Държавен вестник, бр. 82, 2002 г., стр. 13

Б Р О Й  82
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
С Т Р .  13
4. По преценка на дежурния лекар биопсията се
обработва само на криостат или се правят паралелно и
цитонамазки.
5. Криостатните срезове се оцветяват според вида
на материала, като стандартните оцветявания са хема-
лаун еозин и толуидиново синьо.
6. Цитонамазките се оцветяват с 1 % буфериран
разтвор на толуидиново синьо или с Диф куик.
7. Резултатът от спешната биопсия се съобщава по
телефона, нанася се върху искането за хистологично
изследване и се вписва в журнала за биопсии.
8. Материалът, от който е направено гефрирно из-
следване, се пуска задължително за включване в пара-
финов блок.
9. Рутинната биопсия от същия пациент, която след-
ва спешната, следва да се диагностицира от лекаря, който
е отговорил спешното изследване.
8. Цитологично изследване.
8.1. Същност. Осъществява се върху изолирани гру-
пи или единични клетки, получени от лигавицата на
кухи органи, серозни обвивки или от дълбочината на
паренхимни органи с помощта на пункция.
8.2. Област на приложениие. Поради големите пре-
димства, които има цитологичният метод на изследва-
не (простотата на вземане на материала, възможност
за многократно изследване, бързина на приготвяне на
препаратите, и съответно на отговаряне—от порядъка
на минути, до часове), цитологичното изследване се
прилага при широк кръг от заболявания. При много
патологични процеси, особено при туморните, цитоло-
гичната диагностика е необходима база за определяне
на по-нататъшното поведение на клинициста.
8.3. Методичен принцип. Методиките се базират на
фиксиране и оцветяване със съответни оцветители на
клетъчните елементи, за да се проявят на светлинно
микроскопско ниво клетъчните структури. Специфика-
та на микроскопската картина определя морфологична-
та или нозологичната единица. Освен конвенционални-
те методи на оцветяване (с метода на Папаниколау, Май-
Грюнвалд-Гимза и др.), за цитологичната диагностика
могат да се приложат и по-специални способи, като напр.
цитохимични методи (за доказване на гликоген, МПЗ и
др.), флуоресцентна микроскопия, цитофотометрия и др.
На цитологично изследване подлежат всички:
—намазки—ТАБ, гинекологична и скринингова
цитология, храчки, четкови биопсии или при инвазив-
ните клинични техники, плътни туморни маси;
—отпечатъци—от лимфни възли, други хирургични
биопсии, трепанобиопсии;
—центрофугати (камери на Sayk—Стоянов)—изли-
ви в телесни кухини, урина, бронхо-алвеоларен лаваж,
пункции на кисти и други материали в течен вид.
Изследване на цитологични материали
I. Процедурни изисквания за приемане, обработка и
съхраняване на материалите
1. Материалите от изливи в телесни кухини, кисти и
други се изпращат в хепаринизиран съд до 30 мин след
вземането им.
2. Материалите от лимфни възли, хирургични биоп-
сии, трепанобиопсии се изпращат нефиксирани в сух,
затворен съд.
3. Всеки материал се приема с фиш за цитологично
изследване, съдържащ трите имена на пациента, годи-
ни, пол, ЕГН, № на здравната осигуровка, местоживе-
ене, професия, клинични данни и името с подпис на
лекаря, изискващ изследването, както и амбулаторен
номер или номер на ИЗ (приложения № 1 и 2).
4. Всеки материал се завежда в журнал под отделен
номер.
5. Материалите се обработват и оцветяват с различ-
ни оцветителни техники според вида на материала и
начина на тяхното вземане.
6. Отговор на цитологичните препарати се дава от
24 до 48 часа от получаване на материала; за скринин-
гова цитология—до 5 дни.
7. Всички цитологични изследвания се съхраняват в
архив за срок 10 години.
II. Методи за приготвяне на цитологични препарати
А. От пунктати:
1. Зареждане на материала в камера на Зайк. Прес-
той—до 8 ч. на следващия ден.
2. Фиксиране в метилов алкохол—3—5 мин.
3. Изплакване във вода.
4. Оцветяване.
5. Измиване във вода.
6. Изсушаване на стайна температура.
7. Включване—ксилол, балсам.
Б. Отпечатъци от свежи материали:
1. След получаване на материала се осигурява све-
жа срезна повърхност, която се попива с филтърна хар-
тия и върху предметно стъкло се правят отпечатъци.
2. Готовите препарати се сушат:
на въздух—6—24 часа;
в термостат—20—30 мин;
на спиртна лампа—1—2 мин.
3. Фиксират се 3—5 мин в метилов алкохол или
ацетон.
4. Оцветяване.
5. Включване—ксилол, балсам.
В. Цитонамазки (ТАБ, гинекологична и скрининго-
ва цитология, храчки, четкови биопсии при инвазивни-
те клинични техники):
1. Изсушаване (на стайна температура, в термостат
или на пламък).
2. Фиксиране в метилов алкохол—10 мин.
3. Изплакване във вода.
4. Оцветяване (по Гимза или Папенхайм).
5. Изплакване с вода.
6. Включване—ксилол, балсам.
Раздел VII
Стандартни процедури за обработка на различни
видове тъкани
1. Стандартна процедура за обработка на ендоскоп-
ски материал.
1.1. Внимателно отделяне на материала от щипките
и поставяне в 10 %-ов буфериран формалин.
1.2. Водене по “бързата методика”.
1.3. Късчетата се включват в един блок; правят се
серийни срезове на 1—5 микрона. Монтират се макси-
мален брой срезове върху едно стъкло.
1.4. Два от препаратите се оцветяват с хематокси-
лин-еозин. Според вида на материала и преценката на
патолога се прилагат допълнителни методики за оцве-
тяване върху резервните срезове.
—при ендоскопски материал препаратите се оцве-
тяват с PAS и алциан;
—при чернодробна биопсия—van Gieson, PAS с кон-
трола, орсеин;
—при бъбречна биопсия—PAS с метенамин, Мasson-
trichrome, Fe реакция.
При ендоскопски отстранен полип задължително
се прави срез през крачето на полипа за установяване
на инвазия.
Ендоскопски отстранените полипи с размери над
3 мм се обработват по обичайната процедура.
Достоверността на диагнозата върху ендоскопски
материал се увеличава при спазване на определени стан-
дарти за броя и големината на късчетата—минимум
две за ректални, оптимално шест-осем за стомашни
гастробиопсии и оптимално осем късчета при язвена
лезия на стомаха. При чернодробните биопсии трябва
да има минимум три портални пространства, при бъб-
речните—минимум 6 гломерула.
Бърза методика за ендоскопски биопсии
1. Фиксация в загрят до 80 °С фиксатор—2 мин.
2. Ацетон 50 °С—2 мин.
3. Ксилол 60 °С—1—2 мин.
4. Парафин 70 °С—4 мин.
5. Включване.
6. Рязане.
Забележка. Всички р-ри са в термостат за загряване
до необходимата температура, а престоят им за опреде-
лените минути е на стайна температура. Само в пара-
фин престоят е 4 мин в термостат.