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Die real time PCR ist eine Methode zur Amplifikation und Detektion von PCR-Produkten. Bei dieser Methode sind nebst den spezifischen Primern auch Fluoreszenz-markierte Sonden im Reaktionsansatz enthalten, welche während der laufenden PCR hybridisiert werden und so mit dem ständig vermehrenden Amplifikationsprodukt zu einem Fluoreszenzinstensitätsanstieg führt. Es zeigt sich somit nicht eine Endpunktmessung sondern es wird während der logarithmischen Vermehrung der PCR Produkte gemessen (real time). Der Punkt, entsprechend einem PCR-Zyklus, bei welchem eine über dem Hintergrundrauschen liegende Fluoreszenz detektiert werden kann, korreliert mit der Anzahl nachweisbaren Molekülen im Untersuchungsmaterial und kann so, nach in Relation Setzung mit einem konstant vorliegendem Gene (Housekeeping Gene), anhand der Fluoreszenzstärke eine Angabe bezüglich Anzahl erkrankter Zellen im Ausgangsmaterial gemacht werden und erlaubt somit eine Quantifizierung und Beurteilung eines Krankheitsverlaufes. Die hierzu verwendeten Detektionsgeräte sind mit speziellen optischen Einheiten ausgestattet, erlauben aber auch die Durchführung von normalen PCR-Produkten.
Seit 2018 bieten wir zusätzlich Analysen mittels ddPCR, genannt Droplet Digital PCR. Dies ist ein PCR Verfahren, das auf der Wasser-Öl-Emulsionstropfen-Technologie basiert. Eine Probe wird in 20.000 Tröpfchen fraktioniert, und die PCR-Amplifikation der Template-Moleküle findet in jedem einzelnen Tröpfchen statt. Die ddPCR-Technologie verwendet Reagenzien und Arbeitsabläufe, die denen der meisten Standard-TaqMan-Sonden-basierten Assays ähnlich sind. Die massive Sample-Partitionierung ist ein wesentlicher Aspekt der ddPCR-Technik. Diese Aufteilung ermöglicht die Messung von Tausenden von unabhängigen Amplifikationen innerhalb einer einzigen Probe. Diese Methode erlaubt eine absolute Quantifizierung - sie liefert eine absolute Anzahl von Ziel-DNA-Kopien pro Eingangsprobe, ohne dass Standardkurven ausgeführt werden müssen, was diese Technik ideal für Messungen der Ziel-DNA macht und sich für MRD Messungen eignet.
Wir sind laufend daran unsere Methoden zu erweitern und bieten seit 2017 routinemässig auch die Mutationsanalyse mittels Next Generation Sequencing an und bauen unsere PCR Analyse mit digitaler PCR im stetig weiter aus.