必殺! 三味線屋・勇次
おとよ(上総屋・おゆき) - 天海祐希
富喜屋・藤兵衛 - 中尾彬
火盗改方・坂巻重次郎 - 石橋蓮司
内田平内(仕事人) - 清水健太郎
叶屋おせき - 研ナオコ
岩松平吾郎 - 成瀬正孝
浜町の浅吉 - 本田博太郎
お千代・お駒 - ウォーターハウス美希・亜耶
丈吉 - 三国一夫
花屋 - 野村沙知代
上総屋・九兵衛 - 入川保則
烏山の検校 - 火野正平
才蔵 - 金山一彦
そこで才蔵は、今も富喜屋が回春丸を売さばき、それによって廃人となった患者を富喜屋が隠しているという事実を知る。
また、富喜屋は回春丸の製法を聞き出すために、上総屋・九兵衛を捕らえて監禁していた。真相の暴露を才蔵に託した九兵衛は自害し、富喜屋の手下に見つかって逃げ出した才蔵もまた、偶然居合わせた勇次にことの真相を告げた後、死んでしまう。
おとよの父・九兵衛の死と富喜屋の悪行を目にした弥助は、勇次に富喜屋一味の仕置を持ちかけるが、おとよと将来を誓い合う弥助の心情を察する勇次は、仕事に私情を挿めば目が曇り、目が曇れば必ず仕損じると、仕事を断わる。
勇次の言葉に一旦は納得した弥助であったが、鳥越の岩松殺しの仕事人・内田平内を仲間にして、富喜屋に乗り込む。が、的を目の前にしながらも、火盗改方・坂巻重次郎の奸計にはまり、捕らえられた弥助は仕事人の恐ろしさを悪人共に告げ、自害して果てる。
さらし首となった弥助の首の前には、悲しみに佇むおとよと、二人の無念を受け止める、勇次ら仕事人たちの姿があった。
藤田が演じたかつての上方の仕事人の元締だった大道芸人・伝兵衛は、殺し道具に吹き矢と匕首を用いているが、当初はカーリング爆弾を予定していた。これは陶器に火薬を仕込み、床に油を垂らしてカーリングの要領で相手を爆死させるというものであったが、撮影直前に変更となり、最後まで使用されることはなかった(実際、小道具まで製作されスタジオに準備されていた)。また、伝兵衛が勇次に「八丁堀の旦那はん(中村主水)はどないしはったんや?」と尋ね、死んだと聞かされて「はぁ、そらご愁傷さまで...」というマニア心理をくすぐる場面も撮影されたが、劇場公開時にはカットされた。
伝兵衛が連れ子であるお千代とお駒の2人に稼いだ金をせびられる姿は藤田が演じた中村主水が姑・嫁のせん・りつにいびられる姿に近いものがある。
当初、監督は初期から中期のテレビシリーズに演出で参加し、数々の名作を放った蔵原惟繕が予定されていたが、撮影の開始が遅れ、蔵原が次の作品に取り掛からなければならなくなったため、やむなく降板。代わってシリーズのメインカメラマン(撮影技師)を務めた石原興が『必殺始末人』に続いてメガホンを取った。
しかし、興行としては惨敗に終わった。