Държавен вестник, бр. 60, 2003 г., стр. 27

Б Р О Й  60
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
С Т Р .  27
1. Изразяване на резултатите:
I—маса, в g, на отделените примеси
М—процент на зърната в почистената проба, които
частично или напълно са загубили стъкловидния си лом.
2. Резултат
Процентът зърна (х %), които напълно или час-
тично са загубили своя стъкловиден лом, в пробата
от 100 g е:
х % = М . 100 / (100—I).
Приложение № 6
към чл. 6, ал. 1, т. 9
Метод за определяне съдържанието
на танин в сорго (ISO 9648)
1. Обхват
Този международен стандарт установява универса-
лен метод за определяне на съдържанието на танин в
зърно от сорго.
Методът не е специфичен за един отделен тип поли-
феноли. Неговата полезност е установена по добрата
отрицателна корелация, наблюдавана между метабо-
лизираната енергия, определена при експеримент с
птици, и резултатите, получени по този метод.
2. Нормативни позовавания
Посочените стандарти съдържат текстове, чиито
позовавания в този стандарт се считат за текстове на
този международен стандарт. Към момента на публи-
куването посочените издания са били валидни. Всички
стандарти са обект на ревизия, поради което страните
по договорите следва да прилaгат по възможност пос-
ледните издания на посочените по-долу стандарти.Чле-
новете на IEC и на ISO поддържат регистри на актуал-
ните международни стандарти.
БДС ISO 712 Зърно от житни култури и продукти от
преработката на зърно. Определяне на влага (основен
сравнителен метод)
БДС ISO 13 690 Зърнено-житни, зърнено-бобови
култури и млевни продукти. Вземане на проби от насипи
3. Принцип
Танинът се екстрахира с диметилформамид. Цент-
рофугира се, добавя се амониев цитрат и амоняк в алик-
вотна част към супернатантната течност и се измерва
спектрометрично абсорбцията при 525 nm. Определя се
съдържанието на танин по калибрационна крива, из-
градена по танинова киселина.
4. Реагенти
Всички реагенти трябва да бъдат с аналитична чис-
тота. Използваната вода трябва да бъде дестилирана
или най-малкото вода с еквивалентна чистота.
4.1. Танинова киселина, 2 g/l разтвор
Препоръчва се използването на Мerk 773 танинова
киселина, тъй като произходът на таниновата киселина
има определено влияние за калибрационната крива1,
което способства и за междулабораторно сравняване
на резултатите.
Този разтвор може да се пази в продължение на
една седмица.
4.2. Амоняк, разтвор от 8,0 g/l NH3
4.3. Диметилформамид, 75 % (v/v), разтвор
Поставят се 75 ml диметилформамид в 100 ml мери-
телна колба. Долива се с вода до марката.
Внимание—Диметилформамидът е опасен при
вдишване и контакт с кожата. Той дразни също така
очите.
4.4. Железен амониев цитрат, със съдържание на
желязо между 17 и 20 % (m/m), 3,5 g/l разтвор, пригот-
вен 24 h преди употреба.
Съдържанието на желязо в цитрата оказва влияние
върху резултата, поради което то трябва да се съблюда-
ва внимателно.
5. Апаратура
Лабораторна апаратура и по-конкретно следната:
5.1. Механичен раздробител, способен да разрушава
до частици, минаващи напълно през сито (5.2)
5.2. Сито с размер на отворите 0,5 mm
5.3. Центрофуга с обороти 3000 g (3000 Ч 9,81 m/s2)
5.4. Центорфужни епруветки, 50 ml, със запушалки
за херметично затваряне
5.5. Механична бъркалка или магнитна бъркалка
5.6. Механична клатачка за епруветки (тип vortex)
5.7. Спектрометър с клетки, широки 10 mm, позво-
ляващи измерване при 525 nm
5.8. Пипети от 1 ml, 5 ml и 20 ml
5.9. Пипети, градуирани, от 5 ml и 10 ml
5.10. Епруветки, 140 mm Ч 14 mm
5.11. Мерителни колби от 20 ml
6. Вземане на проба
Вземането на проба се извършва съгласно ISO 950.
Зърната от сорго, на които трябва да се определя
съдържанието на танин, може да се запазят сухи, на
тъмно за няколко месеца.
7. Подготовка на пробата за изпитване
Лабораторната проба се почиства от примеси и се
раздробява с механичния раздробител (5.1), така че
частиците да преминават напълно през сито (5.2). Хо-
могенизира се добре.
Танините в раздробеното зърно се окисляват бързо
и затова се препоръчва анализът да се извърши веднага
след раздробяването.
Забележка—Раздробеният продукт може да се за-
пази за няколко дни, ако е сух и на тъмно.
8. Процедура
8.1. Съдържание на влага в изпитваната проба
Влагата на изпитваната проба се определя съгласно
с БДС ISO 712.
8.2. Количество за изпитване
В центрофужна епруветка (5.4) се претегля коли-
чество около 1 g от пробата (т.7) с точност до 1 mg.
8.3. Определяне
8.3.1. С пипетата (5.8) се поставят 20 ml разтвор на
диметилформамид (4.3) в центрофужната епруветка.
Епруветката се затваря херметично със запушалката и
се разбърква в продължение на 60 ± 1 min с бъркалката
(5.5). След това се центрофугира 10 min при 3000 g.
8.3.2. С пипета (5.8) се взема 1 ml супернатантната
течност (8.3.1) и се поставя в епруветката за изпитване
(5.10). Последователно с пипета се добавят 6 ml вода и
1 ml разтвор на амоняк (4.2), след което се разклаща за
няколко секунди на клатачката (5.6).
8.3.3. С пипета (5.8) се взема 1 ml супернатантната
течност (8.3.1) и се поставя в епруветката за изпитване
(5.10). Последователно с пипета се добавят 5 ml вода и
1 ml разтвор на железен амониев цитрат (4.4), разклаща
се за няколко секунди на клатачката (5.6), след което с
пипета се добавя 1 ml разтвор на амоняк (4.2) и отново
се раклаща за няколко секунди на клатачката (5.6).
8.3.4. Разтворите, получени по 8.3.2 и 8.3.3 се сипват в
измерващите кювети и 10 ± 1 min след края на действията,
описани в 8.3.2 и 8.3.3, се измерват абсорбциите при 525 nm
спрямо вода, като се използва спектометърът (5.7).
Резултатът е разликата между двете абсорбции.
8.4. Брой на определенията
Извършват се две определения на изпитваните ко-
личества от една и съща проба.
8.5. Изграждане на калибрационната крива
Калибрационната крива се изработва в деня на оп-
ределението, както е посочено в позиции от а) до в).
а) Подготвят се 6 мерителни колби от 20 ml (5.11) и
с помощта на градуирана пипета (5.9) в тях се поставят
съответно 0 ml, 1 ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml и 5 ml разтвор на
танинова киселина (4.1). Допълват се до марката с раз-
твор на диметилформамид (4.3). Така получената ка-
либрационна скала съответства на съдържания на тани-
нова киселина съответно 0 mg/ml, 0,1 mg/ml, 0,2 mg/ml,
0,3 mg/ml, 0,4 mg/ml и 0,5 mg/ml.
1 Merk 773 танинова киселина е пример за подходящ тър-
говски продукт. Тази информация се дава за удобство на
ползвателите на този международен пазар и не представ-
лява изискване на ISO за този продукт