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Acetylcholinesterase/ ACHE
Eines der vorgefertigten Aliquots zu ca. 40ml wird aufgetaut und 4ml Kaliumzyanoferrat zugegeben. Anschliessend werden 400Mikroliter Iso OMPA zur Reduktion der unspezifischen Esteraseaktivität zugegeben.
Die Substanz ist sehr toxisch, daher ist besondere Vorsicht geboten, und es wird daher unter dem Abzug gearbeitet und die Substanz in einem doppelten Container unter Kühlung aufgewahrt. Nach dem Mischen erfolgt für diese Reaktion keine Filtration Die Lösung wird anschliessend in eine Kuvette eingefüllt und die Schnitte in die Kuvette gestellt. Die ACHE Kuvette kommt dann ins vorgewärmte Wasserbad bei 37°C für exakt 90 Minuten. Nach 90 Minuten wird die Lösung im Spezialabfall entsorgt und die Schnitte wie folgt weiterverarbeitet:
Die ACHE ohne Gegenfärbung wird dreimal in Aqua dest. gespült, und anschliessend für 20 Minuten in 4% Formaldehyd fixiert und dann ohne Alkoholreihe eingedeckt mit Aquamount. Die ACHE mit Gegenfärbung wird nach dem Spülen anschliessend in absolutem Alkohol für 20 Minuten fixiert und für eine Minute in Hämalaun gegengefärbt, kurz in fliessendem Wasser gespült und dann in handwarmem Wasser gebläut. Abschliessend werden die Schnitte über Alkoholreihe entwässert und in Pertex nach Trocknung eingedeckt.