Nhuộm g ram là gì? Quy trình thực hiện và cách phân tích kết quả

Quy trình nhuộm g ram được xem là bước đầu tiên để có thông tin về loại vi khuẩn gây ra căn bệnh đó, sau đó các bác sĩ sẽ tiến hành nuôi cấy và định danh vi khuẩn để phân biệt cấu trúc và tính chất của vi khuẩn nhanh chóng và có cách điều trị hiệu quả các bệnh do nhóm vi khuẩn gây ra. Bài viết dưới đây sẽ cung cấp đến bạn đọc một số thông tin về thuật ngữ chuyên khoa này, mọi người cùng theo dõi nhé. Kỹ thuật nhuộm g ram là gì? Kỹ thuật nhuộm g ram được thực hiện dựa trên đặc tính lý hóa của thành tế bào (được lấy trên cả dịch cơ thể hoặc mẫu sinh thiết nghi ngờ nhiễm khuẩn), sau đó sẽ chia vi khuẩn thành 2 loại chính: và vi khuẩn g ram dương (+). Các loại thuốc cần sử dụng để thực hiện nhuộm g ram bao gồm: Dung dịch tím gen ti an, dung dịch lu go l, tẩy cồn a c e to ne và dung dịch đỏ f u ch sin. Phương pháp nhuộm g ram dùng để xác định nhóm vi khuẩn gây bệnh dựa vào mẫu sinh thiết hoặc dịch cơ thể Nguyên lý thực hiện kỹ thuật nhuộm g ram Lớp vách tế bào của 2 loại vi khuẩn sẽ quyết định đến tính chất bắt màu trong quá trình nhuộm, trong đó màu sắc của hai loại vi khuẩn này như sau: Vi khuẩn g ram âm: Màu hồng. Bên cạnh cấu trúc tế bào, mỗi loại sẽ có các đặc điểm riêng như sau. Bên cạnh cấu trúc tế bào, mỗi loại sẽ có các đặc điểm riêng như sau. Đặc điểm vi khuẩn g ram dương Vi khuẩn g ram (+) có vách tế bào p e p ti do g ly can dày, dạng lưới có độ bắt màu nhạy với thuốc nhuộm tím gen ti an tinh thể, tuy nhiên quá trình tẩy cồn sẽ khó hơn vi khuẩn g ram (-) hơn. Những vi khuẩn này sẽ được phân loại là vi khuẩn g ram dương như: Tụ cầu khuẩn, phế cầu khuẩn s. p ne u mo nia e Xác định vi khuẩn g ram dương và g ram âm dựa trên màu sắc của vách tế bào sau khi nhuộm g ram Đặc điểm vi khuẩn g ram âm Ngược lại với vi khuẩn g ram (+), lớp vách của vi khuẩn g ram (-) sẽ dày hơn và có thêm lớp li p o p o ly sa c cha ri de bên ngoài. Do đó ở bước tẩy cồn có thể hòa tan được lớp màng, nên nó không giữ được màu tím của thuốc nhuộm mà sẽ bắt màu thuốc nhuộm dung dịch f u s hin kiềm, có màu đỏ hoặc hồng. Các vi khuẩn bắt màu g ram âm phổ biến như: Vi khuẩn gây, E. co li, lậu cầu, não mô cầu,... 5 bước trong quy trình nhuộm g ram Quy trình nhuộm g ram sẽ gồm các bước sau đây, trong đó bước tẩy màu giữ vai trò quan trọng có sự ảnh hưởng đến kết quả. Dàn đều dịch cơ thể hoặc mẫu sinh thiết nghi ngờ nhiễm khuẩn lên lam kính sạch. Cố định mẫu bệnh phẩm bằng cách hơ trên ngọn lửa đèn cồn và để nguội. Cố định mẫu bệnh phẩm bằng cách hơ trên ngọn lửa đèn cồn và để nguội. Thực hiện 4 bước nhuộm quan trọng: Đầu tiên cần nhuộm tất cả vi khuẩn thành màu tím, bằng cách phủ dung dịch tím gen ti an và để khoảng 30 giây sau đó rửa dưới vòi nước chảy nhẹ. Tiếp theo cần phân loại vi khuẩn đậm hay nhạt bằng cách phủ dung dịch lu go l để cố định màu, để nguyên trong 30 giây rồi rửa dưới vòi nước. Bước quan trọng nhất tẩy màu tẩy màu bằng cồn a c e to ne để trong 30 giây và rửa lại dưới nước, để phân biệt loại vi khuẩn nào chắc màu và loại nào bị tẩy trôi sau khi phủ qua dung dịch lu go l. Cuối cùng là bước phủ dung dịch đỏ f u ch sin để khoảng 30 giây rồi rửa dưới nước, để xác định các vi khuẩn nào được tẩy hết màu tím bắt lại màu đỏ, trong đó các vi khuẩn chắc màu tím sẽ không bị đổi màu. Soi dưới vật kính dầu. Sau khi hiểu được đặc điểm của từng loại vi khuẩn sau khi thực hiện quy trình nhuộm g ram, mọi người cũng biết được vì sao bước tẩy màu mang ý nghĩa cực kỳ quan trọng và người thực hiện cần phải có kỹ năng nhất định vì khả năng bắt màu của có tỷ lệ chưa cao nên rất dễ đưa ra kết luận sai. Quy trình thực hiện nhuộm g ram cần có 5 bước Cách phân tích kết quả để phân biệt vi khuẩn g ram âm và g ram dương Từ kết quả đã thu được trong quy trình nhuộm g ram, bác sĩ có thể dựa vào sự biến đổi màu sắc để phân biệt vi khuẩn thành hai nhóm chính vi khuẩn g ram âm và vi khuẩn g ram dương. Cụ thể sẽ có 3 cách để phân biệt vi khuẩn như sau: Xem kết quả sau khi nhuộm g ram Vi khuẩn g ram dương sẽ có màu tím hoặc màu xanh tím, vì vách tế bào của chúng chứa nhiều p e p ti do g ly can và không có màng ngoại, do đó chất nhuộm dễ xuyên qua và bám vào tế bào vi khuẩn chuyển thành màu tím. Vi khuẩn g ram âm không bắt màu sau quá trình nhuộm, thường là màu xanh lam hoặc xanh lá cây, vì vách tế bào của vi khuẩn g ram âm ít p e p ti do g ly can hơn và có màng ngoại nên sẽ khó bắt màu. Phân biệt các vi khuẩn Có thể xác định nhanh chóng qua màu sắc sau khi nhuộm g ram và giúp nhận biết bệnh viêm họng do liên cầu khuẩn, vi khuẩn tụ cầu s ta p hy lo co c cu s và vi khuẩn en te ro co c cu s. Khi vi khuẩn không bắt màu, bác sĩ có thể kết luận nhanh rằng chúng thuộc nhóm g ram âm, bao gồm một số loại phổ biến như e s che ri chia co li, sa l mo ne l la, p se u do mo na s và ne i s se ria. Xác định vi khuẩn có thể dựa vào kết quả, màu sắc và tính sinh học Tính chất sinh học của từng vi khuẩn Sẽ có lớp p e p ti do g ly can dày, ít a c i d te i choi c và có khả năng tạo thành nhiều en z y me, chất độc, vác tử cung và lớp màng men màng hãm. Ngược lại có lớp p e p ti do g ly can mỏng, nhiều a c i d te i choi c và có màng ngoại chứa li p o p o ly sa c cha ri de (L P S) và protein. Có khả năng kháng lại một vài kháng sinh. Lưu ý 4 nguyên nhân ảnh hưởng đến kết quả nhuộm g ram Kỹ thuật nhuộm g ram đối với người thường xuyên thực hiện có thể đơn giản nhưng vẫn không tránh khỏi một số sai lệch khi đưa ra kết quả, trong đó có thể xuất phát từ các nguyên nhân sau: Thời gian tẩy cồn không đảm bảo thời gian, có thể quá dài hoặc quá ngắn không thể đưa ra kết quả chính xác. Thuốc nhuộm không đảm bảo chất lượng do nhiều yếu tố khách quan như để quá lâu trước khi sử dụng hoặc có nhiều cặn. Dàn tiêu bản quá dày hoặc quá mỏng. Cố định tiêu bản không kỹ trong quá trình rửa bị bong tiêu bản. Việc tìm đúng loại vi khuẩn gây bệnh là điều rất quan trọng ảnh hưởng đến phác đồ điều trị về sau. Việc tìm đúng loại vi khuẩn gây bệnh là điều rất quan trọng ảnh hưởng đến phác đồ điều trị về sau. Do đó mọi người nên tìm hiểu kỹ và lựa chọn các bệnh viện lớn có nhiều năm kinh nghiệm để thực hiện khám chữa bệnh và chăm sóc sức khỏe, hạn chế trường hợp kết luận sai và mất nhiều thời gian, chi phí mà không đúng bệnh. Bài viết trên đã cung cấp các thông tin về các bước thực hiện quy trình, cách dựa vào tính chất màu sắc và sinh học từ kết quả để phân biệt nhóm vi khuẩn, từ đó các bác sĩ sẽ đưa ra chẩn đoán chính xác hơn và có hướng điều trị phù hợp cho mỗi bệnh nhân.