ドンキーコング トロピカルフリーズ
鼻から火炎弾を放つ豚。3回踏まなければ倒せない。
ヘルメットを被ったペンガー。踏みつけでは倒すことができないが、転ばせることは可能で、転ばせるとタルと同じように投げることで武器として使える。
声 - 笹島かほる
ディディーのガールフレンド。本編内では『スーパードンキーコング3』以来久々の復活であり、ドンキーとコンビを組むのはシリーズ初。1Pのみだとドンキーの背中に乗って移動する。ポニーテールを回転させて少し上昇することができ、水中ではスクリューのように回転する事で水の流れに逆らうこともできる。2P時に使用できるウェポンは「ガムボール・ポップガン」。
ピンクの「DX」バレルから登場する。
入るとダメージを受けるほど冷たい海に浮かぶ凍りついた船の上を進む。モチーフはビーチエリア。
今作は6つの島を巡りながら前作には無かった水中ステージや氷のステージなど様々なステージを冒険していく。各地の島に潜むザ・スノーマッズを倒しながら最後の島である氷漬けにされたドンキーコングアイランドを目指す。1つの島に冒険する6~7つのコースとボスステージが存在し、島ごとにK・O・N・Gパネルを全て集めるとボーナスコースが出現する。 過去作からのアレンジBGM(または原曲)が収録されているステージが存在する場合、ステージ名横に詳細を記載する。(アレンジBGMが複数ステージで使用されている場合は最初に流れるステージのみ記載)
ジューシージャングルアイランドのボス。ザ・スノーマッズの幹部の一人で、工場長。トゲのついたハンマーを持ったシロクマ。ハンマー攻撃の他、氷ブロックを飛ばしたり、急降下で衝撃波を起こす。体力が減ると氷塊弾を飛ばしてくるようになる。トゲ付きの兜を被っていないが、代わりにハンマーを頭上に掲げることで防御している。当然ながらハンマーを振り下ろした時は無防備になる。
ジャングルの中をトロッコで駆け抜ける。飛行機やコンテナなどの障害物が登場する。
ヘルメットを被ったウォラス。踏みつけが効かないが、ローリングアタックを3回当てることで倒せる。
ミサイルのごとく飛んでくるペンゴー。ペンガッチャ1号から発射されるものも存在する。
黄色いフグ。膨らんだり萎んだりを繰り返す。萎んでいる間でなければ倒せない。
トゲトラップや敵、触手が多数待ち構える。
天井からぶら下がった緑色の植物。ドンキー達が下を通ると噛みついてくる。倒すことはできないが、頭上にある足場に乗る事が可能。
声 - 長嶝高士
かつてマリオと戦った初代ドンキーコングであり、現在のドンキーコングの祖父。アクションゲームでは初のプレイアブル化である。杖で地面を突いて跳ねることができ、大ジャンプしたりダメージ判定のあるトゲなどの地面を無傷で渡ることができる。またプレイアブルキャラクターの中で唯一水中で攻撃ができる。2P時には杖から入れ歯を発射する「デンタル・ポップガン」を使用できる。
黄色の「CK」バレルから登場する。
よたよた歩くピンク色の鳥。これと言った特徴はなく、普通に倒せる。
セイウチのような敵キャラ。3回攻撃しないと倒せない。
紫色の大きい魚。スイムスピンを3回当てなければ倒せない。ポンピーが投げてくることがある他、とあるステージで空中を泳いでいる。
ステージ中盤で巨大ダコのエンペラータコラに追いかけられるが、ゴール手前に到着すると機雷の鎖を切って倒す。エンペラータコラから吹き上がる墨に飲み込まれた時点で、ダメージに関係なく1ミスになる。2の船底ステージ『船ぞこダイビング』のアレンジが流れる。
棘だらけの実に乗った黄色い鳥の敵。実から噴き出す毒で大きくジャンプする。