Държавен вестник, бр. 109, 2002 г., стр. 48

С Т Р .  48
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
Б Р О Й  109
4.5. водна баня;
4.6. центрофуга с епруветки от 50  и 15 ml с
шлифови запушалки;
4.7. въздушен хладник с шлифова свръзка;
4.8. спектрофотометър с кювети от 10 mm.
5. Процедура
5.1. Екстракция
Количество от фино раздробена и хомогени-
зирана проба, съдържаща около 80 mg етопа-
бат, се претегля с точност до 1 mg. Изследвана-
та порция се пренася в конична колба от 250 ml
(4.1) и се добавят 100,0 ml разреден метанол
(3.2). Колбите се запушват и се разклащат един
час на клатачката (4.3). Декантира се, филтру-
ва се и първите милилитри от филтрата се от-
страняват.
5.2. Пречистване
Забележка: Всички операции по тази точка
трябва да бъдат проведени бързо.
Пренасят се 20 ml от бистрия екстракт в де-
лителна фуния от 100 ml (4.2), добавят се 5 ml от
разредената 1:10 солна киселина (3.4) и 20 ml
хлороформ (3.6). Отначало се разклаща внима-
телно, а после енергично за 3 min. Оставя се,
докато се разделят зоните и фазата на хлоро-
форма се събира във втора делителна фуния от
100 ml (4.2).
Киселата фаза се екстрахира още два пъти с
по 20 ml хлороформ (3.6). Хлороформените ек-
стракти се събират във втората делителна фу-
ния, а киселата фаза се изхвърля. Към комби-
нирания хлороформен разтвор се добавят 10 ml
разтвор на натриев карбонат (3.7), разклаща се
3 min и се оставя фазите да се разделят. Фазата
на хлороформа се събира в трета делителна
фуния (4.2), а водната фаза се изхвърля. Към
хлороформения разтвор се добавят 10 ml разт-
вор на натриев карбонат (3.7), разклаща се 3min
и се оставя фазите да се разделят.
Фазата на хлороформа се събира в четвърта
делителна фуния от 100 ml (4.2), промива се
двукратно с по 25 ml вода, водните фази се от-
делят, а хлороформеният екстракт се събира
количествено в колба от 250 ml (4.4). Водните
фази се събират в една от делителните фунии;
всяка делителна фуния се промива с няколко
милилитра хлороформ, водната фаза се екстра-
хира със същите милилитри хлороформ, оставя
се фазите да се разделят и фазата на хлорофор-
ма се добавя към хлороформения екстракт в
колбата.
5.3. Хидролиза
С помощта на ротационния вакуум изпари-
тел (4.4) хлороформеният екстракт се изпарява
до около 2 ml на водна баня при температура 50°
C. Остатъкът се разтваря в 2—3 ml метанол (3.1)
и разтворът се пренася количествено в центро-
фужна епруветка от 50 ml с помощта на две
порции от по 10 ml и една порция от 5 ml 0,3 N
солна киселина (3.5). Съединява се въздушният
хладник (4.7), добавят се няколко парченца стък-
ло, разклаща се добре, епруветката се потопява
в кипяща водна баня и се държи там 45 min.
След това се охлажда на струя студена течаща
вода.
5.4. Развитие на цветната реакция и измер-
ване на оптическата плътност
Добавя се 1,0 ml разтвор на натриев нитрит
(3.8), разбърква се и се оставя да престои 2 min.
Добавя се 1,0 ml разтвор на натриев сулфамат
(3.9), разклаща се и се оставя да престои 2 min.
Добавя се 1,0 ml разтвор на 2-аминоетил-1-наф-
тиламин (3.10), разклаща се и се оставя да прес-
тои 10 минути. Добавят се 0,5 g натриев хлорид
(3.11) и 10.0 ml n-бутанол (3.12), разклаща се
енергично, докато натриевият хлорид се разт-
вори напълно.
Супернатантният бутанолов разтвор се из-
тегля с пипета, пренася се в центрофужна епру-
ветка от 15 ml (4.6) и се центрофугира. Оптичес-
ката плътност (ЕА) се измерва на спектрофо-
тометър при 555 nm срещу n-бутанол (3.12).
5.5. Контролен тест
Контролният тест се провежда с 20 ml мета-
нол (3.2) по същата процедура, като се започне
от т. 5.2. Оптическата плътност (ЕB) се измер-
ва при 555 nm срещу n-бутанол (3.12).
5.6. Стандартен тест
Стандартният тест се провежда с 20 ml стан-
дартен разтвор (3.14.2) по същата процедура,
като се започне от т. 5.2. Оптическата плътност
(ЕС) се измерва при 555 nm срещу n-бутанол
(3.12).
6. Пресмятане на резултати
Съдържанието на етопабат в mg на килог-
рам проба се дава от формулата:
(ЕА - ЕВ) / (ЕС - ЕВ) . 80/W,
където:
ЕА е оптическата плътност на разтвора от
пробата;
ЕВ—оптическа плътност на разтвора от кон-
тролния тест;
ЕС—оптическа плътност на разтвора от стан-
дартния тест;
W—теглото на порцията за изследване в гра-
мове.
7. Повторяемост
Разликите между резултатите от две пара-
лелни определяния, проведени върху една и съща
проба, не трябва да надвишават:
• 20%, като относителна стойност—за съ-
държание на етопабат под 7,5 ppm;
• 1,5 ppm, като абсолютна стойност, за съ-
държание между 7,7 и 10 ppm;
• 15%, като относителна стойност, за съдър-
жание над 10 ppm.
ХХХIV. Определяне на динитолмид (ДОТ)
(3,5-динитро-о-толуамид)
1. Цел и обхват
Този метод дава възможност за определяне
количеството на динитолмид (ДОТ) в продук-
ти за изхранване на животни, концентрати и
премикси. Нитрофуранови производни могат да
пречат. Долната граница на определянето е
40 ppm.