Държавен вестник, бр. 79, 2006 г., стр. 48

С Т Р .  48
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
Б Р О Й  79
(2) Биологичните тестове се използват при
спазване изискванията по чл. 5 и чл. 8, т. 2 от
Наредба № 15 за минималните изисквания за
защита и хуманно отношение към опитните
животни и изискванията към обектите за из-
ползването, отглеждането и/или доставката им
(ДВ, бр. 17 от 2006 г.).
Чл. 68б. Съдържанието на паралитичен ток-
син (PSP) в ядливи части на мекотели (в цялото
тяло или в отделни ядливи части) се установява
с биологичен тест на изследване или друг меж-
дународно признат метод. Успоредно с биоло-
гичния тест на изследване може да се използва
и друг метод, когато е необходимо за откриване
на саксотоксин или неговите аналози, за които
има налични стандарти. Когато резултатите са
съмнителни, като референтен метод се използ-
ва биологичният тест.
Чл. 68в. Общото съдържание на амнезиен
токсин (ASP) в ядливите части на мекотели (в
цялото тяло или в отделни ядливи части) се
установява чрез високоефективна течна хрома-
тография (HPLC) или друг признат метод. Ко-
гато резултатите са съмнителни, като референ-
тен метод се използва HPLC.
Чл. 68г. Съдържанието на липофилен ток-
син се определя по един от биологичните мето-
ди, посочени в чл. 68д, или по един от алтерна-
тивните методи, посочени в чл. 68е.
Чл. 68д. (1) За установяване на окадаична
киселина, динофизистоксин, пектенотоксин,
иесотоксини и азаспирациди се използва серия
от биологични тестове с мишки, с различен обем
на пробата (хепатопанкреас или цяло тяло) и
разтвори за екстракция и пречистване. Чувст-
вителността и селективността зависят от избо-
ра на използваните разтворители за екстрахи-
ране и пречистване и това следва да се има
предвид, когато се взема решениe за метода,
който ще бъде използван, за да се обхванат всич-
ки видове токсини.
(2) За установяване на окадаична киселина,
динофизистоксини и пектенотоксини се изпол-
зва единичен биологичен тест с мишка. Този
тест може да се допълни, ако е необходимо, с
течно/течно пречистване с етилацетат/вода или
дихлорметан/вода за отстраняване на евенту-
ална интерференция. Установяването на азас-
пирацид в нормални граници по тази процедура
се извършва чрез използване на цялото тяло
като количество проба.
(3) За всеки тест се използват по три мишки.
Когато две от трите мишки умрат в продълже-
ние на 24 h след инжектирането с екстракт,
еквивалентен на 5 g хепатопанкреас или 25 g за
цяло тяло, се отчита положителен резултат за
наличие на окадаична киселина, динофизисток-
син, пектенотоксин и азаспирацид над устано-
вените граници.
(4) Биологичните тестове с мишки с ацето-
нов екстракт, последван от течно/течно пречис-
тване с диетилов етер, могат да се използват за
откриване на окадаична киселина, динофизис-
токсини, пектенотоксини и азаспирациди. С този
тест не е възможно да се откриват иесотокси-
ни, тъй като те могат да се загубят по време на
пречистването. За всеки тест се използват по
три мишки. Когато две от трите мишки умрат
в продължение на 24 h след инжектирането с
екстракт, еквивалентен на 5 g хепатопанкреас
или 25 g за цяло тяло, се отчита като положите-
лен резултат за наличие на окадаична кисели-
на, динофизистоксини, пектенотоксини и азас-
пирациди на установените граници, посочени в
чл. 110, т. 2, букви “в” и “д” от Наредба № 36 от
2006 г. за специфичните изисквания при произ-
водство, транспортиране и пускане на пазара
на суровини и храни от животински произход.
(5) За установяване на окадаична киселина,
динофизистоксини и азаспирациди може да се
използва биологичен тест с плъх. За всеки тест
се използват три плъха. При проява на диария
в един от плъховете се отчита положителен
резултат за наличие на окадаична киселина,
динофизистоксини и азаспирациди на устано-
вените граници, посочени в чл. 110, т. 2, букви
“в” и “д” от Наредба № 36 от 2006 г. за специ-
фичните изисквания при производство, транс-
портиране и пускане на пазара на суровини и
храни от животински произход.
Чл. 68е. (1) Като алтернативни или допъл-
ващи биологичните тестове се използват реди-
ца методи, като високоефективна течна хрома-
тография (HPLC) с флуорометрично открива-
не, течна хроматография (LC), мас спектромет-
рия (MS), имунологични тестове и функционал-
ни тестове, като инхибиращ фосфатазата био-
логичен тест, при условие че не са по-малко
ефективни от биологичните тестове и прилага-
нето им самостоятелно или в комбинация оси-
гурява съответна защита здравето на хората по
отношение на:
1. окадаична киселина и динофизистоксини—
за откриване наличието на DTX3 може да се
наложи хидролиза;
2. пектенотоксини—PTX1 и PTX2;
3. иесотоксини—YTX, 45 OH YTX, хомо YTX
и 45 OH хомо YTX;
4. азаспирациди—AZA1, AZA2 и АZA3.
(2) Когато се открият нови аналози, имащи
значение за здравето на хората, те се включват
в анализите. Преди химическите изследвания е
необходимо да се осигурят стандарти. Общата
токсичност се изчислява с помощта на конвер-
сионни фактори, основани на наличните данни
за токсичност на всеки токсин.
(3) Параметрите на тези тестове се опреде-
лят след валидиране, като се използва между-
народно признат протокол.
(4) Биологичните тестове се заместват от
алтернативни методи за установяване нали-
чие на токсини по най-бърз начин, след като
съответните стандартни материали за откри-
ване на токсините, посочени в чл. 110, т. 2 от
Наредба № 36 от 2006 г. за специфичните изис-
квания при производство, транспортиране и