Държавен вестник, бр. 83, 2006 г., стр. 75

Б Р О Й  83
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
С Т Р .  75
Кръглата мрежа е поставена между двата
гумени пръстена и се залепва към тях с дву-
компонентно лепило, подходящо за двата ма-
териала.
(в) Една ерленмайерова колба с капацитет
3 l, снабдена със странична тръба за засмукване.
(г) Филтърна помпа.
(д) Пластмасови торби с капацитет най-мал-
ко 80 ml.
(е) Оборудване за запечатване на пластма-
совите торби.
(ж) Ренилаза с активност 1: 150 000 единици
на грам.
2. Събиране на проби за изследвания—как-
то е предвидено в глава първа (2).
3. Процедура
I. Смилане
Пробите от месо предварително се смилат в
месомелачка.
Ако се използва електрически смесител,
смесителят работи три или четири пъти за приб-
лизително една секунда всеки път.
II. Процедура за смилане
Процедурата може да включва пълни гру-
пи (100 g проби наведнъж) или групи от по-
малко от 100 g.
(a) Пълни групи (100 проби наведнъж)—виж
глава втора (A)(3)(II)(a).
(б) По-малки групи (по-малко от 100 про-
би)—виж глава втора (A)(3)(II)(б).
III. Изолиране на ларви чрез филтрация
(a) Лед (300 до 400 g ледени парченца или
натрошен лед) се прибавя към течността за
смилане, за да допълни нейния обем до около
2 l. При по-малки проби количеството лед про-
порционално се намалява.
(б) Храносмилателната течност се бърка,
докато ледът се разтопи. Охладената храно-
смилателна течност се оставя да престои най-
малко 3 min, за да може навитата ларва да се
освободи.
(в) Гелмановата фуния, оборудвана с дър-
жач на филтъра и филтърен диск, се монтира на
една ерленмайерова колба, свързана с филтър-
на помпа.
(г) Храномилателната течност се изсипва в
гелманова фуния и се филтрира. Към края на
филтрацията на храносмилателната течност се
помага да премине през филтъра чрез засмук-
ване с филтърна помпа. Засмукването се пре-
установява, преди филтърът да изсъхне, т.е.
когато от 2 до 5 ml от течността са останали
във фунията.
(д) След като веднъж цялата храносмила-
телна течност е била филтрирана, филтърният
диск се отстранява и поставя в една пластмасо-
ва торба с капацитет от 80 ml заедно с 15 до
20 ml разтвор на ренилаза. Разтворът от рени-
лаза се приготвя чрез прибавяне на 2 g ренилаза
към 100 ml чешмяна вода.
(е) Пластмасовата торба се запечатва двой-
но и поставя между вътрешната и външната
торба в хомогенизатора.
(ж) Хомогенизаторът се оставя да работи в
продължение на 3 min, т.е. докато работи пъл-
на или непълна група проби.
(з) След 3 min пластмасовата торба, снаб-
дена с филтърен диск и разтвор на ренилаза, се
отстранява от хомогенизатора и отваря с но-
жица. Течното съдържание се изсипва във ва-
ничката за броене на ларви или в петриева па-
ничка. Торбата се измива с 5 до 10 ml вода,
която след това се прибавя към ваничката за
броене на ларви за изследване чрез трихине-
лоскоп или в петриевата паничка за изследва-
не чрез стереомикроскоп.
(и) Смлените проби се изследват веднага след
приготвянето им. При никакви обстоятелства
изследването не се отлага до следващия ден.
Забележка. Филтриращите дискове не могат нико-
га да бъдат използвани, ако не са напълно чисти. Не-
чисти дискове не се оставят да изсъхват. Филтърни
дискове могат да бъдат почиствани чрез оставянето
им в разтвор на ренилаза за една нощ. Преди употреба
те се измиват в пресен разтвор от ренилаза, използвай-
ки хомогенизатора.
IV. Положителни и съмнителни резултати
Когато полученият резултат е положителен
или несигурен, се прилага глава първа (3)(III).
В. Изследване чрез автоматично смилане на
сборни проби до 35 g.
1. Съоръжения и реактиви
(a) Нож или ножица за разрязване на проби
за изследване.
(б) Таблички, разграфени на 50 квадрата,
всеки от които може да побира проби от приб-
лизително 2 g месо, или други пособия, даващи
еквивалентни гаранции по отношение на прос-
ледимостта на пробите.
(в) Миксер Трихоматик 35® с филтърна
втулка.
(г) Солна киселина 8,5 ± 0,5 % тегло.
(д) Прозрачни поликарбонатни мембран-
ни филтри с диаметър 50 mm и размер на от-
ворите 14 µ.
(е) Активност на пепсина 1: 10 0001NF (На-
ционална формулировка на САЩ), съответст-
ваща на 1: 12 500 BP (по Британската фармоко-
пея) и на 2000 FIP (Международна федерация
по фармация).
(ж) Везна с точност до 0,1 g.
(з) Пинцети с плосък край.
(и) Определен брой микроскопски предмет-
ни стъкла със странична дължина от най-мал-
ко 5 cm или петриеви панички с размер най-
малко 6 cm в диаметър, разграфени от вътреш-
ната страна на 10 Ч 10 mm квадрати с остър
инструмент.
(й) Един (стерео-) микроскоп с предавана
светлина (увеличение 15 до 60 пъти) или един
трихинелоскоп с хоризонтална масичка.
(к) Съд за събиране на отпадъчни течности.
(л) 10-литрови съдове, които се използват за
обеззаразяване на съораженията, пр. с формол,
и за обеззаразяване на останал изкуствен сто-
машен сок, когато изследваните проби са с по-
ложителен резултат.