Държавен вестник, бр. 109, 2002 г., стр. 62

С Т Р .  62
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
Б Р О Й  109
Паничките се оставят да престоят в продъл-
жение на приблизително18 h при температура
35 до 37 °С.
9. Оценка
Измерва се диаметърът на зоните на инхи-
биране до най-близките 0,71 mm. Записват се
средните измервания за всяка концентрация
върху милиметрова хартия, която показва лога-
ритъма на концентрациите в съотношение с
диаметрите на зоните на инхибиране. Изчерта-
ват се линиите на “най-добро напасване” както
на стандартния разтвор, така и на екстракта,
както е показано например тук по-долу.
Пунктът на “най-добро напасване” за стан-
дартното най-ниско ниво (SL) се определя по
формулата:
7S1 + 4S2 + S4—2S8
SL = –––––––––––  (1)
10
Определя се пунктът на “най-добро напас-
ване” за стандартното най-високо ниво (SН),
като се използва формулата:
7S8 + 4S4 + S2—2S1
SH = –––––––––––  (2)
10
Аналогично се изчисляват точките на “най-
добро напасване” за най-ниското ниво на екст-
ракта (UL) и за най-високото ниво на екстрак-
та (UH), като се заместват U1, U2, U4 и U8 с S1,
S2, S4 и S8 в посочените формули.
Изчислените стойности на SL и SH се запис-
ват върху същата хартия за чертане на диагра-
ми (милиметрова) и се обединяват така, че да
се получи линията на “най-добро напасване” за
стандартния разтвор. Аналогично се записват
стойностите на UL и UH и се обединяват така,
че да се получи линията на “най-добро напасва-
не” за екстракта.
В случай че липсва каквото и да е смущение,
линиите са успоредни. За целите на практиката
линиите могат да се приемат за успоредни, при
положение че стойностите (SH-SL) и (UH-UL)
не се различават с повече от 10 % от техните
средни стойности.
Ако се установи, че линиите не са успоредни,
то или U1 и S1, или U8 и S8 могат да се отхвърлят
и да се изчислят SL, SH, UL и UH, като се изпол-
зват алтернативните формули, така че да се по-
лучат линии на “най-добро напасване”:
5S1 + 2S2—S4
5S2 + 2S4—S8
SL = –––––––– или ––––––––   (3)
6
6
5S4 + 2S2—S1
5S8 + 2S4—S2
SH = –––––––– или ––––––––  (4)
6
6
и аналогично за UL и UH. Алтернативните
линии на “най-добро напасване” се проверят за
успоредност, както е показано по-горе. В край-
ния отчет се отбелязва фактът, че резултатът е
бил изчислен на база трите нива.
Ако се приеме, че линиите са успоредни, се
изчислява логаритъмът на относителната ак-
тивност (логаритъм А) посредством една от
следните формули:
За четири нива—
(U1 + U2 + U4 + U8—S1—S2—S4—S8) . 0,602
Log A=–––––––––––––––––––––––––   (5)
U4 +U8 + S4 + S8 —U1—U2—S1—S2
За три нива—
(U1 + U2 + U4—S1—S2—S4) . 0,401
Log A=––––––––––––––––––––––   (6)
U4 + S4—U1—S1
или
(U2 + U4 + U8—S2—S4—S8) . 0,401
Log A=––––––––––––––––––––––   (7)
U8 + S8—U2—S2
Действителната активност е равна на допус-
каната активност и е по-голяма от относител-
ната активност.
Ако се установи, че относителната актив-
ност е извън обхвата от 0,75 до 2,70, опитът се
повтаря, като се извършват целесъобразни на-
пасвания към концентрациите на екстракта, а
ако това не е възможно—към стандартните
разтвори. Когато относителната активност не
може да бъде ограничена в рамките на необ-
ходимия обхват, всеки получен резултат се счи-
та за приблизителен и това се отбелязва в край-
ния отчет.
Ако се приеме, че линиите не са успоредни,
определянето се повтаря. Ако все още не може
да се постигне успоредност на линиите, опреде-
лянето се счита за незадоволително.
10. Повторяемост
Разликата между резултатите от двете опре-
деляния, които се извършват на базата на една
и съща проба и от един и същ аналитик, не трябва
да надвишава:
—20 % спрямо най-високата стойност—за съ-
държания на монензин натрии от 10 до 25 mg/kg;
—5 mg/kg в абсолютна стойност—за съдър-
жания от 25 до 50 mg/kg;
—10 % спрямо най-високата стойност—за
съдържания над 50 mg/kg.
ХL. Определяне на халофугинон
DL-транс-7-бромо-6-хлоро-3-[3-(3-хидрокси-
2-пиперидил)ацетонил]-квиназолин-4-(3Н)-на
хидробромид
1. Цел и обхват
Методът се използва за определянето на
халофугинон в храните за животните. Долната
граница за определянето е 1 mg/kg.
2. Принцип
След третиране с гореща вода халофугино-
нът се екстрахира като свободна основа в ети-
лов ацетат и след това се разделя като хидро-
хлорид във воден киселинен разтвор. Екстрак-
тът се очиства посредством хроматография с
йонен обмен. Съдържанието на халофугинона
се определя посредством високочестотна хро-
матография със запазена фаза (HPLC), като се
използва детектор на ултравиолетови лъчи.
3. Реагенти:
3.1. ацетонитрил, клас HPLC;
3.2. амберлит XAD-2 смола;
3.3. амониев ацетат;