Държавен вестник, бр. 91, 2002 г., стр. 52

С Т Р .  52
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
Б Р О Й  91
5.2.16. Подвижна фаза: воден разтвор на динатриев
фосфат (5.2.5), 0,006 М, доведен до рН 2,1 с ортофосфор-
на киселина (5.2.6).
5.2.17. Реактив за следколонна дериватизация: в
мерителна колба 1000 cm3 (ml) се разтварят: 62,5 g амо-
ниев ацетат (5.2.2), 7,5 cm3 (ml) оцетна киселина (5.2.3)
и 5 cm3 (ml) пентан-2,4-дион (5.2.4). Долива се до мар-
ката с вода (5.2.1). Този реактив се съхранява на тъмно.
Време за съхранение: максимум 3 дни при 25 °С. Не
трябва да се наблюдават промени в цвета.
5.2.18. Формалдехид-стандарт: основен разтвор
В мерителна колба 1000 cm3 (ml) се наливат 10 g
формалдехид (5.2.9) и се долива с вода до марката.
Концентрацията на разтвора се определя, както следва:
вземат се 5 cm3 (ml) от разтвора, прибавят се 25 cm3 (ml)
от стандартния разтвор на йод (5.2.14) и 10 cm3 (ml)
разтвор на натриев хидроксид (5.2.10). Оставя се да
престои 5 min. Подкислява се с 11 cm3 (ml) HCl (5.2.11)
и се титрува излишъкът от стандартния разтвор на йод
със стандартен разтвор на натриев тиосулфат (5.2.15), в
присъствие на разтвор на скорбяла (5.2.13) като инди-
катор. 1 cm3 (ml) разтвор на йод (5.2.14) е еквивалентен
на 1,5 mg формалдехид.
5.2.19. Формалдехид-стандарт: разреден разтвор
Основният разтвор се разрежда с подвижна фаза
(5.2.16) до 1/100-на от неговата първоначална концен-
трация. 1 cm3 (ml) от този разтвор съдържа около 37 mg
формалдехид. Изчислява се точното съдържание.
5.3. Апаратура
5.3.1. Стандартно лабораторно оборудване.
5.3.2. Помпа за ВЕТХ, без пулсации.
5.3.3. Помпа без пулсации за ниско налягане за ре-
активите (или втора ВЕТХ помпа).
5.3.4. Инжекционен дозаторен кран с 10 µl ка-
пиляра.
5.3.5. Следколонен реактор, състоящ се от следните
компоненти:
—тригърлена колба от 1 dm3 (l),
—нагревател за колби от 1 dm3 (l),
—две колони Vigreux с минимум от 10 тарелки, с
въздушно охлаждане,
—капиляра от неръждаема стомана (за топлообмен)
1,6 mm с вътрешен диаметър 0,23 mm, дължина 400 mm,
—тефлонова капиляра 1,6 mm с вътрешен диаме-
тър 0,30 mm, дължина 5 m (френска плетка), виж до-
пълнение 1,
—един Т-образен съединител без мъртъв обем (Valco
или еквивалентен),
—три съединителя без мъртъв обем,
или: един следколонен модул Applied Biosystems
PCRS 520 или еквивалентен, снабден с реактор от
1 cm3 (ml).
5.3.6. Мембранен филтър с размер на порите 0,45 µm.
5.3.7. SEP-PAKR С18 cartridge (филтриращ патрон)
или еквивалентен.
5.3.8. Готови колони:
—Bischoff hypersil RP 18—type NC ref. C 25.46 1805
(5 µm, дължина 250 mm, вътрешен диаметър 4,6 mm)
—Dupont Zorbax ODS (5 µm, дължина 250 mm, вът-
решен диаметър 4,6 mm)
—Phase SEP, spherisorb ODS 2 (5 µm, дължина
250 mm, вътрешен диаметър 4,6 mm)
5.3.9. Предколона:
Bischoff К1 hypersil RP 18—ref. К1 G 6301 1805 (5 µm,
дължина 10 mm или еквивалентна).
5.3.10. Колоната и предколоната са свързани пос-
редством система Ecotube (ref. A 15020508 Bischoff) или
еквивалентна.
5.3.11. Апаратурата (5.3.5) се сглобява, както е по-
казано на блок-схемата в допълнение 2.
Връзките след дозатора трябва да са възможно най-
къси. Стоманената капиляра между изхода на реактора
и входа на детектора е предназначена да охлажда реак-
ционната смес преди измерването и температурата в
детектора не е известна, но е постоянна.
5.3.12. Детектор за УВ и видимата област.
5.3.13. Пишещо устройство.
5.3.14. Центрофуга.
5.3.15. Ултразвукова вана.
5.3.16. Вибрационна бъркалка (Vortex или екви-
валентна).
5.4. Принцип
5.4.1. Стандартна крива
Тя се получава чрез нанасяне на височините на пи-
ковете като функция от концентрацията на разредения
формалдехид-стандарт.
Приготвят се стандартни разтвори чрез разреждане
на стандартния разтвор на формалдехид (5.2.19) с под-
вижна фаза (5.2.16): 1 cm3 (ml) разтвор (5.2.19), разре-
ден до 20 cm3 (ml) (около 185 µg/100 cm3 (ml), 2 cm3 (ml)
разтвор (5.2.19), разреден до 20 cm3 (ml) (около 370 µg/
100 cm3 (ml), 5 cm3 (ml) разтвор (5.2.19), разреден до
25 cm3 (ml) (около 740 µg/100 cm3 (ml) и 5 cm3 (ml) раз-
твор (5.2.19), разреден до 20 cm3 (ml) (около 925 µg/
100 cm3 (ml). Стандартните разтвори се съхраняват до
1 h при лабораторна температура и трябва да бъдат при-
готвени непосредствено преди употреба. Линейността
на стандартната крива е добра за концентрации между
1 и 15 µg/cm3 (ml).
5.4.2. Приготвяне на пробите
5.4.2.1. Емулсии (кремове, база за гримове, очни
линии)
В колба със запушалка 100 cm3 (ml) се претегля с
точност до 0,001 g количество от пробата (М), съответ-
стващо на предполагаемо количество формалдехид
100 µg. Прибавят се 20 cm3 (ml) дихлорметан (5.2.8) и
20 cm3 (ml) солна киселина (5.2.12), точно измерени.
Разбърква се с вибрационна бъркалка (5.3.16) и с по-
мощта на ултразвукова вана (5.3.15). Двете фази се
разделят чрез центрофугиране (3000 rpm/2 min). Меж-
дувременно филтруващият патрон (5.3.7) се промива с
2 cm3 (ml) метанол (5.2.7), след което с 5 cm3 (ml) вода
(5.2.1). 4 cm3 (ml) от водната фаза се пропуска през
филтруващия патрон, отделят се първите 2 cm3 (ml), а
останалата фракция се събира.
5.4.2.2. Лосиони, шампоани
В колба със запушалка 100 cm3 (ml) се претегля
с точност до 0,001 g количество от пробата (М), съ-
ответстващо на предполагаемо количество формал-
дехид от 500 µg. Долива се с подвижна фаза (5.2.16)
до 100 cm3 (ml). Разтворът се филтрува през филтър
(5.3.6) и се инжектира или пропуска през филтрува-
щия патрон (5.3.7), кондициониран както в 5.4.2.1.
Всички разтвори трябва да се инжектират веднага
след приготвянето им.
5.4.3. Хроматографски условия:
—Скорост на потока на подвижната фаза—
1 cm3 (ml)/min,
—Скорост на потока на реагента—0,5 cm3 (ml)/min,
—Обща скорост на потока на изхода на детектора:
1,5 cm3 (ml)/min,
—Инжектиран обем—10 µl,
—Температура на елуиране—в случай на трудно
разделяне колоната се потапя в баня с топящ се лед;
изчаква се температурата да се стабилизира (15—20 min),
—Температура на следколонния реактор—100 °С,
—Детектор—420 nm.
Забележка: Цялата хроматографска система и възе-
лът след колоната трябва да са добре промити с вода след
използване (5.2.1). Когато системата не се използва по-