Autor: Herbe Leone | Publicado: 2015-11-26T11:56:00-08:00




APLICAÇÃO
DA CROMATOGRAFIA COM GIZ PARA DETERMINAÇÃO DE CLOROFILA E CAROTENOS NAS FOLHA
DE ESPINAFRE

COSTA, Herbe L.J<!--[if !supportFootnotes]-->[1]<!--[endif]-->;
BIAZUTTO, Anderson F.<!--[if !supportFootnotes]-->[2]<!--[endif]-->;
NICASIO, Sergio A<!--[if !supportFootnotes]-->[3]<!--[endif]-->.;
BARBOSA, Darlan L<!--[if !supportFootnotes]-->[4].&nbsp;



RESUMO

Este trabalho trata de
um experimento de cromatografia usando giz.&nbsp;
O objetivo é verificar a ocorrência de carotenos e clorofilas na folha
de espinafre.&nbsp; O experimento envolve a
extração das clorofilas e carotenos presentes no espinafre com o auxílio de
solventes e posterior emprego de técnicas cromatográficas para a visualização e
separação desses componentes. O experimento foi executado no laboratório de
química do Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Pará (IFPA).&nbsp; O seu resultado foi satisfatória e foi possível
compreender a técnica de análise empregada cotidianamente em laboratórios de
pesquisa e em algumas indústrias, como a farmacêutica. 



PALAVRAS CHAVES:&nbsp;Cromatografia; Giz;
Solvente. 



1.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; INTRODUÇÃO

Entre os métodos modernos de análise, a
cromatografia ocupa um lugar de destaque devido a sua eficiência para efetuar a
separação, a identificação e a quantificação das espécies químicas,
isoladamente ou em conjunto com outras técnicas instrumentais de análise, como
por exemplo a espectrofotometria ou a espectrometria de massas. Desde o
experimento de Tswett em 1906 até as modernas placas preparadas, a
cromatografia passou por grande aprimoramento. <!--[if supportFields]><span
 style='mso-spacerun:yes'> CITATION Pal98 \l 1046 <span
 style='mso-element:field-separator'><![endif]-->(Paloschi, Zeni, &amp; Riveros, 1998)<!--[if supportFields]><span
 style='mso-element:field-end'><![endif]-->

Apesar do significado da palavra
cromatografia (crom = cor; graphie = escrita), esse processo de separação de
misturas complexas também pode ser empregado para substâncias incolores. Sua
utilização é muito ampla, especialmente em processos de separação,
identificação, preparação e dosagem de substâncias químicas. Por exemplo,
pode-se cromatografar a urina de um cavalo para saber se ele estava dopado ou
não quando ganhou uma corrida, ou ainda isolar de um vegetal uma certa substância
de interesse farmacológico.<!--[if supportFields]><span
 style='mso-element:field-begin'> CITATION Pal98 \l 1046 <span
 style='mso-element:field-separator'><![endif]-->&nbsp;(Paloschi, Zeni, &amp; Riveros,
 1998)



<!--[if !supportLists]-->2.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->REVISÃO
BIBLIOGRÁFICA



<!--[if !supportLists]-->2.1.&nbsp; <!--[endif]-->Cromatografia,
Extração, Isolamento. 

Aclorofila é facilmente
identificada nas plantas, pois é a responsável pela coloração verde das mesmas.
A clorofila a é a mais abundante no reino vegetal, sendo
encontrada, juntamente com a clorofila b,
numa proporção de 3:1, respectivamente. O mais conhecido dos carotenos é o
b-caroteno, com ampla ocorrência no reino animal e&nbsp; vegetal, sendo normalmente encontrado nas
plantas, junto com a clorofila. É o mais importante dos precursores da vitamina
A e utilizado como corante na indústria alimentícia. As estruturas das
clorofilas a e b e a do b-caroteno são ilustradas abaixo.








O experimento envolve a
extração das clorofilas e carotenos presentes no espinafre com o auxílio de
solventes e posterior emprego de técnicas cromatográficas para a visualização e
separação desses componentes.Giz triturado fará o papel da sílica ou alumina,
normalmente empregados como fase estacionária de uma coluna cromatográfica,
para efetuar a separação dos carotenos e das clorofilas.<!--[if supportFields]>
 CITATION Oli98 \l 1046 <![endif]-->&nbsp;(Oliveira,
 Simonelli, &amp; Marques, 1998)<!--[if supportFields]><span
 style='mso-element:field-end'><![endif]-->

&nbsp;&nbsp;

<!--[if !supportLists]-->3.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->MATERIAIS E REAGENTES 









<!--[if !supportLists]-->3.1.&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Vidrarias






<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Proveta


<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Bécher


<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Suporte
Universal 

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Funil
de decantação 

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Bastão
de vidro 

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Frasco
de vidro para coleta 



<!--[if !supportLists]-->3.2.&nbsp; <!--[endif]-->Reagentes
e materiais&nbsp; 



<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Hexano

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Acetronitrila

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Giz

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Folha
de Espinafre&nbsp; 





<!--[if !supportLists]-->3.3.&nbsp; <!--[endif]-->Aparelhos,
instrumentos e equipamentos.



<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Balança
analítica 

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Capela


<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Bomba
a vácuo






<!--[if !supportLists]-->4.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; <!--[endif]-->PROCEDIMENTO







<!--[if !supportLists]-->1.1.&nbsp;&nbsp; <!--[endif]-->Foi colocado 50g de folha de espinafre em
dois Becker de 250ml, cada;








<!--[if !supportLists]-->1.2.&nbsp;&nbsp; <!--[endif]-->As folhas foram trituradas com o auxílio de
um pistilo. 

<!--[if !supportLists]-->1.3.&nbsp;&nbsp; <!--[endif]-->Para o Becker 01, foi feita uma mistura de
Hexano e Acetronitrila na proporcao de 2:8; para o Becker 2, na proporção de
8:2;







<!--[if !supportLists]-->1.4.&nbsp;&nbsp; <!--[endif]-->A solução verde de ambos os Becker foram
separados por filtração a vácuo das folhas de espinafre; 








<!--[if !supportLists]-->1.5.&nbsp;&nbsp; A porção do Becker 02 formol uma solução
bifásica e foi separada num funil de decantação;





&nbsp; 

&nbsp;&nbsp; 


<!--[if !supportLists]-->1.6.&nbsp;&nbsp; <!--[endif]-->&nbsp;Foi
mergulhado várias vezes e rapidamente a parte inferior do giz nos extratos
preparados;

<!--[if !supportLists]-->1.7.&nbsp;&nbsp; <!--[endif]-->Foi utilizado 2 frascos de vidro para
coleta com tapa para o desenvolvimento da cromatografia. No frasco 01, foi
adicionado Hexano até cobrir o fundo. No frasco 02, foi adicionado
Acetronitrila. 

<!--[if !supportLists]-->1.8.&nbsp;&nbsp; <!--[endif]-->Foi inserido o giz em pé, com a porção
mergulhada no extrato para baixo, em cada frasco. Foi deixado a o solvente
subir até atingir 3cm do giz.&nbsp; Os frascos
foram tampados e observados as colorações das regiões obtidas.&nbsp; 












&nbsp;&nbsp;


<!--[if !supportLists]-->5.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->RESULTADOS E
DISCURSÕES 

O
procedimento foi facilmente executado no laboratório. Foi possível fazer a extração
do composta da planta. As folhas foram moídas a fim de se obter o extrato,
aumentando-se assim a superfície de contato com os solventes para a extração
dos componentes da amostra e possibilitando a retirada da fase aquosa do
extrato.

&nbsp;Para a realização de uma efetiva separação dos
&nbsp;&nbsp;componentes da amostra, foi necessário
o uso de alguns métodos a fim de evitar irregularidades na coluna, tais como a
escolha das proporções de eloentes adequados de Hexano e Acetronitrila. Os
resultados obtidos foram os seguintes:

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Para
100ml de Hexano e Acetronitrila (2:8)

Obteve-se a
extração do composto verde, homogêneo. Nesse experimento, à medida que se
colocou o eluente (hexano), pode-se supostamente deduzir que não houve tempo
suficiente para que nenhum composto fosse deslocado pelo solvente, logo,
recolheu-se o denominado volume morto. 







No teste da
cromatografia não observou-se o deslocamento de Clorofila e Betacoroteno. Nesse
caso, existe uma forte interação com a coluna. o que vai acontecer é que os
polares não serão bem separados dos compostos apolares continuarão a sair
devido a pouca interação com a coluna.

<!--[if !supportLists]-->·&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->Para
100ml de Hexano e Acetronitrila (8:2)

Obteve-se
um composto bifásico. Com o constante acréscimo do solvente, pode-se obter a
primeira banda (amarela) que por ser apolar interagiu mais com a fase móvel do
que com a fase estacionária (polar). 

Obtendo-se
a primeira fração ( banda amarela) e vendo que a banda verde continuava imóvel,
foi necessária a realização de uma eluição por polaridade, ou seja adicionou na
coluna um solvente polar ( Acetronitrila ), que possibilitou o deslocamento dos
componentes das clorofilas (polar), que logicamente interagiu menos com a fase
estacionária, a qual supostamente é menos polar que a fase estacionária.





<!--[if !supportLists]-->6.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;
<!--[endif]-->CONCLUSÃO

Por ser utilizada uma
mistura de um componente polar (Acetronitrila) e um componente apolar( Hexano ),
pode-se dessolver o extrato já que na amostra existem grupos de carotenos
(apolar) e grupo de clorofilas (polar). Então, modulando a polaridade, o
solvente orgânico extrator, pode extrair os componentes desejados.

As duas fases surgiram
em 100ml de Hexano e Acetronitrila (8:2) correspondem à fase orgânica extraída
pelo solvente e à fase aquosa proveniente da umidade natural da planta.

Sabendo-se a fase
estacionária é polar, e que a o grupo de clorofila interagiu mais com a FE ,
pois foi menos deslocada pela fase móvel. Pode-se confirmar que o componente
mais polar é a clorofila. Na CCD, enquanto o caroteno foi facilmente arrastado
pelo solvente para a extremidade superior da placa, a clorofila permaneceu no
centro da placa. Na CC, à medida que o caroteno atravessou a coluna facilmente,
a clorofila permaneceu imóvel na parte superior da mesma.



AGRADECIMENTOS: À
Professora Dr. Rosemary Coutinho. 



Bibliografia

<!--[if supportFields]><span
 style='mso-element:field-begin'>BIBLIOGRAPHY<span style='mso-element:
 field-separator'><![endif]-->LEE, J.
 (1999). Quimica inorganica nao tao concisa. (5).

Oliveira, A., Simonelli, F., &amp; Marques, F.
 (1998). Experimentos cromatográficos. Cromatografando com giz e espinafre:
 um experimento de fácil reprodução nas escolas do ensino médio.

Paloschi, R., Zeni, M., &amp; Riveros, R. (1998).
 Experimentos Cromatograficos. Cromatografia em giz no ensino de quimica:
 didatica e economica(7).

 
 
 
 <!--[if supportFields]><span style='font-size:11.0pt;line-height:107%;
 font-family:"Calibri",sans-serif;mso-ascii-theme-font:minor-latin;mso-fareast-font-family:
 Calibri;mso-fareast-theme-font:minor-latin;mso-hansi-theme-font:minor-latin;
 mso-bidi-font-family:"Times New Roman";mso-bidi-theme-font:minor-bidi;
 mso-ansi-language:PT-BR;mso-fareast-language:EN-US;mso-bidi-language:AR-SA'><span
 style='mso-element:field-end'><![endif]-->
 

<!--[if !supportFootnotes]-->

<!--[endif]-->
 


<!--[if !supportFootnotes]-->[1]<!--[endif]-->
 Graduando em Eng. Química (UNIFESSPA) e Aluno de Tec. Em Química (IFPA)



<!--[if !supportFootnotes]-->[2]<!--[endif]-->
 Aluno do curso de Tec. Em Química pelo IFPA



<!--[if !supportFootnotes]-->[3]<!--[endif]-->
 Aluno do curso de Tec. Em Química pelo IFPA



<!--[if !supportFootnotes]-->[4]<!--[endif]-->
 Aluno do curso de Tec. Em Química pelo IFPA



<!--[if !supportFootnotes]-->[5]<!--[endif]-->
 Aluno do curso de Tec. Em Química pelo IFPA