Държавен вестник, бр. 68, 2014 г., стр. 46

СТР.  46	
Д Ъ Р Ж А В Е Н  В Е С Т Н И К 	
БРОЙ  68
5.3.5.6. един Т-образен съединител без мъртъв 
обем (Valco или еквивалентен),
5.3.5.7. три съединителя без мъртъв обем,
или: един следколонен модул Applied Biosystems 
PCRS 520 или еквивалентен, снабден с реактор 
от 1 cm3 (ml).
5.3.6. Мембранен филтър с размер на порите 
0,45 µm.
5.3.7. SEP-PAKR С18 cartridge (филтриращ 
патрон) или еквивалентен.
5.3.8. Готови колони:
5.3.8.1. Bischoff hypersil RP 18 – type NC ref. 
C 25.46 1805 (5 µm, дължина 250 mm, вътрешен 
диаметър 4,6 mm)
5.3.8.2. Dupont Zorbax ODS (5 µm, дължина 
250 mm, вътрешен диаметър 4,6 mm)
5.3.8.3. Phase SEP, spherisorb ODS 2 (5 µm, 
дължина 250 mm, вътрешен диаметър 4,6 mm)
5.3.9. Предколона:
Bischoff К1 hypersil RP 18 – ref. К1 g 6301 1805 
(5 µm, дължина 10 mm, или еквивалентна).
5.3.10. Колоната и предколоната са свързани 
посредством система Ecotube (ref. A 15020508 
Bischoff) или еквивалентна.
5.3.11. Апаратурата (т. 5.3.5) се сглобява, как­
то е показано на блок-схемата в Допълнение 2.
Връзките след дозатора трябва да са възможно 
най-къси. Стоманената капиляра между изхода на 
реактора и входа на детектора е предназначена да 
охлажда реакционната смес преди измерването 
и температурата в детектора не е известна, но 
е постоянна.
5.3.12. Детектор за УВ и видимата област.
5.3.13. Пишещо устройство.
5.3.14. Центрофуга.
5.3.15. Ултразвукова вана.
5.3.16. Вибрационна бъркалка (Vortex или 
еквивалентна).
5.4. Принцип
5.4.1. Стандартна крива
Тя се получава чрез нанасяне на височините 
на пиковете като функция от концентрацията 
на разредения формалдехид-стандарт.
Приготвят се стандартни разтвори чрез раз­
реждане на стандартния разтвор на формалдехид 
(т. 5.2.19) с подвижна фаза (т. 5.2.16): 1 cm3 (ml) 
разтвор (т. 5.2.19), разреден до 20 cm3 (ml) (около 
185 µg/100 cm3 (ml), 2 cm3 (ml) разтвор (т. 5.2.19), 
разреден до 20 cm3 (ml) (около 370 µg/100 cm3 
(ml), 5 cm3 (ml) разтвор (т. 5.2.19), разреден до 
25 cm3 (ml) (около 740 µg/100 cm3 (ml) и 5 cm3 
(ml) разтвор (т. 5.2.19), разреден до 20 cm3 (ml) 
(около 925 µg/100 cm3 (ml). Стандартните раз­
твори се съхраняват до 1 h при лабораторна 
температура и трябва да бъдат приготвени, 
непосредствено преди употреба. Линейността 
на стандартната крива е добра за концентрации 
между 1 и 15 µg/cm3 (ml).
5.4.2. Приготвяне на пробите
5.4.2.1. Емулсии (кремове, база за гримове, 
очни линии)
В колба със запушалка от 100 cm3 (ml) се 
претегля с точност до 0,001 g количество от 
пробата (М), съответстващо на предполагаемо 
количество формалдехид от 100 µg. Прибавят 
се 20 cm3 (ml) дихлорметан (т. 5.2.8) и 20 cm3 
(ml) солна киселина (т. 5.2.12), точно измерени. 
Разбърква се с вибрационна бъркалка (т. 5.3.16) 
и с помощта на ултразвукова вана (т. 5.3.15). 
Двете фази се разделят чрез центрофугиране 
(3000 rpm/2 min). Междувременно филтруващият 
патрон (т. 5.3.7) се промива с 2 cm3 (ml) метанол 
(т. 5.2.7), след което с 5 cm3 (ml) вода (т. 5.2.1). 
4 cm3 (ml) от водната фаза се пропуска през 
филтруващия патрон, отделят се първите 2 cm3 
(ml), а останалата фракция се събира.
5.4.2.2. Лосиони, шампоани
В колба със запушалка от 100 cm3 (ml) се пре­
тегля с точност до 0,001 g количество от пробата 
(М), съответстващо на предполагаемо количество 
формалдехид от 500 µg. Долива се с подвижна 
фаза (т. 5.2.16) до 100 cm3 (ml). Разтворът се 
филтрува през филтър (т. 5.3.6) и се инжектира 
или пропуска през филтруващия патрон (т. 5.3.7), 
кондициониран както по-горе (т. 5.4.2.1). Всички 
разтвори трябва да се инжектират веднага след 
приготвянето им.
5.4.3. Хроматографски условия:
5.4.3.1. Скорост на потока на подвижната 
фаза – 1 cm3 (ml)/min,
5.4.3.2. Скорост на потока на реагента – 0,5 cm3 
(ml)/min,
5.4.3.3. Обща скорост на потока на изхода на 
детектора – 1,5 cm3 (ml)/min,
5.4.3.4. Инжектиран обем – 10 µl,
5.4.3.5. Температура на елуиране – в случай 
на трудно разделяне колоната се потапя в баня 
с топящ се лед; изчаква се температурата да се 
стабилизира (15 – 20 min),
5.4.3.6. Температура на следколонния реак­
тор – 100 °С,
5.4.3.7. Детектор – 420 nm.
Забележка. Цялата хроматографска система и 
възелът след колоната трябва да са добре промити 
с вода след използване (т. 5.2.1). Когато систе­
мата не се използва повече от два дни, тогава 
промиването с вода трябва да се последва от 
промиване с метанол (т. 5.2.7). Преди реконди­
циониране на системата през нея се пропуска 
вода, за да се избегне кристализация.
5.5. Изчисления
Емулсии (т. 5.4.2.1):
Съдържание на формалдехид в % (M/M):
 
Лосиони, шампоани:
В този случай формулата става:
 
,
където:
M e масата на анализираната проба (т. 5.4.2.1) 
в g;
С – концентрацията на формалдехида, отчете­
на от стандартната крива (т. 5.4.1) в µg/100 cm3 (ml).
5.6. Повторяемост*
За съдържание на формалдехид 0,05 % раз­
ликата между резултатите от две успоредни 
определяния на една и съща проба не трябва да 
надхвърля 0,001 %.