Държавен вестник, бр. 101, 2005 г., стр. 140

С Т Р .  140
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
Б Р О Й  101
екстракцията на киселините от пробата, е кри-
тично и границите за количеството на обработва-
ната проба трябва да се поддържат в посочения
интервал.
7.2. По желание може да се използва подходя-
ща предколона.
В. ОПРЕДЕЛЯНЕ НА ПРОПИОНОВА КИСЕ-
ЛИНА
1. Област на приложение
Този метод е подходящ за определяне на про-
пионова киселина с максимална концентрация 2 %
(M/M) в козметични продукти.
2. Дефиниция
Концентрацията на пропионова киселина, из-
мерена по този метод, се изразява като % (M/M)
от масата на продукта.
3. Принцип
След екстракция на пропионовата киселина от
продукта определянето се извършва чрез газова
хроматография с използване на 2-метилпропионо-
ва киселина като вътрешен стандарт.
4. Реактиви
Всички реактиви трябва да са с квалификация
“за газова хроматография”.
4.1. Етанол, 96 % (V/V).
4.2. Пропионова киселина.
4.3. 2-Метилпропионова киселина.
4.4. Ортофосфорна киселина, 10 % (M/V).
4.5. Стандартен разтвор на пропионова киселина.
В мерителна колба от 50 cm3 (ml) се претегля
около 1,00 g (p) с точност 0,001 g пропионова кисе-
лина и се долива до марката с етанол (4.1).
4.6. Разтвор на вътрешен стандарт.
В мерителна колба от 50 cm3 (ml) се претегля
около 1,00 g (М/) с точност 0,001 g 2-метилпропио-
нова киселина и се долива до марката с етанол (4.1).
5. Апаратура
5.1. Стандартно лабораторно оборудване.
5.2. Газов хроматограф с пламъчно-йонизацио-
нен детектор.
5.3. Стъклена епруветка (2 Ч 15 сm) със запу-
шалка на винт.
5.4. Водна баня, нагласена на 60 °С.
5.5. Стъклена спринцовка от 10 cm3 (ml) с мем-
бранен филтър (диаметър на порите 0,45 µm).
6. Процедура
6.1. Приготвяне на пробата.
6.1.1. Приготвяне на проба без вътрешен стан-
дарт.
В стъклена епруветка (5.3) се претегля около
1 g с точност 0,001 g от пробата (M). Прибавят се
0,5 cm3 (ml) фосфорна киселина (4.4) и 9,5 cm3 (ml)
етанол (4.1).
Епруветката се затваря и се разклаща енергич-
но. Ако е необходимо, епруветката се поставя на
водна баня, нагрята до 60 °С (5.4) за 5 min за пълно
разтваряне на липидната фаза. Охлажда се бързо
на течаща вода. Част от разтвора се филтрува през
мембранен филтър (5.5). Филтратът се хроматог-
рафира същия ден.
6.1.2. Приготвяне на проба с вътрешен стандарт.
В стъклена епруветка (5.3) се претегля 1 g с
точност 0,001 g от пробата (M). Прибавят се
0,5 cm3 (ml) фосфорна киселина (4.4), 0,50 cm3 (ml)
от разтвора на вътрешен стандарт (4.6) и 9,0 cm3
(ml) етанол (4.1).
Епруветката се затваря и се разклаща енергич-
но. Ако е необходимо, епруветката се поставя на
водна баня, нагрята до 60 °С (5.4) за 5 min за раз-
тваряне на липидната фаза. Охлажда се бързо на
течаща вода. Част от разтвора се филтрува през
мембранен филтър (5.5). Филтратът се хроматог-
рафира същия ден.
6.2. Условия за газова хроматография.
Препоръчват се следните работни условия:
Колона
Тип—неръждаема стомана
Дължина—2 m
Диаметър—1/8"
Пълнеж—10 % SPTM 1000 (или еквивалентна) +
1 % H3PO4 върху Chromosorb WAW 100 до 120 mesh.
Температура
Инжектор—200 °С
Колона—120 °С
Детектор—200 °С
Газносител—азот
Скорост на потока—25 cm3 (ml)/min.
6.3. Хроматография.
6.3.1. Стандартна крива.
В серия мерителни колби от 20 cm3 (ml) се пос-
тавят съответно 0,25; 0,50; 1,00; 2,00 и 4,00 cm3 (ml)
разтвор на пропионова киселина (4.5). Във всяка
колба се добавя с пипета 1,00 cm3 (ml) от разтвора
на вътрешен стандарт (4.6), доливат се до марката
с етанол (4.1) и се разбъркват.
Приготвените по този начин разтвори съдър-
жат М/ mg/cm3 (ml) 2-метилпропионова киселина
като вътрешен стандарт (т.е. 1 mg/cm3  (ml) и р/4, р/
2, р, 2р и 4р mg/cm3 (ml) пропионова киселина (т.е.
0,25; 0,50; 1,00; 2,00 и 4,00 mg/cm3 (ml).
Инжектират се по 1 µl от всеки от тези разтво-
ри и се построява стандартна крива, като на абсци-
сата се нанасят отношенията на масите на пропи-
оновата киселина към 2-метилпропионовата ки-
селина, а по ординатата—отношенията на съот-
ветните площи на пиковете им.
За всеки разтвор се правят по три инжектира-
ния и се изчислява средната площ на пиковете.
6.3.2. Определяне.
Инжектира се 1 µl от филтрата на пробата 6.1.1.
Получената хроматограма се сравнява с тези на
стандартните разтвори (6.3.1). Ако пикът има приб-
лизително същото време на задържане както 2-
метилпропионовата киселина, се сменя вътреш-
ният стандарт. Ако не се наблюдава пречене, се
инжектира 1 µl от филтрата на пробата 6.1.2 и се
измерват площите на пика на пропионовата кисе-
лина и на пика на вътрешния стандарт.
Правят се три инжектирания за всеки разтвор
и се изчислява средната площ на пиковете.
7. Изчисления
7.1. От стандартната крива, получена в 6.3.1, се
отчита отношението на масите К, съответстващо
на отношението на площите на пиковете, получе-
ни в 6.3.2.
7.2. От така полученото отношение на масите
се изчислява съдържанието на пропионова кисе-
лина (x) в % (M/M), използвайки формулата:
0,5 Ч 100 Ч Мґ
Мґ
x %(M/M) = К ––––––––  = К ––– ,
50 Ч M
M
където: