Estimulación con agonistas sintéticos de TLR7
Autor: Daniela Melissa Abarca Merlín
Año: 2021
Carrera: Química Farmaceútico Biológica

El cáncer representa la segunda causa de muerte a nivel mundial y tiene un gran impacto social y económico en el mundo. De los 20 millones de casos nuevos anuales, en una población de 019 años, el 11% son tumores del SNC. El meduloblastomaes el tumor de SNC más frecuente en infantes y niños. El meduloblastoma se ubica en el cerebelo y tiene propensión a diseminarse e invadir tejidos adyacentes. La supervivencia de los pacientes es muy altacon los tratamientos actuales. Sin embargo, casi 80% de los sobrevivientes presentan secuelas importantes, consecuencia del tratamiento. Dentro de un solo tumor se han encontrado marcadores genéticos e histológicos que complican la clasificación e impiden el desarrollo de terapias eficaces. El microambiente tumoral contieneelementos del sistema inmunológico (SI) y células tumorales, los cuales interaccionan entre sí y son críticos en la evolución, pronóstico y erradicación del tumor. Por ello, se han propuesto nuevas terapias dirigidas hacia componentes del microambiente tumoral, comoson los receptores tipo Toll (TLRs). Los TLRs son receptores de la inmunidad innata que reconocen ligandos específicos, pueden expresarse tanto en células del SI, como en células tumoralesy tienen efectos proo antitumorales. Previamente, en nuestro grupo de trabajo se encontró expresión de TLR7, TLR8 y TLR9 en biopsias de pacientes con meduloblastoma. Diferentes autores demostraron que la activación de TLR7 y TLR8 conR848, y TLR9 conalgunos CpG ODNspuede erradicartumores sólidos, inducirapoptosis de células malignas y reducir laangiogénesisen tumores del SNC. Por tal motivo, el objetivo del siguiente trabajo fuedeterminar la expresión de TRL7, TLR8 y TLR9 y el efecto de la estimulación de TLR7/8 y TLR9 con R848 y CpG ODN respectivamente, sobre el volumen tumoral, marcadores de proliferacióncelular; expresión de caspasa3; y sobre la expresión de MMP2, MMP3 y MMP9 en un modelo murino de meduloblastoma. Primero, medimos por western blot, la expresión de TLR7, TLR8 y TLR9 en los xenotrasplantes, encontrando quelas células tumorales sólo expresaron TLR7 y TLR9. Posteriormente, los resultados demostraron quedos inyecciones intratumoralesde CpG ODN disminuyeronel volumen tumoralde los xenotrasplantes murinos menores a 200 mm3. Mientras tanto, el R848 notuvo efecto sobre el crecimientotumoral. Después, evaluamos el efecto de R848 y CpG ODN sobre la expresión de MMP3, un marcador de angiogénesis y se demostró que ambos agonistasredujeronsignificativamente suexpresión comparados contra el control. A continuación, por western blotmedimos la expresión de caspasa3, un indicador de apoptosis y no se observó ningún efectode los agonistas. Por último, utilizandoun zimograma, se demostró que los tumores tratados con CpG ODN tienden a mostrarmayor expresiónde MMP2 y MMP9, pero los resultados fueronno significativos. En conclusión, observamos quelos xenotrasplantes murinos expresan TLR7 y TLR9, y no TLR8 bajo nuestras condiciones experimentales. También, demostramosque la estimulación de TLRs con CpG ODN disminuyóel volumen tumoral y parece tener un efecto sobre laproliferación celular y que CpG ODN y R848 disminuyede forma significativa la expresión de MMP3, pero no tienenefecto sobre la expresión de caspasa3. Finalmente, la estimulación con CpG ODNy R848no tuvo un efecto significativo sobre la expresión deMMP2 y MMP9.