Người Nhện: Du hành Vũ trụ Nhện
Diễn viên lồng tiếng

Shameik Moore trong vai Miles Morales / Spider-Man: Một thiếu niên gốc Người Mỹ gốc Phi và Puerto-Rico, người đã tiếp quản danh hiệu Người Nhện của Earth-1610 sau cái chết của Peter Parker trong thực tại của mình.
Hailee Steinfeld trong vai Gwen Stacy / Spider-Woman: Một phiên bản của Gwen Stacy là Spider-Woman of Earth-65, nơi cô ấy là một kẻ chạy trốn bị truy nã kể từ khi vô tình giết chết Peter Parker ở thực tại của cô ấy, người đã biến thành Lizard.
Brian Tyree Henry trong vai Jefferson "Jeff" Davis: Cha người Mỹ gốc Phi của Miles và là một sĩ quan cảnh sát, người gần đây đã được thăng cấp đại úy.
Luna Lauren Vélez trong vai Rio Morales: Người mẹ người Puerto Rico của Miles, một y tá. Vélez cũng chơi một phiên bản thay thế của Rio từ Earth-42.
Jake Johnson trong vai Peter B. Parker / Spider-Man: Một Người Nhện lớn tuổi đến từ Earth-616, người đã từng là người cố vấn cho Miles. Parker hiện có một cô con gái tên là Mayday với Mary Jane Watson.
Jason Schwartzman trong vai Tiến sỹ Johnathan Ohnn / Spot:
Một cựu nhà khoa học từ Alchemax đã trở thành siêu ác nhân sau một tai nạn, cơ thể hiện được bao phủ bởi các cổng liên chiều cho phép anh ta du hành xuyên không gian và các vũ trụ khác nhau. Spot ban đầu không phải là nhân vật phản diện chính của bộ phim mà được đề xuất bởi nhà sản xuất Avi Arad. Phil Lord và Christopher Miller lúc đầu bác bỏ ý kiến này, nhưng sau khi nói nhiều hơn về sức mạnh của hắn, họ biến hắn ta thành nhân vật phản diện.
Issa Rae trong vai Jess Drew / Spider-Woman: Một Người phụ nữ Nhện người Mỹ gốc Phi đang mang thai từ Earth-404, cánh tay phải của O'Hara và lái một chiếc mô tô. Không giống như hầu hết Người Nhện, Drew không giữ kín danh tính bí mật.
Karan Soni trong vai Pavitr Prabhakar / Spider-Man India: An Indian version of Spider-Man from Earth-50101 who lives in Mumbattan (a portmanteau of Mumbai and Manhattan).
Daniel Kaluuya trong vai Hobie Brown / Spider-Punk: Một người Anh da đen, phiên bản punk rock của Người Nhện từ Earth-138 người sử dụng cây đàn guitar của mình như vũ khí chính của mình.
Oscar Isaac trong vai Miguel O'Hara / Spider-Man 2099:
Một Người Nhện "ninja ma cà rồng" có nguồn gốc Ireland và Mexico từ Earth-928 đặt trong năm 2099, người là thủ lĩnh của Spider-Society, một nhóm Người Nhện từ các vũ trụ thay thế được giao nhiệm vụ bảo vệ đa vũ trụ. Isaac mô tả Miguel là "Người Nhện duy nhất không có khiếu hài hước".
Greta Lee tiếp tục vai trò của cô ấy từ Into the Spider-Verse với tư cách là trợ lý AI Lyla của Miguel và Spider-Society. Mahershala Ali lồng tiếng cho phiên bản Earth-42 của Aaron Davis, một biến thể của người chú đã khuất của Miles, người chưa bao giờ trở thành Prowler; Ali trước đây đã lồng tiếng cho phiên bản Earth-1610 của Aaron trong Into the Spider-Verse. Shea Whigham lồng tiếng George Stacy, cha của Gwen và đội trưởng cảnh sát săn lùng Spider-Woman trên Earth-65. Jorma Taccone lồng tiếng Adriano Toomes / Vulture, một siêu ác nhân theo chủ đề kền kền người Ý từ vũ trụ lấy cảm hứng từ Phục Hưng, cũng như Peter Parker / Người Nhện từ loạt phim hoạt hình năm 1967, được xác định là Earth-67, phần sau mà anh thể hiện lại từ Into the Spider-Verse. Jharrel Jerome lồng tiếng Miles G. Morales / Prowler, biến thể Earth-42 của Miles đã chuyển sang cuộc sống tội phạm với chú Aaron của mình.
Các phiên bản bổ sung của Người Nhện xuất hiện trong phim với tư cách là thành viên của Spider-Society, với các vai có giọng nói, bao gồm: Andy Samberg trong vai Ben Reilly / Scarlet Spider; Amandla Stenberg trong vai Margo Kess / Spider-Byte, một Người Nhện từ thực tế ảo; Kimiko Glenn trong vai Peni Parker / SP//dr; Nicolas Cage trong vai Peter Parker / Spider-Man Noir (thông qua các bản ghi âm lưu trữ); John Mulaney trong vai Peter Porker / Spider-Ham (thông qua các bản ghi âm lưu trữ); Taran Killam trong vai Patrick O'Hara / Web-Slinger và con ngựa góa phụ của anh ta; Nic Novicki trong vai Lego Spider-Man, Josh Keaton trong vai Peter Parker / Spectacular Spider-Man từ phim truyền hình The Spectacular Spider-Man (2008–2009), cũng xuất hiện thông qua các cảnh quay lưu trữ của tập một phần của chương trình, "Intervention";[cần dẫn nguồn] Yuri Lowenthal trong vai Peter Parker / Insomniac Spider-Man từ loạt trò chơi điện tử Marvel's Spider-Man by Insomniac Games, cũng xuất hiện thông qua các cảnh quay của trò chơi Marvel's Spider-Man 2 (2023); Mike Rianda trong vai Ezekiel Sims / Spider-Therapist (mặc dù anh ấy chỉ được ghi nhận là "Lồng tiếng bổ sung"); Sofia Barclay trong vai Malala Windsor / Spider-UK, một hóa thân ban đầu từ các phiên bản truyện tranh; Danielle Perez trong vai Charlotte Webber / Sun-Spider; Metro Boomin trong vai Metro-Spider, một phiên bản hư cấu "độc nhất vô nhị" của chính anh ta với tư cách là Người Nhện; Elizabeth Perkins trong vai "Quippy Spider-Person" (đồng thời lồng tiếng ngắn gọn cho Dì May của Miles ở Earth-65); Max Borne / Spider-Man 2211, Typeface, và Riella O'Hara, con gái của Miguel thay thế mà anh ấy đã nuôi nấng cho đến khi cô bé qua đời, cũng xuất hiện trong phim.
Bộ phim cũng bao gồm sự xuất hiện không có giọng nói của Peter Parker / Người Nhện và Eddie Brock / Venom từ phim truyền hình Spider-Man Unlimited (1999–2001), Peter Parker / Spider-Man từ loạt trò chơi điện tử Spider-Man (2000–2001), Peter Parker / Spider-Man từ Marvel Mangaverse, Werewolf Spider-Man từ Marvel Zombies vs. The Army of Darkness (2007), Cyborg Spider-Woman, Bombastic Bag-Man, Julia Carpenter / Spider-Woman, Samurai Spider-Man, Spider-Canada, Anya Corazon / Araña, Spidercide, Tarantula của Earth-1610A, Mary Jane Parker / Spinneret và con gái của cô Anna May-Parker / Spiderling từ series giới hạn 2015 Amazing Spider-Man: Renew Your Vows, Maybelle Reilly / Lady-Spider, Flash Thompson / Captain Spider, Spider-Cop, Pter Ptarker / Spider-Rex, Spider-Cat, Spider-Monkey, Spider-Wolf, Peter Parkedcar / Spider-Mobile, Spider-Plushie, Prince of Arachne, Last Stand Peter Parker, Doppelganger, Spider-Armor MK I, MK II, and MK III, Earth X Spider-Man, Future Foundation Spider-Man, Jessica Drew (bộ đồ cổ điển), Superior Spider-Man, Iron Spider, Stealth / Big Time Spider-Man, Người Nhện mặc bộ đồ Velocity tư floatj trò chơi điện tử Marvel's Spider-Man, Electro Proof, Kaine Parker / Scarlet Spider, Bruce Banner / Spider-Man, Cyclops Spider-Man, Ultimate Spider-Woman, Mattie Franklin / Spider-Woman, Ashley Barton / Spider-Kingpin, và Spyder-Knight từ các tập phim của Ultimate Spider-Man "The Spider-Verse" (2015) và "Return to the Spider-Verse" (2016), Green Goblin từ trò chơi điện tử Spider-Man (1982) và Video-Man từ phim truyền hình Spider-Man and His Amazing Friends (1981–1983) cũng xuất hiện.
Ngoài ra, May "Mayday" Parker cũng xuất hiện với tư cách là con gái sơ sinh của Peter B. Parker và Mary Jane, cùng với một phiên bản người lớn thay thế hoạt động với tên Spider-Girl. Melissa Sturm lồng tiếng Mary Jane "MJ" Parker, vợ của Peter B. Parker và mẹ của Mayday. Rachel Dratch lồng tiếng cho cô Weber, cố vấn tại trường của Miles. Ziggy Marley lồng tiếng cho Lenny, một chủ cửa hàng người Jamaica. Pixar nhà làm phim hoạt hình và nhà làm phim Peter Sohn lồng tiếng cho bạn thân và bạn cùng phòng của Miles Ganke Lee, sau khi lời thoại của anh ấy bị cắt khỏi Into the Spider-Verse. Atsuko Okatsuka lồng tiếng Yuri Watanabe, đồng nghiệp cảnh sát của Đội trưởng Stacy của Earth-65 Ayo Edebiri, Nicole Delaney và Antonia Lentini lồng tiếng cho các phiên bản Glory, MJ và Betty Brant trong vũ trụ của Gwen, những người bạn cùng nhóm của Gwen trong The MaryJanes. J. K. Simmons cũng đảm nhận vai J. Jonah Jameson, lồng tiếng cho nhiều phiên bản khác nhau của nhân vật. Jack Quaid lồng tiếng cho Peter Parker ở Earth-65 người đã chết sau khi biến thành Lizard. Kathryn Hahn trong vai Olivia "Liv" Octavius / Doctor Octopus xuất hiện thoáng qua trong các đoạn hồi tưởng (thông qua các bản ghi âm lưu trữ).[cần dẫn nguồn] Post Malone's single line as a Brooklyn bystander in Into the Spider-Verse is reused in the film.
Các vai live-action cũng góp mặt trong phim, với Tobey Maguire và Andrew Garfield xuất hiện lần lượt trong các phiên bản Peter Parker / Người Nhện tương ứng của họ từ loạt phim Spider-Man của Sam Raimi và loạt phim The Amazing Spider-Man của Marc Webb thông qua các đoạn phim lưu trữ. Donald Glover xuất hiện như một phiên bản thay thế của Aaron Davis / Prowler, diễn lại vai diễn của anh trong bộ phim thuộc Vũ trụ Điện ảnh Marvel (MCU) Spider-Man: Homecoming (2017). Peggy Lu đảm nhận vai chủ cửa hàng tiện lợi, bà Chen từ các phim Venom thuộc Vũ trụ Người Nhện của Sony, nơi được xác định là Earth-688. Kirsten Dunst, Cliff Robertson, Martin Sheen, Topher Grace, Denis Leary, và Emma Stone xuất hiện thông qua tài liệu lưu trữ với vai Mary Jane Watson, 2 phiên bản Ben Parker, Eddie Brock, George Stacy, và Gwen Stacy lần lượt từ Spider-Man (2002), The Amazing Spider-Man (2012) và The Amazing Spider-Man 2 (2014), với các bản ghi âm lưu trữ của Otto Octavius / Doctor Octopus của Alfred Molina từ Spider-Man: No Way Home (2021) được sử dụng cho một phiên bản thay thế của nhân vật của ông với thiết kế giống hệt truyện tranh. Chloe Bennet xuất hiện trong vai Daisy Johnson / Quake thông qua hình ảnh lưu trữ từ "Ascension", tập cuối mùa thứ ba của phim truyền hình Agents of S.H.I.E.L.D. được nhìn thấy trên những mẩu báo trong phòng của Miles và Ganke.