Viroses das orquídeas
Autor: Mariana G. De Nadai | Publicado: 2010-08-13T08:17:00-07:00

INTRODUÇÃO             Além                  das doenças fúngicas e bacterianas, vista num capítulo                  anterior, as orquídeas, a exemplo de outras espécies vegetais                  e animais, são também atacadas por vírus, minúsculos                  seres (alguns nanômetros) que invadem as células, danificando                  seus processos metabólicos e de multiplicação, o                  que acaba por causar a morte das mesmas. Os vírus vivem exclusivamente                  às custas dos processos metabólicos ou celulares de outros                  organismos, não sendo ativos fora da célula (embora possam                  permanecer por longo tempo, inativos, porém infecciosos, em detritos                  vegetais ou mesmo na água).                Embora                seus efeitos muitas vezes pareçam menos graves, à primeira                vista, em comparação com o estrago causado por fungos como                o Pythium e bactérias como o Pseudomonas, é certo que as                viroses são as doenças mais graves das orquídeas,                por sua facilidade de disseminação, perdas de valor e impossibilidade                de tratamento. Assim, a única forma de controle, nos dias atuais,                é a erradicação das plantas atacadas, somado a outras                medidas de prevenção de contágio. Podemos afirmar,                que após o grau de contaminação visível atingir                20 ou 30% das plantas de determinada coleção, o melhor é                descartar e eliminar a coleção toda, pois as chances são                de que a maioria das plantas também está contaminada, embora                ainda sem sintomas.             TIPOS                MAIS IMPORTANTES DE VÍRUS DE ORQUÍDEAS                           Até                o presente, foram diagnosticados cerca de 40 tipos de vírus que                infectam as orquídeas. Destes, apenas alguns poucos produzem efeitos                prejudiciais, em nível comercial, às plantas. Por "nível                comercial", entende-se efeitos que possam prejudicar a apresentação                das flores, e o vigor da planta. Dessa forma, muitos vírus, embora                tenham sintomas claramente visíveis, não são considerados                de importância comercial, por não prejudicarem as florações                nem a produtividade (o vírus da "pipoca" nas folhas,                comum em Laelia purpurata, se enquadra nesse caso).             Dos                vírus de importância comercial, existentes no Brasil, dois                se destacam:             CyMV                - Cymbidium Mosaic Virus             Muito                embora seus efeitos sejam, a princípio, pouco aparentes, o CyMV                é o vírus mais perigoso para a coleção. Explica-se:                como apresenta sintomas menos "graves" do que o ORSV, muitas                vezes as plantas são dadas como saudáveis, o que propicia                a extensão da contaminação por toda a coleção.                Quando se percebe, a coleção toda já está                perdida. Por esse mesmo motivo, é o vírus mais comum nas                coleções. Ataca inúmeros gêneros, desde Cymbidium,                até Cattleya e Phalaenopsis.              Os                efeitos deste vírus nas folhas são dificilmente detectáveis,                mas, seguindo o princípio geral (vide abaixo), ocorrem leves riscos                cloróticos nas nervuras. De modo geral, não atrapalha o                crescimento da planta, nem sua capacidade de floração.              Nas                flores, não há sintomas, de início. Entretanto, passados                alguns dias (entre 7 e 15, dependendo da espécie), surgem riscos                ao longo das nervuras dos segmentos florais, fruto da destruição                do floema floral. Nas flores albas e amarelas, estes riscos são                necróticos (marrons). Nas lilases e vermelhas, são riscos                esbranquiçados. Muitas vezes, o dono da planta despreza estes sintomas,                considerando que a flor está simplesmente "passada".                Entretanto, os sintomas são claramente distintos da senescência                natural ou mesmo a causada por gases de etileno, que se caracterizam pela                perda de substância dos segmentos, e amarelecimento da ovário                (pedúnculo).              O                CyMV pode infectar uma planta, sem afetar sua produtividade ou vigor,                por muitos anos.             ORSV                - Odontoglossum Ringspot Virus (syn. TMV-O)             Identificado                primeiramente em Odontoglossum grande, causando lesões circulares                nas folhas, daí o nome. Este vírus, embora altamente destrutivo,                tem seu controle facilitado pelos seus sintomas, bastante característicos                e facilmente visíveis. Nas folhas, são manchas irregulares                de colorido vermelho a roxo (cuidado para não confundir com escurecimento                arroxeado causado por luminosidade alta, ou pintas roxas em plantas semi-albas                e algumas lilases e amarelas). Estas manchas ou pintas geralmente possuem                regiões necrosadas (mortas). Os brotos podem ficar aleijados (tortos,                fortemente pigmentados, e sem vigor). Nas flores, surgem manchas descoloradas,                com aspecto de "aquarela desbotada". Não confundir com                falhas de colorido de origem genética (variegata). Ocasionalmente,                grandes variações de temperatura podem provocar sintomas                de "color-break" idênticos aos provocados por vírus.                Caso tenha ocorrido esse fator climático, aguardar mais um ano,                para verificar se o sintoma se repete, para então ter certeza do                diagnóstico.              Ao                contrário do CyMV, o ORSV vai degradando o vigor da planta, terminando                por matá-la ao cabo de alguns anos (por inviabilidade de brotação).                          DIAGNÓSTICO             Para                facilitar o diagnóstico visual, talvez ajude se mencionarmos que                a atuação dos vírus, de modo geral, nas plantas,                se dá por morte de células com carga viral elevada. Dessa                forma, as estruturas que entram em contato mais prolongado com o vírus                são as primeiras a serem lesionadas. Os vasos que conduzem a seiva,                não conseguem mais fazê-lo adequadamente, e morrem. Nas plantas,                esses efeitos se mostram como riscos necróticos (mortos) e cloróticos                (amarelados) nas nervuras, falhas de pigmentação nas flores                (por "desnutrição" dos tecidos florais durante                a formação da flor), e aleijamento de brotos (por interrupção                da circulação de nutrientes).              É                importante ressaltar que a sintomatologia descrita acima não é                definitiva. Há plantas que apresentam um ou outro dos sintomas,                sem estar necessariamente contaminada por vírus. Ocasionalmente,                problemas genéticos induzem a planta a produzir folhas e/ou flores                com defeitos, tanto de forma como de colorido. Intoxicação                por gases poluentes (nas áreas urbanas) e fitotoxidade de defensivos                aplicados de forma inadequada também provocam sintomas nas plantas,                que não são semelhantes aos de pragas e doenças conhecidas,                e que, portanto são muitas vezes atribuídas, erroneamente,                a vírus. Por outro lado, há plantas contaminadas que, por                alguma razão, não apresentam qualquer sintoma (o que não                quer dizer que não possam infectar outras plantas, que irão                demonstrar sintomas). Apenas o diagnóstico em laboratório                pode dar a certeza da infecção ou não de uma planta.                Entretanto, cada sintoma que a planta apresentar é um aviso de                que pode estar infectada. A cada sintoma adicional apresentado, maior                a desconfiança. Assim, preventivamente, o melhor é tratar                toda planta que apresente algum dos sintomas descritos acima como suspeita,                isolando-a das demais. Se for uma planta valiosa, ou matriz para clonagem                ou hibridação, pode valer a pena mandar testar em laboratório                especializado (embora o custo seja elevado).              Não                cabe no escopo deste trabalho descrever em profundidade os métodos                de laboratório, para diagnóstico de virose, mas segue um                pequeno resumo:                          Bio-ensaio             Nesse                teste, a seiva oriunda da planta suspeita é inoculada nas folhas                de determinadas espécies de plantas (principalmente Cassia occidentalis, Datura sp, Chenopodium sp. e Tetragona expansa, para                CyMV, e Gomphrena globosa, para ORSV). Estas plantas não são                infectadas sistemicamente (na planta toda) quando contaminadas com ORSV                e/ou CyMV, mas apresentam lesões locais facilmente identificáveis.                Alguns dias após a inoculação, as folhas apresentam                numerosos pontos necróticos, com características específicas                para cada tipo de vírus. Existem kits de teste à venda,                nos E.U.A.             ELISA             É                um ensaio imunológico (ELISA = Enzyme-linked immunosorbent assay).                Nesse teste, há uma reação serológica (de                soro sanguíneo animal) à presença de vírus                específicos. O diagnóstico é dado pela mudança                de cor da solução contendo o soro. Este ensaio é                bastante preciso e rápido, podendo ser aplicado em muitas amostras                ao mesmo tempo. Há também kits à venda, no exterior.             Microscopia                Eletrônica             É                o método mais direto de diagnóstico, onde a seiva suspeita                é tratada com corante especial, e visualizada num microscópio                eletrônico (+ de 50.000 x). As partículas de vírus                são facilmente identificáveis, de acordo com uma tabela                descritiva. Este método é o mais preciso, detectando vírus                em concentrações tão baixas a ponto de não                serem detectadas por Bio-ensaio ou ELISA. Entretanto, é muito caro,                pela complexidade do equipamento.                          FORMAS                DE TRANSMISSÃO             Por                definição, o veículo de disseminação                de vírus nas orquídeas é a seiva. Ou seja, qualquer                ação que ponha em contato a seiva de uma planta contaminada                com a de uma planta saudável, é uma forma de transmissão                de vírus. Por esse raciocínio, chega-se ao principal vetor                de disseminação: ferramentas de corte. Facas. tesouras,                unhas, estacas, enfim, qualquer objeto que possa provocar uma ferida na                planta, são disseminadores de virose por excelência. As próprias                folhas, ao bater umas nas outras, principalmente durante o transporte                das plantas, podem espalhar a doença.              Os                insetos, mesmo os sugadores como pulgões e cochonilhas, embora                suguem seiva, indo de uma planta para outra, não são considerados                vetores específicos para CyMV e ORSV. No entanto, transmitem alguns                outros tipos de vírus, também danosos.              Outras                formas importantes de contágio são a mistura de raízes                entre plantas doentes e saudáveis (quando as plantas estão                muito próximas), e resíduos. O vírus, embora inativo                fora da célula viva (como na água e em resíduos),                mantém seu poder de infecção caso entre em contato                com tecido vivo. Em resumo, vasos, cacos e substrato contaminados, são                fontes de contágio, se forem usados em outras plantas. Da mesma                forma, a água pode carregar partículas de vírus de                uma planta para outra.              O                ORSV, embora uma variante do vírus do mosaico do fumo, é                espécie distinta. Por sua vez, o TMV (Mosaico do fumo) não                infecta orquídeas. Apesar de não haver contaminação                de orquídeas com ORSV através de contato manual de resíduos                de fumo (cigarros), há risco de surgimento de novos tipos de vírus                comuns às duas plantas. O vírus TMV está presente                em alta porcentagem do fumo produzido, e, por conseqüência,                nos cigarros.              É                preciso ter em mente sempre como se faz o contágio, ao se recomendar                medidas preventivas da disseminação de vírus.                          TRATAMENTO             As                perguntas que surgem com maior freqüência no meio orquidófilo,                com relação a vírus, são: "O que devo                fazer para curar minha planta? Se não houver cura, o que faço                com ela?" As respostas, infelizmente, não são agradáveis.                Não há tratamento conhecido para eliminar a infecção                por vírus de uma orquídea. Há trabalhos em andamento                neste sentido, principalmente nos E.U.A., utilizando produtos como Interferon,                ainda sem resultados concretos e economicamente viáveis. Há                muitas pessoas que afirmam que conseguiram "limpar" uma planta,                seja com produtos químicos, seja expondo a sol pleno e outras teorias                mais ou menos fundamentadas em pesquisa científica. Não                há nenhuma "teoria" provada. Dessa forma, plantas com                vírus devem ser descartadas - se possível incineradas. Substrato,                cacos de drenagem e vaso destas plantas não devem ser reaproveitados.                Plantas contaminadas não devem ser doados (a não ser para                pesquisa), vendidos ou passados para outras pessoas de forma alguma.              Podem-se                amarrar estas plantas nas árvores do quintal? É possível,                embora pouco recomendável. Embora não haja disseminação                dos vírus acima por picadas de insetos, o risco de ter plantas                doentes nas proximidades da coleção podendo ser manuseados,                cortados com as mesmas ferramentas etc, é grande. É sempre                melhor, porém mais doloroso, eliminar plantas doentes.                          Eliminação                de Vírus por semeadura             Já                foi exaustivamente comprovado que as viroses mais destrutivas nas orquídeas,                não são transmitidas pelas sementes (provavelmente devido                à ausência de estruturas de reserva na semente). Portanto,                pode-se utilizar uma planta doente como matriz, no intuito de obter-se                descendência sadia. Este recurso é freqüente entre colecionadores                e profissionais que utilizam plantas como matrizes para melhoramento e                hibridação, mantendo (em isolamento) determinadas plantas,                mesmo sabidamente contaminadas. Essas plantas são usadas como matrizes                femininas (portadoras da cápsula de sementes). Grifamos a palavra                femininas, pois não se deve utilizar pólen de plantas contaminadas,                que pode transmitir a doença para as saudáveis. As cápsulas                devem ser colhidas maduras (já fendidas), e as sementes retiradas                sem utilizar objetos pontiagudos (apenas abrir a cápsula e dar                algumas leves pancadas, para que as sementes caiam numa folha de papel).                Nunca utilizar o sistema de semeio de sementes verdes, oriundos de plantas                infectadas, pois a ação da ferramenta, ao raspar as sementes                para colocação no meio de cultura, irá ferir o tecido                interno da cápsula, contaminando as sementes.                          Eliminação                de Vírus por Clonagem             Quando                o Dr. Georges Morel inventou o processo de clonagem, na década                de 60, seu objetivo era produzir clones de batata isentos de vírus,                a partir de cultivares muito produtivos, porém infectados. Posteriormente,                em 1964, estendeu a pesquisa às orquídeas (Cymbidium),                já no intuito de produzir grandes quantidades de plantas idênticas,                para o mercado de flores. A lógica da eliminação                de vírus por clonagem era simples: já que os vírus                das plantas iam infectando as células à medida que a planta                crescia, deveria haver um ponto central de crescimento, onde o vírus                ainda não houvesse chegado a infectar as células. Esse ponto                é o meristema apical, que é o ponto de crescimento da planta,                onde a divisão celular ocorre com muita rapidez. Se esse ponto                pudesse ser isolado e cultivado em laboratório, poderiam ser obtidas                plantas livres do vírus. No caso da batata, assim como em outras                culturas, o processo foi bem-sucedido, gerando lotes de plantas idênticas,                e saudáveis. Já nas orquídeas, houve um problema.                Como as orquídeas crescem de forma muito mais lenta do que outras                culturas, o tamanho do grupo de células saudáveis é                extremamente pequeno (menos de 0,5mm). Este fato torna extremamente difícil                obter protocórmios viáveis, se atendido o objetivo de obter                plantas saudáveis. Embora seja tecnicamente possível (e                tenha sido feito com Cymbidium), comercialmente não é                viável. O que significa que nenhum laboratório de clonagem                produz lotes de meristemas, livres de vírus, a partir de plantas                contaminadas. Em resumo, se a matriz estiver infectada, os mericlones,                de modo geral, também serão. Nesse ponto, é preciso                chamar a atenção para os seguintes fatos: a) No Brasil,                a introdução dos 2 vírus mais importantes, ocorreu                na década de 60; b) Essa introdução se deu, com certeza,                através da importação de mericlones infectados e                c) a expansão destas doenças no Brasil se deu pela proliferação                da multiplicação via meristema de plantas comercialmente                desejáveis, sem os controles necessários.                          PREVENÇÃO             Já                que não há tratamento, a única forma de evitar a                disseminação de vírus nas coleções,                é adotar procedimentos para 1) Identificar plantas doentes; 2)                Evitar introduzir plantas doentes no orquidário; 3) Eliminar plantas                infectadas; 4) Prevenir novas contaminações. De forma prática,                seguem algumas "regras básicas":             1                - Não adquirir plantas "de risco" (coleções                antigas, orquidários comerciais sem normas rígidas de controle                etc)             2                - Aceitar presentes de "cortes especiais" com reservas. Manter                tais plantas isoladas por 1 ano, ou até que tenha feito teste em                laboratório.             3                - Eliminar prontamente quaisquer plantas comprovadamente doentes com vírus;             4                - Isolar plantas suspeitas             5                - Desinfetar bancadas, removendo detritos (raízes mortas etc),                antes de renovar com plantas novas;             6                - Não reutilizar xaxim, cacos ou vasos (vasos podem ser reutilizados,                se mergulhados numa solução de cloro a 20% por 2 horas,                depois secas ao sol)             7                - Manter limpo o local de plantio, não misturando xaxim velho com                novo etc;             8                - Não replantar grande número de plantas num só dia,                principalmente se forem plantas adultas e antigas;             9                - Controlar pragas             10                - Manter distância entre os vasos (1/2 diâmetro do vaso);             11                - Embalar adequadamente plantas de exposição, para minimizar                atrito e feridas;             12                - Não manusear em demasia as plantas. Cuidado ao retirar partes                secas ou mortas, para não ferir as plantas;             13                - Não pendurar plantas umas sobre as outras;             14                - Não reutilizar água ou solução de fertilizante;             15                - Esterilizar ferramentas adequadamente;             16                - Não fumar no orquidário.             17                - Nunca andar pelo orquidário, com canivete na mão, cortando                flores e folhas, tirando mudas, etc., utilizando a mesma ferramenta.                          A                desinfecção de ferramentas de corte é o ponto mais                importante da lista, pois as ferramentas disseminam o virus com grande                eficiência. Há vários métodos para esterilização,                que podem ser adotados de acordo com cada tipo de material da ferramenta:             1                - Fogo. Esse é o mais eficiente, seguro e barato. Tanto o CyMV                como o ORSV são permanentemente destruídos por exposição                a temperaturas acima de 150º C. por alguns segundos. Para atingir                essa temperatura, basta levar a lâmina ao fogo, em toda sua extensão,                por cerca de 15-20 segundos. Por dar melhor cobertura, dar preferência                ao fogo de gás, como o de fogão, fogareiro ou bico de bunsen.                Esse método tem o inconveniente de destruir a têmpera da                ferramenta, inutilizando-a após certo número de "queimas".                Assim, não é apropriado para tesouras de poda e outras ferramentas                de alto custo. Sugerimos utilizar facas pequenas, de aço inox (tipo                "verdura") e cabo de madeira, que tem custo muito baixo (cerca                de R$ 1), e resistência moderada ao fogo. Após queimar a                lâmina, passar a faca em água fria. Cuidado para não                misturar facas "usadas" com as já esterilizadas, na banca                de plantio. Uma boa opção é construir uma caixa de                madeira, com dois compartimentos, para receber as facas. No lado "limpo",                pintar com tinta verde, e, do outro (facas usadas), pintar de vermelho.                Assim, vai-se passando as facas do verde para o vermelho à medida                que vão sendo usadas, evitando confusão.             2                - Cáusticos. Outro sistema bastante eficiente, desde que aplicado                corretamente. Os produtos recomendados são as soluções                de cloro (que atuam por oxidação) e o fosfato trissódico                (que atua por elevação do pH). Deve-se optar por esterilização                por produto químico, quando a material da ferramenta não                permitir o uso do fogo (por ser de plástico ou alumínio).                Para utilizar solução de cloro, recomendamos o seguinte:                diluir 300 ml de solução concentrada de hipoclorito de sódio                (cloro líquido de piscina), em 700 ml de água pura. Manter                essa solução tampada sempre que não estiver sendo                usada (pois o cloro evapora). Passar água limpa na ferramenta antes                de mergulhar no cloro (para remover resíduos vegetais), deixar                a ferramenta no cloro por 3-4 minutos, e passar novamente água                limpa corrente (não a mesma da etapa anterior...) para tirar o                excesso de cloro. Quando a solução de cloro ficar muito                suja, ou a cada semana, trocar por nova. Este sistema é ótimo                para tesouras de poda de aço inox, que se estragam rapidamente                no fogo, mas que tem boa resistência ao cloro. Para utilizar o TSP                (fosfato trissódico), fazer uma solução saturada                (isto é, dissolver o sal de TSP em água destilada até                que não consiga dissolver mais nada, restando uma camada de cristais                no fundo do vasilhame. Manter sempre saturada). O tratamento da ferramenta                é parecido com o utilizado no cloro, devendo permanecer mais tempo                (10-15 minutos). Atenção: ambos os produtos, além                de serem corrosivos para as ferramentas, também atacam a pele.                Utilizar sempre luvas de borracha ao manusear estes produtos. Há                quem utilize o álcool para desinfetar ferramentas. Para eliminar                fungos e bactérias, pode ser eficaz. Para vírus, é                insuficiente. Flambar a ferramenta com álcool, também é                ineficaz, pois não se atinge a temperatura necessária.                          NOVOS                RUMOS             Há                muitos trabalhos de pesquisa em andamento, visando resolver o problema                das viroses em plantas em geral, e também nas orquídeas.                Houve algum progresso na eliminação de vírus em meristemas,                através do tratamento do meristema apical dissecado, com soro específico                para CyMV e ORSV, o que pode resultar na produção de mericlones                saudáveis a partir de matrizes infectadas. Mas a real solução                do problema passa pela criação de plantas imunes a vírus.                Esse processo de engenharia genética, que tem atingido resultados                surpreendentes em culturas como alfafa e tomate, consiste na introdução,                no núcleo da célula vegetal, de determinados genomas virais                não-ativos, tais como a "capa" do vírus. Na presença                deste genoma, o vírus não consegue se replicar, o que resulta                na imunidade da planta hospedeira. Para se fazer o transporte deste genoma,                tem-se utilizado uma bactéria causadora de galhas em plantas (Agrobacterium                tumefaciens). Usa-se a bactéria para introduzir o genoma viral                na forma de plasmídeos (DNA não cromossômico), e depois                se aplica bactericida para eliminar a bactéria. Infelizmente o                progresso nesse campo, aplicado às orquídeas, tem sido mais                lento do que o esperado, devido ao fato da única bactéria                possuidora da capacidade de transportar o genoma de resistência                (A. tumefaciens) ser específico de dicotiledôneas, não                sendo capaz de atuar nas monocotiledôneas, como as orquídeas.                Atualmente estuda-se métodos de injeção direta do                genoma viral no núcleo das células meristemáticas.                Caso haja sucesso nessa empreitada, poderemos ter, num futuro não                muito distante, clones transgênicos de orquídeas com resistência                a virus, o que abrirá uma nova etapa na história da orquidofilia.                Resta esperar e torcer...                          Compilado                e editado por             Eng.                Agr. Roland Brooks Cooke