Mad1
生化学的手法により、Mad1は約90 kDa、718残基からなり、特徴的な桿型のコイルドコイルタンパク質であることが1995年に予測され、その直後に結晶構造が報告された。その後、2002年にはヒトのMad1-Mad2四量体複合体の結晶構造が発表された。実験的制約により、Mad1は484番から584番残基のみの構造が示された。伸長した構造をとった2つのMad1単量体は、N末端側のヘリックス(α1)が平行型コイルドコイルを形成することで強固に保持されており、コイルドコイル末端からはMad2へ向かい、約20残基の後にもう1つのヘリックス(α2)を形成する。Mad2結合ドメインはヘリックスα1とα2の間の領域に位置する。この領域のN末端部分は柔軟で、2つのMad1単量体で異なるコンフォメーションをとっており、そのため複合体は非対称的構造となっている。熱力学的研究により、Mad1はMad2-Cdc20複合体形成速度を低下させる機能を果たしており、そのためin vivoでは競合的阻害剤として作用していることが示唆された。さらに、Mad1-Mad2間の結合部位は複合体構造の内側に埋まっており、Cdc20は結合部位へアクセスすることができない。またMad1-Mad2間の結合は、Mad2のC末端がMad1に対してフォールディングしているという点で独特である。そのため、Mad1-Mad2複合体からのMad2の放出には、これまで知られていないコンフォメーション変化機構が必要となると結論付けられている。