Държавен вестник, бр. 68, 2014 г., стр. 59

БРОЙ  68	
Д Ъ Р Ж А В Е Н  В Е С Т Н И К 	
СТР.  59  
5.2.7.8. Хроматографските условия са дадени 
като указание. Те осигуряват разделяне R, равно 
или по-добро от 1,5, като:
 
,
където:
r1 и r2 са времена на задържане в min;
W1 и W2 – широчини на пиковете при поло­
вината от височините им в mm;
d' – скорост на хартията в mm/min.
Препоръчва се хроматографирането да за­
върши с повишаване на температурата от 90 до 
150 °С при скорост 10 °С/min, за да се елиминира 
възможността за влияние на лабилните вещества 
при следващите хроматографирания.
5.2.8. Изчисления
5.2.8.1. Коефициент на пропорционалност 
на меркаптооцетната киселина. Той е изчислен 
по отношение на метилоктаноат на базата на 
стандартна смес.
Ако с „t“ се означи меркаптооцетната ки­
селина,
нека:
kt е нейният корекционен коефициент;
М' t – нейната маса в сместа в g;
S' t – площта на нейния пик.
Ако с „с“ се означи метилоктаноатът,
нека:
М'c е неговата маса в сместа в mg;
S'c – площта на неговия пик,
тогава:
 
.
Този коефициент варира според използваната 
апаратура.
5.2.8.2. Концентрация на меркаптооцетната 
киселина в пробата.
Ако с „t“ се означи меркаптооцетната ки­
селина,
нека:
kt е нейният корекционен коефициент;
St – площта на нейния пик.
Ако с „с“ се означи метилоктаноатът,
нека:
Мc е неговата маса в сместа в mg;
Sc – площта на неговия пик;
М – масата на първоначалната проба за из­
питване в mg,
тогава % (M/M) на меркаптооцетната кисе­
лина в пробата е:
.
7. Повторяемост*
За съдържание на меркаптооцетна киселина 
от 8 % (M/M) разликата между две успоредни 
определяния на една и съща проба не трябва да 
надвишава по абсолютна стойност 0,8 % (M/M).
*Забележка. Виж ISO 5725.
ХІХ. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЯНЕ 
НА ХЕКСАХЛОРОФЕН
A. ИДЕНТИФИКАЦИЯ 
1. Област на приложение
Методът е подходящ за всички козметични 
продукти.
2. Принцип
Хексахлорофенът се екстрахира с етилацетат 
и се идентифицира чрез тънкослойна хрома­
тография.
3. Реактиви
Всички реактиви трябва да са с квалификация 
„чист за анализ“ (ч.з.а.), а водата – дестилирана 
или с еквивалентна чистота.
3.1. Сярна киселина, 4 М.
3.2. Целит AW.
3.3. Етилацетат.
3.4. Подвижна фаза: бензен, съдържащ 1 % 
(V/V) ледена оцетна киселина.
3.5. Реактив за проявяване на петната I:
Разтвор на родамин В: разтварят се 0,1 g ро­
дамин B в смес от 150 сm3 (ml) диетилов етер, 
70 сm3 (ml) абсолютен етанол и 16 сm3 (ml) вода.
3.6. Реактив за проявяване на петната II:
Разтвор на 2,6-дибром-4-(хлоримино)цикло­
хекса-2,5-диенон: разтварят се 0,4 g 2,6-дибром-
4-(хлоримино)циклохекса-2,5-диенон в 100 сm3 
(ml) метанол, приготвен непосредствено преди 
употреба.
Разтвор на натриев карбонат: разтварят се 
10 g натриев карбонат в 100 сm3 (ml) деминера­
лизирана вода.
3.7. Стандартен разтвор:
Хексахлорофен, 0,05 % (M/V) разтвор в 
етилацетат.
4. Апаратура
4.1. Плаки за тънкослойна хроматография 
Kieselgel F254, 20 x 20 сm или еквивалентни.
4.2. Стандартно оборудване за тънкослойна 
хроматография.
4.3. Термостатирана при 26 °С водна баня, в 
която се слага хроматографската вана.
5. Приготвяне на пробата за изпитване
5.1. Смесват се добре 1 g от хомогенизираната 
проба с 1 g целит AW (т. 3.2) и 1 сm3 (ml) сярна 
киселина (т. 3.1).
5.2. Суши се 2 h при 100 °С.
5.3. Охлажда се и сухият остатък се стрива 
на фин прах.
5.4. Екстрахира се двукратно с по 10 сm3 
(ml) етилацетат (т. 3.3), центрофугира се след 
всяка екстракция и етилацетатните слоеве се 
обединяват.
5.5. Изпарява се при 60 °С.
5.6. Остатъкът се разтваря в 2 сm3 (ml) ети­
лацетат (т. 3.3).
6. Процедура
6.1. Върху плаката за тънкослойна хрома­
тография се нанасят 2 µl от разтвора на пробата 
за изпитване и 2 µl от сравнителния разтвор.
6.2. Хроматографската вана се насища с под­
вижната фаза (т. 3.4).
6.3. Плаката за тънкослойна хроматография се 
поставя във ваната и хроматограмата се развива, 
докато фронтът на разтворителя се придвижи 
на 15 сm.
6.4. Плаката се изважда и се суши в сушилня 
с вентилатор при около 105 °С.
6.5. Проявяване на петната
Петната от хексахлорофена се оцветяват, както 
е посочено в т. 6.5.1 или в т. 6.5.2.