Държавен вестник, бр. 55, 2007 г., стр. 17

Б Р О Й  55
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
С Т Р .  17
(2) Експертизата на сперматозоиди най-мал-
ко включва:
1. обща характеристика и оценка на изслед-
вания материал (семенна течност, размразена
суспензия от сперматозоиди, биопсичен мате-
риал, урина и др.);
2. обем на материала;
3. концентрация на сперматозоидите и общ
брой;
4. подвижност на сперматозоидите;
5. морфология на сперматозоидите (по стрик-
тни критерии на Крюгер);
6. общ брой подвижни сперматозоиди;
7. наличие на дебрис, микроби и други клетки.
Чл. 23. (1) Експертизата на зиготи се из-
вършва:
1. на следващия ден след класическо ин вит-
ро оплождане или ICSI за оценка на фертилиза-
цията и идентифициране на зиготите с нормал-
но и абнормално оплождане;
2. на всеки следващ ден от култивацията за
оценка на степента на развитие и морфология-
та на ембрионите;
3. преди ембриотрансфер или ZIFT за селек-
ция на най-качествените предимплантационни
ембриони за поставяне в тялото на жената;
4. преди криоконсервация за селекция на
качествените предимплантационни ембриони
за съхранение;
5. след размразяване на криоконсервирани
ембриони за оценка на тяхната преживяемост и
селекция за култивация и/или ембриотрансфер.
(2) Експертизата на зиготи включва:
1. идентификация на оплодени яйцеклетки;
2. идентификация на зиготи с два пронук-
леуса;
3. идентификация на зиготи с три и повече
или с един пронуклеус;
4. оценка на морфологията по отношение на
форма на зиготата, характеристика на цито-
плазмата, пронуклеусите, оолемата, перивите-
линното пространство, полярните телца, zona
pelluсida и др.;
5. оценка на степента на развитие по отноше-
ние на броя на бластомерите, наличие на ком-
пактизация, степен на развитие на бластоциста;
6. оценка на морфологията на предимплан-
тационния ембрион по отношение на формата
и симетричността на бластомерите; характерис-
тиката на цитоплазмата, клетъчното ядро, кле-
тъчната мембрана на бластомерите и др.;
7. оценка на морфологията на бластоцисти-
те по отношение клетките на трофобласта и
вътрешната клетъчна маса (ICM), както и по
отношение на големината и формата на блас-
тоцела.
(3) Експертиза на зиготи се извършва чрез
микроскопиране и други изследвания (биохи-
мични, имунологични и др.) в лечебни заведе-
ния, получили разрешение за асистирана ре-
продукция при спазване изискванията за етике-
тиране и проследяемост на зиготите:
1. в условия на стерилност;
2. в съдове и хранителни среди, предназна-
чени за това;
3. в условия на температурен комфорт;
4. при стремеж към минимално времетрае-
не на експертизата с цел минимизиране излага-
нето на зиготите на неблагоприятни фактори
от околната среда.
Чл. 24. (1) Обработка на яйцеклетки се из-
вършва:
1. след тяхната идентификация;
2. преди, по време на и след класическо ин
витро оплождане;
3. преди, по време на и след оплождане чрез
ICSI;
4. преди и след съхранение чрез криоконсер-
вация.
(2) При обработката на яйцеклетки се из-
вършват някои или всички от следните дейнос-
ти и процеси:
1. пипетиране и преместване на кумулусно-
овоцитни комплекси и овоцити;
2. промиване с хранителна среда на кумулус-
но-овоцитни комплекси и овоцити;
3. манипулиране и обработка на кумулус-
ните клетки и тези от короната на яйцеклет-
ката чрез механични средства или ензимни
агенти;
4. оплождане на яйцеклетки чрез инжекти-
ране на единични сперматозоиди в яйцеклетка-
та (при ICSI) или смесване на яйцеклетки със
суспензия от промити живи сперматозоиди (при
класическо ин витро оплождане);
5. култивиране на неоплодени или оплоде-
ни яйцеклетки.
(3) Обработката на яйцеклетки се извършва:
1. при спазване изискванията за етикетира-
не и проследяемост на яйцеклетките;
2. в условия на стерилност;
3. в съдове и хранителни среди, предназна-
чени за това;
4. при контролирани условия по време на
култивация в инкубатор (по отношение на тем-
пература, влажност и газов състав на атмосфе-
рата в инкубатора) или в условия на температу-
рен комфорт (при работа с яйцеклетки извън
инкубатор);
5. при стремеж към минимално излагане на
яйцеклетките на неблагоприятни фактори от
околната среда.
Чл. 25. (1) Обработката на сперматозоиди
включва методи за подбор, промиване и кон-
центриране или разреждане.
(2) При обработката на сперматозоиди се
ползват един или повече от следните методи:
1. центрофугиране в хранителна среда;
2. сепарация чрез центрофугиране през плът-
ностни градиенти;
3. ресуспендиране в хранителна среда;
4. седиментация в хранителна среда;
5. изплуване (Swim-up) в хранителна среда;
6. други методи за селекция и промиване;