Conditions: Dry Eye Syndrome
Keywords: Dry Eye Syndrome Dry Eye DES
Allocation: RANDOMIZED | Intervention model: PARALLEL
Enrollment: 601
Healthy volunteers: no

Brief summary:
The objective of this study is to compare the safety and efficacy of RGN-259 Ophthalmic Solutions to placebo for the treatment of the signs and symptoms of dry eye.

Detailed description:
Dry eye can be caused by many variable factors. Some examples include hormonal changes due to aging, or living in an environment of low humidity for long periods of time. Dry eye is a complex disease that may result in symptoms like discomfort, visual disturbance, and dryness. Patients with dry eye often have damage on the surface of the eye. In previous studies, RGN-259 has been shown to promote healing of the surface of the eye and decrease inflammation. It suggests that RGN-259 has a significant potential to be an important new safe and effective therapeutic in the treatment of dry eye syndrome.

Arms:
arm 1: RGN-259: It is a preservative-free, sterile eye drop solution containing Tβ4 arm 2: It is composed of the same excipients as RGN-259 but does not contain Tβ4

Interventions: intervention 1: RGN-259 intervention 2: Placebo
Intervention descriptions: intervention 1: A preservative-free, sterile eye drop solution containing Tβ4 for direct instillation into each eye, four times a day (QID) for 28 days intervention 2: It is composed of the same excipients as RGN-259 but does not contain Tβ4

Protocol document:
Prot_000.pdf: 
Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 1 of 89 
 
Clinical Trial Protocol   
Protocol Title: 
A Multi­Center, Randomized, Double Masked, Placebo 
Controlled Clinical Study to Assess the Safety and 
Efficacy of 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solutions for 
the Treatment of Dry Eye Using the Controlled Adverse 
Environmental (CAESM) Model (ARISE­2) 
Protocol Number: 
RGN­259/16­110­0008 
Study Phase: 
3 
Product Name: 
RGN­259 Ophthalmic Solution (0.1%) 
IND Number: 
73,446 
Indication: 
Dry Eye Syndrome (DES) 
Investigators: 
Multi­Center 
 
Sponsor: 
ReGenTree, LLC. 
116 Village Boulevard, Suite 200 
Princeton, NJ 08540 
USA 
 
Contract Research 
Organization: 
Ora. Inc. 
300 Brickstone Square, 3rd Floor 
Andover, MA 01810 
USA 
 
IRB/IEC: 
Alpha IRB 
1001 Avenida Pico 
Suite C, #497 
San Clemente, CA 92673 
USA 
 
 
Original Protocol: 
10 October 2016 
Amendment 1: 
01 November 2016   
Amendment 2: 
21 July 2017 
 
 
 
(NCT02974907)


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
21Jul2017 V2.0 
Confidential 
Page 2 of 89 
Confidentiality Statement 
This protocol contains confidential, proprietary information of Ora, Inc. and/or 
ReGenTree, LLC. Further dissemination, distribution or copying of this protocol or its 
contents is strictly prohibited. 
SPONSOR PERSONNEL 
President and CEO: 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
MEDICAL MONITOR 
Medical Monitor: 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ORA PERSONNEL 
Department Vice President: 
 
 
 
 
   
 
 
 
 
 
Department Senior 
Manager: 
 
 
 
 
   
 
 
 
 
 
Project Manager: 
 
 
 
 
   
 
 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 3 of 89 
 
SYNOPSIS 
Protocol Title: 
A  Multi­Center,  Randomized,  Double  Masked, 
Placebo  Controlled  Clinical  Study  to  Assess  the 
Safety and Efficacy of 0.1% RGN­259 Ophthalmic 
Solutions for the Treatment of Dry Eye Using the 
Controlled Adverse Environmental (CAESM) Model 
(ARISE­2) 
Protocol Number: 
RGN­259/16­110­0008 
Study Drug: 
  0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution     
  Placebo Ophthalmic Solution 
Study Phase: 
3 
Study Objective: 
The objective of this study is to compare the safety 
and  efficacy  of  0.1%  RGN­259  Ophthalmic 
Solutions to placebo for the treatment of the signs 
and symptoms of dry eye. 
 
Overall Study Design 
 
Structure: 
Multi­center, 
double­masked, 
randomized, 
placebo­controlled study 
Duration: 
An individual subject’s participation is estimated to 
be approximately 6 weeks (42 days) 
Controls: 
Placebo Ophthalmic Solution (Vehicle) 
Dosage/Dose Regimen: 
Subjects eligible to be randomized will receive one 
of  the  following  treatments  to  be  administered 
bilaterally QID for 28 days (from Visit 2 to Visit 5). 
  0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution 
  Placebo Ophthalmic Solution (Vehicle) 
During  a  14­day  study  run­in  period  (for  the 
purpose 
of 
subject 
selection) 
prior 
to 
randomization,  all  subjects  will  receive  Placebo 
Ophthalmic Solution (Vehicle) bilaterally QID 
Summary of Visit Schedule: 
5 visits over the course of approximately 6 weeks 
 Visit 1   Day ­14   1 day, Screening 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 4 of 89 
 
 Visit 2   Day 1, Confirmation / Baseline 
 Visit 3   Day 8   1 day, 1­Week Follow­Up 
 Visit 4   Day 15   1 day, 2­Week Follow­Up 
 Visit 5   Day 29   2 day, 4­Week Follow­Up 
and Study Exit 
Measures  Taken  to  Reduce 
Bias: 
This is a randomized treatment assignment, double 
masked study. 
Study Population 
Characteristics 
 
Number of Subjects: 
Approximately  800  subjects  will  be  screened  to 
enroll approximately 594 (297 per treatment arm) 
subjects 
Condition/Disease: 
Dry Eye Syndrome   
Inclusion Criteria:   
Subjects must: 
a.  Be at least 18 years of age; 
b.  Provide written informed consent; 
c.  Have a subject reported history of dry eye for at 
least 
 prior to Visit 1; 
d.  Have a history of use or desire to use eye drops 
for dry eye symptoms within
 of Visit 
1; 
e.  Report  a  score  of 
  in  at  least  one 
symptom on the Ora Calibra™ Ocular 
Discomfort  &  4­Symptom  Questionnaire 
assessed pre­CAESM, at Visits 1 and 2; 
f.  Have a Schirmer’s Test score of 
 
 at Visits 1 and 2; 
g.  Have a Tear Film Break­Up Time (TFBUT)©   
 at Visits 1 and 2, pre­CAESM; 




Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 6 of 89 
 
l.  Have at least one eye (the same eye) satisfy all 
criteria for f, g, h, i, j and k. above. 
Exclusion Criteria:   
Subjects must not: 
a.  Have  any  clinically  significant  slit­lamp 
findings  at  Visit  1  that  may  include  active 
blepharitis,  meibomian  gland  dysfunction 
(MGD),  lid  margin  inflammation  or  active 
ocular  allergies  that  require  therapeutic 
treatment,  and/or  in  the  opinion  of  the 
investigator 
may 
interfere 
with 
study 
parameters; 
b.  Be diagnosed with an ongoing ocular infection 
(bacterial,  viral,  or  fungal),  or  active  ocular 
inflammation at Visit 1; 
c.  Have worn contact lenses within 7 days of Visit 
1 or anticipate using contact lenses during the 
study; 
d.  Have  used  any  eye  drops  within  2  hours  of 
Visit 1; 
e.  Have  previously  had  laser­assisted  in  situ 
keratomileusis (LASIK) surgery within the last 
6 months; 
f.  Have used Restasis®    or    XiidraTM within 45 
days of Visit 1; 
g.  Have an IOP > 25 mmHg at Visit 1; 
h.  Have any planned ocular and/or lid surgeries 
over the study period; 
i.  Be using or anticipate using temporary punctal 
plugs during the study that have not been stable 
within 30 days of Visit 1; 
j.  Be  currently  taking  any  topical  ophthalmic 
prescription 
(including 
medications 
for 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 7 of 89 
 
glaucoma) 
or 
over­the­counter 
(OTC) 
solutions,  artificial  tears,  gels  or  scrubs,  and 
cannot  discontinue  these  medications  for  the 
duration  of  the  trial  (excluding  medications 
allowed for the conduct of the study); 
k.  Have  corrected  visual  acuity  greater  than  or 
equal  to  logMAR  +0.7  as  assessed  by  Early 
Treatment  of  Diabetic  Retinopathy  Study 
(ETDRS) scale in both eyes at Visit 1; 
l.  Have an uncontrolled systemic disease; 
m.  Be  a  woman  who  is  pregnant,  nursing  or 
planning a pregnancy; 
n.  Be unwilling to submit a urine pregnancy test 
at Visit 1 and Visit 5 (or early termination visit) 
if 
of 
childbearing 
potential. 
 
Non­
childbearing potential is defined as a woman 
who is permanently sterilized (e.g. has had a 
hysterectomy  or  bilateral  tubal  ligation  or 
bilateral oophorectomy), or is post­menopausal 
(without menses for 12 consecutive months); 
o.  Be a woman of childbearing potential who is 
not using an acceptable means of birth control; 
acceptable  methods of contraception include: 
hormonal    oral,  implantable,  injectable,  or 
transdermal  contraceptives;  mechanical 
 
spermicide in conjunction with a barrier such 
as a diaphragm  or condom;  IUD;  or surgical 
sterilization  of  partner.    For  non­sexually 
active females, abstinence may be regarded as 
an adequate method of birth control; however, 
if the subject becomes sexually active during 
the study, she must agree to use adequate birth 
control as defined above for the remainder of 
the study; 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 8 of 89 
 
p.  Have a known allergy and/or sensitivity to the 
study drug or its components; 
q.  Have a condition or be in a situation which the 
investigator  feels  may  put  the  subject  at 
significant  risk,  may  confound  the  study 
results, or may interfere significantly with the 
subject’s participation in the study; 
r.  Be currently enrolled in an investigational drug 
or device study or have used an investigational 
drug or device within 30 days of Visit 1; 
s.  Be  currently  using  any  medication  known  to 
cause ocular drying (e.g. antihistamines, anti­
depressants)  or  increased  lacrimation  (e.g. 
cholinergics) that is not used on a stable dosing 
regimen for at least 30 days prior to Visit 1; 
t.  Be  receiving  systemic  corticosteroid  therapy 
(not 
including 
inhaled 
corticosteroids), 
ophthalmic  topical  steroids,  immunotherapy, 
or cytotoxic therapy within 14 days of Visit 1 
or anticipate such therapy throughout the study 
period. 
u.  Be unable or unwilling to follow instructions, 
including participation in all study assessments 
and visits. 
Study Formulations: 
  0.1% RGN­259 Ophthalmic Solutions 
  Placebo Ophthalmic Solution 
Efficacy Measures:   
Primary Efficacy Measures: 
  Change from baseline in ocular discomfort 
change from pre­CAESM 
 to post 
CAESM 
  at  Day  29  (Visit  5) 
using the Ora Calibra™ Ocular Discomfort 
Scale; 
 
Hierarchical Efficacy Measure:   


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 9 of 89 
 
  Change  from  baseline  in 
 
staining at Day 29 pre­CAESM in 
 
 
 
 
using the Ora Calibra™ scale.  
Secondary Efficacy Measures: 
  Fluorescein staining (Ora Calibra™ scale) 
at  Visits  3,  4,  and  5  (Change  from  Pre­
CAESM  to  Post­CAESM,  Pre­  and  Post­
CAESM; regions: 
 
 
; 
  Fluorescein staining (Ora Calibra™ scale) 
at  Visits  3,  4,  and  5  (Change  from  Pre­
CAESM  to  Post­CAESM,  Pre­  and  Post­
CAESM; regions: 
 
 
 
 
 
 
 
 
.; 
  Lissamine green staining (Ora Calibra™ 
scale) at Visits 3, 4, and 5 (Pre­ and Post­
CAESM; 
regions: 
 
 
 
  Tear film break­up time at Visits 3, 4, and 5 
(Pre­ and Post­CAESM); 
  Ocular Protection Index (OPI 2.0) at Visit 5 
(Pre­CAESM); 
  Unanesthetized Schirmer’s Test at Visit 5 
(Pre­CAESM); 
  Drop 
comfort 
assessment 
after 
randomization at Visit 2; 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 10 of 89 
 
  Ocular  Surface  Disease  Index  (OSDI)©  at 
Visits 3, 4, and 5 (Pre­CAESM); 
  Ocular discomfort and dry eye symptoms at 
Visits 3, 4, and 5 (Change from Pre­CAESM 
to Post­CAESM, Pre­ and Post­CAESM); 
  Ocular discomfort during CAESM at Visits 4 
and 5; 
  Daily diary. 
Safety Measures: 
  Visual acuity (ETDRS) at Visits 1, 2, 3, 4 
and 5; 
  Slit­lamp biomicroscopy at Visits 1, 2, 3, 4 
and 5;   
  Corneal Sensitivity at Visits 1 and 5 (Pre­
CAESM)); 
  Adverse event query at Visits 1, 2, 3, 4 and 
5; 
  Undilated Fundoscopy at Visits 1 and 5; and 
  Intraocular Pressure at Visits 1 and 5. 
Other: 
Not applicable. 
General Statistical Methods and Types of Analyses 
Analysis Populations 
  Intent­to­Treat Population   The intent­to­treat (ITT) population includes all 
randomized subjects.    The primary analysis will be performed on the ITT 
population with the Last Observation Carried Forward (LOCF) imputation 
method for missing values.    The ITT population may also be analyzed with 
observed data only (i.e., without LOCF) to assess sensitivity.    Subjects in the 
ITT population will be analyzed as randomized. 
  Per Protocol Population   The per protocol (PP) population includes subjects 
in the ITT population who do not have significant protocol deviations and who 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 11 of 89 
 
complete the study.    Protocol deviations will be assessed prior to database 
lock and unmasking.    The PP population will be analyzed using observed 
data  only  for  efficacy  variables.    Subjects  in  the  PP  population  will  be 
analyzed as randomized. 
  Safety  Population    The  safety  population  includes  all  subjects  who  have 
received  at  least  one  dose  of  the  investigational  product.    The  safety 
population will be analyzed for all safety assessments.    Subjects in the Safety 
population will be analyzed as treated.   
 
Randomization 
At Visit 2 (Day 1), subjects will be randomized in a 1:1 ratio to receive either 0.1% 
RGN­259 or placebo.    Randomization will be stratified by the following factors: 
1. Change Pre­CAESM 
 to Post­CAESM 
 in 
ocular discomfort (Ora Calibra Ocular™ Discomfort Scale) at Visit 
2. 
 
 
2. Pre­CAESM 
 fluorescein staining (Ora Calibra ™ 
Scale) at Visit 2 
 
 
   
 
Worst Eye: Eyes are eligible for analysis if they meet all of the inclusion criteria.   
In the case that both eyes are eligible for analysis, the worst eye will be the eye with 
the largest increase in ocular discomfort from pre­CAESM 
 to post­
CAESM 
 at Visit 2.    If the ocular discomfort symptom increase is the 
same in both eyes then the worst eye will be the eye with worse (higher) 
 
 staining pre­CAESM at Visit 2.    If the 
 staining is the same 
in both eyes then the right eye will be selected as the worst eye. 
 
Sample Size and Hierarchical Analysis Approach 
This study is expected to enroll 297 subjects in each of the two treatment arms, for a 
total of 594 randomized subjects.    Assuming a 5% drop out rate, 282 subjects per 
group are expected to complete the study.     


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
21Jul2017 V2.0 
Confidential 
Page 12 of 89 
The primary endpoint is the change from baseline in ocular discomfort change from 
pre­CAESM 
 to post­CAESM 
 at Day 29. The study will be 
considered successful if and only if this endpoint is met. With 
 subjects 
randomized per treatment arm, and a difference between RGN­259 and placebo as 
low as 
, the study will have 
 power to detect a treatment difference. This 
assumes a two­sided test at alpha   0.05 and a common standard deviation (SD) of 
 in both treatment arms. Accounting for up to 5% dropouts in the study, 282 
subjects randomized per treatment arm, or 564 total subjects, will have 
 power 
to detect a difference for the primary endpoint. Difference and SD estimates are 
derived from the phase 2b/3 study. 
The hierarchical endpoint of the change from baseline in 
 staining at 
Day 29 pre­CAESM is also considered in terms of statistical power. It is assumed that 
50% (282 completed subjects accounting for 5% dropouts) of the subjects will have a 
baseline 
. This endpoint will be tested conditionally upon the 
primary endpoint being successful, thereby maintaining the study­wide type I error 
rate for both endpoints. With a sample size of 
 subjects per treatment arm with a 
 (50% of the randomized subjects) the study will have 
 
power to detect a difference as low as 
 between RGN­259 and placebo. This 
assumes a two­sided test at alpha   0.05 and a common SD of 
 in both treatment 
arms. To show a range of power using the same assumptions and accounting for fewer 
subjects with a 
 if only 35% of subjects (99 completed subjects 
per treatment arm) have a baseline 
 then the study will have 
83%  power  to  detect  a  treatment  difference  between  RGN­259  and  placebo. 
Difference and SD estimates are derived from the phase 2b/3 study, in a 
 
 
Primary Efficacy Analyses: 
Change from baseline in ocular discomfort change from pre­ to post­CAESM at Day 
29 (Visit 5) using the Ora Calibra™ Ocular Discomfort Scale will be calculated as: 
(OD  at Day 29   OD  at Day 29)   (OD  at Baseline   OD  at Baseline) 
Where OD    Ocular discomfort at 
 in CAE (pre­CAE) and OD    
Ocular discomfort at 
 in CAE (post­CAE) 
With this calculation, a positive change indicates a worsening of dry eye symptoms 
compared  to  baseline.    In  addition,  treatment  comparisons  between  active  and 
placebo will be calculated as active   placebo, such that a negative result indicates a 




Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 14 of 89 
 
assessment,  OSDI©,  ocular  discomfort  and  dry  eye  symptoms,  ocular  discomfort 
during CAESM, and changes from baseline in these measures will be analyzed by visit 
using two­sample t­tests and Wilcoxon rank sum tests, as appropriate.     
The worst symptom for each subject will be identified as the symptom with the highest 
daily average score during the run­in period (Days ­14 to ­1) as recorded in the subject 
diary.    The worst symptom and each individual symptom will be analyzed using a 
two­sample t­test.    This analysis will be completed separately for the morning and 
evening scores as well as the daily average score.    Additionally, the average score 
for each time point (morning, evening, before bed and daily average) will also be 
analyzed separately using a Wilcoxon rank sum test.   
Safety Variables 
Adverse  events  will  be  coded  using  the  MedDRA  dictionary.    Frequencies  and 
percentages  of  subjects  with  treatment­emergent  adverse  events  (TEAEs),  serious 
TEAEs, and TEAEs causing premature discontinuation will be provided by treatment 
group.    An AE is treatment emergent if it occurs or worsens after the first dose of 
study treatment. Furthermore, frequencies will be given of subjects with TEAEs by 
system organ class, by system organ class and preferred term, by system organ class, 
preferred  term  and  maximal  severity,  by  system  organ  class,  preferred  term  and 
strongest relationship, and by system organ class, preferred term, maximal severity, 
and strongest relationship.    Separate analyses will be performed for ocular specific 
and all AEs (including systemic). 
Other  safety  endpoints  including  visual  acuity,  slit­lamp  biomicroscopy,  corneal 
sensitivity, undilated fundoscopy, and intraocular pressure will be summarized by 
treatment  group  and  visit  using  descriptive  statistics.    Changes  or  shifts  from 
baseline will also be summarized where appropriate.    For assessments performed by 
eye, study eye and fellow eye will be summarized separately.    In addition, shifts 
from  baseline  to  worst  on­treatment  value  for  ocular  safety  assessments  will  be 
summarized. 
Summary of Known and Potential Risks and Benefits to Human Subjects 
There are no known risks with the instillation of RGN­259 (Tβ4 Ophthalmic solution). 
In a 28­day repeat dose ocular toxicity study in the rabbit, RGN­259 (Tβ4 Ophthalmic 
solution) at doses up to 0.1% produced no local or systemic toxicity and did not appear 
to  induce  ocular  disease.    A  Phase  1  clinical  trial  evaluating  the  safety  and 
tolerability of RGN­259 was not required. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 15 of 89 
 
Risks are minimal based on the safety profile of Tβ4 in nonclinical toxicology and 
safety pharmacology studies where systemic doses (≥ 
 mg/kg bw/day) produced no 
observed adverse events.    In a Phase 1 study in healthy volunteers, systemic doses 
of Tβ4 injectable solution up to approximately 
 mg/kg bw/day yielded no dose 
limiting toxicities and no serious adverse events.    Three unexpected and possibly 
related events dizziness (1 subject), headache (1 subject) and pyrexia (1 subject) were 
reported. 
A total of 425 subjects have been enrolled in 5 clinical studies employing the 0.05% 
and 0.1% concentration of Tβ4 ophthalmic drops, and the drug has been shown to be 
safe and well­tolerated.    The largest of these, a 317­subject trial of 0.05% and 0.1% 
Tβ4 ophthalmic drops for treatment of dry eye, reported no significant adverse effects 
and no clinically significant changes in any safety parameters. 
A  Phase  2b/3  trial  proved  RGN­259’s ability to protect from adverse stimuli as 
indicated by the dampening of response from a baseline to 28­day CAESM challenge. 
RGN­259  caused  significant  lowering  of  scores  in  ocular  discomfort  and 
 
corneal staining compared to placebo treatment.   
This  data  indicates  that  RGN­259  ophthalmic  solution  represents  a  promising 
treatment for patients with dry eye disease. 
 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 16 of 89 
 
Schedule of Visits and Measurements 
Procedure 
 
Visit 1 
Day ­14 ± 1 
 
 
Visit 2 
Day 1 
 
 
Visit 3 
Day8 ± 1 
 
 
Visit 4 
Day15 ± 1 
 
 
Visit 5 
Day 29 ±2 
 
 
Pre   
CAESM 
Post   
CAESM 
Pre 
CAESM 
Post 
CAESM 
 
Pre 
CAESM 
Post   
CAESM 
Pre 
CAESM 
Post   
CAESM 
Informed Consent / HIPAA 
X 
 
 
 
 
 
 
 
 
Medical / Medication History 
and Demographic 
X 
 
 
 
 
 
 
 
 
Run in Placebo Collection 
 
 
X 
 
 
 
 
 
 
Study Drug Collection 
 
 
 
 
X 
X 
 
X 
 
Diary Collection 
 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
Medical / Medication History 
Update 
 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
Adverse Event Query 
 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
Pregnancy Test 
X1 
 
 
 
 
 
 
X1 
 
Ocular Discomfort   Ora, 
Calibra™ / Dry Eye 
Symptoms   
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
OSDI© Questionnaire 
X 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
Visual Acuity (ETDRS) 
X 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
Review of Qualification 
Criteria 
X 
X 
X 
X 
 
 
 
 
 
Slit lamp Biomicroscopy 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
Ocular Protection Index (OPI 
2.0)  Ora Calibra™ Scale 
 
 
X 
 
 
 
 
X 
 
TFBUT© 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
Fluorescein Staining Ora 
Calibra™ Scale 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 17 of 89 
 
 
 
 
 
Lissamine Green Staining Ora 
Calibra™ Scale 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
Corneal Sensitivity (Cochet
Bonnet) 
X 
 
 
 
 
 
 
X 
 
Unanesthetized Schirmer’s 
Test 
X 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
CAESM Exposure 
X 
X 
 
X 
X 
CAESM Discomfort  Ora 
Calibra™ Ocular Disc. Scale 
X2 
X2 
 
X2 
X2 
Tear Collection 
 
 
 
X3 
 
 
X3 
 
X3 
Intraocular Pressure 
 
X 
 
 
 
 
 
 
X 
Undilated Fundus Exam 
 
X 
 
 
 
 
 
 
X 
Run in Placebo Dispensation 
 
X 
 
 
 
 
 
 
 
Randomization   
 
 
 
X 
 
 
 
 
 
Subject Self instillation of 
study drug 
 
 
 
X 
X 
 
X 
 
 
Ora Calibra™ Drop Comfort 
Assessment 
 
 
 
X 
X 
 
X 
 
 
Study Drug Dispensation 
 
 
 
X 
X4 
 
X 
 
 
Diary Dispensation 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
 
Exit Subject from Study 
 
 
 
 
 
 
 
 
X 
 
X1      For females of childbearing potential, X2       
 
    X3   Tears may be collected 
after a 30 minute wait period from lissamine instillation, X4  IP will be collected and re dispensed 
at visit 3.   


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 18 of 89 
 
TABLE OF CONTENTS 
TABLE OF CONTENTS ................................................................................................18 
LIST OF ABBREVIATIONS .........................................................................................21 
1 
INTRODUCTION...................................................................................................23 
2 
STUDY OBJECTIVES ...........................................................................................24 
3 
CLINICAL HYPOTHESES ..................................................................................25 
4 
OVERALL STUDY DESIGN ................................................................................25 
5 
STUDY POPULATION .........................................................................................27 
5.1 
Number of Subjects (approximate) .............................................................27 
5.2 
Study population characteristics .................................................................27 
5.3 
Inclusion Criteria .........................................................................................27 
5.4 
Exclusion Criteria .........................................................................................28 
5.5 
Withdrawal Criteria (if applicable) ............................................................29 
6 
STUDY PARAMETERS ........................................................................................30 
6.1 
Efficacy Measures .........................................................................................30 
6.1.1 
Primary Efficacy Variables ...............................................................30 
6.1.2 
Hierarchical Efficacy Variables ........................................................30 
6.1.3 
Secondary Efficacy Variables ...........................................................30 
6.2 
Safety Measures ............................................................................................30 
7 
STUDY MATERIALS ............................................................................................31 
7.1 
Study Drug(s) ................................................................................................31 
7.1.1 
Formulations .....................................................................................31 
Run­In  31 
Randomized Study Treatments ......................................................................31 
7.1.2 
Dispensation Schedule ......................................................................31 
7.1.3 
Instructions for Use ...........................................................................31 
7.2 
Other Study Supplies ...................................................................................32 
8 
STUDY METHODS AND PROCEDURES .........................................................32 
8.1 
Subject Entry Procedures ............................................................................32 
8.1.1 
Overview ...........................................................................................32 
8.1.2 
Informed Consent..............................................................................32 
8.1.3 
Washout Intervals .............................................................................32 
8.1.4 
Procedures for Final Study Entry ......................................................32 
8.1.5 
Methods for Assignment to Treatment Groups: ...............................32 
8.2 
Concurrent Therapies ..................................................................................33 
8.2.1 
Prohibited Medications/Treatments ..................................................33 
8.2.2 
Escape Medications ..........................................................................34 
8.2.3 
Special Diet or Activities ..................................................................34 
8.3 
Examination Procedures ..............................................................................34 
8.3.1 
Procedures to be Performed at Each Study Visit with Regard to 
Study Objective(s) ..........................................................................................34 
8.4 
Schedule of Visits, Measurements and Dosing ..........................................41 
8.4.1 
Scheduled Visits................................................................................41 
8.4.2 
Unscheduled Visits ...........................................................................41 
8.5 
Compliance with Protocol ............................................................................42 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 19 of 89 
 
8.6 
Subject Disposition .......................................................................................42 
8.6.1 
Completed Subjects ..........................................................................42 
8.6.2 
Discontinued subjects .......................................................................42 
8.7 
Study Termination .......................................................................................43 
8.8 
Study Duration .............................................................................................43 
8.9 
Monitoring and Quality Assurance ............................................................43 
9 
ADVERSE EVENTS ..............................................................................................44 
9.1 
Adverse Event ...............................................................................................44 
9.1.1 
Severity .............................................................................................44 
9.1.2 
Relationship to Study Drug ...............................................................44 
9.1.3 
Expectedness .....................................................................................45 
9.2 
Serious Adverse Events ................................................................................45 
9.3 
Procedures for Reporting Adverse Events .................................................46 
9.3.1 
Reporting a Suspected Unexpected Adverse Reaction .....................46 
9.3.2 
Reporting a Serious Adverse Event ..................................................47 
9.4 
Procedures for Unmasking of Study Drug .................................................47 
9.5 
Type and Duration of the Follow­up of Subjects after Adverse Events ..48 
10 
STATISTICAL HYPOTHESES AND METHODS OF ANALYSES................48 
10.1 Analysis Populations ....................................................................................48 
10.2 Statistical Hypotheses ...................................................................................49 
10.3 Sample Size ...................................................................................................49 
10.4 Statistical Analysis ........................................................................................50 
10.4.1 General Considerations .....................................................................50 
10.4.2 Unit of Analysis ................................................................................51 
10.4.3 Missing Data .....................................................................................51 
10.4.4 Multiplicity Consideration ................................................................52 
10.4.5 Primary Efficacy Analyses ...............................................................52 
10.4.6 Hierarchical Efficacy Analysis .........................................................53 
10.4.7 Secondary Efficacy Analyses ...........................................................53 
10.4.8 Safety Variables ................................................................................54 
10.4.9 Interim Analyses ...............................................................................54 
11 
COMPLIANCE WITH GOOD CLINICAL PRACTICES, ETHICAL 
CONSIDERATIONS, AND ADMINISTRATIVE ISSUES ................................54 
11.1 Protection of Human Subjects.....................................................................55 
11.1.1 Subject Informed Consent.................................................................55 
11.1.2 Institutional Review Board (IRB) Approval .....................................55 
11.2 Ethical Conduct of the Study ......................................................................55 
11.3 Subject Confidentiality ................................................................................55 
11.4 Documentation ..............................................................................................56 
11.4.1 Retention of Documentation .............................................................56 
11.5 Labeling, Packaging, Storage, Accountability, and Return or Disposal of 
Study Drug ....................................................................................................56 
11.5.1 Labeling/Packaging...........................................................................56 
11.5.2 Storage of Study Drug ......................................................................57 
11.5.3 Accountability of Study Drug ...........................................................57 
11.5.4 Return or Disposal of Study Drug ....................................................57 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 20 of 89 
 
11.6 Recording of Data on Source Documents and Electronic Case Reports 
Forms (eCRFs)..............................................................................................57 
11.7 Handling of Biological Specimens ...............................................................58 
11.8 Publications ...................................................................................................58 
12 
REFERENCES ........................................................................................................59 
13 
APPENDICES .........................................................................................................61 
Appendix 1:    Schedule of Visits and Measurements ...................................................61 
Appendix 2:    Examination Procedures, Tests, Equipment, and Techniques ...........63 
Appendix 3: Amendment Summary of Changes...........................................................84 
Appendix 4:    Sponsor and Ora Approvals ..................................................................88 
Appendix 5:  Investigator’s Signature .........................................................................89 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 21 of 89 
 
LIST OF ABBREVIATIONS 
AE 
adverse event 
ANCOVA 
analysis of covariance 
BCVA 
best­corrected visual acuity 
CAESM 
controlled adverse environment 
CFR 
Code of Federal Regulations 
CI 
confidence interval 
CRF 
case report form 
DES 
Dry Eye Syndrome 
DHHS 
Department of Health and Human Services 
eCRF 
electronic case report form 
EKG 
Electrocardiograph 
ERC 
ethical review committee 
ETDRS 
Early Treatment of Diabetic Retinopathy Study 
FDA 
Food and Drug Administration 
GCP 
Good Clinical Practice 
GMP 
Good Manufacturing Practice 
HIPAA 
Health Information Portability and Accountability Act 
ICF 
informed consent form 
ICH 
International Conference on Harmonisation 
IEC 
Independent Ethics Committee 
IND 
investigational new drug application 
IOP 
intraocular pressure 
IRB 
institutional/independent review board 
ITT 
intent­to­treat 
IUD 
intra uterine device 
IWRS 
interactive web response system 
KCS 
keratoconjunctivitis sicca 
Kg 
Kilogram 
LASIK 
laser in situ keratomileusis 
LOCF 
last observation carried forward 
logMAR 
logarithm of the minimum angle of resolution 
MedDRA 
Medical Dictionary for Regulatory Activities 
MGD 
meibomian gland dysfunction 
Mg 
Milligram 
mL 
Milliliter 
Mm 
Millimeter 
µg   
microgram   
µL   
microliter   
µm 
Micrometer 
mmHg 
millimeters of mercury 
OD 
right eye 
OPI 
ocular protection index 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 22 of 89 
 
OS 
left eye 
OSDI© 
ocular surface disease index 
OU 
both eyes 
OTC 
over­the­counter 
PMNs 
polymorphonuclear leucocytes 
PP 
per protocol 
QID 
four times a day 
SAE 
serious adverse event 
Ac­SDKP   
N­acetyl­seryl­aspartyl­lysyl­proline 
Tβ4 
Thymosin Beta 4 
TFBUT©/TBUT 
tear film break­up time 
TEAEs 
treatment emergent adverse events 
VA 
visual acuity 
 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 23 of 89 
 
1  INTRODUCTION 
Dry eye is a complex disease that results in symptoms of discomfort, visual disturbance, 
and tear film instability which creates potential for damage for the ocular surface. It is 
accompanied by increased osmolarity of the tear film and inflammation of the ocular 
surface. Estimates of the prevalence of dry eye vary considerably, depending on the 
criteria used to define the syndrome. In the U.S., it has been estimated that as many as 3.2 
million women and 1.7 million men over the age of 50 have dry eye, with a projected 
40% increase in number of patients affected by 2030 (Schaumberg, Sullivan et al. 2002, 
Schaumberg, Sullivan et al. 2003, Smith 2007, Schaumberg, Dana et al. 2009). With the 
aging population in the United States and other countries of the developed world, and 
with increasing computer use, dry eye is expected to become more prevalent and finding 
a treatment is becoming more important (Brewitt and Sistani 2001).   
Thymosin Beta 4 (Tβ4) is a synthetic copy of the naturally­occurring 43­amino acid 
peptide that is found in a variety of tissues and nucleated cell types.    It is found in high 
concentrations in blood platelets (anucleated fragments of precursor megakaryocytes), 
macrophages, polymorphonuclear leucocytes (PMNs), and other lymphoid cells.    PMNs 
and platelets are among the first formed elements to enter wounds.    The mammalian 
gene encoding the expression of Tβ4 localizes to the X­chromosome, and it is the first 
gene to be upregulated during wounding. 
Tβ4 is a major actin sequestering peptide and a potent regulator of actin polymerization 
in all eukaryotic cells.    Actin has many important functions that, among other things, are 
essential for cell motility, microtubule organization, and construction of the cytoskeleton.   
These functions are regulated by Tβ4, which maintains a large pool of actin monomers, 
thus controlling the assembly and disassembly of actin filaments that regulate the 
dynamics of the actin cytoskeleton. 
Tβ4 is released by platelets and is present in wound fluid (Huff et al., 2002) where it 
promotes wound repair and regeneration in various tissues. In the eye, it promotes 
corneal epithelial cell migration, decreases inflammation and has anti­apoptotic activities 
(Sosne, Siddiqi et al., 2004; Sosne et al., 2005; Sosne et al., 2007; Qui et al., 2007), and 
accelerates repair/regeneration after alkali burn and heptanol debridement (Sosne, Szliter 
et al., 2002).    In the eye it up­regulates the gene expression of laminin­5, a major 
subepithelial adhesion protein, located in the basement membrane region of the cornea, 
conjunctiva, and skin, and important in wound healing (Sosne, Lihua et al., 2004).    In 
compassionate use cases, Tβ4 has demonstrated efficacy in repairing non­healing 
neurotrophic corneal ulcers and other corneal epithelial wounds (Dunn et al., 2010, Sosne 
et al., 2010).     
Ac­SDKP can reverse hypertension­induced fibrosis (Peng, 2003) and has anti­
inflammatory activity, which is one possible explanation of how Tβ4 reduces fibrosis 
(Cavasin, 2006). 
It is known that T4 plays a role in vascular biology, acts as a chemo­attractant for 
endothelial cells and stimulates angiogenesis, promotes cell migration and has been 
shown to have anti­apoptotic properties. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 24 of 89 
 
Because of its high concentration and ubiquitous distribution, T4 apparently function as 
an important intracellular structural element and has additional “moonlighting” functions, 
when released from cells either by secretion, cell death, or lysis (Goldstein et al., 2005). 
Topically applied Tβ4 has been shown to be safe and well tolerated in phase 1 and phase 
2 clinical trials in the skin (RGN­137, Tβ4 dermal gel) and the eye (RGN­259, Tβ4 
preservative­free eye drops). Tβ4 injectable solution (RGN­352) is deemed safe and well 
tolerated in a phase 1 clinical trial (Ruff et al., 2010). 
While there were no Phase 1 studies of ophthalmic formulations of Tβ4, a double­blind, 
randomized, placebo­controlled, dose response study was conducted using four cohorts 
with 10 healthy subjects each given a single intravenous dose of Tβ4 or placebo. Cohorts 
received ascending doses of 
 
 mg of Tβ4 (Phase 1A). Following 
safety review of the Phase 1A data, subjects in Phase 1B received the same doses 
administered to those in Phase 1A but daily for 
 consecutive days. Safety evaluations, 
incidence of unexpected adverse events (AEs) and PK parameters were evaluated. AEs 
were infrequent and mild and moderate in intensity. There were no deaths, no dose 
limiting toxicities or SAEs. The PK profile showed a dose proportional response, 
increasing half­life with increasing dose and minimal drug accumulation.   
A Phase 2 dry eye clinical trial (RGN­DE­202) of 0.1% RGN­259 ophthalmic solution 
compared to placebo showed a decrease in ocular discomfort and corneal staining in 
subjects with dry eye as well as a decrease change in corneal staining following exposure 
to a controlled adverse environment which suggests that Tβ4 has a protective effect on 
the eye when used in an adverse environment.   
A more recent Phase 2/3 study was completed and, while the primary endpoints were not 
met, several important measures of efficacy show that RGN­259 has a therapeutic effect 
in the treatment of dry eye. 0.05% RGN­259 and 0.1% RGN­259 ophthalmic solutions 
were shown to be well tolerated, as evidenced by the lack of significant differences in 
drop comfort assessment scores, and safe. Although the primary outcome measures were 
not met, several pre­specified endpoints and subgroups of subjects with more severe dry 
eye symptoms at baseline showed significant treatment effects, notably for the following 
endpoints: ocular discomfort during CAESM 
 at Visit 5, 
improved fluorescein staining in the 
 at Visits 4 and 5, ocular discomfort at 
Visit 5, pre­CAE, and corneal fluorescein staining at Visit 5, pre­CAESM. These results, 
especially those that were repeated from the previous Phase 2 study, suggest that RGN­
259 has a therapeutic effect in the treatment of dry eye. 
 
 
2  STUDY OBJECTIVES   
The objective of this study is to compare the safety and efficacy of 0.1% RGN­259 
Ophthalmic Solutions to placebo for the treatment of the signs and symptoms of dry eye. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 25 of 89 
 
3  CLINICAL HYPOTHESES 
The clinical hypothesis for this study is that 0.1% RGN­259 ophthalmic solution is 
superior to placebo for the primary and hierarchical endpoints of signs and symptoms, as 
follows:   
 
  Change from baseline in ocular discomfort change from pre­CAESM 
 to 
post­CAESM 
 at Day 29 (Visit 5) using the Ora Calibra™ Ocular 
Discomfort Scale; 
  Change from baseline in 
 staining at Day 29 pre­CAESM 
 
 
 using the Ora Calibra™ 
scale.   
4  OVERALL STUDY DESIGN 
This is a Phase 3, multicenter, randomized, double­masked study designed to evaluate the 
efficacy and safety 0.1% RGN­259 ophthalmic solution compared to placebo in subjects 
with dry eye. Approximately 594 male and female subjects at least 18 years of age with a 
subject­reported history of dry eye in both eyes and meeting all other study eligibility 
criteria will be randomized to receive treatment with RGN­259 or placebo in a 1:1 ratio 
(approximately 297 subjects in each treatment group). This study will consist of two 
periods: a 14­day run­in period and a 4­week treatment period. A study flow chart 
appears below: 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 26 of 89 
 
 
Visit 1 
(Day ­14 ± 1): 
Screening 
Informed Consent 
Demographics, Medical/Medication & Ocular History 
Urine Pregnancy Testing (as needed) 
Symptom Questionnaires, Visual Acuity 
Pre CAESM Eye Evaluations 
CAESM Exposure 
Post CAESM Eye Evaluations 
Safety Assessments 
Run in & Subject Daily Diary Dispensed 
 
 
Placebo Run­in Period (14 ± 1 day) 
 
 
Visit 2 
(Day 1): 
Confirmation/ Baseline 
Collection of Run in/Diary 
Medical/Medication Update: AE Query 
Symptom Questionnaires, Visual Acuity 
Pre CAESM Eye Evaluations 
CAESM Exposure 
Post CAESM Eye Evaluations 
Tear Collection 
Randomization 
Study Drug & Subject Daily Diary Dispensed 
 
 
Visit 3 
(Day 8 ± 1): 
1­Week Follow Up 
Collection of Study Drug/Diary 
Medical/Medication Update: AE Query 
Symptom Questionnaires, Visual Acuity 
Eye Evaluations 
Study Drug & Subject Daily Diary Dispensed 
 
 
Visit 4 
(Day 15 ± 1): 
2­Week Follow Up 
Collection of Study Drug/Diary 
Medical/Medication Update: AE Query 
Symptom Questionnaires, Visual Acuity 
Pre CAESM Eye Evaluations 
CAESM Exposure 
Post CAESM Eye Evaluations 
Tear Collection 
Study Drug & Subject Daily Diary Dispensed 
 
 
Visit 5 
(Day 29 ± 2): 
4­Week Follow­Up and 
Study Exit 
Collection of Study Drug/Diary 
Medical/Medication Update: AE Query 
Urine Pregnancy Testing (as needed) 
Symptom Questionnaires, Visual Acuity 
Pre CAESM Eye Evaluations 
CAESM Exposure 
Post CAESM Eye Evaluations 
Tear Collections 
Safety Assessments 
Study Exit 
 
Subjects who terminate early during the treatment period will be asked to complete safety 
assessments prior to commencement of any alternative dry eye therapy (if at all possible). 
Subjects who are terminated early from the study will not be replaced. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 27 of 89 
 
5  STUDY POPULATION 
5.1  Number of Subjects (approximate) 
It is estimated that approximately 800 subjects will be screened to enroll approximately 
594 randomized subjects (297 in each arm). Subjects will be randomized in a 1:1 ratio 
0.1% RGN­259 to placebo ophthalmic solution. 
5.2  Study population characteristics 
All subjects must be at least 18 years of age, of either gender, and of any race, and must 
meet all inclusion criteria and none of the exclusion criteria. 
5.3  Inclusion Criteria 
Subjects must: 
a.  Be at least 18 years of age; 
b.  Provide written informed consent; 
c.  Have a subject reported history of dry eye for at least 
 prior to Visit 1; 
d.  Have a history of use or desire to use eye drops for dry eye symptoms within   
 of Visit 1; 
e.  Report a score of 
 in at least one symptom on the Ora Calibra™ 
Ocular Discomfort & 4­Symptom Questionnaire assessed pre­CAESM, at Visits 
1 and 2; 
f.  Have a Schirmer’s Test score of 
 at Visits 1 and 2; 
g.  Have a Tear Film Break­Up Time (TFBUT)© 
 at Visits 1 and 2, 
pre­CAESM; 
h.  Have a corneal fluorescein staining score of 
 
according to the Ora Calibra™ Scale 
at Visits 1 and 2, pre­CAESM; 
i.  Have a total corneal fluorescein staining of 
 
according to the Ora Calibra™ Scale at Visits 1 and 2, pre­
CAESM; 
j.  Have a total lissamine green conjunctival score of 
 
 
, according to the Ora Calibra™ 
Scale at Visits 1 and 2, pre­CAESM; 
k.  Demonstrate a response to the CAESM at Visits 1 and 2 as defined by: 
a. 
 
 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 28 of 89 
 
b. 
 
 
 
 
 
 
 
   
l.  Have at least one eye (the same eye) satisfy all criteria for f, g, h, i, j and k. 
above. 
5.4  Exclusion Criteria 
Subjects must not: 
a.   
Have any clinically significant slit­lamp findings at Visit 1 that may 
include      active blepharitis, meibomian gland dysfunction (MGD), lid 
margin inflammation or active ocular allergies that require therapeutic 
treatment, and/or in the opinion of the investigator may interfere with 
study parameters; 
b. 
Be diagnosed with an ongoing ocular infection (bacterial, viral, or fungal), 
or active ocular inflammation at Visit 1; 
c. 
Have worn contact lenses within 7 days of Visit 1 or anticipate using 
contact lenses during the study; 
d. 
Have used any eye drops within 2 hours of Visit 1; 
e. 
Have previously had laser­assisted in situ keratomileusis (LASIK) surgery 
within the last 6 months; 
f. 
Have used Restasis® or XiidraTM within 45 days of Visit 1; 
g. 
Have an IOP > 25 mmHg at Visit 1; 
h. 
Have any planned ocular and/or lid surgeries over the study period; 
i. 
Be using or anticipate using temporary punctal plugs during the study that 
have not been stable within 30 days of Visit 1; 
j. 
Be currently taking any topical ophthalmic prescription (including 
medications for glaucoma) or over­the­counter (OTC) solutions, artificial 
tears, gels or scrubs, and cannot discontinue these medications for the 
duration of the trial (excluding medications allowed for the conduct of the 
study); 
k. 
Have corrected visual acuity greater than or equal to logMAR +0.7 as 
assessed by Early Treatment of Diabetic Retinopathy Study (ETDRS) 
scale in both eyes at Visit 1; 
l. 
Have an uncontrolled systemic disease; 
m. 
Be a woman who is pregnant, nursing or planning a pregnancy; 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 29 of 89 
 
n. 
Be unwilling to submit a urine pregnancy test at Visit 1 and Visit 5 (or 
early termination visit) if of childbearing potential.    Non­childbearing 
potential is defined as a woman who is permanently sterilized (e.g. has had 
a hysterectomy or bilateral tubal ligation or bilateral oophorectomy), or is 
post­menopausal (without menses for 12 consecutive months); 
o. 
Be a woman of childbearing potential who is not using an acceptable 
means of birth control; acceptable methods of contraception include: 
hormonal   oral, implantable, injectable, or transdermal contraceptives; 
mechanical   spermicide in conjunction with a barrier such as a diaphragm 
or condom; IUD; or surgical sterilization of partner.    For non­sexually 
active females, abstinence may be regarded as an adequate method of birth 
control; however, if the subject becomes sexually active during the study, 
she must agree to use adequate birth control as defined above for the 
remainder of the study; 
p. 
Have a known allergy and/or sensitivity to the study drug or its 
components; 
q. 
Have a condition or be in a situation which the investigator feels may put 
the subject at significant risk, may confound the study results, or may 
interfere significantly with the subject’s participation in the study; 
r. 
Be currently enrolled in an investigational drug or device study or have 
used an investigational drug or device within 30 days of Visit 1; 
s. 
Be currently using any medication known to cause ocular drying (e.g. 
antihistamines, anti­depressants) or increased lacrimation (e.g. 
cholinergics) that is not used on a stable dosing regimen for at least 30 
days prior to Visit 1; 
t. 
Be receiving systemic corticosteroid therapy (not including inhaled 
corticosteroids), ophthalmic topical steroids, immunotherapy, or cytotoxic 
therapy within 14 days of Visit 1 or anticipate such therapy throughout the 
study period. 
u. 
Be unable or unwilling to follow instructions, including participation in all 
study assessments and visits. 
5.5  Withdrawal Criteria (if applicable) 
If at any time during the study the investigator determines that a subject’s safety has 
been compromised, the subject may be withdrawn from the study. 
Subjects may withdraw consent from the study at any time. 
Sponsor and/or investigator may discontinue any subject for non­compliance or any 
valid medical reason (see Section 8.6.2). 




Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 31 of 89 
 
  Slit­lamp biomicroscopy at Visits 1, 2, 3, 4, and 5;   
  Corneal Sensitivity at Visits 1 and 5 (Pre­CAESM); 
  Adverse event query at Visits 1, 2, 3, 4, and 5; 
  Undilated Fundoscopy at Visits 1 and 5; and;   
  Intraocular Pressure at Visits 1 and 5. 
7  STUDY MATERIALS 
7.1  Study Drug(s) 
7.1.1  Formulations 
Run­In 
Placebo Ophthalmic Solution (Vehicle) 
Randomized Study Treatments 
  0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution 
  Placebo Ophthalmic Solution (Vehicle) 
7.1.2  Dispensation Schedule 
  At the end of Visit 1, qualified subjects will receive run­in (Placebo) for 
two weeks, dosing QID until Visit 2. Subject will be instructed to dose 
in the morning, noon, afternoon, and in the evening before bed; 
 
  At the end of Visit 2, qualified subjects will be randomized and the first 
dose of study drug will be administered in office. A 2 week supply of 
0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution or Placebo Ophthalmic Solution 
will be dispensed for dosing QID. 
 
  At Visits 3, 4, and 5 remaining/used study drug will be collected from 
subjects for drug accountability. At Visit 3, subjects will be redispensed 
the same kit given to them at Visit 2. At Visit 4, subjects will receive a 
new kit with an additional 2 week supply of the same test article they 
were previously randomized to. 
 
  Subjects will be instructed to not use run­in (at Visit 2) or study drug on 
the day of visits (Visit 3, 4, and 5) prior to the visit. 
 
7.1.3  Instructions for Use 
Subjects will be instructed to dose in each eye four times daily (morning, 
noon, afternoon, and in the evening before bed). Subjects will be 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 32 of 89 
 
instructed to use a second drop only if the first drop does not fully coat the 
eye. Subjects will be given detailed instructions on study drug 
administration, accountability, and storage at each visit. 
7.2  Other Study Supplies 
Urine pregnancy tests, Schirmer’s test strips, sodium fluorescein, lissamine green, 
tear collection supplies, Fluress. 
8  STUDY METHODS AND PROCEDURES 
8.1  Subject Entry Procedures 
8.1.1  Overview 
Subjects as defined by the criteria in sections 5.2, 5.3, and 5.4 will be 
considered for entry into this study. 
8.1.2  Informed Consent 
Prior to a subject’s participation in the trial (i.e., prior to changes in a 
subject’s medical treatment and/or prior to study related procedures), the 
study will be discussed with each subject, and subjects wishing to 
participate must give written informed consent using an informed consent 
form (ICF).    The informed consent form must be the most recent version 
that has received approval/favorable review by a properly constituted 
Institutional Review Board (IRB). 
8.1.3  Washout Intervals 
Prohibited medications, treatments, and activities are outlined in the 
Exclusion Criteria (Section 5.4). 
8.1.4  Procedures for Final Study Entry 
Subjects must meet all inclusion and none of the exclusion criteria. 
8.1.5  Methods for Assignment to Treatment Groups: 
Prior to initiation of study run­in (at Visit 1), each subject who qualifies 
for entry will be assigned a screening number.    All screening numbers 
will be assigned in strict numerical sequence at a site and no numbers will 
be skipped or omitted.    If all inclusion and exclusion criteria are met at 
Visits 1 and 2, each qualifying subject will then be assigned a 
randomization number at the end of Visit 2. The Interactive Voice/Web 
Response System (IVRS/IWRS) will be used to account for the 
stratification factors.   
Subjects will be stratified using the worst eye. The worst eye is the eye 
that meets all of the inclusion criteria.    In the case that both eyes are 
eligible for analysis, the worst eye will be the eye with the largest increase 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 33 of 89 
 
in ocular discomfort from pre­CAESM 
post­
CAESM at Visit 2.    If the ocular discomfort symptom increase is the same 
in both eyes then the worst eye will be the eye with worse (higher) 
 
 staining pre­CAESM at Visit 2.    If the i
 
 staining is the same in both eyes then the right eye will be 
selected as the worst eye. 
Subject’s will be stratified by the following factors and cut­offs in the 
worst eye: 
 
1. Change Pre­CAESM 
 Post­CAESM in ocular 
discomfort (Ora Calibra Ocular™ Discomfort Scale) at Visit 2. 
 
 
2. Pre­CAESM
 fluorescein staining (Ora Calibra ™ Scale) 
at Visit 2 
 
 
Both strata will be entered into the IVRS/IWRS, which will assign the 
randomization number and the assigned kit number for the patient. The 
site staff will dispense to the patient the study kit labeled with the 
corresponding kit number. Both the randomization number and the 
dispensed study drug kit number will be recorded on the patient’s source 
document and eCRF. A new kit will be dispensed at Visits 2 and 4 based 
on the subject’s randomization. At Visit 3, the subject will be redispensed 
the Visit 2 kit. The Sponsor, Investigators, and study staff will be masked 
during the randomization process and throughout the study.   
8.2  Concurrent Therapies 
The use of any concurrent medication, prescription or over­the­counter, is to be 
recorded on the subject’s source document and corresponding electronic case report 
form (eCRF) along with the reason the medication was taken. 
Concurrent enrollment in another investigational drug or device study is not 
permitted. 
8.2.1  Prohibited Medications/Treatments 
Disallowed medications/treatments during the study are outlined in the 
Exclusion Criteria (Section 5.4).   


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 34 of 89 
 
8.2.2  Escape Medications 
No escape medications are required for this study. 
8.2.3  Special Diet or Activities 
No special diets or activities are required for this study. 
8.3  Examination Procedures 
8.3.1  Procedures to be Performed at Each Study Visit with Regard to Study 
Objective(s) 
The following procedures will be performed (see Appendix 2 for 
description): 
Visit 1 (Day ­14 ±1):    Screening 
Pre­CAESM Procedures 
  Informed consent / HIPAA; 
  Demographic data and medical / medication history; 
  Urine pregnancy test (for females of childbearing potential); 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort; 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort & 4­Symptom Questionnaire; 
  Ocular Surface Disease Index© (OSDI©); 
  Visual Acuity; 
  Review of qualification criteria; 
  Slit­lamp Biomicroscopy; 
  Tear Film Break­up Time (TFBUT)©; 
  Fluorescein staining   Ora Calibra™;   
  Lissamine Green staining   Ora Calibra™ ; 
  Corneal Sensitivity; 
  Unanesthetized Schirmer’s Test, to be performed at least 15 minutes 
after Lissamine Green staining; 
 
 CAESM exposure; 
o 
 
 
 
Post­ CAESM Procedures 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort; 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 35 of 89 
 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort & 4­Symptom Questionnaire; 
  Slit­lamp Biomicroscopy; 
  TFBUT©; 
  Fluorescein staining   Ora Calibra™;  
  Lissamine Green staining   Ora Calibra™; 
  Intraocular Pressure; 
  Undilated Fundoscopy; 
  Review of qualification criteria; 
  Adverse event query; 
  Dispensation of run­in (RUN­IN) for QID dosing until Visit 2; 
o  Subjects will be instructed to dose in each eye four times daily 
(morning, noon, afternoon, and in the evening before bed); 
  Dispensation of diaries and subject instructions;   
o  Subjects will be instructed to complete diary symptoms BID 
prior to drop instillation in the morning and evening before bed 
until Visit 2; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary QID to 
account for each dose of study drug taken; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary and dose in 
each eye in the afternoon and before bed on the evening of 
Visit 1; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary on the 
morning of their next visit (Visit 2); 
o  Subjects will be instructed to not dose with run­in on the 
morning of their next visit (Visit 2); 
  Qualified subjects will be scheduled for Visit 2. 
Visit 2 (Day 1): Confirmation/Baseline 
Pre­CAESM Procedures 
  Collection and review of run­in (RUN­IN) and subject diaries;   
  Subject will be asked if he/she dosed with run­in on the morning of the 
visit; if the subject indicates he/she dosed that morning, he/she should 
wait at least 4 hours from the time of dosing before efficacy 
assessments are performed; 
  Medical/medication history update; 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 36 of 89 
 
  Adverse event query; 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort; 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort & 4­Symptom Questionnaire; 
  OSDI©; 
  Visual Acuity; 
  Review of qualification criteria; 
  Slit­lamp Biomicroscopy; 
  Ora Calibra™ OPI 2.0; 
  TFBUT©; 
  Fluorescein staining   Ora Calibra™; 
  Lissamine Green staining   Ora Calibra™; 
  Unanesthetized Schirmer’s Test, to be performed at least 15 minutes 
after Lissamine Green staining; 
 
 CAESM exposure; 
o 
 
 
 
Post­ CAESM Procedures 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort; 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort & 4­Symptom questionnaire; 
  Slit­lamp Biomicroscopy; 
  TFBUT©; 
  Fluorescein staining   Ora Calibra™;  
  Lissamine Green staining   Ora Calibra™; 
  Adverse Event Query; 
  Review of qualification criteria; 
  Randomization & Dispensation of study drug kit according to 
randomization for QID dosing until Visit 4; 
  Tear Collection may be performed at least 30­minutes from Lissamine 
Green staining; 
  Subject self­administers first dose of study drug, OU; 
  Ora Calibra™ Drop Comfort and Questionnaire; 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 37 of 89 
 
  Subjects will be instructed to dose in each eye four times daily 
(morning, noon, afternoon, in the evening before bed); 
  Dispensation of diaries;   
o  Subjects will be instructed to complete diary symptoms BID 
prior to drop instillation in the morning and in the evening 
before bed until Visit 3; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary QID to 
account for each dose of study drug taken; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary and dose in 
each eye in the afternoon and before bed on the evening of 
Visit 2; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary on the 
morning of their next visit (Visit 3); 
o  Subjects will be instructed to not dose with study drug on the 
morning of their next visit (Visit 3); 
  Qualified subjects will be scheduled for Visit 3. 
Visit 3 (Day 8 ± 1):    1­Week Follow­Up   
  Collection and review of study drug and subject diaries; 
  Subject will be asked if he/she dosed with study drug on the morning 
of the visit; if the subject indicates he/she dosed that morning, he/she 
should wait at least 4 hours from the time of dosing before efficacy 
assessments are performed; 
  Medical / medication history update; 
  Adverse event query; 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort; 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort & 4­Symptom Questionnaire; 
  OSDI©; 
  Visual Acuity; 
  Slit­lamp Biomicroscopy; 
  TFBUT©; 
  Fluorescein staining   Ora Calibra™; 
  Lissamine Green staining   Ora Calibra™; 
  Unanesthetized Schirmer’s Test, to be performed at least 15 minutes 
after Lissamine Green staining; 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 38 of 89 
 
  Adverse Event Query; 
  Re­dispensation of study drug kit for QID dosing until Visit 4; 
  Subject self­administers dose of study drug, OU;     
  Ora Calibra™ Drop Comfort and Questionnaire; 
  Subjects will be instructed to dose in each eye four times daily (once 
in the morning, once at noon, once in the afternoon and once in the 
evening before bed); 
  Dispensation of diaries;   
o  Subjects will be instructed to complete diary symptoms BID 
prior to drop instillation in the morning and evening prior to 
bed until Visit 4; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary QID to 
account for each dose of study drug taken; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary and dose in 
each eye in the afternoon and before bed on the evening of 
Visit 3; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary on the 
morning of their next visit (Visit 4); 
o  Subjects will be instructed to not dose with study drug on the 
morning of their next visit (Visit 4); 
  Subjects will be scheduled for Visit 4. 
 
Visit 4 (Day 15 ± 1):    2­Week Follow­Up   
Pre­CAESM Procedures 
  Collection and review of study drug and subject diaries; 
  Subject will be asked if he/she dosed with study drug on the morning 
of the visit; if the subject indicates he/she dosed that morning, he/she 
should wait at least 4 hours from the time of dosing before efficacy 
assessments are performed; 
  Medical / medication history update; 
  Adverse event query; 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort; 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort & 4­Symptom Questionnaire; 
  OSDI©; 
  Visual Acuity; 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 39 of 89 
 
  Slit­lamp Biomicroscopy; 
  TFBUT©; 
  Fluorescein staining   Ora Calibra™; 
  Lissamine Green staining   Ora Calibra™; 
  Unanesthetized Schirmer’s Test,    to be performed at least 15 minutes 
after Lissamine Green staining; 
 
 CAESM exposure; 
o 
 
 
; 
Post­CAESM Procedures 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort; 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort & 4­Symptom questionnaire; 
  Slit­lamp Biomicroscopy; 
  TFBUT©; 
  Fluorescein staining   Ora Calibra™;  
  Lissamine Green staining   Ora Calibra™; 
  Tear Collection may be performed at least 30­minutes from Lissamine 
Green staining; 
  Adverse Event Query; 
  Dispensation of study drug kit according to randomization for QID 
dosing until Visit 5; 
  Subject self­administers dose of study drug, OU;     
  Ora Calibra™ Drop Comfort and Questionnaire; 
  Subjects will be instructed to dose in each eye four times daily 
(morning, noon, afternoon, and in the evening before bed); 
  Dispensation of diaries;   
o  Subjects will be instructed to complete diary symptoms BID in 
the morning and the evening before bed prior to drop 
instillation until Visit 5; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary QID to 
account for each dose of study drug taken; 
o  Subjects will be instructed to complete their diary and dose in 
each eye in the afternoon and before bed on the evening of 
Visit 4; 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 40 of 89 
 
o  Subjects will be instructed to complete their diary on the 
morning of their next visit (Visit 5); 
o  Subjects will be instructed to not dose with study drug on the 
morning of their next visit (Visit 5); 
  Subjects will be scheduled for Visit 5. 
 
Visit 5 (Day 29 ± 2): 4­Week Follow­Up and Study Exit 
Pre­CAESM Procedures 
  Collection and review of study drug and subject diaries; 
  Subject will be asked if he/she dosed with study drug on the morning 
of the visit; if the subject indicates he/she dosed that morning, he/she 
should wait at least 4 hours from the time of dosing before efficacy 
assessments are performed; 
  Medical / medication history update; 
  Adverse event query; 
  Urine pregnancy test (for females of childbearing potential); 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort; 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort & 4­Symptom Questionnaire; 
  OSDI©; 
  Visual Acuity; 
  Slit­lamp Biomicroscopy; 
  Ora Calibra™ OPI 2.0; 
  TFBUT©; 
  Fluorescein staining   Ora Calibra™; 
  Lissamine Green staining   Ora Calibra™; 
  Corneal Sensitivity; 
  Unanesthetized Schirmer’s Test, to be performed at least 15 minutes 
after Lissamine Green staining; 
 
 CAESM exposure; 
o  Ora Calibra™ Ocular Discomfort 
 
 
 
Post­CAESM Procedures 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort; 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 41 of 89 
 
  Ora Calibra™ Ocular Discomfort & 4­Symptom Questionnaire; 
  Slit­lamp Biomicroscopy; 
  TFBUT©; 
  Fluorescein staining   Ora Calibra™;  
  Lissamine Green staining   Ora Calibra™; 
  Tear Collection may be performed at least 30­minutes from Lissamine 
Green staining; 
  Intraocular Pressure; 
  Undilated Fundoscopy; 
  Adverse event query; 
  Study Exit. 
Early Termination/Discontinuation   
If a subject is discontinued from the study prior to Visit 5 (Day 29   2), 
then all safety evaluations and Pre­CAESM evaluations that are to be 
performed at Visit 5 (Day 29   2) should be performed on the day of 
discontinuation (early termination) or at the discretion of the investigator.   
Adverse Events (both elicited and observed) and SAEs will be monitored 
throughout the study.    The investigator will promptly review all adverse 
events (both elicited and observed) for accuracy and completeness.    All 
adverse events will be documented on the appropriate source document 
and case report form. 
If a female reports a pregnancy or has a positive pregnancy test during the 
study the investigator will notify Ora immediately.    The investigator shall 
request from the subject and/or the subject’s physician copies of all related 
medical reports during the pregnancy and shall document the outcome of 
the pregnancy.    The investigator will retain these reports together with 
the subject’s source documents and will provide a copy of all 
documentation to Ora. 
8.4  Schedule of Visits, Measurements and Dosing 
8.4.1  Scheduled Visits 
Refer to Appendix 1 for a schedule of visits and measurements. 
8.4.2  Unscheduled Visits 
These visits may be performed in order to ensure subject safety. All 
procedures performed at an unscheduled visit will be recorded in the 
source documents and on the Unscheduled Visit eCRF pages. Any 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 42 of 89 
 
procedure indicated in the eCRF that is not performed should be indicated 
as “Not done.” 
Evaluations that may be conducted at an Unscheduled Visit include: 
  Slit­lamp Biomicroscopy; 
  Visual Acuity; 
  Intraocular Pressure; 
  Pregnancy Test; 
  Undilated Fundoscopy; 
  Assessment of Adverse Events; 
  Assessment of concomitant medications and/or treatments; and 
  Any other assessments needed in the judgment of the investigator. 
 
8.5  Compliance with Protocol 
Subjects will be instructed on proper use of the subject daily diary and proper 
instillation and storage of study drug at the end of Visits 1, 2, 3, and 4, and given 
written instructions. The subject daily diaries and used and unused study drug vials 
will be collected at each visit from Visit 2 up to and including Visit 5 to assess dosing 
and symptom assessment compliance. Dosing compliance will be based off of the 
used and unused vial count. If the subject is less than 80% or more than 125% 
compliant with dosing based on the expected number of used vials, then the subject 
will be deemed non­compliant and a deviation should be recorded.   
In the subject daily diary, if more than 20% of Dose Taken boxes are checked “no”, 
left blank, or missing for a diary period, a subject will be deemed non­compliant and 
a diary deviation will be recorded. If more than 20% of the total diary symptom 
assessments for that dosing period are missed, these subjects will be deemed non­
compliant and a diary symptom assessment deviation will be recorded. These 
guidelines will be used by the Investigator for determining the subject’s necessary 
compliance for the study and for recording deviations from this compliance. 
8.6  Subject Disposition 
8.6.1  Completed Subjects 
A completed subject is one who has not been discontinued from the study. 
8.6.2  Discontinued subjects 
Subjects may be discontinued prior to their completion of the study due to: 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 43 of 89 
 
  adverse events; 
  protocol violations; 
  administrative reasons (e.g., inability to continue, lost to follow 
up); 
  sponsor termination of study; 
  subject choice (e.g. withdrawal of consent); and 
  other 
Note: In addition, any subject may be discontinued for any sound medical 
reason at the discretion of the investigator. 
Notification of a subject discontinuation and the reason for discontinuation 
will be made to Ora and/or study sponsor and will be clearly documented 
on the eCRF. 
Discontinued subjects will not be replaced. 
8.7  Study Termination 
The study may be stopped at any time by the investigator, the sponsor, and/or Ora 
with appropriate notification. 
8.8  Study Duration 
An individual subject’s participation will involve 5 visits over approximately a 6 
week period (42 days). 
8.9  Monitoring and Quality Assurance 
During the course of the study a monitor, or designee, will make routine site visits to 
review protocol compliance, assess study drug accountability, subject safety, and 
ensure the study is being conducted according to the pertinent regulatory 
requirements.  The review of the subjects’ medical records will be performed in a 
manner that adequately maintains subject confidentiality. Further details of the study 
monitoring will be outlined in a monitoring plan. 
Regulatory authorities of domestic and foreign agencies, Ora, Inc. quality assurance 
and or its designees may carry out on­site inspections and/or audits, which may 
include source data checks. Therefore direct access to the original source data will be 
required for inspections and/or audits. All inspections and audits will be carried out 
giving consideration to data protection as well as subject confidentiality to the extent 
that local, state, and federal laws apply. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 44 of 89 
 
9  ADVERSE EVENTS 
9.1  Adverse Event 
An adverse event is defined as any untoward medical occurrence associated with the 
use of a drug in humans, whether or not the event is considered drug­related.    An 
adverse event can therefore be any unfavorable and unintended sign (e.g., an 
abnormal laboratory finding), symptom, or disease occurring after the subject started 
dosing with the study drug, without any judgment about causality.    Any pre­existing 
medical condition that worsens after administration of the study drug will also be 
considered a new adverse event.     
If there is a worsening of a medical condition that was present prior to the 
administration of the study drug, this should also be considered a new adverse event 
and reported.    Any medical condition present prior to the administration of the study 
drug that remains unchanged or improved should not be recorded as an adverse event 
at subsequent visits. 
Study drug includes the investigational drug under evaluation and any comparator 
drug, placebo, or any other medications required by the protocol given during any 
stage of the study. 
Documentation regarding the adverse event should be made as to the nature, date of 
onset, end date, severity, relationship to study drug, action(s) taken, seriousness, and 
outcome of any sign or symptom observed by the physician or reported by the subject 
upon indirect questioning. 
9.1.1  Severity 
Severity of an adverse event is defined as a qualitative assessment of the 
degree of intensity of an adverse event as determined by the investigator 
or reported to him/her by the patient/subject.    The assessment of severity 
is made irrespective of relationship to study drug or seriousness of the 
event and should be evaluated according to the following scale: 
  Mild: Event is noticeable to the subject, but is easily tolerated and 
does not interfere with the subject’s daily activities. 
  Moderate: Event is bothersome, possibly requiring additional 
therapy, and may interfere with the subject’s daily activities. 
  Severe: Event is intolerable, necessitates additional therapy or 
alteration of therapy, and interferes with the subject’s daily 
activities. 
9.1.2  Relationship to Study Drug 
The relationship of each AE to the investigational product should be 
determined by the investigator using these explanations: 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 45 of 89 
 
  Definite: When there are good reason and sufficient 
documentation to demonstrate a direct causal relationship 
between investigational product and AE; 
  Probable: When there are good reasons and sufficient 
documentation to assume a causal relationship in the sense of 
plausible, conceivable, likely but not necessarily highly probable. 
  Possible: When there is sufficient information to accept the 
possibility of a causal relationship in the sense of not impossible 
and not unlikely, although the connection is uncertain or doubtful, 
for example; due to missing data or insufficient evidence. 
  None: When there is sufficient information to accept a lack of a 
causal relationship, in the sense of impossible and improbable. 
  Unclassified: When the causal relationship is not assessable for 
whatever reason due to insufficient evidence, conflicting data or 
poor documentation. 
9.1.3  Expectedness 
The expectedness of an adverse event should be determined based upon 
existing safety information about the study drug using these explanations: 
  Unexpected: An adverse event that is not listed in the 
Investigator’s brochure or is not listed at the specificity or severity 
that has been observed. 
  Expected: An adverse event that is listed in the Investigator’s 
brochure at the specificity and severity that has been observed. 
  Not Applicable: Any adverse event that is unrelated to the study 
drug. 
Adverse  events  that  are  mentioned  in  the  Investigator’s brochure  as 
occurring with a class of drugs or as anticipated from the pharmacological 
properties of the drug, but are not specifically mentioned as occurring with 
the particular drug under investigation are to be considered unexpected. 
The investigator should initially classify the expectedness  of an adverse 
event,  but  the  final  classification  is subject to the Medical Monitor’s 
determination. 
9.2  Serious Adverse Events 
An adverse event is considered serious if, in the view of either the investigator or 
sponsor, it results in any of the following outcomes: 
  Death; 
  A life­threatening adverse event; 
Note:    An adverse event is considered “life­threatening” if, in the view of 
either the investigator or sponsor, its occurrence places the patient or subject 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 46 of 89 
 
at immediate risk of death.    It does not include an adverse event that, had it 
occurred in a more severe form, might have caused death. 
  Inpatient hospitalization or prolongation of existing hospitalization; 
Note:    The term “inpatient hospitalization” refers to any inpatient admission 
(even if less than 24 hours).    For chronic or long­term inpatients, inpatient 
admission includes transfer within the hospital to an acute/intensive care 
inpatient unit.    Inpatient hospitalization does not include:    emergency room 
visits; outpatient/same­day/ambulatory procedures; observation/short stay 
units; rehabilitation facilities; hospice facilities; nursing homes; or clinical 
research/phase 1 units. 
Note:    The term “prolongation of existing hospitalization” refers to any 
extension of an inpatient hospitalization beyond the stay anticipated or 
required for the reason for the initial admission as determined by the 
investigator or treating physician. 
  A persistent or significant incapacity or substantial disruption of the ability to 
conduct normal life functions; 
Note:    A serious adverse event specifically related to visual threat would be 
interpreted as any potential impairment or damage to the subject’s eyes (e.g., 
hemorrhage, retinal detachment, central corneal ulcer or damage to the optic 
nerve). 
  A congenital anomaly/birth defect. 
Important medical events that may not result in death, are life­threatening, or 
require hospitalization may be considered serious when, based upon appropriate 
medical judgment, they may jeopardize the patient or subject and may require 
medical or surgical intervention to prevent one of the outcomes listed in this 
definition. 
9.3  Procedures for Reporting Adverse Events 
All adverse events and their outcomes must be reported to Ora, the study sponsor, and 
the IRB/IEC as required by the IRB/IEC, federal, state, or local regulations and 
governing health authorities and recorded on the appropriate eCRF. 
9.3.1  Reporting a Suspected Unexpected Adverse Reaction 
All adverse events that are ‘suspected’ and ‘unexpected’ are to be reported 
to Ora, the study sponsor and the IRB/IEC as required by the IRB/IEC, 
federal, state, or local regulations and governing health authorities. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 47 of 89 
 
9.3.2  Reporting a Serious Adverse Event 
To ensure subject safety, all serious adverse events, regardless of 
relationship to the study drug, must be immediately reported.    All 
information relevant to the serious adverse event must be recorded on the 
appropriate case report forms.    The investigator is obligated to pursue 
and obtain information requested by Ora and/or the sponsor in addition to 
that information reported on the case report form.    All subjects 
experiencing a serious adverse event must be followed up and the outcome 
reported. 
In the event of a serious adverse event, the investigator must notify Ora 
and the sponsor immediately; obtain and maintain in his/her files all 
pertinent medical records, information, and medical judgments from 
colleagues who assisted in the treatment and follow­up of the subject; 
provide Ora and the study sponsor with a complete case history, which 
includes a statement as to whether the event was or was not suspected to 
be related to the use of the study drug; and inform the IRB of the adverse 
event within their guidelines for reporting serious adverse events. 
Contact information for reporting Serious Adverse Events:   
Name: 
Title: 
Company: 
Office Telephone: 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Alternative Telephone: 
 
Office Facsimile: 
Name: 
Title: 
Office Telephone: 
Mobile Phone: 
Office Facsimile: 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
9.4  Procedures for Unmasking of Study Drug 
All subjects, investigators, and study personnel involved with the conduct of the study 
will be masked with regard to treatment assignments. When medically necessary, the 
investigator may need to determine what treatment arm has been assigned to a 
subject. When possible (i.e., in non­emergent situations), Ora and/or the study 
sponsor should be notified before unmasking study drug. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 48 of 89 
 
9.5  Type and Duration of the Follow­up of Subjects after Adverse 
Events 
The investigator will follow unresolved AEs to resolution until the subject is lost to 
follow­up or until the AE is otherwise classified. Resolution means the subject has 
returned to baseline state of health or the Investigator does not expect any further 
improvement or worsening of the AE. If the patient is lost to follow­up, the 
Investigator should make 3 reasonable attempts to contact the patient via telephone, 
post, or certified mail. All follow­up will be documented in the subject’s source 
document. Non­serious AEs identified on the last scheduled contact must be recorded 
on the AE eCRF with the status noted.   
If the Investigator becomes aware of any new information regarding an existing SAE 
(i.e., resolution, change in condition, or new treatment), a new SAE/Unanticipated 
Report Form must be completed and faxed to Ora within 24 hours of the site’s 
awareness of the new information. The original SAE form is not to be altered. The 
report should describe whether the event has resolved or continues and how the event 
was treated. 
10  STATISTICAL HYPOTHESES AND METHODS OF ANALYSES 
10.1  Analysis Populations 
The following analysis populations will be considered: 
  Intent­to­Treat Population   The intent­to­treat (ITT) population includes all 
randomized subjects. The primary analysis will be performed on the ITT 
population with the Last Observation Carried Forward (LOCF) imputation 
method for missing values. The ITT population may also be analyzed with 
observed data only (i.e., without LOCF) and using multiple imputation 
methods to assess sensitivity. Subjects in the ITT population will be analyzed 
as randomized. 
 
  Per Protocol Population   The per protocol (PP) population includes subjects 
in the ITT population who do not have significant protocol deviations and 
who complete the study. Protocol deviations will be assessed prior to database 
lock and unmasking. The PP population will be analyzed using observed data 
only for efficacy variables. Subjects in the PP population will be analyzed as 
randomized. 
 
  Safety Population   The safety population includes all subjects who have 
received at least one dose of the investigational product. The safety population 
will be analyzed for all safety assessments. Subjects in the Safety population 
will be analyzed as treated.   




Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
21Jul2017 V2.0 
Confidential 
Page 50 of 89 
n   the required sample size per treatment group 
z ­α   the normal probability for two­sided α (if α  0.05, then z ­α   1.96) 
z ­β   the normal probability for power β (if β  0.9, then z ­β   1.282) 
σ   the assumed common standard deviation 
D   the expected treatment difference 
With 297 subjects randomized per treatment arm, and a difference between RGN­259 and 
placebo as low as 
 the study will have 
 power to detect a treatment difference. 
This assumes a two­sided test at alpha   0.05 and a common standard deviation (SD) of 
 in both treatment arms. Accounting for up to 5% dropouts in the study, 282 subjects 
randomized per treatment arm, or 564 total subjects, will have 96.5% power to detect a 
difference for the primary endpoint. Difference and SD estimates are derived from the 
phase 2b/3 study. 
The hierarchical endpoint of the change from baseline in 
 staining at Day 
29 pre­CAESM is also considered in terms of statistical power. It is assumed that 
(
 completed subjects accounting for 5% dropouts) of the subjects will have a baseline 
. This endpoint will be tested conditionally upon the primary 
endpoint being successful, thereby maintaining the study­wide type I error rate for both 
endpoints. With a sample size of 
 subjects per treatment arm with a 
 (
 of the randomized subjects) the study will have 94% power to detect a 
difference as low as 
 between RGN­259 and placebo. This assumes a two­sided test 
at alpha   0.05 and a common SD of 
 in both treatment arms. To show a range of 
power using the same assumptions and accounting for fewer subjects with a 
, if only 
 of subjects (
 completed subjects per treatment arm) have a 
baseline 
 then the study will have 
 power to detect a treatment 
difference between RGN­259 and placebo. Difference and SD estimates are derived from 
the phase 2b/3 study, 
 
 
10.4  Statistical Analysis 
10.4.1  General Considerations 
The quantitative variables will be summarized using number of subjects 
(n), mean, median, standard deviation, minimum and maximum. The 
qualitative variables will be summarized using counts and percentages.   
All summaries will be presented by treatment group. Summaries will be 
provided for demographics, baseline medical history, concurrent therapies, 
and subject disposition. 
For the purpose of summarization, medical history, concurrent therapies, 
and adverse events will be coded to MedDRA and WHO Drug 
dictionaries, as appropriate. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 51 of 89 
 
Baseline measures are defined as the last measure prior to the initiation of 
study treatment, usually at Visit 2. If a measure is taken both pre­CAESM 
and post­CAESM, the baseline will be the time point matched value at Visit 
2. For measures from daily subject diaries, baseline is defined as the 
average of all days during the run­in period, where daily scores are first 
obtained by averaging the AM and PM scores for that day, as applicable. 
For changes from pre­CAESM to post­CAESM post first treatment, the 
change from pre­CAESM to post­CAESM at Visit 2 will be considered the 
baseline value. 
All primary and secondary analyses will be 2­sided at a significance level 
of 0.05. 
10.4.2  Unit of Analysis 
Safety endpoints will be analyzed for both eyes. For efficacy endpoints, 
the unit of analysis will be the “worst eye” as defined by the following: 
Study eye (worst eye): Eyes are eligible for analysis if they meet all of the 
inclusion criteria. In the case that both eyes are eligible for analysis, the 
study eye will be the eye with worst change in pre­ to post­CAESM ocular 
discomfort 
 at Visit 2. If the increase in 
ocular discomfort is the same in both eyes then the study eye will be the 
eye with the largest pre­CAESM 
 fluorescein staining at 
Visit 2. If the change in ocular discomfort and the pre­CAESM 
 
 fluorescein staining is the same in both eyes then the right eye will 
be selected as the study eye. 
10.4.3  Missing Data 
The primary efficacy analyses will be performed using the Last 
Observation Carried Forward (LOCF) imputation method for missing 
values. For the analysis of total corneal fluorescein staining at Day 29 
(Visit 5), the last value from the previous visits will be carried forward, 
matching pre­CAESM or post­CAESM time points. A pre­CAESM time point 
will never be imputed for a post­CAESM value, and vice versa.         
For the analysis of ocular discomfort scores at Day 29 (Visit 5), the last 
value from the previous visits will be carried forward, matching pre­
CAESM or post­CAESM time points similar to the imputation method for 
total corneal fluorescein staining. A pre­CAESM time point will never be 
imputed for a post­CAESM value, and vice versa.   
An analysis using observed data at Day 29 (Visit 5) only will also be 
performed. Additionally, Markov Chain Monte Carlo (MCMC) multiple 
imputation methodology will be used to impute missing data for the 
analyses of the primary efficacy variables. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 52 of 89 
 
No secondary efficacy endpoints or safety endpoints will be imputed. 
10.4.4  Multiplicity Consideration 
To maintain a type I error rate of 5% over the two comparisons of the 
active treatment group to placebo, a hierarchical testing procedure will be 
used for the primary endpoints. First, the change from baseline in the 
change from pre­ to post­CAESM ocular discomfort at Day 29 for 0.1% 
RGN­259 ophthalmic solution will be tested versus placebo at   
α  0.05. If there is a significant difference in this discomfort endpoint, 
then the hierarchical endpoint, the change from baseline in pre­CAESM 
 staining for 0.1 % RGN­259 ophthalmic 
solution will be tested versus placebo at α  0.05.  
For the sign endpoint to be considered successful significance is required 
for the primary symptom; therefore, the family­wise error rate is 
maintained at 0.05 through this fixed sequence testing. 
10.4.5  Primary Efficacy Analyses 
Change from baseline in ocular discomfort change from pre­ to post­
CAESM at Day 29 (Visit 5) using the Ora Calibra™ Ocular Discomfort 
Scale will be calculated as: 
(OD  at Day 29   OD  at Day 29)   (OD  at Baseline   OD  at Baseline) 
Where OD    Ocular discomfort at 
 in CAESM (pre­CAESM) and 
OD
 Ocular discomfort at 
 post­CAESM 
With this calculation, a positive change indicates a worsening of dry eye 
symptoms compared to baseline. In addition, treatment comparisons 
between active and placebo will be calculated as active   placebo, such 
that a negative result indicates a better score for the active treatment (i.e., 
the active treatment had a smaller increase in dry eye symptoms during the 
CAE compared to baseline than the placebo group). 
ANCOVA models will be used to compare the change from baseline to 
Day 29 (Visit 5) in the change from pre­CAESM to post­CAESM in ocular 
discomfort, as measured on the Ora Calibra™ Ocular Discomfort Scale, 
between 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution and Placebo. The 
ANCOVA models will include terms for baseline change from pre­CAESM 
to post­CAESM ocular discomfort and study site. In addition, the study site 
by treatment interaction will be explored in a separate model to evaluate 
how the treatment effect may differ across study sites. The primary 
analysis will use LOCF imputation to have a full accounting of the ITT 
population at the Day 29 visit. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 53 of 89 
 
Sensitivity analyses will be performed on the ITT and PP populations 
using observed data only, and on the ITT population imputing missing 
data using multiple imputation methods. 
10.4.6  Hierarchical Efficacy Analysis 
Change from baseline to Visit 5 (Day 29) in 
 fluorescein 
staining (pre­CAESM) is the hierarchical primary endpoint. 0.1% RGN­259 
will be compared to placebo 
 
   
. It is assumed that 
 of enrolled subjects will have 
 (also based on Phase 2/3 study). 
An ANCOVA model will be used to compare the change from baseline to 
Day 29 (Visit 5), between 0.1% RGN­259 and placebo. The ANCOVA 
model will include terms for baseline 
 staining and study 
site. In addition, the study site by treatment interaction will be explored in 
a separate model to evaluate how the treatment effect may differ across 
study sites. The primary hierarchical analysis will use LOCF imputation to 
have a full accounting of the ITT population at the Day 29 visit. 
Sensitivity analyses will be performed following the same strategy as the 
primary endpoint. Observed values at each visit and time point, as well as 
changes during CAESM and changes from baseline, will also be analyzed 
to support the primary results. 
10.4.7  Secondary Efficacy Analyses 
The continuous and ordinal secondary efficacy variables collected at each 
visit will be summarized descriptively (n, mean, standard deviation, 
median, min and max), and analyzed with two­sample t­tests comparing 
each of the active treatment groups to placebo. All visit­based data will be 
analyzed at each visit and change from baseline. A Wilcoxon rank sum 
test and an ANCOVA model adjusting for baseline and site will also be 
assessed where appropriate. No imputation will be performed for 
secondary efficacy variables. 
Corneal fluorescein staining by region and total, lissamine green staining 
by region, TFBUT, ocular protection index, un­anesthetized Schirmer’s 
test, Drop comfort assessment, OSDI©, ocular discomfort and dry eye 
symptoms, and changes from baseline in these measures will be analyzed 
by visit using two­sample t­tests and Wilcoxon rank sum tests, as 
appropriate.     
The worst symptom for each subject will be identified as the symptom 
with the highest daily average score during the run­in period (Days ­14 to 
­1) as recorded in the subject diary. The worst symptom and each 
individual symptom will be analyzed using a two­sample t­test. This 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 54 of 89 
 
analysis will be completed separately for the morning and evening scores 
as well as the daily average score. Additionally, the average score for each 
time point (morning, evening before bed and daily average) will also be 
analyzed separately using a Wilcoxon rank sum test.   
10.4.8  Safety Variables 
Adverse events will be coded using the MedDRA dictionary.   
Frequencies and percentages of subjects with treatment­emergent adverse 
events (TEAEs), serious TEAEs, and TEAEs causing premature 
discontinuation will be provided by treatment group. An AE is treatment 
emergent if it occurs or worsens after the first dose of study treatment. 
Furthermore, frequencies will be given of subjects with TEAEs by system 
organ class, by system organ class and preferred term, by system organ 
class, preferred term and maximal severity, by system organ class, 
preferred term and strongest relationship, and by system organ class, 
preferred term, maximal severity, and strongest relationship. Separate 
analyses will be performed for ocular specific and all AEs (including 
systemic). 
Other safety endpoints including visual acuity, slit­lamp biomicroscopy, 
corneal sensitivity, undilated fundoscopy, and intraocular pressure will be 
summarized by treatment group and visit using descriptive statistics.   
Changes or shifts from baseline will also be summarized where 
appropriate. For assessments performed by eye, study eye and fellow eye 
will be summarized separately. In addition, shifts from baseline to worst 
on­treatment value for ocular safety assessments will be summarized.     
A full statistical analysis plan (SAP) will be finalized before database lock 
and unmasking. 
10.4.9  Interim Analyses 
No interim analyses are planned for this study. 
11  COMPLIANCE WITH GOOD CLINICAL PRACTICES, 
ETHICAL CONSIDERATIONS, AND ADMINISTRATIVE 
ISSUES 
This study will be conducted in compliance with the protocol, Good Clinical Practices 
(GCPs), including the International Conference on Harmonization (ICH) Guidelines, and 
in general, consistent with the Declaration of Helsinki. In addition, all applicable local, 
state, and federal requirements relevant to the use of study drugs in the countries involved 
will be adhered to. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 55 of 89 
 
11.1  Protection of Human Subjects 
11.1.1  Subject Informed Consent 
Informed consent/assent must take place before any study specific 
procedures are initiated. Signed and dated written informed consent must 
be obtained from each subject and/or from the subject’s parent or legal 
guardian prior to enrollment into the study. If the subject is under the legal 
age of consent, the consent form must be signed by a legal guardian or as 
required by state and/or local laws and regulations. 
All informed consent/assent forms must be approved for use by the 
sponsor and receive approval/favorable opinion from an IRB/IEC prior to 
their use. If the consent form requires revision (e.g., due to a protocol 
amendment or significant new safety information), it is the investigator’s 
responsibility to ensure that the amended informed consent is reviewed 
and approved by Ora prior to submission to the governing IRB/IEC and 
that it is read, signed and dated by all subjects subsequently enrolled in the 
study as well as those currently enrolled in the study. 
If informed consent is taken under special circumstances (oral informed 
consent), then the procedures to be followed must be determined by Ora 
and/or study sponsor and provided in writing by Ora and/or study sponsor 
prior to the consent process. 
11.1.2  Institutional Review Board (IRB) Approval 
This study is to be conducted in accordance with Institutional Review 
Board regulations (U.S. 21 CFR Part 56.103). The investigator must 
obtain appropriate IRB approval before initiating the study and re­
approval at least annually. 
Only an IRB/ERC approved version of the informed consent form will be 
used. 
11.2  Ethical Conduct of the Study 
This study will be conducted in accordance with the ethical principles that originated 
with the Declaration of Helsinki. 
11.3  Subject Confidentiality 
All personal study subject data collected and processed for the purposes of this study 
should be maintained by the investigator and his/her staff with adequate precautions 
as to ensure that the confidentiality of the data in accordance with local, state, and 
federal laws and regulations. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 56 of 89 
 
Monitors, auditors and other authorized representatives of Ora, the sponsor, the 
IRB/IEC approving this study, the FDA, the DHHS, other domestic government 
agencies, and other foreign regulatory agencies will be granted direct access to the 
study subject’s original medical and study records for verification of the data and/or 
clinical trial procedures. Access to this information will be permitted to the 
aforementioned individuals to the extent permitted by law. 
A report of the results of this study may be published or sent to the appropriate health 
authorities in any country in which the study drug may ultimately be marketed, but 
the subject’s identity will not be disclosed in these documents. 
11.4  Documentation 
Source documents may include a subject’s medical records, hospital charts, clinic 
charts, the investigator’s study subject files, as well as the results of diagnostic tests 
such as X­rays, laboratory tests, and EKGs. The investigator’s copy of the Case 
Report Forms serves as the investigator’s record of a subject’s study­related data. 
11.4.1  Retention of Documentation 
All study related correspondence, subject records, consent forms, record of 
the distribution and use of all study drug and copies of case report forms 
should be maintained on file for at least two years after the last approval of 
a marketing application in an ICH region and until there are no pending or 
contemplated marketing applications in an ICH region; or until at least 
two years have elapsed since the formal discontinuation of clinical 
development of the study drug. These documents will be retained for a 
longer period if required by the applicable regulatory requirements or by 
an agreement with the sponsor. It is the responsibility of the sponsor to 
inform the investigator/institution as to when these documents no longer 
need to be retained. 
If the responsible investigator retires, relocates, or for other reasons 
withdraws from the responsibility of keeping study records, custody must 
be transferred to a person who will accept the responsibility. The sponsor 
must be notified in writing of the name and address of the new custodian. 
11.5  Labeling, Packaging, Storage, Accountability, and Return or 
Disposal of Study Drug 
11.5.1  Labeling/Packaging 
Investigational drug will be packaged and labeled into clinical kits. 
For the run­in period, 
 pouches will be packaged in a 2­week clinical 
kit. Each pouch will contain   single­use vials and provide a sufficient 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 57 of 89 
 
medication supply for one day. The 
 vial in each pouch will be not used 
by the study subject and returned to the clinical site. 
For the treatment period, 
 pouches will be packaged in a 2­week clinical 
kit. Each pouch will contain   vials and provide a sufficient supply of 
randomized study drug for one day. The 
 vial in each pouch will be not 
used by the study subject and returned to the clinical site. 
11.5.2  Storage of Study Drug 
The study drugs must be stored in a secure area accessible only to the 
investigator and his/her designees. Study drug(s) must be refrigerated (2­
8°C, Do Not Freeze), protected from light, and secured at the 
investigational site in a locked container.   
11.5.3  Accountability of Study Drug 
The study drugs are to only be prescribed by the principal investigator or 
his/her named sub investigator(s), and is to only be used in accordance 
with this protocol. The study drugs must only be distributed to subjects 
properly qualified under this protocol to receive study drug. The 
investigator must keep an accurate accounting of the study drugs by 
maintaining a detailed inventory. This includes the amount of study drugs 
received by the site, amount dispensed to subjects, amount returned to the 
site by the subjects, and the amount returned to the Sponsor upon the 
completion of the study.  
11.5.4  Return or Disposal of Study Drug 
All study drugs will be returned to the sponsor or their designee for 
destruction. 
11.6  Recording of Data on Source Documents and Electronic Case 
Reports Forms (eCRFs) 
All subject data will be captured in the subject source documents which will be 
transcribed in the eCRFs. The investigator is responsible for ensuring that study data 
is completely and accurately recorded on each subject’s eCRF, source documents, 
and all study­related materials. All study data should also be attributable, legible, 
contemporaneous, and original. Recorded datum should only be corrected in a 
manner that does not obliterate, destroy, or render illegible the previous entry (e.g., by 
drawing a single line through the incorrect entry and writing the revision next to the 
corrected data). An individual who has corrected a data entry should make clear who 
made the correction and when, by adding to the correction his/her initials as well as 
the date of the correction.   
Data entry of all enrolled and randomized subjects will use software that conforms to 
21 CFR Part 11 requirements, and will be performed only by staff who have been 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 58 of 89 
 
trained on the system and have access to the system. Data will not be entered for 
screen failure subjects. An audit trail will be maintained within the electronic system 
to capture all changes made within the eCRF database. After the end of the study and 
database lock, compact discs (CDs) containing copies of all applicable subjects’ 
eCRFs will be provided to each Investigator Site to be maintained on file by the 
Investigator. 
11.7  Handling of Biological Specimens 
Tear samples will be submitted to a central laboratory and / or analytical laboratory 
for processing, storage and analysis. All laboratories meet Good Laboratory Practice 
requirements. Details of sample collection, handling, storage, and shipping 
procedures are found in an appropriate study procedure manual 
11.8  Publications 
Authorship and manuscript composition will reflect cooperation among all parties 
involved in the study. Authorship will be established before writing the manuscript. 
The study sponsor and Ora will have the final decision regarding the manuscript and 
publication. 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 59 of 89 
 
 
12  REFERENCES 
  Brewitt, H. and F. Sistani (2001). "Dry eye disease: the scale of the problem." Surv 
Ophthalmol 45 Suppl 2: S199­202. 
 
Dunn SP, Heidemann DG, Chow CY, Crockford D, Turjman N., Angel J., Allan CB, 
Sosne G. 2010. Treatment of Chronic Nonhealing Neurotrophic Corneal Epithelial 
Defects with Thymosin Beta 4. Ann NY Acad. Sci. 2010 Apr;1194:199­206 
Cavasin MA. 2006. Therapeutic potential of thymosin beta 4 and its derivative N­acetyl­
seryl­aspartyl­lysyl­proline (Ac­SDKP) in cardiac healing after infarction. American J 
Cardiovasc Drugs. 6: 305­311. 
Goldstein AL, Hannappel E, Kleinman HK 2005. Thymosin 4: actin­sequestering 
protein moonlights to repair injured tissues. Trends Mol. Med. 11:421­429. 
Huff T, Otto AM, Müller CS, Meier M, Hannappel E. 2002. Thymosin beta 4 is released 
from human blood platelets and attached by factor XIIIa (transglutaminase) to fibrin and 
collagen. FASEB J. 16:691­696. 
Peng H, Carretero AA, Brigstock DR, Oja­Tebbe N, Rhaleb NE. 2003. Ac­SDKP reverse 
cardiac fibrosis in rates with renovascular hypertension. Hypertension. 42:1164­1170. 
Qiu P, Kurpakus­Wheater M, Sosne G. 2007. Matrix metallopreoteinase activity is 
necessary for thymosin beta 4 promotion of epithelial cell migration. J. Cell Physiol. 
212:165­73. 
Ruff D, Crockford D, Girardi G, Zhang Y. 2010. A randomized, placebo­controlled, 
single and multiple dose study of intravenous thymosin beta 4 in healthy volunteers. Ann 
N.Y. Acad. Sci. 1194:223­229. 
Schaumberg, D. A., R. Dana, J. E. Buring and D. A. Sullivan (2009). "Prevalence of dry 
eye disease among US men: estimates from the Physicians' Health Studies." Arch 
Ophthalmol 127(6): 763­768. 
 
Schaumberg, D. A., D. A. Sullivan and M. R. Dana (2002). "Epidemiology of dry eye 
syndrome." Adv Exp Med Biol 506(Pt B): 989­998. 
 
Schaumberg, D. A., D. A. Sullivan, J. E. Buring and M. R. Dana (2003). "Prevalence of 
dry eye syndrome among US women." Am J Ophthalmol 136(2): 318­326. 
 
Sosne G, Christopherson PL, Barrett RP, Fridman R. 2005. Thymosin beta 4 modulates 
corneal matrix metalloproteinase levels and polymorphonuclear cell infiltration after 
alkali injury. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 46:2388­95. 
Sosne G,    Hafeez S, Greenberry II AL, Kurpakus­Wheater M. 2002. Thymosin β4 
promotes human conjunctival epithelial cell migration. Cur. Eye Res. 24:268­273.       


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 60 of 89 
 
 
Sosne G,    Lihua Xu, Prach L, Mrock LK, Kleinman HK, Letterio JJ, Hazlett LD, 
Kurpakus­Wheater M. 2004. Thymosin β4 stimulates laminin­5 production independent 
of TGF­beta. Exp. Cell Res. 293:175­183. 
Sosne G, Qiu P, Christopherson PL, Wheater MK. 2007. Thymosin beta 4 suppression of 
corneal NFKappaB: a potential anti­inflammatory pathway. Exp. Eye Res. 84:663­9. 
Sosne G, Qiu P, Goldstein AL, Wheater M.2010. Biological activities of thymosin 
{beta}4 defined by active sites in short peptide sequences. FASEB J. 2010 24:2144­51. 
 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 61 of 89 
 
 
13  APPENDICES 
Appendix 1:    Schedule of Visits and Measurements 
Procedure 
 
Visit 1 
Day ­14 ± 1 
 
 
Visit 2 
Day 1 
 
 
Visit 3 
Day8 ± 1 
 
 
Visit 4 
Day15 ± 1 
 
 
Visit 5 
Day 29 ±2 
 
 
Pre   
CAESM 
Post   
CAESM 
Pre 
CAESM 
Post 
CAESM 
 
Pre 
CAESM 
Post   
CAESM 
Pre 
CAESM 
Post   
CAESM 
Informed Consent / HIPAA 
X 
 
 
 
 
 
 
 
 
Medical / Medication History 
and Demographic 
X 
 
 
 
 
 
 
 
 
Run in Placebo Collection 
 
 
X 
 
 
 
 
 
 
Study Drug Collection 
 
 
 
 
X 
X 
 
X 
 
Diary Collection 
 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
Medical / Medication History 
Update 
 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
Adverse Event Query 
 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
Pregnancy Test 
X1 
 
 
 
 
 
 
X1 
 
Ocular Discomfort   Ora, 
Calibra™ / Dry Eye 
Symptoms   
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
OSDI© Questionnaire 
X 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
Visual Acuity (ETDRS) 
X 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
Review of Qualification 
Criteria 
X 
X 
X 
X 
 
 
 
 
 
Slit lamp Biomicroscopy 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 62 of 89 
 
 
Ocular Protection Index (OPI 
2.0)  Ora Calibra™ Scale 
 
 
X 
 
 
 
 
X 
 
TFBUT© 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
Fluorescein Staining Ora 
Calibra™ Scale 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
Lissamine Green Staining Ora 
Calibra™ Scale 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
Corneal Sensitivity (Cochet
Bonnet) 
X 
 
 
 
 
 
 
X 
 
Unanesthetized Schirmer’s 
Test 
X 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
CAESM Exposure 
X 
X 
 
X 
X 
CAESM Discomfort  Ora 
Calibra™ Ocular Disc. Scale 
X2 
X2 
 
X2 
X2 
Tear Collection 
 
 
 
X3 
 
 
X3 
 
X3 
Intraocular Pressure 
 
X 
 
 
 
 
 
 
X 
Undilated Fundus Exam 
 
X 
 
 
 
 
 
 
X 
Run in Placebo Dispensation 
 
X 
 
 
 
 
 
 
 
Randomization   
 
 
 
X 
 
 
 
 
 
Subject Self instillation of 
study drug 
 
 
 
X 
X 
 
X 
 
 
Ora Calibra™ Drop Comfort 
Assessment 
 
 
 
X 
X 
 
X 
 
 
Study Drug Dispensation 
 
 
 
X 
X4 
 
X 
 
 
Diary Dispensation 
 
X 
 
X 
X 
 
X 
 
 
Exit Subject from Study 
 
 
 
 
 
 
 
 
X 
 
X1   For females of childbearing potential, X2       
 
 CAESM exposure, X3   Tears may be collected after 
a 30 minute wait period from lissamine instillation, X4   IP will be collected and re dispensed at 
visit 3.   


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 63 of 89 
 
Appendix 2:    Examination Procedures, Tests, Equipment, and 
Techniques 
The following examination procedures, tests, equipment and techniques are listed in this 
Appendix: 
Visual Acuity Procedures ................................................................................................. 64 
Slit­lamp Biomicroscopy .................................................................................................. 66 
Ora CalibraTM Ocular Discomfort Scale ........................................................................... 67 
Ora CalibraTM Ocular Discomfort & 4­Symptom Questionnaire ..................................... 68 
Ocular Surface and Disease Index (OSDI) © .................................................................... 69 
Ora Calibra™ Ocular Protection Index (OPI) 2.0 System ............................................... 71 
Tear Film Break­Up Time (TFBUT) © ............................................................................. 72 
Fluorescein Staining.......................................................................................................... 73 
Ora CalibraTM Corneal and Conjunctival Staining Scale .................................................. 74 
Lissamine Green Staining ................................................................................................. 75 
Ora CalibraTM Corneal and Conjunctival Staining Scale .................................................. 76 
Unanesthetized Schirmer’s Test ....................................................................................... 77 
Tear Collection.................................................................................................................. 78 
Procedure for Evaluating Intraocular Pressure ................................................................. 79 
Procedure for Evaluating Corneal Sensitivity ................................................................... 80 
Procedure for Conducting Undilated Fundoscopy ............................................................ 81 
Drop Comfort Assessments .............................................................................................. 82 
Subject Diary .................................................................................................................... 83 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 64 of 89 
 
Visual Acuity Procedures 
This procedure will be performed according to Ora, Inc. SOPs and/or guidance 
documents. 
LogMAR Visual Acuity (VA) must be assessed using an ETDRS chart. The procedure 
used will be consistent with the recommendations provided for using the ETDRS eye 
chart. Visual Acuity should be evaluated at the beginning of each visit in the study (i.e., 
prior to slit­lamp examination). Subjects should use most recent correction to attain their 
best­ corrected visual acuity (BCVA). 
Equipment 
The visual acuity chart to be used is the ETDRS chart. If smaller reproduction (18" by 
18", e.g., from Prevent Blindness) wall charts are used, the subject viewing distance 
should be exactly 10 feet (or as specified by the manufacturer). In ALL cases, for 
purposes of standardizing the testing conditions during the study, all sites must use only 
ETDRS Series 2000 Chart 1 & 2, and the right eye (OD) should be tested first. For 
reflectance (wall) charts, the chart should be placed frontally and well illuminated. 
Measurement Technique 
The chart should be at a comfortable viewing angle. The right eye should be tested first. 
The subject should attempt to read each letter, line­by­line, left to right, beginning with 
line 1 at the top of the chart. The subject should be told that the chart has letters only, no 
numbers. If the subject reads a number, he/she should be reminded that the chart contains 
no numbers, and the examiner should then request a letter in lieu of the number. The 
subject should be asked to read slowly, so as to achieve the best identification of each 
letter. He/she is not to proceed to the next letter until he/she has given a definite response. 
If the subject changes a response (e.g., 'that was a "C" not an "O"') before he/she has read 
aloud the next letter, then the change must be accepted. If the subject changes a response 
having read the next letter, then the change is not accepted. The examiner should never 
point to the chart or to specific letters on the chart during the test. 
A maximum effort should be made to identify each letter on the chart. When the subject 
says he/she cannot read a letter, he/she should be encouraged to guess. If the subject 
identifies a letter as one of two letters, he/she should be asked to choose one letter and, if 
necessary, to guess. When it becomes evident that no further meaningful readings can be 
made, despite encouragement to read or guess, the examiner should stop the test for that 
eye. However, all letters on the last line should be attempted as letter difficulties vary and 
the last may be the only one read correctly. The number of letters missed or read 
incorrectly should be noted. 
LogMAR Visual Acuity Calculations 
The last line in which a letter is read correctly will be taken as the base logMAR reading. 
To this value will be added the number "N x 0.02" where 'N' represents the total number 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 65 of 89 
 
of letters missed up to and including in the last line read. This total sum represents the 
logMAR visual acuity for that eye. 
For Example: Subject correctly reads 4 of 5 letters on the 0.2 line, and 2 of 5 letters on 
the 0.1 line. 
Base logMAR 
 0.1 
N (total number of letters incorrect on 
line 0.2 as well as 0.1) 
 4 
N x T (T 0.02) 
 0.08 
Base logMAR + (N x T) 
 0.1 + 0.08 
logMAR VA 
 0.18 
 
Repeat the procedure for the left eye (OS). 
In order to provide standardized and well­controlled assessments of visual acuity during 
the study, all visual acuity assessments at a single site must be consistently done using the 
same lighting conditions and same correction if possible during the entire study. If the 
same correction cannot be used (i.e., a subject forgets his/her glasses), the reason for the 
change in correction should be documented. 
Note: A clinically significant visual acuity decrease (defined as an increase of 0.22 or 
greater in logMAR score) from baseline (Visit 1) will be considered an Adverse Event. 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 66 of 89 
 
Slit­lamp Biomicroscopy 
Slit­lamp biomicroscopy will be performed during the study. Observations will be graded 
as Normal or Abnormal. Abnormal findings, which are clinically significant, will be 
described. The following will be examined at each visit:     
  Cornea   
  Conjunctiva   
  Anterior Chamber 
  Iris 
  Lens 
  Lid 
External magnification and biomicroscopy will be performed using a slit­lamp. 
Magnification will be consistent with standard clinical practice. The subject will be 
seated. 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 67 of 89 
 
Ora CalibraTM Ocular Discomfort Scale   
Ocular discomfort scores will be subjectively graded by the subjects according to the 
following scale, rating each eye separately.     
 
 
 
 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 68 of 89 
 
Ora CalibraTM Ocular Discomfort & 4­Symptom Questionnaire 
 
 
   
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
  
 
 
 
 
 
 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 69 of 89 
 
Ocular Surface and Disease Index (OSDI) © 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 70 of 89 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 71 of 89 
 
Ora Calibra™ Ocular Protection Index (OPI) 2.0 System 
 
A new, automated methodology will be used to simultaneously measure blink rate, blink 
pattern, and tear film stability. The system consists of a novel blink pattern recognition 
and tear film stability device. Together, these tools provide a measure of tear film 
stability as a percent measure of the area of tear film break up (OPI) and Inter Blink 
Interval (IBI) caused by corneal drying.   
Following instillation of 5 μL of 2% preservative­free sodium fluorescein solution into 
the inferior conjunctival cul­de­sac, the subject will be asked to blink several times to 
mix the fluorescein with the tear film. The subject will be instructed to watch television 
while their tear films are recorded using the EYECAP IM 900 camera system for one 
minute. A 15 frame per second video of the fluorescent eye under visual task is taken. 
Subsequently, a computer program will be used to analyze the area of cornea with broken 
tear film on a frame by frame basis. From this program, IBI and OPI are calculated and 
produced as assessments of the level of drying of the ocular surface. 
 
 
 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 72 of 89 
 
Tear Film Break­Up Time (TFBUT) © 
The examiner will instill 
solution into 
the inferior conjunctival cul­de­sac of each eye.    To thoroughly mix the fluorescein with 
the tear film, the subject will be instructed to blink several times.    In order to achieve 
maximum fluorescence, the examiner should wait approximately 
 
 after 
instillation before evaluating TFBUT.       
With the aid of a slit­lamp, the examiner will monitor the integrity of the tear film, noting 
the time it takes to form micelles from the time that the eye is opened.    TFBUT will be 
measured in seconds using a stopwatch for the right eye followed by the left eye. A 
Wratten #12 yellow filter will be used to enhance the ability to grade TFBUT.     
For each eye, two measurements will be taken and averaged unless the two measurements 
are > 2 seconds apart and are each < 10 seconds, in which case, a third measurement 
would be taken and the two closest of the three would be averaged. 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 73 of 89 
 
Fluorescein Staining   
The examiner will instill 
 solution into 
the inferior conjunctival cul­de­sac of each eye. In order to achieve maximum 
fluorescence, the examiner should wait approximately 
 after instillation 
before evaluating fluorescein staining. A Wratten #12 yellow filter will be used to 
enhance the ability to grade fluorescein staining. The staining will be graded with the Ora 
CalibraTM Corneal and Conjunctival Staining Scale. Digital images of fluorescein 
staining may be taken for digital analysis. 








Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 77 of 89 
 
Unanesthetized Schirmer’s Test 
Schirmer Tear Test will be performed according to the following procedure: 
  Using a sterile Tear Flo Schirmer test strip (Rose Enterprises), a bend in the strip 
will be made in line with the notch in the strip 
  The subject will be instructed to gaze up and in 
  The Schirmer test strip will be placed in the lower temporal lid margin of each 
eye such that the strip fits tightly. Subjects will be instructed to close their eyes 
  After 5 minutes have elapsed, the Schirmer strip will be removed. The length of 
the moistened area will be recorded (mm) for each eye 
 
 




Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 79 of 89 
 
 
Procedure for Evaluating Intraocular Pressure 
Intraocular pressure (IOP) will be measured in each eye by contact tonometry by the 
examiner and the results will be recorded in mmHg at Visits 1 and 5, and potentially at an 
Early Termination Visit.   A single measurement is made to obtain a determination of 
IOP.   The same tonometer employing the Investigator’s standard technique will be used 
throughout the study.   In addition, all reasonable efforts will be made to have the same 
examiner obtain all IOP measurements for a given subject. 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 80 of 89 
 
Procedure for Evaluating Corneal Sensitivity 
The aesthesiometer (Cochet Bonnet) is a nylon thread contained in a pen like case that 
can be extended specific distances from the tip of the case. The following steps will be 
followed by the examiner for evaluating corneal sensitivity: 
1.  Remove Cochet Bonnet from box 
2.  Extend the filament to 60 mm (the filament should not have bends in it   if it does, 
the readings will be incorrect and the filament should not be used) 
3.  The examiner will inform the subject that a thin delicate plastic filament will be used 
to test their corneal sensitivity and that they will feel the sensation similar to a strand 
of hair on their eye. (If the subject is hesitant, a spot on the subject’s hand will be 
cleaned with an alcohol pad and the filament touched to the hand to demonstrate the 
painless contact) 
4.  The examiner will instruct the subject to say “Yes” when they feel sensation on their 
eyeball   
5.  The examiner will place their free hand on the cheek below the eye being measured to 
stabilize subject’s head position 
6.  The examiner will position their hand with the device such that the filament is normal 
(90 degree angle with corneal surface). The device should be between the examiner’s 
index, middle finger, and thumb. 
7.  The examiner will extend fingers such that the filament applies gentle pressure on the 
central corneal surface. The examiner will then ask subject if they can perceive the 
filament touching the central corneal surface. 
a.  If the subject responds “Yes”, the examiner will ensure the response is valid by 
performing a sham (not touching the cornea) application and also confirm that 
response was not due to eyelids touching the filament.   
b.  If the subject responds “No”, then the filament is shortened the length by 5mm 
and reapplied to the cornea 
c.  If the subject responds “Yes”, record length; if the subject responds “No”, go to   
step b. 
8.  Step 7 is repeated three times. 
9.  The filament is retracted such that only 10 mm are exposed 
10. The tip is wiped with an alcohol pad gently ENSURING that it does NOT bend the 
filament   
11. The alcohol is allowed to dry before reusing device (alcohol can cause corneal 
abrasions) 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 81 of 89 
 
Procedure for Conducting Undilated Fundoscopy 
An undilated fundoscopy exam will be performed during the study at Visits 1 and 5, and 
potentially at an Early Termination Visit. Observations will be graded as Normal or 
Abnormal. Abnormal findings will be described. The following will be examined:     
  Vitreous 
  Retina 
  Macula 
  Choroid 
  Optic Nerve 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 82 of 89 
 
Drop Comfort Assessments 
This procedure will be performed according to Ora, Inc. SOPs and/or guidance 
documents. 
Subject­Reported Drop Comfort Scale:   
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Subject­Reported Drop Comfort Questionnaire: 
 
 
Ora CalibraTM Drop Comfort Questionnaire: 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 


Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 83 of 89 
 
Subject Diary 
Subjects will be instructed to complete diary prior to dosing in the morning and evening 
before bed. Subjects will also indicate if their dose was taken. 
 
 
 




Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 85 of 89 
 
11 12 
 
 
 
 
 
 
 
 
   
 
 
 
 
 
 
 
     
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
   
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
   
 
 
     
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Updated per enrollment 
increase 




Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 87 of 89 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
   
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
88, 89 
 
 
Updated document 
version date 
 
 
 




Clinical Trial Protocol # RGN­259/16­110­0008 
Sponsor: ReGenTree, LLC. 
 
21Jul2017 V2.0 
 
Confidential                                                                                                    Page 89 of 89 
 
Appendix 5:  Investigator’s Signature 
Protocol Title: 
A Multi­Center, Randomized, Double Masked, Placebo Controlled 
Clinical Study to Assess the Safety and Efficacy of 0.1% RGN­259 
Ophthalmic Solutions for the Treatment of Dry Eye Using the 
Controlled Adverse Environmental (CAESM) Model (ARISE­2) 
Protocol Number: RGN­259/16­110­0008 
Final Date: 21 July 2017 
I agree to implement and conduct the study diligently and in strict compliance with the 
protocol, good clinical practices and all applicable laws and regulations.    I agree to 
maintain all information supplied by Ora and the sponsor in confidence and, when this 
information is submitted to an Institutional Review Board (IRB), Ethical Review 
Committee (ERC) or another group, it will be submitted with a designation that the 
material is confidential. 
I have read this protocol in its entirety, including the above statement, and I agree to all 
aspects. 
Signed: 
 
 
Date:   
 
 
Name:   
 
 
 
Title:   
 
 
 
Site:   
 
 
 
Address:   
 
 
 
Phone Number:   
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

SAP_001.pdf: 
(NCT02974907)




Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 3 of 37 
 
 
Table of Contents 
1. 
Introduction .............................................................................................................................. 7 
2. 
Study Objectives ...................................................................................................................... 7 
3. 
Study Variables ........................................................................................................................ 7 
3.1 Primary Variables ..................................................................................................................... 7 
3.2 Secondary Variables ................................................................................................................ 7 
3.3 Safety Variables ....................................................................................................................... 8 
3.4 Statistical Hypotheses .............................................................................................................. 8 
4. 
Study Design and Procedures ................................................................................................. 9 
4.1 General Study Design .............................................................................................................. 9 
4.2 Schedule of Visits and Assessments ..................................................................................... 11 
5. 
Study Treatments ................................................................................................................... 13 
5.1 Method of Assigning Subjects to Treatment Groups ............................................................. 13 
5.2 Masking and Unmasking ........................................................................................................ 13 
6. 
Sample Size and Power Considerations ............................................................................... 14 
7. 
Data Preparation .................................................................................................................... 14 
7.1 CDISC Compliance ................................................................................................................ 15 
8. 
Analysis Populations .............................................................................................................. 15 
8.1 Intent­to­Treat ........................................................................................................................ 15 
8.2 Per Protocol ........................................................................................................................... 16 
8.3 Safety ..................................................................................................................................... 16 
9. 
General Statistical Considerations ......................................................................................... 16 
9.1 Unit of Analysis ...................................................................................................................... 16 
9.2 Missing or Inconclusive Data Handling .................................................................................. 16 
9.3 Definition of Baseline ............................................................................................................. 17 
9.4 Data Analysis Conventions .................................................................................................... 17 
9.5 Adjustments for Multiplicity .................................................................................................... 18 
9.6 Early Termination Visits ......................................................................................................... 18 
10. 
Disposition of Subjects ........................................................................................................... 18 
11. 
Demographic and Pretreatment Variables ............................................................................. 19 
11.1 Demographic Variables .......................................................................................................... 19 
11.2 Pretreatment Variables and Baseline Disease Characteristics ............................................. 19 
12. 
Medical History, Prior and Concomitant Medications ............................................................ 19 
12.1 Medical History ...................................................................................................................... 19 
12.2 Concomitant Medications ....................................................................................................... 20 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 4 of 37 
 
13. 
Dosing Compliance and Treatment Exposure ....................................................................... 20 
13.1 Dosing Compliance ................................................................................................................ 20 
13.2 Treatment Exposure .............................................................................................................. 21 
14. 
Efficacy Analyses ................................................................................................................... 21 
14.1 Primary Analyses ................................................................................................................... 21 
14.2 Secondary Analyses .............................................................................................................. 24 
15. 
Exploratory Analyses ............................................................................................................. 29 
16. 
Safety Analyses ..................................................................................................................... 29 
16.1 Adverse Events ...................................................................................................................... 29 
16.2 Visual Acuity (ETDRS) ........................................................................................................... 32 
16.3 Slit­Lamp Biomicroscopy ....................................................................................................... 33 
16.4 Undilated Fundoscopy ........................................................................................................... 33 
16.5 Intraocular Pressure (IOP) ..................................................................................................... 33 
16.6 Corneal Sensitivity (Cochet­Bonnet) ...................................................................................... 33 
17. 
Interim Analyses .................................................................................................................... 34 
18. 
Changes from Protocol­Stated Analyses ............................................................................... 34 
19. 
References ............................................................................................................................. 34 
20. 
Tables .................................................................................................................................... 35 
21. 
Listings ................................................................................................................................... 36 
22. 
Figures ................................................................................................................................... 37 
 
 
 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 5 of 37 
 
List of Abbreviations 
Abbreviation 
Definition 
ADaM 
Analysis Dataset Model 
AE 
Adverse Event 
ANCOVA 
Analysis of Covariance 
ATC 
Anatomical Therapeutic Chemical 
BCVA 
Best Corrected Visual Acuity 
CAESM 
Controlled Adverse Environment 
CDISC 
Clinical Data Interchange Standards Consortium 
CRF 
Case Report Form 
CS 
Clinically Significant 
CSR 
Clinical Study Report 
eCRF 
Electronic Case Report Form 
EDC 
Electronic Data Capture 
ETDRS 
Early Treatment of Diabetic Retinopathy Study 
HIPAA 
Health Information Portability and Accountability Act 
IBI 
Inter­blink Interval 
ICH 
International Conference on Harmonization 
IOP 
Intraocular Pressure 
ITT 
Intent­to­Treat 
IVRS/IWRS 
Interactive Voice/Web Response System 
LOCF 
Last Observation Carried Forward 
logMAR 
Logarithm of the Minimum Angle of Resolution 
MCMC 
Markov Chain Monte Carlo 
MedDRA 
Medical Dictionary for Regulatory Activities 
NCS 
Not clinically significant 
OPI 
Ocular Protection Index 
OSDI 
Ocular Surface Disease Index© 
PDF 
Portable Document Format 
PP 
Per Protocol 
PT 
Preferred Term 
QID 
Four Times a Day 
RTF 
Rich Text Format 
SAE 
Serious Adverse Event 
SAP 
Statistical Analysis Plan 
SD 
Standard Deviation 
SDC 
Statistics and Data Corporation, Incorporated 
SDTM 
Study Data Tabulation Model 
SOC 
System Organ Class 
TEAE 
Treatment­Emergent Adverse Event 
TESAE 
Treatment­Emergent Serious Adverse Event 
TFBUT 
Tear Film Break­up Time 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 6 of 37 
 
Abbreviation 
Definition 
ADaM 
Analysis Dataset Model 
VA 
Visual Acuity 
 
 
 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 7 of 37 
 
1.  Introduction 
The purpose of this statistical analysis plan (SAP) is to describe the planned analyses and reporting for 
protocol RGN­259/16­110­0008, version 2.0 dated 21JUL2017.  
This SAP is being written with due consideration of the recommendations outlined in the most recent 
International Conference on Harmonization (ICH) E9 Guideline entitled Guidance for Industry: Statistical 
Principles  for  Clinical  Trials  and  the  most  recent  ICH  E3  Guideline,  entitled  Guidance  for  Industry: 
Structure and Content of Clinical Study Reports. 
This SAP describes the data that will be analyzed and the subject characteristics, efficacy, and safety 
assessments that will be evaluated. This SAP provides details of the specific statistical methods that will 
be  used.  The  statistical  analysis  methods  presented  in  this  document  will  supersede  the  statistical 
analysis methods described in the clinical protocol. If additional analyses are required to supplement 
the planned analyses described in this SAP they may be completed and will be identified in the clinical 
study report (CSR). 
2.  Study Objectives 
The objective of this study is to compare the safety and efficacy of 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution 
to placebo for the treatment of the signs and symptoms of dry eye. 
3.  Study Variables 
3.1 
Primary Variables 
The primary efficacy variable is the change from baseline in ocular discomfort change from pre­CAESM 
to post­CAESM 
 at Day 29 (Visit 5) using the Ora Calibra M Ocular Discomfort 
Scale. 
The primary hierarchical efficacy variable is the change from baseline in inferior corneal staining at Day 
29 pre­CAESM 
 
 
using the Ora Calibra M Scale.  
3.2 
Secondary Variables 
The secondary efficacy variables are listed below. 
• 
Corneal fluorescein staining (Ora Calibra M Scale) at Visits 3, 4, and 5 (change from pre­CAESM  
to  post­CAESM,  pre­  and  post­CAESM;  regions: 
 
 
• 
Corneal fluorescein staining (Ora Calibra M Scale) at Visits 3, 4, and 5 (change from pre­CAESM 
to  post­CAESM,  pre­  and  post­CAESM;  regions: 
 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 8 of 37 
 
 
 
• 
Lissamine green staining (Ora Calibra M Scale) at Visits 3, 4, and 5 (change from pre­CAESM to 
post­CAESM,pre­ and post­CAESM; regions: 
) 
• 
Tear film break­up time at Visits 3, 4, and 5 (pre­ and post­CAESM) 
• 
Ocular Protection Index (OPI) 2.0 at Visit 5 (pre­CAESM) 
• 
Unanesthetized Schirmer’s Test at Visit 5 (pre­CAESM) 
• 
Drop comfort assessment after randomization at Visit 2 
• 
Ocular Surface Disease Index© (OSDI) at Visits 3, 4, and 5 (pre­CAESM) 
• 
Ora Calibra™ Ocular Discomfort and 4­Symptom Questionnaire at Visits 3, 4, and 5 (change 
from pre­CAESM to post­CAESM, pre­ and post­CAESM) 
• 
Ora Calibra™ Ocular Discomfort Scale at Visits 3, 4, and 5 (change from pre­CAESM to post­
CAESM, pre­ and post­CAESM) 
• 
Ocular discomfort during CAESM exposure at Visits 4 and 5 
• 
Daily diary 
3.3 
Safety Variables 
The safety variables include the following: 
• 
Adverse event (AE) query at Visits 1, 2, 3, 4 and 5 
• 
Visual acuity (ETDRS) at Visits 1, 2, 3, 4 and 5 
• 
Slit­lamp biomicroscopy at Visits 1, 2, 3, 4 and 5 
• 
Corneal sensitivity at Visits 1 and 5 (pre­CAESM) 
• 
Undilated fundoscopy at Visits 1 and 5 
• 
Intraocular pressure (IOP) at Visits 1 and 5 (post­CAESM) 
 
3.4 
Statistical Hypotheses 
The statistical hypotheses are stated in terms of one­sided hypotheses, although statistical testing will 
be two­sided. 
H01: There is no difference between RGN­259 Ophthalmic Solution (0.1%) and placebo in the 
change from baseline in ocular discomfort change from pre­CAESM 
to post­CAESM 
 at Day 29 (Visit 5) using the Ora Calibra M Ocular Discomfort Scale. 
H11: The change from baseline in ocular discomfort change from pre­CAESM 
 to post­
CAESM 
 at Day 29 (Visit 5) using the Ora Calibra M Ocular Discomfort Scale is less 
with RGN­259 Ophthalmic Solution (0.1%) than with placebo. 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 9 of 37 
 
H02: There is no difference between RGN­259 Ophthalmic Solution (0.1%) and placebo in the 
change from baseline in inferior corneal staining at Day 29 (Visit 5) pre­CAESM 
 
 
 
 
H12: The change from baseline in inferior corneal staining at Day 29 (Visit 5) pre­CAESM
 
 
 
 
 
with RGN­259 Ophthalmic Solution (0.1%) than with placebo. 
To maintain a type I error rate of 5% over the comparison of the active treatment group to placebo, a 
hierarchical testing procedure will be used for the primary endpoints. First, change from baseline in 
ocular discomfort for 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution change from pre­CAESM 
 to post­
CAESM 
 at Day 29 (Visit 5) will be tested versus placebo at α = 0.05. If there is a significant 
difference in change from baseline in ocular discomfort between 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution 
and placebo, then the change from baseline in inferior corneal staining at Day 29 (Visit 5)  pre­CAESM 
for 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution will be tested versus placebo at α = 0.05 
 
 
  
4.  Study Design and Procedures 
4.1 
General Study Design 
This  is  a  phase  3,  multicenter,  randomized,  double­masked,  placebo  controlled  safety  and  efficacy 
study. It consists of two treatment arms, 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution and placebo ophthalmic 
solution, randomized in a 1:1 ratio. There are five scheduled visits over approximately 6 weeks (43 days 
including screening), with approximately 800 subjects being screened in order to enroll 594 subjects 
(approximately 297 subjects per treatment arm). This study will consist of two periods: a 14­day run­in 
period, during which subjects will instill placebo four times a day (QID; morning, noon, afternoon and 
evening) in both eyes, and a 28­day treatment period, during which subjects will instill randomized study 
medication QID in both eyes. Visit 1 (Day ­14) is the screening visit. Subjects will be challenged for 
 
 in the Controlled Adverse Environment (CAESM) model and will be assessed for eligibility. At 
Visit 2 (Day 1), subjects will be reassessed for eligibility, re­challenged for 
 in the CAESM 
model, and have baseline measures assessed. Eligible subjects will be randomized to receive one of 
the  two  study  drugs.  Randomized  subjects  will  then  begin  using  study  drug  bilaterally  QID  for 
approximately 4 weeks. At the conclusion of 2 and 4 weeks of treatment (Visit 4 [Day 15] and Visit 5 
[Day 29, study exit]), subjects will be challenged for 
 in the CAESM model. 
Study visits will be referred to in all tables and listings as the expected study day corresponding to the 
visit to  enable reviewers to understand the assessment timing  without referring to the protocol  visit 
schedule. Note that there is no Day  0; Day ­1  is directly followed by Day  1. Also, note that Day  1 
corresponds  to  the  day  of  randomization  and  where  most  baseline  measurements  are  taken.  The 






Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 12 of 37 
 
 
CAESM D scomfort – Ora Ca bra™ Ocu ar D scomfort Sca e 
X2 
X2 
 
X2 
X2 
Tear Co ect on  
 
 
 
X3 
 
 
X3 
 
X3 
Intraocu ar Pressure 
 
X 
 
 
 
 
 
 
X 
Und ated Fundus Exam 
 
X 
 
 
 
 
 
 
X 
Run­ n P acebo D spensat on 
 
X 
 
 
 
 
 
 
 
Random zat on  
 
 
 
X 
 
 
 
 
 
Subject Se f­ nst at on of study drug 
 
 
 
X 
X 
 
X 
 
 
Ora Ca bra™ Drop Comfort Assessment 
 
 
 
X 
X 
 
X 
 
 
Study Drug D spensat on 
 
 
 
X 
X 
 
X 
 
 
D ary D spensat on 
 
X 
 
X 
X4 
 
X 
 
 
Ex t Subject from Study 
 
 
 
 
 
 
 
 
X 
X1 = For fema es of ch dbear ng potent a , X2 = 
 
 X3= Tears may be co ected after a 30 m nute wa t per od from  ssam ne  nst at on, X4 = Invest gat ona  product w  be co ected and 
re­d spensed at V s t 3. 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 13 of 37 
 
5.  Study Treatments 
The  study  treatments  are  0.1%  RGN­259  Ophthalmic  Solution  and  placebo  ophthalmic  solution 
(vehicle). 
5.1 
Method of Assigning Subjects to Treatment Groups 
Prior to initiation of study run­in (at Visit 1), each subject who qualifies for entry will be assigned a 
screening number. All screening numbers will be assigned in strict numerical sequence at a site and no 
numbers will be skipped or omitted. If all inclusion and exclusion criteria are met at Visits 1 and 2, each 
qualifying subject will then be assigned a randomization number at the end of Visit 2. The Interactive 
Voice/Web Response System (IVRS/IWRS) will be used to account for the stratification factors.  
Subjects will be stratified using the worst eye. The worst eye is the eye that meets all of the inclusion 
criteria. In the case that both eyes are eligible for analysis, the worst eye will be the eye with the largest 
increase in ocular discomfort from pre­CAESM 
to post­CAESM 
 at Visit 2. If the 
ocular discomfort symptom increase is the same in both eyes then the worst eye will be the eye with 
worse (higher) inferior corneal staining pre­CAESM at Visit 2. If the 
 is the same 
in both eyes then the right eye will be selected as the worst eye. 
Subject’s will be stratified by the following factors and cut­offs: 
1. Change from pre­CAESM 
 to post­CAESM 
 in ocular discomfort (Ora 
Calibra Ocular™ Discomfort Scale) at Visit 2 (Day 1). 
 
  
2. Pre­CAESM inferior corneal fluorescein staining (Ora Calibra™ Scale) at Visit 2 (Day 1). 
 
 
5.2 
Masking and Unmasking 
This is a double­masked study. All subjects, investigators, and study personnel involved with the conduct 
of the study will be masked with regard to treatment assignments for the duration of the study. The 
randomization schedule was created by an unmasked statistician who is not otherwise involved in the 
conduct of the study.  
Under  normal  circumstances,  the  mask  should  not  be  broken.  When  medically  necessary,  the 
investigator may need to determine what treatment arm has been assigned to a subject. When possible 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 14 of 37 
 
(i.e., in non­emergent situations), Ora and/or the study Sponsor should be notified before unmasking 
study drug. Any required unmasking should be performed through the process setup with the IWRS. 
6.  Sample Size and Power Considerations 
The  study  is  expected  to  enroll  297  subjects  in  each  of  the  two  treatment  arms  for  a  total  of  594 
randomized subjects. Assuming a 5% drop out rate, 282 subjects per group are expected to complete 
the study.  
With 297 subjects randomized per treatment arm, and a difference between RGN­259 and placebo as 
low as 
 the study will have 
 power to detect a treatment difference. This assumes a two­
sided test at α = 0.05 and a common standard deviation (SD) of 
 in both treatment arms. Accounting 
for up to 5% dropouts in the study, 282 randomized subjects per treatment arm, or 564 total subjects 
are required to have 
 power to detect a difference for the primary endpoint. Difference and SD 
estimates are derived from the phase 2b/3 study. 
The hierarchical endpoint of the change from baseline in inferior corneal staining at Day 29 (Visit 5)  pre­
CAESM is also considered in terms of statistical power. It is assumed that 50% (
 of 282 completed 
subjects accounting for 5% dropouts) of the subjects will have a baseline tear 
. 
This  endpoint  will  be  tested  conditionally  upon  the  primary  endpoint  being  successful,  thereby 
maintaining the study­wide type I error rate for both endpoints. With a sample size of 141 subjects per 
treatment arm with a 
 will yield 
 power to detect a difference as low as 
 
between 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution and placebo. This assumes a two­sided test at α = 0.05 
and a common SD of 
 in both treatment arms. To show a range of power using the same assumptions 
and accounting for fewer subjects with a 
, if only 
 of subjects (
 completed 
subjects per treatment arm) have a baseline 
 then the study will have 
 power 
to  detect  a  treatment  difference  between  RGN­259  and  placebo.  Difference  and  SD  estimates  are 
conservatively derived from the phase 2b/3 study, 
 
7.  Data Preparation 
All reported study data will be recorded on the electronic case report form (eCRF) supplied by Statistics 
and Data Corporation (SDC) using iMedNet™. Only the Principal Investigator and authorized study staff 
according to the Delegation of Responsibilities log are entitled to make entries in the eCRF. 
Diary data will be collected from subjects at the protocol specified visits and entered by the site staff.  
After data are entered into the clinical study database, electronic edit checks and data review will be 
performed. All data validation specifications and procedures are detailed in the Data Validation Manual 
as a separate document. When the database has been declared to be complete and accurate, the 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 15 of 37 
 
database will be locked. Any changes to the database after data have been locked can only be made 
with the approval of the Sponsor and Ora in consultation with SDC.  
All analyses outlined in this document will be carried out after the following have occurred: 
• 
All data management requirements are met according to SDC standard operating procedures, 
including data entry, performance of edit and validation checks, documentation and resolution 
of data queries, and database lock with written authorization provided by appropriate SDC and 
Sponsor personnel; 
• 
Protocol deviations have been identified and status defined (major/minor deviations);  
• 
Analysis populations have been determined; and 
• 
Randomized treatment codes have been unmasked. 
7.1 
CDISC Compliance 
The raw data collected in the iMedNet database and it will be transformed into submission­ready, 
SDTM and analysis datasets (ADaM). To comply with CDISC Standards the below steps will be 
followed: 
• 
Raw data will be transformed using the Study Data Tabulation Model (SDTM) Implementation 
Guide version 3.2.  
• 
SDTM will be transformed into analysis datasets via the Analysis Dataset Model (ADaM) 
Implementation Guide version 1.1.  
• 
For submission purposes, the SDTM and ADaM metadata will be described within define.xml 
following Define­XML 2.0 Specifications.  
• 
SDTM and ADaM datasets and the define.xml documents will be validated with Pinnacle 21 
version 2.2.0. 
8.  Analysis Populations 
The statistical analysis of safety data will be performed for the safety population. The analysis of baseline 
and  efficacy  data  will  be  performed  for  the  Intent­To­Treat  (ITT)  population.  The  primary  efficacy 
analyses will also be performed on the Per Protocol (PP) population as sensitivity analyses 
8.1 
Intent­to­Treat 
The ITT population includes all randomized subjects. The primary analysis will be performed on the ITT 
population with the Last Observation Carried Forward (LOCF) imputation method for missing values. 
The ITT population may also be analyzed with observed data only (i.e., without LOCF) and using multiple 
imputation methods to assess sensitivity. Subjects in the ITT population will be analyzed as randomized. 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 16 of 37 
 
8.2 
Per Protocol 
The  PP  population  includes  subjects  in  the  ITT  population  who  do  not  have  significant  protocol 
deviations and complete the study. Protocol deviations will be assessed prior to database lock and 
unmasking. The PP population will be analyzed using observed data only for efficacy variables. Subjects 
in the PP population will be analyzed as randomized. 
8.3 
Safety 
The safety population includes all subjects who have received at least one dose of the investigational 
product.  The  safety  population  will  be  analyzed  for  all  safety  assessments.  Subjects  in  the  Safety 
population will be analyzed as treated. 
9.  General Statistical Considerations 
All primary and secondary analyses will be 2­sided at a significance level of 0.05. 
9.1 
Unit of Analysis 
Safety endpoints will be analyzed for both eyes. For efficacy endpoints, the unit of analysis will be the 
study eye, or “worst eye,” as defined by the following: 
Study eye (worst eye): Eyes are eligible for analysis if they meet all of the inclusion criteria. In the case 
that both eyes are eligible for analysis, the study eye will be the eye with worst change in pre­ to post­
CAESM ocular discomfort at Visit 2. If the increase in ocular discomfort is the same in both eyes then the 
study eye will be the eye with the largest pre­CAESM 
 at Visit 2. If the change in 
ocular discomfort and the pre­CAESM 
 is the same in both eyes then the right eye 
will be selected as the study eye. 
Additionally, non­ocular AEs and medical history will be presented at the subject level. Non­study eye 
safety summaries will also be presented as appropriate. 
9.2 
Missing or Inconclusive Data Handling 
The primary efficacy analyses will be performed using the LOCF imputation method for missing values. 
For the analysis of ocular discomfort scores at Day 29 (Visit 5), the last value from the previous visits 
will be carried forward, matching pre­CAESM 
 or post­CAESM 
 time points. A pre­
CAESM time point will never be imputed for a post­CAESM value, and vice versa. The change from pre­ 
to post­CAESM (
) will be carried forward from the last visit with a calculable 
change from pre­ to post­CAESM, rather than calculating the change from the carried forward pre­ and/or 
post­CAESM values. For the analysis of inferior corneal fluorescein staining at Day 29 (Visit 5), the last 
pre­CAESM value from the previous visits will be carried forward.    


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 17 of 37 
 
An analysis using observed data at Day 29 (Visit 5) only will also be performed. Additionally, Markov 
Chain Monte Carlo (MCMC) multiple imputation methodology will be used to impute missing data for the 
analyses of the primary efficacy variables. 
No secondary efficacy endpoints or safety endpoints will be imputed. 
9.3 
Definition of Baseline 
Baseline measures are defined as the last measure prior to the initiation of study treatment, usually at 
Visit 2 (Day 1). If a measure is taken both pre­CAESM and post­CAESM, the baseline will be the time point 
matched value at Visit 2. For measures from daily subject diaries, baseline is defined as the average of 
all days during the run­in period, where daily scores are first obtained by averaging the morning and 
evening scores for that day, as applicable. The change from pre­CAESM to post­CAESM at Visit 2 will be 
considered the baseline value for visits 4 and 5 change from pre­CAESM to post­CAESM, unless any of 
the Visit 2 data is missing. 
9.4 
Data Analysis Conventions 
All data analysis will be performed by SDC after the study is completed and the database has been 
locked and released for unmasking. Statistical programming and analyses will be performed using SAS® 
Version 9.4 or higher. Output will be provided in rich text format (RTF) format for tables and portable 
document format (PDF) format for tables, listings, and figures using landscape orientation.  All study 
data will be listed by subject, treatment, visit (as applicable), and time point (as applicable) based on all 
randomized subjects unless otherwise specified. 
Summaries for quantitative variables will include the number of observations (n), arithmetic mean, SD, 
median, minimum, and maximum. Minima and maxima will be reported with the same precision as the 
raw values. Means and medians will be rounded to one decimal more than the collected data; SDs will 
be rounded to two decimal places more than the collected data. Summaries for qualitative variables will 
include frequency counts and percentages. All percentages will be rounded to one decimal place (i.e., 
XX.X%). Differences between active treatment groups and placebo will be calculated as active minus 
placebo and change from baseline will be calculated as follow­up visit minus baseline.  
All statistical tests will be two­sided with a significance level of 0.05 (α = 0.05). Confidence intervals (CI) 
will be two­sided at 95% confidence. All p­values will be rounded to four decimal places; p­values less 
than 0.0001 will be presented as “<0.0001”; p­values greater than 0.9999 will be presented as “>0.9999”. 
Unless otherwise specified, summaries will be presented by treatment group and, where appropriate, 
visit and time point. 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 18 of 37 
 
9.5 
Adjustments for Multiplicity 
To maintain a type I error rate of 5% over the two comparisons of each active treatment group to placebo, 
a hierarchical testing procedure will be used for the primary endpoints. First, the change from baseline 
in the change from pre­ to post­CAESM ocular discomfort for 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution will be 
tested versus placebo at α = 0.05. If there is a significant difference in change from baseline ocular 
discomfort between 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution and placebo, then change from baseline in 
pre­CAESM inferior corneal fluorescein staining for 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution will be tested 
versus placebo at α = 0.05.  
For the sign endpoint to be considered successful, significance is required for the primary symptom; 
therefore, the family­wise error rate is maintained at 0.05 through this fixed sequence testing. 
9.6 
Early Termination Visits 
Early  termination  visits  and  data  are  captured  in  EDC  as  Visit  5  data  regardless  of  when  the  visit 
occurred. Any early termination visit will be mapped to a scheduled visit if the visit date occurs within 
the scheduled visit window.  If there are more than one visit in a visit window or the visit is outside the 
visit window, then the visit is mapped to an unscheduled visit. If an assessment is performed at an early 
termination visit but it was not part of the planned assessments for the scheduled visit, then the data for 
that early termination visit will be presented in the listings but will not be summarized in the tables. 
10. Disposition of Subjects 
Subject disposition will be presented in terms of the numbers and percentages of subjects who were 
screened failures, randomized, completed the study, and discontinued from the study. The total number 
of screened subjects will be displayed in a table with the reason for screen failure displayed in number 
and percentage of screen failure subjects. Percentages will be calculated using total number of screen 
failures as the denominator. Subjects who are not discontinued from the study will be considered study 
completers. Disposition will be summarized by treatment group and for all subjects. 
The number of subjects in each of the analysis populations (ITT, PP, and Safety) will be displayed by 
treatment and percentages will be calculated using randomized subjects as the denominator. 
The number and percentage of subjects with protocol deviations, including any deviation (major and 
minor)  will  be  summarized  by  treatment  group  for  all  randomized  subjects.  A  subject  listing  will  be 
provided  that  includes  the  date  of  deviation,  deviation  description  and  classification  of  whether  the 
deviation was judged to be major or minor. 
The number and percentage of subjects prematurely discontinued from the study and the reasons for 
study discontinuation will be summarized by treatment group for all randomized subjects. The reasons 
for  study  discontinuation  that  will  be  summarized  include:  adverse  events  (AE),  protocol  violation, 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 19 of 37 
 
administrative reasons, Sponsor termination of study, subject choice and other. A subject listing will be 
provided that includes the date of and reason for premature study discontinuation. 
In addition, subject listings will be provided that include informed consent date, protocol violations, and 
exclusions from the PP population. 
11. Demographic and Pretreatment Variables 
11.1 
Demographic Variables 
The  demographic  variables  collected  in  this  study  include  age,  sex,  race,  ethnicity,  and  iris  color. 
Subjects who record more than one race will be grouped into a single category denoted as multi­racial. 
Demographic variables will be summarized for the ITT and Safety populations, separately. 
Age (years) will be summarized, overall and by treatment, using continuous descriptive statistics. Age 
will also be categorized as follows: <65 years and ≥65 years. Age will be reported in years and calculated 
using the following formula: 
Age = (informed consent date – date of birth) / 365.25 truncated as an integer  
The number and percentage of subjects will be presented, overall and by treatment, for age category, 
sex, race, ethnicity and iris color (by worst eye).  
No statistical inference testing will be performed for the demographic variables. A subject listing that 
includes all demographic variables will be provided. 
11.2 
Pretreatment Variables and Baseline Disease Characteristics 
Baseline dry eye signs and symptoms will be summarized for the worst eye by randomized treatment 
for the ITT population. These will include baseline inferior and total sum fluorescein staining and ocular 
discomfort (Ora Calibra M Ocular Discomfort Scale) with subgroups matching the randomization strata, 
lissamine green staining 
 TFBUT, unanesthetized Schirmer’s test, and OSDI. If signs 
or symptoms were performed both pre­ and post­CAESM at Visit 2, then both time points will be presented 
for the baseline summary. 
A subject listing that includes all pretreatment variables will be provided. 
12. Medical History, Prior and Concomitant Medications 
12.1 
Medical History 
Medical history will be coded using the Medical Dictionary for Regulatory Activities (MedDRA) Version 
19.1. 
Non­ocular medical history  will be summarized using discrete summary statistics and presented by 
treatment group at the subject and event level by System Organ Class (SOC) and Preferred Term (PT) 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 20 of 37 
 
using the Safety population. Ocular medical history will be similarly summarized at the subject level. If 
a subject reports the same PT multiple times within the same SOC, that PT will only be reported once 
within that SOC. As with the PT, if a subject reports multiple conditions within the same SOC, that SOC 
will only be reported once.  
Listings of medical history will be generated separately for ocular and non­ocular data. 
12.2 
Concomitant Medications 
Prior and Concomitant medications will be coded using the World Health Organization Drug Dictionary 
(Enhanced  B2,  September  2016)  and  summarized  to  the  therapeutic  drug  class  (Anatomical 
Therapeutic Chemical (ATC) 4 classification) and preferred name (generic drug name). 
Concomitant  medications  are  defined  as  those  medications  listed  as  having  been  taken  1)  prior  to 
initiation  of  study  drug  administration  and  continuing  for  any  period  of  time  following  the  first 
administration  of  study  drug  or  2)  at  any  time  following  the  first  administration  of  study  drug.  Prior 
medications are defined as those medications listed as having been taken prior to initiation of study drug 
administration, but not taken after initiation of study drug administration. 
Both ocular and non­ocular concomitant medications will be summarized using the Safety population. 
Medications will be tabulated for each treatment group using frequencies and percentages. Subjects 
may have more than 1 medication per ATC 4 classification. At each level of subject summarization, a 
subject will be counted once if he/she reports 1 or more medications. Percentages will be based on the 
number of subjects in each treatment group.  
Listings of concomitant medications will be generated separately for ocular and non­ocular data. 
13. Dosing Compliance and Treatment Exposure 
13.1 
Dosing Compliance 
Dosing compliance (% compliance) will be assessed by calculating the number of actual doses received 
and comparing that to the number of expected doses as follows: 
Compliance (%) = 
Number of Actual Doses Received 
x 100% 
Number of Expected Doses 
The number of actual doses received will be calculated based on the drug accountability case report 
form (CRF) pages, using the number of used vials/bottles as the number of doses received. The number 
of expected doses that will be used for calculating compliance will be calculated as: 4 x [(date of last 
dose – date of Visit 2 [Day 1]) +1] – 2 x [the number of attended visits from Visit 2 – Visit 4] for all 
subjects. Subtracting 2 times the number of attended visits will account for subjects not dosing on the 
day of a visit prior to the visit, on average.  


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 21 of 37 
 
A  categorical  dosing  compliance  variable  will  also  be  derived  as  non­compliant  (<80%),  compliant 
(≥80% and ≤125%) and over compliant (>125%). 
Dosing compliance (%) will be summarized with continuous descriptive statistics for each treatment 
group,  using  the  ITT  population.  The  compliance  category  defined  above  will  be  summarized  with 
discrete summary statistics.  
A subject listing of dosing compliance will also be produced. 
13.2 
Treatment Exposure 
Extent of treatment exposure for completed or discontinued subjects will be calculated in days using the 
following: 
Extent of Exposure (days) = (Date of last dose – date of Visit 2 [Day 1]) + 1 
Extent of treatment exposure for subjects who were lost to follow­up will be calculated in days using the 
following: 
Extent of Exposure (days) = (Date of last recorded visit – date of Visit 2 [Day 1]) + 1 
Extent of treatment exposure (days) for each subject exposed to study drug will be summarized with 
continuous descriptive statistics for each treatment group, using the Safety population. A subject listing 
of treatment exposure will also be produced. 
14. Efficacy Analyses 
14.1 
Primary Analyses 
Ocular discomfort will be assessed pre­CAESM 
and post­CAESM 
 for both eyes 
at Visit 1 (Day ­14), Visit 2 (Day 1, prior to treatment), Visit 4 (Day 15) and Visit 5 (Day 29). The 5­unit 
scale  for  subject  evaluation  of  ocular  discomfort  is  given  by  the  following:  0
 
 
as measured  on  the  Ora  Calibra™  Ocular  Discomfort  Scale.  The  worst  eye  (defined  in 
Section 9.1) from each subject will be used for this analysis. 
The primary analysis, change from baseline in ocular discomfort change from pre­CAESM 
 to 
post­CAESM 
 at Day 29 (Visit 5) using the Ora Calibra™ Ocular Discomfort Scale, will be 
calculated as: 
(OD
 at Day 29 – OD  at Day 29) – (OD
 at Baseline – OD  at Baseline) 
where OD0 = Ocular discomfort at 
 in CAESM (pre­CAESM) and OD
 = Ocular discomfort at 
 
 post­CAESM.  


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 22 of 37 
 
With  this  calculation,  a  positive  change  indicates  a  worsening  of  dry  eye  symptoms  compared  to 
baseline. In addition, treatment comparisons between active and placebo will be calculated as active 
minus placebo, such that a negative result indicates a better score for the active treatment (i.e., the 
active treatment had a smaller increase in dry eye symptoms during the CAESM compared to baseline 
than the placebo group). 
Analysis of Covariance (ANCOVA) models will be used to compare the change from baseline to Day 29 
(Visit 5) in the change from pre­ to post­CAESM in ocular discomfort, as measured on the Ora Calibra™ 
Ocular Discomfort Scale, between 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution and placebo. The ANCOVA 
models will include terms for baseline change from pre­ to post­CAESM ocular discomfort and study site. 
In addition, the study site by treatment interaction will be explored in a separate model to evaluate how 
the treatment effect may differ across study sites. In the case of a significant interaction at the 0.05 level, 
analyses  will be performed by site to understand how the treatment effect differs across sites. The 
primary analysis will use LOCF imputation to have a full accounting of the ITT population at Day 29 (Visit 
5). Pairwise t­tests from the ANCOVA model will be used to compare treatment groups. An example of 
SAS code implementation of the ANCOVA model is as follows: 
PROC M XED; 
    C ASS TREATMENT S TE; 
    MODE  Δ D SCOMFORT   S TE BASE
NE TREATMENT; 
     SMEANS TREATMENT / C  PD FF; 
RUN; 
Sensitivity analyses will be performed on the ITT and PP populations using observed data only, and on 
the ITT population imputing missing data using multiple imputation methods. 
The MCMC method will be performed using the SAS procedure PROC MI. The SAS code for obtaining 
multiple imputation data is: 
PROC M  DATA    NDATA SEED   425754 OUT   OUTDATA1 NIMPUTE = 20; 
    MCMC  N T A    EM; 
    VAR BASE
NE TREATMENT Δ D SCOMFORT; 
RUN; 
where 
­ INDATA is the name of the input dataset 
­ OUTDATA1 is the name of the output dataset 
­ TREATMENT is the name of the treatment group variable in numeric format 
­ BASELINE is the change from pre­CAESM 
 to post­CAESM 
 in ocular 
discomfort of the study eye at Visit 2 (Day 1) 
­ Δ_DISCOMFORT is the change from pre­CAESM 
 to post­CAESM 
 in 
ocular discomfort of the study eye at Visit 5 (Day 29) – BASELINE. 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 23 of 37 
 
After obtaining twenty complete data sets, the following SAS code will be used to run the ANCOVA 
model on each data set: Then, the SAS procedure MIANALYZE will be used to analyze the results from 
the twenty complete data sets to generate a combined inference. The following SAS code will be used: 
 
ODS OUTPUT STAT ST CS   OUTDATA2; 
PROC M XED DATA   OUTDATA1; 
    C ASS TREATMENT; 
    MODE  Δ D SCOMFORT   BASE
NE TREATMENT; 
     SMEANS TREATMENT / C  PD FF; 
    BY 
MPUTAT ON ; 
RUN; 
 
ODS OUTPUT PARAMETEREST MATES   OUTDATA3; 
PROC M ANA YZE DATA OUTDATA2; 
    C ASS TREATMENT; 
    MODE EFFECTS  NTERCEPT BASE
NE TREATMENT; 
RUN; 
where 
­ TREATMENT is the name of the treatment group variable in numeric format 
­ BASELINE is the change from pre­CAESM 
 to post­CAESM 
 in ocular 
discomfort of the study eye at Visit 2 (Day 1) 
­ Δ_DISCOMFORT is the change from pre­CAESM (
 to post­CAESM 
 in 
ocular discomfort of the study eye at Visit 5 (Day 29) – BASELINE 
­ OUTDATA2 is the name of the output dataset that contains the statistical results from the 
ANCOVA model that is run on each of the twenty imputation datasets 
­ OUTDATA3 is the name of the output dataset that contains all the information needed for the 
table. 
As sensitivity analyses, two­sample t­tests and Wilcoxon rank sum tests will also be used to complete 
comparisons between the treatment groups. Change from pre­ to post­CAESM at each visit and time 
point will also be displayed in line plots. 
The primary analysis variable will be presented in subject listings by visit and time point where relevant. 
14.1.1  Primary Hierarchical Efficacy Analysis 
Corneal fluorescein staining (Ora Calibra M Scale) will be performed pre­CAESM and post­CAESM for 
both eyes at Visit 1 (Day ­14), Visit 2 (Day 1, prior to treatment), Visit 4 (Day 15) and Visit 5 (Day 29). 
The 5­unit scale for evaluation of staining in each of the regions 
 
 
 
, as measured on the Ora Calibra™ Scale. Only the change from 
baseline to Visit 5 (Day 29) in pre­CAESM inferior corneal staining, in the worst eye (defined in Section 
9.1), is a primary hierarchical efficacy variable. 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution will be compared to 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 24 of 37 
 
placebo 
 
   
 
. The change from baseline 
in pre­CAESM 
 staining at Visit 5 (Day 29) will be summarized as a continuous 
variable for the 
 for the ITT and PP population. 
Analysis of the inferior corneal staining endpoint will be similar to that of the ocular discomfort scale 
described in Section 14.1, with change from baseline in inferior corneal staining replacing the change 
from baseline in the change from pre­ to post­CAESM ocular discomfort scores. 
Sensitivity  analyses  will  be  performed following  the  same  strategy  as  the  primary  endpoint  using  a 
different randomization seed from the primary analysis multiple imputation method. Observed values at 
each visit and time point, as well as changes from baseline, will also be analyzed to support the primary 
results. 
14.2 
Secondary Analyses 
The continuous  and ordinal secondary  efficacy  variables collected at each  visit  will be summarized 
descriptively (number of subjects (n), mean, SD, median, minimum and maximum), and analyzed with 
two­sample t­tests comparing the active treatment group to placebo. All visit­based data will be analyzed 
at each visit and change from baseline. A Wilcoxon rank sum test and an ANCOVA model adjusting for 
baseline and site will be assessed where appropriate. The ITT population with no imputation is used for 
all secondary efficacy variables. 
All secondary efficacy endpoints will also be presented in listings. 
14.2.1  Fluorescein Staining 
Corneal and conjunctival fluorescein staining will be performed at all scheduled visits, pre­ and post­
CAESM, on both eyes and graded using both the Ora Calibra™ Scale. The scale will grade the cornea 
and conjunctiva by five regions: 
 
 
  
Fluorescein staining scores will be summarized by scale, visit, time point (pre­ and post­CAESM), and 
region 
) using quantitative summary 
statistics.  The  corneal  sum  score  will  be  the  sum  of  scores  from  the 
 
 The conjunctival sum score will be the sum of scores from the 
 
. Change from pre­ to post­CAESM within each 
visit as well as change from baseline will also be summarized for 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution 
and placebo.  


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 25 of 37 
 
Statistical comparisons will employ pairwise two­sample t­tests as the primary method of analysis for 
0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution compared to placebo. A Wilcoxon rank sum test and an ANCOVA 
model adjusting for baseline and site will also be assessed as sensitivity analyses. 
All statistical comparisons will be repeated for the 
   
 
Note: The change from pre­ to post­CAESM in 
 staining scores at Visit 5 (Day 
29) in the 
 the primary hierarchical efficacy variable and will not be included in these 
summaries/analyses. 
14.2.2  Lissamine Green Staining 
The Ora Calibra™ Scale will grade the cornea and conjunctiva by five regions: 
 
 
  
The Ora Calibra™ Scale lissamine green staining scores will be summarized by visit, time point (pre­ 
and post­CAESM), and region 
 using 
quantitative summary statistics. The corneal sum score  will  be the 
 
 
 The conjunctival sum score will be the sum
 
 The total score will be the 
. Change from pre­ to 
post­CAESM within each visit as well as change from baseline will also be summarized for 0.1% RGN­
259 Ophthalmic Solution and placebo. 
Statistical comparisons will employ pairwise two­sample t­tests as the primary method of analysis for 
0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution compared to placebo. A Wilcoxon rank sum test and an ANCOVA 
model adjusting for baseline and site will also be assessed as sensitivity analyses. 
14.2.3  Tear Film Break­Up Time 
TFBUT will be measured in seconds at all scheduled visits, pre­ and post­CAESM, on both eyes. For 
each eye, two measurements will be taken and averaged unless the two measurements are >2 seconds 
apart and are each <10 seconds, in which case, a third measurement would be taken and the two closest 
of the three will be averaged and used for analyses. If the differences between two sequential pairs of 
measurements are the same, e.g., 
, then the median of the three readings will be used 
for analysis.  
TFBUT will be summarized by visit and time point (pre­ and post­CAESM) using quantitative summary 
statistics. Change from pre­ to post­CAESM within each visit as well as change from baseline will also be 
summarized for 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution and placebo. 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 26 of 37 
 
Statistical comparisons will employ pairwise two­sample t­tests as the primary method of analysis for 
0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution compared to placebo. A Wilcoxon rank sum test and an ANCOVA 
model adjusting for baseline and site will also be assessed as a sensitivity analysis. 
14.2.4  Ocular Protection Index 
Ocular Protection Index (OPI) will be assessed at visits 2 and 5, pre­CAESM, on both eyes using the Ora 
Calibra™ OPI 2.0 System. OPI will be expressed as a percentage of the area of tear film break up in 
the eye and ranges from 0 to 100%. Interblink interval (IBI) will also be measured by the Ora Calibra™ 
2.0 System, as a measure of the average time between blinks, in seconds. The Ora Calibra™ OPI 
System will monitor each subject over a one­minute time frame.  
The  OPI  and  IBI  will  be  summarized  by  visit  (pre­CAESM)  using  quantitative  summary  statistics. 
Statistical comparisons will employ pairwise two­sample t­tests as the primary method of analysis for 
0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution compared to placebo. An ANCOVA model adjusting for baseline 
and site will also be assessed as a sensitivity analysis. 
14.2.5  Unanesthetized Schirmer’s Test 
Unanesthetized Schirmer’s Test will be assessed on both eyes at all scheduled visits only at pre­CAESM. 
The Schirmer’s test strip will be placed in the lower temporal lid margin of each eye. After 5 minutes, the 
test strip will be removed and the length of the moistened area will be recorded in millimeters (mm) for 
each eye. Lower values indicate less tears produced in the eye.  
Unanesthetized  Schirmer’s  Test  will  be  summarized  by  visit  using  quantitative  summary  statistics. 
Change from baseline will be also summarized. Statistical comparisons will employ pairwise two­sample 
t­tests as the primary method of analysis for 0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution compared to placebo. 
An ANCOVA model adjusting for baseline and site will also be assessed as a sensitivity analysis. 
14.2.6  Drop Comfort Assessment 
Two tools will be used to assess drop comfort, each of which will be assessed at Visit 2 (Day 1), following 
the first dose of study drug, Visit 3 (Day 8), and at Visit 4 (Day 15) post­CAESM.  
• 
 
 
 
 
 
 
  


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 27 of 37 
 
• 
 
 
 
 
 
 
 
14.2.7  Ocular Surface Disease Index® 
The Ocular Surface Disease Index© (OSDI) will be assessed at the subject level at all scheduled visits 
only at pre­CAESM. Subjects will be asked 12 questions at each visit. Each question will be graded on a 
0 to 4 scale, where 0 = none of the time, 1 = some of the time, 2 = half of the time, 3 = most of the time, 
and 4 = all of the time. The sum of the scores from all questions answered will be calculated. The total 
OSDI  score  will  be  calculated  using  the  formula:  OSDI  =  (Sum  of  scores)  x  25  /  (#  of  questions 
answered). The OSDI is on a scale of 0 to 100, with higher scores representing greater disability. 
Each  individual  response  and  the  total  OSDI  score  will  be  presented  separately  by  visit  using 
quantitative summary statistics. Change from baseline will also be summarized. 
Statistical comparisons will employ pairwise two­sample t­tests as the primary method of analysis for 
0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution compared to placebo. A Wilcoxon rank sum test and an ANCOVA 
model adjusting for baseline and site will also be assessed as sensitivity analysis. 
14.2.8  Ocular Discomfort Using the Ora Calibra™ Scale 
Ocular discomfort scores will be subjectively graded by the subjects using the Ora Calibra™ Ocular 
Discomfort Scale at all scheduled visits, pre­ and post­CAESM, and during CAESM exposure
 
 
 
  
14.2.8.1 
Ora Calibra™ Ocular Discomfort Scale Pre­ and Post­CAESM 
This  secondary  ocular  discomfort  score  will  be  measured  outside  of  the  CAESM  exposure  but  still 
measured pre­ and post­CAESM. Ocular discomfort scores will be summarized by visit and time point 
using quantitative summary  statistics. Change from pre­ to post­CAESM  within  each  visit  as  well  as 
change from baseline will also be summarized.  


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 28 of 37 
 
Statistical comparisons will employ pairwise two­sample t­tests as the primary method of analysis for 
0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution compared to placebo. A Wilcoxon rank sum test and an ANCOVA 
model adjusting for baseline and site will also be assessed as sensitivity analyses. 
14.2.8.2 
Ora Calibra™ Ocular Discomfort Scale During CAESM Exposure 
Ocular discomfort scores during CAESM at 0
 the primary endpoints. The 
Primary endpoints along with the other time points during CAESM exposure will be summarized by visit 
and time point using quantitative summary statistics. The change from pre­CAESM 
 will be 
the change from 
 within the same visit and will also be summarized.  
The  overall  ocular  discomfort  during  CAESM  will  be  compared  between  0.1%  RGN­259  Ophthalmic 
Solution and placebo using a mixed­effect model to account for the correlations among the repeated 
measurements for the same eye. This analysis will be performed for each visit separately, and include 
treatment, time (nominal time will be used), treatment by time interaction, any significant site interaction, 
and the baseline ocular discomfort score as fixed effects, and subject as a random effect. The following 
SAS code will be used: 
ods output  SMeans   outdata1 Diffs   outdata2; 
proc mixed data   indata method   ml; 
   class subjid treatment time; 
   model score   base treatment   time; 
   repeated subject   subjid / type   COV;  
   lsmeans treatment / pdiff cl; 
run; 
where 
­ 
subjid is the unique subject ID; 
­ 
treatment is the name of the treatment group; 
­ 
time is the nominal time of the measurement; 
­ 
score is the ocular discomfort score; 
­ 
base is the baseline ocular discomfort score; and 
­ 
COV is the appropriate variance­covariance structure. 
The appropriate variance­covariance structure will be tested in the following order and only move to the 
next if convergence does not occur: type = UN (unstructured), then EXCH (exchangeable), then AR(1) 
(auto­regressive 1).  
14.2.9  Ora Calibra™ Ocular Discomfort and 4­Symptom Questionnaire 
Ocular discomfort and dry eye symptoms will be assessed at all scheduled visits, pre­ and post­CAESM 
at the subject level in regard to how both eyes feel. The Ora Calibra™ Ocular Discomfort & 4­Symptom 
Questionnaire  will  be used,  which  includes rating  of the severity  of 
 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 29 of 37 
 
 
. 
Ocular discomfort and dry eye symptoms will be summarized by visit and time point (pre­ and post­
CAESM) using quantitative summary statistics. Change from pre­ to post­CAESM within each visit as well 
as change from baseline will be also summarized. 
Statistical comparisons will employ pairwise two­sample t­tests as the primary method of analysis for 
0.1% RGN­259 Ophthalmic Solution compared to placebo. A Wilcoxon rank sum test and an ANCOVA 
model adjusting for baseline and site will also be assessed as sensitivity analyses. 
14.2.10 Daily Diary 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
  
 
 
 
 
 
15. Exploratory Analyses 
There are no exploratory analyses in this study. 
16. Safety Analyses 
All safety analyses will be conducted using the Safety Population. 
16.1 
Adverse Events 
An AE is defined as any untoward medical occurrence associated with the use of a drug in humans, 
whether  or  not  the  event  is  considered  drug­related.  An  AE  can  therefore  be  any  unfavorable  and 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 30 of 37 
 
unintended sign (e.g., an abnormal laboratory finding), symptom, or disease occurring after the subject 
started  dosing  with  the  study  drug,  without  any  judgment  about  causality.  Any  pre­existing  medical 
condition that worsens after administration of the study drug will also be considered a new AE and 
reported.  Any  medical  condition  present  prior  to  the  administration  of  the  study  drug  that  remains 
unchanged or improved should not be recorded as an AE at subsequent visits. All AEs will be coded 
using the MedDRA Version 19.1. 
Study drug includes the investigational drug under evaluation and any comparator drug, placebo, or any 
other medications required by the protocol given during any stage of the study. 
Documentation regarding the AE should be made as to the nature, date of onset, end date, severity, 
relationship to study drug, action(s) taken, seriousness, and outcome of any sign or symptom observed 
by the physician or reported by the subject upon indirect questioning. 
Treatment­emergent adverse events (TEAE) are defined as any event that occurs or worsens on or after 
the day that randomized study treatment is initiated. AEs recorded in the eCRF which began prior to 
treatment will not be included in the summary tables but will be included in the AE data listings. 
Serious adverse events (SAE) are defined as any event that results in death, is life­threatening, requires 
inpatient hospitalization  or prolongation of existing hospitalization, results in persistent or significant 
disability/incapability, is a congenital anomaly/birth defect, or is medically significant. 
An  overall  summary  will  be  presented  that  includes  the  number  of  TEAEs  and  the  number  and 
percentage of subjects who experienced at least one TEAE, by treatment group. This summary will also 
include breakdowns of TEAEs further categorized as ocular (worst eye and fellow eye separately) or 
non­ocular,  treatment­emergent  serious  AEs  (TESAE),  TEAEs  by  maximum  severity,  TEAEs  by 
maximum relationship, and TEAEs leading to subject withdrawal. 
Additional summaries of TEAEs will be provided showing the number and percentage of subjects who 
experienced at least one TEAE. These summaries will be presented by SOC and PT. Non­ocular TEAEs 
will be summarized using discrete summary statistics and presented by treatment group at the subject 
and event level by SOC and PT. Ocular TEAEs will be similarly summarized at the subject level for study 
and fellow eyes separately. If a subject reports the same PT multiple times within the same SOC, that 
PT will only be reported once within that SOC. As with the PT, if a subject reports multiple conditions 
within  the  same  SOC,  that  SOC  will  only  be  reported  once.  In  the  summary,  SOC  will  be  listed  in 
ascending alphabetical order; PTs will be listed in order of descending frequency for all subjects within 
each SOC. The occurrence of non­ocular and ocular TEAEs will also be tabulated by SOC and PT for 
the following:  maximal severity and suspected relationship to study drug. 
Separate summaries will be provided for the following categories of AEs:  


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 31 of 37 
 
• 
Ocular TEAEs in the worst eye 
• 
Ocular TEAEs in the fellow eye 
• 
Non­ocular TEAEs  
• 
Treatment­related ocular TEAEs 
• 
Treatment­related non­ocular TEAEs 
• 
SAEs 
Severity  of  an  AE  is  defined  as  a  qualitative  assessment  of  the  degree  of  intensity  of  an  AE  as 
determined by the Investigator or reported to him/her by the subject. The assessment of severity is made 
irrespective  of  relationship  to  investigational  product  or  seriousness  of  the  event  and  should  be 
evaluated according to the following scale: 
•  Mild: Event is noticeable to the subject, but is easily tolerated and does not interfere with the 
subject’s daily activities. 
•  Moderate: Event is bothersome, possibly requiring additional therapy, and may interfere with the 
subject’s daily activities. 
•  Severe: Event is intolerable, necessitates additional therapy or alteration of therapy, and 
interferes with the subject’s daily activities. 
The relationship of each AE to the study drug should be determined by the investigator using these 
explanations: 
•  Definite: When there are good reason and sufficient documentation to demonstrate a direct 
causal relationship between investigational product and AE; 
•  Probable: When there are good reasons and sufficient documentation to assume a causal 
relationship in the sense of plausible, conceivable, likely but not necessarily highly probable. 
•  Possible: When there is sufficient information to accept the possibility of a causal relationship in 
the sense of not impossible and not unlikely, although the connection is uncertain or doubtful, 
for example; due to missing data or insufficient evidence. 
•  None: When there is sufficient information to accept a lack of a causal relationship, in the sense 
of impossible and improbable. 
•  Unclassified: When the causal relationship is not assessable for whatever reason due to 
insufficient evidence, conflicting data or poor documentation. 
Only TEAEs with a relationship of definite, probable, or possible, or with a missing relationship, will be 
considered as treatment­related TEAEs. 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 32 of 37 
 
Summaries of TEAEs by strongest relationship and maximal severity will be presented for ocular AEs 
and non­ocular AEs separately. The number of subjects with any TEAEs (along with percentages) will 
be tabulated by SOC and PT within each SOC by treatment group. To count the number of subjects 
with any TEAEs, if a subject has multiple TEAEs coded to the same PT within the same SOC, the subject 
will be counted once under each of the strongest relationship and the maximal severity. 
The expectedness of an AE should be determined based upon existing safety information about the 
study drug using these explanations: 
•  Unexpected: An AE that is not listed in the Investigator’s brochure or is not listed at the specificity 
or severity that has been observed. 
•  Expected: An AE that is listed in the Investigator’s brochure at the specificity and severity that 
has been observed. 
•  Not Applicable: Any AE that is unrelated to the study drug. 
AEs that are mentioned in the Investigator’s brochure as occurring with a class of drugs or as anticipated 
from the pharmacological properties of the drug, but are not specifically mentioned as occurring with the 
particular drug under investigation are to be considered unexpected. AEs that are reported as suspected 
with respect to relationship to study drug, and are also categorized as unexpected are to be reported 
directly  to  Ora,  the  sponsor,  and  other  authorities  as  appropriate.  Expectedness  of  the AE  will  be 
included in the subject level listings. 
All AEs will be presented in a subject listing. The AEs leading to study treatment discontinuation will be 
listed separately. In addition, all serious AEs will be presented in a separate listing. 
16.2 
Visual Acuity (ETDRS) 
Best corrected visual acuity (BCVA)  will  be  assessed on both eyes  at all  scheduled  visits pre­CAESM 
using an Early Treatment of Diabetic Retinopathy Study (ETDRS) chart. The Investigator will indicate 
on the CRF whether visual acuity (VA) was measured with or without correction, and if pin­hole was 
used. 
The sites  will  convert  number  of  letters  read correctly  to  the  logarithm of the minimum angle of 
resolution (logMAR) scores and logMAR VA scores will be collected and used for all summaries. 
BCVA and change from baseline will be summarized by treatment group and visit, for the worst 
eye  and  fellow  eye  separately,  using  continuous  summary  statistics  (mean,  SD,  median, 
minimum, and maximum). BCVA data will be also presented in a listing. 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 33 of 37 
 
16.3 
Slit­Lamp Biomicroscopy 
Slit­lamp biomicroscopy examinations will be conducted on both eyes at all scheduled visits, pre­ and 
post­CAESM.  The  slit­lamp  findings  will  include  examinations  of  the  cornea,  conjunctiva,  anterior 
chamber, iris, lens, and lid. Each parameter will be graded as normal or abnormal. Abnormal findings 
will be further classified as not clinically significant (NCS) or clinically significant (CS).  
Slit lamp findings will be summarized by treatment group and visit, for the worst eye and fellow 
eye  separately,  using  qualitative  summary  statistics  (frequency  counts  and  percentages). 
Percentages will be based on the number of subjects with non­missing values for the treatment group 
at a given visit. 
A shift table will show changes from baseline (Visit 2 (Day 1), pre­CAESM) to all observations at 
later study visits and time points. The data for slit­lamp biomicroscopy will be presented in a listing. 
16.4 
Undilated Fundoscopy 
Undilated fundoscopy  examinations  will  be  conducted  on  both  eyes  at Visit 1 (Day ­14) and Visit 5 
(Day 29) post­CAESM. The fundus pathology findings will include examinations of the vitreous, retina, 
macula,  choroid,  and  optic  nerve,  and  be  recorded  as  normal,  abnormal  (NCS),  or  abnormal  (CS). 
Summaries of undilated fundoscopy findings will be presented by treatment and visit, for the worst eye 
and fellow eye separately, using frequency counts and percentages. Percentages will be based on the 
number of subjects with non­missing values for the treatment group at a given visit. 
A  shift  table  will  show  changes  from  baseline  (Visit  1  (Day  ­14))  to  Visit  5  (Day  29)  on  the  above 
variables. The data for undilated fundoscopy will be presented in a listing. 
16.5 
Intraocular Pressure (IOP) 
IOP will be measured for both eyes at Visit 1 (Day ­14) and Visit 5 (Day 29) post­CAESM. IOP will be 
summarized  by  treatment  group  and  visit,  for  the  worst  eye  and  fellow  eye  separately,  using 
continuous summary statistics (mean, SD, median, minimum, and maximum). 
Change from baseline will also be calculated and summarized using continuous summary statistics in 
a table. The data for IOP examinations will be presented in a listing. 
16.6 
Corneal Sensitivity (Cochet­Bonnet) 
Corneal sensitivity will be assessed at Visit 1 (Day ­14) and Visit 5 (Day 29), pre­CAESM for each eye 
separately. Corneal sensitivity is measured in millimeters (mm) three times, and the average of the three 
measurements will be summarized by treatment group and visit using descriptive statistics.  


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 34 of 37 
 
A change from baseline will be calculated as the Visit 5 value minus the Visit 1 value and reported with 
the observed values using continuous summary statistics. 
17. Interim Analyses 
No interim analyses are planned for this study. 
 
18. Changes from Protocol­Stated Analyses 
There are no changes from protocol­stated analyses. 
19. References 
None 
 
 


Protocol RGN­259/16­110­0008, SAP Version 1.0 
 
 08AUG2017 
Confidential & Proprietary 
Page 35 of 37 
 
20. Tables 
Tables that will be included in the topline delivery are shown in boldface font. 
Tab e Number 
Descr pt on 
Popu at on 
Study Population Data 
Table 14.1.1 
Subject Disposition 
All Randomized 
Subjects 
Table 14.1.2.1 
Demographics 
ITT Population 
Tab e 14.1.2.2 
Demograph cs 
Safety Popu at on 
Tab e 14.1.3 
Base ne D sease Character st cs (Worst Eye) 
ITT Popu at on 
Tab e 14.1.3.1 
Ocu ar Med ca  H story 
Safety Popu at on 
Tab e 14.1.3.2 
Non­Ocu ar Med ca  H story 
Safety Popu at on 
Tab e 14.1.4.1 
Ocu ar Concom tant Med cat ons by Treatment Group, Drug C ass and 
Preferred Name 
Safety Popu at on 
Tab e 14.1.4.2 
Non­Ocu ar Concom tant Med cat ons by Treatment Group, Drug C ass 
and Preferred Name 
Safety Popu at on 
Tab e 14.1.5 
Screen Fa ures and Reasons for Screen Fa ure 
A  Screen Fa ed 
Sub ects 
Primary Efficacy Analyses 
Table 14.2.1.1 
Ocular Discomfort Score Change from Pre­CAE 
 to 
Post­CAE (
 at Visit 5 (Day 29) 
ITT Population with 
LOCF 
Tab e 14.2.1.2 
Ocu ar D scomfort Score Change from Pre­CAE 
 to Post­
CAE 
 at V s t 5 (Day 29) 
ITT Popu at on w th 
MCMC 
Tab e 14.2.1.3 
Ocu ar D scomfort Score Change from Pre­CAE 
 to Post­
CAE 
 at V s t 5 (Day 29) 
ITT Popu at on w th 
Observed Data On y 
Tab e 14.2.1.4 
Ocu ar D scomfort Score Change from Pre­CAE 
 to Post­
CAE 
 at V s t 5 (Day 29) 
PP Popu at on w th 
Observed Data On y 
Table 14.2.2.1 
Inferior Corneal Fluorescein Staining Change from Pre­CAE at 
Visit 5 (Day 29) in the 
 
ITT Population with 
LOCF 
 
Tab e 14.2.2.2 
Infer or Cornea  F uoresce n Sta n ng Change from Pre­CAE at V s t 5 
(Day 29)  n the 
 
ITT Popu at on w th 
MCMC 
 
Tab e 14.2.2.3 
Infer or Cornea  F uoresce n Sta n ng Change from Pre­CAE at V s t 5 
(Day 29)  n the 
 
ITT Popu at on w th 
Observed Data On  
 
Tab e 14.2.2.4 
Infer or Cornea  F uoresce n Sta n ng Change from Pre­CAE at V s t 5 
(Day 29)  n the 
 
PP Popu at on w th 
Observed Data On y 
 
Secondary Efficacy Analyses 
Table 14.2.3.1 
Corneal and Conjunctival Fluorescein Staining (Ora Calibra Scale) 
ITT Population 
Table 14.2.3.2 
Corneal and Conjunctival Fluorescein Staining (Ora Calibra Scale) 
in the 
 
ITT Population 
 
 
Tab e 14.2.3.3 
L ssam ne Green Sta n ng (Ora Ca bra Sca e) 
ITT Popu at on 
Tab e 14.2.3.4 
Tear F m Break­Up T me (TFBUT) 
ITT Popu at on 
Tab e 14.2.3.5 
Ocu ar Protect on Index (OPI, Pre­CAE) 
ITT Popu at on 
Tab e 14.2.3.6 
Unanesthet zed Sch rmer's Test (Pre­CAE) 
ITT Popu at on 
Tab e 14.2.3.7 
Ora Ca bra Drop Comfort Sca e 
ITT Popu at on 
Tab e 14.2.3.8 
Ora Ca bra Drop Comfort Quest onna re 
ITT Popu at on 
Tab e 14.2.3.9 
Ocu ar Surface D sease Index (OSDI, Pre­CAE) 
ITT Popu at on 
Tab e 14.2.3.10 
Ora Ca bra Ocu ar D scomfort & 4­Symptom Quest onna re 
ITT Popu at on 
Tab e 14.2.3.11 
Ora Ca bra Ocu ar D scomfort Sca e Dur ng CAE Exposure 
ITT Popu at on