イザベラ・スチュワート・ガードナー
建物の準備が整った後、ガードナーは1年かけて、自分の美学にしたがってコレクションを丁寧に設置した。さまざまな時代や文化から集められた折衷的なギャラリー・インスタレーション、絵画、彫刻、テキスタイル、家具が組み合わさって、豊かで複雑、そしてユニークな物語を生み出している。ティツィアーノの部屋では、ティツィアーノの傑作「エウロパの陵辱」(1561-1562)が、チャールズ・フレデリック・ワースがデザインしたイザベラ・スチュワート・ガードナーのガウンから切り取った淡いグリーンのシルクの上に吊るされている。コレクションには、同じような物語、親密な描写、発見が数多く存在する。
1903年1月1日、ボストン交響楽団のメンバーによる演奏とシャンパンやドーナツなどのメニューが用意されたグランドオープニングの祝賀会で、美術館は内輪でオープンした。その数ヵ月後には一般公開され、古代エジプトからマティスまで、さまざまな絵画、デッサン、家具などが展示された。
現在も、床から天井まで、さまざまなテキスタイル、家具、絵画が配置されている。