Държавен вестник, бр. 31, 2024 г., стр. 58

СТР.  58	
Д Ъ Р Ж А В Е Н  В Е С Т Н И К 	
БРОЙ  31
Разтвор на натриев хлорид: разтварят се 
2,9 g натриев хлорид във вода и се долива 
до 100 ml.
Ацетатен буферен разтвор с рН 5,3: разтва-
рят се 43,5 g натриев ацетат (CH3СООNa.3H2O) 
в дестилирана вода, довежда се рН на разтвора 
до 5,3 с ледена оцетна киселина и се долива 
до 250 ml.
Разтвор на нишесте
Определяне на сухото вещество в нишестето
Претеглят се около 2 g въздушно сухо 
нишесте в часовниково стъкло и се суши 
90 min при температура 130 °С. Охлажда се 
в ексикатор и се претегля отново.
Приготвяне на разтвор на нишесте
В ерленмайерова колба с вместимост 250 ml 
се претегля количество нишесте, еквивалент-
но на 2,000 g безводно нишесте. Добавят се 
90 ml вода и се разбърква чрез разклащане. 
Бързо се нагрява до кипене при постоянно 
разбъркване и се кипи умерено 3 min. Горе-
щият разтвор се прехвърля в мерителна колба 
с вместимост 100 ml. Охлажда се бързо до 
стайна температура на течаща вода, допълва 
се с вода до марката и се разбърква добре. 
Разтворът се приготвя в деня на използването 
му. Използва се само разтворимо нишесте, 
даващо бистри сини разтвори с йода.
Основен разтвор на йод
Разтварят се 11,0 g йод и 22,0 g калиев йо-
дид в 30 – 40 ml вода и се разрежда до 500 ml. 
Основният разтвор може да се съхранява около 
една година в затворен, тъмно оцветен съд.
Разреден разтвор на йод
Разтварят се 20,0 g калиев йодид във вода, 
добавят се 2 ml от основния разтвор на йод и 
се разрежда до 500 ml. Този разреден разтвор 
се прави в деня на използването, като се из-
бягва доколкото е възможно контактът му с 
въздуха, като след употреба колбата веднага 
се затваря.
7.4. Процедура
7.4.1. Приготвяне на разтвора на мед
Претеглят се 10,0 g мед в чаша и се раз-
тварят в около 15 ml вода и 5 ml ацетатен 
буфер без нагряване. Разтворът се прехвърля 
количествено в мерителна колба с вместимост 
50 ml, съдържаща 3 ml разтвор на натриев 
хлорид, и се долива до марката.
Много важно е медът да бъде буфериран 
преди контакта му с натриевия хлорид, тъй 
като при рН под 4,0 в присъствие на натриев 
хлорид диастазната активност се редуцира 
бързо.
Разтворът на мед може да се съхранява 
само няколко часа и поради това се приготвя 
преди анализа.
7.4.2. Стандартизиране на разтвора на ни-
шесте и на първоначалната оптична плътност 
на сините нишестено-йодни разтвори.
Стандартизирането се извършва, за да се 
установи количеството на водата, което трябва 
да се добави към реакционната смес, за да 
се постигне оптична плътност на нишестено-
йодните разтвори между 0,745 и 0,770.
В епруветки се пипетират 20, 21, 22, 23, 24 
и 25 ml вода и 5 ml разреден разтвор на йод. 
В първата епруветка се добавят 0,5 ml смес, 
състояща се от 10 ml вода и 5 ml нишестен 
разтвор, разбърква се добре и веднага се от-
чита оптичната плътност при 660 nm срещу 
празна проба вода в кювета 1 сm. По същия 
начин се постъпва и с другите епруветки, 
докато оптичната плътност влезе в интервала 
0,770 – 0,745.
Определеното по този начин количество 
на водата се използва като стандартно раз-
реждане при всяко определяне на диастазната 
активност с този нишестен разтвор.
7.4.3. Определяне на диастазната активност 
на меда
В колба с вместимост 50 ml се поставят 
10 ml разтвор на мед и колбата се поставя във 
водна баня при температура 50 °С заедно с 
друга колба, съдържаща около 10 ml разтвор на 
нишесте. След 15 min към разтвора на мед се 
добавят 5 ml от нишестения разтвор, разбърк-
ва се и се засича времето. През определени 
интервали, за първи път след 5 min, се вземат 
по 0,5 ml от сместа, поставят се в епруветка и 
се добавят бързо 5 ml от разредения разтвор 
на йод. Добавя се определеното количество 
вода при калибрирането (т. 7.4.2), разбърква 
се и веднага се отчита оптичната плътност 
при 660 nm срещу празна проба вода в кю-
вета 1 сm. След първото вземане на пробата 
интервалите трябва да се подберат така, че 
да се получат 3 – 4 стойности на оптичната 
плътност в интервала 0,456 и 0,155. Ако пър-
вата отчетена стойност на оптичната плътност 
е по-голяма от 0,658, интервалите трябва да 
са от 10 min, ако стойността е между 0,658 и 
0,523, интервалите са между 5 и 10 min и ако 
стойността е между 0,523 и 0,456, интервалите 
са между 2 и 5 min.
Ако първата отчетена стойност на оптична-
та плътност при 5 min е по-ниска от 0,350, се 
препоръчва да се намали времето за първото 
определяне.
7.4.4. Празна проба
Към 5 ml вода се прибавят 10 ml от раз-
твора на мед. Към 0,5 ml от сместа се доба-
вят 5 ml разреден разтвор на йод. Добавя се 
определеното количество вода, разбърква се 
и се отчита оптичната плътност при 660 nm 
срещу празна проба вода в кювета 1 сm. Ако 
има оптична плътност, отчетената стойност се 
изважда от получените стойности по т. 7.4.3.
7.4.5. Изчисляване на резултатите
Диастазната активност като диастазно 
число (ДЧ) се изчислява по формулата: