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Reagenzien und Kits für die Real-Time PCR
Reagenzien und Kits für die Real-Time PCR
Produkte für die Verwendung in (quantitativen) PCR-Echtzeitverfahren. Enthält Mastermixe, DNA-Polymerasen, reverse Transkriptasen, Größenstandards, Kits und Reagenzien.
Die Reverse-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion (RT-PCR) ist ein Laborverfahren, das die reverse Transkription von RNA in DNA und die anschließende Amplifikation der DNA mittels PCR kombiniert.
Bei RT-PCR wandelt ein Reverse Transkriptase-Enzym ein RNA-Template in seine komplementäre DNA (cDNA) um. Die cDNA dient dann als Template für die PCR-Amplifikation.
Ein typisches RT-PCR-Kit enthält die wichtigsten Komponenten für den Assay:
- Puffer
- Primer – eine Kombination aus Desoxynukleotid-Triphosphaten (dNTPs) der vier Basen Adenin (dATP), Cytosin (dCTP), Guanin (dGTP) und Thymin (dTTP)
- Reverse-Transkriptase-Reagenz
Die Kombination von RT-PCR und qRT wird in klinischen und Forschungslabors häufig zur Genexpressionsanalyse und Quantifizierung viraler RNA eingesetzt. Da dieses Verfahren zur Verfolgung der Amplifikationsreaktion auf Fluoreszenz beruht, können diese Kits auch Folgendes enthalten:
- Fluorogene Primer oder markierte fluorogene Sonden
- Fluoreszenzfarbstoff
Reagenzien für die cDNA-PCR sind gesondert oder als cDNA-Kits erhältlich.
RT-PCR wird häufig für den RNA-Nachweis, die molekulare Klonierung und Gensequenzierung verwendet. RT-qPCR kommt für die Genexpressionsanalyse, RNAi- oder Mikroarray-Validierung, den Pathogennachweis, Gentests und andere Erkrankungsforschungen zum Einsatz.