Relatório de Microbiologia I
Autor: Iury Achiney | Publicado: 2015-07-07T19:12:00-04:00


1- Métodos de Antissepsia. 



Introdução:

As bactérias são
microorganismos unicelulares, procariontes, e algumas causam doenças. São
abundantes no ar, no solo e na água, e na sua maioria inofensivas para o ser
humano, sendo algumas até benéficas.

As bactérias reproduzem-se
por divisão celular, as causadoras de doenças denominam-se patogênicas. Estas
possuem diversas formas, que podem variar de acordo com o meio e com o tipo de
associação.

A cultura de bactérias é o
crescimento de colônias de microorganismos induzida pelo Homem para facilitar o
seu estudo.

Para a realização de uma
cultura bacteriana, precisamos de um inoculo e de um meio de cultura. O meio de
cultura é uma substância líquida ou sólida, simples ou complexa, que permite a
nutrição, o crescimento e a multiplicação dos microrganismos do inoculo. Os
meios de cultura são selecionados consoante o tipo de bactéria a observar. As
bactérias multiplicam-se em meios de cultura apropriados desde que sejam
respeitadas as condições de temperatura, pH, umidade e composição.



Objetivos:

O isolamento de um
determinado microrganismo em cultura pura a partir do corpo humano e do
meio-ambiente envolve, em geral, o uso de meios de cultura sólidos e o recurso
a técnicas de isolamento de colônias, como seja pelo método de espalhamento em
placa.&nbsp; Este método permite obter
colônias individualizadas e espacialmente separadas que, teoricamente, são
originadas a partir de uma única célula, correspondendo, por isso, a uma cultura
pura de um microrganismo particular a fim de observar a diversidade.



Material:

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Alça
de platina;

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Bico
de busen;

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Alça
de drigalsky

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Placa
de petter

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Swab
(contonete)

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Fósforo

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Placa
de petrin vazia

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Placa
de petrin com a substancia ágar.

&nbsp;&nbsp;

Métodos: 

1)No
início de cada trabalho prático a superfície da bancada foi desinfetada com
álcool com a utilização de papel toalha. Após a desinfecção manteve-se em cima
do balcão os seguintes materiais para iniciar o isolamento dos
micro-organismos: Alça de platina,bico de busen,alça de drigalsky,placa de
petter,swab,fósforo,placa de petrin vazia,placa de petrin com a substância
ágar.

Após a
separação do material, foi realizada a lavagem das mãos, com exceção do doador
dos micro-organismos da mão e iniciamos a prática ascendendo a o bico de busen.



COLETA DE MICRO-ORGANISMOS DA MÃO

*Primeiramente é necessário dividir a placa de petrin quatro quadrantes
com o auxílio do bico de busen.

*Após abrir a placa
de Petri,flexionar o polegar no primeiro quadrante sem a assepsia das mãos.

*Na sequência lavar
as mãos apenas com H2O e, pressionar o polegar no quadrante 2° segundo.

*Lavar as mãos com
a H2O e detergente, pressionando o polegar no quadrante 3°.

&nbsp;*Lavar as mãos com H2O,detergente e álcool
70°,pressionando o polegar no 4° quadrante.



Conclusão:Pode-se concluir que o
crescimento bacteriano é influenciado pelos agentes anti-sépticos e, também,
por agentes físicos. Esses agentes inibem ou matam as colônias bacterianas,
cada bactéria, por sua vez, possui de acordo com a sua estrutura, a capacidade
de resistência a tais agentes.

Identificação de Bactérias em
Microscopia&nbsp;Ópticas.

Introdução:

&nbsp;A coloração de Gram é uma técnica de
diferencial através de uma coloração que permite descobrir os dois principais
grupos de bactérias por microscopia óptica: as bactérias Gram-positivas e as
bactérias Gram negativas.
As bactérias cuja coloração ficam roxa recebem o
nome de Gram – positivas, e aquelas que ficavam com um tom avermelhado, de Gram
– negativas.
Nesta técnica, as bactérias são colocadas em
contato com um corante violeta, denominado de Cristal Violeta, depois fixação
com lugol,seguido de descoloração com álcool e coradas novamente com corante
vermelho, a Fucsina Básica.

Objetivos:

&nbsp;Bactérias
com componentes estruturais diferentes podem ser diferenciadas quando coradas
pelo método de Gram.

Realizar a coloração de Graw
e identificar bactérias em microscopia óptica.

Aprender sobre a importância
e funcionamento do método de Coloração de Gram e sobre a microbiota da boca.

Material:

*beker

*pipeta
pasteur

*suporte
para lâmina e lâmina

*alça de
platina 

*Corante
álcool cetona fucsina e lugol violeta genciana

*bico de
busen

*placa de
petrin previamente inoculadas.

Métodos: 

1
Observar&nbsp; e caracterizar as colônias.

2 Organizar
legenda 

&nbsp; *colônias : amarela brilhante

&nbsp;&nbsp; *colônias branca opaca ( até 3)

Coloração:

1 –
Esfregaço.

2-Fixação
pelo fogo

3-violeta
genciana-aguardar 1 minuto.

4-Lugol –
1,5 min.

5- Inclinar
a lâmina e gotejar álcool acetona

6 – passar
lamina em H2O corrente.

7 – Fucsina
– 30 segundos.

8 – passar
em H2O corrente.

9-
Microscopia.

RESULTADO:

&nbsp;&nbsp;O que se
verifica, quando se observam as diferentes bactérias sujeitas a esta coloração
ao microscópio, é que estas têm um comportamento diferente face à coloração de
Gram, o que permite classificá-las em:

 

  
  

  &nbsp;&nbsp;Bactérias&nbsp;Gram-positivo&nbsp;&nbsp;(apresentam
  cor púrpura)&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;

  
  
&nbsp;&nbsp;

  
  
Bactérias&nbsp;Gram-negativo&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
  (apresentam cor vermelha)&nbsp;

 


(estafilococos)&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
(cocos e estafilococos)



Conclusão:

Concluímos que o único tipo&nbsp; bactérias que encontramos foram as de tipo
Gram + (coradas de violeta) e em relação á sua forma só foram encontrados
cocos, mas existem outros tipos de bactérias como os estreptococos.

Fazer o esfregaço, que teve como
objetivo separar as bactérias para que estas fossem bem visíveis.

Fixar o material á lâmina através da
chama, para que as células morressem e ficassem fixas (sem movimento) para
permitir um melhor visionamento das mesmas.

Passou-se Lugol por toda a lâmina,
para que as estruturas celulares aumentassem as suas afinidades tintureiras.

A colocação do álcool.

Concluímos
também que se a objetiva de imersão não estiver devidamente limpa a observação
vai ser dificultada ou mesmo não possível de efetuar.