5,10-メテニルテトラヒドロ葉酸
メチレンテトラヒドロ葉酸デヒドロゲナーゼ(NAD)もしくはメチレンテトラヒドロ葉酸デヒドロゲナーゼ(NADP)によって5,10-メチレンテトラヒドロ葉酸から合成される。
また、ヒスチジンの代謝中間体として5-ホルムイミノテトラヒドロ葉酸からホルムイミノトランスフェラーゼシクロデアミナーゼによって合成される。そして、メテニルテトラヒドロ葉酸シクロヒドロラーゼによって10-ホルミルテトラヒドロ葉酸に変換される。