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Se esegue preferibilmente tra la 15ª e la 18ª settimana di gestazione.
È un prelievo di sangue materno per la determinazione di tre sostanze che hanno origine dal feto e dalla placenta (alfa feto proteina, hCG ed estradiolo non coniugato).
Questo esame consente di riconoscere anomalie cromosomiche (circa 65-70% di tutti i casi di trisomia 13.18 e 21). Evidentemente meno accurato dei test precedentemente descritti.
Permette inoltre valutare rischio di ricorrenze di difetti morfologici legati ad alterazioni a livello del dotto neurale (esempio spina bifida).
In presenza di test positivo, si ricorrerà ad un ecografia curata per ottenere una diagnosi più precisa ed in caso di necessità si ricorrerà a un esame invasivo (amniocentesi).