Evaluación de la expresión de proteínas extracelulares en una cepa de Streptomyces Lividans con crecimiento disperso 
Autor: Rosa Nizaibá Marín López
Año: 2022
Carrera: Química Farmaceútico Biológica

Streptomyces es un actinomicetoo actinobacteriacon un ciclo de vida complejo. Los miembros de este géneroson bacterias miceliares, Grampositivasyaerobias estrictas 1. Este género esconsideradouno de los grupos más importantes en la industria ya que son responsables de la producción de la mayoría de los antibióticos utilizados tanto en clínica como en agricultura2. Se ha estudiado ampliamente a la especie Streptomycescoelicolor, que esel estreptomiceto modelo y el miembro genéticamente mejor estudiado del género. Sin embargo, su crecimiento micelar representa un obstáculo para su cultivo en medio líquido, debido a la formación de cúmulos comprimidos(conocidos en inglés como “pellets”)originados por el enredo delashifas, limitando la entrada de nutrientes en el interior. La formación de estos cúmulos afecta la producción de enzimas extracelulares puesto que disminuye el área expuesta de las hifas al medio de cultivo 3. Así mismo, el crecimiento micelar ha sido el principal impedimento para los estudios fisiológicos de Streptomyces, debido a su inestabilidad o variabilidad de los caracteres morfológicos y fisiológicos relacionados con la diferenciación en cultivos sumergidos 2, 4. Dando paso con esto, al desarrollo de métodos experimentales que permitieran examinar la influencia de diferentes condiciones de cultivos para Streptomyces, tomando como modelo los procesos empleados en diferentes microorganismos igualmente filamentosos como las especies fúngicas 2. De la misma forma se ha demostrado que los parámetros de crecimiento de los estreptomicetos filamentosos son similares a los microorganismos unicelulares 4. Entre las diversas técnicas que se han empleado se tienen evidencias que, bajo la limitación de nutrientes el micelio en crecimiento se fracciona continuamente 5, el uso de resortes de acero inoxidable en el matraz permite el crecimiento difuso6, la selección prolongada en cultivos continuos en quimiostato 4, procesamiento por lotes que implica una pregerminación en medio rico 7, el efecto del empleo de polianiones de alto peso molecular en los medios de crecimiento comoCarbopol y Junlon PW110 para promover el crecimiento disperso, debido a que estos polímeros inducen un impulso electrostático entre las células, evitando de esa forma la agregación de esporas y el posterior agrupamiento de micelios en cultivos sumergidos2. De esta forma, el compromiso de lograr una mejora para el estudio de esta especie ha ido evolucionando, empleando estrategias diversas comoel control genético, diversos inductores químicos, entre otros. En el presente trabajo se deseaintroducir ala especieStreptomyces lividans una mutación obtenidaen S. coelicolor aprovechando su estrecha relación filogenética8. En un trabajo previo se obtuvoen S. coelicolor una mutación en la región codificante del gen sco5282, ocasionando una sustitución del ácido aspártico en la posición 125 de la secuencia de la proteína por una glicina (D125G). Esto se realizó por un método de selección empleado en una técnica de sedimentación anteriormente aplicada de forma contraria en la levadura Saccharomyces cerevisiae 9. El amplio estudio del genoma de S. coelicolorreveló que todas las especies estudiadas de esta bacteria, comparten un sólo cromosoma lineal, dando paso a la construcción de una enciclopedia ordenada de clones de cósmidos superpuestos para todo el cromosoma 10. Este hecho es de gran importancia debido a que la mutación D125G se encuentra en el gen sco5282 que a su vez forma parte del cósmido StCB12, el cual se encuentra en la librería de clones de S. coelicolor 2. Esta mutación se verá reflejada en la morfología y fisiología de S. lividans en cultivos líquidos.