Държавен вестник, бр. 83, 2006 г., стр. 39

Б Р О Й  83
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
С Т Р .  39
вот на майчините антитела при прасенцата е око-
ло 3 седмици. Ако те се открият при прасенца на
повече от 3 месеца, малко вероятно е антителата
на африканската чума по свинете да са с произход
от майката.
2. Откриването на антитела срещу вируса на
АЧС в серум или плазма на предоставени органи
служи да улесни диагностиката на АЧС в свине-
въдните обекти, за които има съмнение, че са за-
разени, да установи датата на въвеждане на ин-
фекцията в случай на потвърдено огнище и за
мониторингови и надзорни цели.
Локализирането на серопозитивните свине в
свиневъдния обект може да предостави полезна
информация за това как и откъде вирусът на АЧС
е попаднал в свиневъдния обект.
Въпреки това трябва да се пристъпи към точ-
но оценяване на резултатите от серологичните из-
следвания, като се вземат предвид всички кли-
нични, вирусологични и епизоотични резултати в
рамките на провеждане на анкетата в случай на
съмнение или на потвърждаване на АЧС в съот-
ветствие с чл. 7.
Б. Препоръчителни серологични изследвания
1. Методът Елайза, изследването чрез индирек-
тна имунофлуоресценция (IIFT) и изследването,
базирано върху техниката на Western blot, са най-
добрите изследвания за получаване на серологич-
но потвърждение на АЧС.
Качеството и ефикасността на серологичната
диагностика, извършена от националните лабора-
тории, трябва да бъдат редовно контролирани в
рамките на изследванията, периодично провежда-
ни за междулабораторно сравнение, организирано
от референтната лаборатория на Общността.
2. Методът Елайза е най-надеждният и най-по-
лезният за широкомащабни серологични проучва-
ния. Той се основава на откриването на антитела
на вируса на АЧС, прикрепени към вирусните про-
теини, се прикрепят към твърдата фаза чрез при-
бавка на протеин А, свързан с ензим, който произ-
вежда оцветена реакция, видима, когато реагира с
подходящ субстрат.
Националните лаборатории трябва да извър-
шват редовно качествен контрол на чувствител-
ността и специфичността на всички партиди ре-
активи Елайза, като използват серия от серуми за
съпоставка, доставени от референтната лабора-
тория на Общността.
Тази серия съдържа:
а) серуми с произход от свине, които се нами-
рат в началния стадий на заразяване с вируса на
АЧС (до седемнадесет дни след заразяването);
б) серуми с произход от свине, които се възста-
новяват след боледуване (повече от седемнадесет
дни след заразяването).
Методът Елайза, използван за серологично
диагностициране на АЧС, трябва да открива всич-
ки серуми за сравнение с произход от свине, които
се възстановяват след боледуване. Всички резул-
тати, получени със серумите за сравнение, трябва
да са възпроизводителни. Препоръчва се да се
откриват всички положителни серуми още от на-
чалната фаза. Получените резултати от серумите
за сравнение с произход от свинете, които се нами-
рат в началната фаза на заразяването, дават указа-
ния за чувствителността на метода Елайза.
3. IIFT е бърза техника с висока чувствител-
ност и специфичност за откриване на антитела на
вируса на АЧС, които произлизат от серуми или
тъканни ексудати. Той е базиран на откриването
на антитела на вируса на АЧС, които се свързват
с монопласт от MS клетки, инфектирани от адап-
тиран вирус на АЧС. Реакцията антитяло-антиген
се открива с помощта на флуоресцентен и етике-
тиран протеин А. Положителните проби създават
специфична флуоресценция близо до ядрото на ин-
фектираните клетки.
DIFT и IIFT, използвани заедно за изследване на
орган, кръв или ексудати, събрани от животни, кои-
то имат клинични признаци на АЧС, могат да дове-
дат до бързо и надеждно потвърждение на болестта.
4. IB тестът е много специфична и много чув-
ствителна техника, базирана върху използването
на ленти от нитроцелулоза, които съдържат ви-
русни протеини като антигени. Специфичната ре-
акция антитяло-антиген се открива чрез прибавка
на пероксидаза от протеин А, смесена с подходящ
субстрат. Тази техника е много полезна за изслед-
ване на серуми, за които методът Елайза не показ-
ва задоволителни резултати.
Г л а в а  V I I I
МИНИМАЛНИ ИЗИСКВАНИЯ ЗА БЕЗОПАС-
НОСТ ЗА ЛАБОРАТОРИИ ЗА АЧС
1. Изискванията, дефинирани в табл. 1, трябва
да се спазват във всяка лаборатория, в която ви-
русът на АЧС е разширен чрез репликация в кле-
тъчни култури. Въпреки това следсмъртните из-
следвания, подготовката на тъканите за DIFT или
PCR и серология чрез използване на инактивира-
ни антигени, могат да се извършат според по-
малко стриктни изисквания, при условие че ми-
нималните условия, дефинирани в таблицата, се
спазват, основните хигиенни норми се прилагат и
се извършват операциите по дезинфекция след за-
вършване на манипулациите за отстраняване на
труповете, на тъканите и на серумите в условията
на безопасност.
2. Изискванията, дефинирани в табл. 2, трябва
да се спазват от всяка лаборатория, в която свине-
те са заразени с вируса на АЧС.
3. Всички налични запаси от вируса на АЧС се
съхраняват на сигурно място, в замразено или
лиофилизирано състояние. Всяка ампула трябва
да се етикетира прегледно и в изчерпателни регис-
три се описват складовите наличности на вируса,
както и датата и резултатите от проверките за
качество. Трябва също да има регистри за вписва-
не на добавените вируси към складовата налич-
ност, като за тях се уточнява източникът, както и
вирусите с произход от други лаборатории.
4. Препоръчва се към помещенията за обработ-
ка на вирусите на АЧС, проектирани съгласно
принципите за биологична безопасност, да се при-
бавят пространства, където вирусът не се обработ-
ва. Тези пространства би трябвало да са на разпо-
ложение за подготовка на стъклените прибори и
места за поддържане и за подготовка на неинфек-
тирани клетъчни култури, за обработка на серуми
и за серологични изследвания (други освен мето-
дите, които използват живия вирус на АЧС), за
административна дейност и офиси.