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Preuve de l'évolution par la comparaison de protéines chez différentes espèces
Sommaire
- 1 Preuve de l'évolution par comparaison des séquences de protéine chez différentes espèces
- 2 Procédure
- 3 D'autres questions possibles
1 Preuve de l'évolution par comparaison des séquences de protéine chez différentes espèces
2 Procédure
2.1 Trouver les séquences de la protéine CFTR chez plusieurs espèces dans la banque de données UniProtKB
UniProtKB est une banque de données qui contient toutes les séquences de protéine répertoriées à partir des données publiques (~180 millions de protéines - début 2020).
N.B. : pour étudier l'évolution, on utilise souvent des séquences de protéine : elles sont plus pertinentes du point de vue évolutif (phénotype).
Ici nous travaillons avec la protéine CFTR, qui cause la mucoviscidose quand elle est défectueuse, mais d'autres protéines peuvent être employées (cf liste d'exemples)
Aller sur UniProtKB dans Query taper CFTR. Il faut chercher les protéines par leur nom du gène (1)
UniProt va chercher toutes les entrées dans lesquelles on trouve le terme CFTR solution : la liste est énorme.
(1) N.B. : Le nom de la protéine (cf liste d'exemples) diffère souvent du nom du gène. Il vaut mieux chercher une protéine par le nom de son gène, car les noms de gène sont 'standardisés' par des comités d'experts. UniProtKB est une banque de données sur les protéines : les informations sont focalisées sur les séquences de protéine mais la liste des noms de gènes est exhaustive. Un même gène peut parfois avoir plusieurs noms. Exemple: le gène CFTR a un synonyme : abcc7
2.2 Sélectionner la même protéine chez plusieurs organismes
Sélectionner (cocher) dans la liste les protéines des espèces qui vous intéressent.
Un minimum de 5 séquences de protéine est nécessaire si l'on veut construire un alignement de séquences qui fait du sens. (cf liste d'exemples).
NB: Vérifier que le nom de gène est correct et que les séquences de protéines sélectionnées sont de longueur similaire (parfois les chercheurs ont déterminé la séquence d'une partie de la protéine seulement- en fonction de leur étude). Ce n'est pas impossible, mais moins visuellement frappant et plus complexe à interpréter si on a une séquence bien plus courte ou plus longue.
Afficher le plus grand nombre d'entrées possible sur la page en modifiant "Show" en bas du tableau (p. ex 50, voire 100)
Les séquences sélectionnées sont surlignées de jaune et leur nombre apparaît dans le bandeau jaune en haut. Avant de passer à la page suivante cliquer 'Add to basket', sinon la sélection est perdue.
(N.B: si on avait sélectionné d'autres séquences auparavant : il faut cliquer 'Clear' dans ce bandeau pour éviter qu'elles restent sélectionnées.)
2.3 Construire un alignement
Cliquer le bouton "Align" en-dessus du bandeau en haut de la liste. Après un certain temps (plusieurs secondes, voire minutes) l'alignement apparait.
Les séquences alignées sont affichées sous forme de tableau avec 60 acides aminés par ligne,
une étoile "*" signifie identité ( dans la colonne) pour toutes les séquences alignées.
":" signifie acides aminés qui ont des propriétés physico-chimiques très similaires,
"." signifie acides aminés qui ont des propriétés physico-chimiques similaires,
un "-" signifie que le programme d'alignement a introduit un espace (insertion/délétion ou "gap") pour pouvoir aligner des séquences de différentes longueurs.
Pour retrouver le nom de l'espèce, cliquer sur le numéro d'accession en bleu -> une nouvelle fenêtre s'ouvre avec l'entrée UniProtKB correspondant à cette protéine et le nom complet de l'espèce.
Pour aller plus loin
Cocher la case "Similarity" dans la colonne de gauche : on peut observer que certaines régions sont plus conservées que d'autres.
Cocher la case "Transmembrane" : on peut observer des régions susceptibles d'être transmembranaires
Cocher la case "Natural Variant" : on peut observer les acides aminés susceptibles de différer dans la population humaine (SNP, … )
Cocher la case "DNA Binding" : si une telle région est présente dans la séquence de la protéine, on peut observer ces régions susceptibles de se lier à l'ADN
- ComplémentsEst-ce que des séquences similaires entre un grand nombre d'organismes indiquent qu'il n'y a pas de mutations à ces endroits-là ?
Les propriétés physico chimiques des différents acides aminés sont décrites ici
Un tableau de correspondance des codes à 3 lettres et à1 lettre des acides aminés et des codons est accessible ici .
Un arbre phylogénétique ?
L'arbre produit et visible en dessous de l'alignement est appelé un guided tree . Il est utilisé par le programme pour construire l'alignement et est basé uniquement sur les différences observées entre les séquences. Il ne s'agit pas d'un arbre phylogénétique: un arbre phylogénétique est beaucoup plus complexe à établir !
3 D'autres questions possibles
- Demander aux élèves de rechercher l'époque où se sont séparés les espèces étudiées et comparer avec l'arbre obtenu. Il n'y a pas de site proposant cela mais une recherche sur internet permet souvent de trouver une estimation du dernier ancêtre commun entre deux espèces. NB. Marie-Claude Blatter du SIB indique que c'est en fait une question bien plus complexe qu'il n'y parait et que les outils en ligne qui synthétisent l'état de la recherche sur un large éventail du vivant n’existent pas vraiment.
On peut aussi noter que la discussion sur les alignements permet de mieux mettre en évidence les concepts fondamentaux d'origine commune et de degré de similarité coordonnés entre diverses protéines.
- Trouver les organismes les plus proches de ( humain, souris, vache, ...) pour chacune des protéines étudiées par la classe. Essayer de trouver une autre explication que l’origine commune et l'évolution indépendante depuis la séparation.
- Pourquoi utiliser les séquences ''protéiques'' plutôt que nucléotides dans ce contexte évolutif ?
- Y a-t-il des séquences qui sont similaires chez un grand nombre d'organismes ?
- Est-ce que des séquences similaires entre un grand nombre d'organismes indiquent qu'il n'y a pas de mutations à ces endroits-là ?