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Die Fähigkeit der amphipathischen Polypeptide mit beträchtlichen Netto positive Ladungen, über Lipidmembranen transloziert ist Moncler Jacke Schwarz ein grundsätzliches Problem in der physikalischen Biochemie. Diese Peptide sollten nicht passiv überqueren die Doppelschicht-polaren Region, aber sie tun. Hier präsentieren wir eine Methode, um Peptidtranslokation messen und testen Sie es auf drei repräsentativen membranaktive Peptide. In Proben von riesigen unilamellaren Vesikeln (GUVs) durch Elektroformation bereit, einige GUVs umschließen inneren Vesikeln. Wenn diese GUVs an eine Peptidlösung, die ein Membran-impermeante Fluoreszenzfarbstoff (Carboxyfluorescein) hinzugefügt, das Peptid permeabilisiert die äußere Membran und Farbstoff in den äußeren GUV, die dann zeigt grüne Fluoreszenz. Die inneren Vesikeln dunkel bleiben, wenn das Peptid nicht die äußere Membran durchqueren. Allerdings, wenn das Peptid transloziert, permeabilisiert es die inneren Bläschen als auch, was dann zeigen Fluoreszenz. Wir messen auch die Translokation, gleichzeitig auf dem gleichen GUV, durch das Auftreten von Fluoreszenz-markierten Peptiden an den Innen Vesikelmembranen. Alle drei untersuchten Peptide in der Lage sind zu translozieren, aber in unterschiedlichem Ausmaß. Peptide mit kleineren Gibbs-Energien der Insertion in Moncler Günstig Bestellen die Membran transloziert leichter. Weiterhin Translokation und Zustrom auftreten breit über den gleichen Zeitraum, aber mit sehr unterschiedlichen Kinetik. Translokation über die äußere Membran folgt annähernd exponentiell angestiegen, mit einer charakteristischen Zeit von 10 min. Influx tritt abrupt. In der Außen Vesikel, geschieht Zustrom vor die meisten der Translokation. Einige Peptide überqueren jedoch die Membran vor jeder Zustrom beobachtet. In den inneren Bläschen tritt Zustrom abrupt wann während der Peptid Translokation durch die Membran des äußeren Vesikel.