Държавен вестник, бр. 109, 2002 г., стр. 35

Б Р О Й  109
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
С Т Р .  35
Обемът се допълва със смес от пропан-2-ол и
хексан (3.1). Този реактив е стабилен в продъл-
жение на една седмица.
3.3. Разтворител Б - в мерителна колба от
100 ml се пренасят с пипета 2 ml 3-аминопро-
пан-1-ол и 10 ml ледена оцетна киселина. Ох-
лаждат се до стайна температура и обемът се
допълва с N,N-диметилформамид. Този реак-
тив е стабилен в продължение на една седмица.
3.4. Анилин, ч.з.а.—ако оптическата плът-
ност на празната проба надвишава 0,022, ани-
линът се дестилира над цинков прах, като се
отстраняват първите и последните 10% от дес-
тилата. Охлажда се и се съхранява в кафява
бутилка с шлифова запушалка. Този реактив се
съхранява няколко месеца.
3.5. Стандартен разтвор А на госипол - в
мерителна колба от 250 ml се пренасят 27,9 mg
госипол ацетат. Разтваря се и обемът се допъл-
ва с разтворител А (3.2). 50 ml от този разтвор
се пренасят в мерителна колба от 250 ml и обе-
мът се допълва с разтворител А. Концентраци-
ята на госипола в този разтвор е 0,02 mg/ml.
Преди употреба се оставя в продължение на един
час при стайна температура.
3.6. Стандартен разтвор Б на госипол—в
мерителна колба от 50 ml се пренасят 27,9 mg
госипол ацетат. Разтваря се и обемът се допъл-
ва с разтворител Б (3.3). Концентрацията на
госипола в този разтвор е 0,5 mg/ml.
Стандартните разтвори A и Б на госипол са
стабилни в продължение на 24 h, ако се съхра-
няват на тъмно.
4. Апаратура:
4.1. клатачен апарат: около 35 оборота в min;
4.2. спектрофотометър.
5. Процедура
5.1. Изпитвана проба
Количеството на пробата зависи от предпо-
лагаемото съдържание на госипола в нея. За
предпочитане е да се работи с малка проба и
относително голяма аликвота от филтрата, така
че да се получи количество госипол достатъчно
за прецизно спектрофотометрично измерване.
За определяне на свободния госипол в памучно
семе, брашно от памучно семе и в кюспе от
памучно семе изследваната проба не трябва да
надвишава 1 g. При определяне в смесени про-
дукти за изхранване на животни пробата може
да бъде 5 g. В повечето случаи е достатъчна
аликвота от 10 ml от филтрата. Тя трябва да
съдържа от 50 до 100 µg госипол. При определя-
не на общия госипол пробата трябва да бъде от
0,5 до 5 g, така че аликвота от 2 ml от филтрата
да съдържа от 200 до 400 µg госипол.
Анализът се провежда при стайна темпера-
тура около 20°C.
5.2. Определяне на свободен госипол
Пробата се пренася в колба от 250 ml с шли-
фовано гърло, като дъното на колбата трябва
да е покрито с трошено стъкло. 50 ml от разтвор
А (3.2) се добавят с пипета, колбата се запушва
и се разбърква в продължение на 1 h на клатач-
ния апарат. Филтрува се през сух филтър и
филтратът се събира в малка колба с шлифова-
но гърло. По време на филтруването фунията се
покрива с часовниково стъкло. Равни аликвоти
от филтрата, съдържащ от 50 до 100 µg госипол,
се пренасят в две мерителни колби (А и Б) от по
25 ml. Ако е необходимо, обемът се допълва до
10 ml с разтворител А (3.2). Обемът в колба А
се допълва със сместа пропан-2-ол - хексан (3.1).
Този разтвор се използва като стандартен и
срещу него се измерват разтворите на пробата.
В две други мерителни колби от 25 ml (В и Г)
се пренасят с пипета по 10 ml от разтворител А
(3.2). Обемът в колба В се допълва със сместа
пропан-2-ол - хексан (3.1). Този разтвор се из-
ползва като стандартен и срещу него се измер-
ва празната проба.
Във всяка от колбите Г и Б се добавят по 2 ml
анилин (3.4). Нагрява се в продължение на 30
min над кипяща водна баня, за да се развие оц-
ветяването. Охлажда се до стайна температура,
обемът се допълва със сместа пропан-2-ол -
хексан (3.1), хомогенизира се и се оставя да
престои 1 h.
Оптическата плътност на празната проба Г
се определя чрез сравняване със стандартния
разтвор В. Оптическата плътност на пробата Б
се определя чрез сравняване със стандартния
разтвор А. Измерването се провежда на
спектрофотометър при 440 nm, като се използ-
ва кювета с дебелина 1 cm.
Оптическата плътност на празната проба се
изважда от тази на изследваната проба (кори-
гирана оптическа плътност). От тази стойност
се пресмята количеството на свободния госи-
пол, както е описано в т. 6.
5.3. Определяне на общия госипол
Пробата, съдържаща от 1 до 5 mg госипол, се
пренася в мерителна колба от 50 ml и се добавят
10 ml от разтворител Б (3.3). Едновремено с това
се приготвя и празната проба като 10 ml от раз-
творител Б (3.3) се пренасят в друга мерителна
колба от 50 ml. Двете колби се нагряват в про-
дължение на 30 min над кипяща водна баня.
Охлажда се до стайна температура, обемът на
всяка от колбите се допълва със сместа пропан-
2-ол - хексан (3.1). Хомогенизира се и се оставя
да се утаи в продължение на 10—15 min, след
което се филтрува и филтратите се събират в
колби с шлифови запушалки.
В две мерителни колби от 25 ml се пренасят
по 2 ml от пробата. В други две мерителни кол-
би от 25 ml се пренасят по 2 ml от празната проба.
Обемът на колбите от всяка серия се довежда
до 25 ml със сместа пропан-2-ол - хексан (3.1).
Тези разтвори се използват като стандартни
разтвори.
В други две колби се пренасят по 2 ml анилин
(3.4.) Нагрява се в продължение на 30 min над
кипяща водна баня, за да се развие оцветяване-
то. Охлажда се до стайна температура, обемът