Prática 003/2013 - Cromatografia de pigmentos vegetais em papel
Autor: Guilherme Lacerda | Publicado: 2013-03-17T14:18:00-07:00

Introdução



Cromatografia é um método de separação de
misturas e identificação de seus componentes. Esta separação depende do
comportamento dos&nbsp;analitos,&nbsp;parte da amostra que é o foco da análise química,
entre uma fase móvel e uma fase estacionária. A interação dos componentes da
mistura com estas duas fases é influenciada pelas diferentes forças
intermoleculares, incluindo as forças apolar, polar, iônica, bipolar,
gravitacional e específicas interações de afinidade e solubilidade.&nbsp;


Objetivo
Extrair e diferenciar diferentes pigmentos vegetais pela técnica de cromatografia em papel.&nbsp;


Material

02 Folhas da herbácea Tradescantia







Figura 1: Folha da planta ornamental herbácea Tradescantia sp. (Malvaceae) utilizada para extração dos pigmentos vegetais (Foto:&nbsp;Alexsandro G. dos Santos e Márcio H.
R. de Carvalho).


01 Almofariz e Pistilo

10 mL de Álcool Etílico Comercial (líquido)

10 mL de Solução de Acetona Comercial

02 Folhas de Papel de Filtro nº 102

02 Câmaras Cromatográficas (Frascos de vidro com tampa
seladora)

01 Proveta de 50 mL (ou caneca de medida)

02 Placas de Petri (ou pires)

01 Tesoura

01 Cronômetro (de celular ou relógio).





Métodos

1) Depois de lavadas, uma das
folhas de Tradescantia será colocada
no almofariz e amassada com o auxílio do pistilo acrescentando-se, em pequenas
quantidades, 10 mL de álcool etílico medidos com a proveta. Formando-se, então,
um extrato foliar etanoico;



2) Logo após transferir o extrato
para uma Placa de Petri;



3) Cortar o Papel de Filtro no
tamanho 9 X 9 cm e dobrar ao meio colocado-o em posição vertical sob o conteúdo
de extrato foliar etanólico, deixando-o por 5 minutos cronometrados;



4) Amassar a outra folha de Tradescantia com o pistilo no almofariz
acrescentando, dessa vez, acrescentando-se 10 mL de solução de acetona em
pequenas quantidades. Obteremos então um extrato foliar cetônico que será
transferido para a outra câmara de cromatografia;



5) Repetir o processo do subitem 3
com o outro papel de filtro dobrado &nbsp;com o extrato e aguardar os 5 minutos
cronometrados.



6) Após os 5 minutos de espera,
retirar o papel filtro do extrato foliar etanólico e colocar na posição
invertida. Esperar uns minutos para secar e o papel colocado-os na Câmara Cromatográfica
para serem aguardados mais 5 minutos.



7) Repetir os processos dos
subitens 5 e 6 mas com o&nbsp; extrato foliar
cetônico no lugar do extrato foliar etanólico.



Resultados





Figura 2: Cromatografia em papel do extrato foliar etanólico&nbsp;(Foto:&nbsp;Alexsandro G. dos Santos e Márcio H. R. de Carvalho).









Figura 3: Cromatografia&nbsp;em papel&nbsp;do extrato foliar cetônico&nbsp;(Foto:&nbsp;Alexsandro G. dos Santos e Márcio H. R. de Carvalho).











Figura 4: Notou-se também, nesse experimento, a florescência da
clorofila, que mesmo no ambiente externo da folha, continua a reagir a luz&nbsp;(Foto:&nbsp;Alexsandro G. dos Santos e Márcio H. R. de Carvalho).




Discussão

1) Relacione os diferentes pigmentos observados e suas respectivas colorações:

Padrão de Resposta (PR) -&nbsp;Antocianina - cor roxa; clorofila - cor verde; xantofila - cor amarela.



2) Obteve-se diferença nos&nbsp;perfis&nbsp;cromatográficos em relação ao solvente?

PR - Pelo experimento observo-se maior afinidade do solvente etanólico com a antocianina e do cetônico com a clorofila e xantofila.



3) Por que a clorofila emitia&nbsp;florescência mesmo após a extração com solvente?&nbsp;

PR - Pela reação da mesma em excitação molecular aos fótons da luz natural do ambiente.



Referências bibliográficas

LACERDA, Guilherme Araújo.&nbsp;Manual de
aulas práticas em biologia celular. Janaúba: UNIMONTES, &nbsp; Faculdade de Zootecnia, 2013.&nbsp;31f.





PRADO, Carlos Henrique B. de A.;&nbsp;CASALI,&nbsp;Carlos A. Fisiologia vegetal: práticas em relações hídricas,
fotossíntese e nutrição mineral.&nbsp;Barueri, SP: Manoel, 2006.



RIBEIRO,&nbsp;Núbia Moura; NUNES, Carolina Rodeiro. Análises de pigmentos de pimentões por cromatografia em papel.&nbsp;QUÍMICA NOVA NA ESCOLA,&nbsp;N° 29, AGOSTO 2008. p.34-37.