thumb 溴甲烷和氫氧根陰離子之間的雙分子親核取代 SN2 反應 400px 過渡狀態理論 （Transition state theory，TST）解釋基元化學反應的反應速率。該理論假設在反應物和活化的過渡態絡合物之間有一種特殊的化學平衡（準平衡）。International Union of Pure and Applied Chemistry IUPAC Transition State Theory httpgoldbookiupacorgT06470html accessed November 23 2008 TST 最初用於定性地解釋化學反應是怎麼發生的。TST 就其計算絕對反應速率常數的本來目的來說不算十分成功。因為，絕對反應速率常數的計算需要精確的知道勢能面。Truhlar D G Garrett B C Klippenstein S J Current Status of TransitionState Theory The Journal of physical chemistry 1996 100 31 1277112800 但是，如果一個特定的反應的速率常數可以用經驗的方法測定的話，該理論能夠成功地計算了標準活化焓（ΔH），標準活化熵（ΔS），和標準活化吉布斯自由能（ΔG）。（所表示的是在過渡狀態時所感興趣的值。） 這一理論在 1935 年由普林斯頓大學的亨利艾林和曼徹斯特大學的和邁克爾波拉尼同時提出的。Laidler K King C Development of transitionstate theory The Journal of physical chemistry 1983 87 15 2657Laidler K King C A lifetime of transitionstate theory The chemical intelligencer 1998 4 3 39TST 也叫 活化絡合物理論、絕對速率理論 和 絕對反應速率理論 Laidler K J Theories of Chemical Reaction Rates McGrawHill Series in Advanced Chemistry 1969 p 234 pp。 在 TST 理論出現之前，人們廣泛地使用阿瑞尼士速率定律確定反應能壘的能量。阿倫尼烏斯方程是從經驗推導而來，忽視了對機理的考慮。比如，沒有考慮到從反應物到產物的轉化是涉及到一個還是幾個反應中間體。Eric V Anslyn and Dennis A Dougherty Transition State Theory and Related Topics In Modern Physical Organic Chemistry University Science Books 2006 pp 365373 因而，需要進一步發展，以瞭解和這一定律相關聯的兩個引數，指前因子（the preexponential factor ）（A）和活化能（Ea）。產生了艾林方程的 TST 理論成功地解決了這兩個問題。然而，從阿倫尼烏斯方程的發表（1889）到從 TST 推匯出艾林方程（1935）整整經過了 46 年。在這 46 年裡，許多科學家和研究人員對該理論的發展做出了顯著的貢獻。 理論 過渡狀態理論的基礎思想如下： 透過研究建立在勢能平面上的馬鞍點處的活化絡合物來研究反應速率。而該活化絡合物是怎樣形成的細節並不重要。 活化絡合物與反應物分子處於特定的平衡（準平衡）。 活化絡合物可以轉化成不同的產物，而這種轉化速率可以用動力學理論計算。 發展 在 TST 的發展過程中，主要採取瞭如下三種方法。 熱力學處理 在 1884 年，雅各布斯亨裡克斯範托夫提出了描述溫度對可逆反應平衡常數的依賴關係的範特霍夫方程： A B frac dln KdT frac Delta URT2 其中，ΔU 是內能的變化量，K 是反應的平衡常數，R 是普適氣體常數，而 T 是熱力學溫度。基於實驗工作，1889 年，斯凡特阿瑞尼士提出了一個相似的對於反應常數的表示式： frac dln kdT frac Delta ERT2 這個表示式的積分形式，引出了阿倫尼烏斯方程： k Aefrac ERT A 叫做頻率因子（現在叫指前因子），E 被看作為活化能。到 20 世紀初，許多人接受了阿倫尼烏斯方程，但是，A 和 E 的物理學解釋仍還比較模糊。這就導致了許多化學動力學領域的研究人員提出了關於化學反應如何進行的不同的理論，主要試圖將 A 和 E 與直接負責化學反應的分子熱運動相關聯。 1910 年，（Rene Marcelin）引入了標準吉布斯活化能。他的方程可寫成： kproptoexpleft frac Deltaddagger GominusRTright 在大約與熱內馬塞林同時研究他這個公式的同時，三位荷蘭化學家、、和首次提出了標準活化熵和標準活化焓的概念。他們提出的速率常數方程如下： kproptoexpleft frac Deltaddagger SominusRrightexpleft frac Deltaddagger HominusRTright 然而，常數的性質仍不清楚。 動力學理論處理 上世紀初，和基於氣體的動力學理論，用碰撞理論研究反應速率。碰撞理論將反應中的分子處理成相互碰撞的硬質小球；該理論忽視熵變。 Lewis 用他的這種處理跟蹤反應並和實驗結果取得了很好的一致性。 2HI H2 I2 然而，此後當這種處理方法用於其他反應時，在理論和實驗結果上出現了差異性。 統計熱力學處理 在 TST 理論的發展過程中，統計力學扮演了非常重要的角色。然而，如果考慮到在 19 世紀中葉，麥克斯韋、玻爾茲曼和就已經發表了幾篇用分子動力學和分子速度的統計分佈的概念討論反應平衡和速率的幾篇論文這一事實的話，統計力學在發展 TST 方面的應用過程是非常慢的。 直到 1912 年當法國化學家 A Berthoud 才使用麥克斯韋 玻爾茲曼分佈定律，獲得了對速度常數的表達： frac dln kdT frac abTRT2 其中 a 和 b 是與能量項相關的常數。 兩年以後，Marcelin 透過把化學反應過程處理成一個點在項空間的運動對 TST 理論做出了關鍵性的貢獻。然後，他使用吉布斯的統計力學過程取得了一個相似於他早年已經從熱力學的考慮取得的方程相似的表達。 1915 年，英國物理學家對 TST 做出了另一關鍵性的貢獻。基於其統計分析他得出結論反應速率常數正比於 臨界增量。 Tolman 進一步發展了他的觀點。1919 年，奧地利物理學家將統計力學用於平衡常數並將動力學理論用於可逆反應的速率常數，k1 對於雙原子分子的可逆分解： mathrm AB overset k_1underset k_1begin smallmatrixdisplaystylelongrightarrow displaystylelongleftarrow end smallmatrix mathrm A mathrm B 他取得了對於正反應的速率常數的方程： k_1 frac k_mathrm B Thleft 1expleft frac hnuk_BTrightrightexpleft frac EominusRTright 其中 textstyle Eominus 是在絕對零度時反應的離解能，kB 是波爾茲曼常數，h 是普朗克常數，T 是熱力學溫度，υ 是鍵的振動頻率。這個表述是非常重要的，因為是 kBTh 因子第一次出現在速率方程中，這個因子是 TST 至關重要的部分。 1920 年，美國化學家進一步發展了 Rice 關於臨界增量的概念。他得出結論一個反應的臨界增量（現在叫做活化能）等於所有經歷反應的分子的平均能量減去所有反應物分子的平均能量。 勢能面 在 TST 的發展過程中，勢能面的概念非常重要。這個理論的基礎是由 Marcelin 奠定的。他提出的理論認為：化學反應的程序應該被描述為在具有原子動量和距離兩個坐標的勢能面上的一個點。 1931 年，亨利艾林和邁克爾波拉尼構造了下列反應的勢能面。這個面是一個基於量子力學原理以及振動頻率和離解能的實驗資料的三維面。 H H2 H2 H 在艾林 和 波拉尼做出這一貢獻後的一年，H Pelzer and Eugene Wigner 透過跟蹤一個勢能面上的反應過程做出了一項重大的貢獻。他們的工作的重要性在於是他們首次討論了勢能面上的 山坳 或 馬鞍 點問題。他們的結論是反應速率由體系透過山坳的運動來決定。 艾林方程的推導 亨利艾林、邁克爾波拉尼和 Evans 所加入的唯一重要特點是活化絡合物與反應物處於準平衡的概念。反應速率正比於這些絡合物的濃度乘以它們轉化成產物的頻率 kBTh。 準平衡態假設 Laidler K J Theories of Chemical Reaction Rates McGrawHill Series in Advanced Chemistry 1969 p 234 pp 應該注意的是準平衡態不同於經典的化學平衡，但是可以用同樣的熱力學處理方法描述。考慮如下反應： mathrm A mathrm B rightleftharpoons mathrm ABddagger to mathrm P 這裡體系中所有物種，包括活化絡合物，間達到了完全的平衡，AB。使用統計熱力學，AB的濃度可計算成以 A 和 B 的濃度所表達的濃度。 TST 假設甚至在反應物和產物未相互達到平衡的時候，活化絡合物與反應物仍處於準平衡態。如圖 2 所示，在任何時刻，都將有少量的活化絡合物。其中一些是是剛剛由反應物分子變來的，表達成 ABl（由於它們正在從左往右運動）。另外的那些是剛剛從產物變來的，ABr。由於體系處於完全平衡態，ABl 的濃度與 ABr相等，以至每種的濃度都等於活化絡合物的總濃度的一半： AB_mathrm rddagger frac 12ABddagger 和 AB_mathrm lddagger frac 12ABddagger 如果產物分子突然間從反應體系中拿掉，這些開始作為產物 ABr 的活化絡合物的流動將停止；然而，仍然有一個從左向右的流動。因而，假設為從左到右的流動速率不受產物移掉的影響；換句話說，兩個方向的流動假設是相互獨立的。 在 TST 中，重要的是要理解到當說到活化絡合物與反應物平衡，僅僅是指那些剛剛從反應物分子變來的活化絡合物 ABl 。 對於該準平衡態的平衡常數 K可以寫成： Kddaggerominus frac ABddaggerAB 這樣，過渡態 AB的濃度是 mathrm ABddagger Kddaggerominusmathrm Amathrm B 因而，對產物產生的速率方程為 frac d Pdt kddaggerominusmathrm ABDagger kddagger KDaggerAB k AB 這裡速率常數 k 表示為 k kDagger KDagger k 直接正比於對應於活化絡合物向產物轉化的振動模型的振動頻率；這個振動模式的頻率為 ν。不是每一次振動都必然導致產物的生成，因而，需要一個叫做傳輸係數（transmission coefficient）的比例常數 κ 的引入，來考慮這種效應。所以，k可以被重寫成 kDagger kappanu 對於平衡常數 K 統計力學於溫度的依賴關係的表述： KDagger frac k_BThnu KDagger KDagger frac k_BThnu KDagger 其中 KDagger efrac Delta GDaggerRT 將新的對 k 和 K的表述結合起來，可以寫出一個新的速率常數的表示式，如下： k kDagger KDagger kappafrac k_BTh efrac Delta GDaggerRT 由於 ΔG ΔH TΔS，可以將速率常數的表示式擴充，得到艾林方程： k kappafrac k_BTh efrac Delta SDaggerR efrac Delta HDaggerRT TST 的速率常數表示式可以用於計算 ΔG、ΔH、ΔS和甚至 ΔV（用速率資料表達的（活化體積）。 過渡態理論的侷限性 總的說來，TST 已經給研究者提供了一個瞭解化學反應是如何發生的概念基礎。儘管該理論被廣泛地接收，但它依然存在著侷限性。 例如，該理論假設過渡結構走向勢能面的下坡，它將導致一種產物分子（或一組產物），然而，在一些反應中，過渡態可以以某種方式跨過勢能面，導致用過渡態理論一種未曾預料的產物的選擇。（這種反應的一個例子是由 Anslyn and Dougherty 提供的重氮二環戊烷類的熱分解反應）。 過渡態理論也假定原子核的行為符合經典力學理論的假設艾林，H Journal of Chemical Physics 1935 3 107115。即假設只有能量足夠的原子或分子碰撞才能形成過渡態，否則，不會發反應。然而，根據量子力學，對於任何有限能量的能壘，都有一些粒子仍然能夠穿過能壘的可能性。結合到化學反應這就意味著甚至那些不具備足夠能量穿過勢能面的分子間的碰撞也有機會發生反應。Masel R Principles of Adsorption and Reactions on Solid Surfaces Wiley New York 1996 當這對於高活化能的反應這種效果常常被人們忽略的同時，它對相對低能壘的反應則成為一種重要的現象，因為穿過活化能壘的機率隨著活化能的降低而升高。 過渡態理論不適用於高溫反應。該理論假設反應體系透過勢能面上最低的馬鞍點。回想一下，最高的馬鞍點叫做過渡態。該描述與相對低溫發生的反應一致，然而，在高溫下分子普遍具有較高能量的振動模式：它們的運動成為更復雜碰撞可能導致遠離由過渡態能量所預期的過渡態。這個對過渡態理論的偏離甚至在雙原子氫和氫自由基的交換反應中可以觀察到。Pineda J R Schwartz S D Philosophical Transactions of the Royal Society B 2006 361 14331438 由於存在這些侷限性，有人建議了幾種對過渡態理論的修正。下面將做一個簡要的討論。 廣義的過渡狀態理論 任何形式的 TST，比如微典型變分 TST （microcanonical variational TST）、典型變分 TST （canonical variational TST）、和改良的典型變分 TST （improved canonical variational TST），其中，過渡態不一定位於馬鞍點，被叫做廣義的過渡態理論。 微典型變分 TST 過渡態理論的一個發展，其中，對分割面進行變分處理，將針對固定的能量計算的速率最小化。在微典型變分處理下取得的速率表示式可以對能量積分，在所有能態中考慮統計分佈就能得到典型變分，或熱速率。 典型變分 TST 典型變分 TST 是過渡態理論的一個發展，其中對分割面進行變分處理，在給定的溫度下將速率常數最小化。 改良的典型變分 TST 是對變分過渡態理論的一項改良，其中，對於域值能量以下的能量，分割面的位置取微典型變分閾值能量的位置。這樣就迫使如果處於閾值能量一下的能量分佈的速率常數為零。然後選擇一個折衷的分割平面使具有較高能量的反應物所產生的速率常數最小化。 TST 的應用：酶反應 同樣反應條件下，同一個化學反應，有沒有酶催化其反應速率相差巨大。每個催化事件至少包括三步。所有的催化步驟都發生在幾毫秒中，毫秒數量級的基元反應速率，是酶促反應的特點。根據過渡狀態理論，催化迴圈的最小部分花在最重要一步，即過渡態。絕對反應速率理論定義過渡態的建議為：在反應坐標中的一個獨特的、決定反應速率的物種。此後不久，萊納斯鮑林（Linus Pauling）指出，酶的強有力的催化作用可以用非常緊密地結合於過渡態物種來解釋。Pauling L American Scienist 1948 36 5058 因為反應速率於在過渡態絡合物中的反應物部分成正比，因此，他建議酶作用是增加反應性物種的濃度。Radzicka A Wolfenden R Science 1995 267 9093 因為，酶典型地可以將反應速率增加至非催化反應的 10101015 倍，並且，Michaelis 絡合物對分解反應常數的範圍是：103106 M。因而，他們提出將過渡態絡合物與 10141023 M 範圍的分解反應常數相結合。 該建議被在 Chapel Hill 的被卡羅林納大學的 Wolfenden 極其同所完善。他們假設由酶造成的速率增高正比於酶對相對於 Michaelis 絡合物的過渡態結構的親和力。隨著底物從 Michaelis 絡合物朝著產物進展，在底物的電子分佈方面發生酶誘導的化學過程。 酶透過質子化改變底物的電子結構、電子轉移、集合扭曲、疏水分配、和與路易斯酸堿的相互作用。這些是透過依次地蛋白質和底物的構象變化而完成的。當單個的微弱的力量組合起來，集中在底物上這些單獨的能量的總和導致了一個巨大的力量，能夠重新定位成鍵電子，引起鍵的斷裂和鍵的形成。很像過渡態結構的類似物因而應可作為已知的最強有力的該酶的非共價抑制劑而起到對該酶的抑制作用，甚至，如果僅僅一小部分過渡態能量該抑制劑被俘獲都可明顯見到抑制效應。 所有的化學轉化都透過一個叫做過渡態的不穩定結構，過渡態在底物和產物的化學結構之間保持平衡。對於化學反應的過渡態人們認為有大約 1013 秒的壽命。在數量級上是一個單鍵振動的時間。沒有物理的和譜學的方法可以直接觀察酶催化反應的過渡態的結構，然而，過渡態的結構是瞭解酶催化反應的核心。因為酶的作用是降低化學反應的活化能。 現在人們普遍接收的觀點是：酶的功能是穩定居於反應物和產物之間的過渡態，並且，因而，人們料想它也會於任何與該過渡態在結構上相似的該酶的抑制劑緊密結合。底物和產物經常參與幾個酶催化反應，然而，過渡態只能傾向於一種參與的酶的特徵，這樣一種抑制劑是針對一種特定的酶的。許多過渡態抑制劑的確認支援酶催化的過渡態穩定化假設。 目前已知有大量的酶與過渡態類似物相互作用，其中大多數已經被設計用於目標酶的抑制。例子包括：HIV1 戴白酶、消旋酶類、β 內醯胺酶類、金屬蛋白酶類、環氧化酶類和許多其他的酶類。 嘌呤核苷磷酸化酶 嘌呤核苷磷酸化酶（Purine nucleoside phosphorylase，PNP）是一個與分解代謝和核苷酸再迴圈有關的酶。它也是開發治療白血病和自體免疫性疾病患者中 T 細胞凋亡的新治療藥物的目標。Ringia EAT Tyler PC Evans GB Furneaux RH Murkin AS Schramm VL Transition State Analogue Discrimination by Related Purine Nucleoside Phosphorylases Journal of American Chemical Society 2006 128 22 71267127 次黃嘌呤核苷、鳥嘌呤核苷、和 2 脫氧鳥嘌呤核苷是該酶的主要底物（圖 3 顯示一個代表性的 PNP 催化次黃嘌呤核苷底物的反應。） （Albert Einstein College of Medicine）的 及其同事已經確定了 PNP 的過渡態結構並且用它巧妙地開發了緊密結合過渡態的一系列類似物用以抑制這個酶。Miles RW Tyler PC Furneaux RH Bagdassarian CK Schramm VL Onethirdthesites transitionstate inhibitors for purine nucleoside phosphorylase Biochemistry 1998 37 24 861521PNP 的抑制劑非常像公認的該過渡態結構（見圖 4），該抑制劑具有幾處變化以使得該化合物比稍現即逝的過渡態物種更穩定。 PNP 過渡態結構包含在嘌呤環 N7 位上用於質子化的升高的 pKa。它作為氫鍵氫的提供者與側鏈上第 243 位上的天門冬氨酸殘基上的羰基氧形成氫鍵。在 immucillinH 上這個位置上用 9 脫氮雜嘌呤替代次黃嘌呤進行模擬。過渡態也在糖環上形成一個氧鎓離子，它由具有更穩定的核糖甙鍵亞氨基核糖醇部分提供。在過渡態中磷酸酯鍵與鍵的形成牽涉不多，因而，這一部分在設計類似物抑制劑時不考慮結構模擬。 過渡態類似物展示慢結合抑制物的性質，其中，第一部抑制物結合形成可逆絡合物 EI，然後，透過一個慢的構象改變導致一個非常穩定結合的 EI 絡合物。 E I overset k_1underset k_2begin smallmatrixdisplaystylelongrightarrow displaystylelongleftarrow end smallmatrix EI overset k_3underset k_4begin smallmatrixdisplaystylelongrightarrow displaystylelongleftarrow end smallmatrix EI K_I frac k_2k_1 and K_I frac K_Ik_4k_3k_4 immucillinH 結合的計量化學研究確定每個 PNP 三聚體與一個抑制劑分子相結合，而且，一個抑制劑分子就足夠對這個酶產生 KI 由對 immucillinH 的滴定確定，並且測定它對 PNP 最初速率 vo，並且該值為 41 nM，KI 是由同樣的速度測定計算而來的，但是用了第二穩態速率 vs 取代了初速率。第二穩態速率對應於當所有 E 已經形成 EI 的平衡時的穩態抑制速率。 抑制作用。此前，人們揭示 PNP 的全部催化活性每次是在分子的一個位置上進行，很像對於 F1ATP 合成酶那樣。人們還注意到在三個部位上全可以看到底物、產物、基態類似物的結合。因而，immucillinH stoichiometry 是抑制劑是模擬酶的過渡態的又一個線索。結構證據支援該過渡態類似物的一對三抑制作用，並且，所有基態類似物都顯示完全酶佔據的 immucillinH 計量化學。 來自於酶過渡態分析的 immucillinH 設計是開發具有藥理學活性的高親和力的酶抑制劑的強有力的方法。 注釋 參見 科廷哈米特定律 參考文獻 Laidler K King C Development of transitionstate theory The Journal of physical chemistry 1983 87 15 2657 Laidler K A lifetime of transitionstate theory The chemical intelligencer 1998 4 3 39 Eric V Anslyn Dennis A Doughtery Transition State Theory and Related Topics In Modern Physical Organic Chemistry University Science Books 2006 pp 365373 Schramm VL Enzymatic Transition States and Transition State Analog Design Annual Review of Biochemistry 1998 67 693720 Schramm VL Enzymatic Transition State Theory and Transition State Analogue Design Journal of Biological Chemistry 2007 282 39 2829728300 Radzicka A Woldenden R Transition State and MultisubstrateAnalog Inhibitors Methods in Enzymology 1995 249 284312 Cleland WW Isotope Effects Determination of Enzyme Transition State Structure Methods in Enzymology 1995 249 341373 外部連結 Simple application of TST Category 化學動力學 Category 化學理論