Държавен вестник, бр. 72, 2016 г., стр. 133

БРОЙ  72	
Д Ъ Р Ж А В Е Н  В Е С Т Н И К 	
СТР.  133  
– серуми от свине, заразени с вируси по пре-
живните.
Изследванията ELISA за серологична диаг-
ностика на болестта КЧС трябва да разпознават 
всички референтни серуми от оздравяващи сви-
не. Всички получени резултати се репродуцират. 
Препоръчва се още изследвания да идентифицират 
всички положителни серуми от началната фаза и 
да представят минимум кръстосани реакции със 
серуми от свине, заразени с вируси по преживните. 
Резултатите, получени с референтни серуми от 
свине в начална фаза на инфекцията, дават инди-
кации за чувствителността на изследването ELISA.
Чувствителността на изследването ELISA се 
смята за по-ниска от тази на ВНР и се препоръчва 
да се използва за откриване на болестта в стада. 
Въпреки това за изследванията ELISA е необходи-
ма по-малко специализирана техника и те се осъ-
ществяват много по-бързо от ВНР благодарение на 
автоматизираната техника.
Изследванията ELISA позволят да се открият 
всички инфекции с болестта КЧС на етапа на въз-
становяване от болестта и трябва да са във възмож-
но най-голяма степен освободени от кръстосани 
реакции с антитела срещу вируси по преживните.
Интерпретация на резултатите от серологични-
те изследвания и диференциална диагноза с ин-
фекциите, причинени от вируси по преживните 
(Мукозна болест – вирусна диария по говедата и 
Бордерова болест по овцете).
В случай на откриване на титър на неутрализа-
ция на вируса болестта КЧС, равен или надвиша-
ващ 10 ND50, в серумни проби от една или повече 
свине или при положителен резултат от ELISA в 
серумни проби от група свине, БАБХ въвежда не-
забавно мерките, предвидени в Наредбата за про-
филактика, ограничаване и ликвидиране на КЧС. 
Вече взетите от обекта проби се подлагат на 
втора ВНР (сравнителна крайна титрация на ви-
рус-неутрализиращите антитела срещу болестта 
КЧС и на вируси по преживните).
Ако при сравнителните тестове се открият ан-
титела срещу вируси по преживните, а титрите 
на антитела срещу болестта КЧС отсъстват или 
са в по-малко (под една трета) количество, съм-
нението за болестта КЧС се отхвърля, освен ако 
не съществуват други причини, които оправдават 
продължаване прилагането на мерките, предвиде-
ни в Наредбата за профилактика, ограничаване и 
ликвидиране на КЧС. 
Ако при сравнителните тестове се установи 
титър на неутрализация на вируса, равен или над-
вишаващ 10 ND50 при повече свине и този титър е 
равен или по-висок от титрите, свързани с други 
чумни вируси, БАБХ предприема незабавно не-
обходимите мерки за потвърждение за наличие 
на болестта КЧС, при условие че в съответния 
обект са установени епизоотични прояви на за-
боляването.
Без да се нарушават разпоредбите на Наредбата 
за профилактика, ограничаване и ликвидиране на 
КЧС, ако не е установена нито една епизоотична 
проява или ако резултатите на предишни изслед-
вания са недостатъчни, БАБХ незабавно предприе-
ма мерки в съответния животновъден обект:
– да бъде продължено действието на мерките 
по Наредбата за профилактика, ограничаване 
и ликвидиране на КЧС; 
– да бъдат направени допълнителни изследва-
ния, възможно по-бързо, за да се потвърди 
или отхвърли наличието на вируса на болест- 
та КЧС.
Когато допълнителните контроли и изследва-
ния, посочени в точка 4, не позволят да се от-
хвърли наличието на болестта КЧС, е необходимо 
в съответния животновъден обект да се извърши 
ново вземане на кръвни проби за серологични из-
следвания най-малко две седмици след предишни-
те контроли.
В контекста на тази мярка се вземат и изслед-
ват нови проби от същите свине, за да се направи 
сравнително серологично изследване с предишни-
те проби, позволяващо да се открие сероконверсия 
на вируса на болестта КЧС или на Pestivirus по 
преживните, в зависимост от случая.
Ако при повторните изследвания не се потвър-
ди наличието на вируса на КЧС, наложените мер-
ките се прекратяват. 
Вирусология
Откриване на антиген на вируса чрез имуно- 
флуоресцентен метод
Принципът на този метод е детекция на ан-
тиген на вируса във фини криосрезове от органи 
на свине със съмнение за инфекция с вируса на 
болестта КЧС. Вътреклетъчният антиген се откри-
ва с помощта на антитяло, конюгирано с флуо-
ресцеин-изотиоцианат (ФИТЦ). В НРЛ се използва 
ФИТЦ конюгирано антитяло „Cedicon“, произве-
дено в Холандия. Всеки положителен резултат се 
потвърждава с повтаряне на реакцията с помощта 
на специфично моноклонално антитяло.
Най-подходящи органи са тонзилите, бъбреци-
те, далакът, лимфните възли и дебелото черво. При 
дивите свине може да се използва и натривка от 
костен мозък, ако гореизброените органи не са на 
разположение или са загнили.
Изследването се извършва в рамките на един 
ден. Тъй като пробите се вземат само от органи на 
мъртви животни, приложението им за откриване 
на болестта е ограничено. Сигурността на резулта-
тите от изследването може да е намалена от съм-
нителна флуоресценция, особено когато извършва-
щият няма достатъчно опит с метода или когато 
изследваните органи са загнили. 
Различни техники ELISA позволяват да се от-
крива антигенът на вируса. Антигенът ELISA тряб-
ва да е достатъчно чувствителен, за да позволи 
получаване на положителен резултат при живот-
ни с клинични признаци за наличие на болестта 
КЧС. В Националната референтна лаборатория по 
КЧС работи с Елайза, произведена от BOMMELI, 
Швейцария.
Използването на ELISA се препоръчва за от-
криване на антигена в проби от животни с кли-
нични признаци или патологични изменения на 
болестта. Те не са подходящи за индивидуално 
изследване. Най-подходящи са пробите от левко-
цити, кръвен серум, несъсирена кръв, както и сус-
пензия от органите, описани по точка 1, взети от 
свине, за които съществува съмнение за инфекция 
с вируса на болестта КЧС.
ELISA може да се извърши в рамките на един 
ден с помощта на автоматизирана техника. Основ-
ното му предимство е възможността да се обработ-
ват голям брой проби за кратко време. Препоръчва