Държавен вестник, бр. 21, 2007 г., стр. 47

Б Р О Й  21
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
С Т Р .  47
Въпреки това за потвърждаването на първич-
но огнище на класическа чума по свинете е доста-
тъчно наличието на клинични признаци или ле-
зии, характерни за заболяването, при съответните
свине, съчетано с положителни резултати при поне
в два от тестовете за откриване на антигена или на
генома на вируса.
Вторично огнище на класическа чума по сви-
нете се потвърждава, ако освен епидемиологична
връзка с вече потвърдено огнище или случай има
открити и клинични признаци или лезии, харак-
терни за заболяването в наблюдаваните свине, и
ако тест за откриване на антигена или генома на
вируса е дал положителен резултат.
Появата на първично огнище на класическа
чума по свинете при диви свине се потвърждава
след изолиране на вируса или ако поне два от тес-
товете за откриване на антигена или на генома на
вируса са дали положителен резултат. Могат да се
потвърдят други случаи на класическа чума по
свинете при диви свине, когато е установена епи-
демиологична връзка с вече потвърдени случаи,
ако един тест за откриване на антиген или на гено-
ма на вируса е дал положителен резултат.
2. За да даде положителен резултат, тестът за
откриване на генома или антигена на класическата
чума по свинете трябва да се осъществи със специ-
фични антитела или стартери срещу вируса на КЧС.
Ако тестът не е специфичен за вируса на класичес-
ката чума по свинете, а само за чумния вирус, тряб-
ва да се повтори с използването на специфични
реактиви на класическата чума по свинете.
Г л а в а  V I I
ПРИНЦИПИ И ИЗПОЛЗВАНЕ НА СЕРОЛО-
ГИЧНИТЕ ИЗСЛЕДВАНИЯ И ОЦЕНКА НА
РЕЗУЛТАТИТЕ ОТ ТЯХ
А. Основни принципи и диагностична стойност
1. При свинете, заразени с вируса на класичес-
ката чума по свинете, антитела могат да се откри-
ят в кръвния серум две-три седмици след заразява-
нето. При оздравели свине защитните и неутрали-
зиращите антитела се откриват в течение на годи-
ни, дори през целия живот. При болни животни в
крайна фаза понякога се откриват антитела. При
хронично болни свине антитела се откриват в про-
дължение на няколко дни в края на първия месец
след заразяването.
Заразените в утробата прасета са имунотоле-
рантни към вируса и не произвеждат специфични
антитела. През първите дни след раждането могат
да се открият майчини антитела, които се доказ-
ват при здравите прасенца без виремия до около
две седмици. Ако се открият антитела у прасета
над тримесечна възраст, е малко вероятно антите-
лата да са с произход от майката.
2. Откриването на антитела срещу вируса на
класическата чума по свинете в серумни или плаз-
мени проби позволява да се потвърди диагнозата
на класическа чума по свинете в съмнителните
стопанства, да се установи периодът от началото на
заразяването в огнището и да се вземат мерки за
наблюдение и надзор. Серологичните изследвания
служат най-вече за откриване на класическа чума
по свинете в наскоро заразен животновъден обект.
Малък брой засегнати свине с нисък титър на
антитела говори за скорошна инфекция (две-три
седмици). Голям брой засегнати свине с високи
титри на антитела означава, че вирусът е проник-
нал в животновъдния обект най-малко преди ме-
сец. Местонахождението на серопозитивните сви-
не в обекта може да даде полезна информация за
начина, по който вирусът на класическата чума по
свинете е проникнал в обекта.
 Въпреки това е необходимо да се направи точ-
на оценка и интерпретация на резултатите от се-
рологичните изследвания, като се отчетат всички
клинични, вирусологични и епизоотичните данни
в рамките на изследването, което се провежда в
случай на съмнение или потвърждение на наличи-
ето на класическа чума по свинете.
Б. Препоръчителни серологични тестове
1. Вирус-неутрализационна реакция (ВНР) и
ELISA са най-подходящи за серологична диагнос-
тика на класическата чума по свинете.
Качеството и ефикасността на серологичната
диагностика, извършвана от националната лабо-
ратория, трябва непрекъснато да се контролират
чрез междулабораторен сравнителен тест, органи-
зиран периодично от референтната лаборатория
на Европейския съюз.
2. Вирус-неутрализационна реакция се базира
на определянето на неутрализиращото действие
на антителата в серумна проба върху вируса, изра-
зена като неутрализираща степен от 50 %.
Известно количество от вируса на класичес-
ката чума по свинете се инкубира при 37 °C в
степенно разреден серум. Приготвя се серумен
разтвор в разреждане 1 към 10. Когато е необхо-
дима пълна титрация, се приготвят серумни раз-
твори 1 към 2 и 1 към 5. Всеки един от така при-
готвените серумни разтвори се смесва с равен
обем суспензия на вируса, съдържаща 100 инфек-
циозни дози (TCID 50).
След инкубирането със сместа се заразяват
клетъчни култури, които се инкубират от 3 до 5
дни. След този инкубационен период културите се
фиксират и всяко намножаване на вирус се откри-
ва чрез имунно маркиране (имунопероксидазна или
имунофлуоресцентна реакция).
Резултатите от ВНР се изразяват с реципроч-
ната стойност на началното разреждане на серу-
ма, при което половината от заразените клетъчни
култури (краен титър 50 %) не показват размно-
жаване на вируса (няма специфично маркиране).
Прави се оценка на титъра между две разрежда-
ния. Крайното разреждане е ефективното разреж-
дане на серума по време на неутрализиращата ре-
акция след прибавянето на вируса, но без добавяне
на клетъчна суспензия.
3. Вирус-неутрализационна реакция е най-чув-
ствителният и най-надеждният метод за открива-
не на антитела срещу вируса на класическата чума
по свинете. Затова се препоръчва за серологично
изследване както на отделни животни, така и на
стада. Изследването позволява да се открият и ан-
титела с кръстосана неутрализация.
Прилагането на ВНР за откриване на антитела
срещу вируса на Мукозна болест—вирусната диа-
рия по говедата и Бордерова болест по овцете се