Държавен вестник, бр. 91, 2002 г., стр. 92

С Т Р .  92
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
Б Р О Й  91
ХХХVIII. Идентификация и определяне на 2-фенокси-
етанол, 1-феноксипропан-2-ол, метил, етил, пропил, бутил
и бензил 4-хидроксибензоат в козметичните продукти
А. Идентификация
1. Област на приложение
Методът се отнася до тънкослойно-хроматограф-
ска процедура, която в комбинация с методиката за оп-
ределяне, описана в част Б, позволява идентификация-
та на 2-феноксиетанол, 1-феноксипропан-2-ол, метил,
етил, пропил, бутил и бензил 4-хидроксибензоат в коз-
метичните продукти.
2. Принцип
Консервантите се извличат от подкислена козме-
тична проба с ацетон. След филтруване ацетоновият
разтвор се смесва с вода и мастните киселини се утая-
ват в алкална среда като техни калциеви соли. Алкал-
ната смес (ацетон/вода) се обработва с диетилов етер за
отстраняване на липофилните вещества. След подкис-
ляване консервантите се екстрахират с диетилов етер.
Аликвотна част от диетилетерния екстракт се накапва
върху плака, покрита с тънък слой силикагел. След
проявяване плаката се наблюдава под УВ светлина и
петната се оцветяват с реактива на Millon.
3. Реактиви
3.1. Общи положения
Всички реактиви трябва да са с квалификация “чист
за анализ” (ч.з.а.), а водата—дестилирана или с еквива-
лентна чистота.
3.2. Ацетон
3.3. Диетилов етер
3.4. н -Пентан
3.5. Метанол
3.6. Оцетна киселина, ледена
3.7. Солна киселина (HCI), разтвор 4 mol/dm3 (mol/l)
3.8. Калиев хидроксид (КОН), разтвор 4 mol/dm3 (mol/l)
3.9. Калциев дихлорид дихидрат (CaCI2.2H2O)
3.10. Реактив за оцветяване на Millon. Реактивът на
Millon (живачен II нитрат) е в наличност в търговската
мрежа (Fluka 69820).
3.11. 2-Феноксиетанол
3.12. 1-Феноксипропан-2-ол
3.13. Метил 4-хидроксибензоат (метилпарабен)
3.14. Етил 4-хидроксибензоат (етилпарабен)
3.15. н-Пропил 4-хидроксибензоат (пропилпарабен)
3.16. н-Бутил 4-хидроксибензоат (бутилпарабен)
3.17. Бензил 4-хидроксибензоат (бензилпарабен)
3.18. Стандартни разтвори
За всяко от стандартните вещества (3.11, 3.12, 3.13,
3.14, 3.15, 3.16 и 3.17) се приготвя 0,1 % (М/V) разтвор
в метанол.
3.19. Разтворител за проявяване на хроматограмата
(подвижна фаза). Смесват се 88 обема n-пентан (3.4) и
12 обема ледена оцетна киселина (3.6).
4. Апаратура
Стандартно лабораторно оборудване и:
4.1. Водна баня с възможност за поддържане на
температура 60 °С.
4.2. Съд за проявяване на хроматограмата (хрома-
тографска вана).
4.3. Източник на УВ светлина, 254 nm.
4.4. Плаки за тънкослойна хроматография, 20 Ч 20 cm,
покрити с 0,25 mm силикагел 60F254 с концентрирана
зона (Merck № 11798, Darmstadt или еквивалентни).
4.5. Пещ с възможност за поддържане на темпера-
тура 105 °С.
4.6. Сешоар за коса със сух въздух.
4.7. Ролка за нанасяне на реактива на Millon с дъл-
жина около 10 cm, външен диаметър около 3,5 cm и
дебелина на вълнения пласт 2 до 3 mm (виж забележка-
та под т. 5.2).
4.8. Колби стъклени със запушалки и обем
50 cm3 (ml).
4.9. Електрическа плоча с терморегулатор и наст-
ройка на температурата около 80 °С. За получаване на
равномерно разпределение на температурата плочата
се покрива с алуминиева пластина с размери 20 Ч 20 cm
и дебелина около 6 mm.
7.3. За съдържание на хидрохинон моноетилов етер
1,0 % разликата между резултатите от две успоредни
определяния на една и съща проба не трябва да надви-
шава по абсолютна стойност 0,11 %.
7.4. За съдържание на хидрохинон монобензилов етер
1,0 % разликата между резултатите от две успоредни
определяния на една и съща проба не трябва да надви-
шава по абсолютна стойност 0,11 %.
8. Възпроизводимост (1)
8.1. За съдържание на хидрохинон 2,0 % разликата
между резултатите от две успоредни определяния на
една и съща проба при различни условия (различни
лаборатории, различни аналитици, различни апарати
и/или различно време) не трябва да надвишава по абсо-
лютна стойност 0,37 %.
8.2. За съдържание на хидрохинон монометилов етер
1,0 % разликата между резултатите от две успоредни
определяния на една и съща проба при различни усло-
вия (различни лаборатории, различни аналитици, раз-
лични апарати и/или различно време) не трябва да над-
вишава по абсолютна стойност 0,21 %.
8.3. За съдържание на хидрохинон моноетилов етер
1,0 % разликата между резултатите от две успоредни
определяния на една и съща проба при различни усло-
вия (различни лаборатории, различни аналитици, раз-
лични апарати и/или различно време) не трябва да над-
вишава по абсолютна стойност 0,19 %.
8.4. За съдържание на хидрохинон монобензилов етер
1,0 % разликата между резултатите от две успоредни
определяния на една и съща проба при различни усло-
вия (различни лаборатории, различни аналитици, раз-
лични апарати и/или различно време) не трябва да над-
вишава по абсолютна стойност 0,11 %.
9. Забележки
9.1. Когато е установено съдържание на хидрохинон
значително по-голямо от 2 % и се изисква по-точна
оценка на съдържанието му, екстрактът от пробата (5.1)
трябва да се разреди до концентрация, която би се по-
лучила от проба, съдържаща 2 % хидрохинон, и опреде-
лянето се повтаря.
(При някои апарати абсорбцията може да бъде из-
вън интервала на линейност на детектора при високи
концентрации на хидрохинон.)
9.2. Пречещи фактори
Описаният метод дава възможност за определяне
на хидрохинон и негови етери при единично изократич-
но хроматографиране. Използването на “фенил” коло-
на осигурява достатъчно време на задържане на хидро-
хинона, което не може да се гарантира, когато се използ-
ва С18 колона с описаната подвижна фаза.
Освен това този метод е податлив на влиянието на
пречещи вещества, като редица парабени. В такива
случаи определянето трябва да бъде повторено с изпол-
зване на различни системи подвижна/неподвижна фаза.
Подходящи методи могат да бъдат намерени в публи-
кациите 1 и 2, а именно:
Колона: Zorbax ODS, 4,6 mm Ч 25 сm, или еквива-
лентна:
Температура—36 °С
Скорост—1,5 cm3 (ml)/min
Подвижна фаза:
за хидрохинон—метанол : вода = 5 : 95 (V/V)
за хидрохинон монометилов етер—метанол : вода
= 30 : 70 (V/V)
за хидрохинон монобензилов етер—метанол : вода
= 80 : 20 (V/V) (2).
Колона: Spherisorb S5-ODS, или еквивалентна:
подвижна фаза—вода : метанол = 90 : 10 (V/V)
скорост: 1,5 cm3 (ml)/min
Тези условия са подходящи за хидрохинон (3).
(1) виж ISO 5725
(2) M.Herpol-Boremans et M.-O.Masse, Identification et
dosage de l’hydroquinone et de ses ethers methylique et benzylique
dans les produits cosmetiques pour blanchir la peau. Int. J. Cosmet.
Sci. 8-203-214 (1986).
(3) J.Firth and I.Rix, Determination of hydroquinone in skin
toning creams, Analyst (1986), 111, p. 129.