Ac Monoclonal  !!!!! Será que vem ai a cura 
Autor: Giovanna Loureiro | Publicado: 2016-04-28T08:06:00-07:00


Anticorpos monoclonais&nbsp;&nbsp;são&nbsp;anticorpos&nbsp;produzidos por um único&nbsp;clone&nbsp;de um único&nbsp;linfócito B&nbsp;parental, que é&nbsp;clonado&nbsp;e imortalizado, produzindo sempre os mesmos anticorpos, em resposta um agente&nbsp;patogénico. Esses anticorpos apresentam-se iguais entre si em estrutura, propriedades físico-químicas e biológicas, especificidade e afinidade, ligando-se por isso ao mesmo&nbsp;epítopo&nbsp;no&nbsp;antigénio.&nbsp;[1]

Esses mAbs podem ser gerados em laboratório para reconhecer e se ligar a qualquer&nbsp;antígeno&nbsp;de interesse. O procedimento foi descrito pela primeira vez em 1975, em artigo publicado na revista&nbsp;Nature, por&nbsp;César Milstein&nbsp;e&nbsp;Georges Köhler, que, por esse feito, dividiram o&nbsp;Prêmio Nobel de Medicina&nbsp;1984 com o dinamarquês&nbsp;Niels Kaj Jerne.[1]

A existência de anticorpos diferentes para um mesmo&nbsp;agente patogénico&nbsp;torna a resposta pouco eficiente, sendo os anticorpos monoclonais os mais eficientes. Devido a isto, na pesquisa de diagnósticos e terapêuticas eficazes contra certas&nbsp;patologias, utilizam-se preferencialmente anticorpos monoclonais.

Os anticorpos monoclonais (ou&nbsp;imunoglobulinas&nbsp;monoclonais) podem estar presentes no&nbsp;soro sanguíneo&nbsp;e na&nbsp;urina&nbsp;de pessoas afetadas por doenças tais como o&nbsp;mieloma múltiplo&nbsp;(MM), um tipo de&nbsp;câncer&nbsp;que afeta o&nbsp;sistema imune&nbsp;(neoplasia&nbsp;em&nbsp;plasmócitos, células diferenciadas a partir de&nbsp;linfócitos B). Porém, esses anticorpos não são passíveis de serem isolados a partir de um soro policlonal; logo, há necessidade de se produzirem anticorpos monoclonais.

Os anticorpos monoclonais são produzidos em laboratório a partir de&nbsp;linfócitos B&nbsp;gerados por camundongos, cujos&nbsp;sistemas imunológicos&nbsp;foram estimulados pelos antígenos de interesse. Todavia, por sua origem animal, esses anticorpos, se usados de forma continuada em humanos, estimulavam uma reação imunológica - uma resposta de anticorpos humanos contra aqueles de origem murina, denominada resposta HAMA (Human "Anti-mouse Antibody).[2]&nbsp;Por essa razão, o uso dos mAbs ficou limitado, durante cerca de vinte anos, à produção de kits para diagnósticos ou à pesquisa científica.[1]

Mais recentemente, as modernas técnicas de&nbsp;engenharia genética&nbsp;permitiram que esses anticorpos fossem adaptados ao organismo humano, quando os&nbsp;genes&nbsp;responsáveis pela produção dessas&nbsp;proteínas&nbsp;foram modificados de forma a eliminar a reação&nbsp;imunológica&nbsp;do organismo humano, sendo então gerados os chamados anticorpos monoclonais humanizados. Desta forma, sem alterar a afinidade do anticorpo com o respectivo antígeno, tornou-se possível empregar os anticorpos monoclonais de maneira continuada, em procedimentos terapêuticos.

Na área de&nbsp;oncologia, uma nova geração de medicamentos está baseada na capacidade dos mAbs em reconhecer antígenos específicos de tumores e induzir uma resposta imune contra as células cancerosas. Além disso, os mAbs podem ser modificados para atuarem como portadores de&nbsp;radioisótopos&nbsp;ou&nbsp;toxinas&nbsp;contra células cancerosas.

Antes da descoberta da técnica do&nbsp;hibridoma, eram produzidos apenas&nbsp;anticorpos policlonais, o que requeria um grande número de animais imunizados e não imortalizava as células produtoras de anticorpos. A técnica do hibridoma contribuiu para a redução do número de animais utilizados. Além disso, a técnica oferece outras vantagens:

Alta especificidade;
Alta afinidade;
Determinação de um só&nbsp;epítopo&nbsp;de um&nbsp;antigénio
Alta homogeneidade;
Ausência de&nbsp;anticorpos&nbsp;não específicos;
Maior facilidade de caracterização;
Reduzida variabilidade entre os lotes;


No entanto, existem também desvantagens no uso dessa técnica:

Alto custo;
Reconhecimento de um só epítopo de um antigénio. Esse epítopo pode estar destruído (por ex: pela fixação) mesmo que exista a molécula total do antigénio;
Se o soro não foi produzido contra um epítopo específico do antigénio que se quer detectar e se existirem outros antigénios com esse epítopo, a imensa vantagem da alta especificidade será inútil;




Depois que os hibridomas são fundidos, com a ajuda do&nbsp;polietilenoglicol&nbsp;(PEG), é preciso desenvolver um método de seleção capaz de separar as células fusionadas híbridas das células não fusionadas. Nesta segunda fase do protocolo, os hibridomas são isolados das células de&nbsp;mieloma&nbsp;da mistura de fusão por drogas. Este passo é necessário, pois células de mieloma frequentemente dividem-se mais rapidamente que células do hibridoma que logo seriam excluídas do meio de cultura por competição. Estes mielomas expressam a&nbsp;enzima&nbsp;hipoxantina fosforribosiltransferase&nbsp;(HPRT), que catalisa um passo da via de&nbsp;hipoxantina&nbsp;a&nbsp;purina, uma via&nbsp;biossintética&nbsp;alternativa para síntese e replicação de&nbsp;DNA&nbsp;. De acordo com este fato, cultiva-se a mistura de fusão em um&nbsp;meio HAT&nbsp;(hipoxantina,&nbsp;aminopterina&nbsp;e&nbsp;timidina). A aminopterina bloqueia a principal via de síntese de&nbsp;purinas&nbsp;e&nbsp;pirimidinas; assim, células de&nbsp;mieloma, que já não expressam a enzima HPRT, num meio HAT, não podem se multiplicar. As células do&nbsp;hibridoma&nbsp;se dividem normalmente, uma vez que apresentam atividade da HPRT herdada do&nbsp;linfócito B&nbsp;esplênico&nbsp;parental, podendo assim, usar a hipoxantina como substrato para síntese de DNA. Os linfócitos B não crescem em cultura, e somente as células de hibridoma persistem quando cultivadas continuamente em um meio de seleção HAT. Finalmente a mistura de hibridomas purificada é selecionada para identificação e isolamento de clones que secretam um anticorpo que interage com o antígeno desejado. Isto geralmente é feito a partir da diluição da suspensão dos hibridomas, obtendo-se então os clones que secretam determinado anticorpo monoclonal por técnicas imunoquímicas.