Autor: De Olho na Análise | Publicado: 2011-11-06T22:09:00-03:00

ANÁLISES FORENSES&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Toxicologia Forense estende-se a qualquer aplicação da ciência dos toxicantes cujo objetivo seja a elucidação de uma investigação criminal. O adjetivo forense implica que, quando praticada para esse fim, Toxicologia&nbsp; tem proposições legais como base.
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; De acordo com as diretrizes exaradas pela Sociedade de toxicologia Forense – SOFT (Society of Forensic Toxicologists) e a Academia Americana de Ciências Forenses – AAFS (American Academy of Forensic Sciences) podem se considerado integrantes de caráter&nbsp; “forense” da toxicologia:
&nbsp;&nbsp; Investigação médico-legal (análises post-mortem e investigação criminal);&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Análise de mudança de desempenho pelo uso de substâncias que alteram o estado de consciência (aqui se inclui o controle de dopagem), como, por exemplo, verificação de alcoolemia e outras análises que requeiram avaliação clínica;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Testagem “forense” de drogas na urina (relacionada com a investigação do uso de substâncias que alteram o desempenho, inclusive no ambiente de trabalho);&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Caracterização de crime ambiental.
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; As análises toxicológicas desempenham importante papel quando se pretende estabelecer um nexo causal entre um determinado evento e o efeito, no caso o efeito tóxico, a ele associado. Configuram-se como fator imprescindível no estabelicimento de um aspecto (finalidade de análise). Evidencia-se assim a importância de reconhecer as aspectos analíticos inequívocos, que envolvem essas análises. 
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Um resultado analítico, para ser inequívoco, precisa ser gerado em nível de excelência e, para tanto, os preceitos da Garantia da Qualidade Analítica devem ser observados. Envolvem os procedimentos e processos administrativos e técnicos que controlam a qualidade dos resultados provenientes dos ensaios realizados no laboratório e que tornam possível decidir sobre a confiabilidade desses resultados.
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Especificamente para laboratórios que realizam análises toxicológicas com finalidade forense em materiais biológicos de indivíduos vivos ou matrizes post- mortem , a SOFT/AAFS publicou diretrizes expressando que, na busca do reconhecimento formal da competência dos laboratórios e na realização de ensaios utilizados em Toxicologia Forense , é importante que sejam observados todos os preceitos de qualidade, inclusive a realização de ”Ensaios de Proficiência”por comparações interlaboratoriais e a implementação de diretrizes, em conformidade com as modernas práticas e exigências preconizadas por normas de consenso internacional.
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Esses sistemas de qualidade enfatizam a importância da capacitação do analista; da adequação dos equipamentos e condições laboratoriais; de planos de trabalho definidos e bem elaborados; de cuidados na documentação dos procedimentos e dos dados obtidos; de auditorias internas e externas e de validação da metodologia utilizada. Ao enfocarem mais especificamente os sistemas utilizados em laboratórios que realizam análises toxicológicas com finalidade forense, os procedimentos que consubstanciam a chamada “cadeia de custódia” também constituem aspectos relevantes no estabelecimento da política de qualidade do laboratório.
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; O termo cadeia de custódia refere-se à documentação que o laboratório preenche com o propósito de rastrear todas as operações realizadas com cada amostra desde sua coleta até a completa destruição do material. Os documentos da cadeia de custódia deve possibilitar que seja documentada cada fase do recebimento, aliquotagem, preparação, testes realizados até o processo de disposição final, quer seja estocagem ou o descarte. Deve conter informações sobre:
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Quem manuseou a amostra ou alíquota?&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Quando tal manuseio ocorreu?&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Onde a amostra ou alíquota foi obtida?&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Para onde a amostra ou alíquota retornou/&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Por que a amostra ou alíquota foi manuseada?&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; As anotações devem ser feitas concomitantemente a cada ato do manuseio e cada ato deve corresponder a assinatura completa de quem o realizou.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Há dois tipos de cadeias de custódia:
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Cadeia de custódia externa – do local da coleta até chegar ao laboratório. Esse formulário documenta a transferência da amostra original desde a apreensão ou coleta, durante todo o transporte, que pode até ser estafeta ou correio até o laboratório.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Cadeia de custódia interna – refere-se à amostra ou a alíquotas. Geralmente refere-se à bateria de amostras e, via de regra, deve incluir dados de transferência, armazenamento e descarte.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Qualquer que seja a natureza da amostra a abordagem analítica deve considerar:&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Casos com histórico: análises direcionadas&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Casos sem histórico (general unknowm): análise toxicológica sistemática &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; A investigação toxicológicas daqueles casos que apresentam evidências &nbsp;sobre o analito a ser pesquisado, ou histórico de uso, segue diretamente pesquisa dirigida no sentido de se confirmar a suspeita. Por outro lado, quando não há nenhuma indicação sobre a substância a ser pesquisada, o que ocorre na maioria dos casos de exames em material biológico, inicia-se a marcha analítica pelos chamados métodos de triagem. Os métodos de triagem possibilitam a exclusão de grupos, indicação da presença de substância a ser confirmada. Os resultados de triagem ou histórico das circunstâncias do evento orientam &nbsp;os métodos dirigidos. Tanto as análises&nbsp; direcionadas como aquelas integrantes de uma determinada marcha sistemática devem contemplar os chamados “testes de triagem ou presuntivos” e os “testes confirmatórios”, sem que o resultado toxicológico com finalidade forense não pode ser considerado.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Atualmente a TIAFT ( The International Association of Forensic Toxicology) preconiza que as análises que compõem o processo de triagem sigam a chamada “análise toxicológica sistemática”, que é a busca químico- analítica lógica por uma substância de interesse toxicológico cuja presença não &nbsp;é suspeitada e cuja identidade é desconhecida.
ANÁLISES EM FLUIDOS BIOLÓGICOS &nbsp;&nbsp;&nbsp;Ciscunstâncias de solicitação de exame toxicológico forense: In Vivo e em amostras biológicas &nbsp;post- mortem&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; A investigação toxicológica é comum nos casos de morte violenta que pode se dar por acidentes, homicídios ou suicídios ou ainda em se tratando de averiguação de intoxicação exógena que contribua para o diagnostico na Clínica Médica, integrante da estruturas dos Institutos Médicos Legais.
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; A realização de análises toxicológicas em fluidos biológicos com finalidade forense ‘;e realizada, oficialmente no Brasil, em laboratórios pertencentes á Secretaria de Segurança &nbsp;Pública, estaduais e , em vários casos, como acontece no estado de São Paulo, nos Institutos Médicos-Legais.
Escolha, Coleta, Transporte e Armazenamento de&nbsp; Amostra Biológica para Fins Forenses 
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; A escolha da amostra (matriz biológica) deve ser orientada pelo histórico do caso, que, na maioria das vezes não acompanha o material. Os conhecimentos acerca da toxicocinética – absorção, distribuição, biotransformação, armazenamento e excreção da substância e os relativos a toxicodinâmica – macanismo de ação , se houver histórico são fundamentais para que se alcance o êxito analítico. Outro fator importante a se considerar é o tipo de intoxicação que se foca, aguda ou crônica. Orienta também a escolha da amostra o conhecimento do fenômeno que se pretende averiguar, se exposição passada ou prefressa.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Os fluidos biológicos mais comumente utilizados em análises de indivíduos vivos são sangue e urina. Tanto melhor uma amostra quanto menos invasivo for considerada. No caso das análises post - mortem &nbsp;em que haja histórico da intoxicação, orienta-se a coleta de acordo com o conhecimento da disposição da substância no organismo. Naqueles casos sem históricos, o que é mais comum, opta-se por uma coleção de amostras que possibilitem o achado de praticamente 100% dos xenobióticos envolvidos em intoxicação aguda.
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; No caso de cadáveres queimados, exumados ou putrefatos, amostras não-usuais devem ser coletadas para análise. Neste caso, músculo esquelético, medula óssea, cabelo e humor vítreo são de eleição. No caso de queimados, o sangue pode ser uma amostra difícil e o humor vítreo sempre permanece, além de ser muito útil para a detecção de drogas voláteis. O cabelo tem sido utilizado nestes casos.

Quadro: Coleta de materiais biológicos para análises toxicológicas 
NORMAS DE COLETA
CERÉBRO 100 g
FÍGADO100 g
SANGUE25 g coração 10 g periférico
HUMOR VÍTREOToda quantidade disponível 
BILEToda quantidade disponível 
URINAToda quantidade disponível
CONTEÚDO GÁSTRICOToda quantidade disponível 






MÉTODOS DE ANÁLISES (TRIAGEM, IDENTIFICAÇÃO E QUANTIFICAÇÃO)
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Orfila foi o primeiro toxicologista a usar a análise toxicológica sistemática como prova legal de envenenamento ao provar apresença de arsênio em material proveniente de autópsia. Os princípios de Orfila continham toda a sistemática para a identificação de agentes químicos em material de autópsia, por meio de provas de identificação, como prova legal de envenenamento: objetivo definido, princípios teóricos para especificar as leis gerais que regem o comportamento do objeto, a relação com as teorias de campos conexos (química analítica, bioquímica e a fisiologia) e exemplos concretos da aplicação na teoria. &nbsp;

&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; A análise toxicológica sistemática consta das seguintes etapas:
&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Etapa 1: isolamento e concentração .Preparação da amostra – hidrólise e remoção dos interferentes.Extração líquido-líquido.Extração em fase sólida.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Etapa 2: diferenciação –detecção Imunoensaios.Cromatografia (CCD,CG, CLAE) com detecção por DIC (ionização em chamas), DNP(nitrogênio e fósforo),UV, EM etc.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Etapa 3: identificaçãoComparação com bases de dados.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; A interpretação dos achados laboratoriais quer em situações in vivo ou o estabelecimento da causa mortis é a integração dos conhecimentos sobre toxicocinética do agente e toxicodinâmica e achados necroscópicos que evidenciem ser o toxicante o responsável pelo efeito letal.

REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICA

&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; MOREAU, Regina Lúcia de Moraes; SIQUEIRA, Maria Elisa Pereira Bastos de.TOXICOLOGIA ANALÍTICA. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2008. 318 p. (Ciências farmacêuticas).