ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド
NADはヌクレオチド骨格であるために、ヌクレオチド合成系を基本とするがニコチンアミドの付加については、
ニコチンアミドヌクレオチド + ATP → NAD + ピロリン酸 (PPi)
ニコチンアデニンジヌクレオチドのアミド化(ATP、グルタミン存在下)
の二つの経路が考えられる。ニコチンアミド自体はビタミンB群のナイアシンを原料としている。
酸化還元電位 (Eo') は-0.32Vである。
アデニン塩基を含むことから、NADとNADHはともに強いUV吸収を示す。NADの吸収ピークは259 nmで、モル吸光係数は16,900 Mcmである。一方、還元型のNADHのみ、339 nmに第2の吸収ピークを持ち、そのモル吸光係数は6,220 Mcmである。この第2のピークは酸化型のNADには存在しないため、分光光度計を用い波長340nmあるいは339nmの吸光度を測定することでNADとNADHの間の酸化還元反応を簡単に測定することができる。脱水素酵素活性測定にはこの方法が良く用いられている。
NADとNADHは蛍光にも差が存在している。水溶液中のNADHは460 nmをピークとする寿命0.4 nsの蛍光を発するが、NADは蛍光を発しない。NADHの蛍光特性はタンパク質に結合すると変化するため、これを用いて解離定数を測定することができる。また蛍光顕微鏡を使って生細胞の酸化還元状態を測定することも可能である。