Държавен вестник, бр. 13, 2002 г., стр. 42

С Т Р .  42
Д Ъ Р Ж А В Е Н   В Е С Т Н И К
Б Р О Й  13
Приготвят се две серии с поне 7 флакона. При
изпитване на хомогенни храни не се налага добавяне-
то на дестилирана или деминерализирана вода. Във
всеки флакон се добавя такова количество разреден
стандарт на VC (5.1.2) и ДМА (3.2) или вътрешен
стандарт на ДМА (3.3), че да се получи концентрация
на VC, добавен във флаконите около 0; 0,005; 0,075;
0,010; 0,020; 0,030; 0,040; 0,050 и т. н. мг/л или мг/кг
ДМА и всеки флакон да съдържа еднакво общо коли-
чество разтвор. Количеството на разредения разтвор
на VC (5.1.2) и добавеният ДМА, когато е използван,
трябва да бъде такова, че съотношението между об-
щия обем (µл) на тези разтвори и количеството (г) на
храната във флакона да бъде възможно най-малко,
но не повече от 5, и да бъде еднакво във всички фла-
кони. Флаконите се затварят и работата продължава
съгласно т. 5.4.
5.2. Валидиране на подготовката на стандартния
разтвор по т. 5.1.
5.2.1. Приготвяне на втори стандарт VС (разтвор В).
Процедурата по т. 5.1.1 и 5.1.2 се повтаря за получа-
ване на втори разреден стандарт с концентрация приб-
лизително равна на 0,02 мг VC/л или 0,02 мг VС/кг ДМА
или вътрешен стандарт. Този разтвор се поставя в два
флакона. Флаконите се запечатват, след което се про-
цедира съгласно т. 5.4.2, 5.4.3 и 5.4.5.
5.2.2. Валидиране на разтвор А.
Ако средната стойност от две хроматографски оп-
ределяния с разтвор В (т. 5.2.1) не се различава с повече
от 5 % от съответната точка от калибрационната крива,
получена по т. 5.1.3, разтвор А е валидизиран. В случай,
че средната стойност е по-голяма от 5 %, процедурата
по т. 5.1 и 5.2 се повтаря.
5.3. Построяване на допълнителна крива.
Забележка:
а) кривата трябва да съдържа най-малко 7 точки;
б) кривата трябва да бъде изчислена по тези точки
по метода на най-малките квадрати (5.1.3);
в) кривата трябва да бъде линейна, т. е. стандартно-
то отклонение/отклонения на разликите между изме-
рените отклици yi, разделени на ў за всички измерени
отклици, не трябва да надвишава 0,07 (5.1.3).
5.3.1. Изпитваната проба трябва да бъде представи-
телна за изследваната храна. Предварително храната
трябва да бъде смляна или надробена на малки късче-
та, които да са добре хомогенизирани, преди вземане на
пробата.
5.3.2. Процедура.
Приготвят се две серии от поне 7 флакона (4.4).
Във всеки флакон се поставят по най-малко 5 г от
пробата храна по т. 5.3.1. Проверява се дали във всич-
ки флакони е поставено еднакво количество. Флако-
ните се затварят веднага. Към всеки флакон се при-
бавя за всеки грам от пробата храна по 1 мл дестили-
рана вода или деминерализирана вода с еднаква чис-
тота или, ако е необходимо, подходящ разтворител.
Във всеки флакон се добавя такова количество разре-
ден стандарт на VC по т. 5.1.2, съдържащ вътрешния
стандарт по т. 3.3, ако се сметне за нужно, че да се
получи концентрация на VC, добавен във флаконите
0; 0,005; 0,010; 0,020; 0,030; 0,040 и 0,050 и т. н. мг/кг
храна. Проверява се дали общото съдържание на ДМА
или ДМА, съдържащ вътрешен стандарт по т. 3.3, е
еднакво във всеки флакон. Качеството на разредения
разтвор на VC по т. 5.1.2 и добавеният ДМА, когато
е използван, трябва да бъде такова, че съотношени-
ето между общия обем (µл) на тези разтвори и коли-
чеството (г) на храната във флакона да бъде възмож-
но най-малко, но не повече от 5, и да бъде еднакво във
всички флакони. Флаконите се затварят и се продъл-
жава процедурата по начина, описан по т. 5.4.
5.4. Газ-хроматографско определяне.
5.4.1. Флаконите се разклащат така, че течността да
не влиза в контакт със септума до получаване на въз-
можно най-хомогенен разтвор или суспензия.
5.4.2. Затворените флакони се темперират на водна
баня в продължение на два часа при 60° ± 1 °С. Ако е
необходимо, флаконите се разклащат отново.
5.4.3. Взема се проба от свободното пространство на
флакона. При работа с ръчен хед спейс е необходимо да
се осигури предварително подгряване на газовата сприн-
цовка до същата температура за гарантиране на повто-
римост на резултатите. Измерват се площите или висо-
чините на пиковете на VC и на вътрешния стандарт,
ако е използван.
5.4.4. Построява се графика, като на ординатата се
нанасят площите или височините на VC пикове или
отношението между площта (височината) на VC пико-
ве и площта (височината) на пиковете на вътрешния
стандарт. По абсцисата се нанасят количествата приба-
вен VC (мг), отнесени към количествата на пробата от
храната за всеки флакон (кг). Измерва се отрезът от
абсцисата до точката на пресичане с графиката. Полу-
чената стойност представлява концентрацията на VC в
пробата храна.
5.4.5. От колоната по т. 4.3 по подходящ начин се
премахва излишъкът от ДМА колкото е възможно по-
скоро след появата на пика му.
6. Изчисляване на резултатите. Крайната стойност
на VC, преминал от материала или предмета във/върху
изпитваната храна, изразена в мг/кг, е средната стой-
ност от две определяния по т. 5.4 при условие, че кри-
терият по т. 8 за повторимост е изпълнен.
7. Потвърждаване на количеството на VC.
В случаите, когато определената по т. 6. стойност
на VC, преминал от материала или предмета във/върху
храната, надвишава максимално допустимото количес-
тво от 0,01 мг/кг, резултатът се потвърждава по един от
следните начини:
а) чрез използване на поне една друга колона със
стационарна фаза, но с различна полярност; тази про-
цедура трябва да продължи, докато се получи хрома-
тограма и/или пикове;
б) чрез използване на друг детектор, например мик-
роелектролитичен детектор на проводимостта;
в) чрез използване на мас-спектрометрия; в този
случай, ако молекулните йони с максимуми (m/e) 62 и
64 са в съотношение 3:1, това може да бъде разгледано
с голяма вероятност като доказателство за наличие на
VC; в случай на съмнение трябва да бъде проверен це-
лият мас-спектър.
8. Повторимост.
Разликата между резултатите от две определяния
по т. 5.4, направени паралелно или при бърза последо-
вателност на един и същи образец, от един и същи опе-
ратор, при едни и същи условия, не трябва да надвиша-
ва 0,003 мг VC/кг храна.
Приложение № 9
към чл. 13, ал. 1, т. 3
Символ за разрешен контакт с храни