Държавен вестник, бр. 21, 2007 г., стр. 48

С Т Р .  48
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
Б Р О Й  21
основава на същите принципи и се използва за
извършване на диференциална диагноза на класи-
ческата чума по свинете.
4. Щамовете на вируса, които се използват във
вирус-неутрализационната реакция, трябва да от-
говарят на препоръките на референтната лабора-
тория на Европейския съюз.
5. Разработени са различни варианти на ELISA
с използване на специфични моноклонални анти-
тела—конкурентен (блокиращ) метод и неконку-
рентна ELISA.
Конкурентният (блокиращ) метод обикновено
се основава на моноклонални антитела. Ако се-
румната проба съдържа антитела срещу вируса на
КЧС, свързването на моноклоналното тяло, съче-
тано с пероксидаза, с антигена на вируса води до
намаляване на цветовата екстинция.
При неконкурентната ELISA свързването на
серумните антитела с антигена се сравнява ди-
ректно с помощта на антитела, съчетани с пе-
роксидаза.
6. Националната лаборатория трябва редовно
да извършва контрол на чувствителността и спе-
цифичността на всички партиди от ELISA, като
използва набор референтни серуми, предоставени
от референтната лаборатория на Европейския
съюз. Този набор включва:
—серуми от свине в начална фаза на инфекция
с вируса на класическата чума по свинете (до 21
дни от инфектирането);
—серуми от оздравяващи животни (след 21-ия
ден от инфекцията);
—серуми от свине, заразени с вируси по пре-
живните.
Изследванията ELISA за серологична диагнос-
тика на класическата чума по свинете трябва да
разпознават всички референтни серуми от оздра-
вяващи свине. Всички получени резултати трябва
да могат да се репродуцират. Препоръчва се още
тестовете да могат да идентифицират всички по-
ложителни серуми от началната фаза и да пред-
ставят минимум кръстосани реакции със серуми
от свине, заразени с вируси по преживните.
Резултатите, получени с референтни серуми от
свине в начална фаза на инфекцията, дават инди-
кации за чувствителността на изследването ELISA.
7. Чувствителността на изследването ELISA се
смята за по-ниска от тази на ВНР и се препоръчва
да се използва за откриване на заболяването в ста-
да. Въпреки това за изследванията ELISA е необ-
ходима по-малко специализирана техника и те се
осъществяват много по-бързо от ВНР благодаре-
ние на автоматизираната техника.
 Изследванията ELISA трябва да позволят да
се открият всички инфекции с класическа чума по
свинете на етапа на възстановяване от заболява-
нето и трябва да са във възможно най-голяма сте-
пен освободени от кръстосани реакции с антитела
срещу вируси по преживните.
В. Интерпретация на резултатите от сероло-
гичните изследвания и диференциална диагноза с
инфекциите, причинени от вируси по преживните
(Мукозна болест—вирусна диария по говедата и
Бордерова болест по овцете).
1. В случай на откриване на титър на неутрали-
зация на вируса на класическата чума по свинете,
равен или надвишаващ 10 ND50, в серумни проби
от една или повече свине или при положителен
резултат от ELISA в серумни проби от група свине
мерките, предвидени в член 4, параграф 2 от Ди-
ректива 2001/89/ЕО, се прилагат незабавно или се
продължават във въпросния обект.
Вече взетите от обекта проби трябва да се под-
лагат на втора ВНР (сравнителна крайна титра-
ция на вирус-неутрализиращите антитела срещу
класическата чума по свинете и на вируси по пре-
живните).
2. Ако при сравнителните тестове се открият
антитела срещу вируси по преживните, а титри-
те на антитела срещу класическата чума по сви-
нете отсъстват или са в по-малко (под една тре-
та) количество, съмнението за класическа чума
по свинете се отхвърля, освен ако не съществу-
ват други причини, които оправдават продължа-
ване прилагането на мерките, предвидени в
член 4, параграф 2 от Директива 2001/89/ЕО, във
въпросния обект.
3. Ако при сравнителните тестове се установи
титър на неутрализация на вируса, равен или над-
вишаващ 10 ND50 при повече свине и този титър е
равен или по-висок от титрите, свързани с други
чумни вируси, НВМС следи да се направи потвър-
ждение на наличието на класическа чума по сви-
нете, при условие че в съответния обект са устано-
вени епизоотични прояви на заболяването.
4. Без да се нарушават разпоредбите по чл. 7,
ако не е установена нито една епидемиологична
проява или ако резултатите на предишни тестове
са недостатъчни, компетентният орган следи в съ-
ответния животновъден обект:
—да бъде продължено действието на мерки-
те по чл. 5;
—да бъдат направени допълнителни изследва-
ния, колкото може по-бързо, за да се потвърди или
отхвърли наличието на класическа чума по свине-
те, съгласно глава IV.
5. Ако допълнителните контроли и тестове,
посочени в т. 4, не позволят да се отхвърли нали-
чието на класическа чума по свинете, е необходи-
мо в съответния животновъден обект да се извър-
ши ново вземане на кръвни проби за серологични
изследвания най-малко две седмици след предиш-
ните контроли.
В контекста на това ново вземане на проби сви-
нете, от които са взети и изследвани предишните
проби, се изследват отново, за да се направи сравни-
телно серологично изследване с предишните проби,
позволяващо да се открие серологично конвертира-
не на вируса на класическата чума по свинете или на
Pestivirus по преживните, в зависимост от случая.
Ако тези нови контроли и изследвания не поз-
волят да се потвърди наличието на класическа чума
по свинете, мерките, предвидени в чл. 4, 5 и 7, мо-
гат да бъдат премахнати.
Г л а в а  V I I I
РАЗГРАНИЧИТЕЛЕН ТЕСТ В СЛУЧАЙ НА
ИЗВЪНРЕДНА (СПЕШНА) ВАКСИНАЦИЯ
А. Основни принципи
1. Съществува един разграничителен сероло-
гичен ЕЛАЙЗА тест (разграничителен тест), с
който успешно може да се различат или разграни-