蜘蛛俠：飛躍蜘蛛宇宙
角色

《蜘蛛人：穿越新宇宙》（自左到右）的主要配音演員：沙梅克·摩爾、海莉·史坦菲德、布萊恩·泰瑞·亨利、蘿倫·維萊斯、傑克·強森、傑森·薛茲曼、伊莎·蕾、卡蘭·索尼、丹尼尔·卡卢亚和奧斯卡·伊薩克
沙梅克·摩爾聲演邁爾斯·摩拉斯／蜘蛛人：一名來自1610號宇宙的黑人少年，居住於紐約市布魯克林，擁有一半波多黎各血統。是塗鴉藝術家和物理學高材生，性格天資聰穎又叛逆，在十六個月前成為1610號宇宙的新一任「蜘蛛人」。
賈雷爾·傑羅姆（英语：）聲演邁爾斯·G·摩拉斯／潛行者（英语：）：42號宇宙的邁爾斯，在該宇宙中因為父親之死而成為潛行者。
海莉·史坦菲德聲演關·史黛西／女蜘蛛人：一位來自65號宇宙的女蜘蛛人，在十六個月前與邁爾斯一起拯救多重宇宙，從此喜歡上邁爾斯。這次被蜘蛛人聯盟指派追蹤斑點，因而與邁爾斯重逢。
布萊恩·泰瑞·亨利聲演傑佛遜·摩拉斯（英语：）：邁爾斯的父親，紐約市警察副警長，並即將升上警長。起初看不上蜘蛛人維護正義的方式，後來在結尾因目睹邁爾斯打敗金霸王，從而開始認同蜘蛛人。
蘿倫·維萊斯聲演里歐·摩拉斯 （ 英语 ： ） ：邁爾斯的母親，紐約市醫院的一名急救人員。
維萊斯同時聲演42號宇宙的里歐。
傑克·強森聲演彼得·B·帕克／蜘蛛人：來自另一個宇宙的蜘蛛人，十六個月前偶然地成為邁爾斯的導師，同時受邁爾斯影響而告別落魄生活、與妻子瑪莉珍重歸於好，如今育有一名女兒梅黛·帕克（英语：）。
傑森·薛茲曼聲演喬納森·歐恩／斑點：一名任職於超煉金（英语：）的前科學家，其身體因為十六個月前的對撞機爆炸事故而佈滿黑洞且意外擁有操控次元空間的能力，但因其長相被毀而失去工作及親朋好友，找上邁爾斯尋仇過程中，從一名無名小卒而慢慢變成足以威脅到多重宇宙的跨次元超級反派。
伊莎·蕾聲演潔西卡·「潔絲」·德魯／女蜘蛛人：一名擁有蜘蛛般能力的非裔美國人，騎著摩托車的強悍孕婦，作為格溫的導師。與其他蜘蛛俠不同，她沒有隱藏自己的身份。
卡蘭·索尼聲演帕維特·普拉哈卡／印度蜘蛛人：來自50101號宇宙的印度版蜘蛛人，蜘蛛人聯盟的新成員，其身為蜘蛛人的資歷甚至比邁爾斯還要短。
丹尼爾·卡盧亞聲演霍比·布朗／龐克蜘蛛人：一名來自英國且會彈電吉他的龐克搖滾版本蜘蛛人，因其國家被極權主義政權獨裁統治，而以電吉他作主要武器，與格温的感情很要好。他同時跟邁爾斯一樣叛逆，因此給予邁爾斯一點指引。
奧斯卡·伊薩克聲演米蓋爾·歐哈拉／蜘蛛人2099：一名來自2099年的928號宇宙的未來蜘蛛人，研發出能穿越多元宇宙的宇宙傳送門手錶。曾經造成過一座宇宙崩塌，以此組建「蜘蛛人聯盟」來監視並修復多重宇宙，一向以大局為重，必要時會非常無情。
希亞·溫漢聲演喬治·史黛西（英语：）：格温的父親，紐約市警察局警長，起初不知情女兒的身份，對女蜘蛛人也有著誤解。
葛莉塔·李聲演萊拉（）：米格爾的人工智能助手，全名「抒情式生命體近似值」（）。
馬赫夏拉·阿里聲演亞倫·戴維斯／潛行者 （ 英语 ： ） ：邁爾斯的叔叔，16個月前被金霸王槍殺。
阿里同時聲演來自42號宇宙的亞倫·戴維斯（）。
安迪·山伯格聲演班·萊利／緋紅蜘蛛人（英语：）：來自另一個宇宙的彼得·帕克之基因複製人，米格爾的蜘蛛人聯盟的成員。
阿曼德拉·斯坦伯格聲演瑪歌·凱斯／數位蜘蛛人（英语：）：一名善用虛擬現實的女蜘蛛人，本體則身在自己的宇宙，以化身形式在蜘蛛人聯盟中負責管理儀器。
喬瑪·塔科內（英语：）聲演亞德里安·圖姆斯／禿鷹：一名有著義大利口音以及文藝復興畫風的罪犯，無意間被送到格溫的宇宙引發混亂。
此外電影中出現了許多不同版本的蜘蛛人，他們都是由米格爾領導的蜘蛛人聯盟的成員，2023年5月，聯合導演賈斯汀·K·湯普森證實這部電影包含280個蜘蛛人，其中有95位是獨特和有命名的角色，包括：
來自Insomniac Games的2018年遊戲《蜘蛛人》中的蜘蛛人（英语：）（由尤里·洛文塔爾回歸配音）
1999年電視動畫《超級蜘蛛人（英语：）》中的蜘蛛人
1967年電視動畫《蜘蛛人'67（英语：）》中的蜘蛛人
生化女蜘蛛人（）
派崔克·奧哈拉／蛛絲甩蕩者（）和他的馬維多（）
馬克斯·伯恩／蜘蛛人2211（英语：）
以西基爾·辛斯／蜘蛛治療師（英语：）
來自2008-2009年電視動畫《神奇蜘蛛人》中的彼得·帕克／蜘蛛人（由喬許·基頓（英语：）回歸配音）
來自《漫威日漫宇宙（英语：）》的彼得·帕克／蜘蛛人（英语：）
奧托·奧克塔維斯／究極蜘蛛人（英语：）
分身蜘蛛人（英语：）
終極女蜘蛛人（英语：）
來自《地球X（英语：）》的彼得·帕克／蜘蛛人（英语：）
來自《蜘蛛人：大時代（英语：）》的彼得·帕克／蜘蛛人（英语：）
茱莉亞·卡彭特／蜘蛛女（英语：）
身穿經典套裝的潔西卡·德魯／女蜘蛛人
卡因·帕克／緋紅蜘蛛人（英语：）
安雅·科拉松／蜘蛛女（英语：）
梅貝爾·賴利／女蜘蛛人（英语：）
瑪蒂·富蘭克林／女蜘蛛人（英语：）
艾希莉·巴頓／蜘蛛婊子（英语：）
閃電·湯普森／蜘蛛隊長
馬拉拉·溫莎／英國蜘蛛人（英语：）
夏洛特·韋伯／太陽蜘蛛人（英语：）
間諜蜘蛛騎士（）
蜘蛛殺手（）
來自《超級蜘蛛人（英语：）》的彼得·帕克／蜘蛛人（英语：）
老人版本的彼得·帕克（英语：）
X宇宙的蜘蛛人（英语：）
蜘蛛警察（英语：）
蜘蛛技師（）
武士蜘蛛人（）
《驚奇蜘蛛人：再續誓言（英语：）》的瑪麗·珍·帕克／絲囊（）和她的女兒安娜·梅-帕克／小蜘蛛（）。
加拿大蜘蛛人（）
成年版梅黛·帕克／蜘蛛女孩
狼蛛（英语：）
內褲蜘蛛人（）
多瑪暮宇宙蜘蛛人（）
阿拉克尼王子（）
蜘龍彼得·帕克／蜘蛛恐龍（）
蜘蛛貓（）
蜘蛛猴（英语：）
蜘蛛狼（）
電子防護蜘蛛人（）
獨眼蜘蛛人（）
布魯斯·班納／蜘蛛人（）
彼得·帕克特卡／蜘蛛車（）
勁爆紙袋人（）
蜘蛛裝甲一型、二型和三型（）
樂高蜘蛛人（英语：）
Q版蜘蛛人（）
毛絨蜘蛛人（）
鋼鐵蜘蛛（英语：）。
曾於前集中出現的暗影蜘蛛人、潘妮·帕克和豬豬人於片尾客串登場，貴美子·格倫回歸聲演潘妮·帕克，尼古拉斯·凯奇和约翰·穆拉尼通過檔案錄音的方式回歸聲演暗影蜘蛛人和豬豬人。1982年遊戲《蜘蛛人（英语：）》中的綠惡魔和電視動畫《蜘蛛俠和他的驚奇朋友》中的影像人亦以客串的形式出現。
此外，瑪莉·珍·帕克和彼得·B·帕克的寶寶梅黛·帕克（英语：）也出現於本片中，本片的作曲家梅特罗·布明客串出演他的獨特版本的蜘蛛人。之前曾經執導並在勞德與米勒製作的2021年動畫電影《米家大戰機器人》中擔任主演的麥克·里安達（英语：）客串聲演蜘蛛諮商師（），梅莉莎·席圖姆（）聲演彼得·B·帕克的妻子瑪莉·珍·帕克。傑克·奎德客串聲演65號宇宙的彼得·帕克，其在該宇宙中淪為蜥蜴人。J·K·西蒙斯聲演不同宇宙中的多名J·喬納·詹姆森。而皮克斯动画工作室的動畫師彼得·孫客串聲演邁爾斯的好友兼室友甘克·李（英语：），此前他的台詞在前集中被刪減。
瑞秋·鄧芝（英语：）聲演邁爾斯學校的指導老師韋伯女士（），理奇·馬利（英语：）聲演牙買加店主萊尼（）。岡塚敦子聲演65號宇宙中的一名女警員渡邊由里（英语：），阿尤·艾德維利（英语：）、妮可·迪蘭尼（）與安東尼婭·倫蒂尼（）分別聲演65號宇宙中的格洛麗、MJ與貝蒂·布蘭特，他們是格温所屬樂隊的成員，伊丽莎白·帕金斯聲演65號宇宙的梅·帕克，凱薩琳·哈恩以奧莉薇亞·奧克塔維斯／八爪博士的形像在閃回中短暫出現（語音使用檔案記錄）。波兹·马龙在前作中扮演一位布魯克林旁觀者的台詞在電影中得以重用。帕維特的阿姨瑪雅·普拉哈卡（）、女友嘉雅琪·辛（）與其父辛督察（）亦在電影中出場。
電影中還出現了真人角色，陶比·麥奎爾和安德魯·加菲爾德以檔案影像分別回歸客串飾演《蜘蛛人三部曲》中的彼得·帕克／蜘蛛人和《蜘蛛人驚奇再起系列》中的彼得·帕克／蜘蛛人。唐納·葛洛佛客串飾演來自另一宇宙的亞倫·戴維斯／潛行者（英语：），此前葛洛佛曾於漫威電影宇宙電影《蜘蛛人：返校日》中飾演亞倫·戴維斯。佩吉·陸回歸客串飾演索尼影業蜘蛛人宇宙中的角色陳太太。
克絲汀·鄧斯特、克里夫·羅勃遜、丹尼斯·利瑞和艾瑪·史東透過檔案影像回歸客串他們在《蜘蛛人三部曲》和《驚奇再起系列》飾演的瑪莉·珍·華生、班·帕克、喬治·史黛西（英语：）和關·史黛西。艾佛烈·蒙利納在2021年電影《蜘蛛人：無家日》中飾演的奧托·奧克托維斯／八爪博士的檔案語音被用於本片同一角色的替代版本。汪可盈通過其在MCU電視劇《神盾局特工》飾演的黛西·「絲凱」·約翰森的檔案照片出現在邁爾斯和甘克房間的剪報上。