SMILEVIDEO
ニコニコ動画のアカウントを取得している利用者のみが動画のアップロードが可能となる。アップロード可能な動画形式としてはMPEG-1、MPEG-2、MPEG-4、Windows Media Video、DivX(及び互換の形式)、Flash Video、swf形式(ニコニコムービーメーカー経由)がある。
Flash Videoの場合、一般会員は1ファイル40MB以下かつビットレート600kbps以下、動画のコーデックにはH.263、On2 VP6、H.264を用いたものであれば、特に再エンコードされることなくニコニコ動画において閲覧できる。 その他の形式においては1ファイル100MB以下であればよい。こちらはアップロードされた動画をエンコードした上で、ニコニコ動画において閲覧できる。
1利用者がアップロードできる動画の総容量は、一般ユーザの場合は2GBだが、ニコニコプレミアム会員(ニコニコ動画の有料会員)では8GBとなり、更に容量が毎月大きくなる(1ヶ月ごとに1GB増える)ことでほぼ無制限となった。また、Flash Videoのビットレートが無制限、ファイルサイズが100MBまで許容される。。
また、2008年3月5日のニコニコ動画(SP1)の開始と同時に、ニコニコプレミアム会員に限り、動画のコーデックにH.264、音声のコーデックにAACを用いたMP4コンテナをFlash Videoとしてアップロードできるようになった。 その後、ニコニコ動画(夏)になると一般会員も、H.264形式の動画が投稿できるようになった(ただし、プレミアム会員の場合ビットレートが無制限なのに対し、一般会員は600kbpsである。)。