ポルトガル王女イザベルの肖像
第1のバージョンを制作した際に、カール5世から参照のために渡された肖像画はイザベルの生前に描かれたものであったが、そこでは彼女の顔は同時代に言及された特徴である鷲鼻(英語版)で描かれており、ティツィアーノは肖像画の通りに描いた。しかしカール5世は妻の外見を忠実に再現することではなく、自身の記憶にある妻の姿を目に見える形で再現することを望んでいた。イザベルの顔が青白く生命力に欠けているのは、カール5世が死去した妻が世界から離れて見えることを望んだからかもしれない。
ティツィアーノは1536年にウルビーノ公爵夫人エレオノーラ・ゴンザーガの肖像画を制作する際にルーヴル美術館のラファエロ・サンツィオとジュリオ・ロマーノの『イザベル・デ・レクセンスの肖像』(Ritratto di Dona Isabel de Requesens)を参照したが、本作品においてもそれを踏襲している。
保存状態は良好である。X線撮影を用いた科学的調査では、ティツィアーノが図像に変更を加えた形跡は見つからなかったが、別の女性像を描いたキャンバスを再利用したことが判明している。