アルティメット・スパイダーマン
声 - / 英:ダンテ・バスコ、ディー・ブラッドリー・ベイカー(ヴェノム寄生時)
クン・ルンの高僧候補生だった人物で、アイアンフィストとは面識がある。
第39話「クン・ルンへの旅」でアイアンフィストを倒そうとして失敗してクン・ルンから追い出された後、 第51話「シニスター・シックスの逆襲」でシニスター・シックスの一員として登場した。
第55話「エージェント・ヴェノム」ではヴェノム化した状態でフラッシュを襲い、助けに来たスパイダーマンによってヴェノムをはがされてS.H.I.E.L.D.に捕縛された。その際、回収を免れた一片がフラッシュにとりつき、フラッシュがヴェノム化するきっかけを作った。
2012年4月1日に、本作はアメリカ合衆国のディズニーXDで放送され、その翌日にXbox LiveとPlayStation Storeでパイロット版が配信された。第4シーズン(シーズン4)はvs. the Sinister 6という副題で、2016年から放送されている。
声 - 土井真理 / 英:クリー・サマー
第90話「マダム・ウェブ」にて初登場を果たした人物。
無数の可能性の中から起こる可能性が高いものを抽出して未来を予知する能力を持つ。
第96話、第97話、第98話、第99話(第94話、第95話、第96話、第97話)「異次元のスパイダーマン、再び PART1-4」では、ピーターに多次元世界崩壊の危機を知らせ、彼らの次元間移動の補助をした。
声 - 宮本克哉/ 英:ジェームズ・アーノルド・テイラー
全身を水に変えることができるヴィラン。もともとS.H.I.E.L.D.によってショッピングモールの廃墟に閉じ込められていたが、第87話「ハイドロマン」にて初登場した際に事情を知らないスパイダーマンらによって連れ出された。
声 - / 英:JB・ブラン
第61話(第65話)「帰ってきたガーディアンズ・オブ・ギャラクシー」にて登場した虎型異星人。
声 - / 英:セス・グリーン
声 - / 英:ケビン・マイケル・リチャードソン
鎧を着た巨漢で、「俺は無敵のジャガーノートだ!」が口癖。スパイダーマンをやたらと敵視する第14話「科学フェアの災難」でスパイダーマンらと対峙した際、オーサム・アンドロイドの被害に遭う。
声 - 梅津秀行 / 英 - ジェフ・ベネット
エルダーズ・オブ・ユニバースの一人。コレクターの兄であり、勝負事に執着を持つ。
弟の収集したヴィランを用いたゲームをする際、メイおばさんを含む一般市民を人質に取ったため、スパイダーマンの怒りを買った。
声 - / 英:マリア・キャナル・バレーラ
マイルズの母。
声 - / 英:ジョン・ディマジオ
熊のようなアーマーを装着した悪党で、第35話「要塞ハウス」にて初登場。第69話「ブリトー入手作戦」では、ショッカー同様洗脳され操られていたところ、洗脳の解けたスクィレルガールに投げ飛ばされた。
Clubのデビッド・シムズは、第1話を「原作とは違う作品にしようとした結果、過剰なまでにいい加減で、説得力に欠けた駄作と化した」と評し、この番組の評価をCとした。その一方で彼は『邪悪な王 ドクター・ドゥーム』(原題:Doomed)の評価をC+とし、『ヴェノムの再来』(原題:Back in Black)の評価をB+とした。同じくA.V. Clubに所属するオリヴァー・サヴァは『寄生生物 ヴェノム』(Venom)の評価をB+とし、若い読者に向けてマーベル漫画への入門編にしようとした結果アルティメットのコミックスとも映画とも異なる内容になったとし、Synergy Spider-Manに改題すべきだと話した 。その一方で彼は『ロキと霜の巨人』(原題:Field Trip)の評価をA-とした。
Common Sense Media のエミリー・アシュビーは5つ星満点中4つ星をつけ、アクションとユーモアが番組の根幹をなしているが、ピーターが指導者のもとで仲間たちとともに大人になることとそれに伴う責任について学ぶという姿勢は、子どもたちの印象に残るであろうと評した。
クレイブンの罠にかかって倒される。
第93話、第94話、第95話(第91話、第92話、第93話)「カーネイジの脅威」ではカーネイジによって取り憑かれておりキャプテンアメリカやスパイダーマンを苦戦させたが、後から駆けつけたホワイトダガーの活躍で正気を取り戻すもそのまま寝てしまった。
ハルク役を演じているタタショアはディズニーXDの舞台裏インタビューで、バナーの人格がハルクと同化した結果、ハルクが落ち着いた性格になったと話している。また、ハルク自身は子供じみた性格ながらも、善悪の区別はついている。なお、原語版での一人称はハルクだが、日本語版での一人称は俺。
スパイダーマン・ノワールのいる世界では、ミスター・フィクシットという名前でギャングとして活動していたが、仲間想いで優しさを見せる一面もあり、最終的には事情を知ったスパイダーマン・ノワールと和解し、協力関係を築いた。
声 - 阪口周平 / 英:グラント・ジョージ
アベンジャーズの一員で、「アントマン」にて初登場を果たした。通常の強さを保ったまま身体のサイズを変えられるほか、アリを操ることも可能。ドクター・ストレンジのファン。