エツィオ・アウディトーレ
ヴェネツィアでのエツィオの活動を支援する。
ローザ - ヴェネツィアのスリ集団のメンバー。エツィオに二段跳びの技術を教える。
バルトロメオ・ダルヴィアーノ - 傭兵団を率いる隊長。豪快な熱血漢で、ビアンカと名付けた大剣を振るう。
パンタシレア・バリオーニ - バルトロメオの妻。
ロドリゴ・ボルジア - エツィオとその家族が巻き込まれた陰謀の首謀者。テンプル騎士団のイタリア管区長であり、作中にてローマ教皇アレクサンデル6世となる。
チェーザレ・ボルジア - ロドリゴ・ボルジアの実子でテンプル騎士団の総長。多くの才能と実力を有し、マキャヴェリからは覇王の器と評されている。
クリスティーナ・ヴェスプッチ - アメリゴ・ヴェスプッチのいとこ。エツィオの恋人。
ソフィア・サルトル - コンスタンティノープルで書店を営む女性。後に結婚し、2人の息子を儲ける。
シャオ・ユン - 中国からやって来たアサシン教団の生き残り。彼女の訓練を行う。