アフォンソ・デ・ポルトゥガル (1475-1491)
1491年7月、王の一家はタホ川の河岸近くのサンタレンで夏を過ごしていた。ジョアン2世は息子アフォンソに一緒に泳ごうと誘った。アフォンソは最初は断ったものの、父がアフォンソを伴いたがっている様子を見て、一緒に出掛けることを決めた。ルイ・デ・ピナの年代記によると、以下のようであった。
また、同じくルイ・デ・ピナによると、母レオノールはこのニュースを聞くと、悲しみに襲われ、義理の娘イサベルを伴ってラバに乗り地面に横たわる息子の元へ急いで向かったという。哀悼の意を表すため、両親は黒の服を着た。葬儀はバターリャ修道院で行われ、アフォンソは祖父アフォンソ5世も眠るこの修道院に埋葬された。未亡人となったイサベルはカスティーリャに戻り、グラナダの包囲が解除される前であったがイリョラにいる両親と合流した。両親のカトリック両王は、イサベルと共にいて慰めるために、一時的に軍から離れた。
継承者を失ったジョアン2世は、庶子のコインブラ公ジョルジェを嫡出子としようとしたが不首尾に終わった。王妃レオノールが断固としてジョルジェが王位を継承するのに反対し、カトリック両王もレオノールと同様にレオノールの弟マヌエルの王位継承を支持した。
1494年、健康状態が悪化していたジョアン2世はいとこで義弟のマヌエルを後継者に指名した。ジョアン2世は翌1495年10月に崩御し、1497年にマヌエル1世はアフォンソの未亡人イサベルと結婚した。