おはスタ
小学館の雑誌と連動した企画もある。子ども向け番組であることから、商品について「発売」「購入」という言葉を使うことは禁止されており、「登場」「ゲット」と表現している。
また、小学館でない出版社のアニメ・漫画のキャラクター(例:『ケロロ軍曹』(角川書店)。ただし、この時期は映画の制作元である角川ヘラルド映画がスポンサーに入っていた)などが出演するケースもある。さらに、2009年から不定期に集英社の少女漫画雑誌『りぼん』の連載漫画との連動企画を実施している。
以前は第3スタジオから生放送していた。また2000年2月 - 3月は通常スタジオの改装工事に伴い、天王洲スタジオから生放送したことがある。
2007年12月頃から一時的にCM後毎回現在の時刻を読み上げていた時期もあったが、現在も不定期に行われている。
2011年10月から2013年6月までおよび2014年以降の4月初旬頃から5月下旬ごろまでオープニングCGが導入していた(例えば、12月1日から25日まではクリスマスバージョン)。
放送終了直前には、以下のフレーズを言っている。
終了後、本来の久住小春として火曜日にレギュラー出演。鉄拳はしばらく混同して「きらりちゃん」と何度も呼んでいた。
観月ひかる(萩原舞(°C-ute))
雪野のえる(北原沙弥香)
花咲こべに(吉川友)
ミルフィスト☆ナナリン(不明)
『きらりん☆ミルフィーカード』関連のコーナーに出演した。
UT
月曜日のなわとび「ファルコンチャレンジ」のコーナー。
信岡沙希重
陸上短距離選手。春や秋などの運動会が行われる時期にVTRで出演。早く走れるようになるための練習法を伝授した。
武田双雲 - 2007年 - 2011年4月8日
『かっこいいっ書』に登場。2008・2011年4月はスタジオに飾るメッセージを書道で書いていた。
網島ケイタ(窪田正孝)
毎週水曜日にフォンブレイバー7と共に『ケータイ捜査官7』の宣伝に出演した。
Dr.ゼル(武田論) - 2009年4月 - 2010年3月
『化石練成ゼルゲノム』関連のコーナーに出演した。
ミロマン(初代)(花来谷慎) - 2009年4月 - 12月
本名:大麦三郎。2010年5月から7月まで出演していたミロマンはキャラクターデザインと演じる俳優が違うが、呼び名の区別はない。
ミロマン(2代目)(不明) - 2010年5月 - 7月(実写)、10月 - 12月(CG)
番組スポンサーであったネスレの麦芽飲料「ミロ」の宣伝で出演するヒーロー。「ミロ★シェイクダンス」を踊った。
北神未海(小川真奈) - 2009年5月18日 - 2011年6月10日
『極上!!めちゃモテ委員長』の主題歌を歌うためにMM学園 合唱部とともに登場した。
北神未海(小川真奈) - 2011年6月13日より出演
シソンヌ ハセガワムシ(長谷川忍)・ナンツッテールーノ君(じろう)
2700 ヤソシマムシ(八十島弘行(現・八十島))・ツネムシ(ツネ)
COWCOW タダムシ(多田健二)・ヤマダムシ(山田與志(現・善し)) - アニメとしても登場した。
MCお肉ちゃん(ミサイルマン西代洋)
YU先生(L.A.F.U)
エミリムシ(エミリ)
きほ君
ムッシー - 詳細はムッシーの項を参照。
やまちゃん(山寺宏一) - 1997年10月1日 - 2016年4月1日
1997年番組開始時からのメインMC。その経緯から同局制作の劇場版ポケットモンスターシリーズでは本業の声優を行っている。2010年2月から2011年4月1日まで「メインMCステーション(司会者席)」を使って、2011年4月4日から同年9月30日まで、専用のセグウェイに乗って進行を進めた。2011年10月3日のリニューアル以降は、学校が舞台という設定になったことからそこの校長先生になっており、2013年3月29日まで、毎回変わる担任の先生の声も担当していた。2013年4月1日から夏休みまで大校長になり、「大校長室」から登場するようになっていた。
18年半にわたりMCを務めてきたが、「これからは若い世代に任せたい」と自らの意思により、2016年4月1日をもってMCを卒業した。
卒業後は「おはスタスーパーレジェンド」あるいは「Mr.おはスタ」として、2016年6月29日の『ポケモン・ザ・ムービーXY&Z ボルケニオンと機巧のマギアナ』の特集で卒業後、初のVTR出演、同宣伝で2016年7月13日に3ヶ月ぶりに生出演し、2019年7月11日・12日は『劇場版ポケットモンスター ミュウツーの逆襲 EVOLUTION』の公開スペシャルとして、3年ぶりにレイモンドとともに生出演した。2020年10月2日には、はなちゃんのMC卒業とスバにぃのMC就任を見届けるためにゲスト出演した。
レイモンド(レイモンド・ジョンソン) - 1997年10月 - 2000年3月
ちゃおガール:毎月3日前後に『ちゃお』の宣伝に登場。2015年5月1日、6月3日はみれな(黒澤美澪奈)が、同年7月3日から2017年4月3日まではゆい(加藤結)が、同年4月28日にはゆいゆい(植村友結)が、同年6月2日、7月3日はゆづみ(新谷ゆづみ)が、同年9月1日、10月3日はくるみ(宮田くるみ)が出演。11月から2018年9月までおはガールとなったくるみがちゃおガールとして出演していた。(2015年5月1日 - )
1年コロ組担任 スズキ先生:毎月21日前後に『コロコロイチバン!』の宣伝に登場。(2017年5月 - )
デュエマ生徒会長 チアリ(鈴木智有):木曜日のコーナー『ドギラゴン桜』→『桜本先生のデュエゼミ』→『デュエマ開封革命』に出演。(2019年4月17日 - 2021年2月11日、2022年5月26日 - )
桜本健三(都留拓也(ラパルフェ)):木曜日のコーナー『ドギラゴン桜』→『桜本先生のデュエゼミ』→『デュエマ開封革命』に出演。(2021年12月9日 - )
アルティメッ・トイデ:毎月4日前後に『最強ジャンプ』の宣伝に登場。(2022年4月4日 - )
コロコロ二刀流コーマ:毎月15日前後に『月刊コロコロコミック』の宣伝に登場。(2022年10月14日 - )
絶叫学級(2011年6月21日 - 7月12日、2012年10月23日 - 11月6日、毎週火曜日のみ)
流れ星レンズ(2012年10月2日 - 16日、毎週火曜日のみ)
CRASH!(2012年11月13日 - 27日、毎週火曜日のみ)
ひよ恋(2012年12月4日 - 18日、毎週火曜日のみ)
シュガー*ソルジャー(2014年1月14日 - 28日、毎週火曜日のみ)
ロマンチカクロック(2014年2月4日 - 25日、毎週火曜日のみ)
女の子って。(2015年2月5日 - 26日、毎週火曜日のみ)
つばさとホタル(2015年3月6日 - 27日、2016年5月10日 - 24日、毎週火曜日のみ)
猫田のことが気になって仕方ない。(2015年4月7日 - 28日、毎週火曜日のみ)
なないろ革命(2015年10月6日 - 20日、毎週火曜日のみ)
絶叫学級 転生(2016年4月26日、5月31日)
おはスタ645ランド スーパー園長(村上純(しずる)) ダンボールG(池田一真(現・KAƵMA)(しずる)) トンデレラ姫(近藤春菜(ハリセンボン)) マウンテンガリラ(箕輪はるか(ハリセンボン)) 甘栗ちゃん(小池里奈) スーパー甘栗ちゃん(馬込明美(呑娘。)) 花栗ちゃん(山田花子) ダンボールC(池田一真(しずる)) アトラクションのキャラクター 声 - 高塚正也、野村唯、タネンチュ国場、あげは・野絵、ラフレクラン・きょん、RED×BLUE・ミカイル レイザーラモンHG画伯(HG(レイザーラモン)) カナリア ボン溝黒画伯(ボン溝黒(現・ボンざわーるど)(カナリア)) ネゴシックス画伯(ネゴシックス) バッファロー吾郎 竹若画伯(竹若元博(バッファロー吾郎)) タカダ・コーポレーション 大貫画伯(タカダ・コーポレーション・大貫幹枝) Dr.
ギャグムシ サワヤカブト(村上純(しずる)) バカマキリ(池田一真(現・KAƵMA)(しずる)) フトッチョウチョ(近藤春菜(ハリセンボン)) ガリッチョウチョ(箕輪はるか(ハリセンボン)) サナキング(高塚正也) アヘキング(間寛平) アヘクイーン(信太真妃) トンボーカル(エハラマサヒロ) ケブカナブン(ワッキー(ペナルティ)) イナゴリラ(原西孝幸(FUJIWARA)) キンニクモ(八木真澄(サバンナ)) ウルセミ(多田健二(COWCOW)) ウザセミ(山田與志(現・善し)(COWCOW)) ニコニコオロギ(佐久間一行) ツルピカホタル(ハブ(現・歩子)(Bコース)) オタコオロギ(おたこぷー(プー&ムー)) ニクダンゴムシ(大地洋輔(ダイノジ)) アメンボーン(ボン溝黒(現・ボンざわーるど)(カナリア)) ネゴネゴヤゴ(ネゴシックス) ギュンギュンゼミ(岩橋良昌(プラスマイナス)) シャウトンボ(熊谷岳大(現・熊谷茶)(ガリットチュウ)) カイリキリギリス(福島善成(ガリットチュウ)) アキヤンマ(秋山竜次(ロバート)) リズムシ2700(2700) ギターモスキートン1号、2号(アップダウン) アベハチョウ(阿部浩貴(アップダウン)) ウザバッタ(あべこうじ) ブサイクモ(マンボウやしろ) カミナガバチ(鈴木Q太郎(ハイキングウォーキング)) ツクツクショウジ(庄司智春(品川庄司))