stanford-oval/wikipedia huggingface dataset:
Piala Emas CONCACAF 2019
Babak grup > Grup B

Artikel utama: Grup B Piala Emas CONCACAF 2019
| Pos | Timl b  | Main | M | S | K | MG | KG | SG | Poin | Kualifikasi |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| 1 |  Haiti | 3 | 3 | 0 | 0 | 6 | 2 | +4 | 9 | Lolos ke babak gugur |
| 2 |  Kosta Rika (H) | 3 | 2 | 0 | 1 | 7 | 3 | +4 | 6 | Lolos ke babak gugur |
| 3 |  Bermuda | 3 | 1 | 0 | 2 | 4 | 4 | 0 | 3 |  |
| 4 |  Nikaragua | 3 | 0 | 0 | 3 | 0 | 8 | −8 | 0 |  |
Sumber: CONCACAF
 Tuan rumah.
Haiti  v  Bermuda
| Haiti  | 2–1 |  Bermuda |
| --- | --- | --- |
|  Pierrot  54', 66'  | Laporan |  Leverock  45+2'  |
Kosta Rika  v  Nikaragua
| Kosta Rika  | 4–0 |  Nikaragua |
| --- | --- | --- |
|  Oviedo  7'  Borges  19'  Aguilar  45+1'  Cruz  75'  | Laporan |  |
Nikaragua  v  Haiti
| Nikaragua  | 0–2 |  Haiti |
| --- | --- | --- |
|  | Laporan |  Saba  22'  Rosas  33' (b.d.)  |
Kosta Rika  v  Bermuda
| Kosta Rika  | 2–1 |  Bermuda |
| --- | --- | --- |
|  George  30'  Aguilar  54'  | Laporan |  Wells  59' (pen.)  |
Bermuda  v  Nikaragua
| Bermuda  | 2–0 |  Nikaragua |
| --- | --- | --- |
|  Simmons  60'  Wells  71'  | Laporan |  |
Haiti  v  Kosta Rika
| Haiti  | 2–1 |  Kosta Rika |
| --- | --- | --- |
|  Nazon  57' (pen.)  Alexis  81'  | Laporan |  Saborío  13'  |
Babak grup > Grup C

Artikel utama: Grup C Piala Emas CONCACAF 2019
| Pos | Timl b  | Main | M | S | K | MG | KG | SG | Poin | Kualifikasi |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| 1 |  Jamaika (H) | 3 | 1 | 2 | 0 | 4 | 3 | +1 | 5 | Lolos ke babak gugur |
| 2 |  Curaçao | 3 | 1 | 1 | 1 | 2 | 2 | 0 | 4 | Lolos ke babak gugur |
| 3 |  El Salvador | 3 | 1 | 1 | 1 | 1 | 4 | −3 | 4 |  |
| 4 |  Honduras | 3 | 1 | 0 | 2 | 6 | 4 | +2 | 3 |  |
Sumber: CONCACAF
 Tuan rumah.
Curaçao  v  El Salvador
| Curaçao  | 0–1 |  El Salvador |
| --- | --- | --- |
|  | Laporan |  Bonilla  45+2'  |
Jamaika  v  Honduras
| Jamaika  | 3–2 |  Honduras |
| --- | --- | --- |
|  Orgill  15', 41'  Lowe  56'  | Laporan |  Lozano  54'  Castillo  90+2'  |
El Salvador  v  Jamaika
| El Salvador  | 0–0 |  Jamaika |
| --- | --- | --- |
|  | Laporan |  |
Honduras  v  Curaçao
| Honduras  | 0–1 |  Curaçao |
| --- | --- | --- |
|  | Laporan |  Bacuna  40'  |
Jamaika  v  Curaçao
| Jamaika  | 1–1 |  Curaçao |
| --- | --- | --- |
|  Nicholson  14'  | Laporan |  Gaari  90+3'  |
Honduras  v  El Salvador
| Honduras  | 4–0 |  El Salvador |
| --- | --- | --- |
|  Álvarez  59'  Castillo  65'  Acosta  75'  Izaguirre  90'  | Laporan |  |
Babak grup > Grup D

Artikel utama: Grup D Piala Emas CONCACAF 2019
| Pos | Timl b  | Main | M | S | K | MG | KG | SG | Poin | Kualifikasi |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| 1 |  Amerika Serikat (H) | 3 | 3 | 0 | 0 | 11 | 0 | +11 | 9 | Lolos ke Babak gugur |
| 2 |  Panama | 3 | 2 | 0 | 1 | 6 | 3 | +3 | 6 | Lolos ke Babak gugur |
| 3 |  Guyana | 3 | 0 | 1 | 2 | 3 | 9 | −6 | 1 |  |
| 4 |  Trinidad dan Tobago | 3 | 0 | 1 | 2 | 1 | 9 | −8 | 1 |  |
Sumber: CONCACAF
 Tuan rumah.
Panama  v  Trinidad dan Tobago
| Panama  | 2–0 |  Trinidad dan Tobago |
| --- | --- | --- |
|  Cooper  53'  Bárcenas  68'  | Laporan |  |
Amerika Serikat  v  Guyana
| Amerika Serikat  | 4–0 |  Guyana |
| --- | --- | --- |
|  Arriola  28'  Boyd  51', 81'  Zardes  55'  | Laporan |  |
Guyana  v  Panama
| Guyana  | 2–4 |  Panama |
| --- | --- | --- |
|  Danns  33' (pen.), 90+3' (pen.)  | Laporan |  Arroyo  16'  Vancooten  40' (b.d.)  Davis  51' (pen.)  G. Torres  86'  |
Amerika Serikat  v  Trinidad dan Tobago
| Amerika Serikat  | 6–0 |  Trinidad dan Tobago |
| --- | --- | --- |
|  Long  41', 90'  Zardes  66', 69'  Pulisic  73'  Arriola  78'  | Laporan |  |
Trinidad dan Tobago  v  Guyana
| Trinidad dan Tobago  | 1–1 |  Guyana |
| --- | --- | --- |
|  Molino  80'  | Laporan |  Danns  54'  |
Panama  v  Amerika Serikat
| Panama  | 0–1 |  Amerika Serikat |
| --- | --- | --- |
|  | Laporan |  Altidore  66'  |
Babak gugur

Artikel utama: Babak gugur Piala Emas CONCACAF 2019
Pada babak gugur, jika pertandingan seri setelah 90 menit, perpanjangan waktu akan dimainkan, di mana pemain pengganti keempat diizinkan untuk setiap tim. Jika masih imbang setelah perpanjangan waktu, pertandingan diputuskan melalui adu penalti.
Babak gugur > Perempat final

Haiti  v  Kanada
| Haiti  | 3–2 |  Kanada |
| --- | --- | --- |
|  Nazon  50'  Bazile  70' (pen.)  Guerrier  76'  | Laporan |  David  18'  Cavallini  28'  |
Meksiko  v  Kosta Rika
| Meksiko  | 1–1 (p> w.) |  Kosta Rika |
| --- | --- | --- |
|  Jiménez  44'  | Laporan |  Ruiz  52' (pen.)  |
|   | Adu penalti |   |
|  Jiménez   Montes   Alvarado   Gallardo   Moreno   Salcedo   | 5–4 |   Borges   Aguilar   Leal   Duarte   Calvo   Fuller  |
Jamaika  v  Panama
| Jamaika  | 1–0 |  Panama |
| --- | --- | --- |
|  Mattocks  75' (pen.)  | Laporan |  |
Amerika Serikat  v  Curaçao
| Amerika Serikat  | 1–0 |  Curaçao |
| --- | --- | --- |
| McKennie  25' | Laporan |  |
Babak gugur > Semifinal

Haiti  v  Meksiko
| Haiti  | 0–1 (p> w.) |  Meksiko |
| --- | --- | --- |
|  | Laporan |  Jiménez  93' (pen.)  |
Jamaika  v  Amerika Serikat
| Jamaika  | 1–3 |  Amerika Serikat |
| --- | --- | --- |
|  Nicholson  69'  | Laporan |  McKennie  9'  Pulisic  52', 87'  |
Babak gugur > Final

Artikel utama: Final Piala Emas CONCACAF 2019
Meksiko  v  Amerika Serikat
| Meksiko  | 1–0 |  Amerika Serikat |
| --- | --- | --- |
|  Dos Santos  73'  | Laporan |  |
Penghargaan > Penghargaan individual

Penghargaan berikut diberikan pada akhir turnamen.
Penghargaan Bola Emas:  Raúl Jiménez
Penghargaan Sepatu Emas:  Jonathan David
Penghargaan Sarung Tangan Emas:  Guillermo Ochoa
Penghargaan Pemain Muda Terbaik:  Christian Pulisic
Penghargaan Fair Play:  Amerika Serikat
Penghargaan > Tim terbaik

Para pemain berikut terpilih sebagai yang terbaik di posisi masing-masing, berdasarkan penampilan mereka sepanjang turnamen. Penampilan mereka dianalisis oleh Kelompok Studi Teknis (Technical Study Group, TSG) turnamen, yang memilih tim.
| Penjaga gawang | Bek | Gelandang | Penyerang |
| --- | --- | --- | --- |
|   Guillermo Ochoa |   Luis Rodríguez   Carlos Salcedo   Aaron Long   Jesús Gallardo |   Michael Bradley   Andrés Guardado   Jonathan dos Santos   Jonathan David   Christian Pulisic |   Raúl Jiménez |
Pencetak gol

Sebanyak  96 gol dicetak pada 31 pertandingan, dengan rata-rata 3,1 gol per pertandingan.
6 gol
Jonathan David
5 gol
Lucas Cavallini
Raúl Jiménez
4 gol
Uriel Antuna
3 gol
Neil Danns
Christian Pulisic
Gyasi Zardes
2 gol
Nahki Wells
Junior Hoilett
Elías Aguilar
Duckens Nazon
Frantzdy Pierrot
Rubilio Castillo
Shamar Nicholson
Dever Orgill
Andrés Guardado
Paul Arriola
Tyler Boyd
Aaron Long
Weston McKennie
1 gol
Dante Leverock
Lejuan Simmons
Scott Arfield
Celso Borges
Allan Cruz
Mayron George
Bryan Oviedo
Bryan Ruiz
Álvaro Saborío
Leandro Bacuna
Juriën Gaari
Nelson Bonilla
Djimy Alexis
Hervé Bazile
Wilde-Donald Guerrier
Steeven Saba
Bryan Acosta
Jorge Álvarez
Emilio Izaguirre
Anthony Lozano
Damion Lowe
Darren Mattocks
Stéphane Abaul
Jordy Delem
Kévin Fortuné
Joris Marveaux
Kévin Parsemain
Roberto Alvarado
Jonathan dos Santos
Fernando Navarro
Diego Reyes
Alexis Vega
Abdiel Arroyo
Édgar Bárcenas
Armando Cooper
Erick Davis
Gabriel Torres
Kevin Molino
Jozy Altidore
1 gol bunuh diri
Terence Vancooten (melawan Panama)
Manuel Rosas (melawan Haiti)
Pranala luar

Situs web resmi
| l b Piala Emas CONCACAF 2019 |
| --- | --- |
Babak:  Babak grup Grup A  Grup B  Grup C  Grup D  Babak gugur  Final 
Informasi umum:  Skuat  Statistik 
Kualifikasi:  Kualifikasi Liga Negara CONCACAF
Puteri Indonesia 2016

| Puteri Indonesia 2016 |
| --- | --- |
Puteri Indonesia 2016
Tanggal: 19 Februari 2016
Tempat: Jakarta Convention Center, Jakarta
Pembawa acara: Choky Sitohang Maria Selena Gading Marten Farhannisa Nasution
Stasiun televisi: Indosiar
Kontestan: 39
Semifinalis: 10
Debut: Kalimantan Utara
Berkompetisi kembali: Gorontalo
Pemenang: Kezia Roslin Cikita Warouw ( Sulawesi Utara)
← 20152017 →
l b 
Puteri Indonesia 2016 adalah edisi ke-20 kontes kecantikan Puteri Indonesia yang diselenggarakan pada 19 Februari 2016 di Jakarta Convention Center, Jakarta. Anindya Kusuma Putri, Puteri Indonesia 2015 dari Jawa Tengah, memahkotai Kezia Roslin Cikita Warouw dari Sulawesi Utara sebagai pemenang yang baru. Dia mewakili Indonesia di ajang Miss Universe 2016 di Manila, Filipina serta berhasil masuk 13 besar dan Miss Phoenix Smile.
Felicia Hwang dari Lampung, terpilih sebagai Puteri Indonesia Lingkungan 2016 Runner-up 1 dan mewakili Indonesia pada kontes Miss International 2016 di Tokyo, Japan, serta berhasil memperoleh Runner-up 2 dan Best Dresser.
Intan Aletrino dari Sumatera Barat, terpilih sebagai Puteri Indonesia Pariwisata 2016 dan mewakili Indonesia pada kontes Miss Supranational 2016 di Krynica-Zdroj, Polandia, serta berhasil memperoleh Top 10, Miss Multimedia Award, dan Miss Elegance. Ariska Putri Pertiwi dari Sumatera Utara, terpilih sebagai Runner-Up 3 Puteri Indonesia 2016, dan mewakili Indonesia pada kontes Miss Grand International 2016 di Las Vegas, Amerika Serikat, serta berhasil memperoleh Gelar Miss Grand International 2016 dan Best National Costume.
Tidak seperti tahun sebelumnya. Pada tahun 2016 tersebut, Miss Universe 2015, Pia Wurtzbach dari Filipina berhalangan hadir karena jadwal acara yang bentrok dengan New York Fashion Week 2016 dan juga berkaitan dengan kejadian Bom Sarinah beberapa waktu lalu.
Dan yang datang ke Indonesia Edymar Martínez, Miss International 2015 dari Venezuela. Acara ini juga dihadiri oleh Miss Singapura, Lisa Marie White, meski bukan sebagai tamu utama.
Kontes > Pembawa acara

Choky Sitohang – aktor, pembawa acara
Maria Selena – aktris, pembawa acara, Puteri Indonesia 2011
Gading Marten – aktor dan pembawa acara
Farhannisa Nasution – pembawa acara, Puteri Indonesia Sumatera Utara 2015
Kontes > Dewan juri

Kusuma Dewi - Ketua Dewan Juri
Elvira Devinamira - Puteri Indonesia 2014 dari Jawa Timur
Arief Yahya - Menteri Pariwisata Indonesia
Abdullah Azwar Anas - Bupati Banyuwangi
Yullie Nasution Grillon - Pemilik Yulindra Galery dab Y&D SETYOHADI Stylish Painting Dinnerware
Triawan Munaf - Kepala Badan Ekonomi Kreatif
Rudy Hary - Fotografer Indonesia
Mega Angkasa - Head of Corporate Public Relations PT Mustika Ratu, Tbk
Kontes > Bintang tamu

Yovie & Nuno
Bunga Citra Lestari
Andien
Nada Badra
Lea Simanjuntak
5 Romeo
Rizky Febian
JKT48
Tulus
Hasil > Utama

Pemegang gelar mahkota Puteri Indonesia
| Hasil Akhir | Kontestann | Penempatan Internasional |
| --- | --- | --- |
| Puteri Indonesia 2016 (Miss Universe Indonesia) |  Sulawesi Utara – Kezia Roslin Cikita Warouw | 13 Besar – Miss Universe 2016 |
| Puteri Indonesia Lingkungan 2016 (Miss International Indonesia) |  Lampung – Felicia Hwang | 2nd Runner-up – Miss International 2016 |
| Puteri Indonesia Pariwisata 2016 (Miss Supranational Indonesia) |  Sumatera Barat – Intan Aletrino | 10 Besar (Posisi 7) – Miss Supranational 2016 |
| Puteri Indonesia Perdamaian 2016 (Miss Grand Indonesia) |  Sumatera Utara – Ariska Putri Pertiwi | WINNER – Miss Grand International 2016 |
| 4th Runner-Up  |  DKI Jakarta 1 – Claudia Dara Chaerunnisa |  |
| 10 Besar |   Aceh – Khairunnisa Zakaria   Bali – Anak Agung Sagung Istri Karina Prabasari   Banten – Belda Amelia   DKI Jakarta 2 – Mutia Ardi   Sumatera Selatan – Ratih Anggraini |  |
Hasil > Penghargaan khusus

| Title | Contestant |
| --- | --- |
Puteri Indonesia Persahabatan (Miss Congeniality):  Papua Barat – Lita Ayudiah Capriaty Makatita Mawar
Puteri Indonesia Berbakat (Miss Talent):  01   Kalimantan Barat – Kornelia Meilinda Betsyeba  02   Sumatera Selatan – Ratih Anggraini  03   Sulawesi Selatan – Yulinar Pratiwi Arief
Puteri Indonesia Intelegensia  (Miss Intelligence):  01   Kalimantan Barat – Kornelia Meilinda Betsyeba  02   Lampung – Felicia Hwang Xi Yin  03   DKI Jakarta 3 - Niken Ayu Latviani
Busana Tradisional Terbaik (Best Traditional Costume):  01   Sulawesi Selatan – Yulinar Pratiwi Arief  02   Sumatera Barat – Intan Aletrino  03   Banten – Belda Amelia
Hasil > Puteri Indonesia Kepulauan

Kontestan favorit berdasarkan pemungutan suara dari masing-masing grup kepulauan:
| Gelar | Kontestan |
| --- | --- |
Puteri Indonesia Sumatera:  Sumatera Barat – Intan Aletrino
Puteri Indonesia Jawa:  Jawa Timur – Badzlina Sukmawati
Puteri Indonesia Nusa-Bali:  Nusa Tenggara Timur – Gloria Angelica Radja Gah
Puteri Indonesia Kalimantan:  Kalimantan Barat – Kornelia Meilinda Betsyeba
Puteri Indonesia Sulawesi:  Sulawesi Selatan – Yulinar Pratiwi Arief
Puteri Indonesia Timur:  Maluku – Jean Trifena Patty †
Urutan Pemanggilan

| 0 | 1 | 2 |
| --- | --- | --- |
|  10 Besar Banten  Aceh  Sulawesi Utara  Sumatera Barat  DKI Jakarta 2  Lampung  Sumatera Utara  Bali  DKI Jakarta 1  Sumatera Selatan  |  5 Besar Sulawesi Utara  DKI Jakarta 1  Sumatera Utara  Sumatera Barat  Lampung  |  3 Besar Sulawesi Utara  Sumatera Barat  Lampung  |
Peserta

| Provinsi | Peserta | Umur/Tinggi Badan | Kota/Kabupaten Asal |
| --- | --- | --- | --- |
|  Aceh | Khairunnisa Zakaria | 21/170 cm | Lhokseumawe |
|  Sumatera Utara | Ariska Putri Pertiwi | 21/173 cm | Medan |
|  Sumatera Barat | Intan Aletrino | 22/175 cm | Padang |
|  Riau | Kurnia Illahi | 22/173 cm | Bengkalis |
|  Kepulauan Riau | Agita Maryalda Zahidin | 25/171 cm | Batam |
|  Jambi | Maulia Lestari | 21/168 cm | Jambi |
|  Sumatera Selatan | Ratih Anggraini | 23/177 cm | Palembang |
|  Bangka Belitung | Cinderi Maura Restu | 20/173 cm | Tanjung Pandan |
|  Bengkulu | Dessi Tri Widiarti | 19/170 cm | Manna |
|  Lampung | Felicia Hwang | 23/172 cm | Bandar Lampung |
|  DKI Jakarta 1 | Claudya Dara Chaerunnisa | 21/165 cm | Kepulauan Seribu |
|  DKI Jakarta 2 | Mutia Ardi | 20/166 cm | Jakarta Utara |
|  DKI Jakarta 3 | Niken Ayu Lativani | 22/168 cm | Jakarta Timur |
|  DKI Jakarta 4 | Diana Maharani | 25/173 cm | Jakarta Selatan |
|  DKI Jakarta 5 | Kurnia Anggrayani | 23/174 cm | Jakarta Barat |
|  DKI Jakarta 6 | Delicia Gemma Syah Marita | 22/172 cm | Jakarta Pusat |
|  Banten | Belda Amelia | 20/172 cm | Tangerang |
|  Jawa Barat | Evan Lysandra | 21/173 cm | Bandung Barat |
|  Jawa Tengah | Disma Ajeng Rastiti | 22/168 cm | Grobogan |
|  DI Yogyakarta | Yohana Setianing Sejati | 22/168 cm | Yogyakarta |
|  Jawa Timur | Badzlina Sukmawati | 22/168 cm | Surabaya |
|  Bali | Anak Agung Sagung Istri Karina Prabasari | 20/165 cm | Denpasar |
|  Nusa Tenggara Barat | Ghea Putri Mulya | 25/174 cm | Mataram |
|  Nusa Tenggara Timur | Gloria Angelica Radja Gah | 24/168 cm | Sabu Raijua |
|  Kalimantan Barat | Kornelia Meilinda Betsyeba | 22/170 cm | Sintang |
|  Kalimantan Selatan | Nina Nurlina | 21/166 cm | Banjarmasin |
|  Kalimantan Tengah | Husnul Dwi Amalia | 19/165 cm | Palangkaraya |
|  Kalimantan Timur | Novita Adipati Chandra | 23/168 cm | Balikpapan |
|  Kalimantan Utara | Silvi Monica | 19/168 cm | Tarakan |
|  Sulawesi Selatan | Yulinar Pratiwi Arief | 18/168 cm | Makassar |
|  Sulawesi Barat | Sophia Devi Kadda Taiyeb | 21/165 cm | Mamasa |
|  Sulawesi Tenggara | Nastika Aprilia | 24/170 cm | Kendari |
|  Sulawesi Tengah | Suci Khanisa | 19/167 cm | Palu |
|  Sulawesi Utara | Kezia Roslin Cikita Warouw | 24/183 cm | Minahasa Selatan |
|  Gorontalo | Juliana Ulaan | 21/166 cm | Gorontalo |
|  Maluku | Jean Trifena Patty (almh.)  | 25/166 cm | Ambon |
|  Maluku Utara | Nia Nadia Chalil | 22/175 cm | Ternate |
|  Papua Barat | Lita Ayudiah Capriaty Makatita Mawar | 23/168 cm | Sorong |
|  Papua | Aryani Mei Juventina Sitorus | 19/166 cm | Timika |
Mahkota

Pada tahun ini, mahkota yang digunakan diganti dan untuk pertama kalinya, 3 besar pemenang menggunakan mahkota yang berbeda warna namun dengan desain yang sama.
Bentuk mahkota baru terinspirasi dari Candi Borobudur yang dipersembahkan oleh Emas Putih PLG.
Berikut makna perbedaan warnanya:
Warna merah pada mahkota Puteri Indonesia 2016 melambangkan keberanian rakyat Indonesia untuk cinta kepada Indonesia.
Warna hijau pada mahkota Puteri Indonesia Lingkungan 2016, menggambarkan hutan Indonesia yang merupakan nomor 2 terbesar di dunia setelah Brazil, serta juga menggambarkan kesejukan keberuntungan dan memberi rasa perlindungan. Hal tersebut sangat mewakili seorang Puteri Indonesia Lingkungan yang bertugas melindungi alam dan lingkungan Indonesia
Warna biru pada mahkota Puteri Indonesia Pariwisata 2016 menggambarkan lautan yang ada di Indonesia yang direpresentasikan oleh gelombang ombak laut berwarna biru. Warna biru melambangkan lautan Indonesia yang indah, dinamis, dan kelembutan. Indonesia merupakan Negara kepulauan yang terbesar di dunia begitu juga dengan lautannya. Mahkota ini sangat mewakili seorang Puteri Indonesia Pariwisata yang bertugas mempromosikan pariwisata dan kebudayaan di Indonesia
Pranala luar

(Indonesia) Situs web resmi Puteri Indonesia Diarsipkan 2019-12-14 di Wayback Machine.
| l b Puteri Indonesia |
| --- | --- | --- |
|  1992  1993  1994  1995  1996  1997  1998  1999  |  1992  1993  1994  1995  1996  1997  1998  1999  |  |
|  2000  2001  2002  2003  2004  2005  2006  2007  2008  2009  |  2000  2001  2002  2003  2004  2005  2006  2007  2008  2009  |  |
|  2010  2011  2012  2013  2014  2015  2016  2017  2018  2019  |  2010  2011  2012  2013  2014  2015  2016  2017  2018  2019  |  |
|  2020  2021  2022  2023  2024  2025  |  2020  2021  2022  2023  2024  2025  |  |
 Puteri Indonesia  Puteri Indonesia Lingkungan  Puteri Indonesia Pariwisata  Puteri Indonesia Pendidikan dan Kebudayaan
Reaksi berantai polimerase transkripsi-balik

Reaksi berantai polimerase transkripsi-balik (lebih dikenal dengan nama bahasa Inggris: reverse transcription polymerase chain reaction atau RT-PCR) adalah teknik amplifikasi DNA komplemen dengan RNA virus melalui reaksi berantai polimerase yang menggunakan enzim transkriptase balik.  Proses amplifikasi menggunakan sepasang primer oligonukleotida pada sekuen gen spesifik. Reaksi berantai polimerase transkripsi-balik umumnya digunakan pada berbagai macam agen penyakit. Salah satu deteksinya yang umum ialah pada virus flu burung. Selain itu, reaksi berantai polimerase transkripsi-balik dijadikan sebagai penanda molekuler untuk analisis asam nukleat pada uji koronavirus. Hasil pengujian dari reaksi berantai polimerase balik bersifat cepat dan dapat diandalkan. Keuntungan lain dalam penggunaannya adalah proses penargetan dan identifikasi patogen yang spesifik. Reaksi berantai polimerase transkripsi-balik mulai dikembangkan setelah diketahui mampu melakukan identifikasi genomik dan proteomik dari SARS-CoV-2. Metode reaksi berantai polimerase transkripsi-balik menghasilkan analisis secara kualitatif.
Prinsip kerja

Reaksi berantai polimerase transkripsi-balik merupakan pengembangan dari reaksi berantai polimerase. Dalam biologi molekuler, teknik ini digunakan untuk menghasilkan penggandaan untai DNA. Penggandaan diawali dengan transkripsi balik untai RNA menjadi DNA komplemen menggunakan enzim transkriptase balik. Proses penggandaan sama dengan reaksi berantai polimerase pada umumnya. Sepasang primer yang komplemen dengan sekuensing dua untai DNA komplemen digunakan sebagai bahan pengganda. Enzim DNA polimerase kemudian digunakan untuk memperpanjang ukuran primer sehingga akan dihasilkan untai ganda DNA. Reaksi berantai polimerase transkripsi-balik juga digunakan untuk menggandakan jumlah RNA. Proses amplifikasi RNA tidak berbeda jauh dengan amplifikasi pada DNA. RNA target dihancurkan lalu diubah menjadi DNA melalui proses denaturasi yang menggunakan enzim transkriptase balik. Enzim ini mampu melakukan transkripsi RNA menjadi DNA.
Tahapan

Deteksi ekspresi gen pada reaksi berantai polimerase transkripsi-balik terdiri dari tiga tahap. Tahap pertama isolasi RNA total, kemudian dilanjutkan dengan sintesis DNA komplemen, dan diakhiri dengan amplifikasi daerah transkip gen target. Tahpan-tahapannya secara rinci sebagai berikut:
Tahap pertama adalah isolasi RNA. Sampel klinis pada tahap ini berasal dari jaringan tubuh, seperti darah, spesimen biopsi jaringan, dan kultur sel atau kultur jaringan. Tujuan isolasi RNA adalah untuk mendapatkan mRNA yang terkandung dalam sel. Isolasi RNA dimulai dengan melisiskan sel dan inti sel, lalu dilanjutkan dengan pemisahan DNA/RNA dan protein dengan metoda presipitasi protein, pemisahan RNA dan DNA dengan enzim DNase dan terakhir melakukan penyimpanan RNA dalam ddH2O bebas enzim nukleasi. Larutan RNA yang diperoleh langsung dianalisis dan dapat pula disimpan dalam jangka waktu lama pada suhu -80°C.
Tahap kedua adalah sintesis DNA komplemen, yaitu mengubah RNA khususnya mRNA gen target menjadi DNA komplemen. Enzim yang digunakan ialah enzim transkriptase balik dan Oligo (dT) 15 primer . Larutan DNA komplemen yang akan digunakan secepatnya harus disimpan pada suhu 2-8 °C bila selama 1-2 jam.  Sedangkan suhu -15 °C hingga  -25 °C diterapkan pada penyimpanan dalam jangka waktu lama.
Tahap ketiga adalah amplifikasi daerah transkrip gen target. Proses amplifikasi menggunakan primer oligonukleotida yang spesifik. Amplikon DNA komplemen akan dihasilkan jika reaksi berantai polimerase dilakukan dengan metode dua langkah. Kegunaan amplikon ini sebagai ekspresi transkrip gen target yang dapat divisualisasi secara biokimia dengan elektroforesis pada gel agarose. Penerapan klinis dari reaksi berantai polimerase transkripsi-balik ialah visualisasi ekspresi mRNA BRLF1 EBV pada penderita kanker nasofaring.
Perlakuan

Dalam prosedur reaksi berantai polimerase transkripsi-balik, perlu diperhatikan hal-hal berikut:
Alat-alat yang bebas dari RNAseRNA sangat rentan terhadap RNAse yang menyebar di lingkungan, sehingga sangat dianjurkan menggunakan  alat-alat yang bebas dari RNAse, seperti tabung Eppendorf dan tip mikropipet.
Aluminium dianjurkan sebagai pelapisan pada peralatan laboratorium berbahan gelas.  Degradasi RNAse melalui sterilisasi pada suhu >180 °C selama 2 jam.
Reagen dan larutan yang digunakan sebaiknya bebas RNAse. Dapat pula diberi perlakuan dengan dietil pirokarbonat (DEPC) 0,1 % v/v yang telah disterilisasi.
Tris Hidroklorida tidak boleh diperlakukan dengan Dietil pirokarbonat, karena bersifat sangat reaktif.
Menggunakan sarung tangan berbahan karet pada saat melakukan isolasi RNA. Tutup tabung eppendorf hanya dilakukan dalam waktu yang singkat.
Meja laboratorium dibersihkan sebelum bekerja, Bahan pembersihnya berupa larutan natrium hipoklorit, etanol dengan kandungan 70 %, atau 0,1 % Sodium Dodesil Sulfat;
Penyimpanan RNA dalam waktu yang lama dianjurkan pada suhu -80 °C.
Isolasi RNA diperlakukan di atas es (suhu 4 °C) selama bekerja.
Penyimpanan stok isopropanol dalam waktu yang lama dilakukan pada suhu -80 °C.
Reagen transkriptase balik disimpan pada suhu -20 °C. Pengerjaan di atas es suhu 4 °C diterapkan pada saat melakukan sintesis DNA komplemen
Penyimpanan DNA dan reagen dalam waktu yang lama dianjurkan pada suhu -80 °C.
Preparasi untuk membuat campuran reaksi dilakukan di atas es dengan suhu 4 °C.
Penyimpanan amplikon selama 1-2 hari menerapkan suhu 4 °C. Anjuran yang umum untuk produk reaksi adalah pada suhu -20 °C untuk penyimpanan waktu lama.  Tujuannya adalah menghindari degradasi oleh aktivitas 5’-eksonuklease dari enzim Taq polimerase.