Държавен вестник, бр. 27, 2007 г., стр. 17

Б Р О Й  27
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
С Т Р .  17
1.3. Схема за установяване и идентифициране
на Clavibacter michiganensis ssp. sepedonicus в проби
от картофени растения без симптоми
(1)
Виж раздел 3.2 за препоръчителните размери
на пробата.
(2)
Методите за екстракция и концентриране на
патогена са описани в раздел 3.2.
(3)
Ако най-малко два теста, на базата на различни
биологични принципи, са положителни, трябва
да се направи изолация и потвърждаване. Из-
вършва се поне един скринингов тест. Когато
той е отрицателен, се счита, че пробата е отри-
цателна. Когато той е положителен, трябва да
се направи втори или няколко скринингови тес-
та, на базата на различни биологични принци-
пи, за да се провери първият положителен ре-
зултат. Ако вторият или другите тестове са от-
рицателни, се счита, че пробата е отрицателна.
Не са необходими допълнителни тестове.
(4)
Тестът за селективно изолиране и типична мор-
фология на колонията са описани в раздел 8.
(5)
IF тест е описан в раздел 4.
(6)
PCR тест е описан в раздел 6.
(7)
FISH тест е описан в раздел 5.
(8)
Биологичният тест е описан в раздел 7.
(9)
Култивирането или биологичният тест могат да
се провалят поради конкуренция или потиска-
не от сапрофитни бактерии. Ако се получат по-
ложителни резултати при скрининговите тес-
тове, но тестовете за изолация са отрицателни,
повторете тестовете за изолация и ако е необхо-
димо, тествайте допълнителни проби.
(10)
Сигурната идентификация на предполагаеми
чисти култури от C. m. subsp. sepedonicus се по-
лучава, като се използват тестовете, описани в
раздел 9.
(11)
Патогенният тест е описан в раздел 10.
2. Визуален преглед за симптоми на пръстено-
видно гниене
2.1. Картофени растения
При европейските климатични условия сим-
птомите рядко се откриват на полето и често само
в края на сезона. Още повече симптомите са често
маскирани или повлияни/объркани с/от други бо-
лести, остаряване или други механични повреди.
Следователно може лесно да се пропуснат сим-
птомите при инспекции на полето. Симптомите
на увяхването са много различни от тези при кафя-
вото гниене; то обикновено е бавно и първоначал-
но е ограничено до периферията на листата. Мла-
дите заразени листа често продължават да нараст-
ват макар и по-бавно в заразените зони. Това съз-
дава листа със странни форми. Листата, засегнати
от блокирането на проводящите тъкани по-надолу
по стъблото, често развиват хлоротични, жълти
до оранжеви зони между жилките. Заразените
млади листа, основните листа и дори стъбла могат
впоследствие да загинат. Често листата и клубе-
ните са просто с намален размер. Рядко растения-
та са недоразвити. Цветни снимки на обхвата от
симптоми могат да бъдат намерени на страницата
в интернет http://forum.europa.eu.int/Public/irc/sanco/
Home/main.
2.2. Картофени клубени
Най-ранните симптоми са лека стъкловидност
или полупрозрачност на тъканта, без омекване
около проводящата система, особено близо до сто-
лона. Проводящият пръстен на столоните може да
е малко по-тъмен на цвят от обикновено. Първият
лесно определим симптом е този, при който про-
водящият пръстен има жълтеникаво оцветяване и
когато клубенът се притисне леко с пръсти, струй-
ки от подобна на сирене материя излизат от прово-
дящите съдове. Този ексудат съдържа милиони
бактерии. Покафеняването на проводящата тъкан
може да се развие бързо и симптомите по клубени-
те на този етап наподобяват тези на кафявото гни-
ене, причинявано от Ralstonia solanacearum. Пър-
воначално тези симптоми може да са ограничени
в една част от пръстена, не задължително близо до
столоните, и могат постепенно да се разпрострат
по целия пръстен. С напредването на инфекцията
става разрушаване на проводящата тъкан; външ-
ната кора може да се отдели от вътрешната. При
напредналите стадии на инфекция се появяват
пукнатини по повърхността на клубена, често чер-
веникаво-кафяви по краищата. Напоследък в Ев-
ропа се появиха няколко случая, при които цент-
ралната кора гние, в същото време като проводя-
щия пръстен, причиняващо вторична инвазия с об-
разуване на кухини и некроза. Вторичната гъбна
или бактериална зараза може да маскира симпто-
мите и да бъде трудно и дори невъзможно да се
различат симптомите на напреднало пръстеновид-
но гниене от другите  видове гниенета по клубени-
те. Възможни са атипични симптоми. Цветни сним-
ки на обхвата от симптоми може да се намери на
страницата в интернет http://forum.europa.eu.int/
Public/irc/sanco/Home/main.
3. Приготвяне на пробата
3.1. Картофени клубени
Забележки:
— Стандартният размер на пробата е 200 клубе-
на за тест. По-интензивното пробовземане изисква
повече тестове на проби с този размер. По-големи-
ят брой клубени в пробата ще доведе до потискане
или трудно интерпретиране на резултатите. Въпре-
ки това процедурата може за удобство да бъде при-
ложена за проби с по-малко от 200 клубена, когато
са налични по-малко клубени.