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Die Methode der Real-Time qPCR ermöglicht die gezielte, enzymatische Amplifikation (Vervielfältigung) spezifischer Nukleotidsequenzen und deren Erfassung in Echtzeit (engl. real time). Aufbauend auf dieser Methode habe wir mittels Applied Biosystems 7900HT Fast Real-Time PCR System die Möglichkeit zu einer hochentwickelten Nukleinsäureanalytik in folgenden Bereichen:
- RNA-Analytik: Absolute und relative Quantifizierung von Zielnukleinsäuren
o Absolute Quantifizierung. Unter Verwendung einer Verdünnungsreihe von in vitro Transkripten wird die tatsächliche Transkriptmenge eines bestimmten Gens, d.h. die mRNA quantitativ nachgewiesen.
o Relative Quantifizierung. Die Bestimmung der Gen-Transkript- bzw. mRNA-Menge erfolgt anhand des zahlenmässigen Verhältnisses der Zielnukleinsäure zu einem sogenannten houskeeping-Gen, d.h. zu einer Referenzsequenz.
- DNA-Analytik: Detektion von Einzelnukleotid-Polymorphismen (SNP, engl. single nucleotide polymorphism).