Danh sách nhân vật trong Phineas và Ferb
Nhân vật chính

Phineas Flynn (Vincent Martella lồng tiếng):
Phineas là con riêng của mẹ Linda và là em trai ruột của Candace, cậu đến từ Hoa Kỳ. Cậu là một cậu bé thông minh, sáng tạo và giàu trí tưởng tượng. Phineas luôn tỏ ra là một cậu bé luôn vui vẻ, lịch sự và không bao giờ tức giận với ai. Cậu cũng thường là người nghĩ ra kế hoạch làm việc của hai anh em trong cả ngày, trong một ngày nếu Phineas không phát minh ra một thứ gì đó thì cậu sẽ hoảng hốt và sẽ không kiểm soát được bản thân, trừ một số tập cậu cho là ngày nghỉ ngơi nhưng sau đó mọi việc lại đâu vào đó. Phineas đặc biệt rất yêu thương và luôn quan tâm đến thú cưng của cậu bé là thủ mỏ vịt Perry, chỉ cần Perry không xuất hiện trước mặt trong một thời gian ngắn cũng khiến cậu trở nên lo lắng. Những câu nói quen thuộc của cậu là "Ferb, I know what we're gonna do today." (Ferb, tớ biết hôm nay chúng ta sẽ làm gì rồi!). Sau đó: "Hey, where's Perry?" (Này, Perry đâu rồi?), và "He's a platypus, they don't do much." (Nó là thú mỏ vịt, chúng không làm gì nhiều). Lúc được người khác hỏi cậu có quá nhỏ để thực hiện những việc cậu đang làm (Are you a little young to... ?), Phineas thường nói "Yes, yes I am." hoặc " Yes, we are"(Có, có đấy ạ)- Phineas là người đề ra các dự án để sáng chế ra nhiều thứ.
Ferb Fletcher (Thomas Sangster lồng tiếng):
Ferb là con riêng của Lawrence Fletcher. Cậu đến từ Anh. Cậu là một cậu bé thông minh (thông minh hơn cả Phineas) nhưng ít nói. Thường trong những kế hoạch của hai anh em, Ferb phụ trách phần thi công và tỏ ra rất thành thạo trong công việc. Ferb và Phineas luôn hỗ trợ và giúp đỡ lẫn nhau. Ferb đặc biệt thích Vanessa Doofenshmirtz, con gái của tiến sĩ Doofenshmirtz. Ferb làm tất cả các thứ mà Phineas đưa ra kế hoạch.
Candace Gertrude Flynn (Ashley Tisdale lồng tiếng):
Là 1 nhân vật chính khác của bộ phim. Candace là chị gái của Phineas và Ferb. Cô luôn tìm cách mách mẹ và lật tẩy về những việc hai cậu em Phineas và Ferb làm nhưng đều thất bại (vì những phát minh của Heinz Doofenshmirtz đã vô tình tác động đến). Nhưng thật ra cô lại rất tự hào về những em trai của mình. Trong các tập phim, cô thường có những câu nói với mẹ về những phát minh của hai đứa em " Mom, Phineas and Ferb..." và khi nó biến mất " But but...but but...." (nhưng nhưng...). Cô thích Jeremy, anh nhân viên làm ở tiệm Mr. Slushy Burger và luôn tỏ ra ganh ghét khi thấy Jeremy đi cạnh với những bạn nữ khác.
Thú mỏ vịt Perry (Dee Bradley Baker lồng tiếng):
Perry là một chú thú mỏ vịt có hai cuộc sống song song. Một là thú nuôi yêu quý của hai anh em nhà Phineas và Ferb, còn mặt khác là điệp viên bí mật với tên hiệu đặc vụ P và luôn đội một cái mũ phớt (fedora) trong khi làm nhiệm vụ. Để phòng tránh gia đình và những người khác biết được bí mật của mình, Perry cố gắng từng bước để thuyết phục người khác nhận thức rằng chú chỉ là "một con vật vô thức ngốc nghếch và không làm gì nhiều" bằng cách đóng giả là một con vật hiền lành, nhút nhát và đần độn trước mặt chủ nhân Phineas. Phương thức chính để giữ nguyên trạng thái "khờ khạo" là nhìn trực tiếp mỗi con mắt hướng ra xa nhau về phía đối diện, tạo ra cái nhìn "đần độn". Mỗi khi cậu chắc chắn không còn ai nhìn thấy mình, Perry nhanh chóng bỏ các hành động khờ khạo và đội chiếc mũ điệp viên. Perry rất được các cô gái yêu thích. Nhiệm vụ của Perry là ngăn chặn những kế hoạch điên rồ của tiến sĩ xấu xa Doofenshmirtz. Perry luôn hoàn thành xuất sắc nhiệm vụ, đồng thời vô tình xóa đi dấu vết về những việc hai anh em Phineas và Ferb làm. Trong một nhiệm vụ đặc biệt, kẻ thù của Perry là Kẻ Nhai lại Hủy diệt, người mà kẻ thù của hắn là cả thế giới. Không một ai trong gia đình biết về thân phận thực sự của Perry cho đến khi Phineas và Ferb gặp nguy hiểm và bị đe dọa tính mạng bởi tiến sĩ Doofenshmirtz chiều không gian thứ 2, cậu đã hành động chống cự và bị lộ thân phận, sau bí mật lại được an toàn khi O.W.C.A xóa trí nhớ của những người trong cuộc. Đây là cảnh có trong tập movie của Phineas and Ferb. Thực tế trong bản truyền hình, Perry từng thỏa hiệp với cô bạn thân của Candace - Stacy Hinaro về việc giữ kín thân phận nếu Stacy không muốn bị xóa trí nhớ và phải xem lại 10 phút cuối của một bộ phim ma. Dù Doofenshmirtz là một kẻ thù nguy hiểm, Perry vẫn coi ông ta như một người bạn thân; có những lần sau khi đánh bại thành công âm mưu của Doof nhưng khi thấy Doof đang gặp nguy hiểm có thể ảnh hưởng đến tính mạng ông ta, Perry đã quay lại giải cứu Doof. Tuy là một con thú cảnh nhưng Perry luôn nghĩ cho 2 cậu chủ nhỏ, tình cảm của Perry phát sinh khi cả gia đình Phineas và Ferb đi dã ngoại hoặc đi đâu đó mà không có cậu.
Tiến sĩ Heinz Doofenshmirtz (Dan Povenmire lồng tiếng):
Là nhân vật phản diện chính của bộ phim. Doof là một tiến sĩ điên khùng có tư tưởng xấu xa và là kẻ đứng đầu Tập đoàn Xấu xa Doofenshmirtz. Ông cao đến 1m9 và rất thanh mảnh, nhưng lại bị gù, làm cho vẻ ngoài của ông thấy gầy gò hơn. Ông từng có một tuổi thơ bất hạnh khi không được cha mẹ cưng chiều như người em trai Roger. Doof sống trong căn hộ của một tòa nhà cao tầng đối diện quảng trường thành phố và cách biển một dãy nhà. Hắn từng có vợ và một cô con gái tên là Vanessa nhưng đã li dị nên sống một mình. Vanessa luôn cố gắng mách mẹ về những âm mưu của người cha xấu xa nhưng ông vẫn yêu thương con gái vô điều kiện. Và cũng như Candace, cô không bao giờ thành công. Tiến sĩ Doofenshmirtz thường lập ra những kế hoạch để làm chủ "khắp vùng Ba bang" ("the entire tri-state area") bằng những sáng chế của ông (Ý nghĩ chiếm cả vùng Ba bang này là do trước đó Linda - mẹ của Phineas và Ferb đã vô tình nhắc tới ước mơ sau này của Doofenshmirtz nên từ đó phát sinh ra các vấn đề). Kẻ thù của ông chính là thú mỏ vịt Perry. Perry luôn ngăn chặn thành công các kế hoạch của ông. Tuy ông luôn coi Perry là một kẻ ngáng đường cho nhũng âm mưu của ông nhưng trong thâm tâm, ông luôn coi Perry là một người bạn. Nếu một ngày mà không có Perry đến và ngăn chặn những hành động của ông thì ông rất buồn. Mặc dù Perry và Doofenshmirtz coi nhau như kẻ thù, mối quan hệ giữa họ thiên về hướng "kẻ thù thân thiết". Doof có thói quen giải thích kế hoạch trước khi thực hiện và Perry luôn dừng lại để lắng nghe. Đôi lúc, tùy vào trường hợp, Perry còn giúp Doof thực hiện "ý tưởng trong ngày" trước khi ngăn chặn ông ta khi chuyện trở nên nghiêm trọng, hay khi Doof trở mặt. Perry cũng đã từng đưa cho Tiến sĩ Doofenshimirtz "nút hủy diệt toàn cầu" để xóa đoạn băng đáng xấu hổ của Doof đến mức ông ta không thể ra khỏi nhà mà vì sợ bị chế nhạo. Doofenshmirtz luôn luôn mong chờ sự xuất hiện của Perry và thậm chí bắt đầu lo lắng nếu cậu ta không tới. Ông ta cũng thường đặt sẵn bẫy để chờ Perry dính phải khi cậu xông vào nhà hoặc hang ổ của mình. Thực tế, cả hai người quá quen với sự hiện diện của nhau, đến mức họ không thể trở thành kẻ thù lớn với một ai khác dù chỉ một ngày. Họ thậm chí còn tặng quà nhau trong ngày Giáng Sinh. Trong một lần, Perry giúp đỡ Doof học cách đá bóng để gây ấn tượng với mẹ ông. Trong một lần Perry từ chối phá kế hoạch của Doof vì nó quá ngớ ngẩn và vô hại, Doofenshimirtz còn đi theo và van xin cậu ngăn chặn mình. Trong một tập phim, tiến sĩ đã có một kẻ thù mới là 1 điệp viên gấu trúc Peter và điều đó làm tổn thương Perry. Nhưng cuối cùng, ông và Perry lại tiếp tục trở thành kẻ thù của nhau. Câu thường nói của ông là "Curse you, Perry the Platypus!" (Ta nguyền rủa mi, thú mỏ vịt Perry). Sau đó " I know what's going to happen" có nghĩa là" explodes- phát nổ". Tên của những phát minh (những cỗ máy) của ông thường có hậu tố "-inator" ở phía sau, ngoại trừ trong tập và Rollercoaster, Mom's Birthday,Phineas' Birthday Clip-o-rama và  Flop starz