マリア・アンナ・フォン・プファルツ＝ノイブルク
ベルレプシュ伯爵夫人は王妃懐妊の噂を何度も流したが、それはそのたびに王妃の宮廷内の立場が一時的に強まるからだった。1696年5月に対立していた姑のマリアナ王太后が死んだ後は、トレド大司教ルイス・フェルナンデス・ポルトカレッロ(英語版)枢機卿が王妃の新しい敵対者となった。枢機卿はフランス王が推す次期国王候補への支持を明らかにしていた。
1699年2月、カルロス2世の後継者に決まっていたヨーゼフ・フェルディナント・フォン・バイエルンが急死すると、マリア・アンナは次の後継者として甥のオーストリア大公カール(後の皇帝カール6世)を推したが、ポルトカレッロ枢機卿はフランス王ルイ14世の孫息子アンジュー公爵(後のフェリペ5世王)を推した。死を目前にしたカルロス2世は、自らの来世のことも考慮して、妻ではなく国内最高聖職者の意見を支持した。ポルトカレッロが作成を懇願していたカルロス2世の最後の遺言状には、王位継承者をフランスのアンジュー公爵と治定する旨が書かれた。マリア・アンナは在スペイン皇帝公使アロイス・フォン・ハラハの助力を得て、この遺言状を国王に破棄させることに成功し、義兄の皇帝レオポルト1世に手紙を送って、カール大公が後継者に選ばれたので、彼に軍隊を付けてスペインへ向かわせてほしいと要請した。しかし、もともと外孫であった亡きヨーゼフ・フェルディナントにスペイン王位が与えられることを望んでいた皇帝は、気分を害してこの提案を拒否したため、マリア・アンナは皇帝からも見捨てられた形となった。
姑の王太后マリアナ・デ・アウストリアが自分の孫婿にあたるバイエルン選帝侯マックス・エマヌエルを次の総督に推し、主張を押し通したからである。この時期までマリア・アンナは姑の王太后との良好な関係を維持していたが、この件以降、嫁姑の仲は険悪なものとなった。
マリア・アンナの尊大な態度は彼女に不利に働いたが、それ以上に彼女の致命的な欠陥といえるのは、スペイン人から実家プファルツ=ノイブルク家の家門拡大政策をスペインの利害と同一視していると思われたことである。こうした批判的な見方を助長するかのように、王妃は相談役をすべて自分と同じドイツ出身者で揃えてしまう。聴罪司祭の「デ・キウーサ神父」ことガブリエル・ポンティフェーザー(スペイン語版)は南ティロル地方キウーザ/クラウゼンのドイツ系住民の生まれで、1699年キウーザにカプチン会修道院(ドイツ語版)を建設して故郷に錦を飾った。秘書官のハインリヒ・フォン・ヴィーザー(スペイン語版)や女官長のマリー・ゲルトルーデ・フォン・ベルレプシュ(ドイツ語版)伯爵夫人も実家の兄たちが送り込んだドイツ人だった。こうした取り巻きの存在はスペイン人から強く嫌悪され、同時に王妃の立場をも苦しくした。ヴィーザーは1695年スペインから追放された。王妃はこの事件で気落ちしたように見えたが、憂鬱の本当の原因は、この結婚の本来の目的であったカルロス2世の子を授かり出産するという使命を果たせる可能性が消えたためであった。