ・キュービックCNGノンステップも配置されていたが、後に港北営業所へ転出している。
入札制度導入以降の新製配置や、新たにCNG充填施設が稼働開始した浅間町営業所との大規模な車両転配置を経て、日産ディーゼル・日野自動車・いすゞ自動車・三菱ふそうの4メーカー製の車両が在籍するようになった。
在籍車両の大半は一般路線用の大型車(短尺車)である。当営業所には2012年度にバイオディーゼル燃料 (BDF) 専用給油施設が設置されており、大型短尺車の一部が試験的にBDF使用車両として運用されている。その他、135・219系統に用いられる日野自動車製の小型車が在籍する。現在は中型車の在籍はない。
近年は新機軸の車両を導入しており、2019年度にはピアライン向けにトヨタ・SORAを1台導入した。トヨタ・SORAはピアライン以外の路線でも運行されることがある。
2020年2月5日にはベイサイドブルー・123系統で使用される日野ブルーリボン・ハイブリッド連節バスを4台導入した。国産連節バスを導入したのは横浜市交通局が初めてとなる。