Държавен вестник, бр. 28, 2007 г., стр. 57

Б Р О Й  28
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
С Т Р .  57
Таблица 1. Предложени количества за
приготвяне на микс за хибридизация
Брой на предметните
стъкла
1
4
6
8
10
Стерилна ултрачиста
23,1
92,4
138,6 184,8
231,0
вода
3х hybmix
30,0
120,0 180,0 240,0
300,0
1 % SDS
0,9
3,6
5,4
7,2
9,0
Formamide
27,0
108,0 162,0 216,0
270,0
Праймер EUB 338
4,5
18,0
27,0
36,0
45,0
(100 ng/µl)
Праймер OLI-1 или
4,5
18,0
27,0
36,0
45,0
OLI-2 (100 ng/µl)
Общ обем (µl)
90,0
360,0 540,0 720,0
900,0
NB: Всички разтвори, съдържащи чувствителни на
светлина олиго-праймери, се съхраняват на тъмно и
при—20 °С.
При употреба се предпазват от пряка слънчева свет-
лина или електрическа светлина.
5. 0,1М фосфатен буфер, pH 7,0
Na2HPO4
8,52 g
KH2PO4
5,44 g
Дестилирана вода
1,00 L
Съставките се разтварят, проверява се pH и се
автоклавира при 121 °С за 15 минути.
__________________
Допълнение 8
Култивиране на патладжанени и доматени
растения
Посяват се семена на домати (Lycopersicon
esculentum) или патладжани (Solanum melongena)
в подходяща торо-почвена смес. Разсадът с напъл-
но развити котиледони (10 до 14 дни) се пикира в
подходящи саксии.
Патладжаните и доматите трябва да се от-
глеждат в оранжерия при следните условия пре-
ди инокулация:
Продължителност на
14 часа или естествена-
деня
та продължителност на
деня, ако е по-голяма;
Температура
дневна 21 до 24 °С,
нощна 14 до 18 °С.
Чуствителен сорт домати “Moneymaker”
Чувствителен сорт
патладжани
“Black Beauty”
Доставчици
Виж интернет страница
http://forum.europa.eu.int/
Public/irc/sanco/Home/
main
ЛИТЕРАТУРА
1. Amann, R.I., L. Krumholz and D.A. Stahl. 1990.
Fluorescent-oligonucleotide probing of whole cells for
determinative, phylogenetic and environmental studies
in microbiology. J. Bacteriol. 172: 762-770.
2. Anon. 1998. Council Directive 98/57/EC of 20 July
1998 on the control of Ralstonia solanacearum (Smith)
Yabuuchi et al. Official Journal of the European
Communities L235, 1-39.
3. Boudazin, G., A.C. Le Roux, K. Josi, P. Labarre
and B. Jouan. 1999. Design of division specific primers
of Ralstonia solanacearum and application to the
identification of European isolates. European Journal
of Plant Pathology 105; 373-380.
4. Caruso, P., Gorris, M.T., Cambra, M., Palomo,
J.L., Collar, J and Lopez, M.M. 2002. Enrichment
Double-Antibody Sandwich Indirect Enzyme-Linked
Immunosorbent Assay That Uses a Specific Monoclonal
Antibody for sensitive Detection of Ralstonia
solanacearum in Asymptomatic Potato Tubers. Applied
and Environmental Microbiology, 68, 3634-3638.
5. Cook, D., Barlow, E. and Sequeira, L. 1989.
Genetic diversity of Pseudomonas solanacearum:
detection of restriction fragment length polymorphisms
with DNA probes that specify virulence and the
hypersensitive response. Molecular Plant-Microbe
Interactions 1:113-121.
6. Elphinstone, J.G., Hennessy, J., Wilson, J.K. and
Stead, D.E. 1996. Sensitivity of detection of Ralstonia
solanacearum in potato tuber extracts. EPPO Bulletin
26; 663-678.
7. Englebrecht, M.C. (1994) Modification of a semi-
selective medium for the isolation and quantification of
Pseudomonas solanacearum. In: A.C. Hayward (ed.)
Bacterial Wilt Newsletter 10, 3-5. Australian Centre for
International Agricultural Research, Canberra, Australia.
8. Hayward, A.C. 1964. Characteristics of
Pseudomonas solanacearum. Journal of Applied
Bacteriology 27; 265-277.
9. Hayward, A.C., El-Nashaar, H.M., Nydegger, U.
and De Lindo, L. 1990. Variation in nitrate metabolism
in biovars of Pseudomonas solanacearum. Journal of
Applied Bacteriology 69; 269-280.
10. Ito, S., Y. Ushijima, T. Fujii, S. Tanaka, M.
Kameya-Iwaki, S. Yoshiwara and F. Kishi. 1998.
Detection of viable cells of Ralstonia solanacearum in
soil using a semi-selective medium and a PCR technique.
J. Phytopathology 146; 379-384.
11. Janse, J.D. (1988) A detection method for
Pseudomonas solanacearum in symptomless potato
tubers and some data on its sensitivity and specificity.
Bulletin OEPP/EPPO Bulletin 18, 343-351.
12. Janse, J.D. 1991. Infra- and intra-specific
classification of Pseudomonas solanacaerum strains
using whole cell fatty-acid analysis. Systematic and
Applied Microbiology 14; 335-345.
13. Kelman, A. 1954. The relationship of
pathogenicity of Pseudomonas solanacearum to colony
appearance on a tetrazolium medium. Phytopathology
44; 693-695.
14. Klement Z.; Rudolph, K and D.C. Sands, 1990.
Methods in Phytobacteriology. Akadйmiai Kiadу,
Budapest, 568 pp.
15. Lelliott, R.A. and Stead, D.E. 1987. Methods
for the diagnosis of bacterial diseases of plants. Blackwell
scientific Publications Ltd., Oxford. 216 pp.
16. Lopez, M.M., Gorris, M.T., Llop, P., Cubero, J.,
Vicedo, B., Cambra, M., 1997. Selective enrichment
improves selective isolation, serological and molecular
detection of plant pathogenic bacteria. In: H.W. Dehne
et al., (eds). Klewer Academic Publishers. pp. 117-121.
17. Louws, F.J., Fulbright, D.W., Stephens, C.T.
and De Bruijn, F.J., 1994. Specific genomic fingerprints
of phytopathogenic Xanthomonas and Pseudomonas
pathovars and strains generated with repetitive
sequences and PCR. Applied and Environmental
Microbiology, 60, 2286-2295.
18. Louws, F.J., Fulbright, D.W., Stephens, C.T. and
De Bruijn, F.J. 1995. Differentiation of genomic structure